АНТАГОНИСТЫ DR6 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ В ЛЕЧЕНИИ НЕВРОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ

1. Способ ингибирования связывания рецептора смерти 6 (DR6) с белком-предшественником амилоида (APP), включающий экспонирование полипептида DR6 и/или полипептида APP одному или более антагонистам DR6 в условиях, при которых ингибируется связывание DR6 с APP.
2. Способ по п.1, где указанные один или более антагонистов DR6 выбирают из антитела, которое связывает DR6, растворимого полипептида DR6, содержащего аминокислоты 1-354 из SEQ ID NO: 1, и антитела, которое связывает APP.
3. Способ по п.2, где растворимый полипептид DR6 включает иммуноадгезин DR6.
4. Способ по п.3, где растворимый полипептид DR6 включает последовательность внеклеточного домена DR6, слитую с Fc-областью иммуноглобулина.
5. Способ по п.2, где указанное антитело, которое связывает DR6, связывает полипептид DR6, содержащий аминокислоты 1-349 или 42-349 фиг.1 (SEQ ID NO:1).
6. Способ по п.2, где указанное антитело, которое связывает DR6, является химерным, гуманизированным или человеческим антителом.
7. Способ по п.2, где указанное антитело, которое связывает DR6, конкурентно ингибирует связывание моноклонального антитела 3F4.4.8, 4B6.9.7 или 1E5.5.7, продуцируемого гибридомной клеточной линией, депонированной в ATCC под номером PTA-8095, PTA-8094 или PTA-8096 соответственно.
8. Способ по п.2, где указанное антитело, которое связывает DR6 или растворимый полипептид DR6, соединено с одним или большим количеством небелковых полимеров, выбранных их группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля и полиоксиалкилена.
9. Способ по п.1, где указанное антитело, которое связывает APP, представляет собой моноклональное антитело.
10. Способ по п.9, где указанное моноклональное антитело, которое связывает APP, является химерным, гуманизированным или человеческим антителом.
11. Способ по п.9, где указанное моноклональное антитело, которое связывает APP, конкурентно ингибирует связывание антител 3F4.4.8, 4B6.9.7 или 1E5.5.7.
12. Способ по п.9, где указанное антитело, которое связывает APP, соединено с одним или большим количеством небелковых полимеров, выбранных их группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля и полиоксиалкилена.
13. Способ по п.1, где указанный полипептид DR6 экспрессируется на клеточной поверхности одной или более клеток млекопитающего, и связывание указанного одного или более антагонистов DR6 ингибирует активацию или передачу сигнала DR6.
14. Способ по п.13, где способ осуществляют in vitro для ингибирования апоптоза в одной или большем количестве клеток млекопитающего, экспрессирующих DR6.
15. Способ по п.13, где способ осуществляют in vivo для ингибирования апоптоза в одной или большем количестве клеток млекопитающего, экспрессирующих DR6.
16. Способ по п.13, где, по меньшей мере, одна из одной или большего количества клеток млекопитающего, обладающих полипептидом DR6, экспрессированным на клеточной поверхности, представляет собой клетку комиссурального нейрона, клетку сенсорного нейрона или клетку двигательного нейрона.
17. Способ по п.13, где способ осуществляют in vivo у млекопитающего, страдающего от неврологического состояния или нарушения.
18. Способ по п.17, где неврологическое состояние или нарушение представляет собой боковой амиотрофический склероз, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона или болезнь Альцгеймера.
19. Способ по п.17, где неврологическое состояние или нарушение представляет собой повреждение нейронной клетки или ткани вследствие инсульта, травму ткани головного мозга или спинного мозга, либо поражения нейронной ткани.
20. Способ по п.1, где, по меньшей мере, один из указанных одного или большего количества антагонистов DR6 ингибирует связывание DR6 с полипептидом APP, содержащим аминокислоты 66-81 из SEQ ID NO: 6.
21. Способ по п.1, где, по меньшей мере, один из указанных одного или большего количества антагонистов DR6 ингибирует связывание APP с полипептидом DR6, содержащим аминокислоты 1-655 из SEQ ID NO: 1.
22. Способ лечения млекопитающего, страдающего от неврологического состояния или нарушения, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества одного или более антагонистов DR6.
23. Способ по п.22, где указанные один или более антагонистов DR6 выбирают из антитела, которое связывает DR6, растворимого полипептида DR6, содержащего аминокислоты 1-354 из SEQ ID NO: 1, и антитела, которое связывает APP.
24. Способ по п.23, где растворимый полипептид DR6 включает иммуноадгезин DR6.
25. Способ по п.23, где растворимый полипептид DR6 включает последовательность внеклеточного домена DR6, слитую с Fc-областью иммуноглобулина.
26. Способ по п.23, где указанное антитело, которое связывает DR6, связывает полипептид DR6, содержащий аминокислоты 1-349 или 42-349 фиг.1 (SEQ ID NO:1).
27. Способ по п.23, где указанное антитело, которое связывает DR6, является химерным, гуманизированным или человеческим антителом.
28. Способ по п.23, где указанное антитело, которое связывает DR6, конкурентно ингибирует связывание моноклонального антитела 3F4.4.8, 4B6.9.7 или 1E5.5.7, продуцируемого гибридомной клеточной линией, депонированной в ATCC под номером PTA-8095, PTA-8094 или PTA-8096 соответственно.
29. Способ по п.23, где антитело, которое связывает DR6 или растворимый полипептид DR6, соединено с одним или большим количеством небелковых полимеров, выбранных их группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля и полиоксиалкилена.
30. Способ по п.22, где указанное антитело, которое связывает APP, представляет собой моноклональное антитело.
31. Способ по п.30, где указанное моноклональное антитело, которое связывает APP, является химерным, гуманизированным или человеческим антителом.
32. Способ по п.30, где указанное моноклональное антитело, которое связывает APP, конкурентно ингибирует связывание моноклонального антитела 22C11.
33. Способ по п.30, где указанное моноклональное антитело, которое связывает APP, соединено с одним или большим количеством небелковых полимеров, выбранных их группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля и полиоксиалкилена.
34. Способ по п.22, где, по меньшей мере, один из указанных одного или большего количества антагонистов DR6 ингибирует связывание DR6 с полипептидом APP, содержащим аминокислоты 66-81 из SEQ ID NO: 6.
35. Способ по п.22, где, по меньшей мере, один из указанных одного или большего количества антагонистов DR6 ингибирует связывание APP с полипептидом DR6, содержащим аминокислоты 1-655 из SEQ ID NO: 1.
36. Способ по п.22, где неврологическое состояние или нарушение представляет собой боковой амиотрофический склероз, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона или болезнь Альцгеймера.
37. Способ по п.22, где неврологическое состояние или нарушение представляет собой повреждение нейронной клетки или ткани вследствие инсульта, травму ткани головного мозга или спинного мозга, либо поражения в нейронной ткани.
38. Способ по п.22, где указанному млекопитающему вводят одно или более дополнительных терапевтических средств.
39. Способ по п.22, где один или более антагонистов DR6 вводят млекопитающему посредством инъекции, инфузии или перфузии.
40. Способ по п.38, где указанные одно или более дополнительных терапевтических средств выбирают из NGF, ингибитора апоптоза, ингибитора EGFR, ингибитора β-секретазы, ингибитора γ-секретазы, ингибитора холинэстеразы, анти-Abeta-антитела и антагониста рецептора NMDA.
41. Способ идентификации представляющей интерес молекулы, которая ингибирует связывание DR6 с APP, где способ включает:
сведение вместе DR6 и APP в присутствии или в отсутствие представляющей интерес молекулы, и
определение ингибирования связывания DR6 с APP в присутствии указанной представляющей интерес молекулы.
42. Способ по п.41, где представляющая интерес молекула представляет собой антитело, которое связывает APP, антитело, которое связывает DR6 или растворимый полипептид DR6, содержащий аминокислоты 1-354 из SEQ ID NO: 1.
43. Способ по п.41, где определение ингибирования связывания DR6 с APP в присутствии представляющей интерес молекулы проводят анализом в бесклеточной среде.
44. Способ по п.41, дополнительно включающий:
осуществление способа с использованием клеток млекопитающего, экспрессирующих DR6 на клеточной поверхности, и
определение ингибирования активации или передачи сигнала DR6.
45. Композиция, содержащая представляющую интерес молекулу, идентифицированную по способу п.40.
46. Композиция по п.45 и носитель.
47. Композиция по п.46, где носитель представляет собой фармацевтически приемлемый носитель.
48. Выделенный антагонист DR6, представляющий собой (a) моноклональное антитело, которое связывает полипептид DR6, включающий SEQ ID NO: 1, или (b) растворимый полипептид DR6, или (c) моноклональное антитело, которое связывает APP, включающий SEQ ID NO: 6, где антагонист DR6 ингибирует связывание APP с DR6.
49. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где растворимый полипептид DR6 включает иммуноадгезин DR6.
50. Выделенный антагонист DR6 по п.49, где растворимый полипептид DR6 включает последовательность внеклеточного домена DR6, слитую с Fc-областью иммуноглобулина.
51. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанное антитело, которое связывает DR6, связывает полипептид DR6, содержащий аминокислоты 1-349 или 42-349 фиг.1 (SEQ ID NO:1).
52. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанное антитело, которое связывает DR6, является химерным, гуманизированным или человеческим антителом.
53. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанное антитело, которое связывает DR6, конкурентно ингибирует связывание моноклонального антитела 3F4.4.8, 4B6.9.7 или 1E5.5.7, продуцируемого гибридомной клеточной линией, депонированной в ATCC под номером PTA-8095, PTA-8094 или PTA-8096 соответственно.
54. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанное антитело, которое связывает DR6 или растворимый полипептид DR6, соединено с одним или большим количеством небелковых полимеров, выбранных их группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля и полиоксиалкилена.
55. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанный антагонист DR6 ингибирует связывание DR6 с полипептидом APP, содержащим аминокислоты 66-81 из SEQ ID NO: 6.
56. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где антагонист связывает эпитоп, который ингибирует связывание DR6 с APP путем стерического ингибирования.
57. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанное моноклональное антитело, которое связывает APP, является химерным, гуманизированным или человеческим антителом.
58. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанное антитело, которое связывает APP, конкурентно ингибирует связывание моноклонального антитела 22C11.
59. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанное антитело, которое связывает APP, соединено с одним или большим количеством небелковых полимеров, выбранных их группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля и полиоксиалкилена.
60. Выделенный антагонист DR6 по п.48, где указанный антагонист ингибирует связывание DR6 с полипептидом APP, содержащим аминокислоты 66-81 из SEQ ID NO: 6.
61. Фармацевтическая композиция, содержащая антагонист DR6 по п.п.47-60 и фармацевтически приемлемый носитель.
62. Способ диагностирования пациента с неврологическим нарушением или подверженного неврологическим нарушениям, включающий получение образца от пациента и тестирование образца на присутствие варианта полипептида DR6, обладающего полипептидной последовательностью, которая отличается от последовательности полипептида DR6 с SEQ ID NO: 1.
63. Способ по п.62, дополнительно включающий идентификацию варианта полипептида, как обладающего аффинностью к полипептиду APP, которая отличается от аффинности, наблюдаемой для полипептида DR6 с последовательностью SEQ ID NO: 1.
64. Изделие, включающее:
(a) композицию, содержащую эффективное количество антагониста DR6 по пп.47-60,
(b) контейнер, содержащий указанную композицию, и
(c) этикетку, прикрепленную к указанному контейнеру, либо листок-вкладыш в упаковке, вложенный в указанный контейнер, содержащий инструкции по применению указанного антагониста DR6 для лечения неврологического состояния или нарушения.
65. Набор, включающий:
первый контейнер, этикетку на указанном контейнере и композицию, содержащуюся внутри указанного контейнера,
где композиция содержит активное средство, эффективное для ингибирования апоптоза, по меньшей мере, в одном типе нейронных клеток млекопитающего, этикетка на указанном контейнере, либо листок-вкладыш в упаковке, вложенный в указанный контейнер, указывает, что композицию можно использовать для ингибирования апоптоза, по меньшей мере, в одном типе нейронных клеток млекопитающего, и активное средство в указанной композиции включает, по меньшей мере, один антагонист DR6 по пп.47-60,
второй контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буферный раствор, и инструкции по применению антагониста DR6 для ингибирования апоптоза, по меньшей мере, в одном типе нейронных клеток млекопитающего.