I single player-modus kan spilleren kontrollere Mario, som kan løpe, hoppe og utføre en rekke forskjellige trekk. Spilleren må gjennomføre forskjellige nivåer, som er fylt med både nyttige gjenstander og skadelige hindringer. Spilleren må manøvrere Mario til en stor flaggstang som står mot slutten av hvert trinn for å komme seg videre i spillet. Enkelte områder innenfor nivåene, for eksempel spesifikke plattformer, kan manipuleres ved å stå over dem og vippe Wii-fjernkontrollen. En del nivåer er også satt under vann, hvor spilleren må svømme for å gjennomføre hele nivået.