Изучение антибиотикорезистентности некоторых пробиотических штаммов

Изучение антибиотикорезистентности некоторых пробиотических штаммов

Е.С.Филиппова, Н.А.Забокрицкий, А.В.Молдованов

Институт иммунологии и физиологии УрО РАН, Екатеринбург Уральская государственная медицинская академия, Екатеринбург

В последнее время отмечено увеличение популяций антибиотикорезистентных культур лактобактерий и сенной палочки, так как популяризация антибактериальной терапии среди населения способствует отбору и циркуляции резистентных форм микроорганизмов. Обычно процедура мониторинга основана на анализе антибиотикограмм исследуемых культур по единой методике. На сегодняшний день такой методикой является рекомендация NCCLS - Национального комитета по клиническим лабораторным стандартам США. Согласно данным рекомендациям, чувствительность сначала определяют диско-диффузионным методом на чашках с агаром, затем определяют минимальную подавляющую концентрацию (МПК) макро- и микрометодом с помощью серийных разведений.

Мониторинг антибиотикорезистент-ности штаммов бацилл и молочнокислых бактерий позволяет получить сведения о локальном уровне устойчивости исследуемых производственных штаммов к наиболее распространенным антибиотикам с последующим обоснованием конструирования на их основе бактерийных препаратов с возможностью применения в процессе этиотропной антибактериальной терапии.

На сегодняшний день активность различных антибактериальных соединений в отношении бацилл и лактобацилл изучена мало, но тем не менее в последнее время отмечено увеличение популя-

ций антибиотикорезистентных штаммов. Вопрос этот чрезвычайно актуален, так как эти микроорганизмы входят в состав препаратов, предназначенных для лечения кишечных инфекций и дисбактериозов различных полостей. Использование пробиотиков на основе антибиотикорезистентных штаммов в сочетании с антибиотиками при комплексной терапии целого ряда заболеваний позволило бы составить принципиально новые тактические схемы лечебной коррекции и профилактики дисбиотических состояний.

Цель. Изучить антибиотикоустой-чивость штаммов микроорганизмов-пробионтов, наиболее широко применяемых в конструировании пробиотических и эубиотических препаратов.

Материалы и методы

Для определения антибиотикорези-стентности на основании репрезентативной выборки, согласно уровню антагонистической активности, было отобраны следующие штаммы: Bacillus subtilis 59Т (В-9907), Lactobacillus plantarum 8P-A3 и Lactobacillus acidophilus 100-АШ. Все штаммы депонированы во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов.

Чувствительность пробиотиче-

ских штаммов к антибиотикам изучали диско-диффузным методом (ДДМ) при использовании стандартных дисков, пропитанных антибиотиками (М. О.

Биргср, 1982; Меньшикова В. В., Воро- Результаты и их обсуждение

паева С. Д., 1987). Сравнительное изучение резистентности пробиотических Результаты представлены в таблице.

штаммов осущетсвляли к ряду из 23 анТ аблица

Антибиотикорезистентность исследуемых штаммов. Зона задержки роста микроорганизмов-пробионтов, мм

Штамм Антибиотик Пенициллины Цефолоспо- рины ы л о * S н е е ы д и л О р к а Аминоглико- зиды ы н и л к S а р т £ Синтетические проти-вомикроб-ные ы н а р > fr о р т и X

н и л л s и н е с н и л л и и п м < н и л л s а о * О н и л л и ц s н е \o р а м е н Ф с и м S м и $ а h— о fr е н и л о CO CO fr е м и д и со СО т fr е м и п Ф fr е н и т е ц S 2 о в е Л н и ц и о О СІ т и р О н е п о Сі  а Стрептомицин н и ц и 2 о е І н и ц и 2 С0 т н £ н и ц и 2 С0 р о £ н и ц и 2 а н а н и л  и и £ о 1=1 н и ц а $ о fr о в е Л н и ц а $ о л fr о н и ц и 2 2 н и Л н и лио 0 р т и 1 н о д и л О з а р у Ф

B. subtilis 59Т 8 ї6 - - - її ї9 - - ї0 ї2 ї6 її 9 ї0 9 ї2 ї8 - - ї2 + +

L. plantarum 8P-A3 + 23 + + 22 + ї2 8 3 29 ї8 20 + ї4 + + + ї7 - ї5 28 4 +

L. acidophilus ї00-АШ + Зї + + 30 + + + їЗ ї9 ї4 ї7 + її + + + 2ї - 25 їЗ + +

Примечание: «+» - штамм микроорганизма - пробионта устойчив к воздействию антибиотика в терапевтической концентрации (нет задержки роста исследуемого штамма).

«-» - штамм микроорганизма — пробионта неустойчив к воздействию антибиотика в терапевтической концентрации (нет роста исследуемого штамма).

Резистентными считали штаммы, зона задержки роста которых составляла 0-5 мм, малочувствительными - 6-10 мм, чувствительными - 11-20 мм, высокочувствительными - более 20 мм.

тибиотиков и синтетических противо-микробных средств (группы фторхино-лонов и нитрофуранов) позволило выявить значительные межштаммовые различия. Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием t-критерия Стьюдента в программном пакете Microsoft office -Excel 2003. Различия считали достоверными при p<0,05.

Выводы

На основании результатов проведенных исследований по изучению ан-тибиотикорезистентности пробиотических штаммов можно сделать следующие вывод, что наибольшей антибиоти-коустойчивостью обладают штаммы Ь. рІаШагит 8Р-АЗ и Ь. acidophilum 100-АШ к препаратам пенициллинового ряда (кроме ампициллина), аминогликозидам (кроме неомицина), цефотаксиму и фу-

разолидону. Наименьшей антибиотико-устойчивостью обладает штамм Bacillus subtilis 59Т (В-9907).

Таким образом, эволюционно закрепившаяся природная резистентность микроорганизмов-пробионтов к антибиотикам является важным фактором при отборе культур для создания и промышленного производства про- и эубио-тиков. Анализируя литературные данные

и результаты собственных исследований, можно сделать выводы, что устойчивость бактерий к антибиотикам является характеристическим признаком конкретного штамма микроорганизма. Данные анти-биотикорезистентности необходимо обязательно учитывать при отборе штаммов для конструирования препаратов про-, эуб- и синбиотиков, а также биологически активных пищевых добавок.

Особенности воспалительных изменений мокроты у курильщиков и при отказе от курения

А.Л.Хохлов, Н.В.Смирнова

Кафедра клинической фармакологии Ярославской государственной медицинской академии, Ярославль, Россия

Курение табака является одной из актуальных проблем здравоохранения. Атака табачного дыма и его составляющих приводит к развитию воспаления слизистой оболочки дыхательных путей, нарушением мукоцилиарного клиренса и ограничению воздушного потока, что приводит к развитию глубокоинвалиди-зирующего заболевания - ХОБЛ. Изучение механизмов ее развития привело к тому, что первым шагом в лечении должен быть отказ от курения.

Цели работы. 1. Оценить особенности реологических свойств мокроты и ее микробиологических характеристик у курильщиков и при отказе от курения на основе клинико-инструментальных и лабораторных показателей.

2. Провести комплексное клиническое обследование курильщиков, включающее общеклинические, инструментальные и лабораторные методы исследования.

3. Оценить влияние табачного дыма на изменения реологических свойств мо-

кроты и выраженности ее воспалительных характеристик.

4. Оценить влияние различных вариантов бронхолитической терапии на улучшение симптоматики, воспалительных изменений мокроты при отказе от курения.

Материалы и методы

Обследовано 100 курящих пациентов, находящихся на отказе от курения. Контрольная группа - 20 практически здоровых лиц (никогда не курили), 30 - курильщиков, не бросающих курить и получающих бронхолитическую терапию. В исследование включены пациенты :73 мужчины и 22 женщины в возрасте от 17 до 73 лет (в среднем 45 лет), со стажем курения в среднем 23 пачек/лет и клинически подтвержденным диагнозом: Хронический бронхит, ХОБЛ легкой, средней и тяжелой степени. Проведено открытое рандомизированное сравнительное исследование. Рандомизация больных методом случайной выборки на 2