Влияние L-лизина на развитие гуморального иммунного ответа и активность нейтрофилов в исходном состоянии и в условиях эмоционально-болевого стресса

стояние | s >. Отметим также следующее. Как известно, используемая в гомеопатии вода деструктурируется. В частности, в [4] для того, чтобы вода утратила свою возможную структуру в виде молекулярных ассоциатов, предлагается использовать специальное механическое приспособление. Именно такая вода и является идеальной водой для приобретения квантового состояния или от вещества, первоначально помещенного в гомеопатический препарат, или в результате внешнего воздействия. Как показано в [10], обычная чистая вода может иметь в своем составе стабильные структуры - кластеры - содержащие фиксированное число молекул. Но в ней присутствуют и другие, различного вида, молекулярные ассоциаты. При введении в приготовленную воду атомов или молекул примеси структура воды изменяется, атомы примеси могут служить центрами ассоциатов, число молекул воды в которых определяется примесью. Вследствие встряхивания и разведения вода изменяет структуру, приобретая квантовое состояние в результате первоначального взаимодействия с квантовыми объектами - молекулами или атомами примеси.

Резонанс в гомеопатических препаратах возникает и усиливается, по-видимому, вследствие уменьшения доли примеси, как тормозящего фактора, и обнаруживается по характерному излучению, в котором, как указано в [10], присутствует р-излучение. О наличии в нем и электромагнитной компоненты можно судить по тому, что это излучение находится в области прозрачности воды [10] и связано с излучением валентных электронов, сигнализирующих о вхождении системы в резонансное |£0> состояние.

Воздействие низкоинтенсивного излучения КВЧ-диапазона [2] способствует гармонизации водной среды организма, т.е. переходу ее из нестационарного в резонансное состояние (рис. 1). Но такой же процесс может стимулировать и болезнетворные организмы. Поэтому гомеопатическое лечение имеет более широкий спектр применения, чем КВЧ-терапия. Совместное воздействие низкоинтенсивного КВЧ-излучения и гомеопатических препаратов может оказаться более эффективным, чем одного вида целительного воздействия. Метод КВЧ-диагностики может в перспективе найти успешное применение для визуального подбора подходящих веществ для гомеопатических препаратов.

Выводы. На основании экспериментов [2] предложена теоретическая концепция воздействия гомеопатических препаратов на живые организмы. В водной среде живого организма могут происходить квантово-интерференционные явления. Теоретические разработки данной работы подтверждают предвидения Сент-Дьердьи и предположение, высказанное в [4] о том, что вода есть неотъемлемая часть живого организма.

Литература

1. Ситько С.П., Мкртчян ЛИ. Введение в квантовую медицину.- Киев: Паттерн, 1994.- 144 с.

2. Синицин Н.И. и др. // Биомед. радиоэлектроника.- 1999.-№1.- С. 3-21.

3. Бецкий О.В. и др. // Биомед. технология и радиоэлектроника.- 2003.- №1.- С..37- 44.

4. Уваров В.М. // ВНМТ.- 2003.- Т.Х, №4.- С. 84.

5. Бердышев Г. Д., Махотина О .А. // Физика сознания и жизни, космология и астрофизика.- 2004.- №1.- С. 9-33.

6.Казначеев В., МихайловаЛ.Сверхслабые излучения в межклеточных взаимодействиях.- Новосибирск: Наука, 1991.-144 с.

7. Фейман Р. и др. Феймановские лекции по физике.-1966.- Т. 8.- М.: Мир.- 274 с.

8. Подгорецкий М., Хрусталев О.// УФН.- 1963.- Т. ЬХХХ1, вып.2.- С.217-247.

9. Фулер Роял Ф. // Вест/ биофиз.мед.- 1999.- №2.- С.14.

10. Цетлин В.В. и др. // Биомед. технологии и радиоэлектроника.- 2005.- №6.- С. 53-58.

ABOUT THE ESSENCE OF INFLUENCE OF HOMEOPATHIC MEDICINAL PREPARATIONS TO VITAL ORGANISM

L.S. MARTSENYUK Summary

The theoretical conception of the influence of homeopathic preparations to vital organism is carried out. It is established that in water medium of vital organism occurs the quantum interference.

Key words: homeopathic preparations, water medium

УДК: 577.112.385.4:612.017.1-092.9

ВЛИЯНИЕ L-ЛИЗИНА НА РАЗВИТИЕ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА И АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ В ИСХОДНОМ СОСТОЯНИИ И В УСЛОВИЯХ ЭМОЦИОНАЛЬНО-БОЛЕВОГО СТРЕССА

И.И. БОБЫНЦЕВ, М.Е. ДОЛГИНЦЕВ, А.А. КРЮКОВ, Л.А. СЕВЕРЬЯ-НОВА*

Введение. В настоящее время достаточно широко исследовано влияние целого ряда природных пептидных препаратов и их синтетических аналогов на специфические показатели иммунитета и неспецифические механизмы защиты. Большое значение в реализации функции этих пептидов имеет их первичная структура, обусловленная составом и последовательностью аминокислотных остатков. Некоторые аминокислоты, входящие в состав регуляторных пептидов, способны оказывать влияние на показатели специфической и неспецифической резистентности организма [1-3]. Однако малоизученным остается вопрос о влиянии ключевых аминокислотных остатков в условиях стрессорных воздействий. Отсутствуют данные об эффектах аминокислоты L-лизина, являющейся важным компонентом белков мозга [9-10], на реактивность иммунной системы в условиях стресса.

Цель работы - изучение влияния аминокислоты L-лизина на эффекторные звенья иммунного ответа в исходных условиях и в состоянии вызванного эмоционально-болевого стресса.

Материалы и методы. Эксперименты выполнены на 320 половозрелых крысах-самцах Вистар массой 180-280 г, полученных из питомника РАМН «Столбовая». Животные были разделены на подопытные группы по 10 особей каждая. Забой крыс производили путем передозировки эфирного наркоза.

L-лизин (фирма «ICN») растворяли в изотоническом растворе хлорида натрия и вводили внутрибрюшинно в дозах 0,15; 0,5; 1,5; 5; 15; 50; 150 и 450 мкг/кг при оценке гуморального иммунного ответа и в дозах 0,5; 5; 50 и 500 мкг/кг при исследовании активности нейтрофилов. Аминокислоту вводили 1 раз в сутки на протяжении 4-х дней после иммунизации крыс. Контрольные животные получали физиологический раствор из расчета 1 мл на 1 кг массы тела животного. Развитие гуморального иммунного ответа оценивали на 5-й день после иммунизации стандартным Т-зависимым антигеном (эритроциты барана) по количеству антителообразующих клеток (АОК) в селезенке и по количеству лимфоцитов в органе (клеточность). АОК определяли методом прямого локального гемолиза в камерах Каннигэма [7] в расчете на 106 кариоцитов и на селезенку. Активность кислород-зависимых бактерицидных механизмов нейтрофилов оценивали в спонтанном и стимулированном зимозаном тесте восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) [5]. Определяли уровни спонтанной активности нейтрофилов (сНСТ), а также активности нейтрофилов, индуцированной опсонизированным зимозаном (о/зНСТ), и индуцированной неопсонизированным зимозаном (н/зНСТ). Показатели регистрировали фотометрически при помощи аппарата Multiskan MCC/340 (Labsystems, Финляндия). Результаты тестов отражали в mOD. На основании данных показателей определяли резервы функциональной активности клеток, которые оценивали по коэффициентам активации (КАо - отношение о/зНСТ к сНСТ и КАн - отношение н/зНСТ к сНСТ). Степень дискретности клеточной активности на различные стимулы отражал коэффициент опсонизации (КО - отношение о/зНСТ к н/зНСТ). Фагоцитарную активность нейтрофилов исследовали после их инкубации в течение 30 мин при 37оС с латексом [7]. При этом фагоцитарное число (количество частиц латекса, захваченных одним нейтрофилом, ФЧ) и фагоцитарный индекс (процент нейтрофилов, участвующих в фагоцитозе, ФИ) определяли в мазках, окрашенных по Романовскому - Гимзе. Опыты поставлены на животных, находившихся в исходном состоянии и в условиях эмоционально-болевого стресса, который создавали градуально нарастающим раздражением попарно сгруппированных крыс в камере с электрифицированным полом. Максимальное напряжение на решетке составляло 60 В. Проводили 2 воздействия подряд с интервалом 1 мин в одно и то же время 1 раз в сутки на протяжении 4-х дней после иммунизации животных через 15 мин после введения L-лизина или физиологи-

* 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3, Курский государственный медицинский университет, кафедра патофизиологии. Тел.: (4712) 56-54-58

ческого раствора [4]. Достоверность полученных результатов определяли по параметрическому ґ-критерию Стьюдента [8].

Результаты исследования. Ь-лизин в большинстве использованных доз оказывал существенное влияние на развитие гуморального иммунного ответа (рис. 1). Применение аминокислоты в дозах 15 мкг/кг и 50 мкг/кг вызывало наибольшее и достоверное увеличение количества АОК, как в расчете на 106 ядерных клеток селезенки (на 118-169%, р<0,01-0,001), так и в расчете на весь орган (на 176-182%, р<0,05-0,01). Подобные изменения наблюдались также в подопытной группе животных, получавших Ь-лизин в дозе 5 мкг/кг (на 71-91%, р<0,05-0,01) и при расчете на 106 кариоцитов, и в расчете на орган. Однако значительного изменения числа лимфоцитов в селезенке не отмечалось: оно или незначительно повышалось при введении Ь-лизина в дозах 15 и 50 мкг/кг (на 7-10%, р>0,05), или снижалось при дозе 5 мкг/кг (на 11%, р>0,05). Достоверное увеличение количества АОК в расчете на 106 кариоцитов селезенки было выявлено также при использовании препарата в дозах 5, 150 и 450 мкг/кг (на 74-147%, р<0,01-

0,001). При этом статистически значимого изменения числа АОК в расчете на орган и клеточности селезенки не наблюдалось.

мкг/кг мкг/кг мкг/кг мкг/кг мкг/кг мкг/кг мкг/кг мкг/кг

Рис. 1. Изменения показателей гуморального иммунного ответа после введения Ь-лизина. Условные обозначения: столбики - изменение количества АОК из расчета на орган (заштрихованные), АОК на 106 (белые) и количества лимфоцитов в селезенке (темные) в процентах по отношению к их величинам в контрольных условиях, *- р<0,05—0,001

При использовании Ь-лизина в минимальных дозах - 0,5 и 1,5 мкг/кг, напротив, отмечалось достоверное снижение показателей интенсивности гуморального иммунного ответа -числа АОК на 106 кариоцитов селезенки (на 44%, р<0,01), а также в расчете на орган (на 39-40%, р<0,05). Подобная тенденция наблюдалась и у животных, получавших аминокислоту в дозе 0,15 мкг/кг. Статистически значимых изменений кле-точности селезенки не было выявлено. Сравнение показателей гуморального иммунного ответа контрольных групп интакт-ных животных и животных, подвергавшихся воздействию эмоционально-болевого стресса (рис. 2), показало выраженное уменьшение количества АОК в расчете на орган и на 106 карио-цитов (на 65%, р<0,01-0,001). При этом клеточность селезенки достоверно возрастала (на 57%, р<0,01). Результаты согласуются с [6] - о развитии иммуносупрессии под влиянием стресса.

Введение Ь-лизина во всех дозах в условиях эмоциональноболевого стресса вызывало статистически достоверное повышение показателей гуморального иммунного ответа по сравнению с их величинами в контрольной группе, и, таким образом, выраженность эффектов аминокислоты возрастала (рис. 2). При этом увеличение числа АОК в расчете на 106 ядерных клеток селезенки достигало 131-458% (р<0,01-0,001) и сочеталось с возрастанием этого показателя в расчете на орган - на 83-457%, (р<0,05-0,001). Наибольший прирост количества АОК наблюдался при введении Ь-лизина в дозе 450 мкг/кг, превысивший контрольные величины почти в 4,5 раза. Что же касается изменений числа кариоцитов селезенки под влиянием препарата в условиях стресса, то они были преимущественно однонаправленными (сниженными) и статистически достоверными при дозах аминокислоты 5, 50 и 150 мкг/кг. Степень снижения этого показателя достигала 25^8% (р<0,05-0,001). Использование Ь-лизина в дозах 0,15; 0,5 и 1,5 мкг/кг в условиях стресса вызывало противоположный по направленности эффект в сравнении с применением этих же доз аминокислоты у интактных животных.

Результаты исследования влияния Ь-лизина на показатели активности нейтрофилов представлены в табл. 1. Введение аминокислоты в минимальной использованной дозе 0,5 мкг/кг при-

водило к снижению всех показателей активности кислородзави-симых бактерицидных механизмов полиморфно-ядерных лейкоцитов, с достижением достоверных различий для н/зНСТ (на 15%, р<0,05). При этом отмечено снижение фагоцитарного индекса на 14% (р<0,05) и фагоцитарного числа на 25% (р<0,01). Применение Ь-лизина в дозе 5 мкг/кг вызывало статистически достоверное уменьшение фагоцитарного числа на 22% (р<0,05).

Таблица 1

Показатели (M±m) активности нейтрофилов после введения L-лизина в исходном состоянии

Группа Показатель Контроль 0,З мкг/кг З мкг/кг З0 мкг/кг З00 мкг/кг

НСТ-спонтанный (шОБ) 1,19±0,13 0,92±0,09 1,14±0,09 1,76±0,08* 1,80±0,1З*

НСТ- стимулированный опсонизирован- ным зимозаном (шОБ) 1,20±0,07 1,20±0,06 1,4З±0,16 1,7З±0,14* 1,7З±0,16*

НСТ- стимулированный неопсонизирован- ным зимозаном (шОБ) 1,47±0,09 1,2З±0,04* 1,38±0,10 1,72±0,12 1,97±0,12*

Коэффициент активации опсонизирован- ный 1,10±0,11 1,47±0,21 1,3З±0,17 1,04±0,11 1,01±0,09

Коэффициент активации неопсонизирован- ный 1,32±0,11 1,З2±0,18 1,26±0,11 0,99±0,08* 1,1З±0,09

Коэффициент опсонизации 0,83±0^ 0,98±0,07 1,08±0,13 1,10±0,1З 0,92±0,11

Фагоцитарный индекс (%) 59,27±2,75 З1,20±2,91* З7,60±2,0 З7,80±2,22 66,0±4,47

Фагоцитарное число 1,23±0,08 0,92±0,08* 0,97±0,08* 1,1З±0,08 1,38±0,11

Примечание: * - р<0,0З-0,01 по сравнению с показателями контроля

Рис. 2. Изменения показателей гуморального иммунного ответа под действием эмоционально-болевого стресса и после введения Ь-лизина. Условные обозначения: до перерыва на линии абсцисс столбики - изменение показателей гуморального иммунного ответа при стрессе в процентах по отношению к контрольным величинам; после перерыва - изменение тех же показателей после введения Ь-лизина в условиях стресса в процентах по отношению к их величинам при стрессе без введения аминокислоты, * -р<0,05-0,001

С увеличением дозы препарата, напротив, отмечалось повышение активности нейтрофилов, которое проявилось в увеличении показателей сНСТ на 47% (p<0,01) и о/зНСТ на 47% (p<0,0l) у подопытных животных, получавших L-лизин в дозе З0 мкг/кг. КАн при этом достоверно снижался (на 2З%, p^^), что свидетельствует об уменьшении функционального резерва. Использование препарата в максимальной дозе З00 мкг/кг также вызывало стимуляцию активности кислородзависимых бактерии-цидных механизмов нейтрофилов: увеличение сНСТ на З1% ф<0,0З), о/зНСТ на 46% (p<0^) и н/зНСТ на 34% ф<0,0З). Статистически достоверных изменений функционального резерва, фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа не отмечалось.

Влияние Ь-лизина на активность нейтрофилов сохранялось и в условиях эмоционально-болевого стресса (табл. 2). При сравнении показателей контрольных групп нестрессированных и стрессированных животных отмечалось повышение у последних фагоцитарного индекса (на 21%, р<0,05). Применение Ь-лизина в дозе 5 мкг/кг вызывало статистически достоверное понижение сНСТ (на 32%, р<0,01). При этом отмечался существенный рост функционального резерва: КАо увеличился на 30% (р<0,05), а КАн - на 45% (р<0,01). Показатели фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа у животных данной подопытной группы снижались на 23% и 41% (р<0,01) соответственно.

Показатели (M±m) активности нейтрофилов после введения L-лизина в условиях эмоционально-болевого стресса

Группа Показатель Контроль без стресса Контроль 0,З мкг/кг З мкг/кг З0 мкг/кг З00 мкг/кг

НСТ-спонтанный (шОБ) 1,19±0,13 1,07±0,08 0,96±0,11 0,72±0,0З* 1,18±0,09 1,28±0,06*

НСТ-стимулированный опсонизированным зимозаном (шОБ) 1,20±0,08 1,21±0,10 1,06±0,06 1,04±0,08 1,28±0,10 1,19±0,0З

НСТ-стимулированный неопсонизированным зимозаном (шОБ) 1,47±0,09 1,34±0,09 1,32±0,07 1,31±0,06 1,40±0,14 1,34±0,06

Коэффициент активации опсонизированный 1,10±0,11 1,1З±0,08 1,2З±0,17 1,49±0,13* 1,12±0,08 0,9З±0,07

Коэффициент активации неопсонизирован-ный 1,32±0,11 1,30±0,12 ^±0,20 1,89±0,14* 1,23±0,12 1,07±0,07

Коэффициент опсони-зации 0,83±0^ 0,90±0,04 0,82±0,06 0,80±0,0З 0,96±0,09 0,90±0,04

Фагоцитарный индекс (%) 59,27±2,75 71,60±3,51+ 60,40±2,60* ЗЗ,20±2,98* З3,0±1,69* 59,55±3,18*

Фагоцитарное число 1,23±0,08 1,З1±0,20 0,99±0,06* 0,89±0,07* 0,77±0,04* 0,96±0,06*

Литература

1. Белокрылов Г.А. и др. // Бюл. эксперим. биол. и медицины.- 1991.- Т. 111, № 1.- С. З3-ЗЗ.

2. Белокрылов Г .А. и др. // Бюл. эксперим. биол. и медицины.- 1996.- Т. 121, № З.- С. З09-З12.

3. Белокрылов Г.А. и др. // Бюл. эксперим. биол. и медицины.- 1999.- Т. 127, № 6.- С. 674-676.

4. Бобынцев И.И., Северьянова Л .А. // Бюл. эксперим. биол. и медицины.- 2002.- Т. 133, № З.- С. З04-З06.

З. Зинкин В.Ю., Годков М.А. // Клиническая лабораторная диагностика.- 2004.- № 8.- С. 26-29.

6. Кириллина Е.А. и др. // Иммунология.- 1990.- № 3.- С. 68-70.

7. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля; Пер. с нем.- М., 1987.

8. Плохинский НА. Биометрия.- М.: Изд-во МГУ, 1970.

9. Худоерков Р.М. // Вестн. РАМН-2001.- № 4.- С. 43-48.

10. Murthy S., Janardanasarma K. // Mol. Cell Biochem.- 1999.- Vol.197.- №1-2.- P. 13.

Таблица 2

THE INFLUENCE OF L-LYSINE ON THE HUMORAL IMMUNE RESPONSE DEVELOPMENT AND NEUTROPHIL ACTIVITY IN THE NONSTRESS AND EMOTIONAL-PAINFUL STRESS CONDITIONS

I.I. BOBYNTSEV, M.E. DOLGINTSEV,

A.A. KRYUKOV, L.A. SEVERYANOVA

Summary

Примечание:

- р<0,05 в сравнении со значениями нестрессированных животных, * сравнении с показателями контрольной группы

Однако увеличение вводимой дозы аминокислоты приводило, как и у интактных крыс, к повышению активности кисло-родзависимых бактерицидных механизмов нейтрофилов. Возрастали значения сНСТ при использовании L-лизина в дозе З00 мкг/кг (на 20%, p<0^). Фагоцитарный индекс и фагоцитарное число при этом снижались на 17-36% (p<0^). Использование препарата в дозах 0,З мкг/кг и З0 мкг/кг не вызывало достоверных изменений активности нейтрофилов в НСТ-тесте, однако приводило к уменьшению фагоцитарного индекса (на 16-26%, p^^^^l) и фагоцитарного числа (на 34-49%, p^^^^l). Полученные результаты свидетельствуют о стимулирующем влиянии L-лизина на развитие гуморального иммунного ответа как в исходных условиях - преимущественно, так и при эмоционально-болевом стрессе - особенно.

Наиболее выраженное действие препарата наблюдалось в подопытных группах стрессированных животных, у которых в достаточно широком диапазоне сравнительно малых доз L-лизин эффективно препятствовал развитию вызываемой стрессом иммуносупрессии, проявляя тем самым устойчивое стресслими-тирующее действие. Тот факт, что иммунотропное действие L-лизина не только сохранялось, но значительно усиливалось при стрессе, также позволяет сделать вывод об иммуностимулирующем эффекте препарата. Действие же аминокислоты на активность полиморфно-ядерных лейкоцитов оказалось не столь однозначным. Установлено дозозависимое влияние L-лизина на активность кислородзависимых бактерицидных механизмов ней-трофилов, а именно: ее ослабление при малых и усиление при использовании больших доз аминокислоты. В условиях эмоционально-болевого стресса это активирующее влияние L-лизина значительно уменьшалось, но возросло угнетающее действие на фагоцитарную активность нейтрофилов. Активирующее влияние L-лизина на развитие гуморального иммунного ответа является более выраженным и устойчивым к стрессу, чем его действие на эволюционно более ранние врожденные механизмы защиты. Ввыделяясь из состава белков и пептидов в естественных условиях, L-лизин может играть роль самостоятельного регулятора гуморального иммунного ответа.

The influence of relatively small doses of - p<0,05-0,01 b L-lysine on the effector events of the humoral

immune response and neutrophil activity in rats in non-stress and emotional-painful stress conditions was investigated. It was found that in non-stress condition amino acid dosedependently influenced the humoral immune response development and bactericidal oxygendependent and phagocytic neutrophil activity. In stress condition L-lysine showed essential stresslimiting action on the humoral immune response.

Key words: L-lysine, stress, neutrophil activity

УДК 616.3-008.1:616-053-058

ФАКТОРЫ РИСКА, ВЛИЯЮЩИЕ НА РАЗВИТИЕ ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ПАТОЛОГИИ В ГОРОДЕ КУРСКЕ

А.Е. АНТОНОВ, В.А. ЛАЗАРЕНКО, Ю.П. НОВОМЛИНЕЦ, Б.С. СУКОВАТЫХ*

Одним из актуальных вопросов хирургической и терапевтической гастроэнтерологии является изучение роли факторов риска в формировании патологии верхнего этажа брюшной полости. Важность этого вопроса определяется высокой заболеваемостью: в Российской Федерации за год впервые регистрируют 35,3 больных гастроэнтерологическими заболеваниями на 1000 населения [4], а в Курской области - 59,7. человек на тыс. населения в год [5]. Гастроэнтерологическая патология сопровождается показателями нетрудоспособности и инвалидизации в трудоспособном возрасте, ведет к спаду качества жизни [1-3].

Цель — изучение роли факторов риска в развитии гастроэнтерологической патологии на базе социально-гигиенического исследования. Задачи: изучение влияния ряда факторов риска на развитие гастроэнтерологических заболеваний и присоединение сопутствующей патологии, тяжести течения гастроэнтерологических заболеваний у пациентов, объединенных по возрасту и полу; разработка рекомендаций по формированию здорового образа жизни у больных гастроэнтерологической патологией.

* 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3, Курский государственный медицинский университет, кафедра патофизиологии

+