Det er det første -spillet med tredimensjonal grafikk. Spilleren inntar rollen som gorillaen Donkey Kong, som utforsker ulike nivåer på en øy for å samle inn gjenstander og redde sine kidnappede venner fra King K. Rool. Spilleren fullfører minispill og oppgaver som fem spillbare Kong-figurer med ulike ferdigheter, for å motta bananer og andre samleobjekter. I en separat Multiplayer-modus kan opp til fire spillere konkurrere alle-mot-alle, eller til én spiller står igjen.