Клиническое значение растворимых молекул адгезии (sCD50 - ICAM - 3), апоптоза (sCD95) и sHLA класса i при лимфопролиферативных заболеваниях

166. Woodle E.S., Smith D.M., Bluestone J.A., OKirkman W.M., Green D.R., Skowronski E.W. Anti-human class IMHC antibodies induce apoptosis by a pathway that is distinct from the AS antigen-mediated pathway. Journal of Immunology, 1997, 158, p. 21 Sell 64.

167. Lipori D., Barda-Saad M., Ben-Hamo H., Rozenszajn L.A., et. al. Regulation of stroma dependent T-cell lymphopoiesis: involvement of novel sets of adhesion molecules. Brit. j. Haematology, 1998,102,1 ISH-EHA,p. 160-161.

168. Zweegman S., Veenhof M.A., Huijqens P.C., Drager A.M. Adhesion of megakaryocytic prigenitors to fibroblasts in an in vitro

stroma model: role of TPO, VLA-4 and VLA-5. Haematologica, 1999,84, EHA-4, abstr. book, p. 56-56.

169. Yamada O., Wang Yun-Hua, Moto J.I.T., Mizoguchi H. Clonal T-cell proliferation cansing pure red cell aplasia in chronic B-cell lymphocytic leukaemia successful treatment with cyclosporine following in vitro abrogtion of erythroid colony-suppressing activity. Brit. j. Haematology, 1998,101, p. 335-337.

170. Yuones A., Shell V., Consoli U., Godi K., Zhao S., Palmer J.L., Thomas E.K., Armitage R.J., AndreeffM. Elevated levels of biologically active soluble CD40 ligand in the serum of patients with chronic lymphocytic leukaemia. Brit. j. Haematology, 1998,100, p. 135-141.

Клиническое значение растворимых молекул адгезии ($Сй50 - 1САМ - 3), апоптоза (эСОЭб) и эШ-А класса I при лимфопролиферативных заболеваниях

А.К.Голенков, Т.А.Митина, В.В.Новиков, О.Т.Тагиров В.В.Королева, М.А.Крыжанов,Т.Д Луцкая, Д.В.Новиков, А.Ю. Барышников МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского, Нижегородский госуниверситет

В настоящее время достаточно большое внимание уделяется изучению роли растворимых молекул диффе-ренцировочных лейкоцитарных антигенов в патогенезе лимфопролиферативных заболеваний (множественная миелома - ММ, хронический лимфолейкоз - ХЛЛ, лимфо-мы - НХЛ). Функция растворимых молекул остается в значительной степени не уточненной, хотя существуют гипотезы, объясняющие их происхождение и участие в процессах межклеточного взаимодействия. [1,5,8].

Основными механизмами, обеспечивающими поступление растворимых молекул в жидкие среды организма является протеолиз или альтернативный сплайсинг м-РНК с образованием Б-фрагмента молекулы, содержащий участок, подверженный протеолитическому расщеплению.

Основная роль растворимых молекул в межклеточном взаимодействии, а также взаимодействии между клетками и стромой заключается в регуляции этих процессов [6]. Иммунорегуляторная функция реализуется по гуморально-опосредованному механизму, когда для связи с лигандом не нужен межклеточный контакт и, более того, он становится невозможным после состоявшегося гуморального взаимодействия.

Проблема растворимых молекул, имеющих свои гомологи на поверхностях опухолевых клеток в виде мембранных рецепторов, включает в себя и проблему растворимых лигандов к этим молекулам.

Известно, что РАБ-лиганд (РАБ-Ь) и СЗМХлигавд (СЕМО-Ь) - это трансмембранные протеины, которые экспрессированы преимущественно на активированных Т-лимфо-

и микробиологии

цитах. В последнее время идентифицированы их растворимые гомологи. Изучение их функции in vitro показало, что при ХЛЛ CD40/sCD40L взаимодействие блокирует апоптоз в опухолевых клетках, опосредуемый FAS-L или флюдарабином. Добавление в культуру in vitro антител к CD40L или растворимого CD40 индуцировало апоптоз [12].

Очень важна роль растворимых молекул в клинической гематологии в связи с возможностью использования их в качестве интегрального показателя массы опухоли и факторов клинического прогноза. Установлено, что при ХЛЛ и НХЛ sVCAM-I, sICAM-I и sE-селектин находятся в прямой зависимости от массы опухоли и связаны со стадией заболевания [5,8,9,11]. Высокий уровень sAPO-1/FAS (CD95) коррелировал с большой массой опухоли и прогнозом при ХЛЛ [7]. Растворимый CD23 (sCD23) имеет важное значение для дифференциации стабильной и прогрессирующих форм ХЛЛ [10].

В связи с изложенным, представляет большой интерес изучение концентрации растворимых молекул адгезии (sCD50), апоптоза (sCD95) и sHLA-класс I при ММ, ХЛЛ и НХЛ в зависимости от клинических характеристик болезни с учетом проводимой противоопухолевой химиотерапии.

Материалы и методы

В настоящее исследование включено 22 больных, из них у 14 диагностирована ММ, у 5 - ХЛЛ, у 3 - НХЛ (лим-фома из клеток мантийной зоны в фазе лейкемизации -1, лимфоцитарная лимфома генерализированная - у 2).

У большинства больных с ММ диагностирована Ш стадия болезни. Предшествующее химиотерапевтическое лечение на протяжении 12-106 месяцев было у двенадцати больных, У двух - заболевание установлено впервые. Первичная резистентность выявлена у шести больных, у двух был первый рецидив, у четырех - ремиссия, у двух -начальная фаза болезни. Большинству больных проводили курсы М2 в качестве индукционного и поддерживающего лечения или в связи с начинающимся рецидивом. При отсутствии ответа на эмпирическую противоопухолевую терапию, проводили детерминированное лечение по чусгвительности опухолевых клеток в культуре in vitro. Детерминированная терапия в наших исследованиях проводилась препаратами цисплатины и сарколизином.

У 8 больных с XJIJI и HXJI заболевание носило распространенный характер, предшествующее цитосгатичес-кое лечение было у всех.

Определение концентрации sCD50, sCD95, sHLA-I в сыворотке проводили до и через 1 -2 дня после завершения очередного курса XT. Концентрацию растворимых форм указанных белков определяли с помощью разработанных авторами иммуноферментных методов с применением отечественных моноклональных антител серии ИКО [2,3,4]. Планшеты для иммуноферментного анализа сорбировали первыми антителами, направленными против исследуемых антигенов, после чего в лунки планшетов вносили исследуемые образцы сыворотки и инкубировали планшеты в течении 60 минут при комнатной температуре. Затем планшеты отмывали от несвязавшихся белков и обрабатывали вторыми антителами, конъюгированными с пероксидазой хрена и направленными против других антигенных детерминант того же антигена. После инкубации в течении 60 минут планшеты вновь отмывали и в лунки планшетов вносили субстратную смесь, содержащую ортофенилендиамин и перекись водорода. Реакцию останавливали с помощью 1М раствора серной кис-

лоты. Результаты реакции учитывали спектрофотометрически и выражали в условных единицах на мл сыворотки.

При анализе концентрации растворимых молекул адгезии sCD50 (ICAM-3) у 14 больных ММ (табл. 1) установлено, что она достоверно снижена непосредственно перед началом курса химиотерапии (152 ± 23 ед/мл против 342 ± 20 в контроле р<0,05). После завершения курса концентрация sCD50 незначительно повышалась до 210 ± 70 ед./мл (р>0,05), но не достигала нормальных значений. Изменение достоверности различий концентрации sCD50 после лечения по сравнению с контролем свидетельствуют о закономерности этих изменений.

Изучение концентрации sFAS/APO-I (CD95) при ММ показало, что исходные значения были очевидно выше контрольных, при недостаточной достоверности полученных результатов (845 ± 247 и 401 ± 178 едУмл, р>0,05).

Однако после проведения курса XT концентрация sCD95 возрастала до 1938 ± 410 и различия с контролем становились достоверными.

Исследование концентрации sHLA-I при ММ, гомолог которого экспрессирован на мембране всех лимфоидных элементов и многих других клетках, показало повышенные, по сравнению с контролем, исходные значения (2887 ± 903 и 1021 ±98, р=0,05). После курса лечения концентрация растворимых HLA-I существенно не менялась (2739 ±723 ед 7мл), однако при этом достоверность различий с контролем возрастала (р<0,05).

Оценивая изменения концентрации sCD50, sCD95 и sHLA-I в связи с динамикой показателей периферической крови, следует отметить повышение количества грануло-цитов сразу после окончания курса лечения (48,2 ± 3 и 62 ± 4,7 %, р<0,05) и в абсолютных значениях (2,2 ± 0,3 и 3,1 ±

0,7х109л-р>0,05).

Количество лимфоцитов достоверно снижалось после курса лечения (с 33,1 ± 3,7 до 23,1 ± 3,4 % - р<0,05) и в абсолютных значениях (с 1,6 ±0,2 до 1,1 ±0,1 х 109л-р<0,01).

Таблица 1. Значения концентрации эС050, эСОЭб, эН1А-1 в сыворотке; показатели гранулоцитов и лейкоцитов крови до и после курса противоопухолевой химиотерапии у 14 больных множественной миеломой

Исследуемая группа (количество больных) Диаг- ноз Стадия Предшествующее лечение (курсы ПХТ) Концентрация в сыворотке (ед/мл) Показатели крови

sCDso SCD95 sHLA-I гранулоциты лимфоциты

лечение

до/после до/после до/после до/после до/после

14* ММ III-9 II-5 0-26 152 ±23 845 ± 247 2887 ±903 48,2 ± 3 % 33,1 ± 3,7 %

210 ±70 р > 0,05 1398 ±410 р > 0,05 2739 ±723 р > 0,05 62,6 ± 4,7 % р < 0,05 2,2 ± 0,3 23,1 ±3,4% р < 0,05 1,6 ±0,2

х 105/л 3,1 ±0,7 р > 0,05 х 109/л 1,1 ±0,1 р < 0,01

Контроль sCDjo ед/мл 342 ±20 п=43 Р < 0,05 Р к.пл. > 0,05 401 ±17,8 п-=38 Р и к > 0,05 Р К.П.Л. < 0,05 1021 ±98 п=35 Р и * = 0,05 Р к.п л < 0,05

Контроль SCD95 ед/мл

Контроль sHLA-1 ед/мл

Р н.к. - достоверность исходных данных и контроля, Р *

- достоверность данных контроля и после лечения

У 5 больных ХЛЛ и 3 с НХЛ исследование концентрации вСОбО, бС095 и зН1А-1 в сыворотке крови проводили в сравнении с количеством лейкоцитов, размерами печени, селезенки, лимфатических узлов до и после курсов противоопухолевой химиотерапии. Полученные результаты свидетельствуют о достаточно выраженных изменениях концентрации исследуемых растворимых молекул по сравнению с контролем и после проведения курсов химиотерапии (табл. 2). При анализе значений зС050 установлено их достоверное снижение по сравнению с контролем (214 ± 61 и 342 ± 20 ед./мл - р<0,05).

После проведения курсов химиотерапии концентрация вС050 повышалась по сравнению с исходными значениями, однако была ниже данных контроля (327 ±116 ед./ мл и 342 ± 20, р>0,05). Следует отметить, что повышение концентрации вСВ50 после курса лечения было недостаточно достоверно относительно исходных данных. Однако при этом уходила достоверность различий с контролем, что может указывать на наличие тенденции в изменении концентрации вСБбО до и после курса ХТ.

При анализе изменений концентрации эС095 установлено достоверное повышение значений по сравнению с контролем (952 ± 222 ед./мл и 401 ± 78, р<0,05), однако не было выявлено достоверных различий после лечения. Достоверность различий с контролем сохранялась в обоих исследованиях, что является дополнительным свидетельством, подтверждающим отсутствие влияния курса ХТ на концентрацию бС095 в данном интервале времени.

Показатели вНЬА класса I у больных с ХЛЛ и НХЛ перед началом курса ХТ достоверно превышали контроль (2127 ± 393 и 1021 ± 98 ед./мл, р<0,05) и недостоверно снижались после проведения лечения, причем достоверность различий с контролем сохранялась.

По видимому, смысл снижения концентрации эС095 и вН1А-1 после проведения курса химиотерапии при ХЛЛ и НХЛ заключается в связи этих молекул с массой опухоли. Учитывая это, представлялось целесообразным проанализировать выявленные изменения с величиной массы опухоли у исследуемых больных. Массу опухоли оп-

ределяли по сумме баллов в зависимости от количества и размеров зон поражения (табл. 3).

Таблица 3. Концентрация зН1_А-1 в сыворотке крови у 8 больных хроническим лимфолейкозом и лимфомой в зависимости от массы опухоли

Группы Количество Больных Масса опухоли

I 3 > средней 24 ± 1,9 4210 ±857

средняя по всем больным 15,3

II 5 < средней 10 ± 1,1 р<0,05 1460 ± 90 Р 1-п <0,05

Контроль 1021 ±98, п=35

* Сумма баллов

Лимфоузлы: шея, аксиллярные, паховые, брюшные (0-8 баллов, максимальные значения при симметричном поражении).

Печень, селезенка: (0-5 баллов);

0 - не увеличена,

1 - 2 см из под реберного края,

2-4 см,

3-6 см,

4 - 8 см,

5->= 10 см.

Лейкоцитоз:

0 баллов

30.000/мкл

1 = 30-49.000

2 = 50-99.000

3 = 100-149.000

4 - 150-200.000

5 > 200.000

Как видно из табл. 3, выявлена прямая зависимость между величиной массы опухоли и концентрацией бНЬА-

Таблица 2. Значения концентрации эСОбО, эС095 и э ША-1 у 8 больных хроническим лимфолейкозом и неходжскинскими лимфомами до и после курса противоопухолевой химиотерапии

Количество больных Диагноз Стадия Концентрация в сыворотке крови Лимфоциты крови х 109/л Уменьшение размеров

лечение до/после лимфоузлов

зСР^о $С Г.);; ^ вНЬА-І до/после селезенки

8 ХЛЛ- 5 нхл-з 2-3 214 ± 61 952 ± 222 2127 ±393 58±48 на 70%

327 ± 116 р > 0,05 885 ±212 р > 0,05 1516 ±127 р > 0,05 70±52 р > 0,05

контроль вСЭзо ед/мл 342 ± 20 п=43 Р и.к. < 0,05 Р к.пл. > 0,05 401 ± 17,8 п=38 Р и к. < 0,05 1021 ±98

контроль 5С095 ед/мл Р к.пл. < 0,05 п=35 Р и.к. < 0,05 Р к.пл < 0,05

Контроль єНЬА-І ед/мл

Риде. достоверность исходных и данных контроля Р к.пл. достоверность данных контроля и после лечения

в

с

I антигенов. Полученный результат имеет важное клиническое значение, так как концентрация sHLA-I в сыворотке может рассматриваться в качестве интегрального показателя массы опухоли при В-клеточных лимфопролиферативных заболеваниях. Это важно еще и потому, что клиническая гематология обладает небольшим перечнем подобных прогностических тестов (Pig, ЛДГ, Р2-микро-глобулин, sCD54). Подобный анализ был проведен у больных с ММ (табл. 4).

Таблица 4. Концентрация sHLA-I в сыворотке крови у 13 больных множественной миеломой в зависимости от массы опухоли

Группы Кол-во Больных Масса опухоли * (баллы) Концентрация sHLA-I ед./мл

I 4 > средней 15,5 ±0,4 3484± 1057 Рм'н; г!і:ь<'^'05

средняя масса по всей группе 11,1 балла

II 9 < средней 10±0,4 1192 ± 122

Достоверность Рі-п<0,05 Рыг=0,05

Контроль 1021 ±98 п=35

* больные с небольшой массой опухоли соответствовали 5 баллам, с промежуточной - 10, с большой массой - 15 баллам, в соответствии со стадиями ММ по Dune and Salmon. Больным с видимыми опухолями добавляли по 1 баллу сверх указанной градации

Как видно из таблицы 4 при ММ так же выявлена отчетливая зависимость между концентрацией sHLA-I и массой опухоли.

Таким образом, проведенные исследования концентрации sCD50, sCD95 и sHLA-I класса в сыворотке у 22 больных с ММ, XJIJI и НХЛ в зависимости от проводимой противоопухолевой химиотерапии, выявили однотипные изменения. Они свидетельствуют о том, что в обеих группах больных исходная концентрация sCD50 была достоверно ниже контрольных значений, а концентрации sCD95 и sHLA-I достоверно ее превышали (табл. 5). Объяснить полученный факт достаточно трудно, так как в настоящее время нет убедительных данных, раскрывающих механизм синтеза и метаболизм растворимых молекул.

Касаясь оценки растворимых адгезивных молекул (sCD50), их следует рассмотреть в связи с экспрессией

Таблица 5. Концентрация sCD50, sCD95, sHLA-I у 22 больных ММ, ХЛЛ, НХЛ до и после курса химиотерапии.

Группы (кол-во больных) Концентрация (ед./мл) лимфоциты гранулоциты

SCD50 до/после scd95 до/после SHLA-I до/после до/после до/после

мм (И) 152 ±2,3 845 ± 247 2887 ± 903 1,6 ±0,2 х ю% 1,1 ±0,1 р<0,01 2,2 ±0,3

210 ±70 р>0,05 Рик<0,05 Рплк^.05 1398 ±410 р>0,05 р„к>0,05 Ріілк<0,05 2739 ±723 р>0,05 Phk^OS Рплк<0,05 3,1 ±0,7 р>0,05

ХЛЛ, НХЛ (8) 214 ± 61 952 ± 222 2127 ±393 58 ±48 -

327± 116 р>0,05 Рик<0,05 PrL-1^0,05 885 ± 212 р>0,05 Рик<0,05 Piuik^OS 1516 ±127 р>0,05 Рик<0,05 Piuik^OS 70 ±52 р>0,05

Контроль 342 ± 20 п=43 401 ± 17,8 п=38 1021 ±98 п=35

мембранных С050. В наших наблюдениях экспрессия мембранных С050 на лимфоцитах крови была достаточно высокой как при ХЛЛ, так и при ММ. Следовательно, имеет место очевидная диспропорция между экспрессией мембранных адгезивных молекул (С050) и концентрацией в сыворотке растворимых молекул адгезии (вСОбО).

В связи с этим можно высказать предположение, которое заключается в том, что у исследуемых больных нарушен синтез бС050. Это приводит к их дефициту в гуморальных средах и уменьшению связывания стромальных и клеточных лигандов, что, в свою очередь, увеличивает вероятность непосредственного взаимодействия клеток между собой и стромой. В связи с этим происходит накопление опухолевых клеток или их предшественников (ММ) в костном мозге, печени, селезенке или других органах.

Эта концепция сформулирована на основании проведенного настоящего исследования, включая клинические наблюдения. В действительности, у большинства исследованных больных с ММ, ХЛЛ и НХЛ отмечена большая масса опухоли с опухолевой инфильтрацией костного мозга, костей, лимфатических узлов, печени, селезенки, желудка.

В то же время следует сделать ряд дополнений к выс-казыванной точке зрения, так как несколько клинических наблюдений являются исключением из этого положения. В одном наблюдении ХЛЛ низкая концентрация вС050 в сыворотке сочеталась с гигантской гепато и спленомега-лией и гиперлейкоцитозом. Однако гиперлейкоцитоз не мог быть объяснен с точки зрения предложенной концепции. По-видимому, в данном наблюдении избыточное накопление опухолевых клеток в селезенке затрудняло их дальнейшее поступление в орган, и они накапливались в крови.

В другом наблюдешш ХЛЛ отмечалась высокая концентрация бС050 в сыворотке, при этом была значительная лимфоаденопатия, лейкоцитоз, но не было спленоме-галии. В этом случае высокая концентрация вСВ50 в сыворотке выключала из непосредственного межклеточного взаимодействия опухолевые клетки за счет блокирования их лигандов, что обеспечивало свободную циркуляцию лимфоцитов в крови. По-видимому, сильная экспрессия лигандов в селезенке была нейтрализована избытком бС050, что предотвратило накопление клеток в этом месте.

В то же время накопление опухолевых клеток в лимфатических узлах не могло быть объяснено с позиций вС050 лигандного взаимодействия. Вероятно другая адгезивно-лигандная система обеспечивала накопление опухолевых клеток в лимфатических узлах в данном наблюдении.

Следует так же подчеркнуть, что повышение бСЭЗО после курса лечения относительно данных контроля, представляет собой статистически подтвержденную тенденцию. Она может указывать на переход мембранных С050 в гуморальные среды после цитостатического разрушения клеток или избирательного воздействия цитосгатиков на мембранные С050.

При анализе концентраций вС095 в сыворотке крови у больных ММ, ХЛЛ и НХЛ, установленные изменения сводились к тому, что исследуемые показатели до проведе-

ния курсов ХТ были выше, чем в контроле. После проведенного лечения у больных с ММ концентрация эС095 повышалась, и различия с контролем становились достоверными. При ХЛЛ и НХЛ значения бС095 до и после лечения были достоверно выше контроля и в процессе лечения достоверно не изменялись.

В настоящее время нет объединяющей гипотезы, объясняющей биологическое значение йС095 при ММ, ХЛЛ и НХЛ. Хотя существует достаточно много точек зрения, высказываемых по этому поводу. На наш взгляд более точно отражает суть проблемы точка зрения, предполагающая, что бС095 синтезируется опухолевыми клетками и за счет конкурирования с РА5-Ь защищает бласгные клетки от апоптоза, вызываемого цитотоксическими Т-лим-фоцитами.

Применяя данную, экспериментально подтвержденную, гипотезу для объяснения собственных результатов, очевидно, что полученные высокие значения исходных концентраций свидетельствуют о большой массе опухоли, что совпадало с клиническими наблюдениями. Кроме того, блокирование апоптоза в опухолевых клетках за счет высоких концентраций бСВ95 по существу позволяет рассматривать ММ, ХЛЛ и НХЛ как болезни, прогрессирование которых связано с накоплением массы опухоли. Это согласуется с ранее полученными результатами, установившими очень низкую пролиферативную активность опухолевых клеток при данных заболеваниях. Отсутствие достоверных изменений концентрации зС095 после лечения при получении клинического эффекта, по-видимому, связано с переходом мембранных СЭ95 с разрушенных клеток в сыворотку.

При анализе концентраций зН1А-1, мембранный аналог которого широко экспрессируется на клетках крови, установлено достоверное повышение исходных значений у исследуемых больных. Сопоставление концентрации зНЬА-1 с клиническими данными показало, что концентрация 5НЬА-1 достоверно коррелирует с массой опухоли при ХЛЛ и ММ и поэтому хНЬА-1 может рассматриваться как интегральный критерий массы. Этот показатель имеет очень важное значение для клинической гематологии, так как его можно использовать в качестве критерия эффективности терапии и для прогнозирования рисков клинического течения. Совпадение высоких концентраций зНЬА-1 с большой массой опухоли может указывать на определенную роль эНЬА-! в патогенезе опухолевого роста. Возможно, что вНЬА могут блокировать соответствующие лигавды на клетках мишенях или супрессорах, предотвращая супрессорный эффект иммунной системы на опухолевые клетки.

Литература

I. Новиков В.В. Растворимые дифференцировочные антигены В кн. Иммунотерапия рака. Материалы Европейской школы онкологов 1999, Москва, с. 1-8

2 ПтицынаЮ.С., Новиков Д.В.,Мартынова Т.Г.,Барышни ков А.Ю.,Новиков В.В. Повышенное содержание растворимой формы CD50 антигена (ICAM-3) в сыворотке крови больных вирусным гепатитом G. Аллергология и иммунология, 2000, №9, с. 40

3. Vyasmina E.S., Ptysina Yu. S., Matveeva E.M., Komarova V.D., Baryshnikov A.Y Novikov B.B. Soluble form of HLA class 1 in HIV-infected person and patients with syphilis and/or hepatitis С Russian Journal of HIV/AIDS and related problems, 2001, V. 5, №1, p. 136-137

4. Ptysina Yu.S., Bomyakova L.A., Baryshnikov A. Yu, Martynova T.G., Kryzhanova M. A., Novikov B.B. A soluble form of FAS/Apo-1 (CD95) antigen in the serum of viral hepatitis patients. International Journal on Immunorehabilita-tion, 1999, №14, p 110-111

5. Christensen I., Sundstrom C, Torreman T. Elevated serum levels of soluble vascular cell adhesion molecule-I (SVCAM-I) closely reflect tumor burden in chronic B-lymphocytes leukaemia. Brit. j. Haematology, 1998,4,103,1129 -1137.

6. Clark P., Boswell F., Pearson C., Walker I.D., Grur I.A. Trombin induction of ICAM-I on monocytes and the relationship between monocytes ICAM-I and plasma ICAM-

I in pregnancy. Haematologica, 1999,84, p. 184

7. Del Poeta G., Maurillo L., Suppo G., VendittiA. Both high CD38 and soluble APO-I/FAS (CD95) correlate with advanced stages and poor outcome in В chronic lymphoid leukaemia (В-cell). The Hematol. j., 2000, VI, Sip. 91.

8. Hatzimichael E., Makis A., Chaidos A., Christou L. Soluble adhesion molecules in plasma cell leukaemia. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 163.

9. Salem М., Elbar O., Alwady М., Mabel М., et. al. Serum levels of soluble adhesion molecules (ICAM and VCAM-I). Glicient biomarkers of disease status and response to therapy in non- Hodgkins lymphoma. Haematologica, 1999,84, p.155.

10. Schwaranaier J.D., Shehate М., Milgardn, Hubman R., Treil R. The role of soluble CD23 in differentiation between stable and progressive forms of В-cell. The Hematol. j., 2001, VI, SI, p. 102.

II. Wolowiec D., Frudecka I., Kopelko-Slowic K., Protocrek S., et. al. Concentration of serum soluble form of ICAM-I and E-selectin in patients with different phases of non-Hodgkins lymphoma. The Hematol. j., 2001, VI, SI, p. 140.

12. Gnones A., Shell V., Consoli U., Clodi K., et. al. Elevated levels of biologicaly active soluble CD40 ligand in the serum of patients with chronic lymphocytic leukaemia. Brit. j. Haematology, 1998,100, p. 135 -141.