Elva har i langt over hundre år vært en viktig transportåre for Ohio og vestre Pennsylvania. Som forlengelse av Mississippi har elva gitt adgang til lektertransport helt til New Orleans ved Mexico-golfen. Elva Ohio er seilbar i hele sin lengde opp til Pittsburgh via tallrike dam- og sluseanlegg. Også de to hovedelvene som danner Ohio er seilbare lenger opp; elva Allegheny (523 km lang) er seilbar på de nederste 110 km, mellom Pittsburgh og East Brady, og elva Monongahela (210 km lang) er seilbar hele denne strekningen mellom Pittsburgh og Fairmont, West Virginia. Kommersielt benyttes disse sist nevnte elvestrekningene lite, kull fra West Virginia går idag mest ut på jernbane. Men lektere på inntil åtte fot dyptgående kan navigere elvene hele veien, forutsatt at slusene holdes vedlike.