СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПРОЛИФЕРАТИВНОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ
METHOD FOR PROLIFERATIVE DISEASE TREATMENT

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к способу подавления резистентности по отношению к лечению ингибиторами BRAF.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Участие киназ в пролиферативных заболеваниях хорошо известно. Например, киназы, связанные с онкогенезом, включают рецепторные тирозинкиназы и серин/треонинкиназу, Raf киназу. Эти киназы играют критически важные роли в путях передачи сигналов, которые влияют на многие функции клеток, такие как пролиферация, дифференциация и жизнеспособность, и регулируют их.
Разработка средств лечения пролиферативных заболеваний остается важной задачей. Постоянно необходимы улучшенные способы лечения, в особенности с учетом многочисленных различий характеристик раковых клеток, таких как механизмы роста и выживания, их ответ на терапевтические средства и их способность мутировать и приобретать устойчивость или резистентность по отношению к таким средствам.
Киназа Raf является частью пути передачи сигналов активированной митогеном протеинкиназы (MAPK), включающего сигнальные молекулы Ras-Raf-MEK1-ERK. Raf обладает тремя различными изоформами, A-Raf, B-Raf и C-Raf, которые различаются по своей способности взаимодействовать с расположенным в обратном направлении модулятором Ras. Активирующую мутацию одного из генов Ras можно наблюдать примерно в 20% всех опухолей, и путь Ras/Raf/MEK/ERK активирован примерно в 30% всех опухолей (Bos et al., Cancer Res. 49: 4682-4689, 1989; Hoshino et al., Oncogene 18:813-822, 1999). Активирующая мутация в киназном домене B-Raf происходит примерно в 66% меланом, 12% карцином толстой кишки и 14% рака печени (Davies et al., Nature 417: 949-954, 2002; Yuen et al., Cancer Research 62: 6451-6455, 2002; Brose et al., Cancer Research 62: 6997-7000, 2002).
Малые молекулы - ингибиторы RAF, такие как вемурафениб, подтвердили предположение о том, что BRAFV600E является ключевым движущим фактором пролиферации меланомы и выживания при ее наличии, о чем свидетельствует регрессия опухолей и увеличенная продолжительность жизни пациентов на последней фазе клинических исследований. К сожалению, ответ опухоли может быть кратковременным, если быстро развивается резистентность по отношению к ингибитору RAF.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фиг. 1 проведено сопоставление введения ингибитора BRAF формулы II в непрерывном и в прерывистом режиме и показано, что без учета преимущества роста резистентных клеток введение в прерывистом режиме задерживает или предупреждает начало проявления резистентности по отношению к ингибитору BRAF.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение основано на обнаружении того, что резистентные по отношению к Raf киназе опухолевые клетки являются менее чувствительными, чем опухолевые клетки, которые чувствительны к ингибитору киназы Raf, и обладают селективным недостатком по сравнению с чувствительными клетками при отсутствии ингибитора киназы Raf. Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением резистентность по отношению к лечению ингибитором киназы Raf подавляют путем введения ингибитора киназы Raf в прерывистом режиме.
Подавление резистентности по отношению к лечению означает задержку или предупреждение начала проявления резистентности по отношению к лечению ингибитором киназы Raf.
В настоящей заявке введение в прерывистом режиме означает, что ингибитор киназы B-Raf вводят в течение некоторого периода времени, за которым следует период времени, в течение которого лечение ингибитором киназы B-Raf прекращают. Например, ингибитор киназы Raf вводят ежедневно в течение 4 недель, за которым следуют 2 недели без лечения, и этот цикл повторяют, пока пациента лечат ингибитором киназы Raf.
Ингибиторы BRAF и их применение для лечения пролиферативных заболеваний известны в данной области техники.
Вемурафениб (PLX4032) является ингибитором BRAF, который утвержден FDA (Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США) для лечения пациентов, страдающих меланомой, опухоли которых экспрессируют мутацию BRAF V600E. Вемурафениб обладает следующей химической структурой:
Другим классом соединений, которые ингибируют некоторые киназы на пути MAPK, являются простые эфиры бензимидазолилпиридила. В патенте US 7482367, который во всей своей полноте включен в настоящее изобретение в качестве ссылки, раскрыт ингибитор киназы B-RAF формулы I.
.
Другим классом соединений, которые ингибируют некоторые киназы на пути MAPK, являются пиразолопиримидины. В WO 2011/025927, которая во всей своей полноте включена в настоящее изобретение в качестве ссылки, раскрыто соединение формулы II как ингибитор киназы BRAF, в частности, с мутацией BRAFV600E:
.
В способе, предлагаемом в настоящем изобретении, ингибитором BRAF предпочтительно является соединение формулы II.
В раннем пассаже модели ксеротрансплантата первичной меланомы человека, разработанной для изучения появления резистентности по отношению к ингибитору BRAF, авторы настоящего изобретения установили, что лечение ксенотрансплантатов ингибитором BRAF в режиме длительного непрерывного введения клинически требующихся доз в течение от 4 до 6 недель приводило к появлению резистентных опухолей. Фармакодинамический (ФД) анализ отдельных опухолей показал, что путь RAF-MEK-ERK все же подавлен в резистентных опухолях, хотя степень и длительность подавления меньше, чем в чувствительных опухолях. Кроме того, кинетики пути ингибирования и восстановления для разных резистентных опухолей являются разными. Биохимические анализы показывают, что серин/треонинкиназы и модулирование отрицательных контуров обратной связи к серин/треонинкиназам могут участвовать в резистентности, а также повышающей регуляции экспрессии BRAFV600E. Фармакологическое исследование ответа опухоли дало информацию о популяциях опухолевых клеток и эволюции резистентности. Увеличение дозы лекарственного средства, вводимого мышам, у которых имеются резистентные опухоли, приводит к значительному, но временному ответу опухоли с последующим прогрессированием опухоли. С учетом данных ФД разумно заключить, что существует значительная гетерогенность опухолевых клеток и что опухоли способны быстро адаптироваться по отношению к селективному воздействию, оказываемому путем введения лекарственного средства. Дополнительное свидетельство в пользу такого заключения получено при прекращении лечения лекарственным средством мышей, которым имплантировали резистентные опухоли. После отмены лекарственного средства сначала происходила регрессия опухолей в течение от нескольких дней до недель, затем возобновлялся рост. Эти данные показывают, что адаптация, которая происходит в популяции опухолевых клеток при селективном воздействии, делает клетки менее чувствительными при отсутствии лекарственного средства.
Все резистентные опухоли обладают более значительными содержаниями p-ERK в присутствии соединения-ингибитора BRAF, чем чувствительные опухоли, и обладают более значительными скоростями восстановления после введения дозы. Кинетики восстановления для разных резистентных опухолей являются разными. Рост резистентных к BRAF опухолей зависит от наличия лекарственного средства, и отмена лекарственного средства приводит к регрессии опухолей. Резистентные клетки менее чувствительны, чем чувствительные клетки, при отсутствии соединения. В настоящем изобретении этот факт используется для подавления резистентности по отношению к лечению ингибитором BRAF путем введения ингибитора BRAF в прерывистом режиме.
Таким образом, настоящее изобретение включает способ лечения пролиферативного заболевания, который включает подавление резистентности к лечению с помощью ингибитора BRAF путем введения ингибитора BRAF киназы в прерывистом режиме.
В частности, настоящее изобретение включает способ лечения пролиферативного заболевания, характеризующегося мутацией BRAF киназы, который включает подавление резистентности к лечению с помощью ингибитора BRAF формулы II
путем введения ингибитора BRAF формулы II в прерывистом режиме.
В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение также относится к способу лечения пролиферативного заболевания, характеризующегося мутацией BRAF киназы, который включает подавление резистентности к лечению с помощью ингибитора BRAF путем введения ингибитора BRAF в прерывистом режиме.
Этот объект настоящего изобретения также относится к способу, в котором мутацией BRAF является мутация V600, такая как BRAFV600E.
Пролиферативные заболевания, которые лечат способом, предлагаемым в настоящем изобретении, включают рак, такой как, но не ограничиваясь только ими, рак мочевого пузыря, молочной железы, головного мозга, головы и шеи, печени, желчных путей, карциномы, острые и хронические лимфолейкозы, острые и хронические миелолейкозы, хронические миеломоноцитарные лейкозы, колоректальный желудка, желудочно-кишечный, стромальный, глиому, лимфомы, меланомы, множественную миелому, миелодиспластический синдром, нейроэндокринный, легких, поджелудочной железы, яичников, предстательной железы, почечно-клеточный, саркомы и щитовидной железы, такой как папиллярный рак щитовидной железы. Другие пролиферативные заболевания включают тучноклеточный лейкоз, герминомы, мелкоклеточную карциному легких, желудочно-кишечные стромальные опухоли, нейробластому и остеосаркому.
Более предпочтительно, если пролиферативным заболеванием, которое лечат способом, предлагаемым в настоящем изобретении, является меланома, которая характеризуется мутацией V600, такой как BRAFV600E, или колоректальный рак, характеризующийся мутацией V600, такой как BRAFV600E.
В важном объекте введение в прерывистом режиме включает введение ингибитора BRAF в течение 4 недель с последующим периодом в 2 недели без лечения и повторение цикла, когда пациента лечат ингибитором BRAF или до проявления резистентности. Однако дополнительное введение в прерывистом режиме включает, например, циклы, включающие 1 неделю лечения и 1 неделю без лечения, 2 недели лечения и 1 или 2 недели без лечения, 3 недели лечения и 1, 2 или 3 недели без лечения, 4 недели лечения и 1, 2, 3 или 4 недели без лечения, предпочтительно 4 недели лечения и 1 неделю без лечения или 4 недели лечения и 2 недели без лечения, 5 недель лечения и 1, 2 3, 4 или 5 недель без лечения, 6 недель лечения и 1, 2, 3, 4, 5 или 6 недель без лечения и т. д.
Настоящее изобретение также включает применение ингибитора BRAF для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения пролиферативного заболевания, при котором ингибитор BRAF вводят в прерывистом режиме. Предпочтительно применение ингибитора BRAF формулы II для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения пролиферативного заболевания, при котором ингибитор BRAF формулы II вводят в прерывистом режиме.
Приведенный ниже пример иллюстрирует настоящее изобретение.
Пример 1
3
Опухоли первичной меланомы человека Hmex1906 с помощью 3 пассажей имплантировали голым мышам. За мышами следили, пока объем имплантированных опухолей не достигал 200-400 мм. После достижения этого объема мышам два раза в день вводили 5 мг/кг ингибитора Raf (соединение формулы II) в течение 4 недель. Часть мышей лечили в непрерывном режиме, а других лечили в прерывистом режиме, включающем 4 недели лечения и 2 недели без введения лекарственного средства.
Результаты приведены на фиг. 1. Резистентность проявлялась у всех мышей, получавших соединение формулы II в непрерывном режиме, однако у мышей, которым введение проводили в прерывистом режиме, резистентность не проявлялась.