Способ прогнозирования задержки формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции, подавляющей активность сосудисто-эндотелиального фактора и развития эмбриона
METHOD FOR PREDICTING THE DELAY IN FORMATION OF PLACENTA AND DEVELOPMENT OF EMBRYO WITH EXACERBATION OF CYTOMEGALOVIRUS INFECTION, SUPPRESSING ACTIVITY OF THE VASCULAR ENDOTHELIAL FACTOR AND EMBRYO DEVELOPMENT

Область изобретения: изобретение относится к медицине, а именно к прогнозированию задержки формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на 7-9 неделе гестации, подавляющем активность сосудисто-эндотелиального фактора, оказывающего влияние на формирования плаценты и развитие эмбриона.
Уровень техники
121
165
Сосудисто-эндотелиальный фактор в организме представлен пятью родственными белками. Наиболее изучены VEGF и VEGF [6]. Факторами, инициирующими продукцию VEGF, являются гипоксия и трансформация структуры клеток под действием механических сил [7]. Гипоксия способствует стабилизации HIF-1α (hypoxia-inducible factor-1α), который при достаточной концентрации кислорода быстро разрушается. В условиях гипоксии HIF-1α и HIF-1β объединяются [6], а полученный комплекс связывается со специфическим чувствительным к гипоксии регионом гена VEGF, что повышает его экспрессию. У плода VEGF принимает участие как в васкулогенезе (развитие сосудов), так и ангиогенезе (росте новых микрососудов из уже существующих). Избыток или недостаток фактора ведет к гибели эмбриона в результате нарушения васкуло- и ангиогенеза. Уровень экспрессии VEGF прогрессивно уменьшается после рождения [1]. Наступление беременности сопряжено с ангиогенезом. Пролиферация трофобласта, его миграция и инвазия является универсальным пусковым механизмом в процессах формирования плаценты, определяемых VEGF-1 [2].
Таким образом, изучению роли VEGF-1 во время беременности уделяется большое значение.
Известны способы прогнозирования плацентарной недостаточности, основанные на определении в сыворотке крови VEGF-1 [3-5], основными недостатками которых являются:
- методы позволяют прогнозировать плацентарную недостаточность только в том триместере, в котором проводится исследование содержания VEGF-1 в крови;
- отсутствует интеграция показателей VEGF-1 с инфекционной патологией и угрозой прерывания беременности ранних сроков;
Указанные факторы могут быть устранены в заявляемом способе.
Техническим результатом является повышение точности прогнозирования задержки формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на 7-9 неделе гестации.
Осуществление изобретения
Обследовано 25 беременных в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на первом триместре гестации (7-9 нед.). 15 беременных было обследовано без заболеваний на всем периоде беременности.
Диагноз ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней до 1:1600, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.
Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).
Содержание сосудисто-эндотелиального фактора (VEGF-1) определялось в гомогенате хориона, полученного после проведения медицинского аборта, по случаю обострения ХЦМВИ.
VEGF-1 определяли методом иммуноферментного анализа на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием наборов ЗАО «БиоХимМак» (Москва).
Выполненные исследования показали, что при обострении ХЦМВИ на 7-9 неделе гестации и титре антител IgG к ЦМВ 1:1600 в гомогенате хориона снижается содержание VEGF-1 до 14,40±1,2 нг/мл (в контроле - 46,42±2,1 нг/мл), что создает угрозу формирования плаценты и прерывание беременности.
Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать угрозу формирования плаценты и развития эмбриона по уровню антител IgG к ЦМВ в сыворотке крови и VEGF-1 в гомогенате хориона. Ранее совокупность указанных признаков в прогнозировании угрозы формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на 7-9 неделе гестации не использовалась.
Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами:
Пример 1. Беременная А., 25 л., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Поступила с болями внизу живота и кровянистыми выделениями из половых путей. Гинекологический анамнез осложнен: 1 медицинский аборт без осложнений.
Проведено исследование крови на ЦМВ, УЗИ органов малого таза.
По ИФА выявлены антитела IgM к ЦМВ, титр антител IgG - 1:1600, индекс авидности - 94%.
По УЗИ: в полости матки плодное яйцо с эмбрионом 7 недель 2 дня. Сердцебиение определяется. Гипертонус по задней стенке матки. Внутренний зев сомкнут. Ниже плодного яйца гематома небольших размеров (отслойка ворсинчатого хориона).
Диагноз: Беременность 7-8 недель. Угрожающий самопроизвольный выкидыш. Хроническая цитомегаловирусная инфекция, стадия обострения.
На третий день стационарного лечения усилились боли внизу живота и кровянистые выделения из половых путей. Выставлен диагноз самопроизвольный выкидыш в ходу при сроке 8 недель беременности. Проведено выскабливание стенок полости матки.
По заявленному способу в гомогенате хориона определено содержание VEGF-1 - 13,73 нг/мл.
Заключение: угроза формирования плаценты и развития эмбриона.
Пример 2. Беременная П., 27 л., поступила в гинекологическое отделение Городской клинической больницы (г. Благовещенск) для проведения медицинского аборта. Гинекологический анамнез осложнен: 1 медицинский аборт без осложнений.
Проведено исследование крови на ЦМВ, УЗИ органов малого таза.
По ИФА титр антител IgG к ЦМВ - 1:800, индекс авидности - 97%.
По УЗИ: в полости матки плодное яйцо с эмбрионом 7 недель 3 дня. Сердцебиение определяется. Внутренний зев сомкнут.
Диагноз: Беременность 7-8 недель. Хроническая цитомегаловирусная инфекция, латентная стадия.
При сроке 7 недель беременности проведен медицинский аборт.
По заявленному способу в гомогенате хориона определено содержание VEGF-1 - 47,1 нг/мл.
Заключение: формирование плаценты и эмбриона без осложнений.
Литература
1. Гавриленко Т.И., Рыжкова Н.А., Пархоменко А.Н. Сосудистый эндотелиальный фактор роста в клинике внутренних заболеваний и его патогенетическое значение // Укр. кардиолог. журн. 2011. №4. С. 87-95.
2. Орлова В.И., Авруцкая В.В., Крымшокалова З.С., Крукнер И.Н. Продукция фактора роста и вазоактивных веществ при задержке роста плода // Журнал акушерства женских болезней Росздрава в Ростове-на-Дону. Т. LVII, Вып. 2. 2008. С. 84-85.
3. Савельева Г.М., Федорова М.В., Клименко П.А. Плацентарная недостаточность. М.: Медицина. 1991. 276 с.
4. Стрижаков А.Н., Кушлинский Н.Е., Тимохина Е.В., Тарабрина Т.В. Роль ангиогенных факторов роста в прогнозировании плацентарной недостаточности // Вопр. гин. акуш. и перинатол. 2009. Т. 8, №4. С. 5-11.
5. Ульянина Е.В., Фаткулин И.Ф. Роль сосудисто-эндотелиального фактора роста в прогнозе сосудистых нарушений у беременных с синдромом задержки развития плода // Казанский мед. Журнал. 2015. Т. 96, №2. С. 220-223.
6. MacGabhann Е., Popel A., Interactions of VEGF isoforms with VEGF-1, VEGF-2 and neurpilin in vivo: a computational model of human skeletal muscle // Amer. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2007. Vol. 292. P. 459-474.
7. MacGabhann E., Qutub A., Annex В., Popel A. Systems biology of pro-angiogenic therapies targeting the VEGF system // Wiley Interdiscip. Rev. Syst. Biol. Med. 2010. Vol. 2. P. 694-707.