ФЕРМЕНТ ГИАЛУРОНАНЛИАЗА, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ, ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ГИАЛУРОНАНА

1. Способ получения гиалуронанлиазы, отличающийся тем, что ее получают посредством глубинного культивирования гриба, принадлежащего к роду Fistulina, при температуре от 20 до 30°С в течение от 5 до 11 дней.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что грибом, принадлежащим к роду Fistulina, является вид Fistulina hepatica.
3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что культуральная среда содержит источник углерода, источник азота и неорганические соли.
2
4
2
4
2
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что источником углерода является сахароза, источником азота является дрожжевой аутолизат, а неорганическими солями являются NaHPO·12 НO и MgSO·7HO.
5. Способ по любому из пп. 1, 2 или 4, отличающийся тем, что фермент выделяют из культуральной среды после удаления мицелия и/или посредством экстракции из мицелия после разрушения мицелия.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что фермент по меньшей мере один раз дополнительно промывают при помощи буфера с рН 7,0.
7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что фермент дополнительно очищают посредством хроматографического разделения.
8. Гиалуронанлиаза, получаемая посредством способа по п. 1 путем глубинного культивирования в культуральной среде гриба, принадлежащего к роду Fistulina.
9. Гиалуронанлиаза по п. 8, отличающаяся тем, что грибом рода Fistulina является Fistulina hepatica.
10. Гиалуронанлиаза по п. 8 или 9, отличающаяся тем, что она обладает оптимальной активностью при рН 4,0 и при температуре 20°С.
11. Применение фермента гиалуронанлиаза, полученного с помощью способа по п. 1 путем культивирования гриба, принадлежащего роду Fistulina, для разложения гиалуронана или его производного.
12. Применение фермента гиалуронанлиаза, полученного с помощью способа по п. 1 путем культивирования гриба, принадлежащего роду Fistulina, для получения фармацевтических или косметических композиций в качестве вещества, способствующего проникновению веществ в ткани.
13. Способ получения низкомолекулярного гиалуронана, отличающийся тем, что готовят 0,1-10 вес.% водного раствора высокомолекулярной гиалуроновой кислоты, ее соли или ее производного с рН 3,5-8,0, добавляют водный раствор фермента гиалуронанлиаза, полученного способом по п. 1 путем культивирования гриба, принадлежащего роду Fistulina, и позволяют протекать реакции при температуре 5-50°С в течение от 1 мин до 30 дней.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что реакции позволяют протекать при рН 4,0 и температуре 20°С в течение 24-168 ч.
15. Способ по п. 13 или 14, отличающийся тем, что высокомолекулярная гиалуроновая кислота, ее соль или ее производное имеет молекулярную массу в пределах 1,5-2,2 МДа.
16. Способ по п. 13 или 14, отличающийся тем, что солью гиалуроновой кислоты является натриевая или калиевая соль, а производным гиалуронана является ацилированный гиалуронан.
4
2
4
17. Способ по п. 13 или 14, отличающийся тем, что к 0,1-10%-ному раствору высокомолекулярной гиалуроновой кислоты, ее соли или ее производного и фермента гиалуронанлиаза добавляют 5-20 мМ соли, выбранной из группы, включающей MgSO, МnСl, KСl, CuSO.