ПОВЫШЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ БЕЛКОВ В ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЯХ

1. Конструкция нуклеиновой кислоты, содержащая функционирующий в растении промотор, который функционально связан с нуклеиновой кислотой, кодирующий слитый белок, где слитый белок содержит первый белковый сегмент и второй белковый сегмент, где первый белковый сегмент является представляющим интерес белком, а второй белковый сегмент представляет собой домен UBA белка, где второй белковый сегмент слит с С-концом первого белкового сегмента, и где домен UBA стабилизирует представляющий интерес белок, когда слитый белок экспрессируется в растительной клетке.
2. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 1, в которой нуклеиновая кислота содержит первый нуклеотидный сегмент, который кодирует представляющий интерес белок, и второй нуклеотидный сегмент, который кодирует домен UBA.
3. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 1 или 2, где домен UBA выбран из группы, состоящей из:
(а) домена UBA1 белка RAD23 Arabidopsis;
(б) домена UBA2 белка RAD23 Arabidopsis;
(в) домена UBA2 белка RAD23 дрожжей;
(г) домена UBA белка DDI1 Arabidopsis;
(д) домена UBA белка Ddil дрожжей;
(е) домена UBA белка UBL1 Arabidopsis;
(ж) домена UBA белка DSK2a Arabidopsis;
(и) домена UBA белка DSK2b Arabidopsis;
(к) домена UBA1 белка NUB1 Arabidopsis и
(л) домена UBA2 белка NUB1 Arabidopsis.
4. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 3, где белок RAD23 Arabidopsis выбран из группы, состоящей из белка RAD23a Arabidopsis, белка RAD23b Arabidopsis, белка RAD23c Arabidopsis и белка RAD23d Arabidopsis.
5. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 1 или 2, где второй белковый сегмент представляет собой домен UBA, выбранный из группы, состоящей из нативного домена UBA и консервативного варианта нативного домена UBA.
6. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 5, где домен UBA представляет собой нативный домен UBA1 белка RAD23 Arabidopsis или консервативный вариант нативного домена UBA1 белка RAD23 Arabidopsis, где нативный домен UBA1 имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 9, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 10, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 11, и аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 12.
7. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 5, где домен UBA представляет собой нативный домен UBA2 белка RAD23 Arabidopsis или консервативный вариант нативного домена UBA2 белка RAD23 Arabidopsis, где нативный домен UBA2 имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящее из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 15, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 16, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 17, и аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 18.
8. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 5, где домен UBA представляет собой нативный домен UBA или консервативный вариант нативного домена UBA, где нативный домен UBA1 имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 13, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 19, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 20, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 21, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 22, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 23, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 24, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 25, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 26, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 27, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 28, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 29, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 30, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 31, аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 32.
9. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 1, где представляющий интерес белок является белком, который должен экспрессироваться в трансгенной растительной клетке или трансгенном растении.
10. Слитый белок, кодируемый конструкцией нуклеиновой кислоты по одному из пп. 1-9.
11. Трансгенная растительная клетка, трансгенное растение или трансгенное семя, содержащая/содержащее конструкцию нуклеиновой кислоты по одному из пп. 1-9.
12. Трансгенная растительная клетка, трансгенное растение или трансгенное семя по п. 11, где слитый белок экспрессируется в трансгенной растительной клетке, трансгенном растении или трансгенном семени.
13. Трансгенное растение по п. 12, где экспрессируемый слитый белок придает фенотипический признак трансгенному растению.
14. Способ повышения стабильности экспрессируемого белка в трансгенной растительной клетке или трансгенном растении, включающий:
(а) трансфекцию растительной клетки конструкцией нуклеиновой кислоты по одному из пп. 1-8 с получением трансгенной растительной клетки, несущей конструкцию нуклеиновой кислоты;
(a1) необязательную регенерацию трансгенного растения из трансгенной растительной клетки; и
(б) экспрессию слитого белка в трансгенной растительной клетке или трансгенном растении,
при этом экспрессируемый слитый белок обладает более высокой стабильностью в трансгенной растительной клетке или трансгенном растении, чем соответствующий представляющий интерес белок, и обладает такой же функцией в трансгенной растительной клетке или трансгенном растении, что и соответствующий представляющий интерес белок.