СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ, ДЛИТЕЛЬНОГО ХРАНЕНИЯ И КРИОКОНСЕРВАЦИИ СПЕРМЫ ИНДЮКОВ "ВНИИГРЖ-5"
MEDIUM FOR DILUTION, LONG-TERM STORAGE AND CONSERVATION OF SEMEN OF TURKEYS "VNIIGRZH-5"

Изобретение относится к птицеводству и может применяться в биотехнологиях искусственного осеменения индеек.
С развитием методов искусственного осеменения сельскохозяйственной птицы актуальными стали разработки сред для разбавления, длительного хранения и криоконсервации спермы самцов с целью повышения оплодотворенности яиц. При этом составы сред различны для разных видов птицы.
Одной из задач является длительное хранение и криоконсервация спермы индюков. Для ее решения среди прочих была предложена среда, содержащая растворенные в дистилированной воде: инозитол, лактозу, фосфорнокислый калий двузамещенный и однозамещенный, тиосульфат натрия и цинковый комплекс этилендиаминтетраацетата двунатриевого двуводного [1]. Главным недостатком этой среды являются относительно невысокие показатели оплодотворенности яиц (63,3%) и вывода молодняка (49,9%), получаемые после осеменения спермой, прошедшей криоконсерацию.
В качестве прототипа была выбрана среда «ВИРГЖ-4», имеющая наиболее близкий к заявляемому объекту изобретения состав компонентов [2], используемая для криоконсервации спермы петухов и индюков.
Задачей предлагаемого изобретения было существенное повышение биологической полноценности спермиев индюков при длительном хранении при плюсовых температурах и криоконсервации и, как следствие, - повышение оплодотворенности яиц.
По итогам многочисленных экспериментов установлено, что для решения этой задачи целесообразно в качестве источников ионов магния вместо взятого в прототипе ацетата использовать сульфат и привести соотношение растворенных в 100 мл дистиллированной воды компонентов до следующих диапазонов: глутамат натрия - 1,60-2,00 г; глутаминовая кислота - 0,04-0,05 г; инозитол - 0,24-0,26 г; калий фосфорнокислый двузамещенный - 0,32-0,36 г; глюкоза - 1,00-1,14 г; магния сульфат 0,22-0,23.
При использовании этой среды для криоконсервации спермы индюков в качестве криопротектора добавляют к объему разбавленной спермы N,N-диметилацетамид в концентрации 8%.
Для проверки диапазонов содержания компонентов в сравнении с прототипом были испытаны 4 варианта новой среды, получившей название «ВНИИРГЖ-5», составы которых показаны в таблице 1.
Степень разбавления: 1 часть спермы и 3 части среды. Частота осеменения индеек при хранении спермы при плюсовых температурах - 1 раз в 14 дней; при использовании замороженно-оттаянной спермы - 1 раз в 7 дней.
В таблице 2 приведены результаты сравнительных испытаний различных вариантов среды после замораживания, хранения в течение года при температуре жидкого азота и последующего оттаивания, из которой видно, что объект изобретения имеет значительное преимущество перед прототипом, особенно заметное в вариантах II и III.
В таблице 3 показаны результаты сравнительных испытаний прототипа и состава предлагаемой среды по варианту III (оба без N,N-диметилацетамида) при разных сроках хранения при температуре: +1…+3°С. Здесь также наблюдается преимущество объекта изобретения.
Среду «ВНИИГРЖ-5» готовят следующим образом: в первую емкость наливают 50 мл дистиллированной воды, в которой растворяют: глутамат натрия и фосфорнокислый калий двузамещенный. Во второй емкости в 50 мл дистиллированной воды растворяют глюкозу, инозитол, магния сульфат и глутаминовую кислоту. После полного растворения компонентов оба раствора соединяют в одной емкости.
Технический результат предлагаемого изобретения состоит в существенном повышении биологической полноценности спермиев индюков при длительном хранении и криоконсервации.
Таблица 1
Компоненты среды
Ед. измерения
Среда «ВНИИГРЖ-5»
Прототип «ВИРГЖ-4»
Вариант I
Вариант II
Вариант III
Вариант IV
Глутамат натрия
г
1,26
1,60
2,00
2,40
2,40
Глутаминовая кислота
г
0,03
0,04
0,05
0,06
0,14
Инозитол
г
0,23
0,24
0,26
0,30
0,20
Калий фосфорнокислый двузамещенный
г
0,29
0,32
0,36
0,40
0,35
Глюкоза
г
0,87
1,00
1,14
1,35
0,80
Магния сульфат
г
0,20
0,22
0,23
0,25
-
Магния ацетат
г
-
-
-
-
0,10
Глицин
г
-
-
-
-
0,10
N,N-диметилацетамида
%
8,00
8,00
8,00
8,00
8,00
Вода дистиллированная
мл
100
100
100
100
100
Таблица 2
Среда
Варианты
Проинкубировано яиц, шт.
Оплодотворенность яиц, %
Вывод молодняка, %
Объект изобретения «ВНИИГРЖ-5»
I
200
67,2
60,0
II
213
81,2
72,5
III
198
86,9
79,6
IV
385
70,2
61,3
Прототип «ВИРГЖ-4»
328
79,1
72,9
Таблица 3
Среда
Время хранения спермы, час
Проинкубировано яиц, шт
Оплодотворенность яиц, %
Вывод молодняка, %
Объект изобретения «ВНИИГРЖ-5», вариант III
1
1378
97,0
83,8
24
831
95,2
82,8
48
284
89,1
71,1
Прототип «ВИРГЖ-4»
24
1324
85,6
73,0
Источники информации
1. Осташко Ф.И., Бесулин В.И., Каркач П.М. Среда для разбавления и замораживания спермы индюков: Авт. св. СССР №1477397, А61Д 7/02, 1987.
2. Целютин К.В., Тур Б.К. Искусственное осеменение и криоконсервация спермы сельскохозяйственной птицы (петухи, индюки, гусаки и селезни). - СПб - Пушкин. - 2013. - С. 29.