Влияние острой нитритной интоксикации на эритрон в раннем постнатальном онтогенезе у крыс

апробация методики были проведены «Институтом клиникофармакологических исследований» (Санкт-Петербург).

На фоне проводимой терапии имела место редукция следующих клинических симптомов: после первого месяца приема препарата у всей группы обследуемых больных, независимо от возраста размеров миомы, количества узлов и их локализации, имела место аменорея в течение всего периода лечения; болевой синдром купировался у 69% пациенток; в 53% случаев уменьшились вазомоторные, вегетативные нарушения; гематологические показатели нормализовались у всех пациенток к 3 месяцу приема гинестрила.

При оценке компонентов значительные положительные изменения выявлены последующим шкалам: 46,15% пациентов отметили улучшение ролевого функционирования, обусловленного физическим состоянием; у 69,23% уменьшилась интенсивность боли; 53,85% - отметили улучшение общего состояния

здоровья; у 57,69% повысилась жизненная активность; у 76,92% - улучшилось социальное функционирование, у 57,69% пациентов улучшились показатели психического здоровья.

Рис. 1. Динамика компонентов КЖ.

Таким образом, совокупно показатели физического здоровья улучшились у 69,23% больных, психического здоровья - в 53,85% случаев.

&2Д2

47.93

ПоГЛ<> ЛРЧРМИЯ

Рис. 2. Динамика показателей физического здоровья.

Рис. 3. Динамика показателей психического здоровья.

Таким образом, результаты шестимесячного применения препарата Гинестрил в дозе 12,5 мг в сутки у женщин с миомой матки как репродуктивного, так и пременопаузального возраста позволяют сделать заключение не только об его эффективности (торможение роста миоматозных узлов, редукция клинической

симптоматики, улучшение гематологических показателей) и безопасности (отсутствие серьезных осложнений, несущественность побочных эффектов), но и дают основания оптимистично взглянуть на возможности данной консервативной терапии с целью улучшения качества жизни больных. Кроме того, у пациенток с пременопаузальными расстройствами менструального цикла, т. е. для тех, кто стоит на пороге менопаузы, возможно длительное назначение Гинестрила с целью перевода этих больных из искусственной менопаузы в естественную.

Литература

1. БуяноваС.Н., МгелиашвилиМ.В., ПетраковаСА. // Российский Вестник Акушера-Гинеколога. 2008. №6. С. 45-51.

2. Руководство по эндокринной гинекологии // Под редакцией Е.М.Вихляевой. М:. МИА,1998. 765 с.

3. СамойловаТ.Е., Аль-СейкалТ.С. // Проблемы репродукции. 2004. №6. С. 35^2.

4. Сидорова И.С. Миома матки (современные проблемы этиологии, патогенеза, диагностики и лечения). М:., МИА, 2002. 255 с.

5. Стрижаков А.Н., Давыдов А.И., Лебедев В.А., Пашков ВМ, Коваленко М.В. // Вопросы гинекологии, акушерства, пери-натологии. 2008. Т.7. №4. С. 7-19.

6. Тихомиров А.Л., Лубнин ДМ. Практическая гинекология. М:. МИА, 2009. 429 с.

7. Хомасуридзе А.Х. Применение антипрогестагенов в репро-дуктологии, акушерстве и геинекологии. Тбилиси, Грузия. 60 с.

8. Heikinheimo O., Kekkonen R., LahteeThenmaki P. // Contraception. 2003. Vol.68 (6). Р. 421-426.

9. Steven H. Etsinger, Meldrum S., FiscellaK.et al. // Obstet-Gynec. 2003. Vol. 101. Р. 243-250.

OPTIMIZATION OF CONSERVATIVE THERAPY OF UTERINE LEIOMYOMA WITH ANTIPROGESTERONS AND ASSESSMENT OF THE THERAPY’S INFLUENCE ON WOMEN QUALITY OF LIFE

V.G. VOLKOV, N.V. GUSEVA, I.A. GORSHKOVA Tula State University, Chair of Obstetrics and Gynecology

There are the results of six-month using of the medication Gy-nestril (in a dose of 12,5 mg once a day) within women with uterine leiomyoma both of reproductive age and premenopausal age. It was determined that this medication puts a stay on the tumor growth and improves women quality of life.

Key words: uterine leiomyoma, Mifepristone (Gynestril), quality of life.

УДК [612.12+591.3+615.9]:599.323

ВЛИЯНИЕ ОСТРОЙ НИТРИТНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ НА ЭРИТРОН В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ У КРЫС

Е.К.ГОЛУБЕВА, С.Б.НАЗАРОВ*

Исследовалось влияние острой нитритной интоксикации на эритрон в раннем постнатальном онтогенезе у крыс. Результаты исследования свидетельствуют о неоднозначности проявлений острой нитритной интоксикации у животных разных возрастных категорий. У 5-дневных крысят отмечается снижение гематокрита на фоне рети-кулоцитопении и уменьшения способности макрофагов образовывать розетки с аутологичными эритроцитами. В 14 дней жизни введение нитрита натрия приводит к увеличению концентрации эритроцитов, гемоглобина, гематокрита, активации эритропоэза и клеточных механизмов эритродиереза. Нитритная интоксикация в 21дневном возрасте приводит лишь к снижению гематокрита. В 28 дней жизни нитрит натрия в указанной дозировке изменений со стороны эритрона не вызывает.

Ключевые слова: нитритная интоксикация, онтогенез, эритрон, эритропоэз, эритродиерез.

Оксид азота (N0) - короткоживущий свободный радикал с высокой проникающей способностью [11,13]. Число известных физиологических и патофизиологических эффектов окиси азота постоянно увеличивается. Имеются данные об ее участии в регуляции сердечно-сосудистой, иммунной, нервной, дыхательной и других систем организма [2,3,7,10,11,13,14,15]. N0 может вызывать вазодилатацию, ингибировать агрегацию и адгезию тромбоцитов,

* ГОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия Росздра-ва», 153012, г. Иваново, пр. Ф.Энгельса, 8

является нейромодулятором, обладает цитотоксическим и цитоста-тическим действием. Оксид азота синтезируется в различных клетках организма семейством синтаз окиси азота из аминокислоты L-аргинина. В настоящее время идентифицированы 3 формы NO-синтаз: эндотелиальная, нейрональная и макрофагальная [3]. Существует мнение о роли оксида азота как универсального медиатора физиологических процессов [9,11]. Экзогенные источники оксида азота используются в качестве пищевых добавок и консервантов, а также лекарственных препаратов, применяемых для купирования критических состояний в кардиологии. Несмотря на достаточно большое количество публикаций, посвященных этому соединению, вопрос об участии окиси азота и ее производных в механизмах регуляции эритроцитарного равновесия взрослого и растущего организма освещен недостаточно. В раннем постнатальном онтогенезе происходят существенные преобразования эритрона, связанные с изменением качественного состава и численности циркулирующих эритроцитов, а также со становлением механизмов нейро-гуморальной регуляции. Это делает эритрон наиболее уязвимым для действия повреждающих факторов, в том числе, экзогенного оксида азота и его производных.

Цель исследования - изучение эффектов острой нитрит-ной интоксикации на эритрон в раннем постнатальном онтогенезе у крыс.

Материалы и методы исследования. В экспериментах использовано 163 крысенка первого месяца жизни (66 опытных и 97 контрольных). Животным 5, 14, 21 и 28 дней жизни п/к вводили раствор нитрита натрия из расчета 50 мг/кг [1,5,6]. Через час общепринятыми методами определяли параметры периферической крови: концентрацию эритроцитов, гемоглобина, гематокрит, содержание ретикулоцитов. В качестве критерия оценки структурнофункциональных свойств мембраны эритроцитов исследовали их поверхностную цитоархитектонику. Подсчет различных форм эритроцитов производился при помощи фазово-контрастного светового микроскопа под иммерсией в соответствии с классификацией Г.И.Козинца с соавторами [4]. Согласно классификации, эритроциты распределяли на несколько категорий в зависимости от характера поверхности: дискоциты (стабильные формы), обратимо деформированные (с одним выростом, с гребнем, с множественными выростами), необратимо деформированные эритроциты (стоматоциты, в виде «спущенного мяча», дегенеративные). Для характеристики эритрофагоцитоза определяли фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов на основании реакции взаимодействия макрофагов с аутологичными эритроцитами in vitro в краткосрочных моно-слойных культурах клеток по методике Mantovani B. [12]. Перитонеальные макрофаги, взаимодействуя с аутологичными эритроцитами, образуют специфические розеткоподобные структуры, легко поддающиеся подсчету. Интенсивность внутриклеточного гемолиза оценивалась по результатам дифференцированного подсчета макрофагов, не образующих розеток и образующих розетки с 1-2, 3-5, 6-

8, 9 и более эритроцитами. Результат выражался в процентах. Параметры завершенного фагоцитоза: количество макрофагов с фагосо-мами (эритроциты и их фрагменты) и диффузными включениями гемоглобина - определялись благодаря цитохимической идентификации по результатам бензидиновой реакции. Результат также выражался в процентах. В гемолизате крови определялась концентрация нитрат-ионов (стабильных метаболитов оксида азота) методом потенциометрического исследования [8] с помощью ионселективно-го электрода (НИИ химии СПГУ). Забор крови производился из общего кровотока после декапитации. Эвтаназия осуществлялась посредством дислокации шейных позвонков.

Полученные результаты обработаны методом вариационного анализа с использованием t-критерия Стьюдента. Критический уровень значимости (p) при проверке статистических гипотез принимался равным <0,05.

Результаты и их обсуждение. Согласно полученным нами данным, п/к введение нитрита натрия в дозе 50мг/кг не приводит к летальному исходу у животных исследуемого возрастного периода. Острая нитритная интоксикация в 5-дневном возрасте проявляется уменьшением показателя гематокрита (табл. 1). Одновременно понижено содержание ретикулоцитов. Это может быть связано с более низкой резистентностью их мембраны, обусловленной повреждающим действием производных оксида азота, которые вызывают изменения мембранной структуры и индуцируют процессы ПОЛ, приводящие к преждевременному старению и гибели клеток. Морфологически старение эритроцитов проявляется трансформацией дискоцитов в необратимо изменен-

ные (предгемолитические) формы. Тем не менее, у экспериментальных крысят этой возрастной группы процент дискоцитов (стабильных форм эритроцитов) существенно больше контрольного показателя. Возможно, поддержание численности эритроцитов в циркуляции обеспечивается выходом их из депо.

Ретикулоцитопения сопровождается снижением способности макрофагов образовывать розетки с аутологичными эритроцитами in vitro. Так, достоверно понижено количество розеток с 1-2 эритроцитами (табл. 2). Учитывая уменьшение эритрофаго-цитарной активности перитонеальных макрофагов на фоне меньшей численности клеток-предшественников эритроцитов, можно предположить, что депрессия эритродиереза - компенсаторный механизм, направленный на поддержание концентрации красных клеток крови, необходимой для обеспечения транспорта кислорода в условиях действия повреждающего фактора.

Концентрация нитрат-ионов в гемолизате повышена по сравнению с контрольным значением (табл. 3). Возможно, это связано не только с введением экзогенного NO, стабильный метаболит которого нитрат-ион имеет довольно продолжительный период полужизни в организме, но и с развитием тканевой гипоксии, сопровождающейся увеличением продукции эндогенного оксида азота.

Таблица 1

Изменения гематологических показателей при острой нитритной интоксикации у крысят

Группа Возраст, дни

исследования 5 14 21 28

Концентрация эритроцитов, Т/л

опыт 1,46±0,12 4,02±0,18 3,17±0,35 3,79±0,24

контроль 1,7±0,24 2,82±0,23 3,99±0,24 4,01±0,23

Р 0,3896 0,0023 0,0748 0,5174

Концентрация гемоглобина, г/л

опыт 64,38±6,21 94,09±2,69 80,33±5,98 75,3±4,69

контроль 67,29±7,0 72,88±3,53 84,7±3,33 88,0±4,0

Р 0,7609 0,0003 0,5349 0,0545

Гематокрит, %

опыт 26,73±0,67 28,84±1,21 24,76±1,18 27,56±1,54

контроль 33,11±1,41 20,86±1,99 31,8±2,34 30,38±1,72

Р 0,0022 0,0048 0,0155 0,2369

Содержание ретикулоцитов, %о

опыт 133,44±8,3 105,13±6,48 110,9±10,88 92,8±8,71

контроль 186,9±21,36 119,5±8,41 112,8±13,89 99,6±10,77

Р 0,0385 0,1988 0,9155 0,6296

Содержание оксифильных нормоцитов, %

опыт 3,89±0,51 8,17±1,19 6,44±1,21 4,8±0,74

контроль 4,0±0,49 3,88±0,55 6,7±1,56 3,8±0,65

Р 0,8778 0,0135 0,8989 0,3234

Содержание дискоцитов, %

опыт 40,22±2,62 50,0±4,7 61,4±3,83 62,5±5,04

контроль 28,38±2,65 43,38±5,9 51,7±3,71 58,91±4,95

Р 0,0062 0,3943 0,0856 0,6170

Таблица 2

Розеткообразующая способность перитонеальных макрофагов в норме и при острой нитритной интоксикации у крысят

Группа Возраст, дни

исследования 5 14 21 28

Макрофаги, не образующие розеток, %

опыт 86,5±3,55 60,4±5,43 74,38±7,75 81,67±7,98

контроль 72,57±5,82 82,6±6,64 76,63±6,87 81,38±4,13

Р 0,0679 0,0286 0,8312 0,9749

Макроф аги, образующие розетки с 1 -2 эритроцитами, %

опыт 9,75±2,94 29,1±3,25 18,88±3,66 14,67±5,66

контроль 20,86±3,62 13,8±3,31 18,63±4,59 13,0±2,63

р 0,0347 0,0072 0,9667 0,7970

Таблица 3

Концентрация нитрат-ионов в гемолизате в норме и при острой нитритной интоксикации у крысят

Группа исследования Возраст, дни

5 14 21 28

опыт 67,58±21,85 7,39±2,17 43,64±17,46 51,6±15,46

контроль 14,49±4,85 32,57±18,59 152,5±75,26 15,15±7,15

р 0,0424 0,2350 0,1863 0,0523

В 14 дней жизни через час после введения нитрита натрия у животных увеличивается концентрация эритроцитов. Содержание гемоглобина и гематокрит также повышены по сравнению с контрольными показателями. Возможно, эти изменения обусловлены увеличением активности красного костного мозга, что сопровождается повышенным поступлением в кровоток оксифиль-ных нормоцитов. В то же время происходит увеличение интен-

сивности клеточного гемолиза. Об этом свидетельствует уменьшение количества макрофагов, не образующих розеток. Процент макрофагов, образующих розетки с 1-2 эритроцитами, возрастает. В условиях высокой интенсивности эритропоэза велика вероятность образования эритроцитов, не соответствующих по своим свойствам потребностям организма, следствием чего может явиться активация эритродиереза. Вместе с тем продукты гемолиза способствуют поддержанию уровня эритропоэтической функции красного костного мозга.

Введение нитрита натрия 21-дневным крысятам приводит к снижению гематокрита по сравнению со средневозрастным значением. Этот возраст наряду с 5 днем жизни является одним из критических периодов становления эритрона в раннем постна-тальном онтогенезе у крыс. Как циркулирующие эритроциты, так и процессы эритропоэза и эритродиереза демонстрируют существенные особенности у животных этих возрастных групп. Это делает эритрон наиболее ранимым и подверженным влиянию различных неблагоприятных факторов.

У 28-дневных животных нитрит натрия в указанной дозировке изменений со стороны эритрона не вызывает. Возможно, это обусловлено достаточно высокой зрелостью функциональных систем и адаптивных механизмов крысят этой возрастной группы.

Выводы.

1. Результаты исследования свидетельствуют о неоднозначности проявлений острой нитритной интоксикации у животных разных возрастных групп. Наиболее подвержены повреждающему действию NO и его производных крысята 5 и в некоторой степени 21 дня жизни.

2. Параллельное изменение активности эритропоэза и эритродиереза, по-видимому, обеспечивает оптимальное соотношение этих процессов для поддержания количественного и качественного состава циркулирующих эритроцитов.

Литература

1. Гоженко А.И., Доренский В.С., Рудина Е.И. Причины и механизмы интоксикации нитратами и нитритами // Медицина труда и пром. экология. 1996. №4. С.15-21.

2. Голдовская Л.Ф. Химия окружающей среды: Учебник для вузов. М.: Мир, 2005. С.158-165.

3. Журавлева И.А., Мелентьев И А., Виноградов НА. Роль окиси азота в кардиологии и гастроэнтерологии // Клиническая медицина. 1997. №4. С.18-21.

4. Козинец Г.И., Телемнова Н.Н., Шишканова З.Г. Растровая электронная микроскопия клеток периферической крови здоровых людей // Пробл. гематологии и переливания крови. 1979. Т.24, №7. С.44-47.

5. Овчинников В.В. Эритрограммы метгемоглобиновых эритроцитов //Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. М.: Наука, 1967. С.292-295.

6. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Охотин В.Е., Косицын Н.С. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих. М.: Наука, 1997. 156 с.

7. Салова Л.М., Плеханова Н.Г. Оксид азота как медиатор воспаления // Вестник ДВО РАН. 2006. №6. С. 7-80.

8. Снуг Д., Уэст Д. Основы аналитической химии. М.: Мир,

1979.

9. Дж. Фишер. Эритропоэтин: механизмы гипоксической регуляции // Гематол. и трансфузиол. 1997. Т.42, №1. С. 19-22.

10. Gerlach H. et al. Dose-response characteristics during long-term ingalations of nitric oxide in patients with severe acute respiratory dustress syndrome: a prospective, randomized, controlled study // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2003. Vol.167. P. 1008-1015.

11. Lowenstein C.J., Dinerman J.L., Snyder S.H. Nitric oxide: a physiologic messengers // Ann. Intern. Med. 1994. Vol.120. P. 227-237.

12. Mantovani B. Phagocytosis of in vitro-aged erythrocytes. A sharp distinction between activated and normal macrophages // Exp. Cell Res. 1987. Vol. 173. P. 282-286.

13. S.Moncada, R.M.J.Palmer, E.A.Higgs. Nitric oxide: Physiology, Pathophysiology and Pharmacology // Pharmacological Reviews. 1991. Vol. 43 (2). P.109-142.

14. Nakaki T. Physiological and clinical significance of NO (nitric oxide) - a review // Keio J. Med. 1994. Vol.43. P.15-26.

15. Tomomi G., Masataka M. Nitric oxide and endoplastic reticulum stress atherosclerosis // Thrombosis and Vascular Biology. 2006. Vol. 26. P. 1439.

INFLUENCE OF SHARP NITRIC INTOXICATION ON ERYTHRON

IN EARLY POSTNATAL ONTOGENESIS IN RATS

E.K.GOLUBEVA, S.B.NAZAROV Ivanovo State Medical Academy

Influence of sharp nitric intoxication on erythron in early postnatal ontogenesis in rats was studied. The results of this research indicate the ambiguity of of sharp nitric intoxication manifestations in animals of different age. In 5-day old little rats the decrease of haema-tocrit against the background of reticulocytopaenia and reduction of ability of macrophages to form rosettes with autologic erythrocytes are observed. At 14 days of life introduction of sodium nitrite leads to increase of erythrocytes, haemoglobin concentration, haematocrit, erythropoesis activation and cellular mechanisms of erythrodieresis. Nitric intoxication at 21-day leads only to decrease of haematocrit. At 28 days of life sodium nitrite in the specified dosage does not cause any changes in erythron.

Key words: nitric intoxication, ontogenesis, erythron, erythro-poesis, erythrodieresis.

УДК 618.33

ПРОГНОЗИРОВАНИЕ, ПРОФИЛАКТИКА И ЛЕЧЕНИЕ ЗАДЕРЖКИ ВНУТРИУТРОБНОГО РАЗВИТИЯ ПЛОДА ПРИ СОЧЕТАНИИ ГЕСТОЗА И АНЕМИИ

З.И. ИСАЕВА*

Общее число обследованных составило 210 беременных. Все обследованные были разделены на три группы: Основная группа - 110 беременных с сочетанием гестоза и анемии; контрольная 1 группа -50 беременных с гестозом; контрольная 2 группа - 50 беременных с анемией. Результаты исследования позволяют сделать вывод о высоком риске развития заднржки развития внутриутробного развития плода при гестозе и анемии. Применение комплексной пренатальной терапии при задержке внутриутробного развития на фоне сочетании гестоза и анемии позволяет улучшить перинатальные исходы. Ключевые слова: прогнозирование, профилактика, плод, задержка, гестоз, анемия

В структуре перинатальной заболеваемости задержке внутриутробного развития плода принадлежит ведущее место. По данным различных авторов, частота задержки внутриутробного развтия плода (ЗВРП) колеблется в широком диапазоне (2,417,6%) [1,2,3,4,10].

Различные осложнения беременности оказывают непосредственное влияние на увеличение частоты ЗВРП. К одной из наиболее частых причин задержки внутриутробного развития плода следует отнести гестозы, особенно сочетанные формы [7,8].

При гестозе средней степени тяжести частота ЗВРП составляет 60%, а с тяжелым течением гестоза возрастает до 62% [12].

Среди различных фоновых заболеваний значительное место занимает железодефицитная анемия (ЖДА). Анемия осложняет течение беременности и родов, и в зависимости от тяжести в 2040% случаев присоединяется гестоз. Неблагоприятное влияние оказывает анемия беременных на внутриутробное состояние плода и течение раннего неонатального периода [3,5,7,8].

Клинические наблюдения показывают, что сочетание гесто-за с анемией взаимоотягощают течение гестации и значительно ухудшают исход как для матери, так и для плода [7,8].

Из сказанного следует, что актуальность прогнозирования и совершенствования пренатальной подготовки и родоразреше-ния женщин с задержкой внутриутробного развития плода при сочетании гестоза и анемии не вызывает сомнений.

Цель исследования — разработка прогностических критериев задержки внутриутробного развития плода при беременности осложненной гестозом и анемией и оценка эффективности превентивных мероприятий и комплексной терапии ЗВРП при сочетанной патологии.

Материалы и методы исследования. Для изучения особенностей течения беременности и исхода родов при ЗВРП на фоне сочетания гестоза и анемии, и выделения наиболее значимых факторов риска развития ЗВРП были обследованы беременные женщины с сочетанием гестоза и анемии. (Основная группа - 110), беременные женщины с гестозом (контрольная - 1 группа - 50) беременные женщины с анемией (контрольная - 2 группа - 50).

* Дагестанский научный центр, г. Махачкала