СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЗИГОТНОСТИ ГЕНА FAD-2 КАНОЛЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПЦР С ДЕТЕКЦИЕЙ ПО КОНЕЧНОЙ ТОЧКЕ

1. Способ определения зиготности гена fad-2 растения канолы, где способ включает:
получение образца образца геномной ДНК из растения канолы;
гибридизацию образца геномной ДНК с первым праймером, второым праймером, первым зондом и вторым зондом, где первый праймер и второй праймер содержит SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3, и первый зонд и второй зонд содержит SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 4, где каждый из первого и второго зонда мечен флуоресцентным красителем и гасителем;
измерение флуоресценции первого зонда, второго зонда или их комбинации; и
определение зиготности растения канолы.
2. Способ по п. 1, где образец геномной ДНК содержит мутантную fad-2 последовательность, имеющую однонуклеотидный полиморфизм, где однонуклеотидный полиморфизм состоит из C→T полиморфизма.
3. Способ по п. 2, где образец геномной ДНК дополнительно содержит fad-2 последовательность дикого типа.
4. Способ по п. 1, где вышеупомянутый способ используют для проверки интрогрессии скрещивания кроссбредных растений канолы.
5. Способ по п. 1, где первый зонд содержит VIC в качестве вышеупомянутого флуоресцентного красителя на конце 5' вышеупомянутого первого зонда и MGB гаситель на конце 3' первого зонда.
6. Способ по п. 1, где второй зонд метят FAM на конце 5' вышеупомянутого второго зонда и гасителем MGB на конце 3' первого зонда.
7. Способ по п. 1, где измерение флуоресценции включает измерение и анализ флуоресценции непосредственно в планшет-ридере.
8. Способ по п. 1, где образец ДНК получают из растений канолы на поле.
9. Способ по п. 1, дополнительно включающий гибридизацию первого зонда и второго зонда с образцом геномной ДНК в течение периода времени при температуре от примерно 50 до примерно 70°С.
10. Способ по п. 9, дополнительно включающий повышение температуры после периода времени.
11. Способ по п. 10, где увеличение температуры включает повышение температуры при практически равномерном приращении температуры в течение периода времени.
12. Способ по п. 1, где первый зонд гибридизуется с областью fad-2 последовательности дикого типа, и второй зонд гибридизуется с областью мутированной fad-2 последовательности, имеющей однонуклеотидный полиморфизм (SNP).
13. Способ по п. 1, где первый праймер представляет собой SEQ ID NO:2, второй праймер представляет собой SEQ ID NO:3, первый зонд представляет собой SEQ ID NO:5, и второй зонд представляет собой SEQ ID NO:4.
14. Набор для осуществления способа по п. 1, где набор содержит первый праймер, второй праймер, первый зонд и второй зонд.
15. Набор по п. 14, где первый праймер представляет собой SEQ ID NO:2, второй праймер представляет собой SEQ ID NO:3, первый зонд представляет собой SEQ ID NO:5, и второй зонд представляет собой SEQ ID NO:4