КЛЕТОЧНЫЙ ТРАНСПЛАНТАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕСТРУКТИВНО-ДИСТРОФИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И ТРАВМАТИЧЕСКИХ ПОВРЕЖДЕНИЙ СУСТАВНОГО ХРЯЩА
CELL GRAFT FOR TREATING DESTRUCTIVE DYSTROPHIC DISEASES AND TRAUMATIC INJURES OF ARTICULAR CARTILAGE

Изобретение относится к медицине и биотехнологии, а именно к клеточным трансплантатам для восстановления целостности структур соединительнотканного генеза, и может быть использовано для восстановления дефектов, лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща.
В настоящее время в медицинской практике для лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща используются различные клеточные препараты.
Известно получение клеточных препаратов путем артроскопической биопсии суставного хряща с получением фрагментов гиалиновой хрящевой ткани с ненагружаемых участков с последующим культивированием клеток и дальнейшим их артроскопическим пересаживанием в область дефекта (Р.В.Деев. Анализ рынка клеточных препаратов для коррекции патологии скелетных тканей // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2006. №2(4). С.78-83).
Недостатком известного способа является дополнительная травма поврежденному суставу в процессе биопсии. Кроме этого, объем материала, получаемый известным способом, ограничен, и не позволяет получить достаточного объема для хондропластики. При деструктивно-дистрофических заболеваниях хрящевой ткани взятие материала неэффективно ввиду патологических изменений самой хрящевой ткани.
Была поставлена задача создания клеточного трансплантата для лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща, при заборе материала для которого исключается травмирование поврежденного сустава и представляется возможным получение полноценной здоровой хрящевой ткани.
ТМ
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является материал Cartilink - 2 - сервис, направленный на восполнение дефекта суставного хряща (Р.В. Деев. Анализ рынка клеточных препаратов для коррекции патологии скелетных тканей // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2006. №2(4). С.78-83).
Техническим результатом, на достижение которого направлено создание данного изобретения, является повышение эффективности и снижение травматичности лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща.
Поставленный технический результат достигается тем, что клеточный трансплантат для лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща, представляющий собой жизнеспособные аутогенные клетки, получаемые из гиалиновой хрящевой ткани путем биопсии, состоит из хондробластов и фибробластоподобных клеток, получаемых из стромы реберного гиалинового хряща.
Пример 1. Берется участок интактного гиалинового реберного хряща больного массой 500-1000 мг, переносится в специальный сосуд с консервантом и доставляется в лабораторию культуры клеток. Хрящ размельчается и подвергается трехкратному промыванию буфером HEPAS с гентамицином, амфотерициином. Измельченный хрящ переносится в сосуд с клостридиальной коллагеназой и дезоксирибонуклеазой на 18 часов. После этого клетки отмываются и смешиваются с ростовой средой, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки. Производится подсчет клеток, после чего они переносятся в культуральный флакон и заливаются питательной средой, на которой идет их выращивание. Смена среды с обязательным бактериологическим контролем производится дважды в неделю. После полного зарастания флакона клетки пассируются стандартным способом. Для пересадки используются клетки, начиная с 4 пассажа. Пересадка производится на носителе (например, деминерализованный костный матрикс), которому придаются необходимые в каждом конкретном случае форма и размеры. Всего от забора материала до получения трансплантата проходит 4-5 недель.
Пример 2. Берется участок интактного реберного или суставного гиалинового хряща кролика массой 300 мг. Хрящ переносится в специальный сосуд с консервантом и доставляется в лабораторию культуры клеток. Хрящ размельчается и подвергается трехкратному промыванию буфером HEPAS с гентамицином, амфотерициином, аскорбиновой кислотой. Измельченный хрящ переносится в сосуд с клостридиальной коллагеназой и дезоксирибонуклеазой на 1 сутки. После этого клетки отмываются и смешиваются с ростовой средой, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки. Производится подсчет клеток, после чего они переносятся на питательную среду, на которой идет их выращивание. Смена среды с обязательным бактериологическим контролем производится дважды в неделю. После полного зарастания флакона клетки пассируют стандартным способом. Для пересадки используют клетки, начиная с 4 пассажа.
Заявителями была произведена проверка возможности практического использования заявляемого клеточного препарата для лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща.
Пример 3. Кролику создается модель деструктивно-дистрофического поражения коленного сустава.
После вскрытия полости сустава полностью удаляется дефектный хрящ и на суставную поверхность пересаживается заявляемый клеточный трансплантат. Послеоперационное течение без осложнений. Динамическое наблюдение, рентгенологическое обследование и морфологическое изучение области пересадки показало восстановление хрящевой ткани сустава спустя 4 месяца после операции.
Пример 4. Кролику воспроизводится модель травматического повреждения коленного сустава путем создания механического дефекта гиалинового хряща на суставной поверхности бедренной кости. Через месяц после этого в область дефекта пересаживается заявляемый клеточный трансплантат. Послеоперационное течение без осложнений. Динамическое наблюдение, рентгенологическое обследование и морфологическое изучение области пересадки показало восстановление хрящевой ткани сустава спустя 3 месяца после операции.
Проведенный заявителем анализ уровня техники, включающий поиск по патентным и научно-техническим источникам информации и выявление источников, содержащих сведения об аналогах заявляемого клеточного трансплантата для лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща, позволили установить, что заявители не обнаружили аналог, характеризующийся признаками, тождественными (идентичными) всем существенным признакам заявляемого изобретения.
Определение из перечня выявленных аналогов прототипа позволило выявить совокупность существенных по отношению к усматриваемому техническому результату отличительных признаков заявляемого клеточного препарата для лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща, изложенных в формуле изобретения.
Следовательно, заявляемое изобретение соответствует критерию «новизна».
Для проверки соответствия заявляемого изобретения условию «изобретательский уровень» заявители провели дополнительный поиск известных решений, чтобы выявить признаки, совпадающие с отличительными от прототипа признаками заявляемого клеточного трансплантата для лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща.
Результаты поиска показали, что заявляемое изобретение не вытекает для специалиста явным образом из известного уровня техники, определенного заявителями, не выявлено влияние предусматриваемых существенными признаками заявляемого изобретения преобразований на достижение поставленного технического результата.
Следовательно, заявляемое изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».
Критерий изобретения «промышленная применимость» подтверждается тем, что предлагаемый клеточный трансплантат для лечения деструктивно-дистрофических заболеваний и травматических повреждений суставного хряща может быть использован в травматологии и ортопедии.