Молекулярно-генетический мониторинг в эпидемиологическом надзоре и контроле за гепатитом с

2014, Т. 4, № 1

Материалы научно-практической конференции «От эпидемиологии к диагностике актуальных инфекций...»

Результаты. Десятилетние наблюдения за формированием локального иммунитета у людей, прививавшихся сезонными тривалентными вакцинами, показали постепенное снижение процента конверсий титров этих антител. Однако это не отражалось на частоте конверсий данных антител у привитых людей с низкими исходными титрами локальных IgA (< 1:8). Показано существование высоких титров кросс-реактивных IgA антител к вирусу А (H1N1)pdm2009 еще до его вступления в активную циркуляцию. У людей обнаружены локальные кросс-реактивные антитела к птичьим вирусам А (H5N2) и А (H7N3), но в более низкой концентрации. Вакцинация ЖГВ повышала не только титры, но и авидность локальных антител. Кроме того, она стимулировала гетерологичный иммунный ответ к широкому спектру штаммов вируса гриппа А.

Выводы. Сезонные, пандемические и потенциально пандемические ЖГВ способны активно стимулировать продукцию локальных антител. У невак-цинированных лиц выявляются предсуществующие антитела к новым вирусам и иммунный ответ после вакцинации находится в обратной зависимости от уровней антител до вакцинации. Вакинация ЖГВ повышает также и функциональную активность (авидность) антител. Локальные антитела, индуцированные введением ЖГВ, проявляют широкую кросс-реактивность к различным штаммам гриппа А.

ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТИВНОСТИ ТЕХНОЛОГИИ АЭРОЗОЛЬНОГО РАСПЫЛЕНИЯ ДЕЗИНФЕКТАНТОВ В МИНИМИЗАЦИИ ФАКТОРОВ, ОТВЕЧАЮЩИХ ЗА КОЛОНИЗАЦИЮ ПАЦИЕНТОВ РОДДОМОВ РЕЗИДЕНТНЫМИ ШТАММАМИ А.Е. Макаров, А.П. Ребещенко, А.С. Корначев, А.А. Вакарина, Л.В. Катаева

ФБУН Тюменский НИИ краевой инфекционной патологии Роспотребнадзора

Для повышения результативности биологической безопасности (ББ) роддомов апробирована технология дезинфекции помещений и оборудования с помощью аэрозольного распыления генератором «Ультраспрейер» дезинфектанта на основе перекиси водорода. Объектом исследования являлся роддом № 2 г. Тюмени, где на основе технологии РОУС оказывалась медицинская помощь женщинам с беременностью с 36 недель без соматической патологии. Целью настоящего исследования являлась оценка результативности данной технологии в минимизации угрозы колонизации пациентов роддома резидентными штаммами (РШ) с высокой резистентностью к антибиотикам. В качестве измерителя результативности использовались данные еженедельного микробиологического мониторинга пяти случайно отобранных пар новорожденных и родильниц (мазки со слизистых конъюнктивы, носа, зева, прямой кишки, кожи пупочного остатка новорожденных, рук и молочных желез родильниц). Группа наблюдения включала в себя результаты мониторинга с мая по декабрь 2010 г. Моментом ее создания явилось начало использования в стационаре генератора «Ультраспрейер». Группа контроля охватывала период 2009 г. и первых четырех месяцев 2010 г., когда в стационаре дезинфекция осуществлялась рутинным методом орошения поверхностей. В группе наблюдения было отобрано 1820 проб, а группа контроля 1876 проб.

Установлено, что оцениваемая технология позволила сократить угрозу колонизации РШ пациентов роддома, особенно тех, которые находились в стацио -наре больше четырех дней. Кроме этого отмечено снижение нежелательных клинических исходов в виде случаев инфекционных заболеваний у пациентов, количество которых в группе наблюдения по сравнению с группой контроля, уменьшилось на 32,6% (группа контроля — 58,79, группа наблюдения — 39,6 на 1000 родов или живорожденных новорожденных). Позитивные изменения в качестве медицинского обслуживания отмечались и пациентками, по субъективным ощущениям которых уровень биологической безопасности акушерского стационара вырос, по сравнению с группой контроля в 2 раза.

Таким образом, технология аэрозольного распыления дезинфектантов с помощью аэрозольного генератора «Ультраспрейер» оказалась весьма результативной в части обеспечения биологической безопасности акушерских стационаров.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ В ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОМ НАДЗОРЕ И КОНТРОЛЕ ЗА ГЕПАТИТОМ С

Ю.В. Михайлова

ФБУН Нижегородский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной Роспотребнадзора

На примере крупного города европейской части России получены новые знания об особенностях эпидемического процесса гепатит С-инфекции (ГС) в современных условиях, проявившиеся в изменении динамики распространенности манифестного и латентного компонентов.

Доля серопозитивных лиц среди групп повышенного риска инфицирования ГС колебалась от 4,3±0,6 до 92,5±2,7%, до 30 раз превышая показатель контрольной группы. Встречаемость РНК у серопозитивных лиц составила в среднем 63%. Среди серонегативных лиц из групп повышенного риска инфицирования РНК обнаружена в 1,1±0,4%. У больных хроническим ГС (ХГС) в 4,4±2,1% РНК обнаружена в мононуклеарах при отсутствии вире-мии в плазме крови.

Выявлены качественные и количественные параметры структуры генотипов вируса ГС (ВГС) в Нижегородской области. Генотипическое разнообразие представлено субтипами 1а, 1Ь, 2, 3а, с одинаковым превалирование в общей популяции населения 1Ь (42,9±2,7%) и 3а (40,1±2,7%). В 4,1±1,1% выявлены ассоциации двух субтипов: Пэ+3а, 1а+1К Структура генотипов ВГС характеризуется региональной неравномерностью. Соотношения субтипов отличаются у отдельных контингентов населения (у медицинских работников, пациентов гематологии, гемодиализа 1Ь достоверно преобладал над 3а; у пациентов наркологических стационаров в 52,2% выявлялся 3а; у больных ГС субтипы 1Ь и 3а обнаружены с одинаковой частотой), в разных возрастных и половых группах, при остром ГС и ХГС, при моно- и микст-вариантах инфекции. Изменения, произошедшие в структуре генотипов за последние 17 лет, проявились в снижении удельного веса 1Ь, росте доли 3а, в появлении с 2006 г. циркуляции ВГС субтипа 1а.

Для совершенствования эпидемиологического надзора за ГС экспериментально доказана целесообразность определения РНК в сыворотке и моно-нуклеарах крови для идентификации источника

Материалы научно-практической конференции «От эпидемиологии к диагностике актуальных инфекций...»

Инфекция и иммунитет

инфекции, постановки диагноза до сероконверсии, обоснована необходимость слежения за структурой генотипов ВГС и динамикой ее изменения на региональном уровне для более точного установления связи случаев заболевания, определения путей передачи.

ПАТОГЕННЫЕ ВИДЫ BURKHOLDERIA КАК РЕЦИПИЕНТЫ ПЛАЗМИДЫ Rts1

Е.В. Молчанова

ФКУЗ Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора

Высокая природная резистентность к антибактериальным препаратам Burkholderia pseudomallei, Burkholderia mallei, Burkholderia thailandensis и микроорганизмов cepacia-комплекса может быть обусловлена генами как хромосомной, так и плаз-мидной природы. Плазмиды широко распространены в природе и обеспечивают горизонтальный перенос детерминантов устойчивости к различным ингибирующим агентам. Исследование особенностей наследования и экспрессии генов анти-биотикорезистентности является важным этапом в изучении механизмов развития лекарственной устойчивости.

Ранее была показана способность буркхольдерий воспринимать посредством конъюгации некоторые плазмиды Inc Р-1 группы. Целью данной работы являлось изучение возможности конъюгационной передачи плазмиды Rtsl IncT группы, детерминирующей резистентность к канамицину и несущей транспозон Tn9, обуславливающий достаточную устойчивость к хлорамфениколу, что создавало условия для селекции трансконъюгантов изучаемых штаммов.

В ходе исследования были получены трансконъ-юганты всех указанных выше видов буркхольдерий с возросшей устойчивостью к хлорамфениколу в 5 и более раз. Присутствие плазмиды приводило к морфологическим изменениям колоний, что отражалось в переходе в другие морфотипы (R/S). При этом транспозонные варианты характеризовались перекрестной устойчивостью к офлоксацину и ципроф-локсацину. Определение цитопатогенности (для растения Peireskia aculeata) и вирулентности, LD50 (для золотистых хомячков) штаммов, наследовавших плазмиду, показало снижение данных показателей на 1—2 порядка. В результате культивирования полученных вариантов при непермессивных условиях были выделены ауксотрофные мутанты, зависимые от пролина и/или глутамина, что можно было расценивать как признак включения Tn9 в хромосому.

Таким образом, показано, что плазмида Rts1::Tn9 так же, как и плазмиды Р-1 группы совместимости, может быть использована в генетических исследованиях представителей рода Burkholderia.

КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ ПЕРИТОНЕАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ БЕЛЫХ МЫШЕЙ, ИНФИЦИРОВАННЫХ YERSINIA PESTIS C РАЗНЫМ ПЛАЗМИДНЫМ СОСТАВОМ

Г.Б. Мухтургин, С.А. Витязева, В.В. Войткова

ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора

Возбудитель чумы — Yersinia pestis — одна из наиболее инвазивных бактерий. Патогенность чумного микроба является биологически сложным полиде-терминантным признаком, находящимся под контро-

лем хромосомных и плазмидных генов. Способность Y. pestis к ингибированию механизмов иммунологической защиты организма и паразитированию в фагоцитах многие авторы связывают, в том числе, с наличием у чумного микроба плазмид вирулентности.

Цель работы — изучить динамику изменения субпопуляционного состава клеток перитонеальной жидкости белых мышей на ранних сроках инфекционного процесса, вызванного чумным микробом с разными фенотипическими свойствами.

Исследования проведены на 175 беспородных (18— 20 г) белых мышах обоих полов. В качестве инфекционного агента использовали: Y. pestis subsp. pestis И-2638 (pYP+pYV+pTP33+pYT+), Y pestis И-3479 faYP+, pYT+, pTP33+), Y pestis И-3480 (pYT+, pTP33+), Y pestis subsp. altaica И-2359 feYP+, pYV+, pYT+), Y. pestis subsp. altaica И-2948 (pYV+, pYT+), Y pestis И-2948/3 (pYT+).

Забор перитонеальной жидкости проводили через 30, 60, 90, 120 и 180 мин. Количественное содержание клеток оценивали методом морфологического исследования перитонеальной жидкости в мазках, окрашенных стандартным способом с применением компьютерной программы «Motic Images Plus» (версия 2).

Показано, что наиболее выраженные изменения показателей клеточного состава перитонеальной жидкости экспериментальных животных зарегистрированы у белых мышей, инфицированных Y. pestis subsp. pestis И-2638 и Y. pestis subsp. altaica И-2948. Детальный анализ показал, что в случае применения Y. pestis subsp. pestis И-2638, в отличие от других исследованных штаммов, в перитонеальной жидкости выявлены незрелые и атипичные формы тучных клеток с низким функциональным потенциалом, что указывает на развитие компенсаторно-приспособительной реакции в ответ на введение патогена и может быть связано с наличием в геноме плазмиды рТР33.

Таким образом, морфофункциональная характеристика тучных клеток отражает общую адаптивную перестройку организма в ответ на введение антигена и может служить диагностическим критерием тяжести болезни при инфекционном процессе, вызванном Y. pestis.

ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ПРЕПАРАТА ИЗ СЫРЬЯ COLURIA GEOIDES (ROSACEAE) ПРИ СТАФИЛОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ

Н.П. Неделькина1, С.В. Дутова1, Ю.В. Ростовцева1, М.Р. Карпова2

1ФГБОУ ВПО Хакасский государственный университет им. Н.Ф. Катанова, г. Абакан

2ГБОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск

Важную роль в инфекционной патологии человека играет золотистый стафилококк, практически в 100% случаев его обнаруживают при гнойных заболеваниях мягких тканей и кожных покровов. Лечебный эффект настойки из сырья Coluria geoides (Rosaceae) при стафилококковой инфекции было установлено нами ранее (Дутова и др., 2012). Целью настоящего исследования явилась оценка профилактического действия этого препарата на экспериментальной модели генерализованной стафилококковой инфекции.

Стафилококковую инфекцию моделировали вну-трибрюшинным однократным введением S. Œureus штамма 209Р в дозе, равной '/2 от LD50 (1 млрд клеток) белым 2-месячным аутбредным мышам обоего пола.