Адренергические механизмы регуляции функций фагоцитирующих клеток периферической крови крыс при остром стрессе

Медицинская Иммунология 2002, Т. 4, № 1, стр 29-36 © 2002, СПб РО РААКИ

Оригинальные статьи

АДРЕНЕРГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ ФУНКЦИЙ ФАГОЦИТИРУЮЩИХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ КРЫС ПРИ ОСТРОМ СТРЕССЕ

Шилов Ю.И., Орлова Е.Г.

Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, Пермь

Резюме. Исследовано влияние блокады (3-адренергических рецепторов в условиях острого стресса на функции фагоцитирующих клеток у крыс. Животные 1-й группы подвергнуты острому стрессу. Крысам 2-й группы на фоне тех же воздействий вводили Р-адреноблокатор пропранолол. Статистически достоверное повышение абсолютных показателей кислородозависимой микробицидности фагоцитирующих клеток в НСТ-тесте в 1-й группе отмечено на 3-и и 5-е сутки после стрессорного воздействия. Максимальная стимуляция фагоцитарной активности нейтрофилов, моноцитов и эозинофилов наблюдалась на 1 -5-е сутки. Эти эффекты стресса на функции фагоцитирующих клеток были существенно модифицированы во 2-й группе. Отмечены стимуляция окислительного ответа и поглотительной активности фагоцитирующих клеток в течение 30-360 минут и модификация второго пика активации фагоцитов на 2-5-е сутки. Полученные результаты указывают на участие адренергических механизмов в регуляции функций фагоцитирующих клеток при остром стрессе.

Ключевые слона: стресс, $-адренорецепторы, фагоцитоз, периферическая кровь.

Shilov Ju.I., Orlova E.G.

ADRENERGIC MECHANISMS OF REGULATION OF RAT PERIPHERAL

BLOOD PHAGOCYTIC CELL FUNCTIONS UNDER ACUTE STRESS

Abstract. The effect of P-adrenergic receptors blockade on some functions of phagocytic cells was investigated in rats under acute stress conditions. The animals of the 1st group were subjected to an acute stress. The rats of the 2nd group were treated by propranolol

Введение

Известно, что типовыми изменениями системы крови при стрессе являются нейтрофильный лейкоцитоз, эозипопепия п лимфопепия [3]. Однако связь этих изменений с механизмами резистентности организма при стрессе до конца не изучена. По-

Адрес для переписки:

Шилов Юрий Иванович 614081, Пермь, ул. Голева, 13,

Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН. Тел.: (3422) 345171, факс (3422) 646711. E-mail: соп/@ecology.psu.m

казано, что стрессорные воздействия могут приводить к угнетению реакций клеточиооиосредоваппо-го и гуморального иммунитета, а также поглотительной активности системы монопуклеарпых фагоцитов [1,5, 8]. Остается не ясным, как противоположно направленные изменения числа нейтрофилов и эозинофилов при стрессе отражаются па их функциональной и, в частности, фагоцитарной активности. Не выяснена роль адренергических механизмов, хотя они имеют важное значение в регуляции костномозгового кроветворения при стрессе [3, 10], а па фагоцитирующих клетках экспрессированы как Р-, так и а-адренореценторы [18, 22].

Цель настоящей работы - исследование функциональной активности фагоцитирующих клеток периферической крови крыс при остром стрессе на фоне блокады (3-адрепергических рецепторов.

Материалы и методы

В работе использовали крыс-самцов популяции Wistar массой 169,8+6,05 г. Крысы 1-й группы были подвергнуты острому 6-часовому иммобилизаци-онпому стрессу в сочетании с дозированной кро-вопотерей (по 0,5 мл крови для анализа было взято из сосудов хвоста до иммобилизации и спустя 30 минут, 1, 3, 6 часов, 1, 3, 5 и 7 суток от ее начала). Животные 2-й группы подвергались аналогичному воздействию в условиях блокады (3-адренер-гических рецепторов (две подкожные инъекции пропранолола гидрохлорида в разовой дозе 5 мг/ кг массы тела с интервалом 3 часа; первая инъекция - за 30 минут до начала иммобилизации). Выбор дозы и схемы введения (3-адрепоблокатора основывался на ранее проведенных исследованиях [3, 5]. Контролем служили показатели объединенного исходного фона.

Фагоцитарную активность лейкоцитов оценивали в модификации метода [6]. В микропробирках с аитиадгезивным покрытием смешивали 25 мкл гепарипизироваппой крови и 25 мкл суспензии формалипизированных эритроцитов барана (100х106/мл в среде 199 с добавлением 10 мМ HEPES и 2 мМ I-глутамина). Пробы инкубировали 20 минут при 37°С. Результаты учитывали микроскопически. Рассчитывали комплекс показателей, описанных ранее 111].

Оценку кислородозависимых механизмов бактерицидное™ проводили в модифицированном варианте спектрофотометрического теста с питроси-пим тетразолием (НСТ-теста) |2]. В стимулированной пробе смешивали 25 мкл цельной крови, 12,5 мкл опсонизированного зимозана (Sigma, США, концентрация - 3,0 мг/мл), 12,5 мкл питательной среды (среда 199 с добавлением 2 мМ L-глутамипа и 10 мМ HEPES) и 25 мкл 0,15% раствора НСТ на 0,15 М растворе NaCl. Дальнейший ход определения не отличался от описанного [2], за исключением того, что объем всех реагентов был увеличен в 1,5 раза. Изменения гематологических параметров исследовали общепринятыми методами.

Статистическую достоверность различий оценивали но t-критерию Стыодепта и непараметрическому W-критерию Вилкоксона суммы рангов [9].

Результаты

Установлено, что дозированная кровопотеря, связанная со взятием крови, приводила к сниже-

нию количества эритроцитов и концентрации гемоглобина (р<0,05, начиная с 60-й минуты). Эти показатели оставались сниженными до 7-х суток. Наименьшее среднее значение числа эритроцитов отмечено в 1-й группе па 2-е сутки (5,178+0,443 мли./мл; контроль - 7,495±0,145 млн./мл), во второй группе - на 1-е сутки (5,490+0,533 млн./мл). Статистически достоверных различий в выраженности анемии у животных 1-й и 2-й группы не выявлено. Поэтому развитие умеренной постгеморрагической анемии можно рассматривать лишь как фактор, усиливающий стрессорное воздействие иммобилизации, по ие влияющий на различия показателей функций фагоцитирующих клеток между группами.

Через 3 часа от начала иммобилизации в 1-й группе развивался абсолютный нейтрофильпый лейкоцитоз с максимальной выраженностью через 6 часов (число пейтрофилов в 1 мкл крови через 3 часа составило 6752,50+617,37; через 6 часов - 8824,23±885,61 клеток/мкл; в объединенном исходном фоне - 2577,82+459,73 клеток/мкл, р<0,001). Увеличение абсолютного числа пейтрофилов сохранялось до 5-го дня. Блокада (3-ад-ренорецеиторов на фоне стресса усиливала выраженность пейтрофильпого лейкоцитоза в сравнении с 1-й группой через 3 и 6 часов от начала иммобилизации (число пейтрофилов в 1 мкл крови через 3 часа составило 8921,20+805,09; р<0,05 к 1-й группе; через 6 часов - 12857,50+1358,67 клеток/мкл, р<0,05 к 1-й группе), по уменьшала ее через 48 и 120 часов (р<0,05 к 1-й группе). Изменения интегральных относительных показателей пейтрофильпого фагоцитоза (процент фагоцитоза и фагоцитарное число) в 1-й группе носили двухфазный характер. Первая фаза (совпадающая с периодом иммобилизации) характеризовалась снижением процента фагоцитирующих клеток (рис.1) и фагоцитарного числа (объединенный исходный фон - 0,849+0,137; через 6ч - 0,345+0,027; р<0,002). Однако в связи с развитием пейтрофильпого лейкоцитоза относительные показатели недостаточно отражают изменения фагоцитарной активности пейтрофилов в суммарном выражении. Поэтому были рассчитаны абсолютные показатели - абсолютное число фагоцитирующих пейтрофилов и абсолютное число захваченных ими объектов фагоцитоза. Установлено, что первый показатель в период иммобилизации повышался (объединенный исходный фон - 1253,36+337,63 клеток/мкл крови; через 3 часа - 2643,91+371,29 клеток/мкл; р<0,01; через 6 часов - 2262,00+321,46 клеток/мкл; р<0,05), а второй - ие изменялся (рис.1). По-видимому, разная направленность динамики относительных и абсолютных показателей в этот пе-

25000 г

20000

15000

10000

5000

К Р 0.5 1 3 6 24 48 72 120 168 К Р 0.5 1 3 6 24 48 72 120 168

А Б

Рис. 1. Изменения абсолютного числа захваченных нейтрофилами объектов фагоцитоза на 1 мкл крови (А) и процента нейтро-фильного фагоцитоза (Б) у крыс, подвергнутых острому стрессу (сплошная линия) и стрессу на фоне блокады (3-адренорецепто-ров (пунктирная линия). Здесь и на рис. 2 и 3 по оси абсцисс: К - показатели контроля (объединенный исходный фон); Р - через 30 мин после введения пропранолола; 0,5, 1, 3, 6, 24, 48, 72, 120, 168 - время от начала иммобилизации (часы); по осям ординат - значения показателя. * -/т<0,05 к контролю по ^-критерию Сгьюдента. Все данные представлены в виде средних арифметических и их стандартных ошибок (М±т). Число животных (п) для каждого показателя на всех рисунках: п=22 - контроль, п=12 - в 1-й группе, п=10 - во 2-й группе.

Рис. 2. Изменения абсолютного числа захваченных моноцитами объектов фагоцитоза на 1 мкл крови (А) и процента моноцитарного фагоцитоза (Б) у крыс, подвергнутых острому стрессу (сплошная линия) и стрессу на фоне блокады (3-адренорецепторов (пунктирная линия). Остальные обозначения те же, что и на рис. 1.

А Б

Рис. 3. Изменения абсолютного числа захваченных эозинофилами объектов фагоцитоза на 1 мкл крови (А) и процента эозинофильного фагоцитоза (Б) у крыс, подвергнутых острому стрессу (сплошная линия) и стрессу на фоне блокады 3-адренорецепторов (пунктирная линия). Остальные обозначения те же, что и на рис. 1.

А Б

Рис. 4. Изменения абсолютных (А) и относительных (Б) показателей стимулированного варианта НСТ-теста при стрессе (сплошная линия) и стрессе на фоне блокады Р-адренорецепторов (пунктирная линия). По оси ординат: а - абсолютные значения экстинкции из расчета на 25 мкл крови; б - условные относительные единицы (вычисленные по формуле: а/в х 106, где а -экстинкция пробы против контроля, полученная на спектрофотометре при 710 нм; в - абсолютное содержание фагоцитов (суммы гранулоци-тов и моноцитов) в 1 мкл крови; У\/ - /э<0,05 по УУ-критерию Вилкоксона к контролю. Остальные обозначения те же, что и на рис. 1.

риод связана с выбросом из костного мозга относительно незрелых в функциональном отношении нейтрофилов, подтверждением чему является увеличение числа суммы палочкоядерных и юных нейтрофилов (контроль - 15,00+11,47 кле-ток/мкл; через 1 час - 516,67+153,02; /?<0,005; через 3 часа - 562,67+93,82; р<0,001; через 6 часов - 1172,63+232,31; /?<0,001). Вторая фаза (спустя 24 часа от начала иммобилизации) характеризуется повышением как относительных, так и абсолютных показателей пейтрофильпого фагоцитоза (рис.1).

Блокада (З-адрепорецеиторов пропрапололом не только отменяла раннее снижение относительных показателей пейтрофильпого фагоцитоза, но и приводила к значительной активации фагоцитоза как до иммобилизации, так и па фоне стресса (рис.1). Избыточная активация нейтрофиль-ного фагоцитоза на фоне блокады Р-адрепорецеп-торов в первую фазу приводит к существенной модификации динамики показателей во второй фазе (рис.1). В частности, через 48 часов от начала эксперимента абсолютные и относительные показатели фагоцитоза достоверно ниже, чем в 1-й группе.

Те же закономерности наблюдались в динамике показателей мопоцитариого и эозинофильного фагоцитоза (рис.2 и 3). Отличием являлось снижение в первые 6 часов стресса не только относительных, по и абсолютных показателей мо-поцитарпого фагоцитоза, а также отсутствие депрессии относительных показателей эозинофильного фагоцитоза, несмотря па развитие эозипо-иении через 3 часа после начала иммобилизации (абсолютное число эозипофилов в 1 мкл крови в 1-й группе составило 114,67+45,43, в объединенном исходном фоне - 330,36+43,43, р<0,002). Дополнительный анализ механизмов этого явления показал, что развитие эозинопепии связано преимущественно со снижением в этот срок абсолютного числа пефагоцитирующих эозипофилов (абсолютное число пефагоцитирующих эозипофилов в 1 мкл крови составило 80,99±29,24, в объединенном исходном фоне - 278,21+40,69, р<0,001). Блокада Р-адрепорецепторов приводила к значительному повышению абсолютных и относительных показателей мопоцитариого и эозинофильного фагоцитоза (рис.2 и 3). В отличие от ранее опубликованных данных [3], где изменения гематологических показателей анализировались в динамике первых суток стресса, выявлено развитие эозинофилии па 3-и сутки (число эозипофилов в 1 мкл крови через 72 часа составило 850,17+164,84; р<0,002 к контролю). Кратковременная моноцитопепия через 30 минут после начала иммобилизации сменялась абсолютным мопоцитозом, наиболее выраженным па 2-е

и 7-е сутки (число моноцитов в 1 мкл крови через 30 минут составило 500,00± 124,96; на 2-е сутки - 1896,67+429,65 клеток/мкл; па 7-е сутки -2783,00+565,24 клеток/мкл; в объединенном исходном фоне - 925,46±164,58 клеток/мкл, р<0,05). Блокада Э-адреиорецепторов предотвращала изменения числа моноцитов в крови и развитие стрессорпой эозинопепии. Однако эозипо-филия развивалась в более ранние сроки.

Сходные закономерности выявлены и при оценке изменений показателей кислородозависимой бактерицидиости фагоцитирующих клеток в НСТ-тесте (рис.4). В 1-й группе увеличение абсолютных показателей НСТ-теста отмечено на 3-и и 5-е сутки эксперимента. На фойе блокады Р-адренергических рецепторов пропрапололом статистически значимое увеличение абсолютных показателей НСТ-теста наблюдалось через 30 минут, 3 часа, а также на 5-е и 7-е сутки от начала иммобилизации. В сравнении с изменениями поглотительной активности фагоцитов крови отмечена более глубокая и длительная депрессия относительных показателей бактерицидности циркулирующего пула фагоцитирующих клеток. Она развивалась в 1-й группе через 1 час, во 2-й -через 3 часа после иммобилизации и сохранялась в обеих группах до 48 часов (рис.4) .

Обсуждение

Полученные в работе данные указывают на важную роль активации фагоцитирующих клеток в повышении резистентности организма при стрессе и вовлеченность адренергических механизмов в регуляцию их функций при стрессе. Известно, что стресс представляет собой типовой комплекс реакций аварийного регулирования, направленных па максимальную мобилизацию энергетических ресурсов организма для повышения резистентности организма к действию повреждающих факторов [3, 21]. Суммируя имеющиеся в литературе данные, можно сделать заключение о супрессивном влиянии стресса па гуморальный и клеточио опосредованный иммунный ответ [5, 18, 19]. Оставался открытым вопрос о механизме участия иммунной системы в повышении резистентности организма при стрессе. Поэтому представлялось целесообразным оцепить влияние стресса на ие-специфическое эффекторное звепо иммунной системы. Ранее влияние стресса па фагоцитоз исследовалось в основном с использованием методов, основанных па регистрации клиренса меченных частиц и коллоидов из кровотока [1, 8, 15]. При использовании указанных подходов, во-первых, оцениваются изменения преимущественно клеток Купфера печени, а, во-вторых, получаемые результаты зависят не только от их фагоцитар-

ной активности, но и от состояния микроциркуляции и целого ряда других факторов. Несмотря на то, что нейтрофильный лейкоцитоз и эозиио-пению относят к типовым гематологическим проявлениям стресса, изменения функций циркулирующего пула этих клеток ранее исследованы недостаточно.

Как показано в настоящей работе, при стрессе наблюдается повышение фагоцитарной активности лейкоцитов периферической крови в абсолютном выражении. Изменения показателей нейтрофильного фагоцитоза в условиях стресса имеют двухфазный характер. Первая фаза (совпадающая с периодом иммобилизации) характеризуется снижением относительных и повышением абсолютных параметров нейтрофильного фагоцитоза, а вторая (спустя 24 часа от начала иммобилизации) - увеличением как абсолютных, так и относительных показателей фагоцитоза. Депрессия относительных показателей нейтро-филыюго фагоцитоза в первую фазу связана с выходом из костного мозга относительно незрелых пейтрофилов. Таким образом, повышение суммарной фагоцитарной активности пейтрофилов в эту фазу достигается за счет увеличения их числа в циркуляции. Важно отметить, что первая фаза изменений функций фагоцитирующих клеток совпадает по времени с развитием стадии тревоги общего адаптационного синдрома, а вторая - со стадией повышенной резистентности [21].

Активация нейтрофильного фагоцитоза в первые 6 часов стресса у животных, получавших про-пранолол, на наш взгляд, связана с сочетанием стрессорного повышения уровня эндогенных катехоламинов [3] со стимуляцией этими соединениями а-адренорецепторов в условиях выключения ингибирующего эффекта, реализуемого через Р-адренорецепторы. По нашим данным, Р-ад-ренергический агонист тербуталина сульфат угнетает поглотительную активность фагоцитов периферической крови крыс in vitro, а адреналин в тех же условиях и диапазоне концентраций активирует [12]. Показан оппозитный эффект in vitro антагонистов а2- и Р-адренорецепторов па продукцию a-фактора некроза опухолей мышиными макрофагами [22]. Пропроналол (Р-адре-ноблокатор) повышал ее, а йохимбин и идазок-сан (антагонисты а2-адренорецепторов) снижали. По нашим данным [14], в системе in vivo селективные антагонисты а2-(йохимбин, 5 мг/кг подкожно) и al-адренорецепторов (празозин, 1 мг/кг подкожно) снижают показатели кислородозависимой бактерицидное™ фагоцитирующих клеток крови. Поэтому можно считать, что через а-адренорецепторы реализуется стимулирующий эффект катехоламинов. Избыточная активация нейтрофильного фагоцитоза на фоне блокады Р-

адреиорецепторов в первую фазу приводит к существенной модификации динамики показателей во второй фазе. Более низкая выраженность стрессорпой активации пейтрофилов через 48 часов от начала эксперимента в этих условиях, возможно, связана с истощением общего пула пейтрофилов, либо с изменениями экспрессии а-и Р-адренорецепторов по механизмам обратной связи [4].

Те же закономерности наблюдались в динамике показателей моиоцитарного и эозинофильного фагоцитоза. Отличием являлось снижение в первые 6 часов стресса не только относительных, но и абсолютных показателей моиоцитарного фагоцитоза. Выявленная в настоящей работе депрессия моиоцитарного фагоцитоза и развитие моноцито-нении в ранний период стресса может быть проявлением депрессивного действия глюкокортикоидов на клетки системы мопонуклеарных фагоцитов, ранее выявленного, в том числе, и в условиях стресса при исследовании клиренса [1, 8, 15]. Блокада Р-адренорецеиторов полностью отменяла этот эффект, что указывает на важную роль адренергических механизмов. Несмотря па развитие эозинопе-пии через 3 часа после иммобилизации, депрессии эозинофильного фагоцитоза выявлено не было. Эозипоиения развивалась преимущественно за счет снижения числа нефагоцитирующих эозипофилов. В отличие от ранее описанных закономерностей [3] можно говорить о двухфазном изменении абсолютного содержания моноцитов и эозипофилов при стрессе. Кратковременная моноцитопения и эози-попения, выявляемые в первые сутки стресса, сменяются развитием моноцитоза и эозинофилии. Блокада Р-адреиорецепторов отменяет развитие стрессорной эозинопении и изменения числа моноцитов.

Следует отметить, что адренергические механизмы могут играть существенную роль в стрессорных изменениях функций не только фагоцитирующих клеток, но и Т- и В-лимфоцитов. Так, показана отмена в условиях блокады Р-адренорецепторов депрессивного действия хирургического стресса на пролиферацию Т- и В-лимфоцитов [19]. Угнетение пролиферативного ответа лимфоцитов в отличие от эффекта катехоламинов па фагоцитирующие клетки опосредуется не только через Р-, но и а-адреио-рецепторы [13, 18].

В настоящее время важную роль в запуске нейроэндокринных изменений при стрессе отводят про-воспалительным цитокинам, в частности, интерлейкину-1 (ИЛ) [7]. 1Ь-1 через стимуляцию системы гипоталамус-гипофиз-кора падпочечииков повышает уровень глюкокортикоидных гормонов в крови, в то время как глюкокортикоиды тормозят продукцию 1Ь-1 макрофагами, действуя на уровне транскрипции. Показано, что продукция 1Ь-1 р и ТЫРа

монопуклеарными фагоцитами тормозится агонистами (З-адреиорецепторов, этот эффект отменяется пропранололом [23].

Доказано участие адренергических механизмов в изменениях количества в крови нейтрофилов и различных субнонуляций лимфоцитов [17, 20]. Однако конкретные механизмы этих эффектов до конца не ясны. Показано отсутствие связи этих изменений с экспрессией адгезионных молекул (СОИа, СО 11Ь, С031, С043, СЮ44, С062Ь) и растворимых форм адгезионных молекул (зУСАМ-1, з1САМ-1, эСВ62Е) [20], но доказана роль повышения экспрессии мРНК некоторых хемокипов (вИО-р и а) на клетках эндотелия и моноцитах в условиях стресса [16].

Таким образом, адренергические механизмы играют существенную роль в изменениях фагоцитарной активности нейтрофилов, моноцитов и эозино-филов периферической крови при остром стрессе. Через (3-адре11 ергические рецепторы может обеспечиваться ограничение избыточной стрессорной активации фагоцитирующих клеток.

Список литературы

1. Воронина Н.П. Функциональная активность разных классов макрофагов при стрессе. // Моделирование и клиническая характеристика фагоцитарных реакций: Ресн. сб. паучн. трудов. - Горький, 1989. - С. 15-21.

2. Гордиенко С.М. Сравнительная оценка результатов теста восстановления нитросинего тетразолия при микроскопическом и спектрофотометрическом вариантах метода с различными солями тетразолия. // Лаб. дело. - 1983. - №2. - С. 21-24.

3. Горизонтов П.Д., Белоусова О.И., Федотова М.И. Стресс и система крови. - М.: Медицина, 1983.

- 824 с.

4. Дыгало Н.Н., Калинина Т.С., Носова А.В., Юшкова А.А., Сурпина Н.Ю., Шишкина Г.Т. Регуляция экспрессии адренергических рецепторов стероидными гормонами. // Российский Физиол. жури, им. И.М. Сеченова. - 1998. Т. 84, № 10. - С. 1115-1120.

5. Зимин Ю.И. Стресс: иммунологические аспекты. // Итоги пауки и техники ВИНИТИ. Иммунология. - М.: ВИНИТИ, 1983. - Т. 12. -С. 41-52.

6. Каплин В.Н. Нетрадиционная иммунология инфекций. -Пермь: Изд-во Пермск. гос. мед. академии, 1996. - 163 с.

7. Корнева Е.А., Рыбакина Е.Г., Фомичева Е.Е., Козипец И.А., Шанин С.Н. Иммупомоду-лирующие эффекты интерлейкина 1 и глюкокор-тикоидпых гормонов как взаимодействующих звеньев в пейроиммунорегуляторной цепи. // Гп^ 1ттипогеЬаЫ1ка^оп. - 1998. - № 10. - С. 38-48.

8. Маянский Д.Н., Воронина Н.П., Воронин А.Ю. Изменение поглотительной способности макрофагов из разных органов па введение гидрокортизона. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 1985. -Т. 100, № 9. - С. 324-326.

9. Тюрин Ю.Н., Макаров А.А. Анализ данных на компьютере. - М.: ИНФРА-М, Финансы и статистика. 1995. - 384 с.

10. Хлусов И.А., Дыгай А.М., Гольдберг Е.Д. Адренергическая регуляция продукции интерлейкинов клетками костного мозга в условиях иммо-билизациопного стресса. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 1993. - Т. 116, N 12. - С. 570-572.

11. Шилов Ю.И., Владыкина В.П., Атнагузина

A.Т. Некоторые методические подходы к оценке показателей общего и дифференцированного фагоцитоза лейкоцитов периферической крови. Характеристика различий у здоровых людей. // Пермск. мед. журп. - 1998. - Т. 15, № 2. - С. 3-9.

12. Шилов Ю.И., Орлова Е.Г., Атнагузина А.Т., Шилов Д.Ю. Влияние адренергических соединений и модуляторов цАМФ-зависимого и фосфа-тидилипозитолового пути на функции фагоцитирующих клеток in vitro. // Рецепторы и внутриклеточная сигнализация. - Пущипо, 1998. - С. 63-65.

13. Шилов Ю.И., Гейн С.В. Адренергическая регуляция пролиферативного ответа лимфоцитов в культурах с Т-клеточпыми митогепами. // Бюл. эк-сиерим. биологии и медицины. - 1999. - Т. 128, № 8.

- С. 207-209.

14. Шилов Ю.И., Гилева Н.А., Таскаев В.П. Роль различных типов адренергических рецепторов в изменениях показателей НСТ-теста в условиях адреналинового стресса. // Медицинская Иммунология.

- 2000. - Т. 2, № 2. - С. 143-144.

15. Altura В. Reticuloendothelial cells and host defense. // Vascular Endothelium and Basement Membranes. Adv. Microcirc. Basel: Karger. Vol. 9. -1980. - P. 252-294.

16. Hagiwara H., Mitsumata М., Yamane T„ Jin X., Yoshida Y. Laminar shear stress-induced GRO mRNA and protein expression in endothelial cells. // Circulation. - 1998. - Vol. 98, N 23. - P. 2584-2590.

17. Kappel М., Poulsen T.D., Galbo H., Pedersen

B.K. Effects of elevated plasma noradrenaline concentration on the immune system in humans. // Europ. T. appl. Physiol, and occup. Physiol. - 1998. -Vol. 79, N 1. - P. 93-98.

18. Madden K.S., Felten D.L. Experimental basis for neural-immune interactions. // Physiol. Rev. - 1995. -Vol. 75, N1.-P. 77-106.

19. Nelson C.J., Lysle D.T. Severity, time, and beta-adrenergic receptor involvement in surgery-induced immune alterations. //J. surg. Res. - 1998. - Vol. 80, N

2. -P. 115-122.

20. Schedlowski M., Hosch W., Oberbeck R., Benschop R.J., Jacobs R., Raab H.-R., Schmidt R.E. Catecholamines modulate human NK cell circulation and function via spleen-independent (32-adrenergic mechanisms. // J-Immunol. - 1996. - Vol. 156, N 1. - P. 93-99.

21. Selye H. Studies on adaptation. // Endocrinology. - 1937. - Vol. 21, N2. - P. 169-188.

22. Spengler R.N., Chensue S.W., Giacherio D.A., Blenk N., Kunkel S.L. Endogenous norepinephrine regulates tumor necrosis factor-a production from

macrophages in vitro. //J. Immunol. - 1994. - Vol. 152, N 6. - P. 3024-3031.

23. Yoshimura Т., Kurita C., Nagao Т., Usami E., Nakao Т., Watanabe S., Kobayashi J., Yamazaki F., Tanaka H., Inagaki N., Nagai H. Inhibition of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-l-beta production by beta-adrenoceptor agonists from lipopolysaccharide-stimulated human peripheral blood mononuclear cells. // Pharmacology. - 1997. - Vol. 54, N 3. - P. 144-152.

поступила в редакцию 21.07.2001 принята к печати 04.10.2001