Микрофлора кожи у больных раком молочной железы в условиях противоопухолевой химиотерапии

МИКРОФЛОРА КОЖИ У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ В УСЛОВИЯХ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ХИМИОТЕРАПИИ

О.СЖданова1, Е.П. Красноженов1, В.Е. Гольдберг2, Н.О. Попова2, М.Н. Миненко1, Н.П. Карпинская1

Сибирский государственный медицинский университет, кафедра микробиологии', г. Томск

НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН2

Исследовано состояние микрофлоры кожи у больных раком молочной железы. Полученные данные указывают на развитие дисбактериоза кожи, появление микрофлоры с признаками патогенности, снижение колонизационной резистентное™ в условиях противоопухолевой химиотерапии. На фоне применения противоопухолевого антибиотика адриабласти-на наблюдается снижение обсемененности кожи микроорганизмами и ложное увеличение индекса бактерицидной активности кожи.

SKIN MICROFLORA IN BREAST CANCER PATIENTS UNDER THE CONDITION OF ANTI-TUMOR

CHEMOTHERAPY

O.S. Zhdanova1, E.P. Krasnozhenov1, V.E. Goldberg2, N.O. Popova2, M.N. Minenko1, N.P. Karpinskaya1

Microbiology Chair, Siberian State Medical University', Tomsk Cancer Research Institute, SB RAMSf, Tomsk

Skin microflora was studied in breast cancer patients. The data obtained showed that anti-tumor chemotherapy resulted in the development of skin dysbacteriosis, the evidence of pathogenicity in microflora and the reduction in colonization resistance. When administering adriblastine (anti-tumor antibiotic) the reduction in skin dissemination with microorganisms and the false increase in the index of bactericidal skin activity were found.

В онкологической практике серьезную угрозу для больных представляют бактериальные и грибковые инфекции, являющиеся причиной повышения смертности в условиях химиотерапии и послеоперационном периоде. Часто в качестве возбудителя таких инфекций выступают представители эндогенной микрофлоры пищеварительного тракта и кожи [8, 9].

Нормальная микрофлора кожи в совокупности с факторами неспецифической резистентности и иммунными механизмами препятствует заселению биотопов кожи потенциально патогенными микроорганизмами, обеспечивая колонизационную резистентность (КР). В случае снижения КР увеличивается число и спектр потенциально патогенных микроорганизмов, отмечается их транслокация во внутренние органы и развитие гнойно-воспалительных процессов и септицемии [10]. При комплексном лечении онкологических заболеваний, а также в результате иммунодепрессивного влияния опухо-

ли может наблюдаться изменение микробного биоценоза, выражающееся в увеличении количественного и изменении качественного состава микрофлоры. При этом возможно снижение бактерицидной активности кожи.

Целью нашего исследования явилось изучение состояния микрофлоры кожи в условиях противоопухолевой химиотерапии.

Материалы и методы

Нами было проведено качественное и количественное исследование микрофлоры кожи, бактерицидной активности кожи (БАК), кислотности кожи у 23 женщин в возрасте 49—57 лет с раком молочной железы, проходящих курс полихимиотерапии по адриабластинсодержащим схемам CAF и FAC. Исследования проводили до начала курса химиотерапии, после первого и второго курсов. В качестве контрольной груп-

пы выступали 25 здоровых женщин-доброволь-цев того же возраста.

Микрофлору кожи исследовали методом бактериальных отпечатков по методу Н.Н. Клем-парской с использованием стерильных пластиковых микрочашек площадью 10 см2 с набором стандартных питательных сред: кровяной, желточно-солевой агары, среды Эндо и Сабу-ро. Отпечатки брали с различных биотопов кожи: предплечье, правая и левая молочная железы. Время аппликации составляло 5 с. Учет колоний проводили спустя 24 ч инкубации при 37" С, для грибов - через 5 сут при комнатной температуре. Дифференцировку микроорганизмов проводили по морфологическим, тинкто-риальным и биохимическим свойствам. Определение общей микробной обсемененности кожи проводили методом смывов. Оценка бактерицидной активности кожи проводилась по методу Н.Н. Клемпарской и Г.А. Шальновой [7] на коже предплечья.

Определение чувствительности тестовых культур (S. aures, S. albus, M. lysodeicticus) к химиопрепаратам, используемым при курсовом лечении больных по схемам CAF и FAC: цик-лофосфан, фторурацил, адриабластин, -проводили по аналогии определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом серийных разведений. Из каждого препарата готовили пять десятикратных разведений исходя из его максимальной концентрации: адриабластин - 1,25; 0,125; 0,0125; 0,00125; 0,000125 мг/мл, циклофосфан - 50; 5; 0,5; 0,05; 0,005 мг/мл, 5-фторурацил - 25; 2,5; 0,25; 0,025; 0,0025 мг/мл.

Математическая обработка результатов проводилась с использованием пакета программ «Statistica for Windows 6.0». Так как распределение данных не соответствовало нормальному, были использованы непараметрические критерии: U-критерий Манна — Уитни для независимых выборок и критерий Вилкоксона для зависимых выборок.

Таблица

Общее микробное число различных биотопов кожи больных раком молочной железы в условиях противоопухолевой химиотерапии, Х±т

Группы обследуемых женщин Общее микробное число

Кожа предплечья Кожа непораженной молочной железы Кожа пораженной молочной железы

Женщины группы сравнения(п=25) 17,52±1,47 31,44*3,75 -

Женщины с РМЖ до 41,83±5,32 57.26*8,26 91,71*16,21

начала лечения (п=23) р<0,05 р<0,05 р<0,05

Женщины с РМЖ 37,74*12,81 45,61*8,43 57,61*14,52

после 1 -го курса р>0,05 р>0,05 р>0,05

химиотерапии (п=23) р’>0,05 р‘ > 0,05 р‘ > 0,05 .

Женщины с РМЖ 32,24*7,31 39,10*6,92 44,67*17Д7

после 2-го курса рХ),05 р>0,05 р>0,05

химиотерапии (п=21) р'Х),05 р’ > 0,05 р’<0,05

Примечания, р — уровень достоверности результатов между группой сравнения и женщинами с РМЖ ло проведения противоопухолевой химиотерапии и группами женщин после 1-го и 2-го курсов; р1 - уровень достоверности между группами женщин до лечения и после 1 -го и 2-го курсов.

Результаты

и

обсуждение

У женщин с РМЖ до начала лечения на коже предплечья высевались ассоциации стафилококков 2-3 видов, у 30 % отмечался рост монокультуры, а на коже молочных желез определялись не более 3 видов стафилококка и 2— 3 видов микрококка. При этом гемолитические штаммы составляли 20-40 % от общего количества выделяемых микроорганизмов.

После первого курса химиотерапии у женщин с РМЖ разнообразие видов сократилось за счет грибов, а множественность ассоциаций выделяемых микроорганизмов существенно не изменилась. Регистрировалось увеличение доли гемолитических штаммов до 50 %. После второго курса химиотерапии доминирующее положение в кожном микробиоценозе занимали стафилококки, резко снизилось количество дифтероидов. При этом доля гемолитических штаммов достигла 50—61 %. У двух пациенток определялся золотистый стафилококк. На коже молочных желез множественность ассоциаций стафилококка оставалась прежней, а микрококк либо не определялся вообще, либо высевался в монокультуре.

Проведенное исследование показало, что у женщин с РМЖ появлялись условно-патогенные микроорганизмы, численность их возрастала после каждого курса химиотерапии. Цито-статические препараты, широко использующиеся в терапии рака, известны своей способностью подавлять иммунитет [2]. Их применение способствует снижению КР, что, в свою очередь, приводит к увеличению микроорганизмов с признаками вирулентности.

Анализ проведенных исследований показал, что различные биотопы кожи больных РМЖ отличались повышенной микробной обсеме-ненностью. На коже пораженной молочной железы определялось в три раза больше микроорганизмов, чем у женщин группы сравнения, и почти в два раза больше, чем на коже непораженной молочной железы. Известно, что количество микроорганизмов, колонизирующих кожу, возрастает при различных патологичес-

ких состояниях. Считают, что это явление связано со снижением реактивности организма [3— 6,10]. В условиях цикловой противоопухолевой химиотерапии общая микробная обсемененноспь кожи во всех биотопах снижается (таблица).

Изучение нормальной микрофлоры кожи женщин с РМЖ в условиях противоопухолевой химиотерапии позволило выявить глубокие нарушения в составе кожного микробиоценоза, проявляющиеся в скудности видового разнообразия, увеличении числа условно-патогенных микроорганизмов, что указывает на снижение КР вследствие применения антибиотиков, цитоста-тических препаратов и влияния самой опухоли.

В ходе изучения бактерицидной активности кожи было выявлено достоверное снижение этого показателя у больных РМЖ до химиотерапии. После первого курса химиотерапии БАК

но

Е Г руппа здоровых женщин  Г руппа женщин до химиотерапии ШГруппа женщин после 1-го курса химиотерапии В Группа жеишин после 2-го курс» химиотерапии

Рис. 1. Индекс бактерицидной активности у здоровых женщин и женщин с РМЖ: * — различия достоверны между контролем и группой женщин до химиотерапии: л — различия достоверны между контролем и группой жешцин после 1-го курса химиотерапии

возросла и продолжала оставаться на том же уровне (рис. 1) после второго курса.

Снижение общего микробного числа кожи после курсов химиотерапии и увеличение БАК требовали логического объяснения. Поэтому нами было проведено дополнительное исследование — определение чувствительности тестовых культур (8. ашга, 8. аШш, М. lysodeicticus) к химиопрепаратам, используемым при курсовом лечении больных по схеме САБ: циклофосфан, 5-фторурацил, адриабластин. Оказалось, что наибольшим угнетающим действием на тестовые культуры обладал адриабластин. Наиболее чувствительными культурами к нему оказались 8. а1Ьш и М. lysodeicticus.

Результаты, полученные в ходе исследования, позволяют предположить, что снижение общего микробного числа кожи и мнимое увеличение бактерицидной активности кожи женщин с РМЖ после первого и второго курсов химиотерапии связаны с высокой чувствительностью представителей дермальной микрофлоры к противоопухолевому антибиотику — адриабласти-ну. Возможно, высокая чувствительность микрофлоры связана с механизмом действия данного препарата. Основной эффект адриаблас-тина заключается в подавлении синтеза нуклеиновых кислот [1]. Показано, что аналог этого антибиотика — рубомицин подавлял синтез ДНК в бактериальных и животных клетках. В то же время установлено отсутствие существенных отличий в молекулярном механизме действия ад-риабластина и рубомицина [2].

Таким образом, у женщин с РМЖ еще до проведения химиотерапии выявляются нарушения в кожном микробиоценозе (дисбактериоз кожи), снижается бактерицидная активность

кожи. В условиях противоопухолевой химиотерапии признаки дисбактериоза кожи нарастают. Снижается общее микробное число кожи и повышается ее бактерицидная активность, что является следствием применения противоопухолевого антибиотика адриабластина.

Литература

Х.ГершановичМ.Л. Осложнения прихимио- и гормонотерапии злокачественных опухолей. Л.: Медицина, 1982. 224 с.

2. Гольдберг Е.Д., Новицкий В.В. Противоопухоле вые антибиотики антрациклинового ряда и система кро ви. Томск, 1986.236 с.

3. Иванов А. А. Микроэкология кожи человека и ее взаимосвязь с иммунным статусом организма// Материа лы науч.-практ. конф. 1989. С. 3—11.

4. КалюжнаяЛ.Д., РуденкоА.В., Мурзина Э.А., Волощук Е.М. Аутофлора кожи больных с атопическим дерма титом // Укр. мед. часопис. 1999. № 4 (12). С. 13-19.

5. Клемпарская Н.Н. Изменения микрофлоры кожи при действии на организм экзогенных и эндогенных фак торов // Материалы науч.-практ. конф. 1989. С. 12—23.

6. Клемпарская Н.Н., Шальнова Г.А. Аутофлора как индикатор радиационного поражения организма. М.: Медицина, 1966.207 с.

7. Насонова Т.А., Мальцев В.Н. Современные пред ставления о значении нормальной микрофлоры тела в норме и патологии // Успехи совр. биол. 1983. Т. 96, вып.

1 (4). С. 139-149.

8. Сакаееа Д.Д. Нейтропения при комбинированной химиотерапии злокачественных опухолей и методы ее кор рекции // Г ематология и трансфузиология. 2003. Т. 48, №5. С. 41-48.

9. Смолянская А3., Дмитриева Н.В. и др. Грибковая инфекция в онкологической клинике // Антибиотики и хи миотерапия. 1999. Т. 44, № 4. С. 26-30.

10. Шендеров Б.А. Колонизационная резистентность и антимикробные препараты // Успехи в области изучения и производства антибиотиков ВНИИ антибиотиков. 1990. Вып. 19. С. 5-15.

Поступила 15.12.04