Продукция регуляторных полипептидов при физиологическом течении беременности

ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ОСЛОЖНЕННОГО ТЕЧЕНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ

ПРОДУКЦИЯ РЕГУЛЯТОРНЫХ ПОЛИПЕПТИДОВ ПРИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОМ ТЕЧЕНИИ БЕРЕМЕННОСТИ

З.С. Крымшокалова, В.И. Орлов, А.В. Орлов, З.С. Шомахова

Федеральное государственное учреждение «Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии Федерального агентства по высокотехнологичной

медицинской помощи» ул. Мечникова, 43, Ростов-на-Дону, Россия, 344012

В результате динамического наблюдения за 54 женщинами с физиологическим течением беременности с ранних сроков и до ее окончания установлена стабильная экспрессия проангиоген-ных и антиангиогенных факторов на протяжении всей беременности. Стабилизация АД при физиологическом течении беременности, по-видимому, определяется стабильностью баланса оксида азота и эндотелина-1.

Условия существования плода в утробе матери играют важнейшую роль в устойчивости функциональных систем в более поздние периоды жизни человека.

Внутриматочное программирование физиологических систем плода, возникающее на генном, клеточном, тканевом и системном уровнях, вызывает перманентные структурные и функциональные изменения, которые могут привести к соответствующим болезням во взрослом возрасте.

Гипотеза, высказанная D.J.P. Barker (1994) о ведущей роли ЗРП (IUGR) в формировании патологии у взрослых, явилась мощным стимулом для развертывания серии работ в этой области, принесших целый ряд интересных результатов.

Эпидемиологические исследования у человека показали, что дети, родившиеся с задержкой роста, склоны к развитию гипертонической болезни, ИБС, нарушений толерантности к глюкозе, инсулинорезистентности, диабета II типа, гипер-липидемии, ожирению, обструктивных заболеваний легких и заболеваний репродуктивного тракта [4].

Как показали эти же исследования, внутриматочное программирование пост-натальных функций, связанное с изменением внутриматочной среды, материнским

Крымшокалова З.С. и др. Продукция регуляторных полипептидов при физиологическом течении...

стрессом, гипоксией, назначением глюкокортикостероидов, приводит к постна-тальным осложнениям в сердечно-сосудистой системе, эндокринном метаболизме практически у всех экспериментальных животных [4].

В экспериментальных работах на добровольцах было показано, что имплантация яйцеклетки в стенку матки осуществляется при очень низком напряжении кислорода в окружающих тканях. В участке имплантации РО2 не превышает 20 мм рт. ст. [5].

Совершенно очевидно, что без «экстренного вмешательства материнского организма» шансы плодного яйца на выживание минимальны.

Помощь оказывается по трем направлениям, каждое из которых является эксклюзивным.

1. Формирование межворсинчатого кровотока с огромной площадью ворсин хориона и уникальными возможностями для обмена газов между организмом матери и плода.

2. Беспрецедентная (по сравнению с небеременными) экспрессия регуляторных пептидов, обеспечивающих процессы ангио- и васкулогенеза с формированием маточно-фетоплацентарной сосудистой системы.

3. Морфофункциональная перестройка спиральных артерий матки с потерей способности к сокращению в результате инвазии ворсин хориона в их просвет.

Как было установлено, описанные процессы имеют место в ранние сроки беременности, и именно в эти сроки определяет прогноз и исход каждой беременности. Поскольку эти процессы клинически не манифестируются, отклонения в их реализации ничем себя не проявляют, имеется «скрытый» (субклинический) период развития осложнения, на смену которому приходит клиническая манифестация, свидетельствующая об истощении физиологических адаптационно-компенсаторных резервов и необходимости «подключений» к поддержке гомеостаза организмов матери или плода.

Целью настоящего исследования является изучение уровня регуляторных пептидов при физиологическом течении беременности, что позволит диагностировать акушерскую патологию на доклиническом уровне и провести эффективную терапию.

Материалы и методы исследования. Основу публикации составили итоги обследования 54 женщин, наблюдавшихся в рамках акушерского мониторинга, алгоритм которого предусматривал использование современных методов оценки состояния матери и плода с ранних сроков гестации до ее завершения. Группа женщин с физиологическим течением беременности и родов была сформирована по результатам ретроспективного анализа.

Определение содержания сосудисто-эндотелиального фактора роста (СЭФР, VEGF), эпидермального фактора роста (ЭФР, EGF) в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа наборами фирмы BIOSOURCE (USA).

Определение уровня эндотелина в сыворотке крови пациентов осуществляли методом иммуноферментного анализа наборами фирмы BIOMEDICA GRUPPE (Германия).

Уровень фактора роста плаценты (ФРП, PIGF) и эндоглина в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа наборами фирмы R&D

Systems (USA), инсулиноподобного фактора роста-1 (ИПФР-1, IGF-1) наборами фирмы DSL (США).

Уровень оксида азота (N0) в сыворотке крови пациентов определяли колориметрическим методом, основанным на ферментативной конверсии нитратов в нитриты нитратредуктазой, которая идет с участием оксидов азота. Определение проводили наборами фирмы R&D (США).

Содержание асимметричного диметиларгинина (АДМА) в сыворотке крови пациентов определяли методом иммуноферментного анализа наборами фирмы IMMUN DIAGNOSTIK (Европа), растворимого рецептора сосудисто-эндотели-ального фактора роста -1 (СЭФР-Р1, sVEGFR-l) и трансформирующего фактора роста бета1 (ТФР-бета1, TGFß1) наборами фирмы BENDER MEDSYSTEMS (Европа).

Статистическая обработка данных. Обработка полученных данных предусматривала последовательное выполнение нескольких этапов. Проверялось распределение исходных переменных на нормальность критерием Гири. Рассчитывались дескриптивные статистики, с помощью которой находились средние величины, стандартные ошибки, дисперсии, медианы и доверительные интервалы, а также проверялись выборочные средние у различных групп. В случае отсутствия нормального распределения достоверность различия параметров определяли с помощью критерия Вилкоксона—Манна—Уитни.

Результаты и их обсуждение. Как показали исследования А.В. Орлова (2006), З.С. Шомаховой (2008), уровень ангиогенных факторов роста при наступлении беременности возрастает в связи с необходимостью формирования морфо-функциональной системы «мать—плацента—плод» с постоянно растущей метаболической потребностью, меняющейся в очень короткие отрезки времени.

Данные, представленные в табл. 1, свидетельствуют о том, что содержание сосудисто-эндотелиального фактора роста на протяжении I и II триместров беременности остается стабильным и повышается в III триместре, играя важнейшую роль в процессах ангиогенеза, плацентации и сосудистой проницаемости.

Фактор роста плаценты, играющий важнейшую роль в развитии и становлении фето-плацентарного кровоснабжения, увеличивается в своем содержании по мере прогрессирования беременности почти в 3,5 раза (152 пг/мл в I триместре и 564 пг/мл в III триместре).

Экспрессия трансформирующего фактора роста — ßj, стимулятора ангио-генеза, носит иной характер: после успешной нидации плодного яйца и плаценты его уровень снижается с 63,6 до 36,8 нг/мл.

Эндоглин совместно с soluble fms-like tyrosine kinase-1 (СЭФР-Р1) обладает выраженным антиангиогенным действием. Уровень эндоглина на протяжении всей беременности остается стабильным.

Инсулиноподобный фактор роста, обеспечивающий пролиферацию и диф-ференцировку клеток эмбриона и плаценты, оказывает прямое влияние на рост плаценты и массу плода при физиологическом течении беременности. На всем протяжении беременности ИПФР-1 не претерпевает существенных конформа-ционных изменений.

Крымшокалова З.С. и др. Продукция регуляторных полипептидов при физиологическом течении...

Таблица 1

Содержание регуляторных полипептидов при физиологическом течении беременности

I триместр

Показатель ^-1, нг/мл Endot, фмоль/мл ADMA, мкмоль/л PIGF, пг/мл Endoglin, нг/мл sVEGFR-l, нг/мл ЭФР, пг/мл VEGF, пг/мл TGFp1, нг/мл N3, мкмоль/л

Медиана 112,1 1,4 0,7 152,0 8,7 0,3 542,4 14,8 63,6 13,7

1-й квартиль 107,1 1,0 0,5 116,1 7,0 0,2 508,7 11,4 55,8 11,3

3-й квартиль 124,3 1,6 1,1 163,3 9,1 0,5 575,7 19,8 78,9 14,3

II триместр

Показатель ^-1 Endot ADMA PIGF Endoglin sVEGFR-l EGF VEGF TGFp1 N0

Медиана 113,8 1,3 0,5 156,7 7,7 0,3 351,5 17,3 52,7 13,5

1-й квартиль 77,3 1,2 0,4 101,5 6,9 0,2 249,5 13,3 45,8 11,5

3-й квартиль 136,7 1,9 0,8 184,1 9,3 0,5 525,7 28,9 54,9 14,8

III триместр

Показатель ^-1 Endot ADMA PIGF Endoglin sVEGFR-l EGF VEGF TGFp1 N0

Медиана 153,5 1,3 0,7 564,0 7,4 0,3 467,4 26,3 36,8 14,6

1-й квартиль 123,9 0,8 0,4 506,1 6,8 0,2 294,3 18,6 29,2 13,2

3-й квартиль 192,0 1,6 0,8 710,4 9,1 0,6 573,5 35,0 45,2 17,1

Эпидермальный фактор роста, являясь наиболее мощным стимулятором клеточной пролиферации и дифференцировки и играя ключевую роль в плацен-тации (Г.Е. Чернуха и соавт., 2006), накапливается в крови беременных наиболее значимо в ранние сроки (542 пг/мл), постепенно снижаясь к концу беременности (467,4 пг/мл).

Таким образом, при физиологическом течении беременности формирование сосудистых компонентов функциональной системы «мать—плацента—плод» происходит под влиянием целой группы регуляторных пептидов, уровень которых в сыворотке крови беременных значительно выше по сравнению с небеременными женщинами.

Следует особо подчеркнуть, что их уровень достаточно стабилен, имеет тенденцию к снижению либо к повышению к концу беременности в зависимости от биологических свойств пептидов.

Имеется целая группа регуляторных пептидов, которые, в противовес рассмотренным выше, вызывают противоположный эффект — антиангиогенный. Один из них — растворимый рецептор СЭФР. Как показали наши исследования, его уровень при физиологическом течении беременности стабильно удерживается на одних и тех же показателях (0,3 нг/мл) на протяжении всей беременности.

К этой же группе относится и АДМА — асимметричный диметиларгинин, уровень которого на протяжении беременности также стабильно удерживается в одних и тех же пределах.

Как показали исследования последних лет, важную роль в определении течения беременности играют эндотелиальные факторы — целый ряд биологически активных веществ, обладающих мощным действием на сосудистый тонус. Наибольший интерес из них представляет оксид азота и эндотелин-1, соотношение которых определяет уровень периферического сопротивления в АД.

Как видно из представленных в таблице данных, уровень обеих пептидов при физиологическом течении не изменяется, что, по-видимому, и определяет поддержание стабильного АД при физиологическом течении беременности.

Выводы.

1. При физиологическом течении беременности важную роль в формировании сосудистого компонента функциональной системы «мать—плацента—плод» играют проангиогенные факторы роста (СЭФР, ФРП, ТФР-ß!, ЭФР), экспрессия которых (по сравнению с небеременными женщинами) начинается в ранние сроки беременности и поддерживается на определенном уровне на всем протяжении беременности.

2. Физиологическая роль ангиогенных факторов роста, по-видимому, связана с механизмом регуляции интенсивности ангио- и васкулогенеза, поскольку уровень их содержания на протяжении беременности стабилен, как и содержание проангиогенных факторов.

3. Стабильность уровня АД на протяжении физиологически протекающей беременности определяется исключительной стабильностью баланса оксида азота как вазодилататора и эндотелина -1 как вазоконстриктора.

ЛИТЕРАТУРА

[1] Орлов А.В. Скриниговые маркеры физиологической и осложненной беременности: Ав-тореф. докт. дисс... — Ростов-на-Дону, 2006. — 48 с.

[2] Шомахова З.С. Патогенетические аспекты гестоза беременных: Автореф. канд. дисс... — Ростов-на-Дону, 2008. — 19 с.

[3] Barker D.J.P. Mothers, babies and disease in later life / B.M.J. Publishing Group. — London, 1994.

[4] Fowden A.L., Jinssani D.A., Forhead A.J. Endocrine and metabolic programming during intrauterine development / Early Hum. Dev. — 2005. — N. 81. — Р. 723—734.

[5] Charnock-Jones D.S., Kanfmann P., Mayhew T.M. Aspects of human fetoplacental vasculo-genesis and angiogenesis. A molecular regulation / Placenta. — 2004. — V. 25. — N. 2—3. — P. 103—113.

PRODUCTION OF REGULATIVE POLYPEPTIDES AT A PHYSIOLOGICAL CURRENT OF PREGNANCY

Z.S. Krimshokalova, V.I. Orlov, A.V. Orlov, Z.S. Shomahova

Rostov-on-Don Scientific Researched Institute of Obstetrics and Pediatries

Mechnikova str., 43, Rostov-on-Don, Russia, 344012

As a result of dynamic supervision over 54 women with a physiological current of pregnancy, from early terms and before its termination we saw the stable expression of proangiogenic and antian-giogenic factors throughout all pregnancy is established. Stabilization of the arterial pressure during the physiological currency of pregnancy, apparently, is defined by stability of nitrogen oxide and endotelin-1 balance.