Artusi var en lærd geistlig innen kongregasjonen i Bologna, som student og seminariet, og tilslutt som kannik. Han var en dyktig kontrapunktiker, men var musikalsk tilbakeskuende og hele livet trofast mot de musikalske ideene til sin lærer Gioseffo Zarlino, en av de ledende musikkteoretikerne på slutten av 1500-tallet. Vincenzo Galilei angrep Zarlino i verket fra 1581, og Artusi rykket da ut og forsvarte læreren og musikkstilen hans.