Multiplayer-modus gjør det også mulig for en annen spiller å kontrollere Diddy Kong. Hvis en av karakterene dør i løpet av Multiplayer-modus, kan karakteren bringes tilbake hvis den andre karakteren klarer å treffe en spesiell "DK Barrel" som ligger enkelte steder i spillet. To venner, Rambi og Squawks, kan hjelpe Donkey Kong på bestemte tidspunkter i spillet.