Ved en glukosebelastningsprøve må pasienten faste fra midnatt kvelden før undersøkelsen skal utføres. Det blir tatt blodprøver av pasienten, etterfulgt av at pasienten må drikke 75 gram glukose løst i 3 desiliter vann. Pasienten må holde seg i ro, og fortsette fasten i to timer til, før det blir foretatt ny blodprøve eller test av blodsukkeret.