Влияние композиции дигидрокверцетина и липоевой кислоты на показатели гемостаза в условиях модели хронической венозной недостаточности нижних конечностей у крыс

ВЛИЯНИЕ КОМПОЗИЦИИ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА И ЛИПОЕВОЙ КИСЛОТЫ НА ПОКАЗАТЕЛИ ГЕМОСТАЗА В УСЛОВИЯХ МОДЕЛИ ХРОНИЧЕСКОЙ ВЕНОЗНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ НИЖНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ У КРЫС

М.Б. Плотников, И.С. Иванов, А.В. Сидехменова

ФГБУ "НИИ фармакологии" СО РАМН, Томск E-mail: mbp2001@mail.ru

THE INFLUENCE OF DIHYDROQUERCETIN AND LIPOIC ACID COMPOSITION ON THE HEMOSTASIS IN CONDITIONS OF A MODEL OF LOWER LIMB CHRONIC VENOUS INSUFFICIENCY IN RATS

M.B. Plotnikov, I.S. Ivanov, A.V. Sidekhmenova

Federal State Budgetary Institution "Research Institute for Pharmacology" of Siberian Branch under the Russian Academy

of Medical Sciences, Tomsk

Цель работы: оценка влияния композиции дигидрокверцетина и липоевой кислоты на показатели гемостаза в условиях модели хронической венозной недостаточности нижних конечностей. У животных с хронической венозной недостаточностью нижних конечностей выявлено нарушение внешнего пути свертывания, отразившееся в значимом укорочении протромбинового времени на 3,2 с по сравнению с ложнооперированными животными. Введение исследуемого антиоксидантного комплекса (дигидрокверцетин, липоевая кислота) внутрижелудочно курсом в течение 14 дней сдерживало изменения протромбинового времени.

М.Б. Плотников и соавт.

ВЛИЯНИЕ КОМПОЗИЦИИ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА И ЛИПОЕВОЙ...

Ключевые слова: хроническая венозная недостаточность нижних конечностей, гемостаз, дигидрокверцетин, липоевая кислота.

The aim of this investigation was to estimate the influence of composition of dihydroquercetin and lipoic acid on the hemostasis of rats’ model of lower limbs chronic venous insufficiency. In this model the disturbance of external coagulation pathway was detected. It reflected in significant shorting of a prothrombin time on 3,2 s in comparison with sham-operated animals. Corse i.g. administration of antioxidant composition (dihydroquercetin and lipoic acid) during 14 days suppressed the prothrombin time change.

Key words: chronic venous insufficiency hind limbs, hemostasis, dihydroquercetin, lipoic acid.

Введение

Хроническая венозная недостаточность нижних конечностей (ХВННК) - распространенное заболевание, представляющее собой большую медицинскую и социальную проблему, особенно в индустриально развитых странах. Среди жителей России более 35 млн жителей имеют заболевания вен той или иной степени выраженности [1]. В целом в странах с развитой системой здравоохранения на лечение больных с ХВННК уходит порядка 1-3% бюджета здравоохранения [5]. Известно, что пациенты с ХВННК имеют нарушения в системе гемостаза и находятся в группе больных с риском развития тромбофлебитов [1, 3, 8]. В связи с этим необходимо проводить исследования, направленные на поиск эффективных средств коррекции системы гемостаза у вышеописанной группы пациентов.

Цель исследования: оценка влияния антиоксидантной композиции дигидрокверцетина и липоевой кислоты (липовертин) на показатели гемостаза в условиях модели хронической венозной недостаточности нижних конечностей у крыс.

в дозе 50 мг/кг (каждой субстанции). Животные контрольной и ложнооперированной групп получали экви-объемное количество крахмальной слизи (1 мл). Первое введение осуществляли через сутки после оперативного вмешательства, а последнее - за 1 ч до взятия крови.

Взятие крови осуществляли из общей сонной артерии под эфирным наркозом на 14-е сут. В качестве стабилизатора использовали 3,8%-й раствор цитрата натрия в соотношении с кровью 1 : 9. В плазме крови оценивали активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ, с), протромбиновое время (ПВ, с) и содержание фибриногена (Фг, г/л) с помощью наборов АПТВ(АЧТВ)-EI-Тест, Техпластин-Тест и Тех-Фибриноген-Тест соответственно, на коагулометре Cormay KG-4.

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием пакета статистических программ STATISTICA 8.0. Данные представлены в виде M±m, где M - среднее значение, m - стандартная ошибка среднего значения. Для оценки статистической значимости межгрупповых различий использовали непараметрический критерий Mann-Whitney U-test. За критерий статистически значимых различий принимали значения р<0,05.

Материал и методы

Эксперименты проведены на 20 крысах-самцах ’^Маг массой 300-350 г. Животные получены из лаборатории экспериментального биомоделирования ФГБУ “НИИ фармакологии” СО РАМН. Крыс содержали в условиях лабораторного вивария в естественном световом режиме и стандартной диете при свободном доступе к воде и пище. ХВННК создавали путем ограничения кровотока в полой вене. Для этого у животных под эфирным наркозом проводили лапаротомию, выделяли участок каудальной полой вены проксимальнее правой почечной вены и подводили под него лигатуру. После этого в бедренную вену вводили гепарин в дозе 250 ЕД/кг и осуществляли частичную окклюзию каудальной полой вены. Для этого на участок полой вены помещали иглу диаметром 0,8 мм и перевязывали полую вену. Затем иглу удаляли, частично восстанавливая просвет сосуда. У ложнооперированных животных полностью повторяли оперативное вмешательство, исключая этап окклюзии сосуда.

Животные опытной группы получали композицию дигидрокверцетина (ООО “Флавир”, Россия) и липоевой кислоты (ООО “Марбиофарм”, Россия) в 1%-й крахмальной слизи внутрижелу-дочно в течение 14 сут один раз в день

Результаты и обсуждение

На 14-е сут у животных контрольной группы выявлено нарушение внешнего пути свертывания, отразившееся в значимом укорочении ПВ на 3,2 с по сравнению с ложнооперированными животными. Изменений показателей АПТВ и ФГ в группе контроля не выявлено (таблица).

Полученные данные согласуются с данными Ь. Blomgгen о нарушениях в системе гемостаза у больных с хронической венозной недостаточностью, в которых он описывал изменения ПВ [3]. Наблюдаемое нарушение внешнего пути свертывания, вероятно, обусловлено повреждением эндотелия сосудистой стенки, вызванным воздействием повышенного венозного давления [2, 9].

Таблица

Влияние композиции дигидрокверцетина (50 мг/кг) и липоевой кислоты (50 мг/кг) при курсовом (14 сут) внутрижелудочном введении на показатели гемостаза у крыс в условиях модели хронической венозной недостаточности нижних конечностей

№ п/п Группа животных АПТВ, с ПВ, с ФГ, г/л

1 Ложнооперированные (n=7) 11,8+0,7 22,2+0,6 3,2+0,1

2 Контроль (n=6) 11,0+0,6 3 ,0 0, = cP ,3 +1 ,0 СП 3,4+0,2

3 Липовертин (n=7) 11,2+0,3 22,9+0,8; p2-3=0,02 3,1+0,2

Сибирский медицинский журнал, 2012, Том 27, № 1

В группе животных, получавших антиоксидантную композицию, значения ПВ были выше контрольных и находились на уровне значения показателей у ложноопе-рированных животных (таблица). Влияния липовертина на другие показатели гемостаза не обнаружено.

Активность липовертина обусловлена, вероятно, способностью его компонентов проявлять антикоагуляцион-ную активность и эндотелийпротекторный эффект. Известно, что флавоноиды обладают свойствами подавлять индукцию тканевого фактора эндотелиоцитами [6] и пролонгировать ПВ [5, 7]. Эндотелийпротекторный эффект отражен в ряде исследований, показывающих возможности флавоноидов [11, 12] и липоевой кислоты [10] повышать эндотелийзависимую вазодилатацию при различных патологических состояниях.

Выводы

1. В условиях модели хронической венозной недостаточности нижних конечностей у крыс происходит укорочение протромбинового времени, что свидетельствует о нарушении внешнего пути свертывания.

2. Композиция дигидрокверцетина и липоевой кислоты (липовертин, 100 мг/кг) при курсовом внутриже-лудочном введении предотвращает развитие в данных условиях нарушений в этом звене гемостаза.

Литература

1. Савельев В.С. Флебология. - М. : Медицина, 2001. - 660 с.

2. Bergan J.J. Molecular mechanisms in chronic venous insufficiency // Ann. Vasc. Surg. - 2007. - No. 21. - P. 260-266.

3. Blomgren L., Johansson G., Siegbahn A. et al. Coagulation and

fibrinolysis in chronic venous insufficiency // Vasa. - 2001. -Vol. 30, No. 3. - P. 184-187.

4. Criqui M.H., Jamosmos M., Fronek A. et al. Chronic venous disease in an ethnically diverse population: the San Diego Population Study // Am. J. Epidemiol. - 2003. - Vol. 158, No. 5.

- P. 448-456.

5. Itoh K., Masuda M., Naruto S. et al. Effects of unripe citrus hassaku fruits extract and its flavanone glycosides on blood fluidity // Biol. Pharm. Bull. - 2010. - Vol. 3, No. 4. - P 659-664.

6. Kaur G., Roberti M., Raul F. et al. Suppression of human monocyte tissue factor induction by red wine phenolics and synthetic derivatives of resveratrol // Thromb Res. - 2007. - Vol. 119. No. 2. - P. 247-256.

7. Kuntic V., Filipovic I., Vujic Z. Effects of rutin and hesperidin and their Al(III) and Cu(II) complexes on in vitro plasma coagulation assays // Molecules. - 2011. - Vol. 16, No. 2. -P. 1378-1388.

8. Lee A.J., Lowe G.D., Rumley A. et al. Haemostatic factors and risk of varicose veins and chronic venous insufficiency: Edinburgh Vein Study // Blood Coagul. Fibrinolysis. - 2000. -Vol.11, No. 8. - P. 775-781.

9. Lopez J.A., Kearon C., Lee A.Y.Y. Deep venous thrombosis // Hematol. Am. Soc. Hematol. Educ. Program. - 2004. - P. 439456.

10. Okudan N., Nurullahoglu Atalik K.E., Gokbel H. et al. Alpha lipoic acid treatment improved endothelium-dependent relaxation in diabetic rat aorta // Yakugaku zasshi. - 2011. - Vol. 131, No. 5.

- P. 739-744.

11. Perez-Vizcaino F., Duarte J., Andriantsitohaina R. Endothelial function and cardiovascular disease: effects of quercetin and wine polyphenols // Free Radic. Res. - 2006. - Vol. 40, No. 10.

- P. 1054-1065.

12. Wang B., Peng L., Zhu L. et al. Protective effect of total flavonoids from Spirodela polyrrhiza (L.) Schleid on human umbilical vein endothelial cell damage induced by hydrogen peroxide // Colloids Surf B Biointerfaces. - 2007. - Vol. 60, No. 1. - P. 3640.

Поступила 28.09.2011