СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИСКУССТВЕННОГО ЗАЧАТКА ЗУБА IN VITRO И ПОЛУЧЕННЫЙ ИМ ИСКУССТВЕННЫЙ ЗАЧАТОК ЗУБА

1. Способ получения искусственного зачатка зуба in vitro, включающий этапы:
a) получения выделенных мезенхимальных клеток пульпы зуба и
b) культивирования мезенхимальных клеток пульпы зуба в неадгезивных условиях для формирования клеточного агрегата, представляющего собой искусственный зачаток зуба.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мезенхимальные клетки пульпы зуба включают первичные взрослые мезенхимальные клетки пульпы зуба или состоят из них.
3. Способ по одному из п. 1 или 2, отличающийся тем, что мезенхимальные клетки пульпы зуба получают из ткани пульпы зуба, предпочтительно из ткани пульпы третьего моляра.
4
7
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мезенхимальные клетки пульпы зуба подвергают неадгезивным условиям культивирования в концентрации от 5·10до 5·10 на мл.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мезенхимальные клетки пульпы зуба культивируют в неадгезивных условиях в течение по меньшей мере 48 часов.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мезенхимальные клетки пульпы зуба культивируют в неадгезивных условиях по меньшей мере до тех пор, пока не сформирован клеточный агрегат со средним диаметром от 0,3 мм до 2 мм.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мезенхимальные клетки пульпы зуба культивируют в неадгезивных условиях по меньшей мере до тех пор, пока сформированный клеточный агрегат не проявит повышенную экспрессию ВМР4 HGF, РАХ9, MSX1, коллагена типа I, DSPP и/или предентина по сравнению с выделенными мезенхимальными клетками пульпы зуба непосредственно перед воздействием неадгезивных условий культивирования.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что при формировании клеточного агрегата не применяют какой-либо искусственный биологический или небиологический каркас.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что после культивирования мезенхимальных клеток пульпы зуба в неадгезивных условиях в течение по меньшей мере 2 дней добавляют эпителиальные клетки и совместно культивируют в неадгезивных условиях.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что эпителиальные клетки представляют собой кератиноциты, предпочтительно кератиноциты, полученные из кожи или десны.
11. Искусственный зачаток зуба, полученный с помощью способа по одному из пп. 1-10.
12. Трансплантат, содержащий искусственный зачаток зуба по п. 11.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая искусственный зачаток зуба по п. 11 или трансплантат по п. 12 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый наполнитель.
14. Способ скрининга веществ in vitro, которые модулируют свойства зубной ткани, включающий этапы:
- получения образца искусственного зачатка зуба по п. 11 или клеточного агрегата или ткани, полученных из него;
- разделения соответствующего образца на части;
- инкубации по меньшей мере одной части с веществом, подлежащим скринингу, и
- сравнения параметров, измеренных для обработанной части, с другой частью, которую не инкубировали с веществом, подлежащим скринингу.
15. Способ по п. 14, где часть подвергают действию автономной системы циркуляции до инкубации этой части с веществом, подлежащим скринингу.