СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСНОГО ИММУНОТРОПНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ЖИВОТНЫХ
METHOD FOR PRODUCTION OF COMPLEX IMMUNOTROPIC PREPARATION FOR ANIMALS

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной медицины, а именно к способам получения комплексного иммунотропного препарата для профилактики и лечения болезней и повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза организма животных.
Известен способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза организма животных путем смешивания к 0,2-0,3% суспензии агара концентрата очищенного полисахаридного комплекса. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазол гидрохлорид и формалин, объем доводят до 100 мас.ч. Препарат обладает иммуностимулирующей активностью (RU 2332214 C1, A61K 31/429, 31/115, А61К 36/06, А61К 36/02, А61Р 37/04, 27.08.2008).
К недостаткам препарата можно отнести отсутствие бактерицидной активности к возбудителям воспалительных процессов.
Изобретение направлено на получение комплексного иммунотропного препарата для улучшения неспецифических факторов защиты организма, профилактики и лечения болезней животных, расширяющих ассортимент средств как для повышения активности клеточных и гуморальных звеньев неспецифической резистентности и специфического иммуногенеза организма, так и для повышения бактерицидной активности против возбудителей болезней животных.
Технический результат заключается в повышении неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактике и лечении болезней животных и достигается тем, что смешивается суспензия агара, концентрат полисахаридного комплекса, (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазол гидрохлорид, антибиотик цефтриаксон и формалин. Полученный препарат после стерилизации используют для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактики и лечения болезней животных.
Отличие заявляемого решения от известного заключается в том, что при введении антибиотика цефтриаксона совместно с полисахаридным комплексом и (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлоридом усиливается их действие как на факторы неспецифической резистентности и иммуногенеза, активируется фагоцитоз, так и усиливается бактерицидная активность против возбудителей болезней.
Для осуществления способа использовали следующие вещества.
1. Агар микробиологический ГОСТ 17206
2. Концентрат очищенного полисахаридного комплекса ТУ 10.07.236
3. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2.1-b]-тиазола гидрохлорид ТУ 9333-024
4. Цефтриаксон антибиотик ТУ 18621-0101-01
5. Формалин ГОСТ 1625
6. Вода дистиллированная ГОСТ 6709
Способ осуществляется следующим образом.
Пример 1. 90 мас.ч. 0,2% суспензии агара смешивали с 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 7,0 мас.ч. антибиотика цефтриаксона и 0,2 мас.ч. формалина, объем доводили до 100 мас.ч. Полученный препарат после стерилизации использовали для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактики и лечения болезней животных.
Пример 2. 90 мас.ч. 0,3% суспензии агара смешивали с 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 7,0 мас.ч антибиотика цефтриаксона и 0,2 мас.ч. формалина, объем доводили до 100 мас.ч. Полученный препарат после стерилизации использовали для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактики и лечения болезней животных.
Пример 3. Испытание препарата проводили на свиньях, подобранных по принципу пар-аналогов, в возрасте 60-65 суток. Были созданы четыре группы животных по 10 голов в каждой. Первой группе поросят вводили препарат ПС-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг массы, второй группе - препарат по изобретению (пример 1) в дозе 0,1 мл/кг массы, третьей группе - препарат по изобретению (пример 2) в дозе 0,1 мл/кг массы (опытные варианты). Четвертая группа была контрольной. Через 14 суток после введения препаратов проводили определение показателей неспецифической резистентности организма согласно общепринятым методам исследований.
Данные приведены в таблице 1. Установлено, что предлагаемый препарат улучшает гемопоэз, о чем свидетельствует повышение содержания эритроцитов, лимфоцитов, уровня гемоглобина. Отмечено улучшение показателей неспецифической резистентности: фагоцитарной активности лейкоцитов, лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови, а также уровня гаммаглобулинов. Препарат улучшает клеточные факторы иммуногенеза, о чем свидетельствует повышение активности Т-лимфоцитов, а также CD-4 и CD-8-клеток.
Пример 4. Испытание препарата для изучения профилактической и лечебной эффективности проводили на поросятах-сосунах, подобранных по принципу пар-аналогов, в возрасте 1-3 суток. Были созданы четыре группы животных по 10 голов в каждой. Первой группе поросят вводили препарат ПС-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг массы, второй группе - препарат по изобретению (пример 1) в дозе 0,1 мл/кг массы, третьей группе - препарат по изобретению (пример 2) в дозе 0,1 мл/кг массы (опытные варианты). Четвертая группа была контрольной. Изучали заболеваемость и сохранность поросят в течение 60 суток.
Данные приведены в таблице 2. Изучением заболеваемости и сохранности поросят в течение 60 суток отмечено, что в контрольной группе заболело 6 поросят или 60%, из них три поросенка пали, а три выздоровели. Вначале болезни у поросят проявлялись признаки простой диспепсии, переходящие в токсическую форму с признаками обезвоживания и эшерихиоза. Продолжительность их болезни составила 7,5±0,70 суток. При лабораторных исследованиях патматериала от павших поросят были выделены энтеропатогенные эшерхии, а также стрептококки, стафилококки, протей. Заболеваемость поросят в 1 группе, где применяли прототип (препарат ПС-2), составила 30%, во второй 20%, в третьей 10%, что в 2,0, 3,0 и 6,0 раз меньше, чем в контрольной группе. Болезнь у них протекала признаками небольшого угнетения, незначительными расстройствами пищеварения и при лечении предложенными препаратами поросята выздоравливали в течение 2-4 суток. Установлено, что применение препарата, полученного заявленным способом, способствует повышению сохранности поросят до 100%.
Пример 5. Изучение эффективности препарата при сепсисе, вызванной гноеродным стафилококком (Staphylococcus aureus). Для этого были подобраны по принципу групп-аналогов 5 групп белых мышей по 10 голов в каждой. Предварительно все белые мыши были заражены летальной дозой суспензии суточной агаровой культуры гноеродного стафилококка (Staphylococcus aureus). Через два часа после заражения животные были обработаны испытуемыми препаратами. Первой группе мышей внутримышечно ввели препарат ПС-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг массы, второй группе - антибиотик цефтриаксон в дозе 0,1 г/кг массы, третьей группе - препарат по изобретению (пример 1) в дозе 0,1 мл/кг, четвертой группе - препарат по изобретению (пример 2) в дозе 0,1 мл/кг массы, пятой группе (контрольной) вводили физиологический раствор внутримышечно в дозе 0,1 мл/кг массы. Наблюдение за животными вели в течение 10 дней.
Результаты приведены в таблице 3. Установлено, что из 10 белых мышей контрольной группы все животные заболели и пали на 4 сутки. В первой опытной группе, где был использован препарат ПС-2 (прототип), на 4 сутки заболели и пали 5 мышей, во второй группе, где использовали цефтриаксон, на 5 сутки заболели и пали 4 мышей. В группах белых мышей, где использовали заявляемые препараты, заболели и пали на 5 сутки в третьей группе одно животное, в четвертой - две мышки. Таким образом, сохранность животных от сепсиса при применении заявляемого препарата составила 80-90%, тогда как при применении предлагаемых препаратов раздельно только 50-60%, что свидетельствует о повышении эффективности комплексного препарата.
Таким образом, на основании изучения гематологических, биохимических, иммунологических показателей и результатов экспериментальных исследований и клинического состояния животных установлено, что применение предлагаемого препарата способствует повышению параметров неспецифической резистентности организма и обладает профилактической и лечебной эффективностью при инфекционных болезнях животных.
Таблица 2Показатели заболеваемости и сохранности поросят
Показатель
1 группа (прототип)
Опытная группа
Контрольная группа
препарат по примеру 1
препарат по примеру 2
Количество поросят
10
10
10
10
Заболело
3
2
1
6
Диагноз болезни
Простая диспепсия
Простая диспепсия
Простая диспепсия
Токсическая диспепсия, эшерихиоз
Выздоровело
3
2
1
3
Пало
-
-
-
3
Продолжительность болезни, суток
3,4±0,5
2,8±0,3
2,0±0,1
7,5±0,7
Заболеваемость, %
30
20
10
60
Сохранность, %
100
100
100
70
Таблица 3Показатели профилактической эффективности препаратов
Показатели
Группы животных
1 опытная
2 опытная
3 опытная
4 опытная
контрольная
Количество животных
10
10
10
10
10
Заболели
5
4
1
2
10
Пали
5
4
1
2
10
Сохранность, %
50
60
90
80
0