ТИЕНОПИРАЗОЛЫ
THIENOPYRAZOLES

Настоящее изобретение относится к тиенопиразолам общей формулы I, их получению, фармакологическим препаратам, в состав которых входят такие соединения, а также их применению в лечении болезненных состояний, которые могут корректироваться ингибированием протеинкиназ, в частности, интерлейкин-2-индуцируемой тирозинкиназы (ИТК).
Протеинкиназы - это семейство энзимов, участвующих в сигнальных процессах, которые управляют активацией, ростом и дифференциацией клеток в ответ на сигналы, передаваемые внеклеточными медиаторами, а также на изменения в окружающей среде. В целом такие киназы могут быть отнесены к нескольким группам; те, которые избирательно катализируют фосфорилирование гидроксигрупп сериновых и/или треониновых остатков, и те, которые избирательно катализируют фосфорилирование гидроксигрупп тирозиновых остатков [S.K.Hanks and T.Hunter, FASEB. J., 1995, 9, стр. 576-596]. Такие реакции фосфорилирования могут вызвать серьезные изменения функции протеинов; поэтому протеинкиназы играют важную роль в регулировании самых разнообразных клеточных процессов, включая, в особенности, метаболизм, размножение, дифференциацию и выживаемость клетки.
Необычно высокая активность протеинкиназ отмечалась в клинических картинах многих заболеваний, вызванных нарушениями клеточных функций. Прямо или косвенно это могло быть вызвано, например, нарушением соответствующего механизма контроля киназы, связанным, к примеру, с мутацией, сверхэкспрессией или нарушением активации фермента, либо избыточной или недостаточной выработкой цитокинов или факторов роста, также участвующих в трансдукции сигналов до или после действия киназы. Во всех этих случаях можно ожидать положительного эффекта селективного ингибирования действия киназы.
ИТК представляет собой специфичную к Т-клеткам тирозинкиназу семейства Тес, необходимую для нормального функционирования Th2. Астма - относится к заболеваниям, характеризующимся увеличенной выработкой цитокина Th2, в том числе IL-4. Поэтому ингибитор ИТК в случае астмы должен оказывать влияние на развитие болезни посредством ингибирования продукции цитокина Th2.
Мы обнаружили новую группу тиенопиразолов, обладающих полезными фармакологическими свойствами, в частности способностью ингибировать протеинкиназы, точнее ингибировать протеинкиназу ИТК.
Краткое описание изобретения
Так, в одном из аспектов изобретение относится к соединениям общей формулы I,
Формула I
где:
7
X обозначает N или C-R;
1
1
X обозначает N или C-R;
1
2
3
4
5
6
R, R, R, R, R и R обозначают, независимо друг от друга, водород, возможно замещенный ацил, возможно замещенный алкил, возможно замещенную алкоксигруппу, возможно замещенную ациламиногруппу, возможно замещенную алкенильную группу, возможно замещенную алкоксиалкильную группу,
1
2
1
2
(Y)(Y)NC(=O)-, (Y)(Y)N-, возможно замещенную алкоксикарбонильную группу, возможно замещенную алкилсульфинильную группу, возможно замещенную алкилсульфонильную группу, возможно замещенную алкилсульфонилкарбамоильную группу, возможно замещенную алкилтиогруппу, возможно замещенную алкинильную группу, возможно замещенную ароильную группу, возможно замещенный арил, возможно замещенную ароиламиногруппу, возможно замещенный арилалкил, возможно замещенную арилалкоксигруппу, возможно замещенный арилалкоксиалкил, возможно замещенную арилалкоксикарбонильную группу, возможно замещенный арилоксиалкил, возможно замещенную арилалкилтиогруппу, возможно замещенную арилоксигруппу, возможно замещенную арилоксикарбонильную группу, возможно замещенную арилсульфинильную группу, возможно замещенную арилсульфонильную группу, возможно замещенную арилсульфонилкарбамоильную группу, возможно замещенную арилтиогруппу, возможно замещенную циклоалкенильную группу, возможно замещенную циклоалкоксиалкильную группу, возможно замещенную циклоалкильную группу, возможно замещенную циклоалкилалкильную группу, возможно замещенную циклоалкоксигруппу, возможно замещенную гетероароильную группу, возможно замещенную гетероароиламиногруппу, возможно замещенную гетероарилалкильную группу, возможно замещенную гетероарилалкоксигруппу, возможно замещенную гетероарилалкилоксиалкильную группу, возможно замещенную гетероарилоксигруппу, возможно замещенную гетероарилоксиалкильную группу, возможно замещенную гетероциклоалкильную группу, возможно замещенную гетероарилсульфонилкарбамоильную группу, возможно замещенную гетероциклоалкилалкильную группу, возможно замещенную гетероциклоалкилоксигруппу, возможно замещенную гетероциклоалкилоксиалкильную группу, галогенидную группу, гидроксигруппу, трифторметил, нитрогруппу, возможно замещенную гидроксиалкильную группу, карбоксигруппу или цианогруппу;
5
6
R и R, вместе с двумя углеродами с двойной связью между ними, могут также образовывать возможно замещенное бензольное кольцо;
7
R обозначает водород, галогенидную группу или возможно замещенную алкильную группу; и
1
2
1
2
Y и Y обозначают, независимо друг от друга, водород, возможно замещенный алкил, возможно замещенный арил, возможно замещенный гетероарил, либо Y и Y, вместе с соседним атомом азота, могут формировать возможно замещенную гетероарильную группу, либо возможно замещенную гетероциклоалкильную группу, либо пролекарство, кислый биоизостер, фармацевтически приемлемую соль или сольват такого соединения, либо пролекарство, или кислый биоизостер такой соли или сольвата.
Предпочтительными соединениями настоящего изобретения являются соединения, соответствующие формуле I, где X обозначает N.
7
Также предпочтительными соединениями настоящего изобретения являются соединения, соответствующие формуле I, где X обозначает C-R, в частности C-H или C-галоген.
1
Также предпочтительны соединения формулы I, где X обозначает N.
1
1
Также предпочтительны соединения формулы I, в которых X обозначает C-R, в частности C-H.
2
3
1
2
Также являются предпочтительными соединения формулы I, в которых один из R и R является водородом, а второй - водород, возможно замещенный ацил, возможно замещенная алкоксигруппа, возможно замещенная алкоксикарбонильная группа, возможно замещенный алкил, галогенидная группа или (Y)(Y)NC(=O)-.
4
Также предпочтительны соединения формулы I, где R обозначает водород.
5
1
2
Также предпочтительны соединения формулы I, где R обозначает водород, возможно замещенную алкоксикарбонильную группу, возможно замещенный алкил, возможно замещенный арил, карбоксигруппу или (Y)(Y)NC(=O)-.
6
Также предпочтительны соединения формулы I, в которых R является водородом.
5
6
Также предпочтительны соединения формулы I, в которых R и R, вместе с двумя соседними атомами углерода с двойной связью между ними, формируют возможно замещенное бензольное кольцо.
Следует понимать, что данное изобретение охватывает все соответствующие комбинации перечисленных здесь конкретных и предпочтительных групп.
Особую группу соединений настоящего изобретения образуют вещества формулы (Ia)
Формула (Ia)
1
2
3
4
5
6
где X, R, R, R, R, R и R обозначают приведенные выше группы, либо пролекарство, кислый биоизостер, фармацевтически приемлемую соль или сольват такого соединения; либо пролекарство или кислый биоизостер такой соли или сольвата.
Предпочтительны соединения формулы (Ia), в которых Х обозначает:
(i) N;
(ii) C-Br;
(iii) C-H.
1
Также предпочтительны соединения формулы I(a), в которых R обозначает водород.
2
3
Также предпочтительны соединения формулы I(a), в которых один из R и R обозначает H, а второй обозначает:
(i) водород
(ii) возможно замещенный ацил [например,  и ];
(iii) возможно замещенную алкоксигруппу [например, , , , , , , , , ,  и ];
(iv) возможно замещенную алкоксикарбонильную группу [например, ]; или
(v) возможно замещенный алкил [например, ,, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,  и ];
(vi) галогенидную группу [например, бромогруппу]; или
1
2
(vii) (Y)(Y)NC(=O)- [например, , , , , ,  и ].
4
Предпочтительными являются соединения формулы I(a), в которых R обозначает водород.
5
Также предпочтительными являются соединения формулы I(a), в которых R обозначает:
(i) водород;
(ii) возможно замещенную алкоксикарбонильную группу [например, ];
(ii) возможно замещенный алкил [например, ,, , , , , , ,  и ];
(iii) возможно замещенный арил [например, ];
(iv) карбоксигруппу либо
1
2
(iv) (Y)(Y)NC(=O)- [например, , ,  и].
6
Также предпочтительными являются соединения формулы I(a), в которых R обозначает водород.
Другой особой группой соединений данного изобретения являются соединения формулы (Ib)
(Ib)
2
3
4
5
6
где R, R, R, R и R обозначают определенные выше группы.
Номенклатура:
1
2
3
Соединения формулы I и промежуточные соединения и исходные материалы, используемые в приготовлении, получают названия в соответствии с номенклатурой ИЮПАК, в соответствии с которыми характеристические группы имеют следующую нисходящую последовательность приоритетов при обозначении главной группы: кислоты, сложные эфиры, амиды и т.д. В альтернативном варианте соединения назывались программой AutoNom 4.0 (Beilstein Information Systems, Inc.). Например, соединение формулы I, в котором X обозначает C-H, X обозначает C-H, R обозначает водород, R обозначает 3-(4-гидроксипиперидин-1-ил)пропилокси
4
5
(), R обозначает водород, R обозначает диметиламинометил
6
() и R обозначает водород; то есть соединение имеет следующую структуру:
получает название 1-{3-[2-(5-диметиламиноэтил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1Н-индол-6-илокси]пропил}пиперидин-4-ол.
Конкретные осуществления настоящего изобретения включают следующие соединения формулы I:
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензимидазол, пример 1;
6-метокси-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензимидазол, пример 2;
3-(6-метокси-1H-бензимидазол-2-ил)-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразол, пример 3;
6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензимидазол, пример 4;
5-(3-пиперидин-1-ил-пропокси)-2-(1H-тиено[3,2c]пиразол-3-ил)-индол, пример 5;
1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол, пример 6;
6-(3-пиперидин-1-ил-пропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол, пример 7;
1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}пиперидин-3-ол, пример 8;
(1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}пиперидин-3-ил)метанол, пример 9;
6-[3-(4-этилпиперазин-1-ил)-пропокси]-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол, пример 10;
диметил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-амин, пример 11;
диэтил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-амин, пример 12;
диаллил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-амин, пример 13;
1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пирролидин-3-ол, пример 14;
2-(метил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-амино)-этанол, пример 15;
1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол, пример 16;
1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ол, пример 17;
(1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ил)-метанол, пример 18;
1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]-пропил}-пирролидин-3-ол, пример 19;
3-(5-(3-пиперидин-1-ил-пропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил)-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразол, пример 20;
(2-тиофен-2-ил-этил)-амид 2-{1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты, пример 21;
1-{3-[2-(5-диметиламиноэтил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1h-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол, пример 22;
трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты;
трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты;
трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-диметиламинометил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты;
трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-диметиламинометил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты;
[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]метанол, пример 23;
фенил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-метанол, пример 24;
фенил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-метанон, пример 25;
1-фенил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-этанол, пример 26;
(S)-1-фенил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-этанол, пример 27;
1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-он, пример 28;
1-циклогексил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол, пример 29;
1-циклогексил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол, энантиомер 1, пример 30;
1-пиридин-2-ил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол, пример 31;
2-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол, пример 32;
(R)-2-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол, пример 33A;
(S)-2-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол, пример 33B;
1-(2-пирролидин-1-илметилфенил)-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол, пример 34;
1-трет-бутиловый 5-метиловый эфир 3-(5-ацетил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-индол-2-ил)-тиено[3,2-c]пиразол-1,5-дикарбоновой кислоты, пример 35;
метиловый эфир 3-(5-ацетил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-карбоновой кислоты, пример 36;
3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-карбоновая кислота, пример 37;
[4-(4-фторфенил)-пиперазин-1-ил]-[3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил]-метанон, пример 38;
(3-этокси-пропил)-амид 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-карбоновой кислоты, пример 39;
метиловый эфир 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-карбоновой кислоты, пример 40;
(пиридин-2-илметил)-амид 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-карбоновой кислоты, пример 41;
5-бром-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол, пример 42;
метиловый эфир 2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты, пример 43;
дициклопропил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-метанол, пример 44;
(4-бензо[1,3]диоксол-5-илметилпиперазин-1-ил)-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]метанон, пример 45;
[4-(2-циклогексилэтил)-пиперазин-1-ил]-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]метанон, пример 46;
(2-гидрокси-2-фенилэтил)-амид 2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты, пример 47;
(2-циклогекс-1-енилэтил)-амид 2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты, пример 48;
(2-тиофен-2-илэтил)-амид 2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты, пример 49;
(4-пиридин-2-илпиперазин-1-ил)-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-метанон, пример 50;
(2-придин-3-илэтил)-амид 2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты, пример 51;
циклогексилметил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илметил]-амин, пример 52;
5-[4-(4-хлорбензил)-пиперазин-1-илметил]-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол, пример 53;
[2-(4-феноксифенил)-этил]-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илметил]-амин, пример 54;
3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил]-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразол, пример 55;
1-{3-[2-(5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ол, пример 56;
1-{3-[2-(5-Фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол, пример 57;
2-(5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол, пример 58;
1-(3-{2-[5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол-6-илокси}-пропил)-пиперидин-4-ол, пример 59;
5-метокси-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-пиррол[3,2-b]пиридин, пример 60;
3-бром-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол, пример 61;
{3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил}-метанол, пример 62;
1-{3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}пиперидин-4-ол, пример 63;
2-{5-[4-(4-фторфенил)пиперазин-1-илметил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил}-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол, пример 64;
метил-{3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}-пиридин-2-иламин, пример 65;
бензил-{3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}-амин, пример 66;
6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-2-[5-(4-трифторметилпиперидин-1-илметил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол, пример 67;
[2-(5-пиперидин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-метанол, пример 68;
1-{3-[2-(5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол, пример 69;
3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 70;
3-[2-(5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 71;
[2-(5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-дипиридин-2-илметанол, пример 72;
1-{3-[6-(1-этил-1-гидроксипропил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}-пиперидин-4-ол, пример 73;
3-[2-(5-диметиламинометил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 74;
3-(2-{5-[4-(пиридин-4-илокси)-пиперидин-1-илметил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил}-1H-индол-6-ил)-пентан-3-ол, пример 75;
3-[2-(5-пиперазин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 76;
3-[2-(5-пиперазин-1-ил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 77;
3-{2-[5-(3-циклопропил-[1,2,4]оксадиазол-5-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол-6-ил}-пентан-3-ол, пример 78;
3-[2-(5-пиридин-4-ил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 79;
бис-(1-метилпиперидин-4-ил)-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-метанол, пример 80;
3-[2-(5-дифторметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 81;
4-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пиперидин-4-ол, пример 82;
6-(4-фторпиперидин-4-ил)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол, пример 83;
2-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-бутан-2-ол, пример 84;
1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-этанон, пример 85;
3-[3-пиперидин-4-ил-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 86;
3-[3-пиридин-4-ил-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 87;
3-[3-(4-метил-пиперазин-1-ил)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 88;
3-[3-морфолин-4-илметил-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 89;
4-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-тетрагидропиран-4-ол, пример 90;
3-{2-[5-(1-гидрокси-1-метилэтил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол-6-ил}-пентан-3-ол, пример 91;
3-[2-(5-метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-пиридин-4-ил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 92;
4-[2-(5-метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-тетрагидропиран-4-ол, пример 93;
3-[2-(5-метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-пиперазин-1-ил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 94;
3-[2-(5-метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-морфолин-4-илметил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 95;
2-{3-[6-(1-этил-1-гидроксипропил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил}-тетрагидрофуран-3-карбонитрил, пример 96;
3-[2-(5-метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-метил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 97 и
3-[2-(5-метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-пиперидин-4-ил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол, пример 98;
и пролекарства, кислые биоизостеры, фармацевтически приемлемые соли или сольваты таких соединений или пролекарства и кислые биоизостеры таких солей или сольватов. Свойства данных конкретных соединений суммированы в Таблице 1 ниже.
Краткое описание чертежей
На чертеже приведена схема химического синтеза, описывающая процесс получения того или иного соединения настоящего изобретения.
Полное описание предпочтительных осуществлений настоящего изобретения
В настоящем описании подразумевается, что термин “соединения изобретения” и эквивалентные выражения охватывают соединения формулы I, как описано выше, выражение которых включает в себя пролекарства, фармацевтически приемлемые соли и сольваты, например гидраты, когда позволяет контекст. Аналогично, подразумевается, что ссылки на промежуточные соединения, вне зависимости от того, включены они в формулу изобретения или нет, включают их соли и сольваты в случаях, когда позволяет контекст. Для ясности конкретные подходящие по контексту примеры иногда иллюстрируются в тексте, однако приводятся чисто для иллюстрации и без намерения исключить другие подходящие по контексту примеры.
В соответствии с их использованием выше и во всем описании изобретения следующие термины, кроме специально обозначенных, будут подразумевать следующие значения.
“Пациент” включает как людей, так и других млекопитающих.
“Фармацевтически эффективное количество” предназначено для описания количества соединения, состава, медикамента или иного активного ингредиента, которое является действенным для получения желаемого терапевтического эффекта.
2
2
“Кислый биоизостер” обозначает группу, имеющую сходные химические и физические черты и проявляющую в общем сходные с карбоксигруппой биологические свойства (см. Lipinski, Annual Reports in Medicinal Chemistry, 1986, 21, стр. 283 "Bioisosterism In Drug Design"; Yun, Hwahak Sekye, 1993, 33, стр. 576-579 "Application Of Bioisosterism To New Drug Design"; Zhao, Huaxue Tongbao, 1995, стр. 34-38 "Bioisosteric Replacement And Development Of Lead Compounds In Drug Design"; Graham, Theochem, 1995, 343, стр. 105-109 "Theoretical Studies Applied To Drug Design: ab initio Electronic Distributions In Bioisosteres"). Примеры подходящих кислых биоизостеров включают: -C(=O)-NHOH, -C(=O)-CHOH, -C(=O)-CHSH, -C(=O)-NH-CN, сульфогруппу, фосфоногруппу, алкилсульфонилкарбамоильную группу, тетразолильную группу, арилсульфонилкарбамоильную группу, гетероарилсульфонилкарбамоильную группу, N-метоксикарбомоильную группу, 3-гидрокси-3-циклобутен-1,2-дион, 3,5-диоксо-1,2,4-оксадиазолидинил или гетероциклические фенолы, такие как 3-гидроксиизоксазолил и 3-гидрокси-1-метилпиразолил.
“Ацил” обозначает H-CO- или алкил-CO-группу, алкильная группа которых описана здесь. Типичные ацильные группы включают  и . “Возможно замещенный ацил” обозначает ацильную группу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы. Типичные замещенные ацильные группы включают .
“Ациламиногруппа” это ацил-NH- группа, ацильная группа которой описана здесь. “Возможно замещенная ациламиногруппа” обозначает ациламиногруппу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
“Алкенил” обозначает алифатическую углеводородную группу, содержащую одну или более двойную связь углерод-углерод и которая может быть линейной или разветвленной, имеющей примерно от 2 до 15 атомов углерода в цепи. Предпочтительные алкенильные группы имеют примерно от 2 до 12 атомов углерода в цепи и более предпочтительно от 2 до примерно 4 атомов углерода в цепи. “Разветвленная”, при использовании здесь и во всем тексте, означает, что одна или более алкильных групп, таких как метил, этил или пропил, присоединены к линейной цепи; в данном случае к линейной алкенильной цепи. “Алкенил более низкого порядка” обозначает примерно от 2 до 4 атомов углерода в цепи, которая может быть линейной или разветвленной. Типичные алкенильные группы включают этенил, пропенил, н-бутенил, изобутенил, 3-метилбут-2-енил, н-пентенил, гептенил, октенил, циклогексилбутенил и деценил. “Возможно замещенный алкенил” обозначает алкенильную группу, которая может быть замещена одним или более заместителем алкильной группы.
“Алкоксигруппа” обозначает группу алкил-O-, алкильная группа которой описана здесь. Типичные алкоксигруппы включают метоксильную, этоксильную, н-пропоксильную, изопропоксильную, н-бутоксильную и гептоксигруппы. “Возможно замещенная алкоксигруппа” обозначает алкоксигруппу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы. Типичные замещенные алкоксигруппы включают , , , , , , , ,  и .
“Алкоксиалкильная группа” обозначает группу алкил-O-алкил-, алкильная группа которой описана здесь. Типичные алкоксиметильные группы включают метоксиметил и этоксиметил. “Возможно замещенная алкоксиалкильная группа” обозначает алкоксиалкильную группу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
“Алкоксикарбонильная группа” обозначает группу алкил-O-CO-, алкильная группа которой описана здесь. Типичные алкоксикарбонильные группы включают метокси- и этоксикарбонильную группы. “Возможно замещенная алкоксикарбонильная группа” обозначает алкоксикарбонильную группу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
1-6
2
7
8
7
8
7
8
7
8
“Алкил” обозначает, кроме специально описанных случаев, алифатическую углеводородную группу, которая может быть линейной или разветвленной и иметь примерно от 1 до 15 атомов углерода в цепи. Конкретные алкильные группы имеют от 1 до примерно 6 атомов углерода. Типичные алкильные группы включают Cалкильные группы, такие как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил и трет-бутил. “Возможно замещенный алкил” обозначает алкильную группу, которая может быть замещена одним или более алкильным заместителем, где “заместители алкильной группы” включают, например, ацил, ациламиногруппу, алкоксигруппу, алкоксикарбонильную группу, алкилендиоксигруппу, алкилсульфинильную группу, алкилсульфонильную группу, алкилтиогруппу, возможно замещенную ароильную группу, возможно замещенную ароиламиногруппу, возможно замещенный арил, возможно замещенный арилалкил, возможно замещенную арилалкилоксигруппу, возможно замещенную арилалкилоксикарбонильную группу, возможно замещенную арилалкилтиогруппу, возможно замещенную арилоксигруппу, возможно замещенную арилоксикарбонильную группу, возможно замещенную арилсульфинильную группу, возможно замещенную арилсульфонильную группу, возможно замещенную арилтиогруппу, карбоксигруппу, цианогруппу, циклоалкенильную группу, галогенидную группу, возможно замещенную гетероароильную группу, возможно замещенную гетероарильную группу, возможно замещенную гетероарилалкильную группу, возможно замещенную гетероарилалкилоксигруппу, возможно замещенную гетероароиламиногруппу, возможно замещенную гетероарилоксигруппу, возможно замещенную гетероциклоалкильную группу, гидроксигруппу, нитрогруппу, оксогруппу, трифторметил, YYN-, YYNCO-, YYNSO-, где Y и Y обозначают, независимо друг от друга, водород, алкил, арил, арилалкил, гетероарил или гетероарилалкил. Типичные замещенные алкильные группы включают ,, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,  и .
“Алкилен” обозначает линейную или разветвленную бивалентную углеводородную цепь, имеющую от 1 до примерно 15 атомов углерода. Особыми алкиленовыми группами являются низшие алкиленовые группы, имеющие от 1 до примерно 6 атомов углерода. Типичные группы включают метилен и этилен.
1-6
“Алкилсульфинильная группа” обозначает группу алкил-SO-, алкильная группа которой описана выше. Предпочтительными группами являются такие, в которых алкильной группой является C алкил. “Возможно замещенная алкилсульфинильная группа” обозначает алкилсульфинильную группу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
2
1-6
“Алкилсульфонильная группа” обозначает группу алкил-SO-, алкильная группа которой описана выше. Предпочтительными группами являются такие, в которых алкильной группой является C алкил. “Возможно замещенная алкилсульфонильная группа” обозначает алкилсульфонильную группу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
2
1-6
“Алкилсульфонилкарбамоильная группа” обозначает группу алкил-SO-NH-C(=O)-, алкильная группа которой описана выше. Предпочтительными алкилсульфонилкарбамоильными группами являются такие, в которых алкильной группой является C алкил. “Возможно замещенная алкилсульфонилкарбамоильная группа” обозначает алкилсульфонилкарбамоильную группу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
“Алкилтиогруппа” обозначает группу алкил-S-, алкильная группа которой описана выше. Типичные алкилтиогруппы включают метилтиогруппу, этилтиогруппу, изопропилтиогруппу и гептилтиогруппу. “Возможно замещенная алкилтиогруппа” обозначает алкилтиогруппу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
“Алкинил” обозначает алифатическую углеводородную группу, содержащую тройную связь углерод-углерод и которая может быть линейной или разветвленной и иметь примерно от 2 до 15 атомов углерода в цепи. Предпочтительные алкинильные группы имеют от 2 до примерно 12 атомов углерода в цепи и более предпочтительно примерно от 2 до 6 атомов углерода в цепи. Типичные алкинильные группы включают этинил, пропинил, н-бутинил, изобутинил, 3-метилбут-2-инил и н-пентинил. “Возможно замещенный алкинил” обозначает алкинильную группу, которая может быть замещена одним или более заместителем алкильной группы.
“Ароильная группа” обозначает группу арил-СО, арильная группа которой описана ниже. Типичные группы включают бензоил и 1- и 2-нафтоил. “Возможно замещенная ароильная группа” обозначает ароильную группу, арильная часть которой может быть замещена одним или более заместителем арильной группы, как описано здесь.
“Ароиламиногруппа” это группа ароил-NH-, ароильная часть которой описана выше. “Возможно замещенная ароиламиногруппа” обозначает ароиламиногруппу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы.
5
6
5
6
5
6
5
6
5
6
2
“Арил” как группа или часть группы обозначает: (i) моноциклическую или мультициклическую ароматическую карбоциклическую часть, содержащую примерно от 6 до 14 атомов углерода, такую как фенил или нафтил; или (ii) частично насыщенную мультициклическую ароматическую карбоциклическую часть, в которой арильная и циклоалкильная или циклоалкенильная группа сконденсированы, образуя циклическую структуру, такую как тетрагидронафтил, инденильное или инданильное кольцо. “Возможно замещенная арильная группа” может быть замещена одним или более арильным заместителем, которые могут быть одинаковыми или различными, где “заместитель арильной группы” включает, например, ацил, ациламиногруппу, алкоксигруппу, алкоксикарбонильную группу, алкил, алкилендиоксигруппу, алкилсульфинильную группу, алкилсульфонильную группу, алкилтиогруппу, ароильную группу, ароиламиногруппу, арил, арилалкил, арилалкоксигруппу, арилалкилоксикарбонильную группу, арилалкилтиогруппу, арилоксигруппу, арилоксикарбонильную группу, арилсульфинильную группу, арилсульфонильную группу, арилтиогруппу, карбоксигруппу, цианогруппу, галогенидную группу, гетероароильную группу, гетероарильную группу, гетероарилалкильную группу, гетероарилалкилоксигруппу, гетероароиламиногруппу, гетероарилоксигруппу, гетероциклоалкилалкильную группу, гидроксигруппу, нитрогруппу, трифторметил, YYN-, YYNCO-, YYNSO-, где Y и Y обозначают, независимо друг от друга, водород, алкил, арил, арилалкил, гетероарил и гетероарилалкил, или Y и Y , вместе с соседним атомом азота, образуют азотсодержащее насыщенное алициклическое кольцо, содержащее от 3 до 7 членов.
“Возможно замещенное бензольное кольцо” обозначает бензольное кольцо, которое может быть замещено одним или более заместителем арильной группы.
1-6
“Арилалкил” обозначает арил-алкильную группу, арильная и алкильная части которой описаны выше. Предпочтительные арилалкильные группы содержат C алкильную часть. Типичные арилалкильные группы включают бензил, 2-фенэтил и нафталинметил. “Возможно замещенный арилалкил” обозначает арилалкильную группу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы и может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы. Типичные замещенные арилалкильные группы включают  и .
“Арилалкилоксигруппа” обозначает группу арилалкил-О-, арилалкильная группа которой описана выше. Типичные арилалкоксигруппы включают бензилоксильную и 1- или 2-нафталинметоксигруппы. “Возможно замещенная арилалкилоксигруппа” обозначает арилалкилоксигруппу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы и в алкильной части - одним или более заместителем алкильной группы.
“Арилалкилоксиалкильная группа” обозначает группу арилалкил-О-алкил, арилалкильная и алкильная группы которой описаны выше. Типичные арилалкилоксиалкильные группы включают бензилоксиметил и 1- или 2-нафталинметоксиметил. “Возможно замещенная арилалкилоксиалкильная группа” обозначает арилалкилоксиалкильную группу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы и в алкильной части - одним или более заместителем алкильной группы.
“Арилалкилоксикарбонильная группа” обозначает группу арилалкил-О-СО-, арилалкильная группа которой описана выше. Типичной арилалкилоксикарбонильной группой является бензилоксикарбонил. “Возможно замещенная арилалкилоксикарбонильная группа” обозначает арилалкилоксикарбонильную группу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы и в алкильной части - одним или более заместителем алкильной группы.
“Арилоксиалкильная группа” обозначает группу арил-О-алкил. Типичным арилоксиалкилом является феноксиметил. “Возможно замещенная арилоксиалкильная группа обозначает арилоксиалкильную группу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы и в алкильной части - одним или более заместителем алкильной группы.
“Арилалкилтиогруппа” обозначает группу арилалкил-S-, арилалкильная часть которой описана выше. Типичной арилалкилтиогруппой является бензилтиогруппа. “Возможно замещенная арилалкилтиогруппа” - это арилалкилтиогруппа, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы и в алкильной части - одним или более заместителем алкильной группы.
“Арилоксигруппа” обозначает группу арил-О-, арильная часть которой описана выше. Типичные арилоксигруппы включают возможно замещенные феноксильную и нафтоксигруппы. “Возможно замещенная арилоксигруппа” обозначает арилоксигруппу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы.
“Арилоксикарбонильная группа” обозначает группу арил-О-СО, арильная часть которой описана выше. Типичные арилоксикарбонильные группы включают феноксикарбонильную и нафтоксикарбонильную группы. “Возможно замещенная арилоксикарбонильная группа” обозначает арилоксикарбонильную группу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы.
“Арилсульфинильная группа” обозначает группу арил-SO-, арильная группа которой описана выше. “Возможно замещенная арилсульфинильная группа” обозначает арилсульфинильную группу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы.
2
“Арилсульфонильная группа” обозначает группу арил-SO-, арильная группа которой описана выше. “Возможно замещенная арилсульфонильная группа” обозначает арилсульфонильную группу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы.
2
“Арилсульфонилкарбамоильная группа” обозначает группу арил-SO-NH-C(=O)-, арильная группа которой описана выше. “Возможно замещенная арилсульфонилкарбамоильная группа” обозначает арилсульфонилкарбамоильную группу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы.
“Арилтиогруппа” обозначает группу арил-S-, арильная группа которой описана выше. Типичные арилтиогруппы включают фенилтиогруппу и нафтилтиогруппу. “Возможно замещенная арилтиогруппа” обозначает арилтиогруппу, которая может быть замещена в арильной части одним или более заместителем арильной группы.
“Циклоалкенильная группа” обозначает неароматическую моноциклическую или мультициклическую кольцевую систему, содержащую, по крайней мере, одну двойную связь углерод-углерод и имеющую примерно от 5 до 10 атомов углерода. Типичные моноциклические циклоалкенильные кольца включают циклопентенил, циклогексенил и циклогептенил. Типичным мультициклическим циклоалкенильным кольцом является норборненил. “Возможно замещенная циклоалкенильная группа” обозначает циклоалкенильную группу, которая может быть замещена одним или более заместителем алкильной группы.
“Циклоалкоксиалкильная группа” обозначает группу циклоалкил-О-алкил, циклоалкильная группа которой описана ниже. Типичные циклоалкоксиалкильные группы включают циклопропилоксиметил и циклопентилоксиметил. “Возможно замещенная циклоалкоксиалкильная группа” обозначает циклоалкоксиалкильную группу, которая может быть замещена одним или более заместителем алкильной группы.
“Циклоалкильная группа” обозначает неароматическую моноциклическую или мультициклическую кольцевую систему, содержащую от примерно 3 до примерно 10 атомов углерода. Типичные моноциклические циклоалкильные кольца включают циклопропил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Типичные мультициклические циклоалкильные кольца включают пергидронафтил, адамант-(1- или 2)-ил и норборнил и спироциклические группы, например спиро[4,4]нон-2-ил. “Возможно замещенная циклоалкильная группа” обозначает циклоалкильную группу, которая может быть замещена алкилом или одним или более заместителем алкильной группы.
“Циклоалкилалкильная группа” обозначает группу циклоалкилалкил, циклоалкильная и алкильная части которой описаны выше. Типичные моноцикличные циклоалкилалкильные группы включают циклопропилметил, циклопентилметил, циклогексилметил и циклогептилметил. “Возможно замещенная циклоалкилалкильная группа” обозначает циклоалкилалкильную группу, которая может быть замещена алкилом или одним или более заместителем алкильной группы.
“Циклоалкилоксигруппа” обозначает группу циклоалкил-О-, циклоалкильная группа которой описана выше. Типичные циклоалкилоксигруппы включают циклопропилоксильную, циклопентилоксильную, циклогексилоксильную и циклогептилоксигруппы. “Возможно замещенная циклоалкилоксигруппа” означает циклоалкилоксигруппу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
“Галогенидная группа” или “галоген” обозначает фтор, хлор, бром или иод.
“Гетероароильная группа” обозначает группу гетероарил-СО-, гетероарильная часть которой соответствует описанному здесь. Типичные группы включают пиридилкарбонил. “Возможно замещенная гетероароильная группа” обозначает гетероароильную группу, которая может быть замещена одним или более заместителем арильной группы.
“Гетероароиламиногруппа” обозначает группу гетероароил-NH-, гетероароильная часть которой соответствует описанной выше. “Возможно замещенная гетероароиламиногруппа” обозначает гетероароиламиногруппу, которая может быть замещена одним или более заместителем арильной группы.
“Гетероарильная группа” как отдельная группа или часть группы обозначает ароматическую моноциклическую или мультициклическую органическую часть, содержащую примерно от 5 до 14 членов кольца, в котором один или более членов не является углеродом, а, например, азотом, кислородом или серой. Примеры подходящих гетероарильных групп включают бензимидазолильную, фурильную, имидазолильную, изоксазолильную, изохинолинильную, изотиазолильную, оксадиазолильную, пиразинильную, пиридазинильную, пиразолильную, пиридильную, пиримидинильную, пирролильную, хиназолинильную, хинолинильную, 1,3,4-тиадиазолильную, тиазолильную, тиенильную и триазолильную группы. “Возможно замещенная гетероарильная группа” обозначает гетероарильную группу, которая может быть замещена одним или более заместителем арильной группы.
1-4
“Гетероарилалкильная группа” обозначает группу гетероарилалкил, гетероарильная и алкильная части которой соответствуют описанным выше. Предпочтительные гетероарилалкильные группы содержат C алкильную часть. Типичные гетероарилалкильные группы включают пиридилметил. “Возможно замещенный гетероарилалкил” обозначает гетероарилалкильную группу, которая может быть замещена в гетероарильной части одним или более заместителем арильной группы и в алкильной части - одним или более заместителем алкильной группы.
“Гетероарилалкилоксигруппа” обозначает группу гетероарилалкил-О-, гетероарилалкильная группа которой соответствует описанной выше. Типичные гетероарилалкилоксигруппы включают пиридилметоксигруппу. “Возможно замещенная гетероарилалкилоксигруппа” обозначает гетероарилалкилалкоксигруппу, которая может быть замещена в гетероарильной части одним или более заместителем арильной группы, и которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
“Гетероарилалкилоксиалкильная группа” обозначает группу гетероарилалкил-О-алкил, гетероарилалкильная и алкильная части которой соответствуют описанным выше. Типичные гетероарилалкилоксиалкильные группы включают 4-пиридилметоксиметильную и 3- или 4-хинолинметоксиметильную группы. “Возможно замещенная гетероарилалкилоксиалкильная группа” обозначает гетероарилалкилоксиалкильную группу, которая может быть замещена в гетероарильной части одним или более заместителем арильной группы, и в алкильной части - одним или более заместителем алкильной группы.
“Гетероарилоксигруппа” обозначает группу гетероарил-О-, гетероарильная группа которой соответствует описанной выше. Типичные гетероарилоксигруппы включают пиридилоксигруппу. “Возможно замещенная гетероарилоксигруппа” обозначает гетероарилоксигруппу, которая может быть замещена в гетероарильной части одним или более заместителем арильной группы.
“Гетероарилоксиалкильная группа” обозначает группу гетероарил-О-алкил, гетероарильная и алкильная части которой совпадают с описанными выше. “Возможно замещенная гетероарилоксиалкильная группа” обозначает гетероарилоксиалкильную группу, которая может быть замещена в гетероарильной части одним или более заместителем арильной группы и в алкильной части - одним или более заместителем алкильной группы.
2
“Гетероарилсульфонилкарбамоильная группа” обозначает группу гетероарил-SO-NH-C(=O)-, гетероарильная группа которой совпадает с описанной выше. “Возможно замещенная гетероарилсульфонилкарбамоильная группа” обозначает гетероарилсульфонилкарбамоильную группу, которая может быть замещена одним или более заместителем арильной группы.
9
9
“Гетероциклоалкильная группа” обозначает неароматическую или частично ароматическую моноциклическую или мультициклическую органическую часть, имеющую от 5 до примерно 14 членов в кольце, которое содержит один или более гетероатомов, таких как O, S или NY, где Y обозначает водород, возможно замещенный алкил, возможно замещенный арил, возможно замещенную арилалкильную группу, циклоалкильную группу, возможно замещенную гетероарильную группу или возможно замещенную гетероарилалкильную группу. Типичные гетероциклоалкильные группы включают морфолин, пиперидин, пиперазин, пирролидин, тетрагидрофуран и пергидрофуран. “Возможно замещенная гетероциклоалкильная группа” обозначает гетероциклоалкильную группу, которая может быть замещена алкилом либо одним или более заместителем алкильной группы.
“Гетероциклоалкилалкильная группа” обозначает группу гетероциклоалкилалкил-, гетероциклоалкильная и алкильная части которой соответствуют описанным выше. “Возможно замещенная гетероциклоалкилалкильная группа” обозначает гетероциклоалкилалкильную группу, которая может быть замещена алкилом или одним или более заместителем алкильной группы.
“Гетероциклоалкилоксигруппа” обозначает группы вида гетероциклоалкил-О-, гетероциклоалкильная часть которой соответствует описанной выше. “Возможно замещенная гетероциклоалкилоксигруппа” обозначает гетероциклоалкилоксигруппу, которая может быть замещена в гетероциклоалкилоксильной части алкилом или одним или более заместителем алкильной группы.
“Гетероциклоалкилоксиалкильная группа” обозначает группу гетероциклоалкил-О-алкил, гетероциклоалкильная часть которой соответствует описанной выше. “Возможно замещенная гетероциклоалкилоксиалкильная группа” обозначает гетероциклоалкилоксиалкильную группу, которая может быть замещена в гетероциклоалкилоксильной либо в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
1-4
“Гидроксиалкильная группа” обозначает группу НО-алкил-, алкильная группа которой соответствует описанной выше. Предпочтительные гидроксиалкильные группы включают C алкил. Типичные гидроксиалкильные группы включают: гидроксиметил и 2-гидроксиэтил. “Возможно замещенная гидроксиалкильная группа” обозначает гидроксиалкильную группу, которая может быть замещена в алкильной части одним или более заместителем алкильной группы.
7
8
7
8
2
"YYN-" обозначает замещенную или незамещенную аминогруппу, где Y и Yсоответствуют описанными выше группам. Типичные группы включают аминогруппу (HN-), метиламиногруппу, этиламиногруппу, диметиламиногруппу, и диэтиламиногруппу.
7
8
7
8
2
2
"YYNCO-" обозначает замещенную или незамещенную карбамоильную группу, где Y и Y соответствуют описанным выше группам. Типичными группами являются карбамоил (HNCO-) и диметилкарбамоил (MeNCO-).
7
8
7
8
2
2
2
2
2
"YYNSO-" обозначает замещенную или незамещенную сульфамоильную группу, где Y и Y соответствуют описанным выше группам. Типичными группами являются сульфамоил (HNSO-) и диметилсульфамоил (MeNSO-).
“Пролекарство” означает соединение, которое in vivo преобразуется метаболическими средствами (например, гидролизом) в соединение формулы I, включая его N-оксиды. Например, сложный эфир соединения формулы I, содержащий гидроксигруппу, может быть преобразован гидролизом in vivo в исходную молекулу. Аналогично, сложный эфир соединения формулы I, содержащий карбоксигруппу, может быть преобразован гидролизом in vivo в исходную молекулу.
“Сольват” обозначает физическую ассоциацию соединения данного изобретения с одной или более молекулами растворителя. Такая физическая ассоциация включает водородную связь. В определенных случаях сольват может быть выделен, например, когда одна или более молекул растворителя включается в кристаллическую решетку твердого кристаллического тела. “Сольват” подразумевает как фазу раствора, так и выделенные сольваты. Типичные представители сольватов включают гидраты, этанолаты, метанолаты и т.п.
Подходящими эфирами соединений формулы I, содержащими гидроксигруппу, являются, например, ацетаты, цитраты, лактаты, тартраты, малонаты, оксалаты, салицилаты, пропионаты, сукцинаты, фумараты, малеаты, метилен-бис-β-гидроксинафтоаты, гентизаты, изетионаты, ди-п-толуоилтартраты, метансульфонаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, п-толуолсульфонаты, циклогексилсульфаматы и хиннаты.
Подходящими эфирами соединений формулы I, содержащими карбоксигруппу, являются, например, эфиры, описанные в работе F.J.Leinweber, Drug Metab. Res., 1987, 18, стр. 379.
Особенно полезный класс эфиров соединений формулы I, содержащих гидроксигруппу, может быть образован из кислот, выбранных из описанных в работе Bundgaard et. al., J. Med. Chem., 1989, 32, стр. 2503-2507 и включающих замещенные (аминометил)бензоаты, например диалкиламинометилбензоаты, в которых две алкильные группы могут быть объединены вместе и/или разделены атомом кислорода или возможно замещенным атомом азота, например алкилированным атомом азота, точнее (морфолинометил)бензоаты, например 3- или 4-(морфолинометил)бензоаты, и (4-алкилпиперазин-1-ил)бензоаты, например 3- или 4-(4-алкилпиперазин-1-ил)бензоаты.
Некоторые соединения настоящего изобретения являются щелочными, и такие соединения полезны в виде свободного основания или в виде фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли такого соединения.
Кислотно-аддитивные соли более удобны при использовании; и на практике использование соли неизбежно приводит к использованию свободного основания. Кислоты, которые могут быть использованы для приготовления кислотно-аддитивных солей, предпочтительно включают те, которые при реакции со свободным основанием образуют фармацевтически приемлемые соли, то есть соли, анионы которых не токсичны для пациента в фармацевтических дозах солей, и положительный ингибирующий эффект, производимый свободным основанием, не разрушается побочными эффектами, вызванными анионам. Несмотря на то что фармацевтически приемлемые соли указанных щелочных соединений являются предпочтительными, все кислотно-аддитивные соли полезны в качестве источников свободных оснований, даже если конкретная соль, как таковая, необходима только как промежуточный продукт, например, как в случае, когда соль образуется только в целях очистки и идентификации или когда она используется в качестве промежуточного соединения в приготовлении фармацевтически приемлемой соли путем ионнообменных процессов. Фармацевтически приемлемые соли, охватываемые изобретением, включают соли, полученные из минеральных и органических кислот, и включают гидрогалогениды, например гидрохлориды и гидробромиды, сульфаты, фосфаты, нитраты, сульфаматы, ацетаты, цитраты, лактаты, тартраты, малонаты, оксалаты, салицилаты, пропионаты, сукцинаты, фумараты, малеаты, метилен-бис-b-гидроксинафтоаты, гентизаты, изетионаты, ди-п-толуоилтартраты, метан-сульфонаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, п-толуолсульфонаты, циклогексилсульфаматы и хиннаты.
Когда соединение изобретения замещается кислотным фрагментом, могут образовываться щелочно-аддитивные соли, которые являются более удобной в использовании формой; и на практике использование солевой формы неизбежно приводит к использованию свободной кислотной формы. Основания, которые могут быть использованы в приготовлении этих щелочно-аддитивных солей включают предпочтительно те, которые при реакции со свободной кислотой образуют фармацевтически приемлемые соли, то есть соли, катионы которых не токсичны для пациента в фармацевтических дозах солей, и положительный ингибирующий эффект свободных оснований не ослабляется побочными эффектами, вызванными катионам. Фармацевтически приемлемые соли, включая соли, полученные из солей щелочных и щелочноземельных металлов, в объеме данного изобретения включают соли, полученные из следующих оснований: гидрид натрия, гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид кальция, гидроксид алюминия, гидроксид лития, гидроксид магния, гидроксид цинка, аммиак, этилендиамин, N-метилглюкамин, лизин, аргинин, орнитин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, диэтаноламин, прокаин, N-бензилфенэтиламин, диэтиламин, пиперазин, трис(гидроксиметил)аминометан, гидроксид тетраметиламмония, и т.п.
Кроме применения в качестве активных соединений, соли соединений изобретения могут быть использованы в целях очистки соединений, например, основываясь на разнице растворимостей между солями и исходными соединениями, побочными продуктами и/или исходными материалами способами, хорошо известными специалистам в данной области.
Соединения изобретения являются ингибиторами ИТК и, следовательно, имеют полезное фармакологическое действие. Соответственно, они вводятся в фармацевтические композиции и используются при лечении пациентов, страдающих определенными медицинскими расстройствами. Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает, в соответствии с дальнейшим аспектом, соединения изобретения и композиции, содержащие соединения изобретения, для использования в терапии.
Соединения, охватываемые настоящим изобретением, являются ингибиторами ИТК, в соответствии с тестами, описанными в литературе, и тестами, описанными ниже, результаты которых по современным представлениям коррелируют с фармакологическим действием на человека и других млекопитающих. Таким образом, в дальнейшем осуществлении настоящее изобретение обеспечивает соединения изобретения и композиции, содержащие соединения изобретения, для использования при лечении пациента, страдающего от или подверженного болезненным состояниям, которые могут быть улучшены назначением ингибитора ИТК. Например, соединения настоящего изобретения полезны при лечении астмы.
Ссылки на лечение в данном тексте подразумевают как профилактическую терапию, так и лечение диагностированных состояний.
Настоящее изобретение также охватывает фармацевтические композиции, содержащие, по крайней мере, одно соединение изобретения, в комплексе с фармацевтически приемлемым носителем или связующим веществом.
Соединения изобретения могут назначаться любым подходящим способом. На практике соединения настоящего изобретения могут в общем случае назначаться парентерально, местно, ректально, перорально или путем ингаляций, особенно оральным путем.
Композиции, в соответствии с изобретением, могут быть приготовлены традиционными способами, с использованием одного или более фармацевтически приемлемых составляющих, вспомогательных или связующих веществ. Вспомогательные вещества включают, среди прочего, разбавители, стерильную водную среду и различные нетоксичные органические растворители. Композиции могут быть представлены в виде таблеток, пилюль, гранул, порошков, водных растворов или суспензий, растворов для инъекций, эликсиров или сиропов, и могут содержать один или более агентов из группы, включающей подсластители, ароматизаторы, красители или стабилизаторы, для получения фармацевтически приемлемых препаратов. Выбор носителя и содержания активного вещества в носителе в общем случае определяется в соответствии с растворимостью и химическими свойствами активного соединения, конкретного способа назначения и условиями, которые должны соблюдаться в медицинской практике. Например, такие связующие вещества, как лактоза, цитрат натрия, карбонат кальция, дикальций фосфат и разрыхляющие агенты, такие как крахмал, альгиновые кислоты и определенные сложные силикаты в сочетании со скользящими веществами, такими как стеарат магния, лаурилсульфат натрия и тальк, могут использоваться для приготовления таблеток. Для приготовления капсул выгодно использовать лактозу и полиэтиленгликоли, имеющие высокий молекулярный вес. При использовании водных суспензий последние могут содержать эмульгаторы или агенты, которые стимулируют образование суспензии. Также можно использовать разбавители, такие как сахароза, этанол, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, глицерин и хлороформ или их смеси.
Для парентерального назначения используют эмульсии, суспензии или растворы продуктов в соответствии с изобретением в растительном масле, например кунжутном, арахисовом или оливковом масле, или водно-органические растворы, такие как вода и пропиленгликоль, органические эфиры для инъекционного применения, такие как этилолеат, так же как стерильные водные растворы фармацевтически приемлемых солей. Растворы солей продуктов в соответствии с изобретением особенно полезны при назначении внутримышечных или подкожных инъекций. Водные растворы, также включающие растворы солей в чистой дистиллированной воде, могут быть использованы для введения внутривенно, при условии, что их рН регулируется соответственно, они помещены в соответствующий буферный раствор и доведены до изотонического состояния достаточным количеством глюкозы или хлорида натрия и что они стерилизованы нагреванием, облучением или микрофильтрацией.
При местном применении могут использоваться гели (водные или спиртовые), кремы или мази, содержащие соединения изобретения. Соединения изобретения могут также вводиться в гелевую или матричную основу для применения в виде пластыря, что сделает возможным контролируемое введение соединения через трансдермальный барьер.
При применении в виде ингаляций соединения изобретения могут быть растворены или приготовлены в виде суспензии в подходящем носителе для использования в распылителе или аэрозольном баллончике или могут быть абсорбированы или адсорбированы на подходящий твердый носитель для использования в сухом порошковом ингаляторе.
Твердые композиции для ректального применения включают свечи, состав которых подготовлен в соответствии с известными способами и содержащие, по крайней мере, одно из соединений данного изобретения.
Процент активного ингредиента в композициях изобретения может изменяться при условии соблюдения необходимой пропорции для обеспечения нужной дозы. Очевидно, что несколько форм дозировки могут применяться в одно и то же время. Необходимая доза будет определяться врачом и зависит от желаемого терапевтического эффекта, способа применения и длительности лечения и состояния пациента. Для взрослых дозы варьируются от 0,001 до 50, предпочтительно от 0,001 до 5, мг/кг массы тела в день путем ингаляции, от 0,01 до 100, предпочтительно от 0,1 до 70, точнее от 0,5 до 10, мг/кг массы тела в день перорально и от 0,001 до 10, предпочтительно от 0,01 до 1, мг/кг массы тела в день внутривенно. В каждом конкретном случае дозы будут определяться в соответствии с индивидуальными факторами пациента, такими как возраст, вес, общее состояние здоровья и другие характеристики, которые могут повлиять на эффективность лекарственного продукта.
Соединения в соответствии с изобретением могут вводиться так часто, как это необходимо для достижения желаемого терапевтического эффекта. Некоторые пациенты быстро реагируют на более или менее высокие дозы, и намного более слабые поддерживающие дозы могут оказаться достаточными. Для других пациентов может возникнуть необходимость в длительном лечении в количестве от 1 до 4 доз в день, в зависимости от физиологических потребностей каждого конкретного пациента. В общем случае активный продукт может применяться перорально от 1 до 4 раз в день. Разумеется, для некоторых пациентов будет достаточно принимать одну или две дозы в день.
Соединения изобретения могут быть приготовлены с применением или адаптацией известных методов, применяемых ранее или описанных в литературе.
В реакциях, описанных ниже, может возникнуть необходимость защиты реакционно-способных функциональных групп, например гидроксигрупп, аминогрупп, иминогрупп, тиогрупп или карбоксигрупп, в случаях, когда эти группы необходимы в конечном продукте, для того чтобы избежать их участия в реакциях. Традиционные защитные группы могут применяться в соответствии со стандартной практикой, см., например, T.W.Greene and P.G.M.Wuts in "Protective Groups in Organic Chemistry" John Wiley and Sons, 1991.
Следует принимать во внимание тот факт, что соединения настоящего изобретения могут содержать асимметричные центры. Данные асимметричные центры могут иметь, независимо друг от друга, как R, так и S конфигурацию. Специалистам в данной области будет очевидно, что определенные соединения изобретения могут проявлять геометрическую изомерию. Подразумевается, что настоящее изобретение включает индивидуальные геометрические изомеры и стереоизомеры и их смеси, включая рацемические смеси соединений формулы I, описанных выше. Такие изомеры могут быть выделены из смесей с использованием или адаптацией известных методов, например приемов хроматографии и перекристаллизации, либо приготовляются отдельно из соответствующих изомеров их промежуточных соединений. Кроме того, когда возможно существование таутомеров соединений формулы I, подразумевается, что настоящее изобретение включает все таутомерные формы соединений.
В соответствии с еще одной характеристикой изобретения кислотно-аддитивные соли соединений данного изобретения могут быть приготовлены взаимодействием свободного основания с соответствующей кислотой, с применением или адаптацией известных методов. Например, кислотно-аддитивные соли соединений данного изобретения могут быть приготовлены либо растворением свободного основания в воде, или водно-спиртовом растворе, или ином подходящем растворителе, содержащем соответствующую кислоту, и выделением соли выпариванием раствора, либо проводя реакцию между свободным основанием и кислотой в органическом растворителе, таком как тетрагидрофуран, - в этом случае соль выделяется непосредственно или может быть выделена концентрированием раствора.
Соединения данного изобретения могут быть регенерированы из их кислотно-аддитивных солей с применением или адаптацией известных методов. Например, исходные соединения изобретения могут быть регенерированы из их кислотно-аддитивных солей добавлением щелочи, например водного раствора бикарбоната натрия или водного раствора аммиака.
В соответствии с еще одной характеристикой изобретения щелочно-аддитивные соли соединений данного изобретения могут быть получены реакцией между свободной кислотой и соответствующим основанием с применением или адаптацией известных методов. Например, щелочно-аддитивные соли соединений данного изобретения могут быть приготовлены либо путем растворения свободной кислоты в воде или водно-спиртовом растворе или ином подходящем растворителе, содержащем соответствующее основание, и выделения соли путем выпаривания раствора, либо проведением реакции между свободной кислотой и основанием в органическом растворителе - в последнем случае соль выделяется непосредственно или может быть получена концентрированием раствора.
Соединения данного изобретения могут быть регенерированы из их солей присоединения оснований с применением или адаптацией известных методов. Например, исходные соединения данного изобретения могут быть регенерированы из их щелочно-аддитивных солей реакцией последних с кислотой, например соляной кислотой.
Соединения настоящего изобретения могут быть без труда получены либо они могут образоваться в процессе предложенного изобретения в виде сольватов (например, гидратов). Гидраты соединений настоящего изобретения могут быть легко приготовлены перекристаллизацией из воды.
Исходные материалы и промежуточные соединения, отсутствующие в продаже, могут быть приготовлены с применением или адаптацией известных методов, например методов, описанных в примерах или их очевидных химических эквивалентов.
Настоящее изобретение иллюстрируется, но не ограничивается следующими наглядными примерами.
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензимидазолы настоящего изобретения в общем случае получают в соответствии со схемой I.
Схема I
3-(1H-бензимидазол-2-ил) 1H-[бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразолы настоящего изобретения в общем случае получают в соответствии со схемой II.
Схема II
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индолы настоящего изобретения в общем случае получают в соответствии со схемой III.
Схема III
1
2
3
4
5
6
7
1
2
3
4
5
6
7
В схемах I, II, III, V, VI, VII и VIII R', R', R', R', R', R' и R' обозначают R, R, R, R, R, R и R соответственно, как определено в данном тексте, или являются защищенными формами таковых, или промежуточными группами таковых.
В частности, аминоалкокси-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индолы настоящего соединения получают в соответствии со схемой IV.
Схема IV
3
4
3
4
7
8
На схеме IV, HN(Y)(Y) обозначает возможно замещенный гетероциклоалкил-Н, где гетероциклоалкил-Н обозначает водород при насыщенном азоте внутри гетероциклоалкильного кольца, или Y и Y обозначают Y и Y соответственно, или защищенные производные таковых, или их промежуточные группы.
1
2
3
4
a
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индолы настоящего изобретения формулы (Ia), в которой один из R, R, R и R обозначает возможно замещенную алкильную группу формулы  [где R обозначает алкил, циклоалкильную группу, возможно замещенный арил или гетероарильную группу] и остальные обозначают водород, в общем случае получают в соответствии со схемой V.
Схема V
Примеры  включают ,  и
1
2
3
4
a
b
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индолы настоящего изобретения формулы (Ia), в которой один из R, R, R и R обозначает возможно замещенную алкильную группу формулы  [где R и R обозначают возможно замещенный алкил, возможно замещенную циклоалкильную группу, возможно замещенный арил или возможно замещенную гетероарильную группу] и остальные обозначают водород, в общем случае получают в соответствии со схемой VI.
Схема VI
Примеры  включают , , , , , , , , , и
1
2
3
4
a
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индолы настоящего изобретения формулы (Ia), в которой один из R, R, R и R обозначает возможно замещенную алкильную группу формулы  [где R обозначает возможно замещенный алкил, возможно замещенную циклоалкильную группу, возможно замещенный арил или возможно замещенную гетероарильную группу], а остальные обозначают водород, в общем случае получают в соответствии со схемой VII.
Схема VII
Примеры  в схеме VII включают ,  и
1
2
3
4
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индолы настоящего изобретения формулы (Ia), в которой один из R, R, R и R обозначает водород, другой обозначает возможно замещенную ацильную группу, возможно замещенную ароильную группу или возможно замещенную гетероароильную группу, а остальные обозначают водород, в общем случае получают в соответствии со схемой VIII.
Схема VIII
1
2
3
4
1
2
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индолы настоящего изобретения формулы (Ia), в которой один из R, R, R и R обозначает (Y)(Y)NC(=O)-, а остальные обозначают водород, в общем случае получают в соответствии со схемой IX.
Схема IX
1
2
Примеры (Y)(Y)NC(=O)- на схеме IX включают , , , , ,  и
1
2
3
4
7
8
7
8
2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индолы настоящего изобретения формулы (Ia), в которой один из R, R, R и R обозначает метильную группу, замещенную YYN- (где Y и Y обозначают, независимо друг от друга, водород, алкил, арил, арилалкильную группу, гетероарильную группу или гетероарилалкильную группу), а остальные обозначают водород, в общем случае получают в соответствии со схемой X.
Схема X
7
8
Примеры метильной группы, замещенной YYN- на схеме X, включают , ,  и
Соединения данного изобретения также могут быть приготовлены взаимопревращением других соединений данного изобретения.
Так, например, соединения формулы (I), содержащие карбоксигруппу, могут быть приготовлены гидролизом соответствующих эфиров. Гидролиз может быть без труда осуществлен путем щелочного гидролиза с использованием основания, такого как гидроксид щелочного металла, например гидроксид лития, или карбонат щелочного металла, например карбонат калия, в присутствии водно-органической смеси растворителей, с использованием таких органических растворителей, как диоксан, тетрагидрофуран или метанол, при температуре от комнатной до точки кипения. Гидролиз эфиров также может быть осуществлен путем кислотного гидролиза с использованием неорганической кислоты, такой как соляная кислота, в присутствии смеси воды и инертных органических растворителей, с использованием таких органических растворителей, как диоксан или тетрагидрофуран, при температурах от 50°C до 80°C.
В качестве еще одного примера соединения формулы (I), содержащие карбоксигруппу, могут быть приготовлены путем катализированного кислотой отщепления трет-бутильной группы соответствующих трет-бутиловых эфиров с использованием стандартных условий реакции, например реакции с трифторуксусной кислотой при комнатной температуре.
В качестве еще одного примера, соединения формулы (I), содержащие карбоксигруппу, могут быть приготовлены путем гидрирования соответствующих бензиловых эфиров. Реакция может проводиться в присутствии формиата аммония и подходящего металлического катализатора, например палладия, нанесенного на инертный носитель, такой как углерод, предпочтительно в таком растворе, как метанол или этанол, и при температуре около точки кипения. Реакция может быть также осуществлена в присутствии подходящего металлического катализатора, например платины или палладия, возможно, нанесенного на инертный носитель, такой как углерод, предпочтительно в таком растворителе, как метанол или этанол.
1
2
1
2
В качестве еще одного примера процесса взаимопревращения соединения формулы (I), содержащие YYN-C(=O)- группу, могут быть приготовлены реакцией соединений формулы (I), содержащих карбоксигруппу, с амином формулы YYNH с образованием амидной связи с использованием стандартных методов связывания пептидов. Примеры включают (i) связывание в присутствии O-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний гексафторфосфата и триэтиламина (или диизопропилэтиламина) в тетрагидрофуране (или диметилформамиде) при комнатной температуре, (ii) связывание в присутствии карбодиимида, например дициклогексилкарбодиимида в присутствии триэтиламина, (iii) реакцию с 1-гидроксибензотриазолом и карбодиимидом, таким как 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид в инертном растворителе, таком как диметилформамид, и при комнатной температуре. Так, например, 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-карбоновая кислота (пример 37) может реагировать с 1-(4-фторофенил)пиперазином в присутствии 1-этил-3-(3-дииметиламинопропил)карбодиимида и 1-гидроксибензотриазола, с образованием [4-(4-фторфенил)-пиперазин-1-ил]-[3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил]метанон (пример 38).
Кроме специально обозначенных случаев, следующие условия относятся к процедурам, используемым в приведенных ниже примерах.
Хиральные разделения проводятся на колонке ChiralPak AD 20 мкМ (250×20 мм вн. диам.) с использованием изократических условий элюирования и 80:20:0.1 смеси гептана/этанола/диэтиламина, суммарное время анализа равно 30 минутам со скоростью элюирования, равной 1,0 мл/минута, и детектировании при 254 нм.
Хиральное разделение и фракционный анализ производится с использованием колонки ChiralPak AD 10 мкм (250×4,6 мм вн. диам.), с использованием изократических условий элюирования и 70:30:0,2 смеси гептана/этанола/диметиламина, суммарное время анализа равно 30 минутам со скоростью элюирования, равной 1,0 мл/минута, и детектированием при 254 нм.
ЖХ/МС анализы выполняются с использованием следующего метода: Agilent 1100 Series ВЭЖХ с YMC CombiScreen Pro C18 5,5 мкм 4,6 мм на 33 мм колонке обращенной фазы, с использованием градиентного элюирования и смеси (A) ацетонитрила/0,1% трифторуксусной кислоты и (B) воды/0,1% трифторуксусной кислоты (5%A:95%B до 95%A:5%B более 5,1 минут) при скорости элюирования, равной 1,2 мл/минута; планшетное устройство Agilent 1100 Series автоматического ввода проб с вводом равным 2 мкл; детектор на диодной линейке Agilent 1100 Series с детектированием волн длиной в 215, 254 и 320 нм; Hewlett Packard 1100 Series масс-спектрометр с электрораспылением и положительной ионизацией.
Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) 1H записывались на спектрометре 300 МГц Varian Mercury. В спектрах ядерного магнитного резонанса (ЯМР) химические сдвиги (δ) выражаются в миллионных долях относительно тетраметилсилана. Сокращения обозначают следующее: с=синглет, д=дублет, т=триплет, м=мультиплет, к=квартет, дд=дублет дублетов, ддд=дублет двойных дублетов.
Определение точки плавления производилось на приборе Buchi 535, и полученные значения приводятся в градусах Цельсия.
254
Определения Rf выполняются с использованием готовых тонкослойных хроматографических пластин с силикагелем 60 F.
Пример 1
2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензимидазол
Пример 1A
T
3
2
1
Оксалил хлорид (0,601 мл, 6,99 ммоль, 1,2 экв.) добавляют к смеси 3-бромтиофен-2-карбоновой кислоты (1,20 г, 5,80 ммоль), N,N-диметилформамида (несколько капель, каталитическое количество) и безводного дихлорметана (25 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 20 минут. Реакционную смесь перемешивают в течение 17 часов, продувают азотом и концентрируют при пониженном давлении с целью получить твердое желто-коричневое вещество. Сырой 3-бромтиофен-2-карбонилхлорид растворяют в дихлорометане (25 мл) и добавляют по каплям в течение 10 минут в раствор N,O-диметилгидроксиламингидрохлорида при 0°C (843 мг, 8,64 ммоль), диизопропилэтиламина (2,50 мл, 14,3 ммоль) и дихлорметана (25 мл). За ночь реакционная смесь постепенно нагревается до комнатной температуры. Смесь промывают водой, сушат в присутствии сульфата магния и концентрируют при пониженном давлении. Сырой продукт очищают хроматографией на кремнеземе, элюируя 1:1 смесью этилацетата/гептана, с образованием метоксиметиламида 3-бром-тиофен-2-карбоновой кислоты, в виде белого твердого вещества: ТСХ Rf 0,33 (кремнезем, 1:1 этилацетат/гептан); ЖХ/МС: (M+H 249,94, R=2,18 мин); H ЯМР [(CD)SO), 300 МГц]: δ 7,85 (д, 1H, J=5,3 Гц), 7,17 (д, 1H, 5,3 Гц), 3,62 (с, 3H), 3,24 (с, 3H).
Пример 1B
Смесь бензимидазола (10,0 г, 84,6 ммоль), бензилхлорометилового эфира простого (5,9 мл, 42 ммоль) и ацетонитрила нагревают с обратным холодильником в течение 6 часов. Растворитель удаляют при пониженном давлении, получаемую в результате суспензию смешивают с дихлорметаном и промывают водой. Органический слой сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Сырой продукт хроматографируют на кремнеземе, элюируя 9:1 смесью этилацетата/дихлорметана, с образованием оранжевого твердого вещества. Продукт вторично хроматографируют на кремнеземе, элюируя 8:2 смесью этилацетата/дихлорметана, чтобы получить оранжевое твердое вещество. При растирании порошка с эфиром получают 1-бензилоксиметил-1Н-бензимидазол в виде бежевого твердого вещества.
Пример 1C
o
o
o
1
T
3
2
В раствор 1-бензилоксиметил-1Н-бензимидазола (648 мг, 2,72 ммоль, пример 1B) в тетрагидрофуране (15 мл) при -78C в атмосфере азота при перемешивании добавляют н-бутиллитий (1,30 мл 2,5 M раствора в гексане, 3,25 ммоль) в течение 5 минут и получившийся желтый раствор перемешивают при -78C. Через 25 минут добавляют раствор метоксиметиламида 3-бром-тиофен-2 карбоновой кислоты (680 мг, 2,72 ммоль, пример 1A) в тетрагидрофуране (10 мл) в течение 15 минут и реакционную смесь перемешивают при -78C. Через 1 час реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение еще 2 часов. Реакцию гасят насыщенным хлоридом аммония и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают по очереди водой и солевым раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении до получения желтой маслянистой жидкости. Сырой продукт хроматографируют на кремнеземе, элюируя 40%-ной смесью этилацетата и гептана, чтобы получить продукт. Растирание с эфиром/гептаном дает (1-бензилоксиметил-1H-бензимидазол-2-ил)-(3-бромтиофен-2-ил)метанон в виде беловатого порошка; ТСХ Rf 0,52 (кремнезем, 1:1 смесь этилацетат/гептан); ЖХ/МС: (M+H 427,0, R=3,84 мин); H ЯМР [(CD)SO), 300 МГц]: δ 8,18 (д, 1H, 5,2 Гц), 7,90-7,82 (м, 2H), 7,55-7,50 (м, 1H), 7,45-7,38 (м, 2H), 7,25-7,17 (м, 5H), 6,13 (с, 2H), 4,58 (с, 2H).
Пример 1D
o
1
T
3
2
Смесь (1-бензилоксиметил-1H-бензимидазол-2-ил)-(3-бромтиофен-2-ил)метанона (500 мг, 1,06 ммоль, пример 1C), гидразона бензофенона (276 мг, 1,41 ммоль), ацетата палладия (II) (13,4 мг, 0,06 ммоль), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцена (57,5 мг, 0,104), карбоната цезия (570 мг, 1,75 ммоль) и толуола (10 мл) в атмосфере азота перемешивают при 90C в течение 15 часов. Темную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют этилацетатом, фильтруют и нерастворенные частицы промывают этилацетатом. Объединенные фильтраты и продукты промывания промывают по очереди водой и солевым раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении до состояния желтой маслянистой жидкости. Сырой продукт хроматографируют на кремнеземе и элюируют 80% смесью дихлорметана/гептана, чтобы получить [3-(N'-бензогидрилиден-гидразино)-тиофен-2-ил]-(1-бензилоксиметил-1H-бензоимидазол-2-ил)метанон в виде желто-оранжевого порошка: ТСХ Rf 0,30 (кремнезем, 80% дихлорметан/гептан); ЖХ/МС: (M+H 543,1, R=4,68 мин); H ЯМР [(CD)SO), 300 МГц]: δ 11,64 (с, 1H), 8,08 (д, 1H, 5,5 Гц), 7,84-7,13 (м, 20 H), 6,00 (с, 2H), 4,46 (с, 2H).
o
1
T
3
2
Смесь [3-(N'-бензогидрилиденгидразино)тиофен-2-ил]-(1-бензилоксиметил-1H-бензоимидазол-2-ил)метанона (300 мг, 0,553 ммоль, пример 1D), концентрированной соляной кислоты (4 мл) и этанола (12 мл) нагревают при 75C в течение 260 минут. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой (40 мл) и подщелачивают добавлением 5%-ного водного раствора карбоната кальция. Смесь экстрагируют этилацетатом и объединенные фильтраты и продукты промывки промывают по очереди водой и солевым раствором. Органический слой сушат над карбонатом калия и концентрируют при пониженном давлении до образования твердого коричневого вещества. Твердое вещество хроматографируют на кремнеземе. Ступенчатое градиентное элюирование 70%-ным этилацетатом/гептаном, 80%-ным этилацетатом/гептаном и 90%-ным этилацетатом/гептаном дает оранжевое твердое вещество. Растирание с этилацетатом/гептаном дает 2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензоимидазол в виде бежевого порошка: ТСХ Rf 0,28 (кремнезем, 75% этилацетат/гептан); ЖХ/МС: (M+H 241,0, R=2,15 мин); H ЯМР [(CD)SO), 300 МГц]: δ 13,56 (с, 1H), 12,94 (2, 1Н), 7,78 (д, 1H, 5,3 Гц), 7,69 (д, 1H, 7,3 Гц), 7,48 (д, 1H, 7,0 Гц), 7,22-7,15 (м, 3H).
Пример 2
6-Метокси-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензоимидазол
Пример 2A
T
T
К раствору 5-метоксибензоимидазола (6,18 г, 41,7 ммоль) в диметилформамиде (60 мл) в атмосфере азота добавляют гидрид натрия (1,84 г 60% дисперсия в масле, 46,0 ммоль) двумя порциями и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. Через 0,5 часа добавляют раствор бензилхлорметилового эфира (7,83 г, 50 ммоль) в диметилформамиде (40 мл) по каплям в течение 15 минут и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в воду (500 мл) и трижды экстрагируют этилацетатом (150 мл). Объединенные экстракты промывают последовательно водой и солевым раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении до получения желтой маслянистой жидкости. Маслянистую жидкость хроматографируют на кремнеземе. Ступенчатое градиентное элюирование этилацетатом, 5%-ным метанолом в этилацетате и 10%-ным метанолом в этилацетате дает 3,02 г (27%) 1-бензилоксиметил-6-метокси-1Н-бензоимидазола в виде воскообразного твердого вещества: ТСХ Rf 0,23 основной (кремнезем, этилацетат); ЖХ/МС: (M+H 269,1, R=2,49 мин) и 3,83 г (34%) 1-бензилоксиметил-5-метокси-1H-бензоимидазола в виде маслянистой жидкости: ТСХ Rf 0,15 основной (кремнезем, этилацетат); ЖХ/МС: (M+H 269,1 R=2,34 мин).
Пример 2B
o
o
При перемешивании к раствору 1-бензилоксиметил-6-метокси-1Н-бензоимидазола (1,00 г, 3,72 ммоль, пример 2А) в безводном тетрагидрофуране (15 мл) при -78C в атмосфере азота добавляют н-бутиллитий (1,80 мл 2,5 М раствора в гексане, 4,5 ммоль) в течение 8 минут и получающийся в результате желтый раствор перемешивают при -78C. Через 25 минут раствор метоксиметиламида 3-бромтиофен-2-карбоновой кислоты (1,03 г, 4,12 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляют в течение 20 минут в реакционную смесь при
o
1
T
3
2
-78C. Реакционная смесь постепенно нагревается до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь выливают в 10%-ный водный раствор хлорида аммония (75 мл) и смесь дважды экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой последовательно промывают водой и солевым раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении до получения желтой маслянистой жидкости. Сырой продукт хроматографируют на кремнеземе и элюируют 30%-ным этилацетатом/гептаном и затем 40%-ным этилацетатом/гептаном, чтобы получить воскообразное вещество. Растирание с 25%-ным этилацетатом/гептаном дает 546 мг (32%) (1-бензилоксиметил-6-метокси-1H-бензоимидазол-2-ил)-(3-бромтиофен-2-ил)метанона в виде порошка: ТСХ Rf 0,43 (кремнезем, 40% этилацетат/гептан); ЖХ/МС: (M+H 457, R=3,85 минут); H ЯМР [(CD)SO), 300 МГц]: δ 8,14 (д, 5,2 Гц, 1H), 7,76 (д, 9,0 Гц, 1H), 7,36 (д, 5,0 Гц, 1H), 7,29-7,20 (м, 6H), 7,04 (дд, 2,5, 9,0 Гц, 1H), 6,13 (с, 2H), 4,59 (с, 2H), 3,87 (с, 3H).
Пример 2C
o
T
Смесь (1-бензилоксиметил-6-метокси-1H-бензоимидазол-2-ил)-(3-бромтиофен-2-ил)метанона (680 мг, 1,49 ммоль, пример 2B), гидразона бензофенона (408 мг, 2,08 ммоль), ацетата палладия (II) (17,0 мг, 0,05 ммоль), 1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцена (82,0 мг, 0,148 ммоль), карбоната цезия (775 мг, 2,38 ммоль) и толуола (15 мл) в атмосфере азота перемешивают при 90C в течение 20 часов. Темную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют этилацетатом (25 мл), фильтруют и нерастворенные частицы промывают этилацетатом (25 мл). Фильтрат последовательно промывают водой и солевым раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении, чтобы получить черное вязкое вещество. Сырой продукт хроматографируют на кремнеземе, элюируют дихлорметаном, что дает 605 мг (70%) [3-(N'-бензогидрилиденгидразино)-тиофен-2-ил]-(1-бензилоксиметил-6-метокси-1H-бензоимидазол-2-ил)метанон в виде хрупкой красной пены: ТСХ Rf 0,27 (кремнезем, дихлорметан); ЖХ/МС: M+H 573,2, R=4,62 минуты.
o
1
T
3
2
5
Смесь [3-(N'-бензогидрилиденгидразино)-тиофен-2-ил]-(1-бензилоксиметил-6-метокси-1H-бензоимидазол-2-ил)метанона (300 мг, 0,553 ммоль, пример 2С), концентрированной соляной кислоты (4 мл) и этанола (12 мл) нагревают при 75C при перемешивании в течении 260 минут. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой (40 мл) и подщелачивают добавлением 5%-ного водного раствора карбоната калия. Смесь экстрагируют этилацетатом и объединенные экстракты последовательно промывают водой и солевым раствором. Органический слой сушат в присутствии карбоната калия и концентрируют при пониженном давлении, в результате чего получают коричневое твердое вещество. Порошок хроматографируют на кремнеземе. Ступенчатое градиентное элюирование 70%-ным этилацетатом в гептане, 80%-ным этилацетатом в гептане и 90%-ным этилацетатом в гептане дает оранжевое твердое вещество. Растирание с этилацетатом в гептане дает 6-метокси-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензоимидазол в виде бежевого порошка: ТСХ Rf 0,28 (кремнезем, 75% этилацетат в гептане); ЖХ/МС: M+H 241,0, R=2,15 мин; H ЯМР [(CD)SO), 300 МГц]: наблюдаются два вещества (около 60:40), предположительно медленно обменивающиеся таутомеры имидазола с химическими сдвигами разрешенных линий: основных (дополнительных); δ 13,48 (13,51) шир. с (1H; NH бензимидазола), 12,79 шир. с (1H; NH пиразола), 7,77 д (1H, J=5 Гц; H-α тиофена), 7,57 (7,35) д (1H, J=8,5 Гц; H-7 бензимидазола), 7,20 д (1H, J=5 Гц; H-β тиофена), 6,96 (7,25) д (1H, J=2 Гц; H-4 бензимидазола), 6,82 м (1H; H-6 бензимидазола), 3,80 (3,32) с (3H; метокси). Химические сдвиги определены относительно внутреннего стандарта, диметилсульфоксида-D (δ 2,50).
Пример 3
3-(6-Метокси-1H-бензимидазол-2-ил)-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразол
T
Данное соединение (ЖХ/МС: M+H 321,07, R=2,47 мин) получают с использованием методов, сходных с описанными в примере 2, используя метоксиметиламид 3-бромо-бензотиофен-2-карбоновой кислоты
вместо метоксиметиламида 3-бром-тиофен-2-карбоновой кислоты в стадии сочетания в примере 2В.
Пример 4
6-(3-Пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензимидазол
T
Данное соединение (ЖХ/МС: M+H 382,1, R=2,02 мин) получают с использованием методов, сходных с описанными в примере 2, используя 6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензимидазол
вместо 5-метоксибензимидазол в примере 2А.
Пример 5
5-(3-Пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)индол
Стадия 1. Пример 5A
T
К раствору 1H-тиено[3,2-c]пиразола (160 мг, 1,29 ммоль) и иода (490 мг, 1,94 ммоль) в диметилформамиде (5 мл) добавляют гидроксид калия (220 мг, 3,87 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем добавляют раствор бисульфита натрия (200 мг) в воде (2 мл). Смесь дважды экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные органические слои сушат над сульфатом магния и концентрируют. Остаток хроматографируют (н-гептан-этилацетат, 90:100), чтобы получить 195 мг (60%) 3-иодо-1H-тиено[3,2-c]пиразола в виде бежевого порошка. ЖХ/МС: R= 2,50 мин, 250,90 м/е (M+1).
Стадия 2. Пример 5B
T
К суспензии 3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразола (195 мг, 0,78 ммоль, пример 5A) в дихлорметане (5 мл) добавляют триэтиламин (110 мл, 0,86 ммоль) и затем добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (205 мг, 0,94 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (20 мг, 0,16 ммоль). Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем его разбавляют дихлорметаном и поочередно промывают водой и солевым раствором. Органический слой сушат над сульфатом магния и концентрируют. Остаток хроматографируют на силикагеле (н-гептан-этилацетат, 90:10 как элюент), чтобы получить 220 мг (81%) трет-бутилового эфира 3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты в виде желтого порошка. ЖХ/МС: R=3,45 мин, 372,94 м/е (M+Na).
Стадия 3. Пример 5C
T
К раствору трет-бутилового эфира 3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты (200 мг, 0,57 ммоль, пример 5B) и бис-(дифенилфосфиноферроцен)дихлорпалладия (комплекс с дихлорметаном 1:1, 21 мг, 0,03 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) добавляют 5-(трет-бутилдиметилсиланокси)-1-(трет-бутоксикарбонил)-1Н-индол-2-борную кислоту (335 мг, 0,86 ммоль), приготовленную, как описано в примерах 4-6 из публикации международной патентной заявки № WO 02/32861, после чего добавляют раствор карбоната цезия (741 мг, 2,28 ммоль) в воде (2 мл). Смесь перемешивается с обратным холодильником в течение 15 минут. Затем ее разбавляют этилацетатом и промывают водой и солевым раствором. Органический слой сушат над сульфатом магния и концентрируют. Остаток хроматографируют на силикагеле (н-гептан-этилацетат, 95:05 как элюент), чтобы получить 200 мг (61%) трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутилдиметилсиланокси)-индол-1-карбоновой кислоты в виде белой пены. ЖХ/МС: R=4,29 мин, 570,1 м/е.
Стадия 4. Пример 5D
T
К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутилдиметилсиланокси)-индол-1-карбоновой кислоты (320 мг, 0,56 ммоль, Пример 5C) в тетрагидрофуране (5 мл) при 0°C добавляют тетрабутиламмоний фторид (1,0 M в тетрагидрофуране, 0,67 мл, 0,67 ммоль). Раствор перемешивают при 0°C в течение 30 минут. Затем удаляют растворитель и остаток хроматографируют на силикагеле (дихлорметан-этилацетат, от 95:05 до 90:10 в качестве элюента), чтобы получить 205 мг (80%) трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты в виде оранжевой пены. ЖХ/МС: R=3,74 мин, 456,0 м/е.
Стадия 5. Пример 5E
T
К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты (195 мг, 0,43 ммоль, пример 5D) в 1,3-дибромопропане (2 мл) добавляют карбонат цезия (350 мг, 1,08 ммоль). Образующуюся суспензию нагревают до 100°C в течение 30 минут. Затем ее фильтруют и концентрируют. Остаток хроматографируют на силикагеле (этилацетат-н-гептан, от 05:95 до 20:80 в качестве элюента), чтобы получить 103 мг (42%) трет-бутилового эфира 5-(3-бромпропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты в виде желтой стеклообразной массы. ЖХ/МС: R=4,38 минуты, 576,11 м/е.
Стадия 6. 5-(3-Пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)индол
T
3
2
2
1
К раствору трет-бутилового эфира 5-(3-бромпропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты (100 мг, 0,17 ммоль, пример 5E) в ацетонитриле (4 мл) добавляют пиперидин (33 мкл, 0,34 ммоль) и ДИЭА на полимере (диизопропилэтиламин, 3,86 ммоль/г, 45 мг, 0,34 ммоль). Смесь нагревают до 70°C в течение 2 часов. ДИЭА на полимере пропускается через фильтр, и растворитель удаляется при пониженном давлении. Остаток растворяют в дихлорметане (ДХМ) (1 мл). Добавляют анизол (0,4 мл), затем добавляют трифторуксусную кислоту (ТФУ) (0,5 мл). Ярко-оранжевый раствор перемешивают при 50°C в течение 1 часа и затем переносят непосредственно в ионнообменный картридж (VARIAN, mega bond elut SCX, 5 г), промывают метанолом и элюируют 1,0 М аммиаком в метаноле. Нужные фракции собирают и концентрируют. Остаток хроматографируют (н-гептан-этилацетат, от 95:05 до 90:10 в качестве элюента), чтобы получить 44 мг неочищенного продукта. Растирание бежевой массы в дихлорметане дает 5-(3-пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол [12 мг, 18%, пример 5] в виде белого порошка. ЖХ/МС: R=2,20 мин, 381,18 м/е. H ЯМР [(CD)SO), 300 МГц]: δ 13,25 (шир с, 1H) и 11,39 (шир с, 1H) [NH протоны индола и пиразола], 7,74 (д, J=5 Гц, 1H) и 7,19 (д, J=5 Гц, 1H) [протоны тиофена], 7,29 (шир д, J=8,5 Гц, 1H) [H-7 индола], 7,07 (д, J=2 Гц, 1H) [H-4 индола], 6,74 (дд, J=8,5, 2 Гц, 1H) [H-6 индола], 6,56 (шир д, J=1,5 Гц, 1H) [H-3 индола], 3,96 (т, J=6 Гц, 2H) [-OCH-], 2,50 (м, 6H), 1,91 (м, 2H), 1,53 (м, 4H), 1,40 (м, 3H).
Приведенные ниже примеры 6-22 подготовлены в соответствии с методами, подобными описанным в предыдущих примерах.
Пример 6
1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}пиперидин-4-ол
T
ЖХ/МС: R=2,17 мин, наблюдаемый M+H=397,18
Пример 7
6-(3-Пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол
T
ЖХ/МС: R=2,35 мин, наблюдаемый M+H=381,18
Пример 8
1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}пиперидин-3-ол
T
ЖХ/МС: R=2,45 мин, наблюдаемый M+H=397,4
Пример 9
(1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}пиперидин-3-ил)метанол
T
ЖХ/МС: R=2,49 мин, наблюдаемый M+H=411,2
Пример 10
6-[3-(4-Этилпиперазин-1-ил)-пропокси]-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол
T
ЖХ/МС: R=2,27 мин, наблюдаемый M+H=410,4
Пример 11
Диметил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}амин
T
ЖХ/МС: R=2,23 мин, наблюдаемый M+H=341,16
Пример 12
Диэтил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}амин
T
ЖХ/МС: R=2,35 мин, наблюдаемый M+H=369,19
Пример 13
Диаллил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}амин
T
ЖХ/МС: R=2,48 мин, наблюдаемый M+H=393,14
Пример 14
1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}пирролидин-3-ол
T
ЖХ/МС: R=2,2 мин, наблюдаемый M+H=383,17
Пример 15
2-(Метил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]пропил}амино)-этанол
T
ЖХ/МС: R=2,13 минут, наблюдаемый M+H=371,25
Пример 16
1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]пропил}пиперидин-4-ол
T
ЖХ/МС: R=2,03 мин, наблюдаемый M+H=397,17
Пример 17
1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]пропил}пиперидин-3-ол
T
ЖХ/МС: R=1,87 мин, наблюдаемый M+H=397,2
Пример 18
(1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]пропил}пиперидин-3-ил)метанол
T
ЖХ/МС: R=2,07 мин, наблюдаемый M+H=411,18
Пример 19
1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]пропил}пирролидин-3-ол
T
ЖХ/МС: R=2,48 мин, наблюдаемый M+H=383,2
Пример 20
3-(5-(3-Пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил)-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразол гидрохлорид
T
ЖХ/МС: R=2,49 мин, наблюдаемый M+H=432,18
Пример 21
(2-Тиофен-2-илэтил)амид 2-{1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты
T
ЖХ/МС: R=3,22 мин, наблюдаемый M+H=393,2
Пример 22
1-{3-[2-(5-Диметиламиноэтил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1Н-индол-6-илокси]пропил}пиперидин-4-ол
T
ЖХ/МС: R=1,87 мин, наблюдаемый M+H=454
Пример 23
[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]метанол
2
3
2
2
3
3
2
1
H
H
H
Стадия 1. Смесь трет-бутилового эфира 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-борной 1-карбоновой кислоты [3,82 г, 9,42 ммоль, промежуточное соединение (8), приготовленный, как описано в примере 1-4 публикации международной патентной заявки № WO 02/32861], трет-бутилового эфира 3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [4,0 г, 11,42 ммоль, пример 5B выше], тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (544 мг, 0,470 ммоль), карбоната калия (2 M водный раствор, 12 мл) в тетрагидрофуране (60 мл) продувается N в течение 10 минут, а затем нагревается до 55-60°C в течение 7,5 часов. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (50 мл) и промывают водой (20 мл). Водный слой подвергается обратной экстракции этилацетатом (50 мл). Объединенные этилацетатные фазы сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 35 г колонке силикагеля (5-30% градиент этилацетат в гептане), чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-индол-1-карбоновой кислоты [3,8 г, 69%, промежуточное соединение (9)]; H ЯМР[(CD)SO)]: δ 8,08 (2H, м), 7,64 (1H, с), 7,38 (2H, м), 7,14 (1H, с), 4,81 (2H, с, -OC), 1,65 (9H, с), 1,32 (9H, с), 0,92 (9H, с, Si(C)), 0,10 (6H, с, Si(C)); ЖХ/МС: 584 (M+H).
1
3
2
Стадия 2. Раствор трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-индол-1-карбоновой кислоты [3,8 г, 6,51 ммоль, промежуточное соединение (9)]) в безводном тетрагидрофуране (40 мл) охлаждают до 0°C. К раствору по каплям добавляют фторид тетрабутиламмония (1 М в тетрагидрофуране, 10 мл). Перемешивают при 0°C в течение 20 минут и затем при комнатной температуре в течение 20 минут. Добавляют воду (20 мл) и раствор трижды экстрагируют этилацетатом (30 мл). Объединенные этилацетатные фазы промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 35 г колонке силикагеля (10-50% этилацетата в гептане) и получают трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-гидроксиметилиндол-1-карбоновой кислоты. [2,63 г, 85%, промежуточное соединение (10)] в виде белого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 8,05 (2H, м), 7,62 (1H, с), 7,38 (2H, м), 7,02 (1H, с), 5,21 (1H, т), 4,6 (2H, д), 1,64 (9H, с), 1,25 (9H, с); ЖХ/МС: 470 (M+H).
1
3
2
2
Стадия 3. К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-гидроксиметилиндол-1-карбоновой кислоты [200 мг, 0,426 ммоль, промежуточное соединение (10)] в тетрагидрофуране (5 мл) добавляют KOH (1M водный раствор, 2,5 мл) и нагревают до 60°C в течение 20 часов. Затем удаляют растворитель и остаток растворяют в воде. Водный слой нейтрализуют 3N соляной кислотой и дважды экстрагируют этилацетатом (20 мл). Объединенные этилацетатные фазы дважды промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией с использованием 10 г колонки с силикагелем (50% этилацетата в гептане, затем этилацетат) дает 2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-метанол (84 мг, 74%, пример 23) в виде светло-желтого сухого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,22 (1H, с), 11,43 (1H, с), 7,77 (1H), 7,56 (1H), 7,38 (1H), 7,20 (1H), 7,04 (1H), 6,61 (1H), 5,02 (1H, OH), 4,57 (2H, -CHOH); ЖХ/МС: 270 (M + H).
Пример 24
Фенил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]метанол
2
2
3
3
3
3
2
1
Стадия 1. К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-гидроксиметилиндол-1-карбоновой кислоты [373 мг, 0,794 ммоль, промежуточное соединение (10)] в дихлорметане (20 мл) добавляют реагент Десс-Мартина (407 мг, 0,959 ммоль). Перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем добавляют воду (10 мл) и перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (30 мл) и дважды промывают смесью 10% NaSO/насыщенного NaHCO (4 мл) раствора. Этилацетатную фазу промывают водой, NaHCO, солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 10 г колонке силикагеля, элюируя 30-40% этилацетатным градиентом, чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-формилиндол-1-карбоновой кислоты [300 мг, 81%, промежуточное соединение (11)] в виде белого твердого вещества. H ЯМР [(CD)SO)]: δ 10,079 (1H, с, CHO), 8,323 (1H, с), 8,318 (1H, д), 8,017 (1H, с), 7,978 (1H, д), 7,391 (1H, д), 7,345 (1H, с), 1,660 (9H, с), 1,341 (9H, с); данные ТСХ: Rf=0,37 (30% этилацетат в гептане).
Стадия 2. К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-формилиндол-1-карбоновой кислоты [100 мг, 0,214 ммоль, промежуточное соединение (11)] в безводном тетрагидрофуране (5 мл) добавляют фенилмагнийбромид (1 М в тетрагидрофуране, 1 мл) при -78°C. Реакционную смесь перемешивают при той же температуре в течение 1 часа и затем гасят добавлением воды при 0°C (4 мл). Реакционную смесь трижды экстрагируют этилацетатом (30 мл). Объединенные этилацетатные фазы промывают солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и фильтруют. Упаривание растворителя в вакууме дает трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(гидроксифенилметил)-индол-1-карбоновой кислоты [99 мг, 85%, промежуточное соединение (12)] в виде белой пены; ЖХ/МС: (M+H, 546).
Стадия 3. Смесь трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(гидроксифенилметил)-индол-1-карбоновой кислоты [99 мг, 0,181 ммоль, промежуточное соединение (12)] в тетрагидрофуране (2 мл) и КОН (1M водный раствор, 1 мл) перемешивают при 60°C в атмосфере азота в течение 2 часов. Растворитель удаляют под вакуумом. К полученной суспензии добавляют воду (2 мл) и доводят рН до 6 добавлением 2N соляной кислоты. Продукт трижды экстрагируют дихлорметаном (20 мл) и объединенные экстракты промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 10 г колонке силикагеля, элюируя 50-100% градиентом этилацетата в гептане, чтобы получить фенил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]метанол [56 мг, 89%, пример 24] в виде беловатого твердого вещества; ЖХ/МС: 346 (M+H), 328 [(M-18)+H]; данные ТСХ: Rf=0,14 (50% этилацетата в гептане).
Пример 25
Фенил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]метанон
2
2
3
3
3
Стадия 1. К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(гидроксифенилметил)-индол-1-карбоновой кислоты [640 мг, 1,17 ммоль, промежуточное соединение (12)] в дихлорметане (25 мл) добавляют реагент Десс-Мартина (677 мг, 1,69 ммоль) и перемешивают при комнатной температуре. Через 30 минут добавляют воду (5 мл) и перемешивают в течение 10 минут. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (50 мл) и дважды промывают смесью 10% NaSO/насыщенного NaHCO (5 мл), NaHCO(10 мл), воды (10 мл), соляного раствора и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 35 г колонке силикагеля, элюируя с 30% этилацетатом в гептане, чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-бензоил-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [440 мг, 69%, промежуточное соединение (13)] в виде белого твердого вещества, ЖХ/МС: 544 (M+H).
o
1
3
2
Стадия 2. Смесь трет-бутилового эфира 5-бензоил-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [122 мг, 0,224 ммоль, промежуточное соединение (13)] в тетрагидрофуране (9 мл) и 1M KOH (водный раствор, 2 мл) нагревают до 60C на масляной бане в течение ночи. Удаляют растворитель и добавляют воду (5 мл). Водный слой нейтрализуют 3N соляной кислотой и трижды экстрагируют этилацетатом (20 мл). Объединенные этилацетатные фазы промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 10 г колонке силикагеля, элюируя 50-100% этилацетатным градиентом в гептане, чтобы получить фенил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]метанон (58 мг, 75%, пример 25) в виде бледно-желтого твердого вещества. H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,38 (1H, с), 12,09 (1H, с), 8,05 (1H), 7,78 (8H, м), 7,23 (1H, д, J=5,2 Гц), 6,87 (1H); ЖХ/МС: 344 (M+H).
Пример 26
1-Фенил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]этанол
1
3
2
К раствору трет-бутилового эфира 5-бензоил-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (13)] в безводном тетрагидрофуране (5 мл) добавляют метилмагнийбромид (1М в тетрагидрофуране, 0,8 мл) при -78°C. Перемешивают в атмосфере азота в течение 30 минут. Добавляют еще 0,88 мл метилмагнийбромида и оставляют постепенно нагреваться до комнатной температуры. Наутро к раствору добавляют смесь воды и насыщенного хлорида аммония (2 мл) при 0°C и дважды экстрагируют смесь этилацетатом (25 мл). Объединенные фазы этилацетата промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 10 г силикагеле, элюируя 30-50% градиентом этилацетата в гептане, чтобы получить 1-фенил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]этанол (56 мг, 71%, пример 26) в виде бежевого твердого вещества; ЖХ/МС: 360 (M+H); H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,20 (1H, с), 11,45 (1H, с), 7,73 (1H, д), 7,62 (1H, с), 7,43 (2H, м), 7,25 (6H, м), 6,59 (1H, с), 5,53 (1H, с), 1,86 (3H, с).
Пример 27
(S)-1-Фенил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]этанол
Рацемический 1-фенил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]этанол (45 мг, пример 26) очищается хиральной ВЭЖХ (колонка: chiralcel внеш. диам. 4,6 мм ID × 250 мм, 10 микрон. Подвижная фаза: 55% этанола с 1 ммоль трифторацетата аммония и 45% гептана с 1 ммоль трифторацетата аммония) и необходимые фракции элюента концентрируют и сублимируют, чтобы получить один из энантиомеров 1-фенил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]этанол (11 мг) в виде белого твердого остатка; время удерживания хиральной ВЭЖХ 10,96 мин при 215 нм.
Пример 28
1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-он
Стадия 1. Выполняя последовательность операций, аналогичную описанной на стадии 2 из примера 24, но заменяя фенилмагнийбромид этилмагнийбромидом, получают трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(1-гидроксипропил)-индол-1-карбоновой кислоты [73%, промежуточное соединение (14)] в виде белого твердого вещества
Стадия 2. Выполняя последовательность операций, аналогичную описанной на стадии 1 из примера 25, но заменяя трет-бутиловым эфиром 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(1-гидроксипропил)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (14)] трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(гидроксифенилметил)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (12)], получают трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-пропионилиндол-1-карбоновой кислоты [73%, промежуточное соединение (15)] в виде белого твердого вещества.
1
3
2
2
3
3
H
H
Стадия 3. Выполняя последовательность операций, аналогичную описанной на стадии 2 из примера 25, но заменяя трет-бутиловым эфиром 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-пропионилиндол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (15)] трет-бутиловый эфир 5-бензоил-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (13)], получают 1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-он [94%, пример 28], выделяемый в виде белого твердого остатка; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,34 (1H, с), 11,98 (1H, с), 8,31 (1H, с), 7,77 (2H, м), 7,47 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,21 (1H, д, J=5,2 Гц), 6,79 (1H, с), 3,07 (2H, кв., -CCH), 1,13 (3H, т, -C); ЖХ/МС: 296 (М + H).
Пример 29
1-Циклогексил-1-[2-(1H-тиено [3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол
Раствор трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-5-пропионилиндол-1-карбоновой кислоты [400 мг, 0,807 ммоль, промежуточное соединение (15)] в безводном тетрагидрофуране (20 мл) охлаждают до -78°C в токе азота. К нему прибавляют циклогексилмагнийбромид (2M в тетрагидрофуране, 1 мл). После перемешивания в течение 20 минут охлаждающую баню убирают и в течение 20 минут поднимают температуру реакции до комнатной. Реакционная смесь охлаждается до 0°C и гасится добавлением насыщенного раствора хлорида аммония (6 мл), а затем водой (20 мл). Водный слой трижды экстрагируют этилацетатом (40 мл). Объединенные экстракты промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия и фильруют через колонку с 5 г силикагеля и промывают через колонку с этилацетатом (20 мл). Фильтрат удаляют в вакууме, чтобы получить спирт (520 мг) в виде оранжевой пены.
1
3
2
Оранжевая пена (520 мг, 0,862 ммоль) растворяется в тетрагидрофуране (15 мл) и обрабатывается 1M KOH (водный, 15 мл), затем выдерживается в течение ночи при температуре 70°C на масляной бане. Растворитель удаляют, добавляют воду и нейтрализуют 3N соляной кислотой. Продукт трижды экстрагируют этилацетатом (20 мл). Объединенные фазы этилацетата промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией (10 г колонка силикагеля, 50% этилацетат/гептан) давала 1-циклогексил-1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол (150 мг, 46%, пример 29) в виде кремового порошка; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,21 (1H, с), 11,41 (1H, с), 7,75 (1H, д), 7,53 (1H), 7,29 (1H), 7,20 (1H), 7,11 (1H), 6,59 (1H), 4,21 (1H, OH), 1,91 (3H, шир. м), 1,78 (1H, шир., д), 1,68 (3H, шир. т), 1,39 (1H, шир. д), 1,25-0,87 (5H, м), 0,63 (3H, т); ЖХ/МС: 380 (M+H).
Пример 30
1-Циклогексил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол, энантиомер 1
1
3
2
Рацемическая смесь 1-циклогексил-1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ола (145 мг, пример 29) очищена хиральной ВЭЖХ (колонка: chiralcel OJ. Подвижная фаза: 40% гептан/60% этанол/0,05% ДЭА), и нужные фракции элюента концентрировались и лиофилизировались, чтобы получить хиральный спирт 1-циклогексил-1-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол, энантиомер 1 [51 мг, пример 30] в виде белого порошка; хиральная ВЭЖХ время удерживания 12,57 минут при 215 нм; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,22 (1H, с), 11,39 (1H, с), 7,75 (1H, д, J=5 Гц), 7,53 (1H, с), 7,32 (1H, J=8,7 Гц), 7,20 (1H, д, J=5,2 Гц), 7,11 (1H, дд), 6,60 (1H, с), 4,21 (1H, с, OH), 1,87 (3H, шир. м), 1,71 (1H, шир. д), 1,59 (3H, шир. т), 1,18 (1H, шир. д), 1,18-0,87 (5H, м), 0,63 (3H, т); ЖХ/МС: 380 (M+H).
Пример 31
1-Пиридин-2-ил-1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол
1
3
2
К раствору 2-бромопиридина (224 мг, 1,42 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (2 мл) добавляется н-BuLi (1,6 М в гексане, 0,95 мл, 1,52 ммоль) при -78°C в токе азота. После перемешивания в течение 20 минут к смеси по каплям добавляют раствор 1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил)-пропан-1-она (140 мг, 0,473 ммоль, пример 28) в безводном тетрагидрофуране (4 мл). Через 30 минут охлаждающую баню убирают и продолжают перемешивать при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакцию останавливают добавлением насыщенного раствора хлорида аммония (4 мл), а затем водой (4 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (120 мл). Этилацетатную фазу промывают водой, солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией (10 г колонка силикагеля, 30-60%-ый градиент этилацетата в гептане) позволяет получить конечный продукт. Затем его растворяют в минимальном количестве метанола и растирают с водой, чтобы получить 1-пиридин-2-ил-1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол (171 мг, 31%, пример 31) в виде бежевого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,195 (1H, с), 11,417 (1H, с), 8,472 (1H, д), 7,742-7,661 (4H, м) 7,259-7,166 (4H, м), 6,59 (1H, с), 5,697 (1H, с, OH), 2,361 (2H, м), 0,785 (3H, т); ЖХ/МС: 375 (M+H).
Пример 32
2-[2-(1H-Тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол
1
3
2
К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-5-пропионилиндол-1-карбоновой кислоты [450 мг, 0,908 ммоль, промежуточное соединение (15)] в безводном тетрагидрофуране (25 мл), который охлажден до -78°C, в токе азота через шприц добавляют метилмагнийбромид (1M в тетрагидрофуране, 3 мл). После перемешивания в течение 30 минут охлаждающую баню убирают, и в течение 30 минут поднимают температуру реакции до комнатной. Реакционную смесь охлаждают до -78°C, затем добавляют еще 5 мл метилмагнийбромида. Через 30 минут охлаждающую баню убирают и доводят температуру реакционной смеси до комнатной. Спустя 4 часа, смесь гасят добавлением насыщенного раствора хлорида аммония (6 мл). После перемешивания в течение 10 минут добавляют воду (20 мл) и трижды экстрагируют этилацетатом (40 мл). Объединенные фазы этилацетата промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией (35 г колонка силикагеля, 1:1 этилацетат/гептан) давала 2-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол [148 мг, 52%, пример 32] в виде белого порошка; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,204 (1H, с), 11,402 (1H, с), 7,743 (1H, д), 7,595 (1H, с), 7,333-7,192 (3H, м), 6,598 (1H, с), 4,658 (1H, с, OH), 1,728 (2H, кв), 1,461 (3H, с), 0,702 (3H, т); ЖХ/МС: 312 (M+H).
Пример 33A и Пример 33B
(R)-2-[2-(1H-Тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол и (S)-2-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол
и
Пример 33A
Пример 33B
1
1
3
2
3
2
Рацемическую смесь 2-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ола [пример 32] очищают хиральной ВЭЖХ (Колонка: chiralcel OJ. Подвижная фаза: 40% гептан/60% этанол/0,05% ДЭА), и нужные фракции элюента концентрировали и лиофилизировали, чтобы получить изомеры (R)-2-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол и (S)-2-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-бутан-2-ол. Один изомер имеет время удерживания хиральной ВЭЖХ 11,52 минут при 254 нм; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,21 (1H, с), 11,40 (1H, с), 7,73 (1H, д, J=5,2 Гц), 7,58 (1H, с), 7,32 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,18 (2H, м), 6,59 (1H, с), 4,65 (1H, с), 1,73 (2H, кв), 1,44 (3H, с), 0,70 (3H, т); ЖХ/МС 312 (M+H)], а другой изомер имеет время удерживания хиральной ВЭЖХ 14,35 минут при 254 нм; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,23 (1H, с), 11,41 (1H, с), 7,75 (1H, д, J=5,2 Гц), 7,60 (1H, с), 7,34 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,20 (2H, м), 6,61 (1H, с), 4,67 (1H, с), 1,77 (2H, кв), 1,46 (3H, с), 0,72 (3H, т); ЖХ/МС 312 (M+H)].
Пример 34
1-(2-Пирролидин-1-илметилфенил)-1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол
1
3
2
К охлажденному (-40°C) раствору 1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-она (110 мг, 0,372 ммоль, пример 28) в безводном тетрагидрофуране (2 мл) добавляют (2-(1-пирролидинилметил)фенил)магнийбромид (0,25 М в тетрагидрофуране) в токе азота. Через 1 час охлаждающую баню удаляют и температуру реакционной смеси доводят до комнатной. После ночи выстаивания раствор гасят добавлением насыщенного раствора хлорида аммония (2 мл). Полученный осадок растворяют водой и трижды экстрагируют этилацетатом (2 мл). Объединенные экстракты промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией (10 колонка силикагеля, 1:1 этилацетат/гептан) давала 1-(2-пирролидин-1-илметилфенил)-1-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-пропан-1-ол (50 мг, пример 34) в виде белого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,22 (1H, с), 11,48 (1H, с), 8,73 (1H, с), 7,74 (2H, м), 7,45 (1H, с), 7,41 (1H, т), 7,39-7,25 (4H, м), 6,93 (1H, д), 6,59 (1H, с), 2,68 (1H, д), 2,45 (2H), 2,25 (4H), 2,08 (1H), 1,74 (4H, м), 0,75 (3H, т); ЖХ/МС: 457 (M+H).
Пример 35
1-Трет-бутиловый 5-метиловый эфир 3-(5-ацетил-1-трет-бутоксикарбонил-1Н-индол-2-ил)-тиено[3,2-с]пиразол-1,5-
дикарбоновой кислоты
Стадия 1. К раствору индол-5-карбоновой кислоты [10 г, 62,05 ммоль, промежуточное соединение (16)] в безводном тетрагидрофуране (1000 мл) по каплям добавляют метиллитий (1,6 M в диэтиловом эфире, 150 мл) в течение 60 минут. Полученный осадок перемешивают в течение 40 часов при комнатной температуре.
3
3
1
Реакционную смесь охлаждают до 0°C и гасят осторожным добавлением воды (5 мл) до остановки кипения. Растворитель удаляют в вакууме и суспензию разделяют между фазами дихлорметана (500 мл) и воды (100 мл). Слой дихлорметана промывают 1N соляной кислотой (20 мл), насыщенным NaHCO (20 мл), солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 110 г колонке силикагеля (30-50%-ный градиент этилацетата в гептане), чтобы получить 1-(1H-индол-5-ил)-этанон [5,0 г, 50,6%, промежуточное соединение (17)] в виде бесцветной маслянистой жидкости. При стоянии маслянистая жидкость твердеет; H ЯМР (CDCl): δ 8,846 (1H, шир. с), 8,356 (1H, с), 7,917 (1H, д), 7,449-7,297 (2H, м), 6,690 (1H), 2,713 (3H, с); ЖХ/МС: 160 (М+H).
1
3
Стадия 2. К раствору 1-(1H-индол-5-ил)-этанона [5 г, 31,41 ммоль, промежуточное соединение (17)] и 4-(диметиламино)пиридина (39,4 мг) в тетрагидрофуране (60 мл) по каплям добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (1M в тетрагидрофуране, 32 мл) при 0°C в течение 55 минут. Перемешивают 10 минут, затем добавляют воду (30 мл) и трижды экстрагируют продукт этилацетатом (50 мл). Объединенные фазы этилацетата промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 110 г колонке силикагеля (15-20%-ный градиент этилацетата в гептане), чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-ацетилиндол-1-карбоновой кислоты [1,28 г, 81%, промежуточное соединение (18)] в виде бесцветной маслянистой жидкости. При стоянии маслянистая жидкость твердеет; H ЯМР (CDCl): δ 8,201 (2H), 7,966 (1H), 7,657 (1H), 6,661 (1H), 2,672 (3H), 1,701 (9H); ЖХ/МС: 260 (M+H).
2
3
3
1
Стадия 3. Смесь трет-бутилового эфира 5-ацетилиндол-1-карбоновой кислоты [4,85 г, 18,70 ммоль, промежуточное соединение (18)], этиленгликоля (5,0 г), п-толуолсульфоната пиридиния (100 мг) в бензоле (35 мл) подвергают обратной перегонке под Nв течение 24 часов в ловушке Дина-Старка. К образующейся темной реакционной смеси добавляют твердый NaHCO (2,5 г). После перемешивания в течение 15 минут смесь фильтруют под вакуумом и трижды промывают этилацетатом (30 мл). Фильтрат дважды промывают водой (10 мл) и сушат над сульфатом натрия. Неочищенный продукт хроматографируют на 10 г колонке силикагеля (гептан, затем 10% этилацетата в гептане), чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-(2-метил-[1,3]диоксолан-2-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (19)] в виде бесцветной маслянистой жидкости; H ЯМР (CDCl): δ 8,128 (1H, д), 7,706 (1H, с), 7,625 (1H), 7,475 (1H, дд), 6,591 (1H, д), 4,106 (2H, м), 3,843 (2H, м), 1,742 (3H, с), 1,703 (9H, с); ЖХ/МС: 304 (М+H).
2
3
1
Стадия 4. К раствору трет-бутилового эфира 5-(2-метил-[1,3]диоксолан-2-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [4,96 г, 16,35 ммоль, промежуточное соединение (19)] в безводном тетрагидрофуране (20 мл) добавляют триизопропилборат (4,61 г, 24,51 ммоль) и охлаждают до 0°C под N. К смеси по каплям добавляют диизопропиламид лития (1,8 М в смеси гептан/тетрагидрофуран/этилбензол, 14 мл) при 0°C в течение 40 минут. Еще через 35 минут реакцию гасят добавлением водной 2N соляной кислоты при 0°C. Выпавший белый осадок медленно подкисляют 3N соляной кислотой до pH 3. Смесь превращается в раствор, который дважды экстрагируют этилацетатом (100 мл). Объединенные фазы этилацетата сушат над сульфатом натрия и фильтруют. Твердый сырой продукт растирают с ацетонитрилом и водой, чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-ацетил-2-метилиндол-1-карбоновой кислоты (4,76 г, 96%, промежуточное соединение (20)] в виде светло-желтого твердого остатка; H ЯМР (CDCl): δ 8,30 (2,67, 3H), 8,18 (1H, д), 7,90 (1H, д), 6,78 (1H, с), 2,61 (3H, с), 1,62 (9H, с); ЖХ/МС: ИЭР + 304 (М+H).
В альтернативном варианте сырой продукт можно очищать хроматографией на силикагеле с элюированием этилацетатом в гептане.
2
Стадия 5. В аппарат Смита (емкостью 10-20 мл) помещают трет-бутиловый эфир 5-ацетил-2-метилиндол-1-карбоновой кислоты (436 мг, 1,44 ммоль, промежуточное соединение (20)], 1-трет-бутиловый 5-метиловый эфир 3-иодтиено[3,2-с]пиразол-1,5-дикарбоновой кислоты [392 мг, 0,960 ммоль, промежуточное соединение (21)], аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпалладия с дихлорметаном (78 мг, 0,0955 ммоль), карбонат цезия (938 мг, 2,88 ммоль) и смесь 1,4-диоксан/вода(10:2 мл). Реакционная трубка заполняется N и герметизируется с помощью укупорочного устройства. Реакционная смесь нагревается до 90°C в микроволновой печи (Personal chemistry optimizer) в течение 10 минут. Воду отбирают пипеткой и добавляют твердый сульфат натрия. Органическую фазу напрямую загружают в 10 г колонку силикагеля и хроматографируют на 35 г колонке силикагеля (20-30%-ный градиент этилацетата в гептане), чтобы получить 1-трет-бутиловый 5-метиловый эфир 3-(5-ацетил-1-трет-бутоксикарбонил-1Н-индол-2-ил)-тиено[3,2-с]пиразол-1,5-
1
3
2
дикарбоновой кислоты (230 мг, пример 35) в виде белого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 8,388 (1H, с), 8,199 (1H), 8,055 (1H), 7,901 (1H, с), 7,339 (1H, с), 3,914 (3H, с), 2,662 (3H, с), 1,671 (9H, с), 1,365 (9H, с); ЖХ/МС: 540 (M+H).
Промежуточное соединение (21)
1-Трет-бутиловый 5-метиловый эфир 3-иодтиено[3,2-с]пиразол-1,5-дикарбоновой кислоты, используемый на стадии 5 из примера 35, был получен следующим образом:
Стадия 1. 5-Метил-4-нитротиофен-2-карбоновая кислота получена согласно Snider et al. (H. R. Snider and L. A. Carpino, J. F. Zack, Jr., J. F. Mills, J. Am. Chem. Soc., 1951, 79, 2556-2559) из имеющейся в продаже 5-метилтиофен-2-карбоновой кислоты и этерифицируется в соответствии с известными методами (P. Cogolli, F. Maiolo, L. Testaferri, M. Tiecco, M. Tingoli, J.Chem. Soc., Perkin I, 1980, 1331-1335; V.M. Colburn, B. Iddon, H. Shuschitzky, J. Chem. Soc., Perkin I, 1977, 2436-2441), с тем чтобы получить метиловый эфир 5-метил-4-нитротиофен-2-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (23)].
Стадия 2. Метиловый эфир 5-метил-4-нитротиофен-2-карбоновой кислоты [15,09 г, 75,0 мМ, промежуточное соединение (23)] растворяется в этилацетате (200 мл), к полученному раствору добавляется 10% палладия на активированном угле (1,03 г) и смесь встряхивается под давлением водорода 50 фунтов на кв. дюйм. Катализатор удаляют фильтрацией и растворитель удаляют, выделяя метиловый эфир 4-амино-5-метилтиофен-2-карбоновой кислоты [12,82 г, 99,8%, промежуточное соединение (24)] в виде желтого твердого остатка; МС 171,9 (100%, М+1).
Стадия 3. Перемешиваемую на магнитной мешалке смесь ацетата калия (4,52 г, 46,1 мМ) в толуоле (100 мл), содержащую метиловый эфир 4-амино-5-метилтиофен-2-карбоновой кислоты [12,8 г, 74,7 мМ, промежуточное соединение (24)], нагревают для растворения амина. К смеси добавляют уксусный ангидрид (13,8 мл, 124,9 мМ) и нагревают ее на масляной бане. На протяжении 30 минут добавляют изоамилнитрит (9,73 мл, 72,4 мМ). Нагревание при 93°C продолжают в течение ночи. Охлажденную смесь разбавляют этилацетом (100 мл), фильтруют и фильтрат концентрируют до получения черного порошка, который очищают хроматографией, элюируя смесями гептан-25% этилацетата, гептан-35% этилацетата, гептан-40% этилацетата, гептан-50% этилацетат, гептан-60% этилацетата. Фракции, содержащие чистый продукт, объединяют и концентрируют, чтобы получить метиловый эфир 1-ацетил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [9,74 г, 49,3%, промежуточное соединение (25)].
1
3
2
Стадия 4. К суспензии метилового эфира 1-ацетил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [1,3 г, 5,79 ммоль, промежуточное соединение (25)] в метаноле (30 мл) добавляют метоксид натрия (25% вес. в метаноле). Полученную смесь растворов перемешивают при 60°C на масляной бане в течение 20 минут. Масляную баню убирают и перемешивают раствор в течение 5 минут. К нему добавляют раствор иода (1,76 г, 6,93 ммоль) в диметилформамиде (2 мл). Затем реакционную смесь нагревают до 60°C в течение 1 часа. Растворитель удаляют под вакуумом. Сырой продукт разделяют между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл) и водный слой далее дважды экстрагируют этилацетатом (25 мл). Объединенные фазы этилацетата промывают солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и фильтруют. Растворитель удаляют под вакуумом, чтобы получить метиловый эфир 3-иод-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [1,58 г, 89%, промежуточное соединение (26)] в виде светло-желтого твердого остатка; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,80 (1H, шир. с, NH), 7,947 (1H, с), 3,870 (3H, с).
1
3
2
Стадия 5. К смеси метилового эфира 3-иод-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [1,5 г, 4,87 ммоль, промежуточное соединение (26)] в тетрагидрофуране (120 мл) по каплям добавляют 4-(диметиламино)пиридин (8 мг) и ди-трет-бутилдикарбонат (1M в тетрагидрофуране, 5,3 мл) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 30 минут растворитель удаляли под вакуумом. Твердое вещество суспендировали в смеси этилацетата, гептана и метанола и некоторое время перемешивали. Твердый осадок фильтровали и сушили под вакуумом, чтобы получить 1-трет-бутиловый 5-метиловый эфир 3-иодтиено[3,2-с]пиразол-1,5-дикарбоновой кислоты [1,72 г, 87%, промежуточное соединение (21)] в виде грязно-белого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 6,880 (1H, с), 3,900 (3H, с), 1,633 (9H, с); ЖХ/МС: 409 (М+H).
Пример 36
Метиловый эфир 3-(5-ацетил-1Н-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты
Раствор 1-трет-бутилового 5-метилового эфира 3-(5-ацетил-1-трет-бутоксикарбонил-1Н-индол-2-ил)-тиено[3,2-с]пиразол-1,5-
2
3
3
2
1
дикарбоновой кислоты (115 мг, 0,213 ммоль, пример 35) в тетрагидрофуране (5 мл) обрабатывали 2N соляной кислотой (водный раствор, 3 мл) и нагревали при 70°C в течение 17 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и нейтрализовали NaCO(водный раствор). Водную фазу трижды экстрагируют эфиром (10 мл). Объединенные эфирные фазы промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией на 10 г колонке силикагеля (50-70%-ный градиент этилацетата в гептане) приводит к метиловому эфиру 3-(5-ацетил-1Н-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты (15 мг, пример 36) в виде белого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,82 (1H, с), 12,13 (1H, с), 8,34 (1H, с), 7,97 (1H, с), 7,78 (1H, д), 7,50 (1H, д), 6,90 (1H, с), 3,91 (3H, с), 2,61 (3H, с); ЖХ/МС: 340 (M+H).
Пример 37
3-(5-Гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновая кислота
2
Стадия 1. В двух отдельных аппаратах Смита (емкостью 10-20 мл) смешивают метиловый эфир 3-иод-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [420 мг, 1,36 ммоль, промежуточное соединение (26)], трет-бутиловый эфир 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-борной 1-карбоновой кислоты [912 мг, 2,25 ммоль, промежуточное соединение (8), приготовленный, как это описано в примере 1-4 из публикации международной патентной заявки № WO 02/32861], карбонат калия (2M, водный, 2,25 мл) тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (87 мг, 0,0752 ммоль) и смесь толуола/этанола (9:3 мл). Реакционная трубка заполняется N и герметизируется с помощью укупорочного устройства. Реакционную смесь нагревают до 120°C с помощью микроволновой печи (Personal chemistry optimizer) в течение 900 секунд. После завершения реакций смеси объединяют в одном сосуде, разбавляют этилацетатом (50 мл) и дважды промывают водой (10 мл), солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией на 35 г колонке силикагеля (30-50%-ный градиент этилацетата в гептане) позволила выделить две основных фракции. Фракции с более высокими Rf объединялись, растворитель упаривали под вакуумом, чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-2-(5-метоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [653 мг, промежуточное соединение (27)] в виде светло-желтого порошка. ЖХ/МС: 542 (M+H). Фракции с более низкими Rf объединяли и упаривали под вакуумом, чтобы получить продукт метиловый эфир 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [253 мг, промежуточное соединение (28)] в виде светло-желтого твердого вещества; ЖХ/МС: 442 (М+H).
1
3
2
2
Стадия 2. К раствору метилового эфира 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты (1,0 г, 2,26 ммоль, промежуточное соединение 28) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляют гидроокись натрия (500 мг) и воду (7 мл) и нагревают на масляной бане при 60°C в течение 16 часов. К смеси добавляют воду и доводят до pH 4 2N соляной кислотой. Продукт трижды экстрагируют этилацетатом (50 мл). Объединенные фазы этилацетата промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией на силикагеле (этилацетат, затем 10%-ный метанол в этилацетате) дает маслянистую жидкость. Маслянистую жидкость растворяют в метаноле и встряхивают с водой, чтобы получить 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновую кислоту (286 мг, 91%, пример 37) в виде бежевого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,572 (2H, шир. с), 11,570 (1H, с), 7,817 (1H), 7,509 (1H, с), 7,381 (1H, д), 7,104 (1H, д), 6,677 (1H, с), 5,004 (1H, OH), 4,550 (2H, CHOH); ЖХ/МС: 313 (М+H).
Пример 38
[4-(4-Фторфенил)-пиперазин-1-ил]-[3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-ил]-метанон
1
3
2
2
К раствору 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [124 мг, 0,396 ммоль, пример (37)] в диметилформамиде (5 мл) добавляют 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (91 мг, 0,474 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (54 мг, 0,399 ммоль). После перемешивания в течение 10 минут к нему добавляют диизопропилэтиламин (0,138 мл) и 1-(4-фторфенил)пиперазин (79 мг, 0,438 ммоль). Полученную желтую смесь растворов перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (60 мл) и промывают водой (3×10 мл), солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией на на силикагеле (50%-ный этилацетат/гептан, затем этилацетат) позволяет получить твердое вещество. Вещество повторно растворяют в метаноле и встряхивают с водой, чтобы получить [4-(4-фторфенил)-пиперазин-1-ил]-[3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-ил]-метанон [110 мг, 56%, пример (38)] в виде кремового твердого вещества, т. пл.=156-158°C; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,490 (1H, с), 11,59 (1H, с), 7,563 (2H), 7,356 (1H), 7,109-6,985 (5H, м), 6,648 (1H), 5,004 (1H, т, OH), 4,553 (2H, д, OCH), 3,856 (4H, шир. с), 3,208 (4H, шир. пик); ЖХ/МС: 476 (М+H).
Пример 39
(3-Этокси-пропил)амид 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты
1
3
2
2
Смесь 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [159 мг, 0,507 ммоль, пример 37], 1-гидроксибензотриазола (116 мг, 0,858 ммоль), карбодиимида на полимерной подложке (1,2 ммоль/г, 845 мг) в дихлорметане (8 мл) и диметилформамида (2 мл) перемешивается при комнатной температуре в течение 25 минут перед добавлением 3-этоксипропиламина (45 мг, 0,436 ммоль). Через 4 ч добавляют трисамин на полимере (4,03 ммоль/г, 500 мг) и перемешивают в течение 6 часов. Реакционную смесь фильтруют и смолу промывают на водоструйном насосе дихлорметаном (3×15 мл). Фильтрат упаривают под вакуумом. Сырой продукт очищают хроматографией на 10 г колонке силикагеля (этилацетат, затем 1%-ный метанол в этилацетате), чтобы получить густую суспензию. Ее повторно растворяют в метаноле и встряхивают с водой, чтобы получить (3-этоксипропил)амид 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [30 мг, пример 39] в виде бледно-желтого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,490 (1H, с, NH), 11,56 (1H, NH, с), 8,70 (1H, т), 7,88 (1H, с), 7,51 (1H, с), 7,38 (1H, д), 7,10 (1H, с), 6,66 (1H, с), 5,01 (1H, т, OH), 4,55 (2H, HOCH-), 3,44 (6H, м), 1,80 (2H), 1,12 (3H, т); ЖХ/МС: 399 (М+H).
Пример 40
Метиловый эфир 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты
1
3
2
2
2
3
H
H
Раствор метилового эфира 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [192 мг, 0,435 ммоль, промежуточное соединение (28)] растворяют в тетрагидрофуране (10 мл) и обрабатывают тетрабутиламмонийфторидом (1,0 М в тетрагидрофуране, 0,52 мл) и перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой, солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографировали на 10 г колонке силикагеля (50%-ный этилацетат в гептане, затем этилацетат) для получения твердого вещества. Перекристаллизация из этилацетата и гептана давала метиловый эфир 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [90 мг, 73%, пример 40] в виде бежевого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,66 (1H, с), 11,60 (1H, с), 7,92 (1H, с), 7,51 (1H, с), 7,38 (1H, д, J=8,2 Гц), 7,10 (1H, д, J=8,2 Гц), 6,68 (1H, с), 5,75 (1H, шир. с, OH), 4,54 (2H, с, -COH), 3,90 (3H, с, -COC); ЖХ/МС 328 (M+ H).
Пример 41
(Пиридин-2-илметил)амид 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты
1
3
2
Стадия 1. К раствору метилового эфира 3-иод-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [4,5 г, 14,60 ммоль, промежуточное соединение (26)] в тетрагидрофуране (90 мл) добавляют гидроокись калия (2,83 г, 50,44 ммоль) и воду (20 мл). Полученную реакционную смесь нагревают при 60°C на масляной бане в течение 2 часов. Растворитель удаляют под вакуумом и растворяют сырой продукт в воде (20 мл). Водный слой подкисляют 2N соляной кислотой до pH 5. Осадок белого порошка собирают и промывают водой. Фильтрат трижды экстрагируют этилацетатом (50 мл). Объединенные фазы этилацетата промывают солевым раствором и сушат над сульфатом магния, затем фильтруют. Объединяют твердые продукты и встряхивают их в гептане, затем фильтруют, чтобы получить 3-иод-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновую кислоту [2,15 г, 50%, промежуточное соединение (29)] в виде белого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,711 (1H, с), 7,832 (1H, с); ЖХ/МС: 294 (М+H).
1
3
2
Стадия 2. Смесь 3-иод-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [1,05 г, 3,57 ммоль, промежуточное соединение (29)], 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (821 мг, 4,28 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (482 мг, 3,57 ммоль) в диэтилформамиде (45 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. К смеси добавляют диизопропилэтиламин (1,3 мл, 7,46 ммоль), затем раствор 2-(аминометил)пиридина (425 мг, 3,93 ммоль) в диметилформамиде (2 мл). После перемешивания в течение ночи реакционную смесь разбавляют этилацетатом (200 мл) и промывают водой, солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток хроматографируют на 35 г колонке силикагеля (этилацетат и 10%-ный метанол в этилацетате), чтобы получить (пиридин-2-илметил)амид 3-иод-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [1,08 г, 79%, промежуточное соединение (30)] в виде светло-желтого твердого вещества; ЖХ/МС: 385 (M+H); H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,67 (1H, с), 9,35 (1H, т), 8,53 (1H), 8,01 (1H), 7,80 (1H), 7,36 (1H, д), 7,28 (1H), 4,58 (2H, д).
2
Стадия 3. В аппарате Смита (емкость 10-20 мл) смешивают (пиридин-2-илметил)амид 3-иод-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [255 мг, 0,664 ммоль,промежуточное соединение (30)], трет-бутиловый эфир 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-борной 1-карбоновой кислоты [404 мг, 0,997 ммоль, промежуточное соединение (8), приготовленный в соответствии с примерами 1-4 из публикации международной патентной заявки № WO 02/32861], тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (77 мг, 0,0666 ммоль), карбонат калия (2M водный, 1 мл) и толуол/этанол (6:3 мл). Реакционная трубка заполняется N и герметизируется с помощью укупорочного устройства. Полученную реакционную смесь нагревают до 120°C с помощью микроволновой печи (Personal chemistry optimizer) в течение 1020 с. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (50 мл), дважды промывают водой (10 мл), солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией с использованием 10 г колонки с силикагелем (50% этилацетат в гептане, этилацетат, затем 10%-ный метанол в этилацетате) давала (пиридин-2-илметил)амид 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [397 мг, промежуточное соединение (31)] в виде желтой маслянистой жидкости.
1
3
2
Стадия 4. К раствору (пиридин-2-илметил)амида 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилоксилметил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [258 мг, 0,498 ммоль, промежуточное соединение (31)] в тетрагидрофуране (10 мл) добавляют тетрабутиламмонийфторид (1,0 М в тетрагидрофуране, 0,6 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляют воду и трижды экстрагируют с этилацетатом (30 мл). Объединенные фазы этилацетата промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Очистка хроматографией на 10 г колонке силикагеля (9:1 этилацетата в метиленхлориде, затем 8:1:1 этилацетат/метиленхлорид/метанол) давала (пиридин-2-илметил)амид 3-(5-гидроксиметил-1H-индол-2-ил)-1H-тиено[3,2-с]пиразол-5-карбоновой кислоты [85 мг, 43%, пример 41] в виде белого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,51 (1H, с, NH), 11,545 (1H, с, NH), 9,358 (1H, C(O)NH, т, J=5,7 Гц), 8,533 (1H, д, J=4,5 Гц), 7,990 (1H, с), 7,808 (1H, м), 7,503 (1H, с), 7,387-7,266 (3H, м), 7,097 (1H, д, J=8,1 Гц ), 6,663 (1H, с), 5,021 (1H, OH, т, J=5,7 Гц), 4,612 (2H, д, J=6 Гц), 4,551 (2H, д, J=5,7 Гц); ЖХ/МС: 404 (М+H).
Пример 42
5-Бром-2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1Н-индол
2
3
2
1
В аппарат Смита (емкость 10-20 мл) помещают трет-бутиловый эфир 5-бром-2-метилиндол-1-карбоновой кислоты [290 мг, 1,11 ммоль, промежуточное соединение (32), полученный в соответствии с J. Org. Chem 2002, 67, 7551], трет-бутиловый эфир 3-иодтиено[3,2-с]пиразол-1-карбоновой кислоты [250 мг, 0,714 ммоль, пример 5B выше], аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпалладий с дихлорметаном (58 мг, 0,0710 ммоль), карбонат цезия (698 мг, 2,14 ммоль) и смесь 1,4-диоксан/вода(13:2 мл). Реакционная трубка заполняется азотом и герметизируется с помощью укупорочного устройства. Реакционную смесь нагревают при 90°C с помощью микроволновой печи (Personal chemistry optimizer) в течение 20 минут при высокой мощности нагрева. Содержимое переносят в делительную воронку с использованием этилацетата (60 мл). Слой этилацетата промывают водой (20 мл), солевым раствором и затем сушат над сульфатом натрия. Сырой продукт очищают с помощью 35 г колонки с силикагелем (5-15%-ный градиент этилацетата в гептане), чтобы получить продукт (280 мг, 49%) в виде бежевого твердого вещества. Вещество (90 мг, 0,174 ммоль) помещают в аппарат Смита (емкостью 10-20 мл). К нему добавляют карбонат калия (90 мг) и тетрагидрофуран/метанол/HO (10:5:3 мл). Реакционную трубку запечатывают с помощью укупорочного устройства и нагревают при 70°С в течение 10 минут при нормальной мощности нагрева. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой, солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Сырой продукт очищают с помощью 10 г колонки силикагеля (50%-ный этилацетат в гептане), чтобы получить 5-бром-2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1Н-индол [44 мг, 80%, пример 42] в виде светло-желтого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,33 (1H, с), 11,80 (1H, с), 7,76 (2H), 7,38 (1H), 7,21 (2H), 6,64 (1H, с); ЖХ/МС: 317 (М+H).
Пример 43
Метиловый эфир 2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты
3
3
1
Стадия 1. К раствору метилового эфира 1H-индол-6-карбоновой кислоты [26,65 г, 146 ммоль, промежуточное соединение (33)] и 4-(диметиламино)пиридина (230 мг) в безводном тетрагидрофуране (490 мл) добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (1M в тетрагидрофуране, 150 мл) по каплям в течение 40-минутных периодов. Перемешивают при комнатной температуре 100 минут. Растворитель удаляют под вакуумом и смесь повторно растворяют в этилацетате (400 мл). Слой этилацетата промывают водой (20 мл), 0,5 N соляной кислотой (20 мл), 10%-ным NaHCO (20 мл), водой (20 мл), солевым раствором и сушат над сульфатом натрия, затем фильтруют через 5 г колонку силикагеля. Фильтрат упаривают в вакууме досуха. Твердое вещество перекристаллизуют из смеси этилацетата и гептана, чтобы получить 1-трет-бутиловый 6-метиловый эфир индол-1,6-дикарбоновой кислоты в виде белого твердого вещества (18,53 г). Стадию перекристаллизации повторяют, чтобы получить вторую порцию 1-трет-бутилового 6-метилового эфира индол-1,6-дикарбоновой кислоты в виде белого твердого вещества (16,3 г). Третью порцию (5,17 г) 1-трет-бутилового 6-метилового эфира индол-1,6-дикарбоновой кислоты получают из маточного раствора хроматографией на силикагеле; полный выход 1-трет-бутилового 6-метилового эфира индол-1,6-дикарбоновой кислоты [40 г, 100%, промежуточное соединение (34)]; H ЯМР (CDCl): δ 8,886 (1H, с), 7,937 (1H, д), 7,764 (1H), 7,621 (1H, д), 6,636 (1H), 3,972 (3H, с), 1,734 (9H, с); ЖХ/МС: 276 (M+H).
1
1
3
2
2
Стадия 2. Раствор 1-трет-бутилового 6-метилового эфира индол-1,6-дикарбоновой кислоты [13,32 г, 48,38 ммоль, промежуточное соединение (34)] и триизопропилбората (13,65 г, 72,58 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (200 мл) охлаждают до 0°C в токе азота. К нему добавляют диизопропиламид лития (1,8 М в гептане/тетрагидрофуране/этилбензоле, 35 мл) по каплям в течение 40-минутных периодов. Перемешивают при 0°C в течение 1,5 часов. Реакцию гасят добавлением 3N соляной кислоты до pH~4 по индикаторной бумаге. После перемешивания при 0°C в течение 5 минут смесь разделяют между этилацетатом (200 мл) и водой (50 мл). Слой этилацетата промывают солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Остаток очищают на 300 г колонке силикагеля (30-50%-ный градиент этилацетата в гептане, затем 100%-ный этилацетат). Фракции, содержащие пятна с более высоким Rf, объединяют и растворитель удаляют под вакуумом, чтобы получить беловатое твердое вещество (2,32 г). H ЯМР и МС подтвердили, что это регенирированное исходное вещество, 1-трет-бутиловый 6-метиловый эфир индол-1,6-дикарбоновой кислоты. Фракции, содержащие пятна с более низким Rf, объединяют и растворитель удаляют под вакуумом. Твердый остаток (14,2 г) растирают с ацетонитрилом и водой, чтобы получить 6-метоксикарбонил-1-трет-бутоксикарбонилиндол-2-борную кислоту [11,8 г, 76,5%, промежуточное соединение (35)] в виде бежевого твердого вещества; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 8,764 (1H, с), 8,311 (2H, с, B(OH)), 7,795 (1H, д), 7,675 (1H, д), 6,713 (1H, с), 3,876 (3H, с), 1,621 (9H, с).
1
Стадия 3. Готовят смесь 6-метоксикарбонил-1-трет-бутоксикарбонилиндол-2-борной кислоты (3,24 г, 10,15 ммоль, промежуточное соединение (35)], трет-бутилового эфира 3-иодтиено[3,2-с]пиразол-1-карбоновой кислоты [2,37 г, 6,77 ммоль, пример 5B выше], аддукта [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпалладия с дихлометаном (552 мг, 0,676 ммоль), карбоната цезия (6,61 г, 20,29 ммоль) в смеси 1,4-диоксан/вода (40:10 мл). Полученную смесь нагревают при 82°C на масляной бане в течение 3 часов под азотом. Реакционную смесь выливают в этилацетат (300 мл). Слой этилацетата промывают дважды водой (20 мл), солевым раствором и затем сушат над сульфатом натрия. Сырой продукт реакции очищают на 110 г колонке силикагеля (3% смеси этилацетата в метиленхлориде и 97% гептан), чтобы получить 1-трет-бутиловый 6-метиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты [1,68 г, 50%, промежуточное соединение (36)] в виде белой пены; H ЯМР
3
2
3
2
1
[(CD)SO)]: δ 8,975 (1H, с), 8,017 (1H), 7,669 (1H), 7,583 (1H), 7,379 (1H), 7,048 (1H, с), 3,986 (3H, с), 1,736 (9H, с), 1,440 (9H, с); ЖХ/МС: 498 (М+H). Также выделяют смесь 1-трет-бутилового 6-метилового эфира 1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты или 6-метилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты и 1-трет-бутилового 6-метилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты (340 мг). 1-Трет-бутиловый 6-метиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты [промежуточное соединение (36)] растворяют в смеси метанол/тетрагидрофуран/вода (20 мл, 10:5:3) и обрабатывают карбонатом калия (300 мг). Полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (200 мл) и промывают водой, солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Сырой продукт очищают на 35 г колонке силикагеля (50%-ный этилацетат в гептане, затем этилацетат), чтобы получить метиловый эфир 2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты [136 мг, пример 43] в виде белого порошка; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,434 (1H, с), 12,044 (1H, с), 8,093 (1H, с), 7,789-7,631 (3H, м), 7,231 (1H, д, J=5,4 Гц), 6,752 (1H, с), 3,855 (3H, с); ЖХ/МС: 298 (М+H).
Пример 44
Дициклопропил-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]метанол
1
3
2
К смеси метилового эфира 2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты (180 мг, 0,605 ммоль, пример 43) в безводном тетрагидрофуране (8 мл) добавляют циклопропилмагнийбромид (6,0 мл, 0,5 М в тетрагидрофуране) при 0°C. Ледяную баню убирают и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. К ней добавляют еще циклопропилмагнийбромид (6 мл, 0,5 М в тетрагидрофуране) и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакция не закончилась (ТСХ), добавляют еще циклопропилмагнийбромид (6,0 мл). Затем раствор реакционной смеси перемешивают в течение ночи. Реакцию останавливают при 0°C добавлением насыщенного раствора хлорида аммония. Реакционную смесь разделяют между диэтиловым эфиром и водой. Слой диэтилового эфира промывают солевым раствором и сушат над сульфатом магния. Сырой продукт хроматографируют на 10 г колонке силикагеля (30-50%-ный градиент этилацетата в гептане), чтобы получить конечный продукт (120 мг). Перекристаллизация полученного продукта производится следующим образом: в аппарате Смита смесь твердого продукта (120 мг) и этилацетата (2 мл) нагревают при 70°C с помощью микроволновой печи (Personal chemistry optimizer) в течение 240 секунд при нормальной мощности нагрева. После охлаждения дициклопропил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]метанол кристаллизуется в виде белого твердого вещества т. пл. 110-112°C; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,189 (1H, с), 11,440 (1H, с), 7,747 (1H, д, J=5,1 Гц), 7,631 (1H, с), 7,467 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,249 (2H, м), 6,579 (1H, с), 4,304 (1H, с), 1,225 (2H), 0,581 (2H, м), 0,387 (4H, м), 0,195 (2H, м); ЖХ/МС: 350 (М+H).
Пример 45
(4-Бензо[1,3]диоксо-5-илметилпиперазин-1-ил)-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]метанон
T
3
2
1
Стадия 1. Раствор диизопропиламида лития (1,8 M, 50,5 мл, 90,9 ммоль, 2,5 экв.) добавляют к раствору 1-трет-бутилового 6-метилового эфира индол-1,6-дикарбоновой кислоты [10 г, 38,4 ммоль, промежуточное соединение (34)] в тетрагидрофуране (160 мл) при -78°C. Получающаяся смесь перемешивалась в течение 2 часов при -78°C перед добавлением раствора триметилоловохлорида в тетрагидрофуране (1 M, 145,5 мл, 4 экв.). Полученный раствор нагревали до 0°C в течение 15 минут и дважды делили между этилацетатом (150 мл) и водным полунасыщенным раствором хлорида аммония (200 мл). Органические слои объединяли и сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток был очищен колоночной флэш-хроматографией (10%-ный этилацетат в гептане), чтобы получить триметил(индол-1,6-дикарбоновая кислота, 1-трет-бутиловый, 6-метиловый эфир)олово [8,7 г, промежуточное соединение (37)] ЖХ/МС: 440 (M+H); R=2,5 минуты; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 8,8 (1H, т), 7,8 (1H, д), 6,8 (1H, т), 3,9 (3H, с), 1,7 (9H, с).
3
Стадия 2. Раствор триметил(индол-1,6-дикарбоновая кислота, 1-трет-бутиловый, 6-метиловый эфир)олова [7,5 г, 17,1 ммоль, 2 экв., промежуточное соединение (37)] в диоксане (30 мл) двумя равными порциями в течение 2 часов добавлялся к раствору трет-бутилового эфира 3-иодтиено[3,2-с]пиразол-1-карбоновой кислоты [3 г, 8,6 ммоль, 1 экв., пример 5B выше], иодида меди (171 мг, 0,43 ммоль, 0,1 экв.) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (497 мг, 0,43 ммоль, 0,05 экв.) в диоксане. Смесь нагревалась до 90°C и перемешивалась в течение 24 часов. Затем раствор охлаждали до комнатной температуры и трижды делили между этилацетатом (150 мл) и смесью водного насыщенного раствора NaHCO и солевым раствором 3:1 (300 мл). Объединенные органические слои отмывали солевым раствором (250 мл) и сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток подвергали колоночной флэш-хроматографии (20%-ный этилацетат в гептане) и раствор сырого продукта (5,45 г, смесь метилового эфира 2-(1H-тиена [3,2-c] пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты, 1-трет-бутиловый 6-метиловый эфир 1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)индол-1,6-дикарбоновой кислоты, 6-метилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)индол-1,6-дикарбоновой кислоты и 1-трет-бутилового 6-метилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)индол-1,6-дикарбоновой кислоты) в смеси тетрагидрофурана и воды (50 мл, 1:1) обрабатывался гидроокисью калия (1,1 г, 19 ммоль, 2 экв.) при 60°C. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, а затем охлаждали до комнатной температуры. К раствору добавляли 1N соляную кислоту, чтобы довести рН приблизительно до 6. Твердое вещество фильтровали, промывали водой, гептаном и сушили, чтобы получить 2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновую кислоту [3,18 г, промежуточное соединение (38)], которая использовалась без дальнейшей очистки. ЖХ/МС: 282 (M-H, отрицательный режим).
T
1
Стадия 3. Смесь 2-(1H-тиено[3,2-c] пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты [100 мг, 1,5 экв., промежуточное соединение (38)], дициклогексилкарбодиимид на полимере (2 экв.) и 1-гидроксибензотриазол (1,7 экв.) в дихлорметане (5 мл) встряхивалась в течение 15 минут. Затем добавляли 1-бензо[1,3] диоксол-5-илметилпиперазин и реакционную смесь встряхивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли трисамин на полимере (4 экв.), и смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение ночи. Смолу фильтровали, промывали дихлорметаном и фильтрат концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (20%-ный этилацетат в гептане) и получали (4-бензо[1,3]диоксол-5-илметилпиперазин-1-ил)-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-метанон [пример 45]. ЖХ/МС: 486 (M+H); R=2,35 минут; H ЯМР
3
2
[(CD)SO)]: δ 11,8 (1H, с), 8,0 (1H, с), 7,8 (1H, д), 7,6 (д, 1H), 7,4 (1H, с), 7,2 (1H, д), 7,0 (д, 1H), 6,8 (2H, м), 6,6 (2H, м).
Приведенные ниже примеры 46-51 составлены на основе методов, аналогичных использованным в предыдущем примере.
Пример 46
[4-(2-Циклогексилэтил)-пиперазин-1-ил]-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]метанон
T
3
2
1
Данное соединение [ЖХ/МС: 462 (M+H); R=8,7 мин; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,4 (1H, с), 11,8 (1H, с), 7,8 (1H, д), 7,6 (1H, д), 7,4 (1H, с), 7,2 (1H, д), 7,0 (1H, д), 6,7 (1H, д), 2,8 (6H, м), 1,6 (4H, м), 0,9-1,3 (13Н, м)] получено на основе методов, подобных приведенным в примере 45, используя 1-(2-циклогексилэтил)-пиперазин вместо 1-бензо[1,3]диоксол-5-илметилпиперазина на стадии 3.
Пример 47
(2-Гидрокси-2-фенилэтил)амид 2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты
T
3
2
1
Данное соединение [ЖХ/МС: 403 (M+H); R=2,72 минуты; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,4 (1H, с), 11,8 (1H, с), 8,4 (1H, т), 7,96 (1H, м), 7,89 (1H, м), 7,78 (1H, м), 7,2-7,6 (11H, м), 6,8 (1H, с), 5,6 (1H, д), 4,8 (1Н, д), 3,6 (2H, м)] получено на основе методов, подобных приведенным в примере 45, используя 2-амино-1-фенилэтанол вместо 1-бензо[1,3]диоксол-5-илметилпиперазина на стадии 3.
Пример 48
(2-Циклогекс-1-енилэтил)амид 2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты
T
3
2
1
Данное соединение [ЖХ/МС: 391 (M+H); R=3,3 минуты; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,4 (1H, с), 11,8 (1H,с), 8,2 (1H, т), 7,9(1H, с), 7,7 (1H, д), 7,6 (1H,м), 7,4 (1H,м), 7,2 (1H, д), 6,6 (1H, д), 5,4 (1H, д), 2,2 (1H, м), 2,0 (4H,м), 1,2-1,4 (1H, м)] получено на основе методов, подобных приведенным в примере 45, используя 2-циклогекс-1-енилэтиламин вместо 1-бензо[1,3]диоксол-5-илметилпиперазина на стадии 3.
Пример 49
(2-Тиофен-2-илэтил) амид 2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты
T
3
2
1
Данное соединение [ЖХ/МС: 393 (M+H); R=2,98 минуты; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,4 (1H, д), 11,8 (1H, д), 8,6 (1H, т), 8,0 (1H, с), 7,8 (1H, д), 7,5 (1H, д), 7,4 (1H, м), 7,3 (1H, д), 7,2 (1H, м), 7,0 (1H, м), 6,8 (1H, с), 3,6 (2H, с), 3,0 (2H, м)] получено на основе методов, подобных приведенным в примере 45, используя 2-тиофен-2-илэтиламин вместо 1-бензо[1,3]диоксол-5-илметилпиперазина на стадии 3.
Пример 50
(4-Пиридин-2-илпиперазин-1-ил)-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]метанон
T
Данное соединение [ЖХ/МС: 428 (M+H), R=1,99 минуты] получено на основе методов, подобных приведенным в примере 45, используя 1-пиридин-2-илпиперазин вместо 1-бензо[1,3]диоксол-5-илметилпиперазина на стадии 3.
Пример 51
(2-Пиридин-3-илэтил)амид 2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-карбоновой кислоты
T
Данное соединение [ЖХ/МС: 387 (M+H), R=1,89 минуты] получено на основе методов, подобных приведенным в примере 45, используя 2-пиридин-3-илэтиламин вместо 1-бензо[1,3]диоксол-5-илметилпиперазина на стадии 3.
Пример 52
Циклогексилметил-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илметил]амин
T
T
3
2
1
Смесь трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-формилиндол-1-карбоновой кислоты [200 мг, 1 экв., промежуточное соединение (11), полученный, как это описано для стадии 1 из примера 24], аминометилциклогексан (1,1 экв.), МП-цианоборгидрид (макропористый триэтиламмоний метилполистирол цианоборгидрид, 1,5 экв.) и уксусная кислота (0,5 мл) в диметилформамиде (10 мл) встряхивалась при комнатной температуре в течение ночи. Смолу фильтровали и фильтрат выливали в воду. Смесь дважды экстрагировали этилацетатом; экстракт сушили над сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали на колонке силикагеля (элюировали 20%-ным метанолом в этлацетате), чтобы получить смесь трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-5-[(циклогексилметиламино)метил]-индол-1-карбоновой кислоты [основной продукт, ЖХ/МС: 565 (M+H), R=3,5 минуты], трет-бутилового эфира 5-[(циклогексилметиламино)метил]-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты и трет-бутилового эфира 3-{5-[(циклогексилметиламино)метил]-1H-индол-2-ил}-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты. Данную смесь обрабатывали трифторуксусной кислотой в дихлорметане (10 мл, 1:1) при комнатной температуре в течение 2 часов и реакционную смесь пропускали через колонку SCX с элюированием 7N аммиаком в метаноле, давая циклогексилметил-[2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илметил]амин [пример 52]. ЖХ/МС: 365 (M+H); R=2,5 минуты; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 11,4 (1H, с), 7,8 (д, 2H), 7,5 (1H, с, 7,4 (1H, д), 7,2 (1H, д), 7,0 (1H, д), 6,6 (1H, с), 3,8 (2H, с) 2,2 (2H, д), 1,8-2,0 (4H, м), 1,0-1,2 (4H, м), 0,8-1,0 (3H, м).
Пример 53
5-[4-(4-Хлорбензил)-пиперазин-1-илметил]-2-(1H-тиено[3,2-с]пиразол-3-ил)-1Н-индол
Пример 53
1
3
2
Данное соединение [ЖХ/МС: 462 (M+H); H ЯМР [(CD)SO)]: δ 13,2 (1H, с), 11,6 (1H, с), 7,8 (д, 1H), 7,45 (1H), 7,3-7,4 (6H, м), 7,2 (1H, м), 6,6 (1H, с), 3,5 (4H, м), 3,3-3,4 (6H, м), 3,3 (1H, м), 2,9 (1H, м)] получено на основе методов, подобных приведенным в примере 52, используя 1-(4-хлорбензил)пиперазин вместо С-циклогексилметиламина на стадии 1.
Пример 54
[2-(4-Феноксифенил)-этил]-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илметил]-амин
Пример 54
Данное соединение [ЖХ/МС: 465 (M+H); δ 13,2 (1H, с), 11,4 (1H, с), 7,8 (1H, д), 7,5(1H, с), 7,4 (3H, м), 7,3 (3H, м), 7,2 (2H, м), 6,8 (4H, м), 6,6 (1H, д), 3,8 (2H, с), 2,6-2,8 (4H, м)] получено на основе методов, подобных приведенным в примере 52, используя 2-(4-феноксифенил)этиламин вместо аминометилциклогексана на стадии 1.
Пример 55
3-[6-(3-Пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил]-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразол гидрохлорид
Стадия 1. К раствору 3,4-динитрофенола (2 г, 10,9 ммоль, 1 экв.) в диметилформамиде (40 мл) при перемешивании добавляли хлорпропилпиперидин гидрохлорид (2,8 г, 14,2 ммоль, 1,3 экв.) и карбонат калия (3,2 г, 22,9 ммоль, 2,1 экв.). Смесь нагревали до 100°C в течение 4 часов и реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь пропускали через колонку сильнокислотного катионита и элюировали 7N аммиаком в метаноле, элюент концентрировали и остаток хроматографировали на силикагеле (100 г), чтобы получить 1-[3-(3,4-динитрофенокси)пропил]-пиперидин [3,45 г] в виде желтой маслянистой жидкости.
Стадия 2. 1-[3-(3,4-Динитрофенокси)пропил]-пиперидин [3,2 г] растворяли в метаноле (20 мл) и добавляли палладий на активированном угле (1,12 г, 10%) и муравьиную кислоту (2 мл). Смесь гидрогенизировали при 50 фунт на кв. дюйм в течение 3 часов и смесь фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали, чтобы извлечь продукт 4-(3-пиперидин-1-илпропокси)бензол-1,2-диамин [2,45 г, промежуточное соединение (39)] в виде темной маслянистой жидкости. ЖХ/МС: 250 (M+H).
Стадия 3. Смесь 4-(3-пиперидин-1-илпропокси)бензола-1,2-диамин [2,2 г, промежуточное соединение (39)] и муравьиной кислоты (20 мл) при 100°C перемешивали в течение 3 часов и затем охлаждали до комнатной температуры и пропускали через колонку сильнокислотного катионита. Колонку элюировали 7N аммиаком в метаноле, чтобы получить 6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол [3,45 г, промежуточное соединение (40)] в виде темной маслянистой жидкости; ЖХ/МС: 260 (M+H).
Стадия 4. К раствору 6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензимидазола [2,6 г, промежуточное соединение (40)] в диметилформамиде (20 мл) при перемешивании добавляют гидрид натрия (0,44 г, 60%-ная суспензия в масле) двумя порциями под азотом, а затем приливают по каплям бензилхлорметиловый эфир (1,89 г) в диметилформамиде (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем выливают в воду (150 мл) и затем трижды экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенные экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Хроматография на силикагеле позволяет получить 1-бензилоксиметил-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол [5,7 г, промежуточное соединение (41)]. ЖХ/МС: 380 (M+H).
Стадия 5. 1-Бензилоксиметил-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол [460 мг, промежуточное соединение (41)] растворяли в тетрагидрофуране (15 мл, сухой) под азотом и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли н-бутиллитий (2 мл, 1,3 ммоль, 2,4 экв.) и раствор перемешивали в течение 0,5 часа. Затем смесь нагревали до комнатной температуры и добавляли вторую порцию н-бутиллития (1 мл, 1,2 экв.), затем перемешивание было продолжено в течение 0,5 часа. Затем добавляли метоксиметиламид 3-бромбензо[b]тиофен-2-карбоновой кислоты (401 мг, 1,1 экв.) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор пропускали через колонку сильнокислотного катионита и остаток хроматографировали, чтобы получить [1-бензилоксиметил-6-(3-пиперидин-1-ил-пропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил]-(3-бромбензо[b]тиофен-2-ил)метанон [40 мг, промежуточное соединение (42)].
Стадия 6. Смесь [1-бензилоксиметил-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил]-(3-бромбензо[b]тиофен-2-ил)метанона [40 мг, промежуточное соединение (42)], бензофенон гидразона (18 мг, 1,4 экв.), Pd(OAc) (0,9 мг, 0,05 экв.), дифенилфосфиноферроцена (3,8 мг, 0,1экв.) и карбоната цезия (33,7 мг, 1,6 экв.) в 5 мл толуола под азотом нагревали при 90°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и пропускали через колонку сильнокислотного катионита и элюировали 7N аммиаком в метаноле, чтобы получить [3-(N'-бензгидрилиденгидразино)бензо[b]тиофен-2-ил]-[1-бензилоксиметил-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил]метанон [200 мг, промежуточное соединение (43)].
T
3
2
1
Стадия 7. Смесь [3-(N'-бензгидрилиденгидразино)бензо[b]тиофен-2-ил]-[1-бензилоксиметил-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил]метанона [200 мг, промежуточное соединение (43)] и концентрированной HBr (2 мл) в этаноле (4 мл) нагревали при 90°C в течение ночи. Раствор охлаждали до комнатной температуры и смесь пропускали через колонку сильнокислотного катионита. Элюирование 7N аммиаком в метаноле приводит к 3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил]-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразолу (72,1 мг). Полученное вещество растворяли в смеси HCl/1,4-диоксан (2 мл, 4 M) и метанола (0,05 мл) и смесь концентрировали и сушили, чтобы получить 3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил]-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразола гидрохлорид [85,1 мг, пример 55]. ЖХ/МС: 432 (M+H); R=2,49 минуты; H ЯМР [(CD)SO)]: δ 9,6 (1H, с), 8,0 (1H, т), 7,4 (2H, м), 7,3 (1H, с), 7,2 (1H, м), 6,9 (1H, м), 6,8 (1H, м), 4,2 (2H, т), 3,6-3,7 (4H, м), 3,5-3,6 (2H, м), 3,4 (1H, м), 3,2 (1H, м), 2,8 (2H, м), 2,2 (2H, м), 1,8 (1H, м), 1,4 (1H, м).
Пример 56
1-{3-[2-(5-Фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ол
T
3
1
Стадия 1. 1-(5-фенил-тиено[3,2-c]пиразол-1-ил)этанон [промежуточное соединение (44), ЖХ/МС: 243,1 (M+H), R=3,45 минут; H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,84 (с, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,64 (м, 2H), 7,43-7,31 (м, 3H), 2,75 (с, 3H)] получен с использованием методов, подобных описанным выше для промежуточного соединения (25) с использованием 2-фенил-5-метилтиофена вместо 5-метилтиофен-2-карбоксильной кислоты на стадии 1.
T
Стадия 2. К смеси 1-(5-фенил-тиено[3,2-c]пиразол-1-ил)-этанона [3,82 г, 15,8 ммоль, промежуточное соединение (44)] и этанола (50 мл) одной порцией добавляли 6N соляную кислоту (50,0 мл, 300 ммоль) и получившуюся смесь нагревали при 70°C. Через 18 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и нейтрализовали при помощи 25% водного карбоната калия. Смесь разбавляли водой (200 мл) и выдерживали при 0°C в течение 1 часа. Получившееся твердое вещество собирали, трижды промывали водой (50 мл), а затем высушивали под вакуумом, после чего получился 5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол [2,93 г, 92%, промежуточное соединение (45)] в виде порошка бежевого цвета. ЖХ/МС: 201,0 (M+H), R=3,15 минут).
3
T
3
2
1
Стадия 3. Размельченный KOH (1,09 г, 6,49 ммоль) добавляли одной порцией к перемешиваемой смеси 5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразола [1,30 г, 6,49 ммоль, промежуточное соединение (45)], иода (2,47 г, 9,73 ммоль) и диметилформамида (15 мл) в атмосфере азота при комнатной температуре и темную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 3 часа добавляли при перемешивании 10% водный NaHSO (40 мл). Получившуюся суспензию разбавляли водой (40 мл) и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 минут. Твердое вещество собрали фильтрованием, трижды промывали водой (20 мл), а затем высушивали под высоким вакуумом при 40°C, после чего получился 3-иод-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол [1,94 г 91%, промежуточное соединение (46)] в виде желтовато-коричневого порошка. ТСХ Rf 0,52 (диоксид кремния, 70% этилацетат/гептан); ЖХ/МС: 326,94 (M+H), R=3,38 минут; H ЯМР [600 МГц, (CD)SO]: δ 13,51 (уш. с, 1H), 7,73 (м, 2H), 7,69 (уш. с, 1H), 7,46 (м, 2H), 7,38 (м, 1 Гц).
T
Стадия 4. 4-Диметиламинопиридин (195 мг, 1,60 ммоль) добавляли к смеси 3-иод-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразола [2,60 г, 7,97 ммоль, промежуточное соединение (46)], ди-трет-бутилбикарбоната (2,78 г, 12,7 ммоль) и обезвоженного дихлорметана (30 мл) при комнатной температуре при перемешивании. Получившийся раствор перемешивали при комнатной температуре. Через 16 часов реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (20 мл), последовательно промывали водой (50 мл) и солевым раствором (40 мл), высушивали над сульфатом магния и концентрировали под пониженным давлением с получением маслянистой жидкости янтарного цвета. Неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием дихлорметаном, после чего получился трет-бутиловый эфир 3-иод-5-фенил-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоксильной кислоты [2,56 г, 75%, промежуточное соединение (47)] в виде твердого вещества кремового цвета. ТСХ Rf 0,41 (оксид кремния, дихлорметан); ЖХ/МС: 449,0 (M+Na), R=4,23 минуты).
T
Стадия 5. Смесь 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-борной кислоты и трет-бутилового эфира 1-карбоновой кислоты [2,39 г, 6,11 ммоль, промежуточное соединение (8), приготовленное, как описано в примерах 1-4 публикации международной патентной заявки № WO 02/32861], трет-бутилового эфира 3-иод-5-фенил-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [2,00 г, 4,69 ммоль, промежуточное соединение (47)], карбоната цезия (6,11 г, 17,0 ммоль), комплекса [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II) с дихлорметаном (1:1) (230 мг, 0,282 ммоль), 1,4-диоксана (40 мл) и воды (10 мл) продували азотом, а затем нагревали при 90°C при перемешивании в атмосфере азота. Через 1,5 часа реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (125 мл) и дважды последовательно промывали водой (50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический слой высушивали над сульфатом магния и растворитель удаляли под пониженным давлением, после чего образовался темный остаток. Остаток хроматографировали на кремнеземе с элюированием дихлорметаном, после чего был получен трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутил-диметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [2,55 г, 84%, промежуточное соединение (48)] в виде пены желто-коричневого цвета. ТСХ Rf 0,31 (оксид кремния, дихлорметан); ЖХ/МС: 646,2 (M+H), R=3,05 минуты).
T
3
2
1
Стадия 6. К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [2,44 г, 3,78 ммоль, промежуточное соединение (48)] в тетрагидрофуране (25 мл) при 0°C добавляли фторид тетрабутиламмония (4,20 мл раствора концентрации 1 M в тетрагидрофуране, 4,20 ммоль) одной порцией при перемешивании. Через 40 минут реакционную смесь разделяли на этилацетат (75 мл) и 10% водный хлорид аммония (50 мл) и слои разделяли. Органические вещества последовательно промывали водой (50 мл) и солевым раствором (50 мл), высушивали над сульфатом магния и растворитель удаляли под пониженным давлением. После чего получилась пена янтарного цвета. Неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием смесью 10% этилацетат/дихлорметан, чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты [1,99 г, 99%, промежуточное соединение (49)] в виде пены желто-коричневого цвета. ТСХ Rf 0,31 (оксид кремния, 10% этилацетат/дихлорметан); ЖХ/МС: 532,2 (M+H ), R=4,31 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 9,73 (с, 1H), 7,84-7,81 (м, 2H), 7,76 (с, 1H), 7,61 (д, J=2 Гц, 1H), 7,56-7,44 (м, 4H), 7,07 (с, 1H), 6,84 (дд, J=2,8 Гц, 1H), 1,71 (с, 9H), 1,40 (с, 9H).
T
Стадия 7. Смесь трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты [950 мг, 1,79 ммоль, промежуточное соединение (49)], карбоната цезия (1,75 г, 5,37 ммоль) и 1,3-дибромпропана (6,0 мл) нагревали при 90°C в атмосфере азота. Через 1,5 часа смесь охлаждали до комнатной температуры, отфильтровывали и нерастворимые вещества дважды промывали дихлорметаном (10 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме с образованием мутного масла. Неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием сначала смесью 80% дихлорметан/гептан, а затем 100% дихлорметаном, чтобы получить трет-бутиловый эфир 6-(3-бромпропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [760 мг, 65%, промежуточное соединение (50)] в виде пены белого цвета. ТСХ Rf 0,37 (оксид кремния, дихлорметан); ЖХ/МС: 674 (M+Na), R=2,60 минуты.
3
T
3
2
1
Стадия 8. Смесь трет-бутилового эфира 6-(3-бромпропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [300 мг, 0,460 ммоль, промежуточное соединение (50)], 3-гидроксипиперидина (73,0 мг, 0,722 ммоль), карбоната калия (191 мг, 1,38 ммоль), иодида калия (39,0 мг, 0,235 ммоль) и обезвоженного ацетонитрила (5 мл) нагревали при 70°C при перемешивании со скоростью 200 об/мин. Через 20 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, отфильтровывали, нерастворимые вещества промывали смесью дихлорметан/метанол (5:1) и фильтрат концентрировали под пониженным давлением с образованием темного остатка. Остаток хроматографировали на кремнеземе с элюированием смесью 20% метанол/дихлорметан (20 мл), а затем раствором 1 М аммиака в смеси метанол/дихлорметан 1:9 (30 мл), чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-[3-(3-гидроксипиперидин-1-ил)-пропокси]-индол-1-карбоновой кислоты (329 мг) в виде хрупкой пены зеленого цвета. ЖХ/МС: 673,3 (M+H), 74% УФ чистоты). К раствору трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-[3-(3-гидроксипиперидин-1-ил)-пропокси]-индол-1-карбоновой кислоты (326 мг), анизола (1,0 мл) и дихлорметана (1,0 мл) при комнатной температуре добавляли трифторуксусную кислоту (1,0 мл) и получившийся раствор янтарного цвета нагревали при 45°C. Через 2 часа реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли в колонку Varian Mega Bond Elut сильнокислотного катионита (5 г), обработанную метанолом. Продукт промывали метанолом (30 мл) и элюировали раствором 1 М аммиака в метаноле. Фракции с продуктом смешивали и концентрировали под пониженным давлением с образованием белого твердого вещества. Растирание этого твердого вещества со смесью метанол/эфир (1:4) дало 1-{3-[2-(5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ол [163 мг, 75%, пример 56] в виде порошка грязно-белого цвета. ТСХ Rf 0,55 (оксид кремния, 20% 1 М NH в метаноле/80% дихлорметана); т.пл.: 213-216°C; ЖХ/МС: 473,2 (M+H), R=2,67 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,31 (уш. с, 1H), 11,39 (уш. с, 1H), 7,79 (м, 2H), 7,66 (с, 1H), 7,51-7,36 (м, 4H), 6,93 (д, J=2 Гц, 1H), 6,67 (дд, J=2, 8,5 Гц, 1H), 6,60 (д, J=1,5 Гц, 1H), 4,58 (д, J=5 Гц, 1H), 3,99 (т, J=6,5 Гц, 2H), 3,47 (м, 1H), 2,85 (дм, J=11 Гц, 1H), 2,68 (дм, J=11 Гц, 1H), 2,45 (м, 2H), 1,95-1,67 (м, 5H), 1,62 (дм, J=13,5 Гц, 1H), 1,40 (м, 1H), 1,07 (м, 1H).
Пример 57
1-{3-[2-(5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол
T
3
2
1
Это соединение [ТСХ Rf 0,44 (оксид кремния, 20% 1 М аммиака в метаноле/80% дихлорметана); т.пл.: 239-242°C; ЖХ/МС: 473,2 (M+H), R=2,94 минут; H ЯМР [600 МГц, (CD)SO]: δ 13,30 (уш. с, 1H), 11,37 (уш. с, 1H), 7,80 (д, J=7,7 Гц, 2H), 7,65 (с, 1H), 7,50-7,44 (м, 3H), 7,39 (м, 1H), 6,94 (д, J=1,3 Гц, 1H), 6,67 (дд, J=2, 8,6 Гц, 1H), 6,61 (с, 1H), 4,52 (д, J=4,2 Гц, 1H), 3,99 (т, J=6,4 Гц, 2H), 3,44 (м, 1H), 2,72 (м, 2H), 2,42 (м, 2H), 2,01 (м, 2H), 1,88 (м, 2H), 1,71 (м, 2H), 1,42-1,36 (м, 2H)] приготовлено при помощи методов, аналогичных описанным в примере 56, с использованием 4-гидроксипиперидина вместо 3-гидроксипиперидина на стадии 8.
Пример 58
2-(5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-пиперидин-1-ил-пропокси)-1H-индол
T
T
3
2
1
Смесь трет-бутилового эфира 6-(3-бром-пропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [300 мг, 0,460 ммоль, промежуточное соединение 50)], пиперидина (60,2 мг, 0,707 ммоль), карбоната калия (191 мг, 1,38 ммоль), иодида калия (40,0 мг, 0,241 ммоль) и обезвоженного ацетонитрила (5,0 мл) нагревали при 70°C при встряхивании со скоростью 200 об/мин. Через 20 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, отфильтровывали, нерастворимые вещества трижды промывали дихлорметаном (5 мл) и фильтрат концентрировали под пониженным давлением с образованием темного остатка. Остаток хроматографировали на кремнеземе с элюированием раствором 10% - 1 М аммиака в смеси метанол/90% дихлорметан, чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-[3-(пиперидин-1-ил)-пропокси]-индол-1-карбоновой кислоты (310 мг) в виде хрупкой зеленой пены: ЖХ/МС: 657,3, (M+H), R=3,92 минуты, 50% УФ чистоты). Смесь этого вещества (300 мг), 4 М водного карбоната калия (5,0 мл), тетрагидрофурана (5,0 мл) и метанола (5,0 мл) нагревали при 60°C в течение 2-х часов. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли под вакуумом, после чего получилось твердое вещество. Неочищенное твердое вещество суспендировали в воде (25 мл) и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Твердое вещество было собрано фильтрацией и высушено, после чего получилось твердое вещество серого цвета. Растирание твердого вещества со смесью 20% метанол/эфир дало 2-(5-фенил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол [90,0 мг, 43%, пример 58] в виде твердого вещества серого цвета. ТСХ Rf 0,37 (оксид кремния, 14% - 1 М аммиака в смеси метанол/86% дихлорметан); ЖХ/МС: 457,3 (M+H), R=2,93 минут; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,30 (уш. с, 1H), 11,39 (уш. с, 1H), 7,78 (д, J=7 Гц, 2H), 7,64 (с, 1H), 7,49-7,35 (м, 4H), 6,92 (с, 1H), 6,65 (д, J=8,5 Гц, 1H), 6,59 (с, 1H), 3,98 (т, J=6 Гц, 2H), 2,43-2,33 (м, 6H), 1,88 (м, 2H), 1,50-1,39 (м, 6H).
Пример 59
1-(3-{2-[5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол-6-илокси}-пропил)-пиперидин-4-ол
3
T
3
2
1
Стадия 1. Смесь 1-(тиено[3,2-c]пиразол-1-ил)этанона (5,00 г, 30,1 ммоль), N-бромсукцинимида (16,1 г, 90,4 ммоль) и хлороформа (100 мл) нагревали при 50°C в атмосфере азота в течение 5 часов. Эту смесь оранжевого цвета перемешивали при комнатной температуре в течение еще 17 часов. Получившуюся красно-оранжевую смесь отфильтровывали и нерастворимые вещества дважды промывали дихлорметаном (60 мл). Фильтрат промывали 10% водным NaHSO (60 мл), а затем дважды промывали водой (60 мл), после чего высушивали над сульфатом кальция и концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали в хроматографической колонке с силикагелем с элюированием смесью от 30% этилацетат/гептан до 50% этилацетат/гептан, чтобы получить 1-(5-бром-тиено[3,2-c]пиразол-1-ил)-этанон [6,21 г, 84%, промежуточное соединение (51)] в виде твердого вещества грязно-белого цвета. ТСХ Rf 0,50 (оксид кремния, 40% этилацетат/гептан). ЖХ/МС: 244,93 (M+H), R=3,10 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 8,12 (с, 1H), 7,67 (с, 1H), 2,67 (с, 3H).
T
3
1
Стадия 2. Смесь 1-(5-бром-тиено[3,2-c]пиразол-1-ил)-этанона [12,0 г, 49,0 ммоль промежуточное соединение (51)], 1,4-диоксана (120 мл) и 2 М водного карбоната калия (80,0 мл) перемешивали при 95°C в атмосфере азота. Через 20 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем разбавляли этилацетатом (200 мл). Получившуюся смесь дважды промывали водой (100 мл) и солевым раствором (100 мл), последовательно высушивали над сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Продукт высушивали под вакуумом, чтобы получить 5-бром-1H-тиено[3,2-c]пиразол [9,48 г, 95%, промежуточное соединение (52)] в виде твердого вещества грязно-белого цвета. ТСХ Rf 0,26 (оксид кремния, 1:1 этилацетат/гептан); ЖХ/МС: 202,93 (M+H), R=2,79 минуты; H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ 10,8 (уш. с, 1H), 7,70 (с, 1 H), 7,12 (с, 1H).
T
T
Стадия 3. Раствор 5-бром-1H-тиено[3,2-c]пиразола [8,00 г, 39,4 ммоль, промежуточное соединение (52)] в диметилформамиде (50 мл) добавляли по каплям в смесь гидрида натрия (1,74 г, 60% дисперсия в масле, 43,5 ммоль) и диметилформамида (10 мл) при комнатной температуре в течение 5 минут и получившуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли по каплям 2-(триметилсилил)этоксиметилхлорид (9,85 г, 5,91 ммоль) и получившуюся белую суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 21 часа. Реакционную смесь разбавляли водой (300 мл) и дважды экстрагировали этилацетатом (125 мл). Объединенные экстракты последовательно промывали водой (100 мл) и солевым раствором (100 мл), высушивали над сульфатом магния и концентрировали. Получившийся неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием сначала смесью 30% этилацетат/гептан, а затем смесью 40% этилацетат/гептан, чтобы получить смесь 5-бром-1-(2-триметилсиланилэтоксиметил)-1H-тиено[3,2-c]пиразола и 5-бром-2-(2-триметилсиланилэтоксиметил)-2H-тиено[3,2-c]пиразола [12,1 г, (92%)]. ЖХ/МС: 333,0 (M+H), R=3,97 минуты и 333,0 (M+H), R=3,87 минуты.
T
T
Часть этой смеси 5-бром-1-(2-триметилсиланилэтоксиметил)-1H-тиено[3,2-c]пиразола и 5-бром-2-(2-триметилсиланилэтоксиметил)-2H-тиено[3,2-c]пиразола (5,51 г, 16,5 ммоль), 3-метоксифенилборной кислоты (3,77 г, 24,8 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II), комплекс с дихлорметаном (1,35 г, 1,65 ммоль), 4 М водного карбоната калия (16,5 мл, 66,0 ммоль) и 1,4-диоксана (66,0 мл) продували азотом в течение 5 минут, затем нагревали при 75°C в течение 2,5 часов. Эту темную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом (250 мл) и дважды последовательно промывали водой (100 мл) и солевым раствором (100 мл). Органические вещества высушивали над сульфатом магния и концентрировали с образованием маслянистой жидкости янтарного цвета. Эту жидкость хроматографировали на кремнеземе с элюированием сначала смесью 5% этилацетат/дихлорметан, а затем смесью 10% этилацетат/дихлорметан, чтобы получить смесь 5-(3-метоксифенил)-1-(2-триметилсиланилэтоксиметил)-1H-тиено[3,2-c]пиразола и 5-(3-метоксифенил)-2-(2-триметилсиланилэтоксиметил)-2H-тиено[3,2-c]пиразола [4,58 г, 77%] в виде мутной маслянистой жидкости янтарного цвета. ТСХ Rf 0,41 основное и 0,35 дополнительное (оксид кремния, 5% этилацетат/дихлорметан); ЖХ/МС: 361,2 (M+H), R=4,14 минуты и 361,2 (М+H), R=4,05 минуты.
T
3
1
Часть этой смеси 5-(3-метоксифенил)-1-(2-триметилсиланилэтоксиметил)-1H-тиено[3,2-c]пиразола и 5-(3-метоксифенил)-2-(2-триметилсиланилэтоксиметил)-2H-тиено[3,2-c]пиразола (4,41 г, 12,2 ммоль) и этилендиамина (2,50 мл, 37,0 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота добавляли во фторид тетрабутиламмония (61,0 мл раствора 1 М в тетрагидрофуране, 61,0 ммоль) и получившийся раствор нагревали при 70°C. Через 21,5 часа реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и растворитель удаляли под вакуумом. К остатку добавляли воду (150 мл), а получившуюся водную смесь дважды экстрагировали этилацетатом (100 мл). Смешанные экстрагированные вещества последовательно промывали водой (75 мл) и солевым раствором (75 мл), высушивали над сульфатом магния и концентрировали, чтобы получить 5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол [2,47 г, 87%, промежуточное соединение (53)] в виде твердого вещества грязно-белого цвета: ТСХ Rf 0,45 (оксид кремния, этилацетат); ЖХ/МС: 231,0 (M+H), R=3,20 минуты; H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,65 (уш. с, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,32 (м, 1H), 7,25-7,21 (м, 2H), 7,16 (м, 1H), 6,89 (м, 1H), 3,86 (с, 3H).
3
T
3
1
Стадия 4. Измельченный гидроксид калия (1,35 г, 24,1 ммоль) добавляли одной порцией в раствор 5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразола [1,85 г, 8,03 ммоль, промежуточное соединение (53)] и диметилформамида при 0°C при перемешивании. Через 10 минут добавляли иод (3,05 г, 12,0 ммоль) одной порцией и получившуюся темную реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут, а затем при комнатной температуре в течение 5 часов. Данную реакционную смесь гасили 10% водным NaHSO (100 мл), получившуюся белую смесь разбавляли водой (100 мл) и эту смесь выдерживали при 5°C в течение ночи. Твердое вещество собрали фильтрацией, промывали водой (3×30 мл) и высушивали под вакуумом при 40°C, чтобы получить 3-иод-5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол [2,61 г, 91%, промежуточное соединение (54)] в виде порошка желто-коричневого цвета. Т.пл.: 159-163°C; ТСХ Rf 0,54 (оксид кремния, 80% этилацетат/гептан); ЖХ/МС: 357,0 (M+H), R=3,60 минуты; ЯМР H (300 МГц, CDCl): δ 11,3 (уш. с, 1H), 7,33 (м, 1H), 7,28-7,20 (м, 2H), 7,14 (м, 1H), 6,91 (м, 1H), 3,87 (с, 3H).
T
6
1
Стадия 5. Добавление 4-диметиламинопиридина (102 мг, 0,835 ммоль) к смеси 3-иод-5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразола [1,50 г, 4,21 ммоль, промежуточное соединение (54)], ди-трет-бутилдикарбоната (1,38 г, 6,32 ммоль) и обезвоженного дихлорметана (40 мл) при комнатной температуре при перемешивании. Образовавшийся раствор перемешивался при комнатной температуре. Через 20 часов реакционная смесь была промыта водой (2×30 мл), высушена над сульфатом магния и концентрирована при пониженном давлении с образованием твердого вещества желто-коричневого цвета. Неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием дихлорметаном, чтобы получить трет-бутиловый эфир 3-иод-5-(3-метоксифенил)-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [1,68 г, 87%, промежуточное соединение (55)] в виде твердого вещества кремового цвета: ТСХ Rf 0,27 (оксид кремния, дихлорметан); ЖХ/МС: (M+H 457,0, R 4,08 минуты); H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ 7,75 (с, 1H), 7,40 (дд, J=7,5, 8,5 Гц, 1H), 7,32 (ддд, J=1, 1,5, 7,5 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=1,5, 2,5 Гц, 1H), 7,01 (ддд, J=1, 2,5, 8,5 Гц), 3,84 (с, 3H), 1,65 (с, 9H).
T
Стадия 6. Смесь трет-бутилового эфира 5-(трет-бутилдиметилсиланоксиметил)-1H-индол-2-борной 1-карбоновой кислоты [1,67 г, 4,27 ммоль, промежуточное соединение (8), подготовленное, как описано в примерах 1-4 публикации международной патентной заявки № WO 02/32861], трет-бутилового эфира 3-иод-5-(3-метоксифенил)-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты (1,50 г, 3,29 ммоль, промежуточное соединение (55)], карбоната цезия (4,29 г, 13,2 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II), комплекс с дихлорметаном (1:1) (268 мг, 0,328 ммоль), 1,4-диоксана (35 мл) и воды (7,0 мл) продувалась азотом, а затем нагревалась при 75°C при перемешивании в атмосфере азота. Через 70 минут реакционная смесь была охлаждена до комнатной температуры, разбавлена этилацетатом (100 мл) и дважды последовательно промыта водой (50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический слой был высушен над сульфатом магния и растворитель был удален при пониженном давлении с образованием маслянистой жидкости черного цвета. Эта жидкость была хроматографирована на кремнеземе с элюированием дихлорметаном, чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-[1-трет-бутоксикарбонил-5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [1,80 г, 81%, промежуточное соединение (56)] в виде пены бежевого цвета. ТСХ Rf 0,25 (оксид кремния, дихлорметан); ЖХ/МС: 676,3 (M+H), R=3,82 минуты.
T
Стадия 7. В раствор трет-бутилового эфира 2-[1-трет-бутоксикарбонил-5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [1,70 г, 2,52 ммоль, промежуточное соединение (56)] в тетрагидрофуране (20 мл) при 0°C был добавлен одной порцией при перемешивании фторид тетрабутиламмония (2,80 мл раствора 1 M в тетрагидрофуране, 2,80 ммоль). Через 40 минут эта реакционная смесь оранжевого цвета разделилась между этилацетатом (80 мл) и 10% водным хлоридом аммония (40 мл), и слои были разделены. Органические фазы были последовательно промыты водой (40 мл) и солевым раствором (40 мл), высушены над сульфатом магния, и растворитель был удален при пониженном давлении. Неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием сначала смесью 10% этилацетат/дихлорметан, а затем смесью 20% этилацетат/дихлорметан, чтобы получить 1,54 г желто-коричневой пены. Растирание со смесью эфир/гептан дало трет-бутиловый эфир 2-[1-трет-бутоксикарбонил-5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-6-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты [1,25 г, 88%, промежуточное соединение (57)] в виде порошка белого цвета; ТСХ Rf 0,23 (оксид кремния, 10% этилацетат/дихлорметан); ЖХ/МС: 562,2 (M+H), R=2,80 минуты.
T
Стадия 8. Смесь трет-бутилового эфира 2-[1-трет-бутоксикарбонил-5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-6-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты [1,19 г, 2,12 ммоль, промежуточное соединение (57)], карбоната цезия (2,07 г, 6,35 ммоль) и 1,3-дибромпропана (8,0 мл) нагревалась при 75°C в атмосфере азота. Через 6 часов смесь была охлаждена до комнатной температуры и оставлена на ночь. Смесь была отфильтрована, и нерастворимые вещества были дважды промыты дихлорметаном (10 мл). Фильтрат был концентрирован под вакуумом, в результате чего была получена маслянистая жидкость золотистого цвета. Неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием смесью от 30% этилацетат/гептан до 50% этилацетат/гептан, чтобы получить трет-бутиловый эфир 6-(3-бром-пропокси)-2-[1-трет-бутоксикарбонил-5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-индол-1-карбоновой кислоты [1,11 г, 76%, промежуточное соединение (58)] в виде пены белого цвета. ТСХ Rf 0,46 (оксид кремния, 40% этилацетат/гептан); ЖХ/МС: 682,2 (M+H), R=3,23 минуты.
T
3
2
1
Стадия 9. Смесь трет-бутилового эфира 6-(3-бром-пропокси)-2-[1-трет-бутоксикарбонил-5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-индол-1-карбоновой кислоты [250 мг, 0,366 ммоль, промежуточное соединение (58)], 4-гидроксипиперидина (90,0 мг, 0,889 ммоль), карбоната калия (245 мг, 1,77 ммоль), иодида калия (45,0 мг, 0,271 ммоль) и обезвоженного ацетонитрила (4 мл) нагревалась при 70°C при перемешивании со скоростью 200 об/мин. Через 18 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры в течение 30 минут. В реакционную смесь было добавлено 4 М водного карбоната калия (4,0 мл), и смесь нагревалась при 70°C при встряхивании со скоростью 200 об/мин в течение 30 минут. После охлаждения до комнатной температуры растворитель был удален под вакуумом, и смесь была разбавлена этилацетатом (40 мл). Органические фазы были последовательно промыты водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), высушены над сульфатом магния и концентрированы в осадок темного цвета. Остаток хроматографировали на кремнеземе с элюированием сначала раствором 10% - 1 М аммиака в смеси метанол/ 90% дихлорметан, а затем раствором 20%/1 М аммиака в смеси метанол/80% дихлорметан, чтобы получить 125 мг твердого вещества пурпурного цвета. Растирание этого порошка со смесью 20% метанол/эфир дало 1-(3-{2-[5-(3-метоксифенил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол-6-илокси}-пропил)-пиперидин-4-ол [94,1 мг, 51%, пример 59] в виде порошка бледно-пурпурного цвета. ТСХ Rf 0,40 (оксид кремния, раствор 20% - 1 М аммиака в смеси метанол/80% дихлорметан); т.пл.: 205-207°C; ЖХ/МС: 503,3 (M+H), R=2,22 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,30 (уш.с, 1H), 11,37(уш. с, 1H), 7,67 (2, 1H), 7,43 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,38-7,32 (м, 3H), 6,97-6,91 (м, 2H), 6,65 (дд, J=2, 8,5 Гц, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,51 (д, 4 Гц, 1H), 3,98 (т, J=6 Гц, 2H), 3,85 (с, 3H), 3,41 (м, 1H), 2,72 (м, 2H), 2,42 (м, 2H), 2,01 (м, 2H) 1,92-1,83 (м, 2H), 1,71 (м, 2H), 1,44-1,32 (м, 2H).
Пример 60
5-Метокси-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин
T
3
2
1
Стадия 1. 4-Диметиламинопиридин (102 мг, 0,835 ммоль) был добавлен при перемешивании при комнатной температуре к смеси 5-метоксипирроло[3,2-b]пиридина (4,50 г, 30,4 ммоль, приготовленной согласно методам, описанным в Liebigs Ann. Chem. 1988, 203-208), ди-трет-бутилкарбоната (10,7 г, 49,0 ммоль) и обезвоженного дихлорметана (100 мл). Получившийся раствор перемешивался при комнатной температуре в течение ночи. Реакционная смесь была последовательно промыта водой (75 мл) и солевым раствором (75 мл), высушена над сульфатом магния и концентрирована при пониженном давлении с получением маслянистой жидкости янтарного цвета. Неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием сначала дихлорметаном, а затем смесью 10% этилацетат/дихлорметан, чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-метоксипирроло[3,2-b]пиридин-1-карбоновой кислоты [7,06 г, 94%, промежуточное соединение (60)] в виде вязкой маслянистой жидкости янтарного цвета. ТСХ Rf 0,27 (оксид кремния, дихлорметан); ЖХ/МС: 249,1 (M+H), R=3,60 минуты); H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 8,21 (д, J=9 Гц, 1H), 7,85 (д, J=4 Гц, 1H), 6,76 (д, J=9 Гц, 1H), 6,70 (д, J=4 Гц, 1 H), 3,89 (с, 3H), 1,63 (с, 9H).
4
T
3
2
1
Стадия 2. Раствор трет-бутиллития (15,0 мл раствора 1,5 М в пентане, 22,5 ммоль) добавлялся в раствор трет-бутилового эфира 5-метоксипирроло[3,2-b]пиридин-1-карбоновой кислоты [4,66 г, 18,8 ммоль, промежуточное соединение (60)] в обезвоженном тетрагидрофуране (85 мл) в атмосфере азота при -78°C в течение 4-х минут. Получившаяся реакционная смесь красного цвета перемешивалась при -78°C в течение 41 минуты. В течение 2 минут добавлялся триизопропилборат (8,70 мл, 37,7 ммоль), и получившаяся красно-коричневая реакционная смесь перемешивалась при -78°C в течение 20 минут. Реакционная смесь была нагрета до 0°C, перемешивалась в течение 2,5 часов, а затем была добавлена вода (50 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа растворитель был удален при пониженном давлении. Основность данной водной смеси была повышена 5N водным гидроксидом натрия до pH 14. Смесь была дважды экстрагирована этилацетатом (30 мл). Водный слой был охлажден до 0°C, подкислен 10% водным KHSO до pH 4, и получившаяся кашица выдерживалась при 0°C в течение 15 минут. Твердое вещество было собрано, промыто водой и высушено, в результате чего был получен трет-бутиловый эфир 5-метокси-1H-индол-2-борной 1-карбоновой кислоты [2,48 г, 45%, промежуточное соединение (61)] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 293,16 (M+H), R=2,43 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 8,28 (с, 2H), 8,23 (д, J=9 Гц, 1H), 6,70 (д, J=9 Гц, 1H), 6,58 (с, 1H), 3,87 (с, 3H), 1,60 (с, 9H).
T
3
2
1
Стадия 3. Смесь трет-бутилового эфира 5-метокси-1H-индол-2-борной 1-карбоновой кислоты [600 мг, 2,05 ммоль, промежуточное соединение (61)], трет-бутилового эфира 3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [600 г, 1,71 ммоль, пример 5B], карбоната цезия (2,23 г, 6,84 ммоль), комплекса [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпалладия (II) с дихлорметаном (1:1) (93 мг, 0,114 ммоль), 1,4-диоксана (12 мл) и воды (3,0 мл) продувалась азотом, а затем нагревалась при 90°C при перемешивании в атмосфере азота. Через 105 минут реакционная смесь была охлаждена до комнатной температуры, разбавлена этилацетатом (50 мл) и дважды последовательно промыта водой (25 мл) и солевым раствором (25 мл). Органический слой был высушен над сульфатом магния, растворитель был удален при пониженном давлении, в результате чего получилась пена коричневого цвета. Неочищенный продукт хроматографировали на кремнеземе с элюированием сначала смесью 5% этилацетат/дихлорметан, а затем смесью 10% этилацетат/дихлорметан, в результате чего был получен трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-метоксипирроло[3,2-b]пиридин-1-карбоновой кислоты [470 мг (58%, промежуточное соединение (62)] в виде пены желто-коричневого цвета. ТСХ Rf 0,46 (оксид кремния, 10% этилацетат/дихлорметан); ЖХ/МС: 471,19 (M+H), R=4,02 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 8,32 (д, J=9 Гц, 1H), 8,00 (д, J=5 Гц, 1H), 7,36 (д, J=5 Гц, 1H), 7,07 (с, 1 H), 6,88 (д, J=9 Гц, 1H), 3,92 (с, 3H), 1,65 (с, 9H), 1,33 (с, 9H).
T
3
2
1
Стадия 4. В раствор трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-метоксипирроло[3,2-b]пиридин-1-карбоновой кислоты [250 мг, 0,531 ммоль, промежуточное соединение (62)], анизола (1,0 мл) и дихлорметана (1,0 мл) при комнатной температуре была добавлена трифторуксусная кислота (1,0 мл), и получившийся раствор нагревался при 45°C. Через 1 час получившаяся реакционная смесь зеленого цвета была охлаждена до комнатной температуры, ее основность была повышена 5% водным карбонатом калия (30 мл), и получившаяся смесь была дважды экстрагирована этилацетатом (20 мл). Объединенные экстракты были последовательно промыты водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), высушены над сульфатом магния и концентрированы в вакууме, в результате чего получилась маслянистая смесь. Растирание со смесью эфир/гептан (1:1) дало 5-метокси-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин [107 мг, 74%, пример 60] в виде порошка желто-коричневого цвета. ТСХ Rf 0,52 (оксид кремния, этилацетат); т.пл.: 234-236°C; ЖХ/МС: 271,02 (M+H), R=2,03 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,32 (уш. с, 1H), 11,67 (уш. с, 1H), 7,74 (д, J=5 Гц, 1H), 7,66 (д, J=9 Гц, 1H), 7,18 (д, J=5 Гц, 1H), 6,58-6,53 (м, 2H), 3,85 (с, 3H).
Пример 61
3-Бром-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол.
T
3
2
1
Стадия 1. Трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (63), ЖХ-МС: 570 (M+H), R=4,2 минуты ; H ЯМР [(CD)SO]: δ 7,98 (д, 1H), 7,56 (дд, 2H), 7,35 (д, 1H), 7,06 (с, 1H), 6,86 (дд, 1H), 1,65 (с, 9H), 1,33 (с, 3H), 0,99 (с, 9H), 0,23 (с, 6H)] был приготовлен с выходом 46% при помощи методов, подобных описанным в примере 5C с использованием 6-(трет-бутилдиметилсиланокси)-1H-индол-2-борной кислоты [промежуточное соединение (74), приготовленное по методу, описанному в примерах 4-6 публикации международной патентной заявки № WO 02/32861] вместо 5-(трет-бутилдиметилсиланокси)-1H-индол-2-борной кислоты.
Стадия 2. В раствор трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [0,87 г, 1,51 ммоль, промежуточное соединение (63)] в хлороформе (15 мл) был добавлен бром (95 мкл, 1,81 ммоль). Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение ночи. Добавлялся бисульфит калия, пока оранжевая смесь не приобрела бледно-желтый цвет. Смесь была экстрагирована диэтиловым эфиром. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 95/5, а затем 80/20), в результате чего получилось 0,49 г продукта с одной отсутствующей защитной группой, трет-бутилового эфира 3-[3-бром-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-1H-индол-2-ил]-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты или трет-бутилового эфира 3-бром-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты в виде порошка. Это вещество было растворено в дихлорметане (5 мл). Затем были добавлены ди-трет-бутилбикарбонат (0,28 г, 1,10 ммоль), триэтиламин (0,15 мл, 0,98 ммоль) и ДМАП (диметиламинопиридин) (0,03 г, 0,18 ммоль). Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 30 минут. Растворитель был удален. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 96:4), чтобы получить трет-бутиловый эфир 3-бром-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [0,33 г, 33%, промежуточное соединение (64)] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 648,1 (M+H),
T
R=3,82 минуты.
Стадия 3. В раствор трет-бутилового эфира 3-бром-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [0,32 г, 49 ммоль, промежуточное соединение (64)] в тетрагидрофуране при 0°C был добавлен раствор 1,0 М ТБАФ (тетрабутиламмоний фторида) в тетрагидрофуране (0,51 мл, 0,51 ммоль). Получившийся раствор перемешивался при 0°C в течение 30 минут. Растворитель был удален. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/этилацетат 95/05), чтобы получить трет-бутиловый эфир 3-бром-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидрокси-индол-1-карбоновой кислоты [0,22 г, 83%, промежуточное соединение (65)] в виде пены оранжевого цвета.
T
Стадия 4. В трет-бутиловый эфир 3-бром-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты [0,22 г, 0,40 ммоль, промежуточное соединение (65)] в 1,3-дибромпропане (4 мл) был добавлен карбонат цезия (0,33 г, 1,0 ммоль). Получившаяся суспензия перемешивалась при 75°C в течение 1 часа, а затем была отфильтрована. Нерастворимое вещество было удалено фильтрованием. Фильтрат был концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (н-гептан/этилацетат 100/0, затем 90/10), чтобы получить трет-бутиловый эфир 3-бром-6-(3-бромпропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [0,19 г, 72%, промежуточное соединение (66)] в виде пены белого цвета. ЖХ/МС: 654,0 (M+H), R=4,71 минуты.
T
3
2
1
Стадия 5. К трет-бутиловому эфиру 3-бром-6-(3-бромпропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [0,17 г, 0,26 ммоль, промежуточное соединение (66)] в ацетонитриле (4 мл) были добавлены ДИЭА (N,N-диизопропилэтиламин) на полимерной основе (0,14 мг, 0,52 ммоль) и 4-гидроксипиперидин (53 мг, 0,52 ммоль). Данная смесь плавно перемешивалась при 70°C в течение 4-х часов. Затем она была отфильтрована и концентрирована. Остаток был растворен в дихлорметане (2 мл) и анизоле (0,5 мл). Была добавлена трифторуксусная кислота (0,5 мл). Получившийся ярко-желтый раствор перемешивался при 40°C в течение ночи, после чего он приобрел зеленоватый оттенок. Он был помещен непосредственно в катионную ионообменную колонку (сильнокислотный катионит mega bond elut производства VARIAN, 5 г), промыт метанолом и элюирован раствором 1,0 М аммиака в метаноле. Нужные фракции были смешаны и концентрированы. Остаток был дважды хроматографирован на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/1,0 M аммиака в метаноле, 85/15), чтобы получить 3-бром-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол [29 мг, 23%, пример 61] в виде порошка пурпурного цвета. ЖХ/МС: 475,08 (M+H), R=2,55 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,45 (с, 1H), 11,59 (с, 1H), 7,69 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,27 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,15 (д, J=5,2 Гц, 1H), 6,91 (с, 1H), 6,75 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,60 (уш.с, 1H), 3,99 (м, 2 H), 3,47 (м, 1H), 2,80 (м, 2H), 2,11 (м, 2H), 1,92 (м, 2H), 1,73 (м, 2H), 1,42 (м, 2H), 1,13 (м, 2H).
Пример 62
{3-[6-(3-Пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил}-метанол
T
Стадия 1. В раствор (4-бромтиофен-2-ил)метанола (25 г, 130 ммоль) в дихлорметане был добавлен имидазол (9,7 г, 142 ммоль), а затем трет-бутилдиметилсилилхлорид (23,4 г, 156 ммоль). Получившаяся белая суспензия перемешивалась при комнатной температуре в течение 30 минут. Нерастворимое вещество было отфильтровано. Фильтрат был концентрирован. Остаточная маслянистая жидкость была хроматографирована на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/дихлорметан 90/10), чтобы получить (4-бромтиофен-2-илметокси)-трет-бутилдиметилсилан [34,6 г, промежуточное соединение (67)] в виде желтоватой маслянистой жидкости. ЖХ/МС: 307,0 (M+H), R=4,38 минуты.
Стадия 2. В раствор (4-бромтиофен-2-илметокси)-трет-бутилдиметилсилана [34,6 г, 112,6 ммоль, промежуточное соединение (67)] в тетрагидрофуране (100 мл) при 0°C в атмосфере азота был добавлен раствор 1,8 М ДИАЛ (диизопропиламид лития) в смеси тетрагидрофуран/гептан/этилбензол (68,8 мл, 123,9 ммоль). Затем был добавлен N-формилпиперидин (15 мл, 135,1 ммоль). Данная темно-зеленая смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение ночи и гасилась насыщенным водным хлоридом аммония. Затем она дважды экстрагировалась этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 90/10), чтобы получить 3-бром-5-(трет-бутил-диметилсиланоксиметил)тиофен-2-карбальдегид [30,1 г, 80%, промежуточное соединение (68)].
T
Стадия 3. В раствор 3-бром-5-(трет-бутилдиметилсиланоксиметил)тиофен-2-карбальдегида [30,1 г, 89,7 ммоль, промежуточное соединение (68)] в этаноле (350 мл) был добавлен гидразон бензофенона (20 г, 104,7 ммоль). Получившийся желтый раствор перемешивался с обратным холодильником в течение 6 часов. Затем растворитель был удален, и остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/дихлорметан, 20/80), чтобы получить N-бензогидрилиден-N'-[1-[3-бром-5-(трет-бутил-диметилсиланилоксиметил)тиофен-2-ил]-метилиден]-гидразин [41,3 г, промежуточное соединение (69)]. ЖХ/МС: 515,1 (M+H), (обнаружено 2 изомера) R=4,17 минуты и 4,34 минуты.
Стадия 4. В раствор N-бензогидрилиден-N'-[1-[3-бром-5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)тиофен-2-ил]-метилиден]-гидразина [41,2 г, 80,2 ммоль, промежуточное соединение (69)] в толуоле (500 мл) были добавлены гидразон бензофенона (18,9 г, 96,2 ммоль), карбонат цезия (44,3 г, 136,3 ммоль), а затем 1,1'-дифенилфосфиноферроцен (6,66 г, 12 ммоль) и ацетат палладия (1,35 г, 6 ммоль). Данная оранжевая смесь перемешивалась при 90°C в течение 20 часов. Нерастворимое вещество было отфильтровано, и фильтрат был концентрирован. Остаток хроматографировали (н-гептан/этилацетат, 90/10). Получившееся маслянистое вещество темно-оранжевого цвета (45,7 г) было растворено в метаноле (400 мл), затем была добавлена концентрированная соляная кислота (150 мл). Получившаяся темно-красная смесь перемешивалась при 75°C в течение ночи. Был добавлен 2,5 N раствор гидроксида натрия в воде до нейтрализации pH. Затем смесь была дважды экстрагирована этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 50/50, затем 20/80), чтобы получить (1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил)-метанол [3,3 г, 27%, промежуточное соединение (70)] в виде порошка оранжевого цвета.
T
3
2
1
Стадия 5. В раствор (1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил)-метанола [3,2 г, 20,8 ммоль, промежуточное соединение (70)] в диметилформамиде (40 мл) были добавлены гидроксид калия (3,5 г, 62,3 ммоль) и иод (7,9 г, 31,1 ммоль). Данная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 5 часов. Был добавлен концентрированный раствор бисульфита натрия в воде до исчезновения оранжевого цвета. Получившаяся смесь была несколько раз экстрагирована этилацетатом. Объединенные органические слои были высушены над сульфатом магния и концентрированы. Остаток растирали в дихлорметане, чтобы получить (3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил)-метанол [5,3 г, 91%, промежуточное соединение (71)]. ЖХ/МС: 280,91 (M+H), R=1,93 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,23 (с, 1H), 7,12 (с, 1H), 5,64 (т, J=6,6 Гц, 1H), 4,63 (д, J=6,5 Гц, 1H).
Стадия 6. К (3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил)-метанолу [2,89 г, 10,3 ммоль, промежуточное соединение (71)] в диметилформамиде (20 мл) были добавлены имидазол (1,4 г, 20,6 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (2,63 г, 17,5 ммоль). Получившийся раствор перемешивался при комнатной температуре в течение 5 минут. Затем он был разбавлен водой и дважды экстрагирован этилацетатом. Органический слой был промыт водой, высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 100/0, затем 90/10, затем 70/30), чтобы получить 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразол [3,5 г, 85%, промежуточное соединение (72)] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 395,0 (M+H),
T
R=3,95 минуты.
T
Стадия 7. В 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразол [3,40 г, 8,62 ммоль, промежуточное соединение (72)] в дихлорметане (80 мл) были добавлены ДМАП (диметиламинопиридин) (0,22 г, 1,72 ммоль) и ди-трет-бутилбикарбонат (2,26 г, 10,34 ммоль). Данная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем растворитель был удален. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - дихлорметан), чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [3,57 г, 84%, промежуточное соединение (73)]. ЖХ/МС: 495,07 (M+H), R=4,37 минуты.
T
Стадия 8. В раствор 6-(трет-бутилдиметилсиланокси)-1H-индол-2-борной кислоты [3,57 г, 9,13 ммоль, промежуточное соединение (74), приготовленной по методу, описанному в примерах 4-6 публикации международной патентной заявки № WO 02/32861] и трет-бутилового эфира 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [3,47 г, 7,02 ммоль, промежуточное соединение (73)] в 1,4-диоксане (60 мл) был добавлен [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II) (комплекс с дихлорметаном (1:1)) (385 мг, 0,53 ммоль). Был добавлен водный раствор (25 мл) карбоната цезия (9,14 г, 28,08 ммоль). Данная смесь перемешивалась при 80°C в течение 1 часа. Ее охлаждали до комнатной температуры, после чего она была трижды экстрагирована этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (н-гептан/этилацетат 95/05, затем 90/10), чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-[1-трет-бутоксикарбонил-5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-6-(трет-бутил-диметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [3,8 г, 76%, промежуточное соединение (75)]. ЖХ/МС: 714,38 (M+H), R=3,27 минуты.
T
Стадия 9. В раствор трет-бутилового эфира 2-[1-трет-бутоксикарбонил-5-(трет-бутил-диметилсиланилоксиметил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-6-(трет-бутил-диметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [3,2 г, 4,5 ммоль, промежуточное соединение (75)] в тетрагидрофуране (30 мл) при 0°C был добавлен раствор 1,0 М ТБАФ (тетрабутиламмонийфторида) в тетрагидрофуране. Полученный зеленый раствор перемешивался при 0°C до завершения реакции, после чего был разбавлен водой. Получившаяся смесь была экстрагирована этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/этилацетат 90/10), чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-гидроксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидрокси-индол-1-карбоновой кислоты [1,5 г (66%, промежуточное соединение (76)]. ЖХ/МС: 486,2 (M+H), R=3,30 минуты.
T
Стадия 10. К суспензии трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-гидроксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты [1,45 г, 2,99 ммоль, промежуточное соединение (76)] в 1,3-дибромпропане (5 мл) был добавлен карбонат цезия (2,43 г, 7,48 ммоль). Полученная суспензия перемешивалась при 80°C в течение 3-х часов. Ее охлаждали до комнатной температуры. Нерастворимое вещество было отфильтровано. Фильтрат был нанесен на силикагель для хроматографии (н-гептан/этилацетат 100/0, затем постепенно до 65/35), чтобы получить трет-бутиловый эфир 6-(3-бром-пропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-гидроксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [990 мг, 55%, промежуточное соединение (77)]. ЖХ/МС: 606,1 (M+H), R=3,22 минуты.
T
3
2
1
2
1
Стадия 11. К трет-бутиловому эфиру 6-(3-бром-пропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-гидроксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карболовой кислоты [160 мг, 0,26 ммоль, промежуточное соединение (77)] в ацетонитриле (4 мл) были добавлены ДИЭА на полимерной основе (3,86 ммоль/г, 135 мг, 0,52 ммоль) и пиперидин (52 мкл, 0,52 ммоль). Данная смесь плавно перемешивалась при 75°C в течение 3-х часов. ДИЭА на полимерной основе был отфильтрован, и растворитель был удален. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/1,0M аммиака в метаноле 90/10), чтобы получить маслянистое вещество желтого цвета. Оно было растворено в дихлорметане (1 мл). Были добавлены анизол (0,5 мл), а затем трифторуксусная кислота (0,5 мл). Получившийся желтый раствор перемешивался при 45°C в течение ночи, а затем был помещен непосредственно в катионную ионообменную колонну (VARIAN, mega bond elut, 5 г), промыт метанолом и элюирован раствором 1,0 М аммиака в метаноле. Нужные фракции были смешаны и концентрированы. Остаток растирали в дихлорметане, чтобы получить {3-[6-(3-пиперидин-1-ил-пропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил}-метанол [91 мг, 84%, пример 62] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 411,3 (M+H), R=2,42 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,05 (с, 1H), 11,33 (с, 1H), 7,42 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,05 (с, 1H), 6,91 (с, 1H), 6,65 (дд, J=8,5 Гц, J=1,7 Гц, 1H), 6,52 (с, 1H), 5,65 (т, J=5,7 Гц, 1H), 4,70 (д, J=5,5 Гц, 2H), 3,99 (т, J=6,2 Гц, 2H), 2,45-2,36 (м, 6H), 1,89 (квинтет, J=6,7 Гц, 2H), 1,49 (д, J=5,0 Гц, 4H), 1,39 (д, J=5,2 Гц, 2H).
Пример 63
1-{3-[6-(3-Пиперидин-1-ил-пропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}-пиперидин-4-ол
T
Стадия 1. К трет-бутиловому эфиру 6-(3-бром-пропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-гидроксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты [990 мг, 1,63 ммоль, промежуточное соединение (77)] в ацетонитриле (20 мл) были добавлены ДИЭА на полимерной основе (3,83 ммоль/г, 850 мг, 3,26 ммоль) и пиперидин (0,32 мл, 3,26 ммоль). Данная смесь плавно перемешивалась при 60°C в течение 4-х часов. ДИЭА на полимерной основе был отфильтрован, и растворитель был удален. Остаток хроматографировали на силикагеле (дихлорметан/1,0M аммиака в метаноле 95/05), чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-гидроксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-индол-1-карбоновой кислоты [730 мг, 74%, промежуточное соединение (78)] в виде пены белого цвета. ЖХ/МС: 611,2 (M+H), R=3,05 минуты.
T
Стадия 2. К трет-бутиловому эфиру 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-гидроксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-индол-1-карбоновой кислоты [1,21 г, 1,98 ммоль, промежуточное соединение (78)] в дихлорметане (25 мл) при 0°C был добавлен триэтиламин (0,29 мл, 2,28 ммоль) и метансульфонилхлорид (0,34 мл, 4,40 ммоль). Данная смесь перемешивалась при 0°C в течение 30 минут, а затем при комнатной температуре в течение 4 часов. Она была разбавлена дихлорметаном, а затем промыта насыщенным бикарбонатом натрия. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/метанол 90/10), чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-метансульфонилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-пиперидин-1-ил-пропокси)-индол-1-карбоновой кислоты [0,85 г, 62%, промежуточное соединение (79)] в виде пены желтого цвета. ЖХ/МС: 689,3 (M+H), R=2,58 минуты.
T
3
2
1
Стадия 3. К трет-бутиловому эфиру 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-метансульфонилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-индол-1-карбоновой кислоты [150 мг, 0,26 ммоль, промежуточное соединение (79)] в дихлорметане (5 мл) были добавлены триэтиламин (40 мкл, 0,31 ммоль) и 4-гидроксипиперидин (55 мг, 0,52 ммоль). Данная смесь перемешивалась при 45°C в течение 15 часов. Она была концентрирована. Остаток хроматографировали на силикагеле (дихлорметан/1,0 М аммиака в метаноле, 90/10). Нужные фракции были смешаны и концентрированы. Остаток был растворен в дихлорметане (2 мл) и анизоле (0,5 мл). Была добавлена трифторуксусная кислота (0,5 мл). Данный раствор перемешивался при 45°C в течение 3 часов. Затем он был помещен непосредственно в катионную ионообменную колонку (Varian Mega Bond Elut сильнокислотного катионита, 5 г), промытую метанолом и элюируемую раствором 1,0 М аммиака в метаноле. Нужные фракции были смешаны и концентрированы. Остаток растирали в дихлорметане, а затем хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/метанол 90/10), чтобы получить 1-{3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}-пиперидин-4-ол [19 мг, пример 63]. ЖХ/МС: 494,3 (M+H), R=1,77 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,01 (с, 1H), 11,30 (с, 1H), 7,40 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,04 (с, 1H), 6,90 (с, 1H), 6,64 (дд, J1=8,6 Гц, J2=2,1 Гц, 1H), 4,54 (д, J=4 Гц, 1H), 3,98 (т, J=6,2 Гц, 2H), 3,71 (с, 2H), 3,46 (м, 1H), 2,77 (м, 2H), 2,49-2,35 (м, 6H), 2,15 (т, J=9,7 Гц, 2H), 1,90 (т, J=6,7 Гц, 2H), 1,73 (м, 2H), 1,55-1,30 (м, 8H).
Пример 64
2-{5-[4-(4-Фторфенил)-пиперазин-1-илметил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил}-6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол
T
1
Данное соединение [ЖХ/МС: 573,3 (M+H), R=2,17 минуты; H ЯМР [300 МГц,
3
2
(CD)SO]: δ 13,07 (с, 1H), 11,30 (с, 1H), 7,39 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,11 (с, 1H), 6,99 (м, 1H), 6,92 (м, 1H), 6,63 (д, J=8,5 Гц, 1H), 6,53 (с, 1H), 6,98 (т, J=6,2 Гц, 2H), 3,82 (с, 2H), 3,11 (уш. с, 2H), 2,64 (уш. с, 2H), 2,49-2,33 (м, 6H), 1,88 (т, J=6,7 Гц, 2H), 1,49 (м, 4H), 1,38 (м, 2H)] было получено с выходом 46% при помощи методов, аналогичных описанным в примере 63, с использованием 1-(4-фторфенил)-пиперазина вместо 4-гидроксипиперидина на стадии 3 примера 63.
Пример 65
Метил-{3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}-пиридин-2-ил-амин
T
1
Данное соединение [ЖХ/МС: 501,3 (M+H), R=1,93 минуты; H ЯМР [300 МГц,
3
2
(CD)SO]: δ 13,01 (с, 1H), 11,31 (с, 1H), 8,49 (д, J=4,5Гц, 1H), 7,77 (м, 1H), 7,47 (д, J=8 Гц, 1H), 7,40 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,26 (т, J=6,1 Гц, 1H), 7,06 (с, 1H), 6,90 (с, 1H), 6,64 (д, J=8,7H, 1H), 6,52 (с, 1H), 3,99(с, 3H), 3,97 (м, 2H), 3,87 (с, 2H), 2,43 (м, 6H), 1,91 (т, J=6,4 Гц, 2H), 1,53 (м, 4H), 1,40 (м, 2H)] было получено с выходом 6% при помощи методов, аналогичных описанным в примере 63, с использованием метил-пиридин-2-ил-амина вместо 4-гидроксипиперидина на стадии 3 примера 63.
Пример 66
Бензил-{3-[6-(3-пиперидин-1-илпропокси)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}-амин
T
1
Данное соединение [ЖХ/МС: 500,3 (M+H), R=1,68 минуты; H ЯМР [300 МГц,
3
2
(CD)SO]: δ 13,00 (с, 1H), 11,29 (с, 1H), 7,42-7,20 (м, 6H), 7,04 (с, 1H), 6,90 (д, J=2 Гц, 1H), 6,64 (дд, J1=2,2 Гц, J2=8,5 Гц, 1H), 6,53 (с, 1H), 3,98 (т, J=6,5 Гц, 2H), 3,93 (с, 2H), 3,76 (с, 1H), 2,94 (уш. с, 1H), 2,41 (т, J=1,9 Гц, 2H), 2,34 (м, 4H), 1,88 (м, 2H), 1,50 (м, 4H), 1,38 (м, 2H)] было получено с выходом 37% при помощи методов, аналогичных описанным в примере 63, с использованием бензиламина вместо 4-гидроксипиперидина на стадии 3 примера 63.
Пример 67
6-(3-Пиперидин-1-илпропокси)-2-[5-(4-трифторметилпиперидин-1-илметил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол
T
3
2
1
Данное соединение [ЖХ/МС: 546,3 (M+H), R=1,66 минут; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,03 (с, 1H), 11,29 (с, 1H), 7,39 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,07 (с, 1H), 6,89 (с, 1H), 6,63 (м, 1H), 6,52 (с, 1H), 3,98 (т, J=6,3 Гц, 2H), 3,77 (с, 2H), 3,01 (д, J=11 Гц, 2H), 2,43-2,27 (м, 7H), 2,07 (т, J=10,8 Гц), 1,92-1,78 (м, 4H), 1,50 (м, 6H), 1,37 (м, 2H)] было получено с выходом 36% при помощи методов, аналогичных описанным в примере 63, с использованием 4-трифторметилпиперидина вместо 4-гидроксипиперидина на стадии 3 примера 63.
Пример 68
[2-(5-Пиперидин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]метанол
T
Стадия 1. К трет-бутиловому эфиру 5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [410 мг, 0,83 ммоль, промежуточное соединение (73)] в тетрагидрофуране (5 мл) был добавлен раствор 1,0 М ТБАФ в тетрагидрофуране (0,92 мл, 0,92 ммоль) при 0°C. Полученный раствор перемешивался при 0°C в течение 1 часа. Растворитель был удален и остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/этилацетат 90/10), чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-гидроксиметил-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [230 мг, 73%, промежуточное соединение (80)] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 380,97 (M+H), R=2,8 минуты.
T
Стадия 2. К трет-бутиловому эфиру 5-гидроксиметил-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [220 мг, 0,58 ммоль, промежуточное соединение (80)] в дихлорметане (5 мл) были добавлены триэтиламин (85 мкл, 0,67 ммоль) и метансульфонилхлорид (50 мкл, 0,67 ммоль). Смесь перемешивалась при 0°C в течение 15 минут, а затем при комнатной температуре в течение 30 минут. Полученный раствор был промыт насыщенным бикарбонатом калия. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован, чтобы получить трет-бутиловый эфир 3-иод-5-метансульфонилоксиметил-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [220 мг, 79%, промежуточное соединение (81)] в виде пены белого цвета. ЖХ/МС: 458,97 (M+H), R=3,39 минуты.
T
Стадия 3. К трет-бутиловому эфиру 3-иод-5-метансульфонилоксиметил-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [210 мг, 0,46 ммоль, промежуточное соединение (81)] в дихлорметане (3 мл) были добавлены триэтиламин (70 мкл, 0,55 ммоль) и пиперидин (55 мкл, 0,55 ммоль). Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель был удален, и остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/этилацетат 95/05), чтобы получить трет-бутиловый эфир 3-иод-5-пиперидин-1-илметил-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [110 мг, 53%, промежуточное соединение (82)] в виде пены белого цвета. ЖХ/МС: 448,0 (M+H), R=2,55 минуты.
T
Стадия 4. К трет-бутиловому эфиру 3-иод-5-пиперидин-1-илметил-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [390 мг, 0,87 ммоль, промежуточное соединение (82)] в 1,4-диоксане (8 мл) были добавлены трет-бутиловый эфир 5-(трет-бутил-диметилсиланилоксиметил)-1H-индол-2-борной 1-карбоновой кислоты (450 мг, 1,13 ммоль, промежуточное соединение (8), приготовленное, как описано в примерах 1-4 публикации международной патентной заявки № WO 02/32861], и [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II) (комплекс с дихлорметаном (1:1)) (50 мг, 0,07 ммоль), а затем карбонат цезия (1,13 г, 3,48 ммоль) и вода (3 мл). Данная смесь перемешивалась при 80°C в течение 3-х часов. Затем она была трижды экстрагирована этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаточное маслянистое вещество хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/метанол 95/05), чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-пиперидин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-индол-1-карбоновой кислоты [310 мг, 53%, промежуточное соединение (83)] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 681,33 (M+H), R=3,88 минуты.
T
Стадия 5. К трет-бутиловому эфиру 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-пиперидин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-индол-1-карбоновой кислоты [530 мг, 0,78 ммоль, промежуточное соединение (83)] в тетрагидрофуране (10 мл) при 0°C был добавлен раствор 1 М ТБАФ в тетрагидрофуране (0,86, 0,86 ммоль). Смесь перемешивалась при 0°C в течение 2 часов. Она была разбавлена этилацетатом и промыта водным хлоридом аммония. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 80/20), чтобы получить трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-пиперидин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-гидроксиметилиндол-1-карбоновой кислоты [305 мг, 70%, промежуточное соединение (84)] в виде пены белого цвета. ЖХ/МС: 567,3 (M+H), R=2,89 минуты.
T
3
2
1
Стадия 6. К трет-бутиловому эфиру 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-пиперидин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-гидроксиметилиндол-1-карбоновой кислоты [280 мг, 0,50 ммоль, промежуточное соединение (84)] в смеси тетрагидрофурана (5 мл) и воды (1 мл) был добавлен гидроксид натрия (150 мг, 3,75 ммоль). Смесь перемешивалась при 65°C в течение ночи. Она была разбавлена этилацетатом. Смесь была промыта насыщенным водным хлоридом аммония. Водный слой был экстрагирован этилацетатом. Объединенные органические слои были высушены над сульфатом магния и концентрированы. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/1,0 М аммиака в метаноле 95/05, затем 50/50), чтобы получить [2-(5-пиперидин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-ил]-метанол [10 мг, 5%, пример 68] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 367,1 (M+H), R=2,22 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,08 (с, 1H), 11,45 (с, 1H), 7,47 (с, 1H), 7,34 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,07 (с, 1H), 7,05 (с, 1H), 6,57 (с, 1H), 4,98 (м, 1H), 4,53 (д, J= 5,8 Гц, 2H), 3,71 (с, 2H), 2,44 (м, 4H), 1,53 (м, 4H), 1,42 (м, 2H).
Пример 69
1-{3-[2-(5-Бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}пиперидин-4-ол
T
Стадия 1. К (4-бромтиофен-2-ил)метанолу (18,8 г, 97,4 ммоль, промежуточное соединение (85)] в тетрагидрофуране (200 мл) был добавлен гидрид натрия (3,9 г, 97,4 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 30 минут. Был добавлен иодид тетрабутиламмония (3,6 г, 9,7 ммоль), а затем бензилбромид (11,6 мл, 97,4 ммоль). Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 1 часа. Была добавлена вода. Полученная смесь была экстрагирована диэтиловым эфиром. Эфирный слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 90/10), чтобы получить 2-бензилоксиметил-4-бромтиофен [29,2 г, промежуточное соединение (86)] (количественно) в виде маслянистого вещества желтого цвета. ЖХ/МС: 282,96 (M+H), R=3,68 минуты.
Стадия 2. К 2-бензилоксиметил-4-бромтиофену (29,2 г, 103 ммоль, промежуточное соединение (86)] в тетрагидрофуране (100 мл) был по каплям добавлен раствор 1,8 М ДИАЛ в тетрагидрофуране (63 мл, 113 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. Данный раствор перемешивался при 0°C в течение 30 минут. Затем был добавлен N-формилпиперидин (13,75 мл, 127 ммоль), и полученная реакционная смесь перемешивалась при 0°C в течение 45 минут, а затем при комнатной температуре в течение 15 минут и гасилась насыщенным водным хлоридом аммония. Смесь была экстрагирована этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Оставшееся маслянистое вещество хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 90/10), чтобы получить 5-бензилоксиметил-3-бромтиофен-2-карбальдегид [23,3 г, промежуточное соединение (87)] в виде маслянистого вещества оранжевого цвета.
T
Стадия 3. К (5-бензилоксиметил-3-бромтиофен-2-карбальдегиду (23,2 г, 74,6 ммоль, промежуточное соединение (87)] в этаноле был добавлен гидразон бензофенона (16,1 г, 82 ммоль). Смесь перемешивалась при 80°C в течение ночи. Растворитель был удален. Остаточное маслянистое вещество хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 60/40, затем 0/100), чтобы получить N-бензогидрилиден-N'-[1-(5-бензилоксиметил-3-бромтиофен-2-ил)-метилиден]гидразин [34,1 г, 68%, 2 стадии, промежуточное соединение (88)] в виде воскообразного вещества желтого цвета. ЖХ/МС: 489,0 (M+H), R=1,48 минуты и 1,84 минуты.
T
3
2
1
Стадия 4. К N-бензогидрилиден-N'-[1-(5-бензилоксиметил-3-бромтиофен-2-ил)-метилиден]гидразину (34 г, 69,5 ммоль, промежуточное соединение (88)] в толуоле (500 мл) были добавлены гидразон бензофенона (16,4, 83,4 ммоль), карбонат цезия (38,4 г, 118,2 ммоль), 1,1'-дифенилфосфиноферроцен (5,8 г, 10,4 ммоль) и ацетат палладия (II) (1,17 г, 5,2 ммоль). Суспензия перемешивалась при 90°C в атмосфере азота до завершения реакции. Растворитель был удален. Остаточное маслянистое вещество хроматографировали (элюент - смесь этилацетат/н-гептан 10/90) с образованием маслянистого вещества оранжевого цвета. Его растворяли в этаноле (350 мл). Была добавлена концентрированная соляная кислота (100 мл). Полученная темная смесь перемешивалась при 80°C в течение 15 часов, а затем была разбавлена водой. Смесь была экстрагирована этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 80/20, затем 50/50), чтобы получить 5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол [5,2 г, 37%, промежуточное соединение (89)] в виде порошка оранжевого цвета. ЖХ/МС: 245,1 (M+H), R=2,83 минуты. H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: таутомер 1: δ 12,97 (с, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,40-7,25 (м, 5H), 7,15-7,05 (м,1H), 4,71 (с, 2H), 4,55 (с, 2H) таутомер 2: δ 13,27 (уш. с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,40-7,25 (м, 5H), 7,15-7,05 (м,1H), 4,71 (с, 2H), 4,55 (с, 2H).
T
Стадия 5. 5-Бензилоксиметил-3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразол [промежуточное соединение (90), ЖХ/МС: 371,0 (M+H), R=3,49 минуты] был приготовлен с выходом 77% при помощи методов, аналогичных описанным в примере 5A, с использованием 5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразола [промежуточное соединение (89)] вместо 1H-тиено[3,2-c]пиразола.
Стадия 6. Трет-бутиловый эфир 5-бензилоксиметил-3-иодтиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (91)] был приготовлен с выходом 100% при помощи методов, описанных в примере 5B, с использованием 5-бензилоксиметил-3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразола [промежуточное соединение (90)] вместо 3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразола.
Стадия 7. Трет-бутиловый эфир 2-(5-бензилоксиметил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (92)] был приготовлен с выходом 39% при помощи методов, аналогичных описанным в примере 5C, с использованием трет-бутилового эфира 5-бензилоксиметил-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (91)] вместо трет-бутилового эфира 3-иод-тиено[3,2c]пиразол-1-карбоновой кислоты и 6-(трет-бутил-диметилсиланокси)-1-(трет-бутоксикарбонил)-1H-индол-2-бороновой кислоты [промежуточное соединение (74), приготовленное по методу, описанному в примерах 4-6 публикации международной патентной заявки № WO 02/32861] вместо 5-(трет-бутил-диметилсиланокси)-1-(трет-бутоксикарбонил)-1H-индол-2-бороновой кислоты.
T
Стадия 8. Трет-бутиловый эфир 2-(5-бензилоксиметил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидроксииндол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (93), ЖХ/МС: 576,2 (M+H), R=4,0 минуты] был приготовлен с выходом 33% при помощи методов, аналогичных описанным в примере 5D, с использованием трет-бутилового эфира 2-(5-бензилоксиметил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутил-диметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (92)] вместо трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутил-диметилсиланокси)-индол-1-карбоновой кислоты.
T
Стадия 9. Трет-бутиловый эфир 2-(5-бензилоксиметил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-бромпропокси)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (94), ЖХ/МС: 696,0 (M+H), R=4,82 минуты] был приготовлен с выходом 72% при помощи методов, аналогичных описанным в примере 5E, с использованием трет-бутилового эфира 2-(5-бензилоксиметил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидрокси-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (93)] вместо трет-бутилового эфира 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2c]пиразол-3-ил)-5-гидрокси-индол-1-карбоновой кислоты.
T
3
2
1
Стадия 10. 1-{3-[2-(5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол [пример 69, ЖХ/МС: 517,1 (M+H), R=3,02 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,17 (уш. с, 1H), 11,35 (уш. с, 1H), 7,45-7,25 (м, 6H), 7,20 (с, 1H), 6,91 (д, J=1,7 Гц, 1H), 6,65 (дд, J1=8,6 Гц, J2=2,1 Гц, 1H), 6,55 (с, 1H), 4,78 (с, 2H), 4,59 (с, 2H), 4,53 (м, 1H), 3,98 (т, J= 6,4 Гц, 2H), 3,44 (м, 1H), 2,72 (м, 2H), 2,50 (м, 2H), 2,01 (м, 2H), 1,89 (м, 2H), 1,71 (м, 2H), 1,32 (м, 2H)] был приготовлен с выходом 52% при помощи методов, аналогичных описанным на стадии 6 примера 5, с использованием трет-бутилового эфира 2-(5-бензилоксиметил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(3-бром-пропокси)-индол-1-карбоновой кислоты [промежуточное соединение (94)] вместо трет-бутилового эфира 5-(3-бром-пропокси)-2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1-карбоновой кислоты и 4-гидроксипиперидина вместо пиперидина.
Пример 70
3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
T
3
2
1
К 1-трет-бутиловому 6-метиловому эфиру 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты [250 мг, 0,5 ммоль, промежуточное соединение (36)] в тетрагидрофуране (5 мл) был добавлен раствор 1,0 М этилмагнийбромида в тетрагидрофуране (2,5 мл, 2,5 ммоль) при -45°C в атмосфере азота. Смесь оставили нагреваться до комнатной температуры, а потом перемешивали в течение 3 часов. Были добавлены еще 2 мл раствора 1,0 М этилмагнийбромида. Получившийся раствор перемешивался при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционная смесь гасилась смесью соляного раствора и насыщенного хлорида аммония и экстрагировалась этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 50/50), чтобы получить 3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол [137 мг, 92%, пример 70] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 326,2 (M+H), R=3,07 минуты; H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,18 (с, 1H), 11,43 (с, 1H), 7,73 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,50 (с, 1H), 7,44 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,18 (д, J= 5,2 Гц, 1H), 6,94 (дд, J1=1,1 Гц, J2=8,4 Гц, 1H), 6,56 (д, J=1,5 Гц, 1H), 4,41 (с, 1H), 1,76 (м, 4H), 0,66 (т, J=6,2 Гц, 6H).
Пример 71
3-[2-(5-Бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
T
T
Стадия 1. К трет-бутиловому эфиру 5-бензилоксиметил-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты (1,78 г, 3,78 ммоль, промежуточное соединение (91)] в 1,4-диоксане были последовательно добавлены иодид меди (0,07 г, 0,38 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II) (комплекс с дихлорметаном (1:1)) (0,14 г, 0,19 ммоль) и триметил(1-трет-бутиловый-6-метиловый эфир индол-1,6-дикарбоновой кислоты)олово [4,1 г, 9,45 ммоль, промежуточное соединение (37)]. Смесь перемешивалась при 90°C в течение 5 часов, а затем при комнатной температуре в течение 2 часов. Она была разбавлена диэтилацетатом и промыта насыщенным водным бикарбонатом натрия и солевым раствором. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь н-гептан/этилацетат 80/20, затем 0/100), чтобы получить 1-трет-бутиловый 6-метиловый эфир 2-(5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты [1,66 г, 71%, промежуточное соединение (96), ЖХ/МС: 618,3 (M+H), R=4,57 минуты] в виде порошка желтого цвета и 1-трет-бутиловый 6-метиловый эфир 2-(5-бензилоксиметил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты [0,37 г, 19%, промежуточное соединение (95), ЖХ/МС: 518,2 (M+H), R=3,87 минуты] в виде порошка зеленого цвета.
T
3
2
1
Стадия 2. К 1-трет-бутиловому 6-метиловому эфиру 2-(5-бензилоксиметил-1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты [0,35 г, 0,68 ммоль, промежуточное соединение (95)] в тетрагидрофуране (5 мл) при -78°C в атмосфере азота был добавлен раствор 1,0 М этилмагнийбромида в тетрагидрофуране (1,7 мл, 1,7 ммоль). Смесь перемешивалась при -78°C в течение 1-го часа. Было добавлено еще 1,7 мл раствора 1,0 М этилмагнийбромида. Температура была повышена до -45°C, и смесь перемешивалась в течение 1 часа. Затем ее оставили нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным водным хлоридом аммония и экстрагировали этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - дихлорметан/этилацетат 50/50), чтобы получить 3-[2-(5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол [95 мг, 61%, пример 71] в виде порошка бежевого цвета. ЖХ/МС: 446,3 (M+H), R=3,19 минуты. H ЯМР [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,18 (с, 1H), 11,44 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,43 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,36 (м, 5H), 7,21 (с, 1H), 6,93 (м, 1H), 6,55 (д, J=1,2 Гц, 1H), 4,78 (с, 2H), 4,59 (с, 2H), 4,43 (с, 1H), 1,75 (м, 4H), 0,66 (м, 6H).
Пример 72
[2-(5-Бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-дипиридин-2-илметанол
T
3
2
1
В 2-бромпиридин (305 мг, 1,9 ммоль) в обезвоженном тетрагидрофуране (2 мл) при -78°C в атмосфере азота был добавлен раствор 2,5 М н-бутиллития в тетрагидрофуране (0,76 мл, 1,9 ммоль). Добавляли раствор 1-трет-бутилового 6-метилового эфира 2-(5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-индол-1,6-дикарбоновой кислоты [160 мг, 0,38 ммоль, промежуточное соединение (96)] в тетрагидрофуране (5 мл). Темная смесь медленно нагревалась до комнатной температуры. Смесь гасили насыщенным водным хлоридом аммония и экстрагировали этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток был дважды хроматографирован на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/этилацетат 70/30, затем 50/50), чтобы получить [2-(5-бензилоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-дипиридин-2-илметанол [60 мг, 33%, пример 72] в виде порошка белого цвета. ЖХ/МС: 544,2 (M+H), R=2,65 минуты. ЯМР H [300 МГц, (CD)SO]: δ 13,19 (уш. с, 1H), 11,45 (уш. с, 1H), 8,49 (м, 2H), 7,77 (м, 2H), 7,63 (д, J=7,8 Гц, 2H), 7,43-7,26 (м, 9H), 7,19 (с, 1H), 7,94 (д, J=8,6 Гц, 1H), 6,73 (д, J=3,7 Гц, 1H), 6,57 (с, 1H), 4,77 (с, 2H), 4,58 (с, 2H).
Используя описанные выше методы, можно приготовить следующие соединения.
Пример 73
1-{3-[6-(1-Этил-1-гидроксипропил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил}-пиперидин-4-ол
Пример 74
3-[2-(5-Диметиламинометил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 75
3-(2-{5-[4-(Пиридин-4-илокси)-пиперидин-1-илметил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил}-1H-индол-6-ил)-пентан-3-ол
Пример 76
3-[2-(5-Пиперазин-1-илметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 77
3-[2-(5-Пиперазин-1-ил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 78
3-{2-[5-(3-Циклопропил-[1,2,4]оксадиазол-5-ил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол-6-ил}-пентан-3-ол
Пример 79
3-[2-(5-Пиридин-4-ил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 80
Бис-(1-Метилпиперидин-4-ил)-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-метанол
Пример 81
3-[2-(5-Дифторметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 82
4-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пиперидин-4-ол
Пример 83
6-(4-Фторпиперидин-4-ил)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол
Пример 84
2-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-бутан-2-ол
Пример 85
1-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-этанон
Пример 86
3-[3-Пиперидин-4-ил-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 87
3-[3-Пиридин-4-ил-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 88
3-[3-(4-Метилпиперазин-1-ил)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 89
3-[3-Морфолин-4-илметил-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 90
4-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-тетрагидро-пиран-4-ол
Пример 91
3-{2-[5-(1-Гидрокси-1-метилэтил)-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил]-1H-индол-6-ил}-пентан-3-ол
Пример 92
3-[2-(5-Метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-пиридин-4-ил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 93
4-[2-(5-Метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-ил]-тетрагидро-пиран-4-ол
Пример 94
3-[2-(5-Метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-пиперазин-1-ил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 95
3-[2-(5-Метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-морфолин-4-илметил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 96
2-{3-[6-(1-Этил-1-гидроксипропил)-1H-индол-2-ил]-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-ил}-тетрагидро-фуран-3-карбонитрил
Пример 97
3-[2-(5-Метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-метил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Пример 98
3-[2-(5-Метоксиметил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-3-пиперидин-4-ил-1H-индол-6-ил]-пентан-3-ол
Стадии синтеза для примера 22 подробно описаны ниже и показаны на фиг. 1:
На фиг. 1 приведены следующие промежуточные соединения (1), (2), (3), (4), (5), (6) и (7):
Промежуточное соединение (1)
(4-бромтиофен-2-илметил)диметиламин
T
К раствору 4-бром-2-тиофен-карбоксальдегида (5 г, 26,2 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (50 мл) добавляют триацетоксиборгидрид натрия (8,3 г, 39,3 ммоль) и диметиламин (14,5 мл, 28,8 ммоль), а затем уксусную кислоту (1,55 мл, 39,3 ммоль). Данную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Нерастворимое вещество фильтруют и промывают диэтиловым эфиром. Маточный раствор концентрируют. Получившееся густое маслянистое вещество хроматографируют на силикагеле (элюент - дихлорметан/1,0 М аммиака в метаноле, от 95:05 до 90:10) и получают маслянистое вещество оранжевого цвета. Его растворяют в дихлорметане и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушат над сульфатом магния, концентрируют и получают (4-бромтиофен-2-илметил)-диметиламин [4,08 г, 71%, промежуточное соединение (1)] в виде маслянистого вещества оранжевого цвета. ЖХ/МС: R=0,63 минуты, 219,99 m/e (M+H).
Промежуточное соединение (2)
3-бром-5-диметиламинометилтиофен-2-карбальдегид
T
К (4-бромтиофен-2-илметил)диметиламину [4,08 г, 18,5 ммоль, промежуточное соединение (1)] в тетрагидрофуране (40 мл) при 0°C в атмосфере азота добавляют литийдиизопропиламин (2,0 М в смеси тетрагидрофуран-пентан производства Aldrich Chemicals, 20,4 ммоль). Полученный оранжевый раствор перемешивают при 0°C в течение 30 минут. Затем добавляют N-формилпиперидин (2,5 мл, 22,2 ммоль). Смесь перемешивают при 0°C в течение 1 часа. Смесь разбавляют этилацетатом, промывают солевым раствором, сушат над сульфатом магния и концентрируют. Оставшееся маслянистое вещество оранжевого цвета хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан/1,0 М аммиака в метаноле, 95:05), чтобы получить 3-бром-5-диметиламинометилтиофен-2-карбальдегид [4,4 г, промежуточное соединение (2)] в виде маслянистого вещества оранжевого цвета. ЖХ/МС: R=0,47 минуты, 247,98 m/e (M+H).
Промежуточное соединение (3)
[5-(Бензогидрилиденгидразонометил)-4-бромтиофен-2-илметил]диметиламин
T
К 3-бром-5-диметиламинометилтиофен-2-карбальдегиду [4,30 г, 17,3 ммоль, промежуточное соединение (2)] в этаноле (40 мл) добавили гидразон бензофенона (3,75 г, 19,0 ммоль). Раствор нагревали при 65°C в течение 5 часов. Растворитель был удален при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - н-гептан/этилацетат 90:10), чтобы получить [5-(бензогидрилиденгидразонметил)-4-бромтиофен-2-илметил]диметиламин [5,57 г, 75%, промежуточное соединение (3)] в виде маслянистого вещества оранжевого цвета. ЖХ/МС: R=2,72 минуты, 426,05 m/e (M+H).
Промежуточное соединение (4)
[4-(N'-Бензогидрилиденгидразино)-5-(бензогидрилиденгидразонметил)тиофен-2-илметил]-диметиламин
(4)
T
К соединению (3) (5,5 г, 12,9 ммоль) в растворе в толуоле (100 мл) добавили гидразон бензофенона (3,03 г, 14,4 ммоль), карбонат цезия (7,15 г, 21,9 ммоль), диацетат палладия (0,22 г, 2,80 ммоль) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (1,07 г, 1,94 ммоль). Получившуюся суспензию нагревали при 100°C в течение 4 1/2 часов. Затем растворитель удалили при пониженном давлении. Остаточное маслянистое вещество хроматографировали на силикагеле (элюент - дихлорметан/метанол от 100:0 до 90:10), чтобы получить [4-(N'-бензогидрилиденгидразино)-5-(бензогидрилиденгидразонометил)тиофен-2-илметил]диметиламин [6,98 г, 100%, промежуточное соединение (4)] в виде пены оранжевого цвета. ЖХ/МС: R=3,38 минуты, 542,21 m/e (M+H).
Промежуточное соединение (5)
Диметил-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил)-амин
T
В [4-(N'-бензогидрилиденгидразино)-5-(бензогидрилиден-гидразонометил)тиофен-2-илметил]-диметиламин [промежуточное соединение (4)] в этаноле (100 мл) было добавлено 50 мл концентрированной соляной кислоты. Полученная темно-красная смесь перемешивалась при 85°C в течение 2 часов. Была добавлена вода, а затем добавлялся твердый карбонат натрия, пока pH не стал слегка основным. Затем реакционная смесь была дважды экстрагирована этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали (элюент - смесь этилацетат/1,0 М аммиака в метаноле, 90:10), чтобы получить диметил-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил)-амин [1,06 г, 45% промежуточное соединение (5)] в виде твердого вещества коричневого цвета. ЖХ/МС: R=0,4 минуты, 182,09 m/e (M+H).
Промежуточное соединение (6)
(3-Иод-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил)-диметиламин
T
К диметил-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил)-амину [1 г, 5,51 ммоль, промежуточное соединение (5)] в растворе в диметилформамиде (10 мл) был добавлен иод (2,1 г, 8,3 ммоль) и гидрохлорид калия (0,930 г, 16,5 ммоль). Темный раствор перемешивался при комнатной температуре в течение 5 часов. Был добавлен бисульфит натрия (1,5 г) в водном растворе. Получившаяся суспензия была дважды экстрагирована этилацетатом. Органический слой был высушен над сульфатом магния и концентрирован. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - смесь этилацетат/1,0 М аммиака в метаноле 90:10), чтобы получить (3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил)-диметиламин [0,87 г, 51%, промежуточное соединение (6)] в виде порошка бежевого цвета. ЖХ/МС: R=1,20 минуты, 307,98 m/e (M+H).
Промежуточное соединение (7)
Трет-бутиловый эфир 5-диметиламинометил-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты
T
К (3-иод-1H-тиено[3,2-c]пиразол-5-илметил)-диметиламину [0,77 г, 2,50 ммоль, промежуточное соединение (6)] в суспензии в дихлорметане (10 мл) были добавлены триэтиламин (0,36 мл, 2,75 ммоль), трет-бутилкарбонилангидрид (0,66 г, 3,00 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (60 мг, 0,2 ммоль). Суспензия быстро превратилась в раствор. После этого растворитель был удален. Остаток хроматографировали на силикагеле (элюент - этилацетат), чтобы получить трет-бутиловый эфир 5-диметиламинометил-3-иод-тиено[3,2-c]пиразол-1-карбоновой кислоты [960 мг, 94%, промежуточное соединение (7)] в виде твердого вещества желтого цвета. ЖХ/МС: R=2,07 минуты, 408,01 m/e (M+H).
ПРОТОКОЛ ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА IN VITRO ДЛЯ ИТК
Анализ мышиных спленоцитов на IL-4, стимулированный анти-CD3.
Введение
Тирозинкиназа ИТК участвует во внутриклеточных сигнальных событиях, индуцируемых поверхностными рецепторами лимфоцитов. Так как у мыши с недостатком ИТК понижается продуцирование IL-4 (интерлейкина-4) T-клетками, при помощи клеточного анализа продуцирование IL-4 измеряют внутриклеточную эффективность ингибиторов ИТК настоящего изобретения. В этом анализе уровень IL-4 измеряется в среде мышиных спленоцитов, стимулированных анти-CD3, и определяется способность соединений данного изобретения ингибировать эту реакцию.
Условия анализа
Селезенку мышей линии BALB/c отделяются, и из нее готовят суспензию смешанных спленоцитов. Селезенку гомогенизируют при помощи клеточного фильтра (Falcon, кат. №352350 и 5 мл шприц) в среде RPMI. Смесь центрифугируют и гранулы суспендируют в 3 мл буфера для лизиса красных кровяных клеток (Red Blood Cell Lysing Buffer, Sigma, кат. №7757) и оставляют на 10 минут при комнатной температуре. Клетки снова центрифугируют и повторно суспендируют в среде RPMI, содержащей 10% ЭТС, и пропускают через клеточный фильтр. Полное количество клеток определяют гемоцитометром.
o
2
Количество клеток спленоцитов подбирается равным 10 миллионам на миллилитр среды RPMI, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС), и по 100 мкл данной суспензии помещается в лунки 96-луночного планшета с круглым дном. 50 мкл среды RPMI, содержащей 4-кратную конечную концентрацию анализируемого соединения, добавляется в каждую ячейку. Для определения IC50 используются следующие концентрации соединения. Начальная концентрация 10 мкМ, после чего следует 7 разбавлений 1:3, и в каждой концентрации соединение помещается в три лунки. Добавляется 50 мкл 4-кратной концентрации. Затем клеточные культуры стимулируют добавлением 50 мкл раствора 4 мкг/мл анти-CD3 антител, (BD Bioscience, кат. № 553166), приготовленного в среде RPMI, содержащей 10% ЭТС, и инкубируют при 37C в CO-инкубаторе в течение 3-х дней. В конце 3-го дня инкубации культуральную среду удаляют, а по 50 мкл раствора анализируют на предмет образования IL-4 методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА, набор IL-4 ELISA производства R&D Systems, Inc., кат. № M4000) в стандартных условиях, описанных производителем.
Уровни IL-4 откладывают на графике как функцию концентрации соединения. По получающейся кривой определяют концентрацию соединения, приводящую к 50% ингибированию IL-4, которая называется IC50 (IL-4).
Порядок проведения анализа
7
1. Добавить 100 мкл 1×10/мл мышиных спленоцитов в среде RPMI, содержащей 10% ЭТС, в 96-луночные планшеты с круглым дном.
2. Добавить 50 мкл соединений ИТК (4-кратную конечную концентрацию) в среде RPMI, содержащей 10% ЭТС.
3. Добавить 50 мкл раствора 4 мкг/мл анти-CD3 антител в среде RPMI, содержащей 10% ЭТС.
2
4. Инкубировать при 37°C в CO-инкубаторе в течение 3-х дней.
5. Перенести 150 мкл культуральной среды в свежий планшет.
6. 50 мкл среды использовать для ИФА-анализа (набор R&D, кат. № M4000).
Протокол определения ингибирования ИТК при помощи планшета FlashPlate
33
33
TM
ИТК киназа продуцируется с N-терминальной меткой мальтозу-связывающего белка (MW=~114 кДа) при помощи бакуловирусной системы экспрессии. Перенос радиоактивного [γ-P] фосфата с [γ-P]АТФ на ИТК в процессе аутофосфорилирования ИТК измеряется методом счета сцинтилляций. 384-луночные микропланшеты FlashPlate Plus с покрытием из стрептавидина (PerkinElmer Life Sciences) предназначены для проведения радиометрического анализа внутри планшета. Внутренняя поверхность каждой лунки постоянно покрыта тонким слоем сцинтиллятора и ковалентно-связанным слоем стрептавидина. ИТК выращивается с
33
TM
33
33
33
[γ-P]АТФ, биотинилированным анти-ОБМ антителом (Cell Signaling Technology) и анализируемыми соединениями в 384-луночном покрытом стрептавидином планшете FlashPlate. Биотинилированое анти-ОБМ жестко связывается с ОБМ-меченой ИТК и сшивает ее со стрептавидином на поверхности планшета. Непрореагировавшая P-АТФ смывается, и измеряется P-фосфорилированная ИТК, при этом встроенный в ИТК [γ-P] передает возбуждение сцинтиллятору на поверхности лунки к испусканию света. Радиоактивность регистрируется при помощи сцинтилляционного счетчика Packard TopCount. Реагенты отмеряются и дозируются при помощи роботизированного оборудования производства Beckman Biomek. Тестовые соединения (2 мкл на лунку) предварительно разбавляются из растворов в 1 мМ 100% диметилсульфоксиде в 30% растворы диметилсульфоксида в воде, для получения кривых дозовой зависимости (кривые из 10 точек от (конечной) концентрации 30 мкМ до ~1 нМ); все тесты выполняются дважды. Фоновое связывание анализируется посредством замены ингибитора фермента ЭДТА (этилендиаминтетраацетат, конечная концентрация 25 мМ) на анализируемое соединение, а максимальное связывание анализируется по включению аналитического буфера вместо соединения. Сначала в лунку добавляется анализируемое соединение (2 мкс), а затем 10 мкл раствора фермента в аналитическом буфере. После 30-минутной предварительной инкубации добавляются все остальные реагенты в объеме 10 мкл. Конечные концентрации реагентов в лунке следующие: 20 нМ фермента, 0,25 мкКи
33
2
2
[γ-P]АТФ, аналитический буфер: 20 мМ HEPES (N-2-гидроксиэтилпиперазин-N-2-этансульфоновая кислота) (pH 7,5), 0,15 M NaCl, 3 мМ MgCl, 3 мМ MnCl, 0,01% Triton X-100, 1 мМ ДДТ, 5% глицерина и 0,01% γ-глобулина. Планшет инкубируется при комнатной температуре в течение 60 минут, чтобы прошла реакция киназы. Реакция останавливается при помощи 20 мкл раствора 50 мМ ЭДТА (этилендиаминтетраацетат), и биотинилированному анти-ОБМ позволяют связываться с ИТК стрептавидином в течение последующих 60 минут при комнатной температуре. Несвязанные реагенты отмываются физиологическим раствором с фосфатным буфером, 2×100 мкл. Радиоактивность измеряется в течение 45 с в каждой лунке.
Результаты этих анализов для соединений данного изобретения приведены в таблице I.
Таблица I
МОЛЕКУЛЯРНАЯ СТРУКТУРА И НАЗВАНИЕ ВЕЩЕСТВА
Молекулярная масса
Наблюдаемое M+H
ВЭЖХ, время удержания
IC50(ингибирование фермента), нМ
IC50Анализ ингибирования высвобождения IL-4, нМ
<img file="00000205.tif" he="18" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-бензоимидазол
240,05
241,04
1,82
167
264
<img file="00000206.tif" he="17" wi="37" img-content="undefined" img-format="tif" />6-Метокси-2-(1-H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1-H-бензоимидазол
270,06
271,05
1,9
157
164
<img file="00000207.tif" he="20" wi="40" img-content="undefined" img-format="tif" />3-(6-Метокси-1H-бензоимидазол-2-ил)-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразол
320,07
321,05
2,43
86
2900
<img file="00000208.tif" he="28" wi="46" img-content="undefined" img-format="tif" />Трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-5-(трет-бутил-диметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты
569,24
570,1
4,29
<img file="00000209.tif" he="25" wi="46" img-content="undefined" img-format="tif" />5-(3-Пиперидин-1-ил-пропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол
380,52
381,18
2,18
16,6
153
<img file="00000210.tif" he="27" wi="56" img-content="undefined" img-format="tif" />1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол
396,16
397,18
2,17
3,65
180
<img file="00000211.tif" he="25" wi="51" img-content="undefined" img-format="tif" />6-(3-Пиперидин-1-ил-пропокси)-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол
380,17
381,18
2,32
1,89
163
<img file="00000212.tif" he="30" wi="52" img-content="undefined" img-format="tif" />1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ол
396,16
397,4
2,45
1,62
11,3
<img file="00000213.tif" he="32" wi="50" img-content="undefined" img-format="tif" />(1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ил)-метанол
410,18
411,29
2,49
2,08
129
<img file="00000214.tif" he="26" wi="56" img-content="undefined" img-format="tif" />6-[3-(4-Этил-пиперазин-1-ил)-пропокси]-2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол
409,19
410,3
2,27
2,94
289
<img file="00000215.tif" he="25" wi="51" img-content="undefined" img-format="tif" />Диэтил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-амин
368,17
369,19
2,35
5,22
<img file="00000216.tif" he="28" wi="51" img-content="undefined" img-format="tif" />Диаллил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-амин
392,17
393,14
2,48
12,3
<img file="00000217.tif" he="25" wi="55" img-content="undefined" img-format="tif" />1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-пирролидин-3-ол
382,15
383,17
2,2
15,1
<img file="00000218.tif" he="21" wi="45" img-content="undefined" img-format="tif" />Диметил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-амин
340,14
341,13
2,18
24,2
<img file="00000219.tif" he="30" wi="52" img-content="undefined" img-format="tif" />2-(Метил-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-6-илокси]-пропил}-амино)-этанол
370,14
371,25
2,13
3,26
<img file="00000220.tif" he="16" wi="35" img-content="undefined" img-format="tif" />5-(Метокси-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин
270,05
271,02
2,03
224
<img file="00000221.tif" he="28" wi="53" img-content="undefined" img-format="tif" />1-{3-[2-(1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол
396,16
397,17
2,03
40,9
<img file="00000222.tif" he="30" wi="56" img-content="undefined" img-format="tif" />1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ол
396,16
397,2
1,87
76,3
<img file="00000223.tif" he="32" wi="56" img-content="undefined" img-format="tif" />(1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]-пропил}-пиперидин-3-ил)-метанол
410,17
411,18
2,07
41
<img file="00000224.tif" he="29" wi="55" img-content="undefined" img-format="tif" />1-{3-[2-(1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-илокси]-пропил}-пирролидин-3-ол
382,14
383,2
2,48
45,7
<img file="00000225.tif" he="33" wi="49" img-content="undefined" img-format="tif" />3-(5-(3-Пиперидин-1-ил-пропокси)-1H-бензоимидазол-2-ил)-1H-бензо[4,5]тиено[3,2-c]пиразол гидрохлорид
431,18
432,18
2,49
112
<img file="00000226.tif" he="19" wi="56" img-content="undefined" img-format="tif" />2-{1H-Тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты (2-тиофен-2-ил-этил)-амид
392,07
393,2
3,22
1<img file="00000227.tif" he="34" wi="55" img-content="undefined" img-format="tif" />Трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутил-диметилсиланилокси)-индол-1-карбоновой кислоты
569,24
570,2
4,22
<img file="00000228.tif" he="34" wi="52" img-content="undefined" img-format="tif" />Трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-диметиламинометил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-(трет-бутил-диметилсиланокси)-индол-1-карбоновой кислоты
626,29
627,28
3,73
<img file="00000229.tif" he="35" wi="47" img-content="undefined" img-format="tif" />Трет-бутиловый эфир 2-(1-трет-бутоксикарбонил-5-диметиламинометил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-6-гидрокси-индол-1-карбоновой кислоты
512,2
513,2
2,47
<img file="00000230.tif" he="25" wi="59" img-content="undefined" img-format="tif" />1-{3-[2-(5-Диметиламиноэтил-1H-тиено[3,2-c]пиразол-3-ил)-1Н-индол-6-илокси]-пропил}-пиперидин-4-ол
453,2
454
1,87