Aktivitas Antioksidan Antosianin Buah Lobi-Lobi (Flacourtia inermis Roxb.) Terhadap Kolesterol Total dalam Mencit Antioxidant Activity of Anthocyanin of Batoko Plum Fruit (Flacourtia inermis Roxb.) Against Total Cholesterol in Mice SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi syarat guna mencapai Gelar Sarjana Sains Program Studi Kimia Oleh Elisabet Theofilia Ephipania Latumaerissa 652010032 PROGRAM STUDI KIMIA FAKULTAS SAINS DAN MATEMATIKA UNIVERSITAS KRISTEN SATYA WACANA SALATIGA 2017
MOTTO DAN PERSEMBAHAN Janganlah bersukacita atasku hai musuhku! Sekalipun aku jatuh, aku akan bangun pula, sekalipun aku duduk dalam gelap, Tuhan akan menjadi terangku. (Mikha 7:8) GOD's not death. He surely alive! Glory to GOD in the highest! Karya ini saya persembahkan bagi: . . . Kemuliaan Tuhan Yesus, Sang pemilik hidup Keluarga yang penuh cinta, berkat terbaik Tuhan dalam hidup . . . Terima kasih v
KATA PENGANTAR Terpujilah Allah, hikmat-Nya besar. Begitu kasih-Nya kepada penulis sehingga memampukan penulis menyelesaikan skripsi berjudul "Aktivitas Antioksidan Antosianin Buah Lobi-lobi (Flacourtia inermis Roxb.) Terhadap Kolesterol Total dalam Darah Mencit" ini, dalam rangka menyelesaikan studi Strata 1 guna mencapai gelar Sarjana Sains Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Satya Wacana. Meneliti tentang sumber daya alam di Maluku, dalam hal ini buah Lobi-lobi (Flacourtia inermis Roxb.) muncul dari suatu kerinduan besar penulis untuk mengangkat potensi Maluku dan Indonesia secara keseluruhan di mata dunia. Sumber daya alam potensial yang berlimpah dan belum terjamah seharusnya menjadi kekuatan untuk meningkatkan kesejahteran masyarakat Indonesia. Penelitian dan pengembangan yang berlanjut perlu ditingkatkan guna memenuhi kebutuhan masyarakat Indonesia secara utuh baik dari segi kualitas maupun kuantitasnya. Karena itu, diperlukan peneliti- peneliti muda Indonesia yang mau terus berkarya bagi bangsanya. Terpujilah Allah, hikmat-Nya besar. Begitu cinta-Nya kepada penulis sehingga memperkenankan penulis mendapatkan bantuan dari berbagai pihak dalam mengerjaka skripsi ini. Maka, dengan penuh kasih melalui tulisan ini pun penulis menyampaikan terima kasih kepada: 1. Ibu Dr. Lydia Ninan Lestario, MS dan Ibu dr. Jodelin Muninggar, M.Sc, selaku pembimbing penulisan skripsi yang dengan kasih mendampingi setiap pengerjaan skripsi, membagikan ilmu dengan penuh kerendahan hati, dan dengan lembut mendidik dalam pembentukan karakter yang baik. 2. Ibu Ir. Sri Hartini, M.Sc, selaku Kaprogdi Kimia dan Wali studi yang menyemangati secara moril dan mendukung secara formil hal-hal yang terkait dengan kebutuhan selama perkuliahan di progdi Kimia. 3. Bapak Dr. Suryasatria Trihandaru, M.Sc. nat, selaku dekan Fakultas Sains dan Matematika yang telah memberikan petunjuk dan mengijinkan melaksanakan penelitian. Dan yang dengan kemurahan hati dan kebijaksanaannya menolong setiap penyelesaian kebutuhan proses akademik. 4. Bapak dan Ibu dosen serta semua staff tata usaha FSM UKSW yang dengan setia memberikan waktu, tenaga, pikirannya untuk membekali mahasiswa FSM UKSW dengan ilmu pengetahuan dan pengalaman keilmuan yang memadai. 5. Bapak Lutiyono, A.Md, bapak Slamet Widodo, S.P, bapak Stefanus Agung Wicaksana, A.Md, Ibu Sudaryanti, A.Md, selaku pembimbing khusus kerja laboratorium yang dengan setia dan sigap menolong dalam kelancaran pengujian data penulisan skripsi baik dalam penyediaan kebutuhan kerja laboratorium maupun penyediaan ilmu dan pengetahuan untuk informasi kerja yang memadai. 6. Pendukung terbesar, keluarga yang penuh cinta, Papa Josef, Mama In, kak Welvi, kak Daniel, Sarah, Debora, Ester, Hana, tante Heni, dan oma No yang dengan penuh vi
cinta menyokong kehidupan, memperhatikan dan memenuhi setiap keperluan selama perkuliahan. Doa-doa kalianlah yang menghantarkan saya sampai di saat ini. Juga bagi keluarga besar Latumaerissa dan Syaranamual. 7. Saudara-saudara seiman di Perkantas Salatiga yang terus menyokong iman dalam doa dan tindakan, mengawasi dan mengingatkan dalam setiap tindakan dengan penuh kasih selama menjalani perkuliahan di UKSW, Salatiga. 8. Semua pihak yang tidak dapat disebut satu per satu yang telah membantu, kiranya Tuhan Yesus yang penuh kasih senantiasa memberkati. Penulis berharap agar tulisan ini dapat dimanfaatkan sebaik-baiknya oleh setiap pembaca. Semoga tulisan ini pun dapat menjadi pijakan penelitian yang baik untuk perkembangan ilmu pengetahuan dan teknologi ke depan. Hiduplah garbah ilmiah kita. Kiranya Tuhan Yesus senantiasa memberkati kita. Salatiga, 27 Januari 2017 Elisabet Theofilia Ephifania Latumaerissa vii
ABSTRAK Modifikasi lipid dalam darah memegang peran penting pembentukan LDL teroksidasi yang akan terakumulasi sebagai sel busa yang berujung pada aterosklerosis dan penyakit jantung. Lobi-lobi (Flacourti inermis Roxb.) merupakan salah satu sumber daya alam yang mengandung antosianin dan dapat menghambat oksidasi lipid. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan kandungan antosianin dan aktivitas antioksidan buah lobi-lobi, dan menentukan pengaruh asupannya (variasi dosis:13.975 mg/kg BB; 27.95 mg/kg BB; 41.925 mg/kg BB; and 51.90 mg/kg BB) terhadap konsentrasi kolesterol total secara in vivo. Aktivitas antioksidan ditentukan menurut metode kemampuan mereduksi dan penangkapan radikal DPPH. Sedangkan penentuan kandungan antosianin total digunakan metode diferensial pH dalam ekstrak metanol-HCl 1%. Antosianin total yang terdapat pada lobi-lobi adalah 141.27 ± 0.199 mg/100 g. Ekstrak metanol menunjukkan aktivitas antioksidan yang sedang pada pengujian penangkapan radikal DPPH dengan nilai IC50 sebesar 67.6 µg/L dan 0.0179 ± 0.001 K4Fe(CN)6 mek/g berdasarkan uji kemampuan mereduksi.Asupan lobi-lobi pada dosis 55.90 mg/kg BB selama 3 minggu secara kasar menghasilkan persen penurunan konsentrasi kolesterol total pada mencit (70.78 %). Keywords: aktivitas antioksidan, antosianin, Flacourtia inermis Roxb., kolesterol total, penyakit jantung ABSTRACT Modification of blood lipids of low density lipoprotein (LDL) play a crucial role of oxidized LDL that accumulated as foam cell which can lead to atherosclerosis and heart disease. Batoko plum fruit (Flacourtia inermis Roxb.) is one of anthocyanin containing natural resources of East Indonesia that can inhibit lipid oxidation. The aims of this research were to determine anthocyanin content and antioxidant activity of batoko plum, and determine the effect of its intake (with various of doses: 13.75 mg.kg-1 of weights; 27.95 mg.kg-1 of weights; 41.925 mg.kg- 1 of weights; and 55.90 mg.kg-1 of weights) of the total cholesterol based on in vivo experiment. Antioxidant activity of F. inermis was determined by reducing power and DPPH radical scavenging methods. Whereas, the pH differential method for determine the content of anthocyanin which its extraction method is maceration by using methanol-HCl 0,01%. Total anthocyanin were present in lobi-lobi at 141.27 ± 0.199 mg.100 g-1. Methanolic extracts showed the moderate antioxidant activity in the DPPH radical scavenging assay with IC50 value of 67.6 µg.L-1and 0.0179 ± 0.001 K4Fe(CN)6 Eq.g-1based on reducing power assay. Intake of batoko plumdietat dose of 55.90 mg.kg-1 of weights for 3 weeks widely resulted the highest percentage of decreases in total cholesterol concentration of mice (70.78 %). Keywords: anthocyanin, antioxidant activity, Flacourtia inermis Roxb., heart disease, total cholesterol viii
DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL i PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT..... .. ii PERNYATAAN PERSTUJUAN AKSES... ... ... iii PERNYATAAN PERSETUJUAN PEMBIMBING... iv LEMBAR PENGESAHAN... v MOTTO DAN PERSEMBAHAN... .... KATA PENGANTAR ... . vi ABSTRAK... ... ... . viii ix DAFTAR ISI... ... ... . x DAFTAR TABEL... ... x DAFTAR GAMBAR....... . 1 BAB 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... ... 1 3 BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Lobi-Lobi (Flacourtia inermis Roxb.) ... .. 3 2.2. Antosianin ... .. 4 2.3. Antioksidan ... ... 5 9 BAB 3 METODE PENELITIAN 3.1. Bahan dan Piranti ... ... 9 3.1.1. Bahan ... ... 9 3.1.2. Piranti ... ... 9 3.2. Metode ... ... 9 3.2.1. Pengukuran Kadar Air ... ... 9 3.2.2. Ekstraksi Sampel ... . 9 3.2.3. Kandungan Antosianin Total ... .. 10 3.2.4. Pengukuran Aktivitas Antioksidan Metode KemampuanMerduksi... 10 3.2.5. Pengukuran Aktivitas Antioksidan Metode Penghambatan Radikal Bebas DPPH ... 3.2.6. Uji in vivo Antikolesterol ... 3.2.7. Analisa Data ... BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Kandungan Antosianin Total ... .... 4.2. Aktivitas Antioksidan Berdasarkan Metode Kemampuan Mereduksi ... .. 4.3. Aktivitas Antioksidan Berdasarkan Metode Penghambatan Radikal DPPH ... ... 4.4. Pengaruh Diet Sari Buah Lobi-lobi Terhadap Kolesterol Total dalam Darah Mencit ... ... BAB 5 KESIMPULAN... . DAFTAR PUSTAKA... ... LAMPIRAN... .. 10 11 11 12 12 13 13 15 18 19 22 ix
DAFTAR TABEL Tabel 2.1 Kandungan gizi dalam 100 g buah lobi-lobi ... .. Tabel 4.1 Kandungan antosianin total dalam buah lobi-lobi ... . Tabel4.2Persentasi pengahambatan senyawa radikal DPPH dalam beberapa konsentrasi larutan ekstrak buah lobi-lobi dibandingkan dengan antioksidan sintesis lainnya ... ... Tabel 4.3Kadar kolesterol total dan berat badan mencit sebelum dan sesudah perlakuan ... .. DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Buah Lobi-lobi ... ... Gambar 2.2 Struktur dasar senyawa antosianin (inti flavan) ... . Gambar 2.3 Sasaran reaksi radikal bebas ... ... Gambar2.4 Reaksi senyawa DPPH dengan senyawa antioksidan. Diphenylpicrylhidrazyl (radikal bebas) menjadi ... ... 4- menjadi Fe((CN)6)3↓ ... .. Gambar 2.5 Reaksi reduksi Fe(CN)6 Gambar4.1 Kurva korelasi antara konsentrasi ekstrak lobi-lobi dan aktivitas antioksidan ... Gambar 4.2 Penurunan kolesterol total dalam mencit yang diberi asupan sari buah lobi-lobi dengan pembanding kontrol selama 3 minggu ... .. 4 12 14 16 4 5 7 8 9 15 16 x