Kỹ thuật ELISA và những điều cần biết

Kỹ thuật ELISA giúp chúng ta phát hiện được các kháng thể hoặc kháng nguyên trong mẫu thử bằng phản ứng sinh hóa miễn dịch đặc hiệu. Vậy kỹ thuật ELISA gồm các phương pháp nào, những điều cần biết khi sử dụng kỹ thuật này là gì hãy cùng theo dõi trong bài viết sau nhé.  Nguyên lý kỹ thuật ELISA  Kỹ thuật ELISA là một phương pháp sinh hóa, được sử dụng chủ yếu trong miễn dịch học nhằm phát hiện sự hiện diện của một kháng thể hoặc  Kỹ thuật ELISA là một phương pháp sinh hóa, được sử dụng chủ yếu trong miễn dịch học  Nguyên lý của kỹ thuật ELISA đó là dựa vào sự đặc hiệu kháng nguyên và kháng thể. Nó sẽ được thực hiện theo các bước sau:  kháng nguyên (antigen) hoặc kháng thể (antibody) đã biết được gắn trên một giá thể rắn. Tiếp đó cho mẫu có chứa kháng thể hoặc kháng nguyên cần tìm vào giếng. Bổ sung thêm kháng thể có gắn với enzyme.  Thêm cơ chất (substance) để enzyme sẽ làm biến đổi cơ chất này rồi tạo ra tín hiệu màu có thể xác định được với máy đo huỳnh quang.  Các phương pháp của kỹ thuật ELISA  phẫu thuật về trong ngày  được sử dụng nhiều trong ELISA định tính và ít sử dụng trong ELISA định lượng.  Các phương pháp của kỹ thuật ELISA  phẫu thuật về trong ngày  được sử dụng nhiều trong ELISA định tính và ít sử dụng trong ELISA định lượng. Nó mang ưu điểm là chỉ cần một lần ủ, nhờ đó sẽ tiết kiệm được thời gian và hạn chế được việc kiểm soát trong các quá trình thực hiện.  Nhược điểm của phương pháp này là nhuộm màu nền cao bởi sự liên kết không đặc hiệu giữa kháng thể với bề mặt rắn và protein cố định trên bề mặt rắn. Đồng thời, việc đánh dấu từng loại kháng thể để dùng trong mỗi kháng nguyên cũng tốn kém, đặc biệt là trong trường hợp phải chuẩn đoán một số lượng lớn những loại kháng nguyên khác nhau.  Phương pháp ELISA gián tiếp  Với phương pháp này thì ưu điểm của nó là có độ nhạy cao, chỉ cần tạo một loại  mang enzyme để giúp nhận biết cho các kháng nguyên khác nhau.  Nhược điểm của phương pháp ELISA gián tiếp là phải thực hiện nhiều bước, khiến cho việc kiểm soát các điều kiện cũng bị tăng lên, kéo dài quá trình thực hiện xét nghiệm và thời gian chuẩn đoán.  Phương pháp ELISA Sandwich  Đối với phương pháp ELISA Sandwich thì có nhiều ưu điểm nổi trội, nhất là việc có độ nhạy cao, giảm được nhượm màu nền cũng như các phản ứng không đặc hiệu. Bởi đã được loại bỏ đa số các thành phần tạp chất giúp phản ứng được thực hiện đơn giản và dễ dàng hơn.  Phương pháp này được cho là rất hiệu quả, nó cho định lượng các yếu tố hiện diện trong mẫu với lượng rất thấp. Phương pháp này sử dụng một lượng kháng nguyên cùng loại với kháng nguyên mà chúng ta muốn định lượng trong mẫu (kháng nguyên cạnh tranh) cho phản ứng miễn dịch với cùng một loại kháng để đặc biệt cố định trên mặt rắn. Cuối cùng, đo lượng kháng nguyên này bằng hoạt tính enzyme được liên kết cùng với nó nếu kháng nguyên cạnh tranh càng hiện diện nhiều có nghĩa là loại kháng nguyên đó trong mẫu càng ít và ngược lại.  Sàng lọc ung thư, thử nghiệm thuốc và mang thai  Việc phát hiện sớm bệnh  sẽ giúp bệnh nhân có phần trăm chữa trị và sống sót cao hơn. Do đó, xác định dấu hiệu ung thư sớm luôn được chú trọng trong y học.  Đồng thời ELISA cũng giúp theo dõi mức độ nồng độ dược chất đối với các bệnh nhân đang điều trị bệnh lý, điển hình như kháng thể chống nhiễm trùng trong viêm khớp dạng cấp và viêm ruột. Kỹ thuật ELISA cũng hay được sử dụng để giúp phát hiện và kiểm tra hormone gonadotrophin màng đệm ở người (hCG) trong nước tiểu, qua đó phát hiện một số bệnh lý hoặc phụ nữ đang mang thai.  Phương pháp xét nghiệm ELISA có thể dùng để chẩn đoán một số bệnh lý gồm có:  Bệnh thiếu máu ác tính;  Ung thư biểu mô tế bào vảy;  Tiêu chảy do rotavirus;  Virus varicella-zoster, gây ra  Phương pháp ELISA được sử dụng như một công cụ sàng lọc trước khi bác sĩ chỉ định các xét nghiệm chuyên sâu hơn.  Phát hiện kháng thể tiểu cầu  ELISA giúp phát hiện các kháng thể tiểu cầu một cách đơn giản và ít tốn kém hơn một số phương pháp khác. Đồng thời nó cũng được thực hiện để cung cấp nhiều thông tin hơn cho những xét nghiệm như lymphocytotoxicity (LCT) và xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang tiểu cầu (PIIFT).