МАЛЫЕ МОЛЕКУЛЫ-ИНГИБИТОРЫ ПРОНИКНОВЕНИЯ
SMALL PENETRATION INHIBITING MOLECULES

Данное изобретение имеет отношение к малым молекулам, таким как ингибиторы проникновения вирусов, таких как HIV (ВИЧ), способам их получения, а также к фармацевтическим композициям, к их применению в виде лекарственных средств и к диагностическим наборам, содержащим их. Данное изобретение также относится к комбинациям названных ингибиторов проникновения с антиретровирусными средствами. Кроме того, изобретение относится к их применению в исследованиях в виде стандартных соединений или реагентов. Соединения согласно изобретению используют для предупреждения или лечения инфекционного заболевания, вызванного ВИЧ, и для лечения СПИДа.
Число людей, страдающих ВИЧ/СПИДом, на декабрь 2001 года составляло приблизительно 40 миллионов, из которых более 37 миллионов взрослых и приблизительно 2,7 миллионов детей в возрасте до 15 лет. Число людей, вновь инфицированных ВИЧ, только в 2001 выросло на 5 миллионов, тогда как в 2001 году имело место 3 миллиона смертей от СПИДа. В соответствующей химиотерапии для упомянутых людей, инфицированных ВИЧ/СПИДом, используют ингибиторы вирусной обратной транскриптазы (RT) и протеаз. Ввиду появления штаммов ВИЧ, резистентных к современному поколению ингибиторов RT и протеаз, существует возрастающая потребность в разработке новых противовирусных средств с новыми механизмами действия.
Одной из новых областей появляющихся противоретровирусных средств является область ”ингибиторов проникновения”. Упомянутые лекарственные средства создают, чтобы блокировать ВИЧ при проникновении в клетки человека посредством вмешательства в различные фазы прикрепления и слияния ВИЧ и клетки. Способ проникновения можно разделить на три последовательные отдельные стадии: (1) связывание белка вирусной оболочки gp120 с рецептором CD4 на клетке хозяина, (2) связывание белка вирусной оболочки gp120 с корецепторами (CXCR4/CCR5) на клетке хозяина и (3) слияние мембран клеток вируса и хозяина, опосредованное белком оболочки вируса gp41.
В настоящее время некоторые (ко)рецепторные ингибиторы и два ингибитора слияния, пептиды Т20 и Т1249, на основе элементов gp41 (Trimeris, Durham, NC, USA), проходят конечные стадии клинической разработки. Успешные исследования, “доказательство в принципе”, проводимые с Т20, показали, что слияние ВИЧ является обоснованной, клинически соответствующей мишенью.
Однако применение пептидов имеет много недостатков, если их используют для разработки в виде фармацевтически подходящих лекарственных средств. Поэтому существует потребность в создании малых молекул, которые могут блокировать ВИЧ при вхождении в клетку человека посредством вмешательства в различные фазы прикрепления и слияния ВИЧ и клетки.
WO 0004903 имеет отношение к способу ингибирования инфекции ВИЧ-1, включающему в себя введение пациенту определенных производных тетразола, которые имеют молекулярную массу между 200 и 650 дальтон и которые ингибируют связывание gp120 с CD4.
В патенте FR 1557887 описаны диамид-дикислоты и производные, полимеры для пленок и гибких покрытий. Пономарев и др. в 1992 описали синтез, структуру и свойства полихиназолонов ступенчатого типа. WO 0164643 относится к бензамидам и родственным ингибиторам фактора ХА для [лечения] нарушений свертывания.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Показано, что соединения согласно изобретению являются ингибиторами процесса проникновения вируса ВИЧ в клетку хозяина. Названные соединения формулы (I),
их N-оксидные формы, их стереохимические изомеры, рацемические смеси, соли, пролекарства, сложные эфиры и метаболиты, в которых
А представляет собой арил, гетероарил или гетероциклоалкил;
1
R представляет собой водород, галоген, гидрокси, амино, нитро, алкил, алкилокси или радикал формулы (II),
2
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
4
8
4
8
8
4
8
4
8
8
8
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
R представляет собой алкил, алкенил, алкинил, гидрокси, галоген, нитро, циано, амино, галогеналкил, циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, R-O-, R-S-, R-S(=O)-, R-C(=O)-, R-C(=S)-, R-C(=NH)-, R-C(=NCN)-, R-NH-, (R)-N-, HO-C(=O)-, NH-C(=O)-, NH-S(=O)-, NH-С(=S)-, NH-C(=NH)-, NH-C(=NCN)-, R-NR-C(=O)-, R-NR-S(=O)-, R-O-C(=O)-, R-C(=O)-NR-, R-S(=O)-NR-, R-C(=O)-O-, R-S-CH- или R-O-CH-C(=O)-;
3
R представляет собой гидрокси, амино, алкилокси, циклоалкилокси или моно- или дизамещенный амино, для которого заместители можно выбрать из алкила или циклоалкила;
4
R представляет собой водород, алкил или циклоалкил;
6
7
8
8
8
8
8
8
8
8
7
8
8
8
8
8
8
8
8
2
2
2
2
R представляет собой водород, амино, R-C(=O)-, R-S(=O)-NH-, R-C(=O)-NH-, R-C(=S)-NH-, R-C(=NH)-NH-, R-C(=NCN)-NH-, R-O-C(=O)-NH-, R-O-алкандиил-С-(=О)-NH-, R-алкандиил-S(=O)NH-, арил-алкандиил-С(=О)-NH-, арил-алкендиил-С(=О)-NH-, гетероарил-алкандиил-С(=О)-NH-, циклоалкил-алкандиил-С(=О)-NH-, гетероциклоалкил-алкандиил-С(=О)-NH- или замещенный алкил, для которого заместители можно выбрать из амино, R-C(=O)-, R-S(=O)-NH-, R-C(=O)-NH-, R-C(=S)-NH-, R-C(=NH)-NH-, R-C(=NCN)-NH-, R-O-C(=O)-NH-, R-O-алкандиил-С(=О)-NH-, R-алкандиил-S(=О)-NH-, арил-алкандиил-С(=О)-NH-, гетероарил-алкандиил-С(=О)-NH-, циклоалкил-алкандиил-С(=О)-NH- и гетероциклоалкил-алкандиил- С(=О)-NH-;
7
R представляет собой гидрокси, амино, алкокси, циклоалкокси, или моно-, или дизамещенный амино, для которого заместители можно выбрать из алкила или циклоалкила;
8
R представляет собой алкил, галогеналкил, циклоалкил, арил, гетероарил или гетероциклоалкил;
2
2
2
p
Y представляет собой алкандиил, -C(=O)-, -C(=S)-, -C(=NH)-, -C(=NCN)-, -S(=O)-, -S(=O)-, -C(=O)-CH-O-, -C(=O)-O-, -C(=O)-(CH)-, -C(=O)-NH- или алкендиил-С(=О)-;
2
2
Х означает прямую связь, -О-, -S-, -S(=O)-, -O-S(=O)-,
2
2
2
-S(=O)-O-, -NH-S(=O)-, -S(=O)-NH-, -C(=O)-, -C(=S)-, -C(=NH)-, -C(=NCN)-, -O-C(=O)-, -C(=O)-O-, -NH-C(=O)-, -C(=O)-NH- или алкандиил;
m и n каждый независимо означает нуль, единицу или два;
р равно целому числу от 1 до 4.
Кроме того, соединения согласно изобретению заключают в себе формулу (III),
их N-оксидные формы, их стереохимические изомеры, рацемические смеси, соли, пролекарства, сложные эфиры и метаболиты, в которых
1
R представляет собой водород, галоген или радикал формулы (II),
2
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
4
8
4
8
8
4
8
4
8
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
R представляет собой алкил, алкенил, алкинил, гидрокси, галоген, нитро, циано, амино, галогеналкил, циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, R-O-, R-S-, R-S(=O)-, R-C(=O)-, R-C(=S)-, R-C(=NH)-, R-C(=NCN)-, R-NH-, (R)-N-, HO-C(=O)-, NH-C(=O)-, NH-S(=O)-, NH-C(=S)-, NH-C(=NH)-, NH-C(=NCN)-, R-NR-C(=O)-, R-NR-S(=O)-, R-O-C(=O)-, R-C(=O)-NR-, R-S(=O)-NR- или R-C(=O)-O-;
3
R представляет собой гидрокси, амино, алкилокси, циклоалкилокси, или моно-, или дизамещенный амино, для которого заместители можно выбрать из алкила и циклоалкила;
4
R представляет собой водород, алкил или циклоалкил;
6
7
8
8
8
8
8
8
8
2
R представляет собой водород, амино, R-C(=O)-, R-S(=O)-NH-, R-C(=O)-NH-, R-C(=S)-NH-, R-C(=NH)-NH-, R-C(=NCH)-NH-, R-O-C(=O)-NH-, R-O-алкандиил-С-(=О)-NH-,
8
7
8
8
8
8
8
8
8
8
2
2
2
R-алкандиил-S(=O)-NН-, арил-алкандиил-С(=О)-NH-, гетероарил-алкандиил-С(=О)-NH-, циклоалкил-алкандиил-С(=О)-NH-, гетероциклоалкил-алкандиил-С(=О)-NH- или замещенный алкил, для которого заместители можно выбрать из амино, R-C(=O)-, R-S(=O)-NH-, R-C(=O)-NH-, R-C(=S)-NH-, R-C(=NH)-NH-, R-C(=NCN)-NH-, R-O-C(=O)-NH-, R-O-алкандиил-С(=О)-NH-, R-алкандиил-S(=О)-NH-, арил-алкандиил-С(=О)-NH-, гетероарил-алкандиил-С(=О)-NH-, циклоалкил-алкандиил-С(=О)-NH- и гетероциклоалкил-алкандиил-С(=О)-NH-;
7
R представляет собой гидрокси, амино, алкилокси, циклоалкилокси, или моно-, или дизамещенный амино, для которого заместители выбирают из алкила или циклоалкила;
8
R представляет собой алкил, циклоалкил, арил, гетероарил или гетероциклоалкил;
2
2
2
p
Y представляет собой алкандиил, -C(=O)-, -C(=S)-, -C(=NH)-, -C(=NCN)-, -S(=O)-, -S(=O)-, -C(=O)-CH-O-, -C(=O)-O-, -C(=O)-(CH)-;
2
2
Х означает прямую связь, -О-, -S-, -S(=O)-, -O-S(=O)-,
2
2
2
-S(=O)-O-, -NH-S(=O)-, -S(=O)-NH-, -C(=O)-, -C(=S)-, -C(=NH)-, -C(=NCN)-, -O-C(=O)-, -C(=O)-O-, -NH-C(=O)-, -C(=O)-NH- или алкандиил;
m и n каждый независимо означает нуль, единицу или два;
р равно целому числу от 1 до 4.
Данное изобретение имеет отношение к кватернизации атомов азота описываемых соединений. Основной азот может быть кватернизирован любым агентом, известным специалистам в данной области, включая, например, низшие алкилгалогениды, диалкилсульфаты, галогениды с длинной цепью и арилалкилгалогениды.
Используемый в описании термин “галоид” или “ галоген”, как группа или часть группы, является общим для фтора, хлора, брома или иода.
Термин “алкил”, один или в комбинации, означает насыщенные углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, содержащие от 1 до 10 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 8 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до 6 атомов углерода и даже еще более предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода. Примеры таких алкильных радикалов включают в себя метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, 2-метилбутил, пентил, изоамил, гексил, 3-метилпентил, октил и тому подобные.
Термин “алкандиил”, один или в комбинации, означает бивалентные насыщенные углеводородные радикалы с прямой и разветвленной цепью, содержащие от 1 до 10 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 8 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до 6 атомов углерода и еще более предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода, например, такие как метилен, этан-1,2-диил, пропан-1,3-диил, пропан-1,2-диил, бутан-1,4-диил, пентан-1,5-диил, гексан-1,6-диил, 2-метилбутан-1,4-диил, 3-метилпентан-1,5-диил и тому подобные.
Термин алкендиил, один или в комбинации, означает бивалентные углеводородные радикалы с прямой и разветвленной цепью, содержащие от 2 до 10 атомов углерода, предпочтительно от 2 до 8 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до 6 атомов углерода и еще более предпочтительно от 2 до 4 атомов углерода, содержащие по меньшей мере одну двойную связь, например, такие как этен-1,2-диил, пропен-1,3-диил, пропен-1,2-диил, бутен-1,4-диил, пентен-1,5-диил, гексен-1,6-диил, 2-метилбутен-1,4-диил, 3-метилпентен-1,5-диил и т.п.
Термин “алкенил”, один или в комбинации, означает углеводородные радикалы с прямой и разветвленной цепью, содержащие от 2 до 18 атомов углерода, предпочтительно от 2 до 8 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до 6 атомов углерода и еще более предпочтительно от 2 до 4 атомов углерода, содержащие по меньшей мере одну двойную связь, например, такие как этенил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил и т.п.
Термин “алкинил”, один или в комбинации, означает углеводородные радикалы с прямой и разветвленной цепью, содержащие от 2 до 10 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до 6 атомов углерода и еще более предпочтительно от 2 до 4 атомов углерода, содержащие по меньшей мере одну тройную связь. Примеры алкинильных радикалов включают в себя этинил, пропинил, пропаргил, бутинил, пентинил, гексинил и т.п.
Термин “циклоалкил”, один или в комбинации, означает насыщенный или частично ненасыщенный моноциклический, бициклический или полициклический алкильный радикал, в котором каждый циклический фрагмент содержит приблизительно от 3 до 8 атомов углерода, более предпочтительно приблизительно от 3 до 7 атомов углерода, еще более предпочтительно от 5 до 7 атомов углерода. Примеры моноциклических циклоалкильных радикалов включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил и тому подобные. Примеры полициклических циклоалькильных радикалов включают декагидронафтил, бицикло[5.4.0]ундецил, адамантил и тому подобные.
Термин «арил», один или в комбинации, включает в себя
9
9
9
9
9
9
9
9
9
9
4
9
4
9
9
4
9
4
9
2
2
2
2
2
2
2
2
2
моно-, би- и трициклические ароматические карбоциклы, такие как фенил, нафтил, которые, возможно, могут быть замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из алкила, алкенила, алкинила, гидрокси, галогена, нитро, циано, амино, циклоалкила, галогеналкила, гетероарила, гетероциклоалкила, R-O-, R-S-, R-S(=O)-, R-C(=O)-, R-C(=S)-, R-C(=NH)-, R-C(=NCN)-, R-NH-, (R)-N-, HO-C(=O)-, NH-C(=O)-, NH-S(=O)-, NH-C(=S)-, NH-C(=NH)-, NH-C(=NCN)-, R-NR-C(=O)-, R-NR-S(=O)-, R-O-C(=O)-, R-C(=O)-NR-, R-S(=O)-NR-, R-C(=O)-O- и фенил, возможно замещенный одним или более заместителей, выбранных из алкила, алкокси, галогена, гидрокси, возможно моно- или дизамещенного амино, нитро, циано, галогеналкила, карбоксила, алкилоксикарбонила, циклоалкила, гетероциклоалкила, возможно моно- или дизамещенного аминокарбонила, алкилтио и алкилсульфонила; причем возможные заместители для любой аминогруппы независимо выбирают из алкила, алкилокси, гетероциклоалкила, гетероциклоалкил-алкандиила, гетероцикло-алкилокси, гетероциклоалкилокси-алкандиила, фенила, фенилокси, фенилокси-алкандиила, фенил-алкандиила, алкилоксикарбониламино, амино и аминоалкандиила, в которых каждая из последних аминогрупп возможно может быть моно- или, где возможно, дизамещенной алкилом.
Примеры арила включают в себя фенил, п-толил, 4-метоксифенил, 4-(трет-бутокси)фенил, 3-метил-4-метоксифенил, 4-фторфенил, 4-хлорфенил, 3-нитрофенил, 3-аминофенил, 3-ацетамидофенил, 4-ацетамидофенил, 2-метил-3-ацетамидофенил, 2-метил-3-аминофенил, 3-метил-4-аминофенил, 2-амино-3-метилфенил, 2,4-диметил-3-аминофенил, 4-гидроксифенил, 3-метил-4-гидроксифенил, 1-нафтил, 2-нафтил, 3-амино-1-нафтил, 2-метил-3-амино-1-нафтил, 6-амино-2-нафтил, 4,6-диметокси-2-нафтил и тому подобные.
9
Если не указано особо, переменный R представляет собой алкил, галогеналкил, циклоалкил, гетероарил, гетероциклоалкил или фенил, возможно замещенный одним или более заместителями, выбранными из алкила, алкилокси, галогена, гидрокси, возможно моно- или дизамещенного амино, нитро, циано, галогеналкила, карбоксила, алкилоксикарбонила, циклоалкила, гетероциклоалкила, возможно моно- или дизамещенного аминокарбонила, алкилтио и алкилсульфонила; причем возможные заместители для любой аминогруппы независимо выбирают из алкила, алкилокси, гетероциклоалкила, гетероциклоалкил-алкандиила, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкилокси-алкандиила, фенила, фенилокси, фенилокси-алкандиила, фенил-алкандиила, алкилоксикарбониламино, амино и аминоалкандиила, причем каждая из последних аминогрупп, возможно, может быть моно- или, где возможно, дизамещенной алкилом.
Термин «галогеналкил», один или в комбинации, означает алкильный радикал, имеющий значение, которое определено выше, в котором один или более водородов замещают галогеном, предпочтительно атомами хлора или фтора, более предпочтительно атомами фтора. Примеры таких галогеналкильных радикалов включают в себя хлорметил, 1-бромэтил, фторметил, дифторметил, трифторметил, 1,1,1-трифторэтил и т.п.
Термин «гетероарил», один или в комбинации, означает ароматический моноциклический, бициклический или трициклический гетероцикл, содержащий от 5 до 14 элементов кольца, предпочтительно от 5 до 10 элементов кольца и более предпочтительно от 5 до 6 элементов кольца, которые содержат один или более гетероатомных элементов кольца, выбранных из азота, кислорода и серы, и которые, возможно, по одному или более атомам углерода являются замещенными галогеном, гидрокси, нитро, циано, алкилом, галогеналкилом, алкилокси, амино-алкандиилом, возможно, моно- или дизамещенным амино, карбоксилом, алкилоксикарбонилом, циклоалкилом, возможно, моно- или дизамещенным аминокарбонилом, метилтио, метилсульфонилом, арилом, гетероциклоалкилом и ароматическим моноциклическим, бициклическим или трициклическим гетероциклом, содержащим от 5 до 12 элементов кольца; причем возможные заместители для любых аминогрупп независимо выбирают из алкила, алкилокси, гетероциклоалкила, гетероциклоалкил-алкандиила, гетероцикло-алкилокси, гетероциклоалкилокси-алкандиила, арила, арилокси, арилоксиалкандиила, арилалкандиила, алкилоксикарбониламино, амино и аминоалкандиила; причем каждая из последних аминогрупп, возможно, может быть моно- или, где возможно, дизамещенной алкилом.
Термин «гетероциклоалкил», один или в комбинации, означает насыщенный или частично ненасыщенный моноциклический, бициклический или трициклический гетероцикл, содержащий от 3 до 14 элементов кольца, предпочтительно от 5 до 10 элементов кольца и более предпочтительно от 5 до 6 элементов кольца, который содержит один или более гетероатомных элементов кольца, выбранных из азота, кислорода или серы и который, возможно, является замещенным по одному или более атомам углерода алкилом, алкилокси, галогеном, гидрокси, оксо, возможно, моно или дизамещенным амино, возможно, моно- или дизамещенным амино-алкандиилом, нитро, циано, галогеналкилом, карбоксилом, алкилоксикарбонилом, циклоалкилом, возможно, моно- или дизамещенным аминокарбонилом, метилтио, метилсульфонилом, арилом и насыщенным или частично ненасыщенным моноциклическим, бициклическим или трициклическим гетероциклом, имеющим от 3 до 14 элементов кольца; причем возможные заместители для любой аминогруппы независимо выбирают из алкила, алкилокси, гетероарила, гетероарил-алкандиила, гетероарилокси, гетероарилокси-алкандиила, арила, арилокси, арилокси-алкандиила, арил-алкандиила, алкилоксикарбониламино, амино и амино-алкандиила; в которых каждая из последних аминогрупп, возможно, может быть моно- или, где возможно, дизамещенной алкилом.
Термин «алкилокси», один или в комбинации, определяют как алкильную группу, присоединенную к атому кислорода, где алкил представляет собой насыщенный углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 10 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до 6 атомов углерода, такой как группы метокси, этокси, пропокси, бутокси, пентилокси, гексилокси, 2-метилбутилокси, 3-метилпентилокси и тому подобные.
Термин «циклоалкилокси», один или в комбинации, определяют как циклоалкильную группу, присоединенную к атому кислорода, причем циклоалкил представляет собой насыщенный или частично ненасыщенный моноциклический, бициклический или полициклический алкильный радикал, в котором каждый циклический фрагмент содержит приблизительно от 3 до 8 атомов углерода, более предпочтительно приблизительно от 3 до 7 атомов углерода. Примеры моноциклических циклоалкилокси-радикалов включают в себя циклопропилокси, циклобутилокси, циклопентилокси, циклогексилокси, циклогептилокси, циклооктилокси и тому подобные.
2
Используемый в описании термин С(=О) предназначен для определения карбонильного фрагмента, термин С(=S) предназначен для определения тиокарбонильного фрагмента, термин S(=O) предназначен для определения сульфоксильного или сульфинильного фрагмента, термин S(=O) предназначен для определения сульфонильного фрагмента, термин С(=NH) предназначен для определения имино-фрагмента и термин С(=NCN) предназначен для определения фрагмента цианоимино.
2
Используемый в описании термин гидрокси означает -ОН, термин нитро означает -NO, термин циано означает -CN, термин тио означает -S, термин оксо означает =О.
В каком бы случае не использовали термины “один или более заместителей” или “замещенный” при характеристике соединений формулы (I), (II) и (III), используемые термины указывают, что один или более водородов на атом, указанный в выражениях, используя “один или более заместителей” или “замещенный”, замещают выборкой из указанной группы при условии непревышения указанной нормальной валентности атомов и при условии, что замещение приводит к химически стабильному соединению, то есть соединению, которое является достаточно прочным, чтобы претерпеть выделение до используемой степени чистоты из реакционной смеси и получение в виде терапевтического средства.
1-6
Когда любое изменение (например, галоген или С-алкил) происходит более одного раза в любой составной части, каждое определение остается независимым.
th
Термин “пролекарство”, используемый на протяжении всего текста описания, означает фармакологически подходящие производные, такие как сложные эфиры, амиды и фосфаты, приводящие in vivo к образованию продукта биотрансформации производного, который является активным лекарственным средством, которое определяют в соединениях данного изобретения. Ссылка на Goodman и Gilman (The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8 ed, McGraw-Hill, Int. Ed. 1992, “Biotransformation of Drugs”, pp13-15), описывающих пролекарства, включена в описание. Пролекарства соединения данного изобретения получают модифицируя функциональные группы, присутствующие в соединении, в том смысле, что модификации расщепляются, или при стандартной манипуляции, или in vivo, до исходного соединения. Пролекарства включают в себя соединения данного изобретения, в которых гидрокси-группа или аминогруппа связана с любой группой, которая, когда пролекарство вводят пациенту, расщепляется с образованием свободного гидроксила или свободного амино соответственно.
Пролекарства характеризуются хорошей растворимостью в воде, повышенной биодоступностью и быстро метаболизируют в активные ингибиторы in vivo.
Для терапевтического применения соли соединений данного изобретения являются такими солями, в которых противоион оказывается фармакологически и физиологически приемлемым. Однако соли, содержащие фармакологически неподходящий противоион, также могут найти применение, например, при получении или очистке фармакологически подходящего соединения данного изобретения. Все соли, и фармакологически приемлемые, и фармакологически неприемлемые, включены в объем данного изобретения.
Фармакологически приемлемые или физиологически толерантные формы аддитивных солей, которые способны образовывать соединения данного изобретения, обычно можно получать, используя соответствующие кислоты, например, такие как неорганические кислоты, такие как галогеноводородные кислоты, например хлористоводородная или бромистоводородная кислота, серная, азотная, фосфорная и подобные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гидроксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая, малоновая, янтарная, малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая и подобные кислоты.
Наоборот, названные формы аддитивных солей кислот можно превращать обработкой соответствующим основанием в свободные основные формы.
Соединения данного изобретения, содержащие кислотный протон, также можно превращать в их нетоксичную форму аддитивной соли металла или амина путем обработки соответствующим органическим и неорганическим основаниями. Соответствующие формы основных солей включают в себя, например соли аммония, соли четвертичного аммония, соли щелочных и щелочноземельных металлов, например соли лития, натрия, калия, магния, кальция и т.п., соли органических оснований, например соли бензатина, N-метила, -D-глюкамина, гидрабамина, и соли аминокислот, таких, например, как аргинина, лизина и т.п.
Наоборот, названные основные формы аддитивных солей обработкой соответствующей кислотой можно превращать в свободную кислотную форму.
Термин «соли» также включает в себя гидраты и аддитивные формы растворителей, которые соединения данного изобретения способны образовывать.
N-оксидные формы данных соединений включают в себя соединения, в которых один или несколько атомов азота окисляются до так называемого N-оксида.
Данные соединения также могут существовать в их таутомерных формах. Полагают, что такие формы, хотя подробно не указаны в вышеупомянутой формуле, должны быть включены в объем, охватываемый данным изобретением.
Термин стереохимические изомерные формы соединений данного изобретения, который использовали ранее, определяет все возможные соединения, составленные из тех же самых атомов, связанных одинаковой последовательностью связей, но имеющие различные трехмерные структуры, которые не являются равнозначными, которой могут обладать соединения данного изобретения. Если не упоминают или не указывают особо, химическое обозначение соединения заключает в себе смесь всех возможных стереохимических изомерных форм, которые названное соединение содержит. Названная смесь может содержать все диастереомеры и/или энантиомеры основной молекулярной структуры названного соединения. Полагают, что все стереохимические изомерные формы соединений данного изобретения как в чистом виде или в смеси друг с другом должны быть включены в объем защиты данного изобретения.
Чистые стереоизомерные формы соединений и интермедиатов, которые упоминают в описании, определяют как изомеры, по существу свободные от других энантиомерных или диастереомерных форм такой же основной молекулярной структуры названных соединений или интермедиатов. В частности, термин «стереоизомерно чистый» относится к соединениям или интермедиатам, имеющим стереоизомерный избыток по меньшей мере 80% (то есть минимум 80% одного изомера и максимум 20% других возможных изомеров), вплоть до стереоизомерного избытка 100% (то есть 100% одного изомера и нисколько других), более предпочтительно к соединениям или интермедиатам, имеющим стереоизомерный избыток от 90% вплоть до 100%, наиболее предпочтительно имеющим стереоизомерный избыток от 94% вплоть до 100%, и еще более предпочтительно имеющим стереоизомерный избыток от 97% вплоть до 100%. Термин «энантиомерно чистый» и «диастереоизомерно чистый» следует понимать подобным образом, но в таком случае это относится соответственно к энантиомерному избытку и диастереомерному избытку смеси.
Чистые стереоизомерные формы соединений и интермедиатов данного изобретения могут быть получены при применении известных в данной области способов. Например, энантиомеры можно отделить друг от друга с помощью избирательной кристаллизации их диастереомерных солей с оптически активными кислотами. Альтернативно, энантиомеры могут быть разделены хроматографическими способами c использованием хиральных стационарных фаз. Названные чистые стереохимические изомерные формы также можно получать из соответствующих чистых стереохимических изомерных форм подходящих исходных веществ при условии, что реакция происходит стереоспецифически. Предпочтительно, если требуется специфический стереоизомер, названное соединение следует синтезировать по стереоспецифическим способам получения. В упомянутых способах успешно применяют энантиомерно чистые исходные вещества.
Диастереомерные рацематы соединений данного изобретения можно получать отдельно по общепринятым способам. Соответствующими физическими способами разделения, которые могут быть успешно использованы, являются, например, избирательная кристаллизация и хроматография, например колоночная хроматография.
Соединения могут содержать один или более асимметрических центров и, таким образом, могут существовать в виде различных стереоизомерных форм. Абсолютная конфигурация каждого асимметричного центра, который может присутствовать в соединениях, может быть указана с помощью стереохимических обозначений: R и S, упомянутые обозначения R и S, соответствующие правилам, описаны в Pure Appl. Chem. 1976, 45, 11-30.
Полагают, что данное изобретение также включает в себя все изотопы атомов, встречающиеся на данных соединениях. Изотопы включают атомы, имеющие одинаковое атомное число, но разные массовые числа. В качестве общего примера, но без ограничения, изотопы водорода включают в себя тритий и дейтерий. Изотопы углерода включают в себя С-13 и С-14.
Одной группой соединений являются те соединения, которых касается одно или более из следующих ограничений:
2
Y означает -С(=О)- или -S(=O)-;
1
R представляет собой формулу (II),
2
2
R представляет собой галоген, бром, хлор, алкил, галогеналкил, алкилокси, алкенил или алкинил, в которых названные радикалы R располагаются в соединении формулы (III) в мета-, пара- и мета- и пара-положениях, указанных от фрагмента Y;
n равно 1;
2
2
2
Х представляет собой -СН-, -NH-S(=O)-, -S(=O)-NH-, -NH-C(=O)- или -C(=O)-NH-;
6
7
8
8
6
2
R представляет собой R-C(=O)-, R-S(=O)-NH- или R-C(=O)-NH-, в которых радикалы R располагаются в соединении формулы (II), в соседних друг с другом положениях, указанных от фрагмента Х, то есть в мета- и пара-положениях или в орто- и мета-положениях;
m равно 2;
7
R представляет собой гидрокси или алкилокси;
8
R представляет собой арил, замещенный галогеном, бромом, хлором, алкилом, алкилокси, галогеналкилом, алкенилом, алкинилом, в котором названные заместители на арильном радикале располагаются в мета- или пара-положениях, указанных от точки прикрепления названной арильной группы.
В другом аспекте, соединение данного изобретения представляет собой в качестве неограничивающего примера мономер:
или в качестве неограничивающего примера димер:
Особые реакционные процедуры для получения данных соединений описаны ниже в схемах 1-4 и в примерах (схемы 5 и 6). Для всех препаратов, описанных в дальнейшем, реакционные продукты могут быть выделены из среды и, если необходимо, далее очищены в соответствии со способами, в основном известными в данной области, например, такими как экстракция, кристаллизация, растирание в порошок и хроматография.
Схема 1
2
3
2
3
2
3
2
3
Соединения типа 1-А, такие как антраниловые кислоты, смешивают с растворителями, подобными THF, и основанием, таким как КСО или NaCO, и растворяют в воде с последующим добавлением соединения 1-В к предварительно полученной смеси. После нескольких часов перемешивания при комнатной температуре получают соединение 1-С. Для того чтобы выделить чистое соединение 1-С из раствора, проводят подкисление смеси и экстракцию растворителем, таким как этилацетат. Затем соединение 1-С восстанавливают, например, Pd/C и водородом в растворителе, таком как спирты, этанол или метанол. За этими процедурами следует смешивание при комнатной температуре и удаление растворителя фильтрацией, после чего получают соединение 1-D. Добавляют соединение 1-Е и с использованием THF, KCO или NaCO и воды, как, например, на первой стадии, наконец, получают соединение 1-F.
На схемах 2 и 3 ниже приведена стратегия, подобная таковой на схеме 1.
Схема 2
Схема 3
Схема 4
2
3
2
3
2
3
2
3
Соединения типа 4-А, такие как антраниловые кислоты, смешивают с растворителями, подобными THF, и основанием, таким как КСО или NaCO, растворимым в воде, и с последующим добавлением соединения 4-В к предварительно полученной смеси. После нескольких часов перемешивания при комнатной температуре получают соединение 4-С. Для того чтобы выделить соединение 4-С из раствора, проводят подкисление смеси и экстракцию растворителем, таким как этилацетат. Затем соединение 4-С кипятят с обратным холодильником в тионилхлориде в течение нескольких часов. После удаления тионилхлорида добавляют воду и соединение 4-D экстрагируют дихлорметаном. За этим следует удаление растворителя и смешивание соединения 4-D с соединением 4-Е в присутствии растворителей, подобных THF, основания, такого как КСО или NaCO, и воды, таким образом, наконец, получают соединение 4-F.
Соединения данного изобретения также можно превращать в соответствующие N-оксидные формы, следуя известным в данной области способам превращения трехвалентного азота в N-оксидную форму. Упомянутую реакцию N-окисления обычно можно проводить путем введения в реакцию исходного вещества соединений с соответствующей органической или неорганической перекисью. Подходящие неорганические перекиси включают в себя, например, перекись водорода, перекиси щелочных металлов или щелочноземельных металлов, например перекись натрия, перекись калия; соответствующие органические перекиси могут включать надкислоты, такие как, например, бензолкарбопероксоевая кислота или галоген-замещенная бензолкарбопероксоевая кислота, например 3-хлор-бензолкарбопероксоевая кислота, пероксоалкановые кислоты, например пероксоуксусная кислота, алкилгидроперекиси, например трет-бутил-гидропероксид. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие алканолы, например этанол и подобные, углеводороды, например толуол, кетоны, например 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например дихлорметан, и смеси таких растворителей.
50
50
50
В таблице 1 ниже приведена серия соединений согласно данному изобретению. В левой колонке указана схема синтеза, описанная в данном изобретении, которая делает возможным их получение. Должно быть понятно, что данное изобретение не ограничивается предлагаемыми моделями получения. Кроме того, токсичность соединений определяли на mock-инфицированных клетках по способам, известным специалистам в данной области. Полученные значения CC были выше 25 мкМ. Потом рассчитывали индекс избирательности из соотношения между величиной токсичности (значение CC) и величиной EC (эффективная концентрация лекарственного средства, которая ингибирует 50% популяции вируса), полученных для данных соединений при клеточном исследовании.
Таким образом, соединения данного изобретения можно применять на животных, предпочтительно млекопитающих, и в особенности на человеке, в качестве лекарственных средств как таковых, в смесях друг с другом в виде фармацевтических препаратов.
Кроме того, данное изобретение имеет отношение к фармацевтическим препаратам, которые в качестве активной составной части содержат эффективную дозу по меньшей мере одного из соединений, в дополнение к обычным фармацевтически безвредным наполнителям и вспомогательным средствам. Обычно фармацевтические препараты содержат от 0,1 до 90% мас. соединения. Фармацевтические препараты можно получать по способу, известному по существу любому специалисту в данной области. Для этой цели по меньшей мере одно соединение согласно изобретению вместе с одним или более твердых или жидких фармацевтических наполнителей и/или вспомогательных средств и, если требуется, в сочетании с другими фармацевтически активными соединениями вводят в подходящей для введения форме или стандартной лекарственной форме, и затем их можно использовать в виде фармацевтической композиции в медицине в применении к человеку или в ветеринарии.
Фармацевтические композиции, которые содержат соединение согласно изобретению, можно вводить перорально, парентерально, например внутривенно, ректально, путем ингаляции или местно, предпочтительный способ введения зависит от индивидуального случая, например особого течения нарушения, которое лечат. Пероральное введение является предпочтительным.
Специалисты в данной области на основании своего опыта работы со вспомогательными средствами знают, какие средства являются подходящими для требуемой фармацевтической композиции. Вместе с растворителями, гель-формирующими агентами, суппозиторными основами, таблеточными вспомогательными средствами и активным соединением используют также носители, антиоксиданты, диспергаторы, эмульгаторы, противовспениватели, средства, корригирующие вкус, консерванты, солюбилизаторы, средства для достижения эффекта депонирования, буферные вещества или красители.
Соединения согласно изобретению используют для лечения индивидов, инфицированных ВИЧ, и для профилактики ВИЧ у таких индивидов. Вообще соединения согласно изобретению можно использовать для лечения теплокровных животных, инфицированных вирусами, существование которых опосредовано ферментом интегразой или зависит от него. Состояния, которые предупреждают или лечат соединениями данного изобретения, особенно состояния, ассоциированные с ВИЧ и другими патогенными ретровирусами, включают в себя СПИД, СПИД-родственный синдром (ARC), прогрессивную генерализованную лимфаденопатию (PGL), а также хронические заболевания ЦНС, вызванные ретровирусами, например, такими как ВИЧ-опосредованная деменция и рассеянный склероз.
Поэтому соединения данного изобретения или любую их подгруппу можно использовать как лекарственные средства при вышеприведенных состояниях. Упомянутое применение в качестве лекарственного средства или способ лечения включает в себя системное введение субъектам, инфицированным ВИЧ, количества, эффективного для борьбы с состояниями, связанными с ВИЧ и другими патогенными ретровирусами, такими как ВИЧ-1. Следовательно, соединения данного изобретения можно использовать в производстве лекарственного средства, используемого для лечения состояний, связанных с ВИЧ и другими патогенными ретровирусами.
В предпочтительном аспекте, изобретение имеет отношение к применению соединений данного изобретения или любой их подгруппы в производстве лекарственного средства для лечения или борьбы с инфекцией или заболеванием, ассоциированным с ретровирусной инфекцией у млекопитающего, такой как инфекция ВИЧ-1. Таким образом, изобретение также относится к способу лечения ретровирусной инфекции или заболевания, ассоциированного с ретровирусной инфекцией, включающему в себя введение млекопитающему в случае необходимости, эффективного количества соединений или их подгрупп.
В другом предпочтительном аспекте данное изобретение относится к применению соединений или любой их подгруппе в производстве лекарственного препарата для ингибирования проникновения ретровируса в млекопитающее, инфицированное названным ретровирусом, в частности ретровирусом ВИЧ-1.
В следующем предпочтительном аспекте данное изобретение имеет отношение к применению соединений или любой их подгруппы в производстве лекарственного препарата для ингибирования ретровирусного проникновения, в частности механизма слияния.
Соединения данного изобретения также находят применение для ингибирования ex vivo образцов, содержащих ВИЧ, или образцов, предположительно подвергшихся воздействию ВИЧ. Следовательно, данные соединения можно использовать, чтобы ингибировать ВИЧ, присутствующий в образце биологической жидкости, который либо содержит ВИЧ, либо имеются подозрения, что он содержит ВИЧ или был подвергнут воздействию ВИЧ.
Также можно использовать комбинацию противоретровирусного соединения и соединения данного изобретения в качестве лекарственного средства. Таким образом, данное изобретение также имеет отношение к продукту, содержащему (а) соединение данного изобретения и (b) другое противоретровирусное соединение в виде сочетанного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения для лечения ретровирусных инфекций. Таким образом, чтобы бороться с ВИЧ-инфекцией или лечить ВИЧ-инфекции или инфекции и заболевания, ассоциированные с инфекциями ВИЧ, такие как синдром приобретенного иммунодефицита (AIDS; СПИД) или синдром, связанный со СПИДом (ARC), соединения данного изобретения могут быть введены одновременно в комбинации, например, с ингибиторами связывания, например, такими как декстрансульфат, сурамин, полианионы, растворимый CD4; ингибиторами слияния, например, такими как Т20, Т1249, SHC-C; ингибиторами связывания корецепторов, например, такими как AMD 3100 (Bicyclams), TAK 779; ингибиторами RT, например, такими как фоскарнет и пролекарства; нуклеозидом RTIs, таким как AZT, 3TC, DDC, DDI, D4T, абакавир, FTC, DAPD, dOTC; нуклеотидом RTIs, таким как PMEA, PMPA, тенофовир; NNRTIs, например, такими как невирапин, делавирдин, эфавиренз, TIBO 8 и 9-Cl (тивирапин), ловирид, TMC-125, TMC-120, MKC-442, UC 781, каправирин, DPC 961, DPC963, DPC082, DPC083, каланолид А, SJ-3366, TSAO, 4''-дезаминированный TSAO; ингибиторами РНК-азы Н, такими как SP1093V, PD126338; ингибиторами TAT, такими как RO-5-3335, K12, K37; ингибиторами интегразы, такими как L 708906, L 731988; ингибиторами протеаз, такими как ампренавир, ритонавир, нелфинавир, сахинавир, индинавир, лопинавир, лазинавир, BMS 232632, BMS 186316, DPC 681, DPC 684, типранавир, AG1776, DMP 450, L 756425, PD178390, PNU 140135; ингибиторами гликозилирования, такими как кастаноспермин, дезоксиподжиримицин.
Комбинация может обеспечить синергическое действие, при котором вирусная инвазивная способность и связанные с ней симптомы могут быть предотвращены, существенно снижены или полностью устранены.
Соединения данного изобретения также можно вводить в комбинации с иммуномодуляторами (например, бропиримином, античеловеческими антителами к альфа-интерферону, IL-2, метионин-энкефалином, интерфероном альфа и налтексоном) или с антибиотиками (например, пентамидином изотиоратом), чтобы ослабить инфекцию ВИЧ и ее симптомы, бороться с ними или устранить их.
Для получения форм для перорального введения соединения данного изобретения смешивают с подходящими добавками, такими как наполнители, стабилизаторы или инертные разбавители, и вводят с помощью обычных способов в подходящих для введения формах, таких как таблетки, покрытые таблетки, твердые капсулы, водные, спиртовые или масляные растворы. Примерами подходящих инертных носителей являются аравийская камедь, магнезия, карбонат магния, фосфат калия, лактоза, глюкоза или крахмал, в особенности кукурузный крахмал. В этом случае препарат может быть приготовлен в виде как сухих, так и влажных гранул. Подходящими масляными наполнителями или растворителями являются растительные или животные масла, такие как подсолнечное масло или масло печени трески. Подходящими растворителями для водных и спиртовых растворов являются вода, этанол, растворы сахаров и их смеси.
Полиэтиленгликоли и полипропиленгликоли также используют в качестве других вспомогательных средств для других форм введения.
Для подкожного или внутривенного введения, если требуется, активные соединения вводят в растворы, суспензии или эмульсии с веществами, такими как солюбилизаторы, эмульгаторы или другие вспомогательные средства. Соединения также можно лиофилизировать и полученные лиофилизаты использовать, например, для приготовления инъекционных и инфузионных препаратов. Подходящими растворителями являются, например, вода, физиологический солевой раствор или спирты, например этанол, пропанол, глицерин, кроме того, также растворы сахаров, такие как растворы глюкозы и маннита, или, альтернативно, смеси различных упомянутых выше растворителей.
Подходящими фармацевтическими композициями для введения в виде аэрозолей или спреев являются, например, растворы, суспензии или эмульсии соединений или их физиологически приемлемых солей в фармацевтически приемлемом растворителе, таком как этанол или вода, или в смеси таких растворителей. Если требуется, композиция дополнительно может содержать также и другие фармацевтические вспомогательные средства, такие как поверхностно-активные вещества, эмульгаторы и стабилизаторы, а также пропеллент. Так, композиция обычно содержит активное соединение в концентрации приблизительно от 0,1 до 50%, в частности приблизительно от 0,3 до 3% мас.
Для увеличения растворимости и/или стабильности соединений в фармацевтических композициях может оказаться удобным использование α-, β- или γ-циклодекстринов или их производных. Также и сорастворители, такие как спирты, могут улучшить растворимость и/или стабильность соединений в фармацевтических композициях. При приготовлении водных композиций аддитивные соли данных соединений явно являются более подходящими вследствие их повышенной растворимости в воде.
Соответствующими циклодекстринами являются α-, β- или γ-циклодекстрины (CDs) или их простые эфиры или смешанные эфиры, в которых одну или более гидроксильных групп ангидроглюкозных элементов циклодекстрина замещают алкилом, особенно метилом, этилом или изопропилом, например, случайно метилированным β-CD; гидроксиалкилом, особенно гидроксиэтилом, гидроксипропилом или гидроксибутилом; карбоксиалкилом, особенно карбоксиметилом или карбоксиэтилом, алкилкарбонилом, особенно ацетилом; или алкилоксикарбонилалкилом или карбоксиалкилоксиалкилом, особенно карбоксиметоксипропилом или карбоксиэтоксипропилом; алкилкарбонилоксиалкилом, особенно 2-ацетилоксипропилом. Особо заслуживающими внимание в качестве комплексообразующих веществ и/или солюбилизаторов являются β-CD, случайно метилированный β-CD, 2,6-диметил-β-CD, 2-гидроксиэтил-β-CD, 2-гидроксиэтил-γ-CD, 2-гидроксипропил-γ-CD и (2-карбоксиметокси)пропил-β-CD и в особенности 2-гидроксипропил-β-CD (2-НР-β-CD).
Термин «смешанный простой эфир» означает производные циклодекстрина, в которых по меньшей мере две гидрокси-группы циклодекстрина эстерифицированы различными группами, например, такими как гидроксипропил и гидроксиэтил.
Интересный способ приготовления данных соединений в комбинации с циклодекстрином или его производным описан в ЕР-А-721331. Хотя описанные в названном патенте препараты содержат противогрибковые активные ингредиенты, они в равной степени представляют интерес для приготовления соединений данного изобретения. Препараты, описанные в патенте, особенно подходят для перорального введения и содержат противогрибковое средство в качестве активного ингредиента, достаточное количество циклодекстрина или его производного в качестве солюбилизатора, водную кислую среду в качестве объемного жидкого носителя и спиртовой сорастворитель, который значительно упрощает приготовление композиции. Названные препараты также можно делать более приятными, добавляя фармацевтически приемлемые подсластители и/или вкусовые вещества.
Другие общепринятые способы повышения растворимости соединений данного изобретения в фармацевтических композициях описаны в WO-94/05263, заявке PCT No PCT/EP98/01773, EP-A-499299 и WO 97/44014, и все они включены в данное описание путем цитирования.
В частности, данные соединения могут быть приготовлены в фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество частиц, представляющих собой дисперсию твердых веществ, заключающей в себе (а) соединение данного изобретения и (b) один или более фармацевтически приемлемых растворимых в воде полимеров.
Термин «дисперсия твердых веществ» означает систему в твердом состоянии (в противоположность жидкому или газообразному состоянию), содержащую по меньшей мере два компонента, причем один компонент диспергируют более или менее равномерно по всему другому компоненту или компонентам. Если названная дисперсия компонентов является такой, что система оказывается химически и физически совершенно однородной или гомогенной или состоит из одной фазы, как определено термодинамикой, такая дисперсия твердых веществ называется «твердый раствор». Твердые растворы являются предпочтительными физическими системами, так как компоненты в них обычно оказываются легко биодоступными в организмах, в которые их вводят.
Термин «дисперсия твердых веществ» также включает в себя дисперсии, которые являются во всех отношениях менее гомогенными, чем твердые растворы. Такие дисперсии не являются химически и физически совершенно однородными или содержат более одной фазы.
Растворимый в воде полимер в частицах является подходящим полимером, который имеет кажущуюся вязкость от 1 до 100 мПа.с, если растворен в 2% водном растворе при 20°С.
Предпочтительными растворимыми в воде полимерами являются гидроксипропилметилцеллюлозы или НРМС. НРМС, имеющая степень замещения метокси-групп приблизительно от 0,8 до 2,5 и степень замещения гидроксипропилом, выраженную в молях, приблизительно от 0,05 до 3,0, обычно является растворимой в воде. Степень замещения метокси-групп отражает среднее количество групп метилового эфира, присутствующее на единицу ангидроглюкозы молекулы целлюлозы. Замещение гидроксипропилом, выраженное в молях, отражает среднее количество молей пропиленоксида, которое взаимодействует с каждой единицей ангидроглюкозы молекулы целлюлозы.
Описанные выше частицы можно приготовить сначала путем получения дисперсии твердых веществ компонентов, а затем, возможно, путем растирания или измельчения такой дисперсии. Существуют различные способы приготовления дисперсий твердых веществ, включающие в себя экструзию из расплава, высушивание распылением и испарение раствора.
Кроме того, может оказаться удобным получать данные соединения в форме наночастиц, которые имеют поверхностный модификатор, адсорбированный на их поверхности в количестве, достаточном для поддержания эффективного среднего размера частиц менее 1000 нм. Полагают, что используемые поверхностные модификаторы включают в себя те, которые физически прилипают к поверхности противоретровирусного агента, но не связываются химически с противоретровирусным агентом.
Предпочтительно подходящие поверхностные модификаторы можно выбрать из известных органических и неорганических фармацевтических носителей. Такие носители включают в себя различные полимеры, низкомолекулярные олигомеры, природные продукты и поверхностно-активные вещества. Предпочтительные поверхностные модификаторы включают в себя не ионные и анионные поверхностно-активные вещества.
Еще один интересный способ приготовления данных соединений включает в себя фармацевтическую композицию, в которой соединения данного изобретения включены в гидрофильные полимеры, и применение полученной смеси в качестве покрывающей множество небольших гранул пленки, таким образом получают в результате композицию с хорошей биодоступностью, которую удобно производить и которая подходит для приготовления фармацевтических, стандартных лекарственных форм для перорального введения.
Названные гранулы содержат (а) центральную, округленную или сферическую сердцевину, (b) покрывающую пленку из гидрофильного полимера и противоретровирусное средство и (с) герметически закрывающий-покрывающий полимерный слой.
Вещества, подходящие для применения в виде сердцевин в гранулах, разнообразны, при условии, что названные вещества являются фармацевтически подходящими и имеют соответствующие размеры и твердость. Примерами таких веществ являются полимеры, неорганические вещества, органические вещества и сахариды и их производные.
Другой аспект данного изобретения относится к набору или контейнеру, содержащему соединение данного изобретения в количестве, эффективном для применения в качестве стандарта или реагента при тестировании или исследовании для определения способности возможного фармацевтического препарата ингибировать проникновение ВИЧ, рост ВИЧ или и то, и другое. Данный аспект изобретения может найти применение в фармацевтических научных программах.
ТМ
TM
ТМ
Соединения данного изобретения можно использовать при мониторинге фенотипической резистентности, таком как известный рекомбинантный анализ в условиях клинического контроля развития резистентности заболеваний, таких как ВИЧ. Особенно полезной системой мониторинга резистентности является рекомбинантный анализ, известный как Антивирограм (Antivirogram). Антивирограм представляет собой высокоавтоматизированный, с высокой пропускной способностью, второго поколения рекомбинантный анализ, который может оценить чувствительность, особенно вирусную чувствительность, к соединениям данного изобретения. (Hertogs K, de Bethune M.P, Miller V. et al., Antimicrob Agents Chemother, 1998; 42(2):269-276, включена цитированием.)
Доза данных соединений или их физиологически толерантной соли(ей), которую следует вводить, зависит от индивидуального случая, и, как обычно, дозу адаптируют к условиям индивидуального случая для оптимального эффекта. Таким образом, доза, конечно, зависит от частоты введения и мощности и продолжительности действия соединений, применяемых в каждом случае для терапии или профилактики, но также зависит от природы и тяжести инфекции и симптомов, и от пола, возраста, веса и индивидуальной восприимчивости человека или животного, которого лечат, и от того, является ли терапия острой или профилактической. Обычно ежедневная доза соединения данного изобретения, в случае введения пациенту весом приблизительно 75 кг, составляет от 1 мг до 1 г, предпочтительно от 3 мг до 0,5 г. Дозу можно вводить в виде индивидуальной дозы или разделенной на несколько доз, например на две, три или четыре индивидуальные дозы.
ПРИМЕРЫ
Пример 1
Схема 5: Получение соединений формулы (III)
4
К смеси 0,5 г соединения 5-А в 25 мл THF при комнатной температуре добавляли 5 мл воды и 745 мг карбоната натрия. Смесь перемешивали в течение 30 мин и по каплям добавляли соединения 5-В, 2,2 эквивалента, в THF (5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов и фильтровали, чтобы получить соединения 5-С. Соединение 5-С растворяли в воде и раствор подкисляли раствором концентрированной хлористоводородной кислотой до рН 3 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, высушивали над MgSО и выпаривали, чтобы получить 514 мг (54%) соединения 5-D.
Схема 5
Пример 2
Схема 6: получение соединений формулы (I)
4
К смеси 1 г соединения 6-А в 30 мл THF при комнатной температуре добавляли 10 мл воды и 1,57 г карбоната калия. Смесь перемешивали в течение 30 мин и по каплям добавляли соединения 6-В, 1,1 эквивалент. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов и подкисляли раствором концентрированной хлористоводородной кислоты до рН 3. Полученный раствор экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO и выпаривали, чтобы получить 503 мг (32%) соединения 6-С.
Схема 6
Пример 3
Схема 7: Получение соединений формулы (III)
1
4
К смеси 1,5 г соединения 7-А (R=-CN) в 25 мл DMF при комнатной температуре добавляли карбонат калия, 5,2 г (3 эквивалента). Смесь перемешивали в течение 30 минут при 80°С и добавляли соединение 7-В, 2,33 г. Реакционную смесь перемешивали в течение 12 часов при 140°С. Реакцию контролировали методом TLC, когда исходный материал оказывался израсходованным, смесь оставляли для нагревания вплоть до RT (комнатной температуры) и добавляли воду. Раствор подкисляли добавлением раствора хлористоводородной кислоты до рН 3. Продукт экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO и выпаривали, чтобы получить 3 г (83%) соединения 7-C.
Схема 7
1
1
2
Смесь соединения 7-С, 6,2 г, растворяли в метаноле и добавляли каталитическое количество палладия на угле (когда R= -CN, некоторое количество тиофена было необходимо, чтобы «отравить» катализатор). Смесь перемешивали при RT в атмосфере водорода. Через 4 часа смесь фильтровали и удаляли растворитель. Соединения 7-D, 5 г, (R=mCOH) выделяли в виде белого порошка.
4
К смеси 1,8 г соединения 7-D в 50 мл THF при комнатной температуре добавляли 15 мл воды и 3,4 г карбоната натрия. Смесь перемешивали в течение 30 минут и добавляли ацилхлориды и сульфонилхлориды, 1,1 эквивалента. Реакционную смесь перемешивали в течение 12 часов. Реакционную смесь подкисляли раствором концентрированной хлористоводородной кислоты до рН 3 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, высушивали над MgSO и выпаривали, получая соединение 7-Е.
Пример 4
Соединения в таблице 1 представлены как примеры соединений данного изобретения, и их тестировали при изучении проникновения ВИЧ, где оценивали процент ингибирования связывания, осуществляемого 100-микромолярной концентрацией соединения. Ингибирование сродства связывания IQN17 и Alexa-C28 в присутствии различных соединений (то есть способность соединений вытеснять Alexa-C28 из участка связывания на IQN-17) определяли с помощью зонального электрофореза в капилляре. Эксперименты элетрофореза в капилляре проводили на счетчике Beckman Coulter P/ACE System MDQ и спектрумедиксе Spectrumedix 9610HTS. Капилляры, использованные в счетчике Beckman, имели внутренний диаметр 75 мкм, 50 см действующей длины и внутреннюю поверхность из кварцевого стекла. Разделение проводили при используемом напряжении 30 кВ. Капилляры, использованные в Spectrumedix 9610HTS, имели внутренний диаметр 50 мкм, действующую длину 50 см и внутреннюю поверхность из кварцевого стекла. Разделение проводили при используемом напряжении 13 кВ. Буфером для разделения был 20 мМ борат натрия, рН 8,5.
IQN17 представляет собой растворимую, неагрегирующую трехмерную пептидную модель карман-образующих остатков gp41 и высокорастворимый изолейциновый суперскрученный пептид на основе GCN4. С28 является спиральным полипептидом, состоящим из сегмента, происходящего из С-концевой спирали gp41, включающим в себя 628655 остатков.
Соединения растворяли в связывающем буфере. Связывание определяли в растворах Alexa-C28 и IQN-17. Буфер, IQN-17, соединение изобретения и Alexa-C28 смешивали в таком порядке. DMSO добавляли, чтобы привести концентрацию в конечном растворе к 5% по объему. Соединения оставляли для связывания, по крайней мере, в течение периода одного часа до измерения с помощью CZE. Области пиков Alexa-C28 при постоянной концентрации IQN-17 и различных концентрациях соединений анализировали по сравнению с областью Alexa-C28 в отсутствие соединения и IQN-17. Процент ингибирования связывания, достигаемый с соединениями, колебался от 3,5 до 175%.