УЛУЧШЕННЫЕ СПОСОБЫ ИММУНОАНАЛИЗА

1. Способ определения профиля продукции антитела в тестируемом образце, содержащем жидкость организма субъекта-млекопитающего, где указанное антитело представляет собой биологический маркер болезненного состояния или предрасположенности к заболеванию, где способ включает:
(a) приведение указанного тестируемого образца в контакт со множеством различных количеств антигена, специфичного в отношении указанного антитела,
(b) выявление величины специфического связывания указанного антитела и указанного антигена, и
(c) построение графика или вычисление кривой зависимости величины указанного специфического связывания от количества антигена для каждого количества антигена, используемого на стадии (а), для построения профиля продукции антитела у указанного субъекта или до возникновения заболевания, или на протяжении хода заболевания.
2. Способ по п.1, где способ повторяют для построения профиля продукции антитела.
3. Способ по п.1, где антитело представляет собой аутоантитело.
4. Способ по п.3, где антитело представляет собой аутоантитело, специфичное в отношении белка-маркера опухоли.
5. Способ по п.4, где антиген представляет собой белок-маркер опухоли или его антигенный фрагмент или эпитоп.
6. Способ по п.5, где белок-маркер опухоли представляет собой MUC1, MUC16, c-myc, EGRF, p53, ras, BRCA1, BRCA2, АРС, HER2, PSA, СЕД, СА19.9, NY-ESO-1, 4-5, CAGE, PSMA, PSCA, EpCam, цитокератин, рековерин, калликреин, аннексин, AFP, GRP78, СА125, маммоглобин или raf.
7. Способ по п.3, где антитело представляет собой аутоантитело, характерное для аутоиммунного заболевания или связанное с аутоиммунным заболеванием.
8. Способ по п.3, где антитело представляет собой аутоантитело, характерное для заболевания, приводящего к недостаточности или отказу органа, или связанное с таким заболеванием.
9. Способ по п.8, где заболевание представляет собой заболевание почек или печени.
10. Способ по п.1, где антитело направлено против эпитопа, присутствующего на ткани, трансплантированной субъекту-млекопитающему.
11. Способ по любому из пп.1-10, где антиген представляет собой природный белок или полипептид, рекомбинантный белок или полинуклеотид, синтетический белок или полипептид, пептидомиметик, полисахари.д или нуклеиновую кислоту.
12. Применение способа по любому из пп.4-6 в диагностике, прогнозировании или мониторинге рака.
13. Применение способа по любому из пп.4-6 для:
(а) скрининга популяции людей с отсутствием симптомов для выявления тех субъектов, которые имеют повышенный риск развития рака, где образцы, подлежащие тестированию с использованием указанного способа, представляют собой образцы жидкости организма, полученные у субъектов, и где субъектов, имеющих повышенный уровень аутоантител в сравнении с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень для того субъекта, определяют как имеющих риск развития рака; или
(b) выявления раннего неопластического или раннего канцерогенного изменения у человека с отсутствием симптомов, где образец, подлежащий тестированию с использованием указанного способа, представляет собой образец жидкости организма, полученный у субъекта, и где наличие повышенного уровня антител в сравнении с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень для того субъекта, рассматривают как указание на раннее неопластическое или раннее канцерогенное изменение у субъекта; или
(c) скрининга популяции людей с отсутствием симптомов для выявления тех субъектов, у которых развился рак, где образцы, подлежащие тестированию с использованием указанного способа, представляют собой образцы жидкости организма, полученные у субъектов, и где субъектов, имеющих повышенный уровень аутоантител в сравнении с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень для того субъекта, диагностируют как имеющих рак; или
(d) тестирования популяции людей с симптомами для выявления тех субъектов, у которых развился рак, где образцы, подлежащие тестированию с использованием указанного способа, представляют собой образцы жидкости организма, полученные у субъектов, и где субъектов, имеющих повышенный уровень аутоантител в сравнении с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень для того субъекта, диагностируют как имеющих рак; или
(e) мониторинга развития рака или другого неопластического заболевания у пациента, где образец, подлежащий тестированию с использованием указанного способа, представляет собой образец жидкости организма, полученный у пациента-человека, и где уровень аутоантител, имеющий место у указанного пациента, сравнивают с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень, установленный для того пациента;
(f) оценки прогноза для пациента, у которого диагностировали рак;
(g) предсказания реакции ракового пациента на противораковое лечение, такое как лечение, направленное против фактора роста или передачи сигналов, лучевая терапия, эндокринная терапия, лечение человеческими антителами, химиотерапия или вакцинация;
(h) мониторинга реакции ракового пациента на противораковое лечение, такое как лечение, направленное против фактора роста или передачи сигналов, лучевая терапия, эндокринная терапия, лечение человеческими антителами, химиотерапия или вакцинация; или
(i) выбора противораковой вакцины для применения в отношении ракового пациента.
14. Применение по п.12 или 13, где антиген представляет собой природный белок или полипептид, рекомбинантный белок или полинуклеотид, синтетический белок или полипептид, пептидомиметик, полисахарид или нуклеиновую кислоту.
15. Способ определения профиля продукции двух или более антител в тестируемом образце, содержащем жидкость организма субъекта-млекопитающего, где, по меньшей мере, одно из указанных антител представляет собой биологический маркер болезненного состояния или предрасположенности к заболеванию, где способ включает:
(a) приведение указанного тестируемого образца в контакт с двумя или более наборами антигенов, где каждый из указанных наборов антигенов специфичен в отношении одного из указанных антител, подлежащих выявлению в тестируемом образце и где каждый набор антигенов содержит множество различных количеств указанного антигена,
(b) выявление величины специфического связывания указанных антител и указанных антигенов, и
(c) построение графика или вычисление кривой зависимости величины указанного специфического связывания от количества антигена для каждого набора антигенов, используемого на стадии (а), для построения профиля продукции антитела у пациента или до возникновения заболевания, или на протяжении хода заболевания.
16. Способ по п.15, где определение профиля продукции каждого антитела определяют на основе всех значений величины специфического связывания для всех концентраций антигена, тестируемых для того антитела.
17. Способ по п.15 или 16, где, по меньшей мере, одно или каждое из указанных антител представляет собой аутоантитело, специфичное в отношении белка-маркера опухоли.
18. Способ по п.17, где каждый антиген представляет собой белок-маркер опухоли или его антигенный фрагмент или эпитоп.
19. Способ по п.18, где каждый из указанных белков-маркеров опухоли выбран из группы, состоящей из MUC1, MUC16, c-myc, EGRF, р53, ras, BRCA1, BRCA2, АРС, HER2, PSA, СЕА, СА19.9, NY-ESO-1, 4-5, CAGE, PSMA, PSCA, EpCam, цитокератин, рековерин, калликреин, аннексии, AFP, GRP78, СА125, маммоглобин и raf.
20. Применение способа по любому из пп.17-19 в диагностике, прогнозировании или мониторинге рака.
21. Применение способа по любому из пп.17-19 для:
(a) скрининга популяции людей с отсутствием симптомов для выявления тех субъектов, которые имеют повышенный риск развития рака, где образцы, подлежащие тестированию с использованием указанного способа, представляют собой образцы жидкости организма, полученные у субъектов, и где субъектов, имеющих повышенный уровень аутоантител в сравнении с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень для того субъекта, определяют как имеющих риск развития рака; или
(b) выявления раннего неопластического или раннего канцерогенного изменения у человека с отсутствием симптомов, где образец, подлежащий тестированию с использованием указанного способа, представляет собой образец жидкости организма, полученный у субъекта, и где наличие повышенного уровня антител в сравнении с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень для того субъекта, рассматривают как указание на раннее неопластическое или раннее канцерогенное изменение у субъекта; или
(с) скрининга популяции людей с отсутствием симптомов для выявления тех субъектов, у которых развился рак, где образцы, подлежащие тестированию с использованием указанного способа, представляют собой образцы жидкости организма, полученные у субъектов, и где субъектов, имеющих повышенный уровень аутоантител в сравнении с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень для того субъекта, диагностируют как имеющих рак; или
(d) тестирования популяции людей с симптомами для выявления тех субъектов, у которых развился рак, где образцы, подлежащие тестированию с использованием указанного способа, представляют собой образцы жидкости организма, полученные у субъектов, и где субъектов, имеющих повышенный уровень аутоантител в сравнении с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень для того субъекта, диагностируют как имеющих рак; или
(е) мониторинга развития рака или другого неопластического заболевания у пациента, где образец, подлежащий тестированию с использованием указанного способа, представляет собой образец жидкости организма, полученный у пациента-человека, и где уровень аутоантител, имеющий место у указанного пациента, сравнивают с нормальным контролем, который представляет или уровень антител, имеющий место у контрольных субъектов, или исходный уровень, установленный для того пациента;
(f) оценки прогноза для пациента, у которого диагностировали рак;
(g) предсказания реакции ракового пациента на противораковое лечение, такое как лечение, направленное против фактора роста или передачи сигналов, лучевая терапия, эндокринная терапия, лечение человеческими антителами, химиотерапия или вакцинация;
(h) мониторинга реакции ракового пациента на противораковое лечение, такое как лечение, направленное против фактора роста или передачи сигналов, лучевая терапия, эндокринная терапия, лечение человеческими антителами, химиотерапия или вакцинация; или
(i) выбора противораковой вакцины для применения в отношении ракового пациента.
22. Способ определения профиля продукции антитела в тестируемом образце, содержащем жидкость организма субъекта-млекопитающего, где указанное антитело направлено на чужеродное вещество, введенное в указанного субъекта-млекопитающего, где способ включает
(a) приведение указанного тестируемого образца в контакт со множеством различных количеств антигена, специфичного в отношении указанного антитела,
(b) выявление величины специфического связывания указанного антитела и указанного антигена, и
(c) построение графика или вычисление кривой зависимости величины указанного специфического связывания от количества антигена для каждого количества антигена, используемого на стадии (а), для построения профиля продукции антитела у указанного субъекта.
23. Способ по п.22, где чужеродное вещество представляет собой:
(i) терапевтическое средство, такое как лекарственное средство, пролекарство или терапевтическое средство на основе антитела или вакцина;
(ii) компонент средства доставки, носителя или эксципиента, вводимого с терапевтическим средством;
(iii) не являющаяся мишенью часть терапевтического средства или вакцины; или
(iv) инфекционный агент, такой как грибок, бактерия, вирус или белок.