КОНСТРУКЦИИ НУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ, СОДЕРЖАЩИЕ КЛАСТЕР ГЕНОВ БИОСИНТЕЗА ПИРИПИРОПЕНА И МАРКЕРНЫЙ ГЕН

1. Конструкция нуклеиновой кислоты, содержащая кластер генов биосинтеза пирипиропена и маркерный ген.
2. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где указанный кластер генов биосинтеза пирипиропена содержит по меньшей мере одну полноразмерную нуклеотидную последовательность, выбранную из нижеуказанных нуклеотидных последовательностей согласно (I)-(IV), или ее часть:
(I) участок от 2911 до 27797 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:266;
(II) нуклеотидная последовательность, способная к гибридизации в жестких условиях с последовательностью, комплементарной участку от 2911 до 27797 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:266, и кодирующая белок, по существу эквивалентный белку, кодируемому участком от 2911 до 27797 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:266;
(III) нуклеотидная последовательность полинуклеотида участка от 2911 до 27797 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:266, в котором один или более нуклеотидов удалены, заменены, вставлены или добавлены и который кодирует белок, по существу эквивалентный белку, кодируемому участком от 2911 до 27797 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:266; и
(IV) нуклеотидная последовательность, имеющая по меньшей мере 90%-ную идентичность с полинуклеотидом участка от 2911 до 27797 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:266 и кодирующая белок, по существу эквивалентный белку, кодируемому участком от 2911 до 27797 нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:266.
3. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где указанный кластер генов биосинтеза пирипиропена содержит интересующий ген и область регуляции экспрессии.
4. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.3, где указанный ген содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну из аминокислотных последовательностей, выбранных из SEQ ID NO:267-275, или, по существу, эквивалентную им аминокислотную последовательность.
5. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.3, где указанный ген содержит по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, выбранную из нижеуказанных нуклеотидных последовательностей согласно (1)-(4):
(1) нижеуказанная нуклеотидная последовательность согласно (a)-(i):
(a) нуклеотидная последовательность участка от 3342 до 5158 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(b) нуклеотидная последовательность участка от 5382 до 12777 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(c) нуклеотидная последовательность участка от 13266 до 15144 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(d) нуклеотидная последовательность участка от 16220 до 18018 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(e) нуклеотидная последовательность участка от 18506 до 19296 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(f) нуклеотидная последовательность участка от 19779 до 21389 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(g) нуклеотидная последовательность участка от 21793 до 22877 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(h) нуклеотидная последовательность участка от 23205 до 24773 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266, и
(i) нуклеотидная последовательность участка от 25824 до 27178 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266;
(2) нуклеотидная последовательность, способная к гибридизации в жестких условиях с последовательностью, комплементарной нуклеотидной последовательности согласно (1), и кодирующая белок, по существу эквивалентный белку, кодируемому любой из вышеуказанных нуклеотидных последовательностей;
(3) нуклеотидная последовательность полинуклеотида нуклеотидной последовательности согласно (1), в котором один или более нуклеотидов удалены, заменены, вставлены или добавлены и который кодирует белок, по существу эквивалентный белку, кодируемому любой из вышеуказанных нуклеотидных последовательностей; и
(4) нуклеотидная последовательность, имеющая по меньшей мере 90%-ную идентичность с полинуклеотидом нуклеотидной последовательности согласно (1) и которая кодирует белок, по существу эквивалентный белку, кодируемому любой из вышеуказанных нуклеотидных последовательностей.
6. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.3, где указанная область регуляции экспрессии содержит по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, выбранную из нижеуказанных нуклеотидных последовательностей согласно (1)-(4):
(1) полноразмерная нуклеотидная последовательность из нижеуказанных последовательностей согласно (j)-(s), или ее часть:
(j) нуклеотидная последовательность участка от 2911 до 3341 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(k) нуклеотидная последовательность участка от 5159 до 5381 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(l) нуклеотидная последовательность участка от 12778 до 13265 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(m) нуклеотидная последовательность участка от 15145 до 16219 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(n) нуклеотидная последовательность участка от 18019 до 18505 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(o) нуклеотидная последовательность участка от 19297 до 19778 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(p) нуклеотидная последовательность участка от 21390 до 21792 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(q) нуклеотидная последовательность участка от 22878 до 23204 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266,
(r) нуклеотидная последовательность участка от 24774 до 25823 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266, и
(s) нуклеотидная последовательность участка от 27179 до 27797 нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:266;
(2) нуклеотидная последовательность, способная к гибридизации в жестких условиях с последовательностью, комплементарной нуклеотидной последовательности согласно (1), и имеющая функцию, по существу эквивалентную любой из указанных выше нуклеотидных последовательностей;
(3) нуклеотидная последовательность полинуклеотида нуклеотидной последовательности согласно (1), в котором один или более нуклеотидов удалены, заменены, вставлены или добавлены и который имеет функцию, по существу эквивалентную любой из указанных выше нуклеотидных последовательностей; и
(4) нуклеотидная последовательность, имеющая по меньшей мере 90%-ную идентичность с полинуклеотидом нуклеотидной последовательности согласно (1) и имеющая функцию, по существу эквивалентную любой из указанных выше нуклеотидных последовательностей.
7. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где указанный маркерный ген представляет собой ген устойчивости к лекарственному средству или ген ауксотрофности.
8. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где указанный маркерный ген представляет собой ген устойчивости к дестомицину или ген устойчивости к гигромицину.
9. Трансформант, полученный путем введения указанной конструкции нуклеиновой кислоты по п.1 в хозяина.
10. Трансформант, полученный путем одновременного или раздельного введения конструкции нуклеиновой кислоты, содержащей кластер генов биосинтеза пирипиропена, и конструкции нуклеиновой кислоты, содержащей маркерный ген, в хозяина.
11. Трансформант по п.9, полученный путем введения плазмиды pPYRI02 или космиды pPYRI07 в указанного хозяина.
12. Трансформант по п.9, где указанный хозяин представляет собой нитевидный гриб, продуцирующий пирипиропены.
13. Трансформант по п.12, где указанный нитевидный гриб, продуцирующий пирипиропены, принадлежит роду Penicillium, роду Eupenicillium или роду Aspergillus.
14. Трансформант по п.12, где указанный нитевидный гриб, продуцирующий пирипиропены, представляет собой Penicillium coprobium, Penicillium griseofulvum, Eupenicillium reticulosporum или Aspergillus fumigatus.
15. Трансформант по п.12, где указанный нитевидный гриб, продуцирующий пирипиропены, представляет собой штамм Penicillium coprobium PF1169 или штамм Penicillium coprobium ATCC58615.
16. Способ продуцирования пирипиропенов, включающий культивирование указанного трансформанта по п.9 или 10 и получение указанных пирипиропенов из культуры.