Анализ результатов неоадъювантного лечения больных с учетом иммунофенотипических особенностей рака молочной железы

Е Н

ip.

стном использовании циклоферона и доксоруби-цина, на наш взгляд, требует более осторожного использования этого иммуномодулятора одновременно с полихимиотерапией в клинических условиях. В то же время достоверное и своеобразное противоопухолевое совместное действие доксору-бицина и цитокинов, выделенных из аутокрови, указывает на реальную возможность и целесообразность применения этой методики в лечении РМЖ.

Результаты, полученные в 5-й серии эксперимента, где сыворотка из аутокрови вызывает практически полную остановку деления клеток и сопровождается индукцией апоптоза (АИ 8,1%, ^<0,05) и некроза в опухоли (по-видимому, за счет высвобождения из лимфоцитов фактора некроза опухоли), открывают совершенно новые перспективы в лечении злокачественных опухолей с использованием естественных цитокинов.

Рис. 5. Участок опухоли молочной железы после 24-часового инкубирования в питательной среде КРМ1-1640 с аутосывороткой после УЗО.

В центре некротическая гибель клеток, справа и слева апоптотическая гибель клеток. Окраска гематоксилин-эозином. Увеличение около 10, общее — 40

ЛИТЕРАТУРА

1. Воронцова А.Л. Исследование возможной роли интерферона в сопротивляемости клетки процессу злокачественной трансформации. В кн.: Канцерогенез, методы диагностики и лечения опухолей. Киев, 1971. с. 37—8.

2. Воронцова А.Л. Роль интерферона в противоопухолевой резистентности. Экспер онкол 1989;6(11):49—54.

3. Воронцова А.Л., Гаврина Г.Б., Кудря-вец Ю.И., Захарычев В.Д. Сывороточный тест для определения риска появления метастазов у онкологических больных. Экспер онкол 1991;(13):25—7.

4. Воронцова А.Л., Кудрявец Ю.И., Фадеев В.А. Влияние интерферона на токсический эффект и противоопухолевую активность винбластина при комбини-

рованной терапии метастазирующеи карциномы Льюис. Экспер онкол 1984;(6):54—7.

5. Воронцова А.Л., Кудрявец Ю.И., Фадеев В.А., Балицкий К.П. Антиметаста-тическое действие интерферона при хирургическом удалении экспериментальных опухолей. Экспер онкол 1983;(5):45—9.

АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ НЕОАДЪЮВАНТНОГО ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ С УЧЕТОМ ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКИХ ОСОБЕННОСТЕЙ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

А.А. Субботина, В.П. Летягин, Н.Н. Тупицын, И.В. Высоцкая, В.Д. Ермилова

НИИ клинической онкологии ГУРОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва; кафедра онкологии ММА им. И.М. Сеченова

ANALYSIS OF THE RESULTS OF NEODJUVANT TREATMENT IN PATIENTS WITH CONSIDERATION FOR THE IMMUNOPHENOTYPICAL FEATURES OF BREAST CANCER A.A. Subbotina, V.P. Letyagin, N.N. Tupitsyn, I.V. Vysotskaya, V.D. Yermilova

Research Institute of Clinical Oncology, N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow; Department of Oncology, I.M. Sechenov Moscow Medical Academy

The efficiency of neoadjuvant chemotherapy is directly related to the expression of CD95 (FAS/APO-1) apoptosis receptor on cancer cells, which is confirmed with the pathomorphism and changes of CD95-positive cells during neoadjuvant chemotherapy (the most effective CAF regimen is cyclophosphan, doxorubicin, and 5- fluorouracil).

Рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место в структуре заболеваемости и смертности от злокачественных заболеваний среди женщин. В странах СНГ в 2005 г. его доля составила 17—20%, в России — 30—35% [1]. Ежегодно в мире выявляют около 1 млн новых случаев РМЖ, а к 2010 г. ученые прогнозируют рост заболеваемости до 1,45 млн [2]. Именно поэтому лечение РМЖ — одна из наиболее актуальных проблем в современной клинической онкологии.

В исследованиях РМЖ в настоящее время широкое распространение получили молекулярно-биологические характеристики клеток первичной опухоли: экспрессия различных онкогенов, факторов роста и их рецепторов, молекул, регулирующих апоптоз, рецепторов эстрогенов и прогестерона. Многие из этих показателей являются важными при выборе тактики ведения больных, так как тесно связаны с результатами лечения и прогнозом заболевания. Уровень дифференци-

Новые технологии

Новые технологии

*

Таблица 1. Распределение больных РМЖ по стадиям TNM

Стадия

Число больных абс. %

II6

IIIb:

T4N0M0

T4N1M0

T4N2M2

Всего ...

3

10

9

31

16,1

13,0

9,7

32,2

29,0

100

Рис. 1. Распределение больных РМЖ (%) по овариально-менструальной функции

Таблица 2. Распределение больных по виду

неоадъювантного лечения

Схема ХТ

Число больных

абс.

%

CAF CMFVP Итого ...

16

15

31

51,6

48,4

100

Рис. 2. Распределение больных РМЖ по типу операции в зависимости от примененной схемы ПХТ

ровки злокачественных клеток, экспрессия ими факторов роста и оценка пролиферативной активности опухолевых клеток дают важную информацию об особенностях опухолевого роста [3, 4].

Цель настоящего исследования — оценка взаимосвязи между иммунофенотипом РМЖ и выраженностью патоморфоза опухолевой ткани под влиянием неоадъювантной химиотерапии (ХТ) у больных первичным местно-распространенным РМЖ.

Анализ проводился как в целом по группе, так и в зависимости от примененной схемы неоадъювантной ХТ (циклофосфан, доксорубицин, 5-фто-рурацил — CAF, циклофосфан, метотрексат, 5-фто-рурацил, винкристин, преднизолон — CMFVP).

В группу исследования вошла 31 больная. Большинство пациенток (70,9%) относились к 111б стадии, на 2-м месте по частоте были больные (16,1%) со 11б стадией, а наименьшее число (13,0%) составляли пациентки с 111а стадией опухолевого процесса. Данные представлены в табл. 1.

Все пациентки обследовались и лечились в клиниках РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Средний возраст составил 49,3 года. При этом менструальная функция была сохранена у 14 (45,2%) больных, в состоянии перименопаузы находились 2 (6,4%), в менопаузе — 15 (48,4%) женщин. Менопауза сроком от 2 до 5 лет отмечена у 7 (22,6%) больных, от 5 до 10 лет — у 3 (96,8%), свыше 10 лет — у 5 (16,1%) пациенток. Распределение больных по овариально-менструальной функции показано на рис. 1.

У всех пациенток была установлена местнораспространенная стадия заболевания, что потребовало применения индукционной ХТ до оперативного вмешательства. У 15 (48,4%) больных на консервативном этапе лечения (т.е. до операции) проводилась классическая схема CMFVP. В 16 (51,6%) клинических случаях использован режим CAF. Данные представлены в табл. 2.

Хирургическое вмешательство различного объема выполнено всем больным изучаемой группы.

Радикальную резекцию удалось осуществить в 4 (12,9%) клинических случаях, в остальных выполнена радикальная мастэктомия с сохранением грудных мышц (n=27; 87,1%). Необходимо отметить, что наибольшее число органосохраняющих операций выполнено в группе пациенток, получавших в неоадъювантном режиме поли-ХТ (ПХТ) по схеме CMFVP. Это связано с тем, что в данную группу вошли больные с менее распространенными стадиями РМЖ (IIb—IIIa). Варианты хирургического вмешательства в каждой группе в зависимости от схемы ПХТ представлены на рис. 2.

Исследование выраженности патоморфоза после неоадъювантной ХТ в зависимости от иммунофенотипа РМЖ проведено у 28 больных. Эти данные суммированы в табл. 3.

Как видно из табл. 3, ни один из иммунофе-нотипических признаков РМЖ не имел достоверной связи со степенью выраженности патоморфо-за. Иными словами, при проведении анализа эф-

Е Н

фективности неоадъювантной ХТ РМЖ на основе патоморфо-за опухолевой ткани ни один из иммунологических признаков раковых клеток не был взаимосвязан с эффективностью ХТ.

Дальнейший анализ проведен раздельно в группах больных, получавших лечение по схемам CAF и СМБУР.

Интересным оказалась оценка клинического эффекта на основании выраженности па-томорфоза под действием ХТ по схеме CAF в иммунофенотипически различных группах больных РМЖ (табл. 4).

Результаты, приведенные в табл. 4, свидетельствуют о том, что 2 маркера опухолевых клеток достоверно связаны с выраженностью патоморфоза под влиянием ХТ по схеме САР — CD95 и HLA-I. Рассмотрим более подробно эти наблюдения. Разумеется, группы немногочисленны и, несмотря на достоверность данных, к их трактовке следует относиться с осторожностью и продолжать накапливать материал для проверки этого факта на больших группах больных. Наиболее интересны и достоверны данные, основанные на экспрессии рецептора апоптоза CD95. По мере нарастания пропорции CD95-позитивных опухолевых клеток (отсутствие экспрессии, рецептор представлен на части клеток, мономорфная экспрессия на всех клетках) частота умеренного патоморфоза также возрастала: 44,4, 83,3, 100%. Напротив, в группе больных с минимальным патоморфозом преобладали антиген-отрицательные по CD95 случаи (83,3%). Это указывает на наибольшую эффективность ХТ по схеме САР у больных РМЖ, опухолевые клетки которых экспрессируют РАБ/АРО-Ьантиген. Взаимосвязь выраженности патоморфоза с экспрессией HLA-I была менее значимой, чем связь с экспрессией CD95, однако находилась в диапазоне достоверных значе-

Таблица 3. Выраженность патоморфоза

в иммунофенотипически различных группах больных РМЖ

Маркер Градации Выраженность патоморфоза Уровень

раковых клеток маркера минимальным умеренный значимости

CD29

+/-

+

2

3

1

0,43

- 9

CD95 +/- 1 (11,1) 8 (88,9) 0,08

+ 1

- 1

мис-1 +/- 1 (100) 0 (0) 0,14

+ 9

- 0

CD71 +/- 2 (50) 2 (50) 0,18

+ 9

- 2

HLA-I +/- 0 (0) 4 (100) 0,069

+ 9

- 9

HLA-DR +/- 2(100) 0 (0) 0,058

+ 0

- 7

CD54 +/- 4 (30,8) 9 (69,2) 0,416

+ 0

Примечание. Здесь и далее: «-» — отрицательная реакция; «+/-» — мономорфная положительная реакция. Данные представлены как число больных (в скобках — процент).

Таблица 4. Выраженность патоморфоза под действием

ХТ по схеме СЛЕ в иммунофенотипически различных группах больных РМЖ

Маркер Градации Выраженность патоморфоза Уровень

раковых клеток маркера минимальный умеренный значимости различии

CD29

+/-

+

2

1

0,44

- 5

CD95 +/- 1 (16,7) 1 (83,3) 0,039

+ 0

-

мис-1 +/- Н.о.*

+

- 0

CD71 +/- 1 (50) 1 (50) 0,49

+ 5

- 1

HLA-I +/- 0 (0) 4(100) 0,048

+ 5

- 5

HLA-DR +/- 1 (100) 0 (0) 0,34

+ 0

- 4

CD54 +/- 2(28,6) 5 (71,4) 0,45

+ 0

*Н.о. — не определяли, так как во всех случаях маркер был мономорфно экспрессирован на опухолевых клетках.

Новые технологии

Новые технологии

Н

р

О

Таблица 5. Выраженность патоморфоза под де

ХТ по схеме CMFVP в иммунофенот различных группах больных РМЖ

Маркер Градации Выраженность патоморфоза Уровень

раковых клеток маркера минимальным умеренный значимости

CD29

+/-

+

1

2

0,64

- 4

CD95 +/- 0 (0) 3 (100,0) 0,15

+ 1

- 1

MUC-1 +/- 1 (100) 0 (0) 0,19

+ 3

- 0

CD71 +/- 1 (50) 1 (50) 0,49

+ 4

- 1

HLA-I 0,73

+ 4

- 4

HLA-DR +/- 1 (100) 0 (0) 0,35

+ 0

- 3

CD54 +/- 2(33,3) 4 (66,7) 0,33

+ 0

ний, р=0,048. У пациенток с полным отсутствием антигена на опухолевых клетках умеренный пато-морфоз наблюдался вдвое чаще, чем при моно-морфной экспрессии HLA-I — 75 и 37,5% соответственно. Вместе с тем наибольшая частота умеренно выраженного патоморфоза (100%) отмечена у больных с экспрессией антигена на части раковых клеток. Для правильной интерпретации этих данных потребуется дальнейшее накопление материала.

Таким образом, при оценке выраженности па-томорфоза под действием неоадъювантной ХТ по схеме САР установлено, что наибольшую роль в эффективности лечения играет экспрессия рецептора апоптоза на раковых клетках — с нарастанием пропорции позитивных клеток нарастает выраженность патоморфоза. Результаты, полученные у па-

йствием циенток, прошедших лечение по

ипически схеме САР, являются более дос-

товерными, чем в целом по группе (схемы САР и СМБУР), что свидетельствует о наибольшей эффективности данной схемы у больных с экспрессией CD95.

Следующим этапом нашей работы явилась оценка клинического эффекта на основании выраженности патоморфоза под действием ХТ по схеме СМБУР в иммунофенотипически различных группах больных РМЖ. Эти данные суммированы в табл. 5.

Результаты, представленные в табл. 5, свидетельствуют о том, что эффективность неоадъювант-ной ХТ РМЖ, оцениваемая на основании выраженности пато-морфоза, не зависит от иммунофенотипа раковых клеток. Это во многом объясняет данные, полученные в целом по группе больных РМЖ. Близкая к достоверности связь эффективности лечения (выраженности патомор-фоза) с экспрессией CD95 по всей группе пациенток становилась высокодостоверной только при проведении лечения антрациклинсодержащей схемой САР, а применение СМБУР полностью нивелировало синергическое действие апоптотического рецептора РАБ/АРО-1. Этот факт установлен нами впервые и свидетельствует о возможности назначения неоадъювантных ХТ-схем с учетом иммунологического фенотипа клеток РМЖ.

Таким образом, эффективность неоадъювант-ной ХТ напрямую взаимосвязана с экспрессией рецептора апоптоза CD95 (РАБ/АРО-1) на раковых клетках, что подтверждено степенью выраженности патоморфоза и динамикой CD95-пози-тивных клеток в процессе проведения неоадъ-ювантной ХТ (наиболее эффективна схема САР).

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

1. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2005 г. Вестн РОНЦ им. Н.Н. Блохина 2007;18(2):прил. 1.

2. Parkin D., Pisani P., Ferley J. Global cancer statistics. CA Cancer J Clin 1999;49:33-64.

3. Артамонова Е.В. Роль иммунофеноти-пирования опухолевых клеток в диагностике и прогнозе рака молочной железы. Автореф. дис. ... докг. мед. наук. М., 2003.

4. Барышников А.Ю., Тоневицкий А.Г Моноклональные антитела в лаборатории и клинике. М., 1997. с. 99-105.

5. Абашин С.Ю. Неоадъювантная системная терапия в комплексном лечении местно-распространенного рака молочной железы. Совр онкол 2000;2(4):133.

6. Алимходжаева Л.Т Иммуноморфологи-ческие изменения в опухолях молочной железы при неоадъювантной химиотерапии в условиях искусственной гипергликемии. Опух жен репрод сист 2008;(2):35—7.

7. Кушлинский Н.Е., Портной С.М., Лактионов К.П. Рак молочной железы. М., 2005. с. 174—94.

8. Тупицын Н.Н., Васильев М.Б., Огне-рубов Н.А. Клиническое значение экс-

прессии трансферринового рецептора на клетках рака молочной железы. В кн.: Новое в онкологии. Под ред. И.В. Под-дубной, Н.А. Огнерубова. Воронеж,

2001. с. 197-209.

9. Singh G., Singh D.P, Gupta D., Muralikrishna B.V Neoadjuvant chemotherapy in locally advanced breast cancer. J Surg Oncol 1996;61(1):38—41.

10. Bernard D.J., Courjal F., Maurizis J.C. et al. Effect of epidermal growth factor in HLA class I and class II transcription and protein expression in human breast adenocarcinoma cell lines. Br J Cancer 1992;66(1):88—92.