Louise Labé ble født i Lyon. Hun var datter av repslageren Pierre Charly og hans andre kone Etienne Roybet. Faren hadde arvet repslagerbedriften og etternavnet etter sin første kone Guillemette Labé, som døde i 1515. Han var analfabet, men han var velstående og kunne gi Louise en god utdannelse, etter tidens mål. Han visste at i de mange italienske familiene i byen fikk døtrene noenlunde samme utdannelse som sønnene. Han ønsket det beste for Louise. Hun fikk undervisning i et kloster, snakket italiensk flytende og kunne spansk, latin og gresk. Hun kjente både klassiske tekster og nyere litteratur. Hun kunne spille flere instrumenter, synge, danse, ri og fekte.