Новый взгляд на цитоморфологическую диагностику рака яичников

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ТЕЗИСЫ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ

как выпот с наличием метастатаза аденокарциномы (АК), в 33 подтвердился специфический выпот положительной ФИЦХ с Ber-EP4-Cy3 на биочипах. Два наблюдения из 35 не выявило экспрессию с МКАТ Ber-Ep4-Cy3. В одном случае заключение было изменено на реактивный выпот, а второй — расценен как метастаз низкодифференцированного серозного рака ячников.

Из 19 наблюдений экссудатов и смывов с реактивными изменениями мезотелия после реакции на биочипах с МКАТ Ber-Ep4-Cy3: в 12 наблюдениях изменения были представлены реактивным мезотелием, в 7 — выявлены клетки метастаза АК. В 37% (n=32) наблюдений, требующих проведения дополнительных ФИЦХ исследований, в 17 наблюдениях изменения были представлены реактивным мезотелием, в 15 — выявлены клетки метастаза АК.

Исследования показали преимущества использования биочипов:

• Возможность использования системы обратного контроля.

• Используемый флуорохром имеет длительный срок флуоресценции.

• При малом количестве опухолевых клеток в полученном материале в 15 раз возрастает вероятность их обнаружения.

• Низкая себестоимость

Выводы. ФИЦХ исследование с МКАТ Ber-Ep4 — Cy3 на биочипах является надежным и быстрым методом диагностики характера выпотных жидкостей.

Цитоморфологическая диагностика ликвора при первичных и метастатических поражениях головного мозга с применением иммуноцитохимии

М. В. Савостикова', Л.Я. Фомина', Е. С. Федосеева', Е. Ю. Фурминская'

Место работы: 'ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России

e-mail: savostikovamv@yandex.ru

Цитологическое исследование ликвора является «золотым стандартом» диагностики и, наряду с другими современными методами, позволяет повысить выявляемость первичных и метастатических поражений головного мозга. Для обнаружения зачастую немногочисленных клеток злокачественного новообразования в ликворе и уточнения их гистогенеза в нашей работе мы прибегаем к иммуноцитохимическому исследованию (ИЦХ).

Цель. Оценить возможности цитоморфологической и ИЦХ при исследовании ликвора с первичными и метастатическими поражениями головного мозга.

Материалы и методы. Проведено 60 цитологических исследований ликвора, полученного посредством люмбальной или вентрикулярной пункции, а также пункции объемных образований головного мозга, от 27 пациентов. У женщин подавляющее большинство вторичных поражений ЦНС (12 случаев) было представлено метастазами рака молочной железы, в одном случае диагностирована метастатическая меланома; у мужчин в трех случаях были выявлены метастазы рака легкого и в одном — метастаз плеоморфной липосаркомы. У 7 пациентов были верифицированы первичные опухоли головного мозга (медуллобластомы — 2, глиобластомы — 3, лимфома — 1, тератоидная рабдоидная опухоль — 1). Еще у трех пациентов по данным МРТ имели место доброкачественные, либо неопухолевые изменения головного мозга (аденома гипофиза — 1, очаг ишемии — 1, очаг атрофии — 1). Весь объем СМЖ был использован

для приготовления серии монослойных препаратов с помощью системы Cytospin-3. С целью уточнения цитологического диагноза 7 пациентам были проведены ИЦХ реакции с использованием моноклональных антител к общим цито-кератинам (panCK), СК7, CD3, CD20, CD45, ER, ki67, S100, HMB45, melan A, десмину, ЭМА, Ber-EP4, p63, TTF-1, синапто-физину (Dako) на иммуногистостейнере Ventana. Результаты исследования. У 13 из 17 пациентов метастатические поражения головного мозга подтвердились цитологически. У 7 обследованных по поводу первичных опухолей ЦНС клетки опухоли в СМЖ были обнаружены в трех случаях. В трех наблюдениях с доброкачественными и неопухолевыми образованиями головного мозга клетки опухоли обнаружены не были. Из 60 цитологических исследований СМЖ в 29 случаях удалось выявить клетки опухоли. Чувствительность цитологического исследования составила 51%, что согласуется с данными мировой литературы. Иммуноцитохимическое исследование позволило определить гистогенез метастатической опухоли в 4 наблюдениях, в 2 — первичной опухоли головного мозга (лимфома, медул-лобластома), в 1 доказать отсутствие опухоли. Выводы. ИЦХ исследования расширяют возможности цито-морфологии в выявлении опухолевых клеток и определении их гистогенеза, однако традиционно малый объем ликвора и его низкая клеточность иногда ограничивает применение данного метода.

Новый взгляд на цитоморфологическую диагностику рака яичников

М. В. Савостикова', К. И. Жорданиа', Ю. Г. Паяниди', Н. Н. Гокадзе'

Место работы: 'ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва

e-mail: savostikovamv@yandex.ru

Рак яичников — одна из самых трудных проблем для онкологов всего медицинского мира. За последние 30 лет выживаемость больных этой патологией увеличилась лишь на 13%. Материалы и методы. В лаборатории клинической цитологии ФГБУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина выполнено 79 цитологических и 218 иммуноцитохимических исследований интраоперационных смывов и аспиратов из полости матки при патологии яичников и профосмотре: 36-карцином яичника, 5 — рак после нерадикального или ХТ лечения, 10 — метастазов в яичник, 12 — доброкачественные опухоли яичников, 16 — без патологии яичников.

Выводы.

— При цитологическом исследовании у 29 (74%) из 39 пациенток с диагнозом «рак яичников» в материале из полости матки (в 20 смывах и 19 аспиратах) отмечались единичные клетки и комплексы клеток соответствующих АК яичников. При ИЦХ исследовании материала из полости матки у пациенток с диагнозом «рак яичников» — в 79% (в 31 из 39 наблюдений) определяется коэкспрессия белка р53, WT1 в клетках соответствующего рака яичника. При совместном использовании цитологического и ИЦХ методов — в 82% (в 32 из 39 наблюдений) определяются клетки карциномы яичника в полости матки.

— При серозном раке яичников в 80% (в 20 из 25 наблюдений) в аспирате из полости матки, либо смыве, при цитологическом анализе определяются клетки карциномы, при ИЦХ исследовании 84% (в 21 из 25 наблюдений), при совместном использовании цитологического и ИЦХ методов — 88% (в 22 из 25 наблюдений).

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ТЕЗИСЫ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ

— При наличии в яичнике метастаза карциномы из других органов, аналогичных клеток рака в материале из полости матки не выявляется.

— При цитологическом исследовании клеточного материала из полости матки у 12 пациенток с доброкачественной патологией яичников клеток АК в полученном материале выявлено не было! Однако ИЦХ исследование в 2 наблюдениях выявило очаговую слабую и умеренную экспрессию белка р53 в отдельных клетках эпителия эндометрия при серозной и муцинозной цистаденомах.

— Большую диагностическую ценность имеет маркер р53, поскольку, он экспрессировался клетками карциномы яичников, обнаруженных в полости матки, в 100% наблюдений.

— Маркер серозных карцином яичников и мезотелиомы WT1 экспрессировался 67% наблюдений в клетках рака яичников, обнаруженных в полости матки. Данный маркер может быть диагностически значимым для выявления и диагностики раков яичников в смывах и аспиратах из полости матки.

Современный подход в цитоморфологической диагностике диссеминированного рака желудка

Е. С. Федосеева', М. В. Савостикова', М. Н. Нариманов' Место работы: 'ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России

e-mail: savostikovamv@yandex.ru

Распространенность рака желудка диктует необходимость применения современных технологий в морфологическом исследовании.

Цель. оценить возможности современных методов цитологии в диагностике диссеминированного рака желудка. Материалы и методы. Проведено 33 цитологических и 99 ИЦХ исследований на материале отпечатков с гастро-биоптатов, полученных при эндоскопическом исследовании у пациентов с клиническим диагнозом «рак желудка». Также проведено 55 цитологических и 165 ИЦХ исследований на материале выпотных жидкостей и смывов с брюшной полости у пациентов с распространенным опухолевым процессом. ИЦХ анализ проводился на препаратах, приготовленных с помощью Cytospin-технологии, исследовались реакции с МКАТ к р53, Ki67, HER2/neu, Ber-EP4. ИЦХ исследования проводились на иммуногистостейнере Вентана (BenchMark ULTRA). Также на материале выпотных жидкостей и смывов проводилось флюоресцентное ИЦХ исследование (n=55) с МКАТ к Ber-EP, конъюгированном с FITC (прямой метод), и на биочипах с флюорохромом Cy3. Все ИЦХ исследования были сопоставлены с ИГХ реакциями на операционном материале после гастрэктомии и на клеточных блоках, приготовленных из материала выпотных жидкостей и смывов. Результаты. ИЦХ анализ показал выраженную и умеренную экспрессию белка р53 в 60% наблюдений, выраженную и умеренную экспрессию Ki67 в 75% наблюдений, выраженная экспрессия Her2/neu (3+) отмечалась в 32% исследований. При исследовании выпотных жидкостей и смывов (n=55) уверенное цитологическое заключение о наличии/отсутствии клеток опухоли было дано в 94,5% наблюдений, применение ФИЦХ позволило избежать гипердиагностики в 1 случае и гиподиагностики — в 2.

Выводы. Чувствительность цитологического метода в первичной диагностике рака желудка составила 93,8%. При неуверенном цитологическом заключении и даже при уверенности об отсутствии клеток опухоли в выпотных

жидкостях рекомендуется проводить ИЦХ исследование с BerEp4, либо ФИЦХ прямым методом при необходимости срочного исследования. Технология Cell-block может с успехом применяться для проспективного и ретроспективного ИГХ анализа — в сравнении с традиционной ИЦХ реакции ярче, четче, нет фонового окрашивания, чаще сохраняется структурное расположение клеток опухоли.

Новые методы в цитологической диагностике уринарной патологии

М. В. Савостикова', А.Г. Кудайбергенова', Е. С. Федосеева', А. В. Хачатурян'

Место работы: 'ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава

России, г. Москва

e-mail: savostikovamv@yandex.ru

Наименее благоприятными с точки зрения прогноза являются HGUC, которые относятся к генетически нестабильным опухолям, развиваются по диспластическому пути, характеризуются полисомией 3, 7, 17 хромосом и делецией локуса 9р21. Этот патогенетический путь ассоциирован с большим количеством мутаций — наиболее значимыми являются мутации, связанные с инактивацией гена ТР53, которая наблюдается приблизительно в 60% случаев. Поскольку полисомия 17 хромосомы вызывает амплификацию гена, кодирующего Her2/neu, появляется возможность оценить его гиперэкспрессию иммуноцитохимически.

Материалы и методы. Исследовано: смывов с мочевого пузыря — 25, материала свободно выпущенной мочи — 15 у 30 пациентов с уротелиальной карциномой (УК) в анамнезе. Для приготовления препаратов использовали метод двойного центрифугирования. Все цитологические заключения формировались в соответствии с Парижской системой интерпретации уринарной цитологии 2016 года. Проведено 80 ИЦХ исследований (40 — р53 и 40 — HER2). Результаты исследований. В 19 наблюдениях было дано заключение NHGUC, при ИЦХ исследовании в 1 из 19 выявлена выраженная экспрессия Her2 в единичной мелкой группе клеток, в 4 из 19 отмечена слабая экспрессия р53 в 1—10% клеток. Гистологически в дальнейшем была выявлена уро-телиальная папиллома в 2 наблюдениях, во всех остальных случаях опухолевой патологии не выявлено. В группу цитологических заключений AUC попало 2 наблюдения: ни в одном из них экспрессия HER2 не выявлена, в 1 отмечена слабая экспрессия р53 в 5% клеток (гистологически в одном случае была диагностирована LGUC, в другом — HGUC). В категории «атипические уротелиальные клетки, нельзя исключить уротелиальную карциному высокой степени злокачественности (AUC-H)» — 2 наблюдения: в обоих случаях отмечалась выраженная экспрессия HER2 и умеренная экспрессия р53 в 20% клеток (гистологически в их случаях — HGUC). Категория LGUC была дана в 9 случаях: в 5 из 9 выявлена умеренная и выраженная экспрессия HER2 и в 4 — умеренная р53 (от 5 до 20%) в клетках рака. Заключение о HGUC было дано в 8 наблюдениях: во всех случаях определена выраженная и умеренная экспрессия HER2 и р53 (в 10—90% клеток рака).

Выводы. Цитологический метод, несмотря на сравнительно невысокую чувствительность, остается единственным мало-инвазивным морфологическим методом. Перспективным является иммуноцитохимический метод: выраженная экспрессия р53 и Her2/neu в атипичных уротелиальных клетках значительно повышает вероятность обнаружения HGUC.

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org