КОНЪЮГАТ ИНСУЛИНА С ПРИМЕНЕНИЕМ ФРАГМЕНТА ИММУНОГЛОБУЛИНА

1. Конъюгат инсулина, полученный посредством связывания инсулина с Fc-областью иммуноглобулина через непептидильный полимер, выбранный из группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропиленгликоля, сополимеров этиленгликоля и пропиленгликоля, полиоксиэтилированных полиолов, поливинилового спирта, полисахаридов, декстрана, поливинилэтил простого эфира, биодеградируемых полимеров, липидных полимеров, хитинов, гиалуроновой кислоты и их сочетаний, в котором непептидильный полимер связан с N-концом бета-цепи инсулина.
2. Конъюгат инсулина по п.1, где инсулин является природным инсулином или его вариантом, производным или фрагментом, которые получают посредством любого одного из способов замещения, присоединения, делеции и модификации или их сочетания в аминокислотах природного инсулина.
3. Конъюгат инсулина по п.1, где каждый конец непептидильного полимера связан с аминогруппой или тиоловой группой Fc-области иммуноглобулина и инсулина.
4. Конъюгат инсулина по п.1, где Fc-область иммуноглобулина является агликозилированной.
5. Конъюгат инсулина по п.1, где Fc-область иммуноглобулина составлена из от одного до четырех доменов, выбранных из группы, состоящей из доменов CH1, CH2, CH3 и CH4.
6. Конъюгат инсулина по п.5, где Fc-область иммуноглобулина дополнительно содержит шарнирную область.
7. Конъюгат инсулина по п.1, где Fc-область иммуноглобулина является Fc-областью, полученной из IgG, IgA, IgD, IgE или IgM.
8. Конъюгат инсулина по п.7, где каждый домен Fc-области иммуноглобулина является гибридом домена различного происхождения, полученного из иммуноглобулина, выбранного из группы, состоящей из IgG, IgA, IgD, IgE и IgM.
9. Конъюгат инсулина по п.7, где Fc-область иммуноглобулина является димером или мультимером, составленным из одноцепочечных иммуноглобулинов того же происхождения.
10. Конъюгат инсулина по п.7, где Fc-область иммуноглобулина является Fc-областью IgG4.
11. Конъюгат инсулина по п.10, где Fc-область иммуноглобулина является агликозилированной Fc-областью IgG4 человека.
12. Конъюгат инсулина по п.1, где реакционноспособная группа непептидильного полимера выбрана из группы, состоящей из альдегидной группы, пропиональдегидной группы, бутиральдегидной группы, малеинимидной группы и производного сукцинимида.
13. Конъюгат инсулина по п.12, где производное сукцинимида является сукцинимидилпропионатом, сукцинимидилкарбоксиметилом, гидроксисукцинимидилом или сукцинимидилкарбонатом.
14. Конъюгат инсулина по п.12, где непептидильный полимер имеет реакционноспособную альдегидную группу на обоих концах.
in vivo
15. Состав инсулина длительного действия, имеющий улучшенную продолжительность действия и стабильность, содержащий конъюгат инсулина по любому из пп.1-14.
16. Состав инсулина длительного действия по п.15, где состав применяют для лечения диабета.
17.Способ получения конъюгата инсулина по п.1, включающий стадии:
(1) ковалентное связывание непептидильного полимера, имеющего реакционноспособную группу из производных альдегида, малеинимида или сукцинимида на каждом его конце, с аминогруппой или тиоловой группой Fc-области иммуноглобулина;
(2) выделение конъюгата из реакционной смеси (1), где конъюгат содержит Fc-область иммуноглобулина, ковалентно связанную с непептидильным полимером; и
(3) ковалентное связывание инсулина с другим концом непептидильного полимера выделенного конъюгата для продуцирования пептидного конъюгата, содержащего Fc-область иммуноглобулина и инсулин, которые связаны с каждым концом непептидильного полимера.
18. Способ получения конъюгата инсулина по п.1, включающий стадии:
(1) ковалентное связывание непептидильного полимера, имеющего альдегидную реакционноспособную группу на каждом его конце, с N-концом Fc иммуноглобулина при pH 6,0;
(2) выделение конъюгата из реакционной смеси (1), где конъюгат содержит Fc-область иммуноглобулина, ковалентно связанную с непептидильным полимером на его N-конце; и
(3) ковалентное связывание инсулина с другим концом непептидильного полимера выделенного конъюгата для продуцирования пептидного конъюгата, содержащего Fc-область иммуноглобулина и инсулин, которые связаны с каждым концом непептидильного полимера.
19. Способ получения конъюгата инсулина по п.1, содержащий этапы:
(1) ковалентное связывание непептидильного полимера, имеющего реакционноспособную группу из производных альдегида, малеинимида или сукцинимида на каждом его конце, с аминогруппой или тиоловой группой инсулина;
(2) выделение конъюгата из реакционной смеси (1), где конъюгат содержит инсулин, ковалентно связанный с непептидильным полимером; и
(3) ковалентное связывание Fc-области иммуноглобулина с другим концом непептидильного полимера выделенного конъюгата для продуцирования пептидного конъюгата, содержащего Fc-область иммуноглобулина и инсулин, которые связаны с каждым концом непептидильного полимера.
20. Способ лечения индивидуума, имеющего инсулин-дефицитное нарушение, способ, содержащий введение индивидууму эффективного количества состава длительного действия по п.15.
21. Способ по п.20, где инсулин-дефицитное нарушение является диабетом.