Определение острой токсичности, изучение кумулятивных и местно-раздражающих свойств нового противотуберкулёзного препарата линарола

ЛИТЕРАТУРА: 1. Казаков В.Н. Межфазная тензиометрия

биологических жидкостей в терапии / Казаков В.Н., Синяченко О.В., Игнатенко Г.А. // Донецк: Донеччина, 2003. - 15—126; 2. Зайцев С.Ю. Исследование поверхностного натяжения модельных систем и крови животных методом межфазной тензиометрии / Зайцев С.Ю., Максимов В.И., Милаёва И.В., Миллер Р. // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. -2007.-№2 .-С .44-46.

ОСОБЕННОСТИ НЕКОТОРЫХ ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СЫВОРОТКИ КРОВИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В СВЯЗИ С

ВОЗРАСТОМ

Милаёва И.В., Максимов В.И., Зайцев С.Ю., Довженко Н.А.

Резюме

Поверхностное натяжение сыворотки крови КРС изменяется при изменении белкового, углеводного, жирового, минерального обменов, которое происходит в процессе физиологического роста и развития организма. Максимальное значение поверхностного натяжения у КРС отмечаются при времени измерения 1 с, минимальное - при 100 с, что определятся рядом биохимических показателей сыворотки крови и постепенной адсорбцией белков на границу раздела фаз.

FEATURES OF SOME PHYSIOLOGICAL AND BIOCHEMICAL PARAMETERS

OF BLOOD SERUM OF CATTLE IN CONNECTION WITH AGE

Milaeva I.V., Maksimov V.I., Zaitsev S.Y., Dovzhenko N.A.

Summary

The method of a surface tension measurements of the ^wse serum is a new and promising biochemical method for medical diagnostics. The obtained values of the serum surface tension depend on the age of cowses.

УДК 619:615.9:579.873.21

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ, ИЗУЧЕНИЕ КУМУЛЯТИВНЫХ И МЕСТНО-РАЗДРАЖАЮЩИХ СВОЙСТВ

НОВОГО ПРОТИВОТУБЕРКУЛЁЗНОГО ПРЕПАРАТА -

ЛИНАРОЛА

Мингалеев Д.Н., Честнова Р.В., Садыков Н.И.

Казанская государственная академия ветеринарной медицины

Ключевые слова: новый противотуберкулёзный препарат -

линарол, изониазид, фармако-токсикологические свойства.

Key words: a new antitubercular preparation - linarol, isoniasid, farmako-toxicological properties.

В настоящее время существует широкий арсенал противотуберкулезных средств для профилактики и лечения туберкулеза у людей и животных, однако они не отвечают современным требованиям из-за высокой токсичности, длительного курса применения и дороговизны. Это диктует поиск и внедрение в ветеринарную практику новых, высокоэффективных, малотоксичных и доступных по цене препаратов [5].

К настоящему времени наиболее подробно изучена профилактическая значимость туберкулостатика первого ряда - изониазида [2]. Однако при анализе литературы по вопросам фармакологической характеристики изониазида установлена выраженная токсичность препарата [1], что в свою очередь является одним из важных факторов снижения эффективности его использования как химиопрофилактического и терапевтического средства при туберкулезе.

В ФГУ «Казанский институт органической и физической химии имени А.Е. Арбузова», был создан новый химический препарат - линарол, который успешно прошел испытание in vitro в отношении бактериостатической активности на микобактериях туберкулеза.

Исходя из вышеизложенного, целью наших исследований являлось изучение фармако-токсикологических свойств нового, более эффективного туберкулостатика - линарола.

Материал и методика исследований. Изучение общетоксического действия препаратов из ИОФХ им. Арбузова проводили согласно «Методическим указаниям по изучению общетоксического действия фармакологических веществ» [4].

Острую токсичность определяли по Керберу, на белых нелинейных мышах массой тела 18-20 г, белых нелинейных крысах, массой тела 180-200 г, подобранных по принципу аналогов. Для каждого препарата было сформировано по 7 групп животных по 10 особей в каждой.

Линарол испытывали в дозах 1500, 1800, 2100, 2400, 2700 и 3000 мг/кг массы тела, с шагом дозы 300 мг, при однократном введении в желудок в виде суспензии с дистиллированной водой с помощью атравматичного зонда. При этом объём вводимой суспензии не превышало белым мышам - 0,5 мл, белым крысам - 5 мл. Контрольная группа животных получала соответствующий объём воды.

Наблюдение за животными вели в течение 14 суток. Регистрировали выживаемость животных, клиническую картину, поведение, поедаемость корма, в конце наблюдения проводили диагностическое вскрытие. В результате определяли среднесмертельную (LD50) или максимально введенную дозу.

Кумуляцию изучали методом субхронической токсичности по Ыш. Я. и др.. Для этого было сформировано 2 группы белых крыс по 10 особей в каждой массой тела 180-200 г. Первой группе животных линарол вводили внутрижелудочно с помощью атравматичного зонда в дозе 1/10 от среднесмертелъной. Контрольной группе вводили внутрижелудочно аналогичное количество воды, вводимый объём воды не превышал 5 мл. Введение проводили ежедневно, каждые 4 дня дозу увеличивали в 1,5 раза. Опыт продолжался 28 дней. По результатам определяли коэффициент кумуляции.

Оценку местно-раздражающего действия препарата линарола проводили в опытах на кроликах согласно методическим указаниям [3].

Экспозиция равнялась 4 часам. Препарат наносили из расчёта 20мг/см площади выстриженного участка 7x8 см. На симметричный участок выстриженной кожи другой стороны тела наносили дистиллированную воду. Регистрировали реакцию кожи. Отмечали наличие или отсутствие функциональных и морфологических изменений кожи (эритема, отёк, сухость, шелушение, изъязвления и т.д.). Местное действие на слизистую оболочку изучали однократно на кроликах, путём введения линарола в нативном виде (50 мг) в конъюнктивальный мешок. Изменения слизистой оболочки глаза регистрировали визуально.

Результаты исследований. После введения исследуемого препарата в течение 20-30 минут отмечалось незначительное угнетение общего состояния опытных животных. В дальнейшем общее состояние у них не отличалось от животных контрольной группы, которым вводили соответствующий объём воды.

Однократное внутрижелудочное введение линарола в вышеуказанных дозах не вызвало гибели белых мышей и крыс в течение 14 суток, клиническая картина, поедаемость корма, поведение животных не отличалось от контрольной группы. При диагностическом вскрытии животных на 14 сутки видимых изменений в органах и тканях не обнаружено.

Результаты изучения острой токсичности препарата на белых мышах и крысах показали, что ни одна испытуемая доза данных препаратов не вызвала гибели животных. В дозах больше вышеуказанных, введение препаратов невозможно, ввиду его нерастворимости в воде. В связи с тем, что гибели опытных животных за период наблюдения не было, расчет среднесмертельной дозы (ЛД50), ЛД16, ЛД84 не представлялся возможным, поэтому расчёт не производился. И для дальнейших исследований, согласно «Методическим указаниям по изучению общетоксического действия фармакологических веществ» были взяты дозы линарола - 3000 мг/кг массы тела, как максимально возможные для введения.

Результаты исследования субхронической токсичности и кумулятивных свойств линарола приведены в таблице 1.

Первые клинические признаки, в виде незначительного угнетения наблюдали на 17 сутки эксперимента, непосредственно после введения препарата, спустя 1,0 - 1,5 часа общее состояние животных становилось удовлетворительным, они поедали корм и пили воду. Подобную картину наблюдали до конца опыта.

1. Кумулятивные свойства препарата линарола.

Дни введения Ежедневная доза, мг/кг Суммарная доза за 4 дня, мг/кг Суммарная доза, мг/кг Количество павших животных

1-4 300 1200 1200 0

5-8 450 1800 4000 0

9-12 675 2700 6700 0

13- 16 1012 4048 10748 0

17- 20 1500 6000 16748 0

21- 24 2250 9000 25748 0

25-28 3380 13520 39268 0

За весь период опыта гибели подопытных крыс не было, и применение рекомендуемой формулы для подсчёта коэффициента кумуляции, согласно методики, не представлялось возможным, поэтому можно заключить о слабовыраженных кумулятивных свойствах линарола.

Для изучения местного раздражающего действия на кожу использовали 8 белых кроликов. За день до проведения опыта участки кожи в области спины 5х5см с двух сторон от позвоночника тщательно выстригали. Линарол в виде кашицы, смешанной с дистиллированной водой, наносили на кожу с одной стороны позвоночного столба из расчета 20 мг/см , контролем служила противоположная сторона, где была нанесена дистиллированная вода. Для исключения слизывания на кроликов надевали пластиковые воротники. Экспозиция составляла 4 часа, после чего остатки препарата удаляли с помощью тёплой воды с мылом. Реакцию кожи регистрировали через 1 и 16 часов после однократной аппликации и оценивали в сравнении с симметричным участком кожи того же животного, где была нанесена дистиллированная вода. В течение этого времени каких-либо функциональных нарушений кожи (эритема, отек, трещины, изъязвления, изменения температуры кожи) не отмечалось. Оценку степени эритемы суммировали для каждого животного, после чего вычисляли среднюю оценку выраженности раздражающего эффекта для группы экспериментальных животных.

Степень выраженности раздражающего действия линарола на коже кроликов (таблица 2) определяли согласно принятой классификации (МУ №2163-80, Минздрав СССР).

2. Степень выраженности раздражающего действия линарола на

коже кроликов.

Время исследования, часы Степень эритемы, баллы Интенсивность отёка, баллы Суммарный балл раздражения Степень выраженности раздражающего действия

1 0,125 0,062 0,187 Отсутствие раздражающего действия

16 0 0 0 Отсутствие раздражающего действия

При изучении местного раздражающего действия линарола на слизистую глаза кроликов порошок сорбента наносили в левый конъюнктивальный мешок в количестве 50 мг. Правый глаз опытных животных служил контролем. Влияние линарола на слизистые оболочки глаз выражалось гиперемией и инъецированием сосудов конъюнктивы, которое проходило через 8-12 часов, изъязвления конъюнктивы, рубцовых изменений век, помутнения роговицы не регистрировали.

Выводы. В результате изучения острой токсичности линарола, на различных видах животных установлено, что исследуемый препарат (согласно ГОСТ 12.1.007.76), относятся к 4 классу (малоопасные вещества). Исследование кумулятивных свойств препарата, в течение длительного времени показало, их отсутствие. Установлено, что линарол не обладает местно-раздражающими свойствами.

В свою очередь, туберкулостатик первого ряда - изониазид является высокотоксичным соединением (ЛД50 для мышей равна 178±6,79 мг/кг массы тела).

Таким образом, линарол оказался в 16,8 раз менее токсичен, чем применяемый на практике противотуберкулезный препарат изониазид.

ЛИТЕРАТУРА: 1.Борисова М.И. Применение феназида у больных туберкулезом легких с плохой переносимостью изониазида / М.И. Борисова, В.А. Стаханов, Т.И. Шаркова // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - 2003. - №7. - С. 34 - 37. 2.Кушалиев К.Ж. Иммунологические показатели у телят при применении вакцины БЦЖ и

тубазида: Автореф. дис.... канд. вет. наук / Казанский ордена Ленина вет. ин-т. - Казань, 1993. - 22 с. 3.Методические указания 2163-80 «К постановке исследований по "изучению раздражающих свойств и обоснованию предельно допустимых концентраций избирательно действующих раздражающих веществ в воздухе рабочей зоны» (Минздрав СССР, М.:, 1980). 4.Методические указания по доклиническому изучению общетоксического действия лекарственных препаратов. - М., 1985. - 83 с. 5.Хайкин Б.Я. Эффективность нового противотуберкулезного препарата при экспериментальном туберкулезе телят / Б.Я. Хайкин, А.Н. Литовченко, А.И. Сливкин и др. // Разработка средств и методов борьбы с туберкулезом животных. Сб. науч. тр. ВАСХНИЛ. - Новосибирск, 1990. - С. 64 - 70.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ, ИЗУЧЕНИЕ КУМУЛЯТИВНЫХ И МЕСТНО-РАЗДРАЖАЮЩИХ СВОЙСТВ НОВОГО ПРОТИВОТУБЕРКУЛЁЗНОГО

ПРЕПАРАТА - ЛИНАРОЛА

Мингалеев Д.Н., Честнова Р.В., Садыков Н.И.

Резюме

В результате изучения острой токсичности линарола, на различных видах животных установлено, что исследуемый препарат (согласно ГОСТ 12.1.007.76), относятся к 4 классу (малоопасные вещества), не имеет кумулятивных свойств и не обладает местно-раздражающим действием.

DEFINITION OF SHARP TOXICITY, STUDYING OF THE CUMULATIVE AND A LOCAL-IRRITATING PROPERTIES OF A NEW ANTITUBERCULAR PREPARATION

- LINOROL

Mingaleev D.N., Chestnova R.V., Sadykov N.I.

Summary

As a result of studying of sharp toxicity linarol, on various kinds of animals it is established, that the investigated concern 4 class (little dangerous substance), has no cumulative properties and does not possess local-irritating action.