СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОКСВИРУСОВ И КОМПОЗИЦИИ ПОКСВИРУСОВ

1. Способ получения дикого типа, аттенуированного и/или рекомбинантного поксвируса, без выявленной инфекционной специфичности, который включает следующие этапы:
a) приготовление культуры клеток с дефектом упаковки нуклеотидных последовательностей,
b) инфицирование указанной культуры клеток, для получения инфицированных клеток,
c) культивирование указанных инфицированных клеток в течение соответствующего промежутка времени для получения поксвирусных частиц,
d) выделение EEV и IMV продуцированных поксвирусных частиц из культурального супернатанта и клеток с дефектом упаковки нуклеотидных последовательностей, для получения смеси поксвирусных частиц,
e) этап очистки этой смеси поксвирусных частиц, который позволяет освободить ее от клеточных остатков, причем указанный этап очистки является этапом глубинной фильтрации, для получения очищенной смеси поксвирусных частиц,
f) этап концентрирования указанной очищенной смеси поксирусных частиц, причем указанный этап концентрирования является этапом микрофильтрации для получения концентрированной смеси поксвирусных частиц, и
g) этап диафильтрации,
при этом указанный способ является свободным от продуктов животного происхождения.
2. Способ по п.1, в котором указанные клетки с дефектом упаковки нуклеотидных последовательностей представлены CEF.
3. Способ по п.1 или 2, в котором этап с) длится от двух до четырех дней.
4. Способ по п.1 или 2, в котором этап d) включает разрушение указанной клетки с дефектом упаковки нуклеотидных последовательностей при использовании гомогенизатора высокой скорости.
5. Способ по п.1 или 2, в котором не используется какая-либо нуклеаза и, более конкретно, в котором не используется какая-либо бензоаза.
6. Способ по п.1 или 2, в котором смесь поксовирусных частиц, полученная с помощью указанного способа, включает EEV и IMV с содержанием EEV более чем 1%.
7. Способ по п.1 или 2, дополнительно включающий этап смены буфера, используемого в способе очистки, в частности на этапе g), фармацевтически приемлемым буфером.
8. Способ по п.7, при котором указанный этап осуществляют с помощью тангенциальной фильтрации.
9. Применение рекомбинантного поксвируса, полученного с помощью способа по любому из пп.1-8, для приготовления лекарственного средства.
10. Применение по п.9 для терапевтического или профилактического лечения рака.
11. Применение по п.9 для терапевтического или профилактического лечения инфекционных болезней.