Морфоцитохимические показатели лейкоцитов периферической крови и их взаимосвязь при черепно-мозговой травме

МОРФОЦИТОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЛЕЙКОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ И ИХ ВЗАИМОСВЯЗЬ ПРИ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЕ

Винокурова Т.Ю., Ефимова Л.П.

Сургутский государственный университет,

медицинский институт, кафедра госпитальной терапии, г. Сургут

К числу важнейших составляющих патогенеза черепно-мозговой травмы (ЧМТ) в настоящее время относят иммунопатологические процессы, основными клиническими проявлениями которых являются инфекционные осложнения (Горбунов В.И. и соавт., 1996; Linch D.R., 1994). Изменения морфобиохимических и функциональных характеристик различных популяций лейкоцитов крови предшествуют количественным сдвигам и выявляются на более ранних этапах развития патологического процесса (Козинец Г.И. и соавт., 2002; Гребенюк А.Н. и соавт. 1999). Основными клетками, участвующими в иммунных реакциях, являются нейтрофилы и лимфоциты. Оценить функциональную активность данных клеток можно, проведя комплексное изучение морфологических и цитохимических показателей. Учитывая, что в организме все параметры взаимодействуют между собой, важным представляется изучение взаимосвязи морфоцитохимических показателей вообще и при черепно-мозговой травме в частности.

Целью нашей работы явилась оценка морфоцитохимических показателей лейкоцитов периферической крови, определение наличия и характера их взаимосвязи при черепно-мозговой травме.

Материалы и методы. Обследованы 76 человек, из них 31 - больные с легкой черепно-мозговой травмой (сотрясение и ушиб головного мозга легкой степени), 11 - больные с ушибом головного мозга средней степени тяжести, 34 - практически здоровые лица (доноры). Мужчин было 58 (76%), женщин - 18 (24%). Возраст обследованных от 15 до 66 лет. Из исследования исключали больных, у которых имелись или развились явления респираторной вирусной инфекции, гипертермия любой этиологии и декомпенсированная соматическая патология, а также лица в алкогольном и наркотическом опьянении.

Морфоцитохимическое исследование лейкоцитов включало морфометрию лимфоцитов, изучение нуклеолярного аппарата лимфоцитов (по методу К. Smetana (1970) в модификации И.А.Быковой (1973)), определение миелопе-роксидазы (МПО) (по методу Грехема-Кнолля) и лизосомальных катионных белков (ЛКБ) нейтрофилов периферической крови (по методу М.Г.Шубича (1974) в прописи Б.С.Нагоева (1983)). Все исследования выполнены на 1-7-е сутки после повреждения. Данные обрабатывали в программе «Statistica 6,0», используя метод факторного анализа.

Результаты и обсуждение. В результате проведенного исследования установлено, что при ЧМТ происходит увеличение содержания мелких (при легкой ЧМТ - 51,13±3,44%, при среднетяжелой ЧМТ - 43,09±5,79%, у здоровых лиц - 31,8±2,69%) и снижение количества средних лимфоцитов (при легкой ЧМТ - 45,12±3,4%, при среднетяжелой ЧМТ - 53±4,98%, у здоровых лиц - 61,5±2,26%), что приводит к уменьшению средней площади лимфоцитов (при легкой ЧМТ - 56,2±1,78 мкм2, при среднетяжелой ЧМТ - 59,2±2,95 мкм2, у здоровых лиц -65,82±1,66 мкм2). Отличия морфометрических показателей лимфоцитов в группе больных с легкой ЧМТ были статистически значимы по сравнению с аналогичными в группе здоровых лиц (р<0,001). Ядерно-клеточное соотношение у больных с ЧМТ по сравнению с аналогичным в контрольной группе существенно не изменялось (устойчивые ядерно-клеточные соотношения лимфоцитов указывают на антигенную стимуляцию лимфоцитов). Нуклеолярный аппарат лимфоцитов у больных с ЧМТ в 1-7 сутки характеризовался повышенным содержанием ядрышек в одном ядре (нуклеолярный коэффициент) по сравнению со таким же показателем у здоровых лиц (у больных с легкой ЧМТ - 0,95±0,03, у больных с ЧМТ средней тяжести - 0,98±0,07, у здоровых лиц - 0,54±0,02; р<0,001). При ЧМТ происходило увеличение доли гомогенных, активных, нуклеол и уменьшение доли точечных, неактивных, нуклеол по сравнению с аналогичными показателями у здоровых лиц (р<0,05). Относительное содержание гомогенных нуклеол у больных с легкой ЧМТ составляло 7,61±0,77%, у больных с ЧМТ средней тяжести - 7,2±1,44%, у здоровых лиц - 5,0±0,35%; относительное содержание точечных нуклеол 36,46±1,99%, 35,6±4,23% и 43,3±1,65% соответственно. Увеличение процента гомогенных, активно синтезирующих РНК, ядрышек и общего количества ядрышек в одном ядре свидетельствовало об активации ядрышкового аппарата лимфоцитов.

Установлено статистически значимое повышение цитохимического показателя ЛКБ у больных с ЧМТ по сравнению с таким же показателем у здоровых лиц (р<0,001). В группе больных с легкой ЧМТ цитохимический показатель ЛКБ составляет 167,2±2,18 усл.ед., у больных со среднетяжелой ЧМТ - 157,6±7,54 усл.ед., у здоровых лиц -115,1±2,33 усл. ед. Данные изменения можно связать с увеличением количества клеток, содержащих ЛКБ (р<0,001). У больных с ЧМТ средней степени тяжести отмечалось снижение цитохимического показателя МПО (156,4±14,4 усл.ед.) по сравнению с аналогичным показателем у здоровых лиц (177,9±6,57 усл.ед., р<0,05). При легкой ЧМТ цитохимический показатель МПО незначительно повышался (205±13,84 усл.ед.), но эти изменения статистически не значимы по сравнению с таким же показателем в группе здоровых лиц (р>0,05). Однако имелись значимые различия по данному показателю между группами больных с легкой и среднетяжелой ЧМТ (р<0,05).

Изменения микробицидных систем нейтрофилов при травматических повреждениях головного мозга заключались в увеличении содержания ЛКБ (кислороднезависимых систем) и снижении активности МПО (кислородзависимых систем) по сравнению с аналогичными показателями у здоровых лиц.

Материалы IX международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва

Для изучения взаимосвязей морфоцитохимических показателей использовали факторный анализ переменных, имеющих нормальное распределение. В результате анализа выделены 5 факторов для здоровых лиц и для группы больных с легкой ЧМТ, 4 фактора для группы ЧМТ средней степени тяжести.

Установлено, что два фактора выделены для всех исследуемых групп. Фактор, объединяющий показатели, характеризующие активность миелопероксидазы в нейтрофилах. При этом для всех трех показателей (3-я степень активности МПО, процент клеток, содержащих МПО, и цитохимический показатель МПО) установлены статистически значимые связи с фактором. И фактор, объединяющий морфометрические показатели лимфоцитов, которые свидетельствуют о стабильности и равновесии. Это такие показатели как «площадь клетки и площадь ядра, крупные и средние лимфоциты».

Фактор, объединивший показатели содержания ЛКБ в нейтрофилах (3-я степень содержания ЛКБ, процент клеток, содержащих ЛКБ, цитохимический показатель ЛКБ) значим только для группы здоровых лиц. Этот фактор можно определить как группу показателей, характеризующих кислороднезависимые микробицидные системы.

Для ЧМТ легкой и средней степени значимым был фактор, объединивший показатели содержания ЛКБ - процент клеток, содержащих ЛКБ, и цитохимический показатель ЛКБ, а также количество гомогенных нуклеол. Этот фактор можно характеризовать как отражающий активность ЛКБ и ядрышкового аппарата лимфоцитов.

Для легкой ЧМТ в отличие от среднетяжелой выделен фактор, объединяющий показатели, характеризующие морфофункциональное состояние лимфоцитов (площадь клетки, площадь ядра, количество крупных лимфоцитов и количество точечных нуклеол в ядре лимфоцита).

Таким образом, нами установлены характерные для легкой и среднетяжелой ЧМТ мозга изменения количества и взаимосвязи морфоцитохимических показателей. Эти изменения имеют как патогенетическое значение в формировании ответа иммунокомпетентных клеток на повреждение, так и несут диагностическую информацию при оценке степени тяжести повреждений при ЧМТ.

Выводы

1. При черепно-мозговой травме выявлено увеличение содержания мелких, снижение содержания средних лимфоцитов и активация ядрышкового аппарата лимфоцитов, что свидетельствует об антигенной стимуляции лимфоцитов.

2. При травматических повреждениях головного мозга происходит изменение состояния микробицидных систем нейтрофилов в сторону увеличения активности кислороднезависимых и снижения кислородзависимых систем.

3. Для ЧМТ легкой и средней степени тяжести установлена прямая взаимосвязь показателей, отражающих активность лизосомальных катионных белков нейтрофилов и ядрышкового аппарата лимфоцитов. Для легкой ЧМТ установлена прямая взаимосвязь показателей, отражающих морфофункциональное состояние лимфоцитов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2007. Т. 9. № 4.

2. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2006. Т. 8. № 4.

3. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2005. Т. 7. № 4.

4. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2004. Т. 6. № 4.

5. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2003. Т. 5. № 4.

6. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2002. Т. 4. № 4.

7. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2001. Т. 3. № 4.

8. Журнал научных статей. Здоровье и образование в XXI веке. 2000. Т. 2. № 4.

9. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». ЦКЬ: Шр://е-pubmed.org/isu.html. 2007. Т. 9. № 12.

10. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». ЦКЪ: http://e-pubmed.org/isu.html. 2006. Т. 8. № 12.

11. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». ЦКЪ: http://e-pubmed.org/isu.html. 2005. Т. 7. № 12.

12. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». ЦКЪ: http://e-pubmed.org/isu.html. 2004. Т. 6. № 12.

13. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». ЦКЪ: http://e-pubmed.org/isu.html. 2003. Т. 5. № 12.

14. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». ЦКЪ: http://e-pubmed.org/isu.html. 2002. Т. 4. № 12.

15. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». ЦКЪ: http://e-pubmed.org/isu.html. 2001. Т. 3. № 1.

16. Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». ЦКЪ: http://e-pubmed.org/isu.html. 2000. Т. 2. № 1.

Материалы! IX международного конгресса «Здоровье и образование в XXI веке» РУДН, Москва