СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИБРИДОМЫ, ПРОДУЦИРУЮЩЕЙ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА К АЛЬФА ИЗОФОРМЕ БЕЛКА ТЕПЛОВОГО ШОКА СЕМЕЙСТВА 90 (HSP90α) ЧЕЛОВЕКА И ШТАММ Mus musculus Hhsp90/10A2 - ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ

-9
1. Способ получения гибридомы, продуцирующей моноклональные антитела, ингибирующие биологическую активность Hsp90α в миграции и инвазии клеток in vitro и метастазировании in vivo, заключающийся в том, что проводят: а) выделение нативного Hsp90, б) иммунизацию мышей, в) слияние лимфоцитов иммунных мышей с мышиными миеломными клетками, г) селекцию гибридом на селективной питательной среде, д) отбор и скрининг гибридом, е) криоконсервацию; при этом в конце этапа выделения нативного Hsp90 проводят дополнительную денатурацию белка в диапазоне температур от +85 до +95°C в течение 3-9 мин, где скрининг гибридом на продукцию Hsp90-специфических моноклональных антител проводят методом непрямого ИФА с использованием нативного Hsp90 быка, при этом положительные клоны, секретирующие Hsp90, подвергают второму отбору методом непрямого ИФА и отбирают клоны, секретирующие Hsp90α-специфические антитела с константой диссоциации Kd=1,2×10, и изоэлектрической точкой в диапазоне 6,7-7,4.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительную денатурацию белка проводят при +90°C в течение 5 мин.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве миеломных клеток используют клетки SP2/0.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что селекцию проводят на селективной питательной среде содержащей HAT.
5. Штамм культивируемой гибридомы мышей Mus musculus Hhsp90/10A2, продуцент моноклональных антител, ингибирующих биологическую активность Hsp90α в миграции и инвазии клеток in vitro и метастазировании in vivo, депонирован в Уникальной научной коллекции биологического материала «Экспериментальный генетический криобанк» № УНУ 441692 при ФГБУН Институт биофизики клетки РАН за № СН-2017-1.