ГЕНЫ, КОДИРУЮЩИЕ ГЛАВНЫЙ КАПСИДНЫЙ БЕЛОК L1 ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Выделенный ген, кодирующий главный капсидный белок L1 вируса папилломы человека, отличающийся тем, что он содержит кодоны, предпочтительные для дрожжей Pichia.
2. Ген по п.1, отличающийся тем, что он кодирует главный капсидный белок L1 вируса папилломы человека, имеющий цепочку аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 10 или в положениях от 62 до 568 SEQ ID NO: 10.
3. Ген по п.2, отличающийся тем, что он содержит последовательность нуклеотидов, выбранную из представленных в SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3.
4. Ген по п.2, отличающийся тем, что он содержит последовательность нуклеотидов, выбранную из представленных в SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6.
5. Ген по п.1, отличающийся тем, что он кодирует главный капсидный белок L1 вируса папилломы человека, имеющий цепочку аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 11.
6. Ген по п.5, отличающийся тем, что он содержит последовательность нуклеотидов, выбранную из представленных в SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8 и SEQ ID NO: 9.
7. Вектор экспрессии, отличающийся тем, что он включает последовательность гена по любому из пп.1-6.
8. Полученная методом генной инженерии клетка-хозяин, отличающаяся тем, что она содержит вектор экспрессии по п.7 или содержит ген по любому из пп.1-6, включенный в ее геном.
9. Клетка-хозяин по п.8, отличающаяся тем, что она представляет собой клетку дрожжей Pichia.
10. Иммуногенная макромолекула, отличающаяся тем, что она имеет диаметр от 50 до 80 нм и преимущественно получена в результате самосборки из главных капсидных белков L1 вируса папилломы человека, причем указанные главные капсидные белки L1 вируса папилломы человека экспрессированы в дрожжах Pichia.
11. Иммуногенная макромолекула по п.10, отличающаяся тем, что она получается следующим способом:
(1) культивирование клетки-хозяина по п.9, позволяющее экспрессию указанного главного капсидного белка L1 вируса папилломы человека и его самбосорку в указанную иммуногенную макромолекулу в клетке-хозяине;
(2) отделение указанной иммуногенной макромолекулы.
12. Способ получения иммуногенной макромолекулы по п.10, отличающийся тем, что он включает в себя:
(1) культивирование клетки-хозяина по п.9, позволяющее экспрессию указанного главного капсидного белка L1 вируса папилломы человека и его самбосорку в указанную иммуногенную макромолекулу в клетке-хозяине;
(2) отделение указанной иммуногенной макромолекулы.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что указанная стадия отделения (2) включает:
(a) разрушение клеток-хозяев, полученных на стадии (1), с получением супернатанта, содержащего указанную иммуногенную макромолекулу; и
(b) последовательную очистку супернатанта, полученного на стадии (а), методом колоночной хроматографии на колонке с POROS 50 HS и методом колоночной хроматографии на СНТ с образованием указанных иммуногенных макромолекул.
14. Способ по п.13, отличающийся тем, что на указанной стадии очистки (b), при очистке методом колоночной хроматографии, супернатант, полученный на стадии (а), вводят в колонку с POROS 50 HS, предварительно очищенную и приведенную в равновесие, при этом указанная иммуногенная макромолекула связывается с колонкой, после промывки и приведения к равновесию колонку элюируют линейным градиентом от 100% буфера А до 100% буфера В, собирая хроматографические пики в интервале 70-100 мСм/см, при этом указанный буфер А содержит 50±20 мМ MOPS, 0,75±0,3 M NaCl и 0,05±0,02% Твин-80, рН 6,5±1, и указанный буфер В содержит 50±20 мМ MOPS, 1,5М NaCl и 0,05±0,02% Твин-80, рН 6,5±1; или
продукт, очищенный колоночной хроматографией на колонке с POROS 50 HS, вводят в колонку с СНТ, предварительно очищенную и приведенную в равновесие, после промывки и приведения к равновесию, колонку элюируют линейным градиентом от буфера С до 100% буфера D, собирая хроматографические пики в интервале 50-70 мСм/см, при этом указанный буфер С содержит 50±20 мМ MOPS, 0,5±0,2 М NaCl, 0,04±0,02 М РВ и 0,05±0,02% Твин-80, рН 6,5±1, а указанный буфер D содержит 0,5±0,2 М NaCl, 200 мМ РВ и 0,05±0,02% Твин-80, рН 6,5±1.
15. Иммуногенная композиция, отличающаяся тем, что она содержит:
(i) эффективное количество иммуногенной макромолекулы по п.10; и
(ii) фармацевтически приемлемый носитель.
16. Применение иммуногенной макромолекулы по п.10 для профилактики или лечения заболеваний, связанных с инфицированием вирусом папилломы человека.
17. Способ профилактики или лечения заболеваний, связанных с инфицированием вирусом папилломы человека, отличающийся тем, что он включает введение эффективного количества иммуногенной макромолекулы по п.10 или иммуногенной композиции по п.15 в организм субъекта, нуждающегося в профилактике или лечении.