ЧАСТИЧНЫЕ АГОНИСТЫ ИНТЕРЛЕЙКИНА-2

1. Мутеин интерлейкина 2 (IL-2), имеющий:
(а) пониженную аффинность связывания с рецептором интерлейкина-2γ (IL-2Rγ) по сравнению с полипептидом IL-2, кодируемым SEQ ID NO: 2; и
(b) 15-95% Emax по сравнению с полипептидом IL-2, кодируемым SEQ ID NO: 2.
2. Мутеин IL-2 по п. 1, где мутеин содержит:
(i) одну или более аминокислотных замен, которые увеличивают аффинность связывания с IL-2Rβ по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1, и которые выбраны из L80F, R81D, L85V, I86V и I92F и пронумерованы в соответствии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 1; и/или
(ii) одну или более аминокислотных замен, которые снижают аффинность связывания с рецептором IL-2Rγ и дают 15-95% Emax по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 2, и которые выбраны из (A) L18R и Q22E; и (B) замены в аминокислотном положении 126, пронумерованных в соответствии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 2.
3. Мутеин IL-2 по п. 2, где аминокислотная замена в положении 126 SEQ ID NO: 2 выбрана из группы, состоящей из Q126A, Q126C, Q126D, Q126E, Q126G, Q126H, Q126I, Q126K, Q126M, Q126R, Q126S или Q126T.
4. Мутеин IL-2 по п. 3, где мутеин содержит аминокислотную замену Q126H, Q126K или Q126M.
5. Мутеин IL-2 по п. 3, где мутеин содержит аминокислотную замену Q126H.
6. Мутеин интерлейкина 2 (IL-2), имеющий (а) пониженную аффинность связывания с рецептором интерлейкина 2γ (IL-2Rγ); и (b) 15-95% Emax по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1.
7. Мутеин IL-2 по п. 6, где мутеин содержит одну или более аминокислотных замен, которые снижают аффинность связывания с рецептором IL-2Rγ и дают 15-95% Emax по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1, и которые выбраны из (A) L18R и Q22E; и (B) замены в аминокислотном положении 126, пронумерованных в соответствии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 1.
8. Мутеин IL-2 по п. 7, где мутеин содержит аминокислотную замену в положении 126 SEQ ID NO: 1, выбранную из группы, состоящей из Q126A, Q126C, Q126D, Q126E, Q126G, Q126H, Q126I, Q126K, Q126M, Q126R, Q126S или Q126T.
9. Мутеин IL-2 по п. 8, где мутеин содержит аминокислотную замену Q126H, Q126K или Q126M.
10. Мутеин IL-2 по п. 9, где мутеин содержит аминокислотную замену Q126H.
11. Мутеин IL-2 по любому из пп. 1-10, где мутеин структурно модифицирован для увеличения времени его полужизни.
12. Мутеин IL-2 по п. 11, где указанная модификация включает одну или более модификаций, выбранных из группы, состоящей из связывания с фрагментом человеческого Fc-антитела, связывания с альбумином и ПЭГилирования.
13. Мутеин IL-2 по любому из пп. 1-12, где указанный мутеин увеличивает пролиферацию регуляторных T-клеток (Treg) и/или индуцирует минимальную пролиферацию потенциально воспалительных Т-клеток.
14. Мутеин IL-2 по любому из пп. 1-13, где указанный мутеин вызывает размножение Treg-клеток и не стимулирует размножение потенциально воспалительных Т-клеток и природных клеток-киллеров (NK) или гранулоцитов.
15. Мутеин IL-2 по п. 14, где мутеин индуцирует меньшую пролиферацию потенциально воспалительных Т-клеток по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2.
16. Мутеин IL-2 по п. 15, где указанные потенциально воспалительные T-клетки представляют собой CD4+IFNγ+T-клетки или CD8+IFNγ+T-клетки.
17. Мутеин IL-2 по любому из пп. 1-16, где мутеин увеличивает пролиферацию Treg-клеток по меньшей мере в 3 раза и/или индуцирует меньшую секрецию IFNγ по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1 или SEQ. ID №: 2.
18. Мутеин IL-2 по любому из пп. 1-17, где указанный мутеин не индуцирует секрецию IFNγ из CD8+-T-клеток и/или других субпопуляций воспалительных иммунных клеток.
19. Мутеин IL-2 по любому из пп. 1-18, где мутеин имеет 70-95% Emax по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1.
20. Нуклеиновая кислота, кодирующая мутеин IL-2 по любому из пп. 1-19.
21. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 20.
22. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по п. 20 или вектор по п. 21.
23. Стерильная фармацевтическая композиция, содержащая мутеин IL-2 по любому из пп. 1-19 и фармацевтически приемлемый наполнитель.
24. Шприц, содержащий (а) мутеин IL-2 по любому из пп. 1-19; (b) нуклеиновую кислоту по п. 20; (с) вектор по п. 21; (d) клетку-хозяина по п. 22; и/или (е) фармацевтическую композицию по п. 23.
25. Катетер, содержащий (а) мутеин IL-2 по любому из пп. 1-19; (b) нуклеиновую кислоту по п. 20; (с) вектор по п. 21; (d) клетку-хозяина по п. 22; и/или (е) фармацевтическую композицию по п. 23.
26. Набор, содержащий:
(а) один или более из: (i) мутеина IL-2 по любому из пп. 1-19; (ii) нуклеиновой кислоты по п. 20; (iii) вектора по п. 21; (iv) клетки-хозяина по п. 22; (v) стерильной фармацевтической композиции по п. 23; (vi) шприца по п. 24; и/или (vii) катетера по п.25; и
(b) письменные инструкции по применению (i) мутеина IL-2 по любому из пп. 1-19; (ii) нуклеиновый кислоты по п. 20; (iii) вектора по п.21; (iv) клетки-хозяина по п. 22; (v) стерильной фармацевтической композиции по п. 23; (vi) шприца по п. 24; и/или (vii) катетера по п. 25.
27. Способ лечения аутоиммунного заболевания у индивидуума, нуждающегося в этом, включающий введение индивидууму (а) терапевтически эффективного количества мутеина IL-2 по любому из пп. 1-19; (b) нуклеиновой кислоты по п. 20; (с) вектора по п. 21; (d) клетки-хозяина по п. 22; и/или (е) фармацевтической композиции по п. 23.
28. Способ по п. 27, где аутоиммунное заболевание выбрано из группы, состоящей из ревматоидного артрита, инсулинзависимого сахарного диабета, гемолитической анемии, ревматической лихорадки, тиреоидита, болезни Крона, тяжелой миастении, гломерулонефрита, аутоиммунного гепатита, рассеянного склероза, гнездной алопеции, псориаза, витилиго, дистрофического буллезного эпидермолиза, системной красной волчанки и болезни «трансплантат против хозяина».
29. Способ по п. 28, где аутоиммунное заболевание представляет собой заболевание «трансплантат против хозяина».
30. Способ по любому из пп. 27-29, дополнительно включающий введение мутеина IL-2 по любому из пп. 1-19 или фармацевтической композиции по п. 23 в комбинации с антителом, которое нацеливает мутеин на клетку конкретного типа.
31. Способ по п. 30, где клетка представляет собой регуляторную T-клетку (Treg).
32. Способ по п. 30 или 31, где антитело ковалентно или нековалентно связано с мутеином IL-2.
33. Способ получения мутеина IL-2 по любому из пп. 1-19, включающий культивирование клетки-хозяина по п. 22 в условиях, подходящих для получения мутеина.
34. Способ по п. 33, дополнительно включающий выделение и/или очистку полученного мутеина IL-2.
35. Способ по п. 33 или 34, дополнительно включающий структурную модификацию мутеина IL-2 для увеличения времени его полужизни.
36. Способ по п. 35, где указанная модификация включает одно или более изменений, выбранных из группы, состоящей из связывания с фрагментом человеческого Fc-антитела, связывания с альбумином и ПЭГилирования.
37. Способ предотвращения пролиферации потенциально воспалительных Т-клеток и/или предотвращения секреции IFNγ из CD8+-Т-клеток или других субпопуляций воспалительных иммунных клеток, где указанный способ включает контактирование клетки, экспрессирующей рецептор интерлейкина 2γ (IL-2Rγ), с мутеином IL-2 по любому из пп. 1-19.
38. Способ по п. 37, где указанные потенциально воспалительные T-клетки представляют собой CD4+CD44+IFNγ+-T-клетки или CD8+CD44+IFNγ+-T-клетки.
39. Способ по п. 37 или 38, где способ осуществляют in vitro, in vivo или ex vivo.
40. Способ снижения пролиферации регуляторных T-клеток (Treg), включающий контактирование Treg-клетки с мутеином интерлейкина 2 (IL-2), имеющим: (i) пониженную аффинность связывания с рецептором интерлейкина-2γ (IL-2Rγ) по сравнению с полипептидом IL-2, кодируемым SEQ ID NO: 2; и (ii) 15-95% Emax по сравнению с полипептидом IL-2, кодируемым SEQ ID NO: 2.
41. Способ по п. 40, где мутеин IL-2 содержит:
(i) одну или более аминокислотных замен, которые увеличивают аффинность связывания с IL-2Rβ по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1, и которые выбраны из L80F, R81D, L85V, I86V и I92F и пронумерованы в соответствии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 1; и
(ii) одну или более аминокислотных замен, которые снижают аффинность связывания с рецептором IL-2Rγ и дают 0-50% Emax по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 2, и которые выбраны из (A) L18R и Q22E; и (B) замены в аминокислотном положении 126, пронумерованных в соответствии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 2.
42. Способ снижения пролиферации регуляторных T-клеток (Treg), включающий контактирование Treg-клетки с мутеином IL-2, имеющим: (i) пониженную аффинность связывания с IL-2Rγ по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1; и (ii) 0-50% Emax по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1.
43. Способ по п. 42, где мутеин включает одну или более аминокислотных замен, которые снижают аффинность связывания с рецептором IL-2Rγ и дают 0-50% Emax по сравнению с полипептидом, кодируемым SEQ ID NO: 1, и которые выбраны из (A) L18R и Q22E; и (B) замены в аминокислотном положении 126, пронумерованных в соответствии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 1.
44. Способ по п. 41 или 43, где аминокислотная замена в положении 126 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2 выбрана из группы, состоящей из Q126A, Q126C, Q126D, Q126E, Q126G, Q126H, Q126I, Q126K, Q126M, Q126R, Q126S или Q126T.
45. Способ по п. 44, где мутеин содержит аминокислотную замену Q126H, Q126K или Q126M.
46. Способ по п. 45, где мутеин содержит аминокислотную замену Q126H.
47. Способ по любому из пп. 39-46, дополнительно включающий введение мутеинов с одним или более антителами, которые нацеливают мутеин на Treg-клетку.
48. Способ по п. 47, где антитело ковалентно или нековалентно связано с мутеином.
49. Способ по любому из пп. 39-48, где способ осуществляют in vitro, in vivo или ex vivo.