Влияние фуросемида на сократительную активность воротной вены крыс с экспериментальной хронической почечной недостаточностью

базальную мембрану клубочков и отсутствием экстраренального катаболизма [5]. Следовательно, выявленная нами у переболевших ГЛПС тенденция к повышению концентрации в крови р2-МГ при нормальном содержании его в моче также является свидетельством нарушения у них гломерулярного кровотока.

Л.Т. Пименов и соавт. [8] в своих наблюдениях приводят данные о большей частоте снижения ФРП (у 16 из 20 обследованных) и более значительном повышении сывороточного уровня р2-МГ (более чем в 2 раза по сравнению с контролем), что, вероятно, обусловлено более ранними после ГЛПС сроками обследования — сразу после выписки из стационара и большим числом лиц, перенесших тяжелую форму болезни [8]. Наши исследования показали, что нарушения внутриклубочковой гемодинамики могут наблюдаться как в более поздние сроки после ГЛПС, так и после менее тяжелых форм этого заболевания. У отдельных лиц описанные нами нарушения всех звеньев почечного кровотока сохранялись при динамическом обследовании через 1,5 года после болезни.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют о том, что у пациентов, перенесших ГЛПС, имеются нарушения почечного кровотока на различных уровнях. Они заключаются в замедлении кровотока в почечных и дуговых артериях, а также нарушениях внутриклубочковой гемодинамики с развитием в части случаев состояния гиперфильтрации. Выявленные изменения наблюдаются в основном в течение первого года после ГЛПС, но могут сохраняться и в отдаленные сроки после болезни. Полученные данные диктуют необходимость включения в программу диспансерного наблюдения за переболевшими ГЛПС методов оценки состояния почечной гемодинамики и разработки способов коррекции ее нарушений.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Бандурко Л.П. Изменение микроциркуляции при геморрагической лихорадке с почечным синдромом: Ав-

тореф. дис. ... канд. мед. наук,—Владивосток, 1980.— 22 с.

2. Глазун Л.О. Ультразвуковые критерии тяжести острой почечной недостаточности у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом: Автореф. дис. ... канд. мед. наук.—Хабаровск, 1993.—22 с.

3. Зверев К.В., Кутырина И.М., Герасименко О.И. Клиническое значение почечного функционального резерва // Клин, мед.—1995 —Т. 73, № 3.—С. 99-102.

4. Клиническое руководство по ультразвуковой диагностике/В.В. Митьков,—IV т.—М.: Видар, 1997.—388 с.

5. Короткова И.Ф. Диагностическое значение определения ß2-MHKpomo6yflHHa в биологических жидкостях // Клин, мед.-1987—Т. 65, № 9.-С. 24-28.

6. Кустарников Г.К. Клиника и функциональное состояние почек у переболевших геморрагической лихорадкой с почечным синдромом: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Куйбышев, 1982.

7. Олофинский Л.А. Острая почечная недостаточность при геморрагической лихорадке с почечным синдромом.— Владивосток: Изд-во Дальневосточн. ун-та, 1987.—97 с.

8. Пименов Л.Т., Дударев М.В., Кустарников Г.К., Березина Л.А. Гемодинамические и лабораторно-биохимические характеристики нефропатии у реконвалесцентов после геморрагической лихорадки с почечным синдромом // Тер. арх.—1996.—Т. 68, № 6.-С. 28-30.

9. Рогов В.А., Кутырина И.М., Тареева И.Е. и др. Функциональный резерв почек при нефротическом синдроме // Тер. арх.—1990.—Т. 62, № 6.-С.55-58.

10. Сиротин Б.З. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом,—Хабаровск, 1994.—302 с.

11. Сиротин Б.З., Лобастова Г.С. Патология почек у перенесших геморрагическую лихорадку с почечным синдромом,—Хабаровск, 1980.—96 с.

12. Смородинцев A.A., Казбинцев Л.И., Чудаков В.Г. Вирусные геморрагические лихорадки.—Л., 1963,—292 с.

13. Федорченко Ю.Л. Нарушение проницаемости сосудов и влияние на нее дицинона при геморрагической лихорадке с почечным синдромом: Автореф. дис. ... канд. мед. наук,—Владивосток, 1990,—23 с.

14. Чукавина А.И., Кустарников Г.К..Трусов В.В. Резиду-альные явления после геморрагической лихорадки с почечным синдромом //Сов. мед.—1985,—№ 6.—С. 101-103.

15. Шутов Л.М., Железнякова С.В., Сисина О.Н., Крюч-ко Л.В. Внутриклубочковая гемодинамика у больных с артериальной гипертензией // Актуальные проблемы нефрологии. Почечная гипертензия: Материалы I пленума Правления Научного общества нефрологов России и Российской науч-но-практической конф.—Оренбург, 1996.—С. 74.

Поступила в редакцию 21.12.99 г.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Экспериментальные исследования

© Коллектив авторов. 2000

УДК 616.61-008.64-036-08:615.254.1.076.9:599.323.4

О.Н.Береснева, В.В.Барабанова, И. Г. Каюков, М.М.Парастаева, С.Г.Чефу

ВЛИЯНИЕ ФУРОСЕМИДА НА СОКРАТИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ВОРОТНОЙ ВЕНЫ КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ

O.N.Beresneva, V.V.Barabanova, I.G.Kayukov, M.M.Parastaeva, S.G.Chefu

THE INFLUENCE OF FUROSEMIDE DURING THE CONTRACTILE ACTIVITY OF THE PORTAL VEIN IN RATS WITH CHRONIC RENAL FAILURE IN EXPERIMENT

Научно-исследовательский институт нефрологии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова, Россия

РЕФЕРАТ

Исследовали влияние фуросемида на авторитмическую сократительную активность воротной вены у крыс с экспериментальной хронической почечной недостаточностью (ХПН). Фуросемид применяли через 7 дней после нефрэктомии в дозах 20 и 120 мг на 1 кг массы тела в течение 8 нед. Спустя 8 нед крысы были забиты. Результаты показали, что фуросемид в исследуемых дозах предотвращает снижение функциональной активности воротной вены, которое развивается у крыс через 2 мес после нефрэктомии. Небольшая доза фуросемида (20 мг/кг) оказалась эффективной в отношении развития азотемии в отличие от дозы 120 мг. Ключевые слова: экспериментальная хроническая почечная недостаточность, фуросемид, воротная вена.

ABSTRACT

Under investigation was the effect of furosemide on the contractile activity the portal vein rats with chronic renal failure ( CRF). The rats were given 20 and 120 mg/kg of furosemide daily during 7 week after operetion. After the 8-th week the rats were decapitated. The results have shawn that furosemide prevent the decrease contractile activity of the portal vein typical for the first stage of CRF. Furosemide 20 mg/kg prevent the development of uremia, but furosemide in dosage 120 mg/kg did not have this effect.

Key words: experimental chronic renal failure, furosemide, portal vein.

ВВЕДЕНИЕ

Диуретик фуросемид широко применяется в нефрологической практике для коррекции водно-электролитных нарушений. Но, с другой стороны, этот препарат подавляет активность канальцево-клубочкового механизма обратной связи и может вызвать гиперфильтрацию в не-фронах. что является неблагоприятным гемоди-намическим фактором прогрессирования почечного заболевания |1б].

Диуретический эффект фуросемида связан с блокадой К+, 2СГ-котранспоргера в толстом восходящем колене петли Генле 17]. Этот же электрически нейтральный транспорт ионов присутствует в разных тканях и органах: эритроцитах [5], аксонах |2, 14], кардиомиоцитах [9, II], гладкомышечных клетках сосудов [4]. Известно также, что фуросемид оказывает инги-бирующее действие на оубаин чувствительную

№+-АТФазу кардиомиоиитов (похожую на таковую в почках), что приводит к уменьшению содержания внутриклеточного кальция [13].

Долгое время считали, что вазодилатацион-ное действие фуросемида осуществляется только при посредничестве почек, и именно про-стагланлины почечного происхождения вовлекаются в гемодинамический эффект. Поэтому дилатационное действие препарата отсутствует у больных с хронической почечной недостаточностью и у животных после нефрэктомии [3, 8]. Однако в последние годы установили, что фуросемид является стимулятором синтеза и секреции эндотелий расслабляющих факторов в емкостных и резистивных сосудах [15], в том числе — коронарных [10]. Этот гемодинамический эффект диуретика наблюдается после пе-рорального назначения 40 мг фуросемида через 5 мин и держится в течение 30 мин [6].

Задачей настоящей работы являлось исследование действия фуросемида на авторитмическую сократительную активность воротной вены у крыс с экспериментальной хронической почечной недостаточностью I степени.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

В работе использовали крыс-самцов линии Вистар массой 180—220 г. Модель почечной недостаточности создавали посредством поэтапной нефрэктомии (удаляли 5Д почечной ткани). Животных содержали на стандартной пищевой диете и свободном доступе к воде.

Через 7 дней после второго этапа операции крысы были разделены на 3 группы. Животные 1-й и 2-й группы ежедневно получали per os фуросемид в дозе 20 и 120 мг на 1 кг массы тела. 3-я группа крыс после нефрэктомии препарат не получала. В качестве контроля в эксперименте также использовали животных, не подвергавшихся операции.

Перед забоем у крыс собирали мочу в метаболической камере. Кровь брали во время забоя. Забой производили через 8 нед после второго этапа операции посредством декапитации.

После забоя у животных выделяли фрагмент воротной вены и регистрировали авторитмическую сократительную активность. Одновременно с записью на диаграмной ленте самописиа осуществляли регистрацию и последующую обработку сократительной активности воротной вены на ЭВМ. Результаты обрабатывали статистически с помощью t-критерия Стъюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ

У животных 1-й группы наблюдалось снижение уровня мочевины сыворотки крови в сравнении с оперированными животными, не получавшими препарат. Эта же группа достоверно отличалась и от 2-й группы (табл. I).

Таблица 1

Биохимические показатели сыворотки крови крыс с ХПН и крыс с ХПН, получавших фуросемид

Показатели Группы крыс

ХПН

Сг, ммоль/л 0,12+0,01 0,10±0,02 0,12±0,33

Ur, ммоль/л 13,9+1,5'* 8,9±1,8* ** 12,9+2,5"

Са общий, 2.8+0,1 2,67+0,22 2,68±0,1Б

ммоль/л

Р, ммоль/л 3,0±0,5 2,54+0,35 2,44±0,81

Здесь и в табл. 2: " Различия достовэрны относительно контроля. р<0,05. * Различия достоверны между группами.

В моче (табл. 2) значительное увеличение диуреза относительно группы оперированных животных, но не получавших препарат, выявлено только во 2-й группе крыс. Содержание кальция было снижено в моче 1-й группы в сравнении со 2-й и крысами, которые после удаления почечной массы фуросемид не получали. Достоверных различий в суточной потере белка выявлено не было,

Таблица 2

Биохимические показатели мочи крыс с ХПН и крыс с ХПН, получавших фуросемид

Показатели Группы крыс

ХПН

Диурез, мл 9,88±3,63 11,3±3,4 14,6±6,8

Сг, ммоль/л 9,98+3,45 7,1 ±0,8 5,7±1,5

Ur, ммоль/л 539,1+222,9 505,0+145,4 446,0±145,1

Са, ммоль/л 1,54±0,53 0,61±0,10* " 1,04±0,46

Р, ммоль/л 56,3±27,7 62,8+13,0 47,8±14,8

Суточная потеря белка,г/сут 3,36±3,26 2,6± 2,3 3,5±2,9

Исследование авторитммческой сократительной активности воротной вены (ВВ) показало, что через 2 мес после нефрэктомии у животных наблюдается снижение ее функциональной активности. Оно выражается в уменьшении общей амплитуды фазно-тонических сокращений (в среднем, на 42%) и площади под кривой сокращений, характеризующей выполняемую веной работу (в среднем, на 45%) относительно интактных крыс (табл. 3). У живот-

Таблица 3

Функциональная активность воротной вены крыс, подвергнутых нефрэктомии, и крыс, получавших фуросемид после нефрэктомии

Группа Частота Общая амплитуда Площадь под

животных сокращении фазно- тонических кривой за

в 1 мин сокращений 1 мин. усл. ед.

Контроль 19,6±4,2 135,9±26,0 161,6+48,3

НЭ, 2 мес 24.4±8,3 78,8+24.3* 89.2+16.7*

(п—11}

НЭ+20 мг фуро- 15.7±3,8 190,3+57,7" 139, Ш 3,4"

семида

НЭ+120 мг фу- 12,5+3,2 310,5±78.0" 154,0± 20,3"

росемида

• Различия достоверны относительно контроля, р<0,01. " Различия достоверны относительно группы НЭ животных, не получавших фуросемид.

ных, подвергнутых нефрэктомии и получавших 20 мг/кг фуросемида, снижения функциональной активности ВВ не наблюдалось. Так, общая амплитуда фазно-тонических сокращений, в среднем, на 40,4% превышала соответствующий показатель, характерный для крыс, подвергнутых нефрэктомии, но не получавших фуросе-мид, а выполняемая веной работа — на 50,5%, что практически не отличалось от параметров, отмеченных у интактных животных.

У крыс, подвергнутых нефрэктомии и получавших 120 мг/кг фуросемида, наблюдалось резкое увеличение амплитуды фазных сокращений (в среднем, на 287% относительно группы крыс с ХПН, не получавших препарат). Выполняемая веной работа практически не отличалась от интактных животных (см. табл. 3). Снижения авторитмической сократительной активности у животных, получавших как 20, так и 120 мг/кг фуросемида, не наблюдалось. На рисунке в качестве примера представлена миограмма записи сократительной активности

0а1а f А(П А (Т) А(Г+Т) Б СТ) в^Т) 'ВТ

А 24 64» 87 26. 41 90, 50 . 32. 69 23, 19 71, 3 0

Б 22 121. 4 116, 2 221, 3 69, 43 66, 18 153, 6 0

В 13 234. 2 122, 3 344, 8 80, 68 53, И 168, 7 0

Функциональная активность гладкомышечных клеток воротной вены крыс I — оригинальная миограмма (машинная графика; время записи 1 мин); I — абсолютные значения (средние величины за 1 мин) регистрируемых параметров фазно-тонических

сокращений.

ВВ крыс, получавших фуросемид, и крыс, подвергнутых нефрэктомии, но не получавших препарат.

ОБСУЖДЕНИЕ

Исследования показали, что у животных через 2 мес после нефрэктомии отмечается снижение авторитмической сократительной активности ВВ [1]. Это может быть вызвано нарушением транспорта кальция и энергообеспечения в гладкомышечных клетках (ГМК).

Блокируя в ГМК сосудов К+, 2СГ-ко-транспортер, фуросемид снижает содержание натрия внутри клетки, уменьшает внутримито-хондриальный и внутриклеточный отек. Следствием уменьшения внутриклеточной аккумуляции натрия является снижение внутриклеточного свободного кальция, что связано с Са2+-обменом. Не исключено, что фуросемид оказывает ингибирующее действие на оубаин нечувствительную №+-АТФазу миоцитов (похожую на таковую в почках и кардиомиоцитах), что приводит к уменьшению содержания внутриклеточного кальция. Таким образом, фуросемид замедляет процесс перегрузки миоцитов кальцием и отодвигает во времени развитие второй фазы изменений сократительной активности ВВ, т. е. ее снижение.

Увеличение функциональной активности ВВ у 2-й группы животных, получавших высокую дозу фуросемида, свидетельствует об увеличении входа кальция в ГМК. Изменение активности венозных сосудов вследствие активации кальциевого обмена при экспериментальной уремии формирует ряд компенсаторно-адаптивных реакций организма, в том числе сердечно-сосудистой системы. Не исключено, что перегрузка клеток кальцием, в конечном итоге, может привести к снижению сократительной активности ВВ, как и в случае с животными, подвергнутыми нефрэктомии и не получавшими фуросемид.

Таким образом, результаты показали, что действие фуросемида на В В определя-