Биохимические констелляции в организме птиц в условиях антигенной нагрузки

интенсивность роста массы яйцевода превышает интенсивность роста яичника, это связано с формированием яиц в яйцеводе. Так, среднесуточный прирост яйцевода и яичника составляет от 0,389 г/сут до 1,608 г/сут и от 0,24 г/сут до 1,17 г/сут соответственно.

Таким образом, наибольшая интенсивность роста длины яйцевода наблюдается в период с 60-дневного возраста до 210-дневного (4,14 мм/сут), затем она постепенно снижается и составляет 0,08 мм/сут к 300-310-дневному возрасту.

ЛИТЕРАТУРА

1. Вракин, В.Ф. Анатомия и гистология домашней птицы / В.Ф. Вракин, М.В. Сидорова. - М.: Колос, 1984. - С. 197-210.

2. Жигалова, Е.Е. Морфофункциональные особенности маточно-влагалищного сочленения и каудальной части воронки яйцевода индейки / Е.Е. Жигалова // Всесоюзная конференция молодых ученых и аспирантов по птицеводству. - Загорск, 1989. -С. 74-75.

3. Донкова, Н.В. Морфофункциональная характеристика репродуктивных органов перепелов в период максимальной яичной продуктивности / Н.В. Донкова, А.Ю. Савельева // Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства: сб. науч. тр. - Горки, 2008. - С. 230-236.

4. Кукушкина, Ю.А. Структурно-функциональная характеристика перешейка яйцепровода кур / Ю.А. Кукушкина // Ветеринарная медицина и морфология. - 2009. -№ 2 (15). - С. 6-11.

5. Родин, Е.В. Возрастная морфология яичников кур / Е.В. Родин, С.И. Кузнецова // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: матер. Междунар. науч.-практ. конф., Ульяновская гос. с.-х. академия, 25-26 сентября 2003 г. - Ульяновск, 2003. - С. 92.

6. Шевченко, Н.А. Морфофункциональная характеристика яичника кур-несушек и не откладывающих яйца в период половой зрелости / Н.А. Шевченко // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: матер. Междунар. науч.-практ. конф., Ульяновская гос. с.-х. академия, 25-26 сентября 2003 г. - Ульяновск, 2003. - С. 30-32.

7. Техвер, Ю.Т. Гистология домашних птиц / Ю.Т. Техвер. - Тарту, 1965. -С. 54-69.

8. Хохлов, Р.Ю. Изучение морфометрических показателей яйца кур, содержащихся при оранжевом освещении / Р.Ю. Хохлов // Актуальные проблемы производства и переработки продуктов животноводства и птицеводства: матер. 1-й Междунар. конф. -Уфа, 2000. - С. 298-299.

УДК 636.5.015.017.1:615.371

БИОХИМИЧЕСКИЕ КОНСТЕЛЛЯЦИИ В ОРГАНИЗМЕ ПТИЦ В УСЛОВИЯХ АНТИГЕННОЙ НАГРУЗКИ

И.Н. ГРОМОВ, Л.Н. ГРОМОВА, С.П. ГЕРМАН УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 210026

Введение. Основным методом борьбы с инфекционными болезнями птиц является иммунизация. Для специфической профилактики наиболее распространенных инфекционных болезней весь молодняк

326

птиц перманентно вакцинируется живыми вирус-вакцинами против ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита и инфекционной бур-сальной болезни, а на некоторых птицефабриках - против инфекционного ларинготрахеита. Для иммунизации родительского поголовья применяются инактивированные вакцины [10]. При этом использование ассоциированных вакцин для иммунизации молодняка кур является экономически целесообразным, так как при однократном введении препарата против нескольких инфекций значительно снижаются затраты труда и потери, обусловленные стрессовым состоянием у птицы. Изучению процессов иммуногенеза у животных, вакцинированных против инфекционных болезней, посвящено значительное количество работ в отечественной и зарубежной литературе [7, 8]. При этом исследования в большинстве случаев направлены на установление им-муноморфологических изменений у вакцинированных животных, а также на оценку напряженности поствакцинального иммунитета.

Поскольку вакцины готовят из ослабленных или убитых штаммов вирусов, то при попадании в организм они вызывают иммунобиологическую перестройку, направленную на становление специфического иммунитета против данной болезни. Являясь чрезвычайными раздражителями для организма, вакцинные препараты, попадая во внутреннюю среду, наряду с иммунобиологической перестройкой вызывают комплекс адаптационных реакций, отражающих кратковременное расстройство гомеостаза [1, 2, 6].

Вакцинный процесс, обусловленный введением специфических профилактических препаратов, является отражением сложного по характеру взаимодействия макроорганизма и антигена и не ограничивается только изменениями со стороны иммунной системы. Практически все органы и системы организма участвуют в создании особого состояния - иммунологической перестройки. Чтобы регулировать процессы формирования поствакцинального иммунитета, а также вовремя поддержать организм животного, необходимо знать биохимические реакции, происходящие в этот период.

Цель работы - изучить активность индикаторных ферментов и концентрации метаболитов в плазме крови птиц при ассоциированной вакцинации против инфекционной бурсальной болезни (ИББ), инфекционного бронхита кур (ИБК) и болезни Ньюкасла (БН) на фоне применения иммуностимулятора натрия тиосульфата (7 %-ный водный раствор).

Материал и методика исследований. Для иммунизации птиц использовали жидкую инактивированную ассоциированную эмульгированную вакцину против ИББ, ИБК и БН (ФГУ ВНИИЗЖ). В опыте было использовано 600 птиц 130-158-дневного возраста, подобранных по принципу аналогов и разделенных на три группы (две группы -опытные и одна - контрольная). Молодняк кур 1-й группы (200 птиц) иммунизировали ассоциированной вакциной совместно с натрия тио-

327

сульфатом (в 7%-ной концентрации в вакцине). Предварительно 450 мл вакцины (флакон - 900 доз) смешивали с 112,5 мл свежеприготовленного стерильного водного раствора, содержащего натрия тиосульфат (в количестве 35 %). Полученную смесь вводили однократно внутримышечно, в дозе 0,6 мл, в область грудной мышцы. Птице 2-й группы (200 птиц) ассоциированную вакцину вводили согласно Наставлению по ее применению однократно внутримышечно в область бедра, в дозе 0,5 мл, без иммуностимулятора. Интактная птица 3-й группы (200 птиц) служила контролем.

Вакцинацию птиц опытных групп проводили в 130-дневном возрасте. Место введения вакцины обрабатывали 70%-ным этанолом. За всей птицей было установлено клиническое наблюдение. На 3, 7, 14, 21 и 28-й дни после проведения иммунизации от 4-5 птиц из каждой группы отбирали пробы крови. В полученной сыворотке крови определяли активность аланин-(АлТ) и аспартатаминотрансфераз (АсТ), гамма-глутамилтрансферазы (ГГТ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), креа-тинфосфокиназы (КФК) и щелочной фосфатазы (ЩФ), устанавливали содержание общего белка, альбумина, креатинина, мочевой кислоты, общего холестерина и триглицеридов. Активность АсТ, АлТ, ГГТ и ЛДГ в сыворотке крови определяли кинетически [4] на биохимическом анализаторе «Conelab 30i» («Thermo Electron», Финляндия) с помощью стандартизированных (сертифицированных) наборов реактивов «Thermo Electron» для определения активности указанных энзимов. Активность индикаторных ферментов выражали в МЕ/л.

Концентрацию общего белка в сыворотке крови определяли в би-уретовой реакции, альбумина - в реакции с бромкрезоловым зеленым, креатинина - в реакции Яффе, мочевой кислоты - ферментативным (уреазным) методом, триглицеридов - сульфофосфованилиновым методом, общего холестерина - ферментативным методом [5]. Содержание общего белка и альбумина выражали в граммах на литр, общего холестерина и триацилглицеридов - в микромолях на литр, креатинина и мочевой кислоты - в микромолях на литр.

Цифровые данные обработаны статистически с использованием программы Microsoft Excel 2003.

Результаты исследований и их обсуждение. Установлено, что активность ЛДГ в плазме крови интактных птиц на 3 -й день опыта составила 1518,75±103,93 МЕ/л. У молодняка кур 1-й и 2-й групп данный показатель был соответственно в 1,2 (P>0,05) и 1,3 (P<0,05) раза ниже, чем в контроле. На 7-й и 14-й дни эксперимента активность ЛДГ в плазме крови птиц 1 -й группы уменьшалась по сравнению с контролем на 9-13 %, а у молодняка кур 2-й группы - на 10-16 % (P>0,05).

На 3, 7 и 14-й дни после иммунизации в плазме крови иммунного молодняка кур 1 -й и 2-й групп наблюдалось снижение ферментативной активности ЩФ на 7-15 % (P>0,05) по сравнению с интактной птицей. На 3 -й день эксперимента активность ГГТ в плазме крови птиц 1-й группы уменьшалась по сравнению с контролем на 15 % (P>0,05), а

328

у молодняка кур 2-й группы - на 22 % (Р<0,05). Сходные, но менее выраженные колебания активности ГГТ наблюдались на 7-й и 14-й дни после иммунизации (рис. 1).

вакцина + натрия тиосульфат  вакцина  контроль

100 80 60 40 20

3-й день 7-й день 14-й день 21-й день 28-й день Дни после вакцинации

Рис. 1. Влияние натрия тиосульфата на активность ГГТ в плазме крови птиц, иммунизированных против ИБК, ИББ и БН

0

Снижение активности ЛДГ, ГГТ и ЩФ в плазме крови может быть признаком ослабления синтетической функции печени [4]. При этом использование вакцины совместно с иммуностимулятором способствовало меньшему ингибированию активности указанных ферментов. Следовательно, натрия тиосульфат смягчает негативное воздействие вакцины на паренхиму печени, проявляя протекторные свойства по отношению к гепатоцитам. Данные биохимического анализа согласуются с результатами гистологического исследования печени, показавшими, что иммунизация птиц совместно с натрия тиосульфатом способствует более ранней регенерации печени по сравнению с применением одной вакцины.

Активность АлТ в плазме крови интактных животных на 3-й день эксперимента составила 45,67±3,07 МЕ/л. У птиц 1-й группы данный показатель был снижен на 39 % (Р>0,05), а у молодняка кур 2-й группы - на 47 % (Р<0,05). Сходные, но менее выраженные изменения активности данного энзима были выявлены в последующие сроки исследований (на 7-й и 14-й дни после иммунизации). Активность АсТ в плазме крови птиц 2-й группы на 3-й и 7-й дни эксперимента была на 27 - 44 % (Р>0,05) меньше, чем в контроле. В то же время введение вакцины совместно с натрия тиосульфатом вызывало меньшие колебания активности указанных ферментов. Это означает, что натрия тиосульфат оказывает положительное влияние на процессы трансамини-рования в организме вакцинированных птиц. В отдаленные сроки исследований (на 21-й и 28-й дни после вакцинации) у иммунизированных птиц обеих групп активность ЛДГ, АлТ, АсТ, ГГТ и ЩФ нормализовалась по сравнению с контролем. Во все сроки наблюдений активность КФК в плазме крови интактных и подопытных птиц изменялась несущественно и недостоверно.

Концентрация общего белка в плазме крови молодняка кур контрольной группы в течение эксперимента находилась на уровне 38,89±2,98 - 54,69±8,93 г/л. На 3-й и 7-й дни после вакцинации у молодняка кур 1 -й группы уровень общего белка превышал контрольные значения в 1,5-1,6 раза (Р<0,05), а у птиц 2-й группы - в 1,4 раза (Р>0,05). На 14-й день эксперимента и в последующие сроки исследований содержание общего белка у иммунизированных птиц обеих групп нормализовалось по сравнению с контрольными значениями. Повышение концентрации общего белка под влиянием вакцинации отмечали И.А. Болотников и др. [1], Н.Б. Егорова и др. [2]. Однако некоторые авторы указывают на снижение данного показателя в поствакцинальный период [1, 6, 9]. Сходные изменения были выявлены при изучении уровня альбумина в плазме крови. Так, на 3-й и 7-й дни после вакцинации у иммунизированных птиц 1 -й и 2-й групп данный показатель превышал контрольные значения на 29-36 % (Р>0,05). На 14-28-й дни после вакцинации концентрация альбумина у птиц всех групп различалась несущественно.

Концентрация мочевой кислоты в плазме крови птиц 2-й группы на 3-й день эксперимента возрастала по сравнению с контролем на 27 % (Р<0,05) (рис. 2), а на 7-й день - на 16 % (Р>0,05). Сходные, но менее выраженные изменения были отмечены при изучении содержания кре-атинина.

вакцина + натрия тиосульфат  вакцина  контроль

451

400 -.

^ П п ГПп ггп гт Пп

200 '

0 ,|_|-1-1--[_|-1-1--[_|----[_|----[_|----!

3-й день 7-й день 14-й день 21-й день 28-й день Дни после вакцинации

Рис. 2. Влияние натрия тиосульфата на концентрацию мочевой кислоты в плазме крови молодняка кур

при ассоциированной вакцинации против ИБК, ИББ и БН

Это означает, что компоненты вакцины против ИБК, ИББ и БН угнетают выделительную способность почек. Результаты биохимического исследования согласуются с данными гистологического исследования. Использование вакцины совместно с иммуностимулятором способствовало меньшему колебанию исследуемых показателей. На 14, 21 и 28-й дни опыта содержание мочевины и креатинина в плазме крови иммунных птиц обеих групп не имело существенных различий по сравнению с контрольными данными. Во все сроки наблюдений

330

уровень глюкозы в плазме крови интактных и вакцинированных птиц был примерно одинаковым.

Заключение. Полученные результаты исследований свидетельствуют о том, что инактивированная ассоциированная вакцина против ИБК, ИББ и БН оказывает ингибирующие влияние на белоксинтетиче-скую способность печени и выделительную функцию почек, что сопровождается достоверным уменьшением активности ЛДГ, АлТ и ГГТ, повышением концентрации мочевины.

Наибольшие изменения биохимических показателей наблюдаются на 3-7-й дни после вакцинации. Натрия тиосульфат, вводимый вместе с вакциной, снижает ее реактогенные свойства, что проявляется меньшими колебаниями активности индикаторных ферментов, концентрации мочевой кислоты, а также достоверным увеличением уровня общего белка по сравнению с контролем.

ЛИТЕРАТУРА

1. Болотников, И.А. Стресс и иммунитет у птиц / И.А. Болотников, В.С. Михкиева, Е.К. Олейник. - Л.: Наука, 1983. - 118 с.

2. Иммунологические показатели при введении поликомпонентной вакцины (ВП-4) лицам пожилого возраста / Н.Б. Егорова [и др.] // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2001. - N° 4. - С. 21-23.

3. Камышников, В.С. Клинические лабораторные тесты от А до Я и их диагностические профили: справоч. пособие / В.С. Камышников. - Минск: Бел. наука, 1999. -С. 54.

4. Камышников, В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: в 2 т / В.С. Камышников. - Минск: Беларусь, 2000. - Т. 1. - С. 375-381, 480-484, 433-439.

5. Камышников, В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: в 2 т / В.С. Камышников. - Минск: Беларусь, 2000. - Т. 2. - С. 179-182, 193-194, 290-295, 316-323.

6. Конопатов, Ю.В. Основы иммунитета и кормление сельскохозяйственной птицы / Ю.В. Конопатов, Е.Е. Макеева. - СПб.: Петролазер, 2000. - 120 с.

7. Красочко, П. А. Иммуностимуляторы и современные способы коррекции иммунного ответа / П.А. Красочко, В.А. Машеро // Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и санитария. - 2004. - № 1. - С. 32-36.

8. Красочко, П.А. Современные подходы к классификации иммуномодуляторов / П.А. Красочко // Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и санитария. - 2006. -№ 2. - С. 35-40.

9. Лях, Ю.Г. Изменение биохимических и гематологических показателей крови свиней при введении вакцины против легочного пастереллеза / Ю.Г. Лях, Л.В. Пленина: сб. науч. тр. // ИЭВ им. Вышелесского НАН Беларуси; науч. ред.: Н.Н. Андросик [и др.]. - Минск, 2002. - Т. 36. - С. 122-127.

10. Хохлачев, О.Ф. Современные подходы к вакцинопрофилактике инфекционных болезней птиц / О.Ф. Хохлачев // Матер. 1-го междунар. ветер. конгресса по птицеводству, Москва, 18-22 апреля 2005 г / МСХ РФ; Федер. служба по вет. и фитосан. надзору РФ; Росптицесоюз. - Москва, 2005. - С. 122-126.