Vespucci utførte flere ekspedisjoner langs kysten av Mellom- og Sør-Amerika rundt år 1500. Hans første reise gikk til Guyana. Den neste reisen i 1500 førte ham til kysten av Brasil. På denne ekspedisjonen utforsket han hele strekningen fra Monte Pascual til innløpet av den dype bukta Rio de la Plata.