ОФТАЛЬМОЛОГИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО-2 ДЛЯ КРОССЛИНКИНГА
OPHTHALMIC CROSS-LINKING AGENT-2

Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии, а именно к изделиям медицинского назначения, используемым в качестве офтальмологического раствора, содержащего рибофлавин и вспомогательные вещества, применяемого для процедуры кросслинкинга при эктазиях роговицы.
Известно средство для роговичного коллагенового кросслинкинга, которое обеспечивает укрепление роговицы глаза за счет фотополимеризации стромальных волокон, вследствие комбинированного воздействия фотосенсибилизирующего вещества рибофлавина и ультрафиолетового излучения (A.Caporossi, C.Mazzotta, S.Baiocchi. Technological Innovations in Corneal Collagen Cross-Linking // Ophthalmology Times Europe. Sept. 2007).
За прототип принят офтальмологический раствор для кросслинкинга, содержащий рибофлавина мононуклеотид, декстран с молекулярной массой 450-550 Дa, натрия хлорид, трис-(гидроксиметил)-метиламин, нипагин, трилон Б и воду дистиллированную очищенную [М.М.Бикбов, А.Р.Халимов, Г.М.Бикбова. // Патент на изобретение RU №2412707 от 27.02.2011]. К недостаткам этого средства можно отнести необходимость проведения более частых и продолжительных инсталляций для насыщения роговицы рибофлавином, что обусловлено более низкой вязкостью и биодоступностью полимера. Кроме этого, цена декстрана превышает стоимость предлагаемого хитозана сукцината.
Задачей изобретения является разработка нового офтальмологического раствора пролонгированного действия, расширение арсенала средств для кросслинкинга.
Техническим результатом изобретения является повышение биологической доступности для активных компонентов, входящих в его состав, сокращение продолжительности и количества инстилляций при выполнении процедуры за счет замены его полимерной основы (декстран) на хитозана сукцинат, уменьшение содержания рибофлавина мононуклеотида, что становится возможным благодаря тому, что действующее вещество в достаточном количестве проникает в строму роговицы, а также повышает его растворимость при приготовлении раствора.
Предлагаемое офтальмологического средство согласно изобретению содержит рибофлавина мононуклеотид, хитозана сукцинат, натрия хлорид, трис-(гидроксиметил)-метиламин, нипагин, трилон Б и воду дистиллированную очищенную при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Рибофлавина мононуклеотид
0,09-0,11
Хитозана сукцинат
9,5-10,5
Натрия хлорид
0,8-0,9
Трис-(гидроксиметил)-метиламин
0,08-0,12
Нипагин
0,0075-0,0125
Трилон Б
0,005-0,01
Вода дистиллированная очищенная
остальное
Характеристика компонентов
Рибофлавина мононуклеотид (рибофлавин-5'-монофосфат натрия) - кристаллический порошок желто-оранжевого цвета. Водный раствор имеет желтовато-оранжевый цвет, интенсивно флюоресцирует в ультрафиолетовом свете. Введен в состав предлагаемого средства в концентрации 0,1 мас.%. Важно отметить, что растворимость рибофлавина мононуклеотида натрия значительно выше, чем рибофлавина.
Хитозан (хитозана сукцинат) - используется как гидрофильная основа для создания лекарственных препаратов, имеет низкую токсичность, не оказывают кумулирующего эффекта и, являясь альтернативой синтетическим полимерам, способен обеспечивать продолжительное нахождение действующего вещества в организме, обладая при этом собственным спектром фармакологической активности. Хитозановые гели увеличивают время контакта лечебных компонентов со слизистой. Взаимодействие хитозана с клеточной мембраной сопровождается увеличением проницаемости для лекарственного средства. Введен в состав предлагаемого средства в концентрации 10,0 мас.%.
Трис-(гидроксиметил)-метиламин, (трис) - белый кристаллический порошок, хорошо растворим в воде. Введен в состав предлагаемого средства в качестве буфера в концентрации 0,1 мас.%.
Трилон Б (динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) - представляет собой белый кристаллический порошок без запаха, хорошо растворимый в воде (ФС 42-1173-78 или ГОСТ 10652-73). Трилон Б связывает ионы тяжелых металлов, применяется в качестве стабилизатора для приготовления инъекционных растворов и глазных капель. В офтальмологическое средство трилон Б введен в качестве стабилизирующего компонента в концентрации 0,075 мас.%.
Нипагин - метиловый эфир n-оксибензойной кислоты, белый кристаллический порошок, плохо растворимый в воде (ФС 42-1460-80). Широко используется как консервант при приготовлении инъекционных растворов, глазных капель. В офтальмологическое средство нипагин введен как консервант, способствующий сохранению стерильности средства при хранении и в процессе его использования. Содержание нипагина в растворе составляет 0,01, поскольку оптимальными концентрациями, в которых он проявляет антимикробное действие, являются 0,01-0,05 мас.%.
Натрия хлорид - белый кристаллический порошок, хорошо растворим в воде. Натрия хлорид введен в состав предлагаемого раствора в качестве средства, обеспечивающего физиологическое осмотическое давление раствора.
Предлагаемое средство получают следующим образом. 0,1 г рибофлавина мононуклеотида растворяется при нагревании в 100 мл свежеприготовленной дистиллированной воды. Затем помещается 0,85 г натрия хлорида и 0,1 г трис-(гидроксиметил)-метиламина. Далее последовательно растворяются нипагин 0,01 г и трилон Б 0,075 г. На поверхность раствора порциями при нагревании до 40-50°С и постоянном перемешивании порциями вносится 10,0 г хитозана сукцината до полного растворения. Полученный раствор фильтруется через мембранный фильтр, фасуется во флаконы, которые укупориваются резиновыми пробками, обкатываются алюминиевыми колпачками и затем автоклавируются при 0,5 атм и 110°С в течение 30 минут. Хранится в защищенном от света месте. Срок годности 2 года.
При выполнении экспериментальных исследований проводилась биомикроскопия и офтальмоскопия после ежедневных инстилляций предложенного средства 6-ти кроликам (1-я группа) в течение 14 дней. Парный глаз служил контролем.
Во 2-й группе животных (6 кроликов) проводилась процедура кросслинкинга после деэпителизации роговицы диаметром 4 мм под местной анестезией (инокаин 0,4%). Инстилляций предлагаемого офтальмологического раствора сопровождались одновременным ультрафиолетовым облучением роговицы глаза кроликов устройством «УФалинк» (регистрационное удостоверение № ФСР 2009/05489) в течение 30 минут (6 интервалов по 5 мин, при длине волны 370 нм).
В 3-й экспериментальной группе (6 кроликов) выполнялась процедура кросслинкинга аналогично методике, применяемой в 2-й группе. Проводились инстилляции офтальмологического средства, содержащего 20% декстран.
Во второй группе в течение 3-х часов после процедуры наблюдался незначительный отек роговицы. В последующем установлено, что применение предлагаемого офтальмологического средства во всех экспериментальных группах не выявило какого-либо токсического или раздражающего действия при ежедневной биомикроскопии и офтальмоскопии в течение 14 дней, что было также подтверждено дальнейшими морфологическими исследованиями энуклеированных глаз экспериментальных животных.
Важно отметить, что в тех группах кроликов, где применялся предлагаемый раствор, потребовалось меньшее количество инстилляций (на 10) и времени (на 4 мин) для насыщения роговицы рибофлавином за счет более вязкой консистенции раствора и его высокой биодоступности.
В клинические наблюдения были включены 8 пациентов (8 глаз) в возрасте от 21 до 32 лет с диагнозом кератоконус II-III стадии (по классификации Amsler). Применялись традиционные офтальмологические методы исследования. Кроме этого, были проведены конфокальная биомикроскопия (HRT-III, Heidelberg, Германия), оптикокогерентная томография (ОКТ) (Vizante-OCT, Carl Zeiss, США).
Отек наружных слоев стромы роговицы наблюдали у 45,2% больных, который проходил на 2-3 день к моменту завершения эпителизации. Через месяц у этих пациентов отмечалось увеличение корригированной остроты зрения до 0,53±0,92 (p<0,05). Величина роговичного астигматизма уменьшилась на 2,24±0,25 D (p<0,05). Радиус кривизны роговицы увеличился до 6,88±0,10 мм. При проведении конфокальной микроскопии, через 1 месяц в передней строме выявлялся невыраженный апоптоз кератоцитов, задняя и средняя порции стромы сохранялись без существенных изменений.
За время наблюдений (12 месяцев) каких-либо осложнений, связанных с использованием предлагаемого офтальмологического средства, не отмечалось.
Настоящее изобретение иллюстрируется следующим клиническим примером.
Больной Р., 28 лет, поступил с диагнозом: кератоконус II стадии. Данные обследования: острота зрения - 0,2. Величина роговичного астигматизма - 4,8 D, радиус кривизны роговицы - 6,62 мм, толщина роговицы в центре - 484 мкм по данным оптикокогерентной томографии (ОКТ).
Процедура кросслинкинга проводилась в условиях операционной. Под местной анестезией (2% раствор лидокаина гидрохлорида), после деэпителизации роговицы диаметром 7 мм, производились инсталляции предлагаемого офтальмологического раствора в течение 15 минут, затем шестикратное облучение (по 5 минут) роговицы с использованием устройства «УФалинк» с одновременными инсталляциями предлагаемого офтальмологического средства. В послеоперационном периоде применялась местная антибактериальная и дегидратационная терапия.
В течение первого дня после кросслинкинга у пациента наблюдали незначительный отек наружных слоев роговицы, который исчезал к моменту завершения эпителизации. Через 28 дней отмечалось увеличение корригированной остроты зрения до 0,4. Роговичный астигматизм снизился на 2,4 D, радиус кривизны роговицы составил 6,70 мм, толщина роговицы в центре - 446 мкм (на ОКТ).
Таким образом, предлагаемый состав основы и активных компонентов офтальмологического средства гарантирует эффективное и безопасное проведение процедуры кросслинкинга, применяемого в лечении эктазий роговицы. Средство обеспечивает длительный контакт действующего вещества с оболочкой глаза, позволяет сократить количество инсталляций и дает экономию лекарственного средства.