ИНТЕРНАЛИЗАЦИЯ

1. Способ выделения молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей партнера по связыванию комплекса, интернализованного в клетку, включающий следующие стадии:
(а) приведение клетки в контакт со смешанной группой бактериофаговых частиц, где каждая или по существу все из указанных бактериофаговых частиц экспонируют партнера по связыванию на своей поверхности, где указанный партнер по связыванию экспонирован в виде неслитого (поли)пептида с фаговым оболочечным белком указанной бактериофаговой частицы, и где каждая или по существу все из указанных бактериофаговых частиц содержат молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую данный экспонированный партнер по связыванию,
(б) обеспечение связывания партнера по связыванию, экспонированного на бактериофаговой частице, с его мишенью, с обеспечением посредством этого образования по меньшей мере одного комплекса, причем каждый из указанных комплексов содержит бактериофаговую частицу с экспонированным на ней партнером по связыванию и его мишенью,
(в) культивирование данной клетки в условиях, которые обеспечивают интернализацию по меньшей мере одного из указанных комплексов в клетку,
(г) элюирование молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих партнера по связыванию, которые не интернализуются, в условиях, при которых не происходит по существу никакого лизиса клетки,
(д) лизирование клетки, содержащей интернализованные комплексы, и
(е) выделение из лизированной клетки молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей партнера по связыванию, происходящего из по меньшей мере одного из интернализованных комплексов.
2. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию определения последовательности мишени интернализованного комплекса.
3. Способ по п.1, где указанный экспонированный партнер в виде неслитого (поли)пептида характеризуется непептидной связью между фаговым оболочечным белком и партнером по связыванию.
4. Способ по п.3, где указанная непептидная связь представляет собой дисульфидную связь.
5. Способ по п.4, где указанная дисульфидная связь образуется между первым остатком цистеина, содержащимся в указанном фаговом оболочечном белке, и вторым остатком цистеина, содержащимся в указанном партнере по связыванию.
6. Способ по п.4 или 5, где указанную стадию элюирования указанных молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих партнера по связыванию, которые не интернализуются, проводят в восстановительных условиях, так что указанная дисульфидная связь расщепляется.
7. Способ по любому из пп.1-5, где указанное выделение из лизированной клетки указанной молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей партнера по связыванию, осуществляют посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР).
8. Способ по п.2, где указанную стадию определения последовательности мишени в интернализованном комплексе осуществляют посредством масс-спектрометрии.
9. Мишень и/или партнер по связыванию, получаемые способом по любому из пп.1-8.
10. Способ доставки токсичного вещества в клетку, включающий стадии:
(а) получения (поли)пептида, кодируемого выделенной молекулой нуклеиновой кислоты, охарактеризованной в п.1,
(б) объединения указанного токсичного вещества с указанным (поли)пептидом, кодируемым выделенной нуклеиновой кислотой, охарактеризованной в п.1, и
(в) введения в клетку токсичного вещества, полученного на стадии (б), запуская посредством этого интернализацию указанного токсичного вещества в данную клетку.