Способ получения нуклеината натрия из микроводоросли Chlorella vulgaris Beijerink

3
1. Способ получения нуклеината натрия из микроводоросли Chlorella vulgaris Beijerink, заключающийся в том, что из предварительно подготовленной сухой лиофилизированной биомассы зеленых микроводорослей рода Chlorella vulgaris Bejerink (штамм ИФР № С-111) в количестве 50 г экстрагируют нуклеинат натрия, для чего подготовленную биомассу количественно помещают в трехгорлую круглодонную колбу биореактора, смывают осадок 400 мл цитратно-солевого раствора, состоящего из 20% раствора натрия хлорида и 1% натрия цитрата, смешанных в пропорции 1:1 по объему, с рН раствора 7, добавляют к смеси 40 мл детергента натрия додецилсульфата с концентрацией 100 мл/дм для дополнительного лизиса клеточных стенок и ядра, затем 10 мл изоамилового спирта, нагревают смесь до 90-100°С медленно, в течение 40-60 мин, затем в течение 2-3 ч выдерживают при температуре кипения с постоянным перемешиванием, по окончании процесса смеси дают остыть до комнатной температуры, обрабатывают ультразвуком, центрифугируют и надосадочную жидкость, содержащую нуклеиновые кислоты, переносят количественно в высокую емкость, замеряют объем гидролизата и осаждают из него нуклеиновые кислоты добавлением при помешивании к охлажденному до 1-3°С ацетону в отношении 1:2, затем помещают емкость с гидролизатом и осадителем в морозильную камеру на 3 ч, образовавшиеся при этом в осадке хлопья нуклеиновых кислот собирают центрифугированием, промывают осадок 70%-ным этиловым спиртом, центрифугируют, а затем высушивают в токе инертного газа (воздух, азот) в лабораторном концентраторе и растирают в порошок до мелкодисперсного состояния.
3
2. Способ получения нуклеината натрия из микроводоросли Chlorella vulgaris Beijerink, заключающийся в том, что из предварительно подготовленной сухой лиофилизированной биомассы зеленых микроводорослей рода Chlorella vulgaris Bejerink (штамм ИФР № С-111) в количестве 50 г экстрагируют нуклеинат натрия, для чего подготовленную биомассу количественно помещают в трехгорлую круглодонную колбу биореактора, смывают осадок 370 мл цитратно-солевого раствора, состоящего из 20% раствора натрия хлорида и 1% натрия цитрата, смешанных в пропорции 1:1 по объему, с рН раствора 7, добавляют к смеси 30 мл детергента натрия додецилсульфата с концентрацией 100 мл/дм для дополнительного лизиса клеточных стенок и ядра, нагревают смесь до 90-100°С медленно, в течение 40-60 мин, затем в течение 2-3 ч выдерживают при температуре кипения с постоянным перемешиванием, по окончании процесса смеси дают остыть до комнатной температуры, обрабатывают ультразвуком, центрифугируют и надосадочную жидкость, содержащую нуклеиновые кислоты, переносят количественно в высокую емкость, замеряют объем гидролизата и осаждают из него нуклеиновые кислоты добавлением при помешивании к охлажденному до 1-3°С ацетону в отношении 1:2, затем помещают емкость с гидролизатом и осадителем в морозильную камеру на 3 ч, образовавшиеся при этом в осадке хлопья нуклеиновых кислот собирают центрифугированием, промывают осадок 70%-ным этиловым спиртом, центрифугируют, а затем высушивают в токе инертного газа (воздух, азот) в лабораторном концентраторе и растирают в порошок до мелкодисперсного состояния.
3. Способ получения нуклеината натрия из микроводоросли Chlorella vulgaris Beijerink по пп. 1, 2, отличающийся тем, что производят предварительную подготовку сухой лиофилизированной биомассы микроводоросли, для чего 50 г сухой лиофилизированной биомассы микроводоросли Chlorella vulgaris помещают в емкость, приливают 0,5 н. охлажденную хлорную кислоту, промывают клеточную массу в течение 5 мин энергичным перемешиванием, затем центрифугируют в течение 10 мин при 3500 об/мин, надосадочную жидкость, содержащую кислоторастворимые вещества, отбрасывают, к полученной гомогенной массе приливают этиловый спирт и продолжают промывать клеточный осадок в течение 5 мин, этиловый спирт, экстрагировавший пигменты и липиды, отделяют центрифугированием в течение 10 мин при 3500 об/мин.