Using a mutated pseudo-wild-type protein specifically mutated to prevent precipitation at high pH, the salt bridge’s contribution to the overall free energy of the folded protein state can be determined by performing a point-mutation, altering and, consequently, breaking the salt bridge.
Usando unha proteína mutada de tipo pseudosilvestre que foi especificamente mutada para impedir a súa precipitación a altos pH, a contribución da ponte salina á enerxía libre global do estado pregado da proteína pode determinarse realizando unha mutación puntual, que altera e, en consecuencia, rompe a ponte salina.