Микробиологическое обоснование использования бензалкония хлорида в мягкой лекарственной форме для наружного применения

ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВ

Ан.А. Яремчук1, О.М. Хишова1, Н.П. Половко2

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

БЕНЗАЛКОНИЯ ХЛОРИДА В МЯГКОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ ДЛЯ НАРУЖНОГО ПРИМЕНЕНИЯ

1Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет 2Национальный фармацевтический университет, г. Харьков, Украина

Статья посвящена исследованию влияния концентрации бензалкония хлорида на антимикробную активность мази на основе из макроголов.

Представлены экспериментальные данные изучения антимикробной активности «in vitro» образцов мази с различным содержанием бензалкония хлорида методом диффузии в агар на штаммах: Escherichia coli АТСС 25922, Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027, Staphylococcus aureus АТСС 6538-P, Bacillus pumilis NCTC 8241, Bacillus subtilis АТСС 6633, Proteus vulgaris АТСС 6380, Proteus mirabilis АТСС 12453, а также дрожжеподобные грибы рода кандида - Candida albicans АТСС 10231 и Candida utilis ЛИА-01. Во введении представлена современная проблема патогенеза и лечения ран.

На основании результатов микробиологических исследований подобрана и обоснована оптимально-эффективная концентрация бензалкония хлорида в мази.

Ключевые слова: антимикробная активность, агар, бензалкония хлорид, оптимально-эффективная концентрация, тест-культура.

ВВЕДЕНИЕ

Проблема патогенеза и лечения ран относится к числу наиболее актуальных разделов медицины и имеет многовековую историю.

Характер и направленность раневого процесса определяются действием нескольких факторов:

- во-первых, состоянием повреждения, являющегося «входными воротами» инфекции;

- во-вторых, наличием возбудителя гнойной инфекции, его видом, патогенностью и количеством в ране;

- в-третьих, состоянием реактивности организма, которая определяется суммой его видовых особенностей и зависит от возраста, питания, сопутствующих заболеваний, условий окружающей среды и т. д. [1].

В том случае, когда число микроорганизмов не превышает 105 в 1 грамме ткани, гнойный процесс, как правило (в 70% наблюдений), носит местный характер; превышение этого уровня ведет к распространению гнойного процесса и генерализации инфекции [2,3].

Современное представление о возбудителях гнойной инфекции значительно отличается от классических схем, сформировавшихся несколько десятилетий тому назад. В настоящее время основными возбудителями острой гнойной инфекции являются: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, представители родов Enterococcus, Enterobacter, Streptococcus, Proteus vulgaris, возбудители из группы неклостридиальных анаэробных микроорганизмов [4-6].

В условиях процесса изменения резистентности микрофлоры к антибактериальным средствам, входящим в состав ассортимента лекарственных средств (ЛС), постоянно или длительно используемых в терапии раневого процесса, актуальным является поиск новых эффективных антибактериальных веществ, создание комбинированных ЛС. Усовершенствование состава существующих лекарственных форм с повышением антибактериального спектра, снижение токсичности ЛС - эта проблема также относится к числу актуальных.

В качестве антимикробных агентов довольно широко используют четвертичные аммониевые соединения. В данную группу

входит большое количество веществ, которые проявляют антимикробные, противогрибковые, противовирусные свойства. Характерными представителями этой группы являются хлоргексидина биглюконат, цетилпиридиния хлорид, цетримид, мира-мистин и наиболее широко используемый антисептик - бензалкония хлорид (БХ).

БХ оказывает бактериостатическое и бактерицидное действие в отношении грамположительных и грамотрицательных аэробных и анаэробных микроорганизмов: Staphylococus spp., Streptococcus spp., Escherichia coli, Klebsiella spp., Proteus spp., Pseudomonas aeruginosa., Clostridium spp., Bacilus subtilis. Он более эффективен в отношении грамположительных бактерий. Бензалкония хлорид оказывает фунгистати-ческое и фунгицидное действие на патогенные грибы, в частности, дрожжеподобные грибы рода Candida. Снижает резистентность бактерий и грибов к действию антибиотиков. Эффективен относительно госпитальной микрофлоры с полирезистентностью к химиотерапевтическим средствам, возбудителей инфекций, которые передаются половым путем (Перопета spp., Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas spp., Chlamidia spp., Ureaplasma spp., а также некоторых вирусов, в том числе ВИЧ, Herpes simplex) [7,8].

БХ в силу его антибактериальных свойств широко используется в медицинской практике. В сочетании с цетрами-дом входит в состав крема «Дропален» (GlaxoSmithKline, Великобритания) - комбинирование позволяет подавлять развитие микроорганизмов. Механизм действия

- неспецифическое взаимодействие с бактериальной цитоплазматической мембраной [9].

Известно комбинированное ЛС - мазь «Инфларакс» ("ФК «Здоровье»", Украина), которое содержит амикацин, нимесулид, лидокаин и бензалкония хлорид. Амика-цин и БХ обладают широким спектром антимикробного действия относительно грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, включая стафилококки, синегнойную и кишечную палочки. Механизм действия обусловлен способностью связываться с рибосомами, что ведет к необратимому угнетению синтеза белка, а также способностью фиксироваться на цитоплазматических мембранах бактерий, нарушая их проницаемость, при этом клет-

ка теряет ионы калия, аминокислоты, нуклеотиды [10].

В жидкой лекарственной форме «Ви-ротек интим» БХ - 0,02% раствор (Универсальное агентство "Про-фарма", Украина) используется для профилактики заболеваний, передающихся половым путем (сифилис, гонорея, трихомониаз, герпетическая инфекция половых органов, кандидоз половых органов, ВИЧ) [7]. Совместно с хлоргексидина биглюконатом БХ входит в состав раствора для наружного применения «Бактодерм» («Laboratoire Innotech International», Франция) [11]. Как антисептик используется в составе таблеток для рассасывания «Септогал» (JC "Jadran" Galenski Laboratorij, Хорватия) [12] и пастилок «Септолете» ("KRKA d.d., Novo mesto", Словения) [13].

Целью нашей работы было изучение зависимости антимикробной активности бензалкония хлорида от его концентрации в мази на основе из макроголов, обоснование и определение оптимально-эффективной концентрации БХ в мягкой лекарственной форме на гидрофильной основе.

МА ТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Антимикробную активность образцов мази, содержащих 0,10%; 0,15%; 0,25%; 0,50%; 0,75%; 1,0%; 1,25%; 1,50%; 1,75% и 2,0% БХ изучали общепринятым в микробиологической практике методом in vitro -диффузии в агар, который основан на способности веществ диффундировать в агар, засеянный предварительно тест-культурой микроорганизмов [14,15]. В качестве основы для мази использовали сплав из макроголов 1500 и 400 в соотношении 1:4.

Для определения антимикробной активности в качестве тест-культур использовали эталонные штаммы ATCC (Американская коллекция типовых культур), NCTC (Национальная коллекция типовых культур, Великобритания) - Escherichia coli АТСС 25922, Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027, Staphylococcus aureus АТСС 6538-P, Bacillus pumilis NCTC 8241, Bacillus subtilis АТСС 6633, Proteus vulgaris АТСС 6380, Proteus mirabilis АТСС 12453, а также дрожжеподобные грибы рода кандида

- Candida albicans АТСС 10231 и Candida utilis ЛИА-01.

Все питательные среды готовили согласно требованиям [16].

Определение антимикробной активности в отношении Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Proteus mirabilis и Proteus vulgaris проводили на питательной среде № 1. Во флакон, содержащий 100 мл питательной среды, охлажденной до температуры 48 -50 оС, добавляли по 1 мл инокулята каждой культуры, концентрация которых составляла: Escherichia coli - 1,12*109 КОЕ/1мл, Pseudomonas aeruginosa - 1,31*109

КОЕ/1мл, Staphylococcus aureus - 1,23*109 КОЕ/1мл, Proteus mirabilis - 1,06* 109 КОЕ/1мл и Proteus vulgaris - 1,15*109 КОЕ/1мл. Таким образом, микробиологическая нагрузка на чашке Петри с питательной средой составила для Escherichia coli -1,12*107 КОЕ/1мл, Pseudomonas aeruginosa

- 1,31*107 КОЕ/1мл, Staphylococcus aureus

- 1,23 *107 КОЕ/1мл, Proteus mirabilis

- 1,06*107 КОЕ/1мл и Proteus vulgaris -1,15*107 КОЕ/1мл.

Определение антимикробной активности в отношении Bacillus pumilus и Bacillus subtilis проводили на питательной среде №

9. Во флакон, содержащий 100 мл питательной среды, охлажденной до температуры 60 - 70 оС, добавляли по 1 мл взвеси спор Bacillus pumilus и Bacillus subtilis, концентрация которых составляла: Bacillus pumilus - 1,24*109 КОЕ/1мл, Bacillus subtilis - 1,16*109 КОЕ/1мл. Таким образом, микробиологическая нагрузка на чашке Петри с питательной средой составила для Bacillus pumilus - 1,24*107 КОЕ/1мл, Bacillus subtilis - 1,16*107 КОЕ/1мл.

Определение антимикробной активности в отношении Candida albicans и Candida utilis проводили на питательных средах № 2 и №3, соответственно. В обоих случаях во флакон для каждой тест-культуры, содержащей по 100 мл питательной среды, охлажденной до температуры 48 - 50оС, добавляли по 1 мл взвеси спор Candida albicans и Candida utilis, соответственно, концентрация которых составляла: Candida albicans - 1,18* 108 КОЕ/1мл, Candida utilis - 1,06*108 КОЕ/1мл. Таким образом, микробиологическая нагрузка на чашке Петри с питательной средой составила для Candida albicans - 1,18*106 КОЕ/1мл, Candida utilis - 1,06*106 К0Е/1мл.

Засеянные питательные среды разливали по 20 мл в 5 чашек Петри для каждой тест-культуры, установленных на столе со строго горизонтальной поверхностью. По-

сле застывания среды стерильным бором по трафарету делали 6 лунок диаметром 6 мм на одной чашке Петри. В каждую лунку при помощи стеклянной палочки вносили по 0,1 г испытуемого образца мази. Посевной материал с тест-культурами Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Bacillus pumilus и Bacillus subtilis инкубировали в термостате при температуре 36±1оС в течение 18 - 24 часов; посевной материал с тест-культурами Candida albicans и Candida utilis инкубировали в термостате при температуре 30±1оС в течение 48 часов.

С целью определения оптимальноэффективной концентрации бензалкония хлорида в мази сравнивали массивы значений между исследуемыми концентрациями в пределах штамма микроорганизма с помощью непараметрического метода анализа U-теста Манна-Уитни с уровнем значимости 5 %.

Данный метод является предпочтительным по оценке результатов исследований, где присутствует многофакторность, но при этом нет определенных зависимостей. Для анализа нормальности распределения величин по каждой концентрации тест-культуры использовали критерии Колмогорова-Смирнова, Лиллиефорса и Шапиро-Уилка с уровнем значимости 5%, или 0,05. Для математической обработки и осуществления анализа нами был использован статистический программный продукт STATISTICA 6.0.

Исследование выполнено на базе заводской микробиологической лаборатории ООО «Фармтехнология»; аттестат аккредитации, регистрационный № BY/112 02.2.0.2676 от 10.05.2004, срок действия аттестата аккредитации с 07 мая 2010 г. по 07 мая 2015 г.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты исследования зависимости зон задержки роста тест-культур от концентрации БХ в мази представлены в таблице 1.

Полученный массив данных антимикробной активности, выраженный диаметром зон задержки роста в миллиметрах, по каждой тест-культуре не соответствует закону нормального распределения. Во всех случаях наблюдалось p < 0,05.

Таблица 1 - Зависимость зон задержки роста штамма микроорганизма от концентрации бензалкония хлорида в мази,

Концентрация бензалкония хлорида, %

0,10 0,15 0,25 0,50 0,75 1,0 1,25 1,50 1,75 2,0

Диаметр зон задержки роста, мм

Candida albicans

13,13 ± 0,29 14,22 ± 0,34 16,20 ± 0,25 18,42 ± 0,46 18,58 ± 0,47 18,67 ± 0,58 18,93 ± 0,57 19,38 ± 0,43 20,32 ± 0,40 20,75 ± 0,57

Candida utilis

20,78 ± 0,41 23,02 ± 0,61 24,77 ± 0,54 25,90 ± 0,55 26,17 ± 0,62 26,35 ± 0,74 27,18 ± 0,53 27,60 ± 0,50 28,07 ± 0,39 28,00 ± 0,49

Staphy ococcus aureus

17,53 ± 0,45 18,08 ± 0,37 20,40 ± 0,40 20,73 ± 0,47 21,00 ± 0,39 21,12 ± 0,45 21,38 ± 0,43 21,53 ± 0,43 21,77 ± 0,43 21,88 ± 0,41

Pseudomonas aeruginosa

0,00 ± 0,00 12,10 ± 0,52 13,30 ± 0,39 14,55 ± 0,42 15,43 ± 0,37 16,17 ± 0,27 16,92 ± 0,40 17,48 ± 0,38 18,00 ± 0,35 18,32 ± 0,36

Esc lerichia coli

12,00 ± 0,39 12,72 ± 0,61 13,90 ± 0,20 14,58 ± 0,47 14,72 ± 0,70 14,85 ± 0,49 15,18 ± 0,53 15,47 ± 0,39 15,67 ± 0,40 16,10 ± 0,40

Proteus mirabilis

11,55 ± 0,30 12,83 ± 0,24 13,68 ± 0,28 14,80 ± 0,31 15,05 ± 0,53 15,75 ± 0,25 16,20 ± 0,41 16,12 ± 0,43 16,33 ± 0,40 16,60 ± 0,38

Proteus vulgaris

0,00 ± 0,00 11,00 ± 0,47 11,80 ± 0,25 12,82 ± 0,40 13,07 ± 0,31 13,43 ± 0,37 14,08 ± 0,44 15,10 ± 0,20 15,57 ± 0,34 15,85 ± 0,23

Bacillus subtilis

21,40 ± 0,28 25,37 ± 0,35 26,75 ± 0,25 29,03 ± 0,32 30,10 ± 0,37 31,07 ± 0,25 31,10 ± 0,38 31,42 ± 0,40 31,38 ± 0,39 31,87 ± 0,22

Bacillus pumilus

21,03 ± 0,41 24,18 ± 0,36 2 67 H- 26,82± 0,33 27,97 ± 0,26 28,27 ± 0,45 28,92 ± 0,19 29,45 ± 0,44 29,40 ± 0,36 30,00 ± 0,19

Результаты статистического анализа данных для штаммов микроорганизмов Candida albicans и Candida utilis представлены в таблице 2 и таблице 3, соответственно.

Результаты статистического анализа методом U-теста Манна-Уитни, приведенные в таблице 2 для Candida albicans, свидетельствуют о том, что при сравнении данных между концентрациями БХ 0,5% и 0,75%, 0,5% и 1,0%, 0,75% и 1,0%, 1,0% и 1,25% достоверных отличий не существует, так как значение p > 0,05. Рост антимикробной активности наблюдается в интервале концентраций БХ от 0,1% до 0,5% и от 1,25% до 2,0%, так как значение p < 0,05.

Результаты статистического анализа методом U-теста Манна-Уитни для Candida utilis, приведенные в таблице 3, свидетельствуют о том, что при сравнении данных

между концентрациями БХ 0,5% и 0,75%, 0,75% и 1,0%, 1,75% и 2,0% достоверных отличий не существует, так как значение p > 0,05. В интервале концентраций БХ от 0,1% до 0,5% и от 1,0% до 1,75% наблюдается рост антимикробной активности -значение p < 0,05.

Для остальных исследуемых тест-культур значение p > 0,05 при статистическом анализе методом U-теста Манна-Уитни между сравниваемыми массивами данных наблюдалось при следующих концентрациях:

- для штамма Escherichia coli - 0,5% и 0,75% (p=0,3555), 0,5% и 1,0% (p=0,0546),

0,75% и 1,0% (p=0,6256), 1,0% и 1,25% (p=0,0519);

- для штамма Staphylococcus aureus -между 0,5% и 0,75% (p=0,0594), 0,75% и 1,0% (p=0,2116), 1,0% и 1,25% (p=0,0615), 1,25% и 1,5% (p=0,173 8), 1,5% и 1,75%

Таблица 2 - Значение p-уровня в статистическом анализе данных для Candida albicans методом U-теста Манна-Уитни

Концентрация БХ в мази, % 0,1% 0,15% 0,25% 0,5% 0,75% 1% 1,25% 1,5% 1,75% 2%

0,1%

0,15% 0,0000

0,25% 0,0000 0,0000

0,5% 0,0000 0,0000 0,0000

0,75% 0,0000 0,0000 0,0000 0,2089

1% 0,0000 0,0000 0,0000 0,1039 0,5154

1,25% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0011 0,0256 0,1692

1,5% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0001 0,00443

1,75% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000

2% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0016

Таблица 3 - Значение p-уровня в статистическом анализе данных для Candida utilis методом U-теста Манна-Уитни

Концентрация БХ в мази, % 0,1% 0,15% 0,25% 0,5% 0,75% 1% 1,25% 1,5% 1,75% 2%

0,1%

0,15% 0,0000

0,25% 0,0000 0,0000

0,5% 0,0000 0,0000 0,0000

0,75% 0,0000 0,0000 0,0000 0,2905

1% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0073 0,1602

1,25% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000

1,5% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0075

1,75% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0006

2% 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0045 0,6789

(p=0,0701), 1,75% и 2,0% (p=0,4733);

- для штамма Bacillus pumilis - между 0,75% и 1,0% (p=0,0528), 1,5% и 1,75% (p=0,8303);

- для штамма Bacillus subtilis - между 1,0% и 1,25% (p=0,9764), 1,5% и 1,75% (p=0,7958);

- для Proteus mirabilis - между 1,25% и 1,5% (p=0,4871), 1,25% и 1,75% (p=0,2488), 1,5% и 1,75% (p=0,0736).

Для штаммов микроорганизмов Pseudomonas aeruginosa и Proteus vulgaris наблюдается постоянный рост зон задержки роста микроорганизмов с увеличением концентрации БХ в мази, т.е. при сравнении массива данных с помощью U-теста Манна-Уитни p < 0,05.

ВЫВОДЫ

Установлено, что БХ, введенный в ма-

зевую основу, состоящую из сплава макроголов разной степени конденсации, проявляет ярко выраженную антимикробную активность, как к патогенным грибам, так и к бактериям. Исследуемые образцы мази с БХ в разных концентрациях проявляют антимикробную активность с различной степенью эффективности задержки роста микроорганизмов.

Интегрируя полученные путем статистического анализа значения оптимальноэффективных концентраций по каждому патогенному штамму, определено, что оптимально-эффективная концентрация БХ в мази на основе сплавов макроголов разной степени конденсации находится в интервале концентраций 0,5% - 0,75%. Полученные данные исследований будут нами использованы в усовершенствовании технологии комбинированного ЛС в терапии 1-й фазы раневого процесса.

Вестник фармации №2 (56) 2012 SUMMARY

An. А. Yaremchuk,

O.M. Khishova, N.P. Polovko

MICROBIOLOGICAL STUDY OF

THE POSSIBILITY OF USAGE OF BENZALKONIUM CHLORIDE IN THE OINTMENT

The article is concerned with the influence of benzalkonium chloride concentration on the antimicrobial activity of the ointment consisting of polyethylene oxide base.

There have been presented experimental data of antimicrobial activity study in vitro of ointment samples containing different amounts of benzalkonium chloride by diffusion in agar on the following strains: Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Staphylococcus aureus ATCC 6538-P, Bacillus pumilis NCTC 8241, Bacillus subtilis ATCC 6633 , Proteus vulgaris ATCC 6380, Proteus mirabilis ATCC 12453, and yeast-like fungi of Candida genus

- Candida albicans ATCC 10231 and Candida utilis LIA-01. The modern problem of wounds pathogenesis and treatment is presented in the introduction.

Optimal effective concentration of benza-lkonium chloride in the ointment has been selected and justified on the basis of the results of microbiological studies.

Keywords: antimicrobial activity, agar, benzalkonium chloride, optimal effective concentration, test-culture.

ЛИТЕРАТУРА

1. Теория и практика местного лечения гнойных ран / Е.П. Безуглая [и др.]; под общ. ред. проф. Б.М. Даценка. - Киев: «Здоров'я», 1995. - 384 с.

2. Абаев, Ю.К. Раны и раневая инфекция: учеб. пособие / Ю.К. Абаев; МЗ РБ МГМИ - Минск, 2001. - 58 с.

3. Яремчук, А. А. Разработка состава и технологии лекарственных форм с де-каметоксином для лечения гнойных ран и гнойно-воспалительных заболеваний кожи и слизистой: дис. к-та наук: 15.00.01 / А.А. Яремчук. - Москва, 1991. - 159 с.

4. Абдоминальная хирургическая инфекция: клиника, диагностика, антимикробная терапия: Практическое руководство / Под ред. В.С. Савельева, Б.Р Гель-фанда. - М.: Литтерра, 2006. - 168 с.

5. Петров, С.В. Общая хирургия / С.В.

Петров - СПб: Лань, 1999. - 672 с.

6. Захарова, Ю.А. Сравнительная характеристика микрофлоры, выделенной из очагов гнойно-септических инфекций с множественными и единичными случаями / Ю.А. Захарова, И.В. Фельдблюм // Научно-практический журнал «Эпидемиология и инфекционные болезни» - 2009. - №4.

- С. 16 - 21.

7. Компендиум. Лекарственные препараты [Электронный ресурс] / Специализированное медицинское интернет-издание для врачей, провизоров, фармацевтов, студентов медицинских и фармацевтических вузов. - Киев, 2011. - Режим доступа: http://compendium.com.ua/info/172213/ universal_noe-agentstvo-pro-farma-/virotek-intim. - Дата доступа: 09.03.2012.

8. Регистр лекарственных средств Рос-

сии [Электронный ресурс] / Энциклопедия лекарств и товаров аптечного ассортимента. - Москва, 2012. - Режим доступа: http:// www.rlsnet.ru/mnn_index_id_1809.htm. -

Дата доступа: 09.03.2012.

9. Компендиум. Лекарственные пре-

параты [Электронный ресурс] / Специализированное медицинское интернет-издание для врачей, провизоров, фармацевтов, студентов медицинских и фармацевтических вузов. - Киев, 2011. - Режим доступа : http ://compendium. com .ua/info/2467/

glaxosmithkline-export/drapolen-. - Дата доступа: 09.03.2012.

10. Компендиум. Лекарственные препараты [Электронный ресурс] / Специализированное медицинское интернет-издание для врачей, провизоров, фармацевтов, студентов медицинских и фармацевтических вузов. - Киев, 2011. - Режим доступа: http://compendium.com.ua/info/172542.

- Дата доступа: 10.03.2012.

11. VIDAL [Электронный ресурс] /

Справочник Видаль «Лекарственные препараты в России». - Москва, 2011. - Режим доступа: http://www.vidal.ru/poisk_

preparatov/bactoderm___22504.htm. - Дата

доступа: 10.03.2012.

12. Регистр лекарственных средств России [Электронный ресурс] / Энциклопедия лекарств и товаров аптечного ассортимента. - Москва, 2012. - Режим доступа: http://www.rlsnet.ru/tn_index_id_13111.htm.

- Дата доступа: 10.03.2012.

13. Компендиум. Лекарственные препараты [Электронный ресурс] / Специализированное медицинское интернет-изда-

ние для врачей, провизоров, фармацевтов, студентов медицинских и фармацевтических вузов. Киев, 2011. - Режим доступа: http://compendium.com.ua/info/2535. - Дата доступа: 10.03.2012.

14. Волянський, Ю.Л. Вивчення специфічної активності протимікробних лікарських засобів: метод. рекомендації / Ю.Л. Волянський, І.С. Гриценко, В.П. Широбо-ков. - Київ, 2004. - 38 с.

15. Калиниченко, Н.Ф. Определение активности антибактериальных средств наружного применения для лечения гнойно-воспалительних инфекций: метод. рекомендации/ Н. Ф. Калиниченко, Ю. Л. Волянский,

З.Г. Старобимец - Харьков, 1991. - 16 с.

16. Государственная фармакопея Республики Беларусь. Общие методы контроля качества лекарственных средств / Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении; под общ. ред. Г.В. Годовальнико-ва. - Минск: Минский государственный ПТК полиграфии, 2006. - Т. 1 - С. 656.

Адрес для корреспонденции:

220024, Республика Беларусь, г. Минск, ул. Корженевского, 22,

ООО «Фармтехнология», тел. раб. : 8 (017) 212-90-30,

Яремчук Ан. А.

Поступила 10.04.2012 г.