Bakteriekulturen spres på et objektglass og tørkes inn. Bakteriene fikseres med varme fra en flamme. Fargestoffet krystallfiolett påføres. Grams Jod-løsning tilsettes for å danne et vann-uløselig kompleks med krystallfiolett. Glasset vaskes med alkohol for å fjerne fargen fra de gram-negative. Fargestoffet safranin påføres som motfarging. Resultatet kan observeres i mikroskop.