АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ МОЛЕКУЛЫ, КОТОРЫЕ СВЯЗЫВАЮТ РЕЦЕПТОР ЭПИДЕРМАЛЬНОГО ФАКТОРА РОСТА (FGFR), КОДИРУЮЩИЕ ИХ ВЕКТОРЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Антигенсвязывающая молекула (АСМ), включающая один или несколько специфически детерминируемых остатков (SDR) в одном или нескольких гипервариабельных участках (CDR) моноклонального антитела крысы ICR62, и последовательность, производную от гетерологичного полипептида, причем указанная АСМ специфически связывается с EGFR, но не вызывает клинически значимого уровня токсичности при введении субъекту в терапевтически эффективном количестве, кроме того, указанная АСМ не включает последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 51 и SEQ ID NO: 121.
2. АСМ по п.1, в которой указанные один или несколько SDR находятся в одной или нескольких CDR тяжелой цепи.
3. АСМ по п.2, в которой указанные один или несколько SDR тяжелой цепи выбраны из группы, состоящей из фенилаланина в положении 29 по Kabat, аспарагина в положении 52 по Kabat, тирозина в положении 56 по Kabat и валина в положении 100 b по Kabat.
4. АСМ по п.3, в которой указанные один или несколько SDR тяжелой цепи представляют собой тирозин в положении 56 по Kabat и валин в положении 100 b по Kabat.
5. АСМ по п.3, в которой один или несколько SDR тяжелой цепи являются фенилаланином в положении 29 по Kabat, аспарагином в положении 52 по Kabat, тирозином в положении 56 по Kabat и валином в положении 100 b по Kabat.
6. АСМ по п.1, в которой указанные один или несколько SDR находятся в одной или нескольких CDR легкой цепи.
7. АСМ по п.6, в которой указанные один или несколько SDR легкой цепи включают аспарагин в положении 50 по Kabat.
8. АСМ по п.6, в которой указанные один или несколько SDR легкой цепи включают аспарагин в положении 34 по Kabat и аспарагин в положении 50 по Kabat.
9. АСМ по п.1, включающая по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей пять или по меньшей мере шесть CDR антитела крысы ICR62, или его варианта, или его усеченной формы, содержащие по меньшей мере остатки SDR для указанных CDR.
10. АСМ по п.9, в которой указанный или указанные CDR антитела крысы ICR62 включают замещения по одному или нескольким положениям аминокислот, причем указанная АСМ сохраняет связывающую активность, сопоставимую с активностью незамещенной АСМ.
11. АСМ по п.10, в которой указанный или указанные CDR антитела крысы ICR62 включают замещения по какому-либо положению, за исключением специфически детерминируемых остатков.
12. АСМ по п.11, в которой указанный или указанные CDR антитела крысы ICR62 включают замещения по всем положениям, за исключением специфически детерминируемых остатков.
13. АСМ по п.10, в которой указанный CDR включает замещения по одному или нескольким положениям 27, 28 или 29 по Kabat в CDR1 тяжелой цепи по Chothia, положению 31 CDR1 тяжелой цепи по Kabat, положениям 52, 52а, 53 или 57 по Kabat в CDR2 тяжелой цепи по Kabat или по положению 102 по Kabat CDR3 тяжелой цепи по Kabat.
14. АСМ по п.13, в которой указанный CDR включает замещения по одному или нескольким положениям 30 или 32 по Kabat CDR1 легкой цепи по Kabat, по положениям 51, 52, 53 или 56 по Kabat CDR2 легкой цепи по Kabat, или по положению 94 по Kabat CDR3 тяжелой цепи по Kabat.
15. АСМ по одному из пп.1-14, у которой концентрация ЕС50 для связывания возрастает менее чем примерно от 10 раз до примерно 0,001 раза, возрастает менее чем примерно от 10 раз до примерно 1 раза, возрастает менее чем примерно от 10 раз до примерно 5 раза, возрастает менее чем примерно от 5 раз до примерно 0, 1 раза, возрастает менее чем примерно от 5 раз до примерно 2 раза, возрастает менее чем примерно от 3 раз до примерно 1 раза, возрастает менее чем примерно в 2 раза, возрастет менее чем примерно в 1 раз, возрастает менее чем примерно в 0,1 раса или возрастает менее чем примерно 0,001 раза по сравнению с незамещенной АСМ.
16. АСМ по п.1, причем указанная АСМ включает полипептид, содержащий последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146 и SEQ ID NO: 147.
17. Выделенный полипептид, кодирующий вариабельную область тяжелой цепи иммуноглобулина, включающую модифицированный CDR тяжелой цепи моноклонального антитела крысы ICR62 и каркасный участок тяжелой цепи, производные от одной или нескольких последовательностей гена вариабельной области зародышевой линии клеток человека, причем указанные модифицированные CDR тяжелой цепи включают одно или несколько аминокислотных замещений в положениях по Kabat, выбранных из группы, состоящей из 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 52, 52а, 53, 54, 55, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 100а, 101, 102 и какой-либо их комбинации, причем указанный полипептид, в качестве части антигенсвязывающей молекулы, специфически связывается с EGFR человека, но не вызывает клинически значимого уровня токсичности при введении субъекту в терапевтически эффективном количестве.
18. Полипептид по п.17, в котором указанные модифицированные CDR тяжелой цепи включают одно или несколько аминокислотных замещений по положениям 27, 28, 29, 31, 52, 53, 54, 58 и 102 по Kabat.
19. Полипептид по п.17, в котором указанные модифицированные CDR тяжелой цепи включают одно или несколько аминокислотных замещений по положениям 27, 28, 31, 53, 54 и 58 по Kabat.
20. Полипептид по п.17, в котором указанные модифицированные CDR тяжелой цепи включают аминокислотные замещения по всем положениям в областях CDR тяжелой цепи по Kabat и Chothia за исключением SDR.
21. Полипептид по п.17, в котором указанные модифицированные CDR тяжелой цепи включают аминокислотные замещения по всем положениям в областях CDR тяжелой цепи по Kabat и Chothia за исключением положений 29, 52, 56 и 100b по Kabat.
22. Выделенный полипептид, кодирующий вариабельную область легкой цепи иммуноглобулина, включающую модифицированные CDR легкой цепи моноклонального антитела крысы ICR62 и каркасный участок легкой цепи, производный от одной или нескольких генных последовательностей вариабельной области зародышевой линии клеток человека, причем указанные модифицированные CDR легкой цепи включают одно или несколько аминокислотных замещений в положении по Kabat, выбранном из группы, состоящей из положений 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 и какой-либо их комбинации, причем указанный полипептид, в качестве части антигенсвязывающей молекулы, специфически связывается с EGFR человека.
23. Полипептид по п.22, в котором указанные модифицированные CDR легкой цепи включают аминокислотные замещения по всем положениям в областях CDR легкой цепи по Kabat и по Chothia, за исключением SDR.
24. Полипептид по п.22, в котором указанные модифицированные CDR легкой цепи включают аминокислотные замещения по всем положениям в областях CDR легкой цепи по Kabat и по Chothia, за исключением положений 34 и 50 по Kabat.
25. Выделенный полипептид, который включает последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 138, причем указанный полипептид в качестве части антигенсвязывающей молекулы специфически связывается с EGFR человека.
26. Выделенный полипептид, который включает последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146, и SEQ ID NO: 147, причем указанный полипептид в качестве части антигенсвязывающей молекулы специфически связывается с EGFR человека.
27. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по любому из пп.17-26.
28. Клетка-хозяин, трансфецированная полинуклеотидом по п.27.
29. Вектор, включающий полинуклеотид по п.27.
30. Вектор по п.29, причем указанный вектор является репликативным вектором клонирования.
31. Вектор по п.29, причем указанный вектор является вектором экспрессии.
32. Клетка-хозяин, включающая вектор по п.29.
33. Способ получения антигенсвязывающей молекулы, способной конкурировать с моноклональным антителом крысы ICR62 за связывание с EGFR человека, включающий:
(а) культивирование клеток-хозяев по п.28 в среде в условиях, допускающих экспрессию указанного полинуклеотида, кодирующего указанную антигенсвязывающую молекулу, и
(б) выделение указанной антигенсвязывающей молекулы.
34. Способ получения антигенсвязывающей молекулы, способной конкурировать с моноклональным антителом крысы ICR62 за связывание с EGFR человека, включающий:
(а) культивирование клеток-хозяев по п.32 в среде в условиях, допускающих экспрессию указанного полинуклеотида, кодирующего указанную антигенсвязывающую молекулу, и
(б) выделение указанной антигенсвязывающей молекулы
35. АСМ, представляющая полипептид по одному из пп.17-26.
36. АСМ по одному из пп.1-14, причем указанная АСМ включает область Fc.
37. АСМ по п.36, в которой указанная область Fc была подвергнута гликоинженирингу для получения измененной олигосахаридной структуры.
38. АСМ по п.37, в которой указанная область Fc имеет уменьшенное число остатков фукозы по сравнению с соответствующей не подвергавшейся гликоинженирингу АСМ.
39. АСМ по п.36, в которой указанная область Fc была подвергнута гликоинженирингу для получения повышенной эффекторной функции или повышенного связанного сродства с рецептором Fc по сравнению с соответствующей не подвергавшейся гликоинженирингу АСМ.
40. Фармацевтическая композиция, включающая АСМ по любому из пп.1-14 и фармацевтически приемлемый носитель.
41. Способ нацеливания клеток, экспрессирующих EGFR у субъекта, включающий введение указанному субъекту композиции по п.40.
42. Способ по п.41, в котором указанные клетки сверхэкспрессируют EGFR.
43. Способ по п.41, причем указанный способ применяют для лечения расстройства, которое поддается лечению путем блокирования EGFR-опосредованной клеточной передачи сигнала, у указанного субъекта.
44. АСМ по одному из пп.1-14 для применения в получении лекарственного средства для лечения расстройства, которое поддается лечению путем блокирования EGFR-опосредованной клеточной передачи сигнала.
45. Применение АСМ по одному из пп.1-14 для получения лекарственного средства для лечения расстройства, которое поддается лечению путем блокирования EGFR-опосредованной клеточной передачи сигнала.
46. Способ по п.41, в которых указанное расстройство является клеточным пролиферативным заболеванием.
47. Способ по п.46, в которых указанное клеточное пролиферативное расстройство является раком.
48. Способ по п.47, в которых указанный рак выбран из группы, включающей рак груди, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак кожи, рак поджелудочной железы, рак легких, рак яичника, рак толстой кишки, рак простаты, рак почки и рак мозга.
49. АСМ по любому из пп.1-14, причем указанная антигенсвязывающая молекула не вызывает клинически значимого уровня токсичности при введении субъекту в терапевтически эффективном количестве.
50. АСМ по одному из пп.1-14, причем указанное терапевтически эффективное количество приводит к концентрации указанной АСМ в сыворотке примерно от 1 мкг/мл до примерно 500 мкг/мл на протяжении по меньшей мере 4 недель.
51. АСМ по п.50, причем указанное терапевтически эффективное количество приводит к концентрации указанной АСМ в сыворотке примерно от 1 мкг/мл до примерно 100 мкг/мл на протяжении по меньшей мере 4 недель.
52. АСМ по одному из пп.1-14, причем указанное терапевтически эффективное количество указанной АСМ составляет примерно от 1,0 мг/кг до примерно 15 мг/кг.
53. АСМ по одному из пп.1-14, причем токсичность указанной АСМ измеряют, используя химические показатели крови или гистопатологические индикаторы.
54. Клетка-хоязин по п.28, где клетка хозяин включает первый выделенный полинуклеотид и второй выделенный полинуклеотид
где указанный первый выделенный полинуклеотид включает последовательность, кодирующую первый полипептид, содержащий последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 138,
где указанный второй выделенный полинуклеотид включает последовательность, кодирующую полипептид, содержащий последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 146, и SEQ ID NO: 147.