ЦИКЛОГЕКСИЛАММОНИЕВАЯ СОЛЬ [3-МЕТИЛ-1-Н-ПРОПИЛ-7-(1-ОКСОТИЕТАНИЛ-3)КСАНТИНИЛ-8-ТИО]УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ АНТИТРОМБОТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ
CYCLOHEXYLAMMONIUM SALT OF [3-METHYL-1-N-PROPYL-7-(1-OXOTHIETANYL-3)XANTHINYL-8-THIO]ACETIC ACID EXHIBITING ANTITHROMBOTIC ACTIVITY

Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической химии и фармакологии, и может быть использовано для создания новых лекарственных средств, обладающих антиагрегационной и антикоагуляционной активностью.
Прототипом является пентоксифиллин (3,7-диметил-1-(5-оксогексил)ксантин), который используется в клинике как вазодилатирующее средство, улучшающее микроциркуляцию, реологические свойства крови и оказывающее антиагрегационное и дезагрегационное действие в отношении тромбоцитов (Государственный реестр лекарственных средств / Официальное издание. - М.: Медицина, 2004. - Т.2. - С.1141-1142).
Задачей изобретения является расширение арсенала биологически активных веществ, проявляющих антиагрегационную и антикоагуляционную активность.
Технический результат - получение вещества, проявляющего антиагрегационную и антикоагуляционную активность.
(Iа)
Сущность изобретения: циклогексиламмониевая соль [3-метил-1-н-пропил-7-(1-оксотиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты  формулы
проявляющая антиагрегационную и антикоагуляционную активность.
Заявляемое соединение синтезировали следующим образом.
Ia
Соединение  синтезируют из [3-метил-1-н-пропил-7-(1-оксотиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты (Синтез тиетансодержащих (3-метил-1-н-пропилксантинил-8-тио)уксусных кислот / Ф.А.Халиуллин, Р.А.Губаева, Ю.В.Шабалина // Баш. хим. ж. - 2009. - Т. 16, №4. - С.93-94) в 1 стадию. При взаимодействии [3-метил-1-н-пропил-7-(1-оксотиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты с циклогексиламином в ацетоне образуется циклогексиламмониевая соль [3-метил-1-н-пропил-7-(1-оксотиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты.
Iа
Пример 1. Синтез соединения .
Iа
К раствору 1,16 г (3 ммоль) [3-метил-1-н-пропил-7-(1-оксотиетанил-3)ксантинил-8-тио]уксусной кислоты в 50 мл ацетона добавляют 0,39 г (3,9 ммоль) циклогексиламина. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают ацетоном, сушат. Получают 1,22 г (84%) соединения . Тпл. 204-206°С (из диоксана).
Элементный анализ.
20
31
5
5
2
Найдено, %: С 49,5 Н 6,4 N 14,4 - CHNOS
Вычислено, %: С 49,7 Н 6,6 N 14,6
1
3
3
2
3
2
2
2
2
3
2
2
2
Спектр ЯМР H (СDСl), δ, м.д.: 0,96 (3Н, т, J 7,4 Гц, СН), 1,12-1,48 (6Н, м, (СН)), 1,60-1,73 (2Н, м, 1-CCH), 1,76-1,87 (2Н, м, СН), 2,00-2,11 (2Н, м, СН), 2,97-3,07 (1Н, м, NCH), 3,42-3,58 (5Н, м, S(CH) и 3-СН), 3,92-4,01 (4Н, м, SCH и 1-CH), 4,28-4,39 (2Н, м, S(СН)), 6,50-6,65 (1Н, м, 7-СН).
Заявляемое соединение представляет собой белое кристаллическое вещество, растворимое в воде, диметилформамиде, при нагревании в этаноле и хлороформе.
Антиагрегационная и антикоагуляционная активность.
Антиагрегационную активность заявляемого соединения изучали in vitro по методу Воrn (Воrn, G.V.R. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal / G.V.R. Воrn // Nature. - 1962. - Vol.194, №4832. - P.924-929) на агрегометре “Thromlite-1006А” с использованием донорской крови человека. Метод основан на регистрации изменения оптической плотности богатой тромбоцитами плазмы до и после введения индуктора агрегации тромбоцитов. В качестве индуктора агрегации использовали коллаген в концентрации 5 мг/мл, который вводили после предварительной инкубации вещества в обогащенной тромбоцитами плазме. В качестве препарата сравнения использовали «Трентал», производства Авентис Фарма Лтд., Мумбай, Индия.
Исследование антикоагуляционной активности заявляемого соединения проводили in vitro стандартными коагуляционными методами на турбометрическом гемокоагулометре “Solar CGL 2110” на донорской крови человека с определением активированного парциального (частичного) тромбопластинового времени (АПТВ), протромбинового времени (ПВ) и концентрации фибриногена с использованием стандартных наборов фирмы “Технология-Стандарт” для коагуляционных методов исследования (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ под общей редакцией члена-корреспондента РАМП, профессора Р.У.Хабриева. - М., 2005. - С.461-476). В качестве препарата сравнения использовали «Гепарин натрий», производства ОАО “Синтез”, Курган, Россия.
Iа
Пример 2. Антиагрегационная активность соединения .
Iа
Iа
-3
-3
-4
Влияние соединения  на коллаген-индуцированную агрегацию тромбоцитов оценивали по степени снижения агрегации при предварительной инкубации вещества в обогащенной тромбоцитами плазме (табл.1). По результатам исследования установлено, что введение 2·10 моль/л заявляемого соединения в кювету агрегометра за 5 минут до коллагена приводит к снижению агрегации тромбоцитов в среднем на 12,3% относительно контроля. При изучении зависимости эффекта от концентрации установлено, что в концентрации 10 моль/л соединения  агрегация тромбоцитов снижалась в среднем на 8,3%, в концентрации 5·10 моль/л - на 3,1%. В данных концентрациях пентоксифиллин не проявляет активности.
Iа
Пример 3. Антикоагуляционная активность соединения .
-3
Iа
Iа
Влияние на коагуляционные свойства плазмы оценивали по изменениям показателей коагулограммы в присутствии соединения Iа или препарата сравнения в конечной концентрации 10 г/мл (табл.2). По результатам исследования установлено, что введение соединения  аналогично препарату сравнения, оказывало действие исключительно на активированное парциальное (частичное) тромбопластиновое (АПТВ) время, удлиняя время образования сгустка в среднем на 76,2% относительно контроля, что значительно превышает активность препарата сравнения в аналогичной концентрации. Влияния на другие показатели коагулограммы соединения  и препарата сравнения не отмечалось.
(Iа)
Таким образом, представленное химическое соединение  проявляет большую антиагрегационную активность, чем пентоксифиллин, и большую антикоагуляционную активность, чем гепарин.
Таблица 1
Влияние заявляемого соединения и препарата сравнения на коллаген-индуцированную агрегацию тромбоцитов
Концентрация, моль/л
Подавление коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов, % к контролю
Соединение
n
2·10<sup>-3</sup>
7
12,3±2,1*
<b>Iа</b>
10<sup>-3</sup>
7
8,3±1,9*
5·10<sup>-4</sup>
7
3,1±1,2*
2·10<sup>-3</sup>
7
-
пентоксифиллин
10<sup>-3</sup>
7
-
5·10<sup>-4</sup>
7
-
Примечание: <sup>∗</sup> - р<0,05.
Таблица 2
Влияние заявляемого соединения и препарата сравнения на коагуляционные свойства плазмы
Соединение
n
АПТВ, % к контролю
ПВ, % к контролю
Фибриноген, % к контролю
<b>Iа</b>
7
76,2±3,2<sup>∗</sup>
-
-
гепарин
7
54,7±3,7<sup>∗</sup>
-
-
Примечание: <sup>∗</sup> - р<0,05.