БЕЛКИ, СВЯЗЫВАЮЩИЕ РЕЦЕПТОР ПРОЛАКТИНА, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Связывающий белок, содержащий антигенсвязывающий домен, причем указанный связывающий белок способен связывать рецептор пролактина (PRLR), указанный антигенсвязывающий домен содержит по меньшей мере одну CDR, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:97, 98, 99, 100, 101, 102, 151 и 152.
2. Связывающий белок по п.1, где указанная по меньшей мере одна CDR содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:40-42, 46, 47, 49-51, 56-58, 62, 63, 65-67, 71-73, 77, 79-81, 85-87, 92-94, 149 и 150.
3. Связывающий белок по п.1 или 2, где указанный связывающий белок содержит по меньшей мере 3 CDR.
4. Связывающий белок по любому из пп.1-3, где указанные по меньшей мере 3 CDR представляют собой набор CDR вариабельных доменов тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 40, 41 и 42; SEQ ID NO: 46, 47 и 42; SEQ ID NO: 56, 57 и 58; SEQ ID NO: 62, 63 и 58; SEQ ID NO: 71, 72 и 73; SEQ ID NO: 71, 77 и 73; SEQ ID NO: 85, 86 и 87; SEQ ID NO: 149, 150 и 87.
5. Связывающий белок по любому из пп.1-3, где указанные по меньшей мере 3 CDR представляют собой набор CDR вариабельных доменов легкой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 49, 50 и 51; SEQ ID NO: 65, 66 и 67; SEQ ID NO: 79, 80 и 81; и SEQ ID NO: 92, 93 и 94.
6. Связывающий белок по п.5, дополнительно содержащий набор CDR вариабельных доменов тяжелой цепи, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 40, 41 и 42; SEQ ID NO: 46, 47 и 42; SEQ ID NO: 56, 57 и 58; SEQ ID NO: 62, 63 и 58; SEQ ID NO: 71, 72 и 73; SEQ ID NO: 71, 77 и 73; SEQ ID NO: 85, 86 и 87; SEQ ID NO: 149, 150 и 87.
7. Связывающий белок по п.6, где указанные по меньшей мере два набора вариабельных доменов CDR выбраны из группы, состоящей из:
либо из наборов CDR вариабельных доменов тяжелой цепи SEQ ID NO: 40, 41 и 42 или SEQ ID NO: 46, 47 и 42, и набора CDR вариабельных доменов легкой цепи SEQ ID NO: 49, 50 и 51;
либо из наборов CDR вариабельных доменов тяжелой цепи SEQ ID NO: 56, 57 и 58 или SEQ ID NO: 62, 63 и 58, и набора CDR вариабельных доменов легкой цепи SEQ ID NO: 65, 66 и 67;
либо из наборов CDR вариабельных доменов тяжелой цепи SEQ ID NO: 71, 72 и 73 или SEQ ID NO: 71, 77 и 73, и набора CDR вариабельных доменов легкой цепи SEQ ID NO: 79, 80 и 81; и
либо из набора CDR вариабельных доменов тяжелой цепи SEQ ID NO: 85, 86 и 87 или SEQ ID NO: 149, 150 и 87, и набора CDR вариабельных доменов легкой цепи SEQ ID NO: 92, 93 и 94.
8. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, дополнительно содержащий акцепторную каркасную область человека.
9. Связывающий белок по п.8, где указанная акцепторная каркасная область человека содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:14-38.
10. Связывающий белок по п.8, где указанная акцепторная каркасная область человека содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену каркасной области, где аминокислотная последовательность каркасной области по меньшей мере на 65% идентична последовательности указанной акцепторной каркасной области человека и содержит по меньшей мере 70 аминокислотных остатков, идентичных указанной акцепторной каркасной области человека.
11. Связывающий белок по п.10, где указанная акцепторная каркасная область человека содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену каркасной области в ключевом остатке, причем указанный ключевой остаток выбран из группы, состоящей из:
остатка, соседнего с CDR;
остатка участка гликозилирования;
редкого остатка;
остатка, способного взаимодействовать с PRLR человека;
остатка, способного взаимодействовать с CDR;
канонического остатка;
контактного остатка между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи;
остатка в зоне Vernier; и
остатка в области, которая перекрывается между определенной по Chothia CDR1 вариабельной областью тяжелой цепи и определенной по Kabat каркасной областью первой тяжелой цепи.
12. Связывающий белок по п.10, где указанный ключевой остаток выбран из группы, состоящей из 2L, 43L, 48L, 58L, 64L, 87L, 27H, 48H, 60H, 63H, 64H, 65H, 67H, 69H, 71H, 73H, 75H, 93H.
13. Связывающий белок по п.12, где связывающий белок представляет собой консенсусный вариабельный домен человека.
14. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где указанный связывающий белок содержит по меньшей мере один вариабельный домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 39; SEQ ID NO: 43; SEQ ID NO: 44; SEQ ID NO: 45; SEQ ID NO: 55; SEQ ID NO: 59; SEQ ID NO: 60; SEQ ID NO: 61; SEQ ID NO: 70; SEQ ID NO: 74; SEQ ID NO: 75; SEQ ID NO: 76; SEQ ID NO: 84; SEQ ID NO: 88; SEQ ID NO: 89; SEQ ID NO: 90; SEQ ID NO: 121; SEQ ID NO: 122 и SEQ ID NO: 123.
15. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где указанный связывающий белок содержит два вариабельных домена, где указанные два вариабельных домена имеют аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из:
одной из SEQ ID NO: 39; SEQ ID NO: 43; SEQ ID NO: 44 или SEQ ID NO: 45; и одной из SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 53 или SEQ ID NO: 54;
одной из SEQ ID NO: 55; SEQ ID NO: 59; SEQ ID NO: 60 или SEQ ID NO: 61; и одной из SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 68 или SEQ ID NO: 69;
одной из SEQ ID NO: 70; SEQ ID NO: 74; SEQ ID NO: 75 или SEQ ID NO: 76; и одной из SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 82 или SEQ ID NO: 83; и
одной из SEQ ID NO: 84; SEQ ID NO: 88; SEQ ID NO: 89; SEQ ID NO: 90; SEQ ID NO: 121; SEQ ID NO: 122 или SEQ ID NO: 123; и одной из SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 95 или SEQ ID NO: 96.
16. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где указанный связывающий белок содержит по меньшей мере один вариабельный домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 48; SEQ ID NO: 52; SEQ ID NO: 53; SEQ ID NO: 54; SEQ ID NO: 64; SEQ ID NO: 68; SEQ ID NO: 69; SEQ ID NO: 78; SEQ ID NO: 82; SEQ ID NO: 83; SEQ ID NO: 91; SEQ ID NO: 95 и SEQ ID NO: 96.
17. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где указанный связывающий белок содержит последовательность тяжелой цепи и последовательность легкой цепи, выбранные из группы, состоящей из:
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 124; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 125;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 124; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 126;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 124; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 127;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 124; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 128;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 125;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 126;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 127;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 128;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 130; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 125;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 130; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 126;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 130; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 127;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 130; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 128;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 131; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 132;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 131; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 133;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 131; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 134;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 135; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 132;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 135; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 133;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 135; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 134;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 136; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 132;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 136; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 133;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 136; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 134;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 137; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 138;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 137; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 139;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 137; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 140;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 141; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 138;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 141; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 139;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 141; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 140;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 142; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 138;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 142; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 139;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 142; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 140;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 143; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 144;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 143; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 145;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 143; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 146;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 144;
(ii) тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 145;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 146;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 148; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 144;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 148; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 145;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 148; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 146;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 153; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 139;
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 154; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 139; и
тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155; и легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 139.
18. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где связывающий белок связывает лиганд-связывающий домен D1 PRLR.
19. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где связывающий белок ингибирует связывание пролактина с PRLR.
20. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где связывающий белок способен модулировать биологическую функцию PRLR.
21. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где связывающий белок способен нейтрализовывать PRLR.
on
2
-1
-1
3
-1
-1
4
-1
-1
5
-1
-1
6
-1
-1
22. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где указанный связывающий белок имеет константу скорости ассоциации (K) с PRLR, выбранную из группы, состоящей из: по меньшей мере приблизительно 10Mс; по меньшей мере приблизительно 10Mс; по меньшей мере приблизительно 10Mс; по меньшей мере приблизительно 10Mс; и по меньшей мере приблизительно 10Mс; при измерении с использованием поверхностного плазмонного резонанса.
23. Связывающий белок по любому из предшествующих пунктов, где указанный связывающий белок имеет константу скорости диссоциации (K
) в отношении PRLR, выбранную из группы, состоящей из: не более чем приблизительно 10
с
; не более чем приблизительно 10
с
; не более чем приблизительно 10
с
; и не более чем приблизительно 10
с
, при измерении с использованием поверхностного плазмонного резонанса.
off
-3
-1
-4
-1
-5
-1
-6
-1