Переносимость, фармакокинетические показатели и терапевтическая эффективность флорама в опытах на цыплятах

ПЕРЕНОСИМОСТЬ, ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ И ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ФЛОРАМА В ОПЫТАХ НА ЦЫПЛЯТАХ

А.В. Хмыров, Г.И. Горшков

Аннотация. Установлена высокая переносимость к флораму у цыплят-бройлеров. При лечении колибакте-риозных цыплят химиотерапевтическая эффективность флорама выше, чем колмика-Е.

Ключевые слова: флорам, флорфеникол, колмик-Е, цыплята-бройлеры, биодоступность, гематологические показатели, живая масса, сохранность.

Флорам представляет собой 2%-ный раствор флор-феникола в полиэтиленгликоле. Сам флорфеникол, а также препараты, созданные на его основе (флоридокс, флорикол, флорокс, флорон), рекомендуются к применению в качестве химиотерапевтических средств при заболеваниях, вызванных грамположительной и гра-мотрицательной микрофлорой, - стрептококкозах, ми-коплазмозах, орнитозах, пастереллезе, колибактериозе, сальмонеллезе и др. (Справочник Видаль Ветеринар, 2013). Ценность флорфеникола состоит в том, что он малотоксичен, губительно действует на бактериальную микрофлору, приобретённую устойчивость к некоторым антибиотикам и синтетическим химиотерапевти-ческим средствам, и может быть одним из средств преодоления кризиса химиотерапии, связанного с антибио-тикорезистентностью возбудителей инфекционных болезней.

Цель исследования - изучить безопасность применения флорама, параметры его фармакокинетики в организме цыплят и химиотерапевтическую эффективность при кишечных инфекциях. Знания фармакокине-тики лекарственного препарата позволяет более глубоко представлять механизм его влияния на макро- , в данном случае и микроорганизм, выбирать рациональную лекарственную форму и совершенствовать применение. Показатели кинетики лекарственного вещества в организме зависят, как известно, не только от его химической структуры, растворимости, лекарственной формы, способности вступать во взаимодействие с органами и тканями, но и от вида, возраста, пола, физиологического состояния организма животного или человека (В.Н. Соловьев, А.А. Фирсов, В.А. Филов, 1980; Листопад А.И., Сноз Г.В., Бреславец В.М, 2013; Яковлева И.Н., Мусиенко Н.А., Дронов В.В., 2013).

Работа выполнена в условиях физиологического комплекса Центра аграрных проблем ФГБОУ ВПО «Белгородская ГСХА» на цыплятах-бройлерах. Разделение цыплят по группам проводили с учетом аналогии их по происхождению, возрасту, живой массе, условиям предшествующей инкубации, времени постановки на выращивание, технологии выращивания, физиологическому состоянию. Содержание подопытных цыплят напольное, кормление - по нормам ВНИТИП, поение автоматическое из ниппельных поилок.

Препарат «Флорам» был получен и предоставлен для испытания ООО «Белфармаком» (г. Белгород). Его состав: флорфеникола 2%, вспомогательных веществ - до 100%. Это - бесцветная прозрачная жидкость, хорошо растворима в воде при 15-20 С. Отличается от других препаратов флорфеникола меньшей концентрацией действующего вещества и другой природой наполнителя.

Флорам добавляли к питьевой воде.

Безопасность применения флорама изучали на 3 группах двухсуточных цыплят-бройлеров (по 20 гол. в каждой при средней живой массе 60-62г). Первая группа служила контролем. Цыплятам опытных групп к питьевой воде пять суток подряд добавляли флорам из

расчета на кг массы тела: опытной-1 группе - 1 мл (терапевтическая доза), опытной-2 - 3 мл.

По той же схеме флорам испытан на белых крысах (три группы по 10 гол).

Фармакокинетику флорама (по флорфениколу) изучали на 100 цыплятах средней живой массой 650700г, разделенных на опытную и контрольную группы. Перед началом опыта в течение 6 ч всех цыплят выдерживали на голодной диете без доступа к корму и питьевой воде. Затем давали воду: опытной группе - с добавлением флорама в дозе, эквивалентной 20 мг флорфеникола на кг массы тела, контрольной - эту же воду без добавления препарата. Параллельно с поением цыплят допускали к корму. Опыт продолжался 5 сут.

У 5 цыплят из каждой группы через 30 мин, 1 час, а затем через каждые 3 ч после дачи флорама брали кровь и образцы скелетной мускулатуры, печени, почек, кожи для исследования на содержание флорфени-кола методом диффузии в агар (В.Ф. Ковалев с соавт., 1988).

Химиотерапевтическую активность флорама определяли на 200 цыплятах (по 100 гол. ж.м. 740-760г). От каждой из двух предназначенных для исследования групп у 6 цыплят брали кровь из яремной вены для биохимических и серологических анализов. Из внутренних органов делали посевы на питательные среды (МПА - мясо-пептонный агер, МПБ - мясо-пептонный бульон, агары Эндо и Плоскирева, среды Кларка и Симпсона). С помощью агглютинирующих сывороток выявляли серовары E. coli.

Цыплятам первой (контрольной) группы добавляли по 1 мл/л питьевой воды препарат Колмик-Е, содержащий энрофлоксацин (согласно рекомендации производителя). Вторая группа получала флорам в дозе 1 мл/кг живой массы. Препараты применяли на протяжении 5 сут. Учитывали количество заболевшей и павшей птицы, изменения живой массы, гематологические показатели (гемоглобин, число эритроцитов и лейкоцитов; общий белок сыворотки и его фракции, кальций и фосфор, витамины А и Е).

При наблюдении за цыплятами и белыми крысами, которым в течение 5 сут ежедневно добавляли к питьевой воде флорам, никаких внешне видимых изменений и отличий с контролем не отмечалось ни в процессе приема флорама, ни в последующие 14 сут после его отмены. На вскрытии после эвтаназии 3 животных из каждой группы органы и ткани визуально не имели никаких различий с контролем и нормальными показателями.

В фармакокинетических исследованиях установлено, что уже через 30 мин после перорального введения фло-рама противомикробная активность сыворотки крови возрастала до 12200 мкг/л, что в несколько раз превышает МПК (минимальная подавляющая концентрация) для большинства микроорганизмов, чувствительных к антибиотикам. Высокий уровень флорфеникола сохранялся 8-10 ч. Обычно к 9 ч МПК находилась в пределах 800 мкл, а затем постепенно снижалась. Основные фармако-кинетические параметры составили: Стах (максимальная концентрация) в сыворотке крови - 14,1мкг/мл при tmax (время достижения максимальной концентрации) - 30 мин; через '/г-1ч Стах в почках - 6258, коже - 5950, скелетных мышцах - 3500, печени - 11148 мкг/кг; биодоступность - 94%, период полувыведения - 104+15 мин.

Следовательно, флорам обладает высокой биодоступностью, быстро распределяется в органах и тканях и создает в них высокую концентрацию действующего

вещества (флорфеникола), что должно обеспечивать надежное терапевтическое действие.

Химиотерапевтическая эффективность флорама изучалась в сравнении с колмиком-Е. Полученные в опытах результаты по сравнительной химиотерапевти-ческой эффективности флорама и колмика-Е при коли-бактериозе приведены в таблица 1.

Таблица 1 - Результаты испытания флорама и

Альбумины, % 46,94+4,19 56,6+4,07 +20,6

Глобулины,% 53,06+4,19 43,4+4,07 -18,21

АсТ 2,90+0,16 2,98+0,51 +2,8

АлТ 0,41+0,05 0,37+0,02 -9,8

Кальций, мг % 10,27+0,66 11,5+0,25 +11,98

Фосфор, мг % 6,85+0,25 8,12+0,46 +18,54

Показатели Группы

контрольная

Количество цыплят

в начале опыта 100 100

в конце опыта 96 99

Заболело 92 96

Выздоровело 88 96

% выздоровевших 95,7 100

Падеж 4 1

Сохранность, % 96 99

Среднесуточный прирост 42,0+0,4 43,5+0,3

+ к контролю, % - +3,6

Средняя живая масса 1 цыпленка, к концу опыта, г 1772+0,3 1835+0,3

+ к контролю, % - +3,55

Средний срок выздоровления, сут. 4 3

Как видно из данных таблицы 1, в группе, получавшей флорам, выздоровевших цыплят от числа заболевших было больше на 4,3%, падеж меньше на 3,0%, среднесуточные приросты и живая масса к концу опыта выше на 3,6%, чем у получавших колмик-Е. Индекс продуктивности в контрольной группе составил 196,6, в опытной - 217,4, или на 10,6% выше.

Более высокие показатели при лечении флорамом можно объяснить его изначально превосходящими хи-миотерапевтическими свойствами. Но не следует исключать возможность того, что частично колибактериоз у цыплят был вызван устойчивыми к фторхинолонам бактериями. Несмотря на недавнее введение фторхино-лонов в практику ветеринарной медицины уже выявляются случаи резистентности к ним штаммов возбудителей болезней птиц (М. Mahammad с соав., 2010).

Чтобы утверждать о преимуществе того или иного препарата в химиотерапии, недостаточно учитывать только результаты его противомикробного действия. Не менее значимо его влияние на организм животного (Горшков Г.И., Носков С.Б., Яковлева Е.Г., 2009). Поэтому у цыплят были определены также параметры их физиологического состояния. Данные на этот счет представлены в таблица 2.

Достоверность разницы между группами р>0,05. Несмотря на то, что различия в гематологических показателях имеют низкую статистическую значимость, связанную с их большими индивидуальными колебаниями, в таблице 2 прослеживается тенденция более выраженного положительного влияния на организм цыплят флорама, чем колмика. Коэффициент де Ритиса составил у цыплят группы, где применяли колмик-Е -0,14, флорам - 0,12, или ниже на 14,3%.

Таблица 2 - Гематологические показатели у цыплят,

Группы

Показатели колмик флорам + к контролю, %

Гемоглобин, гл-1 79,42+12,61 80,61+6,15 +1,5

Эритроциты, 2,27+0,05 2,56+0,33 +12,8

млн-мкл

Лейкоциты, 39,1+3,40 36,8+8,59 -5,88

тыс-мкл-1

Общий белок, г % 2,74+0,39 3,28+0,16 +19,7

Выводы

1. Флорам не вызывал каких-либо признаков отравления у 2-суточных цыплят и взрослых крыс при добавлении его в питьевую воду в дозах 1 и 3 мл/кг массы тела, или 20 и 60 мг/кг в пересчете на флорфеникол.

2. Препарат обладает высокой биодоступностью (94%). Через полчаса-час после перорального введения он обнаруживается в сыворотке крови в концентрации 12200 мкг/л, в почках - 6258, печени - 11148, скелетных мышцах - 3500, коже - 5950 мкг/кг. Период полувыведения составляет 140+15 мин.

3. Химиотерапевтическая эффективность флорама выше, чем колмика-Е. Индекс продуктивности группы, получавшей флорам, составил 217,4, получавшей кол-мик Е - 196,6, или на 9,6% ниже.

Список использованных источников

1 Muhammad M., Muhammad L.U., Ambali A.-C. et al. Prevalence of Salmonella associated with chick mortality at hatchind and their susceptibility to antimicrobial agents // Vet. Microbiolody. - 2010. - Vol. 140, № 1-2. - P. 131-135.

2 Горшков Г.И., Носков С.Б., Яковлева Е.Г. Принципы химиотерапии болезней животных // Ветеринарный вестник. -2009. - № 7. - С. 2.

3 Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии: Справочник // В.Ф. Ковалев, И.Б. Волков, Б.В. Виолин и др. - М.: Агропромиздат, 1988. - 223с.

4 Эффективность энрофлоксацина в комплексной гормональной профилактике нарушений воспроизводительной функции у коров / А.И. Листопад, Г.В. Сноз, В.М. Бре-славец и др. // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. - 2013. - № 4. - С. 7-8.

5 Соловьев В.Н., Фирсов А.А., Филов В.А. Фармако-кинетика. - М.: Медицина, 1980. - 423с.

6 Справочник Видаль Ветеринар: Лекарственные средства для ветеринарного применения в России - М.: Аст-раФармСервис, 2013. - С.302-311.

7 Микроядерный тест генотоксично сти и его снижение при добавках к комбикорму птиц фитоминералосорбента. Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана / И.Н. Яковлева, Н.А. Мусиенко, В.В. Дронов и др. - 2013. - Т. 214. - С. 506-510.

Информация об авторах

Хмыров Алексей Владимирович, кандидат биологических наук, руководитель Центра аграрных проблем ФГБОУ ВПО «Белгородская ГСХА».

Горшков Григорий Иванович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой морфологии и физиологии ФГБОУ ВПО «Белгородская ГСХА».