I forhold til forgjengeren var motorvolumet økt til 3.929 ccm, noe som økte ytelsene til 320 hk. 400 GT 2+2 hadde et annet karosseri enn 350 GT, med blant annet lengre akselavstand og en annen taklinje. Det større karosseriet gjorde det mulig med to seter bak, mens 350 GT kun hadde plass til bagasje eller étt enkelt sete bak. Karosseriet ble designet av Carrozzeria Touring. 400 GT 2+2 hadde også en girkasse designet av Lamborghini, med synkronisering på alle gir, noe som forbedret drivverket betraktelig.