СПОСОБЫ СНИЖЕНИЯ ВИРУЛИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ СОДЕРЖАЩИХ PCV-2 КОМПОЗИЦИЙ И СОДЕРЖАЩИЕ PCV-2 КОМПОЗИЦИИ С ПОВЫШЕННОЙ ИММУНОГЕННОСТЬЮ

1. Способ получения содержащей PCV-2 антигенной композиции, заключающийся в том, что осуществляют стадии, на которых:
I) получают первую жидкость, содержащую антиген PCV-2; и
II) отделяют по меньшей мере часть первой жидкости от антигена PCV-2.
2. Способ по п.1, в котором часть первой жидкости отделяют от антигена PCV-2 посредством замены части первой жидкости на вторую жидкость, где вторая жидкость отлична от первой жидкости.
3. Способ по п.2, в котором замена части первой жидкости на вторую жидкость заключается в том, что осуществляют стадии, на которых:
а) добавляют жидкость посредством добавления второй жидкости к первой жидкости, содержащей антиген PCV-2; и
б) концентрируют антиген PCV-2 путем отделения части первой и второй жидкостей.
4. Способ по одному из п.п.1-3, в котором часть первой жидкости отделяют от антигена PCV-2 путем осуществления стадии фильтрации с использованием фильтра.
5. Способ по п.3, в котором стадию концентрирования и стадию добавления жидкости осуществляют практически одновременно.
6. Способ по п.3, в котором стадию концентрирования и стадию добавления жидкости осуществляют по меньшей мере два раза.
7. Способ по п.4, в котором фильтр включает полупроницаемую мембрану.
8. Способ по п.7, в котором полупроницаемая мембрана имеет средний размер пор, который меньше размера антигена PCV-2, что предотвращает прохождение по меньшей мере 90% антигена PCV-2 через поры полупроницаемой мембраны и удерживает антиген PCV-2 на фильтре.
9. Способ по п.4, в котором фильтр имеет такой средний размер пор, который предотвращает прохождение по меньшей мере 90% белков с молекулярной массой от 50 до 500 кДа.
10. Способ по п.3, в котором на стадии концентрирования концентрируют антиген в 3-50 раз по сравнению с объемом первой жидкости.
11. Способ по одному из п.п.1-3, в котором вирулицидную активность содержащей PCV-2 антигенной композиции снижают по меньшей мере на 10% по сравнению с жидкостью, которую не подвергали обработке согласно заявляемому способу.
50
12. Способ по одному из п.п.1-3, в котором содержащая PCV-2 антигенная композиция, полученная путем осуществления стадий I)-II), вызывает уменьшение менее чем на 1 log TCID/мл живого вируса или менее чем на 1 log КОЕ/мл живой бактерии после смешения живого вируса или живой бактерии с содержащей PCV-2 антигенной композицией в течение 2 или более часов.
50
13. Способ по одному из п.п.1-3, в котором содержащая PCV-2 антигенная композиция, полученная путем осуществления стадий I)-II), вызывает уменьшение менее чем на 0,7 log TCID/мл живого вируса или менее чем на 0,7 log КОЕ/мл живой бактерии после смешения живого вируса или живой бактерии с содержащей PCV-2 антигенной композицией в течение 2 или более часов.
14. Способ по одному из п.п.1-3, где способ дополнительно заключается в том, что осуществляют стадию, на которой собирают антиген PCV-2, оставшийся после осуществления стадии II).
15. Способ по п.14, где способ дополнительно заключается в том, что осуществляют стадию, на которой осуществляют очистку продукта, собранного после осуществления стадии II), который содержит антиген PCV-2, с помощью хроматографического метода.
16. Способ по п.15, в котором антиген PCV-2 очищают до достижения степени чистоты антигена PCV-2, составляющей более чем 50 мас.% в пересчете на общее содержание белка.
17. Способ по одному из п.п.1-3, дополнительно заключается в том, что осуществляют стадию, на которой смешивают антиген PCV-2, оставшийся после осуществления стадии II), с дополнительным компонентом, выбранным из группы, включающей фармацевтически приемлемые носители, адъюванты, разбавители, эксципиенты и их комбинации.
18. Способ по п.17, в котором дополнительный компонент представляет собой адъювант.
19. Способ по п.18, в котором адъювант представляет собой карбомер.
20. Способ по одному из п.п.1-3, в котором антиген PCV-2 представляет собой белок ORF-2 PCV-2.
21. Способ по одному из п.п.1-3, в котором антиген PCV-2 представляет собой вирусоподобные частицы белка ORF-2.
22. Способ по одному из п.п.1-3, где способ дополнительно заключается в том, что осуществляют стадию, на которой объединяют содержащую PCV-2 антигенную композицию по меньшей мере с одним дополнительным антигеном.
23. Способ по п.22, в котором по меньшей мере один дополнительный антиген включает антиген вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней и/или антиген Mycoplasma hyopneumoniae.
24. Содержащая PCV-2 антигенная композиция, которую можно получать с помощью способа по одному из п.п.1-23.
50
25. Содержащая PCV-2 антигенная композиция, где содержащая PCV-2 антигенная композиция вызывает уменьшение менее чем на 1 log TCID/мл живого вируса или менее чем на 1 log КОЕ/мл живой бактерии после смешения живого вируса или живой бактерии с содержащей PCV-2 антигенной композицией в течение по меньшей мере 2 ч.
50
26. Содержащая PCV-2 антигенная композиция по п.25, где содержащая PCV-2 антигенная композиция вызывает уменьшение менее чем на 0,7 log TCID/мл живого вируса или менее чем на 0,7 log КОЕ/мл живой бактерии после смешения живого вируса или живой бактерии с содержащей PCV-2 антигенной композицией в течение по меньшей мере 2 ч.
27. Содержащая PCV-2 антигенная композиция по п.25 или п.26, в которой живой вирус представляет собой вирус репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRS).
28. Иммуногенная композиция, включающая содержащую PCV-2 антигенную композицию, которую можно получать с помощью способа по одному из п.п.1-23.
29. Иммуногенная композиция, включающая содержащую PCV-2 антигенную композицию по одному из п.п.24-26.
30. Иммуногенная композиция по п.29, где иммуногенная композиция дополнительно содержит ослабленный живой вирус или ослабленную живую бактерию из по меньшей мере одного другого болезнетворного организма, вызывающего заболевание у свиней.
31. Иммуногенная композиция по п.30, в которой ослабленный живой вирус представляет собой вирус репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRS).
32. Иммуногенная композиция по п.29, где иммуногенная композиция дополнительно содержит бактерии Mycoplasma hyopneumoniae.
33. Иммуногенная композиция по п.29, где иммуногенная композиция дополнительно содержит адъювант.
34. Иммуногенная композиция по п.33, где адъювант представляет собой карбомер.
35. Иммуногенная композиция, содержащая очищенный антиген PCV-2 и адъювант.
36. Иммуногенная композиция по п.35, в которой содержание высокоочищенного антигена PCV-2 составляет более 50 мас.% в пересчете на общее содержание белка, включенного в иммуногенную композицию.
37. Иммуногенная композиция по п.35, в которой антиген PCV-2 представляет собой рекомбинантный белок ORF2 цирковируса свиней, экспрессированный в клетках животных или бактерий.
38. Иммуногенная композиция по п.35, где белок ORF2 цирковируса свиней можно получать с помощью способа, заключающегося в том, что осуществляют стадии, на которых:
а. экспрессируют антиген PCV-2 в клетке-хозяине;
б. собирают клеточную культуру, получая антиген PCV-2;
в. очищают собранный продукт, содержащий антиген PCV-2, с помощью гель-фильтрации;
г. смешивают очищенный антиген PCV-2 с адъювантом.
39. Иммуногенная композиция по п.п.28-38, где иммуногенная композиция индуцирует защитный иммунный ответ против PCV-2 после введения одной дозы иммуногенной композиции.
40. Иммуногенная композиция по п.п.28-38, где введение иммуногенной композиции снижает лимфоидное истощение и воспаление по меньшей мере на 80% у животного по сравнению с животным, которому не вводили иммуногенную композицию.
41. Иммуногенная композиция по п.п.31-38, где иммуногенная композиция индуцирует защитный иммунный ответ против вируса PRRS после введения одной дозы иммуногенной композиции.
42. Иммуногенная композиция по п.п.32-38, где иммуногенная композиция индуцирует защитный иммунный ответ против Mycoplasma hyopneumoniae после введения одной дозы иммуногенной композиции.
43. Иммуногенная композиция по п.п.28-38, где в 2 мл иммуногенной композиции содержится 1 доза антигена PCV-2.
44. Способ уменьшения одного или нескольких клинических симптомов вызываемой PCV-2 инфекции у животного по сравнению с животным, которому не вводили иммуногенную композицию, заключающийся в том, что осуществляют стадию, на которой вводят животному иммуногенную композицию по одному из п.п.28-38.
45. Иммуногенная композиция по одному из п.п.28-38, предназначенная для уменьшения одного или нескольких клинических симптомов инфекции, вызываемой PCV-2, у животного по сравнению с животным, которому не вводили иммуногенную композицию.
46. Способ повышения иммуногенности иммуногенной композиции в отношении цирковируса свиней, заключающийся в том, что осуществляют стадии, на которых:
а. экспрессируют антиген PCV-2 в клетке-хозяине;
б. собирают антиген PCV-2;
в. очищают антиген PCV-2 до достижения степени чистоты более 50 мас.% в пересчете на общее содержание белка, включенного в иммуногенную композицию;
г. смешивают очищенный антиген PCV-2 с адъювантом.