I 1715 giftet hun seg med geheimeråd Hans Adolf Ahlefeldt (1679–1761), hvormed hun fikk datteren Anna Joachimine. Ifølge Gyldenløves testamente, kunne Dorothea fortsatt residere på Gisselfeld, også i et nytt ekteskap. Her ødslet ekteparet godset bort, således at Gyldenløves sønners arv ble kraftig redusert. Sønnesønnen Frederik Christian Danneskiold-Samsøe fikk i oppgave å etablere det jomfrukloster, som Gyldenløve og Dorothea testamentarisk hadde tilsett Gisselfeld.