ПРОИЗВОДНЫЕ ФОСФИНОВОЙ КИСЛОТЫ, ИНГИБИТОРЫ БЕТА-СЕКРЕТАЗЫ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ АЛЬЦГЕЙМЕРА
PHOSPHINIC ACID DERIVATIVES, BETA-SECRETASE INHIBITORS FOR TREATING ALZHEIMER'S DISEASE

Настоящее изобретение относится к производным фосфиновой кислоты, способам их получения, композициям, содержащим указанные производные фосфиновой кислоты, и к их применению для предупреждения и лечения заболеваний.
Точнее, настоящее изобретение относится к соединениям формулы I
в которой
1
R обозначает арил или гетероарил;
2
1
5
R обозначает (С-С)-алкил или фенил;
3
1
5
1
5
R обозначает водород, (С-С)-алкил, O-(С-С)-алкил или фенил;
4
5
6
5
6
1
6
3
6
1
5
1
5
1
5
1
5
1
5
R обозначает (С-С)-алкил, (С-С)-циклоалкил, фенил, пиридил или индолил; "арил" обозначает фенил, который является незамещенным или содержит заместитель, выбранный из группы, включающей ОН, галоген, (С-С)-алкил, O-(С-С)-алкил, пирролидонил и C(O)NRR, где R обозначает водород или (С-С)-алкил и R обозначает незамещенный (С-С)-алкил или (С-С)-алкил, замещенный фенилом;
1
5
"гетероарил" является незамещенным или замещен (С-С)-алкилом;
1
5
1
6
3
1
5
"(С-С)-алкил" или (С-С)-алкил является незамещенным или содержит заместитель, выбранный из группы, включающей фенил, СООН, СООСН и S-(С-С)-алкил;
и к их фармацевтически приемлемым солям.
1
5
Примеры гетероарила включают индолил, хинолинил, изохинолинил и пиридил. Гетероарил может быть незамещенным или замещенным (C-С)-алкилом.
3
1
5
При использовании в настоящем изобретении термин "алкил" обозначает насыщенную алкильную группу с линейной или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, например метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, 2-бутил, трет-бутил и т.п. Алкил может быть незамещенным или содержать заместитель, выбранный из группы, включающей фенил, СООН, СООСН и S-(С-С)-алкил.
Термин "циклоалкил" обозначает насыщенную карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 7 атомов углерода. Примеры включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.
Примеры галогена включают фтор, хлор, йод и бром.
В качестве фармацевтически приемлемых солей можно, например, использовать соли щелочного металла или аммония, которые можно получить, например, обработкой соединений неорганическими или органическими основаниями, например гидрокарбонатами натрия или калия, водными растворами гидроксида натрия или калия или водными растворами аммиака или аминов, например триметиламина или триэтиламина.
1
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает группу формулы (а)
в которой
7
1
5
1
4
R обозначает водород, (С-С)-алкил или O-(С-С)-алкил;
8
5
6
5
6
1
5
1
5
1
5
R обозначает ОН, пирролидонил или -C(O)NRR, где R обозначает водород или (С-С)-алкил и R обозначает (С-С)-алкил или (С-С)-алкил, замещенный фенилом, и
9
1
5
R обозначает водород или (С-С)-алкил.
1
7
8
5
6
5
6
9
1
5
1
5
1
5
2
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает группу формулы (а), в которой R обозначает водород или (С-С)-алкил; R обозначает -C(O)NRR, где R обозначает водород или (С-С)-алкил и R обозначает (С-С)-алкил или -СН-фенил; и R обозначает водород.
1
7
8
5
6
5
6
9
1
5
1
5
В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает группу формулы (а), в которой R обозначает водород или (С-С)-алкил; R обозначает -C(O)NRR, где R и R обозначают С-С-алкил; и R обозначает водород.
1
7
8
9
1
4
1
5
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает группу формулы (а), в которой R обозначает водород или O-(С-С)-алкил; R обозначает ОН или пирролидонил; и R обозначает водород или (С-С)-алкил.
1
1
1
1
5
1
5
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает гетероарил или гетероарил, замещенный (С-С)-алкилом. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает индолил, замещенный (С-С)-алкилом, или хинолинил. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает 1-бутилиндол-6-ил или хинолин-2-ил.
2
2
1
5
1
5
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает фенил, который является незамещенным или замещен фтором. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает (С-С)-алкил, который является незамещенным или замещен S-(C-С)-алкилом.
3
3
1
5
1
5
3
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает водород, (С-С)-алкил или фенил. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает водород, (С-С)-алкил, который является незамещенным или замещен фенилом, СООН или СООСН; или фенил. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой
3
3
2
2
3
R обозначает водород, метил, этил, изопропил, фенил, бензил, СНСООН или СНСООСН. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает метил.
4
4
4
4
4
4
1
6
1
6
1
6
2
3
6
1
5
1
5
1
6
1
6
1
6
2
3
6
1
5
1
5
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает незамещенный (С-С)-алкил; (С-С)-алкил, содержащий один или большее количество заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, N[(С-С)-алкил], (С-С)-циклоалкил, незамещенный фенил, фенил, замещенный одним или более (C-C)-алкилом, и изоксазолил, замещенный одним или более (С-С)-алкилом. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает незамещенный (С-С)-алкил. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает изопропил, изобутил, изопентил или изогексил. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает (С-С)-алкил, содержащий один или большее количество заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, N[(С-С)-алкил], (С-С)-циклоалкил, незамещенный фенил, фенил, замещенный одним или более (С-С)-алкилом, и изоксазолил, замещенный одним или более (С-С)-алкилом. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает метил, замещенный фенилом или изоксазолил, замещенный метилом; этил, замещенный циклогексилом, фенилом или диметиламиногруппой; пропил, замещенный фенилом или диметилфенилом; или бутил, замещенный фтором. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает циклогексил.
4
1
6
2
1
6
1
6
1
4
1
5
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает незамещенный фенил или фенил, замещенный с помощью ОН, N[(С-С)-алкил], незамещенный (С-С)-алкил, (С-С)-алкил, замещенный галогеном; O-(С-С)-алкил или COO(С-С)-алкил.
4
4
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает фенил. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает фенил, замещенный с помощью ОН, диметиламиногруппы, метила, изобутила, трифторметила, метоксигруппы, этоксигруппы или СОО-метила.
4
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой R обозначает незамещенный пиридил или пиридил, замещенный метилом.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой
1
R обозначает группу формулы (а), в которой
7
1
5
1
4
R обозначает водород, (С-С)-алкил или O-(С-С)-алкил;
8
5
6
5
6
1
5
1
5
1
5
R обозначает ОН, пирролидонил или -C(O)NRR, где R обозначает водород или (С-С)-алкил и R обозначает (С-С)-алкил или (С-С)-алкил, замещенный фенилом, и
9
1
5
R обозначает водород или (С-С)-алкил;
2
1
5
1
5
R обозначает фенил, который является незамещенным или замещен фтором, и обозначает (С-С)-алкил, который является незамещенным или замещен S-(С-С)-алкилом;
3
1
5
R обозначает водород, (С-С)-алкил или фенил; и
4
1
6
1
6
1
6
2
3
6
1
5
1
5
1
6
2
1
6
1
6
1
4
1
5
R обозначает незамещенный (С-С)-алкил; (С-С)-алкил, содержащий один или большее количество заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, N[(С-С)-алкил], (С-С)-циклоалкил, незамещенный фенил, фенил, замещенный одним или более (С-С)-алкилом, и изоксазолил, замещенный одним или более (С-С)-алкилом; циклогексил; незамещенный фенил или фенил, замещенный с помощью ОН, N[(С-С)-алкил], незамещенный (С-С)-алкил, (С-С)-алкил, замещенный галогеном; O-(С-С)-алкил или COO(С-С)-алкил; незамещенный пиридил или пиридил, замещенный метилом.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой
1
R обозначает группу формулы (а), в которой
7
9
R и R обозначают водород; и
8
5
6
5
6
1
5
1
5
1
5
R обозначает -C(O)NRR, где R обозначает водород или (С-С)-алкил и R обозначает (С-С)-алкил или (С-С)-алкил, замещенный фенилом;
2
R обозначает фенил;
3
1
5
R обозначает водород, (С-С)-алкил или фенил; и
4
1
6
1
6
1
6
2
3
6
1
5
1
5
1
6
2
1
6
1
6
1
4
1
5
R обозначает незамещенный (С-С)-алкил; (С-С)-алкил, содержащий один или большее количество заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, N[(С-С)-алкил], (С-С)-циклоалкил, незамещенный фенил, фенил, замещенный одним или более (С-С)-алкилом, и изоксазолил, замещенный одним или более (С-С)-алкилом; циклогексил; незамещенный фенил или фенил, замещенный с помощью ОН, N[(С-С)-алкил], незамещенный (С-С)-алкил, (С-С)-алкил, замещенный галогеном; O-(С-С)-алкил или COO(С-С)-алкил; незамещенный пиридил или пиридил, замещенный метилом.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, в которой
1
1
5
R обозначает индолил, замещенный (С-С)-алкил, или хинолинил;
2
R обозначает фенил;
3
1
5
R обозначает (С-С)-алкил; и
4
R обозначает фенил.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I, выбранному из группы, включающей
{(R)-1-[3-(метилпропилкарбамоил)-бензоиламино]-2-фенилэтил}-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
{(R)-1-[3-(метилпентилкарбамоил)-бензоиламино]-2-фенилэтил}-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипентилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоил-5-метилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
{(R)-1-[3-(2-оксопирролидин-1-ил)-5-пропоксибензоиламино]-2-фенилэтил}-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
{(R)-1-[(1-бутил-1Н-индол-6-карбонил)-амино]-2-фенилэтил}-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-п-толилкарбамоилбутил)-фосфиновую кислоту,
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(3-метил-2-п-толилкарбамоилбутил)-фосфиновую кислоту,
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенил-2-п-толилкарбамоилэтил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-((S)-2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-((S)-2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-((R)-2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-изобутилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(3-метилбутилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту,
[2-(3,3-диметилбутилкарбамоил)-пропил]-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(4,4,4-трифторбутилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(3,3,4,4-тетрафторбутилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(2,2,3,3,4,4,4-гептафторбутилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту,
(2-циклогексилкарбамоилпропил)-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту,
[2-(2-циклогексилэтилкарбамоил)-пропил]-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(4-гидроксифенилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(4-метоксифенилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(пиридин-2-илкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту,
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(5-метилпиридин-2-илкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту и
(2-бензилкарбамоилпропил)-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту.
Другим объектом настоящего изобретения являются все формы оптически чистых энантиомеров или смеси диастереоизомеров соединений формулы I.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения соединений формулы I, включающему взаимодействие соединения формулы II
в которой
2
1
5
R обозначает (С-С)-алкил или фенил;
3
1
5
1
5
R обозначает водород, (С-С)-алкил, O-(С-С)-алкил или фенил; и
4
1
6
3
6
R обозначает (С-С)-алкил, (С-С)-циклоалкил, фенил, пиридил или индолил; с соединением формулы III
в которой
1
R обозначает арил или гетероарил; и
10
R обозначает галоген или ОН;
и при необходимости превращение полученного соединения в фармацевтически приемлемую соль.
Реакция может протекать в присутствии активирующего агента или добавки. Примеры активирующего агента включают дициклогексилкарбодиимид и N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимидгидрохлорид. Примеры добавки включают 1-гидроксибензотриазол. Может содержаться основание, например триалкиламин, например триэтиламин. Реакция может протекать в присутствии растворителя, например простого эфира, например тетрагидрофурана. Температура может находиться в диапазоне от 20 до 60°С или от 20 до 40°С.
Соединения формулы III имеются в продаже или их можно получить по методикам, известным специалисту в данной области техники, например, N-метил-N-пропилизофталамовую кислоту, N,N-дипропилизофталамовую кислоту, 5-метил-N,N-дипропилизофталамовую кислоту, N-пентил-N-пропилизофталамовую кислоту и N,N-дипентилизофталамовую кислоту можно получить по методике, описанной в публикации Taylor and Spooner, J. of Agricultural and Food Chemistry, 38: 1422-1427 (1990); 3-(2-оксопирролидин-1-ил)-5-пропоксибензойную кислоту можно получить по методике, описанной в WO 03/045, 913; и 1-бутилиндол-6-карбоновую кислоту можно получить по методике, описанной в WO 03/040,096.
Соединения формулы II являются новыми и являются вариантом осуществления настоящего изобретения. Их можно получить по реакции соединения формулы IV
,
11
2
3
4
2
2
в которой R обозначает защитную группу, например Boc, и R, R и R обладают указанными выше значениями, с сильной неорганической кислотой, например водным раствором HI, HCl или HBr, или, например, с трифторуксусной кислотой, в растворителе, например CHCl, при температуре в диапазоне от 20 до 100°С или при 20°С.
Соединения формулы IV являются новыми и являются вариантом осуществления настоящего изобретения. Их можно получить по реакции соединения формулы V
11
2
в которой R и R обладают указанными выше значениями,
с соединением формулы VI
3
4
в которой R и R обладают указанными выше значениями.
Присоединение по Михаэлю фосфиновых кислот, т.е. соединений формулы V, к акриламидам, соединениям формулы VI [Liu et al., J. Organomet. Chem. 646: 212 (2002)], можно провести в присутствии гексаметилдисилазана при температуре в диапазоне от 20 до 150°С или при, например, 110°С.
Соединения формулы VI являются известными, или их можно получить по методикам, известным в данной области техники, например, путем обработки малоновых кислот, соединений формулы VII
2
с помощью формальдегида и HN(Et) (Liu et al., см. выше) с последующим превращением акриловых кислот в акриламиды.
Соединения формулы V можно получить по реакции соединения формулы VIII
11
11
11
2
3
2
2
с соединением формулы R-O-R, где R обозначает защитную группу, например Boc, например, с (Вос)О [Sampson and Bartlett, Biochemistry 30: 2255 (1991)] и основанием, таким как алкиламин, например NEt, в растворителе, таком как CHCl или МеОН, при температуре в диапазоне от 0 до 50°С или, например, при 22°С. Соединения формулы V можно разделить с использованием хирального амина [Sampson and Bartlett, Biochemistry 30:2255 (1991)], такого как α-(+)-метилбензиламин, в смеси растворителей, такой как кетона со спиртом, например метилэтилкетона с МеОН, и получить соответствующие соли, которые можно перекристаллизовать из той же смеси растворителей, которая описана выше. Удаление солей дает энантиомерно чистые (>95%) (R)-энантиомеры соединения формулы V. Новые соединения формулы V, например соединения V-2 и V-5, приведенные ниже, также являются вариантом осуществления настоящего изобретения.
Соединения формулы VIII можно получить по реакции соединения формулы IX
12
в которой R обозначает дифенилметил с сильной неорганической кислотой, такой как HI, HCl или HBr, например водным раствором HBr, при температуре в диапазоне от 50 до 100°С, например при 100°С или при 105°С. Новые соединения формулы VIII, например соединения VIII-2 и VIII-4, приведенные ниже, также являются вариантом осуществления настоящего изобретения.
Соединения формулы IX можно получить по реакции соединения формулы Х
с защищенным амином, например дифенилметиламингидрохлоридом, и фосфиновой кислотой, например 50% водным раствором фосфиновой кислоты [Baylis et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1:2845 (1984)] в растворителе, таком как вода или диоксан, например вода, при температуре в диапазоне от 50 до 100°С, например при 100°С. Новые соединения формулы IX, например соединения IX-2 и IX-4, приведенные ниже, также являются вариантом осуществления настоящего изобретения.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения соединений формулы I, включающему взаимодействие соединения формулы XI
в которой
1
R обозначает арил или гетероарил;
2
1
5
R обозначает (С-С)-алкил или фенил;
3
1
5
1
5
R обозначает водород, (С-С)-алкил, O-(С-С)-алкоксигруппу или фенил;
с соединением формулы XII
в которой
4
1
6
3
6
R обозначает (С-С)-алкил, (С-С)-циклоалкил, фенил, пиридил или индолил, и при необходимости превращение полученного соединения в фармацевтически приемлемую соль.
Реакция может протекать в присутствии активирующего агента или добавки. Примеры активирующего агента включают дициклогексилкарбодиимид и N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимидгидрохлорид. Примеры добавки включают 1-гидроксибензотриазол. Может содержаться основание, например триалкиламин, например триэтиламин. Реакция может протекать в присутствии растворителя, например простого эфира, например тетрагидрофурана. Температура может находиться в диапазоне от 20 до 60°С или от 20 до 40°С.
2
2
3
3
2
2
2
2
2
Соединения формулы XII имеются в продаже, или их можно получить по методикам, известным специалисту в данной области техники, например, HN(CH)CF можно получить по методике, описанной в публикации Dijols et al., Biochemistry 41: 9286-9292 (2002); HN(CH)CFCHF можно получить из соответствующего бромида через фталимид по методике, описанной в публикации Jacobs et al., J. Med. Chem. 37: 1282 (1994); производные фенетиламина можно получить по методике, описанной в публикации Bailey et al., Can. J. of Chem. 49: 3143-51 (1971) и производные изоксазола можно получить в соответствии с WO 03/072,535.
Соединения формулы XI являются новыми и являются вариантом осуществления настоящего изобретения. Их можно получить путем гидролиза соединения формулы XIII
13
1
4
в которой R обозначает (С-С)-алкил,
в присутствии основания, такого как КОН, NaOH или LiOH, в растворителе, таком как метанол или вода или их смесь, при температуре в диапазоне от 0 до 60°С, например при 20°С.
Соединения формулы XIII являются новыми и являются вариантом осуществления настоящего изобретения. Их можно получить по реакции соединения формулы XIV
3
с соединением формулы III в присутствии активирующего агента, такого как дициклогексилкарбодиимид или N-(3-диметиламинопропил)-N′-этилкарбодиимидгидрохлорид, и добавки, такой как 1-гидроксибензотриазол, и основания, такого как триалкиламин, например N(Et), в растворителе, таком как простой эфир, например тетрагидрофуран, при температуре в диапазоне от 20 до 60°С, например от 20 до 40°С.
Соединения формулы XIV являются новыми и являются вариантом осуществления настоящего изобретения. Их можно получить по реакции соединения формулы XV
11
2
2
в которой R обозначает защитную группу, например Вос, с сильной неорганической кислотой, такой как водный раствор HI, HCl или HBr, или, например, с трифторуксусной кислотой, в растворителе, таком как CHCl, при температуре в диапазоне от 20 до 100°С, например при 20°С.
Соединения формулы XV являются новыми и являются вариантом осуществления настоящего изобретения. Их можно получить по реакции соединения формулы V с соединением формулы XVI
в присутствии, например, гексаметилдисилазана при температуре в диапазоне от 20 до 150°С, например при 110°С (Michael addition, Liu et al.., см. выше).
Примеры
Общие положения: В названиях по систематической терминологии приведены обозначения стереоизомеров R и S (в соответствии с правилами CIP). Если эти обозначения не приведены, то получены смеси изомеров. Использованы следующие аббревиатуры: Boc: трет-бутоксикарбонил; ТФК:
трифторуксусная кислота; МС - масс-спектроскопия.
Пример S1: Получение исходных соединений формулы V
(а) Получение соединений формулы IX
3
2
К суспензии 36,3 г дифенилметиламингидрохлорида в 80 мл воды прибавляли 180 мл 50% водного раствора НРО. Смесь нагревали до температуры кипения и обрабатывали 200 ммоль раствора соответствующего соединения формулы Х в 30 мл диоксана в течение 10 мин и перемешивание продолжали в течение 10 мин. Суспензию охлаждали до 65°С, фильтровали и твердое вещество один раз промывали водой. Влажное твердое вещество перемешивали с 180 мл ацетона при 0°С в течение 10 мин, суспензию фильтровали, твердое вещество один раз промывали холодным ацетоном и сушили и получали искомое соединение формулы IX с выходом 50-70%.
№
Соединение формулы IX
МС
IX-1
[1-(бензгидриламино)-3-метилбутил]-фосфиновая кислота
316,3 (М-Н)<sup>-</sup>
IX-2
[1-(бензгидриламино)-3-метилсульфанилбутил]-фосфиновая кислота
348,3 (М-Н)<sup>-</sup>
IX-3
[1-(бензгидриламино)-2-фенилэтил]-фосфиновая кислота
350,3 (М-Н)<sup>-</sup>
IX-4<sup>1)</sup>
[1-(бензгидриламино)-2-(3,5-дифторфенил)-этил]-фосфиновая кислота
386,2 (М-Н)<sup>-</sup>
<sup>1)</sup> Исходный альдегид получали следующим образом: Раствор 5,3 г 3,5-дифторфенилуксусной кислоты в 40 мл МеОН и 3 мл BF3·Et<sub>2</sub>O нагревали при 50°С в течение 1 ч. Раствор выпаривали, остаток подвергали распределению между Et<sub>2</sub>O и водным раствором NaHCO<sub>3</sub>, органический слой промывали водой, сушили и выпаривали. Оставшийся метиловый эфир (5,6 г) растворяли в 240 мл сухого толуола, охлаждали до -78°С и обрабатывали с помощью 45 мл 1 М раствора диизобутилалюминийгидрида в CH<sub>2</sub>Cl<sub>2</sub> и перемешивание продолжали при -78°С в течение 1 ч. Реакцию останавливали с помощью 30 мл МеОН и 100 мл 50% водного раствора тартрата натрия-калия и экстрагировали с помощью Et<sub>2</sub>O. Органический слой промывали рассолом, сушили и выпаривали и получали 4,5 г (3,5-дифторфенил)-ацетальдегида.
(b) Получение соединений формулы VIII
2
Суспензию 77,4 ммоль соответствующего соединения формулы IX и 210 мл 48% водного раствора HBr нагревали при 105°С в течение 1 ч. Смесь несколько раз промывали с помощью EtO и водный раствор выпаривали досуха. Полученное твердое вещество растворяли в 465 мл этанола. Раствор обрабатывали с помощью 29 мл пропиленоксида и полученную суспензию перемешивали при 20°С в течение ночи. Суспензию фильтровали, твердое вещество промывали холодным этанолом и сушили и получали искомое соединение формулы VIII с выходом 70-95%.
№
Соединение формулы VIII
МС
VIII-1
(1-амино-3-метилбутил)-фосфиновая кислота
150,1 (М-Н)<sup>-</sup>
VIII-2
(1-амино-3-метилсульфанилбутил)-фосфиновая кислота
184,1 (М+Н)<sup>+</sup>
VIII-3
(1-амино-2-фенилэтил)-фосфиновая кислота
185,9 (М+Н)<sup>+</sup>
VIII-4
[1-амино-2-(3,5-дифторфенил)-этил]-фосфиновая кислота
220,1 (М-Н)<sup>-</sup>
(с) Получение соединений формулы V
2
4
К раствору 2,0 ммоль соответствующего соединения формулы VIII в 10 мл МеОН прибавляли раствор 2,2 ммоль (Вос)О в 2 мл МеОН при 20°С и перемешивание продолжали в течение 4 ч. Смесь выпаривали и остаток подвергали распределению между AcOEt и водным раствором KHSO (10%). Органический слой промывали рассолом, сушили и выпаривали и получали неочищенное искомое соединение формулы V с выходом 80-90%. Разделение рацематов проводили путем кристаллизации 2 ммоль соединения формулы V и 2,2 ммоль α-(+)-метилбензиламида в 40 мл метилэтилкетона с последующей перекристаллизацией. Полученную соль подвергали распределению между водным раствором хлористоводородной кислоты и AcOEt и получали (R)-энантиомер соединения формулы V с выходом 30-40% и оптической чистотой 95%.
№
Соединение формулы V
MC/α[D]*
V-1
(1-трет-бутоксикарбониламино-3-метилбутил)-фосфиновая кислота
250,1 (М-Н)<sup>-</sup>
V-2
(1-трет-бутоксикарбониламино-3-метилсульфанилбутил)-фосфиновая кислота
282.1 (М-Н)<sup>-</sup>
V-3
(1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-фосфиновая кислота
284,4 (М-Н)<sup>-</sup>
V-4
((R)-1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-фосфиновая кислота
284,1 (М-Н)<sup>-</sup> α[D] -29,4°
V-5
[1-трет-бутоксикарбониламино-2-(3,5-дифторфенил)-этил]-фосфиновая кислота
320,4 (М-Н)<sup>-</sup>
*.: α[D] (1%, EtOH)
Пример S2: Получение соединений формулы VI
2
2
3
2
2
3
4
Смесь 28 ммоль соответствующего соединения формулы VII и 2,9 мл диэтиламина обрабатывали с помощью 11 мл формалина и кипятили с обратным холодильником в течение 1-3 ч. Раствор охлаждали до 20°С, разбавляли с помощью CHCl и промывали водным раствором NaHCO. Водный слой подкисляли до рН 1 разбавленной хлористоводородной кислотой и экстрагировали с помощью CHCl. Объединенные органические слои сушили и выпаривали и получали соответствующую неочищенную акриловую кислоту с выходом 70-80%. К раствору 4,3 ммоль акриловой кислоты в 7 мл тетрагидрофурана 560 мг п-толуидина последовательно прибавляли 1,8 мл NEt, 950 мг 1-гидроксибензотриазола и 1,28 г N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимидгидрохлорида и суспензию перемешивали при 20°С в течение 1-3 ч. Смесь подвергали распределению между насыщенным водным раствором NHCl и AcOEt, органический слой промывали 0,5 н. водным раствором NaOH, сушили и выпаривали. Неочищенное вещество хроматографировали на диоксиде кремния с использованием смеси н-гептан/AcOEt и получали искомое соединение формулы VI с выходом 50-70%.
№
Соединение формулы VI
МС
VI-1
N-фенилметакриламид
VI-2
2-метилен-N-п-толилбутирамид
190,3 (М+Н)<sup>+</sup>
VI-3
3-метил-2-метилен-N-п-толилбутирамид
204,1 (M+H)<sup>+</sup>
VI-4
2-бензил-N-п-толилакриламид
252,1 (M+H)<sup>+</sup>
VI-5
метиловый эфир 3-фенилкарбамоилбут-3-еновой кислоты
219,7 (М)<sup>+</sup>
VI-6
N-(3-этоксифенил)-акриламид
VI-7
N-(3-трифторметилфенил)-акриламид
VI-8
N-(5-метилпиридин-2-ил)-акриламид
VI-9
N-(4-трет-бутилфенил)-акриламид
VI-10
N-(4-диметиламинофенил)-акриламид
VI-11
N-(4-гидроксифенил)-акриламид
VI-12
метиловый эфир 4-акрилоиламинобензойной кислоты
VI-13
N-(3,4-диметоксифенил)-акриламид
VI-14
N-(3,5-диметоксифенил)-акриламид
VI-15
N-(3,4,5-триметоксифенил)-акриламид
VI-16
N-(α-фенилэтил)-акриламид
VI-17
N-(2-диметиламиноэтил)-акриламид
Пример S3: Получение хлорангидрида М,М-дипропилизофталамовой кислоты
2
Раствор 1,30 г N,N-дипропилизофталамовой кислоты и 1,9 мл SOCl в 5 мл бензола кипятили с обратным холодильником до прекращения выделения газа (30 мин). Раствор выпаривали и остаток перегоняли с толуолом и получали 1,41 г хлорангидрида N,N-дипропилизофталамовой кислоты.
Пример S4: Получение соединения формулы XI, т.е. 3-{[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноил}-2-метилпропионовой кислоты
(a) Получение метилового эфира 3-[((R)-1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-гидроксифосфиноил]-2-метилпропионовой кислоты
2
2
2
2
2
+
Смесь 5,00 г ((R)-1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-фосфиновой кислоты и 18,3 мл HN(TMC) нагревали при 110°С в течение 1 ч. К раствору прибавляли 2,5 мл метилметакрилата и нагревание продолжали при 110°С в течение 2 ч. Раствор охлаждали до 70°С, медленно разбавляли с помощью 10 мл EtOH и выпаривали. Остаток хроматографировали на диоксиде кремния в градиентном режиме с использованием смеси CHCl/МеОН(9:1)→CHCl/МеОН/АсОН(10:1:0,3) и получали 4,10 г искомого соединения. МС: 386,5 (М+Н).
(b) Получение метилового эфира 3-[((R)-1-амино-2-фенилэтил)-гидроксифосфиноил]-2-метилпропионовой кислоты; соли с трифторуксусной кислотой
3
2
2
Раствор 1,75 г метилового эфира 3-[((R)-1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-гидроксифосфиноил]-2-метилпропионовой кислоты и 3,40 мл CFCOOH в 20 мл CHCl перемешивали при 20°С в течение 16 ч и выпаривали и получали 2,23 г неочищенного искомого соединения.
(c) Получение метилового эфира 3-{[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноил}-2-метилпропионовой кислоты
3
2
2
2
2
-
К раствору 2,23 г неочищенного амина в виде соли с ТФК (соединение формулы XIV) в 15 мл диоксана при 0°С последовательно прибавляли 1,9 мл NEt и раствор 1,47 г хлорангидрида N,N-дипропилизофталамовой кислоты в 2 мл диоксана и перемешивание продолжали при 20°С в течение 3 ч. Смесь подвергали распределению между AcOEt и рассолом и значение рН доводили до 2 с помощью хлористоводородной кислоты. Органический слой промывали рассолом, сушили и выпаривали. Остаток хроматографировали на диоксиде кремния в градиентном режиме с использованием смеси CHCl→CHCl/-МеОН/АсОН (10:1:0,5) и получали 2,15 г искомого соединения. МС: 515,3 (М-Н).
(d) Получение 3-{[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноил}-2-метилпропионовой кислоты
2
2
-
Раствор 2,11 г метилового эфира 3-{[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноил}-2-метилпропионовой кислоты в мл МеОН обрабатывали раствором 865 мг LiOH·НО в 2 мл НО и мутный раствор перемешивали при 20°С в течение 1,5 ч. Смесь выпаривали и остаток подвергали распределению между водным раствором HCl (рН 2) и AcOEt. Органический слой промывали рассолом, сушили и выпаривали и получали 1,54 г искомого соединения. МС: 501,4 (М-Н).
Пример 1: Получение соединений формулы I с использованием в качестве исходных веществ соединения формулы II и соединения формулы III
2
2
2
2
2
(а) Смесь 0,4 ммоль соответствующего соединения формулы V и 0,6 мл HN(TMC) нагревали при 110°С в течение 1 ч. К раствору прибавляли 0,6 ммоль соответствующего соединения формулы VI и нагревание продолжали при 110°С в течение 1-4 ч. Раствор охлаждали до 20°, разбавляли с помощью 1 мл EtOH и выпаривали. Остаток хроматографировали на диоксиде кремния в градиентном режиме с использованием смеси CHCl/МеОН(9:1)→CHCl/MeOH/AcOH (10:1:0,5) и получали искомое соединение формулы IV с выходом 30-70%.
№
Соединение формулы IV
МС
IV-1
(1-трет-бутоксикарбониламино-3-метилбутил)-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновая кислота
411,5 (М-Н)<sup>-</sup>
IV-2
(1-трет-бутоксикарбониламино-3-метилсульфанилбутил)-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновая кислота
443,4 (М-Н)<sup>-</sup>
IV-3
(1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-(2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновая кислота
459,1 (М-Н)<sup>-</sup>
IV-4
((R)-1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-(2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновая кислота
459,1 (М-Н)<sup>-</sup>
IV-5
(1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-(2-п-толилкарбамоилбутил)-фосфиновая кислота
475,3 (М+Н)<sup>+</sup>
IV-6
(1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-(3-метил-2-п-толилкарбамоилбутил)-фосфиновая кислота
489,1 (М+Н)<sup>+</sup>
IV-7<sup>1)</sup>
(1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-(2-фенил-2-п-толилкарбамоилэтил)-фосфиновая кислота
522,3 (М)<sup>+</sup>
IV-8
(1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-(3-фенил-2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновая кислота
537,4(M+H)<sup>+</sup>
IV-9
метиловый эфир 3-[(1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-гидроксифосфиноилметил]-N-фенилсукцинамовой кислоты
505,3 (М+Н)<sup>+</sup>
IV-10
[1-трет-бутоксикарбониламино-2-(3,5-дифторфенил)-этил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновая кислота
481,8(М-Н)<sup>-</sup>
1)
-
Соединение IV-7 получали по обратной последовательности реакций, т.е. соответствующие соединения формулы V вводили в реакцию с 2-фенилакриловой кислотой и получали 3-[(1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-гидроксифосфиноил]-2-фенилпропионовую кислоту (МС: 432,4 (М-Н)), которую вводили в реакцию с п-толуидином и получали (1-трет-бутоксикарбониламино-2-фенилэтил)-(2-фенил-2-п-толилкарбамоилэтил)-фосфиновую кислоту.
3
2
2
3
4
3
2
3
2
(b) Раствор 0,20 ммоль соответствующего соединения формулы IV и 0,23 мл CFCOOH в 2,0 мл CHCl перемешивали при 20°С в течение 1,5 ч и выпаривали. Полученное неочищенное соединение формулы II (в виде соли с ТФК) растворяли в 1 мл тетрагидрофурана и последовательно обрабатывали с помощью 0,22 ммоль соответствующего соединения формулы III, 0,70 ммоль NEt, 0,24 ммоль 1-гидроксибензотриазола и 0,26 ммоль N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимидгидрохлорида и суспензию перемешивали при 20°С в течение 1,5 ч. Смесь подвергали распределению между насыщенным водным раствором NHCl и AcOEt, органический слой промывали рассолом, сушили и выпаривали. Неочищенное вещество очищали с помощью ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) (колонка RP-18) в градиентном режиме с использованием смеси CHCN:HO (20:80)→CHCN:НО (95:5) и получали искомое соединение формулы I с выходом 30-40%.
Следующие соединения получали в соответствии с приведенным выше примером:
№
Соединение формулы I
МС
1-1
{(R)-1-[3-(метилпропилкарбамоил)-бензоиламино]-2-фенилэтил}-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
550,3 (М+Н)<sup>+</sup>
1-2
{(R)-1-[3-(метилпентилкарбамоил)-бензоиламино]-2-фенилэтил}-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
578,3(M+H)<sup>+</sup>
1-3
[(R)-1-(3-дипентилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
634,3 (M+H)<sup>+</sup>
1-4
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоил-5-метилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
592,0 (M+H)<sup>+</sup>
1-5
{(R)-1-[3-(2-оксопирролидин-1-ил)-5-пропоксибензоиламино]-2-фенилэтил}-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
592,0 (M+H)""
1-6
{(R)-1-[(1-бутил-1Н-индол-6-карбонил)-амино]-2-фенилэтил}-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
546,2 (М+Н)<sup>+</sup>
1-7
(2-фенилкарбамоилпропил)-{(R)-2-фенил-1-[(хинолин-2-карбонил)-амино]-этил}-фосфиновую кислоту
502,0 (М+Н)<sup>+</sup>
1-8
[(R)-1-(3-гидрокси-2-метилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
481,0 (М+Н)<sup>+</sup>
1-9
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-3-метилбутил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
542,5 (М-Н)<sup>-</sup>
I-10
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-3-метилсульфанилбутил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
574,8 (М-Н)<sup>-</sup>
1-11
[2-(3,5-дифторфенил)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-этил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
612,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-12
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-п-толилкарбамоилэтил)-фосфиновую кислоту
578,4 (М+Н)<sup>+</sup>
1-13
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-п-толилкарбамоилбутил)-фосфиновую кислоту
606,1 (М+Н)<sup>+</sup>
1-14
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(3-метил-2-п-толилкарбамоилбутил)-фосфиновую кислоту
620,2 (M+H)<sup>+</sup>
1-15
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенил-2-п-толилкарбамоилэтил)-фосфиновую кислоту
652,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-16
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(3-фенил-2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
668,2 (M+H)<sup>+</sup>
1-17
метиловый эфир 3-{[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноилметил}-N-фенилсукцинамовой кислоты
636,1 (М+Н)<sup>+</sup>
Пример 2: Получение соединений формулы I с использованием в качестве исходных веществ соединения формулы XI и соединения формулы XII
3
4
3
2
3
2
2
2
Неочищенную 3-{[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноил}-2-метилпропионовую кислоту (0,10 ммоль) растворяли в 0,7 мл тетрагидрофурана и последовательно обрабатывали с помощью 0,16 ммоль соответствующего соединения формулы XII, 0,40 ммоль NEt, 0,16 ммоль 1-гидроксибензотриазола и 0,26 ммоль N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимидгидрохлорида и суспензию перемешивали при 45°С в течение 3 ч. Смесь подвергали распределению между насыщенным водным раствором NHCl и AcOEt, органический слой промывали рассолом, сушили и выпаривали. Неочищенное вещество очищали с помощью ВЭЖХ (колонка RP-18) в градиентном режиме с использованием смеси CHCN:НО (20:80)→CHCN:HO (95:5) и получали искомое соединение формулы I с выходом 10-60% в виде смеси изомеров. Разделение смеси изомеров проводили с помощью тонкослойной хроматографии на диоксиде кремния с использованием смеси CHCl/МеОН/АсОН 9:1:0,25. Нижнее движущееся пятно соответствовало 1(R),2(S)-стереоизомеру.
Следующие соединения получали в соответствии с приведенным выше примером:
№
Соединение формулы I
МС
1-18
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
576,6 (М-Н)<sup>-</sup>
1-19
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-((S)-2-фенилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
576,6 (М-Н)<sup>-</sup>
1-20
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
592,2 (М-Н)<sup>-</sup>
1-21
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-((S)-2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
590,8 (М-Н)<sup>-</sup>
1-22
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-((R)-2-п-толилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
590,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-23
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(3-этоксифенилкарбамоил)-этил]-фосфиновую кислоту
608,2 (М+Н)<sup>+</sup>
1-24
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(3-трифторметилфенилкарбамоил)-этил]-фосфиновую кислоту
632,3 (M+H)<sup>+</sup>
1-25
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(5-метилпиридин-2-илкарбамоил)-этил]-фосфиновую кислоту
579,2 (М+Н)<sup>+</sup>
1-26
[2-(4-трет-бутилфенилкарбамоил)-этил]-[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
618,6 (М-Н)-
1-27
[2-(4-диметиламинофенилкарбамоил)-этил]-[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
607,2 (M+H)<sup>+</sup>
1-28
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(4-гидроксифенилкарбамоил)-этил]-фосфиновую кислоту
580,2 (М+Н)<sup>+</sup>
1-29
метиловый эфир 4-(3-{[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноил}-пропиониламино)-бензойной кислоты
622,3 (M+H)<sup>+</sup>
1-30
[2-(3,4-диметоксифенилкарбамоил)-этил]-[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
624,2 (M+H)<sup>+</sup>
1-31
[2-(3,5-диметоксифенилкарбамоил)-этил]-[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
622,8 (М-Н)<sup>-</sup>
1-32
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(3,4,5-триметоксифенилкарбамоил)-этил]-фосфиновую кислоту
654,2 (M+H)<sup>+</sup>
1-33
[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(1(S)-фенилэтилкарбамоил)-этил]-фосфиновую кислоту
590,4 (М-Н)<sup>-</sup>
1-34
[2-(2-диметиламиноэтилкарбамоил)-этил]-[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
559,2 (М+Н)<sup>+</sup>
1-35
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-изопропилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
542,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-36
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-изобутилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
556,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-37
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(3-метилбутилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
570,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-38
[2-(3,3-диметилбутилкарбамоил)-пропил]-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
584,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-39
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(4,4,4-трифторбутилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
610,4 (М-Н)<sup>-</sup>
1-40
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(3,3,4,4-тетрафторбутилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
628,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-41
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(2,2,3,3,4,4,4-гептафторбутилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
682,2 (М-Н)<sup>-</sup>
1-42
(2-циклогексилкарбамоилпропил)-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
582,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-43
[2-(2-циклогексилэтилкарбамоил)-пропил]-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
610,4 (М-Н)<sup>-</sup>
1-44
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(4-гидроксифенилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
592,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-45
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(4-метоксифенилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
606,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-46
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(пиридин-2-илкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
577,6 (М-Н)<sup>-</sup>
1-47
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(5-метилпиридин-2-илкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
591,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-48
(2-бензилкарбамоилпропил)-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
590,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-49
{2-[(3,5-диметилизоксазол-4-илметил)-карбамоил]-пропил}-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
609,5 (М-Н)<sup>-</sup>
1-50
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-(2-фенетилкарбамоилпропил)-фосфиновую кислоту
604,7 (М-Н)<sup>-</sup>
1-51
[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-[2-(1-метил-2-фенилэтилкарбамоил)-пропил]-фосфиновую кислоту
618,6 (М-Н)<sup>-</sup>
1-52
{2-[2-(2,4-диметилфенил)-1-метилэтилкарбамоил]-пропил}-[(R)-1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-фосфиновую кислоту
646,5 (М-Н)<sup>-</sup>
В качестве примера данные ЯМР [1Н-ЯМР (300 МГц, внутренний стандарт ТМС (тетраметилсилан), значения J в Гц, CD3CD)] приведены для двух соединений, т.е. соединений I-18 и I-37:
Соединение I-18: 7,77 (m, 1Н), 7,67-7,47 (m, 5H), 7,40-7,07 (m, 8H), 4,80 (m, 1H), 3,60-2,95 (m, 7H), 2,55-2,27 (m, 1Н), 2,05-1.80 (m, 1Н), 1,80-1,45 (m, 4H), 1,42 и 1,39 (все d, все J=6, соотношение 3:2, 3Н совместно), 1,04 (m, 3H), 0,70 (m, 3Н).
Соединение I-37: 7,74 (m, 1Н), 7,150 (s, 1Н), 7,50 (m, 2H), 7,30-7,10 (m, 5H), 4,72 (m, 1Н), 3,50-2,75 (m, 9H), 2,35-2,10 (m, 1Н), 1,90-1,30 (m, 8H), 1,26 и 1,24 (все d, все J=6, соотношение 3:2, 3Н совместно), 1,00 (m, 3Н), 0,91 и 0,89 (все d, все J=6, соотношение 2:3, 6Н совместно), 0,70 (m, 3Н).
Пример 3: Получение соединения формулы I с использованием в качестве исходного вещества другого соединения формулы I
2
2
Раствор 14 мг метилового эфира 3-{[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноилметил}-Н-фенилсукцинамовой кислоты (соединение 1-17) в 1 мл МеОН и 3 мг NaOH нагревали при 45° в течение 3 ч. Раствор выпаривали, остаток подвергали распределению между 1 н. водным раствором хлористоводородной кислоты и CHCl, органический слой промывали водой, сушили и выпаривали и получали 11 мг 3-{[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноилметил}-N-фенилсукцинамовой кислоты (соединение 1-53).
№
Соединение формулы I
МС
1-53
3-{[1-(3-дипропилкарбамоилбензоиламино)-2-фенилэтил]-гидроксифосфиноилметил}-N-фенилсукцинамовая кислота
620,3 (М-H)<sup>-</sup>
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, и их фармацевтически приемлемые соли (далее: фармацевтические вещества) обладают фармакологической активностью и применимы в качестве фармацевтических средств. В частности, фармацевтические вещества обладают способностью ингибировать β-секретазу.
Методики клеточного скрининга для ингибиторов продуцирования A-beta, методики изучения подавления продуцирования A-beta in vivo и анализы с использованием мембран или клеточных экстрактов для обнаружения активности секретазы известны в данной области техники и описаны в многочисленных публикациях, включая WO 98/22493, US 5703129, US 5593846 и GB 2395124; все они включены в настоящее изобретение в качестве ссылки. Бета-секретаза описана в нескольких публикациях, включая ЕР 855444, WO 00/17369, WO 00/58479, WO 00/47618, WO 01/00663 и WO 01/00665.
Например, ингибирование β-секретазы фармацевтическими веществами можно продемонстрировать по их способности, например, ингибировать расщепление флуоресцирующего пептидного субстрата (например, с помощью анализа, такого как, например, анализ FRET, описанный, в частности, в публикации Grueninger-Leitch et al.) или замещать, например, пептидный ингибитор β-секретазы на активном связывающем центре β-секретазы, например, как это показано с помощью приведенной ниже методики исследования.
Анализ конкурентного ввязывания радиолиганда (АСРЛ)
96-Луночные микропланшеты (Optiplate Packard) покрывают очищенным белком ВАСЕ (см., GB 2385124: примеры 1 и 2) с использованием концентрации 1 мкг/мл в 30 мМ натрий-цитратном буфере, значение рН которого доведено до 5,5. Покрытие создают путем инкубации 100 мкл/лунка в течение 1-3 дней при 4°С. Затем планшеты промывают с помощью 10 мМ цитрата, рН 4, по 12×300 мкл/лунка. В каждую лунку прибавляют 100 мкл связывающего буфера (30 мМ цитрата, 100 мМ NaCl, 0,1% БСА (бычий сывороточный альбумин), рН 4,1). Исследуемое соединение прибавляют по 5 мкл соответствующих разведений исходного раствора в диметилсульфоксиде. К этому прибавляют радиоактивную метку (тритированное соединение А, см., например, GB 2385124: пример 4) по 10 мкл/лунка обладающего активностью 10 мкКи/мл исходного раствора в связывающем буфере. После инкубации в течение 1,5-2 ч в камере с влажной атмосферой при температуре окружающей среды планшет промывают водой по 2×300 мкл/лунка и переворачивают на сухое полотенце. После прибавления MicroScint20 (Packard) no 50 мкл/лунка планшет закрывают и встряхивают в течение 5 с. Радиоактивность связанного вещества измеряют с помощью счетчика Topcount (Packard). Полное связывание обычно составляет от 2000 до 10000 распадов/мин/лунка в основном в зависимости от чистоты и концентрации белка ВАСЕ. Неспецифическое связывание, оцененное по конкуренции с >1 мкМ пептидного ингибитора (Bachem # H-4848), обычно составляет от 30 до 300 распадов/мин/лунка. Значения IC-50 рассчитывают с помощью Microsoft Excel FIT.
50
Предпочтительные соединения обладают значениями IC<1,0 мкМ. В приведенном ниже перечне представлены некоторые типичные данные для ингибирования β-секретазы:
Пример №
IC<sub>50</sub> in vitro [мкМ]
Пример №
IC<sub>50</sub> in vitro [мкМ]
1-5
0,05
1-37
0,04
1-14
0,20
1-42
0,02
1-18
0,01
В соответствии с этим фармацевтические вещества применимы в качестве ингибиторов β-секретазы, например, при лечении заболеваний и патологических состояний, в которых играет роль или проявляется активность β-секретазы. Такие патологические состояния включают болезнь Альцгеймера и амилоидную ангиопатию головного мозга.
Ингибиторы бета-секретазы можно дополнительно оптимизировать по их способности ингибировать секрецию A-beta в системах клеточных культур, которые хорошо известны в данной области техники. Например, продуцирование A-beta можно измерить с помощью иммунологического анализа в надосадочной жидкости культуры клеток НЕК293, которые сверхэкспрессированы путем трансфицирования предшественника амилоидного белка (ПАБ). Продуцирование А-beta также можно измерить в надосадочной жидкости линий клеток нейробластомы человека, которые экспрессируют эндогенный ПАБ. Кроме того, ингибиторы бета-секретазы можно оптимизировать по эффективности в трансгенных моделях мышей для болезни Альцгеймера, при которой в центральной нервной системе подвергнутых воздействию мышей образуются содержащие A-beta бляшки типа Альцгеймера. Наконец, ингибиторы бета-секретазы предположительно снижают концентрацию A-beta в головном мозге и спинномозговой жидкости у пациентов, страдающих болезнью Альцгеймера, а также у здоровых лиц, у которых еще не образовались бляшки A-beta.
Биохимические и иммунологические исследования показали, что преобладающим белковым компонентом амилоидной бляшки, образующейся в коре головного мозга лиц, пораженных болезнью Альцгеймера (БА), является обладающий молекулярной массой, равной примерно 4,2 килодальтон (кДа), белок, содержащий примерно от 39 до 43 аминокислот. Этот белок обозначен как A-beta-амилоидный пептид, а иногда - beta/A4; в настоящем изобретении он обозначен как A-beta. В дополнение к отложению A-beta в амилоидных бляшках A-beta также обнаруживается на стенках менингиальных и паренхимальных артериол, мелких артерий, капилляров и иногда венул. Поскольку имеются убедительные данные о том, что отложения причинно связаны с БА, было бы желательным ингибировать образование A-beta in vivo и тем самым предупреждать и уменьшать неврологическую дегенерацию путем прекращения образования амилоидных бляшек, снижения нейротоксичности и в общем случае опосредования патологии, связанной с продуцированном A-beta.
Предполагается, что A-beta является внутренним полипептидом, образовавшимся из интегрального белка мембраны типа 1, называемого предшественником бета-амилоидного белка (ПАБ). ПАБ обычно продуцируется многими клетками и in vivo, и в культурах клеток, взятых у различных животных и человека. A-beta образуется при расщеплении ПАБ ферментной (протеазной) системой (системами), собирательно называемыми секретазами, включая бета-секретазу (секретазы), генерирующие N-конец A-beta.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению соединений формулы I и их фармацевтически приемлемых солей для приготовления лекарственных средств, предназначенных для лечения заболеваний, связанных с ингибированием β-секретазы. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению соединений формулы I их фармацевтически приемлемых солей при приготовлении лекарственных средств, предназначенных для предупреждения или лечения болезни Альцгеймера.
Фармацевтические соединения можно применять в качестве лекарственных средств, например, в виде фармацевтических препаратов. Фармацевтические препараты можно вводить перорально, например, в виде таблеток, таблеток с покрытием, драже, капсул из мягкого и твердого желатина, растворов, эмульсий или суспензий. Кроме того, введение также можно выполнить ректально, например, в виде суппозиториев или парентерально, например, в виде растворов для инъекций.
Для получения фармацевтических препаратов фармацевтические соединения можно обработать с использованием фармацевтически инертных неорганических или органических носителей. В качестве таких носителей для таблеток, таблеток с покрытием, драже и капсул из твердого желатина можно использовать, например, лактозу, кукурузный крахмал и его производные, тальк, стеариновую кислоту и ее соли и т.п. Для капсул из мягкого желатина подходящими носителями являются, например, растительные масла, воски, жиры, полужидкие и жидкие полиолы и т.п. Однако в зависимости от природы активного вещества в случае капсул из мягкого желатина носители обычно не требуются. Носителями, подходящими для приготовления растворов и сиропов, являются, например, вода, полиолы, глицерин, растительное масло и т.п. Носителями, подходящими для суппозиториев, являются, например, натуральные или отвержденные масла, воски, жиры, полужидкие или жидкие полиолы и т.п.
Кроме того, фармацевтические препараты могут содержать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, подсластители, красители, вкусовые агенты, соли для изменения осмотического давления, буферы, маскирующие агенты или антиоксиданты. Они также могут содержать другие терапевтически полезные вещества.
Как отмечено выше, объектом настоящего изобретения также являются лекарственные средства, содержащие фармацевтическое вещество и терапевтически инертный наполнитель, а также способ получения таких лекарственных средств, который состоит во включении одного или большего количества фармацевтических веществ и, при необходимости, одного или большего количества других терапевтически полезных веществ в галенову дозировочную форму совместно с одним или более терапевтически инертных носителей.
Дозировка может меняться в широких пределах и, разумеется, в каждом конкретном случае будет подбираться в соответствии с индивидуальными потребностями. В случае перорального введения дозировка для взрослых составляет от примерно 0,01 до примерно 1000 мг фармацевтического вещества в сутки. Суточная доза может вводиться в виде одной дозы или разделенных доз, и, кроме того, если это будет сочтено целесообразным, верхний предел может быть превышен.
Композиция для таблетки (мокрое гранулирование)
Компонент
Ингредиенты
мг/таблетка
5 мг
25 мг
100 мг
500 мг
1.
Соединение формулы I
5
25
100
500
2.
Безводная лактоза DTG
125
105
30
150
3.
Sta-Rx 1500
6
6
6
30
4.
Микрокристаллическая целлюлоза
30
30
30
150
5.
Стеарат магния
1
1
1
1
Всего
167
167
167
831
Перемешать компоненты 1, 2, 3 и 4 и гранулировать с использованием очищенной воды. Высушить гранулы при 50°С. Обработать гранулы на подходящем размалывающем оборудовании. Прибавить компонент 5 и перемешивать в течение 3 мин; спрессовать с помощью подходящего пресса.
Композиция для капсулы
Компонент
Ингредиенты
мг/капсула
5 мг
25 мг
100 мг
500 мг
1.
Соединение формулы I
5
25
100
500
2.
Водная лактоза
159
123
148
-
3.
Кукурузный крахмал
25
35
40
70
4.
Тальк
10
15
10
25
5.
Стеарат магния
1
2
2
5
Всего
200
200
300
600
Перемешивать компоненты 1, 2 и 3 в подходящем смесителе в течение 30 мин. Прибавить компоненты 4 и 5 и перемешивать в течение 3 мин. Поместить в подходящую капсулу.