СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ
METHOD OF TREATING MALIGNANT TUMORS

Изобретение относится к медицине, онкологии и может быть использовано для лечения опухолей карциномы легких Льюис в эксперименте.
На современном этапе развития медицины приоритетными практическими задачами онкологии являются поиск и разработка принципиально новых методических подходов, а также усовершенствование традиционных способов терапии для повышения эффективности лечения злокачественных новообразований.
Измененная механика ткани является одним из ключевых признаков рака. Появляется большое количество доказательств того, что модифицированный механический ландшафт может быть не просто побочным продуктом злокачественной прогрессии, но он может способствовать возникновению рака и/или ускорять его прогрессирование [1].
Способность клеток воспринимать механические сигналы и реагировать на них жизненно важна для развития и функционирования здоровых тканей. Многие заболевания связаны либо с изменением механических свойств ткани, либо с изменением способности клеток воспринимать механические сигналы. Это восприятие происходит, в частности, в интегрин-ассоциированных комплексах, которые образуют сайты прикрепления между клеткой и внеклеточным матриксом (ВКМ).
Способность клеток чувствовать и реагировать на механические раздражители называется механотрансдукцией. Механотрансдукция требует определения внешних сил или биомеханических свойств и передачи этой информации, которая запускает специфический внутриклеточный ответный сигнал. Цитоскелет играет критическую роль в механотрансдукции, связывая клеточные компартменты (например, другие системы цитоскелета и ядро) [2] с устройством, чувствительным к силе.
Способность клеток реагировать на внешние силы, исследовать и интерпретировать механические характеристики ВКМ, а также синтезировать и реконструировать его, играет важную роль во многих аспектах клеточного поведения [3]. Например, жесткость ВКМ при болезненных состояниях (например, раке и фиброзе) [4, 5] или во время старения [6] может отрицательно влиять на миграцию, дифференцировку и пролиферацию клеток.
Из экспериментов с клетками было установлено, что эластичность может контролировать многие клеточные процессы, в том числе подвижность различных клеток, пролиферацию и дифференцировку клеток [7], и даже наведение аксонов нейрональных клеток [8]. Эксперименты, проведенные на полиакриламидных гелях, показали заметный клеточный ответ на жесткость за счет изменений в экспрессии генов, которые в конечном итоге регулируют дифференцировку. Мезенхимальные стволовые клетки (МСК), культивируемые на мягких субстратах (~ 1 кПа), дифференцируются в направлении нейрональной линии, в отличие от более жестких субстратов, которые способствуют либо дифференцировке в миобластные (~10 кПа) (или остеоидные (~30 кПа)) фенотипы [7].
Также было показано, что физические методы могут уменьшать внутриклеточное давление опухоли (ВДО). К ним относятся облучение, гипер- или гипотермическая терапия, ультразвук, гипербарическая кислородотерапия и фотодинамическая терапия.
Облучение вызывает повреждение опухолевых клеток и эндотелия сосудов. Это изменяет микроциркуляцию в опухоли за счет снижения проницаемости сосудистой стенки для жидкости и приводит к снижению ВДО [9]. Тем не менее, на данный момент исследователи пришли к выводу, что доказательства, подтверждающие модуляцию в сосудистом, трансваскулярном и интерстициальном транспорте при облучении, до настоящего времени были неубедительными [10]. При этом, облучение может вызвать местный рецидив и метастазирование из-за гипоксии тканей после лечения [11, 12]. Облучение может также вызывать снижение внутриопухолевого транспорта макромолекул из-за повышенного уровня внутриопухолевого коллагена типа 1 [13].
Другой подход к снижению ВДО - индуцированная гипертермия или переохлаждение. Индукция гипертермии в опухоли имеет эффект, аналогичный облучению. Параллельно со снижением ВДО также наблюдалось увеличение сосудистой перфузии опухоли и снижение гипоксии опухоли [14, 15]. Однако терапевтический эффект гипертермической терапии может быть неодинаковым; разные клеточные линии имеют различную внутреннюю чувствительность к теплу [11]. С другой стороны, гипотермия также может снижать ВДО, вероятно, из-за снижения проницаемости капилляров или клеточного метаболизма [16].
Ультразвук уменьшает ВДО [17] из-за механических (кавитация, радиационное давление) и тепловых эффектов. Тепловые эффекты приводят к повреждению опухолевых клеток и внеклеточного матрикса, которые увеличивают внутреннюю гидравлическую проводимость, уменьшают напряжение матрицы и усиливают кровоток в опухоли. Снижение ВДО, вызванное ультразвуком, ограничено по времени и может не соответствовать временным рамкам комбинированной терапии. Например, в доклинических исследованиях снижение ВДО, вызванное ультразвуком, варьируется от 5 минут до 6 часов [17].
Фотодинамическая терапия может потенциально нарушать микроциркуляцию в опухолях. В модели мышиной меланомы фотодинамическая терапия вызывает первоначальное увеличение ВДО, а затем показывает снижение до 50% контрольного значения через 24 часа [18]. Начальное увеличение ВДО может быть объяснено увеличением сосудистого сопротивления опухоли из-за вазоконстрикции, микроэмболизации и частичной окклюзии сосудов опухших эндотелиальных, раковых или иммунных клеток, обработанных фото динамической терапией. Однако прогрессирующая блокировка микроциркуляторного русла приводит, в конечном итоге, к снижению ВДО. В целом, фотодинамическая терапия как метод снижения ВДО еще не подтвержден из-за его ограниченной глубины проникновения лазерного излучения при больших поверхностных опухолях. Это также самоограничение, так как для этого подхода требуется кислород, приводящей к гибели опухолевых клеток, при этом сам метод воздействия формирует гипоксию [11].
Гипербарическая кислородотерапия направлена на улучшение опухолевого ответа на облучение и заживление пострадиационного повреждения ткани путем увеличения напряжения кислорода и доставки к тканям независимо от гемоглобина. Было показано, что гипербарическая кислородотерапия значительно снижает ВДО [19], а повторное лечение дает лучший терапевтический эффект [20]. Гипербарическая кислородотерапия относительно безопасна, но для подтверждения этого при различных типах опухолей требуется дальнейшее исследование [21]. Кроме того, необходимо оптимизировать комбинированное планирование лечения гипербарической кислородотерапией [17].
Таким образом, фармакологическая терапия и используемые на данный момент физические методы имеют свои недостатки, и их применение в клинической практике еще не подтверждено.
Гипобария является еще одним методом физического воздействия снижения ВДО, который на данный момент практически не был исследован в качестве противоопухолевого терапии. Как и гипербарическая кислородотерапия этот способ имеет системный характер воздействия и относится к физиотерапевтическим процедурам, то есть является безопасным. В силу его системности этот подход может оказывать влияние на все процессы канцерогенеза и, в частности, на метастазирование.
Известен способ, описанный в патенте №СА 2642049 Combination pressure therapy» Carl E. Linton, Allen Ruszkowski, Thomas Jackson Tidwell. Опубликовано: 08.02.2006. Канада. Патент №CA 2642049). Формируют гипоксию в барокамере за счет снижения циклами давления в пределах 760-720 мм.рт.ст.(1-0.95 атм) и воздействуют на организм. Согласно данным и литературным источникам, представленные в патенте, гипоксия стимулирует ответную реакцию посредством активации стволовых клеток, главным образом за счет повышения стимулирующих факторов роста клеток, таких как эритропоэтин и HIF-1. Однако, в описании патента не приведено доказательной базы, что эти явления способствуют терапии широкого спектра заболеваний, включая рак за счет стимуляции стволовых клеток. Однако на сегодняшний день установлено, что HIF-1 является ключевым фактором стимуляции роста опухоли и такой способ будет иметь промоторный, а не ингибирующий эффект [22]. Более того, установлено, что гипербарическая кислородотерапия дает терапевтический противоопухолевый эффект, в частности, за счет деградации HIF-1 в условиях нормоксии в клетке. Также не рассматривается вопрос относительно влияния изменения активности стволовых клеток в результате действия пониженного давления на процессы метастазирования.
Способ описанный в патенте «Targeting cancer with metabolic therapy and hyperbaric oxygen» №US 9801903 B2 основан на подавлении активности HIF-1 за счет гипероксигенации у животных в сочетании с применением кетоновой диеты. Ключевой недостаток этого способа заключается в использовании закисления крови (кетоацидоза), так как кетоновая диета плохо переноситься и имеет системные побочные эффекты на органы и кровь.
Наиболее близким аналогом, выбранным за прототип является способ лечения злокачественных опухолей и газовый состав для его осуществления (Патент №RU 2006112461, опубликован 17.04.2006.) В способе воздействуют на пациентов газовым составом в барокамере, причем терапевтическое воздействие на начальном этапе проводят в режиме гипобарии и далее при постепенном повышении давления до 3,5 атм, создаваемого с помощью специально подобранного состава газовой смеси. Значительный недостаток этого способа заключается в использовании повышенного давления для формирования нового состава газовых смесей воздуха. Давление в 3,5 атм. крайне негативно может сказаться на сердечно-сосудистой системе и тяжело переноситься пациентами, особенно онкобольными.
Новый технический результат - улучшение результатов лечения за счет сокращение осложнений в виде метастазирования.
Для достижения нового технического результата в способе лечения злокачественных опухолей, путем системного воздействии на организм физическим фактором, воздействуют с помощью гипобарии, при давлении в барокамере 0.5 атм. в течение одного часа на протяжении 5 суток, также, при совместном использовании лекарственных препаратов противоопухолевого действия с гипобарией, прием лекарственных препаратов производят до проведения соответствующего сеанса
Способ осуществляют следующим образом. Воздействуют с помощью гипобарии, а также при совместном использовании лекарственных препаратов противоопухолевого действия с баротерапией при давлении в барокамере, равном 0,5 атм. (при постепенном увеличении от 0,4-0,6 атм.), при этом баротерапию выполняют курсами, причем длительность каждого сеанса подбирают индивидульно в зависимости от адаптивных возможностей организма, а в дни проведения баротерапии прием лекарственных препаратов производят до проведения соответствующего сеанса в зависимости от фармакокинетики лекарственного препарата.
Результаты исследований влияния гипобарического воздействия на опухолевый процесс в самостоятельном виде и в комбинации с химиопрепаратом приведены в примере №1.
Проверка влияния гипобарического воздействия на рост опухоли и процессов метастазирования была проведена в экспериментах на мышах линии C57BL/6j) с использованием модели карциномы легких Льюис.
В качестве химиопрепарата был использован метоктрексат ("ВЕРО-фарм"). Метоктрексат вводили внутрибрюшинно в дозе 0,5 мг в сутки (1/3 от максимально переносимой дозы) в течение 1 и 2 недель. Дозы метоктрексата были подобраны для курсового введения и оптимального сочетания терапии с гипобарией.
При комбинированном лечении гипобарией (ГБ) и метотрексатом продолжительность лечения была 1,5 недели. После введения препарата животных помещали в барокамеру на 1 час и снижали давление до 0,5 атм. Выбранный режим воздействия низкого давления на мышей являлся максимально переносимым в установленные сроки терапии. Лечение животных начинали с 5 суток от момента инокуляции опухолевых клеток. Животных выводили из опыта на 21-е сутки эксперимента при токсической дозе золетила (VIRBAC, Франция). Торможение роста опухоли (ТРО) вычисляли по формулам: TPOv=(VкVoп×100% / Vк где Vк- средний объем опухоли в контрольной группе; Sоп - средний объем опухоли в опытной группе. Уровень торможения метастазов (ТМ) в легких рассчитывали по формуле: ТМ=(Sк - Sоп)×100% / Sк, где Sк - средняя площадь метастазов в легких контрольной группы; Sоп - средняя площадь метастазов в легких опытной группы.
Обработку полученных результатов проводили с использованием непараметрических критериев Вилкоксона-Манна-Уитни. Различия считали достоверными при Р<0,05.
По интенсивности роста модель карциномы Льюис можно отнести к последней стадии заболевания раком. Так, к 21 суткам опухоль после прививки достигала 8-10 г, что соответствовало 30% массы тела животных. Кахексия также развивалась в диапазоне 20-30%. Масса метастазов имела значительный диапазон разброса и колебалась от 250 до 650 мг, при массе легких в 150 мг. Поэтому индекс торможения ТРО в пределах 15-30% являются хорошим показателем для исследуемого противоопухолевого эффекта, а для метастазов это показатель должен быть выше 30%.
Комбинированная терапия была сокращена с 2 недель до 1,5 по причине тяжелого состояния животных, так как доза химиопрепарата была максимально переносимой и дополнительная нагрузка ГБ в итоге приводила к гибели 20% при условии лечения в течение 2 недель.
Результаты эксперимента о противоопухолевом действии препарата приведены в Фиг. 1 и на Фиг. 2, а также Фиг. 3. Как видно из результатов, действие химиопрепарата МТХ оказывало умеренный терапевтических эффект и ТРО колебалось в среднем на уровне 15% для первичной опухоли (Фиг. 1). В случае действия ГБ на первичный очаг, ТРО составил в среднем на начальном этапе 20%. В случае комбинированой терапии наблюдался наибольший эффект и достигал 45% на 5 сутки лечения.
Антиметастатическое действие ГБ имело место лишь при длительном воздействии в течение 2 недель и составило 20%, что соответствовало показателю ТМ в группе с метотрексатом, пролеченных на протяжении 1 недели (Фиг. 2 и Фиг. 3). Совместное воздействие ГБ и МТХ в течение 1,5 недель было сопоставимо с группой курсовой 2 недельной терапии МТХ и составила 35%.
Предлагаемый способ основан на анализе источников научно-технической информации уровня техники и результатов экспериментальных исследований авторов.
Hirokawa и соавторы [23, 24] исследовали влияние внутрипросветного давления на культивируемые эпителиальные клетки кишечника (клеточная линия IEC18). Давление на клетки оказывалось газообразным гелием в культуральной колбе до достижения нагрузки 80 мм рт.ст.(Приблизительно 10 кПа). Авторы показали, что такое внешнее давление вызывает пролиферацию клеток, вероятно, посредством активации экспрессии Мус, онкогена, связанного с (β-катенином [23, 24]. Точно так же давление 15 мм рт.ст., приложенное к клеткам толстой кишки, имплантированным в модель крысы, увеличивает метастазирование в печени, что позволяет предположить, что даже небольшое повышение давления может влиять на пролиферацию злокачественных клеток [25].
Помимо изменения клеточной пролиферации, внеклеточное давление может влиять на рост рака, способствуя адгезии клеток [26, 27-29].
Большое количество фактов свидетельствует о том, что микроокружение опухоли с ее механическими стимулами, включая жесткость, может играть главную роль в инициации метастазирования. Например, высокоагрессивный метастатический вариант клеток меланомы B16-F1 мышей вырабатывается путем культивирования клеток в мягком фибриновом каркасе [30]. Weaver и соавторы действительно показали, что жесткость ВКМ, полученная путем сшивания коллагена, способствует злокачественному поведению в эпителиальных клетках молочной железы путем модуляции экспрессии интегрина [31, 32].
В другом эксперименте Tang и соавторов, культивируя Е-клетки на полиакриламидных субстратах с четко определенной жесткостью, продемонстрировали, что доля метастатических R-клеток может быть увеличена на несколько порядков до 70%-90% от исходной клеточной популяции. Аналогичные результаты были получены на субстратах, покрытых ламинином, и при использовании других клеточных линий рака толстой кишки человека (SW480) и рака предстательной железы [33].
Другим ключевым аспектом механического компонента онкологических заболеваний является влияние механотрансдукций на резистентность к онкотерапии. Повышенное давление в объеме опухоли или ВДО было идентифицировано как один из виновников, который препятствует эффективному лечению рака [34]. Повышение ВДО может быть связано с несколькими патофизиологическими факторами. К ним относятся нарушения в сосудистой сети опухоли, лимфатических сосудах и микроокружении, а также пролиферирующие опухолевые клетки в ограниченном пространстве [34].
Повышенная проницаемость сосудов в сочетании с аномальными или отсутствующими лимфатическими сосудами в объеме опухоли приводит к накоплению жидкости и белков в интерстиции, способствуя повышению ВДО.
Известно, что высокий ВДО снижает эффективность терапии рака с помощью нескольких механизмов. Один из механизмов заключается в том, что высокий уровень ВДО приводит к снижению потребления и гетерогенному распределению в паренхиму опухоли лекарств (химиотерапия, таргетная терапия) и других макромолекул [36]. Эти макромолекулы обычно транспортируются через промежуточное пространство конвекцией, транспортный процесс, который зависит от градиентов давления. Повышенная проницаемость сосудов опухоли создает менее крутой градиент вдоль сосудов. Это приводит к уменьшению конвективного транспорта через сосуды в объеме опухоли. Диффузия становится основным транспортным механизмом макромолекул. Тем не менее, они делают это медленнее из-за более плотной опухоли межклеточного матрикса. Макромолекулы могут быть реабсорбированы обратно в кровоток, прежде чем они смогут накапливаться в опухоли на оптимальном уровне, чтобы вызвать эффект.
Другой механизм связан с высоким сопротивлением опухоли сосудов. Высокое опухолевое давление из-за пролиферирующих опухолевых клеток вызывает сжатие сосудистой сети опухоли, что приводит к увеличению сосудистого сопротивления [37]. Это приводит к уменьшению опухолевого кровотока и, как следствие, уменьшает транспорт противоопухолевого агента к опухолевым клеткам.
Третий механизм заключается в том, что ненормальная и извилистая опухолевая сосудистая сеть вызывает застой крови, что приводит к уменьшению кислорода и кровотока в опухолях [38]. Опухоль становится гипоксической, а затем ишемической и некротической. Гипоксия вызывает увеличение анаэробного метаболизма и формирование эффекта Варбурга. В результате повышается концентрации лактата во внеклеточном пространстве. Повышение кислотности ухудшает или дезактивирует некоторые терапевтические препараты и делает их неэффективными. Гипоксия также может вызвать сопротивление лучевой терапии. Гипоксия приводит к накоплению внеклеточного аденозина, который ингибирует противоопухолевые Т-клетки, что позволяет им избежать иммунологического надзора [39].
В связи с повышением давления опухоли и его существенным влиянием на лечение рака модуляция ВДО необходима для улучшения реакции опухоли на лечение рака и, следовательно, общего результата лечения.
Было показано, что фармакологическое и/или физическое воздействие на эти факторы снижает ВДО и улучшает внутриопухолевое распределение и поглощение лекарств. Таким образом, эти методы имеют потенциал для клинического применения лечения рака [40].
Таким образом, предлагаемый способ расширяет ассортимент методов для воздействия на опухолевый рост и распространение опухолевых клеток. Предлагаемый способ с применением гипобарии (ГБ) позволяет получить лечебный эффект, выражающийся в торможении роста опухоли в пределах от 20% до 45% и снижению метастазирования. При этом можно использовать меньшую дозу химиопрепарата, что снижает количество осложнений вызываемых его применением.
Список источников информации
1. Ciasca G., Papi М., Minelli Е., Palmieri V., De Spirito M. Changes in cellular mechanical properties during onset or progression of colorectal cancer. World J. Gastroenterol., 22 (2016), pp. 7203-7214.
2. Cho S., Irianto J., Discher D.E. Mechanosensing by the nucleus: from pathways to scaling relationships. J. Cell Biol., 216 (2017), pp. 305-315.
3. Jansen K.A. et al. A guide to mechanobiology: where biology and physics meet. Biochim. Biophys. Acta, 1853 (11 PtB) (2015), pp. 3043-3052.
4. Jaalouk D.E., Lammerding J. Mechanotransduction gone awry. Nat. Rev. Mol. Cell Biol, 10 (2009), pp. 63-73.
5. Lu P., Weaver V.M., Werb Z. The extracellular matrix: a dynamic niche in cancer progression. J. Cell Biol., 196 (2012), pp. 395-406.
6. 4 Snedeker J.G., Gautieri A. The role of collagen crosslinks in ageing and diabetes - the good, the bad, and the ugly. Muscles Ligaments Tendons J., 4 (2014), pp. 303-308.
7. Engler A.J., et al. Matrix elasticity directs stem cell lineage specification. Cell, 126 (2006), pp. 677-689.
8. D.E. Koser, et al. Mechanosensing is critical for axon growth in the developing brain. Nat. Neurosci., 19 (2016), pp. 1592-1598.
9. Znati C.A., et al. Effect of radiation on interstitial fluid pressure and oxygenation in a human tumour xenografts. Cancer Res., 56 (1996), pp. 964-968.
10. Multhoff G., Vaupel P. Radiation-induced changes in microcirculation and interstitial fluid pressure affecting the delivery of macromolecules and nanotherapeutics to tumours. Front. Oncol. 2 (2012), pp. 165.
11. Patterson D.M., Rustin G.J.S. Vascular Damaging Agents. Clin. Oncol., 19 (2007), pp. 443-456.
12. Harada H., et al. Cancer cells that survive radiation therapy acquire HIF-1 activity and translocate towards tumour blood vessels. Nat. Commun., 3 (2012), pp. 738.
13. Znati C.A., et al. Irradiation reduces interstitial fluid transport and increases the collagen content in tumors. Clin. Cancer Res., 9 (2003), pp. 5508-5513.
14. Leunig M., et al. Interstitial fluid pressure in solid tumours following hyperthermia: possible correlation with therapeutic response. Cancer Res,. 52 (1992), pp. 487-90.
15. Sen A., et al. Mild elevation in body temperature reduces tumour interstitial fluid pressure and hypoxia, and enhances the efficacy of radiotherapy in murine tumour models. Cancer Res., 71 (2011), pp. 3872-3380.
16. Navalitloha Y., Schwartz E.S., Groothuis E.N., Allen C.V., Levy R.M., Groothuis D.R. Therapeutic implications of tumour interstitial fluid pressure in subcutaneous RG-2 tumours. Neuro. Oncol., 8 (2006), pp. 227-233.
17. Watson K.D., et al. Ultrasound increases nanoparticle delivery by reducing intratumoural pressure and increasing transport in epithelial and epithelial-mesenchymal transition tumours. Cancer Res., 72 (2012), pp. 1485-1493.
18. Leunig M., Goetz A.E., Gamarra F., Zetterer G., Messmer K., Jain R.K. Photodynamic therapy-induced alterations in interstitial fluid pressure, volume and water content of an amelanotic melanoma in hamster. Br. J. Cancer, 69 (1994), pp. 101-103.
19. Moen I., Tronstad K.J., Kolmannskog O., Salvesen G.S., Reed R.K., Stuhr L.E.B. Hyperoxia increases the uptake of 5-fluorouracil in mammary tumours independently of changes in interstitial fluid pressure and tumour stroma. BMC Cancer, 9 (2009), pp. 446.
20. Raa A., Stansberg C, Steen V.M., Bjerkvig R., Reek R.K., Stuhr L.E.B. Hyperoxia retards growth and induces apoptosis and loss of glands and blood vessels in DMBA-induced rat mammary tumours. BMC Cancer 7 (2007), pp. 23.
21. Moen I., Stuhr L.E.B. Hyperbaric oxygen therapy and cancer - a review. Target Oncol., 7 (2012), pp. 233-42.
22. Pezzuto A., Carico E. Role of HIF-1 in Cancer Progression: Novel Insights. A Review. Curr. Mol. Med., 18 (2018), pp. 343-351
23. Hirokawa M., et al. Loading of mechanical pressure activates mitogen-activated protein kinase and early immediate gene in intestinal epithelial cells. Dig Dis Sci. 46 (2001), pp. 1993-2003.
24. Hirokawa M., et al. Pressure stimulates proliferation and DNA synthesis in rat intestinal epithelial cells. Life Sci. 61 (1997), pp. 667-672.
25. Gutt C.N., Kim Z.G., Gessmann Т., Lorenz M., Paolucci V. Hepatic tumor spread of colorectal cancer in a laparoscopic animal model. Surg Endosc. 14 (2000), pp. 448-451.
26. Basson M.D. Paradigms for mechanical signal transduction in the intestinal epithelium. Category: molecular, cell, and developmental biology. Digestion. 68 (2003), pp. 217-225.
27. Basson M.D., et al. Effects of increased ambient pressure on colon cancer cell adhesion. J Cell Biochem. 78 (2000), pp. 47-61.
28. Basson M.D., Modlin I.M., Madri J.A. Human enterocyte (Caco-2) migration is modulated in vitro by extracellular matrix composition and epidermal growth factor. J Clin. Invest. 90 (1992), pp.15-23.
29. Thamilselvan V., Basson M.D. Pressure activates colon cancer cell adhesion by inside-out focal adhesion complex and actin cytoskeletal signaling. Gastroenterology, 126 (2004), pp. 8-18.
30. Liu J., et al. Soft fibrin gels promote selection and growth of tumorigenic cells. Nat Mater. 11 (2012), pp. 734-741.
31. Levental KR, et al. Matrix crosslinking forces tumor progression by enhancing integrin signaling. Cell, 139 (2009), pp. 891-906.
32. Paszek M.J., et al. Tensional homeostasis and the malignant phenotype. Cancer Cell, 8 (2005), pp. 241-254.
33. Tang X., et al. A mechanically-induced colon cancer cell population shows increased metastatic potential. Mol. Cancer, 13 (2014), pp. 131.
34. Heldin C-H., Rubin K., Pietras K., Ostman A. High interstitial fluid pressure - an obstacle in cancer therapy. Nature, 4 (2004), pp.806-813.
35. Morel D., Marcelpoil R., Brugal G. A proliferation control network model: the simulation of two-dimensional epithelial homeostasis. Acta Biotheor. 49 (2001), pp. 219-234.
36. Drasdo D., Loeffler M. Individual-based models to growth and folding in one-layered tissues: intestinal crypts and early development. Nonlinear Analysis: Theory, Methods & Applications, 47 (2001), pp. 245-256.
37. Cheng J., et al. Human matrix metalloproteinase-8 gene delivery increases the oncolytic activity of a replicating adenovirus. Mol. Ther., 15 (2007), pp. 1982-1990.
38. Padera T.P., Stoll B.R., Tooredman J.B., Capen D., di Tomase E., Jain R.K. Cancer cells compress intratumour vessels: pressure from proliferating cells impedes transport of therapeutic drugs into tumors. Nature, 427 (2004), pp. 695.
39. Vaupel P., Kallinowski F., Okunieff P. Blood flow, oxygen and nutrient supply, and metabolic microenvironment of human tumors: A review. Cancer Res., 49 (1989), pp. 6449-6465.
40. Jansen K.A., Atherton P., Ballestrem C. Mechanotransduction at the cell-matrix interface. Semin. Cell Dev. Biol., 71 (2017), pp. 75-83.
Приложение
Фиг. 1 Динамика торможения роста первичной опухоли, ТРО%
Фиг. 2 Площадь метастазов в легких
в
д
Фиг. 3 Влияние терапии на процессы метастазирования в легких мышей, где:  и  -вентральная и дорсальная поверхность легких; LLC - контрольная группа; МТХ - терапия метотрексатом; ГБ -терапия гипобарией;