Выявление ложной HLA идентичности в реакции MLC при генотипическом подборе доноров костного мозга

Приложение

терапию ТКИ, в отличие от пациентов резистентных к этой клеток, экспрессирующих белок Ki-67, что свидетельствует о

терапии, в крови уменьшалось количество гемопоэтических снижении их пролиферативной активности.

Выявление ложной HLA идентичности в реакции MLC при генотипическом подборе доноров костного мозга

А.П. Шпакова, Т.И. Булычева, Л.Л. Головкина, Р.М. Кутьина, Б.Б. Хасигова, Т.Д. Пушкина, Л.С. Любимова, Л.А. Кузьмина ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития России, Москва

Введение. В работе представлены результаты по обнаружению в реакции смешанной культуры лимфоцитов - MLC "ложной HLA идентичности" донора (D) и реципиента (R) по негенотипированным в PCR генам и аллелям локусов HLA при подборе доноров сибсов для трансплантации костного мозга (ТКМ).

Материалы и методы. Подбор осуществляли с помощью HLA-генотипирования в реакции PCR-MSSP методом (реактивы "ДНК технология") локуса DRB1 по низкому разрешению, DQB1 по высокому разрешению и определения совместимости D и R в реакции MLC по включению 3Н-тимидина в пролиферирующие лимфоциты. За отсутствие пролиферативного ответа (ПО) принимали RR (Relative Response) < 15%. При выявлении HLA геноидентичности, но при наличии пролиферативного ответа в MLC проводили генотипирование всех имеющихся сибсов и родителей в семьях. При этом дополнительно типировали PCR-SSP методом (реактивы "Protrans") по высокому разрешению локусы DRB1, DQA1 и DPB1. Подбор осуществлен 230 больным с гематологическими заболеваниями с их 243 сибсами.

Результаты и обсуждение. Из всех обследованных больных 3 реципиента оказались несовместимыми в реакции MLC с их 7-ю HLA-DRB1, -DQB1 идентичными D: 5 D были гаплоидентичными и 2 D - HLA-неидентичными по двум С6 хромосомам с R. В семье Я. при генотипировании была определена HLA-идентичность D и R на аллельном уровне по всем трем локусам: DRB1, DQA1 и DQB1, однако в реакции MLC имелся пролиферативный ответ, который составил: R vs D = 26,4% и D vs R = 36,2%. Как оказалось, ПО был вызван различиями гаплоидентичного D с R всего по одному гену нетипированного локуса DPB1. В семье А. была выявлена идентичность двух D с R по двум генам DRB1 и двум аллелям DQB1, но пролиферативный ответ в

MLC составил: R vs D1 = 65,1%, D1 vs R = 42,1%; R vs D2 = 68,5% , D2 vs R = 55,1%. ПО был вызван в этом случае различиями гаплоидентичных доноров с R по одному аллелю DRB1, одному аллелю DQA1 и одному гену DPB1. В семье Г. была определена идентичность D1 и D2 с R по двум генам DRB1 и по двум аллелям DQB1, однако в MLC наблюдали следующий результат: R vs D1 = 63,1%, R vs D2 = 14,2%, D1 vs R = 22,3%; D2 vs R = 28,6%, ПО был вызван отличиями гаплоидентичных D1 и D2 с R по одному аллелю DRB1 и одному гену DPB1 различающихся материнских хромосом. У D3 и D4 этой семьи была определена идентичность c R по двум генам DRB1 и по двум генам DQB1, однако в MLC наблюдали следующий результат: R vs D3 = 23,6%, R vs D4 = 9,5%, D3 vs R = 17,4%; D4 vs R = 22,1%, По при этом был вызван отзличиями HLA генотипически неидентичных D3 и D4 с R по одному аллелю DRB1 и одному гену DPB1 различающихся материнских хромосом и по одному аллелю DQB1 различающихся отцовских хромосом. Причиной изначально "ложной HLA идентичности" гаплоидентичных сибсов с больными по HLA класса II различающихся хромосом С6 в семьях Я., А. и Г. оказалась гомозиготность генов и аллелей HLA класса II гомологичных хромосом С6 одного из родителей сибсов. Особенно интересным оказалось, что причиной "ложной HLA идентичности" по HLA класса II HLA неидентичных D3 и D4 в семье Г. оказалась гомозиготность генов и аллелей HLA класса II гомологичных хромосом С6 обоих родителей.

Заключение. Проведенные исследования свидетельствуют о зависимости пролиферативного ответа в MLC от генетической неидентичности пары донор - реципиент по HLA класса II, что указывает на информативность реакции MLC и на необходимость включения ее в комплекс методов при подборе HLA-идентичного донора.

Инфекции мочевыводящих путей в отделении реанимации гематологического стационара

Е.М. Шулутко, Т.Е. Глухова, К.В. Яцков, И.Н. Шлыкова ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития России, Москва

Введение. Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) занимают второе место среди всех нозокомиальных инфекций у пациентов отделений интенсивной терапии. Они, хотя и не часто, могут приводить к уросепсису, что ведет к повышению летальности. 95% случаев ИМП наблюдаются у пациентов с длительной катетеризацией мочевого пузыря. Одним из критериев ИМП, наряду с другими клиническими и лабораторными данными, является клинически значимая бакте-риурия (> 103). Учитывая, что другие клинические критерии, такие как лихорадка, дизурия и им подобные неспецифичны для ИМП или их оценка затруднена в условиях отделения реанимации гематологического профиля, клинически значимая бактериурия (БУ) представляется наиболее значимым критерием в диагностике ИМП. Цель исследования - оценка частоты, этиологии и факторов риска развития клинически значимой бактериурии в отделении реанимации гематологического профиля.

Материалы и методы. Ретроспективный анализ результатов микробилогического исследования мочи пациентов, находившихся на лечении в отделении анестезиологии и реаниматологии (ОАР) Гематологического научного

центра в период с 01.01.2009 по 01.10.2011. В исследовании включены пациенты, наблюдавшиеся в ОАР 7 и более суток, которым была выполнена длительная катетеризация мочевого пузыря и сделан хотя бы один микробиологический анализ мочи. По данным критериям мы отобрали 76 пациентов (38 мужчин и 38 женщин), средний возраст - 55 лет (от 18 до 88 лет), средняя продолжительность пребывания в ОАР - 30 дней.

Результаты и обсуждение. Данным пациентам был выполнен 171 микробиологический анализ мочи, при этом культура микроорганизмов получена в 43 посевах (25,1%), не получена - в 128 (74,9%). В положительных посевах преобладали грибы рода Candida (26 посевов - 60,5% от положительных посевов), из них Candida albicans - 30,7%, Candida non-albicans - 53,7%. В 4 посевах вид не определяли (15,6%). Далее по распространенности следуют грам-положительные бактерии (24 посева - 55,8%). Среди них преобладают Enterococcus spp. - 46,5%, при этом в одном случае выявлен ванкомицин-резистентный штамм. Реже грамположительная микрофлора представлена Staphylococcus spp. - 9,3%. Грамотрицательные бактерии выявлены

147