СПОСОБЫ ИЗБИРАТЕЛЬНОЙ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ АГРЕГАТОВ А-БЕТА

1. Способ избирательной количественной оценки и/или характеризации агрегатов А-бета, включающий следующие стадии, на которых:
а) наносят предназначенный для тестирования образец на субстрат,
б) добавляют меченные с целью детекции зонды, которые метят агрегаты А-бета посредством специфического связывания с ними, и
в) осуществляют детекцию маркированных агрегатов А-бета, при этом стадию а) можно осуществлять до осуществления стадии б).
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что перед осуществлением стадии а) осуществляют иммобилизацию захватывающих молекул на субстрате.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что осуществляют предварительную обработку образца.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что применяют стеклянный субстрат.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что субстрат имеет гидрофильное покрытие.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что на субстрат наносят покрытие из декстрана.
7. Способ по п. 2, отличающийся тем, что захватывающие молекулы ковалентно связывают с субстратом или с покрытием.
8. Способ по п. 2, отличающийся тем, что захватывающие молекулы метят флуоресцентными красителями.
9. Способ по п. 2, отличающийся тем, что захватывающие молекулы представляют собой антитела к А-бета.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что антитела к А-бета специфически связываются с одним эпитопом агрегата А-бета.
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что применяют зонды, специфические в отношении пептида А-бета.
12. Способ по п. 1, отличающийся тем, что зонды представляют собой антитела к А-бета, меченные флуоресцентным красителем.
13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что применяют два или большее количество различных зондов.
14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что применяют два или большее количество зондов, меченных различными флуоресцентными красителями.
15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что по меньшей мере один зонд представляет собой антитело к А-бета, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом пептида А-бета.
16. Способ по п. 1, отличающийся тем, что детекцию осуществляют с помощью флуоресцентной микроскопии с пространственным разрешением.
17. Способ по п. 1, отличающийся тем, что детекцию осуществляют с помощью конфокальной флуоресцентной микроскопии, флуоресцентной корреляционной спектроскопии (FCS), при необходимости в сочетании с кросс-корреляционным и лазерным сканирующим иммуносольвентным анализом отдельных частиц, лазерного сканирующего микроскопа (LSM), Wetfeld-микроскопии и/или TIRF-микроскопии, и соответствующих обеспечивающих сверхвысокое разрешение модификаций STED, SIM, STORM и dSTORM.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что при детекции собирают такое количество экспериментальных точек, которое позволяет осуществлять детекцию одного агрегата на фоне шумового сигнала.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что регистрируют такое количество величин, которое обеспечивается пространственным разрешением.
20. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве анализируемого образца применяют спинномозговую жидкость (СМЖ, цереброспинальная жидкость), кровь и/или мочу.
21. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для количественной оценки агрегатов А-бета применяют внутренний или внешний стандарт.
22. Способ по п. 21, отличающийся тем, что стандарт для количественной оценки агрегатов А-бета представляет собой полимер, сконструированный из полипептидных последовательностей, последовательности которых имеют соответствующую подобласть, идентичную эндогенным белкам или гомологичную по меньшей мере на 50% по длине соответствующей подобласти эндогенных белков, вызывающих связанное с агрегацией заболевание или амилоидную дегенерацию, или болезнь, связанную с неправильной укладкой белков, при этом полимеры не образуют агрегаты.
23. Набор для избирательной количественной оценки агрегатов А-бета по одному из предыдущих пунктов, содержащий один или несколько из следующих компонентов:
- стеклянный субстрат с нанесенным покрытием из гидрофобной субстанции;
- стандарт;
- захватывающую молекулу;
- зонд;
- субстрат с захватывающей молекулой;
- растворы; и
- буфер.
24. Способ определения эффективности действующих веществ и/или терапий, предназначенных для лечения AD, отличающийся тем, что осуществляют способ по одному из пп. 1-22 и сравнивают друг с другом действующие вещества и/или терапии с точки зрения их воздействия на образование агрегатов А-бета, при этом отбирают те действующие вещества и/или терапии, которые приводят к меньшему образованию агрегатов А-бета по сравнению с контролем.
25. Способ определения того, пригоден ли индивидуум для включения в клиническое исследование или тест, отличающийся тем, что осуществляют количественную оценку и/или характеризацию агрегатов А-бета по одному из пп. 1-22 и сравнивают измеренную величину с пороговым значением.
26. Специфические для агрегатов А-бета зонды.
27. Применение зондов, специфических для агрегата А-бета или специфических для олигомера А-бета соответственно, для специфического связывания с определенным агрегатом А-бета или олигомером А-бета.