Полиморфизм генов цитокиновой сети у детей с воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области

ЛИТЕРАТУРА

1. Адамян, Л.В. Особенности хирургического лечения при патологии культи шейки матки / Л.В. Адамян, В.И.Кулаков, С.Ш.Джабраилова // Акушерство и гинекология. - 1991. - №5. -С.60-62.

2. Белоножкина, Н.Н. Сравнительная оценка исходов операций: супрацервикальной ампутации матки с иссечением слизисто-мышечного лоскута шейки матки и тотальной гистерэктомии при сочетанной доброкачественной патологии тела и шейки матки: автореф. дис.... канд. мед наук. Ростов-на-Дону, 2003. - 20с.

3. Васильченко, М.В. Рак культи шейки матки - особенности клинического течения / М.В.Васильченко, А.В.Важенин, Т.А.Васильева, Е.Ю.Кандакова // Материалы межрегиональной конференции «Актуальные вопросы медицинской радиологии» Челябинск, 1997. С. 19-21.

4. Высоцкий, М.М. Экстирпация культи шейки матки: безопасная техника операции лапароскопическим доступом // Эндоскопическая хирургия / Российская ассоциация эндоскопической хирургии Изд-во Медиа-Сфера, 2005 №1 С.30

5. Матевосян, С.М. Состояние культи шейки матки и качество жизни женщин после различных видов гистерэктомий: авторефер. дис.... канд. мед. наук. - М., - 2005. - 21 с.

6. Манухин, И.Б. Методика экстирпации культи шейки матки лапароскопическим доступом // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии: научно-практический журнал Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины. - М.: Династия 2005. - №3. - С.74-77.

УДК 61:575

© С.В. Викторов, С.В. Чуйкин, Д.О. Каримов, К.В. Данилко, Э.К. Хуснутдинова, 2010

С.В. Викторов1, С.В. Чуйкин1, Д.О. Каримов1, К.В. Данилко1, Э.К. Хуснутдинова2 ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВОЙ СЕТИ У ДЕТЕЙ С ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ

!ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», г. Уфа 2Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН

Изучена ассоциация полиморфных вариантов генов интерлейкина 8 и 10. Проведенные исследования выявили, что генотип ТТ (OR=1,876; 95% CI 1,064-3,306) и аллель Т (OR=1,556; 95% CI 1,025-2,364) полиморфного локуса -251Т>А гена IL8 являются маркерами повышенного риска развития воспалительных заболеваний ЧЛО у детей.

Ключевые слова: воспалительные заболевания челюстно-лицвой области, полиморфные варианты, интерлейкин 8, интерлейкин 10.

S.V. Viktorov, S.V. Chyikin, D.O. Karimov, K.V. Danilko, E.K. Xusnutdinova POLIMORPHISM OF CYTOKINE GENES IN CHILDREN WITH INFLAMATORY DISEASES OF MAXILLOFACIAL AREA

We studied the association of polymorphic variants of interleukins 8 and 10 genes. We observed that genotype TT (OR=1,876; 95% CI 1,064-3,306) and allele T (OR=1,556; 95% CI 1,025-2,364) of polymorph loci -25^>A IL 8 gene are the markers of increased risk of inflammatory disease of maxillofacial area

Key words: inflammatory disease of maxillofacial area, polymorphic variants, interleukin 8, interleukin 10.

Острые воспалительные заболевания челюстно-лицевой области (ЧЛО) являются одной из актуальных проблем современной хирургической стоматологии. В последние годы отмечается увеличение числа данной категории больных, нередко наблюдается тяжёлое, прогрессирующее течение заболеваний, осложняющееся менингоэнцифалитом и другими внутричерепными воспалительными процессами, а также острой дыхательной недостаточностью, медиастенитом, сепсисом и септическим шоком [2].

Особую настороженность вызывает проблема воспалительных заболеваний ЧЛО у детей, для которых характерна высокая распространенность, более тяжелое течение и частота атипичных форм заболевания. Это может быть обусловлено физиологическими особенностями детского организма и прежде всего незрелостью иммунной и нейро-гуморальной систем.

В последние годы большое внимание отечественных и зарубежных ученых уделяется выявлению ассоциаций полиморфных

вариантов генов про- и противовоспалительных цитокинов, определяющих баланс иммунореактивности при развитии патологического процесса [7]. Среди медиаторов воспаления особая роль принадлежит цитокинам, которые представляют собой группу полипептидных молекул с массой от 5 до 50 кДа. В зависимости от воздействия на воспалительный процесс цитокины подразделяются на две группы: провоспалительные и противовоспалительные. Продуцентами провоспалительных цитокинов являются в основном моноциты, макрофаги, Т-клетки и др [4]. К ним относится противовоспалительный цитокин - интерлейкин 8 (1Ь8), который является селективным хемоаттрактантом нейтрофилов [13]. Ген 1Ь8 картирован на хромосоме 4 в локусе 4д12-13, где обнаружен ряд однонуклеотидных замен, в том числе транзиция -251А>Т промо-торной области гена 1Ь8 [10]. Данные, полученные исследователями из Великобритании, показали, что аллель -251А ассоциируется с повышением продукции 1Ь8 [10]. Интерлейкин 10 (1Ь10) относится к группе противовоспалительных цитокинов. Он ингибирует продукцию провоспалительных цитокинов моноцитами и макрофагами, а также повышает пролиферацию В-лимфоцитов и секрецию иммуноглобулинов [3]. Ген 1Ь10 картирован на 1 хромосоме в локусе Ц31-32. В данном участке обнаружены различные полиморфизмы (однонуклеотидные, микросателлитные) [12]. Исследованиями ряда авторов было показано, что полиморфные варианты в промо-торной области гена 1Ь10 приводят к нарушению регуляции транскрипции гена [8].

Учитывая, что в прогрессировании воспалительных заболеваний ЧЛО немаловажную роль играют изменения иммунологического статуса и генетический фон, выявление генетических маркеров при различных клинических формах воспалительных заболеваний ЧЛО является актуальной научнопрактической задачей, решение которой позволит прогнозировать индивидуальные особенности течения и исходы данной патологии.

Целью настоящего исследования является сравнительное изучение частот полиморфных вариантов генов 1Ь8 и 1Ь10 у детей с воспалительными заболеваниями ЧЛО и здоровых индивидов, проживающих в Республике Башкортостан.

Материал и методы

В период 2008-2009гг. было обследовано 108 пациентов с воспалительными заболеваниями ЧЛО, находившихся на лечении в отделении челюстно-лицевой хирургии РДКБ

г.Уфы. Средний возраст обследованных пациентов, отобранных случайным образом, составил 11,6±1,42 года. Половое соотношение мальчиков к девочкам - 57,41% (62) к 42,59% (46) человек. Все обследованные являются жителями Республики Башкортостан различной этнической принадлежности: русские - 49 человек (45,37%), татары - 42 человека (38,79 %), башкиры - 17 человек (15,84%). Диагноз выставлялся на основании данных клинического обследования, результатов общего и биохимического анализов крови, при необходимости для диагностики использовались дополнительные методы обследования (развернутая иммунограмма, ультразвуковое и рентгенологическое исследования).

В качестве контроля были использованы образцы ДНК 106 практически здоровых индивидов, жителей Республики Башкортостан, отобранных с учетом возраста (10,17±1,58 года), половой принадлежности (56 мальчиков - 52,83%, 50 девочек - 47,17%) и этнического состава: русские - 51 человек (48,11%), татары - 42 человека (39,62%), башкиры - 13 человек (12,26%).

Материалом для молекулярно-

генетического исследования послужили 224 образца ДНК, которые экстрагировали фенольно-хлороформным методом из лимфоцитов периферической венозной крови [11]. Анализ генетического полиморфизма осуществляли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) или ПЦР с последующей рестрикцией ампликонов. Перечень исследованных локусов, последовательности локусспецифи-ческих олигонуклеотидных праймеров, а также номенклатура аллелей взяты из литературных источников [5,6,9,10].

Для статистической обработки полученных данных использовались пакеты прикладных программ “Statistica for Windows 5.0” (StatSoft), программного обеспечения MS Exel 98 (Microsoft) и компьютерной программы RxS (Rows x Colums). При попарном сравнении частот генотипов и аллелей в исследуемых группах применялся критерий %2 с поправкой Йетса. Различия между сравниваемыми группами считались статистически значимыми при p<0,05. Относительный риск заболевания по конкретному аллелю или генотипу вычислялся как соотношение шансов (OR - odds ratio) [1].

Результаты

Все обследуемые пациенты были распределены на 4 возрастные группы: 1-я - от 0 до 3 лет (13,82%), 2-я - от 4 до 7 лет (14,78%), 3-я - от 8 до 12 лет (46,22%), 4-я - от 13 до 15

лет (25,18%). Анализ структуры заболеваний показал, что среди всех воспалительных заболеваний ЧЛО у детей с наибольшей частотой встречались лимфадениты - 41,67%, реже диагностировались фурункулы -27,72 %, периоститы челюстей составили 11,14%, на долю абсцессов и флегмон пришлось по 5,42%, остеомиелиты встречались с частотой 6,40%, доля карбункулов составила 2,23%. Среди всех пациентов, обратившихся в стационар отделения челюсто-лицевой хирургии, городские жители составили 76.8%, жители районов Республики Башкортостан 23,2%.

Распределение частот генотипов изученных генов 1Ь8 и 1Ь10 в группах больных и здоровых индивидов соответствовало ожидаемому равновесию Харди-Вейнберга.

При сравнении общей выборки больных воспалительными заболеваниями ЧЛО и группы контроля выявлены достоверные различия по частотам генотипов полиморфного локуса - 251Т>А гена 1Ь8. Так, на долю гомозиготного генотипа ТТ приходилось 49,51% в группе больных пациентов и 34,34% в группе контроля (%2=4,16; р=0,041) (см. таблицу). Также достоверные различия установлены по частоте аллеля Т между больными воспалительными заболеваниями ЧЛО (71,84%), и контролем (62,12%). Полученные результаты позволяют сделать заключение об ассоциации генотипа ТТ (ОЯ=1,88; 95% С1 1,06-3,31) и аллеля Т (ОЯ=1,56; 95% С1 1,03-2,36) с повышенной вероятностью формирования патологического процесса в исследуемой когорте больных.

Таблица

Распределение частот генотипов и аллелей полиморфного локуса - 251Т>А гена 1Ь8 у детей с воспалительными заболеваниями ЧЛО

Генотипы Группа больных Контрольная группа X Р ОЯ С1 -95%

абс. % абс. %

ТТ 51 49,51 34 34,34 4,17 0,041 1,88 1,06-3,31

ТА 46 44,66 55 55,56 1,98 0,160 0,65 0,37-1,12

АА 6 5,83 10 10,10 0,75 0,388 0,55 0,19-1,58

Т 148 71,84 123 62,12 3,89 0,049 1,56 1,03-2,36

А 58 28,16 75 37,88 3,89 0,049 0,64 0,42-0,98

Всего 103 1 99 1

Статистически достоверных различий при анализе распределения частот генотипов и аллелей полиморфного локуса - 627С>А гена 1Ь10 выявлено не было.

Обсуждение

Несмотря на определенные успехи, достигнутые в лечении острых воспалительных заболеваний ЧЛО и их осложнений, заболеваемость продолжает оставаться достаточно высокой, что свидетельствует о необходимости ранней диагностики, совершенствования методов прогнозирования тяжести течения этих заболеваний и эффективного лечения [2].

Согласно современным представлениям воспалительные реакции ЧЛО во многом опосредованы цитокинами. Они могут быть причиной повышенной или пониженной резистентности организма к патогенной флоре.

Продукт гена 1Ь-8 является провоспали-тельным цитокином, который непосредственно стимулирует воспалительную реакцию организма. Повышенное содержание этого ци-токина наблюдается при многих гнойно-восполительных заболеваниях, в частности в очагах деструкции при флегмонах и абсцессах ЧЛО. В результате проведенного исследования была выявлена ассоциация между воспалительными заболеваниями ЧЛО у детей и

генотипом ТТ полиморфного локуса -251 Т>А гена 1Ь8(ОЯ = 1,88; 95% С1 1,06-3,31).

При выявлении взаимосвязи между полиморфными вариантами -627С>А гена 1Ь10 в некоторых исследованиях было установлено, что аллель А полиморфного локуса -627С>А промоторной области гена 1Ь10 ассоциирует с резким снижением уровня экспрессии гена. Обнаружена ассоциация определенных аллелей полиморфных локусов промо-торного участка гена 1Ь10 с заболеваниями, в патогенезе которых ведущее место занимает хронический воспалительный процесс. Снижение секреции 1Ы0 макрофагами может привести к высвобождению провоспалитель-ных цитокинов и матриксных металлопротеаз. Ассоциации полиморфного варианта -627С>А гена 1Ь10 с воспалительными заболеваниями ЧЛО у детей в наших исследованиях не установлено [12].

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют об ассоциации полиморфного варианта - 251 Т>А гена 1Ь8 в развитии воспалительного процесса ЧЛО у детей. В частности показано, что генотип ТТ полиморфного локуса - 251Т>А гена 1Ь8 является маркером повышенного риска развития воспалительных заболеваний ЧЛО у детей (ОЯ=1,88; 95% С1 1,06-3,31).

Сведения об авторах статьи Викторов Сергей Витальевич - врач-стоматолог-интерн БГМУ, e-mail: karimich2007@mail.ru.

Чуйкин Сергей Васильевич -д.м.н., проф., академик РАЕН, декан стоматологического факультета БГМУ, зав. каф. стоматологии детского возраста, г.Уфа, ул. Ленина 3

Каримов Денис Олегович - студен 6 курса БГМУ, e-mail: denis_x@mail.ru.

Данилко Ксения Владиморовна - к.м.н., асс. каф. биологии БГМУ, г. Уфа, ул. Ленина 3.

Хуснутдинова Эльза Камилевна - д.б.н., проф., зав. отделом геномики института биохимии и генетики УНЦ РАН

ЛИТЕРАТУРА

1. Животовский, Л.А. Популяционная биометрия. - М.:Наука, 1991. - 272c.

2. Персии, Л.С. Ортодонтия. Современные методы диагностики зубочелюстно-лицевых аномалий. - М.: Медицина; 2007. - С.9-25.

3. Ройт, А. Иммунология. / А.Ройт, Дж.Брюстофф, Д.Мейл - М.: Мир, 2000. - 592с.

4. Симбирцев, А.С. Цитокиныновая система регуляции защитных реакций организма // Цито-кины и воспаление. - 2002. Т. 1. N1. - С.9-16.

5. Chen W.C., Wu H.C., Chen H.Y., Wu M.C., Hsu C.D., Tsai F.J. Interleukin-1beta gene and receptor antagonist gene polymorphisms in patients with calcium oxalate stones // Urol. Res. - 2001. - Vol. 29, №5. - P. 321-324.

6. Day C., Grove J., Daly A. et al. Tumour necrosis factor-alpha gene promoter polymorphism and decreased insulin resistance // Diabetologia. -1998. -Vol. 41. - P. 430-434.

7. Day C.P. et al, 1998; Fishman D. et al, 1998; Hulkonen J., Vilpo L. et al., 2000; Warzocha K. et al, 1998

8. Eskdale J., Gallagher G., Verweij C.L., Keijsers V., Westendorp R. G. J., Huizinga T. W. J. Interleukin 10 secretion in relation to human IL-10 locus haplotypes // Proc. Nat. Acad. Sci. - 1998. - Vol. 95. - P. 9465-9470.

9. Grove J., Daly A. K., Bassendine M. F., Gilvarry E., Day C. P. Interleukin 10 promoter region polymorphisms and susceptibility to advanced alcoholic liver disease // Gut. - 2000. - Vol. 46. - P. 540545.

10.Hull J., Ackerman H., Isles K., Usen S., Pinder M., Thomson A., Kwiatkowski D. Unusual haplo-typic structure of IL8, a susceptibility locus for a common respiratory virus // Am. J. Hum. Genet. -2001. - Vol. 69. - P. 413-419.

11.Mathew C.C. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA // Methods in Molecular Biology. Ed. Walker J.M. - N.Y., L.: Human Press. - 1984. - Vol. 2. - P. 31-34.

12.Turner D.M., Williams D.M., Sankaran D., Lazarus M., Sinnott P.J., Hutchinson IV. An investigation of polymorphism in the interleukin-10 gene promoter // Eur. J. Immunogenet. - 1997. - Vol.24. -P. 1-8.

13.Yamamoto C., Yoneda T., Yoshikawa M., Fu A., Tokuyama T., Tsukaguchi K., Narita N. Airway inflammation in COPD assessed by sputum levels of interleukin-8 // Chest. - 1997. - Vol. 112. - P. 505-510.

УДК 616.24-002.5-085:615.33.37

© Р.Х. Гисматов, С.Е. Григорьев, З.Р. Хисматуллина, Ю.А. Медведев, З.Р. Гисматова, 2010

Р.Х. Гисматов1, С.Е. Григорьев1, З.Р. Хисматуллина2, Ю.А. Медведев2, З.Р. Гисматова2 КЛИНИЧЕСКАЯ И ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ СИФИЛИСОМ

1 Федеральная Служба Исполнения Наказаний МЮ РФ,

2ГОУ ВПО Башкирский государственный медицинский университет Росздрава, г. Уфа

При комплексной терапии больных сифилисом в условиях пенитенциарной системы использованы пробиотик Бактес-порин и иммуномодулятор Иммурег. Применение в лечении препаратов обеспечивало быструю нормализацию у больных измененных показателей иммунного статуса, ускоренную негативацию диагностических серореакций на сифилис и, соответственно, уменьшение сроков излечения.

Ключевые слова: больные сифилисом, диагностические серологические реакции, Иммурег, Бактиспорин, иммунный статус.

R.H. Gismatov, S.E. Grigoijev, Z.R. Hismatullina Ju.A. Medvedev, Z.R. Gismatova CLINICAL AND IMMUNOLOGIC EFFECTIVNESS OF IN COMPLEX THERAPY OF PATIENTS WITH SYPHILIS