Kort tid etter å ha blitt gjenforent med sin familie, forsøker John Marston å leve et fredelig liv sammen med sin kone Abigail, og sønn Jack på deres ranch ved Beecher's Hope. En stormfull natt dukker imidlertid en zombie opp og biter Abigail, som fortsetter å bite Jack, og gjør dem også til zombier. John forsøker deretter å finne en vaksine, og han reiser til byen Blackwater på jakt etter en doktor. Men han oppdager at nesten hele byen allerede er forlatt. Han støter på en av sine tidligere allierte, professor Harold MacDougal, som kommer med en hypotese om at et spesielt virus har fått disse døde til å komme tilbake til livet som zombie på denne måten.