ПРОИЗВОДСТВО БЕЛКОВ С ВЫСОКИМ СОДЕРЖАНИЕМ МАННОЗЫ В КУЛЬТУРЕ РАСТИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК

1. Выделенная нуклеиновокислотная последовательность, кодирующая человеческий лизосомальный белок, непосредственно соединенный с С-концевым сигналом вакуолярного нацеливания и N-концевым сигнальным пептидом эндоплазматического ретикулума, отличающаяся тем, что данный человеческий лизосомальный белок является человеческой α-галактозидазой.
2. Выделенная нуклеиновокислотная последовательность, кодирующая человеческий лизосомальный белок, непосредственно соединенный с С-концевым сигналом удерживания в эндоплазматическом ретикулуме и N-концевым сигнальным пептидом эндоплазматического ретикулума, отличающаяся тем, что данный человеческий лизосомальный белок является человеческой α-галактозидазой.
3. Выделенная нуклеиновая кислота по пп.1 и 2, отличающаяся тем, что упомянутая человеческая α-галактозидаза имеет последовательность, обозначенную как SEQ ID NO:24.
4. Выделенный нуклеиновокислотный конструкт по п.1, отличающийся тем, что упомянутый сигнал вакуолярного нацеливания имеет последовательность, обозначенную как SEQ ID NO:4.
5. Выделенный нуклеиновокислотный конструкт по п.2, отличающийся тем, что упомянутый сигнал удерживания в эндоплазматическом ретикулуме имеет последовательность, обозначенную как SEQ ID NO:23 (KDEL).
6. Выделенный нуклеиновокислотный конструкт по п.2, имеющий последовательность, обозначенную как SEQ ID NO:19.
7. Выделенная нуклеиновая кислота по п.1, имеющая последовательность, обозначенную как SEQ ID NO:17.
8. Нуклеиновокислотный конструкт, способный к экспрессии в растительной клетке, содержащей выделенную нуклеиновую кислоту по п.1 или 2.
9. Клетка, содержащая нуклеиновокислотный конструкт по п.8.
10. Клетка по п.9, являющаяся растительной клеткой, отличающейся тем, что упомянутый белок - человеческая α-галактозидаза рекомбинантно продуцируется таким образом, что в его составе присутствуют, как минимум, один остаток ксилозы и, как минимум, один обнаженный маннозный остаток.
11. Клетка по п.9, являющаяся растительной клеткой, отличающейся тем, что упомянутый белок - человеческая α-галактозидаза рекомбинантно продуцируется таким образом, что в его составе присутствуют, как минимум, один остаток α-(1,2) ксилозы в гликановом остове и, как минимум, один остаток α-(1,3) фукозы в гликановом остове.
12. Выделенный белок - человеческая α-галактозидаза, кодируемый нуклеиновой кислотой по любому из пп.1-7, причем упомянутая человеческая α-галактозидаза захватывается фибровластами и обладает ферментативной активностью α-галактозидазы.
13. Белок - человеческая α-галактозидаза, продуцируемый клеткой по любому из пп.9-11.
14. Белок - человеческая α-галактозидаза, содержащий по крайней мере один элемент из группы, состоящей из:
(а) С-концевого сигнала удерживания в эндоплазматическом ретикулуме;
(б) N-концевого сигнального пептида эндоплазматического ретикулума;
(в) С-концевого сигнала вакуолярного нацеливания;
(г) по крайней мере одного остатка ксилозы и по крайней мере одного обнаженного маннозного остатка; и
(д) по крайней мере одного остатка α-(1,2) ксилозы в гликановом остове и по крайней мере одного остатка α-(1,3) фукозы в гликановом остове.
15. Использование белка - человеческой α-галактозидазы по любому из пп.12-14 с целью производства лекарственного препарата для лечения болезни Фабри.