Возможности иммуномодуляции для повышения устойчивости телят к заражению вирусом лейкоза

Rezul'taty issledovaniy soley mikroelementov v korm-lenii molodnyaka krupnogo rogatogo skota. [Research results for salts of microelements in the feeding of young cattle]. Sostoyanie i perspektivy raz vitiya sko-tovodstva: materialy mezhdunarodnoy nauchno-prak-ticheskoy konferentsii, posvya shchennoy 100-letiyu so dnya rozhdeniya professora N. I. Nusova. [The State and prospects of development of cattle breeding: proceedings of the international scientific-practical conference devoted to the 100 anniversary of Professor N.I. Noso-va]. Krasnodar, 2009. pp. 217-223.

6. Biologicheski aktivnaya dobavka kormovaya «Verva». [Biologically active feed additive "Verva"]. Patent RF no. 2485793. 2013.

7. Instruktsiya po primeneniyu dobavki kormo-voy VERVA dlya povysheniya produktivnosti i sokh-rannosti krupnogo rogatogo skota i tsyplyat-broylerov. [Instructions for use of food additives VERVA to improve productivity and safety of cattle and broiler chickens]. Syktyvkar: OOO «NTP instituta khimii KNTs Uro RAN», 2011. 2 p.

8. Rodin N.V, Avdeenko A.V, Avdeenko VS. Fak-tory, sposobstvuyushchie rasprostraneniyu zabolevaniy vymen i korov. [The factors contributing to the spread of diseases of the udders and the cows]. Sovremennye problemy veterinarii, zootekhnii i biotekhnologii. Me-zhd. nauch. prakt. konf.: sb.trudov. [Modern problems of veterinary, zootechny and biotechnology. Int. scientific. pract. conf.]. Saratov: iz-vo FGBOU VPO Sara-tovskiy GAU, 2013. pp. 208-210

9. Rodin N.V., Avdeenko V.S., Avdeenko A.V. Etiologiya i differentsial'naya diagnostika subklinich-eskogo mastita u korov. [Etiology and differential diagnosis of subtle clinical mastitis in cows]. Zhivotno-vodstvo Rossii v usloviyakh VTO: mater. Mezhd. nauch. prakt. konf. molodykh uchenykh. [Animal husbandry of Russia in conditions of WTO: mater. Int. scientific. pract. conf. young scientists]. Orel: Izd-vo Orel GAU, 2013. pp.344-346.

10. Plokhinskiy N.A. Matematicheskie metody v biologii. [Mathematical methods in biology]. Moscow: MGU, 1978. 226 p.

УДК 619:616-006.446:619:615.37:636.2

Возможности иммуномодуляции для повышения устойчивости телят к заражению вирусом лейкоза

Смирнов Юрий Петрович, доктор вет. наук, главный научный сотрудник, Суворова Ирина Львовна, ведущий инженер-биохимик

ФГБНУ «НИВИ НЗ России», г. Нижний Новгород, Россия

Е-таП:туш2г£@таИ.га

В статье обобщены данные по изучению влияния биологически активных веществ с иммунопротекторны-ми свойствами на параметры иммунитета и неспецифической резистентности, возможности их применения для защиты молодняка крупного рогатого скота от инфицирования вирусом лейкоза. Установлено, что сочетанное применение ронколейкина с анандином, риботаном и фоспренилом по разработанной схеме оказало положительное влияние на иммунобиологические показатели, что выражалось достоверным повышением общего белка сыворотки крови, альбуминов, у-глобулинов, иммуноглобулинов G, А, М, лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови; снижением веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ), циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). При назначении опытным серонегативным телкам ронколейкина в моноварианте в дозе 3000 МЕ/кг живой массы, растворенного в 5 мл 0,9% физраствора, внутримышечно один раз в 30 дней в течение 6 месяцев выявилось 10% зараженных вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) животных с титром антител к антигенам ВЛКРС 1:2. Это на 20% ниже в сравнении с контрольной группой телок-аналогов, где по окончании опытов выявилось 30% инфицированных животных с титром антител к антигенам ВЛКРС 1:8. При сочетанном назначении серонегативным телкам иммуномодулирующих препаратов один раз в 30 дней в течение 6 месяцев по схеме: внутримышечно ронколейкин в дозе 1000 МЕ/кг живой массы, растворенный в 5 мл 0,9% физраствора, анандин в дозе 10 мл/гол., фоспренил в дозе 5 мл/гол., подкожно риботан в дозе 2 мл/гол., по окончании опытов не выявлялось инфицированных ВЛКРС животных. Таким образом, установлено, что сочетанное применение телкам 6-месячного возраста ронколейкина, анандина, риботана и фоспренила по предлагаемой схеме обеспечивает оптимизацию иммунобиологических показателей и способствует повышению их устойчивости к заражению вирусом лейкоза крупного рогатого скота.

Ключевые слова: лейкоз, вирус лейкоза крупного рогатого скота, серологические, гематологические, иммунобиологические показатели, иммуномодуляторы, иммунопрофилактика

Лейкоз крупного рогатого скота в России занимает первое место в инфекционной патологии животных данного вида. Из реагирующих на лейкоз животных выбраковывается не более 5%, что создает условия для дальнейшего распространения заболевания. Низкий фон популяционного иммунитета становится одной

из важнейших составляющих эпизоотического процесса [1].

По современным представлениям факторная (мультифакториальная) концепция причинно-следственных ассоциаций определяет вторичность «специфического» возбудителя в этиологии инфекционных, в особенности хро-

нически протекающих, заболеваний, в частности лейкоза крупного рогатого скота, а потенциальная («условная») патогенность стала общепризнанной. Предлагается учитывать вто-ричность «специфического» возбудителя в этиологии некоторых инфекционных заболеваний по принципу айсберга: очевидное - лишь малая часть действительного. Возникло понятие иннапарантной инфекции, как непроявленной инфекции, характеризующейся отсутствием клинических признаков. При таких инфекциях решающее значение играет не сам вирус, а дефектность иммунной системы, при которой наличие вируса не предопределяет развитие болезни, в особенности лейкоза у крупного рогатого скота, а дефектность иммунной системы при наличии вируса предопределяет. В этой связи для предупреждения развития лей-козного процесса целесообразно применение средств оптимизации и координации иммунных реакций (иммунопротекции), поддержки ослабленного иммунитета, а также возможного торможения ферментаобратной транскрипта-зы, действие которой повышено при лейкозе, и усиления в сыворотке фактора, нейтрализующего РНК-вирусы [2, 3, 4].

Значимость иммунной системы в профилактике злокачественных новообразований наиболее доказательна в отношении опухолей соединительнотканного происхождения, к которым относятся и лейкозы. Полагают, что при лейкозах возможны как иммунодиагностика, так и иммунопрофилактика, что подтверждается эффектами, полученными при применении блока иммуномодулирующих препаратов [5, 6].

Исследователями показано, что эффективность сочетанного применения иммуномо-дуляторов возрастала в 2-2,5 раза по сравнению с эффектом от использования одного препарата [3, 7]. Так, применение телятам иммуномодуля-торов Т-активина в сочетании с В-активином способствовало снижению уровня инфици-рованности ВЛКРС опытных животных в несколько раз [8].

Таким образом, применение иммуномо-дулирующих препаратов для коррекции иммунного статуса и повышения устойчивости животных, особенно молодняка крупного рогатого скота, к вирусным хроническим инфекциям, в том числе и к инфекции ВЛКРС, является актуальной проблемой в разработке эффективных противолейкозных мероприятий.

Цель исследований - изучить влияние комплекса иммуномодулирующих препаратов на иммунобиологические показатели телят и

выяснить возможности иммуномодуляции в повышении их устойчивости к заражению вирусом лейкоза крупного рогатого скота.

Материал и методы. Исследования проведены в лаборатории инфекционных и инвазионных болезней сельскохозяйственных животных ФГБНУ «НИВИ НЗ России» и в условиях неблагополучного по лейкозу КРС базового хозяйства Нижегородской области с уровнем инфицированности ВЛКРС молодняка 10-20%. Были сформированы три группы (две опытные и одна контрольная) клинически здоровых се-ронегативных (РИД-отрицательных) телок черно-пестрой породы 6-месячного возраста по 10 голов в каждой.

В опытах использовали иммуномодули-рующие средства, разрешенные для применения в ветеринарии: ронколейкин, анандин, ри-ботан, фоспренил.

Ронколейкин - цитокин. Активная его субстанция — интерлейкин-2 (ИЛ-2), один из ключевых элементов иммунного ответа [9]. Его используют согласно инструкции по применению ронколейкина в ветеринарии в качестве иммунокорректора (утв. Россельхознадзором 06.06.2012 г.) при лечении онкологических заболеваний, в том числе и при лейкозе у кошек, собак, лошадей, грызунов.

Риботан - комплексный иммуномодули-рующий препарат, состоящий из смеси низкомолекулярных полипептидов (0,5-1 кД) и низкомолекулярных фрагментов РНК. Согласно инструкции по применению риботана в ветеринарии в качестве иммунокорректора (утв. Рос-сельхознадзором 17.10.2013 г.) он оказывает иммуностимулирующее действие на Т- и В-си-стемы иммунитета животных и функциональную активность макрофагов, а также синтез интерферонов, лимфокинов, в том числе ИЛ-2, повышает содержание лизоцима, пропердина, Р-лизина, уровень нормальных антител, предупреждает развитие стрессовых состояний, поддерживает баланс иммунокоррегирующих клеток, нормальный гомеостаз при вирусных, бактериальных и паразитарных болезнях.

Анандин - иммуностимулирующее средство, относится к новым высокоактивным синтетическим органическим соединениям и является индуктором цитокинов (интерферонов, фактора некроза опухолей, интерлейкинов). В инструкции по применению анандина 10% раствора для инъекций при лечении чумы собак (утв. Россельхознадзором 31.07.2013 г.) отмечено, что препарат эффективен для всех классов ДНК и РНК-геномных вирусов, акти-

вирует клеточный и гуморальный иммунный ответ, фагоцитоз, усиливает функциональную активность Т- и В-лимфоцитов, нейтрофилов.

Фоспренил - противовирусный препарат с иммуномодулирующими свойствами. Согласно инструкции по применению фоспренила для стимуляции неспецифической резистентности и лечения вирусных инфекций у животных и птиц (утв. Росельхознадзором 21.03.2011) препарат стимулирует механизмы естественной резистентности, повышает устойчивость организма к инфекциям вирусной природы (па-ра-орто-тога-герпесвирусов, короновирусов и других вирусов). Иммуномодулирующее действие фоспренила проявляется в стимуляции продукции ряда ключевых цитокинов, обеспечивающих сбалансированное формирование ТЪ 1 и ТЪ 2 иммунного ответа при вирусном инфекционном процессе (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-10, ИЛ-12), а также фактора некроза опухолей (ФНО-2).

В литературе отсутствуют данные о применении этих препаратов в комбинации для повышения устойчивости молодняка к заражению ВЛКРС.

Телкам первой опытной группы вводили внутримышечно ронколейкин в дозе 3000 МЕ/кг живой массы, растворенный в 5 мл 0,9% физраствора, один раз в 30 дней в течение 6 месяцев.

Животным второй опытной группы назначали биологически активные препараты в сочетании по схеме: один раз в 30 дней в течение 6 месяцев ронколейкин в дозе 1000 МЕ/кг живой массы, растворенный в 5 мл 0,9% физраствора, анандин в дозе 10 мл/гол., фоспренил в дозе 5 мл/гол. внутримышечно, риботан в дозе 2 мл/гол. подкожно.

Телкам-аналогам контрольной группы вводили физраствор в дозе 5 мл/гол. один раз в 30 дней в течение 6 месяцев

До проведения опыта и по его окончании у всех животных исследовали иммунобиологические показатели, а также проводили исследования на лейкоз серологическим (РИД) и гематологическим методами. Определяли титры противовирусных антител к антигенам ВЛКРС у выявленных серопозитивных телок методом последовательного разведения сывороток крови от 1:2 до последнего разведения, при котором РИД оценивается как отрицательная, выяснялось содержание ВНСММ в плазме крови (уровень эндогенной интоксикации) и криоглобулинов [10, 11]. Определяли циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК), бактерицидную (БАС) и лизоцимную (ЛАС) активность сыворотки крови, общий белок и

белковые фракции, иммуноглобулины классов G, М, А, форменные элементы крови и лейкоцитарная формула по общепринятым методикам [12, 13, 14, 15]. Для определения статистически достоверных различий между средними величинами использовали ^критерий Стъю-дента при Р>0,95; 0,99; 0,999.

Результаты и их обсуждение. Влияние иммуномодулирующих средств на иммунобиологические показатели телок представлено в таблице. Через 6 месяцев после начала опыта у телок первой опытной группы отмечалось достоверное уменьшение числа лейкоцитов на 4,9%, у второй опытной группы этот показатель был достоверно ниже на 17,1% по сравнению с контрольной.

Абсолютное число лимфоцитов у животных первой и второй опытных групп было достоверно ниже на 7,0 и 22,8% соответственно по сравнению с контролем. Процент сегмен-тоядерных нейтрофилов у животных первой и второй опытных групп был достоверно выше на 3,8 и 15,4% соответственно.

Применение телятам 6-месячного возраста ронколейкина, и в особенности ронколейки-на в сочетании с анандином, риботаном и фос-пренилом по разработанным схемам оказало положительное влияние на иммунологическую реактивность, что выражалось достоверным повышением общего белка сыворотки крови, альбуминов, у-глобулинов, иммуноглобулинов G, А, М, лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови, снижением ВНСММ и ЦИК в сравнении с контролем.

По окончании опыта выявлена одна се-ропозитивная телка в первой опытной группе с титром антител к антигенам ВЛКРС 1:2, но показатели крови были в пределах физиологической нормы. Во второй опытной группе не выявлено РИД-положительных животных, тогда как в контрольной группе выявлены три серопозитивные телки с титром антител к антигенам ВЛКРС 1:8 с показателями крови в пределах физиологической нормы.

Выводы. Установлено, что сочетанное применение телкам 6-месячного возраста рон-колейкина, анандина, риботана и фоспренила по предлагаемой схеме обеспечивает оптимизацию иммунобиологических показателей, характеризующуюся достоверным повышением общего белка сыворотки крови, альбуминов, у-глобулинов, иммуноглобулинов G, А, М, ли-зоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови, снижением ВНСММ, ЦИК по сравнению с интактными животными.

Таблица

Влияние иммуномодулирующих средств на иммунобиологические показатели телок и их инфицированность вирусом лейкоза крупного рогатого скота

Показатель Первая опытная группа Вторая опытная группа Контрольная группа

ронколейкин ронколейкин + анандин + риботан + фоспренил физраствор

до опыта после опыта до опыта после опыта до опыта после опыта

РИД

Титр антител - 1:2 - - 0 (0,0) 1:8

Лейкоциты,109/л 7,1±0,5 7,8±0,4* 6,04±0,4 6,8±0,7** 7,5±0,7 8,2±0,3

Лимфоциты, % 67,0±0,8 68,1±0,9 67,6±0,6 65,3±1,3** 69,1±1,4 69,8±0,7

Лимфоциты,абс. 4,7±0,41 5,3±0,4* 4,1±0,35 4,4±0,4* 5,2±0,5 5,7±0,3

Нейтрофилы сегментоядерные % 25±1,0 27±1,5* 25±1,4 30±1,2** 24±1,6 26±0,4

ВНСММ, у.е 13,0±0,6 12,0±0,6* 13,9±0,4 11,4±0,4* 75,6±1,2* 13,6±0,6 14,1±0,4

Общий белок, г/л 67,0±1,0 73,0±1,2* 68,0±0,9 68,4±0,8 71,3±1,2

Альбумины, г/л 31,9±0,5 33,6±0,5* 34,4±0,3 34,6±0,6* 35,4±0,5 33,1±0,3

у-глобулины, г/л 18,4±1,2 21,4±1,2 17,9±1,0 23,1±1,3** 17,0±0,9 21,1±1,4

Иммуноглобулины G, г/л 6,1±0,8 18,0±0,5* 5,8±0,7 18,8±1,0** 6,8±0,5 17,1±1,4

Иммуноглобулины А, г/л 0,5±0,1 0,6±0,1 0,5±0,1 0,7±0,1* 0,8±0,1 0,6±0,2

Иммуноглобулины М, г/л 1,7±0,1 3,1±0,2 1,6±0,1 3,8±0,1* 1,8±0,1 3,4±0,2

ЛАС, % 5,0±0,07 7,0±0,07*** 5,1±0,09 6,9±0,08** 5,2±0,02 5,8±0,02

БАС, % 55,3±1,9 64,2±1,1* 50,4±1,7 65,6±1,5* 51,3±1,0 62,3±1,2

ЦИК, ед.опт.пл. 29,6±1,2 25,6±1,5* 32,0±1,5 26,5±0,2* 30,3±1,3 30,1±1,3

Криоглобулины,

Примечания: достоверно при *Р> 0,95; ** Р>0,99; ***р>0,999 по сравнению с контрольной группой

Установлена возможность повышения устойчивости телок 6-месячного возраста к заражению вирусом лейкоза крупного рогатого скота путем сочетанного применения иммуно-модулирующих средств по предлагаемой схеме.

Список литературы

1. Петров Р.В. Иммунология. М.: Мед., 1987.416 с.

2. Макаров В.В. О проблеме причинности инфекционных заболеваний //Ветеринарный консультант. 2003. № 20. С. 10-15.

3. Земсков В.М. Современная концепция и общие закономерности иммуномодулирующей терапии //Успехи современной биологии. 2014. Т. 134. № 1. С. 26-34.

4. Зюсс Р. Рак: эксперименты и гипотезы. М.: Мир, 1977. 360 с.

5. Матэ Ж. Досье рака: Пер. с франц. М., 1983. 268 с.

6. Александров И.Д. Фармакокоррекция при лейкозе крупного рогатого скота //Межд. вестник

ветеринарии. Тематический выпуск: Эффективные и безопасные ветеринарные лекарственные средства. СПб., 2009. № 2. С. 126-129.

7. Сюрин В.Н. Проблемы вирусов и молекулярные основы рациональной терапии вирусных инфекций // Актуальные проблемы ветеринарной медицины в России: сб. научн. тр., посвященный 100-летию вет. науки в России и 30-летию СО РАС-ХН. Новосибирск, 1998. С. 400-407.

8. Способ профилактики лейкоза крупного рогатого скота: пат. 2188655 Рос. Федерация. № 2000104287/13; заявл. 24.04.2000; опубл. 10.09.2002. Бюл. 25. 8 с.

9. Островский М.В., Моисеев А.Н., Сахаров Е.Д. Ронколейкин: методические рекомендации для ветеринарных врачей. ООО «Биотех» - СПб.: Альто Эго, 2010. 28 с.

10. Малахова М.Я. Методы эндогенной интоксикации. СПб., 1995. 50 с.

11. Способ выявления криоглобулинов: пат. 1569707, МПК А 61310/00. Рос. Федерация. № 4422771/30-15, заявл. 15.03.1988; опубл. 07.06.1990. Бюл. № 21. 8 с.

12. Гриневич Ю.А., Алферов А.Н. Определение иммунных комплексов в крови онкологических больных // Лабораторное дело. 1981. №8. С.493-496.

13. СмирноваО.В., КузьминаТ.А. Фотонефело-метрический способ определения бактерицидной активности сыворотки крови //ЖМЭИ. 1966. №2 4.

С. 8-11.

14. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом // Лабораторное дело. 1968. №1. С.28-30.

15. Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф. Ветеринарная гематология. М.: Колос, 1995. 256 с.

Possibilities of immunomodulation for increasing resistance of calves to BLV-infection Smirnov Yu.P., DSc in Veterinary, chief researcher, Suvorova I.L., chief biochemist

Scientific and Research Veterinary Institute of the Non-Chernozem Zone of the Russian Federation, Nizhny Novgorod, Russia

The article summarizes data on the effect of biologically active substances with immunoprotective properties on immune indices and nonspecific immunity as well possibilities of their use to protect young cattle from infection with the bovine leukemia virus (BLV). It has been established that combined use of ronkoleukin, anandin, ribotan and phosprenil according to the developed pattern had a positive impact on immunobiological indicators that resulted in a significant increase in the level of serum total protein, albumins, y-globulins, immunoglobulins of classes G, M, A, bactericidal and lysozyme activity of blood serum, decrease of substances of low and medium molecular weight (LMMW) and circulating immune complexes (CICs). When ronleukin applying to seronegative heifers in a dose of 3000 IU/kg body weight dissolved in 5 ml of 0.9% saline solution intramuscularly once a month for 6 months we identified 10% BLV-infected animals with a titer of antibodies to BLV-antigens 1:2 which was 20% lower than control group of heifers analogues, where at the end of the experiments we identified 30% of infected animals with a titers of antibodies to BLV-antigens 1: 8. When ronleukin applying to seronegative heifers in a dose of 1000 IU / kg of body weight dissolved in 5 ml of 0.9% saline solution, anandin in a dose of 10 ml / head intramuscularly, phosprenil in a dose of 5 ml / head, ribotan in a dose of 2 ml / head subcutaneously once a month for 6 months at the end of the experiments we did not reveal BLV- infected animals. Thus, it has been shown that the combined use of ronleukin, anandin, ribotan and phosprenyl to six-month-old heifers according to the developed pattern provides normalization of immunobiological indices and promotes an increase in their resistance to BLV- infection.

Key words: leukemia, bovine leukemia virus (BLV), serological, hematological, immunobiological indices, immunomodulators, immunoprophylaxis

References

1. Petrov R.V Immunologija. [Immunology]. Moscow: Med., 1987. 416 p.

2. Makarov V.V. O probleme prichinnosti in-fekcionnyh zabolevanij. [On problem of causality of infectious diseases]. Veterinarnyj konsul'tant. 2003. no. 20. pp. 10-15.

3. Zemskov V.M. Sovremennaja koncepcija i obshhie zakonomernosti immunomodulirujushhej ter-apii. [Modern concept and general patterns of immu-nomodulating therapy]. Uspehi sovremennoj biologii. 2014. Vol. 134. no. 1. pp. 26-34.

4. Zjuss R. Rak: jeksperimenty i gipotezy. [Cancer: experiments and hypotheses]. Moscow: Mir, 1977. 360 p.

5. Matje Zh. Dos'e raka. [Dossier of cancer]. Per. s franc. Moscow., 1983. 268 p.

6. Aleksandrov I.D. Farmakokorrekcija pri lejkoze krupnogo rogatogo skota. [Pharmacocorrection at bovine leukosis]. Mezhd. vestnik veterinarii. Tematicheskij vy-pusk: Jeffektivnye i bezopasnye veterinarnye lekarstvennye sredstva. Saint-Petersburg, 2009. no. 2. pp. 126-129.

7. Sjurin V.N. Problemy virusov i molekuljarnye osnovy racional'noj terapii virusnyh infekcij. [Problems of viruses and molecular basis of rational therapy of viral infections]. Aktual'nye problemy veterinarnoj mediciny v Rossii: Sb. nauchn. tr., posvjashhennyj 100-letiju vet. nauki v Rossii i 30-letiju SO RASHN. [Modern problems of veterinary medicine in Russia: Collection of scientific articles, devoted to 100-anniversary of veterinary science in Russia and 30-anniversary of SB RASkHN]. Novosibirsk, 1998. pp. 400-407.

8. Aleksandrov I.D., Voronin E.S. Sposob profilaktiki lejkoza krupnogo rogatogo skota. [Method for preventing leucosis in cattle]. Patent RF, no.2188655, 2002.

9. Ostrovskij M.V., Moiseev A.N., Saharov E.D. Ronkolejkin: metodicheskie rekomendacii dlja veter-inarnyh vrachej. [Ronleukin: guidelines for veterinarians]. OOO «Bioteh». Saint-Petersburg: Al'to Jego, 2010. 28 p.

10. Malahova M.Ya. Metody jendogennoj intoksikacii. [Methods of endogenic intoxication]. Saint-Petersburg, 1995. 50 p.

11. Panilov N.A., Nejmark T.Yu. Sposob vy-javlenija krioglobulinov. [Method for identification of cryoglobulins]. Patent RF, no. 1569707, 1990.

12. Grinevich Yu.A., Alferov A.N. Opredele-nie immunnykh kompleksov v krovi onkologicheskikh bol'nykh. [Identification of immune complexes in the blood of cancer patients]. Laboratornoe delo. 1981. no. 8. pp.493-496

13. Smirnova O.V, Kuz'mina T.A. Fotonefelo-metricheskiy sposob opredeleniya bakteritsidnoy ak-tivnosti syvorotki krovi. [Photonephelometric method for determining bactericidal activity of blood serum]. ZhMEI. 1966. no. 4. pp. 8-11.

14. Dorofeychuk V.G. Opredelenie aktivnosti lizotsima nefelometricheskim metodom. [Determining lysozyme activity by nephelometric method]. Laboratornoe delo. 1968. no. 1. pp. 28-30.

15. Simonyan G.A., Khisamutdinov F.F. Veter-inarnayagematologiya. [Veterinary hematology]. Moscow: Kolos, 1995. 256 p.