БИБЛИОТЕКА FV НА ОСНОВЕ КОМБИНАЦИЙ БЕЛКОВ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ

1. Способ конструирования библиотеки Fv, основанный на комбинировании белков, включающий стадии:
H
L
(a) приготовления белков домена вариабельной области тяжелой цепи (V) и белков домена вариабельной области легкой цепи (V); и
H
L
(b) спаривания белков домена V и белков домена V, приготовленных на стадии (а), друг с другом.
H
L
2. Способ по п. 1, где стадия (b) предусматривает спаривание белков домена V и белков домена V случайным спариванием или направленным спариванием.
3. Способ по п. 1, где библиотека Fv допускает функциональный анализ ее индивидуальных членов.
4. Способ по п. 3, где индивидуальный функциональный анализ не включает стадии пре-скрининга, основанной на связывании с мишенью.
H
L
5. Способ по п. 1, где белок домена V и белок домена V имеют желаемую вариабельность, которую в них ввели.
H
L
6. Способ по п. 1, где белки домена V и белки домена V происходили от человека или не от человека.
H
L
7. Способ по п. 1, где мутацию вводят в CDR (участок, определяющий комплементарность) или каркас в белке домена V или белке домена V.
8. Способ по п. 7, где этим CDR является CDR3.
9. Способ по п. 1, где спаривание белок-белок на стадии (b) выбрано из группы, включающей: (i) спаривания между доменами дикого типа; (ii) спаривания дисульфидными связями между цистеинами, введенными в домены белков; (iii) спаривания суперспиралью из слияния между суперспиральными доменами; (iv) спаривания взаимодействием белок-белок, и (v) их комбинаций.
10. Способ по п. 1, дополнительно предусматривающий стадию (с) хранения собранных Fv в индивидуальных компартментах, получивших идентификационные (ID) номера.
11. Способ скрининга желаемого антитела Fv, включающий стадии:
(a) конструирования библиотеки Fv, основанной на комбинации белков согласно способу по любому из пп. 1-10; и
(b) выполнения функционального анализа на индивидуальных членах библиотеки Fv на желаемое свойство, характеристику или активность с использованием этой библиотеки Fv.
12. Способ по п. 11, где желаемыми свойством, характеристикой или активностью является пролиферация клеток, дифференциация или смерть клеток.
13. Способ по п. 11, дополнительно предусматривающий стадию (с) определение идентификационного (ID) номера компартмента, в котором хранится желаемое антитело Fv.
H
L
14. Способ по п. 13, дополнительно предусматривающий стадию (d) идентификации белка домена V и белка домена V антитела Fv из идентифицированного компартмента стадии (с).
15. Способ по п. 13, дополнительно предусматривающий стадию (d) идентификации последовательности отдельного антитела Fv из идентифицированного компартмента.
16. Желаемое антитело Fv, определенное скринингом согласно способу по любому из пп. 11-15.
H
L
17. Библиотека Fv, основанная на комбинации белков, причем эта библиотека Fv содержит белки домена V, спаренные с белками домена V.
18. Библиотека Fv по п. 17, где спаривание белок-белок на стадии (b) выбрано из группы, включающей: (i) спаривания между доменами дикого типа; (ii) спаривания дисульфидными связями между цистеинами, введенными в домены белков; (iii) спаривания суперспиральюспиралью из слияния суперспиральных доменов; (iv) спаривание взаимодействиями белок-белок; и их комбинации.
H
L
19. Библиотека Fv по п. 17, где мутацию вводят в CDR (участок, определяющий комплементарность) или каркас в белке домена V или белке домена V.
20. Библиотека Fv по п. 17, где Fv хранят в индивидуальных компартментах, получивших идентификационные (ID) номера.
21. Библиотека Fv по п. 17, которую конструируют способом, по любому из пп. 1-10.