Устройство для забора каллусной ткани
CALLUS TISSUE SAMPLING DEVICE

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к растениеводству, и может быть использовано для стерильного забора  каллусной ткани древесных и кустарниковых растений.
Каллусная ткань является основным объектом исследований по клеточной инженерии растений. Это связано, прежде всего, с тем, что такие направления исследований, как клеточная селекция, соматическая гибридизация, клональное микроразмножение, получение веществ вторичного метаболизма и другие направления, предусматривают в своей технологии получение растений-регенерантов именно из каллусной или суспензионной культуры от дифференцированных клеток.
Культура изолированных тканей обычно бывает представлена каллусными или реже — опухолевыми тканями. Каллусная культура — это неорганизованная пролиферирующая ткань, состоящая из дедифференцированных клеток. В дальнейшем они специализируются как каллусные, т. е. становятся особым образом дифференцированными. Каллус, что означает «мозоль», может образовываться как на изолированных кусочках ткани (эксплантах) in vitro, так и на растении при поранении. (Калашникова Е.А. Клеточная инженерия растений 2-е изд. Учебник и практикум для вузов" 2020г.)
Известно, что культивирование каллуса происходит in vitro, путем подсадки эксплантов, при соблюдении строгой стерильности. При необходимости используется антибактериальная терапия. Далее очищенный эксплантат помещается в подходящую среду, и с прошествием определенного количества времени, происходит каллусообразование. (1. Тихонов И. В. Биотехнология: учебник / под ред. Е. С. Воронина. – СПб. : ГИОРД, 2005.) (Мурашкина И. А., Васильев И. Б.,Гордеева В. В., 2015 ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России, 2015)
Известен способ получения каллуса в качестве первичного экспланта из  черенков с почками, нарезанных с молодых побегов устойчивых к сердцевинной гнили клонов осины, произрастающих в Матюшинском участковом лесничестве Пригородного лесничества Республики Татарстан. Для выращивания каллуса использовали питательную среду Мурасига и Скуга (М8), содержащую цитодев (2,0 мг/л) и БАП (0,5 мг/л). В культуру были введены черенки с 1-2 почками. Пробирки с эксплантами ставили в световую комнату, где поддерживали температуру 22-25°С. Прирост каллусной массы наблюдали в течение 45 дней. За это время формировалась каллусная ткань плотного типа, в которой отмечалось появление меристематических очагов, из которых в дальнейшем развивались растения-регенеранты. Формирование первичных микропобегов в каллусной ткани происходило в течение 30-35 дней. (статья Получение здорового посадочного материала осины (populus tremula l.) из каллусной ткани с целью оздоровления осинников республики Татарстан, Петрова Г.А., интернет-источник https://cyberleninka.ru/article/n/poluchenie-zdorovogo-posadochnogo-materiala-osiny-populus-tremula-l-iz-kallusnoy-tkani-s-tselyu-ozdorovleniya-osinnikov-respubliki?ysclid=l6do360gel969091534 ).
Существенными недостатками известных способов получения каллусных клеток являются большие объемы работы по стерилизации эксплантатов растений.
Задача изобретения – создание устройства для стерильного забора каллусной ткани.
Технический результат -  возможность забора каллусной ткани непосредственно из области каллусной мозоли, что обеспечивает стерильность отобранной каллусной ткани и исключает необходимость работы по ее стерилизации.
Технический результат достигается посредством предложенного устройства для забора каллусной ткани, выполненного в виде   разборного инструмента, включающего  полую трубку с рукоятью и мандрен с рукоятью. При этом, полая трубка диаметром 3 мм  снабжена наружной и внутренней резьбой, а на расстоянии 0,5 см от внешнего края трубки имеется   отверстие размером 1,5х3мм. На внешней стороне рукояти в месте выхода трубки имеется паз для соединения с рукоятью мандрена посредством размещенного на рукояти мандрена шипа. Конец мандрена выполнен  заостренным.
Новизна и изобретательский уровень предполагаемого изобретения заключается  в том, что из уровня техники не выявлено техническое решение, которое бы решало поставленную задачу.
Устройство характеризуется следующими графическими материалами
фиг. 1. Устройство в сборе.
Фиг.2 Устройство в разобранном виде.
Устройство забора каллусной ткани  выполнено в виде   разборного инструмента и включает  полую трубку 1 с рукоятью 2 и мандрен 3  с рукоятью 4. При этом, полая трубка  1 диаметром 3 мм  снабжена наружной резьбой 5 и внутренней резьбой 6, а на расстоянии 0,5 см от внешнего края трубки 1 имеется отверстие 7 размером 1,5х3мм. На внешней стороне рукояти 2 в месте выхода трубки 1 имеется паз 8 для соединения с рукоятью 4 мандрена 3 посредством размещенного на рукояти 4   шипа 9. Мандрен 3 выполнен с заостренным концом, который выступает из трубки 1 как видно на фиг.1
Работу устройством для сбора каллусной ткани осуществляют следующим образом.
После стерилизационной обработки места прокола устройство   собирают, фиксируя шип 9 рукояти 4 мандрена 3   в  пазу 8 рукояти 2 .  Затем конец трубки 1 вводят в выбранный участок, содержащий каллусную ткань. Для начала делают укол с помощью мандрена 3 , затем прокручивают устройство  до вхождения полой трубки в полость каллусной мозоли. После этого рукоять 4 с мандреном 3  отсоединяют, а  полую трубку 1   продвигают дальше в полость мозоли, пока не закроется отверстие 7. Затем  повторяют прокручивающие движения внутри полости каллусной мозоли  для сбора достаточного количества каллусной ткани через отверстие 7. Затем полую трубку 1 выкручивающими движениями с помощью рукояти 2 достают из полости каллусной мозоли, и с помощью мандрена 3 собранное содержимое проталкивают в подготовленную стерильную тару.
Таким образом, предложенный инструмент позволяет проводить забор каллусной ткани напрямую из области каллусной мозоли древесных и кустарниковых растений, что позволяет обойти этапы стерилизации, как при выращивании эксплантатов на спец.средах. Предложенное устройство  для забора каллусной ткани обеспечивает легкую проходимость в полость мозоли и выход из нее за счет того, что  имеется резьба на наружной поверхности полой трубки, а также обеспечивает  забор необходимого количества каллусной ткани за счет наличия отверстия и внутренней резьбы на полой трубке. Стерильность обеспечивает отсутствие контакта с внешней средой.
Следовательно, поставленная задача решена.