Препарат для лечения рыб при гельминтозах
PREPARATION FOR THE TREATMENT OF FISH WITH HELMINTHIASES

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности, к препаратам для лечения рыб при гельминтозах и может быть использовано в аквакультуре.
Уровень техники
Известна композиция на основе албендазола с противоописторхозной фармакологической активностью), которая является популярным антигельминтным средством, обладающим активностью также в отношении патогенных простейших. Действует на кишечные и тканевые формы паразитов; активен в отношении яиц, личинок и взрослых гельминтов. Противоглистное действие албендазола обусловлено угнетением полимеризации тубулина, приводящим к нарушению метаболизма и гибели гельминтов. Албендазол активен в отношении кишечных паразитов, включая нематоды-Ascarislumbricoides, Trichuristrichiura, Enterobiusvermicularis, Ancylostomaduodenale, Necatoramericanus, Strongyloidesstercoralis, CutaneousLarvaMigrans; цестоды-Hymenolepsisnana (карликовый цепень), Taeniasolium (свинойцепень), Taeniasaginata (бычийцепень); простейшие Giardialamblia. Албендазол активен в отношении тканевых паразитов, включая цистныйэхинококкозиальвеолярный эхинококкоз, вызываемые инвазией Echinococcusgranulosus и Echinococcusmultilocularis соответственно. Эффективен при лечении нейроцистицеркоза, вызываемого инвазией личинок свиного цепня T.solium, капилляриоза, вызываемого Capillariaphilippinensis, и гнатостомоза, вызываемого инвазией Gnathostomaspinigerum. (См. пат. РФ №2545797 опубл. 10.04.2015 Бюл. №10).
Однако активность албендазола в отношении трематод-Opisthorchisfelineus и О. viverrini недостаточна, кроме того, этот препарат обладает гепатотоксичностью.
Известен альбендазол (АБЗ) и его лекарственные формы для борьбы с гельминтозами животных. Препарат, обладая широким спектром действия, в том числе против нематод, цестодитрематод, успешно используют для лечения гельминтозов на разных видах животных, и особенно, жвачных. АБЗ эффективен против нематод, в том числе, и преимагинальных стадий. Эффективность его против нематодирусов, буностом, стронгилоидов и трихоцефал несколько ниже. АБЗ снижает зараженность животных и магинальными фасциолами, но неактивен против молодых трематод [Bradley R.E., Randell W.F., Armstrong D.A. EfficiencyofalbendazoleagainstFasciolahepatica // Amer.J.Vet.Res. 1981. V. 42, №8. P. 1062-1064]. Аналогичная картина отмечена и в отношении мониезий и гнатостом.
Недостатком АБЗ является необходимость использовать его в относительно высоких дозах и зачастую увеличивать длительность приема препарата из-за плохой растворимости в воде и физиологических средах [Тумольская Н.И. Альбендазол новые возможности лечения гельминтозов // Новые лекарства. 2003. №4]. Вследствие низкой водорастворимости, эффективность препарата не достигает теоретически возможной. (См. пат. РФ №2546535, опубл.: 10.04.2015 Бюл. №10. Противопаразитарное средство на основе альбендазола и способ его использования для лечения гельминтозов млекопитающих).
Известен препарат "Филомецид" для лечения рыб при гельминтозах по способу получения который включает приготовление: 1) нерастворимой в воде формы нилверма; 2) истинного раствора нилверма-основания в органическом растворе в соотношении 10:15 путем нагревания; 3) добавление наполнителя до 100 масс. % с последующей пропиткой его раствором препарата. В 1 кг полученного продукта содержится 100 граммов действующего вещества (См. пат. №. 2124833; Способ получения антгельминтного средства "филомецид"; Скачков Д.П., Борисова М.Н., Шумакович И.Е., Солоненко И.Г. Опубл.: 20.01.1999.).
Согласно патенту №2124833 данный препарат предназначен для борьбы только с филометроидозом карпов, т.е., рекомендован для применения при одном гельминтозе, что является недостатком данного препарата.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту принятый авторами за прототип является препарат «Альбен» гранулы в 1 г содержащие в качестве действующего вещества альбендазол - 200 мг (20%), а в качестве вспомогательных веществ: поливинилпирролидон, стеарат кальция, крахмал картофельный и лактозу. (См. Ершова Т.А. «Феномикс» и «Альбен гранулы» - новые антигельминтики против цестодозов / Т.А. Ершова, К.В. Гаврилин // Рыбоводство. - 2008. №1. С. 44-45.).
Недостатком данного препарата является недостаточная эффективность в дозе 0,2 г/кг массы тела при двукратном применении с интервалом 24 часа приботрицефалезе и кавиозе карпов.
Раскрытие изобретения
Задачей предлагаемого изобретения является разработка высокоэффективного препарата для лечения рыб при гельминтозах, обладающего выраженным антгельминтным действием широкого спектра, низкой токсичностью, высокой эффективностью в лечении гельминтозов рыб.
Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к антгельминтному действию широкого спектра, снижению токсичности, повышению удобства применения и дозирования.
Технический результат достигается с помощью препарата для лечения рыб при гельминтозах содержащего порошкообразный албендазол, вспомогательные вещества при этом, что он дополнительно содержит порошкообразный прозиквантель, а в качестве вспомогательных веществ используют Е-472а - структурного вещества и пластификатора (эфир глицерина с карбоновой и жирными кислотами), натрий карбоксиметилцеллюлоза, аэросил-300 - гидрофобизатор и кислотный красный 2С - красителя Е-122. Препарат получают осаждением с использованием двух осадителей - карбинола и циклогексанола.
Сущность получения препарата заключается в следующем: к смеси порошкообразных албендазола и празиквантеля добавляют растворитель диоксан и Е-472а - являющегося структурным веществом и пластификатором (эфиром глицерина с карбоновой и жирными кислотами). Проводят перемешивание. После испарения растворителя добавляют натрий карбоксиметилцеллюлоза, аэросил-300 - гидрофобизатор и красителя Кислотного красного 2С (Е-122) для предания препарату привлекательного вида для животных. После чего проводят осаждение в присутствии карбинола и циклогексанола. Полученную суспензию отфильтровывают и сушат при комнатной температуре получая кристаллический порошок. Использование предложенного способа позволяет значительно упростить процесс получения препарата антигельминтиков и обеспечить высокое качество антгельминтного препарата.
Осуществление изобретения Примеры конкретного получения препарата для лечения рыб при гельминтозах.
Пример 1. К порошкообразным албендазолу 1,0 масс. % и празиквантелю 0,5 масс. % добавляют растворитель диоксан объемом 0,5 мл и 30,0 масс. % Е-472а - являющегося структурным веществом и пластификатором (эфиром глицерина с карбоновой и жирными кислотами), затем проводят перемешивание, а после испарения растворителя добавляют в масс%: 38,5 натрий карбоксиметилцеллюлоза; 22,0 аэросил-300 - гидрофобизатор и остальное масс. % красителя Кислотного красного 2С (Е-122) для предания препарату привлекательного вида для животных. После чего проводят осаждение в присутствии карбинола и циклогексанола. Полученную суспензию отфильтровывают и сушат при комнатной температуре, получая кристаллический порошок.
Получено 0,956 г массы желтоватого оттенка. Выход составил 95,6%.
Пример 2. Проводим аналогично примеру 1 со следующим соотношением компонентов масс. %:
празиквантела
- 1,0
албендазола
- 2,0
растворяют в 0,5 мл диоксане
Е-472а (эфир глицерина с карбоновой и жирными кислотами)
- 30,0
натрий карбоксиметилцеллюлозы
- 37,0
аэросила-300
- 21,0
кислотный красный 2С (Е-122), осадители карбинол и циклогексанол
- остальное.
Получено 0,968 г массы желтоватого оттенка. Выход составил 96,8%.
Пример 3. Проводим аналогично примеру 1 со следующим соотношением компонентов масс. %:
празиквантела
- 1,5
албендазола
- 3,0
растворяют в 0,5 мл диоксане
Е-472а (эфир глицерина с карбоновой и жирными кислотами)
- 30,0
натрий карбоксиметилцеллюлозы
- 35,5
аэросила-300
- 29,0
кислотный красный 2С (Е-122), осадители карбинол и циклогексанол
- остальное.
Получено 0,97 г массы желтоватого оттенка. Выход составил 97%.
Пример 4. Проводим аналогично примеру 1 со следующим соотношением компонентов масс. %:
празиквантела
- 2,0
албендазола
- 4,0
растворяют в 0,5 мл диоксане
Е-472а (эфир глицерина с карбоновой и жирными кислотами),
30,0
натрий карбоксиметилцеллюлозы
- 34,0
Аэросила
- 19,0
кислотный красный 2С (Е-122), осадители карбинол и циклогексанол
- остальное
Получено 0,966 г массы желтоватого оттенка. Выход составил 96,6%.
Пример 5. Проводим аналогично примеру 1 со следующим соотношением компонентов масс. %:
празиквантела
- 2,5
албендазола
- 0,5
растворяют в 0,5 мл диоксане
Е-472а (эфир глицерина с карбоновой и жирными кислотами),
- 30,0
натрий карбоксиметилцеллюлозы
- 32,5
аэросила-300
- 18,0
кислотный красный 2С (Е-122), осадители карбинол и циклогексанол
- остальное
Получено 0,96 г массы желтоватого оттенка. Выход составил 96%.
Оптимальным составом препарата является состав, полученный по примерам №2 - №4, а именно по выходу конечного продукта, который составил соответственно 96,8, 97,0, 96,6%. Предложенный препарат пригоден как для ветеринарно-промышленного, так и для частного использования вследствие простоты, экспрессности и минимальных потерь при получении микрокапсул.
Примеры конкретного испытания препарата для лечения рыб при гельминтозах,
Пример 1. При изучении острой токсичности определяют переносимые, токсические и летальные дозы препарата для лечения гельминтозов рыб.
Изучаемый препарат вводят peros с помощью зонда, непосредственно в желудок мышам и крысам. В течение 14 дней после введения препарата осуществляют наблюдение за состоянием животных. Параметры острой токсичности рассчитывают методом пробит - анализа по Литчфилду и Уилкоксону (Litchfield J.T., Wilcoxon F., 1949) в модификации З. Рота и математическим методом Кербера (Беленький М.Л., 1963).
Результаты опытов по определению параметров острой токсичности оценивают в соответствии с общепринятой классификацией химических веществ по степени опасности (ГОСТ 12.1.007.76).
(ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности (с Изменениями N 1, 2). М.: Стандартинформ, 2007.).
Оценку острой токсичности препарата проводят на белых беспородных мышах, крысах. В ходе экспериментов определяют параметры острой токсичности, значимые дозы, а также проводят систематические клинические исследования. Результаты экспериментов представлены в таблице 1.
Клиническая картина отравления лабораторных животных (крыс, мышей) после введения больших доз препарата была сходна и проявлялась развитием общего угнетения. Животные сидели с полуприкрытыми глазами, сбившись в кучку. Реакция на внешние раздражители слабо выражена. Аппетит отсутствовал. В таком состоянии животные находились несколько часов, постепенно клинические признаки интоксикации ослабевали и полностью исчезали через сутки. После введения препарата в смертельных дозах общее состояние животных значительно ухудшалось. Гибель крыс и мышей наступала по прошествии нескольких часов.
50
По степени воздействия на организм (по показателю средняя смертельная доза при введении в желудок), препарат относится к умеренно опасным веществам (3 класс опасности ГОСТ 12.1.007-76): LD для белых мышей при пероральном введении составляет 3191 мг/кг, для белых крыс при - 3191 мг/кг.
Пример 2. Для изучения антигельминтной эффективности препарата, было сформировано 6 опытных групп рыб, спонтанно инвазированных нематодой Philometroideslusiana. Препарат вводят в пищевод карпов через катетер в виде эмульсии с использованием эмульгатора Твин-80. Первая группа получила препарат в дозе 30 мг/кг однократно; вторая группа в той же дозе двукратно с интервалом 24 часа; третья группа 45 мг/кг однократно; четвертая группа в той же дозе двукратно; пятая группа 60 мг/кг однократно; шестая группа в той же дозе двукратно. Контрольная группа лечению не подвергалась, рыбе вводят то же количество геля без препарата. Кормление осуществляют один раз в день гранулированным кормом. Через 10 суток после последнего введения препарата было проведено паразитологическое обследование рыб в опытных и контрольной группах. Результаты опытов представлены в таблице 2.
Препарат продемонстрировал наибольшую эффективность при двукратном применении в дозах 45 и 60 мг/кг массы рыб. Исходя из полученных данных, можно сделать вывод, что наиболее эффективная и экономически выгодная доза - 45 мг/кг, соответственно, ее и целесообразно считать оптимальной.
Пример 3. Для изучения антигельминтной эффективности препарата, было сформировано 6 опытных групп рыб, спонтанно зараженных ленточным гельминтом Bothriocephalusacheilognathi. Препарат вводят в пищевод карпов через катетер в виде эмульсии с использованием эмульгатора Твин-80. Первая группа получила препарат в дозе 30 мг/кг однократно; вторая группа в той же дозе двукратно с интервалом 24 часа; третья группа 45 мг/кг однократно; четвертая группа в той же дозе двукратно; пятая группа 60 мг/кг однократно; шестая группа в той же дозе двукратно. Контрольная группа лечению не подвергалась, рыбе вводят то же количество геля без препарата. Кормление осуществляют один раз в день гранулированным кормом. Через 14 суток после введения препарата было проведено паразитологическое обследование рыб в опытных и контрольной группах. Результаты опытов представлены в таблице 3.
Препарат проявил наибольшую эффективность при двукратном применении в дозах 45 и 60 мг/кг массы рыб. Исходя из полученных данных, можно сделать вывод, что оптимальной терапевтической дозой является применение препарата из расчета 40 мг/кг массы.
Препарат для лечения рыб при гельминтозах является эффективным за счет различного механизма воздействия компонентов на гельминтов рыб, обеспечивающий широкий спектр антгельминтной эффективности.
Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:
- выраженное антгельминтное действие широкого спектра;
- низкая токсичность;
- высокая эффективность в лечении гельминтозов рыб.