Инфекционная иммунология

Медицинская Иммунология 2003, Т.5, № 3-4 ©2003, СПбРОРААКИ

ИНФЕКЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ

ВЫЯВЛЕНИЕ АНТИГЕНОВ ГРИБОВ ПРИ НЕКОТОРЫХ СОМАТИЧЕСКИХЗАБОЛЕВАНИЯХУДЕГЕЙ - НОВЫЙ ПОДХОД К ДИАГНОСТИКЕ МИКОТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ

Агафонова Е.В.. Халдеева Е.В., Нарыков Р.Х., Ананьева Н.С., Макарова Т.П., Шакирова А.Р., Шафикова Д. Л., Ривкина Г.И., Ившина И.Н.

Казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии, Казань, Россия; Казанский государственный медицинский университет, Казань, Россия

В современных условиях экологического прессинга, использования антибиотиков широкого спектра действия, распространения вторичной иммунологической недостаточности отмечается недостаточное внимание диагностике кандидозной инфекции, утяжеляющей течение соматических заболеваний у детей. В задачу работы входила клиническая апробация иммуноферментного сенсорного анализа (Казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии) по выявлению маннано-протеинового антигена клеточной стенки Candida albicans с использованием поликлональной кроличьей сыворотки при некоторых соматических заболеваниях. В исследование включались дети с хроническими гастродуоденитами и язвенной болезнью желудка (N=110), с вторичными пиелонефритами (N= 24), а также новорожденные дети от матерей с кандидомикозной инфекцией (N- 33).

Детям проводилось общепринятое культуральное микологическое исследование (посевы на агаризованную среду Сабуро с идентификацией микроскопическими и биохимическими методами: тесты на проростковые трубки и хламидоспоры, ферментация углеводов). Микологическому исследованию подвергались биоптаты слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки, а также средняя порция мочи. По данным авторов метода, выделяется очень высокий (10'2-10"3) - 4 класс, высокий ( 10~4-10~5 мг/мл) - 3 класс, умеренный (10~6-10~7 мг/мл ) - 2 класс, низкий ( 10-8-10'9 мг/мл ) -1 класс уровни антигенемии.

При хронических гастродуоденитах и язвенной болезни двенадцатиперстной кишки грибковая колонизация слизистой оболочки желудка отмечена в 32,4 % случаев, преимущественно видом Candida albicans, при этом у 98 % больных в сыворотке крови выявлен значимый уровень антигенемии от 10-9 до 10-2 мг/мл, преимущественно (70 %) отмечались реакции 2 и 3 класса. При хронических обструктивных пиелонефритах при непрерывно-рециди-вирующем течении кандидурия отмечена у 41,6 % детей, а в 90 % случаев отмечен значимый уровень антигенемии, преимущественно выявлены реакции 2-го и 3-го класса. При обследовании детей и матерей с клиническими проявлениями кандидозной инфекции среди рожениц антигене-мия отмечена в 70 % случаев, антигенемия у новорожденных выявлена в 66,7 %.

Таким образом, метод иммуносенсорного выявления маннанового антигена Candida albicans отличается высокой селективностью, экспрессностью и может быть использован как скринирующий в диагностике кандидозной инфекции при некоторых соматических заболеваниях у детей.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИНТРАВАГИНАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ ЛИК0ПИДА В ХОДЕ М0Н0ТЕРАПИИ ВАГИНАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ ИДИСБИОЗОВ

Аракелян М.А., Нестеров И.М., Тотолян А.А.

Санкт -Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П.Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Актуальность проблемы терапии инфекци-онно-воспалительных заболеваний женской половой сферы, разработка новых подходов на основе принципа иммуноориентации, внедрение в клиническую практику эффективных иммунотропных лекарственных средств очевидна. Среди современных иммунотропных средств с доказанной клинической эффективностью при терапии инфекционно-воспалительных заболеваний, в т.ч. гинекологического профиля, одними из перспективных являются препараты мурамилпептидного ряда, к которым относится Ликопид.

Цель исследования заключалась в оценке клиникоиммунологической эффективности интравагинального применения Ликопида (вагинальные свечи, мг) в ходе монотерапии хронических инфекционно-воспалительных и дисбиотических заболеваний нижнего отдела женской репродуктивной сферы.

Материалы и методы. В исследовании приняли участие 19 женщин репродуктивного возраста (средний возраст 28,4±1,1 лет) с наличием хронических неспецифического бактериального вагинита, бактериального вагиноза и кандидозного вагинита. Вагинальный микробиоценоз рассматривали в соответствии с классификациями, предложеннымиJirovec О. et al. (1947) и Кира Е.Ф. (1995). Клини-ко-микробиологические исследования с целью определения типа вагинального микробиоценоза проведены по стандартным общепринятым методикам. Клинико-микро-биологическая эффективность курса терапии оценивалась по частоте нормализации вагинального биоценоза.

Оценка местного иммунитета проведена в объеме определения иммуноглобулинового профиля вагинального секрета (определение концентрации IgA, slgA, IgM, IgE, IgG и его подклассов (IgGl - IgG4) методом ELISA параллельно в сыворотке крови и в вагинальном секрете). Определение функционального состояния (степень проницаемости) вагинального гисто-гематического барьера и механизма происхождения иммуноглобулинов в вагинальном секрете проводилось по сравнительной оценке концентрации альбумина (колориметрический метод) и иммуноглобулинов в вагинальном секрете и в сыворотке крови, а также анализа ряда интегральных показателей (Q -коэффициент проницаемости, ОКС - относительный коэффициент секреции). Клинико-иммунологические исследования проводились дважды - до и после проведенного курса терапии. Курс терапии Ликопидом составил 10 дней по 1 вагинальной свече.

Результаты исследований. Положительный клинический эффект применения Ликопида, отмеченный в 42% случаев (верификация вагинального нормоценоза), ха-

растеризовался следующими иммунологическими изменениями: тенденция к увеличению в вагинальном секрете уровней абсолютных и относительных концентраций и в^А; значимому (р<0,05) увеличению абсолютных и относительных концентраций и ^в2 на фоне увеличения коэффициентов () и ОКС для этих иммуноглобулинов.

Кроме того, в 48% случаев констатировано обострение хронического воспалительного процесса с выявлением ранее не диагностированных хламидиоза, мико-уреаплаз-моза, вируса простого герпеса. Изменения иммуноглобулинового профиля вагинального секрета пациенток этой группы состояли в увеличении суммарной концентрации иммуноглобулинов за счет тенденции к увеличению абсолютных концентраций и 1^0. Также констатировано достоверное (р<0,001) увеличение уровней абсолютных (более чем в 3 раза) и относительных (более чем в 5 раз) концентраций на фоне значимых (р<0,01) увеличений коэффициентов £) (^Е) и ОКС (1яЕ) при отсутствии достоверных изменений степени проницаемости вагинального гисто-гематического барьера и изменений концентрации сывороточного ^Е. Последний факт позволяет обосновать локально синтезируемое происхождение ^Е в вагинальном секрете у пациенток этой группы и резкое увеличение степени его местного синтеза под воздействием Ликопида.

Заключение. Таким образом, проведенное исследование демонстрирует достаточно высокую клиническую эффективность интравагинального применения Ликопида в ходе монотерапии инфекционно-воспалительных и дис-биотических заболеваний нижнего отдела женской половой сферы, а также позволяет характеризовать некоторые составные в механизме воздействия препарата на местный иммунитет женского репродуктивного тракта, что является перспективной предпосылкой для дальнейшего более углубленного (плацебо контролируемого) исследования.

ВЗАИМОСВЯЗЬ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ И КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫХ ПРОЯВЛЕНИЙ ОСТРОГО ПЕРИОДА ИНФЕКЦИОННОГО М0Н0НУКЛЕ03А И ПСЕВДОТУБЕРКУЛ ЕЗА У ДЕТЕЙ

Бертрам Л.И.. Кашуба Э. А., Дроздова Т.Г., Любимцева О.А., Полуэктова Л.В., Кулахметова Н.Н., Кечерукова Л.М.

Тюменская государственная медицинская академия, клинико-иммунологический центр;

Городская инфекционная клиническая больница, Тюмень, Россия

Заболеваемость цитомегаловирусной инфекцией точно не определена, но цитомегалия считается одной из самых распространенных инфекций человека. Характер клинических проявлений при данной болезни, а также и форма - манифестно выраженная или бессимптомная - зависят от реактивности организма.

Целью работы было определить особенности течения псевдотуберкулеза и инфекционного мононуклеоза на фоне инфицированности ЦМВ.

Под наблюдением находилось 37 детей в возрасте от 7 до 15 лет. Пациентов с псевдотуберкулезом было 26, а с инфекционным мононуклеозом - 11. Диагноз псевдотуберкулеза у всех детей был подтвержден серо-

логически, а инфекционного мононуклеоза - обнаружением атипичных мононуклеаров в периферической крови. Иммунный статус больных был исследован на 2-3 неделе болезни. С помощью моноклональных антител на лазерном цитометре «Facskan Becton Dickinson» определяли субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови в следующей панели моноклональных антител: CD3, CD4, CD8, CD16, CD20, CD23, CD7, CD71, CD38, CD50, CD54, HLADR. Уровни основных классов иммуноглобулинов определяли по Манчини (1965). Контрольную группу составили 12 детей сопоставимого возраста.

При наличии фоновой инфицированности ЦМВ псевдотуберкулез у детей протекал более тяжело, чаще с рвотой (в 2 раза), болями в животе (практически в 3 раза), сопровождался развитием налетов на миндалинах (в 19,05% случаев). Тяжесть течения заболевания у пациентов данной группы была обусловлена более частым вовлечением в процесс внутренних органов. Инфекционный мононуклеоз у серопозитивных к ЦМВ детей также протекал тяжелее, с повторными повышениями температуры (20%), сопровождался более выраженной и длительной интоксикацией (р<0,05). Общим в клинических проявлениях псевдотуберкулеза и инфекционного мононуклеоза у инфицированных ЦМВ детей было более частое развитие желтухи, выраженная лимфоаденопатия.

Анализ иммунограмм осуществлялся в период, когда идет восстановление измененных иммунологических показателей (2-3 неделя болезни). При псевдотуберкулезе на 2 - 3 неделе болезни у всех детей регистрировался лимфоцитоз (р<0,05), общее количество Т-лимфоцитов и их субпопуляций не отличалось от нормативных значений, а из активационных маркеров были повышенными значения CD38+ клеток. Различия в группах детей в зависимости от инфицированности ЦМВ при псевдотуберкулезе выявлены со стороны HLADR. Процент клеток, экспрессирующих данный маркер у ЦМВ серопозитивных оказался выше (р<0,05). Уровни В-лимфоцитов больных псевдотуберкулезом не отличались от нормативных значений, несколько повышенными были уровни IgA, IgM, а у ЦМВ серонегативных начинали повышаться IgG (р<0,05). Следовательно, при псевдотуберкулезе фоновая инфи-цированность ЦМВ задерживает продукцию иммуноглобулинов. При инфекционном мононуклеозе на 2-3 неделе болезни у ЦМВ - серопозитивных больных определялись более высокие показатели CD3+ клеток, низкие Т - хелперы (CD4+, pi<0,05). Повышенными в обеих группах были CD8+ (цитотоксические), (р<0,05), HLADR (р<0,001), СБ71+клетки, иммуноглобулины всех классов при низких значениях В- лимфоцитов ( р<0,05). Таким образом, при инфекционном мононуклеозе выявлена активная реакция со стороны клеточного иммунитета. Однотипные иммунологические реакции, характерные для ЦМВИ и инфекционного мононуклеоза определяют большую напряженность в иммунной системе при инфекционном мононуклеозе у ЦМВ - серопозитивных больных.

Выводы. Наличие фоновой инфицированности ЦМВ при псевдотуберкулезе и инфекционном мононуклеозе определяет более тяжелое течение заболевания, иммунорегу-ляторный дисбаланс в остром периоде болезни, а также необходимость проведения иммунореабилитационных мероприятий данным пациентам.

КОМПЛЕКСНЫЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ И МОЛЕКУЛЯРНО • МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ БОЛЬНЫХ С АБСЦЕССАМИ ГОЛОВНОГО МОЗГА

Благовещенский С.В.. Качков И.А., Чумаков В.А., Пинегин Б.В., Сучков С.В.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт, Москва, Россия;

Институт иммунологии, Москва, Россия

Цель. Разработка комплексного подхода к мониторингу больных с абсцессами головного мозга и оценка состояния иммунологической реактивности пациента.

Методы. Нами обследовано 20 пациентов с абсцессами головного мозга. Оценку бактериального профиля полости абсцесса проводили методом традиционного культивирования, содержание вирусов и внутриклеточных паразитов - методом ПЦР-анализа, наличие антимикробных аутоантител - методом ИФА, состояние иммунологической реактивности - путем оценки состава субпопуляций, уровня фагоцитоза, цитоки-нового спектра и сывороточной концентрации иммуноглобулинов.

Результаты. В посевах, взятых из полости абсцессов, выделялись стафилококки, стрептококки и P. aeruginosa. Редкой находкой были грамм-положительные анаэробы (Peptostreptococcus) и анаэробные палочки. В 4 случаях бактериальные посевы были стерильными. У 8 больных в полости абсцесса идентифицированы внутриклеточные паразиты (в том числе, в 4х случаях в комбинации со стафилококками и стрептококками). В одном случае у больного с острым менингитом in situ и в периферической крови выявлен генетический материал цитомегаловируса (ЦМВ). Результаты определения микробного пейзажа методами культуры и ПЦР-анализа подтверждены серологическим скринингом образцов крови на наличие антиин-фекционных аутоантител.

Наличие изолированной бактериальной инфекции сочеталось с отдельными негативными сдвигами в показателях иммунограммы - дисбалансом иммунорегулятор-ных субпопуляций, дефицитом СОЗ+-лимфоцитов, нарушениями фагоцитарной функции, изменениями в соотношении про- и противовоспалительных цитокинов. Вышеуказанные нарушения наиболее заметно проявили себя у больных с сочетанными видами инфекций -бактериальной и вирусной природы (1) и бактериями и внутриклеточными паразитами (2), что коррелировало с тяжелым клиническим течением процесса и формированием большого числа осложнений.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ НОВОГО ПЕПТИДНОГО ИММУНОМОДУЛЯТОРА «БЕСТИМ»

В ТЕРАПИИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ С ПРЕИМУЩЕСТВЕННО ВНУТРИКЛЕТОЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИЕЙ ВОЗБУДИТЕЛЯ

БоковановВ.Е.. Васильева Г.Ю., Позняк A.JL, Колобов А. А., Симбирцев А.С.

ГНЦ ГосНИИ особо чистых биопрепаратов М3 МП РФ, Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время большое практическое значение имеют препараты, способные повышать эффективность

антибактериальной терапии инфекционных заболеваний с преимущественно внутриклеточной локализацией возбудителя.

К таким заболеваниям относятся, в частности, туберкулезная и хламидийная инфекции. Новый пептидный иммуномодулирующий препарат Бестим, обладающий способностью стимулировать иммунологические реакции, зависимые от Т-хелперов 1 типа, и показавший хорошие результаты в ходе предклинических испытаний на модели экспериментального туберкулеза у мышей, был применен у больных различными формами туберкулеза и мочеполового хламидиоза. Исследование проводилось с участием 48 больных инфильт-ративным туберкулезом легких, из них 33 пациента получали препарат в дозе 100 мкг внутримышечно, 1 раз вдень, 5 дней, 15 пациентов получали Бестим по 10 мкг внутримышечно, 1 раз в день 5 дней. Все пациенты получали противотуберкулезную терапию, основу которой составляло внутривенное введение изониазида. Кроме того, Бестим (100 мкг внутримышечно, 1 раз в день, 5 дней) использовался в качестве дополнения к антибактериальной терапии у 79 больных распространенными и локализованными формами мочеполового хламидиоза. Результаты терапии сравнивались с контрольной группой больных, получавших аналогичную антибактериальную терапию без применения каких-либо иммуномодулирующих средств.

При использовании Бестима у больных туберкулезом легких к третьему месяцу наблюдения произошло статистически достоверное, по сравнению с контролем, снижение числа больных с рентгенологически определяемыми полостями в легких. Значительно снизилось количество пациентов, выделявших микобактерии. При исследовании действия Бестима на эффективность терапии хламидиозной инфекции выявлено, что после окончания полного курса антибактериальной терапии (20 дней) почти у всех больных, получавших Бестим, произошла санация биологических жидкостей от хла-мидий и ликвидация наблюдавшихся ранее симптомов заболевания. Причем, после использования Бестима реже возникали рецидивы заболевания по сравнению с контрольной группой. У больных, получавших Бестим в дозе 100 мкг, наблюдалось статистически достоверное повышение относительного количества СОЗ+ лимфоцитов через 20-30 дней после начала лечения Вестимом. У больных хламидиозом, леченных Бестимом, после окончания курса лечения, произошло существенное повышение содержания СЭ4+ лимфоцитов и снижение продукции интерлейкина-6, что является признаком стимуляции созревания Т-лимфоцитов и снижения интенсивности воспалительного процесса, видимо, вследствие санации макроорганизма от хлами-дий. У больных инфильтративным туберкулезом легких, получавших Бестим, наблюдалось достоверное снижение стимулированной пролиферации лимфоцитов и одновременно повышение пролиферации лимфоцитов, стимулированной РРБ, что указывает на увеличение специфичности пролиферативного ответа.

Таким образом, применение Бестима в качестве средства патогенетической терапии у больных инфекционными заболеваниями с преимущественно внутриклеточной локализацией возбудителя способствовало санации организма от патогена и ликвидации иных патологических признаков заболеваний.

ИММУНОРЕАБИЛИТАЦИЯ ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ

Борзова О.Г., Чернышов В.Н., Зотова В.В.

Областная детская больница,

Ростовский государственный медицинский университет, Ростов-на-Дону, Россия

В предыдущих исследованиях установлено, что у детей, больных герпесвирусной инфекцией (ГИ), вызванной цитомегаловирусом и вирусом простого герпеса, отмечается снижение числа CD3+ и CD4+ лимфоцитов, повышение количества CD8+ и CD 16+ лимфоцитов, активированных HLA-DR лимфоцитов, повышение спонтанной и индуцированной экспрессии провоспалительных цитокинов (IL-1, TNFa, IL-4), активности молекулярной адгезии -1C АМ-1, резкое угнетение интерферонового статуса и снижение числа Thl клеток. Выраженность иммунологических нарушений коррелировала с тяжестью клинических проявлений заболевания.

Целью настоящего исследования явилась разработка комплексной программы лечения герпесвирусной инфекции с включением иммунокорригирующих препаратов.

Материалы и методы. Обследовано 170 пациентов в возрасте от 1 мес до 15 лет. Иммунологический мониторинг проводился с помощью проточного цитофлюоримет-ра FACSCalibur и моноклональных антител Becton Dickinson, определялись внутриклеточные цитокины методом проточной цитометрии. Постановка диагноза основывалась на клинических проявлениях заболевания и вспомогательных лабораторных тестах: ПЦР (определение ДНК вирусов), ИФА (IgG, IgM антитела - тест-системы Вектор-Бест), цитологических методах. При разработке программы лечения были использованы препараты, воздействующие на различные патогенетические звенья патологического процесса: антиоксидантные, аномальные нуклеозиды (зовиракс, валтрекс, фамвир), препараты интерферона альфа (виферон) и его индукторы (цикоферон, неовир), иммунокорригирующие и метаболические препараты. На заключительном этапе лечения проводилась реабилитация больных (физическая, социальная, психологическая). Комплексная терапия проводилась индивидуально с учетом иммунного статуса больных, тяжести состояния, клинического течения ГИ и сопутствующих заболеваний.

Использование предложенной программы лечения позволило добиться быстрого наступления клинико-лабораторной ремиссии у больных. После лечения пациентов с ГИ отмечалось повышение числа CD4+ лимфоцитов за счет увеличения Thl клеток, снижение повышенного количества цитотоксических CD8+ лимфоцитов и естественных киллеров - CD16+. Нормализовалось число активированных HLA‘DR+ лимфоцитов. При исследовании уровня IL-1, TNFa, IL-4 выявлена их нормализация. В лабораторных тестах выявлено исчезновение ДНК вирусов в исследуемых средах и снижение уровня противовирусных антител в крови. Клинически у больных отмечалась регрессия патологических симптомов. Проведение физической, социальной и психологической реабилитации детей способствовало повышению качества жизни и ускоряло процесс выздоровления.

Таким образом, разработка комплексной программы лечения детей, больных герпесвирусной инфекцией, оказывает выраженный противовирусный эффект, нормализует иммунный статус пациентов, сокращает сроки лечения и повышает качество жизни.

КЛИНИЧЕСКОЕЗНАЧЕНИЕ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИЙ БРОНХОЛЕГОЧНОЙ СИСТЕМЫ У ДЕТЕЙ

Бурдакова Ю.А., Манзенюк О.Ю., Машков А.Е.. Друзюк Е.З., Черепахина Н.Е., МирончиковаЮ.В., МоскалецО.В., Сучков С.В.

Московский областной

научно-исследовательский клинический

институт им. М. Ф. Владимирского,

Москва, Россия

В этиопатогенезе таких бронхолегочных заболеваний, как бронхиальная астма, пневмония, хронический бронхит важную роль играют не только бактерии и грибы, но и внутриклеточные патогены. Заболевания, вызываемые этими инфекционными возбудителями, характеризуются частыми осложнениями и рецидивами, поэтому актуальным является выявление возбудителей на ранних этапах болезни.

Целью работы явилось .исследование спектра инфекционных возбудителей у детей с бронхолегочной патологией и разработка клинических стандартов ПЦР-диагнос-тики в практике педиатра и детского хирурга.

Основная задача работы заключалась в детекции инфекционной ДНК методом ПЦР с последующим клиническим анализом полученных результатов.

Материалы и методы. Фарингеальные мазки и кровь, взятые от детей с различными формами бронхолегочной патологии, тестировали методом ПЦР с последующей детекцией в агарозном геле. Обследовано 45 детей, из которых 11 - с острой гнойной деструктивной пневмонией (ОГДП) и 34 - с хроническими бронхолегочными заболеваниями, подавляющую часть из которых составляли дети с бронхиальной астмой (13), респираторным аллер-гозом (6) и бронхитами (5). Биообразцы тестировали на наличие ДНК цитомегаловируса (ЦМВ), вирусов простого герпеса (ВПГ) 1 и 2 типов, микоплазмы пневмонии, микоплазмы хоминис, хламидии трахоматис, уре-аплазмы уреалитикум, токсоплазмы гондии и кандиды альбиканс.

Результаты. При ОГДП наиболее часто выявлялся ЦМВ (53%), причем частота выявления в крови составила 75%. Дрожжеподобный грибок обнаруживали в 33% случаев, микоплазма пневмонию - в 20%, а хламидия трахоматис в 14% (в группе детей моложе года).

При заболеваниях хронического течения наиболее часто также обнаруживали ЦМВ (42%) и микоплазму пневмонию (26%), а микоплазма хоминис выявлялась в 23% случаев. В 24% случаев регистрировали смешанный тип инфекции, что являлось очень важным фактором для выработки адекватной тактики этиотропной терапии и последующей программы патогенетически обоснованных лечебно-реабилитационных мероприятий.

Таким образом, результаты проведенного комплексного исследования продемонстрировали высокую диагностическую информативность использования метода ПЦР-диагностики в ведении больных детей с хроническими формами бронхолегочных заболеваний, а также клиническую значимость генодиагностики для разработки и подбора оптимизированных программ терапии при бронхолегочной патологии с учетом конкретных спектров инфекционных возбудителей, идентифицируемых по технологии ПЦР.

ПАРВОВИРУСНАЯ И ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИИ И ИММУННАЯ ДИСФУНКЦИЯ У БОЛЬНЫХ ЛИМФОГРАНУЛОМАТОЗОМ

Бычкова Е.Ю.. Долгих Т.И\, Любошенко Т.М.

Областной онкологический диспансер, г. Омск; 'Государственная медицинская академия, г. Омск

Иммунная дисфункция при лимфогрануломатозе (ЛГМ) создает благоприятный фон для развития инфекционного процесса. Цитомегаловирусная (ЦМВИ) и пар-вовирусная В19 (PV В19) инфекции развиваются у имму-нокомпрометированных пациентов, к которым относятся и больные ЛГМ. В этой ситуации большая роль отводится лабораторным методам диагностики - исследованию показателей неспецифического и специфического иммунитета.

Цель работы. Изучить распространенность парвови-русной инфекции и ЦМВИ в группе больных ЛГМ и сопутствующие изменения показателей иммунного статуса.

Материалы и методы. Обследовали 33 больных с морфологически верифицированным диагнозом ЛГМ в возрасте 32±6 лет. Группу контроля составили 15 практически здоровых лиц. Материалом для исследования служила периферическая кровь. Оценка иммунного статуса включала определение основных субпопуляций лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD16, CD20, CD25, CD95), показателей фагоцитоза, НСТ-активности, количества IgA, IgM, IgG по стандартным методикам. Одновременно определяли показатели сыворотки крови: уровень антител классов IgG и IgM к PV В19 и уровень антител классов IgG и IgM к цитомегаловирусу (ЦМВ), авидность IgG методом ИФА, содержание антигена («ранних» белков ЦМВ) методом иммунофлюоресценции (РИФ) и ДНК ЦМВ (метод ПЦР).

Результаты исследования. Изучение показателей Т -клеточного звена иммунитета у больных ЛГМ показало наличие дисбаланса субпопуляций лимфоцитов: снижение содержания CD3, CD8 и повышение CD20 лимфоцитов по сравнению с контролем. В фагоцитарном звене наблюдалась тенденция к снижению фагоцитарного индекса, НСТ активированного, количества активных фагоцитов. Проведены «пилотные» исследования на парвовирус-ную инфекцию и установлено, что одновременное повышение уровня IgM и IgG к PV В19 наблюдалось у 36% больных. В 4% случаев выявлен повышенный уровень IgM к PV В19 без последующего переключения на синтез IgG. Серопозитивность больных ЛГМ по ЦМВ составила 100% при уровне инфицированности населения Омской области 80%. Одновременное повышение уровня IgM, IgG и наличие антигена ЦМВ отмечалось у 45,83% больных, что является показателем острой ЦМВИ. В 12,5% случаев было повышение уровня IgG и появление антигена ЦМВ, свидетельствующее о персистенции вируса в организме.

О перенесенной в прошлом ЦМВИ и отсутствии в данный момент реактивации инфекции свидетельствовало

повышение уровня у 41,67% больных. У 36% больных наблюдается сочетание парвовирусной В19 инфекции и ЦМВИ на фоне анемии.

Заключение. Полученные данные позволили предположить, что у больных ЛГМ опухолевый процесс формирует сдвиги, затрагивающие разные звенья иммунореактивности: формирование недостаточности Т-звена, фагоцитоза и активацию гуморального звена, что в свою очередь способствует реактивации оппортунистических инфекций: ЦМВИ и парвовирусной. В результате возможно отягощение течения онкологического процесса и усугубление иммунодефицита за счет действия РУ В19 на эрит-роцитарный росток, а ЦМВ на эритроцитарный и лейкоцитарный ростки кроветворения.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ПРОГНОЗА ХРОНИЗАЦИИ БЕЗЭРИТЕМНОЙ ФОРМЫ ИКСОДОВОГО КЛЕЩЕВОГО Б0РРЕЛИ03АУДЕГЕЙ

Васильева Ю.П.. Железникова Г.Ф., Скрипченко Н.В., Монахова Н.Е.,

Карчевская Л. В.

Научно-исследовательский институт детских инфекций М3 РФ, Санкт-Петербург, Россия

Иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) - острое инфекционное природно-очаговое заболевание, вызываемое бор-релиями и передающееся клещами, имеющее наклонность к хроническому и рецидивирующему, а также латентному течению с преимущественным поражением кожи, нервной системы, опорно-двигательного аппарата и сердца. По наличию поражения кожи, нервной системы, опорно-двигательного аппарата и сердца. По наличию главного пато-гномоничного для ИКБ клинического признака - мигрирующей эритемы - различаются две основные формы заболевания: эритемная и безэритемная. Ранее нами были выявлены прогностические критерии перехода эритемной формы ИКБ в хроническое течение [1]. Особенностью патогенеза безэритемной формы является отсутствие воспалительного ответа в месте проникновения боррелий, что ведет к быстрой диссеминации возбудителя. Механизмы хронизации при этом не ясны. В связи с тем, что течение безэритемной формы значительно чаще, чем эритемной, приобретает хронический характер, актуальным является поиск иммунологических критериев прогноза неблагополучного исхода безэритемной формы.

Цель настоящей работы состояла в сравнении некоторых иммунологических показателей в острую стадию заболевания при безэритемной форме ИКБ с разными исходами - клиническим выздоровлением и развитием хронического течения. Под наблюдением находились 11 детей в возрасте от 3 до 14 лет, имевших гладкое течение безэритемной формы ИКБ (1-я группа) и хронизацию процесса (2-я группа). Серологическая диагностика ИКБ осуществлялась стандартным методом РНИФ. Иммунологическое

Группа N TNF-cx пг/мл IFN-Y пг/мл IL-4 пг/мл СГТАТ 1/|д |д£ кЕ/л

1-я 7 11,4±4,9 3671134* 145±59 0,7410,24 2418*

2-я 4 192+112 407±209 428±148* 1,4810,05 3131172

К 10 19±4 92±24 51 ±7 100+32

Р 1.2 < 0,05# = 0,05# <0,05

Примечание: #-по критерию Манн-Уитни; *- достоверное отличие от К (здоровые дети) при р<0,05.

обследование включало определение в первую неделю болезни в сыворотке крови методом ИФА содержания цито-кинов ТЫР-а, 1РЫ-у, 1Ь-4, а также общего ^Е.

У детей с выздоровлением (1-я группа) мы наблюдали выраженную секрецию главного медиатора клеточного иммунного ответа - 1РЫ-у, при отсутствии активации синтеза провоспалительного монокина ТЫБ-а. Преимущественной активации клеточного звена иммунного ответа соответствовал низкий уровень общего и относительно невысокий титр противоборрелиозных антител.

У пациентов, имевших клинические признаки хрони-зации процесса, в первую неделю заболевания мы наблюдали тенденцию к нарастанию системной продукции ТКР-а, равное соотношение цитокинов ТЫ/ТЬ2 (индекс №N-7/11^-4=0,95 против 2,5 у пациентов 1 группы) и, в соответствии с более выраженной активацией ТЬ2, достоверно более высокий среднегеометрический титр (СГТ) противоборрелиозных антител. Больные со склонностью к хронизации ИКБ имели относительно высокий уровень общего ^Е, который коррелировал с интенсивной продукцией 1Ь-4 и ТЬ2-подобным иммунным ответом.

Таким образом, иммунологическими критериями прогноза перехода острой стадии безэритемной формы ИКБ в хроническую в первую неделю после начала заболевания могут служить такие особенности цитокинового и иммунного статуса, как склонность к сравнительно высокой продукции "ШЕ-сх и, особенно, 11.-4, высокий титр антител к боррелиям и умеренно повышенный в сравнении с «нормой» уровень общего ^Е.

ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУБКЛАССОВ ДО АНТИТЕЛ К ОСНОВНОМУ БЕЛКУ МИЕЛИНАУ БОЛЬНЫХ С ВИРУСНЫМИ ЭНЦЕФАЛИТАМИ

Воробьева Н. Л.. Демкина В. А., Гервазиева В.Б.

Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова РАМН, Москва, Россия

Одним из наиболее неблагоприятных последствий вирусных энцефалитов, приводящих к ранней инвалидиза-ции и существенному снижению качества жизни пациента, является развитие аутоиммунного демиелинизирующе-го процесса в ЦНС. В то же время практическая неврология не располагает достаточным набором адекватных методов, позволяющих своевременно оценивать неблагоприятный прогноз развития вирусных энцефалитов. Как известно, одним из основных маркеров демиелинизации служит выявление в сыворотке крови повышенного содержания антител (АТ) к основному белку миелина (ОБМ). Однако зачастую в остром периоде вирусных энцефалитов воспалительные процессы в ткани мозга бывают настолько выражены, что практически у всех пациентов выявляется повышенный уровень АТ к ОБМ. В этом случае диагностическое значение имеет изменение уровня АТ в динамике патологического процесса. Так, если содержание антител сохраняется на повышенном уровне или нарастает, то это, как правило, свидетельствует в пользу развития аутоиммунной демиелинизации. Возможно, что более полную информацию о прогнозе развития аутоиммунных реакций можно получить при исследовании не столько суммарного уровня АТ к ОБМ, сколько его отдельных субклассов. Тем более, известно, что при ряде аутоиммунных заболеваний диагностическое значение

имеет определение именно отдельных субклассов IgG АТ. В связи с этим целью настоящей работы явилось исследование соотношения отдельных субклассов IgG АТ к ОБМ в динамике вирусных энцефалитов.

Материалом для исследования служили сыворотки 78 детей в возрасте от 1 года до 15 лет с вирусными энцефалитами различной этиологии. Уровень отдельных субклассов определяли при помощи разработанного авторами метода количественного ИФА. Поскольку суммарный уровень IgG АТ к ОБМ варьировал у отдельных больных в достаточно большом диапазоне (92-1030 мкг/мл), мы сочли целесообразным для последующего сопоставления данных определять процентное содержание отдельных субклассов IgG АТ к ОБМ.

В результате проведенного исследования мы выявили 3 варианта динамики соотношения субклассов IgG АТ к ОБМ. Так у 16 пациентов с более высоким суммарным уровнем IgG АТ к ОБМ (564±12,3 мкг/мл), значительно нарастающим в динамике заболевания (711±9,3 мкг/мл), доля IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4 в остром периоде составляла 45,8; 42,9; 9,1 и 2,2% соответственно. В динамике это соотношение составило 61,2; 22,1; 15,4 и 1,3%. В последующем у всех пациентов данной группы была выявлена демиели-низация на МРТ или на секции.

У 34 больных, также с повышенным в остром периоде суммарным содержанием IgG АТ к ОБМ (411±10,1 мкг/ мл), в большинстве случаев снижающимся в динамике заболевания, но не достигающим нормативных значений (295±8,7 мкг/мл), соотношение IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4 АТ к ОБМ в остром периоде составило: 65,2; 23,4; 9,7; 1,7%, а в динамике заболевания - 41,5; 47,2; 6,2 и 5,1 %. Демиели-низация на МРТ была выявлена у 11% из таких больных.

У 28 больных с незначительно повышенным уровнем IgG АТ к ОБМ в остром периоде заболевания (108±4,7 мкг/мл), снижающимся до нормативных значений в динамике (31,4±1,5 мкг/мл), доля IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4 в остром периоде составила 64,6; 24,7; 7,5 и 3,2% соответственно. В динамике это соотношение практически не менялось: 63,4; 25,3; 7,9 и 3,4%. В последующем ни у одного из этих больных не было выявлено признаков демиелинизации.

Таким образом очевидно, что динамика перераспределения отдельных субклассов IgG АТ к ОБМ достаточно адекватно отражает активацию механизмов аутоиммунной демиелинизации у больных с вирусными энцефалитами, что позволяет рассматривать ее в качестве одного из критериев прогнозирования исходов заболевания и выбора тактики лечения. Мы полагаем, что прогностически неблагоприятным признаком в отношении риска развития аутоиммунной демиелинизации является преобладание в остром периоде заболевания IgG2 и IgG3 АТ к ОБМ на фоне снижения доли IgGl и IgG4 АТ к ОБМ с преимущественным нарастанием в динамике патологического процесса доли IgGl, IgG3 и снижением IgG2, IgG4 АТ к ОБМ. Причем, особое диагностическое значение имеет определение пониженной изначально фракции IgGl АТ к ОБМ и нарастание доли IgG3 АТ к ОБМ в динамике заболевания. Благоприятным в прогностическом отношении признаком является преобладание в остром периоде заболевания АТ к ОБМ IgGl и отчасти IgG4 субклассов при достаточно незначительной доле AT IgG2 и IgG3 субклассов. Еще одним показателем благоприятного исхода вирусных энцефалитов можно считать отсутствие существенного перераспределения отдельных субклассов в динамике вирусных энцефалитов.

ВЛИЯНИЕ ИММУНОМСЩУЛИРУЮЩЕЙ ТЕРАПИИ НА ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ ВНЕБОЛЬНИЧНЫХ ПНЕВМОНИЯХ

Гресь С.Н., Розентул А.Ш.

Военно-медицинская академия, г. Санкт-Петербург, Россия

Внебольничная пневмония (ВП) - одно из наиболее распространенных заболеваний органов дыхания. Заболеваемость составляет 8-15 случаев на 1000 человек населения. У больных ВП с тяжелым течением, в связи с выраженной интоксикацией отмечены изменения ряда психофизиологических показателей на фоне проявлений иммунодефицита.

Обследовано 28 больных ВП с тяжелым течением. В острой фазе болезни у 10,7% больных наблюдался делириозный синдром в форме галлюцинаторных наплывов, а у 17,9% пациентов различного рода вестибулопатии (кружение, перемещение тела в пространстве) в сочетании с сенестопатиями. В ряде случаев (7,9%), у лиц с преморбидной агрессивной деза-даптированностью, галлюцинации сопровождаются психомоторным возбуждением и агрессией. В клинической картине ВП наблюдался астенический феномен с различными синд-ромальными оттенками (60,7%), которые зависят от премор-бидных индивидуально-психологических особенностей больных. При этом преобладали депрессивный (14,3%), тревожно-фобический (28,6%), ипохондрический компоненты (25,0%) либо их сочетания. В то же время у части больных ВП (особенно с выраженными преморбидными тенденциями спонтанности и лабильности) к концу лихорадочной фазы может наблюдаться в 35,7% случаев эйфорическая недооценка тяжести заболевания (анозогнозия и расторможенность). У 67,9% больных ВП, депрессивный компонент осложняется реакцией на лечение, усиливается тревожность в связи с необходимостью длительного нахождения в стационаре и соблюдения определенного режима. У лиц с истероидной акцентуацией (39,3%) на фоне астенического состояния может наблюдаться феномен психогенного индуцирования, с появлением симптоматики, индуцированной окружающими больными.

21 пациенту ВП после оценки иммунологического статуса с целью иммунокорригирования на фоне антибиотикоте-рапии применяли препарат ронколейкин в дозе 500.000 МЕ, через 2-3 дня, № 3-4. При этом отмечено, что на фоне облегчения клинического течения ВП проявления астенического синдрома (тревожность, депрессия) не достигали дезадаптирующих значений и к моменту выписки из стационара определялись лишь в форме заостренностей по соответствующим шкалам. При среднетяжелых формах ВП с невыраженной или кратковременно выраженной общей интоксикацией и лихорадкой определялись их нормальные значения. Применение иммунокорригирующей терапии с помощью рон-колейкина приводит к нормализации психофизиологического статуса у лиц, страдающих ВП с тяжелым течением.

КОГОРТНОЕОБСЛЕДОВАНИЕДЕГЕЙ, РОЖДЕННЫХ ОТ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ МАТЕРЕЙ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИХ ЗНАЧЕНИЯ В ПОДДЕРЖАНИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СВЯЗАННЫХ С ЭНТЕРОВИРУСАМИ

Григорьева Ю.В.. Слободенюк А.В.,

Евстафьева О. А.

Научно-исследовательский институт вирусных инфекций РФ М3, Екатеринбург, Россия

Несмотря на очевидные успехи реализуемой ВОЗ расширенной программы иммунизации с поставленной

целью - глобальной ликвидации полиомиелита к 2000 г. к настоящему времени полиомиелит по-прежнему представляет определенную опасность, особенно возрастает риск заболевания при иммунодефиците любой этиологии у вакцинированного лица и (или) у того, кто был в контакте (вакциноассоциированный полиомиелит по контакту).

В качестве основного потенциального источника возвращения и распространения полиовируса эксперты ВОЗ считают персистентно - инфицированных иммунодефи-цитных лиц.

В этой связи особое внимание должно быть уделено лицам с иммунологической недостаточностью и, прежде всего детям, рожденным от ВИЧ-инфицированных матерей (дВИЧм ).

Темой настоящей работы является организация когор-тных исследований на основании данных об иммунном статусе детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, и оценка данных о реализации в этой группе Программы расширенной иммунизации неврологических заболеваний, возможно связанных с полио- и родственными энтеровирусами.

Среди организационно-методических форм решения поставленных задач создание когорт, позволяющих классифицировать состояние иммунной системы дВИЧм, представляется нам крайне актуальным.

Поскольку неврологические заболевания у дВИЧм могут быть связаны с родственными полиовирусу энтеровирусами, их выявление также представляется очень важным.

Так, описана неподлежащая лечению антибиотиками лихорадка у ребенка 5 лет, который был перена-тально инфицирован ВИЧ. С помощью ПЦР в ликво-ре был выявлен вирус Коксаки В4. Таким образом, пер-систирующая лихорадка была единственным проявлением хронической Коксаки В4 инфекции в мозгу ребенка. Известно, что вирусы Коксаки В могут служить причиной менингита, диареи, панкреатита и, как следствие, диабета, мио-, эндо- и перикардита. Процессы, связанные с изменением соотношения СБ4/СВ8 клеток, лежат в основе энтеровирусного миокардита. Вместе с тем в числе выделенных клинических категорий ВИЧ-инфицированых детей энтеровирусная патология, которая может присутствовать во всех категориях, не учитывается.

Для определения у дВИЧм специфического иммунного ответа опосредованного антителами, нами была сделана попытка исследования сывороток ВИЧ-инфицирован-ных детей 3-20 месячного возраста.

Случайная выборка включала 21 ребенка. Исследование проводили в тест-системе РНГА, разработанной в ЕНИИВИ. В качестве контроля использовали стандартные диагностические сыворотки для определения ан-тигрупповых вируснейтрализующих антител к полио-и Коксаки В вирусам. Дополнительная обработка сывороток мертиолятом давала возможность дифференцировать принадлежность иммуноглобулинов к классу или У двух детей старше 20 месяцев специфи-

ческие антитела обнаруживали в титре 1:160 и у одного ребенка - 1:40, в остальных случаях антитела не выявлялись.

Таким образом, имеющиеся данные подтверждают необходимость более детальных знаний о иммунном статусе каждого ребенка, рожденного от ВИЧ-инфицированной матери.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ В ДИНАМИКЕ ИНФЕКЦИОННОГО МОНОНУКЛЕОЗАУДЕТЕЙ РАЗЛИЧНЫХ ВОЗРАСТНЫХ ГРУПП

Гульман Л. А., Куртасова Л.М., Ольховский И.А.. Андреева А.А.. Сургутская Г.Б.

Красноярская государственная медицинская академия, Россия;

Краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД, г. Красноярск

В настоящее время отмечается рост заболеваемости инфекционным мононуклеозом (ИМ) среди детского населения (Л.А.Гульман, 2000; В.В.Иванова, Н.В.Алексан-дрова, 2002; О.И.Галактионова и соавт., 2002). При этом известно, что вирус Эпштейна-Барр может оказывать непосредственно цитопатическое воздействие на иммуноком-петентные клетки. Целью данного исследования явилось изучение изменений иммунологических параметров в динамике ИМ у детей в различных возрастных группах.

Проведены динамические наблюдения за 54 больными ИМ со среднетяжелой формой заболевания в трех возрастных группах: 1-3 года - 18 детей; 4-6 лет - 15 детей; 7-14 лет - 21 ребенок в острый период и фазу реконвалесцен-ции. Контрольную группу составили 107 практически здоровых детей аналогичных возрастов. Методом непрямой иммунофлюоресценции с моноклональными антителами серии СД фирмы «Дако» определяли CD3+, CD4+, CD8+, CD72+ - лимфоциты. Содержание иммуноглобулинов классов А, М, G в сыворотке крови изучалось методом радиальной иммунодиффузии в геле. Концентрация ЦИК в сыворотке крови исследовалось в реакции с полиэтиленг-ликолем. Фагоцитарная активность нейтрофилов крови оценивалась в тесте с латексом.

Изучение содержания атипичных мононуклеаров в периферической крови в острый период ИМ не выявило достоверных различий между среднестатистическими показателями в наблюдаемых возрастных группах (22,2%±2,40; 19,5%±2,95; 20,5%±2,03 соответственно).

Результаты полученных данных установили в острый период ИМ во всех исследуемых группах больных высокое содержание лейкоцитов и абсолютное число лимфоцитов в периферической крови по сравнению с параметрами контрольной группы. Изучение фенотипического спектра лимфоцитов крови в острый период заболевания показало во всех возрастных группах статистически значимое повышение абсолютного количества CD3+, CD72+, снижение процентного содержания CD4+ - лимфоцитов, значительное увеличение абсолютного и относительного числа CD8+ - клеток и резкое падение индекса дифференцировки в сравнении с контрольными величинами. При этом в старшей возрастной группе снижение процентного содержания CD4+ - клеток происходило на фоне увеличения их абсолютного количества.

Реакция гуморального звена иммунитета во всех исследуемых группах больных характеризовалась повышением концентрации IgM в сыворотке крови по сравнению с параметрами контроля. При этом только в старшей возрастной группе обнаружено увеличение содержания IgA и IgG относительно показателей контроля.

В период реконвалесценции ИМ во всех возрастных группах содержание лимфоцитов в периферической крови находится на уровне, достоверно более низком, чем в ост-

ром периоде заболевания, в то же время статистически значимо превышает показатели в контрольной группе. Аналогично изменяется абсолютное количество СГ)72+ - клеток. Следует отметить, в младшей возрастной группе сохранение умеренного повышения количества лейкоцитов относительно нормативных значений.

Кроме того, у больных младшего возраста в период реконвалесценции не только не восстанавливается количество активно «работающих» нейтрофилов крови до уровня контрольной группы, но и снижается их поглотительная способность.

При оценке гуморального звена иммунитета в младшей возрастной группе в период реконвалесценции установлено статистически значимое снижение содержания ^А в сыворотке крови как относительно показателей контроля, так и по сравнению с параметрами острого периода заболевания. При этом в средней возрастной группе концентрация соответствует контрольным значениям, а у

больных старшего возраста достоверно превышает контрольные показатели.

Таким образом, результаты проведенных исследований показали у больных младшей возрастной группы в динамике ИМ более глубокие и стойкие нарушения иммунного статуса, что, вероятно, связано с относительно незрелой иммунной системой у детей раннего возраста. Это обстоятельство необходимо учитывать при разработке иммуно-реабилитационных программ у данной категории больных.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПАРОТИТНОЙ ИНФЕКЦИИ У ИММУНОКОМПРОМЕГИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ

Дроздова Т.Г.. Попович Т.Г., Кашуба Э.А., Ханипова Л.В.

Тюменская государственная медицинская академия, Нижневартовская городская больница, г. Тюмень, Нижневартовск, Россия

Несмотря на проведение плановой вакцинации, периодически наблюдаются подъемы заболеваемости паротит-ной инфекцией среди детей, подростков и взрослых лиц молодого возраста. Заболевание характеризуется полиморфизмом клинических проявлений с вовлечением в патологический процесс различных органов и систем. Подробно описаны изменения в остром периоде инфекции и их последствия со стороны железистых органов и ЦНС. Связь паротитной инфекции с особенностями иммунной системы изучена в меньшей степени.

Цель настоящей работы - исследование влияния пре-морбидной иммунокомпрометированности на течение и иммунное реагирование больных паротитной инфекцией.

Материал и методы. Диагностика фоновой иммунной патологии осуществлялась на основании клинико-анамнестических данных по методике, разработанной Институтом Иммунологии М3 РФ (г. Москва). Иммунологическое обследование включало анализ лейкограммы, определение субпопуляционного состава Т-лимфоцитов (Лф) (СБЗ+, СБ4+, СБ8+, СБ16+, СБ20+), уровня сывороточных иммуноглобулинов ^А, ^М, методом иммунодиффузии в геле по Манчини, количества ЦИК в 4% полиэтиленгликоле, фагоцитарной функции нейтрофилов (Нф) - фагоцитоз поглощения, адгезии, НСТ-тест (спонтанный и стимулированный). Обследованы 27 больных паротитной инфекцией 6-14 лет в остром периоде заболевания (7 - 14 дни болезни). Выделены 2 группы пациен-

тов: иммунокомпрометированные (ИК) 55,6% и иммунологически здоровые (ИЗ) до заболевания - 44,4%.

Основные результаты. Клинически у иммунокомпро-метированных детей эпидемический паротит характеризовался более длительным течением, закономерным повышением температуры (у 100% больных против 60% у ИЗ), но с меньшей высотой лихорадки - субфебрильная температура зарегистрирована у 62,5% ИК и только у 20% ИЗ пациентов. В данной группе в отличие от ИЗ практически у всех больных имело место поражение нескольких желез в разных комбинациях, в том числе наблюдались мастит (22,2%), тиреоидит (11,1%), панкреатит (33,3%), орхит (33,3%), у одного больного этой группы паротитная инфекция осложнилась банальным (бактериальным) паротитом, у 1/3 больных - наслоились ОРВИ.

При исследовании иммунного статуса у ИК больных по сравнению с ИЗ выявлены более высокий лимфоцитоз (59,2±3,1 против 39,4±3,3% у ИЗ, р<0,05) и количество СБЗ+Лф (3129±29 против 13851352 у ИЗ р<0,01 при норме 2590±309), были активированы метаболическая функция Нф в НСТ тесте (27,0±1,2 против 1412,3 у ИЗ, р<0,01 при норме 18,5±2,6) с сохранением функционального резерва фагоцитов, и продукция (2,5±0,4 против 1,15±0,2 у ИЗ р<0,01 при норме 2,04±0,3). В то же время определялись низкие показатели СБ16+Лф (4,1 ±2,1 против 16,0±3,2%, р<0,001 у ИЗ при норме 12,7±4,4) и ЦИК 4% (27±4,2 против 67,5+11,1 у ИЗ, р<0,001 при норме36,2±12,4).

У иммунологически здоровых пациентов при легком течении заболевания с преимущественным поражением слюнных желез в период разгара имеет место тенденция к снижению СБЗ+, С04+, СЭ8+ лимфоцитов, иммунорегу-ляторного индекса, ^А, и повышение СВ16+ клеток.

Заключение. Таким образом, паротитная инфекция у иммунокомпрометированных детей протекает тяжелее, чем у иммунологически здоровых, характеризуется полиморфизмом клинических проявлений и сопровождается иммунологическим дисбалансом с активацией ряда показателей, за исключением СВ16+ и ЦИК.

ИММУННЫЙ СТАТУС ДЕТЕЙ С ДИССЕМИНИРОВАННЫМ ЭНЦЕФАЛОМИЕЛИТОМ

Железникова Г.Ф.. Скрипченко Н.В.,

Старшинов Я.Ю., Монахова Н.Е.,

Карчевская Л.В.

Научно-исследовательский институт детских инфекций М3 РФ, Санкт-Петербург, Россия

Диссеминированный энцефаломиелит (ДЭМ) относится к демиелинизирующим заболеваниям ЦНС инфек-

ционной этиологии. В 80% случаев заболевание завершается выздоровлением с исчезновением очагов демиелини-зации на МРТ. Однако протяженность процесса во времени и исход значительно варьируют в зависимости от характера течения ДЭМ - острого или подострого. Острое течение характеризуется быстрым нарастанием неврологической симптоматики и разрешением воспалительного процесса в течение 2-3 месяцев, с полным восстановлением функций ЦНС. Менее благоприятное подострое течение характеризуется постепенным развитием неврологических нарушений и длительным (1-2 г) периодом восстановления, как правило, с резидуальными последствиями.

Цель исследования состояла в выявлении особенностей системного цитокинового ответа и изменений иммунного статуса при остром (1-я группа, n=l 1) и под остром (2-я группа, п=6) течении ДЭМ. Первое обследование (I) было проведено на 4-6-й неделе болезни, второе (II) - после курса терапии, в фазу выздоровления.

В разгар заболевания у детей с острым течением ДЭМ (1-я группа) наблюдали выраженный системный цитоки-новый ответ с значительным превышением «контрольного» уровня IFN-y, IL-4 и TNF-a. Подострое течение ДЭМ ассоциировано, напротив, с угнетением секреции IL-4 и TNF-a, при отсутствии выраженного прироста уровня IFN-y. Слабый цитокиновый ответ сочетался у детей 2-й группы с высоким содержанием в крови IgA при сниженном уровне общего IgE. Кроме того, у них отмечено нарушение соотношения CD4/CD8 Т-лимфоцитов и уменьшение содержания CD20+ В-клеток. Перечисленные признаки могут быть использованы для прогноза пролонгированного течения ДЭМ.

Интересно отметить, что период восстановления при остром течении ДЭМ характеризовался угнетением продукции цитокинов, снижением концентрации общего IgE, индекса CD4/CD8, содержания В-лимфоцитов. Можно предположить, что купирование воспалительного процесса в ЦНС осуществляется при активном участии «анти-энцефалитогенных» клонов, среди которых в разных моделях описаны Th3, Th2, «естественно активированные» CD4+CD25+ Т-клетки и другие регуляторные Т-лимфоциты (Апаскег О. et а1., 2001). Особенностью большинства этих регуляторных клеток является секреция иммуносуп-рессивных цитокинов TGF-P и/или IL-10, осуществляющих негативную регуляцию иммунного ответа обоих типов (Thl и Th2). Возможно, раннее развитие механизмов негативного контроля иммунного ответа снимает остроту воспалительного процесса в ЦНС, одновременно продлевая персистенцию возбудителя и являясь причиной затяжного характера заболевания у детей 2-й группы. Снижение содержания общего IgE в динамике санирующего иммун-

№ Гр. IFN-y IL-4 TNF-a IgA, г/л IgE, кЕ/л CD20, % CD4/8

1-я 338186 * 131+33 * 192172* 0,8610,2 70,5123 24,711,4 2,710,2

1 2-я 78134 14,2+9 * 1,511,6 * 1,5210,2* 16,513,7* 17,710,8* 1,410,1*

Р <0,05 <0,01 <0,05 <0,05 <0,05 <0,01 <0,01

1-я 31116 *# 9,3±3,6 *# 10,5+6,2 # 0,65+0,1* 19,1+2,1*# 16,511,6*# 1,710,3#

II 2-я 80129 23,5112* 7,015,3 1,1210,3 3,511,2 *# 17,811,1* 1,310,1*

К п=14 92+24 51,3+7,2 19,0+3,9 1,05+0,1 100+32 23,512,5 2,310,2

Примечания: цитокины в пг/мл; *- достоверное отличие (р<0,05) от К (здоровые дети), # - достоверное отличие от показателя при I обследовании.

ного ответа при остром или подостром течении ДЭМ позволяет предположить существенную роль IgE-зависимых реакций в патогенезе демиелинизирующих воспалительных заболеваний ЦНС, что согласуется с данными современной литературы (Dimitriadoual V. et al., 2000).

ИММУНОФЕНОТИП ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ С ГЕПАТИТОМ С

Залялиева М.В., Курбанов Ф.М., Давидян М.И.

Институт иммунологии АН РУЗ, Республиканский центр СПИДа, Ташкент, Узбекистан

Сочетание вирусного гепатита С и ВИЧ-инфекции среди инъекционных наркоманов способствует усилению репликации вируса иммунодефицита человека и прогрессированию СПИДа, вызывает выраженные нарушения в иммунном ответе.

Целью исследования явилось изучение экспрессии дифференцировочных антигенов и маркеров ранней и поздней активации лимфоцитов периферической крови пациентов, инфицированных ВИЧ и вирусным гепатитом С.

Исследование проведено на 48 ВИЧ-инфицированных пациентах с наличием гепатита С. Обследованные в возрасте 20-35 лет, из них 46 мужчин и 2 женщины. Инфицированные ВИЧ и вирусным гепатитом С произошло в результате внутривенного употребления наркотиков. Продолжительность употребления наркотиков у всех инфицированных от 1 года до 4 лет. В стадии первичных проявлений (2Б, 2В) было 32 пациента, в стадии вторичных заболеваний (ЗА, ЗБ, ЗВ) - 16.

Диагноз ВИЧ-инфекции устанавливался по обнаружению специфических антител к ВИЧ и его отдельным белкам в реакциях ИФА и иммуноблотинга. У всех обследованных выявлен ВИЧ-1. Скрининг HCV был проведен в ИФА (IMUCHEK - HCV А в [KOKUSAI]: International Reagent Corporation Japan). Показатели клеточного иммунитета определяли иммунофенотипированием CD антигенов к CD3, CD4, CD8, CD 16, CD25, CD95 и HLA-DR с помощью соответствующих моноклональных антител производства МедБиоСпектр (РФ).

У всех обследованных ВИЧ-инфицированных наркоманов в 100% случаев выявлялись антитела к вирусу гепатита С. В стадии первичных проявлений ВИЧ-инфекции у 64,5% установлен хронический гепатит, в стадии вторичных заболеваний у 100%.

У больных в стадии первичных проявлений наблюдалось достоверное снижение CD4 клеток (р<0,001), а содержание цитоксических CD8 лимфоцитов повышено (р<0,01), вследствие чего индекс иммунорегуляции регистрировался значимо ниже контрольных значений. В группе ВИЧ-инфицированных в стадии вторичных заболеваний иммунологические изменения претерпевают заметные изменения в сторону ухудшения.

В стадии первичных проявлений снижение HLA-DR клеток незначимо относительно контроля, а в стадии вторичных заболеваний их экспрессия достоверно ниже показателей первой группы ВИЧ-инфицированных. Также отмечено достоверное снижение клеток, экспрессирующих маркер CD25. Содержание лимфоцитов, экспрессирующих молекулы апоптоза (CD95) отмечалось в группах больных в зависимости от прогрессирования болезни. В стадии первичных проявлений их количество не превышало контрольные данные. А в стадии вторичных заболеваний

количество CD95 клеток достоверно возрастало как относительно контроля, так и относительно показателей в первой группе.

Таким образом, смешанная ВИЧ и HCV-инфекция сопровождается признаками депрессии иммунной системы

- сниженным содержанием CD3, CD4 лимфоцитов, снижением соотношения CD4/CD8 лимфоцитов, снижением молекул ранней и поздней активации по мере прогрессирования вирусного гепатита С, употребление наркотоксикантов.

ЭКСПРЕССИЯ РЕЦЕПТОРОВ ЦИТОКИНОВ И МОЛЕКУЛ АДГЕЗИИ НА РАЗНЫХ СРОКАХЛЕЧЕНИЯ ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕИ

Зотова В.В.. Чернышов В.Н., Борзова О.Г., Бортникова О.Г., Мационис А.Э., Плужникова Г.Э.

Областная детская больница, РГМУ, РОПАБ, Ростов-на-Дону, Россия

В настоящее время большое внимание уделяется изучению процессов взаимодействия клеток при заболеваниях различного генеза. Известно, что цитокины (ЦК) являются медиаторами межклеточных взаимодействий в иммунном ответе и служат связующим звеном между иммунной и другими системами организма. По биологической активности цитокины разделяют на регуляторы воспалительных процессов, регуляторы «клеточного» и «гуморального» антигенспецифического ответа. Кроме того, к межклеточным взаимодействиям в иммунной системе имеют прямое отношение интегрины. Однако только ICAM I (CD54) экспрессируется под влиянием активации ЦК -IL-1, TNF-a и IFN-у на антигенпрезентирующих клетках (АПК), включая В-лимфоциты.

В связи с этим целью настоящей работы явилось изучение экспресии CD54+, TNF-a, IL-1, IL-4 на лимфоидных и миелоидных клетках, а также коэкспрессии CD3+/ IFN-y у больных герпесвирусной инфекцией детей, вызванной цитомегаловирусом и вирусом простого герпеса.

Материалы и методы. Обследовано 116 детей в возрасте от 1 месяца до 15 лет, больных герпесвирусной инфекцией. Диагноз подтверждался ПЦР (выделение ДНК вирусов), ИФА (IgM, IgG антитела), цитологическими тестами и клинической картиной заболевания. Экспрессию рецепторов ЦК, CD54+ и INF-y изучали с помощью моноклональных антител фирмы Becton Dickinson методом Fastlmmune на проточном цитофлюориметре FACSCalibur.

При обследовании детей, больных герпесвирусной инфекцией, выявлено повышение спонтанной и индуцированной экспрессии рецепторов CD54+ на CD3+ и CD14+ клетках, что свидетельствует об активизации процессов межклеточного взаимодействия. Вместе с тем отмечено снижение спонтанной и индуцированной экспрессии IFN-y, которая была снижена в 4 раза по сравнению со здоровыми детьми. Экспрессия IL-4 в спонтанном тесте не отличалась от показателей здоровых лиц, а индуцированная оказалась в 2,5 раза ниже. После проведения комплексной противовирусной терапии отмечена нормализация экспрессии исследуемых цитокинов при сохраняющейся высокой экспрессии CD54+.

Таким образом, у детей, больных герпесвирусной инфекцией, повышено содержание внутриклеточных провос-палительных цитокинов, усилено межклеточное взаимодействие, коррелирующее с активностью инфекционного про-

цесса. Резкое угнетение интерферонового статуса способствует активной репликации CMV и HSV. Проведение противовирусной терапии (с включением аномальных нуклео-зидов, препаратов интерферона и их индукторов, иммунокорректоров и др.) нормализует цитокиновый статус у детей и способствует их быстрейшему выздоровлению.

ИЗУЧЕНИЕХЕМ0ТАКСИЧЕСК0Й АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ КРОВИ БОЛЬНЫХ СИНДРОМОМ РАЗДРАЖЕННОГО КИШЕЧНИКА

Зурочка А.В.. Гриценко В.А., Журавлева Т.В., Городечный П.П., Скороходов А.Н.,

Кашеварова М.В.

Челябинская государственная медицинская академия, кафедра микробиологии, ЦНИЛ ЧелГМА, НИИ иммунологии ЧелГМА, Центр клинической микроэкологии, Челябинск, Россия

Качественное и/или количественное изменение нормальной аутофлоры кишечника, называемое дисбактериозом (ДБ), который трактуется как состояние срыва адаптации, нарушение защитных и компенсаторных механизмов, является основной причиной развития СРК. Хорошо известна иммуномодулирующая функция нормальной микрофлоры кишечника, и при ее нарушениях в иммунной системе происходят значительные изменения. Наши исследования направлены на оценку влияния различных свойств микроорганизмов (наличие гемолизинов, антили-зоцимной активности (АЛА), антиинтерцидной активности (АИА), серорезистентности) на функциональное состояние нейтрофилов крови при дисбактериозе, ассоциированном с высоким титром гемолитической E.coli.

Материалы и методы. Нами были обследованы 20 пациентов Центра клинической микроэкологии НИИ иммунологии ЧелГМА с диагнозом “синдром раздраженного кишечника, дисбактериоз” с гемолитической E.coli, высеваемой в титрах более 105. Оценивалась миграционная и хемотаксическая активность нейтрофилов крови, активность неспецифических эстераз и экспрессия CD1 lb, CD 14 в зонах миграции. Хемотаксическую активность нейтрофилов исследовали под агарозным гелем (R.D. Nelson et al„ 1975) к бактериальным хемоаттрактантам (ХА) суточных культур E.coli штаммов К12, П19, МПН39, МПН39/1, МПН39/3 и St.aureus штамма “Cowan” 209. Активность эстераз в нейтрофилах определяли методом азосочетания по Пирсу (1962). Иммуноморфологические исследования нейтрофилов проводились по методике Сибиряка С.В. с соавт. (1997).

Результаты и обсуждение. В результате исследования отмечено наличие положительного хемотаксического ответа на все изучаемые ХА, при этом индекс хемотаксиса нейтрофилов на штаммы, обладающие комбинацией факторов персистенции (АЛА и АИА E.coli штамма МПН39) и гемолизинами (E.coli штамм П19 и St.aureus) был ниже, чем на другие ХА. При оценке эстеразной активности нейтрофилов в зонах хемотаксического ответа была получена несколько иная картина. Наличие антилизоцимных факторов изоштаммов E.coli МПН39/1Д так же как и наличие гемолизинов у E.coli, значительно угнетает эстеразную активность нейтрофилов. Отмечено, что комбинация факторов персистенции, характерная для E.coli МПН39, снижая хемотаксическую активность нейтрофилов, усиливает их эстеразную активность. Оценивая экспрессию адге-

зивных молекул на поверхности мигрирующих нейтрофилов, было отмечено наиболее выраженное торможение экспрессии С011Ь при комбинации факторов персистенции (Е.соН МПН39). Выявлено также некоторое снижение экспрессии СОНЬ при хемотаксическом воздействии гемолитического штамма Е.соН. Характер экспрессии рецепторов к липополисахариду (ЛПС) Е.соН (С014) несколько отличается от С011Ь. Было показано, что экспрессия С014 при комбинации факторов персистенции согласуется с экспрессией С011Ь. Таким образом, штамм Е.соН П19 с гемолитической активностью вызывает угнетение миграционной, метаболической и адгезионной функции нейтрофилов на фоне усиления экспрессии рецепторов к ЛПС

Е.соН у больных ДБ, вызванного гемолитическим штаммом Е.соН. Это может свидетельствовать о том, что нейт-рофилы данной категории больных сохраняют способность активироваться ЛПС, но их функциональная активность в отношении гемолитической Е.соН резко снижена. Это может быть как причиной, так и следствием длительной персистенции гемолитической кишечной палочки. Влияние комбинации факторов персистенции (Е.соН МПН39) усиливает метаболическую активность, но угнетает экспрессию рецепторов к ЛПС, снижает адгезивные свойства нейтрофилов и тормозит их хемотаксическую активность у данной категории больных. Вероятно, у таких больных может формироваться нарушение нормальной микрофлоры с селекцией персистирующих штаммов микроорганизмов с подобными свойствами. По всей видимости, это является результатом влияния в первую очередь антиинтерцидных факторов бактерий, поскольку изоштаммы, лишенные их, оказывают противоположное влияние на нейтрофилы.

Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о том, что при длительно текущем нарушении микробиоценоза кишечника, сопровождающемся повышенным титром гемолитической кишечной палочки, у больных формируются нарушения функциональной активности нейтрофилов периферической крови, проявляющиеся угнетением их двигательной и метаболической активности, экспрессии адгезивных молекул СБ11Ь и рецепторов к ЛПС (СВ14), которые наиболее выражены при наличии гемолитических факторов и комбинации антилизоцимной и антиинтерцидной активности. Это приводит к созданию благоприятных условий для селекции персистентных штаммов микроорганизмов и поддержанию хронического воспалительного процесса.

РОЛЬ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИММУННЫХ КОМПЛЕКСОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ

ИванисВ.А.. Маркелова Е.В., Максема И.Г., Пысина Т.В., Компанец Г.Г., Слонова Р.А.

Владивостокский государственный медицинский университет, Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО РАМН, Владивосток, Россия

В современной клинической иммунологии большое значение придается проблеме циркулирующих в крови иммунных комплексов (ЦИК) - важных потенциальных факторов иммунного поражения органов и тканей. Известно, что иммунные комплексы способны инициировать разнообразные воспалительные процессы, активируя мак-

рофаги и непосредственно реагируя с тромбоцитами и системой комплемента, что приводит к высвобождению вазоактивных аминов, увеличению адгезивной способности эндотелиальных клеток и усилению сосудистой проницаемости. С Рс-рецепторными взаимодействиями ЦИК, вызывающих гиперактивацию системы комплемента, связывают патогенез шока, геморрагического синдрома и других ургентных состояний, имеющих место при ГЛПС. Изучению иммунных комплексов у больных ГЛПС посвящены работы Т.П.Владимировой, И.Н.Гавриловской, отмечающих прямую зависимость уровней ЦИК от тяжести клинических проявлений болезни. В эксперименте Yan Fang Liu, Syen Ktjian и др. отмечали раннее, на первой неделе инфицирования, появление растворимых ЦИК, сначала в пределах сосудов, затем в клетках почечных канальцев, печени, что может быть одним из факторов, запускающих некробиотические процессы. В более поздние сроки болезни определяются и депозиты нерастворимых ЦИК, чаще в клубочках и базальной мембране почек - органа-мишени хантавируса, сигнализируемые о конкретном повреждении тканей.

Нами у 180 больных ГЛПС изучена частота, уровень и характеристика размеров ЦИК в зависимости от срока болезни, клинической формы и серотипа хантавируса (Hantaan или Seoul),величины титров специфических антител в НМФА. Концентрацию ЦИК определяли методом Digeon, качественный анализ - путем полиэтиленг-ликольпреципитации. Результаты показали четкую зависимость выявления ЦИК от срока болезни: в течение первой недели у 37,9%, на второй вдвое чаще (у 69,6%), на третьей у 71,5% больных. Частота выявления ЦИК была прямо пропорциональна продукции антител к хантавиру-су. Менее четкая зависимость частоты выявления ЦИК связана с тяжестью инфекции. В ранние сроки ЦИК чаще выявлялись при среднетяжелой форме инфекции, чем при тяжелой (соответственно 67,7 и 25,0%). В более поздние сроки частота выявления ЦИК при любой степени тяжести была примерно одинаковой. Концентрация ЦИК (в норме 71,22±5,2 едОП) прямо зависела от тяжести ГЛПС и более продолжительного срока болезни (424,5± 1,4 на 1 неделе и 607,2±3,9 едОП на 4 неделе у больных тяжелой формой в отличие от 181,0±3,4 и 201,4+1,2 едОП в те же сроки болезни при легкой форме, р<0,05). Известно, что ЦИК малых размеров формируются при избытке антигена, не элиминируются фагоцитами, не способны фиксировать комплемент, циркулируя в крови долгое время. Определение степени дисперсности ЦИК показало, что у больных тяжелыми формами ГЛПС мелкодисперсные комплексы встречались почти в 2 раза чаще, чем у больных среднетяжелой формой практически в течение всей болезни. У больных легкой формой выявлялись ЦИК только крупных и средних размеров.

ДИНАМИКА ПРОДУКЦИИ ИНТЕРЛЕЙКИНА-2 В ПРОЦЕССЕ ФОРМИРОВАНИЯ ПРОТИВОХОЛЕРНОГО ИММУНИТЕТА

Каболова 3.3., Козловский В.Н., Васильева Г.И.

Научно-исследовательский противочумный институт, Ростов-на-Дону, Россия

В связи с тем, что ранее нами было выявлено снижение продукции IL-2 при парентеральном введении как микробных клеток (м.к.) Vibrio cholerae, так и холерного токсина (XT), целью настоящего исследования явилось опреде-

ление синтеза этого цитокина при других способах введения - пероральном и интраназальном как вероятных путях осуществления специфической профилактики холеры с помощью вакцинных препаратов. Определение спонтанной антиген- и митогениндуцированной продукции 1Ь-2 осуществляли в супернатантах микрокультур лимфоидных клеток с помощью иммуноферментного метода, используя антицитокиновые моноклональные антитела производства фирм Caltag (Канада) и РЬагт^еп (США). Изучение синтетической активности лимфоцитов мезентериальных лимфоузлов животных, иммунизированных перорально целыми микробными клетками, показало, что спонтанная продукция 1Ь-2 оказывается в несколько раз выше, чем при их парентеральном введении, но все же ниже, чем в контроле. При этом также сохраняется тенденция к ее восстановлению к концу продуктивного периода, когда на 21 и 28 сутки после иммунизации спонтанная продукция 1Ь-2 соответствует контрольному уровню. При парентеральном введении этот показатель не отличался от контрольного только на 28 сутки после иммунизации, что может быть свидетельством меньшего повреждающего действия пероральной иммунизации на функциональную активность иммунокомпетентных клеток (ИКК) в сравнении с парентеральной. Митогенстимулированная продукция 1Ь-2 в этом случае не нарушалась вовсе и на всех этапах формирования иммунитета соответствовала контрольному уровню. Анализируя влияние пероральной иммунизации ХТ на синтетическую активность ИКК мезентериальных лимфоузлов, следует обратить внимание на существенное снижение спонтанной продукции 1Ь-2 лимфоцитами иммунизированных животных, которая помимо того, что оказалась значительно ниже контрольного уровня и уровня продукции в случае иммунизации целыми м.к. холерного вибриона, еще и была статистически более низкой в сравнении с показателями, полученными при парентеральном введении ХТ в первую неделю после иммунизации и на 28 сутки после введения иммуногена. Митогенстимулированная продукция 1Ь-2 в первую неделю после иммунизации была значительно ниже и контрольного уровня, и уровня продукции, отмечавшегося при иммунизации целыми м.к., но не отличалась по интенсивности от таковой при парентеральном введении ХТ. Однако на 3 и 4 неделе после иммунизации стимулированная продукция 1Ь-2, хоть и увеличивалась в сравнении с показателями первой недели, оставаясь практически в 2 раза меньшей, чем при иммунизации целыми м.к., оказалась статистически достоверно более низкой, чем даже при парентеральном введении. Это обстоятельство свидетельствует о том, что введение ХТ регов приводит к формированию выраженного иммунологического дефицита за счет снижения функциональной активности иммуноцитов. Интраназальная аппликация целых м.к. холерного вибриона во все сроки исследования не сопровождалась, судя по показателям спонтанной и митогениндуцированной продукции 1Ь-2, нарушением синтетической активности лимфоцитов мезентериальных лимфоузлов иммунизированных животных. Весьма интересным оказалось и то обстоятельство, что интраназальное введение ХТ в отличие от целых м.к. сопровождалось значительным увеличением продукции 1Ь-2 лимфоцитами не только мезентериальных лимфоузлов, но и интраэпителиальными лимфоцитами. При этом наиболее значительное увеличение продукции ростового фактора, как спонтанной, так и при стимуляции митогеном, отмечалось на начальных этапах иммунизационного периода, то есть в первую неделю после вве-

дения антигенов. Обнаруженный факт позволяет предположить возможную эффективность одновременного перо-рального введения целых м.к. V.cholerae и интраназально-го введения XT в целях оптимизации иммунного ответа на антигены холерного вибриона, поскольку способность холерного токсина в физиологических пределах интенсифицировать продукцию IL-2 несомненно будет играть положительную роль в отношении пролиферативной активности лимфоцитов, контактировавших с другими антигенами холерного вибриона, и их способности к дифференци-ровке.

МНОГОУРОВНЕВОЕ ИССЛЕДОВАНИЕАКГИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ

Каленова Л.Ф., Кашуба Э.А., Чебышева Е.В., Тюлькова Т.Е., Молокова О.М.

Городская иммуноаллергологическая консультативно-диагностическая поликлиника, ПНИЛэкологической и клинической иммунологии инфекционно-паразитарных заболеваний ТОЮУНЦРАМН, г.Тюмень

Фагоцитирующие клетки, прежде всего нейтрофиль-ные гранулоциты (НГ) периферической крови, являясь первой линией противоинфекционного иммунитета, играют важную роль в устойчивости организма к инфекционным агентам. Одной из возможных причин существования инфекционных процессов могут быть изменения в фагоцитарном звене и работающих с ними в комплексе других защитных системах (Т-, В-, НК-клетки и цитоки-ны) организма (Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 1995). Хронические инфекции, в свою очередь, не могут не приводить к изменению функциональной активности всего макроорганизма и в том числе фагоцитирующих клеток.

Нами проведено лабораторное исследование иммунореактивности организма детей 6-14 лет, больных хроническим описторхозом (п=27), и условно здоровых детей того же возраста (контрольная группа, п=15). У детей с описторхозом выявлено значительное снижение числа НГ в периферической крови - 45,2±2,0% при 56,9±2,1% в контроле (р<0,01). Степень завершенности фагоцитоза НГ в тесте с дрожжевыми клетками при инкубировании в течение 120 и 30 мин достоверно снижена до 0,95±0,07 при норме 0,64±0,04 (р<0,01). Поглотительная активность нейтрофилов в тесте с частицами латекса была в пределах нормы - 88,1 ±1,5% при 88,7±1,4% в контроле (р>0,05). Состояние кислородза-висимой бактерицидности по результатам спонтанного и стимулированного вариантов НСТ-теста свидетельствовало о повышенной активности и наличии резервов в лизосо-мальном аппарате - 25,4±2,1% и 51,4±2,3% (р<0,01 по сравнению с контролем) соответственно. Исследование рецепторного аппарата НГ, выделенных на двойном градиенте плотности фиколл-верографина - 1,077 и 1,094 г/мл с использованием лазерной проточной цитометрии выявило значительное снижение экспрессии рецепторов FcyRIII до 261±17 при норме 392±16 в условных единицах (усл.ед) интенсивности флюоресценции (р<0,01). Рецепторы FcyRIII на НГ отвечают на фагоцитоз опсонизированных IgG бактерий и включают триггерный механизм активации и слаженной работы всех систем внутриклеточного переваривания. При снижении уровня экспрессии FcyRIII процесс фагоцитоза может замедляться, что и проявляется в тесте с дрожжевыми клетками. На НГ снижена экспрессия моле-

кул адгезии С011Ь -194±12 при 244±8 усл.ед. в контрольной группе (р<0,01), что уменьшает способность НГ мигрировать в зону инфекционного воспаления. Экспрессия рецептора готовности к апоптозу СВ95 снижена до 69+9 при 89±8 усл.ед. в контроле (р<0,05). Снижение уровней экспрессии рецепторов к ^О, адгезии и готовности к апоптозу на НГ свидетельствует об их функциональной незрелости (Васкоск С.Р. е1 а1., 1990). Вполне возможно, что это связано с высоким уровнем провоспалительного цитокина ТЫРос, уровень которого в сыворотке крови детей с инвазией был повышен до 910+68 пкг/мл при норме 90±7 пкг/мл (р<0,01). Длительное повышение концентрации ТОТос может сопровождаться выходом из костного мозга в кровоток незрелых НГ, а также приводить к снижению экспрессии рецепторов активации за счет их интернализации или шеддинга (РоЛеи Р., ШеЫоо1 С., 1994). Снижение числа и функциональной незрелости НГ может быть также связано с низким уровнем стресс-ассоциированного гормона кортизола - 344±31 против 463±26 нмоль/мл в контроле (р<0,01). Наличие фагоцитарной недостаточности НГ при хронической опистор-хозной инвзии у детей, в свою очередь, может способствовать более частому возникновению и более тяжелому течению сопутствующих инфекционных заболеваний. Таким образом, изучение рецепторного аппарата НГ и определение цитокинового и гормонального статуса организма при хронической инфекционной патологии помогает расширить наше представление о причинно-следственных взаимосвязях при формировании вторичных иммунодефицитных состояний. Этот вопрос важен для клинической иммунологии, так как от его решения во многом зависят стратегия и тактика лечащего врача в выборе метода лечения.

ВЛИЯНИЕ ВОБЭНЗИМА НА ИММУННЫЙ ОТВЕТ ПРИ ГЕНЕРАЛИЗОВАНННЫХ ФОРМАХ МЕНИНГОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ У ДЕТЕЙ

Кашуба Э.А.. Рычкова О.А.. Дроздова Т.Г., Петров В.Г., Кухтерин А.А., Полуэктова Л.В.

Тюменская медицинская академия,

Городская инфекционная больница, г. Тюмень

Цель исследования: изучение иммунного ответа с точки зрения фаз общего адаптационного синдрома (стресса) и иммунорегулирующего эффекта системной энзимотера-пии у детей при генерализованных формах менингококко-вой инфекции (ГФМИ).

Методы исследования. Фенотипирование лимфоцитов (Лф) с применением моноклональных антител к диф-ференцировочным антигенам Лф методом проточно-лазерной цитофлюреметрии с помощью аппарата РАСБсап.

Результаты. Обследовано 30 детей в возрасте от 4 мес. до 14 лет с ГФМИ: менингококцемия, менингит. В1-3 дня болезни (фаза мобилизации) отмечалось снижение СОЗ+,СБ7+ (Т-лимфоциты), С08+, СБ16+( цитотоксичес-кие и киллеры), СБ4+ (Т-хелперы) клеток и маркеров активации адгезии с компонентом комплемента СО 11Ь при повышенном количестве В-лимфоцитов, экспрессирующих СБ20+ рецепторы. На 12-14 день заболевания отмечалось повышение лимфоцитов, экспрессирующих СБ20+, С054+, СБ38+ рецепторы, на фоне снижения маркеров активации адгезии - СЭ 11Ь ( см. табл.). Для метаболической коррекции клеточно-гуморальных нарушений иммунной системы в схему лечения был включен Вобэнзим. При использовании вобэнзима отмечалось достоверное повышение лимфоцитов, экспрессирующих СЭЗ+, СБ7+, СБ8+

Табл. ПОКАЗАТЕЛИ ЭКСПРЕССИИ CD-АНТИГЕНОВ ЛИМФОЦИТОВ (В %) УДЕГЕЙ С ГФМИ

CD антиген Здоровые Больные ГФМИ (1-3 день болезни) Больные ГФМИ (после 12-14 дня болезни) Больные ГФМИ (после 12-14 дня болезни), получавшие вобэнзим

CD3 63,7± 2,1 37,27±3,51** 57,36±3,95 63,46±5,2***

CD4 37,1 ±1,07 25,65±3,67* 38,06±2,1 39,3±1,82

CD8 27,5±1,13 23,2±3,6 23,2±1,62 29,08±2,8***

CD20 8,59±0,85 16,75±2,3** 13,93±2,16** 12,12±2,0*

CD16 16,5±0,52 10,87±1,98** 14,1 ±3,02 17,08±2,18

CD7 69,4±2,4 45,0±6,13** 68,14±5,3 78,3±1,93*, ***

CD71 8,54±0,76 15±2,78* 14,98±1,81 * 10,44±2,48

CD11b 22,7±2,8 14,5±2,78** 16,5±3,15* 24,43±3,01 *, ***

CD54 11,3±1,82 17,3±2,24* 23,09±5,1* 27,12±4,94**

CD38 30,6±2,63 37,5±4,83 41,93±5,85*‘ 55,84±1,86**, ***

Примечание: ’-достоверность различий относительно группы здоровых (р<0,05);

** - достоверность различий относительно группы здоровых) р<0,001);

*** - достоверность различий относительно группы больных, не получавших вобэнзим(р<0,01; р<0,05, р<0,001).

рецепторы и экспрессия рецепторов адгезии CD38+, CD50+, CD lib.

Выводы. Иммунный ответ при ГФМИ носит фазный характер. Энзимный препарат- вобэнзим оказывает иммуномодулирующее действие: увеличивает репрезентативность Т-,В-лимфоцитов, цитотоксических киллеров, маркеров адгезии лимфоцитов.

АДАПТАЦИОННО-БИОРИТМОЛОГИЧЕСКИЙ ПОДХОД ПРИ ИЗУЧЕНИИ ОСОБЕННОСТЕЙ ВЛИЯНИЯ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ НА ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОЙ И НЕЙРОЭНДОКРИННОЙ СИСТЕМЫ У МЫШЕЙ ИНБРЕДНЫХ ЛИНИЙ

Кириличева Г.Б.. Соловьева М.С., Пронин А.В.

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф.Гамалеи РАМН, Москва, Россия

Проблема регуляции иммунного ответа и генетического контроля регуляторных процессов является одной из наиболее важных в современной иммунологии.

Целью работы является экспериментальное исследование механизмов, определяющих вариабельность воздействия иммуномодуляторов на иммунную и нейроэндокринную системы у мышей инбредных линий, и разработка на этой основе более адекватных методов оценки иммуномодулирующего эффекта.

В ходе настоящей работы впервые применен биоритмологический подход к изучению влияния иммуномодуляторов на показатели иммунной и нейроэндокринной системы у мышей с генетически обусловленными четкими различиями в функциональных характеристиках этих систем. В работе использованы иммуномодуляторы различной структуры и происхождения, различающиеся механизмом иммуномодулирующего эффекта.

Анализ представленных экспериментальных данных позволяет сделать вывод о том, что сравнительная оценка иммуномодулирующего эффекта у мышей инбредных линий зависит от условий постановки эксперимента, в частности, от фазы биоритма, на которую приходится исследо-

вание. Показано, что сравнивать можно лишь те экспериментальные группы, в которых исследование приходится на однотипные фазы биологического ритма изучаемых показателей. Установлено, что необходимым этапом любых сравнительных экспериментов по изучению иммуномодулирующего эффекта является проведение биоритмологических исследований. Проведение сравнительного анализа традиционными методами в одной временной точке не может обеспечить корректную постановку сравнительного эксперимента по оценке иммуномодулирующего эффекта у мышей инбредных линий.

Разработаны новые критерии стандартизации экспериментов по сравнительной оценке иммуномодулирующей активности. При проведении сравнительного анализа уровень изучаемого показателя у контрольных животных сравниваемых групп должен находиться в одной и той же фазе биологического ритма.

Нами разработан оригинальный амплитудно-биоритмологический подход в изучении иммуномодулирующего эффекта. Обосновывается применение этого метода, доказывается его преимущество и принципиальное отличие от традиционных методов исследования иммуномодулирующего эффекта.

Доказана возможность применения амплитудно-биоритмологического подхода при изучении различных патологических воздействий: вирусных и бактериальных заражениях и интоксикациях, действии ионизирующей радиации, стрессорном воздействии.

ИЗМЕНЕНИЯ ФАКТОРОВ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ОДОНТОГЕННЫХ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ И ИХ КОРРЕКЦИЯ

Королинский С. А.. Беловолова Р. А..

Новгородский С.В.

Ростовский государственный медицинский университет, Ростов-на-Дону, Россия

В диагностике и лечении гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области большое внимание уделяется оценке общего иммунитета. Местный иммунитет слизистой оболочки полости рта (СОПР) у таких больных изу-

чен в меньшей степени. С целью выявления характера и направленности изменений гуморальных факторов местного иммунитета СОПР было проведено клиническое и иммунологическое обследование 52 больных с одонтогенными гной-но-воспалительными заболеваниями до операции и спустя 4 суток. По клинико-лабораторным признакам активности воспалительного процесса были выделены три группы больных. I группу составили больные с ограниченным воспалительным процессом. Во II группу вошли больные с распространенностью флегмон до 3 клетчаточных пространств, госпитализированные в ранние сроки от начала заболевания. В III группу были выделены больные, поступившие в поздние сроки от начала заболевания с локализацией флегмон в 4 и более клетчаточных пространствах.

Изменения показателей системного иммунитета на микробную инвазию характеризовались инертностью у больных всех трех групп и колебались в пределах нормы. В то же время регистрировались отчетливые изменения со стороны факторов местного иммунитета. У всех обследованных отмечено повышение содержания (348,4±33,3 мг/мл - I гр., 434,5±21,8 мг/мл - II гр., 650,64±75,8 мг/мл -III гр.) и различная степень снижения уровня ^А (126,8±13,1 мг/мл - I гр„ 139,0±10,2 мг/мл - II гр., 118,34±22,4 мг/мл -III гр) в слюне. Уровень составлял у больных II группы 87,0±10,7

мг/мл и у больных III группы 106,50±12,5 мг/мл.

В соответствии с характером выявленных изменений проводилась дифференцированная иммунокоррекция. В послеоперационном периоде больным I группы назначался иммуномодулятор местного действия - «Имудон» (Солвей-фарм, Бельгия) в предлагаемой изготовителем лечебной дозировке. Больным II и III групп иммунокоррекция проводилась местными (Имудон) и общими иммуномодуляторами: «Полиок-сидоний» (ГНЦ “Институт иммунологии” Минздрава России) и «Иммуновинин» (ГУП “Иммунопрепарат”, г. Уфа).

На 4 сутки после операции количественные изменения иммуноглобулинов в сыворотке крови кардинально не изменялись. В слюне регистрировался дальнейший рост концентрации в^А у больных всех групп. Во II группе уровень ^А слюны превышал норму (235,3±48,3 мг/ мл), а в

I и III группах колебался в пределах ее средних значений. Содержание у больных во II и III группах нормализо-

валось (58,6±7,2 мг/мл - II гр., 50,4±3,6 мг/мл - III гр.).

Таким образом, реакция иммунной системы на микробную инвазию при одонтогенных гнойно-воспалительных заболеваниях характеризуется преимущественной вовлеченностью факторов местного иммунитета и проявляется дисбалансом иммуноглобулинов слюны разной степени выраженности, сопряженной с тяжестью и стадией воспалительного процесса. Сочетанное применение «Имудона» и «По-лиоксидония» сопровождается выраженным терапевтическим и иммунокорригирующим эффектом.

ИЗМЕНЕНИЕ УРОВНЯ ДО-АТ К КАПСУЛЬНОМУ ПОЛИСАХАРИДУ ГЕМОФИЛЬНОЙ ПАЛОЧКИ ТИПА В У ПРИВИТЫХ ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКОЙ ПАТОЛОГИЕЙ БРОНХОЛЕГОЧНОГО АППАРАТА

Костинов М.П.. Рыжов А.А., Ястребова Н.Е., Ляшова В.Н.,Овечко Н.Н.

НИИВС им. И.И. Мечникова РАМН

Целью исследования явилось изучение влияния вакцины АсТ-№Ь на динамику ^в-АТ к полисахариду гемо-фильной палочки типа Ь у детей с хронической патологией бронхолегочного аппарата.

Вакцинацию вышеуказанным препаратом проводили 24 детям в возрасте от 5 до 16 лет после выписки из стационара. Выбор вакцинного препарата осуществлялся с учетом результатов микробиологического анализа при поступлении в клинику. Поствакцинальный период проходил без развития реакций или осложнений. Исследования сывороток проводили с помощью коммерческой иммуно-ферментной тест-системы для количественного определения IgG-AT к капсульному полисахариду Hib (Fuller Laboratories,США) и полуколичественного иммунофер-ментного теста, разработанного в НИИВС им. И.И.Меч-никова РАМН. Выявлено, что через 1 мес. после введения вакцины отмечается нарастание IgG-AT против капсульного полисахарида с 6,59±1,2 мкг/мл до 18,88±1,5 мкг/мл с сохранением высокого уровня в течение 1 года (14,18± 1,0 мкг/мл р<0,001). При этом уровень IgM-AT к полисахариду гемофильной палочки снизился через 1 мес. после вакцинации и регистрировался в значениях ОП от 0,78±0,04 до 0,25±0,03, р<0,02. Однако через год уровни IgM-AT были обнаружены в исходных значениях. У 65% привитых детей была достигнута ремиссия заболевания в течение года.

Таким образом, введение вакцины Act-Hib детям с хронической бронхолегочной патологией приводит к возрастанию специфических IgG-AT, которые, в свою очередь, могут оказывать положительное влияние на исход хронического процесса.

ВЛИЯНИЕ IFN-ТЕРАПИИ НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ С

Кузнецов С.И.. Латаш В.Г.

Медицинская академия последипломного образования, Санкт-Петербург, Россия; Городская больница № 32, Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время доказано, что наиболее тесно система IFN связана с иммунной системой, так как для IFN свойственен чрезвычайно широкий спектр многогранных иммунотроп-ных эффектов. Цель нашего исследования состояла в оценке влияния экзогенного рекомбинантного cc-IFN (Реаферона) на некоторые показатели, отражающие состояние специфической и неспецифической резистентности организма у больных, страдающих хроническим вирусным гепатитом С (ХВГ С) и подвергнутых IFN-терапии. В динамике обследован 21 человек с ХВГ С, которым проведен 3-недельный курю IFN-терапии (курсовая доза Реаферона - 52,5 млн. ME). Показатели резистентности оценивали до и после лечения, а также спустя

1,5 месяца по завершении курса IFN-терапии. В венозной крови определяли: спонтанную миграцию лейкоцитов, РТМЛ с ФГА, фагоцитарное число (ФЧ) и фагоцитарный индекс (ФИ) на латексный тест-объект, лизосомально-катионный тест (Л КТ), концентрацию иммуноглобулинов (IgA, IgG, IgM), циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК). Влияние IFN-терапии оценивали по изменению процента больных в группах (до, после и на отдаленных сроках) с нормальными, повышенными и пониженными показателями. До начала лечения спонтанная миграция у 70% больных была в пределах нормы и у 30% понижена. После окончания курса лечения и на отдаленных сроках процент лиц с нормальными показателями возрос до 85-87% и соответственно уменьшилось количество больных с пониженными значениями миграции. РТМЛ на ФГА имела обратные тенденции. До лечения было 30% больных с нормальными значениями реакции и 70% - с повышенными. После курса IFN-терапии больные распределились

примерно пополам (47/53). Однако через 1,5 месяца показатели вернулись практически на исходный уровень (35/65). Фагоцитарные показатели имели следующие значения: ФЧ - до лечения (70%-нормальные, 25%-повышенные и 5%-понижен-ные), после лечения (75 / 5 / 20); через 1,5 месяца (60 / 35 / 5). ФИ - до лечения (35/0/65), после лечения (10/0/ 90) и через

1.5 месяца (65 / 0 / 35). По ЛКТ, отражающему кислородозависимую биоцидность нейтрофильных гранулоцитов, больные распределились следующим образом: до лечения (65/10 /25), после лечения (75 / 0 / 15). IFN-терапия не влияла на концентрацию Ig G. До, после и спустя 1,5 месяца после окончания лечения все больные по этому показателю укладывались в нормальный диапазон. В отношении других классов Ig группы претерпевали изменения, но в сторону увеличения больных с нормальными показателями: Ig А - до лечения (63 /11 / 26), после лечения (75/5/20), через 1,5 месяца986/5/9); IgM

- до лечения (70 / 25 / 5), после лечения (65 /25/10), спустя

1.5 месяца (86 /5/9). ЦИК и также обозначили тенденцию к нормализации в отдаленные сроки: до лечения (35 / 65 / 0), после лечения (16 / 84 /0), через 1,5 месяца (48 /52 /0).

Таким образом, мы полагаем, что можно говорить о положительном влиянии IFN-терапии на исследованные показатели резистентности, так как после завершения курса лечения и особенно на отдаленных сроках возрастает процент больных, укладывающихся в нормальный диапазон значений.

ВЛИЯНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЙ ТЕРАПИИ НА ТЕЧЕНИЕ ОСТРЫХ И ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЛЁГКИХУ ВЗРОСЛЫХ И ДЕТЕЙ

Кузник Б.И., Витковский Ю.А., Гаймоленко И.Н., Лиханов И.Д., ПросецкаяТ.А., Цыбенова Б.Ц.

Читинская медицинская академия

Исследования проведены на 150 больных острым абсцессом лёгкого, 20 взрослых больных с внутрибольничной пневмонией и 47 детях с хроническими обструктивны-ми болезнями легких. Все больные взрослые и дети были разделены на 3 группы: 1. контрольная, получавшая традиционное лечение; 2. больные, наряду с традиционным лечением получавшие тималин; 3. больные, в комплексную терапию которых был включен тимомиметик вилон (Lys-Glu). У больных до и после лечения определялись основные показатели клеточного и гуморального иммунитета, содержание провоспалительных цитокинов и IL-4, свёртываемости крови и фибринолиза.

Проведенные наблюдения показали, что у большинства взрослых больных имеется выраженный лейкоцитоз с нейтрофильным сдвигом влево. У значительной части больных детей лейкоцитоз отсутствовал. Число лимфоцитов у взрослых оставалось в пределах нормы или было снижено, а у детей повышено. В то же время у взрослых количество Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов (CD4+) и В-лимфоцитов (CD20+, CD22+) оказалось значительно сниженным, тогда как содержание ЦТЛ (CD8+) сохранялось в пределах нормы или было даже увеличено. У детей абсолютное количество CD3', CD4\ CD16+, CD8+ и CD22+ в большинстве случаев было увеличено. Иммунорегуля-торный индекс у всех больных был уменьшен. У взрослых отмечалось как увеличение, так и уменьшение способности лимфоцитов адгезировать кровяные пластинки, у детей этот показатель оказался сниженным.

У большинства взрослых больных выявлялось увеличение концентрации основных классов иммуноглобулинов, тогда как их уровень у больных детей был значитель-

но снижен. У всех больных обнаружено нарушение соотношения между числом В-лимфоцитов и продукцией иммуноглобулинов.

Как у взрослых, так и у детей отмечалось значительное увеличение провоспалительных цитокинов: IL-la и (3, IL-8, TNFa, IFNa и у, а также провоспалительного цито-кина IL-4. При этом выявлялось нарушение нормального взаимоотношения между уровнем про- и противовоспалительных цитокинов.

У обследуемых больных развивалась гиперкоагуляция, резко увеличивалась концентрация фибриногена, снижался уровень антитромбина III, тормозился тотальный эуг-лобулиновый и хагеманзависимый фибринолиз. У подавляющего числа взрослых и у 1/3 больных детей выявлялись растворимые фибринмономерные комплексы.

У больных, находящихся на традиционном лечении, число лейкоцитов уменьшалось, тогда как количество лимфоцитов проявляло слабую тенденцию к повышению. Число CD3+, CD4+, CD8+, CD22+ и концентрация иммуноглобулинов практически не изменялись. У таких больных проявления ДВС-синдрома уменьшились, однако окончательно не исчезли.

У взрослых больных, где применялся тималин или вилон, резко возросло число лимфоцитов, более чем в 1,5 раза увеличилось количество CD3\ нормализовалось содержание CD4’, значительно увеличилось, хотя не достигло нормы, количество CD22+ и повысилась концентрация IgM. Иммунорегуляторный коэффициент приблизился или достиг нормы. У детей увеличилось содержание CD4\ возрос иммунорегуляторный индекс, нормализовался показатель адгезии тромбоцитов к лимфоцитам и приблизилось к норме, или достигло нормы содержание IgG, IgM и IgA. Одновременно увеличилась продукция иммуноглобулинов на один В-лимфоцит. Кроме того, при лечении тималином и вилоном снизилось содержание провоспалительных цитокинов и наметилась тенденция к восстановлению нормального соотношения между про- и противовоспалительным цитокином IL-4.

Практически у всех больных, леченных тималином или вилоном, исчезли явления ДВС, нормализовалось время коагуляции крови и плазмы, а также скорость растворения фибринового сгустка.

Предпринятое лечение с использованием иммуномодуляторов помогло значительно уменьшить летальность и резко сократить сроки пребывания больных в стационаре и на листке нетрудоспособности.

Представленные данные свидетельствуют о целесообразности применения иммуномодулирующих препаратов в комплексной терапии больных с острыми и хроническими неспецифическими заболеваниями лёгких.

ВЛИЯНИЕ IFN-ТЕРАПИИ НА РЕПЛИКАЦИЮ ВИРУСА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИСХОДНОГО УРОВНЯ АЛАТ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ С

Ла'таш В.Г.. Кузнецов С.И.

Городская больница №32, Санкт-Петербург, Россия; Медицинская академия последипломного образования, Санкт-Петербург, Россия

Проведено клинико-биохимическое исследование по изучению влияния экзогенного a-IFN на репликативную активность вируса в зависимости от исходного уровня Ал АТ в сыворотке крови больных хроническим вирусным

гепатитом С (ХВГ С). Был обследован 21 человек, у которых до начала лечения рекомбинантным а-1РЫ (Реафе-рон), в конце курса и на отдаленных сроках оценивались два вышеуказанных показателя. Пациенты в возрасте от 18 до 57 лет имели в анамнезе компенсированное клиническое течение ХВГ С с положительной РСЯ НСУ и различным уровнем АлАТ. Все больные получали трехнедельный курс внутримышечного введения рекомбинантного а-1РЫ в суммарной дозе 52,5 МЕ. В большинстве случаев на введение препарата клинически наблюдали легкое течение гриппоподобного синдрома. По уровню исходного АлАТ можно выделить три основные группы, в зависимости от результата влияния 1ЕЫ-терапии на репликативную активность вируса НСУ:

1. АлАТ с исходно нормальным уровнем на протяжении всех этапов обследования - 5 чел. Сразу после 1РЫ -терапии все пациенты имели РСЯ(-), а в отдаленные сроки у 3 чел.РСК(-) и у 2 чел. РСК(+).

2. Исходный уровень АлАТ умеренно повышен - 5 чел., на фоне терапии снизился до нормы - 2 чел. с РСЯ(-) или сохранялся на том же повышенном уровне - 3 чел., однако РСИ(-) имели 2 чел. и РС11(+) -1 чел. В отдаленные сроки у всех 5 пациентов АлАТ оставался в пределах нормальных значений и исчезала репликативная активность вируса.

3. Изначально повышенный уровень АлАТ отмечался на всех этапах исследования - И чел., сразу после 1РЫ-терапии у 5 чел. количество АлАТ приходило к норме ( из них РСЯ(-) - 3 чел. и РСЯ(+) - 2 чел.) или оставалось без динамики - 6 чел. (РСК(-) - 3 чел. и РСЛ(+) - 3 чел.). На отдаленных сроках наблюдения на фоне умеренно выраженного цитолиза гепатоцитов количество РСИ(-) - пациентов составляло 3 чел., РС11(+) - 8 чел.

Позитивное влияние 1РЫ-терапии на течение ХВГ С у больных на различных сроках наблюдения можно оценить следующим образом:

1. По окончании курса 1РЫ-терапии количество АлАТ нормализовалось у 10 чел. ( плюс 5 чел. с исходно нормальным значением) и исчезала репликативная активность вируса у 13 чел.

2. На отдаленных сроках из 11 РСИ(-) - пациентов с нормальным уровнем АлАТ составило 8 чел. и умеренно повышенным - 3 чел.

Таким образом, получены данные о возможном влиянии ПТЧ-терапии на активность АлАТ и репликацию вируса НСУ. Положительным эффектом противовирусной терапии от применения экзогенного а-ШЙ можно считать нормализацию активности АлАТ и исчезновение репликации вируса в сыворотке крови больных ХВГ С.

НАРУШЕНИЕТОЛЕРАНТНОСТИ ОРГАНИЗМА К ЕГО МИКРОФЛОРЕ - НОВЫЙ ВИД ИММУНОПАТОЛОГИИ

Лебедев К.А.

МГМСУ, Москва

В последние десятилетия резко увеличилось количество различных воспалительных патологий, вызываемых условно-патогенной микрофлорой и возбудителями латентных инфекций. Известно, что в основе формирования нормальной микрофлоры лежит возникновение толерантности к ней организма. Мы выдвигаем гипотезу о том, что снятие толерантности организма к аутомикрофлоре в сочетании с активацией последней, что часто возникает при антибиотикотерапии или воздействии других факторов,

раздражающих и активирующих микробы, может приводить к развитию воспалительного заболевания, вызываемого такими активированными микроорганизмами.

Воспалительные заболевания, имеющие подобную природу возникновения, мы назвали экзоиммунными заболеваниями в противовес аутоиммунным заболеваниям, так как в обоих случаях в основе возникновения заболевания лежит снятие толерантности.

В подтверждение подобной гипотезы мы приводим наблюдения над 56 клинически здоровыми женщинами, у которых в период подготовки к беременности были найдены в слизистой влагалища хламидии. Им назначались циклы антибиотикотерапии. В начале лечения антихла-мидийные антитела классов А и G не выявлялись. Однако вскоре после окончания антибиотикотерапии у 14 женщин были выявлены высокие титры антихламидийных антител, в мазках хламидии продолжали выявляться, а у двух женщин обнаружились клинические проявления цер-вицита и уретрита.

Если наша гипотеза верна, то она не только объясняет широкое распространение в настоящее время воспалительных заболеваний, вызванных условно-патогенной микрофлорой, но и заставляет считать, что широко распространенный сейчас среди части медиков взгляд на необходимость широкого активного уничтожения антибиотиками условно-патогенной микрофлоры у клинически здоровых людей требует существенной коррекции, так же как и широкое применение иммуномодуляторов у редко болеющих клинически здоровых лиц.

ХРОНИЧЕСКИЕ ПИЕЛОНЕФРИТЫ: ПРОБЛЕМЫ ИММУНОПАТОГЕНЕЗА И ИММУНОДИАГНОСТИКИ

Литвинов В. А.1. Пинегин Б.В.4, МатушевскийИ.А.1, Сучков С.В.2’3

1 Кафедра урологии РГМУ им. Н.И. Пирогова;

2ММА им. Сеченова; 3Лаборатория клинической иммунологии МОНИКИ; 4 ГНЦ «Институт Иммунологии», Москва, Россия

Сегодня важная роль иммунной системы в патогенезе и исходе хронических инфекционных заболеваний с различной локализацией не вызывает сомнений (Маянский В.Н., 1992; Gruber Н.Е., 1991; Peters К.М. et al., 1994). Одной из мало изученных в этом плане клинических моделей являются хронические пиелонефриты, удельный вес которых среди всех инфекций мочевых путей составляет от 32 до 58% (по данным разных авторов) и 11,1% среди всех урологических заболеваний (Лопаткин Н.А., Мартов А.Г.). Кроме того, довольно часто наблюдается переход острого пиелонефрита в хроническую стадию. Хронизация процесса в эволюции пиелонефрита связана с рядом факторов, среди которых ключевое значение имеет формирование вторичного постинфекци-онного иммунодефицита, вызванного как иммуногенностью микробных возбудителей и токсичностью продуктов их жизнедеятельности, так и особенностями иммунологической реактивности организма-хозяина [Haas D.W., McAndrew М.Р., 1996; Smeltzer M.S., Gilasy A.P., 2000].

Характер и специфика иммунологической реактивности при хронических пиелонефритах, в свою очередь, определяется в том числе и морфологической деструкцией ткани почки и окружающих мягких тканей в зоне воспаления, приобретающих на определенном этапе воспаления

свойства агрессивных аутоантигенов. Развивающиеся в этих условиях иммунодефицит и дисбаланс компонентов иммунного ответа снижают возможности специфической и неспецифической защиты, что также способствует пер-систенции микробных агентов и развитию, таким образом, порочного круга, обуславливающего поддержание патологического процесса [Gruber Н.Е., 1991; Smeltzer M.S., Gilasy A.P., 2000].

Вместе с тем исследования иммунного статуса при хронических пиелонефритах проводились, в основном, фрагментарно, и в литературе отсутствует однозначная информация относительно роли микробных ассоциатов и конкретных звеньев иммунного ответа в патогенезе инфекционно-воспалительного процесса, что является серьезным препятствием на пути к созданию системы иммунологического мониторинга пациентов с хроническим пиелонефритом. Так, в частности, в литературе отсутствуют работы, в которых сопоставлялись бы данные относительно особенностей микробного пейзажа, характерного для хронического пиелонефрита, с иммунологическими сдвигами в периферической крови, хотя известно, что некоторые бактерии способны выключать процессы антителооб-разования как прямым, так и опосредованным (через индукцию факторов, препятствующих активации Т-клеток) путем, и тем самым снижать общий уровень иммунного ответа организма хозяина на инфекционный возбудитель [Del Piano М. et al., 1989; Moniuddin A.A. et al., 1991].

Немаловажную роль при этом играют цитокины, которые, будучи медиаторами иммунитета, способны менять характер течения гнойно-воспалительного процесса в ту или иную сторону [Ковальчук Л.В., 1989; Seidel.J., 1989; Klosterhaefen В. et al., 1996]. Естественно, что при таком сложном механизме иммунорегуляции течение хронического инфекционного (в том числе, гнойно-септического) процесса зависит не только от иммуногенного потенциала инфицирующих микроорганизмов, но и от исходного иммунного статуса организма-хозяина.

Таким образом, несмотря на появление и развитие новых методов диагностики, внедрение в практику современных антибактериальных препаратов и определенную тенденцию к улучшению результатов лечения, процент инва-лидизации таких больных, в том числе в практике уролога, остаётся достаточно высоким и, по данным разных авторов, колеблется в пределах 10-18%. Естественно, что хаотично применяемые сегодня в хирургической практике отдельные иммунологические тесты не позволяют грамотно оценить роль иммунологических нарушений на фоне микробной инфекции у больных с осложнениями хронического пиелонефрита и использовать такого рода информацию в прогнозировании состояния пациента и характера осложнений и исхода заболевания. Это ставит разработку системы иммунологического мониторинга и иммунологических критериев эффективности лечения хронического пиелонефрита в ряд актуальных проблем современной урологии и клинической иммунологии.

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ ЭФФЕКТЫ ЛИКОПИДАУ РАБОТНИКОВ, КОНТАКТИРУЮЩИХ С ИЗОЦИАНАТАМИ

Литовская А.В.. Егорова И.В., Букина К.Л.

Научно-исследовательский институт гигиены и профпатологии М3 РФ, Нижний Новгород, Россия

Под влиянием изоцианатов, обладающих токсико-ал-лергическим действием, у работающих в контакте с ними

может возникать бронхиальная астма, обструктивные болезни дыхательных путей, риниты, конъюнктивиты. При исследовании иммунных процессов установлены нарушения иммунитета различной выраженности в зависимости от уровня действующего фактора, стажа работы, наличия той или иной патологии.

Целью настоящего исследования явилось изучение системного и местного иммунитета у рабочих современного производства пенополиуретанов при использовании в качестве сырья толуилендиизоцианата (ТДИ), концентрация которого в воздухе рабочей зоны не превышает П ДК, после назначения Ликопида.

Обследовано 23 человека, выработавших льготный пенсионный стаж в химической промышленности (15 женщин и 8 мужчин в возрасте от 41 до 59 лет). Оценивалось состояние системного иммунитета (фенотип лимфоцитов с моноклональными антителами и системой визуализации фирмы Dako, содержание IgM, IgG, IgA, ЦИК, лизо-цима, активность фагоцитоза нейтрофилов) и иммунитета слюны (содержание IgM, IgG, IgA, лизоцима). Лико-пид назначался в дозе 1 мг в день в течение 10 дней. Повторное исследование иммунного статуса проводилось через 30 дней после окончания курса терапии.

Фоновое обследование рабочих позволило установить ряд изменений по сравнению с контролем: снижение процентного содержания клеток, несущих дифференцировоч-ные антигены CD3, CD8, и увеличение ИРИ, однако абсолютные величины CD3+-, CD4+-, CD16+-, HLA-DP,DQ,DR+ - клеток были повышенными, вероятно, в связи с наличием лимфоцитоза в крови. Выявлено также повышение IgM, фагоцитарного индекса и уменьшение уровня лизоцима слюны. После курса Ликопида обнаружено достоверное повышение поглотительной способности нейтрофилов (по значениям фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса) и ЦИК наряду с понижением лизоцима сыворотки крови, снижение абсолютных величин общего содержания лимфоцитов, CD3+ -, CD4+-, CD19+-, CD25+-клеток, а также тенденция к нарастанию лизоцима слюны. Следует отметить, что повышение активности фагоцитоза наблюдалось, преимущественно, при исходно более низких значениях фагоцитарного числа, а частота пониженного по сравнению с контролем уровня встречалась лишь у 1 из 23 обследованных (против 4 из 23 до курса Ликопида). Низкие индивидуальные величины лизоцима слюны определялись после назначения препарата реже -у 5 рабочих, а до назначения - у 8. Четкой закономерности в отношении динамики уровня лимфоцитов, несущих различные дифференцировочные антигены, после курса Ликопида обнаружить не удалось.

Полученные данные свидетельствуют об иммуномодулирующем эффекте Ликопида. Выявленные особенности иммунного профиля могут быть связаны с изученным контингентом и условиями проведения обследования.

КОРРЕКЦИЯ ПОЛИОКСИДОНИЕМ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУННОГО СТАТУСА И УРОВНЯ КОРТИЗОЛА ПРИ РЕЦИДИВИРУЮЩЕМ ОБСТРУКТИВНОМ СИНДРОМЕ У ДЕТЕЙ

Лопатина В.А.. Ширшев С.В.

Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, г.Пермь, Россия

Введение. Рецидивирующий обструктивный синдром (РОС) у детей объединяет очень многие, сходные по клини-

ческой картине заболевания, что создает трудности в плане дифференциальной диагностики, в частности, с бронхиальной астмой. Основой для этого являются анатомо-физио-логические особенности ребенка. Диагностика требует много времени и усилий, и в течение всего этого срока диагноз будет оставаться неопределенным. При формировании факторов, способствующих хронизации воспаления (бактери-ально-вирусный эндобронхит, атопическая сенсибилизация) приведет к усилению обструктивной готовности ребенка, что связано с нарушениями иммунной системы в патогенезе обструкции. Известно, что недостаточность кортизола, возникающая на фоне постоянно активированной функции коры надпочечников, является одним из факторов, участвующих в формировании обструкции бронхов. В связи с этим представляется важным изучение взаимосвязи иммунной системы и уровня кортизола при РОС, а также оценка иммунокорригирующих мероприятий.

Цель и задачи. Целью настоящего исследования явилось изучение иммунного статуса и уровня кортизола у детей, страдающих РОС и оценка эффективности терапии данного состояния полиоксидонием.

Материалы и методы. В работе представлены данные обследования 63 детей в возрасте от 3 до 6 лет с рецидивирующим синдромом бронхиальной обструкции на фоне острой респираторной вирусной инфекции. Иммунокоррекция проводилась полиоксидонием (ПО) в комплексе с основной терапией. ПО инъецировали внутримышечно в возрастной дозе, общим курсом 5 инъекций. Контролем иммуномодулирующего действия ПО явилась группа детей, страдающих РОС, получавших только общепринятую терапию. Основные показатели иммунной системы изучены до терапии и после ее окончания. Для этого определяли общее количество и парциальный состав лейкоцитов периферической крови; уровень СБЗ+ -, СП4+ -, С 08* -, СБ16+ , С019+ - лимфоцитов; количество сывороточных иммуноглобулинов (^) классов С,А,М; уровень общего сывороточного ^Е; фагоцитарную активность лейкоцитов дифференцированно для нейтрофилов, моноцитов и эозинофилов; уровень кортизола в сыворотке крови методом радиоиммунологического анализа.

Основные результаты, заключение. Установлено, что при РОС развивается вторичный комбинированный иммунодефицит, с преимущественной заинтересованностью Т- клеточного и фагоцитарного звеньев иммунной системы. Снижается уровень СОЗ+- и С08’ -клеток с параллельным угнетением фагоцитарной активности нейтрофилов и повышением уровня общего Т^Е на фоне эозино-филии венозной крови, что определяет аллергический характер воспаления. РОС сопровождается существенным снижением уровня кортизола в сыворотке крови. Терапия рецидивирующего обструктивного синдрома полиоксидонием нивелирует некоторые негативные влияния общепринятой терапии на показатели иммунной системы и приводит к доминированию клеточно-опосредованных иммунных реакций за счет увеличения СБ16+- клеток, функциональной активности фагоцитов, что ведет к снижению уровня общего ^Е, модулируя уровень кортизола.

Таким образом, изменения иммунной системы и уровня кортизола при рецидивирующем обструктивном синдроме могут рассматриваться как ведущие факторы патогенетического механизма данного заболевания. Коррекция иммунного статуса полиоксидонием, равно как и уровня кортизола, тесно связана с положительной клинической динамикой и более длительной ремиссией заболевания, что позволяет снизить заболеваемость ОРВИ.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СОСТОЯНИЯ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ГРИППЕ А И ГРИППЕ В

Львов Н.И.

Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Повсеместная распространенность, поли-этиологичность, уникальная изменчивость вирусов гриппа обусловливают актуальность проблемы. Известно, что вирусы гриппа оказывают цитопатическое действие не только на эпителиальные, но и на иммунокомпетентные клетки, что приводит к угнетению механизмов местной и общей защиты организма, возникновению осложнений заболевания.

Цель и задачи. Исследовать состояние клеточного иммунитета у больных гриппом А и гриппом В в динамике заболевания и сравнить показатели клеточного иммунитета в зависимости от этиологии гриппа.

Материалы и методы. Обследовано 28 больных гриппом А и 27 больных гриппом В. Все обследованные лица молодого возраста (16-21 год), мужского пола, поступившие из организованных коллективов в клиники инфекционных болезней ВМедА в первые 3 суток заболевания в период эпидемий гриппа А и В. Субпопуляции лимфоцитов иммунофенотипировали с помощью моноклональных антител в лимфоцитотоксическом тесте с двойным флюоресцентным окрашиванием. Количество клеток, несущих соответствующий маркер, высчитывали в абсолютных и относительных (в процентах) величинах. Функциональную активность нейтрофилов периферической крови оценивали в НСТ-тесте, функциональную активность естественных киллеров (ЕК) - по цитотоксическому действию на клетки-мишени К-562. Кровь для исследования забирали в начале заболевания (1-3 день болезни -1 период), в периоде реконвалесценции (7-10 день болезни - II период). В контрольную группу (п= 20) были отобраны здоровые лица того же пола и возраста, что и в группе исследования.

Этиологию гриппа определяли в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и иммуноферментном анализе (ИФА). В РТГА определяли титры антител к антигенам вирусов гриппа A (H1N1, H3N2, H0N1, H2N2, HswNl) и В, в ИФА - содержание антител классов IgM и IgG к антигенам вирусов гриппа А и В. За диагностически достоверное принимали 4-кратное и более увеличение титров антител в РТГА, а также увеличение оптической плотности на 0,5 единиц и более в ИФА в динамике заболевания.

Математическое обеспечение решения задач исследования проводилось с использованием пакета прикладных программ “Statistica for Windows”, версия 5,0.

Основные результаты. Показатели клеточного иммунитета больных гриппом А и гриппом В в динамике заболевания представлены в таблице (на предыдущ. стр.).

В динамике заболевания достоверно не изменялись показатели относительного количества общих Т-лимфоци-тов (CD3%), относительного и абсолютного количества В-лимфоцитов (CD25), клеток, несущих на своей поверхности рецепторы к интерлейкину 2 (CD25) и главный комплекс гистосовместимости II типа (HLAII). В обеих группах достоверно снизилось количество лейкоцитов, показатели спонтанного и стимулированного НСТ-теста. В процессе заболевания достоверно увеличилось относительное и абсолютное количество лимфоцитов, абсолютное количество Т-лимфоцитов (CD3), Т-лимфоцитов хелпе-ров (CD4), Т-лимфоцитов супрессоров (CD8) и относи-

тельное количество естественных киллеров (ЕК%). У больных гриппом А достоверно меньше относительное количество Т-лимофоцитов хелперов (CD4%) в острый период заболевания (I), а также больше абсолютное количество Т-лимфоцитов супрессоров (CD8) и количество NK-кле-ток (CD16) в период реконвалесценции (II). Поэтому в обоих периодах заболевания при гриппе А достоверно меньшие значения коэффициента CD4/CD8. Эти данные согласуются с тем, что при гриппе А нарастает и становится достоверно большими, чем при гриппе В, относительное и абсолютное количество клеток с маркерами апоптоза (CD95% и CD95 соответственно).

Заключение. Полученные результаты исследования могут свидетельствовать о том, что при гриппе А происходит более выраженная стимуляция цитотоксических и NK-клеток, ответственных за элиминацию пораженных вирусом клеток.

ФАКТОРЫ ПРОГРЕССИРОВАНИЯ ПИЕЛОНЕФРИТАУДЕТЕЙ

Макарова Т.П.. Агафонова Е.В., Халдеева Е.В., Шакирова А.Р., Файзрахманова Е.С.

Казанский государственный медицинский университет; Казанский НИИЭМ

В связи с увеличением торпидных, проградиентных по течению инфекционно-воспалительных заболеваний мочевыводящих путей становится очевидным необходимость поиска новых этиологических факторов прогрессирования заболевания. Определенную роль в развитии пиелонефритов (ПН) играет система местного иммунитета, недостаточно изученной является роль грибов рода кандида в этиологии различных форм пиелонефритов у детей.

Целью исследования явилось изучение роли грибов рода кандида и механизмов местного иммунитета при непрерывно-прогрессирующем течении хронического пиелонефрита у детей. Под наблюдением находилось 54 ребенка с различными вариантами ПН-вторичный обструктивный (ВО), вторичный дизметаболический (ВД), вторичный обструктивный дизметаболический (ВОД). Исследовали уровни IgA slgA IgG IgM в моче (Е.В.Чернохвостова, 1985), всем детям проводилось бактериологическое и микологическое исследование, определение уровня циркулирующего маннанового антигена Candida albicans в сыворотке крови методом иммуносенсоров (лаборатория грибковых аллергенов, Казанский НИИЭМ).

По сравнению с группой здоровых отмечено существенное снижение уровня slg А (0,21 мг/мл) по сравнению с группой условно-здоровых детей (р<0,05), наиболее существенное для детей с ВОДПН (0,12 мг/мл). При сопоставлении с вариантами бактериурии наиболее существенное снижение slgA было отмечено при высеве Pr. Mirabilis и Enterobacter. В целом по группе детей с ПН мы отмечали умеренное увеличение содержания IgG (0,72 мг/мл) и IgA (0,65 мг/мл), по уровню IgM разница с группой здоровых детей была недостоверной, хотя в

11,3 % отмечено повышение уровня IgM в моче (в основном при ВОДПН). Нами выделены различные типы ди-симмуноглобулинемий (ДИГ), характеризующих состояние местного иммунитета - 1 тип (отсуствие slg А, снижение и/или отсуствие IgG, Ig) достоверно чаще (р<0,05) встречался при ВДПН, 2 тип (снижение и/или отсуствие slgA, повышение IgG, IgA, снижение и/или отсуствие Ig

М) был более характерен для ВОПН (р<0,05) и ВОДПН ( 44,6 %), 3 тип (снижение и/или отсутствие slg А, повышение и/или нормальное содержанием IgG, существенное повышение IgA, IgM, достоверно чаще встречался при ВОДПН (р<0,05).

В 41,6 % у детей с ВОПН и ВОПН отмечен значимый уровень кандидурии (>103), которая преимущественно сочеталась с выделением энтеробактерий, при этом в 90 % отмечен значимый уровень антигенемии (от 10-9 мг/мл), что свидетельствует о формировании висцерального микоза слизистых оболочек мочевого тракта. В данной группе отмечено достоверное снижение si А (р<0,05), повышение IgA, IgG, IgM, т.е. формирование ДИГ 3 типа, что свидетельствует в пользу заинтересованности механизмов местного иммунитета в формировании осложненного течения хронического пиелонефрита у детей. Данные о состоянии местной иммунной защиты и формировании кандидоза слизистых оболочек требуют целенаправленной коррекции при непрерывно-рецидивирующем течении ПН у детей.

ВЛИЯНИЕТЕТРАПЕПТИДАЛИВАГЕНА НА ИММУНИТЕТ, ГЕМОСТАЗ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОРГАНИЗМА

Малежик Л.П., Хасанова Н.В.

Читинская государственная медицинская академия

В Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН на основании анализа аминокислотного состава цитомедина гепалина, методом целенаправленного конструирования получен тетрапептид ливаген (Lys-Glu-Asp-Ala).

Изучение свойств ливагена показало, что этот препарат в опытах in vitro стимулирует клеточный иммунитет, фагоцитоз, антиоксидантную защиту, в больших дозах (40 мкг/мл и более) тормозит активацию системы комплемента по классическому пути, обладает антикоагулянтной активностью и ингибирует фибринолиз. Обнаруженные эффекты проявляются на плазме и крови здоровых людей и больных вирусным гепатитом.

Используемый как лечебный препарат при токсическом гепатите у крыс, вызванном введением четырёххлористого углерода, ливаген способствует быстрому купированию патологического процесса, нормализует пигментный обмен и уменьшает содержание трансаминаз, ликвидирует признаки гепатоцеллюлярной недостаточности и вызывает появление очагов регенерации в печени.

Полученные данные позволяют рекомендовать ливаген для клинических испытаний при различных заболеваниях печени.

ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ У ДЕТЕЙ С РАЗЛИЧНОЙ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ

МанзенюкО.Ю.. Москалец О.В.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского, Москва, Россия

Вопрос о роли инфекционных агентов, способных пер-систировать в организме человека, в формировании и/или

прогрессировании иммунной недостаточности, дискутируется уже давно. Периодическая реактивация латентной инфекции, особенно вирусов из семейства герпеса, не только усугубляет течение заболеваний, вызванных другими патогенами, но, по-видимому, может приводить к срыву механизмов естественной толерантности и противоопухолевого надзора, т.е. к развитию аутоиммунной и онкологической патологии. Поэтому своевременное выявление данных возбудителей, особенно у детей, весьма актуально как для проведения адекватной терапии, так и для иммунореабилитации.

Целью настоящей работы было изучение частоты выявления ЦМВ методом ПЦР при различных инфекционно-воспалительных процессах.

Материалы и методы. Обследовано 65 детей с бронхолегочной патологией (11 - с острыми деструктивными пневмониями, 54 - с ХОБЛ), 13 - с хроническими пиелонефритами и 2 - с атипично протекающими гематогенными остеомиелитами. Клинический материал (кровь, фарингеальные мазки и соскобы из уретры) исследовали методом ПЦР с детекцией в агарозном геле. Использовали коммерческие тест-системы отечественного производства.

Результаты: При бронхолегочной патологии ДНК ЦМВ выявлялась в 52,6% случаев, причем особенно часто (в 72,7%) ее детектировали при острых деструктивных пневмониях. У детей с ХОБЛ этот показатель составил 42%. Частота выявления вируса в крови была значительно выше, чем в фарингеальных мазках. Отмечалась также корреляция между частотой выявления ЦМВ и тяжестью заболевания. При хроническом пиелонефрите этот вирус выявлен в соскобах из уретры в 15,4% случаев и не разу не определялся в крови. У обоих больных остеомиелитом в крови также была обнаружена ДНК ЦМВ.

Выводы. Высокая частота выявления ЦМВ с помощью ПЦР при хронической инфекционной патологии, особенно в случае тяжело или атипично протекающих процессов, может свидетельствовать о наличии серьезной иммунной дисфункции. Таким больным необходимо проводить углубленное исследование иммунного статуса для подбора адекватной иммунокорригирующей терапии и последующей иммунореабилитации.

ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ПАМЯТЬ Медуницьш Н.В.

ГИСК им. ЛА.Тарасевича, Москва, Россия

Приобретенный иммунитет имеет два уникальных признака: специфичность и иммунологическую память. Вся вакцинопрофилактика основана на существовании феномена иммунологической памяти. Главным элементом иммунологической памяти являются клетки памяти, которые образуются из так называемых наивных клеток, не обладающих еще антигенной специфичностью. Для формирования иммунологической памяти необходимо участие вспомогательных клеток, представляющих антиген наивным клеткам.

Различают В- и Т-клетки памяти, центральные и эффек-торные Т-клетки памяти. В-клетки памяти образуются в зародышевых центрах, а Т-клетки памяти - в тимусзависи-мых зонах лимфоидных органов. Центральные Т-клетки памяти накапливаются в местах их образования и являются источником формирования эффекторных Т-клеток памяти. Развитие иммунологической памяти зависит от свойств антигена, его дозы, пути введения, адъювантов, состояния иммунной системы, генотипа и других факторов.

Существующие в практике вакцины, обеспечивающие формирование гуморального иммунитета, обладают высокой эффективностью

Механизмы развития поствакцинальной памяти слабо изучены. Дискуссионным является вопрос о роли антигена в развитии иммунологической памяти. По одной из теорий предполагается, что память сохраняется длительное время благодаря присутствию антигена в организме. Вместе с тем, память сохраняется, хотя антигены уже не обнаруживаются иммунологическими методами.

Нами получены доказательства, что нативный белковый антиген связывается клетками неиммунизированных животных с помощью 1а-белков (продуктов генов гистосовместимости класса II), которые экспрессируются на поверхности иммунокомпетентных клеток. Вероятно, 13-белки являются универсальными рецепторами для нативного антигена. Комплексы антигенов с 1а-белками нами обнаружены на лимфоцитах, макрофагах и дендритных клетках. Степень экспрессии 1а-белков на клетках соответствует их способности связывать нативный антиген. Наиболее выраженной способностью экспрессировать 1а-белки и фиксировать экзогенный антиген обладают дендритные клетки.

На основании полученных данных сделан вывод, что вспомогательные клетки, прежде всего дендритные клетки, являются своеобразным хранилищем для антигена, связанного с продуктами генов гистосовместимости. Эта связь препятствует полному расщеплению антигена, не позволяет обнаружить антиген иммунологическими методами, но обеспечивает длительное образование клеток иммунологической памяти.

ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСА ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ЭНТЕРОКОЛИТОМ

Мусаходжаева Д. А., Узакова Н.Т.

Институт иммунологии АН РУз,

Ташкент, Узбекистан

Хронический энтероколит у детей в климатических условиях Узбекистана наиболее частая патология среди других хронических заболеваний желудочно-кишечного тракта. Наблюдаемое при этом заболевании диффузное поражение тонкой кишки и ферментативная недостаточность приводят к развитию полидефицита таких биологически активных веществ, как белки, жиры, углеводы, микроэлементы, витамины, вследствие чего происходит дисбаланс в работе системы иммунитета.

В связи с вышесказанным нами было проведено исследование по изучению некоторых параметров иммунной системы у 27 детей, больных хроническим энтероколитом в возрасте 3 - 7 лет. Контрольную группу составили 25 практически здоровых детей того же возраста. Было установлено, что развитие хронического энтероколита сопровождается значительным количественным снижением в периферической крови СОЗ+-, СВ4+-, С08+-клеток. Уменьшение количества С04+-клеток, по данным ряда авторов,

связано со скоплением лимфоцитов в очаге поражения. Снижение абсолютного и относительного числа CD8+-клеток, по всей видимости, связано с ростом антигенной нагрузки в виде некротических масс и микроорганизмов. Длительное антигенное воздействие из очага поражения индуцирует развитие аутоиммунного процесса, который прогрессирует при дефектах в работе иммунорегуляторных клеток. Содержание CD16+- клеток при этом существенно увеличивается. Принимая во внимание тот факт, что ингибиторами NK- клеток являются Т-супрессоры/цитоток-сические лимфоциты, можно предположить, что выявленное понижение С08+-клеток у детей с хроническим энтероколитом также играет роль в повышении уровня CD 16+-лимфоцитов.

Работу В-системы иммунитета оценивали, в основном, по двум параметрам: по содержанию в крови циркулирующих CD20+- клеток и уровню основных классов сывороточных иммуноглобулинов G, А и М.

Анализ содержания С020+-клеток показал пониженное количество их у больных детей. При исследовании гуморального звена было отмечено повышение уровня IgA при сниженном содержании IgG и IgM. Вероятно, повышение уровня сывороточного IgA свидетельствует об имеющемся хроническом воспалительном процессе, связанном с нарушением защитного барьера слизистой оболочки кишечника с поступлением в кровь пищевых антигенов и ответной секрецией иммуноглобулинов. Увеличение содержания IgA и снижение числа С08+-клеток, по видимому, характерно для энтероколитов и связано с хроническим процессом в слизистой оболочке кишечника. Исследование неспецифического фактора защиты - фагоцитоза показало, что при хроническом энтероколите происходит снижение фагоцитарной активности нейтро-филов, которое происходит за счет уменьшения активных фагоцитов. Известно, что одним из механизмов достижения контакта между фагоцитами и клеткой-мишенью является специфическое взаимодействие с клетка-ми-мишенями макрофагов, «армированных» путем связывания с их поверхностными Fc- рецепторами антител к клеткам-мишеням. В формировании «армированных» макрофагов важная роль принадлежит Т-клеткам и их продуктам, в частности, IFNy. Пониженный уровень фагоцитоза, возможно, является следствием пониженного уровня Т- лимфоцитов.

Выявленная направленность иммунных сдвигов и их выраженность указывают на важную патогенетическую роль иммунных механизмов в развитии и прогрессировании изменений в работе желудочно-кишечного тракта.

ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ И ГРИБЫ РОДА КАНДИДА ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ У ДЕТЕЙ, АССОЦИИРОВАННОЙ С ГЕЛИКОБАКТЕР ПИЛОРИ

НарьпсовР.Х.

Казанский государственный медицинский университет, Казань. Россия; Детская городская клиническая больница №2, Казань, Россия

Персистенция Helicobacter pylori, применение антибиотиков широкого спектра действия при эрадикационной терапии определяют формирования вторичной иммунологической недостаточности (ВИН) при хронической пато-

логии желудочно-кишечного тракта у детей и инициируют персистенцию грибов рода кандида (ГРС).

Целью иссследования явился поиск новых этиологических факторов при хронической патологии гастродуоденальной зоны у детей и оптимизация методов терапии. Под наблюдением находились 110 детей школьного возраста с хроническими гастродуоденитами (поверхностные-15, гипертрофические - 39, эрозивные - 25) и язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки (N=31). Комплексное изучение показателей иммунологической реактивности включало определение количественного содержания ИКК - CD3, CD4, CD8, CD19, CD16/56, CD3+DR+, CD25+, CD11 b+, CD18+ лимфоцитов, IgA, G, M, ЦИК. Изучалась экспрессия молекул адгезии (CDllb) и цитолиза (CD16) на нейтрофилах (метод проточной цитофлюориметрии “Becton Dickinson”), кислородзависимая биоцидность в спонтанном и индуцированном вариантах НСТ теста, процессы захвата и переваривания патогена (культура Sh. aureus). Культуральные микологические исследования включали идентификацию ГРС с комплексом методов для изучения их видового состава (лаборатория грибковых аллергенов, Казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии) изучался уровень антигенемии маннаново-протеинового антигена С. albicans с помощью оригинального иммуносен-сорного метода (Халдеева Е. В., 1998).

При исследовании иммунного статуса выявлено про-градиентное формирование ВИН при длительной персис-тенции Helicobacter pilori, затрагивающее снижение количества ИКК (CD3, CD4), повышенную экспрессию активационных маркеров (CD25, CD lib, HLA DR), а также формирование фагоцитарных дисфункций, связанных со снижением экспрессии CD 16 (р<0,05), нарушением био-цидности (р<0,05) и внутриклеточного киллинга. При исследовании биоптатов со слизистой оболочки желудка отмечена обсемененность ГРС в 32,4 % с преимущественной колонизацией С. albicans, также значимыми были высевы вида С. crusei и ассоциаций видов. При формировании хронических эрозивных дефектов слизистой желудка и язвенной болезни отмечено проградиентное нарастание колонизации С. albicans и С. crusei, значимым было нарастание высева ассоциаций ГРС, что коррелировало с формированием ВИН. В связи с полученными результатами традиционные схемы эрадикационной терапии были дополнены антимикотиком (дифлюкан) и современным иммуномодулятором (полиоксидоний ), что приводило к нормализации показателей иммунологической реактивности и удлинению периодов ремиссии заболевания ( р<0,05).

ВЛИЯНИЕ ЭРАДИКАЦИИ HELICOBACTER PYLORI НА ПАРАМЕТРЫ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА ПОЛОСТИ РТА

Нейзберг Д.М.**, СтюфИ.Ю.*

* * Кафедра терапевтической стоматологии СПб ГМУим. акад. И.П. Павлова

* Кафедра клинической лабораторной диагностики СПбМАПО,

* * Лаборатория клинической иммунологии и аллергологии стоматологического факультета СПб ГМУ им. акад. И.П. Павлова

Открытие в 1982 году австралийскими учеными J. Warren и B.Marshall микроорганизмов, известных сейчас как Helicobacter pylori (HP), принципиально измени-

ло представления об этиологии, патогенезе и принципах лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Современные исследователи оценивают НР как фактор, возможно, оказывающий влияние на течение воспалительных заболеваний пародонта. В некоторых работах для обозначения таких поражений вводится специальный термин - НР-ассоциированное заболевание пародонта.

Обследовано 37 пациентов. В 100% случаев язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки ассоциировалась с НР инфекцией. Пациенты, у которых в полости рта был обнаружен НР методом ПЦР, составили основную группу (19 больных). Контрольную группу составили 18 пациентов, у которых НР в полости рта обнаружен не был. Все пациенты получали эрадикационную терапию по стандартным 7-ми и 10-ти дневным схемам. Повторное определение НР в полости рта выполнялось через 2 недели после окончания курса лечения и контрольной фиброгастроскопии.

Базовые показатели пародонтальных индексов в основной группе были значимо выше, чем в контрольной, что, вероятно, связано с присутствием НР в полости рта. При исследовании факторов местного иммунитета полости рта получены достоверные различия между группами. При исследовании смешанной не стимулированной слюны в основной группе (НР-позитивные пациенты) определялись достоверно более низкие уровни активности лизо-цима чем в контрольной (53,0±2,3 и 65,0±1,4, соответственно, -г2Р<0,005) и более низкое содержание секреторного (32,7±2,8 и 41,1 ±2,2, Р<0,05). Однако были обнаружены

повышенные по сравнению с контрольной группой уровни и титр аутоантител к тканям десны (1/5 и Б соответственно). Подобный дисбаланс факторов местного иммунитета полости рта имеет общие черты с особенностями иммунного ответа слизистой оболочки желудка при НР-ассоциированных заболеваниях.

В ходе дальнейшего исследования основная группа была разделена на две подгруппы в зависимости от получаемой терапии. Пациентам первой подгруппы (13 человек) с целью эрадикации НР в полости рта назначались ротовые ванночки с антибактериальными агентами - хлор-гекседином биглюконатом (0,05%) и метрогилом. Пациенты второй подгруппы (6 больных) по различным причинам не проводили эрадикационную терапию в полости рта. У пациентов первой подгруппы наблюдалась полная эра-дикация НР в полости рта и в желудке, что подтверждено результатами повторных исследований (ПЦР и фиброга-строскопия). У 4 из 6 пациентов второй подгруппы после окончания курса лечения при повторных пробах вновь обнаруживался НР, что может быть связано с отсутствием необходимой эрадикационной терапии в полости рта.

Кроме того, были обнаружены статистически достоверные различия по уровню редукции пародонтологичес-ких индексов между группами и подгруппами, т.е. улучшение состояния пародонта наступило в первой подгруппе и контрольной группе.

При оценке степени влияния эрадикации НР на факторы местного иммунитета полости рта, через 2 недели после завершения лечения, в первой подгруппе и контрольной группе отмечено повышение активности лизоци-ма (63,8±2,4) и повышение уровня секреторного ^А (67,4± 1,8) до уровня референтной нормы. Умеренно повысился уровень (2,1±0,06 и 2,6±0,002) в первой подгруппе и значительно (в два раза по сравнению со второй подгруппой) снизился титр аутоантител к тканям паро-

донта (с 1/5 и до S) в смешанной не стимулированной слюне. Такой характер течения патологии пародонта связан с ремиссией сопутствующего заболевания, однако амплитуда редукции пародонтальных индексов гораздо значимее в первой подгруппе. Положительная динамика, вероятно, может быть обусловлена элиминацией такого значимого патогенетического фактора, как НР. Снижение пародонтальных индексов у больных первой подгруппы коррелирует с полной эрадикацией НР в полости рта. У пациентов второй подгруппы редукция индексов незначительна, что может быть обусловлено сохранением НР в полости рта. Сравнительный анализ литературных и наших экспериментальных данных позволяет сделать вывод о том, что HP-ассоциированные заболевания пародонта и желудка сопровождаются сходным дисбалансом некоторых факторов местного иммунитета полости рта -по показателям содержания лизоцима, секреторного IgA, IgG и титра органспецифичных аутоантител.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АТТЕНУИРОВАННОГО ШТАММА САЛЬМОНЕЛЛЫ В КАЧЕСТВЕ СИСТЕМЫ ДОСТАВКИ ДНК-ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ВИЧ-1

Некрасова Н.А.. Карпенко Л.И.. Игнатьев Г.М., Бажан С.И., Ильичев А.А.

НИИ Биоинженерии, Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор», п. Кольцово, Новосибирская обл.

Для создания вакцины против ВИЧ-инфекции были задействованы многие традиционные подходы, однако получить эффективную вакцину пока не удалось. Одним из перспективных подходов к конструированию вакцин является идентификация эпитопов внутри белковых антигенов ВИЧ-1 и создание на их основе мультиэпитопных вакцин. В последнее время появились убедительные доказательства, что ответы цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+ ЦТЛ), ассоциированные с ВИЧ-инфекцией, являются важными медиаторами противовирусного иммунитета и, следовательно, ВИЧ-специфические ЦТЛ могут быть важным компонентом эффективной вакцины против ВИЧ-1. В Государственном научном центре вирусологии и биотехнологии «Вектор» был проведен дизайн искусственного поли-СТЬ-эпитопного Т-клеточного иммуногена TCI (Т Cell Immunogen), кандидата для использования в качестве ДНК-вакцины против ВИЧ-1. Целевой белок состоит из 392 аминокислотных остатков и содержит около восьмидесяти перекрывающихся эпитопов (как CD8+ ЦТЛ, так и CD4+ Тх) из основных вирусных белков-антигенов Env, Gag, Pol и Nef. В качестве системы доставки ДНК вакцины, созданной на основе гена белка TCI, в данной работе был использован аттенуированный штамм сальмонеллы. Использование подобного подхода иммунизации позволяет стимулировать не только системный, но и мукозальный иммунный ответ, являющийся важным звеном противовирусного иммунитета.

Целью нашей работы являлось исследование имму-ногенных свойств рекомбинантного штамма сальмонеллы, несущего искусственный белок TCI.

Материалы и методы. Плазмида pCDNA3.1.-TCI, кодирующая ген белка TCI под контролем цитомегаловирус-ного промотора, была любезно предоставлена Белавиным П.А. Рекомбинантный штамм сальмонеллы Salmonella typhimurium SL 7207/ pCDNA3.1.-TCI был получен путем электропорации плазмиды pCDNA3.1.-TCI в исходный

штамм сальмонеллы. Для оценки иммуногенных свойств полученного рекомбинантного штамма была проведена однократная перректальная иммунизация мышей линии BALB/c. Забор крови и селезенки осуществляли через 7, 10,14,21,30,48 и 55 сутки после иммунизации.

Гуморальный иммунный ответ оценивался по появлению специфических антител в сыворотке иммунизированных животных. Титр специфических антител выявляли с использованием твердофазного иммуноферментного анализа. Клеточный иммунный ответ оценивался в реакциях бласттрансформации и клеточной цитотоксичности.

Результаты исследования. При иммунизации мышей рекомбинантным штаммом сальмонеллы происходила наработка специфических антител, которые связывались как с белком TCI, так и с рекомбинантными белками ВИЧ-1 (Env, Gag) и лизатом инактивированного вируса ВИЧ-1. Титры антител ко всем антигенам увеличивались, начиная с 7-10 дня после иммунизации, и достигали максимальных значений к концу периода наблюдений (48-55 сутки).

Оценка пролиферативной активности спленоцитов иммунизированных животных показала, что иммунизация рекомбинантным штаммом S. typhimurium SL 7207/ pCDNA3.1.-TCI вызывает формирование клона клеток памяти, поскольку индекс стимуляции клеток in vitro специфическими белками ВИЧ-1 достоверно увеличивается на 14 сутки по сравнению с показателями на 0 сутки (день проведения иммунизации). Этот показатель сохранялся на высоком уровне на протяжении всего срока наблюдения (48 суток).

Полученная вакцинная конструкция была также исследована на способность индуцировать ЦТЛ ответ у иммунизированных животных, который оценивался по выявлению IFN-у-продуцирующих клеток в реакции ELISPOT. Иммунизация рекомбинантным штаммом сальмонеллы, несущим ДНК-вакцину, вызывала появления клона цитотоксических лимфоцитов с максимальным значением на 30 сутки. Полученные данные свидетельствуют, что при ДНК-иммунизации происходят все стадии, необходимые для доставки целевого иммуногена иммунной системе, а именно экспрессия гена TCI, процессинг

Табл.

целевого белка и представление полученных пептидов CD8+ лимфоцитам в комплексе с молекулами МНС I класса. Таким образом, можно сделать заключение о перспективности данного подхода конструирования вакцин и использования аттенуированных штаммов сальмонелл в качестве систем доставки ДНК вакцин.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ МОНОТЕРАПИИ ПОЛ ИОКСИДОНИЕМ У ПАЦИЕНТОВ С СИНДРОМОМ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТИПАЦИИ

Нестерова И.В., Алексеева Е. А.. Крылов В.П., Швыдченко И.Н., Рожкова Г.Г.

Российский центр функциональной хирургической гастроэнтерологии, Краснодар, Россия;

Медицинский центр УД Президента РФ, Москва, Россия

Синдром хронической обстипации (СХО) объединяет комплекс клинических симптомов и ряда показателей функционального состояния кишечника, связанных с нарушением его регулярного опорожнения. Различные продукты бактериального метаболизма при условии снижения детоксикационных способностей макроорганизма, нарушении регулярной эвакуации шлаков, расстройстве иммунной реактивности могут стать причиной аутоинтоксикации, которая замыкает порочный круг изменений при СХО. Известно, что синтетический иммуномодулятор по-лиоксидоний (ПО) обладает высокой детоксикационной способностью, антиоксидантным и мембраностабилизирующим эффектами, а также выраженной иммунотроп-ной активностью в отношении нейтрофилов, моноцитов и натуральных киллеров. Поэтому представляет определённый интерес изучить клинико-иммунологическую эффективность монотерапии ПО у пациентов с СХО, что и явилось целью данного исследования.

Материалы и методы. В группу наблюдения вошли 16 пациентов с СХО. Диагноз устанавливался на основании клинических проявлений: диспептический синдром (задержка стула более 5 дней, отсутствие позывов на дефека-

Показатели До введения полиоксидония После введения полиоксидония

Астено-вегетативный синдром 62,5-100% 25 - 43,7 %

Диспептический синдром 56,2-100% 31,2 - 50 %

Показатели иммунограммы:

Лейкоциты (тыс.) 5900 ±0,14 5465±0,16

Лимфоциты (%) 34,7±1,7 38,6±1,5

CD3 33,06±1,7 33,19±2,84

CD4 27,62±1,44 27,06±2,26

CD8 22,06±1,02 21,19±1,73

CD19 15,34±0,93 17,75±2,22

CD16 15,76±0,90 19,75±2,44

Нейтрофилы (%) 58,5±0,7 61,8±0,9

CD11b 61,29±3,56 59,88±5,79

CD16 64,42±3,91 68,44±5,11

CD95 43,54±4,4 49,69±7,61

% фагоцитоза 38,94±1,25 62,38±2,96

% переваривания 57,63±1,77 66,97±1,99

IgM (мг/л) 143,48±10,4 199,06±28,3

IgG (мг/л) 1115±69,2 1122±52,06

IgA (мг/л) 104,9±6,6 136,5±10,5

цию, невозможность самостоятельно опорожнить кишечник, боли в животе, метеоризм), астено-вегетативный синдром (слабость, недомогание, утомляемость, головные боли); и верифицировался колоноскопически и рентген-контролем за пассажем контрастной взвеси по толстой кишке. Иммунный статус оценивали до и после терапии ПО. Монотерапию ПО в виде ректальных суппозиториев, содержащих 6 мг препарата, проводили по схеме: 3 дня ежедневно и затем через день, курсом 10 суппозиториев. Курсовая доза - 60 мг.

Результаты. Большинство пациентов, прошедших курс терапии ПО субъективно отмечали значительное улучшение общего состояния. Ни в одном случае не было отмечено ни общих, ни местных побочных реакций. Иммунологические показатели у пациентов исследуемой группы не претерпели значительных изменений в результате терапии ПО, за исключением значительного улучшения фагоцитарной активности нейтрофилов. Полученные данные представлены в таблице.

Заключение. Результаты проведенного исследования свидетельствуют о позитивном клиническом и иммуномодулирующем эффекте ПО у пациентов с СХО, что позволяет рекомендовать его использование в терапии данной патологии желудочно-кишечного тракта.

СОСТОЯНИЕ СИСТЕМНОГО И МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ

Нестеров И.М.. Галкина О.В., Аракелян М.А., Буравцова Н.А., Алексеева Е.Ф., Тотолян А.А.

Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им.акад.И.П.Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Известно, что до 20% женщин репродуктивного возраста страдают урогенитальным хламидиозом, оказывающим негативное воздействие на здоровье матери и ребенка. Однако в доступной современной отечественной и зарубежной литературе имеются единичные публикации, описывающие влияние данного заболевания на местный гуморальный иммунитет женской половой сферы.

Целью данного исследования явилось сравнение влияния хронического урогенитального хламидиоза на показатели системного и местного иммунитета женщин репродуктивного возраста.

Материалом для исследований была периферическая кровь и образцы вагинального секрета 34 женщин (средний возраст - 28,4±1,1 лет). В контрольную группу вошли 14 практически здоровых фертильных женщин с верифицированным вагинальным нормоценозом. Основную группу составили 20 пациенток с хроническим урогенитальным хламидиозом со средней длительностью заболевания

11,5±2Д месяцев.

Клинико-микробиологические исследования с целью определения типа вагинального микробиоценоза проведены по стандартным методикам. Иммунологический анализ периферической крови включал определение функциональной активности нейтрофилов (фагоцитоз и миграционная активность) и основных популяций и субпопуляций пула циркулирующих лимфоцитов. В образцах вагинального секрета и периферической крови проведено определение концентрации иммуноглобулинов классов А, М, G, slgA, IgE и подклассов IgG методом ELISA. Для оценки состояния гистогематического барьера влагалища (ГГБ) в иссле-

дованных биологических жидкостях определяли концентрацию альбумина колориметрическим методом.

Анализ факторов неспецифической иммунологической защиты показал, что при данной патологии фагоцитарная активность нейтрофилов достоверно превышает нормальный уровень (р<0,001), а их миграционная активность ниже нормальных значений (р<0,05). В результате сравнительной фенотипической характеристики лимфоцитов у пациенток с хроническим персистирующим течением хламидийной инфекции выявлен дисбаланс соотношения иммунорегуляторных субпопуляций Т-лимфоци-тов в сторону повышения цитотоксических Т лимфоцитов (CD8+), достоверное (р<0,05) снижение иммунорегу-ляторного индекса (CD4+/CD8+), повышение количества лимфоцитов, экспрессирующих HLAII класса и естественных киллерных клеток (CD56+).

У женщин, вошедших в основную группу, отмечалась сниженная проницаемость ГГБ (на что указывали достоверно низкие концентрации альбумина в вагинальном секрете и Q(Alb) (р< 0,01)). Уровень IgE в вагинальном секрете в 2-2,5 раза превышал значения нормы (р<0,001). Концентрация остальных исследованных иммуноглобулинов была достоверно ниже нормы (р<0,001). Вероятно, снижение проницаемости ГГБ при данной патологии приводит к уменьшению диффузии иммуноглобулинов из периферической крови и затруднению поступления компонентов молекулы slgA на поверхность слизистых женского репродуктивного тракта. Эти факторы приводят к снижению естественных защитных функций слизистых оболочек женской половой сферы и создают условия для дальнейшей хронизации инфекционного процесса. Повышенный местный уровень IgE скорее всего обусловлен местными аллергическими реакциями, возникшими в результате длительного контакта с патогенной флорой.

Следовательно, полученные результаты свидетельствуют о том, что при хроническом урогенитальном хла-мидиозе происходит нарушение функционирования как местного, так и системного звена иммунитета. Наиболее значительные сдвиги были выявлены нами на местном уровне. В связи с этим нам кажется целесообразным изучение параметров местного и общего иммунитета при хроническом хламидиозе для подбора терапии и оценки ее эффективности.

Таким образом, иммунологическое исследование периферической крови больных репродуктивного возраста с хронической хламидийной инфекцией выявило неадекватную реакцию периферических нейтрофилов на персисти-рующий патоген. В очаге поражения выявляются значительные нарушения функционирования гуморального звена иммунитета. Вероятно, из-за сниженной проницаемости ГГБ иммуноглобулины из периферической крови не могут поступать в необходимом количестве для защиты слизистой. Достоверно сниженная концентрация slgA скорее всего обусловлена затрудненным поступлением компонентов молекулы данного иммуноглобулина через измененные эпителиоциты.

В то же время сниженная проницаемость ГГБ влагалища приводит к уменьшению концентрации сывороточных иммуноглобулинов в вагинальном секрете. Все эти факторы приводят к снижению защитных функций барьера. Возможно, что сочетание данных изменений является одной из причин развития урогенитального хламидиоза. Проведенное исследование позволяет заключить наличие изменений Т-клеточного звена иммунитета. Изменения местного звена иммунитета связаны с происходящим рез-

ким снижением степени диффузионной способности вагинального гисто-гематического барьера, что, соответственно, приводит к снижению диффузии иммуноглобулинов через поврежденный барьер.

Это в первую очередь относится к slgA, дефицит которого может возникать в результате альтерации эпителия и нарушения синтеза секреторного компонента и сборки slgA. Увеличение как относительного, так и абсолютного содержания IgE, местный синтез которого при нормоценозе отсутствует, происходит в первую очередь вследствие его локальной продукции. Это можно объяснить сопровождением инфекционно-воспалительного процесса IgE-опосредованной аллергией, выраженной в той или иной степени.

ЭКСПРЕССИЯ АКТИВАЦИОННЫХ МАРКЕРОВ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С

Никитин В.Ю.. Сухина И.А., Гусев Д.А., Жданов К.В., Цыган В.Н.

Воєнно-медицинская академия,

Санкт-Петербург, Россия

Введение. Накопленные факты показывают, что при развитии HCV-инфекции, вероятно, происходит переключение иммунного ответа с Т-хелперов 1 типа на Т-хелперы

2 типа. Это в совокупности с другими факторами приводит к прогрессированию инфекционного процесса при ГС. Изучение субпопуляционного состава лимфоцитов и маркеров их активации в периферической крови, по нашему мнению, является необходимым условием для выявления нарушения баланса между Thl и Th2 при ГС.

Цель и задачи исследования. Целью работы являлось изучение экспрессии маркеров активации на поверхности Т- и В-лимфоцитов периферической крови у больных хроническим гепатитом С (ХГС). Для этого были поставлены следующие задачи: количественное определение основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови и лимфоцитов, несущих поверхностные активационные маркеры CD25 и HLA-DR.

Материалы и методы. Объектом настоящего исследования являлись больные ХГС (п=31). Контрольную группу составляли здоровые лица (п=15). Для иммунофено-типирования использовали прямые моноклональные антитела (МКА) CD25, HLA-DR, CD3, CD4, CD8, CD19 фирмы “Becton Dickinson”,США. Образцы лизированных клеток цельной крови в следующих комбинациях - CD4/ CD8/CD3, CD3/HLA-DR, CD3/CD25, CD56/CD3 - анализировали на проточном цитофлюориметре FACScan (“Becton Dickinson”, США).

Основные результаты. В результате исследований установлено:

1) Изучение содержания основных субпопуляций лимфоцитов показало, что повышение содержания общего количества Т-лимфоцитов (CD3) наблюдалось у больных в 6,5% случаев, Т-хелперов (CD3+CD4+) - в 13%, цитоток-сических Т-лимфоцитов (CD3+CD8+) - в 3%, а В-лимфоцитов (CD19) - в 26%. При сравнении средних значений всех перечисленных показателей не обнаружено достоверных различий.

2) Изучение “раннего” маркера активации CD25 на Т лимфоцитах показало, что повышенное содержание CD3+CD25+ лимфоцитов имеют 19% больных. При сравнительном анализе средних величин данного показателя у контрольной группы и группы больных ГС не обнаружено

достоверных различий. Выявлено, что количество активированных В-лимфоцитов, несущих маркер CD25 (CD3‘CD25+), повышалось у больных в 31% случаев. Было получено незначительное различие при сравнении средних величин по данному показателю между больными ГС (2,45±0,3) и здоровыми (1,9±0,2) группы с достоверностью р=0,05.

3) Повышенное содержание активированных В-лим-фоцитов, несущих маркер “поздней” активации (CD3-HLA-DR+) обнаружено у 48,5% больных ХГС. Статистический анализ показал значительное различие средних величин этого показателя между группой здоровых лиц (12,6±1) и группой больных (8,95±0,7) с высокой достоверностью (р<0,01). Содержание активированных Т-лимфоцитов (CD3+HLA-DR+) было повышено только у 13% больных, и различия средних величин по этому показателю между сравниваемыми группами не наблюдалось.

4) Проведенный корреляционный анализ выявил среднюю прямую связь между CD25 и CD19 (г=0,44;р<0,05) и сильную прямую связь между HLA-DR и CD19 (г=0,83;р<0,001). С другими субпопуляциями (CD3, CD4, CD8) у данных маркеров активации значимая корреляционная связь не обнаружена.

Заключение. Полученные данные подтверждают, что у больных ХГС про активация В-клеточного (гуморального) иммунного ответа, не являющегося эффективным в борьбе с внутриклеточной инфекцией. Главную роль в уничтожении инфицированных клеток играет Т-клеточный иммунный ответ, и у больных ХГС он недостаточно активирован. Корреляционный анализ показал положительную корреляцию только между маркерами активации и В-лимфоцитами.

ОПЫТ КЛИНИЧЕСКОГО И ЛАБОРАТОРНОГО ПРИМЕНЕНИЯ РОНКОЛЕЙКИНА

Новиков Д. К.. Аль-Габри А. М.. Шейх Мохаммад Муала, Новикова Н.Д., Новиков П.Д.

Витебский медицинский университет,

Беларусь

Препарат «Ронколейкин» использован для лечения больных с осложненными формами мочекаменной болезни у взрослых и детей с затяжными пневмониями, а также для лабораторной диагностики.

Больным (12) с мочекаменной болезнью, осложненной пиелонефритом, препарат вводили по 1 ампуле внутривенно по 3 инъекции через день. Показатели иммунного статуса оценивали в динамике: до начала лечения, в середине лечения и перед выпиской из стационара. Отмечено улучшение: повышение уровня сниженных С04-лимфо-цитов, снижение повышенного уровня С025-лимфоцитов, стимуляция фагоцитоза, нормализация дисиммуноглобу-линемии. Впервые выявлено влияние ронколейкина на секрецию с мочой у этих больных легких цепей (каппа и лямбда) иммуноглобулинов: после введения ронколейкина, но не других препаратов, уже на следующий день легкие цепи в моче переставали выявляться. Правда, их секреция возобновлялась через несколько дней после окончания инфузии ронколейкина.

При обследовании детей с затяжной пневмонией были достоверно снижены показатели CD3 лимфоцитов до 41 ±5%, Т-хелперов до 24±4%; уровень лимфоцитов с рецептором к IL-2 был повышенным у 10 детей - 31+4%, а

Табл. 1. ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ РОНКОЛЕЙКИНАУДЕТЕЙ С ЗАТЯЖНЫМ ТЕЧЕНИЕМ ПНЕВМОНИИ

Иммунологические показатели Группа детей, получающих ронколейкин (п=20) на фоне традиционной терапии Группа контрольная (п=12) Достоверность различий

CD3, % 64±4,2 49±6,2 Р<0,05

CD4, % 2,5±0,3 1,7±0,3 Р<0,05

CD25, % 34±2,1 18±1,2 Р<0,001

у 16 - сниженным до 5+1,5%. В 50% случаев у детей с затяжной пневмонией выявлялась дисиммуноглобули-немия типа gam; у 4 детей был снижен уровень IgM, у 9 детей - IgG.

Мы применили ронколейкин в терапии детей с затяжной пневмонией. Препарат вводили в/венно капельно в дозе 500 ООО ЕД через 2 дня, всего 4 инъекции на фоне общепринятой комплексной терапии. После применения рон-колейкина у всех детей отмечались положительные сдвиги по CD3 и CD25 маркерам лимфоцитов, хелперная субпопуляция и уровни иммуноглобулинов имели тенденцию к нормализации. В то же время, отмечалась и клиническая эффективность ронколейкина: после 2-й инъекции препарата происходил как бы «обрыв» заболевания, уменьшались симптомы интоксикации, количество мокроты снижалось, кашель становился легче, физикальные данные также имели положительную динамику. После 4-го введения ронколейкина отмечалось клиническое выздоровление детей с положительной динамикой при рентгенологическом контроле. Проведенные исследования показали хорошую клиническую переносимость ронколейкина у всех обследованных больных с затяжными пневмониями, а также значительную клиническую эффективность его применения по подавлению воспалительного процесса в легочной ткани.

Ронколейкин впервые использован нами для выявления рецепторов к IL-2 на лимфоцитах человека. В настоящей работе использовали ронколейкин (с альбумином и без), который сорбировали на фиксированных и активированных эритроцитах или частицах латекса. Специфичность взаимодействия диагностикума «ронколейкин-частица» с рецептором для IL-2 (IL-2R) подтверждена опытами блокировки связывания. У больных мочекаменной болезнью (24), бронхиальной астмой (26), детей с затяжными пневмониями (27) и здоровых лиц (18) определяли уровень лимфоцитов, несущих рецепторы к IL-2-ронколейкину. Параллельно определяли С025+-лимфоциты с помощью моноклональных антител методом иммунофлюоресценции. Результаты обоих методов высоко коррелировали. Однако метод с «ронколейкин-частицей» в ряде случаев выявлял на 15-25% больше лимфоцитов, несущих IL-2R. Это объясняется частичной потерей активного рецептора с лимфоцитов в процессе обработки их моноклональными антителами и инкубации на холоде при иммунофлюоресценции. Оказалось возможным определять сенсибилизацию лимфоцитов к антигенам и аллергенам после их стимуляции ими по усилению экспрессии рецепторов к IL-2, определяемых «рон-колейкин-частицами». При наличии сенсибилизации экспрессия IL-2R усиливалась на 15-30%.

Испытание ронколейкина в комплексной терапии детей с затяжным течением пневмонии

Под нашим наблюдением в течение года находились 32 ребенка в возрасте 7-12 лет, поступившие в стационар по поводу очагово-сливной пневмонии. Группа наблюдения состояла из 20 мальчиков и 12 девочек. Пневмония подтверждалась рентгенологическим обследованием. Изначально дети получали традиционную терапию с ис-

пользованием антибиотиков широкого спектра действия, секрето и муколитических препаратов, физиопроцедур и т.п. Клинически состояние детей улучшалось к концу второй недели лечения, но продолжали оставаться пневмонические симптомы: кашель, периодически приступообразный, наличие хрипов при ацекультации над определенным регионом; ускоренная СОЭ, нейтрофильный сдвиг крови - по лабораторным данным, уменьшение, но не исчезновение очагов инфильтрации при контроле рентгенограммы. Примерно к 6-7 неделе болезни у всех детей проявлялись и стабилизировались признаки хронической интоксикации с землистым оттенком цвет кожных покровов, круги под глазами, нарушение трофики слизистых оболочек полости рта, проявления дисбактериоза желудочно-кишечного тракта с соответствующими изменениями в копрограмме. Проводилось иммуномодулирующее лечение с использованием тимогена, эстифана. Динамика в клиническом плане использования вышеуказанных препаратов оценивалась как слабо положительная. Антибиотики менялись неоднократно.

Иммунологические показатели, выполненные в динамике наблюдения за больными детьми, представляли существенный интерес.

Так, в остром периоде пневмонии содержание СОЗ составляло от 34 до 47%; С04 - от 20 до 31%; СБ25 - от 18 до 24%; при формировании затяжного характера течения пневмонии (на 8-й неделе заболевания) показатели СОЗ и С04-лимфоцитов оставались сниженными в прежних значениях, а уровень СБ25 снижался более, чем в 2 раза и составлял от 10 до 15%. После последовательной иммуномодуляции Т-миметическими препаратами и иммунотерапии донорским нормальным иммуноглобулином повторными курсами показатели СОЗ и СБ4 клеток приблизились к возрастным нормативным значениям, но уровень С025-рецеп-торов оставался сниженным. По данным некоторых авторов известно, что при хронических процессах, содержание активированных Т- и В-лимфоцитов, имеющих рецептор к 1Ь-12, не претерпевало существенных изменений в ту или иную сторону, поэтому снижение экспрессии С025-рецеп-торов в нашем случае наводило на мысль селективной стимуляции этой субпопуляции клеток.

Для лечения детей с затяжным характером пневмонии был использован ронколейкин с активностью 500 тыс МЕ, который вводился внутривенно 2 раза в неделю в течение

2 -х недель, а 6 детям в течение 6 недель. Раз. доза для детей до 10 лет - 250 тыс МЕ, старше 10 - 500 тыс МЕ.

Изучение иммунологических показателей проводилось до введения препарата, после 2-го и 4-го введения. Переносимость препарата у всех детей была хорошей, гриппоподобного синдрома и повышения реакции не отмечалось ни в одном случае.

Динамика иммунологических показателей представлена в таблице 1.

Как видно из приведенных данных, восстановление экспрессии рецепторов к 1Ь-2 было подчеркнуто манифестным по сравнению с популяционным спектром общих, хел-перных и супрессорных клеток.

Клинически отмечалась четкая тенденция, а затем исчезновение инфильтратов в легких, что коррелировало с общим состоянием и самочувствием детей.

Полученные результаты дают основание рекомендовать ронколейкин не только в случае риска генерализации инфекции, но и при угрозе трансформации острого воспаления в затяжное.

Клиническая эффективность ронколейкина при эрозивных гастритах и гастродуоденитах у детей

Мы наблюдали 44 ребенка с эрозивными заболеваниями верхних отделов желудочно-кишечного тракта.

Возраст детей от 10 до 14 лет. Эрозии выявлены при фиброгастродуоденальном исследовании, проводившемся с диагностической целью по поводу обследования детей. У 27 детей - эрозии на слизистой желудочно-кишечного тракта рецидировали и давность заболевания составляла более 2-х лет. У остальных детей - это впервые выявленное заболевание. Обострения в основном отмечались весной и осенью.

Ронколейкин применялся курсом в 2 внутривенных инъекции с интервалом в 4 дня и методом per os в течение последующих 6-10 дней в разовой дозе 500 тыс ME до еды за 30 мин. Традиционное лечение зависело от кислото- и секретообразующей функции, состояния желчевыводящих путей, типа вегетативной реактивности.

Контрольная группа составила 18 детей того же возраста с рецидивирующими эрозивными заболеваниями верхних отделов желудочно-кишечного тракта.

Наблюдение контролировалось ФГДС в конце 3-й недели обострения. Эрозии были эпителизированы у всех детей. Катамнез диспансерного обследования детей в течение 1-1,5 лет не выявил рецидива в группе детей, получавших ронколейкин. Из детей контрольной группы (п=18) рецидивы эрозии весной проявились у 7 детей, осенью еще у 4.

Таким образом, использование ронколейкина в комплексной терапии детей с эрозивными гастродуоденитами является целесообразным и клинически обоснованным как противорецидивная терапия. Факт клинического эффекта требует дальнейшего изучения и идентификации специфического объектного критерия.

ДИНАМИКА ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ КОРЬЮ И ОСОБЕННОСТИ ПРОТИВОКОРЕВОГО ИММУНИТЕТА НА КРАЙНЕМ СЕВЕРЕ В ПЕРИОД ЕЕ ЛИКВИДАЦИИ

Новицкий И.А.. Родина Д.В.

Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, г.Красноярск, Россия

Введение. На Крайнем Севере показатели специфического иммунного ответа на введение живой коревой вакцины (ЖКВ) существенно отличаются от других регионов, что осложняет ликвидацию кори в Российской Федерации к 2010 году.

Цели и задачи. Оценить уровень противокоревого иммунитета после ревакцинации ЖКВ разных этнических групп Крайнего Севера

Материалы и методы. Проведен анализ заболеваемости корью с 1970-2002 гг. и изучен противокоревой иммунитет у привитых живой коревой вакциной на Крайнем Севере -Таймырский автономный округ. Обследовано 2430 человек, относящихся к разным этническим группам - долгане, нганасане, эвенки, ненцы. Основные методы исследования- определение специфических антител (IgG) к вирусу кори, эпидемиологический анализ.

Основные результаты. После введения плановой ревакцинации ЖКВ в 1986-1987 гг. зарегистрирован длительный период (1992-1999 гг.), когда корь в Таймырском автономном округе не регистрировалась. В 2000 году выявлено 57 случаев кори (112,7 на 100 тыс. населения). В более позднее время (2001-2002 гг.) случаи кори не регистрировались. Заболели дети, проживающие только в г.Ду-динке, в возрасте от 5 до 17 лет. Все заболевшие были привиты против кори, из них повторно 52 человека 91,2%. Продолжительность эпидемии составила 2,5 месяца. При исследовании противокоревого иммунитета через 1 месяц после регистрации последнего случая кори серонегативных лиц к вирусу кори в г.Дудинке не выявлено, тогда как до начала эпидемии таких лиц определено 10,2%. В других поселках Таймырского автономного округа выявлено от 12,2 до 20,1 серонегативных к вирусу кори. Проведенный среди разных этнических групп Таймыра анализ показал наиболее высокий уровень противокоревых поствакци-нальных антител у европеоидного населения и, наоборот, самый низкий у местного населения- нганасан. В первые 12 лет после ревакцинации живой коревой вакциной уровень противокоревого иммунитета был стабильным, тогда как в более длительный период наблюдения зарегистрировано снижение его показателей.

Заключение.После длительных периодов отсутствия в Таймырском автономном округе наблюдалась вспышка коревой инфекции с быстрым сроком завершения и выраженной локальностью. В Таймырском автономном округе будут продолжаться вспышки коревой инфекции при заносе дикого вируса кори из других регионов, при этом местное население в наибольшей степени подвержено опасности заболеть корью. Необходима третья прививка живой коревой вакциной в возрастной группе 16-18 лет, что обусловлено снижением противокоревого иммунитета после ревакцинации против кори именно в этом возрасте.

ДИНАМИКА ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У ДЕТЕЙ С ПОСЛЕДСТВИЯМИ МЕНИНГОЭНЦЕФАЛИТА, ПОЛУЧАВШИХ ТИМОПТИН

Нурмухамедова М. А., Мусаходжаева Д. А.,

Ташкентский педиатрический медицинский институт, Институт иммунологии АН РУз,

Ташкет, Узбекистан

Менингоэнцефалиты являются одним из наиболее частых форм нейроинфекционных заболеваний у детей. В резидуальном периоде отмечается прогрессирование симптомов болезни. При этом выявляются существенные изменения иммунного статуса, коррекция которых важна для лечения и исхода заболевания. В традиционной терапии не всегда учитываются иммунологические особенности этих болезней, особенно при их сочетании и, как следствие, медикаментозное лечение не всегда оказывается эффектив-ным.

Целью работы явилось изучение состояния иммунной системы в резидуальном периоде инфекционно аллергических менингоэнцефалитов у детей и оценка иммуномодулирующего эффекта отечественного препарата тимоп-тина. Под наблюдением находились 28 больных детей в возрасте от 1 до 14 лет. Контрольную группу составили 19 детей того же возраста. Первопричины развития менингоэнцефалитов были: ранее перенесенная нейровирусная инфекция, сальмонеллез, сепсис, а также развитие менинго-энцефалита в поствакцинальном периоде. Иммунный ста-

туе оценивали количественным методом. Определяли следующие маркеры CD3, CD4, CD8, CD20, CD16. Количество лимфоцитов оценивали в относительных и абсолютных величинах с использованием моноклональных антител ЗАО «Сорбент-сервис» (Москва, Россия). А также изучали содержание иммуноглобулинов класса A, G, М методом иммунодиффузии.

При изучении состояния иммунной системы было установлено, что количество CD3+ клеток у обследованных было в 1,4 раза ниже показателей контрольной группы (Р<0,001), количество CD4+-mieTOK достоверно снижено в

1,5 раза (Р<0,01), а СВ8+-клеток повышено по сравнению с таковыми контрольной группы в 1,2 раза (Р<0,05). Выраженная тенденция к увеличению, по сравнению с нормативными значениями, наблюдалась в содержании CD16+ клеток в периферической крови обследованных детей, повышение которого, возможно, является отражением возникающих при прогредиентном течении нарушений нуклеинового гомеостаза.

Изучение гуморального звена иммунитета выявил достоверное повышение количества CD20+ лимфоцитов, а уровень иммуноглобулина А и М достоверно снижен по сравнению с контрольной группой (Р<0,01).

С учетом вышеперечисленных изменений иммунитета на фоне базисной терапии нами была проведена иммунокоррекция комплексом кислых полипептидов из вилочко-вой железы млекопитающих, содержащих а,-тимозин (ТИМОПТИН). Препарат произведен Институтом Био-органической химии им.акад.А.С.Садыкова АН РУз, Узбекистан.

Иммуномоделируюшее действие препарата вызывалось стандартными методами подкожного или внутримышечного введения по схеме: однократно от 10-20 мкг. до 50 мкг в зависимости от возраста ребенка. Курс лечения составлял 5 инъекций, выполняемых через день. После окончания курса лечения производилось изучение вышеперечисленных иммунных параметров. Проведенная иммунокоррекция способствовала увеличению количества Т-лимфо-цитов, нормализации количества CD4+- клеток. Значительно снизилось, хотя и не достигло нормы, количество CD16+- и С020*-лимфоцитов. Повысилась концентрация иммуноглобулинов А и М.

Представленные данные свидетельствуют о целесообразности применения иммуномодулирующего тимоптина в комплексной терапии больных детей с инфекционно аллергическим менингоэнцефалитом.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАН-СВЯЗЫВАЮЩИХ УЧАСТКОВ В СОСТАВЕ ОБОЛОЧЕЧНЫХ БЕЛКОВ ВИРУСА ГЕПАТИТА С

Оленина Л.В.. Кузьмина Т.Н., Соболев Б.Н., Кураева Т.Е., Колесанова Е.Ф., Арчаков А.И.

Государственное учреждение институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН, Москва, Россия

Вирус гепатита С (ВГС) является основным этиологическим фактором парентерально распространяемых вирусных гепатитов человека. ВГС инфекция отличается высоким уровнем хронизации и риском развития цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. ВГС представляет серьезную угрозу здоровью человечества, но, несмотря на интенсивную работу в этом направлении многих исследовательских лабораторий, попытки создания эффек-

тивной вакцины пока не увенчались успехом. Присоединение вируса к рецепторам на поверхности клетки-хозяина является критическим этапом для инициации инфекции. Оболочечные гликопротеины ВГС Е1 и Е2 ответственны за распознавание и взаимодействие с клеточными рецепторами. Эти белки отличает чрезвычайно высокий генетический полиморфизм. Они содержат только несколько протяженных участков сохраняющихся консервативными среди различных изолятов вируса. Показано, что множество вирусов и бактерий взаимодействует с такими общераспространенными молекулами на клеточной поверхности и в экстраклеточном матриксе как гликозаминог-ликаны, а именно гепаран сульфаты. Эти молекулы представляют собой неразветвленные полисахаридные цепочки, присоединенные к небольшим полипептидным компонентам, заякоренным в клеточной мембране. Гепаран сульфат рассматривается как один из возможных рецепторов для ВГС. Как было недавно показано, рекомбинантный Е2 гликопротеин взаимодействует с гепарином, растворимым высокосульфатированным членом семейства глико-заминогликанов. Наше исследование посвящено поиску участков в составе оболочечных белков ВГС, взаимодействующих с гликозаминогликанами. Мы синтезировали пептидную библиотеку, перекрывающую консервативные участки этих белков. Каждый пептид был биотинилиро-ван по И-концевому остатку. Мы протестировали пептидную библиотеку на взаимодействие с иммобилизованными гепарином и гепаран сульфатом с помощью твердофазного анализа. В результате нескольких раундов скрининга мы идентифицировали один высококонсервативный и два менее консервативных участка (628-638, 491-501 и 667-678 аминокислотные позиции в консенсусной последовательности белка Е2 соответственно) в составе белка Е2, с высокой эффективностью взаимодействующих с гликозаминогликанами. Мы оценили иммуногенность найденных участков в процессе инфекции у человека с использованием панели сывороток пациентов в острой и хронической фазе инфекции и выявили, что два из найденных участков обладают иммуногенными свойствами. Взаимодействие найденных участков с гликозаминогликанами является доза-зависимым и специфично ингибируется антипептидными антителами, полученными к этим участкам. Участки, ответственные за взаимодействие ви-рионов с клеточными рецепторами могут быть использованы как компоненты синтетических или рекомбинантных вакцин против ВГС.

Эта работа поддержана межведомственной программой Российского министерства промышленности, науки и техники «Вакцины нового поколения. Тема № 01.03. Синтетические и субъединичные вакцины».

АУТОИММУННЫЕ РЕАКЦИИ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ У БОЛЬНЫХ С ПЕРИОДОНТИТОМ

Орехова Л .Ю., Кудрявцева Т.В., Левин М.Я.. Осипова В.А.

Кафедра терапевтической стоматологии, Лаборатория клинической иммунологии и аллергологии НПЦ стоматологического факультета Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И.П.Павлова

При деструктивных процессах в тканях организма компоненты поврежденных клеток поступают во внутреннюю

среду и могут быть обнаружены в серологическом тесте. В ответ на поступление антигена в организме могут формироваться аутоантитела, роль которых подлежит оценке в каждом случае.

Нами было обследовано 29 больных пародонтитом (I группа), 49 больных с пародонтитом, осложненным периодонтитом (II группа) и 20 лиц с интактным пародон-том (контрольная группа).

Установлено, что при заболеваниях пародонта (I группа) в ротовой жидкости в 62,0% случаев обнаружен антиген, свойственный пародонту, при развитии периодонтита (II группа) частота выявления антигена и его уровень существенно не нарастают.

В обеих группах обнаружены признаки аутоиммунной реакции - появление аутоантител и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). Аутоантитела в достаточно высоких титрах (1:16 и выше) обнаружены в I группе у 24,1 % пациентов, во II группе в 8,2% (1=1,8). Средние титры были достоверно ниже во II группе (12,2±0,36 и 3,1±0,5; р<0,05).

Средний уровень ЦИК во II группе был достоверно ниже, чем в I, составляя 0,011±0,001 ед. против 0,052±0,0027 ед. (р<0,05). Соответственно, и число больных, у которых выявлены ЦИК, было ниже во II группе, составляя 14,3% против 24,1%.

Таким образом, определение антигена ткани пародонта показывает, что степень повреждения поверхностных тканей выражено одинаково в обеих группах. Выраженность аутоантигенного стимула также одинакова. Однако аутоиммунная реакция у больных II группы выражена меньше, что отражает снижение реактивности иммунной системы при обширных и глубоких воспалительных процессах, характерных для периодонтита. Это следует учитывать при оценке состояния больных. Предполагается, что местная аутоиммунная реакция при пародонтитах имеет защитный характер.

МЕСТНЫЕ ФАКТОРЫ ГУМОРАЛЬНОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ У БОЛЬНЫХ ПЕРИОДОНТИТОМ

Орехова Л.Ю., Кудрявцева Т.В., Левин М.Я., Осипова В.А.

Кафедра терапевтической стоматологии, Лаборатория клинической иммунологии и аллергологии НПЦ стоматологического факультета Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И.П.Павлова

С целью оценить роль местной иммунной защиты ротовой полости в возникновении и развитии воспалительных заболеваний пародонта было проведено сравнение уровней лизоцима и иммуноглобулинов в ротовой жидкости 29 больных пародонтитом (I группа) и 49 больных с пародонтитом, осложненным периодонтитом (II группа). Контрольную группу составили 20 человек с интактным пародонтом.

Показано, что при заболеваниях пародонта существенно снижена активность лизоцима в ротовой полости, составляя 68,4±1,4%, 53,0±2,4% против 85,9±1,2% (р<0,01) в контрольной группе. Соответственно, число пациентов с низким уровнем лизоцима составило 69,0 и 71,4%, тогда как в контрольной группе таких случаев не было.

В ротовой жидкости обеих групп больных было снижено содержание я^А. Однако при сочетании пародонтита с периодонтитом уровень я^А был выше, чем при неосложненном пародонтите, составляя 53,5+2,5 мкг/мг и 39,9+1,7 мкг/ мг у больных против 85,1 ±4,2 мкг/мг в контроле (р<0,05).

Соответственно, число больных с выраженным дефицитом slgA было ниже, составляя 28,6% против 82,8% (р<0,05).

Содержание в ротовой жидкости больных II группы IgG и IgM было умеренно повышено в сравнении с показателями больных неосложненным пародонтитом, составляя 2,7±0,2 мкг/мг и 3,1±0,5 мкг/мг против 2,36±0,18 мкг/мг и 1,24±0,3 мкг/мг (р<0,05). Частота выявления минимальных количеств IgE не имела существенных отличий в двух группах.

Содержание в ротовой жидкости больных II группы IgG и IgM было умеренно повышено в сравнении с показателями больных с неосложненным пародонтитом, составляя 2,7±0,2 мкг/мг и 3,1±0,5 мкг/мг против 2,36±0,18 мкг/мг и 1,24±0,3 мкг/мг (р<0,05). Частота выявления минимальных количеств IgE не имела существенных отличий в двух группах.

Таким образом, подтверждено, что у больных пародонтитом снижается содержание активного лизоцима и slgA в ротовой полости. При развитии периодонтита существенно снижена активность лизоцима. В то же время содержание иммуноглобулинов в ротовой жидкости не снижается, что может компенсировать дефицит лизоцима.

ИММУНОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ В ПЛАЗМЕ КРОВИ ДОНОРОВ

Орлова М.Л.. ШобуховаТ.С., Ястребова Н.Е., Санков М.Н., Мигунов В.Н.,Зингерман Б.В., Орлова Г.К.

Гематологический научный центр РАМН, НИИ вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова РАМН, НПЦ «Медицинская иммунология» М3 РФ, г. Москва

Контроль содержания специфических антибактериальных антител в гипериммунных препаратах плазмы крови доноров в настоящее время проводится по инициативе станций переливания крови с применением эритроцитарных диагностику -мов собственного изготовления. Срок действия нормативных документов М3 РФ «Плазма противопротейная», «Плазма антисинегнойная», «Плазма антисинегаойная антитоксическая» истёк в 1994 г. Государственный НИИ стандартизации и контроля медицинских биологических препартов им. Л. А. Тарасевича М3 РФ инициировал создание современных фармакопейных статей на препараты гипериммунной плазмы крови человека. Задачей исследования было сравнительное изучение двух тест-систем: латексагтлютинации (ЛАТЕСТ) и иммуноферментного анализа (ИФА), кандидатов на национальный стандарт метода контроля антител к условно-патогенным бактериям (УПБ). В работе были использованы в качестве антигена для ИФА препараты клеточных стенок гра-мотрицательных бактерий (P. aeruginosa, S. minnesota, Е. coli, Kl. pneumoniae) и грамположительных бактерий (S. aureus, S. pneumoniae, S. epidermidis), т.к. они содержат родовые, видовые эпитопы и играют ведущую роль в патогенезе заболеваний, вызываемых УПБ. ИФА-система выявляла в плазме крови доноров антитела класса IgG (ИФА- IgG - УПБ). В соответствии с инструкцией ЛАТЕСТ выявлял суммарные антитела к УПБ (ЛАТ-УПБ). Анализ образцов плазмы 106 доноров ГНЦ РАМН, собранных в январе 2003 г., выявил тест-систе-мой ИФА IgG УПБ 21,7 % доноров с повышенным титром антител к S. aureus, 9,4 % доноров - к S. pneumoniae, 7,5 % доноров -к S. epidermidis, 13,2 % доноров - к P. aeruginosa, 1,9 % доноров - к 5. minnesota, 0 % доноров - к Е. coli, 1,9% доноров -к Kl. pneumoniae. Установлено, что содержание специфических антител к УПБ, выявляемое Л АТЕСТом, не коррелирует с

данными, полученными ИФА-УПБ. По нашему мнению, это может быть связано с тем, что Л АТЕСТ выявляет в основном IgM специфические антитела. Анализ доступных нам научных публикаций по рассматриваемой проблеме позволяет утверждать, что применение РПГА при оценке уровня специфических антител к УПБ свидетельствует об активности в основном IgM антител, которые имеют короткий период полу-жизни, быстро теряют антигенсвязывающую активность при процедуре замораживания - оттаивания СЗП, легко расщепляются протеазами разрушившихся гранулоцитов и тромбоцитов (в большей или меньшей степени контаминирующих плазму). Практически здоровые взрослые люди всегда имеют антитела естественного происхождения против УПБ. Напряжённость естественного иммунитета не изменяется с возрастом, что свидетельствует о постоянном ответе иммунной системы на антигены и эндотоксин, вырабатываемые бактерия-ми-комменсалами. Из-за разной распространённости УПБ и их разной иммуногенности у здоровых людей можно выявить разные титры, связанные с сезонными особенностями, профессией донора и т. п. Наибольший спектр антител установлен у доноров, связанных с обслуживанием технических средств и занятых строительными работами. В 2002 г. М3 РФ утвердило фармакопейную статью на «Плазму для фракционирования», предназначенную для получения препаратов внутримышечного и внутривенного иммуноглобулинов. Согласно требованиям ФС, срок хранения сырья 1 год. По нашим данным антитела класса IgM к УПБ сохраняются в све-жезаготовленной плазме после её заморозки в течение 3-6 мес. Увеличение срока антигенсвязывающей активности антител может быть достигнуто применением фильтрующих устройств, обеспечивающих снижение на 3-4 порядка содержания тромбоцитов и лейкоцитов в плазме. Испытанные тест-системы, по нашему мнению, должны иметь различное предназначение. Тест-система ИФА IgG УПБ должна применяться при отборе сырья для фракционирования и получения препаратов иммуноглобулина, поскольку IgM антитела при спиртовом фракционировании уходят в баласт. ЛАТЕСТ УПБ должен использоваться при отборе гипериммунных плазм, которые в дальнейшем целесообразно маркировать в соответствии с выявленным уровнем грамположительных и грамот-рицательных УПБ. Эксперты Совета Европы в своих требованиях по заготовке свежезамороженной плазмы считают нецелесообразным выделять гипериммунные плазмы и маркировать из-за невозможности стандартизации этой транс-фузионной среды.

МОНОКЛОНАЛЬНЫЕАНТИТЕЛА И RT-PCR В ДИАГНОСТИКЕ ОРТО-И ПАРАМИКСОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

ПаньшинА.. Тендлер Е.*, Лапинь Е., Гизина И., Покамонский Ш., Зиндер О.*, Орвелл К.**, Липкинд М. and Шихмантер Э.

Ветеринарный институт им. Кимрона, БейтДаган, Израиль;

* Медицинский центр им. РАМБАМ, Хайфа, Израиль;

* * Лаборатория Клинической Вирусологии, Худдинг, Швеция

Вплоть до последнего десятилетия классические вирусологические и серологические методы, включающие в себя изоляцию вируса, а также тесты торможения гемагглюти-нирующей и нейраминидазой активностей вирусов были ведущими в диагностике орто- и парамиксовирусных заболеваний у людей и животных. Основным недостатком

этих методов было то, что лабораторный диагноз, как правило, можно было поставить не ранее третью дня с момента начала исследований. Кроме того, с помощью классических методов было невозможно проводить дифференци-ровку между различными штаммами, принадлежащими к одному и тому же серотипу парамиксовирусов. Большинство из этих трудностей было преодолено благодаря использованию новых подходов, основанных на применении моноклональных антител и RT PCR.

Целью настоящего сообщения является обобщение нашего десятилетнего опыта применения моноклональных антител и RT PCR для изучения орто- и парамиксовирусных инфекций у птиц.

Ранее описанные нами панели моноклональных антител были использованы для двух целей - характеристики выделенных вирусов и определения циркулирующих антител. Было показано, что с помощью моноклональных антител можно различать идентичные по классическим тестам парамиксовирусы, и, на основании полученных результатов, проводить дальнейшую группировку этих вирусов, используя программы для филогенетического анализа. В то же время было показано отсутствие прямой коррелятивной связи между антигенной структурой парамиксовирусов и их вирулентностью. Использование моноклональных антител для серологической диагностики позволило не только верифицировать специфичность сывороточных антител в отношении того или иного вируса, но и установить вирусный белок и, более того, эпитопы этого белка, против которых данные сывороточные антитела направлены.

RT PCR, выполняемый нами по стандартному методу, позволил проводить раннюю диагностику орто- и парамиксовирусных инфекций (предварительный ответ может быть дан в течение 12 часов с момента получения материала).

При этом появляется возможность дифференцировать не только тип и субтип вирусов, но, в ряде случаев, и его патогенность. Последующее определение нуклеотидной последовательности амплифицированного фрагмента гена и филогенетический анализ, позволяют определить возможный источник и вероятные пути распространения инфекции и принять оперативные меры для её ликвидации. Кроме того, используя методы предварительной оценки антигенного профиля по выведенной из нуклеотидной последовательности аминокислотной последовательности, можно с большой степенью вероятности предсказать способность данного вируса преодолевать иммунитет, индуцированный использованной в данном регионе противовирусной вакциной.

Пути дальнейшего усовершенствования методов применения моноклональных антител и RT PCR обсуждаются.

MONOCLONAL ANTIBODIES AND RT-PCR IN DIAGNOSTICS OF ORTHO- AND PARAMYXOVIRUS AVIAN INFECTIONS

Panshin A.,TendlerYe.*, Lapin K., GisinL, Pokamunski S., Zinder O.*, Orvell C.**, Lipkind M. and Shihmanter E.

Division of Avian Diseases, Kimron Veterinary Institute, BEIT DAG AN P. 0. Box 12,50250 ISRAEL;

* Department of Clinical Biochemistry, Rambam Medical Center, Haifa, ISRAEL;

**Laboratory of Clinical Virology, Huddinge University Hospital, HUDDINGE, S14186 SWEDEN

Up to the last decade, classical virological and serological methods (virus isolation by means of the inoculating clinical

specimens - cell cultures or embryonic chicken egg- for hemagglutination inhibition and neuraminidase inhibition tests) were the main assays in the diagnosis ortho- and paramyxovirus diseases in people and animals. The basic disadvantage of these methods was that the laboratory diagnostics procedure,takes at least three days. In addition, classical methods did not allow for the differentiation between the various strains, belonging to the same serotype of paramyxoviruses. The majority of these difficulties have been overcome due to use of new approaches based on application of the monoclonal antibodies and RT PCR techniques. The purpose of the present report is to summarize our ten years of experience in the application of monoclonal antibodies and RT PCR for studying ortho- and para-myxovirus avian infections. Panels of monoclonal antibodies have been used for two basic purposes: to characterize field isolates of viruses and to determine circulating antibodies.

It has been shown, that para-myxoviruses, which did not differ from each other in classical tests, were able to be differentiated among them by means of the monoclonal antibodies. The data obtained has been further used to group these viruses, using programs for the phylogenetic analysis. In turn, the results of the grouping allowed us to carry out the epidemiological analysis. At the same time, our results have not been able to confirm a direct correlation between antigenic structure of para-myxoviruses and their virulence. Use of monoclonal antibodies for serological diagnostics has allowed to verify the anti-viral specificity of the serum antibodies as well as to determine the virus protein and epitopes of this fiber against which the serum antibodies are directed.

RT PCR allows a considerably reduction in the time necessary for performance of the virological analysis. Preliminary result can be obtained within 12 hours, and the method also enables the diagnosis of the type and subtype of viruses and, in some cases, to determine and their pathogenicity. The subsequent determination of nucleotide sequence of the amplified fragment together with the phylogenetic analysis, allows the determine of possible sources of the viruses and the probable ways of their circulation. That, in turn, allows operative actions to abolish outbreaks of disease in avian flocks.

In addition, the protein amino acid sequences may be deduced from nucleotide sequences, and the antigenic index profiles may be generated from the amino acid sequences. Using these data it is possible to predict ability of a field isolate to overcome the immunity induced by an antiviral vaccine used in this region.

Opportunities of the further improvement of the methods of application of monoclonal antibodies and RT PCR are discussed.

ПРИМЕНЕНИЕ ЦИТОМЕДИНОВ ПЕРЕДНЕЙ И ЗАДНЕЙ ДОЛЕЙ ГИПОФИЗА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КАЛОВОГО ПЕРИТОНИТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Патеюк А.В., Кузник Б.И.

Читинская государственная медицинская академия

Нами методом уксусно-кислой экстракции выделены цитомедины из передней (ЦПДГ) и задней (ЦЗДГ) долей гипофиза. Оказалось, что ЦПДГ в опытах in vitro увеличивают экспрессию рецепторов на Т- и Т-активных лимфоцитах, повышают фагоцитарную активность лейкоцитов, обладают слабым антикоагулянтным действием и активируют фибринолиз. ЦЗДГ увеличивают экспрессию рецепто-

ров на В-лимфоцитах, проявляют более выраженное анти-коагулянтное и стимулирующее фибринолиз действие, а также сильнее, чем ЦПДГ повышают фагоцитарную активность нейтрофилов. В опытах in vivo, проведенных на интактных молодых цыплятах, ЦПДГ стимулируют реакции клеточного, ЦЗДГ - гуморального иммунитета.

Учитывая что цитомедины гипофиза обладают иммуностимулирующим действием, мы решили использовать их в эксперименте для лечения крыс с каловым перитонитом.

Исследования проведены на 105 белых крысах. У 90 из них воспроизводили модель калового перитонита. Контролем служили 15 интактных крыс. Больным животным вводили внутримышечно ЦПДГ и ЦЗДГ изолированно и совместно по 0,1 мг/кг массы на протяжении 5 дней. Кроме того, в отдельных сериях исследования для сравнения результатов терапии в той же курсовой дозе использовали тималин или бурсилин.

При развитии калового перитонита у крыс отмечалось резкое угнетение иммунитета: уровень гемолизинов и ге-магглютининов снижался на 40%, количество АОК уменьшалось в 1,8 раза. Одновременно у таких крыс в 2 раза возрастало число лейкоцитов.

При лечении больных животных цитомединами гипофиза, тимуса и бурсы наряду с резким улучшением клинического состояния выявлены значительные сдвиги в иммунной системе: приближалось к норме количество лейкоцитов, повышался уровень гемолизинов и гемагглюти-нинов, а также количество АОК. При этом ЦЗДГ и бурсилин в большей степени влияли на гуморальный, а ЦПДГ и тималин - на клеточный иммунитет. При совместном введении цитомединов ПДГ и ЗДГ все исследуемые показатели иммунитета даже несколько превосходили аналогичные у интактных животных.

Полученные данные свидетельствуют о том, что ЦПДГ и ЦЗДГ по своему действию на течение калового перитонита у крыс не уступают известным иммуномодуляторам

- тималину и бурсилину.

ДИАГНОСТИКА СТАФИЛОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ С ПОМОЩЬЮ РЕКОМБИНАНТНОГО ХЛОПЬЕОБРАЗУЮЩЕГО ФАКТОРА

ПозурВ.К.. Иванова В.Д., Бидненко С.И., Пилипенко В.Г., Раевская Г.Е.

Киевский национальный университет имени Тараса Шевченко, Украина;

Институт травматологии и ортопедии АМН Украины;

АТЗТНПК«ДиаПроф Мед», Киев, Украина

На сегодня лабораторная диагностика стафилококковой инфекции предполагает комплексное исследование с использованием микробиологических и серологических методов, однако установление с его помощью этиологического диагноза во многих случаях малоэффективно, чему способствует и отсутствие коммерческих тест-наборов для серологической диагностики. Поиск диагностических средств направлен на обнаружение поверхностных видоспецифических антигенов этих бактерий, одним из которых является и хлопьеобразующий фактор (ХОФ).

Целью работы было выяснение возможности использования иммуноферментного анализа (ИФА) на основе рекомбинантного ХОФ для серологической диагностики стафилококковой инфекции.

Обследованы сыворотки 100 больных в возрасте от 20 до 55 лет с остеомиелитом различной локализации, находившихся на лечении в стационаре, и 74 здоровых доноров. Сыворотки 8 больных исследованы в динамике инфекционного процесса (в острой фазе, в стадии реконва-лесценции). Стафилококковая этиология заболевания подтверждалась с помощью микробиологического и/или серологического исследования (реакции агглютинации с культурой выделенных от больного микроорганизмов, реакции пассивной гемагглютинации с видоспецифическим антигеном S.aureus производства НИИ ЭМИБ (Казахстан)). Для выявления анти-ХОФ-антител в сыворотке крови сконструирована иммуноферментная тест-система с использованием в составе иммуносорбента афинноочи-щенного рекомбинантного ХОФ. Сыворотки титровали двукратно (начиная с разведения 1/25), ставили 2 контроля на неспецифическую сорбцию: контроль сыворотки (лунку не сенсибилизировали антигеном), контроль конъюгата (не вносили сыворотку). Учет реакции осуществляли по титру, за который принимали то разведение исследуемой сыворотки, при котором оптическая плотность (ОП) превышала сумму значений ОП двух контролей.

Показано, что анти-ХОФ-антитела обнаруживаются в сыворотке крови всех здоровых доноров. Минимальный и максимальный титры в группах здоровых и больных людей составляют соответственно 1:50 - 1:800 и 1:400 -1:6400. Несмотря на широкий диапазон изменения значений показателя средний титр анти-ХОФ-антител достоверно выше (р<0,01) в группе больных гнойной инфекцией, чем у здоровых доноров. Достоверного различия по данному показателю у больных с моно- и микстинфекцией не выявлено. При определении в ИФА антител к ХОФ у больных в динамике инфекционного процесса установлено, что у 50% больных в период выздоровления происходит снижение титра антител, у остальных титр увеличивается (25%) или остается на неизменном уровне (25%). При этом у всех обследованных пациентов титр анти-ХОФ-антител в период выздоровления остается выше среднего показателя в группе здоровых доноров. Результаты определения титров анти-ХОФ-антител в сыворотке больных стафилококковой инфекцией с помощью ИФА совпадают с результатами исследования микрофлоры и с данными серологических исследований, что свидетельствует об информативной (диагностической и прогностической) ценности данного теста.

Учитывая результаты исследования сывороток здоровых доноров, минимальным диагностическим титром анти-ХОФ-антител, указывающим на стафилококковую этиологию костно-гнойной инфекции, можно считать титр 1:800. Титры анти-ХОФ-антител, превышающие 1:800, которые характерны только для больных стафилококковой инфекцией, могут служить надежным диагностическим критерием при подтверждении данной этиологии заболеваний.

ИЗУЧЕНИЕ УРОВНЕЙ ЦИТОКИНОВ У БОЛЬНЫХ СИФИЛИСОМ

ПунченкоО. Е.. КотовА. Ю., Синева С.А.

Медицинская Академия Последипломного Образования, ГосНИИособо чистых биопрепаратов, Санкт-Петербург, Россия

При проникновении Treponema pallidum (Т.р.) в организм, запускается каскад иммунологических реакций. Если

гуморальное звено изучено достаточно хорошо, то проявления клеточного иммунного ответа требуют более глубокого изучения. Целью работы было изучение уровней 111-1(3, 1Ь-4,1Ь-8, у1РЫ у больных первичным и вторичным сифилисом. Исследованию подвергались сыворотки больных, проходивших лечение на базе Областного КВД. Диагноз первичного и вторичного рецидивного сифилиса у всех больным был установлен на основе анамнеза, данных клинического обследования, а также подтвержден положительными реакциями в стандартных серологических тестах. Обнаружение цитокинов проводилось иммунохими-ческим методом. Выявлено достоверное увеличение во вторичном периоде сифилиса (больные со сроком заболевания 2-3 года) следующих цитокинов: 1Ь-1Р - с 0,07±0,02 до 1,34±0,16 пг/мл (р < 0,05), 1Ь-4с5,83±1,18 до20,15±2,6пг/ мл (р < 0,05), 1Ь-8 с 16,25±1,84 до 72,45±5,92 пг/мл (р <

0,05). С другой стороны, обнаружено снижение концентрации у1БЫ с 159,6± 13,26 до 98,00±7,44 пг/мл (р < 0,05). Представленные данные свидетельствуют о выраженном гуморальном иммунном ответе, который усиливается при появлении неспецифического кардиолипинового антигена. Клеточный иммунный ответ, который играет важную роль в защите макроорганизма, на этой стадии оказался ингибирован, что объясняет дальнейшее размножение Т.р. и прогрессирование инфекции.

ВЛИЯНИЕ ИММУНОТРОПНОЙ ФАРМАКОТЕРАПИИ НА ПОКАЗАТЕЛИ КАЧЕСТВА ЖИЗНИ ПРИ РЕЦИДИВИРУЮЩЕЙ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ

РедькинЮ.В.. Одокиенко А.Ю.

Омская государственная медицинская академия, г. Омск, Россия

Введение. Исследование качества жизни (КЖ), наряду с динамикой клинических и лабораторных данных, в отечественной медицине является относительно новым подходом к оценке эффективности фармакотерапии. Необходимо отметить, что в условиях хронизации патологии КЖ может стать одним из основных критериев оценки состояния пациента.

Цель и задачи. Целью исследования явилось обоснование связи клинико-лабораторных показателей и показателей КЖ у пациентов, страдающих рецидивирующей гер-пинфекцией (ГИ), до и после проведения курса этиотроп-ной и иммуноактивной терапии и на основании полученных данных выработать адекватную тактику ведения таких больных.

Материалы и методы. В исследование включены 30 пациентов, страдающих рецидивирующей ГИ, средний возраст которых составил 30,6±6,8 лет при «стаже» заболевания 3,1 ±0,7 лет. Все пациенты обследовались с использованием общеклинических и иммунологических методов, включая цитокиновый профиль, и наблюдались у клинического иммунолога при Омском центре профилактики и борьбы со СПИД и инфекционными заболеваниями. Характер изменений иммунного статуса соответствовал наличию хронического инфекционного синдрома с явлениями клеточного иммунодефицита (дисбаланс им-мунокомпетентных клеток, снижение иммунорегуляторно-го индекса), нарушением функции фагоцитов и накоплением патогенных ЦИК. Курс фармакотерапии длительностью в 1 месяц включал: этиотропную терапию (ацикловир), иммуноактивную терапию в дискретном режиме (тималин, циклоферон, полиоксидоний), при необходимо-

Табл. ПОКАЗАТЕЛИ ЮКУ БОЛЬНЫХ РЕЦИДИВИРУЮЩЕМ ГИ ДО И ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ

КЖ ФФ РФФ ТБ ОФЗ ПЖ СФ РЭФ ОДЗ ОФС оде

Больные ГИ до лечения 50,13 ±1,76 49,18 ±1,59 46,02 ±2,70 36,26 ±1,89 46,43 ±2,24 42,39 ±2,71 42,11 ±2,46 37,41 ±2,66 49,17 ±1,66 38,29 ±2,80

Больные ГИ после лечения 53,51 ±2,21 46,26 ±2,32 49,83 ±2,64 39,60 ±1,78 58,36 ±2,56 51,36 ±1,96 44,23 ±2,33 49,07 ±1,72 49,06 ±2,68 49,20 ±2,43

Контроль, возраст 21,75 ± 2,95 года 57,00 ±1,74 56,92 ±2,12 62,11 ±2,33 63,93 ±1,87 70,85 ±2,49 56,84 ±2,66 55,96 ±1,62 64,14 ±1,88 59,05 ±2,27 62,33 ±2,54

сти - системную энзимотерапию (вобэнзим). До и после лечения пациенты заполняли адаптированный в России вопросник общего типа БЕ - 36 для оценки качества жизни.

Результаты. После проведения курса иммуноактивной терапии у всех пациентов наблюдалась положительная клиническая динамика (исчезновение элементов высыпаний, отсутствие рецидива или рецидив в редуцированной форме, нормализация температуры тела). При исследовании показателей КЖ у больных рецидивирующей ГИ после проведенного курса лечения была прослежена динамика, соответствующая повышению показателей КЖ, касающихся душевного состояния - шкалы социального функционирования, полноценности ощущения жизни и общего уровня душевного здоровья, которые, однако, не достигали контрольных значений.

ФФ-шкала физического функционирования; РФФ-шкала ролевого физического функционирования; ТБ - шкала телесной боли; ОФЗ - шкала общего уровня физического здоровья; ПЖ - шкала полноценности ощущения жизни;СФ - шкала социального функционирования; РЭФ

- шкала ролевого эмоционального функционирования; ОДЗ - шкала общего уровня душевного здоровья; ОФС -шкала общего физического состояния; ОДС - шкала общего уровня душевного состояния

Заключение. Таким образом, показатели КЖ при рецидивирующей ГИ могут служить критерием эффективности лечения. При этом очевидна необходимость повторных курсов иммуноактивной терапии с учетом динамики клинической картины, показателей иммунного статуса и КЖ.

ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСА И АКТИВНОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ УБОЛЬНЫХСХРОНИЧЕСКИМИ ВИРУСНЫМИ ГЕПАТИТАМИ ВИС

Родина Д .В.. Савченко А.А., Слепов Е.В.

Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера СО РАМН, Красноярский государственный университет, Красноярск, Россия

Среди вирусных заболеваний вирусные гепатиты В и С занимают одно из ведущих мест. Это обусловлено многообразием клинических проявлений и, как правило, хроническим течением заболевания. Однако, несмотря на широкую распространённость, патогенез хронических вирусных гепатитов В (ХВГВ) и С (ХВГС) изучен недостаточно. Несомненно, что функциональные свойства имму-нокомпетентных клеток в значительной степени обусловлены их обменом веществ. Таким образом, целью данной

работы явилось изучение иммунологических показателей и активности метаболических ферментов лимфоцитов крови у больных ХВГВ и ХВГС.

Обследовано 196 человек в возрасте от 25 до 45 лет. Среди них 74 здоровых (40 женщин и 34 мужчин), 86 с ХВГВ (45 женщин и 41 мужчина), 36 с ХВГС (15 женщин и 11 мужчин). Диагноз устанавливался при помощи стандартных клинико-биохимических методов обследования больных и верифицировался обнаружением с помощью иммуноферментных методов и метода полимеразно-цепной реакции специфических маркеров вирусных инфекций. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4 и CD8. Концентрацию иммуноглобулинов класса А, М и G в сыворотке определяли методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Определение НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови проводили биолюминесцентным методом.

Обнаружено, что по исследуемым иммунологическим параметрам крови между группами больных ХВГВ и ХВГС выявляются значительные различия. У больных ХВГВ и ХВГС обнаружено понижение величины имму-норегуляторного индекса. При этом, у больных ХВГВ выявляется выраженное снижение концентрации CD4+-лимфоцитов и СВ8+-лимфоцитов, тогда как у лиц с ХВГС снижение иммунорегуляторного индекса обусловлено, главным образом, уменьшением количества СБ4+-клеток. Кроме того, у обследованных больных ХВГВ и ХВГС выявляется снижение концентрации IgA в сыворотке крови при незначительном повышении концентрации IgM. Уровень IgG у лиц с ХВГВ соответствует таковому у здоровых людей, в то время как у больных ХВГС он достоверно снижен. При исследовании метаболического статуса иммунокомпетентных клеток у больных ХВГВ и ХВГС обнаружено снижение уровней активности глюко-зо-6-фосфатдегидрогеназы, НАД- и НАДН-зависимой реакций малатдегидрогеназы и глутатионредуктазы, но повышена активность глицерол-3-фосфатдегидрогеназы, а также НАД- и НАДФ-зависимых глутаматдегидроге-наз. Установлено противоположное изменение активности аэробной реакции лактатдегидрогеназы (ЛД Г): у больных ХВГВ активность фермента в 2 раза снижена по сравнению с контрольным диапазоном, тогда как у больных ХВГС - в полтора раза ниже.

Таким образом, установлено, что при ХВГВ и ХВГС выявляется снижение реактивности кли клеточного и гуморального звена иммунной системы. Причем различия в иммунном статусе у больных ХВГВ и ХВГС минимальны. Особенности метаболизма иммунокомпетентных клеток у больных хроническими гепатитами В и С характери-

зуются снижением интенсивности пластических процессов, зависящих от концентрации Н АД ФН и рибозо-5-фос-фата, а также понижением активности аэробных реакций. В то же время, у больных ХВГВ в лимфоцитах крови стимуляция гликолиза продуктами липидного катаболизма проявляется на фоне снижения аэробной реакции ЛДГ, тогда как у больных ХВГС синтез пирувата стимулируется как за счет продуктов липидного катаболизма, так и повышением активности аэробной ЛДГ. Можно предположить, что данная особенность метаболизма лимфоцитов у больных ХВГС характеризует повышенный уровень стимуляции реакций аэробного дыхания.

РОЛЬ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ В ТЕРАПИИ ДИСБАКТЕРИОЗА КИШЕЧНИКА

Ручкина И.Н.. Парфенов А.И.

Центральный научно-исследовательский институт гастроэнтерологии, Москва, Россия

Цель работы: изучить эффективность иммуномодулятора - Гепон для коррекции дисбактериоза кишечника.

Материал и методы: Обследовано 14 больных с синдромом раздраженного кишечника (СРК) и 2 - с гиполакта-зией (ГЛ.). У всех 16 больных был выявлен дисбактериоз. Гепон 0,002 г назначали местно в микроклизмах, предварительно растворив, в 40-50 мл физиологического раствора. Процедуру повторяли через день, № 5. Больные получали также адсорбенты и регуляторы моторики.

Результаты и обсуждение: У всех 16 больных после второй или третьей клизмы нормализовался стул, исчез метеоризм и уменьшился болевой синдром. У 5 больных увеличилось выделение слизи с калом. Также, у всех 16 пациентов количество бифидо- и лактобактерий увеличилось на 1 - 2 порядка и достигло нижней границы нормы. В повторных посевах кала исчезли кандиды, кокковая флора и протей, снизилось содержание клебсиелл и клос-тридий.

Всем больным дважды проводилось исследование иммунологического статуса. При поступлении в стационар у всех больных отмечался недостаток зрелых нейт-рофилов (38%), одновременно наблюдался дефицит Т-хелперов (28%) и истощение цитолитической активности комплемента (44%). После завершения курса лечения гепоном, показатели иммунного статуса улучшились: снизилось количество юных нейтрофилов, нормализовалось содержание Т- хелперов, выросла активность комплемента.

Таким образом, применение препарата Гепон в виде микроклизм приводит к положительному клиническому эффекту у больных СРК и ГЛ и восстановлению эубиоза. Улучшение микробиоценоза кишечника связано с повышением местного иммунитета за счет активации фагоцитоза условно-патогенных микроорганизмов и продукции лизоцима. Повышается устойчивость кишечного эпителия к продуктам метаболизма условно-патогенной микрофлоры. Улучшаются показатели гуморального иммунитета: усиливается продукция всех классов иммуноглобулинов и специфических антител. Повышение секреции слизи в просвет кишечника связано со стимуляцией функции бокаловидных клеток и с активацией местного иммунитета: выработкой лизоцима, секреторного иммуноглобулина А.

Заключение: Гепон - представитель нового класса иммуномодуляторов - рекомендуется включать в комплек-

сную терапию хронических заболеваний кишечника с целью коррекции эубиоза.

СПЕЦИФИЧЕСКИЙ ПОСТВАКЦИНАЛЬНЫЙ ИММУНИТЕТ У ЗДОРОВЫХ И ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКОЙ БРОНХОЛЕГОЧНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ ВАКЦИНЫ “PNEUMO-23”

Рыжов А. А. Костинов М.П., Ванеева Н.П., Цветкова Н.В., Ляшова В.Н.,

НИИВС им. И.И.Мечникова РАМН

Целью работы явилось изучение динамики синтеза IgG-AT к полисахаридам различных сероваров S. pneumoniae, входящих в состав вакцины “Pneumo-23”, у детей, вакцинированных вышеуказанным препаратом.

Вакцинацию осуществляли препаратом Pneumo-23 28 больным с хронической бронхолегочной патологией (возраст от 5 до 16 лет) после выписки из стационара. Контрольную группу составили 15 практически здоровых детей того же возраста. Исследование сывороток проводили до, через 1 месяц и 1 год после введения препарата с помощью полуколичественного иммуноферментного теста, разработанного в НИИВС им.И.И.Мечникова РАМН.

Проведенные исследования показали, что после вакцинации у больных детей отмечалось выраженное нарастание IgG-AT к комплексному препарату полисахаридов, входящих в состав вакцины, с сохранением их в течение года (до вакцинации - 0,64±0,02, через 1 месяц после вакцинации - 1,0±0,02 и через 1 год - 0,94±0,05; р<0,05). В то же время нам не удалось обнаружить нарастание IgG-AT к отдельным компонентам вакцины. У здоровых детей выявлено аналогичное нарастание антител к комплексному препарату полисахаридов вакцины (0,70±0,03, 1,48± 0,03 и 1,20±0,03 соответственно, р<0,05). При этом выявлено повышение уровня АТ к отдельным компонентам вакцины: к полисахаридному препарату сероваров Т-3, 6-В, 23-

F. Следует отметить, что повторные обострения основного заболевания у привитых больных детей в течение 1 года уменьшились до 33%.

Таким образом, вакцинация Pnevmo-23 больных с хронической бронхолегочной патологией оказывала положительное влияние на увеличение периода ремиссии и уменьшение частоты обострений.

СПОНТАННАЯ ПРОДУКЦИЯ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ И ЭКСПРЕССИЯ МАРКЕРНЫХ РЕЦЕПТОРОВ У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ

Сабиров У.Ю.*. Ризопулу А.П.,

Мунасипова Н.М., Умарова А.

* Научно-исследовательский институт кожных и венерических болезней М3 РУз,

Институт иммунологии АН РУз, Ташкент, Узбекистан

Было обследовано 47 ВИЧ-инфицированных в возрасте от 21 до 31 года, из них 38 мужчин, 9 женщин, 41 (87%) был инфицирован инъекционным, 6 (13%) - половым путем. По диагнозам больные распределились следующим образом: ВИЧ-инфицированные, стадия 1-2В - 35 человек, стадии 2-ЗА - 7 человек, стадия СПИД - 1 больной. Наличие ВИЧ-инфекции устанавливали по идентифика-

ции специфических антител к ВИЧ и его отдельным белкам в ИФА и иммуноблотинге.

Целью настоящего исследования было изучить распространенность возбудителей ИППП у ВИЧ инфицированных, иммунофенотипа субпопуляций лимфоцитов и спонтанной продукции 1Ь-8 и ТЫ Ра.

Уровень 1Ь-8 и ТЫ Ра определяли с использованием сэндвич-метода твердофазного иммуноферментного анализа (ООО «Цитокин», НИИ ОЧБ, СПб). Иммунофенотип основных популяций лимфоцитов проводили в имму-нофлюоресцентном методе с применением специфических моноклональных антител (МедБиоСпектр, Москва).

При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем, методом ПЦР, бактериоскопически КСР, были выявлены следующие сопутствующие заболевания: у 13 — хламидийная инфекция, у 19 -уреоплазменная, у 1 - ВПГ-

1, у 6 - ВПГ-2, трихомонады - у 4, гонорея - у 1, гардно-релли - у 4, сифилис - у 4.

Уровень спонтанной продукции ТЫ Ра в среднем был ниже показателей здоровых людей (5,9±0,5 пг/мл) и значительно варьировал при индивидуальном анализе. Так, у

1 больного продукция ЮТос составила 310 пг/мл. Уровень 1Ь-8 в среднем был повышен в группе обследованных (от 5,7 до 91,5 пг/мл).

Количество СБ4+ лимфоцитов варьировало в широких пределах и составило от 150 до 1140 клеток/мкл (среднее значение 610±97). Известно, что цитотоксические Т-лимфоциты являются защитной популяцией при вирусных инфекциях и при тяжелом течении процесса наблюдается их депрессия. Наши исследования показали, что повышенный уровень СБ8+ лимфоцитов характеризовал только 17% пациентов (<850 кл/мкл) и наблюдался в группе больных с инъекционным путем инфицирования. У всех пациентов, заразившихся половым путем, их число имело тенденцию к снижению. Экспрессия рецепторов с активационными маркерами СБ25+ была достоверно снижена по сравнению с показателями контроля. Число клеток, имевших С095+ маркеры, было достоверно снижено у 28% больных, у остальной части пациентов - не отличалось от контрольных значений. Выявлено повышенное число активационных маркеров СБ38+ у 97% пациентов.

Таким образом, у ВИЧ-инфицированных обнаружен дисбаланс в продукции провоспалительных цитокинов, тенденции к параллельному снижению СБ4+ и СВ8+ клеток, а также маркеров активации - СВ25*, СВ95* с повышенным уровнем СБ38 рецепторов. Среди сопутствующих преобладают ЗППП -хламидии и уреоплазменная инфекции.

ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСАУДЕТЕЙ 1 -3 И 4 - 7 ЛЕТ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ХАРАКТЕРА ТЕЧЕНИЯ ОСТРОЙ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИИ

Савченко А.А.. Мартынова Г.П., Котова Я.А.

Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера СО РАМН, Красноярская государственная медицинская академия, Красноярск, Россия

Острые кишечные инфекции (ОКИ) остаются наиболее распространенными заболеваниями детского возраста. Не следует упускать из вида тот факт, что развитие критических состояний у детей с ОКИ обусловлены иногда быстрым, непредсказуемым развитием болезни, при этом, существующие традиционные методы лабораторной

диагностики не позволяют своевременно на ранних этапах заболевания оценить ответную реакцию организма на патогенное действие инфекционно-токсических факторов. В связи с этим весьма актуальной остается проблема прогнозирования тяжести, характера течения и исхода заболевания. Целью исследования явилось изучение особенностей иммунного статуса у детей в зависимости от характера течения ОКИ.

Обследовано 243 детей с ОКИ в возрасте 1-3 лет (139 детей) и 4 - 7 лет (104 ребенка). Во всех случаях имела место этиологическая расшифровка заболевания. Всем детям при поступлении в стационар (1-3 день болезни) и в динамике заболевания проводили комплексное клиниколабораторное обследование, у части больных проводилось исследование микробиоценоза кишечника. В качестве контроля обследовано 26 здоровых ребенка в возрасте 1-3 лет и 49 детей 4-7 лет. Популяционный и субпопуляцион-ный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител CD3, CD4, CD8, CD16 и CD72. Для дополнительной характеристики Т-клеточного звена иммунной системы вычисляли иммунорегуляторный (CD4+/ CD8+) и лейко-Т-клеточный индексы (Лейкоциты/СОЗ+). Концентрацию иммуноглобулинов класса А, М, G определяли методом иммунодиффузии по Манчини. Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови оценивали турбидиметрическим методом.

При исследовании особенности состояния клеточного звена иммунной системы у детей 1-3 лет в зависимости от характера течения ОКИ установлено, что у больных с гладким и негладким течением ОКИ снижена концентрация лейкоцитов и лимфоцитов в крови, а также процентное и абсолютное содержание CD3+-, CD4+- и СВ8+-кле-ток. Кроме того, в обеих группах больных детей младшего возраста повышена величина лейко-Т-клеточного коэффициента, но у больных с негладким течением выявляется более выраженное повышение значений данного коэффициента, в том числе и по отношению к группе больных с гладким течением ОКИ. Только у больных с гладким течением ОКИ обнаружено статистически достоверное повышение относительной концентрации СБ16+-клеток, тогда как только у больных с негладким течением выявляется выраженное понижение процентного содержания общих лимфоцитов в периферической крови. Обнаружено, что у больных с негладким течением ОКИ по сравнению с больными с гладким течением повышены сывороточная концентрация Ig А и величина соотношения IgG/CD72+.

Независимо от характера течения ОКИ у больных детей 4-7 лет относительно контрольной группы понижены абсолютная концентрация лимфоцитов, процентное содержание СВ4+-клеток и величина иммунорегуляторного индекса. Кроме того, у детей с гладким и негладким течением ОКИ выявляется снижение абсолютной концентрации CD3+- и СВ4*-лимфоцитов. Однако у больных с негладким течением ОКИ понижение величин данных иммунных показателей более выражено, в том числе и относительно показателей детей с гладким течением ОКИ. При исследовании особенности состояния гуморального звена иммунной системы у детей 4-7 лет с разным течением ОКИ обнаружено, что только у больных с гладким течением ОКИ понижена абсолютная концентрация С072+-лим-фоцитов и, соответственно, повышена величина лейко-В-клеточного коэффициента. В то же время, только у больных старшей возрастной группы с негладким течением ОКИ повышена сывороточная концентрация IgA и вели-

чина относительного синтеза Ig А. Больные дети были обследованы в начальный период ОКИ, когда характер течения заболевания был еще не определен. Таким образом, можно заключить, что уже в начальный период инфекционного процесса в иммунной системе выявляются особенности, позволяющие прогнозировать характер течения ОКИ. У детей с негладким характером течения ОКИ выявляются более выраженные нарушения иммунного статуса при отсутствии каких-либо компенсаторных изменений. В то же время, у детей с гладким характером течения ОКИ в системе иммунитета выявляются компенсаторные процессы.

ОЦЕНКА УРОВНЯ TNF-ot У БОЛЬНЫХ С РАЗНЫМИ ФОРМАМИ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛ ИОЗОВ В ПРИМОРСКОМ КРАЕ

Симакова А.И..Мандракова Н.В., Маркелова Е.В.

Владивостокский государственный медицинский университет, Владивосток, Россия

Иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) вызывается спирохетой рода Borrelia и передается с укусом зараженного клеща. По клиническим признакам при остром течении ИКБ выделяют эритемную и безэритемную формы. Велика вероятность хронизации процесса, механизмы которого изучены недостаточно. Показано участие провос-палительных цитокинов в развитии эритемы и острофазового ответа, а также в патогенезе поздних осложнений. Однако данные противоречивы, особенно в отношении роли TNF-a (Васильева Ю.П. с соавт., 2002).

Цель настоящей работы состояла в сравнении изменения уровня TNF-a у больных с разными формами ИКБ.

Под наблюдением в инфекционном отделении ККБ №2 г. Владивостока находились 38 больных в возрасте от 16 до 73 лет с эритемной формой (1-я группа, п= 23) и безэри-темной формой (2-я группа, п= 15). Диагноз ИКБ был подтвержден в динамике методом непрямой реакции иммунофлюоресценции (НРИФ) у больных 1-й группы в 73% случаев, во второй - у всех. Уровень TNF-a в сыворотке крови определяли методом твердофазного ИФА с использованием реактивов «R&D Diagnostic, Inc., USA» с чувствительностью 0,1 пг/мл.

В ранние сроки болезни (1-я неделя) уровень TNF-a в 1-й группе был повышен в 3,9 раза, а во 2-й группе в 6,3 (16,98±5,03 и 27,10±0,93 пг/мл соответственно при норме 4,27±1,23 пг/мл). Анализ клинических проявлений болезни показал, что в группе больных с безэритемной формой преобладал общетоксический синдром, длительность лихорадки составила 6,3±0,7 дней, отмечалось поражение внутренних органов. Течение болезни при эритемной форме характеризовалось менее выраженным интоксикационным синдромом с длительностью лихорадки 4,0±0,6 дней.

В динамике через 10 дней уровень TNF-a у больных 1-й группы снизился в 2 раза (6,99±4,86 пг/мл), во второй группе снижение в 2,6 раза (10,44±4,54 пг/мл). Отдаленные результаты (через 6 мес.) свидетельствуют о том, что в обеих группах уровень TNF-a снизился, достигая нормальных величин, и составил 3,63±0,27 пг/мл.

Таким образом, в результате проведенного анализа установлено, что у больных с безэритемной формой болезни отмечается более существенный рост уровня TNF-a в ранние сроки болезни. Повышение уровня данного цитокина коррелирует с тяжестью течения этой формы ИКБ. Даль-

нейшие исследования позволят уточнить патогенетическую роль TNF-a в развитии клинических проявлений при иксодовых клещевых боррелиозах.

ОКСИД АЗОТА, ФАКТОР НЕКРОЗА ОПУХОЛИ-а, ИНТЕРЛЕЙКИН-1 а В БИОПТАТАХ ПЕЧЕНИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ С

Скляр Л.Ф.. Маркелова Е.В., Журавлева Н.В.*, Чекаловец И.В.*, Дурнева М.А., Мыльцина И.Н., КущГ.П., ПечеркинаМ.И., Журавлева А.С.

Владивостокский государственный медицинский университет, Россия

* Тихоокеанский институт биоорганический химии ДВО РАН, Владивосток, Россия

Выяснение функциональной роли молекулы оксида азота (N0) в жизнедеятельности гепатоцитов и других клеток печени представляется особенно актуальным вя-виду того, что индукция N0 в печени является многоступенчатым процессом со сложным уровнем регуляции, механизмы которого окончательно не изучены. В последнее время большинство исследований посвящено изучению роли N0 в процессах апоптоза в печени. Считается, что при HCV инфекции в ответ на воздействие фактора некроза опухоли-a (TNF-a) и интерлейкина -la (IL-la) клетки Купфера и сами гепатоциты увеличивают объем выработки индуцибельной NO-синтазы, что приводит к изменению характера нитрооксидергического воздействия на печень. При этом образование оксида азота может возрастать в десятки и сотни раз, и нитрооксид-радикалы становятся токсичными для клеток печени. Молекулы оксида азота реагируют со свободными радикалами, которые в избытке образуются при вирусном поражении печени, что сопровождается образованием большого количества перок-синитрита, высокотоксичного в отношении гепатоцитов. Пероксинитрит индуцирует процессы перекисного окисления липидов в клеточной мембране и вызывает однони-тевые разрывы в ДНК. Повреждение клеток пероксинит-ритом может происходить за счет расщепления АТФ или ингибирования митохондриального дыхания. При исследовании роли NO в патогенезе HCV инфекции также показано, что уровень нитрооксидемии у данных больных напрямую сопряжен с величиной репликативного потенциала.

Цель настоящей работы состояла в изучении содержания локального уровня цитокинов (TNF-a и IL-la) и стабильных метаболитов оксида азота (нитратов и нитритов) в супернатантах гомогенизатов биоптатов печени у 12 больных с хронической HCV инфекцией в период обострения и у 5 здоровых лиц. Среди обследованных все были лицами мужского пола в возрасте от 19 до 33 лет. Диагноз хронического вирусного гепатита С (ХВГС) верифицирован наличием маркеров к HCV инфекции методом ИФА и ПЦР. Образцы ткани получали методом пункционной биопсии. Оценку активности патологического процесса в печени осуществляли в соответствии с международной классификацией, для чего определяли индекс гистологической активности (ИГА) и гистологический индекс склероза (ГИС). Исследование уровней цитокинов проводили методом твердофазного ИФА с помощью диагностических наборов (R&D Diagnostics Inc., USA) с чувствительностью 1 пг/мл. Уровень метаболитов оксида азота определяли непрямым методом по Емченко Н.Е. и др. (1994) с

последующим фотоколориметрическим исследованием при длине волны в 450 нм.

Проведенные исследования показали, что локальный уровень содержания TNF-a и IL-la был высоким у больных с обострением ХВГС по сравнению со здоровыми (155,36+12,8 пг/мл против 25,77±8,3 пг/мл и 67,43±2,26 пг/мл против 16,41±2,9 пг/мл соответственно, при Р<0,01). Увеличение показателей локальных TNF-a и IL-la, на наш взгляд, обусловлено реакцией системного ответа организма на хронический инфекционный процесс, а также местными изменениями воспалительных и иммунных реакций. Средний уровень метаболитов оксида азота в биоптатах печени у больных ХВГС в репликативную фазу составил 34,0+4,1 мкМ/л, что существенно превышало его показатели у здоровых лиц (1,4±0,2 мкМ/л, Р<0,05). Выявлены коррелятивные связи уровня активности патологического процесса (гепатоспленомегалия, цитолиз) с уровнем нит-роксидэмии. Учитывая многообразие биологических процессов, обусловленных оксидом азота в печени, усиливая или подавляя синтез N0 в этом органе, можно, по-видимому, влиять на ход патологических процессов при вирусных гепатитах, что может быть использовано в тактике патогенетической терапии и контроле эффективности лечения.

Таким образом, изучение N0 как эндогенного соединения, выполняющего функции посредника в межклеточных взаимодействиях и цитотоксического эффектора иммунологической защиты организма, позволяет прояснить важные проблемы, касающиеся механизмов патогенеза инфекции на разных стадиях, а также позволяет надеяться на успешное использование новых знаний в целях разработки более эффективных стратегий лечения.

ПОЛУЧЕНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К СТАФИЛОКОККОВОМУ a-ТОКСИНУ (CAT), РЕКОМБИНАНТНОГО CAT И РАЗРАБОТКА НА ИХ ОСНОВЕ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ

ТлеулиеваР.Т.. Беклемишев А.Б.*, Камынина Т.П.*, Сидорова Ю.Н.*,

Синенко С.А.,Беляев Н.Н.

Институт молекулярной биологии и биохимии имМЛЛйтхожина, Алматы, Казахстан; *ГУ НИИ биохимии СО РАМН, Новосибирск, Россия

Известно, что септические состояния стафилококкового происхождения сопровождаются появлением в крови CAT, который используют в качестве этиологического маркера сепсиса. Между тем в настоящее время отсутствуют коммерческие тест-системы, позволяющие надежно и быстро определить этиологическую природу сепсиса. Целью работы явилась разработка ингибиторной иммуно-ферментной тест-системы на основе моноклональных антител (МАТ) и рекомбинантного CAT (рСАТ).

Мышиные МАТ получали с помощью стандартной гибридомной технологии. Мышей линии BALB/c иммунизировали CAT 70% чистоты с использованием полного адъюванта Фрейнда. Полученную гибридому D3 клонировали 5 раз. Штамм гибридомы показал хорошие ростовые свойства, стабильность и высокую продукцию МАТ. MAT D3 имели изотип IgG2a, обладали высокой специфичностью к CAT (отсутствие связывания с СЭА, СЭВ и СЭЕ), подтвержденной в иммуноблоттинге. Минимальная концентрация МАТ, используемая для выявления нативного CAT в непрямом ИФА составляла 0,35 мкг/мл.

Для отработки условий проведения ингибиторного ИФА использовали отдиализованную сульфатную фракцию культуральной среды моноклональной гибридомы D3.

Для получения рСАТ структурную область гена CAT S.aureus шт. Wood 46 клонировали в клетках E.coli в составе сконструированного нами экспрессирующего вектора pREB, предназначенного для прямой экспрессии генов прокариот под контролем регуляторной области гена гесА Proteus mirabilis. При индукции трансформированных клеток E.coli налидиксовой кислотой или митомицином С наблюдался высокий уровень синтеза CAT (-30% от суммарного клеточного белка), причем токсин эффективно секретировался в периплазму и, что следует особо отметить, в культуральную среду. Синтезированный рСАТ обладал высокой гемолитической активностью, сравнимой с таковой у нативного CAT из S.aureus. Этот факт свидетельствует о корректном процессинге чужеродного для E.coli CAT, являющегося типичным секреторным белком грамположительных бактерий. Была исследована также гемолитическая активность и локализация в клетке рекомбинантной формы CAT, содержащей дополнительную шести-гистидиновую аминокислотную последовательность на С-конце молекулы. Как и в первом случае рекомбинантный белок обладал гемолитической активностью и секретировался в периплазму и культуральную жидкость. рСАТ, содержащий дополнительную С-конце-вую шести-гистидиновую последовательность, очищали аффинной хроматографией на 1\']2+-НТА-сефарозе-6В и использовали для конструирования диагностической тест-системы на основе ингибиторного ИФА.

Сравнительный анализ нативного и рекомбинантного CAT в непрямом ИФА показал более высокую иммобили-зационную способность рСАТ в отношении пластика в стандартных условиях (щелочной pH наслаивающего буферного раствора), что позволило уменьшить концентрацию рСАТ при сорбции на планшет. Ингибиторный ИФА при использовании рСАТ в качестве сорбированного антигена не отличался по чувствительности от варианта с использованием нативного CAT и позволял выявлять нативный CAT в буферном растворе в концентрации до 150 нг/мл. Таким образом, полученные гибридома, продуцирующая МАТ к CAT, и секретирующий штамм трансформированных клеток E.coli с высокой суперпродукцией рСАТ могут послужить основой для производства высокочувствительной надежной иммуноферментной тест-системы, пригодной для использования в диагностических целях в клинических лабораториях.

ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННОГО ЭНДОКАРДИТАУ НАРКОЗАВИСИМЫХ ВИЧ- ИНФИЦИРОВАННЫХ БОЛЬНЫХ

Уланова В.И.. Мазуров В.И., Цинзерлинг В.А.

Медицинская академия последипломного образования, Государственная педиатрическая медицинская академия, Санкт- Петербург, Россия

В последние годы в нашей стране отмечен значительный рост числа лиц, использующих внутривенное введение наркотиков. Широкое распостранение ВИЧ-инфекции среди наркоманов обусловило ряд особенностей клинического течения инфекционного эндокардита (ИЭ) в данной категории больных.

За период 1998-2002 гг. на базе Александровской больницы Санкт-Петербурга было проведено обследование 80

больных инфекционным эндокардитом (ИЭ), из них 49 мужчин и 31 женщина в возрасте от 18 до 30 лет. Кроме того, проанализированы результаты патологоанатомических вскрытий умерших в 2002 г. от инфекционных эндокардитов и ВИЧ-инфекции в ПАО больницы им. С.П. Боткина. В обследуемой группе больных основным фактором риска развития ИЭ являлось внутривенное введение наркотиков. Диагноз ИЭ устанавливался с использованием системы диагностических критериев Бике на основании клинических данных, а также результатов эхокардиографического исследования (образование подвижных вегетаций на клапанах сердца) и высевов из крови типичных возбудителей.

Особенностью клинического течения эндокардита у наркоманов было преимущественное поражение правых камер сердца (97,5%) с образованием вегетаций на створках трикуспидального клапана, а также септицемия, вызванная высоковирулентной микрофлорой (золотистый стафилококк — в 89,7% наблюдений). Основными клиническими синдромами при остром течении ИЭ были тромбоэмболический (65%), септический с развитием острого ДВС-синдрома (75,5%), острая недостаточность кровообращения (37,5%), а также вторичная нефропатия (100% больных).

В группе больных ИЭ, по нашим данным, ВИЧ-серо-позитивными являлись 95,4%. Наряду с этим в крови обследуемых лиц с большой частотой определялись маркеры гепатита С (82%) и В (62,6%), а также микст-инфек-ции (38,5%). В большинстве наблюдений больные находились на стадии латентной ВИЧ-инфекции или персис-тирующей генерализованной лимфоаденопатии.

Течение ИЭ на фоне иммунодефицита, связанного с ВИЧ-инфекцией, характеризовалось снижением активности системного воспаления, редким развитием осложнений, имеющих иммунокомплексную природу (васкулит, гломерулонефрит). В наблюдаемой группе больных геморрагический васкулит на фоне стафилококковой септицемии наблюдался у 4 человек (5%), острый гломерулонефрит выявлен у 5 больных (5,9%).

По данным аутопсии одной из основных причин смерти больных ОИЭ (43,7%) была септикопиемия с формированием гнойных очагов в паренхиматозных органах и полиорганная недостаточность. Вместе с тем у ВИЧ-инфицированных лиц определялись умеренно выраженные морфологические признаки вторичного иммунодефицита, а также изменения, характерные для ВИЧ среди клеток мононуклеарного ряда селезенки, лимфоузлов, головного мозга (ВИЧ-энцефалит).

Нами проведено сравнение данных морфологического исследования у ВИЧ-инфицированных больных ОИЭ с группой пациентов, умерших от осложнений ИЭ при отсутствии ВИЧ-инфекции. По нашим данным, течение ИЭ в группе больных без ВИЧ-инфекции характеризовалось распостра-ненными гнойными процессами с образованием выпота в полостях, гнойным менинго-энцефалитом, формированием очагов гнойного воспаления эмболической природы в печени, селезенке, почках и других органах и системах.

В группе наркозависимых ВИЧ-инфицированных больных ИЭ госпитальная летальность составила 30,2% (24 чел.). Основными причинами смерти являлись дис-семинация возбудителя с развитием полиорганной недостаточности (43,7%), острая недостаточность кровообращения на фоне присоединившегося миокардита (32,5%), а также тромбоэмболические осложнения (23,8%). Следует также отметить, что среди осложнений ВИЧ-инфек-

ции в стадии СПИДа, по многолетним данным прозектуры больницы им. С. П. Боткина, инфекционный эндокардит не наблюдался.

ЛЕЧЕНИЕ АСПЕРГИЛЛЕЗА ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ГРАНУЛЕМАТОЗНОЙ БОЛЕЗНИ

Усачева А.Ю.. Болотов А.А, НецветаеваТ.Э., Андрианов П.А., Пашанов Е.Д., КондратенкоИ.В.

Российская детская клиническая больница, Научно-исследовательский институт детской гематологии М3 РФ, Москва

Введение. Хроническая гранулематозная болезнь (ХГБ) характеризуется нарушением образования свободных радикалов кислорода, играющих ключевую роль во внутриклеточном киллинге патогенных бактерий и грибов. В результате больные с ХГБ страдают тяжелыми рецидивирующими инфекциями, наиболее частыми возбудителями которых являются Staphylococcus aureus, Aspergillus sp., кишечные грамотрицательные бактерии. Аспергиллез является самым тяжелым инфекционным осложнением ХГБ. Протоколы терапии аспергиллеза при ХГБ включают длительное применения амфотери-цина В и при возможности - удаление аспергиллемы. Однако хирургическое лечение используется далеко не всегда, так как ее локализация в легком, теле позвонков, ребрах, головном мозге исключает этот метод. Таким образом основным методом терапии аспергиллеза у больных с ХГБ является длительная (4-6 мес) консервативная терапия с использованием амотерицина-В в дозе 1,5 мг/кг массы больного и его комбинация с препаратами триазоловых антифунгинальных антибиотиков (итра-коназола, вариконазола). Эффективность итраконазо-ла в терапии аспергиллеза продемонстрирована в единичных наблюдениях.

Цель работы. Разработка схемы терапии аспергиллеза, устойчивого к амотерицину В, у больного с ХГБ.

Материалы и методы. Исследование хемилюминес-ценции нейтрофилов, посев отделяемого из раны с определением чувствительности к антифунгинальным препаратам, КТ грудной клетки.

Основные результаты. Мы наблюдали мальчика 17-и лет с ХГБ. Семейный анамнез не отягощен. Заболевание дебютировало в 2-недельном возрасте с развития двухсторонней пневмонии, в дальнейшем в 2 мес возрасте развился БЦЖит, затем страдал рецидивирующим абсцедирующим лимфаденитом, повторными пневмониями, однократно имел место поддиафраг-мальный абсцесс. Диагноз установлен в 6-летнем возрасте на основании характерных клинических и лабораторных показателей. С этого времени постоянно получал профилактическую терапию тримктопримом-сульфометоксазолом. Профилактика аспергиллеза интраконазолом, обязательная для больных с ХГБ, не проводилась. В возрасте 16 лет - развитие сепсиса гриб-ково-бактериальной этиологии с формированием множественных септических очагов (гнойный медиастенит, эмпиема плевры, паравертебральная флегмона верхнегрудного отдела позвоночника, гнойный эпидурит С7-D5 уровня), аспергиллеза (аспергиллема правого легкого, аспергиллема паравертебральной области) с развитием тетрапареза с нарушением функции тазовых органов. Аспергиллез был подтвержден обнаружением Aspergillus fumigatus в мокроте при микроскопии, высе-

вом Aspergillusgpp. из гнойного содержимого, полученного при дренировании паравертебральной флегмоны верхнегрудного отдела позвоночника, рентгенографическим исследованием органов грудной клетки, КТ исследованием грудной клетки. Проводилась антибактериальная терапия с использованием антибиотиков широкого спектра действия, проведено 7 переливаний гранулоцитарной массы через день, комбинированная противогрибковая терапия включала Фунгизон в дозе 90 мг/сут ежедневно в течение 3 месяцев, параллельно получал итраконазол в дозе 300 мг/сут (получал его в той же дозе в течение 18 дней без перерыва). На фоне проводимой в течение 2 мес удалось полностью справиться с бактериальными инфекциями. Продолжительная противогрибковая терапия привела к значительной положительной динамике - сокращение размеров ас-пергиллемы в области верхней доли правого легкого в

3 раза, подтвержденное КТ исследованием грудной клетки в динамике.

Заключение. При выявлении аспергиллеза у больных с ХГБ необходимо определение чувствительности к противогрибковым препаратам, целесообразно проведение комплексной терапии с использованием амфотерицина В, итраконазола, переливания гранулоцитарной массы. Оправдано длительное применение итраконазола в высокой дозе, что позволяет существенно сократить объем последующего оперативного вмешательства или, возможно, совсем его избежать.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОСЛЕДСТВИЯ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТАУДЕТЕЙ

Ханипова Л.В.. Кашуба Э.А., Дроздова Т.Г., Чебышева Е.В., Кечерукова Л.М., Рождественская Ю.В.

Тюменская государственная медицинская академия; ММЛПУ «Городская иммуноаллергологическая консультативно-диагностическая поликлиника», Тюмень, Россия

Клещевой энцефалит (КЭ) у детей сохраняет черты классической нейроинфекции, вызывая формирование не только функциональных, но и органических неврологических последствий. Вирус КЭ может поражать не только нервную, но и иммунную систему, что является фоном для формирования в дальнейшем иммунных дисфункций.

Цель: изучить иммунологические исходы КЭ у детей с учетом преморбидного иммунопатологического фона.

Материал и методы: в катамнезе обследовано 49 детей в возрасте от 8 до 14 лет, в сроки до 5 лет после острого КЭ. Для выявления признаков иммунной недостаточности (ИН) до заболевания использована «Карта выяв-

ления иммунной недостаточности у детей при иммунноэпидемических исследованиях». Были выделены группы иммунологически здоровых (ИЗ) (37,4%) и иммуноком-прометированных детей (ИК) (65,3%). Иммунологическое обследование включало фенотипирование лимфоцитов методом проточной цитометрии (СБЗ+, СБ4+, С08+, СБ7+, СБ50+, СБ54+, СБ38+, СБ71+, НЬАБК+, СБ20+, СБ23+, СБ16+, СВ11Ь+-лимфоциты), определение содержания ^А, ^М, ^С, уровня ЦИК (с 3,5%, 5% и 7% ПЭГ), фагоцитоза, метаболической активности (НСТ-тест) и функционального резерва (ФРН) нейтрофилов. Для оценки выявленных изменений применяли частотный анализ с вычислением степени иммунных расстройств и построением формул иммунных нарушений (ФИН) (Земсков А.М., 1995).

Результаты. Максимальная частота неврологической симптоматики отмечалась на протяжении первых двух лет после острого периода КЭ (у 42,6% на 1 году и 33,3% ИЗ 2 году; и у 71,4% на 1-м и 50% ИК на 2-м). Клинические проявления иммунной дисфункции нарастали с максимальной частотой через 2-3 года после острого КЭ (у ИЗ 16,7% на 2-м и 25% на 3-м году; у ИК 75% на 2-м и 60% на 3-м году), снижаясь затем у ИЗ детей и сохраняясь у ИК детей весь период наблюдения (у ИЗ к 5-му году у 12,5%, у ИК у 62,5% детей) и манифестировались инфекционным (ИС) и аллергическим синдромами. Аллергический синдром отмечался только у 16,7 - 25% ИЗ детей на 2 - 3 году и проявлялся появлением рецидивирующей крапивницы. ИС у ИК детей характеризовался учащением респираторных инфекций, рецидивирующими воспалительными процессами со стороны ЛОР органов, фурункулезом, появлением рецидивирующих герпетических высыпаний. ИЗ имели меньшее клиническое разнообразие. При иммунологическом обследовании выявлены расстройства во всех звеньях иммунной системы. Показатели со 2-3 степенью иммунных расстройств, были сформированы в формулы иммунных нарушений и обобщены в таблице.

Параметры, вошедшие в формулы, представлены показателями адгезии, активации (СБНЬ, С038, СБ54, НЬАВЫ), гуморального (ЦИК, 1й) и неспецифического звена (НСТ, функциональный резерв нейтрофилов (ФРН)), отличались большей степенью отклонения у ИК детей.

Заключение: Таким образом, перенесенный КЭ приводит к формированию синдрома иммунных дисфункций, с наибольшей частотой через 2-3 года, что подтверждается выявленными изменениями во всех звеньях иммунной системы. У детей с преморбидной ИН иммунные дисфункции характеризуются большей степенью и стойкостью. В связи с этим необходимо удлинение диспансерного наблюдения за детьми, перенесшими КЭ, с участием иммунолога.

Срок катамнеза Формула иммунных нарушений у:

ИЗ детей И К детей

6 месяцев 1 год 2 года 3 года 4 года 5 лет CD11Ь2'40 ФРН3+42,Э CD202+286 CD382-3+66-7 CD11b2.3'40 CD542-3'40 ЦИК5з+60 CD382-3+S0 CD11b3‘40 ЦИКЗз+66'7 ЦИК7з+66'7 НСТз+50 ЦИК52+25 ЦИК72+12,5 lgGi+50 HLADR2-3+57,2 CD382-3+50 ЦИК7з+50 ФРН2‘62'5 CD382-3+40 CD542-3’37,5 CD382-3+8° НСТз+66'7 ФРН2-з‘66'7 ЦИК33+б6,7 ЦИК53+66'7 ЦИК72-з+5° ЦИКЗз+66'7 ЦИК5з+66'7 ЦИК7з+66'7 CD11 Ь2.з+100НСТ3+б6'7 ФРН2-з'66,7

Нижний индекс указывает степень иммунных расстройств, верхний индекс - знак - показывает отклонение параметра от нормативного в сторону повышения или понижения, цифра - частоту встречаемости.

ИММУНОЭПИДЕМИОЛОГИЯ КАК ИНСТРУМЕНТ ПРОФИЛАКТИКИ И БОРЬБЫ С ИНФЕКЦИОННОЙ ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬЮ ПЕРСОНАЛА МЕДИЦИНСКИХ УЧРЕЖДЕНИЙ

ХрапуноваИ.А.. Филатов Н.Н., Сучков С.В.*

Центр госсанэпиднадзора в г. Москве;

* МОНИКИ, Москва;

*ММА им. И.М. Сеченова, Москва, Россия

Существующие способы оценки условий возникновения внутрибольничных инфекций и прогнозирования соответствующих рисков ограничиваются рамками традиционного бактериологического мониторинга, который способен проиллюстрировать лишь факт инфицирования объекта исследования и не способен на доклиническом этапе дать оценку состояния антимикробного иммунитета у персонала лечебно-профилактического учреждения (ЛПУ). Вместе с тем, медицинский персонал, первым встречается с возбудителями самых различных инфекционных заболеваний, в связи с чем форма иммунодефицита и напряженность у таких лиц противоинфекционного иммунитета, определяющего исход этого этапа, с одной стороны, и все последующие стадии развития инфекционного заболевания и его осложнений, с другой, являются ключевыми факторами в профилактике инфекционной заболеваемости.

Риск инфицирования работников медицинской сферы определяется, в основном, двумя ключевыми факторами:

- внешним воздействием на организм микробной флоры из категории внутрибольничной инфекции или же инг дукцией вирулентных свойств у эндогенной микробной флоры кишечника, дыхательных путей и др. под влиянием провоцирующих стимулов внешней (госпитальное микроокружение) или внутренней (гомеостатической) среды с последующим переходом группы микробов из разряда условно-патогенных в разряд патогенных с вирулентным потенциалом;

- уровнем сопротивляемости макроорганизма-хозяи-на к воздействию условно-патогенной микрофлоры с вирулентным потенциалом за счет имеющегося ресурса собственного противоинфекционного иммунитета.

Естественно, что всестороннее изучение особенностей вовлечения в эпидемический процесс медицинских работников, выявление путей и механизмов передачи инфекций и исследование состояния у медицинского персонала противовирусного и антибактериального иммунитета является чрезвычайно важной комплексной задачей, решить которую способна новая дисциплина - иммуноэпидемиология, располагающая для этих целей арсеналом соответствующих технологий и средств.

ЛИМФОТРОПНАЯ ГЕРПЕТИЧЕСКАЯ ИНФЕКЦИЯ КАК ФАКТОР, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЙ РАЗВИТИЕ НЕДОСТАТОЧНОСТИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ

Черноусов А.Д.. Чувиров Г.Н., Голубкова О.В.

ГНЦ - Институт иммунолти М3 РФ, НПО «МедБиоСпектр», Клиника «Бреста»

В подавляющем большинстве случаев недостаточность иммунной системы характеризуется строго очерченным симптомокомплексом, в основе которого лежит нарушение противоинфекционного иммунитета. У пациентов с частотой рецидивирования простого герпеса более 8 раз в год и с превышением нормального уровня АТ к ЦМВ

(96 человек) и ВЭБ (31 челочек) различные клинические проявления недостаточности иммунной системы (частые простудные заболевания, кандидоз слизистых, хронические воспалительные процессы бронхолегочного аппарата и носоглотки, воспалительные процессы органов малого таза и гнойничковые поражения кожи) встречались суммарно в 89,9% случаев. Указанные клинические проявления недостаточности иммунной системы развивались на фоне снижения показателей клеточного иммунитета и дисбаланса ИГА.

Противовирусная терапия, включающая валацикловир (5 г на курс) и интерферон а2Р (5x10 ед. на курс) - всего 6 курсов с интервалом 10 дней приводила у 60% пациентов с превышением АТ к ЦМВ к отсутствию рецидивирования в течение 1 года и у остальных пациентов к снижению частоты и длительности рецидивов. Указанная терапия одновременно приводила к устранению клинических проявлений недостаточности иммунной системы. Отсутствие клинических проявлений недостаточности иммунной системы в данной группе больных сопровождалось нормализацией показателей иммунного статуса. У пациентов с превышением уровня АТ к ВЭБ терапия не была эффективна.

Курсовая монотерапия противогерпетическими препаратами валацикловиром пациентов с превышением титров АТ к ЦМВ и фамцикловиром пациентов с превышением титров АТ к ВЭБ так же приводила к снижению частоты и длительности рецидивов простого герпеса, устранению клинических проявлений недостаточности иммунной системы и нормализации показателей иммунного статуса. Однако, если валацикловир был эффективен в отношении ВПГ-1,2, ЦМВ, то курсовая монотерапия фамцикловиром приводила к снижению уровня антителообразо-вания не только к ВПГ-1,2, ЦМВ, но и ВЭБ.

Снижение интенсивности клинических проявлений недостаточности иммунной системы и нормализации показателей иммунного статуса на фоне курсовой терапии позволяет сделать вывод о том, что лимфотропная герпетическая инфекция является одним из факторов, определяющих развитие недостаточности иммунной системы.

ЦИТОКИНЫ ПРИ ОСТРЫХ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТАХ ВИСУ ПОДРОСТКОВ

Шилова И.В., Горячева Л.Г.,

Железникова Г.Ф., Монахова Н.Е.

Научно-исследовательский институт детских инфекций М3 РФ, Санкт-Петербург, Россия

Внимание к проблеме вирусных гепатитов В и С у подростков объясняется отчетливым ростом заболеваемости в этой возрастной группе. По данным клиники вирусных гепатитов нашего института, заболевание у 64% подростков принимает первично-хроническое течение, редко проявляясь клинически, и обнаруживается при случайном обследовании. Многие исследователи связывают этот процесс с нарушением баланса между популяциями ТЫ и ТЬ2 и изменением выработки различных цитокинов.

Целью нашего исследования явилось изучение клини-ко-иммунопатогенетических особенностей течения острых вирусных гепатитов В и С в зависимости от исхода заболевания. Под наблюдением находилось 48 детей в возрасте от 11 до 16 лет, которые проходили лечение в клинике вирусных гепатитов и амбулаторно в поликлинике НИИ-ДИ. Из них 23 подростка переносили острый вирусный гепатит В (ОВГВ) и 25 - острый вирусный гепатит С

Группы п Исход п Т^ос 11.-8 1РМу 1Ь4 1РМу/ 11.-4 1дА

ОВГВ 11 Вызд. 8 240±144 389±145‘ 426±259 190±69* 2,2 1,7±0,1* 392±118*

Затяж. 3 92±60 78±46 10±10* 23±14 0,43 0,8±0,1* 31 ±0,5*

Р р<0,05 Р<0,05 р<0,001 р<0,001

ОВГС 13 Вызд. 4 10±6 325±43* 328±32* 15±42*# 21,8 . 1,6±0,2* 653±117*

Хрон. 9 57±15 61 ±15 56±23 169±65* 0,33 0,8±0,1* 173±87

р р<0,05 р<0,001 р*0,001 р<0,05 р<0,001 р<0,001

к 10 19±4 49±11 92±24 51 ±7 1,2±0,1 100±32

Примечания: К - здоровые дети; * - достоверные отличия (р<0,05) в сравнении с контрольной группой; # - между группами ОВГВ и ОВГС.

(ОВГС). Диагноз ставился на основании клинико-эпиде-миологических, анамнестических данных, результатов биохимического и вирусологического обследования. У 24 детей в острую фазу болезни проводились иммунологические исследования по определению сывороточных уровней И-8, таИа, ПТОу, 1Ь-4, ДО, ДО, ^М, ДО.

При ОВГВ исходом было выздоровление у абсолютного большинства больных, однако у 3 из 11 детей наблюдалась значительная задержка антителообразования, длительная (до 3 мес.) циркуляция HBeAg и HBsAg (до 1 года) в сыворотке. У этих детей наблюдался слабо выраженный ответ макрофагального звена, что видно по уровням продукции тара, 1Ь-8. Одновременно у них наблюдалось снижение уровня 1РЫу и 1Ь-4. Особенностью иммунного статуса этих детей было снижение уровня в крови ^А, ^Е. В группе выздоровевших отмечалось усиление выработки ТЫРсс, П.-8, 1РЫу, П.-4.

В отличие от ОВГВ в исходе ОВГС переход в хроническое течение имел место у 2/3 больных. В этой группе детей и в группе с затяжным течением ОВГВ иммунологические показатели были сходны. Одновременно у детей с исходом ОВГС в хроническую форму наблюдалось нарушение баланса ТЬ 1/ТЬ 2 при существенном преобладании 1Ь-4 над 1РЫу.

Сопоставление цитокинового статуса при благоприятном течении ОВГВ и ОВГС (с выздоровлением) показало следующую особенность иммунной системы при ОВГС - слабую активацию продукции Т№а и 1Ь-4.

Общим иммунологическим критерием прогноза неблагоприятного (затяжного или хронического) течения ОВГВ и ОВГС может быть нарушение баланса цитокинов ТЫ/ ТЬ2, относительно низкий уровень продукции ^А и ДО.

ВЛИЯНИЕ ЦИТАМИНА ЖЕЛУДКА НА ДИНАМИКУ БЕЛКОВ ОСТРОЙ ФАЗЫ ВОСПАЛЕНИЯ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ГАСТРОДУОДЕНИТАХУДЕГЕЙ

ШербакВ.А.. Аксенова Т.А., Щербак А.И.

Читинская государственная медицинская академия, Россия

Хронический гастродуоденит (ХГ) сопровождается гибелью клеток и воспалением в очаге поражения. Воспалительная реакция, являющаяся ответом на элиминацию поврежденных клеток, усиливает миграцию фагоцитов в пораженный участок и включает процессы репаративной регенерации. Одновременно фагоцитарные клетки стимулируют синтез белков-гликопротеидов в печени. Эти белки в норме содержатся в крови в значительно меньших количествах или же у здоровых людей не выявляются, а при воспалении появляются в виде вновь синтезирован-

ных белков. Эти две группы белков носят название белков острой фазы (БОФ). Различают положительные БОФ, уровень которых нарастает более чем на 25%, и отрицательные, концентрация которых снижается при тех же самых условиях (Витковский Ю.А., Федорова Т., 1999). Первую группу составляют церулоплазмин, фибриноген, СЗ-компонент комплемента, а]-антитрипсин, о^-кислый гликопротеин, гаптоглобин, С-реактивный белок, сывороточный амилоид Р и некоторые другие. К отрицательным БОФ относят альбумин, преальбумин, трансферрин, ли-попротеиды низкой и очень низкой плотности, кининоген, прекалликреин, ангиотензиноген (Кузник Б.И., 2001).

С целью оценки динамики различных групп острофазовых белков в процессе лечения обследовано 25 детей с ХГ в возрасте 10-15 лет. 12 больных (1 группа) находились на традиционном лечении, 13 детей (2 группа) в дополнении к обычному лечению получали пищевую добавку вентрамин (Институт биорегуляции и геронтологии, Санкт-Петербург. Гигиенический сертификат №72-ЦГС-1197 от 28 ноября 1996 г.). Вентрамин - биологически активная добавка к пище, полученная из слизистой желудка, относящаяся к классу ци-таминов. В настоящее время одним из перспективных направлений лечения является использование эндогенных межклеточных регуляторов - цитомединов, способных нормализовать функцию пораженного органа и восстановить защитные системы организма. Данные литературы свидетельствуют о том, что при патологии того или иного органа синтез цитомединов нарушен, что является одной из причин дисфункции этого органа. Поэтому применение цитаминов в терапии любого заболевания патогенетически обосновано.

До лечения обе группы по клиническим и биохимическим показателям не отличались. Выявлены повышение гаптоглобина до 82,6+0,9 мг/дл (р<0,001), церулоплазмина до 49,0±1,12 (р<0,05), макроглобулина 173,2±16,1 (р<0,01), аполипопротеина-А1 до 166,6±15,4 (р<0,05), С-реактивного белка (р<0,05). Одновременно происходило снижение преальбумина до 21,28±0,51 (р<0,05). Статистически значимых изменений СЗ- и С4-компонентов комплемента мы не выявили.

После лечения у детей 1 группы отмечалась только тенденция к восстановлению показателей БОФ, однако до нормы они не возвращались, что свидетельствует о сохраняющихся острофазовых нарушениях. У детей, получавших вентрамин, выявлена нормализация церулоплазмина, макроглобулина и преальбумина. При этом у детей 2 группы оставались умеренно повышенные показатели С-реактивного протеина и церулоплазмина.

Таким образом, при хронических гастродуоденитах выявлены значительные изменения содержания белков острой фазы; применение вентрамина позволяет лучше корригировать эти нарушения.

Табл. 1. ЭКСПРЕССИЯ FAS И FASL НА ЛИМФОЦИТАХ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ И БОЛЬНЫХ ГЛПС

Здоровые доноры

Острый период Реконвалесценция

Fas (CD95)+ лимфоциты, % FasL(CD178)+ лимфоциты, % 8,1 ±1,3 4,8 ±1,0 17,7 ±1,3* 14,5 ±1,0* 14,6 ±0,9* 9,3 ±0,8*#

* - различия статистически достоверны (р<0,05) в сравнении с группой здоровых доноров. * - различия статистически достоверны в сравнении с группой больных в остром периоде (р<0,05).

ЭКСПРЕССИЯ FAS (CD95), FASL (CD178) НА ЛИМФОЦИТАХ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ГЛПС

Юсупова P. III.. Ахматова Н.К.*,

Сибиряк С.В., Ямалов Р.Ф.*

Отдел иммунологии Всероссийского центра глазной и пластической хирургии М3 РФ, Уфа, Россия; *НИИВС им И.И. Мечникова, ГУП “Иммунопрепарат”, г. Уфа, Россия

Род хантавирусов (сем. Bunyaviridae) вызывает заболевание человека, обобщенно названное: геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС). Заболевание характеризуется лихорадкой, поражением почек, развитием геморрагического синдрома, в тяжелых случаях - ток-сико-инфекционным шоком, ДВС синдромом, острой почечной недостаточностью. Иммунологические нарушения и их роль в патогенезе ГЛПС мало изучены. В настоящем исследовании изучена динамика экспрессии Fas (CD95) и FasL (CD178) на лимфоцитах периферической крови у больных в остром периоде ГЛПС (5-9 дни заболевания) и периоде реконвалесценции (14-18 дни заболевания) в зависимости от вариантов тяжести клинического течения. Выявление Fas и FasL-экспрессирующих лимфоцитов в периферической крови осуществляли методом непрямого иммунофлюоресцентного окрашивания с использованием мышиных МКА против Fas (клон, DX-2, Caltag Lab., USA) и FasL (клон alf.2.1,Caltag Lab., USA). Результаты иллюстрирует таблица 1.

В остром периоде ГЛПС содержание СБ95-экспресси-рующих лимфоцитов более чем в 2 раза превышало нормальные значения, а фаза реконвалесценции характеризовалась снижением содержания CD95+ клеток, но нормализации показателя не наблюдалось. Содержание лимфоцитов, экспрессирующих FasL, в остром периоде заболевания также существенно нарастало. В фазе реконвалесценции наблюдалось более резкое снижение экспрессии FasL, нежели Fas. При проведении двухфакторного дисперсионного анализа выявлено влияние факторов вариантов тяжести и периодов клинического течения на содержание Fas+-H FasL+-лимфoцитoв, при этом коэффициенты влияния контролирующего фактора соответственно составили: 5а2 = 60 %, F = 23,7; р « 0,00001; ?в2 = 17 %, F = 7.63, р < 0,01 - для Раз+-лимфоцитов; ?А2 = 52,6 %, F = 37,4, Р « 0,00001; ?в2 = 23.6 %, F = 33.6, Р < 0,00002 -для FasL+-лимфоцитов. Тяжелые варианты острого клинического течения ГЛПС характеризовались максимальными значениями экспрессии Fas+ и FasL+ на лимфоцитах, а легкие формы заболевания, наоборот, наименьшими. В фазе реконвалесценции наблюдалась аналогичная тенденция: снижение количества Fas+ и FasL+ экспрессирующих клеток также четко зависело от тяжести заболевания. При тяжелых формах у реконвалесцентов эти показатели оста-

вались самыми высокими, а при легких - минимальными, практически приближаясь к норме. Полученные данные свидетельствуют об участии Рав/РазЁ-зависимого апоптоза в механизмах иммунорегуляции при ГЛПС и, возможно, лимитировании экспансии вируса в иммуно-компетентных клетках.

РЕАФЕРОН-ЕСЛИПИНТЛИПОСОМАЛЬНЫЙ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ГРИППА И ОРЗ

Ерофеева М.К.,Максакова В.Л., Колыванова И. Л., Николаева В.М., Колокольцов А.А.,

Шадрин А.С., Кисеоев О.И.

НИИ гриппа РАМН Санкт-Петербург, "Вектор-Медика "Кольцово

Рекомбинантный альфа-2 интерферон идентичен человеческому лейкоцитарному интерферону альфа-2, обладает противовирусной, иммуномодулирующей и интерфероногенной активностью. Пероральная форма ли-посомального препарата рекомбинантного альфа-2 интерферона - РЕАФЕРОН-ЕС ЛИПИНТ липосомаль-ный применяется в комплексной терапии гепатита В. Теоретические предпосылки и лабораторные исследования позволяют считать, что оригинальный отечественный препарат РЕАФЕРОН-ЕС ЛИПИНТ липосомаль-ный будет эффективен для профилактики и терапии гриппа и ОРЗ.

Целью исследования являлась оценка эффективности и переносимости препарата в профилактике гриппа и других ОРЗ у взрослых. Строго контролируемое эпидемиологическое наблюдение проведено в коллективе интернатного типа среди 612 мужчин 18-28 лет в марте -апреле 2002 г. Критерием оценки эффективности препарата являлось изучение заболеваемости гриппом и ОРЗ в сравниваемых группах за 4 недели приема препарата, и в течение месяца после курса, а также переносимость препарата.

РЕАФЕРОН-ЕС ЛИПИНТ липосомальный содержит интерферон а2-рекомбинантный (500 000 МЕ), нейтральный фосфолипид лецитин (75 мг), холестерин (10 мг), витамин Е (10 мг), витамин С (15 мг), сахарозу, хлориды, фосфаты. Лиофилизированный препарат восстанавливает структуру при добавлении воды. В качестве плацебо использовали препарат того же цвета, вкуса и массы. Схема применения препаратов предусматривала 4 семидневных цикла приема по понедельникам и четвергам, по 500 000 МЕ за 30 минут до еды, всего на курс 4 000 000 МЕ. Плацебо получали с той же кратностью и периодичностью.

В Санкт-Петербурге в 2002 г. регистрировались локальные вспышки гриппа и ОРЗ. Результаты се-

рологической лабораторной диагностики в наблюдаемом коллективе свидетельствовали о вирусной природе заболеваний. Профилактический прием препарата обеспечил достоверное снижение заболеваемости ОРЗ в основной группе: ИЭ - 2,2, КЭ - 54 %. За весь период наблюдения ИЭ ~ 1,8; КЭ - 44 %. У принимавших препарат отмечалось более легкое течение заболеваний, число осложнений было меньше в 1,6

раза. Побочные и аллергические реакции отсутствовали.

Хорошая переносимость, отсутствие побочных и аллергических реакций, выраженная эффективность испытуемого препарата РЕАФЕРОН-ЕС ЛИПИНТ липосо-мальный позволяет рекомендовать его для профилактики гриппа и ОРЗ в период эпидемического или сезонного повышения заболеваемости.