КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА ПЕЧЕНИ У ЛЮДЕЙ НА ОСНОВЕ РЕНИЯ-188 И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТАКОЙ КОМПОЗИЦИИ
RHENIUM-188 COMPOSITION FOR TREATING HEPATIC CANCER IN INDIVIDUALS, AND METHOD FOR PREPARING THIS COMPOSITION

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к созданию химиотерапевтических композиций для лечения рака печени у людей.
Более конкретно объектом настоящего изобретения является композиция для лечения рака печени у людей, включающая комплекс радиоактивного изотопа рения(III) с высокой активностью и липофильную органическую фазу.
В особенности изобретение обеспечивает новый способ стабильного введения радиоактивной метки в липофильную фазу посредством высокоактивного комплекса радиоизотопного рения(III), а также автоматизации этого способа.
Уровень техники
Рак печени у людей представляет собой серьезное заболевание и является пятой наиболее распространенной формой рака в мире. Его частота возникновения значительно варьируется по регионам. Он в большей мере поражает Юго-Восточную Азию и Африку, но частота его возникновения в развитых странах, особенно в Европе стремительно возрастает (Е. Garin, P. Bourguet, in Ell and Gambir 3rd Ed., Nuclear Medicine in Clinical Diagnosis and Treatment, Hong-Kong: Churchill-Livingstone, 2004, 473-483).
Прогноз по раку печени является крайне неудовлетворительным. Терапевтические возможности ограничиваются степенью тяжести лежащей в основе гепатопатии и внутрипеченочным распространением болезни. Трансплантация печени является единственным по-настоящему радикальным лечением опухоли и спровоцированного заболевания печени. Удаление хирургическим путем также является эффективным хирургическим методом. К сожалению, это лечение применимо только к пациентам, не страдающим циррозом печени, процент которых составляет менее чем 5% случаев в западных странах. В этом отношении два терапевтических подхода кажутся наиболее оптимистичными: внутриартериальная или внутриопухолевая метаболическая лучевая терапия и артериальная химиоэмболизация с помощью Lipiodol.
Метаболическая лучевая терапия широко используется в радикальном или паллиативном лечении многих видов рака, особенно рака печени. Метаболическая лучевая терапия опухолей печени проводится, главным образом, через печеночную артерию. Здоровая печень снабжается кровью и кислородом одновременно через воротную вену и печеночную артерию. Однако опухоли, которые с избытком васкуляризованы, по существу, снабжаются через печеночную артерию, тогда как вплоть до 80% снабжения здоровых тканей происходит через воротную вену.
Артериальная химиоэмболизация была разработана для улучшения проведения метаболической лучевой терапии. Эта методика состоит из инъекции в печеночную артерию пациента смеси, содержащей химиотерапевтическое вещество, ассоциированное с частицами, которые вызывают эмболию, т.е. они блокируют поток крови к опухоли.
Эта терапия, которая является альтернативой хирургическому удалению и лучевой терапии, имеет двукратное преимущество:
- она высвобождает высококонцентрированную дозу химиотерапевтического вещества в опухоль, щадя здоровые ткани и остальной организм;
- эмболизация опухоли удерживает лекарственное средство внутри нее, тем самым увеличивая эффективность лекарственного средства, одновременно ослабляя опухоль, лишая ее питательных веществ и кислорода.
Более того, побочные эффекты для пациента значительно ограничиваются, и эта терапия, как оказалось, дает преимущество в плане выживания пациентов, ее получающих (В. Lambert, J.Nucl.Med., 2005, 46, 60-66).
131
131
Вектором, наиболее широко используемым для внутрипеченочного введения, является Lipiodol. Lipiodol, также известный в Соединенных Штатах как Ethidiol, является жирорастворимым контрастным агентом, полученным путем йодирования и этерифицирования макового масла (смесь линолевой, олеиновой, пальмитиновой и стеариновой кислот); это масло получают из семян мака. Доля йода составляет около 38% по массе (т.е. 475 мг/мл). Lipiodol селективно захватывается клетками гепатокарциномы (ГКЦ) и определенными печеночными метастазами, происходящими из толстого кишечника, нейроэндокринных желез и молочной железы. Таким образом, Lipiodol используется для обнаружения гепатокарциномы и ее возможных сателлитных опухолей, не обнаруживаемых обычными способами визуализации, а затем также и для доставки химиотерапевтических веществ. Также было показано, что внутриопухолевое время пребывания намного больше, чем время пребывания в здоровой печени, с пребыванием в гепатокарциноме, которое может достигать вплоть до нескольких месяцев. Персистенция Lipiodol в опухолях привела к предположению, что он должен быть ковалентно мечен радиоактивным йодом-131 (I) для проведения направленной лучевой терапии, где "холодный" (т.е. нерадиоактивный) йод, содержащийся в Lipiodol, заменяется радиоактивным йодом. Однако период полураспада йода-131 (I) составляет только восемь дней, и этот элемент является источником большинства γ-излучений. Следовательно, интерес к его разработке в стандартной клинической терапии быстро угас.
90
186
188
Кроме того, поскольку свойства йода-131 являются недостаточно оптимальными, были предложены другие радиоактивные элементы с более подходящими характеристиками, в особенности иттрий-90 (Y) и рений-186 или 188 (Re, Re). Однако иттрий-90 является дорогостоящим и проблематичным для визуализации, и риски выброса, проводящие к нежелательному медуллярному излучению, не могут быть не учтены. Это ограничивает его разработку (S.J. Wang et al., J. Nucl. Med., 1996, 37, 332-335).
188
Что касается рения, то были описаны два пути введения меток. Первый путь, который подобен введению метки йода-131, состоит из ковалентного введения метки в Lipiodol (S.J. Wang et al., Appl. Radiat. Isot., 1996, 47, 267-271) с помощью хелата ЭДТБ (N,N,N',N'-тетракис(2-бензимидазолилметил)1, 2-этандиамина). Этот способ заключается в приведении хелата ЭДТБ, растворенного в ледяной или безводной уксусной кислоте, в контакт с Lipiodol. Уксусная кислота извлекается из этой смеси пропусканием аргона в течение ночи, а хелат фиксируется на алифатической цепи жирных кислот, образующих Lipiodol. Таким образом, Lipiodol, меченный хелатом ЭДТБ, приводится в контакт с Re. Таким образом, проводится реакция между хелатом ЭДТБ и рением с получением радиоактивно меченого Lipiodol (см. схему):
188
99
188
188
188
188
6
5
3
2
6
5
2
Однако эта методика оказалась непрактичной и невоспроизводимой. Второй путь представляет собой солюбилизацию в Lipiodol химически нейтрального и липофильного комплекса рения и на сегодняшний день является наиболее разработанным способом. В настоящее время проводится фаза I клинических исследований Re-HDD/Lipiodol (В. Lambert et al., J. Nucl. Med., 2005, 46, 60-66) (HDD = 4-гексадецил-2, 2, 9, 9-тетраметил-4, 7-диаза-1, 10-декантиол). К сожалению, полученные выходы введения метки составляют около 50%, и это является препятствием для получения высокой активности (В. Lambert et al., Eur. J. Nucl. Med., 2006, 33, 344-352). Таким образом, предлагались отличные от Re-HDD комплексы, например ReN-DEDC (бис-(диэтилдитиокарбамато)нитридо рений) (А. Boschi et al., Nucl. Med. Commun., 2004, 25, 691-699), которые в свою очередь имеют проблему в стабильности в течение 24 часов из-за радиолиза комплекса при высокой активности. Эти проблемы в стабильности составов предшествующего уровня техники снижают эффективность композиций и делают очень трудоемким их использование клинически. Набор для введения радиоактивной метки, основанный на комплексе SSS (Super Six Sulphur), бис(тритиопероксибензоат)(дитиобензоат)рений(III), описанный F. Mevellec et al. (F. Mevellec et al., Inorg. Chem. Comm., 1999, 2, 230-233; (WO 01/90114 A1)), показал хорошие результаты при низкой активности. Однако эта патентная заявка касается, главным образом, мечения лимфоцитов с помощью Те, для чего используются относительно небольшие диапазоны радиоактивности (0.4-0.8 ГБк). Другое исследование привело к разработке набора для синтеза Re(III). Эти комплексы в степени окисления III особенно перспективны для радиофармацевтических продуктов, поскольку они имеют более высокую химическую и термодинамическую стабильность, чем радиофармацевтические продукты, в которых радиоактивный металл находится в степени окисления V, как и в случае HDD и DEDC. Композиция, полученная с помощью этого набора, включающая комплекс Re-SSS с низкой активностью и Lipiodol, стабильна в течение по меньшей мере 48 часов и преимущественно фиксирует опухоль печени. Вкратце, способ приготовления в соответствии с этим набором состоит из стадии смешивания перрената натрия в 0,5 мл солевого раствора с 0,8 мг SnCb, 7,5 мг глюконата натрия, 30 мг аскорбиновой кислоты и 40 мг оксалата калия в растворе в 0,5 мл солевого раствора в концентрации 0,9%. Конечный объем, следовательно, равняется 1 мл. Восстановление перрената происходит при комнатной температуре в течение 15 минут, и образуется промежуточное соединение. К этому промежуточному соединению добавляют 20 мг лиганда - дитиобензоата натрия. Смесь должна быть нагрета в течение 30 минут при 100°С для того, чтобы получить крайне липофильный комплекс [Re-(CH-CS)(CH-CS)]. Этот комплекс растворяют в 2-3 мл нерадиоактивного Lipiodol. Отделение водной фазы, содержащей избыток лиганда, от радиоактивно меченой липофильной фазы проводится в течение 10 минут центрифугированием при 3500 об/мин. Этот набор дает возможность приготовления небольших количеств радиоактивно меченого Lipiodol со средней радиохимической чистотой, близкой к 91%. Однако он не позволяет высокоактивно метить рением, поскольку полученные уровни составляют порядка 37-370 МБк. Более того, выходы введения метки и значения радиохимической чистоты являются недостаточными для приготовления терапевтических композиций с использованием Re (N. Lepareur et al., J. Label. Compd. Radiopharm., 2004, 47, 857-867; E. Garin et al., Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging, 2004, 31, 542-546).
188
Более того, подготовка радиоактивных меток и особенно мечение Lipiodol высокоактивным рением приводит к значительному облучению обслуживающего персонала. В этой связи в литературе было описано несколько автоматизированных систем, особенно для приготовления фторированных и карбонизированных радиоактивных меток для визуализации с помощью позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ), а также для получения рениевых меток, активность которых выше 15 ГБк (S.J. Oh et al., Appl. Radiat. Isot., 2001, 54, 419-427; S.J. Oh et al., Appl. Radiat. Isot., 2003, 59, 225-230). Однако, насколько нам известно, не существует автоматизированного способа, позволяющего приготовить комплексы Re-SSS для приготовления химиотерапевтических веществ.
Раскрытие изобретения
Целью изобретения, главным образом, является преодоление указанных недостатков предшествующего уровня техники.
Более конкретно целью изобретения является обеспечение композиции для лечения рака печени у людей, которая является стабильной и эффективной и приготовление которой безопасно для оператора.
Еще одной целью изобретения является обеспечение автоматизированного способа получения такой композиции.
Эти цели, а также и другие, которые появятся здесь ниже, достигаются посредством композиции для лечения рака печени у людей, включающей комплекс рения(III) с высокой радиоизотопной активностью и липофильную органическую фазу. Термин "высокая радиоизотопная активность" относится к радиоактивности выше, чем 3,7 ГБк. В соответствии с изобретением такая композиция для лечения рака печени у людей включает комплекс радиоизотопного рения(III) с высокой активностью, т.е. с радиоактивностью выше, чем 3,7 ГБк, и липофильную органическую фазу в эмульсии с водной фазой.
Более конкретно изобретение относится к композиции для лечения рака печени у людей, включающей комплекс следующей формулы (I):
<mrow><mrow><mo>[</mo><mrow><mi>M</mi><msub><mrow><mrow><mo>(</mo><mrow><mi>R</mi><mi>C</mi><msub><mi>S</mi><mn>3</mn></msub></mrow><mo>)</mo></mrow></mrow><mn>2</mn></msub><mrow><mo>(</mo><mrow><mi>R</mi><mi>C</mi><msub><mi>S</mi><mn>2</mn></msub></mrow><mo>)</mo></mrow></mrow><mo>]</mo></mrow><mtext> </mtext><mrow><mo>(</mo><mi>I</mi><mo>)</mo></mrow></mrow>
188
где М представляет собой Re с высокой активностью, т.е. активностью выше, чем 3,7 ГБк, и липофильную органическую фазу, эмульгированную с водной фазой, R представляет собой алкильную, циклоалкильную, аралкильную или арильную группу, незамещенную или замещенную одним или более заместителями, выбранными из атомов галогена, гидроксильной группы, и алкильной, и алкоксильной групп.
1
12
6
5
2
n
Алкильные группы для R могут быть C-C линейными или разветвленными группами, предпочтительно группами, имеющими от 3 до 12 атомов углерода. Циклоалкильные группы для R предпочтительно имеют от 3 до 7 атомов углерода, например 6 атомов углерода. Арильные группы для R могут быть фенильного или нафтильного типа. Аралкильные группы для R могут быть типа СН(СН), где n варьируется от 1 до 3, предпочтительно n равняется 1 или 2.
Предпочтительно, в соответствии с изобретением группа R является необязательно замещенной арильной, аралкильной или циклогексильной группой.
Предпочтительно, когда R представляет собой арильную группу, она выбирается из ряда фенильных групп, фенила, замещенного одной или несколькими метильной, этильной, пропильной, бутильной, этокси, метокси и/или гидроксильной группами, и/или одним или несколькими атомами фтора, хлора, брома и/или йода, нафтила и нафтила, замещенного группой, выбранной из алкильной, алкоксильной групп и атомов галогена.
Если R будет аралкильной группой, то она преимущественно будет бензильной или фенетильной группой.
Композиция также включает липофильную органическую фазу, которая может быть органическим растворителем или маслом. Если органическая фаза является маслом, то она предпочтительно будет представлять собой смесь йодированных эфиров жирных кислот.
Предпочтительно, это масло будет представлять собой Lipiodol - смесь йодированных метиловых эфиров макового масла, которое является маслом, полученным из маковых зерен.
Применение Lipiodol в композиции в соответствии с настоящим изобретением приводит к стабильной композиции. В дополнение к этому она характеризуется предпочтительным и продолжительным удерживанием в опухоли, что позволяет проводить эффективное лечение рака печени.
Преимущественно композиция в соответствии с настоящим изобретением включает липофильную органическую фазу, которая может быть эмульгирована с водной фазой. Предпочтительно, водная фаза представляет собой физиологический солевой раствор. Это улучшает ее биораспределение.
Композиция для лечения рака печени, включающая высокоактивный комплекс радиоизотопного рения формулы (I) и липофильную органическую фазу, может быть приготовлена менее чем за час с использованием набора, включающего три емкости, соответственно содержащие:
<mrow><mrow><mo>(</mo><mrow><mi>R</mi><mi>C</mi><msubsup><mi>S</mi><mn>2</mn><mo>−</mo></msubsup><mi>Z</mi><msup><mn>1</mn><mo>+</mo></msup></mrow><mo>)</mo></mrow></mrow>
- восстанавливающий агент и добавки (соль олова, глюконат, оксалат и антиоксидант), дитиокарбоксилат
, в котором R является тем определенным выше, и Z1 представляет собой фармацевтически приемлемый катион и
- липофильную органическую фазу.
+,
Фармацевтически приемлемые катионы для Z1 могут быть выбраны из числа катионов с общей формулой MgX где Х представляет собой атом галогена, такой как Br или Сl, четвертичных аммониевых катионов, а также ионов щелочных металлов, таких как Na.
Композиция для лечения рака печени, включающая высокоактивный радиоизотопный рений формулы (I) и липофильную органическую фазу, может быть приготовлена с помощью автоматизированной системы и особенно автомата TADDEO от Comecer (Италия).
Автоматизированный способ по изобретению включает следующие стадии:
- синтез комплекса формулы (I),
- очистку в колонке комплекса формулы (I),
- выпаривание органического растворителя, предпочтительно при температуре от 40°С до 100°С,
- стерилизующую фильтрацию,
- солюбилизацию комплекса формулы (I) в липофильной органической фазе, предпочтительно Lipiodol.
Комплекс формулы (I) синтезируют в две стадии:
188
VII
-
4
Первая стадия состоит из восстановления иона перрената формулы [ReO] в объеме от 0,5 мл до 2 мл в присутствии:
- от 2,6 до 4 мг/мл хлорида олова,
- от 20 до 30 мг/мл глюконата натрия,
- от 26 до 40 мг/мл оксалата калия и
- от 20 до 30 мг/мл аскорбиновой кислоты.
188
Таким образом, мы получили нейтральное радиоактивное соединение, у которого степень окисления Re снижена, например, с VII до V. Однако целесообразно использовать антиоксидант в процессе восстановления для того, чтобы предотвратить повторное окисление промежуточного комплекса снова в перренат ион. Период выдерживания при комнатной температуре, требуемый для проведения реакции восстановления, составляет между 5 и 15 минутами.
<mrow><mi>R</mi><mo>−</mo><mi>C</mi><msubsup><mi>S</mi><mn>2</mn><mo>−</mo></msubsup></mrow>
188
3
2
2
На второй стадии это соединение подвергают реагированию с ионом общей формулы
, где R представляет собой алкильную, циклоалкильную, аралкильную или арильную группу, незамещенную или замещенную одним или более заместителем, выбранным из атомов галогена, гидроксильной группы, алкильных групп и алкоксильных групп. Реакция между промежуточным соединением и лигандом проводится в течение 15 минут при нагревании до 100°С. Таким образом, конечное соединение с формулой [Re(RCS)(RCS)] получают в две стадии. Этот комплекс является высоколипофильным.
Важно, чтобы реакционный объем синтеза соединения (I) был маленьким, порядка от 0,5 до 2 мл. Применение большего объема вызывает негативное влияние на качество образования комплекса и на радиохимическую чистоту.
Очистку осуществляют хроматографией, особенно высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ). Очистка в колонке проводится с использованием колонки С 8 или снова колонки С 18. Термины «колонка С 8 или колонка С 18» относятся к колонкам обращенно-фазовой ВЭЖХ, для которых неподвижной фазой является неполярная фаза, составленная из силикагеля, на которую прикрепляются цепи из 8 или 18 атомов углерода. В этом случае элюирование проводится с использованием полярной подвижной фазы и выбирается в зависимости от химической природы молекул, которые необходимо элюировать.
После элюирования очищенный комплекс подвергается стерилизующей фильтрации, а затем растворению в 2-3 мл нерадиоактивного Lipiodol. Под термином "стерилизующая фильтрация" понимается прохождение комплекса в растворе через фильтр с пористостью 0,2 мкм для удаления патогенных микроорганизмов.
Автоматизация метода позволяет использовать этот состав для клинических и фармацевтических целей благодаря значительному ограничению воздействия радиоактивности на оператора. Таким образом, по сравнению с предшествующим уровнем техники способ по настоящему изобретению позволяет получить стабильные и эффективные композиции, подходящие для практического терапевтического применения. Кроме того, время приготовления значительно снижается, а воспроизводимость значительно увеличивается по сравнению с набором, разработанным в публикации N. Lepareur et al. (J. Label. Compd. Radiopharm., 2004, 47, 857-867).
Осуществление изобретения
Следующие варианты осуществления приведены в качестве примеров настоящего изобретения и никоим образом не ограничивают его.
Фигура 1 представляет собой изображение автоматизированного способа.
188
188
6
5
3
2
6
5
2
Пример 1: Получение комплекса [Re-(CH-CS)(CH-CS)] (Re-SSS) с высокой активностью
188
188
6
5
2
6
5
3
2
6
5
2
В подходящей емкости смешивают 4 мг хлорида олова, 30 мг глюконата натрия, 60 мг оксалата калия и 30 мг аскорбиновой кислоты. Все эти лиофилизированные вещества восстанавливают в 0,5 мл физиологического солевого раствора. Затем добавляют раствор Re-перрената (11,1 ГБк, 1 мл). Полученную таким образом смесь взбалтывают в течение 15 минут при комнатной температуре. К этой смеси мы добавляем 40 мг (CH)-CSNa (0,2 ммоль) в 0,5 мл физиологического солевого раствора. Смесь нагревают в течение 15 минут при 100°С с образованием комплекса [Re-(СН-CS)(СН-CS)].
188
Пример 2: Приготовление меченого Re(III) соединения с высокой активностью в растворе в Lipiodol
К реакционной смеси, полученной в примере 1, добавляют 2 мл Lipiodol. Смесь встряхивают в течение 10 минут и затем центрифугируют при 3500 об/мин в течение 10 дополнительных минут. Водная фаза, содержащая избыток реагентов, извлекается, и собирается меченная радиоактивной меткой липоиодированная фаза.
Выход введения метки = 98,6%.
Радиохимическая чистота (РХЧ) = 96%.
Тонкослойная хроматография на силикагеле (здесь и далее -  ТСХ):
f
R=0.62.
Выход введения метки в процентах рассчитывается следующим образом:
Выход введения радиоактивной метки (%) = [активность липофильной фазы (Бк) × 100] / [активность липофильной фазы (Бк) + активность водной фазы (Бк)].
188
Радиохимическая чистота, подходящая для фармацевтического применения, определяется как по меньшей мере 95% от комплекса Re(III), содержащегося в липофильной фазе.
Целью анализа с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле является определение радиохимической чистоты приготовленного раствора. Элюент, используемый для эффективного перемещения, представляет собой смесь петролейного эфира и дихлорметана в соответствующих объемных процентных пропорциях 60%/40% (об/об). Затем проводят хроматографию в соответствии со способами, хорошо известными специалисту в данной области техники. Вкратце, каплю меченного радиоактивной меткой раствора помещают на пластину ТСХ, расположенную в хроматографической камере. Растворитель, в этом случае смесь петролейного эфира и дихлорметана, помещают в резервуар камеры, чтобы он не касался пластины. Камеру снова закрывают, и происходит передвижение фронта растворителя, захватывающего с собой образец меченного радиоактивной меткой раствора. По окончании передвижения пластина разрезается на две половины, и активность каждой пластины измеряется с помощью бета-счетчика или любого другого счетчика, подходящего для измерения радиоактивности. Хроматографические пластины исследуются, например, с помощью Fujix BAS 1000 phosphorimager.
Радиохимическая чистота (обозначается как РХЧ) выражается в процентах и рассчитывается следующим образом:
f
РХЧ=[активность целевого радиоактивного пятна (Бк) × 100] / [общую активность (Бк)] Отношение перемещения радиоактивности R=(радиоактивность перемещения фронта растворителя, проходящего вдоль соединения (Бк)) / (общая радиоактивность пластины ТСХ (Бк)).
188
Пример 3: Приготовление меченого Re(III) соединения с высокой активностью в растворе в Lipiodol
3
6
4
2
К реакционной смеси, полученной в примере 1, с лигандом 4-CH-O-(CH)-CSNa (47,6 мг, 0,23 ммоль) добавляют 2 мл Lipiodol. Смесь взбалтывают в течение 10 минут и затем центрифугируют при 3500 об/мин в течение 10 дополнительных минут. Водную фазу извлекают и собирают меченную радиоактивной меткой фазу.
Выход введения метки = 98%.
Радиохимическая чистота = 97%.
f
ТСХ: R=0,25.
188
Пример 4: Приготовление меченого Re(III) соединения с высокой активностью в растворе в Lipiodol
3
2
11
2
К реакционной смеси, полученной в примере 1, с лигандом CH(CH)CSNa (61 мг, 0,2 ммоль) добавляют 2 мл Lipiodol. Смесь взбалтывают в течение 10 минут и затем центрифугируют при 3500 об/мин в течение 10 дополнительных минут. Водную фазу извлекают и собирают меченную радиоактивной меткой фазу.
Выход введения метки = 32%.
Радиохимическая чистота = 97%.
f
ТСХ: R=0,90.
188
Пример 5: Автоматизированное приготовление (TADDEO) меченого Re(III) соединения с высокой активностью в растворе в Lipiodol
188
188
188
6
5
2
6
5
3
2
6
5
2
6
5
3
2
6
5
2
Согласно фигуре 1 в емкость помещают 1,4 мг хлорида олова, 30 мг глюконата натрия, 40 мг оксалата калия и 30 мг аскорбиновой кислоты. Эту смесь лиофилизированных веществ восстанавливают 1 мл Re-перрената (8 ГБк). После 5 минут выдерживания при комнатной температуре раствор автоматически переносится в реактор R с потоком воздуха при 1,5 бар. Сосуд В, содержащий 20 мг лиганда (СН)-CSNa (0,2 ммоль), восстанавливают путем промывания колбы F2, содержащей 0,5 мл этанола + 0,3 мл Lipiodol. Раствор переносят из В в R потоком воздуха при 1,5 бар. Реактор R нагревают в течение 12 минут при 100°С с получением комплекса [Re-(CH-CS)(СН-CS)], затем охлаждают продуванием воздуха при 2 бар через реактор в течение семи минут. Реакционную смесь затем переносят в колонку С18 Sep-Pak обращенно-фазовой ВЭЖХ и промывают 20 мл дистиллированной воды (F3) и затем  2 мл смеси дистиллированной воды и этанола 1/1 (F4). Комплекс [Re-(CH-CS)(CH-CS)] затем элюируют в сосуд С с помощью 5 мл этанола (F5). Этанол выпаривают при температуре 85°С и добавляют 2 мл Lipiodol (F6) для получения требуемой меченной радиоактивной меткой композиции.
Выход введения метки = 60%.
Радиохимическая чистота = 91,2%.
f
ТСХ: R=0,62.
188
Пример 6: Автоматизированное приготовление (TADDEO) меченого Re(III) соединения с высокой активностью (>3,7 ГБк) в растворе в Lipiodol
188
188
188
6
5
2
6
5
3
2
6
5
2
6
5
3
2
6
5
2
Согласно фигуре 1 емкость А содержит 4 мг хлорида олова, 30 мг глюконата натрия, 40 мг оксалата калия и 30 мг аскорбиновой кислоты. Эту смесь лиофилизированных веществ восстанавливают 1,5 мл Re-перрената (7,65 ГБк). После 5 минут при комнатной температуре раствор автоматически переносится в реактор R потоком воздуха при 1,5 бар. Сосуд В, содержащий 40 мг лиганда (CH)-CSNa (0,4 ммоль), восстанавливают путем промывания колбы F2, содержащей 1 мл этанола + 0,3 мл Lipiodol. Раствор переносят из В в R потоком воздуха при 1,5 бар. Реактор R нагревают в течение 15 минут при 100°С с получением комплекса [Re-(CH-CS)(CH-CS)], затем охлаждают продуванием воздуха при 2 бар через реактор в течение 7 минут. Реакционную среду затем переносят в колонку С18 Sep-Pak обращенно-фазовой ВЭЖХ и промывают 10 мл дистиллированной воды (F3) и затем 2 мл смеси дистиллированной воды и этанола 1/1 (F4). Комплекс [Re-(СН-CS)(СН-CS)] затем элюируют в сосуд С с помощью 5 мл этанола (F5). Этанол выпаривают при температуре 100°С и добавляют 2 мл Lipiodol (F6) для получения требуемой меченной радиоактивной меткой композиции.
Выход введения метки = 59,5%.
Радиохимическая чистота = 94%.
f
ТСХ: R=0,62.
188
Пример 7: Автоматизированное приготовление (TADDEO) меченого Re(III) соединения с высокой активностью в растворе в Lipiodol
188
188
188
6
5
2
6
5
3
2
6
5
2
6
5
3
2
6
5
2
Согласно фигуре 1 емкость содержит 4 мг хлорида олова, 30 мг глюконата натрия, 40 мг оксалата калия и 30 мг аскорбиновой кислоты. Эту смесь лиофилизированных веществ восстанавливают 1 мл Re-перрената (0,2 ГБк). После 5 минут при комнатной температуре раствор автоматически переносится в реактор R потоком воздуха при 1,5 бар. Сосуд В, содержащий 40 мг лиганда (СН)-CSNa (0,4 ммоль), восстанавливают путем промывания колбы F2 (1 мл этанола + 0,5 мл Lipiodol). Раствор переносится из В в R потоком воздуха при 1,5 бар. Реактор R нагревают в течение 15 минут при 100°С с получением комплекса [Re-(CH-CS)(CH-CS)], затем охлаждают путем продувания воздуха при 2 бар через реактор в течение 7 минут. Реакционную среду затем переносят в колонку С18 Sep-Pak обращенно-фазовой ВЭЖХ и промывают 10 мл дистиллированной воды (F3) и затем 2 мл смеси дистиллированной воды и этанола 1/1 (F4). Комплекс [Re-(СН-CS)(СН-CS)] затем элюируют в колбу С с помощью 2,5 мл этанола (F5). Этанол выпаривают при 100°C и добавляют 2 мл Lipiodol (F6) для получения требуемой меченной радиоактивной меткой композиции.
Выход введения метки = 67,4%.
Радиохимическая чистота = 90,1%.
f
ТСХ: R=0,62.
188
Пример 8: Стабильность меченого Re(III) соединения с высокой активностью в растворе в Lipiodol
Меченые композиции, полученные в соответствии с примером 3, подвергают выдерживанию в присутствии физиологического солевого раствора в течение 64 часов.
Затем фазы разделяют, как указано выше. Смесь встряхивают в течение 10 минут и затем центрифугируют при 3500 об/мин в течение 10 дополнительных минут. Водную фазу извлекают и собирают радиомеченную липоиодированную фазу. Рассчитывают радиоактивность отдельно водной и липофильной фазы для того, чтобы убедиться, что не происходит перераспределение радиоактивности в водной фазе (радиолиз комплекса). 97% радиоактивности остается в Lipiodol, и радиохимическая чистота комплекса остается неизменной.
188
Пример 9: Стабильность меченого Re(III) соединения с высокой активностью в растворе в Lipiodol
Другую меченую композицию, полученную в соответствии с примером 2 (радиоактивность = 10,3 ГБк; выход введения радиоактивной метки = 97,8%; радиохимическая чистота = 92,1%), подвергают выдерживанию в присутствии физиологического солевого раствора в течение 168 часов. Затем фазы разделяют, как указано выше. Смесь встряхивают в течение 10 минут и затем центрифугируют при 3500 об/мин в течение 10 дополнительных минут. Водную фазу извлекают и собирают радиомеченную липоиодированную фазу. Рассчитывают две фазы для того, чтобы убедиться, что не происходит перераспределение радиоактивности в водной фазе (радиолиз комплекса). 99,6% радиоактивности остается в Lipiodol, и радиохимическая чистота комплекса остается подобной (радиохимическая чистота = 90,2%). Промывание физиологическим солевым раствором, как описано в предшествующем уровне техники (В. Lambert et al., J.Nucl. Med., 2005, 46, 60-66), не является необходимым в данном случае, поскольку комплекс образуется с достаточной радиохимической чистотой.
Этот способ приводит к стабильному соединению при одновременном упрощении способа приготовления, поскольку это делается, главным образом, в водной фазе. Таким образом, этот способ полностью подходит для приготовления высокоактивных химиотерапевтических композиций.