ПРОМОТОРЫ ДЛЯ УВЕЛИЧЕННОЙ ЭКСПРЕССИИ БЕЛКА У МЕНИНГОКОККА

1. Нуклеиновая кислота, содержащая промотор, который включает:
(i) -10-область из промотора менингококкового гена porA и
(ii) -35-область из промотора менингококкового гена porA,
где -10-область и -35-область разделены встроенной последовательностью из 12-20 нуклеотидов, и где встроенная последовательность или не содержит поли-G-последовательность, или включает поли-G-последовательность, имеющую не более чем 8 последовательных G нуклеотидов.
2. Нуклеиновая кислота, содержащая промотор, функционально связанный с нижележащим кодирующим белок геном, где промотор включает (i) -10-область из промотора менингококкового гена рРНК и/или (ii) -35-область из промотора менингококкового гена рРНК.
3. Нуклеиновая кислота, содержащая промоторную область из промотора менингококкового гена рРНК, функционально связанную с кодирующим белок геном, имеющим 5′-UTR, которая содержит регуляторные элементы трансляции для экспрессии белка.
4. Нуклеиновая кислота, содержащая промотор, который включает -10-область из промотора менингококкового гена porA и -35-область из промотора менингококкового гена рРНК.
5. Нуклеиновая кислота, содержащая промотор, который включает SEQ ID NO: 18, или вариант SEQ ID NO: 18, который отличается от SEQ ID NO: 18 вплоть до 4 однонуклеотидным вставкам, делециям или заменам.
6. Нуклеиновая кислота по любому из предшествующих пунктов, где:
- 10-область представляет собой ТАТААТ;
- 35-область из промотора менингококкового гена porA представляет собой TGGTTT; и/или
- 35-область из промотора менингококкового гена рРНК представляет собой TTGACA.
7. Нуклеиновая кислота по любому из пп. 1-5, где встроенная последовательность между -35-областью и -10-областью имеет между 12-20 нуклеотидов, например, SEQ ID NO: 27 или SEQ ID NO: 28 или SEQ ID NO: 29.
8. Нуклеиновая кислота по п. 7, где встроенная последовательность не включает последовательность GGGGG.
9. Нуклеиновая кислота по любому из пп. 1-5, где нетранскрибируемый участок, расположенный по ходу транскрипции от -10-последовательности, но против хода транскрипции от сайта инициации транскрипции имеет между 5-10 нуклеотидов, например, TGAAGAC или TCGCAAC.
10. Нуклеиновая кислота по любому из пп. 1-5, содержащая SEQ ID NO: 30.
11. Нуклеиновая кислота по любому из пп. 1-5, содержащая SEQ ID NO: 18 или ее вариант, например, нуклеотиды 6-39 из SEQ ID NO: 36, нуклеотиды 6-38 из SEQ ID NO: 37, или нуклеотиды 6-39 из SEQ ID NO: 38.
12. Бактериальный экспрессионный вектор, содержащий последовательность ДНК, которая включает промотор из любого предшествующего пункта.
13. Менингококк, содержащий последовательность ДНК, которая включает промотор из любого предшествующего пункта.
14. Менингококк по п. 13, где промотор направляет экспрессию белка наружной мембраны.
15. Менингококк по п. 14, где белок наружной мембраны представляет собой fHbp.
16. Менингококк по любому из пп. 13-15, где бактерия не экспрессирует активный MltA.
17. Менингококк по любому из пп. 13-15, где бактерия имеет нокаут SynX и/или LpxL1.
18. Менингококк по любому из пп. 13-15, с серологической группой В.
19. Менингококк по любому из пп. 13-15, с серологической группой W135.
20. Менингококк по любому из пп. 13-15, с иммунотипом L3.
21. Везикулы наружной мембраны, полученные из менингококка по любому из пп. 13-20.
22. Иммуногенная фармацевтическая композиция, содержащая везикулы по п. 21.
23. Композиция по п. 22, включающая один или более из сопряженных конъюгированных сахаридов из менингококка.
24. Способ индуцирования иммунного ответа у млекопитающего, включающий введение композиции по п. 22 или 23 млекопитающему.