КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ГЕМОГЛОБИНОПАТИИ

1. Композиция для лечения гемоглобинопатии, содержащая эндонуклеазу Cas9 и одну или более «руководящих» РНК, где каждая из указанных одной или более «руководящих» РНК связывается с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из кодирующей области Bсl11а; регуляторной области гена Bсl11а; локуса человеческого β-глобина взрослых; области сайленсинга фетального гемоглобина (HbF); Bсl11а-регулируемой области сайленсинга HbF; промотора гена γ-глобина; промотора гена δ-глобина; и сайта мутации гена β-глобина.
2. Композиция для лечения гемоглобинопатии, содержащая один или более полинуклеотидов, кодирующих эндонуклеазу Cas9 и одну или более «руководящих» РНК, где каждая из указанных одной или более «руководящих» РНК связывается с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из кодирующей области Bсl11а; регуляторной области гена Bсl11а; локуса человеческого β-глобина взрослых; области сайленсинга фетального гемоглобина (HbF); Bсl11а-регулируемой области сайленсинга HbF; промотора гена γ-глобина; промотора гена δ-глобина; и сайта мутации гена β-глобина.
3. Композиция для лечения гемоглобинопатии, содержащая один или более векторов, кодирующих эндонуклеазу Cas9 и одну или более «руководящих» РНК, где каждая из указанных одной или более «руководящих» РНК связывается с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из кодирующей области Bсl11а; регуляторной области гена Bсl11а; локуса человеческого β-глобина взрослых; области сайленсинга фетального гемоглобина (HbF); Bсl11а-регулируемой области сайленсинга HbF; промотора гена γ-глобина; промотора гена δ-глобина; и сайта мутации гена β-глобина.
4. Композиция по любому из пп.1-3, где гемоглобинопатия выбрана из группы, состоящей из β-талассемии и серповидно-клеточной болезни.
5. Композиция по любому из пп.1-3, где указанные одна или более «руководящих» РНК содержат полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NOs: 48-54.
6. Композиция по любому из пп.1-3, где указанные одна или более «руководящих» РНК содержат:
(a) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 48;
(b) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49;
(c) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50;
(d) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 48, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 49-53;
(e) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 51, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 48 и 54;
(f) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 52, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 48 и 54;
(g) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 48 и 54; или
(h) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 51-53.
7. Композиция по любому из пп.1-3, где указанные одна или более «руководящих» РНК связываются с полинуклеотидной последовательностью в области сайленсинга фетального гемоглобина, приведенной в SEQ ID NO: 1.
8. Композиция по любому из пп.1-3, где указанные одна или более «руководящих» РНК связываются с полинуклеотидной последовательностью в области сайленсинга фетального гемоглобина, приведенной в SEQ ID NO: 2.
9. Клетка для лечения гемоглобинопатии, содержащая эндонуклеазу Cas9 и одну или более «руководящих» РНК, где каждая из указанных одной или более «руководящих» РНК связывается с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из кодирующей области Bсl11а; регуляторной области гена Bсl11а; локуса человеческого β-глобина взрослых; области сайленсинга фетального гемоглобина (HbF); Bсl11а-регулируемой области сайленсинга HbF; промотора гена γ-глобина; промотора гена δ-глобина; и сайта мутации гена β-глобина.
10. Клетка для лечения гемоглобинопатии, содержащая один или более полинуклеотидов, кодирующих эндонуклеазу Cas9 и одну или более «руководящих» РНК, где каждая из указанных одной или более «руководящих» РНК связывается с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из кодирующей области Bсl11а; регуляторной области гена Bсl11а; локуса человеческого β-глобина взрослых; области сайленсинга фетального гемоглобина (HbF); Bсl11а-регулируемой области сайленсинга HbF; промотора гена γ-глобина; промотора гена δ-глобина; и сайта мутации гена β-глобина.
11. Клетка для лечения гемоглобинопатии, содержащая один или более векторов, кодирующих эндонуклеазу Cas9 и одну или более «руководящих» РНК, где каждая из указанных одной или более «руководящих» РНК связывается с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из кодирующей области Bсl11а; регуляторной области гена Bсl11а; локуса человеческого β-глобина взрослых; области сайленсинга фетального гемоглобина (HbF); Bсl11а-регулируемой области сайленсинга HbF; промотора гена γ-глобина; промотора гена δ-глобина; и сайта мутации гена β-глобина.
12. Клетка по любому из пп.9-11, где указанная клетка выбрана из группы, состоящей из гемопоэтической стволовой клетки (HSC), гемопоэтической клетки-предшественника и эритроидной клетки.
13. Клетка по любому из пп.9-11, где указанные одна или более «руководящих» РНК содержат полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NOs: 48-54.
14. Клетка по любому из пп.9-11, где указанные одна или более «руководящих» РНК содержат:
(a) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 48;
(b) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49;
(c) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50;
(d) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 48, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 49-53;
(e) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 51, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 48 и 54;
(f) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 52, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 48 и 54;
(g) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 48 и 54; или
(h) полинуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54, и полинуклеотидную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO: 51-53.
15. Клетка по любому из пп.9-11, где указанные одна или более «руководящих» РНК связываются с полинуклеотидной последовательностью в области сайленсинга фетального гемоглобина, приведенной в SEQ ID NO: 1.
16. Клетка по любому из пп.9-11, где указанные одна или более «руководящих» РНК связываются с полинуклеотидной
последовательностью в области сайленсинга фетального гемоглобина, приведенной в SEQ ID NO: 2.
17. Клетка по любому из пп.9-11, введенная субъекту с гемоглобинопатией.
18. Клетка по п.17, где гемоглобинопатия выбрана из группы, состоящей из β-талассемии и серповидно-клеточной болезни.