Фармацевтическая композиция для предупреждения или лечения гепатита B

1. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения гепатита В, содержащая
в качестве активного ингредиента по меньшей мере один олигонуклеотид, выбранный из группы, состоящей из олигонуклеотида, представленного последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1, 2 или 6, или комплементарной ей последовательностью нуклеиновой кислоты; и олигонуклеотид, имеющий по меньшей мере одну химическую модификацию в олигонуклеотиде.
2. Композиция по п. 1, где олигонуклеотид, имеющий химическую модификацию, имеет по меньшей мере одну химически модифицированную межнуклеозидную связь.
3. Композиция по п. 2, где олигонуклеотид, имеющий химически модифицированную межнуклеозидную связь, имеет химическую модификацию, в которой фосфатная группа нуклеотида химически модифицирована фосфоротиоатом, фосфородитиоатом, фосфорамидатом или боранофосфатом.
4. Композиция по п. 1, где олигонуклеотид, имеющий химическую модификацию, имеет по меньшей мере одну химически модифицированную сахарную группировку.
5. Композиция по п. 4, где сахарная группировка модифицирована таким образом, что группа -Н в 2' положении пентозы в нуклеотиде замещена метоксиэтилом (МОЕ), диметиламинооксиэтокси (DMAOE), диметиламиноэтоксиэтилом (DMAEOE), метилом (ОМе), аминопропокси (АР) или фтором (F), или
сахарная группировка замещена 2'-F-β-D-арабинофуранозилом (F-ANA).
6. Композиция по п. 4, где сахарная группировка химически модифицирована в виде LNA (запертая нуклеиновая кислота) или PNA (пептидная нуклеиновая кислота).
7. Композиция по п. 1, где олигонуклеотид находится в состоянии, в котором GalNAc (N-ацетилгалактозамин) связан с 3' или 5' концом через линкер.
8. Композиция по п. 1, где олигонуклеотид, имеющий химическую модификацию, имеет две или более чем две химические модификации, выбранные из группы, состоящей из химической модификации межнуклеозидной связи и химической модификации сахарной группировки.
9. Композиция по п. 8, где олигонуклеотид, имеющий две или более чем две химические модификации, имеет химическую модификацию, в которой фосфатная группа нуклеотида химически модифицирована фосфоротиоатом, фосфородитиоатом, фосфорамидатом или боранофосфатом, и
дополнительно имеет химическую модификацию, в которой группа -Н в 2' положении пентозы в нуклеотиде замещена метоксиэтилом (МОЕ), диметиламинооксиэтокси (DMAOE), диметиламиноэтоксиэтилом (DMAEOE), метилом (ОМе), аминопропокси (АР) или фтором (F), или сахарная группировка нуклеотида замещена F-ANA.
10. Композиция по п. 8, где олигонуклеотид, имеющий две или более чем две химические модификации, имеет химическую модификацию, в которой фосфатная группа нуклеотида химически модифицирована фосфоротиоатом, фосфородитиоатом, фосфорамидатом или боранофосфатом, и
дополнительно имеет химическую модификацию, в которой сахарная группировка химически модифицирована в виде LNA (запертая нуклеиновая кислота) или PNA (пептидная нуклеиновая кислота).
11. Композиция по п. 1, где олигонуклеотид образует G-квадруплекс с вирусом гепатита В (HBV).
12. Композиция по п. 1, уменьшающая уровень цкзДНК (циклическая ковалентно замкнутая ДНК) HBV.
13. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая фармацевтически приемлемый носитель.
14. Композиция по п. 13, где фармацевтически приемлемый носитель содержит наночастицы хитозана, коллоидные дисперсные системы, комплексы макромолекул, нанокапсулы, наночастицы, микросферы, шарики и эмульсии типа «масло в воде», мицеллы, смешанные мицеллы или липосомы.
15. Композиция по п. 14, где фармацевтически приемлемый носитель представляет собой наночастицу хитозана, и хитозан имеет молекулярную массу от 50 кДа до 190 кДа.
16. Композиция по п. 1, вводимая индивиду перорально или парентерально.
17. Композиция по п. 1, вводимая индивиду внутрибрюшинно, внутривенно, чрескожно, подъязычно, внутримышечно, интраназально или подкожно.
18. Способ лечения или предупреждения гепатита В, включающий
введение индивиду эффективной дозы фармацевтической композиции для лечения или предупреждения гепатита В, содержащей в качестве активного ингредиента по меньшей мере один олигонуклеотид, выбранный из группы, состоящей из олигонуклеотида, представленного последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 1, 2 или 6, или комплементарной ей последовательностью нуклеиновой кислоты; и олигонуклеотид, имеющий по меньшей мере одну химическую модификацию в олигонуклеотиде.
19. Способ по п. 18, где олигонуклеотид, имеющий химическую модификацию, имеет по меньшей мере одну химически модифицированную межнуклеозидную связь.
20. Способ по п. 19, где олигонуклеотид, имеющий химически модифицированную межнуклеозидную связь, имеет химическую модификацию, в которой фосфатная группа нуклеотида химически модифицирована фосфоротиоатом, фосфородитиоатом, фосфорамидатом или боранофосфатом.
21. Способ по п. 18, где олигонуклеотид, имеющий химическую модификацию, имеет по меньшей мере одну химически модифицированную сахарную группировку.
22. Способ по п. 21, где сахарная группировка модифицирована таким образом, что группа -Н в 2' положении пентозы в нуклеотиде замещена метоксиэтилом (МОЕ), диметиламинооксиэтокси (DMAOE), диметиламиноэтоксиэтилом (DMAEOE), метилом (ОМе), аминопропокси (АР) или фтором (F), или
сахарная группировка замещена F-ANA.
23. Способ по п. 21, где сахарная группировка химически модифицирована в виде LNA (запертая нуклеиновая кислота) или PNA (пептидная нуклеиновая кислота).
24. Способ по п. 18, где олигонуклеотид находится в состоянии, в котором GalNAc (N-ацетилгалактозамин) связан с 3' или 5' концом через линкер.
25. Способ по п. 18, где олигонуклеотид, имеющий химическую модификацию, имеет две или более чем две химические модификации, выбранные из группы, состоящей из химической модификации межнуклеозидной связи и химической модификации сахарной группировки.
26. Способ по п. 25, где олигонуклеотид, имеющий две или более чем две химические модификации, имеет химическую модификацию, в которой фосфатная группа нуклеотида химически модифицирована фосфоротиоатом, фосфородитиоатом, фосфорамидатом или боранофосфатом, и
дополнительно имеет химическую модификацию, в которой группа -Н в 2' положении пентозы в нуклеотиде замещена метоксиэтилом (МОЕ), диметиламинооксиэтокси (DMAOE), диметиламиноэтоксиэтилом (DMAEOE), метилом (ОМе), аминопропокси (АР) или фтором (F), или сахарная группировка нуклеотида замещена F-ANA.
27. Способ по п. 25, где олигонуклеотид, имеющий две или более чем две химические модификации, имеет химическую модификацию, в которой фосфатная группа нуклеотида химически модифицирована фосфоротиоатом, фосфородитиоатом, фосфорамидатом или боранофосфатом, и
дополнительно имеет химическую модификацию, в которой сахарная группировка химически модифицирована в виде LNA (запертая нуклеиновая кислота) или PNA (пептидная нуклеиновая кислота).
28. Способ по п. 18, где олигонуклеотид образует G-квадруплекс с HBV.
29. Способ по п. 18, где композиция для лечения или предупреждения гепатита В уменьшает уровень цкзДНК (циклическая ковалентно замкнутая ДНК) HBV.
30. Способ по п. 18, где композиция для лечения или предупреждения гепатита В дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель.
31. Способ по п. 30, где фармацевтически приемлемый носитель содержит наночастицы хитозана, коллоидные дисперсные системы, комплексы полимеров, нанокапсулы, наночастицы, микросферы, шарики, эмульсии типа «масло в воде», мицеллы, смешанные мицеллы или липосомы.
32. Способ по п. 31, где фармацевтически приемлемый носитель представляет собой наночастицу хитозана, и хитозан имеет молекулярную массу от 50 кДа до 190 кДа.
33. Способ по п. 18, где композицию для лечения или предупреждения гепатита В вводят индивиду перорально или парентерально.
34. Способ по п. 18, где композицию для лечения или предупреждения гепатита В вводят индивиду внутрибрюшинно, внутривенно, чрескожно, подъязычно, внутримышечно, интраназально или подкожно.
35. Способ скрининга терапевтического агента против гепатита В, включающий:
приведение в контакт вируса гепатита В (HBV) с веществом-кандидатом и подтверждение того, образует ли HBV G-квадруплекс с данным веществом-кандидатом.
36. Способ по п. 35, дополнительно включающий отбор вещества-кандидата в качестве терапевтического агента против гепатита В, если HBV образует G-квадруплекс с данным веществом-кандидатом.
37. Способ по п. 35, где образование G-квадруплекса подтверждают способом, выбранным из группы, состоящей из анализа изменения электрофоретической подвижности (EMSA), кругового дихроизма (CD), ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и способа применения антител, специфичных в отношении G-квадруплекса.
38. Способ по п. 35, где вещество-кандидат содержит 4 или более чем 4 гуанина (G).
39. Способ по п. 35, где G-квадруплекс образован связыванием области энхансера II HBV, имеющей последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 19, с веществом-кандидатом.