АМИНОГЕТЕРОАРИЛЬНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ В КАЧЕСТВЕ БЛОКАТОРОВ HCN
AMINOHETEROARYL DERIVATIVES AS HCN BLOCKING AGENTS

Настоящее изобретение относится к аминогетероарильным производным, к фармацевтическим композициям, содержащим эти производные, и к применению этих аминогетероарильных производных при лечении хронической невропатической боли.
Невропатическая боль или спонтанная боль и аномальная чувствительность с последующим повреждением нерва обычно происходит из-за травматического повреждения, инфекции или заболевания или в результате оперативного вмешательства и может сохраняться долгое время после того, как излечивают первоначальное повреждение. Варианты современного лечения ограничены или являются неадекватными для многих людей.
h
f
q
HCN-каналы представляют собой молекулярные субстраты токов, известных как I, I и I.
55
471
76
f
h
h
Активируемые гиперполяризацией, открываемые циклическим нуклеотидом (HCN) каналы, также известные как пейсмейкерные каналы, впервые идентифицированные в пейсмейкерных клетках (Di Francesco, 1993, Annu Rev Physiol., :455-472), также были обнаружены в множестве периферических и центральных нейронов (например, Notomi & Shigemoto, 2004, J. Comp. Neurol., :241-276). Эти каналы медленно активируются за счет гиперполяризации, генерируя деполяризующий внутренний ток (называемый I в клетках сердца и I в нейронах), и являются проницаемыми как для ионов натрия, так и для ионов калия. Четыре изоформы HCN-канала присутствуют в процессирующих боль областях нервной системы, включая таламус, миндалину, спинной мозг и первичные сенсорные нейроны. Вероятно, что все четыре субъединицы присутствуют в ганглии задних корешков (DRG), с HCN1, имеющим самый высокий уровень экспрессии. Это согласуется с кинетикой активации тока I, зарегистрированного в случае DRG (Tu и др., J Neurosci. Res., 2004, :713-722).
h
h
h
h
71
76
Ток Iобнаружен в нейронах из многих областей нервной системы, вовлекаемых в ноцицепцию, включая студенистое вещество спинного мозга, ганглий задних корешков, миндалину, кору головного мозга и таламус. Токи I, по-видимому, должны экспрессироваться в среде и/или в больших DRG и могут отсутствовать из сомы больше всего С-типа (небольших) DRG (Scroggs и др., J Neurophysiol., :271-279; Tu и др., J Neurosci. Res., 2004, :713-722). Кроме того, сообщалось, что повреждение нерва у крыс (модель Чанга) увеличивает плотность тока I в случае больших DRG и вызывает побуждаемые пейсмейкером потенциалы спонтанного действия в лигированном нерве. ZD 7288, блокатор I-канала, снижает частоту возбуждения эктопических разрядов в А-бета- и А-дельта-волокнах, не вызывая блокирования проводимости (Lee и др., 2005, J. Pain, 417-424).
h
23
Интраперитонеальное введение блокатора I, ZD 7288, в случае модели невропатической боли, в зависимости от дозировки, реверсирует механическую аллодинию (Chung/von Frey; Chaplan и др., 2003, J Neurosci., :1169-1178). ZD 7288 также подавляет аллодинию в случае CFA-крысиной модели воспалительной боли и блокирует спонтанную боль в случае крысиной модели умеренного термического повреждения.
Другая исследовательская группа сообщала, что местное введение ZD 7288 в седалищный нерв спустя 4 часа после оперативного вмешательства у крыс ослабляет механическую аллодинию в случае модели Бреннана (Dalle & Eisenach, 2005, Reg. Anesth. and Pain, Med, 243-248).
h
h
th
Предполагают, что во время состояний острой хронической боли первичные афференты становятся гипервозбудимыми вследствие периферической чувствительности после воспаления и изменение экспрессии ионного канала на участке повреждения нерва связано с невропатией. ZD 7288, индуцирующий ингибирование I, снижает спонтанную активность в случае нерва, поврежденного миелинизированным DRG (Yagi и др., 2000, Proc, 9 World Congress on Pain, 109-117), таким образом, уменьшая ассоциированную боль. Текущие предклинические данные указывают, что блокаторы канала I могут быть полезны при лечении хронической невропатической боли.
HCN pacemaker channels and pain: a drug discovery perspective
15
Доступные в настоящее время блокаторы HCN, по-видимому, ингибируют все изоформы HCN при отсутствии очевидной селективности к подтипу, что таким образом ограничивает их полезность в случае экстракардиальных симптомов, таких как боль (Wickenden и др., "", Current Pharm. Design, 2009, , 2149-2169).
h
Эти сведения необходимы для дополнительных ингибиторов канала I, которые должны быть пригодны для лечения боли, такой как невропатическая или воспалительная боль.
Для этой цели согласно настоящему изобретению предусматриваются аминогетероарильные производные, имеющие общую формулу I:
,
где
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
Ar означает фенил или 6-членную гетероарильную группу, содержащую 1 или 2 атома азота, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителем(ями), выбираемым(и) из группы, состоящей из галогена, (С)алкила, галоген(С)алкила, (С)алкилокси, галоген(С)алкилокси, CN, (С)алкилтио и галоген(С)алкилтио;
1
Х означает О, S или NR;
1
1-4
R означает Н или (С)алкил;
2
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
R означает (С)алкил, галоген(С)алкил, (С)алкилокси(С)алкил или галоген(С)алкилокси(С)алкил;
3
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
R означает Н, (С)алкил, галоген(С)алкил, (С)алкилокси(С)алкил или галоген(С)алкилокси(С)алкил; или
2
3
R и R образуют вместе с атомом углерода, с которым они связаны, 3-7-членный насыщенный цикл, необязательно содержащий атом кислорода;
1
2
3
1
2
3
3
2
Y, Y и Y независимо означают CH или N; при условии, что по меньшей мере один из Y, Y и Y означает N и что, когда Yозначает N, Y означает N;
4
5
1-4
1-4
1-4
1-4
R и R независимо означают Н, (С)алкил, галоген(С)алкил, (С)алкилокси(С)алкил; или
4
5
R и R образуют вместе с атомом азота, с которым они связаны, 3-7-членный насыщенный цикл, необязательно содержащий атом кислорода; или их фармацевтически приемлемые соли, для использования при лечении боли, такой как невропатическая или воспалительная боль.
Другой аспект данного изобретения относится к аминогетероарильному производному согласно формуле 1:
,
где
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
Ar означает фенил или 6-членную гетероарильную группу, содержащую 1 или 2 атома азота, каждый из которых может быть необязательно замещен одним или более заместителем(ями), выбираемым(и) из группы, состоящей из галогена, (С)алкила, галоген(С)алкила, (С)алкилокси, галоген(С)алкилокси, CN, (С)алкилтио и галоген(С)алкилтио;
1
Х означает О, S или NR;
1
1-4
R означает Н или (С)алкил;
2
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
R означает (С)алкил, галоген(С)алкил, (С)алкилокси(С)алкил или галоген(С)алкилокси(С)алкил;
3
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
1-4
R означает Н, (С)алкил, галоген(С)алкил, (С)алкилокси(С)алкил или галоген(С)алкилокси(С)алкил; или
2
3
R и R образуют вместе с атомом углерода, с которым они связаны, 3-7-членный насыщенный цикл, необязательно содержащий атом кислорода;
1
2
3
1
2
3
3
2
Y, Y и Y независимо означают CH или N; при условии, что по меньшей мере один из Y, Y и Y означает N и что, когда Yозначает N, Y означает N;
4
5
1-4
1-4
1-4
1-4
R и R независимо означают Н, (С)алкил, галоген(С)алкил или (С)алкилокси(С)алкил; или
4
5
2
3
3
4
5
1
2
3
R и R образуют вместе с атомом азота, с которым они связаны, 3-7-членный насыщенный цикл, необязательно содержащий атом кислорода; или к его фармацевтически приемлемой соли; за исключением 4-(1-{[3-хлор-5-(трифторметил)-2-пиридинил]сульфанил}этил)-2-пиримидинамина и соединений формулы I, где Ar означает фенил; Х означает О; R означает СН; R, R и R означают Н; Y означает N; Y означает N; и Y означает СН.
Это условие относится к раскрытию 4-[1-(4-хлорфенокси)этил]-2-пиримидинамина в WO 2008/067389 (ALSGEN Inc.) в качестве соединения, пригодного для предупреждения или лечения симптомов бокового амиотрофического склероза (ALS), и к раскрытию 4-(1-феноксиэтил)-2-пиримидинамина, 4-[1-[3-(трифторметил)фенокси]этил]-2-пиримидинамина, 4-[1-(2,4-дихлорфенокси)этил]-2-пиримидинамина и 4-(1-{[3-хлор-5-(трифторметил)-2-пиридинил]сульфанил}этил)-2-пиримидинамина в качестве соединений, доступных в библиотеках скрининга, но без известной фармацевтической полезности.
1-4
Термин «(С)алкил», как используется в определении формулы I, означает алкильную группу с разветвленной или неразветвленной цепью, имеющей 1-4 атома углерода, подобную бутилу, изобутилу, трет-бутилу, пропилу, изопропилу, этилу и метилу. Предпочтительным является метил.
Термин «галоген» означает F, Cl, Br или I. Предпочтительным галогеном является F.
1-4
1-4
В термине «галоген(С)алкил» галоген означает 1 или более атомов галогена в качестве заместителя(ей). Предпочтительным галоген(С)алкилом является трифторметил.
1-4
1-4
В термине «галоген(С)алкилокси» галоген означает 1 или более атомов галогена в качестве заместителя(ей). Предпочтительным галоген(С)алкилокси является трифторметилокси.
Предпочтительными являются аминогетероарильные производные формулы I, где Ar означает фенил или 6-членную гетероарильную группу, выбираемую из пиридин-2-ила, пиридин-3-ила, пиридин-4-ила, пиразин-2-ила и пиримидин-2-ила.
1
2
3
Также предпочтительными являются соединения формулы I, где Y и Y означают N и Y означает CH.
2
3
3
4
5
Далее, предпочтительными являются соединения формулы I, где R означает CH и R означает H. Более предпочтительными являются соединения, где, в дополнение, R и R означают H.
Особенно предпочтительные аминогетероарильные производные согласно данному изобретению для использования при лечении боли, такой как невропатическая и воспалительная боль, выбирают из группы, состоящей из
(R)-4-(1-(3-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амина;
(R)-4-(1-(2-хлор-5-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амина;
(R)-4-(1-(2,5-дифторфенокси)этил)пиримидин-2-амина;
(R)-4-(1-(2,4-дифторфенокси)этил)пиримидин-2-амина;
(R)-4-(1-(3-метоксипиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амина;
(S)-4-(1-(3-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амина;
(S)-4-(1-(2,5-дифторфенокси)этил)пиримидин-2-амина;
(4-(1-(3-(трифторметил)пиридин-2-илтио)этил)пиримидин-2-амина;
(R)-4-(1-(3-(трифторметил)пиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амина;
(R)-4-(1-(4-(трифторметил)пиримидин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амина; и
4-(1-(3-(трифторметил)пиридин-2-иламино)этил)пиримидин-2-амина;
или их фармацевтически приемлемых солей.
Особенно предпочтительными аминогетероарильными производными согласно данному изобретению являются
(R)-4-(1-(3-метоксипиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин;
(4-(1-(3-(трифторметил)пиридин-2-илтио)этил)пиримидин-2-амин;
(R)-4-(1-(3-(трифторметил)пиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин;
(R)-4-(1-(4-(трифторметил)пиримидин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин; или
4-(1-(3-(трифторметил)пиридин-2-иламино)этил)пиримидин-2-амин;
или их фармацевтически приемлемые соли.
Аминогетероарильные производные согласно данному изобретению можно получать с помощью способов, общеизвестных в области органической химии.
1
3
2
5
Аминогетероарильное производное формулы 1, например, можно получать из соответствующего соединения формулы 2 (схема 1), где Х, Y-Y и R-R имеют значения, как определено выше. Соединения формулы 1, где Х означает О или S, можно получать из соединения формулы 2, где Х означает О, используя реагент Ar-XH, где Х означает О или S и Ar имеет значения, как определено выше, используя условия сочетания по Мицунобу (т.е. триалкил- или арилфосфин в присутствии диалкилазадикарбоксилата, в растворителе, таком как тетрагидрофуран). Соединения формулы 1, где Х означает О или S, можно также получать из соединений формулы 2, где Х означает О или S, используя реагент Ar-X', где X' представляет собой удаляемую группу, такую как фтор, хлор, метансульфонил или нитрогруппа. Такие превращения обычно осуществляют в полярном апротонном растворителе, таком как N-метилпирролидинон (NMP) или тетрагидрофуран (ТГФ), используя основание, такое как гидрид натрия.
Схема 1
1
1
1-4
1
Аминогетероарильное производное формулы 1, где Х означает NR и R означает Н или (С)алкил, можно получать из соединения формулы 2, где Х означает NR, используя реагент формулы Ar-X', где X' представляет собой удаляемую группу, такую как фтор, хлор или нитрогруппа, в присутствии основания, такого как триэтиламин, или путем катализируемой переходным металлом реакции при использовании реагента формулы Ar-X", где X" означает группу, которая окислительно присоединяется к типу металла низкой валентности, такую как хлор, бром, йод и трифторметансульфонил.
2
3
2
3
3
Соединения формулы 2 можно получать, как показано на схеме 2. Восстановление соединений формулы 3, где R имеет значение, как определено выше, путем гидрирования в присутствии подходящего катализатора или гидрида металла, в качестве реагента, такого как боргидрид натрия или литийалюминийгидрид, приводит к получению соединений формулы 2, где Х означает О и R означает Н. Введение во взаимодействие соединения формулы 3, где R имеет значение, как определено выше, с металлоорганическим реагентом общей формулы R-металл, где R имеет значение, как определено выше, и металл представляет собой такой, как, например, литий, триалкилсилил или часть галогенида магния, приводит к получению соединений формулы 2 со спиртовой группой, где Х означает О.
Путем использования хирального реагента или катализатора для осуществления реакции присоединения гидрида, гидрирования или присоединения несущего алкильную группу металлоорганического реагента можно получать соединения формулы 2, которые необязательно обогащены одним стереоизомером.
Схема 2
1
1
1-4
1
2
3
Соединения формулы 2, где Х означает NR, где R означает (С)алкил, можно получать, как показано на схеме 3. Путем введения в реакцию конденсации соединения формулы 3 с амином общей формулы RNH в присутствии дегидратирующего агента, такого как сульфат магния или тетраизопропоксид титана, получают промежуточный имин формулы 4, который можно восстанавливать с помощью гидрида металла в качестве реагента, или путем гидрирования, или можно обрабатывать с помощью металлоорганического реагента формулы R-металл, получая соединение формулы 2.
Схема 3
1
1
2
6
6
3
6
1
Соединения формулы 2, где Х означает NR и где R означает Н, можно получать, как показано на схеме 3, путем конденсации соединения формулы 3 с амином общей формулы YNH, где Y означает группу, такую как гидроксильная или сульфинильная группа формулы SOR, где R означает алкил или необязательно замещенную арильную группу, в присутствии дегидратирующего агента, такого как сульфат магния или тетраизопропоксид титана, получая промежуточный имин формулы 5, который можно непосредственно восстанавливать с помощью гидрида металла, в качестве реагента, или путем гидрирования, или путем обработки с помощью металлоорганического реагента формулы R-металл, с сопутствующей удаляемой группой Y (т.е. избегая выделения соединений формулы 6) или затем путем подходящей стадии удаления группы Y, получая соединение формулы 2. Такой путь может проходить через промежуточные соединения формулы 6, которые, когда Y означает хиральную группу с одной конкретной конфигурацией (например, SOR), могут позволять осуществлять разделение диастереомеров и, следовательно, получать соединения формулы 2 в виде одного энантиомера, где Х означает NR.
1
1
1
1
1-4
1-4
1
Соединения формулы 2, где Х означает NR и R означает Н, можно превращать в соединения формулы 2, где Х означает NR и R означает (С)алкил, путем восстановительного аминирования при использовании подходящего реагента, содержащего (С)карбонил, в присутствии восстановителя, такого как триацетоксиборгидрид натрия, или путем реакции с группой формулы RX', где X' имеет значение, определенное выше, в присутствии основания, такого как триэтиламин.
4
5
4
5
N
В случае альтернативного способа аминогетероарильное производное формулы 1 можно получать из соответствующего соединения формулы 7, где X' означает хлор, бром или нитрогруппу, осуществляя реакцию N-арилирования при использовании реагента общей формулы HNRR, где RиR имеют значения, как определено выше, как показано на схеме 4. Используют реагент формулы 7, где X' имеет значение, как описано выше на схеме 4. Для такой SAr-реакции может требоваться присутствие основания, такого как триэтиламин.
Схема 4
4
5
Соединения формулы 1 можно получать из соответствующего соединения формулы 8, где X" имеет значение, как определено выше, путем осуществления реакции N-арилирования при использовании реагента общей формулы HNRR, как показано на схеме 5. Реакцию осуществляют путем использования катализируемого подходящим переходным металлом N-арилирования.
Схема 5
Соединения формулы 7 можно получать, как показано на схеме 6, используя превращения, аналогичные таковым, описанным на схеме 1, исходя из соединений формулы 9. Подобным путем соединения формулы 8 можно получать, как показано на схеме 7, исходя из соединений формулы 10.
Схема 6
Схема 7
3
Соединения формулы 9, где Х означает О, можно получать из соединений формулы 11, как показано на схеме 8, путем восстановления, используя подходящий восстановитель, или реакцию с металлоорганическим реагентом формулы R-металл. Подобным образом соединения формулы 10 можно получать из соединений формулы 15, как показано на схеме 9.
1
Соединения формул 9 и 10, где Х означает NR, можно получать, как показано на схемах 8 и 9, соответственно, используя превращения, аналогичные таковым, описанным на схеме 3.
Схема 8
Схема 9
2
7
8
1-3
1-3
1-3
1-4
1-3
1-4
7
8
9
Соединения формулы 11 и формулы 15, где R имеет значения, как определено выше, можно получать из являющихся енольными эфирами соединений формул 20 и 22, соответственно, как показано на схемах 10 и 11, соответственно. Кросс-сочетание соединений формул 19 и 21, соответственно, с винилметаллическим соединением формулы 23, где М означает металлсодержащий фрагмент, такой как триалкилстаннан (например, три-н-бутилолово), и R и R независимо выбирают из Н, (С)алкила, галоген(С)алкила, (С)алкилокси(С)алкила и галоген(С)-алкилокси(С)алкила, при условии, что не более чем четыре атома углерода являются смежно связанными через атом углерода, несущий как R-, так и R-группы, и R означает алкильную или триалкилсилильную группу, приводит к получению соединений формулы 20 и формулы 22, соответственно. Последующий кислотный гидролиз енольных эфиров формулы 20 и формулы 22, соответственно, приводит к получению желательных промежуточных продуктов формулы 11 и формулы 15, соответственно.
Схема 10
Схема 11
2
7
8
9
Соединения формулы 3, где R имеет значение, как определено выше, можно получать из являющихся енольными эфирами соединений формулы 25, как показано на схеме 12, путем кросс-сочетания соединений формулы 24 с винилметаллическими соединениями формулы 23, где M, R, R и R имеют значения, как определено выше, приводящего к образованию являющихся енольными эфирами соединений формулы 25. Последующий кислотный гидролиз являющихся енольными эфирами соединений формулы 25 приводит к получению желательного карбонильного соединения формулы 3.
Схема 12
1
2
3
2
10
11
1-10
10
11
2-10
12
13
1-10
12
13
2-10
14
15
1-10
14
15
2-10
4
5
3
1
2
2
4
5
Соединения формулы 3, где Y и Y означают N и Y означает CH, можно получать, исходя из моноацетальных защищенных дикетонов формулы 26, где R имеет значение, как определено выше, и R и R независимо означают (С)алкильные группы (например, метил или этил) или оба R и R связаны вместе с образованием (С)алкилиденовой группы (например, этилен), как показано на схеме 13. Путем конденсации соединения формулы 26 с соединением формулы 28, где R и R независимо означают (С)алкильные группы (например, метил или этил) или оба R и R связаны вместе с образованием (С)алкилиденовой группы (например, бутилен), и R и R независимо означают (С)алкильные группы (например, метил или этил) или оба R и R связаны вместе с образованием (С)алкилиденовой группы (например, бутилен), получают являющееся енамином соединение формулы 27. Путем конденсации соединения формулы 27 с амидином формулы 29, где R и R имеют значения, как определено выше, получают пиримидин формулы 30. Кислотный гидролиз соединения формулы 30, например, при использовании кислоты, такой как соляная кислота, приводит к получению соединения формулы 3, где Y означает CH, Y и Y означают N и R, R и R имеют значения, как определено выше.
Схема 13
Некоторые превращения, описанные выше, можно осуществлять, используя аналогичные промежуточные продукты, которые имеют гетероатомы, защищенные посредством защитных групп, как показано на схеме 14.
Схема 14
5
2
1
3
4
10
11
Например, соединения формулы 30, где R означает Н, можно превращать в соединения формулы 32, где R, Y-Y, R, R и R имеют значения, как определено выше, и PG представляет собой защитную группу, которая может включать, но не исчерпывающим образом, трет-бутилоксикарбонил (Вос) и бензилоксикарбонил (Cbz). Селективный гидролиз ацетальной функциональной группы приводит к получению соединений формулы 33. Использование таких защитных групп полностью описано в Wuts P.G.M. и Greene T.W. "Protecting Groups in Organic Synthesis", New York, Wiley (2006). Используя те же самые пути, как описано на схемах 1, 2, 3 и 12, те же самые продукты можно получать путем добавления стадии снятия защиты, исходя из соединений формулы 33.
Схема 15
2
3
3
16
16
16
3
12
13
14
15
Аминогетероарильные производные формулы 1, где R и R имеют значения, как определено выше, и Y означает СН, можно получать, как показано на схеме 15. Путем введения во взаимодействие соединения формулы 34а, где R означает Н, алкилокси или арилокси, с соединением Ar-X' или Ar-X", способом, аналогичным таковому, представленному на схеме 7, затем, где необходимо, путем взаимопревращения подходящей функциональной группы для конвертирования Rв Н, получают соединения формулы 35. Альтернативно, введение во взаимодействие соединения формулы 34b с соединением Ar-XH, затем, где необходимо, путем взаимопревращения подходящей функциональной группы для конвертирования Rв Н, приводит к получению соединения формулы 35. Путем обработки соединения формулы 35 с помощью металлоорганического соединения общей формулы СН-металл, где металл имеет значение, как определено выше, получают соединения формулы 36, которые можно окислять до соединений формулы 37. Путем конденсации соединений формулы 35 с реагентом формулы 28, где R, R, R и R имеют значения, как определено выше, получают являющиеся енамином соединения формулы 38, которые, когда их конденсируют с соединениями формулы 29, дают соединения формулы 1.
Схема 16
2
1-4
1-4
1-4
1-4
17
1-4
18
1-4
1-4
5
Соединения формулы 1, где R означает (С)алкилокси(С)алкил или галоген(С)алкилокси(С)алкил, можно получать, как показано на схеме 16, исходя из соединения формулы 39, где R означает (С)алкиленовую группу. При монозащите гидроксильной группы с помощью подходящей защитной группы получают соединение формулы 40, где PG представляет собой защитную группу, такую как, но не исчерпывающим образом, трет-бутилдиметилсилил. Путем введения во взаимодействие соединения формулы 40 с подходящим реагентом формулы Ar-XH, Ar-X' или Ar-X" (см. схемы 6 и 7), используя условия, указанные выше на схеме 1, получают соединения формулы 41. При удалении защитной группы получают соединения формулы 42 и при О-алкилировании с помощью реагента формулы 43, где R означает (С)алкил или галоген(С)алкил, получают соединения формулы 1. Модификация этого пути, в соответствии с чем R замещен подходящей защитной группой, которая является ортогональной к группе PG, связанной с кислородом, возможна образом, аналогичным таковому, представленному на схеме 14. Такие стратегии в отношении защитной группы хорошо известны квалифицированному специалисту в данной области.
Схема 17
3
19
20
1-10
19
20
2-10
3
17
19
20
Соединения формулы 39, где Х означает О и Y означает СН, можно получать из соединений формулы 44, где R и R независимо означают (С)алкильные группы (например, метил или этил) или оба R и R связаны вместе с образованием (С)алкилиденовой группы, как показано на схеме 17, в последовательности, аналогичной таковой, представленной на схемах 13 и 15. Путем введения во взаимодействие соединения формулы 44, где R, R, R и R имеют значения, как определено выше, и Х означает О, с реагентом формулы 28 получают соединение формулы 45. Путем последующей обработки с помощью реагента формулы 29 получают соединения формулы 46, у которых удаляют защиту с помощью, например, кислоты, такой как соляная кислота, получая соединения формулы 39, где Х означает О.
Схема 18
4
5
4
5
4
21
22
4
5
Соединения формулы 2 можно получать путем прямого замещения группы X' у соединений формулы 9, где X' имеет значение, как определено выше, с помощью амина общей формулы HNRR, где R и R имеют значения, как определено выше, как показано на схеме 18. Альтернативно, замещение группы X' можно осуществлять при использовании замещенного гидразина в качестве реагента формулы 47, где R имеет значение, как определено выше, и R и R могут означать Н, алкильную или арильную группу, получая соединения формулы 48. Разрыв связи азот-азот, используя, например, никель Ренея, приводит к получению соединений формулы 2, где R имеет значение, как определено выше, и R означает Н.
Схема 19
4
5
Аналогичную последовательность реакций можно осуществлять, исходя из соединения формулы 10, в соответствии с чем осуществляют реакцию N-арилирования с помощью реагента общей формулы HNRR или реагента формулы 47, используя катализатор на основе переходного металла, как показано на схеме 19.
4
5
23
24
4
5
Соединения формулы 2, где R и R, оба, означают Н, можно получать из соединения формулы 10 путем N-арилирования при использовании имина формулы 49, где R и R независимо означают фенил или необязательно замещенные фенильные циклы, путем применения катализатора на основе переходного металла, как, например, тетракис(трифенилфосфин)палладий(0), приходя к соединению формулы 50, как показано на схеме 20. Гидролиз функциональной иминогруппы приводит к получению соединения формулы 2, где R и R, оба, означают Н. Альтернативно, соединения формулы 1 можно получать непосредственно из соединений формулы 48 путем введения группы Ar с последующим гидролизом бензофенонимина.
4
5
4
5
Реагент общей формулы HNRR можно заменять реагентом формулы 47, согласно схеме 4, приходя к получению соединений формулы 1 в соответствии с последовательностью, аналогичной таковой, представленной на схеме 18. Подобным образом, реагенты формулы 46 и формулы 47 можно заменять реагентом HNRR, согласно схеме 5, приходя к получению соединений формулы 1 в соответствии с последовательностью, аналогичной таковой, представленной на схеме 19 и схеме 20.
Схема 20
1
2
3
4
5
25
1
2
3
4
5
Соединения формулы 1, где Y, Y и Y, все, означают N и R и R, оба, означают Н, можно получать путем реакции амидина формулы 51 с диалкилцианокарбонимидодитиоатом формулы 52, где Rозначает алкильную группу, с образованием аминотиоалкил-1,3,5-триазина формулы 53, как показано на схеме 21, к которому присоединяют ароматический остаток, используя один из способов, указанных выше, с образованием соединений формулы 54. Путем удаления тиоалкильной группы из соединений формулы 54, используя, например, никель Ренея, получают соединения формулы 1, где Y, Y и Y, все, означают N и R и R, оба, означают Н.
Схема 21
2
2
Соединения формулы 3, где R имеет значение, как определено выше, можно получать путем добавления металлоорганического реагента общей формулы R-металл или гидрида в качестве восстановителя к соединению формулы 55, где Е представляет собой подходящую электрофильную группу-предшественник для кетона или альдегида, как например нитрильная или амидная функциональная группа, такая как амид Вайнреба, как показано на схеме 22. Аналогичным образом можно получать соединения формулы 11, формулы 15 и формулы 33.
Схема 22
Аминогетероарильные производные согласно данному изобретению, в соответствии с формулой I, могут содержать один или более центр(ов) хиральности и, следовательно, могут существовать в виде стереоизомеров, включая диастереомеры. В рамки настоящего изобретения входят вышеуказанные стереоизомеры и каждый из индивидуальных R-, S-, R/S- и S/S-изомеров соединений формулы I и их солей, по существу, свободные, т.е. ассоциированные менее чем с 5%, предпочтительно менее чем с 2%, в особенности менее чем с 1%, другого стереоизомера, и смеси таких стереоизомеров в любых пропорциях.
Очищенные стереоизомеры можно получать, используя методы, такие как кристаллизация хиральных солевых форм, хиральное хроматографическое разделение или разделение с использованием ферментативных методов. Такие методы хорошо известны квалифицированному специалисту в данной области. Можно использовать методы, описанные в "Advanced Organic Chemistry" (March J., New York, Wiley (1985)) и в "Chirality in Industry" (под ред. A.N. Collins, G.N. Sheldrake и J. Cosby, 1992; John Wiley).
2
3
13
14
15
18
17
18
35
36
Настоящее изобретение также охватывает меченные изотопами аминогетероарильные производные формулы I согласно настоящему изобретению, которые идентичны таковым, перечисленным в данном контексте, но дело в том, что один или более атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающейся(щегося) в природе. Примеры изотопов, которые можно вводить в соединения согласно данному изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, серы, фосфора, фтора и хлора, такие как Н, Н, С, С, N, O, O, F, S и Cl, соответственно.
3
14
3
14
2
in vivo
Некоторые меченные изотопами соединения формулы (I) (например, соединения, меченные с помощью Н и С) пригодны в случае анализов по распределению в ткани соединения и/или субстрата. Меченные тритием изотопы (т.е. Н) и углеродом-14 (т.е. С) являются особенно предпочтительными вследствие легкости их получения и обнаружения. Далее, замена более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (т.е. Н), может давать некоторые терапевтические преимущества, проистекающие из-за большей метаболической стабильности (например, требования увеличенного периода полураспада  или уменьшенной дозировки), и, следовательно, может быть предпочтительной в некоторых случаях. Меченные изотопами соединения формулы (I) обычно можно получать посредством следующих методик, аналогичных таковым, описанным на схемах и/или в нижеприводимых примерах, путем замены немеченного изотопом реагента с помощью соответствующего меченного изотопом реагента.
Фармацевтически приемлемые соли можно получать путем обработки свободного основания соединения формулы I с помощью неорганической кислоты, такой как соляная кислота, бромоводородная кислота, фосфорная кислота и серная кислота, или с помощью органической кислоты, такой как, например, аскорбиновая кислота, лимонная кислота, винная кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, фумаровая кислота, гликолевая кислота, янтарная кислота, пропионовая кислота, уксусная кислота и метансульфоновая кислота. Предпочтительными являются соли, полученные с соляной кислотой и L-(+)-винной кислотой.
Аминогетероарильные производные согласно данному изобретению могут существовать в несольватированных формах, а также в сольватированных формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п. Вообще, сольватированные формы считаются эквивалентными несольватированным формам для цели данного изобретения.
Настоящее изобретение, далее, относится к фармацевтическим композициям, содержащим аминогетероарильное производное согласно общей формуле I или его фармацевтически приемлемую соль, в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и, необязательно, с другими терапевтическими агентами. Термин «приемлемый» означает, что является совместимым с другими ингредиентами композиции и безвреден для его реципиентов.
Композиции включают, например, таковые, пригодные для перорального, сублингвального, подкожного, внутривенного, эпидурального, интратекального, внутримышечного, трансдермального, пульмонального, локального, офтальмического или ректального введения и т.п., причем все находятся в разовых лекарственных формах для введения. Предпочтительный путь введения представляет собой пероральный путь.
Для перорального введения активный ингредиент может присутствовать в виде дискретных единиц, таких как таблетки, капсулы, порошки, гранулы, растворы, суспензии и т.п.
Для парентерального введения фармацевтическая композиция согласно данному изобретению может находиться в контейнерах с разовой дозой или мультидозой, например, инъецируемые жидкости в предопределенных количествах, например в герметично закрытых пузырьках и ампулах, и также может храниться в высушенном путем сушки вымораживанием (лиофизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например воды, перед использованием.
The Science and Practice of Pharmacy
Смешанный с такими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, например, как описано в стандартной ссылке: Gennaro A.R. и др., Remington: (20-е изд., Lippincott Williams & Wilkins, 2000, см., особенно, часть 5: Pharmaceutical Manufacturing), активный агент может быть подвергнут прессованию с получением твердых дозированных единиц, таких как пилюли, таблетки, или может быть подвергнут обработке с получением капсул, суппозиториев или пластырей. При помощи фармацевтически приемлемых жидкостей активный агент можно применять в виде жидкой композиции, например в виде инъецируемого препарата, в форме раствора, суспензии, эмульсии, или в виде спрея, например назального спрея.
Для получения твердых дозированных единиц рассматривают использование обычных добавок, таких как наполнители, красители, полимерные связующие и т.п. Вообще, можно использовать любую фармацевтически приемлемую добавку, которая не интерферирует с функцией активных соединений. Пригодные носители, с которыми можно вводить активный агент согласно данному изобретению в виде твердых композиций, включают лактозу, крахмал, производные целлюлозы и т.п. или их смеси, используемые в подходящих количествах. Для парентерального введения можно использовать водные суспензии, изотонические физиологические растворы и стерильные инъецируемые растворы, содержащие фармацевтически приемлемые диспергаторы и/или смачивающие агенты, такие как пропиленгликоль или бутиленгликоль.
Данное изобретение, далее, включает фармацевтическую композицию, как описано ранее, в комбинации с упаковочным материалом, пригодным для вышеуказанной композиции, причем вышеуказанный упаковочный материал включает инструкции по применению данной композиции, для использования, как описано ранее.
h
h
Обнаружено, что аминогетероарильные производные согласно данному изобретению являются ингибиторами канала I, как определено по методу пэтч-кламп в электрофизиологии, используя канал HCN1 человека (см. международную заявку на патент WO 01/090142: "Full length human HCN1 I channel subunits and variants" - Akzo Nobel N.V.), экспрессируемый в HEK-клетках.
h
Соединения согласно данному изобретению полезны при лечении боли, которая опосредуется модуляцией канала I, предпочтительно, невропатической или воспалительной боли, такой как невропатическая боль, имеющая место при состояниях, подобных тригеминальной невралгии, постгерпетической невралгии (боль после опоясывающего лишая), диабетической невропатии, фантомной боли конечности после ампутации, рассеянному склерозу, боли после химиотерапии, фибромиалгии (хроническое мышечное болевое нарушение), ВИЧ-инфекции, алкоголизму, раковому заболеванию (как прямое следствие ракового заболевания в случае периферических нервов или как побочный эффект некоторых химиотерапевтических лекарственных средств) и атипической лицевой боли.
Соединения согласно данному изобретению также можно использовать в сочетании с другими лекарственными средствами, например анальгетическими лекарственными средствами, такими как опиоиды и нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (NSAID), включая селективные ингибиторы СОХ-2.
Соединения согласно данному изобретению можно вводить людям в достаточном количестве и в течение достаточного количества времени для облегчения симптомов. В качестве иллюстрации, уровни дозировки для людей могут находиться в диапазоне 0,001-50 мг/кг массы тела, предпочтительно, в дозировке, равной 0,01-20 мг/кг массы тела.
Данное изобретение далее проиллюстрировано следующими примерами.
Способы
Общие химические методики
1
Все реагенты или приобретены из общих коммерческих источников, или синтезированы в соответствии с литературными методиками, с использованием коммерческих источников. Протонный ЯМР (Н-ЯМР) получали на спектрометре Bruker DPX 400 и ссылались на тетраметилсилан (TMS) в качестве внутреннего стандарта. Масс-спектр регистрировали на приборе Shimadzu LC-8A (ВЭЖХ) PE Sciex API 150EX LCMS.
Промежуточные соединения
Соединение 1а
: 1-(Диметиламино)-4,4-диметоксипент-1-ен-3-он
3,3-Диметокси-2-бутанон (24,96 г) и N,N-диметилформамиддиметилацеталь (25,09 мл) комбинируют и нагревают при температуре 100°С в течение ночи. Затем добавляют N,N-диметилформамиддиметилацеталь (5 мл) и продолжают нагревать в течение следующего дня. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, получая 34,29 г 4-(1,1-диметоксиэтил)пиримидин-2-амина в виде масла коричневого цвета.
Подобным образом получают следующие соединения:
1b
: 1-(Диметиламино)-4,4-диметоксигекс-1-ен-3-он
, исходя из 3,3-диметокси-2-пентанона.
1с
: 1-(Диметиламино)-4,4-диметоксибут-1-ен-3-он
, исходя из 1,1-диметокси-2-пропанона.
1d
: 1-(2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-3-(диметиламино)проп-2-ен-1-он
, исходя из 1-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)этанона (полученного в две стадии из 2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-карбоксальдегида).
Соединение 2а
: 4-(1,1-Диметоксиэтил)пиримидин-2-амин
1а
1-(Диметиламино)-4,4-диметоксипент-1-ен-3-он () (34,29 г) растворяют в этаноле (750 мл). Добавляют карбонат калия (65,3 г) и гуанидингидрохлорид (20,77 г) и полученную суспензию кипятят с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, остаток перемешивают с водой в течение ночи, отфильтровывают и сушат в вакуумном сушильном шкафу при температуре 40°С в течение ночи, получая указанное в заголовке соединение (21,01 г) в виде твердого вещества белого цвета. Фильтрат экстрагируют дихлорметаном (3 раза по 700 мл) и объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая дальнейшую массу (10,6 г) указанного в заголовке соединения.
Подобным образом получают следующие соединения:
2b
1b
: 4-(1,1-Диметоксипропил)пиримидин-2-амин
, исходя из 1-(диметиламино)-4,4-диметоксигекс-1-ен-3-она () и гуанидингидрохлорида.
2с
1с
: 4-(1,1-Диметоксиметил)пиримидин-2-амин
, исходя из 1-(диметиламино)-4,4-диметоксибут-1-ен-3-она () и гуанидингидрохлорида.
2d
1а
: 4-(1,1-Диметоксиметил)-2-(N-метиламино)пиримидин
, исходя из 4-(1,1-диметоксиэтил)пиримидин-2-амина () и N-метилгуанидингидрохлорида.
2е
1а
: 4-(1,1-Диметоксиэтил)-2-(пирролидин-1-ил)пиримидин
, исходя из 1-(диметиламино)-4,4-диметоксипент-1-ен-3-она () и пирролидин-1-карбоксимидамидгидроиодида.
2f
1d
: 4-(2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил)пиримидин-2-амин
, исходя из 1-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-3-(диметиламино)проп-2-ен-1-она () и гуанидингидрохлорида.
Соединение 3а
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этанон
2а
К перемешиваемому раствору 4-(1,1-диметоксиэтил)пиримидин-2-амина () (180 г) в тетрагидрофуране (2 л) добавляют 2 М соляную кислоту (980 мл) и продолжают перемешивать при комнатной температуре в течение ночи. Наибольшее количество растворителя удаляют в вакууме и остающийся водный раствор выливают в водный насыщенный раствор гидрокарбоната натрия. Окрашенный в песочный цвет осадок отфильтровывают и высушивают в вакууме при температуре 40°С, получая указанное в заголовке соединение (112 г).
Подобным образом получают следующие соединения:
3b
2b
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)пропанон
, исходя из 4-(1,1-диметоксипропил)пиримидин-2-амина ().
3с
2d
: 1-[2-(N-метиламино)пиримидин-4-ил]этанон
, исходя из 4-(1,1-диметоксиметил)-2-(N-метиламино)пиримидина ().
3d
2е
: 1-(2-(Пирролидин-1-ил)пиримидин-4-ил)этанон
, исходя из 4-(1,1-диметоксиэтил)-2-(пирролидин-1-ил)пиримидина ().
Соединение 4а
: 2-Хлор-4-ацетилпиридин
К раствору 2-хлор-4-цианопиридина (41,6 г) в безводном эфире в атмосфере азота по каплям добавляют метилмагнийиодид (200 мл, 3 М раствор в эфире). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Твердые вещества, которые образуются, собирают и вносят немедленно в смесь 1000 г льда, 500 мл воды и 250 мл 6 н. раствора HCl. Водный раствор выдерживают до достижения комнатной температуры и затем экстрагируют эфиром (800 мл), и объединенные органические слои сушат (сульфат натрия) и выпаривают, получая масло красного цвета, которое кристаллизуется при стоянии. Это вещество обрабатывают смесью эфира (приблизительно 300 мл) и гептана (~50 мл). Раствор охлаждают на бане со смесью ацетон/сухой лед, что в результате приводит к образованию твердых веществ желтого цвета, которые отфильтровывают и высушивают на воздухе в течение 30 минут, получая указанное в заголовке соединение (21,7 г) в виде твердого вещества желтого цвета.
Соединение 5а
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этанол
3а
1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этанон () (0,5 г) растворяют в 50 мл метанола и охлаждают до температуры 0°С. Порциями добавляют боргидрид натрия (0,138 г) и смесь перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Добавляют насыщенный раствор хлорида аммония (20 мл) и эту смесь дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и выпаривают, получая указанное в заголовке соединение (270 мг) в виде бесцветного масла, которое отверждается при стоянии.
Подобным образом получают следующие соединения:
5b
3b
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)пропанол
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанона ().
5с
3с
: 1-[2-(N-Метиламино)пиримидин-4-ил]этанол
, исходя из 1-[2-(N-метиламино)пиримидин-4-ил]этанона ().
5d
4а
: 1-(2-Хлорпиридин-4-ил)этанол
, исходя из 2-хлор-4-ацетилпиридина ().
Соединение 6а
: (R)-1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этанол
3а
К раствору 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанона () (59,8 г) в N,N-диметилформамиде (600 мл) при комнатной температуре добавляют хлор[(1R,2R)-N-(п-толуолсульфонил)-1,2-дифенил-1,2-этандиамин](п-цимен)рутений(II) (3,35 г). Полученный раствор темно-оранжевого цвета затем продувают аргоном и добавляют комплекс муравьиная кислота-триэтиламин (5:2) (189 г). Реакционную смесь перемешивают в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение 1 часа, потом выпаривают досуха при пониженном давлении, получая остаток темно-коричневого цвета, который обрабатывают дихлорметаном и минимальным объемом метанола, и хроматографируют на силикагеле, элюируя 4-10% метанола в дихлорметане. Фракции, содержащие продукт, объединяют и выпаривают при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение (29,2 г), которое имеет соотношение энантиомеров 2,4%:97,6% согласно хиральной хроматографии SFC (сверхкритическая флюидная хроматография).
Подобным образом получают следующие соединения:
6b
3а
: (S)-1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этанол
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанона () и используя хлор[(1S,2S)-N-(п-толуолсульфонил)-1,2-дифенил-1,2-этандиамин](п-цимен)рутений(II) в качестве катализатора.
6с
: (R)-1-(2-Аминопиримидин-4-ил)пропанол
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанона и используя хлор[(1R,2R)-N-(п-толуолсульфонил)-1,2-дифенил-1,2-этандиамин](п-цимен)рутений(II) в качестве катализатора.
6d
: (S)-1-(2-Аминопиримидин-4-ил)пропанол
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанона и используя хлор[(1S,2S)-N-(п-толуолсульфонил)-1,2-дифенил-1,2-этандиамин](п-цимен)рутений(II) в качестве катализатора.
6е
3с
: (S)-1-(2-N-метиламинопиримидин-4-ил)этанол
, исходя из 1-[2-(N-метиламино)пиримидин-4-ил]этанона () и используя хлор[(1S,2S)-N-(п-толуолсульфонил)-1,2-дифенил-1,2-этандиамин](п-цимен)рутений(II) в качестве катализатора.
6f
3d
: (R)-1-(2-(Пирролидин-1-ил)пиримидин-4-ил)этанол
, исходя из 1-(2-(пирролидин-1-ил)пиримидин-4-ил)этанона () и используя хлор[(1R,2R)-N-(п-толуолсульфонил)-1,2-дифенил-1,2-этандиамин](п-цимен)рутений(II) в качестве катализатора.
Соединение 7а
: 2-N-(Бензилоксикарбонил)амино-4-(1,1-диметоксиметил)пиримидин
2с
К раствору 4-(1,1-диметоксиметил)пиримидин-2-амина () (15 г) в тетрагидрофуране (300 мл) добавляют раствор карбоната натрия (37,6 г) в воде (200 мл). К этому раствору, по каплям, добавляют раствор бензилхлорформиата (50,6 мл) в тетрагидрофуране (50 мл). После выдерживания в течение 3 часов при комнатной температуре, перемешивание прекращают и слои смеси разделяют. Водную фазу три раза экстрагируют этилацетатом и объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат (сульфат натрия) и концентрируют в вакууме, получая жидкость желтого цвета, которую три раза очищают с помощью флэш-хроматографии (60% этилацетата в гептане), получая указанное в заголовке соединение (17,95 г) в виде твердого вещества белого цвета.
Соединение 8а
: 2-N-(бензилоксикарбонил)амино-4-формилпиримидин
7а
К раствору 2-N-(бензилоксикарбонил)амино-4-(1,1-диметоксиметил)пиримидина () (17,96 г) в тетрагидрофуране (150 мл) добавляют водный раствор HCl (1 М раствор, 150 мл) и полученную смесь перемешивают при температуре 60°С в течение ночи. Кислую смесь подщелачивают (рН>10) путем добавления насыщенного водного раствора карбоната натрия и слои разделяют с получением водной фазы, которую дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои затем комбинируют, сушат (сульфат натрия) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение (14,1 г) в виде не совсем белого твердого вещества.
Соединение 9а
: 1-[2-(N-бензилоксикарбониламино)пиримидин-4-ил]-2,2,2-трифторэтанол
8а
К раствору 2-N-(бензилоксикарбонил)амино-4-формилпиримидина () (40 г) в безводном N,N-диметилформамиде (800 мл), в атмосфере азота, добавляют некоторое количество молекулярных сит. После перемешивания в течение 30 минут добавляют карбонат калия (2,15 г) и трифторметилтриметилсилан (26,5 г) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. Смесь выливают в насыщенный солевой раствор (1000 мл), экстрагируют этилацетатом (2 раза по 500 мл), промывают полунасыщенным солевым раствором (2 раза по 500 мл), сушат (сульфат натрия) и абсорбируют на 100 г диоксида кремния перед очисткой с помощью гравитационной колоночной хроматографии (элюент: гептан/этилацетат=1:1), получая указанное в заголовке соединение (18,49 г) в виде не совсем белого твердого вещества.
Соединение 10
: 1-[2-Аминопиримидин-4-ил]-2,2,2-трифторэтанол
9а
К раствору 1-[2-(N-бензилоксикарбониламино)пиримидин-4-ил]-2,2,2-трифторэтанола () в смеси этанол-тетрагидрофуран (1:1) (500 мл) в атмосфере азота добавляют палладий-на-угле (785 мг). Смесь помещают в атмосферу водорода (баллон) и перемешивают при комнатной температуре. Спустя 45 минут реакционную смесь отфильтровывают через целит, концентрируют в вакууме и очищают с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан/метанол=от 99:1 до 95:5), получая указанное в заголовке соединение (1,52 г).
Соединение 11а
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этаноноксим
3а
К суспензии 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанона () (4 г) в этаноле (70 мл) и воде (14 мл) добавляют гидроксиламингидрохлорид (4,05 г), затем ацетат натрия (7,18 г), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение одного часа. По истечении этого времени реакционную смесь концентрируют в вакууме, добавляют воду и перемешивают в течение 15 минут. Осадок собирают путем фильтрации, промывают водой и высушивают в вакууме при температуре 40°С в течение ночи, получая указанный в заголовке продукт (4,29 г) в виде твердого вещества светло-желтого цвета.
Подобным образом получают
11b
3b
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)пропаноноксим
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанона ().
Соединение 12а
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этиламин
3а
1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этанон () (4,29 г) растворяют в смеси этанол/тетрагидрофуран (1:1, 400 мл). Суспензию насыщают аргоном. Добавляют никель Ренея (50%-ная суспензия в воде, приблизительно 4 мл) и в колбу вводят водород. Реакционную смесь оставляют перемешиваться в атмосфере водорода (баллон). Спустя 4 дня добавляют дополнительное количество никеля Ренея (50%-ная суспензия в воде, ~4 мл). Спустя 10 дней реакционную смесь отфильтровывают через кизельгур и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в смеси этанол/тетрагидрофуран (1:1, 150 мл), через эту смесь барботируют аргон, добавляют никель Ренея (50%-ная суспензия в воде, ~4 мл) и реакционную смесь помещают под давление водорода, равное 8 бар, и перемешивают. Спустя 4 дня реакционную смесь отфильтровывают через кизельгур и концентрируют в вакууме, получая 4,4 г твердого вещества темно-коричневого цвета, которое очищают с помощью колоночной хроматографии (от 5% триэтиламина в этилацетате до 10% метанола в этилацетате), получая указанное в заголовке соединение (1,54 г).
Подобным образом получают
12b
11b
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)пропиламин
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропаноноксима ().
Соединение 13а
: 1-(2-Гидразинопиридин-4-ил)этанол
5d
1-(2-Хлорпиридин-4-ил)этанол () (14,3 г) растворяют в гидразингидрате (275 мл). Полученную смесь нагревают при температуре 100°С при перемешивании в течение ночи. Смесь концентрируют в вакууме, получая масло желтого цвета, которое растворяют в небольшом объеме метанола и добавляют эфир, что в результате приводит к осаждению твердого вещества белого цвета. Полученную суспензию перемешивают в течение 30 минут и отфильтровывают, остаток (гидразингидрохлорид) удаляют. Фильтрат концентрируют в вакууме, получая указанное в заголовке соединение (13,7 г) в виде масла светло-коричневого цвета.
Соединение 14а
: 1-(2-Аминопиридин-4-ил)этанол
13а
1-(2-Гидразинопиримидин-4-ил)этанол () растворяют в этаноле (300 мл) и добавляют никель Ренея (35 мл, 50%-ная суспензия в воде). Колбу продувают аргоном, снабжают атмосферой водорода (баллон) и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Смесь отфильтровывают и концентрируют в вакууме, получая масло красного цвета, которое растворяют в метаноле и концентрируют на диоксиде кремния, перед очисткой с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния (от 100% этилацетата до 20% метанола в этилацетате), получая указанное в заголовке соединение (9,0 г) в виде масла оранжевого цвета.
Соединение 15
: 1-(4-Амино-6-(метилтио)-1,3,5-триазин-2-ил)этанол
В атмосфере азота 2-гидроксипропанимидамидгидрохлорид (4,97 г) суспендируют в безводном N,N-диметилформамиде (25 мл) и добавляют гидрид натрия (1,66 г, 60% масс. в минеральном масле) в виде одной порции. Когда выделение газа прекращается, суспензию белого цвета нагревают до температуры 65°С. Спустя 1 час добавляют диметилцианокарбонимидодитиоат (6,24 г) и смесь перемешивают при температуре 65°С в течение 18 часов. Реакционную смесь концентрируют и растирают в воде (200 мл). Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и водный слой экстрагируют с помощью 5% метанола в дихлорметане (3 раза по 100 мл). Объединенные органические экстракты сушат (сульфат натрия) и концентрируют, перед очисткой с помощью флэш-хроматографии, элюируя с помощью 10% метанола в дихлорметане, получая указанное в заголовке соединение (300 мг) в виде масла желтого цвета, которое отверждается при стоянии.
Соединение 16а
: 4-(1-(2-Хлорфенокси)этил)-6-(метилтио)-1,3,5-триазин-2-амин
15
К раствору 1-(4-амино-6-(метилтио)-1,3,5-триазин-2-ил)этанола () (203 мг) в безводном тетрагидрофуране (8 мл) добавляют, по каплям, 2-хлорфенол (0,122 мл) и трифенилфосфин (314 мг), затем диизопропилазодикарбоксилат (0,233 мл). Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 80 минут, потом концентрируют в вакууме, растворяют в этилацетате (40 мл) и промывают 1 н. раствором гидроксида натрия (2 раза по 40 мл), сушат над сульфатом натрия и концентрируют, получая масло желтого цвета. Очищают с помощью хроматографии SCX, элюируя смесью дихлорметан-метанол (1:1), затем 2 н. раствором аммиака в смеси дихлорметан-метанол (1:1), потом с помощью колоночной флэш-хроматографии при использовании 1% ацетонитрила в дихлорметане, получая указанное в заголовке соединение (207 мг).
Подобным образом получают
16b
: 4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)этил)-6-(метилтио)-1,3,5-триазин-2-амин
, исходя из 2-хлор-4-фторфенола.
Соединение 17
: 1-(4-Амино-1,3,5-триазин-2-ил)этанол
15
К раствору 1-(4-амино-6-(метилтио)-1,3,5-триазин-2-ил)этанола () (398 мг) в этаноле (20 мл) добавляют никель Ренея в виде 50%-ной суспензии в воде (6 мл) и реакционную смесь нагревают при температуре 85°С в течение 30 минут, после чего охлаждают до комнатной температуры, отфильтровывают и выпаривают, получая указанное в заголовке соединение (230 мг).
Соединение 18а
: (R)-2-Бром-6-(1-(2-хлорфенокси)этил)пиридин
Synthesis
13
Раствор (S)-1-(6-бромпиридин-2-ил)этанола (1 г) (получаемый по способу S. Ishikawa, T. Hamada, K. Manabe и S. Kobayashi, , 2005, , 2176-2182), 2-хлорфенола (0,615 мл, 0,764 г) и трифенилфосфина (1,558 г) в тетрагидрофуране (20 мл) в атмосфере азота охлаждают до температуры 0°С. Затем по каплям добавляют раствор диизопропилазодикарбоксилата (1,17 мл, 1,2 г) в тетрагидрофуране (10 мл) и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Растворитель удаляют при пониженном давлении, затем добавляют гептан для осаждения побочного продукта - трифенилфосфиноксида. После фильтрации и выпаривания фильтрата с последующей очисткой с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, элюируя смесью гептан/этилацетат в соотношении 8:2, получают указанное в заголовке соединение (1,45 г) в виде прозрачной жидкости.
Подобным образом получают следующие соединения:
18b
: (R)-2-Бром-6-(1-(2,4-дифторфенокси)этил)пиридин
, исходя из 2-хлор-4-фторфенола.
18с
: (R)-2-Бром-6-(1-(3-фторфенокси)-этил)пиридин
, исходя из 3-фторфенола.
Соединение 19
: 1-(2-Аминопиримидин-4-ил)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этанол
2f
К раствору 4-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)пиримидин-2-амина () (7,18 г) в метаноле (300 мл) добавляют моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (10,49 г) и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Смесь отфильтровывают через карбонат натрия и концентрируют в вакууме, получая твердое вещество коричневого цвета, которое растворяют в N,N-диметилформамиде (400 мл), к которому добавляют имидазол (5,2 г) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (7,7 г), и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрируют в вакууме и очищают с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, элюируя с помощью 50-75% этилацетата в гептане, получая указанное в заголовке соединение (850 мг).
Соединение 20а
: 4-(2-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-1-(2-хлор-4-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
19
К раствору 1-(2-аминопиримидин-4-ил)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этанола () (640 мг), 2-хлор-4-фторфенола (696 мг) и трифенилфосфина (1246 мг) в дихлорметане (10 мл), по каплям, добавляют раствор (Е)-бис(4-хлорбензил)диазен-1,2-дикарбоксилата в дихлорметане (20 мл). Смесь перемешивают при температуре 45°С в течение ночи, перед фильтрацией, и фильтрат помещают в колонку с диоксидом кремния и элюируют с помощью 10-100% эфира в гептане. Содержащие продукт фракции концентрируют, получая указанное в заголовке соединение (835 мг) в виде твердого вещества белого цвета.
Подобным образом получают следующее соединение:
20b
: 4-(2-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-1-(3-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
, исходя из 3-фторфенола.
Соединение 21а
: 2-(2-Аминопиримидин-4-ил)-2-(2-хлор-4-фторфенокси)этанол
20а
К раствору 4-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(2-хлор-4-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амина () (830 мг) в тетрагидрофуране (15 мл) добавляют тетрабутиламмонийфторид (1 г) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 дней. Смесь концентрируют и очищают с помощью колоночной хроматографии, используя 0-10% метанола в дихлорметане, получая указанное в заголовке соединение (348 мг) в виде твердого вещества белого цвета.
Подобным образом получают следующее соединение:
21b
20b
: 2-(2-Аминопиримидин-4-ил)-2-(3-фторфенокси)этанол
, исходя из 4-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(3-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амина ().
ПРИМЕРЫ
Пример 1А
: (R)-4-(1-(3-Фторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
6b
+
D
(S)-1-(2-Аминопиримидин-4-ил)этанол () (7,75 г), 3-фторфенол (6,87 г) и трифенилфосфин (16,07 г) добавляют к тетрагидрофурану (150 мл), в атмосфере азота, и охлаждают до температуры 0°С (баня со смесью насыщенный солевой раствор/лед). Полученную смесь коричневого цвета перемешивают при температуре 0°С в течение 20 минут, затем, по каплям, добавляют диизопропилазодикарбоксилат (12,06 мл, 12,39 г) в виде раствора в тетрагидрофуране (40 мл). Реакционную смесь поддерживают при температуре 0-2°С в течение добавления и затем оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Растворитель удаляют при пониженном давлении, перед загрузкой сырого продукта на слой диоксида кремния, и очищают с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, элюируя смесью гептан/этилацетат в соотношении 7:3, затем путем кристаллизации из этанола, получая указанное в заголовке соединение (6,2 г) в виде кристаллического твердого вещества белого цвета. MS (ES): m/z=234,0 [М+Н]; [α]=-153,0 (метанол, с=1,8 мг/мл).
Подобным образом получают следующие соединения:
1В
: (R)-4-(1-(2-Хлор-5-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2-хлор-5-фторфенола, MS (ES): m/z=268 [М+Н].
1С
: (R)-4-(1-(2-Хлорфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2-хлорфенола, MS (ES): m/z=250 [М+Н].
1D
: (R)-4-(1-(2-Трифторметилфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из 2-трифторметилфенола, MS (ES): m/z=284 [М+Н]; [α]=-179,6 (метанол, с=0,9 мг/мл).
1Е
: (R)-4-(1-(2,5-Дифторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2,5-дифторфенола, MS (ES): m/z=252 [М+Н].
1F
: (R)-4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из 2-хлор-4-фторфенола, MS (ES): m/z=268 [М+Н]; [α]=-164,7 (метанол, с=2 мг/мл).
1G
: (R)-4-(1-(3-Бромфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из 3-бромфенола, MS (ES): m/z=295 [М+Н]; [α]=-164,7 (метанол, с=2 мг/мл).
1Н
: (R)-4-(1-(2,5-Дихлорфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2,5-дихлорфенола, MS (ES): m/z=284 [М].
1I
: (R)-4-(1-(2,4-Дифторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из 2,4-дифторфенола, MS (ES): m/z=252 [М+Н]; [α]=-57,2 (метанол, с=3,7 мг/мл).
1J
: (R)-4-(1-(2,3-Дифторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2,3-дифторфенола, MS (ES): m/z=252 [М+Н].
1K
: (R)-4-(1-(3-Фтор-5-трифторметилфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 3-фтор-5-трифторметилфенола, MS (ES): m/z=302 [М+Н].
1L
: (R)-4-(1-(2-Хлор-5-трифторметилфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2-хлор-5-трифторметилфенола, MS (ES): m/z=318 [М+Н].
1М
: (R)-4-(1-(3-Метилфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 3-метилфенола (м-крезола), MS (ES): m/z=230 [М+Н].
1N
: (R)-4-(1-(2-Хлор-5-метилфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2-хлор-5-метилфенола, MS (ES): m/z=264 [М+Н].
1О
: (R)-4-(1-(2-Хлор-4-трифторметилфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2-хлор-4-трифторметилфенола, MS (ES): m/z=318 [М+Н].
1Р
: (R)-4-(1-(3,4-Диметоксифенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из 3,4-диметоксифенола, MS (ES): m/z=276 [М+Н]; [α]=-99,7 (метанол, с=1 мг/мл).
1Q
6е
: (R)-4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)этил)-N-метилпиримидин-2-амин
+
, исходя из (S)-1-(2-N-метиламинопиримидин-4-ил)этанола () и 2-хлор-4-фторфенола, MS (ES): m/z=282 [М+Н].
1R
6е
: (R)-4-(1-(3-Фторфенокси)этил)-N-метилпиримидин-2-амин
+
, исходя из (S)-1-(2-N-метиламинопиримидин-4-ил)этанола () и 3-фторфенола, MS (ES): m/z=248 [М+Н].
1S
6b
: (R)-4-(1-(3-Метоксипиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (S)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 3-метокси-2-(1Н)-пиридона, MS (ES): m/z=247 [М+Н]; [α]=-147,2 (метанол, с=1,6 мг/мл).
1Т
: (S)-4-(1-(3-Фторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из 3-фторфенола и (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола, MS (ES): m/z=234 [М+Н]; [α]=+145,6 (метанол, с=1,33 мг/мл).
1U
: (S)-4-(1-(2-Трифторметилфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2-трифторметилфенола и (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола, MS (ES): m/z=284 [М+Н].
1V
: (S)-4-(1-(2,5-Дифторфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2,5-дифторфенола и (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола, MS (ES): m/z=268 [М+Н].
1W
: (S)-4-(1-(3-Бромфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из 3-бромфенола и (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола, MS (ES): m/z=296 [М+Н]; [α]=-132,3 (метанол, с=8,3 мг/мл).
1Х
6d
: (R)-4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)пропил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (S)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанола () и 2-хлор-4-фторфенола, MS (ES): m/z=282 [М+Н]; [α]=-128 (хлороформ, с=0,5 мг/мл).
1Y
6d
: (R)-4-(1-(3-Фторфенокси)пропил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (S)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанола () и 3-фторфенола, MS (ES): m/z=248 [М+Н]; [α]=-104 (хлороформ, с=0,5 мг/мл).
1Z
6с
: (S)-4-(1-(3-Фторфенокси)пропил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанола () и 3-фторфенола, MS (ES): m/z=248 [М+Н]; [α]=+99 (хлороформ, с=0,5 мг/мл).
Примере 1А
Подобным образом, как описано в , получают следующие соединения:
Пример 2А
: 4-(1-(3-Трифторметилфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 3-трифторметилфенола и 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола, MS (ES): m/z=284 [М+Н].
2В
: 4-(1-(3-Хлорфенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 3-хлорфенола и 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола, MS (ES): m/z=250 [М+Н].
2С
: 4-(1-(3-Трифторметоксифенокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 3-трифторметоксифенола и 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола, MS (ES): m/z=300 [М+Н].
2D
6b
: (R)-4-(1-(3-(Трифторметил)фенилтио)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из (S)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 3-(трифторметил)бензолтиола, MS (ES): m/z=298 [М-Н].
2Е
6b
: (R)-4-(1-(2-Хлорфенилтио)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из (S)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-хлорбензолтиола, MS (ES): m/z=266 [М+Н].
2F
6b
: (R)-4-(1-(3-Фторфенилтио)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из (S)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 3-фторбензолтиола, MS (ES): m/z=250 [М+Н].
2G
6с
: (S)-4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)пропил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанола () и 2-хлор-4-фторфенола, MS (ES): m/z=282 [М+Н]; [α]=+128,9 (хлороформ, с=0,5 мг/мл).
2Н
14а
: 4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)этил)пиридин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиридин-4-ил)этанола () и 2-хлор-4-фторфенола, MS (ES): m/z=267 [М+Н].
2I
18
: 4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)этил)-1,3,5-триазин-2-амин
+
, исходя из 1-(4-амино-1,3,5-триазин-2-ил)этанола () и 2-хлор-4-фторфенола, MS (ES): m/z=269 [М+Н].
2J
6f
: (R)-4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)этил)-2-(пирролидин-1-ил)пиримидин
+
, исходя из (R)-1-(2-(пирролидин-1-ил)пиримидин-4-ил)этанола () и 2-хлор-4-фторфенола, MS (ES): m/z=322 [М+Н].
2K
5а
: (4-(1-(3-Трифторметил)пиридин-2-илтио)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 3-(трифторметил)пиридин-2-тиола, MS (ES): m/z=301 [М+Н].
Пример 3А
(R)-4-(1-(3-(Трифторметил)пиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
:
6а
+
К раствору (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () (250 мг) в безводном N-метилморфолине (4 мл) при температуре окружающей среды добавляют 2-метилпропан-2-олят калия (222 мг) и раствор оставляют перемешиваться в течение 30 минут, затем добавляют 2-фтор-3-(трифторметил)пиридин (282 мг), смесь перемешивают в течение 10 минут при температуре окружающей среды и затем нагревают при температуре 100°С под воздействием микроволнового излучения в течение 2 минут, после чего охлаждают и гасят водой (50 мл). Осажденное твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и высушивают на воздухе при небольшом вакууме. Полувысушенное вещество обрабатывают метиленхлоридом и сушат над сульфатом магния, к которому добавлен активированный уголь, затем отфильтровывают через слой дикалита и выпаривают, получая указанное в заголовке соединение (359 мг), MS (ES): m/z=285 [М+Н].
Подобным образом получают следующие соединения:
3В
5а
: 4-(1-(3-Метоксипиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-хлор-3-метоксипиридина, MS (ES): m/z=247 [М+Н].
3С
14а
: 4-(1-(3-(Трифторметил)пиридин-2-илокси)этил)пиридин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиридин-4-ил)этанола () и 2-хлор-3-(трифторметил)пиридина, MS (ES): m/z=284 [М+Н].
3D
14а
: 4-(1-(4-(Трифторметил)пиримидин-2-илокси)этил)пиридин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиридин-4-ил)этанола () и 2-хлор-4-(трифторметил)пиримидина, MS (ES): m/z=285 [М+Н].
Пример 4А
(R)-4-(1-(3-Метоксипиразин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
:
6а
+
D
К раствору (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () (1 г) в безводном N-метилморфолине (15 мл) добавляют гидрид натрия (0,302 г, 60%-ная дисперсия в масле), поддерживая реакционную температуру ниже 25°С, с использованием водяной бани. Как только добавление завершается, охлаждающую баню удаляют и смесь оставляют перемешиваться в течение 30 минут, затем добавляют раствор 2-хлор-3-метоксипиразина (1,039 г) в безводном N-метилморфолине (2 мл) и реакционную смесь оставляют перемешиваться в течение ночи при температуре окружающей среды. Смесь гасят водой (300 мл) и экстрагируют этилацетатом (4 раза по 100 мл) и объединенные органические слои промывают с помощью 10% масс./об. раствора хлорида лития (2 раза по 100 мл), потом насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и выпаривают, получая твердое вещество бледно-коричневого цвета. Путем очистки на колонке со 100 г диоксида кремния, элюируя с помощью 100% этилацетата, затем путем кристаллизации из этилацетата получают указанный в заголовке продукт (520 мг). MS (ES): m/z=248 [М+Н]; [α]=-110,9 (метанол, с=2 мг/мл).
Подобным образом получают следующие соединения:
4В
10а
: 4-(2,2,2-Трифтор-1-(3-(трифторметил)пиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-[2-аминопиримидин-4-ил]-2,2,2-трифторэтанола () и 2-фтор-3-(трифторметил)пиридина, MS (ES): m/z=339 [М+Н].
4С
6с
: (R)-4-(1-(3-(Трифторметил)пиридин-2-илокси)пропил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанола () и 2-фтор-3-(трифторметил)пиридина, MS (ES): m/z=299 [М+Н]; [α]=-122,4 (хлороформ, с=0,5 мг/мл).
4D
5с
: 4-(1-(3-(Трифторметил)пиридин-2-илокси))этил)-N-метилпиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-[2-(N-метиламино)пиримидин-4-ил]этанола () и 2-фтор-3-(трифторметил)пиридина, MS (ES): m/z=299 [М+Н].
4Е
5с
: 4-(1-(6-Метилпиридин-2-илокси))этил)-N-метилпиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-[2-(N-метиламино)пиримидин-4-ил]этанола () и 2-фтор-6-метилпиридина, MS (ES): m/z=245 [М+Н].
4F
5с
: 4-(1-(3-Бром-5-метилпиридин-2-илокси))этил)-N-метилпиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-[2-(N-метиламино)пиримидин-4-ил]этанола () и 2-хлор-3-бром-5-метилпиридина, MS (ES): m/z=324 [М+Н].
4G
5а
: 4-(1-(6-(Трифторметил)пиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-фтор-6-(трифторметил)пиридина, MS (ES): m/z=285 [М+Н].
4Н
5а
: 4-(1-(3-Хлорпиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2,3-дихлорпиридина, MS (ES): m/z=251 [М+Н].
4I
6b
: (S)-4-(1-(3-(Трифторметил)пиридин-2-илокси)пропил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (S)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)пропанола () и 2-хлор-3-(трифторметил)пиридина, MS (ES): m/z=299 [М+Н]; [α]=-122,4 (хлороформ, с=0,5 мг/мл).
4J
5а
21
: 4-(1-(6-(Трифторметил)пиразин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
J. Med. Chem.
+
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-хлор-6-(трифторметил)пиразина (полученного из 3-(трифторметил)пиразин-1-оксида, как описано в , 1978, , 536), MS (ES): m/z=286 [М+Н].
4K
5а
: (R)-4-(1-(6-(Трифторметил)пиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-фтор-6-(трифторметил)пиридина, MS (ES): m/z=285 [М+Н].
4L
5а
: 4-(1-(6-Бром-4-метилпиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 3-бром-2-хлор-5-метилпиридина, MS (ES): m/z=309 [М].
4М
5а
: 4-(1-(6-Бромпиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-бром-6-фторпиридина, MS (ES): m/z=297 [М+Н].
4N
5а
: (R)-4-(1-(6-Фторпиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2,3-дифторпиридина, MS (ES): m/z=235 [М+Н].
4О
5а
: 4-(1-(6-Метилпиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-фтор-6-метилпиридина, MS (ES): m/z=231 [М+Н].
4Р
5а
: (R)-4-(1-(4-(Трифторметил)пиримидин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-хлор-4-(трифторметил)пиримидина, MS (ES): m/z=286 [М+Н]; [α]=-53,9 (метанол, с=1,7 мг/мл).
4Q
5а
: (R)-4-(1-(Пиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
+
D
, исходя из (R)-1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола () и 2-фторпиридина, MS (ES): m/z=217 [М+Н]; [α]=-92,1 (метанол, с=2,5 мг/мл).
Пример 5А
4-(1-(3-(Трифторметил)пиридин-2-иламино)этил)пиримидин-2-амин
:
12а
+
К раствору 2-хлор-3-(трифторметил)пиридина (526 мг), 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этиламина () (400 мг), 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтила (BINAP; 108 мг) и трет-бутоксида натрия (334 мг) в безводном продутом азотом толуоле (40 мл) и продувают аргоном. Добавляют ацетат палладия(II) (26 мг) и реакционную смесь нагревают при температуре 70°С в течение ночи в атмосфере аргона. Реакционную смесь выливают в воду (200 мл) и экстрагируют этилацетатом (3 раза по 200 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным солевым раствором (400 мл), сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая вещество, которое очищают с помощью колоночной хроматографии (элюент: от 40% этилацетата в гептане до 80% этилацетата в гептане). Фракции, содержащие продукт, концентрируют в вакууме и очищают с помощью колоночной хроматографии, получая 241 мг указанного в заголовке соединения в виде прозрачного масла оранжевого цвета. MS (ES): m/z=284 [М+Н].
Подобным образом получают следующее соединение:
5В
: 4-(1-(4-(Трифторметил)пиримидин-2-иламино)этил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2-хлор-4-(трифторметил)пиримидина, MS (ES): m/z=285 [М+Н].
Пример 6
4-(1-(3-(Метилтио)пиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амин
:
+
К раствору (R)-4-(1-(6-фторпиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амина (389 мг) (полученный, как описано для (R)-4-(1-(6-фторпиридин-2-илокси)этил)пиримидин-2-амина, но исходя из 1-(2-аминопиримидин-4-ил)этанола) в безводном диметилсульфоксиде (10 мл) добавляют метантиолят натрия (582 мг), раствор перемешивают в течение 5 минут и затем нагревают под воздействием микроволнового излучения при температуре 140°С в течение 300 секунд. Полученную смесь гасят водой (300 мл), полученное твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и высушивают. Твердое вещество растирают в гептане и, далее, получают указанное в заголовке соединение (226 мг) в виде твердого вещества бледно-коричневого цвета. MS (ES): m/z=263 [М+Н].
Пример 7А
(R)-6-(1-(2-Хлорфенокси)этил)пиридин-2-амин
:
18а
+
(R)-(+)-2,2'-Бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтил (30 мг), ацетат палладия (II) (7,2 мг) и карбонат цезия (0,365 г) вносят в 3-горлую колбу, оснащенную термометром, холодильником и вводом для азота. Систему продувают азотом, затем добавляют раствор (R)-2-бром-6-(1-(2-хлорфенокси)этил)пиридина () (0,25 г) и бензофенонимина (0,174 г) в толуоле (40 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь потом нагревают при температуре 95°С в течение 20 часов, охлаждают, разбавляют эфиром и отфильтровывают через дикалит. Фильтровальный осадок промывают эфиром и фильтрат концентрируют при пониженном давлении, получая смолообразное вещество оранжевого цвета, которое очищают с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния, элюируя смесью гептан/этилацетат (7:3), получая смолообразное вещество желтого цвета, которое обрабатывают тетрагидрофураном (5 мл) и затем добавляют 2 М раствор HCl (3 мл), и реакционную смесь выдерживают в течение ночи при комнатной температуре. При подвергании смеси очистке с помощью колоночной хроматографии на диоксиде кремния, элюируя смесью гептан/этилацетат (7:3), получают указанный в заголовке продукт (88 мг) в виде смолообразного вещества бледно-желтого цвета. MS (ES): m/z=249 [М+Н].
Подобным образом получают следующие соединения:
7В
18b
: (R)-6-(1-(2,4-Дифторфенокси)этил)пиридин-2-амин
+
, исходя из (R)-2-бром-6-(1-(2,4-дифторфенокси)этил)пиридина (), MS (ES): m/z=251 [М+Н].
7С
18с
: (R)-6-(1-(3-Фторфенокси)этил)-N,N-диметилпиридин-2-амин
+
, исходя из (R)-2-бром-6-(1-(3-фторфенокси)этил)пиридина () и диметиламина, пропуская кислотную стадию снятия защиты. MS (ES): m/z=261 [М+Н].
7D
18с
: (R)-2-(1-(3-Фторфенокси)этил)-6-(пирролидин-1-ил)пиридин
+
, исходя из (R)-2-бром-6-(1-(3-фторфенокси)этил)пиридина () и пирролидина, пропуская стадию снятия защиты с помощью кислоты. MS (ES): m/z=287 [М+Н].
7Е
18с
: (R)-2-(Азетидин-1-ил)-6-(1-(3-фторфенокси)этил)пиридин
+
, исходя из (R)-2-бром-6-(1-(3-фторфенокси)этил)пиридина () и азетидина, пропуская стадию снятия защиты с помощью кислоты. MS (ES): m/z=273 [М+Н].
Пример 8
4-(1-(2-Хлорфенокси)этил)-1,3,5-триазин-2-амин
:
16а
+
К раствору 4-(1-(2-хлорфенокси)этил)-6-(метилтио)-1,3,5-триазин-2-амина () (181 мг) в этаноле (10 мл) добавляют никель Ренея посредством шприца (2,0 мл) и реакционную смесь нагревают при температуре 85°С в течение 40 минут, затем охлаждают до комнатной температуры, и смесь отфильтровывают через целит и промывают смесью этанол/вода (1/1, об./об.) и метанолом. Фильтрат концентрируют в вакууме и затем очищают с помощью колоночной хроматографии (элюируя 1% ацетонитрила в дихлорметане), получая указанное в заголовке соединение (25 мг). MS (ES): m/z=251 [М+Н].
Пример 9А
4-(1-(2-Хлор-4-фторфенокси)-2-метоксиэтил)-пиримидин-2-амин
:
21а
+
К раствору 2-(2-аминопиримидин-4-ил)-2-(2-хлор-4-фторфенокси)этанола () (185 мг) в безводном тетрагидрофуране, в атмосфере азота, добавляют гидрид натрия (23 мг, 60%-ная дисперсия в масле) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут, после чего добавляют метилиодид (0,045 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение еще 45 минут, выливают в насыщенный водный раствор хлорида аммония, потом экстрагируют этилацетатом, промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и в вакууме. Очищают с помощью колоночной хроматографии, при элюировании с помощью 10-100% эфира в гептане, получая указанное в заголовке соединение (60 мг) в виде масла, которое отверждается при стоянии. MS (ES): m/z=298 [М+Н].
Подобным образом получают следующее соединение:
9В
21b
: 4-(1-(3-Фторфенокси)-2-метоксиэтил)пиримидин-2-амин
+
, исходя из 2-(2-аминопиримидин-4-ил)-2-(3-фторфенокси)этанола (). MS (ES): m/z=264 [М+Н].
Пример 10
Биологическое тестирование с использованием автоматизированного метода пэтч-кламп в электрофизиологии
А
: Клеточная культура
2
6
2
2
2
Клетки HEK-hHCN1-2H10 культивировали на матрасах площадью 225 см в МЕМ (с солями Эрла), дополненной 10% Fetalclone II + 0,1 мМ не являющихся незаменимыми аминокислот + 1 мМ пирувата натрия + 10 мМ HEPES + 0,5 мг/мл G418. Клетки выдерживали в определенном режиме, при температуре 37°С, в атмосфере с 5% СО и при 100% относительной влажности, до достижения 50% конфлюентности. За 24 часа до использования клетки инкубировали при температуре 30°С для увеличения мембранной экспрессии HCN1 и непосредственно собирали перед экспериментами пэтч-кламп. Питательную среду удаляли путем аспирации под вакуумом и клетки промывали с помощью 50 мл забуференного фосфатом физиологического раствора Дульбекко (без CaCl и MgCl; D-PBS). Клетки затем диссоциировали путем инкубации с 5 мл смеси, в соотношении 1:1, из 0,1% трипсина/0,04% EDTA и буфера для диссоциации клеток (CDS) при температуре 37°С в течение 2 минут. Диссоциацию клеток заканчивали путем добавления 5 мл питательной среды, после чего эти клетки механически диссоциировали путем осторожного растирания 3-4 раза, используя пипетку емкостью 10 мл. Клетки подсчитывали, используя гемоцитометр, регенерировали путем центрифугирования при 212 g в течение 1½ минут и ресуспендировали в 5 мл отфильтрованного раствора для внешней регистрации (см. ниже). Клетки снова регенерировали путем центрифугирования, как описано выше, и ресуспендировали в отфильтрованном внеклеточном растворе при плотности, равной 2×10 клеток на мл, растирая 4-5 раз. Клетки немедленно переносили в систему IonWorks.
В
: Регистрации пэтч-кламп
2
2
2
50
Автоматизированные регистрации пэтч-кламп осуществляли, используя систему IonWorks Quattro (MDS Analytical Technologies). Систему IonWorks Quattro заполняли внутриклеточным (в мМ: глюконат калия, 130; NaCl, 10; MgCl, 1; EGTA, 1; HEPES, 10, pH 7,35) и внеклеточным (в мМ: глюконат натрия, 104; NaCl, 10; KCl, 30; MgCl, 1; CaCl, 1,8; HEPES, 10; глюкоза, 5; рН 7,35) растворами для регистрации. Перфорированные регистрации пэтч-кламп получали с помощью 0,1 мг/мл амфотерицина В (в 0,36% ДМСО) и потенциал клеток фиксировали при -40 мВ. Полные клеточные перфорированные регистрации пэтч-кламп осуществляли в два отдельных периода времени, со скачками напряжения -80 мВ и -120 мВ, в течение 1 с; вычитание утечки осуществляли, используя импульс напряжения, равный -10 мВ, перед активацией канала. Соединения тестировали в 12 концентрациях (полулогарифмические интервалы; 1% ДМСО) и инкубировали в течение 10 минут между текущими регистрациями. Исключали клетки с полными клеточными токами менее 100pS, сопротивлениями изоляции <50 МОм или если сопротивление изоляции изменялось на >50% в ходе эксперимента. Амплитуду зависимых от времени токов, опосредуемых HCN, как до, так и после добавления соединения, измеряли как разницу между током, зарегистрированным непосредственно после переходного состояния мощности во время пошагового изменения до тест-напряжения, и током, измеряемым после достижения им амплитуды устойчивого состояния. Данные обрабатывали, используя систему программного обеспечения IonWorks Quattro, версия 2, и анализировали согласно Activity Base c XLFit4.1, используя стандартную логистическую функцию по 4 параметрам. Строили кривые концентрация-ответ и эффективность соединения по отношению к каналу hHCN1 обозначали как рЕС, с соответствующими достоверными интервалами.
h
50
50
Соединения согласно данному изобретению блокируют ток I на >50% при концентрации 300 мкМ; предпочтительный ряд соединений обладает активностью рЕС более чем 4, при скачке напряжения -80 мВ и, далее, предпочтительные соединения согласно данному изобретению имеют активность рЕС более чем 5 при скачке напряжения -80 мВ.
Пример 11
Крысиная (Чанг) модель невропатической боли
В случае этой модели механическую аллодинию индуцировали путем тугого лигирования левого спинномозгового нерва L5. Этот анализ успешно использовали для демонстрации антиаллодинических эффектов противосудорожных средств (габапентин), антидепрессантов (дулоксетин) и опиоидных анальгетиков (морфин), которые клинически используют при лечении невропатической боли.
При исследовании использовали самцов крыс Wistar (масса тела составляла 228-301 г во время оперативного вмешательства). Крыс помещали на приподнятое (~40 см) сетчатое дно в боксы из люцита и порог отдергивания (лап) крыс на механический раздражитель (калиброванные нити накала Фрая) измеряли, используя нити накала возрастающей силы (2,6-167 мН). Нити накала Фрая прикладывали к подошвенной поверхности лапы животного и определяли пороговый ответ, используя метод «вверх и вниз» (Chaplan S.R. и др., J. Neurosci. Methods, 53:55-63, 1994; Dixon. J. Ann. Rev. Pharmacol. toxicol., 20: 441-462, 1980). Положительный ответ отмечали, если лапа резко отдергивалась. Отсечку 15 г выбирали в качестве верхнего предела для тестирования. При последующих базисных измерениях каждое животное анестезировали и туго лигировали спинномозговой нерв L5. Животным давали возможность выздоравливать от оперативного вмешательства в течение периода времени по меньшей мере трое суток. В день введения лекарственного средства повторно измеряли пороги отдергивания лапы (0 минут). Непосредственно после этого отсчета крысам перорально вводили наполнитель или тестируемое соединение, и отсчеты проводили в различные моменты времени после введения соединения.
50
max
Данные выражали в виде среднего значения ± стадартная ошибка при измерении. Статистические анализы осуществляли, используя односторонний анализ отклонений по Крускалю-Валлису, непараметрический статистический тест. Каждую из подвергаемых лечению групп затем сравнивали с группами с наполнителем, используя непараметрический тест Данна. Значение ED (дозировка, при которой аллодинию подавляют приблизительно на 50%) также рассчитывали при t, используя линейную регрессию (сигмоидальный дозировочный ответ; переменная крутизна) с константами 0 и 15 г (отсечка) для нижней части и верхней части, соответственно (программное обеспечение XLFit).