Влияние эмоционального стресса беременных крыс на показатели развития головного мозга их 21-дневного потомства

Анализ ХЭПС, рассчитанных на основе экспериментальных данных. Была проведена статистическая обработка экспериментальных данных, аналогичная вышеописанной, но в применении не к первичным характеристикам, а к интегральным оценкам исследовательской активности и уровня тревожности крыс. Анализ показал более четкие межгрупповые различия, появилась также возможность оценивать тенденцию в изменении поведения животных, подвергшихся какому-либо внешнему воздействию.

Различия между контрольной и опытной группами. Дескриптивный анализ показал достоверные межгругшовые различия только по уровню тревожности: на 30 день жизни УТ составил 134,08+17,95 в контроле и 92,2±21,17 в опыте, а на 35 день жизни — соответственно, 132,0± 18,51 и 96,56+20,43.

Тот же анализ поведенческих реакций, выраженных в единицах интегрального показателя (С), выявил достоверные статистические различия:

— в 30-дневном возрасте: в "принюхиваниях" (4,53±1,48 в контроле и 10,03±3,37 в опыте), в "движениях" (соответственно, 0,02±0,005 и 0,07± ±0,02) и "заходах в закрытые рукава" (67,05+8,94 и 46,03±10,56);

— в 35-дневном возрасте: в "заходах в открытые рукава" (0,07±0,04 в контроле и 0,01 ±0,01 в опыте) и в "заходах в закрытые рукава" (66,15±9,25 в контроле и 48,21 ±10,22 в опыте).

Динамика изменений в поведении крыс. Динамику изменения поведения считаем целесообразным изучать при помощи индекса ИА/УТ, особенно, если имеет место параллельное увеличение или уменьшение ИА и УТ. В описываемом

эксперименте у контрольной группы наблюдалось почти полное сохранение этого индекса (за исключением двух крыс). В опытной группе индекс ИА/УТ менялся в динамике значительно чаще.

Таким образом, в ходе проведенного исследования определены принципы оценки характеристик эмоционально-психического статуса крыс.

Литература

1. Бронштейн И.Н., Семендяев К.А. Справочник по математике для инженеров и учащихся втузов. М: Наука, 1980. 974 с.

2. Вознесенская В.В., Полетаева И.И. // Журн. высш. нервн. деят. 1987. Т.37, №1. С.174-176.

3. Григорьев Н.Р, Функциональная организация поисковой активности: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. Чита, 1998. 40 с.

4. Крушинский JI.B., Полетаева И.И., Романова Л.Г. и др. // Журн. высш. нервн. деят. 1978. Т.28, №5. С.903-912.

5. Кудрявцева H.H. // Журн. высш. нервн. деят. 1987. Т.37, №5. С.929-934.

6. Кудрявцева H.H., Ситников А.П. // Журн. высш. нервн. деят. 1986. Т.36, №4. С.686-691.

7. Лильп И.Г., Бизикоева Ф.З., Полетаева И.И., Иванов В. И. // Генетика. 1995. Т. 31, № 1. С. 101 -110.

8. Лильп И.Г., Бизикоева Ф.З., Полетаева И.И., Иванов В.И.//Генетика. 1992. Т.28, №3. С.87-96.

9. Лильп И.Г., Бизикоева Ф.З., Ревещин A.B. и др. // Генетика. 2000. Т.36, №12. С.1598-1613.

10. Полетаев И.И., Шилова О.Б., Корочкин Л.И. // Онтогенез. 1996. Т.27, №4. С.294-299.

11. Шилова О.Б., Орлова Е.О., Г.И. Ковалев и др. // Генетика. 2000. Т.36, №11. С.1507-1514.

УДК 599.323.4: 591.48

Б.Я. Рыжавский, Т. В. Соколова

ВЛИЯНИЕ ЭМОЦИОНАЛЬНОГО СТРЕССА БЕРЕМЕННЫХ КРЫС НА ПОКАЗАТЕЛИ РАЗВИТИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА ИХ 21-ДНЕВНОГО ПОТОМСТВА

Дальневосточный государственный медицинский университет, г. Хабаровск

Данные литературы свидетельствуют, что стрессовые воздействия, оказанные на беременных самок, приводят к отклонениям в соматическом, половом развитии, поведении потомства [1-3, 5, 7-13]. Показано, что у пренатально стрессированных взрослых крыс обоего пола при умеренном стрессовом воздействии в гиппокампе была более высокая концентрация ацетилхолина, чем у животных

контрольной группы, что указывает на влияние пренатального стресса на развитие холинергичес-ких систем переднего мозга, проявляющееся и спустя значительное время после воздействия [11].

Пренатально стрессированные взрослые крысы имели повышенное содержание кортикотропина в амигдале, уменьшенное количество рецепторов к глюкокортикоидам в гиппокампе [13]. Стрессиро-

вание беременных самок ведет к нарушениям астральных циклов, уменьшает уровень тревожности и увеличивает двигательную активность у потомства женского пола. Потомство мужского пола характеризуется пониженной двигательной активностью и высокой агрессивностью [I]. Пренатально перенесенный стресс оказывает модифицирующее влияние на механизмы гонадотропной функции гипофиза [9], устраняет половые различия в содержании катехоламинов [5], вызывает долговременные отклонения полового поведения у потомства.

По-видимому, действие стресса на развитие потомства определяется изменениями функциональной активности эндокринных желез, наблюдающимися при этом. Подтверждением служат следующие данные. У крыс, которым в возрасте 1-5 дней вводили по 0,1 мг кортизола, в последующем была более высокая двигательная активность, а также значительно изменена реакция на интрас-триатную инъекцию кортиколиберина [10]. Введение крысам кортикостерона в течение последней трети беременности вызывало изменения двигательной активности их потомков во взрослом периоде жизни, неидентичные у самцов и самок [12]. В связи с изложенным уместно упомянуть, что на стрессовые воздействия реагируют железы как беременной, так и плодов [3, 8].

В то же время в доступной литературе мы не обнаружили информации об особенностях морфологии мозга таких животных. По-видимому, одной из причин этого является отсутствие в подобных случаях грубых структурных изменений. Морфомет-рические методики, основанные на использовании современного измерительного аппарата МЕКОС (медицинские компьютерные системы), позволяют регистрировать достаточно тонкие количественные морфологические сдвиги в структуре исследуемого объекта. Мы предприняли попытку обнаружить такие изменения в мозге потомства крыс, подвергнутых стрессу во время беременности.

Материал и методы

Исследованы 21-дневные крысы — потомство интактных самок (контроль) и самок, подвергнутых в течение 5 дней II или III триместра беременности эмоциональному стрессу по модифицированной методике создания эмоционального стресса [2], состоящей в ежедневном помещении беременных крыс под стеклянный колпак, не препятствующий доступу воздуха, с площадью пола около 300 см2, освещаемый тремя 100-ваттными лампами, расположенными на расстоянии 50 см. Время ежедневного пребывания под колпаком составляло 1 ч (с 13-00 до 14-00).

Забой 21-дневного потомства осуществляли де-капитацией. Определяли массу тела, мозга, полушария, надпочечника и половых желез. Парафиновые срезы головного мозга, полученные из разных отделов полушария, окрашенные на нуклеиновые кислоты галлоцианином, подвергали мор-фометрическому анализу: окуляр-микрометром MOB-15 определяли толщину коры переднетемен-ной доли (ПТД) и собственно теменной доли

Резюме

Исследованы 21-дневные крысята — потомство самок, которые во II или III триместре беременности подвергались ежедневно эмоциональному стрессу, и контрольные — потомство интактных самок. Более значительные отклонения от контроля обнаружены при действии стрессора в III триместре. Головной мозг имел большие, чем в контроле, массу мозга, полушария, толщину коры в собственно теменной доле, увеличенные размеры нейронов, их цитоплазмы и ядер в 5 слое пере-днетеменной доли, гиппокамла, концентрации РНК в цитоплазме нейронов гиппокамла. Подопытные животные характеризовались также большей массой тела, половых желез, надпочечников, мозга и его полушарий. В надпочечниках имелось повышение активности стероид-дегидрогеназы.

B.Ya. Ryzhavskii, T.V. Sokolova

EFFECT OF EMOTIONAL STRESS OF PREGNANT RATS ON BRAIN DEVELOPMENT INDICES OF THEIR 21-DAYS OLD POSTERITY

Far Eastern State medical University, Khabarovsk Summary

We investigated 21 days old rats — the posterity of the females which on the 2nd or 3rd trimester of pregnancy were subjected to daily emotional stress and control group — the posterity of intact rats. Most considerable differences as compared with control were found under stress on the 3rd trimester. Their brain thickness of cortex in parietal lobe was larger than that in the control group. The increase of neurons size, their cytoplasm and /or nucleus in the 5th layer of anterior parietal lobe, hippocamp, concentration of RNA in cytoplasm of hippocamp neurons was also revealed. They were also expressed in larger body mass, sexual glands, adrenal glands, activity of steroiddehydrogenase in the adrenal cortex.

(СТД), на аппарате МЕКОС измеряли площадь сечения цитоплазмы и ядер нейронов 2 и 5 слоев, 2-го поля гиппокампа, концентрацию РНК в цитоплазме этих клеток (для каждого случая в каждой структуре измерено по 25 клеток не менее чем в пяти полях зрения).

На свежезамороженных срезах надпочечников, яичников и семенников ставили реакцию на ЗР-ол-стероиддегидрогеназу (СтДГ) по [4]. Активность СтДГ измеряли на аппарате МЕКОС во всех зонах коры надпочечников, теке фолликулов. На этих же препаратах измеряли также толщину коры надпочечников, диаметр наибольшего фолликула, средний диаметр семенного канальца.

Полученные показатели обрабатывали на ПК с использованием программы 81аиз1юа.

Результаты и их обсуждение

Полученные данные свидетельствуют об отсутствии достоверных половых различий по большинству показателей в норме и о наличии изменений под действием пренатально перенесенного стрес-

Морфометрические показатели развития головного мозга, надпочечников и половых желез 21-дневных крыс, матери которых подвергались эмоциональному стрессу во время беременности

Показатель Группа животных

контроль стресс

2 триместр 3 триместр

Масса тела, г 30,8±0,6 29,9±0,6 37,711,9*

Массы органов, мг:

- мозга 1301+11 1293± 10,6 1351115,9*

- полушария 456±6,2 460+8,2 484+9,6*

- семенника 84±3,2 78,4+3,9 10316,9*

- яичника 8,3±0,45 8,5±0,7 1111,7*

- надпочечника 5,3±0,22 5,2+0,2 6,810,4*

Толщина коры надпочечников, мкм 617±22 664+22,3 692128,6*

Активность СтДГ в надпочечнике, усл. ед:

- клубочковая зона 209± 12,7 418+21* 285122*

- пучковая зона 341±25,7 444129* 450128*

- сетчатая зона 462126,4 512127 556126*

Диаметр овариального фолликула, мкм 442±27,5 368+35 512156

Диаметр семенного канатика, мкм 92±6,3 90+5,3 12515,5

Толщина коры ПТД мкм 1311±35 1313150 1369145

Толщина коры СТД мкм 895±27,2 943127 980111,6*

Морфометрические и гистохимические показатели нейронов

Площадь цитоплазмы, мкм2:

- 5 слой ПТД 105+6,5 10213,3 12414,8*

- 5 слой СТД 112+4,7 11114 9214,4*

- 2 слой ПТД 62+2,8 7013,5 6712,6

- 2 слой СТД 57± 1,5 6112 6312,4

- гиппокамп 65±2,6 9114,5* 8112,8*

Площадь ядер, мкм2:

- ПТД 5 слой 103±4,2 11515,7 11013,5

- СТД 5 слой 8912,6 10714,2 10313

- ПТД 2 слой 86+3,8 8313,5 8012,5

- гиппокамп 83±2,8 9014,3 10013,6*

Концентрация РНК в цитоплазме, усл. ед.:

- ПТД 5 слой 241+7,8 249111,6 23419,3

- СТД 5 слой 243+7,3 217110,3 233111,2

- ПТД 2 слой 204±9,1 278112 234+11,5*

- СТД 2 слой 296±14 27117,3 288112,3

- гиппокамп 275+17,5 320115,9* 260112,2

Примечание. *— отличие от контроля достоверно, р<0,05.

са. Объединенные показатели, полученные при изучении самцов и самок, суммированы в таблице.

Последствия стрессового воздействия различаются в зависимости от срока беременности, на котором оно было произведено. Потомство самок, стрессированных во II триместре, отличалось от контрольного большей активностью СтДГ в адре-нокортикоцитах клубочковой и пучковой зон, большими размерами ядер нейронов 5 слоя собственно теменной доли и цитоплазмы в нейронах гиппокам-па, повышенной концентрацией РНК в нейронах гиппокампа и 2 слоя коры в переднетеменной доле.

Стрессовое воздействие, оказанное в III триместре беременности, привело к значительно большему числу отличий потомства от контрольного. Они проявлялись более высокими показателями массы тела, мозга, полушария, половых желез, надпочечника, толщины его коры, а также среднего диаметра семенных канальцев. Имелась тенденция к увеличению диаметра наибольшего ова-риального фолликула. Активность СтДГ в адре-нокортикоцитах всех зон коры надпочечников и в текоцитах фолликулов яичников была достоверно выше, чем в контроле.

Морфометрический анализ мозга выявил, что у крысят подопытной группы наблюдались большие, чем в контроле, толщина коры собственно теменной доли, площадь сечения цитоплазмы нейронов 5 слоя переднетеменной доли полушария, гиппокампа. Нейроны гиппокампа имели, кроме того, увеличенные размеры ядер, в результате размеры данных нейронов превышали таковые в контроле на 22%. Размеры цитоплазмы и ядер в нейронах 5 слоя собственно теменной доли изменялись разнонаправленно: ядра — увеличивались, цитоплазма — уменьшалась. При этом размеры тел нейронов не менялись, а ядерно-цитоплазма-тическое отношение возрастало.

Совокупность изложенных данных, характеризующих особенности крысят этой группы, позволяет говорить о признаках акселерации, проявляющихся отличиями в их физическом и половом развитии. Мозг животных этой группы имеет особенности, которые можно расценивать как признаки большей продвинутое™ органа в развитии, повышенной, по сравнению с контрольной, функциональной активности корковых нейронов. Обращает внимание и то, что в разных, функционально отличающихся зонах коры, а также в ее функционально различных слоях отклонения показателей, характеризующих нейроны, были неоднотипными.

Изложенные факты могут рассматриваться в качестве компонента в морфологическом эквиваленте функциональных особенностей мозга таких животных [2]. Полученные данные, кроме того, подтверждают, что последствия воздействий, оказываемых на беременных, для их потомства в решающей степени определяются сроком гестации, на котором произведено воздействие. Их можно рассматривать также как подтверждение одного из положений гипотезы об опережающем отражении в эмбриогенезе, а именно о повышенной вероятности акселерации при протекании эмбриогенеза в умеренно некомфортных условиях [7].

Литература

1. Батуев A.C., Виноградова Е.П., Полякова О.Н. // Журн. высш. нервн. деят. 1996. Т.46, №3. С.558-563.

2. Зайченко И.Н., Проймина Ф.И., Ордян Ф.И. // Журн. высш. нервн. деят. 1999. Т.49, №1. С.106-112.

3. Лойда 3., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов. М.: Мир, 1982.

4. Мицкевич М.С. Гормональные регуляции в онтогенезе животных. М.: Наука, 1978. 224 с.

5. Носенко Н.Д. // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1996. Т.82, №4. С.46-52.

6. Рыжавский Б.Я. Постнатальный онтогенез коркового вещества надпочечников. Новосибирск, 1989. 135 с.

7. Рыжавский Б.Я. // Журн. высш. нервн. деят. 2000. Т.50. С. 1046-1054.

8. Рыжавский Б.Я., Еременко И.Р. // Физиол. журн. им. И.М.Сеченова. 1999. Т.84, №4. С.373-379.

9. Тарасенко JI. В., Синицын П.В., Резников A.B. // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1996. Т.82, №4. С.39-45.

10. Хухо Ф. Нейрохимия. М.: Мир. 1990. 384 с.

11. Day J.C., Koehi M., Déroché V. et al. // J. Neu-rosci. 1998. Vol. 18, No.5. P.1886-1892.

12. Diaz R., Fuxe K., Orgen S.O. // Neuroscience. 1997. Vol.81, No.l. P.129-140.

13. Weinsctock M. // Neurosci. Biobehav. Rev. 1997. Vol.21, No.l. P.l-10.

УДК 616.233: 616.24] - 002: 615.849.15: 615.832

С.С. Гаврильев, M.K. Винокурова, Л.П. Гаврильева, Т.С. Илларионова, И.Ш. Малогулова, A.A. Кузьмина

МЕТОД ЛАЗЕРОФИТОТЕРАПИИ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ЗАТЯЖНОЙ ПНЕВМОНИЕЙ И ХРОНИЧЕСКИМ БРОНХИТОМ

Медицинский институт Якутского государственного университета им. М.К. Ачмосова, г. Якутск

В последние годы в Якутии отмечается высокая частота затяжных неспецифических пневмоний с превращением их в хронические формы и поражением бронхов. Своеобразие патогенетических механизмов развития пневмонии определяет тканевую реакцию с фибропластической направленностью, приводящую к склерозированию легочной ткани и картине выраженного пневмофиброза [6, 7].

Лечение больных затяжными формами пневмонии с выраженным пневмофиброзом и хроническим бронхитом представляет большую сложность и является одной из трудноразрешимых проблем современной пульмонологии из-за низкой эффективности антибиотикотерапии, которая не в состоянии полностью устранить проявления морфологических изменений воспалительного характера. Поэтому лечение больных при создавшейся ситуации требует совершенствования лечебных мероприятий с разработкой новых режимов комплексной терапии.

Мы предприняли попытку повысить эффективность лечения больных затяжной пневмонией и хроническим бронхитом путем применения лазе-рофитотерапии в сочетании с противомикробны-ми препаратами. Задача исследования заключалась в разработке методики применения режима лазерного излучения и фитосбора после введения противомикробных препаратов в организм.

Материалы и методы

Нами предложен метод лазерофитотерапии, обеспечивающий глубокое проникновение антиби-

Резюме

Разработан и применен в комплексном лечении 47 больных затяжной пневмонией и хроническим бронхитом новый метод лазерофитотерапии, учитывающий особенности патогенеза воспалительного процесса в условиях Севера (выраженная фибропластическая реакция органов дыхания). Предлагается пролонгированная схема применения глубокопроникающего инфракрасного лазерного излучения в режиме ударной волны (80 Гц). Лазеротерапия дополняется фитотерапией с использованием аборигенных лекарственных растений по специальной прописи. Сочетанная методика лечения обеспечивает глубокую диффузию лекарственных препаратов и компонентов растений в зону поражения через пнев-мофиброзные изменения в условиях локальной микроциркуляции и усиливает их лечебное действие. Показатели эффективности лечения выявили явные преимущества лазерофитотерапии в комплексной химиотерапии, о чем свидетельствуют значительные клинико-рентгено-лошческие, иммунологические и биохимические параметры инволюции патологического процесса в отличие от обычного лечения больных данной категории.

отиков и антибактериальных препаратов в зону поражения через пневмофиброзные изменения с усилением их лечебного действия путем применения грудного фитосбора. Это достигается локализованным наружным воздействием полупроводникового инфракрасного лазера "Узор" в режиме ударной волны в области проекции патологических изменений с одновременным назначением фитосбора из лекарственных растений Якутии. Метод испытан у