I mai 1536 ble George Boleyn arrestert og satt i Tower of London, anklaget for et incestuøst forhold til sin søster Anne; dessuten for å ha gjort narr av kong Henriks manglende seksuelle evner, og kommentert at prinsesse Elizabeth angivelig ikke var kongens datter - uttalelser som ble regnet som høyforræderi. Til overmål leste han anklagene høyt i retten, noe han var spesifikt bedt om ikke å gjøre, og som ytterligere ydmyket kongen. Om incest-anklagen svarte George: «På grunnlag av bare en eneste kvinne er dere villige til å tro denne ondskap om meg, og på grunnlag av hennes påstander domfelle meg.» Dette utsagnet om «bare en eneste kvinne» ble i ettertid tolket som rettet mot hans kone Jane. Men dommer John Spelman som var til stede, nevnte lady Bridget Wingfield som hadde vært hoffdame både hos dronning Katarina og hennes etterfølger dronning Anne. Lady Wingfield og Anne stod hverandre nær, og da kongeparet reiste til Calais i 1532, gjorde de opphold på veien til Dover nettopp for å besøke henne. Av Spelmans rapport fremgår det at noe hun hadde avslørt om dronning Anne, bidro til at denne ble dømt.