Изучение химического состава надземных органов спиреи иволистной (Spiraea salicifolia L. ) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

© КРИВОШЕЕВ И.М., МИРОВИЧ В.М. - 2012 УДК 615.322:582.628.2

ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА НАДЗЕМНЫХ ОРГАНОВ СПИРЕИ ИВОЛИСТНОЙ (SPIRAEA SALICIFOLIA L.) МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Игорь Михайлович Кривошеев, Вера Михайловна Мирович

Резюме. Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии проведено исследование состава фенольных соединений листьев и цветков спиреи иволистной. Было идентифицировано в листьях и цветках по 15 соединений (флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, кумарин, танин). Преобладающие компоненты: флавоноиды - лютеолин-7-глюкозид, витексин, кверцетин, робинин; фенолкарбоновые кислоты - кофейная, галловая.

Ключевые слова: спирея иволистная, лекарственные растения, ВЭЖХ, фенольные соединения.

THE STUDY OF CHEMICAL COMPOSITION OF SPIRAEA SALICIFOLIA L. OVERGROUND ORGANS BY HIGHLY EFFECTIVE LIQUID CHROMATOGRAPHY METHOD

I.M. Krivosheev, V.M. Mirovich

Summary. Investigation of the phenolic compounds from the leaves and flowers Spiraea salicifolia L. (Rosaceae Juss) was studied by HELCh method. In the leaves and the flowers were identified 15 compounds (flavonoids, phenolic acids, cumarinum, tanninum). Predominant components: flavonoids - luteolin-7-glucoside, vitexin, quercetin, robinin; phenolic acids - caffeic and gallic.

Key words: Spiraea salicifolia L., medicine plants, HELCh method, phenolic compounds.

Спирея иволистная (Spiraea salicifolia L.) относится к семейству розоцветных (Rosaceae Juss). Род спирея (Spiraea L.) насчитывает примерно 100 видов, на территории СНГ встречается 22 вида [2,6].

Спирея иволистная - представляет собой листопадный кустарник 1-2 м высоты, с широколанцетовидными, к основанию суженными в короткий черешок листьями, на верхушке листья заострённые, иногда притупленные, неравномерно пиловидно-зубчатые, с сильно выдающимися жилками, цветки с розовым венчиком, собраны в густые метелки. Спирея иволистная широко распространена в средней полосе России, Сибири, на Дальнем Востоке, а также в Китае, Японии и Северной Америке [5].

В надземной части спиреи иволистной обнаружены дубильные вещества, кумарины, флавоноиды. Из флавоноидов идентифицированы гиперозид, дипентозид кверцетина, в гидролизате содержались кемпферол, кверцетин, цианидин. Листья содержат фенолкарбоновые кислоты - кофейную и феруловую [1,3,7].

Применение спиреи иволистной в народной, монгольской, тибетской медицине свидетельствует о том, что в данном растении содержится ряд биологически активных веществ. Отвары и настои применяются при желудочнокишечных заболеваниях, ревматизме, гельминтозах, гинекологических заболеваниях [3,4]. Фармакологическая активность спиреи иволистной, очевидно, обусловлена наличием в ней разнообразных фенольных соединений.

Цель работы: изучение компонентного состава фенольных соединений, содержащихся в надземных органах спиреи иволистной (S. salicifolia).

Материалы и методы

Объектом исследования служили листья и цветки спиреи иволистной (S. salicifolia), собранные в июле 2010 года в южных районах Иркутской области. Собранные образцы сырья сушили воздушно-теневым способом.

Для анализа были взяты два извлечения: из листьев и цветков. Приготовление извлечения проводили следующим образом: сырьё измельчали до частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм. Навеску сырья 5 г для листьев (2 г для цветков) помещали в колбу на 100 мл, прибавляли 50 мл 70% спирта этилового, колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр.

Для исследования листьев спиреи иволистной использовали извлечение в разведении 1:5. Для этого 5 мл извлече-

ния из листьев помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляли 15 мл 70% спирта этилового, перемешивали и доводили 70% спиртом этиловым до метки

Для исследования цветков спиреи иволистной использовали извлечение в разведении 1:2. Для этого 5 мл извлечения из цветков помещали в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводили 70% спиртом этиловым до метки (исследуемый образец 2).

Параллельно готовили серию 0,05% растворов сравнения в 70% спирте этиловом: рутина, кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-глюкозида, галловой кислоты, кофейной кислоты, хлорогеновой кислоты, цикориевой кислоты, коричной кислоты, о-кумаровой кислоты, эпигаллокатехингаллата, салицина, гиперозида, геспередина, апигенина, феруловой кислоты, умбеллиферона, эпикатехина, эскулетина, кумарина, дигидрокверцетина, кемпферола, метоксикумарина. Условия хроматографирования. Анализ проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы <Ю1Ь8ТО№>, модель 305, ФРАНЦИЯ; инжектор ручной, модель RHEODYNE 7125 ША с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для <^т^ш8».

Для разделения веществ была использована металлическая колонка размером 4,6х250 мм КгошаБИ С 18, размер частиц 5 микрон.

В качестве подвижной фазы применяли раствор метанол-вода-фосфорная кислота концентрированная, в соотношении 400:600:5. Анализ проводили при комнатной температуре. Скорость подачи элюента 0,8 мл/мин. Продолжительность анализа 70 мин. Детектирование проводилось с помощью УФ-детектора <Ю1Ь8ТО№> ЦУ/УК модель 151, при длине волны 254 нм.

В хроматограф вводили по 50 мкл исследуемых растворов и растворов сравнения, хроматографировали по выше приведенной методике.

Идентификацию разделённых веществ проводили путём сопоставления времён удерживания пиков анализируемой пробы со временами удерживания стандартов. Оценку количественного соотношения в исследуемых образцах проводили по площади пиков методом внутренней нормализации.

Результаты и обсуждение

Согласно результатам анализа в извлечениях из листьев спиреи иволистной (исследуемый образец 1) зафиксировано 19 пиков веществ, из них идентифицировано 15 соединений. В извлечениях из цветков спиреи иволистной (исследуемый

Таблица 1

Характеристика фенольных соединений спиреи иволистной

№ п/п Вещество Листья Цветки

Время удерживания, мин Содержание в смеси, % Время удерживания, мин Содержание в смеси, %

1 таннин 3,57б 1,03 3,221 3,30

2 галловая кислота 4,084 7,32 3,760 23,37

3 хлорогеновая кислота 5,ббб 4,51 5,877 5,93

4 виценин б,8б1 2,47 6,837 5,73

5 кофейная кислота 8,002 7,03 8,285 13,71

б феруловая кислота 8,952 3,84 - -

7 кумарин 10,600 3,25 10,950 2,24

8 эпикатехин 12,270 7,87 11,820 3,76

9 геспередин - - 12,940 5,09

10 лютеолин-7-глюкозид 14,300 10,36 14,400 2,57

11 робинин 20,590 8,07 23,310 8,60

12 витексин 22,190 10,10 25,220 10,99

13 дигидро-кверцетин 34,960 9,79 36,410 0,50

14 кверцетин 44,880 4,85 41,930 5,89

15 кемпферол 57,310 5,19 60,730 2,25

1б лютеолин 65,590 0,08 65,630 4,26

образец 2) зафиксировано 17 пиков веществ, идентифицировано было 15 соединений. Все идентифицированные вещества относятся к фенольным соединениям. Листья и цветки спиреи иволистной содержат флавоноиды, фенолкарбоно-вые кислоты, кумарины, дубильные вещества (табл. 1).

В листьях спиреи иволистной преобладают флавоноиды

- лютеолин-7-глюкозид, витексин, дигидрокверцетин, роби-

нин. Из фенолкарбоновых кислот больше всего содержится галловой и кофейной кислот.

В цветках спиреи иволистной из флавоноидов преобладающими являются - витексин, роби-нин, кверцетин и гесперидин. Содержание в цветках фенолкар-боновых кислот - галловой и кофейной в 2-3 раза больше, чем в листьях (табл. 1).

Качественный состав фенольных соединений листьев и цветков спиреи иволистной существенно не различается. Отличие состоит в наличие у листьев феруловой кислоты и в отсутствие флаво-ноида гесперидина, который был обнаружен в листьях.

Таким образом, в результате проведённых исследований было определено, что листья и цветки спиреи иволистной (Spiraea salicifolia L.) содержат комплекс фенольных соединений, в состав которого входят флавоноиды, фенолкарбоновые кислотами, кумарины и дубильные вещества. Методом ВЭЖХ изучен его компонентный состав. В результате анализа было идентифицировано 16 фенольных соединений, из них присутствие 9 соединений в химическом составе надземных органов спиреи иволистной установлено впервые.

ЛИТЕРАТУРА

1. Карпова Е.А., Полякова Т.А. Содержание фенольных соединений и потенциал биологической активности сибирских дальневосточных видов рода Spiraea L. (Rosaceae Juss.) // Растительный мир Азиатской России. - 2009. - Т. 4. №2.

- С.79-88.

2. Полякова Т.А. Внутривидовая изменчивость дальневосточных и сибирских видов рода Spiraea L.: Автореферат дис. ...канд. биол. наук. - Новосибирск, 2004. - 16 с.

3. Растительные ресурсы СССР: цветковые расте-

ния, их химический состав, использование. Семейства Hydrangeaceae-Haloragaceae. - СПб., 1991. - С.101.

4. Телятьев В.В. Полезные растения Центральной Сибири.

- Иркутск, 1987. - 400 с.

5. Флора Сибири. Rosaceae / Под ред. А.В. Положий, Л.И. Малышева. - Новосибирск, 1988. - 199 c.

6. Черепанов С.К. Сосудистые растения СССР. - Л., 1981.

- 510 с.

7. Ahn B. T., Oh K. J., Park S. K., et al. Phenolic compounds from leaves Spiraea salicifolia // Saengyak Hakhoechi. - 1996. -Vol. 27. №3. - P.178-183.

Информация об авторах: Кривошеев Игорь Михайлович - аспирант, e-mail: i-mikhalich@rambler.ru; Мирович Вера Михайловна - старший преподаватель д. ф. н.; 664003, Иркутск, ул. Красного Восстания, 1, ИГМУ,

кафедра фармакогнозии и ботаники, тел. (3952) 243447.

СЛУЧАИ ИЗ ПРАКТИКИ

© КОНЫШКО Н.А. - 2012 УДК 616.395

КЛИНИЧЕСКИЕ ПОСЛЕДСТВИЯ ДЛИТЕЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ СТРОГОЙ ДИЕТЫ У ЖЕНЩИНЫ РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА

Наталья Александровна Конышко

Резюме. В статье представлен современный взгляд на проблему приверженности к различного рода диетам, приведен клинический случай следования строгой диете у женщины репродуктивного возраста и проведен клинический анализ последствий с позиций патогенеза соматической патологии.

Ключевые слова: строгая диета, соматическая патология, женщины репродуктивного возраста.

CLINICAL CONSEQUENCES OF A STRICT DIET PROLONGED APPLICATION IN REPRODUCTIVE AGE WOMAN

N.A. Konyshko