СПЕЦИФИЧНЫЕ ДЛЯ ПАЦИЕНТА ЛИНИИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ПОЛУЧЕННЫЕ ИЗ ЧЕЛОВЕЧЕСКИХ ПАРТЕНОГЕНЕТИЧЕСКИХ БЛАСТОЦИСТОВ

1. Изолированная линия стволовых клеток человека, полученная из партеногенетических бластоцист, в которой по меньшей мере одна клетка, составляющая линию клеток, является
a) гетерозиготной по одному или более однонуклеотидным полиморфизмам (SNP); или
b) гомозиготной по одному или более аллелям HLA; или
c) комбинацией (a) и (b).
2. Изолированная линия клеток по п.1, в которой по меньшей мере одна клетка является гомозиготной по аллелям HLA.
3. Изолированная линия клеток по п.1, в которой по меньшей мере одна клетка образует тератому после трансплантации мыши с ослабленным иммунитетом.
4. Изолированная линия клеток по п.1, в которой по меньшей мере одна клетка является МНС-совместимой с неоплодотворенным донором ооцитов.
5. Изолированная линия клеток по п.4, в которой по меньшей мере одна клетка является МНС-совместимой с прямым родственником донора бластоцисты.
6. Изолированная линия клеток по п.1, в которой по меньшей мере одна клетка в значительной степени подверглась генетическому импринтингу, в соответствии с происхождением донора.
7. Изолированная линия клеток по п.1, в которой по меньшей мере одна клетка (i) будет пролиферировать в культуре in vitro в течение более одного года, (ii) сохраняет возможность дифференцировки в производные тканей эндодермы, мезодермы и эктодермы во всей культуре, и (iii) поддается ингибированию дифференцировки, когда ее культивируют на питающем подслое фибробластов.
8. Изолированная линия клеток по п.7, в которой по меньшей мере одна клетка дифференцируется в клетку, выбранную из группы, состоящей из нейрональной клетки, кардиомиоцита, гладкомышечной клетки, клетки поперечно-полосатой мышцы, эндотелиальной клетки, остеобласта, олигодендроцита, гемопоэтической клетки, жировой клетки, стромальной клетки, хондроцита, астроцита, кератиноцита, клетки панкреатического островка, лимфоидной клетки-предшественника, тучной клетки, мезодермальной клетки и эндодермальной клетки.
9. Изолированная линия клеток по п.1, в которой по меньшей мере одна клетка не обладает способностью формировать жизнеспособный организм.
10. Изолированная линия клеток по п.1, в которой по меньшей мере одна клетка экспрессирует один или более маркеров, выбранных из группы, состоящей из SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81 и ОСТ-4.
11. Способ лечения субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение клеточной композиции, содержащей дифференцированные клетки, где дифференцированные клетки получены из линии стволовых клеток по п.1.
12. Способ по п.11, в котором субъект имеет заболевание, выбранное из группы, состоящей из болезни Паркинсона, болезни Хантингтона, болезни Альцгеймера, ALS, дефектов или повреждений спинного мозга, рассеянного склероза, мышечной дистрофии, муковисцидоза, болезни печени, диабета, болезни сердца, дегенерации желтого пятна, дефектов или повреждений хряща, ожогов, язв стопы, болезни сосудов, болезни мочевыводящих путей, СПИДа и рака.
13. Библиотека стволовых клеток, включающая аутологичные или аллогенные стволовые клетки, где стволовые клетки получены из партеногенетически активированных ооцитов от одного или более доноров-людей, и где стволовые клетки представляют собой HLA-гомозиготные стволовые клетки.
14. Библиотека по п.13, в которой каждый член библиотеки идентифицирован как полный сибс, полусибс или неродственный, в соответствии с маркерами однонуклеотидного полиморфизма (SNP).
15. Библиотека по п.13, в которой донор ооцитов является гистосовместимым с членом библиотеки.
16. Библиотека по п.13, в которой член библиотеки подвергся геномному импринтингу в соответствии с происхождением донора ооцитов.
17. Библиотека по п.13, в которой стволовые клетки получены от HLA-гетерозиготного или HLA-гомозиготного донора ооцитов.
18. Библиотека по п.13, в которой каждый член является гомозиготным по комбинации аллелей МНС, отличной от других членов библиотеки.
19. Библиотека по п.13, в которой каждый член является по меньшей мере гомозиготным по одному или более генам HLA класса I и генам HLA класса II.
20. Библиотека по п.13, в которой гены HLA класса I выбраны из комбинаций гаплотипов HLA A*, HLA B*, HLA и Cw*.
21. Библиотека по п.13, в которой гены HLA класса II выбраны из комбинаций гаплотипов HLA DRB1*, DRB3*, DRB4*, DRB5*, DQA1* и DQB1*.
22. Библиотека по п.13, в которой каждый член (i) будет пролиферировать в культуре in vitro в течение более одного года, (ii) сохраняет возможность дифференцировки в производные одной или всех тканей эндодермы, мезодермы и эктодермы во всей культуре, и (iii) поддается ингибированию дифференцировки, когда его культивируют на питающем подслое фибробластов.
23. Библиотека по п.22, в которой каждый член сохраняет кариотип, в котором хромосомы являются эуплоидными и не изменяются на протяжении длительного культивирования.
24. Библиотека по п.13, в которой каждый член может дифференцироваться в эктодермальные, мезодермальные и эндодермальные клетки зародышевой линии.
25. Библиотека по п.13, в которой каждый член характеризуется в соответствии с HLA-типом, и каждый член является HLA-совместимым с потенциальными реципиентами.
26. Способ генерации HLA-гомозиготных стволовых клеток, включающий:
a) скрининг доноров ооцитов на HLA-гаплотипы, широко распространенные в данной популяционной группе;
b) инкубирование ооцитов человека, находящихся в метафазе II, в средах для экстракорпорального оплодотворения (IVF);
c) инкубирование клеток стадии (b) в средах IVF, включающих ионофор;
d) инкубирование клеток стадии (с) в средах IVF, включающих пуромицин; и
2
e) инкубирование клеток стадии (d) в свежей среде IVF при низком парциальном давлении О,
2
в котором стадии инкубации (b)-(d) осуществляют при высоком парциальном давлении О, и в котором внутренние клеточные массы (ICM), полученные из клеток на стадии (d), продуцируют пригодные для культивирования стволовые клетки.
27. Способ по п.26, дополнительно включающий HLA-типирование биологических родителей донора ооцитов стадии (a).
28. Банк клеток, включающий HLA-гомозиготные стволовые клетки, в котором стволовые клетки получены из партеногенетически активированных ооцитов от HLA-гомозиготных или HLA-гетерозиготных людей-доноров ооцитов.
29. Банк клеток по п.28, в котором стволовые клетки классифицируют по идентичности HLA-гаплотипам, широко распространенным в данных популяционных группах.
30. Банк клеток по п.28, в котором банк клеток включает криоконсервированные аутологичные или аллогенные стволовые клетки.