ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ЭРИТРОЦИТЫ, В КОТОРЫХ ЗАКЛЮЧЕН ФЕРМЕНТ, ЗАВИСИМЫЙ ОТ ПИРИДОКСАЛЬФОСФАТА, И ЕГО КОФАКТОР

1. Набор или композиция, содержащие комбинацию:
(а) инъецируемой фармацевтической суспензии, которая обеспечивает длительную ферментативную активность, зависимую от пиридоксальфосфата (PLP), пациенту или субъекту, нуждающемуся в этом, содержащую эритроциты и фармацевтически приемлемый носитель, причем в эритроцитах инкапсулировано множество молекул PLP-зависимого фермента и содержится PN-киназа и PNP-оксидаза в количестве, достаточном для производства пиридоксальфосфата (PLP) из предшественника PLP, присутствующего в кровотоке пациента или субъекта, в количестве, достаточном для поддержания достаточной части молекул PLP-зависимого фермента в его голоферментных формах для сохранения ферментативной активности через 24 часа после введения; где суспензия необязательно содержит консервирующий раствор, содержащий неорганический фосфат, для ингибирования ферментативной активности PLP-фосфатазы внутри эритрацитов;
(b) композиции, содержащей достаточное количество фармацевтически приемлемого предшественника PLP, подходящего для введения пациенту или субъекту;
(c) необязательно PLP, инкапсулированного в эритроцитах вместе с молекулами PLP-зависимого фермента;
(d) необязательно, инструкции для пациента или субъекта по дозировке предшественника PLP, которая позволяет обеспечить продуцирование достаточного количества PLP в указанных эритроцитах.
2. Набор или композиция по п.1, где суспензия дополнительно содержит PLP или предшественник PLP, инкапсулированный в эритроцитах и/или присутствующий вне указанных эритроцитов, и где, когда он присутствует, количество инкапсулированного предшественника PLP является эффективным для поддержания инкапсулированного PLP-зависимого фермента в его голоферментной форме дольше относительно того же PLP-зависимого фермента, не инкапсулированного в эритроцитах.
3. Набор или композиция по п.2, где предшественник PLP представляет собой нефосфатный предшественник, выбранный из пиридоксаля, пиридоксина, пиридоксамина и их комбинаций.
4. Набор или композиция по п.2, в которых предшественник PLP, присутствующий в суспензии, является предшественником фосфата.
5. Набор или композиция по п.4, в которых предшественник фосфата, присутствующий в суспензии, содержит пиридоксинфосфат (PNP) и/или пиридоксаминфосфат (PMP).
6. Набор или композиция по п.1, включающие от 0,01 до около 30 мг PLP-зависимого фермента на мл эритроцитов.
7. Набор или композиция по п.6, включающие от около 0,05 до около 10 мг PLP-зависимого фермента на мл эритроцитов.
8. Набор или композиция по п.2, включающие от 0,05 до около 600 мкмоль PLP и/или PNP и/или PMP на литр эритроцитов.
9. Набор или композиция по п.1, где суспензия дополнительно содержит пиридоксинкиназу (PN-киназу), пиридоксинфосфатоксидазу (PNP оксидазу) и/или агент, ингибирующий PLP-фосфатазу.
10. Набор или композиция по п.1, где PLP-зависимый фермент представляет собой метиониназу (METase), тирозин-феноллиазу (TPL), тирозин-аминотрансферазу (TATase) или цистатионин-бета-синтазу (CBS).
11. Композиция набора по п.1, в которой суспензия содержит консервирующий раствор, содержащий неорганический фосфат для ингибирования ферментативной активности PLP-фосфатазы внутри эритроцитов.
12. Набор или композиция по п.1, в которых суспензию получают путем открытия пор в мембранах эритроцитов; контактирования эритроцитов с PLP-зависимым ферментом до, во время и/или после открытия пор; обеспечения проникновения фермента в эритроциты; закрытия пор эритроцитов, содержащих фермент; введения энзимсодержащих эритроцитов в буфер для образования первой суспензии; необязательно инкубации первой суспензии для обеспечения лизиса наиболее хрупких эритроцитов; удаления лизированных эритроцитов; и суспендирования эритроцитов в консервирующем растворе, получая таким образом суспензию.
13. Набор или композиция по п.12, где нефосфатным предшественником является пиридоксин.
14. Терапевтический способ лечения для истощения или уменьшения в плазме крови или в кровотоке субстрата, выбранного из метионина, гомоцистеина и тирозина, у пациента или субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному пациенту или субъекту по меньшей мере одной дозы эффективного количества набора или композиции по любому из пп.1-13.
15. Способ по п.14, включающий введение эффективного количества нефосфатной формы витамина В6, где суспензию и нефосфатную форму витамина В6 вводят отдельно или последовательно; и где введение 1) эффективного количества витамина B6 и эффективного количества инкапсулированного PLP-зависимого фермента обеспечивает значительно большую остаточную активность PLP-зависимого фермента, чем 2) введение того же количества витамина B6 и того же количества неинкапсулированной свободной формы PLP-зависимого фермента.
16. Способ по п.14, в котором PLP-зависимый фермент представляет собой метиониназу (METазу), тирозинфеноллиазу (TPL), тирозин аминотрансферазу (TATазу) или цистатионин бета-синтазу (CBS); и
при этом, когда фермент представляет собой METазу, способ истощает или снижает гомоцистеин в плазме крови, или в кровотоке, или в печени у пациента или субъекта, нуждающегося в этом;
при этом, когда фермент представляет собой TPL или TATазу, способ с помощью TPL истощает или снижает тирозин в плазме крови или в кровотоке у пациента или субъекта, нуждающегося в этом; а также
при этом, когда фермент представляет собой CBS, способ истощает или снижает гомоцистеин в плазме крови, или в кровотоке и/или в печени у пациента, страдающего от гомоцистинурии и/или гипергомоцистинурии и/или связанных патологий.
17. Способ по п.16, в котором пациент или субъект, нуждающийся в этом, страдает от рака.
18. Способ по п.17, где указанный рак включает опухолевые клетки, ауксотрофные по метионину или тирозину, и PLP-зависимый фермент представляет собой METазу, TPL, TATазу или комбинации TPL и TATазы.
19. Способ по п.14, в котором пациент или субъект страдает синдромом Ричнера-Ханхарта, а PLP-зависимый фермент представляет собой ТАТазу.
20. Способ по п.14, где пациент или субъект страдает от гомоцистинурии и/или гипергомоцистинурии, и PLP-зависимый фермент представляет собой CBS.