James Charles Stuart

Ayahanda James, Darnley, dibunuh pada tanggal 10 Februari 1567 di Kirk o' Field, Edinburgh, mungkin sebagai pembalasan atas pembunuhan Rizzio. James mewarisi gelar ayahandanya Adipati Albany dan Earl Ross. Maria sudah tidak populer, dan pernikahannya pada tanggal 15 Mei 1567 dengan James Hepburn, Earl keempat Bothwell, yang secara luas dicurigai membunuh Darnley, meningkatkan perasaan buruk terhadapnya. Pada bulan Juni 1567, pemberontak Protestan menangkap Maria dan memenjarakannya di Puri Loch Leven; dia tidak pernah melihat putranya lagi. Dia dipaksa untuk berabdikasi pada tanggal 24 Juli 1567 demi mendukung James bocah dan untuk menunjuk saudara tirinya yang tidak sah, James Stewart, Earl Moray, sebagai wali penguasa.