Da Gian Galeazzo Sforza døde den 21. oktober 1494 i en alder av bare 25 år og fem års ekkteskap, mente den unge enken at han var blitt myrdet på oppdrag av sin onkel. Dessuten hadde Isabella akllerede opplevd fornedrelser fra Ludovico Sforzas side. Disse omstendigheter, og rivalisering med Ludovico Sforzas hustru, Beatrice d’Este, foranlediget til slutt Isabella til å be om våpenhjelp fra aragoneserne. Men dette bare fsatte fart på den innledede utvikling som snart endte med at hennes fars rike og hele den appenniniske halvøy faktisk havnet på utenlandske hender.