ПОЛИНУКЛЕОТИДЫ, КОДИРУЮЩИЕ ИНТЕРЛЕЙКИН-12 (IL12), И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Липидная наночастица (LNP), включающая матричную РНК (мРНК), кодирующую человеческий полипептид IL-12, где указанная мРНК включает открытую рамку считывания ("ORF"), кодирующую человеческий полипептид IL12B, слитый непосредственно или с помощью линкера с человеческим полипептидом IL12A, где указанная липидная наночастица включает (i) молярное отношение 40-60% ионизируемого аминолипида, 8-16% фосфолипида, 30-45% стерина и 1-5% ПЭГ-модифицированного липида; или (ii) молярное отношение 45-65% ионизируемого аминолипида, 5-10% фосфолипида, 25-40% стерина и 0,5-5% ПЭГ-модифицированного липида.
2. Липидная наночастица по п. 1, где человеческий полипептид IL12B включает аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 23-328 из SEQ ID NO: 48.
3. Липидная наночастица по п. 1 или 2, где человеческий полипептид IL12A включает аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 336-532 из SEQ ID NO: 48.
4. Липидная наночастица (LNP), включающая матричную РНК (мРНК), содержащую открытую рамку считывания (ORF), кодирующую слитый белок, содержащий человеческий полипептид IL12B, слитый непосредственно или с помощью линкера с полипептидом IL12A человека, где полипептид IL12B включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, где полипептид IL12A включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, и где LNP включает ионизируемый аминолипид; фосфолипид; стерин; и ПЭГ-модифицированный липид.
5. Липидная наночастица по п. 4, где липидная наночастица имеет молярное отношение примерно 20-60% ионизируемого аминолипида: 5-25% фосфолипида: 25-55% стерина; и 0,5-15% ПЭГ-модифицированного липида.
6. Липидная наночастица по любому из пп. 1-5, где полипептид IL12B функционально связан с полипептидом IL12A пептидным линкером.
7. Липидная наночастица по любому из пп. 1-6, где полипептид IL12B расположен на 5'-конце полипептида IL12A или пептидного линкера.
8. Липидная наночастица по любому из пп. 1-6, где полипептид IL12A расположен на 5'-конце полипептида IL12B или пептидного линкера.
9. Липидная наночастица по любому из пп. 1-8, где пептидный линкер включает линкер Gly/Ser.
10. Липидная наночастица по п.9, где Gly/Ser линкер включает (GnS)m, где n является 1, 2 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 или 20, и m является 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 или 20.
11. Липидная наночастица по п. 10, отличающаяся тем, что линкер Gly/Ser включает (GnS)m, n является 6, и m является 1.
12. Липидная наночастица по любому из пп. 1-11, где ORF кодирует сигнальный пептид.
13. Липидная наночастица по п. 12, где сигнальный пептид является человеческим сигнальным пептидом IL12B.
14. Липидная наночастица по п. 13, где человеческий сигнальный пептид IL12B включает аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 1-22 из SEQ ID NO: 48.
15. Липидная наночастица по любому из пп. 1-14, где человеческий полипептид IL12 включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 48.
16. Липидная наночастица по любому из пп. 1-15, где мРНК включает участок связывания мкРНК.
17. Липидная наночастица по п. 16, где участок связывания мкРНК является участком связывания miR-122.
18. Липидная наночастица по п. 17, где участок связывания мкРНК является участком связывания miR-122-3p или miR-122-5p.
19. Липидная наночастица по п. 18, где участок связывания мкРНК является участком связывания miR-122-5p, включающим последовательность, представленную в SEQ ID NO: 54.
20. Липидная наночастица по любому из пп. 1-19, где мРНК включает 3'-UTR.
21. Липидная наночастица по п. 20, где 3'-UTR включают последовательность, представленную в SEQ ID NO: 240.
22. Липидная наночастица по п. 20 или 21, где участок связывания мкРНК расположен в 3'-UTR.
23. Липидная наночастица по п. 22, где мРНК включает 5'-UTR.
24. Липидная наночастица по п. 23, где 5'-UTR включают последовательность, представленную в SEQ ID NO: 39.
25. Липидная наночастица по любому из пп. 1-24, где мРНК включает 5'-концевую кэп-структуру.
26. Липидная наночастица по п. 25, где 5'-концевой кэп-структурой является Cap0, Cap1, ARCA, инозин, N1-метил-гуанозин, 2′фтор-гуанозин, 7-деаза-гуанозин, 8-оксо-гуанозин, 2-амино-гуанозин, LNA-гуанозин, 2-азидогуанозин, Cap2, Cap4, 5'-метилG-кэп или их аналог.
27. Липидная наночастица по любому из пп. 1-26, где мРНК включает 3'-полиA-хвост.
28. Липидная наночастица по п. 1, где мРНК включает последовательность, представленную в SEQ ID NO:6.
29. Липидная наночастица по п. 1, где мРНК включает нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична SEQ ID NO: 236 или 237 или включает нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 236 или 237.
30. Липидная наночастица по любому из пп. 1-29, где мРНК включает по меньшей мере один модифицированный нуклеозид.
31. Липидная наночастица по п. 30, где по меньшей мере один химически модифицированный нуклеозид выбран из группы, состоящей из псевдоуридина, N1-метилпсевдоуридина, 5-метилцитозина, 5-метоксиуридина и их комбинации.
32. Липидная наночастица по п. 31, где по меньшей мере один химически модифицированный нуклеозид является N1-метилпсевдоуридином.
33. Липидная наночастица по любому из п. 31, в которой мРНК полностью модифицирована химически модифицированными уридинами.
34. Липидная наночастица по любому из пп. 1-33, где ионизируемый аминолипид является Cоединением 18.