СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ИЗ МЕДИЦИНСКОЙ ПИЯВКИ
METHOD FOR MAKING PREPARATION OF MEDICINAL LEECH

Изобретение относится к новым препаратам для медицинских целей, а именно к лечебным средствам на основе биологически активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой, и способу их получения.
Указанный препарат относится к поликомпонентным физиологически активным препаратам, обладающим противовоспалительным, рассасывающим, анальгезирующим действием, снижает реологические свойства крови, ингибируя агрегацию тромбоцитов и эритроцитов, является иммуномодулятором, проявляет нейротрофические свойства.
Известны различные способы выделения биологически активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой:
1. Способ получения секрета слюнных желез медицинской пиявки. Баскова И.П., Патент России №2045954, 1994 г.
2. Экстракты из медицинских пиявок:
а) экстракт из головной части медицинской пиявки и туловищ:
Markward F. Untersuchungen uber Hirudin. Naturwissenschaften, 1955, 42, p.537-538.
Markward F. Die isolierung und Chemische Charakterisierung des Hirudins. Hoppe Seylers Z. Physiol., 1957, 308, p.147-156.
Markward F. Blutgerinnungshemender Wirkstoff aus Blutsaugenden Tieren. Iena, 1963.
Walsman P., Markward F. On the isolation of the thrombin inhibitor Hirudin. Thromb Res., 1995, 40, p.563-570.
Баскова И.П. и др. Сравнительная характеристика гирудина из цельных пиявок, головок и туловищ. Биохимия, 1980, 45, с.266-272.
б) экстракты из цельных медицинских пиявок:
Refers F.J., Zebe E. Protease inhibitors in the alimentary tract of the medicinal leech Hirudo medicinalis in vivo and in vitro studies. J. Comp. Physiol. Biochem., 1992, 162, p.82-92.
Баскова И.П. и др. Сравнительная характеристика гирудина из цельных пиявок, головок и туловищ. Биохимия, 1980, 45, с.266-272.
Известен лечебный гель "Пиявит +", представляющий собой водно-солевой экстракт цельной медицинской пиявки (Горбань В.И. и др. Патент РФ №2268739 от 05.01.04 г.).
Известен также препарат «Пиявит», представляющий собой порошок из лиофильно высушенной цельной медицинской пиявки (Баскова И.П. и др., патент РФ №2033173 от 31.01.92 г. - прототип).
Однако на наш взгляд лиофилизация не позволяет в полной мере сохранить биологическую активность веществ белковой природы, а экстракция не позволяет полностью выделить биологически активные вещества из тела медицинской пиявки.
Целью изобретения является разработка нового препарата для медицинских целей, расширяющего арсенал средств аналогичного назначения - лечебного средства на основе биологических активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой и способа его получения.
Указанная цель достигается путем исключения лиофильной сушки и экстракции, но с использованием консерванта и связующего - водного раствора поливинилового спирта и хлорида магния.
Пример 1. Приготовление консервирующего раствора.
В колбу с мешалкой и обратным холодильником помещают 2,0 л воды, 0,5 кг хлорида магния и 0,25 кг поливинилового спирта (ПВС 20/1) (ГОСТ 10779-78).
Массу нагревают на кипящей водяной бане и перемешивают до полного растворения исходных компонентов. После самоохлаждения получают прозрачную вязкую массу.
Пример 2. Приготовление препарата.
Пиявок, выдержанных в режиме активного голодания не менее 4 месяцев до полного освобождения кишечного канала от крови, вводят в анабиоз при температуре 5…10 градусов. после чего промывают холодной водой (температура 5…10 градусов), помещают в полотняный мешочек и подвешивают в холодильнике при температуре 5…10 градусов на срок 2…4 часа для удаления избыточной влаги. После чего пиявку перекладывают в полиэтиленовый пакет и замораживают при температуре -25…-28 градусов. Замороженную таким образом пиявку измельчают в гомогенизаторе. Полученную массу смешивают с консервирующим раствором в соотношении 1:1 и распределяют на протвене из нержавеющей стали, который помещают в сушильный шкаф, где и высушивают при температуре 30…37 градусов до образования пленки.
Получают эластичную пленку темно-коричневого цвета, которая обладает самоадгезией. Из получаемого материла изготавливают таблетки, драже, пленки.
Полученный препарат проверяли на антикоагулянтную активность в сравнении с прототипом.
Таблица 1
Антикоагулянтная активность водных экстрактов препарата "Пиявит" (прототип) и заявляемого объекта (среднее из 5 параллельных)
№ пробы
Состав
Цвет раствора
Антикоагулянтная активность, АКБ
1
Препарат "Пиявит" + физраствор (прототип)
Темно-коричневый
3600+/-100
2
Заявляемый объект + физраствор
Темно-коричневый
3750+/-110
Как видно из представленных данных, антикоагулянтная активность образцов практически одинакова. Однако следует учесть тот факт, что указанные образцы (прототип и заявляемый объект) - это поликомпонентные препараты и не все стороны их биологического действия изучались количественно.
Также проводились исследования на микробиологическую чистоту заявляемого объекта (на соответствие ФСП 42-0543-06 с12) после хранения при комнатной температуре в течение 6 месяцев.
Таблица 2
Микробиологические исследования*
№ п/п
Определяемые показатели, ед. измерения
Результаты исследования
Величина допустимого уровня
1
ОМЧ КОЕ/г
4,0*100 KOE/г
Не более 1000 аэробных бактерий КОЕ/г
2
Дрожжи плесени
Не обнаружены
Не более 100 КОЕ/г
3
E.coli
Не обнаружены
Отсутствие в 1,0 г
4
S.aureus
Не обнаружены
Отсутствие в 1,0 г
5
Salmonella
Не обнаружены
Отсутствие в 1,0 г
6
P.aeruginosa
Не обнаружены
Отсутствие в 1,0 г
7
Другие кишечные бактерии
Не обнаружены
Не более 100 КОЕ/г
*Нормативная документация на методы исследования - Госфармакопея XI издания - том 11 от Изменения 3. Категория 4.2; выпуск 2, М.: Медицина, 1990. - с.187.