СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА ИЗ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ СРЕДЫ ДРОЖЖЕЙ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ НА ОСНОВЕ АЛЬФА-ИНТЕРФЕРОНА ЧЕЛОВЕКА (ВАРИАНТЫ)

1. Способ получения фармацевтического препарата из культуральной среды дрожжей, включающий концентрирование культуральной среды, осаждение целевого белка и его хроматографическую очистку с использованием гель-фильтрации и ионообменной хроматографии, отличающийся тем, что культивируют штамм дрожжей Pichia pastoris, который является продуцентом альфа-16-интерферона человека, а хроматографическую очистку проводят последовательно на Сефакриле HR 100 и диэтиламиноэтил-целлюлозе.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что осаждение целевого белка проводят при 60%-ном насыщения сульфата аммония.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что гель-фильтрацию на Сефакриле HR 100 проводят с использованием в качестве уравновешивающего и элюирующего раствора 50 мМ аммоний-ацетатного буфера (рН 5,5), содержащего 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты и 0,5% Твин-20.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что ионообменную хроматографию белков, полученных по п.3, на диэтиламиноэтил-целлюлозе проводят с использованием в качестве уравновешивающего раствора 50 мМ аммоний-ацетатного буфера (рН 7,0), содержащего 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты, 0,5% Твин-20, а отмывку примесных белков осуществляют последовательным использованием уравновешивающего буферного раствора и уравновешивающего буферного раствора, содержащего 0,1 М хлористого натрия, элюцию проводят градиентом концентрации хлористого натрия 0,1-1,0 М в 50 мМ аммоний-ацетатном буфере (рН 5,5), содержащем 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты, 0,5% Твин-20.
5. Фармацевтический препарат на основе альфа-интерферона человека по первому варианту, содержащий этилендиаминтетрауксусную кислоту и солевую буферную систему, отличающийся тем, что он содержит альфа-16-интерферон человека и Твин-20 при следующем соотношении ингредиентов:
Рекомбинантный альфа-16-интерферон человека
с активностью 10<sup>6</sup>-10<sup>7</sup> МЕ/мл
10-100 мкг/мл
Этилендиаминтетрауксусная кислота
0,5-1,5 мг/мл
Твин-20
0,5-5 мг/мл
Буферный раствор рН 5,5
не более 6,0, 10-20 мМ
6. Фармацевтический препарат по п.5, отличающийся тем, что он содержит модифицированный рекомбинантный альфа-16-интерферон человека.
7. Фармацевтический препарат по п.5, отличающийся тем, что он имеет жидкую форму, например, в виде эмульсии, и/или сиропа, и/или капель, и/или липосомной формы.
8. Фармацевтический препарат на основе альфа-интерферона человека по второму варианту, содержащий этилендиаминтетрауксусную кислоту и солевую буферную систему, отличающийся тем, что он содержит альфа-16-интерферон человека и Твин-20 при следующем соотношении ингредиентов до начала лиофильной сушки:
Рекомбинантный альфа-16-интерферон человека
с активностью 10<sup>6</sup>-10<sup>7</sup> МЕ/мл
10-100 мкг/мл
Этилендиаминтетрауксусная кислота
0,5-1,5 мг/мл
Твин-20
0,5-5 мг/мл
Буферообразующие соли, обеспечивающие рН 5,5 - не более 6,0
и молярность, равную при растворении
10-20 мМ
9. Фармацевтический препарат по п.8, отличающийся тем, что он содержит модифицированный рекомбинантный альфа-16-интерферон человека.
10. Фармацевтический препарат по п.8, отличающийся тем, что препарат имеет сухую лиофилизованную форму как основу лекарственных форм в виде таблетки, и/или капсулы, и/или порошка, и/или гранул, и/или суппозитория.