Hans musikalske karriere strakk seg over mer enn 60 år, med de største suksessene i 1960-årene. Han grunnla John Mayall & the Bluesbreakers, og påvirket mange musikeres karrierer, blant andre Eric Clapton, Jack Bruce, Peter Green, John McVie, Mick Fleetwood, Mick Taylor, Don Sugarcane Harris, Harvey Mandel, Larry Taylor, Aynsley Dunbar, Dick Heckstall-Smith og Coco Montoya.