Den femte sesongen dreier seg om kampen for å stoppe Lucifer, og redde verden fra apokalypsen. Gjennom hele sesongen, mens Castiel søker etter Gud, kjemper Sam og Dean mot både engler og demoner når de forsøker å forhindre sin egen skjebne for å bli fartøyene til henholdsvis Lucifer og Michael. De prøver å stoppe Lucifer, ved å hente Colt fra demonen Crowley - og forsøke å drepe Lucifer med den. Men dette mislykkes, og de mister vennene Jo og Ellen i prosessen. Ute av stand til å beseire Lucifer, ble Sam og Dean med informasjon fra Trickster, avslørt for å være erkeengelen Gabriel. Med hjelp fra demonen Crowley bestemte de seg for å samle ringene til Apokalypsens fire ryttere, inkludert Døden selv, som fungerer som nøkkelen til Lucifers fengsel.