АНТИТЕЛА ПРОТИВ ФАКТОРА РОСТА НЕРВОВ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ

1.  Способ получения антитела, подходящего для применения у кошки, предусматривающий стадии:
- получения донорного антитела вида, отличного от кошки, причем донорное антитело характеризуется специфичностью связывания в отношении целевого антигена, присутствующего у кошек;
- сравнения каждого аминокислотного остатка в аминокислотной последовательности каркасных участков донорного антитела с каждым аминокислотным остатком, присутствующим в соответствующем положении в аминокислотной последовательности каркасных участков одного или нескольких кошачьих антител, для идентификации одного или нескольких аминокислотных остатков в пределах аминокислотной последовательности каркасных участков донорного антитела, которые отличаются от одного или нескольких аминокислотных остатков в соответствующем положении в пределах аминокислотной последовательности каркасных участков одного или нескольких кошачьих антител; и
- замещения одного или нескольких идентифицированных аминокислотных остатков в донорном антителе одним или несколькими аминокислотными остатками, присутствующими в соответствующем положении в одном или нескольких кошачьих антителах.
2.  Химерное антитело или его связывающий фрагмент, которые специфично связываются с кошачьим фактором роста нервов (NGF) и нейтрализуют способность кошачьего NGF связываться с рецептором кошачьего NGF р75 или TrkA, причем указанное химерное антитело содержит вариабельные домены легкой и/или тяжелой цепи, происходящие из антитела, которое связывается с фактором роста нервов у вида, отличного от кошек, и константные домены легкой и тяжелой цепи, полученные из происходящих из кошки антител.
3.  Химерное антитело по п. 2, в котором химерное антитело содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью последовательности с ней, и/или тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2 или последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью аминокислот с ней.
4. Антитело или связывающий фрагмент антитела по п. 2 или 3 для применения при лечении или предупреждении боли у кошки, при лечении артрита или артритического состояния у кошки, при лечении состояния, вызванного, связанного с или приводящего в результате к повышенной экспрессии кошачьего NGF или повышенной чувствительности к NGF у кошки, или при лечении индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у кошки и состояний, связанных с ней.
5. Нейтрализующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые способны специфично связываться с кошачьим фактором роста нервов (NGF), в которых антитело или связывающий фрагмент антитела содержит вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:23 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью с ней, и/или вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:22 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью с ней.
6. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 5, в которых легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:25 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью с ней и/или в которых тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:24 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью последовательности с ней.
7. Антитело или связывающий фрагмент антитела по п. 5 или 6 для применения при лечении или предупреждении боли у кошки, при лечении артрита или артритического состояния у кошки, при лечении состояния, вызванного, связанного с или приводящего в результате к повышенной экспрессии кошачьего NGF или повышенной чувствительности к NGF у кошки, или при лечении индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у кошки и состояний, связанных с ней.
8.  Нейтрализующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые способны специфично связываться с кошачьим фактором роста нервов (NGF), в которых антитело или связывающий фрагмент антитела содержит вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:3 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью с ней, и/или вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:4 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью с ней.
9. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 8, в которых легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью с ней.
10. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п. 8 или 9, в которых тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO: 17 и SEQ ID NO:18, или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью последовательности с ней.
11. Антитело или связывающий фрагмент антитела по п. 8 или 9 для применения при лечении или предупреждении боли у кошки, при лечении артрита или артритического состояния у кошки, при лечении состояния, вызванного, связанного с или приводящего в результате к повышенной экспрессии кошачьего NGF или повышенной чувствительности к NGF у кошки, или при лечении индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у кошки и состояний, связанных с ней.
12. Антитело против кошачьего NGF или его связывающий кошачий NGF фрагмент, содержащие вариабельный участок легкой цепи, содержащий по меньшей мере одно из:
каркасного участка FR1, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26,
каркасного участка FR2, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:27,
каркасного участка FR3, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:28, и
каркасного участка FR4, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:29,
и/или вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий по меньшей мере одно из:
каркасного участка FR1, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:30,
каркасного участка FR2, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:31,
каркасного участка FR3, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:32, и
каркасного участка FR4, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:33.
13. Антитело против кошачьего NGF или связывающий кошачий NGF фрагмент по п. 12, которые содержат вариабельный домен легкой цепи, имеющий:
(i) участок FR1 SEQ ID NO:26, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: D1 представляет собой Е или N, I2 представляет собой V, Р или Т, Е3 представляет собой V или М, М4 представляет собой L или I, S7 представляет собой Т, S10 представляет собой F, S12 представляет собой Р или А, Т14 представляет собой I или А, Е17 представляет собой D, S18 представляет собой Р или А, V19 представляет собой А, I21 представляет собой F, и S22 представляет собой F; и/или
(ii) участок FR2 SEQ ID NO:27, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: Y2 представляет собой F, L3 представляет собой F или R, K5 представляет собой R, R8 представляет собой Q, L12 представляет собой R, I14 представляет собой М, и Y15 представляет собой Н или А; и/или
(iii) участок FR3 SEQ ID NO:28, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: G1 представляет собой R, F6 представляет собой I, S7 представляет собой Т, Т13 представляет собой А или S, T16 представляет собой I или А, K18 представляет собой R или Т, S20 представляет собой A, G или Т, R21 представляет собой G, V22 представляет собой М, Q23 представляет собой Е, Т24 представляет собой А, V или Р, Е25 представляет собой D, V29 представляет собой I, H или L и F31 представляет собой Y; и/или
(iv) участок FR4 SEQ ID NO:29, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: F1 представляет собой S, Q3 представляет собой Р, К6 представляет собой Н, Q, Е, S или Т, Е8 представляет собой D, L9 представляет собой V, I или М, и K10 представляет собой R, D или Т.
14. Антитело против кошачьего NGF или связывающий кошачий NGF фрагмент по п. 12 или 13, которые содержат вариабельный домен тяжелой цепи, имеющий:
(i) участок FR1 SEQ ID NO:30, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих Q1 представляет собой D или Е, V2 представляет собой Е, Q3 представляет собой L или R, L4 представляет собой V, V5 представляет собой М, Е6 представляет собой Q или D, A9 представляет собой G, Е10 представляет собой D или N, L11 представляет собой V или R, V12 представляет собой R или К, Q13 представляет собой К, Т, Е, N или R, Р14 представляет собой Т, G15 представляет собой Е, Е16 представляет собой G, А или Т, S17 представляет собой A, L18 представляет собой V, R19 представляет собой K или Е, L20 представляет собой I или P, Т21 представляет собой F или S, A23 представляет собой K, V или Q, A24 представляет собой Т или D, и G26 представляет собой А; и/или
(ii) участок FR2 SEQ ID NO:31, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: V2 представляет собой L, F или I, R3 представляет собой С или Н, А5 представляет собой S, V или Т, G7 представляет собой А, Е или S, K8 представляет собой Q или Е, L10 представляет собой F или Р, Е11 представляет собой Q, W12 представляет собой С или L, M13 представляет собой V или I, и G14 представляет собой А или S; и/или
(iii) участок FR3 SEQ ID NO:32, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: R1 представляет собой Q или K, L2 представляет собой F, Т3 представляет собой I, I4 представляет собой L, М или V, Т5 представляет собой S, R6 представляет собой А, Т, K, G или V, Т8 представляет собой N, D, А или S, S9 представляет собой А, D или Т, K10 представляет собой Т, Е, Q, N или R, N11 представляет собой D или К, Т12 представляет собой I или А, V13 представляет собой A, L или G, F14 представляет собой Y, V, A, S или W, L15 представляет собой М, Q16 представляет собой Е, D, Н или V, М17 представляет собой L, H18 представляет собой N, S, T, D, G или R, S19 представляет собой N, Q21 представляет собой R, К или Т, S22 представляет собой Т, I, А или V, Е23 представляет собой А, Т, D, G или S, A26 представляет собой G или S, Т27 представляет собой V, М, I или A, Y28 представляет собой Н, Y29 представляет собой Н или F, и A31 представляет собой Т, V, G, L, I или М; и/или
(iv) участок FR4 SEQ ID NO:33, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: W1 представляет собой R, С или L, G2 представляет собой A, Q3 представляет собой Н, R, P или V, G4 представляет собой D, T5 представляет собой А или V, Т6 представляет собой L, I, Q, М или S, V7 представляет собой I, T8 представляет собой А, I или R, V9 представляет собой G, S10 представляет собой Р, и А11 представляет собой S или Q.
15. Антитело против кошачьего NGF или связывающий кошачий NGF фрагмент по п. 12 или 13, где антитело имеет кошачий константный домен НС2 типа.
16. Антитело или связывающий фрагмент антитела по п. 12 или 13 для применения при лечении или предупреждении боли у кошки, при лечении артрита или артритического состояния у кошки, при лечении состояния, вызванного, связанного с или приводящего в результате к повышенной экспрессии кошачьего NGF или повышенной чувствительности к NGF у кошки, или при лечении индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у кошки и состояний, связанных с ней.
17. Фармацевтическая композиция для лечения боли или состояния, приводящего в результате к или вызванного болью у кошки, для лечения артрита или артритического состояния у кошки, для лечения состояния, вызванного, связанного с или приводящего в результате к повышенной экспрессии кошачьего NGF или повышенной чувствительности к NGF у кошки, или для лечения индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у кошки и состояний, связанных с ней, содержащая терапевтически эффективное количество антитела против кошачьего NGF или его связывающего фрагмента по любому из пп. 2-16 вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем, вспомогательным веществом или разбавителем.
18. Фармацевтическая композиция по п. 17 для применения при лечении или предупреждении боли у кошки, при лечении артрита или артритического состояния у кошки, при лечении состояния, вызванного, связанного с или приводящего в результате к повышенной экспрессии кошачьего NGF или повышенной чувствительности к NGF у кошки, или при лечении индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у кошки и состояний, связанных с ней.
19. Выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 2-16.
20. Нуклеиновая кислота по п. 19 для применения при лечении или предупреждении боли у кошки, при лечении артрита или артритического состояния у кошки, при лечении состояния, вызванного, связанного с или приводящего в результате к повышенной экспрессии кошачьего NGF или повышенной чувствительности к NGF у
кошки, или при лечении индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у кошки и состояний, связанных с ней.