ДНК-ВАКЦИНА, НАЦЕЛЕННАЯ НА VEGFR-2, ДЛЯ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ

1. Применение ослабленного штамма Salmonella, содержащего по меньшей мере одну копию молекулы ДНК, содержащей кассету экспрессии, кодирующую белок рецептора VEGF, при лечении рака, которое дополнительно включает в себя введение
i) по меньшей мере одной ДНК-вакцины, кодирующей опухолевый антиген или антиген опухолевой стромы, выбранной из по меньшей мере одного дополнительного ослабленного штамма Salmonella, содержащего по меньшей мере одну копию дополнительной молекулы ДНК, содержащей дополнительную кассету экспрессии, кодирующую опухолевый антиген или антиген опухолевой стромы, или
ii) по меньшей мере одного ингибитора контрольных точек, выбранного из антител против PD-1, PD-L1 и CTLA4, или
iii) по меньшей мере одной сконструированной Т-клетки, содержащей на своей клеточной поверхности по меньшей мере один белок, связывающий опухолевый антиген и/или по меньшей мере один белок, связывающий антиген опухолевой стромы; или
iv) по меньшей мере одного биспецифического антитела, проявляющего специфичность связывания с одним поверхностным белком Т-клеток и с опухолевым антигеном или с антигеном опухолевой стромы; или
v) или любой их комбинации.
2. Применение по п. 1, в котором ослабленный штамм Salmonella и по меньшей мере один дополнительный ослабленный штамм Salmonella выбирают из относящихся к видам Salmonella enterica, в частности, в котором ослабленным штаммом Salmonella и по меньшей мере одним дополнительным ослабленным штаммом Salmonella является Salmonella typhi Ту21а.
3. Применение по п. 1 или 2, в котором кассета экспрессии и дополнительная кассета экспрессии представляют собой эукариотическую кассету экспрессии, в частности, в котором кассета экспрессии и дополнительная кассета экспрессии содержат промотор ЦМВ.
4. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором белок рецептора VEGF выбран из группы, включающей в себя человеческий VEGFR-2, имеющий аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 1, и белок, в котором идентичность последовательности по меньшей мере приблизительно на 80% совпадает с SEQ ID NO 1, в частности, в котором VEGFR-2 имеет аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 1.
5. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором молекула ДНК и дополнительная молекула ДНК содержат ген резистентности к антибиотику канамицину, pMB1 ori и промотор ЦМВ, в частности, в котором молекула ДНК и дополнительная молекула ДНК содержат последовательность ДНК согласно SEQ ID NO 2.
6. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором указанный опухолевый антиген, кодируемый указанным дополнительным ослабленным штаммом Salmonella, выбирают из группы, состоящей из белка (WT1) опухоли Вильмса человека, имеющего аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 3, и белка, в котором идентичность последовательности по меньшей мере приблизительно на 80% совпадает с SEQ ID NO 3, человеческого мезотелина (MSLN), имеющего аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 4, и белка, в котором идентичность последовательности по меньшей мере приблизительно на 80% совпадает с SEQ ID NO 4; человеческого КЭА, имеющего аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 5, и белка, в котором идентичность последовательности по меньшей мере приблизительно на 80% совпадает с SEQ ID NO 5; рр65 ЦМВ, имеющего аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 6, и белка, в котором идентичность последовательности по меньшей мере приблизительно на 80% совпадает с SEQ ID NO 6; рр65 ЦМВ, имеющего аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 7, и белок, в котором идентичность последовательности по меньшей мере приблизительно на 80% совпадает с SEQ ID NO 7, и рр65 ЦМВ, имеющего аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 8, и белка, в котором идентичность последовательности по меньшей мере приблизительно на 80% совпадает с SEQ ID NO 8; а антиген опухолевой стромы, кодируемый указанным дополнительным ослабленным штаммом Salmonella, выбирают из группы, состоящей из белков активации фибробластов человека (FAP).
7. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором ослабленный штамм Salmonella вводят одновременно с или перед введением указанной по меньшей мере одной ДНК-вакцины, кодирующей опухолевый антиген или антиген опухолевой стромы, указанного по меньшей мере одного ингибитора контрольных точек, указанной по меньшей мере одной сконструированной Т-клетки и/или указанного по меньшей мере одного биспецифического антитела.
8. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором лечение сопровождается химиотерапией, лучевой терапией или биологической терапией рака, в частности, в котором ослабленный штамм Salmonella вводят перд или во время химиотерапии или цикла лучевой терапии или биологической терапии рака, или и перед, и во время химиотерапии или цикла лучевой терапии или биологической терапии рака.
9. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором ослабленный штамм Salmonella и по меньшей мере один дополнительный ослабленный штамм Salmonella вводят перорально.
10. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором рак выбран из группы, содержащей колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак легких, рак яичников, мезотелиому, острый миелолейкоз, хронический миелолейкоз, глиобластому, рак желудка, печеночноклеточный рак, почечно-клеточный рак, рак предстательной железы и рак шейки матки.
5
11
6
10
6
9
6
8
6
7
11. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором разовая доза ослабленного штамма Salmonella и по меньшей мере одного дополнительного ослабленного штамма Salmonella составляет от приблизительно 10 до приблизительно 10, в частности, от приблизительно 10 до приблизительно 10, более предпочтительно от приблизительно 10 до приблизительно 10, более предпочтительно, от приблизительно 10 до приблизительно 10, наиболее предпочтительно, от приблизительно 10 до приблизительно 10 колониеобразующих единиц (КОЕ).
12. Применение по любому из предшествующих пунктов, в котором лечение представляет собой индивидуализированную иммунотерапию рака, включающую в себя этап оценки профиля экспрессии указанного опухолевого антигена и/или предварительного иммунного ответа на указанный опухолевый антиген у пациента.
13. Фармацевтическая композиция, которая содержит ослабленный штамм Salmonella, содержащий по меньшей мере одну копию молекулы ДНК, содержащую кассету экспрессии, кодирующую белок рецептора VEGF, а также дополнительно содержит по меньшей мере один дополнительный ослабленный штамм Salmonella, включающий в себя по меньшей мере одну копию дополнительной молекулы ДНК, содержащей дополнительную кассету экспрессии, кодирующую опухолевый антиген или антиген опухолевой стромы.
14. Фармацевтическая композиция по п. 13, в которой ослабленный штамм Salmonella и по меньшей мере один дополнительный ослабленный штамм Salmonella представляют собой Salmonella typhi Ту21а, а кассета экспрессии и дополнительная кассета экспрессии представляют собой эукариотическую кассету экспрессии, в частности, содержащую промотор ЦМВ, причем белок рецептора VEGF выбран из группы, состоящей из VEGFR-2 человека, имеющего аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 1, и белка, в котором идентичность последовательности по меньшей мере приблизительно на 80% совпадает с SEQ ID NO 1, в частности, в котором VEGFR-2 человека имеет аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO 1.
15. Фармацевтическая композиция по п. 13 или 14, предназначенная для использования в качестве лекарственного средства, в частности, для использования при лечении рака.