АНТИТЕЛА, НАПРАВЛЕННЫЕ ПРОТИВ ИММУНОГЛОБУЛИН-СВЯЗЫВАЮЩИХ БЕЛКОВ S. AUREUS

1. Моноклональное антитело, противодействующее Staphylococcus aureus, которое содержит связывающий сайт CDR, специфически распознающий SpA-E дикого типа Staphylococcus aureus, и является перекрестно-специфичным и дополнительно распознает по меньшей мере SpA-A и SpA-D Staphylococcus aureus и представляет собой:
H
L
H
L
a) антитело, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи антитела (V) и вариабельный домен легкой цепи антитела (V), которые характеризуются шестью определяющими комплементарность участками (CDR) CDR1-CDR6, причем CDR1, CDR2 и CDR3 содержатся в V, а CDR4, CDR5 и CDR6 содержатся в V, причем последовательности CDR1-CDR6 являются любыми из антител, приведенных в таблице 1; или
b) функционально активный вариант антитела (a) (исходного антитела), причем функционально активный вариант характеризуется одной или несколькими точечными мутациями в любой из последовательностей CDR1-CDR6 данного исходного антитела, при этом получается CDR-вариант, у которого последовательность по меньшей мере на 60% идентична соответствующей исходной последовательности CDR;
D
D
причем данное антитело связывается с SpA дикого типа и мутантным SpA с соотношением констант диссоциации K (мутантный SpA) / K (SpA дикого типа) по меньшей мере 0,5 при определении по связыванию с SpA-D дикого типа и мутантного SpA-D, при этом данный SpA-D дикого типа состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID 138, а указанный мутантный SpA-D состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID 143.
2. Антитело по п. 1, при этом связывающий сайт CDR также распознает по меньшей мере один из SpA-B, SpA-C, Sbi-I и Sbi-II.
3. Антитело по п. 1 или 2, которое распознает по меньшей мере три домена иммуноглобулин-связывающего белка (IGBP), предпочтительно по меньшей мере четыре, пять или шесть доменов IGBP, причем предпочтительно оно распознает по меньшей мере три домена IGBP.
4. Антитело по любому из пп. 1-3, которое распознает по меньшей мере SpA-E, SpA-A и SpA-D.
5. Антитело по любому из пп. 1-4, которое конкурирует с SpA и необязательно с Sbi за связывание с IgG-Fc.
6. Антитело по любому из пп. 1-5, которое представляет собой полноразмерное моноклональное антитело, фрагмент такого антитела, содержащий по меньшей мере связывающий сайт CDR, или слитый белок, содержащий по меньшей мере связывающий сайт CDR, при этом данное антитело не встречается в природе и включает рандомизованную или искусственную аминокислотную последовательность.
7. Антитело по любому из пп. 1-6, где функционально активный вариант представляет собой человеческий, гуманизованный, химерный или мышиный и/или прошедший созревание сродства вариант исходного антитела.
8. Антитело по любому из пп. 1-7, при этом функционально активный вариант включает одну или более точечных мутаций в любой из исходных последовательностей CDR, причем количество точечных мутаций в каждой из исходных последовательностей CDR составляет 0, 1, 2 или 3.
9. Антитело по любому из пп. 1-8, которое выбрано из группы, состоящей из её представителей (i) и (ii), причем:
(i)
A) антитело содержит:
a) CDR1, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 43; и
b) CDR2, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 44; и
c) CDR3, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 45; и
d) CDR4, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 103; и
e) CDR5, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 104; и
f) CDR6, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 105;
либо: B) антитело является функционально активным вариантом антитела A, у которого последовательность по меньшей мере на 60% идентична в каждой из последовательностей CDR, которые характеризуются тем, что количество точечных мутаций в каждой из последовательностей CDR составляет 0, 1, 2 или 3;
или (ii)
A) антитело содержит:
a) CDR1, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 13; и
b) CDR2, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 14; и
c) CDR3, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 15; и
d) CDR4, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 73; и
e) CDR5, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 74; и
f) CDR6, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 75;
либо: B) антитело является функционально активным вариантом антитела A, у которого последовательность по меньшей мере на 60% идентична в каждой из последовательностей CDR, которые характеризуются тем, что количество точечных мутаций в каждой из последовательностей CDR составляет 0, 1, 2 или 3.
H
L
H
L
10. Моноклональное антитело, противодействующее Staphylococcus aureus, которое содержит связывающий сайт CDR, специфически распознающий SpA-E дикого типа Staphylococcus aureus и является перекрестно-специфичным и дополнительно распознает по меньшей мере SpA-A и SpA-D Staphylococcus aureus, а также содержит вариабельный домен тяжелой цепи антител (V) и вариабельный домен легкой цепи антител (V), которые характеризуются шестью определяющими комплементарность участками (CDR) CDR1-CDR6, причем CDR1, CDR2 и CDR3 содержатся в V, а CDR4, CDR5 и CDR6 содержатся в V, которое выбрано из группы, состоящей из её представителей (i) и (ii), причем:
(i)
A) антитело содержит:
a) CDR1, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 43; и
b) CDR2, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 44; и
c) CDR3, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 45; и
d) CDR4, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 103; и
e) CDR5, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 104; и
f) CDR6, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 105;
либо: B) антитело является функционально активным вариантом антитела A, у которого последовательность по меньшей мере на 60% идентична в каждой из последовательностей CDR;
или (ii)
A) антитело содержит:
a) CDR1, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 13; и
b) CDR2, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 14; и
c) CDR3, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 15; и
d) CDR4, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 73; и
e) CDR5, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 74; и
f) CDR6, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID 75;
либо: B) антитело является функционально активным вариантом антитела A, у которого последовательность по меньшей мере на 60% идентична в каждой из последовательностей CDR.
11. Антитело по любому из пп. 1-6, которое включает любую из последовательностей HC по SEQ ID 152-162 и последовательность LC по SEQ ID 163.
12. Антитело по любому из пп. 1-11 для применения при лечении субъекта, подверженного риску или страдающего от инфекции или колонизации S. aureus, включающем введение указанному субъекту эффективного количества антитела для ограничения инфекции у него или для ослабления вызванного данной инфекцией заболевания или для подавления патогенеза заболевания, вызванного S. aureus, типа пневмонии, сепсиса, бактериемии, раневой инфекции, абсцесса, послеоперационной инфекции, эндофтальмита, фурункулеза, карбункулеза, эндокардита, перитонита, остеомиелита или инфекции суставов.
13. Фармацевтический препарат, включающий антитело по любому из пп. 1-11, предпочтительно составляющий парентеральную или мукозальную лекарственную форму, необязательно содержащую фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель.
14. Антитело по любому из пп. 1-11 для диагностического применения для выявления любых инфекций S. aureus, включая инфекции вырабатывающими много токсина штаммами MRSA типа некротизирующей пневмонии и продукцию токсина при фурункулезе и карбункулезе.
15. Диагностический препарат антитела по любому из пп. 1-11, необязательно содержащий данное антитело с меткой и/или другой диагностический реагент с меткой.
16. Выделенные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие антитело по любому из пп. 1-11.
17. Способ получения антитела по любому из пп. 1-11, при этом клетка-хозяин, содержащая кодирующую последовательность для экспрессии легкой цепи и тяжелой цепи антитела по любому из пп. 1-11, культивируется или содержится в условиях для продукции данного антитела.