СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА "ТРИОКРИН"
"TRIOKRIN" BIOLOGICALLY ACTIVE PRODUCT PRODUCTION METHOD

Изобретение относится к технологии переработки оленеводческой продукции, в частности к способам получения биологически активного продукта, характеризуемого высоким гипотензивным, адаптогенным и тонизирующим действием.
Известен способ получения биологически активного продукта (пантокрина) путем экстракции пантов 50%-ным этиловым спиртом и 0,05%-ной уксусной кислотой, настаиванием в течение 6 суток (см. патент РФ № 2045269, МПК A61K 35/32).
Известен способ получения биологически активного продукта из сырья пантового оленеводства (из хвостов пантовых оленей), включающий измельчение сырья, его экстракцию этиловым спиртом и подкисление экстракта уксусной кислотой. Экстракцию осуществляют вначале 70%-ным этиловым спиртом в течение 3 суток при соотношении спирт:сырье 6:1, затем 60%-ным спиртом в течение 2 суток при соотношении спирт:сырье 4:1 и далее 50%-ным спиртом в течение 2 суток при соотношении спирт:сырье 2:1 с последующим объединением экстрактов, вымораживанием при температуре -15…20°C и фильтрацией целевого продукта (см. патент РФ № 2223106, МПК A61K 35/32, публ. 10.02.2004, Бюл. №4).
Известен способ получения биологически активного продукта, обладающего гипотензивным действием, из пенисов и/или семенников пантовых оленей путем измельчения сырья с последующей экстракцией подкисленным до pH 4,7 60%-ным раствором этилового спирта при комнатной температуре (20-25°C) и соотношении спирт:сырье 5:1 в течение 144-240 часов. После окончания процесса экстракции экстракт подвергают вымораживанию при температуре -15-18°C в течение 5 суток с последующей фильтрацией конечного продукта (см. патент РФ № 2353375, МПК A61K 35/48, публ. 27.04.09, Бюл. №12 - прототип).
Однако сравнительные исследования биохимического состава монобиосубстанций (хвостов, половых органов и пантов), биохимического состава экстрактов на их основе и данных по гипотензивному, тонизирующему и адаптогенному действию экстрактов из монобиосубстанций показали, что наибольшим гипотензивным действием обладают экстракты из пантов, адаптогенным действием - экстракты из хвостов, а тонизирующим - экстракты из половых органов.
Так, в таблице 1 отражен биохимический состав биосубстанций.
Таблица 1
Биохимический состав биосубстанций
Показатели
Биосубстанции (порошкообразное состояние)
хвосты
половые органы
панты
Жир, %
11,0
10,28
1,68
Белок, %
63,5
55,9
43,6
Зола, %
2,3
2,7
40,4
Сумма аминокислот, г/кг
37,2
32,3
20,7
Сумма витаминов, усл. ед./кг
124,4
107,8
70,5
Макроэлементы, г/кг
9,4
12,2
25,0
Микроэлементы, мг/кг
162,9
142,9
529,7
Как видно из таблицы 1, за счет меньшего содержания золы в биосубстанциях из хвостов и половых органов содержание белка выше на 45,6 и 28,2% по сравнению с пантами. В этих биопродуктах наблюдается преимущество по сумме аминокислот (хвосты - 37,2 г/кг, половые органы - 32,3 г/кг, панты - 20,7 г/кг), витаминов (хвосты - 124,4 усл. ед., половые органы - 107,8 усл. ед., панты - 70,5 усл. ед.), за исключением витаминов B5 и B12, в то время как биосубстанция из пантов обладает значительным преимуществом по содержанию макро-, микроэлементов при равных условиях изготовления субстанций.
В таблице 2 приведен биохимический состав экстрактов из полученных порошкообразных биосубстанций (хвостов, половых органов, пантов) при экстракции 70%-ным спиртом в соотношении сырье:спирт 1:10, при наличии в растворе 0,05%-ной уксусной кислоты. Экстракцию проводили в течение 12 дней при комнатной температуре 20-25°C. Вымораживание экстракта осуществляли в течение 5 дней при температуре -18°C.
Таблица 2
Биохимический состав спиртовых экстрактов
Показатели
Экстракты
хвосты
половые органы
панты
Аминокислоты, г/л
23,6
21,7
19,5
Витамины, усл. ед./л
126,5
110,2
107,5
Макроэлементы, г/л
1,17
0,56
13,1
Микроэлементы, мг/л
29,1
2,19
403,9
Согласно данным таблицы 2 тенденция биохимического состава биосубстанций сохраняется и в экстрактах.
Активность спиртовых экстрактов определялась биологическими методами по аналогии с пантокрином: гипотензивное - по их способности снижать кровяное давление у кроликов (ФС 42-2323-85), адаптогенное - по продолжительности пребывания животных при +2…+4°C, тонизирующее - по длительности плавания животных до полной утомляемости мышей (на белых мышах по методике И.М. Брехмана, 1969).
Данные по гипотензивному, тонизирующему и адаптогенному действию экстрактов приведены в таблице 3.
Таблица 3
Биологическая активность спиртовых экстрактов
Показатели
Экстракты
хвосты
половые органы
панты
Гипотензивное действие, %
15,9±1,1
17,9±1,2
24,3±1,2
Адаптогенное действие, мин
268,5±21,8
241,0±22,1
181,2±16,7
Тонизирующее действие, с
260,3±21,8
264,9±20,8
174,4±14,2
Как видно из таблицы 3, спиртовой экстракт из пантов превосходит аналоги из хвостов и половых органов по гипотензивному действию на 26,4 и 34,6%, соответственно, и уступает указанным биосубстанциям по адаптогенному действию на 24,2 и 32,5%, по тонизирующему действию на 33,0 и 34,2%.
Таким образом, проведенные исследования показали, что продукты, изготовленные из отдельных биосубстанций (хвосты, половые органы, панты), имеют преимущество по какому-либо одному действию (гипотензивному, адаптогенному, тонизирующему), а значит, не могут обладать высоким биологическим эффектом, присущим препарату из комплексного сырья, где каждый вид сырья, обладая преимуществом по какому-либо действию, обеспечивает повышение эффективности продукта в целом.
Необходима разработка способа получения биологически активного продукта с высокой эффективностью и обеспечивающего полное и рациональное использование сырья от пантовых оленей.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе получения биологически активного продукта, включающем измельчение сырья, его экстракцию раствором этилового спирта, подкисленного до pH 4,7 при температуре 20-25°C, и перемешивание ежесуточно в течение 5 минут с последующим вымораживанием экстракта при температуре -15…-18°C и фильтрацией конечного продукта, в качестве сырья используют смесь пантов, хвостов и половых органов (пенисов и семенников) маралов в соотношении, %: 60:20:20, соответственно, а экстракцию смеси проводят 50%-ным спиртовым раствором в соотношении спирт:сырье 7:1 в течение 12-14 суток.
Сущность способа заключается в следующем.
Панты являются ежегодно восстанавливаемым продуктом. Так, в течение жизни животные могут давать данную продукцию 10-14 раз, в то время как хвосты и половые органы получают в процессе убоя животных в связи с травмами, несовместимыми с жизнью животного, или выбраковки маралов по продуктивности. То есть объем заготовленных в течение года хвостов и половых органов не может представлять интерес для промышленной переработки. Заготовка хвостов и половых органов в течение более длительного времени снижает их качество, не позволяя рационально использовать данное сырье. Комплексное использование продукции пантового оленеводства (хвостов, половых органов и пантов), как показали исследования, при определении оптимальных параметров способа производства биологически активного продукта позволяет обогатить продукт из пантов адаптогенным и тонизирующим действием, повышая биологическую активность конечного продукта, при этом весь накопленный объем хвостов и половых органов (при наличии преобладающего объема пантов) полностью перерабатывается.
Для определения оптимальных параметров способа при комплексном использовании сырья пантовых оленей были проведены исследования по выявлению биохимического состава водно-спиртовых экстрактов комплексных биосубстанций при следующих соотношениях моносубстанций в смеси: панты:хвосты:половые органы, %: 40:30:30; 50:25:25; 60:20:20; 70:15:15 по технологическим параметрам, аналогичным получению монобиосубстанций, то есть размол сырья, экстракция 70%-ным раствором этилового спирта при соотношении спирт:сырье 10:1 в присутствии 0,05% ледяной уксусной кислоты в течение 12 суток при температуре 20-25°C с последующим вымораживанием при -18°C в течение 5 суток и фильтрацией конечного продукта.
Биохимический состав водно-спиртовых экстрактов приведен в таблице 4.
Таблица 4
Биохимический состав водно-спиртовых экстрактов комплексных биосубстанций
Показатели
Соотношение панты:хвосты:половые органы, %
40:30:30
50:25:25
60:20:20
70:15:15
Аминокислоты, г/л
21,4
20,9
20,4
18,3
Витамины, усл. ед./л
120,2
116,7
114,4
111,2
Макроэлементы, г/л
6,2
6,8
8,4
11,3
Микроэлементы, мг/л
124,9
218,3
348,0
364,6
Как видно из таблицы 4, оптимальным соотношением монобиосубстанций является соотношение 60:20:20, так как при небольшой разнице в биохимическом составе при данном соотношении расходуется 60% пантов, то есть сырья, всегда находящегося в достаточном количестве.
Аналогичная тенденция просматривается и при определении биологических свойств экстрактов из вышеприведенных комплексных биосубстанций (табл.5).
Таблица 5
Биологическая активность экстрактов из комплексных биосубстанций
Показатели
Соотношение панты:хвосты:половые органы
действия
40:30:30
50:25:25
60:20:20
70:15:15
Гипотензивное, %
19,2±0,8
24,6±0,5
27,6±0,8
26,3±0,3
Адаптогенное, мин
274,9±9,2
272,3±14,4
266,3±18,7
220,8±11,1
Тонизирующее, с
256,3±14,5
241,2±19,9
232,2±13,3
204,4±16,7
Согласно таблице 5 биологические свойства экстрактов из биосубстанций превышают (практически при любом комплексе) гипотензивные, адаптогенные и тонизирующие свойства экстрактов, изготовленных из моносубстанций (табл.3) при одинаковых технологических параметрах проведения процесса.
В связи с тем что тканевая основа хвостов, пенисов и семенников, по сравнению с пантами, характеризуется более деликатным составом, что предполагает более щадящие технологические режимы, были проведены опыты по разработке оптимальных режимов при уже определившемся оптимальном соотношении монопродуктов в сырье (соотношении панты:хвосты:половые органы 60:20:20). Так, высокая концентрация спирта может вызывать денатурацию белковой части, в том числе белковой части гормонов и ферментов, снижая биологическую активность экстракта. На качество конечного продукта влияет соотношение спирт:сырье и время проведения экстракции.
Для исследования были задействованы концентрации этилового спирта 50, 60, 70%, при соотношении компонентов спирт:сырье 5:1; 7:1; 10:1 и времени проведения экстракции 10, 12, 14 суток. Экстракцию проводили при температуре 20-25°C. Спиртовые экстракты были подкислены ледяной уксусной кислотой в количестве 0,05% от объема экстракта, что обеспечивало в дальнейшем выпадение длинных циклических белковых молекул в осадок при экстрагировании. Температура вымораживания поддерживалась на уровне -15…-18°C и была обусловлена тем, что при температуре выше -15°C период выпадения белков более длительный, а ниже -20°C происходит кристаллизация связанной воды, что в дальнейшем снижает активность препарата.
Результаты исследования отражены в таблице 6.
Таблица 6
Биологическая активность экстрактов при разных режимах экстрагирования
Показатели действия
Время проведения экстракции, суток
Биологические свойства экстрактов
5:1
7:1
10:1
50%
60%
70%.
50%
60%
70%
50%
60%
70%
Гипотензивное, %
10
31,6
29,9
28,6
30,4
28,3
27,7
28,7
28,3
28,0
12
34,2
33,8
30,1
33,4
31,3
29,8
31,9
30,0
27,6
14
33,6
32,4
29,4
32,9
30,5
29,3
29,6
28,9
27,0
Адаптогенное, мин
10
268,8
243,7
236,6
266,5
254,4
249,9
256,3
244,7
236,8
12
285,3
264,3
258,8
280,3
273,7
264,4
268,8
266,9
266,3
14
280,1
260,2
251,7
276,4
268,6
260,9
267,7
260,2
263,1
Тонизирующее, с
10
276,6
268,1
260,3
272,8
264,4
251,3
256,5
247,6
224,7
12
288,8
279,2
275,3
289,1
280,3
272,6
280,4
263,5
232,2
14
281,4
272,2
270,5
281,4
276,5
269,1
276,9
260,6
230,1
Согласно проведенным исследованиям лучшие показатели гипотензивного, тонизирующего и адаптогенного действия экстрактов наблюдались при снижении концентрации этилового спирта с 70 до 50% и снижении степени разведения с 10:1 до 5:1, при этом оптимальным временем проведения процесса экстракций следует считать по всем показателям 12-14 суток. Таким образом, оптимальной концентрацией этилового спирта следует считать 50% при соотношении спирт:сырье 5:1 и 7:1. Однако различие биологических показателей при соотношении 7:1 по сравнению с соотношением 5:1 незначительно, а объем конечного продукта (почти при равных показателях качества) при разведении 7:1 выше на 33%. Так, при 12%-ном осадке (после фильтрации) выход конечного продукта при разведении 5:1 составляет 5,28 кг, а при разведении 7:1-7,04 кг, что выше предыдущего на 33%.
Пример. Свежие (собранные в день съема) или замороженные в морозильной камере (после дефростации), обезволошенные цельные панты маралов, половые органы (пенисы с семенниками), обезволошенные хвосты в соотношении панты:хвосты:половые органы, 60 кг:20 кг:20 кг помещали в куттер для измельчения. Содержимое куттера заливали 70 литрами 50%-ного водного раствора этилового спирта, подкисленного 0,05%-ным раствором уксусной кислоты до pH 4,7. Экстракцию проводили в течение 12 суток при комнатной температуре 23°C при одноразовом в течение суток перемешивании экстракта в течение 5 минут. По истечении необходимого времени экстракции экстракт помещали в холодильник с температурой -18°C на 5 суток для вымораживания с последующей фильтрацией конечного продукта.
Таким образом, использование заявленного способа получения биологически активного продукта «Триакрин» из комплексного сырья (пантов, хвостов и половых органов самцов маралов) позволяет получать продукт с высокой эффективностью при более полном рациональном использовании сырья от пантовых оленей.