СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ГЕМОФИЛЕЗА, СТРЕПТОКОККОЗА И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА СВИНЕЙ
METHOD OF OBTAINING HYPERIMMUNE SERUM AGAINST SWINE HEMOPHILOSIS, STREPTOCOCCOSIS, AND PASTEURELLOSIS

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения гипериммунной сыворотки для лечения и профилактики гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней. Известен способ изготовления гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней, получаемой от продуцентов свиней (RU 2118169 А61К 39/02, 39/09, 39/102 - прототип).
Однако данный способ экономически нецелесообразен, т.к. срок эксплуатации свиней составляет 5-6 месяцев (в зависимости от длины хвоста и клинического состояния продуцентов). Кроме того, процесс иммунизации и крововзятий у этого вида животных крайне трудоемок. Целесообразно использовать в качестве продуцентов волов, срок эксплуатации которых не менее 5 лет.
Технический результат заявляемого изобретения состоит в повышении выхода целевого продукта и упрощении способа, а также применении препарата одновременно против трех заболеваний.
3
3
Указанный технический результат предлагаемого способа достигается тем, что для создания грундиммунитета волам (не более один раз в пять лет) двукратно подкожно в разные участки тела вводят инактивированные и концентрированные гемофилезный, стрептококковый и пастереллезный антигены: сначала по 10-15 миллиардов микробных тел с добавлением 10 см Al(ОН), а через 14 дней - по 20-25 млрд м.т.
Гипериммунизацию волов проводят 7-10-внутримышечными инъекциями в возрастающих дозах инактивированных и концентрированных антигенов, очищенных от культуральной жидкости в общей дозе каждого антигена 1800-2400 млрд микробных тел с интервалом 2-3 дня.
3
В процессе эксплуатации после каждого взятия крови (16-17 см крови на 1 кг массы тела) через 1-2 дня проводят очередные внутримышечные инъекции инактивированного концентрированного гемофилезного, стрептококкового и пастереллезного антигенов в дозе по 400-500 млрд м.т каждого, а через 8-10 дней после этого от продуцентов снова берут кровь.
Способ осуществляют следующим образом.
Пример 1. Гипериммунизацию волов проводили путем 10 внутримышечных инъекций в возрастающих дозах инактивированного и концентрированного гемофилезного, стрептококкового и пастереллезного антигенов, очищенных от культуральной жидкости в общем количестве 2400 млрд м.т каждого антигена с интервалом 2-3 дня по схеме:
40-60-100-150-250-350-450 - 2-недельный перерыв - 200-300-500 млрд м.т.
Результаты определения активности
Титры полученной сыворотки составили:
контроль (прототип)
к Pasteurella multocida
А 1:128
1:128
реакция пассивной
В 1:512
1:512
гемагглютинации (РПГА)
Д 1:128
1:128
Haemophilus pleuropneumoniae 5870
1:320
1:320
Реакция агглютинации (PA) ГУ-19
1:640
1:640
Streptococcus suis Касли
Реакция агглютинации (РА)
1:200
1:200
Пример 2. В сравнении с примером 1 увеличено количество инъекций и дозы антигенов при гипериммунизации. Проводят 11 инъекций в общем количестве 3000 млрд м.т каждого антигена по схеме: 40-60-100-150-250-350-450 - 2-недельный перерыв - 200-300-500-600 млрд м.т.
Результаты определения активности
Титры получаемой сыворотки составили:
Контроль (прототип)
к P.multocida
A
1:128
1:128
РПГА
В
1:512
1:512
Д
1:128
1:128
H.pleuropneumoniae 5870
1:320
1:320
РА
ГУ-19
1:640
1:640
Str. Suis (PA)
1:200
1:200
Увеличение числа инъекций больше 10 и общего количества антигенов больше 2400 млрд м.т не привело к дальнейшему повышению титра антител сыворотки. Увеличение количества антигенов и числа инъекций нецелесообразно, так как оказывает дополнительную нагрузку на иммунную систему продуцентов и не выгодно с экономической точки зрения.
Пример 3. Уменьшили количество инъекций до 7 при уменьшении общего количества вводимых антигенов до 1800 млрд м.т:
40-60-100-200-300-500-600 млрд. м.т.
Титры полученной сыворотки составили:
Контроль (прототип)
к P.multocida
A
1:128
1:128
РПГА
В
1:512
1:512
Д
1:128
1:128
H.pleuropneumoniae
5870
1:320
1:320
PA
ГУ-19
1:640
1:640
Str. Suis (PA)
1:200
1:200
Уменьшение числа инъекций до 7 при уменьшении общего количества антигенов до 1800 млрд м.т не привело к снижению титра антител в сыворотке.
Пример 4. Уменьшили количество инъекций до 6 при уменьшении общего количества вводимых антигенов до 1300 млрд м.т по схеме:
40-60-150-250-350-450 млрд м.т.
Титры полученной сыворотки составили:
Контроль (прототип)
к P.multocida
A
1:64
1:128
РПГА
В
1:256
1:512
Д
1:64
1:128
H.pleuropneumonie
5870
1:160
1:320
PA
ГУ-19
1:320
1:640
Str. Suis (PA)
1:100
1:200
Уменьшение числа инъекций до 6 при уменьшении общего количества вводимых антигенов до 1300 млрд м.т каждого антигена привело к снижению титров антител в полученной сыворотке.
Предложенный способ апробирован с положительными результатами в лабораторных и производственных условиях.
Предложенный способ в отличие от известного обладает следующими преимуществами:
1. Увеличивается выход сыворотки в 3,2-3,5 раза (табл.2).
Таблица 2
Вид продуцента
Вес,
Кол-во крови с 1кг живого веса
Выход,
(кг)
животного,
(мл)
(мл)
свиньи
150-160
13
1950-2080
волы
400-450
16
6400-7200
2. Более прост в исполнении и менее трудоемок.
Срок эксплуатации свиней 5-6 месяцев (в зависимости от длины хвоста и клинического состояния продуцентов). Процесс иммунизации и крововзятий у этого вида животных крайне трудоемок. Напротив, срок эксплуатации волов не менее 5 лет.
Отсюда вытекает, что грунд- и гипериммунизация свиней проводится раз в 5-6 месяцев, в то время как волов - раз в 5 лет.
3. Более экономически целесообразен, что вытекает из пунктов 1 и 2. Кроме того, данная сыворотка может использоваться для лечения и профилактики гемофилеза, стретококкоза и пастереллеза одновременно.