Ghirlandaios særskilte talent var hans dyktighet i avbildningen av samtidens liv og portretter av samtidens mennesker innenfor konteksten av de religiøse fortellinger. Det gjorde ham meget populær og skaffet ham store bestillinger. Hans ry var særlig tuftet på hans freskomalerier med en høytidelig stil som speilet utviklingen til det florentinske maleriet i tiden før Leonardo da Vinci. Hans tidligste kjente verk er freskene til alteret i Ognissanti-kirken i Firenze, malt i 1472-73. Senere malte han sankt Hieronymus og for samme kirke, begge i 1480. I 1481-82 malte han to fresker i Det sixtinske kapell. Den bevarte fresken, , er et eksempel på Ghirlandaios bruk av folk han kjente som vitne til ei religiøs hending. I freskene i Sassettikapellet i Santa Trinità i Firenze innlemmet han portrett av medlemmene av de mektige familiene Medici, Sassetti og Spini.