Диагностическое значение протеомного анализа жидкости передней камеры глаза при катаракте, первичной открытоугольной глаукоме и псевдоэксфолиативном синдроме

точной кривой с максимальными значениями офтальмо-тонуса в утренние часы, подчеркивающие стабилизацию глаукомного процесса. При использовании новых расчетных показателей, таких как средняя скорость изменения офтальмотонуса в течение суток, скорость его подъема и спуска, а также продолжительность плато в точке минимального снижения офтальмотонуса и количество патологических пиков колебаний, были выявлены статистически достоверные различия в суточных флюктуациях офталь-мотонуса, характеризующих прогрессирование заболевания.

Комплексная оценка суточных флюктуаций офтальмо-тонуса и системного АД в перспективе позволит персонализировать выбор и назначение местных и системных гипотензивных препаратов.

Литература

1. Leske M.C. Hennls A., Honkanen R. Risk factors for Incident open-angle glaucoma: the Barbados Eye Studies // Ophthalmology. 2008. Vol. 115(1). P. 85-93.

2. Topouzis F. Association of blood pressure status with the optic disk structure in non-glaucoma subjects: the Thessaloniki Eye Study // Am. J. Ophthalmol. 2006. Vol. 142(1). P. 60-67.

3. Mitchell P., Lee A.J., Wang G.G. Open-angle glaucoma and systemic hypertension: The Blue Mountains Eye Study // J. Glaucoma. 2004. Vol. 13(4). P. 319-326.

4. Mitchell P., Smith W., Attebo K. Prevalence of open-angle glaucoma in Australia. The Blue Mountains Eye Study // Ophthalmology. 1996. Vol. 103(10). P. 1661-1669.

5. Orzalesl N., Rosettl L., Ombonl S. Vascular risk factors In glaucoma: the results of a national survey // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 2007. Vol. 245(6). P. 795-802.

6. Чазова И.Е. Роль суточного мониторирования артериального давления в оценке эффективности антигипертензивной терапии (Результаты суточного мониторирования артериального давления в программе КЛИП-АККОРД) // Consilium Medicum. Системные гипертензии (прилож.). 2007. Т. 9. № 1. С. 3-7 [Chazova I.E. The role of daily monitoring of blood pressure in the evaluation of hypotensive therapy efficacy (Results of daily monitoring of blood pressure in the CLIP-ACCORD program) // Consilium Medicum. Suppl. "Systemic Hypertension". 2007. Vol. 9 (1). P. 3-7 (in Russian)].

7. Самойлов А.Я. Диагностика глаукомы // Руководство по глазным болезням / под ред. В.Н. Архангельского. М.: Медгиз, 1960. Т. II. Кн. 2. С. 577-601 [Samojlov A.Ja. Diagnosis of glaucoma (in the book. Ocular disorders - manual) / ed. V.N. Arhangel'sky. M.: Medgiz, 1960. Vol. II. Book 2. P. 577-601 (in Russian)].

8.Graham S.L. et al. Central blood pressure, arterial waveform analysis, and vascular risk factors in glaucoma // J. Glaucoma. 2013. Vol. 22(2). P. 98-103.

9. Pache M. A sick eye in a sick body? Systemic findings in patients with primary open-angle glaucoma // Surv. Ophthalmol. 2006. Vol. 51(3). P. 179-212.

10. Leske M.C. Hejil A., Hyman L. Predictors of long-term progression in the Early Manifest Glaucoma Trial // Ophthalmology. 2007. Vol. 114(11). P. 1965-1972.

11. Jurgens C., Grossjohann R. Relationship of systemic blood pressure with ocular perfusion pressure and intraocular pressure of glaucoma patients in telemedical home monitoring // Med Sci Monit. 2012. Vol. 18(11). P. 85-89.

12. Sehi M., Flanagan J.G., Zeng L. The association between diurnal variation of optic nerve head topography and intraocular pressure and ocular perfusion pressure in untreated primary open-angle glaucoma // J Glaucoma. 2011. Vol. 20(1). P. 44-50.

13. Sung K.R, Lee S., Park S.B. Twenty-four hour ocular perfusion pressure fluctuation and risk of normal-tension glaucoma progression // Invest. Ophthalmol Vis Sci. 2009. Vol.50(11). P. 5266-5274.

Полный список литературы Вы можете найти на сайте http://www.rmj.ru

DOI: 10.21689/2311-7729-2017-17-1-13-17

Диагностическое значение протеомного анализа жидкости передней камеры глаза при катаракте, первичной открытоугольной глаукоме и псевдоэксфолиативном синдроме

Н.И. Самохина, С.А. Кочергин, И.Б. Алексеев

ФГБОУ ДПО РМАНПО МЗ РФ, Москва

РЕЗЮМЕ

Протеомный анализ является одним из новых направлений исследований состава биологических жидкостей. Главная цель клинической протео-мики - обнаружение нового белкового или пептидного биомаркера, связанного с определенным заболеванием. В последние годы данный метод исследования приобретает большую актуальность и в офтальмологии.

Цель исследования: определить протеомный состав жидкости передней камеры глаза (ПКГ) и его различия при катаракте, первичной открыто-угольной глаукоме (ПОУГ) и псевдоэксфолиативном синдроме (ПЭС).

Материал и методы: в исследование были включены 29 образцов жидкости ПКГ пациентов с катарактой, глаукомой в сочетании с ПЭС и без него. Забор жидкости ПКГ осуществлялся во время первого этапа операции экстракции катаракты. Для каждого образца проводилась высокоэффективная жидкостная хроматография в сочетании с высокоточной тандемной масс-спектрометрией в 3 технических повторах. Анализ аннотации белков жидкости ПКГ проводился с помощью базы данных Gene Ontology (GO).

Результаты: в работе найдены 263 белковые группы, характеризующие протеом жидкости ПКГ. Большая часть белков (148 из 263) была обнаружена во всех группах. В соответствии с классификацией GO, большинство выделенных белковых групп участвуют в регуляции протеолиза. Среди белков жидкости ПКГ чаще встречаются аннотированные как обладающие активностью в отношении ингибирования эндопептидаз. Преобладающим молекулярным процессом в протеоме жидкости ПКГ является негативная регуляция пептидазной активности, важная для защиты жидкости ПКГ от протеолиза. Клеточная локализация белков аннотирована как принадлежность к внеклеточному пространству. Заключение: полученные данные позволяют оценить различия в протеомном составе внутриглазной жидкости в представленных группах больных. Найдена тенденция к возникновению различий состава протеома жидкости ПКГ у больных с ПЭС и без него. Проведение протеомных исследований глазной жидкости является перспективным, т. к. дает возможность разработки методов диагностики и лечения заболеваний глаза.

Ключевые слова: протеомный анализ, жидкость передней камеры глаза, катаракта, глаукома, псевдоэксфолиативный синдром. Для цитирования: Самохина Н.И., Кочергин СА., Алексеев И.Б. Диагностическое значение протеомного анализа жидкости передней камеры глаза при катаракте, первичной открытоугольной глаукоме и псевдоэксфолиативном синдроме // РМЖ. Клиническая офтальмология. 2016. № 1. С. 13-17.

ABSTRACT

Diagnostic value of the anterior chamber's fluid proteomic analysis in patients with cataract, primary open-angle glaucoma and pseudoexfoliation syndrome

Samokhina N.I., Kochergin S.A., Alexeev I.B.

Russian medical Academy of postgraduate education, Moscow

Proteomic analysis is perspective for investigation of body fluids composition. Proteomics is highly useful in identification of candidate biomarkers (body fluids proteins that are of value for diagnosis). Recently this analysis is used in ophthalmology.

Aim: to analyze proteomic composition of anterior chamber's fluid and its differences in cataract, primary open angle glaucoma and pseudoexfoliation syndrome.

Material and methods: twenty nine human aqueous humor samples from patients with eye diseases (cataract, glaucoma with and without pseudoexfoliation syndrome) were characterized by high-resolution chromato-mass-spectrometry. Fluid of the anterior chamber was obtained during first stage of cataract surgery. Gene Ontology classifier was used to annotate the proteins.

Results: 263 protein groups were identified. Most identified proteins (148 out of263) were found in all groups. According to Gene Ontology, main molecular function of most proteins was the endopeptidase inhibitor activity and regulation of proteolysis. The trend to difference in proteomic composition was identified in patients with pseudoexfoliation syndrome and without it.

Conclusions: received data shows the difference in proteomic composition of anterior chamber's fluid of patients with cataract, pseudoexfoliation syndrome and primary open-angle glaucoma. Proteomic analysis of eye fluids permits to develop new methods of diagnosis and treatment of eye diseases. Keywords: proteomic analysis, aqueous humor, cataract, glaucoma, pseudoexfoliation syndrome.

For citation: Samokhina N.I., Kochergin S.A., Alexeev I.B. Diagnostic value of the anterior chamber's fluid proteomic analysis in patients with cataract, primary open-angle glaucoma and pseudoexfoliation syndrome //RMJ. Clinical ophthalmology. 2017. № 1. P. 13-17.

Протеомный анализ является одним из новых направлений исследований состава биологических жидкостей. Протеомика - наука, основным предметом изучения которой являются белки, их функции и взаимодействия в живых организмах, в т. ч. в человеческом. Основная ее задача -количественный анализ экспрессии белков в клетках в зависимости от их типа, состояния или влияния внешних условий [1]. Протеомика осуществляет сравнительный анализ больших групп белков - от всех белков, вовлеченных в тот или иной биологический процесс, до полного протеома (совокупности всех белков организма) [2]. Традиционно изучение белков являлось одним из разделов биохимии, но после определения структуры всей геномной ДНК человека и ряда других организмов у исследователей белков появились новые методы, с которыми и связывают появление в 1997 г. нового термина «протеомика» [3]. В частности, появились исчерпывающие базы данных, содержащие последовательности всех белков человека, а также их протеолитических ферментов, полученных в стандартных условиях. Это позволяет идентифицировать белки по молекулярной массе их фрагментов методом масс-спектрометрии. Поскольку протеомика оперирует большим объемом данных, для обработки которых требуются специализированные алгоритмы и большие вычислительные мощности, она тесно связана с биоинформатикой.

В последние годы протеомный анализ стал неотъемлемой частью биомедицинских исследований [4]. Главной це-

лью клинической протеомики является обнаружение нового белкового или пептидного биомаркера, который связан с определенным заболеванием. Биомаркер - молекула, наличие или отсутствие которой позволяет сделать вывод о протекании определенного клеточного процесса или определить тип клетки. Сравнение протеомов здорового человека и больного позволяет выявить конкретные белки, потенциально вовлеченные в развитие болезни, которые в дальнейшем могут стать мишенями для новых лекарственных препаратов. Кроме того, если такие белки уже известны, анализ про-теома может использоваться как метод ранней диагностики.

Одним из основных методов протеомики является масс-спектрометрия белков, которая позволяет установить количественный и качественный состав в исследуемом образце, будь то очищенный и выделенный белок или клеточный лизат. В клинической практике установление новых биомаркеров может помочь в разработке скринин-говых методов для ранней диагностики заболевания.

В настоящее время в медицине применение методов протеомного анализа позволяет выявить маркеры онкологических заболеваний на их ранней стадии [5-7]. Есть работы по диагностике хронических дерматозов и аутоиммунных заболеваний кожи методом протеомного анализа [8]. Определен протеомный профиль мочи пациентов с хроническим гломерулонефритом, выявлены белки-маркеры, ответственные за разные фазы течения патологического процесса [9].

В последнее время метод протеомного анализа приобретает большую актуальность и в офтальмологии. С по-

мощью масс-спектрометрии были исследованы слеза и жидкость ПКГ, забор которых осуществлялся при различных заболеваниях [10-13], в частности, при глаукоме.

Жидкость ПКГ (син.: водянистая влага (ВВ)) вырабатывается пигментным и непигментным эпителием цилиарно-го тела [14]. Секреция происходит со скоростью 23 мкл/мин. Человеческий глаз производит от 3 до 9 мл ВВ в сутки. Функции ВВ - обеспечение питанием бессосудистых тканей глаза (хрусталика, стекловидного тела, роговицы) и удаление шлаковых метаболитов. Основная трудность протеомного исследования ПКГ заключается в небольшом количестве ее объема, который можно получить из одного глаза. Так как общий объем ВВ в передней камере не превышает 150-200 мкл [15] и с возрастом уменьшается [16], трудно собрать больше 100-150 мкл.

В состав жидкости ПКГ входит около 99% воды и менее 1% белков, среди которых преобладают фракции альбуминов, глобулины и трансферрин. По сравнению с сывороткой крови ВВ содержит гораздо меньше белка (от 2,4 до 3,7 мг/мл) [17]. Также в жидкости ПКГ были обнаружены различные аминокислоты (лизин, гистидин, триптофан), ферменты (протеаза), гиалуроновая кислота (ГК).

Среди белков жидкости ПКГ у пациентов с глаукомой идентифицированы матриксные металлопротеиназы [18], которые осуществляют лизис базальных мембран и гидролиз всех существующих компонентов межклеточного мат-рикса и активируют связанные с ним ангиогенные факторы роста [19, 20]. Также в жидкости ПКГ выделены ангиоген-ный фактор VEGF А [21] и фибронектин [22].

Фибронектин - гликопротеин внеклеточного матрикса, выполняет регуляторную и стабилизирующую функции в межклеточных взаимодействиях и является общей адгезивной молекулой для соединительной ткани (тканевая форма), плазмы крови и других биологических жидкостей (плазменная форма). По литературным данным, фибро-нектин определяется в составе псевдоэксфолиативного материала и во всех структурах дренажной системы глаза [23].

В нескольких исследованиях обнаружена более высокая концентрация фибронектина в жидкости ПКГ у пациентов с глаукомой [24], причем при псевдоэксфолиатив-ной глаукоме уровень этого гликопротеина значительно выше, чем при ПОУГ. Авторы связывают это с повреждением и нарушенной проницаемостью гематоофтальмиче-ского барьера [22]. В другом исследовании у пациентов без подтвержденного диагноза глаукомы с ПЭС был определен более высокий уровень фибронектина в жидкости ПКГ, чем у пациентов без ПЭС [25].

Также в жидкости ПКГ пациентов с псевдоэксфолиатив-ной глаукомой были обнаружены более высокие уровни ме-таллопротеиназ 2 и 3 типа и эндогенного ингибитора метал-лопротеиназы-2. Это свидетельствует о нарушении баланса между металлопротеиназами и их эндогенными ингибиторами и может быть одним из звеньев патогенеза ПЭС.

При ПОУГ в жидкости ПКГ были обнаружены более высокие уровни растворимого CD44 - интегрального клеточного гликопротеина, играющего важную роль в межклеточных взаимодействиях, клеточной адгезии и миграции. Это рецептор для ГК, некоторых других лигандов, а также, возможно, матриксных металлопротеиназ [26]. Авторы выдвинули рабочую гипотезу о том, что ПОУГ биохимически характеризуется снижением концентрации ГК в жидкости ПКГ и повышением экспрессии рецептора CD44 для

ГК, что, в свою очередь, может влиять на трабекулярный аппарат и выживаемость ганглионарных клеток сетчатки.

В нескольких исследованиях определяли уровень антител сыворотки крови пациентов с глаукомой. Были обнаружены антитела к Hsp [27], у-енолазе [28], белку, стимулирующему активацию аденилатциклазы [29] и гликоза-миногликанам [30]. Также были определены повышенные уровни антител к антигенам сетчатки и другим структурам глаза в сыворотке крови больных глаукомой [31-33]. В жидкости ПКГ пациентов с глаукомой нормального давления тоже обнаружили повышенные уровни антител к антигенам сетчатки по сравнению с таковыми у пациентов из группы контроля [34].

Цель исследования: определить протеомный состав жидкости ПКГ и его различия при катаракте, ПОУГ и ПЭС.

Материал и методы

Под наблюдением находились 29 пациентов в возрасте от 45 до 82 лет. 1-ю группу (контрольную) составили пациенты с катарактой (11 человек), не имеющие другой оф-тальмопатологии. Во 2-ю группу вошли пациенты с катарактой и ПЭС без подтвержденного диагноза глаукомы (5 человек). 3-ю группу составили пациенты с катарактой и открытоугольной глаукомой (7 человек). В 4-ю группу вошли пациенты с катарактой, ПОУГ и ПЭС (6 человек) (табл. 1).

В исследование включались пациенты, не имеющие тяжелых соматических заболеваний, хронических системных заболеваний, не переносившие за последний год лазерные операции на исследуемом глазу и не имеющие в анамнезе хирургических вмешательств на глазном яблоке.

Пациентам всех групп проводились комплексное офтальмологическое обследование и забор жидкости ПКГ для проведения протеомного исследования.

Офтальмологическое обследование включало визомет-рию, периметрию, тонометрию, гониоскопию, биомикроскопию, прямую и обратную офтальмоскопию, оптическую когерентную томографию, ультразвуковое В-скани-рование, пахиметрию, определение критической частоты слияния мельканий.

Забор жидкости ПКГ проводился во время первого этапа операции экстракции катаракты в филиале № 1 ГКБ им. С.П. Боткина «Офтальмологический стационар». Жидкость ПКГ исследовалась при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с высокоточной тандемной масс-спектро-метрией. ВЭЖХ проводили с помощью прибора Agilent 1100 Series (Agilent Technologies, США). Тандемный масс-спектрометрический анализ проводили с помощью прибора Orbitrap Q Exactive (Thermo Scientific,

Таблица 1. Характеристика выборки исследования

Группа Диагноз пациентов на момент сбора клинического материала Количество проб Возраст пациентов [лет], M±m Концентрация белка, [мкг/мкл], M±m

1 Катаракта 11 67,5±12,1 4,6±1,7

2 Катаракта, ПЭС 5 76±5,8 2,5±1,6

3 Каратакта, ПОУГ 7 76,9±3,6 4,3±1,8

4 Катаракта, ПОУГ, ПЭС 6 74,5±6,9 2,7±0,7

Всего 29 72,6±9,3 3,8±1,8

США). Лабораторные исследования проводились на базе ФГБНУ «НИИ биомедицинской химии им. В.Н. Оре-ховича» (ИБМХ).

В исследование были включены 29 образцов жидкости ПКГ. Каждый образец исследовался с помощью ВЭЖХ в сочетании с высокоточной тандемной масс-спектрометри-ей в 3 технических повторах. Биоинформатический анализ полученных спектров проводился с использованием программы MaxQuant версии 1.5.2.8. Полученный список белков имел уровень ложноположительных результатов (FDR)=1% как для белковых, так и для пептидных идентификаций, что было получено путем сопоставления результатов с инвертированной базой данных.

Анализ аннотации белков жидкости ПКГ проводился с помощью Gene Ontology (GO). GO - это важный биоинформационный проект, посвященный созданию унифицированной терминологии для аннотации генов и генных продуктов всех биологических видов. Целями проекта являются поддержание и пополнение определенного списка генов и их продуктов, составление аннотаций генов и продуктов, а также разработка инструментов доступа к базе данных проекта. GO является частью более крупного проекта Open Biomédical Ontologies [35-37].

Для определения уровня значимости обогащения использовали расчет значений p-value по формуле гипергеометрического распределения или мультивариантного гипергеометрического распределения, которое в теории вероятностей моделирует количество удачных выборок без возвращения из конечной совокупности. Наиболее значимыми считали биологические процессы с наименьшим значением p-value. Например, уровень значимости обогащения p=8,77x10-44 свидетельствует о высокой достоверности полученного результата.

Результаты

В работе найдены 263 белковые группы, характеризующие протеом жидкости ПКГ. Основная часть выделенных нами белковых групп отвечает за функцию связывания биологических молекул и тем самым осуществляет регуляцию клеточного ответа на различные сигналы, что важно для координации всех биохимических процессов, происходящих в жидкости ПКГ.

Большая часть белков (148 из 263) была обнаружена во всех группах. В соответствии с классификацией GO, большинство выделенных белковых групп участвуют в регуляции протеолиза. К примеру, ингибитор эндопептидазы и регулятор пептидазы, выделенные в жидкости ПКГ, предотвращают развитие патологического протеолиза. По литературным данным, большинство белков, обнаруженных в жидкости ПКГ, также выделены в плазме крови и спинномозговой жидкости [4].

Из выделенных нами белков жидкости ПКГ особого внимания заслуживает Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF, фактор пигментного эпителия, genename SERPIN F1), который относится к семейству серпинов - белков, ингибирующих пептидазы. Данный белок выявлен во всех исследуемых группах. По литературным данным, PEDF синтезируется в клетках пигментного эпителия сетчатки [38], защищает нейрональные клетки от апоптоза и является природным ингибитором ангиогенеза [39].

Особый интерес представляют 26 белков, выделенных только в группе пациентов с катарактой. Среди них а-кри-сталлин (идентификатор Gene Name CRYAA), витамин K-зависимый белок (PROSl), корнеодесмосин (CDSN), пла-

кофилин-1 (PKP1), а-цепь тубулина (TUBA1B). По литературным данным, эти белки являются структурными составляющими вещества хрусталика и появляются в жидкости ПКГ при развитии катаракты [40, 41]. Авторы связывают их появление (особенно белков-кристаллинов) с биохимическими изменениями, происходящими при развитии катаракты. Также авторы отмечают, что гены alpha-crystallin A (CRYAA), beta-crystallin A3 (CRYBA1) и beta-crystallin A4 (CRYBA4) относятся к генам, отвечающим за изменения в хрусталике, соответственно, мутации в них вызывают катаракту.

Из 16 белков, характеризующих катаракту с ПЭС, впервые выявленными являются 6 белков: флавин-редуктаза (BLVRB), белок S100-A1 (S100A1), глутатион^-трансфе-раза-3 (GSTM3), а-1-цепь коллагена (COL18A1), рибонук-леаза-4 (RNASE4), десмин (DES). Для группы пациентов с глаукомой найдено 12 уникальных белков, 4 из них являются впервые выявленными: аполипопротеин С -111 (APOC3), а-2-цепь коллагена (COL1A2), а-3-цепь коллагена (COL9A3), пролин-богатый белок-4 (PRR4).

Из 4 белков, характеризующих глаукому с ПЭС, 2 являются впервые выявленными: F-бокс белок (NCCRP1) и НАД(Ф)Н-дегидрогеназа (NQO1).

Семь белковых групп, найденных на пересечении множеств «катаракта + ПЭС» и «глаукома + ПЭС», позволяют выявить тенденции к возникновению различий белкового состава при ПЭС. Основные функции этих белков - участие в связывании различных биологических молекул и регуляция метаболических процессов в жидкости ПКГ.

Среди белков жидкости ПКГ по сравнению со всем про-теомом человека чаще встречаются аннотированные как обладающие активностью в отношении ингибирования эн-допептидаз (GO:0004866) (уровень значимости обогащения p=9,74x10-41), что свидетельствует о важности защиты жидкости ПКГ от протеолиза. Основной молекулярный процесс в протеоме жидкости ПКГ - каскад активации белков (GO:0072376) (уровень значимости обогащения p=8,77x10-44), т. к. клеточный сигналинг очень важен для координации биохимических процессов в клетках. Как и ожидалось, клеточная локализация белков жидкости ПКГ аннотирована как принадлежность к внеклеточному пространству (GO:0044421) (уровень значимости обогащения p=1,78x10-196). Это обусловлено тем, что белки внеклеточного матрикса играют важную роль в формировании структур глаза, а внутренняя поверхность эндотелиальных клеток граничит с ВВ, заполняющей ПКГ.

Анализ аннотации белков, «конститутивно» представленных в жидкости ПКГ, по результатам нашей работы и ранее опубликованным данным показал, что чаще встречаются белки, аннотированные как обладающие активностью в отношении ингибирования эндопептидаз (GO:0004866) (уровень значимости обогащения p=1,73x10-34). Преобладающим молекулярным процессом в протеоме жидкости ПКГ является негативная регуляция пептидазной активности (GO:0010466) (уровень значимости обогащения p=4,29x10-32), важная для защиты жидкости ПКГ от протеолиза. Так, например, протеолиз субъединиц коннексинов, образующих щелевые контакты между волокнами хрусталика, или волокон, в которые упакованы кристаллины, вызывает помутнение хрусталика [42]. Клеточная локализация аннотирована как принадлежность к внеклеточному пространству (GO:0005615) (уровень значимости обогащения p=8,99x10-84).

Заключение

Впервые в России были исследованы образцы жидкости ПКГ 29 пациентов с катарактой, глаукомой и ПЭС методом хромато-масс-спектрометрии на приборе высокого разрешения.

Полученные данные позволяют оценить различия в белковом составе внутриглазной жидкости у больных представленных групп. В исследовании были идентифицированы группы белков, ранее не описанные в составе жидкости ПКГ. Также выявлены 4 уникальные группы белков, характерные для катаракты, ПЭС и глаукомы. Найдена тенденция к возникновению различий состава протеома жидкости ПКГ у больных с ПЭС и без него.

Анализ объединенного протеома ВВ на предмет преобладания определенных структурно-функциональных групп белков с использованием категорий GО выявил, что основной функцией белков жидкости ПКГ является инги-бирование эндопептидаз.

Обнаруженные различия в белковом составе жидкости ПКГ свидетельствуют об изменении обмена веществ, что может являться одним из ключевых звеньев патогенеза ПЭС и глаукомы.

Проведение протеомных исследований глазных жидкостей является перспективным, т. к. дает возможность разработки методов диагностики и лечения заболеваний глаза.

Литература

1. Anderson N.L., Anderson N.G. Proteome and proteomlcs: new technologies, new concepts, and new words // Electrophoresis. 1998. Vol. 19 (11). P. 1853-1861.

2. Engholm-Keller K., Larsen M.R. Technologies and challenges in large-scale phospho-proteomic // Proteomics. 2013. Vol. 13 (6) P. 910-931.

3. James P. Protein identification in the post-genome era: the rapid rise of proteomics // Quarterly reviews of biophysics. 1997. Vol. 30 (4). P. 279-331.

4. Hu S., Loo J.A., Wong D.T. Human body fluid proteome analysis // Proteomics. 2006 Vol. 6. P. 6326-6353.

5. Власова М.А., Мошковский С.А., Сафарова М.Р. и др. Молекулярная диагностика рака яичника с использованием протеомных технологий // Биомедицинская химия. 2005. № 51 (4). С. 367-383 [Vlasova M.A., Moshkovskij S.A., Safarova M.R. et al. Pro-teomic technologies in molecular diagnosis of ovarian cancer // Biomedical chemistry. 2005. Vol. 51 (4). P. 367-383 (in Russian)].

6. Soltys S.G., Shi G., Tibshirani R. et al. The use of plasma SELDI-TOF MS proteomic patterns for detection of head and neck squamous cell cancers (HNSCC) // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2003. Vol. 57. P. 202.

7. Zhang Z., Bast R.C., Yu Y. et al. Three biomarkers identified from serum proteomic analysis for the detection of early stage ovarian cancer // Cancer Res. 2004. Vol. 64. P. 5882-5890.

8. Знаменская Л.Ф. Протеомные технологии в изучении патогенеза псориаза // Вестник дерматологии и венерологии. 2011. № 3. С. 27-33 [Znamenskaja L.F. Proteomic technologies in investigation of psoriasis pathogenesis // Herad of dermatology and ve-nerology 2011. Vol. 3. P. 27-33 (in Russian)].

Полный список литературы Вы можете найти на сайте http://www.rmj.ru

DOI: 10.21689/2311-7729-2017-17-1-17-20

Особенности микроциркуляции и морфометрии диска зрительного нерва у больных глаукомой нормального давления

Б.М. Азнабаев1,2, А.Ш. Загидуллина1, А.А. Александров1,2, Г.Р. Исмагилова2, Р.Р. Саттарова2

1 ФГБОУ ВО «Башкирский ГМУ» МЗ РФ, Уфа

2 ЗАО «Оптимедсервис», Уфа

РЕЗЮМЕ

Целью исследования явилось изучение морфометрических показателей и параметров микрокровотока диска зрительного нерва (ДЗН) у больных глаукомой нормального давления (ГНД) в сравнении с группой контроля при помощи методов оптической когерентной томографии (ОКТ) и оптической когерентной томографии с ангиографией (ОКТА).

Материал и методы: обследовано 54 пациента с ГНД (97 глаз) в возрасте от 46 до 65 лет (средний возраст - 55,80±9,42 года) преимущественно с начальной (80 глаз, 82,5%) и развитой стадиями (17 глаз, 17,5%) глаукомы.

Результаты и обсуждение: выявлены изменения показателей микроциркуляции ДЗН при ГНД. Наиболее значимые изменения в сравнении с группой контроля отмечены при определении площади неперфузируемых зон ДЗН у больных ГНД на уровне ONH (полнослойном) - в среднем 0,308±0,515 мм2, что в 4,7 раза превышает значения аналогичного показателя в контрольной группе (p<0,05). Площадь неперфузируемых зон ДЗН у больных ГНД на уровне RPC (слой сплетения нервных волокон) составила 0,674±0,720 мм2, что в 2,7 раза больше аналогичного показателя в группе контроля (p<0,05). Выявлены достоверные корреляционные связи показателей ОКТА с основными ОКТ-показателями комплекса ганглиозных клеток сетчатки, а также средней толщиной слоя нервных волокон сетчатки (СНВС).

Выводы: показатели ОКТА являются информативными в отношении оценки степени перфузии области ДЗН и могут быть рассмотрены в качестве дополнительных критериев при диагностике ГНД.

Ключевые слова: глаукома нормального давления, микроциркуляция, оптическая когерентная томография с ангиографией, ОКТ, ОКТА.

Для цитирования: Азнабаев Б.М., Загидуллина А.Ш., Александров А.А. и др. Особенности микроциркуляции и морфометрии диска зрительного

нерва у больных глаукомой нормального давления //РМЖ. Клиническая офтальмология. 2017. № 1. С. 17-20.