Han har jobbet for en rekke forsknings-institutter inkludert Centrum Wiskunde & Informatica (CWI) i Nederland, National Institute of Standards and Technology (NIST) i USA, og Corporation for National Research Initiatives (CNRI). Fra 2000 til 2003 jobbet han for firmaet Zope. I 2003 forlot Van Rossum Zope for å begynne hos firmaet Elemental Security. Mens han var der jobbet han på et skreddersydd programmeringsspråk for selskapet. Fra 2005 til desember 2012 jobbet han ved Google, hvor han brukte halvparten av arbeidstiden sin på å utvikle programmeringsspråket Python. I januar 2013 startet han å jobbe for Dropbox.