Количественное определение общего белка в вагинальных суппозиториях и вагинальных мягких желатиновых капсулах

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО БЕЛКА В ВАГИНАЛЬНЫХ СУППОЗИТОРИЯХ И ВАГИНАЛЬНЫХ МЯГКИХ ЖЕЛАТИНОВЫХ КАПСУЛАХ

Ульянов А.М.

Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, научно-исследовательский институт молекулярной медицины, г. Москва

Работа посвящена разработке метода количественного определения общего белка в вагинальных суппозиториях и вагинальных мягких желатиновых капсулах. Разработан метод количественного определения общего белка, в модификации с применением бицинхониновый кислоты в вагинальных суппозиториях и вагинальных мягких желатиновых капсулах. Ключевые слова: количественное определение, белки, вагинальные суппозитории, вагинальные мягкие желатиновые капсулы.

Развитие биотехнологии обусловило появление значительной номенклатуры лекарственных препаратов, содержащих высокоактивные белковые соединения в малых дозах. Стандартизация этой группы лекарственных препаратов представляет собой определенные трудности, т.к. имеющиеся вспомогательные вещества могут в значительной степени искажать результаты анализа, что, в свою очередь, затрудняет валидацию стадий технологического процесса производства лекарственных препаратов и выявляет необходимость разработки методики количественного определения.

В качестве методики количественного определения веществ белковой природы в вагинальных суппозиториях и вагинальных мягких желатиновых капсулах нами был использован спектрофотометрический метод определения общего белка, в модификации с применением бицинхониновой кислоты (ВСА). Данный метод позволяет значительно ускорить анализ на стадиях технологического процесса, по сравнению с другими методами.

При отработке методики по определению соединений белковой природы в вагинальных суппозиториях и вагинальных мягких желатиновых капсулах в качестве модели использовали альбумин. Физико-химические свойства альбумина позволяют использовать его для моделирования взаимодействия большой группы веществ белковой природы с компонентами вагинальных суппозиториев и вагинальных мягких желатиновых капсул. Целью данного исследования являлась разработка количественной методики определения общего белка в вагинальных суппозиториях и вагинальных мягких желатиновых капсулах при введении в них альбумина. Задачи данного исследования:

-разработать методику выделения белка из вагинальных суппозиториев и из вагинальных мягких желатиновых капсул;

-разработать методику количественного анализа белка методом BCA.

Результаты:

1) Была разработана методика выделения белка из вагинальных суппозиториев, включающая в себя экстракцию 0,01 М трисом (^=8,0), термостатирование при 37о С и центрифугирование. Затем нижнюю, жидкую фракцию в количестве анализировали на наличие общего белка методом ВСА.

2) Была разработана методика выделения белка из вагинальных мягких желатиновых капсул, с введенным в ее состав альбумином, включающая в себя вскрытие капсул, количественный перенос содержимого в бюкс, промывание петролейным эфиром внутренней поверхности оболочек капсул, выпаривание петролейного эфира и центрифугирование. Затем нижнюю, жидкую фракцию в количестве анализировали на наличие общего белка методом ВСА.

3) Содержание белка в пробе определяли спектрофотометрически на спектрофотометре Spectronic Genesys 2PC при длине волны 562 нм, используя калибровочную кривую. Содержание общего белка в вагинальных суппозиториях составило 0,49±0,001 мг, в вагинальных мягких желатиновых капсулах 0,48±0,003 мг. Заключение: разработан метод определения общего белка в вагинальных суппозиториях, содержащих альбумин, как модельный препарат. Выявлено, что вид гидрофобной основы оказывал значительное влияния на высвобождение альбумина из вагинальных суппозиториев, так же, как и состав гидрофобного содержимого вагинальных мягких желатиновых капсул.

ЛИТЕРАТУРА

1. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2009. Т. 11. № 4.

2. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2008. Т. 10. № 4.

3. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2007. Т. 9. № 4.

4. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2006. Т. 8. № 4.

5. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2005. Т. 7. № 4.

6. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2004. Т. 6. № 4.

7. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2003. Т. 5. № 4.

8. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2002. Т. 4. № 1.

9. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2001. Т. 3. № 1.

10. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2000. Т. 2. № 1.

11. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2009. Т. 11. № 12.

12. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2008. Т. 10. № 12.________

Материалы X международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва

13. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2007. Т. 9. № 12.

14. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2006. Т. 8. № 12.

15. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2005. Т. 7. № 12.

16. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2004. Т. 6. № 12.

17. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2003. Т. 5. № 12.

18. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2002. Т. 4. № 1.

19. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2001. Т. 3. № 1.

20. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2000. Т. 2. № 1.

QUANTITATIVE DEFINITION OF SUMMARY PROTEIN IN VAGINAL SUPPOSITORIES AND VAGINAL SOFT GELATINOUS CAPSULES

Ulyanov A.M

Sechenov Moscow Medical Academy, Research institute of molecular medicine, Moscow 119991, 8/2 Trubetskaya str.

The study is dedicated to the development of the method of the quantitative definition of summaiy protein in vaginal suppositories and vaginal soft gelatinous capsules. The development of biotechnology is the main reason of appearance of the significant amount of medical products, which contain high-effective proteins in low dosages. The standardization of this group of drugs was always difficult, because compounds of the form may mask results of the analysis. We choose bicinchoninic acid assay, because this method may significantly accelerate analysis in all technological stages in compare with other methods. The method of quantitative definition of summary protein in vaginal suppositories and vaginal soft gelatinous capsules was created.

Keywords: quantitative definition, protein, vaginal suppositories, vaginal soft gelatinous capsules.

Материалы X международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва