PENGARUH PEMBERIAN TEH KOMBUCHA DOSIS BERTINGKAT PERORAL TERHADAP GAMBARAN HISTOLOGIK GASTER MENCIT STRAIN BALB/C ARTIKEL KARYA TULIS ILMIAH Diajukan untuk Memenuhi Tugas dan Melengkapi Syarat dalam Menempuh Program Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Disusun oleh : ARIEF BUDI SAPTANI G2A004024 FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS DIPONEGORO SEMARANG 2008
HALAMAN PENGESAHAN Telah disetujui oleh dosen pembimbing, artikel karya tulis ilmiah dari : Nama : Arief Budi Saptani NIM : G2A 004 024 Tingkat : Program Pendidikan Sarjana Fakultas : Universitas Diponegoro Judul : Pengaruh Pemberian Teh Kombucha Dosis Bertingkat Peroral Terhadap Gambaran Histologik Gaster Mencit Strain Balb/C Dosen pembimbing : dr.Akhmad Ismail, Msi Med Semarang, 29 juni 2008 Dosen Pembimbing dr. Akhmad ismail , Msi Med NIP : 132 162 894
THE EFFECT OF GRADUAL DOSES OF KOMBUCHA TEA ORALLY TO GASTRIC HISTOLOGICAL APPEARANCE OF BALB/C MICE Arief Budi Saptania),Akhmad Ismailb) ABSTRACT Background : Kombucha tea has been used as traditional medicine to stabilize metabolism and neutralize the poison, so it is believed can cure constipation, expedite digestion and against arteriosklerosis. But there are only a few researches about side effects of kombucha tea. The objective of this study is to investigate the effect of gradual doses of kombucha tea orally to gastric histological appearance of balb/c mice Methods: This study was an experimental study with post test only control group design. The sampel were 20 male 8 weeks balb/c mice, that randomly allocated into 4 groups. group K recieved only standard food, group P1 received kombucha tea 0,26 ml/2x/day , group P2 received kombucha tea 0,39 ml/2x/day, group P3 received 0,59 ml/2x/day. Data were collected from investigation of gastric histological appeareance of mice. The difference of measured parameters between groups were analyzed by Mann-Whitney. Data were analyzed by SPSS 12,0 for windows Result : Mean score of epithelial integrity of gastric from four groups were significantly different (p = 0,020). Mean score of gastric epithelial integrity in K group (0,40 + 0,31)were the lowest. Meanwhile, the mean score in P3 group (1,48+ 0,11) were the highest. The Mann-Whitney test showed significant difference in K-P1(p=0,016), K-P2(0,008), K-P3 (p=0,008), and P1-P3(0,008) Conclusion : There was significant changes in gastric histological appearance of mice in supplementation of kombucha tea for 3 weeks Keywords : Kombucha tea, gastric histological appearance a)Student Of Medical Faculty, Diponogoro University,Semarang b) Lecturer, Histology Departement Of Medical Faculty, Diponogoro University, Semarang v iii
PENGARUH PEMBERIAN TEH KOMBUCHA DOSIS BERTINGKAT PERORAL TERHADAP GAMBARAN HISTOLOGIK GASTER MENCIT STRAIN BALB/c Arief Budi Saptania), Akhmad Ismailb) ABSTRAK Latar Belakang: Teh kombucha telah banyak digunakan sebagai obat tradisional untuk menstabilkan metabolisme dan menawarkan racun sehingga dipercaya dapat mengobati sembelit, melancarkan pencernaan dan melawan arteriosklerosis. Namun belum banyak penelitian mengenai efek samping dari penggunaan teh kombucha. Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui penagaruh pemberian teh kombucha dosis bertingkat terhadap gambaran histologi gaster mencit strain BALB/c Metoda: Penelitian eksperimental Post Test Only Control Group Design. Sampel terdiri dari 20 ekor mencit Balb/c jantan umur 8 minggu yang di bagi 4 kelompok, kelompok control hanya mendapat pakan standar, kelompok perlakuan satu (P1) mendapat teh kombucha 0.26 ml/2x/hari, perlakuan 2 (P2) mendapat teh kombucha0,39 ml/2x/hari dan perlakuan 3 (P3) mendapat teh kombucha 0,59 ml/2x/hari. Data diperoleh dari pemeriksaan gambaran histologi gaster mencit. Analisis data dengan SPSS 12,0 for windows, dilakukan uji normalitas Shapiro- Wilk dan dilanjutkan dengan uji statistic non parametric Kruskal-Wallis dan tes Mann Whitney Hasil: Rerata skor integritas epitel dari keempat kelompok bermakna (p=0,020). Rerata skor integritas epitel kelompok K adalah paling kecil, yaitu0,40 + 0,31..Sedangkan rerata skor integritas epitel yang paling besar adalah P3, yaitu 1,48+ 0,11. Uji Mann-Whitney didapatkan perbedaan bermakna pada K-P1(p=0,016), K-P2(0,008), K-P3 (p=0,008), dan P1-P3(0,008) Kesimpulan: Terjadi perubahan gambaran histologi gaster yang bermakna pada pemberian teh kombucha dengan dosis bertingkat selama 3 minggu Kata kunci : teh kombucha, histologi gaster a) Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Diponogoro Semarang b) Staf pengajar Bagian Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Diponogoro Semarang
PENDAHULUAN Kecenderungan penggunaan obat tradisional saat ini cukup tinggi. Diantaranya adalah jamur teh yang di kenal dengan teh Kombucha, kombucha (cairan jamur teh ) adalah salah satu probiotik yang mulai populer di konsumsi sebagai obat pada tahun 2002 baik di negara-negara Asia, maupun di Eropa dan Amerika.1 Khasiat dari teh kombucha ini pun bermacam-macam. Hal ini disebabkan oleh karena Kombucha tidak khas membidik organ tertentu, namun mempengaruhi tubuh secara menyeluruh dengan menstabilkan metabolisme tubuh dan menawarkan racun. Manfaat yang di dapat antara lain adalah mengobati sembelit atau melancarkan pencernaan, menawarkan racun, membunuh kanker, dan melawan arteriosklerosis, serta bermanfaat untuk imunitas tubuh 1,2 Penelitian tentang efek terapetik dari penggunaan teh kombucha ini tidak di imbangi dengan penelitian mengenai efek samping penggunannya. Hanya beberapa kasus yang berkaitan dengan efek samping penggunaan teh Kombucha ini yaitu hepatotoksis, asidosis metabolik, ikterik, cemas, gangguan di mulut, kram, mual dan nyeri perut.3 Adanya efek samping yang berupa mual dan nyeri perut ini tampaknya merupakan reaksi pembersihan yang di sebut dengan "Healing process". Gejala seperti ini bisa di sebabkan oleh tiga sebab,yaitu adanya reaksi alergi terhadap asam-asam organik pada penderita. Kedua disebabkan oleh aktivitas sitokin. Dan yang terakhir karena kelemahan dan gangguan pada ginjal dan vesika urinaria4 v v
Sampai saat ini belum banyak penelitian mengenai efek samping penggunaan teh Kombucha. Terutama yang meneliti tentang efek Kombucha terhadap histologi gaster. Salah satunya penelitian terhadap organ hewan coba tikus putih (mus musculus), yaitu hepar, dilakukan oleh Sigit Eko Kusworo. Penelitian tersebut memberikan teh kombucha per oral dengan dosis bertingkat 0,13 ml/20g BB/hari, 0,26 ml/20g BB/hari, 0,39 ml/20 g BB/hari, 0,13 ml/20 g BB 2x/hari, 0,26 ml/ 20g BB 2x/hari dan 0,39 ml/20 g BB 2x/hari selama 35 hari. Hasil penelitian menunjukkan pada perlakuan dengan dosis 0,39 ml/ 20g BB/hari sel mulai terlihat tidak jelas batas-batasnya, pada perlakuan dengan dosis 0,13ml/20g BB 2x/hari inti kariolisis mulai terlihat, dan pada perlakuan dengan dosis 0,26ml/20g BB 2x/hari eritrosit mulai terlihat dalam jumlah yang cukup banyak sehingga hepar mengalami perdarahan.7 Penyakit gaster, terutama gastritis dan ulkus peptik masih merupakan masalah kesehatan yang angka kejadiannya relatif tinggi. Dalam hal ini pola makan yang salah, jenis dan jumlah makanan yang dikonsumsi merupakan faktor pencetus yang sering ditemukan. Obat-obatan, alkohol, zat kimia, kafein, terbukti dapat menigkatkan sekresi asam lambung yang kemudian dapat menimbulkan reaksi erosif mukosa lambung. Jalur aktivasi ini melalui reseptor vagus, histamin, asetil kolin, dan reseptor gastrin yang terdapat dalam mukosa lambung.5 Berawal dari permasalahan ini, peneliti bermaksud melakukan analisa secara ilmiah tentang pengaruh pemberian teh kombucha dosis bertingkat terhadap gambaran histologik gaster.
METODE PENELITIAN Penelitian ini meliputi bidang Histologi, Patologi Anatomi Dan Farmakologi.Penelitian dilakasanakan di laboratorium Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Diponogoro.Pengumpulan data dilakukan selama 12 minggu.Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental dengan pendekatan the post test only control group design yang menggunakan mencit jantan strain Balb/c sebagai objek penelitian. Populasi penelitian ini adalah mencit Balb/c jantan yang diperoleh dari pusat penelitian hewan coba Surabaya.Sedangkan sample penelitian ini diperoleh dari populasi yang ada secara random. Penentuan besar sample berdasarkan ketentuan WHO dengan jumlah sample minimal 5 ekor per kelompok12. Pada penelitian ini terdiri dari 4 kelompok perlakuan , dimana setiap kelompok terdapat 6 ekor mencit, sehingga jumlah sample yang dibutuhkan 24 ekor mencit.Kriteria inklusinya adalah mencit jantan,umur 8 minggu, sehat, berat kurang lebih 20 gram,tidak terdapat cacat anatomi. Sebagai kriteria eksklusi yaitu mencit tampak sakit ( gerakan tidak aktif ) atau mati saat proses adaptasi atau perlakuan dan terdapat abnormalitas anatomi Variabel bebas penelitian ini adalah teh kombucha yang diberikan secara bertingkat dan variabel tergantung penelitian ini adalah gambaran mikroskopis gaster mencit Balb/c. Data yang dikumpulkan dalam penelitian ini adalah data primer hasil pengamatan gambaran histologi gaster mencit Balb/c dari kelompok perlakuan yang di bandingkan dengan kelompok kontrol.Cara pengumpulan data dengan cara seluruh sample yang berjumlah 24 mencit, dibuat 4 kelompok masing-masing terdiri dari 6 ekor mencit yang dibagi secara acak. Kelompok v vii
pertama adalah kontrol yang diberi pakan standar. Sedangkan kelompok lainnya mendapat perlakuan dengan diberi teh kombucha dosis bertingkat. Keempat kelompok mencit tersebut adalah. Kontrol (K) tidak diberi perlakuan, Perlakuan 1 (P1) diberi teh kombucha 0.26 ml 2x/hari/sonde, Perlakuan 2 (P2) diberi teh kombucha 0,39 ml 2x/hari/sonde, Perlakuan 3 (P3) diberi teh kombucha 0,59 ml 2x/hari/sonde. Sebelum diberi perlakuan, seluruh mencit diadaptasikan dulu dengan dikandangkan per kelompok dan diberi pakan standard dan minuman yang sama selama 1 minggu secara ad libitium. Setelah itu masing-masing kelompok mencit mendapat perlakuan berbeda selama 3 minggu. Mencit diperlakukan seperti diatas, dimana teh kombucha diberikan dengan sonde lambung selama 3 minggu. Kemudian mencit dibunuh (dekapitasi) untuk pengambilan lambung mencit dengan metode laparotomy, bagian gaster yang diambil adalah corpus gaster, kemudian dibuat preparat yang di proses dengan metode baku histologi Tjarta Achmad13. Lalu dilakukan pemeriksaan mikroskopis Dari setiap mencit dibuat 2 preparat lambung dan tiap preparat dibaca dalam 5 lapangan pandang yaitu pada keempat sudut dan bagian tengah preparat dengan perbesaran 100x dan 400x. Sasaran yang di baca adalah gambaran struktur histologis lambung mencit. Data pemeriksaan ditulis dalam formulir untuk kemudian dianalisa Data yang dikumpulkan dalam penelitian ini adalah data primer yang diperoleh dari lambung mencit, dimana pengamatan dilakukan dengan melihat
gambaran histologik yang tampak pada lapisan mukosa lambung,yaitu integrasi epitelnya pada tiap-tiap kelompok perlakuan di bandingkan dengan kontrol. Setelah dilihat gambaran mikroskopisnya, kemudian akan dilakukan penilaian melalui scoring berdasarkan modifikasi dari Manja Barthel dkk.6 Pengukuran derajat kerusakan lambung dikuantitatifkan dengan menggunakan scorring sebagai berikut : Tabel 1. Skor integritas epitel mukosa modifikasi ManjaBarthel dkk6 No. Skor Integritas epitel mukosa 1. 0 Tidak ada perubahan patologis 2. 1 lepasnya epitel 3. 2 Kerusakan lapisan mukosa ( 1-10 sel /lesi) 4. 3 Ulserasi epitel (gap >10 sel epitel/lesi) HASIL PENELITIAN Data dianalisa secara deskriptif kemudian hasil disajikan dalam bentuk tabel dan grafik Box-plot. Uji hipotesa dilakukan dengan menggunakan statistik non parametrik yaitu Kruskal Wallis. Hasil yang didapatkan signifikan sehingga dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney U. v ix
Tabel 2. Rerata skor integritas epitel pada kelompok kontrol (n=5), perlakuan 1 (n=5), perlakuan 2 (n=5) dan perlakuan 3 (n=5) Kelompok Mean Median SD Kontrol 0,40 0,40 0,31 Perlakuan 1 0,96 1,00 0,17 Perlakuan 2 1,20 1,20 0,37 Perlakuan 3 1,48 1,40 0,11 Rerata skor integritas epitel dari keempat kelompok bermakna (p=0,002). Rerata skor integritas epitel kelompok K adalah paling kecil, yaitu 0,40. Sedangkan rerata skor integritas epitel yang paling besar adalah P3, yaitu 1,48 Tabel 3. Hasil uji statistik perbandingan antar kelompok (Mann-Whitney U) Ada perbedaan yang bermakna ( p<0,05) K P1 P2 P3 Kontrol
0,016
0,008
0,008
Perlakuan 1 0,016*
0,310 0,008
Perlakuan 2 0,008
0,310
0,151 Perlakuan 3 0,008
0,008
0,151
Hasil perbedaan antar kelompok dengan uji Mann-Whitney U membuktikan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna (p<0,05) pada kelompok- kelompok sebagai berikut : K dan P1; K dan P2; K dan P3; P1 dan P3. Sedangkan P1 dan P2 serta P2 dan P3 tidak berbeda bermakna karena dibutuhkan rentang dosis yang cukup lebar untuk mendapatkan hasil yang bermakna.
Gambar 1. Grafik box-plot skor derajat perubahan histopatologi gaster R E T S A G 2.00 11 s k e d n 1.50 1.00 I 0.50 0.00 PERLAKUAN P1 Kontrol P2 P3 Treatment Median dari kelompok kontrol, perlakuan 1, perlakuan 2, perlakuan 3 jauh berbeda. Median terbesar terdapat pada perlakuan 3, sedangkan yang terkecil terdapat pada kontrol. PEMBAHASAN Dari penelitian ini diperoleh hasil bahwa pemberian teh kombucha dengan dosis bertingkat dari 0,26 ml;0,39 ml;0,59 ml sebanyak 2 kali sehari selama 35 hari didapatkan perubahan bermakna gambaran histologi gaster pada mencit strain balb/c berupa iritasi mukosa gaster. Rerata skor integritas epitel masing-masing kelompok adalah kontrol (0,40), perlakuan 1 (0,96), perlakuan 2 (1,20), perlakuan 3 (1,48). Hasil ini v xi
menunjukkan pemberian teh kombucha pada dosis 0,59 ml menyebabkan iritasi mukosa lambung mencit paling besar. Kombucha mengandung banyak asam organik, vitamin B1, B2, B6, B12, asam folat, vitamin C, asam amino esensial dan berbagai enzim penting. Kandungan asam organiknya terdiri dari asam laktat, asam asetat, asam glukoronat, asam usnat, asam oksalat, asam sitrat, asam malat, asam glukonat, asam butirat, asam nukleat, asam kondroitin, dan asam hialuronik.8 Hal ini yang mungkin dapat menghilangkan barier mukosa atau hilangnya integritas epitel permukaan. Karena kombinasi asam dan empedu akan merusak epitel dan meningkatkan permeabilitas mukosa.9. Keadaan ini dapat menyebabkan gastritis hingga ulserasi peptikum Gastritis merupakan respon terhadap cedera kimia iritan oleh alkohol atau obat. Bahan-bahan ini menyebabkan eksfoliasi sel epitel permukaan dan mengurangi sekresi mukus yang merupakan berier protektif terhadap serangan asam. Erosi pada gastritis akut sering multiple dengan perdarahan yang berat serta mengancam hidup penderita.10 Sedangkan ulserasi peptikum adalah kerusakan pada mukosa yang melapisi saluran pencernaan akibat serangan asam dan pepsin. Ulkus gaster dapat berlangsung akut atau kronis.11 KESIMPULAN Terjadi perubahan gambaran histologi gaster yang bermakna pada pemberian teh kombucha dengan dosis bertingkat selama 3 minggu
SARAN Perlu dilaksanakan penelitan lebih lanjut tentang pengaruh pemberian teh kombucha terhadap gambaran histologik lambung dengan menggunakan dosis yang lebih tinggi. UCAPAN TERIMA KASIH Penulis memanjatkan puji syukur yang terhingga kepada Allah SWT dan berterima kasih kepada dr. Akhmad Ismail atas bimbingan dan koreksi yang selama ini diberikan, dr. Ika Prawitra selaku reviewer, staf bagian histologi FK UNDIP, staf bagian patologi anatomi FK UNDIP, keluarga, teman-teman dan pihak lain yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah membantu terlaksananya artikel penelitian ini v xiii
DAFTAR PUSTAKA 1. Pengobatan Tradisional Tetap Diminati Masyarakat. Available from URL : HYPERLINK 1670174.htm.2005. Disitasi pada tanggal 3 Februari 2008. 2. Kombucha Manchurian Tea. Available from URL : HYPERLINK 2005. Disitasi tanggal 24 November 2007. 3. kombucha the beverage of long, healty life. Available from URL : HYPERLINK . 2002. Disitasi pada tanggal 23 November 2007. 4. Available from URL : HYPERLINK 2006. Disitasi tanggal 23 November 2007. 5. Ganong . F. W . buku ajar fisiologi kedokteran; editor Bahasa Indonesia Widjyakusumah D.M Ed 17 . Jakarta:EGC. 1998: 478-484 6. Barthel M, Hapfelmeier S, Quintanilla-Martínez L, Kremer M, Rohde M, Hogardt M, et al. Pretreatment of mice with streptomycin provides a Salmonella enterica serovar typhimurium colitis model that allows analysis of both pathogen and host. Available from URL:
7. Kusworo SE. Efek pemberian teh kombucha per oral terhadap struktur mikroanatomi hepar tikus putih (Mus Musculus). Available from URL : HYPERLINK sogitekoku-6712. 2007. Disitasi 29 November 2007. 8. How Does Kombucha Culture Work?. Available from URL : HYPERLINK Disitasi pada tanggal 20 November 2008. 9. Robbin S, Kumar V. buku ajar patologi II (Basic Pathologhy) ; alih bahasa : Staf Pengajar Laboratorium Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Jakarta : EGC. 1995: 241-250. 10. Macfarlane PS, Reid R,Callender R, Pathology Ilustrated. 5th ed. Churchill livingstone: New York. 2000: 301-310 11. Underwood J.E.C; editor bahasa Indonesia ; Sarjadi. Ed 2. Jakarta: EGC. 1999: 430-437 12. World Health Organization. Research Guidelines for Evaluating the Safety and Efficacy of Herbal Medicines. Manila: World Health Organization Regional Office for the Western Pacific: 1993. v xv
LAMPIRAN 1 Descriptives Indeks Treatment Kontrol P1 P2 Mean 95% Confidence Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std. Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Confidence Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std. Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Mean 95% Confidence Interval for Mean 5% Trimmed Mean Median Variance Std. Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Statistic .4000 .0074 .7926 .4000 .4000 .100 .31623 .00 .80 .80 .60 .000 1.200 .9600 .7522 1.1678 .9556 1.0000 .028 .16733 .80 1.20 .40 .30 .512 .612 1.2000 .7354 1.6646 1.1889 1.2000 .140 .37417 .80 1.80 1.00 .60 1.145 2.000 Std. Error .14142 .913 2.000 .07483 .913 2.000 .16733 .913 2.000
P3 Mean 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 5% Trimmed Mean Median Variance Std. Deviation Minimum Maximum Range Interquartile Range Skewness Kurtosis Tests of Normality Kolmogorov-Smirnov(a) Indeks Treatment Kontrol P1 Statistic .136 .231 df 5 5 Sig. .200(*) .200(*) P2 .300 5 .161 P3 .367 5 .026 This is a lower bound of the true significance. a Lilliefors Significance Correction Detrended Normal Q-Q Plots 2.00 11 1.50 s k e d n 1.00 I 0.50 0.00 Kontrol P1 P2 P3 Treatment v 1.4800 .04899 1.3440 1.6160 1.4778 1.4000 .012 .10954 1.40 1.60 .20 .20 .609 .913 3.333 2.000 Shapiro-Wilk Statistic df Sig. .987 .881 5 5 .967 .314 .908 5 .453 .684 5 .006 xvii
Kruskal-Wallis Test Ranks Indeks Treatment Kontrol P1 N 5 5 Mean Rank 3.30 9.20 P2 5 12.50 P3 5 17.00 Total 20 Test Statistics(a,b) Indeks Chi-Square df 14.505 3 Asymp. Sig. .002 a Kruskal Wallis Test b Grouping Variable: Treatment NPAR TESTS /M-W= Indeks BY Treatment(1 2) /MISSING ANALYSIS. NPar Tests [DataSet0] C:\Documents and Settings\Administrator\My Documents\Abud\dta abud.sav Mann-Whitney Test Ranks Indeks Treatment Kontrol P1 N 5 5 Mean Rank 3.20 7.80 Sum of Ranks 16.00 39.00 Total 10 Test Statistics(b) Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W 1.000 16.000 Z 2.440 Asymp. Sig. (2-tailed) .015 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .016(a) a Not corrected for ties. b Grouping Variable: Treatment NPAR TESTS
/M-W= Indeks BY Treatment(1 3) /MISSING ANALYSIS. NPar Tests [DataSet0] C:\Documents and Settings\Administrator\My Documents\Abud\dta abud.sav Mann-Whitney Test Ranks Indeks Treatment Kontrol P2 N 5 5 Mean Rank 3.10 7.90 Sum of Ranks 15.50 39.50 Total 10 Test Statistics(b) Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W .500 15.500 Z 2.522 Asymp. Sig. (2-tailed) .012 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008(a) a Not corrected for ties. b Grouping Variable: Treatment NPAR TESTS /M-W= Indeks BY Treatment(1 4) /MISSING ANALYSIS. NPar Tests [DataSet0] C:\Documents and Settings\Administrator\My Documents\Abud\dta abud.sav Mann-Whitney Test Ranks Indeks Treatment Kontrol P3 N 5 5 Mean Rank 3.00 8.00 Sum of Ranks 15.00 40.00 Total 10 Test Statistics(b) v xix
Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W .000 15.000 Z 2.652 Asymp. Sig. (2-tailed) .008 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008(a) a Not corrected for ties. b Grouping Variable: Treatment Mann-Whitney Test Ranks Indeks Treatment P1 P2 Total N 5 5 10 Mean Rank 4.40 6.60 Test Statisticsb Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 7.000 22.000 -1.193 .233 a .310 a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Treatment NPAR TESTS /M-W= Indeks BY Treatment(2 4) /MISSING ANALYSIS. NPar Tests [DataSet0] F:\SPSS Abud.sav Mann-Whitney Test Sum of Ranks 22.00 33.00
Ranks Indeks Treatment P1 P3 Total N 5 5 10 Mean Rank 3.00 8.00 Test Statisticsb Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .000 15.000 -2.668 .008 a .008 a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Treatment NPAR TESTS /M-W= Indeks BY Treatment(3 1) /MISSING ANALYSIS. NPar Tests [DataSet0] F:\SPSS Abud.sav Mann-Whitney Test Ranks Indeks Treatment P1 P2 Total N 5 5 10 Mean Rank 4.40 6.60 v Sum of Ranks 15.00 40.00 Sum of Ranks 22.00 33.00 xxi
Test Statisticsb Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 7.000 22.000 -1.193 .233 a .310 a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Treatment NPAR TESTS /M-W= Indeks BY Treatment(3 4) /MISSING ANALYSIS. NPar Tests [DataSet0] F:\SPSS Abud.sav Mann-Whitney Test Ranks Indeks Treatment P2 P3 Total N 5 5 10 Mean Rank Sum of Ranks 20.00 35.00 4.00 7.00 Test Statisticsb Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 5.000 20.000 -1.596 .110 a .151 a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Treatment NPAR TESTS /M-W= Indeks BY Treatment(4 1) /MISSING ANALYSIS. NPar Tests
[DataSet0] F:\SPSS Abud.sav Mann-Whitney Test Ranks Indeks Treatment P1 P3 Total N 5 5 10 Mean Rank 3.00 8.00 Test Statisticsb Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .000 15.000 -2.668 .008 a .008 a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Treatment NPAR TESTS /M-W= Indeks BY Treatment(4 3) /MISSING ANALYSIS. NPar Tests [DataSet0] F:\SPSS Abud.sav Mann-Whitney Test Ranks Indeks Treatment P2 P3 Total N 5 5 10 Mean Rank 4.00 7.00 v Sum of Ranks 15.00 40.00 Sum of Ranks 20.00 35.00 xxiii
Test Statisticsb Indeks Mann-Whitney U Wilcoxon W Z Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 5.000 20.000 -1.596 .110 a .151 a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Treatment
LAMPIRAN 2 DOSIS KONVERSI TEH KOMBUCHA Faktor konversi = 0,0026 Teh kombucha dosis 100 ml : 0,0026 x 100 ml = 0,26 ml Teh kombucha dosis 150 ml : 0,0026 x 150 ml = 0,39 ml Teh kombucha dosis 200 ml : 0,0026 x 200 ml = 0,52 ml v xxv
LAMPIRAN 3 Mencit 20 g Mencit 20 g 1.0 Tikus 200 g 0.14 Marmut 400 g 0.08 Kelinci 1,5 kg 0.004 Kucing 2 kg 0.03 Kera 4 kg 0.016 Anjing 12 kg 0.008 Manusia 70 kg 0.0026 TABEL KONVERSI PERHITUNGAN DOSIS (LAURENCE & BACHARACH, 1964) Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,5 kg Kucing 2 kg Kera 4 kg 7.0 12.25 27.8 29.7 64.1 1.0 1.74 3.9 4.2 9.2 0.57 1.0 2.25 2.4 5.2 0.25 0.44 1.0 1.08 2.4 0.23 0.41 0.92 1.0 2.2 0.11 0.19 0.42 0.45 1.0 0.06 0.1 0.22 0.24 0.52 0.0018 0.0031 0.07 0.0076 0.16 Anjing 12 kg 124.2 17.8 10.2 4.5 4.1 1.9 1.0 0.32 Manusia 70 kg 387.9 56.0 31.5 14.2 13.0 6.1 3.1 1.0
LAMPIRAN 4 Teh Kombucha Teh Kombucha (KT) memiliki banyak nama lain diantaranya teh manchuria, hung ca ku, tea kvass, kargasok tea dan sebagainya. Di Indonesia sendiri Kombucha lebih dikenal sebagai jamur dipo. KT sebenarnya adalah minuman yang difermentasi dengan koloni simbiosis antara bakteri dan ragi. Bertekstur licin, kenyal, berwarna keabuan seperti kue panekuk. KT mengandung banyak as organik, vitamin B1, B2, B6, B12, asam folat, vitamin C, asam amino esensial dan berbagai enzim penting. Kandungan asam organiknya terdiri dari asam laktat, asam asetat, asam glukoronat, asam usnat, asam sitrat, asam oksalat, asam malat, dan asam glukonat. 2 Teh kombucha merupakan minuman hasil fermentasi antara air, teh, gula dan "jamur" kombu. "jamur " kombu ini adalah organisme berbentuk lembaran gelatin (gel) berwarna putih dengan ketebalan antara 0,3-1,2 cm dan terbungkus selaput liat. Jamur kombu merupakan koloni dari ragi (yeast) dengan beberapa bakteri. Salah satunya Saccharomyces lugwigii yang bersimbiosis dengan Bacterium zylinum dan organisme lain yang ukurannya lebih kecil, baik dari bakteri maupun ragi. Dalam istilah asiing, "jamur" kombu disebut dengan scoby (symbiotic coloni of bacteri and yeast). 2 Teh kombucha dapat dibuat sendiri. Namun pada penelitian ini teh kombucha diperoleh melalui industri rumah tangga yang membiakkan dan menghasilkan minuman teh kombucha. Berikut akan dijelaskan mengenai pembuatan teh kombucha : A. Bahan dan Alat untuk membuat kombucha. 1. Bahan a. "jamur" kombu (jamur dipo). b. Satu liter (1.000 ml) air putih. c. Gula pasir 75-100 gram (10% dari volume air) d. Empat bungkus teh celup hitam/hijau atau teh rajangan 4- 8 sendok teh. 2. Alat a. Wadah atau panci yang tidak terbuat dari bahan alumunium atau logam lain (wadah dari bahan kaca atau stainless steel). b. Toples kaca. c. Kain bersih untuk penutup toples. v xxvii
d. Botol kaca atau plastik. e. Corong plastik. B. Cara membuat Kombucha 1. Rebus 1 liter air hingga mendidih 2. Jika air sudah mendidih, tambahkan 4 sachet teh celup atau 4-8 sendok teh (sdt) teh hitam atau hijau. 3. Biarkan teh mengembang (diamkan sekitar 15 menit). 4. Pisahkan teh celup atau saring dari airnya. 5. Tambahkan 70-100 gram gula putih (1 sendok makan setara dengan 20 gram), aduk hingga gula bercampur dengan air teh. 6. Biarkan larutan teh yang sudah menandung gula sampai hangat atau suam-suam kuku (sekitar 20-250C). Jika larutan teh masih panas, dikhawatirkan koloni "jamur" kombu akan mati. 7. Jika suhu sudah turun, masukkan larutan teh ke dalam toples kaca. Jangan menggunakan wadah dari bahan logam. Bahan ini bisa bereaksi dengan kandungan asam dihasilkan oleh kombucha. 8. Masukkan "jamur" kombu ke dalam toples yang sudah berisi larutan teh manis. 9. Tutup toples dengan kain bersih dan ikat dengan menggunakan karet gelang. Menutup toples usahakan serapat mungkin agar semut, lalat, nyamuk, debu, dan sumber polusi lain tidak dapat masuk. Saat memasang kain penutup toples, pastikan udara bisa mengalir dengan bebas. 10. "jamur" kombu yang bercampur dengan larutan teh manis akan melakukan proses fermentasi. Proses ini membutuhkan waktu 7-10 hari (tergantung dari suhu ruangan tempat menyimpan toples). Lebih hangat suhu ruangan, lebih cepat proses fermentasinya. Suhu ruangan tidak kurang dari 200C dan tidak lebih dari 300C. Suhu ruangan idealnya 23-270C. Sebaiknya ruangan tempat fermentasi dalam keadaan gelap, tetapi kondisi udaranya tidak lembab. Koloni "jamur" kombu akan rusak jika terkena sinar matahari langsung. 11. Selama proses fermentasi, toples yang berisi "jamur" kombu tidak perlu dipindah-pindahkan atau digoyang-goyang. 12. Jika larutan teh sudah mencapai tingkat keasaman yang benar (pH 3-5,5) angkat "jamur" kombu dengan tangan sebelumnya sudah dicuci bersih. 13. Tuangkan larutan teh kombu yang sudah jadi ke dalam botol plastik atau kaca dengan bantuan corong plastik. Setelah terisi penuh, botol ditutup rapat-rapat. 14. Untuk mendapatkan hasil maksimal, biarkan kombucha di dalam botol selama beberapa hari (sekitar 5 hari). Bakteri fermentasi akan berhenti bekerja setelah aliran udara tidak berjalan (botol tertutup rapat), tetapi ragi masih terus bekerja. 15. Kombucha di dalam botol siap minum sebaiknya disimpan dalam keadaan dingin (di dalam lemari es). Di dalam lemari es, kombucha bisa bertahan sekitar 3 minggu.