Влияние пренатального пассивного табакокурения на динамику соматического развития у крысят линии Вистар в гнездовом периоде

ЛИТЕРАТУРА:

1. Измеров, Н. Ф. Методика расчета индивидуального профессионального риска в зависимости от условий труда и состояния здоровья работника : методические рекомендации / Н. Ф. Измеров, Л. В. Прокопенко, Н. И. Симонова. — Методические рекомендации. Утв. Председателем Научного совета 45Минздравсоцразви-тия России и РАМН «Медико-экологические проблемы здоровья работающих». 23.06.2011. — М., 2011. — 20 с.

2. Профессиональный риск для здоровья работников [Текст] : руководство / Под ред. Н. Ф. Изме-рова, Э. И. Денисова. — М. : Тровант, 2003. — 448 с.

3. Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и

классификация условий труда [Текст]: руководство Р. 2.2.2006-05 // Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. — М., 2005. — 142 с.

4. Степанов, Е. Г. Оценка индивидуального профессионального риска учителей / Е. Г. Степанов, И. Б. Ишмухаметов // Медицина труда и промышленная экология. — 2012. — № 1. — С. 38-41.

5. Устьянцев, С. Л. К оценке индивидуального профессионального риска / С. Л. Устьянцев //Медицина труда и промышленная экология. — 2006. — № 5. — С. 22-28.

6. Чеботарёв, А. Г. Интегральная оценка условий труда горнорабочих при подземных работах / А. Г. Чеботарёв // Бюллетень Научного Совета «Медико-биологические проблемы работающих». — 2003. — № 1. — С. 33-36.

УДК 613.84:612.б]:616-092.9

А. А. ИСЕНГУЛОВА, Е. А. ВАСИЛЬЕВА, О. В. ШИРШОВ, В. В. ТИХОНОВ, И. В. МИРОШНИЧЕНКО

ВЛИЯНИЕ ПРЕНАТАЛЬНОГО ПАССИВНОГО ТАБАКОКУРЕНИЯ НА ДИНАМИКУ СОМАТИЧЕСКОГО РАЗВИТИЯ У КРЫСЯТ ЛИНИИ ВИСТАР В ГНЕЗДОВОМ ПЕРИОДЕ

Оренбургский государственный медицинский университет

A. A. ISENGULOVA, E. A. VASILYEVA, O. V. SHIRSHOV, V. V. TIKHONOV, I. V. MIROSHNICHENKO

THE INFLUENCE OF PRENATAL PASSIVE SMOKING OF WISTAR RAT PUPS

ON THE DYNAMICS OF SOMATIC DEVELOPMENT DURING THE BREEDING PERIOD

Orenburg State Medical University

РЕЗЮМЕ.

В данной работе проводился анализ влияния пре-натального пассивного табакокурения на динамику соматического развития крысят линии Вистар. Соматическое развитие в период молочного вскармливания у крысят, перенесших пренатальное пассивное курение, протекало значительно медленнее, чем у крысят контрольной группы (не подвергавшиеся пассивному табакокурению). Полученные данные свидетельствуют о существенном влиянии прена-тального пассивного табакокурения на соматическое развитие в раннем постнатальном периоде.

Мирошниченко Игорь Васильевич — д. м. н., профессор, заведующий кафедрой нормальной физиологии; тел. 8 (3532) 40-35-60; e-mail: k_normphys@orgma.ru

Исенгулова Айнагуль Акимкереевна — к. м. н., доцент кафедры нормальной физиологии; тел. 8 (3532) 40-35-60; e-mail: k_ normphys@orgma.ru

Васильева Евгения Александровна — ассистент кафедры нормальной физиологии; тел. 8 (3532) 40-35-60; e-mail: k_normphys@orgma.ru Ширшов Олег Валерьевич — к. м. н., доцент кафедры нормальной физиологии; тел. 8 (3532) 40-35-60; e-mail: k_normphys@orgma.ru Тихонов Владимир Владимирович — старший преподаватель кафедры нормальной физиологии; тел. 8 (3532) 40-35-60; e-mail: k_normphys@orgma.ru

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ПРЕНАТАЛЬНОЕ ПАССИВНОЕ ТАБАКОКУРЕНИЕ, СОМАТИЧЕСКОЕ РАЗВИТИЕ, КРЫСЫ, ГНЕЗДОВОЙ ПЕРИОД.

SUMMARY.

In this paper, we conducted comparative analysis of the impact of prenatal passive Smoking on the dynamics of somatic development of rat pups of Wistar. Somatic development in the period of milk feeding in rat pups of the control group (not exposed to passive Smoking) proceeded much faster than that of rats undergoing passive Smoking. The data indicate significant effects of prenatal passive Smoking on physical development in the early postnatal period.

KEY WORDS: PASSIVE SMOKING, SOMATIC DEVELOPMENT, PRE-WEANING PERIOD, RATS, THE BREEDING PERIOD

В период внутриутробного развития факторы окружающей среды, влияющие на организм матери, оказывают воздействие на формирование и развитие плода. Одним из таких факторов является табачный дым. Широкое распространение табакокурения в настоящее время приводит к тому, что от 9,3% до 82,9% некурящих беременных женщин попадает в категорию пассивных курильщиков [1]. Пассивное табакокурение матери в течение беременности приводит к повыше -

нию риска задержки внутриутробного развития, гибели эмбриона, преждевременным родам и другим патологиям [2]. Вредное влияние табачного дыма может быть связано как с химическими компонентами, входящими в его состав, так и с влиянием гемической цир-куляторной гипоксии, обусловленной действием двух факторов: вазоконстрикторным действием никотина, снижающим фетоплацентарный кровоток, и повышением концентрации в крови карбоксигемоглобина при связывании молекул гемоглобина с содержащимся в сигаретном дыме СО (угарным газом). Хорошо известно, что пренатальное воздействие сигаретного дыма приводит к задержке внутриутробного роста [3, 4]. Ряд исследований показывает, что у детей женщин, подвергавшихся во время беременности воздействию пассивного курения, чаще наблюдается снижение массы тела при рождении [5, 6], однако данных о динамике последующего соматического развития потомства матерей — пассивных курильщиц нет.

В настоящей работе проводился анализ влияния пренатального пассивного табакокурения на динамику соматического развития крысят линии Вистар в ранний постнатальный период развития.

МЕТОДИКА.

В экспериментах использовали потомство крыс линии Вистар. Крысы содержались в стандартных условиях (температура 21±3° С, при 12-часовом периоде освещения, корм и вода — ad libitum). В экспериментах использовали потомство от первой беременности самок с массой тела 150-200 г. Для моделирования неблагоприятных условий использовалось пассивное табакокурение: 6 самок крыс опытной группы с 1 по 20 день гестации ежедневно в течение 8 часов подвергались пассивному курению в камере по J. Gustavo Zayas и соавт. (2004), но без поддержания четкого режима влажности. Контрольная группа (3 самки) беременных крыс в аналогичный период помещалась в камеру, но вентилируемую воздухом без табачного дыма. За сутки до ожидаемых родов самок помещали в индивидуальные домашние клетки с материалом для строительства гнезда (опилки, вата, бумага).

В зависимости от процедуры пренатального пассивного табакокурения из крысят были сформированы две группы: 1-я — контрольная группа, 2-я — опытная группа.

В работе было использовано 72 крысенка (2 группы: контрольная группа — 51, опытная группа — 21). Исследования проводили без учета пола крысят.

Для тестирования потомства использовали набор тестов для оценки развивающегося соматического фенотипа крыс из батареи тестов, разработанной в Институте нормальной физиологии им. П. К. Анохина [7]. Самок перед тестированием отсаживали из домашних клеток, а помет помещали

в индивидуальный бикс. Для оценки соматического развития в течение с 1 по 21 сутки постнатального развития (ПР) использовались признаки:

• Масса тела определялась ежедневно с 1 по 21 сутки ПР. Взвешивание проводили с использованием весов с точностью до 0,01 г.

• «Выделение ушных раковин» оценивалось с 3 по 4-е сутки ПР. Признак оценивается как «0», если ушные раковины не отделены. Выделение одной и двух ушных раковин оценивается соответственно как «1» и «2».

• «Разделение пальцев» оценивалось со 2 по 7-е сутки ПР. Регистрируется количество разделенных пальцев на передних и задних лапах. Признак оценивается отдельно для передних и задних конечностей. Признаку присваивается «0», если разделение между всеми пальцами отсутствует. Пальцы не считаются разделенными, если хотя бы по одной из фаланг они не разделены. Признаку присваиваются показатели от «1» до «10» в зависимости от числа разделенных пальцев.

• «Появление шерсти» оценивалось с 3 по 6-е сутки ПР. Оценивается появление первичного волосяного покрова. Наличие его оценивается как «1», отсутствие — «0».

• «Появление резцов» оценивалось с 7 по 14 сутки ПР. Появление нижних и верхних резцов регистрируется независимо. Отсутствие резцов оценивается как «0». Появление 1 и 2 резцов — «1» и «2» соответственно.

• «Полное обшерствление» оценивалось с 10 по 14 сутки ПР. Критерием полного обшерствления является наличие шерстного покрова на вентральной линии живота, образующего шерстный «гребень». Наличие его оценивается «1», отсутствие — «0».

• «Прозревание» оценивалось с 11 по 15 сутки ПР. Незрячее животное оценивается на «0». При полном открывании 1 или 2 глаз признак оценивается соответственно как «1» или «2».

Все манипуляции с животными осуществляли в соответствии с требованиями Локального Этического Комитета.

Статистический анализ параметрических данных осуществляли, оценивая генеральные эффекты возраста и влияния пренатального пассивного табакокурения (АМОУА).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

Для оценки влияния пренатального пассивного табакокурения на соматическое развитие крысят проведено сравнение показателей соматического развития у крысят опытной и контрольной групп. В течение гнездового периода, ежедневно происходила прибавка масса тела у всех обследованных животных.

Фактор «возраст» для опытной группы составил Б (20, 393) = 164,57, р=0,0000, для контрольной группы — Б (20, 986) = 256,94, р=0,000. При дисперсионном

анализе фактор «пренатальное пассивное табакокурение» оказывал достоверное влияние на изменение массы тела: F (20, 1379) = 2,2909, p=0,001. Post hock — анализ показал, что масса тела животных опытной группы в периоды с 5 по 21 сутки постнатального развития была достоверно меньше по сравнению с массой тела животных контрольной группы (LSD-тест).

Для выяснения периода формирования дефицита массы была проведена оценка прибавки массы тела посуточно в течение всего гнездового периода. Фактор «возраст» оказывал влияние на прибавку массы тела крысят: для опытной группы F (19, 936) = 3,6716, p=0,000, для контрольной группы — F (19, 373) = 3,2020, p=0,000.

Масса тела экспериментальных крысят, подвергавшихся воздействию фактора «пренатальное пассивное табакокурение», в течение всего гнездового периода в среднем была на 9-16% меньше, чем у крысят контрольной группы. Максимальное отставание массы тела крысят опытной группы наблюдалось в первые 3-е суток раннего постнатального периода (14-16%), к 4-м суткам разница в массе уменьшилась до 9% с последующим увеличением к 21 суткам дефицита массы тела крысят опытной группы до 14%.

На 1, 2 и 3-и сутки постнатального развития прирост массы тела крысят опытной группы составил 0,61±0,37 г, 0,79±0,35 г, 0,83±0,24 г и был достоверно ниже (р=0,001, р=0,02, р=0,001 соответственно) прироста массы тела крысят из контрольной группы 1,24±0,23 г, 1,07±0,36 г и 1,1±0,14 г соответственно. На 18 сутки гнездового периода отмечается достоверное преобладание прироста массы у крысят контрольной группы (р<0,02). В показателях прироста массы тела с 4 до 18, 19, 20 суток постнатального развития достоверных различий между крысятами этих

В ходе проведенного исследования установлено, что в группе крысят, перенесших пренатальное пассивное табакокурение, отмечается более позднее соматическое развитие, что проявляется в сниженной

групп не было обнаружено.

Дисперсионный анализ оценки своевременности формирования соматических признаков выявил влияние фактора «пренатальное пассивное табакокурение» на следующие признаки: выделение ушных раковин (F (1, 206) = 20,195, p=0,000), разделение пальцев (F (1, 356) = 14,736, p=0,0002), появление шерсти (F (1, 291) = 17,250, p=0,000), полное обшерствление (F (1, 339) = 5,1032, p=0,02), появление верхних резцов (F (1, 557) = 26,848, p=0,000).

При анализе влияния фактора «пренатальное пассивное табакокурение» на развитие двух соматических признаков — появление нижних резцов — F (1, 565) = 2,7250, p=0,09 и появление сосков у самок — F (1, 277) = 3,6794, p=0,05, — достоверных различий не было обнаружено.

Post hock — анализ (LSD-тест) динамики и индексов своевременности развития изучаемых соматических признаков показал (табл.), что по индексу своевременности появления шерсти, выделения ушных раковин, прорезывания верхних резцов и разделения пальцев передних конечностей существуют достоверные различия между крысятами опытной и контрольной групп. Достоверных различий по другим признакам, таким как полное обшерствление, прозревание, разделение пальцев задних конечностей и прорезывание нижних резцов, нами выявлено не было. При сравнении среднегрупповых суммарных индексов своевременности соматического развития (ИССР) выявлены достоверные различия между двумя группами животных. Полученные данные дают основание говорить о наличии влияния фактора «пренатальное пассивное табакокурение» на соматическое развитие потомства крыс в период молочного вскармливания.

массе тела при рождении, меньшей прибавке в массе в течение раннего постнатального периода развития и отставанием в формировании соматических признаков по сравнению с контрольной группой.

Таблица — Средние значения суммарного индекса своевременности соматического развития

Соматический признак Индекс своевременности соматического развития

Контроль Опыт

Появление шерсти 1,38±0,50 0,31±0,47**

Выделение ушных раковин 1,95±0,22 1,04±0,72**

Полное обшерствление 2,0±0,0 1,96±0,20

Прозревание 0,00±0,00 0,27±0,69

Разделение пальцев передних конечностей 1,76±0,44 0,9±0,5**

Разделение пальцев задних конечностей 0,19±0,4 0,20±0,4

Прорезывание нижних резцов 1,33±0,48 1,16±0,64

Прорезывание верхних резцов 1,52±0,51 1,00±0,57*

Суммарный ИССР 10,1±1,37 6,76±1,63**

* — р<0,005; ** — р<0,001.

Влияние пренатального пассивного табакокурения на развитие соматических признаков у потомства можно связать с влиянием двух факторов — внутриутробной гипоксии и фетоплацентарной недостаточности. По данным ряда авторов, внутриутробная гипоксия связана как с повышением концентрации кар-боксигемоглобина, содержащегося в табачном дыме, так и с вазоконстрикторным действием никотина, вызывающим снижение плацентарного кровотока [8].

В работе Е. И. Тюльковой (2014) было установлено, что гипоксия вызывает торможение соматического развития, следовательно, может быть одним из факторов, замедляющих соматическое развитие у перенесших пассивное курение. Фетоплацентарная недостаточность, возникающая под действием табачного дыма, проявляется характерными патоморфологическими признаками: уменьшением массы и толщины плаценты; снижением числа плодовых капилляров и материнских синусов при уменьшении их диаметров; нарушении кровообращения в виде резкого полнокровия, отека, кровоизлияний в лабиринтном слое плаценты; очагами ишемии и тромбоза материнских лакун с развитием крупных ишемических инфарктов; образованием крупных очагов деструкции клеток трофобласта с формированием различного размера полостей и др. Подобная реорганизация структуры гематоплацентар-ного барьера может вызывать задержку внутриутробного развития, что проявляется в рождении потомства со сниженной массой тела при рождении [9].

Таким образом, результаты данной работы подтверждают предположение о том, что комплекс факторов, входящих в состав табачного дыма, при прена-тальном пассивном табакокурении может оказывать негативное влияние на своевременное формирование соматических признаков.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Shah, CP. Public health and preventative medicine in Canada. 5th edn. — Toronto, Canada, Elsevier. — 2003. — P. 201.

2. Шабалов, Н. П. Неонатология/ Н. П. Шабалов. — М.: МЕДпресс-информ, 2006. — Т. 1. — С. 109-114.

3. Andres, R. L. Perinatal complications associated with maternal tobacco use / R. L. Andres, M. C. Day // Seminars in Fetal & Neonatal Medicine. — 2000. — Aug; 5 (3). — Р. 231-41.

4. Tong, E. K. Changing conclusions on secondhand smoke in a sudden infant death syndrome review funded by the tobacco industry / E. K. Tong, L. England, S. A. Glantz // Pediatrics. — 2005. — Mar; 115 (3). — Р. 356-66.

5. Leonardi-Bee, J. Secondhand smoke and adverse fetal outcomes in nonsmoking pregnant women: a meta-analysis Pediatrics. / J. Leonardi-Bee, J. Britton, A. Venn // Pediatrics. — 2011. - 127 (4). — Р. 734-741.

6. Salmasi, G. Environmental tobacco smoke exposure and perinatal outcomes: systematic review and meta-anal-yses / G. Salmasi, R. Grady, J. Jones, S. D. McDonald// Acta Obstetricia et Gynecologica. — 2010. — 89. — Р. 423-441.

7. Зарайская, И. Ю. Сравнительный подход к изучению системогенеза ранних поведенческих актов. XVIII съезд физиологического общества им. И. П. Павлова : Тез. докл. / И. Ю. Зарайская, Е. А. Александрова. — Казань, 2001. — С. 93.

8. Lips, K. S. Nicotinic acetylcholine receptors in rat and human placenta / K. S. Lips, D. Bruggmann, U. Pfiel [et al.] // Placenta. — 2005. — Vol. 26, № 10. — Р. 735-746.

9. Корнеев, Г. И. Морфофункциональные изме-ысыии фетоплацентарного комплекса крыс на фоне

табачной интоксикации / Г. И. Корнеев, Л. В. Лизур-чик, О. Ю. Сипайлова, С. В. Лебедев, Е. В. Шейда // Вестник Оренбургского государственного университета. — 2014. — № 6 (167), июнь. — С. 67-70.

УДК 613.86

Н. П. СЕТКО1, Г. В. САДЧИКОВА2

ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАРУШЕНИЙ ПСИХИЧЕСКОГО ЗДОРОВЬЯ У ДЕТЕЙ И ПОДРОСТКОВ

1 — Оренбургский государственный медицинский университет

2 — Федеральное бюджетное учреждение здравоохранения «Центр гигиены и эпидемиологии в Оренбургской области» N. P. SETKO1, G. V. SADCHIKOVA2

HYGIENIC CHARACTERISTICS OF THE VIOLATIONS MENTAL HEALTH IN CHILDREN AND ADOLESCENTS

1 — Orenburg State Medical University

2 — FBIH «Center of Hygiene and Epidemiology in the Orenburg region»

РЕЗЮМЕ. хиатру впервые в жизни и взятых на диспансерное

Проведен анализ показателей числа детей / и консультативное наблюдение, первичной заболе-на 10 000 детского населения, обратившихся к пси- ваемости наркологическими расстройствами и от-