Определение активности АЛТ в крови доноров как суррогатного маркера вирусного гепатита

ЭКОЛОГИЯ И ГИГИЕНА

Н. В. Полякова

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АЛТ В КРОВИ ДОНОРОВ КАК СУРРОГАТНОГО МАРКЕРА ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА

«Областной Центр крови»

Учитывая постоянное увеличение количества ВИЧ-инфицированных среди населения всего мира, а также эпидемиологическую настороженность в отношении парентеральных гепатитов В и С, возрастающую востребованность донорской крови и ее компонентов, вопрос повышения вирусной безопасности гемотрансфузий является актуальной проблемой.

По данным ВОЗ, во всем мире насчитывается от 300 до 500 млн. лиц, хронически инфицированных вирусным гепатитом. Особая опасность вирусных гепатитов В и С объясняется частыми случаями хронизации инфекций. Особенно тревожным является то, что заражение гепатитом возможно при инокуляции очень небольшего количества крови больного (0,1-0,5 мкл). Установлено, что вирус гепатита В обладает большой вирулентностью и устойчивостью, что обеспечивает высокий уровень передачи инфекции при гемотрансфузии.

В последние десятилетия, по данным литературы, именно риск инфицирования реципиента вирусными, бактериальными или паразитарными инфекциями резко ограничивает использование доз крови и ее компонентов. Несмотря на все усилия по профилактике вирусных и бактериальных заболеваний во всем мире растет число лиц, инфицированных гепатитом В, С, D, Е, ВИЧ и другими инфекциями. В ряде стран это приняло характер эпидемии.

Высокая инфицированность населения различными вирусными заболеваниями, с одной стороны, резко сужает базу донорских кадров, а с другой стороны - предъявляет повышенные требования к тестированию донорской крови, предназначенной для компонентной гемотерапии или получения препаратов крови.

Повышение качества диагностики заболеваний является первостепенной задачей в службе крови в масштабах мировой практики. На сегодняшний день расширение опасности распространения заболеваний при переливании крови и ее компонентов являются проблемами, требующими тщательного изучения.

Цель работы - улучшение выявляемости инфицирования населения вирусным гепатитом.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Проведено определение инфицированно-сти вирусом гепатита В и С в массиве донаций донорской крови с использованием иммунофер-ментного анализа.

Все дозы крови, взятые от доноров, исследовались на наличие антител к возбудителю бруцеллеза (реакция Хеддельсона), что связано с

неблагополучной эпидемиологической ситуацией по данной инфекции в регионе, а также определяются антитела к возбудителю сифилиса. Вся донорская кровь исследовалась на содержание АЛТ на биохимических анализаторах. Такое методическое обеспечение диагностического процесса способствует улучшению выявляемости вирусоносительства и тем самым повышает безопасность донорской крови.

Донорская кровь и ее компоненты, находящиеся в Карагандинском Центре крови (включая полученные в результате аутологичных дона-ций), соответствуют требованиям, установленным для каждого компонента крови, они биологически полноценны, идентифицированы по группам крови и резус-фактору, получены от обследованных доноров и исследованы для исключения гемотрансмиссивных инфекций.

При каждой донации выполняются следующие исследования донорской крови: 1) иммуно-гематологические исследования: определение группы крови АВ0, определение резус фактора, определение аллоиммунных антител, определение антигенной структуры эритроцитов, 2) специфические и неспецифические маркеры гемот-рансмиссивных инфекций согласно установленным перечням и требованиям к методам диагностики.

Исследования выполнялись на образцах крови, взятой у донора во время донации и идентифицированных с соответствующими (единицами) дозами крови или ее компонента.

Донором крови и ее компонентов может быть любой гражданин Казахстана, не имеющий противопоказаний к донации и выразивший добровольное согласие на сдачу крови. Пригодность донора к донации устанавливается на основе данных о состоянии здоровья, полученных в результате собеседования с донором, медицинского осмотра и лабораторного обследования донора. При обследовании доноров исключаются заболевания внутренних органов и центральной нервной системы, а также возможность заражения донора инфекционными гемотрансмиссивными заболеваниями с учетом принадлежности донора к группам сексуального риска и наркомании. Решение о пригодности донора к донации принимает врач, проводящий обследование донора. Сбор данных о здоровье донора, собеседование, медицинский осмотр и лабораторные исследования выполнялись до донации и после, а их результаты документированы.

Технологии, используемые при заготовке крови и ее компонентов, обеспечивают предупреждение их контаминации, а также сохранение биологической полноценности, функциональной активности и лечебной эффективности. В процессе заготовки, обследования, производства, хранения, транспортирования применения и утилизации донорской крови и ее компонентов применяются материалы, вещества и технические средства, разрешенные к использованию на тер-

ритории РК и соответствующие установленному назначению.

Материалы и оборудование, используемые в процессах заготовки, переработки, хранения (в том числе при низких температурах) и применения крови и ее компонентов устойчивы к воздействию физических и химических факторов, включая воздействие дезинфицирующих средств. Медицинская организация, применяющая кровь и ее компоненты для переливания реципиентам, информирует о всех случаях развития постранфу-зионных реакций.

Согласно существующим требованиям организация службы крови при получении информации о возможном заражении реципиента ге-мотрансмиссивными инфекциями должна выявить донора, от которого могло произойти заражение и принять меры для предотвращения использования полученной от этого донора (этих доноров) крови и ее компонентов. Подобных примеров в работе Карагандинского Центра крови нет. Практически все гемотрансфузионные реакции и осложнения носят иммунный характер или содержат существенный иммунологический компонент. Одна из важных задач современной трансфузиологии - инфекционная безопасность: недопущение гемотрансфузий инфицированных компонентов донорской крови. Эта задача в Карагандинском Центре крови решается комплексом строго регламентированных клинико-лабораторных методов обследования донора и реципиента на гемотрансмиссивные инфекции.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Проблема безопасности донорской крови и ее компонентов очень актуальна, что связано с высоким уровнем распространения среди населения различных вирусных заболеваний, в том числе всех видов вирусного гепатита.

Пути передачи вируса гепатита В многообразны. К естественным путям относится вертикальная передача вируса от матери ребенку во время родов или внутриутробно во второй половине беременности при нарушении плацентарного барьера. К естественным путям передачи относится и половой путь, который обеспечивает передачу вируса почти у 20% больных острым гепатитом В. Больные хроническим гепатитом В заражают своих партнеров значительно чаще. Возбудитель гепатита В может передаваться бытовым путем, что чаще всего наблюдается в семьях больных хроническим гепатитом В и/или в организованных коллективах при общем пользовании предметами гигиены (мочалки, расчески, бритвенные приборы и др.). Передача вируса может осуществляться также через постельное белье, общие полотенца, носовые платки и т.д., а также при прямом или опосредованном контакте с кровью или биологическими жидкостями (слюна, сперма, содержимое носоглотки и др.), при гемотрансфузиях крови, при использовании нестерильного мединструментария. Инкубационный период для гепатита В составляет в среднем

от 40 до 200 сут. В странах со средней (2-7%) частотой носительства вирусного гепатита В, к которым относится и Казахстан, ежегодно инфицируются десятки человек и из них большой процент подлежит госпитализации. У 6-10% пациентов заболевание переходит в хроническую форму, в дальнейшем у них может развиться цирроз и первично-клеточная карцинома.

Вирус гепатита С характеризуется генетической неоднородностью. В настоящее время известно 12 генотипов и субтипов вирусного гепатита С. Особенно много генотипов регистрируется в Африке и Юго-Восточной Азии. Это служит косвенным подтверждением того, что гепатит С существует в этих регионах в течение длительного времени, возможно, несколько столетий.

Для клинической практики значение имеют 5 видов генотипа вируса - 1а, 1Ь, 2а, 2Ь, За. Установлены определенные географические различия в распространении различных генотипов. В США регистрируется, в основном, генотип 1а. В Японии, на Тайване и Китае распространены генотипы 1Ь, 2а, 2Ь. В Центральной Европе преобладает генотип 1ф, а на юге возрастает доля генотипа 1Ь. В России и в Казахстане чаще других регистрируется генотип 1Ь, затем с убывающей частотой - За, 1а и 2а.

Пути передачи вируса гепатита С сходны с возбудителя гепатита В, однако в отличие от вируса гепатита В, естественные механизмы и пути распространения менее характерны - риск внутриутробного заражения, при половых контактах и в быту относительно низок, а преобладает парентеральный путь передачи - при гемот-рансфузиях с инфицированной кровью и при проведении медицинских манипуляций. В связи с наличием множества генотипов вируса гепатита С у лиц, перенесших заболевание, не вырабатывается невосприимчивость к повторным заражениям. Считается, что возможны повторные заражения различными генотипами возбудителя. Высокая изменчивость и низкая иммуногенность штаммов вируса гепатита С обусловливает слабый иммунный ответ на внедрение возбудителя и, следовательно, высокий уровень хронических форм заболевания. Необходимо отметить, что данная особенность возбудителя препятствует созданию вакцины против гепатита С.

Источником гепатита являются больные с острой и хронической формами заболевания. Наибольшую эпидемическую опасность представляют лица с бессимптомными формами гепатита. Инкубационный период при заражении вирусом гепатита С - 20-120 дней, в среднем 40-45 дней.

Согласно литературным данным, вирусом гепатита С в России инфицировано 2-5% доноров, в Прибалтике - 1-3%, в Средней Азии - 8%, в Молдавии - 12%. Высока инфицированность вирусом гепатита С больных гемодиализа - 1954%, больных гемофилией - 59-90%, венерическими заболеваниями - 8-11%, наркоманией - до 73%.

Медицина и экология, 2010, 4

53

Учитывая высокий риск передачи вируса гепатита В и С при гемотрансфузиях, вся кровь, взятая при донациях у доноров, обследуется на выявление двух специфических маркеров вирусных гепатитов: поверхностного антигена вирусов гепатита В (Нвs Ад) и антител к вирусу гепатита С (антиВГС). В крови лиц, пораженных вирусом гепатита В и С, сероконверсия с появлением в крови специфических антител наступает от 8 -10 нед. с возможными колебаниями от 3 - 4 нед. до 4 м - 6 мес. В этот период больные чувствуют себя удовлетворительно, жалоб не предъявляют и не обращаются за медицинской помощью. Этот период называется «серонегативным окном». Вместе с тем при переливании этой крови реципиентам существует риск заражения гепатитом. Поэтому все дозы крови обследуются на АЛТ. АЛТ - суррогатный маркер, т. е. неспецифический маркер гепатита.

Повышение активности АЛАТ происходит через 7-8 нед. после заражения пациента гепатитом В и С, т. е. в фазу «серонегативного окна». Повышение активности АЛТ может быть маркером потенциально существующего гепатита, для определения антител которого не существует тест-систем.

В Карагандинской области все формы острого вирусного гепатита в 2008 г. составили 274 случая (показатель 20,4), в 2009 г. - 231 случай (показатель - 17,1), республиканский показатель составил 46,6 и 3б,1 соответственно по годам. ВГВ в Карагандинской области в 2008 г. - 58 случаев (показатель 4,3), в 2009 г. - 42 случая (3,1), республиканский показатель соста-

вил 4,4 и 3,2 соответственно. ВГС в 2008 г. - 11 случаев (0,82), в 2009 г. - 8 (0,59), республиканский показатель ВГС составил 0,94 и 084 по годам соответственно.

Таким образом, с целью снижения риска передачи возбудителя гепатита через донорскую кровь и ее компоненты необходимо исследование доз крови на маркеры гепатита и определение активности АЛТ как суррогатного маркера в фазу «серонегативного окна».

ЛИТЕРАТУРА

1. Аграненко В. А. Трансфузионная медицина -современные проблемы и перспективы /В. А. Аграненко, Б. Ф. Кавешников. - 1994. - 244 с.

2. Голосова Т. В. Обеспечение безопасности передачи вирусных инфекций при гемотрансфузи-ях /Т. В. Голосова, Ф. В. Сомова, Т. А. Туполева // Трансфузионная медицина. - 1995. - №5. - С. 75.

3. Лабораторные методы исследования в клинике /Под ред. В. В. Меньшикова. - М., 1987. -294 с.

4. Румянцев А. Г. Клиническая трансфузиоло-гия /А. Г. Румянцев, В. А. Аграненко. - М.: Гэотар медицина, 1997. - 575 с.

5. Рагимов А. А. Трансфузионная иммунология / А. А. Рагимов, Н. Г. Дашкова. - М., 2000. - 283 с.

6. Рагимов А. А. Профилактика гепатита В у доноров /А. А. Рагимов, Н. Г. Дашкова, Н. Токарева. - М., 2001. - 354 с.

7. Шевченко Ю. Л. Безопасное переливание крови /Ю. Л. Шевченко, Е. Б. Жибурт. - СПб., 2000. - 308 с.

Поступила 13.08.10

N. V. Polyakova

DEFINITION OF ALT-ACTIVITY IN DONORS BLOOD AS THE SURROGATE MARKER OF VIRUS HEPATITIS

The author's data pointed the high degree of infected population by hepatitis И and C. For the lowering of risk of transfer of hepatitis agents through the donor blood and its components, it is necessary to examine the blood doses for the revealing of hepatitis markers and the definition of ALT-activity as the surrogate marker in phase of «seronegative window».

Н. В. Полякова

ДОНОРЛАР КАНЫНДАРЫ АЛТ БЕЛСЕНД1Л1Г1Н ВИРУСТЬЩ ГЕПАТИТТЕРДЩ СУРРОГАТТЬЩ МАРКЕР1 РЕТ1НДЕ АНЬЩТАУ

Автор кел^рген мэлiметтер т±ррындардыч арасында В жэне С гепати™ жуктырудыч дечгей жорары екенш керсетедк Донор каны жэне оныч компоненттерi аркылы бертетш гепатит коздыррыштары катерш темендету Yшiн гепатит маркерлерше кан дозасына зерттеу журпзу кажет жэне АЛТ белсендтИн суррогатты маркер ретшде аныктау керек.