Функциональная характеристика органа слуха при генетической и негенетической тугоухости: анализ аудиограмм

Функциональная характеристика органа слуха при генетической и негенетической тугоухости: анализ аудиограмм

Левая-Смоляк А.М.1, Меркулова Е.П.1, Олейник О.А.2, Лёле Е.3, Стринкевич Э.А.4

1 Белорусский государственный медицинский университет, Минск

2 Институт генетики и цитологии НАН РБ, Минск

3 Университетская клиника г. Фрайбурга, Германия

4 Белорусская медицинская академия последипломного образования, Минск

Levaya-Smaliak A.M.1, Merkulova E.P.1, Oleynik O.A.2, Lohle E.3, Strinkevich E.A.4

1Belarusian State Medical University, Minsk 2 Institute of genetics and cytology of the National Academy of Sciences of the Republic of Belarus, Minsk

3University hospital of Freiburg, Germany 4 Belarusian Medical Academy of Post-Graduate Education, Minsk

Functional characteristics of hearing organ for genetic and non-genetic hearing loss: analysis of audiogramms

Резюме. Настоящее исследование описывает аудиологический профиль генетической сенсоневральной тугоухости (СНТ), обусловленной однонуклеотидной мутацией 35delG в гене коннексина 26, наиболее частой причиной детской врожденной СНТ в странах Европы. 142 ребенка (55%) из 258, страдающих несиндромальной двусторонней тугоухостью, имели в своем генотипе данную мутацию. Аудиологический профиль 35delG-ассоциированной тугоухости соответствует более тяжелым нарушениям слуха (3-4 степень по ВОЗ). Качественный анализ форм аудиограмм не выявил достоверных различий между группами с различной этиологией СНТ. Ключевые слова: врожденная СНТ, коннексин 26, мутация 35delG, тональная пороговая аудиограмма (ТПА).

Summary. The present study describes the audiological profile of genetic hearing loss caused by single-nucleotide mutation 35delG in gene GJB2, as one of the common cause of childhood sensorineural hearing loss in European countries. The mutation 35delG was detected in 142 (55%) of 258 patients suffered from non-syndromic hearing loss. Audiological profile is that of a profound or severe hearing loss. Qualitative analysis of shapes of audiograms has showed no significant differences between groups with different ethiology of sensorineural hearing loss. Keywords: congenital sensоrineural hearing loss, connexin 26, mutation 35delG, pure-tone audiogram.

Сенсоневральная тугоухость (СНТ) является одним из самых частых врожденных нарушений органов чувств с частотой встречаемости 1-2 ребенка на 1000 новорожденных для двусторонних глубоких нарушений слуха (> 70 дБ) и более 4 детей на 1000, если включать легкие, средние и односторонние нарушения слуха [9, 11]. Врожденная тугоухость может иметь различные причины, хотя как мимнимум в 50% случаев установлена генетическая причина тугоухости в развитых странах мира, две трети из них носят несиндромальный характер, при котором тугоухость не сочетается с другими патологическими состояниями [5, 6]. Мутация в гене, кодирующем коннексин 26, ответственна за практически половину случаев генетических нарушений слуха. За двадцать лет описано более 70 различных мутаций в этом гене, но наибольший интерес для исследователей представляет однонуклеотидная мутация 35delG, которая составляет около 70% всех мутаций гена GJB2 [1-3, 15]. Высокая частота вышеупомянутой мутации требует описания ее фенотипических проявлений. Первоначально сообщалось

о глубоких нарушениях слуха при 35delG-ассоциированной тугоухости, но последние исследования показали, что данная мутация может быть причиной нарушения слуха и при менее тяжелых степенях тугоухости [8, 12, 16].

Цель исследования - сравнительный анализ аудиологического профиля 35delG-вызванной тугоухости и негенетических форм несиндромальной сенсо-невральной тугоухости.

Материалы и методы

Нами обследовано 258 детей в возрасте от 4 лет до 18 с несиндромальной двусторонней СНТ. Дети с односторонней тугоухостью и с признаками синдромальной тугоухости (поражение почек, щитовидной железы, глаз, сердечно-сосудистой системы, когнитивными расстройствами) были исключены из исследования. Всем пациентам выполнено клиническое и аудиологическое обследование. Клиническое обследование включало сбор анамнеза на наличие факторов риска развития тугоухости, педиатрическое обследование и осмотр ЛОР-органов. Аудиологическое обследование проводилось методом тональной

пороговой аудиометрии (ТПА) на диагностическом аудиометре МА-31 (1ермания) в стандартном диапазоне частот (125— 8000 Гц) с предварительной стандартизацией нулевого уровня воздушного проведения по международному стандарту JSO-64. Методом акустической тимпано-метрии было диагностировано отсутствие кондуктивного компонента тугоухости у всех детей. Анализ ТПА проводили по количественным (средним тональным порогам слуха воздушной проводимости в стандартном диапазоне частот на лучше слышащее ухо, порогами слуха на четырех речевых частотах и степени тугоухости) и качественным (форма аудиограмм) характеристикам. Степень тугоухости определялась по порогу слуха на четырех речевых частотах (500, 1000, 2000 и 4000 Гц) для лучше слышащего уха. Для оценки тяжести нарушений слуха использовалась классификация ВОЗ: 20-50 дБ потери слуха - 1-я степень, 51-70 дБ -2-я, 71-90 дБ- 3-я, более 90 дБ - 4-я степень. Качественный анализ форм ТПА проведен в соответствии с классификацией Liu и Xu [14], наиболее

Таблица ll Стандарты для классификации формы аудиограмм

Форма ТПА Определение

Асимметричная Отличие в 15 дБ между ушами как минимум на 2 частотах и в 10 дБ -на 4 частотах

Плоская Высокие, средние и низкие частоты отличаются менее чем на 10 дБ

Нисходящая Низкие частоты лучше воспринимаются, чем средние и высокие

Остаточная Только остатки слуха на низких частотах

и-образная Средние частоты воспринимаются хуже, чем низкие и высокие, на 15 дБ и более

Восходящая Низкие частоты воспринимаются хуже, чем высокие, на 10 дБ и более

Таблица 2 Стандарты для классификации формы аудиограмм и Xu)

Форма ТПА 1енотип

Абсолютное число % Общее число %

c мутацией без мутации c мутацией без мутации

Асимметричная 23 16 16.2% 13.8% 39 15.1%

Симметричная: нисходящая остаточная плоская и-образная 64 51 45.1% 44.0% 115 44.6%

40 41 28.2% 35.3% 81 31.4%

6 1 4.2% 0.9% 7 2.7%

5 6 3.5% 5.2% 11 4.3%

Общее число 142 116 100.0% 100.0% 258 100.0%

полно отражающей многообразие форм аудиограмм (табл. 1).

Всем пациентам был выполнен молекулярно-генетический анализ на наличие мутации 35СеЮ в Институте генетики и цитологии. ДНК лейкоцитов периферической крови изолировалась методом ПЦР по общепринятой методике со специфическими праймерами, после чего амплифицированный фрагмент подвергался эндонуклеазной обработке для выявления мутации. Наличие мутации 35СеЮ в гомозиготном состоянии свидетельствует о несиндромальной СНТ вызванной данной мутацией. Если мутация не определялась, тугоухость классифицировалась как негенетическая СНТ.

Статистический анализ выполнен с использованием лицензированной системы «В-5у$1ет-Огд». Для сравнения групп с генетической и негенетической СНТ по порогам слуха, формам ТПА использовались тест Уилкоксона (для непараметрических данных), точный критерий Фишера (для данных, которые можно представить в виде таблицы 2x2) и метод повторяющихся событий для по-

строения графиков усредненных аудио-грамм.

Результаты и обсуждение

Результаты молекулярно-генетиче-ского анализа. Среди наших пациентов генетическая этиология СНТ диагностирована у 109 детей (42,2%) с определением мутации 35СеЮ в гомозиготном состоянии, 33 пациента (12,8%) были носителями данной мутации в гетерозиготном состоянии. Наличие мутации 35СеЮ в генотипе ребенка, страдающего двусторонней СНТ стало поводом для объединения таких пациентов в одну группу с генетической этиологией заболевания. Их общее количество составило 142 (55%), что свидетельствует о превалирующей роли генетической СНТ в структуре врожденных нарушений слуха. У 116 (45%) детей с несиндромальной СНТ мутация 35СеЮ не обнаружена, что говорит о негенетической (инфекционной, приобретенной или другой) природе заболевания.

Результаты аудиологического обследования. Различные формы ТПА представлены в табл. 2. Восходящей формы ТПА у обследуемых детей с СНТ не выявлено.

МЕДИЦИНСКИЕ НОВОСТИ

№7^ 2012

88

Точный тест Фишера показал отсутствие статистически значимых различий (р=0,36) в отношениях каждой формы ау-диограммы в двух исследуемых группах пациентов с СНТ.

С помощью метода повторяющихся событий, используя абсолютное значение тональных порогов слуха по воздушной проводимости на лучше слышащее ухо в диапазоне частот от 250 до 6000 Гц и число каждой из форм ТПА, нами получены усредненные графики ТПА для группы с генетической и негенетической СНТ (рис. 1). Все формы ТПА практически идентичны в двух группах, исключая нисходящую, которая в группе детей с негенетической СНТ носит пологий характер, а в группе детей с 35СеЮ-ассоциированной СНТ - крутонисходящий. Но, повторим, эти отличия статистически недостоверны.

Высокое соотношение 35СеЮ-ассоциированной СНТ среди пациентов с прелингвальной несиндромальной СНТ имеет большое значение в клинической практике. До недавнего времени считалось, что особенности форм аудиограмм могут помочь в определении генетической этиологии СНТ. Сейчас появились исследования, которые ставят под сомнения этот факт. Результаты наших исследований также свидетельствуют о том, что по форме аудиограммы мы не можем судить об этиологии нарушений слуха.

Сравнительный анализ медиан абсолютных значений порогов слуха на 4 речевых частотах на лучше слышащее ухо (для группы с генетической СНТ она составляет 92,5 ({81,6; 97,5}), а в группе с негенетической СНТ - 90,62 ({75,0; 97,5}) также не выявил статистически достоверных различий в двух сравниваемых группах, тест Уиллкоксона равен 0,3. Эти данные представлены на рис. 2. По вертикали - число (%) пациентов с СНТ от общего количества, по горизонтали - порог слуха (ПС) на 4 речевых частотах. Указана градация порога слуха в зависимости от степени потери слуха в диапазоне 20-50 дБ, 51-70 дБ, 71-90 дБ и более 90 дБ).

Проанализировав степени СНТ мы получили несколько иные данные. Между двумя группами СНТ различной этиологии установлены статистически достоверные различия в сторону превалирования более глубоких нарушений слуха в группе с 35СеЮ-ассоциированной СНТ (точный критерий Фишера составляет 0,02). Распределение детей с разной степенью СНТ в зависимости от наличия мутации 35СеЮ в гене коннексина 26 представлено на рис. 3.

Рисунок 1

Графические изображения усредненных форм ТПА в двух сравниваемых группах (N=258), построенные методом повторяющихся событий

Рисунок 2

Медиана абсолютных порогов слуха на лучше слышащее ухо на 4 речевых частотах (500, 1000, 2000 и 4000 Гц) в группах детей с генетической и негенетической СНТ (N=258, тест Уиллкоксона = 0,3). Пояснения в тексте статьи

Используя метод повторяющихся событий для средних тональных порогов слуха по воздушной проводимости в стандартном диапазоне частот, мы построили усредненные графики ТПА для двух сравниваемых групп (рис. 4). ТПА незначительно отличаются в области речевых частот в сторону более грубых нарушений слуха в группе с з5СеЮ-ассоциированной СНТ но эти различия статистически недостоверны.

Данная работа подтверждает результаты других европейских исследований о более тяжелых нарушениях слуха у пациентов - носителей ядерной

мутации 35СеЮ в гене GJB2 [7, 8, 10, 12, 16, 17].

Наши исследования свидетельствуют о том, что молекулярно-генетическое тестирование на наличие мутации 35СеЮ в гене коннексина 26 следует включить в комплексный клинико-аудиологический протокол обследования детей с прелинг-вальной СНТ как первый шаг для определения причины снижения слуха.

Выводы

Молекулярно-генетическое исследование детей Беларуси, страдающих не-синдромальной двусторонней сенсонев-ральной тугоухостью, выявило высокую

встречаемость генетических нарушений слуха (55%), обусловленных мутацией 35delG в гене коннексина 26.

Установлено, что в группе с генетически детерминированной (35delG) сен-соневральной тугоухостью статистически достоверно (р<0,05) превалируют более тяжелые нарушения слуха (3-4-й степени тяжести по ВОЗ).

По качественным характеристикам ТПА статистически значимых отличий по формам аудиограмм между группами детей, страдающих генетической и негенетической сенсоневральной тугоухостью не выявлено (р>0,05).

Рисунок 3

Распределение детей

Рисунок 4

Динамика средних тональных порогов слуха у обследуемых детей в стандартном диапазоне частот в группах детей с генетической и негенетической СНТ

-с мутациеи

----без мутации

1SÖÖ 3DCE

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Маркова Т.Г. Клинико-генетический анализ врожденной и доречевой тугоухости: автореф. дис. ...д-ра мед.наук. - М., 2008.

2. Маркова Т.Г., Поляков А.В. // Вестн. оториноларингологии. - 2007. - №4. - С.7-10.

3. Журавский С.Г., Иванов С.А., Тараскина А.Е. и др. // Мед. акад. журн. - 2009. - Т.9. - С.41-45.

4. Antoniadi T., Rabionet R., Kroupis C, Aperis G.A. et al. // Clin. Genet. - 1999. - Vol.55, N5. - P.381-382.

5. Apps S., Rankin W, Kurmis A. // Int. J. Audiol. -2007. - N46. - P.75-81.

6. Bitner-Giindzicz M. // Br. Med. Bull. - 2002. -Vol.63. - P.73-94.

7. Cohn E.S., KelleyP.M. // Am. J. Med. Genet. (Semin. Med. Genet.). - 1999. - Vol.89. - P.130-136.

8. Cryns K, Orzan E, Murgia A. et al. // J. Med. Genet. - 2004. - Vol.41. - P.147-154.

9. Dureux - Smith A, Fitzpatrcck E, Whittingham J. // Int. J. Audiol. - 2008. - Vol.47. - P.1-10.

10. Hilgert N, Huentelman M, Thorburn A. et al. // Eur. J. Hum. Genet. - 2009. - Vol.17. - P.517 -524.

11. Mehl A.L., Thompson V. // Pediatrics. - 2002. -Vol.109. - P.E7.

12. Yan M, Tao Y, Yun L. et al. // Am. J. Med. Gen. -2010.- Vol.6. - P.2912-2915.

13. Murgia A, Orzan E, PolliR. et al. // J. Med. Genet. -1999. - Vol.36. - P.829-832.

14. Liu J, Xu G. // Eur. Arch. Otorhinolaryngol. - 1999. -Vol.154. - P.231-235.

15. Putcha G, Bejani B, Bleoo S. et al. // Genetics in Medicine. - 2007. - Vol.9. - P.413-426.

16. Snoeckx R, Huygen P., Feldmann D. et al. // Am. J. Hm. Gen. - 2005. - Vol.77. -P.945-957.

17. SalvinelliF, CasaleM, FiriisiL. et al. // J. Laryngolog. Otolog. - 2004. - Vol.118. - P.8-11.

Поступила 27.04.2012г.

К СВЕДЕНИЮ АВТОРОВ И РЕКЛАМОДАТЕЛЕЙ

Среди основных задач журнала «Медицинские новости» - целенаправленное и гарантированное продвижение статей, авторов, идей, новых технологий, лекарственных препаратов и медицинской техники; повышение цитируемости статей и их авторов посредством возможностей научного периодического издания и сайта www.mednovosti.by, использующих современные информационные PR-технологии.

Продвижение информационных материалов осуществляется следующим образом:

1. Ваши статьи и информационные материалы размещаются в базе данных Научной электронной библиотеки eLIBRARYru (Москва), единственной в странах СНГ анализирующей цитируемость включенных в нее журналов и статей.

По данным этой библиотеки, журнал «Медицинские новости» - самое высокоцитируемое периодическое издание среди журналов медицинского профиля в Беларуси. Кроме того, журнал «Медицинские новости» занимает 184-е место в мире по цитируемости среди зарубежных медицинских журналов в рейтинге SCIENCE INDEX, 2010. Публикуясь в журнале «Медицинские новости», Вы автоматически становитесь автором крупнейшего научного информационного ресурса eLIBRARYru сети Интернет и, как следствие, повышаете свою цитируемость и читаемость в зарубежных странах (услуга бесплатная).

2. Тексты Ваших статей в полном объеме и информационные материалы как из текущего номера, так и опубликованные в номерах предыдущих лет, могут быть размещены на сайте www.mednovosti.by в разделе «Архив МН». По данным Google Analitics, только в марте 2012 года наш сайт посетили более 98 600 уникальных пользователей из 100 стран мира (услуга платная, тексты размещаются для постоянного доступа).

3. В разделе «Новости» на главной странице сайта www.mednovosti.by дважды в квартал может быть размещен PR-реферат статьи или информационного материала, опубликованного в любом номере журнала, с активной ссылкой на полный текст статьи или информационного материала, размещенных в «Архиве МН» на сайте www.mednovosti.by (услуга платная).

4. Информация о Ваших монографиях, статьях, патентах, зарегистрированных в РБ лекарственных препаратах и медицинской технике, об учреждениях, фирмах и предприятиях может стать доступной любому посетителю сайта www. mednovosti.by с помощью баннеров, обеспечивающих выход на развернутый рекламный текст (услуга платная).

Подробнее об этих и других услугах - на сайте www.mednovosti.by.

Заявки присылайте на адрес e-mail: redakcia@tut.by или звоните: (017) 226-03-95; (029) 695-94-19.

ВЫХОДНЫЕ ДАННЫЕ

«Медицинские новости» № 7(214) 2012 г. Рецензируемый научно-практический информационно-аналитический журнал. Свидетельство о регистрации № 965 выдано Министерством информации Республики Беларусь 9 июля 2010 года. Периодичность - 1 раз в месяц

Учредитель

Частное издательское

унитарное предприятие «ЮпокомИнфоМед» Юридический адрес: 220018, г. Минск, ул. Якубовского, 70-5 УНП191350993

Редакция

Шарабчиев Юрий Талетович

Третьякова Ирина Георгиевна

Марковка С.Н., Пручковская О.Н.

Шусталик М.В.

Адрес для переписки: 220030, Минск, пл. Свободы, 23-35. Тел./ факс (+375-17) 226-03-95, 327-07-54 (гл. редактор), моб. (029) 695-94-19 (Velcom).

Е-mail: redakcia@tut.by www.mednovosti.by

Для сведения

Рукописи рецензируются независимыми специалистами.

C информацией «К сведению авторов»

можно ознакомиться на сайте www.mednovosti.by

Ответственность за достоверность и интерпретацию предоставленной информации несут авторы. Редакция оставляет за собой право

по своему усмотрению размещать полные тексты публикуемых статей на сайте редакции www.mednovosti.by и в электронных базах данных (на сайтах) своих партнеров.

Перепечатка материалов только с разрешения редакции. Рукописи не возвращаются.

Подписано в печать 16.07.2012 г

Формат 60х84 1/8.

Гарнитура Helvetica Narrow.

Уч.-изд. л. 12,92 . Тираж 1607 экз. Заказ 1500

Цена свободная.

Подписка: по каталогу РУП «Белпочта» индексы: 74954 (инд.), 749542 (вед.); по каталогу ОАО «Агентство Роспечать» индекс: 74954

Типография ООО «Поликрафт» Лицензия №02330/0494199 от 03.04.09 Минск, ул. Кнорина, 50