ХИМЕРНЫЙ БЕЛОК

1. Химерный белок формулы
Ht1-Ht2-Casp,
где Casp представляет собой домен каспазы;
Ht1 представляет собой первый домен гетеродимеризации; и
Ht2 представляет собой второй домен гетеродимеризации
и где в присутствии химического индуктора димеризации (CID) пара идентичных химерных белков взаимодействует так, что Ht1 одного химерного белка гетеродимеризуется с Ht2 другого химерного белка, обуславливая гомодимеризацию двух доменов каспазы.
2. Химерный белок по п. 1, где Ht1 не гетеродимеризуется с Ht2 того же химерного белка.
3. Химерный белок по п. 1 или 2, где домен каспазы содержит инициаторную каспазу, выбранную из следующей группы: каспаза-8, каспаза-9 и каспаза-10.
4. Химерный белок по п. 1 или 2, где домен каспазы содержит исполнительную каспазу, выбранную из каспазы-3 и каспазы-7.
5. Химерный белок по любому из пп. 1-4, где один домен гетеродимеризации содержит связывающий FK506 белок (FKBP), а другой домен гетеродимеризации содержит домен FRB mTOR.
6. Химерный белок по п. 5, где Ht1 содержит FRB и Ht2 содержит FKBP.
7. Химерный белок по п. 5 или 6, где CID представляет собой рапамицин или аналог рапамицина.
8. Химерный белок, содержащий домен каспазы и домен гетеродимеризации, содержащий домен FRB mTOR.
9. Последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный белок по любому из пп. 1-8.
10. Конструкция нуклеиновой кислоты, содержащая одну или несколько последовательностей нуклеиновых кислот по п. 9 и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую T-клеточный рецептор (TCR) или химерный антигенный рецептор (CAR).
11. Конструкция нуклеиновой кислоты, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую химерный белок, содержащий домен каспазы и домен гетеродимеризации, содержащий связывающий FK506 белок (FKBP), и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую химерный белок по п. 8.
12. Конструкция нуклеиновой кислоты структуры:
Ht1-Casp-coexpr-Ht2-Ht2,
Casp
где представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую домен каспазы;
Ht1
представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую первый домен гетеродимеризации;
Ht2
представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую второй домен гетеродимеризации; и
coexpr
Ht1-Casp
Ht2-Ht2
представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, обеспечивающую коэкспрессию и ,
где экспрессия конструкции нуклеиновой кислоты приводит к продукции химерного белка Ht1-Casp и обеспечивающего взаимодействия белка Ht2-Ht2, и где в присутствии химического индуктора димеризации (CID) пара химерных белков Ht1-Casp9 взаимодействует так, что Ht1 каждого химерного белка гетеродимеризуется с доменом Ht2 обеспечивающего взаимодействие белка, обуславливая гомодимеризацию двух доменов каспазы.
13. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 12, где Ht1 содержит связывающий FK506 белок (FKBP), а Ht2 содержит домен FRB mTOR.
14. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 11-13, которая также содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую T-клеточный рецептор (TCR) или химерный антигенный рецептор (CAR).
15. Вектор, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты по п. 9 или конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из пп. 10-14.
16. Вектор, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты по п. 9, который также содержит необходимый нуклеотид.
17. Вектор по п. 16, где необходимый нуклеотид кодирует химерный антигенный рецептор или T-клеточный рецептор так, что когда вектор используют для трансдукции клетки-мишени, клетка-мишень коэкспрессирует химерный белок по любому из пп. 1-8 и химерный антигенный рецептор или T-клеточный рецептор.
18. Клетка, экспрессирующая химерный белок по любому из пп. 1-8.
19. Клетка по п. 16, содержащая химерный белок по п. 7 и химерный белок по п. 8.
20. Клетка, экспрессирующая два белка:
Ht1-Casp и Ht2-Ht2,
где Ht1-Casp представляет собой химерный белок, содержащий домен каспазы (Casp) и первый домен гетеродимеризации (Ht1); а Ht2-Ht2 представляет собой обеспечивающий взаимодействие белок, содержащий два вторых домены гетеродимеризации (Ht2),
где в присутствии химического индуктора димеризации (CID) пара химерных белков Ht1-Casp9 взаимодействует так, что Ht1 каждого химерного белка гетеродимеризуется с доменом Ht2 обеспечивающего взаимодействие белка, обуславливая гомодимеризацию двух доменов каспазы.
21. Клетка по любому из пп. 18-20 содержащая последовательность нуклеиновой кислоты по п. 9.
22. Клетка по любому из пп. 18-21, которая представляет собой гемопоэтическую стволовую клетку, лимфоцит или T-клетку.
23. Способ получения клеток по любому из пп. 18-22, включающий этап трансдукции или трансфекции клеток вектором по любому из пп. 15-17.
24. Способ удаления клеток по любому из пп. 18-22, включающий этап воздействия на клетки химическим индуктором димеризации (CID)
25. Способ по п. 24, где CID представляет собой рапамицин или аналог рапамицина.
26. Способ профилактики или лечения заболевание у индивидуума, включающий этап введения индивидууму клеток по любому из пп. 18-22.
27. Способ по п. 26, включающий следующие этапы:
(i) трансдукции или трансфекции образца клеток, выделенных у индивидуума, вектором по любому из пп. 15-17, и
(ii) введения трансдуцированных/трансфицированных клеток пациенту.
28. Способ по п. 27 для лечения злокачественной опухоли.
29. Способ профилактики и/или лечения у индивидуума патологического иммунного ответа, вызванного введением индивидууму клеток по любому из пп. 18-22, включающий этап введения индивидууму рапамицина или аналога рапамицина.
30. Способ по п. 29, где патологический иммунный ответ выбран из следующей группы: реакция "трансплантат против хозяина"; направленная внеопухолевая токсичность; синдром активации иммунной системы и лимфопролиферативные нарушения.
31. Способ лечения заболевания у индивидуума по п. 26, который включает следующие этапы:
(i) введение индивидууму клеток по любому из пп. 18-22;
(ii) мониторинг развития у индивидуума патологического иммунного ответа; и
(iii) введение индивидууму рапамицина или аналога рапамицина, если индивидуум демонстрирует признаки развития или наличие развитого патологического иммунного ответа.
32. Клетка по любому из пп. 18-22 для применения в трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, инфузии лимфоцитов или адоптивном переносе клеток.
33. Рапамицин или аналог рапамицина для применения в профилактике или лечении патологического иммунного ответа, вызванного введением индивидууму клеток по любому из пп. 18-22.