ISSN-e: 2541-1128 ISSN-p: 2407-8603 ISOLASI SENYAWA CAPSAICIN PADA BUAH CABAI RAWIT (Capsicum frutescens L) DAN UJI ANTIBAKTERI PADA Salmonella thypi Sri Rahmawati1, Yayuk Andayani2, Aliefman Hakim3, Hardani4 1,2,3Program Studi Magister Pendidikan IPA, Universitas Mataram 1,4Prodi Farmasi, Politeknik Medica Farma Husada Mataram Email: yayukmtr@unram.ac.id2, Abstrak Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi senyawa capcaisin pada buah cabai rawit serta untuk mengetahui aktifita antibakteri. Dari hasil penelitian telah berhasil dilakukan isolasi senyawa capcaisin dari buah cabai rawit (Capsicum fruktescens L) di diperoleh randemen sebesar 23,31%, dengan menggunakan pelarut aseton sebnayak 500 ml dengan menggunakan metode ektraksi secara maserasi. Analisis gugus fungsi dengan menggunakan FT-IR Dari hasil analisi spektrofotometer inframerah (IR) menunjukkan pita serapan pada daerah bilangan gelombang 3453,2 cm-1 memberikan putunjuk adanya Gugus -OH stretching dengan intensitas serapan menengah dan bentuk pita yang melebar. Kemudian Pita yang muncul pada daerah gelombang 2956,6 cm-1 merupakan gugus -NH streaching, dugaan ini didukung dengan adanya serapan yang muncul pada daerah 1467 cm-1 gelombang yang merupakan bangkokan NH bending (scissoring), munculnya pita serapan yang tajam pada daerah 1498,9 cm-1 dan 1467 cm-1 menunjukkan adanya gugus C=C aromatik dan menunjukkan bahwa Kristal hasil pemurnian tersebut merupakan suatu amida sekunder karena menyerap didaerah dekat 1500 cm-1. Pita serapan yang muncul pada daerah bilangan gelombang 2920,1 cm-1 dan 2850,1 cm-1merupakan gugus -CH stretching dari CH3 dan CH2. Sementara regangan C=O karbonil muncul pada daerah bilangan gelombang 1718,0 cm-1 sedangkan pita serapan yang muncul pada daerah bilangan gelombang 1250,2 cm-1 merupakan vibrasi regangan asimetrik C-O dari system C-O-C atau O-CH3. Berdasarkan hasil Infra red (IR) diduga bahwa isolate merupakan suatu senyawa capcaisin dengan adanya gugus -OH, -NH, -CH2, -CH3, C=C, C=O dan O-CH3. Senyawa capcaisin hasil isolasi efektif sebagai antibakteri terhadap bakteri Salmonella typhi pada kosentrasi 100% dengan rerata diameter zona hambat sebesar 11,6 %. Kata Kunci: Isolasi, Senyawa Capsaisin, Cabe rawit, Salmonella thypi 1. Pendahuluan identik dengan pulau lombok. Umumnya masyarakat menggunakan cabai hampir dalam setiap menu masakan khas yang disediakan. Cabai (Capsicum sp.) sering sebagai bumbu masakan yang digunakan dimanfaatkan sebagai saus karena rasanya yang pedas, cabai dapat pula dijadikan sebagai bahan baku pembuatan herbal atau obat-obatan alam. Kandungan senyawa dalam buah cabai rawit Cabai (Lombok) salah senyawa capsaicin. Senyawa ini merupakan senyawa alkaloid yang stabil dengan rumus molekul C18H27NO3, tidak terpengaruh oleh suhu dingin dan panas, tidak memiliki bau, rasa dan warna (Todd dkk., 1977). Capsaicin berbentuk kristal, mencair pada suhu sekitar 650C, memiliki titik didih 2100C dan biasanya capsaicin ini terdapat dibagian buah cabai rawit terutama pada plasenta (tempat melekatnya biji) (Wong, 1989). satunya adalah Jurnal Penelitian dan Kajian Ilmiah Kesehatan Politeknik"Medica Farma Husada" Mataram Volume 6. No. 2 - Oktober 2020 157
ISSN-e: 2541-1128 ISSN-p: 2407-8603 Gambar 1. Senyawa Capsaicin Capcaisin memiliki berbagai bioaktivitas dalam antara menurunkan resiko berbagai penyakit kronis termasuk kanker (Kailaku et al, 2007), kardiovaskular (Arab & Steck, 2000). Penelitian ini merupakan penelitian eksplorasi untuk mengisolasi senyawa capsaicin dari buah cabai rawit (Capsicum fruktescens L) dan menguji aktivitas antibakteri. lain memiliki pengaruh 2. Kajian Literatur Isolasi senyawa capcaisin telah dilakukan dengan metode beragam, isolasi diantaranya oleh Purseglove dkk tahun 1981, telah berhasil mengekstrak komponen pemberi etanol. rasa pedas menggunakan pelarut Komponen pemberi rasa pedas ini kemudian diidentifikasi sebagai capsaicinoid. Menurut Todd dkk (2005) capsaicin adalah bagian komponen capsaicinoid yang penting dalam cabai rawit. Langi (2000) melaporkan bahwa hasil ekstraksi cabai rawit asal Kota Tomohon, menggunakan pelarut etanol selama 180 menit diperoleh rendemen oleoresin dan kandungan capsaicin tertinggi sebesar 19,19% dan 21,11%. Penelitian Novita Thaib dkk (2005) isolasi capsaisin pada buah cabai rawit dengan menggunakan metode refluks menghasilkan kadar capsaicin sebanyak 0,5 gram (0,5%) dari 100 gram cabai kering. yang Isolasi adalah suatu cara untuk mengambil satu senyawa aktif yang terdapat di dalam tanaman untuk mengetahui senyawa yang berkhasiat dalam Isolasi tanaman metabolit sekunder dari suatu tumbuhan terdiri simplisia/sampel, atas ekstraksi, dan karakterisasi senyawa isolat. Isolasi metabolit tumbuhan sekunder dari berbagai bagian memiliki tingkat kesulitan yang berbeda-beda. Beberapa faktor yang mempengaruhi tingkat kesulitan tersebut adalah ada tidaknya metabolit sekunder mayor dalam sampel dan jauh dekatnya Rf antara berbagai komponen dalam sampel. Faktor-faktor inilah yang harus dipertimbangkan sebelum merancang sebuah prosedur isolasi (Hakim, 2016). tersebut. penyiapan tahapan fraksinasi, pemurnian, Uji aktivitas antibakteri terhadap bakteri Salmonella typhi. Demam tifoid adalah penyakit infeksi akut usus halus yang disebabkan oleh Salmonella typhi. Bakteri ini merupakan kuman batang gram negatif yang tidak memiliki spora dan bergerak dengan flagel peritrik (Cita, 2011). Penyakit ini ditransmisikan melewati makanan atau minuman yang terkontaminasi oleh feses atau urin dari orang yang terinfeksi. Di Indonesia, insiden tifoid masih tergolong tinggi, bahkan menempati urutan ketiga di dunia (Purba et al., 2016). 3. Metode Penelitian Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Kimia Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan (FKIP), Laboratorium Mikrobiologi FKIP, Laboratorium Kimia Fakultas MIPA dan Laboratorium Kimia Analitik Fakultas MIPA Universitas Mataram, dilaksanakan mulai pada bulan April - Juli tahun 2019 dengan populasi tumbuhan cabai yang berasal dari petani cabai di Daerah Leneng Praya Lombok tengah, sedangkan sampel dalam penelitian ini adalah bagian buah cabai rawit (Capsicum fruktescens Jurnal Penelitian dan Kajian Ilmiah Kesehatan Politeknik"Medica Farma Husada" Mataram Volume 6. No. 2 - Oktober 2020 158
ISSN-e: 2541-1128 ISSN-p: 2407-8603 L) yang berwarna merah sebnayak 500 gram. (telah matang) di evaporasi dan menghasilkan ektrak kental buah cabai tersebut ditambahkan dengan dietil eter kemudian dikocok dan didinginkan dalam pecahan es batu lalu didiamkan sampai terbentuk kristal. rawit. Ekstrak kental A. Alat-Alat yang digunakan Erlenmeyer Blender, Peralatan Maserasi, Pisau Cater, Batang Pengaduk, Beker gelas Gelas kimia, Penyaring, Rotary evaporator, Satu set alat refluks, Satu set alat Soxletasi, thermometer, kulkas, kolom kromatografi, lampu UV, dan spektrofotometer FT-IR. B. Bahan-Bahan yangdigunakan E. Pembuatan Larutan Uji Biakan bakteri yang diperoleh disuspensikan kedalam larutan NaCl 0,9% sampai diperoleh kekeruhan yang sesuai dengan standar 0,5 Mac Farland atau sebanding dengan jumlah bakteri 108 (CFU)/mL. F. Penyiapan Sampel Aseton, Aquadest, Aluminium Foil, Kloroform p.a, , Kertas saring, Platsilika Silica gel 60, Senyawa Capsaicin, Bakteri Uji Salmonella typhi, Media Nutrient Agar (NA), Muller Hinton Agar (MHA), Kontrol Negatif (Aquadest Steril) Kontrol Positif (Ciprofloksasin 500 mg). C. Pembuatan Simplisia Buah Cabai rawit merah sebanyak 5 kg dicuci bersih pada air mengalir kemudian dilakukan proses sortasi basah dan kemudian dipsahkan buah cabai rawit yang masih bagus serta yang sudah mulai rusak dan dicuci kembali pada air mengalir. Kemudian proses selanjutnya adalah dilakukan perajangan dengan cara bahan digunting kecil kecil dan dilakukan pengeringan selama 8 hari . buah cabai rawit yang telah kering kemudian dihaluskan dengan cara di blender. Bahan yang telah diblender dimasukkan dalam wadah yang sesua, bersih dan terlindung dari cahaya. D. Pembuatan Ekstrak Sebanyak 100 gram serbuk kering buah cabai rawit dimaserasi dengan cara dimasukkan dalam wadah toples kaca dan ditambahkan dengan pelarut Aseton 500 ml dan didiamkan pada suhu kamar selama 2 hari dengan beberapa kali pengadukan. Kemudian disaring dan ekstrak ditampung dalam wadah botol kemudian untuk Senyawa Capsaicin diencerkan dengan aquadest kemudian dibuatkan dalam konsentrasi 12,5%, 25%, 50% dan 100%. G. Pengujian Bakteri Uji senyawa Capsaicin Pada Metode yang digunakan dalam uji aktivitas antibakteri dari senyawa capsaicin ini dilakukan yaitu metode difusi sumuran. Setelah bakteri Staphylococcus Klebsiella pneumoniae dan Salmonella typhi diencerkan dan dioleskan pada media MHA dalam cawan petri yang sudah dilubangi dengan menggunakan tabung dirham untuk membentuk sumuran dengan berbagai kosentrasi yaitu 12,5%, 25%, 50% dan 100%. Setiap cawan petri terdapat 6 sumuran yaitu 4 sumuran untuk kosentrasi dan positif untuk dua (Ciprofloksasin 500 mg) dan kontrol negatif ( Aquadest) dan selanjutnya diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam. Selanjutnya diameter terbentuk diamati dan diukur bening yang diameter daerah hambatnya dengan jangka sorong. Perlakuan ini kemudian diulang sebanyak tiga kali 4. Hasil dan Pembahasan epidermidis, sumuran kontrol Buah cabai rawit setelah proses sortasi basah dan sortasi kering kemudian diblender halus untuk memperoleh partikel yang jauh lebih kecil Jurnal Penelitian dan Kajian Ilmiah Kesehatan Politeknik"Medica Farma Husada" Mataram Volume 6. No. 2 - Oktober 2020 159
ISSN-e: 2541-1128 ISSN-p: 2407-8603 sehingga pelarut lebih mudah menyerap dengan bahan uji dan berdifusi lebih banyak ke dalam partikel sehingga proses ekstraksi berlangsung lebih baik dan lebih cepat. Serbuk buah cabai rawit kemudian diekstraksi menggunakan metode maserasi. secara maserasi menghasilkan randemen capcaisin sebanyak 23,31%, warna Ektraksi putih berbentuk endapat menyerupai garam halus dan panjang. selanjutnya diidentifikasi menggunakan FT-IR. Karakterisasi FTIR (Fourier Transform Infra Red) hasil ekstraksi Capcaisin didadapatkan gugus senyawa Capcaisin. Karakterisasi FTIR dari hasil senyawa capcaisin dari buah cabai rawit dapat dilihat pada Gambar 2. data spektroskopi fungsi dari Gambar 2. Karakterisasi FTIR (Fourier Transform Infra Red) Senyawa Capcaisin Dari Buah Cabai Rawit spektrofotometer analisi inframerah (IR) menunjukkan pita serapan pada cm-1 daerah bilangan gelombang 3453,2 memberikan putunjuk adanya Gugus -OH stretching dengan intensitas serapan menengah dan bentuk pita yang melebar. Kemudian Pita yang muncul pada daerah gelombang 2956,6 cm- 1 merupakan gugus -NH streaching, dugaan ini didukung dengan adanya serapan yang muncul pada daerah 1467 cm-1 gelombang yang merupakan bangkokan NH bending (scissoring), munculnya pita serapan yang tajam pada daerah 1498,9 cm-1 dan 1467 cm-1 menunjukkan adanya gugus C=C aromatik dan menunjukkan bahwa Kristal hasil pemurnian tersebut merupakan suatu amida sekunder karena menyerap didaerah Dari hasil dekat 1500 cm-1. Pita serapan yang muncul pada daerah bilangan gelombang 2920,1 cm-1 dan 2850,1 cm-1merupakan gugus -CH stretching dari CH3 dan CH2. Sementara regangan C=O bilangan pada karbonil muncul gelombang 1718,0 cm-1 sedangkan pita serapan yang muncul pada daerah bilangan gelombang 1250,2 cm-1 merupakan vibrasi regangan asimetrik C-O dari system C-O-C atau O-CH3. Berdasarkan hasil Infra red (IR) diduga bahwa isolate merupakan suatu senyawa capcaisin dengan adanya gugus -OH, -NH, -CH2, -CH3, C=C, C=O dan O-CH3. daerah antibakteri capcaisin pada buah cabai rawit terhadap bakteri Salmonella thypi menunjukkan adanya zona Hasil penelitian uji daya Jurnal Penelitian dan Kajian Ilmiah Kesehatan Politeknik"Medica Farma Husada" Mataram Volume 6. No. 2 - Oktober 2020 160
ISSN-e: 2541-1128 ISSN-p: 2407-8603 hambat pada konsentrasi 25%, 50% dan 100%. Zona hambat juga terbentuk pada kontrol positif, tetapi tidak terbentuk pada kontrol negatif. Pada Tabel 1 terlihat hasil pengujian diameter zona hambat Salmonella tiga kali pengulangan thypi pada Tabel 1 Data Zona Hambat (mm) capcaisin Terhadap Bakteri Salmonella thypi Zona Hambat (mm) P1 P2 P3 Rata-Rata Dari hasil penelitian diketahui bahwa diameter zona hambat Salmonella thypi terhadap senyawa capcaisin pada buah cabai rawit menunjukkan hasil yang berbeda pada tiap konsentrasi. Terdapat peningkatan diameter zona hambat dengan terbentuk peningkatan konsentrasi dari senyawa tersebut. Zona pada konsentrasi 12,5% yaitu 3,03 mm, sedangkan zona pada konsentrasi 100% yaitu 11,6 mm. Diameter zona hambat maksimal tersebut tidak lebih baik dibandingkan kontrol positif yaitu ciprofloxasin sebesar 26,13 mm. Aquadest tidak menunjukkan adanya daya hambat pertumbuhan bakteri. Adanya beragam aktivitas biologis ini diduga 12,5% 25% 3,1 3,0 3,0 3,03 6,10 5,1 8,4 6,53 yang sejalan hambat minimal terbentuk hambat maksimal terbentuk Konsentrasi 100% 50% K(+) K (-) 9,7 8,5 10,2 9,46 25,5 22,9 30,0 26,13 karena peran senyawa metabolit sekunder yang terkandung (Utomo et al, 2015). 14,1 12,5 8,2 11,6 - - 5. Kesimpulan Berdasarkan hasil uji dan pengamatan yang telah dilakukan, maka dapat ditarik kesimpulan bahwa isolasi senyawa capcaisin dari buah cabai rawit (Capsicum fruktescens L) di diperoleh randemen tertinggi sebesar 23,31%, Senyawa capcaisin hasil isolasi efektif sebagai antibakteri terhadap pada kosentrasi 100% dengan rerata diameter zona hambat sebesar 11,6 %. bakteri Salmonella typhi 6. Referensi Novita T, 2015. Isolasi Capsaicin Dari Oleoresin Cabai Rawit (Capsicum fruktescens L). Chemistry Progress.Volume 8, Nomor 2, Universitas Samratulanggi, Manado. Tood, P.H., Bensinger, M.G. dan Biftu, T. (1997). Determination of pungency due gasliquid chromatography. Journal of Food Science 42: 660-664. to capsicum by Wong, D. 1989. Mechanism and Theory in Food Chemistry. New York: Van Nostrand Reinhold. Hakim, A. 2016. Meningkatkan Kualitas Pembelajaran Kimia bahan Alam Melalui Praktikum, Arga Puji Press, Mataram. Jurnal Penelitian dan Kajian Ilmiah Kesehatan Politeknik"Medica Farma Husada" Mataram Volume 6. No. 2 - Oktober 2020 161
ISSN-e: 2541-1128 ISSN-p: 2407-8603 Purseglove, J., Brown, E., Green, C. & Robbins, S. 1981. Spices. Longman, New York. Kailaku, S. I., K. T. Dewandari dan Sunarmani. 2007. Potensi Likopen Dalam Tomat Untuk Kesehatan. Buletin Teknologi Pascapanen Pertanian.3,50-58. Cita YP. 2011. Bakteri Salmonella typhi dan Kesehatan demam Masyarakat, September, 6(1):42-46. tifoid. Jurnal Arab, L. and Steck. S. 2000. Lycopene and Cardiovascular American Journal of Clinical Nutrition. 71:1691- 1695. Diseases. Purba IE, Wandra T, Nugrahini N, Nawawi S. 2016. Program pengendalian demam tifoid di Indonesia : tantangan dan peluang. Media Litbangkes. 26(2):99-108. Jurnal Penelitian dan Kajian Ilmiah Kesehatan Politeknik"Medica Farma Husada" Mataram Volume 6. No. 2 - Oktober 2020 162