**α-komplementasi** merupakan fenomena di mana subunit α dari enzim β-galaktosidase yang berasal dari vektor plasmid dapat mengaktifkan enzim β-galaktosidase yang gennya(lacZ) telah menjadi mutan pada DNA kromosom bakteri sehingga enzim tersebut dapat menjadi enzim yang fungsional.

Struktur Enzim β-Galaktosidase
------------------------------

*lacZ*, gen yang menyandikan beta-galaktosidase
Enzim β-galaktosidase terdiri atas 146 asam amino yang terbagi dalam 4 subunit. Bagian yang dekat dengan ujung 5’ pada gen lacZ mengkodekan subunit α yang berfungsi dalam proses tetramerisasi yaitu proses pembentukan struktur 3 dimensi protein tersebut, sementara itu bagian yang dekat dengan ujung 3’ pada lacZ mengkodekan sisi aktif enzim tersebut. Keempat subunit β-galaktosidase harus berkumpul untuk membentuk satu enzim yang fungsional).

Bagian yang terlibat dalam alfa-komplementasi
---------------------------------------------

### *lacZ'*

*lacZ'*, gen yang menyandikan beta-galaktosidase yang hanya mengandung subunit α(terdapat pada vektor plasmid)
**Gen *lacZ'*** merupakan gen yang hanya mengandung subunit α pada β-galaktosidase tetapi tidak mengandung gen yang menyandikan sisi aktif enzim tersebut.} Hal tersebut diakibatkan karena gen *lacZ* yaitu gen yang menyandikan β-galaktosidase merupakan gen yang cukup besar jika ditaruh seluruhnya di dalam vektor plasmid, oleh sebab itu, dalam vektor plasmid hanya terkandung sebagian dari gen yang menyandikan β-galaktosidase untuk menjaga ukuran plasmid agar tetap kecil.

### *lacZ∆M15*

*lacZ∆M15*, gen yang menyandikan beta-galaktosidase yang telah mengalami delesi pada subunit α nya(terdapat pada DNA kromosom bakteri)
Gen *lacZ∆M15* adalah gen penyandi β-galaktosidase yang terdapat pada DNA kromosom bakteri yang telah mengalami delesi sebanyak 90 pasang basa pada sekuens yang dekat dengan ujung 5’. Hal tersebut mengakibatkan subunit α pada enzim β-galaktosidase kehilangan 30 asam amino sehingga tidak dapat melakukan tetramerisasi yaitu yang berhubungan dengan pelipatan protein sehingga enzim ini menjadi tidak fungsional.

Mekanisme
---------

Gen lacZ dalam proses kloning DNA berfungsi sebagai gen pelapor, yaitu gen yang ekspresinya bergantung pada masuk atau tidaknya insert pada vektor kloning. Hal ini disebabkan karena adanya MCR (Multiple Cloning Site) di antara gen penyandi β-galaktosidase.

### Tidak terdapat insert pada vektor kloning

Gambar hasil **koloni biru** pada cawan petri
lacZ akan ditranskripsi secara normal dan dapat membentuk α-complementaion menjadi β-galaktosidase yang dapat memecah X-gal menjadi galaktosa dan turunan indoksil. Turunan tersebut selanjutnya akan dioksidasi sehingga membentuk turunan dibromo-dikloro yang menyebabkan berubahnya warna koloni menjadi biru saat ditumbuhkan pada media agar yang mengandung X-gal.

### Terdapat insert pada vektor kloning

Gambar hasil **koloni putih** pada cawan petri
Akan terdapat tambahan gen insert yang ikut ditranskripsi oleh RNA polimerase. Hal tersebut menyebabkan gen lacZ tersebut tidak dapat membentuk enzim β-galaktosidase yang fungsional dan X-gal tidak akan dipecah sehingga koloni yang dihasilkan tetap berwarna putih.

Referensi
---------

1. ↑  Attwood, T. K.; Cammack, R. (2006), *Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology* (edisi ke-2nd), New York: Oxford University Press,Inc;, ISBN 0198529171 (lihat di Penelusuran Buku Google)
2. 1 2 3  Welply JK, Fowler AV,Zabin I (1981). "Beta-Galactosidase alpha-Complementation" (pdf). *J Biol Chem*. **256**: 6804–6810. Pemeliharaan CS1: Banyak nama: authors list (link)
3. ↑  Howe, CJ. (1995), *Gene Cloning and Manipulation*, New York: Cambrigde University Press, ISBN 0521403413  (lihat di Penelusuran Buku Google)
4. 1 2 3 4 5 6  Burton, Z. F.; Kaguni, J. M. (1997), *Experiment in Molecular Biology:Biochemical Applications*, California: Academic Press, ISBN 012147370 Periksa nilai: length `|isbn=` (bantuan)  (lihat di Penelusuran Buku Google)
5. ↑  Langley KE,Villarejo MR,Fowler AV,Zamenhof PJ,Zabin I (1975). "Molecular Basis of β-Galactosidase α-Complementation" (pdf). *Proc Nat. Acad. Sci*. **72**: 1254–1257. Pemeliharaan CS1: Banyak nama: authors list (link)
6. 1 2 3 4 5  Nichol (2002), *An Introduction to Genetic Engineering*, New York: Cambridge University Press, ISBN 0521808677  Parameter `|first2=` tanpa `|last2=` di Authors list (bantuan) (lihat di Penelusuran Buku Google)
7. ↑  Rapley, R.; Walker, JM (1998), *Molecular Biomethods Handbook*, New Jersey: Humana Press,Inc, ISBN 0521889090 Periksa nilai: checksum `|isbn=` (bantuan)  (lihat di Penelusuran Buku Google)