СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОЧНОЙ МИКРОКУЛЬТУРЫ

2
1. Способ определения функциональной активности клеточной микрокультуры, включающий количественную оценку изменений плотности клеточной микрокультуры в опытных и контрольных образцах, вызванных спонтанной миграцией клеточной микрокультуры, содержащей тестируемый антиген, путем фокусирования клеточной микрокультуры с тестируемым антигеном на дно лунок плоскодонного культурального микропланшета, заполненного культуральной средой в течение 0,5-2,0 ч, проводят культивирование клеточной микрокультуры in vitro в течение 0,5-72 ч при 37°С в атмосфере 5% СО, определяют изменение площади, занимаемой клеточной микрокультурой, визуально в световом микроскопе со шкалой измерения или путем автоматического анализа оцифрованного изображения измененной площади, причем степень функциональной активности выражают в виде индекса миграции, который рассчитывают по формуле: , где: ИМ - индекс миграции,  - средний диаметр для параллельных опытных микрокультур,  - тоже для контрольных микрокультур при значениях, выражаемых числом в интервале от 10 до 100%, при усилении миграции клеточной микрокультуры в опытных образцах по сравнению с контрольными считают проявлением специфического ослабления иммунитета по отношению к тестируемому антигену, а при значениях, выражаемых числом в интервале от 100 до 10%, при подавлении миграции клеточной микрокультуры в опытных образцах по сравнению с контрольными устанавливают усиление специфического иммунитета.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что фокусирование клеточной микрокультуры с тестируемым антигеном осуществляют в устройстве, содержащем установленный на опорах пластмассовый штатив с вертикально вставленными в гнезда штатива фокусирующих камер с конусными стенками в виде наконечников для автоматической пипетки, с клеточной микрокультурой с тестируемым антигеном, причем наконечники устанавливают в гнезда штатива над дном лунок плоскодонного культурального микропланшета на высоте 0,1-2,0 мм.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что от клеточных микрокультур в разное время культивирования отбирают культуральные жидкости и методом иммуноферментного анализа определяют в них содержание цитокинов и по его количественному изменению оценивают функциональную активность клеток.