ПЕПТИД GLP-1 С ПРИСОЕДИНЕННОЙ ОЛИГОСАХАРИДНОЙ ЦЕПЬЮ

1. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, обладающий активностью GLP-1, в котором, по меньшей мере, одна аминокислота заменена аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью, в
(a) GLP-1;
(b) пептиде, который имеет аминокислотную последовательность GLP-1 с делецией, заменой или вставкой одной или нескольких аминокислот; или
(c) аналоге GLP-1.
2. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, представляющий собой:
(а1) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, имеющий одну или несколько аминокислот, дополнительно присоединенных к С-концу (позиция 37) GLP-1, в котором по меньшей мере одна из указанных присоединенных аминокислот заменена аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью;
(а2) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, имеющий одну аминокислоту, дополнительно присоединенную к С-концу (позиция 37) GLP-1, в котором указанная присоединенная аминокислота заменена аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью;
(а3) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, имеющий одну или более аминокислот, дополнительно присоединенных к N-концу (позиция 7) GLP-1, в котором, по меньшей мере, одна из присоединенных аминокислот заменена аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью;
(а4) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, имеющий одну аминокислоту, дополнительно присоединенную к N-концу (позиция 7) GLP-1, в котором указанная присоединенная аминокислота заменена аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью;
(а5) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, в котором аминокислота, по меньшей мере, в одном сайте, который выбирают из позиций 18, 20, 22, 26, 30, 34 и 36 GLP-1, заменена аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью; или
(b) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, имеющий аминокислотную последовательность пептида GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, определенную в любом из пунктов (a1)-(а5) с делецией, заменой или вставкой одной или нескольких аминокислот за исключением аминокислоты(аминокислот) с присоединенной олигосахаридной цепью.
3. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, в котором:
указанная аминокислота с присоединенной олигосахаридной цепью представляет собой Asn с присоединенной олигосахаридной цепью;
в указанной аминокислоте с присоединенной олигосахаридной цепью олигосахаридная цепь присоединена к аминокислоте без помощи линкера;
указанная олигосахаридная цепь состоит из четырех или более сахаров;
олигосахаридная цепь выбрана из группы, состоящей из дисиало-, моносиало-, асиало-, диGlcNAc- и диманнозных олигосахаридных цепей; и
указанная олигосахаридная цепь является в значительной степени однородной.
4. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, в котором, по меньшей мере, две аминокислоты каждая заменены аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью, в
(a) GLP-1; или
(b) пептиде, который имеет аминокислотную последовательность GLP-1 с делецией, заменой или вставкой одной или нескольких аминокислот; или
(c) аналоге GLP-1.
5. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, представляющий собой:
(a1) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, в котором, по меньшей мере, две аминокислоты GLP-1 каждая заменены аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью, и, по меньшей мере, один из замещенных сайтов является позицией 18, 20, 22, 26, 30, 34 и 36 GLP-1;
(а2) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, в котором, по меньшей мере, две аминокислоты GLP-1 каждая заменены аминокислотой с присоединенной олигосахаридной цепью, и замещенные сайты все выбраны из позиций 18, 20, 22, 26, 30, 34 и 36 GLP-1;
(b) пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, имеющий аминокислотную последовательность пептида GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью, как определено по пункту (a1 или (а2), с делецией, заменой или вставкой одной или нескольких аминокислот, за исключением аминокислот с присоединенной олигосахаридной цепью.
6. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.5, в котором:
каждая из указанных аминокислот с присоединенной олигосахаридной цепью представляет собой Asn с присоединенной олигосахаридной цепью;
в указанной аминокислоте с присоединенной олигосахаридной цепью олигосахаридная цепь присоединена к аминокислоте без помощи линкера;
указанные олигосахаридные цепи состоят из четырех или более сахаров;
каждая из указанных олигосахаридных цепей независимо выбрана из группы, состоящей из дисиало-, моносиало-, асиало-, диGlcNAc- и диманнозных олигосахаридных цепей; и
указанная олигосахаридная цепь является в значительной степени однородной.
7. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, в котором указанная аминокислота с присоединенной олигосахаридной цепью представляет собой Asn с присоединенной олигосахаридной цепью или Cys с присоединенной олигосахаридной цепью.
8. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, в котором в указанной аминокислоте с присоединенной олигосахаридной цепью олигосахаридная цепь присоединена к аминокислоте без помощи линкера.
9. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, в котором указанная олигосахаридная цепь состоит из четырех или более сахаров.
10. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, в котором указанная олигосахаридная цепь выбрана из группы, состоящей из дисиало-, моносиало-, аеиало-, диGlcNAc- и диманнозных олигосахаридных цепей.
11. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, в котором указанная олигосахаридная цепь представлена следующей формулой 1:
формула 1
1
2
в которой R и R представляют собой одинаковые или различные группы и каждая представляет собой следующее:
формула 2
, ,
,  или
и Ас представляет собой ацетильную группу.
12. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, в котором указанная олигосахаридная цепь является в значительной степени однородной.
13. Пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1, обладающий, по меньшей мере, одним из следующих свойств:
более высокая стабильность в крови по сравнению с GLP-1;
активность в контролировании уровня сахара в крови, по меньшей мере, в 10 раз более высокая по сравнению с GLP-1 в OGTT (пероральный тест на толерантность к глюкозе); и
по меньшей мере, в 30 раз более высокая устойчивость к DPP-IV по сравнению с GLP-1.
14. Фармацевтическая композиция, включающая пептид GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1 для лечения или предупреждения заболевания, связанного с GLP-1.
15. Фармацевтическая композиция по п.14, где указанное заболевание, связанное с GLP-1, представляет собой диабет.
16. Фармацевтическая композиция по п.14, в которой указанная олигосахаридная цепь имеет, по меньшей мере, 90%-ную однородность.
17. Способ лечения или предупреждения заболевания, связанного с GLP-1, включающий введение эффективного количества пептида GLP-1 с присоединенной олигосахаридной цепью по п.1.
18. Способ по п.17, где указанное заболевание, связанное с GLP-1, представляет собой диабет.