Способы скрининга с использованием обонятельных рецепторов и новых соединений, идентифицированных этими способами

1. Композиция, способная модулировать активность обонятельного рецептора и идентифицированная способом, включающим:
(a) измерение первой активности обонятельного рецептора,
(b) контактирование тестируемого агента с обонятельным рецептором,
(c) измерение второй активности обонятельного рецептора после контактирования с тестируемым агентом, и
(d) определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если вторая активность обонятельного рецептора увеличивается или уменьшается по сравнению с первой активностью обонятельного рецептора.
2. Композиция по п.1, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, указанных в SEQ ID NO: 61-3808.
3. Композиция по п.1, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 41-60.
4. Композиция, способная модулировать активность обонятельного рецептора и идентифицированная способом, включающим:
(a) контактирование тестируемого агента с обонятельным рецептором,
(b) детектирование взаимодействия между тестируемым агентом и одной или более аминокислотами обонятельного рецептора, и
(c) определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если тестируемый агент взаимодействует с одной или более аминокислотами.
5. Композиция по п. 4, где способ включает детектирование взаимодействия между тестируемым агентом и одной или более аминокислотами в 7-спиральном трансмембранном домене (7TM) обонятельного рецептора.
6. Композиция по п. 4 или 5, где способ дополнительно включает измерение первой активности обонятельного рецептора до контактирования с тестируемым агентом и измерение второй активности обонятельного рецептора после контактирования с тестируемым агентом.
7. Композиция по любому из пп. 4-6, где способ дополнительно включает контактирование лиганда обонятельного рецептора с обонятельным рецептором.
8. Композиция по любому из пп. 4-7, где способ дополнительно включает определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным снижать активность обонятельного рецептора, если вторая активность обонятельного рецептора снижается по сравнению с первой активностью обонятельного рецептора.
9. Композиция по любому из пп. 4-7, где способ дополнительно включает определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным повышать активность обонятельного рецептора, если вторая активность обонятельного рецептора повышается по сравнению с первой активностью обонятельного рецептора.
10. Композиция по любому из пп. 4-9, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных в SEQ ID NO: 61-3808.
11. Композиция по любому из пп. 4-9, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 41-60.
12. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR9.2.9, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 41, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Gln103, Leu104, Lys275, Arg87, Val81, Met84, Val279, Tyr262, Met209, Gly258, Val111, Tyr255, Thr282, Phe107 и Thr80.
13. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR38.1.21, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 42, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Lys273, Thr78, Leu82, Tyr260, Thr256, Tyr253 и Phe105.
14. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR21.2.15, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 43, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Met103, Met83, His107, Ile106, Leu182, Asn197, Gly201, Val204, Ser260, Phe256 и Leu273.
15. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR21.2.43, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 44, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Asp285, Met80, Met88, Leu108, Ile111, His112, Thr115, Val209, Val210, Thr213, Leu214, Val262, Ile263, Ser266, Ile281, Ala284 и Leu288.
16. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catGr5 (B3:72908295-72909287), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 55, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Tyr277, Lys290, Phe119, Pro177, Leu180, Ile181, Pro199, Cys217 и Phe220.
17. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catGr6 (D1:105486528-105487493), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 56, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из His112, Asn209, Tyr265, Phe88, Phe111, Met170, Met206, Cys261, Ile264, Ser279, Ile280 и Thr283.
18. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catG7 (B3:74116955-74117893), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 57, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Met81, Tyr258, Gln100, Thr77, Lys269, Leu104, Thr276, Val277, His73, Val273 и Val78.
19. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catG8 (E3:40237904-40238842), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 58, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Met81, Leu101, Phe104, Leu105, Gly108, Glu180, Val202, Phe206, Tyr259 и Lys272.
20. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catG9 (D1:105462554-105463512), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 59, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Tyr79, Lys278, Phe110, Val111, Gly114, Val208, Ile212, Phe258, Ala261, Leu262, Tyr265, Val282 и Ser285.
21. Композиция по любому из пп. 4-11, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR5.2.5, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 50, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Tyr263, Tyr77, Phe108, Val112, Ser116, Val206, Asp210, Phe256 и Thr283.
22. Композиция по любому из пп. 4-21, где взаимодействие определют путем сайт-направленного мутагенеза, рентгеновской кристаллографии, рентгеновской спектроскопии, ядерного магнитного резонанса (ЯМР), оценки перекрестного связывания, масс-спектроскопии, электрофореза, анализа методом смещения и их комбинации.
23. Композиция, способная модулировать активность обонятельного рецептора и идентифицированная способом, включающим:
(a) контактирование агониста обонятельного рецептора с обонятельным рецептором,
(b) измерение первой активности обонятельного рецептора,
(c) контактирование тестируемого агента с обонятельным рецептором,
(d) измерение второй активности обонятельного рецептора, и
(e) определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если первая активность больше или меньше, чем вторая активность.
24. Композиция по п. 23, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, указанных в SEQ ID NO: 61-3808.
25. Композиция по п. 23, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 41-60.
26. Композиция по п. 23, где агонист обонятельного рецептора выбран из группы, состоящей из трифернала, изовалериановой кислоты, 3-метил-2-гексановой кислоты, альфа-ионона, гексилацетата, амилмеркаптана, гелионаля, пара-анисальдегида, 4-этоксибензальдегида, ментола, метилэвгенола, метилсалицилата, фенилацетальдегида, бета-ионона, амилацетата, нонанетиола, ацетофенона, кумарина, лилиаля, мета-анисальдегида, 4-метилвалериановой кислоты, пентанола, аллилфенилацетата, гексановой кислоты, альфа-ионона, цитраля, изоамилацетата, октантиола, пропиофенона, 7-метоксикумарина и их комбинаций.
50
27. Композиция по любому из пп. 1-3 и 23-26, где тестируемый агент имеет величину EC не более чем приблизительно 200 мкΜ.
28. Композиция по любому из пп. 1-3 и 23-26, где тестируемый агент имеет величину Emax не менее, чем приблизительно 2,0.
29. Композиция по любому из пп. 1-3, где стадия (с) включает определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если активность обонятельного рецептора снижается после его контактирования с тестируемым агентом.
30. Композиция по любому из пп. 1-3, в котором стадия (с) включает определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если активность обонятельного рецептора увеличивается после его контактирования с тестируемым агентом.
31. Пищевой продукт, содержащий композицию по любому из пп. 1-30.
32. Пищевой продукт по п. 31, где композиция присутствует в концентрации приблизительно от 0,0001% до приблизительно 10% по массе пищевого продукта.
33. Пищевой продукт по п. 31, где композиция присутствует в концентрации приблизительно от 0,001 м.д. до приблизительно 1000 м.д. пищевого продукта.
34. Пищевой продукт по п.31, где композиция присутствует в концентрации приблизительно от 1 мкΜ до приблизительно 1 М пищевого продукта.
35. Пищевой продукт по любому из пп. 31-34, где композиция присутствует в количестве, эффективном для улучшения вкусовых качеств пищевого продукта, как было определено специалистами по оценке вкуса.
36. Пищевой продукт по любому из пп. 31-34, где пищевой продукт включает корм для домашних питомцев.
37. Пищевой продукт по любому из пп. 31-34, где корм для домашних питомцев представляет собой корм для кошек или корм для собак.
38. Пищевой продукт по любому из пп. 31-34, где корм для кошек представляет собой влажный корм для домашних питомцев или сухой корм для домашних питомцев.
39. Способ повышения интенсивности запаха пищевого продукта, включающий смешивание пищевого продукта с композицией по любому из пп. 1-30, где композиция присутствует в концентрации приблизительно от 0,0001% до приблизительно 10% по массе смеси.
40. Способ повышения интенсивности запаха пищевого продукта, включающий смешивание пищевого продукта с композицией по любому из пп. 1-30, где композиция присутствует в концентрации приблизительно от 0,001 м.д. до приблизительно 1000 м.д. смеси.
41. Способ повышения интенсивности запаха пищевого продукта, включающий смешивание пищевого продукта с композицией по любому из пп. 1-30, где композиция присутствует в концентрации приблизительно от 1 мкМ до приблизительно 1 М смеси.
42. Способ получения пищевого продукта, включающего композицию по любому из пп. 1-30, где указанный способ включает тепловую обработку предшественника пищевого продукта, и где композицию получают в процессе тепловой обработки.
43. Способ по п. 42, где тепловая обработка включает стерилизацию, автоклавирование, экструзию, литье под давлением или их комбинации.
44. Способ идентификации соединения, способного модулировать активность обонятельного рецептора, включающий:
(a) измерение первой активности обонятельного рецептора,
(b) контактирование тестируемого агента с обонятельным рецептором,
(c) измерение второй активности обонятельного рецептора после контактирования с тестируемым агентом, и
(d) определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если вторая активность обонятельного рецептора увеличивается или уменьшается по сравнению с первой активностью обонятельного рецептора.
45. Способ по п. 44, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, указанных в SEQ ID NO: 61-3808.
46. Способ по п. 44, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 41-60.
47. Способ идентификации соединения, способного модулировать активность обонятельного рецептора, где указанный способ включает:
(a) контактирование тестируемого агента с обонятельным рецептором,
(b) детектирование взаимодействия между тестируемым агентом и одной или более аминокислотами обонятельного рецептора, и
(c) определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если тестируемый агент взаимодействует с одной или более аминокислотами.
48. Способ по п. 47, где указанный способ включает детектирование взаимодействия между тестируемым агентом и одной или более аминокислотами в 7-спиральном трансмембранном домене (7TM) обонятельного рецептора.
49. Способ по п. 47 или 48, который также включает измерение первой активности обонятельного рецептора до контактирования с тестируемым агентом и измерение второй активности обонятельного рецептора после контактирования с тестируемым агентом.
50. Способ по любому из пп. 47-49, который также включает контактирование лиганда обонятельного рецептора с обонятельным рецептором.
51. Способ по любому из пп. 47-50, который также включает определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным снижать активность обонятельного рецептора, если вторая активность обонятельного рецептора снижается по сравнению с первой активностью обонятельного рецептора.
52. Способ по любому из пп. 47-50, который также включает определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным повышать активность обонятельного рецептора, если вторая активность обонятельного рецептора повышается по сравнению с первой активностью обонятельного рецептора.
53. Способ по любому из пп. 47-52, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных в SEQ ID NO: 61-3808.
54. Способ по любому из пп. 47-52, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 41-60.
55. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR9.2.9, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 41, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Gln103, Leu104, Lys275, Arg87, Val81, Met84, Val279, Tyr262, Met209, Gly258, Val111, Tyr255, Thr282, Phe107 и Thr80.
56. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR38.1.21, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 42, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Lys273, Thr78, Leu82, Tyr260, Thr256, Tyr253 и Phe105.
57. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR21.2.15, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 43, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Met103, Met83, His107, Ile106, Leu182, Asn197, Gly201, Val204, Ser260, Phe256 и Leu273.
58. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR21.2.43, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 44, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Asp285, Met80, Met88, Leu108, Ile111, His112, Thr115, Val209, Val210, Thr213, Leu214, Val262, Ile263, Ser266, Ile281, Ala284, и Leu288.
59. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catGr5 (B3:72908295-72909287), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 55, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Tyr277, Lys290, Phe119, Pro177, Leu180, Ile181, Pro199, Cys217, и Phe220.
60. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catGr6 (D1:105486528-105487493), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 56, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из His112, Asn209, Tyr265, Phe88, Phe111, Met170, Met206, Cys261, Ile264, Ser279, Ile280, и Thr283.
61. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catG7 (B3:74116955-74117893), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 57, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Met81, Tyr258, Gln100, Thr77, Lys269, Leu104, Thr276, Val277, His73, Val273 и Val78.
62. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catG8 (E3:40237904-40238842), содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 58, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Met81, Leu101, Phe104, Leu105, Gly108, Glu180, Val202, Phe206, Tyr259, и Lys272.
63. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой кошачий обонятельный рецептор catG9 (D1:105462554-105463512) содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 59, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Tyr79, Lys278, Phe110, Val111, Gly114, Val208, Ile212, Phe258, Ala261, Leu262, Tyr265, Val282, и Ser285.
64. Способ по любому из пп. 47-54, где обонятельный рецептор представляет собой собачий обонятельный рецептор CafaOR5.2.5, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ ID NO: 50, и где одна или более аминокислот обонятельного рецептора выбраны из группы, состоящей из Tyr263, Tyr77, Phe108, Val112, Ser116, Val206, Asp210, Phe256 и Thr283.
65. Способ по любому из пп. 47-64, где взаимодействие определют путем сайт-направленного мутагенеза, рентгеновской кристаллографии, рентгеновской спектроскопии, ядерного магнитного резонанса (ЯМР), оценки перекрестного связывания, масс-спектроскопии, электрофореза, анализа методом смещения и их комбинации.
66. Способ идентификации соединения, способного модулировать активность обонятельного рецептора, где указанный способ включает:
(a) контактирование агониста обонятельного рецептора с обонятельным рецептором,
(b) измерение первой активности обонятельного рецептора,
(c) контактирование тестируемого агента с обонятельным рецептором,
(d) измерение второй активности обонятельного рецептора, и
(e) определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если первая активность больше или меньше, чем вторая активность.
67. Способ отбора корма для домашних питомцев или его компонента, включающий
(a) измерение первой активности обонятельного рецептора,
(b) контактирование тестируемого агента с обонятельным рецептором,
(c) измерение второй активности обонятельного рецептора после контактирования с тестируемым агентом, и
(d) выбор тестируемого агента как корма для домашних питомцев или его компонента, если вторая активность обонятельного рецептора увеличивается или уменьшается по сравнению с первой активностью обонятельного рецептора.
68. Способ по п. 66 или 67, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, указанных в SEQ ID NO: 61-3808.
69. Способ по п. 66 или 67, где обонятельный рецептор представляет собой собачий или кошачий обонятельный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 41-60.
70. Способ по п. 66, где агонист обонятельного рецептора выбран из группы, состоящей из трифернала, изовалериановой кислоты, 3-метил-2-гексановой кислоты, альфа-ионона, гексилацетата, амилмеркаптана, гелионаля, пара-анисальдегида, 4-этоксибензальдегида, ментола, метилэвгенола, метилсалицилата, фенилацетальдегида, бета-ионона, амилацетата, нонанетиола, ацетофенона, кумарина, лилиаля, мета-анисальдегида, 4-метилвалериановой кислоты, пентанола, аллилфенилацетата, гексановой кислоты, альфа-ионона, цитраля, изоамилацетата, октантиола, пропиофенона, 7-метоксикумарина и их комбинаций.
50
71. Композиция по любому из пп. 44-47 и 66-69, где тестируемый агент имеет величину EC не более чем приблизительно 200 мкΜ.
72. Композиция по любому из пп. 44-47 и 66-69, где тестируемый агент имеет величину Emax не менее, чем приблизительно 2,0.
73. Композиция по любому из пп. 44-47, где стадия (с) включает определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если активность обонятельного рецептора снижается после его контактирования с тестируемым агентом.
74. Композиция по любому из пп. 44-47, где стадия (с) включает определение того факта, что тестируемый агент является соединением, способным модулировать активность обонятельного рецептора, если активность обонятельного рецептора увеличивается после его контактирования с тестируемым агентом.