АМНИОТИЧЕСКИЕ АДГЕЗИВНЫЕ КЛЕТКИ

-
1. Изолированная амниотическая адгезивная клетка, где указанная клетка адгезивна к пластику для тканевых культур, и где указанная клетка является ОСТ-4 (октамерсвязывающий белок 4) по данным ОТ-ПЦР.
-
2. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка является HLA-G по данным ОТ-ПЦР.
+
3. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка также является CD49f по данным проточной цитометрии.
-
-
+
4. Изолированная клетка по п. 3, где указанная клетка является ОСТ-4, HLA-G и CD49f.
+
+
-
5. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка является CD90, CD105 или CD117 по данным проточной цитометрии.
+
+
-
6. Изолированная клетка по п. 5, где указанная клетка является CD90, CD105 или CD117.
-
-
+
+
+
-
7. Изолированная клетка по п. 6, где указанная клетка является ОСТ-4, HLA-G по данным ОТ-ПЦР, и CD49f, CD90, CD105 и CD117 по данным проточной цитометрии.
+
+
8. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка является VEGFR1/Flt-1 (рецептор 1 сосудистого эндотелиального фактора роста) и VEGFR2/KDR (рецептор 2 сосудистого эндотелиального фактора роста) по данным иммунолокализации.
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
9. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка является одним или несколькими из: CD9, CD10, CD44, CD54, CD98, Tie-2 (рецептор ангиопоэтина), TEM-7 (эндотелиальный маркер 7 опухоли), CD31, CD34, CD45, CD133, CD143 (ангиотензин-I-превращающий фермент, АСЕ), CD146 (адгезивная
-
молекула клетки меланомы) или CXCR4 (рецептор 4 хемокина (мотив C-X-C)) по данным иммунолокализации.
+
+
+
+
+
+
+
-
-
-
-
-
-
-
10. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка является CD9, CD10, CD44, CD54, CD98, Tie-2 (рецептор ангиопоэтина), TEM-7 (эндотелиальный маркер 7 опухоли), CD31, CD34, CD45, CD133, CD143, CD146 и CXCR4 по данным иммунолокализации.
-
11. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка представляет собой VE-кадгерин по данным иммунолокализации.
+
+
12. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка также является положительной по CD105 и CD200 по данным иммунолокализации.
13. Изолированная клетка по п. 1, где указанная клетка не экспрессирует CD34 по данным иммунолокализации, после воздействия 50 нг/мл VEGF в течение 7 дней.
14. Изолированная популяция клеток, содержащая клетку по п. 1.
15. Изолированная популяция клеток по п. 14, где по меньшей мере 50% клеток в указанной популяции представляют собой клетки по п. 1.
16. Изолированная популяция клеток по п. 14, где, по меньшей мере, 90% клеток в указанной популяции представляют собой клетки по п. 1.
17. Изолированная популяция клеток, содержащая клетку по п. 7.
18. Изолированная популяция клеток по п. 17, где по меньшей мере 50% клеток в указанной популяции представляют собой клетки
по п. 7.
19. Изолированная популяция клеток по п. 11, где по меньшей мере 90% клеток в указанной популяции представляют собой клетки по п. 7.
20. Изолированная популяция клеток, содержащая клетку по п. 4, где указанная изолированная популяция клеток не является амнионом.
21. Изолированная популяция клеток по п. 14, где по меньшей мере 50% клеток в указанной популяции представляют собой клетки по п. 4.
22. Изолированная популяция клеток по п. 14, где по меньшей мере 90% клеток в указанной популяции представляют собой клетки по п. 4.
23. Композиция, содержащая изолированную амниотическую адгезивный клетку по п. 1 или п. 7.
24. Изолированная популяция клеток по п. 14, где указанный второй тип клетки является эмбриональной стволовой клеткой, клеткой крови, стволовой клеткой, выделенной из периферической крови, стволовой клеткой, выделенной из плацентарной крови, стволовой клеткой, выделенной из плацентарного перфузата, стволовой клеткой, выделенной из плацентарной ткани, стволовой клеткой, выделенной из крови пуповины, стволовой клеткой пуповины, мезенхимальной стволовой клеткой костного мозга, мезенхимальной стромальной клеткой костного мозга, гематопоэтической стволовой клеткой, соматической стволовой клеткой, хондроцитом, фибробластом, мышечной клеткой, эндотелиальной клеткой, ангиобластом, предшественником
эндотелиальной клетки, перицитом, кардиомиоцитом, миоцитом, кардиомиобластом, миобластом, эмбриональной стволовой клеткой или клеткой, управляемой таким образом, чтобы она стала подобной эмбриональной стволовой клетке.
25. Изолированная популяция клеток по п. 24, где указанный второй тип клетки содержит по меньшей мере 10% клеток в указанной популяции.
26. Изолированная популяция клеток по п. 24, где указанный второй тип клетки содержит по меньшей мере 25% клеток в указанной популяции.
27. Изолированная популяция клеток по п. 24, где указанный второй тип клетки является гематопоэтической стволовой клеткой или клеткой-предшественником.
+
28. Изолированная популяция по п. 28, где указанная гематопоэтическая стволовая клетка или клетка-предшественник является клеткой CD34.
-
+
-
+
+
-
29. Изолированная амниотическая адгезивная клетка, где указанная клетка адгезивна к пластику для тканевых культур, и где указанная клетка является ОСТ-4 по данным ОТ-ПЦР, и CD49f, HLA-G, CD90, CD105 и CD117 по данным иммунолокализации, и где указанная клетка:
(a) экспрессирует один или несколько из: CD9, CD10, CD44, CD54, CD98, CD200, Tie-2, TEM-7, VEGFRl/Flt-1 или VEGFR2/KDR (CD309) по данным иммунолокализации;
(b) не экспрессирует CD31, CD34, CD38, CD45, CD133, CD143, CD144, CD146, CD271, CXCR4, HLA-G или VE-кадгерин по данным иммунолокализации, или не экспрессирует SOX2 по данным ОТ-ПЦР;
(c) экспрессирует мРНК для ACTA2, ADAMTS1, AMOT, ANG, ANGPT1, ANGPT2, ANGPTL1, ANGPTL2, ANGPTL4, BAI1, CD44, CD200, CEACAM1, CHGA, COL15A1, COL18A1, COL4A1, COL4A2, COL4A3, CSF3, CTGF, CXCL12, CXCL2, DNMT3B, ECGF1, EDG1, EDIL3, ENPP2, EPHB2, FBLN5, F2, FGF1, FGF2, FIGF, FLT4, FN1, FST, FOXC2, GRN, HGF, HEY1, HSPG2, IFNB1, IL8, IL12A, ITGA4, ITGAV, ITGB3, MDK, MMP2, MYOZ2, NRP1, NRP2, PDGFB, PDGFRA, PDGFRB, PECAM1, PF4, PGK1, PROX1, PTN, SEMA3F, SERPINB5, SERPINC1, SERPINF1, TIMP2, TIMP3, TGFA, TGFB1, THBS1, THBS2, TIE1, TIE2/TEK, TNF, TNNI1, TNFSF15, VASH1, VEGF, VEGFB, VEGFC, VEGFR1/FLT1 или VEGFR2/KDR;
(d) экспрессирует один или несколько белков из: CD49d, коннексин-43, HLA-ABC, бета-2-микроглобулин, CD349, CD318, PDL1, CD106, галектин-1, ADAM 17, предшественник ангиотензиногена, филамин A, альфа-актинин 1, мегалин, рецептор I и II ацетилированного ЛПНП в макрофагах, предшественник рецептора активина типа IIB, белок Wnt-9, глиальный фибриллярный кислый белок, астроцит, миозин-связывающий белок C или тяжелую цепь миозина, немышечный тип A;
(e) секретирует VEGF, HGF, IL-8, MCP-3, FGF2, фоллистатин, G-CSF, EGF, ENA-78, GRO, IL-6, MCP-1, PDGF-BB, TIMP-2, uPAR или галектин-1 в культуральную среду, в которой растет клетка;
(f) экспрессирует микроРНК: miR-17-3р, miR-18a, miR-18b, miR-19b, miR-92 или miR-296 на более высоком уровне, чем эквивалентное количество мезенхимальных стволовых клеток костного мозга;
(g) экспрессирует микроРНК: miR-20a, miR-20b, miR-221, miR-222, miR-15b или miR-16 на более низком уровне, чем
эквивалентное количество мезенхимальных стволовых клеток костного мозга;
(h) экспрессирует миРНК: miR-17-3р, miR-18a, miR-18b, miR-19b, miR-92, miR-20a, miR-20b, miR-296, miR-221, miR-222, miR-15b или miR-16; или
2
2
(i) экспрессирует увеличенные уровни CD202b, IL-8 или VEGF при культивировании при менее чем примерно 5% O по сравнению с экспрессией CD202b, IL-8 или VEGF при 21% O.
-
+
-
+
+
-
30. Изолированная амниотическая адгезивная клетка по п. 29, где указанная клетка является ОСТ-4 по данным ОТ-ПЦР, и CD49f, HLA-G, CD90, CD105 и CD117 по данным иммунолокализации, и где указанная клетка:
(a) экспрессирует CD9, CD10, CD44, CD54, CD98, CD200, Tie-2, TEM-7, VEGFR1/Flt-1 и/или VEGFR2/KDR (CD309) по данным иммунолокализации;
(b) не экспрессирует CD31, CD34, CD38, CD45, CD133, CD143, CD144, CD146, CD271, CXCR4, HLA-G и/или VE-кадгерин по данным иммунолокализации, и/или не экспрессирует SOX2 по данным ОТ-ПЦР;
(c) экспрессирует мРНК для ACTA2, ADAMTS1, AMOT, ANG, ANGPT1, ANGPT2, ANGPTL1, ANGPTL2, ANGPTL4, BAI1, CD44, CD200, CEACAM1, CHGA, COL15A1, COL18A1, COL4A1, COL4A2, COL4A3, CSF3, CTGF, CXCL12, CXCL2, DNMT3B, ECGF1, EDG1, EDIL3, ENPP2, EPHB2, FBLN5, F2, FGF1, FGF2, FIGF, FLT4, FN1, FST, FOXC2, GRN, HGF, HEY1, HSPG2, IFNB1, IL8, IL12A, ITGA4, ITGAV, ITGB3, MDK, MMP2, MYOZ2, NRP1, NRP2, PDGFB, PDGFRA, PDGFRB, PECAM1, PF4, PGK1, PROX1, PTN, SEMA3F, SERPINB5, SERPINC1, SERPINF1, TIMP2, TIMP3, TGFA, TGFB1, THBS1, THBS2, TIE1, TIE2/TEK, TNF, TNNI1, TNFSF15,
VASH1, VEGF, VEGFB, VEGFC, VEGFR1/FLT1 и/или VEGFR2/KDR;
(d) экспрессирует один или несколько из: CD49d, коннексин-43, HLA-ABC, бета-2-микроглобулина, CD349, CD318, PDL1, CD106, галектин-1, ADAM 17, предшественник ангиотензиногена, филамин A, альфа-актинин 1, мегалин, рецептор I и II ацетилированных ЛПНП в макрофагах, предшественник рецептора активина типа IIB, белок Wnt-9, глиальный фибриллярный кислый белок, астроцит, миозин-связывающий белок C и/или тяжелую цепь миозина, немышечный тип A;
(e) секретирует один или несколько из: VEGF, HGF, IL-8, MCP 3, FGF2, фоллистатин, G-CSF, EGF, ENA-78, GRO, IL-6, MCP-1, PDGF-BB, TIMP-2, uPAR и галектин-1 в культуральную среду, в которой растет клетка;
(f) экспрессирует микроРНК: miR-17-3р, miR-18a, miR-18b, miR-19b, miR-92 и/или miR-296 на более высоком уровне, чем эквивалентное количество мезенхимальных стволовых клеток костного мозга;
(g) экспрессирует микроРНК: miR-20a, miR-20b, miR-221, miR-222, miR-15b и/или miR-16 на более низком уровне, чем эквивалентное количество мезенхимальных стволовых клеток костного мозга; и
(h) экспрессирует миРНК: miR-17-3р, miR-18a, miR-18b, miR-19b, miR-92, miR-20a, miR-20b, miR-296, miR-221, miR-222, miR-15b и/или miR-16; и/или
2
2
(i) экспрессирует увеличенные уровни CD202b, IL-8 и/или VEGF при культивировании в менее чем примерно 5% O по сравнению с экспрессией CD202b, IL-8 и/или VEGF при 21% О.
31. Изолированная популяция клеток по п. 29.
32. Изолированная популяция клеток по п. 30.
33. Постоянный или разлагаемый бесклеточный или синтетический матрикс или скаффолд, содержащий клетку по любому из пп. 1, 2, 4, 7 или 9.
34. Матрикс или скаффолд по п. 33, где указанный матрикс или скаффолд представляет собой амниотическую мембрану; дегидратированный внеклеточный матрикс; плацентарный коллаген или плацентарную внеклеточную мембрану.
35. Способ лечения индивидуума, имеющего заболевание или нарушение сердечно-сосудистой системы, включающий введение популяции клеток по п. 1 или 7 указанному индивидууму в количестве и в течение времени, достаточных для детектируемого улучшения одного или нескольких симптомов указанного заболевания или нарушения.
36. Способ лечения индивидуума, имеющего заболевание или нарушение сердечно-сосудистой системы, включающий введение популяции клеток по п. 1 или 7 указанному индивидууму в количестве и в течение времени, достаточных для детектируемого улучшения одного или нескольких показателей сердечной функции, где указанные показатели сердечной функции представляют собой сердечный выброс (CO), сердечный индекс (CI), давление заклинивания в легочной артерии (PAWP), сердечный индекс (CI), % функцию укорочения (%FS), функцию выброса (EF), фракцию выброса левого желудочка (LVEF); конечно-диастолический диаметр левого желудочка (LVEDD), конечно-систолический диаметр левого желудочка (LVESD), сократительную способность (dP/dt),
уменьшение функционирования предсердий или желудочков, увеличение эффективности накачки, уменьшение скорости падения эффективности накачки, уменьшение потери гемодинамического функционирования или уменьшение осложнений, ассоциированных с кардиомиопатией, по сравнению с тем, что было у данного индивидуума до введения амниотических адгезивных клеток.
37. Способ лечения индивидуума, имеющего нарушение кровотока в ЦНС или в районе ЦНС, включающий введение терапевтически эффективного количества амниотических адгезивных клеток по п. 1 или 7.
38. Способ лечения индивидуума, имеющего нарушение кровотока в конечности или в районе конечности, включающий введение терапевтически эффективного количества амниотических адгезивных клеток по п. 1 или 7.