Mifune filmdebuterte 1947 i (). Fra 1948 medvirket han i en rekke av filmene til den kjente japanske filmregissøren Akira Kurosawa, blant dem (1950), (1954), (1961) og (1962). Senere filmer inkluderer blant annet (1968), (1971), (1979), (1981) og (1992). Han hadde også en sentral rolle i den japansk-amerikanske tv-serien fra 1980.