НОВЫЕ МОДУЛЯТОРЫ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ
NOVEL IMMUNE SYSTEM MODULATORS RELATED APPLICATIONS

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании предварительной заявки на патент США с серийным номером 61/491965, поданной 1 июня 2011 года, которая включена в настоящий документ путем ссылки в полном объеме.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0002] Настоящее изобретение относится, в основном, к области иммунологии. В частности, настоящее изобретение относится к композициям и способам изменения иммунной функции. Более конкретно, настоящее изобретение относится к композициям и способам воздействия на иммунную стимуляцию, опосредованную молекулами Toll-подобных рецепторов (TLR).
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] Стимуляция иммунной системы, которая включает стимуляцию как врожденного иммунитета, так и приобретенного иммунитета, представляет собой сложное явление, которое приводит к защитном или неблагоприятным физиологическим последствиям для хозяина. В последние годы вырос интерес к механизмам, лежащим в основе врожденного иммунитета, который предположительно инициирует и поддерживает приобретенный иммунитет. Этот интерес был отчасти подогрет недавним открытием семейства высококонсервативных белков образраспознающих рецепторов, известных как Toll-подобные рецепторы (TLR), которые предположительно участвуют во врожденном иммунитете в качестве рецепторов патоген-ассоциированных молекулярных паттернов (РАМР) и ассоциируемых с опасностью молекулярных паттернов (DAMP). Поэтому большой интерес представляют собой композиции и способы, пригодные для модулирования врожденного иммунитета, поскольку они могут влиять на терапевтические подходы к состояниям, включающим аутоиммунитет, воспаление, атеросклероз, аллергию, астму, отторжение трансплантата, заболевание «трансплантат против хозяина» (GvHD), инфекцию, рак и иммунодефицит.
[0004] Toll-подобные рецепторы (TLR) представляют собой семейство образраспознающих и сигнальных молекул, участвующих во врожденном иммунитете. Это семейство включает, по меньшей мере, двенадцать членов, обозначаемых TLR1-TLR13, для которых функция и специфичность известны для большинства, но не для всех членов. Известно, что некоторые из этих TLR передают сигнал в ответ на столкновение с определенными типами молекул нуклеиновых кислот. Например, TLR9 передает сигнал в ответ на Cp-G-содержащую ДНК, TLR3 передает сигнал в ответ на двухцепочечную РНК, а TLR7 и TLR8 передают сигнал в ответ на некоторые одноцепочечные РНК. Существует ряд отчетов, описывающих иммуностимулирующее действие некоторых типов молекул нуклеиновых кислот, включая нуклеиновые кислоты CpG и двухцепочечные РНК. Следует отметить, что было описано, что Toll-подобный рецептор 9 (TLR9) распознает бактериальную ДНК и ДНК CpG, тогда как TLR7 и 8 распознают одноцепочечную РНК: Hemmi Н et al. (2000) Nature 408:740-5; Bauer S. et al. (2001) Proc Natl Acad Sci USA 98:9237-42; Heil et al. (2004) Science, 303:1526. Помимо их природных лигандов, известны также некоторые синтетические или искусственные лиганды к этим реагирующим на нуклеиновые кислоты TLR. Они включают некоторые CpG олигодезоксирибонуклеотиды (CpG ODN), олигорибонуклеотиды (ORN) и некоторые аналоги ORN, а также некоторые низкомолекулярные вещества, включая имиквимод (R-837) и резиквимод (R-848). Имиквимод и резиквимод классифицируют как имидазоаминохинолин-4-амины; первый из них в настоящее время имеется в продаже под названием AldaRa™ производства компании 3M Pharmaceuticals для местного лечения аногенитальных наростов, связанных с папилломавирусной инфекцией. Помимо их применения при лечении некоторых вирусных инфекций, таких как папилломавирус, некоторые агонисты TLR предположительно также пригодны в качестве адъювантов, противоопухолевых агентов и противоаллергических агентов. Поскольку усилением врожденного иммунитета может лечиться множество заболеваний и состояний, существует постоянная потребность в дополнительных и улучшенных агонистах TLR.
[0005] Также недавно было описано, что иммунные комплексы, содержащие IgG и нуклеиновую кислоту, могут стимулировать TLR9 и участвовать в активации В-клеток при некоторых аутоиммунных заболеваниях. Leadbetter Е.A. et al. (2002) Nature 416:595-8. Такая же и дополнительная документальная информация об этих утверждениях была сделана для TLR7,8 и 9: рассмотрено в публикации Sun S. et al. (2007) Inflammation and Allergy - Drug Targets 6:223-235.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0006] Описаны соединения с птеридиновым ядром в качестве модуляторов иммунной системы. Молекулы, описанные в настоящем документе, могут изменять TLR-опосредованную иммуностимулирующую передачу сигналов за счет ингибирования передачи сигналов TLR и, следовательно, могут быть пригодны в качестве ингибиторов иммунной стимуляции. Композиции и способы, описанные в настоящем документе, пригодны для ингибирования иммунной стимуляции in vitro и in vivo. Поэтому такие композиции и способы пригодны в ряде клинических применений, включая их использование в качестве фармацевтических агентов и способов для лечения состояний, включающих нежелательную иммунную активность, в том числе воспалительные и аутоиммунные расстройства. Композиции настоящего изобретения могут быть также пригодны в способах получения лекарственных средств для применения при лечении состояний, включающих нежелательную иммунную активность, в том числе различных воспалительных и аутоиммунных расстройств.
[0007] В одном аспекте настоящего изобретения представлено соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемая соль,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где P равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, гетероарил, арил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой H или метил, то Q не представляет собой H.
[0008] В некоторых вариантах реализации, X отсутствует. В других вариантах реализации, X представляет собой алкил. В других вариантах реализации, X представляет собой циклоалкил. В других вариантах реализации, X представляет собой арил. В других вариантах реализации, X представляет собой гетероцикл.
11
[0009] В некоторых вариантах реализации, Y представляет собой кислород. В других вариантах реализации, Y представляет собой серу. В других вариантах реализации, Y представляет собой NR.
[0010] В некоторых вариантах реализации, L или L' представляет собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 4 углеродных атомов.
[0011] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы II:
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой H или метил, то Q не представляет собой H.
[0012] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы III:
где
1
2
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[0013] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы IV:
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
n равен 2-6;
3
4
3
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, гетероарил, арил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R независимо представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой Н или метил, то Q не представляет собой H.
11
11
1
4
[0014] В некоторых вариантах реализации, Y представляет собой NR, и R представляет собой H или (C-C)алкил.
1
1
1
2
[0015] В некоторых вариантах реализации, Q представляет собой H, OR, SR или CHRR.
1
2
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
[0016] В некоторых вариантах реализации, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4.
1
2
3
4
b
c
[0017] В некоторых вариантах реализации, NRR, NRR и NRR, каждый независимо, представляют собой гетероцикл, выбранный из
d
2
3
2
12
2
p
a
2
p
b
c
12
a
b
c
1
4
b
c
и , где где R представляет собой H, Me, Et, n-Pr, i-Pr, n-Bu, i-Bu, t-Bu, CHCMe, Ph, CHPh, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где R представляет собой алкил, фенил или гетероцикл; R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород или (C-C)алкил, или R и R, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от трех до семи кольцевых атомов, и это кольцо может необязательно содержать другой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, и может быть необязательно замещено одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из группы, состоящей из алкила, фенила и бензила; и p равен 2-4.
5
6
1
4
1
4
a
b
c
a
2
a
2
b
c
a
b
c
1
4
b
c
[0018] В некоторых вариантах реализации, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, (C-C)алкил, гидрокси, (C-C)алкокси, SR, NRR, S(=O)R, S(=O)R, S(=O)NRR, где R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород или (C-C)алкил, или R и R, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от трех до семи кольцевых атомов, и это кольцо может необязательно содержать другой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, и может быть необязательно замещено одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из группы, состоящей из алкила, фенила и бензила.
d
2
3
2
[0019] В некоторых вариантах реализации, представляет собой , где R представляет собой H, Me, Et, n-Pr, i-Pr, n-Bu, i-Bu, t-Bu, CHCMe, Ph или CHPh.
[0020] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы V:
где
3
A представляет собой =O, =S или =NR,
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл; и
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-С)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
5
3
[0021] В некоторых вариантах реализации, R выбран из группы, состоящей из Me, CF, Ph и 3,5-дифторфенила.
[0022] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы VI:
где
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[0023] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы VII:
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[0024] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I представляет собой одно или более соединений, выбранных из соединений в Таблицах 1-3.
[0025] В другом аспекте описана фармацевтическая композиция, содержащая, по меньшей мере, одно соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
связь между NZ и Q представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR, или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-С)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой H или метил, то Q не представляет собой H.
[0026] В другом аспекте описан способ лечения воспалительного или аутоиммунного заболевания у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы I,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или=NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-С)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[0027] В некоторых вариантах реализации, аутоиммунное заболевание выбрано из кожной и системной красной волчанки, инсулинозависимого сахарного диабета, ревматоидного артрита, рассеянного склероза, атеросклероза, псориаза, псориатического артрита, воспалительной болезни кишечника, атеросклероза, анкилозирующего спондилита, аутоиммунной гемолитической анемии, синдрома Бехчета, синдрома Гудпасчера, болезни Грейвса, синдрома Гийена-Барре, тиреоидита Хасимото, идиопатической тромбоцитопении, миастении гравис, злокачественной анемии, нодозного полиартериита, полимиозита/дерматомиозита, первичного билиарного склероза, саркоидоза, склерозирующего холангита, синдрома Шегрена, системного склероза (склеродермии и КРЕСТ-синдрома), артериита Такаясу, височного артериита и гранулематоза Вегенера. В некоторых конкретных вариантах реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой системную красную волчанку. В некоторых конкретных вариантах реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой инсулинозависимый сахарный диабет. В некоторых конкретных вариантах реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит. В некоторых конкретных вариантах реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой рассеянный склероз. В некоторых конкретных вариантах реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой рассеянный склероза. В некоторых конкретных вариантах реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой синдром Шегрена. В некоторых конкретных вариантах реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз.
[0028] В другом аспекте описан способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимуляции у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы I,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой H или метил, то Q не представляет собой H.
[0029] В другом аспекте описан способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы I,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой Н или метил, то Q не представляет собой Н.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Определения
[0030] Ниже представлены определения терминов, используемых в настоящем описании. Первоначальное определение, представленное для группы или термина в настоящем документе, относится к этой группе или термину в тексте настоящего описания отдельно или в составе другой группы, если не указано иное. Если не указанное иное, то все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют такое же значение, какое обычно понимают специалисты в данной области.
1
4
3
3
3
3
a
a
e
2
e
2
e
2
e
2
e
b
c
b
2
e
b
2
e
2
b
c
2
b
c
d
a
b
c
a
b
c
b
e
d
b
c
d
2
b
c
d
2
b
c
b
a
b
2
e
a
b
c
d
b
c
e
[0031] Термины «алкил» и «алк» относятся к прямому или разветвленному алкановому (углеводородному) радикалу, содержащему от 1 до 12 углеродных атомов, предпочтительно, от 1 до 6 углеродных атомов. Примеры «алкиловых» групп включают метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, пентил, гексил, изогексил, гептил, 4,4-диметилпентил, октил, 2,2,4-триметилпентил, нонил, децил, ундецил, додецил и тому подобные. Термин «(C-C)алкил» относится к прямому или разветвленному алкановому (углеводородному) радикалу, содержащему от 1 до 4 углеродных атомов, такому как метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил и изобутил. «Замещенный алкил» относится к алкиловой группе, замещенной одним или более заместителями, предпочтительно, 1-4 заместителями, в любой доступной точке присоединения. Примеры заместителей включают, но не ограничиваясь этим, одну или более из следующих групп: водород, галоген (например, один галогенный заместитель или несколько гало-заместителей, образующих в последнем случае такие группы как CF или алкиловую группу с CCl), циано, нитро, оксо (то есть, =O), CF, OCF, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл, арил, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, P(=O)R, S(=O)OR, P(=O)OR, NRR, NRS(=O)R, NRP(=O)R, S(=O)NRR, P(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)NRR, NRS(=O)NRR, NRP(=O)NRR, NRC(=O)R или NRP(=O)R, где R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; R, R и R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R вместе с N, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл; и R в каждом случае независимо представляет собой алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил. В вышеупомянутых иллюстративных заместителях такие группы как алкил, циклоалкил, алкенил, алкинил, циклоалкенил, гетероцикл и арил могут быть сами необязательно замещены.
2
6
3
3
3
3
a
a
e
2
e
2
e
2
e
2
e
b
c
b
2
e
b
2
e
2
b
c
2
b
c
d
a
b
c
a
b
c
b
e
d
b
c
d
2
b
c
d
2
b
c
b
a
b
2
e
a
b
c
d
b
c
e
[0032] Термин «алкенил» относится к прямому или разветвленному углеводородному радикалу, содержащему от 2 до 12 углеродных атомов и, по меньшей мере, одну двойную углерод-углеродную связь. Примеры таких групп включают этенил или аллил. Термин «С-Салкенил» относится к прямому или разветвленному углеводородному радикалу, содержащему от 2 до 6 углеродных атомов и, по меньшей мере, одну двойную углерод-углеродную связь, такому как этиленил, пропенил, 2-пропенил, (E)-бут-2-енил, (Z)-бут-2-енил, 2-метил-(E)-бут-2-енил, 2-метил-(Z)-бут-2-енил, 2,3-диметил-бут-2-енил, (Z)-пент-2-енил, (E)-пент-1-енил, (Z)-гекс-1-енил, (E)-пент-2-енил, (Z)-гекс-2-енил, (E)-гекс-2-енил, (Z)-гекс-1-енил, (E)-гекс-1-енил, (Z)-гекс-3-енил, (E)-гекс-3-енил и (E)-гекс-1,3-диенил. «Замещенный алкенил» относится к алкениловой группе, замещенной одним или более заместителями, предпочтительно, 1-4 заместителями, в любой доступной точке присоединения. Примеры заместителей включают, но не ограничиваясь этим, одну или более из следующих групп: водород, галоген (например, один галогенный заместитель или несколько гало-заместителей, образующих в последнем случае такие группы как CF или алкиловую группу с CCl), циано, нитро, оксо (то есть, =O), CF, OCF, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл, арил, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, P(=O)R, S(=O)OR, P(=O)OR, NRR, NRS(=O)R, NRP(=O)R, S(=O)NRR, P(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)NRR, NRS(=O)NRR, NRP(=O)NRR, NRC(=O)R или NRP(=O)R, где R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; R, R и R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R вместе с N, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл; и R в каждом случае независимо представляет собой алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил. Иллюстративные заместители могут быть сами необязательно замещены.
2
6
3
3
3
3
a
a
e
2
e
2
e
2
e
2
e
b
c
b
2
e
b
2
e
2
b
c
2
b
c
d
a
b
c
a
b
c
b
e
d
b
c
d
2
b
c
d
2
b
c
b
a
b
2
e
a
b
c
d
b
c
e
[0033] Термин «алкинил» относится к прямому или разветвленному углеводородному радикалу, содержащему от 2 до 12 углеродных атомов и, по меньшей мере, одну тройную углерод-углеродную связь. Примеры таких групп включают этинил. Термин «С-Салкинил» относится к прямому или разветвленному углеводородному радикалу, содержащему от 2 до 6 углеродных атомов и, по меньшей мере, одну тройную углерод-углеродную связь, такому как этинил, проп-1-инил, проп-2-инил, бут-1-инил, бут-2-инил, пент-1-инил, пент-2-инил, гекс-1-инил, гекс-2-инил, гекс-3-инил. «Замещенный алкинил» относится к алкиниловой группе, замещенной одним или более заместителями, предпочтительно, 1-4 заместителями, в любой доступной точке присоединения. Примеры заместителей включают, но не ограничиваясь этим, одну или более из следующих групп: водород, галоген (например, один галогенный заместитель или несколько гало-заместителей, образующих в последнем случае такие группы как CF или алкиловую группу с CCl), циано, нитро, оксо (то есть, =O), CF, OCF, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл, арил, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, P(=O)R, S(=O)OR, P(=O)OR, NRR, NRS(=O)R, NRP(=O)R, S(=O)NRR, P(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)NRR, NRS(=O)NRR, NRP(=O)NRR, NRC(=O)R или NRP(=O)R, где R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; R, R и R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R вместе с N, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл; и R в каждом случае независимо представляет собой алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил. Иллюстративные заместители могут быть сами необязательно замещены.
3
7
3
3
3
3
a
a
e
2
e
2
e
2
e
2
e
b
c
b
2
e
b
2
e
2
b
c
2
b
c
d
a
b
c
a
b
c
b
e
d
b
c
d
2
b
c
d
2
b
c
b
a
b
2
e
a
b
c
d
b
c
e
[0034] Термин «циклоалкил» относится к полностью насыщенной циклической углеводородной группе, содержащей от 1 до 4 колец и от 3 до 8 углеродов в каждом кольце. «С-Сциклоалкил» относится к циклопропилу, циклобутилу, циклопентилу, циклогексилу или циклогептилу. «Замещенный циклоалкил» относится к циклоалкиловой группе, замещенной одним или более заместителями, предпочтительно, 1-4 заместителями, в любой доступной точке присоединения. Примеры заместителей включают, но не ограничиваясь этим, одну или более из следующих групп: водород, галоген (например, один галогенный заместитель или несколько гало-заместителей, образующих в последнем случае такие группы как CF или алкиловую группу с CCl), циано, нитро, оксо (то есть, =O), CF, OCF, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл, арил, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, P(=O)R, S(O)OR, P(=O)OR, NRR, NRS(=O)R, NRP(=O)R, S(=O)NRR, P(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)NRR, NRS(=O)NRR, NRP(=O)NRR, NRC(=O)R или NRP(=O)R, где R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; R, R и R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R вместе с N, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл; и R в каждом случае независимо представляет собой алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил. Иллюстративные заместители могут быть сами необязательно замещены. Иллюстративные заместители включают также спиро-присоединенные или конденсированные циклические заместители, особенно спиро-присоединенный циклоалкил, спиро-присоединенный циклоалкенил, спиро-присоединенный гетероцикл (кроме гетероарила), конденсированный циклоалкил, конденсированный циклоалкенил, конденсированный гетероцикл или конденсированный арил, где вышеупомянутые циклоалкиловые, циклоалкениловые, гетероциклические и ариловые заместители могут быть сами необязательно замещены.
3
3
3
3
a
a
e
2
e
2
e
2
e
2
e
b
c
b
2
e
b
2
e
2
b
c
2
b
c
d
a
b
c
a
b
c
b
e
d
b
c
d
2
b
c
d
2
b
c
b
a
b
2
e
a
b
c
d
b
c
e
[0035] Термин «циклоалкенил» относится к частично ненасыщенной углеводородной группе, содержащей от 1 до 4 колец и от 3 до 8 углеродов в каждом кольце. Примеры таких групп включают циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил и так далее. «Замещенный циклоалкенил» относится к циклоалкениловой группе, замещенной одним или более заместителями, предпочтительно, 1-4 заместителями, в любой доступной точке присоединения. Примеры заместителей включают, но не ограничиваясь этим, одну или более из следующих групп: водород, галоген (например, один галогенный заместитель или несколько гало-заместителей, образующих в последнем случае такие группы как CF или алкиловую группу с CCl), циано, нитро, оксо (то есть, =O), CF, OCF, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл, арил, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, P(=O)R, S(=O)OR, P(=O)OR, NRR, NRS(=O)R, NRP(=O)R, S(=O)NRR, P(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)NRR, NRS(=O)NRR, NRP(=O)NRR, NRC(=O)R или NRP(=O)R, где R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; R, R и R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R вместе с N, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл; и R в каждом случае независимо представляет собой алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил. Иллюстративные заместители могут быть сами необязательно замещены. Примеры заместителей включают также спиро-присоединенные или конденсированные циклические заместители, особенно спиро-присоединенный циклоалкил, спиро-присоединенный циклоалкенил, спиро-присоединенный гетероцикл (кроме гетероарила), конденсированный циклоалкил, конденсированный циклоалкенил, конденсированный гетероцикл или конденсированный арил, где вышеупомянутые циклоалкиловые, циклоалкениловые, гетероциклические и ариловые заместители могут быть сами необязательно замещены.
3
3
3
3
a
a
e
2
e
2
e
2
e
2
e
b
c
b
2
e
b
2
e
2
b
c
2
b
c
d
a
b
c
a
b
c
b
e
d
b
c
d
2
b
c
d
2
b
c
b
a
b
2
e
a
b
c
d
b
c
e
[0036] Термин «арил» относится к циклическим, ароматическим углеводородным группам, которые имеют от 1 до 5 ароматических колец, особенно к моноциклическим или бициклическим группам, таким как фенил, бифенил или нафтил. Содержащие два или более ароматических колец (бициклические и так далее), ароматические кольца ариловой группы могут быть соединены в одной точке (например, бифенил) или быть конденсированы (например, нафтил, фенантренил и тому подобные). «Замещенный арил» относится к любой ариловой группе, замещенной одним или более заместителями, предпочтительно, 1-3 заместителями, в любой доступной точке присоединения. Примеры заместителей включают, но не ограничиваясь этим, одну или более из следующих групп: водород, галоген (например, один галогенный заместитель или несколько гало-заместителей, образующих в последнем случае такие группы как CF или алкиловую группу с CCl), пиано, нитро, оксо (то есть, =O), CF, OCF, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл, арил, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, P(=O)R, S(=O)OR, P(=O)OR, NRR, NRS(=O)R, NRP(=O)R, S(=O)NRR, P(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)NRR, NRS(=O)NRR, NRP(=O)NRR, NRC(=O)R или NRP(=O)R, где R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; R, R и R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R вместе с N, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл; и R в каждом случае независимо представляет собой алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил. Иллюстративные заместители могут быть сами необязательно замещены. Примеры заместителей включают также конденсированные циклические группы, особенно конденсированный циклоалкил, конденсированный циклоалкенил, конденсированный гетероцикл или конденсированный арил, где вышеупомянутые циклоалкиловые, циклоалкениловые, гетероциклические и ариловые заместители могут быть сами необязательно замещены.
[0037] Термин «карбоцикл» относится к полностью насыщенной или частично насыщенной циклической углеводородной группе, содержащей от 1 до 4 колец и от 3 до 8 углеродов в каждом кольце, или к циклическим, ароматическим углеводородным группам, которые имеют от 1 до 5 ароматических колец, особенно к моноциклическим или бициклическим группам, таким как фенил, бифенил или нафтил. Термин «карбоцикл» включает циклоалкил, циклоалкенил, циклоалкинил и арил, описанные выше в настоящем документе. Термин «замещенный карбоцикл» относится к карбоциклу или карбоциклическим группам, замещенным одним или более заместителями, предпочтительно, 1-4 заместителями, в любой доступной точке присоединения. Примеры заместителей включают, но не ограничиваясь этим, заместители, описанные выше для замещенного циклоалкила, замещенного циклоалкенила, замещенного циклоалкинила и замещенного арила. Иллюстративные заместители включают также спиро-присоединенные или конденсированные циклические заместители в любой доступной точке или точках присоединения, особенно спиро-присоединенный циклоалкил, спиро-присоединенный циклоалкенил, спиро-присоединенный гетероцикл (кроме гетероарила), конденсированный циклоалкил, конденсированный циклоалкенил, конденсированный гетероцикл или конденсированный арил, где вышеупомянутые циклоалкиловые, циклоалкениловые, гетероциклические и ариловые заместители могут быть сами необязательно замещены.
[0038] Термины «гетероцикл» и «гетероциклический» относятся к полностью насыщенным или частично или полностью ненасыщенным, включая ароматические (то есть, «гетероариловые»), циклическим группам (например, 4-7-членным моноциклическим, 7-11-членным бициклическим или 8-16-членным трициклическим кольцевым системам), которые имеют, по меньшей мере, один гетероатом, по меньшей мере, в одном углеродсодержащем кольце. Каждое кольцо указанной гетероциклической группы, содержащее гетероатом, может иметь 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из атомов азота, атомов кислорода и/или атомов серы, где гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены, а гетероатомы азота могут быть необязательно кватернизованы. (Термин «гетероарилий» относится к гетероариловой группе с четвертичным атомом азота и, следовательно, с положительным зарядом). Гетероциклическая группа может быть присоединена к остальной части молекулы по любому гетероатому или углеродному атому кольца или кольцевой системы. Примеры моноциклических гетероциклических групп включают азетидинил, пирролидинил, пирролил, пиразолил, оксетанил, пиразолинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, оксазолил, оксазолидинил, изоксазолинил, изоксазолил, тиазолил, тиадиазолил, тиазолидинил, изотиазолил, изотиазолидинил, фурил, тетрагидрофурил, тиенил, оксадиазолил, пиперидинил, пиперазинил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролодинил, 2-оксоазепинил, азепинил, гексагидродиазепинил, 4-пиперидонил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, триазинил, триазолил, тетразолил, тетрагидропиранил, морфолинил, тиаморфолинил, тиаморфолинила сульфоксид, тиаморфолинила сульфон, 1,3-диоксолан и тетрагидро-1,1-диоксотиенил, и тому подобные. Примеры бициклических гетероциклических групп включают индолил, изоиндолил, бензотиазолил, бензоксазолил, бензоксадиазолил, бензотиенил, бензо[d][1,3]диоксолил, 2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксинил, хинуклидинил, хинолинил, тетрагидроизохинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензопиранил, индолизинил, бензофурил, бензофуразанил, хромонил, кумаринил, бензопиранил, циннолинил, хиноксалинил, индазолил, пирролопиридил, фуропиридинил (такой как фуро[2,3-c]пиридинил, фуро[3,2-b]пиридинил] или фуро[2,3-b]пиридинил), дигидроизоиндолил, дигидрохиназолинил (такой как 3,4-дигидро-4-оксо-хиназолинил), триазинилазепинил, тетрагидрохинолинил и тому подобные. Примеры трициклических гетероциклических групп включают карбазолил, бензидолил, фенантролинил, каридинил, фенантридинил, ксантенил и тому подобные.
3
3
3
3
a
a
e
2
e
2
e
2
e
2
e
b
c
b
2
e
b
2
e
2
b
c
2
b
c
d
a
b
c
a
b
c
b
e
d
b
c
d
2
b
c
d
2
b
c
b
a
b
2
e
a
b
c
d
b
c
e
[0039] «Замещенный гетероцикл» и «замещенный гетероциклический» (такой как «замещенный гетероарил») относится к гетероциклу или гетероциклическим группам, замещенным одним или более заместителями, предпочтительно, 1-4 заместителями, в любой доступной точке присоединения. Примеры заместителей включают, но не ограничиваясь этим, одну или более из следующих групп: водород, галоген (например, один галогенный заместитель или несколько гало-заместителей, образующих в последнем случае такие группы как CF или алкиловую группу с CCl), циано, нитро, оксо (то есть, =O), CF, OCF, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл, арил, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, P(=O)R, S(=O)OR, P(=O)OR, NRR, NRS(=O)R, NRP(=O)R, S(=O)NRR, P(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)NRR, NRS(=O)NRR, NRP(=O)NRR, NRC(=O)R или NRP(=O)R, где R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; R, R и R в каждом случае независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R вместе с N, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл; и R в каждом случае независимо представляет собой алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил. Иллюстративные заместители могут быть сами необязательно замещены. Иллюстративные заместители включают также спиро-присоединенные или конденсированные циклические заместители в любой доступной точке или точках присоединения, особенно спиро-присоединенный циклоалкил, спиро-присоединенный циклоалкенил, спиро-присоединенный гетероцикл (кроме гетероарила), конденсированный циклоалкил, конденсированный циклоалкенил, конденсированный гетероцикл или конденсированный арил, где вышеупомянутые циклоалкиловые, циклоалкениловые, гетероциклические и ариловые заместители могут быть сами необязательно замещены.
[0040] Термин «алкиламино» относится к группе, имеющей структуру -NHR', где R' представляет собой водород, алкил или замещенный алкил, циклоалкил или замещенный циклоалкил, как описано в настоящем документе. Примеры алкиламино-групп включают, но не ограничиваясь этим, метиламино, этиламино, н-пропиламино, изо-пропиламино, циклопропиламино, н-бутиламино, трет-бутиламино, неопентиламино, н-пентиламино, гексиламино, циклогексиламино и тому подобные.
[0041] Термин «диалкиламино» относится к группе, имеющей структуру -NRR', где R и R', каждый независимо, представляют собой алкил или замещенный алкил, циклоалкил или замещенный циклоалкил, циклоалкенил или замещенный циклоалкенил, арил или замещенный арил, гетероциклил или замещенный гетероциклил, как описано в настоящем документе. В диалкиламино-фрагменте R и R' могут быть одинаковыми или различными. Примеры диалкиламино-групп включают, но не ограничиваясь этим, диметиламино, метилэтиламино, диэтиламино, метилпропиламино, ди(н-пропил)амино, ди(изо-пропил)амино, ди(циклопропил)амино, ди(н-бутил)амино, ди(трет-бутил)амино, ди(неопентил)амино, ди(н-пентил)амино, ди(гексил)амино, ди(циклогексил)амино и тому подобные. В некоторых вариантах реализации, R и R' связаны с образованием циклической структуры. Образованная циклическая структура может быть ароматической или неароматической. Примеры циклических диаминоалкиловых групп включают, но не ограничиваясь этим, азиридинил, пирролидинил, пиперидинил, морфолинил, пирролил, имидазолил, 1,3,4-триазолил и тетразолил.
[0042] Термины «галоген» или «гало» относятся к хлору, брому, фтору или йоду.
[0043] Если не указано иное, то считается, что любой гетероатом с недостающими валентностями имеет достаточное количество водородных атомов для заполнения этих валентностей.
[0044] Соединения настоящего изобретения могут образовывать соли, которые также входят в рамки настоящего изобретения. Упоминание соединения настоящего изобретения следует понимать как включающее его соли, если не указано иное. Термин «соль(и)», используемый в настоящем документе, означает кислотные и/или основные соли, образованные с неорганическими и/или органическими кислотами и основаниями. Кроме того, если соединение настоящего изобретения содержит одновременно основной фрагмент, такой как, но не ограничиваясь этим, пиридин или имидазол, и кислотный фрагмент, такой как, но не ограничиваясь этим, карбоновая кислота, то могут образовываться цвиттер-ионы («внутренние соли»), которые входят в термин «соль(и)», используемый в настоящем документе. Предпочтительны фармацевтически приемлемые (то есть, нетоксичные, физиологически приемлемые соли), хотя пригодны также другие соли, например, на стадиях выделения или очистки, которые могут быть использованы при 110лучении. Соли соединений настоящего изобретения могут быть образованы, например, взаимодействием соединения I с определенным количеством кислоты или основания, таким как эквивалентное количество, в среде, такой как среда, в которой выпадает в осадок указанная соль, или в водной среде, с последующей лиофилизацией.
[0045] Соединения настоящего изобретения, которые содержат основной фрагмент, такой как, но не ограничиваясь этим, амин или пиридиновое или имидазольное кольцо, могут образовывать соли с различными органическими и неорганическими кислотами. Примеры солей присоединения кислот включают ацетаты (такие как ацетаты, образованные с уксусной кислотой или тригалоуксусной кислотой, например, трифторуксусной кислотой), адипинаты, альгинаты, аскорбаты, аспартаты, бензоаты, бензолсульфонаты, бисульфаты, бораты, бутираты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, циклопентанпропионаты, диглюконаты, додецил сульфаты, этансульфонаты, фумараты, глюкогептаноаты, глицерофосфаты, гемисульфаты, гептаноаты, гексаноаты, гидрохлориды, гидробромиды, гидройодиды, гидроксиэтансульфонаты (например, 2-гидроксиэтансульфонаты), лактаты, малеаты, метансульфонаты, нафталинсульфонаты (например, 2-нафталинсульфонаты), никотинаты, нитраты, оксалаты, пектинаты, персульфаты, фенилпропионаты (например, 3-фенилпропионаты), фосфаты, пикраты, пивалаты, пропионаты, салицилаты, сукцинаты, сульфаты (такие как сульфаты, образованные с серной кислотой), сульфонаты, тартраты, тиоцианаты, толуолсульфонаты, такие как тозилаты, ундеканоаты и тому подобные.
[0046] Соединения настоящего изобретения, которые содержат кислотный фрагмент, такой как, но не ограничиваясь этим, карбоновая кислота, могут образовывать соли с различными органическими и неорганическими основаниями. Примеры основных солей включают соли аммония, соли щелочных металлов, такие как соли натрия, лития и калия, соли щелочноземельных металлов, такие как соли кальция и магния, соли с органическими основаниями (например, с органическими аминами), такими как бензатины, дициклогексиламины, гидрабамины (образованные с N,N-бис(дегидроабиетил)этилендиамином), N-метил-D-глюкамины, N-метил-D-гликамиды, трет-бутиламины, а также соли с аминокислотами, такими как аргинин, лизин и тому подобные. Основные азотсодержащие группы могут быть кватернизованы такими агентами как низшие алкилгалогениды (например, метил, этил, пропил и бутил хлориды, бромиды и йодиды), диалкилсульфаты (например, диметил, диэтил, дибутил и диамил сульфаты), длинноцепные галогениды (например, децил, лаурил, миристил и стеарил хлориды, бромиды и йодиды), аралкилгалогениды (например, бензил и фенетил бромиды) и другие.
[0047] В настоящем документе рассмотрены также пролекарства и сольваты соединений настоящего изобретения. Термин «пролекарство», используемый в настоящем документе, означает соединение, которое при введении субъекту подвергается химическому превращению в метаболических или химических процессах с образованием соединения настоящего соединения или его соли и/или сольвата. Сольваты соединений настоящего изобретения включают, например, гидраты.
[0048] Соединения настоящего изобретения и их соли или сольваты могут существовать в их таутомерной форме (например, в виде амида или имино-эфира). Все такие таутомерные формы подразумеваются в настоящем документе как часть настоящего изобретения.
[0049] Все стереоизомеры соединений настоящего изобретения (например, те, которые могут существовать за счет асимметричных атомов углерода в различных заместителях), включая энантиомерные формы и диастереомерные формы, входят в рамки настоящего изобретения. Отдельные стереоизомеры соединений настоящего изобретения могут быть, например, в основном, свободными от других изомеров (например, в виде чистого или в основном чистого оптического изомера, имеющего определенную активность), или могут быть смешаны, например, в виде рацематов со всеми другими или некоторыми другими стереоизомерами. Хиральные центры в настоящем изобретении могут иметь S или R конфигурацию, определенную по рекомендациям международного союза чистой и прикладной химии (ИЮПАК) 1974 года. Рацемические формы могут быть разделены физическими способами, такими как, например, фракционная кристаллизация, разделение или кристаллизация диастереомерных производных, или разделение при помощи хиральной колоночной хроматографии. Отдельные оптические изомеры могут быть получены из рацематов любым пригодным способом, включая, без ограничения, стандартные способы, такие как, например, образование соли с оптически активной кислотой с последующей кристаллизацией.
[0050] Соединения настоящего изобретения, после их получения, предпочтительно выделяют и очищают для получения композиции, содержащей определенное весовое количество, которое равно или превышает 90%, например, равно или превышает 95%, равно или превышает 99% соединений («в основном, чистых» соединений), которые затем используют или составляют в композиции, описанные в настоящем документе. Такие «в основном, чистые» соединения настоящего изобретения также рассмотрены в настоящем документе как часть настоящего изобретения.
[0051] Рассмотрены все конфигурационные изомеры соединений настоящего изобретения, как с примесями, так и в чистой или, в основном, чистой форме. Определение соединений настоящего изобретения охватывает оба цис (Z) и транс (Е) алкеновых изомера, а также цис и транс изомеры циклических углеводородов или гетероциклических колец.
[0052] В настоящем описании могут быть выбраны группы и их заместители для получения устойчивых фрагментов и соединений.
oe
[0053] Ниже более подробно описаны определения конкретных функциональных групп и химических терминов. Для целей настоящего изобретения, химические элементы идентифицированы в соответствии с периодической таблицей элементов, версией CAS, расположенной на внутренней стороне обложки книги Handbook of Chemistry and Physics, 75 издание, а функциональные группы, в основном, определены так, как описано в настоящем документе. Кроме того, общие принципы органической химии, а также конкретные функциональные фрагменты и химическая активность описаны в книге “Organic Chemistry”, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, полное содержание которой включено в настоящий документ путем ссылки.
[0054] Некоторые соединения настоящего изобретения могут существовать в определенных геометрических или стереоизомерных формах. В настоящем изобретении рассмотрены все такие соединения, включая цис- и транс-изомеры, R- и S-энантиомеры, диастереомеры, D)-изомеры, (L)-изомеры, их рацемические смеси и других их смеси, как входящие в рамки настоящего изобретения. Дополнительные асимметричные атомы углерода могут присутствовать в заместителях, таких как алкиловая группа. Все такие изомеры, а также их смеси, подразумеваются включенными в настоящее изобретение.
[0055] Изомерные смеси, содержащие любое из различных изомерных отношений, могут быть использованы в соответствии с настоящим изобретением. Например, если смешаны только два изомера, то настоящим изобретением охвачены все смеси, содержащие изомерные отношения 50:50, 60:40, 70:30, 80:20, 90:10, 95:5, 96:4, 97:3, 98:2, 99:1 или 100:0. Специалистам в данной области понятно, что для более сложных изомерных смесей подразумеваются аналогичные соотношения.
2
3
13
11
14
15
18
17
31
32
35
18
36
3
14
3
14
2
[0056] Настоящее изобретение включает также меченные изотопами соединения, которые идентичны соединения, описанным в настоящем документе, за исключением того, что один или более атомов замещены атомами, имеющими атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, которые могут быть внедрены в соединения настоящего изобретения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора и хлора, такие как H, H, C, C, C, N, O, O, P, P, S, F и Cl, соответственно. Соединения настоящего изобретения или их энантиомеры, диастереомеры, таутомеры или фармацевтически приемлемые соли или сольваты, которые содержат упомянутые выше изотопы и/или другие изотопы других атомов, входят в рамки настоящего изобретения. Некоторые меченные изотопами соединения настоящего изобретения, например, те, в которые внедрены радиоактивные изотопы, такие как H и C, пригодны для анализа распределения лекарства и/или субстрата в тканях. Изотопы трития, то есть, H, и углерода-14, то есть, C, наиболее предпочтительны, благодаря простоте получения и обнаружения. Кроме того, замена более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, то есть H, может давать определенное терапевтическое преимущество из-за более высокой метаболической устойчивости, например, увеличенного периода полувыведения in vivo или снижения необходимых доз, и поэтому это может быть более выгодно в некоторых условиях. Соединения с изотопными метками обычно могут быть получены по способам, описанным на Схемах и/или в Примерах ниже, с заменой легкодоступными реагентами с изотопной меткой реагентов без изотопной метки.
[0057] Если, например, задан определенный энантиомер соединения настоящего изобретения, то его можно получить асимметричным синтезом или путем преобразования со вспомогательным хиральным агентом, где полученную диастеромерную смесь разделяют, а вспомогательную группа отщепляют с образованием чистых заданных энантиомеров. Альтернативно, если молекула содержит основную функциональную группу, такую как аминогруппа, или кислотную функциональную группу, такую как карбоксил, то образуют диастереомерные соли с соответствующей оптически активной кислотой или основанием, с последующим разделением образовавшихся диастереомеров фракционной кристаллизацией или хроматографическими способами, хорошо известными в данной области, и последующим выделением чистых энантиомеров.
[0058] Следует понимать, что соединения, описанные в настоящем документе, могут быть замещены рядом заместителей или функциональных фрагментов. В общем, термин «замещенный», используемый со стоящим перед ним термином «необязательно» или без него, а также заместители, содержащиеся в формулах настоящего изобретения, относятся к замене водородных радикалов в данной структуре на радикал определенного заместителя. Если в данной структуре может быть замещено более одного положения более, чем одним заместителем, выбранным из определенной группы, то заместитель может быть одинаковым или различным в каждом положении. При использовании в настоящем документе, термин «замещенный» включает все допустимые заместители органических соединений. В широком аспекте, допустимые заместители включают ациклические и циклические, разветвленные и неразветвленные, карбоциклические и гетероциклические, ароматические и неароматические заместители органических соединений. Для целей настоящего изобретения, гетероатомы, такие как азот, могут иметь водородные заместители и/или любые допустимые заместители органических соединений, описанные в настоящем документе, которые заполняют валентности этих гетероатомов. Более того, настоящее изобретение никоим образом не ограничивается допустимыми заместителями органических соединений. Комбинации заместителей и переменных, предполагаемые настоящим изобретением, предпочтительно являются такими, которые приводят к образованию устойчивых соединений, пригодных для лечения, например, инфекционных заболеваний или пролиферативных расстройств. Термин «устойчивые», при использовании в настоящем документе, предпочтительно, относится к соединениям, которые обладают достаточной устойчивостью для обеспечения возможности производства и которые сохраняют целостность соединения в течение достаточного периода времени, чтобы быть обнаруженными и, предпочтительно, в течение достаточного периода времени, чтобы быть пригодными для целей, детализированных в настоящем документе.
[0059] При использовании в настоящем документе, термин «адаптивная иммунная реакция» относится к любому типу антиген-специфической иммунной реакции. Адаптивные иммунные реакции, которые в данной области известны также как специфические иммунные реакции, затрагивают лимфоциты и также характеризуются иммунологической памятью, посредством которой реакция на второе или последующее воздействие антигена более активна, чем реакция на первое воздействие антигена. Термин «адаптивная иммунная реакция» включает как гуморальный (антительный) иммунитет и клеточно-опосредованный (клеточный) иммунитет.
[0060] При использовании в настоящем документе, «аллергия» относится к приобретенной гиперчувствительности к веществу (аллергену). Аллергические состояния включают экзему, аллергический ринит или насморк, сенную лихорадку, астму, уртикарную сыпь (крапивницу) и пищевые аллергии, а также другие атопические состояния.
[0061] При использовании в настоящем документе, термин «антигенное вещество» относится к любому веществу, которое вызывает адаптивную (специфическую) иммунную реакцию. Антиген обычно представляет собой любое вещество, которое может специфически связываться с T-клеточным антигенным рецептором, антителом или B-клеточным антигенным рецептором. Антигенные вещества включают, без ограничения, пептиды, белки, углеводы, липиды, фосфолипиды, нуклеиновые кислоты, аутакоиды и гормоны. Антигенные вещества дополнительно включают, в частности, антигены, которые классифицируют как аллергены, раковые антигены и микробные антигены.
[0062] При использовании в настоящем документе, «астма» относится к расстройству дыхательной системы, характеризующемуся воспалением, сужением дыхательных путей и повышенной реактивностью дыхательных путей к вдыхаемым агентам. Астма зачастую, хотя не всегда связана с атомическими или аллергическими симптомами. Например, астма может быть вызвана воздействием аллергена, воздействием холодного воздуха, респираторной инфекцией и физической нагрузкой.
[0063] При использовании в настоящем документе, термины «аутоиммунное заболевание» и, равноценно, «аутоиммунное расстройство» и «аутоиммунитет» относятся к иммунологически опосредованному острому или хроническому поражению ткани или органа, полученного от хозяина. Эти термин охватывают как клеточные так и опосредованные антителами аутоиммунные явления, а также органоспецифический и органонеспецифический аутоиммунитет. Аутоиммунные заболевания включают инсулинозависимый сахарный диабет, ревматоидный артрит, системную красную волчанку, рассеянный склероз, атеросклероз, псориаз и воспалительную болезнь кишечника. Аутоиммунные заболевания включают также, без ограничения, анкилозирующий спондилит, аутоиммунную гемолитическую анемию, синдром Бехчета, синдром Гудпасчера, болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, тиреоидит Хасимото, идиопатическую тромбоцитопению, миастению гравис, злокачественную анемию, нодозный полиартериит, полимиозит/дерматомиозит, первичный билиарный склероз, саркоидоз, склерозирующий холангит, синдром Шегрена, системный склероз (склеродермию и КРЕСТ-синдром), артериит Такаясу, височный артериит и гранулематоз Вегенера. Аутоиммунные заболевания включают также некоторые связанные с иммунным комплексом заболевания.
[0064] При использовании в настоящем документе, термины «рак» и, эквивалентно, «опухоль» относятся к состоянию, при котором патологически воспроизводящиеся клетки, произошедшие от хозяина, присутствует в организме субъекта в обнаруживаемом количестве. Рак может быть злокачественным или незлокачественным раком. Раки и опухоли включают, но не ограничиваясь этим, рак желчных протоков; рак головного мозга; рак молочной железы; рак шейки матки; хориокарциному; рак ободочной кишки; рак эндометрия; рак пищевода; гастральный (желудочный) рак; внутриэпителиальные неоплазмы; лейкозы; лимфомы; рак печени; рак легких (например, мелкоклеточный и немелкоклеточный); меланому; нейробластомы; рак рта; рак яичников; рак поджелудочной железы; рак простаты; ректальный рак; ренальный (почечный) рак; саркомы; рак кожи; рак яичек; рак щитовидной железы, а также другие карциномы и саркомы. Раки могут быть первичными или метастатическими.
[0065] При использовании в настоящем документе, термин «CpG ДНК» относится к иммуностимулирующей нуклеиновой кислоте, которая содержит цитозин-гуаниновый (CG) динуклеотид, С-остаток которого не метилирован. Влияние нуклеиновых кислот CpG на иммунную модуляцию было подробно описано в патентах США, таких как патенты США с серийными номерами 6194388; 6207646; 6239116; и 6218371, а также в опубликованных заявках на международный патент, таких как WO 98/37919, WO 98/40100, WO 98/52581 и WO 99/56755. Полное содержание каждого из этих патентов и опубликованных заявок на патент включено в настоящий документ путем ссылки. Не метилированной может быть вся иммуностимулирующая нуклеиновая кислота, или не метилированными могут быть ее части, но не метилированным должен быть, по меньшей мере, C в 5'-CG-3'.
[0066] В одном варианте реализации, CpG ДНК представляет собой CpG олигодезоксирибонуклеотид (ОДН), который имеет последовательность оснований, представленную 5'-TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3' (ОДН 2006; SEQ ID NO: 1). CpG ОДН дополнительно классифицируют по структуре и функции, по меньшей мере, на следующие три класса или типа, которые все охвачены термином CpG ОДН, используемым в настоящем документе: CpG ОДН В-класса, такие как ОДН 2006, включают первоначально описанный иммуностимулирующий CpG ОДН и характеристически активируют В-клетки и NK-клетки, но не вызывает или лишь слабо вызывает экспрессию интерферона I типа (например, IFN-a). CpG ОДН А-класса, описанные в опубликованной международной заявке РСТ WO 01/22990, внедряют мотив CpG, включают химерный скелет фосфодиэфира/фосфоротиоата и характеристически активируют NK-клетки, и вызывают экспрессию плазмацитоидными дендритными клетками больших количеств IFN-a, но не активируют или лишь слабо активируют В-клетки. Пример CpG ОДН А-класса представляет собой 5'-G*G*GGGACGATCGTCG*G*G*G*G*G-3' (ОДН 2216, SEQ ID NO: 2), где «*» представляет собой фосфоротиоат, и «» представляет собой фосфодиэфир. CpG ОДН С-класса включают CpG, включают полностью фосфоротиоатный скелет, включают богатую GC палиндромную или почти палиндромную область и способны активировать В-клетки, а также вызывать экспрессию IFN-a. CpG ОДН C-класса были описаны, например, в опубликованной заявке на патент США 2003/0148976. Пример CpG ОДН С-класса представляет собой 5'-TCGTCGTTTTCGGCGCGCGCCG-3' (ОДН 2395; SEQ ID NO: 3). Обзор различных классов CpG ОДН представлен также в публикации Vollmer J et al. (2004) Eur J Immunol 34:251-62.
[0067] При использовании в настоящем документе, «цитокин» относится к любому из множества растворимых белков или гликопротеинов, которые действуют на иммунные клетки через специфические рецепторы, воздействуя на состояние активации и функцию иммунных клеток. Цитокины включают интерфероны, интерлейкины, фактор некроза опухоли, трансформирующий бета-фактор роста, колониестимулирующие факторы (CSF), хемокины, а также другие. Различные цитокины влияют на врожденный иммунитет, приобретенный иммунитет, или на них обоих. Цитокины, в частности, включают, без ограничения, IFN-a, IFN-p, IFN-y, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-18, TNF-a, TGF-β гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (G-CSF) и гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF). Хемокины, в частности, включают, без ограничения, IL-8, IP-10, I-TAC, RANTES, MIP-1a, MIP-1p, Gro-a, Gro-, Gro-y, MCP-1, MCP-2 и MCP-3.
[0068] Более зрелые T-хелперные клетки CD4+ могут быть классифицированы на цитокин-ассоциированные, поперечено-регуляторные подмножества или фенотипы: Th1, Th2, Th17 или TReg. Клетки Th1 связаны с IL-2, IL-3, IFN, GM-CSF и высокими уровнями TNF-a. Клетки Th2 связаны с IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-13, GM-CSF и низкими уровнями TNF-a. Подмножество Th1 промотирует клеточно-опосредованный иммунитет и гуморальный иммунитет, который характеризуется у мышей переключением иммуноглобулинового класса на IgG2a. Реакции Th1 могут быть также связаны с гиперчувствительностью замедленного типа и аутоиммунным заболеванием. Подмножество Th2 вызывает, в основном, гуморальный иммунитет и вызывает у мышей переключение иммуноглобулинового класса на IgE и IgGI. Изотипы антител, связанные с реакциями Th1, обычно обладают хорошими нейтрализующими и опсонизирующими способностями, тогда как те, которые связаны с реакциями Th2, больше связаны с аллергическими реакциями.
[0069] Было показано, что некоторые факторы влияют на коммитирование профилей Th1 или Th2. Регуляторы, описанные лучше всего, представляют собой цитокины. IL-12 и IFN-y представляют собой положительные регуляторы Th1 и отрицательные регуляторы Th2. IL-12 промотирует продуцирование IFN-y, а IFN-y обеспечивает положительный ответ на IL-12. IL-4 и IL-10 необходимы для установления профиля цитокина Th2 и для понижающей регуляции продуцирования цитокина Th1; влияние IL-4 в некоторых случаях доминирует над влиянием IL-12. Было показано, что IL-13 ингибирует экспрессию воспалительных цитокинов, включая IL-12 и TNF-a, за счет LPS-индуцированных моноцитов, таким же образом, как IL-4.
[0070] При использовании в настоящем документе, «эффективное количество» относится к любому количеству, которое необходимо или достаточно для достижения или ускорения заданного результата. В некоторых случаях эффективное количество представляет собой терапевтически эффективное количество. Терапевтически эффективное количество представляет собой любое количество, которое необходимо или достаточно для ускорения или достижения заданной биологической реакции у субъекта. Эффективное количество для любого конкретного применения может варьироваться в зависимости от таких факторов, как заболевание или состояние, подлежащее лечению, конкретного введенного агента, величины субъекта или тяжести заболевания или состояния. Специалисты в данной области могут эмпирически определить эффективное количество конкретного агента без излишних экспериментов.
[0071] При использовании в настоящем документе, «отторжение трансплантата» относится к иммунологически опосредованной сверхостром, остром или хроническом поражении ткани или органа, полученного из другого источника, а не от хозяина. Следовательно, этот термин охватывает как клеточное, так и антитело-опосредованное отторжение, а также отторжение аллотрансплантатов и ксенотрансплантатов.
[0072] При использовании в настоящем документе, термин «иммунная клетка» относится к клетке, принадлежащей к иммунной системе. Иммунные клетки включают Т-лимфоциты (Т-клетки), В-лимфоциты (В-клетки), природные клетки-киллеры (NK), гранулоциты, нейтрофилы, макрофаги, моноциты, дендритные клетки и специализированные формы любых из вышеперечисленных, например, плазмацитоидные дендритные клетки, клетки плазмы, NKT, Т-хелперы и цитотоксические Т-лимфоциты (CTL).
[0073] При использовании в настоящем документе, термин «иммунный комплекс» относится к любому конъюгату, содержащему антитело и антиген, специфически связанный с антителом. В одном варианте реализации, антиген представляет собой аутоантиген.
[0074] При использовании в настоящем документе, термин «иммунный комплекс, содержащий нуклеиновую кислоту», относится к любому конъюгату, содержащему антитело и антиген, содержащий нуклеиновую кислоту и специфически связанный с антителом. Антиген, содержащий нуклеиновую кислоту, может содержать хроматин, рибосомы, небольшие ядерные белки, гистоны, нуклеосомы, ДНК, РНК или любую их комбинацию. Антитело может, но не обязательно должно быть специфически связано с компонентом нуклеиновой кислоты антигена, содержащего нуклеиновую кислоту. В некоторых вариантах реализации, термин «иммунный комплекс, содержащий нуклеиновую кислоту» относится также к неантительным комплексам, таким как HMGB1, LL-37, а также к другим белкам, связывающим нуклеиновые кислоты, таким как гистоны, факторы транскрипции и ферменты, закомплексованные с нуклеиновыми кислотами.
[0075] При использовании в настоящем документе, термин «заболевание, связанное с иммунным комплексом» относится к любому заболеванию, характеризующемуся продуцированием и/или накоплением в ткани иммунных комплексов, включая, но не ограничиваясь этим, системную красную волчанку (SLE) и родственные заболевания соединительной ткани, ревматоидный артрит, заболевания иммунного комплекса, связанные с гепатитом C и гепатитом B (например, криоглобулинемия), синдром Бехчета, аутоиммунный гломерулонефрит и васкулопатию, связанную с присутствием иммунных комплексов LDL/анти-LDL.
[0076] При использовании в настоящем документе, «иммунодефицит» относится к заболеванию или расстройству, при котором иммунная система субъекта не функционирует с нормальной эффективностью или при котором необходимо усилить иммунную реакцию субъекта, например, во избежание опухоли или рака (например, опухолей головного мозга, легких (например, мелкоклеточных или немелкоклеточных), яичников, молочной железы, простаты, ободочной кишки, а также других карцином и сарком) или инфекции у субъекта. Иммунодефицит может быть приобретенным, или он может быть наследственным.
[0077] При использовании в настоящем документе, «реакция у субъекта, связанная с иммуностимулирующей нуклеиновой кислотой» относится к измеримой реакции у субъекта, связанной с введением указанному субъекту иммуностимулирующей нуклеиновой кислоты. Такие реакции включают, без ограничения, выработку цитокинов, хемокинов, факторов роста или иммуноглобулина; экспрессию поверхностных маркеров активации иммунных клеток; изменение Th1/Th2; и клиническую активность заболевания.
[0078] При использовании в настоящем документе, термины «инфекция» и, эквивалентно, «инфекционное заболевание» относятся к состоянию, при котором инфекционный организм или агент присутствует в обнаруживаемом количестве в крови или в стерильной при нормальных условиях ткани или в стерильном при нормальных условиях отделе субъекта. Инфекционные организмы и агенты включают вирусы, бактерии, грибки и паразиты. Этот термин охватывает как острые, так и хронические инфекции, а также сепсис.
[0079] При использовании в настоящем документе, термин «врожденная иммунная реакция» относится к любому типу иммунной реакции на определенные патоген-ассоциированные молекулярные паттерны (РАМР) или ассоциируемые с опасностью молекулярные паттерны (DAMP). Врожденный иммунитет, который в данной области известен также как природный или естественный иммунитет, затрагивает, в основном, нейтрофилы, гранулоциты, мононуклеарные фагоциты, дендритные клетки, клетки NKT и клетки NK. Врожденные иммунные реакции могут включать, без ограничения, продуцирование интерферона I типа (например, IFN-a), активацию нейтрофилов, активацию макрофагов, фагоцитоз, опсонизацию, комплементную активацию и любую их комбинацию.
[0080] При использовании в настоящем документе, термин «собственная ДНК» относится к любой ДНК, полученной из генома субъекта-хозяина. В одном варианте реализации, собственная ДНК включает комплементарную ДНК (кДНК), полученную из организма субъекта-хозяина. Собственная ДНК включают интактную и укороченную ДНК.
[0081] При использовании в настоящем документе, термин «собственная РНК» относится к любой РНК, полученной из генома субъекта-хозяина. В одном варианте реализации, собственная РНК представляет собой матричную РНК (мРНК), полученную из организма субъекта-хозяина. В другом варианте реализации, собственная РНК представляет собой регуляторную РНК, такую как микроРНК. В одном варианте реализации, собственная РНК включает рибосомальную РНК (рРНК), полученную из организма субъекта-хозяина. Собственная РНК включает интактную и укороченную РНК.
[0082] При использовании в настоящем документе, термин «субъект» относится к позвоночному животному. В одном варианте реализации, субъект представляет собой млекопитающее. В одном варианте реализации, субъект представляет собой человека. В других вариантах реализации, субъект представляет собой позвоночное животное, не являющееся человеком, включая, без ограничения, приматов, не являющихся человеком, лабораторных животных, сельскохозяйственных животных, домашних животных и не одомашненных животных.
[0083] При использовании в настоящем документе, «субъект, страдающий или имеющий риск развития TLR-опосредованной иммуностимуляции» относится к субъекту, на которого воздействует или существует риск воздействия PAMP, DAMP или другого лиганда TLR.
[0084] При использовании в настоящем документе, термины «Toll-подобный рецептор» и, эквивалентно, «TLR» относится к любому члену семейства, состоящего, по меньшей мере, из тринадцати высококонсервативных белков образраспознающих рецепторов млекопитающих (TLR1-TLR13), которые распознают PAMP, DAMP и действуют как ключевые элементы передачи сигналов во врожденном иммунитете. Полипептиды TLR имеют общую характеристическую структуру, которая содержит внеклеточный (экстрацитоплазматический домен), который имеет богатые лейцином повторы, трансмембранный домен и внутриклеточный (цитоплазматический) домен, который участвует в передаче сигналов TLR. TLR включают, но не ограничиваясь этим, TLR человека.
[0085] Последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для всех десяти известных в настоящее время TLR человека содержатся в общедоступных базах данных, таких как GenBank. Точно также, последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для различных TLR из многочисленных видов, не являющихся человеком, также содержатся в общедоступных базах данных, включая GenBank. Например, последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для TLR9 человека (hTLR9) можно найти под номерами доступа GenBank AF245704 (кодирующая область, охватывающая нуклеотиды 145-3243) и AAF78037, соответственно. Последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для мышиного TLR9 (mTLR9) можно найти под номерами доступа GenBank AF348140 (кодирующая область, охватывающая нуклеотиды 40-3138) и AAK29625, соответственно. Предсказанный белок TLR9 человека содержит 1032 аминокислоты и имеет общую аминокислотную идентичность 75,5% с мышиным TLR9. Как и другие белки TLR, TLR9 человека содержит внеклеточные богатые лейцином повторы (LRR) и цитоплазматический Toll/интерлейкин-1R (TIR) домен. Он имеет также сигнальный пептид (остатки 1-25) и трансмембранный домен (остатки 819-836).
[0086] Последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для TLR8 человека (hTLR8) можно найти под номерами доступа GenBank AF245703 (кодирующая область, охватывающая нуклеотиды 49-3174) и AAF78036, соответственно. Последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для мышиного TLR8 (mTLR8) можно найти под номерами доступа GenBank AY035890 (кодирующая область, охватывающая нуклеотиды 59-3157) и AAK62677, соответственно.
[0087] Последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для TLR7 человека (hTLR7) можно найти под номерами доступа GenBank AF240467 (кодирующая область, охватывающая нуклеотиды 135-3285) и AAF60188, соответственно. Последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для мышиного TLR7 (mTLR7) можно найти под номерами доступа GenBank AY035889 (кодирующая область, охватывающая нуклеотиды 49-3201) и AAK62676, соответственно.
[0088] Последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для TLR3 человека (hTLR3) можно найти под номерами доступа GenBank NM003265 (кодирующая область, охватывающая нуклеотиды 102-2816) и NP003256, соответственно. Последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот для мышиного TLR3 (hTLR3) можно найти под номерами доступа GenBank AF355152 (кодирующая область, охватывающая нуклеотиды 44-2761) и AAK26117, соответственно.
[0089] Тогда как hTLRl экспрессируется убиквитарно, hTLR2, hTLR4 и hTLR5 присутствуют в моноцитах, молиморфонуклеарных фагоцитах и дендритных клетках. Muzio М et al (2000) J Leukoc Biol 67:450-6. В недавних публикациях было описано, что hTLRl, hTLR6, hTLR7, hTLR9 и hTLR10 присутствуют в В-клетках человека.
Человеческий TLR7 и hTLR9 присутствуют в плазмацитоидных дендритных клетках (pDC), тогда как миелоидные дендритные клетки экспрессируют hTLR7 и hTLR8, но не hTLR9. Однако TLR8 человека не экспрессируется в pDC.
[0090] Как члены семейства провоспалительного рецептора интерлейкина-1 (IL-1R), TLR обладают общей гомологией в своих цитоплазматических доменах, называемых доменами гомологии Toll/IL-IR (TIR). Смотри опубликованные РСТ публикации PCT/US98/08979 и PCTAJS01/16766. Внутриклеточные механизмы передачи сигналов, опосредованные TLR, в основном, одинаковы, причем MyD88 и ассоциированный с рецептором фактора некроза опухоли фактор 6 (TRAF6) предположительно играют решающие роли. Wesche Н et al. (1997) Immunity 7: 837-47; Medzhitov R et al. (1998) Mol Cell 2: 253-8; Adachi О et al. (1998) Immunity 9: 143-50; Kawai T et al. (1999) Immunity 11: 115-22); Cao Z et al. (1996) Nature 383:443-6; Lomaga MA et al. (1999) Genes Dev 13: 1015-24. Сигнальная трансдукция между MyD88 и TRAF6, как известно, затрагивает члены семейства киназ, ассоциированных с рецептором серин-треонинкиназы IL-1 (IRAK), включая, по меньшей мере, IRAK-1 и IRAK-2. Muzio М et al. (1997) Science 278: 1612-5.
[0091] Вкратце, MyD88 предположительно действует как адаптерная молекула между TIR доменом TLR или IL-1R и IRAK (который включает, по меньшей мере, один из IRAK-1, IRAK-2, IRAK-4 и IRAK-M). MyD88 содержит C-концевой домен гомологии Toll и N-концевой домен смерти. Домен Toll-гомологии MyD88 связывает TIR домен TLR или IL-1R, а домен смерти MyD88 связывает домен смерти серинкиназы IRAK. IRAK взаимодействует с TRAF6, который действует как проход, по меньшей мере, в два пути, один - ведущий к активации фактора транскрипции NF-KB, а другой - ведущий к активации Jun и Fos, членов семейства фактора транскрипции активирующего белка-1 (АР-1). Активация NF-KB включает активацию ТАК-1, члена семейства киназ MAP 3 (MAPK), и киназ IKB. Киназы IoB фосфорилируют IKB, что приводит к его расщеплению и транслокации NF-KB в ядро. Активация Jun и Fos предположительно затрагивает киназы MAP киназы (MAPKK) и MAP киназы ERK, р38 и JNK/SAPK. Оба NF-KB и АР-1 участвуют в контролировании транскрипции ряда ключевых генов иммунной реакции, включая гены для различных цитокинов и костимулирующих молекул. Смотри AdeRem A et al. (2000) Nature 406: 782-7; Hacker H et al. (1999) EMBO J 18: 6973-82.
[0092] При использовании в настоящем документе, термины «лиганд TLR» и, эквивалентно, «лиганд к TLR», а также «агонист передачи сигналов TLR» относятся к молекуле, отличной от низкомолекулярной молекулы Формулы I, описанной в настоящем документе, которая взаимодействует, прямо или косвенно, с TLR через домен TLR, отличный от домена TIR, и вызывает TLR-опосредованную передачу сигналов. В одном варианте реализации, лиганд TLR представляет собой природный лиганд, то есть, лиганд TLR, который встречается в природе. В одном варианте реализации, лиганд TLR относится к молекуле, отличной от природного лиганда TLR, например, к молекуле, полученной в результате человеческой деятельности. В одном варианте реализации, TLR представляет собой TLR9, а сигнальный агонист TLR представляет собой CpG нуклеиновую кислоту.
[0093] Описаны лиганды для многих, но не для всех TLR. Например, было описано, что TLR2 передает сигналы в ответ на пептидогликан и липопептиды. YoshimuRa A et al. (1999) J Immunol 163: 1-5; Brightbill HD et al. (1999) Science 285: 732-6; AlipRantis AO et al. (1999) Science 285: 736-9; Takeuchi О et al. (1999) Immunity 11: 443-51; Underhill DM et al. (1999) Nature 401: 811-5. Было описано также, что TLR4 передает сигналы в ответ на липополисахарид (LPS). Смотри Hoshino K et al. (1999) Immunol 162: 3749-52; Poltorak Aet al. (1998) Science 282: 2085-8; Medzhitov R et al. (1997) Nature 338: 394-7. Было также описано, что бактериальный флагеллин представляет собой природный лиганд к TLR5. Смотри Hayashi F et al. (2001) Nature 410: 1099-1103. Было описано, TLR6, сопряженный с TLR2, передает сигналы в ответ на протеогликан. Смотри Ozinsky A et al. (2000) Proc Natl Acad Sci USA 97: 13766-71; Takeuchi O et al. (2001) Int Immunol 13: 933-40.
[0094] Недавно было описано, что TLR9 представляет собой рецептор для CpG ДНК. Hemmi Н et al. (2000) Nature 408: 740-5; Bauer S et al. (2001) Proc Natl Acad Sci USA 98: 9237-42. CpG ДНК, которая включает бактериальную ДНК и синтетическую ДНК с CG динуклеотидами, в которых цитозин не метилирован, более подробно описан в других источниках. Marshak-Rothstein с коллегами недавно также описали свое открытие, что передача сигналов TLR9 может возникать при некоторых аутоиммунных заболеваниях в ответ на иммунные комплексы, содержащие IgG и хроматин. Leadbetter ЕА et al. (2002) Nature 416: 595-8. Следовательно, в широком смысле доказано, что TLR9 может передавать сигналы в ответ на собственную или не собственную нуклеиновую кислоту, как ДНК, так и РНК, если эта нуклеиновая кислота присутствует в соответствующем контексте, например, как часть иммунного комплекса.
[0095] Недавно было описано, что некоторые имидазохинолиновые соединения, обладающие противовирусной активностью, представляют собой лиганды TLR7 и TLR8. Hemmi Н et al. (2002) Nat Immunol 3: 196-200; Jurk M et al. (2002) Nat Immunol 3: 499. Имидазохинолины представляют собой сильнодействующие синтетические активаторы иммунных клеток с противовирусными и противоопухолевыми свойствами. Используя макрофаги из мышей дикого типа и мышей с дефицитом MyD88, Hemmi et al. недавно показали, что два имидазохинолина, имиквимод и резиквимод (R848), вызывают фактор некроза опухоли (TNF) и интерлейкин-12 (IL-12) и активируют NF-KB только в клетках дикого типа, что согласуется с кативацией через TLR. Hemmi et al. (2002) Nat Immunol 3: 196-200. Макрофаги из мышей с дефицитом TLR7, но не других TLR, не продуцировали обнаруживаемые количества цитокинов в ответ на эти имидазохинолины. Кроме того, указанные имидазохинолины вызывали дозозависимую пролиферацию селезеночных B-клеток и активацию внутриклеточных сигнальных каскадов в клетках из мышей дикого типа, но не в клетках из мышей TLR7-/-. Люциферазный анализ установил, что экспрессия человеческого TLR7, но не TLR2 или TLR4, в человеческих зародышевых почечных клетках приводит к активации NF-KB в ответ на резиквимод. Следовательно, открытия Hemmi et al. позволяют предположить, что эти имидазохинолиновые соединения представляют собой неприродные лиганды TLR7, которые могут вызывать передачу сигналов через TLR7. Недавно было описано, что R848 также представляет собой лиганд к человеческому TLR8. Смотри Jurk М et al. (2002) Nat Immunol 3:499. Nat Immunol 3: 499. Было также описано, что оцРНК представляет собой природный лиганд, и что аберрантная стимуляция TLR7 и/или TLR8 под действием РНК: комелксов участвует в аутоиммунитете.
[0096] Недавно было описано, что лиганды TLR3 включают поли (I: C) и двухцепочечные РНК (дцРНК). Для целей настоящего изобретения, поли (I: C) и двухцепочечную РНК (дцРНК) классифицируют как олигонуклеотидные молекулы. Стимуляцией почечных клеток, экспрессирующих один из ряда TLR с поли (I: С), ученые Alexopoulou et al. описали, что только клетки, экспрессирующие TLR3, реагируют на активацию NF-aB. Смотри Alexopoulou L et al. (2001) Nature 413: 732-8.
[0097] Alexopoulou et al. описали также, что клетки дикого типа, стимулированные действием поли (I: С), активируют NF-KB и продуцируют воспалительные цитокины IL-6, IL-12 и TNF-a, тогда как соответствующие реакции TLR3-/- клеток были существенно ослаблены. Напротив, клетки TLR3-/- реагировали эквивалентно клеткам дикого типа в ответ на липополисахарид, пептидогликан и CpG динуклеотиды. Анализ клеток MyD88-/- показал, что этот адаптерный белок участвует в дцРНК-индуцированной выработке цитокинов и пролиферативных реакциях, без ущерба для активации NF-KB и киназ MAP, что указывает на различные пути для этих клеточных реакций. Alexopoulou et al. предположили, что TLR3 может играть роль в защитной реакции хозяина против вирусов.
[0098] При использовании в настоящем документе, «клетка, экспрессирующая TLR» относится к любой клетке, которая экспрессирует, естественно или искусственно, функциональный TLR. Функциональный TLR представляет собой белок TLR полной длины или его фрагмент, способный вызывать сигнал в ответ на взаимодействием с его лигандом.
[0099] В общем, функциональный TLR содержит, по меньшей мере, TLR лиганд-связывающий фрагмент внеклеточного домена TLR полной длины и, по меньшей мере, фрагмент TIR домена, способный взаимодействовать с другим полипептидом, содержащим домен Toll-гомологии, например, MyD88. В различных вариантах реализации, TLR представляет собой TLR полной длины, выбранный из TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9 и TLR10.
Соединения
[00100] В одном аспекте описаны новые птеридиновые соединения. Авторы настоящей заявки неожиданно открыли птеридиновые соединения в качестве модуляторов иммунной системы. Неожиданным было то, что птеридиновые соединения, описанные в настоящем документе, пригодны в способах ингибирования иммунной реакции, как in vitro, так и in vivo, включая способы лечения заболеваний, связанных с иммунным комплексом, и аутоиммунных расстройств. В другом аспекте настоящего изобретения представлены новые птеридиновые композиции. Как описано ниже, было обнаружено, что эти композиции и другие птеридиновые композиции пригодны в способах ингибирования иммунной реакции, как in vitro, так и in vivo, включая способы лечения заболеваний, связанных с иммунным комплексом, и аутоиммунных расстройств. Предполагается также, что новые птеридиновые композиции, описанные в настоящем документе, могут быть использованы для предупреждения и лечения малярии, а также для лечения других заболеваний.
[00101] В одном аспекте описано соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемая соль:
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2 '
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, гетероарил, арил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой H или метил, то Q не представляет собой H.
2
m
[00102] В некоторых вариантах реализации, X отсутствует. В других вариантах реализации, X выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, арила и гетероцикла. В некоторых вариантах реализации, X представляет собой -(CH)-, где m равен 2-4. В других вариантах реализации, X представляет собой арил. Неограничивающие примеры арила включают необязательно замещенный фенил и нафтил. В других вариантах реализации, X представляет собой гетероцикл. В некоторых вариантах реализации, X представляет собой насыщенный гетероцикл. Неограничивающие примеры насыщенного гетероцикла включают пиперазин. В других вариантах реализации, X представляет собой ненасыщенный гетероцикл. Неограничивающие примеры ненасыщенного гетероцикла включают пиридин, пиразин, пиримидин и пиридазин.
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
1
2
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
1
1
1
2
2
q
1
2
2
2
1
2
12
12
2
p
b
c
2
2
3
2
2
2
2
3
2
2
2
3
2
3
[00103] В некоторых вариантах реализации, Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR, CRRR или CHRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4. R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4. В некоторых вариантах реализации, Q представляет собой H, OR, SR или CHRR. В других вариантах реализации, Q представляет собой -(CH)NRR. В некоторых конкретных вариантах реализации, Q представляет собой -(CH)NRR. В некоторых конкретных вариантах реализации, Q представляет собой . В других вариантах реализации, Q представляет собой , где R представляет собой алкил, арил или гетероцикл. В некоторых вариантах реализации, C(=O)R представляет собой ,  или . В других вариантах реализации, Q представляет собой NH(CH)NRR. В некоторых конкретных вариантах реализации, Q представляет собой NH(CH)N(CH), NH(CH)N(CHCH) или NH(CH)N(CH)(CHCH). В других вариантах реализации, Q представляет собой алкил. Неограничивающие примеры алкила включают метил, этил, пропил, изо-пропил, бутил, втор-бутил и трет-бутил.
[00104] В некоторых вариантах реализации, X представляет собой фениловую группу. В этих вариантах реализации, Q присоединен к фениловой группе в орто, мета или пара-положении относительно птеридинового ядра. В некоторых конкретных вариантах реализации, Q представляет собой . В некоторых конкретных вариантах реализации, Q представляет собой , присоединенный к фениловой группе в пара-положении относительно птеридинового ядра.
11
11
[00105] В некоторых вариантах реализации, Y представляет собой кислород. В других вариантах реализации, Y представляет собой серу. В других вариантах реализации, Y представляет собой NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкенилову или ариловую группу. В некоторых вариантах реализации, L представляет собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 4 углеродных атомов.
2
2
7
3
4
3
4
6
5
5
[00106] В других вариантах реализации, X представляет собой водород. В некоторых конкретных вариантах реализации, Y представляет собой NH. В некоторых конкретных вариантах реализации, L представляет собой -(CH)-. В некоторых конкретных вариантах реализации, R представляет собой NRR. В некоторых конкретных вариантах реализации, R и R объединены в виде морфолино-группы. В некоторых конкретных вариантах реализации, R представляет собой . В некоторых конкретных вариантах реализации, R представляет собой водород. В других конкретных вариантах реализации, R представляет собой хлор.
7
[00107] В некоторых конкретных вариантах реализации, X представляет собой фениловую группу, а Q представляет собой . В этих вариантах реализации, R представляет собой морфолино-группу, a Y представляет собой O или NH. Другие группы заместителей являются такими, как описано в настоящем документе.
2
m
[00108] В некоторых конкретных вариантах реализации, -X-Q представляет собой . В других конкретных вариантах реализации, -X-Q представляет собой . В других конкретных вариантах реализации, -X-Q представляет собой . В других конкретных вариантах реализации, -X-Q представляет собой . В этих вариантах реализации, Y представляет собой NH, S или О, и L представляет собой -(CH)-, где m равен 2-6. Другие группы заместителей являются такими, как описано в настоящем документе.
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
7
7'
7
7'
3
4
1
4
3
4
3
4
7
3
4
3
4
7
3
2
7
7
7
7
7
[00109] В некоторых вариантах реализации, R и R, каждый независимо, представляют собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил. R и R могут быть одинаковыми или различными. В некоторых вариантах реализации, R или R представляет собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, a R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл. В некоторых конкретных вариантах реализации, R представляет собой NRR. В некоторых конкретных вариантах реализации, R и R представляют собой алкиловые группы. В некоторых конкретных вариантах реализации, R представляет собой N(CH). В других конкретных вариантах реализации, R представляет собой морфолино-группу. В других конкретных вариантах реализации, R представляет собой  или . В других конкретных вариантах реализации, R представляет собой алкил. В других конкретных вариантах реализации, R представляет собой арил или гетероарил. Неограничивающие примера ариловой и гетероариловой группы для R включают
, , , , , ,  и .
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
a
b
c
b
c
1
4
5
6
3
2
3
3
3
3
[00110] В некоторых вариантах реализации, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR. В каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом. В некоторых вариантах реализации, R или R выбран из группы, состоящей из H, СН, СНСН, фенила, F, Br, Cl, OH, CF, SCH, S(=O)CH, , , , , , Ph,  и .
[00111] В других вариантах реализации, соединение Формулы (I) имеет структуру Формулы (II):
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2
Q представляет собой H, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R или алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой Н или метил, то Q не представляет собой H.
[00112] В других вариантах реализации, соединение Формулы (I) имеет структуру Формулы (III):
где
1
2
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой H, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (С-С)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00113] В других вариантах реализации, соединение Формулы (I) имеет структуру Формулы (IV):
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
n равен 2-6;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, где гетероарил или арил необязательно замещены (С-С)алкилом, галогеном или амино;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R независимо представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой Н или метил, то Q не представляет собой Н.
11
11
1
4
1
4
[00114] В некоторых конкретных вариантах реализации, Y в соединении Формулы (IV) представляет собой NR, и R выбран из группы, состоящей из Н или (C-C)алкила. Неограничивающие примеры (C-C)алкила включают метил, этил, пропил, изо-пропил, бутил, втор-бутил и трет-бутил.
1
2
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
[00115] В некоторых вариантах реализации, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4.
1
2
3
4
b
c
[00116] В некоторых вариантах реализации, NRR, NRR и NRR, каждый независимо, представляют собой гетероцикл, выбранный из
d
2
3
2
12
2
p
a
2
p
b
c
12
a
b
c
1
4
b
c
и , где R представляет собой Н, Me, Et, n-Pr, i-Pr, n-Bu, i-Bu, t-Bu, CHCMe, Ph, CHPh, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где R представляет собой алкил, фенил или гетероцикл; R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород или (C-C)алкил, или R и R, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от трех до семи кольцевых атомов, и это кольцо может необязательно содержать другой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, и может быть необязательно замещено одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из группы, состоящей из алкила, фенила и бензила; и p равен 2-4.
5
6
1
4
1
4
a
b
c
a
2
a
2
b
c
a
b
c
1
4
b
c
6
d
2
3
2
[00117] В некоторых вариантах реализации, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, (C-C)алкил, гидрокси, (C-C)алкокси, SR, NRR, S(=O)R, S(=O)R, S(=O)NRR, где R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород или (C-C)алкил, или R и R, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее от трех до семи кольцевых атомов, и это кольцо может необязательно содержать другой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, и может быть необязательно замещено одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из группы, состоящей из алкила, фенила и бензила. В некоторых конкретных вариантах реализации, R представляет собой , где R представляет собой Н, Me, Et, n-Pr, i-Pr, n-Bu, i-Bu, t-Bu, CHCMe, Ph или CHPh.
[00118] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы V:
где
3
A представляет собой =O, =S или =NR;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл; и
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
5
1
4
1
4
5
1
4
1
4
2
2
3
2
3
2
2
2
2
2
3
5
3
1
4
5
3
[00119] В некоторых вариантах реализации, R представляет собой (C-C)алкил или галоген. Неограничивающие примеры (C-C)алкила включают Me, Et, Pr, i-Pr, Bu, sec-Bu, tert-Bu. В других вариантах реализации, R представляет собой галогенированный (C-C)алкил. Неограничивающие примеры галогенированного (C-C)алкила включают CFH, CFH, CF, CFCF, CFCFH, CFCHF, CFCH. В других вариантах реализации, R представляет собой Ph или замещенную фениловую группу, где каждый из 1-5 водородов замещен галогеном, OH, амино, нитро, CF или (C-C)алкилом. В некоторых конкретных вариантах реализации, R выбран из группы, состоящей из Me, CF, Ph, 3,5-дифторфенила и 3,5-дихлорфенила.
[00120] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы VI:
где
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00121] В некоторых вариантах реализации, соединение Формулы I имеет структуру Формулы VII:
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00122] В одном аспекте настоящего изобретения представлено соединение, выбранное из Примеров 1-74, описанных в Таблицах 1, 2 и 3. Нумерованные соединения в Таблицах 1-3 представляют собой иллюстративные и неограничивающие птеридиновые соединения настоящего изобретения.
[00123] В другом аспекте настоящего изобретения представлена фармацевтическая композиция, содержащая, по меньшей мере, одно соединение формул I-VII, описанное в настоящем документе, и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
[00124] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ лечения аутоиммунного заболевания у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы I,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00125] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ лечения аутоиммунного заболевания у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы II,
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R или алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00126] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ лечения аутоиммунного заболевания у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы III,
где
1
2
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c
1
4
R представляет собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00127] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ лечения аутоиммунного заболевания у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы IV,
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1,
1
1
2
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR SR или CRRRr, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
n равен 2-6;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, гетероарил, арил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R независимо представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00128] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ лечения аутоиммунного заболевания у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы V,
,
где
3
А представляет собой =O, =S или =NR;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл; и
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил, или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00129] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ лечения аутоиммунного заболевания у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы VI,
,
где
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00130] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ лечения аутоиммунного заболевания у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы VII,
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00131] В некоторых вариантах реализации, птеридиновая композиция существует в форме гидрата или фармацевтически приемлемой соли. Птеридиновая композиция может быть введена субъекту любым пригодным способом введения, включая, без ограничения, пероральный и парентеральный. Парентеральные способы введения являются такими, как описано выше в отношении замещенных 4-первичных аминоптеридинов.
[00132] В некоторых вариантах реализации, аутоиммунное заболевание выбрано из кожной и системной красной волчанки, инсулинозависимого сахарного диабета, ревматоидного артрита, рассеянного склероза, атеросклероза, псориаза, псориатического артрита, воспалительной болезни кишечника, анкилозирующего спондилита, аутоиммунной гемолитической анемии, синдрома Бехчета, синдрома Гудпасчера, болезни Грейвса, синдрома Гийена-Барре, тиреоидита Хасимото, идиопатической тромбоцитопении, миастении гравис, злокачественной анемии, нодозного полиартериита, полимиозита/дерматомиозита, первичного билиарного склероза, саркоидоза, склерозирующего холангита, синдрома Шегрена, системного склероза (склеродермии и КРЕСТ-синдрома), артериита Такаясу, височного артериита и гранулематоза Вегенера.
[00133] В некоторых вариантах реализации, аутоиммунное заболевание выбрано из группы, состоящей из системной красной волчанки, ревматоидного артрита, псориаза, воспалительной болезни кишечника, синдрома Шегрена, полимиозита, васкулита, гранулематоза Вегенера, саркоидоза, анкилозирующего спондилита, синдрома Рейтера, псориатического артрита и синдрома Бехчета. В одном конкретном варианте реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой системную красную волчанку. В другом конкретном варианте реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит. В одном конкретном варианте реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз. В другом конкретном варианте реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой синдром Шегрена. В одном варианте реализации, субъект представляет собой человека. В одном варианте реализации, аутоиммунное заболевание представляет собой заболевание, связанное с иммунным комплексом, как описано выше.
[00134] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимуляции у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы I,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00135] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимуляции у млекопитающих видов, нуждающихся в этом, включающий введение указанным млекопитающим видам терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения Формулы II,
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00136] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы III,
где
1
2
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой Н, алкил, гетероарил, или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00137] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы IV,
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
n равен 2-6;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R независимо представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00138] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы V,
,
где
3
А представляет собой =O, =S или =NR;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл; и
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где
q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил, или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00139] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы VI,
,
где
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00140] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы VII,
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00141] В некоторых вариантах реализации, способ воздействия на TLR-опосредованную иммуно стимуляцию у субъекта включает введение субъекту, страдающему или имеющему риск развития TLR-опосредованной иммуностимуляции, эффективного количества соединения Формул I-VII, представленных в настоящем документе, для ингибирования TLR-опосредованной иммуностимуляции у указанного субъекта.
[00142] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы I,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, С(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (СгС4)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00143] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы II,
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой Н, алкил, гетероарил, или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R или алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00144] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы III,
где
1
2
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R представляет собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
m равен 2-6;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00145] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы IV,
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2 '
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
n равен 2-6;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, гетероарил, арил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R независимо представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
11
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу; R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00146] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы V,
,
где
3
А представляет собой =O, =S или =NR;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл; и Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где
q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (СгС4)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00147] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы VI,
,
где
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00148] В другом аспекте настоящего изобретения представлен способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, включающий контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения Формулы VII,
где
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (СН)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
3
4
3
4
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, арил, гетероарил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
5
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R представляет собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом.
[00149] В некоторых вариантах реализации, способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов включает контакт клетки, экспрессирующей TLR, с эффективным количеством соединения Формул I-VII, представленных выше, для ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов в ответ на лиганд к TLR.
[00150] В некоторых вариантах реализации, способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов включает контакт иммунной клетки, экспрессирующей функциональный TLR, с
(a) эффективным количеством агониста сигналов TLR для стимуляции передачи сигналов TLR в отсутствие птеридиновой композиции, и
(b) эффективным количеством птеридиновой композиции, имеющей структурную Формулу I, II, III, IV, V или VI, описанную в настоящем документе, для ингибирования передачи сигналов TLR в ответ на агонист сигналов TLR, по сравнению с передачей сигналов TLR в ответ на агонист сигналов TLR в отсутствие указанной птеридиновой композиции.
[00151] В некоторых конкретных вариантах реализации, птеридиновая композиции, используемая для ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов, имеет структуру Формулы IV. В некоторых конкретных вариантах реализации, птеридиновая композиция существует в форме гидрата или фармацевтически приемлемой соли. В некоторых конкретных вариантах реализации, способ ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов осуществляют in vitro или in vivo.
[00152] В некоторых вариантах реализации, TLR представляет собой TLR9, а агонист сигналов TLR представляет собой агонист сигналов TLR9. В этих вариантах реализации, указанный способ представляет собой способ ингибирования внутриклеточной передачи сигналов TLR9 в ответ на агонист сигналов TLR9. Агонист сигналов TLR в одном варианте реализации представляет собой CpG ДНК, которая может быть олигодезоксинуклеотидом (ОДН). В некоторых вариантах реализации, CpG ОДН представляет собой ОДН 2006. В других вариантах реализации, CpG ОДН принадлежит к любому классу CpG ОДН, включая А-класс (например, ОДН 2216), В-класс (например, ОДН 2006) или С-класс (например, ОДН 2395).
[00153] В некоторых вариантах реализации, В одном варианте реализации, агонист сигналов TLR представляет собой иммунный комплекс, который содержит нуклеиновую кислоту.
[00154] В некоторых вариантах реализации, способы, описанные в настоящем документе, пригодны для изменения TLR-опосредованной передачи сигналов. Эти способы пригодны также для изменения TLR-опосредованной передачи сигналов в ответ на соответствующий лиганд TLR или агонист передачи сигналов TLR. Например, эти способы могут быть использованы для лечения любого из различных состояний, включающих аутоиммунитет, воспаление, аллергию, астму, отторжение трансплантата, болезнь «транспланта против хозяина» (GvHD), инфекцию, сепсис, рак или иммунодефицит. В общем, в способах, применимых при лечении состояний, включающих аутоиммунитет, воспаление, аллергию, астму, отторжение трансплантата и GvHD, используют малые молекулы, которые ингибируют TLR-опосредованную передачу сигналов в ответ на соответствующий лиганд TLR или агонист передачи сигналов TLR. В общем, в способах, пригодных при лечении состояний, включающих инфекцию, рак и иммунодефицит, используют небольшие молекулы, которые усиливают TLR-опосредованную передачу сигналов в ответ на соответствующий лиганд TLR. В некоторых вариантах реализации, указанные способы используют для ингибирования или промотирования TLR-опосредованной передачи сигналов в ответ на лиганд TLR или агонист передачи сигналов TLR. В некоторых вариантах реализации, указанные способы используют для ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов в ответ на лиганд TLR или агонист передачи сигналов TLR. В некоторых вариантах реализации, указанные способы используют для ингибирования или промотирования TLR-опосредованной иммуностимуляции у субъекта. В некоторых вариантах реализации, указанные способы используют для ингибирования иммуностимулирующей реакции, связанной с нуклеиновой кислотой, у субъекта.
[00155] В некоторых вариантах реализации, в способе, пригодном для изменения TLR-опосредованной передачи сигналов, используют низкомолекулярные композиции соединений Формул I-VII. Указанные композиции настоящего изобретения используют для изменения TLR-опосредованной передачи сигналов в ответ на соответствующий лиганд TLR или агонист передачи сигналов TLR. Например, малые молекулы могут быть использованы в способах для лечения любого из различных состояний, включающих аутоиммунитет, воспаление, аллергию, астму, отторжение трансплантата, GvHD, инфекцию, сепсис, рак и иммунодефицит. В общем, в способах пригодных при лечении состояний, включающих воспаление, воспаление, аллергию, астму, отторжение трансплантата и GvHD, используют малые молекулы, которые ингибируют TLR-опосредованную передачу сигналов в ответ на соответствующий лиганд TLR или агонист передачи сигналов TLR. В общем, в способах, пригодных при лечении состояний, включающих инфекцию, рак и иммунодефицит, используют малые молекулы, которые усиливают TLR-опосредованную передачу сигналов в ответ на соответствующий лиганд TLR. В некоторых случаях указанные молекулы могут быть использованы в способе для ингибирования или промотирования TLR-опосредованной передачи сигналов в ответ на лиганд TLR или агонист передачи сигналов TLR. В некоторых случаях указанные малые молекулы могут быть использованы в способе для ингибирования TLR-опосредованной иммуностимулирующей передачи сигналов в ответ на лиганд TLR или агонист передачи сигналов TLR. В некоторых вариантах реализации, указанные малые молекулы используют в способе для ингибирования или промотирования TLR-опосредованной иммуностимуляции у субъекта. В некоторых вариантах реализации, указанные малые молекулы используют в способе для ингибирования TLR-опосредованной иммуностимуляции у субъекта. В некоторых вариантах реализации, указанные малые молекулы используют для ингибирования иммуностимулирующей реакции, связанной с нуклеиновой кислотой, у субъекта.
[00156] Более того, способы, описанные в настоящем документе, могут комбинироваться с введением дополнительных агентов для достижения синергетического эффекта на TLR-опосредованную иммуностимуляцию. Более конкретно, тогда как было обнаружено, что агенты, описанные в настоящем документе, напрямую влияют на TLR и, следовательно, напрямую влияют на клетки с TLR, например, антиген-презентирующие клетки (АРС), такие агенты могут быть использованы в сочетании с дополнительными агентами, которые влияют на иммунные клетки, не являющиеся АРС, например, Т-лимфоциты (Т-клетки). Такой подход эффективно представляет иммуномодулирующее вмешательство на двух уровнях: врожденный иммунитет и приобретенный иммунитет. Поскольку врожденный иммунитет предположительно инициирует и поддерживает приобретенный иммунитет, то такое комбинированное вмешательство является синергетическим.
[00157] В другом аспекте представлен способ ингибирования иммуностимулирующей реакции, связанной с нуклеиновой кислотой, у субъекта. Указанный способ включает введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения Формул I-VII, представленных выше, для ингибирования иммуностимулирующей реакции, связанной с нуклеиновой кислотой, у субъекта.
[00158] В некоторых вариантах реализации, субъект, подлежащий лечению птеридиновыми соединениями, описанными в настоящем документе, проявляет симптомы, указывающие на заболевание иммунной системы. В других вариантах реализации, субъект, подлежащий лечению птеридиновыми соединениями, описанными в настоящем документе, не проявляет никаких симптомов, указывающих на заболевание иммунной системы.
[00159] В некоторых вариантах реализации, TLR представляет собой TLR9. В некоторых конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту. В других конкретных вариантах реализации, иммуностимулирующая нуклеиновая кислота представляет собой CpG нуклеиновую кислоту. В других конкретных вариантах реализации, иммуностимулирующая нуклеиновая кислота представляет собой ДНК-содержащий иммунный комплекс.
[00160] В некоторых вариантах реализации, TLR представляет собой TLR8. В некоторых конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой природный лиганд для TLR8. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой РНК. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту. В других конкретных вариантах реализации, иммуностимулирующая нуклеиновая кислота представляет собой РНК-содержащий иммунный комплекс. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой иммуностимулирующий имидазохинолин. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой резиквимод (R848).
[00161] В некоторых вариантах реализации, TLR представляет собой TLR7. В некоторых конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой природный лиганд для TLR7. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой иммуностимулирующую нуклеиновую кислоту. В одном варианте реализации, лиганд для TLR представляет собой РНК. В других конкретных вариантах реализации, иммуностимулирующая нуклеиновая кислота представляет собой РНК-содержащий иммунный комплекс. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой иммуностимулирующий имидазохинолин. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой резиквимод (R848).
[00162] В некоторых вариантах реализации, TLR представляет собой TLR3. В некоторых конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой двухцепочечную РНК. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой иммунный комплекс, описанный в настоящем документе. В других конкретных вариантах реализации, лиганд для TLR представляет собой поли (I:С). В других конкретных вариантах реализации, TLR представляет собой TLR9, а агонист сигналов TLR представляет собой агонист сигналов TLR9. В других конкретных вариантах реализации, агонист сигналов TLR представляет собой CpG ДНК, которая может быть олигодезоксинуклеотидом (ОДН).
[00163] В некоторых вариантах реализации, агонист сигналов TLR представляет собой иммунный комплекс, содержащий нуклеиновую кислоту.
[00164] В другом аспекте представлен способ ингибирования иммунной реакции на антигенное вещество. Указанный способ включает контакт иммунной клетки, экспрессирующей функциональный Toll-подобный рецептор, с:
(a) эффективным количеством антигенного вещества для стимуляции иммунной реакции на указанное антигенное вещество в отсутствие птеридиновой композиции, и
(b) эффективным количеством птеридиновой композиции, имеющей структурные Формулы I-VII, описанные выше, для ингибирования иммунной реакции на антигенное вещество, по сравнению с иммунной реакцией на антигенное вещество в отсутствие птеридиновой композиции.
[00165] В некоторых вариантах реализации, иммунная реакция представляет собой врожденную иммунную реакцию. В других вариантах реализации, иммунная реакция включает адаптивную иммунную реакцию. В некоторых конкретных вариантах реализации, птеридиновая композиция существует в форме гидрата или фармацевтически приемлемой соли. В некоторых конкретных вариантах реализации, способы ингибирования иммунной реакции на антигенное вещество осуществляют in vitro или in vivo.
[00166] В некоторых вариантах реализации, антигенное вещество представляет собой аллерген. В других вариантах реализации, антигенное вещество представляет собой антиген, который представляет собой или получен из микробного агента, включая бактерии, вирусы, грибки или паразиты. В других вариантах реализации, антигенное вещество представляет собой раковый антиген.
[00167] В некоторых вариантах реализации, функциональный TLR экспрессируется клеткой естественным образом. Неограничивающие примеры клеток, экспрессирующих TLR, включают клеточную линию RPMI 8226.
[00168] В одном варианте реализации, клетка экспрессирует функциональный TLR естественным образом и представляет собой клетку, выделенную из клеточной линии человеческой множественной миеломы RPMI 8226 (АТСС CCL-155; American Type Culture Collection (АТСС), Манассас, штат Вирджиния). Эта клеточная линия была получена из периферической крови 61-летнего мужчины с диагнозом множественной миеломы (тип IgG лямбда). Matsuoka Y et al. (1967) Proc Soc Exp Biol Med 125:1246-50. RPMI 8226 была ранее описана как восприимчивая к CpG нуклеиновым кислотам, по данным индуцирования белка IL-6 и мРНК IL-12p40. Takeshita F et al. (2000) Eur J Immunol 30:108-16; Takeshita F et al. (2000) Eur J Immunol 30:1967-76. Ученые Takeshita et al. использовали только эту клеточную линию для изучения конструктов промотора, чтобы идентифицировать связывающие сайты фактора транскрипции, важные для передачи сигналов CpG нуклеиновой кислоты. Известно, что клетки RPMI 8226 секретируют ряд других хемокинов и цитокинов, включая IL-8, IL-10 и IP-10 в ответ на иммуностимулирующие нуклеиновые кислоты. Поскольку эта клеточная линия экспрессирует TLR9, через который иммуностимулирующие нуклеиновые кислоты, такие как, например, CpG нуклеиновые кислоты, опосредуют свое действие, она представляет собой пригодную клеточную линию для применения в способах настоящего изобретения, в отношении CpG нуклеиновых кислот в качестве эталона и испытуемых соединений, а также других лигандов TLR9.
[00169] Аналогично мононуклеарным клеткам периферической крови (РВМС), наблюдали, что клеточная RPMI 8226 повышающе регулирует экспрессию клеточной поверхностью маркеров, таких как CD71, CD86 и HLA-DR в ответ на воздействие CpG нуклеиновой кислоты. Это наблюдали при помощи проточного цитометрического анализа указанной клеточной линии. Соответственно, способы, представленные в настоящем документе, могут быть структурированы для применения в качестве считываемых данных экспрессии соответствующим образом выбранного маркера клеточной поверхности, в дополнение или вместо продуцирования хемокинов или цитокинов, или других считываемых данных, описанных где-либо в настоящем документе.
[00170] Было также обнаружено, что клеточная линия RPMI 8226 реагирует на некоторые малые молекулы, включая имидазохинолиновые соединения. Например, инкубация клеток RPMI 8226 с имидазохинолиновым соединением R848 (резиквимод) вызывает продуцирование IL-8, IL-10 и IP-10. Недавно было описано, что R848 опосредует свой иммуностимулирующий эффект через TLR7 и TLR8. Способность RPMI 8226 реагировать на R848 позволяет предположить, что клеточная линия RPMI 8226 также экспрессирует TLR7, как было ранее описано для нормальных B-клеток человека.
[00171] Клеточная линия RPMI 8226 может быть использована в немодифицированной форме или в модифицированной форме. В одном варианте реализации, клетку RPMI 8226 трансфицируют репортерным конструктом. Предпочтительно, указанную клетку устойчиво трансфицируют репортерном конструктом. Репортерный конструкт, как правило, содержит промотор, кодирующую последовательность и сигнал полиаденилирования. Кодирующая последовательность может содержать репортерную последовательность, выбранную из группы, состоящей из фермента (например, люциферазы, щелочной фосфатазы, бета-галактозидазы, хлорамфеникол-ацетилтрансферазы (CAT), секретированной щелочной фосфатазы и так далее), биолюминесцентного маркера (например, зеленого флуоресцентного белка (GFP, патент США №5491084) и так далее), поверхностно-экспрессированной молекулы (например, CD25), секретированной молекулы (например, IL-8, IL-12 р40, TNF-α и так далее) и других обнаруживаемых белковых продуктов, известных специалистам в данной области. Предпочтительно, кодирующая последовательность кодирует белок, имеющий уровень или активность, поддающуюся количественному определению.
[00172] В некоторых вариантах реализации, функциональный TLR искусственно экспрессирован (включая сверхэкспрессию) клеткой, например, путем внедрения в клетку вектора экспрессии с кодирующей последовательностью для указанного функционального TLR, где указанная кодирующая последовательность функционально связана с генной экспрессирующей последовательностью. При использовании в настоящем документе, кодирующая последовательность и генная экспрессирующая последовательность описаны как функционально связанные, если они ковалентно связаны таким образом, чтобы устанавливать экспрессию или транскрипцию и/или трансляцию указанной кодирующей последовательности под воздействие или контроль генной экспрессирующей последовательности. Две ДНК последовательности описаны как функционально связанные, если индукция промотора в положении 5' генной экспрессирующей последовательности приводит к транскрипции кодирующей последовательности, и если природа связи между указанными двумя ДНК последовательностями (1) не приводит к внедрению мутации со сдвигом рамки считывания, (2) не препятствует способности указанной области промотора направлять транскрипцию кодирующей последовательности, или (3) не препятствует способности соответствующего РНК транскрипта транслироваться в белок. Следовательно, генная экспрессирующая последовательность является функционально связанной с кодирующей последовательностью, если указанная генная экспрессирующая последовательность способна влиять на транскрипцию этой кодирующей последовательности так, что полученный транскрипт транслируется в заданный белок или полипептид.
[00173] В некоторых вариантах реализации, кодирующая последовательность относится к последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей для функционального TLR. В некоторых вариантах реализации, кодирующая последовательность относится к последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей для репортера.
[00174] Клетка, которая искусственно экспрессирует функциональный TLR, может быть клеткой, которая экспрессирует не функциональный TLR, а вектор экспрессии TLR. Например, фибробласты 293 человека (АТСС CRL-1573) не экспрессируют TLR3, TLR7, TLR8 или TLR9. Как описано в представленных ниже примерах, такие клетки могут быть транзиентно или устойчиво трансфицированы соответствующим вектором (или векторами) экспрессии с образованием клеток, которые экспрессируют TLR3, TLR7, TLR8, TLR9 или любую их комбинацию. Альтернативно, клетка, которая искусственно экспрессирует функциональные TLR, может быть клеткой, которая экспрессирует функциональный TLR на существенно более высоком уровне с вектором экспрессии TLR, чем это происходит без вектора экспрессии TLR.
[00175] Для применения в способах настоящего изобретения, клетка, которая искусственно экспрессирует функциональный TLR, предпочтительно представляет собой устойчиво трансфицированную клетку, которая экспрессирует функциональный TLR. Такая клетка также может быть устойчиво трансфицирована соответствующим репортерным конструктом.
Анализы эффективности
[00176] Способы настоящего изобретения могут быть оценены при помощи любой из многочисленных систем считывания данных, основанных на пути сигнальной трансдукции TLR/IL-1R. В некоторых вариантах реализации, считывание данных для указанного способа основано на применении нативных генов или, альтернативно, трансфицированных или иным образом искусственно внедренных репортерных генных конструктов, которые восприимчивы к пути сигнальной трансдукции TLR/IL-1R, включающему MyD88, TRAF, р38 и/или ERK. Häcker Н et al. (1999) EMBO J 18:6973-82. Эти пути активируют киназы, включая комплекс киназы кВ и c-Jun N-концевые киназы. Поэтому репортерные гены и репортерные генные конструкты, особенно пригодные для указанных анализов, включают, например, репортерный ген, функционально связанный с промотором, восприимчивым к NF-κВ. Примеры таких промоторов включают, без ограничения, промоторы для NF-κВ, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-12 p40, IP-10, CD80, CD86 и TNF-α. Репортерный ген, функционально связанный с TLR-чувствительным промотором, может содержать, без ограничения, фермент (например, люциферазу, щелочную фосфатазу, β-галактозидазу, хлорамфеникол-ацетилтрансферазу (CAT) и так далее), биолюминесцентный маркер (например, зеленый флуоресцентный белок (GFP, например, патент СИТА №5491084), голубой флуоресцентный белок (BFP, например, патент США №6486382) и так далее), поверхностно-экспрессированную молекулу (например, CD25, CD80, CD86) и секретированную молекулу (например, IX-1, IL-6, IL-8, IL-12 р40, TNF-α).
В некоторых вариантах реализации, репортер выбран из IL-8, TNF-α NF-κВ-люциферазы (NF-kB-1uc; Häcker Н et al. (1999) EMBO J 18:6973-82), IL-12 p40-luc (Murphy TL et al. (1995) Mol Cell Biol 15:5258-67) и TNF-luc (Häcker H et al. (1999) EMBO J 18:6973-82). В анализах, основанных на считывании данных ферментативной активности, субстрат может быть представлен как часть указанного анализа, а обнаружение может включать измерение хемилюминесценции, флуоресценции, окрашивания, внедрения радиоактивной метки, устойчивости лекарства или другого маркера ферментативной активности. Для анализов, основанных на поверхностной экспрессии молекулы, обнаружение может быть осуществлено с использованием анализа проточной цитометрии (FACS) или функциональных анализов. Секретированные молекулы могут быть анализированы при помощи фермент-связанного иммуносорбентного анализа (ELISA) или биоанализов. Многие из этих и других пригодных систем считывания данных хорошо известны в данной области и имеются в продаже.
Репортерные конструкты
[00177] Клетка, экспрессирующая функциональный TLR и пригодная для способов настоящего изобретения, имеет, в некоторых вариантах реализации, вектор экспрессии, содержащий изолированную нуклеиновую кислоту, которая кодирует репортерный конструкт, пригодный для обнаружения передачи сигналов TLR. Вектор экспрессии, содержащий изолированную нуклеиновую кислоту, которая кодирует репортерный конструкт, пригодный для обнаружения передачи сигналов TLR, может содержать репортерный ген под управлением элемента ответа на промотор (элемента энхансера). В некоторых вариантах реализации, элемент ответа на промотор связан с минимальным промотором, чувствительным к фактору транскрипции, который, как предполагают авторы настоящей заявки, активируется вследствие передачи сигналов TLR. Примеры таких минимальных промоторов включают, без ограничения, промоторы для следующих генов: АР-1, NF-κВ, ATF2, IRF3 и IRF7. Эти минимальные промоторы содержат соответствующие элементы ответа на промотор, чувствительные к АР-1, NF-κВ, ATF2, IRF3 и IRF7, соответственно. В других вариантах реализации, вектор экспрессии, содержащий изолированную нуклеиновую кислоту, которая кодирует репортерный конструкт, пригодный для обнаружения передачи сигналов TLR, может содержать ген под управлением элемента ответа на промотор, выбранного из элементов ответа, чувствительных к IL-6, IL-8, субъединицы IL-12 р40, IFN типа I, RaNTES, TNF, IP-10,1-ТАС и интерферон-стимулированного элемента ответа (ISRE). Элемент ответа на промотор, как правило, присутствует в многочисленных копиях, например, в виде тандемных повторов. Например, в одном репортерном конструкте кодирующая последовательность для люциферазы находится под контролем вышележащего 6Х тандемного повтора элемента ответа NF-κВ. В некоторых вариантах реализации, ISRE-люциферазный репортерный конструкт, пригодный в настоящем изобретении, имеется в продаже у компании Stratagene (номер по каталогу 219092) и содержит 5х тандемный повтор ISRE, присоединенный к вышележащему TATA-боксу люциферазного репортерного гена. Как описано в настоящем документе, сам репортер может быть любым генным продуктом, пригодным для обнаружения по способам, известным в данной области. Такие способы обнаружения могут включать, например, измерение самопроизвольного или стимулированного испускания света, ферментативной активности, экспрессии растворимой молекулы, экспрессии молекулы клеточной поверхности и так далее.
[00178] Считывание данных, как правило, включает стандартные элементы передачи сигналов Toll/IL-IR, например, молекул MyD88, TRAF и IRAK, хотя в случае TLR3 роль MyD88 менее понятна, чем для других членов семейства TLR. Как описано в настоящем документе, такие реакции включают индукцию гена под управлением специфического промотора, такого как промотор NF-κВ, увеличение уровня определенных цитокинов, увеличение уровня определенных хемокинов и так далее. Ген под управлением промотора NF-κВ может быть геном, который естественным образом содержит промотор NF-κВ, или он может быть геном в конструкте, в который вставлен промотор NF-κВ. Гены и конструкты, которые содержат промотор NF-κВ, включают, но не ограничиваясь этим, IL-8, IL-12 р40, NF-κB-luc, IL-12 p40-luc и TNF-luc.
[00179] Увеличение уровня цитокинов может быть результатом увеличения продуцирования, увеличения устойчивости, увеличения секреции или любой комбинации из вышеперечисленного, цитокинов в ответ на TLR-опосредованную передачу сигналов. Цитокины, как правило, включают, без ограничения, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-18, IFN-α, IFN-β, IFN-γ, TNF-α, GM-CSF, G-CSF, M-CSF. Цитокины Th1 включают, но не ограничиваясь этим, IL-2, IFN-γ и IL-12. Цитокины Th2 включают, но не ограничиваясь этим, IL-4, IL-5 и IL-10.
[00180] Увеличение уровня цитокинов может быть результатом увеличения продуцирования, увеличения устойчивости, увеличения секреции или любой комбинации из вышеперечисленного, хемокинов в ответ на TLR-опосредованную передачу сигналов. Хемокины, представляющие собой особое значение в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваясь этим, CCL5 (RaNTES), CXCL9 (Mig), CXCL10 (IP-10) и CXCL11 (I-ТАС), IL-8 и MCP-1.
Сокращения
ACN
Ацетонитрил
ЭА
Этилацетат
ДМФ
Диметилформамид
ПЭ
Петролейный эфир
ДХМ
Дихлорметан
ТГФ
Тетрагидрофуран
НОВТ
1-Гидроксибензотриазол
EDCI
1-Этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид
HBTU
2-(1H-Бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат
HATU
N-[(диметиламино)(3H-1,2,3-триазоло(4,4-b)пиридин-3-илокси)метилен]-N-метилметанаминия гексафторфосфат
PyBOP
1H-Бензотриазол-1-илокситрипирролидинофосфония гексафторфосфат
BOPCl
Бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфиния хлорид
BOP
Бензотриазол-1-илокситрис(диэтиламино)фосфония гексафторфосфат
ТЭА
Триэтиламин
ДИПЭА
Диизопропилэтиламин
DMAP
4-Диметиламинопиридин
РСС
Пиридиния хлорхромат
PDC
Пиридиния дихромат
NBS
N-бромсукцинимид
NCS
N-хлорсукцинимид
NIS
N-йодсукцинимид
9-BBN
9-Борабицикло[3.3.1]нонан
TsOH
п-Толуолсульфоновая кислота
ТФА
Трифторацетамид
CDI
Карбонилдиимидазол
Способы получения
[00181] Ниже представлены общие синтетические схемы для производства соединений настоящего изобретения. Эти схемы являются иллюстративными и не предназначены для ограничения возможных приемов, которые могут использовать специалисты в данной области для получения соединений, описанных в настоящем документе. Специалистам в данной области понятны различные способы. Кроме того, различные стадии указанных синтезов могут быть выполнены в альтерантивной последовательности или порядке для получения заданного соединения(ий). Все документы, цитируемые в настоящем документе, включены в настоящий документ путем ссылки в полном объеме. Например, следующие реакции являются иллюстрациями, но не ограничением получения некоторых из исходных материалов и примеров, используемых в настоящем документе.
[00182] На Схемах 1-5 описаны различные способы синтеза промежуточных соединений, которые могут быть использованы для получения соединений настоящего изобретения. Специалистам в данной области понятны различные модификации этих способов для достижения результатов, аналогичных тем, которые авторы настоящего изобретения представили ниже.
[00183] Птеридиновое соединение VI' может быть получено так, как показано на Схеме 1.
Схема 1
Стадия 1
[00184] Амид I' может быть ацилирован при помощи бензоилхлорида II', в присутствии основания, такого как триэтиламин и диизопропилэтиламин, и необязательно с добавлением диметиламинопиридина для получения бензоиламида III'. Соответствующие растворители для этой реакции включают метиленхлорид, ацетонитрил, хлороформ и тетрагидрофуран.
Стадия 2
[00185] Реакция бензоиламида III' с основанием, таким как NaOH, КОН или CsOH, дает птеридин-4(3H)-он IV'. Соответствующие растворители для этой реакции включают ДМСО, этанол и воду.
Стадия 3
[00186] Реакция птеридин-4(3H)-она IV' с хлорирующими агентами, такими как оксихлорид фосфора или тионилхлорид, дает хлор-птеридин V'. Соответствующие растворители для этой реакции включают метиленхлорид, хлороформ или толуол. Стадия 4
7
[00187] Обработка хлор-птеридина V' нуклеофилом RLY, в присутствии основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия, триэтиламин и диизопропилэтиламин, и необязательно с использованием катализатора, такого как Pd(0), дает птеридиновое соединение VI'. Соответствующие растворители для этой реакции включают хлороформ, метиленхлорид, толуол и тетрагидрофуран.
[00188] Птеридиновое соединение XII' может быть получено так, как показано на Схеме 2.
Схема 2
Стадия 1
[00189] Амид I' может быть ацилирован при помощи бромбензоилхлорида VII', в присутствии основания, такого как триэтиламин и диизопропилэтиламин, и необязательно с добавлением диметиламинопиридина для получения бромбензоиламида VIII'. Соответствующие растворители для этой реакции включают хлороформ, метиленхлорид, ацетонитрил и тетрагидрофуран.
Стадия 2
[00190] Реакция бромбензоиламида VIII' с основанием, таким как NaOH, KOH или CsOH, дает бромфенилптеридин-4(3H)-он IX'. Соответствующие растворители для этой реакции включают ДМСО, этанол, воду.
Стадия 3
[00191] Реакция бромфенилптеридин-4(3H)-она IX' с хлорирующими агентами, такими как оксихлорид фосфора или тионилхлорид, дает хлор-фенилптеридин X'.
Соответствующие растворители для этой реакции включают метиленхлорид, хлороформ и толуол.
Стадия 4
7
[00192] Обработка хлор-фенилптеридина X' нуклеофилом RLYH, в присутствии основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия, триэтиламин и диизопропилэтиламин, дает бром-птеридин XI'. Соответствующие растворители для этой реакции включают тетрагидрофуран, этанол и толуол. Стадия 5
1
2
[00193] Обработка бром-птеридина ХГ нуклеофилом NHRR, в присутствии основания, такого как трет-бутоксид натрия или карбонат цезия, и в присутствии катализатора, такого как Pd(0), дает птеридиновое соединение XII'. Соответствующие растворители для этой реакции включают тетрагидрофуран и толуол.
[00194] Птеридиновое соединение XIX' может быть получено так, как показано на Схеме 3.
Схема 3
Стадия 1
[00195] Амид XIII' может быть ацилирован при помощи бензоилхлорида II', в присутствии основания, такого как триэтиламин и диизопропилэтиламин, и необязательно с добавлением диметиламинопиридина для получения бензоиламида XIV. Соответствующие растворители для этой реакции включают хлороформ, метиленхлорид, ацетонитрил и тетрагидрофуран.
Стадия 2
[00196] Реакция бензоиламида XIV' с основанием, таким как NaOH, KOH или CsOH, дает птеридин-4(3H)-он XV'. Соответствующие растворители для этой реакции включают ДМСО, этанол, воду.
Стадия 3
5
[00197] Реакция птеридин-4(3H)-она XV' с нуклеофилом HR в присутствии основания, такого как триэтиламин и диизопропилэтиламин, дает птеридин-4(3H)-он XVI'. Соответствующие растворители для этой реакции включают хлороформ, этанол, метиленхлорид, ацетонитрил и тетрагидрофуран.
Стадия 4
[00198] Обработка птеридин-4(3H)-она XVI' хлорирующими агентами, такими как оксихлорид фосфора или тионилхлорид, дает хлор-птеридин XVII'. Соответствующие растворители для этой реакции включают метиленхлорид, хлороформ и толуол.
Стадия 5
7
[00199] Обработка хлор-птеридина XVII' нуклеофилом RLYH, в присутствии основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия, триэтиламин и диизопропилэтиламин, дает птеридин XVIII'. Соответствующие растворители для этой реакции включают метиленхлорид, ацетонитрил, этанол, толуол и тетрагидрофуран.
Стадия 6
6
[00200] Обработка птеридина XVIII' нуклеофилом HR, в присутствии основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия, триэтиламин и диизопропилэтиламин, или основания, такого как трет-бутоксид натрия или карбонат цезия, в присутствии катализатора, такого как Pd(0), дает птеридиновое соединение XIX'. Соответствующие растворители для этой реакции включают метиленхлорид, ацетонитрил, этанол, толуол, этанол, толуол и тетрагидрофуран.
[00201] Птеридиновые соединения XXIV' и XXV' могут быть получены так, как показано на Схеме 4.
Схема 4
Стадия 1
3
7
[00202] Реакция 4,6-дихлор-5-нитропиримидина XX' с нуклеофилом NH и RLYH дает амино-5-нитропиримидин XXI'. Соответствующие растворители для этой реакции включают этанол, метиленхлорид, ацетонитрил и тетрагидрофуран.
Стадия 2
2
2
[00203] Восстановление амино-5-нитропиримидина XXI' восстанавливающими агентами, такими как H, гидросульфит и SnCl, дает диаминопиримидин XXII'. Соответствующие растворители для этой реакции включают хлороформ, этанол, метиленхлорид, ацетонитрил и тетрагидрофуран.
Стадия 3
[00204] Реакция диаминопиримидина XXII' с  дает смесь птеридиновых соединений: XXIV' и XXV'.
[00205] Птеридиновые соединения XXXIII' могут быть получены так, как показано на Схеме 5.
Схема 5
Стадия 1
[00206] Реакция дигидроксипиримидина XXVI'' с бензолдиазонием дает (фенилдиазенил)пиримидин-диол XXVII'. Соответствующие растворители для этой реакции включают этанол и воду.
Стадия 2
3
2
[00207] Реакция (фенилдиазенил)пиримидин-диола XXVII' с хлорирующим реагентом дает (фенилдиазенил)пиримидин-дихлорид XXVIII'. Соответствующие хлорирующие реагенты включают POCl и SOCl. Соответствующие растворители для этой реакции включают хлороформ и метиленхлорид. Альтернативно, в качестве растворителя может быть использован неразбавленный хлорирующий реагент. Также могут быть использованы основания. Соответствующие основания включают триэтиламин и диизопропилэтиламин.
Стадия 3
[00208] Реакция (фенилдиазенил)пиримидин-дихлорида XXVIII' с нуклеофилом XXIX' в присутствии основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия, триэтиламин и диизопропилэтиламин, дает соединение XXX'. Соответствующие растворители для этой реакции включают тетрагидрофуран, этанол и толуол.
Стадия 4
[00209] Восстановление соединения XXX' дает соединение XXXI'. Соответствующие растворители для этой реакции включают тетрагидрофуран, этанол и толуол. Восстановление может быть достигнуто при помощи водорода или формиата аммония. Может быт использован катализатор, такой как Pd(0).
Стадия 5
[00210] Реакция конденсации соединения XXXI' с пируватом XXXII' дает соединение XXXI'. Соответствующие растворители для этой реакции включают тетрагидрофуран, этанол, пропанол, н-бутанол, 2-бутанол и толуол. Может быть использовано нагревание.
[00211] Кроме того, другие соединения формул I-VII могут быть получены по способам, общеизвестным специалистам в данной области. В частности, в следующих примерах представлены дополнительные способы получения соединений настоящего изобретения.
[00212] Далее настоящее изобретение будет описано в сопровождении рабочих примеров, представленных ниже, которые представляют собой предпочтительные варианты реализации настоящего изобретения. Эти примеры являются иллюстративными, а не ограничивающими, и также следует понимать, что могут существовать другие варианты реализации, которые входят в общую идею и рамки настоящего изобретения, описанные в формуле изобретения, приложенной к нему.
Фармацевтические композиции
[00213] В настоящем изобретении представлена также фармацевтическая композиция, содержащая, по меньшей мере, одно из соединений, описанных в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, и фармацевтически приемлемый носитель.
[00214] В другом аспекте описана фармацевтическая композиция, содержащая, по меньшей мере, одно соединение Формулы I, или его фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель,
где
Z отсутствует или присутствует;
если Z присутствует, то
7'
Z представляет собой L'-R;
1
связь между NZ и C представляет собой одинарную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой двойную связь; и
6
3
R представляет собой =O, =S или =NR;
если Z отсутствует, то
1
связь между NZ и C представляет собой двойную связь;
1
6
связь между C и R представляет собой одинарную связь; и
6
R описан ниже;
X отсутствует или представляет собой алкил, циклоалкил, арил или гетероцикл;
2
q
1
2
1
2
p
b
c
1
1
1
2
2'
Q представляет собой Н, (CH)NRR, NR(CH)NRR, OR, SR или CRRR, где q равен 0 или 1, и p равен 2-4;
1
2
2'
1
2
1
4
12
2
p
a
2
p
b
c
R, R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, алкенил, циклоалкил, алкилциклоалкил, арил, алкиларил, гетероцикл, алкилгетероцикл, или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл, который может быть необязательно замещен одной-четырьмя группами, которые могут быть одинаковыми или различными, выбранными из (C-C)алкила, фенила, бензила, C(=O)R, (CH)OR и (CH)NRR, где p равен 2-4;
7
7'
3
4
1
4
a'
b'
c'
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой Н, алкил, гетероарил,  или NRR, где гетероарил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино; и R, R и R, каждый независимо, представляют собой (C-C)алкил;
3
4
3
4
1
4
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, гетероарил, арил или алкиларил, или R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют гетероцикл; где гетероарил или арил необязательно замещен (C-C)алкилом, галогеном или амино;
11
11
Y представляет собой кислород, серу или NR, где R представляет собой водород, алкиловую, циклоалкиловую, алкениловую или ариловую группу;
12
R представляет собой алкил, арил или гетероцикл;
L и L', каждый независимо, представляют собой алкил или алкенил, содержащий от 2 до 10 углеродных атомов;
5
6
3
3
a
a
a
2
a
b
c
2
b
c
a
a
b
c
a
b
c
b
a
b
a
b
2
p
b
c
R и R, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, циано, нитро, CF, OCF, алкил, циклоалкил, алкенил, необязательно замещенный арил, гетероцикл, OR, SR, S(=O)R, S(=O)R, NRR, S(=O)NRR, C(=O)OR, C(=O)R, C(=O)NRR, OC(=O)R, OC(=O)NRR, NRC(=O)OR, NRC(=O)R, алкарил, алкилгетероциклил или NR(CH)NRR;
a
в каждом случае R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, алкенил, циклоалкенил, алкинил, гетероцикл или арил; и
b
c
b
c
1
4
в каждом случае R и R независимо представляет собой водород, алкил, циклоалкил, гетероцикл, арил, или указанные R и R, вместе с атомом азота, с которым они связаны, необязательно образуют гетероцикл, содержащий 1-4 гетероатома, где этот гетероцикл необязательно замещен (C-C)алкилом;
5
6
при условии, что если R и R представляют собой Н или метил, то Q не представляет собой H.
[00215] Выражение «фармацевтически приемлемый носитель», используемое в настоящем документе, означает фармацевтически приемлемый материал, композицию или среду, такую как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, формообразующее средство, растворитель или инкапсулирующий материал, участвующий в переносе или доставке рассматриваемого фармацевтического средства от одного органа или части тела к другому органу или части тела. Каждый носитель должен быть «приемлемым» в том смысле, что он должен быть совместим с другими компонентами композиции и не должен быть вредным для пациента. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают: сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрия карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; формообразующие средства, такие как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как бутиленгликоль; многоатомные спирты, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт; фосфатные буферные растворы; и другие нетоксичные совместимые субстанции, используемые в фармацевтических композициях. Термин «носитель» означает органический или неорганический ингредиент, природный или синтетический, который смешан с активным ингредиентом для облегчения применения. Компоненты фармацевтических композиций также могут быть смешаны с соединениями настоящего изобретения и друг с другом, таким образом, чтобы не было такого взаимодействия, которое существенно ухудшает заданную фармацевтическую эффективность.
[00216] Как описано выше, некоторые варианты реализации фармацевтических агентов настоящего изобретения могут быть представлены в форме фармацевтически приемлемых солей. Термин «фармацевтически приемлемая соль», в этом отношении, относится к относительно нетоксичным солям присоединения неорганических или органических кислот соединений настоящего изобретения. Эти соли могут быть получены in situ при окончательном выделении и очистке соединений настоящего изобретения, или по отдельной реакции очищенного соединения настоящего изобретения в его форме свободного основания с соответствующей органической или неорганической кислотой и выделением образовавшейся соли. Иллюстративные соли включают гидробромидные, гидрохлоридные, сульфатные, бисульфатные, фосфатные, нитратные, ацетатные, валератные, олеатные, пальмитатные, стеаратные, лауратные, бензоатные, лактатные, фосфатные, тозилатные, цитратные, малеатные, фумаратные, сукцинатные, тартратные, нафтилатные, мезилатные, глюкогептонатные, лактобионатные и лаурилсульфонатные соли, и тому подобные. (Смотри, например, Berge et al, (1977) “Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci. 66:1-19).
[00217] Фармацевтически приемлемые соли рассматриваемых соединений включают обычные нетоксичные соли или четвертичные аммониевые соли этих соединений, например, полученные из нетоксичных органических или неорганических кислот. Например, такие обычные нетоксичные соли включают соли, полученные из неорганических кислот, таких как хлороводородная, бромоводородная, серная, сульфаминовая, фосфорная, азотная и тому подобных; и соли, полученные из органических кислот, таких как уксусная, бутановая, янтарная, гликолевая, стеариновая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, пальмитиновая, малеиновая, гидроксималеиновая, фенилуксусная, глутаминовая, бензойная, салициловая, сульфаниловая, 2-ацетоксибензойная, фумаровая, толуолсульфоновая, метансульфоновая, этандисульфоновая, щавелевая, изотионовая и тому подобных.
[00218] В других случаях соединения настоящего изобретения могут содержать одну или более кислотных функциональных групп и, следовательно, быть способными образовывать фармацевтически приемлемые соли с фармацевтически приемлемыми основаниями. Термин «фармацевтически приемлемые соли» в этих случаях относится к относительно нетоксичным солям присоединения неорганических или органических оснований соединений настоящего изобретения. Эти соли точно также могут быть получены in situ во время окончательного выделения или очистки соединений, или по отдельной реакции очищенного соединения в его форме свободной кислоты с соответствующим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат фармацевтически приемлемого катиона металла, с аммиаком или с фармацевтически приемлемым органическим первичным, вторичным или третичным амином. Иллюстративные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли лития, натрия, калия, кальция, магния и алюминия и тому подобных. Иллюстративные органические амины, пригодные для образования солей присоединения оснований, включают этиламин, диэтиламин, этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперазин и тому подобные. (Смотри, например, Berge et al, supra).
[00219] В композициях могут также присутствовать увлажняющие средства, эмульгаторы и смазывающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия, стеарат магния и полиэтиленоксид-полибутиленоксидный сополимер, а также красители, разделительные средства, покрытия, подсластители, ароматизаторы и отдушки, консерванты и антиоксиданты.
[00220] Композиции настоящего изобретения включают композиции, пригодные для перорального, назального, локального (включая буккальное и сублингвальное), ректального, вагинального и/или парентерального введения. Композиции могут быть удобно представлены в единичных лекарственных формах, и могут быть получены по любому из способов, хорошо известных в области фармации. Количество активного компонента, который может комбинироваться с материалом носителя для получения единичной лекарственной формы, варьируется в зависимости от пациента, подлежащего лечению, и конкретного способа введения. Количество активного компонента, который может комбинироваться с материалом носителя для получения единичной лекарственной формы, обычно представляет собой такое количество соединения, которое вызывает терапевтический эффект. Как правило, из 100% это количество находится в диапазоне от около 1% до около 99% активного компонента, предпочтительно, от около 5% до около 70%, наиболее предпочтительно, от около 10% до около 30%.
[00221] Способы получения этих рецептур или композиций включают стадию смешивания соединения настоящего изобретения с носителем и, необязательно, с одним или более вспомогательными компонентами. В общем, композиции приготавливают путем равномерного и тщательного смешивания соединения настоящего изобретения с жидкими носителями или тщательно измельченными твердыми носителями, или с ними обоими, а затем, при необходимости, придания продукту формы.
[00222] Композиции настоящего изобретения, пригодные для перорального введения, могут быть в форме капсул, саше, пилюль, таблеток, лепешек (с использованием вкусовой основы, обычно сахарозы и гуммиарабика или трагаканта), порошков, гранул или в виде раствора или суспензии в водной или неводной жидкости, или в виде эмульсии «масло в воде» или «вода в масле», или в виде эликсира или сиропа, или в виде пастилок (с использованием инертной основы, такой как желатин и глицерин, или сахароза и гуммиарабик) и/или в виде жидкостей для полоскания рта и тому подобных, каждый из которых содержит предварительно определенное количество соединения настоящего изобретения в качестве активного ингредиента. Соединение настоящего изобретения может также быть введено в виде болюса, электуария или пасты.
[00223] В твердых лекарственных формах настоящего изобретения для перорального введения (капсулах, таблетках, пилюлях, драже, порошках, гранулах и тому подобных) активный ингредиент смешивают с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, такими как цитрат натрия или дикальция фосфат, и/или любыми из следующих: наполнители или сухие разбавители, такие как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и/или кремниевая кислота; связующие агенты, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и/или гуммиарабик; увлажнители, такие как глицерин; средства для улучшения распадаемости таблеток, такие как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты, карбонат натрия и натрия крахмалгликолят; ингибиторы растворения, такие как парафин; ускорители абсорбции, такие как четвертичные аммониевые соединения; смачивающие агенты, такие как, например, цетиловый спирт, глицерина моностеарат и полиэтиленоксид-полибутиленоксидный сополимер; абсорбенты, такие как каолин и бентонитовая глина; смазывающие вещества, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, натрия лаурилсульфат и их смеси; а также красители. В случае капсул, таблеток и пилюль фармацевтические композиции могут также включать буферные агенты. Твердые композиции такого же типа могут быть также использованы в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах, где используют такие формообразующие средства как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и тому подобное.
[00224] Таблетка может быть сделана прессованием или формованием, необязательно с одним или более вспомогательными ингредиентами. Спрессованные таблетки могут быть получены с использованием связующего вещества (например, желатина или гидроксибутилметилцеллюлозы), смазывающего вещества, инертного разбавителя, консерванта, средства для улучшения распадаемости таблеток (например, натрия крахмалгликолята или сшитой карбоксиметилцеллюлозы натрия), поверхностно-активного или диспергирующего агента. Формованные таблетки могут быть получены путем формования в соответствующем автомате смеси порошковых компонентов, увлажненных инертным жидким разбавителем.
[00225] Таблетки и другие твердые лекарственные формы фармацевтических композиций настоящего изобретения, такие как драже, капсулы, пилюли и гранулы, могут быть необязательно рифлеными или полученными с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области составления фармацевтических композиций. Они могут быть также составлены так, чтобы обеспечивать медленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента, с использованием, например, гидроксибутилметилцелллюлозы в различных соотношениях для получения заданного профиля высвобождения, других полимерных матриц, липосом и/или микросфер. Они могут быть стерилизованы, например, фильтрацией через фильтр, удерживающий бактерии, или путем введения стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены в стерильной воде или какой-либо другой стерильной среде для инъекций непосредственно перед использованием. Эти композиции могут также необязательно содержать контрастные агенты, и могут иметь такой состав, что они высвобождают активный компоненты) только, или предпочтительно, в определенной части желудочно-кишечного тракта, необязательно, замедленным образом. Примеры залитых композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски. Активный ингредиент может также быть в микро-инкапсулированной форме, если это уместно, с одним или более описанными выше формообразующими средствами.
[00226] Жидкие лекарственные формы для перорального введения соединений настоящего изобретения содержат фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо активного ингредиента, жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изобутиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, бутиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (в частности, хлопковое масло, арахисовое масло, кукурузное масло, масло проростков, оливковое масло, касторовое масло и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбита, а также их смеси. Кроме того, для солюбилизации соединений могут быть использованы циклодекстрины, например, гидроксибутил-.бета.-циклодекстрин.
[00227] Кроме инертных разбавителей, композиции для перорального введения могут также содержать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, красители, отдушки и консерванты.
[00228] Суспензии, помимо активных соединений, могут содержать суспендирующие агенты, как например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбита, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, и их смеси.
[00229] Рецептуры фармацевтических композиций настоящего изобретения для ректального или вагинального введения могут быть представлены в виде суппозиториев, которые могут быть получены смешиванием одного или более соединений настоящего изобретения с одним или более соответствующими нераздражающими формообразующими средствами или носителями, включая, например, масло какао, полиэтиленгликоль, воск для суппозиториев или салицилат, и которые являются твердыми при комнатной температуре, но жидкими при температуре тела и, следовательно, плавятся в прямой кишке или полости влагалища и высвобождают активные фармацевтические агенты настоящего изобретения.
[00230] Композиции настоящего изобретения, которые пригодны для вагинального введения, включают также пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или композиции спреев, содержащие такие носители, которые, как известно в данной области, являются пригодными.
[00231] Лекарственные формы для местного или трансдермального введения соединения настоящего изобретения включают порошки, спреи, мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, растворы, пластыри и средства для ингаляции. Активное соединение может быть смешано в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и с любыми консервантами, буферами или пропеллентами, которые могут быть необходимы.
[00232] Мази, пасты, кремы и гели могут содержать, помимо активного соединения настоящего изобретения, формообразующие средства, такие как животные и растительные жиры, масла, воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремниевую кислоту, тальк и оксид цинка, или их смеси.
[00233] Порошки и спреи могут содержать, помимо соединения настоящего изобретения, формообразующие средства, такие как лактоза, тальк, кремниевая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и порошкообразный полиамид, или смеси этих веществ. Спреи могут дополнительно содержать обычные пропелленты, такие как хлорфторуглеводороды и летучие незамещенные углеводороды, такие как бутан и бутан.
[00234] Трансдермальные пластыри обладают дополнительным преимуществом, обеспечивая контролируемую доставку соединения настоящего изобретения в организм. Такие лекарственные формы могут быть получены путем растворения или диспергирования фармацевтических агентов в соответствующей среде. Могут быть использованы также усилители абсорбции для увеличения потока фармацевтических агентов настоящего изобретения через кожу. Скорость такого потока может контролироваться либо за счет обеспечения мембраны, контролирующей скорость, либо за счет диспергирования соединения в полимерной матрице или геле.
[00235] Офтальмические композиции, глазные мази, порошки, растворы и тому подобные также входят в рамки настоящего изобретения.
[00236] Фармацевтические композиции настоящего изобретения, пригодные для парентерального введения, содержат одно или более соединений настоящего изобретения в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми стерильными изотоническими водными или неводными растворами, дисперсиями, суспензиями или эмульсиями, или стерильными порошками, которые могут быть восстановлены в стерильных растворах или дисперсиях для инъекций непосредственно перед применением, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты, растворенные вещества, которые обеспечивают изотоничность композиции с кровью предназначенного реципиента, или суспендирующие или загущающие агенты.
[00237] В некоторых случаях для прологинования действия лекарства желательно замедлить абсорбцию лекарства из подкожной или внутримышечной инъекции. Это может быть осуществлено использованием жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала, обладающего слабой растворимостью в воде. Тогда скорость абсорбции лекарства зависит от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. Альтернативно, замедленная абсорбция парентерально введенной лекарственной формы осуществляется растворением или суспендированием этого лекарства в масляном носителе. Одна стратегия инъекций депо включает применение полиэтиленоксид-полибутиленоксидных сополимеров, в которых жидкий носитель представляет собой жидкость при комнатной температуре и затвердевает при температуре тела.
[00238] Формы депо для инъекций получают созданием микроинкапсулированных матриц рассматриваемых соединений в биоразлагающихся полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения лекарства и полимера, а также от природы конкретного используемого полимера, можно контролировать скорость высвобождения лекарства. Примеры других биоразлагающихся полимеров включают сложные поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Композиции депо для инъекций также получают включением лекарства в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма.
[00239] При введении соединений настоящего изобретения в качестве фармацевтических средств людям и животным, они могут быть введены в чистом виде или в виде фармацевтической композиции, содержащей, например, от 0,1% до 99,5% (более предпочтительно, от 0,5% до 90%) активного ингредиента в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.
[00240] Соединения и фармацевтические композиции настоящего изобретения могут быть использованы в комплексных терапиях, то есть указанные соединения и фармацевтические композиции могут быть введены параллельно, до или после одной или нескольких других заданных терапевтических или медицинских процедур. В конкретной комбинации терапий (терапевтических средств или процедур), которую используют в комплексном режиме, учитывают совместимость заданных терапевтических средств и/или процедур и ожидаемого заданного терапевтического эффекта. Следует также понимать, что используемые терапии могут давать заданный эффект для одного и того же расстройства (например, соединение настоящего изобретения может быть введено параллельно с другим противовоспалительным и иммуноподавляющим агентом); таким как, но не ограничиваясь этим, нестероидные противовоспалительные средства, базисные препараты для лечения ревматоидного артрита, стероиды и биологические средства, такие как антительные терапии), или они могут давать различные эффекты (например, контролировать какие-либо неблагоприятные эффекты).
[00241] Соединения настоящего изобретения могут быть введены внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно, подкожно, локально, перорально или другими приемлемыми способами. Эти соединения могут быть использованы для лечения артритических состояний у млекопитающих (то есть, у людей, сельскохозяйственных животных и домашних животных), птиц, ящериц и любых других организмов, которые могут переносить эти соединения.
[00242] В настоящем изобретении представлен также фармацевтический пакет или набор, включающий один или более контейнеров, содержащих один или более ингредиентов фармацевтических композиций настоящего изобретения. Необязательно вместе с таким контейнером(ами) может присутствовать уведомление в форме, предписанной государственным органом, регулирующим производство, применение и продажу фармацевтических средств или биологических продуктов, и в этом уведомлении отражается одобрение этим органом производства, применения или продажи для введения людям.
Введение субъекту
[00243] Некоторые аспекты настоящего изобретения включают введение эффективного количества композиции субъекту для достижения определенного результата. Следовательно, композиции малых молекул, пригодные в соответствии со способами настоящего изобретения, могут быть составлены любым образом, пригодным для фармацевтического использования.
[00244] Композиции настоящего изобретения вводят в фармацевтически приемлемых растворах, которые могут стандартно содержать фармацевтически приемлемые концентрации соли, буферных агентов, консервантов, совместимых носителей, адъювантов и необязательно других терапевтических ингредиентов.
[00245] Для применения в терапии, эффективное количество соединения может быть введено субъекту любым способом, обеспечивающим поглощение соединения соответствующими клетками-мишенями. «Введение» фармацевтической композиции настоящего изобретения может быть осуществлено любыми способами, известными опытным специалистам. Конкретные способы введения включают, но не ограничиваясь этим, пероральный, трансдермальный (например, через пластырь), парентеральную инъекцию (подкожную, интрадермальную, внутримышечную, внутривенную, интраперитонеальную, интратекальную и так далее) или мукозальный (интраназальный, интратрахеальный, ингаляция, внутриректальный, внутривагинальный и так далее). Инъекция может быть в виде болюса или непрерывной инфузии.
[00246] Например, фармацевтические композиции по настоящему изобретению зачастую вводят внутривенным, внутримышечным или другими парентеральными способами, или биолистическим введением при помощи «генной пушки» в эпидермис. Они могут быть также введены интраназальным введением, ингаляцией, локально, перорально или в виде имплантатов, и возможно даже ректальное или вагинальное применение. Соответствующие жидкие или твердые фармацевтические формы препаратов представляют собой, например, водные или солевые растворы для инъекции или ингаляции, микроинкапсулированные, инкохлеированные, нанесенные на микроскопические частицы золота, содержащиеся в липосомах, небулизированные, аэрозоли, гранулы для имплантации в кожу или высушенные на остром предмете для нанесения в кожу царапанием. Фармацевтические композиции включают также гранулы, порошки, таблетки, таблетки с покрытием, (микро)капсулы, суппозитории, сиропы, эмульсии, суспензии, кремы, капли или препараты с продолжительным высвобождением активных соединений, и в этих препаратах обычно используют формообразующие средства и добавки и/или вспомогательные средства, такие как средства для улучшения распадаемости таблеток, связующие вещества, агенты для покрытий, агенты набухания, смазывающие вещества, ароматизаторы, подсластители или солюбилизаторы, описанные выше. Указанные фармацевтические композиции пригодны для применения в различных системах доставки лекарств. Краткий обзор существующих способов доставки лекарств представлен в публикации Langer R (1990) Science 249:1527-33, которая включена в настоящий документ путем ссылки.
[00247] Концентрация соединений, входящих в композиции, используемые в способах настоящего изобретения, может находиться в диапазоне от около 1 нМ до около 100 мкМ. Эффективные дозы предположительно находятся в диапазоне от около 10 пикомоль/кг до около 100 микромоль/кг.
[00248] Фармацевтические композиции, предпочтительно, приготавливают и вводят в стандартных дозах. Жидкие стандартные дозы представляют собой пробирки или ампулы для инъекции или другого парентерального введения. Твердые стандартные дозы представляют собой таблетки, капсулы, порошки и суппозитории. Для лечения пациента, в зависимости от кативности конкретного соединения, способа введения, цели введения (то есть, профилактическое или терапевтическое), природы и тяжести расстройства, возраста и веса тела пациента, могут быть необходимы различные дозы. Введение данной дозы может быть выполнено как однократным введением в форме индивидуальной стандартной дозы, или иначе в виде более мелких стандартных доз. Повторное или многократное введение доз с определенными интервалами дней, недель или месяцев также подразумевается настоящим изобретением.
[00249] Композиции могут быть введены per se (неразбавленными) или в форме фармацевтически приемлемой соли. При использовании в медицине, соли должны быть фармацевтически приемлемыми, однако фармацевтически неприемлемые соли могут быть использованы для удобства получения фармацевтически приемлемой соли. Такие соли включают, но не ограничиваясь этим, соли, полученные из следующих кислот: хлороводородная, бромоводородная, серная, азотная, фосфорная, малеиновая, уксусная, салициловая, п-толуолсульфоновая, винная, лимонная, метансульфоновая, муравьиная, малоновая, янтарная, нафталин-2-сульфоновая и бензолсульфоновая. Такие соли могут быть также получены в виде солей щелочного металла или щелочноземельного металла, таких как натриевые, калиевые или кальциевые соли карбоновой кислотной группы.
[00250] Пригодные буферные агенты включают: уксусную кислоту и соль (1-2% вес./об.); лимонную кислоту и соль (1-3% вес./об.); борную кислоту и соль (0,5-2,5% вес./об.); и фосфорную кислоту и соль (0,8-2% вес./об.). Пригодные консерванты включают бензалкония хлорид (0,003-0,03% вес./об.); хлорбутанол (0,3-0,9% вес./об.); парабены (0,01-0,25% вес./об.) и тимеросал (0,004-0,02% вес./об.).
[00251] Композиции, пригодные для парентерального введения, обычно содержат стерильные водные препараты, которые могут быть изотоническими с кровью реципиента. Среди приемлемых жидких носителей и растворителей - вода, раствор Рингера, фосфатно-солевой буферный раствор и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для этой цели может быть использована любая смесь нелетучего минерального или неминерального масла, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, при приготовлении инъецируемых средств находят применение жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. Композиции носителей, пригодных для подкожного, внутримышечного, интраперитонеального, внутривенного и других способов введения, представлены в публикации Remington Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Истон, штат Пенсильвания.
[00252] Соединения, пригодные в настоящем изобретении, могут быть доставлены в смесях, состоящих более чем из двух таких соединений. Смесь может дополнительно содержать один или более адъювантов, помимо указанной комбинации соединений.
[00253] Возможны различные способы введения. Конкретный выбранный способ зависит, конечно, от конкретного выбранного соединения, возраста и общего состояния здоровья субъекта, конкретного состояния, подлежащего лечению, а также от дозы, необходимой для терапевтической эффективности. Способы настоящего изобретения, вообще говоря, могут быть осуществлены на практике при помощи любого способа введения, который является приемлемым в медицине, означая любой способ, который обеспечивает эффективные уровни реакции, не вызывая клинически неприемлемых неблагоприятных эффектов. Предпочтительные способы введения рассмотрены выше.
[00254] Композиции для удобства могут быть представлены в стандартных лекарственных формах и могут быть приготовлены любым способом, хорошо известным в области фармации. Все способы включают стадию смешивания соединений с носителем, который состоит из одного или более вспомогательных ингредиентов. Как правило, указанные композиции приготавливают равномерным и тщательным смешиванием указанных соединений с жидким носителем, тонко измельченным твердым носителем или с ними обоими, а затем, при необходимости, приданием продукту формы.
[00255] Другие системы доставки могут включать системы доставки с временным высвобождением, замедленным высвобождением или непрерывным высвобождением. Такие системы позволяют избежать повторных введений соединений, увеличивая удобство для субъекта и врача. Существуют системы доставки с многочисленными типами высвобождения, и они известны специалистам в данной области. Они включают системы на полимерной основе, такие как поли(лактид-гликолид), сополиоксалаты, поликапролактоны, полиэфирамиды, полиортоэфиры, полигидроксимасляную кислоту и полиангидриды. Микрокапсулы перечисленных выше полимеров, содержащие лекарства, описаны, например, в патенте США №5075109. Системы доставки включают также неполимерные системы, такие как: липиды, включая стерины, такие как холестерин, холестериновые сложные эфиры и жирные кислоты или нейтральные жиры, такие как моно-, ди- и триглицериды; гидрогелевые системы высвобождения; силиконовые системы; системы на пептидной основе; восковые покрытия; прессованные таблетки с использованием стандартных связующих и формообразующих средств; частично вставленные имплантаты; и тому подобные. Конкретные примеры включают, но не ограничиваясь этим: (a) эрозионные системы, в которых агент настоящего изобретения содержится в форме матрицы, такие как описаны в патентах США №№4452775, 4675189 и 5736152, и (b) диффузионные системы, в которых активный компонент проникает с контролируемой скоростью из полимера, такие как описаны в патентах США №№3854480, 5133974 и 5407686. Кроме того, могут быть использованы системы доставки на основе насосной аппаратуры, некоторые из которых приспособлены для имплантации.
Эквиваленты
[00256] Следующие иллюстративные примеры предназначены для облегчения иллюстрации настоящего изобретения, и они не предназначены и не должны толковаться в качестве ограничения рамок настоящего изобретения. Конечно, специалистам в данной области из полного текста настоящего документа станут понятны различные модификации настоящего изобретения и многие дополнительные варианты его реализации, помимо тех, которые показаны и описаны в настоящем документе, включая следующие примеры и ссылки на научную и патентную литературу, цитируемую в настоящем документе. Следует понимать, что содержание этих цитируемых ссылок включено в настоящий документ путем ссылки для облегчения иллюстрации уровня техники. Следующие примеры содержат важную дополнительную информацию, иллюстративные примеры и руководство, которые могут быть адаптированы для практического осуществления настоящего изобретения в его различных вариантах реализации и эквивалентах.
ПРИМЕРЫ
Пример 1
[00257] Суспензию 3-амино-2-пиразинкарбоновой кислоты (15 г, 0,108 моль) в сухом метаноле (250 мл) перемешали и добавили концентрированную серную кислоту (10 мл, 18,4 г, 0,188 моль). Добавление кислоты вызвало растворение основной части твердого вещества. Смесь перемешивали при дефлегмации, что привело к образованию прозрачного желтого раствора. Этот раствор перемешивали при дефлегмации в течение 5 часов, а затем выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор разбавили метиленхлоридом (500 мл) и перемешали, и медленно добавили раствор карбоната калия (26 г, 0,188 моль) в воде (75 мл). После перемешивания в течение 16 минут, органическую фазу отделили от водной фазы и высушили над сульфатом магния. После фильтрации для удаления высушивающего агента, растворители удалили под пониженным давлением. Твердый остаток перекристаллизовали из изопропилового спирта для получения метилового эфира в виде желто-коричневого порошка с выходом 7,22 г (43,7%).
[00258] Метиловый эфир 2-аминопиразинкарбоновой кислоты (2,2 г, 0,0144 моль) и 4-бромбензоилхлорид (11,0 г, 0,05 моль) смешали в хлороформе (50 мл) и добавили пиридин (8 мл). Эту смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Данные ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде) показали, что осталось значительное количество метилового эфира 2-аминопиразинкарбоновой кислоты. Добавили дополнительное количество 4-бром-бензоилхлорида (5,5,0 г, 0,025 моль) и пиридина (4 мл) и продолжали нагревание при 65°C в течение ночи. Данные ТСХ показали, что израсходован весь метиловый эфир 2-аминопиразинкарбоновой кислоты. Раствор охладили и добавили метанол (25 мл). После перемешивания в течение 30 минут, растворители удалили под пониженным давлением. Твердый остаток перекристаллизовали из н-бутанола.
[00259] Твердый метиловый эфир (полученный выше) суспендировали в смеси метанола (50 мл) и тетрагидрофурана (50 мл). Эту смесь нагревали до кипения для получения прозрачного бледно-оранжевого раствора. Нагрев убрали и медленно добавили концентрированный водный раствор аммиака (25 мл). Этот раствор перемешивали без нагревания в течение нескольких минут, начало выделяться твердое вещество. После перемешивания в течение 2 часов, смесь охладили до комнатной температуры, и данные ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде) показали образование пятна нового продукта. Смесь отфильтровали, а твердое вещество промыли эфиром и высушили. Выход = 4,4 г (95%) из метилового эфира 2-аминопиразин-3-карбоновой кислоты.
-3
[00260] К раствору гидроксида калия (3,8 г, 0,058 моль) в воде (60 мл) и ДМСО (20 мл) добавили бензамид (2,18 г, 6,8×10 моль). Эту смесь слегка нагрели для облегчения растворения твердого бензамида, после чего прозрачный желтый раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 45 минут. Аликвоту реакционного раствора подкислили уксусной кислотой и проверили при помощи ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде). Исходный материал (rf=0,55) полностью превратился в единственный новый продукт (rf=0,43). Реакционную смесь подкислили до pH около 5,0 при помощи уксусной кислоты, что вызвало осаждение продукта. Добавили лед (50 г) и перемешивали суспензию до расплавления льда. Твердый продукт отделили фильтрацией и хорошо промыли водой. После высушивания выход составил 2,06 г (100%).
-3
[00261] Суспензию птеридинона (2,06 г, 6,8×10 моль) в хлороформе (50 мл) перемешали и добавили тионилхлорид (4,05 г, 2,48 мл, 0,034 моль) и ДМФ (1,0 мл). Эту смесь перемешивали при дефлегмации в течение 1 часа. Образовавшийся прозрачный желтый раствор проверили при помощи ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде). Исходный материал (rf=0,43) полностью превратился в единственный новый продукт (rf=0,87). После охлаждения, растворители выпарили под вакуумом, а твердый желтый остаток растерли в диэтиловом эфире. Этот материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
-2
[00262] Хлорптеридин, полученный выше, суспендировали в н-бутаноле (25 мл) и добавили N-2-аминоэтилморфолин (1,77 г, 1,78 мл, 1,36×10 моль). Эту смесь затем нагревали при дефлегмации в течение 30 минут. После охлаждения, бутанол выпарили под вакуумом для получения бледно-желтого твердого вещества. Его разделили между этилацетатом (200 мл) и 5% раствором бикарбоната натрия (200 мл). Этилацетатный слой отделили и промыли 5% раствором бикарбоната натрия (100 мл). Затем этилацетатный раствор экстрагировали 5% раствором HCl (2×50 мл). Объединенные кислотные растворы снова промыли этилацетатом (100 мл), а затем подщелочили добавлением твердого карбоната калия. Осажденное твердое вещество экстрагировали в метиленхлориде (2×100 мл), а объединенные экстракты высушили над сульфатом магния. После фильтрации для удаления сульфата магния, метиленхлорид выпарили под пониженным давлением для получения желто-коричневого твердого вещества. Его очистили хроматографией на диоксиде кремния, используя 5% метанол в метиленхлориде в качестве элюента. Из фракции, содержащей продукт, получили желто-коричневое твердое вещество весом 1,6 г (57% из птеридинона) после выпаривания растворителей. ЯМР этой фракции подтвердил, что она представляет собой заданное соединение. Продукт перекристаллизовали из толуола.
-3
-2
[00263] Второй раз этот эксперимент начали из 2,16 г (7,13×10 моль) гидроксильного соединения. Хлорирование выполнили так, как описано выше, с тионилхлоридом / ДМФ в хлороформе. Выделение продукта: после охлаждения, реакционный раствор разбавили метиленхлоридом (100 мл), и этот раствор промыли 10% раствором бикарбоната натрия (200 мл). После высушивания (MgSO4), раствор отфильтровали, а растворители выпарили под вакуумом. Остававшееся твердое вещество растворили в хлороформе (100 мл) и добавили N-2-амино-этилморфолин (1,89 г, 1,9 мл, 1,45×10 моль). Эту смесь затем нагревали при дефлегмации в течение 30 минут. После охлаждения, добавили метиленхлорид (200 мл), и промыли этот раствор 5% раствором бикарбоната натрия (200 мл). Метиленхлоридный слой отделили и экстрагировали 5% раствором HCl (2×50 мл). Объединенные кислотные растворы снова промыли метиленхлоридом (100 мл), а затем подщелочили добавлением твердого карбоната калия. Осажденное твердое вещество экстрагировали в метиленхлорид (2×100 мл), а объединенные экстракты высушили над сульфатом магния. После фильтрации для удаления сульфата магния, метиленхлорид выпарили под пониженным давлением до объема около 5 мл. Добавил этиловый эфир (100 мл), и продукт быстро кристаллизовался. Твердое вещество отделили фильтрацией, промыли эфиром и высушили. Выход составил 1,87 г (63%) из гидроксильного соединения.
-5
-5
-3
-3
-3
1
[00264] 250 мл круглодонную колбу, оснащенную мешалкой, высушили в печи, а затем охладили под азотом. В охлажденную колбу добавили трис(дибензилиденацетон) дипалладий(0) (22,8 мг, 2,5×10 моль), +/- binap (46,6 мг, 7,5×10 моль), трет-бутоксид натрия (0,675 г, 7×10 моль) и толуол (25 мл). Колбу снова продули азотом и добавили бромптеридин (1,81 г, 4,36×10 моль) и N-метилпиперазин (0,600 г, 6,0×10 моль). Эту смесь перемешивали при 90°C в течение ночи. После охлаждения, реакционную смесь вылили в делительную воронку, содержащую воду (100 мл) и метиленхлорид (100 мл). Органические экстракты промыли водой, а затем высушили над сульфатом магния. После фильтрации для удаления высушивающего агента, органические растворители удалили под вакуумом. Остаток очистили хроматографией на силикагеле, используя 15% метанол в метиленхлориде в качестве элюента. Фракции, содержащие продукт, объединили и выпарили для получения продукта (Пример 1) в виде оранжевого твердого вещества. Выход составил 155 мг (8,2%). H ЯМР: 2,81 м.д., синглет, 3H; 3,25 м.д., триплет, 6Н; 3,6 м.д., мультиплет, 8Н; 4,1 м.д., мультиплет, 2Н; 4,25 м.д., триплет, 2Н; 4,6, мультиплет, 2Н; 7,1 м.д., дублет, 2Н; 8,1 м.д., дублет, 2Н; 8,8 м.д., синглет, 1Н; 8,9 м.д., синглет, 1Н. ЖХ/МС: М+1=435,35.
-4
[00265] Образование гидрохлоридной соли: птеридин (43 мг, 1×10 моль) растворили в кипящем этаноле. К этому желтому раствору добавили концентрированную хлороводородную кислоту (30 мкл). Раствор охладили, в результате чего кристаллизовалась трис-гидрохлоридная соль в виде оранжевого твердого вещества. Ее отделили фильтрацией и промыли этанолом, затем диэтиловым эфиром. Твердую соль высушили под вакуумом. Выход = 22,5 мг, молярная масса = 543,91.
Примеры 54 и 55
[00266] Метил 3-амино-5,6-дихлор-2-пиразинкарбоксилат (3,2 г, 0,0144 моль) и бензоилхлорид (7,03 г, 0,05 моль) смешивают в хлороформе (50 мл) и добавляют пиридин (8 мл). Эту смесь перемешивают при 50°C в течение ночи. Добавляют дополнительные количества бензоилхлорида (3,5,0 г, 0,025 моль) и пиридина (4 мл), и продолжают нагревание при 65°C в течение ночи. Раствор охлаждают и добавляют метанол (25 мл). После перемешивания в течение 30 минут, растворители удаляют под пониженным давлением. Твердый остаток перекристаллизовывают из н-бутанола.
-3
[00267] Суспензию дихлор-соединения (2,6 г, 8,0×10 моль) в 2-пропаноле (25 мл) перемешивают и обрабатывают N-метилпиперазином (4,0 г, 4,43 мл, 0,04 моль). Эту смесь нагревают при дефлегмации в течение одного часа. После охлаждения на льду, продукт может кристаллизоваться, и его отделяют фильтрацией.
-3
[00268] Твердый метиловый эфир (2,96 г, 7,6×10 моль) суспендируют в смеси метанола (50 мл) и тетрагидрофурана (50 мл). Эту смесь нагревают до кипения для получения прозрачного бледно-оранжевого раствора. Нагрев убирают и медленно добавляют концентрированный водный раствор аммиака (25 мл). Этот раствор перемешивают без нагревания в течение нескольких минут, и твердое вещество начинает отделяться. После перемешивания в течение 2 часов, смесь охлаждают до комнатной температуры, и можно использовать ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде), чтобы показать образование пятна нового продукта. Смесь фильтруют, а твердое вещество промывают эфиром и высушивают.
-3
[00269] К раствору гидроксида калия (4,0 г, 0,06 моль) в воде (60 мл) и ДМСО (20 мл) добавляют бензамид (2,7 г, 7,2×10 моль). Эту смесь слегка нагревают для облегчения растворения твердого бензамида, после чего прозрачный желтый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 45 минут. Аликвоту реакционного раствора подкисляют уксусной кислотой и проверяют при помощи ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде). Реакционную смесь подкисляют до pH около 5,0 при помощи уксусной кислоты, что приводит к осаждению продукта. Добавляют лед (50 г) и перемешивают суспензию до расплавления льда. Твердый продукт отделяют фильтрацией и хорошо промывают водой.
-3
[00270] Суспензию птеридинона (2,06 г, 6,8×10 моль) в хлороформе (50 мл) перемешивают и добавляют тионилхлорид (4,05 г, 2,48 мл, 0,034 моль) и ДМФ (1,0 мл). Эту смесь перемешивают при дефлегмации в течение 1 часа. После охлаждения, раствор в хлороформе промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, а затем высушивают над сульфатом магния. Раствор в хлороформе фильтруют, а растворители упаривают под вакуумом для получения твердого желтого остатка, который растирают в диэтиловом эфире. Этот материал используют на следующей стадии без дополнительной очистки.
-2
[00271] Хлорированный птеридин, полученный выше, растворяют в хлороформе (100 мл) и добавляют N-2-амино-этилморфолин (1,89 г, 1,9 мл, 1,45×10 моль). Эту смесь затем нагревают при дефлегмации в течение 30 минут. После охлаждения добавляют метиленхлорид (200 мл), и этот раствор промывают 5% раствором бикарбоната натрия (200 мл). Метиленхлоридный слой отделяют и экстрагируют 5% раствором HCl (2×50 мл). Объединенные кислотные растворы снова промывают метиленхлоридом (100 мл), а затем подщелачивают добавлением твердого карбоната калия. Осажденное твердое вещества экстрагируют в метиленхлорид (2×100 мл), а объединенные экстракты высушивают над сульфатом магния. После фильтрации для удаления сульфата магния, метиленхлорид выпаривают под пониженным давлением до объема около 5 мл. Добавляют этиловый эфир (100 мл), и продукт быстро кристаллизуется. Твердое вещество отделяют фильтрацией, промывают эфиром и высушивают.
-3
[00272] В 250 мл реактор гидрирования Парра загружают хлорид (468 мг, 1,0×10 моль), этанол (50 мл), ацетат натрия (1,0 г) и 10% палладий на углероде (500 мг). Эту смесь гидрогенируют при исходном давлении водорода 50 PSI в течение ночи. Реактор Парра продувают азотом, а содержимое нагревают до кипения. Катализатор удаляют фильтрацией горячей смеси, а катализатор промывают кипящим этанолом (10 мл). Объединенные фильтраты концентрируют под вакуумом приблизительно до 10 мл, а затем охлаждают на льду. Отделившееся твердое вещество выделяют фильтрацией и высушивают под вакуумом. ЖХ/МС: М+1=435,4.
Пример 56
-3
-3
-3
-3
[00273] Дихлорптеридин (1,37 г, 3,64×10 моль) и N-(2-аминоэтил)морфолин (1,0 г, 7,68×10 моль) добавили к 2-пропанолу (15 мл) и нагревали эту смесь при 60°C. Добавили диизопропилэтиламин (0,94 г, 7,28×10 моль) и продолжали нагревание в течение ночи. Данные ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде) показали оставшийся дихлорптеридин, поэтому добавили дополнительное количество N-(2-аминоэтил)морфолина (1,0 г, 7,68×10 моль). Температуру повысили до 85°C на 2 часа, а затем реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал очистили хроматографией на диоксиде кремния, используя 20% метанол в метиленхлориде.
1
Фракции, содержащие продукт, объединили и выпарили под пониженным давлением. Оставшийся материал растворили в этаноле (40 мл) и диэтиловом эфире (100 мл). К этому раствору добавили концентрированную хлороводородную кислоту (500 мкл). Твердую гидрохлоридную соль отделили и отделили фильтрацией. После промывания диэтиловым эфиром и высушивания, получили 400 мг продукта в виде желтого порошка. H ЯМР: 2,4 м.д., синглет, ЗН, 2,7 м.д., дублет, 2Н, 3,65 м.д., мультиплет, 12Н, 4,0 м.д., мультиплет, 12 Н, 4,4 м.д., мультиплет, 4Н, 7,6 м.д., триплет, 2Н, 7,65 м.д., квартет, 1Н, 7,8 м.д., мультиплет, 1Н, 8,4 м.д., дублет, 2Н, 9,5 м.д., широкий синглет, 1Н, ЖХ/МС, М+2=564,5.
Пример 57
-3
[00274] Хлорптеридин (1,76 г, 4,93×10 моль) перемешали в ТГФ (50 мл), и добавили к нему раствор формиата аммония (2,5 г), растворенного в воде (4 мл). К нему добавили 10% палладий на углероде (200 мг). Эту смесь перемешивали под азотом при дефлегмации в течение 30 минут. Данные ТСХ (диоксид кремния, 25% метанол в метиленхлориде) показали единственное соединение с глубой флуоресценцией при Rf=0,43. Теплый раствор отфильтровали от катализатора и осажденных солей. Осадок на фильтре промыли горячим ТГФ (2×50 мл), а объединенные фильтраты промыли 1:1 насыщенным солевым раствором и водой. Растворители удалили под пониженным давлением, а твердый остаток перемешивали в диэтиловом эфире (40 мл), затем отделили фильтрацией. После высушивания получили 1,4 г (88%) продукта в виде желто-коричневого твердого вещества.
-3
-3
[00275] Гидроксиптеридин (1,9 г, 5,89×10 моль) перемешали в оксихлориде фосфора (25 мл) и добавили диизопропилэтиламин (761 мг, 5,89×10 моль). Этот раствор нагревали при 75°C в течение 6 часов, а затем выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. Избыток оксихлорида фосфора удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал перемешивали со льдом (30 г) для разрушения оставшегося оксихлорида фосфора. Эту смесь разделили между 10% раствором карбоната калия (150 мл) и метиленхлоридом (150 мл). Метиленхлоридный раствор высушили над сульфатом магния, затем отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшийся материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
-2
[00276] Хлорптеридин, полученный выше, растворили в н-бутаноле (50 мл) и добавили N-метил-N'-(2-аминоэтил)пиперазин (2,0 г, 1,4×10 моль). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 30 минут. Данные ТСХ (диоксид кремния, 25% метанол в метиленхлориде) показали единственный продукт с голубой флуоресценцией при Rf=0,093. н-Бутанол удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал экстрагировали перемешиванием в диэтиловом эфире (100 мл). Объединенные фильтраты экстрагировали водой (50 мл). Эти водные экстракты обработали карбонатом калия для осаждения продукта в виде маслянистого вещества. Продукт экстрагировали в метиленхлорид (100 мл). После высушивания над сульфатом магния, метиленхлоридный слой отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшееся твердое вещество (1,28 г) растворили в метаноле (40 мл) и нагревали этот раствор до дефлегмации. Добавили концентрированную хлороводородную кислоту (982 мкл) и охладили раствор на льду. Кристаллизовалась гидрохлоридная соль Примера 57, и ее отделили фильтрацией. После промывания метанолом, а затем диэтиловым эфиром, твердое вещество высушили для получения продукта в виде его гидрохлоридной соли с выходом 950 мг. ЖХ/МС: М+1=448,45.
Пример 58
-3
-3
[00277] Хлорптеридин (1,35 г, 3,96×10 моль) перемешали в н-бутаноле (20 мл) и добавили гистамин (878 мг, 7,9×10 моль). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 30 минут. Данные ТСХ (диоксид кремния, 25% метанол в метиленхлориде) показали единственный продукт с голубой флуоресценцией при Rf=0,18. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (100 мл), и эту смесь экстрагировали 5% хлороводородной кислотой (100 мл), затем водой (100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Щелочную водную смесь экстрагировали метиленхлоридом (2×150 мл). После высушивания над сульфатом магния, метиленхлоридный раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшееся твердое вещество перемешали в диэтиловом эфире (100 мл), а затем отделили фильтрацией для получения 850 мг продукта в виде желто-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС: М+1=416,27.
Пример 59
-3
-3
[00278] Хлорптеридин (1,35 г, 3,96×10 моль) перемешали в н-бутаноле (20 мл) и добавили 4-(2-аминоэтил)пиридин (968 мг, 7,9×10 моль). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 30 минут. Данные ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде) показали единственный продукт с голубой флуоресценцией при Rf=0,14. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (100 мл), и эту смесь экстрагировали 5% хлороводородной кислотой (100 мл), затем водой (100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Щелочную водную смесь экстрагировали метиленхлоридом (2×150 мл). После высушивания над сульфатом магния, метиленхлоридный раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшийся материал очистили хроматографией на силикагеле, используя 15% метанол в хлороформе в качестве элюента. Фракции, содержащие продукт, объединили и выпарили для получения продукта в виде серого порошка с выходом 650 мг. ЖХ/МС: М+1=427,26.
Пример 60
-3
-3
-3
[00279] Хлорптеридин (852 мг, 2,5×10 моль) перемешали в н-бутаноле (20 мл) и добавили 2-(2-аминоэтил)пиридин (611 мг, 5,0×10 моль) вместе с диизопропилэтиламином (646 мг, 5,0×10 моль). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 30 минут. Данные ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде) показали единственный продукт с голубой флуоресценцией при Rf=0,14. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (100 мл), и эту смесь экстрагировали 5% хлороводородной кислотой (100 мл), затем водой (100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Щелочную водную смесь экстрагировали метиленхлоридом (2×150 мл). После высушивания над сульфатом магния, метиленхлоридный раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшееся маслянистое вещество кристаллизовалось при стоянии. Это твердое вещество перемешивали в диэтиловом эфире (25 мл), а затем выделили фильтрацией для получения, после промывания диэтиловым эфиром и высушивания, 750 мг продукта в виде желто-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС: М+1=427,26.
Пример 61
-3
3
[00280] Хлорптеридин (852 мг, 2,5×10 моль) перемешали в н-бутаноле (20 мл) и добавили S-(2-аминоэтил)изотиомочевины дигидробромид (1,41 г, 5,0×10- моль) вместе с диизопропилэтиламином (1,3 г, 0,01 моль). Эту смесь нагревали при дефлегмации в течение 30 минут. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (200 мл), и экстрагировали эту смесь 5% хлороводородной кислотой (2×100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Продукт выделился в виде бледно-желтого твердого вещества. Это твердое вещество отделили фильтрацией и промыли водой для получения, после высушивания, 961 мг продукта в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС: М+1=424,21.
Пример 62
-3
-3
-3
[00281] Хлорптеридин (852 мг, 2,5×10 моль) перемешали в н-бутаноле (20 мл) и добавили 2-(аминометил)-5-метилпиразин (616 мг, 5,0×10 моль) вместе с диизопропилэтиламином (646 мг, 5,0×10 моль). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 30 минут. Данные ТСХ (диоксид кремния, 20% метанол в метиленхлориде) показали единственный продукт с голубой флуоресценцией при Rf=0,50. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (200 мл), и эту смесь экстрагировали 5% хлороводородной кислотой (100 мл), затем водой (100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Щелочную водную смесь экстрагировали метиленхлоридом (2×150 мл). После высушивания над сульфатом магния, метиленхлоридный раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшееся маслянистое вещество кристаллизовалось при перемешивании в диэтиловом эфире (150 мл), а затем его отделили фильтрацией для получения, после промывания диэтиловым эфиром и высушивания, 600 мг продукта в виде желто-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС: М+1=428,23.
Пример 63
-3
-3
-3
-3
[00282] Хлорптеридин (500 мг, 1,47×10 моль) перемешали в н-бутаноле (20 мл) и добавили N-метил-N'-диметилэтилендиамин (300 мг, 2,93×10 моль) вместе с диизопропилэтиламином (379 мг, 2,93×10 моль). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 30 минут. Данные ТСХ (диоксид кремния, 20% метанол в метиленхлориде) показали единственный продукт с голубой флуоресценцией при Rf=0,14. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (200 мл), и эту смесь экстрагировали 5% хлороводородной кислотой (100 мл), затем водой (100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Щелочную водную смесь экстрагировали метиленхлоридом (3×100 мл). После высушивания над сульфатом магния, метиленхлоридный раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшееся маслянистое вещество растворили в диэтиловом эфире (100 мл), и к этому раствору добавили раствор серной кислоты (144 мг, 1,47×10 моль), растворенной в диэтиловом эфире (2,0 мл). Смесь, содержащую сульфатную соль, перемешивали в течение одного часа, затем выделили твердое вещество фильтрацией для получения, после промывания диэтиловым эфиром и высушивания, 425 мг продукта. ЖХ/МС: М+1=407,5.
Пример 64
-3
-3
-3
[00283] Хлорптеридин (852 мг, 2,5×10 моль) перемешали в н-бутаноле (20 мл) и добавили 3-[1,2,4]-триазол-1-ил-пропиламин (631 мг, 5,0×10 моль) вместе с диизопропилэтиламином (646 мг, 5,0×10 моль). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 8 часов. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (200 мл), и эту смесь экстрагировали 5% хлороводородной кислотой (100 мл), затем водой (100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Щелочную водную смесь экстрагировали метиленхлоридом (3×100 мл). После высушивания над сульфатом магния, метиленхлоридный раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшееся маслянистое вещество кристаллизовалось при перемешивании в диэтиловом эфире (100 мл), а затем его отделили фильтрацией для получения, после промывания диэтиловым эфиром и высушивания, 350 мг продукта в виде желто-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС: М+1=431,35.
Пример 65
-3
-3
-3
[00284] Хлорптеридин (852 мг, 2,5×10 моль) перемешали в н-бутаноле (20 мл) и добавили 2,4-диамино-6-(3-аминопропил)амино-1,3,5-триазин (916 мг, 5,0×10 моль) вместе с диизопропилэтиламином (646 мг, 5,0×10 моль). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 5 часов. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (200 мл), и эту смесь экстрагировали 5% хлороводородной кислотой (100 мл), затем водой (100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Щелочную водную смесь экстрагировали н-бутанолом (2×100 мл), а объединенные экстракты промыли насыщенным солевым раствором (50 мл). После высушивания над сульфатома натрия, н-бутанольный раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением до объема приблизительно 25 мл. Этот раствор охлаждали в морозильной камере в течение ночи. Твердое вещество, которое кристаллизовалось, отделили фильтрацией для получения, после промывания н-бутанолом, а затем диэтиловым эфиром, и после высушивания, 900 мг продукта в виде желто-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС: М+1=488,37.
Примеры 66 и 67
[00285] Суспензию метил 3-амино-5,6-дихлор-2-пиразинкарбоксилата (25,0 г, 0,113 моль) в 2-пропаноле (200 мл) перемешали и добавили пирролидин (8,84 г, 0,124 моль). К этой смеси добавили диизопропилэтиламин (16,3 г, 0,126 моль), после чего реакционную смесь нагревали до дефлегмации. При дефлегмации образовался коричневый раствор. Через 2 часа при дефлегмации, данные ТСХ (диоксид кремния, 1:1 этилацетат и гексан) показали, что весь исходный материал израсходован с образованием единственного продукта. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры, в результате чего продукт кристаллизовался. Твердый продукт отделили фильтрацией и промыли 2-пропанолом, а затем диэтиловым эфиром. После высушивания получили 24,8 г (85,5%) продукта в виде розового твердого вещества.
-2
[00286] Пиразин (24,8 г, 9,66×10 моль) перемешали в пиридине (200 мл) и 3 порциями добавили бензоилхлорид (33,9 г, 0,241 моль). Этот раствор перемешивали при 65°C в течение ночи. После охлаждения, пиридин удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал растворили в метиленхлориде (400 мл) и добавили воду (200 мл). К этой смеси добавляли карбонат калия, пока водный раствор не стал щелочным по лакмусу. Метиленхлоридный раствор отделили и промыли 2% HCl (250 мл). Затем этот раствор высушили над сульфатом магния. После фильтрации, растворители удалили под пониженным давлением. Оставшийся материал перемешивали с диэтиловым эфиром (200 мл), что привело к кристаллизации продукта. Твердый продукт отделили фильтрацией. После промывания диэтиловым эфиром и высушивания, получили имид в виде серого твердого вещества с выходом 36,8 г (82%).
[00287] Имид (28,0 г, 0,06 моль) перемешивали в ТГФ в 500 мл колбе для работы под давлением. К нему добавили концентрированный аммиак (40 мл). Колбу закрыли и нагревали при 65°C в течение 3 часов. После охлаждения, твердое вещество, которое кристаллизовалось, отделили фильтрацией. Подтвердили, что это твердое вещество представляет собой исходный имид. Данные ТСХ (диоксид кремния, 1:1 этилацетат и гексан) показали, что фильтраты содержат дополнительное количество имида (Rf=0,56) вместе с другим соединением (Rf=0,44). После выпаривания растворителей под пониженным давлением, эти два материала разделили хроматографией на диоксиде кремния, используя 2,5% метанол в метиленхлориде. Фракции, содержащие продукт, объединили и выпарили для получения продукта в виде белого твердого вещества с выходом 1,9 г. ЖХ/МС: М+1=346,25.
-3
-2
-2
[00288] Суспензию пиразина (1,8 г, 5,49×10 моль) в ДМСО (25 мл) перемешали и добавили раствор гидроксида калия (85%, 2,94 г, 4,45×10 моль) в воде (25 мл). Эту смесь нагрели до 60°C, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Густую суспензию разбавили водой (25 мл) и добавили уксусную кислоту (2,67 г, 4,45×10 моль). После перемешивания в течение 10 минут, птеридинон отделили фильтрацией, промыли водой и высушили. Выход птеридинона составил 1,6 г (88,9%).
-3
-3
[00289] Птеридинон (1,6 г, 4,88×10 моль), оксихлорид фосфора (25 мл) и диизопропилэтиламин (636 мг, 4,92×10 моль) смешали и нагревали при 80°C в течение 8 часов. Избыток оксихлорида фосфора удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал перемешивали с метиленхлоридом (100 мл). При перемешивании добавили лед и воду (100 г), и добавляли карбонат калия, пока pH водного раствора не составил 7,0. Метиленхлоридный раствор отделили и высушили над сульфатом магния. После фильтрации, метиленхлорид выпарили под пониженным давлением. Оставшийся дихлорптеридин использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
-2
-2
[00290] Дихлорптеридин, полученный выше, и N-(2-аминоэтил)морфолин (2,54 г, 1,95×10 моль) добавили к н-бутанолу (50 мл). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 12 часов. Данные ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде) показали оставшийся дихлорптеридин, поэтому добавили дополнительное количество N-(2-аминоэтил)морфолина (2,54 г, 1,95×10 моль). Нагревание при 110°C продолжали еще 12 часов. Данные ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде) показали два соединения при Rf=0,62 и при Rf=0,33. Растворитель удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал очистили хроматографией на диоксиде кремния, используя 10% метанол в метиленхлориде, затем 15% метанол в метиленхлориде. Фракции, содержащие два продукта, объединили и выпарили под пониженным давлением. Соединение 1 с Rf 0,62 идентифицировали как Пример 66 и выделили с выходом 572 мг. Соединение 2 с Rf 0,33 идентифицировали как Пример 67 и выделили с выходом 250 мг. ЖХ/МС: Пример 67, М+1=593,54. Пример 66, М+1=534,45.
Пример 68
-2
-2
-2
[00291] Суспензию метил 3-амино-5,6-дихлор-2-пиразинкарбоксилата (5,0 г, 2,25×10 моль) в 2-пропаноле (50 мл) перемешали и добавили N-метилпиперазин (2,48 г, 2,48×10 моль). К этой смеси добавили диизопропилэтиламин (3,2 г, 2,48×10 моль), после чего реакционную смесь нагрели до дефлегмации. При дефлегмации образовался коричневый раствор. Через 2 часа при дефлегмации, данные ТСХ (диоксид кремния, 10% метанол в метиленхлориде) показали, что весь исходный материал израсходован с образованием единственного продукта. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры в течение ночи, в результате чего продукт кристаллизовался. Твердый продукт отделили фильтрацией и промыли 2-пропанолом, а затем диэтиловым эфиром. После высушивания получили 5,8 г (90,2%) продукта в виде розового твердого вещества.
-2
-2
[00292] Пиразин (9,5 г, 3,32×10 моль) перемешали в пиридине (60 мл) и 3 порциями добавили 4-трет-бутилбензоилхлорид (16,5 г, 8,4×10 моль). Этот раствор перемешивали при 65°C в течение 20 часов. После охлаждения, пиридиновый раствор вылили в воду (300 мл), а выпавшее в осадок твердое вещество экстрагировали в метиленхлорид (2×200 мл). Затем объединенные экстракты высушили над сульфатом магния. После фильтрации растворители удалили под пониженным давлением. Оставшийся материал перемешали с диэтиловым эфиром (100 мл). Твердый продукт выделили фильтрацией. После промывания диэтиловым эфиром и высушивания, получили имид в виде желто-коричневого твердого вещества с выходом 13,5 г (67%).
-2
[00293] Имид (13,5 г, 2,23×10 моль) перемешали в смеси ТГФ (25 мл) и метанола (65 мл). К нему добавили концентрированный аммиак (40 мл). Смесь нагревали с дефлегматором в течение 2 часов. После охлаждения растворители удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал растворили в метиленхлориде (250 мл). Метиленхлоридных раствор промыли 5% карбонатом калия (100 мл), а затем водой (100 мл). После высушивания над хлоридом магния, раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшийся материал перемешали с диэтиловым эфиром (100 мл). Кристаллизовавшийся твердый продукт отделили фильтрацией. После промывания диэтиловым эфиром и высушивания, получили продукт в виде желто-коричневого твердого вещества с выходом 9,1 г (94,7%).
-2
[00294] Хлорпиразин (15 г, 3,48×10 моль) растворили в ДМФ (250 мл) и добавили 10% палладий на углероде (200 мг). Эту смесь гидрогенировали при давлении 50 PSI в аппарате Парра до прекращения поглощения водорода (2 часа). Полученную суспензию перенесли в колбу и нагрели до кипения. Горячий раствор отфильтровали для удаления катализатора, а фильтраты охлаждали в морозильной камере в течение ночи. Твердое вещество, которое кристаллизовалось из раствора, отделили фильтрацией, промыли ДМФ, затем диэтиловым эфиром и высушили. Гидрохлоридную соль продукта выделили с выходом 5,4 г (36%). ЖХ/МС: М+1=397,35.
-3
-2
-2
[00295] Суспензию пиразина (1,8 г, 5,49×10 моль) в ДМСО (25 мл) перемешали и добавили раствор гидроксида калия (85%, 2,94 г, 4,45×10 моль) в воде (25 мл). Эту смесь нагрели до 60°C, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Густую суспензию разбавили водой (25 мл) и добавили уксусную кислоту (2,67 г, 4,45×10 моль). После перемешивания в течение 10 минут, птеридинон отделили фильтрацией, промыли водой и высушили. Выход птеридинона составил 1,6 г (88,9%).
-2
-2
-2
[00296] Суспензию пиразина (4,3 г, 1,0×10 моль) в ДМСО (45 мл) перемешали и добавили раствор гидроксида калия (85%, 5,36 г, 8,11×10 моль) в воде (45 мл). Эту смесь нагрели до 80°C, а затем перемешивали при этой температуре в течение 2 часов. Густую суспензию разбавили водой (50 мл) и добавили уксусную кислоту (4,86 г, 8,11×10 моль). После перемешивания в течение 10 минут, дигидроксиптеридин отделили фильтрацией, промыли водой и высушили. Выход дигидроксиптеридина составил 2,96 г (75%). ЖХ/МС: М+1=395,33.
-3
-2
[00297] Дигидроксиптеридин (2,86 г, 7,25×10 моль), оксихлорид фосфора (50 мл), хлороформ (50 мл) и диизопропилэтиламин (1,87 г, 1,45×10 моль) смешали и нагревали с дефлегматором в течение 6 часов. Избыток оксихлорида фосфора и хлороформа удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал перемешали с метиленхлоридом (200 мл). При перемешивании добавили лед и воду (100 г), и добавляли бикарбонат натрия до pH водного слоя 8,0. Метиленхлоридный раствор отделили и высушили над сульфатом магния. После фильтрации, метиленхлорид выпарили под пониженным давлением. Оставшийся дихлорптеридин использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
-2
[00298] Дихлорптеридин, полученный выше, и N-(2-аминоэтил)морфолин (3,77 г, 2,90×10 моль) добавили к н-бутанолу (25 мл). Эту смесь нагревали при 110°C в течение 12 часов. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (200 мл) и экстрагировали эту смесь 5% хлороводородной кислотой (2×100 мл). Объединенные водные экстракты промыли диэтиловым эфиром (100 мл), затем подщелочили добавлением карбоната калия. Щелочную водную смесь экстрагировали метиленхлоридом (2×150 мл), а объединенные экстракты высушили над сульфатом магния. Метиленхлоридный раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшийся материал очистили хроматографией на диоксиде кремния, используя 25% метанол в метиленхлориде и перейдя на 25% метанол и 2% метиламин в метиленхлориде. Не прореагировавший дихлорптеридин элюировали первым, а продукт элюировали при переходе элюента на 25% метанол и 2% метиламин в метиленхлориде. Фракции, содержащие продукт, объединили и выпарили под пониженным давлением для получения Примера 68 с выходом 250 мг. ЖХ/МС: М+1=619,54.
Пример 69
[00299] Бензамидина гидрохлорид (26,0 г, 0,166 моль) и диметилмалонат (21,9 г, 0,166 моль) смешали в сухом метаноле (200 мл). Эту смесь перемешали и добавили 30% метоксид натрия в метаноле (89,7 г, 0,498 моль). Образовался осадок хлорида натрия, и эту смесь перемешивали при 55°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавили водой (500 мл) для получения прозрачного раствора. Его подкислили добавлением уксусной кислоты (35 мл), что привело к быстрому образованию белого осадка. После перемешивания в течение 30 минут, твердое вещество отделили фильтрацией. Осадок на фильтре последовательно промыли водой, метанолом и ацетоном. После высушивания получили 2-фенил-4,6-дигидроксипиримидин с выходом 25 г (80%) в виде белого твердого вещества.
[00300] Раствор 1:
[00301] Анилин (9,3 г, 0,10 моль) растворили в воде (200 мл) и добавили концентрированную хлороводородную кислоту (20 мл), содержащую лед (100 г). Этот раствор перемешали и по каплям добавили раствор нитрита натрия (6,9 г, 0,10 моль), растворенного в воде (50 мл). После завершения добавления, раствор диазония выдерживали на льду, и приготовили раствор 2.
[00302] Раствор 2:
[00303] Гидроксид натрия (24 г, 0,60 моль) и 2-фенил-4,6-дигидроксипиримидин (18,8 г, 0,10 моль) растворили в воде (200 мл), и после завершения растворения добавили лед (100 г).
[00304] Раствор 1 медленно вылили в раствор 2 при температуре льда, при перемешивании. Полученный ярко-оранжевый раствор перемешали, и скоро кристаллизовалась натриевая соль азосоединения, образовав густую суспензию. Через 30 минут, густую суспензию подкислили концентрированной хлороводородной кислотой, и после выстаивания в течение 30 минут, азосоединение отделили фильтрацией. Сырое твердое вещество промыли водой и высушили для получения азопиримидина в виде желтого вещества с выходом 12,8 г (43,7%).
[00305] Дигидроксифенилазопиримидин (11,7 г, 0,04 моль) измельчили в порошок и смешали с оксихлоридом фосфора (45 мл). Эту смесь перемешали и медленно добавили диизопропилэтиламин (12,3 мл). Полученную оранжевую суспензию нагревали с дефлегматором в течение 1 часа. После охлаждения, избыток оксихлорида фосфора удалили под пониженным давлением. Оставшийся материал обработали льдом, а затем его экстрагировали метиленхлоридом (300 мл). Метиленхлоридные экстракты промыли водой (2×150 мл), затем высушили над сульфатом магния. После фильтрации растворитель удалили под пониженным давлением. Оставшийся материал перемешали со смесью 50/50 этил ацетата и гексана (50 мл). Полученное твердое вещество отделили фильтрацией и промыли 50/50 смесью этилацетата и гексана. После высушивания получили 10,5 г (79,7%) продукта в виде оранжевого твердого вещества.
-2
-2
[00306] Смесь 2-фенил-4,6-дихлор-5-фенилазопиримидина (6,58 г, 2,0×10 моль) и N-(2-аминоэтил)морфолина (10,4 г, 8,0×10 моль) в н-бутаноле (50 мл) нагрели до кипения. Густая суспензия, которая первоначально образовалась, превратилась в раствор, когда смесь достигла дефлегмации. Через 1 час при дефлегмации, горячий раствор разбавили 2-пропанолом (100 мл), поддерживая раствор при дефлегмации. После добавления 2-пропанола, нагревание при дефлегмации продолжали еще 1 час. После охлаждения, продукт кристаллизовался в виде желтого твердого вещества. После охлаждения на льду, твердое вещество отделили фильтрацией, промыли 2-пропанолом и высушили для получения продукта в виде зернистого оранжевого вещества с выходом 9,8 г (94,8%).
-2
[00307] Фенилазопиримидин (16,5 г, 3,19×10 моль) перемешали в метаноле (100 мл) и ТГФ (100 мл). К нему добавили 10% палладий на углероде (500 мг). Раствор нагрели до дефлегмации и 3 порциями добавили формиат аммония (16 г), растворенный в воде (25 мл), за период 1 час. После нагревания с дефлегматором в течение 2 часов, оранжевый цвет азопиримидина исчез, а данные ТСХ (диоксид кремния, 10%) метанол в метиленхлориде) показали расходование азосоединения с образованием единственного продукта (Rf=0,13). После охлаждения, катализатор удалили фильтрацией, а фильтраты выпарили под пониженным давлением. Оставшийся материал разделили между метиленхлоридом (400 мл) и 10% раствором карбоната калия (100 мл). Раствор высушили над сульфатом магния. После фильтрации для удаления сульфата магния, растворители удалили под пониженным давлением. К оставшемуся материалу добавили диэтиловый эфир (100 мл), и эту смесь перемешивали в течение 15 минут. Твердое вещество отделили фильтрацией и промыли диэтиловым эфиром. После высушивания получили триаминопиримидин в виде желто-коричневого твердого вещества с выходом 11,2 г (82%).
-3
-3
1
3
[00308] Триаминопиримидин (0,855 г, 2,0×10 моль) и этилпируват (0,348 г, 3,0×10 моль) смешали в 2-бутаноле (10 мл). Эту смесь нагревали с дефлегматором, в результате чего образовался прозрачный желтый раствор. После нагревания при дефлегмации в течение 2 часов, данные ТСХ (диоксид кремния, 15% метанол в метиленхлориде) показали единственный продукт с голубой флуоресценцией. Раствор охладили до комнатной температуры, в результате чего кристаллизовался птеридинон. К этой суспензии добавили 2-пропанол (10 мл) и продолжали перемешивание еще 15 минут. Птеридинон отделили фильтрацией, промыли 2-пропанолом и высушили. Выход составил 0,75 г (78,2%). ЖХМС: М+1=480,3. H ЯМР (CDCl): 2,57 м.д., синглет, 3Н, 2,63 м.д., мультиплет, 8Н, 2,76 м.д., триплет, 2Н, 2,80 м.д., триплет, 2Н, 3,65 м.д., триплет, 4Н, 3,79 м.д., триплет, 4Н, 3,86 м.д., квартет, 2Н, 4,64 м.д., триплет, 2Н, 6,99 м.д., триплет, 1Н, 7,50 м.д., мультиплет, 3H, 8,48 м.д., триплет, 2Н.
Пример 70
-3
-3
1
3
[00309] Триаминопиримидин (0,855 г, 2,0×10 моль) и этилбензоилформиат (0,535 г, 3,0×10 моль) смешали в 2-бутаноле (10 мл). Эту смесь нагревали до 100°C в течение 16 часов. Темно-красный раствор охлаждали до комнатной температуры в течение ночи, что привело к кристаллизации птеридинона. Птеридинон отделили фильтрацией, промыли 2-бутанолом, затем диэтиловым эфиром и высушили. Выход составил 0,123 г (11,4%). ЖХ/МС: М+1=542,4. H ЯМР (CDCl): 2,63 м.д., мультиплет, 4Н, 2,67 м.д., мультиплет, 4Н, 2,77 м.д., триплет, 2Н, 2,85 м.д., триплет, 2Н, 3,66 м.д., мультиплет, 4Н, 3,81 м.д., мультиплет, 4Н, 3,87 м.д., мультиплет, 2Н, 4,73 м.д., триплет, 2Н, 7,31 м.д., мультиплет, 2Н, 7,74 м.д., мультиплет, 6Н, 8,39 м.д., триплет, 2Н, 8,52 м.д., дублет, 2Н.
Пример 71
-3
-3
1
3
[00310] Триаминопиримидин (0,855 г, 2,0×10 моль) растворили в теплом 2-бутаноле (10 мл). К теплому раствору добавили этил-трифторметилпируват (0,510 г, 3,0×10 моль). Эту смесь закрыли септой и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Летучие вещества удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал растворили в диэтиловом эфире (25 мл). Раствор перемешивали в течение нескольких минут, в результате чего кристаллизовался птеридинон. Птеридинон отделили фильтрацией, промыли диэтиловым эфиром и высушили. Выход составил 0,750 г (70,3%). ЖХ/МС: М+1=534. H ЯМР (CDCl): 2,61 м.д.', широкий синглет, 8Н, 2,76 м.д., триплет, 2H, 2,82 м.д., триплет, 2Н, 3,61 м.д., мультиплет, 4Н, 3,78 м.д., мультиплет, 4Н, 3,86 м.д., мультиплет, 2Н, 4,66 м.д., триплет, 2Н, 7,32 м.д., мультиплет, 1H, 7,55 м.д., мультиплет, 3Н, 8,49 м.д., дублет, 2Н.
Пример 72
-3
-3
1
3
[00311] Триаминопиримидин (0,855 г, 2,0×10 моль) и этил-4-цианобензоилформиат (0,610 г, 3,0×10 моль) смешали в 2-бутаноле (10 мл). Эту смесь нагрели до 95°C, в результате чего образовался желтый раствор. Нагревание при 95°C продолжали в течение ночи. Образовавшуюся суспензию охладили до комнатной температуры и разбавили диэтиловым эфиром (25 мл). После перемешивания в течение 15 минут, птеридинон отделили фильтрацией, промыли диэтиловым эфиром и высушили. Выход ярко-желтого продукта составил 0,860 г (76%). ЖХ/МС: М+1=567. H ЯМР (CDCl): 2,64 м.д., мультиплет, 8Н, 2,79 м.д., триплет, 2Н, 2,85 м.д., триплет, 2Н, 3,65 м.д., триплет, 4Н, 3,80 м.д., триплет, 4Н, 3,91 м.д., квартет, 2Н, 7,35 м.д., мультиплет, 2Н, 7,53 м.д., мультиплет, 3H, 7,78 м.д., мультиплет, 2Н, 8,52 м.д., мультиплет, 4Н.
Пример 73
-2
-2
-2
[00312] К перемешанной суспензии 2-фенил-4,6-дихлор-5-фенилазопиримидина (6,20 г, 1,88×10 моль) в 2-бутаноле (75 мл) добавили раствор N-метил-N'-(2-аминоэтил)пиперазина (6,0 г, 4,19×10 моль) и диизопропилэтиламин (5,41 г, 4,19×10 моль) в 2-бутаноле (25 мл). Эту смесь нагрели до кипения. Первоначально образовавшаяся густая суспензия превратилась в раствор, когда смесь достигла дефлегмации. Темно оранжевый раствор нагревали при дефлегмации в течение 5 часов. После охлаждения в течение ночи при комнатной температуре, продукт отделили в виде желтого твердого вещества. 2-Бутанол удалили под пониженным давлением, а оставшееся твердое вещество растворили в метиленхлориде (300 мл). Этот раствор промыли 10% раствором карбоната калия (150 мл), затем высушили над сульфатом магния. Раствор отфильтровали и выпарили под пониженным давлением. Оставшееся твердое вещество перемешивали в течение 3 часов в диэтиловом эфире (200 мл), а затем отделили фильтрацией, промыли диэтиловым эфиром и высушили. Продукт выделили с выходом 5,6 г (55%).
-2
[00313] Фенилазопиримидин (4,07 г, 7,5×10 моль) перемешали в метаноле (40 мл) и ТГФ (40 мл). К нему добавили 10% палладий на углероде (300 мг) и формиат аммония (3 г), растворенный в воде (6 мл). Раствор нагрели до 55°C. После нагревания при 55°C в течение 15 минут, оранжевый цвет азопиримидина исчез, а данные ТСХ (диоксид кремния, 25% метанол в метиленхлориде) показали расходование азосоединения с образованием единственного продукта. Добавили воду (10 мл) и продолжали перемешивание в течение 5 минут. После охлаждения катализатор удалили фильтрацией, а фильтраты обрабатывали карбонатом калия до щелочной среды. Смесь перемешали с метиленхлоридом (200 мл). Метиленхлоридную фазу отделили и высушили над сульфатом магния. После фильтрации для удаления сульфата магния, растворители удалили под пониженным давлением. К оставшемуся материалу добавили диэтиловый эфир (50 мл) и гексан (50 мл), и эту смесь перемешивали в течение 5 минут. Растворители декантировали от неочищенного триаминопиримидина, который использовали без очистки на следующей стадии.
-3
-3
[00314] Неочищенный триаминопиримидин (-7,5×10 моль) и этилбензоилформиат (1,34 г, 7,5×10 моль) смешали в н-бутаноле (20 мл). Эту смесь нагревали до 110°C в течение 5 часов, а затем выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. н-Бутанол удалили под пониженным давлением, а оставшийся материал очистили хроматографией на диоксиде кремния, используя 15% метанол в метиленхлориде в качестве элюента. Фракции, содержащие продукт, объединили и выпарили под пониженным давлением для получения 0,271 г (6,4%) продукта. ЖХ/МС%: М+1=568,58.
Пример 74
-3
-3
[00315] Триаминопиримидин (0,855 г, 2,0×10 моль) и этил-3,5-дифторбензоилформиат (0,643 г, 3,0×10 моль) смешали в 2-бутаноле (10 мл). Эту смесь нагревали при дефлегмации в течение 5 часов. После охлаждения кристаллизовался птеридинон. Птеридинон отделили фильтрацией, промыли 2-пропанолом, затем диэтиловым эфиром и высушили. Выход составил 0,800 г (69,2%). ЖХ/МС: М+1=578,51.
[00316] Анализ антагониста TLR9
[00317] Клетки HEK-Blue™-hTLR9 приобрели у компании InvivoGen Inc. и использовали для определения антагонизма исследуемого соединения и реакций, управляемых человеческим TLR9 (hTLR9). Клетки HEK-Blue™-hTLR9 разработаны для изучения стимуляции человеческого TLR9 путем контролирования активации NF-kB. Как описано производителем, «клетки HEK-Blue™-hTLR9 были получены совместной трансфекцией гена hTLR9 и секретированного оптимизированным образом эмбрионального репортерного гена щелочной фосфатазы (SEAP) в клетки HEK293. Репортерный ген SEAP помещен под контроль минимального промотора IFN-b, гибридизованного с пятью связывающими сайтами NF-kB и АР-1. Стимуляция лигандом TLR9 активирует NF-kB и АР-1, что вызывает выработку SEAP. Уровни SEAP могут быть легко определены в среде для обнаружения QUANTI-Blue™, которая становится пурпурной/синей в присутствии щелочной фосфатазы».
[00318] Анализ антагонизма TLR9
[00319] День1:
[00320] Приготовили клеточную суспензию клеток HEK-Blue™-hTLR9 в количестве ~450000 клеток на мл в экспериментальной среде, которая содержала 5% (об./об.) инактивированной нагреванием эмбриональной бычьей сыворотки. 180 мкл клеточной суспензии (~80000 клеток) добавили в каждую лунку плоскодонного 96-луночного планшета и поместили в инкубатор при 37°C на ночь.
[00321] День 2
[00322] Исследуемые соединения серийно разбавили в экспериментальной среде, обычно начиная с 10 мкМ, и 3-кратно разбавляя в 96-луночном эталонном планшете. 20 мкл разбавленного исследуемого соединения перенесли при помощи 12-канальной многоканальной пипетки в планшет с клетками и инкубировали при 37°C в течение 1 часа. Затем в каждую лунку добавили 20 мкл антагониста hTLR9 (такого как ОДН 2006,1 мкМ), и инкубировали планшет при 37°C в течение ночи.
[00323] День 3
[00324] QUANTI-Blue™ производства Invivogen приготовили по инструкциям производителя. 180 мл повторно суспендированного QUANTI-Blue™ добавили в каждую лунку плоскодонного 96-луночного планшета. Затем на планшет добавили 20 мкл на лунку индуцированного HEK-Blue™-hTLR9 клеточного супернатанта и инкубировали планшет при 37°C в течение 1-3 часов. Уровни SEAP определили с использованием спектрофотометра при 620 нм.
50
[00325] Расчет IC
50
[00326] Выработку SEAP, зависящую от зависящего от концентрации ингибирования hTLR9, выразили как концентрацию соединения, которая вызывает полумаксимальный уровень SEAP, вызываемый действием только агониста hTLR. Процентную активность для каждого наблюдения рассчитали по формуле: % активности = ((наблюдаемая оптическая плотность (ОП) - фоновая ОП)/(ОП только с агонистом - фоновая ОП))*100. 50% ингибирующую концентрацию (IC) рассчитали, используя построение 4-параметрической сигмоидальной кривой Хилла, где точку перегиба сигмоидальной кривой определяют как точку 50% активности. Результаты показаны в Таблице 4.
[00327] Влияние исследуемых продуктов на нокдаун Toll-подобного рецептора (TLR) после введения однократной внутрибрюшинной дозы самцам мышей С57 B1/6.
50
[00328] Влияние исследуемых продуктов на нокдаун Toll-подобного рецептора (TLR) оценили на мышах C57B1/6J. Первичные конечные точки включали окончательный сбор крови для анализа выработки цитокинов в ответ на инъекцию агониста CpG-ДНК TLR9. Использовали самцов мышей C57B1/6J возрастом ~8 недель производства Jackson LaboRatories. Исследуемые группы представляли собой 3 мыши на одну экспериментальную группу, и этим группам вводили исследуемый продукт в сериях уменьшающихся доз в диапазоне от 400 мкг до 10 мкг. Результаты показаны в Таблице 5. Обработку экспериментальным продуктом выполнили в T=0 часов путем внутрибрюшинной инъекции. Обработку агонистом (CpG ОДН 1668) выполнили спустя один час, Т=1 час, путем внутрибрюшинной инъекции. Вскрытие выполнили через 3 часа после обработки агонистом, Т=4 часа. Образцы крови собрали в пробирки для отделения сыворотки, оставили свертываться при комнатной температуре в течение, по меньшей мере, 20 минут, центрифугировали при комнатной температуре при 3000 g в течение 10 минут и экстрагировали сыворотку. Выполнили твердофазный иммуноферментный анализ для определения уровней мышиного IL-12 по методике производителя (BioLegend Inc.). Уровни IL-12 в сыворотке рассчитали и нанесли на график зависимости от введенной дозы антагониста, и определили ингибирующую дозу при 50% (ID).