МУТАНТНАЯ П-ГИДРОКСИФЕНИЛПИРУВАТДИОКСИГЕНАЗА, НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, КОДИРУЮЩАЯ ЕЕ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активный фрагмент, где по сравнению с аминокислотной последовательностью белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы риса дикого типа аминокислотная последовательность мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) имеет одну или более мутаций, выбранных из группы, состоящей из 93S, 103S, 141R, 141K, 141T, 165V, 191I, 220K, 226H, 276W, 277N, 336D, 337A, 338D, 338S, 338Y, 342D, 346C, 346D, 346H, 346S, 346Y, 370N, 377C, 386T, 390I, 392L, 403G, 410I, 418P, 419F, 419L, 419V, 420S, 420T, 430G и 431L, в одном или более положениях, соответствующих положениям 93, 103 , 141, 165, 191, 220, 226, 276, 277, 336, 337, 338, 342, 346, 370, 377, 386, 390, 392, 403, 410, 418, 419, 420, 430 и 431 аминокислотной последовательности белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы риса дикого типа, показанной в SEQ ID NO: 2.
2. Мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активный фрагмент по п. 1, где аминокислотная последовательность мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы также имеет, по меньшей мере, 80%, по меньшей мере, 85%, по меньшей мере, 90%, по меньшей мере, 95%, по меньшей мере, 96%, по меньшей мере, 97%, по меньшей мере, 98% или, по меньшей мере, 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO: 2.
3. Мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активный фрагмент по п. 1, где мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы имеет аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 2, за исключением того, что он содержит одну или более аминокислотных мутаций по п. 1.
4. Мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активный фрагмент по любому из пп. 1-3, где аминокислотная последовательность мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы содержит одну или более мутаций, выбранных из группы, состоящей из R93S, A103S, H141R, H141K, H141T, A165V, V191I, R220K, G226H, L276W, P277N, P336D, P337A, N338D, N338S, N338Y, G342D, R346C, R34370, R346C, R34634, R346C, R346C P386T, L390I, M392L, E403G, K410I, K418P, G419F, G419L, G419V, N420S, N420T, E430G и Y431L в одном или более положениях, соответствующих положениям 93, 103, 141, 165, 191, 220, 226, 276, 277, 336, 337, 338, 342, 346, 370, 377, 386, 390, 392, 403, 410, 418, 419, 420, 430 и 431 аминокислотной последовательности белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы риса дикого типа, показанной в SEQ ID NO: 2.
5. Мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активный фрагмент по п. 4, где мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы имеет аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 82 или SEQ ID NO: 84.
6. Мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активный фрагмент по п. 4, где аминокислотная последовательность мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы содержит следующие аминокислотные мутации: H141R/G342D, H141R/D370N, G342D/D370N, H141R/N338D, H141R/G342D, N338D/G342D, K418P/G419F, G419F/N420S, G342D/R346C, G342D/R346H, H141R/N420S, G338D/K418P, P277N/N338D, L276W/P277N, H141R/G342D/D370N, H141R/N338D/N420S, H141R/N338S/N420S, P336D/N338D/G342D, P336D/N338S/G342D, P336D/N338Y/G342D, N338D/G342D/R346C, N338D/G342D/R346H, N338D/G342D/R346S, N338S/G342D/R346C, N338S/G342D/R346H, N338S/G342D/R346S, N338Y/G342D/R346C, N338Y/G342D/R346H, N338Y/G342D/R346S, P336D/G342D/R346C, P336D/G342D/R346H, P336D/G342D/R346S, P336D/N338D/R346C, P336D/N338D/R346H, P336D/N338D/R346S, P336D/N338S/R346C, P336D/N338S/R346H, P336D/N338S/R346S, P336D/N338Y/R346C, P336D/N338Y/R346H, P336D/N338Y/R346S, H141R/N338D/G342D, H141R/G342D/K418P, H141R/G342D/G419F, H141R/G342D/P386T, K418P/G419F/N420T, K418T/G419F/N420T, H141R/G342D/R346C, H141R/G342D/R346H, H141R/G342D/N420S, H141R/G342D/P277N, H141R/G342D/P336D, H141R/G342D/L276W, H141R/G342D/R346S, H141R/G342D/L390I, H141R/G342D/I377C, H141R/G342D/M392L, H141R/P337A/G342D, H141R/N338S/G342D, H141R/N338Y/G342D, P277N/N338D/G342D, P277N/G342D/R346C, P277N/N338D/N420S, N338D/G342D/K418P, H141R/N338D/G342D/K418P, H141R/N338D/G342D/G419F, H141R/N338D/G342D/P386T, H141R/N338D/G342D/R346C, H141R/N338D/G342D/R346H, H141R/G342D/K418P/G419F, H141R/G342D/L276W/P277N, P336D/N338D/G342D/R346C, P336D/N338D/G342D/R346H, P336D/N338D/G342D/R346S, P336D/N338S/G342D/R346C, P336D/N338S/G342D/R346H, P336D/N338S/G342D/R346S, P336D/N338Y/G342D/R346C, P336D/N338Y/G342D/R346H, P336D/N338Y/G342D/R346S, P277N/P336D/N338D/G342D, P277N/N338D/G342D/R346C, P277N/N338D/K418P/G419F, H141R/N338D/G342D/K418P/G419F, H141R/N338D/G342D/G419F/N420S, H141R/G336D/G342D/K418P/G419F/N420S, H141R/N338D/G342D/K418P/G419F/N420S, H141R/N338D/G342D/K418P/G419F/N420T, H141R/N338D/G342D/R346C/K418P/G419F/N420S, H141R/N338D/G342D/R346H/K418P/G419F/N420S, H141R/P277N/N338D/G342D/K418P/G419F/N420S или H141R/P277N/P336D/N338D/G342D/K418P/G419F/N420S.
7. Мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологичсеки активный фрагмент по п. 6, где мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы имеет аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 114, SEQ ID NO: 116, SEQ ID NO: 118, SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 190, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 194, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 198, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 206, SEQ ID NO: 208, SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 212, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 218, SEQ ID NO: 220, SEQ ID NO: 222, SEQ ID NO: 224, SEQ ID NO: 226, SEQ ID NO: 228, SEQ ID NO: 230, SEQ ID NO: 232, SEQ ID NO: 234, SEQ ID NO: 236, SEQ ID NO: 238, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 244, SEQ ID NO: 246, SEQ ID NO: 248, SEQ ID NO: 250, SEQ ID NO: 252, SEQ ID NO: 254, SEQ ID NO: 256, SEQ ID NO: 258 или SEQ ID NO: 260.
8. Слитый белок, содержащий мутантный белок HPPD или его биологически активный фрагмент по любому из пп. 1-7 и дополнительный компонент, который слит с ним, например, пептидную метку, например 6×His, или пластид-направленный пептид, например, хлоропласт-направленный пептид.
9. Выделенный полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активный фрагмент по любому из пп. 1-7, или слитый белок по п. 8, или его комплементарная последовательность, где полинуклеотид предпочтительно представляет собой ДНК, РНК или их гибрид, и полинуклеотид предпочтительно является одноцепочечным или двухцепочечным.
10. Полинуклеотид по п. 9, где он имеет последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из:
(1) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей аминокислотную последовательность, показанную в: SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 114, SEQ ID NO: 116, SEQ ID NO: 118, SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 150, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 154, SEQ ID NO: 156, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 190, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 194, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 198, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 206, SEQ ID NO: 208, SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 212, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 218, SEQ ID NO: 220, SEQ ID NO: 222, SEQ ID NO: 224, SEQ ID NO: 226, SEQ ID NO: 228, SEQ ID NO: 230, SEQ ID NO: 232, SEQ ID NO: 234, SEQ ID NO: 236, SEQ ID NO: 238, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 244, SEQ ID NO: 246, SEQ ID NO: 248, SEQ ID NO: 250, SEQ ID NO: 252, SEQ ID NO: 254, SEQ ID NO: 256, SEQ ID NO: 258 или SEQ ID NO: 260, или ее комплементарной последовательности;
(2) последовательности нуклеиновой кислоты, показанной в: SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 75, SEQ ID NO: 77, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 87, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 115, SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 119, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 123, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 145, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 149, SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 153, SEQ ID NO: 155, SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 185, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 193, SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 199, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 209, SEQ ID NO: 211, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 217, SEQ ID NO: 219, SEQ ID NO: 221, SEQ ID NO: 223, SEQ ID NO: 225, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 229, SEQ ID NO: 231, SEQ ID NO: 233, SEQ ID NO: 235, SEQ ID NO: 237, SEQ ID NO: 239, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 245, SEQ ID NO: 247, SEQ ID NO: 249, SEQ ID NO: 251, SEQ ID NO: 253, SEQ ID NO: 255, SEQ ID NO: 257 или SEQ ID NO: 259, или ее комплементарной последовательности;
(3) последовательности нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется с последовательностью, показанной в пп. (1) или (2), в жестких условиях; и
(4) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей аминокислотную последовательность, аналогичную последовательности, показанной в пп. (1) или (2), за счет вырожденности генетического кода, или ее комплементарной последовательности.
11. Полинуклеотид по п. 10, где последовательность нуклеиновой кислоты оптимизирована для экспрессии в растительной клетке.
12. Конструкция нуклеиновой кислоты, содержащая полинуклеотид по любому из пп. 9-11 и функционально связанный с ним регуляторный элемент.
13. Экспрессионный вектор, содержащий полинуклеотид по любому из пп. 9-11 и функционально связанный с ним регуляторный элемент экспрессии.
14. Клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид по любому из пп. 9-11, конструкцию нуклеиновой кислоты по п. 12 или экспрессионный вектор по п. 13, где предпочтительно клетка-хозяин является растительной клеткой.
15. Способ получения растения, обладающего повышенной устойчивостью или толерантностью к гербициду, включающий регенерацию растительной клетки по п. 14 в растение.
16. Растение, полученное способом по п. 15.
17. Способ повышения устойчивости или толерантности растительной клетки, ткани растения, части растения или растения к гербициду, ингибирующему HPPD, включающий экспрессию мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активного фрагмента по любому из пп. 1-7, или слитого белка по п. 8 в растительной клетке, ткани растения, части растения или растении;
или, включающий скрещивание растения, экспрессирующего мутантный белок п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активный фрагмент по любому из пп. 1-7, или слитый белок по п. 8, с другим растением, и скрининг растения или его части, имеющих повышенную устойчивость или толерантность к гербициду, ингибирующему HPPD;
или, включающий редактирование гена эндогенного белка HPPD растительной клетки, ткани растения, части растения или растения для достижения экспрессии мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активного фрагмента по любому из пп. 1-7, или слитого белка по п. 8.
18. Применение мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) или его биологически активного фрагмента по любому из пп. 1-7, слитого белка по п. 8 или полинуклеотида по любому из пп. 9-11 для повышения устойчивости или толерантности клетки-хозяина, растительной клетки, ткани растения, части растения или растения к гербициду, ингибирующему HPPD, где предпочтительно клетка-хозяин является бактериальной клеткой или грибковой клеткой.
19. Способ борьбы с сорняками на участке выращивания растений, включающий нанесение на участок выращивания гербицидно эффективного количества одного или более гербицидов, ингибирующих HPPD, где растение включает растение по п. 16 или растение, полученное способом по любому из пп. 15 и 17; где предпочтительно гербицид, ингибирующий HPPD, включает, по меньшей мере, один из следующих эффективных ингредиентов: 1) трикетоны: сулкотрион, мезотрион, бициклопирон, темботрион, тефурилтрион и бензобициклон; 2) дикетонитрилы: 2-циано-3-циклопропил-1-(2-метилсульфонил-4-трифторметилфенил)пропан-1,3-дион, 2-циано-3-циклопропил-1-(2-метилсульфонил-3,4- дихлорфенил)пропан-1,3-дион и 2-циано-1-[4-(метилсульфонил)-2-трифторметилфенил]-3-(1-метилциклопропил)пропан-1,3-дион; 3) изоксазолы: изоксафлутол, изоксахлортол и кломазон; 4) пиразолы: топрамезон, пирасульфотол, пиразоксифен, пиразолат, бензофенап, бипиразон, толпиралат, фенпиразон, ципирафлуон и трипирасульфон; 5) бензофеноны; и 6) другие: ланкотрион, фенхинотрион; и более предпочтительно, гербицид, ингибирующий HPPD, включает, по меньшей мере, один из эффективных ингредиентов: темботрион, фенпиразон, ципирафлуон, топрамезон, мезотрион и бипиразон.
20. Растение по п. 16, способ по любому из пп. 17 и 19 или применение по п. 18, где растение представляет собой двудольное или однодольное растение, такое как пищевая культура, бобовая культура, масличная культура, волокнистая культура, плодовая культура, корневищная культура, овощная культура, цветочная культура, лекарственная культура, промышленная культура, пастбищная культура, сахарная культура, культура для производства напитков, газонная культура, древесная культура, ореховая культура и тому подобное.
21. Способ получения мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD), который сохраняет или усиливает способность катализировать превращение п-гидроксифенилпирувата (HPP) в гомогентизат и значительно менее чувствителен к гербицидам, ингибирующим HPPD, чем белок HPPD дикого типа, включающий стадии: мутирования нуклеиновой кислоты, кодирующей HPPD дикого типа, слияния и лигирования мутированной нуклеиновой кислоты в рамке считывания с нуклеиновой кислотой, кодирующей компонент, повышающий растворимость, в экспрессионном векторе с образованием последовательности, кодирующей слитый белок, трансформации полученного рекомбинантного экспрессионного вектора в клетку-хозяин, экспрессии слитого белка в подходящих условиях, содержащих гербицид, ингибирующий HPPD, и ферментативный субстрат HPPD, и скрининга мутантного белка п-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD), который сохраняет или усиливает способность катализировать превращение п-гидроксифенилпирувата (HPP) в гомогентизат, и имеет значительно сниженную чувствительность к гербициду, ингибирующему HPPD; где предпочтительно компонент, увеличивающий растворимость, выбран из NusA, который образует слитый белок с мутантным белком HPPD по настоящему изобретению; предпочтительно экспрессионный вектор выбран из вектора pET-44a; и клетка-хозяин выбрана из бактериальной клетки, грибковой клетки или растительной клетки.