БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ФАКТОРЫ ВИРУЛЕНТНОСТИ И ВАРИАНТЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Способ повышения продукции интересующего полипептида, где способ предусматривает:
a) наличие патогенных клеток А/Е, содержащих рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA,
b) экспрессию полипептида Orf11/GrlA, кодируемого рекомбинантной молекулой нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA, и
c) выращивание патогенных клеток А/Е в условиях, благоприятных для продукции интересующего полипептида, где продукция интересующего полипептида повышается по сравнению с патогенными клетками А/Е, которые не содержат рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA.
2. Способ по п.1, где рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA является гетерологичной.
3. Способ по п.1, где рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA не является гетерологичной.
4. Способ по п.1, где рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA получена из энтерогеморрагической E.coli (ЕНЕС), энтеропатогенной E.coli (EPEC) или Citrobacter rodentium.
5. Способ по п.1, где рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA по существу идентична последовательности L0043 с номером доступа No.AF071034.
6. Способ по п.1, где полипептид Orf11/GrlA кодируется молекулой нуклеиновой кислоты по существу идентичной последовательности L0043 с номером доступа No.AF071034.
7. Способ по п.1, где рекомбинантный полипептид Orf11/GrlA по существу идентичен последовательности SEQ ID NO: 56.
8. Способ по любому из пп.1-7, где повышение продукции дополнительно предусматривает повышение секреции интересующего полипептида.
9. Способ по любому из пп.1-7, где условия, благоприятные для продукции интересующего полипептида, представляют собой условия, которые являются благоприятными для секреции антигенов типа III.
3
10. Способ по п.9, где условия, благоприятные для секреции антигенов типа III, включают культивирование патогенных клеток А/Е в среде для клеточной культуры, содержащей минимальную среду с добавлением около 20-100 мМ NaHCO.
4
11. Способ по п.10, где минимальная среда дополнена MgSO, составляющей около 5-10 мМ, глюкозой, составляющей около 0,1-1,5%, и аминокислотами, составляющими около 0,05-5%.
2
12. Способ по п.9, где указанные условия, благоприятные для секреции антигенов типа III, включают культивирование патогенных клеток А/Е в присутствии СО, в количестве около 2-10%, при температуре около 37°С.
13. Способ по п.9, где указанные условия, благоприятные для секреции антигенов типа III, включают культивирование патогенных клеток А/Е с оптической плотностью (OD), равной около 0,7-0,8 при 600 нм.
3
4
14. Способ по п.9, где указанные условия, благоприятные для секреции антигенов типа III, включают культивирование патогенных клеток А/Е в среде для клеточной культуры, содержащей минимальную среду с добавлением около 20-100 мМ NaHCO, около 5-10 мМ MgSO, около 0,1-1,5% глюкозы и около 0,05-0,5% казаминовых кислот.
3
4
15. Способ по п.9, где указанные условия, благоприятные для секреции антигенов типа III, включают культивирование патогенных клеток А/Е в среде для клеточной культуры, содержащей минимальную среду с добавлением около 44 мМ NaHCO, около 0,8-8 мМ MgSO, около 0,4% глюкозы и около 0,1% казаминовых кислот.
16. Способ по п.9, дополнительно включающий отделение супернатанта клеточной культуры от патогенных клеток А/Е, содержащего рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA.
17. Способ по п.9, где интересующий полипептид является секретируемым полипептидом.
18. Способ по п.9, где интересующий полипептид является антигеном типа III.
19. Способ по п.9, где интересующий полипептид выбран из одного или нескольких полипептидов группы, состоящей из NleA, NleB, NleC, NleD, NleE, NleF, NleG, NleH, Tir, EspA, EspB, EspD, EspF, EspG, EspH и Map.
20. Способ по п.9, где патогенная клетка А/Е представляет собой энтерогемаррогическую E.coli (ЕНЕС), энтеропатогенную E.coli (ЕРЕС) или клетку Citrobacter rodentium.
21. Патоген А/Е, содержащий рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты GrlA.
22. Патоген А/Е по п.18, где патоген А/Е представляет собой энтерогеморрагическую E.coli (ЕНЕС), энтеропатогенную E.coli (ЕРЕС) или Citrobacter rodentium.
23. Способ для повышения продукции интересующего полипептида, где способ включает:
a) введение рекомбинантной молекулы нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA в патогенную клетку А/Е,
b) экспрессию полипептида Orf11/GrlA, кодируемого рекомбинантной молекулой нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA, и
c) выращивание патогенной клетки А/Е в условиях, благоприятных для продукции интересующего полипептида, где продукция интересующего полипептида повышается по сравнению с патогенной клеткой А/Е, которая не содержит рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты Orf11/GrlA.