5,7-бис(стирил)-1,4-диазепин0п0рфиразины как перспективные фотосенсибилизаторы: синтез, физико-химические и фотофизические свойства

106

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

чество CD3+CD16&CD56- -клеток было 7,1 ± 5,1 %, в то время как CD3+CD56+- и CD3+CD16+-KreTOK было значительно меньше (4,3 ± 3,0 % и 3,1 ± 2,9 % соответственно). Основную массу NKT-клеток составляют CD56+CD16 - -лимфоциты (5,5 ± 3,7 % из СD45+CD3+-клеток), реже встречаются клетки с фенотипом CD56- CD16+ и CD56+CD16+ (3,0 ± 4,2 % и 0,7 ± 0,6 % соответственно).

Заключение. В структуре популяций NK- и NKT-клеток присутствует несколько субпопуляций лимфоцитов, отличающихся по экспрессии антигенов CD16 и CD56. Для NK-клеток наиболее характерны субпопуляции CD56+lowCD16+low~-, CD56 - CD16+-лимфоцитов и 2 минорные субпопуляции CD56+lowCD16+hi и CD56+CD16-. Популяция NKT-клеток представлена в основном субпопуляциями CD56+CD16 - -, CD56 - CD16+- и CD56+CD16+-клеток.

А. В. Таллерова, О. С. Кузнецова

ВЛИЯНИЕ ЛАДАСТЕНА НА РОСТ КАРЦИНОМЫ

ЛЕГКИХ ЛЬЮИС У МЫШЕЙ

ФГБНУ«НИИ фармакологии им. В. В. Закусова», Москва

Введение. Современная интенсивная противоопухолевая химиотерапия сопровождается многочисленными побочными эффектами. В связи с этим одной из важнейших проблем экспериментальной и клинической фармакологии является разработка новых фармакотерапевтических подходов к снижению токсичности и повышению терапевтической эффективности лекарственного метода лечения злокачественных опухолей. В настоящее время определено место антиоксидантов в профилактике как опухолевых заболеваний, так и осложнений цитостатической терапии. В НИИ фармакологии им. В.В. Закусова разработан анксио-литический препарат Ладастен (^(2-адамантил)-^(2-п-бромфенил)амин), сочетающий антирадикальную и имму-нофармакологическую активности.

Цель исследования — оценить влияние Ладастена на рост опухоли карциномы легкого Льюис (Lewis lung carcinoma, LLC) у мышей линии C57Bl/6.

Материалы и методы. В качестве экспериментальной модели злокачественного роста была использована эпидер-моидная LLC, штаммы опухолевых клеток получены из банка клеточных культур НИИ ЭДиТО РОНЦ им. Н.Н. Блохина. Взвесь опухолевых клеток LLC имплантировали мышам подкожно в область подмышечной впадины по 50 мг в 0,5 мл раствора Хэнкса на 1 мышь. Животных рандоми-зировали в следующие группы: 1-я — группа активного контроля (LLC), в которой обработку производили 1 % суспензией крахмала, 2-я — Ладастен в дозе 30 мг/кг. Введение препарата начинали через 48 ч после инокуляции опухоли и продолжали в течение 7 дней. На 9-е сутки развития LLC через 24 ч после окончания введения крахмала и Ладастена мышам измеряли объем опухоли метрически и вычисляли процент торможения роста опухоли (ТРО). Статистическую обработку данных проводили по непарному t-критерию Стьюдента. Различия считали статистически значимыми прир < 0,05.

Результаты. При введении Ладастена в течение 7 дней в дозе 30 мг/кг у мышей-опухоленосителей наблюдали ТРО на 60,7 % (1025,5 ± 106,1 мм3) по сравнению с контрольной группой (2611,5 ± 216,5 мм3).

Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что применение Ладастена безопасно при развитии опухоли, и монотерапия препаратом вызывает выраженное ТРО, что определяет перспективы исследования Ладастена при комбинированном применении в химиотерапии.

П. А. Тараканов1, А. О. Симаков2, М.Е. Неганова1, Е.Н. Тараканова1, Д. В. Мищенко3 5,7-БИС(СТИРИЛ)-1,4-ДИАЗЕПИНОПОРФИРАЗИНЫ КАК ПЕРСПЕКТИВНЫЕ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРЫ: СИНТЕЗ, ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ И ФОТОФИЗИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ИФАВ РАН, Черноголовка, Московская область; 2Центр теоретической и компьютерной химии, Осло, Норвегия;

3ИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область

Введение. Полусинтетические фотосенсибилизаторы (ФС) тетрапиррольного типа благодаря своей биосовместимости и высоким фотофизическим характеристикам на сегодняшний день лидируют среди ФС, прошедших клинические испытания. Однако ввиду сложности и нестабильности их структуры поиск синтетических аналогов тетрапиррольных макроциклов является актуальным направлением в химии макрогетероциклических соединений. К основным недостаткам синтетических ФС относят низкую биосовместимость и отсутствие доступного разнообразия. Одним из перспективных направлений решения данной проблемы является синтез новых гетероциклических аналогов фталоцианина.

Цель исследования — синтез тетрапиррольных макроциклов, содержащих 5,7-бис(стирил)-1,4-диазепиновые гетероциклы. Исследование физико-химических и фотофизических свойств полученных соединений, а также оценка их перспективности в качестве ФС для фотодинамической терапии.

Материалы и методы. Очистку соединений проводили с помощью гельпроникающей хроматографии. Строение полученных соединений подтверждено методами ЭСП, инфракрасного (ИК) излучения, Ш- и 2Б-ядерной магнитно-резонансной спектроскопии и МЛЪВ1-ТОР масс-спек-трометрии. Квантовые выходы флуоресценции и генерации синглетного кислорода определены методом сравнения со стандартом (Рс/п). Теоретический анализ механизма фотосенсибилизации в рамках модели диаграммы Яблонского проводили на основе квантово-химических расчетов методом теории функционала плотности (ББТ), используя програмный пакет ОЯСЛ 3.0.3.

Результаты. Разработаны методы синтеза новых макро-гетероциклов, содержащих 1,4-диазепиновые гетероциклы как симметричного (Л4-типа), так и низкосимметричного строения (Л3В-типа). В рамках полученной серии структурных аналогов 5,7-бис(стирил)-1,4-диазепинопорфира-зинов удалось установить взаимосвязь структура — свойство, что открывает эффективные пути управления физико-химическими и фотофизическими свойствами данного класса соединений для решения как терапевтических, так и диагностических задач.

Заключение. Интенсивное поглощение в ближнем ИК-диапазоне (более 700 нм), высокие квантовые выходы син-

№1 / том 15 / 2016

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 107

глетного кислорода, возможность реализации широкого К. С. Титов1, М.В. Киселевский2, синтетического разнообразия 1,4-диазепинового гетероци- И.Ж. Шубина2, И.Н. Михайлова2 кла делают 5,7-бис(стирил)-1,4-диазепинопорфиразины РОЛЬ БИОТЕРАПИИ В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ перспективными для создания синтетических ФС 3-го по- С МЕТАСТАТИЧЕСКИМИ ПЛЕВРИТАМИ, коления. АСЦИТАМИ И ПЕРИКАРДИТАМИ Работа выполнена при поддержке РФФИ(№ 14-03-32031). 1ГБУЗ МКНЦ ДЗМ, Москва; 2ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва Л. В. Татьяненко, А. И. Котельников, О. В. Доброхотова, Цель исследования — провести сравнительную оценку Н.Ю. Шматко, Н.А. Санина, С.М. Алдошин клинической эффективности и переносимости различных НИТРОЗИЛЬНЫЕ КОМПЛЕКСЫ ЖЕЛЕЗА методов внутриполостной иммунотерапии у больных С ФУНКЦИОНАЛЬНЫМИ ЛИГАНДАМИ с опухолевыми серозитами, резистентными к системной ТИОКАРБАМИДОМ И ЕГО АЛИФАТИЧЕСКИМИ лекарственной терапии. ПРОИЗВОДНЫМИ КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ Материалы и методы. В исследование включены 203 АНТИМЕТАСТАТИКИ больных с различными диссеминированными злокачест-ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область венными опухолями с морфологически подтвержденными Введение. Известно, что активный транспорт ионов опухолевыми серозитами (плевриты — 93, асциты — 72 Са2+ через мембрану саркоплазматического ретикулума и перикардиты — 38). Для генерации лимфокин-активиро-(СР) происходит за счет энергии гидролиза аденозинтри- ванных киллеров (ЛАК) использовали мононуклеарные фосфата (АТФ), осуществляемого Са2+-АТФазой СР. Ин- лейкоциты, полученные из серозного экссудата больного гибирование транспорта Са2+ изменяет соотношение вну- (аутологичные) или при сепарации периферической крови три- и внеклеточного содержания Са2+, что предотвращает здоровых доноров (аллогенные), которые далее генериро-образование тромбов и адгезию метастатических клеток вали в СО2-инкубаторе в присутствии интерлейкина-2 к эндотелию капилляров, препятствуя росту метастазов. (ИЛ-2) (Ронколейкин, ООО «Биотех», Россия) в течение 3 Цель исследования — изучение влияния новых катион- сут. Для проведения внутриполостной биотерапии серозных динитрозильных комплексов железа с тиокарбамидом ную полость катетеризировали Плевроканом (B. Braun, и его алифатическими производными — новых синтетиче- Германия) по стандартным методикам. Экссудат макси-ских аналогов природных доноров NO — на ферментатив- мально удаляли до начала лечения и через каждые 2 дня ную активность Са2+-АТФазы СР. в процессе иммунотерапии. В серозную полость 1 раз в день Материалы и методы. Исследовали соединения ежедневно вводили Ронколейкин (ИЛ-2) по 1 млн МЕ ± ЛАК [Fe(C3N2H8S)Cl(NO)2]0[Fe(NO)2(C3N2H8S)2]+Cl- (I), [Бе^С по 100-150 млн клеток № 10 при плевритах, № 15 при ас-(N(CH3)2)2(NO)2]Q (II), [Fe^QNH^yNO^Cl х H2O (III) цитах и № 5 при перикардитах. В конце иммунотерапии и [Fe^QNH^^NO^SO^j х H2O (IV). Фермент Са2+-АТ- Плеврокан удаляли. По окончании лечения отсутствие Фазу СР выделяли из белых мышц задних конечностей опухолевых клеток в остаточном экссудате в результате кроликов, удельная активность Са2+-АТФазы составляла их лизиса активированными лимфоцитами коррелировало 15000 нМ/мг белка/мин. Гидролитическую активность с наступлением клинического эффекта. Са2+-АТФазы рассчитывали из тангенса угла наклона ки- Результаты. Внутриполостная биотерапия у больных нетической кривой гидролиза АТФ. О скорости изменения с опухолевыми серозитами позволяет достичь объективно-концентрации ионов Са2+ судили по кинетике их поглоще- го ответа для опухолевых плевритов: при использовании ния везикулами СР. Обратимость действия исследованных ИЛ-2 и аутологичных ЛАК — 92,9 %, ИЛ-2 и аллогенных соединений определяли путем диализа буферного раство- ЛАК — 93,4 %, ИЛ-2 — 80 % (продолжительность объектив-ра Са2+-АТФазы СР, содержащего 10-5 М соединений I—IV. ного ответа 8,2; 8,5 и 7,9 мес соответственно); для опухолевых Диализ проводили против 100-кратного избытка буферного асцитов: при применении ИЛ-2 и аллогенных ЛАК — 73,2 %, раствора в отсутствие комплексов в течение 24 ч при 4 °С. ИЛ-2 — 61,3 % с продолжительностью объективного отве-Результаты. Показано, что нитрозильные комплексы та 5,1 и 4,8 мес (в 69,5 и 64,7 % случаев в 2 группах больных железа I—IV полностью тормозят транспортную и гидро- раком яичников после внутрибрюшинной иммунотерапии литическую функции Са2+-АТФазы СР в концентрации в сыворотке крови отмечалось достоверное снижение уров-10—4 М. В концентрации 10—5 М они на 57 ± 6; 75 ± 8; 80 ± 8 ня онкомаркера СА-125 по сравнению с исходно повышен-и 85 ± 9 % тормозят активный транспорт Са2+ и на 0; 40 ± 4; ным уровнем; р < 0,05); для опухолевых перикардитов: при 48 ± 5 и 38 ± 4 % гидролиз АТФ соответственно. Комплекс II использовании ИЛ-2 и аллогенных ЛАК — 95,7 %, ИЛ-2 — обратимо и неконкурентно тормозит гидролитическую 86,7 % (продолжительность объективного ответа 3,4 и 3,2 мес). функцию Са2+-АТФазы СР с К = 1,7 х 10—6 М, что указы- Основным побочным эффектом внутриполостной биоте-вает на нековалентное связывание соединения с фермен- рапии в 83 % случаев был гриппоподобный синдром. Ге-том и предполагает его влияние на структурно-функцио- матологической и других видов токсичности у пациентов нальное состояние мембраны СР. отмечено не было. Заключение. Полученные данные позволяют предпо- Заключение. Таким образом, внутриполостную биоте-ложить наличие у соединений I—IV антиметастатической рапию у больных с опухолевыми серозитами, возникаю-активности. щими при прогрессировании заболевания после 1—3 линий Исследования поддержаны Программой Президиума РАН № 1 системной цитостатической терапии, следует начинать «Наноструктуры: физика, химия, биология, основы технологий». с введения ИЛ-2 в монорежиме, как не менее высокоэф-

№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ