СПОСОБЫ ОЧИСТКИ МАЛЫХ МОДУЛЯРНЫХ ИММУНОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ БЕЛКОВ

1. Способ очистки малого модулярного иммунофармацевтического белка от белкового препарата, содержащего высокомолекулярные агрегаты, включающий стадию хроматографии белкового препарата на колонке с гидроксиапатитом в эксплуатационных условиях, таким образом, что очищенный малый модулярный иммунофармацевтический белок содержит менее 4% агрегатов.
2. Способ по п.1, где способ включает не более 3 хроматографических стадий.
3. Способ по п.1 или 2, где эксплуатационное условие включает элюирование малого модулярного иммунофармацевтического белка из хроматографической колонки с гидроксиапатитом в фосфатном буфере.
4. Способ по п.3, где фосфатный буфер содержит фосфат натрия в концентрации в диапазоне от 1 мМ до 50 мМ.
5. Способ по п.3, где фосфатный буфер дополнительно содержит хлорид натрия в концентрации в диапазоне от 100 мМ до 2,5 М.
6. Способ по п.3, где фосфатный буфер содержит фосфат натрия в концентрации в диапазоне от 2 мМ до 32 мМ и хлорид натрия при концентрации в диапазоне от 100 мМ до 1,6 М.
7. Способ по п.3, где фосфатный буфер имеет значение рН в диапазоне от 6,5 до 8,5.
8. Способ по п.1, где эксплуатационное условие включает элюирование малого модулярного иммунофармацевтического белка из хроматографической колонки с гидроксиапатитом при помощи NaCl или фосфатного градиента.
9. Способ по п.1, где способ дополнительно включает стадию очистки белкового препарата при помощи аффинной хроматографии перед проведением хроматографии на колонке с гидроксиапатитом.
10. Способ по п.9, где аффинная хроматография включает хроматографию белка А.
11. Способ по п.1, где способ дополнительно включает стадию очистки белкового препарата при помощи ионнообменной хроматографии с использованием анионообменной хроматографической смолы.
12. Способ по любому из пп.9-11, где способ дополнительно включает стадию очистки белкового препарата при помощи ионнообменной хроматографии после проведения аффинной хроматографии, но перед проведением хроматографии на колонке с гидроксиапатитом.
13. Способ по п.1, где очищенный малый модулярный иммунофармацевтический белок содержит менее 2% агрегатов.
14. Способ по п.1, где белковый препарат содержит более 10% высокомолекулярных агрегатов.
15. Способ по п.1, где малый модулярный иммунофармацевтический белок специфично связывает CD20.
16. Способ по п.15, где малый модулярный иммунофармацевтический белок содержит аминокислотную последовательность, имеющую как минимум 80% идентичности любой из SEQ ID NOs:1-59 и 67-76.
17. Способ очистки малого модулярного иммунофармацевтического белка от белкового препарата, содержащего высокомолекулярные агрегаты, где способ включает подвергание белкового препарата (а) аффинной хроматографии и/или ионнообменной хроматографии, и (b) хроматографии на колонке с гидроксиапатитом в эксплуатационных условиях, таким образом, что очищенный малый модулярный иммунофармацевтический белок содержит менее 4% агрегатов.
18. Малый модулярный иммунофармацевтический белок, очищенный при помощи способа в соответствии с п.1.
19. Способ очистки белка от белкового препарата, содержащего более 20% высокомолекулярных агрегатов, включающий стадию хроматографии белкового препарата на колонке с гидроксиапатитом в эксплуатационных условиях, таким образом, что очищенный белок содержит менее 4% агрегатов, где эксплуатационные условия включают элюирование белка из хроматографической колонки с гидроксиапатитом в фосфатному буфере и где фосфатный буфер содержит фосфат натрия в концентрации в интервале от 2 мМ до 32 мМ и хлорид натрия в концентрации в интервале от 100 мМ до 1,6 М.
20. Фармацевтическая композиция, содержащая малый модулярный иммунофармацевтический белок и фармацевтически приемлемый носитель, где малый модулярный иммунофармацевтический белок содержит менее 4% высокомолекулярных агрегатов.