ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО И киРНК

1. Везикулярная система доставки лекарственного средства, включающая:
а) по крайней мере один липидный бислой, окружающий по крайней мере одну водную полость, причем липид включает по крайней мере один нейтральный липид, которым является фосфатидилхолин,
б) по крайней мере одну короткую интерферирующую рибонуклеиновую кислоту (киРНК), содержащуюся в указанной по крайней мере в одной водной полости, и
в) по крайней мере один гидрофобный лекарственный агент, включенный в указанный по крайней мере один липидный бислой.
2. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1, где липид, кроме того, содержит по крайней мере один дополнительный нейтральный липид, катионный липид или анионный липид.
3. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1 или 2, где по крайней мере одна киРНК содержит двухцепочечную РНК (дцРНК), микро-РНК (миРНК), РНК в виде короткой шпильки (кшРНК) или их комбинацию.
4. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1 или 2, где нуклеотидная последовательность указанной киРНК получена из антисмыслового олигонуклеотида, плазматической ДНК или генома человека.
5. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1 или 2, где гидрофобный лекарственный агент выбирают из группы, включающей таксоид, доцетаксел, паклитаксел, цисплатин (CDDP), карбоплатин, прокарбазин, мехлоретамин, циклофосфамид, камптотецин, ифосфамид, мелфалан, хлорамбуцил, бузулфан, нитрозомочевина, дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин, блеомицин, пликомицин, митомицин, этопозид (VP 16), тамоксифен, ралоксифен, агенты, связывающиеся с рецептором эстрогена, таксол, гемцитабин, навелбин, ингибиторы фарнезилпротеинтрансферазы, трансплатин, 5-фторурацил, винкристин, винбластин, метотрексат, циклоспорин, мицелламин В, бриостатин-1, галомон, цислатин, EPO906 или их комбинацию.
6. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.5, где гидрофобным лекарственным средством является EPO906.
7. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.2, где указанным по крайней мере одним дополнительным нейтральным липидом является холестерин, дипальмитоилфосфатидилхолин (ДПФХ), дистеароилфосфатидилхолин (ДСФХ), фосфохолин (ФОХ), димиристоилфосфатидилхолин (ДМФХ), фосфатидилхолин (ФХ), фосфатидилэтаноламин (ФЭА), фосфатидилхолин из яиц (ФХЯ), дилауроилфосфатидилхолин (ДЛФХ), димиристоилфосфатидилхолин (ДМФХ), 1-миристоил-2-пальмитоилфосфатидилхолин (МПФХ), 1-пальмитоил-2-миристоилфосфатидилхолин (ПМФХ), 1-пальмитоил-2-стеароилфосфатидилхолин (ПСФХ), 1-стеароил-2-пальмитоилфосфатидилхолин (СПФХ), 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфохолин, 1,2-диарахидоил-зп-глицеро-3-фосфохолин, 1,2-диэйкозеноил-sn-глицеро-3-фосфохолин, пальмитоилолеоилфосфатидилхолин, лизофосфатидилхолин, дилинолеоилфосфатидилхолин, дистеароилфосфатидилэтаноламин (ДСФЭА), димиристоилфосфатидилэтаноламин (ДМФЭА), дипальмитоилфосфатидилэтаноламин (ДПФЭА), пальмитоилолеоилфосфатидилэтаноламин (ПОФЭА), лизофосфатидилэтаноламин, карбонилметоксиполиэтиленгликоль-дистеароилфосфатидилэтаноламин (МПЭГ-750-ДСФЭА, МПЭГ-2000-ДСФЭА и МПЭГ-5000-ДСФЭА), карбонилметоксиполиэтиленгликоль-дипальмитоилфосфатидилэтаноламин (МПЭГ-2000-ДПФЭА и МПЭГ-5000-ДПФЭА), карбонилметоксиполиэтиленгликоль-димиристилфосфатидилэтаноламин (МПЭГ-2000-ДМФЭА и МПЭГ-5000-ДМФЭА) или их комбинация.
8. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.7, где нейтральным липидом является ДПФХ, ДСФХ, ФОХ, ДМФХ, ФХ, ФЭА, МПЭГ-2000-ДМФЭА или их комбинация.
9. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.2, где указанным по крайней мере одним дополнительным катионным липидом является N-1-(2,3-диолеилокси)пропил-N,N-триметиламмонийхлорид (ДОТМА), 1,2-бис(олеоилокси)-3-(4'-триметиламмонио)пропан (ДОТАП), 1,2-диолеоил-3-(4'- триметиламмонио)бутаноил-sn-глицерин (ДОТБГ), 1,2-диолеоил-3-сукцинил-зп-глицеринхолиновый эфир (ДОСХ), холестериловый эфир (4'-триметиламмонио)бутановой кислоты, 1,2-диолеоил-3-диметилгидроксиэтиламмонийбромид, 1,2-диолеилоксипропил-3-диметилгидроксиэтиламмонийбромид, 1,2-димиристилоксипропил-3-диметилгидроксиэтиламмонийбромид, O,O'-дидодецил-N-пара-(2-триметиламмонийэтокси)бензоил-N,N,N-триметиламмонийхлорид, липоспермин, DC-Chol (3α-N-(N',N"-диметиламиноэтан)карбонилхолестерин), липополи(L-лизин), N-(α-триметиламмониоацетил)дидодецил-D-глутаматхлорид или их комбинация.
10. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.2, где указанным по крайней мере одним дополнительным анионным липидом является фосфатидилсерин, фосфатидилглицерин, димиристоилфосфатидилсерин (ДМФС), дипальмитоилфосфатидилсерин (ДПФС), фосфатидилсерин из мозга (ФСМ), дилаурилоилфосфатидилглицерин (ДЛФГ), димиристоилфосфатидилглицерин (ДМФГ), дипальмитоилфосфатидилглицерин (ДПФГ), дистеароилфосфатидилглицерин (ДСФГ), диолеоилфосфатидилглицерин (ДОФГ) или их комбинация.
11. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1 или 2, дополнительно включающая фармацевтически приемлемый эксципиент.
12. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.11, где дополнительным фармацевтически приемлемым эксципиентом является стабилизирующий агент, выбранный из группы, включающей холестерин, полиэтиленгликоль (ПЭГ) или токоферол.
13. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1 или 2, где киРНК подавляет трансляцию гена, который ускоряет рост гиперпластических или канцерогенных клеток.
14. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1 или 2, причем киРНК включант 15-50 нуклеотидных остатков.
15. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.13, где ген выбран из группы, включающей EphA2, киназу фокальной адгезии (РАК), [бэтта]2 адренергический рецептор ([бэтта]2АР), ESR1, белок-супрессор опухоли pRB, MDR-1, NKkappaB и Nek2.
16. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1, дополнительно включающая фрагмент для узнавания мишени.
17. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.16, где фрагмент для мишени выбран из группы, включающей фолат-МПЭГ-ДМФЭА-трансферин, альфа-токоферол, ретиноевую кислоту и пептид RGD.
18. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.9, дополнительно включающая холестерин, димиристоилфосфатидилэтаноламин-полиэтиленгликоль 2000 (ДМФЭА-ПЭГ2000) и токоферол.
19. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.18, где молярное соотношение ФХ:холин:ДМФЭА-ПЭГ000:токоферол составляет приблизительно 81,9:15,4:2:0,7.
20. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1, где массовое соотношение липида и киРНК составляет от 10:1 до 20:1.
21. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.20, где массовое соотношение фосфолипида и киРНК составляет 14:1.
22. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1, где концентрация гидрофобного лекарственного средства составляет по крайней мере приблизительно 0,5 мг/мл.
23. Везикулярная система доставки лекарственного средства по п.1, где концентрация киРНК составляет приблизительно 1-1,2 мг/мл.
24. Способ получения везикулярной системы доставки лекарственного средства по п.1, при этом указанный способ включает;
а) получение первого раствора, включающего по крайней мере один нейтральный липид, которым является фосфатидилхолин, по крайней мере одно гидрофобное лекарственное средство и смешиваемый с водой органический растворитель,
б) получение липидной пленки при упаривании смешиваемого с водой органического растворителя из первого раствора,
в) получение второго раствора, включающего по крайней мере одну киРНК и водный раствор,
г) смешивание липидной пленки (б) с вторым раствором (в), при этом получают везикулярную систему доставки лекарственного средства.
25. Способ получения ВСДЛС по п.2, при этом указанный способ включает:
а) получение первого раствора, включающего по крайней мере один нейтральный липид, которым является фосфатидилхолин, по крайней мере один дополнительный нейтральный липид, катионный липид или анионный липид, по крайней мере одно гидрофобное лекарственное средство и смешиваемый с водой органический растворитель,
б) получение липидной пленки при упаривании смешиваемого с водой органического растворителя из первого раствора,
в) получение второго раствора, включающего по крайней мере одну киРНК и водный раствор, и
г) смешивание липидной пленки (б) с вторым раствором (в), при этом получают везикулярную систему доставки лекарственного средства.
26. Способ по п.24 или 25, где фрагмент для узнавания мишени добавляют в первый раствор (а).
27. Способ по п.24 или 25, где указанным гидрофобным лекарственным средством является таксоид, камптотецин, доксорубицин, мицелламин В, винкристин, бриостатин-1, галомон, цисплатин, ЕР0906, доцетаксел, паклитаксел, цисплатин (CDDP), карбоплатин, прокарбазин, мехлоретамин, циклофосфамид, ифосфамид, мелфалан, хлорамбуцил, бусулфан, нитрозомочевина, дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин, блеомицин, фикомицин, митомицин, этопозид (VP 16), тамоксифен, ралоксифен, агенты, связывающиеся с рецептором эстрогена, таксол, гемцитабин, навелбин, ингибиторы фарнезилпротеинтрансферазы, трансплатин, 5-фторурацил, винкристин, винбластин, метотрексат и циклоспорин или их комбинация.
28. Способ по п.24 или 25, где указанный смешиваемый с водой органический растворитель выбирают из группы, включающей спирт, ацетон, диметилформамид, диметилсульфоксид, диметилацетамид или полиэтиленгликоль.
29. Способ по п.28, где смешиваемым с водой органическим растворителем является спирт, выбранный из группы, включающей метанол, гликоль, глицерин, пропиленгликоль или этанол.
30. Способ по п.24 или 25, где указанный по крайней мере один дополнительный нейтральный липид выбран из группы, включающей дипальмитоилфосфатидилхолин (ДПФХ), дистеароилфосфатидилхолин (ДСФХ), фосфохолин (ФОХ), димиристоилфосфатидилхолин (ДМФХ), фосфатидилхолин (ФХ), фосфатидилэтаноламин (ФЭА), фосфатидилхолин из яиц (ФХЯ), дилаурилоилфосфатидилхолин (ДЛФХ), димиристоилфосфатидилхолин (ДМФХ), 1-миристоил-2-пальмитоилфосфатидилхолин (МПФХ), 1-пальмитоил-2-миристоилфосфатидилхолин (ПМФХ), 1-пальмитоил-2-стеароилфосфатидилхолин (ПСФХ), 1-стеароил-2-пальмитоилфосфатидилхолин (СПФХ), 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфохолин (ДСФХ), 1,2-диарахидоил-sn-глицеро-3-фосфохолин, 1,2-диэйкозеноил-sn-глицеро-3-фосфохолин (ДЭФХ), пальмитоилолеоилфосфатидилхолин (ПОФХ), лизофосфатидилхолин, дилинолеоилфосфатидилхолин, дистеароилфосфатидилэтаноламин (ДСФЭА), димиристоилфосфатидилэтаноламин (ДМФЭА), дипальмитоилфосфатидилэтаноламин (ДПФЭА), пальмитоилолеоилфосфатидилэтаноламин (ПОФЭА) и лизофосфатидилэтаноламин или их комбинация.
31. Способ по п.24 или 25, где стабилизирующий агент добавляют в первый раствор (а).
32. Способ по п.31, где стабилизирующим агентом является холестерин, полиэтиленгликоль (ПЭГ) или токоферол.
33. Способ одновременной совместной доставки гидрофобного лекарственного средства и киРНК субъекту, причем указанный способ заключается во введении везикулярной системы доставки лекарственного средства по п.1.