Цитограмма тканевых лейкоцитов в слизистой оболочке желудка у собак при экспериментальной язвенной болезни на фоне лечения лазерным излучением в постоянном магнитном поле

Рис. Динамика радиоактивности крови и лимфы после введения очищенного стафилококкового а-токсина, меченного I125 , в полости закрытых абсцессов легких и эмпиемы плевральных полостей. 1 - показатели резорбции в кровь токсина, введенного в закрытые полости при гнойно-некротических воспалениях легких; 2 -показатели резорбции в кровь токсина, введенного в гнойные плевральные полости; 3 - показатели резорбции в лимфу грудного лимфатического протока токсина, введенного в закрытые полости при гнойно-некротических воспалениях легких; 4 - показатели резорбции в лимфу грудного лимфатического протока токсина, введенного в гнойные плевральные полости; 5 - показатели резорбции в лимфу правого лимфатического протока токсина, введенного в закрытые полости при гнойно-некротических воспалениях легких; 6 - показатели резорбции в лимфу правого лимфатического протока токсина, введенного в гнойные плевральные полости.

ЛИТЕРАТУРА

1. Хирургия легких и плевры: Руководство для врачей [Текст]/И. С.Колесников, М.И.Лыткин.-Л.: Медицина, 1988.-382 с.

2. Разработка экспериментальной модели

абсцесса легкого, сочетающегося с эмпиемой плевры [Текст]/К.В.Самсонов//Бюл. физиол. и патол.

дыхания.-2004.-Вып.18.-С.62-63.

3. Экспериментальное воспроизведение закры-

тых и дренируемых абсцессов легких для изучения элиминации из них бактериального токсина [Текст]/К.В.Самсонов//Бюл. физиол. и патол.

дыхания.-2003.-Вып .14.-С.30-32.

4. Lung abscess and empiema

[ТеХ]/И.Р.'Wiedemann, T.W.Rice//Semin. Thorac.

Cardiovasc. Surg.-1995.-Vol.7, №2.-P.119-128.

П

УДК 619:616.3: 615.246.2:636.7

А.Н. Чубин, Л.А.Набока

ЦИТОГРАММА ТКАНЕВЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ЖЕЛУДКА У СОБАК ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ НА ФОНЕ ЛЕЧЕНИЯ ЛАЗЕРНЫМ ИЗЛУЧЕНИЕМ В ПОСТОЯННОМ МАГНИТНОМ ПОЛЕ

Институт ветеринарной медицины и зоотехнии ДальГАУ, Благовещенск РЕЗЮМЕ

Целью данной работы явилось изучение цитограммы тканевых лейкоцитов в слизистой оболочке желудка у собак при экспериментальной язвенной болезни на фоне лечения лазерным излучением в постоянном магнитном поле. В

результате проведенных исследовании

установлено, что рубцевание язвы желудка на фоне лечения лазерным излучением в постоянном магнитном поле сопровождается снижением количества лимфоцитов, неитрофилов,

эритроцитов, тучных, плазматических,

дегенерирующих клеток и увеличением численности эозинофилов, моноцитов и макрофагов в собственной пластинке слизистой.

SUMMARY A.N.Chubin, L.A.Naboka

TISSUE LEUCOCYTE CYTOGRAM IN GASTRIC MUCOSA IN DOGS WITH EXPERIMENTALLY INDUCED MUCOSA TREATED WITH LASER IRRADIATION IN MAGNET STATIC FIELD

The purpose of this work was to study tissue leukocyte cytogram in gastric mucosa of the dogs with experimentally induced ulcer treated with laser irradiation in magnet static field. It was found that treatment with laser irradiation in magnet static field resulted in stomach ulcer scarring accompanied by decrease in the number of lymphocytes neutrophils, erythrocytes, mast cells plasma and degenerating cells as well as increase in the number of monocytes and macrophages in lamina propria mucosae.

Несмотря на более чем полуторавековую историю изучения язвенной болезни, эта проблема остается актуальной как в теоретическом, так и в практическом отношении [1, 3, 9]. В последние годы в физиотерапии стали, широко применятся низкоинтенсивные лазеры в сочетании с постоянным магнитным полем (ПМП), повышающим степень проникновения вглубь тканей, что позволяет осуществлять чрескожное воздействие на внутренние органы [2, 6]. Ряд авторов отмечают противовоспалительный и репаративный эффект магнито-лазерной терапии при язвенной болезни желудка [7, 8, 10, 11, 13], снижение активности воспалительной реакции с уменьшением числа лимфоидно-плазматических элементов [12, 14, 15, 16, 17]. По мнению других авторов репаративная активность действительно имеет место, но при этом появляется большое количество дистрофически измененных клеток слизистой желудка, длительное время сохраняются явления гиперемии, отека стромы, ее лимфоцитарная инфильтрация [15]. Следовательно, единой точки зрения об эффекте магнито-лазерной терапии при язвенной болезни в настоящее время нет.

В этой связи целью данной работы явилось изучение цитограммы тканевых лейкоцитов в слизистой оболочке желудка у собак при экспериментальной язвенной болезни на фоне лечения лазерным излучением в ПМП.

Материалы и методы исследования

Экспериментальная часть исследования выполнена на собаках, которых разделили на 2 группы. В обеих группах моделировали язву желудка в антральном отделе путем диатермокоагуляции слизистой оболочки желудка через фиброгастроскоп фирмы «Olympus» модель CLE-4U (Япония), с последующим введением винкрестина из расчета 0,01 мг/кг для стойкой хронизации процесса. Группа 1 (контроль) - не подвергалась ни каким воздействиям. Голодным собакам 2-й группы в течение 14 дней область желудка облучали лазером с ПМП, на вентральной брюшной

поверхности от мечевидного отростка в каудальном направлении в четырех зонах по 2 минуты в каждой при частоте 50 Гц и мощности 40-45 МВт.

Биопсия проводилась щипцовым методом, из язвенного дефекта, тела и антрального отдела желудка. Материал фиксировали в 4%-ном растворе параформальдегида на фосфатном буфере (рН=7,4), обезвоживали в градиете этанола возрастающей концентрации, просветляли в ксилоле и заключали в парафин. Из каждого объекта изготавливали не менее 3-х блоков. Срезы, толщенной 5мкм, окрашивали гематоксилином и эозином.

Численная плотность лимфоцитов, нейтрофилов, эозинофилов, тучных клеток, эритроцитов, моноцитов, макрофагов, дегенерирующих и плазматических клеток определяли:

N1

Na =

где N1 - количество структур в Атк (площадь тестового квадрата, расположенного в площади среза изучаемой зоны).

Статистическую обработку результатов проводили с определением стандартному значению критерия (1) Стьюдента. Различия между средними значениями считали достоверными при р<0,05. При расчетах учитывали, что распределение исследуемых признаков было близким к норме.

Результаты исследования и их обсуждение

При исследовании тканевых лейкоцитов в собственной пластинке слизистой желудка у собак 2й группы было отмечено, что численная плотность лейкоцитов на фоне лечения лазерным излучением в ПМП уменьшалась в 1,98 раз, что составляет 50,07% (таблица). Данный показатель колебался от 5,15 до 5,25%. Абсолютная численная плотность лимфоцитов на фоне терапии составляла от 1,927 до 2,017. Верхняя граница относительного показателя колебалась в пределах от 37,45 до 42,47%. В сравнении с данными, полученными при изучении биопсии контрольной группы, имеется тенденция к снижению относительного показателя в среднем на 14%. Абсолютное же количество достоверно отличается друг от друга.

Колебания относительной численности нейтрофилов на фоне лечения были в пределах от 15,9 до 22,22%, абсолютной же численности от

0,652 до 1,100. В сравнении данными биопсии контрольной группы очевидно достоверное отличие относительных показателей. Абсолютное же число клеток имеет явную тенденцию к уменьшению. Так на фоне лечения, данный показатель уменьшился на 20%.

Абсолютное количество эозинофилов на фоне лечения составляло от 0,135 до 0,489. Верхняя граница относительного показателя была от 7,45 до 9,97%. В сравнении с данными, полученными в контроле, видно достоверное отличие относительного показателя. Он увеличился в 1,4 раза, что составляет в среднем 68%.

Абсолютная плотность тучных клеток на фоне

ТК

Таблица

Цитограмма тканевых лейкоцитов в слизистой в оболочке желудка у собак при экспериментальной язвенной болезни на фоне лечения лазерным излучением в ПМП

Параметры, абс. (%) Группы животных

контрольная опытная

Численная плотность лейкоцитов МЛ 10,70±0,26 5,39±0,43*

Лимфоциты % 46,20±3,97 39,96±2,51

МЛ 2,520±0,158 1,972±0,045*

Нейтрофилы % 23,69±1,82 18,81±3,01*

МЛ 1,197±0,145 0,876±0,224

Эозинофилы % 5,89±1,31 8,81±1,26*

МЛ 0,187±0,077 0,312±0,177

Тучные клетки % 3,69±1,17 3,94±1,06

МЛ 0,119±0,064 0,131±0,052

Эритроциты % 7,20±0,34 5,12±0,72*

МЛ 0,271±0,092 0,178±0,066

Моноциты % 4,80±1,41 15,75±2,21*

МЛ 0,154±0,087 0,681±0,075*

Макрофаги % 2,40±0,751 4,31±0,96*

МЛ 0,118±0,125 0,165±0,041

Дегенерирующие клетки % 5,02±1,02 4,56±0,25

МЛ 0,168±0,092 0,167±0,096

Плазматические клетки % 3,50±1,202 2,25±0,85

МЛ 0,131±0,084 0,108±0,058

Примечание: МЛ - численная плотность клеток на 103 кв. мкм площади среза зоны; * - достоверное отличие величин значения между группами сравнения.

противоязвенной терапии лазерным излучением в ПМП составила от 0,0790 до 0,183. Величина относительного показателя данных клеток была в пределах от 2,78 до 4,90%. Относительные различия данного показателя были недостоверны, но отмечалась тенденция к его увеличению, который в ходе лечения увеличился в среднем на 8%. Абсолютное количество тучных клеток достоверно не отличалось в сравниваемых группах.

Количество эритроцитов (абсолютное и относительное) на фоне противоязвенной терапии имело тенденцию к снижению. Абсолютное число составило от 0,112 до 0,244. Относительная численность данных клеток колебалась в пределах от 5,0 до 5,84%. В сравнении с данными, полученными в контроле, имеется достоверное отличие относительных показателей. На фоне терапии, количество эритроцитов в среднем уменьшилось на 30%.

Абсолютное число моноцитов на фоне лечения лазерным излучением в ПМП составляло от 0,605 до 10,656. Относительные показатели колебались в пределах от 13,44 до 16,96%. В сравнении с показателями контроля, очевидно достоверное отличие. Количество моноцитов в ходе лечения увеличилось в 2,9 раза.

Абсолютное количество макрофагов на фоне противоязвенной терапии было от 0,124 до 0,206. Относительная нижняя граница данного вариационного ряда была равной 3,35%, а верхняя -5,27%. В сравнении с показателями контрольной группы, имеется достоверное отличие относительных показателей. На фоне лечения лазерным излучением в ПМП количество макрофагов увеличилось в 1,6 раза.

Регяистрировалась тенденция к уменьшению относительного и абсолютного количества дегенерирующих клеток на фоне проводимой терапии. При этом абсолютное количество данных клеток составило от 0,071 до 0,263. Относительные показатели были в пределах от 4,56 до 4,75%. В сравнении с данными биопсии контрольной группы, отмечается уменьшение количества данных клеток в среднем на 13%.

Абсолютное количество плазматических клеток в собственной пластинке слизистой на фоне противоязвенной терапии лазерным излучением в ПМП составляло от 0,05 до 0,166. Верхняя граница относительного числа данных клеток составляла 2,91%, а нижняя - 1,30%. В сравнении с данными, полученными в контроле видна тенденция к уменьшению данного показателя. На фоне терапии данный показатель уменьшался на 30%.

Проведенные исследования показали, что магнитолазерной терапия при язвенной болезни желудка действительно обладает противовоспалительным и репаративным эффектами, что проявляется снижением активности воспалительной реакции с уменьшением числа лимфоидно-плазматических элементов. Известно что, нейтрофильные гранулоциты играют большую роль во всех этапах развития язвенной болезни и тесно связаны со многими его проявлениями. Эти клетки первыми появляются в участке повреждения тканей организма. Нейтрофилы способны к миграции, осуществляют фагоцитоз и выделяют различные лизосомальные ферменты и медиаторы, повышающие проницаемость сосудов, активирующие Т-лимфоциты и макрофаги. Экстраваскулярная миграция и

аккумуляция нейтрофильных лейкоцитов в участке повреждения и проникновения антигенов - одно их главных проявлений реакции клеточного иммунитета. Обильная инфильтрация тканей нейтрофилами в сочетании с нарушениями микроциркуляции обуславливает нарушение питания тканей [3, 4].

Макрофаги - постоянные участники иммунного ответа организма. Кроме этого, данные клетки секретируют большое количество ферментов, цитокинов и других веществ в окружающие ткани, причем секреция зависит от их активности. Макрофагальные цитокины увеличивают

интенсивность синтеза ДНК в лимфоцитах, ускоряют созревание тимоцитов в Т-клетки. Они ускоряют дифференцировку В-лимфоцитов в плазматические клетки. Система макрофагов представляет собой высокомобильную систему и, взаимодействуя с лимфоцитами, составляет с ними единое функциональное целое [4, 5].

Лимфоциты играют большую роль в организации иммунных клеточных реакций. Лимфоциты всех популяций только временно остаются в ткани лимфоидных органов (в том числе и в лимфоидных образованиях желудка), далее они мигрируют в кровь и ткани и возвращаются в лимфатические узлы через венулы или с током лимфы. Лимфоциты -иммуннокомпетентные клетки, которые

взаимодействуют с другими клетками, осуществляют защиту организма и количественная характеристика лимфоцитов в формировании иммунного процесса и в воспалительном инфильтрате имеет не только теоретический интерес, но и определенное диагностическое и прогностическое значение[1, 4, 5].

Большое количество эозинофилов в тканях всегда следует рассматривать с позиций возможной активации тучных клеток, являющихся предвестниками аллергической реакции

немедленного типа. Видимо, эозинофилы связывают гистамин, выделяемый тучными клетками. Показано, что свою эффекторную функцию, эозинофильные лейкоциты выполняют в очагах иммунного воспаления. Кроме этого, клиническими и лабораторными Данными показано, что некоторые из продуктов секреции этих клеток могут вызывать повреждение эндотелия, тромбообразование и нарушение микроциркуляции [3, 4, 9].

Тучные клетки являются одним из основных источников химических медиаторов воспаления. При повреждении эпителия желудка, ткани и клетки данного органа подвергаются дистрофическим изменениям вплоть до некроза. Продукты распада клеток и тканей, лизосомальные ферменты и химические медиаторы из макрофагов и нейтрофилов приводят к расширению артериального звена микроциркуляторного русла и далее к артериальной и венозной гиперемии, замедлению кровотока, стазу, тромбозу или кровоизлияниям [4, 5].

Повышенная сосудистая проницаемость, характеризующаяся: транссудацией плазмы, выходом клеток из сосудов в ткани начинается сразу после повреждения и гиперемии. Химические медиаторы воспаления также оказывают повреждающее действие на эндотелий капилляров. В первую очередь из

сосудов выходят в ткани нейтрофилы, при выраженном поражении эндотелия появляется диапедез эритроцитов. Несколько позже очаг патологического процесса заполняют моноциты, лимфоциты и макрофаги.

Следует отметить, что большинство клеток, при воспалительных и иммунных реакциях поступает из тока крови, но возможна миграция к месту появления антигена и тканевых макрофагов (резидентных) макрофагов из близлежащих тканей. Причем, динамика макрофагальной реакции связана с течением патологического процесса. При благоприятном течении количество макрофагов резко возрастает, как и в самом патологическом очаге, так и в окружающих тканях [3, 9]. Встречающиеся дегенерирующие клетки, возможно, являются следствием несовершенной пролиферации, что приводит к быстрому апоптозу, а так же может свидетельствовать о повышении клеточного иммунитета и усилении регенерации поврежденных тканей (лизис разрушенных тканей далее появление фибробластов и замещения язвенного дефекта рубцовой тканью.

Таким образом, рубцевание язвы желудка на фоне лечения лазерным излучением в ПМП сопровождается снижением количества лимфоцитов, нейтрофилов, эритроцитов, тучных, плазматических, дегенерирующих клеток и увеличением численности эозинофилов, моноцитов и макрофагов в собственной пластинке слизистой.

ЛИТЕРАТУРА

1. Опыт хирургического лечения язвенной болезни желудка [Текст]/Дж.Абдулаев//Хирургия.-1999.-№6.-С.8-11.

2. Лазерная и магнитная терапия в эксперименте и практике [Текст]/А.И.Аркина.-Самара, 1992.-С.59-62.

3. Самостатические клетки в слизистой оболочки желудка при воспалительном процессе [Текст]/Л.И.Аруин//Клин. мед.-1986.-№9.-С.84-88.

4. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника [Текст]/Л.И.Аруин, В.А.Каппу-ляр.-М.: изд-во «Триада-Х», 1998.-С.358-369.

5. Современные концепции пищеварения [Текст] /А.А.Алиев//Науч. труды Всесоюз. НИИ физиол., биохимии и питания животных.-Боровск, 1985.-Т.30.-С.3-9.

6. Лазерная и магнитная терапия в эксперименте и практике [Текст]/А.И.Аркина.-Самара, 1992.-С.59-62.

7. Лазерная терапия в комплексном лечении

язвенной болезни [Текст]/Л.М.Барсукова,

Н.А. Третьякова//Применение лазерного излучения в клинической практике и эксперименте.-

Благовещенск, 1994.-С.20-22.

8. Влияние облучения слизистой оболочки желудка гелий-неоновым лазером на эпителиальные клетки [Текст]/И.М.Байбеков, Э.Ш.Мусаев//Бюл. эксперим. биол. мед.-1988.-№6.-С.750-752.

9. Язвенная болезнь [Текст]/В.Х.Василенко, А.Л.Гребнев.-М., 1987.-С.224-230.

10. Основы лазерной терапии

[Текст]/В.Е.Иларионов.-М., 1992.-123 с.

11. Лазеротерапия гастродуоденальных язв [Текст]/ В.Н.Кошелев.-Саратов, 1986.-С.128-130.

12. Лазер в лечении ран [Текст]/В.Н.Кошелев.-

Саратов, 1980.-С.141-143.

13. Магнитолазерная терапия язвенной болезни

двенадцатиперстной кишки [Текст]/Т.А.Максименко, О.П.Коротич//Применение лазерного излучения в клинической практике и эксперименте.-

Благовещенск, 1994.-С.24-25.

14. Лазеры в клинической медицине [Текст]/Н. Д. Плетнев .-М., 1991.-С.379-381.

15. Влияние инфракрасной лезеротерапии на состояние местного иммунитета при хроническом

гастрите у детей [Текст]/А.С.Потапова,

Р.П.Нарциссов//Рос. журн. гастроэнрерол., гепатол., колопроктол.-1988.-Т.5, №4.-С.106-108.

16. Медико-биологическое обоснование применение магнитных полей в практике здравоохранения [Текст]/Ю.А.Холодов, Р.С.Трубни-кова.-Л., 1989.-С.20-24.

17. Лазеротерапия язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной и тонкой кишки [Текст]/ М.Б.Хуцишвили.-М.: Медицина, 1990.-С.125-129.

п

УДК 619:616.34:849.19 А.Н. Чубин, Л.А.Набока

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРОЦИРКУЛЯЦИИ СОБСТВЕННОЙ ПЛАСТИНКИ СЛИЗИСТОЙ ЖЕЛУДКА СОБАК С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ ЖЕЛУДКА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ В ПОСТОЯННОМ МАГНИТНОМ ПОЛЕ

Институт ветеринарной медицины и зоотехнии ДальГАУ, Благовещенск

РЕЗЮМЕ

Цель нашего исследования состояла в изучении влияния лазерного излучения в постоянном магнитном поле на

микроциркуляцию в собственной пластинке желудка у собак при экспериментальной язвенной болезни антрального отдела. Применялся щипцовый метод биопсии из язвенного дефекта, тела и антрального отдела желудка. В результате проведенного исследования установлено, что на фоне воздействия лазерного излучения в постоянном магнитном поле, в собственной пластинке желудка собак с экспериментальной язвенной болезнью, купируются признаки воспаления, улучшается микроциркуляция и лимфоток, вследствие чего и снижается количество интерстициальных пространств.

SUMMARY A.N.Chubin, L.A.Naboka

MORPHOLOGIC CHARACTERISTIC OF LAMINA PROPRIA MUCOSAE MICROCIRCULATION SUBJECTED TO LASER IRRADIATION IN MAGNET STATIC FIELD

The purpose of the research was to study the effect of laser irradiation in magnet static field on on microcirculation in gastric lamina propria mucosae in dogs with experimentally induced antral ulcer. Excisional biopsy of ulcer site, gastric body and gastric antral part was used.

The study showed that treatment with laser irradiation in magnet static field resulted in relief of inflammation. Besides, microcirculation and lymph flow improve with the result that the number of interstitial space decreases.

Проблемы лечения язвенной болезни, как в ветеринарной так и медицинской практике по-прежнему остается актуальной, несмотря на успешный синтез все более мощных антисекреторных средств,

цитопротекторов и антибактериальных фармпрепаратов. Не случайно в последние годы вновь возродился интерес к немедикаментозным методам лечения язвенной болезни, в первую очередь к лазеротерапии [10, 13]. Рядом авторов описан механизм чрескожного воздействия лазерного луча на внутренние органы. Есть данные о влиянии лазерного излучения низкой интенсивности на репаративные процессы в тканях. Отмечено устойчивое снижение уровня ПОЛ и повышение активности антиоксидантных ферментов, усиление процессов пролиферации, повышение аэрации тканей, снижение воспалительной реакции, а также улучшение трофики стенки сосудов и капилляров [2, 3, 7, 14].

Магнитное поле способно действовать на микроциркуляцию и агрегацию частиц в кровяном русле. Проводником магнитного тока служит эритроцит, под действием поля происходит изменение зарядов на его мембране, заставляя отталкиваться эритроциты друг от друга. При этом возникает и ваготонический эффект с уменьшением артериальной гипертензии [8]. Наведенное действие силы при сочетанном воздействии лазерного излучения и постоянного магнитного поля на порядок выше, значительно увеличивается глубина проникновения в ткани лазерного излучения, так как магнитное поле деполяризует частицы и ускоряет их движение [2, 3].

Ранее нами установлено [9], что облучение эпигастральной области лазером низкой

интенсивности в постоянном магнитном поле (НИЛИ в ПМП) при остром гастроэнтерите обладает противовоспалительным эффектом, а также увеличивает объемную долю фундальных желез, т.е. воздействует на секреторную функцию желудка.

Цель нашего исследования состояла в изучении влияния лазерного излучения в постоянном магнитном поле на микроциркуляцию в собственной пластинке желудка у собак при экспериментальной язвенной болезни антрального отдела.

Материалы и методы исследования

Экспериментальная часть исследования