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로스앤젤레스 &amp; 인디펜던트 철도 및 퍼시픽 전기철도 정류장이었던 이 역은 1953년 9월 30일 샌타모니카 에어 라인 폐선과 함께 폐쇄되었으며, 2012년 4월 28일 토요일 재개까지 운행을 중단했다. 엑스포선 개통을 위해 역 지대에서 완전히 재건축되었다. 정기 운영이 2012년 4월 30일 월요일에 재개되었다.
엑스포/웨스턴역(Expo/Western Station)은 로스앤젤레스 군 광역철도의 엑스포선역 중 하나이다. 로스앤젤레스의 엑스포지션 파크 지구에 있는 웨스턴 애비뉴(Western Avenue)와 엑스포지션 대로(Exposition Boulevard)의 교차로에 위치한다.
이 역은 "far-side" 승강장 구조이다. 이것은 승강장이 건널목 사이에 두고 각각 한쪽씩 위치하며, 열차는 항상 건널목을 건너고 승강장에서 정차한다.
이 역의 예술작품은 예술가 Ronald J. Llanos에 의해 만들어졌다. "Ephemeral Views: A Visual Essay"라는 제목의 이 설치물은 "로스앤젤레스 거리 생활을 활성화시키는 많은 인물"의 장면을 묘사하고 있다.
과거 이 역에서는 로스앤젤레스 앤드 인디펜던스 및 퍼시픽 전기 트롤리 선이 정차하였다가, 1953년 9월 30일 샌타모니카 에어라인 폐선과 함께 폐쇄되었다. 이후 2012년 4월 28일 토요일에 이 위치에서 엑스포 선 개통을 위해 재건되었다. 정기 운행은 2012년 4월 30일 월요일에 재개되었다.
앨릭 레너드 마에마에(, 1985년 12월 10일 ~ )는 솔로몬 제도의 축구 선수로 포지션은 미드필더이다. 현재는 바누아투의 아미칼레 소속으로 뛰고 있다.
한계초등학교는 대한민국 강원특별자치도 인제군에 있는 초등학교다.
인제초등학교는 대한민국 강원특별자치도 인제군에 있는 초등학교이다.
인제남초등학교는 대한민국 강원특별자치도 인제군에 있는 초등학교이다.
인제초등학교 가리산분교는 대한민국 강원도 인제군에 있었던 공립 초등학교이다.
월학초등학교는 대한민국 강원특별자치도 인제군에 있는 초등학교다.
원통초등학교는 대한민국 강원특별자치도 인제군 원통리에 있는 초등학교다.
원통초등학교 신덕분교는 대한민국 강원특별자치도 인제군에 있었던 공립 초등학교이다.
토트백()은 큼지막한 사이즈에 가방의 상단이 개방되어 있고 파우치의 양 옆으로 2개의 손잡이를 마주하게 달아놓은 가방이다. 토트백은 재사용 가능한 쇼핑백으로 흔히 사용한다. 전형적인 토트백은 질긴 천에 가죽으로 손잡이를 달거나 바닥을 댄 형태이며, 가죽 버전은 표면이 오돌토돌한 작은 자갈 형태인 경우가 많다. 일반적으로 원단은 캔버스, 황마포, 나일론과 합성소재의 사용이 점점 많아지고 있으며, 합성소재는 빛에 장시간 노출되면 변질된다. 많은 저가의 토트백은 재사용 재질로 제조하는 경우가 흔하며, 이 경우 최소한의 처리절차를 거친 천연 소재나 유기물질의 처리과정에서 생산되는 부산물이 그 재료가 된다. 토트백은 일반적으로 사각형 모양을 하고 있으며, 어떤 것들은 내부에 지퍼가 있어 부분으로 나누어 진 것도 있다.
토트 (tote)는 운반 (carry)을 의미하는 북미의 구어체 용어에서 유래하였으며, 일반적으로 무거운 짐을 옳기는 것과 연관된다. 1677년 버지니아주에서 최초로 기록되었으나, 어원은 확실치 않다. 아프리카가 어원이라는 주장이 있으나 이것 역시 확실하지 않다. 가방을 뜻하는 저지 독일어 "tute" 와 연관이 있을 수 있으며, 이는 독일어 "Tüte"(가방)와 어원이 같다. '토트 백'이라는 용어는 1900년에 처음으로 사전에 기록되었다.
켈리백()은 파리에 기반을 둔, 고급 패션 명품 제조업체인 에르메스에 의해 디자인된 가죽 가방이다. 그 가방은 대중화되기 전에 여러 번 재설계를 했고 그리고 나서 미국 여배우이자 모나코의 공비인 그레이스 켈리의 이름을 따서 지어졌다. 그 가방은 이제 비싼 지위 상징이 되었다.
알파 인더스트리()는 1959년 미국 테네시주 녹스빌에서 설립된 의류 제조업체이다. 미군 스타일을 표방한 밀리터리 브랜드이며, 항공 재킷을 주로 판매한다.
주민투표법 제8조는 국가정책의 수립에 참고하기 위한 주민투표에 대해 규정하고 있는데 규정의 문언으로 볼 때 중앙행정기관의 장은 실시 여부 및 구체적 실시구역에 관해 상당한 범위의 재량을 가진다고 볼 수 있다. 이를 감안할 때 중앙행정기관의 장으로부터 실시요구를 받은 지방자치단체 내지 지방자치단체장으로서는 주민투표 발의에 관한 결정권한, 의회의 의견표명을 비롯하여 투표시행에 관련되는 권한을 가지게 된다고 하더라도, 나아가 지방자치단체가 중앙행정기관장으로부터 제8조의 주민투표 실시요구를 받지 않은 상태에서 일정한 경우 중앙행정기관에게 실시요구를 해 줄 것을 요구할 수 있는 권한까지 가지고 있다고 보기는 어렵다..
플라이트 재킷()은 항공기에 탑승하는 조종사 및 승무원들이 착용하는 재킷이다. 군용 항공기 운용을 고려하여 군용품으로 개발된 것이다. 시중에도 이 재킷을 모방하여 만들어진 밀리터리 패션 제품들이 많다. 흔히들 사제품이 품질이 더 좋다고 생각하는 경우가 많지만, 사실 군용품도 소재나 기능성 면에선 정규 계약을 체결한 업체에 의해 제작되기 때문에 오히려 사제품보다 좋은 경우도 많다.
선윤지(宣允祉)는 보성선씨(寶城宣氏)의 시조(始祖)이다. 생졸연대는 정확하지는 않으나 1300년대 중반부터 1400년대 초반 사람이다. 호는 용암(龍菴) 또는 퇴휴당(退休堂)이라 한다. 배우자는 연안李氏이며, 슬하에 2남(安景, 安赫)과 1녀(남편 필문 이선제(李先齊))가 있다.
중국 명나라 과거시험에서 장원급제하여 문연각 학사가 되었으며, 1382년(고려 우왕 8년) 명나라 사신으로 고려에 와서 귀화하였다. 1382년 전라도안렴사(全羅道按廉使)를 하면서 전라도 지방의 백성들에게 어질고 깨끗한 정치를 베풀어 백성들의 부역을 없애고 누에치고 농사짓는 일에 전력을 기울이게 하였다. 또한 당시 왜구가 조양(兆陽)과 복홀(伏忽)까지 침범해 약탈함으로써 폐현이 되다시피 했을 때, 왜구를 소탕하고 잔적을 격멸하여 잃었던 지역을 완전히 회복하였으며,전라도 안렴사를 마치고도 벼슬을 계속하면서 전라도지방에서 선정을 베풀었던 것으로 전해진다.
선윤지는 유학을 숭상하고 무예에 남다른 소질이 있었으며, 야은 길재, 장령 서견, 농암 김주와 교의가 두터웠다고 한다. 고려의 신하로서 고려 왕조에 충절과 절개를지켜 조선이 건국됨에 따라 벼슬을 내놓고 고려의 유신(遺臣)들과 산수를 벗삼으며 여생을 보내셨다.
보성 오충사(五忠祠), 장흥 포충사, 고양 오충사에 배향(配享) 되었으며, 지역 유림들과 보성선씨 후손들이 제향을 모시고 있다. 이 곳에는 선윤지뿐만 아니라 유성군 선형, 선거이, 선세강, 선약해 등 총 5분을 모시고 있다.
선윤지의 후손들은 2000년 통계청 인구조사시 39,001여명으로 집계되었다.
또한 『성호보휘(姓號譜彙)』와 『대동기문(大東奇聞)』에 의하면 “선윤지 호는 퇴휴당(退休堂)으로 선성(宣城)사람이다. 명조의 학사로 명나라 홍무(洪武)년간에 고려로 와 공민왕조에 벼슬살이를 하였는데 그 벼슬은 안렴사(按廉使)에까지 이르렀다. 고려가 망하자 보성으로 가 살기 시작하였으며 태종이 몇 번이나 그를 불렀으나 최후까지 불응하고 말았는데 그가 죽자 태종은 이조판서란 중직을 내렸다.”로 불사이군(不事二君)의 충절을 적고 있다.
윤영(尹英, 1955년 4월 3일~)은 대한민국의 정치인이다. 제18대 국회의원이다.
정동성(鄭東星, 1939년 7월 8일~1999년 8월 5일)은 대한민국의 정치인이다. 제10·11·12대 국회의원을 지냈다. 종교는 천주교이며, 세례명은 프란치스코 사베리오이다.
1939년 7월 8일 경기도 여주군 능서면의 중산층 집안에서 출생. 능서초등학교를 졸업하고 서울로 이주하여 가톨릭계 학교인 동성중학교, 동성고등학교를 졸업. 1962년 경희대학교 체육학과를 졸업하였다.
소규모자본 중소기업인 서울제강 공동설립자인 김인성의 딸과 결혼하였다. 이후 민주공화당에 입당하였다. 박정희 독재정권의 유신을 지지하는 45인에 포함되었다. 1978년 제10대 국회의원 선거에서 여주군에 출마하여 친야 무소속 오세응과 동반 당선되었다.
정동윤(鄭東允, 1937년 12월 7일 ~ 2025년 10월 23일)은 대한민국의 정치인이다. 제12·13대 국회의원을 지냈다.
정동호(鄭東鎬, 1936년 11월 5일~2009년 3월 26일)는 대한민국의 군인 출신 정치인이다. 육군에서 1957년부터 1986년까지 군복무를 하고, 중장 전역하였다. 대통령 경호실 실장, 제13·14대 국회의원 등을 지냈다. 종교는 불교이며 호국금강사 설립의 주역이다. 현재 헌법재판소 재판관 조한창의 장인이다.
정래정(丁來正, 1923년 4월 9일~1979년 5월 2일)은 대한민국의 정치인이다. 제6·7대 국회의원을 지냈다.
사단법인 한국번역가협회는 비영리 단체로 번역가를 양성하고 권익을 옹호하기 위하여 1971년에 창립되었다. 현재 매년 3월, 7월, 11월 3회에 걸쳐 번역능력인정시험 (TCT)을 시행하고 있으며, 사무국은 서울시 종로구 새문안로3길 12에 있다.
Remove before flight는 항공기에서 볼 수 있는 경고 메시지이다. 일반적으로 빨간 리본에 써져 있으며, 보호 커버 또는 기계적 부품의 이동을 방지하기 위해 달아둔다.
피키캐스트()는 관심사 소셜 네트워킹 서비스로, '우주의 얕은 재미'라는 슬로건 아래 모바일 콘텐츠 크리에이터 &amp; 큐레이터를 표방하고 있다. "세상을 즐겁게"라는 미션과, "Beyond Normal"이라는 공식 슬로건, "Asia No.1 Mobile Media"라는 비전을 가지고 있다. 한국용 애플리케이션과 대만용 애플리케이션 두 가지를 운영하고 있다. 2015년 6월, 누적 앱 다운로드 수는 900만 건을 넘었고, 2015년 1분기 월간 이용자 수 773만명을 기록하고 있다. 또한, APP 서비스 별 일평균 이용시간 통계에서는 Facebook에 이어 12.1분으로 인스타그램이나 카카오스토리를 제치고 2위를 차지하고 있기도 하다.
피키캐스트 사용자들은 서로를 피키피플, 혹은 핔플이라고 부른다. 피키캐스트는 좋은 사용자 문화를 위해 노력하고 있다. 이것은 사용자들의 특징이라고 할 수도 있지만, 피키캐스트 자체적으로 노력한 결과라고 볼 수도 있다. 2014년 12월 29일에는 '제1회 SUN플 어워드'를 개최하여 BEST 감동부문, BEST 지식부문, BEST 드립부문, BEST 앱부문의 네 부문에서 좋은 댓글을 쓴 이용자들을 선정해 자체 선물인 피키프트(Piki+Gift)를 수여하기도 했다.
사진 등 원래 있던 저작물을 주로 이용해서 콘텐츠를 큐레이팅해 제작하는 방식이기 때문에 원작자의 저작권을 침해한다는 논란이 있다. 이러한 문제점 때문에 피키캐스트의 시발점이라고 할 수 있는 피키캐스트 페이스북 페이지의 경우, 페이스북 측에서 저작권 위반을 명목으로 페이지가 삭제당하기도 했다.
애플리케이션을 출시한 이후에도 이러한 문제는 해결되지 않았는데, 2014년 11월의 경우, 스타트업얼라이언스 센터장의 블로그 글이 무단으로 도용되어 피키캐스트 게시물로 올라가는 사태가 일어나기도 했다. 이에 대해 피키캐스트가 무단 도용 글에 대한 명확한 사태 규정 대신 게시물 삭제라는 방식을 택하면서 피키캐스트의 저작권 문제와 대응 방식에 대한 논의가 수면 위로 떠오르게 되었다. 사용자들 역시 이 콘텐츠와 이에 대한 사과를 피키캐스트 애플리케이션 내부에서는 전혀 찾아볼 수 없게 되어 문제 대응 방식이 부적절하다는 의견이다.
피키캐스트에서는 지속적으로 발생 가능한 저작권 문제를 해결하기 위해 표면적으로나마 여러 저작권 정책을 시행하고 있다. 저작권자에게 이용 동의를 구하고, 원저작권자와 제휴를 맺고, 원 출처를 명시해 링크를 걸고, 저작권 침해 신고를 위한 기능을 만들고, 신고가 들어오면 48시간 내로 조치한다는 것이 그 정책이다. 본인의 저작권이 침해 당한 경우 다음과 같은 절차에 따라 신고할 수 있다. 본인이 저작권자 혹은 법적 대리인일 때, 애플리케이션에 있는 신고 버튼을 눌러 신고하거나 이미지를 길게 눌러 신고할 수 있다. 그 후 신고서를 작성해서 이메일로 전송하면 48시간 이내로 연락을 받을 수 있다. 신고를 하기 위해서는 신분인증서류 및 저작권 증빙서류를 제출해야 한다. 저작권 침해가 확인된 시점 이후 24시간 이내에 해당 게시물의 게재가 중단된다.
에디터 자질 논란.
피키캐스트는 지정한 에디터들만 콘텐츠를 제작할 수 있다. 최근에는 강혜정, 에릭남 같은 연예인들이 에디터로 활동하기도 했다. 문제는 피키캐스트가 불특정 다수가 이용하는 성격을 가지고 있다 보니 에디터들에게 어느 정도 도덕성을 요구할 수 밖에 없다는 것에 있다.
에디터에 대한 가장 큰 논란은 '리뷰왕 김리뷰'라는 에디터로부터 시작되었다. '리뷰왕 김리뷰'는 제작하는 콘텐츠마다 20만번 이상의 조회수를 기록하는 유명 에디터였다. 하지만 그가 '일간베스트'라는 외부 사이트에서 비윤리적인 발언 및 특정 지역을 비하하는 용어 사용 등을 했다는 이유에서 그를 에디터로 더 이상 고용해서는 안된다는 사용자 의견이 제기되었다. 결국 피키캐스트는 이러한 사태에 대해 사과하고 2개월의 정직 처분을 내렸다. 이후 '리뷰왕 김리뷰'가 자진퇴사하였다.
다양한 연령대를 위한 콘텐츠를 다루고 있음에도 불구하고 1.0 버전에서는 미성년자에게 부적합한 콘텐츠에 대한 제약이 없었다. 예를 들어, 여성들의 신체 부위를 강조하는 gif 들을 모아 놓은 콘텐츠나, 성행위에 대해 직접적으로 언급한 콘텐츠들이 제작되었는데, 미성년자들도 이러한 콘텐츠에 아무런 인증 절차 없이 접근할 수 있었다. 이러한 콘텐츠는 방송에서는'15세 이상 시청가' 혹은 '19세 이상 시청가'에 적합한 정도라 보인다.
이러한 문제를 해결하기 위해 피키캐스트는 2.0 버전을 출시하면서 15세 연령 제한을 시작했다. 연령 인증은 휴대폰을 통한 본인인증으로 진행되는데, 이에 따라 해외에 있는 사용자들이 사용하지 못한다는 문제가 제기되기도 했다.
피키캐스트는 3.0 버전을 출시하면서 유저에게 직접적인 영향이 가는 업데이트를 진행했다. 이전에는 UI 변경 등 간접적인 업데이트 위주였지만, 3.0에서는 에디터가 아닌 일반인들 사이의 구독을 삭제한 것이다. 전국민이 알만큼 많은 사람들이 피키캐스트를 이용한 이유는 카카오스토리, 페이스북과 같은 유저간의 만남 공간에서 취향별 질 높은 정보까지 얻을 수 있기 때문인데, 비유하자면 페이스북에서 팔로우를 폐지하는 업데이트를 해버린 것이다. 이로 인해 많은 유저들이 탈퇴하는 등 논란이 있자 피키캐스트는 특정 비매너 유저들만 구독하는 일명 '저격 구독'을 막기 위함이라고 했지만 '구독 불가 설정', '구독자 비공개', '구독자 삭제(취소)', '구독자 숨기기', '유저(구독) 차단' 중 단 1가지만 단순한 시스템으로 제작해 충분이 방지가 가능하고, 사실상 개발자 입장에서도 구독 시스템을 삭제해서 유저 시스템을 재개발 하는 것보단 더욱 쉬운 방식이기 때문에 이를 목적으로 한 것은 아니라 더욱 논란은 커졌다. 따라서, 피키캐스트 일부 유저들은 피키캐스트의 이러한 행위를 봐서 공식적인 입장은 발표하지 않았지만 '저격 구독'을 막으려고 한 것이 아닌 댓글에서의 유저간 '친목'을 막으려고 하는 것이라고 말했지만 댓글을 통해 특정 주제에 대해 유저간의 생각과 정보를 공유하는 것이 원동력인 커뮤니티에서 친목을 막는다는 것은 말이 안되고, 만약 실제로 유저간 친목을 막으려는 목적이었다면 TV와 같이 일방적 송출을 하듯이 댓글 시스템을 폐지하는 것이 정상이다. 하지만 피키캐스트가 아무런 언급이 없는걸 보아 함부로 직접적인 말을 할 수 없는 사항이기 때문에 친목을 막으려는 것이었다는 주장도 설득력이 있다. 피키캐스트 3.0 발표 이후 업데이트 게시물 등에서도 볼 수 있듯이 확연하게 댓글의 수는 물론 유저간 유명인 등의 탈퇴로 질까지 감소하는 문제가 발생해 사실상 피키캐스트 본질의 이용 목적이 사라졌다는 문제가 제기되기도 했다.
프세우다프리티스 우르빌리("Pseudaphritis urvillii")는 페르카목에 속하는 조기어류 물고기의 일종이다. 프세우다프리티스과(Pseudaphritidae)와 프세우다프리티스속("Pseudaphritis")의 유일종이다. 강하형(降河型, catadromous) 물고기, "투퐁(tupong)" 또는 "콩골리(congolli)" 등의 이름으로도 알려져 있다.
민물과 기수(汽水) 그리고 바닷물에서 발견된다. 태즈메이니아주를 포함한 오스트레일리아 남동부 주변 수역에서 발견된다. 흐름이 완만한 강 어귀와 개울에서 주로 서식한다. 수온의 범위는 5~20 °C이다.
그레고리 폴랑코(, 1991년 9월 14일 ~ )은 일본 프로 야구 지바 롯데 마린스의 외야수이다. 엘 커피(El Coffee)라는 별명을 가지고 있다.
마크 웨이드(, 1962년 3월 21일 ~ )는 미국의 만화가이다. 80년대부터 활동한 원로 작가로 DC 코믹스에서 《플래시》, 《킹덤 컴》, 《》, 마블 코믹스에서 《캡틴 아메리카》와 같은 작품의 스토리를 썼다. 2007~2010년의 기간에 그는 붐! 스튜디오의 편집장을 지냈고, 《이리디머블》 등의 작품을 썼다.
마크 웨이드는 1962년 3월 21일 앨라배마주에서 태어났다. 그의 첫 번째 만화책은 4세 때 구매한 《배트맨》 #180이었으며 이후 만화광이 되었다. 10대 초반에 그는 만화책 교환 잡지인 《어메이징 히어로즈》와 《코믹 바이어스 가이드》에 자유 기고를 시작했고, 80년대 중반 《어메이징 히어로즈》의 편집장, DC 코믹스의 편집장 자리에 오를 수 있었다. 이 시기 그는 《리전 오브 슈퍼히어로즈》, 《둠 패트롤》을 써냈다.
츠바키팩토리()는 헬로! 프로젝트에 소속된 일본의 11인조 여성 아이돌 그룹이다.
유닛 이름의 유래는 "만엽의 시대부터 사람들에게 사랑 받고 온 일본 원산의 꽃, 동백나무처럼 단정하고 늠름한 아름다움을 간직하고, 에버그린 싱싱함과 강함을 갖춘 그룹으로 자라길 바란다"으로 알려졌다. 앞서 결성된 코부시팩토리와 마찬가지로 유닛 이름의 전형은 Berryz코보의 활동 정지 후, "헬로! 프로젝트 어드바이저"에 취임하게 된 시미즈 사키도 관여하고 있으며, Berryz코보의 스피릿도 계승해 가게와 "팩토리(공방)"으로 담겨있다.
동년 9월 4일, Zepp Tokyo에서 행해진「하로프로 연수생 발표회 2016 9월 ~SINGING!~」에서 2017년 1월의 메이저 데뷔를 하는 것이 발표되었다.
2021년 1월 20일, Juice=Juice와 츠바키팩토리의 합동 신멤버 오디션의 개최를 발표하였다.
동년 7월 7일, Juice=Juice와 츠바키팩토리의 합동 신멤버 오디션에서 카사이 유우미, 야기 시오리, 후쿠다 마린과 하로프로 연수생의 요후 루노가 합격하여 신멤버로 가입.
2022년 7월 5일, 9th 싱글「アドレナリン・ダメ／弱さじゃないよ、恋は／アイドル天職音頭」(6월 29일 발매)가 오리콘 주간 앨범 차트에서 첫 1위를 획득했다.
2023년 4월 2일, 아사쿠라 키키가 마쿠하리 멧세에서 행해진「Hello! Project 히나페스 2023 츠바키팩토리 프리미엄 ~아사쿠라 키키 졸업 스페셜~」을 기해 츠바키팩토리와 헬로! 프로젝트를 졸업.
동년 4월 13일, 야마기시 리코와 키시모토 유메노가 2023년 가을 콘서트를 기해 츠바키팩토리와 헬로! 프로젝트를 졸업하는 것을 발표하였다.
동년 6월 26일, 헬로! 프로젝트의 전 그룹, 신그룹, 하로프로 연수생과 합동으로 신멤버 오디션「헬로! 프로젝트 25주년 기념 신멤버 오디션」을 개최하는 것을 발표하였다.
동년 11월 6일, 야마기시 리코, 키시모토 유메노가 일본 무도관에서 행해진「츠바키팩토리 콘서트 투어 2023 가을 가석야 ~야마기시 리코 · 키시모토 유메노 졸업 스페셜~ 아카츠키」를 기해 츠바키팩토리와 헬로! 프로젝트를 졸업.
2024년 1월 26일, 니이누마 키소라가 2024년 봄 콘서트를 기해 츠바키팩토리와 헬로! 프로젝트를 졸업하는 것을 발표하였다.
동년 2월 7일,「헬로! 프로젝트 25주년 기념 신멤버 오디션」에서 이시이 미하네, 무라타 유우, 도이 후우카가 합격하여 신멤버로 가입.
동년 6월 10일, 니이누마 키소라가 일본 무도관에서 행해진「츠바키팩토리 콘서트 투어 2024 봄「C'mon Everybody !」니이누마 키소라 졸업 스페셜 ~Ready Go! Now!~」를 기해 츠바키팩토리와 헬로! 프로젝트를 졸업.
동년 7월 13일, 헬로! 프로젝트의 전 그룹, 하로프로 연수생, 하로프로 연수생 홋카이도와 합동으로 신멤버 오디션「헬로! 프로젝트 신멤버 오디션 2024」를 개최하는 것을 발표하였다.
2025년 1월 27일, 야기 시오리가 동년 4월 30일의 일본 무도관에서 결성 10주년 기념 콘서트를 기해 츠바키팩토리와 헬로! 프로젝트를 졸업하는 것을 발표하였다.
동년 4월 30일, 야기 시오리가 일본 무도관에서 행해진「츠바키팩토리 10th Anniversary Concert at BUDOKAN ~OUR DAYS~」를 기해 츠바키팩토리와 헬로! 프로젝트를 졸업.
동년 8월 16일 - 신멤버로 하로프로 연수생 중에서 니시무라 이츠키가 가입하는 것이 발표되었다. 헬로! 프로젝트의 전 그룹, 하로프로 연수생, 하로프로 연수생 홋카이도와 합동으로 신멤버 오디션「헬로! 프로젝트 신멤버 오디션 2025」를 개최하는 것을 발표하였다.
글라시르()는 노르드 신화에 나오는 나무 또는 숲이다. “신들과 인간들 사이에 가장 아름다운” 나무로, 황금으로 된 잎이 달리며 아스가르드의 발홀 대문 앞에 있다고 한다. 글라시르는 《신 에다》의 〈시어법〉에서 언급된다. 《고 에다》 중 〈효르바르드의 아들 헬기의 서사시〉에도 "클라시르의 숲"이라는 뜻의 "글라시스룬드"()라는 표현이 나온다.
레라드()는 노르드 신화에 나오는 나무이다. 위그드라실과 동일시되는 경우도 있다. 레라드는 발홀 지붕 꼭대기 위에 서 있으며, 염소 헤이드룬과 사슴 에이크쉬르니르가 그 줄기를 갉아먹는다.
13세기 초 튜턴 기사단이 디트리히이슈타인(Dietrichstein)이라는 나무로된 요새를 건설하면서 역사가 시작됐다. 1242년 몽골에 의해서 요새가 폐허가 된 이후로는 1377년 헝가리의 지기스문트 왕이 현재의 브란 성 부근에 석재로된 요새를 건설할 것을 명령했다.
부쿠레슈티에서 접근하기 위해서는 먼저 브라쇼브까지 기차를 이용해 와야한다. 브라쇼브 버스터미널에서 약 1시간 정도 소요되며 요금은 7레이이다.
브란을 찾는 관광객들이 가장 많이 찾는 곳은 브란 성이다. 브란 성은 브램 스토커가 쓴 소설 드라큘라에서 드라큘라 백작이 사는 성의 모델이 되었기 때문이다. 드라큘라의 모델이 되었다고 하는 가시 공작 블라드(Vlad the Impaler)는 실제로 이 성에 3일만 머물렀다고 한다.
아노락(Anorak)은 북극 지방의 전통 복장이다. 동물의 털가죽으로 만들어진 것이 특징이다. 이누이트족은 한대 기후가 나타나는 캐나다북부, 알래스카, 그린란드, 시베리아, 스칸디나비아 등 북극 지방에 살고있으며 순록, 바다표범 등을 사냥하며 생활한다. 이들은 가장 쉽게 구할 수 있는 재료인 동물의 가죽과 털로 옷을 만든다. 동물의 가죽과 털로 만든 옷은 추위와 바람을 효과적으로 막을 수있다. 형태는 모자가 달려있고 두껍다.
비행복(飛行服)은 항공기에 탑승 할 때 착용하는 옷이다. 보온성, 실용성, 내구성, 내화성에 치중되어 있다.
비행복은 군용기, 글라이더 및 헬리콥터와 같은 항공기를 비행하는 동안 착용하는 전신 의류이다. 이 옷은 일반적으로 착용자를 따뜻하게 유지하고 실용적이고(주머니가 많음) 내구성이 뛰어나다.(난연성 포함) 외관은 일반적으로 점프 수트와 유사하다. 군용 비행복은 계급 휘장을 보여줄 수도 있다. 실용성 때문에 근접전이나 방문, 승선, 수색, 압수 상황에서 전투복으로 사용하기도 한다.
정명섭(丁明燮, 1910년 2월 12일 ~ 1997년 2월 25일)은 대한민국의 정치인이다. 제3·4·6대 국회의원을 지냈다.
정무식(鄭茂植, 1924년~1988년 7월 15일)은 대한민국의 정치인이다. 제8·9대 국회의원을 지냈다.
정문화(鄭文和, 1940년 5월 2일~)는 대한민국의 정치인이다. 제15·16대 국회의원을 지냈다.
정병학(鄭炳學, 1927년 12월 7일~ )은 대한민국의 정치인이다. 제10대 국회의원을 지냈다.
정상천(鄭相千, 1931년 8월 25일 ~ 2015년 3월 4일)은 대한민국의 정치인이다. 제14·15대 국회의원을 지냈으며 1978년부터 1980년까지 제17대 서울특별시장을 역임했다. 종교는 천주교이며, 세례명은 요셉이다.
정상희(鄭商熙, 1907년 8월 7일 ~ 1981년 3월 7일)는 대한민국의 기업인, 정치인. 삼성전자 초대 대표이사 사장, 제4·5대 국회의원이다. 본관은 온양(溫陽), 자는 신상(神像)이다.
1907년 고려 선종 때 호부상서(現 기재부 장관)를 지낸 정보천의 후손이다.
1930년 중국 상해 교통대학(交通大學) 1년을 수료하고, 1935년 당시 세계 3위 대학이자 일본 명문대 메이지대학(明治大學)에서 법학 학사 학위를 졸업하였다.
1939년 협신산업상사 대표를 시작으로, 8.15 광복 후 1949년 삼호방직·삼호무역 부사장, 1956년 동화통신사 부사장, 1957년 제일화재해상보험주식회사 사장, 1961년 대한방직협회 이사, 1968년 삼호방직무역주식회사 회장, 1969년 삼성전자 초대 대표이사 사장, 1970년 삼성물산 사장, 동방생명보험 대표이사 등을 지냈다.
1958년 자유당 소속으로 충청북도 중원군 선거구에서 제4대 민의원에 당선되었다. 1960년에는 무소속으로 같은 선거구에서 5대 민의원으로 당선되었다.
정선호(鄭善昊, 1938년 1월 1일~)는 대한민국의 기업인, 정치인이다. 제5공화국에서 체육부차관을 지냈으며 제11·12대 국회의원을 지냈다. 대흥제지 대표이사를 지냈다. 본관은 함평.
장학사는 교육연구사와 함께 특정직에 속하는 교육전문직 공무원이다. 일반적으로 직속기관에 근무하는 교육전문직원을 교육연구사, 교육행정기관에 근무하는 교육전문직원을 장학사로 칭한다. 교육청과 교육청 산하기관에서 근무하는 일반행정직 공무원과는 별도로 분류되는 공무원으로, 교육경력 7년 이상인 자가 응시할 수 있는 직종이지만 실제로는 현직 교사가 응시하는 것이 보통이다.
정시채(丁時采, 1936년 4월 5일~2023년 9월 6일)는 대한민국의 관료, 정치인이다. 농림부 장관을 지냈으며 제11·12·14대 국회의원을 지냈다. 본관은 나주이다.
정양숙(鄭良淑, 1949년 3월 10일~)은 대한민국의 정치인이다. 제14대 국회의원을 지냈다.
정영훈(鄭泳薰, 1932년 9월 17일~2011년 4월 19일)은 대한민국의 정치인이다. 제14·15대 국회의원을 지냈다. 호는 부암(芙巖
미국의 텔레비전 시리즈 《워킹 데드》()의 시즌 2는 2011년 10월 16일부터 2012년 3월 18일까지 방영되었다. 총 13개의 에피소드로 이루어져 있다.
투렌()은 프랑스의 전통적인 프로뱅스 중 하나이다. 주요 도시는 투르이다. 1790년 프랑스의 데파르트망에 의해 앵드레루아르, 루아레셰르, 앵드르, 비엔주로 나뉘었다.
송산그린시티(松山그린시티, Songsan Green City)는 대한민국 경기도 화성시 시화간척지 일대에 2030년까지 조성되는 신도시이다. 동측지구, 남측지구, 서측지구로 나뉜다. 현재 동측지구 일부에 주민들이 입주하여 새솔동이 신설되어 있다. 서측지구에는 현재 주민은 없으며 대부분 매립이 완료되지 않아 등기가 되어 있지 않으나 원래부터 송산면으로 등기되었던 토지와 자동차안전연구원 등 매립 후 송산면으로 등기된 토지도 존재한다.
1986년에 5만 명 인구를 수용하는 시화지구 개발 계획이 있었다. 2003년 12월 12일에는 시화지구를 관광, 레저, 연구, 생태가 조화를 이루는 신도시로 개발하는 계획이 수립되었으며, 2005년 7월 19일 이 지역에 대한 명칭을 송산그린시티로 확정하였다. 2008년부터 2009년까지 계획한 토지이용계획은 송산그린시티 개발 계획이며 단계적 개발계획을 보면 1단계는 동측지구, 2단계는 남측지구, 3단계는 서측지구다. 2015년에 대규모 아파트의 분양이 시작되었고 동측지구의 개발이 시작되었으며, 2017년에 남측지구의 개발이 시작되고 2018년에 동측지구의 아파트 입주가 시작되었고 2021년 여름에 동측지구의 마지막 아파트인 대방노블랜드 5차, 6차가입주하고 2022년에 서측지구의 개발이 시작될 예정이다.
리프로그래밍()은 포유류의 발생 과정이나 세포 배양 과정에서 DNA 메틸화 (DNA methylation)와 같은 후성유전학적 표시(epigenetic marks)가 변화되는 과정을 의미한다. 이러한 조절은 종종 히스톤 (histone)의 공유 결합 수정 및 대체와도 관련이 있다.
후성유전학적 표시의 상당 부분 (10%에서 100%)이 빠르게 (수 시간에서 수일) 리프로그래밍되는 현상은 포유류의 세 가지 생애 단계에서 발생한다. 정자 (sperm)와 난자 (oocytes)가 수정된 후 초기 발생 단계에서 거의 100%에 달하는 후성유전학적 표시들은 두 번의 짧은 기간 동안 리프로그래밍된다.
포유류의 수정 후, DNA 메틸화 패턴은 대부분 지워졌다가 초기 배아 발생 과정에서 다시 확립된다. 부모로부터 전달된 대부분의 메틸화는 초기 배아 발생 과정에서 지워지고, 또 배우자 형성 (gametogenesis) 과정에서 다시 지워지며 그때마다 탈메틸화 (demethylation)와 재메틸화 (remethylation)가 일어난다 (유전체 각인이 되어있는 유전자의 DMR (Differentially methylated region)은 여기서 제외된다). 초기 발생 과정에서 일어나는 탈메틸화는 착상 전 기간에 일어난다. 정자와 난자가 수정하여 접합체를 형성한 후, 부계 DNA는 신속하게 탈메틸화되고, 모계 DNA는 더 느리게 탈메틸화되어 거의 메틸화되지 않은 상태의 상실배 (morula)가 형성된다. 배반포 (blastocyst)가 형성된 후 메틸화가 시작될 수 있으며, 배아가 착상 단계에 이르기까지 메틸화가 진행된다. 이 리프로그래밍은 새롭게 형성된 배아가 전분화능 (totipotency)을 갖게 되고, 기존의 후성유전학적 특징을 지우는 과정을 말한다. 착상 후 체세포의 메틸화 패턴은 각 개별 세포 유형을 정의하는 것으로, 단계 및 조직에 따라 다르며 오랜 시간 동안 안정적으로 지속된다.
또한, 생식세포전구체 (primordial germ cells, PGCs) 내에서는 생식세포 형성 중에 탈메틸화가 발생한다. 수정 후 새롭게 형성된 배아를 구성하는 몇몇 세포들은 배융선 (germinal ridge)을 따라 이동하게 되고, 마침내 정자, 난자와 같은 생식세포 (germ cell)가 된다. 유전체 각인 (genomic imprinting)에 의해 양친의 유전체는 각각 다르게 표시 (mark)되지만, 생식세포가 되는 과정 동안에는 모두 새롭게 리프로그래밍된다. 그러므로 배우자형성 (gametogenesis)과정 동안에 생식세포전구체는 원래 양친이 가지고 있던 DNA 메틸화 패턴을 지운 후, 배아의 성별에 따라 재확립되게 된다.
체세포 핵치환과 같이 착상 전 배아를 생체 외에서 조작하는 경우, 각인된 유전체자리의 메틸화 패턴에 이상이 생기는 것이 확인되었으며, 이는 복제된 동물에서 치명적인 영향을 미친다는 것이 보고된 바 있다.
리프로그래밍은 체세포 핵 치환 뿐만 아니라 줄기세포 관련 유전자를 외인성 (exogenous)으로 과발현 시킴으로써 인위적으로 유도할 수도 있다. 즉, 성인의 섬유아세포 (fibroblast)와 같은 성숙한 세포로부터 유도만능줄기세포 (Induced Pluripotent Stem cells, iPSCs)를 만들어 낼 수 있다는 것인데, 그 결과 세포 치료와 같은 의생명과학연구 (biomedical research)를 위한 줄기세포를 배아의 이용 없이 생산할 수 있게 되었다.
생쥐의 정자 유전체는 DNA의 CpG 부위에서 80~90%가 메틸화되어 있으며, 이는 대략 2천만 개의 메틸화 부위에 해당한다. 수정 후, 부 염색체는 DNA 복제가 시작되기 전의 활성 과정 (active process)에 의해 6시간 내에 거의 완전히 탈메틸화된다 (그림의 파란색 선). 성숙한 난모세포에서는 약 40%의 CpG 부위가 메틸화된다. 모 염색체의 탈메틸화는 주로 메틸화 효소가 모체 유래 DNA에 작용하는 것을 차단하고, 복제 중에 메틸화된 모체 DNA가 희석됨으로써 발생한다 (그림의 빨간색 선). 상실배 (16세포 단계)에는 소량의 DNA 메틸화만 존재한다 (그림의 검은색 선). 수정 후 배반포 단계에서는 3.5일째부터 메틸화가 증가하기 시작해, 4.5일에서 5.5일 사이에 메틸화 수준이 12%에서 62%로 급격히 높아지며, 이후 자궁 착상을 거쳐 최대 수준에 도달한다. 수정 7일 후에는 착상된 배아에서 새롭게 형성된 생식세포전구체가 나머지 체세포로부터 분리되며, 이 때 생식세포전구체는 체세포와 거의 유사한 메틸화 수준을 가지게 된다.
착상된 배아에서 새롭게 형성된 생식세포전구체는 체세포에서 유래한다. 이 시점에서 생식세포전구체는 높은 메틸화 수준을 가진다. 이 세포들은 배반포 상태에서 배융선으로 향해 이동하며, 이 과정에서 빠르게 증식하고 두 단계에 걸쳐 탈메틸화가 진행된다. 첫 번째 단계에서는 복제 희석에 의한 탈메틸화가 일어나지만, 두 번째 단계에서는 활성 과정에 의한 탈메틸화가 일어난다. 특히 두 번째 단계에서는 특정 유전자자리 (loci)의 탈메틸화로 이어진다. 이 시점에서 생식세포전구체의 유전체는 전체 생애 주기에서 모든 세포 중 가장 낮은 DNA 메틸화 수준을 나타낸다. 이 과정은 배아 발달 13.5일(E13.5)에 해당하며, 관련 내용은 이 섹션의 두 번째 그림 참조.
수정 후, 부계와 모계의 유전체는 후성유전학적 흔적을 지우고 전분화능을 획득하기 위해 탈메틸화된다. 이 과정에서 비대칭성이 나타난다: 수컷의 핵은 빠르고 능동적으로 탈메틸화된다. 반면 암컷의 핵은 연속적인 세포 분열 동안 수동적으로 탈메틸화된다. DNA 탈메틸화 과정은 염기 절제 복구 및 기타 DNA 수선 기반 메커니즘이 포함된다. 이 과정이 전반적으로 이루어지긴 하지만, 각인된 유전자와 관련된 차별적 메틸화 영역(DMRS), 레트로트랜스포존, 그리고 중심부 이질염색질과 같이 이를 피하는 특정 서열이 있다. 배아가 완전한 유기체로 분화하기 위해서는 재메틸화가 필요하다.
학습 및 기억.
학습과 기억은 일시적인 사고, 언어, 의식과 같은 다른 정신적 과정과는 달리 영속성을 지닌다. 학습과 기억은 구구단처럼 천천히 축적될 수도 있고 뜨거운 난로를 만지는 것처럼 빠르게 축적될 수도 있지만, 한 번 습득하면 의식적으로 오랫동안 기억하여 사용할 수 있다. 공포 조건화 (contexual fear conditioning)를 한 번 경험한 쥐는 특히 강력한 장기 기억을 형성한다. 훈련 후 24시간이 지난 시점에서 해마 뉴런의 쥐 게놈에서 9.17%의 유전자가 차등적으로 메틸화되어 있는 것으로 밝혀졌다. 여기에는 훈련 후 24시간이 지난 시점에서 2,000개 이상의 차등 메틸화된 유전자가 포함되었으며, 그 중 500개 이상의 유전자가 탈메틸화되었다. 뇌의 해마 영역은 공포 기억이 처음 저장되는 곳이지만 (이 섹션의 뇌 그림 참조) 이러한 저장은 일시적이며 해마에 남지 않는다. 쥐의 경우, 조건화 후 단 하루 만에 해마 절제술을 시행하면 공포 조건화가 제거되지만, 조건화 시점과 해마 절제술 시점 사이에 긴 지연(28일)이 있을 경우 상당량의 공포를 유지한다.
리프로그래밍을 처음으로 체외에서 성공시킨 사람은 존 거든(John Gurdon)이다. 그는 1962년에 분화된 장상피세포 (intestinal epithelial cell)를 핵이 제거된 개구리의 난자 (oocytes)에 삽입하여 성숙한 체세포를 배아상태로 되돌릴 수 있음을 증명해냈다. 이러한 공로를 인정받아 그는 2012년에 일본의 과학자인 신야 야마나카와 함께 노벨 생리의학상을 수상하였다. 야마나카는 자신이 발견한 4개의 유전자를 이용하면 거든이 발견한 핵치환에 의한 리프로그래밍과 마찬가지로 성숙한 체세포로부터 유도만능줄기세포를 만들어 낼 수 있다는 것을 2006년에 입증하였으며, 매우 짧은 시간 만에 노벨상을 받는 영예를 안게 되었다.
체세포 핵 치환 (Somatic Cell Nuclear Transfer, SCNT).
난자는 성체의 핵과의 치환을 통해 배아상태로 리프로그래밍 될 수 있다. 리프로그래밍 된 세포는 어떤 세포타입이든 상관없이 새로운 유기체 (organism)로 발달할 수 있는 능력을 가지게 된다. 체세포 핵 치환 과정 동안 난자는 체세포 핵의 조직 특이적 유전자의 발현을 억제하고 배아 특이적 유전자들을 재발현시키기 때문에 해당세포는 배아상태로의 리프로그래밍 이 가능해 진다. 이러한 리프로그래밍은 체세포 에피타입 (somatic epitype)의 발달과는 구분된다. 체세포 에피타입은 발달과정상에서 유전체의 변화 없이 후성유전학적 조절에 의한 유전자 발현 변화를 통해 다른 유기체로 바뀔 수 있는 잠재력을 가지는 상태를 의미한다. 하지만 체세포 핵 치환의 경우 세포의 유전체가 바뀌어 다른 세포타입으로 전환되는 것이기 때문에 체세포 에피타입과는 구분된다. 체세포 핵 치환은 매우 정교한 기술으로 오랜 훈련이 필요한 작업이며, 이를 사람에 적용함에 있어서 사람의 난자를 채취해야 하기 때문에 그 수가 제한적이라는 단점을 가진다.
유도만능줄기세포 리프로그래밍 (Induced Pluripontent Stem cell Reprogramming, iPS reprogramming).
일반적으로 유도만능줄기세포 리프로그래밍은 이미 성숙한 체세포에 리프로그래밍에 필요한 인자 (factor) 4가지(Oct4, Sox2, Klf4, C-Myc)를 인위적으로 과발현시켜 만능줄기세포를 유도해내는 기술을 의미한다. 선택된 인자들은 전사인자 (transcription factor)로 이들의 과발현에 의해 하위 유전자들의 발현이 조절되어 리프로그래밍이 이루어지게 된다. 4가지 유전자를 과발현시키는 방법으로는 바이러스, 플라스미드 벡터, mRNA, 단백질 등이 있다. 이 경우, 모든 종류의 체세포를 이용해 만능줄기세포를 유도할 수 있으며, 과발현 시키는 방법 역시 일반적으로 많은 연구에 쓰이는 기술이기 때문에 체세포 핵치환에 비해 많은 사람들이 쉽게 이용할 수 있는 기술이다.
확률론적 관점에서 OSKM 방법 이해.
다양한 유전적 및 세포적 이질성(heterogenity) 때문에 체외에서 만능성으로 리프로그래밍하는 동안 중요한 사건들의 효율성과 시간 척도를 정량화하는 것은 어려움이 있었다. 이를 해결하기 위해 바이러스 매개 전이를 필요로 하지 않고 리프로그래밍 인자 발현의 이질성을 줄이기 위해, 약물 유도성 Oct4, Sox2, Klf4 및 c-Myc 바이러스 유전자를 동일하게 통합한 '2차' 재프로그래밍 형질전환 시스템이 고안되었었다. 하지만 2차 생쥐의 체세포 재프로그래밍은 새로 감염된 체세포보다 100배 더 높았지만, 유도된 세포의 1-20%만이 3-4주 후에 iPS 세포를 생성했었다. 또한, 다양한 실험 설정에서 부분적으로 재프로그래밍된 '중간' 세포주가 유도되었으며, 이 중 일부는 자발적이거나 추가 조작에 의해 훨씬 나중에 완전히 재프로그래밍된 iPS 세포를 생성할 수 있었다.
몇 주간의 리프로그래밍 유도 기간와 상대적으로 낮은 효율성이 Oct4, Sox2, Klf4 및 c-Myc 유전자 발현을 충분히 제어한 후에도 지속되었기 때문에, 이러한 연구들은 기본적인 후성유전학적 재프로그래밍 메커니즘에 관련된 중요한 질문들을 해결하지 못했었다. 그 질문들에는 리프로그래밍 과정은 시간이 지남에 따라 어떻게 진행되며, 리프로그래밍 인자의 지속적인 발현에도 불구하고 다수의 세포가 리프로그래밍되지 않는 이유는 무엇인지, Oct4, Sox2, Klf4 및 c-Myc에 의해 유도된 노화 또는 세포 자멸사를 회피한 일부 체세포가 다른 세포보다 더 일찍 iPS 세포로 전환되는 이유, Oct4, Sox2, Klf4 및 c-Myc 리프로그래밍 인자를 발현하는 모든 성체 기증 세포가 결국 iPS 세포를 생성하는가에 대한 아니면 추가적인 유전적 또는 소분자 화합물의 조작이 필요성과 높은 리프로그래밍 효율성은 비계통 세포(non-lineage) 또는 성체 줄기 세포에만 국한되어 있는 가에 대한 것이 포함되어 있다.
Hanna 등의 연구자들은 이 현상을 연구하기 위해, 특정 전사 인자의 통합 패턴이 같은 체세포(이 경우 B 세포)를 사용하는 시스템을 사용하여 그림에서처럼 가설을 세우고 실험을 진행하였다. 리프로그래밍은 2주 동안 배양 후 세포 내에서 녹색 형광 단백질로 표지된 NANOG의 발현을 통해 평가되었으며, 이 과정에서 3~5%의 세포에서 관찰되었고 18주 후에는 &gt;92%로 증가하였다. 이는 모든 세포가 유도만능줄기 세포가 될 수 있는 확률적 과정임을 나타냈고. 또한 p53나 그 효과자 p21의 억제는 세포 분열 속도를 증가시켜 리프로그래밍을 가속화할 수 있음을 밝혔다.
세포융합 (Cell Fusion).
세포융합은 두 개 이상의 세포질이 융합하여 단일의 세포막으로 싸여진 상태로 되는 것을 말한다. 세포분열 저해제를 이용하여 두 개의 체세포를 하나의 세포로 융합할 수 있으며, 이 때 두 개의 핵은 여전히 분리되어 존재한다. 이렇게 만들어진 이핵체 (heterokaryon)는 두 개의 핵 중 우위 (dominant)의 핵이 자신의 유전자 발현 패턴을 다른 핵에 강요하여 하위 (recessive)의 핵의 유전자 발현 패턴에 변화가 생기게 된다. 이처럼 세표융합의 결과 두 개의 핵이 공존하는 이핵체의 경우, DNA 복제와 세포분열이 일어나지 않는다는 문제를 가진다.
직접교차분화(Direct Conversion).
성숙한 체세포를 다른 유형의 성숙한 체세포로 직접 변환하는 과정으로, 중간 단계인 유도만능줄기세포(iPSC) 상태로 되돌리지 않고 수행된다. 이 방법은 특정 세포 유형을 보다 효율적이고 안전하게 생성할 수 있는 잠재력을 가지고 있다. 직접 전환의 핵심은 특정 전사 인자를 도입하여 세포의 정체성을 리프로그래밍하는 것이다. 과정이 비교적 빠르고 효율적이며, 중간 단계 없이 목표 세포로 직접 변환할 수 있어 잠재적으로 안전성이 높다. 하지만 세포 유형에 따라 전환 효율이 다를 수 있다.
화학적 리프로그래밍(chemically induced reprogramming).
유도만능줄기세포 제작 방법에 앞서 언급했던 4가지(Oct4, Sox2, Klf4, C-Myc)을 인위적으로 유전자를 과발현 시켜 제작한 방법과는 달리 구조가 알려진 화합물을 활용한 세포의 리프로그래밍이 개발되었다. 본 연구에서 사용한 성인 지방 유래 간질 세포(human adipose stem cell)을 이용해서 먼저, 체세포에서 발견되는 특이적인 유전자 발현을 감소 혹은 억제시키는 화합물질을 처리해서 이들의 특성을 8일 동안 억제시킨다. 이후 후성유전학적인 세포의 특성을 지우기 위해 히스톤 메틸트랜스퍼라제 억제제 등 탈메틸화 유도 화합물 혼합물을 8~12일간 처리한다. 세번째 단계 전분화능줄기세포의 생존에 도움을 주는 녹아웃 혈청 대체제와 ERK와 GSK3를 억제하는 화합물을 처리함으로써 세포 리프로그래밍이 될 수 있다. 이 방법을 사용한 리프로그래밍은 저렴하고 농도 및 시간 의존 방식으로 세포를 제어하기에 쉬우며 대량 생산이 용이하다는 장점이 있다.
리프로그래밍의 단계.
세포 운명이 변경될 수 있다는 발견과 함께, 세포가 재프로그래밍되는 동안 어떤 사건들이 발생하는지에 대한 질문이 중요해졌다. iPSC 리프로그래밍의 최종 산물은 형태(morphology), 증식(proliferation), 유전자 발현, 다능성(pluripotency), 텔로머라제(telomerase) 활성에서 유사하기 때문에, 유전적 및 형태학적 표지자가 재프로그래밍의 어느 단계가 진행 중인지 확인하는 방법으로 사용되었다. 재프로그래밍은 세 가지 단계로 정의된다: 개시(initiation), 성숙(maturation), 안정화(stabilization).
개시(initiation).
시작 단계는 세포 유형 특정 유전자의 하향 조절과 다능성 유전자의 상향 조절과 관련이 있다. 세포가 다능성으로 이동하면서 텔로머라제(telomerase) 활성화가 다시 시작되어 텔로미어(telomere)가 연장된다. 세포 형태는 다능성 유전자 발현을 준비하기 위해 세포가 자신을 수정함에 따라 리프로그래밍 과정에 직접적인 영향을 미칠 수 있다. 시작 단계가 완료되었음을 나타내는 주요 지표는 다능성과 관련된 첫 번째 유전자인 Oct-4 또는 Homeobox 단백질 NANOG의 발현이며, 이 과정에서 세포는 간엽-상피 전환(mesenchymal–epithelial transition)을 거치고, 세포 자살과 세포 노화가 감소한다.
만약 세포가 하나의 체세포에서 다른 체세포로 직접 리프로그래밍된다면, 각 세포 유형과 관련된 유전자들이 상향 조절되거나 하향 조절된다. 이는 직접적인 세포 리프로그래밍을 통해 발생하거나 iPSC와 같은 중간 단계를 거쳐 원하는 세포 유형으로 분화시킬 수 있다.
시작 단계는 세 가지 경로 중 하나를 통해 완료된다: 핵 치환, 세포 융합, 또는 정해진 인자(microRNA, 전사 인자, 후성유전학적 표지자 및 기타 소분자).
체세포 핵 치환(Somatic cell transfer).
난자가 체세포 핵 치환 후 성체 핵을 배아 상태로 재프로그래밍할 수 있어, 이러한 세포로부터 새로운 유기체를 개발할 수 있다.
리프로그래밍은 체세포 에피타입의 발달과는 구별되며, 체세포 에피타입(epitype)은 유기체가 발달 단계를 벗어난 후에도 잠재적으로 변화할 수 있다. 체세포 핵 치환 중 난자는 체세포 핵의 조직 특이적 유전자를 끄고 배아 특이적 유전자를 다시 켠다. 이 과정은 존 거든이 올챙이를 이용한 복제와 돌리 양을 통해 입증되었다. 특히 이러한 사건들은 세포 운명이 되돌릴 수 있는 과정임을 보여주었다.
세포 융합(Cell fusion).
세포 융합은 이핵 세포(heterokaryon)라고 불리는 다핵 세포를 생성하는 데 사용된다. 융합된 세포는 원래는 침묵되어 있던 유전자들이 다시 활성화되고 발현될 수 있도록 한다. 유전자들이 재활성화되면서 세포는 다시 분화할 수 있다. 이핵 세포 재프로그래밍을 돕기 위해 yamanaka 인자와 같은 전사 인자가 여전히 필요한 경우도 있다.
정해진 인자.
체세포 핵 치환과 세포 융합과는 달리, 정의된 인자는 전체 유전체가 아닌 리프로그래밍 인자만 필요하다. 이러한 재프로그래밍 인자에는 마이크로RNA, 전사 인자, 후성 유전적 표지, 기타 소분자가 포함된다. Yamanaka가 발견한 iPSC 발달로 이끄는 원래의 전사 인자에는 Oct4, Sox2, Klf4, c-Myc (OSKM 인자)가 있다. OSKM 인자가 다능성을 유도하고 돕는 것으로 밝혀졌지만, Homeobox 단백질 NANOG, LIN25, TRA-1-60, C/EBPα와 같은 다른 전사 인자들도 리프로그래밍의 효율성을 높이는 데 기여한다. 마이크로RNA와 기타 소분자 주도 과정의 사용은 체세포에서 다능성으로의 분화 효율성을 높이는 수단으로 활용되고 있다.
성숙(maturation).
성숙 단계는 첫 번째 다능성 유전자가 발현되는 시작 단계의 끝에서 시작된다. 이 단계에서 세포는 리프로그래밍 과정을 시작한 요인들로부터 독립할 준비를 한다. iPSC에서 처음으로 감지되는 유전자는 Oct4, Homeobox 단백질 NANOG, Esrrb이며, 이후에 Sox2가 뒤따라 발현된다. 성숙 단계의 후반에서는 트랜스젠 유전자 침묵이 발생하여 세포가 유도된 전사 인자로부터 독립하기 시작함을 나타낸다. 세포가 독립하게 되면 성숙 단계가 끝나고 안정화 단계가 시작된다.
리프로그래밍 효율성이 가변적이고 낮은 효율성으로 입증되었기 때문에, 모든 세포가 성숙 단계를 완료하고 다능성에 도달하지는 않는다. 리프로그래밍을 겪는 일부 세포는 유전자 발현 변화의 스트레스로 인한 산화 스트레스로 인해 성숙 단계의 시작 부분에서 여전히 세포 자살 상태에 있다. 마이크로RNA, 단백질 및 OSKM 인자의 다양한 조합을 사용하면 리프로그래밍의 효율성을 높이는 방향으로 나아가고 있다.
안정화(stabilization).
안정화 단계는 세포가 다능성에 도달한 후에 발생하는 과정들을 의미한다. 한 가지 유전적 표지자는 Sox2의 발현과 X 염색체의 재활성화이며, 후성유전학적 변화로는 텔로머라제가 텔로미어를 연장하고 세포의 후성유전학적 기억을 상실하는 것이 포함된다. 세포의 후성유전학적 기억은 DNA 메틸화의 변화에 의해 재설정되며, 활성화 유도 시티딘 탈아미노효소(activation-induced cytidine deaminase), TET 효소(TET enzymes), 그리고 DNA 메틸트랜스퍼라제(DNA methyltransferase)를 사용하여 성숙 단계부터 안정화 단계까지 진행된다. 세포의 후성유전학적 기억이 상실되면 세 가지 배엽으로 분화할 가능성이 생긴다. 이는 세포가 완전히 재프로그래밍된 것으로 간주되며, 원래의 체세포 유형으로 되돌아가지 않고도 계대 배양이 가능하다는 특징을 가진다.
화학적 리프로그래밍 단계를 통해 인간 체세포가 리프로그래밍 되는 단계는 앞서 서술한 단계와 상이하다.
세포 배양 시스템에서의 리프로그래밍.