Фармако-токсикологическая и биологическая оценка лекарственных средств при отравлении животных синтетическими пиретроидами

Литература.

1. Онищенко Г.Г. Химическая безопасность Российской Федерации и проблема охраны здоровья населения. // Тезисы докладов 3-го съезда токсикологов России под. ред. акад. РАМН, проф. Г.Г. Онищенко и член-корреспондента РАМН, проф. Б.А. Курляндский. - М., 2008. - С. 20-22.

2. Зимаков Ю.А., Гареев Р.Д., Барабанов В.И. и др. Разработка средств для защиты животных от инга-ляционных поражений аммиаком и хлором /// Междунар. научн. конфер., «Токсикозы жив-х и акт. пробл. болезн. молодняка», 25-27 окт. 2006. - 2006. - С.104-108.

3. Гольдфарб Ю.С., Простакишин Г.П., Остапенко Ю.Н. Особенности диагностики организационных и лечебных мероприятий при ингаляционных отравлениях токсичными химическими веществами в аварийных ситуациях. // Тезисы докладов 3-го съезда токсикологов России под. ред. акад. РАМН, проф. Г.Г. Онищенко и член-корреспондента РАМН, проф. Б.А. Курляндский. - М., 2008. - С. 388-389.

4. Литвинов Н.Н., Остапенко Ю.Н., Логинова Е.В. идр. Система профилактики острых отравлений химической этиологии.// Тезисы докладов 3-го съезда токсикологов России под. ред. акад. РАМН, проф. Г.Г. Онищенко и член-корреспондента РАМН, проф. Б.А. Курляндский. - М., 2008. - С. 418-420.

5. Иванов А.В. Обеспечение химической и биологической безопасности животноводства в современных условиях.// Матер. Международ.науч.конф.: Токсикозы животных и актуальные проблемы молодняка. - Казань, 2006. - С.9-12.

6. Курляндский, Б.А. Интенсификация токсикологических исследований в России настоятельное требование современности. // Тезисы докладов 3-го съезда токсикологов России под. ред. акад. РАМН, проф. Г.Г. Онищенко и член-корреспондента РАМН, проф. Б.А. Курляндский. - М., 2008. - С. 13-16.

7. Папуниди К.Х., Тремасов М.Я. Разработка средств защиты животных от отравлений парами аммиака. // Тезисы докладов 3-го съезда токсикологов России под. ред. акад. РАМН, проф. Г.Г. Онищенко и член-корреспондента РАМН, проф. Б.А. Курляндский. - М., 2008. - С. 205-206.

EFFECT OF PREPARATION RIA-1 ON AMMONIA VAPORS ON THE ANIMAL ORGANISM A.V. Malanev, R.M. Aslanov

Summary. At the present time to neutralize the ammonia vapor is used in case of accidents inefficient water curtain. In Federal Center of Toxicological and Radiation Safety an efficient converter of ammonia fumes - an aerosol of RIA-1. The aim of this work was to study the effect of RIA-1 and ammonia vapors on the organism of animals. In determining the acute toxicity of ammonia showed that the most sensitive to ammonia vapors are sheep, following the hens are more sensitive, then rabbits. The most resistant to the toxic ammonia are white rat. The study of the influence of degassing on hematological and biochemical parameters of blood were carried out on rabbits and sheep. The results show that RIA-1 has no effect on hematological and biochemical parameters, degasser in aerosol form has no negative effects on the animals. Determination of the effectiveness of the degasser was conducted on rabbits during poisoning of ammonia vapor. In rabbits poisoned with ammonia vapor, the number of erythrocytes and leukocytes, hemoglobin, total protein, glucose levels remained within the physiological fluctuations. There was an increase of alkaline phosphatase activity on the third day of 20.0 %. ALT at the 1 - and the third day rose by 79.7 % and 83.3 %, respectively, on 7 - th day - by 55.3 % compared with the baseline values. The activity of AST also increased at 1 - and the third day by 98.9 % and 100.1 %, respectively, on the 7th day - by 100.6 % relative to the background. In rabbits, poisoned by ammonia vapor using a degasser, hematological and biochemical parameters during the study period remained within the physiological norm. Experiments proved that the use of RIA-1 as a degasser to protect animals from being poisoned with lethal doses of ammonia vapors, and a positive effect on the body.

Key words: fallow of ammonia, poisoning, neutralization, degasser, indicators of blood.

УДК 619:616-099-02:632.95

ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ ЖИВОТНЫХ СИНТЕТИЧЕСКИМИ ПИРЕТРОИДАМИ

А.Г. МАЛАНЬЕВА, кандидат биологических наук, научный сотрудник

М.Ю. МИТРОХИН, соискатель ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»

E-mail: vnivi@mail.ru

Резюме. Особое место среди многообразия применяемых инсектицидов занимают синтетические пиретроиды. Цель наших исследований - изыскание средств и разработка схем их применения для лечения отравлений животных синтетическими пиретроидами, содержащими дельтаметрин. Для проведения скрининга различных препаратов использовали белых крыс. Испытывали их лечебную эффективность при пероральном введении дельтаметрина в масляном растворе в абсолютносмертельной дозе. Антидот АЛ-5 способствует выживаемости 80 % животных. Учитывая тот факт, что у подопытных крыс отмечались нарушения функций желудочно-

кишечного тракта, для повышения эффективности совместно с антидотом возможно использование пробиотических препаратов, а также сорбентов. Все изученные сорбенты в большей или меньшей степени поглощали дельтаметрин. Наиболее эффективной сорбцией обладали лигнин и активированный уголь. Применение пробиотического препарата Энтеро-спорин благоприятно сказывалось на физиологическом состоянии животных. Для коррекции патологических процессов, вызванных отравлением дельтаметрином, предложена схема лечения, включающая антидот АЛ-5, лигнин и Энтероспорин. При проведении комплексного лечения количество эритроцитов и содержание гемоглобина уменьшалось незначительно и восстанавливалось на 7-е сутки. Количество лейкоцитов увеличивалось незначительно. Содержание общего белка оставалось на уровне фона. Отмечалось изменение активности изучаемых ферментов, но к10-м сут. эксперимента происходило ее восстановление до уровня фоновых показателей. Ключевые слова: синтетические пиретроиды, дельтаме-трин, антидот, лечение.

Развитие научно-технического прогресса, сверх-интенсивная эксплуатация природных ресурсов без реабилитации окружающей среды, растущее загрязнение почвы, воды, воздуха, бесконтрольное применение пестицидов, минеральных удобрений способствуют ухудшению токсикологической ситуации, и, как следствие, ухудшению здоровья людей и животных [1].

Особое место среди многообразия применяемых пестицидов занимают синтетические пиретроиды. Вещества этой группы характеризуются относительной дешевизной, небольшими нормами расхода на единицу площади, простотой применения и высокой эффективностью [2, 3]. Однако бесконтрольное использование, нарушение сроков ожидания, норм расхода, правил хранения, транспортировки и др. способствуют ухудшению токсикологической ситуации. Существующие средства и методы лечения отравлений пиретроидами не в полной мере удовлетворяют потребности ветеринарной службы, а для некоторых токсичных препаратов антидоты не созданы [4].

В связи с этим важное направление совершенствования ветеринарно-профилактических мероприятий

- разработка и освоение новых средств и методов профилактики и лечения токсикозов животных, в том числе с применением препаратов, обладающих биоактивными свойствами, способными оказывать регулирующее влияние на интенсивность обменных процессов, усиливать функциональную активность органов и систем организма, повышать уровень естественной резистентности животных [5, 6].

Цель наших исследований - изыскание препаратов и разработка схем их применения для лечения отравлений животных синтетическими пиретроидами, содержащими дельтаметрин.

Условия, материалы и методы. В экспериментах использовали белых мышей живой массой 18...20 г; белых крыс живой массой 180.200 г; кроликов породы Серый великан живой массой 2,5...3,0 кг. Особи опытных и контрольных групп на протяжении всего периода исследования находились в одинаковых условиях содержания и кормления.

Для экспериментальных исследований использовали кристаллический дельтаметрин, содержащий 98,2 % активного действующего вещества, предоставленный лабораторией физико-химического анализа ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ».

Острую токсичность дельтаметрина рассчитывали по методу Кербера (1931).

Исследования адсорбционной способности сорбентов in vitro проводили с использованием методики, описанной В.С. Крюковым и др. (1992), модифицированной в ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Остаточные количества пиретроидо определяли методом газожидкостной хроматографии на хроматографе «Dimension-1».

В ходе экспериментов фиксировали клиническое состояние животных, потребление корма и воды, температуру тела, продолжительность жизни, изучали патологоанатомическое состояние внутренних органов. У опытных животных для составления наиболее полной картины воздействия дельтаметрина и комплексного лечения на организм до опыта, на 1, 3, 7, 10 и 15-е сут. брали кровь для гематологических и биохимических исследований: у крыс путём декапитации, у кроликов

- из ушной вены.

Для проведения скрининга лечебных препаратов дельтаметрин вводили белым крысам перорально в масляном растворе в абсолютносмертельной дозе. Изучали эффективность атропина сульфата

(0,2 мг/кг), феназепам (3 мг/кг), диазепам (3 мг/кг), фенобарбитал (65 мг/кг), АЛ-5 (0,5 мл/кг), АЛ-7 (0,5 мл/кг), аминазин (50 мг/кг).

Для определения сорбционных свойств в присутствии дельтаметрина исследовали лигнин (ЗАО «Лекс»), цеолит (Майнского месторождения Ульяновской области), бентонит (Биклянского месторождения Республики Татарстан), уголь активированный (НТЦ ООО «ХимИн-вест»), шунгит (ООО «ТатХимИнвест»), полисорб (ЗАО «Полисорб») и фитосорб (ООО «Маркорм»). Опыты проводили в водно-солевом и кислотно-солевом растворах в соотношении пестицид-сорбент 1:1000.

В экспериментах по изучению эффективности скармливания животным сорбентов использовали белых крыс обоего пола, разделенных по принципу аналогов на группы.

Для лечения дисбактериоза, вызванного отравлением дельтаметрином, использовали препараты Бифи-думбактерин, Лактобактерин и Энтероспорин.

В результате проведенных исследований была разработана схема лечения для коррекции патологических процессов, вызванных отравлением дельтаметрином, которая включает антидот АЛ-5, лигнин и Энтероспорин. Опыт по изучению ее эффективности проводили на 20 кроликах породы Серый великан по 5 гол. в каждой. Животных I группы не лечили, они служили контролем затравки; II - лечили антидотом АЛ-5; III - антидотом АЛ-5, сорбентом и пробиотиком; особи IV группы -служили биологическим контролем.

Таблица. Эффективность препаратов при отравлении белых крыс дельтаметрином в абсолютносмертельной концентрации

Препарат, доза Животные, гол

выжи- ло пало выживае- мость,%

Атропина сульфат, 0,2 мг/кг 0 15 0

Феназепам, 3 мг/кг 0 15 0

Диазепам, 3 мг/кг 0 15 0

Фенобарбитал, 65 мг/кг 0 15 0

АЛ-5, 0,5 мл/кг 12 3 80

АЛ-7, 0,5 мл/кг 9 6 40

Аминазин, 50 мг/кг 0 15 0

контроль затравки 0 15 0

Результаты и обсуждение. Наибольшую выживаемость обеспечило использование антидота АЛ-5

- 80 % особей (см. табл.).

Учитывая тот факт, что у животных отмечались нарушения функций желудочно-кишечного тракта, для повышения эффективности совместно с этим антидотом можно использовать пробиотические препараты, а также сорбенты.

Все сорбенты в большей или меньшей степени обладали сорбирующими свойствами по отношению к дельтаметрину.

В нейтральной среде полисорб сорбировал дельтаметрин на 21,5 %, лигнин - на 96,2 %, бентонит - на 70,8 %, цеолит - на 70,1 %, шунгит - на 75,3 %, фитосорб - на 18,5 %, активированный уголь - на 95,9 %. В кислой среде сорбционные свойства оказались выше: полисорб - 85,0 %, лигнин - 98,3 %, бентонит - 87,5 %, цеолит - 86,1 %, шунгит - 90,5 %, фитосорб - 63,9 %, активированный уголь - 98,1 %.

Наиболее эффективной сорбцией обладали лигнин и активированный уголь, как при нейтральном, так и при кислом значениях pH.

Скармливание животным активированного угля обеспечивало их выживаемость на уровне 87,5 %. Но

в варианте с лигнином наблюдалось более охотное поедание корма, вследствие чего сорбент оказывал большее влияние на выживаемость животных, которая составила 100 %. Кроме того, в крови восстановление показателей крови до уровня исходных значений при использовании лигнина наблюдалось к 10.15 сут. эксперимента, а в варианте с активированным углем оно продолжалось от 15 сут. и более.

Применение пробиотических препаратов благоприятно сказывалось на физиологическом состоянии животных. Наиболее эффективным было использование препарата Энтороспорин. На наш взгляд, такая ситуация обусловлена тем, что Bacillus subtilis-93, входящие в его состав, обладают антагонистической активностью по отношению к широкому спектру условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, регулируют и стимулируют пищеварение, способствуя лучшему усвоению пищи, а также с помощью протеолитических и фибринолитических ферментов очищают воспалительные очаги от некротической ткани. Благодаря этим свойствам у животных, получавших указанный препарат, количество лактозоотрицательных форм кишечной палочки и дрожжеподобных грибов сохранялось на исходном уровне на протяжении всего эксперимента, численность бифидобактерий не изменялась в течение опыта, а количество лактобактерий и лактозоположительных форм кишечной палочки снижалось незначительно и только к концу опыта.

В эксперименте по изучению эффективности схемы коррекции патологических процессов, вызванных дельтаметрином,клинические признаки отравления у всех животных начинали проявляться сразу же после введения препарата, они находились в возбужденном состоянии. Через 1.1,5 ч проявлялась саливация, затем наблюдались вялость, атаксия. В последующем у животных в контроле (без лечения) наблюдались судороги, плавательные движения, затем развивались клонико-тонические судороги, ползание на животе и в течение 10.12 ч все они пали.

У особей второй группы после введения препарата АЛ-5 на фоне появления клинических признаков отравления животные через 2.3 минуты приходили в возбужденное состояние. Позже никаких клинических признаков отравления не обнаруживалось, только все кролики были скученными, апатичными. На следующий день у всех особей наблюдались диарея и вялость. Через 3-е сут. один кролик пал.

В третьей группе на следующий день у части животных наблюдались диарея, апатичность. У всех особей отмечено удовлетворительное потребление корма и воды. Падежа в этой группе не зафиксировано, но слабость и вялость животных наблюдали до 3-х сут. эксперимента.

При проведении комплексного лечения (третья группа) количество эритроцитов и содержание гемоглобина в крови уменьшалось незначительно с восстановлением величины этих показателей на l-е сутки. Количество лейкоцитов повышалось незначительно. Также наблюдалось увеличение скорости оседания эритроцитов с восстановлением на 10-е сут эксперимента. Содержание общего белка оставалось на уровне фона. Восстановление белковых фракций отмечалось к 10-м суткам. Кроме того, у кроликов третьей группы отмечалось незначительное угнетение ацетилхолинэстеразы и увеличение активности щелочной фосфатазы, однако к 10-м сут. эксперимента они восстанавливались до фонового уровня. Наблюдалась незначительная гиперфер-ментия АСТ и АЛТ с восстановлением на l-е сут. опыта. Гипогликемии не установлено, отмечено повышение содержания глюкозы с восстановлением на l-е сут.

Выводы. Таким образом, разработанная схема, включающая применение антидота АЛ-5, лигнина и Энтероспорина, защищает животных от отравления абсолютно-смертельной дозой дельтаметрина. Проведенные токсикологические, клиникогематологические, биохимические исследования показывают, что их использование не только защищает животных от отравления синтетическими пиретроидами, но и положительно влияет на организм.

Литература.

1. Иванов А.В., Тремасов М.Я., Папуниди К.Х. Токсикологическая безопасность - проблемы и пути их решения. //Материалы 2-го съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов России. - Казань, 2009. - 620 с.

2. Иванов А.В., Галяутдинова Г.Г., Егоров В.И. и др. Случаи отравления крупного рогатого скота пестицидами на пастбище. // Ветеринария. - 2006. - № 8. - С. 13-14.

3. Смирнов А.М., Дорожкин В.И., Таланов Г.А. Ветеринарно-санитарные мероприятия на территориях, загрязненных эко токсикантами. //Материалы первого съезда ветеринарных фармакологов России. - Воронеж, 2007. - С. 10-14.

4. Тремасов М.Я. Проблемы ветеринарной экотоксикологии. // Материалы международной конференции ветеринарных фармакологов и токсикологов, посвящённой 125-летию Н.А. Сошественского. - Казань, 2001. - С.10-14.

5. Антипов В.А., Трошин А.Н. Подготовка специалистов для ветеринарной фармации. // Второй съезд ветеринарных фармакологов и токсикологов России. Казань. 9-12 июня 2009 года. Материалы съезда. - Казань, 2009. - 15-18 с.

6. Папуниди К.Х., Шкуратова И.А., Донник И.М. и др. Патогенетические аспекты применения сорбентов в районах экологического неблагополучия. // Учёные записки КГАВМ. - Казань, 2005. - Т. 181. - С. 174-180.

PHARMACO-TOXICOLOGICAL AND BIOLOGICAL ASSESSMENT OF DRUGS AT POISONING

ANIMALS OF SYNTHETIC PYRETROIDS

A.G. Malaneva, M.Ju. Mitrovich

Summary. A special place among the variety of the drugs take insecticidal synthetic pyretroids. The aim of research was the finding of drugs and the development of schemes to use for the treatment of poisoning animals with synthetic pyretroids containing deltamethrin. For the screening of various therapeutic agents used white rats. Deltamethrin was administered orally in oil solution in absolutely lethal dose. Have therapeutic efficacy in cases of poisoning in white rats deltamethrin. Antidote AL-5 promotes survival of 80% of the animals. Given the fact that the animals were observed abnormalities in the gastrointestinal tract to improve with the use of the antidote can be used probiotic preparations, as well as sorbents. Studies have shown that all the sorbents to a greater or lesser extent had the sorption properties in relation to deltamethrin. The most effective sorption had lignin and activated charcoal. The experiments for the study of probiotic preparations have shown that the use of «Enterosporin» beneficial to the physiological state of animals. As a result of experiments with a view to enhancing and correcting the pathological processes caused by the poisoning of deltamethrin was developed regimen that includes an antidote AL - 5, lignin and «Enterosporin.» When carrying out a comprehensive treatment of red blood cells and hemoglobin content decreased slightly with the restoration of these parameters on the 7th day. The number of leukocytes increased only slightly. The content of total protein remained at background level. Noted changes in the activity of the studied enzymes, but the recovery to the level of background rates happening to the 10th day of the experiment.

Key words: synthetic pyretroids, deltamethrin, antidote, treatment.