НОВЫЕ АЗАЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ
NEW AZACYCLIC COMPOUNDS

Настоящее изобретение относится к органическим соединениям, которые можно применять для лечения и профилактики ряда заболеваний у млекопитающих, в частности, к ингибиторам гормончувствительной липазы (HSL), предназначенных для лечения диабета, метаболического синдрома или тучности.
Настоящее изобретение предлагает новое соединение формулы (I)
в которой
1
R представляет собой алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкилалкил, галогеналкил, амино-группу, аминоалкил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, фенил, пиридинил, пиразинил, пиримидил или пиридазинил,
или же указанные пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, фенил, пиридинил, пиразинил, пиримидил и пиридазинил содержат от одного до трех заместителей, независимо выбранных из группы, включающей алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкилалкил, галоген, галогеналкил, гидрокси-группу, гидроксиалкил, алкокси-группу, алкоксиалкил, галогеналкокси-группу и гидроксигалогеналкил,
или указанные амино-группа и аминоалкил содержат при атоме азота один или два заместителя, независимо выбранных из группы, включающей алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкилалкил, гидроксиалкил и алкоксиалкил;
2
R представляет собой фенил, пиридинил, пиразинил, пиримидил или пиридазинил,
или указанные фенил, пиридинил, пиразинил, пиримидил и пиридазинил содержат от одного до трех заместителей, независимо выбранных из группы, включающей алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкилалкил, галоген, галогеналкил, гидрокси-группу, гидроксиалкил, алкокси-группу, алкоксиалкил, галогеналкокси-группу и гидроксигалогеналкил;
3
R представляет собой водород, алкил, циклоалкил или галогеналкил;
2
n
2
А представляет собой -(CH)-, -C(O)- или S(O)-;
n равно нулю, 1 или 2;
или его фармацевтически приемлемые соли.
Главная физиологическая роль белой жировой ткани (WAT) - снабжать другие ткани энергией, когда в этом возникает необходимость. У млекопитающих белая жировая ткань является главным энергетическим депо, аккумулирующим запасы топлива в форме триацилглицеридов (TAG) в периоды избытка энергии. Высвобождение свободных жирных кислот (FFA) из TAG стимулируется катехоламинами и регулируется гормонами, такими как инсулин, глюкагон и эпинефрин. Наиболее важным ферментом в WAT, который считается ответственным за гормонрегулируемый гидролиз триглицеридов, является гормончувствительная липаза (HSL).
Разрегулирование адипоцитозного липолиза, приводящее к повышенному уровню циркулирующих неэстерифицированных жирных кислот (NEFA), связано с тучностью и сопутствующими заболеваниями, включая развитие диабета 2 типа. У тучных или инсулин-резистентных пациентов увеличено депо висцеральной жировой ткани. В таких депо повышен уровень белка HSL, и они проявляют повышенную липолитическую активность, в связи с их устойчивостью к инсулин-зависимому подавлению липолиза. Это приводит к повышению уровня в плазме крови свободных жирных кислот (FFA), что в дальнейшем еще больше усиливает инсулиновую резистентность из-за накопления триглицеридов в других тканях, отличных от WAT, таких как печень, поджелудочная железа и мышцы. Таким образом, повышенный уровень FFA в плазме крови, обусловленный повышенной активностью HSL, вносит свой вклад в инсулиновую резистентность и усугубляет ее у пациентов, страдающих тучностью и диабетом 2 типа. Нормализация повышенного уровня в крови FFA и триглицеридов за счет ингибирования HSL будет уменьшать накопление триглицеридов в тканях, отличных от WAT, таких как печень, мышцы и поджелудочная железа, что приведет к снижению продукции глюкозы печенью, более интенсивному окислению жирных кислот в мышцах и улучшению функции р-клеток.
Имеется также связь между повышенным уровнем FFAs и повышенным риском сердечно-сосудистых заболеваний, включая атеросклероз и дисфункцию миокарда. Кроме того, высокая липолитическая активность и повышенный уровень FFAs приводит к инсулиновой резистентности и повышенному артериальному давлению у крыс с гипертензией. FFA накапливаются в печени, что приводит к повышенной продукции TAG, которые поступают внутрь секретируемых липопротеинов очень низкой плотности (VLDL). Следовательно, при уменьшении активности HSL будет снижаться высвобождение FFA в кровь, что будет ограничивать поступление в печень FFA, вовлекаемых в синтез TAG. Таким образом, ингибиторы HSL могут обладать полезным действием, например оказывать терапевтический эффект при неалкогольной жировой дистрофии печени (NAFLD) и неалкогольного стеатогепатита (NASH).
Объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) и его упомянутые ранее соли и эфиры; их применение в качестве терапевтически активных веществ; способ изготовления указанного соединения, промежуточных продуктов, фармацевтических композиций, лекарственных препаратов, содержащих указанное соединение, его фармацевтически приемлемые соли или эфиры; применение указанного соединения, солей или эфиров для лечения или профилактики заболеваний, в частности для лечения или профилактики диабета, метаболического синдрома, дислипидемии, атеросклероза, тучности, сердечнососудистых заболеваний, дисфункции миокарда, воспаления, неалкогольной жировой дистрофии печени или неалкогольного стеатогепатита; а также применение указанного соединения, солей или эфиров в изготовлении лекарственных препаратов для лечения или профилактики диабета, метаболического синдрома, дислипидемии, атеросклероза, тучности, сердечнососудистых заболеваний, дисфункции миокарда, воспаления, неалкогольной жировой дистрофии печени или неалкогольного стеатогепатита.
Термин "алкил", отдельно или в комбинации, обозначает алкил с неразветвленной или разветвленной цепью, включающий от 1 до 8 атомов углерода, в частности, от 1 до 6 атомов углерода или же, в частности, от 1 до 4 атомов углерода. Примерами являются метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, метилбутил, диметилпропил, этилпропил, н-гексил, метилпентил, диметилбутил, триметилпропил и этилметилпропил. В частности, примерами являются метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил и диметилпропил.
Термин "циклоалкил", отдельно или в комбинации, обозначает циклоалкильное кольцо, включающее 3-8 атомов углерода, в частности, 3-6 атомов углерода. Примерами являются циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. В частности, примером является циклопропил.
Термин "алкилциклоалкил", отдельно или в комбинации, обозначает циклоалкильную группу, в которой один или более атомов водорода замещены алкилом. Примерами являются метил-циклопропил, диметил-циклопропил, метил-циклобутил, диметил-циклобутил, метил-циклопентил, диметил-циклопентил, метил-циклогексил и диметил-циклогексил. В частности, примерами являются метил-циклопропил и диметил-циклопропил.
Термин "циклоалкилалкил", отдельно или в комбинации, обозначает алкил, в котором один или более атомов водорода замещены на циклоалкил. Примерами являются циклопропилметил, циклопропилэтил, циклобутилметил, циклобутилэтил, циклопентилметил, циклопентилэтил, циклогексилметил, циклогексилэтил, циклогептилметил, цикл огептил этил, циклооктилметил и циклооктилэтил. В частности, примерами являются циклопропилметил, циклопропилэтил, циклобутилметил и циклобутилэтил.
Термин "алкилциклоалкилалкил", отдельно или в комбинации, обозначает алкил, в котором один или более атомов водорода замещены на алкилциклоалкил. Примерами являются метил-циклопропилметил, диметил-циклопропилметил, метил-циклопропилэтил, диметил-циклопропилэтил, метил-циклобутилметил, диметил-циклобутилметил, метил-циклобутилэтил, диметил-циклобутилэтил, метил-циклопентилметил, диметил-циклопентилметил, метил-циклопентилэтил, диметил-циклопентилэтил, метил-циклогексилметил, диметил-циклогексил метил, метил-циклогексилэтил, диметил-циклогексилэтил, метил-циклогептилметил, диметил-циклогептилметил, метил-циклогептилэтил, диметил-циклогептилэтил, метил-циклооктилметил, диметил-циклооктилметил, метил-циклооктилэтил и диметил-циклооктилэтил.
Термин "гидрокси ", отдельно или в комбинации, обозначает группу -OH. Термин "гидроксиалкил", отдельно или в комбинации, обозначает алкил, раскрытый ранее, в котором один или более атомов водорода замещены гидроксигруппой. Примерами гидроксиалкила являются гидроксиметил, гидроксиэтил, гидроксипропил, гидроксиметилпропил и дигидроксипропил. В частности, примерами являются гидроксиэтил и гидроксиметилпропил.
Термин "алкокси", отдельно или в комбинации, обозначает группу формулы -O-алкил, в которой термин алкил имеет значение, раскрытое ранее. Примерами являются метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси.
Термин "алкоксиалкил", отдельно или в комбинации, обозначает алкил, раскрытый ранее, в котором один или более атомов водорода замещены алкоксигруппой. Примерами являются метоксиметил, этоксиметил, метоксиметил, этоксиэтил, метоксипропил и этоксипропил.
Термин "галоген", отдельно или в комбинации, обозначает фтор, хлор, бром или иод. В частности, примерами являются фтор или хлор.
Термин "галогеналкил", отдельно или в комбинации, обозначает алкил, раскрытый ранее, в котором один или более атомов водорода замещены галогеном. Примерами галогеналкила являются фторметил, дифторметил, трифторметил, трифторэтил, трифторметилэтил или пентафторэтил. В частности, примером является трифторэтил.
Термин "галогеналкокси", отдельно или в комбинации, обозначает алкоксигруппу, раскрытую ранее, в которой один или более атомов водорода замещены галогеном. Примерами галогеналкокси-групп являются фторметокси-, дифторметокси-, трифторметокси-, трифторэтокси-, трифторметилэтокси-, трифтордиметилэтокси- или пентафторэтокси-группы. В частности, примерами являются трифторметокси- и трифторметилэтокси-группы.
Термин "гидроксигалогеналкил", отдельно или в комбинации, обозначает алкил, раскрытый ранее, в котором один или более алкильных атомов водорода замещены гидрокси-группой, и в котором один или более алкильных атомов водорода замещены галогеном, причем термины «гидрокси-группа» и «галоген» имеют значение, раскрытое выше. Примерами гидроксигалогеналкила являются гидрокситрифторэтил, гидрокситрифторпропил, гидроксигексафторпропил.
2
Термин "амино", употребляемый отдельно, обозначает группу -NH.
Термин "аминоалкил", отдельно или в комбинации, обозначает алкил, раскрытый ранее, в котором один или более атомов водорода замещены аминогруппой. Примерами аминоалкила являются аминометил, аминоэтил, аминопропил и аминометилпропил. В частности, примерами являются аминоэтил и аминопропил.
Термин "карбонил", отдельно или в комбинации, обозначает группу -C(O)-.
2
Термин "сульфонил", отдельно или в комбинации, обозначает группу -S(O)-.
Термин "защитная группа" относится к группам, которые применяются для блокирования реакционной способности функциональных групп, таких как аминогруппы или гидрокси-группы. Примерами защитных групп являются трет-бутоксикарбонил (Boc), бензилоксикарбонил (Cbz), флуоренилметоксикарбонил (Fmoc) или бензил (Bn). В частности, защитной группой является трет-бутоксикарбонил (Boc).
Отщепление защитных групп можно проводить стандартными способами, известными специалисту в данной области техники, такими как гидрогенирование, или же в присутствии кислоты, например HCl или TFA, или основания, например триэтиламина.
Термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к таким солям, которые сохраняют биологическую активность и свойства свободных оснований или свободных кислот, и которые не являются неприемлемыми с биологической или иной точки зрения. Такие соли образуются при участии неорганических кислот, таких как хлороводородная кислота, бромоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., в частности хлороводородная кислота, и органических кислот, таких как уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, н-ацетилцистеин и т.п. Кроме того, эти соли можно получить путем добавления неорганического или органического основания к свободной кислоте. Соли, полученные при участии неорганических оснований, включают, без ограничения, соли натрия, калия, лития, аммония, кальция, магния и т.п. Соли, полученные при участии неорганических оснований, включают, без ограничения, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, включая природные замещенные амины, циклические амины и основные ионно-обменные смолы, такие как изопропиламиновые, триметиламиновые, диэтиламиновые, триэтиламиновые, трипропиламиновые, этаноламиновые, лизиновые, аргининовые, н-этилпиперидиновые, пиперидиновые, полииминовые смолы и т.п. В частности, фармацевтически приемлемыми солями соединения формулы (I) являются гидрохлоридные соли, соли метансульфоновой кислоты и лимонной кислоты.
Соединение формулы (I) можно также сольватировать, например гидратировать. Сольватирование можно осуществлять в ходе процесса изготовления, или оно может происходить, например, как следствие гигроскопических свойств изначально безводного соединения формулы (I) (гидратация). Термин «фармацевтически приемлемые соли» также включает физиологически приемлемые сольваты.
"Фармацевтически приемлемые эфиры" обозначает, что соединение общей формулы (I) можно дериватизировать по функциональным группам с получением производных, которые способны превращаться in vivo обратно в соединение-предшественник. Примеры таких соединений включают физиологически приемлемые и метаболически лабильные эфирные производные, такие как метоксиметиловые эфиры, метилтиометиловые эфиры и пивалоилоксиметиловые эфиры. Кроме того, объемом настоящего изобретения охвачены любые физиологически приемлемые эквиваленты соединения общей формулы (I), равно как и метаболически лабильные эфиры, способные давать соединение-предшественник общей формулы (I) in vivo.
Соединение формулы (I) может содержать несколько асимметрических центров и может присутствовать в форме оптически чистых энантиомеров, смесей энантиомеров, например в форме рацематов, оптически чистых диастереомеров, смесей диастереомеров, диастереомерных рацематов или смесей диастереомерных рацематов.
Согласно правилу Канна-Ингольда-Прелонга ассиметрический атом углерода может иметь конфигурацию "R" или "S".
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретение является соединение формулы (I), раскрытое выше, а также его фармацевтически приемлемые соли или эфиры, в частности соединение формулы (I), описанное выше и его фармацевтически приемлемые соли, в частности, соединение формулы (I), раскрытое выше.
1
Еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой алкил, циклоалкил, галогеналкил, пиразолил, фенил или пиридинил,
или же в которой указанные пиразолил, фенил и пиридинил содержат от одного до трех заместителей, независимо выбранных из группы, включающей алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, галоген, галогеналкил, гидрокси-группу, гидроксиалкил, алкокси-группу, алкоксиалкил, галогеналкокси-группу и гидроксигалогеналкил.
1
В частности, одним из вариантов настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой алкил, циклоалкил, галогеналкил, пиразолил, фенил или пиридинил,
или в котором указанные пиразолил, фенил и пиридинил содержат от одного до трех заместителей, независимо выбранных из группы, включающей алкил, галоген и галогеналкокси-группу.
1
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой алкил, циклоалкил, галогеналкил или фенил,
или же в котором указанные пиразолил, фенил и пиридинил содержат от одного до трех заместителей, независимо выбранных из группы, включающей алкил, галоген и галогеналкокси-группу.
1
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой алкил, циклоалкил, галогеналкил, фенил, замещенный пиразолил, замещенный фенил или замещенный пиридинил, причем указанные замещенный пиразолил, замещенный фенил и замещенный пиридинил содержат от одного до трех заместителей, независимо выбранных из группы, включающей алкил, галоген и галогеналкокси-группу.
1
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой алкил, пиразолил, замещенный одной алкильной группой, или фенил, замещенный одним атомом галогена.
1
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой 2,2-диметилпропил, 1-метил-1Н-пиразол-5-ил или хлорфенил.
2
Еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой фенил или пиридинил, или в котором указанные фенил и пиридинил содержат от одного до трех заместителей, независимо выбранных из группы, включающей алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, галоген, галогеналкил, гидрокси-группу, гидроксиалкил, алкокси-группу, алкоксиалкил, галогеналкокси и гидрокси галогеналкил.
2
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой фенил, содержащий от одного до трех заместителей, независимо выбранных из группы, включающей галогеналкил и галогеналкокси-группу.
2
Настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I), раскрытому выше, в котором R представляет собой 2,2,2-трифторэтилфенил, трифторметоксифенил или 1,1,1-трифтор-2-метилэтокси-группу.
3
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой водород, алкил или галогеналкил.
3
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой водород или алкил.
3
Еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором R представляет собой водород или метил.
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором A представляет собой -C(O)-.
2
В частности, еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором A представляет собой -S(O)-.
2
n
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, в котором A представляет собой -(CH)-.
Настоящее изобретение относится также к соединению формулы (I), раскрытому выше, в котором n равно 1.
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является также соединение формулы (I), раскрытое выше, соответствующее одной из формул (1a) или (1b), а также смесь таких соединений.
В частности, еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), раскрытое выше, соответствующее одной из формул (Ic) или (Id), а также смесь таких соединений.
В частности, примеры соединения формулы (I), раскрытого выше, выбирают из группы, включающей
(5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-8-(2-хлор-пиридин-3-сульфонил)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-трифторметокси-бензолсульфонил)-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-8-циклопропансульфонил-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-метил-пропан-1-сульфонил)-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-метил-2Н-пиразол-3-сульфонил)-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-8-(2,2-диметил-пропан-1-сульфонил)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-метил-2Н-пиразол-3-сульфонил)-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-6-метил-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6SR)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-6-метил-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он; и
(5RS,6SR)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1 -он.
В частности, примерами соединения формулы (I), раскрытого выше, являются также соединения, выбранные из группы, включающей
(5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-метил-2Н-пиразол-3-сульфонил)-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5RS,6RS)-8-(2,2-диметил-пропан-1-сульфонил)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он; и
(5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-метил-2Н-пиразол-3-сульфонил)-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он.
Объектом настоящего изобретения являются также способы получения соединения формулы (I), раскрытого выше.
Получение соединения формулы (I) по настоящему изобретению можно осуществлять последовательными или сходящимися путями синтеза. Синтезы по изобретению показаны в нижеследующих общих схемах. Навыки, необходимые для проведения реакций и очистки конечных продуктов, доступны специалистам в данной области техники. В случае если в процессе реакции получают смесь энантиомеров или диастереомеров, такие энантиомеры или диастереомеры можно разделять способами, раскрытыми в настоящем описании, или способами, известными специалисту в данной области техники, например, с помощью хиральной хроматографии или кристаллизации. Заместители и индексы, которые использованы в нижеследующем описании, имеют значение, раскрытое в данном тексте.
Схема 1 описывает синтез промежуточных веществ, которые используются в описанных ниже реакциях.
Схема 1
3
3
3
3
4
Исходное вещество, например коммерчески доступный метиловый эфир 1-бензил-3-оксопиперидин-4-карбоновой кислоты, обрабатывают подходящим основанием, таким как трет-бутоксид калия, в подходящем растворителе, например в DMF, после чего добавляют 1-бром-2-метоксиэтан с получением соединения общей формулы (II). Соединение общей формулы (II) можно либо восстанавливать до соединения общей формулы (III), в которой R представляет собой водород, с помощью подходящего восстанавливающего агента, например NaBH в метаноле, либо вводить в реакцию с подходящими реагентами с нуклеофильным центром на атоме углерода, например, с реактивами Гриньяра формулы RMgX, производными лития формулы RLi или цинковыми реагентами, с образованием соединения формулы (III), в которой R представляет собой алкил, циклоалкил или галогеналкил. Эти реакции проводят в подходящих растворителях, в условиях, известных специалисту в данной области техники.
Схема 2
1
4
Последующий синтез скелета 2-аза-спиро[4.5]декан-1-она можно осуществить, как показано на Схеме 2, путем обработки соединения общей формулы (III) с помощью соединения общей формулы (IX) и хлорида диметиалюминия в растворителе, например в толуоле, при температуре флегмы, с получением соединений общей формулы (IVa), (IVb) или их смеси. Как вариант, можно использовать диоксан в качестве растворителя и триметилалюминий в качестве металлоорганического реагента. Снятие защитной группы в стандартных условиях гидрогенирования дает соединения общей формулы (Va), (Vb) или их смесь. В ходе последующей реакции с соединением общей формулы (VI) в подходящем растворителе, таком как THF, метиленхлорид, DMF и т.п., в присутствии основания, такого как гидрид натрия, пиридин, триэтиламин или DMAP, получают соединения общей формулы (1a), (1b) или их смесь. Соединения общей формулы (1a), (1b) или их смесь, где А представляет собой -C(O)-, a Rпредставляет собой амино-группу или амино-группу, содержащую при атоме азота один заместитель, выбранный из группы, включающей алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкилалкил, гидроксиалкил и алкоксиалкил, можно получить из соединений общей формулы (Va), (Vb) или их смеси, а также из соединения общей формулы (VII), в которой R представляет собой алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкилалкил, гидроксиалкил или алкоксиалкил. Соединение общей формулы (VIII) можно использовать в реакции совместно с подходящим конденсирующим агентом, таким как EDC, ВОР и т.п., в растворителях, таких как THF, ацетонитрил, и основания, такого как, например, основание Хунига, триэтиламин, или DMAP, с получением соединений общей формулы (1a), (lb) или их смеси, где А представляет собой -C(O)-.
3
Еще одна последовательность реакций для получения соединения общей формулы (I) представлена на схеме 3. Соединение общей формулы (I), в которой R представляет собой H, можно окислять различными окислителями, такими как оксалилхлорид/DMSO/аминовое основание, TEMPO/NaOCl или многие другие окислители, в подходящих условиях, с получением соединения общей формулы (X). Последующее превращение соединения общей формулы (C) в соединения общей формулы (I) можно осуществлять так же, как описано выше.
Схема 3
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является также способ получения соединения формулы (I), раскрытого выше
включающий реакцию
a) соединения формулы (V) в присутствии соединения формулы (VI);
2
n
2
2
n
2
2
2
n
1
2
3
в частности, в присутствии основания, например, гидрида натрия, в случае если A представляет собой -(CH)-, и пиридина, в случае если A представляет собой -C(O)- или -S(O)-, в растворителе, например в THF, в случае если A представляет собой -(CH)-, или в пиридине, в случае если A представляет собой -C(O)- или -S(O)-, при температуре в интервале между -78°C и КТ, где R, R, R и A раскрыты выше, а X представляет собой галоген, в частности, хлор, в случае если A представляет собой -C(O)- или -S(O)-, и иод или бром, в случае если A представляет собой -(CH)-;
b) соединения формулы (V) в присутствии соединения формулы (VII);
2
3
4
1
в частности, в присутствии основания, например, основания Хунига или триэтиламина, в растворителе, например в THF или DMF, при температуре в интервале между КТ и 160°C, где R, R и R раскрыты выше, a R представляет собой амино-группу или аминоалкил, содержащий при атоме азота один заместитель, выбранный из группы, включающей алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкилалкил, гидроксиалкил и алкоксиалкил, и группа А представляет собой -C(O)-;
или
с) соединения формулы (V) в присутствии соединения формулы (VIII);
1
2
3
в частности, в присутствии конденсирующего реагента, в частности EDC или ВОР, и основания, например DMAP или триэтиламина, в растворителе, например в THF или ацетонитриле, где R, R, R и A раскрыты выше, и A представляет собой -C(O)-.
В частности, промежуточные продукты выбирают из группы, включающей этиловый эфир 1-бензил-4-(2-метокси-этил)-3-оксо-пиперидин-4-карбоновой кислоты;
этиловый эфир 1-бензил-3-гидрокси-4-(2-метокси-этил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты;
(5SR,6RS)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5SR,6RS)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-[-4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он;
(5SR,6RS)-6-гидрокси-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он; и
этиловый эфир 1-бензил-3-гидрокси-4-(2-метокси-этил)-3-трифторметил-пиперидин-4-карбоновой кислоты.
Объектом настоящего изобретения является также соединение формулы (I), описанное выше, если оно получено по любому из раскрытых способов.
Объектом настоящего изобретения является также соединение формулы (I), раскрытое выше, предназначенное для применения в качестве терапевтически активного вещества.
Аналогичным образом, объектом настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, включающие соединение формулы (I), раскрытое выше, и терапевтически инертный носитель.
Объектом настоящего изобретения является также соединение формулы (I), описанное выше, предназначенное для изготовления лекарственных препаратов для лечения или профилактики заболеваний, вызванных расстройствами, связанными, например, с ферментом гормончувствительной липазой.
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), описанное выше, предназначенное для изготовления лекарственных препаратов для лечения или профилактики диабета, метаболического синдрома, дислипидемии, атеросклероза или тучности.
Кроме того, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), описанное выше, предназначенное для изготовления лекарственных препаратов для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, дисфункции миокарда, воспаления, неалкогольной жировой дистрофии печени или неалкогольного стеатогепатита.
Еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является, в частности, соединение формулы (I), описанное выше, предназначенное для изготовления лекарственных препаратов для лечения или профилактики диабета.
Кроме того, еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение формулы (I), описанное выше, предназначенное для изготовления лекарственных препаратов для лечения или профилактики диабета II типа.
Настоящее изобретение относится также к применению соединения формулы (I), раскрытого выше, в изготовлении лекарственных препаратов для лечения или профилактики диабета, метаболического синдрома, дислипидемии, атеросклероза или тучности.
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является также применение соединения формулы (I), раскрытого выше, в изготовлении лекарственного препарата для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, дисфункции миокарда, воспаления, неалкогольной жировой дистрофии печени или неалкогольного стеатогепатита.
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является применение соединения формулы (I), раскрытого выше, в изготовлении лекарственных препаратов для лечения или профилактики диабета.
Еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является применение соединения формулы (I), раскрытого выше, в изготовлении лекарственных препаратов для лечения или профилактики диабета II типа.
Кроме того, объектом настоящего изобретения является способ лечения или профилактики диабета, метаболического синдрома, дислипидемии, атеросклероза или тучности, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I), раскрытого выше.
Одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является также способ лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, дисфункции миокарда, воспаления, неалкогольной жировой дистрофии печени или неалкогольного стеатогепатита, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I), раскрытого выше.
В частности, одним из вариантов осуществления настоящего изобретения является способ лечения или профилактики диабета, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I), раскрытого выше.
Еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения является способ лечения или профилактики диабета II типа, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I), раскрытого выше.
Методы анализа
6
Получение человеческой полноразмерной гормончувствительной липазы-His:
6
6
6
1) Клонирование: получали к-ДНК из коммерчески доступной polyA+РНК мозга человека и использовали ее в качестве матрицы в ПЦР по методу перекрывающегося сплайсинг-расширения с получением полноразмерной человеческой HSL ORF с 3′-концевой гистидиновой меткой (His). Эту полноразмерную вставку клонировали в вектор pFast-BAC и верифицировали ДНК-последовательности от нескольких отдельных клонов. ДНК из подходящего полноразмерного клона, содержащую 3′-концевую His, использовали для трансформации штамма E.coli DH10BAC. Полученную бакмидную ДНК использовали для получения стока бакуловирусов с известным титром для генерации белка. Последовательность закодированной HSL соответствует элементу под номером Q05469 в базе Swissprot, с дополнительный C-концевой меткой His.
6
10
2) Очистка белка: Культура: 5.5 л, клетки High Five, экспрессирующие человеческую полноразмерную HSL-His, 48 ч, содержащая 25 мкмоль Е-64. Количество клеток: 1.78×10 клеток/мл, 90% жизнеспособность.
7
-1
-1
Клетки размораживали. Суспендировали клетки на льду в Основном Буфере следующего состава: 10% глицерин, 25 мМ Tris-Cl, 300 мМ NaCl, 10 мМ имидазол, 10 мМ 2-меркаптоэтанол, пепстатин 2 мкг/мл, леупептин 2 мкг/мл, антипаин 2 мкг/мл, pH 8.0, при 4°C, в конечном объеме 475 мл, содержащем 3.75×10 клеток/мл. Дезинфекцию проводили 3 раза по 30 сек., добавляли Lubrol РХ до конечной концентрации 0.2% с последующим перемешиванием в течение 15 мин при 4°C и центрифугированием при 25000×g, 60 мин, 4°C. Растворимые белки смешивали с 60 мл предварительно промытой и уравновешенной Ni-NTA агарозой (Qiagen 30210), после чего перемешивали вращением в течение 45 мин, 4°C и центрифугировали при 1000 об/мин 5 мин и оставляли для осаждения смолы на 5 мин. Супернатант удаляли, смолу промывали в сосуде для центрифугирования пятью объемами Основного Буфера, содержащего 0.2% Lubrol РХ. Снова центрифугировали, после чего супернатант отбрасывали. Смолу переливали на мембрану с диаметром пор 0.8 мкм в одноразовую ячейку для фильтрации (Nalge 450-0080) и промывали пятью объемами Основного Буфера, содержащего 0.2% Lubrol РХ. Затем ее промывали 30 объемами Основного Буфера, содержащего 60 мМ имидазол, pH 7.5, при 4°C. Белок элюировали пятью объемами буфера следующего состава: 25 мМ Tris-Cl, 300 мМ NaCl, 200 мМ имидазол, 10 мМ 2-меркаптоэтанол, pH 7.5, при 4°C, для чего смолу с буфером перемешивали вращением в течение 30 мин, 4°C. Смолу помещали в мембранную одноразовую ячейку для фильтрации с диаметром пор 0.2 мкм (Millipore SCGP U02 RE), и собирали элюат. Элюат концентрировали с помощью фильтрующей центрифуги 30k MWCO (Sartorius Vivascience Vivacell 100, VC1022) до 20 мл. Затем его диализовали в течение ночи при 4°C дважды против 2 л буфера следующего состава: 10% глицерин, 25 мМ Tris-Cl, 300 мМ NaCl, 0.2 мМ EDTA, 0.2 мМ DTT, pH 7.5, при 4°C. Белок фильтровали через одноразовую ячейку для фильтрования с диаметром пор 0.22 мкм (Millipore SCGP00525). Концентрацию белка вычисляли по поглощению при 280 нм, используя коэффициент: 280=0.67 см мг. Общий выход составил 235 мг. Белок хранили при -80°C.
Анализ ингибирования фермента гормончувствительной липазы (HSL) человека:
Ферментную активность HSL измеряли в ходе колориметрического анализа с использованием 2,3-димеркапто-1-пропанол трибутирата (Aldrich, St. Louis, МО) в качестве субстрата. Обычно готовили 1.5 мМ раствор 2,3-димеркапто-1-пропанол трибутирата (DMPT) в 100 мМ MOPS, pH 7.2, содержащий 0.2 мг/мл BSA, свободного от жирных кислот, путем обработки ультразвуком при 4°C до получения гомогенной суспензии. Готовили серию трехкратных разведений исследуемых веществ в DMSO (из 2 мМ стока в DMSO). Растворы соединений разводили в 24 раза в растворе, содержащем 1.5 мМ DMPT, и наносили по 18 мкл в лунку на 384-луночные микропланшеты (Corning Costar). Добавляли по 12 мкл в лунку человеческой HSL (15 мкг/мл) и инкубировали реакционную смесь при 37°C в течение 20 минут. Добавляли 6 мкл 12 мМ раствора дитио-бис-(2-нитробензойной кислоты) (DTNB) в DMSO, содержащего 1.2% SDS и 0.6% Triton X-100, и инкубировали смесь при комнатной температуре в течение 15 минут. Образование продукта контролировали по абсорбции при 405 нм на спектрофотометре вертикального сканирования Envision Reader (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Shelton, CT).
Клеточный анализ:
Для количественной оценки ингибирующего эффекта соединений на липолиз в интактных клетках (адипоцитах) использовали следующий метод.
Пре-адипоцитные клетки 3T3-L1 высевали на 96-луночные планшеты с плотностью 20000 клеток на лунку, в 200 мкл питательной среды (DMEM/10% телячья сыворотка/1×антибиотик-антимикотик) вплоть до слияния. Через 48 ч после наступления слияния среду удаляли и проводили дифференцировку клеток в адипоциты с помощью среды для дифференцировки (DMEM/10% FBS/1×антибиотик-антимикотик, содержащей 1 мкМ IBMX (3-изобутил-1-метилксантин) ингибитор фосфодиэстераз, 1 мкМ дексаметазон, 1 мкМ росиглитазон, 10 мкг/мл инсулина). Клетки инкубировали в указанной среде в течение 3 дней, после чего среду заменяли пост-диференцирующей средой (DMEM/10% FBS, содержащей 10 мкг/мл инсулина), и клетки инкубировали еще в течение 3 дней. После этого среду заменяли поддерживающей средой (DMEM/10% FBS). Клетки подпитывали каждые три дня поддерживающей средой до момента использования. Анализ липолиза можно проводить на 9-14 день после инициации дифференцировки в 96-луночных планшетах.
Анализ липолиза проводили следующим образом. Адипоциты промывали дважды с помощью 200 мкл бикарбонатного Hepes-буфера Кребса-Рингера (KRBH), содержащего 3% BSA. Концентрация тестируемых соединений в DMSO составляла 10 мМ, первоначально их разбавляли до 5 мМ в DMSO. Затем готовили серию пятикратных разведений этих веществ в DMSO (от 5 мМ до 320 пМ). Каждое соединение затем разводили в 200 раз в KRBH / 3% BSA (итого, 0.5% DMSO). Диапазон конечных концентраций полученных растворов составлял от 25 мкМ до 1.6 пМ. Добавляли по 150 мкл разведенных соединений в каждую лунку (в трипликатах) и преинкубировали клетки 30 мин при 37°C. Добавляли форсколин (конечная концентрация 50 мкМ) в лунки и инкубировали клетки в течение 120 минут при 37°C. Отбирали по 100 мкл в новый 96-луночный планшет для анализа на глицерин. Количество продуцированного глицерина определяли с помощью набора для определения глицерина (Sigma).
Примеры
HSL человека, IC<sub>50 </sub>(мкМ)
Примеры
HSL человека, IC<sub>50 </sub>(мкМ)
1
0.06
9
0.03
2
0.01
10
0.02
3
0.02
11
0.05
4
0.01
12
0.02
5
0.16
13
0.02
6
0.09
14
0.74
7
0.02
15
0.43
8
0.03
50
50
50
Величина IC для соединений формулы (I) и их фармацевтически приемлемых солей или эфиров, описанных выше, находится в интервале 0.0001-1000 мкМ, в частности, величина IC этих соединений находится в интервале 0.001-500 мкМ, и, в частности, величина IC этих соединений находится в интервале 0.001-5 мкМ. Эти результаты были получены с помощью описанного выше анализа ингибирования фермента HSL (мкМ означает «микромолярный»).
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли можно применять в качестве лекарственных препаратов (например, в форме фармацевтических препаратов). Такие фармацевтические препараты можно вводить внутрь, например орально (например, в форме таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий), интраназально (например, в форме, назальных спреев) или ректально (например, в форме суппозиториев). Кроме того, введение можно осуществлять также парэнтерально, например внутримышечно или внутривенно (например, в форме растворов для инъекций).
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли можно процессировать совместно с фармацевтически инертными, неорганическими или органическими адъювантами для изготовления таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, драже и твердых желатиновых капсул. В качестве таких адъювантов можно применять, например, лактозу, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновую кислоту или ее соли и т.п., в случае таблеток, драже и твердых желатиновых капсул.
Подходящими адъювантами для мягких желатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, жиры, полужидкие вещества и жидкие полиолы и т.п.
Подходящими адъювантами для изготовления растворов и сиропов являются, например, вода, полиолы, сахароза, инвертированный сахар, глюкоза и т.п.
Подходящими адъювантами в случае растворов для инъекций являются, например, вода, спирты, полиолы, глицерин, растительные масла и т.п.
Подходящими адъювантами для суппозиториев являются, например, природные и отвержденные масла, воски, жиры, полужидкие или жидкие полиолы и т.п.
Кроме того, фармацевтические препараты могут содержать консерванты, солюбилизаторы, вещества, повышающие вязкость, стабилизаторы, увлажняющие агенты, эмульгаторы, подсластители, красители, ароматизаторы, соли для варьирования осмотического давления, буферы, маскирующие агенты или антиоксиданты. Они могут также содержать и другие терапевтически полезные вещества.
В соответствии с настоящим изобретением, соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли можно применять для лечения или профилактики диабета, метаболического синдрома, дислипидемии, атеросклероза, тучности, сердечно-сосудистых заболеваний, дисфункции миокарда, воспаления, неалкогольной жировой дистрофии печени или неалкогольного стеатогепатита. Дозировку можно варьировать в широких пределах и, разумеется, ее следует подбирать в соответствии с индивидуальными потребностями в каждом конкретном случае. В целом, в случае орального введения, подходящей является дозировка примерно от 0.1 мг до 20 мг на килограмм массы тела, предпочтительно примерно от 0.5 мг до 4 мг на килограмм массы тела (например, примерно 300 мг на одного человека), разделенная предпочтительно на 1-3 отдельные порции, например, содержащие одинаковые дозы. При этом, очевидно, вышеуказанный верхний предел можно превышать, если к этому имеются показания.
Настоящее изобретение далее наглядно представлено в Примерах, которые не носят ограничивающий характер.
В случае если приведенные в примерах вещества получают в виде смеси энантиомеров, чистые энантиомеры можно выделить способами, раскрытыми в данном описании, или способами, известными специалисту в данной области техники, например, такими, как хиральная хроматография или кристаллизация.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: (5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
Стадия A: этиловый эфир 1-бензил-4-(2-метокси-этил)-3-оксо-пиперидин-4-карбоновой кислоты
К раствору бензилового эфира 1-бензил-3-пиперидон-4-карбоновой кислоты (4.7 г, 18.9 ммоль) в диметилформамиде (50 мл) при 0°C добавляли трет-буоксид калия (4.23 г, 37.8 ммоль), смесь нагревали до комнатной температуры и продолжали перемешивание еще в течение 30 минут. Добавляли раствор 1-бром-2-метокси-этана (3.4 мл, 36.0 ммоль) в диметилформамиде (10 мл) с последующим добавлением иодида натрия (1.35 г, 9.0 ммоль). Полученную смесь нагревали при 80°C в течение 2 часов с последующим перемешиванием в течение ночи при 50°C. После охлаждения реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (50 мл), промывали водой (3×50 мл), солевым раствором (50 мл), высушивали над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме с получением неочищенного остатка, который очищали в ходе флэш-хроматографии на колонке (1:9 AcOEt/гептан) с получением указанного в заголовке вещества в виде светло-коричневого масла (2.17 г, 38%). MS (ESI): 320.1 (МН+).
Стадия В: этиловый эфир 1-бензил-3-гидрокси-4-(2-метокси-этил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты
2
4
К раствору этилового эфира 1-бензил-4-(2-метокси-этил)-3-оксо-пиперидин-4-карбоновой кислоты (774 мг, 2.42 ммоль) в MeOH (5 мл) при 0°C осторожно добавляли борогидрид натрия (110 мг, 2.91 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь гасили с помощью 1N NaOH и дополнительно разбавляли с помощью 1N NaOH и этилацетата. Органический слой отделяли и промывали солевым раствором, высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного остатка, который очищали в ходе флэш-хроматографи на колонке с получением этилового эфира 1-бензил-3-гидрокси-4-(2-метокси-этил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты (610 мг, 78%) в виде белого твердого вещества. MS (ESI): 322.3 (МН+).
Диастереомерные рацематы можно затем разделять в ходе флэш-хроматографи на колонке с получением этилового эфира (3RS,4SR)-1-бензил-3-гидрокси-4-(2-метокси-этил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты (298 мг, 38%) MS (ESI): 322.3 (МН+) и этилового эфира (3SR,4SR)-1-бензил-3-гидрокси-4-(2-меокси-этил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты (150 мг, 20%). MS (ESI): 322.3 (МН+).
Стадия C: (5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
2
4
К раствору этилового эфира (3RS,4SR)-1-бензил-3-гидрокси-4-(2-метокси этил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты (618 мг, 1.92 ммоль) и 4-(трифторметокси)анилина (516 мкл, 3.85 ммоль) в толуоле (5 мл) в атмосфере аргона при комнатной температуре добавляли диметилалюминий хлорид (0.9 М раствор в гептане, 4.27 мл, 3.85 ммоль), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили с помощью насыщенного водного раствора NaSO, и эту смесь фильтровали через Celite и выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали в ходе флэш-хроматографи на колонке (1:1 AcOEt/гептан) с получением (5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (620 мг, 77%) в виде белого твердого вещества. MS (ESI): 405.4 (МН+).
Пример 2: (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
Стадия A: (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-Диаза-спиро[4.5]декан-1-он
2
2
4
Смесь (5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (293 мг, 0.70 ммоль), уксусной кислоты (1 мл) и катализатора Перлмана (195 мг) в MeOH (20 мл) перемешивали при комнатной температуре при атмосферном давлении в среде H в течение 4 ч. Катализатор удаляли фильтрацией, фильтрат выпаривали с получением неочищенного остатка, который растворяли в воде, и полученный раствор подщелачивали с помощью 1N NaOH и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и выпаривали при пониженном давлении с образованием (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она в виде грязно-белого твердого вещества. MS (ESI): 331.2 (МН+).
Стадия B: (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-(4- трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
2
4
(5SR,6RS)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он (33 мг, 0.10 ммоль) растворяли в пиридине (1 мл) при комнатной температуре, добавляли 1,3,5-триметил-1H-пиразол-4-сульфонил хлорид (22 мг, 0.10 ммоль), и эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, полученный остаток растворяли в AcOEt и промывали с помощью 0.1М HCl и солевого раствора. Органический слой высушивали (NaSO), фильтровали и выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного остатка, который очищали в ходе флэш-хроматографи на колонке (4:1 AcOEt/гептан) с получением (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она в виде бесцветного твердого вещества (36 мг, 71%). MS (ESI): 505.1 (МН+)
Пример 3: (5RS,6RS)-8-(2-хлор-пиридин-3-сульфонил)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-Фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия B, из смеси (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (описанного в примере 2, стадия A) и 2-хлор-пиридин-3-сульфонилхлорида. Бесцветное твердое вещество. MS (ESI):506.0 (МН)
Пример 4: (5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-трифторметокси-бензолсульфонил)-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия B, из смеси (5RS,6RS)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (описанного в примере 2, стадия A) и 2-трифторметокси-бензолсульфонилхлорида. Бесцветное твердое вещество. MS (ESI):555.2 (МН)
Пример 5: (5RS,6RS)-8-циклопропансульфонил-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия B, из смеси (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (описанного в примере 2 стадия A) и циклопропансульфонилхлорида. Бесцветное твердое вещество. MS (ESI): 435.3 (МН).
Пример 6: (5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-метил-пропан-1-сульфонил)-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия B, из смеси (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (описанного в примере 2, стадия A) и пропан-2-сульфонилхлорида. Белое твердое вещество. MS (ESI):451.2 (МН)
Пример 7: (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил1-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
Стадия A: (5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 1, стадия C, из смеси этилового эфира (3RS,4SR)-1-бензил-3-гидрокси-4-(2-метокси-этил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты и 4-(2,2,2-трифтор-этил)-фениламина). Светло-желтое твердое вещество. MS (ESI):419.3 (МН).
Стадия B: (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия А, из смеси (5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она и катализатора Перлмана в атмосфере водорода. Белое твердое вещество. MS (ESI): 329.2 (МН).
Стадия C: (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия В, из смеси (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (описанного в примере 7 стадия В) и 2-хлор-бензолсульфонилхлорида. Бесцветное твердое вещество. MS (ESI): 503.0 (МН).
Пример 8: (5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-метил-2Н-пиразол-3-сульфонил)-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия B, из смеси (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (описанного в примере 7, стадия В) и 2-метил-2Н-пиразол-3-сульфонилхлорида. Светло-желтое твердое вещество. MS (ESI): 473.2 (МН).
Пример 9: (5RS,6RS)-8-(2,2-диметил-пропан-1-сульфонил)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия B, из смеси (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-[4-(2,2,2-трифтор-этил)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (описанного в примере 7, стадия В) и 2,2-диметил-пропан-1-сульфонилхлорида. Светло-желтое твердое вещество. MS (ESI): 463.2 (МН).
Пример 10: (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-[-4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
Стадия А: (5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-[-4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 1, стадия С, из смеси этилового эфира (3RS,4SR)-1-бензил-3-гидрокси-4-(2-метокси-этил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты и (rac)-4-(2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фениламина. Светло-желтое твердое вещество. MS (ESI):449.2 (МН).
Получение исходного вещества, (rac)-4-(2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фениламина:
2
3
2
4
i) К раствору 1-фтор-4-нитро-бензола (4.24 г) и (rac)-1,1,1-трифтор-пропан-2-ола (4.563 г) в ацетонитриле (50 мл) в атмосфере аргона добавляли при КТ CsCO(13.04 г) и эту смесь нагревали с обратным холодильником в течение 10 ч. Затем ее подкисляли разбавленным водным раствором HCL10 и делили между AcOEt и водой. Затем слои разделяли, высушивали над NaSO, после чего растворитель выпаривали с получением (rac)-1-нитро-4-(2,2,2-трифтор-1-метилэтокси)-бензола в виде коричневого масла (6.74 г), которое использовали без дополнительной очистки.
+
ii) (rac)-1-нитро-4-(2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-бензол (6.74 г) в метаноле (80 мл) гидрировали при КТ над Pd/C (10%, 500 мг) в атмосфере водорода (при атмосферном давлении) в течение 12 ч. Катализатор отфильтровали, и фильтрат концентрировали в вакууме с получением целевого соединения (rac)-4-(2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фениламина (5.8 г) в виде светло-желтого масла. MS (ESI): 206.1 (МН).
Стадия В: (5SR,6TS)-6-гидрокси-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия A, из смеси (5SR,6RS)-8-бензил-6-гидрокси-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она и катализатора Перлмана в атмосфере водород. Светло-коричневое твердое вещество. MS (ESI):359.1 (МН).
Стадия C: (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия В, из смеси (5SR,6SR)-6-гидрокси-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1 -она и 2-хлор-бензолсульфонилхлорида. Светло-желтое твердое вещество. MS (ESI): 533.1 (МН).
Пример 11: (5RS,6RS)-6-гидрокси-8-(2-метил-2Н-пиразол-3-сульфонил)-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
+
Указанное в заголовке вещество получали по аналогии с примером 2, стадия B, из смеси (5SR,6RS)-6-гидрокси-2-[4-((rac)-2,2,2-трифтор-1-метил-этокси)-фенил]-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (описанного в примере 10, стадия В) и 2-метил-2Н-пиразол-3-сульфонилхлорида. Светло-желтое твердое вещество. MS (ESI):503.1 (МН).
Пример 12: rac-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декане-1,6-дион
В круглодонной колбе на 10 мл смешивали оксалилхлорид (46.1 мг, 31.8 мкл, 356 мкмоль) и DCM (5 мл) с получением бесцветного раствора.
2
2
4
+
Добавляли по каплям DMSO (27.8 мг, 25.3 мкл, 356 мкмоль) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин. Добавляли раствор 8-(2-хлорфенилсульфонил)-6-гидрокси-2-(4-(трифторметокси)фенил)-2,8-диазаспиро[4.5]декан-1-она (124 мг, 246 мкмоль) в DCM (1 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при -40°C. Добавляли по каплям триэтиламин (74.6 мг, 103 мкл, 737 мкмоль), реакционную смесь нагревали до КТ и перемешивали в течение 3 ч. Реакционную смесь вливали в 15 мл DCM и промывали с помощью HO (2×10 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором, высушивали над NaSO и концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (от 0 до 100% AcOEt в гептане) с получением указанного в заголовке вещества в виде грязно-белого твердого вещества (73 мг, 59%). MS (ESI):503.1 (МН).
Пример 13: (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-6-метил-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она и
Пример 14: (5RS,6SR)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-6-метил-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
2
4
2
4
2
+
+
В атмосфере аргона, в круглодонной колбе на 10 мл, смешивали безводный хлорид церия (III) (32.3 мг, 131 мкмоль) и THF (2 мл) с получением белой суспензии. Суспензию охлаждали до 0°C на ледяной бане и перемешивали в течение 40 мин. Добавляли по каплям раствор rac-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декане-1,6-диона (36.6 мг, 72.8 мкмоль) в THF. Перемешивание продолжали в течение 35 мин, после чего добавляли по каплям метилмагний иодид (3М раствор в диэтиловом эфире, 43.7 мкл, 131 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, при температуре от 0°C до КТ. Реакционную смесь выливали на лед/HO, добавляли насыщенный раствор NHCl и экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Органические слои объединяли, промывали с помощью насыщенного NaCl, высушивали над NaSO и концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток очищали в ходе флэш-хроматографи на колонке (EtOAc/MeOH/HO 93:5:2) с получением (5RS,6RS)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-6-метил-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (9.6 мг, 25%) в виде светло-желтого твердого вещества, MS (ESI): 519.2 (МН) и (5RS,6SR)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-6-метил-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-она (7.4 мг, 20%) в виде светло-желтого твердого вещества, MS (ESI): 519.2 (МН).
Пример 15: (5RS,6SR)-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-6-гидрокси-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декан-1-он
2
4
+
К раствору rac-8-(2-хлор-бензолсульфонил)-2-(4-трифторметокси-фенил)-2,8-диаза-спиро[4.5]декане-1,6-диона (34 мг, 67.6 мкмоль) в метаноле добавляли борогидрид натрия (2.81 мг, 74.4 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь гасили с помощью 1Н NaOH и дополнительно разбавляли с помощью 1Н NaOH и этилацетата. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного остатка, который очищали в ходе флэш-хроматографи на колонке с получением указанного в заголовке вещества в виде грязно-белого твердого вещества (5 мг, 15%) MS (ESI): 505.1 (МН).
Пример А
Соединение формулы (I) можно применять известным по существу способом в качестве активного компонента при изготовлении таблеток следующего состава:
На таблетку
Активный компонент
200 мг
Микрокристаллическая целлюлоза
155 мг
Кукурузный крахмал
25 мг
Тальк
25 мг
Гидроксипропилметилцеллюлоза
20 мг
425 мг
Пример B
Соединение формулы (I) можно применять известным по существу способом в качестве активного компонента при изготовлении капсул следующего состава:
На капсулу
Активный компонент
100.0 мг
Кукурузный крахмал
20.0 мг
Лактоза
95.0 мг
Тальк
4.5 мг
Стеарат магния
0.5 мг
220.0 мг