СПОСОБ И УСТРОЙСТВО ОБНАРУЖЕНИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕРМОСТОЙКИХ МИКРООРГАНИЗМОВ В ПРОДУКТАХ

1. Способ обнаружения присутствия термостойких микроорганизмов в продукте, включающий стадии:
(a) помещения аликвоты продукта в сосуд, содержащий оптический зонд, чувствительный к метаболиту термостойких микроорганизмов, где метаболитом термостойких микроорганизмов является кислород, и где оптический зонд является чувствительным к кислороду фотолюминесцентным красителем,
(b) пастеризации аликвоты в сосуде,
(c) инкубирования пастеризованной аликвоты в сосуде в течение периода инкубации, и
(d) периодического обращения к зонду во время периода инкубации, отличающийся тем, что в ходе таких обращений измеряют произошедшие в зонде изменения в ответ на изменения концентрации метаболита термостойких микроорганизмов в аликвоте, при этом эти изменения концентрации указывают на присутствие жизнеспособных термостойких микроорганизмов в аликвоте.
2. Способ по п.1, дополнительно включающий стадии (i) преобразования измеренных произошедших в зонде изменений в концентрацию термостойких микроорганизмов в пастеризованной аликвоте перед инкубированием с помощью известного алгоритма преобразования, и (ii) регистрации выявленной концентрации термостойких микроорганизмов.
3. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию герметичного закрытия аликвоты в удерживающей камере сосуда перед пастеризацией.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что продукт представляет собой пищевой продукт, предназначенный для потребления животными или человеком.
5. Способ по п.5, отличающийся тем, что продуктом является молоко.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что сосудом является пробирка, кювета или многолуночный планшет.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что сосуд образует удерживающую камеру, имеющую увеличенное отношение поверхности к объему.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что пастеризацию осуществляют при заданной температуре в течение заданного периода времени, и тепловое равновесие аликвоты в сосуде достигается за ½ периода времени пастеризации.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что пастеризацию осуществляют при заданной температуре в течение заданного периода времени, и тепловое равновесие аликвоты в сосуде достигается за ¼ периода времени пастеризации.
10. Способ по п.6, отличающийся тем, что сосудом является многолуночный планшет, содержащий более чем 40 лунок.
11. Способ по п.1, отличающийся тем, что (i) сосуд образует удерживающую камеру, содержащую открытый верхний конец и закрытый нижний конец, при этом (ii) зонд располагают в удерживающей камере рядом с нижним концом.
12. Способ по п.1, отличающийся тем, что чувствительный к кислороду фотолюминесцентный краситель является чувствительным к кислороду комплексом переходных металлов.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что чувствительный к кислороду комплекс переходных металлов выбирают из группы, состоящей из рутения-бипиридила, рутения-дифенил-фенантролина, платины-порфирина, палладия-порфирина, фосфоресцирующего комплекса тетрабензопорфирина, хлорина, порфирин-кетона, азапорфирина и люминесцентного комплекса с длительным периодом распада иридия(Ш) или осмия (II).
14. Способ по п.1, отличающийся тем, что в ходе обращений измеряют время жизни фотолюминесценции.
15. Способ по п.1, отличающийся тем, что аликвоту в сосуде пастеризуют при 72°C в течение 20 секунд и инкубируют при 30°-50°C в течение 24 часов.
16. Способ по п.1, отличающийся тем, что аликвоту в сосуде пастеризуют при 63°C в течение 30 минут и инкубируют при 30°-55°C в течение 24 часов.
17. Способ по п.15 или 16, отличающийся тем, что аликвоту в сосуде инкубируют при 30°C.
18. Способ по п.1, отличающийся тем, что температуры пастеризации достигают посредством сухого блочного нагревателя.
19. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию добавления в аликвоту питательных веществ, эффективных для ускорения роста по меньшей мере одного термостойкого микроорганизма, перед пастеризацией.
20. Способ обнаружения присутствия в продукте термостойких микроорганизмов и общего количества микроорганизмов для их сравнения, включающий стадии:
(a) взятия пробы продукта,
(b) помещения первой аликвоты пробы в первую удерживающую камеру, содержащую первый зонд, чувствительный к метаболиту термостойких микроорганизмов,
(c) помещения второй аликвоты пробы во вторую удерживающую камеру, содержащую второй зонд, чувствительный к аналиту-мишени,
(d) пастеризации первой аликвоты, но не второй аликвоты, в первой удерживающей камере,
(e) инкубирования пастеризованной первой аликвоты в первой удерживающей камере и второй аликвоты во второй удерживающей камере в течение периода инкубации, и
(f) периодического обращения к обоим зондам в течение периода инкубации, при этом в ходе этих обращений измеряют произошедшие в зонде изменения в ответ на изменения концентрации метаболита термостойких микроорганизмов в первой аликвоте и изменения концентрации аналита-мишени во второй аликвоте, при этом эти изменения концентрации указывают на присутствие жизнеспособных термостойких микроорганизмов в первой аликвоте и на присутствие общего количества жизнеспособных микроорганизмов во второй аликвоте, где метаболитом термостойких микроорганизмов и аналитом-мишенью является кислород, и где первый и второй зонды являются чувствительным к кислороду фотолюминесцентным красителем.
21. Способ по п.20, дополнительно включающий стадии (i) преобразования измеренных произошедших в первом зонде изменений в концентрацию термостойких микроорганизмов в пастеризованной первой аликвоте перед инкубированием с помощью известного алгоритма преобразования, (ii) преобразования измеренных произошедших во втором зонде изменений в концентрацию общего количества микроорганизмов во второй аликвоте перед инкубированием с помощью известного алгоритма преобразования, и (iii) регистрации выявленной концентрации термостойких микроорганизмов и общего количества микроорганизмов.
22. Способ по п.20, дополнительно включающий стадию герметичного закрытия первой и второй аликвот в их соответствующих удерживающих камерах перед пастеризацией и инкубированием.
23. Способ по п.20, отличающийся тем, что продукт представляет собой пищевой продукт, предназначенный для потребления человеком.
24. Способ по п.20, отличающийся тем, что продуктом является молоко.
25. Способ по п.20, отличающийся тем, что первую и вторую удерживающие камеры образуют посредством отдельных и независимых пробирок или кювет.
26. Способ по п.20, отличающийся тем, что первая и вторая удерживающие камеры представляют собой разные лунки на многолуночном планшете.
27. Способ по п.20, отличающийся тем, что первая и вторая удерживающие камеры имеют увеличенное отношение поверхности к объему.
28. Способ по п.20, отличающийся тем, что пастеризацию осуществляют при заданной температуре в течение заданного периода времени, и тепловое равновесие аликвоты в сосуде достигается за ½ периода времени пастеризации.
29. Способ по п.20, отличающийся тем, что пастеризацию осуществляют при заданной температуре в течение заданного периода времени, и тепловое равновесие аликвоты в сосуде достигается за ¼ периода времени пастеризации.
30. Способ по п.26, отличающийся тем, что многолуночный планшет содержит более чем 40 лунок.
31. Способ по п.20, отличающийся тем, что (i) первая и вторая удерживающие камеры имеют открытые верхние концы и закрытые нижние концы, и (ii) каждый зонд располагают в соответствующей удерживающей камере рядом с нижним концом.
32. Способ по п.20, отличающийся тем, что чувствительный к кислороду фотолюминесцентный краситель является чувствительным к кислороду комплексом переходных металлов.
33. Способ по п.32, отличающийся тем, что чувствительный к кислороду комплекс переходных металлов выбирают из группы, состоящей из рутения-бипиридила, рутения-дифенил-фенантролина, платины-порфирина, палладия-порфирина, фосфоресцирующего комплекса тетрабензопорфирина, хлорина, порфирин-кетона, азапорфирина и люминесцентного комплекса с длительным периодом распада иридия(III) или осмия (II).
34. Способ по п.20, отличающийся тем, что в ходе обращений измеряют время жизни фотолюминесценции.
35. Способ по п.20, отличающийся тем, что первую аликвоту пастеризуют при 72°C в течение 20 секунд, при этом и первую, и вторую аликвоты инкубируют при 30°-50°C в течение 24 часов.
36. Способ по п.20, отличающийся тем, что первую аликвоту пастеризуют при 63°C в течение 30 минут, при этом и первую, и вторую аликвоты инкубируют при 30°-55°C в течение 24 часов.
37. Способ по п.35 или 36, отличающийся тем, что первую аликвоту инкубируют при 30°C.
38. Способ по п.20, отличающийся тем, что температуры пастеризации достигают посредством сухого блочного нагревателя.
39. Способ по п.20, дополнительно включающий стадию добавления питательных веществ для ускорения роста микроорганизмов в первую и вторую аликвоты перед пастеризацией и инкубированием.