Иммунокоррекция

Медицинская Иммунология 2004, Т. 6, №3-5 © 2004, СПб РО РААКИ

ИММУНОКОРРЕКЦИЯ

ПОВЫШЕНИЕ УРОВНЯ И-8 В КРОВИ КАК ПОКАЗАТЕЛЬ И ПРИЧИНА РАЗВИТИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАРОДОНТА

Алексеева Е.С.

СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Провоспалительные цитокины играют важную роль при развитии воспалительных процессов.

Целью представляемой работы было выявление связи уровня 1Ь-8 в крови с развитием хронических воспалительных заболеваний пародонта.

В динамике было обследовано 125 больных с ВЗП, из которых у 80 был диагностирован хронический генерализованный катаральный гингивит (ХГКГ) и у 45 - хронический генерализованный пародонтит (ХГП).

Больные подвергались лечению по общепринятой методике, 25% из них получала дополнительное лечение с применением противовирусного, интерферогенного иммунотропного препарата «Полирем». У больных изучали стоматологические индексы, характеризующие состояние пародонта. В сыворотке крови определяли уровень 11^-8 с использованием тест-системы для иммуно-ферментного анализа (ТОО «Цитокин», Санкт-Петербург, 1998).

Было установлено, что до лечения у больных ХГКГ уровень 1Ь-8 составляет в среднем 1,28±0,03 пг/мл. У больных ХГП - 2,5+0,04 пг/мл, что в 3-5 раз превышает контрольные цифры.

В результате лечения с применением «Полирема» уровень 1Ь-8 снижался при ХГКГ до 0,58±0,02 пг/мл, при ХГП

- до 0,7±0,05. Лечение без «Полирема» обеспечивало снижение уровня 1Ь-8 до 0,7±0,03 и 0,9±0,03 пг/мл, соответственно.

Показатели уровня 1Ь-8 достоверно коррелировали с состоянием пародонта: при низком уровне 1Ь-8 нулевые значения папилло-маргипально-альвеолярного индекса (ПМА) отмечены у 89,7% обследованных, высокие показатели (более 25) не обнаружены. При высоком содержании 1Ь-8 нулевые значения ПМА зарегистрированы в 20,6%, высокие - в 54,0%.

Показателями высокой стойкости капилляров десны при низкой активности 1Ь-8 обладали 86,4% обследованных, при высокой активности - лишь 15,0%.

Уровень 1Ь-8 может быть использован как показатель дифференцировки ХГКГ и ХГП. До начала лечения при уровне 1Ь-8 до 1 пг/мл все обследованные имели клинический диагноз ХГКГ, при уровне 1,3 пг/мл и выше -ХГП.

Повышенная продукция провоспалительного цитоки-на 1Ь-8 является одним из факторов патогенеза воспалительных заболеваний пародонта, поэтому с целью снижения данного фактора риска следует рекомендовать использование препарата «Полирем».

ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА

Барышников А.Ю.

НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей ГУ Российский онкологический научный центр им. H. Н. Блохина РАМН, Москва, Россия

Моноклональные антитела (МКА) используются в диагностике различных заболеваний, в том числе и онкологических. Однако в последнее время их стали применять в терапии злокачественных заболеваний в качестве таргентной терапии, т.е. терапии, направленной на определенные мишени. Такие МКА или блокируют поверхностные клеточные рецепторы, прерывают пути передачи сигналов, или индуцируют апоптоз. На основе двух МКА ICO-90 и ICO-25, полученных в Онкоцентре, разработаны совместно с другими учреждениями терапевтические МКА. МКА АТЕМА, созданные на основе МКА ICO-90, направлены против антигена CD3 Т-лимфоцитов человека. Соединяясь с комплексом CD3/TcR на поверхности активированных Т-клеток, МКА индуцируют апоптоз. АТЕМА создана для купирования острой реакции отторжения трансплантатов. Препарат АТЕМА успешно проходит II фазу клинических испытаний в клиниках Москвы при остром отторжении трансплантата почки. Терапевтические МКА ИМУТЕРАН разработаны на основе МКА ICO-25, направленных против MUC-1 антигена. Эти МКА успешно проходят II фазу клинических испытаний. В лекции будут представлены данные о зарубежных и отечественных терапевтических МКА и перспективы их использования.

КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ И ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРИМЕНЕНИЯ РОНКОЛЕЙКИНА ПРИ КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ТЯЖЕЛООБОЖЖЕННЫХ.

Бекмуратов А.Я.1. Саввулиди Ф.Г.2,

Тлеулиева Р.Т.2, Беляев H.H.2

1Городская клиническая больница № 4, Институт молекулярной биологии и биохимии, Алматы, Казахстан

Ожоги являются одним из самых распространенных травматических поражений. Известно, что при термической травме наблюдаются существенные сдвиги в иммунном статусе пострадавших, что влечет за собой зачастую инфекционные осложнения ожоговой болезни, такие как сепсис, пневмония и другие. В этой связи, использование современных иммуномодуляторов при лечении тяжелых ожогов представляется очень перспективным. Нами начато изучение эффективности применения рекомбинантного IL-2 (Ронколейкина) у больных с обширными ожогами.

Ронколейкин включали в комплексную терапию 21 больного (14 мужчин и 7 женщин) с ожогами от 8 до 60% поверхности тела при площади глубокого поражения от 5

до 50% поверхности тела. Ронколейкин вводили внутривенно капельно в дозе 500 тыс. ME трижды через каждые 2 дня. Иммунологические показатели оценивали у 10 больных до лечения и после последнего введения Ронколейкина. В качестве контроля использовали кровь 8 здоровых доноров. Активность Т- и В-клеток оценивали в тесте бластной трансформации лимфоцитов мононуклеарной фракции периферической крови, выделенной на градиенте фикол-верогра-фина, стимулированных ФГА или ЛПС. Продукцию IL-2 Т-лимфоцитами оценивали в тесте индукции мононуклеа-ров ФГА с помощью ИФА (Протеиновый контур, С.-Петербург). Продукцию IL-1 моноцитами/макрофагами периферической крови, выделенными адгезией на пластике из мононуклеарной фракции, определяли с помощью биологического метода в тесте костимуляции тимоцитов молодых мышей. Содержание TNF-a в периферической крови определяли с помощью ИФА (Протеиновый контур).

В процессе лечения Ропколейкином клинически достоверно улучшилось состояние рай, что позволило успешно оперативно восстановить кожный покров. В период острой ожоговой токсемии клиническая эффективность Ронколей-кипа оценена, как хорошая или удовлетворительная у 100% больных. В период септикотоксемии применение препарата дало хороший и удовлетворительный клинический результат в 45,5 и 54,5% случаев соответственно. Активность Т- и В-клеток, по нашим данным, у ожоговых больных в среднем не отличалась от здоровых доноров и не изменялась в ходе лечения. Уровень TNF-a у больных также не отличался от контроля. Продукция IL-1 моноцитами была в среднем несколько понижена, по по критерию Стъюдента пе отличалась от контроля. Однако прослеживалось деление больных на две группы: (1) больные, у которых исходный средний уровень продукции IL-1 был выше, чем в контроле на 20%, (2) больные, у которых исходный средний уровень IL-1 был ниже, чем в контроле на 30%. В обоих группах после лечения уровень продукции IL-1 возвращался к норме. Уровень продукции IL-2 у больных до лечения был существенно ниже (32,8±10,0 пг/мл), чем в контроле (81,0±6,1 пг/мл). После лечения он возвращался к норме (85,9±10,8 пг/мл).

Таким образом, Ронколейкин показал высокую клиническую эффективность при лечении ожоговых больных в тяжелой форме. Препарат хорошо переносился больными. Наибольший клинический эффект наблюдался после второй инфузии. Наиболее поврежденным звеном иммунной системы оказалась способность Т-лимфоцитов к продукции IL-2. После лечения Ропколейкином в комплексе с традиционными методами эта функция полностью восстанавливалась.

ВЛИЯНИЕ САПОНИНСОДЕРЖАЩЕГО ЭКСТРАКТА SAPONARIA OFFICINALIS НА ИММУНОГЕННОСТЬ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ ВИРУСА ГЕПАТИТА С

Богоявленский А.П.. Березин В.Э., Прилипов А.Г.*, Толмачева В.П., Худякова С.С., Махмудова Н.Р., Тустикбаева Г.Б., Левандовская С.В.,

Ермакова О., Омиртаева Э.

Институт микробиологии и вирусологии,

Алматы, Казахстан;

Институт вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН, Москва, Россия *

Иммуногепность белков, как правило, зависит от их пространственной организации. Особое значение приобретает использование рекомбинантных белков, синтезированных под контролем регуляторных элементов прокариотической

клетки продуцента, не способных синтезировать гликозид-ные элементы амфифильных белков в качестве антигенов.

В наших экспериментах проводилось изучение влияния сапонинсодержащего экстракта Saponaria officinalis на им-муногенность рекомбинантных белков вируса гепатита С Е1 и Е2. Надмолекулярные комплексы вирусных антигенов и сапонинсодержащего экстракта были сформированы ступенчатым экстенсивным диализом при переводе белков из раствора мочевины в раствор детергента МЭСК с последующим удалением поверхностно-активного вещества.

В ходе экспериментов было показано, что использование санонинсодержащего экстракта позволяет стимулировать образование специфических иммуноглобулинов различных подклассов. Кроме того, установлено увеличение количества INF-y, IL-2, IL-4, IL-10.

Таким образом, использование сапонинсодержащего экстракта Saponaria officinalis способно стимулировать образование гуморального и клеточного иммунитета к рекомбинантным белкам вируса гепатита С.

ПРИМЕНЕНИЕ ГАЛАВИТА У БОЛЬНЫХ С ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫМИ ГНОЙНОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ОСЛОЖНЕНИЯМИ

Бунятян К .А.. Винницкий Л.И., Инвиянева Е.В.

Российский научный центр хирургии РАМН,

Москва, Россия

Уже является доказанным необходимость применения иммунокорригирующих препаратов в комплексном лечении различных заболеваний при выявленной вторичной иммунной недостаточности.

Целью настоящего исследования явилась оценка эффективности и безопасности применения отечественного иммунокорректора галавит при лечении ранних послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений у хирургических больных.

В исследование были включены 95 хирургических больных с заболеваниями сердца, сосудов, легких, трахеи, органов брюшной полости, а также посттравматическим остеомиелитом конечностей, у которых развились ранние послеоперационные гнойно-воспалительные осложнения, такие как трахеобронхит, пневмония, медиастенит, панкреонекроз, перитонит, нагноение послеоперационной рапы. У всех больных была выявлена вторичная иммунная недостаточность, комбинированный тип нарушений (по классификации ВОЗ).

Все больные данной группы получали галавит внутримышечно 0,1 г через день курсом 15-20 инъекций на фоне общепринятой антибактериальной и симптоматической терапии. Контрольную группу составили 20 больных с различной хирургической патологией (идентичной по нозологиям основным группам больных) с гнойно-воспалительными послеоперационными осложнениями, получавших стандартную общепринятую терапию без применения иммунокорригирующих препаратов.

Для исследования иммунного статуса использовали метод проточной лазерной питометрии fia приборе FACScan фирмы «Becton Dickinson» (США) с использованием моноклональных антител производства НПЦ «Сорбент» (Россия) к дифференцировочным и активационным маркерам, меченным FITC. Уровень иммуноглобулинов трех основных классов IgA, IgMJgG определяли методом радиальной иммунодиффузии с помощью иммунодиффузионных планшетов производства «РЕАФАРМ», Москва. Фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН) определяли с использовани-

ем меченного FITC стафилококком на проточном цитометре. Концентрацию IL-6 и TNF определяли, используя набор для иммуноферментного анализа фирмы «Cytimmune» (США).

После курса галавита отмечали восстановление СБ4+лимфоцитов с 32+2,5 до 41,1 ± 19%, CD8+ лимфоцитов с 12,8± 1,7 до 18,5±2,2% и ФАН с 58,7±3,1 до 72±2,6%. Снижение концентрации IL-6 (с 31,1+4,5 до 5,5±1,4 пг/ мл) и TNF-a (с 10,4±1,2 до 6,5±0,8 пг/мл) подтверждало иммуномодулирующий и противовоспалительный эффект галавита. В контрольной группе перечисленные выше измененные показатели к выписке не восстанавливались. Течение послеоперационных гнойно-воспали-тельных осложнений в данной группе оказалось длительным, долго сохранялись повышенная температура и явления интоксикации организма. В основной группе отмечено улучшение общего состояния больных, ранняя нормализация температуры, быстрое и эффективное очищение и гранулирование послеоперационных ран, разрешение трахеобронхитов и пневмоний, что приводило к сокращению пребывания больных в стационаре. Таким образом, включение галавита в комплексное лечение ранних послеоперационных осложнений оказывает положительный клинический эффект у хирургических больных.

ВЛИЯНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ПРЕПАРАТОВ НА ПРОЦЕССЫ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ ПРИ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ У ДЕТЕЙ, ИНФИЦИРОВАННЫХ ГЕРПЕСВИРУСАМИ

Вершинина Е.Н.. Иванова В.В., Говорова Л.В.

НИИ детских инфекций М3 России, Санкт-Петербург, Россия

Инфицирование гернесвирусами оказывает существенное влияние на становление иммунной системы ре-

бёнка на первом году жизни, определяя его восприимчивость к вирусам респираторной группы. Известно, что реализация лимфоцитами функций иммунной защиты находится в прямой зависимости от структурного и функционального состояния биологических мембран, в том числе от интенсивности процессов свободнорадикального окисления (СРО).

Целью проводимого исследования являлось определение вариантов метаболического ответа при респираторных заболеваниях у детей, инфицированных герпесвиру-сами, и разработка иммуномодулирующей терапии.

У 130 детей в возрасте от 1 мес. до 3 лет, больных ОРВИ, диагностировали герпесвирусную инфекцию (ВПГ, ЦМВИ, ВЭБ). Исследование интенсивности процессов СРО в лимфоцитах осуществляли методом хеми-люминесценции (Флюорат АВЛФ-02).

Инфицирование герпесвирусами установлено в 77,6% случаев. Из них моногерпетическая инфекция - 33,5%, смешанная - 44,1%. Среди больных ОРВИ с герпесвирусной инфекцией интенсивность СРО была различной: у 53% детей -низкая (менее 60 имп х 10'3), у 9%-нормаль-ная (от 60 до 99 имп х 10'3), у 27%-высокая (от 100 до 300 имп х 10“3), у 11%-сверхвысокая (более 300 имп х 10'3). "

Детям с диагностированной герпесвирусной инфекцией назначали иммуномодуляторы: виферон (ВФ)-ЗЗ чел. и циклоферон (ЦФ)-ЗО чел.; контрольную группу составили дети, получающие только базисную теранию-41 чел.. У детей с разным уровнем СРО, получавших ЦФ, с 1-3 дней отмечали нормализацию температуры тела, купирование симптомов интоксикации и катарального синдрома.

Циклоферон оказывал регулирующий эффект: активация СРО в лимфоцитах детей с изначально низким уровнем СРО и снижение СРО у детей с изначально высоким уровнем (табл.).

Проведенные нами исследования показали достоверное модулирующее (про- и ангиоксидантное) действие препарата циклоферон на процессы СРО в лимфоцитах, что дополняет его иммунокорригирующую направленность.

ТАБЛИЦА. ПОКАЗАТЕЛИ СУММАРНОЙ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ

Иммуномодулятор Интенсивность суммарной ХЛ

<60 имп х 103 >100 имп хЮ'3

1 исслед. 2 исслед. 1 исслед. 2 исслед.

Виферон 45,5±7,4 72,7+31,6 214144,5 151,3125,9

Циклоферон 32,1 ±10,1 127138* 256,3±43,9 62,2137*

Контроль 35,6+10,1 56,3±22,3 214,1±26,2 140160

* - р <0,05 по сравнению с острым периодом

ДИНАМИКА НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА В РЕЗУЛЬТАТЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ИНФРАКРАСНОГО ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ

Галкина О.В., Нестеров И.М., Кондрина Е.Ф., Алексеева Е.Ф., Тотолян Арег А.

Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Россия

В последние годы все чаще для лечения хронических воспалительных процессов применяются различные не-

медикаментозные методы, воздействующие на иммунный статус организма. Одним из таких методов является воздействие инфракрасным лазерным излучением (ИК Л И).

Целью настоящей работы явилось изучение ИК ЛИ на показатели иммунитета пациентов с хроническими воспалительными заболеваниями придатков матки (ХВЗПМ) и нормогонадотропной недостаточностью яичников.

Облучали области проекции придатков матки через переднюю брюшную стенку импульсной светодиодной матрицей мощностью 100 мВт и боковые влагалищные своды с помощью сменного ИК излучателя и рассеивающей световодной насадки (мощность 50 мВт). В работе был исполь-

зован двухканальный светодиодный матричный лазер третьего поколения «A30P-2K-02». Курс лечеиия включал 12 процедур. Проведено обследование и лечение 37 женщин (средний возраст 27,3±1,4 года). Иммунологическое исследование проводили до начала лечения, и после окончания курса терапии. В периферической крови пациентов определяли фагоцитарную активность нейтрофилов (в латексном тесте), общую активность комплемента (по 50% гемолизу), количество циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) методом преципитации 5% раствором полиэтиленгликоля, уровень иммуноглобулинов классов A,M,G, секреторного IgA, альбумина. В вагинальном секрете определяли концентрацию slgA, IgA, lgM, IgG (имму нофермснтным методом), и альбумина (колориметрическим методом).

У всех обследованных пациенток к 5-6 сеансу проходил болевой синдром, к окончанию курса терапии исчезали клинические проявления бактериального вагиноза. Альгодисменорея купировалась у 85% пациенток.

К окончанию курса терапии в периферической крови пациенток происходило снижение уровня ЦИК (с 0,083±0,007 до 0,048+0,005 усл.ед., р<0,001), повышение фагоцитирующей активности нейтрофилов (с 50,05+6,07 до 61,23±3,05%, р<0,05) а также спонтанной миграции мононуклеаров (с 1,49+0,38 до 2,82±0,36 усл.ед., р<0,05) и гранулоцитов (с 1,25±0,26 до 2,49±0,24, р<0,005).

При иммунологическом анализе вагинального секрета к моменту окончания терапии отмечалось достоверное повышение концентрации slgA, IgG (р<0,005) и снижение уровня IgM (р<0,001). Эти изменения сочетались с повышением концентрации альбумина в вагинальном секрете (р<0,01).

Полученные данные свидетельствуют о стимулирующем действии ИК ЛИ на иммунологические параметры местного и системного иммунитета. Повышение проницаемости гистогематического барьера влагалища способствует усилению поступления иммуноглобулинов из системного кровотока, что в свою очередь проводит к повышению защитных свойств местной иммунной системы. Использование ИК ЛИ в терапии ХВЗПМ является прогностически благоприятным фототерапевтическим методом лечения данной патологии.

ВЛИЯНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ СЕМЕЙСТВА IL-1 НА ДИСРЕГУЛЯЦИЮ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ОТВЕТА И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЦИТОКИНОВОЙ ИММУНОТЕРАПИИ

Громова А.Ю.. Тимчук Л.Э., Кузнецов Н.И., Князькин И.В., Симбирцев A.C.

ГНЦ НИИ особо чистых биопрепаратов, Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время выявлен ряд полиморфных вариантов генов про- и противовоспалительных цитокинов. Следствием функционального полиморфизма этих генов является измененный характер экспрессии и продукции кодируемых белков. Функциональный полиморфизм генов про-и противовоспалительных цитокинов может являться одной из главных причин диерегулянии и хронизации воспалительного ответа и предрасположенности к ряду заболеваний. Нами было выявлено, что полиморфизм генов IL-lß(+3953) и IL-lRa*2(VNTR) является одной из причин иммуноопосредованного поражения печени при хроническом гепатите С, значительно ассоциируется с хроническим гнойным риносинуситом и туберкулезом, определяя харак-

тер течения этих заболеваний. В наших исследованиях среди больных и доноров ни разу не встречалось совместное носительство гомозиготных вариантов генов 1Ь-1р(+3953)+ и 1Ь-И1а*2 и сочетаний гаплотипов 1Ь-1Р(+3953)+/П-111а*2 и 1Ь-1(3(+3953)71Ь-№а*1. Гаплотип 1Ь-1р*2+1Ь-№а*2 встречался у 2% доноров и 30% больных хроническим гнойным риносинуситом в виде сочетания гетерозиготного гена 1Ь-1(3(+3953)+/ и гомозиготного гена 1Ь-1 Яа*2. В целом, влияние функционального полиморфизма генов 1И|Зи 1Ь-Ша можно обобщить следующим образом: носительство нормальных вариантов этих генов определяет адекватную продукцию соответствующих белков и регуляцию функционирования системы 1Ь-1; у носителей генетически обусловленного перевеса в сторону продукции 1Ь-1р вследствие носи-тельства высокопродуцирующего полиморфного варианта гена 1Ь-1Р воспаление протекает более остро и, так как 1Ь-1Р является ключевым медиатором развития лихорадки, с более высокими значениями температуры тела; у носителей генетически обусловленного перевеса в сторону выработки 1Ь-111а при носительстве высокопродуцирующего варианта гена 1Ь-1Ла воспалительный ответ более продолжителен, что может являться причиной хронизации воспаления. Системная и местная терапия рекомбинантным 1Ь-1Р (Беталейкин) высокоэффективна при диерегуляции воспалительного ответа у носителей генетически обусловленного перевеса в сторону выработки 1Ь-Ша. Для носителей гомозиготного высокопродуцирующего варианта гена 1Ь-1Р такая терапия низкоэффективна и вызывает побочный эффект - лихорадку после введения экзогенного 1Ь-1. Выявление функционального полиморфизма генов 1Ь-1Р и 1Ь-Ша позволяет со значительной точностью прогнозировать степень эффективности и характер лихорадки при терапии экзогенным 1Ь-1р. Как известно, 1Ь-1 является ключевым медиатором воспалительного ответа, но на характер воспалительного ответа может оказывать дополнительное влияние и функциональный полиморфизм других про- и противовоспалительных цитокинов. Выявление патологий, ассоциированных с про- или противовоспалительным генотипом, при которых функциональный полиморфизм генов медиаторов воспаления влияет на характер течения заболевания, позволит более обоснованно и эффективно применять цитокиновую иммунотерапию.

ОПТИМИЗАЦИЯ МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЬТУР КЛЕТОК МЕЛАНОМЫ КОЖИ И РАКА ПОЧКИ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ АУТОЛОГИЧНЫХ И АЛЛОГЕННЫХ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВАКЦИН

Данилова А.Б.. Данилов А.О., Ларин С.С.*, Балдуева И.А., Бычкова Н.В.**, Киселев С.Л.*, Колосов М.Л., Канаев С.В., Моисеенко В.М., Хансон К.П.

ГУН НИИ онкологии им.Н.Н.Петрова Минздрава России, Санкт-Петербург;

* Институт биологии гена РАН, Москва;

* * Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины МЧС РФ, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Эффективность противоопухолевой вакцины зависит от точности определения возможных мишеней для иммунного ответа на молекулярном уровне. При создании аутологичных и аллогенных клеточных вакцин источником опухолеассоциированпых антигенов служат

выделенные и культивируемые вне организма больных клетки злокачественных опухолей. Однако, несмотря на непрерывное совершенствование технологии культивирования клеток и значительные успехи в получении ко-роткоживущих культур и постоянных опухолевых клеточных линий различного происхождения, до сих пор существуют значительные трудности в создании условий, благоприятных для индивидуальных первичных культур опухолевых клеток, которые дают им селективные преимущества в росте по сравнению с нормальными клетками. В то же время возможность быстро наращивать значительный клеточный материал in vitro сокращает сроки приготовления вакцин, что немаловажно для успешного лечения больных.

Цели и задачи. Выявить оптимальные условия дезагрегации, культивирования, замораживания, модификации, облучения клеток меланомы кожи и рака ночки. Изучить возможности получения постоянных опухолевых клеточных линий из первичных культур с сохранением определенного иммунофенотипа клеток.

Материалы и методы. Для приготовления культур клеток меланомы кожи и рака почки был использован операционный материал 154 больных, проходивших лечение в НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова в 2001-04 гг. Технология приготовления аутологичных вакцин предполагает осуществление следующих этапов: дезагрегацию образцов опухоли, культивирование клеток, различные приемы повышения эффективности вакцин путем стимуляции специфического Т-клеточного ответа и их анализ, облучение клеток с целью блокады их пролиферативной активности. Аллогенная вакцинация предполагает использование постоянных опухолевых клеточных линий.

Результаты. В культуру были переведены клетки из опухолевых образцов от 106 больных меланомой кожи и 49 больных раком почки. После процессов диссоциации адаптировались к росту in vitro первичные культуры 79 больных меланомой кожи (74,5%) и 34 - раком почки (69,4%). Неудачи в культивировании наблюдали в 27 случаях меланомы (25,5%) и 15 - рака почки (30,6%). Оптимальными условиями для культивирования большинства культур меланомы кожи и рака почки являются: среда DMEM/F12, содержащая 20% эмбриональной сыворотки коров, 20% кондиционированной среды культуры FLECh, инсулин, трансферрин, селен в стандартной дозе. Культуры меланомы и рака почки, полученные от разных больных, проявляли вариабельность в морфологии, типе роста и пролиферативной активности. В процессе пассирования клетки в основном сохраняли антигенный фенотип, присущий данному типу опухоли. С целью получения постоянных клеточных линий субкультуры меланомы кожи от 2 пациентов, обладающие стабильной пролиферативной активностью, были клонированы. Удалось изолировать 3 и 7 клонов, соответственно. Для модификации опухолевых клеток были подобраны оптимальные условия невирусного переноса генов с помощью липосом, при которых максимальная эффективность трансфекции достигала 30% с использованием генетических конструкций, кодирующих (3-галактозидазу и белок GFP. Эффективность блокады пролиферации клеток меланомы и рака почки с помощью гамма-излучения зависела от пролиферативного пула клеточной популяции. При облучении в суммарной дозе 20 Гр и 40 Гр 67,7±2,38 и 76,7±0,42 соответственно клеток сохраняли жизнеспособность, при этом, по данным проточной цитометрии, накапливались в фазе G2 митотического цикла.

Заключение. Противоопухолевые клеточные вакцины могут быть успешно созданы как на основе первичных культур, так и на основе постоянных линий опухолевых клеток. Лимитирующими факторами в создании вакцин являются малая жизнеспособность выделенных клеток опухолей и низкая скорость их роста, поэтому желательно подбирать оптимальные условия дезагрегации и культивирования индивидуально для каждого пациента. Генетическую модификацию клеток меланомы кожи можно успешно проводить с помощью липофекции. Для блокады пролиферации опухолевых клеток с сохранением их жизнеспособности можно применять дозы в диапазоне 20-40 Гр.

ОЦЕНКА КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ СПОРОБАКТЕРИНА ПРИ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ ОТЕЧНЫМ ПАНКРЕАТИТОМ

Дибисова А.Б.. Тарасенко B.C., Смолягин А.И.

Оренбургская государственная медицинская академия, Оренбург, Россия

По данным литературы (В.И. Филин и А.Л. Костю-ченко, 1994; Л.И. Винницкий и К.А. Бунатян; И.В. Ярема и др., 1998), при острых хирургических заболеваниях органов брюшной полости изменения иммунитета являются фактором, во многом определяющим течение заболевания, способствующим поддержанию воспалительного процесса и снижающим репарацию. Одним из новых подходов в комплексном лечении больных панкреатитом является использование живого бактериального препарата споробактерина, созданного в Оренбургской медицинской академии на основе сенной палочки (Bac.subtillis 534), обладающего высокой способностью блокировать транслокацию хирургической инфекции из желудочно-кишечного тракта в очаг поражения и выраженным иммуномодулирующим эффектом (В.И. Никитенко, 1996, 2001). Споробактерин с успехом применяется для профилактики и лечения различных инфекционно-воспалительных заболеваний и осложнений (В.И. Никитенко с соавт., 1996; A.A. Третьяков, 1998; В.К. Есипов, 1999), в том числе в послеоперационном периоде при остром деструктивном панкреатите (B.C. Тарасенко, 2000). Целью работы явилось определение целесообразности использования в комплексном консервативном лечении больных отёчным панкреатитом жидкой формы споробактерина с учётом клинической эффективности и иммунологических показателей. Было обследовано 50 больных отёчной формой острого панкреатита разной степени тяжести. В зависимости от получаемого лечения больные были разделены на две равные группы, сопоставимые по тяжести процесса и иммунному статусу. Одна группа получала стандартное лечение с включением дезинтоксикационных мероприятий, спазмолитиков, антигистаминных препаратов, цитостатиков и антиферментов, вторая группа - такое же базовое лечение и споробактерин (внутрь по 15 капель три раза в день). Для оценки иммунного статуса у больных был изучен субпопуляционный состав лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8+, CD19+) в реакции иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител фирмы «Сорбент». Определение сывороточных иммуноглобулинов (IgA, IgM, IgG) проводилось методом радиальной иммунодиффузии (G. Mancini et al., 1964). Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке

крови определялся в реакции преципитации с раствором полиэтиленгликоля. Содержание интерлейкинов в сыворотке крови (IL-4, IL-8, гамма-IFN, TNF-a) изучено им-муноферментным методом. У больных обеих групп в первые 3 дня заболевания в крови отмечен лейкоцитоз с ней-трофильным сдвигом и, напротив, снижение количества CD3, CD4, С08-клеток. В сыворотке крови наблюдалось повышение уровня IgA, IgM, ЦИК, лактоферрина, TNF-a и IL-8. Через 7 дней после проводимого консервативного лечения у больных обеих групп отмечена положительная динамика в клиническом течении заболевания: нормализация температуры тела, купирование болевого синдрома, улучшение данных УЗИ, нормализация ряда биохимических показателей. Наряду с клиническими изменениями в положительную сторону у больных второй группы наблюдались более выраженные тенденции к нормализации показателей иммунного статуса по сравнению с пациентами первой группы. У больных второй группы отмечалась положительная динамика уровня лейкоцитов, CD8-KJieTOK, IgA, ЦИК, лактоферрина, TNF-a, IL-8.

Таким образом, применение в комплексном консервативном лечении острого отечного панкреатита жидкой формы споробактерипа показывает его клинико-иммунологическую эффективность.

РОЛЬ ИЗУЧЕНИЯ ФАРМАКОКИНЕТИКИ ПРЕПАРАТА «ВИФЕРОН» В ФОРМИРОВАНИИ РЕЖИМА ИНТЕРФЕРОНОТЕРАПИИ У БЕРЕМЕННЫХ

Ефанов A.A.. Тареева Т.Г., Федотова A.B., Малиновская В.В., Паршина О.В., Никольская И.Г.

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии, ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, Москва, Россия

У 352 беременных с инфекционно-воспалительными заболеваниями (ИВЗ) различной локализации нами выявлены корреляции между нарушениями интерфероно-генеза, характером ИВЗ, гормональной функцией ФПК, акушерскими и перинатальными осложнениями. Полученные данные послужили основанием для применения системной интерферонотсрапии у беременных. Разработка режимов терапии начата с изучения фармакокинетики (ФК) препарата виферон (рекомбинантный a-2B IFN с мембраностабилизаторами, ректальные свечи по 150 и 500 тыс. МЕ).

Цель исследования: изучить ФК препарата виферон у беременных в зависимости от характера ИВЗ, акушерской и экстрагенитальной патологии.

Материалы и методы: исследование иптерфероново-го статуса (ИФС) в динамике (10 проб за сутки) проведено у 68 пациенток с урогенитальной инфекцией (УГИ), в том числе у 14 с гестозо.м, у 15 беременных с бронхиальной астмой (БА) и у 12 больных пиелонефритом (ПН) в III триместре беременности. Возраст пациенток составил 25-28 лет, масса тела 68-72 кг.

Результаты: при исследовании ФК у беременных с УГИ выявлено увеличение концентрации сывороточного интерферона (IFN) в течение 2-3 часов, снижение и повторный рост IFN через 4-6 часов от введения 1 дозы ви-ферона с определением максимального уровня к 6-8 часу исследования (32-64 ME/мл). Тенденция к снижению уровня через 12 часов требовала двукратного введения препарата в течение суток. Характер фармакокинетичес-

кой кривой позволил предположить, что в первые 3-4 часа действует препарат, а второй подъем сывороточного обусловлен активацией эндогенной системы 1РЫ, более выраженной при использовании виферона-2. Динамика почасового изменения способности лейкоцитов к продукции а- и у-1РЫ зависела от исходного ИФС. У беременных с гестозом ФК виферона характеризовалась своеобразием: высокие концентрации сывороточного 1РЫ (до 120 МЕ/мл) достигались к 8-12 часу и сохранялись до 24 часов. Отмечено «пиковое» повышение способности лейкоцитов к продукции у-1РК через 6-12 часов от введения

1-й дозы препарата. Полученные данные определяли целесообразность введения препарата 1 раз в сутки. ФК виферона у беременных с вторичным хроническим ПН характеризовалась аналогичными изменениями. При изучении ФК у беременных с БА выявлено, что уровень сывороточного увеличивался в течение первых 3 часов с повторным ростом через 11-13 часов от введения 1 -й дозы виферона-2. Повышение спонтанной продукции 1РИ наблюдалось через 1 и 11 часов. Способность лейкоцитов к продукции сх-ШЫ была вариабельной и зависела от исходного ИФС, характеризовалась увеличением уровня через 3 и 13 часов до 150 и 230 МЕ/мл соответственно. При определении способности лейкоцитов к продукции у-ШЫ выявлен аналогичный тип кривой с увеличением уровня через 3 и 13 часов до 16 МЕ/мл.

Таким образом, изучение ФК препарата виферон позволило выявить факт активации эндогенной системы в процессе виферонотерапии, уточнить кратность назначения препарата в течение суток и целесообразность учета дозозависимости эффектов при составлении программ интерферонокоррекции у беременных.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ПНЕВМОКОККОВОЙ ПОЛИСАХАРИДНОЙ ВАКЦИНЫ В ОРГАНИЗОВАННЫХ КОЛЛЕКТИВАХ МОЛОДЫХ ЛЮДЕЙ

Жоголев С.Д.. Жоголев К.Д., Огарков П.И.

Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова, Санкт-Петербург, Россия

Средством специфической профилактики пневмококковой инфекции является вакцина «Пневмо 23» фирмы Авентис Пастер (Франция), зарегистрированная в России в мае 1999 г. Впервые в нашей стране данная вакцина была применена нами в воинских коллективах. К 2001 г. было привито 3 тыс. военнослужащих из числа молодого пополнения в различных регионах, а в ноябре-декабре 2002 г. - более 10 тыс.

В ходе проведенных исследований было установлено, что антигенный состав пневмококковой вакцины в достаточной мере соответствует серотиповой мозаике штаммов пневмококков, циркулирующих в воинских коллективах, особенно тем серотипам пневмококков, которые наиболее часто вызывают пневмонию. При изучении антигенной активности пневмококковой вакцины, установлена ее значительная иммуногенность. Вакцина оказалась слабореактогенной, хорошо совместимой с другими вакцинами, вводимыми в плановом порядке.

В Северо-Западном регионе вакцина проявила свою наибольшую эффективность через 3-4 недели после применения, когда выработался полноценный поствакци-нальный иммунитет. В период со 2 но 5 месяц после вакцинации заболеваемость пневмониями была ниже, чем в

группе непривитых в 6 раз, а коэффициент эффективности составил 83,7%. В остальных регионах, где вакцинация в воинских коллективах осуществлялась с началом вспышки пневмоний, вакцина оказалась эффективной уже в первый месяц после вакцинации. Причем в этот период эффективность вакцины была даже выше, чем во 2-

5 месяцы поствакцинального периода, что позволяет рекомендовать применение вакцины в качестве средства экстренной профилактики в очагах пневмококковой инфекции. Эффективность вакцины за весь 5-ти месячный по-ствакцинальный период наблюдения во всех регионах страны была 62,1-73,5%. Особенно эффективной оказалось совместное введение гриппозной и пневмококковой вакцины, осуществленное в Дальневосточном регионе, что и понятно, исходя из тесной взаимосвязи гриппозной и пневмококковой инфекции. Эффективность дивакцинации в отношении пневмоний составила 78,5%.

Эффективность «Пневмо 23» была выражена в отношении не только пневмоний, но и других заболеваний часто пневмококковой этиологии: острых бронхитов, синуситов и отитов. Заболеваемость острыми бронхитами среди привитых была достоверно ниже, чем в группе сравнения в 2,4-4,8 раза при эффективности 57,5-79,1%. Заболеваемость ОРЗ в 1,3-2,0 раза меньше при эффективности до 48,7%. Заболеваемость острыми синуситами и острыми отитами среди привитых либо отсутствовала, либо была в 2,5-4,3 раза ниже, чем у непривитых при эффективности 59,5-76,7%. Особенно эффективной в отношении всей этой патологии с эффективностью не ниже 80% оказалась дивакцинация «Ваксигрипом» и «Пневмо 23».

В ноябре-декабре 2002 г. пневмококковая вакцина была применена более широко. В 5 округах было привито в общей сложности 10 749 военнослужащих из числа молодого пополнения ряда учебных частей. Во всех 5 округах в воинских частях, где была проведена вакцинация «Пневмо 23», заболеваемость пневмониями в поствакци-нальный период (декабрь 2002 г.- апрель 2003 г.) была значительно ниже, чем за аналогичные 5 месяцев, предшествовавшие вакцинации (декабрь 2001 г.- апрель 2002 г). Кратность снижения заболеваемости пневмониями в различных воинских частях составила от 1,8 до 5,4 раза, в среднем 3,5 раза, при эффективности вакцинации -71,43 %. В воинских подразделениях, где вакцинация «Пневмо-23» не проводилась (группы сравнения), заболеваемость пневмониями в 2003 г. в основном возрастала или оставалась на прежнем уровне. При сравнении заболеваемости пневмониями среди привитых пневмококковой вакциной и среди пепривитых за пятимесячный период пребывания в учебных подразделениях (декабрь 2002- апрель 2003 г.) также установлена значительная эпидемиологическая эффективность вакцины. Уровень заболеваемости пневмониями среди вакцинированных «Пневмо-23» в большинстве воинских частей был в 2-3,9 раза ниже, чем среди невакцинированных (коэффициент эффективности 50,0-74,2%).

Если все-таки привитые «Пневмо 23» заболевали пневмониями, болезнь у них протекала значительно легче, чем у непривитых. Среди привитых отсутствовали тяжелые формы течения пневмоний и не было осложнений, а средняя продолжительность болезни была на 6 дней короче.

Таким образом, вакцина «Пневмо-23» является эффективным средством профилактики пневмоний в коллективах военнослужащих, приводящим к снижению заболеваемости пневмониями в среднем в 3 раза (коэффициент эффективности вакцины - до 74,2%).

ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ РЕАМБЕРИНА И ЦИКЛОФЕРОНА НА ИММУННУЮ СИСТЕМУ БОЛЬНЫХ ГЕРОИНОВОЙ ИНТОКСИКАЦИЕЙ

Зурочка A.B.. Горбач В.В.

НИИ иммунологии ЧелГМА, Челябинск, Россия

Изучали влияние героиновой интоксикации на состояние иммунной системы больных до и после применения реабилитационных мероприятий с учетом влияния комбинированного применения реамберина (детоксикация) и циклоферона (иммупокоррекция).

Оценку состояния иммунной системы проводили с определением формулы крови, CD3, CD4, CD8, CD10, CD1 lb, CD16, CD20, CD25, CD34, CD56, CD95 и HLA-DR позитивных лимфоцитов, фагоцитарной, лизосомальной и НСТ-активности нейтрофилов и моноцитов, уровней IgA, IgM, IgG, ЦИК,CH 50, С1-С5 фрагментов комплемента.

Исследования показали, что на фоне героиновой интоксикации отмечается активация клеточного и гуморального звеньев иммунитета. При проведении детоксицирующих мероприятий происходит значительное снижение активности всех звеньев иммунной системы. Это связано с возможной повышенной активностью эндорфииов, характерной для героиновых наркоманов. Детоксикация же, по-видимому, приводит к появлению истинной картины состояния иммунной системы в отсутствие воздействия наркотиков. Все это поставило перед нами задачу коррекции состояния иммунной системы у героиновых наркоманов. С этой целыо была применена комбинированная терапия реамберином и циклофероном по стандартным схемам.

Было выявлено, что такое комбинированное применение этих препаратов восстанавливало активность клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. Это проявлялось в повышении числа CD3, CD4, CD8, CD25 и HLA-DR положительных лимфоцитов, восстановлении фагоцитарной реакции нейтрофилов, нормализации уровней IgM, IgG и активности комплемента.

Таким образом, комбинированное применение реамберина и циклоферона восстанавливает активность иммунной системы героиновых наркоманов.

ОЦЕНКА ДЕЙСТВИЯ ИММУНОМОДУЛЯТОРА «БЕСТИМ» НА АКТИВНОСТЬ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК КРОВИ И СЕКРЕЦИЮ ЦИТОКИНОВ У УСЛОВНО ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ IN VITRO

Зурочка В.А.

Челябинская государственная медицинская академия, НИИ иммунологии ЧелГМА,

Челябинск, Россия

Нами было проведено исследование влияния нового иммуномодулятора «Бестим» на активность иммунных клеток человека in vitro. «Бестим» (у-О-глутамил-Ь-триптофан натриевая соль) представляет собой дипептид с выраженными иммуностимулирующими свойствами. «Бестим» активизирует дифференцировку предшественников Т-лимфоцитов, усиливает продукцию интерлейкина-2, значимо повышает фагоцитарную активность макрофагов. Препарат преимущественно стимулирует Т-хелнеры 1 типа (Th 1) и, соответственно, реакции клеточного иммунитета. Отсутствие выраженного влияния «Бестима» на продукцию свободных радикалов предохраняет ткани от повреждения, возникающего вследствие стимуляции фагоцитов, что делает применение

препарата относительно безопасным. В то же время многие вопросы действия «Бестима» на иммунокомпетентные клетки крови человека остаются мало изученными.

Материалы и методы. С целью исследования влияния этого препарата на активность иммунных клеток человека in vitro, мы инкубировали «Бестим» с цельной кровыо доноров при 37°С в течение 1 часа. Концентрация препарата составила 0,1 мкл на 1 мл крови. Контролем служила кровь того же донора, которую инкубировали в течение 1 часа в тех же условиях с добавлением 0,1 мкл физиологического раствора на 1 мл крови. Оценивали действие «Бестима» на экспрессию CD3, CD4, CD8, CD10, CDUb, CD16, CD20, CD25, CD34, CD56, CD95, HLA-DR, фагоцитарную и лизосомальную активность нейтрофилов, количество иммуноглобулинов А, М, G, ЦИК, СН50 и С1-С5 фрагментов комплемента. Оценивалась секреция следующих цитокинов: ILlß, IFN-y, IL4, ILIO в супернатанте иммуноферментным методом. Функциональная активность лимфоцитов определялась в реакции бласт-ной трансформации лимфоцитов в цельной крови в 5-кратном разведении средой RPMI-1640 с добавлением /-глютамина и антибиотиков после 72-часовой инкубации при 37°С с 5% С02 Оценивалась спонтанная пролиферация лимфоцитов, пролиферация в ответ на фитогемагглютинин в максимальной (конечная концентрация 50 мкг/мл-Ф,), оптимальной (конечная концентрация 15 мкг/мл-Ф2) концентрациях, и пролиферация в ответ на Л ПС E. coli (конечная концентрация 30 мкг/мл). Морфологическая оценка препаратов производилась после окраски по Романовскому-Гимзе. Было обследовано 20 допоров. Результаты исследования были обработаны статистически с использованием программы «Statistica 6.0», достоверность отличия оценивалась по U критерию Mann-Whitney.

Результаты и выводы. Исследования показали, что после часовой инкубации с цельной кровью достоверно увеличился процент CDlltT, CD16+ и достоверно снизился процент IgM и G, ЦИК. Одновременно отмечается тенденция к увеличению активности и интенсивности фагоцитоза и лизосомалыюй активности. Дискутируется вопрос о влиянии «Бестима» на фагоцитарные клетки и на натуральные киллеры in vitro, активация которых может способствовать снижению концентрации ЦИК и lg М и G как основных составляющих иммунных комплексов. Одновременно изучали хемотаксическую активность «Бестима». Было выявлено, что «Бестим» обладает хемо-аттрактантными свойствами, стимулируя хемотаксис нейтрофилов доноров. Эти данные подтверждают предположение о том, что один из механизмов иммуномодулирующего действия «Бестима» может быть связан с его влиянием на активность не только макрофагов, по и нейтрофилов. При оценке влияния «Бестима» па ФГА и ЛПС Е. coli индуцированную секрецию лейкоцитами цитокинов, было выявлено увеличение секреции провоспалительных цитокинов.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИММУНОКОРРИГИРУЮЩЕЙ ТЕРАПИИ ПРИ ОСЛОЖНЕННЫХ ФОРМАХ ХРОНИЧЕСКОГО РИНОСИНУСИТА

Калимуллина З.Х.

Казанская государственная медицинская академия, Россия

Распространенность хронического риносинусита (ХРС), осложненного грибковой инфекцией, имеет вы-

раженную тенденцию к росту, особенно за последнее десятилетие. Задачей исследования являлось изучение динамики показателей иммунологической реактивности у пациентов с ХРС, осложненным кандидозной инфекцией под влиянием иммуномодулятора полиокси-допия. Обследованы 113 человек, страдающих ХРС, имеющих упорно рецидивирующее течение заболевания и резистентность к традиционной терапии. Колонизация слизистой оболочки носа и околоносовых пазух дрожжеподобными грибами рода Candida отмечена у 60 пациентов (53,1%), из них 58 больных (96,7%) имеют инвазивную форму кандидоза, которая подтверждается присутствием циркулирующего антигена Candida spp. в сыворотке крови. Проведено комплексное иммунологическое исследование показателей клеточного звена иммунитета: CD3+, CD4+', С08+‘Т-лим-фоцитов, соотношения CD4+/CD8+, СБ19+‘В-лимфо-цитов; гуморального звена: IgA, IgG, IgM, ЦИК; фагоцитарной активности нейтрофилов: фагоцитарного индекса (ФИ), фагоцитарного числа (ФЧ), спонтанного НСТ-теста (НСТсп-тест), стимулированного НСТ-те-ста (НСТст-тест) и фагоцитарного резерва. Пациенты были разделены на 2 группы по 30 человек. Первая группа больных (обследуемая) получала в составе общепринятой терапии (антибиотики, сосудосуживающие и муколитические препараты в комплексе с анти-микотиком - флуконазолом, а также местная санация очага воспаления) полиоксидоний, который назначался по 6 мг через день N 5 и далее 2 раза в неделю, не менее 10 инъекций на курс. 30 больных контрольной группы получали традиционное лечение ХРС в комплексе с флуконазолом, без полиоксидония.

Анализ данных показал, что у больных ХРС, осложненным кандидозной инфекцией, отмечено формирование вторичной иммунологической недостаточности (ВИН), связанной с угнетением клеточного звена иммунитета, что проявлялось в снижении общего количества Т-лимфоцитов, за счет Т-хелперов, нарушении соотношения CD4+/CD8+, которое выявлено в 80% случаев. Кроме того, отмечается достоверное снижение показателей ФЧ и ФИ, а также повышение НСТсп-теста и угнетение НСТст-теста. В целом, у больных ХРС, ассоциированным с грибами рода Candida, фагоцитарные дисфункции имели место в 86,7% случаев. Сочетанное угнетение Т-клеточного звена иммунитета и фагоцитарной активности нейтрофилов при данной патологии отмечалось у 70% пациентов. При исследовании показателей гуморального иммунитета существенных отклонений не выявлено.

Учитывая выраженные изменения вышеуказанных показателей иммунной системы с формированием ВИН, в состав терапии включен иммунокорректор полиоксидоний, что позволило улучшить показатели клеточного звена иммунитета и фагоцитарной активности нейтрофилов. Увеличилось содержание CD3+, СБ4+-Т-лимфоци-тов и нормализовалось соотношение CD4+/CD8+, отмечено также достоверное повышение ФЧ, ФИ и НСТст-теста. На этом фоне в 76,7% случаев была достигнута стойкая клиническая ремиссия ХРС с отрицательными результатами микологического и бактериологического исследования.

Таким образом, применение полиоксидония в лечении ХРС, осложненного микотической инфекцией показал высокую клинико-иммунологическую эффективность.

РОЛЬ ИНФЕКЦИОННОГО ФАКТОРА ПРИ ПОДБОРЕ ИММУНОСУПРЕССИВНОЙ ТЕРАПИИ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПОЧЕК

Кальметьева Л.Р.. Хайруллина P.M., Хасанов P.P., Хасанова А.Ш.

Республиканская детская клиническая больница, Уфа, Россия

При подборе иммуносупрессивной терапии формируются условия для развития и персистенции патогенных микроорганизмов, что может явиться патогенетической основой сохраняющейся активности воспалительного процесса. Актуальной проблемой является выявление этиологически значимого фактора.

Целью исследовании явилось определение этиопато-генетической роли инфекционного фактора в формировании рецидивов при хронических гломерулонефритах (ХГН) и резистентности к проводимой иммуносупрессивной терапии. Обследовано 72 больных с ХГН в возрасте от 5 до 17 лет, из них у 15 больных в процессе подбора иммуносупрессивной терапии обследование проводилось от 2 до 7 раз. Оценка иммунного статуса включала имму-нофенотипирование лимфоцитов методами прямой и непрямой иммунофлюоресценции, определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов A,M,G, уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), титра комплемента по 50% гемолизу негепаринизированной крови. Роль инфекционного фактора при подборе иммуносупрессивной терапии оценивалась методом люминол-зависимой хемилюминесценции цельной крови с бактериальными и грибковыми антигенами (патент №2153673). Учитывались также результаты бактериологических исследований материала из зева и мочи с определением чувствительности к антибиотикам. У 22 больных проведена биопсия почек, из них у 3 установлен ме-зангиокагшллярный гломерулонефрит с переходом в фибропластический. Клинико-лабораторными критериями активности процесса в зависимости от формы ХГН явились высокая протеинурия, гематурия, гипопротеинемия. Наиболее значимыми иммунологическими маркерами активности процесса были высокий уровень общих Т-лим-фоцитов (CD3+), естественных киллерных клеток (CD16+), Т-хелперов (CD4+), В-лимфоцитов (CD19+), а также наличие маркеров ранней (CD25+) и поздней (CD95+ и HLA-DR+) активации. Гуморальное звено характеризовалось дисиммуноглобулииемией (гиперпродукция IgM и гипоиммуноглобулинемия IgG), высоким уровнем ЦИК. У 75% больных по данным хемилюминесценции выявлена выраженная сенсибилизация к бактериальным и грибковым антигенам. При этом полученные результаты корреллировали с данными бактериологических исследований. Отсутствие эффекта от проводимой традиционной иммуносупрессивной терапии, наблюдавшееся у обследованных больных, явилось основанием для включения в базисный курс антибактериальной и противогрибковой терапии. Препаратами выбора явились антибиотики из группы цефалоспоринов III-IV поколения, фторхинолонов, карбопинемов. Проведение иммунологического мониторинга после курса комбинированной терапии выявило снижение уровня сенсибилизации к бактериальным и грибковым антигенам достоверно снизился. Клиническими проявлениями эффективности проводимой терапии явилась длительная ремиссия у 50% больных.

ЦЕЛЕСООБРАЗНОСТЬ ЛЕЧЕБНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ВАКЦИНЫ КОДИВАКУ ДЕТЕЙ С ЗАТЯЖНОЙ ФОРМОЙ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВА ТОКСИГЕННЫХ КОРИНЕБАКТЕРИЙ ДИФТЕРИИ

Корженевская Т.Б.. Кветная А.С.,

Иванова В.В., Шмелева Е.А., Камальдинова Э.Г.

НИИ детских инфекций М3 РФ, Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время накоплен значительный материал, свидетельствующий об эффективности иммунотерапии, в связи с чем возникла необходимость поиска новых лекарственных форм, обладающих иммуномодулирующим эффектом, стимулирующим антибактериальный иммунитет. В связи со снижением иммунного статуса у детей с различными формами бактерионосительства (БН) токсигенных коринебактерий дифтерии (ТКД) возникла необходимость поиска новых лекарственных форм.

С целью разработки тактики терапии при носитель-стве токсигенных С.(ИрЫ1гепае вакцина Кодивак была применена у 41 ребенка с различными формами бактерионосительства ТКД: у 6 детей - с кратковременной формой носительства, у 10 - средней продолжительности и у 25 - с затяжной формой. Группу контроля составили 10 детей, привитые по графику, у которых отсутствовали контакты с больными дифтерией и бактерионосителями ТКД, не болевшие в течение последних 3-х месяцев и не имеющие хронической патологии ЛОР-органов.

Вакцина Кодивак, полученная из клеточной стенки не-токсигенного штамма С.сИрЫкепае (НИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, г. Москва, авторское свидетельство № 1471857 от 8.12.88г. - разработчик проф. Е.А.Шмелева), выпускается в сухом виде, в одной ампуле содержится одна доза (3 мг). Препарат применяют путем подкожного введения или орошения слизистой носа и ротоглотки. Для подкожного введения содержимое ампулы растворяют в

1 мл растворителя для инъекций, интенсивно встряхивают до полного растворения. По схеме, предложенной разработчиком препарата Кодивак Шмелевой Е.А., изначально рекомендовано раздельное использование: подкожно

- двух-, трехразовое введение с интервалом 2-4 дня или интраназальное введение в течение 5-7 дней. Подкожно препарат вводился под лопатку в дозе 1 -3 мг курсом N 2-

3 ежедневно и с интервалом 2-3 дня.

Интраназально вакцину Кодивак использовали по 4-8 капель в зависимости от возраста в каждый носовой ход 4 раза в день в течение 7 дней. Вместе с тем, преимуществом указанного способа, в отличие от подкожного, явилась нормализация биоценоза слизистой ротоглотки носителей ТКД, однако в 71,5% наблюдений после курса инграназаль-ного введения Кодивака отмечались высевы ТКД.

Нами была предложена схема сочетанного подкожного и интраназального введения вакцины Кодивак. Подкожное введение осуществлялось три раза под лопатки по 3 мг на инъекцию с интервалом 2 и 4 дня, в курсовой дозе 9 мг. Одновременно ребенок получал ежедневно в течение 5 дней Кодивак в каплях - по 2 - 3 капли в каждый носовой ход 4 раза в сутки.

Иммунологическая эффективность сочетанного применения вакцины Кодивак у детей с затяжной формой БН характеризовалась высокой продукцией специфических антибактериальных антител, сохранявшейся в течение месяца: средняя величина геометрических титров (СГТ) увеличивалась с 19,6±5,3 - до лечения; до 43,9±16,9 - через 7

дней; 45,7+18,5 - через 14 и 72,1±20,4 - через 21 день соответственно. Отмечен рост активности иммунокомпетент-ных клеток по реакции РБТЛ на ФГА с 65,4 до 74,1% - на

2 неделе обследования, нормализация индекса регуляции с 1,5 до 2,51 на 3 неделе наблюдения. В то же время интра-назальное введение кодивака способствовало нормализации показателей микробиоценоза слизистой ротоглотки: увеличение представителей резидентной микрофлоры (например, Neisseria spp. от 33,3 до 50%) и исчезновение условно-патогенных микроорганизмов (в частности, Н. influenzae, S.aureus и грибов рода Candida на 3 неделе наблюдения). При оценке морфофункционального состояния фарингеального эпителия отмечено повышение активности фагоцитоза, уменьшение деструктивных процессов в энителиоцитах, увеличение уровней местного специфического и неспецифического секреторного IgA.

Таким образом, обоснована эффективность сочетанного применения вакцины кодивак (интраназально + подкожно) у детей с затяжной формой БН, имеющая ряд преимуществ: в течение 7-дневного курса терапии вводится оптимально допустимая доза антигена, способствующая созданию «грунд» иммунитета; нормализации биоценоза слизистой ротоглотки; обеспечивающая активную выработку нарастания титров специфических антибактериальных антител у 60% детей, чем достигнута убедительная клиническая эффективность в 69,2% наблюдений. Весь комплекс терапевтической тактики, отработанный в ходе настоящего исследования, позволил при диспансерном наблюдении в катамнезе за детьми носителями ТКД, получившими курс лечения в клиниках института, при проведении повторных лабораторных бактериологических обследований подтвердить 100% санацию от ТКД спустя 1-2 года.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ ПРИ ПРЕДРАКОВЫХ СОСТОЯНИЯХ.

Короткова О.В.. Подистов Ю.И., Ротобельская Л.Е.

Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва, Россия

Дисплазии шейки матки являются предраковыми состояниями и представляют довольно сложную проблему в связи с трудностями лечения. Особый интерес вызывает исследование иммунологической реактивности больных с данной патологией для рационального применения в клинике препаратов, обладающих иммунотропным и ан-тиоксидантным эффектом, и разработки принципиально новых подходов к лечению.

Цель исследования: изучение особенностей иммунного статуса женщин с дисплазиями шейки матки и влияния имунофана на иммунологические показатели в процессе стандартной терапии.

Материалы и методы. Оценку иммунологического статуса проводили до начала лечения и через 1 месяц по окончании лечения имунофаном. Обследовали 42 пациентки моложе 30 лет и 40 женщин старше 30 лет с дисплазиями шейки матки с различными патоморфологическими изменениями (CINI.CINII, CINIII). Фенотипиро-вание лимфоцитов проводили методом проточной цитоф-люориметрии с использованием моноклональных анти-

тел (НПЦ «МедБиоСпектр»), Сывороточные иммуноглобулины G, А, М определяли методом радиальной иммунодиффузии по Манчини.

Результаты исследования. При изучении исходных показателей иммунного статуса до начала лечения не выявлено серьезных изменений, практически все средние значения находились в пределах диапазона физиологической нормы. Однако индивидуальный анализ показателей иммунограммы позволил выявить некоторые особенности иммунного статуса данной категории больных. Снижение относительного содержания CD3+ лимфоцитов в группе больных моложе 30 лет наблюдалось у 33,3% больных, а у больных старше 30 лет - у 45% больных.У более, чем 50% больных обеих групп снижено число CD4+ лимфоцитов. 50,0% больных моложе 30 лет и 67,5% больных старшего возраста имели также сниженный уровень CD8+ лимфоцитов. Таким образом, наиболее выраженная иммуносупрессия наблюдалась у больных старшего возраста. Повышение уровня Т-лимфоцитов с фенотипом CD8+ клеток имело место у 30,9% больных I группы и у 12,5% больных II группы. Изменение соотношения субпопуляций CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов приводило к снижению иммунорегуляторного индекса в 38,0 и 35,0% случаев соответственно. Примерно у трети всех больных отмечено снижение количества лимфоцитов, экспрессирующих В-клеточный антиген CD20, а также активационные антигены CD38 и HLA-DR. Содержание CD16+ клеток было повышено у 50,0 и у 42,5% больных, находилось в пределах нормы у 35,7 и у 42,5%, ниже нижней границы нормы у 14,2 и 15,0% больных I и II групп соответственно. Более половины всех пациентов имели повышенный уровень иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM. Таким образом, индивидуальный анализ показателей иммунограммы позволил выявить характерные особенности иммунного статуса данных пациенток. Для дальнейшего анализа результатов оценки иммунного статуса пациентов разных возрастных групп разделили на подгруппы в зависимости от исходного уровня каждого показателя: выше и ниже среднего. В подгруппе больных с исходно низкими показателями на фоне терапии имунофаном отмечено повышение маркера CD3 с 48,51±2,13 до 65,04±3,78% (р<0,001), CD4 с 27,61 ± 1,4 до 37,02%±2,43 (р<0,02), CD8 с 19,26±0,66% (р<0,001), CD20 с 3,59±0,22 до 5,69±0,42% (р<0,001), CD38 с 13,58+1,72 до 28,12±3,81 %(р<0,005), CD16 с 6,45±1,11 до 15,82±2,7% (р<0,01), иммунорегуля-торный индекс увеличился с 0,78±0,08 до 1,35±0,09% (р<0,001). Таким образом, все исследуемые показатели клеточного иммунитета на фоне терапии у больных с исходно низкими значениями возросли до нормы. Такая же картина наблюдалась и в группе больных старше 30 лет. При анализе характера изменений показателей клеточного иммунитета в зависимости от исходного уровня практически для всех них выявлена одинаковая закономерность. В подгруппе больных с изначально низкими значениями выявлено повышение показателей на 40-80%, в подгруппе с исходно нормальными значениями не отмечено каких-либо изменений со стороны клеточного иммунитета, в подгруппе больных с исходно высокими показателями они либо не изменялись, либо отмечалось незначительное их снижение, не превышающее 10%.

Выводы: необходимо осуществлять индивидуальный подход к назначению иммуномодулирующей терапии в зависимости от исходных показателей иммунного статуса и клинического состояния больного и проводить динамическое наблюдение за состоянием иммунитета.

ЛЕЧЕНИЕ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАЛЬЦЕВ И КИСТИ МЕТОДОМ РЕГИОНАРНОЙ МАЛООБЪЕМНОЙ ГЕМОПЕРФУЗИИ

Кузнецов С.И.. Конычев A.B., Буркова Н.В., Эйсмонт Ю.А., Бутько Б.Е.

Медицинская академия последипломного образования, Санкт-Петербург, Россия

Для лечения гнойно-воспалительных заболеваний пальцев и кисти продолжительное время и достаточно успешно используется регионарная внутривенная и вну гри-костная инфузия антибиотиков нод двумя манжетами, которая обеспечивает возможность пролонгированного депонирования препаратов в дистальных отделах конечности. Контакт крови с любой чужеродной поверхностью (в том числе и с угольными гемосорбентами) приводит к запуску активационных процессов в гуморальных и клеточных системах крови. Результатом такой активации является образование большого разнообразия биологически активных макромолекул и активированных клеток, которые при попадании в область раны будут оказывать модулирующее действие на процессы воспаления и регенерации тканей. Известно, что нейтрофильные лейкоциты, как клетки «быстрого реагирования», обладают готовым к применению мощным арсеналом биоцидных продуктов, а также способны при активации быстро включать кислород-зависимые биоцидные системы для существенного усиления бактерицидности. Именно благодаря совместному антимикробному действию кислородзависимых механизмов и кислороднезависимых лизосомальных катионных белков нейтрофилов осуществляются одновременно много-направленные повреждающие воздействия на структурную целостность и обмен веществ микроорганизмов, приводящие к их гибели при фагоцитозе и воспалении.

Метод регионарной малообъёмной гемоперфузии (РМОГ) направлен на мобилизацию эндогенных защитных ресурсов, существенной частью которых являются кислородзависимые и кислороднезависимые биоцидные продукты нейтрофильных гранулоцитов. Метод подразумевает наложение жгута на плечо больной конечности, пункцию локтевой вены, забор крови в специальную колонку, содержащую гемоконтактный препарат, активацию крови путём ротации колонки и возврат активированной аутокрови обратно в вену через ту же пупкциоп-ную иглу. Процедура эксфузии - инфузии занимает 3-10 минут. Объём перфузируемой крови 15-50 мл. После её завершения и ухода из вены другой жгут накладывается на предплечье, а жгут с плеча снимается. Снятие второго жгута осуществляется через 15-30 минут.

На базе Центра гнойной хирургии кисти методом РМОГ пролечено 30 больных с гнойно-некротическими заболеваниями пальцев и кисти. Курс лечения включал 3 процедуры РМОГ с интервалами 1-2 дня. В качестве гемоконтакт-ного препарата использовали угольный гемосорбент СКТ-6А-ВЧ. Больные, получавшие РМОГ, находились в различных фазах воспаления. У одних больных процедура применялась сразу после поступления в стационар, у других - в качестве предоперационной подготовки перед 2-м этапом хирургического лечения (реконструктивно-восстановитель-ные операции), у некоторых РМОГ применяли для улучшения трофики и в качестве реабилитационной процедуры. Субъективно после завершения курса РМОГ больные отмечали уменьшение либо стихание болевых ощущений в ране, улучшение самочувствия и настроения. Клинически

отмечали полное купирование воспалительных явлений в более ранние сроки по сравнению с контрольными больными. Значительно быстрее происходило очищение раны и формирование грануляций. Антибактериальная терапия некоторым больным не проводилась.

Таким образом, предварительные результаты исследования свидетельствуют о том, что РМОГ может быть использована для лечения больных с гнойно-воспалительными заболеваниями пальцев и кисти на различных стадиях процесса. Одним из возможных механизмов лечебного действия может быть создание повышенной концентрации биоактивных продуктов в зоне поражения, в том числе и эндогенных антибиотических средств. Процедура РМОГ существенно сокращает сроки госпитализации больных и уменьшает период их реабилитации.

РОЛЬ РЕФЛЕКСОТЕРАПИИ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ И ИММУНОРЕАБИЛИТАЦИИ БОЛЬНЫХ С ПОЗДНИМИ ЛУЧЕВЫМИ ПОВРЕЖДЕНИЯМИ

Кузьмина Е.Г.,Зубова Н.Д.,Курпешева А.К.

Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск, Россия

Введение. Успехи современной онкологии значительно продлевают профессиональную деятельность и активную жизнь больных. В то же время лучевые и комбинированные методы вызывают развитие поздних лучевых повреждений (ПЛП). Вторичный иммунодефицит при Г1ЛГ1 часто носит обратимый характер. Однако восстановление иммунитета происходит не в полном объеме или оно значительно задерживается. Поэтому необходим поиск средств лечения ПЛП.

Цель исследования. Изучить влияние рефлексотерапии (РТ) на устранение клинических проявлений и восстановление иммунитета при ПЛП.

Материал и методы. Обследовано 34 больных с ПЛП органов малого таза, которые 0,5-10 лет назад получили лучевое или комбинированное лечение по поводу рака тела матки или яичников. 14 больным (группа контроля) проведена базисная терапия (БТ), включавшая применение сердечно-сосудистых, противомикробных, местно-действую-щих рассасывающих препаратов. 20 пациентам (опытная группа) на фоне БТ проведена РТ. Использовали классическую акупунктуру, учитывая симптомокомплекс каждого больного. Курс РТ составлял 10-12 процедур.

Состояние иммунитета оценивали до и после терапии. Определяли количество лейкоцитов, состав лимфоцитов: B-(CD19+), Т-общие (CD3+), Т- хелиеры/ индукторы (CD4+), Т-супрессоры/ киллеры (CD8T), иммунорегуля-торный индекс, ИРИ, CD4+/CD8+, НК-клетки (CD16+), активированные Т-клетки (CD3+HLADR+), функцию НК-лимфоцитов по лизису клеток линии К-562, ЦИ, функцию В-лимфоцитов - но уровню сывороточных иммуноглобулинов IgM, IgG и IgA классов и циркулирующих иммунных комплексов, ЦИК. Оценивали количество фагоцитирующих нейтрофилов (ФЧ) к среднему числу поглощенных фагоцитом микробов. (ФЧ и ФИ). Проведена статистическая обработка с использованием t-критерия Стыоден-та и метода ранговой корреляции.

Основные результаты. Применение рефлексотерапии купировало болевой синдром, нарушения психоэмоциональной сферы и функциональные расстройства у большинства онкологических больных.

В иммунном статусе пациентов с ПЛП снижена популяция Т-клеток: количество Т-общих (CD3+), Т-хелпе-ров (CD4+), Т-цитотоксических лимфоцитов (CD8+), ИРИ, количество NK-клеток и ЦИ. Фагоцитарная активность нейтрофилов усилена. В системе В-клеток нарушения менее выражены.

Проанализирована динамика индивидуальных показателей иммунитета пациентов в зависимости от изменения исходного числа лимфоцитов после лечения с РТ. 1 группа, 6 человек (30,0%), у которых после лечения количество лимфоцитов снизилось, 2 группа - 7 человек (35,0%) с сохранившимся исходным уровнем лимфоцитов, 3 группа - 7 человек (35,0%), у которых после лечения уровень лимфоцитов повысился.

Исходный иммунный статус 1 группы характеризуется гиперактивацией: повышено число лейкоцитов, Т-ци-тотоксических и В-клеток с усилением активации Т-кле-ток и повышенным уровнем сывороточных иммуноглобулинов IgM класса, фагоцитоз усилен. Во 2-й группе состояние иммунитета близко к норме (снижен уровень NK-клеток и их цитотоксичность). В 3-й группе преобладает иммунодепрессия: ниже нормы уровень лейкоцитов и лимфоцитов, снижено количество Т-, В-, НК-клеток, уровни IgM и IgA классов.

Эффект лечения с РТ в 1-й группе: снижение уровня лимфоцитов, особенно CD8+ Т- клеток, числа активированных Т-лимфоцитов, CD16+ NK-клеток, В-лимфоци-тов, поглотительной способности нейтрофилов. Во 2-й группе нормализовалось число NK-клеток. В 3-й группе снизилась иммунодепрессия: возрос уровень лимфоцитов, Т-, В-лимфоцитов, усилился фагоцитоз.

БТ также оказывала влияние на клинические проявления заболевания и состояние иммунитета, однако иммуномодулирующий эффект проявлялся в меньшей степени. Таким образом, курс РТ значительно усилил действие БТ, оказав иммуномодулирующее действие на иммунитет: снял гиперактивацию лейкоцитов и лимфоцитов, значительно устранил признаки иммунодепрессии.

Заключение. Необходимо рекомендовать проведение курса РТ в комплексной программе лечения больных ПЛП в качестве воздействия, значительно повышающего эффективность лечения, снижающего клинические проявления ПЛП и восстанавливающего иммунитет.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ РЕКОМБИНАНТНОГО ИНТЕРЛЕЙКИНА-2 В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ХРОНИЧЕСКОГО ОСТЕОМИЕЛИТА

Курманова Г.М.. Омарова М.Н., Жанкин Б.А., Султанбаев Т.Ж., Спиричева Н.Х.

Научный центр гигиены и эпидемиологии,

Казахский национальный медицинский университет, Алматы, Казахстан

Хронический остеомиелит (ХО) - одна из сложнейших хирургических патологий, трудно поддающийся лечению, реабилитации и приводящий к инвалидизации в молодом трудоспособном возрасте. Общепризнанно, что лечение ХО должно быть комплексным и проводиться с учётом того, что местные гнойно-некротические процессы в кости протекают на фоне глубоких общих изменений в организме - интоксикации, угнетения иммунитета, диспротеинемии. Основная цель лечения - ликвидация гнойно-деструктивного процесса в костной ткани -

может быть достигнута лишь при сочетании радикального оперативного вмешательства с рациональной, направленной антимикробной терапией, активации иммунных сил организма.

С целью оценить эффективность рекомбинантного интерлейкина-2 (pIL-2; Ронколейкин/Биотех) в комплексном лечении ХО было обследовано 20 больных посттрав-матическим ХО.

Материал и методы. Больные в возрасте от 25 до 60 лет, средний возраст 31,45±5,57 лет, 6 женщин и 14 мужчин. Длительность костно-гнойного процесса у них была от 6 мес. до 4 лет. ХО сформировался после открытых переломов у 8, у остальных - после операции по поводу закрытого перелома (остеосинтез). У больных наблюдался костно-гнойный процесс: бедренной кости - 6, костей голени - 6, костей предплечья - 3, плечевой - 2, ребра - 1, плюсневых костей на фоне диабетической стопы - 1, обеих лодыжек с вовлечением голеностопного сустава (остеоартрит) - 1. Контрольная группа - 26 больных, сопоставимых по возрасту, форме, локализации, давности процесса.

Больные получали pIL-2 в дозе 0,5 млн ME в/в ка-пелыю за день до операции (1-е введение) и на следующий день после операции (2-е введение). В ряде случаев через сутки - 3-я инфузия. Операция - секвестро- и некротомия с удалением металлоконструкций. Кроме того, больные получали антибиотики широкого спектра (гентамицип, линокомицин) и дезинтоксикационную терапию.

Результаты. Только у половины больных наблюдалось повышение температуры тела до 37-38°С. Несмотря на костно-гнойный процесс, выраженность местной воспалительной реакции была умеренной или слабой (отек, воспаление мягких тканей). В общем анализе крови не отмечалось существенных изменений лейкоформулы, но увеличивалось общее содержание лейкоцитов. У 8 больных отмечалось ускорение СОЭ в 1,5-2,5 раза.

До начала лечения в иммунограмме отмечалось снижение CD3+ (612,6±126,23/мкл, Р<0,001), CD4 + (522,5±120,96/мкл, Р<0,01), CD8+ лимфоцитов (342,0±118,26/мкл, Р<0,05); умеренное повышение CD25+ лимфоцитов (180,8±50,55/мкл, Р<0,01). В результате проведенного лечения достоверно выросло относительное содержание CD95+ лимфоцитов. Выросло абсолютное содержание CD3+ (1080,5+147,9/мкл, Р<0,05), и CD4+ (850,0±89,25/мкл, Р<0,05), нормализовался уровень CD8+ (562,0+121,36/мкл). Число лимфоцитов, несущих рецептор к IL-2, выросло в 2,8 раз (CD25+ 518,4±128,13/мкл, Р<0,05), также возросло число лимфоцитов, несущих Fas (CD95+ 497,7+125,64/мкл, Р<0,05).

В результате применения pIL-2 наблюдалось заживление операционной рапы первичным натяжением у 15 больных, вторичным - у 5 больных на 10-20 день после операции - в среднем 14,5+5,57 дней (в контрольной группе - 21,52±3,82 дней). Рецидив костпо-гнойного процесса наблюдался у одного больного через 10 месяцев (больной с ХО бедренной кости). Различие с контрольной группой достоверное (Р<0,01).

Таким образом, применение pIL-2 у больных хроническим остеомиелитом способствовало нормализации содержания лимфоцитов в периферической крови, процессов дифференцировки Т-лимфоцитов, повышению их функциональной активности. Восстановление содержания иммунокомпетентных клеток и их функциональной

активности способствовало более благоприятному течению послеоперационного периода, ускорению процессов заживления послеоперационной раны, полному купированию костно-гнойного процесса и консолидации переломов,

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩАЯ ТЕРАПИЯ ПРИ РЕЦИДИВАХ ИНФЕКЦИОННОГО М0Н0НУКЛЕ03А

Левина A.C.. Железникова Г.Ф., Иванова В.В., Монахова Н.Е., Корчевская Л.В.

НИИ детских инфекций, Санкт-Петербург, Россия

Острый инфекционный мононуклеоз (ИМ) вызывается вирусом Эпштейна-Барр, особенностью которого является селективное заражение В-лимфоцитов и длительная персистенция в организме. Ранее мы показали, что у 25% детей, перенесших острый ИМ, формируется рецидивирующее течение инфекции. Это требует поиска эффективных способов лечения заболевания в периоде рецидива.

Цель настоящей работы - сравнить эффективность двух схем иммуномодулирующей терапии при рецидивах ИМ.

Дети (от 3 до 10 лет) с рецидивом ИМ получили ви-ферон (ВФ) (п=13) или лейкинферон с человеческим лейкоцитарным интерфероном (ЛФ+ЧЛИ) (п=11).

Клиническая эффективность ЛФ+ЧЛИ была достоверно выше, что иллюстрируют данные таблицы.

Через 1 месяц после выписки из стационара у 57% детей, получивших курс ВФ, сохранялась гепатомегалия (против 10% после курса ЛФ+ЧЛИ), у 29% - симптомы интоксикации (против 10% после ЛФ+ЧЛИ). В этот же срок при оценке иммунного статуса у детей, леченных ВФ, наблюдали нейтрофилез, мобилизацию в кровь Т-лимфо-цитов CD3 и CD4 с соотношением CD4/CD8 до 6,2 (против 3,1 у детей, получивших курс ЛФ+ЧЛИ). У детей, леченных ЛФ+ЧЛИ, циркулирующий пул CD8 Т-лимфоци-тов (13,8±1,9% vs 10±0,75%) и ЕК CD16 (18,7+1,7% vs 14,1±1,5%, р<0,05), как и содержание CD95+ активированных и готовых к апоптозу лимфоцитов (26,3±1,4% vs 21,6±1,8%, р<0,05) были значительно выше, чем у детей, леченных ВФ. У пациентов последней группы через месяц после выписки из стационара обнаружили активацию гуморальных механизмов защиты, проявляющуюся нарастанием в крови уровня IgA (1,4±0,23г/л vs 0,93±0,19) и IgG (9,7±0,6 vs 7±0,6 г/л, р<0,05).

Таким образом, терапия с использованием ЛФ+ЧЛИ была более эффективна по сравнению с курсом ВФ, что можно объяснить благоприятным влиянием набора ранних цитокинов в составе ЛФ и высокой противовирусной активностью препарата ЧЛИ. Можно предположить, что курс ЛФ+ЧЛИ способствует более выраженной активации клеточных механизмов защиты но сравнению с ВФ.

ВЛИЯНИЕ ОКТРЕОТИДА НА СИСТЕМНЫЙ УРОВЕНЬ И-8 У БОЛЬНЫХ ДЕСТРУКТИВНЫМ ПАНКРЕАТИТОМ

Леонович С.И., Борткевич Л.Г., Ревтович М.Ю.

Белорусский государственный медицинский университет, Минск, Республика Беларусь

Введение. Согласно современным представлениям гиперпродукция провоспалительных цитокинов, в частности 1Ь-8, является ответственной за развитие системных осложнений при деструктивном панкреатите. В связи с этим становится актуальным разработка различных вариантов антицитокиновой терапии данного заболевания.

Материал и методы. У 43 пациентов с деструктивным панкреатитом (мужчин - 33, женщин - 10; средний возраст 37,5±2,49 года и 52,1±4,79 года соответственно) на 1 и 10 сутки лечения проанализирована динамика системного уровня 1Ь-8 в зависимости от характера проводимой терапии с помощью «сэндвич«-метода твердофазного им-муноферментного анализа с использованием наборов

ООО «Цитокин». Все пациенты были разделены на 4 группы: 1-я группа в качестве панкреотропных препаратов получала ингибиторы протеаз (контрикал, овомин),

2-я группа - комбинацию ингибиторов протеаз и пенток-сифиллина (100 мг 2 раза в сутки), в 3-й группе использовали сочетание октреотида (0,1 мг подкожно 3 раза в сутки в течение 5 дней) в сочетании с ингибиторами протеаз, в 4 группе применялась комбинация октреотида, пен-токсифиллина и ингибиторов протеаз.

Результаты. Уровень IЬ-8 в 1 сутки наблюдения был одинаков во всех исследуемых группах. Последующая динамика имела некоторые отличия, зависевшие от варианта консервативной терапии. В первых 2 группах мы отметили достоверный (р<0,05) рост 1Ь-8 в динамике наблюдения, уровни которого составили на 1 и 10 сутки наблюдения соответственно в 1-й группе 331,2±36,67 и 492,4±30,7 пг/мл и во 2-й группе 247,1±31,47 и 353,4+27,8 пг/мл. Использование октреотида (3 группа) предотвратило рост системного уровня 1Ь-8 в динамике наблюдения, который составил в этой группе на 1 сутки 331,9±28,07 и на 10 сутки 365,4±14,6 пг/мл (р>0,05). Это может свидетельствовать об антицитокиновых свойствах октреотида. Наиболее эффективным оказалось использование комбинации препаратов в 4 группе, что проявилось достоверным снижением уровня 1Ь-8 с 370,0+27,76 до 278,3±31,84 пг/мл (р<0,05) к 10 суткам наблюдения.

Более низкий уровень 1Ь-8 в динамике наблюдения в случае использования октреотида привел к снижению частоты легочных осложнений в случае использования октреотида (2 человека (9,1%)), в то время как в первых 2 группах они наблюдались несколько чаще и были отмечены у 7 человек (33,3%).

ТАБЛИЦА. ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ СИМПТОМОВ ПРИ РЕЦИДИВЕ ИНФЕКЦИОННОГО М0Н0НУКЛЕ03А

Терапия Интоксикация Налеты Затруднение носового дыхания Лимфаденопатия Гепатомегалия Спленомегалия

ВФ 13,4±1,5 7,1± 1,0 16,2+1,7 37,5+4,8 28,5±3,2 15,6±2,3

ЛФ+ЧЛИ 8,5± 0,9* 4,2± 1,2* 11,5±1,2* 26,4±3,6* 17,8±3,1* 11,6±2,1

* -р<0,05

Заключение. Таким образом, октреотид может снижать системный уровень IL-8, проявляя противовоспалительную активность и уменьшая частоту системных осложнений заболевания. Комбинация октреотида и пен-токсифиллина приводит к суммации антицитокиновых свойств обоих препаратов.

ИММУНОГЕНОМОНИТОРИНГ В КЛИНИКЕ ХРОНИЧЕСКИ-РЕЦИДИВИРУЮЩИХ ПИЕЛОНЕФРИТОВ

Литвинов В.А.. Черепахина Н.Е., Бурдакова Ю.А., Матушевский И.А., Соболевский A.C., Сучков С.В.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф.Владимирского; Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова;

РГМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия

Цель: апробировать в клинике хронически-рецидиви-рующих пиелонефритов современные схемы иммуноте-рапевтического лечения.

Методы: обследована группа из 56 больных хроническим пиелонефритом из урологических клиник МОНИКИ и РГМУ им. Н.И. Пирогова. Кровь, моча и урогенитальные соскобы тестировали с помощью ПЦР-наборов с детекцией в агарозе на наличие генетического материала ци-томегаловируса (CMV), М. pneumonia, Chi. trachomatis, Ur. urealyticum, T. gondii и С. albicans. Сыворотки этих пациентов тестированы также на соответствующие серологические маркеры вышеуказанных инфекций. Комплексное исследование иммунного статуса включало определение удельной доли основных субпопуляций иммунных клеток, состояния фагоцитоза, показателей интерферонового статуса с использованием соответствующих тест-наборов.

Результаты: при хроническом пиелонефрите наиболее часто выявляются ДНК Chi. trachomatis (52%), Ur. urealyticum (38%) и C. albicans (14%) в моче, тогда как в урогенитальных соскобах частота генопозитивных тестов была значительно ниже. В большинстве из этих случаев образцы крови являются серопозитивными на соответствующие анти-инфекционные аутоантитела, преимущественно IgG-изоти-па. Вместе с тем, у 29% серопозитивиых больных ни в моче, ни в крови инфекционная ДНК не выявлялась. При обострении заболевания наблюдался рост двух показателей -содержания микробной ДНК в моче и рост уровня серопо-зитивности периферической крови на соответствующие ан-тиинфекционные антитела. В ремиссии вышеуказанные параметры в большинстве случаев имели тенденцию к улучшению, однако титры антиинфекционных аутоантител сохранялись на достаточно высоких уровнях.

Одновременно у 62% больных, имеющих серо- и генопозитивные признаки вышеуказанных инфекций, наблюдалось снижение иммунологической реактивности за счет подавления механизмов естественной цитотоксичности, падения ИРИ (иммунорегуляторного индекса) и ингибирования фагоцитарной функции. Частота совпадений положительных результатов в группах обследованных лиц по ПЦР-маркерам, серологическим инфекционным маркерам и показателям иммунологической реактивности составила 46%.

Выводы: в связи с формируемой иммупосупрессисй, вызванной инфицированием мочеполовой системы, необходимо включение в комплексную схему лечебных ме-

роприятий иммунокорригирующих препаратов. Одновременно для правильного и адекватного контроля лечебных мероприятий в программу мониторинга следует включать лабораторные методы иммуногеномониторинга с использованием ПЦР-диагностики, ИФА-анализа и иммунофе-нотипирования.

ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ ПРИМЕНЕНИЯ ТИМОГЕНА В ВЕТЕРИНАРИИ

Лютинский С.И.. Крячко О.В., Смирнов B.C.*

Государственная академия ветеринарной медицины, ВМедА, Санкт-Петербург, Россия

Изучены иммуномодулирующие свойства тимогена при гипотрофии сельскохозяйственных животных: в опытах на гипотрофичных щенках норок клеточного содержания, поросятах - гипотрофиках, гипотрофичных телятах, цыплятах-гипотрофиках были установлены общие закономерности и видовые особенности реакции животных на препарат показано корригирующее влияние тимогена на структурно-функциональные показатели Т- и В-звеньев иммунной системы, увеличение коэффициента дифферен-цировки Т-клеток, повышение числа циркулирующих Т-и В-лимфоцитов. Иммунокоррекция стимулировала активность роста, повышала прирост массы у подопытных животных вплоть до состояния физиологической нормы.

Исследована эффективность применения тимогена в комплексном лечении некоторых болезней сельскохозяйственных животных. В результате применения тимогена для профилактики нитрито-нитратного токсикоза телят резко снизилась смертность, повысился среднесуточный привес молодняка крупного рогатого скота, применение препарата в комплексном лечении неспецифической бронхопневмонии поросят оказывало стимулирующее влияние преимущественно на систему клеточного иммунитета: увеличивалось общее содержание Т-лимфоцитов, повышалось число хелперных клеток, возрастал коэффициент диффереицировки субпопуляций Т-клеток вплоть до уровня здоровых животных. Использование тимогена в комплексной терапии бронхопневмонии поросят оказалось весьма эффективным: уменьшался падеж больных, сокращалось время лечения, повышались привесы излеченных животных. Применение тимогена в комплексном лечении поросят, пораженных трихоцефалезно-баланти-диозно-эймерийной ассоциацией, стимулировало возрастание числа Т-лимфоцитов по сравнению с исходными данными, существенно повышало содержание lg G и Ig М. Лечение химиотерапевтическими препаратами в сочетании с тимогеном способствовало нормализации иммунного статуса и общего состояния животных.

Исследована эффективность применения тимогена в целях повышения эффективности вакцинопрофилакти-ки, в частности, вирусного трансмиссивного гастроэнтерита свиней коронавирусной этиологии. Тимоген применяли супоросным свиноматкам, первично вакцинированным против коронавирусного гастроэнтерита вакциной из штамма римс, за 10 и 5 дней до ревакцинации и одновременно с ревакцинацией. Эффект применения выражался в повышении синтеза специфических антител в ответ на антиген и, что самое важное, способствовал выживанию родившихся поросят. Наибольший эффект сохранения приплода наблюдался при одновременном введении вакцины и тимогена.

ЦИТОКИНОТЕРАПИЯ С ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ НАПРАВЛЕННОСТЬЮ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ГНОЙНОСЕПТИЧЕСКИХ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Макаров A.A., Сускова B.C.

НИИ трансплантологии и искусственных органов М3 РФ, Москва, Россия

Наш опыт успешной спленотерапии гнойно-септических и воспалительных заболеваний (ГСВЗ) путём подключения больному ксеноселезёнки, инфузии ксеноспленсперфузата или введения иммунокорригирующего препарата селезёнки-спленопида показал, что эффективность терапии была выше в тех случаях (в 5-10%), когда у больных вовремя процедуры или сразу после неё появлялись непродолжительные побочные реакции (гипертермия, озноб). Поскольку доказано, что селезёнка вырабатывает большое количество природных ци-токинов (ЦК), есть основание связывать появление побочных реакций с воздействием вводимых ЦК.

Исходя из этих наблюдений и положения, что при любой патологии воспалительная реакция является естественной защитной, мы изучили возможность использования для повышения эффективности спленотерапии больных с ГСВЗ метод небольшого усиления воспалительной реакции на ранних этапах заболевания. С этой целью 10 больным внутримышечно вводился полученный нами из селезёнки телят полицитокиновый препарат - спленопид-МА (Сп-МА), содержащий относительно высокие концентрации естественных ripo-и противовоспалительных цитокинов.

Лечение Сп-МА включалось в комплексную терапию ГСВЗ в начале развития инфекционного процесса при появлении признаков системной воспалительной реакции (СВР), лейкоцитоза, палочко-ядерного сдвига в формуле крови, лимфопении. Препарат вводился ежедневно в первые 2-3 дня и далее через день в дозе, вызывающей временное (на 2-8 часов) повышение температуры на 0,3-0,5°С даже при уже имеющемся субфибрилитете. Подобное повышение могло указывать на усиление воспалительной реакции за счет вводимых провоспалительных ЦК (TNFa, IL-Iß , IL-6 и др.), суммарная активность которых в Сп-МА очевидно выше, чем противовоспалительных ЦК (IL-1 RA, IL-10).

Апробация метода дала хороший положительный клинический эффект у 9 больных из 10, из которых четверо находились в критическом состоянии. Больные выздоровели к 2-3 неделям лечения. В первые 2 суток после введения Сп-МА клинико-лабораторные показатели существенно не изменились, если не считать отмеченного временного дополнительного повышения температуры. Но с 3-4 суток наметилась положительная динамика с постепенным купированием проявлений сепсиса, СВР, с регрессией имеющейся органной недостаточности, с уменьшением и устранением (к 7-10 суткам) лихорадки, снижением лейкоцитоза и лейкоцитарного индекса интоксикации и повышением содержания в крови лимфоцитов. К 10-12 суткам лечения эти показатели обычно нормализовывались. К этому же времени у большинства больных отмечалось улучшение общего состояния, исчезновение признаков сепсиса, СВР и нормализация органной функции.

Так как Сп-МА является цитокиносодержащим препаратом, есть основание связывать эффективность действия его с влиянием на все звенья как естественной неспецифической защиты (с чем и связана гиперергичес-кая реакция на его введение), так и на гуморальный и клеточный иммунитет. Подобное воздействие препарата с преимущественно иммуностимулирующей направленно-

стью мы наблюдали при лечении ГСВЗ полученным нами из селезёнок телят спленопидом-М, который, однако, был менее сильным, чем Сп-МА.

Апробированный метод нуждается в дальнейшей доработке, однако перспективность его очевидна.

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ИММУНОМОДУЛЯТОРА ЛИКОПИДА У БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА В СТАРЧЕСКОМ И ПОЖИЛОМ ВОЗРАСТЕ

Максименкова О.М.. Санникова A.A.,

Зыкина С.А., Кузнецов A.A.

Ижевская государственная медицинская академия, МСЧ № 3, Ижевск, Россия

Многочисленными исследованиями установлено снижение эффективности функционирования иммунной системы у лиц старческого и пожилого возраста. Наиболее распространенным заболеванием у этой возрастной группы остается ишемическая болезнь сердца (ИБС). Атеросклероз - главная причина ИБС, рассматривается как аутоиммунное воспаление. Поэтому, включение иммун-нокорригирующих средств в схемы лечения ИБС позволит повлиять на патогенетические механизмы развития и прогрессирования заболевания, тем самым увеличить активный период жизни лиц.

Целью работы является оценка клинико-иммунологической эффективности лечения ликопидом больных ИБС в старческом и пожилом возрасте. В предварительном обследовании участвовали 30 больных ИБС со стабильной стенокардией напряжения функционального класса

3 и 4, средний возраст 71,91 ± 3,62 года. Первая группа -контрольная (15 человек) получала традиционную терапию при ИБС. К лечению второй группы (остальные 15 человек) был добавлен с целью иммунокоррекции лико-пид в дозе 1 мг/сутки в течение 10 дней. Иммунный статус изучали до и после лечения (через 6 месяцев) у всех больных. В результате обследования на первом этапе (до лечения) в обеих группах были выявлены изменения показателей иммунитета. Так, CD3 составило 62,14 ± 1,93%, CD4 34,63 ± 1,89%. Показатели СБ8были 29,18 ± 1,97%. Имму-норегуляторный индекс (ИРИ) (CD4/CD8) имел тенденцию к повышению и составил 3,17 ±0,17 у.е. Количество циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) было увеличено до 1,27 ± 0,27 у.е. Эти изменения доказывают наличие у больных ИБС 1 степени (10% от нормы) иммунологической недостаточности. На втором этапе исследования (через 6 месяцев после лечения) в контрольной группе достоверных изменений показателей иммунитета не было выявлено. Во второй группе, напротив, эти показатели были иными. Так, CD3 повысился до 68,02 ±1,67%, CD4

40,9 ± 1,72%, CD8 21,47 ±1,89%. Снизился ИРИ до 2,84 ±

0,12 у.е. и уменьшилось количество ЦИ К до 0,92 ± 0,64 у.е. После лечения ликопидом во второй группе у 60% больных отмечено уменьшение частоты ангиозных приступов и одышки при нагрузке в 2 раза; у 40% больных явных изменений в самочувствии не отмечено.

Таким образом, результаты работы показали, что применение ликопида у больных ИБС в геронтологическом возрасте улучшает клиническое течение заболевания (уменьшается частота приступов стенокардии) и положительно влияет на иммунологический статус организма (нормализуются показатели клеточного иммунитета).

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ЛИНИМЕНТА ЦИКЛОФЕРОНА В ПАРОДОНТОЛОГИИ

Маркарян М.И.. Демирчан К.Б.

Кафедра профилактики стоматологических заболеваний и детской стоматологии Ереванского государственного медицинского института им. М. Гераци, Ереван, Армения

В настоящее время иммунокоррекция является одной из важных составляющих комплексного лечения генерализованного пародонтита как заболевания с инфекционным и иммунным, в том числе аутоиммунным, компонентами (Орехова Л.Ю., 1997; Максимовский Ю.М. и соавт., 2000; Исаков В.А., Ковалевский А.М., 2003 и др.).

Целью настоящей работы явилось изучение эффективности применения линимента циклоферопа (НТФФ «Полисан», Санкт-Петербург) в комплексном лечении генерализованного пародонтита (ГП).

Материал и методы исследования. Из 69 больных с ГП легкой и средней степени 32 (контрольная группа) получали традиционную местную консервативную терапию, в том числе лечение кариеса зубов и его осложнений, удаление над- и поддесневых зубных отложений, полоскание полости рта 0,05% раствором хлоргексидина. Аналогичное лечение, но с применением вместо раствора хлоргексидина аппликаций на десневой край линимента цик-лоферона два раза в день но 15 минут в течение 12 дней получали 37 пациентов основной группы.

Состояние тканей пародонта оценивали до и после лечения по субъективным (запах изо рта, отек и гиперемия десен, наличие налета на зубах), объективным (индексы Грина-Вермиллиона, Мюллемана, Рассела, РМА, йодное число Свракова, проба Кулажепко), микробиологическим (качественный и количественный состав микрофлоры зубодесневых карманов) и иммунологическим показателям (уровни IL-4, IL-8, y-IFN и slgA в десневой жидкости).

Основные результаты исследования. Выявлена высокая эффективность линимента циклоферопа в лечении генерализованного пародонтита у 32 из 37 пациентов основной группы (в контрольной 20 из 32), а также связь положительной динамики показателей состояния тканей пародонта с нормализацией показателей местного иммунитета полости рта.

Таким образом, можно рекомендовать местное применение ленимента циклоферопа для лечения генерализованного парадонтита.

МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ АРТРОФООНА ПРИ ИММУННОМ ВОСПАЛЕНИИ: ДАННЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО И КЛИНИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЙ

Мартюшев-Поклад A.B.. Дугина Ю.Л.,Черевко-ва Е.В.*,Шерстобоев Е.Ю.**,Качанова М.В., Бабаева А.Р.*,Петров В.И.*,Эпштейн О.И., Сергеева С.А.

НПФ «Материа Медика Холдинг», Москва, Россия;

* Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград, Россия;

** НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН,

Томск, Россия

Артрофоон (АФ, антитела к TNF-a - сверхмалые дозы для перорального введения) - новое средство лечения

ревматоидного артрита (РА), разработанное в России. По фармакодинамическим свойствам АФ может быть отнесен к болезнь-модифицирующим средствам лечения РА. В ходе экспериментальных и клинических исследований нами изучалось влияние препарата на системную продукцию цитокинов.

Методы. Экспериментальное исследование влияния АФ на выработку цитокинов проведено с использованием модели коллагенового артрита. Для индукции артрита мышам-самцам линии CBA/CaLac (18-20 г) вводили однократно в правую заднюю лапу 100 мкг коллагена II типа в 50 мкл полного адъюванта Фрейнда. Животные в течение 14 дней получали АФ (0,2 мл водного раствора per os), введение начинали за 1 день до индукции артрита (контроль - дистиллированная вода, преднизолон 53 мг/кг/сут. per os). Динамику уровня TNF-a, интерлейкинов 1,6,10, интерферона-гамма (IFN-у) в сыворотке крови оценивали методом ИФА через 3 ч, 24 ч, 3,5,9,13,17,21 сут после введения коллагена. Рассчитывали суммарную продукцию цитокинов за весь период исследования (площадь под кривой «концентрация-время»).

Клиническая эффективность АФ при РА была показана в 6-месячном рандомизированном испытании (препарат сравнения диклофенак, ДФ -100 мг/сут. per os), в котором приняли участие 60 больных классическим или достоверным РА. АФ назначали 4 раза в сутки по 2 таблетки для рассасывания во рту. У части пациентов в обеих группах до начала и через 6 мес. лечения оценивали содержание в сыворотке цитокинов TNF-a, IL-6, IL-1 (в ИФА).

Результаты. Инъекция коллагена мышам приводила к значительному повышению в сыворотке (в сравнении с фоном) уровня провоспалительных цитокинов TNF-a, IL-

1, IL-6, IFN-y. Влияние АФ и нредпизолона (ПР) на системную выработку цитокинов было однонаправленным. В группе АФ снижение суммарной продукции TNFa относительно контроля составило 43% (в группе ПР - 39%), продукции IL-1 - 25% (в группе ПР - 4%). Суммарная продукция IL-6 повысилась па 44% (в группе ПР - на 71%), продукция IFN-y повысилась на 51% (в группе ПР

- на 32%), продукция IL-10 повысилась на 24% (группа ПР - на 18%). Все изменения (кроме продукции IL-1 в группе ПР) были статистически достоверными, р<0,05.

В ходе клинического исследования эффект артрофо-она, в отличие от ДФ, развивался постепенно, достигая максимума к 6 мес. лечения. Сравнение эффективности длительного применения АФ и ДФ с использованием критериев, принятых Американской коллегией ревматологов (ACR), показало, что влияние АФ па важнейшие проявления РА было более полным: так, доля пациентов, соответствовавших критериям не менее чем 20-процентного улучшения (ACR20), была более чем в 2,5 раза выше в группе АФ (57% в группе АФ, 20% - ДФ). У пациентов группы артрофоона зафиксировано значительное (>25%) снижение уровня провоспалительных цитокинов в сыворотке. У 70% пациентов снизилась концентрация хотя бы одного цитокина, у 40% - снизилась концентрация всех трех провоспалительных цитокинов. В группе ДФ клинический эффект от приема препарата был более быстрым, но менее выраженным; изменений в системной выработке провоспалительных цитокинов в группе ДФ не выявлено. В отличие от традиционных НПВС, артрофо-оп не вызывал побочных эффектов. Наблюдение в течение одного года после окончания исследования показало, что поддерживающая доза артрофоона 3-5 табл./день способна сохранить достигнутое клиническое улучшение. Полученные данные хорошо согласуются с результатами

экспериментального исследования и свидетельствуют о способности АФ снижать системную выработку провос-палительных цитокинов, повышенную при РА.

Выводы. Артрофоон оказывает комплексное влияние на активность цитокинового каскада при системном аутоиммунном воспалении, отличное от влияния парентеральных антагонистов TNFa (в частности, инфликсимаба). Одним из вероятных механизмов противовоспалительного действия артрофоона при РА является снижение системной продукции TNFa.

ШЕСТИЛЕТНИЙ ОПЫТ ВАКЦИНОТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ

Моисеенко В.М.1. Балдуева И.А.1, Данилова А.Б.1, Данилов А.О.1, Орлова Р.В.1, Тюкавина Н.В.1, Семенова А.И.1, Киселев С.Л.2, Ларин С.С.2, Щекина Л.А3, Улейская Г.И.3, Проценко С.А.1, Барчук A.C.1, Анисимов В.В.1, Гафтон Г.И.1, Кочнев В.А.1, Молчанов С.Е.4, Школьник М.И.4, Карелин М.И.4, Хансон К.П.1, Георгиев Г.П.2

1ГУН НИИ онкологии им.проф.Н.Н.Петрова М3 ]Рф, Санкт-Петербург; 2Институт биологии гена РАН, Москва; 4Болъница №31, Санкт-Петербург; Центральный научно-исследовательский рентгено-радиологический институт, Санкт-Петербург, Россия

Вакцинотерапия аутологичными дендритными клетками (ДК), модифицированными и немодифицированны-ми опухолевыми клетками с/без адъювантов относится к перспективным направлениям биотерапии и представляет собой попытку преодоления иммунологической толерантности и получение противоопухолевого эффекта.

Цель исследования. Оценить клиническую эффективность вакцинотерапии: 1) костно-мозговыми предшественниками ДК, активированными опухолевым лизатом*, 2) опухолевыми клетками, модифицированными геном tag 7*,

3) опухолевыми клетками с различными адъювантами (БЦЖ, интерлейкин-lß (IL-lß) (Беталейкин), низкие дозы циклофосфамида) у больных солидными опухолями.

Результаты. За период с 1998 по 2004 год в исследование включено 270 пациентов. Клиническая оценка произведена у 163 больных с гистологически верифицированным диагнозом меланомы кожи - 83 больных, раком почки - 65 больных, раком предстательной железы - 8 больных, раком толстой кишки - 5 больных, шванномой - 1 больной и раком верхнедолевого бронха - 1 больной. В течение этого времени: 1) 54 пациента получили вакцинотерапию с IL-1: 20 - с лечебной, и 34 - с адъювантной целью. Осложнения: лихорадка I-II ст. зарегистрирована у 35% больных. Стабилизация процесса наблюдалась у 10 больных (50%). Средняя продолжительность эффекта составила 6 мес. (от 3 до 14 месяцев). У 6 пациентов эффект продолжается в течение 3-10 мес. В группе пациентов, получавших адьювантную вакцинотерапию, у 21 больного (61,8%) время до прогрессирования заболевания составило в среднем 16,4 мес. (от 4,5 до 43 мес.). Медиана выживаемости пациентов, получавших вакцинотерапию с лечебной целью, составила 5 мес. от начала лечения, средняя продолжительность жизни 8 мес. (95% CI 4,8-11,2 мес.). Медиана выживаемости больных, получавших вакци-

* - Исследование выполнено частично за счет средств, выделенных Правительством Москвы.

нотераиию с адьювантной целью, составила 13 мес. от начала лечения, а средняя продолжительность жизни 14,7 мес. 2) 18 больных получили вакцинотерапию с IL1 -(3 в сочетании с цик-лофосфамидом. Осложнения: лихорадка I-II ст. Стабилизация процесса наблюдалась у 6 больных (33%). Средняя продолжительность эффекта составила 14,3 мес. (от 4 до 30 мес.). Медиана выживаемости на фоне вакцинотерапии составила 12 месяцев от начала лечения, средняя продолжительность жизни 17,1 мес. (95% CI 8,2-26,1 мес.),3) 28 больных получили вакцинотерапию аутологичной вакциной, модифицированной геном tag7. Стабилизация процесса наблюдалась у 7 (32%) пациентов. Средняя продолжительность эффекта составила 6,8 месяцев. Минимальный регресс метастазов в легких (регресс <50%) зарегистрирован у 1 больной раком почки продолжительностью 12 мес. У 6 больных с высоким риском развития рецидива после полных циторедуктивных операций средняя продолжительность безрецидивного периода составила 9,6 мес. (от 4 до 21 мес.). Медиана выживаемости

- 6,5 мес., средняя продолжительность жизни 8,1 мес. (95% CI 5,9-10,2 мес.). Реакция гиперчувствителыюсти замедленного типа (ГЗТ) зарегистрирована у 16 (57%). 4) 15 больных получили вакцину на основе костно-мозговых предшественников дендритных клеток. Шесть больных (40%) получили от 1 до 4 внутривенных введений ДК-вакцины. Стабилизация опухолевого процесса в этой группе наблюдалась у 2 пациентов, продолжительностью 3 и 4 мес. Прогрессирование

- у 4 больных. 6 больных получили от 2 до 12 подкожных и/ или внутрикожных инъекций ДК-вакцины. Реакция ГЗТ зарегистрирована у 4 пациентов (67%). Стабилизация опухолевого процесса - у 3 больных (50%) продолжительностью 4-5 мес+. Двум пациентам внутрикожные инъекции аутологичной вакцины комбинировали с низкими дозами цитоста-тиков (5-фторурацил 500 мг + цисплатина 20 мг в/в 1-5 дни, с последующим введением ДК-вакцины или циклофосфамид 300 мг/м2 за 3 дня до введения вакцины). Выполнено по 4 введения ДК-вакцины. В обоих случаях зарегистрировано прогрессирование заболевания. Двое больных получали внутрикожные введения ДК-вакцины в комбинации с ILl-р. В результате лечения у i больного раком почки достигнут минимальный регресс метастазов в легких и плевре (<50%), который продолжался в течение 10 мес. Медиана выживаемости на фоне проведения вакцинотерапии составила 12 мес. от начала лечения, средняя продолжительность жизни 9,6 мес. (95% CI 6,8-12,5 мес.).

Выводы. Вакцинотерапия аутологичными ДК, модифицированными и немодифицированными опухолевыми клетками с/без адъювантов хорошо переносится больными, сопровождается иммунологическим и клиническим эффектом.

ИНДУКЦИЯ МЕЛАНОМАСПЕЦИФИЧЕСКИХ ЦТЛ С ПОМОЩЬЮ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК, НАГРУЖЕННЫХ СМЕСЬЮ ЛИЗАТОВ КЛЕТОК РАЗЛИЧНЫХ ЛИНИЙ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА

Москалева Е.Ю.1,2. Кутняк О.В.1, Кондрашева И.Г.2, Гукасова Н.В.1,2, Кешелава В.В.1, Корженевский Д. А., Коростолев С.А.1, Северин С.Е.2, Северин Е.С.1

Всероссийский научныц центр молекулярной диагностики и лечения , Москва, Россия; Московский научно-исрледователъский институт медицинской экологии , Москва, Россия

Введение. Для приготовления противоопухолевых вакцин с использованием дендритных клеток (ДК) важ-

но иметь доступный источник опухолеспецифических антигенов. Ранее нами было показано, что использование для этих целей лизатов опухолевых клеток позволяет получить опухолеспецифические ЦТЛ с более высокой ЦТА, чем при использовании МНС1-рестриктированных опухолеспецифических пептидов. В то же время опухолевая ткань больного, которую можно использовать для приготовления лизатов, доступна далеко не всегда, а в отношении эффективности использования несингенного опухолевого материала в литературе приводятся противоречивые данные. В связи с этим, целыо настоящего исследования явилось изучение возможности использования смеси лизатов клеток меланомы человека различных линий для индукции меланомаспецифических ЦТЛ.

Материалы и методы. Д К получали из моноцитов периферической крови здоровых доноров, которые выделяли с помощью адгезии на пластике и культивировали в среде RPMI 1640 с 10% инактивированной фетальной сыворотки крупного рогатого скота в течение 5 дней с добавлением ГМ-КСФ и IL-4. К незрелым ДК на 24 часа вносили лизаты опухолевых клеток определенной меланомы (ДКЫСЛ), или смесь лизатов клеток меланом различных линий (ДКСМССЬ), а затем еще на 24 часа - факторы для индукции созревания ДК: лейкинферон и TNF-a. Для приготовления иммуногенных ДК были использованы лизаты трех линий клеток меланомы человека: Вго, Каг и MS (по белку 50 мкг/мл) и смесь указанных лизатов в равном соотношении (суммарно по белку 50 мкг/мл). Лизаты опухолевых клеток готовили с помощью замораживания-оттаивания. ЦТЛ индуцировали с помощью ДК, нагруженных лизатами, и после повторной стимуляции исследовали их ЦТА и фенотип.

Результаты и обсуждение. Показано, что линия Вго была устойчива как к ЦТЛ, индуцированным ДКМСЛ, так и к ЦТЛ, индуцированным ДКСЫОТ1, в то время как меланомы Каг и MS были чувствительны к ЦТЛ, индуцированным и ДКЫС1|, и ДКСМССЬ. При этом линия MS была даже более чувствительна к ЦТЛ, индуцированным с помощью ДКСМОТ> (таблица). Чувствительность меланом коррелировала с уровнем экспрессии белка Fas и Fas-зависимого апоптоза.

Показано, что индукция ЦТЛ и с помощью контрольных ДК, и с помощью ДК, нагруженных опухолевыми лизатами, сопровождается накоплением CD56+ и CD3+CD56+-iuieTOK.

При индукции ЦТЛ с помощью ДК больных меланомой при нагрузке ДК сингснным опухолевым материалом ЦТА составляла 0 - 15% у разных больных при соотношении мишеныэффектор, равном 1:40. При использовании ДК больного, нагруженных смесыо лизатов разных меланом или смесью лизата опухолевых клеток с HSP70 удавалось индуцировать ЦТЛ с более высокой ЦТА, чем при использовании лизата сингенных опухолевых клеток. Таким образом, нагрузка ДК смесью лизатов разных ме-

ТАБЛИЦА. ЦТА ЛИМФОЦИТОВ, ИНДУЦИРОВАННЫХ ДК^, И ДКСМЕСЬВ ОТНОШЕНИИ РАЗЛИЧНЫХ МЕЛАНОМ ПРИ СООТНОШЕНИИ МИШЕНЬ'.ЭФФЕКТОР

Линия клеток меланомы ЦТА,%

Индукция ДК... Индукция ДК

Вго 0 0

Каг 46 32

MS 17 48

ланом позволяет индуцировать ЦТЛ, обладающие достаточно высокой ЦТА в отношении различных линий меланомы.

Заключение. При меланоме в качестве источника опухолеспецифических антигенов для приготовления вакцин с использованием Д К может быть использована смесь лизатов различных опухолевых клеток меланомы человека.

НОВЫЕ АСПЕКТЫ ТЕРАПИИ АТОПИИ

Немыкина O.E.. Егорова Н.Б., Курбатова Е.А, Щербакова Б.В. Грубер И.М.

ГУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва, Россия

Иммунологические механизма патогенеза атопии позволяют пересмотреть на новой теоретической основе сложившиеся представления о роли иммунокорректоров в терапии IgE-опосредованной аллергии. Применение таких препарататов представляется патогенетически оправданным не только в случаях, отягощенных частыми бактериальными и вирусными инфекциями, но и при многих других атопических заболеваниях. Однако существующие иммунотропные препараты в достаточной степени не охарактеризованы по селективной способности изменять дисбаланс Thl/Th2 лимфоцитов, нарушенный при этой патологии. На примере атопического дерматита мы изучили возможность оптимизации терапии с помощью поликомпонентной вакцины «Иммуновак-ВП-4».

Под наблюдением было 27 детей с АД в возрасте от 4 до 14 лет. У 23 из них было установлено среднетяжелое течение АД и у 4-х легкое. Все больные лечились в стационаре и после выписки находились под наблюдением от 6 до 12 месяцев. Больным проводили базисную терапию и вводили поликомпонентную вакцину «Иммуновак-ВП-4» 3-кратно и перорально 5-кратно. До введения вакцины и через 1-2 и 3-6 месяцев после окончания курса вакцинотерапии исследовали содержание субпопуляций лимфоцитов с маркерами CD3, CD4, CD8, CD16, CD21 и CD25 с использованием моноклональных антител методом проточной цитометрии на проточном цитометре фирмы «BIO-RAD«. Уровень общего IgE определяли методом твердофазного двуциклового хемилюминесцентного иммуномет-рического анализа на анализаторе «IMMULITE» фирмы Хоффман Ла-Рош». Уровень сывороточных иммуноглобулинов A,M,G классов определяли по Манчини.

Изучение динамики субпопуляций лимфоцитов показало, что после курса терапии прослеживается четкая динамика нарастания абсолютного и относительного количества субпопуляций лимфоцитов с маркерами CD3, CD4, CD 16, CD21, CD25 (табл. 1). Обращает на себя внимание тот факт, что увеличение абсолютного и относительного числа субпопуляций лимфоцитов происходило постепенно и не выявлялось сразу после курса терапии вакциной. Существенные сдвиги были выявлены в интервале 1-2 месяцев после введения вакцины, а наиболее высокие значения определялись через 3-6 месяцев. В этот срок абсолютное количество лимфоцитов с маркером CD 16 составляло (0,4±0,03)х109 г/л, что превышало исходное значение в 2,2 раза (р<0,001). Абсолютное содержание субпопуляций CD21 и CD25 увеличивалось по сравнению с исходным уровнем в этот срок в 1,7 и 1,43 раза соответственно.

Содержание IgA и IgG в сыворотке крови до иммунотерапии было ниже нормальных значений, уровень IgM был в пределах нормы, а количество общего IgE было зна-

чительно выше номы (773,5± 107,6) кЕ/л. После курса терапии в первые 2 срока исследования существенная динамика выявлена в содержании общего ^Е, его уровень снизился до (461+95,5) кЕ/л (р< 0,05). Через 3-6 месяцев после введения вакцины было отмечено значительное увеличение количества (р< 0,05).

Характер аутофлоры тесно связан с особенностями недостаточности иммунной системы. Кишечник меняет свою экологию, реагируя на разнообразные нарушения гомеостаза, поэтому дисбиотические реакции можно использовать как критерий адекватности проводимой терапии. Проведенная терапия поликомпонентной вакциной способствовала существенному увеличению (на 1-2 по-

рядка) лакто- и бифидобактерий и практически полному исчезновению стафилококка и протея.

Положительная динамика иммунологических и мик-роэкологических показателей коррелировала с данными клинического обследования больных. Было выявлено постепенное снижение тяжести течения заболевания, субъективной симптоматики и индекса ЗСОЯАБ в 3,5;

2,9 и 3,2 раза соотественно.

Таким образом, выявлена стойкая (в течение 6 месяцев) ремиссия клинических показателей у детей с АД. Полученные данные позволяют рекомендовать поликомгюнентную вакцину « Имму новак-ВП-4» для оптимизации терапии аллергических заболеваний, в частности, атопического дерматита.

ТАБЛИЦА 1. ДИНАМИКА СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ ПРИ ТЕРАПИИ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА У ДЕТЕЙ ПОЛИКОМПОНЕНТНОЙ ВАКЦИНОЙ

Срок исследования Маркеры лимфоцитов, средние данные, М±т

CD3 CD4 CD8 CD16 CD21 CD25

% абс % Абс. % абс % абс % абс % абс

До начала лечения п=24 59,0±2,4 1,4+0,8 32,4+1,6 0,78±0,06 24,7±1,9 0,64±0,05 7,6±0,8 0,1810,02 11,6±0,8 0,3+0,02 1,2Ю2 0,018±0,004

При выписке п-20 60,8±2,2 1.5Ю.1 34,2±1,4 о,эзю,ов 24,7±1,9 0,68+0,С6 8,7±0,9 0,ЙЮ,03 12,4+0,8 0,38*10,04 1,4±02 ОДНО,003

Через 1 -2 мес. 66,8*±1,7 1,76*±0,13 38,2**±1,2 1,14±0,07** 25,1+2,6 0,75+0,05 12,0**±1,2 0,33**10,03 15,9**±1,1 0,45**Ю,03 №±0,26 0,04*10,001

Через 3-6 мес. п=24 68,1**±1,1 1,9**Ю,1 ЗВД***±1,0 1,15*^0,11 25,4±1,0 0,73±0,06 13,4***±1,2 0,4***Ю,03 14,9*±1,0 0,51 "Ю,03 2,1**±0,05 о,т*ю,ом

Достоверность разности по сравнению со сроком до терапии

- *р<0,05

- **р<0,01

-***р<0,001

ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕПАРАТА ВИФЕРОН В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ПИЕЛОНЕФРИТА У БЕРЕМЕННЫХ

Никольская И.Г.. Тареева Т.Г., Будыкина Т.С., Микаелян A.B., Делинян Н.В.

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии,

ГУНИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, Москва, Россия

Цель. Исследование интерферонового статуса (ИФС) и аутоантител к y-IFN и его рецепторам у беременных с различными стадиями хронического пиелонефрита и подбор корригирующей терапии с использованием препарата виферон.

Материал и методы. Обследовано состояние ИФС и аутоантител к y-IFN и его рецепторам методом ИФА в III триместре у 51 беременной с хроническим пиелонефритом. Из них у 30 (59%) пациенток имелась клиника обострения хронического пиелонефрита, подтвержденная лабораторными методами обследования. У 21 больной хронический пиелонефрит был в стадии стойкой ремиссии (41%).

Результаты. У 27 пациенток из 30, имевших обострение процесса, выявлялось повышение уровня аутоантител к y-IFN и его рецепторам, у 45% из них это повышение было значительным и составляло от 20 усл.ед. и выше. У беременных с выраженным обострением пиелонефрита IFN был на уровне 4 (2-4) ME/мл, способность лейко-

цитов к продукции а-IFN - 16 (4-16) ME/мл,y-IFN - 8(2-8) МЕ/мл.

Из 21 пациентки с хроническим пиелонефритом в стадии стойкой ремиссии у 18 (86%) отмечалось снижение уровня антител к у-1РЫ и его рецепторам. У остальных 3 пациенток группы уровень антител к Y-IFN и его рецепторам был повышен. Это были пациентки с мочекаменной болезнью (МКБ), имевшие обострение МКБ во время беременности.

Сывороточный Y-IFN у пациенток в стадии ремиссии составил 4(4-8) МЕ/мл, способность лейкоцитов к продукции a-IFN 32(8-32) МЕ/мл, Y-IFN -16(4-16) МЕ/мл.

Заключение. Таким образом, повышение уровня антител ку-1РЫ и его рецепторам может быть сопряжено с обострением хронического инфекционного процесса в почке. Различные типы ИФС у беременных с пиелонефритом также сопряжены с вариантами клинического проявления заболевания, характеризуют различные степени угнетения системы ШН, что позволяет рекомендовать дифференцированный подход к корригирующей терапии. При хроническом пиелонефрите в стадии ремиссии препарат виферон-1 применялся дважды в сутки 5 дней, повторяя курс каждые 4-6 недель;

В период реконвалесценции после выраженного клинического обострения виферон-2 назначался по 1 св. 2 раза в день 5 дней, далее по 1 свече дважды в сутки через день (на курс 20 свечей). Это позволило снизить количество обострений пиелонефрита на 20% и предупредить рецидивирующее течение заболевания.

РАЗРАБОТКА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ХИТОЗАНА

Нудьга JI.A.. Цыган В.H., Никитин В.Ю., Жоголев К.Д., Жоголев С.Д.

Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург;

Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова, Санкт-Петербург, Россия

Проведены исследования по разработке лекарственных форм на основе хитозана для энтерального, парентерального и наружного применения.

Освоен выпуск биологически активной добавки к пище (БАД), изготавливаемой из мелкодисперсного порошка хитозана (из панциря камчатского краба) и бурых морских водорослей (морская капуста и фукус). Показано, что БАД с хитозаном повышает неспецифическую резистентность организма к действию неблагоприятных факторов среды, обладает противоопухолевыми свойствами, стимулирует рост бифидобактерий и полезной кишечной флоры. Аминогруппы хитозана эффективно связывают жиры и выводят их из организма, способствуя снижению уровня холестерина в крови. Хитозан способен активно сорбировать молекулы органической и неорганической природы, что делает целесообразным его назначение при повышенной токсической нагрузке, пищевых отравлениях и других интоксикациях.

Для парентерального применения разработаны технические условия препарата «Хитосол», который оказался менее токсичным по сравнению с исследованными параллельно другими полисахаридами (пирогенал, продигио-зан). Он не вызвал аллергизирующего и пирогенного эффектов. В опытах на мышах установили, что этот препарат оказывает выраженное защитное действие при бактериальной септической инфекции. Так, при введении хи-тосола животным и последующим их заражении летальной дозой кишечной палочки выживаемость мышей достигала 60-90%. Хитосол активировал фагоцитоз микроорганизмов, увеличивал количество мигрирующих фагоцитов в очаг воспаления. Также было выявлено и изучено противовирусное действие хитосола на модели гриппозной инфекции у мышей. Хитосол при введении животным как в момент заражения вирусом гриппа, так и за 24 ч до заражения способствовал увеличению выживаемости подопытных животных и более легкому течению у них гриппозной инфекции. Выживаемость мышей при профилактическом введении препарата увеличивалась в

3-4 раза, а при интраназальном введении вместе с вирусом - в 2,0-2,5 раза. Хитосол был успешно применен в крупномасштабных производственных испытаниях в свиноводческом комплексе для профилактики инфекционных заболеваний поросят-сосунов (A.c. № 1681858). Однократное внутримышечное применение препарата повышало сохранность молодняка у свиней на 10-15% и обеспечивало среднесуточный прирост массы тела поросят на 20-40 г. Препарат может быть рекомендован для повышения иммунорезистентности и у других видов животных, а после завершения клинических испытаний - у человека.

Проведенные нами исследования свидетельствуют также об эффективности применения препаратов хитозана в виде наружных лекарственных форм (раствор, гель, пленка, губка). При изучении их влияния на процесс за-

живления кожной раны у крыс и кроликов наиболее эффективным оказалось применение 5%-го геля ацетата хитозана, обеспечивающего ускорение процесса репарации кожи на 20% по сравнению с контролем. Хитозан в виде губки оказался эффективным стимулятором остеогенеза, что было показано нами при применении этой лекарственной формы для устранения экспериментально созданного костного дефекта нижней челюсти у кроликов. Исследование механизмов стимулирующего эффекта хитозана при заживлении ран показало, что в основе его лежит активация фазы биологического очищения раны и оптимизация течения раневого инфекционного процесса. Главная роль при этом принадлежит повышению функциональной активности фагоцитов: ускорению миграции фагоцитов в рану (очаг воспаления), а также усилению фагоцитарной активности макрофагов вследствие увеличения положительного заряда их поверхностной мембраны и активации механизмов кислородзави-симой бактерицидное™.

Сочетание выраженной биологической активности с биодеградируемостыо, уникальные физико-химические свойства делают возможную область применения хитозана в медицине весьма обширной. Значительным преимуществом препаратов хитозана является их полимерная структура, позволяющая изготовить препараты различных агрегатных состояний: от растворов до твердых изделий типа контактных линз, перевязочного и шовного материала и т.п.

Таким образом, результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод о перспективности использования препаратов хитозана в медицине и целесообразности дальнейших исследований по разработке разнообразных лекарственных форм хитозана для наружного, энтерального и парентерального применения.

ВЛИЯНИЕ СПЛЕНОПИДА НА КЛИНИКОИММУНОЛОГИЧЕСКУЮ КАРТИНУ У ПЕРЕНЕСШИХ ГЕМОРРАГИЧЕСКУЮ ЛИХОРАДКУ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ

Обухова Е.В.. Санникова A.A., Максименкова О.М.

Ижевская государственная медицинская академия, Ижевск, Россия

В качестве этиогштогенстического средства у рекон-валесцентов ГЛПС впервые с целью иммуномодуляции был применен препарат спленопид, разрешенный для медицинского применения ГФК М3 РФ от 19.12.2002 г. Цель и задачи исследования: обоснование клинико-иммунологической эффективности иммуномодулятора силенопида в комплексной терапии реконвалесцентов ГЛПС на амбулаторно-поликлиническом этапе реабилитации.

Материалы исследования: было обследовано 90 мужчин реконвалесцентов ГЛПС, перенесших среднетяжелое течение острого периода, период наблюдения - 1 месяц после выписки из стационара. По принципу рандомизации сформированы: основная группа (I группа) - 45 реконвалесцентов (39+20,5 лет), получавших на фоне традиционной терапии спленопид; группа сравнения (II группа) - 45 реконвалесцентов (41 ±1,74 года), лечившихся традиционно (курантил, поливитаминные препараты и др.); контрольная группа - 30 практически здоровых

лиц. Спленопид назначался в разовой дозе 230 мг (16 мг по активному белку) на курс лечения от 3 до 5 внутримышечных инъекций. Методы исследования включали: сбор анамнеза; оценку физического статуса, исследование общеклинических анализов крови, мочи; определение суточной протеинурии; оценка концентрационной способности почек по пробе Зимницкого; биохимическое исследование крови; определение неорганических компонентов мочи: К, Na, Са, Mg; изучение активности ферментов в моче: лизоцима и NAG (№ацетил-|5-Б-гексозаминидазы); определение (32 - микроглобулина крови и мочи. Изучение показателей иммунного статуса с использованием моноклональных и поликлональных антител для определения CD3+ (Т-лимфоцитов), CD4+ (Т-хелперов), CD8+ (Т-киллеров/супрессоров), CD20+ (В-лимфоцитов) методом иммунофлуоресценции; определение уровня иммуноглобулинов A, G, М методом радиальной иммунодиффузии по Манчини; ЦИК - фотометрическим методом; и фагоцитарной активности (фагоцитарный индекс, фагоцитарное число, адгезия нейтрофилов). Показанием к проведению иммуномодулирующей терапии были: присутствие у большинства пациентов синдрома постинфек-ционной астении, лабораторных подтверждений развивающегося тубулоинтерстициального нефрита, изменения клеточного и гуморального иммунитета различного уровня, подтверждающих наличие у реконвалесцентов ГЛПС иммунной недостаточности первой степени, снижение показателей неспецифической резистентности организма.

Основные результаты: При назначении препарата отмечается достоверно положительная динамика исчезновения симптомов синдрома постинфекционной астении, болевого и отечного (общей слабости, повышенной утомляемости, болей и тяжести в поясничной области, сухости во рту и жажды, исчезновение «+» симптома сотрясения). В I группе выявлена достоверная нормализация показателей клеточного иммунитета (CD3+, CD8+), тогда как во II группе эти же показатели изменяются недостоверно, хотя имеется положительная тенденция к их нормализации. Динамика иммуноглобулинов достоверно не отличалась в сравниваемых группах. Уровень IgG повысился, но недостоверно в I группе и составил 11,83+0,76 г/л (р<0,01). ЦИК снижались достоверно в обеих группах, но нормализовались только в первой (0,83±0,36 усл.ед., р<0,05). Достоверные различия выявлены в показателе активации фагоцитоза, который на фоне терапии спленопидом повысился до 60,69±2,88% (р<0,05), тогда как в сравниваемой группе составил 56,83±3,96% (р<0,1).

Заключение: спленопид оказал положительное влияние на клиническую картину периода реконвалесцен-ции; комплексное обследование функционирования канальцевой системы показало нефропротективное действие спленопида; в группе с применением спленопида наблюдалась более быстрая положительная динамика иммунологических показателей в виде нормализации CD3+, CD8+, активации фагоцитоза, способствуя клиническому улучшению течения периода выздоровления. Таким образом, спленопид можно рекомендовать в качестве препарата для лечения реконвалесцентов ГЛПС, поскольку он не токсичен, не вызывает побочных эффектов и доказал свою клинико-иммунологическую эффективность у этой группы больных. Спленопид хорошо переносится больными, ни в одном случае применения препарата не отмечено осложнений или нежелательных эффектов, в том числе аллергических реакций. Противопоказанием

для применения препарата является индивидуальная непереносимость.

ОЦЕНКА КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЦИТОКИНОТЕРАПИИ ЗАТЯЖНЫХ И ХРОНИЧЕСКИХ ФОРМ ЛИСТЕРИОЗА У ДЕТЕЙ

Попова Н.В.1. Беляев H.H.2, Саввулиди Ф.Г.2, Тлеулиева Р.Т.2

*ГОО «ДиаМед»; Институт молекулярной биологии и биохимии им. МЛ. Айтхожина, Алма-Ата, Казахстан

Ухудшение эпидемической ситуации по листериозу в последнее время обусловлено широким распространением листерий во внешней среде, их высокой устойчивостью, снижением иммунореактивности детского организма, внутриутробной инфицированпостью плода. В педиатрической практике актуальность проблемы связана с ростом количества больных детей с затяжными и хроническими формами листериоза, несмотря на традиционно проводимую антибактериальную терапию.

Цель работы - установить клинико-иммунологичес-кие особенности при затяжных и хронических формах листериоза у детей и оценить степень эффективности коррекции выявленных нарушений препаратом Ронколей-кин .

Под наблюдением находились 20 детей в возрасте от 1 года до 13 лет, больных затяжными и хроническими формами листериоза. Среди клинических форм в преобладающем большинстве выделена первично-генерализованная форма - 54,1% (в т.ч. с поражением суставов, паротитом, гепатитом). У 13% больных заболевание протекало в тяжелой форме, у остальных - в среднетяжелой. Иммунологические исследования проводились до введения препарата Ронколейкин и через 2 суток после последней инъекции. В качестве контроля использовали кровь 6 здоровых доноров (дети в возрасте 10-13 лет). Активность Т- и В-клеток оценивали в тесте бластной трансформации лимфоцитов мононуклеарной фракции периферической крови, выделенной на градиенте фикол-ве-рографина, стимулированных ФГА или ЛПС. Продукцию IL-2 и IL-4 Т-лимфоцитами оценивали в тесте индукции мононуклеаров ФГА с помощью ИФА («Протеиновый контур», С.-Петербург). Продукцию IL-1 моноцитами/ макрофагами периферической крови, выделенными адгезией на пластике из мононуклеарной фракции, определяли с помощью биологического метода в тесте костиму-ляции тимоцитов молодых мышей. Содержание TNF-a в периферической крови определяли с помощью ИФА («Протеиновый контур»). Помимо функциональных тестов у больных определяли содержание основных популяций мононуклеарных клеток по CD-маркерам с помощью иммунофлуоресценции. Ронколейкин вводили на фоне традиционной терапии трехкратно через 48 ч внутривенно капельно в дозах 250 тыс. МЕ - детям до 5 лет, 500 тыс. МЕ - детям старше 5 лет.

В течение первых суток от начала терапии значительно уменьшились проявления интоксикации, сократились сроки лихорадочного периода, по сравнению с больными, находящимися на традиционном лечении. В течение

6 месяцев после выписки не было отмечено рецидивов заболевания. Проведенное иммунологическое исследование до начала терапии показало снижение относительно-

го содержания зрелых Т-лимфоцитов, но при этом активность Т-клеток не отличалась от контрольной группы и существенно не изменялась в ходе терапии. Пролиферативная активность В-лимфоцитов была резко угнетена. По результатам иммунограммы после окончания терапии выявлено увеличение количества Т-лимфоцитов и их субпопуляций, а также увеличение количества В-клеток. Наблюдалось незначительное усиление их пролиферативной активности, однако, не достигающее полного восстановления. У больных уровень содержания TNF не превышал норму и не изменялся в ходе лечения. Продукция IL-1 моноцитами также не отличалась от контроля. Также не было отмечено существенных отклонений в продукции IL-2 и IL-4 Т-клетками после стимуляции ФГА.

Таким образом, при хронических и затяжных формах листериоза у детей наблюдаются определенные сдвиги в иммунной системе, основным из которых является значительное угнетение пролиферативной активности В-лимфоцитов. Лечение Ронколейкином существенно улучшает клинические и иммунологические показатели.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЦИТОКИНОТЕРАПИИ ПРИ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЕ У ДЕТЕЙ

Просекова Е.В.. Деркач В.В.

Владивостокский государственный медицинский университет, Дальневосточный филиал НИИ КИ СО РАМН, Детский «Астма-центр»,

Владивосток, Россия

Введение. Регуляторное участие цитокинов в Th2-lgE опосредованном воспалении при бронхиальной астме (БА) определяет рациональность использования препаратов, индуцирующих или содержащих цитокиновый профиль Th,- хелперов.

Цель. Анализ эффективности ронколейкина и лей-кинферона в терапии среднетяжелой БА у детей составлял цель нашего исследования.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 90 детей в возрасте от 6 до 15 лет со среднетяжелым клиническим течением БА с базисной терапией недокромилом натрия и ронколейкином или лейкинфероном. Для оценки эффективности терапии использовали клинические (балльная оценка симптомов, пикфлуометрия), биохимические (уровень оксида азота (N0) в конденсате паров выдыхаемого воздуха (КПВВ) и иммунологические (содержание INFy, IL-lß и IL-6 в сыворотке крови) маркеры воспаления. Препараты цитокинов включали в приступный период болезни, спровоцированный респираторными инфекциями.

Основные результаты. Проведенные исследования отметили, что включение ронколейкина или лейкинфс-рона в терапию БА обеспечивали достоверно более быстрое, чем при монотерапии недокромилом натрия, купирование симптомов обострения, меньшую потребность в ß2-aroHHCTax короткого действия и снижение содержания N0 в КПВВ в течение трех недель с 10,4+0,66 до 3,22±0,36 М/л. Включение цитокинотерапии в программу лечения БА обеспечивало нормализацию уровня сывороточных IL-lß с 4,70±0,34 до 3,03±0,13 pg/ml р<0,001, IL-6 с 12,44±0,96 до 7,07±0,98 pg/ml, нарастание INFy с 19,97 ±2,76 pg/ml до 39,93 ±2,83 pg/ml р<0,01. При этом в группе с монотерапией тайледом данные показатели через 3 недели от начала лечения оставались 4,01 ±0,19,9,28±1,01 и 23,13±2,87 pg/ml соответственно.

Заключение. Проведенные исследования отметили, что комбинация тайледа с ронколейкином или лейкинфероном при терапии среднетяжелой БА у детей ускоряет купирование воспалительного процесса в дыхательных путях, обеспечивает коррекцию иммунных нарушений, повышает контроль за болезнью.

ИММУНОКОРРИГИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА ПРЕПАРАТА ЛАКТО ФЛОР В ЛЕЧЕНИИ ХРОНИЧЕСКОГО ПАРОДОНТИТА

Сафаров Р.Т.. Миркамалова Л.И.

ТашИУВ, Республиканский ОНЦ М3 Ташкент, Узбекистан

В патогенезе пародонтита большую роль играют иммунологические нарушения, характеризующиеся наличием вторичного Т-клеточного иммунодефицита. Одним из эффективных методов воздействия на зону воспалительного очага является антибактериальная терапия, оказывающая депрессивное действие на иммунную систему. Учитывая положительное влияние отечественного препарата Лакто ФЛОР (ЛФ) на заживление ран, уменьшение побочного действия при лучевой и химиотерапии злокачественных новообразований, целью нашего исследования явилось изучение влияния препарата ЛФ на клиническое состояние и иммунологические показатели при хроническом пародонтите.

Под наблюдением было 69 больных хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) 27 мужчин и 42 женщины в возрасте 26-54 года. Из них 47 человек (ХГП легкой степени 12, средней степени 15 и тяжелой степени - 20) получали ЛФ. После удаления над- и поддесне-вых зубных отложений оставляли турунды, пропитанные ЛФ. Группу сравнения составили 22 пациентов (ХГП легкой 7, средней - 8 и тяжелой степени 7), лечение которых проводили с применением антибиотиков широкого спектра действия (АБТ). Для оценки эффективности лечения использовали индекс гигиены (ИГ) и ПАМ, определяли глубину ПК с помощью пуговичного зонда, степень подвижности зубов. Курс лечения составил 10-12 процедур.

Иммунологические исследования проводили до и после курса лечения и включали: определение количества общих, Т-лимфоцитов методом спонтанного Е-розеткообра-зоваиия, фенотипирования лимфоцитов с помощью моноклональных антител производства ИИ М3 РФ (CD4, CD8, CD16, CD19). Функциональную активность лимфоцитов определяли по КонА-индуцированной продукции ФУМ-Л (оптимальная доза) и ФСМ-Л (субопримальная доза КонА) - фактора, угнетающего и стимулирующего миграцию лейкоцитов периферической крови в реакции торможения миграции лейкоцитов РТМЛ. Определялась активность цитокинов (сФУМ и сФСМ) в сыворотке и сенсибилизация in vitro к смыву из ротовой полости - СРП.

Установлено, что течение ХГП сопровождается снижением количественных и функциональных показателей Т-клеточного иммунитета с нарушением баланса цитокинов сФУМ и сФСМ в сыворотке и сенсибилизацией in vitro к смыву из ротовой полости (СРП). Глубина нарушений иммунного статуса коррелирует с тяжестью патологического процесса.

Терапия ХГП с применением антибиотиков широкого спектра действия с витаминизированной смесью, атак-

же препарата Лакто ФЛОР приводит к нормализации клинических показателей (на основании изменения ИГ и ПМА).

Лакто ФЛОР оказывает иммуномодулирующий эффект на измененные показатели иммунного статуса, по сравнению с АБТ, и выражается в повышении количественных и функциональных параметров Т-клеточного иммунитета, нормализации баланса сывороточных цито-кинов сФУМ и сФСМ, а также в снижении частоты сенсибилизации к СРП. Анализ результатов по изучению влияния терапии на параметры иммунного статуса пациентов с ХГП выявил более выраженное (при Р<0,01) положительное влияние монотерапии препаратом ЛФ, по сравнению с группой АБТ.

ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК ЦЕНТРАЛЬНОЙ ЛИМФЫ ЧЕЛОВЕКА

Сидоренко Ю.С.1, Златник Е.Ю.1, Гукасова Н.В.2, Москалева Е.Ю.2,3, Попова О.Н.3, Северин С.Е2., Северин Е.С.3

1 Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, Ростов, Россия; Московский НИИ медицинской экологии, у1осква, Россия;

Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения, Москва, Россия

Введение. Для лечения рака легкого в ряде клиник успешно применяется метод лимфохимиотерапии с использованием центральной лимфы. В том случае, если центральная лимфа может быть источником для приготовления иммуногенных дендритных клеток (ДК), метод лимфохимиотерапии окажется возможным сочетать с использованием иммунотерапии на основе ДК-вакцин. В связи с этим целью настоящей работы стало изучение ДК центральной лимфы и возможности приготовления иммуногенных ДК из клеток лимфы, собираемой у больных в процессе проведения лимфохимиотерапии.

Материалы и методы. ДК получали из клеток лимфы после отделения примеси эритроцитов с помощью центрифугирования через градиент фиколл-пак и инкубации в культуральной среде с добавлением 1Ь-4 и ГМ-КСФ или только ГМ-КСФ. Для индукции созревания ДК вносили ТОТ-а и лейкинферон. Фенотип КЛ исследовали с помощью проточной цитофлуориметрии. Антигенпредстав-ляющеую способность (АПС) ДК оценивали по включению 3Н-тимидина при культивировании ДК лимфы с ал-логенными лимфоцитами. Цитотоксическую активность (ЦТА) сингенных лимфоцитов, индуцированных ДК, нагруженными лизатом опухолевых клеток меланомы человека линии МБ, определяли в отношении этих же клеток, предварительно помеченных 3Н-тимидином.

Результаты и обсуждение. Исходная популяция клеток лимфы была достаточно гомогенной по светорассеянию и не отличалась от обычной фракции мононуклеар-ных лейкоцитов периферической крови. Кроме того в лимфе обнаруживалось около 5% более крупных клеток, среди которых присутствовала небольшая доля клеток с фенотипом ДК (СБ83, СБ86, СБ54, НЬЛ-ОИ). У отдельных больных доля ДК в лимфе достигала 4%. После инкубации с факторами роста и созревания ДК по светорассеянию обнаружено три популяции, одна из которых соответствует мононуклеарным лейкоцитам, другая - бо-

лее крупным клеткам (в этой области обычно находятся зрелые ДК, которые получают из моноцитов периферической крови). Третья популяция соответствует погибшим и погибающим клеткам. По морфологии ДК, полученные из лимфы, отличаются от ДК, получаемых из моноцитов, и напоминают ДК, получаемые из костного мозга. В лимфе обнаружено до 4% клеток, несущих маркер стволовых кроветворных клеток CD34, которые могут быть предшественниками ДК в процессе инкубации в присутствии ГМ-КСФ, IL-4, TNFa и лейкинферона. В процессе инкубации клеток лимфы с факторами роста и созревания количество С034+-клеток возрастало. При исследовании АПС ДК (их количество подсчитывали по количеству крупных клеток) показано, что Д К, полученные из клеток лимфы больных раком легкого, обладают достаточно высокой АПС, хотя и несколько меньшей, чем ДК, полученные из моноцитов периферической крови. Для исследования возможности индукции специфических в отношении опухолевых антигенов ЦТЛ с помощью ДК, полученных из клеток лимфы, ДК инкубировали с лизатом клеток меланомы человека линии MS и после отмывания добавляли к сингенным лимфоцитам, источником которых служили клетки лимфы. Показано, что в выбранных условиях удается индуцировать меланомаспецифи-ческие ЦТЛ с помощью ДК, полученных из клеток лимфы человека.

Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что центральная лимфа содержит около 4% ДК. Их количество, степень зрелости и функциональная активность могут быть увеличены при инкубации с соответствующими цитокинами. Приготовленные таким образом из клеток центральной лимфы ДК могут быть нагружены опухолеспецифическими антигенами и индуцировать антигенспецифические ЦТЛ, что позволяет предполагать возможность использования таких ДК для приготовления аутологических ДК-вакцин. Оптимальным источником опухолеспецифических антигенов при этом может служить опухолевый материал, полученный у больного в процессе операции или при получении биопсии.

ИММУНОКОРРЕКЦИЯ ЦИТОКИН-ОПОСРЕДОВАННОГО ИММУНОДЕФИЦИТА У БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ГЕНИТАЛИЙ

Снимшикова И.А.. Ререкин И.А., Пехото O.K., Пальчик Е.А., Шманева И.А., Батраченко O.E.

Орловский государственный университет, медицинский институт, Орел, Россия

Несмотря на большое количество работ, посвященных терапии острых воспалительных заболеваний гениталий, остается нерешенным вопрос выбора тактики ведения больных и совершенствования имеющихся способов лечения. Исследованиями последних лет показано, что хирургические инфекции, как правило, сопровождаются цитокин-опосредованным иммунодефицитом. В связи с этим приобретает актуальность разработка комплексного патогенетически обоснованного подхода к терапии воспалительных заболеваний органов малого таза с включением в программы лечения методов, позволяющих корригировать цитокиновый статус. Целью работы явилось изучение показателей системного и локального цитоки-нового статуса у женщин с острыми воспалительными

заболеваниями органов малого таза на фоне сочетанного использования сеансов эфферентной терапии и локальной иммунокоррекции препаратом суперлимф. Курс эфферентной терапии включал в себя 2-3 сеанса плазмафе-реза, который осуществлялся дискретным способом по общепринятой методике, через день. Локальная иммунокоррекция (ЛИ) препаратом суперлимф в виде вагинальных суппозиториев проводилась ежедневно в течение 5-

7 дней. Эфферентная терапия в сочетании с ЛИ была использована в комплексном лечении 24 женщин, среднего возраста 33,7±4,8 года. Контрольную группу составили 40 больных, получавших традиционное лечение. Концентрацию цитокинов в сыворотке крови и смывах из очага воспаления определяли методом твердофазного ИФА с помощью коммерческих тест-систем «Протеиновый контур» и «Цитокин» (г. Санкт-Петербург). Анализ результатов оценки цитокинового статуса позволил установить у пациенток два типа реагирования организма на локальный воспалительный процесс: первый тип, сопровождающийся увеличением синтеза провоспалительных цитокинов и «активным» течением заболевания и второй - со снижением продукции 1Ь-1(3, 1Ь-6, 1Ь-8, ТОТ-сс на фоне затяжного течения патологического процесса в гениталиях. Так, исследования концентраций провоспалительных цитокинов в смывах из очага воспаления, проведенные до применения эфферентной терапии и ЛИ, выявили повышение их уровня в 87,5% случаев. При этом повышенная продукция 1Ь-1(3,1Ь-6,1Ь-8, ТЫИ-а отмечалась у 42% больных, 1Ь-1(3,1Ь-6 и П.-8 - у 37,5%, 1Ь-1(5 - у 12,5%, 1Ь-6 - у 8% женщин соответственно. Более высокие концентрации в смывах отмечены для 1Ь-1(3 и 1Ь-8, что сочеталось с выраженностью местной воспалительной реакции, вероятно, вследствие рекрутирования фагоцитов в зону воспаления. Кроме того, в сыворотках крови 96% данных пациентов определялся повышенный уровень 1Ь-1(3 и ТОТ-а, у 25% - 1Ь-8. При этом показатели продукции 1Ь-1(5,1Ь-8 и ТОТ-а в очаге воспаления значительно превышали их концентрацию в сыворотке крови. Второй тип реагирования организма на локальный патологический процесс наблюдался в 12,5% случаев. При этом снижение концентрации 1Ь-8 в смывах отмечалось у 58% больных данной группы; 1Ь-1(3 и 1Ь-8 - у 17%; 1Ь-1|3 и ТОТ-а - у 4%; И-6 - у 17%; 1Ь-1(3,1Ь-8, ТОТ-сс - у 4% женщин соответственно. Изучение концентраций цитокинов смывов в динамике при применении эфферентной терапии и ЛИ препаратом суперлимф показало, что после окончания курса лечения повышения уровня 1Ь-1(3, 1Ь-8 и ТЫР-ос, при исходном их снижении, не отмечалось только у 2 женщин. При этом следует отметить, что у 20% женщин сеансы плазмафереза и ЛИ приводили к активации исходно повышенной эндогенной продукции 1Ь-1(3 и 1Ь-8 в очаге воспаления, вероятно, до уровня оптимального для купирования локального патологического процесса. У остальных женщин па фоне сочетанного использования плазмафереза и препарата суперлимф отмечалась нормализация концентраций провоспалительных цитокинов как в смывах, так и в сыворотке крови. После курса традиционной терапии уровни исследуемых цитокинов достоверно изменялись, однако, значений нормы в смывах из очага воспаления достигали только у 12,5% женщин. Вместе с тем, у 67% больных наблюдалась нормализация их концентраций в сыворотке крови. Таким образом, проведенные исследования показали, что сочетанное использование сеансов дискретного плазмафереза и иммунокоррекции препаратом суперлимф в программе комплексно-

го лечения женщин с воспалительными заболеваниями гениталий приводит к быстрому восстановлению показателей системного и локального цитокинового статуса, что способствует более раннему, по сравнению с традиционной терапией, купированию локального патологического процесса.

ВЛИЯНИЕ БЕТАЛЕЙКИНА НА ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ЛЕЧЕНИЯ У БОЛЬНЫХ РМЖ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ МЕТАСТАТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА

Стахеева М.Н., Слонимская Е.М., Бабышкина H.H., Чердынцева Н.В., Симбирцев А.С., Кладиев А.А

НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, Томск, Россия; НИИ ОЧБ, Санкт-Петербург, Россия

Актуальность проблемы. Эффективность лечения и исход онкологических заболеваний, в частности, рака молочной железы (РМЖ), определяются клинико-патоге-нетическими особенностями злокачественного процесса: темпом роста опухоли, ее гистологическим типом, стадией болезни, возрастом, гормональным, иммунным статусом больного [И.А.Балдуева и соавт, 1996]. Степень вовлечения регионарных лимфатических узлов в опухолевый процесс - один из важнейших факторов прогноза РМЖ, характеризующий его агрессивность, который необходимо учитывать при проведении противоопухолевого лечения [В.А.Хайленко, 2002, В.Ф.Семиглазов, 2002]. С другой стороны, эффективность противоопухолевого лечения зависит от уровня естественной сопротивляемости организма, которая зачастую бывает угнетена в результате развития злокачественного новообразования и применения повреждающих методов воздействия на опухоль[-Л.Х.Гаркави и соавт., 1998]. Это делает актуальным поиск средств и методов коррекции противоопухолевой резистентности, морфофункциональной составляющей которой является иммунная система.

Целью работы явилось исследование влияния бета-лейкина (рекомбинатного интерлейкина-1) на иммунологические показатели и эффективность противоопухолевого лечения у больных с операбельным РМЖ в зависимости от распространенности метастатического процесса в регионарные лимфатические узлы.

Материал и методы. В исследование была включена 21 пациентка с T1.4N0.2M0 Диагноз верифицирован морфологически. В зависимости от регионарного метастази-рования больные были разделены на 2 группы: 1 (N^,) -12 больных и 2 (N2) - 9 человек. Противоопухолевое лечение включало внутривенные иифузии беталейкина в дозе 5 нг/кг массы тела в течение 5 дней с последующим проведением 2-3 курсов неоадъювантной полихимиотерапии по схеме CMF стандартными дозами и радикального хирургического вмешательства. Эффективность лечения оценивалась по частоте и срокам прогрессирования заболевания. Показатели иммунного статуса исследовали в соответствии с методическими рекомендациями [Р.В.Петров и соавт.,1992]. Статистическую обработку материалов проводили с использованием критерия % 2, непараметрического критерия Вилкоксона для зависимых переменных.

Результаты исследования. Применение беталейкина до начала предоперационной полихимиотерапии у боль-

ных РМЖ с No.! сопровождалось протекторным эффектом в отношении количественных показателей субпопуляций лимфоцитов, функциональной активности нейт-рофильных фагоцитов и увеличением спонтанной пролиферативной активности лимфоцитов по сравнению с группой сравнения. Использование беталейкина у пациенток с N2 не оказало влияния на иммунную систему.

Анализ отдаленных результатов лечения показал, что за 3-летний период наблюдения у больных РМЖ с N0_i, получавших беталейкин, признаков прогрессирования заболевания отмечено не было. Среди пациенток с N2 у 2-х больных выявлено метастатическое поражение костей скелета в течение первого года наблюдения (х 2=2,39, р=0,13). Интересным оказался тот факт, что иммунный статус у больных РМЖ с N2 без прогрессирования заболевания в ответ на проводимое лечение ответил изменением практически всех исследуемых параметров, за исключением индекса стимуляции пролиферации лимфоцитов ФГА. Для больных с неблагоприятным исходом отмечена обратная зависимость: после применения беталейкина без статистически значимой динамики остался 21 показатель, по окончании полихимиотерапии 10 из 34 параметров по сравнению с исходными значениями. Выявленный феномен ригидности может свидетельствовать

об истощении резервов исследуемой системы и, как следствие, об отсутствии выбора адекватного типа реагирования организма.

Заключение. Проведенное нами исследование показало, что характер влияния беталейкина на иммунологические показатели и эффективность его включения в схему противоопухолевого лечения у больных операбельным РМЖ определяется степенью вовлеченности регионарных лимфатических узлов в опухолевый процесс. Высокий риск неблагоприятного течения и исхода заболевания у больных РМЖ с N2 сочетается с ригидностью иммунной системы.

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ СВОЙСТВА ПРЕПАРАТА ЦИТОВИР-3

Степанов A.B.. Легеза В.И., Смирнов B.C., Пак Н.В.

В Мед А, НИИЦ (МБЗ) ГНИИИВМ МО РФ, Санкт-Петербург, Россия

В работе исследовались иммуномодулирующие свойства комплексного препарата Цитовир-3, содержащего тимоген натрий, бендазол, и аскорбиновую кислоту в соотношении 1:20:50 массовых частей. Препарат вводили перорально в дозах 5,3 и 16,0мк/кг. О выраженности иммуномодулирующего действия препарата судили по интенсивности синтеза интерферона (IFN), уровню лизо-цима, неспецифических эстераз и миелопероксидазы в сыворотке крови. Кроме того, оценивали противовирусную и противобактериальную активность препарата. Вирусную инфекцию моделировали путем заражения мышей вирусом гриппа (ВГА) А/Виктория/72 (H3N2) в дозе 3-4 ЛД50. Бактериальную инфекцию воспроизводили на мышах при заражении B.fragilis штамм 2393 в дозе 2,5 ЛД50.

Результаты исследования показали, что Цитовир-3 стимулировал процессы синтеза и секреции в кровь эндогенного интерферона, при введении в дозе 16,0 мг/кг титр IFN возрастал до 8,0 ЕД/мл пик синтеза приходил-

ся на 24 часа с момента введения препарата. При использовании в дозе 5,3 мг/кг титр IFN составил 6,0 ЕД/мл, максимум накопления при этом наблюдался через 4 часа после введения Цитовира-3. Максимальная концентрация лизоцима (1,76 мкг/мл), неспецифической эстеразы (1,12 у.е.) и миелопероксидазы (1,32 у.е.) в сыворотке крови отмечена на 3-и сут. после перорального введения препарата. При 3-кратном увеличении дозы цитовира-3 динамика накопления указанных факторов не изменилась, однако концентрации были примерно в 2 раза выше (лизоцим - 3,12 мкг/мл; неспецифическая эстераза - 2,12 у.е.; миелопероксидаза - 2,98 у.е.). Цитовир-3 обеспечивал выживаемость до 80% инфицированных ВГА животных при применении до заражения и до 100% при его применении после заражения. В испытанных дозах препарат Цитовир-3 обладает защитным эффектом в отношении экспериментальной бактероидной инфекции (повышает выживаемость на 60-80%).

Вывод. Цитовир-3 позволяет комплексно оптимизировать на самых ранних стадиях процессы противоинфек-ционной защиты, особенно в условиях быстро развивающейся инфекции, и вследствие этого является эффективным средством профилактики и терапии бактериальных и вирусных инфекций.

СОВРЕМЕННЫЕ ПРОГРАММЫ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ И ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ В УРОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

Сучков С .В.. Матушевский И.А., Литвинов В.А., Пинегин Б.В., Бурдакова Ю.А., Черепахина Н.Е., Соболевский A.C.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского; Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова; РГМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия;

ГНЦ «Институт иммунологии«, Москва, Россия

Неудовлетворительные результаты лечения больных детей, страдающих хроническими пиелонефритами, зачастую связаны с наличием у таких пациентов вторичного постинфекционного иммунодефицита. К настоящему времени получены данные, касающиеся участия конкретных механизмов клеточного иммунитета в развитии и хронизации пиелонефрита. Значительно меньше информации содержится в литературе относительно гуморальных факторов иммунорегуляции и их роли в реализации эффекторных механизмов иммунного ответа при данном заболевании в целом. Немаловажную роль на уровне отдельных звеньев иммунологической реактивности против конкретного микробного возбудителя или микробных ассоциатов, могли бы играть цитокины, которые способны менять характер течения инфекционно-воспалительного процесса в ту или иную сторону. Естественно, что при таком сложном механизме иммунорегуляции течение инфекционно-воспалительного процесса и пиелонефрита, в частности, зависит, по всей видимости, не только от иммуногенного потенциала инфицирующих микроорганизмов, но и от исходного иммунного статуса организма-хозяина. В связи с этим, лечение таких пациентов должно быть направлено не только на ликвидацию инфекционного возбудителя, но и на коррекцию иммунологических нарушений и восстановление физиологического уровня иммунной функции, что

особенно актуально при ремиттирующем течении заболевания, приводящем к обострениям основного заболевания.

Для проведения адекватной и эффективной иммунокорригирующей терапии лечащему врачу необходимо четко представлять точки приложения действия иммунофарма-кологических средств, знать особенности их фармакокинетики и специфику их действия на конкретные звенья иммунологической реактивности. Особенную сложность представляют комбинированные схемы с использованием двух и более препаратов, каждый из которых обладает собственным механизмом фармакотерапевтического эффекта.

Сравнительный анализ имеющейся в литературе информации и собственного клинического опыта показывает, что такими комбинациями в комплексном лечении хронических пиелонефритов могут стать сочетания антимикробных средств с иммунофармакокорригируюгцими препаратами стимулирующего и замещающего ряда, последние из которых способны стимулировать субпопуляции фагоцитов и повышать эффективность кооперативного взаимодействия Т- и В-лимфопи гов в реакциях антитело-образования в ответ на микробный антиген. Препараты из категории иммуностимулирующих, например,ликопид или полиоксидоний, также стимулируют бактерицидную и ци-тотоксическую активность фагоцитов, сокращая при этом общую продолжительность лечения инфскционно-воспа-лительных заболеваний и гнойно-септических поражений и существенно снижая дозу антибиотиков и других антибактериальных препаратов. Вместе с тем, хаотично применяемые сегодня отдельные иммунологические тесты не позволяют грамотно оценить роль иммунологических нарушений на фоне микробной инфекции у больных с хроническими пиелонефритами и использовать такого рода информацию в прогнозировании осложнений и исходов заболевания. Это ставит разработку системы иммунологического мониторинга и иммунологических критериев эффективности лечения хронических пиелонефритов у детей в ряд актуальных проблем современной урологии.

ВЛИЯНИЕ МП-1 НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ ЛИМФОЦИТОВ У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ

Тетерева Е.А.. Плавай В.В.

Ростовский государственный медицинский университет, НИЙ клинической иммунологии, Ростов-на-Дону, Россия

Пептиды костномозгового происхождения, входящие в состав препарата миелопид, стимулируют пролиферацию и дифференцировку предшественников иммуноком-нетентных клеток и увеличивают функциональную активность зрелых клеток-эффекторов (Р.В. Петров, A.A. Михайлова, Л. А. Фонина, Р.Н. Степаненко, 2000г.). В настоящее время выделено шесть индивидуальных миелопеп-тидов (МП), каждый из которых характеризуется различным эффектом и механизмом действия. Так, МП-1 - пептид с выраженным иммунокорригирующим действием. В этой связи представляет интерес проанализировать действие МП-1 на иммунокомпетентные клетки, выделенные от ВИЧ-инфицированных пациентов.

Целью данной работы явилось изучение эффекта МП-

1 на пролиферативную активность лимфоцитов ВИЧ-ин-фицированных пациентов in vitro.

Обследовано 20 человек в возрасте от 37 до 42 лет, которые были разделены на 2 группы. Первую составили больные с диагнозом ВИЧ-инфекция в стадии генерализованной лимфоаденопатии (ГЛАП) - 8 человек, стадии пре-СПИД - 7 человек. Вторую группу составили 5 практически здоровых доноров. Лимфоциты выделяли в градиенте фиколл-верографина. Оценку функциональной активности лимфоцитов осуществляли с помощью реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) с ФГА и МП-1 с подсчетом индекса стимуляции (ИС).

Результаты исследования показали, что лимфоциты, выделенные от ВИЧ-инфицированных, при добавлении т г:кго МП-1 обладают повышенной пролиферативной активностью, более выраженной у больных в стадии пре-СПИД (ИС РБТЛ = 1,62 на стадии ГЛАП; ИС РБТЛ = 2,01 на стадии пре-СПИД). В группе доноров влияние МП-1 не приводит к заметным изменениям пролиферативной активности лимфоцитов (ИС РБТЛ = 0,83).

Т.о., по мере утяжеления клинической картины ВИЧ-инфекции эффект, оказываемый МП-1 на пролиферативную активность лимфоцитов, увеличивается, достигая максимума на стадии пре-СПИД.

ПРИМЕНЕНИЕ ЛЕЙКИНФЕРОНА В ЛЕЧЕНИИ МЕНИНГЕАЛЬНОЙ ФОРМЫ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА

Толоконская Н.П.. Никонов С.Д., Беляев Д.Л., Казакова Ю.В.

Новосибирская государственная медицинская академия;

Муниципальная инфекционная клиническая больница № 1, Новосибирск;

ГУ НИИ региональной патологии и патоморфологии, Новосибирск;

ГУ НИЙ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва, Россия

Введение. Большинство регионов Российской Федерации являются природными очагами КЭ и его переносчики неограниченно долго существуют в природных условиях без участия человека. В течение последнего десятилетия показатель заболеваемости КЭ в Западной Сибири превышает общероссийский в 3-4,5 раза, с тенденцией к утяжелению клинических проявлений болезни. Общепринятым методом этиотропного лечения КЭ является применение противоклещевого иммуноглобулина и иммунной плазмы. Обладая высоким нейротропизмом, вирус КЭ проникает через гема-тоэнцефалический барьер и становится недоступным для нейтрализующих антител, циркулирующих в крови больных.

Для лечения большинства вирусных инфекций успешно применяются препараты интерферона. Лейкинферон (ЛФ) - иммунокорректор с широким спектром действия

- помимо интерферонов-а содержит природный комплекс цитокинов первой фазы иммунного ответа в естественном соотношении и обеспечивает в организме сбалансированную продукцию провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, обеспечивая высокий уровень индуцированной продукции медиаторов клеточного и гуморального иммунитета с преимущественной активацией Т-хелперов I типа. Однако применение больших доз Л Ф может способствовать (на первых этапах ле-

чения) усилению иммунопатологических реакций, что крайне нежелательно при поражении ЦНС.

Цель исследования: разработка эффективных методов лечения менингеальной формы КЭ с применением малых доз ЛФ, вводимых лимфотропным способом.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 39 б-х менингеальной формой КЭ с применением у 24 б-х ЛФ по 1 ампуле (10 тыс. МЕ) в первый межпальцевый промежуток кисти на 1,3 и 5-й дни болезни на фоне стандартной этиотропной терапии противоклегцевым иммуноглобулином. Иммунный статус оценивался с моноклональными антителами фирмы «Сорбент». Спонтанная и стимулированная продукция цитокинов мононуклеарны-ми клетками крови (митоген конканавалин-А) определялась методом электрохемилюминесценции.

Результаты: клинический диагноз был подтвержден обнаружением специфических методом ИФА. У 22 б-х заболевание соответствовало средней степени тяжести, а в 2-х случаях диагностирована тяжелая форма КЭ. Все 39 б-х получали стандартную базисную терапию со специфическим иммуноглобулином, а 24 б-х дополнительно ЛФ. В группе с ЛФ зарегистрировано двукратное сокращение сроков пребывания в стационаре на фоне выраженной иммунокоррекции но основным показателям (СОЗ+, СБ4+, СБ8+, СБ4/СБ8, СБ20+, СБ16+, количество лейкоцитов и лимфоцитов). В группе сравнения отмечено достоверное увеличение дисбаланса показателей иммунограммы (рост абсолютного количества СБЗ+ в 1,8 раза, СВ4+ в 1,9 раза, СБ8+ в 1,8 раза, СБ20+ в 4,7 раза, СБ16+ в 2,5 раза больше, чем у здоровых лиц). Одновременно продукция цитокинов клетками крови б-х группы сравнения была существенно более низкой по сравнению с показателями у б-х получавших ЛФ (1Ь-2 в 3,3-3,4 раза,

11.-4 в 5,4-7,0 раз, 1Ь-10 в 5,1-7,6 раза, ШЫ-у в 5,7-2,2 раза для спонтанной и индуцированной продукции соответственно). Рост цитокиновой продукции клетками крови б-х, получавших ЛФ сопровождался существенным сокращением продолжительности основных клинических симптомов (на 2-6 дней).

Заключение. Лимфотропное применение ЛФ у б-х с менингеальной формой клещевого энцефалита обеспечивает ускорение выздоровления, сокращение сроков стационарного лечения в 2 раза, быструю и сбалансированную активацию продукции цитокинов Т-хелперами, что сопровождается гемо- и иммунокоррекцией, снижением интенсивности иммунопатологических реакций и изменением характера иммунного ответа в динамике заболевания.

ПОКАЗАТЕЛИ АКТИВНОСТИ ИНТЕРФЕРОНА а, 0 ПРИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПАРОДОНТА И ЭФФЕКТ ПРИМЕНЕНИЯ ИНТЕРФЕРОНОГЕННОГО ПРЕПАРАТА

Улитовский С.Б.. Левин М.Я., Алексеева Е.С.

СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Интерфероны (1Е1М) сф, действующие через одни и те же клеточные рецепторы, помимо противовирусного и противоопухолевого эффекта, обладают способностью подавлять трансляцию белков в организме, активировать ЕК-клетки, повышают продукцию некоторых цитокинов (1Ь-1,1Ь-2), являются функциональными антагонистами ряда интерлейкинов, в высоких дозах подавляют как гуморальный, так и клеточный ответ.

В этом плане заслуживает внимания изучение роли IFNaP при воспалительных заболеваниях пародонта (ВЗП).

Было обследовано 125 больных с ВЗП, из которых у 80 был хронический генерализованный катаральный гингивит (ХГКГ), у 45 - хронический генерализованный пародонтит (ХГП). Больным проводилось лечение по общепринятой методике. Часть больных получала дополнительное лечение отечественным препаратом «Полирем», являющимся индуктором интерферона и иммуностимулирующим препаратом (Киселев О.И. и соавт., 1994).

В крови обследованных определяли IFNaP по методу Г.А. Кондратьевой и соавт. 91988 в модификации В.Б. Аникина и Р.Ю. Ариненко (НИИ Гриппа РАМН).

Обнаружено, что до начала лечения уровень IFNaP был снижен при ХГКГ до 165,3+0,24 МЕ/мл, при ХГП -до 166,8±1,3 МЕ/мл против 198,5±1,5 МЕ/мл в контроле.

После лечения по обычной схеме уровень IFNaP нарастал в обеих группах до 181,4±0,9 и 181,7±0,9 мг/мл. После дополнительного лечения с препаратом «Полирем» (таблетки и местно) уровень IFNaP возрастал до 198,5±0,17 и 196,5±0,8 мг/мл.

Через 12 месяцев после лечения уровень IFNaP составлял в группах леченных с применением Полирема 195,8±0,3 и 193,5+0,7 МЕ/мл, в контрольных группах 175,1±1,5 и 176,1±1,2 мг/мл. Повышение уровня IFNaP соответствовало степени снижения признаков воспалительной реакции - успеху лечения ВЗП.

На всем массиве при сниженном 171 МЕ/мл уровне IFNaP полное отсутствие признаков воспаления по стандартному папилло-маргинально-альвеолярному индексу ПМА=0 отмечено лишь у 2,3% пациентов. В этой группе высокие значения ПМА - выше 25 выявлены у 74,4% обследованных. Наоборот, при высоких показателях уровня ИФаР (выше 190 МЕ/мл) нулевые значения ПМА выявлены у 85,6%, тогда как высокие показатели лишь у двух пациентов (1,5%).

Приведенные материалы показывают, что IFNaP является одним из факторов, определяющих резистентность больных ВЗП к развитию и хронизации воспалительной реакции, и препараты с интерфероногенной активностью показаны для лечения ВЗП. Таким образом, на представляется целесообразным рекомендовать использование препарата «Полирем» в комплексном лечении ВЗП.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЙ И РЕГИОНАЛЬНОЙ ЛИМФОТРОПНОЙ ИММУНОТЕРАПИИ ЛЕЙКИНФЕРОНОМ У БОЛЬНЫХ ОСТРОПРОГРЕССИРУЮЩИМИ ФОРМАМИ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ.

Челнокова О.Г.. Кибрик Б.С., Беляев Д.Л.

Ярославская государственная медицинская академия, НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва, Россия

Значение иммунотерапии в лечении больных остропрогрессирующими деструктивными формами туберкулеза определяется патогенезом заболевания. Вторичный иммунодефицит является фоном для развития тяжелых форм туберкулеза и углубляется при неблагоприятном течении, формируя порочные круги острого прогрессирования процесса. Крайне тяжелое состояние больных с ярко выраженной и длительно сохраняющейся интоксикацией в течение 4-6 месяцев, быстрое развитие устойчи-

вости микобактерий к антимикробным препаратам, степень иммунных нарушений с отклонением основных показателей более 60% от нормальных значений, функциональная неполноценность иммунных клеток и избыток факторов, ингибирующих активность цитокинов, затрудняют проведение эффективной иммунотерапии. Поиск новых методов иммунокоррекции, позволяющих восстанавливать иммунный статус в течение 2-3 недель у больных остропрогрессирующими формами туберкулеза, в том числе у больных казеозной пневмонией, обусловил выбор использования ургентной иммунокоррекции с помощью экстракорпоральной иммунофармакотерапии и региональной лимфотропной терапии лейкинфероном. В комплексное лечение 15 впервые выявленных больных с остропрогрессирующими формами туберкулеза, из них 10 больных казеозной пневмонией, на 2 - 4 неделе от начала противотуберкулезной терапии при сохранении ярко выраженных клинических проявлений была включена экстракорпоральная иммунофармакотерапия с лейкинфероном (10 тыс. МЕ) 1-3 сеанса один раз в неделю. Между процедурами 2 раза в неделю вводили лейкинферон в/м (10 тыс. МЕ). В лечении 7 больных с развитием осгро-прогрессирующего туберкулеза на фоне неэффективной терапии была использована региональная лимфотропная терапия с ретростернальпым введением лейкинферона (10 тыс. МЕ) в сочетании с изониазидом 10% - 6 мл 2-3 раза в неделю на 10-12 процедур. Клинические проявления интоксикации и бронхолегочного синдрома у больных данной группы были менее выражены, рентгенологическая картина свидетельствовала о преобладании аль-теративного поражения легочной ткани, в том числе с развитием казеозной пневмонии у 5 из 7 больных. Положительный клинический эффект в виде значительного уменьшения интоксикации и улучшения общего состояния был отмечен в течение первых двух недель иммунотерапии при использовании данных методик у всех больных. Полное купирование интоксикации, в том числе но лабораторным данным, наблюдалось через 6-8 недель от начала иммунотерапии. Восстановление показателей иммунного статуса в виде повышения общего числа лимфоцитов, Т-лимфоцитов - хелперов, восстановление имму-норегуляториого индекса до 1-1,5 было зарегистрировано на второй - третьей неделе иммунотерапии у всех больных. Рентгенологическая динамика подтвердила положительный эффект у 17 больных в виде уменьшения ии-фильтративных и очаговых изменений, очищения полостей от казеозно-некротических масс, отграничения процесса с формированием стенок полостей, преимущественно тонкостенных. Стабилизация рентгенологической картины при улучшении клинического состояния была получена у 5 наиболее тяжелых больных казеозной пневмонией с двухсторонним субтотальным поражением легких. Прекращение бактериовыделения по данным микроскопии через 2 месяца от начала иммунотерапии наблюдалось у 20 (90%) больных, в том числе у 14 больных с множественной лекарственной устойчивостью МВТ, у 2 больных уменьшилась массивность бактериовыделения. Предварительные результаты исследования показали возможность быстрой и эффективной иммупокоррекции у наиболее тяжелой категории больных остроирогрессиру-ющими формами туберкулеза с использованием экстракорпоральной и региональной иммунотерапии с лейкип-фероном, что оказало позитивное влияние па течение заболевания. Быстрое восстановление показателей иммунного статуса, выраженное уменьшение интоксикации в те-

чение двух недель позволяют отнести данные методы иммунокоррекции к методам иммунореанимации у больных остропрогрессирующими деструктивными формами туберкулеза легких с изменением типа воспаления в динамике заболевания.

ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКА И ИММУНИТЕТ Шабашова Н.В.

НИИ медицинской микологии МАП О, Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время никто не сомневается в том, что вакцинация внесла радикальные изменения в структуру инфекционной заболеваемости на земле. Практически любой ребенок в нашей стране в течение первых двух лет жизни получает 13 доз разных вакцин для профилактики

9-ти инфекций. Для сокращения числа инъекций многие зарубежные фирмы создают комбинированные комплексные вакцины для одновременной профилактики многих инфекций (до 5-7). Но по данным научных исследований и в практике известно, что даже после многократной вакцинации в отдельных случаях не удается достичь стойкого длительного иммунитета, особенно если речь идет о таких инфекциях, как коклюш, полиомиелит, корь, или при вакцинациях комбинированными препаратами. Возникает вопрос, в чем причины такой неэффективности, казалось бы, действенных отработанных вакцин? Во-пер-вых, показано, что существует генетически обусловленная неотвечаемость или слабый иммунный ответ на различные антигены у части людей. Так, по данным РПГА, из 448 детей 2-6 лет, привитых от дифтерии и столбняка, у 12,5% не развился достаточно эффективный АТ-ответ и у 21,2% - оппозитныйтип реагирования - развитие нео-твечаемости (в целом 33,7%). Это были дети, имеющие в анамнезе перинатальные поражения ЦНС или неврологические синдромы, ортопедические нарушения, вертебральный синдром, патологию глазного дна, печени, желчевыводящих путей, особенно в сочетании с пищевой аллергией или с ВСД. При этом зачастую наблюдали снижение СОЭ, лейкопению в сочетании с нейтропенией, снижение ИРИ и реакции лимфоцитов на некоторые воздействия. Причем такие изменения были и при оппозит-ном и неонпозитном типе ответа на дифтерийный анатоксин ( ДА), что позволило авторам утверждать: у детей с генетически зависимым низким ответом на ДА возможно ослабление иммунного ответа на ДА, обусловленное ВИН нейрогенно-вертебрального генеза. Это наблюдение не единично и относится не только к развитию противодифтерийного иммунитета. Нашими исследованиями установлено, что у 30% детей, больных хроническим каи-дидозом кожи и слизистых оболочек в принципе не было отвечаемое™ на антигены грибов рода Candida. Выявляли семейный случай неотвечаемости на вакцину BCG, когда двое детей до года заболели тяжелым туберкулезом, несмотря на вакцинацию в роддоме. Показано, что у детей с БА, первично вакцинированных живой коревой вакциной, антителогенез был достоверно ниже на 14 и 30 сутки по сравнению со здоровыми, 71,4% остались к этому сроку серонегативными, через год у части из них появились антитела, но у остальных так и не появились. Возникает вопрос: это полная неотвечаемость или способ тестирования не адекватен типу иммунного ответа на коревую вакцину, что может быть второй причиной неэф-

фективности прививок не только против кори, но также против полиомиелита, коклюша. Известно, что клеточноопосредованный ответ - необходимый компонент защиты макроорганизма от подобных инфекций, так же как и от грибов, и от туберкулеза. Но именно этот тип ответа остается вне зоны внимания вакцинологов, возможно, из-за отсутствия стандартного способа тестирования. К сожалению, в практике прививочного дела эффективность иммунизации против любых микроорганизменных антигенов до сих пор оценивается исключительно по наличию «протективных антител». Создается впечатление, по данным разных исследований, что высокий антителогенез к концу первого месяца иммунного процесса при целом ряде прививок является свидетельством переключения иммунного ответа с клеточно-опосредованной реакции на антительную, поскольку чрезмерная клеточная отвечае-мость разрушительна для макроорганизма - в иммунной системе она супрессируется переключением на синтез 1Ь-

4 и 1Ь-10, чему есть доказательства в литературе.

Но в мире нет абсолютно безопасных вакцин. В силу своего несовершенства существующие вакцины могут вызывать побочные реакции, живые - стертые формы инфекции. Побочное действие вакцин зависит не только от свойств препарата, но и от состояния физиологических систем организма и его генетических особенностей. С другой стороны, эффективность некоторых вакцин явно недостаточна, что может быть обусловлено названными выше причинами, в том числе отсутствием учета современных представлений о развитии иммунного ответа на антигенно-различные прививочные материалы, ввиду стандартности оценки их иммунногенности исключительно по выработке антител. Представляется, что при ВИН необходимо тестирование детей на возможность ответа их иммунной системы на конкретную вакцину, во-первых, и, во-вторых, не стоит применять у таких пациентов комбинированные вакцины.

КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИММУНОКОРРЕКЦИИ БЕТАЛЕЙКИНОМ ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЖЕНСКИХ ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ

ТПалыгин В.В.. Заболотных Н.В., Кочорова М.Н., Симбирцев А.С.*

ГУ «СПб НИИ фтизиопулъмонологии М3 РФ»;

* ГНЦ НИИ особо чистых биопрепаратов

Известно, что туберкулез женских половых органов характеризуется вялым течением и сопровождается развитием угнетения клеточного иммунитета. По нашим данным, он также характеризуется нарушением статуса ци-токинов, что является обоснованием целесообразности использования иммуномодуляторов для его лечения. Бе-талейкин наряду со способностью корригировать вторичные иммунодефициты, обладает антифибротическим эффектом, что является важным для терапии туберкулеза женских гениталий, для которого характерно развитие фиброзных процессов в малом тазу.

Цель исследования: оценить клиническую эффективность беталейкина в комплексной терапии активного туберкулеза женских половых органов.

Материалы и методы: из 28 больных туберкулезом женских гениталий, 17 женщин (группа I), на фоне комплексной терапии получали беталейкин (5 нг/кг внутривенно капельно 5 дней), 11 больных (группа II) - стандартную противотуберкулезную терапию. Эффектив-

ность лечения оценивалась по клинической симптоматике, данным бимануального осмотра, УЗИ исследования, гистеросальпингографии (ГСГ) через 2 недели и 1 месяц после иммунокоррекции, что соответствовало 1,5 и 2 месяцам противотуберкулезной терапии.

Результаты: через две недели после использования беталейкина исчезновение симптомов интоксикации отмечалось у 80% изначально имевших их пациенток I группы (4 из 5) против 66,7% (2 из 6) во II группе. Под влиянием беталейкина у всех больных при УЗИ регистрировалась нормализация контуров яичников, а в четырех из восьми случаев (50%) исходного их увеличения - уменьшение размеров. Во второй группе у двух (40%) из пяти больных по УЗИ наблюдалось нарастание воспалительного процесса в яичниках у двух - уменьшение их размеров, но не до нормы.

Через месяц применения беталейкина в основной группе уменьшение спаечного процесса в малом тазу наблюдалось у 5 из 7 больных (71,4%), тогда как в контрольной группе - в трех из 6 случаев (50%). Нормализация размеров яичников под влиянием иммунокорректора, по данным УЗИ, отмечалась у 5 из 8 пациенток (62,5%), тогда как в контрольной группе - в 40% случаев. Восстановление менструального цикла - у 57% (4 из 6) против 50% (2 из 4) соответственно. У девяти больных I группы, у которых по ГСГ регистрировались изменения маточных труб, в 4 случаях отмечено улучшение их проходимости. Во второй группе восстановление ГСГ картины не выявлено.

Заключение: включение беталейкина в комплексную терапию туберкулеза женских половых органов повышает эффективность его лечения, способствуя более раннему исчезновению симптомов интоксикации, ликвидации воспалительных явлений в яичниках, улучшая состояние маточных труб по данным ГСГ.

ИММУНОКОРРИГИРУЮЩАЯ ТЕРАПИЯ ПРИ ОЖОГОВОЙ БОЛЕЗНИ

Шаповалов К.Г.. Малежик Л.П., Романова Е.Н.

ГОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия, Чита, Россия

В настоящее время лечение обожженных больных представляет определенные трудности. Ведущими звеньями патогенеза данной патологии являются интоксикация и развивающийся иммунодефицит, который усугубляет общее состояние больных. Данные литературы свидетельствуют о том, что применение иммунотропных веществ дает хорошие результаты. В связи с этим мы исследовали некоторые иммунокорректоры: эпиталамин -комплекса полипептидов, выделенных из эпифиза крупнорогатого скота и вилон - дипептид, синтезированный на основании аминокислотного анализа препарата тимуса - тималина.

Нами проведено обследование и лечение 140 больных в Читинском областном ожоговом центре. Пациенты были разделены на две группы. В первой (контрольной) группе, включающей 100 пациентов, проводилась общепринятая терапия. Во второй группе, состоящей из 40 больных, дополнительно к стандартной терапии применяли комплексно эпиталон в дозе 10 мг и вилон по 10 мкг в сутки однократно внутримышечно в течение 5 дней, начиная с 4-5 суток от момента получения ожоговой травмы. Кроме того все пациенты в зависимости от площади ожога на три группы: до 20%, 20-40% и свыше 40% поверхности тела.

Для исследования иммунной системы проводился подсчет лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови. Так же определяли содержание Т-«общих», Т-«ак-тивных» и В-лимфоцитов. Определяли концентрацию иммуноглобулинов А, М, в методом ракетного электрофореза. Интерлейкины 1Ь-1а, 1Ь -1(3, ТЫРа, IЬ-4 исследовали методом ИФА.

Нашими исследованиями установлено, что у всех больных с глубокими ожогами в начале периода острой ожоговой токсемии регистрируется лейкоцитоз и лимфопения. У пациентов с площадью глубокого ожога до 20% поверхности тела на 10 сутки с момента травмы сохраняются нарушения Т-клеточного звена иммунитета, отмечается нарастание сывороточных иммуноглобулинов. У больных с площадью ожога 20-40% поверхности тела, помимо дефицита Т-кле-точного звена иммунитета, резко снижалось содержание иммуноглобулина А. При исследовании системы комплемента, отмечено нарастание активности компонентов уже на 5 сутки с момента ожога и значительное повышение про-воспалительных цитокинов - 1Ь-1сх, 1Ь -1(3, ТЫРа более чем в 20 раз. На 10 сутки содержание нровоспалительных цитокинов снижалось, но все же превышало норму: так 1Ь-1(3 и ТОТа - в 18 раз, 1Е-1а - в 2 раза, содержание Ц.-4 не изменялось. Дефект иммунной системы усугубляет течение заболевания, что приводит к нарушениям функций органов и развитию осложнений: пневмонии - 42%, сепсис - 22%, острые язвы ЖКТ - 10% случаев.

При использовании комплексной иммунокорригирующей терапии уже на 10 сутки с момента получения травмы повышалось содержание субпопуляций лимфоцитов, концентрация исследуемых иммуноглобулинов и интерлейкинов практически соответствовала норме. Такие изменения наблюдались у пациентов с площадью ожога до 20%. У пациентов же с ожогами 20-40% площади тела, данные показатели не достигали нормы и оставались ниже контрольной группы. У больных с площадью ожога свыше 40% поверхности тела применение иммунокорректоров приводило к повышению исследуемых показателей, хотя они и были менее выражены но сравнению со второй группой.

Под влиянием проведенной иммунокорригирующей терапии у всех групп больных значительно реже встречаются пневмонии и сепсис, не наблюдались острые язвы ЖКТ.

Таким образом, у больных с глубокими ожогами развивается иммунодефицит, выраженность которого прямо пропорциональна площади поражения. Комплексное применение эпиталамина и вилопа приводит к полной или частичной нормализации изучаемых показателей, что сопровождается снижением активности воспалительного процесса, и, как следствие, - к снижению частоты осложнений.

ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТОВ ВОДОРОСЛЕВОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ЧЕЛОВЕКА

Шевчук О.В.. Меньшикова Е.А., Бубнова О.С., Незговоров Д.В.

Институт физиологии природных адаптаций УрО РАН, Архангельск, Россия

Введение. Взаимосвязь экологических и климатических условий на Севере создает неблагоприятный фон для жителей. Состояние иммунной системы у человека на

Севере отличается низким содержанием в крови функционально активных Т-лимфоцитов, иммуноглобулина А, а также дефицитом фагоцитарной защиты.

Цель: изучить влияние препаратов водорослевого происхождения на состояние иммунной системы человека на Севере.

Задачи: Выявить влияние препаратов водорослевого происхождения на активность фагоцитов, содержание циркулирующих иммунных комплексов ^Аи 18Е.

Материалы и методы: обследовано 125 людей различного возраста до и после курса иммунокоррекции препаратами водорослевого происхождения - ламинарии (дополан), альгинаты калия, кальция и магния. Количественное определение проводили иммунофер-ментным методом, ^А - методом кинетической нефелометрии с помощью иммунохимического анализатора Эррей фирмы «БЕКМАНА», ЦИК - в реакции флокуляции с ПЭГ 3,5%.

Результаты: в ходе иммунокоррекции дополаном было обнаружено увеличение активных фагоцитов у 54,05% обследуемых (в среднем с 44,21до 66%), содержания ^А в сыворотке крови у 68,18% (с 0,71 до 1,04г/л), а также снижение концентраций ЦИК у 54,55% и у 72,73% обследованных лиц. После курса приема альгината калия обнаружено увеличение содержания ^А у 95,6% (с 0,67 г\л до 1,26 г\л),% активных фагоцитов у 84,5% (с 37,0 до 67,63%), а также снижение уровня ЦИК у 93,4% (с 2,77 до 2,08 г\л) и содержания ^Е у 74,5% ( с 42 до 29 МЕ/мл). После применения альгината кальция наблюдали увеличение активных фагоцитов у 53,5% обследуемых людей в среднем на 20,9%, также повышение содержания ^ Ас 1,29 до 1,72 г\л у 58,1% человек. При применении данного препарата нормализацию уровней ЦИК в крови (с 3,01 до 1,69 г\л) наблюдали у 67,4% лиц, выявлено также снижение содержания реагинов в крови у 39,5% обследованных людей.

Заключение: иммуностимулирующая способность полисахаридов и солей альгиновых кислот ламинарии проявляется повышением фагоцитарной и переваривающей активности нейтрофилов, увеличением содержания ^ А, снижением содержания ^Е и уровней ЦИК.

МАКРОЛИДНЫЕ АНТИБИОТИКИ КАК ИММУНОКОРРЕКТОРЫ. НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ЛЕЧЕННИЮ ИММУНОДЕФИЦИТНЫХ СОСТОЯНИЙ

Шмарина Г.В.. Пухальскнй А.Л.,

Капранов Н.И.

Медико-генетический научный центр РАМН, Москва, Россия

Наиболее известным представителем семейства макролидных антибиотиков является эритромицин. В основе структуры этих препаратов лежит лактонное кольцо, содержащее от 12 до 23 атомов углерода. В качестве антибактериальных препаратов используются 14-, 15- и 16-членные макролиды. Многочисленные эксперименты и клинические наблюдения показывают, что только 14- и 15-членные макролиды (эритромицин, рокситромицин, кларигромицин, азитромицин) обладают выраженным противовоспалительным действием, которое связывают со способностью этих препаратов подавлять продукцию гтровоспалительных цитокинов. Нами была исследована динамика маркеров восиале-

ния у больных с легочной формой муковисцидоза (25 детей в возрасте 12±0,6 лет), получавших хроническую терапию малыми дозами кларитромицина (250 мг через день) в течение 1 года. Забор материала для исследования (образцы крови и мокроты), а также стандартное клиническое обследование, включая измерение показателей функции внешнего дыхания, производили до начала исследования, а затем каждые 3 месяца. Уже через 3 месяца от начала приема препарата отмечали значимое снижение уровня провоспалительных цитокинов (TNF-a и IL-8) в мокроте. Этот эффект сохранялся в течение всего периода наблюдения, причем через 12 мес. у большинства больных TNF-a в мокроте не определялся. Через 6 мес. было отмечено значимое снижение уровня IL-4 в мокроте, тогда как содержание IFNy практически не менялось. Таким образом, соотношение IFNy/IL-4 повышалось более, чем на порядок (в 17 раз). Сходные изменения соотношения IFNy/IL-

4 наблюдали и в плазме больных. Этот эффект также был связан с выраженным снижением уровня IL-4. Через 12 месяцев преобладание IFNy в периферической крови сохранялось. Вычислить индекс IFNy/IL-4 для образцов мокроты, полученных через 12 мес., не представлялось возможным, так как содержание обоих регуляторных цитокинов было ниже чувствительности метода. Хроническая терапия кларитромицином сопровождалась также существенным повышением высоты пролиферативного ответа на ФГА (7530419817 кип./ мин в точке 3 мес. против 1860411587 имп./мин до начала лечения; р<0,001). Этот эффект сохранялся в течение всего периода наблюдения. Полученные нами результаты свидетельствуют, о том что 14-членный макролидный антибиотик кларитромицин обладает не только противовоспалительным, но и иммуномодулирующим действием. В частности, длительное введение этого препарата сопровождается сдвигом в сторону Thl, что, по всей вероятности, оказывает благоприятный эффект на течение хронического воспалительного процесса в легких больных. Этот вывод может быть проиллюстрирован статистически значимым повышением показателей функции внешнего дыхания, которое мы наблюдали через 1 год после начала терапии. Приведенные выше данные, а также положительный опыт клинического применения макролидов при разнообразной патологии (диффузный панбронхиолит, бронхиальная астма, риносинусит, псориаз, хирургическая травма, немелкоклеточный рак легкого) свидетельствуют о том, что механизм действия макролидов на иммунную систему является более сложным, чем это представлялось ранее. При всех перечисленных видах патологии можно предполагать массивный выброс провоспалительных цитокинов и, как следствие, активацию гипоталамо-ги-пофизарно-надпочечниковой оси и симпатической нервной системы. Противовоспалительные агенты (глю-кокортикоиды и катехоламины), не будучи в состоянии ликвидировать очаг воспаления, существенно угнетают активность Thl лимфоцитов. Макролиды способны вмешиваться в развитие такого сценария за счет снижения продукции провоспалительных цитокинов. При этом не только снижается интенсивность воспалительного процесса in situ, но и ослабляется активность ги-поталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси и симпатической нервной системы, что приводит к восстановлению равновесия между про- и противовоспалительной составляющими патологического процесса.

ПРИНЦИПЫ ФОРМИРОВАНИЯ ИНТЕРФЕРОНКОРРИГИРУЮЩЕЙ ТЕРАПИИ У БЕРЕМЕННЫХ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

Шугинин И.О.. Ефанов A.A., Малиновская В.В., Гусева Т.С., Ткачева И.И., Бирюкова Н.В.

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии, ГУНИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, Москва, Россия

Немаловажное значение в патогенезе бронхиальной астмы имеет система интерферона, способная выполнять важные функции в общем комплексе контрольно-регуляторного механизма, направленного на поддержание имун-ного гомеостаза. Нарушения интерфероногенеза, дисбаланс цитокинов при этом заболевании, высокая частота перинатальной патологии, в том числе внутриутробной инфекции, свидетельствует о целесообразности проведения подобных исследований.

Целью исследования явилось повышение эффективности терапии акушерских и перинатальных осложнений у беременных с бронхиальной астмой.

Изучены параметры интерферонового статуса (ИФС) у 107 беременных, страдающих БА различной степени тяжести, и 20 беременных контрольной группы во II и III триместре беременности.

ИФС у беременных контрольной группы характеризовался следующими показателями: способностью лейкоцитов к продукции a-IFN - 128 (64-256) МЕ/мл, -IFN - 48 (32-64) МЕ/мл во II и III триместре беременности. Значения сывороточного IFN не превышали 4 (2-

4) МЕ/мл и 4 (2-6) МЕ/мл во II и III триместре беременности соответственно. Анализ интерфероногенеза у беременных с бронхиальной астмой показал, что способность лейкоцитов к продукции a-IFN достоверно отличалась от показателей контрольной группы (р< 0,05) и составила 64 (32-128) МЕ/мл и 64 (32-256) МЕ/мл во II и III триместре беременности соответственно. Способность лейкоцитов к продукции y-IFN в этих же сроках беременности была ниже относительно показателей контрольной группы (р<0,01) и составила 8 (4-16) МЕ/мл и 16 (8-32) МЕ/мл соответственно. Уровень сывороточного IFN достоверно не отличался от показателей контрольной группы и составил в II триместре 4 (4-8) МЕ/ мл, в III триместре беременности 2 (2-4) МЕ/мл. Анализ основных параметров ИФС в зависимости от перинатальных исходов позволил выявить низкий уровень интерфероногенеза у пациенток, родивших детей с перинатальной патологией. Так, у матерей, родивших детей с ВУИ, способность лейкоцитов к продукции a-IFN составила 32МЕ(24-64МЕ/мл), y-IFN не превышали 4МЕ(2-8 МЕ/мл), р<0,01. При исследовании суточного ритма продукции интерферонов выявлено, что уровень сывороточного и спонтанного IFN в течение суток повышался в 10 и 15 часов (до 8 МЕ/мл) и в 11 и 17 часов (до 15 и 35 МЕ/мл) соответственно. Способность лейкоцитов к продукции -IFN возрастала в 10 и15 часов (до 260 и 190 МЕ/мл), а y-IFN в 10 и 20 часов (до 24 и 16 МЕ/мл) соответственно.

Терапию вифероном-2 начинали проводить с 20 недели беременности. Схема приема препарата была разработана с учетом особенностей проведенного нами суточного мониторирования и фармакокинетики виферона 2. Препарат назначался дважды в сутки в 7 и 18 часов, в течение 10 дней с дальнейшим интерферонстабилизирую-

щим курсом, по 1 свече дважды в сутки два раза в неделю, на курс 10 свечей.

После проведенного лечения достоверно увеличилась способность лейкоцитов к продукции а и у-ШК по сравнению с результатами до лечения (р<0,01) и (р<0,05) соответственно. Причем способность лейкоцитов к продукции а-1РЫ была высокой уже после проведения основного курса, без стабилизирующего.

Выводы: В целом, анализ интерфероногенеза у беременных с БА различной степени тяжести характеризовался снижением способности лейкоцитов к продукции а-от значений контрольной группы - при легком и среднем течении БА достоверность отличий составила р<0,05, при тяжелом течении Б А р< 0,01. Гаммаинтерфе-роногепез при БА характеризовался низкими показателями во всех клинических группах и достоверно отличался от показателей контрольной группы (р<0,01).

Выраженность нарушений интерферонового статуса коррелирует с тяжестью бронхиальной астмы у беременных и частотой развития перинатальных осложнений. Наиболее значимым является нарушение интерфероногенеза.

Включение в комплексную терапию препарата вифе-рон-2 с учетом особенности его фармакокинетики у беременных с бронхиальной астмой позволяет снизить частоту акушерских и перинатальных осложнений.

ОБ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЙ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ХРЕНА ОБЫКНОВЕННОГО И РОД ИОЛЫ РОЗОВОЙ

Юшков В.В.. Юшкова Т.А., Щербинина Я.Г.

Государственная фармацевтическая академия, Пермь, Россия

В клинической практике эмпирически используется огромное количество препаратов растительного происхождения, в том числе и хрена обыкновенного. Так, в качестве обоснованности его применения указывается, что хрен обыкновенный повышает иммунитет. Вместе с тем, в доступной отечественной и зарубежной литературе отсутствуют сведения об экспериментальном изучении им-мунотропной активности хрена обыкновенного.

Целью нашей работы явилось проведение скрининга иммунотропной и противовоспалительной активности хрена обыкновенного и сравнение его с иммуномодулирующим эффектом родиолы розовой.

Опыты выполнены на 120 линейных мышах массой 18-20 г. Опытную и контрольную группы составляли животные одного возраста, нола, массы, полученные одновременно из одного питомника и содержащиеся в одинаковых условиях. Скрининг иммунотропной активности осуществляли на модели первичного иммунного ответа.

О влиянии хрена обыкновенного на иммунную систему судили по изменению фагоцитоза и количества антителообразующих клеток (АОК).

Препараты хрена обыкновенного и родиолы розовой из расчёта 1/50БЬ50 вводили перорально в течение трех суток до иммунизации. В качестве антигена использовали эритроциты барана.

Установлено, что препараты хрена обыкновенного относятся к классу малотоксичных биологически активных веществ, причем менее токсичных, чем родиола розовая. Все обследованные фитопрепараты активизировали ней-трофильный фагоцитоз (табл.). Об этом свидетельствует достоверное увеличение показателей активности фагоцитоза, фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа. При сравнительной оценке влияния хрена обыкновенного и родиолы розовой на фагоцитоз достоверных отличий не выявлено. Все использованные фитопрепараты достоверно увеличивали число антителообразующих клеток в селезенке, что свидетельствует о наличии у них самостоятельного иммуномодулирующего действия. Следует отметить, что разные фитопрепараты хрена обыкновенного проявили одинаковый иммуностимулирующий эффект, превышающий таковой у родиолы розовой.

На модели каррагенинового воспаления на крысах было установлено, что фитопрепараты хрена обыкновенного проявляют флоголитическое действие. Что же касается родиолы розовой, то она не изменила течения каррагенинового воспаления. Сравнение выраженности противовоспалительного эффекта фитопрепарат хрена не уступает бруфену.

Таким образом, нами показано, что фитопрепараты хрена обыкновенного и родиолы розовой обладают самостоятельным выраженным иммуномодулирующим действием. Следует отметить, что фитопрепараты хрена обыкновенного обладают большей биологической активностью, поскольку им еще присущ противовоспалительный эффект.

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОТЕРАПИИ ПРИ АЛЛЕРГИЧЕСКОМ КОНЪЮНКТИВИТЕ

Ястребнова Н.Н.. Халимова З.А., Дамадаева Ж.А.

Дагестанская государственная медицинская академия, Махачкала, Дагестан, Россия

Аллергический конъюнктивит (АК) поражает примерно 15% всего населения и является актуальной проблемой для практических аллергологов и офтальмологов. Проведен анализ результатов обследования и лечения больных (60) ноллинозом с проявлениями (АК) и аллергического ринита (АР), находившихся в аллер-

ТАБЛИЦА. ВЛИЯНИЕ ХРЕНА ОБЫКНОВЕННОГО И РОДИОЛЫ РОЗОВОЙ НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У МЫШЕЙ

Серии опыта лДю Доза ФА,% ФИ ФЧ Число АОК на 106 ЯСК

Контроль 45,8+2,9 0,6+0,04 1,34+0,11 69,8+17,5

Настойка хрена 23,9 мл/кг 1/500150 81,8+2,0*** 1,53+0,19*** 1,88+0,25*** 196,7+5,6***

Сок хрена 5,15 г/кг 1/500150 71,6+6,5*** 1,84+0,28*** 2,25+0,62*** 201,1+8,4***

Экстракт родиолы розовой 20,5 мл/кг 1/500150 69,6+2,9*** 1,53+0,36*** 2,19+045*** 113,5+4,5***

*** -достоверные отличия с контролем (р <0,05).

гологическом отделении РКБ. Поражение глаз характеризовалось зудом, жжением, светобоязнью, слезотечением, отеком и гиперемией конъюнктивы. Симптомы заболевания появлялись ежегодно в одно и то же время. Период обострения АК начинался с апреля по июнь (18 больных), с июня по июль (17 больных), с июля по сентябрь (25 больных). При специфическом аллергологическом обследовании (CAO) выявлены положительные кожные скарификационные пробы с пыльцевыми аллергенами: амброзия, ежа, лебеда, овсяница, полынь, рожь, кукуруза. Содержание общего иммуноглобулина Е в сыворотке в период обострения превышал норму у всех больных (от 260 до 930 ме/мл, при N до 130 ме/мл). При офтальмоскопии обнаружены мелкие сосочки на коньюнктиве верхних век, гиперемия и отек слизистой, точечные эрозии роговицы. В январе-феврале (в период ремиссии) все больные получили курс специфической иммунотерапии (СИТ), выявленными виновными аллергенами (не более 3-х аллергенов) по стандартной схеме, начиная с разведения

10-7 и до 10'1. Курс лечения повторялся 3 года подряд, примерно в одно и то же время. После 1 и 2 курса в период обострения (сезон цветения растений) больным проводилась неспецифическая терапия кестином в дозе 10 мг 1 раз в сутки и местно хай-кром (кромоглицие-вая кислота) по 1-2 капли в оба глаза 3-4 раза в сутки. После 2 курса лечения больные (47) отметили значительное облегчение симптомов заболевания (как АК, так и АР), у 13 больных сохранялась ринорея, чиханье, заложенность носа. По завершении 3 курса СИТ в период обострения легкие симптомы АК сохранялись у

2-х больных, которые купировались применением хай-крома. Таким образом, всем больным с АК целесообразно проведение CAO и СИТ соответствующими аллергенами, не менее 3-х лет подряд.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ В КОРРЕКЦИИ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА НА ФОНЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ГИПЕРГРАВИТАЦИОННОЙ ТЕРАПИИ

Яшков А.В.. Труханова И.Г., Тарасова Е.Л.

Самарский государственный медицинский университет, Самара, Россия

Ревматоидный артрит является не только медицинской, но и социальной проблемой.

Поиск эффективных средств для лечения ревматоидного артрита остается актуальной проблемой в ревматологии.

Цель - повышение эффективности лечения больных с ревматоидным артритом за счет включения в комплексную терапию гравитационного фактора.

Патогенетические предпосылки применения данного способа лечения следующие. Использование гравитационной терапии у больных с ревматоидным артритом, имеющих преимущественное поражение суставов нижних конечностей, предусматривает воздействие повышенной гравитации с вектором центробежных сил краниокаудального направления в сочетании с дозированной мышечной работой ногами. Это позволяет регулировать регионарный кровоток, улучшает оксигенацию, трофику тканей, способствует как усиленному притоку крови, так и хорошему венозному оттоку в тканях пораженных суставов.

Исследование проводилось в 2-х сопоставимых по клиническим проявлениям группах пациентов в возрасте от 25 до 55 лет с диагнозом «Ревматоидный артрит». В состав каждой группы входило 10 человек.

1 группа получала базисную медикаментозную терапию. В лечение 2-й группы наряду с базисной медикаментозной терапией применялась гипергравитационная.

Контроль за эффективностью лечения осуществлялся с помощью клинико-лабораторных и иммунологических показателей активности заболевания, включающих в себя изучение лимфоцитов с рецепторами CD4+, CD8+, CD16+, CD95+, HLA-DR+, соотношение CD4+/CD8+, определение иммуноглобулинов A, M, G, ЦИК, РФ, факторов неспецифической защиты.

У больных 2-й группы быстрее отмечалась положительная динамика лабораторных показателей активности воспалительного процесса. Положительной динамикой клинических проявлений считались уменьшение продолжительности утренней скованности, снижение индекса Ричи, уменьшение болей при движении и в покое по ВАШ, уменьшение окружности сустава не менее, чем на 0,5 см. Определение клеточных маркеров лимфоцитов показало снижение процента CD4+ и повышение клеток CD8+ и CD16+ у пациентов 2-й группы.

Таким образом, предварительные результаты применения гравитационной терапии в комплексном лечении больных с ревматоидным артритом открывают перспективы в лечении данной патологии.