АКТИВИРУЕМЫЕ МИКРООКРУЖЕНИЕМ ОПУХОЛИ КОНЪЮГАТЫ ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ - СВЯЗЫВАЮЩЕЕ ВЕЩЕСТВО И СВЯЗАННЫЕ С НИМИ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат, содержащий: (i) связывающий клетку фрагмент, который связывается с компонентом клеточной поверхности на целевой клетке в патологической ткани, причем компонент клеточной поверхности подвергается медленной интернализации при связывании конъюгатом связывающее вещество - лекарственный препарат; (ii) лекарственный фрагмент, который оказывает фармакологический эффект на неспецифические клетки вблизи целевой клетки, при этом лекарственный фрагмент имеет EC50 в отношении фармакологического эффекта, которая по меньшей мере в 10 раз снижена, когда он является частью конъюгата связывающее вещество - лекарственный препарат, по сравнению со свободным лекарственным фрагментом, высвобождаемым из конъюгата связывающее вещество - лекарственный препарат; и (iii) линкерный фрагмент, ковалентно связывающий полипептидный связывающий фрагмент с лекарственным фрагментом, при этом линкерный фрагмент содержит последовательность распознавания субстрата, которая расщепляется ферментом, внеклеточно присутствующим в патологической ткани, причем в присутствии фермента может происходить расщепление линкерного фрагмента и высвобождение свободного лекарственного фрагмента.
2. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 1, отличающийся тем, что патологическая ткань представляет собой опухоль.
3. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 1 или 2, отличающийся тем, что целевая клетка представляет собой опухолевую клетку.
4. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 1 или 2, отличающийся тем, что целевая клетка представляет собой макрофаг, моноцитарную клетку-супрессор (МКС), дендритную клетку, фибробласт, NK-клетку, тучную клетку, гранулоцит, эозинофил, B-клетку или клетку сосудистого эндотелия.
5. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат, связанный с компонентом поверхности на целевой клетке, характеризуется полупериодом интернализации, составляющим по меньшей мере 6 часов, более предпочтительно по меньшей мере 10, 12, 14, 16, 18, 20, 24, 36, 48 или 60 часов.
6. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что компонент клеточной поверхности представляет собой белок, который избирательно экспрессируется целевой клеткой в патологической ткани по сравнению с нормальными клетками из здоровой ткани.
7. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по пп. 2, 3 или 4, отличающийся тем, что компонент поверхности представляет собой белок контрольной точки или костимулирующий рецептор.
8. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 7, отличающийся тем, что компонент поверхности представляет собой белок контрольной точки, выбранный из группы, состоящей из CTLA-4, PD-1, LAG-3, BTLA, KIR, TIM-3, PD-L1, PD-L2, B7-H3, B7-H4, HVEM, GAL9, CD160, VISTA, BTNL2, TIGIT, PVR, BTN1A1, BTN2A2, BTN3A2 и CSF-1R, более предпочтительно CTLA-4, PD-1, LAG-3, TIM-3, BTLA, VISTA, HVEM, TIGIT, PVR, PD-L1 и CD160, а связывающий фрагмент является антагонистом контрольной точки.
9. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 7, отличающийся тем, что компонент поверхности представляет собой костимулирующий рецептор или лиганд, выбранные из группы, состоящей из 4-1BB, 4-1BB-L, OX40, OX40-L, GITR, CD28, CD40, CD40-L, ICOS, ICOS-L, LIGHT и CD27, более предпочтительно 4-1BB, OX40, GITR, CD40 и ICOS, а связывающий фрагмент является костимулирующим агонистом.
10. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что связывающий клетку фрагмент представляет собой антитело, такое как гуманизированное антитело, человеческое антитело или химерное антитело, или содержит его антигенсвязывающую часть, которая связывает компонент клеточной поверхности, такую как Fab, F(ab)2, F(ab'), F(ab')2, F(ab')3, Fd, Fv, дисульфид-связанный Fv, dAb или sdAb (или нанотело), CDR, scFv, (scFv)2, ди-scFv, би-scFv, tascFv (тандемный scFv), AVIBODY (например, диатело, триатело, тетратело), рекрутер T-клеток (BiTE), scFv-Fc, Fcab, mAb2, малое модульное иммунофармацевтическое средство (SMIP), Genmab/унитело или дуотело, домен V-NAR, IgNAR, минитело, IgGACH2, DVD-Ig, протело, интратело или мультиспецифическое антитело.
11. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что связывающий фрагмент представляет собой отличную от антитела структуру, например, выбранную из группы, состоящей из аффител, аффимеров, аффилинов, антикалинов, атримеров, авимеров, дарпинов, FN3-каркасов (например, аднектинов и центиринов), финомеров, доменов Куница, нанофитинов, пронектинов, O-тел, трител, авимеров, бициклических пептидов и Cys-узлов.
12. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из предыдущих пунктов, представленный одной из формул
где
CBM представляет связывающий клетку фрагмент, который в каждом случае может быть одинаковым или разным;
1
L представляет спейсер или связь;
SRS представляет последовательность распознавания субстрата;
2
L представляет саморасщепляющийся линкер или связь;
DM представляет лекарственный фрагмент;
m равен целому числу от 1 до 6; и
n равен целому числу от 1 до 500, более предпочтительно от 1 до 100, от 1 до 10 или от 1 до 5.
1
1
1
13. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 12, отличающийся тем, что L представляет собой углеводород (неразветвленный или циклический), такой как 6-малеимидокапроил, малеимидопропаноил и малеимидометил циклогексан-1-карбоксилат, или L представляет собой N-сукцинимидил 4-(2-пиридилтио)пентаноат, N-сукцинимидил 4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилат, N-сукцинимидил (4-йодоацетил)аминобензоат, или L представляет собой простой полиэфир, такой как поли(этиленгликоль).
1
1
14. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 12, отличающийся тем, что CBM содержит тиол, а L представляет собой поли(этиленгликоль), сопряженный с тиольной группой посредством малеимидного фрагмента, Lпредставлен формулой
где p равен целому числу от 1 до 100, предпочтительно от 6 до 50, более предпочтительно от 6 до 12.
1
1
15. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 12, отличающийся тем, что CBM содержит тиол, а L представляет собой углеводородный фрагмент, сопряженный с тиольной группой посредством малеимидного фрагмента, Lпредставлен формулой
где p равен целому числу от 1 до 20, предпочтительно от 1 до 4.
16. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что последовательность распознавания субстрата расщепляется протеазой, предпочтительно сериновой протеазой, металлопротеазой или цистеиновой протеазой.
17. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 16, отличающийся тем, что протеаза присутствует внеклеточно в патологической ткани пациента на уровнях по меньшей мере в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или даже 100 раз больших, чем в здоровой ткани пациента.
18. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 16, отличающийся тем, что протеаза присутствует внеклеточно в патологической ткани пациента на уровнях по меньшей мере в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или даже 100 раз больших, чем в другой ткани пациента.
19. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что протеаза представляет собой матриксную металлопротеиназу, выбранную из мембраносвязанных матриксных металлопротеиназ (таких как MMP14-17 и MMP24-25) и секретируемых матриксных металлопротеиназ (таких как MMP1-13, MMP18-23 и MMP26-28), предпочтительно представляет собой MMP1, MMP2, MMP3, MMP4, MMP9, MMP11, MMP13, MMP14, MMP17 или MMP19, более предпочтительно - MMP2, MMP9 или MMP14.
20. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что протеаза представляет собой дизинтегрин и металлопротеиназу (ADAM) или дизинтегрин или металлопротеиназу с тромбоспондиновыми мотивами (ADAMTS).
21. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что протеаза представляет собой легумаин, матриптазу (MT-SP1), эластазу нейтрофилов, TMPRSS, тромбин, активатор плазминогена u-типа (uPA, также называемый урокиназой), PSMA или CD10 (CALLA).
22. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что протеаза представляет собой пост-пролин расщепляющую протеазу, такую как активирующий фибробласты белок альфа (FAPα).
23. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 12-15, отличающийся тем, что последовательность распознавания субстрата расщепляется активирующим фибробласты белком альфа (FAPα) и представлена
где
2
1
6
Rпредставляет собой H или (C-C)алкил и предпочтительно представляет собой H;
3
1
6
Rпредставляет собой H или (C-C)алкил, предпочтительно представляет собой метил, этил, пропил или изопропил, и более предпочтительно - метил;
4
1
6
2
Rотсутствует или представляет собой (C-C)алкил, -OH, -NH или галоген;
X представляет собой O или S; и
2
2
2
-NH- представляет собой амин, который является частью L, если L представляет собой саморасщепляющийся линкер, или частью DM, если L представляет собой связь.
2
2
4
2
3
24. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 12-15 или п. 23, отличающийся тем, что L представляет собой саморасщепляющийся линкер, выбранный из группы, состоящей из -NH-(CH)-C(=O)-, -NH-(CH)-C(=O)-, п-аминобензилоксикарбонила (PABC) и 2,4-бис(гидроксиметил)анилина.
25. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-24, отличающийся тем, что фармакологический эффект лекарственного фрагмента зависит от способности свободного лекарственного фрагмента проникать в клетки, тогда как в качестве части конъюгата связывающее вещество - лекарственный препарат лекарственный фрагмент практически не способен проникать в клетки.
1
26. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-24, отличающийся тем, что фармакологический эффект лекарственного фрагмента существенно снижен посредством ковалентного связывания с L.
27. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-26, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент представляет собой иммуномодулятор.
28. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 27, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент представляет собой агент, активирующий иммунитет.
29. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 27, отличающийся тем, что свободный лекарственный фрагмент индуцирует путь врожденного иммунитета.
30. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по пп. 27, 28 или 29, отличающийся тем, что иммуномодулятор представляет собой ингибитор иммуно-DASH, который ингибирует ферментативную активность DPP8 и DPP9 и индуцирует пироптоз макрофагов.
31. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по пп. 27, 28 или 29, отличающийся тем, что агент, активирующий иммунитет, является агонистом STING.
32. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по пп. 27, 28 или 29, отличающийся тем, что агент, активирующий иммунитет, является агонистом RIG-1.
33. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по пп. 27, 28 или 29, отличающийся тем, что агент, активирующий иммунитет, является агонистом Толл-подобного рецептора (TLR), например, выбранным из группы, состоящей из агониста TLR1/2, агониста TLR2, агониста TLR3, агониста TLR4, агониста TLR5, агониста TLR6/2, агониста TLR7, агониста TLR7/8, агониста TLR7/9, агониста TLR8, агониста TLR9 и агониста TLR11, предпочтительно выбранным из группы, состоящей из агониста TLR3, агониста TLR7, агониста TLR7/8 и агониста TLR9.
34. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-26, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент является цитотоксическим для опухолеассоциированных фибробластов (CAF).
35. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-26, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент поляризует популяции опухолеассоциированных макрофагов в пользу макрофагов M1 или ингибирует иммуносупрессивную активность макрофагов M2.
36. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-26, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент ускоряет примирование T-клеток и/или миграцию дендритных клеток.
37. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-26, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент ингибирует или снижает количество клеток Treg, например, путем блокирования иммуносупрессивной функции или миграции в лимфатические узлы и/или микроокружение опухоли.
38. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-26, отличающийся тем, что терапевтический индекс конъюгата связывающее вещество - лекарственный препарат является по меньшей мере в 5 раз большим, чем терапевтический индекс для свободного лекарственного фрагмента при системном введении, более предпочтительно по меньшей мере в 10, 20, 30, 40, 50, 75 или даже 100 раз большим.
39. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что иммуномодулятор представляет собой низкомолекулярный ингибитор, имеющий молекулярную массу менее 5000 а. е. м., предпочтительно менее 2500 а. е. м.
40. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат, содержащий полипептид, содержащий одну или более последовательностей аффимеров, которые связываются с белком клеточной поверхности на клетках в опухоли, и имеющий один или более присоединенных к нему фрагментов лекарственный препарат - конъюгат, причем фрагменты лекарственный препарат - конъюгат представлены формулами
где
1
L представляет спейсер или связь;
SRS представляет последовательность распознавания субстрата для внеклеточной протеазы, которая экспрессируется во внеклеточном пространстве опухоли;
2
L представляет саморасщепляющийся линкер или связь;
DM представляет лекарственный фрагмент;
m равен целому числу от 1 до 6, предпочтительно 1, 2 или 3; и
n равен целому числу от 1 до 500, более предпочтительно от 1 до 100, от 1 до 10 или от 1 до 5.
41. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 40, отличающийся тем, что последовательность аффимера представляет собой PD-L1-связывающий фрагмент.
−6
42. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 41, отличающийся тем, что PD-L1-связывающий фрагмент представляет собой последовательность полипептида аффимера, который связывается с PD-L1 с Kd, составляющей 1×10М или менее, и ингибирует взаимодействие PD-L1, с которым он связан, с PD-1.
43. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 41 или 42, отличающийся тем, что полипептид PD-L1-связывающего аффимера имеет аминокислотную последовательность, представленную в общей формуле (I)
n
m
FR1-(Xaa)-FR2-(Xaa)-FR3 (I)
где
FR1 представляет собой полипептидную последовательность, представленную MIPGGLSEAK PATPEIQEIV DKVKPQLEEK TNETYGKLEA VQYKTQVLA (SEQ ID NO: 1) или полипептидную последовательность, имеющую по меньшей мере 70% гомологии с ней;
(SEQ ID NO: 2)
FR2 представляет собой полипептидную последовательность, представленную GTNYYIKVRA GDNKYMHLKV FKSL , или полипептидную последовательность, имеющую по меньшей мере 70% гомологии с ней;
FR3 представляет собой полипептидную последовательность, представленную EDLVLTGYQV DKNKDDELTG F (SEQ ID NO: 3), или полипептидную последовательность, имеющую по меньшей мере 70% гомологии с ней; и
Xaa, отдельно в каждом случае представляет собой аминокислотный остаток; и
n и m, каждый, независимо равны целому числу от 3 до 20.
44. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 41 или 42, отличающийся тем, что полипептид PD-L1-связывающего аффимера имеет аминокислотную последовательность, представленную в общей формуле:
n
m
MIP-Xaa1-GLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKTQVLA-(Xaa)-Xaa2-TNYYIKVRAGDNKYMHLKVF-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa)-Xaa6-D-Xaa7-VLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO: 4)
где
Xaa, отдельно в каждом случае представляет собой аминокислотный остаток;
n и m, каждый, независимо равны целому числу от 3 до 20;
Xaa1 представляет собой Gly, Ala, Val, Arg, Lys, Asp или Glu;
Xaa2 представляет собой Gly, Ala, Val, Ser или Thr;
Xaa3 представляет собой Arg, Lys, Asn, Gln, Ser или Thr;
Xaa4 представляет собой Gly, Ala, Val, Ser или Thr;
Xaa5 представляет собой Ala, Val, Ile, Leu, Gly или Pro;
Xaa6 представляет собой Gly, Ala, Val, Asp или Glu; и
Xaa7 представляет собой Ala, Val, Ile, Leu, Arg или Lys.
45. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 41 или 42, отличающийся тем, что полипептид PD-L1-связывающего аффимера имеет аминокислотную последовательность, представленную в общей формуле:
n
m
MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKT QVLA-(Xaa)-STNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGP-(Xaa)-ADRVLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO: 5)
где
Xaa, отдельно в каждом случае представляет собой аминокислотный остаток; и
n и m, каждый, независимо равны целому числу от 3 до 20.
46. Белок по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что полипептид PD-L1-связывающего аффимера имеет аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 76-84, или аминокислотную последовательность, имеющую с ними по меньшей мере 70% гомологии.
47. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-46, отличающийся тем, что по меньшей мере один фрагмент лекарственный препарат - конъюгат присоединен к последовательности аффимера посредством тиольной боковой цепи цистеина, внесенной в последовательность аффимера, предпочтительно в части областей последовательности аффимера, соответствующих FR1, FR2 и/или FR3.
48. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-47, отличающийся тем, что связывание аффимера с PD-L1 (a) повышает пролиферацию T-клеток в анализе реакции смешанной культуры лимфоцитов (СКЛ); (b) повышает выработку интерферона-γ в анализе СКЛ-реакции; и/или (c) повышает секрецию интерлейкина-2 (IL-2) в анализе СКЛ-реакции.
49. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-48, отличающийся тем, что аффимер является частью слитого белка, содержащего полипептидные фрагменты для продления времени полужизни, выбранные из группы, состоящей из Fc-домена или его части, белка альбумина или его части, альбумин-связывающего полипептидного фрагмента, трансферрина или его части, трансферрин-связывающего полипептидного фрагмента, фибронектина или его части или фибронектин-связывающего полипептидного фрагмента.
1
1
1
50. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-49, отличающийся тем, что L представляет собой углеводород (неразветвленный или циклический), такой как 6-малеимидокапроил, малеимидопропаноил и малеимидометил циклогексан-1-карбоксилат, или L представляет собой N-сукцинимидил 4-(2-пиридилтио)пентаноат, N-сукцинимидил 4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилат, N-сукцинимидил (4-йодоацетил)аминобензоат, или L представляет собой простой полиэфир, такой как поли(этиленгликоль).
1
1
51. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 50, отличающийся тем, что аффимер содержит цистеин со свободным тиолом, а L представляет собой поли(этиленгликоль), сопряженный с тиольной группой посредством малеимидного фрагмента, L представлен формулой
где p равен целому числу от 1 до 100, предпочтительно от 6 до 50, более предпочтительно от 6 до 12.
1
1
52. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 50, отличающийся тем, что аффимер содержит цистеин со свободным тиолом, а L представляет собой углеводородный фрагмент, сопряженный с тиольной группой посредством малеимидного фрагмента, L представлен формулой
где p равен целому числу от 1 до 20, предпочтительно от 1 до 4.
53. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из предыдущих пунктов 41-52, отличающийся тем, что последовательность распознавания субстрата расщепляется сериновой протеазой, металлопротеазой или цистеиновой протеазой.
54. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 53, отличающийся тем, что протеаза присутствует внеклеточно в опухолевой ткани пациента на уровнях, по меньшей мере в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или даже 100 раз больших, чем в неопухолевой ткани пациента.
55. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 53, отличающийся тем, что протеаза присутствует внеклеточно в опухолевой ткани пациента на уровнях, по меньшей мере в 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или даже 100 раз больших, чем в другой ткани пациента.
56. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-55, отличающийся тем, что протеаза представляет собой матриксную металлопротеиназу, выбранную из мембраносвязанных матриксных металлопротеиназ (таких как MMP14-17 и MMP24-25) и секретируемых матриксных металлопротеиназ (таких как MMP1-13, MMP18-23 и MMP26-28), предпочтительно представляет собой MMP1, MMP2, MMP3, MMP4, MMP9, MMP11, MMP13, MMP14, MMP17 или MMP19, более предпочтительно - MMP2, MMP9 или MMP14.
57. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-55, отличающийся тем, что протеаза представляет собой дизинтегрин и металлопротеиназу (ADAM) или дизинтегрин или металлопротеиназу с тромбоспондиновыми мотивами (ADAMTS).
58. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-55, отличающийся тем, что протеаза представляет собой легумаин, матриптазу (MT-SP1), эластазу нейтрофилов, TMPRSS, тромбин, активатор плазминогена u-типа (uPA, также называемый урокиназой), PSMA или CD10 (CALLA).
59. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-55, отличающийся тем, что протеаза представляет собой пост-пролин расщепляющую протеазу, такую как активирующий фибробласты белок альфа (FAPα).
60. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-55, отличающийся тем, что последовательность распознавания субстрата расщепляется активирующим фибробласты белком альфа (FAPα) и представлена
где
2
1
6
Rпредставляет собой H или (C-C)алкил и предпочтительно представляет собой H;
3
1
6
Rпредставляет собой H или (C-C)алкил, предпочтительно представляет собой метил, этил, пропил или изопропил, и более предпочтительно - метил;
4
1
6
2
Rотсутствует или представляет собой (C-C)алкил, -OH, -NH или галоген;
X представляет собой O или S; и
2
2
2
-NH- представляет собой амин, который является частью L, если L представляет собой саморасщепляющийся линкер, или частью DM, если L представляет собой связь.
2
2
4
2
3
61. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-55 или п. 60, отличающийся тем, что L представляет собой саморасщепляющийся линкер, выбранный из группы, состоящей из -NH-(CH)-C(=O)-, -NH-(CH)-C(=O)-, п-аминобензилоксикарбонила (PABC) и 2,4-бис(гидроксиметил)анилина.
62. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-61, отличающийся тем, что фармакологический эффект лекарственного фрагмента зависит от способности свободного лекарственного фрагмента проникать в клетки, тогда как в качестве части конъюгата связывающее вещество - лекарственный препарат лекарственный фрагмент практически не способен проникать в клетки.
1
63. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-61, отличающийся тем, что фармакологический эффект лекарственного фрагмента существенно снижен посредством ковалентного связывания с L.
64. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-61, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент представляет собой иммуномодулятор.
65. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 64, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент представляет собой агент, активирующий иммунитет.
66. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по п. 64, отличающийся тем, что свободный лекарственный фрагмент индуцирует путь врожденного иммунитета.
67. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 64-66, отличающийся тем, что иммуномодулятор представляет собой ингибитор иммуно-DASH, который ингибирует ферментативную активность DPP8 и DPP9 и индуцирует пироптоз макрофагов.
68. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 64-66, отличающийся тем, что иммуномодулятор является агонистом STING.
69. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 64-66, отличающийся тем, что иммуномодулятор является агонистом RIG-1.
70. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 64-66, отличающийся тем, что иммуномодулятор является агонистом Толл-подобного рецептора (TLR), например, выбранным из группы, состоящей из агониста TLR1/2, агониста TLR2, агониста TLR3, агониста TLR4, агониста TLR5, агониста TLR6/2, агониста TLR7, агониста TLR7/8, агониста TLR7/9, агониста TLR8, агониста TLR9 и агониста TLR11, предпочтительно выбранным из группы, состоящей из агониста TLR3, агониста TLR7, агониста TLR7/8 и агониста TLR9.
71. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-61, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент является цитотоксическим для опухолеассоциированных фибробластов (CAF).
72. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-61, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент поляризует популяции опухолеассоциированных макрофагов в пользу макрофагов M1 или ингибирует иммуносупрессивную активность макрофагов M2.
73. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-61, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент ускоряет примирование T-клеток и/или миграцию дендритных клеток.
74. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-61, отличающийся тем, что лекарственный фрагмент ингибирует или снижает количество клеток Treg, например, путем блокирования иммуносупрессивной функции или миграции в лимфатические узлы и/или микроокружение опухоли.
75. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-61, отличающийся тем, что терапевтический индекс конъюгата связывающее вещество - лекарственный препарат является по меньшей мере в 5 раз большим, чем терапевтический индекс для свободного лекарственного фрагмента при системном введении, более предпочтительно по меньшей мере в 10, 20, 30, 40, 50, 75 или даже 100 раз большим.
76. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 41-75, отличающийся тем, что иммуномодулятор представляет собой низкомолекулярный ингибитор, имеющий молекулярную массу менее 5000 а. е. м., предпочтительно менее 2500 а. е. м.
77. Комбинация ингибитор PD-L1/стимулятор врожденного иммунитета, содержащая PD-L1-связывающий полипептид и конъюгированный к нему лекарственный фрагмент, который является стерильным индуктором врожденного иммунного ответа (таким как ингибитор иммуно-DASH, агонист STING, агонист TRL7/8 или агонист RIG-1), при этом PD-L1-связывающий полипептид приводит к накоплению ингибитора PD-L1/стимулятора врожденного иммунитета в опухолях по сравнению с другой тканью пациента, а лекарственный фрагмент избирательно высвобождается из PD-L1-связывающего полипептида в микроокружение опухоли по сравнению с другой тканью пациента.
78. Фармацевтический препарат, подходящий для терапевтического применения пациентом-человеком, содержащий (i) конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из пп. 1-76 или комбинацию ингибитор PD-L1/стимулятор врожденного иммунитета по п. 77 и (ii) один или более фармацевтически приемлемых эксципиентов, буферов, солей и т. п.
79. Применение фармацевтического препарата по п. 78 в качестве части лечения пациента, страдающего от онкологического заболевания.
80. Применение фармацевтического препарата по п. 79, отличающееся тем, что лечение включает введение пациенту ингибитора PGE2.
81. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат для уничтожения клеток ОМЛ, содержащий: i) связывающий клетку фрагмент, который связывается с компонентом клеточной поверхности, избирательно экспрессируемым на клетках ОМЛ (таким как CD33 или CD123), причем компонент клеточной поверхности интернализуется клетками ОМЛ при связывании конъюгатом связывающее вещество - лекарственный препарат; (ii) фрагмент ингибитора иммуно-DASH, который при высвобождении из конъюгата в виде свободного ингибитора иммуно-DASH является токсичным для клеток ОМЛ; и (iii) линкерный фрагмент, ковалентно связывающий фрагмент, связывающий клетку, с фрагментом ингибитора I-DASH, при этом линкерный фрагмент содержит последовательность распознавания субстрата, которая расщепляется ферментом, внутриклеточно присутствующим в клетках ОМЛ (таким как катепсин), при этом интернализация конъюгата связывающее вещество - лекарственный препарат клетками ОМЛ после связывания компонента клеточной поверхности приводит к воздействию на линкерный фрагмент внутриклеточного фермента, расщеплению линкерного фрагмента и внутриклеточному высвобождению свободного фрагмента иммуно-DASH в клетках ОМЛ.
82. Конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат, содержащий фрагмент, связывающий клетки ОМЛ (такой как вещество, связывающее CD33, или вещество, связывающее CD123), и имеющий один или более присоединенных к нему фрагментов лекарственный препарат - конъюгат, причем фрагменты лекарственный препарат - конъюгат представлены формулами
где
1
L представляет спейсер или связь;
SRS представляет последовательность распознавания субстрата для внутриклеточной протеазы, которая экспрессируется в клетках ОМЛ;
2
L представляет саморасщепляющийся линкер или связь;
DM представляет фрагмент ингибитора иммуно-DASH;
m равен целому числу от 1 до 6, предпочтительно 1, 2 или 3; и
n равен целому числу от 1 до 500, более предпочтительно от 1 до 100, от 1 до 10 или от 1 до 5.
83. Фармацевтический препарат, подходящий для терапевтического применения пациентами-людьми в качестве части лечения ОМЛ, содержащий (i) конъюгат связывающее вещество - лекарственный препарат по любому из п. 80 или п. 18 и (ii) один или более фармацевтически приемлемых эксципиентов, буферов, солей и т. п.
84. Применение фармацевтического препарата по п. 82 в качестве части лечения пациента, страдающего от ОМЛ.