Композиция для применения в косметическом средстве (варианты)
COMPOSITION FOR USE IN A COSMETIC PRODUCT (OPTIONS)

Изобретение предназначено для использования в косметических средствах, направленных на улучшение состояния кожи, для решения возрастных проблем после 30 лет (морщины, атоничность), а также для поддержания молодой кожи до 30 лет (придание сияния, тонуса).
Кожа является основным барьером, защищающим целостность организма, при этом она способна автономно синтезировать некоторые регуляторные вещества. С течением времени изменения в структурных единицах кожи происходят на всех уровнях. В молодом возрасте это менее заметно, потенциал кожи еще велик, функционал не нарушен, однако масса внешних (УФ-излучение, техногенное загрязнение, неправильно подобранный уход и др.) и внутренних факторов (гормональные изменения, фоновые воспалительные процессы, дисбаланс в поступлении питательных веществ с пищей и др.) с течением времени приводят к визуальным проявлениям, которые определяются как старение. Кожа теряет упругость, начинают появляться морщинки и пигментные пятна, происходит постепенное провисание овала лица. При глубоком исследовании структурных элементов кожи наблюдаются серьезные нарушения в функционировании внутриклеточных ферментативных систем, митохондрий (клеточная «электростанция»), эндоплазматического ретикулума (многофункциональный органоид), накапливаются повреждения в ДНК, нарушаются рецепторный отклик и синтез мембранных белков, окисляются липиды клеточных мембран и другие изменения. Внеклеточный матрикс также накапливает повреждения (сшивки белковых волокон), синтез новых и ферментативная деградация старых структур снижаются - все это приводит к менее плотной и менее функциональной среде. Весь накопленный калейдоскоп несогласованностей открывает необходимость дополнительного регулирования процессов в коже с помощью косметических продуктов.
-6
-6
Было проведено поэтапное изучение существующих исследований и обнаружено, что [7-(диметиламино)фенотиазин-3-илиден]-диметилазания хлорид (метиленовый синий) в концентрации от 0,1⋅10 М до 1,0⋅10 М обладает заметной биологической активностью, антиоксидантным действием при тестах на клеточных культурах и оказывает известное антисептическое действие.
Было показано в экспериментах на искусственной модельной коже и на фибробластах, взятых у доноров старше 80 лет, что применение метиленового синего стимулирует клеточный рост и пролиферацию (данные получены из анализа фибробластов) в течение 4-х недель (с еженедельной прогрессией). Также наблюдалось снижение окислительного спровоцированного стресса: метиленовый синий значительно снижал образования свободных форм кислорода и, как следствие, выживаемость клеток повышалась. Помимо внутриклеточного влияния, был замечен значительный рост синтеза компонентов внеклеточного матрикса (коллаген и эластин), а также увеличился контрольный синтез IGF1. Следует отметить, что при этом не происходило влияния на степень увлажненности (влагосодержания) в коже.
Более того, эксперимент на фибробластах от пожилых доноров показал снижение экспрессии генов, ассоциируемых с сенесцентными клетками, которые служат показателями клеточного старения - бета-галактозидазы и р16. Также метиленовый синий вызывает активацию белка NRF2, обуславливающего в том числе антиоксидантную защиту, а также других генов антиоксидантной защиты GCLC, GSR и GPX7 (RU 2 742 964 C2).
В рассматриваемом исследовании эффективность метиленового синего сравнивалась с действием N-ацетилцистеина и рапамицина [US 2017 / 0246177 A1].
Здесь необходимо отметить и осветить химическую роль метиленового синего: краситель, обладающий окислительно-восстановительными свойствами. В водном растворе окисленная форма метиленового синего имеет ярко-синий цвет, однако восстановленная форма в растворе бесцветна и прозрачна. Процесс восстановления метиленового синего легко определяется визуально по обесцвечиванию раствора и переходу в лейкоформу (бесцветную). Обесцвечивание происходит за различные временные отрезки, что зависит от концентрации и вида восстанавливающего вещества. Данный эффект можно фиксировать также инструментально при помощи спектрфотометрии.
Известно исследование, в котором был проведен анализ возможных восстановителей для перевода метиленового синего в бесцветную лейкоформу. Цель данного исследования имеет биологически важное значение. Дело в том, что согласно данному исследованию E.Wulfert, A.Atkinson, A.M. Salomon [WO 02/04025 A1], окисленная форма метиленового синего становится не токсичной и позитивно биологически активной только после восстановления до лейкоформы антиоксидантной системой живого организма. Таким образом живые структуры изначально претерпевают окислительный стресс от применения метиленового синего, после восстановления которого возможно наблюдать позитивные эффекты. В случае накожного применения предполагается, что принцип сохраняется.
Также было показано в исследовании влияние метиленового синего на протекание болезни Альцгеймера и его способность пенетрировать через гемато-энцефалический барьер. Однако есть только одно веское объяснение подобного: метиленовый синий проникает уже в восстановленной форме - лейкоформе - в силу своей большей липофильности. В связи с тем, что клеточные мембраны имеют единую природу независимо от локализации клеточных единиц, принцип большего липофильного сродства лейкометиленового делает его более эффективным и перспективным для применения и в косметических продуктах.
Отсюда следует, что восстановленная форма метиленового синего (бесцветная лейкоформа) обладает активностью, не дестабилизирующей антиоксидантную систему живых тканей. В связи с этим было важно подобрать корректный восстановитель, чтобы перевести окисленную форму в восстановленную. Желательно, чтобы данное вещество также обладало биологической активностью при топическом применении.
Были рассмотрены следующие варианты: аскорбиновая кислота, N-ацетил-L-цистеин и двухкомпонентные комбинации с раствором аскорбиновой кислоты. Были оценены влияние уровня рН и комбинации восстановителей на скорость восстановления и стабильность восстановленной лейкоформы.
В исследовании биологической активности метиленового синего [US 2017 / 0246177 A1] его эффективность сравнивалась с действием N-ацетилцистеина, известного также своими антиоксидантными свойствами в живом организме, так как он является прекурсором глютатиона, определяющим окислительно-восстановительные характеристики внутриклеточной среды. Однако, как показали E.Wulfert, A.Atkinson, A.M. Salomon [WO 02/04025 A1], данное вещество обладает восстанавливающей способностью и в прямых окислительно-восстановительных реакциях, являясь донором электронной пары.
Данное исследование обнаружило, что все перечисленные выше исследованные восстановители эффективны, однако комбинация аскорбиновая кислота+N-ацетил-L-цистеин не только быстро восстанавливает синюю форму, но и образуют стабильную во времени лейкоформу (тестирование на воздухе в течение 10 месяцев с регулярной визуальной оценкой). Раствор метиленового синего в той же концентрации будет сохранять стойкое голубое/синее окрашивание на воздухе.
Исходя из биологической рациональности и механизмов антиоксидантной активности, для дальнейшего изучения нами была выбраны комбинации метиленового синего и N-ацетил-L-цистеина, метиленового синего и N-ацетил-L-цистеина+аскорбиновая кислота.
Были протестированы растворы с соотношением N-ацетил-L-цистеина и метиленового синего от 2:1 до 2000:1. При добавлении аскорбиновой кислоты ее соотношение с N-ацетил-L-цистеином варьировалось от 0,5:1 до 5:1. Данные сочетания быстро и эффективно восстанавливали метиленовый синий до бесцветной формы независимо от уровня рН (были протестированы при рН 3,7 и 9,8).
По результатам исследований были составлены косметические композиции (сыворотки), в состав которых были внесены комбинации с выше указанными веществами: метиленовый синий и N-ацетил-L-цистеин, метиленовый синий и N-ацетил-L-цистеин и аскорбиновая кислота.
Диапазон тестируемых концентраций:
метиленового синего составляла
от 0,00001 масс.% до 0,001 масс.%;
N-ацетил-L-цистеин
- от 0,00002% до 15%;
аскорбиновая кислота
- от 0,00001% до 35%.
Предлагаются два варианта композиции для применения в косметическом средстве.
Первый вариант композиции для применения в косметическом средстве включает, масс.%:
метиленовый синий
0,00001 - 0,001,
N-ацетил-L-цистеин
0,00002 - 15,
вспомогательные вещества
0 - 9,5,
вода
84,999 - 99,99997.
Второй вариант композиции для применения в косметическом средстве включает, масс.%:
метиленовый синий
0,00001 - 0,001,
N-ацетил-L-цистеин
0,00002 - 15,
аскорбиновая кислота
0,00001 - 35,
вспомогательные вещества
0 - 9,5,
вода
54,999 - 99,99996.
Оптимальным рН является 5,3 - 5,7, но технический результат будет достигаться и при других значениях, хотя эффективность может и несущественно снизиться.
Техническим результатом является получение стабильной восстановленной формы метиленового синего (лейкоформы), которая обладает более выраженной активностью в сравнении с не восстановленной. Применение композиций в косметических средствах обеспечивает выравнивание микрорельефа и общего тона кожи, сокращение глубины мелких морщинок, уплотнение кожи.
Комбинации веществ метиленового синего с N-ацетил-L-цистеином, аскорбиновой кислотой были введены в состав вариантов гидрогелевой сыворотки и переданы на тестирование различным группам панелистов в возрасте от 23 до 55 лет для получения субъективной оценки состояния кожи.
Косметическая композиция может содержать по меньшей мере одну добавку, например, ретинол, ретинальдегид, различные формы аскорбиновой кислоты, церамиды (NP, AP, EOP), альфа-липоевую кислоту, олеаноловую кислоту, экстракты магнолии, тимьяна, лакричника, метилсульфонилметан, салициловую кислоту, азелаиновую кислоту, ниацинамид, альфа-гидроксикислоты.
Следует отметить, что технический результат достигается наличием в композиции метиленового синего в сочетании с N-ацетил L-цистеином и, во втором варианте, также с аскорбиновой кислотой в определенном соотношении.
Технический результат достигается и при отсутствии вспомогательных веществ, но наличие вспомогательных веществ может его незначительно модулировать и усиливать.
Ниже приводятся примеры применения предлагаемых вариантов композиции.
Пример 1.
Состав (масс.%):
Вода
91,9995
Изопентилдиол
2
N-ацетил-L-цистеин
2
Метиленовый синий
0,0005
Ксантановый гум
0,5
Метилсульфонилметан
2
Фитиновая кислота
0,2
Гидроксид натрия
0,3
Феноксиэтанол, этилгексилглицерин
1
рН=
5,7
При регулярном применении сыворотки (2 раза в день) в течение 28 дней наблюдалось выравнивание микрорельефа и общего тона кожи, сокращение глубины мелких морщинок. Все тестировавшие (17 человек) отметили уплотнение кожи, улучшение овала лица.
Пример 2.
Также были проведены тестирования (14 чел.) другого состава, также показавшего визуальный эффект.Тон кожи стал более однородным, улучшился рельеф и появилось общее сияние.
Состав (масс.%):
Вода
90,9993
Изопентилдиол
2
N-ацетил L-цистеин
2
Метиленовый синий
0,0007
Ксантановый гум
0,5
Метилсульфонилметан
2
Бетаин
1
Фитиновая кислота
0,2
Гидроксид натрия
0,3
Феноксиэтанол, этилгексилглицерин
1
рН=
5,5
Пример 3.
Дополнительно были проведены тестирования (10 чел.) другого состава. Эффект был схожим с предыдущими вариантами: улучшение тона, уплотнение кожи, сокращение морщинок в области «гусиных лапок».
Вода
90,4997
Изопентилдиол
1
Метиленовый синий
0,0003
N-ацетил-L-цистеин
5
Гидроксипропил гуар
0,5
Бетаин
1
Экстракт лакричника
0,5
Фитиновая кислота
0,2
Гидроксид натрия
0,3
Феноксиэтанол, этилгексилглицерин
1
рН=
5,3
Пример 4.
Дополнительно были проведены тестирования (7 чел.) еще одного состава. Все панелисты отметили выравнивание цвета лица, улучшение тургора и общего состояния кожи (увлажненности, плотность).
Вода
87,4995
Изопентилдиол
4
Аскорбиновая кислота
2
Метиленовый синий
0,0005
N-ацетил-L-цистеин
1
Гидроксипропил гуар
0,6
Бетаин
1
Метилсульфонилметан
2
Экстракт магнолии
0,5
Фитиновая кислота
0,2
Гидроксид натрия
0,2
Феноксиэтанол, этилгексилглицерин
1
рН=
5,5
Было показано, что все комбинации веществ обладают выраженным эффектом разглаживания рельефа, улучшения тонуса, снижения пигментации и заметного уплотнения кожи. Тестирование длилось 4 недели. Наличие вспомогательных веществ (которые могут быть различными) может незначительно усиливать положительные эффекты, но не оказывает на них существенного влияния.
Также сыворотка с комбинацией метиленового синего и N-ацетил-L-цистеина была отдельно передана группе из 5 женщин-панелистов (возраст 27 - 40 лет) для сравнения с одиночным применением метиленового синего в составе продукта: на одну часть лица наносился продукт с исследуемыми веществами, на другую сыворотка с метиленовым синим в окисленной форме (сыворотка голубого цвета) Для исключения влияния субъективности, связанной с цветовым отличием, в сыворотку с лейкометиленовым синим (без N-ацетил-L-цистеина) был введен синтетический краситель в микродозе. Тестирование длилось 2 недели. Было показано визуально заметное отличие в состоянии кожи: сторона лица, испытывавшая лейкоформу метиленового синего, спустя две недели применения имела больше сияния и тургора и менее выраженные морщинки в области «гусиных лапок».
Состав исследуемой активной сыворотки (пример 5):
Вода
88,4995
Изопентилдиол
2
N-ацетил-L-цистеин
2
Метиленовый синий
0,0005
Ксантановый гум
0,6
Метилсульфонилметан
2
Экстракт магнолии
0,5
Фитиновая кислота
0,2
Гидроксид натрия
0,18
Краситель CI 42090
0,00007
Феноксиэтанол, этилгексилглицерин
1
рН=
5,3
Пример 6.
Состав (масс.%):
Вода
99,99997
N-ацетил-L-цистеин
0,00002
Метиленовый синий
0,00001
рН=
5,5
При регулярном применении лосьона (2 раза в день) в течение 28 дней наблюдалось выравнивание микрорельефа и общего тона кожи, сокращение глубины мелких морщинок. Все тестировавшие (17 человек) отметили уплотнение кожи, улучшение овала лица.
Пример 7.
Состав (масс.%):
метиленовый синий
0,00001,
N-ацетил-L-цистеин
0,00002,
аскорбиновая кислота
0,00001,
вода
99,99996,
при рН
5,5.
При регулярном применении лосьона (2 раза в день) в течение 35 дней наблюдалось выравнивание микрорельефа и общего тона кожи, сокращение глубины мелких морщинок. Все тестировавшие (15 человек) отметили уплотнение кожи, улучшение овала лица.
Пример 8
Состав, масс.%:
Вода
89,4995
Изопентилдиол
3
Метиленовый синий
0,0005
N-ацетил-L-цистеин
1
Гидроксипропил гуар
0,6
Бетаин
1
Метилсульфонилметан
2
Экстракт магнолии
1
Фитиновая кислота
0,7
Гидроксид натрия
0,2
Феноксиэтанол, этилгексилглицерин
1
рН=
5,5
При регулярном применении сыворотки (2 раза в день) в течение 28 дней наблюдалось выравнивание микрорельефа и общего тона кожи, сокращение глубины мелких морщинок. Все тестировавшие (17 человек) отметили уплотнение кожи, улучшение овала лица.
Пример 9.
Состав, масс.%:
метиленовый синий
0,001,
N-ацетил-L-цистеин
15,
вода 84,999
- 99,99997,
рН
5,4.
При регулярном применении лосьона (2-3 раза в день) в течение 24 дней наблюдалось выравнивание микрорельефа и общего тона кожи, сокращение глубины мелких морщинок. Все тестировавшие (10 человек) отметили уплотнение кожи, улучшение овала лица.
Пример 10
Состав, масс.%:
метиленовый синий
0,001,
N-ацетил-L-цистеин
15,
аскорбиновая кислота
30,
вода
54,999,
рН
5,5.
При регулярном применении лосьона (2-3 раза в день) в течение 31 дня наблюдалось выравнивание микрорельефа и общего тона кожи, сокращение глубины мелких морщинок. Все тестировавшие (17 человек) отметили уплотнение кожи, улучшение овала лица.
Пример 11
Состав, масс.%:
метиленовый синий
0,001,
N-ацетил-L-цистеин
10,
аскорбиновая кислота
35,
вода
54,999,
рН
5,5.
При регулярном применении лосьона (2-3 раза в день) в течение 31 дня наблюдалось выравнивание микрорельефа и общего тона кожи, сокращение глубины мелких морщинок. Все тестировавшие (25 человек) отметили уплотнение кожи, улучшение овала лица.
Ключевое значение имеет факт получения стабильной восстановленной формы метиленового синего (лейкоформы), которая обладает более выраженной активностью в сравнении с не восстановленной. Данное преимущество объяснимо как и более липофильной природой вещества, так и биохимией процессов, протекающих в коже (исключение первичного окислительного стресса).
Следует отметить, что исследуемые вещества безопасны и разрешены для применения в составе косметических продуктов согласно техническому регламенту Таможенного союза 009/2011 «О безопасности парфюмерно-косметической продукции».