Элементный состав костной ткани человека в норме и при патологии

ХИМИЯ

Вестн. Ом. ун-та. 2015. № 4. С. 39-44.

УДК 54.062, 543.544.5.068.7

С.А. Герк, О.А. Голованова

ЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ КОСТНОЙ ТКАНИ ЧЕЛОВЕКА В НОРМЕ И ПРИ ПАТОЛОГИИ*

Проведено сравнительное исследование микро- и макроэлементного состава костных тканей человека в «норме» с содержанием элементов в костных образцах, поврежденных вследствие коксартроза, а также в физиогенных (дентин и эмаль зуба) и в патогенных (слюнные, зубные и почечные камни) биоминералах. Показано, что в «норме» костная ткань по минеральному составу наиболее близка к дентину и к зубным камням. Установлено, что в костных тканях человека при коксартрозе изменяется величина атомного соотношения Са/Р и содержание элементов: меди, олова, железа, марганца, стронция и хрома (в ряде случаев). Выявлена взаимосвязь концентрационных рядов микроэлементов Zn > Sr > Fe пораженной костной ткани с рядами для зубных и почечных камней.

Ключевые слова: элементный состав, физиогенная и патогенная минерализация, кости, коксартроз, спектроскопия. * 2

Введение

Костная ткань относится к высокоспециализированным физиогенным биоминералам и представляет собой биохимическую систему с многокомпонентным составом и сложным строением. Благодаря такой структурной организации данный органо-минеральный агрегат (далее - ОМА) обеспечивает нормальное течение обмена веществ (метаболизма) в организме человека в целом. При этом, находясь в постоянном контакте с биологическими жидкостями, костная ткань является местом депонирования макро- и микроэлементов [1-4]. Известно, что элементы не синтезируются в организме, а поступают с пищевыми продуктами, водой, воздухом и выполняют важную роль при костном ремоделировании [5]. Так, обобщая литературные данные о роли и степени участия микроэлементов в костеобразовании, их можно разделить на пять групп [6]: 1) активаторы костной минерализации - Cu, Mn, F, Si, V;

2) ингибиторы костной минерализации - Sr, Cd, Be, Fe; 3) активаторы костной резорбции - Mg, Zn, Ba; 4) элементы, принимающие участие в синтезе органических веществ - Zn, Be, Cu, Mn, Si; 5) активаторы костных клеток и ферментов - Mg, Zn, Be и их ингибиторы - Mo. Изменение содержания элементов в костной ткани (избыток или недостаток), прежде всего кальция и фосфора, приводит к нарушению метаболических процессов и является причиной различных костно-суставных заболеваний, патологий зубов и патогенного минералообразования - формирования слюнных, зубных, почечных и других камней [1; 7-9]. Однако, несмотря на значительное количество работ, в которых описана роль макро- и микроэлементов в физиологических процессах, до сих пор остаются дискуссионными данные по элементному составу костных тканей, в том числе в условиях развития патологии.

Актуальность данной проблемы возрастает и в связи с сохраняющейся сложной экологической обстановкой природных объектов (источников поступления элементов в организм человека) промышленных городов-мегаполисов, а именно: чрезмерным выбросом в атмосферу промышленных отходов, усиленной эксплуатацией почв, нерациональным использованием природных ресурсов и загрязнением водных источников. Так, на сегодняшний день вода многих рек России стала практически не пригодной для питья из-за превышающего ПДК содержания органических веществ синтетического происхождения (СПАВ, ПАУ, диоксины), нефти, нефтепродуктов и солей тяжелых металлов [10].

Цель работы: изучить особенности элементного состава костной ткани человека в «норме» по сравнению с патогенными ОМА и при костных заболеваниях (на примере коксартроза).

* Работа выполнена при частичной финансовой поддержке совета по грантам Президента Российской Федерации, проект № СП-933.2015.4, Российского фонда фундаментальных исследований (грант № 15-29-04839 офи_м).

© С.А. Герк, О.А. Голованова, 2015

40

С.А. Герк, О.А. Голованова

Объекты и методы исследования

Работа является продолжением исследования коллекции головок бедренных костей мужчин и женщин Омского региона в возрасте от 30 до 79 лет, удаленных вследствие коксартроза. В качестве контрольных проб костной ткани использованы непораженные образцы, которые извлекались в соответствии с Приказом Министерства здравоохранения СССР от 21 июля 1978 г. № 694 «Об утверждении инструкции о производстве судебно-медицинской экспертизы, положения о бюро судебно-медицинской экспертизы и других нормативных актов по судебно-медицинской экспертизе» (п. 2.24), федеральными законами от 12 января 1996 г. № 8-ФЗ «О погребении и похоронном деле» (п. 3) и от 31 мая 2001 г. № 73-ФЗ «О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации» (п. 14, 16). Для изучения динамики заболевания из бедренных головок получали по три горизонтальных среза: верхний, средний и нижний (порядок чередования приведен в направлении гиалиновый хрящ - бедренная кость), которые в дальнейшем анализировали в виде сухих порошкообразных проб. Усредненный состав разных пораженных пластинок сравнивали между собой и с контрольными образцами.

Содержание ионов макро- и микроэлементов в исследуемых образцах определяли с по-

мощью следующих спектральных методов анализа: ионов кальция - метод атомно-абсорбционной спектроскопии (ААС) на спектрометре AAS 1N по ГОСТ 26570-95 [11, с. 6-8]; общий фосфор - спектрофотометрический метод на автоматизированной линии «Contiflo» (ГОСТ 26657-97) [12, с. 10-13]; остальные элементы -метод масс-спектроскопии с индуктивно-связанной плазмой (ИСП-МС) на спектрофотометре ELAN 9000. Концентрации ионов элементов рассчитывали по градуировочным кривым с использованием стандартных растворов. Пределы обнаружения элементов методами спектрофотомерии и ААС составляли 10-6 масс. %, для ИСП-МС - 10-9 -10--13 масс. %.

Статистическую обработку полученных данных проводили методом Стьюдента для доверительной вероятности Р = 0,95, исходя из предположения об их распределении по нормальному закону (программный пакет Statistic Soft 2006).

Результаты и их обсуждение

Анализ литературных источников показал, что данные по количественному содержанию элементов в костной ткани достаточно противоречивы [1; 5; 7; 13-15], что обусловлено спецификой состава разных костей, их типом (табл. 1), возрастными особенностями человека (табл. 2), условиями среды проживания (климат, техногенное воздействие), характером питания и т. д.

Таблица 1

Содержание микроэлементов в разных костях здорового человека (в пересчете на сухой вес), -10-3 масс. % [7]

Исследуемая кость Mn Al Си Ti V

Малоберцовая 0,173 ± 0,030 0,113 ± 0,017 0,086 ± 0,030 0,062 ± 0,006 0,006 ± 0,004

Большеберцовая 0,184 ± 0,024 0,106 ± 0,024 0,084 ± 0,022 0,063 ± 0,006 0,006 ± 0,0007

Бедренная 0,220 ± 0,048 0,117 ± 0,034 0,040 ± 0,012 0,078 ± 0,010 0,006 ± 0,001

В среднем 0,192 ± 0,031 0,112 ± 0,016 0,070 ± 0,020 0,068 ± 0,008 0,006 ± 0,001

Таблица 2

Содержание микроэлементов в костной ткани в зависимости от их возраста, -10-4 масс. % [16, с. 40-60]

Микроэлементы Возраст костной ткани

эмбрионы от 16-17 до 21 недели от одного дня до 19 лет от 20 до 40 лет от 50 до 83 лет

Fe 215,8 146,2 132,8 119,3

Si 23,8 25,3 22,4 16,4

Al 5,96 6,45 7,42 8,09

Pb 4,48 3,03 7,09 1,04

Cu 2,86 1,64 1,42 1,24

Sr 1,27 2,73 1,48 6,78

Ti 1,01 1,13 1,02 1,25

Mn 0,99 1,08 1,17 1,24

Сравнительное исследование литературных и экспериментальных данных позволило установить, что основными макроэлементами кости, содержание которых составляет больше 10-3 % от массы тела, выступают кальций, фосфор, натрий, калий, магний; к элементам с массовым составом от 10-3 до 10-6 % относятся цинк, марганец, медь, никель и другие (табл. 3 и 4). Видно, что физиогенные ОМА (кости, зубы) по макроэлементному составу значительно отличаются от патогенных конкрементов фосфатного типа, встречающихся наиболее часто в

организме человека (зубные, слюнные и почечные камни). Интервал варьирования элементов в костной и зубной ткани более узкий, очевидно, вследствие закономерного характера формирования физиогенных биоминералов и меньшего влияния эндогенных факторов на данный процесс. Условно можно отметить, что костная ткань по минеральному составу (Са, Р, Na, К, Mg) наиболее близка к физиогенному ОМА - дентину и к патогенным биоминералам -зубным камням, что может указывать на сходство составов минералообразующих сред и/или механизмов их образования [17].

Элементный состав костной ткани человека в норме и при патологии

41

Таблица 3

Макроэлементный состав физиогенных (костной ткани, эмали и дентина зуба) и патогенных (зубных, слюнных, почечных камней) ОМА фосфатного типа, масс. %

Компонент Костная ткань Эмаль Дентин Зубные камни 9; 25] Слюнные камни [9] Почечные камни [26] г

[18; 19] [20; 21] [22] «норма» при коксартрозе [20; 21] [9; 23] [20; 21] [9; 24]

Ca/P 1,37 1,77 - 0,89 ± 0,04 1,81 ± 0,01 1,63 1,6-1,69 1,61 1,64-1,65 1,49-2,04 1,49-1,79 - 1,67

Na 0,70 0,90 0,50 0,44 ± 0,02 0,46 ± 0,14 0,50-0,90 0,25-0,90 0,60 0,7 0,37-0,88 0,28-0,95 0,1-2,43 -

Mg 0,55 0,72 0,30 0,19 ± 0,007 0,22 ± 0,01 0,07-0,44 0,25-0,56 1,23 0,8-1,0 0,32-0,50 0,20-0,24 1,5-84,58 -

K 0,03 0,03 0,20 0,058 ± 0,013 0,028 ± 0,013 0,001-0,008 0,05-0,30 0,05 0,02-0,04 0,11-0,13 0,03-0,12 0,07-4,05 -

Примечание: «-» - данные отсутствуют.

Таблица 4

Элементный состав физиогенных (костной ткани, эмали, дентина зуба) и патогенных (зубных, слюнных, почечных камней) ОМА фосфатного типа, -10-4 масс. %

Элемент Костная ткань Эмаль [18; 19] Дентин [18; 19] Зубные камни [9] Слюнные камни [9] Почечные камни [30]

[18; 19] [27] [14]1; [712 «норма» при коксартрозе

Fe 1000 - - 15 ± 1 170 ± 11 800 100 81,9 67,2 15,7-125,2

Cu 1000 18 4,00 ± 0,121 0,49 ± 0,13 1,6 ± 0,20 80 50 15,3 12,6 0,6-8,2

Ba 1000 - - 3,7 ± 0,8 2,1 ± 1,4 200 50 40,9 6,7 8-28,9

Pb 800 19 200 - - 1000 40 - 5,8 16,2-33

Si 500 - 300-4002 19 ± 3 27 ± 5 1400 100 - - -

Zn 400 140 60-1802 77 ± 1 81 ± 23 1200 700 251,9 29,7 185-857

Sr 200 - - 72 ± 3 61 ± 1 1400 200 88,2 36,3 115-555

Cr - - - 1,0 ± 0,3 18 - - 70,6 73,0 2-13,4

Mn - 100 2,20 ± 0,481 2,30-3,002 0,082 ± 0,047 1,4 ± 0,2 60 + 24,1 - 1,9-8

Ni - 70 - 4,4 ± 1,5 4,6 ± 1,0 10 + 16,0 4,7 3,4-17

Al - - 1,17 ± 0,341 130-18002 2,9 ± 1,1 4,4 ± 1,4 400 150 - - -

Ti - - 7,80 ± 0,101 0,99 ± 0,14 0,98 ± 0,42 - - 76,2 581,4 1,8-43

Sn - - - 0,04 ± 0,04 0,19 ± 0,10 90 + 1,5 0,58 0,5-2

As - 10-30 - - - - - 0,84 2,1 0,6-4,8

Ge - - - - - - - - - -

Ga - - - - - - - 3,0 2,8 0,4-0,6

Br - - - - - - - 34,7 38,6 0,8-2

I - - - - - - - 4,4 58,5 0,3-1013

Au - 1,00 - - - - - - - -

U - - - - - - - - - -

АЯ - 0,4 - - - 40 700 2,08 - 0,2-0,6

Rb - - - - - - - - - 0,3-4,7

Se - - - - - 20 + 0,87 2,8 0,6-0,8

In - - - - - - 0,532 - 0,2-0,5

Cd - - - - 70 - 0,63 - 0,3-0,5

ИЯ - 0,40 - - - - - - - -

Li - - - - - 10 - - - -

S - - - - - 50 - - - -

Te - - - - - - - 1,0 - 0,2-0,5

V - - - - - - - 42,7 289,6 2-7,2

Mo - - - - - - - 1,39 - 0,5-0,9

Rb - - - - - - - 1,35 - -

Cs - - - - - - - 0,96 0,5-0,8

Sb - - - - - - - 0,6 5,9 0,2-2,8

La - - - - - - - 7,6 6,3 0,2-4,5

Zr - - - - - - - 3,6 1,6 1,2-3,3

Ce - - - - - - - 30,1 1,93 1,1-1,9

Nb - - - - - - - 0,90 - 0,2-0,6

Y - - - - - - - 0,87 - 0,2-2

Примечание: «-» - данные отсутствуют; «+» - присутствуют в концентрациях менее 10-6 масс. %.

42

С.А. Герк, О.А. Голованова

Для Са/Р-коэффициента костной ткани, в отличие от стехиометричного гидроксилапатита (далее - ГА) и других физиогенных биоминералов (эмали и дентина), характерен широкий интервал варьирования значений, что можно объяснить разной степенью минерализации костей различных типов. Нами установлено, что для исследуемых костных образцов нижняя граница Са/Р составляет порядка 0,8. Такое отличие от литературных данных (табл. 3), по-видимому, обусловлено слабой минерализацией губчатой кости проб. Выявлено, что с увеличением степени поражения костных срезов (от нижнего к верхнему) уменьшается содержание ионов кальция и общего фосфора (рис. 1). Но поскольку количество фосфора по сравнению с кальцием понижается практически в два раза, величина атомного соотношения Са/ Р возрастает (табл. 3), что может быть обусловлено прежде всего изоморфными замещениями позиций ионов кальция катионами металлов, а также фосфатных тетраэдров карбонат- и другими ионами [17; 28]. Возможно, доминирующей заменой ионов в структуре костного апатита в данном случае является анионное замещение фосфатных тетраэдров, что является одной из причин снижения окристалли-зованности гидроксилапатита костных тканей [17].

Рис. 1. Содержание общего кальция

Как и в случае макроэлементного состава, содержание микроэлементов в костной ткани значительно отличается от патогенных ОМА (табл. 4). В состав патогенных биоминералов входит наибольшее число микроэлементов, что в очередной раз подтвер-

ждает спонтанный и физиологически неконтролируемый механизм их образования. Все элементы в патогенных конкрементах содержатся в меньшем количестве, чем в костях. В отличие от других физиогенных минералов, костная ткань по содержанию Pb, Si, Zn, Sr, Ag уступает только эмали. При этом в ней содержится больше меди (в 13 раз) и бария (в 5 раз). По сравнению с дентином данный биоминерал наиболее богат практически всеми микроэлементами, за исключением цинка и серебра.

Ряды ранжирования микроэлементов, содержание которых составляет 0,0050,2 масс. %, по увеличению их концентраций выглядят следующим образом (табл. 4) [7; 9; 14; 18; 19; 27; 29]: для костной ткани - Fe > > Cu > Ba > Pb > Si > Zn > Sr > Ni > Al > Mn; зубных камней - Zn > Sr > Fe > Ti > Cr; для слюнных камней - Ti > V > Cr > Fe > I; для почечных камней - Sr > Zn > Fe. Видно, что по сравнению с костной тканью в патогенных биоминералах число элементов в ряду, содержание которых в ОМА не менее 0,005 масс. %, уменьшается в 2 раза (для слюнных и зубных камней) и в 3 раза (для почечных камней). Остальные элементы в патогенных агрегатах представлены в меньшем количестве, чем в кости. Во всех рядах присутствует железо, в почечных и зубных образованиях в больших количествах содержится также Sr и Zn, а в слюнных и почечных появляются новые элементы Cr и Ti. Приведенные данные указывают на разную степень участия элементов в патогенной и физиогенной минерализации. Первостепенная роль в минерализации разного характера принадлежит железу, стронцию и цинку. В патогенных ОМА принимают участие микроэлементы, такие как Cr и Ti.

Головки бедренных костей исследуемой нами коллекции, в отличие от литературных данных, содержат микроэлементы в малых количествах (табл. 4). Так, концентрационные ряды элементов, содержание которых превышает 0,005 масс. %, состоят из двух и трех элементов: в «норме» - Zn > Sr и при коксартрозе - Zn > Sr > Fe. Такая последовательность элементов при повреждении костной ткани коррелирует с рядами для зубных и почечных камней, что может указывать на патологическое течение процесса минерализации костной ткани при коксартрозе.

Выявлено, что в пораженных верхних срезах костных тканей лиц первой и второй возрастных групп (30-49 и 50-59 лет) по сравнению с контрольными пробами повышено содержание ионов меди в 3 раза, олова в 4 раза, железа в 11 раз, марганца в 17 раз и хрома (в ряде образцов) в 18 раз (рис. 2). Также в отличие от «нормы» в поврежденных пробах можно отметить незначительное уменьшение количества ионов стронция.

Элементный состав костной ткани человека в норме и при патологии

43

Рис. 2. Содержание микроэлементов в «нормальной» и поврежденной костной ткани человека первой и второй возрастных групп

Следовательно, полученные результаты свидетельствуют о нарушении процессов костного ремоделирования при коксартрозе. С одной стороны, возрастает содержание элементов, оказывающих активирующее действие на костную минерализацию (Cu и Mn), с другой, изменяется количество микроэлементов, ускоряющих скорость костной резорбции (Fe и Sn). Завышенные концентрации токсичного элемента хрома в ряде образцов также указывают на разрушающий (дегенеративный) характер метаболизма при данном заболевании. Роль олова в костном обмене в настоящее время не изучена.

В образцах костных тканей лиц третьей и четвертой категорий (60-69 и 70-79 лет) определенных закономерностей по изменению содержания микроэлементов при патологии установить не удалось, что может быть связано с процессами старения костной ткани и наличием сопутствующих заболеваний в данном возрастном интервале.

Таким образом, в работе установлено, что при заболеваниях, обусловленных нарушением Са/Р обмена веществ, таких как коксартроз, в костных тканях человека изменяется содержание следующих элементов: меди, олова, железа, марганца, стронция и хрома (в ряде случаев). При данном повреждении выявлено увеличение значения Са/Р-коэффициента, в основном за счет уменьшения содержания общего фосфора.

В состав костной ткани, в отличие от патогенных ОМА, входит меньшее количество микроэлементов, содержание которых зависит от степени минерализации костного об-

разца. Выявлена взаимосвязь концентрационных рядов микроэлементов Zn > Sr > Fe пораженной костной ткани с рядами для зубных и почечных камней, что может указывать на патологическое течение костной минерализации.

Показано, что в условиях физиологической «нормы» костная ткань по минеральному составу наиболее близка к физиогенному ОМА - дентину и к патогенным биоминералам - зубным камням.

Полученные данные могут быть использованы при изучении процессов костной минерализации в модельных условиях с целью разработки эффективных лечебных и профилактических методов восстановления костных тканей при костно-суставных заболеваниях.

ЛИТЕРАТУРА

[1] Авицын А. П., Жаворонков А. А., Риш М. А., Строчкова Л. С. Микроэлементы человека. М., 1991. 496 с.

[2] Зацепин С.Т. Костная патология взрослых. М., 2001. 640 с.

[3] Лунева С. Н. Биохимические изменения в тканях суставов при дегенеративно-дистрофических заболеваниях и способы биологической коррекции : дис. ... д-ра биол. наук. Тюмень, 2003. 297 с.

[4] Ерохин А. Н., Исаков Б. Д., Накоскин А. Н. Особенности микроэлементного состава костной ткани при чрескостном дистракционном остеосинтезе методом Илизарова в условиях высокогорья (экспериментальное исследование) // Саратовский научно-медицинский журнал.

2014. № 10 (1). С. 119-123.

[5] Новиков М. И. Динамика накопления биогенных макро- и микроэлементов в костной ткани собак в постнатальном онтогенезе и в условиях чрескостного дистракционного остеосинтеза : дис. ... канд. биол. наук. Н. Новгород, 2008. 137 с.

[6] Лемешева С. А. Химический состав, свойства костного апатита и его аналогов : дис. ... канд. хим. наук. М., 2010. 177 с.

[7] Прохончуков А. А., Жижина Н. А., Тигранян Р. А. Гомеостаз костной ткани в норме и при экстремальных условиях. М., 1984. 200 с.

[8] Голованова О. А., Борбат В. Ф. Почечные камни. М., 2005. 171 с.

[9] Голованова О. А. Биоминералогия мочевых, желчных, зубных и слюнных камней из организма человека : дис. ... д-ра геол.-минерал. наук. Томск, 2009. 240 с.

[10] Александрова Т. В., Нахаева В. И. Генотоксический анализ водных проб естественного источника питьевой воды из реки Омь на генные и хромосомные мутации // Современные проблемы науки и образования. 2014. № 6. URL: http://www.science-education.ru/120-15369.

[11] ГОСТ 26570-95. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения кальция. М., 2000.

[12] ГОСТ 26657-97. Корма, комбикорма, комбикормовое сырьё. Метод определения содержания фосфора. М., 2000.

44

С.А. Герк, О.А. Голованова

[13] Накоскин А. Н. Возрастные изменения и половые различия биохимического состава костной ткани человека : дис. ... канд. биол. наук. Курган, 2004. 111 с.

[14] Lundager Madsen H. E., Abbona F., Barrese E. Effects of cadmium on crystallization of calcium phosphates // Crystal Research and Crystal Technology. 2004. Vol. 39. № 3. P. 235-239.

[15] Войнар А. О. Значение микроэлементов в организме человека и животных. М., 1955. 24 с.

[16] Энока P. M. Основы кинезиологии : пер. с англ. Киев : Олимпийская литература, 1998. 399 с.

[17] Гилинская Л. Г., Занин Ю. Н., Назьмов В. П. Типоморфизм парамагнитных радикалов CO2-, CO3- и CO33- в природных карбонатапатитах // Геология и геофизика. 2002. T. 43. № 3. С. 297303.

[18] Матвеева Е. Л. Биохимические изменения в синовиальной жидкости при развитии дегенеративно-дистрофических процессов в коленном суставе : автореф. дис. ... д-ра биол. наук. Тюмень, 2007. 24 с.

[19] Вербова А. Ф. Состояние костной ткани и кальций-фосфорного обмена у рабочих фосфорного производства // Казанский медицинский журнал. 2002. Т. 83. № 2. С. 148-150.

[20] Ньюман У, Ньюман М. Минеральный обмен кости / пер. с англ. О. Я. Терещенко, Л. Т. Туточ-киной ; под ред. Н. Н. Демина. М., 1961.270 с.

[21] Legeros R. Z. Calcium phosphates in oral biology and medicine. Karger, 1991. 221 p.

[22] Корж А. А, Белоус А. М., Панов Е. Я. Репаративная регенерация кости. М., 1972. 215 с.

[23] Пилат Т. Л. Зубной камень и его влияние на ткани пародонта // Стоматология. 1984. № 3. С. 88-90.

[24] Ткаленко А. Ф. Влияние физико-химических характеристик слюны, слюнных и зубных отложений на исход лечения больных слюннокаменной болезнью : автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2004. 26 с.

[25] Киселева Д. В. Особенности состава, структуры и свойств ряда фосфатных и карбонатных биоминералообразований : дис. ... геол.-минерал. наук. Екатеринбург, 2007. 197 с.

[26] LeGeros R. Z. Formation and transformation of calcium phosphates: relevance to vascular calcification // Zeitschrift fur Kardiologie. 2001. Supplement Band 90. Р. 116-124.

[27] Смолеговский А. М. История кристаллохимии фосфатов. М., 1986. 263 с.

[28] Баринов С. М., Комлев В. С. Биокерамика на основе фосфатов кальция. М., 2005. 204 с.

[29] Christoffersen M. R., Seierby N., Zunic T. B., Chris-toffersen J. Kinetics of dissolution of triclinic calcium pyrophosphate dehydrate crystals // Journal of Crystal Growth. 1999. Vol. 203. Р. 234-243.