ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩАЯ МОЛЕКУЛА, СОДЕРЖАЩАЯ FcRn-СВЯЗЫВАЮЩИЙ ДОМЕН, КОТОРАЯ ОБЕСПЕЧИВАЕТ КЛИРЕНС АНТИГЕНОВ

1. Антигенсвязывающая молекула, содержащая модифицированный FcRn-связывающий домен, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит аминокислотную замену в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436, где числа указывают положения замен в соответствии с нумерацией EU.
2. Антигенсвязывающая молекула по п. 1, где FcRn-связывающий домен содержит
a) аминокислотные замены в положениях EU252 и EU434; и
b) аминокислотные замены в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU387, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.
3. Антигенсвязывающая молекула по п. 1, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит
в положении EU238 аспарагиновую кислоту,
в положении EU250 валин,
в положении EU252 тирозин,
в положении EU254 треонин,
в положении EU255 лейцин,
в положении EU256 глутаминовую кислоту,
в положении EU258 аспарагиновую кислоту или изолейцин,
в положении EU286 глутаминовую кислоту,
в положении EU307 глутамин,
в положении EU308 пролин,
в положении EU309 глутаминовую кислоту,
в положении EU311 аланин или гистидин,
в положении EU315 аспарагиновую кислоту,
в положении EU428 изолейцин,
в положении EU433 аланин, лизин, пролин, аргинин, или серин,
в положении EU434 тирозин или триптофан, и/или
в положении EU436 изолейцин, лейцин, валин, треонин или фенилаланин.
4. Антигенсвязывающая молекула по п. 2, где FcRn-связывающий домен содержит аминокислотную замену аминокислоты в одном или более из сочетаний положений, выбранных из группы, состоящей из
a) EU252, EU434 и EU436;
b) EU252, EU307, EU311 и EU434;
c) EU252, EU315 и EU434;
d) EU252, EU308 и EU434;
e) EU238, EU252 и EU434;
f) EU252, EU434, EU307, EU311 и EU436; и
g) EU252, EU387 и EU434.
5. Антигенсвязывающая молекула по п. 4, где FcRn-связывающий домен содержит:
a) в положении EU252 тирозин, в положении EU315 аспарагиновую кислоту и в положении EU434 тирозин; или
b) в положении EU252 тирозин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 изолейцин; или
c) в положении EU252 тирозин, в положении EU434 тирозин и в
положении EU436 лейцин; или
d) в положении EU252 тирозин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
e) в положении EU252 тирозин, в положении EU254 треонин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 изолейцин.
6. Антигенсвязывающая молекула по п. 2, где FcRn-связывающий домен содержит аминокислотную замену в трех или более положениях, где три или более положения представляют собой сочетание, выбранное из группы, состоящей из
a) EU252/EU434/EU307/EU311/EU286;
b) EU252/EU434/EU307/EU311/EU286/EU254;
c) EU252/EU434/EU307/EU311/EU436;
d) EU252/EU434/EU307/EU311/EU436/EU254;
e) EU252/EU434/EU307/EU311/EU436/EU250;
f) EU252/EU434/EU308/EU250;
g) EU252/EU434/EU308/EU250/EU436; и
h) EU252/EU434/EU308/EU250/EU307/EU311.
7. Антигенсвязывающая молекула по п. 6, где FcRn-связывающий домен содержит:
a) в положении EU252 тирозин, в положении EU286 глутаминовую кислоту, в положении EU307 глутамин, в положении EU311 аланин и в положении EU434 тирозин; или
b) в положении EU252 тирозин, в положении EU254 треонин, в положении EU286 глутаминовую кислоту, в положении EU307 глутамин, в положении EU311 аланин и в положении EU434 тирозин; или
c) в положении EU252 тирозин, в положении EU307 глутамин, в
положении EU311 аланин, в положении EU434 тирозин и в положении 436 изолейцин; или
d) в положении EU252 тирозин, в положении EU254 треонин, в положении EU286 глутаминовую кислоту, в положении EU307 глутамин, в положении EU311 аланин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 изолейцин; или
e) в положении EU250 валин, в положении EU252 тирозин, в положении EU254 треонин, в положении EU308 пролин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
f) в положении EU250 валин, в положении EU252 тирозин, в положении EU307 глутамин, в положении EU311 аланин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
g) в положении EU252 тирозин, в положении EU307 глутамин, в положении EU311 аланин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
h) в положении EU250 валин, в положении EU252 тирозин, в положении EU308 пролин, и в положении EU434 тирозин; или
i) в положении EU250 валин, в положении EU252 тирозин, в положении EU307 глутамин, в положении EU308 пролин, в положении EU311 аланин и в положении EU434 тирозин.
8. Антигенсвязывающая молекула по п. 2, где FcRn-связывающий домен содержит аминокислотную замену в трех или более положениях, где три или более положения представляют собой сочетание, выбранное из группы, состоящей из
a) EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU286;
b) EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU250 и EU308;
c) EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU250 и EU286 и
EU308;
d) EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU250 и EU286 и EU308 и EU428.
9. Антигенсвязывающая молекула по п. 8, где FcRn-связывающий домен содержит:
a) в положении EU252 тирозин, в положении EU286 глутаминовую кислоту, в положении EU307 глутамин, в положении EU311 аланин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
b) в положении EU250 валин, в положении EU252 тирозин, в положении EU307 глутамин, в положении EU308 пролин, в положении EU311 аланин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
c) в положении EU250 валин, в положении EU252 тирозин, в положении EU286 глутаминовую кислоту, в положении EU307 глутамин, в положении EU308 пролин, в положении EU311 аланин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
d) в положении EU250 валин, в положении EU252 тирозин, в положении EU286 глутаминовую кислоту, в положении EU307 глутамин, в положении EU308 пролин, в положении EU311 аланин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин.
10. Антигенсвязывающая молекула по п. 2, где FcRn-связывающий домен содержит аминокислотную замену в трех или более положениях где три или более положения представляют собой сочетание, выбранное из группы, состоящей из:
a) EU434 и EU307 и EU311;
b) EU434 и EU307 и EU309 и EU311; или
c) EU434 и EU250 и EU252 и EU436.
11. Антигенсвязывающая молекула по п. 10, где FcRn-связывающий домен содержит:
a) в положении EU307 глутамин, в положении EU311 гистидин и в положении EU434 тирозин; или
b) в положении EU307 глутамин, в положении EU309 глутаминовую кислоту, в положении EU311 аланин и в положении EU434 тирозин; или
c) в положении EU307 глутамин, в положении EU309 глутаминовую кислоту, в положении EU311 гистидин и в положении EU434 тирозин; или
d) в положении EU250 валин; в положении EU252 тирозин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин.
12. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-11, где соотношение высокомолекулярных частиц составляет менее 2%.
13. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-11, где антигенсвязывающая молекула содержит антигенсвязывающий домен, обладающий
a) более низкой связывающей активностью в отношении антигена при pH 5,5-6,5, чем при pH 7-8, или
b) «зависимой от концентрации кальция связывающей» активностью в отношении антигена.
14. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-5, где связывающая активность указанной связывающей молекулы в отношении FcRn при pH 7 составляет 50-150 нМ, т.пл. превышает 63,0 градусов C, а оценка Epibase составляет менее 250.
15. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-3 и 6-7,
где связывающая активность указанной связывающей молекулы в отношении FcRn при pH 7 составляет 15-50 нM, т.пл. превышает 60 градусов C, а оценка Epibase составляет менее 500.
16. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-3 и 8-9, где связывающая активность указанной связывающей молекулы в отношении FcRn при pH 7 составляет более 15 нM, т.пл. выше 57,5 градусов C, а оценка Epibase составляет менее 500.
17. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-3, где FcRn-связывающий домен содержит аминокислотную замену
a) в положениях EU238, EU255 и/или EU258, и
b) в трех или более положениях, где три или более положения представляют собой одно из сочетаний, приведенных в таблицах 4-7.
18. Антигенсвязывающая молекула по п. 1, где
a) аминокислота в положении EU257 FcRn-связывающего домена отличается от аминокислоты, выбранной из группы, состоящей из аланина, валина, изолейцина, лейцина и треонина, и/или
b) аминокислота в положении EU252 FcRn-связывающего домена не является триптофаном.
19. Антигенсвязывающая молекула по п. 1, где антигенсвязывающая молекула обладает связывающей активностью в отношении существующего антитела против лекарственного средства, которая не существенно повышена по сравнению со сродством связывания контрольного антитела, содержащего интактный FcRn-связывающий домен.
20. Антигенсвязывающая молекула по п. 19, где FcRn-связывающий домен дополнительно содержит аминокислотную замену в
одном или более положениях выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440.
21. Антигенсвязывающая молекула по п. 20, где FcRn-связывающий домен содержит одну или более аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из
в положении EU387 аргинин,
в положении EU422 глутаминовую кислоту, аргинин, или серин, аспарагиновую кислоту, лизин, треонин или глутамин;
в положении EU424 глутаминовую кислоту или аргинин, лизин или аспарагин;
в положении EU426 аспарагиновую кислоту, глутамин, аланин или тирозин;
в положении EU433 аспарагиновую кислоту;
в положении EU436 треонин;
в положении EU438 глутаминовую кислоту, аргинин, серин или лизин; и
в положении EU440 глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту или глутамин.
22. Антигенсвязывающая молекула по п. 1, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит три или более замен, где три или более замены представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблицах 12-13.
23. Антигенсвязывающая молекула по п. 1, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит три или более замен, где три или более замены представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблицах 14-15.
24. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 20-23, где
FcRn-связывающий домен содержит:
a) в положении EU252 тирозин, в положении EU387 аргинин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
b) в положении EU252 тирозин, в положении EU422 глутаминовую кислоту, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
c) в положении EU252 тирозин, в положении EU422 аргинин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
d) в положении EU252 тирозин, в положении EU422 серин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
e) в положении EU252 тирозин, в положении EU424 глутаминовую кислоту, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
f) в положении EU252 тирозин, в положении EU424 аргинин, в положении EU434 тирозин и в положении EU436 валин; или
g) в положении EU252 тирозин, в положении EU434 тирозин, в положении EU436 валин и в положении EU438 глутаминовую кислоту; или
h) в положении EU252 тирозин, в положении EU434 тирозин, в положении EU436 валин и в положении EU438 аргинин; или
i) в положении EU252 тирозин, в положении EU434 тирозин, в положении EU436 валин и в положении EU438 серин; или
j) в положении EU252 тирозин, в положении EU434 тирозин, в положении EU436 валин, и в положении EU440 глутаминовую кислоту.
25. Антигенсвязывающая молекула по п. 1, где антигенсвязывающая молекула представляет собой антитело.
26. Применение антигенсвязывающей молекулы по любому из
пп. 1-25 для улучшения поглощения антигена клетками, опосредованного антигенсвязывающей молекулой.
27. Применение антигенсвязывающей молекулы по любому из пп. 1-25 для уменьшения концентрации в плазме конкретного антигена, где антигенсвязывающая молекула содержит антигенсвязывающий домен, который способен связываться с указанным антигеном.
28. Способ улучшения фармакокинетических характеристик антигенсвязывающей молекулы, включающий стадию введения аминокислотной замены в FcRn-связывающий домен указанной антигенсвязывающей молекулы по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.
29. Способ замедления клиренса антигенсвязывающей молекулы у субъекта, включающий стадию введения аминокислотной замены в FcRn-связывающий домен указанной антигенсвязывающей молекулы по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.
30. Способ увеличения времени удерживания антигенсвязывающей молекулы в плазме, включающий стадию введения аминокислотной замены в FcRn-связывающий домен указанной антигенсвязывающей молекулы по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.
31. Способ увеличения скорости клиренса присутствующего в плазме антигена под действием антигенсвязывающей молекулы, включающий стадию введения аминокислотной замены в FcRn-связывающий домен указанной антигенсвязывающей молекулы по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.
32. Способ повышения способности антигенсвязывающей молекулы обеспечивать клиренс содержащегося в плазме антигена, включающий стадию введения аминокислотной замены в FcRn-связывающий домен указанной антигенсвязывающей молекулы по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.
33. Способ по любому из пп. 28-32, где в положение EU256 FcRn связывающего домена дополнительно вводят аминокислотную замену.
34. Способ по любому из пп. 28-32, где способ дополнительно включает стадию введения в FcRn-связывающий домен аминокислотной замены в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440.
35. Способ получения антигенсвязывающих молекул по любому из пп. 1-25, который включает стадии
(a) выбора исходного FcRn-связывающего домена и изменение исходного FcRn путем введения аминокислотной замены в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU238,
EU250, EU252, EU254, EU255, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436;
(b) выбор антигенсвязывающего домена антигенсвязывающей молекулы и изменение по меньшей мере одной аминокислоты в антигенсвязывающем домене для получения pH-зависимого антигенсвязывающего домена или кальций-ион-зависимого антигенсвязывающего домена;
(c) получение гена, кодирующего антигенсвязывающую молекулу, в которой соединены человеческий FcRn-связывающий домен и антигенсвязывающий домен, описанные в пунктах (a) и (b), и
(d) получение антигенсвязывающей молекулы с использованием гена, полученного в пункте (c).
36. Способ по п. 35, где на стадии a) в FcRn-связывающий домен дополнительно вводят аминокислотную замену в положении EU256.
37. Способ по любому из пп. 35-36, где способ дополнительно включает стадию введения в FcRn-связывающий домен аминокислотной замены в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440.
38. Антигенсвязывающая молекула, содержащая модифицированный FcRn-связывающий домен, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит аминокислотную замену по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440, где сродство связывания указанной антигенсвязывающей молекулы к существующему
антителу против лекарственного средства (ADA) при нейтральных значениях pH не существенно повышено по сравнению со сродством связывания антигенсвязывающей молекулы, содержащей интактный FcRn-связывающий домен.
39. Антигенсвязывающая молекула по п. 38, где антигенсвязывающая молекула дополнительно обладает повышенным сродством связывания к FcRn в нейтральных или кислых диапазонах значений pH.
40. Антигенсвязывающая молекула по п. 38, где замещающая аминокислота в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440, выбрана из группы, состоящей из
a) в положении EU387 аргинин;
b) в положении EU422 глутаминовую кислоту, аргинин, серин, аспарагиновую кислоту, лизин, треонин или глутамин;
c) в положении EU424 глутаминовую кислоту, аргинин, лизин или аспарагины;
d) в положении EU426 аспарагиновую кислоту, глутамин, аланин или тирозин;
e) в положении EU433 аспарагиновую кислоту;
f) в положении EU436 треонин;
g) в положении EU438 глутаминовую кислоту, аргинин, серин, или лизин; и
h) в положении EU440 глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту или глутамин.
41. Антигенсвязывающая молекула по п. 38, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит аминокислотную
замену в одном или более положениях, или одно из сочетаний замен, описанных в таблице 10.
42. Антигенсвязывающая молекула по п. 38, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит любую из аминокислотных замен или сочетаний замен, описанных в таблице 11.
43. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 39-42, где модифицированный FcRn-связывающий домен дополнительно содержит аминокислотную замену в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU434 и EU436, где указанные замены обуславливают повышение FcRn-связывающей активности в нейтральном или кислом диапазоне значений pH.
44. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 39-42, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит аминокислотные замены в положениях
i) a) EU438/EU440 или b) EU424; и
ii) a) EU434, b) EU252/EU254/EU256; c) EU428/EU434; или d) EU250/EU428.
45. Антигенсвязывающая молекула по п. 44, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит аминокислотные замены
i) a) EU438R/EU440E или b) EU424N; и
ii) a) M434H; b) M252Y/S254T/T256E; c) M428L/N434S; или d) T250Q и M428L (нумерация EU).
46. Антигенсвязывающая молекула по п. 45, где
модифицированный FcRn-связывающий домен содержит три или более аминокислотные замены, где три или более замены представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблицах 13 и 15.
47. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 39-42, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит замены
a) по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU438, EU440, EU433, или по двум или более положениям, где два положения представляют собой одно из сочетаний, выбранных из группы, состоящей из EU422/EU424 и EU438/EU440; и
b) по двум или более положениям, где два положения представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблице 9.
48. Антигенсвязывающая молекула по п. 47, где модифицированный FcRn-связывающий домен содержит три или более аминокислотные замены, где три или более аминокислотные замены представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблицах 12 или 14.
49. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 39-42, где указанная антигенсвязывающая молекула содержит pH-зависимый антигенсвязывающий домен или ион кальция-зависимый антигенсвязывающий домен.
50. Способ уменьшения связывающей активности в отношении существующего ADA у антигенсвязывающей молекулы, содержащей FcRn-связывающий домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и повышенной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH, где указанный
способ включает стадии
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, которая содержит FcRn-связывающий домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и повышенной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH; и
b) замены аминокислоты в FcRn-связывающем домене по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440, с получением антигенсвязывающей молекулы, содержащей модифицированный FcRn-связывающий домен.
51. Способ по п. 50, где стадия b) включает замену аминокислоты в трех или более положениях, где три или более положения представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблице 10.
52. Способ по п. 50, где стадия b) включает введение трех или более аминокислотных замен в FcRn-связывающий домен, где три или более аминокислотные замены представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблице 11.
53. Способ увеличения общего числа антигенов, с которыми может связываться одна антигенсвязывающая молекула, при отсутствии значительного повышения связывающей активности в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где указанный способ включает стадии
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии a), путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440.
54. Способ облегчения внеклеточного высвобождения не содержащей антигена антигенсвязывающей молекулы, которая была поглощена клетками в антиген-связанной форме, при отсутствии значительного повышения связывающей активности указанной антигенсвязывающей молекулы в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где способ включает стадии
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436, и EU428; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена,
описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440.
55. Способ повышения способности антигенсвязывающей молекулы удалять антиген из плазмы при отсутствии значительного повышения связывающей активности в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где указанный способ включает стадии
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434, EU436 и EU428; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440.
56. Способ улучшения фармакокинетических характеристик антигенсвязывающей молекулы при отсутствии значительного повышения связывающей активности в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где указанный способ включает стадии
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440.
57. Способ уменьшения концентрации общего или свободного антигена в плазме при отсутствии значительного повышения связывающей активности в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где указанный способ включает стадии
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен, где антигенсвязывающая молекула содержит антигенсвязывающий домен, который способен связываться с указанным антигеном,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309,
EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440.
58. Способ получения антигенсвязывающей молекулы, которая содержит FcRn-связывающий домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и пониженной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH, где указанный способ, состоящий из стадии
(a) обеспечения FcRn-связывающего домена, обладающего повышенной связывающей активностью в отношении FcRn в нейтральных или кислых диапазонах значений pH и в отношении существующего ADA в нейтральных диапазонах значений pH,
(b) замены аминокислоты по одному или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436, EU438 и EU440,
(c) выбора антигенсвязывающего домена антигенсвязывающей молекулы и изменения по меньшей мере одной аминокислоты в антигенсвязывающем домене с целью получения pH-зависимого антигенсвязывающего домена, или выбора ион кальция-зависимого антигенсвязывающего домена;
(d) получения гена, кодирующего антигенсвязывающую молекулу, объединяющую человеческий FcRn-связывающий домен и
антигенсвязывающий домен, полученных на стадиях (a) и (b), и
(e) получения антигенсвязывающей молекулы с использованием гена, полученного на стадии (c), где указанная полученная антигенсвязывающая молекула обладает повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и пониженной связывающей активностью в отношении эндогенного ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антигенсвязывающим доменом, содержащим интактный FcRn-связывающий домен.
59. Способ по п. 58, где FcRn-связывающий домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn и существующего ADA в нейтральных или кислых диапазонах значений pH и в отношении существующего ADA в нейтральных диапазонах значений pH, содержит аминокислотную замену в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.
60. Способ по любому из пп. 53-57, где аминокислотную замену на стадии a) осуществляют в трех или более положениях, где указанные три или более положения представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблицах 4-7.
61. Способ по любому из пп. 53-58, где аминокислотные замены на стадии b) осуществляют в трех или более положениях, где указанные три или более положения представляют собой одно из сочетаний, описанных в таблице 10.