ДИФФЕРЕНЦИРОВКА ЭМБРИОНАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА В ПАНКРЕАТИЧЕСКИЕ ЭНДОКРИННЫЕ КЛЕТКИ

1. Способ индукции экспрессии инсулина в клетках, экспрессирующих гормоны, включающий культивирование клеток панкреатической энтодермы с эфриновым лигандом.
2. Способ по п. 2, в котором культивирование клеток панкреатической энтодермы с эфриновым лигандом также усиливает экспрессию ΝΚΧ6.1.
3. Способ по п. 2, в котором культивирование клеток панкреатической энтодермы с эфриновым лигандом усиливает экспрессию инсулина и ΝΚΧ6.1 в клетках панкреатической энтодермы по сравнению с экспрессией инсулина и ΝΚΧ6.1 в необработанных клетках панкреатической энтодермы.
4. Способ по п. 3, в котором клетки панкреатической энтодермы, по существу, не экспрессируют CDX2 или SOX2.
5. Способ по п. 4, в котором клетки панкреатической энтодермы экспрессируют приблизительно менее 10% CDX2 или SOX2.
6. Способ по любому из пп. 1-5, в котором эфриновым лигандом является эфрин A3 или эфрин A4.
7. Способ по п. 6, в котором клетки панкреатической энтодермы получают путем поэтапной дифференцировки плюрипотентных стволовых клеток.
8. Способ по п. 7, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные плюрипотентные стволовые клетки человека.
9. Клетки, экспрессирующие инсулин и ΝΚΧ6.1, полученные способом по п. 1.
10. Популяция клеток, полученная путем культивирования клеток панкреатической энтодермы с эфриновым лигандом, причем популяция клеток экспрессирует повышенные количества инсулина и ΝΚΧ6.1 по сравнению с клетками панкреатической энтодермы, не обработанными эфриновым лигандом.
11. Популяция клеток по п. 10, где эфриновым лигандом является эфрин A3 или эфрин A4.
12. Способ повышения экспрессии соматостатина в клетках, экспрессирующих гормоны, включающий культивирование клеток панкреатической энтодермы в среде, содержащей активин А или активин С.
13. Способ по п. 12, в котором подавлена экспрессия инсулина, глюкагона и грелина.
14. Способ по п. 12, в котором популяция клеток панкреатической энтодермы, обработанных активином А или активином С, экспрессирует больше соматостатина, чем популяция клеток панкреатической энтодермы, не обработанных активином А или активином С.
15. Способ по п. 14, в котором экспрессия инсулина подавлена в популяции клеток панкреатической энтодермы, обработанных активином А или активином С, по сравнению с экспрессией инсулина в популяции клеток панкреатической энтодермы, не обработанных активином А или активином С.
16. Способ по п. 12, в котором экспрессия глюкагона подавлена в популяции клеток панкреатической энтодермы, обработанных активином А или активином С, по сравнению с экспрессией глюкагона в популяции клеток панкреатической энтодермы, не обработанных активином А или активином С.
17. Способ по п. 12, в котором экспрессия грелина подавлена в популяции клеток панкреатической энтодермы, обработанных активином А или активином С, по сравнению с экспрессией грелина в популяции клеток панкреатической энтодермы, не обработанных активином А или активином С.
18. Способ по любому из пп. 12-17, в котором клетки панкреатической энтодермы, по существу, не экспрессируют CDX2 или SOX2.
19. Способ по п. 18, в котором клетки панкреатической энтодермы, обработанные активином А или активином С, получают путем поэтапной дифференцировки плюрипотентных клеток.
20. Способ по п. 19, в котором плюрипотентные клетки, из которых получают клетки панкреатической энтодермы, являются эмбриональными плюрипотентными клетками человека.
21. Способ повышения экспрессии NKX6.1 путем обработки клеток панкреатической энтодермы средой, содержащей семафорин 3А или эпиген.
22. Способ по п. 21, в котором популяция клеток панкреатической энтодермы, обработанная средой, содержащей семафорин 3А или эпиген, экспрессирует повышенное количество NKX6.1 по сравнению с клетками панкреатической энтодермы, не обработанными средой, содержащей семафорин 3А или эпиген.
23. Способ по п. 21, в котором уровень экспрессии инсулина, глюкагона и грелина не изменяется в клетках панкреатической энтодермы, обработанных средой, содержащей семафорин 3А или эпиген, по сравнению с клетками панкреатической энтодермы, не обработанными средой, содержащей семафорин 3А или эпиген.
24. Способ индукции формирования эндокринных кластеров, включающий культивирование панкреатических эндокринных клеток с агонистом рецептора сфингозина-1.
25. Способ по п. 24, в котором для обработки панкреатических эндокринных клеток в качестве агониста рецептора сфингозина-1 используют сфингозин-1-фосфат (S1P).
26. Способ по п. 24, в котором панкреатические эндокринные клетки получают путем поэтапной дифференцировки плюрипотентных стволовых клеток.
27. Способ по п. 26, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные плюрипотентные стволовые клетки человека.