Hos tsetsefluer befruktes og utvikles bare ett egg i gangen. Larven klekkes i et hulrom i hunnen (morens) bakkropp, her lever den de første larvestadiene. Den spiser av et sekret som utskilles fra noen kjertler. Utviklingen av hver larve tar omtrent en uke og etterhvert som larven vokser fyller den nesten hele bakkroppen.