ШТАММ ДРОЖЖЕЙ Pichia pastoris PS106(pHIG), ЯВЛЯЮЩИЙСЯ ПРОДУЦЕНТОМ ИММУННОГО ИНТЕРФЕРОНА ЧЕЛОВЕКА, РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДА pHIG И СПОСОБ ЕЕ КОНСТРУИРОВАНИЯ

1. Рекомбинантна  плазмида pHIG, обеспечивающа  биосинтез гамма-интерферона человека, имеюща  размер 8,42 т.п.о. и состо ща  из следующих элементов:
фрагмента ДНК бифункционального бактериально-дрожжевого вектора рPIC9 размером 8 т.п.о., ограниченного сайтами рестрикции EcoR1-Xho1 и включающего бактериальный ген устойчивости к ампициллину, бактериальную область инициации репликации, ген HIS4 дрожжей, фрагмент 5'-некодирующей области дрожжевого гена АОХ1 размером 0,95 т.п.о., содержащий область, обеспечивающую активацию транскрипции этого гена в присутствии метанола в качестве источника углерода в культуральной среде; фрагмент гена АОХ1 размером 0,33 т.п.о., содержащий область терминации транскрипции этого гена; фрагмент 3'-нетранслируемой области гена АОХ1, размером 0,76 т.п.о. и препрообласть гена MFα дрожжей Saccharomyces cerevisiae размером 0,27 т.п.о., обеспечивающую секрецию рекомбинантного белка в культуральную среду;
Xho1-EcoR1 - фрагмента размером 0,42 т.п.о., содержащего кодирующую часть гена гамма-интерферона человека, за исключением области, кодирующей сигнальный пептид.
2. Штамм дрожжей Pichia pastoris PS106(pHIG) - продуцент гамма-интерферона человека, представл ющий собой штамм Pichia pastoris PS99 (his4 рер4::РНO85), трансформированный плазмидой pHIG по п.1.
3. Способ конструировани  рекомбинантной плазмиды pHIG по п.1, при котором осуществл ют расщепление вектора рPIC9 ферментами рестрикции Xho1 и EcoR1, расщепленный вектор рPIC9 лигируют с Xho1-EcoR1 - фрагментом гена гамма-интерферона человека, затем полученной лигазной смесью трансформируют клетки Escherichia coli. и отбирают клоны, содержащие рекомбинантную плазмиду pHIG.