Giuseppe Gasparo Mezzofanti var sønn av tømmermannen Francesco Mezzofanti og hans hustru Gesualda Dall'Olmo Mezzofanti; han ble født i Via Malcontenti al vecchio N 1988 i Bologna og døpt 20. september 1774. Alle hans søsken, med unntak av søstreren Teresa, døde som spedbarn.