Margulies hadde flere, små roller på film og fjernsyn før hun fikk rollen som Carol Hathaway i sykehusserien . Hun fikk god kritikk og vant en Primetime Emmy Award og opptil flere Screen Actors Guild Awards for rolleskildringen. Margulies hadde stemmen til Neera i (2000) og dukket opp i miniserien (2001). I 2009 fikk hun rollen som advokat Alicia Florrick i advokatserien , og hun spilte i samtlige syv sesonger. Margulies fikk god kritikk og vant flere priser for arbeidet, blant annet to Primetime Emmy Awards, en Golden Globe, en Critics' Choice Television Award og to Screen Actors Guild Awards.