Молекулярная диагностика первичной медиастинальной В-клеточной лимфомы и диффузной В-крупноклеточной лимфомы с первичным вовлечением лимфоузлов средостения

ТОМ 4

НОМЕР 2

201 1

КЛИНИЧЕСКАЯ

ОНКОгематология

ДИАГНОСТИКА, КЛИНИКА И ТЕРАПИЯ ГЕМО Б Л АСТО З О В

Молекулярная диагностика первичной медиастинальной В-клеточной лимфомы и диффузной В-крупноклеточной лимфомы с первичным вовлечением лимфоузлов средостения

Я.К. Мангасарова, А.В. Мисюрин, А.У. Магомедова, С.К. Кравченко,

А.М. Кременецкая, А.И. Воробьев

______________________РЕФЕРАТ_____________________

Несмотря на то что первичная медиастинальная В-клеточная лимфома (ПМВКЛ) и диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДВККЛ) отнесены к В-клеточной крупноклеточной лимфоме по классификации ВОЗ, они имеют разное происхождение и, как следствие, разные иммунологические, молекулярно-генетические характеристики и ответ на терапию. В статье обсуждается проблема дифференциальной диагностики ПМВКЛ и ДВККЛ с первичным вовлечение лимфоузлов средостения и пути ее решения.

Ключевые слова

первичная медиастинальная В-клеточная лимфома (ПМВКЛ), диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДВККЛ) с первичным вовлечением лимфоузлов средостения.

Molecular differential diagnosis distinguishes between primary mediastinal B-cell lymphoma and diffuse large B-cell lymphoma with primary involvement of mediastinal lymph nodes

Ya.K. Mangasarova, A.V. Misyurin, A.U. Magomedova, S.K. Kravchenko, A.M. Kpemenetskay, A.I. Vorobjov

SUMMARY

Primary mediastinal B-cell lymphoma (PMBL) has been recognized as a subtype of diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) based on its distinctive clinical and morphological features but differs from other types of DLBCL due to its peculiar immunophenotype and gene expression profile.

The problems of differential diagnostic of PMBL and diffuse large B-cell lymphoma with primary involvement of mediastinal lymph nodes are presented in this article.

Keywords:

primary mediastinal B-cell lymphoma (PMBL), diffuse large-B cell lymphoma (DLBCL) with primary involvement of mediastinal lymph nodes.

Russian Hematology Scientific Center, Ministry of Health, Moscow Контакты: v.k.jana@mail.ru Принято в печать: 24 мая 2011 г.

ВВЕДЕНИЕ

Лимфомы средостения составляют 20 % всех опухолей с вовлечением медиастинальных структур. В-клеточные лимфопролиферативные заболевания (ЛПЗ) с первичным вовлечением лимфоузлов средостения представлены первичной медиастинальной В-крупноклеточной лимфомой (ПМВКЛ) и диффузной В-крупноклеточной лимфомой (ДВККЛ) [1]. Несмотря на то что ПМВКЛ и ДВККЛ отнесены к крупноклеточной лимфоме по классификации ВОЗ, они имеют разное происхождение и, как следствие, разные иммунологические, молекулярно-генетические характеристики и ответ на терапию. До настоящего времени не существовало методов, позволяющих дифференцировать собственно ПМВКЛ и ДВККЛ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения. Однако появление новых данных о различии профилей экспрессии ряда генов при этих заболеваниях создало предпосылку для использования молекулярных методов с целью дифференциальной диагностики этих форм крупноклеточной лимфомы.

Основываясь на одинаковой рентгенологической (первичное вовлечение

лимфоузлов средостения и смежных структур) и клинической картине (одышка, кашель, синдром сдавления верхней полой вены), сходных иммунологических характеристиках, ДВККЛ с изолированным вовлечением лимфоузлов средостения, как правило, относят к ПМВКЛ, что представляется ошибочным, поскольку терапевтическая тактика в отношение ДВККЛ и ПМВКЛ разная [2—5].

Работ, посвященных лечению ДВККЛ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения, опубликовано мало. Главным образом, это связано с тем, что данной группе пациентов устанавливается диагноз ПМВКЛ с учетом клинической картины (первичное вовлечение медиастинальных лимфоузлов). Прогноз для больных с диагнозом ДВККЛ, II стадией и большой массой опухоли в дебюте заболевания и у пациентов с генерализованной формой ДВККЛ одинаковый. Общая 5-летняя выживаемость у больных как со II стадией заболевания и опухолью более 10 см, так и с III—IV стадией при использовании в лечении СНОР-подобных программ химиотерапии не превышает 50 %, по данным South West Oncology Group. Улучшить

142

ФГБУ ГНЦ МЗ и СР РФ, Москва

Молекулярные различия между первичной медиастинальной и В-крупноклеточной лимфомой средостения

результаты лечения в группе пациентов с диагнозом ДВККЛ и большой массой опухоли в дебюте заболевания позволяет применение высокодозной полихимиотерапии [6].

В отличие от ДВККЛ, использование СНОР-подобных программ химиотерапии у пациентов с диагнозом ПМВКЛ позволяет достичь общей 5-летней выживаемости 70 % [5]. Точная диагностика ПМВКЛ и ДВККЛ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения и использование дифференцированной терапии, вероятно, позволит улучшить имеющиеся результаты.

Анатомическая локализация, иммунофенотипические и биологические признаки свидетельствуют о происхождении ПМВКЛ из В-лимфоцитов тимуса, которые располагаются в его мозговом слое вокруг телец Гассаля. Предполагается, что первично ПМВКЛ возникает в тимусе с последующим вовлечением лимфоузлов передневерхнего средостения [7]. ДВККЛ происходит из В-клеток лимфоузлов зародышевого центра (GC — Germinal Center) или активированных В-клеток (ABC — Activated B-Cell) периферической крови [8].

Гистологической особенностью ПМВКЛ служит диффузный рост опухолевых клеток среди тонких прослоек и тяжей фиброзной ткани [9]. Кроме того, при ПМВКЛ характерно наличие в 25 % случаев островков эпителия тимуса на фоне основного субстрата опухоли, что также отражает происхождение опухоли из В-клеток тимуса [10]. При ПМВКЛ в отличие от ДВККЛ кроме экспрессии основных В-клеточных маркеров (CD20, CD79a) также наблюдается экспрессия CD23 в 75 % случаев и отсутствует реакция с антигенами CD10, CD21 [9, 11, 12]. Важная иммуногистохимическая характеристика ПМВКЛ — отсутствие экспрессии поверхностного иммуноглобулина класса М ^^М) на опухолевых клетках при наличие экспрессии CD79a и транскрипционных факторов Oct-2, BOB1, Pu.1 [13, 14]. Остается неясным генез нарушения синтеза sIg в опухолевых клетках ПМВКЛ. При ДВККЛ sIg экспрессируется в 50—75 % случаев, что связано с уровнем дифференцировки опухолевых клеток [1]. Иммунофенотип опухолевых клеток ПМВКЛ: CD20+, CD79a+, CD23 +/-, CD 10-, sIg—, а ДВККЛ: CD20+, CD79a+, CD23-, CD10 +/—, sIg+/— (табл. 1). Дифференциально-диагностическими маркерами ДВККЛ и ПМВКЛ служат CD23 и sIg, но их информативность недостаточна, формируется группа пациентов в пределах 25—50 % случаев В-клеточных лимфом с первичным поражением лимфоузлов средостения, диагностика которых затруднена, что требует дополнительных исследований для точной верификации диагноза.

Анализ широкой панели генов позволил выделить несколько подтипов ДВККЛ: ABC-тип, GC-тип и ПМВКЛ [4,

Таблица 1. Иммуногистохимические критерии дифференциального диагноза ДВККЛ и ПМВКЛ

ДВККЛ ПМВКЛ

CD45 + +

CD79« + +

CD20 + +

CD23 -/+ +/-

CD30 -/+ +/-

Bcl2 +/- -/+

Bcl6 +/- -/+

sIgM +/- -

CD21 - -

CD10 -/+ -

MUM1 +/- +

«+» — положительная реакция более чем в 90 % случаев; «+/-» — положительная реакция в большинстве случаев; «-/+» — положительная реакция менее чем в 50 % случаев; «-» — отрицательная реакция в 100 % случаев.

8, 15]. Для ДВККЛ, родоначальником которой считаются В-клетки GC-центра, наиболее часто характерны реци-прокные транслокации с участием 3q27 локус BCL6. Гиперэкспрессия BCL6 блокирует созревание В-лимфоцитов на уровне GC-центра с высоким темпом деления. Ключевое нарушение в опухолевых клетках ДВККЛ ABC-типа заключается в активации NFkB (Nuclear Factor-«B). ПМВКЛ отличается по профилю экспрессии генов как от GC-типа, так и от активированного варианта ДВККЛ. При ПМВКЛ в отличие от ДВККЛ характерно снижение экспрессии генов — участников передачи сигнала от В-клеточного рецептора [3]. Кроме того, при ПМВКЛ определяется высокий уровень цитоплазматического онкопротеина TRAF1 (TNF Receptor Associated Factor 1), приводящего к активации NFkB и, следовательно, к увеличению выживаемости Ig-негативных опухолевых клеток [16]. В отличие от всех ДВККЛ опухолевые клетки ПМВКЛ так же, как и нормальные тимические медуллярные В-клетки, экспрессируют мембранный белок MAL (Lymphocyte Maturation Associated protein), который характерен только для линии Т-клеток. Белок MAL кодируется геном MAL (22q13); это мембранный белок, связанный с аппаратом Гольджи, он участвует в контроле за проницаемостью гликолипидных молекул [17]. Кроме того, ПМВКЛ характеризуется уникальным профилем экспрессии генов цитокиновых сигнальных путей, нехарактерным для ДВККЛ [3]. Опухолевые клетки ПМВКЛ имеют хромосомные аберрации с участием хромосомы 9 (9p24). Данный регион содержит гены, кодирующие тирозинкиназу JAK2 (Janus Kinase 2), а также PDL1 (Programmed Death Ligand 1) и PDL2 (Programmed Death Ligand 2). Перестройка в хромосоме 9 (локус р24) влечет за собой увеличение копий JAK2, что приводит к активации латентных цитоплазматических транскрипционных факторов STAT-семейства (Signal Transducer and Activator of Transcription), вследствие чего изменяется рост и дифференцировка опухолевых клеток [18—20]. При ПМВКЛ выявляется повышенная экспрессия генов PDL1 и PDL2, которые связываются с рецептором PD-1, находящимся на поверхности клеток, что приводит к подавлению Т-клеточного ответа и росту опухолевого клона в тимусе [21,22].

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Определить уровень экспрессии генов JAK2, MAL, PDL1, PDL2, TRAF1 при ПМВКЛ и ДВККЛ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения, выявить значимые молекулярные маркеры для дифференциальной диагностики указанных заболеваний.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В исследование были включены пациенты, находившиеся под наблюдением в ГНЦ. Обследовано 30 пациентов в возрасте 18—72 года (медиана возраста 32 года) с диагнозом ПМВКЛ. Для формирования групп контроля были получены лимфоциты крови от 6 доноров в возрасте 19—50 лет (медиана 27 лет) и биоптат лимфоузла 12 больных в возрасте 20—68 лет (медиана 45 лет) с установленным диагнозом генерализованной ДВККЛ (без вовлечения медиастинальных лимфоузлов). Всем пациентам диагноз устанавливали в соответствие с критериями ВОЗ.

У всех пациентов, а также в контрольных группах определялся уровень экспрессии мРНК генов JAK2, MAL, PDL1, PDL2, TRAF1. Уровень экспрессии генов определяли методом полимеразной цепной реакции

www.medprint.ru

143

Я.К. Мангасарова и др.

А Б В

Рис. 1. Уровень экспрессии генов:

А — в группе пациентов с ПМВКЛ

(ПЦР) в реальном времени. Особенность данного исследования, отличающая его от обычной ПЦР, в возможности количественного измерения ПЦР-продукта во время экспоненциальной фазы процесса амплификации. При гистологическом исследовании исходного материала оценивали содержание опухолевых клеток в образцах (присутствовали у всех больных).

ПЦР в реальном времени. ПЦР в реальном времени проводили с помощью прибора АВ 7500 (Applied Biosystems) и технологии TaqMan. TaqMan ПЦР основана на 5'-экзонуклеазной активности полимеразы. ДНК-зонд, имеющий флюоресцентный краситель на 5'-конце и гаситель флюоресценции на 3'-конце, комплементарен участку амплифицируемой области. Гаситель поглощает испускаемое флюоресцентной меткой излучение, а фосфатная группа в 3'-положении блокирует полимеразу. При отжиге зонд количественно связывается с комплементарным участком ДНК. Во время стадии элонгации полимераза синтезирует комплементарную цепь ДНК и, дойдя до участка, гибридизованного с зондом, начинает расщеплять его за счет 5'-экзонуклеазной активности. В результате флюоресцентная метка отделяется от гасителя, и ее свечение может быть определено. Увеличение флюоресценции будет прямо пропорционально количеству наработанного ПЦР-продукта. Количество ПЦР-продукта увеличивается с каждым циклом реакции вдвое. Поэтому зависимость количества ПЦР-продукта от количества циклов выражается экспонентой.

Количество копий каждого гена определялось относительно стандартной калибровочной кривой.

Для проведения амплификации были синтезированы оригинальные пары праймеров с местами посадки в разных экзонах генов JAK2, MAL, PDL1, PDL2, TRAF1.

Во всех зондах содержался краситель FAM490.

Условия для проведения циклов количественной реакции ПЦР были следующие: 95 °С —10 мин, затем 50 циклов: 95 °С — 15 с, 60 °С — 60 с.

Для каждого образца ПЦР-реакция проводилась одновременно в трех лунках (трипликаты). Соотношение матрицы и реагентов было следующим: 5 мкл кДНК и 20 мкл реакционной смеси. В качестве контрольного гена использовался ABL.

РЕЗУЛЬТАТЫ

У пациентов с диагнозом ПМВКЛ выявлялась гиперэкспрессия гена JAK2 в 17 (57 %) из 30 случаев, гена MAL — в 10 (33 %) из 30, PDL1 — в 2 (7 %) из 30, PDL2 — в 7 (23 %) из 30, TRAF1 — в 14 (47 %) из 25. В контрольной группе у пациентов с диагнозом ДВККЛ (без вовлечения медиастинальных лимфоузлов) гиперэкспрессия гена JAK2 определялась только в 1 (8,3 %) из 12 случаев, TRAF1 — в 2 (16 %) из 12, гиперэкспрессия генов MAL, PDL1, PDL2 не выявлялась. При анализе группы пациентов с диагнозом ПМВКЛ у 12 из 30 больных обнаружено совпадение молекулярных маркеров с контрольной группой пациентов с ДВККЛ (без вовлечения медиастинальных лимфоузлов), т. е. гиперэкспрессия генов JAK2, MAL, PDL1, PDL2, TRAF1 отсутствовала. У 18 из 30 пациентов определялась повышенная экспрессия указанных выше генов (рис. 1), что позволило подтвердить диагноз ПМВКЛ. В 14 (78 %) из 18 случаев выявлялась гиперэкспрессия гена TRAF1, в 2 (11 %) из 18 — PDL1, в 7 (38 %) из 18 — PDL2, в 17 (94 %) из 18 — JAK2, в 10 (55,5 %) из 18 — MAL. Таким образом, у 12 из 30 пациентов диагноз ПМВКЛ был пересмотрен в пользу ДВККЛ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения.

В табл. 2 представлена медиана уровня экспрессии исследуемых генов. Обращает на себя внимание, что уровень экспрессии генов в группе пациентов с ПМВКЛ в несколько раз превышает таковой в контрольной группе ДВККЛ без вовлечения лимфоузлов средостения и ДВККЛ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения. При сравнении групп ПМВКЛ и ДВККЛ с первичным вовлечением медиастинальных лимфоузлов по критерию Манна—Уитни выявлены значимые различия в уровне экспрессии генов JAK2, MAL, PDL2, TRAF1 (р < 0,05).

ОБСУЖДЕНИЕ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ПМВКЛ — один из вариантов гетерогенной группы ДВККЛ, но благодаря клиническим, морфологическим и молекулярно-биологическим особенностям была выделена как самостоятельный вариант В-клеточных опухолей в REAL-классификации 1994 г. и затем в ВОЗ классификации 2001 и 2008 гг. [1]. ПМВКЛ в отличие от ДВККЛ

Таблица 2. Медиана экспрессии генов

Диагноз TRAF1, % PDL1, % PDL2, % JAK2, % MAL, %

ДВККЛ без вовлечения лимфоузлов средостения

ДВККЛ с первичным вовлечением медиастинальных лимфоузлов

ПМВКЛ

144

Клиническая онкогематология

Молекулярные различия между первичной медиастинальной и В-крупноклеточной лимфомой средостения

происходит из В-клеток тимуса. Это подтверждается наличием островков тимуса в субстрате опухоли и иммунофенотипом В-клеток тимуса CD79a+, sIg—, CD23+/—, CD 10— [9, 11]. Дифференциальная диагностика ДВККЛ с изолированным вовлечением лимфоузлов средостения и ПМВКЛ сложна. При гистологическом исследовании ПМВКЛ ткань тимуса присутствует только в 25 % случаев, что соответственно не может быть основным критерием диагностики. По данным иммуногистохимического исследования опухолевые клетки ПМВКЛ имеют определенный иммунофенотип, однако в дифференциальной диагностике с ДВККЛ будет 25—50 % случаев, когда опухолевые клетки ДВККЛ не экспрессируют sIg. Таким образом, данных иммунологического и морфологического исследований бывает недостаточно для точной верификации диагноза. A. Rosenwald и соавт. опубликовали результаты исследования, в котором на основании молекулярного анализа показано, что В-клеточные ЛПЗ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения в 65 % случаев представлены ПМВКЛ, в 35 % случаев — ДВККЛ. При ПМВКЛ в отличие от ДВККЛ характерно снижение экспрессии генов — участников передачи сигнала от В-клеточного рецептора и повышение экспрессия генов цитокиновых путей [22]. Таким образом, молекулярная диагностика подтверждает гетерогенность В-клеточных лимфом с первичным вовлечением медиастинальных лимфоузлов и позволяет провести дифференциальную диагностику в группе пациентов с диагнозом ПМВКЛ и ДВККЛ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения [18].

По данным нашего исследования, диагноз ПМВКЛ был подтвержден в 60 % случаев и пересмотрен в пользу ДВККЛ в 40 % случаев. Гены JAK2, MAL, PDL2, TRAF1 представляются специфическими и чувствительными маркерами при проведении дифференциальной диагностики ДВККЛ с первичным вовлечением лимфоузлов средостения и ПМВКЛ. Ген PDL1 обладает наименьшей информативностью относительно других исследованных нами генов. Учитывая, что в патогенезе ПМВКЛ участвует несколько ключевых нарушений, отличающих этот вариант лимфомы от ДВККЛ, мы полагаем, что для корректной верификации диагноза ПМВКЛ необходима констатация гиперэкспрессии не менее двух указанных выше генов. Использование такого строгого критерия позволит избежать диагностических ошибок, связанных с возможностью активации отдельных генов у некоторых из больных ДВККЛ. Так, в рассмотренной нами контрольной группе больных ДВККЛ (без вовлечения медиастинальных лимфоузлов) гиперэкспрессия гена JAK2 определялась у 1 (8,3 %) из 12 пациентов, а гиперэкспрессия TRAF1 — у 2 (16 %) из 12.

Таким образом, уровень экспрессии генов JAK2, MAL, PDL2, TRAF1 отражает разный патогенез и происхождение ДВККЛ и ПМВКЛ, благодаря чему использование данных маркеров позволяет провести дифференциальную диагностику между этими заболеваниями.

ЛИТЕРАТУРА

1. Swerdlow S.H., Campo E., Harris N.L. et al. Diffuse large B-cell lymphoma, not otherwise specified. WHO Classification of Hematopoetic and Lymphoid Tissues. Lyon: IARC, 2008: 233-7.

2. Coiffier B. Diffuse large cell lymphoma. Curr. Opin. Oncol. 2001; 13: 325-34.

3. Savage K.J., Monti S., Kutok J.L. et al. The molecular signature of mediastinal large B-cell lymphoma differs from that of other diffuse large B-cell lymphomas and shares features with classical Hodgkin lymphoma. Blood 2003; 102: 3871-9.

4. Monti S., Savage K., Kutok J. Molecular profiling of diffuse large B-cell lymphoma identifies robust subtypes including one characterized by host inflammatory response. Blood 2005; 105: 1851-61.

5. Zinzani P.L., Martelli M., Bertini M. et al. Induction chemotherapy strategies for primary mediastinal large B-cell lymphoma with sclerosis: a retrospective multinational study on 426 previously untreated patients. Haematologica 2002; 87: 1258-64.

6. Магомедова А.У., Кравченко С.К., Кременецкая А.М. и др. Модифицированная программа NHL-BFM-90 в лечении больных диффузной В-крупноклеточной лимфосаркомой. Тер. арх. 2006; 10: 44-7.

7. Isaacson P.G., Norton A, Addis B. The human thymus contains a novel population of B-lymphocytes. Lancet 1987; 2: 1488-91.

8. Bea S., Colomo L., Lopez-Guillermo А. et al. Clinicopathologic significance and prognostic value of chromosomal imbalances in diffuse large B-cell lymphomas. J. Clin. Oncol. 2004; 22(17): 3498-506.

9. Ковригина А.М., Пробатова Н.А. Лимфома Ходжкина и крупноклеточные лимфомы. М.: МИА, 2007: 108-24.

10. Cazals-Hatem D., Lepage E., Brice P. et al. Primary mediastinal large B-cell lymphoma. A clinicopathologic study of 141 cases compared with 916 nonmediastinal large B-cell lymphomas, a GELA (“Groupe d’Etudedes Lymphomas de l’Adulte”) study. Am. J. Surg. Pathol. 1996; 20: 877-88.

11. Savage K.J. Primary mediastinal large B-cell lymphoma. Oncologist 2006; 11: 488-95.

12. Bertran H.C., Check I.J., Milano M.A. Immunophenotyping large B-cell lymphomas flow cytometric pitfalls and pathologic correlation. Am. J. Clin. Pathol. 2001; 116: 191-203.

13. Loddeenkemper C., Anagnostopoulos I., Hummel M. et al. Differential Emu enhancer activity expression of BOB.1/OBF.1, Oct2, PU.1, and immunoglobulin in reactive B-cell populations, B-cell non-Hodgkin lymphomas, and Hodgkin lymphomas. J. Pathol. 2004; 202: 60-9.

14. Leithauser F., Bauerle M., Huynh M.Q. et al. Isotype-switched immunoglobulin genes with a high load of somatic hypermutation and lack of ongoing mutation activity are prelevant in mediastinal B-cell lymphoma. Blood 2001; 98: 2762-70.

15. Rosenwald A, Wright G., Chan W. et al. The use of molecular profiling to predict survival after chemotherapy for diffuse B-cell lymphoma. N. Engl. J. Med. 2002; 346: 1937-47.

16. Rodig SJ., Savage K.J., LaCasce A.S. et al. Expression of TRAF1 and nuclear c-Rel distinguishes primary mediastinal large cell lymphoma from other types of diffuse large B-cell lymphoma. Am. J. Surg. Pathol. 2007; 31: 106-12.

17. Copie-Bergman С., Gaulard P., Maouche-Chretien L. et al. The MAL gene is expressed in primary mediastinal large B-cell lymphoma. Blood 2009; 94(10): 3567-75.

18. Melzner I., Bucur A.J., Brderlein S. et al. Biallelic mutation of SOCS-1 impairs JAK2 degradation and sustains phospho-JAK2 action in the MedB-1 mediastinal lymphoma line. Blood 2005; 105: 2535-42.

19. Ding B.B., Yu J.J., Yu R.Y. et al. Constitutively activated STAT3 promotes cell proliferation and survival in the activated B-cell subtype of diffuse large B-cell lymphomas. Blood 2008; 111: 1515-23.

20. Monti S., Savage K.J., Kutok J.L. et al. Molecular profiling of diffuse large B-cell lymphoma identifies robust subtypes including one characterized by host inflammatory response. Blood 2005; 105: 1851-61.

21. Shipp M.A., Ross K.N., Tamayo P. et al. Diffuse large B-cell lymphoma outcome prediction by gene-expression profiling and supervised machine learning. Nat. Med. 2002; 8: 68-74.

22. Rosenwald A, Wright G., Leroy K. et al. Molecular diagnosis of primary mediastinal B cell lymphoma identifies a clinically favorable subgroup of diffuse large B cell lymphoma related to Hodgkin lymphoma. J. Exp. Med. 2003; 198: 851-62.

23. Lenz G., Wright G., Dave S.S. et al. Stromal gene signatures in large-B-cell lymphomas. N. Engl. J. Med. 2008; 359: 2313-23.

www.medprint.ru

145