ПРОИЗВОДНЫЕ ОКСОАЗЕПАНИЛАЦЕТАМИДА И ОКСОАЗЕПАНИЛФЕНОКСИАЦЕТАМИДА, СОДЕРЖАЩИЕ ИХ КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЕ ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ РЕПЛИКАЦИИ ВИРУСА ГЕПАТИТА С (HCV)
OXOAZEPANYLACETAMIDE AND OXOAZEPANYLPHENOXYACETAMIDE DERIVATIVES, COMPOSITIONS CONTAINING THEM AND METHOD FOR INHIBITING HEPATITIS TYPE C VIRUS (HCV) REPLICATION

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым способам и композициям, предназначенным для ингибирования вирусов. Конкретными вариантами осуществления изобретения являются способы ингибирования вируса гепатита С (HCV) и вируса, вызывающего тяжелый острый респираторный синдром (SARS). Изобретение относится также к композициям, которые включают новые содержащие лактам соединения, которые можно применять для ингибирования вирусов.
Предпосылки создания изобретения
Гепатит представляет собой системное заболевание, которое поражает преимущественно печень. Начало заболевания характеризуется такими симптомами, как анорексия, тошнота, рвота, усталость, недомогание, артралгии, миалгии и головные боли, после чего начинается желтуха. Заболевание может характеризоваться также повышенными уровнями аминотрансфераз ACT и АЛТ в сыворотке. Количественная оценка уровней этих ферментов в сыворотке позволяет установить степень поражения печени.
Существует пять общих категорий вирусных агентов, ассоциированных с гепатитом: вирус гепатита A (HAV); вирус гепатита В (HBV); агенты двух типов ни А, ни В (НАНВ), один присутствует в кровотоке (гепатит С), а другой передается энтеральным путем (гепатит Е); и ассоциированный с HBV агент дельта (гепатит D).
Существуют две общие клинические категории гепатита, а именно острый гепатит и хронический гепатит. Для острого гепатита характерен широкий диапазон симптомов, от бессимптомного и характеризующегося отсутствием проявлений заболевания до инфекций, приводящих к смертельному исходу. Заболевание может быть субклиническим и постоянным или быстро прогрессирующим, переходящим в хроническое заболевание печени, которое сопровождается циррозом, а в некоторых случаях оно переходит в печеночно-клеточный рак. У взрослых жителей Соединенных Штатов кавказской расы острый гепатит примерно в 5-10% случаев прогрессирует, переходя в хронический гепатит В. Среди остальных случаев примерно в 65% заболевание является бессимптомным. На Дальнем Востоке заражение, как правило, происходит в перинатальный период и в 50-90% случаев прогрессирует, переходя в хроническое состояние. По-видимому, различная скорость прогрессирования заболевания связана с возрастом, в котором происходит заражение, а не с генетическими различиями между хозяевами. В Соединенных Штатах примерно 0,2% популяции хронически инфицировано, причем наибольший процент приходится на группы повышенного риска, такие как врачи, наркоманы и пациенты, подвергающиеся гемодиализу. В таких странах и областях, как Тайвань, Гонконг и Сингапур, процент людей, инфицированных гепатитом, может составлять до 10%.
В Соединенных Штатах примерно 20% пациентов с хроническим гепатитом умирают от печеночной недостаточности, а еще у 5% развивается ассоциированная с гепатитом В карцинома. На Дальнем Востоке большой процент популяции инфицирован HBV, и после продолжительной хронической инфекции (от 20 до 40 лет) примерно у 25% из этих людей развивается печеночно-клеточный рак.
После разработки серологических тестов как на гепатит А, так и на гепатит В учеными были выявлены другие пациенты с симптомами, сходными с симптомами гепатита, для которых инкубационные периоды и пути передачи соответствуют инфекционному заболеванию, но у которых отсутствуют серологические признаки инфекции, вызываемой вирусом гепатита А или В. Почти через 15 лет агент-возбудитель был идентифицирован как РНКовый вирус. Этот вирус (названный «вирусом гепатита С») не обладает гомологией с HBV, ретровирусами или другими вирусами гепатита.
Вирус гепатита С (HCV), по-видимому, является основной причиной возникающих после трансфузии и спорадических случаев заболевания гепатитом ни А, ни В (НАНВ) во всем мире, и он играет основную роль в развитии хронического заболевания печени, включая почечно-клеточный рак (Kuo и др., Science 244, 1989, сс.362-364; Choo и др., British Medical Bulletin 46 (2), 1990, сс.423-441). У примерно 150000 из примерно 3 миллионов людей, подвергающихся каждый год трансфузии, развивается острый гепатит С (Davis и др.. New Eng. J. Med. 321 (22), 1989, сс.1501-1506). Кроме того, примерно у половины людей, заболевших острым гепатитом С, развивается хронический гепатит С.
До последнего времени не существовало эффективной терапии для лечения острых или хронических инфекций, вызываемых вирусами гепатита В или С, и, как правило, пораженные гепатитом пациенты должны были смириться с тем, что заболевание идет своим чередом. Большинство противовирусных лекарственных средств, таких как ацикловир, а также попытки поддерживать иммунную систему путем применения кортикостероидов, оказались неэффективными (Alter, «Viral hepatitis and liver disease», под ред. Zuckerman, изд-во Alan R. Liss, New York, 1988, cc.537-542). Было установлено, что определенной противовирусной активностью обладает арабинозид аденосина (Jacyna и др., British Med. Bull.46, 1990, cc.368-382), хотя токсические побочные действия, связанные с этим лекарственным средством, делают его неприемлемым для такого лечения.
Другой метод лечения, приводящий к определенным благоприятным действиям в отношении хронических инфекций, вызываемых вирусами гепатита В и С, заключается в применении рекомбинантного α-интерферона (Davis и др., New Eng. J. Med. 321(22), 1989, сс.1501-1506; Perrillo и др., New Eng. J. Med. 323, 1990, сс.295-301). Однако среди пациентов с инфекциями, вызываемыми вирусом гепатита В, только примерно 35% инфицированных людей реагируют на такое лечение, а среди людей, инфицированных в перинатальном возрасте, только примерно 10% реагируют на лечение. В случае инфекций, вызываемых вирусом гепатита С, несмотря на видимое кратковременное благоприятное действие такой терапии спустя шесть месяцев после окончания лечения у половины пациентов, реагировавших на терапию, наступал рецидив. Кроме того, дополнительная трудность, связанная с терапией с использованием α-интерферона, заключается в том, что композиция часто вызывает токсические побочные действия, такие как тошнота и симптомы, напоминающие грипп, что требует уменьшения доз для чувствительных пациентов.
Печеночно-клеточный рак представляет собой заболевание, связанное с инфекциями, вызываемыми вирусами гепатита В и гепатита С. В целом считается, что печеночно-клеточный рак представляет собой наиболее распространенный тип рака во всем мире. Он является причиной примерно 1000000 смертей каждый год, большинство из которых происходят в Китае и областях Африки, расположенных южнее Сахары. Имеется четкое доказательство этиологической роли инфекции, вызываемой вирусом гепатита В, в возникновении печеночно-клеточного рака. Носители HBV имеют риск развития печеночно-клеточного рака, более чем в 90 раз превышающий этот риск у людей, не являющихся носителями HBV. Во многих случаях ДНК вируса гепатита В интегрируется в клеточный геном опухоли. В последнее время на основе данных о том, что у некоторых пациентов с печеночно-клеточным раком в кровотоке присутствуют антитела к HCV, было установлено, что вирус гепатита С также ассоциирован с печеночно-клеточным раком. В настоящее время хирургическая резекция является единственным методом лечения печеночно-клеточного рака, поскольку химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия оказываются недостаточно эффективными (Colombo и др., Lancet, 1989, сс.1006-1008; Bisceglie и др., Ann. of Internal Med. 108, 1988, сс.390-401; Watanabe и др., Int J. Cancer 48, 1991, сс.340-343; Bisceglie и др., Amer. J. Gastro. 86, 1991, сс.335-338).
Тяжелый острый респираторный синдром, или «SARS», представляет собой респираторное заболевание, часто приводящее к смертельному исходу, которое было в последние годы выявлено в Азии, Северной Америке и Европе. В последнее время было установлено, что агентом, ответственным за SARS, является неизвестный ранее коронавирус, который был недавно секвенирован в Центре по контролю и предупреждению заболеваемости (CDC).
Принимая во внимание серьезную угрозу людям, подвергнувшимся вирусным инфекциям, таким как инфекция, вызываемая HCV, и SARS, очевидно, что чрезвычайно важна разработка новых методов лечения таких инфекций. Настоящее изобретение направлено на достижение этой и других важных целей.
Краткое изложение сущности изобретения
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предложены способы лечения вирусной инфекции у страдающего от них пациента, которые заключаются в том, что пациенту вводят в терапевтически эффективном количестве замещенный оксоазепанилацетамид. В некоторых вариантах осуществления изобретения замещенный оксоазепанилацетамид представляет собой соединение формулы I:
или его стереоизомер или фармацевтически приемлемую соль, где
2
25
Q обозначает О, S, SO, SO или N(R);
25
R обозначает Н или алкил;
80
60
3
R обозначает алкил, необязательно имеющий вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R, или арилалкил, необязательно имеющий вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
3
20
21
50
2
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R), R, карбамоил, карбамоиламиногруппу, карбамоилоксигруппу, NO, азидогруппу, гидразиногруппу, гидроксиламиногруппу, сульфоксигруппу, сульфонил, сульфид, дисульфид, алкилсульфонил, S-алкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкиламиногруппу, гетероциклоалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкил, алкоксиалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкиламиноалкил, арил, арилалкил, алкиларил, арилалкиламиногруппу, арилалкиламиноалкил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, -арилалканоилалкил, -С(=O)арил, -ОС(=O)арил, -С(=O)-арилоксигруппу, -С(=O)арилалкоксигруппу, -С(=O)ариламиногруппу, арилоксиалкил, арилалканоилалкил,
-С(=O)арилалкил, -ОС(=O)арилалкил, -С(=O)арилалкилоксигруппу, арилалканоилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкилгетероарил, гетероарилалкиламиногруппу, гетероарилалкиламиноалкил, арилалкилоксигруппу и арилсульфонил; где алкоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарил, алкилсульфонил, S-алкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкиламиногруппа, гетероциклоалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкил, алкоксиалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкиламиноалкил, арил, арилалкил, алкиларил, арилалкиламиногруппа, арилалкиламиноалкил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, арилалканоилалкил,
61
60
-С(=O)арил, -ОС(=O)арил, -С(=O)-арилоксигруппа, -С(=O)арилалкоксигруппа, -С(=O)ариламиногруппа, арилоксиалкил, арилалканоилалкил, -С(=O)арилалкил, -ОС(=O)арилалкил, -С(=O)арилалкилоксигруппа, арилалканоилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкилгетероарил, гетероарилалкиламиногруппа, гетероарилалкиламиноалкил, арилалкилоксигруппа и арилсульфонил каждый необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
3
а
2
b
с
2
d
е
или две группы R, когда они присутствуют на соседних атомах углерода, вместе могут образовывать фрагмент формулы -(O)-(СН)-(O)-(СН)-(O)-, где а, с и е независимо друг от друга обозначают 0 или 1, и b и d независимо друг от друга обозначают 0, 1, 2 или 3; при условии, что фрагмент не содержит двух соседних атомов кислорода и что сумма а, b, с, d и е равна по меньшей мере 3;
1
60
61
R выбрана из группы, включающей Н, алкил, алкенил, алкинил, арил, арилалкил, гетероарил и гетероарилалкил, где алкил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R, и где алкенил, алкинил, арил, арилалкил, гетероарил и гетероарилалкил каждый необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
60
1
6
1
6
2
6
2
6
2
1
6
12
13
12
13
50
1
6
2
6
2
6
1
6
1
6
1
6
1
6
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей ОН, C-Салкоксигруппу, C-Сгидроксиалкил, С-Салкенил, С-Салкинил, CN, NO, -S-C-Салкил, NRR, -C(=O)NRR, галоген, R, гетероарил, гетероарилалкил, гетероциклоалкил, пергалоалкил, пергалоалкоксигруппу, амидиногруппу, арилалкилоксигруппу, -S-арилалкил, азидогруппу, гидразиногруппу, гидроксиламиногруппу, сульфоксигруппу, сульфонил, сульфид, дисульфид, арил и арилалкил, где C-Салкоксигруппа, С-Салкенил, С-Салкинил, -S-C-Салкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероциклоалкил, арилалкилоксигруппа, -S-арилалкил, арил и арилалкил каждый необязательно имеет вплоть до трех заместителей, выбранных из группы, включающей C-Салкил, C-Салкоксигруппу, галоген, ОН и С-Спергалоалкил;
61
60
1
6
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей R и C-Салкил;
2
n
Х обозначает простую связь, группу формулы -(СН)-, где n обозначает 1, 2, 3, 4 или 5; или группу формулы II:
2
2
20
где Y обозначает СН, S, SO, SO или N(R);
75
76
20
21
50
61
60
R и R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R) и R, где алкилоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа и гетероарил каждый необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R, и где алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
2
Z обозначает алкил, арил, арилалкил или гетероарил, каждый из которых необязательно имеет вплоть до двух заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
2
20
21
50
2
2
f
11
10
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей H, ОН, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R), R, карбамоил, карбамоиламиногруппу, карбамоилоксигруппу, NO, азидогруппу, гидразиногруппу, гидроксиламиногруппу, сульфоксигруппу, сульфонил, сульфид, дисульфид, алкилсульфонил, S-алкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкиламиногруппу, гетероциклоалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкил, алкоксиалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкиламиноалкил, арил, арилалкил, алкиларил, арилалкиламиногруппу, арилалкиламиноалкил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, -арилалканоилалкил, -С(=O)арил, -ОС(=O)арил, -С(=O)-арилоксигруппу, -C(=O)арилалкоксигруппу, -C(=O)ариламиногруппу, арилоксиалкил, арилалканоилалкил, -C(=O)арилалкил, -ОС(=O)арилалкил, -C(=O)арилалкилоксигруппу, арилалканоилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкилгетероарил, гетероарилалкиламиногруппу, гетероарилалкиламиноалкил, арилалкилоксигруппу, арилсульфонил и группу формулы -(CH)-N(R)-(R);
61
60
где алкоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарил, алкилсульфонил, S-алкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкиламиногруппа, гетероциклоалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкил, алкоксиалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкиламиноалкил, арил, арилалкил, алкиларил, арилалкиламиногруппа, арилалкиламиноалкил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, -арилалканоилалкил, -C(=O)арил, -ОС(=O)арил, -C(=O)-арилоксигруппа, -C(=O)арилалкоксигруппа, -C(=O)ариламиногруппа, арилоксиалкил, арилалканоилалкил, -C(=O)арилалкил, -ОС(=O)арилалкил, -C(=O)арилалкилоксигруппа, арилалканоилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкилгетероарил, гетероарилалкиламиногруппа, гетероарилалкиламиноалкил, арилалкилоксигруппа и арилсульфонил каждый необязательно имеют вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и где алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
f обозначает 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6;
11
R обозначает Н, алкил или арилалкил;
10
61
60
R обозначает алкил, алкенил, циклоалкил, арил, арилалкил, гетероарилалкил или циклоалкилалкил, где арилалкил, арил и гетероарил каждый необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и где алкил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
11
10
61
или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать гетероциклическое кольцо, которое необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
12
13
R и R каждая независимо друг от друга обозначает Н, алкил или арилалкил;
20
21
61
60
R и R каждая независимо друг от друга обозначает H, алкил или арилалкил, где арилалкил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R, и где алкил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и
50
R обозначает группу формулы III:
в которой m, n, о и p каждый обозначает 0 или 1 и
30
31
1
6
R и R каждая независимо друг от друга обозначает C-Салкил.
В некоторых вариантах осуществления изобретения соединение, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль по п.1 имеет формулу IV:
80
3
В других вариантах осуществления изобретения в соединениях, предлагаемых в изобретении, R обозначает бензил, необязательно имеющий вплоть до двух заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и Z имеет формулу V или VI:
2
в которой k и m каждый обозначает 0, 1 или 2, и R все могут быть одинаковыми или иметь различные значения.
3
20
21
50
61
60
В некоторых других вариантах осуществления изобретения R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R), R, арил и арилалкил; где алкоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарил, арил и арилалкил каждый необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и где алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
3
a
2
b
c
2
d
e
или две группы R, когда они присутствуют на соседних атомах углерода, вместе могут образовывать фрагмент формулы -(O)-(CH)-(O)-(CH)-(O)-; и
2
20
21
50
2
f
11
10
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R), R, арил, арилалкил и группу формулы -(CH)-N(R)-(R);
61
60
где алкоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарил, арил и арилалкил каждый необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и где алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R.
1
3
1
6
1
6
3
3
1
6
1
6
1
6
3
3
40
41
40
1
6
41
1
6
1
6
В следующих вариантах осуществления изобретения R выбрана из группы, включающей Н, бензил и алкил; R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, C-Салкил, C-Салкоксигруппу, СF, ОСF, аллилоксигруппу, галоген, пиридил, -С(O)-ОС-Салкил, тиазолил, необязательно замещенный C-Салкильной группой, феноксигруппу, необязательно имеющую вплоть до трех заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, C-Салкоксигруппу, СF и ОСF; и N(R)(R), где R обозначает C-Салкил и R обозначает С-Салкил, необязательно замещенный -ОС-Салкилом;
3
а
2
b
с
2
d
е
или две группы R, когда они присутствуют на соседних атомах углерода, вместе могут образовывать фрагмент формулы -(O)-(СН)-(O)-(СН)-(O)-; и
2
1
6
1
6
2
f
11
10
11
1
6
10
2
g
3
6
1
6
1
6
3
3
12
13
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, C-Салкил, C-Салкоксигруппу, и группу формулы -(CH)-N(R)(R), в которой f обозначает 1; R обозначает Н или C-Салкил; и R обозначает необязательно замещенную арилалкильную группу формулы -(CH)-L, где g обозначает 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и L выбран из группы, включающей Н, С-Сциклоалкил, аллил, пиридил и фенил, где фенил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, ОН, С-Салкил, OC-Салкил, СF, ОСF и N(R)(R);
11
10
или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать пиперидин, который необязательно замещен гетероциклоалкильной группой.
25
2
2
n
2
2
20
2
n
2
n
В некоторых из вариантов осуществления изобретения, дополняющих каждый из вышеописанных вариантов, Z имеет формулу V, или Z имеет формулу VI. В некоторых из других вариантов осуществления изобретения, дополняющих каждый из вышеописанных вариантов, Q обозначает О, или Q обозначает N(R), или Q обозначает S, или Q обозначает SO, или Q обозначает SO. В следующих вариантах осуществления изобретения, дополняющих каждый из вышеописанных вариантов, Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3. В следующих вариантах осуществления изобретения Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН, или Y обозначает S, или Y обозначает SO, или Y обозначает SO, или Y обозначает N(R). В других вариантах осуществления изобретения, дополняющих вышеописанные варианты, Q обозначает О; Z имеет формулу V; и Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3. В других вариантах осуществления изобретения, дополняющих вышеописанные варианты, Q обозначает О; Z имеет формулу VI; и Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3.
В других вариантах осуществления изобретения, дополняющих вышеописанные варианты, Q обозначает S; Z имеет формулу V; и Х обозначает группу формулы
2
n
2
n
2
2
2
2
-(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3. В других вариантах осуществления изобретения, дополняющих вышеописанные варианты, Q обозначает S; Z имеет формулу VI; и Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3. В следующих вариантах осуществления изобретения, дополняющих вышеописанные варианты, Q обозначает О; Z имеет формулу V; и Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН или S. В некоторых из других вариантов осуществления изобретения, дополняющих вышеописанные варианты, Q обозначает О; Z имеет формулу VI; и Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН или S. В некоторых из других вариантов осуществления изобретения, дополняющих вышеописанные варианты, Q обозначает S; Z имеет формулу V; и Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН или S. В некоторых из других вариантов осуществления изобретения, дополняющих вышеописанные варианты, Q обозначает S; Z имеет формулу VI; и Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН или S.
В некоторых из других вариантов осуществления изобретения соединения, предлагаемые в изобретении, представляют собой соединения, перечисленные ниже в таблице 1.
В определенных вариантах осуществления изобретения соединения, предлагаемые в изобретении, формулы I или формулы IV не представляют собой N-(4-этоксибензил)-N-(2-оксоазепан-3-ил)-2-феноксиацетамид или N-[(2-фторфенил)метил]-N-(2-оксоазепан-3-ил)-2,2-дифенилацетамид.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способам ослабления симптома вирусной инфекции, заключающимся в том, что пациенту, страдающему инфекцией, вводят соединение, предлагаемое в изобретении, или композицию, содержащую соединение, предлагаемое в изобретении. В определенных вариантах осуществления изобретения вирусная инфекция вызвана HCV.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способам ослабления симптома SARS, заключающимся в том, что пациенту, страдающему им, вводят соединение, предлагаемое в изобретении, или композицию, содержащую соединение, предлагаемое в изобретении.
Другими вариантами осуществления настоящего изобретения являются способы лечения заболевания, вызываемого HCV, у страдающего им пациента, заключающиеся в том, что пациенту вводят в терапевтически эффективном количестве замещенный оксоазепанилацетамид или замещенный оксоазепанилфеноксиацетамид.
Следующими вариантами осуществления настоящего изобретения являются способы лечения SARS у страдающего им пациента, заключающиеся в том, что пациенту вводят в терапевтически эффективном количестве замещенный оксоазепанилацетамид или замещенный оксоазепанилфеноксиацетамид.
Настоящее изобретение относится также к способам ингибирования HCV у пациента, заключающимся в том, что пациенту вводят в терапевтически эффективном количестве соединение, предлагаемое в изобретении.
Настоящее изобретение относится также к способам ингибирования вируса, вызывающего SARS, у пациента, заключающимся в том, что пациенту вводят в терапевтически эффективном количестве соединение, предлагаемое в изобретении.
Объектами настоящего изобретения являются также фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение, предлагаемое в изобретении.
50
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения объектами изобретения являются соединения формулы II, способность которых ингибировать HCV характеризуется величиной IС менее 10 мкМ по данным анализа, описанного ниже в примере 83 или примере 84.
Настоящее изобретение относится также к композициям, содержащим соединения, предлагаемые в изобретении, и к способам применения соединений, предлагаемых в изобретении. Описаны также методы получения соединений, предлагаемых в изобретении. Специалистам в данной области после ознакомления с настоящим описанием должны быть очевидны другие пригодные для данной цели методы. Указанные выше и другие отличительные признаки соединений, предлагаемых в изобретении, более подробно описаны ниже.
Подробное описание изобретения
Одним из объектов настоящего изобретения являются новые способы и композиции, предназначенные для ингибирования вирусных инфекций, прежде всего инфекций, вызываемых HCV, и SARS. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения объектами изобретения являются способы ослабления симптома вирусной инфекции и способы лечения вирусной инфекции, заключающиеся в том, что пациенту, страдающему инфекцией, вводят соединение, предлагаемое в изобретении. В других вариантах осуществления изобретения объектами изобретения являются способы ингибирования HCV или вируса, вызывающего SARS, заключающиеся в том, что пациенту, страдающему ими, вводят соединение, предлагаемое в изобретении. В некоторых вариантах способов, предлагаемых в изобретении, соединение, предлагаемое в изобретении, представляет собой замещенный оксоазепанилацетамид. В других вариантах осуществления изобретения соединение представляет собой замещенный оксоазепанилфеноксиацетамид. В некоторых вариантах осуществления изобретения замещенный оксоазепанилацетамид представляет собой соединение формулы I:
или его стереоизомер или фармацевтически приемлемую соль, где
2
25
Q обозначает О, S, SO, SO или N(R);
25
R обозначает Н или алкил;
80
60
3
R обозначает алкил, необязательно имеющий вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R, или арилалкил, необязательно имеющий вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
3
20
21
50
2
61
60
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R), R, карбамоил, карбамоиламиногруппу, карбамоилоксигруппу, NO, азидогруппу, гидразиногруппу, гидроксиламиногруппу, сульфоксигруппу, сульфонил, сульфид, дисульфид, алкилсульфонил, S-алкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкиламиногруппу, гетероциклоалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкил, алкоксиалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкиламиноалкил, арил, арилалкил, алкиларил, арилалкиламиногруппу, арилалкиламиноалкил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, -арилалканоилалкил, -C(=O)арил, -ОС(=O)арил, -C(=O)-арилоксигруппу, -C(=O)арилалкоксигруппу, -C(=O)ариламиногруппу, арилоксиалкил, арилалканоилалкил, -C(=O)арилалкил, -ОС(=O)арилалкил, -C(=O)арилалкилоксигруппу, арилалканоилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкилгетероарил, гетероарилалкиламиногруппу, гетероарилалкиламиноалкил, арилалкилоксигруппу и арилсульфонил; где алкоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарил, алкилсульфонил, S-алкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкиламиногруппа, гетероциклоалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкил, алкоксиалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкиламиноалкил, арил, арилалкил, алкиларил, арилалкиламиногруппа, арилалкиламиноалкил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, -арилалканоилалкил, -C(=O)арил, -ОС(=O)арил, -C(=O)-арилоксигруппа, -C(=O)арилалкоксигруппа, -C(=O)ариламиногруппа, арилоксиалкил, арилалканоилалкил, -C(=O)арилалкил, -ОС(=O)арилалкил, -C(=O)арилалкилоксигруппа, арилалканоилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкилгетероарил, гетероарилалкиламиногруппа, гетероарилалкиламиноалкил, арилалкилоксигруппа и арилсульфонил каждый необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
3
a
2
b
c
2
d
e
или две группы R, когда они присутствуют на соседних атомах углерода, вместе могут образовывать фрагмент формулы -(O)-(CH)-(O)-(CH)-(O)-, где а, с и е независимо друг от друга обозначают 0 или 1, и b и d независимо друг от друга обозначают 0, 1, 2 или 3; при условии, что фрагмент не содержит двух соседних атомов кислорода и что сумма а, b, с, d и е равна по меньшей мере 3;
1
60
61
R выбрана из группы, включающей Н, алкил, алкенил, алкинил, арил, арилалкил, гетероарил и гетероарилалкил, где алкил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R, и где алкенил, алкинил, арил, арилалкил, гетероарил и гетероарилалкил каждый необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
60
1
6
1
6
2
6
2
6
2
1
6
12
13
12
13
50
1
6
2
6
2
6
1
6
1
6
1
6
1
6
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей ОН, C-Салкоксигруппу, С-Сгидроксиалкил, С-Салкенил, С-Салкинил, CN, NO, -S-C-Салкил, NRR, -C(=O)NRR, галоген, R, гетероарил, гетероарилалкил, гетероциклоалкил, пергалоалкил, пергалоалкоксигруппу, амидиногруппу, арилалкилоксигруппу, -S-арилалкил, азидогруппу, гидразиногруппу, гидроксиламиногруппу, сульфоксигруппу, сульфонил, сульфид, дисульфид, арил и арилалкил, где C-Салкоксигруппа, С-Салкенил, С-Салкинил, -S-C-Салкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероциклоалкил, арилалкилоксигруппа, -S-арилалкил, арил и арилалкил каждый необязательно имеет вплоть до трех заместителей, выбранных из группы, включающей С-Салкил, C-Салкоксигруппу, галоген, ОН и C-Спергалоалкил;
61
60
1
6
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей R и C-Салкил;
2
n
Х обозначает простую связь, группу формулы -(СН)-, где n обозначает 1, 2, 3, 4 или 5; или группу формулы II:
2
2
20
где Y обозначает CH, S, SO, SO или N(R);
75
76
20
21
50
61
60
R и R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R) и R, где алкилоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа и гетероарил каждый необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R, и где алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
2
Z обозначает алкил, арил, арилалкил или гетероарил, каждый из которых необязательно имеет вплоть до двух заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
2
20
21
50
2
2
f
11
10
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R), R, карбамоил, карбамоиламиногруппу, карбамоилоксигруппу, NO, азидогруппу, гидразиногруппу, гидроксиламиногруппу, сульфоксигруппу, сульфонил, сульфид, дисульфид, алкилсульфонил, S-алкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкиламиногруппу, гетероциклоалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкил, алкоксиалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкиламиноалкил, арил, арилалкил, алкиларил, арилалкиламиногруппу, арилалкиламиноалкил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, -арилалканоилалкил, -C(=O)арил, -ОС(=O)арил, -C(=O)-арилоксигруппу, -C(=O)арилалкоксигруппу, -C(=O)ариламиногруппу, арилоксиалкил, арилалканоилалкил, -C(=O)арилалкил, -ОС(=O)арилалкил, -C(=O)арилалкилоксигруппу, арилалканоилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкилгетероарил, гетероарилалкиламиногруппу, гетероарилалкиламиноалкил, арилалкилоксигруппу, арилсульфонил и группу формулы -(CH)-N(R)-(R);
61
60
где алкоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарил, алкилсульфонил, S-алкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкиламиногруппа, гетероциклоалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкил, алкоксиалкиламиноалкил, гетероциклоалкилалкиламиноалкил, арил, арилалкил, алкиларил, арилалкиламиногруппа, арилалкиламиноалкил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, -арилалканоилалкил, -C(=O)арил, -ОС(=O)арил, -C(=O)-арилоксигруппа, -C(=O)арилалкоксигруппа, -C(=O)ариламиногруппа, арилоксиалкил, арилалканоилалкил, -C(=O)арилалкил, -ОС(=O)арилалкил, -C(=O)арилалкилоксигруппа, арилалканоилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, алкилгетероарил, гетероарилалкиламиногруппа, гетероарилалкиламиноалкил, арилалкилоксигруппа и арилсульфонил каждый необязательно имеют вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и где алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
f обозначает 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6;
11
R обозначает Н, алкил или арилалкил;
10
61
60
R обозначает алкил, алкенил, циклоалкил, арил, арилалкил, гетероарилалкил или циклоалкилалкил, где арилалкил, арил и гетероарил каждый необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и где алкил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
11
10
61
или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать гетероциклическое кольцо, которое необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
12
13
R и R каждая независимо друг от друга обозначает Н, алкил или арилалкил;
20
21
61
60
R и R каждая независимо друг от друга обозначает Н, алкил или арилалкил, где арилалкил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R, и где алкил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и
50
R обозначает группу формулы III:
в которой m, n, о и p каждый обозначает 0 или 1 и
30
31
1
6
R и R каждая независимо друг от друга обозначает C-Салкил.
В некоторых вариантах осуществления изобретения соединение, предлагаемое в изобретении, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль по п.1 имеет формулу IV:
80
3
В других вариантах осуществления изобретения в соединениях формулы IV R обозначает бензил, необязательно имеющий вплоть до двух заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и Z имеет формулу V или VI:
2
в которой k и m каждый обозначает 0, 1 или 2, и R все могут быть одинаковыми или иметь различные значения.
В некоторых вариантах осуществления изобретения понятие «замещенный оксоазепанилацетамид» относится к соединению, имеющему структуру, которая описывается формулой:
1
в которой А обозначает необязательно замещенную алкильную, арильную или арилалкильную группу; кольцо В представляет собой необязательно замещенное 5-9-членное кольцо, которое необязательно содержит слитое с ним необязательно замещенное арильное или гетероарильное кольцо; С обозначает группу формулы -Q-Z, как указано выше, и D обозначает группу R, как указано выше. В других вариантах осуществления изобретения понятие «замещенный оксоазепанилацетамид» относится к указанной выше структуре, которая описывается формулой:
В контексте настоящего описания понятие «алкил» относится к насыщенным углеводородным группам, включая углеводороды с прямой, разветвленной цепью и циклические углеводороды (т.е. «циклоалкильные» группы), такие, например, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, втор-пентил, трет-пентил, неопентил, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил, насыщенным системам, содержащим несколько колец, таким как декагидронафталин и адамантан и т.п., включая алкилзамещенные производные указанных выше групп.
В контексте настоящего описания понятие «алкенил» обозначает алкильную группу, которая содержит одну или несколько двойных связей углерод-углерод и не является ароматической. Понятие «алкинил» обозначает алкильную группу, которая содержит одну или несколько тройных связей углерод-углерод и не является ароматической. Понятие «пергалоалкил» обозначает алкильную группу, в которой все атомы водорода замещены атомами галогена.
В контексте настоящего описания понятие «алканоил» обозначает группу формулы -C(=O)алкил.
2
В контексте настоящего описания понятие «алкоксигруппа» обозначает фрагмент формулы -O-алкил. Понятие пергалоалкоксигруппа обозначает алкоксигруппу, в которой все атомы водорода замещены атомами галогена. Понятие «алкоксиалкил» обозначает группу формулы -алкил-O-алкил. Понятия «моноалкиламиногруппа» и «диалкиламиногруппа» обозначают соответственно группы формул -NH-алкил и N(алкил), в которой фрагменты, представляющие собой алкильные группы, могут быть одинаковыми или различными. Понятие «алкиламиноалкил» обозначает группу формулы -алкил-NR'R'', в которой R' обозначает алкил и R'' обозначает Н (т.е. «моноалкиламиноалкил») или алкил (т.е. «диалкиламиноалкил»). Понятие «алкоксиалкиламиноалкил» обозначает алкиламиноалкильную группу, в которой одна или обе алкильные группы R' и R'' замещены алкоксигруппой.
В контексте настоящего описания понятие «арил» относится к ароматической углеводородной системе, такой, например, как фенил, нафтил, фенантренил, антраценил, пиренил и т.п. В некоторых вариантах осуществления изобретения арильные группы имеют от 6 до 10 атомов углерода.
Понятие «арилалкоксигруппа» относится к алкоксигруппе, которая содержит арильную группу. Понятие «арилоксиалкил» обозначает группу формулы -алкил-O-арил. Понятие «арилкарбонил» обозначает фрагмент, имеющий формулу -C(=O)арил. Понятие «арилалканоилалкил» обозначает фрагмент, имеющий формулу алкил-С(=O)арилалкил. Понятие «арилалкилоксигруппа» обозначает группу формулы -O-арилалкил, например бензилоксигруппу. Понятие «алкилгетероарил» обозначает группу формулы гетероарил-алкил, например 4-метилпирид-2-ильную группу.
В контексте настоящего описания понятие «арилалкил» (или «аралкил») обозначает алкильную группу, к которой присоединена арильная группа, например, такую как бензильная и нафталинэтильная группы. В некоторых вариантах осуществления изобретения арилалкильные группы имеют от 7 до 11 атомов углерода.
В контексте настоящего описания понятие «алкиларил» (или «алкарил») обозначает арильную группу, к которой присоединены одна или несколько алкильных групп, такую, например, как 4-метилфен-1-ильная группа или ксилильная группа, присоединенная через фенильное кольцо.
Понятия «ариламиногруппа», «арилалкиламиногруппа» и «алкариламиногруппа» обозначают соответственно арильную, арилалкильную или алкиларильную группу, присоединенную через аминогруппу формулы -NR'', в которой R'' обозначает Н или алкил. Понятия «арилалкиламиноалкил» и «алкилариламиноалкил» обозначают алкильную группу, которая содержит арилалкиламиногруппу или алкилариламиногруппу соответственно.
В контексте настоящего описания понятие «гетероциклоалкил» относится к группе, которая содержит неароматическое кольцо, несущее один или несколько кольцевых гетероатомов (т.е. отличных от атома углерода), которые предпочтительно представляют собой О, N или S, и которая может содержать также одну или несколько присоединенных алкильных групп. Под понятие «гетероциклоалкил» подпадают также фрагменты, которые содержат экзоциклические гетероатомы, например циклоалкильное кольцо, в котором кольцевой атом углерода присоединен к экзоциклическому атому О или S через двойную связь. Под понятие «гетероциклоалкил» подпадают также фрагменты, которые имеют одно или несколько ароматических колец, слитых (т.е. имеющие общую связь с) с неароматическим гетероциклическим кольцом, такие, например, как фталимидил, диимидил нафталимидилпиромеллитовой кислоты, фталанил и бензопроизводные насыщенных гетероциклов, такие как индоленовые и изоиндоленовые группы.
Понятие «гетероциклоалкиламиногруппа» обозначает гетероциклоалкильную группу, присоединенную через аминогруппу формулы -NR'', в которой R'' обозначает Н или алкил. Понятие «гетероциклоалкиламиноалкил» обозначает гетероциклоалкиламиногруппу, присоединенную через алкильную группу. Понятие «гетероциклоалкилалкил» обозначает гетероциклоалкильную группу, присоединенную через ее экзоциклическую алкильную группу. Понятие «гетероциклоалкилалкиламиноалкил» обозначает группу формулы -алкил-NR''-гетероциклоалкилалкил, в которой R'' обозначает Н или алкил.
В контексте настоящего описания понятие «гетероарил» относится к арильной группе, содержащей один или несколько кольцевых гетероатомов (т.е. отличных от атома углерода), которые предпочтительно представляют собой О, N или S. В некоторых вариантах осуществления изобретения гетероарильные группы являются моноциклическими или бициклическими и содержат вплоть до четырех кольцевых гетероатомов. Примерами некоторых из предпочтительных гетероарильных групп являются радикалы, представляющие собой производные пиррола, пиразола, имидазола, триазолов, тетразола, пиридина, пиразина, пиридазина, пиримидина, триазинов, хинолинов, индолов, бензимидазолов и т.п.
Понятие «гетероарилкарбонил» обозначает фрагмент, имеющий формулу -C(=O)-гетероарил. Понятие «гетероарилалкил» обозначает группу формулы -алкил-гетероарил. Понятие «алкилгетероарил» обозначает группу формулы -гетероарил-алкил. Понятие «гетероарилалкиламиногруппа» обозначает группу формулы -NR''-гетероарилалкил, в которой R'' обозначает Н или алкил. Понятие «гетероарилалкиламиноалкил» обозначает группу формулы -алкил-гетероарилалкиламиногруппа.
Понятие «галоген» обозначает элемент группы VII, в том числе фтор, хлор, бром и йод.
2
2
2
2
Как правило, суффикс «сульфонил» относится к присоединению группы через группу формулы -S(=O)-. Так, понятие «алкилсульфонил» обозначает группу формулы -SO-алкил, понятие «арилсульфонил» относится к фрагменту, имеющему формулу -S(=O)-арил, и понятие «гетероарилсульфонил» относится к фрагменту, имеющему формулу -S(=O)-гетероарил.
Как правило, понятие, содержащее суффикс «окси», относится к присоединению группы через атом кислорода. Например, понятие «арилокси» относится к арильной группе, присоединенной через атом кислорода, такой как феноксигруппа, а понятие «аралкилоксигруппа» или «арилалкилоксигруппа» обозначает группу формулы -O-арилалкил, которая эквивалентна группе арилалкил-O-, которая эквивалентна группе -O-алкиларил.
В контексте настоящего описания понятие «арилоксикарбонил» относится к фрагменту, имеющему формулу -C(=O)-O-арил, например феноксикарбонилу.
В контексте настоящего описания понятие алкоксиалкоксиалкил относится к фрагменту, имеющему формулу -алкил-O-алкил-О-алкил.
В контексте настоящего описания понятие «гидроксиалкил» относится к алкильной группе, в которой атом водорода замещен группой ОН.
В контексте настоящего описания понятие «алкоксикарбонил» относится к фрагменту, имеющему формулу -C(=O)-O-алкил.
2
Понятие «боковая цепь встречающейся в естественных условиях альфа-аминокислоты» относится к боковой цепи встречающихся в естественных условиях альфа-аминокислот за исключением глицина, которые, как известно, имеют формулу HN-CHR-COOH, в которой R обозначает боковую цепь. Примерами таких встречающихся в естественных условиях аминокислот являются 20 так называемых «незаменимых» аминокислот, например серин и треонин. Другие примеры боковых цепей встречающихся в естественных условиях аминокислот можно найти в книге «Biochemistry», 3-е изд., под ред. Matthews, Van Holde и Ahern, изд-во Addison Wesley Longman, San Francisco, CA, полностью включенной в настоящее описание в качестве ссылки.
Некоторые варианты осуществления настоящего изобретения относятся к соединениям формулы IV:
80
3
в которой R обозначает бензил, необязательно имеющий вплоть до двух заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и Z имеет формулу V или VI:
2
в которой k и m каждый обозначает 0, 1 или 2, и R все могут быть одинаковыми или иметь различные значения.
3
20
21
50
61
60
В некоторых вариантах осуществления изобретения R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R), R, арил и арилалкил; где алкоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарил, арил и арилалкил каждый необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и где алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R;
3
a
2
b
c
2
d
e
или две группы R, когда они присутствуют на соседних атомах углерода, вместе могут образовывать фрагмент формулы -(O)-(CH)-(O)-(CH)-(O)-; и
2
20
21
50
2
f
11
10
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, алкил, алкоксигруппу, алкенилоксигруппу, галоген, арилоксигруппу, гетероарил, N(R)(R), R, арил, арилалкил и группу формулы -(CH)-N(R)-(R);
61
60
где алкоксигруппа, алкенилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарил, арил и арилалкил каждый необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R; и где алкил необязательно имеет вплоть до пяти заместителей, независимо друг от друга выбранных из групп R.
1
3
1
6
1
6
3
3
1
6
1
6
1
6
3
3
40
41
40
1
6
41
1
6
1
6
В некоторых из других вариантов осуществления изобретения R выбрана из группы, включающей Н, бензил и алкил; R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, C-Салкил, C-Салкоксигруппу, СF, ОСF, аллилоксигруппу, галоген, пиридил, -С(O)-ОC-Салкил, тиазолил, необязательно замещенный C-Салкильной группой, феноксигруппу, необязательно имеющую вплоть до трех заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, C-Салкоксигруппу, СF и ОСF; и N(R)(R), где R обозначает C-Салкил и R обозначает C-Салкил, необязательно замещенный -OC-Салкилом;
3
а
2
b
с
2
d
e
или две группы R, когда они присутствуют на соседних атомах углерода, вместе могут образовывать фрагмент, имеющий формулу -(O)-(СН)-(O)-(CH)-(O)-; и
2
1
6
1
6
2
f
11
10
11
1
6
10
2
g
3
6
1
6
1
6
3
3
12
13
R каждая независимо друг от друга выбрана из группы, включающей Н, ОН, C-Салкил, C-Салкоксигруппу, и группу формулы -(CH)-N(R)(R), в которой f обозначает 1; R обозначает Н или C-Салкил; и R обозначает группу формулы -(CH)-L, где g обозначает 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и L выбран из группы, включающей Н, С-Сциклоалкил, аллил, пиридил и фенил, где фенил необязательно имеет вплоть до трех заместителей, выбранных из группы, включающей галоген, ОН, C-Салкил, ОC-Салкил, СF, ОСF и N(R)(R);
11
10
или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать пиперидин, который необязательно замещен гетероциклоалкильной группой.
25
2
2
n
2
2
20
2
n
2
n
В некоторых вариантах осуществления изобретения Z имеет формулу V, или Z имеет формулу VI. В некоторых других вариантах осуществления изобретения Q обозначает О, или Q обозначает N(R), или Q обозначает S, или Q обозначает SO, или Q обозначает SO. В следующих вариантах осуществления изобретения Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3. В следующих вариантах осуществления изобретения Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН, или Y обозначает S, или Y обозначает SO, или Y обозначает SO, или Y обозначает N(R). В других вариантах осуществления изобретения Q обозначает О; Z имеет формулу V; и Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3. В других вариантах осуществления изобретения Q обозначает О; Z имеет формулу VI; и Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3.
2
n
2
n
2
2
2
2
В других вариантах осуществления изобретения Q обозначает S; Z имеет формулу V; и Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3. В других вариантах осуществления изобретения Q обозначает S; Z имеет формулу VI; и Х обозначает группу формулы -(СН)-, в которой n обозначает 2 или 3. В некоторых из других вариантов осуществления изобретения Q обозначает О; Z имеет формулу V; и Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН или S. В некоторых из других вариантов осуществления изобретения, Q обозначает О; Z имеет формулу VI; и Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН или S. В некоторых из других вариантов осуществления изобретения Q обозначает S; Z имеет формулу V; и Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН или S. В некоторых из других вариантов осуществления изобретения Q обозначает S; Z имеет формулу VI; и Х обозначает группу формулы II, в которой Y обозначает СН или S.
Некоторые другие варианты осуществления изобретения относятся к соединениям, представленным ниже в таблице 1.
Пред ставленные в настоящем описании замещенные оксоазепанилацетамидные производные легко можно синтезировать, как показано на схеме 1, что более подробно проиллюстрировано в разделе «Примеры».
Схема 1
Следует иметь в виду, что путем выбора в качестве исходных продуктов соответствующим образом замещенного аминолактама и альдегида можно получать широкое разнообразие замещенных оксоазепанилацетамидных производных, включая соединения формул (I) и (IV). Так, некоторые варианты осуществления изобретения относятся к способам получения соединений формул (I) и (IV) согласно схеме 1. Кроме того, подразумевается, что под объем настоящего изобретения подпадают промежуточные продукты, а также соответствующие способы их синтеза, проиллюстрированные на схеме 1 и описанные ниже в примерах. При применении этих способов переменные, входящие в формулы соединений, могут принимать любые значения из числа указанных для соединений формул (I) и (IV).
Подразумевается, что под объем настоящего изобретения подпадают все возможные протонированные и непротонированные формы указанных в настоящем описании соединений, а также их сольваты и фармацевтически приемлемые соли. Подразумевается также, что каждое из конкретно указанных в настоящем описании соединений включает все возможные таутомеры и стереоизомеры.
В тексте настоящего описания соединения представлены с помощью их общих и индивидуальных химических формул, а также названий. Во всех таких случаях подразумевается, что под объем настоящего изобретения подпадают все индивидуальные стереоизомеры указанных в настоящем описании соединений, а также их рацемические формы.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, и их фармацевтически приемлемые соли можно применять для лечения вирусных инфекций у животных и человека, прежде всего инфекций, вызываемых HCV, и SARS. Соединения, предлагаемые в изобретении, можно применять индивидуально или в составе фармацевтической композиции, содержащей одно или несколько соединений, предлагаемых в изобретении, в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями. Таким образом, другими объектами настоящего изобретения являются фармацевтические композиции и способы лечения вирусных инфекций с применением в качестве действующих веществ новых соединений, представленных в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления изобретения соединения, предлагаемые в изобретении, можно получать в виде солей, например в виде аминовых солей (но не ограничиваясь ими), которые могут содержать любой из многочисленных фармацевтически приемлемых противоионов. Пригодными противоионами для аминовых солей являются ацетат, адипат, аминосалицилат, ангидрометиленцитрат, аскорбат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бромид, цитрат, камфорат, камфорсульфонат, хлорид, эстолат, этансульфонат, фумарат, глюкогептаноат, глюконат, глутамат, лактобионат, малат, малеат, манделат, метансульфонат, пантотенат, пектинат, фосфат/дифосфат, полигалактуронат, пропионат, салицилат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат и тозилат. Специалисту в данной области должны быть известны другие пригодные типы анионов.
Соединения, предлагаемые в изобретении, можно включать в состав фармацевтических композиций, которые могут содержать одно или несколько соединений, предлагаемых в изобретении, и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей. Соединения, предлагаемые в изобретении, можно вводить в порошкообразной или кристаллической форме, в составе жидкого раствора или суспензии. Их можно вводить различными путями, обеспечивающими эффективность при введении противовирусных агентов, включая (но не ограничиваясь ими) местное введение, или введение оральным путем, или парентерально с помощью инъекции (например, внутривенно или внутримышечно).
При введении с помощью инъекции соединения, предлагаемые в изобретении, предпочтительно вводят в виде стандартных доз, находящихся в ампулах или в контейнерах, содержащих несколько доз. Предназначенные для инъекции композиции могут находиться в таких формах, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных наполнителях, и они могут включать различные агенты, необходимые для приготовления препарата. В альтернативном варианте действующее вещество может находиться в форме порошка (лиофилизированного или нелиофилизированного), предназначенного для восстановления перед осуществлением введения с помощью пригодного наполнителя, такого как стерильная вода. В предназначенных для инъекции композициях носитель, как правило, представляет собой стерильную воду, физиологический раствор или другую пригодную для инъекции жидкость, например арахисовое масло для внутримышечных инъекций. В композицию можно включать также различные забуферивающие агенты, консерванты и т.п.
Композиции для местного применения можно приготавливать с использованием носителей, таких как гидрофобные или гидрофильные основания, с получением мазей, кремов, лосьонов, с использованием водных, маслянистых или спиртовых жидкостей с получением лекарственного вещества в вязком носителе (наносимые кисточкой) или с использованием сухих разбавителей с получением порошков.
Композиции для орального введения могут находиться в таких формах, как таблетки, капсулы, суспензии для орального введения и растворы для орального введения. В композициях для орального введения можно применять носители, такие как обычные агенты, необходимые для приготовления композиций, и они могут обладать способностью к пролонгированному высвобождению, а также способностью к быстрому высвобождению.
Предназначенная для введения доза зависит в большой степени от состояния и размера пациента, подлежащего лечению, пути и частоты введения, чувствительности патогена к конкретному выбранному соединению, степени вирулентности патогена и других факторов. Эти вопросы, однако, находятся в компетенции лечащего врача согласно принципам лечения, хорошо известным в области лечения вирусных инфекций. Другим фактором, влияющим на точность схемы приема лекарственного средства, который не связан с природой инфекции и специфическими отличительными особенностями индивидуума, является молекулярная масса соединения.
Под объем представленного в настоящем описании изобретения подпадает также способ лечения вирусной инфекции, заключающийся в том, что млекопитающему вводят соединение, предлагаемое в изобретении, в количестве, эффективном для лечения инфекции. Одним из предпочтительных путей введения противовирусных соединений, предлагаемых в изобретении, является введение оральным и парентеральным путем, например с помощью внутривенной (i.v.) инфузии, внутривенного (i.v.) болюса и внутримышечной (i.m.) инъекции.
Соединения, представленные в настоящем описании, можно приготавливать в виде фармацевтических композиций путем смешения с фармацевтически приемлемыми нетоксичными эксципиентами и носителями. Как указано выше, такие композиции можно приготавливать в форме, пригодной для парентерального введения, прежде всего в форме жидких растворов или суспензий; или для орального введения, прежде всего в форме таблеток или капсул; или для интраназального введения, прежде всего в форме порошков, капель в нос или аэрозолей; или для введения через кожу, например, с помощью трансдермальных бляшек; или их можно приготавливать в любой другой форме, пригодной для указанных и других путей введения, как это должно быть очевидно специалистам в данной области.
Композиции может быть удобно вводить в виде стандартных доз, и их можно приготавливать любыми методами, хорошо известными в области фармацевтики, например, как описано в справочнике Remington's Pharmaceutical Sciences (изд-во Mack Pub. Co., Easton, PA, 1980). Препараты для парентерального введения могут содержать в качестве обычных эксципиентов стерильную воду или физиологический раствор, полиалкиленгликоли, такие как полиэтиленгликоль, масла растительного происхождения, гидрогенизированные нафталины и т.п. В качестве эксципиентов для контроля высвобождения действующих веществ можно применять, в частности, биосовместимый биоразложимый лактидный полимер, лактидный/гликолидный сополимер или сополимеры полиоксиэтилена/полиоксипропилена. К другим системам, которые можно применять для парентерального введения указанных действующих веществ, относятся частицы сополимера этилена/винилацетата, осмотические насосы, имплантируемые инфузионные системы и липосомы. Препараты для введения с помощью ингаляции содержат в качестве эксципиентов, например, лактозу, или можно применять водные растворы, содержащие, например, простой полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир, гликохолат и дезоксихолат, или маслянистые растворы для введения в форме капель для носа, или гели, предназначенные для интраназального введения. Препараты для парентерального введения могут содержать также гликохолат для буккального введения, салицилат для ректального введения или лимонную кислоту для вагинального введения. Препараты для трансдермальных бляшек предпочтительно представляют собой липофильные эмульсии.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно применять в качестве единственного действующего вещества, присутствующего в фармацевтическом средстве, или можно применять в сочетании с другими действующими веществами, например другими агентами, которые можно применять для лечения вирусных инфекций.
Концентрации представленных в настоящем описании соединений в терапевтической композиции должны варьироваться в зависимости от многих факторов, включая предназначенную для введения дозу лекарственного средства, химические характеристики (например, гидрофобность) используемых соединений и путь введения. Композиции, предназначенные для введения человеку в виде стандартной дозы, как в жидкой, так и твердой форме, могут содержать от примерно 0,01% до примерно 99% действующего вещества, предпочтительно диапазон составляет от примерно 0,1 до 60%. Например, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, могут присутствовать в эффективных с точки зрения ингибирующего действия количествах в предназначенном для парентерального введения водном физиологическом буферном растворе, содержащем примерно от 0,1 до 10 мас./об.%. соединения.
Типичные диапазоны доз составляют от примерно 1 мг/кг до примерно 1 г/кг веса тела в день; предпочтительный диапазон доз составляет от примерно 0,01 до 100 мг/кг веса тела в день. Такие препараты, как правило, содержат обладающие ингибирующей эффективностью количества соединения, предлагаемого в изобретении. Однако предпочтительная доза предназначенного для введения лекарственного средства зависит от таких переменных, как тип и степень прогрессирования заболевания или нарушения, общее состояние здоровья конкретного пациента, относительная биологическая эффективность выбранного соединения и состав эксципиента для соединения и путь введения.
Хотя настоящее изобретение описано применительно к конкретным предпочтительным вариантам его осуществления, приведенные ниже примеры служат только для иллюстрации изобретения и не направлены на ограничение его объема.
Для номенклатуры рассматриваемых соединений использовали программу ACD Name, версия 5.04 (28 мая 2001 г.), которую можно получить от фирмы Advanced Chemistry Development, Inc., и программу с товарным знаком ChemInnovation NamExpert + Nomenclator™, которую можно получить от фирмы ChemInnovation Software, Inc. Некоторые из исходных продуктов обозначали с использованием стандартной номенклатуры ИЮПАК.
Примеры
Пример 1
Получение 3-метил-4-пропоксибензальдегида
4-Гидрокси-3-метилбензальдегид [(1); 16,65 г; 1 экв.], 1-бромпропан [12,2 мл; 1,1 экв.], йодид натрия [4,58 г; 0,25 экв.], карбонат калия [33,8 г; 2 экв.] и ДМФ (300 мл) добавляли в высушенную круглодонную колбу. Сверху на колбу устанавливали конденсатор и резиновый мембранный разделительный элемент, затем продували аргоном. Реакционную смесь нагревали до 75°С в течение 12 ч в атмосфере аргона. Затем реакционную смесь сливали в делительную воронку, содержащую воду (900 мл) и этилацетат (900 мл). Органический слой промывали еще дважды водой и дважды соляным раствором и сушили над сульфатом натрия. Органический фильтрат концентрировали в вакууме, получая 3-метил-4-пропоксибензальдегид в виде неочищенного масла. Продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Пример 2
Получение (3S)-3-{[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]амино}азапергидроэпин-2-она
3-метил-4-пропоксибензальдегид (9,72 г; 1 экв.), (S)-альфа-амино-омега-капролактам [6,99 г; 1 экв.], триацетоборогидрид натрия (34,68 г; 3 экв.) и метиленхлорид (220 мл) добавляли в круглодонную колбу. Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Для прекращения реакции осторожно добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (200 мл). Образовавшуюся смесь разбавляли этилацетатом (200 мл) и встряхивали в делительной воронке. После выделения органических слоев водный слой снова экстрагировали двумя дополнительными порциями этилацетата (всего 400 мл). Органические слои объединяли и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и органический фильтрат концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт. Образовавшееся неочищенное масло растворяли в метиленхлориде и очищали с помощью экспресс-хроматографии с использованием градиента метиленхлорид/метанол. Очищенные фракции объединяли и концентрировали в вакууме, получая (3S)-3-{[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]амино}азапергидроэпин-2-он в виде масла.
Пример 3
Получение N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-(4-карбонилфенокси)-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]ацетамида
В круглодонную колбу добавляли (3S)-3-{[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]амино}азапергидроэпин-2-он (4,00 г), 4-формилфеноксиуксусную кислоту (4,96 г; 2 экв.), ЭДКИ (5,28 г; 2 экв.) и ТГФ (30 мл). Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. После этого смесь концентрировали в вакууме и разбавляли этилацетатом (50 мл) и водой (50 мл). Образовавшуюся суспензию помещали в делительную воронку и интенсивно встряхивали. Затем органические слои выделяли и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и органический фильтрат концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт. Образовавшийся неочищенный твердый продукт растворяли в метиленхлориде и очищали с помощью экспресс-хроматографии с использованием градиента метиленхлорид/метанол. Очищенные фракции объединяли и концентрировали в вакууме, получая N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-(4-карбонилфенокси)-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]ацетамид в виде чистого твердого вещества.
Пример 4
Получение N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-{4-[(циклогексиламино)метил]фенокси}-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]ацетамида
В круглодонную колбу добавляли N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-(4-карбонилфенокси)-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]ацетамид (0,30 г; 1 экв.), циклогексиламин (0,30 мл; 4 экв.) и метиленхлорид (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. К смеси добавляли триацетоксиборогидрид натрия (0,42 г; 3 экв.). Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре еще в течение 3 ч. Для прекращения реакции осторожно добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (3 мл). Образовавшуюся смесь разбавляли этилацетатом (10 мл) и встряхивали в делительной воронке. После выделения органических слоев водный слой снова экстрагировали двумя дополнительными порциями этилацетата (всего 20 мл). Органические слои объединяли и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и органический фильтрат концентрировали в вакууме, получая неочищенный твердый продукт. После этого твердую смесь растворяли в ДМСО и очищали с помощью препаративной ЖХВР. Затем очищенные фракции объединяли и лиофилизировали, получая N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-{4-[(циклогексиламино)метил]фенокси}-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]ацетамид в виде очищенной соли трифторуксусной кислоты (ТФК) белого цвета.
Пример 5
Получение N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-N-{[3-(N-циклогексилкарбамоил)-4-пропоксифенил]метил}-2-феноксиацетамида (8)
Указанное соединение синтезировали согласно приведенной ниже схеме 2.
Схема 2
а) 3-Метил-4-пропоксибензальдегид (2)
В высушенную круглодонную колбу добавляли 5-формилсалициловую кислоту (8,76 г; 1 экв.), 1-бромпропан (10,1 мл; 2,1 экв.), йодид натрия (3,95 г; 0,5 экв.), карбонат калия (21,87 г; 3 экв.) и ДМФ (211 мл). Сверху на колбу устанавливали конденсатор и резиновый мембранный разделительный элемент, затем продували аргоном. Реакционную смесь нагревали до 75°С в течение 12 ч в атмосфере аргона. Затем реакционную смесь сливали в делительную воронку, содержащую воду (900 мл) и этилацетат (900 мл). Органический слой промывали еще дважды водой и дважды соляным раствором и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и органический фильтрат концентрировали в вакууме, получая пропил-5-карбонил-2-пропоксибензоат (1). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
б) Пропил-5-{[((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)амино]метил}-2-пропоксибензоат (4)
В круглодонную колбу добавляли 3-метил-4-пропоксибензальдегид (6,00 г; 1 экв.), (S)-альфа-амино-омега-капролактам (3,69 г; 1,2 экв.), триацетоксиборогидрид натрия (15,24 г; 3 экв.) и метиленхлорид (240 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Для прекращения реакции осторожно добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (200 мл). Образовавшуюся смесь разбавляли этилацетатом (200 мл) и встряхивали в делительной воронке. После выделения органических слоев водный слой снова экстрагировали двумя дополнительными порциями этилацетата (всего 400 мл). Органические слои объединяли и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и органический фильтрат концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт. Образовавшееся неочищенное масло растворяли в метиленхлориде и очищали с помощью экспресс-хроматографии с использованием градиента метиленхлорид/метанол. Очищенные фракции объединяли и концентрировали в вакууме, получая пропил-5-{[((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)амино]метил}-2-пропоксибензоат в виде масла.
в) Пропил-5-{[N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-феноксиацетиламино]метил}-2-пропоксибензоат (6)
В круглодонную колбу добавляли пропил-5-{[((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)амино]метил}-2-пропоксибензоат (4,52 г; 1 экв.), феноксиацетилхлорид (2,1 мл; 1,2 экв.), основание Хюнига (2,6 мл; 1,2 экв.) и ТГФ (125 мл). Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. После этого реакцию прекращали путем добавления воды (3 мл) и концентрировали в вакууме для удаления ТГФ. Неочищенную смесь растворяли в этилацетате (200 мл) и промывали водой (100 мл). Затем органический слой выделяли и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и органический фильтрат концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт. Образовавшееся неочищенное масло растворяли в метиленхлориде и очищали с помощью экспресс-хроматографии с использованием градиента метиленхлорид/метанол. Очищенные фракции объединяли и концентрировали в вакууме, получая пропил-5-{[N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-феноксиацетиламино]метил}-2-пропоксибензоат (6) в виде чистого твердого вещества.
г) 5-{[N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-феноксиацетиламино]метил}-2-пропоксибензойная кислота (7)
В круглодонную колбу добавляли пропил-5-{[N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-феноксиацетиламино]метил}-2-пропоксибензоат (1,15 г; 1 экв.), гидроксид лития (0,278 г; 5 экв.), ТГФ (11,5 мл) и воду (11,5 мл). Колбу снабжали конденсатором и нагревали до 48°С. После завершения реакции (примерно через 18 ч, через каждый час осуществляли мониторинг хода реакции с помощью ТСХ) смесь концентрировали в вакууме для удаления ТГФ. Реакционную смесь подкисляли до рН 6 путем добавления 0,5 М водной лимонной кислоты. Осадок отфильтровывали, промывали водой и сушили путем откачивания воздуха, получая 5-{[N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-феноксиацетиламино]метил}-2-пропоксибензойную кислоту (7) в виде чистого твердого вещества белого цвета.
д) N-((35)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-N-{[3-(N-циклогексилкарбамоил)-4-пропоксифенил]метил}-2-феноксиапетамид (8)
В сосуд добавляли 5-{[N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-феноксиацетиламино]метил}-2-пропоксибензойную кислоту (0,020 г; 1 экв.), циклогексиламин (10,0 мкл; 2 экв.), ЭДКИ (0,017 г; 2 экв.) и ДМФ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Затем смесь фильтровали через пробку для удаления нерастворившихся частиц. Неочищенный раствор непосредственно инъецировали в колонку для препаративной ЖХВР. Очищенные фракции объединяли и концентрировали в вакууме, получая N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-N-{[3-(N-циклогексилкарбамоил)-4-пропоксифенил]метил}-2-феноксиацетамид (8) в виде чистого твердого вещества.
Пример 6
Получение N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-бром-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]ацетамида
В высушенную круглодонную колбу добавляли (3S)-3-{[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]амино}азапергидроэпин-2-он (3,00 г; 1 экв.), основание Хюнига (2,4 мл, 1,1 экв.) и ТГФ (100 мл). Затем смесь охлаждали в атмосфере аргона до 0°С с помощью бани со льдом/водой. К полученной выше охлажденной смеси добавляли по каплям в течение 5 мин бромацетилхлорид (1,3 мл; 1,5 экв.). Образовавшийся раствор перемешивали еще в течение 30 мин при 0°С. После этого реакцию прекращали путем добавления воды (3 мл) и концентрировали в вакууме для удаления ТГФ. Неочищенную смесь растворяли в этилацетате (200 мл) и промывали водой (100 мл). Затем органический слой выделяли и сушили над сульфатом натрия. Сульфат натрия отфильтровывали и органический фильтрат концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт. Образовавшееся неочищенное масло растворяли в метиленхлориде и очищали с помощью экспресс-хроматографии с использованием градиента метиленхлорид/метанол. Очищенные фракции объединяли и концентрировали в вакууме, получая N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-бром-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]ацетамид в виде чистого твердого вещества.
Пример 7
Получение N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]-2-(фениламино)ацетамида
В круглодонную колбу добавляли N-((38)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-2-бром-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]ацетамид (0,250 г; 1 экв.), анилин (0,11 мл; 2 экв.), йодид натрия (0,023 г; 0,25 экв.), карбонат калия (0,168 г; 2 экв.) и ДМФ (2,4 мл). После этого реакционную смесь нагревали до 75°С в течение 8 ч в атмосфере аргона. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали через ватную пробку для удаления избытка нерастворившихся солей, а именно йодида натрия и карбоната калия. Неочищенный раствор очищали с помощью препаративной ЖХВР. Очищенные фракции объединяли и концентрировали в вакууме, получая N-((3S)-2-оксоазапергидроэпин-3-ил)-N-[(3-метил-4-пропоксифенил)метил]-2-(фениламино)ацетамид в виде соли ТФК.
Следует иметь в виду, что общие процедуры, описанные в примере 7, можно применять для получения широкого разнообразия соединений, предлагаемых в изобретении. Например, бромид, используемый в примере 7, можно заменять любым из многочисленных нуклеофилов, таких как анилины, тиофенолы, алкоксиды и т.д., используя те же самые общие условия.
Примеры 8-82
Репрезентативные замещенные оксоазепанилацетамидные производные
Репрезентативные замещенные оксоазепанилацетамидные производные, предлагаемые в изобретении, представлены в таблице 2. В таблице 2 МН+ относится к молекуле иона, выявляемой с помощью масс-спектрометрии.
Процедуры анализа
Пример 83
Количественная оценка РНК репликона HCV в линиях клеток (анализ HCV с использованием клеток)
3
2
Линии клеток Huh-11-7 или Huh-9-13, несущие репликоны HCV (Lohmann и др., Science 285, 1999, сс.110-113), высевали из расчета 5×10 клеток/лунку в 96-луночные планшеты и подпитывали средой, содержащей DMEM (с высоким содержанием глюкозы), 10% фетальной телячьей сыворотки, пенициллин-стрептомицин и заменимые аминокислоты. Клетки инкубировали в термостате в атмосфере, содержащей 5% СО, при 37°С. После завершения периода инкубации экстрагировали общую РНК и очищали из клеток с помощью набора Qiagen RNeasy 96 (каталожный номер 74182). Для того чтобы путем амплификации РНК HCV получить количество продукта, достаточное для обнаружения с помощью специфического для HCV зонда (см. ниже), применяли праймеры, специфические для HCV (см. ниже), опосредующие как обратную транскрипцию (ОТ) РНК HCV, так и амплификацию кДНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), с использованием набора TaqMan One-Step RT-PCR Master Mix (фирма Applied Biosystems, каталожный номер 4309169). Праймеры для ОТ-ПЦР имели следующие нуклеотидные последовательности, расположенные в NS5B-области генома HCV:
Прямой праймер «RBNS5bfor» HCV: 5'GCTGCGGCCTGTCGAGCT
Обратный праймер «RBNS5Brev» HCV: 5'CAAGGTCGTCTCCGCATAC
Обнаружение продукта ОТ-ПЦР осуществляли с использованием системы обнаружения последовательности (Sequence Detection System (SDS)) типа Applied Biosystems (ABI) Prism 7700, которая позволяет обнаруживать флуоресценцию, испускаемую, когда зонд, меченный флуоресцентным красителем-репортером и красителем-гасителем, подвергается процессингу в ходе ПЦР. Повышение уровня флуоресценции измеряли в ходе каждого цикла ПЦР, и оно отражает увеличение количества продукта ОТ-ПЦР. Конкретно количественная оценка основана на определении порогового цикла, при котором график уровня амплификации пересекает определенный пороговый уровень флуоресценции. Сравнение пороговых циклов для образца с известным стандартом представляет собой высокочувствительный метод измерения относительной концентрации матрицы в различных образцах (Бюллетень для пользователя фирмы ABI №2, 11 декабря 1997 г.). Данные анализировали с помощью программы SDS фирмы ABI, версия 1.7. По относительной концентрации матрицы можно определять количества копий РНК с использованием стандартной кривой для РНК HCV с известным количеством копий (Бюллетень для пользователя фирмы ABI №2, 11 декабря 1997 г.).
Обнаружение ОТ-ПЦР-продукта осуществляли с использованием следующего меченого зонда:
5' FAM-CGAAGCTCCAGGACTGCACGATGCT-TAMRA,
FAM - флуоресцентный краситель-репортер,
TAMRA - краситель-гаситель.
ОТ-реакцию проводили при 48°С в течение 30 мин, после чего осуществляли ПЦР. Для ПЦР с использованием системы обнаружения последовательности типа ABI Prism 7700 задавали следующие параметры термоячейки: один цикл при 95°С, 10 мин, затем 35 циклов, каждый из которых включал одну инкубацию при 95°С в течение 15 с и вторую инкубацию при 60°С в течение 1 мин.
Для стандартизации данных относительно используемой в качестве внутреннего стандарта молекулы в клеточной РНК осуществляли ОТ-ПЦР с использованием глицеральдегид-3-фосфат-дегидрогеназы (GAPDH) клеточной матричной РНК. Количество копий GAPDH является очень стабильным в используемых линиях клеток. ОТ-ПЦР с использованием GAPDH осуществляли на точно таком же образце РНК, для которого определяли количество копий HCV. GAPDH-праймеры и - зонды, а также стандарты для определения количества копий входят в состав набора ABI Pre-Developed TaqMan Assay (каталожный номер 4310884Е). Для расчета активности соединений, тестируемых в отношении ингибирования репликации РНК HCV, использовали соотношение РНК HCV/GAPDH.
Пример 84
Активность соединений в качестве ингибиторов репликации HCV (анализ с использованием клеток) в содержащих репликон клеточных линиях Huh-7
3
50
Влияние конкретного противовирусного соединения на уровни РНК репликона HCV в клетках линии Huh-11-7 или -9-13 определяли путем сравнения количества РНК HCV, нормализованного относительно GAPDH (например, соотношение HCV/GAPDH) в клетках, обработанных соединением, и в клетках, обработанных контролями, приводящими к 0%-ному ингибированию и к 100%-ному ингибированию. Конкретно метод заключался в том, что клетки высевали из расчета 5×10 клеток/лунку в 96-луночный планшет и инкубировали с: 1) средами, содержащими 1% ДМСО (контроль, приводящий к 0%-ному ингибированию), 2) 100 международных единиц, МЕ/мл интерферона-альфа 2b в средах/1% ДМСО или 3) средах/1% ДМСО, содержащих фиксированную концентрацию соединения. Затем 96-луночные планшеты, как описано выше, инкубировали при 37°С в течение 3 дней (первичный скрининговый анализ) или в течение 4 дней (для определения IC). Процент ингибирования определяли согласно следующей формуле:
% ингибирования = [100-((S-C2)/C1-C2))]×100,
в которой
S = отношение количество копий РНК HCV/количество копий РНК GAPDH в образце,
С1 = отношение количества копий РНК HCV/количество копий РНК GAPDH в контроле, приводящем к 0%-ному ингибированию (среды/1% ДМСО),
С2 = отношение количества копий РНК HCV/количество копий РНК GAPDH в контроле, приводящем к 100%-ному ингибированию (100 МЕ/мл интерферона-альфа 2b).
50
50
Кривые зависимости ответа от дозы ингибитора получали путем добавления в лунки серийных трехкратных разведений (3 log) соединения начиная с наибольшей концентрации конкретного соединения, составляющей 10 мкМ, и заканчивая наименьшей концентрацией, составляющей 0,01 мкМ. В том случае, если значение IС не находилось в диапазоне линейного изменения зависимости, использовали дополнительные серийные разведения (например, от 1 мкМ до 0,001 мкМ). Значение IC определяли с помощью программы IDBS Activity Base с использованием Microsoft Excel «XL Fit», в которой А = величина, соответствующая 100%-му ингибированию (100 МЕ/мл интерферона-альфа 2b), В = величина, соответствующая 0%-му ингибированию в контроле (среды/1% ДМСО), и С = средняя точка на кривой, которую рассчитывают следующим образом: С=(В-А/2)+А. Величины А, В и С выражали в виде отношения РНК HCV/PHK GAPDH для каждого образца в каждой лунке 96-луночного планшета, как описано выше. Для определения величин, соответствующих 100%-му и 0%-му ингибированию, использовали среднее значение для 4 лунок для каждого планшета.
Каждое из соединений, перечисленных в таблице 2, которое можно синтезировать согласно процедурам, проиллюстрированным на схеме 1 и в примерах 1-7, можно анализировать согласно методу, описанному выше в примере 83 и/или примере 84. Многие из этих соединений обладают активностью в отношении ингибирования HCV в концентрации менее 10 мкМ. Некоторые из этих соединений обладают активностью в отношении ингибирования HCV в концентрации менее 1 мкМ. Более конкретно некоторые соединения из примеров 1-82 ингибируют HCV в концентрации менее 0,1 мкМ. Таким образом, в некоторых предпочтительных вариантах осуществления способов и соединений, предлагаемых в изобретении, переменные, входящие в формулы (I) и (VII), выбирают из числа тех, которые представлены в примерах 1-82. Кроме того, благодаря своей очень высокой активности предпочтительным является каждое из этих соединений индивидуально, а также оно является предпочтительным в качестве представителя группы, включающей любое или все соединения из примеров 1-82, при применении в представленных в настоящем описании способах. Каждое из этих соединений является предпочтительным для применения при приготовлении лекарственных средств, предназначенных для лечения биологических состояний.
Однако поскольку можно применять также соединения, которые ингибируют HCV в описанных выше анализах в более высоких концентрациях, таких как 10 мкМ, 20 мкМ или 50 мкМ, то объем настоящего изобретения не ограничивается только соединениями, обладающими активностью в концентрации 10 мкМ или менее.
Следует иметь в виду, что все упомянутые в настоящем описании патенты, заявки на патент и печатные публикации, включая книги, полностью включены в настоящее описание в качестве ссылки.
Специалистам в данной области должно быть очевидно, что можно вносить многочисленные изменения и модификации в предпочтительные варианты осуществления изобретения без отклонения от сущности изобретения. Подразумевается, что все такие вариации подпадают под объем изобретения.