СПОСОБЫ ВИЗУАЛИЗАЦИИ МЕТАБОЛИЗМА С ЦЕЛЬЮ ОЦЕНКИ ООЦИТОВ И ЭМБРИОНОВ

1. Способ оценки качества ооцита или эмбриона, включающий:
(а) исследование тестируемой клетки, выбранной из ооцита или сопутствующей ооциту клетки яйцевого бугорка или эмбриона или эмбриональной клетки, путем микроскопии визуализации времени жизни флуоресценции (FLIM) с целью получения гистограммы времени жизни автофлуоресценции эндогенного никотинамидадениндинуклеотида (NADH) или флавинадениндинуклеотида (FAD) в тестируемой клетке,
(б) усреднение гистограммы времени жизни автофлуоресценции NADH или автофлуоресценции FAD или того и другого для всей тестируемой клетки или цитоплазмы тестируемой клетки, или митохондрия тестируемой клетки,
(в) сравнение усредненной гистограммы времени жизни флуоресценции тестируемой клетки с эталонным значением усредненной гистограммы времени жизни флуоресценции, чтобы определить, имеет ли усредненная гистограмма времени жизни флуоресценции, полученная с использованием тестируемой клетки, статистические отличия от эталонного значения, и
(г) если усредненная гистограмма времени жизни флуоресценции, полученная с использованием тестируемой клетки, не имеет статистических отличий от эталонного значения, выбор ооцита для оплодотворения in vitro или эмбриона для имплантации, и, если усредненная гистограмма времени жизни флуоресценции, полученная с использованием тестируемой клетки, имеет статистические отличия от эталонного значения, отказ от использования ооцита для оплодотворения in vitro или эмбриона для имплантации.
2. Способ по п. 1, включающий стадию определения статистической значимости путем подгонки гистограмм времени жизни к сумме двух экспонент и измеренные параметры клетки признаются входящими или не входящими в область значений параметров, обнаруженных у здоровых клеток.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором сравниваемыми параметрами измерений и здоровых клеток являются параметр альфа, определяемый как соотношение амплитуды двух экспонент, и параметр бета, определяемый как продолжительность более длительной экспоненты.
4. Способ по п. 1 или 2, в котором максимальное значение параметра альфа у здоровых клеток находится в области 1,0-4,0, и соответствующее максимальное значение параметра бета у здоровых клеток находится в области 2000-3000 пс.
5. Способ по п. 1 или 2, в котором проводят FLIM на волне длиной около 740 нм методом двухфотонного возбуждения флуоресценции с использованием полосового фильтра излучения с центром на волне около 460 нм.
6. Способ по п. 1 или 2, в котором проводят FLIM на волне длиной около 340 нм методом однофотонного возбуждения флуоресценции с использованием полосового фильтра излучения с центром на волне около 460 нм.
7. Способ по п. 1 или 2, в котором проводят FLIM во временной области.
8. Способ по п. 1 или 2, в котором проводят FLIM в частотной области.
9. Способ по п. 1 или 2, в котором проводят FLIM на волне длиной около 900 нм методом двухфотонного возбуждения флуоресценции с использованием полосового фильтра излучения с центром на волне около 550 нм.
10. Способ по п. 1 или 2, в котором проводят FLIM на волне длиной около 450 нм методом однофотонного возбуждения флуоресценции с использованием полосового фильтра излучения с центром на волне около 550 нм.