ИММУНОГЕННЫЕ БЕЛКИ STREPTOCOCCUS

1. Способ идентификации белка Streptococcus, который способен вызвать иммунный ответ в отношении по меньшей мере двух штаммов и/или серотипов Streptococcus, включающий:
а) идентификацию по меньшей мере части секретируемого белка, поверхностно-ассоциированного белка и/или белка, который по меньшей мере на 50% идентичен последовательности фактора бактериальной вирулентности;
б) выбор по меньшей мере одного белка, идентифицированного на стадии а), который сохраняется по меньшей мере в двух штаммах и/или серотипах Streptococcus, и
в) определение способности по меньшей мере одного белка, выбранного на стадии б), или его иммуногенной части, производного и/или аналога, специфически связывать антитело и/или иммунные клетки животного, инфицированного первым штаммом и/или серотипом Streptococcus, и антителом и/или иммунными клетками животного, инфицированного вторым штаммом и/или серотипом Streptococcus.
2. Способ по п.1, в котором указанный секретированный белок и/или поверхностно-ассоциированный белок идентифицируют путем выявления по меньшей мере части геномной последовательности гена Streptococcus, включающего мотив секретированного и/или поверхностно-ассоциированного белка.
3. Способ по п.1, в котором указанный белок, обладающий по меньшей мере 50%-ной идентичностью по отношению к последовательности бактериального фактора вирулентности, идентифицируют путем выявления по меньшей мере в части геномной последовательности гена Streptococcus, который обладает по меньшей мере 50%-ной идентичностью по отношению к последовательности гена фактора бактериальной вирулентности.
4. Способ по п.1, в котором указанный белок, последовательность которого идентична по меньшей мере на 50%, последовательности бактериального фактора вирулентности, идентифицируют путем выявления по меньшей мере части геномной последовательности гена Streptococcus, которая гибридизируется с нуклеотидной последовательностью полной длины какой-либо из последовательностей нуклеиновой кислоты, перечисленных на фиг.4, при 65°С в буфере, содержащем 0,5 М натрий фосфат, 1 мМ EDTA и 7% натрий додецилсульфат при pH 7,2,
промывают дважды буфером, содержащим 40 мМ натрий фосфат (pH 7,2), 1 мМ EDTA и 1% натрий додецилсульфат, в течение 30 мин при 65°С,
причем молекулы нуклеиновой кислоты остаются гибридизированными после двухкратной промывки буфером, содержащим 40 мМ натрий фосфат (pH 7,2), 1 мМ EDTA и 5% натрий додецилсульфат, в течение 30 мин при 65°С.
5. Способ по п.2, дополнительно включающий выбор гена, который сохраняется по меньшей мере в двух штаммах и/или серотипах Streptococcus.
6. Способ по п.5, дополнительно включающий получение белка, кодируемого указанным геном, или иммуногенной части, производного и/или аналога указанного белка.
7. Способ по п.2, в котором указанный ген экспрессируется в прокариотической системе экспрессии.
8. Способ по п.1, включающий:
- получение выделенных и/или рекомбинантных белков Streptococcus,
- инкубирование указанных белков с антителом и/или иммунными клетками животного, инфицированного первым штаммом и/или серотипом Streptococcus, и антителом и/или иммунными клетками животного, инфицированного вторым штаммом и/или серотипом Streptococcus,
- определение способности белка связывать антитело и/или иммунные клетки животного, инфицированного первым штаммом и/или серотипом Streptococcus, и антитело и/или иммунные клетки животного, инфицированного вторым штаммом и/или серотипом Streptococcus.
9. Способ по п.8, дополнительно включающий экспрессию указанного белка, используя последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует указанный белок.
10. Способ по п.1, в котором указанное антитело и/или иммунные клетки получают из сыворотки в период выздоровления.
11. Способ по п.1, в котором указанный белок Streptococcus способен индуцировать опсонофагоцитоз-индуцирующие антитела.
12. Способ по п.1, в котором идентифицируют по меньшей мере два белка Streptococcus, способных индуцировать иммунный ответ против по меньшей мере двух штаммов и/или серотипов Streptococcus.
13. Способ получения по меньшей мере одного белка, идентифицированного способом по одному из пп.1-12.
14. Способ по п.1, в котором указанным видом рода Streptococcus является Streptococcus uberis.
15. Белок Streptococcus, способный индуцировать иммунный ответ в отношении по меньшей мере двух штаммов и/или серотипов Streptococcus, который может быть получен способом по одному из пп.1-14.
16. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты, включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую по меньшей мере два белка, получаемых способом по одному из пп.1-14, и/или по меньшей мере два белка, выбранных из таблицы 5 и/или таблицы 6, и/или иммуногенную часть по меньшей мере одного из указанных белков, под контролем функционально связанного промотора.
17. Рекомбинантный носитель, включающий нуклеиновую кислоту, кодирующую по меньшей мере два белка, получаемых способом по одному из пп.1-14, и/или выбранных из таблицы 5 и/или таблицы 6, и/или иммуногенную часть по меньшей мере одного из указанных белков.
18. Иммуногенная композиция, способная индуцировать иммунный ответ в отношении по меньшей мере двух штаммов и/или серотипов Streptococcus, включающая по меньшей мере один выделенный и/или рекомбинантный белок по п.15, рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты по п.16, рекомбинантный носитель по п.17 и/или их иммуногенную часть, производное и/или аналог.
19. Способ получения иммуногенной композиции, способной индуцировать иммунный ответ против по меньшей мере двух штаммов и/или серотипов Streptococcus, который включает получение клеток по меньшей мере с одним рекомбинантным вектором, причем по меньшей мере один указанный вектор включает последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует по меньшей мере один белок, получаемый способом по одному из пп.1-12 или 14, и/или по меньшей мере один белок, выбранный из таблицы 5 и/или таблицы 6, и/или их иммуногенную часть, производное и/или аналог.
20. Способ измерения иммунитета животного в отношении S.uberis, включающий определение по меньшей мере в одном образце от указанного животного наличия антител, направленных против белка, выбранного из таблицы 5 и/или таблицы 6, или белка по п.15, и/или его иммуногенной части.
21. Способ индукции иммунного ответа против по меньшей мере двух штаммов и/или серотипов Streptococcus, включающий введение хозяину по меньшей мере одного выделенного и/или рекомбинантного белка по п.15, рекомбинантной молекулы нуклеиновой кислоты по п.16, рекомбинантного носителя по п.17 и/или их иммуногенной части, производного и/или аналога.
22. Диагностический набор, включающий по меньшей мере один белок, выбранный из таблицы 5 и/или таблицы 6, или белок по одному из п.15, или его иммуногенную часть, и средства выявления антитела, связывающего указанный белок или его иммуногенную часть.