Экспериментальное изучение возможностей применения препаратов с антиэстрогенной активностью в профилактике РА к а молочной железы

Литература

1. Хаджиева З.Д. Разработка и изучение пенных лекарственных форм препаратов солодки бальнеологического назначения: Автореф. дис. ... канд. фармац. наук. Пятигорск, 1995.

2. Пенные (кислородные) интрагастральные коктейли: Методические указания для работников курортов. Ессентуки, 1990.

3. Максимкина Е.А., Лоскутова Е.Е., Дорофеева В.В. Конкурентоспособность аптечной организации в условиях рынка. М., 1999.

Пятигорская государственная фармацевтическая академия 19 июля 2006 г.

УДК 615.357:618.19-006.6

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ С АНТИЭСТРОГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ПРОФИЛАКТИКЕ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

© 2006 г. А.Р. Чочиева

Chemoprevention evaluation of tamoxifen and letrozol in rat mammary gland tumor model was studied. It was shown that both drugs modify N-nitroso-N-methylurea (MNM)-induced carcinogenesis in mammary gland of female Wistar rats. Treatment with tamoxifen or letrozol at the beginning of MNM treatment was followed by a significant fall in tumor incidence and increasing of their latent period. According to our results letrozol was more active as chemo-preventive agent, than tamoxifen.

Рак молочной железы (РМЖ) - гормонозависимое заболевание, в развитии которого значительную роль играют эндогенные эстрогены. Важная роль в профилактике РМЖ отводится препаратам с антиэстрогенной активностью. Наиболее изучен к настоящему времени тамоксифен. Механизм его действия как типичного антиэстрогена объясняется способностью конкурентно связываться с эстрогенными рецепторами в органах-мишенях и препятствовать образованию эстроген-рецепторного комплекса с эндогенным лигандом 17-Ь-эстрадиолом. Тамоксифен, блокируя эстро-генные рецепторы, снижает уровень циркулирующего IGF-1, продукцию IGF-1 и TGFa с одновременной стимуляцией TGFp. В итоге всей сложной гаммы воздействий происходит транслокация комплекса «тамоксифен-ER» из цитоплазмы в ядро клетки со снижением синтеза ДНК, остановкой опухолевой пролиферации в G1 фазе клеточного цикла и подавлением чувствительности новообразования к эстрогенным стимулам [1].

Важным представляется тот факт, что к настоящему времени тамокси-фен является практически единственным средством с доказанной антиканцерогенной активностью. В 1998 г. препарат был одобрен Федеральным агентством США по контролю за продуктами и лекарствами (FDA) в

качестве средства профилактики РМЖ у женщин, имеющих высокую вероятность его возникновения [2]. Но наряду с положительными свойствами у тамоксифена имеется ряд отрицательных побочных эффектов, ограничивающих широкое клиническое использование тамоксифена в профилактических целях. Наиболее серьезным из них является канцерогенное действие - повышение риска развития рака эндометрия [3].

Применение тамоксифена в качестве химиопрофилактического средства при РМЖ указывает на возможность предотвращения данного заболевания с помощью других антигормональных препаратов. В последнее время стала весьма актуальной идея использования с указанной целью ингибиторов ароматазы, действие которых связано с ингибированием фермента, обеспечивающего конверсию андрогенов в эстрогены. При этом, согласно результатам значительного числа исследований, гиперэкспрессия ароматазы наблюдается при неопластических изменениях в молочной железе [4-9].

Химиопрофилактический потенциал антиароматазных средств теоретически шире, чем у тамоксифена, так как препараты данной группы способны оказывать влияние не только на пролиферацию (фазу промоции канцерогенеза), но и на синтез эстрогенов и соответственно их геноток-сичных метаболитов - катехолэстрогенов (фазу инициации). Кроме того, несомненным достоинством препаратов является хорошая переносимость и отсутствие значительных побочных эффектов при длительном применении [10].

Целью нашего исследования явилось изучение влияния тамоксифена и ингибитора ароматазы летрозола на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс М-метил-Ы-нитрозомочевиной.

Материалы и методы

Исследования проведены на 60 крысах-самках линии Вистар массой 100-120 г, полученных из вивария Пятигорской государственной фармацевтической академии. Животные содержались на стандартной лабораторной диете и получали воду без ограничения. В качестве канцерогенного агента использовано вещество N-метил-Ы-нитрозомочевина (МНМ), синтезированное в НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова М3 РФ. Опухоли молочной железы индуцировали по описанной методике [11] путем подкожных инъекций МНМ в область одной и той же молочной железы у основания левой передней лапки в дозе 2,5 мг на крысу в 0,2 мл воды для инъекций 1 раз в неделю в течение 5 недель (всего 5 инъекций, суммарная доза канцерогена составила 12,5 мг на крысу).

Было сформировано три группы животных. Первой группе животных (20 крыс), служившей контролем, вводили только канцероген. Животные 2-й и 3-й групп (по 20 крыс в каждой) получали с первого дня эксперимента наряду с канцерогеном соответственно тамоксифен («TEVA», Израиль) или летрозол («Novartis Pharma», Франция) по 5 мг/кг массы тела

3 раза в неделю [11, 12]. Продолжительность опыта составила 190 дней. Животных, доживших до окончания эксперимента, забивали парами фто-ротана. Всех павших и забитых животных подвергали полной аутопсии. Опухоли молочной железы обрабатывали гистологически по стандартной методике с окраской гематоксилином и эозином. При морфологическом изучении микроструктуры опухолей молочной железы у крыс большинство новообразований имело строение аденокарцином.

Результаты исследований обрабатывали статистически. Для оценки степени достоверности полученных различий в сравниваемых группах пользовались критериями 1 Стьюдента и х2.

Результаты и их обсуждение

Результаты проведенного исследования представлены в таблице.

Первые опухоли были зарегистрированы в контрольной группе к 90-му дню эксперимента, в эти же сроки зарегистрировано первое новообразование во 2-й группе крыс. В группе животных, получавших летрозол, опухоль молочной железы впервые обнаружена на 118-й день эксперимента. Через 190 дней после начала введения канцерогена опухоли молочной железы были зарегистрированы у 90 % животных контрольной группы, у 35 - 2-й группы и у 30 % - 3-й группы. Средний латентный период возникновения опухолей у животных контрольной группы составил 124±7,4 дня; во 2-й группе - 140±11,9; в 3-й группе он был достоверно более продолжительным и равнялся 173,6±17 дням. Средняя продолжительность жизни животных с ОМЖ в контрольной группе была равна 32,2±2,1 дня, 55,6±3,4 -в группе, получавшей тамоксифен, и 58,8±8,2 - в группе с летрозолом. В опытных группах нами также отмечено увеличение выживаемости животных: до конца эксперимента в контрольной группе дожило 2 крысы, во 2-й группе - 11, в 3-й - 12 крыс.

Влияние тамоксифена и летрозола на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс К-нитрозо-К-метилмочевиной

Группа, воздействие Эффективное число крыс День эксперимента

90 104 118 132 146 160 174 190

Число животных с опухолями молочной железы на день эксперимента, абс./%

Контроль, МНМ 20 3/15 5/25 10/50 13/65 15/75 15/75 17/85 18/90

МНМ + тамоксифен 20 1/5* 1/5* 2/10* 4/20* 4/20* 5/25* 7/35* 7/35*

МНМ + летрозол 20 - - 1/5* 3/15* 4/20* 5/25* 6/30* 6/30*

Различия с контрольной группой достоверны: * - р < 0,05.

Таким образом, в условиях наших опытов оба изученных препарата оказывали достоверное ингибирующее влияние на возникновение индуцированных ОМЖ. Тамоксифен в сравнении с контролем снижал частоту

возникновения опухолей в 2,5 раза, летрозол - в 3 раза. Препараты также увеличивали сроки возникновения опухолей соответственно на 16±4,5 и 49,6±9,6 дней. Противобластомное действие препаратов проявилась и в значительном увеличении продолжительности жизни животных - опухо-леносителей в опытных группах по сравнению с животными контрольной группы. Следует отметить, что летрозол по антиканцерогенной активности не только не уступал общепризнанному в качестве химиопрофилакти-ческого средства тамоксифену, но и несколько превосходил последний (особенно по увеличению латентного периода образования опухолей).

Антиканцерогенная активность препаратов, установленная в эксперименте, может быть связана как со снижением уровня эстрогенов, так и определенными изменениями метаболических показателей сыворотки крови (концентрации глюкозы, холестерина, триглицеридов и др.) [13, 14]. Несомненным достоинством ингибиторов ароматазы является их способность угнетать процесс локального эстрогенобразования [15] и относительно небольшое число побочных эффектов, что позволяет рассматривать их в качестве реальной альтернативы тамоксифену. Анализ литературы и собственных результатов позволяет считать летрозол перспективным химиопрофилактическим средством и рекомендовать дальнейшее изучение его антибластомогенных свойств с целью последующего внедрения в качестве средства лекарственной профилактики РМЖ.

Литература

1. Гершанович М.Л. и др. Введение в фармакотерапию злокачественных опухолей. СПб., 1999.

2. FisherB. et al. // J. Natl. Cáncer Inst. 1998. Vol. 90. P. 1371-1388.

3. O 'Regan R.M., CisnerosA. // J. Natl. Cáncer Inst. 1998. Vol. 90. P. 1552-1558.

4. Макаренко Н.П., Поддубная И.В. // Современная онкология. 2001. Т. 3. № 3. C. 111-114.

5. GossP. // Cancerous Management. 2002. Vol. 9 (2 Suppl). P. 2-8.

6. Goss P.E., Strasser-Weippl K. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2004. Vol. 18 (1). P. 113-130.

7. Ingle J.N. // J. Oncology. 2001. Vol. 15(Suppl 7). P. 28-34.

8. KalidasM., Brown. P. // J. Breast Cancer Clin. 2005. Vol. 6(1). P. 27-37.

9. PrichardR.S. et al. // Br. J Surg. 2003. Vol. 90 (7). P. 772-783.

10. Santen R.J. // Вопросы онкологии. 2001. Т. 47. № 2. C. 187-193.

11. Джиоев Ф.К. Экспериментально-клинический анализ действия гормонов // Сб. науч. тр. СОГМИ / Под ред. Р. Д. Хубецовой. Краснодар, 1989. С. 112-114.

12. Sinha S. et al. // Breast Cancer Res. Treat. 1998. Vol. 48. P. 45-51.

13. Берштейн Л.М., Цырлина Е.В., Коваленко И.Г. // Вопросы онкологии. 2003. T. 49. № 6. C. 716-724.

14. Chow L.W. et al. // J. Biomed. Pharmacotherapy. 2005. Suppl. 2. P. 302-305.

15. Берштейн Л.М. // Вопросы онкологии. 2002. T. 48. № 4. C. 496-504.

Сеееро-Осетинская государственная медицинская академия,

г. Владикавказ 6 июля 2006 г.