Лечение сосудистого заболевания и его осложнений
TREATING VASCULAR DISEASE AND COMPLICATIONS THEREOF

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Настоящая заявка заявляет приоритет по предварительной заявке на патент США с регистрационным номером 61/709754 под названием "Композиции и способы для лечения сосудистого заболевания и осложнений, возникающих после лечения сосудистых заболеваний", поданной 4 октября 2012 г.
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0002] Настоящее изобретение в целом относится к областям медицины, сосудистой биологии и иммунологии. Более конкретно, настоящее изобретение относится к применению средств, таких как антитела (Ab), которые специфично связывают интерлейкин-1α (IL-1α), для предупреждения осложнений, связанных с сосудистым заболеванием и его лечением.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] Рестеноз коронарных артерий после баллонной ангиопластики и размещения стента является одной из основных причин смертности в интервенционной кардиологии. Полагают, что рестеноз возникает в результате воспалительного ответа на повреждение, полученное в результате процедуры (т.е. баллонной ангиопластики), и реакции на стент сам по себе. В этой связи желание снизить частоту рестеноза после размещения стента в последнее время привело к появлению стентов с лекарственным покрытием (DES). Хотя исследования со стентами, покрытыми сиролимусом и паклитакселом, в коронарных артериях показали снижение частоты рестеноза по сравнению с непокрытыми металлическими стентами, более свежие метаанализы вызывают беспокойство в связи с существенным увеличением частоты позднего тромбоза стента и смерти.
[0004] В дополнение к замедлению процесса гиперплазии неоинтимы, лежащему в основе рестеноза, DES обладают нежелательным свойством ограничения реэндотелизации люминальной поверхности стента. Обусловленная этим постоянно открытая поверхность стента, по-видимому, предрасполагает пациентов к позднему образованию тромбов, что совпадает с прекращением антикоагулянтной терапии. Поскольку длительная антикоагулянтная терапия сама по себе не позволяет избежать значительной смертности, большой интерес представляют другие механизмы, ограничивающие гиперплазию неоинтимы, индуцированную установкой стента.
[0005] Воспалительные процессы, приводящие к рестенозу коронарных артерий после реваскуляризации, также вовлечены в уменьшение проходимости сосудов после вмешательства при заболевании периферических артерий. Поверхностная бедренная артерия является местом особенно частого вмешательства, и частота рестеноза является высокой. Бедренно-подколенная система не всегда идеально подходит для размещения стента в связи с протяженностью поражений, аномальным вращением, связанным с сосудами нижней конечности, и необходимости в антикоагуляции. Процедуру реваскуляризации можно выполнять посредством только баллонной ангиопластики или атерэктомии с размещением стента или без него. Рестеноз происходит в результате воспалительного ответа на процедуру реваскуляризации.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
[0006] Настоящее изобретение основано на обнаружении того, что средство, специфично нацеливающееся на IL-1α, может снижать частоту серьезных нежелательных клинических явлений (МАСЕ) и рестеноза у пациентов, подвергшихся хирургическому лечению (например, стентированию, баллонной ангиопластике и атерэктомии) стеноза сосуда.
[0007] Соответственно, в настоящем изобретении предложен способ снижения вероятности возникновения или тяжести серьезного нежелательного клинического явления, имеющего место у субъекта-млекопитающего, получившего хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда или ожидающего его получения, при этом способ включает стадию введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и количество средства, нацеливающегося на IL-1α, такого как антитело к IL-1α (Ab), эффективное для снижения вероятности возникновения или тяжести серьезного нежелательного клинического явления, имеющего место у субъекта.
[0008] Также в пределах объема настоящего изобретения находится способ снижения вероятности возникновения рестеноза (или увеличения времени до возникновения рестеноза), имеющего место у субъекта-млекопитающего, получившего хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда или ожидающего его получения, при этом способ включает стадию введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и количество средства, нацеливающегося на IL-1α, такого как Ab к IL-1α, эффективное для снижения вероятности возникновения рестеноза сосуда.
В дополнение, настоящее изобретение относится к применению средства, нацеливающегося на IL-1α, такого как Ab к IL-1α, для снижения вероятности возникновения серьезного нежелательного клинического явления, имеющего место у субъекта-человека, получившего хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда или ожидающего его получения, и к применению средства, нацеливающегося на IL-1α, такого как Ab к IL-1α, для снижения вероятности возникновения рестеноза, имеющего место у субъекта-человека, получившего хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда или ожидающего его получения.
[0009] Средство, нацеливающееся на IL-1α, может представлять собой Ab к IL-1α, такое как моноклональное Ab (mAb) к IL-1α. Ab к IL-1α может представлять собой IgG1, как, например, mAb, обозначенное как MABp1 (см. заявку на патент США №13/225029, поданную 2 сентября 2011 г., в отношении описания этого антитела), или mAb, содержащее один или несколько участков, определяющих комплементарность (CDR), из MABp1.
[0010] Средство, нацеливающееся на IL-1α, может быть составлено в фармацевтическую композицию, которую можно вводить субъекту посредством инъекции, подкожно, внутривенно или внутримышечно. В данном способе доза, вводимая пациенту, может составлять по меньшей мере 0,5 (например, по меньшей мере 0,5, 1, 2, 2,5, 3, 3,75, 4 или 5) мг/кг массы тела.
th
[0011] Если не указано иное, то все технические термины, которые используются в данном документе, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в той области техники, к которой относится настоящее изобретение. Обычно подразумеваемые определения биологических терминов можно найти в Rieger et al., Glossary of Genetics: Classical and Molecular, 5th edition, Springer-Verlag: New York, 1991; и Lewin, Genes V, Oxford University Press: New York, 1994. Обычно подразумеваемые определения медицинских терминов можно найти в Stedman’s Medical Dictionary, 27 Edition, Lippincott, Williams & Wilkins, 2000.
2
[0012] Как применяется в данном документе, "антитело" или "Ab" представляет собой иммуноглобулин (Ig), раствор идентичных или гетерогенных Ig или смесь Ig. "Ab" также может относиться к фрагментам и сконструированным версиям Ig, таким как Fab-, Fab'- и F(ab')-фрагменты; а также scFv, гетероконъюгатам Ab и подобным искусственным молекулам, в которых используют CDR, полученные из Ig, для придания специфичности к антигену. "Моноклональное антитело" или "mAb" представляет собой Ab, которое экспрессируется одной клональной линией В-клеток, или популяцию молекул Ab, которые содержат только один вид антиген-связывающих участков, способных к иммунной реакции с определенным эпитопом определенного антигена. "Поликлональное антитело" или "поликлональное Ab" представляет собой смесь гетерогенных Ab. В типичном случае поликлональное Ab будет включать множество различных молекул Ab, которые связываются с определенным антигеном, и при этом по меньшей мере некоторые из этих различных Ab вступают в иммунную реакцию с другим эпитопом антигена. Как используется в данном документе, поликлональное Ab может быть смесью двух или нескольких mAb.
[0013] "Антиген-связывающая часть" Ab содержится внутри вариабельного участка Fab-части Ab и представляет собой часть Ab, которая придает Ab специфичность к антигену (т.е., как правило, является трехмерным карманом, сформированным CDR тяжелых и легких цепей Ab). "Fab-часть" или "Fab-участок" представляет собой фрагмент, полученный в результате протеолитического расщепления папаином Ig, которая содержит антиген-связывающую часть этого Ig. "Часть, отличная от Fab" представляет собой часть Ab, расположенную за пределами Fab-части, например, "Fc-часть" или "Fc-участок". "Константный участок" Ab представляет собой часть Ab, расположенную вне вариабельного участка. Обычно в пределах константного участка содержится "эффекторная часть" Ab, которая является частью Ab, отвечающей за связывание с другими компонентами иммунной системы, обеспечивающими иммунный ответ. Так, например, участок Ab, который связывается с компонентами системы комплемента или Fc-рецепторами (не через его антиген-связывающую часть), является эффекторной частью этого Ab.
[0014] В отношении белковой молекулы, такой как Ab, термин "очищенный" означает отделенный от компонентов, которые в естественных условиях сопутствуют таким молекулам. Обычно Ab или белок являются очищенными, когда они по меньшей мере приблизительно на 10% (например, 9%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98%, 99%, 99,9% и 100%) по весу свободны от белков, отличных от Ab, или других встречающихся в природе органических молекул, с которыми они связаны в естественных условиях. Чистоту можно измерить любым подходящим способом, например, путем колоночной хроматографии, электрофореза в полиакриламидном геле или HPLC-анализа. Химически синтезированный белок или другой рекомбинантный белок, полученный в типе клеток, отличном от типа клеток, в котором он встречается в природе, является "очищенным".
5
6
7
8
9
10
11
12
[0015] Под "связывать", "связываться" или "вступать в реакцию с" подразумевают, что одна молекула распознает определенную вторую молекулу в образце и прилипает к ней, но практически не распознает другие молекулы в образце и не прилипает к ним. Как правило, Ab, которое "специфично связывает" другую молекулу, имеет в отношении этой другой молекулы, превышающую приблизительно 10, 10, 10, 10, 10, 10, 10 или 10 литров/моль.
[0016] "Терапевтически эффективное количество" представляет собой количество, которое способно производить желаемый с медицинской точки зрения эффект у обработанного животного или человека (например, облегчение или предупреждение заболевания или симптома заболевания или увеличение способности к выживанию или продолжительности жизни).
[0017] Хотя способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в данном документе, можно применять при осуществлении настоящего изобретения на практике или при его тестировании, подходящие способы и материалы описаны ниже. Кроме того, определенные варианты осуществления, которые обсуждаются ниже, являются только иллюстративными и не предназначены быть ограничивающими.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
[0018] Настоящее изобретение охватывает композиции и способы для предупреждения или замедления развития осложнений у субъекта-человека, получившего хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда или ожидающего его получения. Описанные ниже предпочтительные варианты осуществления иллюстрируют вариант адаптации этих композиций и способов. Тем не менее, исходя из описания этих вариантов осуществления, другие аспекты настоящего изобретения могут быть созданы и/или применены на практике на основании описания, представленного ниже.
Общая методология
th
th
[0019] В данном документе описаны способы, включающие традиционные иммунологические и молекулярно-биологические методики. Иммунологические способы (например, анализы для выявления и определения локализации комплексов антиген-Ab, иммунопреципитация, иммуноблоттинг и т.п.) в целом известны в данной области техники и описаны в методологических монографиях, таких как Current Protocols in Immunology, Coligan et al., ed., John Wiley & Sons, New York. Молекулярно-биологические методики подробно описаны в таких монографиях, как Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., vol. 1-3, Sambrook et al., ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 2001; и Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel et al., ed., Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York. Способы анализа Ab описаны в Handbook of Therapeutic Abs, Dubel, S., ed., Wiley-VCH, 2007. Общие способы терапевтического лечения описаны в McPhee and Papadakis, Current Medical Diagnosis and Treatment 2010, 49 Edition, McGraw-Hill Medical, 2010; и Fauci et al, Harrison’s Principles of Internal Medicine, 17 Edition, McGraw-Hill Professional, 2008.
Снижение вероятности MACE и рестеноза
[0020] Композиции и способы, описанные в данном документе, применимы для снижения вероятности возникновения или тяжести МАСЕ, имеющего место у субъекта-млекопитающего, получившего хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда или ожидающего его получения, а также снижения вероятности возникновения рестеноза, имеющего место у субъекта, или увеличения времени до возникновения рестеноза у субъекта. Субъект-млекопитающее может быть любым, страдающим от сосудистого заболевания, включая людей, собак, кошек, лошадей, крупный рогатый скот, овец, коз и свиней. Субъекты-люди могут быть лицами мужского пола, женского пола, взрослыми, детьми или пожилыми (65 лет и старше). Субъект-млекопитающее может иметь заболевание периферических артерий, заболевание коронарных артерий, заболевание почечных артерий, болезнь Бюргера, атеросклероз или ишемию. Субъект также может проходить лечение антикоагулянтами, статинами, гипотензивными средствами, цилостазолом и/или пентоксифиллином или уже пройти такое лечение. Хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда может включать ангиопластику, шунтирование, атерэктомию и/или стентирование (непокрытыми металлическими стентами или стентами с лекарственным покрытием).
[0021] МАСЕ может включать смерть в течение 30 дней, инсульт, инфаркт миокарда/нестабильную стенокардию, экстренную хирургическую реваскуляризацию, значительную эмболизацию целевой конечности, тромбоз целевого сосуда или ухудшение симптомов хронической ишемии конечностей. Снижение или повышение, измеряемое в процентах, может составлять по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80 или 90%.
Антитела и другие средства, нацеливающиеся на IL-1α
а
9
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
[0022] В настоящем изобретении можно применять любой подходящий тип Ab или другого биологического средства (например, белок слияния, содержащий IL-1α-связывающий компонент, такой как рецептор IL-1), который специфично связывает IL-1α и предупреждает осложнения или замедляет их развитие у субъекта-человека, получившего хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда или ожидающего его получения. Например, применяемое Ab к IL-1α может представлять собой mAb, поликлональное АЬ, смесь mAb, или фрагмент Ab, или сконструированную Ab-подобную молекулу, такую как scFv. К Ab предпочтительно составляет по меньшей мере 1×10 М или более (например, больше 9×10 М, 8×10 М, 7×10 М, 6×10 М, 5×10 М, 4×10 М, 3×10 М, 2×10 М или 1×10 М). В предпочтительном варианте осуществления в настоящем изобретении применяют полностью человеческие mAb или mAb TRUE HUMAN, содержащие (i) антиген-связывающий вариабельный участок, проявляющий очень высокую аффинность связывания (например, по меньшей мере нано- или пикомолярную) с человеческим IL-1α, и (ii) константный участок. Человеческое Ab предпочтительно представляет собой IgG1, хотя оно может принадлежать к другому изотипу, как, например, IgM, IgA или IgE, или подклассу, как, например, IgG2, IgG3 или IgG4. Одним примером особенно применимого mAb является MABp1, IL-1α-специфичное mAb типа IgG1, описанное в заявке на патент США с регистрационным номером 12/455458, поданной 1 июня 2009 года. Другие применимые mAb содержат по меньшей мере один, но предпочтительно все CDR из MABp1. CDR можно определить согласно известным способам, таким как описанные в Ofran et al., J. Immunol., 181: 6230, 2008; и Antibody Engineering Volume 2. 2d edition, Konterman and Dubel (eds), Springer, 2010.
[0023] Поскольку В-лимфоциты, которые экспрессируют Ig, специфичный к человеческому IL-1α, в норме встречаются у людей, предпочтительным способом получения mAb в настоящее время является сначала выделение такого В-лимфоцита из субъекта, а затем его иммортализация, так чтобы он мог воспроизводиться в культуре путем клеточного деления в течение длительного времени. Субъектов, не имеющих большого количества естественных В-лимфоцитов, которые экспрессируют Ig, специфичный к человеческому IL-1α, можно иммунизировать одним или несколькими антигенами человеческого IL-1α для повышения числа таких В-лимфоцитов. Человеческие mAb получают путем иммортализации человеческой клетки, секретирующей Ab (например, человеческой плазматической клетки). См., например, патент США №4634664.
[0024] В иллюстративном способе одного или нескольких (например, 5, 10, 25, 50, 100, 1000 или более) субъектов-людей подвергают скринингу на наличие в их крови такого человеческий IL-1α-специфичного Ab. Этих субъектов, у которых экспрессируется требуемое Ab, затем можно использовать в качестве доноров В-лимфоцитов. В одном возможном способе периферическую кровь получают от донора-человека, имеющего В-лимфоциты, которые экспрессируют человеческий IL-1α-специфичное Ab. Затем такие В-лимфоциты выделяют из образца крови, например, путем сортировки клеток (например, сортировки клеток с активацией флуоресценции, "FACS"; или сортировки клеток с помощью магнитных бусин) для отбора В-лимфоцитов, экспрессирующих человеческий IL-1α-специфичный Ig. Затем эти клетки можно иммортализировать путем вирусной трансформации (например, используя EBV) или путем слияния с другой иммортализованной клеткой, такой как клетка миеломы человека, согласно известным методикам. В-лимфоциты в пределах этой популяции, экспрессирующие Ig, специфичный к человеческому IL-1α, затем можно выделить с помощью способов предельных разведений (например, клетки в лунках титрационного микропланшета, которые являются положительнымив отношении Ig, специфичного к человеческому IL-1α, отбирают и субкультивируют, и процесс повторяют до тех пор, пока не будет выделена требуемая клональная линия). См., например, Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103, Academic Press, 1986. Предпочтительными являются клональные линии клеток, которые экспрессируют Ig, характеризующийся по меньшей мере наномолярной или пикомолярной аффинностью связывания с человеческим IL-1α. MAb, секретируемые этими клональными линиями клеток, могут быть очищены из среды культивирования или биологической жидкости (например, асцита) с помощью традиционных процедур очистки Ig, таких как солевое фракционирование, эксклюзионная хроматография, ионообменное разделение и аффинная хроматография.
2
2
[0025] Хотя иммортализованные В-лимфоциты можно применять в культурах in vitro для получения mAb прямым способом, в некоторых случаях для получения mAb может потребоваться применение гетерологичных систем экспрессии. См., например, способы, описанные в заявке на патент США №11/754899. Например, гены, кодирующие mAb, специфичное к человеческому IL-1α, могут быть клонированы и введены в вектор экспрессии (например, вектор экспрессии на основе плазмиды) для экспрессии в гетерологичной клетке-хозяине (например, клетках СНО, клетках COS, клетках миеломы и клетках Е. coli). Поскольку Ig содержат тяжелую (Н) и легкую (L) цепи в конфигурации HL, гены, кодирующие каждую из них, можно выделять отдельно и экспрессировать в разных векторах.
[0026] Химерные mAb (например, "гуманизированные" mAb), которые являются антиген-связывающими молекулами, имеющими различные части, полученные из различных видов животных (например, вариабельный участок мышиного Ig, слитый с константным участком человеческого Ig), хотя в целом и являются менее предпочтительными из-за большей вероятности того, что у субъекта разовьется ответ на Ab, могут применяться в настоящем изобретении. Такие химерные Ab можно получить с помощью способов, известных в данной области техники. См., например, Morrison et al., Proc. Nat’l. Acad. Sci. USA, 81: 6851, 1984; Neuberger et al., Nature, 312: 604, 1984; Takeda et al., Nature, 314: 452, 1984. Аналогично, Ab могут быть гуманизированы с помощью способов, известных в данной области техники. Например, mAb с требуемой специфичностью связывания могут быть гуманизированы различными производителями или как описано в патентах США №№5693762, 5530101 или 5585089.
[0027] MAb, описанные в данном документе, можно подвергнуть созреванию аффинности для повышения или иного изменения их специфичности связывания с помощью известных способов, таких как перетасовка доменов VH и VL (Marks et al. Bio/Technology 10: 779-783, 1992), случайный мутагенез гипервариабельных участков (HVR) и/или остатков каркасных участков (Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci. USA 91: 3809-3813, 1994; Schier et al. Gene 169: 147-155, 1995; Yelton et al. J. Immunol. 155: 1994-2004, 1995; Jackson et al., J. Immunol. 154 (7): 3310-9, 1995; и Hawkins et al, J. Mol. Biol. 226: 889-896, 1992. Варианты аминокислотной последовательности Ab могут быть получены путем внесения соответствующих изменений в нуклеотидную последовательность, кодирующую Ab. Кроме того, могут быть произведены модификации в последовательностях нуклеиновых кислот, кодирующих mAb (например, без изменения аминокислотной последовательности mAb), для повышения выработки mAb в определенных системах экспрессии (например, удаление интронов и/или оптимизация кодонов для данной системы экспрессии). MAb, описанные в данном документе, также могут быть модифицированы путем конъюгации с другой белковой (например, другим mAb) или небелковой молекулой. Например, mAb может быть конъюгировано с водорастворимым полимером, таким как полиэтиленгликоль или углеродная нанотрубка (см., например, Kam et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102: 11600-11605, 2005). См. заявку на патент США с номером 11/754899.
[0028] Предпочтительно, для обеспечения того, чтобы субъекту можно было вводить высокие титры человеческий IL-1α-специфичного mAb с минимальными нежелательными эффектами, композиции mAb по настоящему изобретению являются по меньшей мере на 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,9 и более процентов по весу чистыми (без учета каких-либо вспомогательных веществ). Композиции mAb по настоящему изобретению могут включать только один тип mAb (т.е. полученный от одной клональной линии В-лимфоцитов) или могут включать смесь двух или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более) различных типов mAb.
[0029] Хотя IL-1α-специфичные Ab, описанные выше, являются предпочтительными для применения в настоящем изобретении, в некоторых случаях можно применять другие средства, которые специфически нацеливаются на IL-1α, поскольку их введение приводит к предупреждению или замедлению развития осложнений у субъекта-человека, получившего хирургическое лечение стеноза кровеносного сосуда или ожидающего его получения. Эти другие средства могут включать малые органические молекулы, аптамеры, пептиды и белки, которые специфически связывают IL-1α.
Фармацевтические композиции и способы
[0030] Композиции Ab к IL-1α можно вводить животным или людям в фармацевтически приемлемых носителях (например, стерильном физиологическом растворе), которые выбраны на основе способа и пути введения и общепринятой фармацевтической практики. Перечень фармацевтически приемлемых носителей, а также фармацевтических составов можно найти в Remington Pharmaceutical Sciences, общепринятом руководстве в этой области, и в USP/NF. К композициям могут быть добавлены другие вещества, и могут быть предприняты другие шаги для стабилизации и/или сохранения композиций и/или для содействия их введению субъекту.
[0031] Например, композиции Ab можно лиофилизировать (см. Draber et al., J. Immunol. Methods. 181: 37, 1995; и PCT/US90/01383); растворять в растворе, содержащем ионы натрия и хлора; растворять в растворе, содержащем одно или несколько стабилизирующих средств, таких как альбумин, глюкоза, мальтоза, сахароза, сорбит, полиэтиленгликоль и глицин; фильтровать (например, с использованием фильтра на 0,45 и/или 0,2 микрона); приводить в контакт с бета-пропиолактоном и/или растворять в растворе, содержащем микробицид (например, детергент, органический растворитель и смесь детергента и органического растворителя).
[0032] Композиции Ab можно вводить животным или людям с помощью любой подходящей методики. Как правило, такое введение будет парентеральным (например, внутривенным, подкожным, внутримышечным или внутрибрюшинным введением). Композиции можно также вводить непосредственно в целевой участок, например, путем инъекции. Другие способы доставки, например, липосомальная доставка или диффузия из устройства, пропитанного композицией, известны в данной области техники. Композиция может вводиться путем однократной болюсной инъекции, многократных инъекций или путем непрерывной инфузии (например, внутривенно, или посредством брюшинного диализа).
[0033] Терапевтически эффективное количество представляет собой количество, которое способно приводить к требуемого с медицинской точки зрения результату у обработанного животного или человека. Эффективное количество композиций Ab к IL-1α представляет собой количество, демонстрирующее клиническую эффективность у пациентов, измеренную по улучшению одной или нескольких характеристик, описанных выше. Как хорошо известно в области медицины, дозировка для любого животного или человека зависит от множества факторов, включающих размер субъекта, площадь поверхности тела, возраст, конкретную композицию, подлежащую введению, пол, время и путь введения, общее состояние здоровья и другие лекарственные средства, вводимые одновременно. Предпочтительные дозы варьируют в диапазоне от около 0,2 до 20 (например, 0,05, 0,10, 0,15, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20 или 40) мг/кг массы тела. Дозу можно давать систематически, например, каждый час, ежедневно, два раза в неделю, еженедельно, раз в две недели, раз в три недели или ежемесячно. Предпочтительно дают 2 или больше (например, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или больше) дозы.
ПРИМЕРЫ
[0034] Пример 1: CV-18C3 является стерильным инъекционным жидким составом MABp1 в стабилизирующем изотоническом буфере.
[0035] Пример 2: анализ безопасности, фармакокинетических свойств и предварительной эффективности противовоспалительного терапевтического антитела в снижении риска развития рестеноза у пациентов, подвергающихся чрескожной бедренно-подколенной реваскуляризации, проводимый в рамках фазы II открытого рандомизированного исследования.
[0036] Испытуемых субъектов с сосудистым заболеванием рандомизировали в одну из двух групп. Было запланировано получение обеими группами стандартного лечения (например, стентирования непокрытыми металлическими стентами, баллонной ангиопластики и/или атерэктомии). Тестовую группу также обрабатывали с помощью MABp1 (3,75 мг/кг IV в день 0 и в недели 2, 4 и 6; а затем 200 мг подкожно каждые 4 недели, начиная с месяца 2), тогда как контрольная группа не получала MABp1. У двух групп анализировали отличия в частоте повторного хирургического вмешательства на сосудах. Серьезные нежелательные сердечно-сосудистые явления ("МАСЕ": определяемые как смерть в течение 30 дней, инсульт, инфаркт миокарда/нестабильная стенокардия, экстренная хирургическая реваскуляризация, значительная эмболизация целевой конечности, тромбоз целевого сосуда или ухудшение симптомов хронической ишемии конечностей/рестеноза) также анализировали. Из 43 оцениваемых субъектов 22 находились в тестовой группе и 21 находился в контрольной группе.
[0037] Несмотря на рандомизацию, характеристики исходного уровня у обеих групп не были сбалансированными. У пациентов в группе MABp1 был значительно более высокий риск развития рестеноза по сравнению с контрольной группой (распространенность диабета (59% по сравнению с 24%), более частые процедуры атерэктомии (41% по сравнению с 29%)) и менее значительное улучшение лодыжечно-плечевого индекса (ABI) после процедуры (таблица 1).
[0038] На 15 неделе последующего наблюдения 9% (2 из 22) пациентов, обработанных MABp1, испытывали МАСЕ по сравнению с 24% (5 из 21) в контрольной группе (р=0,24). В этот момент времени вероятность того, что пациенты в контрольной группе будут испытывать МАСЕ, была в 3 раза выше по сравнению с вероятностью для группы MABp1 (отношение шансов 3,1, 95% CI, 0,53-18,3).
[0039] Проходимость также оценивали на основании клинических симптомов заболевания периферических сосудов (хромоты) с подтверждением рестеноза посредством ангиографии. В течение первых 15 недель у двух пациентов (9,5%) в контрольной группе наблюдался рестеноз их целевого сосуда, требовавший повторного вмешательства. В то же время даже при более высоком риске на исходном уровне у всех пациентов, получавших MABp1, сохранялась проходимость сосудов, при этом в течение 15-недельного периода после вмешательства рестеноз не отмечался.
[0040]
Другие варианты осуществления
[0041] Следует понимать, что хотя настоящее изобретение было описано в связи с его подробным описанием, вышеуказанное описание предназначено для иллюстрации, а не для ограничения объема настоящего изобретения, который определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации находятся в рамках объема следующей формулы изобретения.