Фенотипическая коррекция генетически контролируемого иммунного ответа

ИММУНОЛОГИЯ № 4, 2013

© Р.в. ПЕТРОВ, Р.М. ХАИТОВ, 2013 УДК 615.276.4.012.076.9

Р.В. Петров, Р.М. Хаитов

фенотипическая коррекция генетически контролируемого иммунного ответа

ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России, 115478, г Москва

Описан впервые в мире предложенный авторами принцип фенотипической коррекции генного контроля иммунного ответа. В результате многолетних исследований сформирована, теоретически обоснована, экспериментально подтверждена и внедрена в практику здравоохранения оригинальная платформа создания конъюгированных иммуногенов и вакцин путем присоединения антигенов к полиэлектролитным иммуностимуляторам. Разработанный принцип создания иммуногенов и вакцин нового типа позволяет «обойти» генный контроль иммунного ответа, что обеспечивает сильный иммунитет даже у генетически низкореагирующих на данный антиген организмов.

Ключевые слова: иммунитет, фенотипическая коррекция, вакцины R.V. Petrov, R.M. Khaitov

PHENOTYPIC CORRECTION OF GENETICALLY CONTROLLED IMMUNE RESPONSE

State research center Institute of immunology of FMBA of Russia, 115478, Moscow, Russia

The principle of phenotypic correction of genetic immune response control has been suggested by the authors and it has been described for the first time in the world. The original platform for creation of conjugated immunogens and vaccines by adding antigens to polyelectrolyte immunostimulants has been developed, theoretically substantiated, experimentally validated and implemented into the health care practice as a result of many research years. This principle permits "to evade" the gene control of immune response providing a strong immunity to given antigen even in genetically low responding organisms.

Keywords: immunity, phenotypic correction, vaccines

Лауреат Нобелевской премии К. Ландштейнер [1] показал, что антигенная характеристика белков определяется не всей большой молекулой протеина, а его малыми химическими группировками - антигенными детерминантами (рис. 1, левая часть). Присоединение малой химической группировки, например фенильной, к белку меняет его антигенную специфичность, хотя сама эта детерминанта не антигенна. Такие малые химические структуры в отличие от антигенов получили название гаптенов. Конъюгирование белка и гап-тена приводит к образованию нового весьма слабого антигена. Для проявления этой слабой антигенности требуются дополнительные стимуляторы, а именно адъюванты типа Фрейнда. Другими словами, сам белок как носитель гаптена не является достаточно сильным стимулятором иммунного ответа к гаптену.

М. Села [2] сконструировал прототип белка из четырех аминокислот - полипептид с разветвленными цепями (ТГАЛ) (рис. 1, правая часть). Этот искусственный пептид проявил антигенные свойства. Но также очень слабые. Требовался адъювант Фрейнда. Так ведут себя практически все высокоочищенные или генно-инженерные белки и полипептиды.

В 1977 г. (рис. 1, нижняя часть) мы впервые опубликовали результаты поисков возможности присоединения гаптенных группировок не к белку-носителю, а к молекулам неантигенных синтетических линейных полиэлектролитов - полианионов или поликатионов [3]. Фактически впервые были получены полностью синтетические - неприродные - антигены, которые вызывали достаточно сильный иммунный ответ без белковых, липопротеидных и т. д. природных антигенных носителей.

Специально подчеркиваем еще раз: использованные полиэлектролиты сами антигенностью не обладали. Однако гаптенная специфичность сконструированных на их основе наноструктур проявилась в виде сильного иммунного ответа

Петров Рэм Викторович

без каких-либо дополнительных адъювантов типа Фрейнда. Единственным обязательным условием [4] для экспрессии этих свойств полиэлектролитных носителей была длина молекулы поликатиона или полианиона: обычно не менее 5001000 звеньев при MM 50-100 000 Д (рис. 2). Низкомолекулярные аналоги повторяющихся звеньев полимера не влияют на иммунные реакции.

Полиэлектролитный носитель сам оказывает иммуностимулирующее действие и присоединенные к нему гапте-ны или слабые белковые антигены обеспечивают сильный эпитопспецифический иммунный ответ без дополнительных адъювантов.

Таким образом, нам удалось конструировать ранее не известные наноструктуры - сильные иммуногены из тех антигенных детерминант, которые в том или ином случае необходимы для создания иммуногенов или вакцин требуемой специфичности [5].

Статья посвящается многолетнему исследованию и использованию конъюгированных иммуногенов и вакцин нового поколения.

Наши исследования базировались на особенностях генетического контроля иммунного ответа и были нацелены на осуществление фенотипической коррекции иммуногенеза. Эта задача успешно решена путем химического соединения антигена с упоминавшимися полиэлектролитными молекулами, которые обеспечивают обход генного контроля иммунного ответа, т. е. фенотипическую коррекцию слабого иммунитета, обусловленного генами низкого иммунного реагирования.

В чем суть такого подхода?

В результате исследований, выполненных в 1960-е годы на различных линиях и сублиниях инбредных мышей при иммунизации различными микробными и клеточными антигенами, было доказано, что способность иммунологически реагировать на конкретные антигены детерминирована генетически [6, 7]. С помощью гибридологического анализа обнаружен доминантный характер наследования высокого типа иммунного ответа. Работы Нобелевского лауреата Б. Бенасеррафа [8], а также Х. Макдевита и М. Села [9] на мо-

- 180 -

Рис. 1. Искусственные антигены.

Здесь и на рис. 3, 5,6: АОК - антителообразующие клетки.

дели пептидных антигенов позволили выявить конкретные гены иммунного ответа, названные Ir-генами (от immune response - иммунный ответ) (рис. 3). Ir-гены располагаются в главном комплексе гистосовместимости - МНС (Major Histocompatibility Complex). Этот комплекс, впервые описанный Нобелевскими лауреатами Дж. Снеллом у мышей (H-2) (см. рис. 3, а) и Ж. Доссе у человека (HLA), представляет

Рис. 2. Зависимость иммуностимулирующего действия от степени полимеризации (и) поликатиона и полианиона.

Представлены коэффициенты стимуляции продукции АОК при совместном введении антигена (5 млн эритроцитов барана) с фракциями поли-конидинов (1) или ПАК (2).

собой совокупность тесно связанных генов, картированных соответственно на хромосомах 17 и 6.

На рис. 4 изображены структурные формулы некоторых синтетических полиэлектролитных носителей - поликатионов и полианионов. Например, полианион - полиакриловая кислота, поликатион - поли-4-винилпиридин, его сополимеры, производные поликонидина. Несмотря на существенные различия в строении и даже в самой химической природе элементарных звеньев макромолекул этих полимеров, их иммуностимулирующая активность в целом близка по величине. Так, любой из них при комплексировании с каким-либо слабым антигеном существенно увеличивает иммунный ответ - примерно на порядок. Важно подчеркнуть, что мономерные аналоги звеньев этих полимеров вовсе не проявляют какого-либо иммуномодулирующего действия. Из этих сопоставлений, а также из результатов специальных физико-химических исследований, проведенных совместно с акад. В.А. Кабановым, следует, что механизм действия полиэлектролитных носителей обусловлен их макромолекулярной природой и объясняется способностью к многоточечному кооперативному взаимодействию с другими комплементарными макромолекулами или кооперативной многоточечной абсорбцией на химически комплементарных поверхностях [10].

При изучении иммунологических механизмов действия синтетических полиэлектролитов анализировали ранние изменения в мембране клеток иммунной системы (активность циклазных ферментов, систему ионного транспорта, микровязкость липидного матрикса) и основные этапы иммуногенеза, которые в конечном счете определяют иммунный ответ, его высоту и силу [11]. В результате были открыты механизмы действия полиэлектролитов, состоящие в активации Т- и В-клеточной миграции, клеточной кооперации, компенсации функции Т-хелперов, кластеризации мембранных белков, сопровождающейся повышением проницаемости клеточной мембраны для ионов Ca2+, Na+, К+ и активацией Ca2+ и (Na+, К+) - АТФаз.

- 181 -

ИММУНОЛОГИЯ № 4, 2013

Рис. 3. Гены главного комплекса гистосовместимости

а - главный комплекс гистосовместимости мыши (H-2); б - главный комплекс гистосовместимости человека (HLA).

На основании полученных материалов о важнейших свойствах полиэлектролитов и механизмах реагирования клеток на них мы предположили, что химическое объединение молекул АГ и полиэлектролита, обеспечивающее фокусирование действия полимера на клетках, взаимодействующих с антигеном, позволит получить наноструктуры с повышенной иммуногенностью. Помимо уже рассмотренного синтетического антигена гаптен-полиэлекрoлит примером могут служить иммуногены, полученные присоединением к полиэлектролитным носителям молекул различных антигенов.

Химическое соединение полиэлектролита с антигеном позволяет концентрировать иммуностимулирующее действие полиэлектролита на антигенреактивных клетках. Введение ковалентных конъюгатов антиген-полиэлектролит в организм животных и человека индуцирует иммунный ответ на антиген, значительно более интенсивный, чем ответ на введение антигена или нековалентного комплекса антиген + полиэлектролит.

Работы Р.В. Петрова, РМ. Хаитова и соавт. [12-14] показали, что конъюгированные иммуногены можно создавать, используя белковые и полисахаридные антигены, а также синтетические пептиды, имитирующие природные антигенные детерминанты. Исследованы конъюгаты как с модельными антигенами, так и с антигенами микроорганизмов. Путем ковалентного соединения антигена с полиэлектролитом созданы высокоиммуногенные конъюгаты, содержащие O- и Н-антигены сальмонелл, гемагглютинин, нейраминидазу, NP- и М-белки вирусов гриппа А и В, гликопротеиновый антиген бруцелл, очищенный белковый компонент туберкулина (PРD) и многие другие. Во всех случаях соединение антигена с полиэлектролитом повышало на порядок и более интенсивность иммунных реакций в отношении антигена даже у генетически низкореагирующих особей (рис. 5).

Детально описаны особенности иммунных реакций, развивающихся в организме в ответ на введение конъюгированных иммуногенов. Показано, что происходит интенсификация продукции антител изотипов IgM, IgGp IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, но не IgE. После однократного введения конъюгата формировалась иммунная память, уровень иммунного ответа на

повторное введение того же конъюгата превышал в 10-100 раз уровень первичной иммунной реакции. В лимфатических узлах, ближайших к месту инъекции конъюгата, активировались специфические к антигену Т-хелперы и цитолитические Т-клетки, способные убивать клетку-мишень, зараженную соответствующим вирусом [5-11].

Среди важнейших особенностей иммунного ответа на конъюгированные иммуногены необходимо выделить относительную Т- и IR-независимость. Под влиянием полиэлектролитов происходит стимуляция продукции антител к Т-зависимым антигенам даже в организме, дефицитном по содержанию Т-клеток. Полноценный иммунный ответ на конъюгат-полиэлектролит развивается также в организме, имеющем IR-гены слабой иммунной реакции на данный антиген (рис. 6) [15]. Благодаря Т- и IR-независимости конъюгированные иммуногены очень ценны в реальной практике, так как вызывают эффективный иммунный ответ при Т-иммунодефиците и генетически предопределенной слабой способности реагировать на данный антиген. Обычные вакцины в таких случаях неэффективны. Фенотипическая коррекция иммунного ответа доказана в опытах на мышах различных линий при комбинированной иммунизации или вакцинации вместе с полиэлектролитами различных антигенов [14].

В прямых экспериментах по заражению животных различными возбудителями инфекций установлено, что конъюгиро-

Рис. 4. Синтетические полиэлектролиты-иммуномодуляторы.

- 182 -

Рис. 6. Фенотипическая коррекция иммунного ответа при иммунизации конъ-югантом.

1 - СИФ; 2 - 57СBL. По вертикали количество АОК на селезенку.

Рис. 5. Накопление в динамике АОК в селезенке мышей, иммунизированных БСА (1), нестабильным (2) или стабильным (3) комплексом БСА + полиэлектролит, конъюгантом БСА -полиэлектролит (4).

По оси абсцисс - время (в сут).

ванные иммуногены способны защищать от летальных доз инфекций [5, 11, 14]. Конъюгированные иммуногены, содержащие гемагглютинин и нейраминидазу вируса гриппа, химически связанные с полиэлектролитом-иммуностимулятором, индуцировали высокий уровень защиты при заражении мышей различных линий патогенным для них штаммом вируса гриппа в смертельной дозе 10 LD50 (рис. 7) [14, 16].

В модели экспериментального заражения мышей вирусом гриппа установлено, что даже конъюгаты, содержащие в

качестве антигенной части М-белок вируса гриппа, в определенной мере защищают от заражения патогенным вирусом [5, 16]. Ранее считалось, что иммунные реакции специфичные в отношении М-белка, не играют существенной роли в защите от гриппозной инфекции.

Результаты исследования протективных свойств конъюгированных иммуногенов, содержащих О- и Н- антигены сальмонелл, тоже показали высокий уровень вакцинирующего (защитного) действия конъюгатов. В модели естественной для мышей инфекции Salmonella typhimurium продемонстрировано, что в составе конъюгата с полиэлектролитом протек-тивная эффективность полисахаридного O-антигена сальмонелл возрастает в 20-40 раз. Используя конъюгат О-антигена (или двух антигенов О+Н) с полиэлектролитом, можно защитить мышей от заражения абсолютно смертельной дозой 100 LD50 Salmonella typhimurium [13].

Рис. 7. Конъюгированная противогриппозная вакцина.

- 183 -

ИММУНОЛОГИЯ № 4, 2013

Рис. 8. ПО.

Первый оригинальный препарат нового класса гетероцепных алифатических полиаминов.

Мы провели специальную работу по созданию синтетического полимера-иммуностимулятора, отвечающего требованиям, которые предъявляются к фармакологическим препаратам. От других полиэлектролитов такой препарат должен отличаться безвредностью, способностью к деструкции и выведению из организма. При решении этих задач было необходимо сохранить способность полимера к многоточечным кооперативным взаимодействиям, с которой и связана иммуностимулирующая активность полиэлектролитов. Совместно с А.В. Некрасовым в 1990 г. был синтезирован биодеструк-тируемый полимер, отвечающий сформулированным выше требованиям, - сополимер N-окиси 1,4-этиленпиперазина и (Ы-карбоксиэтил)-1,4-этиленпиперазиния бромида, впоследствии названный полиоксидонием (ПО) (рис. 8) [17].

ПО запатентован с приоритетом 1990 г Множество повторяющихся дипольных NO-групп обеспечивает высокую способность к многоточечным кооперативным взаимодействиям. Карбоксиэтильные группы привносят дополнительные адсорбционные свойства, а главное - служат универсальными сайтами для химического присоединения к любому антигену.

ПО подвергается в организме деструкции биологическими системами утилизации N-окисей третичных полиаминов. Хорошо известно, что окисление третичных аминов через образование N-оксидов - это основной путь метаболизма азотистых соединений в живой природе. Изучены механизмы деструкции ПО, определены кинетические и термодинамические константы этого процесса. Установлено, что ПО деструктирует вследствие разрывов N-C-связи, что характерно для алифатических N-окисей. Детально изучена фармакокинетика Н- и С-меченого ПО в организме экспериментальных животных. Показано, что ПО эффективно выводится из организма, определены периоды полураспределения и полуэлиминации, время удержания, клиренс и другие важные фармакокинетические параметры [18].

Иммуностимулирующие свойства ПО сравнимы с таковыми у ранее изученных синтетических полиэлектролитов. Под влиянием ПО значительно активируются функции фагоцитов, повышается интенсивность антителообразования в ответ на чужеродные антигены.

Ковалентное соединение ПО с белковыми или полисахаридными антигенами приводит к усилению иммуногенности конъюгированных антигенов. ПО в качестве носителя повышает иммуногенность и протективные свойства антигенов, выделенных из возбудителей гриппа, бруцеллеза, брюшного тифа, гепатита А, туберкулеза и других бактериальных и вирусных инфекций [5, 11, 14].

Создание перечисленных выше конъюгированных вакцин находится на разных стадиях. Разработана, производится и внедрена в практику здравоохранения тривалентная полимерсубъединичная конъюгированная вакцина против гриппа, завершены клинические испытания бруцеллезной вакцины, а также доклинические испытания брюшно-тифозной вакци-

ны, проводятся доклинические испытания вакцины против туберкулеза.

Успешный опыт создания и внедрения в практику полимер-субъединичной гриппозной вакцины является апробированной основой для следующих вакцин и заслуживает более подробного описания. Мы создали вакцину, содержащую очищенные белки - ге-магглютинин и нейраминидазу трех вирусов гриппа: А (Н1Ши H3N2) и В, конъюгированные с пО [19]. Эта вакцина известна под названием «Гриппол» [20]. Промышленный выпуск вакцины Гриппол осуществляется с 1997 г. крупнейшими в России предприятиями по производству высококачественных иммунобиологических препаратов и лекарственных средств («Иммуноген», «Петровакс»).

Доказано, что иммуностимулирующие и мембраноактивные свойства полиэлектролитов критически зависят от степени полимеризации и наличия повторяющихся ионогенных или дипольных групп, т.е. обусловлены полимерностью как таковой. Таким образом, впервые в медицинскую практику внедрены синтетические макромолекулы, биологическое действие которых основано на их эффективном физико-химическом взаимодействии с клетками. До настоящей работы круг полимеров для медицины был ограничен химически нейтральными веществами типа поливинилпирролидон, использующимися в качестве конструкционных материалов или пассивных носителей низкомолекулярных лекарств.

Сравнение полученных нами результатов с достижениями других исследователей в мире позволяет утверждать, что представленная работа не имеет аналогов и относится к лидирующим в области новых принципов и технологий создания вакцин.

ЛИТЕРАТУРА

3. ПетровР.В., ЕвдаковВ.П., ХаитовР.М., ФилатоваЕ.Д., Алексеева Н.Ю., Савинова И.В. Антигенные свойства пикратов полиоснований. Доклады АН СССР. 1977; 236(5): 1260-3.

4. Кабанов В.А., Мустафаев М.И., Некрасов А.В., Норимов А.Ш., Петров Р.В., Хаитов Р.М., Хаустова Л.И. Критический характер влияния степени полимеризации полиэлектролитов на их иммуностимулирующие свойства. Доклады АН СССР. 1984; 274(4): 998-1001.

5. Петров Р.В., Хаитов Р.М. Искусственные антигены и вакцины. М.; Медицина: 1988.

6. Петров Р.В., Манько В.М., Егоров И.К. О различной антителообразующей способности у мышей высокоинбредных линий. Доклады АН СССР. 1963;153(3): 728-30.

7. Петров Р.В., Манько В.М., Пантелеев Э.И. Межлинейные различия антителогенеза у инбредных мышей, иммунизированных одним или двумя антигенами. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1966; 62(8): 70-4.

11. Петров Р.В., Хаитов Р.М., Атауллаханов Р.И. Иммуногенетика и искусственные антигены. М.; Медицина; 1983.

12. Кабанов В.А., Мустафаев М.И., Норимов А.Ш., Петров Р.В., Хаитов Р.М. Иммуногенность комплекса бычьего сывороточного альбумина с поликатионом, нагруженным гидрофобными боковыми группами. Доклады АН СССР. 1978; 243(5): 1130-3.

13. Петров Р.В., Кабанов В.А., Хаитов Р.М., Некрасов А.В., Алексеева Н.Ю., Апарин П.Г., Елкина С.И. Протективная эффективность конъюгатов бактериального антигена с синтетическими полиэлектролитами. Доклады АН СССР. 1983; 270(5): 1257-9.

14. Петров Р.В., Хаитов Р.М. Иммуногены и вакцины нового поколения. М.: ГЭОТАР-Медиа: 2011.

17. Некрасов А.В., Пучкова Н.Г., Атауллаханов Р.И., Иванова А.С., Хаитов Р.М., Петров Р.В. Производные поли-1,4-этиленпиперазина, обладающие иммуностимулирующей, противовирусной и антимикробной активностью. Патент № 2073031 (Российская Федерация). Приоритет: август 1990.

- 184 -

КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ

18. ПетровР.В., ХаитовР.М., НекрасовА.В., АтауллахановР.И., ПучковаН.Г., Иванова А.С. Полиоксидоний - препарат нового поколения иммуномодуляторов с известной структурой и механизмом действия. Иммунология. 2000; 5: 24-8.

19. Петров Р.В., Хаитов Р.М., Некрасов А.В., Мельников С.Я., Атауллаханов Р.И., Пучкова Н.Г., Михеева А.В., Иванова А.С. Способ получения вакцины против вируса гриппа. Патент № 1580617 (Российская Федерация). Приоритет: май 1988.

20. ПетровР.В., ХаитовР.М., НекрасовА.В., ИвановаА.С., Пучкова

Н.Г. Гриппозная вакцина нового поколения - Гриппол. Физиология и патология иммунной системы. 2004; 8(1): 10-26.

REFERENCES

1. Landsteiner K. The specificity of serological reactions. Cambridge, Massachusetts: Harvard University, 1946.

2. Sela M. Antigenicity: some molecular aspects. Science. 1969; 166: 1365-74.

3. Petrov R.V., Evdakov V.P., Khaitov R.M., Filatova E.D., Alekseeva N.Yu., SavinovaI.VAntigenic properties picrate polygrounds. Reports. USSR Academy of Sciences. 1977; 236(5): 1260-3 (in Russian).

4. Kabanov V.A., Mustafayev M.I., Nekrasov A.V., Norimov A.§h, Petrov R.V., Khaitov R.M., Khaustova L.I. Critical nature of the influence degree of polymerization polyelectrolytes on their immune-stimulating properties. Reports. USSR Academy of Sciences. 1984; 274(4): 998-1001 (in Russian).

5. Petrov R.V., Khaitov R.M. Artificial antigens and vaccines. M.: Meditsinf. 1988 (in Russian).

6. Petrov R.V., Man’ko VM., Egorov И.К. The different antibodyforming ability of the mice to highlyinbred lines. Reports. USSR Academy of Sciences. 1963; 153(3): 728-30 (in Russian).

7. PetrovR.V., Man’ko V.M., PanteleevE.I. Bulletin of experimental biology and medicine. 1966; 62(8): 70-4 (in Russian).

8. Benacerraf B. The genetic mechanisms that control the immune response and antigen recognition. Ann. Immunol. 1974; 1250: 143-164.

9. McDevittH.O., SelaM. Genetic control of the antibody response.

J. Exp. Med. 1965; 122: 517-31.

10. Kabanov V.A., PetrovR.V., KhaitovR.M. Artificial antigens and vaccines based on non-natural polyelectrolytes. Sov. Sci. Rev. D. Physicochem. Biol., 1984,V 5, 277-322.

11. Petrov R.V., Khaitov R.M., Ataullakhanov R.I. Immunogenetics and artificial antigens. M.; Meditsina; 1983. (in Russian).

12. Kabanov V.A., Mustafayev M.I., Norimov A.§h, Petrov R.V., Khaitov R.M. Immunogenicity complex bovine serum albumin with polycation, loaded hydrophobic side groups. Reports. AS USSSR, 1978; 243:5: 1130-3.

13. Petrov R. V., Kabanov V.A., Khaitov R.M., Nekrasov A. V., Alekseeva N.Yu., AparinP.G., Elkina S.I. Protective efficacy of conjugates of bacterial antigen with synthetic polyelectrolytes. Reports. USSR Academy of Sciences. 1983; 270(5): 1257-9 (in Russian).

14. Petrov R.V., Khaitov R.M. Immunogenes and vaccines of new generation. M.; GEOTAR-Media: 2011. (in Russian).

15. Petrov R.V., Khaitov R.M., Norimov A.S., Nekrasov A.V., Koryakin

S.A. Phenotype correction of Ir-genic control of immune response to (T,G)-A-L conjugated to synthetic polyelectrolytes. Immunol. Lett. 1986; 12: 237-42.

16. Petrov R.V., Khaitov R.M., Zhdanov VM., Sinyakov M.S., Nekrasov A.V Influenza virus antigens conjugated with a synthetic polyelectrolytes: a novel model of vaccines. vaccine. 1985; 3: 392-400.

17. Nekrasov A.V Puchkova N.G., Ataullakhanov R.I, Ivanova A.S., Khaitov R.M., Petrov R.V Derivatives ofpoly (1,4-Etilenpiperazin, have immunostimulating, antiviral and antimicrobial activity. Patent № 2073031 (Russian Federation). Priority: August 1990.

18. Petrov R.V., Khaitov R.M., Nekrasov A.V, Ataullakhanov R.I., Puchkova N.G., Ivanova A.S. Immunologiya. 2000; 5: 24-8 (in Russian).

19. Petrov R.V., Khaitov R.M., Nekrasov A.V, Mel’nikov S.Ya., Ataullakhanov R.I., Puchkova N.G., Mikheeva A.V, Ivanova A.S. A method of obtaining a vaccine against the influenza virus. Patent № 1580617 (Russian Federation). Priority: may 1988.

20. Petrov R.V., Khaitov R.M., Nekrasov A.V., Ivanova A.S., Puchkova N.G. Fiziologiya i patologiya immunnoy sistemy. 2004; 8(1): 10-26.

Поступила 13.02.13

КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 612.411:57.034].085

М.Е. Диатроптов, М.А. Диатроптова, О.В. Макарова

ИНФРАДИАННЫЕ РИТМЫ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ СЕЛЕЗЕНКИ

у крыс-самцов линии вистар

ФГБУ НИИ морфологии человека РАМН, 117418, г Москва

Проведено исследование инфрадианных колебаний показателей морфофункциональных зон селезенки, уровня стероидных гормонов, неоптерина, TGF-pi в сыворотке крови и продукции цитокинов ИФНY, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ФНОа клетками селезенки, активированными конканавалином А, у крыс-самцов Вистар. Установлен синхронный

4-суточный период колебаний объемной плотности лимфоидных фолликулов и количества мононуклеаров в селезенке, их максимальные значения наблюдались на фоне низкого содержания стероидных гормонов в сыворотке крови. Уровень неоптерина в сыворотке крови также имел 4-суточную периодичность. Продукция ИЛ-2 клетками селезенки и уровень TGF-р в крови отрицательно коррелировали с концентрацией кортикостерона. Ритмические изменения этих показателей необходимо учитывать в экспериментальных и клинических исследованиях.

Ключевые слова: инфрадианныйритм, кортикостерон, цитокины, селезенка, крыса

- 185 -