Способ прогнозирования повторных респираторных инфекций у детей
METHOD FOR PREDICTION OF REPEATED RESPIRATORY INFECTIONS IN CHILDREN

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может найти применение для выявления группы риска повторных респираторных инфекций среди детей в возрасте от 4 месяцев до 14 лет.
Частые повторные респираторные заболевания у детей являются серьезной медико-социальной проблемой, так как на долю этой группы риска приходится до 80% всей заболеваемости дыхательных путей у детей [1, 2, 3, 4]. Исследователями хорошо изучена данная проблема и разработана подробная классификация причин повторных респираторных заболеваний. Учитываются анамнез ребенка и нарушения функционирования различных органов, что позволяет выделить 5 подгрупп риска повторных респираторных инфекций. К первой подгруппе относятся дети с нарушением работы ЛОР органов, органов пищеварения и аллергиями. Ко второй - дети с нарушениями нервной системы, на фоне которой развиваются вирусные и бактериальные инфекции. К третьей - дети с вегетососудистой дистонией. К четвертой - с нарушениями лимфатической системы. К пятой - дети с обменно-конституциональными нарушениями [5, 6]. Все вышеперечисленные нарушения приводят к частым повторным респираторным инфекциям, которые классифицируются исходя из особенностей течения и клинических проявлений острых респираторных заболеваний и наличия хронических заболеваний. Для детей старше 3х лет критерием классификации З.С. Макаровой предложено использовать инфекционный индекс (отношение всех случаев ОРЗ к возрасту ребенка). Для эпизодически болеющих детей инфекционный индекс составляет 0,2-0,3, а для часто болеющих - 1,1-3,5 [7, 8]. По данным ВОЗ в первые 3 года жизни дети в сельской местности переносят в среднем 6-8 эпизодов ОРЗ в год, а в городе - 7-10 [9, 10, 11]. При повышении числа эпизодов ОРЗ используют термин «возвратные реккурентные респираторные инфекции» (РРИ) [12, 13, 14, 15, 16, 17]. Количество эпизодов ОРЗ для включения в группу РРИ зависит от нозологии. Так, например, для среднего отита - 4 эпизода за 12 месяцев, ринита - 5 и более эпизодов в год, фарингита и тонзиллита - 3 и более эпизодов в год. Среди как европейских, так и отечественных педиатров, нет единого мнения о валидности термина РРИ [2, 16, 17, 18, 19, 20]. Для большинства исследователей основанием включения в группу повторных респираторных инфекций являются критерии, разработанные А.А, Барановым и А.Ю. Альбицким [21, 22], в основу которых положена частота респираторных заболеваний в течение года с поправкой на возраст.
Кроме оценки клинической картины заболеваемости респираторными инфекциями, для включения в группу повторных респираторных инфекций отечественными исследователями разработаны лабораторные методы и соответствующие критерии.
Известно, что при остром респираторном заболевании изменяется количественно-качественный состав микробиоты ротоглотки. Отмечается снижение количества нормофлоры, а именно, содержания лактобацилл, бифидобактерий, α-, γ-гемолизирующих стрептококков и непатогенных нейсерий. Увеличивается количество условно-патогенных микроорганизмов в разнообразных ассоциациях. Для группы риска повторных респираторных инфекций характерно увеличение интенсивности бактериальной колонизации слизистых золотистым стафилококком, гемофильной палочкой, энтеробактериями и грибами рода Candida [23, 24]. В межморбидном периоде в группе риска повторных респираторных инфекций снижение нормофлоры ротоглотки сохраняется, а среди условно-патогенных микроорганизмов в 90% случаев сохраняется высокая бактериальная колонизация золотистым стафилококком [25, 26, 27]. В группе повторных респираторных инфекций отмечается изменение метаболического профиля микробиоценоза ротоглотки в сторону увеличения протеолитической активности микрофлоры и снижения концентрации масляной кислоты в слюне [24].
Слизистая оболочка ротоглотки вместе с имеющейся на ней микрофлорой представляет собой единую систему, проявляющую реакцию на различные факторы воздействия. Большое количество факторов в многоуровневой системе взаимодействия всех компонентов объекта - это множество одновременно происходящих процессов, которые накладываются друг на друга и дают нечеткий ответ, который может быть детерминирован методами математического моделирования [28]. Использование концентраций короткоцепочечных жирных кислот для прогнозирования повторных респираторных инфекций с применением проекционных методов многомерной статистики может быть эффективно вне зависимости от причин принадлежности пациента к этой группе риска [29]. Наиболее простым и надежным методом математического моделирования является линейный дискриминантный анализ (ЛДА), который демонстрирует высокие показатели чувствительности и специфичности за счет алгоритма пошагового исключения малоинформативных компонентов и выявления специфического соотношения компонентов, характерного для состояния, заданного обучающей выборкой [31].
Известен способ прогноза частоты повторных респираторных инфекций у детей раннего возраста по соотношению индуцированной митогенами и спонтанной продукцией цитокинов фактора некроза опухоли α и интерферона γ мононуклеарными клетками [32]. Полученный индекс обеспечивает высокую прогностическую точность и чувствительность, связанную с высокой информативностью показателей в отношении иммунного ответа. Основным существенным недостатком известного способа является отсутствие учета других факторов риска на формирование здоровья ребенка.
Известен метод прогностической оценки течения и исхода ОРВИ у детей в результате контроля функционального состояния Т-лимфоцитов в лимфоглоточном кольце методом нагрузочных тестов in vitro и в крови [33]. Метод основывается на сравнении показателей местного системного иммунитета с помощью определения количественных показателей Т-лимфоцитов. Основным недостатком данного способа является наличие характеристики изменений только в клеточном звене иммунной системы, что определяет невысокую возможность прогнозирования частоты повторяемости ОРВИ.
Известен метод прогнозирования риска повторных респираторных инфекций у детей младшего школьного возраста [34]. Метод основан на математическом моделировании Байесовской нейронной сети анамнестических данных детей. Прогностическая точность модели обеспечивается большим объемом обучающей и тестовой выборок. Основным недостатком данного способа является отсутствие первоначального учета лабораторных показателей.
Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа, является способ индивидуального прогнозирования развития повторных эпизодов ОРВИ у детей дошкольного возраста, проживающих в экологически неблагоприятных районах. Был проведен расчет прогностических коэффициентов для лабораторных показателей и различных факторов риска. В зависимости от полученной суммы соответствующих коэффициентов прогнозировалась степень вероятности развития повторных респираторных заболеваний у детей [35]. Основным недостатком данного способа является его проведение на детях без хронической бронхолегочной патологии.
Технической проблемой, решаемой изобретением, является разработка быстрого и достоверного способа прогнозирования повторных респираторных инфекций у детей вне зависимости от причин принадлежности ребенка к группе риска повторных респираторных инфекций путем идентификации специфического соотношения концентраций короткоцепочечных жирных кислот в слюне.
Задача решается определением концентраций короткоцепочечных жирных кислот в слюне газохроматографическим методом и формированием результатов прогнозирования по классификационным уравнениям дискриминантного анализа.
Технический результат, получаемый в результате реализации предложенного способа, состоит в том, что заявляемый способ позволит прогнозировать повторные респираторные инфекции у детей с использованием метаболического отпечатка микробиоценоза ротоглотки, то есть реакции микробиоты и изменению метаболических путей сбраживания субстратов вне зависимости от причин принадлежности пациента к группе риска повторных респираторных инфекций. В предлагаемом способе учитывается влияние острого периода заболевания на изменения метаболического отпечатка. Метод является универсальным, быстрым, безопасным, неинвазивным, простым в использовании и достаточно легко воспроизводимым.
Сущность изобретения заключается в следующем: методом газожидкостной хроматографии определяют концентрации низкомолекулярных короткоцепочечных жирных кислот в слюне пациентов. В зависимости от наличия острого периода заболевания выбирают классификационные уравнения. Полученные результаты умножают на коэффициенты классификационных уравнений и суммируют с учетом знаков коэффициентов. Затем по величине полученных значений определяют принадлежность ребенка к группе риска повторных респираторных инфекций.
Определение концентрации КЖК в слюне проводят газожидкостной хроматографией, методом прямого ввода в испаритель хроматографа супернатанта водного раствора слюны в 0,1N соляной кислоте (рН 1,9-2,1).
Способ осуществляют следующим образом.
Для определения КЖК использовали супернатант пробы слюны. Получение его проходит по следующей схеме:
Пробоподготовка.
1. В одноразовой пластиковой пробирке взвешивали 2-3 грамма слюны на аналитических весах с точностью до 3-го знака.
2. К пробе приливали 1 мл 40% хлорной кислоты и 1 мл стандартного вещества (диметилмасляная кислота). Гомогенизировали смесь путем энергичного встряхивания в закрытой пробирке.
3. Пробирку с гомогенной смесью центрифугировали 10 минут при 6000 об./мин.
4. Полученный супернатант был прозрачным и имел кислую реакцию (рН 1,9-2,1).
Хроматографирование.
Для хроматографирования использовали газо-жидкостной хроматограф Кристалл 5000.2 с капиллярной колонкой FFAP диаметр - 0,25 мм, длина 32 м. (неподвижная фаза - пленка с 2-нитротерефталевой кислотой) и детектором пламенно-ионизационного типа. Газ - носитель азот. Температурный режим термостата колонки - изотерма 155°С. Температура испарителя и детектора - 250°С. Скорость газа носителя - 60 см/сек при давлении газа носителя 136 кПа. Деление потока газа носителя - 1:35.
Пробу - супернатант отбирали из пластиковой пробирки хроматографическим шприцом 1 мкл и вводили в испаритель хроматографа. Пики концентраций короткоцепочечных жирных кислот определяли по времени удержания. Времена удержания определяли на основании разделения стандартного образца - смеси монокарбоновых кислот гомологического ряда от уксусной до капроновой кислоты.
Времена удержания:
Уксусная кислота, мин
1,36
Пропионовая кислота, мин
1,59
Изомасляная кислота, мин
1,69
Масляная кислота, мин
1,94
Изовалериановая кислота, мин
2,16
Стандартное вещество (α,α-диметилмасляная кислота), мин
2,39
Валериановая кислота, мин
2,6
Изокапроновая кислота, мин
3,16
Капроновая кислота, мин
3,6
Обработка хроматограмм.
Расчет пиков проводился с помощью компьютерной программы прибора путем анализа последовательности пиков, их границ и высот. Площади пиков определяются как площади треугольников с основанием, равным ширине пика и высотой, равной высоте пика. Исходя из площади пика стандарта (α,α-диметилмасляной кислоты) с известной концентрацией и отношениям площадей анализируемых пиков, рассчитывали концентрацию каждого компонента смеси КЖК. В формуле расчета использовали также коэффициенты горения, которые являются коэффициентами перевода молярной концентрации в весовую. Концентрации отдельных компонентов рассчитывали по формуле:
где
i
ст
C, С. - концентрации стандарта и компонента,
i
ст
S, S. - площади пиков,
i
K - переводной коэффициент.
Определение прогностических коэффициентов.
Для острого периода заболевания:
Расчет прогностических коэффициентов проводили по формулам классификационных уравнений линейного дискриминантного анализа:
1
F=1368,494*C2+1538,684*C3+7103,235*iC5+2165,619*C5-683,304
2
F=1403,533*C2+1583,797*C3+7338,304*iC5+2241,567*C5-719,622
где
1
F - классификационная функция, при максимальном значении которой, пациент относится к группе риска повторных респираторных инфекций;
2
F - классификационная функция, при максимальном значении которой, пациент не относится к группе риска повторных респираторных инфекций;
С2 - относительная концентрация уксусной кислоты;
С3 - относительная концентрация пропионовой кислоты;
iC5 - относительная концентрация изовалериановой кислоты;
С5 - относительная концентрация валериановой кислоты.
Для периода ремиссии:
Расчет прогностических коэффициентов проводили по формулам классификационных уравнений линейного дискриминантного анализа:
1
F=48,2003*iC4-5,8212*C4+49,1095*iC5+369,9298*C6-2,4024
2
F=129,961*iC4+29,9281*C4-61,2817*iC5+73,5953*C6-1,9865
где
1
F - классификационная функция, при максимальном значении которой, пациент относится к группе риска повторных респираторных инфекций;
2
F - классификационная функция, при максимальном значении которой, пациент объект не относится к группе риска повторных респираторных инфекций;
iC4 - относительная концентрация изомасляной кислоты;
С4 - относительная концентрация масляная кислоты;
iC5 - относительная концентрация изовалериановой кислоты;
С6 - относительная концентрация капроновая кислоты.
Изобретение иллюстрируют следующими примерами.
Пример 1. Пациентка С. Возраст 5 лет, поступила в стационар с диагнозом острый бронхит. Анализ концентраций короткоцепочечных жирных кислот в слюне показал следующие концентрации (ммоль/г): уксусная - 42,134 ммоль/г; пропионовая - 4,386 ммоль/г; изомасляная - 0,389 ммоль/г; масляная - 1,02 ммоль/г; изовалериановая - 0,110 ммоль/г; валериановая - 0,231 ммоль/г; изокапроновая - 0,096 ммоль/г; капроновая 0,0958 ммоль/г. Суммарная молярная концентрация короткоцепочечных жирных кислот - 48,46 ммоль/г. Из полученных концентраций рассчитали относительные концентрации: уксусной - 0,870 ед.; пропионовой - 0,091 ед.; изовалериановой - 0,00225 ед.; валериановой кислот - 0,00476 ед. Для расчета значений прогностических коэффициентов полученные значения относительных концентраций короткоцепочечных жирных кислот были умножены на коэффициенты классификационных уравнений дискриминантного анализа и сложены с учетом знака.
1
F=1368,494*0,87+1538,684*0,091+7103,235*0,00225+2165,619*0,00476-683,304=672,071
2
F=1403,533*0,87+1583,797*0,091+7338,304*0,00225+2241,567*0,00476-719,622=671,191
1
Полученные значения прогностических коэффициентов сравнили между собой. Максимальное значение F=672,071 указывает на принадлежность пациента к группе риска повторных респираторных инфекций. Проведенный анализ анамнестических данных показал, что пациент за последний год 6 раз переболел ОРВИ, а за предыдущий год - 7 раз. Таким образом анамнестический анализ подтвердил принадлежность пациента к группе риска повторных респираторных заболеваний.
Пример 2. Пациент X. Возраст 6 лет, поступил в стационар с диагнозом острый бронхит.
Анализ концентраций короткоцепочечных жирных кислот в слюне показал следующие концентрации (ммоль/г): уксусная - 4,94 ммоль/г; пропионовая - 0,418 ммоль/г; изомасляная - 0,114 ммоль/г; масляная - 0,1034 ммоль/г; изовалериановая - 0,071 ммоль/г; валериановая - 0,09 ммоль/г; изокапроновая - 0,0332 ммоль/г; капроновая 0,0332 ммоль/г. Суммарная молярная концентрация короткоцепочечных жирных кислот - 5,804 ммоль/г. Из полученных концентраций рассчитали относительные концентрации: уксусной - 0,851 ед.; пропионовой - 0,072 ед.; изовалериановой - 0,0122 ед.; валериановой кислот - 0,0156 ед. Для расчета значений прогностических коэффициентов полученные значения относительных концентраций короткоцепочечных жирных кислот были умножены на коэффициенты классификационных уравнений дискриминантного анализа и сложены с учетом знака.
1
F=1368,494*0,851+1538,684*0,072+7103,235*0,00122+2165,619*0,00156-683,304=712,99
2
F=1403,533*0,851+1583,797*0,072+7338,304*0,00122+2241,567*0,00156-719,622=713,799
2
Полученные значения прогностических коэффициентов сравнили между собой. Максимальное значение F=713,799 не указывает на принадлежность пациента к группе риска повторных респираторных инфекций. Проведенный анализ анамнестических данных показал, что пациент за последний год 1 раз переболел ОРВИ, а за предыдущий год - 2 раза. Таким образом анамнестический анализ не подтвердил принадлежность пациента к группе риска повторных респираторных заболеваний.
Пример 3. Пациентка С. Возраст 8 лет, проходила профилактические мероприятия повторных респираторных заболеваний.
Анализ концентраций короткоцепочечных жирных кислот в слюне показал следующие концентрации (ммоль/г): уксусная - 10,38 ммоль/г; пропионовая - 2,054 ммоль/г; изомасляная - 0,49 ммоль/г; масляная - 0,691 ммоль/г; изовалериановая - 0,366 ммоль/г; валериановая - 0,4393 ммоль/г; изокапроновая - 0,2748 ммоль/г; капроновая - 0,279 ммоль/г. Суммарная молярная концентрация короткоцепочечных жирных кислот - 14,97 ммоль/г. Из полученных концентраций рассчитали относительные концентрации: изомасляной - 0,0327 ед.; масляной - 0,0461 ед.; изовалериановой - 0,02443 ед.; капроновой кислот - 0,0187 ед. Для расчета значений прогностических коэффициентов полученные значения относительных концентраций короткоцепочечных жирных кислот были умножены на коэффициенты классификационных уравнений дискриминантного анализа и сложены с учетом знака.
1
F=48,2003*0,0327-5,8212*0,0461+49,1095*0,02443+369,9298*0,0187-2,4024=7,01
2
F=129,961*0,0327+29,9281*0,0461-61,2817*0,02443+73,5953*0,0187-1,9865=3,52
1
Полученные значения прогностических коэффициентов сравнили между собой. Максимальное значение F=7,01 указывает на принадлежность пациента к группе риска повторных респираторных инфекций. Проведенный анализ анамнестических данных показал, что пациент за последний год 8 раз переболел ОРВИ, а за предыдущий год - 6 раз. Таким образом анамнестический анализ подтвердил принадлежность пациента к группе риска повторных респираторных заболеваний.
Пример 4. Пациентка П. Возраст 9 лет, проходила профилактические мероприятия повторных респираторных инфекций.
Анализ концентраций короткоцепочечных жирных кислот в слюне показал следующие концентрации (ммоль/г): уксусная - 5,677 ммоль/г; пропионовая - 1,351 ммоль/г; изомасляная - 0,107 ммоль/г; масляная - 0,0631 ммоль/г; изовалериановая - 0,0447 ммоль/г; валериановая - 0,3771 ммоль/г; изокапроновая - 0,0144 ммоль/г; капроновая - 0,0144 ммоль/г. Суммарная молярная концентрация короткоцепочечных жирных кислот - 7,649 ммоль/г. Из полученных концентраций рассчитали относительные концентрации: изомасляной - 0,014 ед.; масляной - 0,00825 ед.; изовалериановой - 0,00584 ед.; капроновой кислот - 0,001885 ед. Для расчета значений прогностических коэффициентов полученные значения относительных концентраций короткоцепочечных жирных кислот были умножены на коэффициенты классификационных уравнений дискриминантного анализа и сложены с учетом знака.
1
F=48,2003*0,014-5,8212*0,00825+49,1095*0,00584+369,9298*0,001885-2,4024=-0,790
2
F=129,961*0,014+29,9281*0,00825-61,2817*0,00584+73,5953*0,001885-1,9865=-0,135
2
Полученные значения прогностических коэффициентов сравнили между собой. Максимальное значение F=-0,135 не указывает на принадлежность пациента к группе риска повторных респираторных инфекций. Проведенный анализ анамнестических данных показал, что пациент за последний год 3 раз переболел ОРВИ, а за предыдущий год - 2 раз. Таким образом анамнестический анализ не подтвердил принадлежность пациента к группе риска повторных респираторных заболеваний.
Способ прогнозирования повторных респираторных инфекций у детей был апробирован у детей в возрасте от 4 месяцев до 14 лет на базе консультативно-диагностического центра при Московском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора в 2018-2019 гг. и в детском инфекционном отделении ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского у пациентов стационара в 2016-2017 г. Было обследовано 193 пациента амбулаторного приема и 126 пациентов стационара. Полученные результаты подтверждались анамнестическими данными в соответствии с критериями Баранова-Альбицкого. Чувствительность заявленного метода прогнозирования группы риска повторных респираторных инфекций в острый период составила 88,9%, специфичность 82,4%, а в период ремиссии - чувствительность метода составила 72,2%, специфичность - 77,1%.
Литература:
1. Izumo Т, Maekawa Т, Ida М, et al. Effect of intranasal administration of Lactobacillus pentosus S-PT84 on influenza virus infection in mice / T Izumo, T Maekawa, M. Ida //. International Immunopharmacology. - 2010; Vol. 10. - P. - 1101-1106
2. Jesenak, M. Role of biofilm in children with recurrent upper respiratory tract infections / M. Jesenak, M. Ciljakova, Z. Rennerova, E. Babusikova, P. Banovcin // European Journal of Clinical Microbiology. - 2014. - V 61. 34 - P. 38
3. Midulla, F. Rhinovirus bronchiolitis and recurrent wheezing: 1-year follow-up / Midulla F. // Eur Respir J. - 2012 - Vol. 39(2). - P. 396-402.
4. Pasquali, C. Enhanced Mucosal Antibody Production and Protection against Respiratory Infections Following an Orally Administered Bacterial Extract / Pasquali С et al. // Front Med. - 2014. - Vol. 1. - P. 41.
5. Ляликов, C.A. Часто болеющие дети / С.А. Ляликов, И.М. Лысенко, И.В. Сарвилина; под общ. ред. М.Г. Романцева, И.Ю. Мельниковой. - Санкт-Петербург: ГБОУ ВПО «Северо-западный Государственный Медицинский Университет им. И.И. Мечникова, 2013. - 36 с.
6. Романцев, М.Г. Рациональная фармакотерапия ЧБД: руководство для врачей / Романцев М.Г. - М. ТЭОТАР-Медиа, 2009. - 352 с.
7. Макарова, З.С. Оздоровление и реабилитация ЧБД: пособие для педагогов дошкольных учреждений / З.С. Макарова, Л.Г. Голубева. - М: Гуманит. изд. центр «ВЛАДОС», 2004. - 270 с.
8. Макарова, З.С. Часто болеющие дети и их реабилитация в условиях детской поликлиники / З.С. Макарова // Поликлиника. - 2005. - Том 1. - С. 9-16.
9. Midulla, F. Rhinovirus bronchiolitis and recurrent wheezing: 1-year follow-up/ Midulla F. // Eur Respir J. - 2012 - Vol. 39(2). - P. 396-402.
10. Pasquali, C. Enhanced Mucosal Antibody Production and Protection against Respiratory Infections Following an Orally Administered Bacterial Extract / Pasquali С et al. // Front Med. - 2014. - Vol. L - P. 41.
11. Yaqoob Al-Hamdani, F. Evaluation of the Predisposing Factors for Recurrent Respiratory Tract Infections in Iraqi Pediatric Patients / F. Yaqoob Al-Hamdani, B. Zuheir Al-Mutawalli // AJPS. - 2014. - Vol. 14. - №2. - P. 89-93.
12. Репина, И.Б. Вакцинация детей с осложненным преморбидным фоном учебное пособие / И.Б. Репина, Л.А. Галкина. - М: Издательство., 2015. - 28 с.
13. Agren, K. What is wrong in chronic adenoiditis/tonsillitis immunological factor. Clinical Bacteriology / K. Agren, K. Lindberg, A. Samulesson // Int J Pediatr Otorhinolaryngol. - 1999. Vol 1. - P. 137-139.
14. Bassis, CM. Analysis of the upper respiratory tract microbiotas as the source of the lung and gastric microbiotas in healthy individuals. / C.M. Bassis, JR. Erb-Downward, RP. Dickson, C.M. Freeman, T.M. Schmidt, V.B. Young, J.M. Beck, J.L. Curtis, G.B. Huffnagle, J.A. // MBio. 2015; 6. doi: 10.1128/mbio.00037-15
15. Bitar, M.A. The role of OM85 BV (Broncho-Vaxom) in preventing recurrent acute tonsillitis in children / M.A. Bitar, R. Saade // Int J Pediatr Otorhinolaryngol. - 2013 Vol. 77. - №5. P. 670-673.
16. El-Azami-El-Idrissi, M. Pediatric recurrent respiratory tract infections: when and how to explore the immune system? / M. El-Azami-El-Idrissi L.-I. Mounia, S. Chaouki, S. Atmani, A. Bouharrou, M. Hida // The Pan African Medical Journal. - 2016. - Vol. 24. P - 53.
17. Izumo T, Maekawa T, Ida M, et al. Effect of intranasal administration of Lactobacillus pentosus S-PT84 on influenza virus infection in mice / T Izumo, T Maekawa, M. Ida //. International Immunopharmacology. - 2010; Vol. 10. - P. - 1101-1106.
18. Cochrane Commentary: Probiotics For Prevention of Acute Upper Respiratory Infection-NY: Explore, 2015. - 420 p.
19. Jesenak, M. Recurrent Respiratory Infections in Children - Definition, Diagnostic Approach, Treatment and Prevention Bronchitis. / M. Jesenak, M. Ciljakova, Z. Rennerova, E.Babusikova, P. Banovcin-Rieka.: University Campus STePri, 2011. - 190 p.
20. Mansilla, E. A narrative summary of selected presentations given at the second Encuentro Latinoamericano de Infecciones Respiratorias Recurrentes (ELAIR), an educational summit held in Buenos Aires, Argentina, 4th-5th July 2015 IE. Mansilla, A. Ciceran, J.A. Ortega-Martell // EMJ Respir. 2016. - Vol 4 (Suppl 1). - P. 10-17.
21. Альбицкий, В.Ю. Часто болеющие дети. Клинико-социальные аспекты. Пути оздоровления / В.Ю. Альбицкий, А.А. Баранов Саратов, 1986, - 45 с.
22. Баранов, А.А. Часто болеющие дети: профилактика и лечение - Союз педиатров России. Российский национальный педиатрический формуляр / под ред. А.А. Баранова. - М.: ГЭОТАР МЕДИА, 2009. - 912 с.
23. Алешкин, В.А. Микробиоценозы открытых полостей и муконазальный иммунитет / В.А. Алешкин, С.С. Афанасьев, Е.А. Воропаева // Эффективная фармакотерапия.
24. Медведева, Е.А. Метаболическая активность микрофлоры ротоглотки у детей с бронхитом и внебольничной пневмонией / Е.А. Медведева, Е.Р. Мескина // Альманах клинической медицины. - 2015. №42. - С. 72-78.
25. Иванов, В.А. Состояние здоровья часто болеющих детей и повышение эффективности их санаторного оздоровления / В.А. Иванов, В.А. Шарапов, А.Л. Заплатников // Русский медицинский журнал. - 2007. - Том 15 - №21. - С. 1559-1566.
26. Караулов, А.В. Показатели колонизационной резистентности слизистых ротоглотки как объективные критерии мукозального иммунитета при бронхитах у детей / А.В. Караулов, В.А. Алешкин, Е.А. Воропаева, В.А. Метельская, В.В. Слободенюк, М.С. Афанасьев, A.M. Затевалов, А.П. Топтыгина, С.С. Афанасьев, Ю.В. Несвижский, Ю.Н. Урбан, Е.О. Рубальский, Н.С. Матвеевская // Иммунология (двухмесячный научно-практический журнал). - 2012, - Том 33. - №5. - С. 255-259.
27. Караулов, А.В. Дисфункции иммунитета при респираторных заболеваниях: нужны ли иммуномодуляторы у часто болеющих детей? / А.В. Караулов // Вопросы современной педиатрии. - 2015. - Том 14 - №2. - С. 260-264.
28. 3атевалов A.M., ОЦЕНКА СТЕПЕНИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ МИКРОФЛОРЫ РОТОГЛОТКИ И КИШЕЧНИКА С ПОМОЩЬЮ МЕТОДОВ МАТЕМАТИЧЕСКОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ / Селькова Е.П., Афанасьев С.С, Алешкин А.В., Миронов А.Ю., Гусарова М.П., Гудова Н.В. // Клиническая лабораторная диагностика. 2016. Т. 61. №2. С. 117-121.
29. 3атевалов A.M., ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА ПРОДУКЦИИ КОРОТКОЦЕПОЧЕЧНЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ МИКРОБИОТОЙ РОТОГЛОТКИ У ПАЦИЕНТОВ, НЕ ИМЕЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ РЕСПИРАТОРНОГО ТРАКТА И РОТОВОЙ ПОЛОСТИ / Селькова Е.П., Гудова Н.В., Оганесян А.С. // Альманах клинической медицины. 2018. Т. 46. №8. С. 784-791.
30. Медведева Е.А., Мескина Е.Р. МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МИКРОФЛОРЫ РОТОГЛОТКИ У ДЕТЕЙ С БРОНХИТОМ И ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИЕЙ. Альманах клинической медицины. 2015; (42): 72-78.
31. Боровиков, В.П. STATISTICA: Статистический анализ и обработка данных в среде Windows / В.П. Боровиков, И.П. Боровиков. - М.: Филинъ, 1997. - 608 с. - ISBN 589568033-Х.
32. Патент РФ №2297003 МПК G01N 33/68 Способ прогнозирования частоты повторных заболеваний у детей раннего возраста, страдающих острыми респираторными заболеваниями.
33. Данилов Л.А. Прогнозирование течения и исхода воспалительного процесса верхних дыхательных путей часто болеющих детей на основании оценки функционального состояния системного и местного иммунитета // Автореф. дисс. канд. мед. наук - Москва, 1992 г.
34. Майоров Р.В. Оптимизация организации профилактики частоты возникновения респираторных заболеваний на основе прогностических программ скринингового выявления детей, имеющих высокий риск вхождения в группу часто болеющих детей респираторными инфекциями // Дисс. док. мед. наук. - Москва, 2015 г.
35. Патент РФ №2357675, МПК А61В 10/00 G01N 33/50 Способ прогнозирования повторных респираторных заболеваний у детей.