經革蘭氏染色的兩種細菌，紫色者為陽性的金黃色葡萄球菌（ATCC 25923 菌株），粉紅色者為陰性的大腸桿菌（ATCC 11775 菌株）
**革蘭氏染色**（英語：）是用來鑑别細菌的一種方法：這種染色法利用細菌細胞壁上的生物化学性质不同，可將細菌分成兩類，即革蘭氏陽性（英語：）与革蘭氏陰性（英語：）。这一染色方法由丹麥醫生漢斯·克斯蒂安·革蘭於1884年所發明，最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係，后推广为鉴别细菌种类的重要特性之一，对由细菌感染引起的疾病的临床诊断及治疗有着广泛用途。

革蘭氏阳性菌和革蘭氏阴性菌对抗生素的反应并不一样，因而通过抽取样品医生可以在很短的时间内（5分钟左右）确定细菌的革蘭氏性质，医生从而可依据结果初步判断，迅速给病人注射抗生素，而不需要等待几天细菌培植得到的化验结果。然而并非所有的细菌都可以通过革兰氏染色归类，如分歧杆菌等则需进行抗酸染色鉴别。

染色结果
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革蘭氏染色结果示例經革蘭氏染色的大腸桿菌（革蘭氏陰性菌）經革蘭氏染色的大腸桿菌（革蘭氏陰性菌）經革蘭氏染色的金黃葡萄球菌（革蘭氏陽性菌）經革蘭氏染色的金黃葡萄球菌（革蘭氏陽性菌）
革蘭氏染色的对象是细菌的细胞壁。染色后的细菌可在显微镜下更好的观察，以便于区分。不同的细菌在该染色法的作用底下反应不同，藉以主要区分成为以下的类型：

### 革蘭氏阳性菌

条目：革蘭氏陽性菌
革蘭氏阳性菌，胞壁染色后呈**蓝紫色**。

### 革蘭氏阴性菌

条目：革兰氏阴性菌
革蘭氏阴性菌，染色后呈**红色**。

### 不确定或者多变

染色流程及原理
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流程可概括为：染色-脱色-複染。

* 第一步：初染剂（Primary Stain）

使用结晶紫染色，染色部位主要為染細胞壁上的肽聚醣。

* 第二步：媒染劑（Mordant）

加入複方碘溶液或稱革蘭氏碘液（Gram's Iodine）後，兩者會形成不溶性的結晶紫-碘（CV-I）複合体。細菌呈紫黑色。第二步是關键，它的目的是分辨细菌的革蘭氏染色特性。若為革蘭氏陽性菌，此複合體係結合於細胞壁之鎂、核糖核酸（Magnesium Ribonucletic Acid），形成鎂-核糖核酸-結晶紫-碘（Mg-RNA-CV-I）複合體，不易脫去，染劑也就固定下來了。

* 第三步：脫色劑（Decoloring Agent）

使用酒精（95%）脱色，試劑具脂溶劑（Lipid Solvent）和蛋白脫水劑（Protein Dehydrating Agent）之雙重功能。此步驟對革蘭氏陽性細菌無效，因為其細胞壁上厚厚的細胞壁（成分為肽聚醣）層次多，交聯緻密，故遇脫水時網孔縮小，再加上不含類脂，使得乙醇不會溶出縫隙，因此阻隔了結晶紫-碘複合體的外渗，仍然呈紫色只能留在细菌体内。革蘭氏陰性菌細胞壁層薄，外膜類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯度差，在遇脫色劑時，以類脂爲主的外膜迅速溶解，薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋複合體溶出，因此會被脱色而成為無色。

* 第四步：複染劑（Counterstain）

為了對比，在此之後会加入番红（Safranin）進行複染，革蘭氏阴性菌成红色，而革蘭氏阳性菌仍保有原來的紫色。

定性
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### KOH-试验

另外的一种方法是氢氧化鉀-试验。将培养好的细菌取出一小部分，使其悬浮于一滴KOH溶液中。革蘭氏阳性菌与之不发生反应，用细针穿过该溶液，溶液呈正常液体状。革蘭氏陰性菌因細胞壁中主要成分為脂多醣，脂質含量較高，接觸強鹼KOH後與KOH發生皂化反應，以細針穿過會有明顯黏稠狀。

### 氨肽酶试验

除了个别例外，只有革蘭氏阴性菌才能证明氨肽酶的存在。这是该试验的基础。
将要进行试验的细菌放入试管加水。放入一张显示肽酶活性的试纸，在37°C下等待10到35分钟，试纸变成深黄色。

参见
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|  | 维基共享资源中相关的多媒体资源：**革蘭氏染色** |

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|  | 維基教科書中的相關電子：**革兰氏染色（英文）** |

* 革蘭氏阳性菌
* 革蘭氏阴性菌
* 分歧杆菌与抗酸染色

外部链接
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* 丁香园上的"革兰氏染色法(原理、方法和意义) （页面存档备份，存于）"（简体中文）
* 实验二十二 简单染色法和革兰氏染色法 （页面存档备份，存于）**（简体中文）**
* 微生物學實驗 （页面存档备份，存于）之"實驗二、革蘭氏染色法"（繁體中文）
* 高瞻生物實驗手冊 （页面存档备份，存于）之"實作二：細菌染色觀察（簡單染色法、革蘭氏染色法）"（繁體中文）
* Gram staining technique video （页面存档备份，存于）（英文）

参考文献
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### 注释

1. ↑  结晶紫（英語：）或稱**龍膽紫**（英語：），也稱「甲基紫10B」。

### 引用

1. ↑  Colco, R.. Current Protocols in Microbiology. 2005, **00** (1): Appendix 3C. ISBN 978-0471729259. PMID 18770544. doi:10.1002/9780471729259.mca03cs00.
2. ↑ . Georgia Highlands College.  [2017-06-09]. （原始内容存档于2017-06-10）.
3. ↑  : 第三章. 2016. ISBN 9787040444957.

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| * 
* 论
* 编
生物染色剂 |
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| 铁及含铁血黄素（英语：） | 
* 普鲁士蓝

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| 脂類 | 
* 苏丹红
	+ 蘇丹二號
	+ 蘇丹三號
	+ 蘇丹四號
	+ 油紅O
	+ 蘇丹黑B

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| 糖类 | 
* PAS染色法

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|  |
| 類澱粉蛋白 | 
* 剛果紅

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| 细菌 | 
* 革蘭氏染色
	+ 甲基紫/結晶紫
	+ 番紅
	+ 抗酸染色
	+ 苯酚品红溶液/品紅
	+ 亞甲藍
* 金胺-若丹明染色法（英语：）
	+ 金胺O
	+ 罗丹明B

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| 结缔组织 | 
* 三色染色（英语：）：馬森三色染色法/利利三色染法（英语：）
	+ 亮綠SF淡黄（英语：）
	+ 比布列希猩红
	+ 磷钼酸
	+ 固綠FCF
* Van Gieson's stain（英语：）

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| 脱氧核糖核酸 | 
* DAPI
* 赫斯特染色
* 甲基绿
* 吉姆萨染液

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| 其他 | 
* 孔雀石绿
* 苏木精-伊红染色
	+ 苏木精
	+ 伊红-Y
* 银染（英语：）
	+ 顾冒林氏乌洛托品银染（英语：）
	+ 嗜銀染色法（英语：）
* 甲基藍
* 赖特氏染色剂（英语：）
* 顾冒林氏三色染色法（英语：）
* 中性紅
* 健那绿B
* Movat's stain（英语：）

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| 组织染色能力 | 
* 嗜酸（英语：）
* 嗜堿（英语：）
* 嫌色

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