ВАКЦИНАЦИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИММУНО-ИЗОЛИРОВАННЫХ КЛЕТОК, ПРОДУЦИРУЮЩИХ ИММУНОМОДУЛЯТОР

1. Вакцинная композиция, содержащая:
5
6
(a) по меньшей мере одну извлекаемую биосовместимую макрокапсулу, содержащую от приблизительно 1×10 до приблизительно 1×10 иммуно-изолированных аллогенных клеток гематопоэтического происхождения, секретирующих по меньшей мере 20 нг/24 часа GM-CSF в течение по меньшей мере 7 суток, и
6
7
6
(b) антигенный компонент, где антигенный компонент содержит от 1×10 до 1×10 аутологичных клеток опухолей, полученных от пациента с хордомой, и где по меньшей мере 4×10 клеток опухолей являются облученными,где по меньшей мере одна биосовместимая макрокапсула содержит:
сердцевину, содержащую аллогенные клетки и внутреннюю спираль, где аллогенные клетки распределены на внутренней спирали; и
полупроницаемую мембрану, окружающую сердцевину, позволяющую диффузию через нее GM-CSF,
и дополнительно содержит одно или несколько из следующего:
(i) трубка для извлечения;
(ii) крючок для извлечения, прикрепленный к трубке для извлечения, где крючок для извлечения облегчает извлечение по меньшей мере одной биосовместимой макрокапсулы после имплантации;
(iii) коннектор, где коннектор прикрепляет мембрану по меньшей мере одной биосовместимой макрокапсулы к трубке для извлечения;
(iv) разъем для загрузки, где разъем для загрузки облегчает загрузку клеток, и
(v) пробирка для транспортировки, где пробирка для транспортировки содержит корпус пробирки и крышку пробирки.
2. Вакцинная композиция по п.1, где трубка для извлечения дополнительно содержит крючок для извлечения для облегчения извлечения по меньшей мере одной биосовместимой макрокапсулы после имплантации.
3. Вакцинная композиция по п.1,
где конец коннектора, который вставляют в мембрану, имеет форму усеченного конуса.
4. Вакцинная композиция по п.1,
где разъем для загрузки обладает усеченным коническим концом,
который вставлен в мембрану с притиранием.
5. Вакцинная композиция по п.1, где иммуно-изолированные аллогенные клетки дополнительно секретируют по меньшей мере одно дополнительное иммуномодулирующее средство,
где по меньшей мере одно дополнительное иммуномодулирующее средство выбрано из группы, состоящей из IL-12, IL-15, IL-4, интерферона-гамма, хемокинов или факторов роста дендритных клеток, IL-3, IL-9, IL-1, IL-2, IL-7, трансмембранных рецепторов IFNγ, фактора стволовых клеток (SCF) растворимого или мембранного, FL (лиганда Flt3), G-CSF, агонистов TLR7, T-клеточного иммуноглобулина муцина-3 (TIM-3), гена индуцируемого глюкокортикоидами белка, родственного семейству TNFR (GITR), продукта гена активации лимфоцитов 3 (LAG-3), Vista, стимулятора B- и T-лимфоцитов (BTLA), индуцируемого костимулятора T-клеток (ICOS), члена 4 суперсемейства рецепторов фактора некроза опухолей (OX40), CD40, CD137 (41BB), CD27, индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) и их комбинаций.
6. Вакцинная композиция по п.1, где указанные иммуно-изолированные аллогенные клетки представляют собой устойчивую линию клеток человека.
7. Вакцинная композиция по п.6, где устойчивая линия клеток человека представляет собой линию неадгерентных клеток.
8. Вакцинная композиция по п.1, где указанные иммуно-изолированные аллогенные клетки являются бессмертными или иммортализованными.
9. Вакцинная композиция по п.1, где указанные иммуно-изолированные аллогенные клетки не являются опухолевыми.
10. Вакцинная композиция по п.1, где указанные иммуно-изолированные аллогенные клетки происходят из относящегося к млекопитающим источника.
-15
11. Вакцинная композиция по п.1, где указанные иммуно-изолированные аллогенные клетки секретируют от приблизительно 80 до приблизительно 960×10 г/24 час GM-CSF.
12. Вакцинная композиция по п.1, где вакцинная композиция дополнительно содержит одно или несколько дополнительных лекарственных средств,
где одно или несколько дополнительных лекарственных средств представляют собой модуляторы иммунных контрольных точек, выбранные из группы, состоящей из ассоциированного с цитотоксическими T-лимфоцитами белка (CTLA-4), белка 1 программируемой гибели клеток (PD-1), лиганда белка 1 программируемой гибели клеток (PD-L1), T-клеточного иммуноглобулина муцина-3 (TIM-3), гена индуцируемого глюкокортикоидами белка, родственного семейству TNFR (GITR), продукта гена активации лимфоцитов 3 (LAG-3), Vista, стимулятора B- и T-лимфоцитов (BTLA), индуцируемого костимулятора T-клеток (ICOS), члена 4 суперсемейства рецепторов фактора некроза опухолей (OX40), CD40, CD137 (также известного как 41BB), CD27, индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) и их комбинаций.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая вакцинную композицию по п.1 и физиологически приемлемый носитель.
14. Способ терапии или вакцинации против злокачественных опухолей, включающий введение эффективного количества вакцинной композиции по п.1 пациенту.
15. Способ по п.14,
где злокачественная опухоль выбрана из группы, состоящей из рака легкого, меланомы, рака молочной железы, рака ободочной кишки, рака поджелудочной железы, рака почки, острого лейкоза, хронического лейкоза, глиобластомы, лимфомы низкой степени злокачественности, лимфомы высокой степени злокачественности, множественной миеломы, саркомы, злокачественной опухоли кости, опухоли мозга, рака желудка, рака пищевода, рака головы и шеи, рака щитовидной железы, рака мочевого пузыря, рака предстательной железы, рака яичника, рака тела матки, хордомы и рака шейки матки.
16. Способ по п.14, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу и антигенный компонент имплантируют, и по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу впоследствии удаляют.
17. Способ по п.16, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу имплантируют на период менее, чем 12 суток.
18. Способ по п.16, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу и антигенный компонент вводят последовательно под кожу в непосредственной близости или контакте.
19. Способ по п.14, где способ включает множественные инъекции.
20. Способ по п.19, где множественные инъекции происходят через равные интервалы.
включаетвключает21. Способ получения по меньшей мере одной биосовместимой макрокапсулы, используемой в вакцинной композиции по п.1, включающий:
(a) культивирование аллогенных клеток в течение по меньшей мере двух пассажей, чтобы убедиться, что клетки секретируют GM-CSF;
(b) ресуспендирование культивированных клеток в среде для культивирования клеток;
(c) загрузку клеток по меньшей мере в одну биосовместимую макрокапсулу; и
(d) разрезание трубки для извлечения, чтобы удалить разъем для загрузки.
22. Способ по п.21, дополнительно включающий стадию герметичного закрытия отрезанного конца трубки для извлечения.
23. Способ получения аутологичного источника антигенов опухолей для применения в вакцинной композиции, включающий:
a) получение образца солидной ткани, содержащего аутологичные клетки опухолей;
b) расщепление образца солидной ткани с использованием фермента;
c) дополнительное механическое расщепление образца солидной ткани;
d) инактивацию фермента и
e) выделение отдельных клеток опухолей из образца солидной ткани для получения суспензии клеток, содержащей источник антигенов опухолей.
6
7
24. Способ по п.23, где включаетвыделяют от 1×10 до приблизительно 1×10 клеток опухолей.
25. Способ по п.24, где образец солидной ткани получают посредством биопсии или хирургии.
26. Способ по п.25, где образец солидной ткани получают от пациента с хордомой.
27. Способ по п.24, где фермент, используемый на стадии b), представляет собой коллагеназу.
2+
2+
28. Способ по п.27, где коллагеназу инактивируют с использованием буфера, не содержащего Ca и Mg.
29. Способ по п.23, дополнительно включающий облучение суспензии клеток.
30. Способ по п.29, где суспензию клеток облучают при 10000 рад (100 Гр).
31. Способ по п.29, дополнительно включающий замораживание суспензии клеток для хранения вплоть до 12 месяцев.
32. Способ лечения злокачественной опухоли у пациента, включающий введение эффективного количества:
a) аутологичного источника антигенов опухолей, полученного способом по п.23; и
5
6
b) по меньшей мере одной извлекаемой биосовместимой макрокапсулы, содержащей от приблизительно 1×10 до приблизительно 1×10 иммуно-изолированных аллогенных клеток, секретирующих по меньшей мере 20 нг/24 часа GM-CSF, где по меньшей мере одна биосовместимая макрокапсула содержит:
i) сердцевину, содержащую аллогенные клетки и внутреннюю спираль, где аллогенные клетки распределены на внутренней спирали; и
ii) полупроницаемую мембрану, окружающую сердцевину, позволяющую диффузию через нее GM-CSF.
33. Способ по п.32, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу и аутологичный источник антигенов опухолей имплантируют, и по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу впоследствии удаляют.
34. Способ по п.33, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу и аутологичный источник антигенов опухолей вводят последовательно под кожу в непосредственной близости или контакте.
35. Способ по п.34, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу имплантируют до аутологичного источника антигенов опухолей.
36. Способ по п.33, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу имплантируют на период менее, чем 12 суток.
37. Способ по п.36, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу имплантируют на период от 4 до 10 суток.
38. Способ по п.37, где по меньшей мере одну биосовместимую макрокапсулу имплантируют на период от 5 до 7 суток.
39. Способ по п.32, где лечение включает множественные инъекции.
40. Способ по п.39, где множественные инъекции происходят через равные интервалы.
41. Способ по п.40, где, когда лечение включает терапию или вакцинацию против злокачественных опухолей, равные интервалы включают в себя еженедельные инъекции в течение четырех недель с последующими двумя дополнительными иммунизациями каждые две недели.
42. Способ по п.39, где множественные инъекции представляют собой подкожные инъекции.