СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ЭЛЕКТРОДОВ, ЭЛЕКТРОДЫ, ПОЛУЧЕННЫЕ УКАЗАННЫМ СПОСОБОМ И ЭНЗИМНЫЕ БИОСЕНСОРЫ, ВКЛЮЧАЮЩИЕ УКАЗАННЫЕ ЭЛЕКТРОДЫ

1. Способ изготовления электрода, полученного методом трафаретной печати, модифицированного берлинской лазурью, характеризующийся тем, что он включает последовательное нанесение на поверхность указанного электрода раствора, содержащего ионы железа(III) или железа(II) и, по меньшей мере, одно поверхностно-активное вещество в подходящем растворителе и раствора, содержащего ионы ферроцианида(II) или феррицианида(III) и, по меньшей мере, одно поверхностно-активное вещество в подходящем растворителе, с такими концентрациями указанных растворов, которые обеспечивают образование берлинской лазури непосредственно на поверхности электрода.
2. Способ по п.1, в котором указанный электрод, полученный методом трафаретной печати, не подвергается предварительной обработке перед указанным последовательным нанесением растворов.
3. Способ по п.1, в котором указанный раствор, содержащий ионы ионы железа(III) или железа(II), является кислым раствором с рН 0,5-6,0 соединения, выбранного из группы, состоящей из солей железа(III) или железа(II) неорганических кислот.
4. Способ по п.3, в котором указанные соли железа(III) или железа(II) неорганических кислот выбраны из хлорида железа(III), сульфата железа(III) и нитрата железа(III).
5. Способ по п.3, в котором указанный раствор является раствором хлорида железа(III) в водной 0,01 М HCl с рН 2,0.
6. Способ по п.1, в котором указанный раствор, содержащий ионы гексацианоферрат(III), является кислым раствором с рН 0,5-6,0 соли, содержащим ионы ферроцианида(II) или феррицианида(III).
7. Способ по п.6, в котором указанная соль выбрана из гексацианоферрата натрия, калия, аммония и кобальта.
3
6
8. Способ по п.6, в котором указанный раствор является раствором феррицианида калия KFe(CN) в водной 0,01 М HCl с рН 2,0.
2
2
2
9. Способ по п.1, в котором указанные растворы имеют одинаковые концентрации 20-2 мМ, и наносятся равными объемами 100 нл - 4 µл на электрод с поверхностью 0,314 мм-3,14 см, предпочтительно 3,14 мм.
10. Способ по п.1, в котором указанный электрод, полученный методом трафаретной печати, выполнен из инертного материала с трафаретной печатью графитовой краской.
11. Способ по п.1, дополнительно включающий стадии удаления растворов, нанесенных на 10 мин, промывки поверхности рабочего электрода промывочным раствором, состоящим из водного раствора с рН 0,5-6,0, и при необходимости промывки дистиллированной водой и высушивания в печи с температурой 50°-200°С в течение 10 мин - 3 ч.
12. Способ по п.11, в котором указный промывочный раствор является водным раствором 0,01 М HCl с рН 2,0.
13. Способ по п.12, в котором электрод высушивают в печи при температуре 100°С в течение 1 ч 30 мин.
14. Способ по п.1, в котором указанное поверхностно-активное вещество выбрано из катионных, анионных, амфотерных поверхностно-активных веществ и их смесей и добавлено в количествах для каждого раствора 0,001-10 мас.% по отношению к общему объему раствора.
15. Способ по п.12, в котором указанное поверхностно-активное вещество выбрано из группы, состоящей из лаурилсульфата натрия и лаурилэтоксисульфата, хлорида бензалкония, полиоксиэтилен производных эфиров жирных кислот и сорбита и их смесей.
16. Способ по п.12, в котором указанное поверхностно-активное вещество является полиоксиэтилен (20) монолауратом сорбита в количестве 0,05 мас.% по отношению к общему объему раствора.
2
17. Электрод, полученный методом трафаретной печати, модифицированный берлинской лазурью, изготовленный способом по п.1, в котором количество нанесенной берлинской лазури составляет 10-200 нмоль/см.
2
18. Электрод, полученный методом трафаретной печати, по п.17, в котором количество берлинской лазури составляет 100 нмоль/см.
19. Энзимный электрод, содержащий электрод, полученный методом трафаретной печати, модифицированный, по п.17, и подходящий энзим, иммобилизованный на указанном электроде, выбранный таким образом, чтобы его продукт мог быть окислен или восстановлен электрохимически на указанном модифицированном электроде.
20. Энзимный электрод по п.19, в котором указанный энзим является энзимом глюкозооксидазы.
21. Энзимный биосенсор, содержащий энзимный электрод по п.19 в качестве рабочего электрода, при необходимости противо-электрод и ячейку для анализируемой биологической жидкости, такую, чтобы последняя контактировала с иммобилизованным энзимом указанного энзимного электрода.
22. Биосенсор по п.21, включающий электрод, полученный методом трафаретной печати, и указанный электрод сравнения в качестве отдельных электродов.
23. Способ определения количества анализируемого вещества в биологической жидкости, включающий приложение соответствующего потенциала на энзимный электрод по п.19 и электрод сравнения, включенный в энзимный биосенсор по п.21, и регистрацию генерированного тока.
24. Способ по п.23, в котором указанное анализируемое вещество является глюкозой и приложенный потенциал составляет (-250)-(+200) мВ.
25. Способ по п.24, в котором указанный прилагаемый потенциал равен -50 мВ.