Under annen verdenskrig ble C-47 og modifiserte Douglas DC-3-ere brukt av de allierte styrker til transport av tropper, militært materiell og sårede soldater. Mer enn 10 000 fly ble produsert i Long Beach og Santa Monica, California og Oklahoma City, Oklahoma. C-47 spilte en viktig rolle i mange av USAs felttog, i Stillehavskrigen ikke minst de som foregikk i jungelen i Ny-Guinea og under Burma-krigen hvor C-47 (og den maritime versjon, R4D) alene gjorde det mulig for allierte tropper å slå den japanske styrken ved transport av mannskap og forsyninger, slepe glidefly og transport av fallskjermsoldater.