Изменение структуры ДНК при модельной лазерной модификации крови с фотодитазином

72

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

Материалы и методы. В работе использовали клеточную линию HepG2 (гепатоцеллюлярная карцинома). Оценку результатов МТТ-теста проводили путем сопоставления оптической плотности в опытных и контрольных лунках после инкубации клеток карциномы с образцами сесквитерпеновых лактонов в течение 72 ч.

Результаты. По результатам MTT-анализа выявлено, что в концентрации 3,0 и 5,0 мкг/мл изучаемые образцы сесквитерпеновых лактонов оказались цитотоксичными в отношении культуры клеток HepG2. Однако при микроскопическом исследовании в лунках с соединениями цити-зинил-эпоксиарглабин, 3р-гидроксиархалин, 4-пиридин-производное арглабина, 3-пиридинпроизводное арглабина, 3-пиридин-6-метоксипроизводное гроссгемина обнаружены жизнеспособные клетки в меньшем количестве, чем в контроле. Поэтому были проведены дополнительные исследования оставшихся образцов, показавших высокую цитотоксичность (ß-эпоксиарглабин, анабазинил-эпокси-арглабин, эпоксиарголид, анабазиниларголид, эстафиатин) в меньших концентрациях (0,1; 0,5; 1,0; 1,5 мкг/мл).

Заключение. Образцы сесквитерпеновых лактонов (ß-эпоксиарглабин, анабазинил-эпоксиарглабин, эпокси-арголид, анабазиниларголид, эстафиатин) показали высокую цитотоксичность в отношении клеток гепатоцеллюляр-ной карциномы HepG2. Полученные результаты свидетельствуют о том, что данные образцы сесквитерпеновых лактонов являются перспективными для углубленного изучения их противоопухолевой активности в условиях in vivo.

А.В. Сергеев1, Н.Л. Чебан1, Ю.М. Букреев1, И.М. Лученко1, Н.Ю. Соколов2, В.В. Решетникова1, И.Ж. Шубина ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ НАБЛЮДЕНИЯ ПРИМЕНЕНИЯ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ СРЕДСТВ ХИМИОПРОФИЛАКТИКИ РАКА ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия;

ФГБУ ЦКБ с поликлиникой управления делами Президента РФ, Москва, Россия

Введение. Разработаны лечебно-профилактические препараты «Каскатол» (КС, бета-каротин, витамины Е и С), «Чаголюкс» (ЧЛ) на основе экстракта чаги, «Розола-крит» (РОЗ) на основе экстракта корня солодки, плодов шиповника и травы тысячелистника. Препараты разработаны в виде БАДов и поступили в аптечную сеть.

Цель исследования — изучить антиканцерогенную активность препаратов и дать оценку возможности их использования в группах онкологического риска.

Материалы и методы. Антиканцерогенную активность препаратов изучали на модели химического канцерогенеза ЖКТ и печени, индуцированного у крыс ^метил-^ бензилнитрозамином (МБН), N-нитрозодиэтиламином (НДЭА) или ^метил-^нитрозомочевиной (МНМ). Препараты давали вместе с кормом на протяжении всего эксперимента.

Результаты. КС и ЧЛ при систематическом введении животным уменьшали на 35—50 % частоту образования опухолей пищевода, желудка, печени, индуцированных МБН и НДЭА и на 25—35 % опухолей молочной железы,

индуцированных МНМ. Препараты удлиняли латентный период появления опухолей и степень их злокачественности. Препараты обладали антимутагенным и иммуномоду-лирующим действием. Систематический прием КС и РОЗ в группе «злостных курильщиков» (175 человек) в течение 1,5—2,5 лет уменьшал проявления хронического бронхита, повышал антиоксидантный потенциал организма и объективно снижал тягу к табакокурению. Прием КС и ЧЛ у женщин с мастопатиями (115 пациенток) объективно улучшал самочувствие, уменьшал проявления мастолгии, снижал интенсивность климактерических расстройств. Прием КС, РОЗ и ЧЛ в течение 1—1,5 лет больными с хроническим простатитом и аденомой простаты (68 участников) приводил к сокращению никтурии, уменьшению болей и дневной дизурии, отмечено полное опорожнение мочевого пузыря, благоприятная динамика PSA.

Заключение. Препараты КС, ЧЛ и РОЗ можно рассматривать в качестве потенциальных средств химиопрофи-лактики рака.

Ю.Г. Симаков1, В. А. Пурцхванидзе2 ИЗМЕНЕНИЕ СТРУКТУРЫ ДНК ПРИ МОДЕЛЬНОЙ ЛАЗЕРНОЙ МОДИФИКАЦИИ КРОВИ С ФОТОДИТАЗИНОМ

1ФГБОУ ВО «МГУТУ» им. К.Г. Разумовского, Москва, Россия;

2МЦВТ«ЛазерВита», Москва, Россия

Введение. Лазерная модификация крови часто применяется для стимуляции иммунитета у пациентов с онкологическими и другими формами заболеваний. Однако ранее почти не изучалось действие лазерной модификации крови на структуру ДНК в гетерохроматине клеточных элементов крови.

Цель исследования — изучить структуру ДНК в ядрах эритроцитов рыб при модельной лазерной модификации с применением фотодитазина.

Материалы и методы. Работа проведена на молоди рыб Brachydanio rerio, размером около 2 см, которая в настоящее время широко используется в онкологических исследованиях. Опыт проведен на 30 особях. Две партии рыб были контрольные, они подвергались действию либо лазера, либо фотодитазина. В 3-й партии рыб модельную модификацию крови проводили путем экспозиции рыб в растворе фотодитазина с концентрацией 3,0 мг/л в течение 5 мин и облучения красным лазером с длиной волны 630 нм в течение 3 мин при мощности 50 Дж/см2-. ДНК в ядрах эритроцитов окрашивали акридиновым оранжевым и исследовали на препаратах «давленая капля» в поле зрения люминесцентного микроскопа МБМ 3 Л (Пирс., 1969). При этом гашение зеленой флуоресценции ДНК указывает на разрыв нитей ДНК, а оранжевая люминесценция говорит о расхождении ДНК до одноцепочных нитей (Кар-ноухов, 2002). Препараты крови исследовались через 1, 24 и 48 ч после проведения модельной модификации.

Результаты. Отдельное воздействие лазера или фотодитазина не вызывает изменения флуоресценции ядер эритроцитов, а при проведении модельной модификации уже через час наблюдается гашение зеленой флуоресценции в некоторых участках ядер, где происходит разрыв нитей

Спецвыпуск / том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

73

ДНК. Однако через 24 ч гашение флуоресценции исчезает, что связано, скорее всего, с репарацией поврежденных участков ДНК, а свечение в ряде ядер эритроцитов заменяется на оранжевое. Это указывает на появление одноце-почных ДНК. Через 48 ч интенсивность флуоресценции ядер эритроцитов приближается к контролю, но в ядрах эритроцитов появляются аномалии в строении.

Заключение. Воздействие синглетного кислорода в процессе модельной лазерной модификации крови рыб приводит к изменению структуры ДНК в ядрах эритроцитов. Изменение носит провизорный характер, и через некоторое время происходит репарация ДНК. Через 2 сут достоверно возрастает полиморфизм ядер и наблюдаются их морфологические отклонения. Мы рекомендуем при проведении лазерной модификации крови с хлориновыми фотосенсибилизаторами у людей из-за возможности нарушения структуры ДНК не проводить одновременно лазерную модификацию крови с фотодинамической терапией.

В.В. Синайко1, Т.Л. Юркштович2, П.М. Бычковский3, К.А. Фроленков4, П.И. Кохавец4, Н.А. Артемова1 ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ КОМПЛЕКСНОГО ЛЕЧЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ С ГЛИОБЛАСТОМОЙ (GRADE IV) C ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ РАЗЛИЧНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ТЕМОЗОЛОМИДА 1ГУ «РНПЦ онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова», а/г Лесной, Республика Беларусь; 2Учреждение БГУ«НИИфизико-химических проблем», Минск, Республика Беларусь;

3Учебно-научно-производственное РУП«Унитехпром БГУ», Минск, Республика Беларусь;

4РУП «Белмедпрепараты», Минск, Республика Беларусь

Введение. Для обеспечения внутреннего рынка страны современными эффективными лекарственными препаратами в Республике Беларусь разработана технология получения и производства фармацевтической субстанции те-мозоломида. После производства готовой лекарственной формы препарата темобел, являющегося дженериком оригинального препарата темодал производства фирмы «Schering-Plough», с сентября 2011 г. началось клиническое использование этого препарата.

Цель исследования — оценить 5-летние результаты комплексного лечения пациентов с глиобластомой в зависимости от использования препаратов темодал или темо-бел в послеоперационной схеме химиолучевой терапии.

Материалы и методы. В исследование включен 251 пациент с морфологически верифицированном диагнозом глиобластомы (Grade IV), которым в послеоперационном периоде проведен курс химиолучевой терапии в СОД 50— 64,9 Гр с использованием темодала (n = 122) или темобела (n = 129). Оценка выживаемости проводилась по методу Каплана — Майера с использованием log-rank теста, для анализа влияния основных клинических факторов на выживаемость пациентов применялась модель пропорциональных рисков Кокса. Результаты считались статистически значимыми прир < 0,05.

Результаты. При мультивариантном анализе с использованием модели пропорциональных рисков Кокса было показано, что использование различных лекарственных

форм темозоломида (темодал либо темобел) не является независимым прогностическим фактором, влияющим на выживаемость пациентов. Медиана, 1-, 3- и 5-летняя безрецидивная выживаемость при использовании препарата темодал составила 10 ± 0,58 мес, 36,0 ± 4,4 %, 6,7 ± 2,3 и 4,2 ± 2,8 %, а препарата темобел — 9 ± 0,82 мес, 38,3 ± 4,3, 12,6 ± 3,2 и 4,0 ± 2,9 % соответственно (р = 0,982). Медиана, 1-,2-, 3- и 5-летняя общая выживаемость при использовании препарата темодал составила 16 ± 0,78 мес, 71,3 ± 4,1, 14,1 ± 3,2 и 7,5 ± 2,4 %, а препарата темобел — 17 ± 1,54 мес, 70,7 ± 4,1, 17,1 ± 3,9 и 7,9 ± 2,5 % соответственно (р = 0,378).

Заключение. Статистически значимых различий в результатах комбинированного лечения пациентов с глио-бластомой в зависимости от использования различных лекарственных форм темозоломида (темодал либо темобел) не выявлено.

В.П. Сокуренко, Л.И. Корытова

ЛУЧЕВОЙ мукозит профилактика и лечение

ФГБУ «Российский научный центр радиологии и хирургических технологий», Санкт-Петербург, Россия

Цель исследования — профилактика местных лучевых реакций слизистой орофарингеальной области.

Задача — оценить эффективность и токсичность (местную и общую) разработанной методики местного применения гидрогелевого высокоструктурированного материала (диски) на основе альгината натрия и гиалуро-новой кислоты с прополисом (5 %).

Материалы и методы. Исследуемый материал применяли с 1-го дня конформной лучевой терапии (ЛТ) на фоне карбоплатина у больных раком органов полости рта и ротоглотки. Кратность применения исследуемого материала — 3 раза в день (за 1 ч до сеанса ЛТ, через 3 и 6 ч после облучения), экспозиция — 1 ч. Длительность применения — весь период лучевого лечения (35 дней) и в течение 10 дней по завершении ЛТ. Общее количество больных, включенных в исследование, — 17 (9 — с первичной локализацией опухоли в области дна полости рта и 8 — в области миндалин). Контрольная группа — 29 больных, получивших конформную ЛТ на фоне общепринятых средств профилактики местных лучевых реакций.

Результаты. Переносимость исследуемого материала удовлетворительная, вкусовые качества индифферентные, осложнений, аллергических реакций не зарегистрировано. Отмечен отчетливый положительный субъективный и объективный эффект: в контрольной группе у 16 (64 %) больных на СОД 35—45 Гр зарегистрированы острые лучевые реакции II—III степени тяжести, а по достижении СОД 55—62 Гр мукозит III—IV степени зарегистрирован у 13 (52 %) пациентов, что являлось причиной перерыва в лечении (12—16 дней) в 22 % случаев. Включение в терапию сопровождения исследуемого материала обеспечило более позднее развитие лучевого мукозита II степени на СОД 48—58 Гр; мукозит III—IV степени не зарегистрирован. Необходимость проведения сплит-курса составила 12 против 22 %. Редукция химиотерапии (радиомодификация) в контрольной группе проведена у 6 пациентов, в исследуемой — у 3.

Спецвыпуск/ том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ