Показатели иммунного статуса периферической крови доноров

Evidence for genetic heterogeneity in inflammatory bowel disease (IBD); HLA genes in the predisposition to suffer from ulcerative colitis (UC) and Crohn's diseases. Clin. Exp. Immunol. 1997; 109: 175-9.

57. Zhang H.X., Li J.C ., Xu G., Liu Z.J. Association between HLA-Cw polymorphism and inflammatory bowel disease. Zhonghua Nei Ke Za Zhi. 2011; 50 (10): 856-8.

58. Mallas E.G., Mackintosh P., Asquith P., Cooke W.T. Histocompatibility antigens in inflammatory bowel disease. Their clinical significance and their association with arthropathy with special reference to HLA-B27 (W27). Gut. 1976; 17: 906-10.

59. Mochida A., Kinouchi Y., Negoro K., Takahashi S., Takagi S., Nomura E.

et al. Butyrophilin-like 2 gene is associated with ulcerative colitis in the Japanese under strong linkage disequilibrium with HLA-DRB1*1502. Tissue Antigens. 2007; 70 (2): 128-35.

60. Morozova N.A. Clinical and genetic relationships in inflammatory bowel diseases

61. Belousova E.A. Resistant forms of inflammatory bowel disease: Diss. Moscow; 1998.

62. Loranskaya I.D., Khalif I.L., Dolbin A.G., Yazdovskiy V.V. Genetic markers HLA-nonspecific inflammatory and functional diseases of the colon. Rossiyskie meditsinskie vesti. 2001; 2: 43-6.

Поступила 09.01.14

© КОЛЛЕКТИв АвТОРОв, 2014 УДК 612.118.017.1.083

1Л.М. Селимова, 2Л.в. Серебровская, 1Л.Б. Калнина, 2О.Н. Хохлова, 3А.Н. Гуляева, 1Д.Н. Носик ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ДОНОРОВ

1ФГБУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского Минздрава России, 123098, Москва; 2ФГБУ ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, 111123, Москва; 3ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава России, 125167, Москва

Проведен расширенный анализ фенотипа основных популяций лимфоцитов, активированных пулов клеток и уровня ци-токинов у 57 образцов периферической крови условно здоровых лиц, полученных в отделе заготовки крови и ее компонентов НИИ переливания крови ФГБУ Гематологический научный центр количества лимфоцитов, Т-хелперов и активированных Т-клеток с фенотипом CD3+HLA-DR+ и уровень определяемых цитокинов по показателям нормы не отличались от данных литературы. В отдельных случаях наблюдалось увеличение количества ЦТЛ, В-лимфоцитов и натуральных киллеров (НК), снижение или увеличение индекса CD4/CD8 относительно нормы. Наиболее частым отклонением от нормы было снижение количества НК. Среди условно здоровых лиц, сдающих кровь в качестве доноров, присутствовали лица с нарушениями иммунной системы.

Ключевые слова: проточная цитометрия; лимфоциты; интерлейкины.

L.M. Selimova1, L.V. Serebrovskaya2, L.B. Kalnina1, O.N. Khokhlova2, A.N. Guliyayeva3, D.N. Nosik1 THE INDICATORS OF IMMUNE STATUS OF PERIPHERAL BLOOD OF DONORS

1The D.I. Ivanovskiy research institute of virology of Minzdrav of Russia, 123098, Moscow, Russia ; 2The central research institute of epidemiology of Rospotrebnadzor, 111123 Moscow, Russia; 3The hematology research center of Minzdrav of Russia, 125167, Moscow, Russia

The expanded analysis of 57 samples of peripheral blood from conditionally healthy patients was implemented concerning phenotype of main populations of lymphocytes, activated pools of cells and level of cytokines. The samples were received in the department of storage of blood and its components of the research institute of blood transfusion of the hematology research center. It is demonstrated that number of T-lymphocytes, T-helpers and activated TY-cells with phenotype CD3+HLA-R+ and level of detected cytokines by .standard indicators had no difference with publications data. In particular cases an increase of number of cytolytic T-lymphocytes, B-lymphocytes and natural killers and decrease or increase of CD4/CD8 index relative to standard were detected. The decrease of number of natural killers was the most frequent aberration. The study demonstrates that among conditionally healthy patients giving blood as donors persons with disorders of immune system were presented.

Keywords: flow cytometry; lymphocyte; interleukin.

К настоящему времени разработан широкий набор тестов для оценки иммунного статуса человека [1]. Хорошо известно, что отдельные компоненты иммунной защиты организма могут быть угнетены у практически здоровых лиц со скрытыми (компенсированными) нарушениями иммунной системы. Эти явления усугубляются экологической обстановкой и социально-экономическими условиями. Начиная с первой половины 90-х годов прошлого века в России наметилась

Для корреспонденции: Селимова Людмила Мидатовна, д-р биол. наук Адрес: 123098, Москва, ул. Гамалеи, 1Б E-mail: lselim@mail.ru

тенденция к снижению как общего числа доноров крови, так и ее качества. Стал заметным переход резервной категории доноров в активную. При этом основным мотивом сдачи крови стал материальный.

В связи с этим очень важно всестороннее и постоянное изучение иммунной системы условно здоровой категории населения, так как это имеет непосредственное отношение к практической и фундаментальной медицине и социально-экономической сфере государства.

Для оценки уровня иммунокомпетентности организма доноров нами было проведено исследование по двум важным критериям функциональной активности иммунной системы человека. Это иммунофенотипирование основных популяций лимфоцитов и измерение уровня цитокинов в

периферической крови доноров. Наряду с изучением основных популяций лимфоцитов с фенотипом CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD19+, CD3-16+56+, CD3+CD16+56+ анализировали активированный пул клеток (CD3+HLA-DR+, CD4+CD62L+, CD8+CD62L+, CD8+CD38+, CD4+CD69+, CD8+CD69+, CD19+CD69+), которые имеют диагностическое значение при инфекционных, главным образом хронических инфекционных заболеваниях, передающихся через кровь [2-4]. Оценивали уровни провоспалительных (ИФН-у, ФНОа, ИЛ-ф, ИЛ-2) и противовоспалительных (ИЛ-4, ИЛ-10) цитокинов в плазме доноров, имеющих диагностическое значение не только при инфекционных заболеваниях, но и наряду с маркерами активации лимфоцитов при хронических инфекциях, передающихся через кровь [5].

Материалы и методы. В работе использовали периферическую кровь, полученную от 57 доноров (20 женщин, 37 мужчин в возрасте 18-49 лет), обращавшихся в донорский пункт НИИ переливания крови в 2011-2012 гг (^ = 30 ± 9,1). Выбор доноров для анализа носил случайный характер. Кровь отбирали в стандартные 9-миллилитровые вакутейне-ры ("BD Vacutainer", Великобритания), в качестве консерванта использовали К2ЭДТА. Окраску клеточных компонентов проводили не позже чем через 2 ч после взятия крови. Алик-воту 3 мл из образца крови осаждали при 2000 об/мин в течение 20 мин при 20oC, плазму крови отбирали и хранили при -20oC до анализа на цитокины.

Для окраскиклеток цельной крови использовали следующие моноклональные антитела фирмы «Beckman Coulter» (США): CD3(FITC)/CD19(PE), CD3(FITC)/CD4(PE), CD3(FITC)/ CD8(PE), CD3(FITC)/HLA-DR(PE), CD3(FITC)/CD16+56+(PE), CD62L(PCy5), CD8(FITC)/CD38(PE), CD69(PCy5). Окрашенные клетки анализировали на проточном цитофлюориметре EPICS XL («Beckman Coulter», США).

Уровни цитокинов в плазме определяли с использованием коммерческих иммуноферментных тест-систем (ЗАО «Вектор-Бест», Россия) в соответствии с инструкциями.

Статистический анализ данных описательной статистики и определение коэффициента ранговой корреляции Пирсона (r) проводили с помощью программы BioStat 2009 ("AnalystSoft"). Уровень значимости (а) был равен 0,05.

Результаты и обсуждение. Значения основных клеточных маркеров иммунного статуса представлены в табл. 1 и 2. В них указаны полученные нами средние значения показателей иммунного статуса и минимальные и максимальные значения в сравнении с данными других авторов [6, 7] для условно здоровых доноров. Как видно из табл. 2, количество Т-клеток (CD3+), Т-хелперов (CD3+CD4+) и активированных Т-клеток (CD3+HLA-DR+) не отличается от данных, полученных другими авторами. Остальные показатели имеют отклонения в ту или иную сторону. Эти отклонения единичны. Так, у 3 обследуемых наблюдалось повышенное (на 6-17%) относительное количество Т-цитотоксических лимфоцитов (ЦТЛ) по сравнению с данными других авторов. При этом у всех количество натуральных киллеров (НК) было ниже минимальной границы нормы по относительным и абсолютным значениям, а индекс соотношения Т-хелперы/Т-ЦТЛ (CD4/CD8) колебался в пределах 1,1-1,3. Количество В-лимфоцитов у 1 донора было завышено как по относительным, так и по абсолютным показателям в 1,5 раза по сравнению с верхним уровнем нормы, и незначительно (в 1,1-1,2 раза) - у 3 доноров.

Значения НК (CD3-CD16+56+) у 9 доноров были ниже приблизительно на 20-60% в относительных количествах и у 5 из них - на 30-70% ниже только в абсолютных количествах относительно нижнего уровня нормы. У 1 донора было повышено количество ЦТЛ (CD3+CD8+), у остальных этот

Таблица 1

показатели фенотипических маркеров лимфоцитов периферической крови доноров

Популяция лимфоцитов Относительное количество* Абсолютное количество, -109/л

CD3+ 75 ± 6,4 1,5 ± 0,38

CD3+CD4+ 45,8 ± 5,3 0,94 ± 0,3

CD3+CD8+ 26 ± 6,3 0,5 ± 0,13

CD19+ 12,9 ± 4,5 0,29 ± 0,11

CD3+HLA-DR+ 3,4 ± 1,56 0,046 ± 0,03

CD3-CD16+CD56+ 9,76 ± 4,57 0,2 ± 0,9

CD3+C16+CD56+ 4,7 ± 3 0,1 ± 0,06

CD4+/CD8+ 1,9 ± 0,59

Примечание. * - относительно общего количества лимфоцитов. Указано среднее значение и стандартное отклонение (ц ± о).

показатель приближался к верхней границе нормы. У 3 доноров количество Т-натуральных киллеров (ТНК) было выше нормы. Возможно, это связано с тем, что функции НК частично могут выполняться различными пулами СБ8+-клеток. По другим показателям существенных отклонений у этих образцов не обнаружено. Вероятно, при определении процентного содержания НК относительно всех лимфоцитов крови возможно снижение их количества при высоком содержании Т-лимфоцитов (СБ3+). В связи с этим мы определили коэффициент ранговой корреляции Пирсона по их относительному и абсолютному количеству по двум указанным фенотипи-ческим маркерам. Были получены следующие результаты. В первом случае наблюдалась средняя корреляция (г = -0,63), во втором - слабая (г = -0,25). Таким образом, можно полагать, что наблюдаемое нами снижение относительного количества НК в некоторых случаях может быть действительно связано с высоким относительным содержанием Т-лимфоцитов. Мы также выявили слабый уровень отрицательной корреляции между относительными количествами ЦТЛ и НК (г = -0,3). Низкому содержанию НК следует уделять повышенное внимание, так как уменьшение их количества может быть связа-

Таблица 2

Cравнение полученных значений интервалов фенотипических маркеров лимфоцитов периферической крови у практически здоровых лиц с данными литературы и нормами, используемыми в ЦнИИ эпидемиологии

Популяция лимфоцитов Полученные данные

CD3+, % 4 8 61 55-75 61-85

CD3+, • 109/л 1,03-2,3 0,90-2,2 0,946-2,079

CD3+CD4+, % 34-56 35-60 35-55

CD4+, • 109/л 0,62-1,57 0,6-1,9 0,576-1,336

CD3+CD8+, % 16-41 12-30 19-35

CD8+, • 109/л 0,28-0,9 0,3-0,8 0,372-0,974

CD19+, % 5-26 5-15 7-17

CD19+, • 109/л 0,06-0,58 0,12-0,45 0,111-0,376

CD3+HLA-DR+, % 1-7 0-5 0,5-6,0

CD3+HLA-DR+, • 109/л 0,016-0,137 0-0,1 0,007-0,165

CD3-CD16+CD56+, % 3-22 12-25 8-18

CD3-CD16+CD56+, • 109/л 0,09-0,39 0,3-0,6 0,123-0,369

CD3+CD16+CD56+, % 1-14 0-5 0,5-6,0

CD3+CD16+CD56+, • 109/л 0,03-0,22 0-0,1 0,007-0,165

CD4+/CD8+ 1-3,3 1,2-2,5 1,5-2,6

Таблица 3

показатели активированных пулов лимфоцитов периферической крови доноров, несущих CD62L, CD38, CD69

Популяция лимфоцитов Среднее (ц ± о) Интервал

CD4+CD62L+ 36,4 ± 7,7 21-48

CD4+CD62L+, % 76 ± 8,9 59-92

CD8+CD62L+ 20 ± 10 6-41

CD8+CD62L+, % 50 ± 13 24-80

CD8+CD38+ 16,7 ± 7 4-30

CD8+CD38+, % 38,8 ± 13 16-69

CD4+CD69+ 0,35 ± 0,24 0,3-0,7

CD4+CD69+, % 0,7 ± 0,29 0,6-1,2

CD8+CD69+ 0,45 ± 0,2 0,4-0,9

CD8+CD69+, % 0,9 ± 0,2 0,7-1,5

CD19+CD69+ 0,29 ± 0,14 0,3-0,6

CD19+CD69+, % 0,7 ± 0,26 0,6-1,1

но с острой или хронической вирусной инфекцией, аутоиммунными заболеваниями, иммунодефицитными и психическими синдромами [8].

У 3 обследованных наблюдалось существенное увеличение относительного и абсолютного количества ТНК (СВ3+СВ16+СЭ56+) приблизительно в 2-3 раза. При этом у одного донора индекс СБ4/СБ8 составил 2,9 за счет относительного снижения уровня ЦТЛ, а у второго - 1,1 за счет относительного увеличения, хотя оно и оставалось на верхней границе нормы. У третьего индекс СБ4/СБ8 составил 1,4 на фоне показателя НК (относительного или абсолютного) ниже нормы. Остальные показатели были в пределах нормы. У всех этих доноров отмечена тенденция к повышению уровня ИФН-у. ТНК были открыты около 14 лет назад. Являясь фенотипически неоднородной популяцией клеток, они дублируют функции НК и являются связующим звеном между врожденным и приобретенным иммунитетом, однако их роль в настоящее время полностью не изучена [9]. Известны случаи существенного увеличения их уровня по сравнению с нормой [10].

По индексу СБ4/СБ8 наблюдались отклонения как от минимального, так и от максимального значения нормы. Три высоких значения в пределах 2,9-3,3 были получены за счет сдвига количества ЦТЛ (СБ3+СБ8+) в сторону нижнего предела и СБ3+СБ4+-Т-хелперов - в сторону верхнего предела нормы. Остальные их показатели были практически в пределах нормы. Также наблюдали три низких значения СБ4/СБ8-индекса от 1 до 1,14. У одного из доноров при индексе 1 это было за счет незначительного увеличения количества ЦТЛ по сравнению с нормой при сохранении практически нормальных остальных показателей, у другого донора при индексе 1,1 количество ЦТЛ соответствовало верхнему показателю нормы, а количество НК было ниже нормы. Остальные показатели не выходили за пределы нормы. У донора с индексом 1,14 все показатели соответствовали норме, за исключением ТНК, содержание которых было повышено.

Следует отметить, что 17% образцов крови имели индексы в пределах 1,2-1,4. По данным ЦНИИ эпидемиологии, эти значения находятся в пределах нормы, по другим данным [7], - являются пониженными. У этих лиц, как правило, количество ЦТЛ приближалось к верхнему пределу нормы или было немного увеличенным, а количество С04+-Т-лимфоцитов приближалось к нижней границе нормы. В отдельных случаях наблюдалось снижение уровня НК и повышение содержания ТНК. Вероятно, индекс 1,2 можно считать нормой, но в таких случаях необходим дифференцированный анализ крови и по другим иммунологическим показателям. При

Таблица 4

уровни цитокинов в плазме доноров

Цитокин Среднее (ц ± о), пг/мл Диапазон, пг/мл

ИФН-у 6,3 ± 3,5 4-18

ФНОа 1 ± 1,1 0-3

ИЛ-1Р 0,25 ± 1,1 0-5

ИЛ-2 3,85 ± 4,4 0-10

ИЛ-4 0,3 ± 0,4 0-1

ИЛ-10 0,1 ± 0,4 0-2

определении коэффициента ранговой корреляции Пирсона между основными значениями маркеров иммунного статуса и возрастом доноров слабая отрицательная корреляция была обнаружена только для индекса СБ4/СБ8 (г = -0,34). Возможно, это связано с тем, что среди доноров доля лиц старше 41 года составляла 10%. Корреляции между полом доноров и значениями основных показателей иммунного статуса обнаружено не было.

В табл. 3 и 4 представлены результаты определения относительного количества маркеров активации в крови и цитокинов в плазме условно здоровых лиц. Как видно, показатели цитокинов находятся в пределах нормы. Следует отметить, что накопление данных о количестве клеток, несущих маркеры СБ8+СБ38+ у здоровых людей, очень важно. Наряду с количеством СБ4+-Т-лимфоцитов прежде всего по этим маркерам можно судить о функциональной активности иммунной системы человека в целом. Увеличение экспрессии маркера СБ38+ на поверхности ЦТЛ является начальным этапом в цепи запуска механизмов активации иммунной системы. Маркер СБ62Ь+ определяет готовность лимфоцитов к восприятию иммунных сигналов. Каких-либо особенностей этих показателей по сравнению с данными литературы мы не обнаружили [9-13]. Относительные количества маркеров активации были практически одинаковы как у мужчин, так и у женщин. Однако у мужчин во всех случаях наблюдалась тенденция к их увеличению. Наибольшие различия отмечены в процентном содержании СБ8+, несущих СБ62Ь+. У мужчин их было на 15% больше, чем у женщин. Корреляция между процентным содержанием маркеров активации и возрастом была обнаружена только для клеток СБ8+, несущих СБ62Ь+ (г = 0,65).

На основании проведенного исследования можно полагать, что среди условно здоровых лиц, сдающих кровь в качестве доноров, могут присутствовать имеющие нарушения в иммунной системе по основным фенотипическим маркерам.

ЛИТЕРАТУРА

1. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии. Иммунология. 2001; 4: 4-6.

2. Gudo E.S., Bhatt N.B., Bila D.R., Abreu C.M., Tanuri A., Savino W. et al. Co-infection by human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and human T cell leukemia virus type 1 (HTLV-1): does immune activation lead to a faster progression to AIDS? BMCInfect. Dis. 2009; 9: 211-23.

3. Liu Z., Cumberland W.G., Hultin L.E., Prince H.E., Detels R., Giorgi J.V. Elevated CD38 antigen expression on CD8+ T cells is a stronger marker for the risk of chronic HIV disease progression to AIDS and death in the Multicenter AIDS Cohort Study than CD4+ cell count, soluble immune activation markers, or combinations of HLA-DR and CD38 expression. J. Acquir. Immun. Defic. Syndr. Hum. Retroviral. 1997; 16 (2): 83-92.

4. Park S.W., Royal W. 3rd, Semba R.D., Wiegand G.W., Griffin D.E. Expression of adhesion molecules and CD28 on T lymphocytes during human immunodeficiency virus infection. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1998; 5 (4): 583-7.

5. Stacey A.R., Norris P.J., Qin L., Haygreen E.A., Taylor E., Heitman

J. et al. Induction of a striking systemic cytokine cascade prior to peak viremia in acute human immunodeficiency virus type 1 infection, in contrast to more modest and delayed responses in acute hepatitis В and С virus infections. J. Virol. 2009; 83 (8): 3719-33.

6. Тотолян Арег А., Балдуева И.А., Бубнова Л.Н., Закревская А.В., Зуева Е.Е., Калинина Н.М. и др. Стандартизация методов им-мунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека. Медицинская иммунология. 1999; 1 (5): 21-43.

7. Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Тотолян Арег А., Черешнев В.А. Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови лимфоцитов человека и их нормативные значения (методом многоцветного цитометрического анализа). Медицинская иммунология. 2009; 11 (2-3): 227-38.

8. Whiteside T.L., Herberman R.B. Role of human natural killer cells in health and disease. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1994; 1 (2): 125-33.

9. De Martino M., Rossi M.E., Azzari C. Gelli M.G., Chiarelli F., Galli L. et al. Viral load and CD69 molecule expression on freshly isolated and cultured mitogen-stimulated lymphocytes of children with perinatal HIV-1 infection. Clin. Exp. Immunol. 1999; 117 (3): 513-6.

10. Chan A.C., Serwecinska L., Cochrane A., Harrison L.C., Godfrey D.I., Berzins S.P. Immune characterization of an individual with an exceptionally high natural killer T cell frequency and her immediate family. Clin. Exp. Immunol. 2009; 156 (2): 238-45.

11. Godfrey D.I., Hammond K.J., Poulton L.D., Smyth M.J., Baxter A.G. NKT cells: facts, functions and fallacies. Immunol. Today. 2000; 21 (11): 573-83.

12. Nielsen S.D., Afzelius P., Ersboll A.K., Nielsen J.O., Hansen J.E. Expression of the activation antigen CD69 predicts functionality of in vitro expanded peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from healthy donors and HIV-infected patients. Clin. Exp. Immunol. 1998; 114 (1): 66-72.

13. Pawlowski P., Mysliwiec J., Stasiak-Barmuta A., Bakunowicz-Lazarczyk A., Gorska M. Increased percentage of L-selectin+ and ICAM-1+ peripheral blood CD4+/CD8+ T cells in active Graves' ophthalmopathy. Folia Histochem. Cytobiol. 2009; 47 (1): 29-33.

REFERENCES

1. Haitov R.M., Pinegin В.У Human immune status in health and disease. Immunologija. 2001; 4: 4-6.

2. Gudo E.S., Bhatt N.B., Bila D.R., Abreu C.M., Tanuri A., Savino W. et al. Co-infection by human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and human T cell leukemia virus type 1 (HTLV-1): does immune activation lead to a faster progression to AIDS? BMCInfect. Dis. 2009; 9: 211-23.

3. Liu Z., Cumberland W.G., Hultin L.E., Prince H.E., Detels R., Giorgi J.V. Elevated CD38 antigen expression on CD8+ T cells is a stronger

marker for the risk of chronic HIV disease progression to AIDS and death in the Multicenter AIDS Cohort Study than CD4+ cell count, soluble immune activation markers, or combinations of HLA-DR and CD38 expression. J. Acquir. Immun. Defic. Syndr. Hum. Retroviral. 1997; 16 (2): 83-92.

4. Park S.W., Royal W. 3rd, Semba R.D., Wiegand G.W., Griffin D.E. Expression of adhesion molecules and CD28 on T lymphocytes during human immunodeficiency virus infection. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1998; 5 (4): 583-7.

5. Stacey A.R., Norris P.J., Qin L., Haygreen E.A., Taylor E., Heitman J. et al. Induction of a striking systemic cytokine cascade prior to peak viremia in acute human immunodeficiency virus type 1 infection, in contrast to more modest and delayed responses in acute hepatitis В and С virus infections. J. Virol. 2009; 83 (8): 3719-33.

6. Totolian Areg A., Baldueva I.A., Bubnova L.N., Zakrevskaya A.V., Zueva E.E., Kalinina N.M. et al. Standardization of immunopheno-typing of blood cells and bone marrow. Meditsinskaya Immunologi-ya. 1999; 1

7. Khaidukov S.V., Zurochka A.V., Totolian Areg A., Chereshnev V.A. Major and lymphocyte populations of human peripheral blood lymphocytes and their reference values, as assayed by multi-colour cy-tometry. Meditsinskaya Immunologiya. 2009; 11

8. Whiteside T.L., Herberman R.B. Role of human natural killer cells in health and disease. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1994; 1 (2): 12533.

9. De Martino M., Rossi M.E., Azzari C. Gelli M.G., Chiarelli F., Galli L. et al. Viral load and CD69 molecule expression on freshly isolated and cultured mitogen-stimulated lymphocytes of children with perinatal HIV-1 infection. Clin. Exp. Immunol. 1999; 117 (3): 513-6.

10. Chan A.C., Serwecinska L., Cochrane A., Harrison L.C., Godfrey D.I., Berzins S.P. Immune characterization of an individual with an exceptionally high natural killer T cell frequency and her immediate family. Clin. Exp. Immunol. 2009; 156 (2): 238-45.

11. Godfrey D.I., Hammond K.J., Poulton L.D., Smyth M.J., Baxter A.G. NKT cells: facts, functions and fallacies. Immunol. Today. 2000; 21 (11): 573-83.

12. Nielsen S.D., Afzelius P., Ersboll A.K., Nielsen J.O., Hansen J.E. Expression of the activation antigen CD69 predicts functionality of in vitro expanded peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from healthy donors and HIV-infected patients. Clin. Exp. Immunol. 1998; 114 (1): 66-72.

13. Pawlowski P., Mysliwiec J., Stasiak-Barmuta A., Bakunowicz-Lazarczyk A., Gorska M. Increased percentage of L-selectin+ and ICAM-1+ peripheral blood CD4+/CD8+ T cells in active Graves' ophthalmopathy. Folia Histochem. Cytobiol. 2009; 47 (1): 29-33.

Поступила 20.11.13

Уважаемые читатели!

Приглашаем вас посетить сайт издательства "Медицина" в Интернете

Наш адрес:

www.medlit.ru