ANT-1 ble først fløyet på Ekaterininskaya Square, nå Krasnokazarmenaya Street. Det ble testfløyet ofte i løpet av de neste to år. Det ble deretter lagret fra slutten på 1930-tallet og tidlig til 1940-tallet, da det ble hengt opp under taket. Men under andre verdenskrig, forsvant det før krigen sluttet. Det er ikke kjent hva som hadde skjedd, selv om det er sannsynlig at det ble ødelagt av tyskerne i deres marsj mot Moskva i løpet av sommeren 1941 sammen med andre Tupolev-fly. Siden det var det eneste som ble bygget, er det ingen gjenværende ANT-1 i dag.