Florios italienske og engelske ordbok, kalt , ble utgitt i folio i 1598. Etter at skotsk kong Jakob I etterfulgte den barnløse dronning Elisabeth I ble Florio utpekt som kongelig lærer i fransk og italiensk for prins Henry Frederick, og han ble etterpå en herre ved det kongelige , og var «Clerk of the Closet» for dronning Anna av Danmark, som han også instruerte i språk.