Penelitian Kesempurnaan Kematian Sapi setelah Penyembelihan dengan dan tanpa Pemingsanan Berdasarkan Parameter Waktu Henti Darah Memancar (The Perfection of Cattle Died after Slaughtered by Stunning and Non Stunning Methods according to Gushing Blood Downtime) Herwin Pisestyani1*, Nadhear Nadadyanha Dannar1, Koekoeh Santoso2, Hadri Latif1 1Bagian Kesehatan Masyarakat Veteriner, Departemen Ilmu Penyakit Hewan dan Kesehatan Masyarakat Veteriner 2Bagian Fisiologi, Departemen Anatomi Fisiologi dan Farmakologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor, Jalan Agatis Kampus IPB Dramaga, Bogor 16680. *Penulis untuk korespondensi: Diterima 9 Maret 2015, Disetujui 26 Juni 2015 ABSTRAK Parameter untuk mengetahui kesempurnaan kematian pada sapi setelah disembelih yaitu dengan melihat refleks kelopak mata dan atau waktu henti darah memancar. Menurut EFSA (2004) kematian merupakan suatu keadaan yang ditandai dengan respirasi fisiologis dan sirkulasi darah telah berhenti sebagai akibat dari pusat sistem tersebut di batang otak secara permanen kehilangan fungsi karena kekurangan oksigen dan energi. Waktu henti darah memancar merupakan indikasi bahwa jantung sudah tidak dapat memompa darah keluar dari tubuh karena tidak ada lagi asupan oksigen darah dalam jantung, sehingga hewan tersebut dapat dikatakan mati. Tujuan dari penelitian ini untuk menghitung waktu henti darah memancar pada penyembelihan sapi dengan metode pemingsanan dan tanpa pemingsanan yang dipotong di rumah potong hewan ruminansia besar (RPHRB), sehingga diperoleh data rataan waktu hewan mati sempurna. Tiga puluh ekor sapi Brahman Cross dibagi menjadi 2 kelompok perlakuan yaitu, sebanyak 15 ekor yang disembelih dengan pemingsanan (kelompok 1) dan sebanyak 15 ekor yang disembelih tanpa pemingsanan (kelompok 2). Waktu henti darah memancar dihitung sesaat setelah hewan disembelih sampai darah berhenti memancar. Hasil dari penelitian diperoleh rataan waktu henti darah memancar pada sapi yang dipingsankan sebelum disembelih adalah sebesar 3,02 menit dan rataan waktu henti darah memancar pada sapi yang disembelih tanpa pemingsanan adalah sebesar 2,13 menit. Selang waktu henti darah memancar antara sapi yang dipingsankan dengan sapi yang tidak dipingsankan sebelum disembelih adalah 53,4 detik. Waktu henti darah memancar dipengaruhi oleh perlakuan hewan sebelum pemotongan, yaitu dengan atau tanpa pemingsanan. Kata kunci: Pemingsanan, sapi, tanpa pemingsanan, waktu henti darah ABSTRACT Palpebra reflex and gushing blood downtime can be used as parameters to see animals death after slaughtered. Stop bleeding time was an indication that the heart is unable to pump blood out of the body due to no more oxygen in the blood of the heart, so that the cattle can be said has been dead perfectly. The aims of this study was to calculate the stop bleeding time of cattle slaughtered by stunning and non stunning methods, thus obtained the avaraging data of perfectly death time of animals. Thirty catlles's Brahman Cross divided into two treatment groups, firstly 15 cattle's were slaughtered by stunning method (group 1) and the second one 15 cattle's were slaughtered by non stunning method (group 2). Blood gushing downtime was calculated immediately after the animal is slaughtered until the blood stops radiating. The results showed the average blood gushing downtime in cattles that were stunning before slaughtered is 3,02 minutes and the average time to stop blood gushing in cattles of non stunning group is 2,13 minutes. The interval blood gushing downtime between the cattles slaughtered by stunning and non stunning was 53,4 seconds. Blood gushing downtime was affected by the treatment of animals before they were slaughtered. Keywords: cattle, gushing blood downtime, non stunning, stunning.
Penyembelihan Sapi dengan dan tanpa Pemingsanan | 59 PENDAHULUAN Kebutuhan daging sapi dan kerbau untuk kon- sumsi dan industri di Indonesia pada tahun 2012 mencapai 484 ribu ton (Ditjennak & Keswan, 2012). Setiap tahun permintaan tersebut akan terus me- ningkat seiring dengan bertambahnya populasi pen- duduk dan tingginya minat masyarakat terhadap konsumsi daging. Tingginya permintaan menye- babkan intensitas pemotongan juga meningkat, sehingga keberadaan rumah potong hewan (RPH) sebagai tempat untuk pemotongan hewan sangat diperlukan. Dalam pelaksanaannya RPH harus dapat menjaga kualitas daging, baik dari tingkat kebersih- an, kesehatan, ataupun kehalalan dagingnya. Di Indonesia ada 2 metode sebelum pemotong- an, yaitu dengan pemingsanan dan tanpa peming- sanan. Praktik pemotongan sapi tanpa dipingsan- kan telah dilakukan sejak lama di Indonesia, sedang- kan pemotongan dengan pemingsanan bertujuan agar sapi mendapatkan perlakuan sesuai dengan kesejahteraan hewan, sehingga meminimalkan ke- jadian stres pada sapi. Hampir sebagian besar RPH masih menggunakan metode konvensional dalam proses penyembelihan, yaitu dengan cara sapi di- ikat dan ditarik dengan kuat sehingga sapi roboh ke lantai baru kemudian disembelih. Perlakuan yang kasar dalam penanganan pemotongan hewan akan menyebabkan stres pada hewan dan menghasilkan kualitas daging yang rendah. Penanganan hewan saat pemotongan harus diatur dengan baik untuk mempertahankan standar karena kesejahteraan hewan merupakan bagian dari kualitas daging (Grandin, 2001). Untuk meminimalkan stres dan rasa sakit pada hewan potong, khususnya pada sapi, di beberapa RPH dilakukan pemingsanan sebelum hewan disembelih. benar-benar telah mati sebelum dilakukan pe- nanganan lebih lanjut. Parameter yang dapat digunakan untuk melihat hewan mati sempurna adalah dengan melihat re- fleks kornea dan atau waktu henti darah memancar. Waktu henti darah memancar merupakan indikasi bahwa jantung sudah tidak dapat memompa darah keluar dari tubuh akibat tidak ada lagi asupan oksigen darah dalam jantung, sehingga hewan ter- sebut dapat dikatakan mati. Menurut EFSA (2004) kematian merupakan suatu keadaan yang ditandai dengan respirasi fisiologis dan sirkulasi darah telah berhenti sebagai akibat dari pusat sistem tersebut di batang otak secara permanen kehilangan fungsi karena kekurangan oksigen dan energi. Selama ini parameter yang digunakan untuk menentukan hewan mati sempurna adalah dengan melihat re- fleks kelopak mata. Tujuan dari penelitian ini, yaitu mendapatkan data rataan waktu henti darah me- mancar pada penyembelihan sapi dengan peming- sanan dan tanpa pemingsanan. BAHAN DAN METODE Sampel berupa 30 ekor sapi Brahman Cross yang dipilih menggunakan metode purposive sampling. Penelitian ini dilakukan di RPHR wilayah Depok, Tangerang, dan Tasikmalaya dari bulan September 2013 sampai dengan Maret 2014. Sapi yang diamati pada penelitian ini dibagi menjadi 2 kelompok, yaitu sebanyak 15 ekor disembelih dengan dilakukan pe- mingsanan terlebih dahulu dan 15 ekor disembelih tanpa melalui proses pemingsanan. Penyembelih- an dilakukan pada malam hari sesuai dengan waktu penyembelihan dari masing-masing RPH-R Daging yang dihasilkan oleh RPH harus memenuhi persyaratan aman, sehat, utuh, dan halal (ASUH). Halal merupakan syarat penting yang harus di- penuhi oleh daging yang dihasilkan oleh RPH karena sebagian besar masyarakat Indonesia memeluk agama Islam. Titik kritis dari makanan halal ter- utama daging, terletak pada sumber bahan baku, proses penyembelihan, dan proses produksinya. Pemingsanan pada sapi harus dilakukan dengan benar agar memenuhi aspek kesejahteran hewan dan kehalalan pada daging yang dihasilkan. Untuk itu diperlukan pengetahuan untuk memastikan agar metode pemingsanan tidak menyebabkan kerusak- an berat/permanen pada otak dan pengetahuan tentang indikator kematian hewan sehingga hewan Waktu henti darah memancar pada sapi yang disembelih dengan dan tanpa pemingsanan di- hitung menggunakan stopwatch. Tombol start pada stopwatch ditekan sesaat setelah sapi disembelih dan terlihat darah pertama kali memancar. Ditunggu selang beberapa waktu sampai terlihat darah sudah tidak lagi memancar lalu tombol stop pada stopwatch ditekan dan dilihat waktu (detik) yang tertera pada layar stopwatch. Analisis Data Data yang diperoleh dianalisis secara kuantitatif. Data dianalisis dengan uji t untuk mengetahui per- bedaan waktu henti darah memancar pada pe- nyembelihan sapi dengan pemingsanan dan tanpa pemingsanan dengan menggunakan SPSS 16.
60 | Pisestyani et al. HASIL Obyek penelitian yang digunakan dalam peneli- tian ini adalah sapi Brahman Cross jantan. Jumlah total sapi yang diamati pada penghitungan waktu henti darah memancar adalah sebanyak 30 ekor yang dibagi menjadi 2 kelompok, yaitu sebanyak 15 ekor disembelih dengan dilakukan pemingsanan ter- lebih dahulu dan 15 ekor disembelih tanpa melalui proses pemingsanan. Hasil penghitungan waktu henti darah memancar pada sapi Brahman Cross yang dipingsankan dan tanpa pemingsanan sebelum di- sembelih disajikan dalam Tabel 1. diproduksi oleh Accles dan Shelvoke. Cash Magnum Knocker menembakkan baut (bolt) berukuran panjang 121 mm dan diameter 11,91 yang berbentuk kepala jamur (mushroom-headed). Cartridge merupa- kan tenaga pendorong untuk menyebabkan trauma ke korteks otak tanpa penetrasi ke dalam tengkorak (Accles & Shelvoke, 2014). Tipe non-penetrating menyebabkan ketidaksadaran melalui pelemahan sistem syaraf yang mengakibatkan hilangnya ke- sadaran tanpa perubahan anatomis di otak. Pe- mingsanan merupakan salah satu teknik sebelum pemotongan pada hewan dengan tujuan untuk Tabel 1 Waktu henti darah memancar pada sapi yang disembelih dengan dan tanpa pemingsangan Perlakuan sebelum penyembelihan Rataan Waktu henti darah memancar (menit) Minimun Maksimum Pemingsanan 3,02a 1,53 4,33 Tanpa pemingsanan 2,13b 1,04 3,14 Huruf superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan uji berbeda nyata (p<0,05) Hasil dari penelitian ini menunjukkan adanya per- bedaan waktu henti darah yang signifikan (p<0,05) pada sapi yang disembelih dengan pemingsanan dan sapi yang disembelih tanpa pemingsanan terlebih dahulu. Rataan waktu henti darah memancar pada sapi yang dipingsankan terlebih dahulu sebelum disembelih adalah sebesar 3,02 menit dengan waktu henti darah maksimum sebesar 4,33 menit dan minimum sebesar 1,53 menit. Sedangkan waktu yang dibutuhkan untuk darah berhenti memancar pada sapi yang disembelih tanpa dipingsankan ter- lebih dahulu mempunyai nilai rataan sebesar 2,13 menit dengan waktu henti darah minimum sebesar 1,04 menit dan maksimum sebesar 3,14 menit. Per- bedaan waktu henti darah berhenti memancar antara sapi yang dipingsankan dengan sapi yang tidak dipingsankan sebelum disembelih adalah 53,4 detik. PEMBAHASAN Sapi yang dipingsankan sebelum disembelih membutuhkan waktu henti darah lebih lama di- bandingkan sapi yang tidak dipingsankan. Waktu henti darah memancar dipengaruhi oleh perlakuan hewan sebelum penyembelihan. Sapi yang diamati dengan perlakuan pemingsanan sebelum penyem- belihan, dipingsankan mengunakan captive bolt stun gun non-penetrating. Non-penetrating captive bolt stun gun yang digunakan di RPH di Indonesia adalah tipe Cash Magnum Knocker caliber 0,25 yang menghilangkan rasa sakit pada hewan dan me- mudahkan manusia dalam melaksanakan penyem- belihan. Jantung pada sapi dapat memompa darah lebih stabil tanpa adanya peningkatan frekuensi jantung. Penurunan tekanan jantung terutama ven- trikel selama pengeluaran darah terjadi karena pe- nurunan oksigen darah pada miokardium. Respirasi pada hewan yang dipingsankan akan menurun sehingga distribusi oksigen ke jantung juga me- nurun. Hal ini mengakibatkan kekuatan frekuensi jantung dan tekanan darah menurun (Vemini et al., 1983). Kondisi tersebut membuat waktu henti darah memancar pada sapi yang dipingsankan lebih lama dibandingkan dengan sapi yang tidak dipingsankan. Sapi yang disembelih tanpa melalui proses pe- mingsanan terlebih dahulu, difiksasi menggunakan restraining box mark IV. Menurut Grandin (1991), restraining box adalah alat yang digunakan untuk mengendalikan sapi sebelum disembelih agar ting- kat stres pada sapi berkurang. Pada prinsipnya, tingkat stres dapat diturunkan karena (1) saat sapi masuk ke dalam restraining box sapi tidak merasa takut karena terhindar dari pengaruh lingkungan area penyembelihan, hal tersebut penting terutama bagi sapi yang cukup agresif; (2) untuk mengatasi terjangan kepala sapi karena pandangan di sekeli- ling sapi tertutup penuh; (3) memudahkan dalam merobohkan sapi tanpa perlakuan kasar; (4) stabili- tas alat ini membuat sapi menjadi lebih tenang dan mengatasi gerakan berontak yang tiba-tiba; dan (5) tekanan alat pada sapi tidak menimbulkan kesakitan
Penyembelihan Sapi dengan dan tanpa Pemingsanan | 61 dan berlangsung cepat. Pada prinsipnya, tingkat stres dapat diturunkan karena pergerakan alat halus, memiliki tingkat kebisingan yang rendah, tekanan alat pada sapi tidak menimbulkan kesakit- an, dan sapi tidak merasa takut karena terhindar dari pengaruh lingkungan area penyembelihan. Upaya penurunan stres menggunakan mark IV masih menyisakan sapi dalam keadaan sadar, sehingga stres masih berpengaruh pada sapi dibanding- kan dengan metode pemingsanan. Implikasi dari penggunaan metode mark IV tetap mengakibatkan terjadinya peningkatan tekanan darah dan frekuensi jantung. Peningkatan frekuensi jantung menyebab- kan darah yang dipompa keluar pada saat disembelih menjadi lebih cepat, sehingga darah yang memancar pada sapi akan lebih cepat berhenti. Peningkatan tekanan darah terjadi akibat adanya penyempitan pembuluh darah kapiler pada jaringan. Darah di- pompakan melalui pembuluh darah oleh jantung. Pembuluh-pembuluh darah merupakan sistem yang tertutup, yang membawa darah dari jantung ke seluruh jaringan tubuh dan kembali ke jantung. Aliran darah ke tiap-tiap jaringan diatur oleh mekanisme kimia lokal dan mekanisme saraf umum yang melebarkan atau menyempitkan pembuluh darah jaringan untuk memenuhi kebutuhan nutrisi dan oksigen pada jaringan melalui sistem kemoreseptor (Guyton & Hall, 2006). Mekanisme kimia lokal me- rupakan mekanisme pengaturan saraf otonom, yaitu oleh zat-zat kimia seperti asetilkolin dan katekolamin, yang utama adalah norepinefrin dan epinefrin. Katekolamin menyebabkan penyempitan buluh-buluh darah sehingga terjadi peningkatan tekanan darah. Stres sehubungan dengan peming- sanan dan pengeluaran darah secara normal menye- babkan pelepasan katekolamin sehingga terjadi penyempitan pembuluh darah jaringan (Vemini et al., 1983). Stunning menjadi sangat penting karena stres sebelum penyembelihan memiliki dampak buruk terhadap kualitas daging yang dihasilkan. Stres sebelum penyembelihan menyebabkan peningkat- an kadar katekolamin dan kreatinin kinase dalam tubuh. Peningkatan kadar katekolamin dan kre- atinin kinase menyebabkan glikolisis secara cepat sehingga terjadi penumpukan asam laktat pada daging. Stres sebelum penyembelihan juga menye- babkan penurunan kadar glikogen yang menyebab- kan tingginya pH daging dan daya ikat air. Selain itu, daging yang dihasilkan lebih keras dengan warna yang lebih gelap (Chulayo et al., 2012). Penyembelihan sapi dengan pemingsanan mau- pun tanpa pemingsanan harus memenuhi kaidah halal diantaranya harus memotong tiga saluran pada leher, yaitu esofagus, trakhea, dan pembuluh darah (vena jugularis dan arteri karotis). Proses penyembelihan mengakibatkan pengeluaran darah dari pembuluh darah dalam jumlah yang besar. Respon fisiologis dari hewan yang kehilangan darah dalam jumlah yang besar secara tiba-tiba disebut syok hemoragik. Syok hemoragik merupakan gejala klinis akibat berkurangnya curah jantung dan perfusi darah ke organ karena penurunan volume darah (hipovolemia) yang disebabkan oleh hilangnya darah. Hal ini disebabkan ketidakmampuan sistem homestasis tubuh dalam mengembalikan jumlah normal darah akibat banyaknya darah yang keluar. Penurunan volume darah selama perdarahan akut menyebabkan penurunan tekanan vena cava dan pengisian darah ke jantung. Hal ini menyebabkan penurunan curah jantung dan tekanan arteri. Tubuh memiliki sejumlah mekanisme yang menjadi aktif dalam upaya untuk mengembalikan tekanan arteri kembali normal melalui refleks baroreseptor dan refleks kemoreseptor. Namun, karena terhentinya asupan oksigen dan nutrisi ke jantung akibat per- darahan yang sangat parah (hypovolemia) menye- jantung gagal berkontraksi. Kegagalan babkan jantung berkontraksi mengakibatkan tidak ada lagi aliran darah dalam tubuh, sehingga perfusi darah ke organ tidak terjadi (Klabunde, 2011). Proses ini dapat berujung pada kematian. Pengeluaran darah selama penyembelihan he- wan sangat dipengaruhi oleh curah jantung, walau- pun jantung bukan merupakan faktor utama dalam pengaturan curah jantung. Terdapat berbagai faktor sirkulasi perifer yang mempengaruhi aliran darah ke dalam jantung yang berasal dari vena, yang disebut aliran balik vena, yang merupakan pengatur utama. Alasan utama mengapa faktor-faktor perifer biasa- nya lebih penting daripada jantung itu sendiri dalam mengatur curah jantung adalah karena jantung me- miliki mekanisme di dalam jantung itu sendiri yang biasanya memungkinkan jantung untuk memompa secara otomatis berapapun darah yang mengalir ke dalam atrium kanan yang berasal dari vena. Tujuan dari pengeluaran darah adalah untuk mengeluarkan darah dan memastikan hewan mati dengan meng- hentikan suplai oksigen ke otak (Gregory, 1998). Menurut Anil (2012), proses kehilangan darah (blood loss) membutuhkan waktu tertentu untuk mencapai tingkat kritis. Pemotongan yang efektif akan menyebabkan 40%-60% volume darah hilang dalam pola dan tingkat yang sama pada spesies yang berbeda. Anil (2012) juga melaporkan bahwa 33% darah akan hilang setelah 30 detik pemotong- an, sedangkan Anil et al. (2006) melaporkan 25% darah akan hilang setelah 17 detik. Menurut AWAC
62 | Pisestyani et al. (1994), setiap individu hewan membutuhkan waktu yang berbeda untuk mengalami perdarahan hingga kematian. Waktu kematian tertunda jika hanya arteri pada satu sisi leher yang terputus atau ujung arteri mengalami penyumbatan sebelum pendarah- an sempurna. Perdarahan akan menyebabkan ke- tidaksadaran yang berlanjut dengan kematian. Ke- matian terjadi karena kurangnya suplai oksigen ke otak yang telah disuplai oleh aliran arteri. DAFTAR PUSTAKA Accles, S. 2014. Cash magnum knocker product data sheet [Internet]. co.uk/cash_magnum_knocker.htm. Download: January 13, 2015. Agbeniga B. 2011. Influence of conventional and kosher slaughter techniques in cattle on carcass and meat quality. Thesis. University of Pretoria. Pretoria. Pengeluaran darah yang baik dapat terjadi pada hewan dalam keadaan sehat namun dapat diper- lambat jika hewan mengalami kondisi demam, infeksi pada bagian jantung, paru-paru, dan otot (Roca, 2002; Agbeniga, 2011). Kerusakan otot dapat disebabkan oleh beberapa hal diantaranya karena terbanting atau karena penyakit infeksius yang menyebabkan rusaknya pembuluh darah kapiler pada jaringan sehingga darah masuk ke otot yang menyebabkan kualitas daging menurun. Kesempur- naan pengeluaran darah merupakan syarat agar kualitas daging yang dihasilkan baik. Kontraksi, gravitasi, dan aktifitas jantung merupakan faktor yang mempengaruhi pengeluaran darah otot-otot hewan (Vemini et al., 1983) oleh sebab itu, selama penyembelihan hewan harus dibiarkan berkontraksi hingga mati sempurna, setelah itu baru dilakukan penggantungan dan pelepasan kulit. Kesimpulan dari penelitian ini menunjukkan bahwa sapi mati sempurna berdasarkan waktu henti darah memancar pada sapi yang disembelih dengan metode pemingsanan adalah 3,02 menit sedangkan pada sapi yang disembelih dengan me- tode tanpa pemingsanan adalah 2,13 menit. UCAPAN TERIMAKASIH Penelitian ini didanai oleh Penelitian Unggulan Strategis Perguruan Tinggi, Skema: Penelitian Lintas Fakultas/Departemen/Pusat, Institut Pertanian Bogor, Dana DIPA IPB tahun anggaran 2013 kode MAK: 2013.089.521219. Anil MH. 2012. Effect of slaughter method on car- cass and meat characteristics in the meat of cattle and sheep. ter_and_meat_quality. Download: September 16, 2013. Anil MH, Yesildere T, Aksu H, Matur E, McKinstry JL, Erdogan O, Hughes S, Mason C. 2006. Compari- son of Halal slaughter with captive bolt stunning and neck cutting in cattle:exsanguination and quality parameters. Animal Welfare 15: 325-330. [AWAC] Animal Welfare Advisory Committee. 1994. Code of Recommendations and Minimum Stan- dards for the Welfare of Animals at the Time of Slaughter at Licensed and Approved Premises. welfare/codes/ ...slaughter/index.htm. Download: September 19, 2013. [Ditjennak dan Keswan] Direktorat Jenderal Peter- nakan dan Kesehatan Hewan. 2012. Press release jenderal peternakan konfrensi pers direktur dan kesehatan hewan tentang supply demand daging sapi/kerbau sampai dengan Desember 2012. Ditjennak dan Keswan. Jakarta [EFSA] European Food Safety Authority. 2004. Welfare aspects of animal stunning and killing methods. Scientific report of the scientific panel for animal health and welfare on a request from the commission related to welfare aspects of animal stunning and killing methods (Question No EFSAQ-2003-093). Download: Oktober 28, 2014. Grandin T. 2001. Antemortem handling and welfare. Di dalam: Hui YH, editor. Meat Science and Appli- "Penulis menyatakan tidak ada konflik kepenting- an dengan pihak-pihak terkait dalam penelitian ini". cations. Marcel Dekker. New York. Gregory NG. 1998. Animal Welfare and Meat Pro- duction. Cambridge University Pr. Cambridge.
Penyembelihan Sapi dengan dan tanpa Pemingsanan | 63 Gregory NG, Grandin T. 1998. Animal Welfare and Meat Science. CABI Publishing. New York, USA. p4-145 Klabunde RE. 2011. Cardiovascular Physiology Con- cepts. Marian University College of Osteopathic Medicine. Indiana. Gregory NG. 2004. Physiology and Behaviour of Animal suffering. Blackwell Science Oxford. Guyton AC, Hall JE. 2006. Fisiologi Kedokteran. Irawati, Ramadhani D, Indriyani F, Dany F, Nuryanto I, Rianti S, Resmisari T, Suyono Y, pe- nerjemah; Rachman LY, Hartanto H, Novrianti A, Wulandari N, editor. Jakarta (ID): Penerbit Buku Kedokteran EGC. Terjemahan dari: Textbook of Medical Physiologi. Ed ke-11. Review of modified and copy mark IV type restraint boxes. 2013. Kota tidak diketahui (AU): Depart- ment of Agriculture, Fisheries and Forestry. Roca RO. 2002. Humane slaughter of bovine. Download: October 20, 2014. Vemini RJ, Field RA, Riley ML, Varnell TR. 1983. Effect of delayed bleeding after captive bolt stunning on heart activity and removal in beef cattle. Journal of Animal Science 57: 628-631.