Tom Holland som Peter Parker / Spider-Man: en tenåring som får superkrefter etter å ha blitt bitt av en radioaktiv edderkopp Zendaya som Michelle Jones-Watson: Parker's klasse-kamerat og kjæreste. Benedict Cumberbatch som Dr. Stephen Strange: en kirurg. Jacob Batalon som Ned Leeds: Parker's beste venn. Jon Favreau som Harold «Happy» Hogan: Leder for sikkerheten ved Stark Industries. Tidligere personlig sjåfør og livvakt for Tony Stark. Willem Dafoe som Norman Osborn / Green Goblin: Forsker og CEO for Oscorp Alfred Molina as Otto Octavius / Doctor Octopus: En vitenskapsmann med mekaniske tentakel festet til kroppen sin etter en ulykke. Skuespilleren spilte samme rolle i Spider-Man 2 (fra 2004) Jamie Foxx som Max Dillon / Electro: elektriker ansatt ved Oscorp. Tony Revolori som Eugene «Flash» Thompson: Parker's klasse-kamerat og tidligere konkurrent. Marisa Tomei som May Parker: Peter Parkers tante. Andrew Garfield som Peter Parker / Spider-Man: En alternativ versjon av Peter Parker fra et annet univers. Tobey Maguire som Peter Parker / Spider-Man: En alternativ versjon av Peter Parker fra et annet univers.