КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ УХОДА ЗА ПОЛОСТЬЮ РТА
ORAL CARE COMPOSITION

[1] Мягкие ткани полости рта (например, слизистые оболочки полости рта, ткань десны и язык) являются восприимчивыми к физическому, физико-химическому и биологическому повреждению. Повреждение мягкой ткани в полости рта часто является очень болезненным и даже может поставить под угрозу способность человека жевать и глотать. Существуют различные причины повреждения мягкой ткани в полости рта, в том числе плохо подогнанные ортодонтические скобы и зубные протезы, инфекция, вызванная микроорганизмами, физическая травма из-за кусания или из-за еды с острой формой, ожоги и виды аллергии.
[2] Известно, что в поддержании здоровой ткани и в восстановлении повреждения вовлечены различные медиаторы и биологические пути. В частности, белки теплового шока (HSP) вовлечены во множество функций укладки белков и ведения «домашнего хозяйства» и способствуют укладке или повторной укладке денатурированных белков, которые могут образоваться вследствие повышенных температур, повреждения ткани или стресса. HSP обнаружены в большинстве клеток и тканей и во внеклеточной и межклеточной жидкостях, таких как кровь и слюна. Сообщается, что внеклеточные HSP выполняют важные функции в защите поверхности зубов, защите слизистой оболочки, цитопротекции и воспалительном процессе. Был определен ряд HSP с различными молекулярными массами. Они включают HSP 27 кДа, HSP 47 кДа, HSP 56 кДа, HSP 60 кДа и HSP 70 кДа. Особый интерес представляет HSP27, который выполняет важную функцию в определении структуры и функции нормальной кожи, модулирует активацию пути Nf-kB, контролирует рост клеток и контролирует ответ на стресс. Дополнительно было показано, что HSP27 уменьшает воспаление и уменьшает количество активных форм кислорода (Arrigo et al., 2007, FEBS Letters 581, p3665-3674).
[3] Существует необходимость в обеспечении композиций, которые эффективно предупреждают повреждение мягкой ткани и/или обеспечивают заживление ран в мягкой ткани в полости рта. Из-за их функции в поддержании здоровой ткани, при воспалительном процессе и в восстановлении повреждения HSP представляют собой пригодные молекулярные мишени для предупреждения повреждения тканей и для обеспечения заживления мягкой ткани.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[4] Авторы настоящего изобретения продемонстрировали, что экспрессия HSP27 постепенно увеличивалась при повреждении мягкой ткани в полости рта. Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что воздействие очень низких концентраций основной аминокислоты, такой как аргинин, на поврежденную мягкую ткань приводит к значительно усиленной экспрессии HSP27. Таким образом, можно применять небольшие количества аргинина для ускорения заживления ран и восстановления повреждения мягкой ткани в полости рта.
[5] Соответственно, в первом аспекте предусмотрена композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель.
[6] Предпочтительно основная аминокислота или ее соль присутствует в композиции в количестве от 0,003 вес. % до 0,05 вес. % по общему весу композиции. Более предпочтительно основная аминокислота или ее соль присутствует в композиции в количестве от 0,005 вес. % до 0,02 вес. % по общему весу композиции. Наиболее предпочтительно основная аминокислота или ее соль присутствует в композиции в количестве приблизительно 0,005 вес. % по общему весу композиции.
[7] Основная аминокислота необязательно выбрана из аргинина, лизина и гистидина. Предпочтительно основная аминокислота представляет собой аргинин.
[8] Композиция необязательно выбрана из ополаскивателей для полости рта, спреев, средств для чистки зубов, полос для полости рта, жевательных резинок и пастилок.
[9] Композиция для ухода за полостью рта необязательно дополнительно содержит одно или более средств, выбранных из поверхностно-активных веществ, средств для уменьшения чувствительности, отбеливающих средств, средств для предупреждения образования зубного камня, связующих веществ, загустителей, детергентов, средств, повышающих адгезию, регуляторов пенообразования, средств, регулирующих pH, средств, улучшающих вкусовые ощущения, подсластителей, ароматизаторов, красителей, увлажнителей, источников фторида и их комбинаций.
[10] Композиция необязательно содержит свободную основную аминокислоту и практически не содержит каких-либо солей основной аминокислоты.
[11] Во втором аспекте предусмотрена композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель, для применения в предупреждении или восстановлении повреждения мягкой ткани в полости рта. Предпочтительно композиция представляет собой композицию, описанную в данном документе.
[12] Предупреждение или восстановление повреждения мягкой ткани необязательно предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани. Кроме того, ткань необязательно представляет собой ткань десны.
[13] В третьем аспекте предусмотрена композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель, для применения в заживлении раны в полости рта. Предпочтительно композиция представляет собой композицию, описанную в данном документе.
[14] Применение необязательно предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани, имеющей рану. Кроме того, рана необязательно находится в ткани десны.
[15] В четвертом аспекте предусмотрена композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель, для применения в предупреждении или лечении воспаления в ткани полости рта.
[16] Применение необязательно предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани, имеющей рану. Кроме того, ткань необязательно представляет собой ткань десны.
[17] В пятом аспекте предусмотрена композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель, для применения в уменьшении количества активных форм кислорода в ткани полости рта.
[18] Применение необязательно предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани, имеющей рану. Кроме того, ткань необязательно представляет собой ткань десны.
[19] Варианты применения, описанные в данном документе, необязательно предусматривают приведение в контакт полости рта с композицией в течение периода, составляющего по меньшей мере 30 секунд, по меньшей мере 1 минуту, по меньшей мере 5 минут, по меньшей мере 10 минут, по меньшей мере 15 минут или по меньшей мере 1 час.
[20] В шестом аспекте предусмотрен способ повышения или усиления экспрессии HSP27 в мягкой ткани полости рта, предусматривающий введение в ткань композиции, содержащей основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель.
[21] Способ необязательно предусматривает одно или более из предупреждения или восстановления повреждения мягкой ткани в полости рта, заживления раны в ткани полости рта, предупреждения или лечения воспаления в ткани полости рта и уменьшения количества активных форм кислорода в ткани полости рта. Кроме того, ткань необязательно представляет собой ткань десны. Кроме того, способ дополнительно необязательно предусматривает приведение в контакт полости рта с композицией в течение периода, составляющего по меньшей мере 30 секунд, по меньшей мере 1 минуту, по меньшей мере 5 минут, по меньшей мере 10 минут, по меньшей мере 15 минут или по меньшей мере 1 час.
[22] В седьмом аспекте предусмотрен способ повышения или усиления экспрессии HSP27 в ткани полости рта, предусматривающий введение в ткань эффективного количества основной аминокислоты или ее соли.
[23] Эффективное количество основной аминокислоты или ее соли необязательно составляет от 10 до 10000 ppm. Кроме того, эффективное количество основной аминокислоты или ее соли необязательно составляет от 10 до 1000 ppm. Кроме того, эффективное количество основной аминокислоты или ее соли необязательно составляет от 10 до 500 ppm. Кроме того, эффективное количество основной аминокислоты или ее соли необязательно составляет от 10 до 200 ppm. Кроме того, эффективное количество основной аминокислоты или ее соли необязательно составляет от 10 до 100 ppm. Кроме того, эффективное количество основной аминокислоты или ее соли необязательно составляет от 10 до 50 ppm или от 50 ppm до 100 ppm. Основная аминокислота или ее соль необязательно представляет собой аргинин.
[24] В восьмом аспекте предусмотрено применение композиции для ухода за полостью рта, содержащей основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель, в изготовлении лекарственного препарата для одного или более из следующего: предупреждения или восстановления повреждения мягкой ткани в полости рта, заживления раны в полости рта, предупреждения или лечения воспаления в полости рта и уменьшения количества активных форм кислорода в ткани полости рта. Композиция может представлять собой композицию, описанную в данном документе. Предпочтительно предупреждение или восстановление повреждения мягкой ткани, заживление раны, предупреждение или уменьшение воспаления и/или уменьшение количества активных форм кислорода предусматривает повышение или усиление продуцирования HSP27 в ткани.
[25] Ткань необязательно представляет собой ткань десны. Кроме того, лекарственный препарат необязательно подлежит приведению в контакт с полостью рта в течение периода, составляющего по меньшей мере 30 секунд, по меньшей мере 1 минуту, по меньшей мере 5 минут, по меньшей мере 10 минут, по меньшей мере 15 минут или по меньшей мере 1 час.
[26] В конкретных вариантах осуществления в настоящем раскрытии предусмотрено следующее.
1.1 Композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель.
1.2 Композиция 1.1, где основная аминокислота или ее соль присутствует в композиции в количестве от 0,003 вес. % до 0,05 вес. % по общему весу композиции.
1.3 Композиция 1.2, где основная аминокислота или ее соль присутствует в композиции в количестве от 0,005 вес. % до 0,02% вес. % по общему весу композиции.
1.4 Композиция 1.3, где основная аминокислота или ее соль присутствует в композиции в количестве от 0,005 вес. % по общему весу композиции.
1.5 Любая предыдущая композиция, где основная аминокислота выбрана из аргинина, лизина и гистидина.
1.6 Композиция 5, где основная аминокислота представляет собой аргинин.
1.7 Любая предыдущая композиция, где композиция выбрана из ополаскивателей для полости рта, спреев, средств для чистки зубов, полос для полости рта, жевательных резинок и пастилок.
1.8 Любая предыдущая композиция, где композиция для ухода за полостью рта дополнительно содержит одно или более средств, выбранных из поверхностно-активных веществ, средств для уменьшения чувствительности, отбеливающих средств, средств для предупреждения образования зубного камня, связующих веществ, загустителей, детергентов, средств, повышающих адгезию, регуляторов пенообразования, средств, регулирующих pH, средств, улучшающих вкусовые ощущения, подсластителей, ароматизаторов, красителей, увлажнителей, источников фторида и их комбинаций.
1.9 Любая предыдущая композиция, где композиция содержит основную аминокислоту в свободной форме и практически не содержит каких-либо солей основной аминокислоты.
1.10 Любая предыдущая композиция для применения в предупреждении или восстановлении повреждения мягкой ткани в полости рта.
1.11 Любая из композиций 1.1-1.9 для применения в заживлении раны в ткани полости рта.
1.12 Любая из композиций 1.1-1.9 для применения в предупреждении или лечении воспаления в ткани полости рта.
1.13 Любая из композиций 1.1-1.9 для применения в уменьшении количества активных форм кислорода в ткани полости рта.
1.14 Композиция для применения 1.10-1.13, где применение предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани.
1.15 Композиция для применения 1.10-1.14, где ткань представляет собой ткань десны.
1.16 Композиция для применения 1.10-1.15, где применение предусматривает приведение в контакт полости рта с композицией в течение периода, составляющего по меньшей мере 30 секунд, по меньшей мере 1 минуту, по меньшей мере 5 минут, по меньшей мере 10 минут, по меньшей мере 15 минут или по меньшей мере 1 час.
1.17 Способ повышения или усиления экспрессии HSP27 в ткани полости рта, предусматривающий введение в ткань любой из композиций 1.1-1.9.
1.18 Способ 1.17, где способ предусматривает предупреждение или восстановление повреждения мягкой ткани в полости рта.
1.19 Способ 1.17 или 1.18, где способ предусматривает заживление раны в ткани полости рта.
1.20 Любой из способов 1.17-1.19, где способ предусматривает предупреждение или лечение воспаления в ткани полости рта.
1.21 Любой из способов 1.17-1.20, где способ предусматривает уменьшение количества активных форм кислорода в ткани полости рта.
1.22 Любой из способов 1.17-1.21, где ткань представляет собой ткань десны.
1.23 Любой из способов 1.17-1.22, предусматривающий приведение в контакт полости рта с композицией в течение периода, составляющего по меньшей мере 30 секунд, по меньшей мере 1 минуту, по меньшей мере 5 минут, по меньшей мере 10 минут, по меньшей мере 15 минут или по меньшей мере 1 час.
1.24 Применение любой из композиций 1.1-1.9 в изготовлении лекарственного препарата для предупреждения или восстановления повреждения мягкой ткани в полости рта.
1.25 Применение любой из композиций 1.1-1.9 в изготовлении лекарственного препарата для заживления раны в ткани полости рта.
1.26 Применение любой из композиций 1.1-1.9 в изготовлении лекарственного препарата для предупреждения или лечения воспаления в ткани полости рта.
1.27 Применение любой из композиций 1.1-1.9 в изготовлении лекарственного препарата для уменьшения количества активных форм кислорода в ткани полости рта.
1.28 Применение 1.24-1.27, где ткань представляет собой ткань десны.
1.29 Применение 1.24-1.28, где лекарственный препарат предназначен для повышения или усиления продуцирования HSP27 в ткани.
1.30 Применение 1.24-1.29, где лекарственный препарат подлежит приведению в контакт с полостью рта в течение периода, составляющего по меньшей мере 30 секунд, по меньшей мере 1 минуту, по меньшей мере 5 минут, по меньшей мере 10 минут, по меньшей мере 15 минут или по меньшей мере 1 час.
1.31 Способ повышения или усиления экспрессии HSP27 в ткани полости рта, предусматривающий введение в ткань эффективного количества основной аминокислоты или ее соли.
1.32 Способ 1.31, где основная аминокислота или ее соль представляет собой аргинин.
1.33 Способ 1.31 или 1.32, где эффективное количество основной аминокислоты или ее соли составляет от 10 до 1000 ppm.
1.34 Любой из способов 1.31-1.33, где эффективное количество основной аминокислоты или ее соли составляет от 10 до 500 ppm.
1.35 Любой из способов 1.31-1.34, где эффективное количество основной аминокислоты или ее соли составляет от 10 до 100 ppm.
1.36 Любой из способов 1.31-1.35, где эффективное количество основной аминокислоты или ее соли составляет от 10 до 50 ppm.
1.37 Любой из способов 1.31-1.36, где способ предусматривает предупреждение или восстановление повреждения мягкой ткани в полости рта.
1.38 Любой из способов 1.31-1.37, где способ предусматривает заживление раны в ткани полости рта.
1.39 Любой из способов 1.31-1.38, где способ предусматривает предупреждение или лечение воспаления в ткани полости рта.
1.40 Любой из способов 1.31-1.39, где способ предусматривает уменьшение количества активных форм кислорода в ткани полости рта.
1.41 Любой из способов 1.31-1.40, где ткань представляет собой ткань десны.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
[27] Следующее описание предпочтительного(предпочтительных) варианта(вариантов) осуществления является по своей природе лишь иллюстративным и никоим образом не предназначено для ограничения настоящего изобретения, его практического использования или вариантов применения.
[28] По всему тексту настоящей заявки диапазоны используются в качестве сокращенного обозначения для описания каждого и любого значения, которое находится в пределах диапазона. В качестве граничного значения диапазона может быть выбрано любое значение в пределах диапазона. Кроме того, все ссылки, приведенные в данном документе, тем самым включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В случае конфликта определений в настоящем раскрытии и в приведенной ссылке настоящее раскрытие является предпочтительным.
[29] Если не указано иное, все значения процентного содержания и количества, указанные в данном документе и в других местах в настоящем описании, следует понимать как относящиеся к процентам по весу. Приведенные количества получены в пересчете на активный вес материала.
[30] В одном варианте в данном документе предусмотрена композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель.
[31] Основные аминокислоты, которые можно применять в композициях по настоящему изобретению, включают не только встречающиеся в природе основные аминокислоты, такие как аргинин (2-амино-5-гуанидинопентановая кислота), лизин (2,6-диаминогексановая кислота) и гистидин (2-амино-3-(1H-имидазол-4-ил)пропановая кислота), но также любые основные аминокислоты, содержащие карбоксильную группу и аминогруппу в молекуле, которые являются водорастворимыми и обеспечивают водный раствор с pH приблизительно 7 или больше. Соответственно, основные аминокислоты включают без ограничения аргинин, лизин, цитруллин, орнитин, креатин, гистидин, диаминобутановую кислоту, диаминопропионовую кислоту и их соли или их комбинации. В конкретном варианте осуществления основные аминокислоты выбраны из аргинина, лизина и гистидина. Предпочтительно основная аминокислота представляет собой аргинин, например L-аргинин.
[32] В предпочтительных вариантах осуществления композиция содержит свободную основную аминокислоту. Тем не менее, следует понимать, что на практике в настоящем изобретении также можно использовать производные основной аминокислоты. Например, можно использовать основную аминокислоту в виде соли или сложного эфира. Также основная аминокислота может быть представлена в виде различных конъюгатов. Ряд таких конъюгатов будет известен специалистам в данной области. В предпочтительном варианте осуществления основная аминокислота включена в композиции для ухода за полостью рта в ее свободной форме, и композиция практически не содержит солей или любых других производных, таких как сложные эфиры, комплексы и конъюгаты основной аминокислоты. Под выражением «практически не содержит» подразумевают, что композиция содержит соли основной аминокислоты в количестве менее 0,0005 вес. % по общему весу композиции.
[33] Композиции по настоящему изобретению предназначены для применения в полости рта. Таким образом, соли или производные для применения в настоящем изобретении должны быть безопасными для такого применения в представленных количествах и концентрациях. Подходящие соли включают соли, известные в данной области как фармацевтически приемлемые соли, которые считают, как правило, физиологически приемлемыми в представленных в данном документе количествах и концентрациях. Физиологически приемлемые соли включают соли, полученные из фармацевтически приемлемых неорганических или органических кислот или оснований. Такие соли включают, например, соли присоединения кислоты, такие как гидрохлоридная или бромидная соль, и соли присоединения основания, такие как соли, полученные с помощью щелочных металлов, таких как калий и натрий, или щелочноземельных металлов, таких как кальций и магний. Предпочтительная соль представляет собой бикарбонат (например, бикарбонат аргинина).
[34] В предпочтительных вариантах осуществления композиция содержит аминокислоту - аргинин. Аргинин является коммерчески доступным из ряда источников (например, Ajinomoto). В предпочтительном варианте осуществления аргинин включен в композиции для ухода за полостью рта в его свободной (кислотной) форме, и композиция практически не содержит солей аргинина или любых других производных аргинина, таких как сложные эфиры, комплексы и конъюгаты аргинина. Под выражением «практически не содержит» подразумевают, что композиция содержит соли аргинина в количестве менее 0,0005 вес. % по общему весу композиции. Авторы настоящего изобретения обнаружили, что аргинин сам по себе является эффективным в усилении продуцирования HSP27 в поврежденной ткани десны.
[35] В некоторых вариантах осуществления композиция содержит основную аминокислоту (например, аргинин) или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. %, или до 0,07 вес. %, или до 0,06 вес. %, или до 0,05 вес. %, или до 0,04 вес. %, или до 0,03 вес. %, или до 0,02 вес. %, или до 0,01 вес. %, или до 0,009 вес. %, или до 0,008 вес. %, или до 0,007 вес. %, или до 0,006 вес. %, или до 0,005 вес. % по общему весу композиции. В других вариантах осуществления композиция содержит основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,002 вес. % до 0,08 вес. %, или до 0,07 вес. %, или до 0,06 вес. %, или до 0,05 вес. %, или до 0,04 вес. %, или до 0,03 вес. %, или до 0,02 вес. %, или до 0,01 вес. %, или до 0,009 вес. %, или до 0,008 вес. %, или до 0,007 вес. %, или до 0,006 вес. %, или до 0,005 вес. % по общему весу композиции. В дополнительных вариантах осуществления композиция содержит основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,003 вес. % до 0,08 вес. %, или до 0,07 вес. %, или до 0,06 вес. %, или до 0,05 вес. %, или до 0,04 вес. %, или до 0,03 вес. %, или до 0,02 вес. %, или до 0,01 вес. %, или до 0,009 вес. %, или до 0,008 вес. %, или до 0,007 вес. %, или до 0,006 вес. %, или до 0,005 вес. % по общему весу композиции. В еще одних дополнительных вариантах осуществления композиция содержит основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,004 вес. % до 0,08 вес. %, или до 0,07 вес. %, или до 0,06 вес. %, или до 0,05 вес. %, или до 0,04 вес. %, или до 0,03 вес. %, или до 0,02 вес. %, или до 0,01 вес. %, или до 0,009 вес. %, или до 0,008 вес. %, или до 0,007 вес. %, или до 0,006 вес. %, или до 0,005 вес. % по общему весу композиции. В еще одних дополнительных вариантах осуществления композиция содержит основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,005 вес. % до 0,08 вес. %, или до 0,07 вес. %, или до 0,06 вес. %, или до 0,05 вес. %, или до 0,04 вес. %, или до 0,03 вес. %, или до 0,02 вес. %, или до 0,01 вес. %, или до 0,009 вес. %, или до 0,008 вес. %, или до 0,007 вес. %, или до 0,006 вес. % по общему весу композиции. Композиция необязательно содержит основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,01 вес. % до 0,08 вес. %, или до 0,07 вес. %, или до 0,06 вес. %, или до 0,05 вес. %, или до 0,04 вес. %, или до 0,03 вес. %, или до 0,02 вес. % по общему весу композиции. Предпочтительно композиция содержит основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,003 вес. % до 0,05 вес. % или от 0,005 вес. % до 0,02 вес. % по общему весу композиции. Более предпочтительно композиция содержит основную аминокислоту или ее соль в количестве 0,005 вес. % по общему весу композиции.
[36] Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что основные аминокислоты, такие как аргинин, являются эффективными в усилении продуцирования HSP27 в поврежденной ткани десны с применением низких концентраций, определенных выше, при этом, таким образом, ускоряют восстановление поврежденной ткани. Путем включения аргинина в композиции для ухода за полостью рта при таких низких концентрациях минимизируют любые нежелательные побочные эффекты и/или токсические эффекты аминокислоты.
Форма композиции
[37] Описанные в данном документе композиции могут быть представлены в виде, например, ополаскивателя для полости рта, спрея, средства для чистки зубов, полосы для полости рта, жевательной резинки, гранулы, жвачки или пастилки. Средство для чистки зубов включает без ограничения зубную пасту, гель и порошок. Композиции могут находиться в полужидкой форме, такой как гель, а также в виде текучей жидкости, которую можно применять по отношению к полости рта путем окрашивания кисточкой или другим подходящим устройством. В данном документе «окрашивание» означает нанесение тонкого слоя композиции на поверхность в полости рта.
Носители и другие ингредиенты
[38] Используемое в настоящем документе выражение «приемлемый для применения в полости рта носитель» обозначает любые безопасные и приемлемые материалы для применения в полости рта. Такие материалы включают воду или другие растворители, которые могут содержать увлажнитель, такой как глицерин, сорбит, ксилит и т. д. В некоторых аспектах термин «приемлемый для применения в полости рта носитель» охватывает все компоненты композиции для ухода за полостью рта, за исключением основной аминокислоты или ее соли. В других аспектах термин относится к инертным или неактивным ингредиентам, которые предназначены для доставки основной аминокислоты или ее соли и/или любых других функциональных ингредиентов в полость рта.
[39] Приемлемые для применения в полости рта носители для применения в настоящем изобретении включают традиционные и известные носители, применяемые в получении ополаскивателей для полости рта или средств для полоскания рта, зубных паст, зубных гелей, зубного порошка, пастилок, жвачек, гранул, съедобных полос, таблеток и т. д. Носители должны быть выбраны с учетом совместимости друг с другом и с другими ингредиентами композиции.
[40] Представлены следующие неограничивающие примеры. В композиции в виде зубной пасты носитель, как правило, представляет собой систему вода/увлажнитель, которая составляет основную часть по весу композиции. В качестве альтернативы, компонент-носитель композиции в виде зубной пасты может содержать воду, один или более увлажнителей и другие функциональные компоненты, отличные от основной аминокислоты или ее соли. В составе в виде средства для полоскания рта или ополаскивателя для полости рта носитель, как правило, представляет собой жидкую смесь воды/спирта, в которой растворена или диспергирована основная аминокислота. В растворяемой пастилке носитель, как правило, содержит образующий твердую матрицу материал, который медленно растворяется в полости рта. В жевательных резинках носитель, как правило, содержит гуммиоснову, тогда как в съедобной полосе носитель, как правило, содержит один или более пленкообразующих полимеров.
[41] Композиции, применяемые в представленных в данном документе способах, могут содержать один или более дополнительных ингредиентов для ухода за полостью рта, которые могут обладать конкретными функциями. Один или более дополнительных ингредиентов для ухода за полостью рта можно необязательно выбирать из группы, состоящей из поверхностно-активных веществ, средств для уменьшения чувствительности, отбеливающих средств, средств для предупреждения образования зубного камня, связующих веществ, загустителей, детергентов, средств, повышающих адгезию, регуляторов пенообразования, средств, регулирующих pH, средств, улучшающих вкусовые ощущения, подсластителей, ароматизаторов, красителей, консервантов, увлажнителей, источников фторида и их комбинаций.
8-20
8-20
[42] Поверхностно-активные вещества могут присутствовать в композициях для ухода за полостью рта, представленных в данном документе, для обеспечения композициям возможности пенообразования, вкусовых, ароматических свойств, текстуры и вкусовых ощущений и, в частности, для приведения композиций в более косметически приемлемый вид. Подходящие поверхностно-активные вещества включают без ограничения водорастворимые соли C-алкилсульфатов, сульфированные моноглицериды C-жирных кислот, саркозинаты, таураты, лаурилсульфат натрия, натрия кокоилмоноглицерид сульфонат, лаурилсаркозинат натрия, лаурилизетионат натрия, лауреткарбоксилат натрия и додецилбензолсульфонат натрия и кокоамидопропилбетаин. Предпочтительно поверхностно-активное вещество предусматривает лаурилсульфат натрия (SLS).
[43] Представленные в данном документе композиции необязательно включают одно или более средств для уменьшения чувствительности. Такие средства включают без ограничения соли калия, такие как нитрат калия, бикарбонат калия, хлорид калия, цитрат калия и оксалат калия; капсаицин; эвгенол; соли стронция; соли цинка; хлоридные соли и их комбинации. Такие средства можно добавлять в эффективных количествах, например, от приблизительно 1 вес. % до приблизительно 20 вес. % по общему весу композиции, в зависимости от выбранного средства. Определенные в данном документе композиции можно также применять для лечения гиперчувствительности путем блокирования дентинных канальцев при нанесении на поверхность зубов.
[44] Представленные в данном документе композиции могут необязательно включать отбеливающее средство для зубов или средство для отбеливания зубов. Подходящие отбеливающие средства и средства для отбеливания зубов включают пероксиды, хлориты металлов, персульфаты. Пероксиды включают гидропероксиды, пероксид водорода, пероксиды щелочных и щелочноземельных металлов, органические пероксисоединения, пероксикислоты и их смеси. Пероксиды щелочных и щелочноземельных металлов включают пероксид лития, пероксид калия, пероксид натрия, пероксид магния, пероксид кальция, пероксид бария и их смеси. Другие пероксиды включают перборат, пероксид мочевины и их смеси. Подходящие хлориты металлов могут включать хлорит кальция, хлорит бария, хлорит магния, хлорит лития, хлорит натрия и хлорит калия. Такие средства можно включать в эффективных количествах, например, от 1 вес. % до 20 вес. % по общему весу композиции, в зависимости от выбранного средства.
4
2
7
4
2
7
2
2
2
7
2
2
2
7
2
2
2
7
[45] Представленные в данном документе композиции могут необязательно содержать средства для предупреждения образования зубного камня, такие как пирофосфатные соли, в том числе пирофосфатные соли, содержащие два или четыре атома щелочного металла, такие как NaPO, KPO, NaKPO, NaHPOи KHPO, триполифосфат натрия, полифосфаты с длинной цепью, такие как гексаметафосфат натрия, и циклические фосфаты, такие как триметафосфат натрия.
[46] Представленные в данном документе композиции могут дополнительно содержать связующее вещество. Можно использовать любое традиционное связующее вещество. Подходящие связующие средства включают морские коллоиды; карбоксивиниловые полимеры; каррагенаны; крахмалы; целлюлозные полимеры, такие как гидроксиэтилцеллолоза, карбоксиметилцеллюлоза (кармеллоза), гидроксипропилметилцеллюлоза и их соли (например, натрия кармеллоза); природные камеди, такие как камедь карайи, ксантан, аравийская камедь и трагакантовая камедь; хитозан; коллоидный алюмосиликат магния и коллоидный диоксид кремния. Предпочтительно связующее вещество присутствует в композиции в количестве от 0,1 вес. % до 5 вес. % по общему весу композиции.
[47] Загустители, которые можно включать в определенные в данном документе композиции, включают природные и синтетические камеди и коллоидные частицы. Подходящие загустители включают встречающиеся в природе полимеры, такие как каррагенан, ксантановая камедь, полигликоли различной молекулярной массы, продаваемые под торговой маркой Polyox, и поливинилпирролидон. Совместимые неорганические загустители включают соединения аморфного диоксида кремния и соединения коллоидного диоксида кремния, доступные под торговым названием Cab-o-sil, изготовляемые Cabot Corporation. Другие неорганические загустители включают природные и синтетические глины, такие как глины на основе гекторита, силикат лития-магния (лапонит) и алюмосиликат магния (Veegum).
[48] Определенные в данном документе композиции могут необязательно содержать одно или более средств, повышающих адгезию. Средство, повышающее адгезию, может представлять собой полимерный клейкий материал. Полимерный клейкий материал может представлять собой любое средство, которое присоединяется к поверхности зуба млекопитающего и/или к гетерогенной биопленке, которая также может присутствовать на поверхности зуба. Прикрепление может происходить любым образом, как например вследствие ионного взаимодействия, сил Ван-дер-Ваальса, гидрофобных-гидрофильных взаимодействий и т. д. Клейкий материал может представлять собой, например, любые гомополимеры или сополимеры (называемые далее в данном документе в совокупности «полимерами»), которые прилипают к поверхности зуба. Такие полимеры могут включать целлюлозные полимеры, например, один или более из гидроксиалкилцеллюлозных полимеров, таких как гидроксипропилметилцеллюлоза (HPMC), гидроксиэтилпропилцеллюлоза (HEPC), гидроксибутилметилцеллюлоза (HBMC) и карбоксиметилцеллюлоза (CMC). Предпочтительно полимерный клейкий материал содержит по меньшей мере один целлюлозный материал, например, натрия карбоксиметилцеллюлозу.
[49] Полимерный клейкий материал может альтернативно или дополнительно включать полимеры на основе поли(этиленоксида) (такие как POLYOX от Dow Chemical), линейный PVP и сшитый PVP, сополимеры PEG/PPG (такие как BASF Pluracare L1220), блок-сополимеры этиленоксида (EO) - пропиленоксида (PO) (такие как полимеры, продаваемые под торговой маркой Pluronic, доступные от BASF Corporation), эфир канифоли, шеллак, клеи на основе кремнийорганических полимеров, склеивающиеся при надавливании (такие как BioPSA от Dow-Corning), метакрилаты или их смеси. В одном варианте осуществления сополимер предусматривает (PVM/MA). Сополимер необязательно может быть выбран из группы, состоящей из поли(метилвинилового эфира/малеинового ангидрида), или поли(метилвинилового эфира/малеиновой кислоты), или полуэфиров поли(метилвинилового эфира/малеиновой кислоты), или смешанных солей поли(метилвинилового эфира/малеиновой кислоты).
[50] Можно применять полимеры с любой молекулярной массой, в том числе, например, со значениями молекулярной массы от 50000 до 500000 Да, от 500000 до 2500000 Да или от 2500000 до 10000000 Да (рассчитанной в виде среднечисленной или средневесовой массы).
[51] Композиции для ухода за полостью рта, определенные в данном документе, также могут содержать регулятор пенообразования. Регуляторы пенообразования, как правило, увеличивают количество образованной пены, например, при чистке щеткой полости рта с применением композиции в соответствии со способами, определенными в данном документе. Иллюстративные примеры регуляторов пенообразования, которые увеличивают количество пены, включают без ограничения полиоксиэтилен и определенные полимеры, в том числе альгинатные полимеры.
[52] Предпочтительно пенообразующее средство в композиции для ухода за полостью рта присутствует в количестве от 0,01 до приблизительно 0,9 вес. %, или от 0,05 до 0,5 вес. %, или от 0,1 до приблизительно 0,2 вес. % по общему весу композиции.

[53] Полиоксиэтилен может увеличивать количество пены и густоту пены, образованной компонентом-носителем для ухода за полостью рта композиции по настоящему изобретению. Полиоксиэтилен широко известен также как полиэтиленгликоль («PEG») или полиэтиленоксид. Полиоксиэтилены, подходящие для настоящего изобретения, будут характеризоваться молекулярной массой от 200000 до 7000000 Да, и предпочтительно от 600000 до 2000000 Да, и более предпочтительно от 800000 до 1000000 Да. Polyox является торговым названием высокомолекулярного полиоксиэтилена производства компании Union Carbide.
[54] Предпочтительно представленные в данном документе композиции дополнительно содержат по меньшей мере одно средство, регулирующее pH. Такие средства включают подкисляющие средства для снижения pH, средства, повышающие основность, для повышения pH и буферные средства для регулирования pH в необходимом диапазоне. Средство, регулирующее pH, предпочтительно содержит средство, повышающее основность, и/или буферное средство. Например, можно включать одно или более соединений, выбранных из подкисляющих средств, средств, повышающих основность, и буферных средств для обеспечения значения pH от 2 до 10 или в различных иллюстративных вариантах осуществления для обеспечения значения pH от 2 до 8, от 3 до 9, от 4 до 8, от 5 до 7, от 6 до 10 или от 7 до 9. Можно применять любое приемлемое для применения в полости рта средство, регулирующее pH, в том числе без ограничения карбоновые, фосфорные и сульфоновые кислоты, кислые соли (например, мононатрия цитрат, динатрия цитрат, мононатрия малат); гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид натрия; карбонаты, такие как карбонат натрия, бикарбонаты и сесквикарбонаты; бораты; силикаты; фосфаты (например, мононатрия фосфат, тринатрия фосфат, пирофосфатные соли), имидазол и т. д. Одно или более средств, регулирующих pH, предпочтительно присутствуют в общем количестве, эффективном для поддержания композиции в приемлемом для применения в полости рта диапазоне pH.
[55] Средства, улучшающие вкусовые ощущения, которые можно включать в композиции, применяемые в определенных в данном документе способах, включают материалы, которые придают необходимую текстуру или другое ощущение во время применения композиции. Такие средства включают бикарбонатные соли, которые могут обеспечивать «ощущение чистоты» зубам и деснам из-за бурного вспенивания и высвобождения диоксида углерода. Можно применять любой приемлемый для применения в полости рта бикарбонат, в том числе без ограничения бикарбонаты щелочных металлов, такие как бикарбонаты натрия и калия, бикарбонат аммония и их смеси. Одна или более бикарбонатных солей необязательно присутствуют в общем количестве от 0,1 вес. % до 50 вес. %, например, от 1 вес. % до 20 вес. % по общему весу композиции.
[56] Представленные в данном документе композиции могут необязательно содержать подсластитель. Подсластители, которые можно применять в композициях по настоящему изобретению, включают искусственные подсластители, такие как сахарин, ацесульфам, неотам, цикламат или сукралоза; природные подсластители высокой интенсивности, такие как тауматин, стевиозид или глицирризин; или сахарные спирты, такие как сорбит, ксилит, мальтит или маннит. Они могут присутствовать в количестве не более 0,5 вес. %, необязательно от 0,005 вес. % до 0,1 вес. % в пересчете на общий вес композиции.
[57] Представленные в данном документе композиции могут необязательно содержать ароматизатор. Ароматизаторы, которые можно применять в композициях по настоящему изобретению, включают эфирные масла, а также различные ароматизирующие альдегиды, сложные эфиры, спирты и аналогичные материалы. Примеры эфирных масел включают масла мяты колосистой, мяты перечной, аниса, грушанки, сассафраса, гвоздики, шалфея, эвкалипта, майорана, корицы, лимона, лайма, грейпфрута и апельсина. Пригодными также являются химические вещества, такие как ментол, карвон и анетол. Из них наиболее часто используют масла мяты перечной и мяты колосистой. Ароматизатор можно включать в композицию в количестве от 0,1 вес. % до 5 вес. % или от 0,5 вес. % до 1,5 вес. % по общему весу композиции.
[58] Представленные в данном документе композиции могут содержать по меньшей мере один краситель. Красители в соответствии с данным документом включают пигменты, красящие вещества и средства, обеспечивающие специфический блеск или отражательную способность, такие как средства, придающие эффект жемчуга. Можно применять любой приемлемый для применения в полости рта краситель, в том числе без ограничения тальк, слюду, карбонат магния, карбонат кальция, силикат магния, алюмосиликат магния, диоксид кремния, диоксид титана, оксид цинка, красный, желтый, коричневый и черный оксиды железа, ферроцианид аммония-трехвалентного железа, темно-фиолетовый краситель, пигмент ультрамарин, титанированную слюду, хлороксид висмута и т. п. Один или более красителей необязательно присутствуют в общем количестве от 0,001 вес. % до приблизительно 20 вес. %, например, от 0,01 вес. % до 10 вес. % или от 0,1 вес. % до 5 вес. % по общему весу композиции.
[59] В композиции, применяемые в способах по настоящему изобретению, можно включать консерванты, такие как хлоргексидин, триклозан, соединения четвертичного аммония (такие как хлорид бензалкония) или парабены (такие как метилпарабен или пропилпарабен). Количество консерванта, как правило, составляет не более 0,5 вес. %, необязательно от 0,05 до 0,1 вес. % по общему весу композиции.
[60] Представленные в данном документе композиции могут необязательно содержать увлажнитель. Можно применять любой приемлемый для применения в полости рта увлажнитель, в том числе без ограничения многоатомные спирты, такие как глицерин, сорбит, ксилит или низкомолекулярные PEG. Большинство увлажнителей также выполняют функцию подсластителей. Один или более увлажнителей необязательно присутствуют в общем количестве в диапазоне от 1 вес. % до 70 вес. %, например, от 1 вес. % до приблизительно 50 вес. %, от 2 вес. % до 25 вес. % или от 5 вес. % до 15 вес. % по общему весу композиции.
[61] Предпочтительно определенные в данном документе композиции содержат источник фторид-ионов. Источники фторид-ионов включают без ограничения фторид двухвалентного олова, фторид натрия, фторид калия, монофторфосфат калия, монофторфосфат натрия, монофторфосфат аммония, фторсиликат натрия, фторсиликат аммония, аминофторид, такой как олафур (N'-октадецилтриметилендиамин-N-ионный,N,N'-трис(2-этанол)дигидрофторид), фторид аммония и их комбинации. Источник фторид-ионов необязательно включает фторид двухвалентного олова, фторид натрия, аминофториды, монофторфосфат натрия, а также их смеси. Предпочтительно композиция для ухода за полостью рта по настоящему изобретению может также содержать источник фторид-ионов или ингредиент, обеспечивающий фтор, в количествах, достаточных для обеспечения от приблизительно 50 до приблизительно 5000 ppm фторид-ионов, например, от приблизительно 100 до приблизительно 1000, от приблизительно 200 до приблизительно 500 или приблизительно 250 ppm фторид-ионов. Источники фторид-ионов можно добавлять к композициям, применяемым в настоящем изобретении, в количестве от 0,001 вес. % до 10 вес. %, например, от 0,003 вес. % до 5 вес. % или от 0,01 вес. % до 1 вес. % или до 0,05 вес. %. Тем не менее, следует понимать, что значения веса фторидных солей для обеспечения соответствующего уровня фторид-иона будут варьироваться, исходя из веса противоиона в соли, и специалист в данной области техники может легко определить такие количества. Предпочтительная фторидная соль может представлять собой фторид натрия.
Варианты применения
[62] Как упоминалось выше, авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что основные аминокислоты, такие как аргинин, при низких концентрациях, являются эффективными в усилении продуцирования HSP27 в поврежденных мягких тканях полости рта. Полагают, что HSP27 является «молекулярным шапероном». Когда клетки подвергаются стрессовым воздействиям или повреждению, белки денатурируют (развертываются), теряя свою биологическую активность. Подвергнутые стрессовым воздействиям или поврежденные клетки продуцируют HSP, такие как HSP27, которые облегчают укладку денатурированных белков в их активную конформацию. Более того, считают, что в частности HSP27 вовлечен в воспалительные и апоптотические ответы и, таким образом, выполняет важную функцию в восстановлении повреждения ткани и в заживлении ран. Вследствие усиления продуцирования HSP27 в поврежденных тканях полости рта, основные аминокислоты, такие как аргинин, являются эффективными в обеспечении заживления поврежденной ткани полости рта и в обеспечении заживления ран в полости рта. Поскольку HSP27 выполняет основную функцию в восстановлении и заживлении ткани, применение основных аминокислот для целенаправленного воздействия на экспрессию HSP27 обеспечивает новое и предпочтительное клиническое состояние по сравнению с другими известными средствами для восстановления ткани и заживления ран, которые могут целенаправленно воздействовать на другие пути или медиаторы.
[63] Соответственно, в одном варианте предусмотрена композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель, для применения в предупреждении или восстановлении повреждения ткани в полости рта и/или для обеспечения заживления ран в ткани полости рта. Композиция может представлять собой композицию, описанную в данном документе. Предпочтительно применение предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани. Повреждение ткани или рана, как описано выше, могут возникать из-за плохо подогнанных ортодонтических скоб и зубных протезов, инфекции, вызванной микроорганизмами, физической травмы из-за кусания или из-за еды с острой формой, ожогов и/или видов аллергии.
[64] В другом варианте предусмотрен способ предупреждения или восстановления повреждения ткани в полости рта и/или обеспечения заживления ран в ткани полости рта, предусматривающий приведение в контакт полости рта с композицией для ухода за полостью рта, содержащей основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель. Композиция может представлять собой композицию, описанную в данном документе. Предпочтительно предупреждение или восстановление повреждения ткани и/или заживление ран предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани.
[65] Принимая во внимание то, что авторы настоящего изобретения обнаружили, что представленные в данном документе композиции являются эффективными в усилении или повышении продуцирования HSP-27, и поскольку известны функции HSP-27 в уменьшении воспаления и уменьшении количества активных форм кислорода, дополнительно предусмотрена композиция для ухода за полостью рта, содержащая основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель, для применения в предупреждении или лечении воспаления в ткани полости рта и/или для применения в уменьшении количества активных форм кислорода в ткани полости рта. Композиция может представлять собой композицию, описанную в данном документе. Предпочтительно применение предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани. Уменьшение воспаления и/или уменьшение количества активных форм кислорода может происходить вместе с восстановлением/заживлением повреждения ткани и ран, как описано выше, и, таким образом, может улучшать восстановление/заживление повреждения ткани и ран.
[66] В другом варианте дополнительно предусмотрен способ предупреждения или лечения воспаления и/или уменьшения количества активных форм кислорода в ткани полости рта, предусматривающий приведение в контакт полости рта с композицией для ухода за полостью рта, содержащей основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,001 вес. % до 0,08 вес. % по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель. Композиция может представлять собой композицию, описанную в данном документе. Предпочтительно способ предусматривает повышение или усиление экспрессии HSP27 в ткани.
[67] В дополнительном варианте предусмотрен способ повышения или усиления экспрессии HSP27 в мягкой ткани полости рта, предусматривающий введение в ткань описанной в данном документе композиции. Способ дополнительно необязательно предусматривает одно или более из следующего: предупреждения или восстановления повреждения мягкой ткани в полости рта, заживления раны в ткани полости рта, предупреждения или лечения воспаления в ткани полости рта и уменьшения количества активных форм кислорода в ткани полости рта.
[68] В еще одном дополнительном варианте предусмотрено применение любой из определенных в данном документе композиций для изготовления лекарственного препарата для одного или более из предупреждения или восстановления повреждения мягкой ткани в полости рта, заживления раны в ткани полости рта, предупреждения или лечения воспаления в ткани полости рта и уменьшения количества активных форм кислорода в ткани полости рта. Каждый из данных эффектов предпочтительно связан с повышенной или усиленной экспрессией HSP27.
[69] В некоторых вариантах осуществления вариантов, представленных в данном документе, ткань представляет собой мягкую ткань. Термин «мягкая ткань», как правило, относится к любой ткани полости рта, отличной от твердых поверхностей зубов, и охватывает слизистые оболочки полости рта, ткань десны и язык. В предпочтительном варианте осуществления ткань предусматривает ткань десны.
[70] Повышенная или усиленная экспрессия HSP27, как определено в данном документе, относится к экспрессии гена HSP27 и/или к экспрессии белка.
[71] Для достижения клинических результатов, описанных в данном документе, композицию можно приводить в контакт с раной или тканью полости рта в течение периода, составляющего по меньшей мере 30 секунд, по меньшей мере 1 минуту, по меньшей мере 5 минут, по меньшей мере 10 минут, по меньшей мере 15 минут или по меньшей мере 1 час. Длительность контактирования можно изменять в соответствии с формой композиции. Если основную аминокислоту или ее соль применяют в качестве компонента ополаскивателя для полости рта, то иллюстративный минимальный период ополаскивания составляет от 10 секунд до 2 минут. Если основную аминокислоту или ее соль применяют в качестве компонента средства для чистки зубов, то иллюстративный минимальный период чистки зубов щеткой составляет от 30 секунд до 5 минут, или по меньшей мере 1 минуту, или по меньшей мере 2 минуты. Если основную аминокислоту или ее соль применяют в качестве компонента полосы для полости рта, то полосу размещают в полости рта, в качестве иллюстрации, в течение периода от 15 минут до 8 часов (например, в течение ночи). Если основную аминокислоту или ее соль применяют в качестве компонента жевательной резинки, то иллюстративный минимальный период жевания составляет от 1 до 20 минут.
[72] Следующие примеры иллюстрируют способы по настоящему изобретению и варианты их применения. Примеры являются иллюстративными и не ограничивают объем настоящего изобретения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Состав 1 - средство для чистки зубов
[73] В таблице 1 продемонстрирован иллюстративный состав согласно настоящему изобретению.
Таблица 1
Ингредиенты
Вес (%)
Вода
Q.S.
Осажденный карбонат кальция
20-40
Глицерин
10-20
Алкилсульфат в качестве поверхностно-активного вещества
1-3
Основная аминокислота
0,001-0,08
Пирофосфат тетранатрия
0,1-1
Натрия CMC
1-3
Бикарбонат натрия
1-3
Бензиловый спирт
0,1-0,5
Сахарин натрия
0,1-0,5
Ароматизирующее вещество
1-3
Диоксид титана
0,5-2
Пример 2. Влияние аргинина на продуцирование HSP27 в поврежденной ткани десны
[74] Применяли протокол с нанесением царапин для повреждения и подвергания стрессу ткани десны человека (MatTek Corporation). В среду для культивирования, содержащую ткань, вносили аргинин в дозе 50 ppm. Обработанную ткань инкубировали при 37°C для обеспечения заживления ткани. Клеточный супернатант собирали в разные моменты времени и измеряли уровень содержания HSP27. Результаты показаны в таблице 2.
Таблица 2. Результаты анализа содержания HSP27 (ткань десны)
Концентрация HSP27 (нг/мл)
Время инкубирования, часы
Образец без нанесенных царапин
Образец с нанесенными царапинами, необработанный
Образец с 50 ppm аргинина
0
12,77
9,48
22,78
1
5,90
87,88
218,76
4
15,16
297,93
359,72
[75] Как можно видеть из таблицы 2, ткань без царапин продуцировала HSP27 на низких уровнях, которые значительным образом не менялись с течением времени. Для ткани с нанесенными царапинами наблюдали повышенное продуцирование HSP27. Аргинин при низкой дозе, составляющей 50 ppm, значительно усиливал и фактически повышал продуцирование HSP27 - наблюдали значительное повышение количества HSP27 как через 1 час, так и через 4 часа по сравнению с необработанной тканью с нанесенными царапинами. Эти данные указывают на то, что аргинин эффективно обеспечивает восстановление повреждения ткани и заживление ран в мягких тканях полости рта при низких концентрациях.
Пример 3. Миграция кератиноцитов человека в ответ на обработку путем нанесения царапины
2
[76] Кератиноциты человека культивировали в среде DMEM, дополненной 10% FBS и 1% антибиотика, при 37°C в атмосфере 5% CO в чашках Петри. Как только клетки достигали 80-90% конфлюэнтности наносили царапину в горизонтальном направлении и наносили царапину в вертикальном направлении сквозь слой клеток. К культуре добавляли 1 мл тестируемого раствора, и клетки дополнительно инкубировали, и их контролировали с помощью фотомикроскопа для оценивания закрытия зазора, образованного царапинами. Сравниваемые тестируемые растворы представляли собой образец со 100 ppm аргинина в среде DMEM и образец с необработанной средой DMEM. Результаты, показанные в таблице 3 ниже, выражены в виде средней ширины зазора как процент от изначальной ширины зазора (в 0 часов). Обнаружили, что в обоих условиях, зазор полностью закрывался через 144 часа, но зазор закрывался значительно быстрее в присутствии образца со 100 ppm аргинина по сравнению с образцом с DMEM в качестве контроля.
Таблица 3. Закрытие зазора после нанесения царапин
Время, часы
% закрытия зазора,необработанный образец
% закрытия зазора,образец со 100 ppm аргинина
24
17%
21%
48
52%
63%
144
100%
100%
[77] Также проводили второй эксперимент на закрытие зазора, в котором сравнивали результаты, полученные при применении раствора со 100 ppm аргинина в DMEM, с результатами для коммерческих составов ополаскивателей для полости рта в 1:500 объем/объем разведениях. В одном тесте применяли состав ополаскивателя для полости рта с 0,8% вес/объем аргинина. Во втором тесте применяли состав ополаскивателя для полости рта с 0,075% вес/объем хлорида цетилпиридиния (CPC) в качестве отрицательного контроля. CPC является типичным антибактериальным средством и консервантом, применяемым в продуктах для ухода за полостью рта. Результаты показаны в таблице 4 ниже. Обнаружили, что разведение 1:500 ополаскивателя для полости рта с 0,08% аргинина показывает результаты, аналогичные результатам для раствора со 100 ppm аргинина, тогда как разведение 1:500 ополаскивателя для полости рта с CPC приводило в результате к значительно меньшему закрытию зазора.
Таблица 4. Закрытие зазора после нанесения царапин
Время, часы
% закрытия зазора,образец со 100 ppm аргинина
% закрытия зазора,ополаскиватель для полости рта с 1:500 Arg
% закрытия зазора,ополаскиватель для полости рта с 1:500 CPC
48
75%
87%
38%
Пример 4. Внутриклеточная экспрессия HSP27 в кератиноцитах с нанесенными царапинами
2
[78] Кератиноциты человека культивировали в среде DMEM, дополненной 10% FBS и 1% антибиотика, при 37°C в атмосфере 5% CO в чашках Петри. Как только клетки достигали 80-90% конфлюэнтности наносили царапину в горизонтальном направлении и наносили царапину в вертикальном направлении сквозь слой клеток. К культуре добавляли 1 мл раствора с 50 ppm аргинина и клетки дополнительно инкубировали в течение 1 часа или 4 часов. Через 0 часов, 1 час и 4 часа клетки собирали, промывали и трипсинизировали и добавляли 1 мл буфера для экстракции HSP-27. Затем суспензию клеток гомогенизировали с помощью металлических шариков в течение 5 минут, а затем анализировали содержание HSP27 с применением ELISA. Результаты показаны в таблице 5 ниже. Как в необработанных, так и в обработанных с помощью аргинина клетках нанесение царапины вызывало сильное повышение внутриклеточной экспрессии HSP-27 через один час, которое снижалось через 4 часа. Тем не менее, очевидно, что обработка с помощью аргинина приводит в результате к значительно более высокой экспрессии HSP-27. Без ограничения теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что именно этот изначальный всплеск экспрессии HSP-27 во время физического повреждения способствует лучшему заживлению ран.
Таблица 5. Результаты анализа внутриклеточной экспрессии HSP27
Время, часы
HSP-27 (нг/мл),необработанный образец
HSP-27 (нг/мл),образец с 50 ppm аргинина
0
17,78
17,11
1
49,36
64,04
2
51,99
45,12
[79] Хотя конкретные варианты осуществления настоящего изобретения были проиллюстрированы и описаны, специалистам в данной области будет понятно, что различные изменения и модификации могут быть выполнены без отступления от объема настоящего изобретения, определенного в прилагаемой формуле изобретения.