ТОЧНЫЙ ТАРГЕТИНГ ГЕНОВ В ОТНОШЕНИИ КОНКРЕТНОГО ЛОКУСА КУКУРУЗЫ

1. Способ встраивания одной или более экзогенных последовательностей нуклеиновой кислоты в геном клетки кукурузы, имеющий локус E32, включающий: получение двухцепочечного разрыва в локусе E32 с использованием сайт-специфичной нуклеазы, лигирование в участок разрыва полинуклеотида, содержащего одну или более экзогенных последовательностей, в геном клетки кукурузы в локусе E32.
2. Способ по п. 1, где сайт-специфичная нуклеаза включает одну или более нуклеаз с цинковыми пальцами, выбранных из группы, представленной в таблице 1A.
3. Способ по п. 1, дополнительно включающий стадию экспрессии продукта одной или более экзогенных последовательностей.
4. Способ по п. 2, дополнительно включающий стадию экспрессии продукта одной или более экзогенных последовательностей.
5. Способ по п. 1, где одна или более экзогенных последовательностей нуклеиновой кислоты включают кодирующую последовательность, регуляторную последовательность или участок-мишень для ДНК-связующего домена.
6. Способ по п. 2, где одна или более экзогенных последовательностей нуклеиновой кислоты включают кодирующую последовательность, регуляторную последовательность или участок-мишень для ДНК-связующего домена.
7. Способ по п. 3, где одна или более экзогенных последовательностей нуклеиновой кислоты включают кодирующую последовательность, регуляторную последовательность или участок-мишень для ДНК-связующего домена.
8. Способ по п. 4, где одна или более экзогенных последовательностей нуклеиновой кислоты включают кодирующую последовательность, регуляторную последовательность или участок-мишень для ДНК-связующего домена.
9. Способ по п. 5, где кодирующая последовательность кодирует продукт, придающий: устойчивость к гербицидам, устойчивость к насекомым; устойчивость к заболеваниям; устойчивость к стрессу; изменение оксидативного стресса; повышение выхода масел; изменение содержания и состава питательных веществ; изменение физических свойств; мужскую стерильность; высыхание; устойчивость к полеганию; урожайность; изменение количества или качества крахмала; изменение качества масла; изменение качества или количества белка; изменение композиции аминокислот или их комбинации.
10. Способ по п. 6, где кодирующая последовательность кодирует продукт, придающий: устойчивость к гербицидам, устойчивость к насекомым; устойчивость к заболеваниям; устойчивость к стрессу; изменение оксидативного стресса; повышение выхода масел; изменение содержания и состава питательных веществ; изменение физических свойств; мужскую стерильность; высыхание; устойчивость к полеганию; урожайность; изменение количества или качества крахмала; изменение качества масла; изменение качества или количества белка; изменение композиции аминокислот или их комбинации.
11. Способ по п. 7, где кодирующая последовательность кодирует продукт, придающий: устойчивость к гербицидам, устойчивость к насекомым; устойчивость к заболеваниям; устойчивость к стрессу; изменение оксидативного стресса; повышение выхода масел; изменение содержания и состава питательных веществ; изменение физических свойств; мужскую стерильность; высыхание; устойчивость к полеганию; урожайность; изменение количества или качества крахмала; изменение качества масла; изменение качества или количества белка; изменение композиции аминокислот или их комбинации.
12. Способ по п. 8, где кодирующая последовательность кодирует продукт, придающий: устойчивость к гербицидам, устойчивость к насекомым; устойчивость к заболеваниям; устойчивость к стрессу; изменение оксидативного стресса; повышение выхода масел; изменение содержания и состава питательных веществ; изменение физических свойств; мужскую стерильность; высыхание; устойчивость к полеганию; урожайность; изменение количества или качества крахмала; изменение качества масла; изменение качества или количества белка; изменение
композиции аминокислот или их комбинации.
13. Способ по п. 3, где экзогенная последовательность выбрана из группы, состоящей из гена PAT и гена AAD-1.
14. Способ по п. 4, где экзогенная последовательность выбрана из группы, состоящей из гена PAT и гена AAD-1.
15. Способ по п. 1, где полинуклеотид дополнительно содержит нуклеотидные последовательности, гомологичные последовательностям в локусе E32.
16. Способ по п. 15, где гомологичные нуклеотидные последовательности фланкируют экзогенную последовательность.
17. Способ по п. 1, где полинуклеотид дополнительно содержит промотор.
18. Способ по п. 1, где одна или более из встраиваемых экзогенных последовательностей нуклеиновой кислоты передается потомству в последующих поколениях.
19. Растение кукурузы или часть растения кукурузы, содержащая одну или более экзогенных последовательностей, встроенных в локус E32 способом по п. 1.
20. Семя кукурузы, содержащее одну или более экзогенных последовательностей, встроенных в локус E32 способом по п. 1.