Изучение профиля гиперчувствительности к пыльцевым и грибным аллергенам в московском регионе

иммунология

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 616-056.43-074

Ахапкина И.Г., Краханенкова С.Н., Добронравова Е.В., Шушпанова Е.Н.

изучение профиля гиперчувствительности к пыльцевым и грибным аллергенам в московском регионе

ФГБУ "НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова" РАМН, Москва 105064, Москва, Россия

Профиль гиперчувствительности к пыльцевым и грибным аллергенам (АГ) является важным элементом общей картины иммунных заболеваний, необходимым для разработки эффективности лечебных препаратов.

Цель работы заключалась в анализе частоты выявления сочетанных форм гиперчувствительности к пыльцевым и грибным АГ (пыльцы березы, лещины, ежи сборной, полыни, грибов A. alternata, C. herbarum, R. nigricans, P. notatum, C. albicans, A. fumigatus) в Московском регионе на основании данных скарификационных кожных проб.

Моносенсибилизация была выявлена в 23,36% случаев гиперчувствительности, при этом ведущими оказались АГ A. alternata и пыльцы ежи (6,54 и 4,67°%), далее следовали АГ пыльцы полыни, P. notatum, R. nigricans, пыльцы березы, C. albicans (3,74, 3,74, 1,87, 1,87, 0,93% соответственно). Полисенсибилизация была выявлена в 51,40% случаев, причем чаще встречалась сочетанная гиперчувствительность к пыльцевым АГ растений (20,6%) и к пыльцевым и грибным АГ (20,56%). В группе пациентов с полисенсибилизацией преобладали сочетанные аллергические реакции на пыльцевые АГ и АГ A. alternata (36,36%). В целом по частоте встречаемости лидировали сенсибилизация к АГ пыльцы березы, ольхи, лещины, полыни, ежи сборной и АГ A. alternata (76,14, 69,32, 57,95, 55,68, 39,77 и 56,82% соответственно). В Московском регионе преобладают сочетанные формы гиперчувствительности к двум и более пыльцевым и грибным АГ. Чаще встречается полисенсибилизация к пыльцевым АГ и АГ A. alternata.

Ключевые слова: сочетанная гиперчувствительность; грибные аллергены; пыльцевые аллергены" моносенсибилизация; полисенсибилизация.

I.G. Akhapkina, S.N. Krakhanenkova, E.V. Dobronravova, E.N. Shushpanova

THE STUDY OF PROFILE OF HYPERSENSITIVITY TO POLLEN AND FUNGAL ALLERGENS IN THE MOSCOW REGION

The I.I. Metchnikov research institute of vaccines and serums of of the Russian academy of medical sciences, Moscow, Russia The profile of hypersensitivity to pollen and fungal allergens is an important element of common pattern of immune diseases needed for development of effective pharmaceuticals. The purpose of the study was to analyze the rate of detection of combined forms of hypersensitivity to pollen and fungal allergens (pollen of birch, hazel, cocksfoot, wormwood, fungi A. alternata, C. herbarum, R. nigricans, P. notatum, C. albicans, A. fumigatus) in the Moscow region on the basis of data of scarification skin samples. The mono-sensibilization was established in 23.36% of all cases of hypersensitivity. At that, among leading allergens turned out A. alternata and cocksfoot pollen (6.540% and 4.67%), followed by allergens of wormwood pollen, P. notatum, R. nigricans, birch pollen and C. albicans (3.740%, 3.740%, 1.87%, 1.87% and 0.93% correspondingly). The polysensibilization was established in 51.40% of cases. Besides, the combined hypersensitivity to pollen allergens ofplants (20.26%) and to pollen and fungal allergens (20.56%) occurred more frequently. In the group of patients with polysensibilization predominated combined allergic reactions to pollen allergens and A. alternata allergens (36.36%). On the whole, most frequently occurred sensitization to allergens of birch, hazel, cocksfoot, wormwood and A. alternata allergen (76.140%, 69.32%, 57.95%, 55.68%, 39.77% and 56.82% correspondingly). In the Moscow region predominate combined forms of hypersensitivity to two and more pollen and fungal allergens. The polysensitization to pollen allergens and A. alternata allergen occurs more frequently.

Keywords: combined hypersensitivity, fungal allergen, pollen allergen, monosensitization, polysensitization

Одним из наиболее эффективных способов помощи людям с гиперчувствительностью к ингаляционным аллергенам (АГ) является своевременное проведение специфической иммунотерапии (СИТ). Успешность СИТ, а соответственно и качество жизни людей с аллергопатологией, в значительной степени зависит от эффективного выявления провокационного АГ. Однако нередки случаи сочетанной гиперчувствительности, причем не всегда к близкородственным АГ. В частности, особый интерес представляют проявления сочетанной гиперчувствительности как к нескольким видам пыльцевых АГ, так и пыльцевых и грибных АГ. Основанием для этого служат не только известные перекрестные реакции, но и со-

Для корреспонденции:

Ахапкина Ирина Гавриловна, isun17@yandex.ru

временные исследования ассоциации пыльцы растений и грибов, которые показывают, что в той или иной степени пыльца практически всех растений несет на себе споры грибов [1, 2], причем уже доказано, что зараженность пыльцы грибами не обусловлена случайным фактором внешнего поражения. Это было показано на примере изучения ассоциации грибов с мужскими соцветиями березы повислой (Betula pendula). В этом случае грибы высевались как с раскрывшихся соцветий, так и с внутренней части, после предварительной дезинфицирующей обработки внешней части соцветий (личное сообщение Антроповой А.Б.]. Следовательно, в периоды пы-ления человек подвергается массивному воздействию пыльцевых и грибных АГ одновременно. Более того, полисахарид-ные антигены грибов в настоящее время признаны в качестве соединений, обладающих адъювантными свойствами [3, 4]. Поэтому изучение профиля гиперчувствительности, в част-

КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА, № 5, 2014

ности к пыльцевым и грибным АГ, представляется весьма важным для получения общей картины иммунных заболеваний, понимания их механизма и способов помощи больным. Отсюда вытекает и проблема качества аллергенных экстрактов и состава аллерговакцин для проведения специфической иммунотерапии, а также разработка способов и препаратов для дифференциальной диагностики.

Цель данной работы заключалась в анализе частоты выявления сочетанных форм гиперчувствительности к пыльцевым и грибным АГ в Московском регионе на основании данных скарификационных кожных проб.

Материалы и методы. В работе использовали аллергенные экстракты грибов Alternaria alternata, Cladosporium herbarum, Rhizopus nigricans, Penicillium notatum, Candida albicans, Aspergillus fumigatus (10 000 PNU/мл, Allergop-harma, Германия), тест-контрольную жидкость ("Биомед", Петрово-Дальнее, РФ), контрольный раствор гистамина-902 (Histamine 1+999, Allergopharma, Германия), коммерческие АГ пыльцы ольхи клейкой (Alnus glutinosa), березы повислой (Betula pendula Roth), лещины обыкновенной (Corylus avellana), ежи сборной (Dactylis glomerata), полыни горькой (Artemisia absinthium) ("Микроген", Москва). Для выявления гиперчувствительности использовали метод постановки скарификационных кожных проб. Внутреннюю часть предплечья протирали раствором 96% этилового спирта для подсушивания кожного покрова, затем наносили по капле тестируемого АГ, тест-контрольной жидкости и раствора гистамина. Стерильным одноразовым скарификатором производили по две параллельные царапины (длиной 0,5 см) в месте нанесения растворов. Через 20 мин проводили визуальный контроль. АГ и контрольные жидкости стирали 96% раствором этилового спирта для предотвращения развития иммунологических реакций и инфекционного заражения. Анализ частоты встречаемости сенсибилизации к выбранным АГ проводили среди пациентов, обратившихся в поликлинико-диагностический отдел института в течение года. В 1-ю группу включено 107 человек в возрасте от 3 лет до 41 года с подозрением на сенсибилизацию к бытовым, грибным и пыльцевым АГ. Во 2-й группе было 88 человек

301 25-

о;

i 20 И ш

I 15

л

= ЮН ss

50

25,24

20,56

4,67

6,54

8,41

1,87

3,74

3,74

0 0

1,87,

0,93

ZZA

6|*5,61 1,87

8,41

--1-Г" "Г" "I" "Г" "I-^г.,.^.,.""!' Г Г

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

Рис. 1. Общий профиль гиперчувствительности к пыльцевым и грибным аллергенам в московском регионе.

1 - гиперчувствительность к аллергену пыльцы березы; 2 - гиперчувствительность к аллергену пыльцы лещины; 3 - гиперчувствительность к аллергену пыльцы ежи сборной; 4 - гиперчувствительность к аллергену пыльцы полыни; 5 - гиперчувствительность к аллергену A. alternata; 6 - гиперчувствительность к аллергену C. herbarium; 7 - гиперчувствительность к аллергену A. fumigatus; 8 - гиперчувствительность к аллергену P. notatum; 9 - гиперчувствительность к аллергену R. nigricans; 10 - гиперчувствительность к аллергену C. albicans; 11 -сочетанная гиперчувствительность к аллергенам пыльцы деревьев; 12 -сочетанная гиперчувствительность к аллергенам пыльцы трав; 13 - сочетанная гиперчувствительность к пыльцевым аллергенам; 14 - соче-танная гиперчувствительность к аллергенам грибов; 15 - сочетанная гиперчувствительность к пыльце деревьев и грибов; 16 - сочетанная гиперчувствительность к аллергенам пыльцы трав и грибов; 17 - сочетанная гиперчувствительность к пыльцевым и грибным аллергенам; 18 - не выявлена гиперчувствительность.

в возрасте от 4 до 52 лет с полисенсибилизацией к грибным и пыльцевым АГ.

Результаты и обсуждение. Для выявления чувствительности к АГ обычно используют либо различные модификации способа постановки кожных проб, либо определение количества специфических иммуноглобулинов класса Е (IgE) иммунохимическими методами. В данном случае нами был выбран метод постановки кожных скарификационных проб, диагностическая чувствительность которого уступает только чувствительности способа внутрикожных проб [5].

Результаты скарификационных кожных проб относительно так называемой индивидуальной панели АГ, включающей рассматриваемые в данном исследовании АГ пыльцы березы, лещины, ежи сборной, полыни, грибов A. alternata, C. herbarum, R. nigricans, P. notatum, C. albicans, A. fumigatus, а также АГ домашней пыли, пера подушки, библиотечной пыли, эпителия собаки, кошки и лошади, клещей домашней пыли, пыльцы тимофеевки, подсолнечника, одуванчика, позволили изучить общий профиль гиперчувствительности пациентов к пыльцевым и грибным АГ в Московском регионе. Так, у 27 (25,24%) человек не была обнаружена аллергическая реакция на рассматриваемые пыльцевые и грибные АГ. Положительная реакция только на один АГ из изучаемых была выявлена у 25 (23,36%) человек. При этом 55 (51,40%) человек продемонстрировали полисенсибилизацию к двум АГ и более. Общий профиль гиперчувствительности к пыльцевым и грибным АГ в Московском регионе представлен на рис. 1. Интересно отметить, что случаи моносенсибилизации к АГ пыльцы трав, лещины, а также широко распространенным в окружающей среде грибам C. herbarum, A. fumigatus не были выявлены. По количеству моносенсибилизации к пыльцевым АГ выделялся АГ ежи сборной, среди грибных АГ доминировал АГ A. alternata. Сочетанная гиперчувствительность к пыльцевым АГ встречалась наиболее часто, однако не была отмечена в отношении АГ пыльцы только трав.

В то же время полисенсибилизация к АГ пыльцы деревьев выявлялась с той же частотой, что и полисенсибилизация к пыльцевым и грибным АГ. Несколько меньше было количество случаев сочетанной гиперчувствительности к АГ как пыльцы деревьев и грибным, так и пыльцы трав и грибов. Полисенсибилизация только к грибным АГ встречалась редко. При этом частота выявления сочетанной гиперчувствительности к АГ грибов и пыльцевым АГ в разных модификациях равнялась частоте выявления полисенсибилизации только к пыльцевым АГ и составляла 20,56%. Известно, что в пыльцевых аллергенных экстрактах присутствует такое аллергенное соединение, как профилин, который часто на-

40 35 30

к

I 25

5 20 1 15

ш

^ ю

5 0

36,36

15,92

3,42

4,54

12,5

6,82

,5,68

« 2.27

Ока о

4,54 4,54

1 2 3 4 5 6 7 8  'ío'M'KWa'M'Ve'Ve'

Рис. 2. Профиль гиперчувствительности к пыльцевым и грибным аллергенам при полисенсибилизации. Сочетанная гиперчувствительность к АГ: 1 - пыльцы деревьев, 2 -пыльцы трав, 3 - пыльцевым, 4 - грибов, 5 - пыльцевым и A. alternata, 6 - пыльцевым и C. albicans, 7 - пыльцевым и R. nigricans, 8 - пыльцевым и P. notatum, 9 - пыльцевым и A. fumigatus, 10 - пыльцевым и C. gerbarum, 11 - грибов и ольхи, 12 - грибов и березы, 13 - грибов и лещины, 14 - грибов и ежи сборной, 15 - грибов и полыни, 16 - сочетан-ная гиперчувствительность к двум и более АГ грибов и к двум и более пыльцевым АГ.

80 70 60 50 40 30 20 10 О

69,32

76,14

57-95 55,68 56,82 39,77

20,45

11,36 4,54 Щ 5,68

тЩ т.

17,04

1

4

8 9 10 11

Рис. 3. Частота выявления гиперчувствительности к различным аллергенам при полисенсибилизации.

Гиперчувствительность к АГ: 1 - пыльцы ольхи, 2 - пыльцы березы, 3 - пыльцы лещины, 4 - пыльцы ежи сборной, 5 - пыльцы полыни,

6 - A. alternata, 7 - C. herbarium, 8 - A. fumigatus, 9 - P. notatum, 10 -R. nigricans, 11 - C. albicans.

зывают паналлергеном. Но, поскольку в рамках данной работы не определялась чувствительность к индивидуальным аллергенным соединениям, то относить полученные данные к перекрестным реакциям, вероятно, преждевременно.

Показатели пациентов с полисенсибилизацией (2-я группа) были использованы для анализа характеристик сочетан-ной гиперчувствительности к АГ пыльцы ольхи, березы, лещины, ежи сборной, полыни, грибов A. alternata, C. herbarum, R. nigricans, P. notatum, C. albicans, A. fumigatus. Данные представлены на рис. 2. Общий профиль гиперчувствительности к пыльцевым и грибным АГ при полисенсибилизации демонстрировал наибольшее число случаев сочетанных аллергических реакций на пыльцевые АГ и АГ A. alternate. С АГ других грибов эти показатели были в несколько раз ниже. Однако A. alternate не является самым распространенным грибом в регионе [6]. Можно предположить, что аллергенный экстракт этого гриба обладает сильно выраженными имму-ногенными свойствами. Полисенсибилизация к грибным АГ в разных сочетаниях и к индивидуальному пыльцевому АГ (см. рис. 2, 11-15) выявлялась только в случаях АГ березы, ежи сборной и полыни, причем количество таких пациентов было невелико. И если достаточно высокий процент случаев выявления сочетанной гиперчувствительности к АГ пыльцы растений был характерен для общего профиля сенсибилизации, то количество случаев сочетанных аллергических реакций на два и более пыльцевых и два и более грибных АГ в данной группе увеличилось в процентном соотношении. Интересно отметить, что и в этой группе пациентов не были выявлены случаи сочетанной гиперчувствительности к АГ ежи сборной и полыни. Сенсибилизация к названным АГ была отмечена только в сочетании с АГ пыльцы деревьев и грибов.

На рис. 3 представлены данные о частоте выявления гиперчувствительности к изучаемым аллергенным экстрактам. Очевидно, что в Московском регионе доминировала сенсибилизация к АГ пыльцы растений, причем по частоте встречаемости выделялась гиперчувствительность к АГ березы, ольхи, лещины и полыни.

Примерно такой же уровень сенсибилизации к АГ A. alternate в отличие от других грибных АГ, процент выявления сенсибилизации к которым был ниже в 2 раза и более. Можно предположить, что разница в распространенности гиперчувствительности к АГ пыльцы растений и грибов обусловлена разницей в строении носителей аллергенных соединений -пыльцевых зерен и спор грибов, вследствие чего иммунологический ответ макроорганизма протекает по-разному. Возможно, при попадании на слизистую оболочку пыльцевых зерен и спор грибов высвобождение аллергенных соединений из первых происходит с более высокой скоростью, соот-

ветственно раньше активируется цепочка иммунологических реакций аллергического типа либо АГ пыльцы растений являются более сильными иммуногенами.

Таким образом, в результате проведенного исследования было показано, что в московском регионе полисенсибилизация к двум АГ и более обнаруживалась в 51,40% случаев гиперчувствительности, причем доминировала сенсибилизация к АГ пыльцы растений. Сочетанная гиперчувствительность к АГ пыльцы растений и АГ A. alternate преобладает над другими модификациями полисенсибилизации. Моносенсибилизация в основном обусловлена АГ A. alternate, ежи сборной, полыни, P. notatum, березы, R. nigricans (в порядке убывания). Поскольку результаты постановки скарификаци-онных кожных проб необходимы для дифференциальной диагностики и проведения в дальнейшем СИТ, то полученные результаты настоящего исследования, вероятно, можно использовать в известной дискуссии о правильности использования для лечения аллергиков индивидуальных аллергенных соединений или так называемого паналлергена либо сложных смесей, в которых представлен широкий спектр аллергенных соединений.

Работа выполнена при поддержке РФФИ, номер проекта 11-04-01063-а.

ЛИТЕРАТУРА

1. Антропова А.Б., Биланенко Е.Н., Мокеева В.Л., Чекунова Л.Н., Желтикова Т.М. Микромицеты, ассоциированные с пыльцой березы повислой (Betula pendula Roth). В кн.: Тезисы докладов 2-го съезда микологов России «Современная микология в России». М.: Национальная академия микологии; 2008: 216.

2. Глушакова А.М., Желтикова Т.М., Чернов И.Ю. Дрожжи, ассоциированные с пыльцой ветроопыляемых растений. Микология и фитопатология. 2013; 47(5): 294-9.

3. Instanes C., Ormstad H., Rydjord B. et al. Mould extracts increase the allergic response to ovalbumin in mice. Clin. Exp. Allergy. 2004; 34(10): 1634-41.

4. Saegusa S., Totsuka M., Kaminogawa S., Hosoi T. Cytokine responses of intestinal epithelial-like Caco-2 cells to non-pathogenic and opportunistic pathogenic yeasts in the presence of butyric acid. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2007; 71(10): 2428-34.

5. Available at: http://www.vitasite.ru/diagnostics/laboratory/allergo-probi.html.

6. Антропова А.Б. Микромицеты как источник аллергенов в жилых помещениях г. Москвы: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. М.; 2005.

REFERENCES

1. Antropova A.B., Bilanenko E.N., Mokeeva V.L., Chekunova L.N., Zheltikova T.M. The micromycetes associated with pollen of a birch of povisly

2. Glushakova A.M., Zheltikova T.M., Chernov I.Ju. The yeast associated with pollen of anemogamous plants. Mikologiya i fitopatologiya. 2013; 47

3. Instanes C., Ormstad H., Rydjord B. et al. Mould extracts increase the allergic response to ovalbumin in mice. Clin. Exp. Allergy. 2004; 34(10): 1634-41.

4. Saegusa S., Totsuka M., Kaminogawa S., Hosoi T. Cytokine responses of intestinal epithelial-like Caco-2 cells to non-pathogenic and opportunistic pathogenic yeasts in the presence of butyric acid. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2007; 71(10): 2428-34.

5. Available at: http://www.vitasite.ru/diagnostics/laboratory/allergo-probi.html.

6. Antropova A.B. Micromycetes as source of allergens in dwelling of Moscow: Diss. Moscow; 2005.

Поступила 29.11.13