Chambers er utdannet jurist (West Virginia University, 1974), og har også en MBA (Indiana University, 1975). I perioden 1976-1982 arbeidet han i IBM, før han fra 1982 til 1990 arbeidet ved Wang Laboratories. Han begynte i Cisco i 1991 som , før han ble adm. dir (CEO) i 1995. I 2006 ble han også selskapets styreformann.