Вопросы стандартизации исследований слезной жидкости

3. Родин А.С., Большунов А. В. Результаты ФДТ при субретинальных неоваскулярных мембранах по данным флюоресцентной ангиографии и оптической когерентной томографии // Вестник офтальмол. - 2003. - № 2. - С. 11-13.

4. Семенов А.Д., Качалина Г.Ф., Ильичева Е.В. Экспериментальная модель субретинальной неоваскулярной мембраны // Актуальные проблемы офтальмологии: Тез. докл. юбилейного симп. - М., 2003. - С. 411-412.

5. Mori K., Yoneya S., Ohta M. et al. Angiographic and histologic effects of fundus photodynamic therapy with a hydrophilic photosensitizer: mono-L-aspartyl chlorin e6 // Ophthalmology. - 1999. - Vol. 106. - P. 1384-1391.

6. Moshfeghi D., Kaiser P.K., Grossniklaus H.. et al. Clinicopathologic study after submacular removal of choroidal neovascular membranes treated with verteporfin ocular photodynamic therapy // Am.J.Ophthalmol. - 2003. - Vol. 135. - No. 3. - P. 343-350.

7. Peyman G.A., Moshfeghi D.M., Moshfeghi A. et al. Photodynamic therapy for choriocapillaris using tin-ethyl-etiopurpurin (SnET2) // Ophthalmic. Surg. Lasers. - 1997. - Vol. 28.- P.409-417.

8. Puliafito C.A., Rogers A.H., Martidis A., Greenberg P.B. Ocular Photodynamic therapy. - Slack Inc., NJ. - 2002. - 144 p.

9. Schmidt-Erfurth U., Miller J.W., Sickenberg M. et al. Photodynamic therapy with verteporfin for choroidal neovascularization caused by age-related macular degeneration: results of retreatments in a phase 1 and 2 -study // Arch.Ophtalmol. - 1999. - Vol. 117. - P.1177-1187 .

10. Stranadko E.Ph., Ponomarev G.V., Meshkov V.M. et al. The first experience of Photodithazine clinical application for photodynamic therapy of malignant tumors. In Optical Methods for Tumor Treatment and Detection: Mechanisms and Techniques in Photodynamic Therapy IX, T.J.Dougherty, Editor // Proc. SPIE. - 2000. - Vol. 3909. - P. 138-144.

11. Treatment of Age-related Macular degeneration with Photodynamic therapy (TAP) Study Group. Photodynamic therapy of subfoveal choroidal neovascularization in age-related macular degeneration with verteporfin. Two-year results of 2 randomized clinical trials - TAP report 2 // Arch. Ophthalmol. -2001. - Vol. 119. - № 2. - P. 198-207.

12. Verteporfin in Photodynamic therapy Study Group. Verteporfin therapy of subfoveal choroidal neovascularization in age-related macular degeneration // Am. J. Ophthalmol. - 2001. - Vol. 131. - № 5. -P. 541-560.

УДК 617.764.1-008.811-073_

ВОПРОСЫ СТАНДАРТИЗАЦИИ ИССЛЕДОВАНИЙ СЛЕЗНОЙ ЖИДКОСТИ

А. А. БЫСТРЕВСКАЯ, С.Н. ШАТОХИНА, Л. А. ДЕЕВ, В.Н. ШАБАЛИН

Смоленская государственная медицинская академия Российский НИИ геронтологии МЗ РФ Москва

Изучение морфологической картины жидких сред глаза человека представляет собой новое направление в диагностике офтальмологических заболеваний. В настоящее время получены данные морфологической картины слезной жидкости при различной патологии (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8).

Однако авторы не описывают приемы получения слезы, не указывают качество поверхности, с которой контактирует слеза, а эти факторы могут влиять на морфологическую картину слезной жидкости и искажать результаты исследования.

Целью исследования явилась разработка стандартных условий получения образцов слезной жидкости для морфологического анализа.

Материал и методы

Базовой моделью исследования была избрана капля слезной жидкости (СЖ), полученная от 220 здоровых людей: 110 мужчин и 110 женщин в возрасте от 21 до 30 лет (в среднем 22,6). Забор СЖ во всех случаях проводили утром, натощак. СЖ получали различными способами: без стимуляции слезоотделения, с применением механического, биологического и химического раздражителя.

На обезжиренное предметное стекло наносили каплю СЖ в объеме 10-20 мкл, при этом диаметр капли составлял 5-7 мм. Каплю высушивали при различных температурных режимах. Продолжительность периода высыхания (до момента анализа структуры) составляла 18-24 часа.

Результаты и их обсуждение

На 1-м этапе нашего исследования проводили подбор температурного режима перевода слезной жидкости в твердую фазу.

Нами было проведено три серии исследований. СЖ здоровых людей (по 20 проб в каждой группе). СЖ получали без стимуляции слезоотделения.

Исследование проводилось в условиях интервала температуры от +4° до +40°С.

Первая серия выполнялась в условиях комнатной температуры (+18°м-+25° С). При данной температуре при высыхании капли СЖ происходит зональная дифференцировка белковых и солевых веществ, т.н., капля имеет разную толщину слоя в центре и на периферии. При испарении воды происходит неравномерное изменение концентрации растворимых веществ. В «борьбе» за оставшуюся воду соли «выдавливают» органические вещества на периферию капли. При высыхании капли слезной жидкости в ее твердой фазе количественное содержание солей повышается от периферии к центру, а количественное распределение органических веществ имеет обратный порядок.

Вторая серия экспериментального исследования проводилась в условиях термостата (+37°-+40° С). Исследования показали некоторые особенности структурирования СЖ: испарение воды в капле при данной температуре происходило слишком быстро. Это не обеспечивало в полной мере зональной диффе-ренцировки белковых и солевых веществ. Мы считаем, что при быстром испарении воды из капли СЖ, для распределения растворенных веществ по зонам физико-химической активности не хватало времени, из-за чего осмотические и онкотические силы не успевают осуществить полное зональное разделение солевых и белковых веществ.

Третья серия экспериментальных исследований проводилась в условиях более низких температур (+17°-+4° С). В этих условиях процесс испарения воды протекал медленно, и различия результатов действия осмотических и онкотиче-ских сил успевали за это время в значительной степени нивелироваться. Зональное распределение осуществлялось в полной мере, однако дегидратация проходила в 3 раза длительнее, чем в первой серии эксперимента.

На 2-м этапе нашего исследования проводилось изучение зависимости структуропостроения СЖ от вида подложки.

От каждого обследуемого (80 человек) получали слезную жидкость без стимуляции слезоотделения в объеме не менее 0,1 мл и помещали в пробирку. Послед осторожного перемешивания жидкости исследовали ее системную ор-

45

ганизацию методом клиновидной дегидратации. В одинаковых условиях получали фации слезной жидкости на новых специально обработанных предметных стеклах отечественного производства, импортного производства и на пластике тест-карты диагностического набора «Литос-система».

Результаты показали, что наилучшее структуропостроение слезной жидкости наблюдалось на пластике тест-карты «Литос-система». В этих случаях краевая зона фации слезной жидкости имела ровные внешние и внутренние границы, в ней отмечались немногочисленные разнонаправленные трещины.

На 3-м этапе нашего исследования изучалась зависимость структуропо-строения СЖ от вида раздражителя.

Брали слезную жидкость у одних и тех же здоровых людей трёхкратно с пятидневным промежутком. Для получения достаточного количества слезной жидкости использовали стимуляцию слезоотделения с помощью воздействия на слизистую оболочку глаза репчатого лука, нашатырного спирта, фильтровальной бумаги. В данном исследовании было взято 80 здоровых - 40 мужчин и 40 женщин в возрасте 21-30 лет. Результаты проведенных исследований показали следующие закономерности.

1. У 33,2% обследованных текстуры (внешний вид кристаллических структур) слезной жидкости были однотипными независимо от вида стимуляции слезоотделения.

2. У 66,8% здоровых лиц текстуры слезной жидкости были разнотипными, т.е. в зависимости от того или иного вида раздражителя текстуры отличались по форме или степени насыщенности пигмента.

Выводы

1. Оптимальный диапазон температуры для формирования структурных зон СЖ находился в условиях комнатной температуры в пределах +18°-25° С.

2. Для получения четкой морфологической картины слезной жидкости и правильной интерпретации результатов необходимо использовать в качестве подложки пластиковую тест-карту диагностического набора «Литос-система».

3. У здоровых людей отмечается различное структуропостроение слезной жидкости в зависимости от вида раздражителя. Для объективной оценки морфологической картины слезной жидкости при проведении групповых исследований необходимо использовать один вид раздражителя.

Литература

1. Девяткин А. А. Морфология внутриглазной жидкости при старческой катаракте: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - М., 2003.

2. Девяткин А.А., Шатохина С.Н., Шабалин В.Н. и др. Системная организация внутриглазной жидкости при старческой катаракте // Междунар. семинар по вопросам пожилых «Самарские лекции», 7-й: Материалы докладов и статей. - Самара, 20003. - с. 69.

3. Деев Л.А., Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфологическая классификация слезной жидкости различных стадий первичной открытоугольной глаукомы // Морфология биологических жидкостей в диагностике и контроле эффективности лечения: Матер. Всерос. науч.-практ. конф. - М., 2001. - С. 98-100.

4. Егорова Э.В., Иошин И.Э., Шилкин Г.А. и другие. Кристаллографический и иммунологиче-« « « « # #

ский анализ слезной жидкости у пациентов с осложненной катарактой на единственном глазу // Сб. науч. статей «Современные технологии хирургии катаракты» - М., 2002. - С. 90-95.

5. Назарова Л.О. Структурные методы исследования слезной жидкости в диагностике злокачественных новообразований и воспалительных заболеваний органа зрения: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - М., 2001.

6. Назарова Л.О., Шатохина С.Н., Шабалин В.Н. Структурное организация перекорнеальной пленки в диагностике новообразований органа зрения и орбиты // Съезд офтальмологов России, 7-й: Тез. докл. - М., 2000.- Ч. 2. - С. 118.

7. Прокофьева Г.Л., Можеренков В.П., Абакумова Л.Я. и другие. Значение исследования слезы в ранней диагностике инфицирования при проникающих травмах глаза // Вестн. офтальмологии. - 1994. - № 2. - С. 10-11.

8. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей человека. - М., 2001. - 303 с.

УДК 617.735-002+616.379-008.64]:615.747_

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РЕТИНАЛАМИНА У БОЛЬНЫХ С НЕПРОЛИФЕРАТИВНОЙ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ РЕТИНОПАТИЕЙ

И.В. ВОРОБЬЕВА, С. А. КОЧЕРГИН, И.Б. АЛЕКСЕЕВ

Российская медицинская академия последипломного образования, г. Москва

В последние годы во всем мире отмечается возрастание заболеваемости сахарным диабетом. Из года в год увеличивается частота диабетической ретинопатии. Проблема лечения ретинопатии остается сложной. Используемые многочисленные медикаментозные средства (эмоксипин, тауфон и др.) не позволяют достичь стойкого эффекта.

Использование пептидных биорегуляторов благоприятно для больных сахарным диабетом, т.к. они обладают регулирующим действием на уровне специализированных клеточных популяций. Они обладают способностью регулировать процессы синтеза белка и межклеточных взаимодействий.

Ретиналамин регулирует процессы метаболизма в сетчатке, способствует улучшению функционального взаимодействия пигментного эпителия и наружных сегментов фоторецепторов, усиливает активность ретинальных макрофагов, оказывает положительное влияние на коагуляционную систему крови (1-6).

Цель: оценка эффективности применения пептидного биорегулятора (ре-тиналамина) у больных с непролиферативной диабетической ретинопатией.

Материал и методы исследования. Обследование проходило на базе Московской офтальмологической клинической больницы, на кафедре офтальмологии РМАПО. Часть больных проходили лечение в третьем хирургическом отделении, часть наблюдались амбулаторно. В 2004 г. обследовано 23 человека (46 глаз) с сахарным диабетом I типа (3 человека) и II типа (20 человек). Среди больных 6 мужчин и 17 женщин. Давность заболевания от 5 до 12 лет. Возраст больных, находившихся под наблюдением, от 22 до 72 лет. Стадия диабетической ретинопатии устанавливалась в соответствии с классификацией E. Kohner и M. Porta (1991) с учетом критериев ETDRS (Early Treatment Diabetic Retinopathy Study Research Goup, 1991). Непролиферативная стадия диабетической ретинопатии была диагностирована у всех пациентов.