Особенности межсистемных связей при сочетанном течении хронического холецистита и метаболического синдрома

электроэнцефалограмму не только качественно (визуально), но и количественно при использовании графического метода анализа и построении вокруг фазового портрета какой либо описывающей фигуры, например, эллипса, как в нашем случае. Таким образом, открывается еще один способ доказательной оценки не только исходного состояния пациента при дисфункции гипотала-мо-гипофизарно-тиреоидной системы, но и динамики на фоне лечения. Проведенное исследование демонстрирует возможность метода определять тонкие изменения биоэлектрической активности мозга в зависимости от уровня дисфункции (гипоталамус-щитовидная железа) и, как следствие, определяет возможность дифференцированного подхода к лечению диц данной категории.

Литература

1.Белецкая О.М. Патогенез и перспектива лечения синдрома низкого 3-йодтиронина при нетиреоидных заболеваниях.- Харьков, ХИУВ.- 1992.

2. Кэттайл В. М., Арки Р. А. Патофизиология эндокринной системы: Пер. с англ.- СПб: Невский диалект.- 2001.

3.Бутрова С.А. Ожирение (этиология, патогенез, классификация).- М., 2000.

4.Гинзбург М.М., Крюков Н.Н. Ожирение. Влияние на развитие метаболического синдрома. Профилактика и лечение.- М.: Медпрофилактика, 2002.

5.Дедов И.И., Мельниченко ГА. Ожирение: этиология, патогенез, клинические аспекты.- М.: Мед.Информ. Агенство, 2004.

6.Касаткина Э.идр.Консенсус эндемический зоб.- М., 1999.

7Малявская С.И. и др. Метаболический инсулинрезистент-

ный синдром: диагностика, клиническое значение, педиатрические аспекты.- Архангельск: СГМУ, 2004.

8.Полубояринова И.В., Романцова Т.И. // Ожирение и метаболизм.- 2006; Т.8, №3.- С.9-13.

9.Щеплягина Л. А. Медико-социальные последствия роста напряженности зобной эндемии для детей и подростков: Сб. лекций.- М.,1997.- С.41-42.

10.Сидоренко А.В. и др.// Биомедицинские технологии и радиоэлектроника.- 2007.- №6.- С.18-21.

11.Щукин С.И., Майстров А.И. //. Биомедицинские технологии и радиоэлектроника.- 2007.- №6.- С.3-11.

12.Сидоренко А.В. и др. // Биомедицинские технологии и радиоэлектроника.- 2006.- №11.- С.53-59.

13.Лужнов П.В. и др.// Биомедицинские технологии и радиоэлектроника.- 2005.- №10.- С. 49-56.

14.Лужнов П.В. и др. // Биомедицинские технологии и радиоэлектроника.- 2004.- №10.- С.44-49.

15.Кохановская Ю.Г. и др.// Мат-лы докл. Всерос. научно-техн. конф. студентов, аспирантов и молодых ученых.- Томск, 2007.- С. 137-139.

APPLICATION OF THE GEOMETRICAL METHOD OF THE PHASE PORTRAIT ANALYSIS FOR THE ESTIMATION OF BIOELECTRIC ACTIVITY OF THE BRAIN IN TEENAGERS WITH HYPOTHALAMOHY-POPHYSIAL THYROID SYSTEM DYSFUNCTION

N.G.ABDULKINA, S.V.ALA’TSEVA, L.I.KONSTANTINOVA, J.G.KOKHANOVSKAYA, V.A.KOCHEGUROV, V.V.MARCHENKO, N.P.STEPANENKO

Summary

Under supervision there were 93 children in the age of from 8 till 17 years (83 with a pathology of hypothalamohypophysial thyroid system and 10 healthy). According to electroencephalography the phase portrait of bioelectric activity of a brain in occipital assignments has been certain and investigated its parameters. It is revealed, that the phase portrait allows to estimate electroencephalogram not only is qualitative, but also quantitatively, opening one more way of a demonstrative estimation not only an initial condition for the patient hypothalamohypophysial thyroid system dysfunction, but also dynamics on a during of treatment. Besides carried out research shows an opportunity of a method to define thin changes of bioelectric activity of a brain depending on a level dysfunctions (hypothalamyc-thyroid gland) and as consequence, defines an opportunity of the differentiated approach to treatment in the patients of the given category.

Key words: hypothalamohypophysial thyroid system

УДК 616.366-002:577.121:616-008.6

ОСОБЕННОСТИ МЕЖСИСТЕМНЫХ СВЯЗЕЙ ПРИ СОЧЕТАННОМ ТЕЧЕНИИ ХРОНИЧЕСКОГО ХОЛЕЦИСТИТА И МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА

А.В. ЮРЕНКО, М.В. АНТОНЮК, Л.А. БЕЛИК*

По результатам обследования 160 пациентов проведен канонический корреляционный анализ клинических, иммунных и метаболических взаимосвязей при сочетанном течении хронического холецистита и метаболического синдрома и определена степень напряжения систем организма и выраженность межсистемных взаимоотношений при развитии хронического холецистита.

К наиболее распространенным хроническим заболеваниям желчного пузыря (ЖП) и желчевыводящих путей (ЖВП) относятся хронические холециститы (Хр.Х). В настоящее время большое внимание уделяется вопросам этиологии и патогенеза развития Хр.Х, который рассматривается как хроническое воспалительное заболевание стенки ЖП, сопровождающееся моторнотоническими нарушениями ЖВП и изменениями биохимических свойств желчи и крови. При длительном течении хронического холецистита воспаление приводит к различным нарушениям метаболического и иммунного статуса [14].

Интерес к изучению метаболического синдрома (МС) в последние десятилетия среди специалистов связан с его значимостью как предшественника сахарного диабета и сердечнососудистых заболеваний. Крайне сложно выделить первичное звено метаболических нарушений, так как те или иные проявления могут одновременно выступать в роли как причины, так и следствия. В настоящее время преобладает точка зрения, что пусковым моментом для развития целого ряда метаболических нарушений служит вызванная теми или иными причинами инсу-линорезистентность (ИР) и гиперинсулинемия. Большую роль в развитии ИР отводят факторам, среди которых ведущими являются абдоминальное ожирение, нарушения гемодинамики, состояние симпатоадреналовой системы, характер питания и т.д. [1,10]. В литературе широко обсуждается связь между состоянием иммунореактивности и метаболическим синдромом (МС), который часто протекает на фоне Хр.Х. При этом данные достаточно противоречивы [8]. До настоящего времени взаимоотношения факторов, вызывающих метаболические нарушения у пациентов при коморбидном течении Хр.Х и МС, остаются одной из малоизученных проблем.

Цель работы - анализ иммуно-метаболических и клинических взаимосвязей при сочетанном течении Хр.Х и МС.

Материалы и методы. Обследовано на условиях добровольного информированного согласия 160 человек (средний возраст 49,51±1,02 лет, 59 мужчин, 101 женщина), из них 107 пациентов с хроническим некалькулезным холециститом, 20 пациентов с хроническим калькулезным холециститом и 33 здоровых пациента. У 43,3% пациентов с ХХ выявлена избыточная масса тела (ИМТ), у 37% пациентов - различная степень ожирения, у 43,1% пациентов - артериальная гипертония.

Диагноз ХХ выставлялся на основании клинических, лабораторных и функциональных методов исследования по критериям международной классификации (Римский консенсус, 1999). В обследование включались пациенты с ХХ в стадии ремиссии. Метаболический синдром диагностировали согласно критериям Национального комитета США по холестерину (АТР, 2001). При моделировании характера взаимосвязей учитывали массу тела, состояние гемодинамики, липидного и углеводного обменов, систем перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты (ПОЛ - АОЗ) и гемостаза, клеточного и фагоцитарного звеньев иммунитета, медиаторов воспаления, изучение которых на ранних этапах развития заболевания позволяет адекватно оценить состояние гомеостаза и степень тяжести его нарушений.

Обследование включало анкетирование с целью выявления факторов риска развития МС, ультразвуковое исследование печени, желчного пузыря. Лабораторное исследование проводили в клинико-диагностической лаборатории (руководитель Ходосова К.К.). В сыворотке крови определяли уровни общего холестерина (ОХС), холестерина липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП), триглицеридов (ТГ) (наборы «ОЬУБХ

Владивостокский филиал ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания - НИИ медицинской климатологии и восстановительного лечения, 690105, г. Владивосток-105, ул. Русская 73-г, тел./факс (4232) 34-55-02, Email: imkvl ivanov@mail.ru

DIAGNOSTICUM»), апопротеинов - апо-А1 и апо-В (наборы «DiaSys»), глюкозы, инсулина методом иммуноферментного анализа («DRG Diagnostics»), фактора некроза опухолей - альфа (TNF-a) и рецептора к TNF-a (TNF RI) методом иммуноферментного анализа («BD Bioscience»), С-реактивного белка (СРБ) методом латекс-агглютинации («OLVEX DIAGNOSTICUM». Расчет содержания холестерина липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП) проводили по формуле Фридвальда: ХС

ЛПНП=ОХС-ХС ЛПВП-ТГ/2,2. Индекс атерогенности (ИА) определяли по формуле: ИА=(ОХС-ХС ЛПВП)/ХС ЛПВП. Уровни протромбинового индекса (наборы «Техпластин-тест»), фибриногена («фибриноген-тест»), частично активированного тромбпластинового времени («АЧТВ-тест») и нарушения в системе протеина С («парус-тест») исследовали на полуавтоматическом коагулометре «КС 1 Amelung» (Германия). Для оценки процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в гемолизате эритроцитов определяли содержание малонового альдегида (МДА) [4], о состоянии системы антиоксидантной защиты судили по интегральному показателю общей антиоксидантной активности (АОА) плазмы крови, определяемому величиной торможения переокисления липидов модельной системой желточных липо-протеидов [7]. Фенотипирование иммунокомпетентных клеток периферической крови вели с использованием моноклональных антител к молекулам CD3, CD4, CD8, CD 16, CD 22, CD 25, HLA-DR (Витебск) [6]. Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали по методу Д.Н. Маянского с соавторами [9].

Таблица 1

Признаки, характеризующие группы переменных больных Хр.Х и МС

Группы перем-х (системы) Признаки

х1 динамические показатели - САД, ДАД, ЧСС

х2 антропометрические показатели - индекс Кетле, ОТ, ОБ, ОТ/ОБ

х3 показатели медиаторов воспаления - СРБ, ТЫБ-а, фибриноген

х4 показатели липидного обмена: ОХС, ХС ЛПВП, ХС ЛПНП, ТГ,ИА

х5 показатели углеводного обмена - сахар, инсулин, индекс НОМА

хб показатели системы транспортных белков ХС (апопротеинов) - апо А1, апоВ, апоВ/апоА1

х7 показатели системы ПОЛ-АОЗ - МДА, АОА, МДА/АОА

х8 показатели САСС - ПТИ, АПТВ, фибриноген, парус-тест

х9 показатели клеточного звена иммунитета - СЭ3, СЭ4, СЭ8, 004/008, СБ16, СЭ22, Я- ИЛ-2, НЬА-ЭЯ

х10 показатели системы комплемента - ЦИК С3, С4, К=С3/С4

хП показатели фагоцитарного звена иммунитета - ФАН, ФР, ФЧ, ФЧР, стадии фагоцитоза, НСТ, НСТР, ИАН, ИАНР;

х12 показатели гуморального звена иммунитета - !е А, !е М, !е О.

Изучение метаболической активности нейтрофилов проводили с помощью теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест), резерва теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТР), индекса активации нейтрофилов (ИАН) и резерва индекса активации нейтрофилов (ИАНР) по методу Park В.Н. в модификации Е.В. Шмелева [15]. Концентрацию иммуноглобулинов А, М, G определяли в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа (наборы «Вектор-Бест»). Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) крупных (С3) и мелких (С4) размеров проводилось методом M. Digeon, M. H. Jover, J. Rizo в модификации П. В. Стручкова [12]. В качестве показателя патогенности использовали К = С4/С3.

Статистическую обработку результатов вели на основе электронной базы данных по прикладной программе «Statistica б.0». Для оценки межсистемных связей использовали канониче-

ский корреляционный анализ. Критический уровень значимости для статических критериев принимали при р <0,05.

Результаты. По результатам клинико-лабораторного обследования пациентов разделили на 3 группы: 1-я группа здоровые пациенты - 33 человека; 2-я группа - 50 пациентов с хроническим холециститом без проявлений МС; 3-я группа - 77 пациентов с хроническим холециститом и МС. Проведенное исследование выявило клинико-метаболические нарушения, характерные для Хр.Х и проявляющиеся изменениями гемодинамики, массы тела, липидного и углеводного обменов, системы ПОЛ-АОЗ и гемостаза, клеточного и фагоцитарного звеньев иммунитета, медиаторов воспаления. Однако одновременное изменение величин каких-либо параметров еще не свидетельствует об их взаимосвязи и может быть случайным. С целью выявления общих звеньев, оказывающих взаимное влияние при коморбидном течении Хр.Х и МС, применяли канонический корреляционный анализ. Каноническая корреляция позволяет исследовать зависимость между двумя множествами переменных.

По аналогии с парной корреляцией теснота связи между множеством переменных определяется коэффициентом канонической корреляции (г).

Оценку канонических корреляционных связей клиникометаболических параметров использовали как критерий сравнения групп пациентов по степени напряжения регуляторных систем организма при развитии патологического процесса.

Алгоритм исследования включал формирование групп переменных (х) изучаемых клинико-метаболических показателей связанных между собой в ту или иную систему организма, и выделение среди них существенных групп факторов, влияющих на развитие и прогрессирование заболевания (табл.1).

Проведенный канонический корреляционный анализ выявил существенные различия в группах по степени напряжения межсистемных связей. Данные показатели оценивали по количеству выявленных зависимостей (п) и уровню г.

Анализ межсистемных связей у пациентов 1-й группы представлен в табл. 2. Из 12 изучаемых групп переменных в межсистемные отношения в 1-й группе вовлечены пять систем, число достоверных канонических зависимостей составило 12. Наиболее значимыми по коэффициентам канонической корреляции и количеству межсистемных связей были две группы переменных. К ним отнесли группу показателей, отражающих состояние системы апопротеинов (хб), имеющую наиболее значимые связи с показателями ПОЛ-АОЗ (х7), фагоцитарного (хп), клеточного звеньев иммунитета (хр), а так же группу показателей фагоцитарного звена иммунитета (хц) с сильной канонической зависимостью с показателями гемодинамики (хі), апопротеинов (хб) и липидного обмена (х4). Высокий уровень корреляционных связей имели так же система ПОЛ-АОЗ (х7) и липидного обмена (х4) при двух канонических зависимостях. Полученные данные в 1-й группе показали, что для поддержания гомеостаза в равновесии большое значение имеют состояние системы, отвечающей за транспорт холестерина (ХС) из клетки и в клетку, системы фагоцитарного звена иммунитета, отвечающей за неспецифическую резистентность и системы ПОЛ-АОЗ. Их устойчивое взаимодействие позволяет поддерживать метаболическую стабильность организма в целом. Включение сложных адаптационных механизмов в условиях системного воспаления у лиц с хроническим холециститом отразилось в напряженности и структуре корреляционных межсистемных связей (табл.3). В ответной реакции организма у больных с Хр.Х задействовано 9 систем из 12 изучаемых, число межсистемных связей по сравнению с контролем увеличилось более чем в 2 раза (п=28). Как видно из табл. 3, активизируются системы, отражающие уровень напряженности воспалительного процесса. Максимальное количество канонических зависимостей выявлено у группы показателей медиаторов воспаления (х3), апопротеинов (хб,), клеточного (хр) и фагоцитарного звеньев иммунитета (хп) и системы ПОЛ-АОЗ (п=3). В межсистемные взаимоотношения включились группы переменных, характеризующие липидный обмен (х4), систему комплемента (хю) и антропометрические показатели (х2), которые имели по две достоверные канонические зависимости.

Канонический анализ межсистемных связей в 3-й группе (табл. 4) показал, что у пациентов при сочетанном течении Хр. Х

Таблица 2

Результаты канонического анализа больных 1-й группы

х1 х2 х3 х4 х5 хб х7 х8 х9 х10 хп х12

х1 0,82**

х2

х3

х4 0,72** 0,б3*

х5

хб 0,89* 0,б3* 0,74**

х7 0,72** 0,89*

х8

х9 0,б3*

хю

х11 0,82** 0,63* 0,74**

х12

Примечание: * - р<0,05, ** - р<0,01, *** - р<0,001; пустые ячейки - связи статистически незначимые

и МС в патологический процесс вовлечены практически все системы, а количество канонических зависимостей увеличилось в 3 раза по сравнению с 1-й группой (п=42). Наиболее важными системами, влияющими на клинико-метаболическую стабильность организма у пациентов 3-й группы по итогам канонической корреляции и количеству взаимосвязей стали 6 систем, характеризующие антропометрические показатели (х2), показатели системы ПОЛ-АОЗ (х7), липидного обмена (хД медиаторов воспаления (х3), гемодинамики (хх), фагоцитарного (хп) и клеточного (х9) звеньев иммунитета.

В отличие от 1-й и 2-й групп в межсистемные отношения у лиц 3-й группы с высоким коэффициентом корреляции вовлечены показатели, характеризующие состояние углеводного обмена (х5), САСС (х8) и гуморального звена иммунитета (х12).

Система апопротеинов, отвечающая за транспорт ХС, потеряла ведущую роль в межсистемных отношениях в 3-й группе. Для этой системы сохранилась каноническая зависимость только с системой ПОЛ-АОЗ (х7). По данным литературы при хроническом воспалении кроме апопротеинов, в межклеточной среде функционируют и специфичные белки-векторы направленного переноса к клеткам жирных кислот (ЖК). Белки - векторы переноса ЖК способны обеспечить увеличения поглощения липопро-теинов (ЛП) одними видами клеток и блокировать рецепторное поглощение ЖК в составе ЛП иными клетками. В условиях синдрома системного воспалительного процесса СРБ является белком-вектором для ЖК в ответ на действие первичных медиаторов воспаления, к которым относится семейство провоспали-тельных цитокинов. В результате концентрация СРБ в плазме крови возрастает, он связывается с липопротенами очень низкой плотности (ЛПОНП), перекрывает их физиологические апоЕ/В-100 лиганды и сам становится патофизиологическим лигандом. Одновременно все клетки рыхлой соединительной ткани синтезируют и формируют из плазматической ткани рецептор для СРБ+ЛПОНП. Действие СРБ приводит к функциональному липоидозу клеток рыхлой соединительной ткани, что проявляется формированием липидных пятен в интиме артерий, перегрузкой макрофагов при поглощении ими СРБ + ЛПОНП и депонированием избыточного количества ТГ [13].

Для уточнения напряженности межсистемных связей вычисляли средний суммарный интегральный показатель (СИП) в группах:

СИП= [Г 1+ Г?_+.   +Гш]

[п1+2+...ш]?

где г - канонический коэффициент корреляции, п - число канонических зависимостей.

Считали, что чем выше показатели СИП и меньше выявленных канонических зависимостей, тем более стабильны системы организма [3]. Проведен сравнительный анализ уровня СИП по группам (рис.). Уровень СИП во 2-й группе (0,76 ±0,02) практически равен уровню СИП в 1-й группе (0,74±0,03 у.е.). Достаточно высокий СИП свидетельствует о сохранении способности организма к адаптации в условиях хронического заболевания в фазе ремиссии. У пациентов 3-й группы отмечается достоверное снижение (р<0,001) СИП (0,68±0,02) по сравнению со 2-й группой и на 10,8% с 1-й группой. Снижение уровня СИП при большом числе межсистемных канонических зависимостей говорит о том, что при сочетанном течении Хр.Х и МС процесс напряжения Таблица 3 регуляторных возможностей организма протекает интенсивнее.

При длительном течении хронического холецистита воспаление приводит к нарушениям метаболического и иммунного статуса. Активированные лейкоциты и моноциты участвуют в «метаболическом взрыве», высвобождая активные радикалы, участвующие в реакциях перекисного окисления липидов [8]. Начальные метаболические нарушения при развитии Хр. Х связаны непосредственно с нарушением транспортной функция апопротеинов. По данным литературы изменение уровня ОХС при патологии ЖВП сопряжено, как правило, с повышением уровня апоВ - высокомолекулярного белка осуществляющего транспорт ХС в клетку. Липопротеины высокой плотности имеют уникальную способность акцептировать ХС с клеточных мембран, и таким образом частицы ЛПВП участвуют в переносе ХС из тканей обратно в печень, тем самым препятствуя развитию атеросклеротического процесса. Белки осуществляющие транспортную функцию ЛПВП - апоА1 [5].

СИП, у.е.

Рис. Сравнительный анализ суммарного интегрального показателя по группам

Важную роль в прогрессировании метаболических нарушений играет избыточная масса тела. В данном случае антропометрические показатели имели выраженную корреляционную связь с системой апопротеинов и медиаторами воспаления на начальных этапах формирования МС. При прогрессировании процесса избыточное отложение жира сопровождается комплексом нарушений липидного, углеводного обмена.

Висцеральная жировая

ткань может способствовать накоплению свободных жирных кислот, секреции провоспалительных цитокинов и лептина, вызывающих индукцию иммуновоспали-тельных реакций. Полученные результаты подтверждаются и литературными данными [2,11].

Выводы. Таким образом, метод канонической корреляции способствовал выделению наиболее значимых в развитии Хр.Х и МС систем и определению степени напряженности межсистемных взаимоотношений.

Ведущими являются изменения клеточного и фагоцитарного звена иммунитета и транспортной функции апопротеинов, которые влекут за собой серьезные нарушения в липидном и

Каноническая зависимость межсистемных связей 2-й группы пациентов

х1 х2 х3 х4 х5 х6 х7 х8 х9 х10 х11 х12

х1

х2 0,82** 0,82*

хэ 0,82** 0,81** 0,75* 0,87* 0,73* 0,77*

х4 0,57* 0,89*

х5

х6 0,82* 0,81** 0,63* 0,85*** 0,91*

х7 0,75* 0,57* 0,63*

ха 0,63*

х9 0,87* 0,89* 0,63* 0,63*

*10 0,73* 0,85***

Х11 0,77* 0,91* 0,63*

Таблица 4

Каноническая зависимость межсистемных связей у пациентов 3-й группы

х1 х? х3 х4 х5 х6 х7 х8 х9 х10 х11 х12

х1 0,42*** 0,64* 0,58** 0,84**

х2 0,42*** 0,62* 0,42** 0,82** 0,45* 0,8**

х3 0,64* 0,62* 0,74** 0,8*

х4 0,42** 0,74** 0,85** 0,46* 0,74*

0,82** 0,85** 0,81**

х6 0,63*

0,58** 0,45* 0,46* 0,63* 0,62* 0,77**

х8 0,8** 0,8* 0,66**

х9 0,74* 0,8* 0,9**

х10 0,81*** 0,66**

х11 0,84** 0,8* 0,62* 0,9**

х12 0,77***

Примечание: * - р<0,05, ** - р<0,01, *** - р<0,001; пустые ячейки - связи статистически незначимые

углеводном обмене, в системе антиоксидантной защиты организма, гемодинамике, приводящие, в конечном итоге, к развитию у больных хроническим холециститом метаболического синдрома.

Литература

1.Александров О.В. и др. //РМЖ.- 2006.- №6.- С. 50-55.

2.Астраханцева Э.Л. и др // Бюллетень СО РАМН.- 2004.-№1 (111).- С. 63-112.

3.Глинский В.В. и др. Статистический анализ: Уч. пособ.- 3е изд. М.:ИНФРА-М.: Новосибирск: СО, 2002.- 241с.

4.Гончаренко М.С., Латинова А.М. // Лаб. дело.- 1985.-№1.- С. 60-61.

5.ИванчековаР.А. и др. // Тер. арх..- 2005.- С. 10-14.

6.ИльинаН.И. и др. // Иммунол.- 2000.- №5.- С. 8-9.

7.Клебанов Г.И. и др. // Лаб. дело.- 1988.- №5.- С. 59-62

8.Куликова А.Н. // Цитокины и воспаление.- 2007.-Т.6., №3.- С. 14-19.

9.Маянский Д.Н. и др. Комплексная оценка функции фагоцитов при воспалительных заболеваниях: методич. реком.- Новосибирск, 1988.- 24 с.

10.Моисеев С.В., Фомин В.В. // Клин. фармакол. и тер.-2004.- №13 (4).- С. 70-74

11.Северов М.В. // Клин. фармакол. и тер.- 2008.- №17 (1).-С.11-15

12.Стручков П. В. и др. // Лаб. дело.- 1987.- №7.- С. 410413

13.Титов В.Н. и др. // Клин. лаб. диагн.- 2008.-№1.- С. 2334.

14.Хворостинка В.Н. и др. // Сучасна гастроентерологія.-2004.- №3.- С. 32-34.

15.ШмелевЕ.В. и др. // Лаб. дело.- 1979.- №9.- С. 13-15.

DISTINCTIVE FEATURES OF INTERSYSTEM COMMUNICATIONS AT COMBINED COURSE OF CHRONIC CHOLECYSTITIS AND METABOLIC SYNDROME

M.V. ANTONYUK, L.A. BELIK, A.V. YURENKO,

Summary

By results of inspection in 160 patients the initial correlation analysis of clinical, immune and metabolic interrelations is lead at combined course of chronic cholecystitis and metabolic syndrome. The degree of a pressure of systems of an organism and expressiveness of intersystem mutual relations is certain at development of chronic cholecystitis.

Key words: chronic cholecystitis, metabolic syndrome.

УДК 611.018.25.017.1.086 - 055.2

РОЛЬ НЕЙТРОФИЛОВ В ФОРМИРОВАНИИ МИКРОБИОЦЕНОЗА СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК

Ю.С.АНДРЕЕВА, И.И. ДОЛГУШИН*

В супернатантах нейтрофилов имеется огромный арсенал бактерицидных факторов, содержание которых изменяется после активации клетки. Секреторные продукты нейтрофилов оказывают селективное действие на микробиоценоз: они снижают содержание условнопатогенной флоры, при этом, не влияя на лактофлору.

Нейтрофилы относятся к тканевым фагоцитирующим клеткам [5]. В тканях нейтрофилы осуществляют все свои эффектор-ные функции, участвуя в антимикробных и воспалительных реакциях. В последние годы показано, что значительная часть этих клеток покидает ткани и мигрирует на поверхность слизистых оболочек, где они и погибают [5]. Остается не ясным, каков биологический смысл такого «марша смерти» нейтрофилов в слизистый биослой. Не исключено, что, мигрируя на поверхность эпителия и разрушаясь в результате некробиоза или апоптоза, нейтрофилы выделяют наружу антимикробные продукты своих лизосом, которые, обладая бактерицидностью, влияют на микрофлору, заселяющую слизистые оболочки. В секретах репродук-

* Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Челябинская ГМА, 454092, г. Челябинск, Воровского, 64. Тел. (351)232-74-56

тивной системы женщин содержится значительное количество нейтрофилов [13]. В этой связи возникло предположение, что одной из функций цервикальных и вагинальных нейтрофилов является участие в регуляции микробиоценоза этих биотопов.

Цель исследования - определение роли нейтрофилов и их секреторных продуктов в регуляции микробиоценоза влагалища здоровых женщин и женщин с бактериальным вагинозом.

Материалы и методы. Для достижения поставленной цели проведено иммунологическое и микробиологическое обследование 123 женщин в возрасте 19-35 лет, из которых 32 женщины имели установленный диагноз - бактериальный вагиноз, а остальные были здоровыми. Исследования проводились в первой фазе менструального цикла. У всех пациенток при обследовании были исключены трихомониаз, гонорея, сифилис, ВИЧ-инфекция, хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз, генитальный герпес и цитомегаловирусная инфекция. Для изучения функционального ответа нейтрофилы выделяли из периферической венозной крови на двойном градиенте плотности стерильных растворов фиколла-верографина (Pharmacia, Sweden; Spofa, CSSR) (плотность верхнего слоя градиента составляла 1,075-1,077, а нижнего - 1,093-1,095) и оценивали по лизосомальную активность (Фрейдлин И.С., 1984); с помощью спонтанного и индуцированного НСТ-теста проводилось определение внутриклеточного кислородзависимого метаболизма полиморфноядерных лейкоцитов (Маянский А.Н., Виксман М.К., 1979); исследование фагоцитарной активности нейтрофилов проводилось на модели поглощения частиц полистирольного латекса (Лебедев К. А., Поня-кина И. Д., 1990) и контрольных штаммов микроорганизмов (S. aureus (штамм 209), E. coli (штамм М-17) (препарат «Колибакте-рин», ФГПУ «НПО «Микроген» МЗ РФ, г. Москва), Lactobacillus spp. (препарат «Лактобактерин сухой», фирма «ИмБио», г. Нижний Новгород), Bifidobacterium spp. (препарат «Бифидумбактерин сухой», ЗАО «Экополис», г. Ковров) [7,8].

Микробиологическое обследование проводилось с целью выявления этиологически значимого возбудителя генитальной инфекции и оценки состава микрофлоры влагалища (Приказ № 286 МЗ РФ «О совершенствовании контроля за заболеваниями, передающимися половым путем» от 07.12.93 г). Исследование на гонорею и трихомониаз проводилось по общепринятым методикам и согласно приказу № 936 МЗ СССР «Об унификации лабораторных методов исследования в диагностике гонореи и трихо-мониаза» от 12 июля 1985 г. Для определения антигенов хлами-дий, уреаплазм, микоплазм, вируса простого герпеса I,II типа, цитомегаловируса и гарднерелл использовали реакции прямой и непрямой иммунофлюоресценции (РИФ). Кроме РИФ, индикация уреаплазм проводилась на основании качественной пробы на уреазу с использованием жидкой питательной среды. Для оценки микробиоценоза влагалища проводили бактериологическое исследование, с целью количественного определения резидентной и факультативной флоры [11]. Для получения продуктов секреции нейтрофилов использовали гепаринизированную венозную кровь здоровых женщин и женщин с бактериальным вагино-зом. Нейтрофилы выделяли на двойном градиенте плотности стерильных растворов фиколла-верографина (Pharmacia, Sweden; Spofa, CSSR). Плотность верхнего слоя градиента составляла 1,075-1,077, а нижнего - 1,093-1,095. Секреторные продукты нейтрофилов получали методом, разработанным научным коллективом, возглавляемым профессором Долгушиным И. И. и опубликованным в работах 1984-2001г.

Уровень оксида азота в продуктах секреции нейтрофилов определяли по содержанию нитратов, которые регистрировали в виде нитритов по реакции Грисса, после восстановления их губчатым кадмием. Активность пероксидазы определяли на основании фотометрической регистрации понижения концентрации индигокармина, который окисляется перекисью водорода в присутствии пероксидазы [12]. Определение уровня активности лизоцима проводили с помощью нефелометрического метода [13]. Концентрацию БПИ (бактерицидный/индуцирующий протеин) и дефенсинов определяли с помощью наборов реагентов «BPI-1» и «HNP1-3» (HyCult biotechnology, Нидерланды). Использованный метод основан на двух-сайтовом твердофазном иммуноферментном анализе (ИФА). ИФА-диагностика была проведена на автоматическом ИФА-анализаторе Personal Lab. Для определения бактерицидной активности гепаринизированной крови, лейкоцитарной взвеси, нейтрофилов и их секреторных продуктов использовали классический метод [8]. Полученные