Реакция трансмиттерных систем рефлексогенных зон кожи человека на акупунктуру

№ 6 - 2010 г.

14.00.00 медицинские науки

УДК 612.79:615.814.1

РЕАКЦИЯ ТРАНСМИТТЕРНЫХ СИСТЕМ РЕФЛЕКСОГЕННЫХ ЗОН КОЖИ ЧЕЛОВЕКА НА АКУПУНКТУРУ

Е.А. Гурьянова

ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова»

С целью выявления динамики уровня гистамина автор изучал содержание нейротрансмиттера в структурах кожи человека в области точек акупунктуры в разные сроки до и после иглоукалывания люминесцентно-гистохимическим методом Кросса. Материалом служила кожа женщин, взятая при операции фэйс-лифтинга. Проведенный спектрофлуориметрический анализ позволил выявить особенности распределения гистамина в различно расположенных точках акупунктуры до и после иглоукалывания. При изучении влияния иглоукалывания в течение двух и 10 мин на структуры кожи человека в области точек акупунктуры, расположенных на лице, установлено, что достоверные изменения содержания гистамина в структурах кожи начинаются уже через 1 ч после воздействия. Установлено достоверное повышение содержания гистамина, в основном, в эпителии и гранулярных люминесцирующих клетках гиподермы. Выявлена разница в реакции тучных и гранулярных люминесцирующих клеток кожи на иглоукалывание. Наиболее реагирующими тучными клетками являются клетки, локализующиеся на границе дермы с гиподермой. При малой экспозиции иглы содержание гистамина в тучных клетках остаётся неизменным или падает. Гранулярные люминесцирующие клетки, напротив, отвечают повышением содержания гистамина и медленным возвращением его к исходным показателям. В контрольных зонах всех исследованных точек происходило повышение содержание гистамина в меньшей степени, чем в точках акупунктуры. Увеличение времени иглоукалывания приводит к более стойким изменениям гистаминного статуса кожи. Иглоукалывание в течение 10 мин приводит к массовой дегрануляции тучных клеток в гиподерме через 2 ч после процедуры во всех исследованных точках. Возвращение к исходным показателям люминесценции гистамина происходит к концу первых суток

Ключевые слова: акупунктурные точки, кожа, иглоукалывание, гистамин,

гранулярные люминесцирующие клетки

Гурьянова Евгения Аркадьевна - кандидат медицинских наук, доцент кафедры гистологии, цитологии, эмбриологии ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова», е-шаП: lechfac@mail.ru

Введение. Особое внимание в настоящее время уделяется исследованию местной реакции тканей кожи в области точек акупунктуры (ТА), которой отводится роль триггера, запускающего все последующие этапы развития эффектов рефлексотерапии [1,

2, 7]. Для понимания механизмов акупунктуры актуальным является изучение

морфофункциональных изменений тканевых и клеточных компонентов кожи в проекции ТА, происходящих при иглоукалывании (ИУ) [1, 2]. Все клетки человеческого организма выделяют в межклеточное пространство, кровь и лимфу биологически активные вещества, благодаря которым осуществляются процессы взаимодействия, объединяющие клетки и ткани организма в единое целое. Важную роль при этом играют нейротрансмиттеры, особенно гистамин. Известно, что недифференцированные клетки экспрессируют на своей мембране рецепторы к гистамину, при взаимодействии с которым активируется их деление на ранних этапах дифференцировки [5, 7]. Основными гистаминсодержащими структурами кожи человека в проекции точек акупунктуры являются тучные и гранулярные люминесцирующие клетки (ГЛК) [3]. Гистамин присутствует и в окружающем клетки соединительнотканном матриксе. В серии экспериментов, проведённых на кафедре гистологии Чувашского госуниверситета, доказана нейроэндокринная природа гранулярных клеток: ГЛК экспрессируют

нейронспецифическую энолазу и синаптофизин, дают положительную реакцию Массон-Фонтана, содержат гистамин, катехоламины, серотонин, субстанцию Р, вазоактивный интестинальный пептид и др. Данные цитоструктуры в коже, тимусе, селезёнке и других органах обеспечивают сопряжение нервных, эндокринных и иммунных механизмов в интегральном ответе организма на любые внешние воздействия [4, 8, 9]. ГЛК кожи в проекции ТА в основном локализуются в области потовых желёз. Ранее были выявлены отличия в реакции на иглоукалывание со стороны кожи в проекции дистальных и корпоральных точек акупунктуры у крыс [4]. Однако строение точек акупунктуры у крыс и человека имеет некоторые различия. В частности, преобладающими гистаминсодержащими цитоструктурами у крыс являются тучные клетки и волосяные фолликулы, у человека - ГЛК и тучные клетки. В этом плане интересен вопрос изменений, возникающих при иглоукалывании, в биоаминном обеспечении точек акупунктуры человека.

Целью настоящего исследования является выявление динамики содержания гистамина в коже человека в области ТА различных меридианов при воздействии иглоукалыванием в разные сроки.

Материал и методы исследования. В работе были исследованы образцы человеческой кожи, взятые у 12-ти женщин 45-50 лет после операции фэйс-лифтинга (с учётом предварительного согласия пациенток). Иглоукалывание стальными иглами (пр-во «Контур», Чебоксары) проводилось непосредственно до операции в точки SI 19, BL 2 и ТЕ 17, а также в зоны, находящиеся рядом с ТА, в течение 2 и 10 мин, что соответствует возбуждающему (I и II) методу воздействия [2]. ТА SI 19 локализуется на середине расстояния между козелком и суставом нижней челюсти; ТЕ 17 - кзади от основания мочки уха, между сосцевидным отростком и восходящей ветвью нижней челюсти; BL 2 -кпереди и книзу от козелка. Согласно международной классификации, данные меридианы относятся к классическим акупунктурным и соответствуют: SI - меридиан тонкого кишечника (Small Intestine), TE - меридиан трех полостей туловища (Triple Energizer), GB - меридиан желчного пузыря (Gall Bladder). Данные точки обладают высокой клинической эффективностью [2]. Локализацию точек акупунктуры определяли по анатомическим ориентирам и с помощью прибора «Рефлекс». Электрокожное сопротивление в ТА составляло 55-65 кОм, вне точек - 100-110 кОм. Из полученных сразу после операции кусочков кожи изготавливали криостатные срезы, которые обрабатывали люминесцентно-гистохимическим методом Кросса [10]. Полученные препараты рассматривали под люминесцентным микроскопом ЛЮМАМ-4. Метод спектрофлуориметрии использовали для количественного выражения уровня гистамина в тканевых структурах кожи. Показания снимали с табло усилителя в условных единицах.

Статистическую обработку данных проводили с помощью персонального компьютера «Репйит» с использованием стандартного пакета программ.

Результаты исследования. Ранее было установлено, что морфологическим субстратом, создающим гистаминовое обеспечение кожи человека в области как ТА, так и близлежащих участков, являются эпителий, тучные клетки (ТК), волосяные фолликулы, эластические волокна сетчатого слоя, ядра фибробластов [3]. Акупунктура оставляет хорошо заметное повреждение эпидермиса и дермы в виде ярко-желтой люминесцирующей полосы, проникающей вплоть до гиподермы. Около него имеется небольшой участок (около 100 мкм), где повышено содержание исследуемого нейротрансмиттера, и заметны тучные клетки. Это связано с тем, что игла способствует механическому повреждению тканей и дегрануляции тучных клеток.

После 2-минутной экспозиции иглы в точку SI 19 через 1 ч происходит постепенное повышение содержания гистамина: в эпителии - в 1,3 раза, сосочковом и сетчатом слоях дермы - в 1,2 раза. В гиподерме содержание гистамина осталось неизменным. В тучных клетках, расположенных под эпителием, в сетчатом слое около волосяных фолликулов, сальных желёз иглоукалывание не вызывало достоверных изменений содержания гистамина. Очевидно, это связано с более низкой сульфатированностью гепарина, покрывающего эти клетки. Поэтому далее мы приводим данные только по тучным клеткам, лежащим на границе сетчатого слоя и гиподермы. Мастоциты этой локализации отличались наибольшим размером и высоким содержанием гистамина. В ГЛК гиподермы содержание гистамина увеличилось в 1,4 раза.

Через 2 ч после снятия иглы содержание гистамина во всех исследованных структурах имело тенденцию к снижению. Число люминесцирующих тучных клеток уменьшилось в 2 раза за счет дегрануляции. Исходные показатели гистаминового статуса выявлены только через 4 ч после ИУ.

В контрольной зоне (рядом с точкой SI 19) содержание гистамина повышалось в эпителии и сетчатом слое дермы аналогично таковому в проекции ТА. Так, через 1 ч в сосочковом слое дермы содержание гистамина повышалось в 1,19 раза, а в гиподерме оставалось неизменным. Через 2 ч после снятия иглы содержание гистамина уменьшилось в эпителии, фибробластах сосочкового слоя дермы, в эластических волокнах сетчатого слоя на 5-10 %, в тучных клетках, расположенных в нижней трети сетчатого слоя дермы, в гиподерме и в ГЛК приблизилось к первоначальным значениям.

После 10-минутной экспозиции иглы в точке SI 19 через 1 ч содержание гистамина увеличилось по сравнению с первоначальным в 1,5 раза во всех исследуемых структурах, кроме гиподермы, где замечено повышение содержания диамина в 2 раза. Наиболее высокого содержания гистамин достигает в эластических волокнах сетчатого слоя дермы и в ГЛК.

Через 2 ч после процедуры содержание гистамина в эпителии, сосочковом слое дермы, в гиподерме снижается на 20 %. Тем не менее, эти показатели остаются далекими от первоначального уровня диамина. Через 4 ч мы наблюдали продолжающееся снижение содержания гистамина в исследованных структурах, и лишь в гиподерме и тучных клетках показатели приблизились к таковым до процедуры.

Динамика показателей гистамина в точке BL 2 аналогична таковой в точке SI 19, поэтому далее мы приводим данные по точке ТЕ 17.

После 2-минутной экспозиции иглы через 1 ч в точке ТЕ 17 содержание гистамина в структурах кожи повышается, но несколько меньше, чем в точке SI 19. В эпителии содержание гистамина возрастает в 1,1 раза, в сосочковом и сетчатом слоях дермы - в 1,3 раза, в ГЛК гиподермы - в 1,2 раза, в гиподерме и тучных клетках, расположенных в нижней трети сетчатого слоя дермы, остается неизменным. Через 2 ч после снятия иглы содержание гистамина во всех исследованных структурах имело тенденцию к снижению. В сосочковом слое дермы тучные клетки не выявлялись. Исходные показатели гистаминового статуса выявлены только через 4 ч после ИУ.

В контрольной зоне (рядом с точкой ТЕ 17) эпителий реагирует менее интенсивно. В фибробластах и эластических волокнах содержание гистамина растет, но незначительно. Через 2 ч после ИУ содержание гистамина падает во всех структурах, и показатели люминесценции начинают приближаться к исходным.

После 10-минутной экспозиции иглы через 1 ч в точке ТЕ 17 наблюдается увеличение содержания гистамина по сравнению с интактной кожей в эпителии в 1,4 раза, в фибробластах сосочкового и эластических волокнах сетчатого слоя дермы - в 1,3 раза. В тучных клетках, расположенных в нижней трети сетчатого слоя дермы, содержание гистамина увеличивается в 2 раза, в ГЛК гиподермы - в 1,6 раз. Число выявившихся тучных клеток резко снизилось.

Через 2 ч после ИУ содержание гистамина продолжает оставаться на прежнем уровне. Через 4 ч после ИУ выявлено снижение интенсивности люминесценции гистамина в эластических волокнах сетчатого слоя дермы и в тучных клетках на 20-25 %. В эпителии и в сосочковом слое дермы показатели приблизились к таковым до процедуры. ТК в сосочковом слое дермы и на границе сетчатого слоя и гиподермы не выявлялись.

Вне точки ТЕ 17 через 1 ч после 10 мин ИУ выявлено увеличение содержания гистамина в эпителии и сосочковом слое дермы. Однако через 2 ч после ИУ процедуры содержание исследованного диамина в контрольной зоне снизилось во всех описываемых структурах до первоначальных показателей. Таким образом, в контрольной зоне всех исследованных точек происходило повышение содержание гистамина в меньшей степени, чем в точках акупунктуры. По-видимому, это связано с исходно меньшей численностью и меньшей общей площадью тучных клеток в контрольных зонах по сравнению с зонами точек акупунктуры [2, 3].

Обсуждение результатов. При изучении влияния иглоукалывания на структуры кожи в области точек акупунктуры нами было установлено закономерное повышение содержания гистамина. Однако структуры кожи реагировали по-разному. Так, наибольшее повышение содержания гистамина замечено в эпителии и в ГЛК гиподермы, а наименьшее - в сетчатом слое дермы богатом эластическими и коллагеновыми волокнами. Можно предположить, что стабильный уровень гистамина в дерме связан с фактом существенного увеличения в ТА с высокой клинической эффективностью концентрации мукополисахаридов и коллагена [6]. С другой стороны, известно, что эластические волокна являются аминоадсорбирующей субстанцией, т. е. не способной продуцировать гистамин. Аминопродуцирующими структурами кожи принято считать тучные клетки и ГЛК, которые реагируют повышением содержания гистамина [3]. Исследованиями многих авторов было показано, что в точках акупунктуры число тучных клеток выше, чем в окружающих зонах [2, 3, 6]. Возможно, факт возрастания содержания гистамина объясняется явлением дегрануляции многочисленных зрелых тучных клеток и выбросом из них биологически активных веществ. Это подтверждается невыявляемостью ТК в гиподерме через 2 ч после воздействия. Отсутствие ТК, как регуляторного звена, через 2 ч после иглоукалывания приводит к накоплению гистамина в тканях и

повышенной пролиферации клеток соединительной ткани до момента восстановления тучноклеточной популяции.

Нами выявлена разница в реакции тучных клеток и ГЛК на иглоукалывание. При малой экспозиции иглы содержание гистамина в мастоцитах остаётся неизменным или падает. ГЛК, напротив, отвечают повышением содержания гистамина и медленным возвращением его к исходным показателям.

Таким образом, рефлексотерапия способствует увеличению содержания гистамина в точке акупунктуры - локальном участке кожи, являющимся местом запуска каскада ответных реакций организма. Возможно, иглоукалывание воздействует на органы, корреспондируемые точками акупунктуры, посредством изменения трансмиттерного обеспечения периферической крови. Полученные данные подтверждают гипотезу нейрогормональных механизмов рефлексотерапии, обеспечивающих сочетанный контроль боли и иммунитета, и участие акупунктуры в стимуляции секреции ряда нейропередатчиков, включая гистамин [1, 6].

Список литературы

1. Василенко А. М. Концепция интегрального регуляторного континуума как основа современной теории рефлексотерапии / А. М. Василенко // Рефлексотерапия. -2006. - № 4. - С. 5-8.

2. Вогралик В. Г. Основы традиционной восточной рефлексодиагностики и пунктурной адаптационной терапии / В. Г. Вогралик, В. М. Вогралик.- М., 2001. - 435 с.

3. Гурьянова Е. А. Биоаминное обеспечение структур кожи человека в области точек акупунктуры / Е. А. Гурьянова, Е. В. Любовцева, Л. А. Любовцева // Морфологические ведомости. - 2007. - № 1-2. - С. 52-54.

4. Гурьянова Е.А. Исследование гистаминсодержащих структур кожи в области точек акупунктуры у крыс после иглоукалывания / Е. А. Гурьянова, Л. А. Любовцева, Е.

B. Любовцева // Вестн. восстанов. медицины. - 2007. - № 4. - С. 98-100.

5. Корнеева Е. А. Проблема нейрогуморальной регуляции иммунного гомеостаза / Е. А. Корнеева, Э. К. Шхинек, Г. В. Гущин // Физиология человека. - 1984. - Т. 10, № 2. -

C.179-182.

6. Лиманский Ю. П. Научные основы акупунктуры / Ю. П. Лиманский, С. А. Гуляр, И. З. Самосюк // Рефлексотерапия. - 2007. - № 2. - С. 59-71.

7. Любовцева Л. А. Люминесцентно-гистохимическое исследование аминосодержащих структур костного мозга, тимуса и крови при действии нейромедиаторов и антигенов. / Л. А. Любовцева. - Чебоксары : Изд-во Чувашского госуниверситета, 1993. - 91 с.

8. Любовцева Л. А. / Л. А. Любовцева, О. А. Ефремова, Н. Н. Голубцова // Международный журнал по иммунореабилитации. - 2009. - Т. 11, № 1. - С. 25-26.

9. Сарилова И. Л. Морфофункциональная характеристика структур тимуса при

экспериментальной тестэктомии : автореф. дис..... канд. мед. наук / И. Л. Сарилова. -

Саранск, МордГУ, 2009. - 24 с.

10. Cross S. A. A study of methods available for cyto^emical localization of histamine by fluorescence induced with o-phtalaldehyde or acetaldehyde / S. A. Cross, S. W. Ewen, F. W. Rost // Histohem. J. - 1971. - Vol. 3, N 6. - P 471-476.

REACTION OF HUMAN SKIN REFLEXING TRANSMITIOUS SYSTEMS ON ACUPUNCTURE

E.A. Guryanova

FSEIHPE Chuvash State University at the name of Ulyanov

The author studied both the reveal of histamine level dynamics and the content of neurotransmitter in human skin structures in acupuncture points area, before and after acupuncture of luminescent-hist-chemical Kross method.

The skin of a woman, taken after face-lifting, was studied. The spectra- fluorimetric analysis revealed histamine distribution features in various points of acupuncture before and after acupuncture.

Acupuncture influence study during 2 and 10 minutes on human skin structures on acupuncture points area of a face showed the vivid histamine content changes in skin to start in 1 hour after the procedure. The actual histamine content rise is mostly estimated to be in epithelium and hypodermic luminescent granular cells. The reaction for acupuncture in a huge and granular luminescent skin cells is revealed. The huge cells bordering dermal and hypodermic locations are the most reactive ones.

The content of histamine in huge cells persists or becomes lower in little needle exposure. Granular luminescent cells show the rise of histamine content and its slow return to primary state.

The rise of histamine content in all studied control zones gave less increase than in acupuncture zones. The expansion of acupuncture time period results in more stable changes of histamine skin status. During 10 minutes acupuncture leads to huge cells massive DE-granulation in hypodermic layer, in 2 hours after the examination of all studied cells. The original histamine luminescent state appears at the end of a first day.

Keywords: acupuncture points, skin,acupuncture, histamine, granular luminescent cells

About authors:

Guryanova Evgeniya Arcadyevna - medical sciences doctor, assistant professor of histology and cytology department, embryology FSEI HPE “Chuvash State University at the name of Ulyanov”, e-mail: lechfac@mail.ru

List of the Literature:

1. Vasilenko A.M. Concentration of integral regulatory continuum as the base of modern reflector-therapy theory / A.M. Vasilenko // Reflector-therapy. - 2006. - P.5-8.

2. 2. Vogralik V.G. Bases of traditional eastern reflector-therapy and puncture adaptation therapy / V.G. Vogralik, V.M. Vogralik.-M., 2001. - 435p.

3. Guryanova E.A. Bio-amine supply for human-being skin structure in acupuncture area / E.A. Guryanova, E.V. Liubovtseva, L.A. Liubovtseva, L.A. Liubovtseva // The Morphological bulletin. - 2007. № 1-2. - P. 52-54.

4. Guryanova E.A. Research of acupuncture skin structures with histamine after acupuncture in rats / E.A. Guryanova, L.A. Liubovtseva, E.V. Liubovtseva // Recovery medicine bulletin. - 2007. - №4. - P. 98-100.

5. Korneeva E.A. Problem of immune homeostasis neuro-humoral regulation / E.A. Korneeeva, E.K. Shkhinek, G.V. Gushchin // Human physiology. - 1984. - V. 10, № 2. -P. 179-182.

6. Limanskiy Y.P. Scientific bases of acupuncture / Y.P. Limanskiy, S.A. Guliar, I.Z.Samosiuk // Reflexive therapy. - 2007. - № 2. - P. 59-71.

7. Liubovtseva L.A. Luminescent- hist-chemical research of bony-brain amino-structures, thymus, and blood with neurology-mediators and antigen action. / L.A. Liubovtseva. -Cheboksary: Publishing of Chuvash State University,1993. - 91 p.

8. Liubovtseva L.A. / L.A. Liubovtseva, O.A. Efremova, N.N. Golubtsova // International Journal on immunology rehabilitation. - 2009. - V. 11, № 1. - P. 25-2б.

9. Sarilova I.L. Morph-functional feature of thymus structures in experimental test ectomy : authoref. dis med. sc. cand. / I.L. Sarilova. Saransk, MordSU, 2009. - 24 p.

10. Cross S. A. A study of methods available for cyto^emical localization of histamine by fluorescence induced with o-phtalaldehyde or acetaldehyde / S. A. Cross, S. W. Ewen, F. W. Rost // Histohem. J. - 1971. - Vol. 3, N б. - P 471-47б.