Yotsuba er tegnet som en liten jente med grønt hår med fire musefletter i et firkløvermønster. Navnet hennes kommer av det japanske ordet for firkløver, . Hun har en bekymringsløs og energisk personlighet, og finner glede i selv enkle saker mens hun lærer om alt mulig i hverdagen sin. I den japanske versjonen av serien skrives Yotsubas dialog uten kanji, som får måten hun snakker på til å virke mer barnslig og enkel. I tillegg er skriften skrevet med en font som får det til å virke som hun snakker med høy intensitet. Hennes energiske personlighet er bemerket av de andre figurene i serien, spesielt av nabofamilien, Ayase. Adoptivfaren hennes har selv sagt at hun kan finne glede i alt. Likevel, når hun blir veldig skremt eller redd gråter hun. I tillegg har hun en uforklart frykt for alt som ligner på en målskive.