Возрастные особенности резистентности эритроцитарной мембраны крыс к гемолитическим факторам in vitro

culation vessels decreases in the right ventricle on the 15th day, at high reactivity of micro-vessels in the left ventricle and an inter-ventricular partition remaining on 15-30th day.

Key words: myocardium, microcirculation vessels, physical activities.

УДК 612.111+591.3

ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ЭРИТРОЦИТАРНОЙ МЕМБРАНЫ КРЫС К ГЕМОЛИТИЧЕСКИМ ФАКТОРАМ IN VITRO

Е.К.ГОЛУБЕВА, С.Б.НАЗАРОВ*

Исследовались возрастные особенности резистентности мембраны эритроцитов к действию различных гемолизирующих факторов in vitro в раннем постнатальном онтогенезе у крыс. Полученные результаты свидетельствуют о высокой способности эритроцитов противостоять воздействию растворов кислоты, глицерина, пониженному осмотическому давлению и механическому повреждению, что отражает увеличение в крови содержания молодых клеток красного ряда на фоне существенных преобразований эритрона. Низкая пере-кисная резистентность является результатом недостаточности эрит-роцитарных антиоксидантов, наиболее выраженной в 21 день жизни.

Ключевые слова: эритрон, гемолитическая резистентность эритроцитов, онтогенез.

Ребенок и животные разных видов рождаются в условиях незавершенного эритроцитарного системогенеза. Возрастные особенности эритрона были предметом многих исследований. Тем не менее, вопрос о проявлениях и механизмах преобразований эритрона в раннем постнатальном онтогенезе остается открытым. Незрелорождающиеся животные (крысы, мыши, кролики и другие) демонстрируют существенные отличия состава периферической крови, состоящие в относительно низких значениях его показателей в момент рождения и постепенном увеличении по мере роста и развития организма. На этом фоне наблюдается транзиторное снижение показателей эритрона [4,5], в развитии которого немаловажное значение, по-видимому, имеет снижение продолжительности жизни эритроцитов и увеличение интенсивности эритродиереза [6]. Результатом активации гемолиза является замена эритроцитарной популяции, сформировавшейся до рождения и неадекватной по своим свойствам условиям постнатальной жизни организма, содержащей короткоживущие эритроидные клетки, образованные вследствие высокой активности неосновных путей эритропоэза [5,7]. В свою очередь, продукты распада эритроцитов могут способствовать поддержанию высокого уровня эритропоэза и стимуляции развития эритропо-этической функции красного костного мозга. Селективному удалению из циркуляции подвержены эритроциты с измененными морфофункциональными и биохимическими свойствами [2,12], мембрана которых обладает пониженной эластичностью и высокой повреждаемостью в результате действия гемолитических факторов. Изучение функциональных особенностей эритроци-тарных клеток, отражающих изменения их биохимических параметров и характеризующих внутренние факторы гемолиза, ведущие эритроцит к разрушению на определенном этапе жизни в кровотоке, позволит существенно дополнить представления о механизмах и физиологической роли эритродиереза в постна-тальном развитии эритрона растущего организма.

Цель исследования  установить возрастные особенности резистентности мембраны эритроцитов к действию различных гемолизирующих факторов in vitro в раннем постнатальном онтогенезе у крыс.

Материалы и методы исследования. В экспериментах использовано 204 беспородные белые крысы: 148 крысят 1 месяца жизни и 56 контрольных взрослых животных. Забор крови у взрослых крыс производился из насечки хвоста, у крысят  из общего кровотока после декапитации. Эвтаназия осуществлялась посредством дислокации шейных позвонков.

В 1, 5, 10, 21 и 28 дни жизни крысят общепринятыми методами определялись концентрация эритроцитов, гемоглобина, гематокрит, содержание ретикулоцитов и оксифильных нормоци-тов. Производился расчет морфометрических параметров эритроцитов: среднего содержания гемоглобина в эритроците (ССГЭ),

средней концентрации гемоглобина в эритроците (СКГЭ), среднего объема эритроцита (СОЭр).

Для характеристики функциональных свойств эритроцитов исследовалась способность их мембраны противостоять воздействию кислоты, глицерина, пониженного осмотического давления, свободных радикалов кислорода и механическому воздействию. Оценка кислотной, глицериновой и осмотической резистентности эритроцитов производилась на основании графической регистрации кинетики разрушения красных клеток крови под влиянием кислоты, глицерина и пониженного осмотического давления с помощью специального устройства. В качестве веществ, индуцирующих гемолиз, использовались 0,004Н раствор соляной кислоты,

0,3М раствор глицерина, дистиллированная вода. Суспензия эритроцитов и гемолизирующий раствор помещались в кювету в соотношении 1:1. В последнем случае гемолиз происходил в конечной концентрации раствора, эквивалентной 0,45% №С1. При расшифровке полученных кривых определялись следующие показатели: время начала гемолиза (1^), время окончания гемолиза (Ъш), длительность гемолиза (Ъг), время 50%-ного гемолиза ^50), интегральный показатель эритрограммы (ИП) [3]. Перекисная резистентность оценивалась с использованием тест-набора для определения перекисного гемолиза (НПО СРеакомплекс» Чита) фотоколори-метрическим методом. Устойчивость эритроцитов к механическому гемолизу исследовалась посредством 30-минутного воздействия с применением магнитной мешалки в изотоническом растворе КаС1. Степень гемолиза, как и в предыдущем случае, оценивалась с помощью фотоэлектроколоримера.

Полученные результаты обработаны методом вариационного анализа с использованием Ъ-критерия Стьюдента. Критический уровень значимости (р) при проверке статистических гипотез принимался равным <0,05.

Результаты и их обсуждение. Результаты исследования показали, что крысята рождаются с низкой концентрацией эритроцитов, гемоглобина и показателем гематокрита на фоне значительно повышенного содержания ретикулоцитов и оксифильных нормоцитов (табл.1), что свидетельствует о высокой функциональной активности эритропоэза в пренатальный период. СОЭр новорожденных крысят более чем в два раза превышает показатель взрослых животных, составляя 196,36±32,84 мкм3 при 76,78±3,19 мкм3 в контроле (р<0,01). Возможно, вследствие действия эритропоэтического стимула (гипоксии, сопровождающей внутриутробное развитие) в кровь поступают ретикулоциты, отличающиеся по своим морфометрическим параметрам, в частности, большими размерами. Такой интегративный показатель состояния эритроцитарной системы как концентрация эритроцитов в периферической крови до 10 дня жизни включительно не претерпевает существенных изменений на фоне снижающегося содержания ретикулоцитов и оксифильных нормоцитов, тогда как концентрация гемоглобина значительно возрастает уже к 5дневному возрасту. У 10-дневных крысят концентрация ретику-лоцитов в крови минимальна и соответствует уровню взрослых, относительное содержание ретикулоцитов и оксифильных нор-моцитов продолжает снижаться. Эритроциты животных этой возрастной группы характеризуются максимальным ССГЭ, которое составляет 62,88±4,00 пг при 24,96±0,86 пг у взрослых животных (р<0,001). СОЭр и СКГЭ превышают значения аналогичных показателей взрослых крыс, составляя соответственно 178,22±7,19 мкм3 и 36,91±1,16% при 76,78±3,19 мкм3 и 31,80±0,35% в контроле (р<0,001; р<0,001). 21 день жизни является одним из критических периодов постнатального становления эритрона у крыс [4]. К этому возрасту в почках уже в достаточной степени вырабатывается эритропоэтин [8], обусловливая качественно новый уровень регуляции эритрона. У 21-дневных крысят отмечается прирост концентрации эритроцитов при неизменном содержании гемоглобина в периферической крови на фоне увеличивающейся концентрации ретикулоцитов. К окончанию исследуемого периода концентрация эритроцитов, гемоглобина и показатель гематокрита так и не достигают уровня взрослых крыс. Концентрация ретикулоцитов в периферической крови продолжает увеличиваться, отражая достаточно высокую эритро-поэтическую активность красного костного мозга.

* ГОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации»] 153012, Россия, г. Иваново, пр. Ф.Энгельса, 8

Таблица 1

Динамика показателей периферическойкрови в раннем постнатальном онтогенез крыс

Показатель и его значение у взрослых крыс Возраст

1 5 10 21 28

Концентрация эритроцитов, Т/л 5,41±0,17 1,86±0,14 р <0,001 Р1 Р2 1,84±0,06 <0,001 >0,05 1,70±0,07 <0,001 >0,05 >0,05 3,74±0,23 <0,001 <0,001 <0,001 4,19±0,29 <0,01 <0,001 >0,05

Концентрация гемоглобина, г/л 136,93±1,98 89,80±5,52 р <0,001 Р1 Р2 105,03±4,13 <0,001 <0,05 104,32±4,07 <0,001 <0,05 >0,05 101,63±3,33 <0,001 >0,05 >0,05 119,09±3,34 <0,001 <0,001 <0,001

Г ематокрит, % 43,00±0,69 27,92±1,45 р <0,001 Р1 Р2 29,46±0,92 <0,001 >0,05 28,90±0,50 <0,001 >0,05 >0,05 27,82±1,26 <0,001 >0,05 >0,05 33,86±1,13 <0,001 <0,01 <0,01

Содержание ретикулоцитов,  35,33±4,84 960,80±15,15 Р <0,001 Р1 Р2 456,8±87,27 <0,001 <0,001 169,8±31,53 <0,001 <0,001 <0,01 121,93±9,63 <0,001 <0,001 >0,05 181,5±22,68 <0,001 <0,001 >0,05

Концентрация ретикулоцитов, Г/л 185,98±23,52 1779,7±163,0 Р <0,001 Р1 Р2 795,4±166,6 <0,01 <0,001 270,3±50,27 >0,05 <0,001 <0,01 525,3±54,76 <0,001 <0,001 <0,01 867,5±123,3 <0,001 <0,001 <0,05

Содержание оксифильных нормоцитов, % 1,33±0,59 75,93±3,82 Р <0,001 Р1 Р2 22,04±2,72 <0,001 <0,001 11,27±2,18 <0,001 <0,001 <0,01 4,10±1,89 >0,05 <0,001 <0,05 5,43±1,29 <0,01 <0,001 >0,05

Примечание (здесь и далее): р  достоверность различий с показателем взрослых крыс, р1  достоверность различий с 1 днем жизни, р2  достоверность различий с предшествующей возрастной группой.

В основе механизма кислотного гемолиза денатурация некоторых протеинов мембраны с последующей их агрегацией [1]. Во все исследуемые сроки время 50% гемолиза и интегральный показатель кислотной резистентности эритроцитов у крысят достоверно превышают значения взрослых животных (табл.2). Начинается кислотный гемолиз позднее практически во всех возрастных группах. Лишь в 28-дневном возрасте отсутствуют различия с показателем взрослых крыс. Окончание кислотного гемолиза отсрочено и продолжительность его достоверно дольше на протяжении всего исследуемого периода. Увеличение кислотной резистентности, характерное для эритроцитов крысят исследуемого возрастного периода, косвенно свидетельствует о высоком содержании в циркуляции молодых клеток красного ряда [9], что подтверждается результатами исследования клеточного состава крови.

Стойкость эритроцитов к действию глицерина является характеристикой состояния фосфолипидных компонентов клеточной мембраны, которые и определяют проницаемость ее для этого вещества. Гемолитический эффект изотонического раствора глицерина, по-видимому, связан с повреждающим действием его на полосу 3 цитоскелета [13]. Эритроциты 5- и 21-дневных крысят характеризуются повышенной стойкостью в растворе глицерина, о чем свидетельствует увеличенный интегральный показатель глицериновой эритрограммы. І50 не отличается от показателя взрослых крыс. В 21 день жизни отмечается увеличение времени половины гемолиза по сравнению с новорожденными и более позднее, чем у взрослых животных, начало разрушения эритроцитов. Тем не менее, в 10- и 21-дневном возрасте оно заканчивается раньше, а у 1-, 10- и 21-дневных крысят продолжается меньшее время, возможно, отражая несовершенство липидного метаболизма на фоне незрелости ферментативных систем эритроцитарных клеток.

Осмотический гемолиз является следствием избыточного проникновения в эритроцит воды из среды с пониженным осмотическим давлением с последующим разрывом мембраны. Осмотическая резистентность эритроцитов также зависит от фосфоли-пидного состава их мембраны. Во всех возрастных группах ИП осмотической резистентности эритроцитов превышает контрольное значение, характеризуя присутствие большого количества молодых красных клеток, тогда как по времени 50%-ного гемолиза достоверных различий не выявлено. ИП осмотической резистентности эритроцитов скачкообразно возрастает у 5-дневных крысят и сохраняется на относительно стабильном уровне до 21дневного возраста. У 5-дневных животных отсрочено окончание осмотического гемолиза по сравнению с взрослыми крысами и крысятами предшествующей возрастной группы.

Механическая резистентность эритроцитов отражает вероятность и степень повреждения клеток в циркуляции. Исследова-

ние механической стойкости показало, что мембрана эритроцитов 1- и 21-дневных крысят обладает повышенной устойчивостью к механическим воздействиям. Это определяется высоким уровнем эритропоэтической активности у животных данных возрастных групп.

Таблица 2

Динамика показателей резистентности эритроцитов в раннем постнатальном онтогенез крыс

Показатель и его значение у взрослых крыс Возраст

1 5 10 21 28

10 кислотного гемолиза, мин. 2,19±0,19 4,31±0,38 Р <0,001 Р1 Р2 3,65±0,61 <0,05 3,91±0,73 <0,05 >0,05 >0,05 5,29±0,46 <0,001 >0,05 <0,05 2,46±0,20 >0,05 <0,001 <0,001

150 кислотного гемолиза, мин. 4,08±0,20 8,07±0,53 Р <0,001 Р1 Р2 7,61±1,07 <0,01 >0,05 8,45±0,95 <0,001 >0,05 >0,05 8,16±1,02 <0,001 >0,05 >0,05 5,11±0,26 <0,01 <0,001 <0,01

1ю0 кислотного гемолиза, мин. 7,74±0,72 13,83±0,92 Р <0,001 Р1 Р2 18,96±1,43 <0,001 <0,01 14,97±1,52 <0,001 >0,05 >0,05 24,43±2,21 <0,001 <0,001 <0,01 13,00±2,21 <0,05 >0,05 <0,01

Длительность кислотного гемолиза, мин. 5,55±0,68 9,52±0,70 Р <0,001 Р1 Р2 15,31±1,52 <0,001 <0,01 11,07± 1,37 <0,01 >0,05 <0,05 19,14±1,99 <0,001 <0,001 <0,01 10,54±2,09 <0,05 >0,05 <0,01

ИП кислотной резистентности 4,41±0,20 8,43±0,47 Р <0,001 Р1 Р2 7,83±0,63 <0,001 >0,05 8,39±0,92 <0,001 >0,05 >0,05 8,82±0,71 <0,001 >0,05 >0,05 5,62±0,39 <0,05 <0,001 <0,01

10 глицеринового гемолиза, мин. 0,52±0,26 0,88±0,19 Р >0,05 Р1 Р2 1,74±1,06 >0,05 >0,05 1,14±0,58 >0,05 >0,05 >0,05 3,16±0,97 <0,05 <0,05 >0,05 1,17±0,39 >0,05 >0,05 >0,05

150 глицеринового гемолиза, мин. 4,07±0,77 3,76±0,57 Р >0,05 Р1 Р2 5,74±1,30 >0,05 >0,05 3,96±1,08 >0,05 >0,05 >0,05 6,80±1,26 >0,05 <0,05 >0,05 3,76±0,54 >0,05 >0,05 <0,05

1ю0 глицеринового гемолиза, мин. 21,47±3,09 14,56±1,70 Р >0,05 Р1 Р2 19,72±2,24 >0,05 >0,05 11,56±2,24 <0,05 >0,05 <0,05 13,47±2,12 <0,05 >0,05 >0,05 15,98±1,77 >0,05 >0,05 >0,05

Длительность глицеринового гемолиза, мин. 20,95±2,95 13,68±1,66 Р <0,05 Р1 Р2 17,98±2,23 >0,05 >0,05 10,42±2,27 <0,01 >0,05 <0,05 10,31±2,28 <0,01 >0,05 >0,05 14,81±1,84 >0,05 >0,05 >0,05

ИП глицериновой резистентности 1,36±0,14 1,34±0,12 Р >0,05 Р1 Р2 2,05±0,23 <0,05 <0,05 1,36±0,20 >0,05 >0,05 <0,05 1,97±0,24 <0,05 <0,05 >0,05 1,40±0,12 >0,05 >0,05 <0,05

150 осмотического гемолиза мин. 4,36±1,45 3,82±0,27 Р >0,05 Р1 Р2 6,51±0,60 >0,05 <0,001 5,87±1,50 >0,05 >0,05 >0,05 7,00±1,73 >0,05 >0,05 >0,05 3,65±0,68 >0,05 >0,05 >0,05

1ю0 осмотического гемолиза мин. 18,07±2,14 21,30±1,16 Р >0,05 Р1 Р? 26,65±1,51 <0,01 <0,05 16,16±2,20 >0,05 <0,05 <0,001 20,37±2,74 >0,05 >0,05 >0,05 18,97±1,55 >0,05 >0,05 >0,05

ИП осмотической резистентности 15,85±1,37 29,22±1,51 Р <0,001 Р1 Р2 41,34±2,18 <0,001 <0,001 38,19±7,15 <0,01 >0,05 >0,05 39,72±5,41 <0,001 >0,05 >0,05 26,24±1,82 <0,001 >0,05 <0,05

Интенсивность механического гемолиза, % 2,68±0,98 0,31±0,22 Р <0,05 Р1 Р2 2,22±0,71 >0,05 <0,05 1,91±1,14 >0,05 >0,05 >0,05 0,00±0,00 <0,05 >0,05 >0,05 0,37±0,17 >0,05 >0,05 <0,05

Интенсивность пере-кисного гемолиза, % 11,93±2,25 6,54±0,80 Р <0,05 Р1 Р2_ 33,09±3,11 <0,001 <0,001 43,38±3,72 <0,001 <0,001 <0,05 52,91±8,17 <0,001 <0,001 >0,05 31,75±8,80 <0,05 <0,01 >0,05

Способность эритроцитов противостоять окислительному гемолизу называют перекисной резистентностью. Механизмом этого вида гемолиза является перекисное окисление липидов клеточной мембраны, интенсивность которого обратно пропорциональна активности антиоксидантных клеточных систем. В норме эритроидные клетки содержат мощный арсенал антиоксидантов, защищающих их от радикалов кислорода [10,11]. При снижении уровня антиоксидантов увеличивается активность процессов ПОЛ, что влечет за собой уменьшение стабильности мембраны эритроцитов и сопутствующее сокращение нормальной продолжительности жизни красных кровяных клеток [14], выражающееся в увеличении процента гемолиза. Используемый метод характеризует уровень обеспеченности организма токоферолом и другими антиоксидантами. Анализ возрастной динамики интенсивности перекисного гемолиза выявил тенденцию к нарастанию этого показателя у крысят с максимумом в 21 день жизни. Причем у 1-дневных животных процент перекисного гемолиза ниже, чем у взрослых. Интенсивность перекисного гемолиза в 5 дней жизни уже достоверно повышена. Вероятно, при определенном несовершенстве ферментативных систем молодых эрит-роидных клеток антиоксидантная активность незрелых эритроци-

тов недостаточна. Во все остальные сроки показатель также выше значения взрослых крыс. В 10 дней жизни процент перекисного гемолиза превышает уровень 5-дневных крысят. Устойчивость эритроцитарной мембраны к перекисному гемолизу оказывается минимальной у крысят 21-дневного возраста. В 28 дней жизни процент перекисного гемолиза повышен, но не превышает значения предыдущей возрастной группы.

Выводы:

1. В раннем постнатальном онтогенезе крыс происходят существенные преобразования эритрона, отражающие изменение интенсивности эритропоэза, эритродиереза и связанные с этим особенности клеточного состава крови.

2. Резистентность эритроцитарной мембраны к большинству использованных гемолизирующих факторов у животных исследуемого возрастного периода повышена, свидетельствуя об увеличении доли молодых клеток.

3. Низкая перекисная резистентность является следствием недостаточности эритроцитарных антиоксидантных систем, что наиболее выражено в 21 день жизни, один из критических периодов развития эритрона.

Литература

1. Иванов, И.Т. Агрегация денатурированных мембранных белков  начальный этап кислотного гемолиза / И.Т. Иванов, Л.Ц. Бенов // Биофизика.- 1991.  Т.36.- Вып.5.- С.839-843.

2. Козлова, Н.М. Окисление мембранных белков и изменение поверхностных свойств эритроцитов / Н.М. Козлова, Е.И. Слобожанина, Е.А. Черницкий // Биофизика.- 1998.- №3.-С.480-483.

3. Леонова, В.Г. Динамика качественного состава красной крови у детей от года до четырнадцати лет и ее реакции при некоторых гематологических заболеваниях / В.Г. Леонова, Ж.Ж. Рапопорт // Анализ регуляции в системе красной крови: Сб. науч. работ. Красноярск: Ин-т физики СО АН СССР.- 1975. С.212-231.

4. Назаров, С.Б. Системный подход к изучению физиологии эритрона и его реализация в онтогенетических исследованиях / С.Б. Назаров, Л. С. Горожанин // Вестник Ивановской медицинской академии.- 1996.- Т.1.- №3-4.- С.30-37.

5. Новожилов, А.В. Динамика гематологических показателей крови белых крыс в постнатальном онтогенезе / А.В. Новожилов, Л. Н. Катюхин // Журнал эволюционной биохимии и физиологии.- 2008.- Т.44, №6.- С. 613-621.

6. Decreased cation channel activity and blunted channel-dependent eryptosis in neonatal erythrocytes / Hermle T. [et al.]// Am. J. Physiol. Cell. Physiol.- 2006.- Vol.291.- №4.- P.710^17.

7. Edoh, D. Fetal hemoglobin during infancy and in sickle cell adults / D. Edoh, C. Antwi-Bosaiko, D. Amuzu. // Afr. Health. Sci.-2006.- Vol.6, №1. P. 51-54.

8. Fricol, W. The influence of age and sex on erythropoietin titers in the plasma and tissue homogenates of hypoxic rats / W. Fricol, J. Barone-Varelas, T. Barone // Exp. Hematol.- 1982.- Vol.10, N5.-P. 472-477.

9. Fujino, T. Enzimatic removal of oxidized protein aggregates from erythrocyte membranes / T. Fujino, K. Ando, M. Beppu, K. Kikugawa // J. Biochem.- 2000.- Vol.127.-№6.- P. 1081-1086.

10. Ghaffari, S. Oxidative Stress in the Regulation of Normal and Neoplastic Hematopoiesis / S. Ghaffari // Antioxid Redox Signal. 2008.- Vol.10 (11).  P. 1923-1940.

11. Hemoglobin autoxidation and regulation of endogenous H2O2 levels in eiythrocytes / R.M. Johnson [et al.]// Free Radic. Biol. Med.- 2005.- Vol.39.- P.1407-1417.

12. Reduced immune complex binding capacity and increased complement susceptibility of red cells from children with severe malaria-associated anemia / B.O. Owuor [et al.] // Mol. Med.- 2008.-№14.- P.89-97.

13. Sauer, A. Kinetics of hemolysis of normal and abnormal red blood cells in glycerol-containing media / A. Sauer, T. Kurzion, D. Meyerstein, N. Meierstein // Biochim. et biophys. acta. Biomembranes.- 1991.- Vol.1063, N2.- P.203-208.

14. Tsantes, A.E. Redox imbalance, macrocytosis, and RBC homeostasis. Antioxid. Redox Signal / Tsantes A.E., Bonovas S., Travlou A., Sitaras N.M..- 2006.-№8.- P.1205-1216.

AGE FEATURES OF ERYTHROCYTE MEMBRANE RESISTANCE TO HEMOLYTIC FACTORS IN VITRO IN RATS

YE.K. GOLUBEVA, S.B. NAZAROV Ivanovo State Medical Academy, Chair of Normal Physiology

We investigated age-related features of red blood cell membrane resistance to the action of various hemolytic factors in vitro in early postnatal ontogenesis in rats. The results indicate a high ability of red blood cells resistant to acid, glycerol, low blood osmotic pressure and mechanical damage which reflects the increase of young red cell content in blood. The low peroxide resistance is a result of red blood cell antioxidants deficiency. It is most pronounced on the 21th day of life.

Key words: erythron, hemolytic resistance of erythrocytes, ontogenesis.

УДК 615.322.03-015.4.076.9

МНОЖЕСТВЕННЫЙ КОРРЕЛЯЦИОННЫЙ АНАЛИЗ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ И БИОХИМИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ У ИНТАКТНЫХ КРЫС ПОСЛЕ КУРСА АППЛИКАЦИЙ ВОДОРОСЛЕЙ И ЛЕЧЕБНОЙ ГРЯЗИ

Н.В. ЕФИМЕНКО*, Б.Н. РОГОЗЯН**, А.С. КАЙСИНОВА*

В эксперименте у животных изучены противовоспалительные, иммунные и регуляторные биохимические эффекты курсовых аппликаций препаратов из зеленых и бурых водорослей в сравнении с анапской грязью методом парных корреляций. Выявлено, что каждое из благоприятных воздействий аппликаций зеленых и бурых водорослей имеет свою специфику в общем русле активации иммунных и биохимических процессов, что можно использовать в целях первичной и вторичной профилактики распространенных заболеваний.

Ключевые слова: противовоспалительные, иммунные и регуляторные биохимические эффекты, зеленые и бурые водоросли.

Обильные запасы морских водорослей анапского региона (МВАР) наводят на мысль о возможности расширенного использования МВАР для лечебных целей [2]. В Пятигорском государственном НИИ курортологии Федерального медико-

биологического агентства в последние годы проводились научноисследовательские работы «Влияние препаратов из водорослей на течение воспалительного процесса и иммунологические показатели у крыс с адъювантным артритом  и СВлияние препарата из водорослей на течение остеоартроза» [1].

Цель исследования  изучение противовоспалительных, иммунных и регуляторных биохимических эффектов курсовых аппликаций препаратов из зеленых и бурых водорослей в сравнении с анапской грязью методом парных корреляций.

Материалы и методы исследования. В течение 4 месяцев изучены и проанализированы иммунные эффекты (ближайшие и отдаленные) курсовых аппликаций препаратов из зеленых и бурых водорослей в сравнении с анапской грязью у интактных животных (98 крыс). Курс из 12 аппликаций, проводимых при температуре 420С и экспозиции 15 минут через 1-2 дня, составил 28 дней. Ближайшие результаты исследованы непосредственно после курса, отдаленные  через 3 месяца после его завершения. Группы животных: 1) интактные (24); 2) с аппликациями анапской грязи (24); 3) с аппликациями препарата из зеленых водорослей (24), 4) с аппликациями препарата из бурых водорослей (26).

Проведены иммуногематологические тесты (лейкоформула, количество лейкоцитов в крови, содержание в крови циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), показатели фагоцитоза нейтрофилами (фагоцитарная активность лейкоцитов  ФАЛ, фагоцитарный индекс лейкоцитов  ФИЛ, показатель завершенности фагоцитоза  ПЗФ), тест нитросинего тетразолия  спонтанного (НСТ сп.) и стимулированного (НСТ стим.), реакция бласттрансформации лимфоцитов  спонтанная (РБТЛ сп.), на фитгемагглютинин (РБТЛ на ФГА) и на конканавалин А (РБТЛ на КонА); биохимические тесты (содержание в крови общего белка, фибриногена, инсулина, кортизола, серотонина, гистамина, адреналина, дофамина).

Результаты и их обсуждение. При анализе результатов воздействия МВАР у интактных животных установлено, что

* ФГУ «Пятигорский ГНИИК ФМБА России»] Россия, 357501, Ставропольский край, г. Пятигорск, проспект Кирова, 30

ОАО «Санаторий «Анапа» 353456, Краснодарский край, г.Анапа, ул. Гребенская, 3.