ИММОБИЛИЗОВАННАЯ ЦИКЛОАЛИФАТИЧЕСКАЯ ПЕПТИДНАЯ АЦИЛТРАНСФЕРАЗА, СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Иммобилизованная циклоалифатическая пептидная ацилтрансфераза.
2. Иммобилизованная циклоалифатическая пептидная ацилтрансфераза по п. 1, где циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу иммобилизуют на носителе; и носитель выбирают из неорганического носителя или пористого гидрофильного носителя фермента.
2
2
3
3. Иммобилизованная циклоалифатическая пептидная ацилтрансфераза по п. 2, где, в расчете на общую массу неорганического носителя, содержание SiO больше чем 50 масс.%, и содержание AlO больше чем 1 масс.%.
4. Иммобилизованная циклоалифатическая пептидная ацилтрансфераза по п. 2, где пористый гидрофильный носитель фермента выбран из следующих: носитель фермента, в котором в качестве матрицы используют полиметакрилат со связанным эпоксидом, или содержащий функциональные аминогруппы.
1
5. Иммобилизованная циклоалифатическая пептидная ацилтрансфераза по п. 1, где иммобилизованную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу используют для катализа деацилирования ацила R в соединении формулы I, вследствие этого получая соединение формулы II:
1
2
3
4
5
6
где R представляет собой ацил, R представляет собой гидрокси или ацилокси, R представляет собой водород или гидрокси, R представляет собой водород или гидрокси, R представляет собой водород или гидроксисульфонилокси и R представляет собой водород или карбамоил.
6. Иммобилизованная циклоалифатическая пептидная ацилтрансфераза по п. 1, где соединение формулы I представляет собой соединение формулы Ia или Ib, или его фармацевтически приемлемую соль:
7. Способ получения иммобилизованной циклоалифатической пептидной ацилтрансферазы по любому из пп. 1-6, включающий следующие стадии:
смешивание раствора, содержащего свободную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу, с носителем с получением иммобилизованной циклоалифатической пептидной ацилтрансферазы по любому из пп. 1-6.
8. Способ по п. 7, где указанную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу получают из природных или искусственных мутантов или их вариантов, и она может быть получена в результате трансформации путем введения чужеродных генов циклоалифатической пептидной ацилтрансферазы.
9. Способ по п. 7, где раствор, содержащий свободную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу, получают следующим образом: культивируя штамм, так чтобы получить раствор, содержащий свободную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу, или культивируя штамм и затем разрушая клеточную стенку полученных гифов так, чтобы получить раствор, содержащий свободную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу.
10. Способ по п. 9, где штамм принадлежит к Actinoplanes или Streptomyces.
11. Способ по п. 7, где носитель выбран из неорганических носителей или пористых гидрофильных носителей ферментов.
12. Способ по п. 7, где отношение в смеси свободной циклоалифатической пептидной ацилтрансферазы к носителю составляет от 10до 1000 единиц (ед.), предпочтительно от 20 до 600 единиц (ед.) фермента на один грамм носителя.
13. Способ по п. 7, где значение pH раствора, содержащего свободную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу, составляет от 4 до 9.
14. Способ по п. 7, где температура для смешивания раствора, содержащего свободную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу, с носителем составляет от 0 до 80°C, предпочтительно от 20 до 35°C.
15. Способ по любому из пп. 7-14, где после смешивания раствора, содержащего свободную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу, с носителем, свободную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу отделяют от циклоалифатической пептидной ацилтрансферазы, связанной с носителем, так чтобы получить иммобилизованную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу.
16. Способ получения соединения формулы II, включающий следующие стадии:
(a) смешивание соединения формулы I с буферным раствором, так чтобы получить раствор 1;
(b) смешивание раствора 1 с иммобилизованной циклоалифатической пептидной ацилтрансферазой по любому из пп. 1-6 для проведения реакции деацилирования, так чтобы получить соединение формулы II:
1
2
3
4
5
6
где R представляет собой ацил, R представляет собой гидрокси или ацилокси, R представляет собой водород или гидрокси, R представляет собой водород или гидрокси, R представляет собой водород или гидроксисульфонилокси, и R представляет собой водород или карбамоил.
17. Способ по п. 16, где отношение иммобилизованной циклоалифатической пептидной ацилтрансферазы к соединению формулы I составляет от 0,01 до 10 ед./г.
18. Способ по п. 16, где значение pH буфера на стадии (a) составляет от 4 до 9.
19. Способ по п. 16, где буфер на стадии (a) выбирают из одного или более из группы, состоящей из буфера цитрата натрия, буфера первичного кислого фосфата калия - вторичного кислого фосфата натрия и буфера Tris (трис(гидроксиметил)аминометан)-HCl.
20. Способ по п. 16, где температура для реакции деацилирования на стадии (b) составляет от 20 до 70°C.
21. Способ по любому из пп. 16-20, где на стадии (b) при деацилировании иммобилизованную циклоалифатическую пептидную ацилтрансферазу выделяют из реакционного раствора, содержащего продукт, с получением соединения формулы II.
22. Способ по п. 21, где способ выделения иммобилизованной циклоалифатической пептидной ацилтрансферазы из реакционного раствора, содержащего продукт, включает фильтрацию или центрифугирование.