Исследование эндотелиопротективного эффекта l-аргинина и его комбинаций с эналаприлом и лозартаном

Исследование эндотелиопротективного эффекта 1_-аргинина и его комбинаций с эналаприлом и лозартаном

Т.Г.Покровская, В.И.Кочкаров, М.В.Покровский, Л.М.Даниленко, Е.Б.Лртюшкова, В.А.Метельская, Н.Г.Гуманова, Ю.П.Клявс, М.М.Корнеев, М.С.Брусник

Курский государственный медицинский университет, Курск

Ключевые слова: эндотелиальная дисфункция, оксид азота, ЫДОМЕ, Ц-аргинин, эналаприл, лозартан.

Имеющиеся сведения о метаболизме Ь-аргинина дают возможность сделать заключение о конкурентном характере биотрансформации этой аминокислоты, поэтому изучение выраженности эндотелиопротекгивных эффектов Ь-аргинина на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота является актуальным для решения проблем фармакотерапии ЭД [1,2,5]. Также интересным представляется оценить возможность усиления эндотелиопротективных свойств эндотеяи-отропных гипотензивных средств (ингибиторов АПФ, блокаторов АТ 1 -рецепторов) Ь-аргинином.

Целью исследования было проведение оценки эндотелиопротективного эффекта Ь-аргинина и его комбинаций с эналаприлом и лозартаном калия в эксперименте.

Материалы и методы. Моделирование Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота осуществляли ежедневным внутрибрюшинным введением М-нитро-Ь-аргинин метилового эфира (Ь-ИАМЕ) в течение 7 дней крысам-самцам \Vistar массой 250-300 г. в дозе 25 мг/кг (1 группа, п=10). На фоне введения Ь-ЫАМЕ осуществляли ежедневное внутрибрюшинное введение Ь-аргинина в дозе 200 мг/кг - 2 группа (п=10), внутрижелудоч-ное введение эналаприла малеата в дозе 0,5 мг/кг -3 группа (п=10), внугрижелудочное введение лозартана калия 6 мг/кг - 4 группа (п= 10), а также комбинаций Ь-аргинина и эналаприла в тех же дозах - 5 группа (п=10) и Ь-аргинина и лозартана соответственно - 6 группа (п=10). На 7 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал натрия 50 мг/кг) вводили катетер в правую сонную артерию для регистрации показателей гемодинамики - систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС), которые измеряли непрерывно посредством датчика и компьютерной программы “ВюзЬеЦ”. Исследовали соотношение выраженности эндоте-лийнезависимой (ЭНЗВ) и эндотелийзависимой (ЭЗВ) вазодилатации с внутривенным введением нитропруссида натрия (30 мкг/кг) и ацетилхолина (40 мкг/кг) соответственно с выведением коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД) по методике, описанной намиранее.[4].

Для определения биохимических маркеров использована модификация метода определения стабильных метаболитов N0, позволяющая проводить одноэтапное количественное определение

суммарных нитратов и нитритов. Уровень экспрессии эндотелиальной синтазы оксида азота (е-Ж)8) определяли в клеточном лизате по методу Хендриксона [3].

При морфометрии сердца использован метод раздельного взвешивания миокарда с определением диаметра кардиомиоцитов.

Результаты в обсуждение. При определении соотношения ЭНЗВ и ЭЗВ у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады МО-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1 ±0,1 у интактных и 5,4±0,6 у животных, получавших Ь->(АМЕ. Этот показатель, названный коэффициентом эндотелиальной дисфункции и является отражением степени коррекции эндотелиальной дисфункции. В группах, получающих медикаментозное лечение показатели КЭД распределились следующим образом: в группе с Ь-аргинином - 2,5±0,1, эналаприлом -3,3±0,2, лозартаном - 2,3±0,1, Ь-аргинином +эна-лаприлом - 2,6±0,1, Ь-аргинином+лозартаном -

1,7±0,1, что свидетельствует об аддитивном эффекте Ь-аргинина в отношении эндотелиопреотекции.

При регистрации показателей гемодинамики была выявлена значительная артериальная гипертензия в 1 -й группе животных, которая компенсировалась во всех группах, получающих медикаментозную коррекцию, но целевые уровни артериального давления (АД) были достигнуты только в 4-й группе (рис. 1, рис. 2).

Концентрация нитрит-ионов (ЇЧОх) у животных, получавших Ь-КАМЕ, составила 61,2 ±3,6, тогда как у интактных - 114,1 ±4,1, во 2-й группе -115,1±4,9, в 3-й - 67,8±4,0, в 4-й - 68,9±3,9, в 5-й -95,4±5,7, в 6-й - 99,4±5,9 мкМоль/л. Оценка экспрессии эндотелиальной ЫО-синтазы в % от контроля сывороткой животных, получавших Ь-ЫАМЕ и указанные препараты и их комбинации выявила следующие показатели: интакгаые животные -

72,9±3,8, 1-я группа - 21,4±4,7, 2-я группа -

36,5±4,7, 3-я группа - 42,2±3,6, 4-я группа -

43,3±3,8, 5-я группа - 40,1±3,7, 6-я группа -

43,3±4,1.

Морфометрия диаметра миокардиоцитов выявила существенные преимущества Ь-аргинина и его комбинаций с эналаприлом и лозартаном в способности предотвращать гипертрофию миокардиоцитов. Так, диаметр миокардиоцитов составил в группе животных, получавших Ь-КАМЕ -18,4± 1,1, в группе интакгных - 9,1±1,1, в группе с введением

- Интактные

- L-NAME

- L-NAME + L-аргинин 200 мг/кг

- L-NAME+эналаприл 0,5 мг/кг

- L-NAME + эналаприл 0,5 мг/кг

+ L-аргинин 200 мг/кг

Рисунок 1. Влияние комбинированного использования Ь-аргинина и эналаприла на АД систолическое и АД диастолическое при моделировании Ь-ИАМЕ (25 мг/кг внутрибрюшинно однократно в течение 7 дней) индуцированного дефицитаМО.

Примечание: * - при р< 0,05 в сравнении с Ь-КАМЕ; ** - при р< 0,05 в сравнении с интактными животными

- Интактные

- L-NAME

- L-NAME + L-аргинин 200 мг/кг

- L -NAME+ лозартан 6 мг/кг

- L-NAME+ лозартан мг/кг

+ L-аргинин 200 мг/кг

Рисунок 2. Влияние комбинированного использования Ь-аргинина (200 мг/кг) и лозартана калия (6 мг/кг) на АД систолическое и АД диастолическое при моделировании Ь^АМЕ (25 мг/кг внутрибрюпшнно однократно в течение 7 дней) индуцированного дефицита N0.

Примечание: * - при р< 0,05 в сравнении с Ь-КАМЕ; ** - при р< 0,05 в сравнении с интактными животными

2. Гранин В.Г. Экзогенные доноры оксида азота и ингибиторы его образования (химический аспект) / В.Г.Граник, С.Ю.Рябова, Н.Б.Григорьев И Успехи химии. -1997. - Т. 66, №8. С. 792-807.

3. Метельская ВА. Возможности лабораторной оценки NO-продуцирующей функции эндотелия // Клинич. илаб. диагностика. - 2004. -№9. С. 86.

4. Покровский М.В. Новый взгляд на коррекцию эндотелиальной дисфункции/ М.В. Покровский, В.И. Кочкаров, Т.Г. Покровская и соавт. // Российский журнал иммунологии. 2006.-Т.9С. 60-61.

5. Boger R.H. L-Arginine improves vascular function by overcoming deleterious effects of ADMA, a novel cardiovascular risk factor / R.H.Boger, E.S. Ron // Altern. Med. Rev.-2005. - V. 10(1).-P. 14-23.

L-аргинина - 10,0*0,8, эналаприла - 15,2*1,0, лозартана - 13,9±0,9, эналаприл + L-аргинин -

11,0±0,9, лозартан + L-аргинин -11,7±0,8 мкм.

Сочетанное использование бпокатора АТ1-рецепторов лозартана и L-аргинина не предотвращало развитие гипертензии, но оказывало наибольшее эндотелиопротективное действие на модели L-NAME-индуцированного дефицита N0, выражающееся в наибольшем снижении показателя КЭД. Это можно объяснить блокадой лозар-таном эффектов ангиотензина, который является эндогенным антагонистом N0.

Литература

1. Белоусов Ю.Б. Эндотелиальная дисфункция как причина атеросклеротического поражения артерий при артериальной гипертензии: методы коррекции /Ю.Б. Белоусов, Ж.Н. Намсараев // Фарма-тека. -2000. -Мб. С. 62-72.

Research endothelioprotective effect L- arginine and its combinations with enalapril and lozartan

T.G.Pokrovskaya, VJ.Kochkarov, M.V.Pokrovskiy, L.M.Danilcnko, E.B.Artjushkova, V.A.Metelskaja, N.G.Gumanova, J.P.Kljavs, M.M.Korneyev, M.S.Brusnik

Kursk state medical university, Kursk

Key words: endothelial dysfunction, oxide of nitrogen, L-NAME, L- arginine, enalapril, lozartan.

L- arginine renders endothelioprotective action on model of the L-NAME-induced deficiency of oxide of nitrogen. Combined use L-arginine with enalapril, and L-arginine with lozartan strengthens endothelioprotective action of monotherapy with enalapril and with lozartan, that is expressed in decrease in factor to endothelial dysfunction. Also prevention of reduction in the contents nitrite-ions NOx and increases in cross diameter of cardiomyocytes is revealed.