ИММУНОГЛОБУЛИНЫ К CD52 ЧЕЛОВЕКА

1. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, в котором легкая цепь и тяжелая цепь включают три гипервариабельных участка (CDR), находящиеся в
а) SEQ ID NO: 3 и 16, соответственно;
б) SEQ ID NO: 4 и 17, соответственно;
в) SEQ ID NO: 5 и 18, соответственно;
г) SEQ ID NO: 6 и 19, соответственно;
д) SEQ ID NO: 7 и 20, соответственно;
е) SEQ ID NO: 8 и 21, соответственно;
ж) SEQ ID NO: 10 и 23, соответственно;
з) SEQ ID NO: 12 и 25, соответственно;
и) SEQ ID NO: 12 и 137, соответственно; или
к) SEQ ID NO: 13 и 26, соответственно.
2. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, связывающиеся с той же самой антигенной детерминантой на CD52 человека, что и моноклональное антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1.
3. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, конкурирующие прямым или перекрестным образом с моноклональным антителом или антигенсвязывающим фрагментом по п.1.
4. Моноклональное антитело или антигенсвязывающий фрагмент по пп.1, 2 или 3, где антитело представлено гуманизированным антителом, мышиным антителом или химерным антителом.
5. Моноклональное антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где каркасные участки тяжелой цепи указанного антитела включают последовательности зародышевой линии VH3-72 или VH3-23 человека, и где каркасные участки легкой цепи указанного антитела включают последовательность зародышевой линии VΚ2 A18b человека.
6. Моноклональное антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где антитело включает (H)-CDR1, H-CDR2, H-CDR3 тяжелой цепи и (L)-CDR1, L-CDR2 и L-CDR3 легкой цепи, аминокислотные последовательности которых представлены следующими:
а) SEQ ID NO: 51, 59, 69, 29, 36 и 43, соответственно;
б) SEQ ID NO: 50, 60, 69, 29, 37 и 43, соответственно;
в) SEQ ID NO: 50, 61, 68, 29, 38 и 43, соответственно;
г) SEQ ID NO: 50, 61, 69, 29, 36 и 43, соответственно;
д) SEQ ID NO: 50, 62, 69, 29, 39 и 43, соответственно;
е) SEQ ID NO: 52, 61, 70, 30, 40 и 43, соответственно;
ж) SEQ ID NO: 54, 64, 71, 31, 36 и 45, соответственно;
з) SEQ ID NO: 56, 65, 73, 32, 41 и 47, соответственно;
и) SEQ ID NO: 56, 65, 294, 32, 41 и 47, соответственно; или
к) SEQ ID NO: 56, 66, 74, 33, 41 и 48, соответственно.
7. Моноклональное антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где легкая цепь и тяжелая цепь указанного антитела включают следующие аминокислотные последовательности:
а) SEQ ID NO: 3 и 16, соответственно;
б) SEQ ID NO: 4 и 17, соответственно;
в) SEQ ID NO: 5 и 18, соответственно;
г) SEQ ID NO: 6 и 19, соответственно;
д) SEQ ID NO: 7 и 20, соответственно;
е) SEQ ID NO: 8 и 21, соответственно;
ж) SEQ ID NO: 10 и 23, соответственно;
з) SEQ ID NO: 12 и 25, соответственно; или
и) SEQ ID NO: 13 и 26, соответственно.
8. Моноклональное антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где указанная тяжелая цепь и легкая цепь включают следующие аминокислотные последовательности:
а) SEQ ID NO: 103 и 102, соответственно;
б) SEQ ID NO: 136 и 138, соответственно;
в) SEQ ID NO: 137 и 138, соответственно;
г) SEQ ID NO: 158 и 165, соответственно;
д) SEQ ID NO: 158 и 166, соответственно;
е) SEQ ID NO: 159 и 165, соответственно;
ж) SEQ ID NO: 159 и 166, соответственно;
з) SEQ ID NO: 161 и 166, соответственно; или
и) SEQ ID NO: 163 и 166, соответственно.
9. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, при этом тяжелая цепь и легкая цепь указанного антитела включают аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 274 и 275, соответственно, без сигнальных последовательностей.
10. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, при этом тяжелая цепь и легкая цепь указанного антитела включают аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 276 и 278, соответственно, без сигнальных последовательностей.
11. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, при этом тяжелая цепь и легкая цепь указанного антитела включают аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 277 и 278, соответственно, без сигнальных последовательностей.
12. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, при этом тяжелая цепь и легкая цепь указанного антитела включают аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 281 и 282, соответственно, без сигнальных последовательностей.
13. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, при этом легкая цепь указанного антитела включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 102, 138 и 164-168.
14. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, при этом легкая цепь указанного антитела включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 275, 278 и 282, без сигнальных последовательностей.
15. Легкая цепь антитела или ее фрагмент, включающие аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 102, 138, 164-168, 275, 278 и 282, без сигнальных последовательностей (если присутствуют).
16. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, при этом тяжелая цепь указанного антитела включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 103, 136, 137 и 158-163.
17. Моноклональное антитело к CD52 человека или его антигенсвязывающий фрагмент, при этом тяжелая цепь указанного антитела включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 274, 276, 277 и 281, без сигнальных последовательностей.
18. Тяжелая цепь антитела или ее фрагмент, включающие аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 103, 136, 137, 158-163, 274, 276, 277 и 281, без сигнальных последовательностей (если присутствуют).
19. Моноклональное антитело по любому из пп.1-8, 13, 16 и 18, где указанное антитело представлено молекулой IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4.
20. Антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-8, 13, 16 и 18, где такой фрагмент представлен одноцепочечным антителом, Fv, Fab, Fab’, F(ab’)2, Fd, одноцепочечной молекулой Fv (scFv), биспецифическим одноцепочечным димером Fv, диателом, антителом с удаленным доменом или антителом с одним доменом (dAb).
21. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по пп.1, 2 или 3, где указанное антитело или фрагмент связываются с аминокислотной последовательностью, включающей SEQ ID NO: 104, и в некоторых случаях связывание указанного антитела или фрагмента с SEQ ID NO: 104 снижено в результате замещения аланина в одном или нескольких остатках 4, 7, 8 и 11 последовательности SEQ ID NO: 104.
22. Моноклональное антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-8, 13, 14, 16, 17 и 19-21, где указанное антитело или антигенсвязывающий фрагмент обладают одним или несколькими свойствами, выбираемыми из группы, состоящей из следующего:
а) снижение количества Т- или В-лимфоцитов, или обоих типов клеток;
б) преимущественное снижение количества Т-лимфоцитов в сравнении с В-лимфоцитами;
в) повышение уровней циркуляции ФНО-альфа, ИЛ-6 или MCP-1 в сыворотке;
г) опосредование антитело-зависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (АЗКЦ) клеток, экспрессирующих CD52;
д) опосредование комплемент-зависимой цитотоксичности (КЗЦ) клеток, экспрессирующих CD52;
е) связывание с CD52 в присутствии нейтрализующих антител к алемтузумабу; и
ж) способствование внутриклеточной передаче сигналов в Т- или В-лимфоцитах человека, или клеток обоих типов.
23. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь или ее антигенсвязывающий участокантитела  по любому из пп.1, 4-14, 16, 17 и 19-22.
24. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь или ее антигенсвязывающий участок антитела по любому из пп.1, 4-14, 16, 17 и 19-22.
25. Выделенная нуклеиновая кислота, включающая:
а) нуклеотидную последовательность тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 285, 287, 288 и 292, или указанную нуклеотидную последовательность без последовательности, кодирующей сигнальный пептид;
б) нуклеотидную последовательность легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 286, 289 и 293, или указанную нуклеотидную последовательность без последовательности, кодирующей сигнальный пептид; или
в) нуклеотидные последовательности по п. а) и б).
26. Выделенная нуклеиновая кислота по п.25, где указанная выделенная нуклеиновая кислота включает нуклеотидную последовательность тяжелой цепи и нуклеотидную последовательность легкой цепи, выбранные из группы, состоящей из:
а) SEQ ID NO: 285 и SEQ ID NO: 286, соответственно, обе последовательности без последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды;
б) SEQ ID NO: 287 и SEQ ID NO: 289, соответственно, обе последовательности без последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды;
с) SEQ ID NO: 288 и SEQ ID NO: 289, соответственно, обе последовательности без последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды; и
д) SEQ ID NO: 292 и SEQ ID NO: 293, соответственно, обе последовательности без последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды.
27. Применение выделенной нуклеиновой кислоты, включающей нуклеотидную последовательность тяжелой цепи, и выделенной нуклеиновой кислоты, включающей нуклеотидную последовательность легкой цепи, для получения лекарственного средства для лечения пациента, причем указанная нуклеотидная последовательность тяжелой цепи и нуклеотидная последовательность легкой цепи выбраны из группы, состоящей из:
а) SEQ ID NO: 285 и SEQ ID NO: 286, соответственно, обе последовательности без последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды;
б) SEQ ID NO: 287 и SEQ ID NO: 289, соответственно, обе последовательности без последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды;
в) SEQ ID NO: 288 и SEQ ID NO: 289, соответственно, обе последовательности без последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды;
е) SEQ ID NO: 292 и SEQ ID NO: 293, соответственно, обе последовательности без последовательностей, кодирующих сигнальные пептиды.
28. Рекомбинантный вектор, включающий (1) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую тяжелую цепь или ее антигенсвязывающий фрагмент, (2) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую легкую цепь или ее антигенсвязывающий фрагмент, или (3) обе нуклеиновые кислоты моноклонального антитела по любому из пп.1, 4-14, 16, 17 и 19-22.
29. Клетка-хозяин, содержащая первую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую тяжелую цепь или антигенсвязывающий фрагмент моноклонального антитела по любому из пп.1, 4-14, 16, 17 и 19-22, причем указанная первая последовательность нуклеиновой кислоты функционально связана с контрольным элементом экспрессии, и вторую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую легкую цепь или антигенсвязывающий фрагмент моноклонального антитела, причем указанная последовательность второй нуклеиновой кислоты функционально связана с контрольным элементом экспрессии.
30. Способ получения антитела к CD52 или его антигенсвязывающего фрагмента, включающий содержание клетки-хозяина по п.29 в условиях, подходящих для экспрессии антитела или его фрагмента.
31. Способ по п.30, дополнительно включающий выделение антитела или фрагмента.
32. Композиция, включающая моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22, и фармацевтически приемлемую основу или носитель.
33. Способ лечения пациента, нуждающегося в этом, включающий введение пациенту эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22.
34. Способ по п.33, в котором пациент подвергается трансплантации.
35. Способ по п.33, дополнительно включающий введение пациенту агента, стимулирующего нейтрофилы или NK-клетки.
36. Способ по п.35, где агент представлен Г-КСФ или ГМ-КСФ.
37. Способ по п.33, дополнительно включающий введение пациенту агента, стимулирующего регуляторные Т-клетки.
38. Способ по п.37, где агент представлен рапамицином.
39. Способ лечения аутоиммунного заболевания у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение пациенту эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22.
40. Способ по п.39, где указанное аутоиммунное заболевание представлено рассеянным склерозом, ревматоидным артритом, системной красной волчанкой или васкулитом.
41. Способ лечения рака у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение пациенту эффективного количества моноклонального антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22.
42. Способ по п.41, где указанный рак представлен лейкозом.
43. Способ по п.41, где указанный рак представлен лимфомой.
44. Способ по п.41, где указанный рак представлен Т-клеточным злокачественным новообразованием, и антитело или его фрагмент преимущественно снижают количество Т-клеток в сравнении с В-клетками.
45. Способ по п.41, где указанный рак представлен солидной опухолью.
46. Способ ингибирования ангиогенеза у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение пациенту эффективного количества моноклонального антитела или его фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22.
47. Способ по п.46, где у пациента имеется солидная опухоль.
48. Способ по п.46, где у пациента имеется неоваскуляризация.
49. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22 для получения лекарственного средства для лечения аутоиммунного заболевания у пациента.
50. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22 для получения лекарственного средства для лечения рака у пациента.
51. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22 для получения лекарственного средства для лечения пациента, нуждающегося в трансплантации.
52. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22 для получения лекарственного средства для лечения неоваскуляризации у пациента.
53. Применение антитела или его фрагмента по любому из пп.1-14, 16, 17 и 19-22 в качестве лекарственного средства.