Композиции и способы получения (R)-ретикулина и его предшественников

1. Способ получения (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина, предусматривающий
(a) обеспечение бензилизохинолинового производного;
(b) введение в контакт бензилизохинолинового производного со смесью ферментов, способных превращать бензилизохинолиновое производное в (R)-ретикулин или предшественник (R)-ретикулина, при условиях, позволяющих превращение бензилизохинолинового производного в (R)-ретикулин или предшественник (R)-ретикулина.
2. Способ получения (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина, предусматривающий
(a) обеспечение бензилизохинолинового производного;
(b) введение в контакт бензилизохинолинового производного со смесью ферментов, способных превращать бензилизохинолиновое производное в (R)-ретикулин или предшественник (R)-ретикулина, при условиях, позволяющих превращение бензилизохинолинового производного в (R)-ретикулин или предшественник (R)-ретикулина,
где бензилизохинолиновое производное характеризуется химической формулой:
1
2
3
4
где каждый R, R, R и R представляет собой атом водорода, гидроксильную группу или метоксигруппу;
5
и где R представляет собой атом водорода или метильную группу; и
где предшественник (R)-ретикулина характеризуется химической формулой:
1
2
3
4
где каждый R, R, R и R представляет собой атом водорода, гидроксильную группу или метоксигруппу;
5
и где R представляет собой атом водорода или метильную группу, при условии, что (R)-ретикулин исключается формулой.
3. Способ по п. 2, где бензилизохинолиновое производное выбрано из группы, состоящей из (S)-N-метилкоклаурина, (S)-3'-гидрокси-N-метилкоклаурина и (S)-ретикулина, и где предшественник (R)-ретикулина выбран из (R)-N-метилкоклаурина, (R)-3'-гидрокси-N-метилкоклаурина.
4. Способ по п. 2, где смесь ферментов содержит первый полипептид, способный окислять бензилизохинолиновый предшественник с образованием окисленного бензилизохинолинового предшественника, и второй полипептид, способный восстанавливать окисленный бензилизохинолиновый предшественник с образованием (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина, где окисленный бензилизохинолиновый предшественник характеризуется химической формулой:
1
2
3
4
где каждый R, R, R и R представляет собой атом водорода, гидроксил или метоксигруппу;
5
и где R представляет собой атом водорода или метильную группу.
5. Способ по п. 4, где первым полипептидом, способным окислять бензилизохинолиновый предшественник до окисленного бензилизохинолинового предшественника, является цитохром Р450, а вторым полипептидом, способным восстанавливать бензилизохинолиновый предшественник с образованием (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина, является альдокеторедуктаза.
6. Способ по п. 4 или 5, где первым полипептидом является полипептид, выбранный из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 219 - SEQ. ID NO: 321; SEQ. ID NO: 325 и SEQ. ID NO: 338, и где вторым полипептидом является полипептид, выбранный из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 59 - SEQ. ID NO: 115; SEQ. ID NO: 327; SEQ. ID NO: 329; SEQ. ID NO: 330 и SEQ. ID NO: 340.
7. Способ по п. 4 или 5, где первый и второй полипептиды являются полипептидом слияния.
8. Способ по п. 7, где полипептидом слияния является полипептид, изложенный в SEQ. ID NO: 323.
9. Способ по п. 1, где способ выполняют in vivo или in vitro.
10. Способ по п. 5, где цитохром Р450 и альдокеторедуктазу получают из представителя группы семейств растений, состоящей из Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
11. Способ по п. 10, где представитель семейства растений выбран из группы видов растений, состоящей из Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
12. Способ получения (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина, предусматривающий
(a) обеспечение химерной последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей в качестве функционально связанных компонентов:
(i) первую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид CYP450;
(ii) вторую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид AKR; и
(iii) одну или несколько последовательностей нуклеиновой кислоты, способных контролировать экспрессию в клетке-хозяине;
(b) введение химерной последовательности нуклеиновой кислоты в клетку-хозяина и выращивание клетки-хозяина для продуцирования CYP450 и AKR, а также для продуцирования (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина; и
(с) извлечение (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина.
13. Способ по п. 12, где предшественник (R)-ретикулина характеризуется химической формулой:
1
2
3
4
где каждый R, R, R и R представляет собой атом водорода,
гидроксильную группу или метоксигруппу;
5
и где R представляет собой атом водорода или метильную группу, при условии, что (R)-ретикулин исключается формулой.
14. Способ по п. 12 или 13, где первая и вторая последовательности нуклеиновой кислоты функционально связаны для продуцирования полипептида слияния, содержащего CYP450 и AKR.
15. Способ по п. 12, где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CYP450, выбрана из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 116 - SEQ. ID NO: 218; SEQ. ID NO: 324 и SEQ. ID NO: 337, и где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая AKR, выбрана из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 1 - SEQ. ID NO: 58; SEQ. ID NO: 326; SEQ. ID NO: 328 и SEQ. ID NO: 339.
16. Способ по п. 12, где CYP450 и AKR получают из представителя группы семейств растений, состоящей из Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
17. Способ по п. 16, где представитель семейства растений выбран из группы видов растений, состоящей из Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
18. Способ получения (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина, предусматривающий
(а) обеспечение первой химерной последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей в качестве функционально связанных компонентов первую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид CYP450, и первую последовательность нуклеиновой кислоты, контролирующую экспрессию первой последовательности нуклеиновой кислоты в клетке;
(b) обеспечение второй химерной последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей в качестве функционально связанных компонентов вторую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид AKR, и вторую последовательность нуклеиновой кислоты, контролирующую экспрессию второй последовательности нуклеиновой кислоты в клетке;
(c) введение первой и второй химерных последовательностей нуклеиновой кислоты в клетку-хозяина и выращивание клетки-хозяина для продуцирования CYP450 и AKR, а также для продуцирования (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина; и
(d) извлечение (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина.
19. Способ по п. 18, где предшественник (R)-ретикулина характеризуется химической формулой:
1
2
3
4
где каждый R, R, R и R представляет собой атом водорода, гидроксильную группу или метоксигруппу;
5
и где R представляет собой атом водорода или метильную группу, при условии, что (R)-ретикулин исключается формулой.
20. Способ по п. 19, где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CYP450, выбрана из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 116 - SEQ. ID NO: 218; SEQ. ID NO: 324 и SEQ. ID NO: 337, и где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая AKR, выбрана из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 1 - SEQ. ID NO: 58; SEQ. ID NO: 326; SEQ. ID NO: 328 и SEQ. ID NO: 339.
21. Способ по п. 18 или 19, где CYP450 и AKR получают из представителя группы семейств растений, состоящей из Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
22. Способ по п. 21, где представитель семейства растений выбран из группы видов растений, состоящей из Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
23. Композиция для получения (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина, содержащая смесь ферментов, содержащую первый полипептид, способный окислять бензилизохинолиновое производное с образованием окисленного бензилизохинолинового производного, и второй полипептид, способный восстанавливать окисленное бензилизохинолиновое производное с образованием (R)-ретикулина или предшественника (R)-ретикулина;
где бензилизохинолиновое производное характеризуется химической формулой:
1
2
3
4
где каждый R, R, R и R представляет собой атом водорода, гидроксильную группу или метоксигруппу;
5
и где R представляет собой атом водорода или метильную группу; и
где предшественник (R)-ретикулина характеризуется химической формулой:
1
2
3
4
где каждый R, R, R и R представляет собой атом водорода,
гидроксильную группу или метоксигруппу;
5
и где R представляет собой атом водорода или метильную группу, при условии, что (R)-ретикулин исключается формулой.
24. Композиция по п. 23, где первым полипептидом является цитохром Р450, а вторым полипептидом является альдокеторедуктаза.
25. Композиция по п. 23 или 24, где первым полипептидом является полипептид, выбранный из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 219 - SEQ. ID NO: 321; SEQ. ID NO: 325 и SEQ. ID NO: 338, и где вторым полипептидом является полипептид, выбранный из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 59 - SEQ. ID NO: 115; SEQ. ID NO: 327; SEQ. ID NO: 329; SEQ. ID NO: 330 и SEQ. ID NO: 340.
26. Композиция по n. 23, где первый и второй полипептиды являются полипептидом слияния.
27. Композиция по п. 23 или 26, где цитохром Р450 и альдокеторедуктаза являются получаемыми из представителя группы семейств растений, состоящей из Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
28. Композиция по п. 27, где представитель семейства растений выбран из группы видов растений, состоящей из Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
29. Рекомбинантный вектор экспрессии, содержащий в качестве функционально связанных компонентов:
(i) последовательность нуклеиновой кислоты, способную контролировать экспрессию в клетке-хозяине; и
(ii) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CYP450,
где вектор экспрессии приемлем для экспрессии в клетке-хозяине.
30. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 29, где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CYP450, определяется последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 116 - SEQ. ID NO: 218; SEQ. ID NO: 324 и SEQ. ID NO: 337.
31. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 29, где CYP450 является получаемым из представителя семейства растений, включающего в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
32. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 31, где представитель семейства растений выбран из видов растений, включающих в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
33. Рекомбинантный вектор экспрессии, содержащий в качестве функционально связанных компонентов:
(i) последовательность нуклеиновой кислоты, способную контролировать экспрессию в клетке-хозяине; и
(ii) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую AKR,
где вектор экспрессии приемлем для экспрессии в клетке-хозяине.
34. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 33, где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая AKR, выбрана из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 1 - SEQ. ID NO: 58; SEQ. ID NO: 326; SEQ. ID NO: 328 и SEQ. ID NO: 339.
35. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 33, где AKR является получаемой из представителя семейства растений, включающего в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
36. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 35, где представитель семейства растений выбран из видов растений, включающих в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
37. Рекомбинантный вектор экспрессии, содержащий в качестве функционально связанных компонентов:
(i) последовательность нуклеиновой кислоты, способную контролировать экспрессию в клетке-хозяине; и
(ii) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CYP450 и AKR,
где вектор экспрессии приемлем для экспрессии в клетке-хозяине.
38. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 37, где последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей CYP450, является последовательность нуклеиновой кислоты, выбранная из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 116 - SEQ. ID NO: 218; SEQ. ID NO: 324 и SEQ. ID NO: 337, и где последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей AKR, является последовательность нуклеиновой кислоты, выбранная из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 1 - SEQ. ID NO: 58; SEQ. ID NO: 326; SEQ. ID NO: 328 и SEQ. ID NO: 339.
39. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 37, где AKR и CYPR являются получаемыми из представителя семейства растений, включающего в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
40. Рекомбинантный вектор экспрессии по п. 39, где представитель семейства растений выбран из видов растений, включающих в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
41. Способ получения (R)-ретикулина, предусматривающий
(a) обеспечение (S)-ретикулина и
(b) введение в контакт (S)-ретикулина со смесью ферментов, способных превращать (S)-ретикулин в (R)-ретикулин, при условиях, которые допускают превращение (S)-ретикулина в (R)-ретикулин.
42. Способ по п. 41, где смесь ферментов содержит первый полипептид, способный окислять (S)-ретикулин с образованием 1,2-дегидроретикулина, и второй полипептид, способный восстанавливать 1,2-дегидроретикулин с образованием (R)-ретикулина.
43. Способ по п. 41, где первым полипептидом, способным окислять (S)-ретикулин с образованием 1,2-дегидроретикулина, является цитохром Р450, а вторым полипептидом, способным восстанавливать 1,2-дегидроретикулин с образованием (R)-ретикулина, является альдокеторедуктаза.
44. Способ по пп. 41-42, где первый полипептид выбран из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 219 - SEQ. ID NO: 321; SEQ. ID NO: 325 и SEQ. ID NO: 338, и где второй полипептид выбран из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 59 - SEQ. ID NO: 115; SEQ. ID NO: 327; SEQ. ID NO: 329; SEQ. ID NO: 330 и SEQ. ID NO: 340.
45. Способ по п. 42, где первый и второй полипептиды являются полипептидом слияния.
46. Способ по п. 41, где способ выполняют in vivo или in vitro.
47. Способ по п. 43 или 45-46, где цитохром Р450 и альдокеторедуктазу получают из представителя семейства растений, включающего в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
48. Способ по п. 47, где представитель семейства растений выбран из видов растений, включающих в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
49. Способ получения (R)-ретикулина, предусматривающий
(а) обеспечение химерной последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей в качестве функционально связанных компонентов:
(i) первую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид CYP450;
(ii) вторую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид AKR; и
(iii) одну или несколько последовательностей нуклеиновой кислоты, способных контролировать экспрессию в клетке-хозяине;
(b) введение химерной последовательности нуклеиновой кислоты в клетку-хозяина и выращивание клетки-хозяина для продуцирования CYP450 и AKR, а также для продуцирования (R)-ретикулина; и
(c) извлечение (R)-ретикулина.
50. Способ по п. 51, где первая и вторая последовательности нуклеиновой кислоты функционально связаны для продуцирования полипептида слияния, содержащего CYP450 и AKR.
51. Способ по п. 49 или 50, где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CYP450, выбрана из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 116 - SEQ. ID NO: 218; SEQ. ID NO: 324 и SEQ. ID NO: 337, и где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая AKR, выбрана из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 1 - SEQ. ID NO: 58; SEQ. ID NO: 326; SEQ. ID NO: 328; SEQ. ID NO: 339.
52. Способ по п. 49 или 50, где CYP450 и AKR получают из представителя семейства растений, включающего в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
53. Способ по п. 52, где представитель семейства растений выбран из видов растений, включающих в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
54. Способ получения (R)-ретикулина, предусматривающий
(a) обеспечение первой химерной последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей в качестве функционально связанных компонентов первую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид CYP450, и первую последовательность нуклеиновой кислоты, контролирующую экспрессию первой последовательности нуклеиновой кислоты в клетке;
(b) обеспечение второй химерной последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей в качестве функционально связанных компонентов вторую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид AKR, и вторую последовательность нуклеиновой кислоты, контролирующую экспрессию второй последовательности нуклеиновой кислоты в клетке;
(c) введение первой и второй химерных последовательностей нуклеиновой кислоты в клетку-хозяина и выращивание клетки-хозяина для продуцирования CYP450 и AKR, а также для продуцирования (R)-ретикулина; и
(d) извлечение (R)-ретикулина.
55. Способ по п. 54, где последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей CYP450, является последовательность нуклеиновой кислоты, выбранная из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 116 - SEQ. ID NO: 218; SEQ. ID NO: 324 и SEQ. ID NO: 337, и где последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей AKR, является последовательность нуклеиновой кислоты, выбранная из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 1 - SEQ. ID NO: 58; SEQ. ID NO: 326; SEQ. ID NO: 328 и SEQ. ID NO: 339.
56. Способ по п. 54, где CYP450 и AKR получают из представителя семейства растений, включающего в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
57. Способ по п. 56, где представитель семейства растений выбран из видов растений, включающих в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
58. Композиция для получения (R)-ретикулина, содержащая смесь ферментов, содержащую первый полипептид, способный окислять (S)-ретикулин с образованием 1,2-дегидроретикулина, и второй полипептид, способный восстанавливать 1,2-дегидроретикулин с образованием (R)-ретикулина.
59. Композиция по п. 58, где смесь ферментов содержит первый полипептид, способный окислять (S)-ретикулин с образованием 1,2-дегидроретикулина, и второй полипептид, способный восстанавливать 1,2-дегидроретикулин с образованием (R)-ретикулина.
60. Композиция по п. 59, где первым полипептидом, способным окислять (S)-ретикулин с образованием 1,2-дегидроретикулина, является цитохром Р450, а вторым полипептидом, способным восстанавливать 1,2-дегидроксиретикулин с образованием (R)-ретикулина, является альдокеторедуктаза.
61. Композиция по пп. 58-60, где первый полипептид выбран из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 219 - SEQ. ID NO: 321; SEQ. ID NO: 325 и SEQ. ID NO: 338, и где второй полипептид выбран из группы, состоящей из SEQ. ID NO: 59 - SEQ. ID NO: 115; SEQ. ID NO: 327; SEQ. ID NO: 329; SEQ. ID NO: 330 и SEQ. ID NO: 340.
62. Композиция по п. 58, где первый и второй полипептиды являются полипептидом слияния.
63. Композиция по п. 58-60, где цитохром Р450 и альдокеторедуктаза являются получаемыми из представителя семейства растений, включающего в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
64. Композиция по п. 63, где представитель семейства растений выбран из видов растений, включающих в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
65. Способ выявления присутствия или отсутствия последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей AKR и/или CYP450, в клетке, предусматривающий
(a) обеспечение клетки;
(b) экстрагирование геномной ДНК из клетки и
(c) анализ геномной ДНК на предмет присутствия последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей AKR и/или CYP450.
66. Способ по п. 65, где клеткой является растительная клетка, получаемая из растения, принадлежащего к семейству растений, включающему в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
67. Способ по п. 65, где растительную клетку получают из растения, принадлежащего к семейству растений, включающему в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
68. Способ модуляции экспрессии последовательностей нуклеиновой кислоты в клетке, в естественных условиях экспрессирующей AKR и/или CYP450, предусматривающий
(a) обеспечение клетки, в естественных условиях экспрессирующей AKR и/или CYP450;
(b) обеспечение мутагенеза клетки;
(c) выращивание клетки для получения множества клеток и
(d) определение того, содержит ли множество клеток клетку, содержащую модулированные уровни AKR и/или CYP450.
69. Способ по п. 68, где клеткой является растительная клетка, получаемая из растения, принадлежащего к семейству растений, включающему в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
70. Способ по п. 68, где растительную клетку получают из растения, принадлежащего к семейству растений, включающему в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
71. Способ получения растения с завязывающимися семенами, предусматривающий модулирование экспрессии последовательностей нуклеиновой кислоты в клетке, в естественных условиях экспрессирующей AKR и/или CYP450, при этом способ предусматривает
(a) обеспечение растения с завязывающимися семенами, в естественных условиях экспрессирующего AKR и/или CYP450;
(b) обеспечение мутагенеза семени растения с получением мутировавшего семени;
(c) выращивание из мутировавшего семени мутировавших растений следующего поколения, способных к завязыванию семян следующего поколения; и
(d) получение семян следующего поколения или другой части мутировавших растений и анализ на предмет проявления растениями следующего поколения или семенем следующего поколения модулированной экспрессии AKR и/или CYP450.
72. Способ по п. 71, где растение принадлежит к семейству растений, включающему в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
73. Способ по п. 71, где растение принадлежит к семейству растений, включающему в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
74. Способ получения растения, экспрессирующего пониженные уровни AKR и/или CYP450, при этом способ предусматривает
(а) обеспечение растения, экспрессирующего AKR и/или CYP450; и
(b) снижение экспрессии AKR и/или CYP450 в растении с использованием индуцированного вирусом сайленсинга генов.
75. Способ по п. 74, где растение принадлежит к семейству растений, включающему в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
76. Способ по п. 74, где растение принадлежит к семейству растений, включающему в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
77. Способ по пп. 69, 71 или 74, где способ обеспечивает модуляцию уровней продуцирования алкалоидов в растении, в естественных условиях способном продуцировать алкалоиды.
78. Способ по п. 77, где алкалоид выбран из группы алкалоидов, состоящей из морфина, кодеина, тебаина, папаверина, носкапина, (S)-ретикулина, (R)-ретикулина, кодамина, лауданина и лауданозина.
79. Применение последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей AKR или CYP450, для определения генотипа растения.
80. Применение по п. 79, где растением является представитель семейства растений, включающего в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
81. Применение по п. 79, где растение выбрано из семейства растений, включающего в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.
82. Применение последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей AKR или CYP450, в качестве маркера для оценивания сегрегации в растительной популяции последовательности нуклеиновой кислоты, генетически связанной с ней.
83. Применение по п. 82, где растительная популяция содержит растения, принадлежащие к семейству растений, включающему в себя Papaveraceae, Lauraceae, Annonaceae, Euphorbiaceae и Moraceae.
84. Применение по п. 82, где растительная популяция содержит растения, принадлежащие к семейству растений, включающему в себя Papaver somniferum, Papaver bracteatum и Papaver rhoeas.