ЖИВОТНЫЕ, НЕ ЯВЛЯЮЩИЕСЯ ЧЕЛОВЕКОМ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЕ ЭКЗОГЕННУЮ ТЕРМИНАЛЬНУЮ ДЕЗОКСИНУКЛЕОТИДИЛТРАНСФЕРАЗУ

1. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, геном которого содержит:
последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT), функционально связанную с элементом контроля транскрипции; и
вариабельную область иммуноглобулина, содержащую нереаранжированные сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека, функционально связанные с геном константной области иммуноглобулина.
2. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 1, отличающееся тем, что элемент контроля транскрипции регулирует экспрессию последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей экзогенную TdT в про-В-клетках и/или пре-В-клетках.
3. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 2, отличающееся тем, что элемент контроля транскрипции выбран из группы, состоящей из элемента контроля транскрипции RAG1, элемента контроля транскрипции RAG2, элемента контроля транскрипции тяжелой цепи иммуноглобулина, элемента контроля транскрипции легкой κ-цепи иммуноглобулина и/или элемента контроля транскрипции легкой λ-цепи иммуноглобулина.
4. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая экзогенную TdT, расположена в локусе легкой κ-цепи иммуноглобулина, локусе легкой λ-цепи иммуноглобулина, локусе тяжелой цепи иммуноглобулина, локусе RAG1, локусе RAG2.
5. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 1-4, отличающееся тем, что по меньшей мере 10% V-J-соединений легкой цепи иммуноглобулина у указанного животного содержат нематричные присоединения.
6. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, что сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека представляют собой сегменты гена вариабельной области тяжелой цепи человека.
7. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 6, отличающееся тем, что ген константной области представляет собой ген константной области тяжелой цепи.
8. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 7, отличающееся тем, что ген константной области тяжелой цепи имеет эндогенное происхождение.
9. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 6-8, отличающееся тем, что гены вариабельной области иммуноглобулина и константной области иммуноглобулина расположены в эндогенном локусе тяжелой цепи иммуноглобулина.
10. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 6-9, геном которого дополнительно содержит вариабельную область иммуноглобулина, содержащую нереаранжированные сегменты гена вариабельной области легкой цепи человека, функционально связанные со вторым геном константной области иммуноглобулина.
11. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 10, отличающееся тем, что вариабельная область иммуноглобулина, функционально связанная со вторым геном константной области иммуноглобулина, расположена в эндогенном локусе легкой цепи иммуноглобулина.
12. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 11, отличающееся тем, что сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека, функционально связанные со вторым геном константной области иммуноглобулина, представляют собой сегменты гена вариабельной области κ-цепи человека.
13. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 11, отличающееся тем, что сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека, функционально связанные со вторым геном константной области иммуноглобулина, представляют собой сегменты гена вариабельной области λ-цепи человека.
14. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 11-13, отличающееся тем, что второй ген константной области представляет собой ген константной области κ-цепи.
15. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 11-13, отличающееся тем, что второй ген константной области представляет собой ген константной области λ-цепи.
16. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 14, отличающееся тем, что ген константной области κ-цепи имеет эндогенное происхождение.
17. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 15, отличающееся тем, что ген константной области λ-цепи имеет эндогенное происхождение.
18. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 16, отличающееся тем, что эндогенный локус легкой цепи иммуноглобулина является локусом κ-цепи иммуноглобулина.
19. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 17, отличающееся тем, что эндогенный локус легкой цепи иммуноглобулина является локусом λ-цепи иммуноглобулина.
20. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 1-19, отличающееся тем, что нереаранжированные сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека подвергаются реаранжировке при развитии В-клеток с получением реаранжированных генов вариабельной области в В-клетках животного, не являющегося человеком.
21. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 20, отличающееся тем, что по меньшей мере 10% реаранжированных генов вариабельных областей содержат нематричные присоединения.
22. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, геном которого содержит:
последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT), функционально связанную с элементом контроля транскрипции; и
вариабельную область Т-клеточного рецептора (TCR), содержащую нереаранжированные сегменты гена вариабельной области TCR человека, функционально связанные с геном константной области TCR.
23. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 22, отличающееся тем, что сегменты гена вариабельной области TCR человека представляют собой сегменты гена вариабельной области TCRα человека.
24. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 22, отличающееся тем, что сегменты гена вариабельной области TCR человека представляют собой сегменты гена вариабельной области TCRβ человека.
25. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 22-24, отличающееся тем, что нереаранжированные сегменты гена вариабельной области TCR человека подвергаются реаранжировке при развитии Т-клеток с получением реаранжированных генов вариабельной области TCR в Т-клетках животного, не являющегося человеком.
26. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 25, отличающееся тем, что по меньшей мере 10% реаранжированных генов вариабельных областей содержат нематричные присоединения.
27. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, геном которого содержит:
последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT), функционально связанную с элементом контроля транскрипции; и
вариабельную область иммуноглобулина, содержащую нереаранжированные сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека, функционально связанные с геном константной области TCR.
28. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 27, отличающееся тем, что сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека представляют собой сегменты гена тяжелой цепи.
29. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 27, отличающееся тем, что сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека представляют собой сегменты гена κ-цепи.
30. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 27, отличающееся тем, что сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека представляют собой сегменты гена λ-цепи.
31. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 28-29, отличающееся тем, что ген константной области TCR представляет собой ген константной области TCRα.
32. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 28, отличающееся тем, что ген константной области TCR представляет собой ген константной области TCRβ.
33. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 22-32, отличающееся тем, что элемент контроля транскрипции регулирует экспрессию последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей экзогенную TdT, в двойных отрицательных (DN) CD4/CD8 тимоцитах и/или двойных положительных (DP) CD4/CD8 тимоцитах.
34. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 33, отличающееся тем, что элемент контроля транскрипции представляет собой элемент контроля транскрипции RAG1, элемент контроля транскрипции RAG2, элемент контроля транскрипции TCRα, элемент контроля транскрипции TCRβ, элемент контроля транскрипции TCRγ и/или элемент контроля транскрипции TCRδ.
35. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 22-34, отличающееся тем, что последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая экзогенную TdT, расположена в локусе RAG1, локусе RAG2, локусе цепи TCRα, локусе цепи TCRβ, локусе цепи TCRγ и/или локусе цепи TCRδ.
36. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 1-35, отличающееся тем, что животное, не являющееся человеком, является млекопитающим.
37. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 36, отличающееся тем, что млекопитающее является грызуном.
38. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по п. 37, отличающееся тем, что грызун является крысой или мышью.
39. Способ, индуцирующий экспрессию антитела, содержащего вариабельный домен человека, причем указанный способ включает воздействие антигена на генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 1-21, так что генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, продуцирует антитело, содержащее вариабельный домен человека, специфичный по отношению к антигену.
40. Способ получения Т-клетки, экспрессирующей Т-клеточный рецептор (TCR), содержащий вариабельный домен человека, специфичный по отношению к пептиду, презентированному на МНС, причем указанный способ включает:
(а) воздействие антигена, содержащего пептид, или нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген, содержащий пептид, на генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 22-26, так что указанный пептид презентируется на MHC в организме животного, не являющегося человеком; и
(b) получение Т-клетки, экспрессирующей TCR, специфичный по отношению к пептиду, презентируемому на MHC, из генетически модифицированного животного, не являющегося человеком, по (a).
41. Способ получения Т-клетки, экспрессирующей химерный рецептор антигена (CAR), содержащий вариабельный домен иммуноглобулина человека и константный домен иммуноглобулина, специфичный по отношению к пептиду, презентированному на МНС, причем указанный способ включает:
(а) воздействие антигена, содержащего пептид, или нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген, содержащий пептид, на генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, по любому из пп. 27-32, так что указанный пептид презентируется на MHC в организме животного, не являющегося человеком; и
(b) получение Т-клетки, экспрессирующей CAR, специфичный по отношению к пептиду, презентируемому на MHC, из генетически модифицированного животного, не являющегося человеком, по (a).
42. ЭС-клетка генетически модифицированного животного, не являющегося человеком, геном которой содержит:
последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT); и
вариабельную область иммуноглобулина, содержащую нереаранжированные сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека, функционально связанные с геном константной области иммуноглобулина.
43. ЭС-клетка генетически модифицированного животного, не являющегося человеком, геном которой содержит:
последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT); и
вариабельную область Т-клеточного рецептора (TCR), содержащую нереаранжированные сегменты гена вариабельной области TCR человека, функционально связанные с геном константной области TCR.
44. ЭС-клетка генетически модифицированного животного, не являющегося человеком, геном которой содержит:
последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT); и
вариабельную область иммуноглобулина, содержащую нереаранжированные сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека, функционально связанные с геном константной области TCR.
45. Способ получения генетически модифицированного животного, не являющегося человеком, включающий применение ЭС-клетки генетически модифицированного животного, не являющегося человеком, по любому из пп. 42-44.
46. Способ получения животного, не являющегося человеком, включающий генетическую инженерию животного, не являющегося человеком, с целью внедрения в его зародышевую линию
последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT); и
вариабельной области иммуноглобулина, содержащей нереаранжированные сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека, функционально связанные с геном константной области иммуноглобулина.
47. Способ получения животного, не являющегося человеком, включающий генетическую модификацию, включающую инженерию животного, не являющегося человеком, с целью внедрения в его зародышевую линию
последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT); и
вариабельной области Т-клеточного рецептора (TCR), содержащей нереаранжированные сегменты гена вариабельной области TCR человека, функционально связанные с геном константной области TCR.
48. Способ получения животного, не являющегося человеком, включающий генетическую модификацию, включающую инженерию животного, не являющегося человеком, с целью внедрения в его зародышевую линию
последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT); и
вариабельной области иммуноглобулина, содержащей нереаранжированные сегменты гена вариабельной области иммуноглобулина человека, функционально связанные с геном константной области TCR.
49. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, ЭС-клетка животного, не являющегося человеком, или способ по любому из предшествующих пунктов, в которых терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза (TdT) представляет собой TdT человека.
50. Генетически модифицированное животное, не являющееся человеком, ЭС-клетка животного, не являющегося человеком, или способ по любому из предшествующих пунктов, в которых терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза (TdT) представляет собой короткую изоформу TdT (TdTS).