ПОЛУЧЕНИЕ ЦЕЛЛОБИОЗЫ ИЗ БИОМАССЫ

1. Способ получения целлобиозы, который включает следующие стадии:
a) материал, содержащий целлюлозу подвергают кислотной обработке, при которой образуется жидкая фаза и твердая фаза, содержащая целлюлозу, причем содержание сухого вещества на стадии а) составляет 7,5-50 масс.%;
b) отделение твердой фазы, полученной на стадии а), от жидкой фазы;
c) твердую фазы, полученную на стадии b), подвергают обработке целлюлазой, причем содержание сухого вещества составляет 7,5-50 масс.%, где обработку целлюлазой проводят в присутствии препарата фермента, который содержит, по меньшей мере, один тип полипептида, демонстрирующего активность целлобиогидролазы, причем:
(i) указанный препарат фермента целлюлазы произведен организмом, лишенным ферментов, которые демонстрируют значительную β-глюкозидазную активность, или
(ii) исходный препарат фермента целлюлазы добавляют к адсорбирующему материалу, выбранному из материалов, содержащих целлюлозу, хитин и хитозан, с последующей промывкой адсорбирующего материала, в результате чего получают препарат фермента целлюлазы, обладающий β-глюкозидазной активностью, в котором β-глюкозидазная активность минимизирована или исключена или
(iii) в котором ферментативная активность любых полипептидов с β-глюкозидазной активностью подавляется ингибитором, таким образом, получают жидкую фазу, содержащую целлобиозу, и твердую фазу, и
d) отделяют жидкую фазу, содержащую целлобиозу, от твердой фазы, полученной на стадии с).
2. Способ по п.1, в котором на стадии с) содержание сухого вещества в твердой фазе, полученной на стадии b), составляет 12-20 масс.%.
3. Способ по п.1, где содержащий целлюлозу материал, который обрабатывают на стадии с), содержит на 50% или больше аморфной целлюлозы относительно общего количества целлюлозы.
4. Способ по п.1, где содержание сухого вещества в ходе обработки на стадии а), составляет 10-30%.
5. Способ по п.1, где соотношение фермент/субстрат на стадии с) составляет от 0,01 до 0,1.
6. Способ по одному или нескольким из пп.1-5, где препарат целлюлазы имеет Р-глюкозидазную активность и где препарат целлюлазы добавляют к материалу, содержащему целлюлозу, который обрабатывают на стадии с), с последующей промывкой материала, таким образом, чтобы минимизировать или исключить β-глюкозидазную активность твердой фазы.
7. Способ по одному или нескольким из пп.1-5, где препарат целлюлозы содержит, по меньшей мере, один полипептид, демонстрирующий активность целлобиогидролазы, из следующей группы целлобиогидролаз (ЕС 3.2.1.91); целлобиогидролиз гликозилгидролазы из группы GH6 или целлобиогидролиз гликозилгидролазы из группы GH7, или полипептид, демонстрирующий активность целлобиогидролазы и имеющий 70% или больше, идентичности с любой из последовательностей SEQ ID №1 или SEQ ID №2, и/или где полипептид, демонстрирующий активность целлобиогидролазы производится путем секреции из рекомбинантных дрожжей или грибкового экспрессирующего хозяина, который лишен измеряемой β-глюкозидазной активности.
8. Способ по одному или нескольким из пп.1-5, где содержащую целлобиозу жидкую фазу со стадии d), дополнительно обрабатывают на стадии е), которая включает: необязательное концентрирование раствора целлобиозы, и дополнительную очистку целлобиозы из (необязательно концентрированного) раствора целлобиозы.
9. Способ по п. 8, в котором стадия е) включает один или несколько следующих приемов: кристаллизация целлобиозы, хроматография, нанофильтрация, микрофильтрация, ультрафильтрация, осаждение органическими растворителями, или использование микроорганизмов.
10. Способ по одному или нескольким из пп.1-5 или 9, где стадии с) и d) повторяют несколько раз, причем свежую водную фазу добавляют к твердой фазе, в последующих циклах.
11. Способ по одному или нескольким из пп.1-5 или 9, где стадии с) и d) проводят одновременно, путем непрерывной замены жидкой фазы, содержащей целлобиозу, свежей водной фазой.
12. Способ очистки целлобиозы из композиции, содержащей целлобиозу и глюкозу, который включает стадию превращения глюкозы путем окисления глюкозы в присутствии оксидазы глюкозы (GOX) и кислорода.
13. Способ по одному или нескольким из пп.1-5 или 9, где глюкозу в жидкой фазе, содержащей целлобиозу, превращают в глюконовую кислоту способом по п.12.
14. Способ по п.13, в котором глюконовую кислоту, полученную способом по п.13, удаляют из жидкой фазы, содержащей целлобиозу, с помощью одного или нескольких следующих приемов: ионообменная хроматография, осаждение, электродиализ.
15. Препарат целлобиозы, полученный способом по одному или нескольким из пп.1-14.
16. Применение препарата целлобиозы по п.15 в качестве пищевого компонента, кормовой добавки для животных, косметического компонента.
17. Применение по п.16, где препарат целлобиозы добавляют в кормовой препарат для животных в дозировке 0,01-1 масс.%.
18. Применение по п.16, где препарат целлобиозы добавляют в рецептуру теста для кекса или сухого печенья в комбинации с такими подсластителями, как ксилит, мальтит и/или стевия, где понижена дозировка сахарозы в тесте.
19. Применение препарата целлобиозы по п.15 для лечения воспалительных заболеваний кишечника у млекопитающих, таких как язвенный колит, болезнь Крона, коллагеновый колит, лимфоцитарный колит, ишемический колит, «диверсионный» колит и/или синдром Бехчета.