Louis Pasteur

Louis Pasteur, nado en Dole (departamento do Jura) o 27 de decembro de 1822 e finado o 28 de setembro de 1895, foi un químico francés cuxos descubrimentos tiveron enorme importancia en diversos campos das ciencias naturais, sobre todo na química e microbioloxía. A el débese a técnica coñecida como pasteurización. A través de experimentos refutou definitivamente a teoría da xeración espontánea e desenvolveu a teoría xerminal das enfermidades infecciosas. Polos seus traballos é considerado o pioneiro da microbioloxía moderna, iniciando a chamada «Idade de Ouro da Microbioloxía».
Aínda que a teoría microbiana foi moi controvertida nos seus inicios, hoxe en día é fundamental na medicina moderna e a microbioloxía clínica e conduciu a innovacións tan importantes como o desenvolvemento das vacinas, os antibióticos, a esterilización e a hixiene como métodos efectivos de cura e prevención contra a propagación das doenzas infecciosas. Esta idea representa o inicio da medicina científica, ao demostrar que a enfermidade é o efecto visible (signos e síntomas) dunha causa que pode ser buscada e eliminada mediante un tratamento específico. No caso das enfermidades infecciosas, débese buscar o xerme causante de cada enfermidade para achar un modo de combatelo.
As súas contribucións na química orgánica foron o descubrimento do dimorfismo do ácido tartárico, ao observar ao microscopio que o ácido racémico presentaba dous tipos de cristal, con simetría especular. Foi xa que logo o descubridor das formas dextroxiras e levoxiras que desviaban o plano de polarización da luz co mesmo ángulo pero en sentido contrario. Traxectoria
Primeiros anos
Louis Pasteur naceu o 27 de decembro de 1822, en Dole, Jura, Francia, no seo dunha familia católica dun pobre curtidor. Foi o terceiro fillo de Jean-Joseph Pasteur e Jeanne-Etiennette Roqui e as súas irmás eran Virginie, Josephine e Emilie Pasteur. O seu pai, logo de ser sarxento no exército napoleónico, retomou a profesión familiar de curtidor. A súa irmá Emilie tiña unha enfermidade que lle producía un atraso mental e tiña a mente dun neno de cinco anos. En 1825 a familia deixou Dole para ir a Marnoz, para finalmente instalarse en Arbois en 1830. A familia trasládase a Marnoz en 1826 e a Arbois en 1827. Pasteur ingresou na escola primaria en 1831. Era disléxico e disgráfico.
O mozo Pasteur seguiu en Arbois os cursos da escola mutua logo entrou no colexio da cidade. É nesta época que se fixo coñecer polos seus talentos de pintor; por outra banda fixo numerosos retratos de membros da súa familia e dos habitantes da pequena cidade.
Non foi un alumno especialmente aplicado ou brillante na escola nin na Universidade, xa que os seus intereses eran a pesca e a pintura. É nesta época que se fixo coñecer polos seus talentos de pintor; debuxou moitos pasteis e retratos dos seus pais, amigos e veciños. Pasteur cursou estudos secundarios no Collège d'Arbois. En outubro de 1838, parte cara París para matricularse nun internado, pero entralle morriña e regresa en novembro.
En 1839, ingresa no Collège Royal de Besançon para estudar filosofía e licénciase en Letras en 1840. Foi nomeado titor no colexio de Besançon, á vez que continuaba unha carreira de ciencias con especialización en matemáticas. Suspendeu o seu primeiro exame en 1841. Conseguiu aprobar o baccalauréat (bacharelato de ciencias xerais) de Dijon, onde obtivo a licenciatura en Ciencias Matemáticas (Bachelier ès Sciences Mathématiques) en 1842, pero cunha nota mediocre en química.
Máis tarde, en 1842, Pasteur realizou a proba de acceso á École Normale Supérieure. Durante o exame, tivo que loitar contra o cansazo e só sentiuse cómodo coa física e as matemáticas. Pasou a primeira serie de probas, pero como a súa clasificación era baixa, Pasteur decidiu non continuar e volver tentalo o ano seguinte. Volveu ao internado parisiense para preparar o exame. Tamén asistiu a clases no Lycée Saint-Louis e as conferencias de Jean-Baptiste Dumas na Sorbonne. En 1843, aproba o exame cunha cualificación alta e ingresa na École Normale Supérieure. En 1845 obtivo a licenciatura en ciencias. En 1846, foi nomeado profesor de física no Collège de Tournon (agora chamado Lycée Gabriel-Faure) en Ardèche. Pero o químico Antoine Jérôme Balard quixo que volvese á École Normale Supérieure como axudante de laboratorio (agrégé préparateur). Uniuse a Balard e simultaneamente comezou as súas investigacións en cristalografía e en 1847, presentou as súas dúas teses, unha en química e outra en física: (a) Tese de Química: "Recherches sur la capacité de saturation de l'acide arsénieux. Etudes des arsénites de potasse, de soude et d'ammoniaque. "; (b) Tese de Física: "1. Études des phénomènes relatifs à la polarisation rotatoire des liquides 2. Aplicación da polarización rotatoria dos líquidos á solución de diversas cuestións de química".
Tras exercer brevemente como profesor de física no Liceo de Dijon en 1848, pasou a ser profesor de química, en 1849, na Universidade de Estrasburgo, onde coñeceu e cortexou a Marie Laurent, filla do reitor da universidade. casan o 29 de maio de 1849, e xuntos tiveron cinco fillos, dos que só dous sobreviviron á idade adulta; os outros tres morreron de tifo.
Carreira
Pasteur foi nomeado profesor de química na Universidade de Estrasburgo en 1848, e ocupou a cátedra de química en 1852. En febreiro de 1854, para ter tempo de realizar traballos que puidesen valerlle o título correspondente do Instituto, obtén tres meses de permiso retribuido coa axuda dun certificado médico de convenencia. Prolongou o permiso até o 1 de agosto, data de inicio dos exames. "Dígolle ao Ministro que irei facer os exames para non aumentar a vergoña do servizo. Tamén para non deixar a outro unha suma de 6 ou 700 francos".
Nese mesmo ano 1854, foi nomeado decano da nova facultade de ciencias da Universidade de Lille, onde iniciou os seus estudos sobre a fermentación. Foi nesta ocasión cando Pasteur pronunciou a súa tan citada observación: "dans lles champs de l'observation, le hasard ne favorise que lles esprits préparés" ("No campo da observación, o azar só favorece ás mentes preparadas"). .
En 1857 trasladouse a París como director de estudos científicos da École Normale Supérieure, onde asumiu o control desde 1858 ata 1867 e introduciu unha serie de reformas para mellorar o nivel do traballo científico. Os exames fixéronse máis ríxidos, o que propiciou mellores resultados, unha maior competencia e un aumento do prestixio. Con todo, moitos dos seus decretos eran ríxidos e autoritarios, o que provocou dúas graves revoltas estudantís. Durante "a revolta das xudías" decretou que todos os luns servísese e comese un estofado de cordeiro que os alumnos se negaron a comer. Noutra ocasión ameazou con expulsar a calquera alumno que fose sorprendido fumando, e 73 dos 80 alumnos da escola dimitiron. Fixo grandes descubrimentos.
En 1863 foi nomeado profesor de xeoloxía, física e química na École nationale supérieure deas Beaux-Arts, cargo que ocupou até a súa dimisión en 1867. En 1867 ocupou a cátedra de química orgánica da Sorbona, pero máis tarde renunciou ao cargo por problemas de saúde. En 1867 creouse, a petición de Pasteur, o laboratorio de química fisiolóxica da École Normale, e foi director do laboratorio desde 1867 ata 1888. En 1887 creou en París o Instituto Pasteur, do que foi director o resto da súa vida. Investigación
Asimetría molecular
Nos seus primeiros traballos como químico, que comezou na École Normale Supérieure e continuou en Estrasburgo e Lille, Pasteur examinou as propiedades químicas, ópticas e cristalográficas dun grupo de compostos coñecidos como tartaratos.
En 1848 resolveu un problema relativo á natureza do ácido tartárico. Unha solución deste composto derivado dos seres vivos facía xirar o plano de polarización da luz que o atravesaba. O problema era que o ácido tartárico derivado por síntese química non tiña tal efecto, aínda que as súas reaccións químicas eran idénticas e a súa composición elemental era a mesma.
Pasteur observou que os cristais de tartaratos tiñan caras pequenas. Logo observou que, nas mesturas racémicas de tartaratos, a metade dos cristais eran destros e a outra metade zurdos. En solución, o composto destro era dextroxiro e o zurdo levóxiro. Pasteur determinou que a actividade óptica estaba relacionada coa forma dos cristais, e que unha disposición interna asimétrica das moléculas do composto era a responsable da torsión da luz. Os tartaratos (2R, 3R)- e (2S, 3S)- eran imaxes especulares isométricas e non superpoñibles entre si. Era a primeira vez que alguén demostraba a quiralidade molecular, e tamén a primeira explicación do isómeroismo.
Algúns historiadores consideran que os traballos de Pasteur neste campo son as súas "achegas máis profundas e orixinais á ciencia" e o seu "maior descubrimento científico". "
En 1854 foi nomeado decano da Facultade de Ciencias na Universidade de Lille.
Fermentación e teoría xerminal das enfermidades
Pasteur sentiuse motivado para investigar a fermentación mentres traballaba en Lille. En 1856, un fabricante de viño local, M. Bigot, cuxo fillo era un dos alumnos de Pasteur, pediulle consello sobre os problemas da fabricación de alcol de remolacha e a acidificación. Pasteur comezou as súas investigacións sobre o tema repetindo e confirmando os traballos de Theodor Schwann, quen demostrou unha década antes que os fermentos estaban vivos.
Segundo o seu xenro, René Vallery-Radot, en agosto de 1857 Pasteur enviou un traballo sobre a fermentación láctica á Société des Sciences de Lille, pero o traballo foi lido tres meses máis tarde. Posteriormente, o 30 de novembro de 1857, publicouse unha memoria. Nas memorias, desenvolveu as súas ideas afirmando que: "Pretendo establecer que, así como existe un fermento alcohólico, o fermento da cervexa, que se atopa en todas partes onde o azucre se descompón en alcol e ácido carbónico, tamén existe un fermento particular, un fermento láctico, sempre presente cando o azucre se converte en ácido láctico. "
Pasteur tamén escribiu sobre a fermentación alcohólica. Publicouse integramente en 1858. Jöns Jacob Berzelius e Justus von Liebig propuxeran a teoría de que a fermentación se producía por descomposición. Pasteur demostrou que esta teoría era incorrecta e que o fermento era a responsable da fermentación para producir alcol a partir do azucre. Tamén demostrou que, cando un microorganismo diferente contaminaba o viño, producíase ácido láctico, o que agreaba o viño. En 1861, Pasteur observou que fermentaba menos azucre por parte de fermento cando esta expúñase ao aire. A menor taxa de fermentación aeróbica coñeceuse como efecto Pasteur. As investigacións de Pasteur tamén demostraron que o crecemento de microorganismos era responsable da deterioración de bebidas como a cervexa, o viño e o leite. Unha vez establecido isto, inventou un proceso no que líquidos como o leite se quentaban a unha temperatura de entre 60 e 100 °C. Isto mataba á maioría das bacterias e mohos xa presentes no seu interior. O 20 de abril de 1862, Pasteur e Claude Bernard completaron as probas con sangue e ouriños. Pasteur patentou o proceso, para combater as "enfermidades" do viño, en 1865. O método coñeceuse como pasteurización, e pronto se aplicou á cervexa e o leite.
A contaminación das bebidas levou a Pasteur á idea de que os microorganismos que infectan a animais e humanos causan enfermidades. Propuxo impedir a entrada de microorganismos no corpo humano, o que levou a Joseph Lister a desenvolver métodos antisépticos en cirurxía. (1865)
En 1866, Pasteur publicou Études sur le Vin, sobre as enfermidades do viño, e en 1876 publicou Études sur a Bière, sobre as enfermidades da cervexa.
A principios do século XIX, Agostino Bassi demostrara que a muscardina estaba causada por un fungo que infectaba aos vermes da seda. Desde 1853, dúas enfermidades chamadas pébrine e flacherie infectaran a un gran número de vermes da seda no sur de Francia, e en 1865 estaban a causar enormes perdas aos agricultores. En 1865, Pasteur trasládase a Alès e traballa durante cinco anos, até 1870.
Os vermes de seda con pébrine estaban cubertos de corpúsculos. Durante os tres primeiros anos, Pasteur pensou que os corpúsculos eran un síntoma da enfermidade. En 1870, chegou á conclusión de que os corpúsculos eran a causa da pebrina (agora sábese que a causa é un microsporidio). Pasteur tamén demostrou que a enfermidade era hereditaria. Pasteur desenvolveu un sistema para previr a pébrine: despois de que as couzas femias puxesen os seus ovos, as couzas convertíanse en polpa. A polpa examinábase cun microscopio e, se se observaban corpúsculos, destruíanse os ovos. Pasteur chegou á conclusión de que a causa da flacherie eran as bacterias. Actualmente crese que a causa principal son os virus. A propagación da flacherie pode ser accidental ou hereditaria. A hixiene podía utilizarse para previr a flacherie accidental. Utilizábanse couzas cuxas cavidades dixestivas non contiñan os microorganismos causantes da flacherie para pór ovos, o que evitaba a flacherie hereditaria.
Xeración espontánea
Tras os seus experimentos de fermentación, Pasteur demostrou que a pel da uva era a fonte natural de fermentos, e que as uvas esterilizadas e o zume de uva nunca fermentaban. Extraeu zume de uva de debaixo da pel con agullas esterilizadas, e tamén cubriu as uvas con tea esterilizada. Ambos os experimentos non puideron producir viño en recipientes esterilizados.
Demostrou que todo proceso de fermentación e descomposición orgánica se debe á acción de organismos vivos e que o crecemento dos microorganismos en caldos nutritivos non era debido á xeración espontánea. Recibiu unha crítica especialmente severa de Félix Archimède Pouchet, que era director do Museo de Historia Natural de Ruán. Para resolver o debate entre os eminentes científicos, a Academia Francesa de Ciencias ofreceu o Premio Alhumbert dotado con 2. 500 francos a quen puidese demostrar experimentalmente a favor ou en contra da doutrina.
Pouchet afirmou que o aire en todas partes podía provocar a xeración espontánea de organismos vivos nos líquidos. A finais da década de 1850, realizou experimentos e afirmou que eran unha proba da xeración espontánea. Francesco Redi e Lazzaro Spallanzani achegaran algunhas probas contra a xeración espontánea nos séculos XVII e XVIII, respectivamente. Os experimentos de Spallanzani en 1765 suxerían que o aire contaminaba os caldos con bacterias. Na década de 1860, Pasteur repetiu os experimentos de Spallanzani, pero Pouchet comunicou un resultado diferente utilizando un caldo distinto.
Pasteur realizou varios experimentos para refutar a xeración espontánea. Colocou líquido fervido nun matraz e deixou que entrase aire quente. Despois pechou o matraz e non creceu ningún organismo nel. Noutro experimento, ao abrir frascos que contiñan líquido fervido, entrou po nos frascos, facendo que crecesen organismos nalgúns deles. O número de frascos nos que crecían organismos era menor a maior altitude, o que demostraba que o aire a grande altitude contiña menos po e menos organismos. Pasteur tamén utilizou matraces de pescozo de cisnes que contiñan un líquido fermentable. O aire entraba no matraz a través dun longo tubo curvado que facía que as partículas de po se pagasen a el. Nada crecía nos caldos a menos que se inclinasen os matraces, facendo que o líquido tocase as paredes contaminadas do pescozo. Isto demostraba que os organismos vivos que crecían neses caldos procedían do exterior, do po, en lugar de xerarse espontaneamente dentro do líquido ou pola acción do aire puro.
Estes foron algúns dos experimentos máis importantes que refutaron a teoría da xeración espontánea. En 1881, Pasteur realizou unha serie de cinco presentacións dos seus descubrimentos ante a Academia Francesa de Ciencias, que se publicaron en 1882 co título Mémoire Sur les corpuscules organisés qui existent dans l'atmosphère: Examen de la doctrine des générations spontanées (Relato dos corpúsculos organizados que existen na atmosfera: Exame da doutrina das xeracións espontáneas). Pasteur gañou o Premio Alhumbert en 1862. Concluíu que:
Enfermidade do verme da seda
En 1865, Jean-Baptiste Dumas, químico, senador e antigo ministro de Agricultura e Comercio, pediu a Pasteur que estudase unha nova enfermidade que estaba diezmando as explotacións de verme da seda do sur de Francia e de Europa, a pébrine, caracterizada a escala macroscópica por manchas negras e a escala microscópica polos "corpúsculos de Cornalia". Pasteur aceptou e realizou cinco longas estancias en Alès, entre o 7 de xuño de 1865 e 1869.
Erros iniciais
Ao chegar a Alès, Pasteur familiarizouse coa pébrine e taméncon outra enfermidade do verme de seda, coñecida antes que a pebrine: flacherie ou enfermidade das chairas mortas. Contrariamente, por exemplo, a Quatrefages, que acuñou a nova palabra pébrine, Pasteur cometeu o erro de crer que as dúas enfermidades eran iguais e mesmo que a maioría das enfermidades dos vermes de seda coñecidas até entón eran idénticas entre si e coa pébrine. Foi en cartas de 30 de abril e 21 de maio de 1867 a Dumas cando fixo por primeira vez a distinción entre pébrine e flacherie.
Cometeu outro erro: empezou negando a natureza "parasitaria" (microbiana) da pebrina, que varios estudosos (en particular Antoine Béchamp) considérase ben establecida. Incluso unha nota publicada o 27 de agosto de 1866 por Balbiani, que Pasteur ao principio pareceu acoller favorablemente non tivo ningún efecto, polo menos inmediatamente. "Pasteur equivócase. Só cambiaría de opinión no transcurso de 1867".
Vitoria sobre a pebrina
Nunha época na que Pasteur aínda non comprendera a causa da pébrine, propagou un proceso eficaz para deter as infeccións: elixíase unha mostra de crisálidas, triturabanse e buscábanse os corpúsculos no material triturado; se a proporción de pupas corpusculares na mostra era moi baixa, a mostra considerábase boa para a reprodución. Este método de clasificación das "sementes" (ovos) aproxímase a un método que Osimo propuxera uns anos antes, pero cuxos ensaios non foran concluíntes. Mediante este proceso, Pasteur frea a pébrine e salva moitas das industrias da seda das Cevenas.
O propio Pasteur, en 1871 obrigou ós médicos dos hospitais militares a ferve-lo instrumental e as vendaxes. Describiu un forno, chamado "forno Pasteur", útil para esterilizar instrumental cirúrxico e material de laboratorio.
A flacherie resiste
En 1878, no Congrès international séricicole, Pasteur admitiu que "se se vence a pébrina, a flacherie aínda exerce os seus estragos". Atribuíu a persistencia da flacherie ao feito de que os agricultores non seguiran os seus consellos.
En 1884, Balbiani, que desdeñaba o valor teórico dos traballos de Pasteur sobre as enfermidades dos vermes da seda, recoñecía que o seu procedemento práctico remediara os estragos da pebrina, pero engadía que este resultado tendía a ser contrarrestado polo desenvolvemento da flacherie, menos coñecida e máis difícil de previr.
A pesar do éxito de Pasteur contra a pebrina, a sericultura francesa non se salvou dos danos. (Véxase Sériciculture na Wikipedia en francés).
Inmunoloxía e vacinación
Cólera dos polos
O primeiro traballo de Pasteur no desenvolvemento de vacinas foi sobre o cólera dos polos. Recibiu as mostras da bacteria (máis tarde chamada Pasteurella multocida na súa honra) de Henry Toussaint. Iniciou o estudo en 1877 e, ao ano seguinte, foi capaz de manter un cultivo estable utilizando caldos. Tras outro ano de cultivo continuo, descubriu que as bacterias eran menos patóxenas. Algunhas das súas mostras de cultivo xa non podían inducir a enfermidade en polos sans. En 1879, Pasteur, que planeaba irse de vacacións, encargou ao seu axudante Charles Chamberland que inoculara os polos con cultivos bacterianos frescos. Chamberland esqueceuse e foise de vacacións. Ao seu regreso, inxectou os cultivos dun mes a polos sans. Os polos mostraron algúns síntomas de infección, pero en lugar de que as infeccións fosen mortais, como adoitaba ocorrer, os polos recuperáronse completamente. Chamberland supuxo que se cometeu un erro e quixo refugar o cultivo aparentemente defectuoso, pero Pasteur impediullo. Pasteur inxectou aos polos recentemente recuperados bacterias frescas que normalmente matarían a outros polos; os polos xa non mostraron ningún signo de infección. Para el estaba claro que as bacterias debilitadas fixeran que os polos se volvesen inmunes á enfermidade.
En decembro de 1880, Pasteur presentou os seus resultados á Academia Francesa de Ciencias co título "Sur les maladies virulentes et en particulier sur la maladie appelée vulgairement choléra des poules (Sobre as enfermidades virulentas, e en particular sobre a enfermidade comunmente chamada cólera dos polos)" e publicouno na revista da academia (Comptes-Rendus hebdomadaires des séances de l'Académie des Sciences). . Atribuíu que as bacterias se debilitaban ao contacto co osíxeno. Explicou que as bacterias conservadas en recipientes herméticos nunca perdían a súa virulencia, e que só as expostas ao aire en medios de cultivo podían utilizarse como vacina. Pasteur introduciu o termo "atenuación" para este enfraquecemento da virulencia na súa presentación ante a academia, dicindo: De feito, a vacina de Pasteur contra o cólera dos polos non era regular nos seus efectos e foi un fracaso.
Ántrax
Na década de 1870, aplicou este método de inmunización ao ántrax, que afectaba ao gando, e espertou o seu interese por combater outras enfermidades. Pasteur cultivou bacterias a partir do sangue de animais infectados con ántrax. Cando inoculou a bacteria aos animais, produciuse o ántrax, o que demostrou que a bacteria era a causa da enfermidade. Moitas reses morrían de ántrax en "campos malditos". A Pasteur dixéronlle que as ovellas que morrían de ántrax estaban enterradas no campo. Pasteur pensou que as miñocas poderían levar a bacteria á superficie. Atopou bacterias do ántrax nos excrementos das miñocas, o que demostrou que estaba no certo. Dixo aos granxeiros que non enterrasen animais mortos nos campos. Pasteur levaba tentando desenvolver a vacina contra o ántrax desde 1877, pouco despois de que Robert Koch descubrise a bacteria.
O 12 de xullo de 1880, Henri Bouley leu ante a Academia Francesa de Ciencias un informe do cirurxián veterinario Henry Toussaint, que non era membro da academia. Toussaint desenvolvera unha vacina contra o ántrax matando os bacilos mediante quecemento a 55 °C durante 10 minutos. Fixo probas en oito cans e 11 ovellas, a metade dos cales morreron tras a inoculación. Non foi un grande éxito. Ao coñecer a noticia, Pasteur escribiu inmediatamente á academia que non podía crer que a vacina morta funcionase e que a afirmación de Toussaint "bota por terra todas as ideas que tiña sobre virus, vacinas, etc. ". Tras as críticas de Pasteur, Toussaint cambiou ao fenol para matar os bacilos do ántrax e probou a vacina en ovellas en agosto de 1880. Pasteur pensaba que este tipo de vacina morta non debía funcionar porque cría que as bacterias atenuadas utilizaban nutrientes que as bacterias necesitaban para crecer. Pensaba que oxidar as bacterias facíaas menos virulentas.
Pero Pasteur descubriu que o bacilo do ántrax non se debilitaba facilmente cultivándoo no aire, xa que formaba esporas, a diferenza do bacilo do cólera dos polos. A principios de 1881, descubriu que cultivar os bacilos do ántrax a uns 42 °C os incapacitaba para producir esporas, e describiu este método nun discurso pronunciado ante a Academia Francesa de Ciencias o 28 de febreiro. O 21 de marzo anuncia o éxito da vacinación nas ovellas. Ante esta noticia, o veterinario Hippolyte Rossignol propuxo que a Société d'agriculture de Melun organizase un experimento para probar a vacina de Pasteur. Pasteur asinou o acordo do desafío o 28 de abril. En maio realizouse un experimento público en Pouilly-le-Fort. Utilizáronse 58 ovellas, 2 cabras e 10 bovinos, á metade dos cales se lles administrou a vacina os días 5 e 17 de maio; mentres que a outra metade non foi tratada. . Todos os animais foron inxectados co cultivo virulento fresco do bacilo do ántrax o 31 de maio. O resultado oficial observouse e analizou o 2 de xuño en presenza de máis de 200 espectadores. Todas as reses sobreviviron, vacinadas ou non. Pasteur predixera valentemente: "A miña hipótese era que as seis vacas vacinadas non enfermarían gravemente, mentres que as catro vacas non vacinadas perecerían ou polo menos enfermarían gravemente" Con todo, todas as ovellas e cabras vacinadas sobreviviron, mentres que as non vacinadas morreran ou estaban a morrer ante os espectadores. O seu informe á Academia Francesa de Ciencias do 13 de xuño conclúe: Pasteur non revelou directamente como preparou as vacinas utilizadas en Pouilly-le-Fort. Aínda que o seu informe indicaba que se trataba dunha "vacina viva", os seus cadernos de laboratorio mostran que en realidade utilizou unha vacina morta con dicromato de potasio, desenvolvida por Chamberland, bastante similar ao método de Toussaint.
A noción de que unha forma débil dunha enfermidade causa inmunidade á versión virulenta non era nova; isto sabíase desde facía moito tempo no caso das vexigas. Sabíase que a inoculación das vexigas (variolación) producía unha enfermidade moito menos grave e reducía enormemente a mortalidade, en comparación coa enfermidade adquirida de forma natural. A finais da década de 1790, Edward Jenner tamén estudara a vacinación usando a varíola bovina (Vaccinia virus) para obter inmunidade cruzada contra as vexigas, e a principios do século XIX a vacinación estendeuse á maior parte de Europa.
A diferenza entre a vacinación contra as vexigas e a vacinación contra o ántrax ou o cólera dos polos era que os organismos destas dúas últimas enfermidades debilitáronse artificialmente, polo que non era necesario atopar unha forma naturalmente débil do organismo da enfermidade. Este descubrimento revolucionou o traballo en enfermidades infecciosas, e Pasteur deu a estas enfermidades debilitadas artificialmente o nome xenérico de "vacinas", en honra ao descubrimento de Jenner.
En 1876, Robert Koch demostrara que o Bacillus anthracis causaba o ántrax. Nos seus traballos publicados entre 1878 e 1880, Pasteur só mencionou o traballo de Koch nunha nota ao pé de páxina. Koch coñeceu a Pasteur no Sétimo Congreso Médico Internacional de 1881. Uns meses máis tarde, Koch escribiu que Pasteur utilizara cultivos impuros e cometera erros. En 1882, Pasteur contestou a Koch nun discurso, ao que Koch respondeu agresivamente. Koch afirmou que Pasteur probou a súa vacina en animais inadecuados e que a investigación de Pasteur non era propiamente científica. En 1882, Koch escribiu "Sobre a inoculación do ántrax", no que refutaba varias das conclusións de Pasteur sobre o ántrax e criticaba a Pasteur por manter os seus métodos en segredo, sacar conclusións precipitadas e ser impreciso. En 1883, Pasteur escribiu que utilizaba cultivos preparados de forma similar aos seus exitosos experimentos de fermentación e que Koch malinterpretaba as estatísticas e ignoraba os traballos de Pasteur sobre os vermes da seda.
Erisipela porcina
En 1882, Pasteur enviou ao seu axudante Louis Thuillier ao sur de Francia debido a unha epizootia de erisipela porcina. Thuillier identificou o bacilo que causaba a enfermidade en marzo de 1883. Pasteur e Thuillier aumentaron a virulencia do bacilo tras pasalo por pombas. Despois pasaron o bacilo por coellos, debilitándoo e obtendo unha vacina. Pasteur e Thuillier describiron incorrectamente a bacteria en forma de oito. Roux describiu a bacteria con forma de bastón en 1884.
Rabia
Pasteur fabricou a primeira vacina contra a rabia cultivando o virus en coellos e debilitándoo despois secando o tecido nervioso afectado. A vacina contra a rabia foi creada inicialmente por Emile Roux, médico francés e colega de Pasteur, que producira unha vacina morta con este método. A vacina probouse en 50 cans antes do seu primeiro ensaio en humanos. Esta vacina aplicouse a Joseph Meister, de 9 anos, o 6 de xullo de 1885, despois de que un can rabioso mutilase gravemente ao neno. Pasteur correu un risco persoal, xa que non era médico titulado e podería ser procesado por tratar ao neno. Despois de consultar cos médicos, decidiu seguir adiante co tratamento. Durante 11 días, Meister recibiu 13 inoculacións, cada unha delas utilizando virus que foran debilitados durante un período de tempo máis curto. Tres meses despois examinou a Meister e comprobou que gozaba de boa saúde. Pasteur foi aclamado como un heroe e o asunto legal non seguiu adiante. A análise dos seus cadernos de laboratorio mostra que Pasteur tratara a dúas persoas antes de vacinar a Meister. Unha delas sobreviviu, pero é posible que en realidade non tivese rabia, e a outra morreu de rabia. Pasteur comezou o tratamento de Jean-Baptiste Jupille o 20 de outubro de 1885, e o tratamento tivo éxito. Máis tarde, en 1885, persoas, incluídos catro nenos dos Estados Unidos, acudiron ao laboratorio de Pasteur para ser inoculados. En 1886, tratou a 350 persoas, das cales só unha desenvolveu a rabia. O éxito do tratamento sentou as bases para a fabricación de moitas outras vacinas. O primeiro dos Institutos Pasteur tamén se construíu sobre a base deste logro.
En The Story of San Michele (A historia de San Michele), Axel Munthe escribe sobre algúns riscos que correu Pasteur na investigación da vacina contra a rabia: Grazas aos seus estudos sobre os xermes, Pasteur animou aos médicos a desinfectarse as mans e o equipo antes dunha intervención cirúrxica. Antes disto, poucos médicos ou os seus axudantes practicaban estes procedementos. Ignaz Semmelweis e Joseph Lister xa practicaran a desinfección das mans en contextos médicos na década de 1860. Controversias
Heroe nacional francés aos 55 anos, en 1878 Pasteur dixo discretamente á súa familia que nunca revelase a ninguén os seus cadernos de laboratorio. A súa familia obedeceu, e todos os seus documentos gardáronse e herdaron en segredo. Finalmente, en 1964, o neto e último descendente home de Pasteur, Pasteur Vallery-Radot, doou os papeis á Biblioteca Nacional de Francia. Con todo, os papeis estiveron restrinxidos a estudos históricos até a morte de Vallery-Radot en 1971. Os documentos non recibiron un número de catálogo até 1985.
En 1995, centenario da morte de Louis Pasteur, un historiador da ciencia Gerald L. Geison publicou unha análise dos cadernos privados de Pasteur na súa obra The Private Science of Louis Pasteur (A ciencia privada de Louis Pasteur), e declarou que Pasteur dera varias versións enganosas e xogado ao engano nos seus descubrimentos máis importantes. Max Perutz publicou unha defensa de Pasteur en The New York Review of Books. Baseándose en exames posteriores dos documentos de Pasteur, o inmunólogo francés Patrice Debré concluíu no seu libro Louis Pasteur (1998) que, a pesar da súa xenialidade, Pasteur tiña algúns defectos. Nunha recensión do libro afírmase que Debré "ás veces atópao inxusto, combativo, arrogante, de actitude pouco atractiva, inflexible e mesmo dogmático".
Fermentación
Científicos anteriores a Pasteur estudaran a fermentación. Na década de 1830, Charles Cagniard-Latour, Friedrich Traugott Kützing e Theodor Schwann utilizaron microscopios para estudar os fermentos e chegaron á conclusión de que eran organismos vivos. En 1839, Justus von Liebig, Friedrich Wöhler e Jöns Jacob Berzelius afirmaron que o fermento non era un organismo e que se producía cando o aire actuaba sobre o mollo das plantas.
En 1855, Antoine Béchamp, profesor de química na Universidade de Montpellier, realizou experimentos con solucións de sacarosa e chegou á conclusión de que a auga era o factor de fermentación. Cambiou a súa conclusión en 1858, afirmando que a fermentación estaba directamente relacionada co crecemento de mohos, que requirían aire para o crecemento. Considerouse o primeiro en mostrar o papel dos microorganismos na fermentación
Pasteur comezou os seus experimentos en 1857 e publicou os seus descubrimentos en 1858 (número de abril de Comptes Rendus Chimie, o artigo de Béchamp apareceu no número de xaneiro). Béchamp observou que Pasteur non aportou ningunha idea ou experimento novedoso. Por outra banda, Béchamp probablemente coñecía os traballos preliminares de Pasteur en 1857. Con ambos os científicos reclamando prioridade no descubrimento xurdio unha disputa, que se estendeu a varias áreas, e durou durante toda a súa vida.
Con todo, Béchamp atopábase no bando perdedor, tal e como sinalaba o obituario publicado na revista "BMJ": O seu nome estaba "asociado a controversias xa pasadas sobre a prioridade, que non ten sentido lembrar". Béchamp propuxo a teoría incorrecta das microenzimas. Segundo K. L. Manchester, os antiviviseccionistas e os defensores da medicina alternativa promoveron a Béchamp e as microenzimas, afirmando inxustificadamente que Pasteur plaxiou a Béchamp.
Pasteur pensaba que o ácido succínico invertía a sacarosa. En 1860, Marcellin Berthelot illou a invertase e demostrou que o ácido succínico non invertía a sacarosa. Pasteur cría que a fermentación debíase só a células vivas. El e Berthelot mantiveron unha longa discusión sobre o vitalismo, na que Berthelot opúxose vehementemente a calquera idea de vitalismo. Hans Buchner descubriu que a zimasa (que non é unha encima, senón unha mestura de encimas) catalizaba a fermentación, o que demostraba que a fermentación era catalizada por encimas dentro das células. Eduard Buchner Tamén descubriu que a fermentación podía ter lugar fóra das células vivas.
Vacina contra o ántrax
Pasteur anunciou publicamente o éxito no desenvolvemento da vacina contra o ántrax en 1881. Con todo, foi o seu admirador convertido en rival, Henry Toussaint, quen desenvolveu a primeira vacina. Toussaint illou a bacteria causante do cólera aviario (posteriormente denominada "pasteurella" en honra a Pasteur) en 1879 e proporcionou mostras a Pasteur, quen as utilizou para os seus propios traballos. O 12 de xullo de 1880, Toussaint presentou o éxito da súa investigación ante a Academia Francesa de Ciencias, utilizando unha vacina atenuada contra o ántrax en cans e ovellas. Pasteur, movido polos celos, impugnou o descubrimento mostrando publicamente o seu método de vacinación en Pouilly-le-Fort o 5 de maio de 1881. Pasteur deu entón unha descrición enganosa da preparación da vacina contra o ántrax utilizada no experimento. Afirmou que fabricara unha "vacina viva", pero utilizou dicromato potásico para inactivar as esporas do ántrax, un método similar ao de Toussaint. O experimento promocional foi un éxito e axudou a Pasteur a vender os seus produtos, obtendo os beneficios e a gloria.
Ética experimental
Os experimentos de Pasteur cítanse a miúdo como contrarios á ética médica, especialmente no que respecta á vacinación de Meister. Non tiña ningunha experiencia na práctica médica e, o que é máis importante, carecía de licenza médica. Isto cítase a miúdo como unha grave ameaza para a súa reputación profesional e persoal. O seu socio máis próximo, Émile Roux, que tiña formación médica, negouse a participar no ensaio clínico, probablemente porque o consideraba inxusto. Con todo, Pasteur levou a cabo a vacinación do neno baixo a atenta mirada dos médicos Jacques-Joseph Grancher, xefe da clínica pediátrica do Hospital Infantil de París, e Alfred Vulpian, membro da Comisión sobre a rabia. Non se lle permitiu soster a xiringa, aínda que as inoculacións realizáronse baixo a súa supervisión. Foi Grancher quen se encargou das inxeccións e defendeu a Pasteur ante a Academia Nacional de Medicina de Francia neste asunto.
Pasteur tamén foi criticado por manter en segredo o seu procedemento e non realizar os ensaios preclínicos axeitados en animais. Pasteur afirmou que mantivo o seu procedemento en segredo para controlar a súa calidade. Máis tarde revelou os seus procedementos a un pequeno grupo de científicos. Pasteur escribiu que vacinara con éxito a 50 cans rabiosos antes de utilizalo en Meister. Segundo Geison, os cadernos de laboratorio de Pasteur mostran que só vacinou a 11 cans.
Premios e distincións
En 1853, Pasteur recibiu 1500 francos da Sociedade Farmacéutica pola síntese do ácido racémico. En 1856, a Royal Society de Londres concedeulle a medalla Rumford polo seu descubrimento da natureza do ácido racémico e a súa relación coa luz polarizada, e a medalla Copley en 1874 polo seu traballo sobre a fermentación. Foi elixido membro estranxeiro da Royal Society (ForMemRS) en 1869.
Días finais e legado
Expuxo a "teoría xerminal das enfermidades infecciosas", segundo a cal toda enfermidade infecciosa ten a súa causa (etioloxía) nun xerme con capacidade para se propagar entre as persoas. Esta sinxela idea representa o inicio a medicina científica, ó demostrar que a enfermidade é o efecto visible (signos e síntomas) dunha causa que pode ser buscada e eliminada mediante un tratamento específico. No caso das enfermidades infecciosas débese procurar o xerme causante de cada enfermidade para achar un modo de combatelo.
Polos seus traballos é considerado o pioneiro da microbioloxía moderna que inicia así a chamada "Idade de Ouro da Microbioloxía".
"Anímote a que te intereses por eses dominios sagrados chamados expresivamente laboratorios. Ten en conta que son os templos do futuro, a saúde e o benestar. En eles a humanidade crecerá, fortalecerase e mellorará. Alí, a humanidade aprenderá a progresar entendendo a harmonía da natureza, evitando así a súa tendencia cara a barbarie, o fanatismo e a destrución". Louis Pasteur
A el se lle debe a técnica coñecida como pasteurización.