КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ИММУНОТЕРАПИИ

1. Т-клетка, содержащая
1) антигенраспознающий рецептор, который связывает первый антиген, при этом связывание способно активировать Т-клетку и
2) ингибирующий химерный рецептор антигена, который связывает второй антиген, при этом связывание способно ингибировать Т-клетку.
2. Изолированная иммунореактивная клетка по п. 1, где первый антиген содержит опухолевый антиген или антиген патогена.
3. Т-клетка по п. 1, где вторым антигеном является CD33, CD38, лейкоцитарный антиген человека (HLA), антиген эпителиально-мезенхимального перехода (FMT), специфичный для органа антиген, антиген, специфичный для гематоэнцефалического барьера, Е-кадгерин, цитокератин, связывающий опиоиды белок/молекула клеточной адгезии (OPCML), HYLA2, антиген, отсутствующий при карциноме прямой и ободочной кишки (DCC), белок 1, связывающий область прикрепления к каркасу/матриксу (SMAR1), углевод клеточной поверхности или О-гликан муцинового типа.
4. Т-клетка по п. 1, где указанный ингибирующий химерный рецептор антигена экспрессируется рекомбинантно.
5. Т-клетка по п. 1, где ингибирующий химерный рецептор антигена экспрессируется с вектора и/или где антигенраспознающий рецептор экспрессируется с вектора.
6. Т-клетка по п. 1, где указанный антигенраспознающий рецептор является Т-клеточным рецептором (TCR) или химерным рецептором антигена (CAR).
7. Т-клетка по п. 1, где
(a) указанный антигенраспознающий рецептор является экзогенным;
(b) указанный антигенраспознающий рецептор является эндогенным; или
(c) указанный антигенраспознающий рецептор экспрессируется рекомбинантно.
8. Т-клетка по п. 1, где указанный первый антиген является опухолевым антигеном, выбранным из группы, состоящей из CD19, CAIX, CEA, CDS, CD7, CD10, CD20, CD22, CD30, CD33, CD34, CD38, CD41, CD44, CD49f, CD56, CD74, CD123, CD133, CD138, антигена клетки, инфицированной цитомегаловирусом (CMV), EGP-2, EGP-40, ЕрСАМ, erb-B2,3,4, FBP, эмбрионального ацетилхолинового рецептора, рецептора фолата α, GD2, GD3, HER-2, hTERT, IL-13R-α2, κ-легкой цепи, KDR, LeY, молекулы клеточной адгезии L1, MAGE-Α1, мезотелина, Muc-1, Muc-16, лигандов NKG2D, NY-ESO-1, раково-эмбрионального антигена (h5T4), PSCA, PSMA, ROR1, TAG-72, VEGF-R2 и WT-1.
9. Т-клетка по п. 1, где указанный ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR) содержит внутриклеточный домен передачи сигнала, выбранный из группы, состоящей из полипептида CTLA-4, полипептида PD-1, полипептида LAG-3, полипептида 2В4 и полипептида BTLA.
10. Т-клетка по п. 9, где указанный ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR) дополнительно содержит трансмембранный домен, выбранный из группы, состоящей из полипептида CD4, полипептида CD8, полипептида CTLA-4, полипептида PD-1, полипептида LAG-3, полипептида 2В4 и полипептида BTLA.
11. Т-клетка по п. 1, где указанный ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR) дополнительно содержит Fab, scFv, лиганд, специфичный лиганд или поливалентный лиганд.
12. Т-клетка по п. 1, где антигенраспознающий рецептор содержит химерный рецептор антигена.
13. Т-клетка по п. 12, где химерный рецептор антигена выбран из группы, состоящей из 19-28z, P28z, M28z и 56-28z.
14. Применение Τ-клетки по любому из пп. 1-13 для снижения опухолевой нагрузки и/или размера опухоли у субъекта, для повышения выживаемости субъекта, имеющего неоплазию, или для ослабления заболевания трансплантат против хозяина у субъекта.
15. Применение по п. 14, в котором неоплазия выбрана из группы, состоящей из рака крови, В-клеточного лейкоза, множественной миеломы, острого лимфобластного лейкоза (ALL), хронического лимфобластного лейкоза, неходжкинской лимфомы, рака яичника, рака простаты, рака поджелудочной железы, рака легкого, рака молочной железы и саркомы, и острого миелоидного лейкоза (AML).
16. Способ получения Т-клетки, включающий:
введение в Т-клетку нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, которая кодирует антигенраспознающий рецептор, который связывает первый антиген, где связывание способно активировать клетку; и
введение в Т-клетку нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, которая кодирует ингибирующий химерный рецептор антигена, который связывает второй антиген, при этом связывание способно ингибировать Т-клетку.
17. Ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR), содержащий:
(i) внеклеточный домен, который связывает антиген;
(ii) трансмембранный домен, функционально связанный с внеклеточным доменом; и
(iii) внутриклеточный домен, который способен индуцировать внутриклеточную передачу сигнала, чтобы ингибировать или предотвратить иммунную активность Т-клетки, при этом внутриклеточный домен функционально связан с трансмембранным доменом.
18. Ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR) по п. 17, где иммунный ответ включает высвобождение цитокинов, уничтожение мишени или пролиферацию, и/или где иммунный ответ стимулируется лигирование цепи CD3 или фосфорилированием ITAM.
19. Ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR) по п. 17, в котором указанный внутриклеточный домен передачи сигнала содержит домен, выбранный из группы, состоящей из внутриклеточной части полипептида CTLA-4, внутриклеточной части полипептида PD-1, внутриклеточной части полипептида LAG-3, внутриклеточной части полипептида 2В4 и внутриклеточной части полипептида BTLA.
20. Ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR) по п. 17, в котором указанный трансмембранный домен содержит трансмембранный домен полипептида, выбранный из группы, состоящей из полипептида CD4, полипептида CD8, полипептида CTLA-4, полипептида PD-1, полипептида LAG-3, полипептида 2В4 и полипептида BTLA.
21. Ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR) по п. 17, дополнительно содержащий Fab, scFv, лиганд, специфичный лиганд или поливалентный лиганд.
22. Ингибирующий химерный рецептор антигена (iCAR) по п. 17, в котором связывание антигена с iCAR способно к активированию внутриклеточного домена передачи сигнала, который снижает, подавляет или предотвращает активацию иммунного ответа.
23. Последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая ингибирующий химерный рецептор антигена по любому из пп. 17-22.
24. Вектор, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты по п. 23.
25. Композиция, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты по п. 23.
26. Композиция, содержащая вектор по п. 24.
27. Вектор, содержащий (а) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую химерный рецептор антигена, который связывает первый антиген, и (b) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую ингибирующий химерный рецептор антигена, который связывает второй антиген, и внутриклеточный домен, который способен активировать внутриклеточную передачу сигнала Т-клетке, чтобы снизить, подавить или предотвратить активацию иммунного ответа, опосредованного Т-клеткой.
28. Композиция, содержащая а) нуклеиновую кислоту, содержащую последовательность, кодирующую химерный рецептор антигена, который связывает первый антиген, и (b) нуклеиновую кислоту, содержащую последовательность, кодирующую ингибирующий химерный рецептор антигена, который связывает второй антиген, и внутриклеточный домен, который способен активировать внутриклеточную передачу сигнала Т-клетке, чтобы снизить, подавить или предотвратить активацию иммунного ответа, опосредованного Т-клеткой.
29. Клетка, содержащая ингибирующий химерный рецептор антигена по любому из пп. 17-22.
30. Клетка, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты по п. 23.
31. Клетка, содержащая вектор по п. 24.
32. Клетка, содержащая вектор по п. 27.
33. Клетка, содержащая композицию по п. 28.
34. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество Т-клетки по любому из пп. 1-13 в фармацевтически приемлемом эксципиенте.
35. Применение Т-клетки для модулирования ответа трансплантат против лейкоза или ответа трансплантат против опухоли у субъекта, где Т-клетка является аллогенной для субъекта и содержит ингибирующий химерный рецептор антигена, который связывает антиген, при этом связывание способно ингибировать аллогенную Т-клетку.
36. Применение по п. 35, в котором аллогенная клетка содержит эндогенный Т-клеточный рецептор.
37. Применение по п. 35, в котором антигеном является CD33, CD38, лейкоцитарный антиген человека (HLA), антиген эпителиально-мезенхимального перехода (FMT), специфичный для органа антиген, антиген, специфичный для гематоэнцефалического барьера, Е-кадгерин, цитокератин, связывающий опиоиды белок/молекула клеточной адгезии (OPCML), HYLA2, антиген, отсутствующий при карциноме прямой и ободочной кишки (DCC), белок 1, связывающий область прикрепления к каркасу/матриксу (SMAR1), углевод клеточной поверхности или О-гликан муцинового типа.
38. Применение по п. 37, в котором субъект имеет метастатическую злокачественную опухоль молочной железы, гематологическое злокачественное новообразование или солидную опухоль, и лейкоцитарным антигеном человека (HLA) является HLA-I.
39. Применение по п. 37, в котором субъект имеет опухоль, которая подверглась эпителиально-мезенхимальному переходу (ЕМТ), и антигеном является один или несколько из следующих антигенов: антиген эпителиально-мезенхимального перехода (ЕМТ), Е-кадгерин и цитокератин.
40. Применение по п. 35, в котором связывание ингибирующего химерного рецептора антигена с антигеном снижает клеточную гибель среди клеток, содержащих антиген.
41. Применение по любому из пп. 35-40, в котором способ ослабляет заболевание трансплантат против хозяина (GVHD) у субъекта или его симптом.