Iben Hjejle ble i 1992 opptatt ved Statens Teaterskole i København og avsluttet utdannelsen i 1996. Hun fikk sitt gjennombrudd i Søren Kragh-Jacobsens , som banet veien til en rolle i hvor hun spilte sammen med John Cusack og Jack Black. Siden har hun kun medvirket i danske produksjoner, og har siden 2005 medvirket i to TV-serier på samme tid: (hvor hun spiller seg selv) og (hvor hun spiller hovedpersonens kollega).