Перспективы создания нового поколения средств химиопрофилактики рака

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

99

снижения гематологической токсичности оценивали по показателям периферической крови. Статистическую обработку данных проводили с использованием непараметрических критериев Вилкоксона—Манна—Уитни (U) и углового преобразования Фишера (ф).

Результаты. При добавлении в схему полихимиотерапии «цисплатин + этопозид» полисахаридов Tussilago farfara L. значимо снижалась масса опухоли, торможение роста опухоли составило 36 % против 25 % в группе животных, получавших только цитостатики. На 1-е сутки после 2-кратного введения цитостатиков у животных, получавших дополнительно полисахариды, установлено увеличение количества тромбоцитов, эритроцитов и показателя гемоглобина по сравнению с этими значениями в группе полихимиотерапии. Если 2-кратное введение противоопухолевых препаратов достоверно не влияло на количество гранулоцитов в периферической крови животных, то добавление в схему лечения полисахаридов приводило к увеличению этого показателя до уровня контроля. На 1-е сутки после 3-кратного введения цитостатиков под влиянием полисахаридов зафиксировано увеличение общего количества лейкоцитов, количества тромбоцитов, эритроцитов, лимфоцитов и гранулоцитов и показателя гемоглобина относительно этих значений в группе животных, получавших только полихимиотерапию.

Заключение. Проведенные эксперименты доказывают целесообразность включения полисахаридов Tussilago farfara L. в схему цитостатического лечения «цисплатин + это-позид» в целях повышения ее эффективности и снижения гематологической токсичности.

А.В. Семейкин1, Е.Н. Карева1, Т.А. Федотчева1, А.С. Лунина1, В.М. Ржезников2, Н.Л. Шимановский1 АНТИПРОЛИФЕРАТИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРОГЕСТИНА БУТЕРОЛА НА КЛЕТКИ ОПУХОЛИ ШЕЙКИ МАТКИ HELA 1ГБОУ ВПО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва; 2ФГБУ ЭНЦМинздрава России, Москва

Введение. Прогестины широко применяют для терапии рака эндометрия (медроксипрогестерон, мегестрол) и профилактики гормонозависимых гиперплазий тканей репродуктивного тракта женщины (медроксипрогесторон, прогестерон). Известные механизмы их действия включают подавление экспрессии эстрогеновых рецепторов (преимущественно типа а) в ткани-мишени. Недостаточная эффективность делает актуальным расширение спектра существующих препаратов этого класса.

Цель исследования — изучить влияние нового отечественного лиганда рецепторов прогестерона, 17а-ацетокси-3р-бутаноилокси-6-метил-прегна-4,6-диен-20-она (бутерола) и препаратов сравнения — прогестерона (Р4) и медрокси-прогестерона ацетата (МПА) на жизнеспособность клеток рака шейки матки HeLa и экспрессию в них гена эстроге-нового рецептора типа а (ERa).

Материалы и методы. Исследуемые соединения вносили в лунки плоскодонного 96-луночного планшета (Costar) с культурой HeLa до конечных концентраций 10-7—10-5 М при сроке инкубации 7 сут. Пролиферацию клеток культу-

ры оценивали при помощи МТТ-теста на планшетном фотометре «Униплан» («Пикон», Россия). Экспрессию мРНК ERa в клетках после инкубации в течение 7 сут оценивали методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием амплификатора фирмы BioRad (США). Данные обрабатывали с использованием программ Microsoft Office Excel 2007 и GraphPad Prizm 5.0.

Результаты. Максимальное подавление пролиферации клеток культуры HeLa наблюдалось в присутствии бутерола (38,5—52,1 %). Бутерол достоверно (в среднем на 15,0— 26,1 %) превосходил по антипролиферативной активности Р4 и МПА во всех концентрациях (p < 0,05). Суммируя данные по действию соединений во всех изученных концентрациях (10-7-10-5 М), был построен ряд исследуемых веществ по убыванию антипролиферативной активности: бутерол > Р4 = МПА. Все соединения в концентрации 10-6 М вызывали снижение экспрессии гена ERa в клетках HeLa на 83,4—98,6 % (р = 0,05). Бутерол вызывал весьма значительное подавление экспрессии гена ЕRa (в среднем на 83,4 % относительно контроля), однако оно было достоверно меньше (в среднем на 10,3 %), чем аналогичный показатель для препаратов сравнения (МПА — на 94,1 %, Р4 — на 93,3 %), что указывает на возможность опосредования его цитостатического эффекта также влиянием на другие факторы роста и апоптоза.

Заключение. Отечественный прогестин бутерол превосходит прогестерон и МПА по антипролиферативной активности на клетках рака шейки матки человека и является перспективным соединением для дальнейшего изучения с целью получения нового эффективного препарата для гормонотерапии гиперпластических процессов тканей-мишеней репродуктивного тракта женщины.

A.В. Сергеев1, Ю.М. Букреев1, И.М. Лученко1,

B.В. Решетникова1, Н.Ю. Соколов2, И.Ж. Шубина1 ПЕРСПЕКТИВЫ СОЗДАНИЯ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ СРЕДСТВ ХИМИОПРОФИЛАКТИКИ РАКА

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; 2ФГУ«ГВКГим. Н.Н. Бурденко» Минобороны России, Москва

Введение. Предупреждение возникновения злокачественных новообразований является приоритетным направлением онкологии, и разработке средств химиопро-филактики рака (ХПР) уделяют все больше внимания. Полиеновые соединения (ПС) — ретиноиды, каротиноиды, убихинон и др. — обладают антиканцерогенными, антимутагенными и другими свойствами, которые позволяют рассматривать их в качестве потенциальных средств ХПР.

Цель исследования — изучение возможности создания средств ХПР на основе ПС, растительных экстрактов и микроэлементов.

Материалы и методы. Использованы ранее разработанные нами препараты: Каскатол (КС), Каскорутол, Коэн-зим Q-10 плюс (КК) и др. Экстракты шиповника, эхинацеи и других растений получены по специальной технологии. Использованы органические соединения Мg, Zn и других элементов. Иммунологические методы оценки гуморального и клеточного иммунитета описаны нами ранее.

Результаты. Разработаны новые препараты Биоэнер-готоник 01-03 (БЭ-1) и БЭ 01-05 (БЭ-2) на основе экс-

№1 I том 15 I 2016

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

100

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

трактов шиповника, эхинацеи, аргината Mg, Zn и других микроэлементов. Разработаны лекарственная форма препаратов в твердых желатиновых капсулах, методы стандартизации и контроля качества, подготовлена и утверждена нормативно-техническая документация, осуществлен опытно-промышленный выпуск. В сравнительных исследованиях по имму-нофармакологии БЭ-1 и БЭ-2 были на 30—40 % менее эффективны в стимуляции гуморального и клеточного иммунитета по сравнению с КС и КК. Систематическое ежедневное введение мышам BALB/c комбинации препаратов БЭ + КС или БЭ + КК было на 40-50 % более эффективно, чем использование только КС или КК. Комбинированное применение БЭ и КС эффективно снижало иммунодепрессию, индуцированную цитостатиком аранозой.

Заключение. Разработанные БЭ можно рассматривать в качестве перспективных потенциальных средств ХПР и рекомендовать их в комбинированном использовании с препаратами КС, КК и другими ПС.

Си Джан1, Е.В. Санарова2, М.В. Дмитриева2, А. П. Полозкова2, Н.А. Оборотова1,2, А.В. Ланцова2, О.Л. Орлова2, З.С. Шпрах2 РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ НОВОГО АНАЛОГА ГИПОТАЛАМИЧЕСКОГО ГОРМОНА СОМАТОСТАТИНА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России, Москва;

2ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

Введение. В лаборатории разработки лекарственных форм РОНЦ им. Н.Н. Блохина разработана модель липо-сомальной лекарственной формы (ЛЛФ) нового отечественного аналога гипоталамического гормона соматостатина (АГГС). Доказана эффективность данной ЛЛФ на перевиваемой опухоли мышей - аденокарциноме молочной железы Са-755: торможение роста опухоли при дозе 5 мг/кг составило более 60 %, при дозе 20 мг/кг — более 80 %, что указывает на перспективность дальнейших исследований модели ЛЛФ АГГС с целью получения высокоэффективного противоопухолевого препарата из группы аналогов соматостатина.

Цель исследования — разработка методики спектрофо-тометрического количественного определения содержания АГГС в ЛЛФ.

Материалы и методы. АГГС (РОНЦ им. Н.Н. Блохина); яичный фосфатидилхолин E PC S (Lipoid, Германия); холестерин (Sigma, Япония); PEG-2000-DSPE (Lipoid, Германия); сахароза («Химмед», Россия); спирт этиловый 95 % (ЗАО «Брынцалов-А» — «Ферейн», Россия). Спектрофото-метрия в ультрафиолетовом спектре.

Результаты. Содержание АГГС в ЛЛФ определяли в интенсивном максимуме поглощения при длине волны 282 ± 3 нм. Установлено, что интенсивность поглощения спиртовых растворов ЛЛФ препарата в данном максимуме подчиняется закону Бугера — Ламберта — Бера в диапазоне концентраций от 0,02 до 0,2 мг/мл в пересчете на АГГС. Максимумы поглощения в растворах субстанции и лекарственной формы совпадают. При оценке влияния вспомогательных

веществ ЛЛФ на спектральные характеристики действующего вещества обнаружено, что сахароза не поглощает в области 250—350 нм, в то время как компоненты липосо-мального бислоя (фосфатидилхолин, холестерин, РЕв-2000-Б8РЕ) в данной области имеют собственное значительное поглощение. Это обстоятельство следует учитывать при анализе, используя в качестве раствора сравнения раствор вспомогательных веществ с соответствующей концентрацией. Относительная ошибка определения АГГС в ЛЛФ не превышает 2,0 %, что указывает на высокую точность анализа с использованием разработанной методики.

Заключение. Разработанная методика может быть использована для количественного определения АГГС в ЛЛФ.

Л.Ю. Скляров, И.В. Назимов, Р.Х. Зиганшин, Н.Ю. Половков СИНТЕЗ МУЛЬТИФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ

ФГБУН «ИБХ им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН», Москва; ИНХС РАН, Москва

Введение. Природным кором (центральная часть разветвленной, дендримерной молекулы) белков и пептидов можно считать гетероциклические и ароматические соединения — порфирины, корины, пиридины, фенолы и ряд других конденсированных соединений, осуществляющих жизненно важные функции.

Цель исследования. Кором для синтеза мультиплетных пептидов послужили полифункциональные производные аминокислот и гетероциклы, полученные на основе реакции. Необычные физико-химические свойства образующихся полифункциональных гетероциклов — сильная флуоресценция и высокая реакционная способность боковых групп — были использованы как для синтеза порфира-зинов и их дендримеров, так и для разработки аналитических методов.

Материалы и методы. В качестве исходных соединений для синтеза порфиразинов и их дендримеров использованы 3-амино-, 3-гидроксипиридины и 6-пептидилпиридины.

Результаты. Широкий спектр флуоресценции мультиплетных производных порфиразина (400—900 нм) позволил наблюдать связывание этих соединений с раковыми клеточными линиями методом проточной цитофлуориметрии. Показана возможность связывания полученных соединений с ионами щелочноземельных, тяжелых, платиновых металлов и способностью образовывать суспензию нано-частиц с узким распределением по размерам.

Заключение. Относительно высокая реакционная способность нитрильных групп в получаемых гетероциклах позволяет рассматривать их как перспективные би- и полифункциональные флуоресцентные реагенты в синтезе аналогов противораковых препаратов, содержащих амин-ные и сульфгидрильные группы.

Е.Г. Славина, А.И. Черткова, М.Е. Абрамов, З.Г. Кадагидзе РЕФНОТ - НОВЫЙ ИММУНОМОДУЛЯТОР В ОНКОЛОГИИ

ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

Введение. Новый отечественный иммуномодулятор Рефнот является гибридной молекулой двух биологически

№1 / том 15 / 2016

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ