Исследование прекондиционирующего эффекта резвератрола и никорандила при коррекции ADMA-подобной преэклампсии

В.В. ГУРЕЕВ, Г.А. ЛАЗАРЕВА, Е.Г. СТУПАКОВА, Л.А. ЖИЛИНКОВА

ИССЛЕДОВАНИЕ ПРЕКОНДИЦИОНИРУЮЩЕГО ЭФФЕКТА РЕЗВЕРАТРОЛА И НИКОРАНДИЛА ПРИ КОРРЕКЦИИ ADMA-ПОДОБНОЙ

ПРЕЭКЛАМПСИИ

Кафедра фармакологии, федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»,

Россия, 308015, г. Белгород, ул. Победы, 85.

Тел. (4722) 30-13-73. E-mail: gureev@bsu.edu.ru

Поиск новых лекарственных препаратов, обладающих прекондиционирующими свойствами, является перспективным направлением современной фармакологии. В работе исследовалась роль прекондиционирующих свойств резвератрола и никорандила при коррекции ADMA-подобной преэклампсии.

Введение резвератрола (2 мг/кг) и никорандила (2х10 мг/кг) приводило к выраженной коррекции морфофункцио-нальных нарушений, возникающих при моделировании экспериментальной преэклампсии. Сочетанное введение блокатора К+АТф-каналов - глибенкламида (50 мг/кг) с исследуемыми препаратами практически полностью устраняло протективное влияние резвератрола и никорандила.

Приведенные данные позволяют говорить о значительной роли прекондиционирующих свойств резвератрола и никорандила в реализации положительных эффектов при коррекции морфофункциональных нарушений, возникающих при моделировании ADMA-подобной преэклампсии.

Ключевые слова: преэклампсия, резвератрол, никорандил, прекондиционирование, глибенкламид, крысы.

V.V. GUREEV, G.A. LAZAREVA, E.G. STUPAKOVA, L.A. ZHILINKOVA

STUDY OF EFFECT PREKONDITSIONIRUYUSCHEGO RESVERATROL AND NICORANDIL IN THE

CORRECTION OF ADMA-LIKE PRE-ECLAMPSIA

Department Pharmacology Federal State Autonomous Educational Institution of Higher Education «Belgorod National Research University», Russia, 308015, Belgorod, Victory str., 85.

ТеЬ (4722) 30-13-73. E-mail: gureev@bsu.edu.ru

The search for new drugs have prekonditsioniruyuschimi properties is a promising direction of modern pharmacology. We investigated the role of prekonditsioniruyuschih properties of resveratrol and nicorandil in the correction of ADMA-like pre-eclampsia.

Keeping resveratrol (2 mg/kg) and nicorandil (2x10 mg/kg) led to a marked correction of morphological and functional disorders arise in modeling experimental preeclampsia. Concomitant administration of a blocker of K+ATP-channels -glibenclamide (50 mg/kg) with the test drugs practically eliminate protective effects of resveratrol and nicorandil.

These data suggest a significant role prekonditsioniruyuschih properties of resveratrol and nicorandil in the implementation of the positive effects of the correction of morphological and functional disorders arise when modeling ADMA-like pre-eclampsia.

Key words: preeclampsia, resveratrol, nicorandil, preconditioning, glibenclamide, rats.

Введение обладающих эндотелиопротективной, противо-

Преэклампсия является самым частым забо- ишемической, антиоксидантной активностью

леванием беременных и занимает первое место в [3, 11, 14, 16, 17, 24]. Для коррекции морфофункцио-

причинах материнской и перинатальной смертно- нальных нарушений в условиях ADMA-подобной

сти. В патогенезе этого грозного заболевания все преэклампсии наше внимание привлекли резве-

больше внимание уделяется дисфункции эндоте- ратрол, оказывающий активирующее действие на

лия [5, 6, 7, 15, 26, 25] и плацентарной ишемии [19, eNOS, и никорандил, являющийся донатором NO и

21, 22, 26]. В связи с этим актуальным является активирующий биологические процессы, протека-

направление поиска новых лекарственных препа- ющие при ишемическом прекондиционировании.

ратов для лечения и профилактики преэклампсии, В проведённых исследованиях было выявлено,

что резвератрол и никорандил оказывают выраженное протективное действие при коррекции морфофункциональных нарушений при экспериментальной преэклампсии [10]. Имеющиеся сведения о способности резвератрола и никорандила активировать К+АТФ-каналы логически предопределяли положительные эффекты их применения при коррекции морфофункциональных нарушений при ADMA-подобной преэклампсии [20, 23]. Понятно, что улучшение микроциркуляции за счёт снижения тонуса миоментрия и прекондиционирующий эффект опосредованно улучшают функцию эндотелия за счёт уменьшения ишемии плаценты. Однако исследуемые препараты обладают целым спектром биологических активностей, которые также могут обусловливать положительные эффекты. Поэтому представленные эксперименты посвящены выяснению роли К+АТФ-каналов в механизме протективных эффектов резвератрола и никорандила при ADMA-подобной преэклампсии...

Цель

Исследовать роль К+АТФ-каналов в реализации положительных эффектов резвератрола и нико-рандила в коррекции морфофункциональных нарушений при АйМА-подобной преэклампсии.

Методика исследования

Опыты проводились на белых крысах-самках линии wistar массой 250-300 г. ADMA-подобный агент - неселективный блокатор NO-синтазы ^ни-тро^-аргинин-метиловый эфир ^^АМЕ) вводился внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут в течение 7 дней (14-20-е сутки беременности) [2, 4, 8]. Для определения роли К+АТФ-каналов в реализации положительных эффектов исследуемых фармакологических агентов нами был использован блокатор этих каналов - глибенкламид (50 мг/кг). На 21-е сутки беременности под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) проводили комплекс функциональных проб и анализ биохимических показателей [1, 9, 12, 13]. Беременные самки были разделены на группы (п=10): I - интактные; II - с введением L-NAME; III - с введением L-NAME и резвератрола (2 мг/кг) ; IV - с введением L-NAME и никорандила (2х10 мг/кг); V - с введением L-NAME, никорандила (2х10 мг/кг) и глибенкламида (50 мг/кг); VI - с введением L-NAME, резвератрола (2 мг/кг) и гли-бенкламида (50 мг/кг).

Для всех данных была применена описательная статистика: данные проверены на нормальность распределения. Тип распределения опреде-

лялся критерием Шапиро - Уилка. В случае нормального распределения были подсчитаны среднее значение (M) и стандартная ошибка среднего (m). Межгрупповые различия анализировались параметрическими (t-критерий Стьюдента) или непараметрическими (критерий Манна - Уитни) методами, в зависимости от типа распределения. Статистическую значимость различий между морфологическими изменениями после их ранжирования оценивали с помощью метода анализа непараметрических данных Манна - Уитни. Расчёты выполнены с помощью статистических программ Microsoft Excel 7.0.

Результаты и обсуждение

Блокада NO-синтазы, вызванная семидневным введением L-NAME, приводила к нарушению взаимоотношений вазодилатирующих и вазокон-стрикторных механизмов регуляции сосудистого тонуса, о чём свидетельствовало увеличение КЭД с 1,17±0,10 у интактных беременных животных до 3,36±0,23 (р<0,05). Кроме этого, наблюдался значительный подъём систолического и диасто-лического артериального давления с 133,8±2,45 и 95,4±2,82 до 181,3±4,58 и 144,7±4,09 мм рт. ст. соответственно. Введение блокатора NO-синтазы приводило к значительному снижению показателя микроциркуляции в плаценте с 425,90±39,55 до 210,00±21,08 (р<0,05), а также к снижению содержания стабильных метаболитов NOх в сыворотке крови с 2,35±0,21 мкмоль/л до 1,33±0,09 мкмоль/л (р<0,05) (табл. 1). При микроскопическом исследовании плаценты наблюдаются неравномерное кровенаполнение спонгиозного слоя, вакуольная дистрофия гигантского трофобласта, очаги некроза на границе гигантского трофобласта и дециду-альной ткани, дистрофические изменения и малокровие децидуального слоя.

Введение никорандила приводило к нормализации взаимоотношения вазодилатирующих и ва-зоконстрикторных реакции при экспериментальной преэклампсии, о чём свидетельствует снижение КЭД до 1,96±0,13. Кроме того, отмечалось статистически значимое снижение диастолическо-го артериального давления до 126,9±6,3 мм рт. ст. (р<0,05). Исследование микроциркуляции плаценты выявило её существенное улучшение, однако целевого уровня оно не достигало.

При биохимическом исследовании сыворотки крови обнаружено статистически значимое предотвращение снижения содержания стабильных метаболитов NO. Микроскопическое исследова-

ние плаценты выявило резко выраженную положительную динамику гистологической картины, заключающуюся в отсутствии деструктивных повреждений.

Выводы

Таким образом, результаты проведённых серий экспериментов позволяют сделать вывод о том, что К+ -каналы играют значительную роль

Таблица 1

Результаты коррекции ADMA-подобной преэклампсии у крыс ^±m; N=10)

САД мм рт. ст. ДАД мм рт. ст. КЭД усл. ед. Микроциркуляция пер. ед. Концентрация нитрит-ионов (NOx) мкмоль/дЛ

Интактные 133,8±2,45у 95,36±2,82у 1,17±0,10у 452,4±27,16у 2,22±0,07у

L-NAME 181,3±4,58* 144,7±4,09* 3,36±0,23* 213,7±14,97* 1,27±0,04*

L-NAME + никорандил 174,1±6,14* 126,9±6,3у* 1,96±0,13у* 377,9±18,8у* 1,80±0,07у*

L-NAME + резвератрол 154,6±7,53у* 110,90±8,71у 3,36±0,41* 409,9±30,57у 1,78±0,05у*

L-NAME + резвератрол + глибенкламид 158,1±5,16y 120,8±3,16у 2,95±0,22* 257,1±14,88* 1,57±0,04у

L-NAME + никорондил + глибенкламид 186,0±7,46* 134,5±8,92* 2,55±0,0,17*у 289,9±13,2*у 1,47±0,05у

Примечание: САД, ДАД - систолическое и диастолическое артериальное давление (мм рт. ст.); КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции (у.е.); микроциркуляция в плаценте (Пер/ед); концентрация нитрит-ионов (1\Юх); *- р < 0,05 в сравнении с группой интактных животных; у- р < 0,05 в сравнении с группой L-NAME.

Введение резвератрола приводило к существенной коррекции морфофункциональных изменений при моделировании ADMA-подобной преэклампсии. Это выразилось в снижении систолического и диастолического артериального давления. Уровень микроциркуляции в плаценте и содержание конечных метаболитов N0 в плазме крови достигал уровня статистически не отличимого от группы интактных животных. Однако нужно отметить, что КЭД оставался на прежнем уровне.

Введение глибенкламида в сочетании с резве-ратролом и никорандилом значительно снижало эффективность данных препаратов, но не полностью. Происходили подъём артериального давления, повышение коэффициента эндотелиальной дисфункции, ухудшение микроциркуляции в плаценте, снижение концентрации конечных метаболитов оксида азота в плазме крови. Введение резвератрола и никорандила в комбинации с гли-бенкламидом животным с АйМА-подобной пре-эклампсией приводило к ухудшению морфологической картины в плаценте. В ней наблюдались фиброзные отложения, дистрофические изменения гигантоклеточного трофобласта и децидуаль-ного слоя выражены не значительно, присутствовали единичные очаги некроза.

в реализации положительных эффектов резвератрола и никорандила при коррекции морфофункциональных нарушений при ADMA-подобной преэклампсии, но не обуславливают их полностью. Результаты проведённого эксперимента дают основания утверждать о перспективности нового направления поиска лекарственных препаратов для коррекции преэклампсии и необходимости дальнейшего исследования препаратов, обладающих прекондиционирующей активностью.

ЛИТЕРАТУРА

1. Возможности фармакологической коррекции хронической ишемии конечности в эксперименте / Артюшкова Е.Б., Пашков Д.В., Покровский М.В. и др. // Эксперим. и клинич. фармакология. - 2008. - Т. 71. № 3. - С. 23-25.

2. Влияние L-аргинина, витамина В6 и фолиевой кислоты на показатели эндотелиальной дисфункции и микроциркуляции в плаценте при моделировании L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота / М.В. Покровский, О.О. Новиков, В.В. Гуреев [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2011. - Т. 152. № 7. - С. 77-80.

3. Гуреев В.В. ADMA - eNOS - детерминированные пути фармакологической коррекции гестоза / Гуреев В.В., Покровский М.В., Корокин М.В. и др. - Белгород: Изд-во БелГУ, 2014. -265 с.; ил.

4. Гуреев В.В. Коррекция ADMA-подобного гестоза в эксперименте с помощью ингибитора аргиназы L-норвалина и препаратов, входящих в стандартную схему лечения / В.В. Гуреев, О.С. Полянская, А.А. Должиков // Курский научно-практический

вестник «Человек и его здоровье». - 2012. - № 2. - С. 14-20. 5. Гуреев В.В. Эндотелиальная дисфункция - центральное звено в патогенезе гестоза / В.В. Гуреев // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Сер. «Медицина. Фармация». - 2012. - № 4 (123), вып. 17/1. - С. 5-12.

6. Зайнулина М.С., Мозговая Е.В., Нианури Д.А. Диагностическое значение эндотелиограммы у беременных с поздним ге-стозом и сахарным диабетом // Журнал акушерства и женских болезней. - 1999. - № 2. - С.22-24.

7. Зайнулина М.С., Петрищев Н.Н. Эндотелиальная дисфункция и её маркеры при гестозе // Журнал акушерства и женских болезней - 1997. - № 3. - С.18-22.

8. Использование L-аргинина в коррекции эндотелиаль-ной дисфункции при экспериментальной преэклампсии / М.В. Покровский, Т.Г. Покровская, В.В. Гуреев [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2012. - Т. 75. № 2. -С. 14-16.

9. Коррекция ADMA-подобного гестоза в эксперименте / В.В. Гуреев, С.А. Алехин, А.А. Должиков, А.С. Мостовой // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». - 2012.

- № 1. - С. 14-19.

10. Коррекция эндотелиальной дисфункции никорандилом, тетрагидробиоптерином и резвератролом при моделировании экспериментального гестоза / Гуреев В.В., Жилинкова Л.А., Сту-пакова Е.Г. // Фундаментальные исследования. - 2015. - № 1-1.

- С. 58-62.

11. Коррекция дистантным ишемическим прекондициони-рованием эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобном экспериментальном гестозе / В.В. Гуреев, М.В. Покровский, А.А. Должиков [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Сер. «Медицина. Фармация». - 2012.

- № 4 (123), вып. 17/1. - С. 128-134.

12. Покровский М.В., Кочкаров В.И., Покровская Т.Г. и др. Методические подходы для количественной оценки развития эндотелиальной дисфункции при L-NAME-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте // Кубанский науч. мед. вестн. - 2006. - № 10 (91). - С. 72-77.

13. Пути коррекции NO-дефицитного состояния при патологии беременных в эксперименте / В.В. Гуреев, М.В. Покровский, О.С. Полянская [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Сер. «Медицина. Фармация». -2011. - № 4 (99), вып. 13/2. - С. 40-43.

14. Реалии и перспективы фармакологической коррекции ADMA-eNOS - ассоциированных путей при преэклампсии / М.В. Покровский, Н.Г. Филиппенко, В.В. Гуреев [и др.] // Рациональная фармакотерапия в кардиологии. - 2010. - № 6 (6). - С. 882-887.

15. Супряга О.М. Роль эндотелиальной дисфункции в генезе гипертензивных состояний у беременных // Акуш. и гинекол. -1995. - № 6. - С. 5-9.

16. Тюренков И.Н., Перфилова В.Н., Попова Т.А. и др. Изменение оксидантного и антиоксидантного статуса у самок с экспериментальным гестозом под влиянием производных ГАМК // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2013. -Т. 155. № 3. - С. 340-344.

17. Фармакологическая коррекция ADMA-eNOS-ассоцииро-ванных мишеней при преэклампсии / М.В. Покровский, Т.Г. Покровская, В.В. Гуреев [и др.] // Акушерство и гинекология. - 2011. -№ 2. - С. 16-20.

18. Хецуриани Т. Факторы, участвующие в нарушении метаболизма оксида азота и развитии эндотелиальной дисфункции при преэклампсии / Т. Хецуриани // Аллергология и иммунология. - 2004. - Т. 5. № 3. - С. 393-395.

19. Crocker I Gabor Than Award Lecture 2006: pre-eclampsia and villous trophoblast turnover: perspectives and possibilities // Placenta. - 2007 - Apr; 28 Suppl A: S4-13.

20. Dietary supplementation with resveratrol protects against striatal dopaminergic deficits produced by in utero LPS exposure / K.M. Rose, M.S. Parmar, J.E. Cavanaugh // Brain Res. - 2014. -№ 1573. - P. 37-43.

21. Ducray J.F., Naicker T, Moodley J. Pilot study of comparative placental morphometry in pre-eclamptic and normotensive pregnancies suggests possible maladaptations of the fetal component of the placenta. // European Journal of Obstetrics Gynecology and Reproductive Biology. 2011 May; 156(1):29-34.

22. Purkerson M.L., Vekerdy L. A history of eclampsia, toxemia and kidney in pregnancy // Am. J. Nephrol. - 1999. - 19:2. - P. 313319.

23. Regulation of myometrial contraction by ATP-sensitive potassium (KATP) channel via activation of SUR2B and Kir 6.2 in mouse / S.H. Hong, K.S. Kyeong, C.H. Kim [et al]. - J Vet Med Sci. 2016 Apr 18. [Epub ahead of print]

24. Remote Ischemic Preconditioning Correction in Adma-Like Gestosis Model / Gureev V.V., Alehin S.A., Pokrovskiy M.V. [et al.] // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2014. - № 5. - Vol. 1095-1098.

25. Robertson W.B., Khong T.Y. Hypertension in pregnancy // Eds F. Sharp, E.M Symonds. - New York, 1987. - P. 101-193.

26. Van Oppenraaij RH, Bergen NE, Duvekot JJ, de Krijger RR, Hop Ir WC, Steegers EA, Exalto N. Placental vascularization in early onset small for gestational age and preeclampsia. // Reproductive Science 2011 Jun; 18(6):586-93.

Поступила 08.07.2016

Б.Н. ГУРМИКОВ12, М.С. БОЛОКОВ12, А.Б. АПИШЕВА2

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНОГО СПОСОБА ЛЕЧЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМ ДЕСТРУКТИВНЫМ ПАНКРЕАТИТОМ

1Кафедра хирургии № 1 и последипломного образования ФГБОУ ВПО «МГТУМедицинский институт», 385000, г. Майкоп, ул. Первомайская, 191. Тел. 8 (8772) 52-31-31. E-mail: gurmikov@mail.ru 2Хирургическое отделение ГБУЗ РА «Адыгейская республиканская клиническая больница», 385000, г. Майкоп, ул. Жуковского, 4. Тел. 8 (8772) 52-47-54

В настоящее время остаётся актуальным вопрос в отношении целесообразности чрескожных пункционно-дре-нирующих, эндоскопических и традиционных хирургических вмешательств при остром деструктивном панкреатите. Цель работы заключалась в определении тактики ведения больных в зависимости от ультрасонографической и КТ-картины патоморфологических изменений поджелудочной железы. В клинике пролечено 429 пациентов с острым панкреатитом. Из них деструктивный панкреатит имел место у 96 (22,34 %) пациентов. 83 (86,46 %) пациен-