СПОСОБЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ ПОЧЕК
METHODS FOR DIAGNOSIS AND TREATMENT OF CHRONIC KIDNEY DISEASE

Притязание на приоритет
Данная патентная заявка испрашивает приоритет согласно предварительной заявки на патент США № 62/513396, поданной 31 мая 2017 г., и предварительной заявки на патент США № 62/567623, поданной 3 октября 2017 г., содержание каждой из которых включено посредством ссылки во всей полноте, и в отношении которых испрашивается приоритет.
Область техники изобретения
Раскрытый в настоящее время объект изобретения относится к способам диагностики и лечения хронической болезни почек (ХБП (CKD)) у животного, такого как домашнее животное или домашний питомец (например, кошка или собака).
Уровень техники изобретения
Хроническая болезнь почек (ХБП), также известная как хроническое почечное заболевание или хроническая почечная недостаточность, представляет собой прогрессирующую потерю почечной функции в течение периода в месяцы или годы. ХБП может быть вызвана рядом состояний и механизмов, и поражает как людей, так и других млекопитающих, особенно кошек. Почечная функция у гериатрических кошек прогрессивно снижается с течением времени, приводя к терминальной стадии заболевания.
У животных, страдающих почечным заболеванием, для определения степени тяжести заболевания используют несколько показателей крови. К этим показателям относятся азот мочевины крови (АМК (BUN)), фосфор, фактор роста фибробластов 23 (ФРФ–23 (FGF–23)), паратиреоидный гормон (ПТГ (PTH)) и креатинин. Уровни АМК, фосфора и креатинина в кровотоке растут в процессе развития почечной недостаточности, поскольку повреждение почки животного делает почку неполноценной для фильтрации продуктов жизнедеятельности. Удержание фосфора происходит на ранних стадиях хронической болезни почек, что приводит к повышенной сывороточной концентрации ФРФ–23 и ПТГ. Повышенные сывороточные концентрации ФРФ–23 и ПТГ также вносят вклад в развитие болезни почек и могут также способствовать минерально–костным нарушениям при хронической болезни почек.
Были предприняты различные подходы к лечению или задержке прогрессирования ХБП, включая диетотерапию, контроль гипертензии и гемодиализ. Современная диетотерапия включает снижение количества пищевого белка и фосфора. Однако такие диеты могут приводить к другим проблемам, так как не удовлетворяются потребности животного в белке. Соответственно, в данной области техники остается потребность в кормовых композициях для домашних питомцев, которые могут лечить или задерживать прогрессирование ХБП.
Схема стадирования ХБП у кошек и собак разработана Международным обществом изучения заболеваний почек (International Renal Interest Society (IRIS)) (www.iris–kidney.com; см. также публикацию Elliott et al., Dietary therapy for feline chronic kidney disease, Encyclopedia of feline clinical nutrition, 2–nd edition, 2015). Основой системы стадирования является концентрация креатинина в плазме. Такая система определения стадии заболевания широко одобрена, однако, в данной области техники остается потребность в способах мониторинга других аспектов прогрессирования ХБП и оптимизации вариантов лечения.
1–5
6–8
9,10
11
10,12,13
5
14–18
Гиперфосфатемия является хорошо задокументированным осложнением ХБП у кошек и связана с повышенными рисками смерти и прогрессированием азотемии. Удержание фосфора является результатом неспособности почек экскретировать достаточно фосфата, чтобы сбалансировать пищевой рацион. Действия организма для поддержания нормофосфатемии приводят к вторичному почечному гиперпаратиреозу и избытку ФРФ–23. Эти гормональные нарушения предотвращают явную гиперфосфатемию на ранних стадиях ХБП, но, как полагают, способствуют костной патологии и кальцификации мягких тканей, что вместе с нарушенным гомеостазом кальция и фосфата включает ХБП–(минерально–костное нарушение (ХБП–MКН). ФРФ–23 сам по себе является сильным прогностическим фактором выживания и развития болезни у кошек с ХБП. Ограничение пищевого фосфата составляет основу лечения ХБП у кошек, и, как показано, снижает концентрации в плазме фосфата, ФРФ–23 и ПТГ и улучшает выживаемость.
19
20–22
23
24–28
23,24
27
23
29
30,31
В последнее время вырос интерес к роли магния при ХБП–МКН. Помимо того, что магний является существенным минералом для многочисленных внутриклеточных процессов, он, как считают, представляет собой ингибитор сосудистой кальцификации и высвобождения профибротических цитокинов. Гипомагниемия была идентифицирована как фактор риска смертности и возможно снижения почечной функции у людей с ХБП. Более того, общая концентрация магния в сыворотке (tMg), по–видимому, снижает риски, связанные с гипофосфатемией у людей с ХБП, поскольку высокое содержание фосфата связано только с более высокими рисками смертности и развитием терминальной стадии почечного заболевания у пациентов с более низким tMg. Интересно, что магний может быть вовлечен в регуляцию ФРФ–23, поскольку наблюдается обратная корреляция между этими двумя переменными у людей, больных ХБП, находящихся на гемодиализе, и концентрации ФРФ–23 повышаются у грызунов, получающих питание с дефицитом магния.
3
Мало что известно о роли магния при кошачьей ХБП–МКН. Исследование среди кошек с азотемической ХБП выявило значительно повышенный tMg в плазме при терминальной стадии заболевания, в то время как низкие значения tMg в плазме наблюдали у 25% кошек на более ранних стадиях ХБП. Ни прогностическая значимость магниевого статуса, ни взаимосвязь между магнием и ФРФ–23 не были исследованы у кошек с ХБП. Таким образом, остается необходимость дополнительного изучения в этом направлении.
Сущность изобретения
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы лечения или задержки прогрессирования хронической болезни почек (ХБП) у животного, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах осуществления способ включает: определение количества магния в образце крови животного; сравнение количества магния с заданным референтным значением, где заданное референтное значение основано на среднем уровне магния в крови в контрольной популяции; и обеспечение животного композицией, содержащей магний или его соль, для лечения животного, если количество магния находится ниже заданного референтного значения.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы лечения или задержки прогрессирования ХБП у животного, нуждающегося в этом, где животное имеет дефицит магния по сравнению с заданным референтным значением. В некоторых вариантах осуществления способ включает: введение композиции, содержащей эффективное количество магния или его соли, и где заданное референтное значение основано на среднем уровне магния в крови в контрольной популяции.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы лечения или задержки прогрессирования ХБП у животного, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах осуществления способ включает: определение количества магния в образце крови животного; сравнение количества магния с заданными референтными значениями; где заданные референтные значения основаны на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции; и обеспечение животного схемой лечения, если количество магния находится ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы диагностики и лечения животного с риском ХБП. В некоторых вариантах осуществления способ включает: получение образца крови животного; определение количества магния в образце крови животного; сравнение количества магния с заданными референтными значениями; где заданные референтные значения основаны на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции; диагностирование животного, как имеющего риск ХБП, если количество магния находится ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения; и обеспечение животного схемой лечения, если количество магния находится ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения.
В некоторых вариантах осуществления способы, предложенные в раскрытом в настоящее время объекте изобретения, также включают стадии: определения количества ФРФ–23 (FGF–23) в образце крови животного; сравнение количества ФРФ–23 с третьим заданным референтным значением; где заданное референтное значение основано на среднем уровне ФРФ–23 в крови в контрольной популяции, и где более высокий уровень ФРФ–23 по сравнению со вторым заданным референтным значением указывает на более высокую вероятность эффективного лечения.
В некоторых вариантах осуществления схема лечения, предложенная раскрытым в настоящее время объектом изобретения, включает, по меньшей мере, одну схему лечения, выбираемую из группы, включающей введение композиции, содержащей эффективное количество магния или его соли, снижение потребления фосфата, снижение потребления белка, введение полиненасыщенных жирных кислот, назначение лечения фосфатным связующим, введение калия, снижение потребления натрия с пищей и их комбинации.
В некоторых вариантах осуществления схема лечения, предложенная раскрытым в настоящее время объектом изобретения, включает, по меньшей мере, одну схему лечения, выбираемую из группы, включающей диетотерапию, гемодиализ, заместительную почечную терапию, выведение повреждающих почки соединений, трансплантацию почки, откладывание или исключение повреждающих почки процедур, введение модифицирующего диуретика и их комбинации.
В некоторых вариантах осуществления способы, предложенные в раскрытом в настоящее время объекте изобретения, также включают: определение количества, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера, выбираемого из группы, включающей фосфат, креатинин, азот мочевины крови (АМК (BUN)) и паратиреоидный гормон (ПТГ (PTH)) в образце крови, и сравнение количества, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера с четвертым заданным референтным значением, где количество фосфата, креатинина, азота мочевины крови (АМК) и/или паратиреоидного гормона (ПТГ), находящееся выше четвертого заданного референтного значения, указывает на более высокую вероятность эффективного лечения.
В некоторых вариантах осуществления способы, предложенные в раскрытом в настоящее время объекте изобретения, также включают поддержание животного на композиции в течение достаточного периода времени для уменьшения количества ФРФ–23 у животного.
В некоторых вариантах осуществления количество магния в образце крови составляет меньше чем приблизительно 50% среднего количества магния в крови у контрольной популяции.
В некоторых вариантах осуществления количество ФРФ–23 или дополнительных биомаркеров в образце крови составляет, по меньшей мере, приблизительно 150% среднего количества ФРФ–23 или дополнительных биомаркеров в крови у контрольной популяции.
В некоторых вариантах осуществления способы, предложенные в раскрытом в настоящее время объекте изобретения, также включают: определение кровяного давления животного, сравнение кровяного давления с пятым заданным референтным значением, и введение схемы предупреждения или лечения гипертензии, если кровяное давление выше, чем пятое заданное референтное значение.
В некоторых вариантах осуществления магний находится в координационном комплексе магния.
В некоторых вариантах осуществления схема лечения представляет собой введение композиции, содержащей эффективное количество магния или его соли.
В некоторых вариантах осуществления количество магния находится в интервале приблизительно между 50 и 500 мг/1000 ккал.
В некоторых вариантах осуществления композицию, содержащую магний, дают животному, по меньшей мере, один раз в день.
В некоторых вариантах осуществления количество магния определяют с помощью масс–спектрометрии, флуоресценции или люминесценции.
В некоторых вариантах осуществления количество ФРФ–23 определяют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA).
В некоторых вариантах осуществления животное представляет собой животное–компаньон, такое как собака или кошка.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает кормовые композиции для домашнего питомца, содержащие эффективное количество магния или его соли, для лечения или задержки прогрессирования ХБП у животного, нуждающегося в этом.
В некоторых вариантах осуществления количество магния находится в интервале приблизительно между 50 и 100 мг на суточную порцию или стандартную дозу.
В некоторых вариантах осуществления количество магния составляет не больше чем приблизительно 0,25% масс. от массы кормовой композиции для домашних животных.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает применение магния для лечения или задержки прогрессирования ХБП у животного, нуждающегося в этом, где животное имеет дефицит магния по сравнению с заданным референтным значением и где заданное референтное значение основано на среднем уровне магния в крови у контрольной популяции.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает использование уровней магния в крови в качестве биомаркера для прогнозирования и/или количественного описания хронической болезни почек у животного, где уровни магния в сравнении с заданным референтным значением обеспечивают обоснование для необходимости коррекции питания для лечения хронической болезни почек у животного, нуждающегося в этом.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы диагностики хронической болезни почек (ХБП) у животного, включающий: определение количества магния в образце крови животного; сравнение количества магния с заданными референтными значениями; где заданные референтные значения основаны на среднем содержании магния в крови в контрольной популяции; и где количество магния, находящееся ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения, указывает на наличие или вероятность ХБП.
Краткое описание чертежей
ФИГ. 1 показывает концентрации ФРФ–23 в плазме у кошек с азотемической ХБП на стадии 2–3 по классификации IRIS, распределенных по квартилям в соответствии с общей концентрацией магния в плазме.
ФИГ. 2A–2C показывают влияние магниевой добавки на общий магний, ФРФ–23 и фосфат в крови. Пунктирная линия означает верхнюю границу референтного интервала плазменного ФРФ–23 у гериатрических кошек (700 пг/мл).
ФИГ. 3A–3I показывают влияние магниевой добавки на общий магний (A), ФРФ–23 (B), креатинин (C), симметричный диметил–аргинин (СДМА (SDMA)) (D), фосфат (E), систолическое давление крови (F), калий (G), кальций (H) и паратиреоидный гормон (ПТГ) (I) у кошек с азотемической ХБП на стадии 2–3 по IRIS.
P
P
ФИГ. 4 показывает общую концентрацию магния в плазме у кошек на стадиях от 2 до 4 ХБП по IRIS. Значительно более высокие концентрации магния в плазме наблюдают у кошек на 4 стадии ХБП по IRIS (среднее 3,01 мг/дл; СО (SD) 1,206; <0,001) в сравнении с кошками на 2 стадии по IRIS (среднее 2,04 мг/дл; СО 0,261) и стадии 3 ХБП (среднее 2,04 мг/дл; СО 0,361). Частота распространения (95% ДИ (СI)) гипомагниемии равна 9% (4–14), 18% (7–29) и 10% (0–27), соответственно, на стадиях 2, 3 и 4 по IRIS. Частота распространения гипермагниемии значительно выше на стадии 4 по IRIS (50%; 95% ДИ 19–81; <0,001) по сравнению со стадией 2 по IRIS (3%; 95% ДИ 0–6) и 3 (6%; 95% ДИ 0–13). «Ящики» означают медианы с 25–м и 75–м процентилями, «усы» означают интервалы. Пунктирные линии помечают нижние и верхние границы референтного интервала для общего магния в плазме (1,73–2,57 мг/дл).
ФИГ. 5 показывает концентрации ФРФ–23 в плазме у кошек на стадии 2–4 ХБП по IRIS, поделенных по магниевому статусу. Кошки с гипомагниемией (tMg <1,73 мг/дл) имеют значительно более высокий плазменный ФРФ–23 по сравнению с нормомагниемическими кошками в пределах каждой стадии. «Ящики» означают медианы с 25–м и 75–м процентилями, «усы» означают интервалы. Пунктирная линия помечает верхнюю границу референтного интервала для ФРФ–23 в плазме (700 пг/мл).
P
P
ФИГ. 6 показывает концентрации ФРФ–23 в плазме нормофосфатемических (NP) и гиперфосфатемических (HP) кошек со 2 и 3 стадией ХБП по IRIS, поделенных по медианной плазменной концентрации tMg (2,04 мг/дл). Плазменный ФРФ–23 значительно выше у кошек с tMg ниже медианы как у нормофосфатемических (=0,003), так и гиперфосфатемических кошек (=0,004). «Ящики» означают медианы с 25–м и 75–м процентилями, «усы» означают интервалы. Пунктирная линия помечает верхнюю границу референтного интервала для плазменного ФРФ–23 (700 пг/мл).
P
P
P
ФИГ. 7 показывает кривую Каплана–Мейера, иллюстрирующую выживаемость в кошек с азотемической ХБП, сгруппированных по магниевому статусу. Кошки с гипомагниемией (голубая кривая; 1/20 цензурировано; ОР (HR) 2,92; 95% ДИ 1,78–4,82; <0,001) и гипермагниемией (серая кривая; 0/11 цензурировано; ОР 2,88; 95% ДИ 1,54–5,38; =0,001) при диагнозе азотемической ХБП находятся при повышенном риске смерти по сравнению с нормомагниемическими кошками (черная кривая; 23/143 цензурировано). Никакой существенной разницы в выживаемости не наблюдают между гипомагниемическими и гипермагниемическими кошками при одновариантном анализе (=0,951). Цензурированные случаи отмечены.
Подробное описание изобретения
На сегодняшний день сохраняется потребность в композициях кормов для домашних животных для лечения ХБП, а также в способах мониторинга прогрессирования ХБП и оптимизации терапевтических схем. Настоящая заявка относится к биомаркерам для диагностики ХБП у животных, включая, но не ограничиваясь ими, магний и ФРФ–23, и к способам лечения ХБП с их использованием. Настоящая заявка также предлагает корма для домашних животных, содержащие эффективное количество магния для лечения ХБП. Для ясности, но не в качестве ограничения, подробное описание раскрытого в настоящее время объекта изобретения поделено на следующие подразделы:
1. Определения.
2. Биомаркеры.
3. Способы лечения.
4. Конечные продукты.
1. ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Термины, используемые в данном описании, как правило, имеют свои обычные значения для данной области техники в контексте данного изобретения и в конкретном контексте, где используется каждый термин. Некоторые термины обсуждены ниже или в другом месте в описании, чтобы дать дополнительные указания специалисту при описании способов и композиций изобретения и как их реализовать и использовать.
В данном документе артикль «a» или «an» при использовании вместе с термином «содержащий» в формуле изобретения и/или в описании изобретения может означать «один», но также это согласуется со значением «один или больше», «по меньшей мере, один» и «один или больше, чем один». Кроме того, термины «имеющий», «включающий», «состоящий из» и «содержащий» являются взаимозаменяемыми, и специалист в данной области техники понимает, что эти термины являются неограничивающими терминами.
Термин «примерно» или «приблизительно» имеет значение в пределах допустимого интервала ошибок для конкретного значения, определенного специалистом в данной области техники, который будет зависеть отчасти от того, как значение измерено или определено, то есть, от ограничений измерительной системы. Например, «приблизительно» может иметь значение в пределах 3 или больше чем 3 стандартных отклонений в соответствии с практикой в данной области техники. С другой стороны, «приблизительно» может означать интервал до 20%, предпочтительно до 10%, более предпочтительно до 5% и еще более предпочтительно до 1% от заданного значения. С другой стороны, особенно в отношении биологических систем или процессов, термин может иметь значение в пределах порядка величины предпочтительно 5–кратного и более предпочтительно 2–кратного значения.
Термин «эффективное лечение» или «эффективное количество» вещества означает лечение или количество вещества, которых достаточно, чтобы вызвать положительные или желаемые результаты, включая клинические результаты, и, как таковые, «эффективное лечение» или «эффективное количество» зависят от ситуации, при которой их применяют. В контексте введения композиции с целью снижения риска ХБП и/или введения композиции для лечения или задержки прогрессирования ХБП эффективное количество композиции, описанной в изобретении, представляет собой количество, достаточное для лечения и/или устранения ХБП, а также ослабления симптомов и/или снижения вероятности ХБП. Эффективное лечение, описанное в изобретении, представляет собой лечение, достаточное для лечения и/или устранения ХБП, а также ослабления симптомов и/или снижения вероятности ХБП. Снижение может составлять уменьшение на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98% или 99% тяжести симптомов ХБП или вероятности ХБП. Эффективное количество может быть введено за один или несколько приемов введения. Вероятность эффективного лечения, описанного здесь, означает вероятность того, что лечение будет эффективным, то есть, достаточным для лечения и/или устранения ХБП, а также для ослабления симптомов.
Как используется в данном случае и как хорошо понимают в данной области техники, «лечение» представляет собой прием для получения полезных или желательных результатов, включая клинические результаты. Применительно к этому объекту изобретения полезные или желательные клинические результаты включают, но без ограничения, ослабление или устранение одного или нескольких симптомов, уменьшение степени заболевания, стабилизированное (то есть, не ухудшающееся) состояние заболевания, предотвращение заболевания, задержка или замедление развития болезни и/или улучшение или временное облегчение болезненного состояния. Снижение может составлять уменьшение на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98% или 99% тяжести осложнений или симптомов. «Лечение» также может означать продление срока жизни по сравнению с ожидаемым выживанием, если лечение не проводить.
Canis lupus familiaris
Felis domesticus
Термин «корм для домашних животных», или «кормовая композиция для домашних животных», или «пищевой продукт для домашних животных» или «готовый пищевой продукт для домашних животных» означает продукт или композицию, которые предназначены для употребления животным–компаньоном, таким как кошка, собака, морская свинка, кролик, птица или лошадь. Например, но не в порядке ограничения, животное–компаньон может представлять собой «домашнюю» собаку, например, . В некоторых вариантах осуществления животное–компаньон может представлять собой «домашнюю» кошку, такую как . «Корм для домашних животных», или «кормовая композиция для домашних животных», или «пищевой продукт для домашних животных» или «готовый пищевой продукт для домашних животных» включает любые продукты питания, корма, закуски, пищевые добавки, жидкости, напитки, лакомства, игрушки (жевательные и/или потребляемые игрушки), заменители пищи или заместители пищи.
Как используется в данном случае, термин «заданное референтное значение» или «референтное значение» относится к пороговому значению биомаркера, путем сравнения с которым может быть проведена диагностика ХБП. Референтное значение может представлять собой пороговое значение или референтный интервал. В некоторых вариантах осуществления референтное значение может быть получено из анализа ROC–кривой (график зависимости чувствительности от частоты ложно положительных заключений), выбирающего референтное значение как значение, которое максимально повышает чувствительность при одновременном сохранении специфичности выше определенного пользователем порога. В некоторых вариантах осуществления референтное значение может быть выбрано как значение, которое максимально повышает специфичность при одновременном сохранении чувствительности выше определенного пользователем порога, например, 80%–ную чувствительность. В некоторых вариантах осуществления референтное значение может представлять собой верхнюю границу интервала уровней биомаркера, полученного из популяции здоровых субъектов, если биомаркер увеличивается у субъектов, имеющих ХБП, то есть, заданный алгоритм имеет позитивную логику. Наоборот, референтное значение может представлять собой нижнюю границу интервала уровней биомаркера, полученного из популяции здоровых субъектов, если биомаркер снижается у субъектов, имеющих ХБП, то есть, имеет отрицательную логику.
Термин «контрольная популяция» означает контрольную группу животных, которая не имеет хронической болезни почек и у которой не производилось никаких манипуляций с переменными. Выбор животных, включаемых в контрольные группы, может быть основан на генетическом фоне, среднем состоянии здоровья, возрасте, истории питания, вакцинации или профилактическом лечении. В некоторых вариантах осуществления контрольной популяцией может быть группа, по меньшей мере, из 3, предпочтительно, по меньшей мере, 10, более предпочтительно, по меньшей мере, 50 животных сходного генетического фона, возраста и среднего уровня здоровья.
2. БИОМАРКЕРЫ
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает биомаркеры и способы применения биомаркеров для диагностики животных, как имеющих риск хронической болезни почек (ХБП), и/или для определения прогрессирования ХБП.
Термин «биомаркер», используемый в данном изобретении, относится к любому биологическому соединению, связанному с прогрессирующим развитием рассматриваемого заболевания. В частности, биомаркером для диагностики ХБП является любое биологическое соединение, связанное с прогрессированием ХБП. Лечение болезни почек может быть скорректировано в зависимости от прогрессирования ХБП, на которое указывают биомаркеры, связанные с развитием ХБП, а прогноз выздоровления можно быть определен за счет мониторинга биомаркеров.
В некоторых вариантах осуществления биомаркером является магний. В некоторых вариантах осуществления биомаркером является общий магний в крови животного. В некоторых вариантах осуществления биомаркером является магний в сыворотке животного. В некоторых вариантах осуществления биомаркер представляет собой магний в плазме животного. В некоторых вариантах осуществления биомаркером является магний в образце мочи животного.
В некоторых вариантах осуществления изменение в уровне магния связано с ХБП. В некоторых вариантах осуществления повышенный уровень магния указывает на прогрессирование ХБП и/или повышенный риск развития ХБП. В некоторых вариантах осуществления повышенный уровень магния указывает на прогрессирование ХБП и/или повышенный риск развития ХБП. В некоторых вариантах осуществления более высокий уровень магния по сравнению с заданными референтными значениями, основанными на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции, указывает на прогрессирование ХБП и/или повышенный риск развития ХБП. В некоторых вариантах осуществления более низкий уровень магния по сравнению с заданными референтными значениями, основанными на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции, указывает на прогрессирование ХБП и/или повышенный риск развития ХБП.
В некоторых вариантах осуществления изменение в уровне магния связано с показателем смертности и/или коэффициентом выживаемости. В некоторых вариантах осуществления повышенный уровень магния указывает на повышенный показатель смертности и/или пониженный коэффициент выживаемости. В некоторых вариантах осуществления пониженный уровень магния указывает на повышенный показатель смертности и/или пониженный коэффициент выживаемости. В некоторых вариантах осуществления более высокий уровень магния по сравнению с заданными референтными значениями, основанными на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции, указывает на более высокий показатель смертности и/или более низкий коэффициент выживаемости. В некоторых вариантах осуществления более низкий уровень магния по сравнению с заданными референтными значениями, основанными на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции, указывает на более высокий показатель смертности и/или более низкий коэффициент выживаемости.
В некоторых вариантах осуществления изменение уровня магния связано с повышенным показателем смертности гиперфосфатемического животного. В некоторых вариантах осуществления повышенный уровень магния указывает на повышенный показатель смертности гиперфосфатемического животного. В некоторых вариантах осуществления пониженный уровень магния указывает на повышенный показатель смертности гиперфосфатемического животного. В некоторых вариантах осуществления более высокий уровень магния по сравнению с заданными референтными значениями, основанными на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции, указывает на более высокий показатель смертности гиперфосфатемического животного. В некоторых вариантах осуществления более низкий уровень магния по сравнению с заданными референтными значениями, основанными на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции, указывает на более высокий показатель смертности гиперфосфатемического животного.
В некоторых вариантах осуществления способ диагностики и лечения животного с риском хронической болезни почек (ХБП) включает: получение образца крови животного; определение количества магния в образце крови животного; сравнение количества магния с заданными референтными значениями; где заданные референтные значения основаны на средних уровнях магния в крови в контрольной популяции; диагностирование животного, как имеющего риск ХБП, если количество магния находится ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения; и обеспечение животного схемой лечения, если количество магния находится ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения.
В некоторых вариантах осуществления биомаркер также включает фактор роста фибробластов 23 (ФРФ–23 (FGF–23)). В некоторых вариантах осуществления биомаркером является общий ФРФ–23 в крови животного. В некоторых вариантах осуществления биомаркером является ФРФ–23 в сыворотке животного. В некоторых вариантах осуществления биомаркером является ФРФ–23 в плазме животного. В некоторых вариантах осуществления биомаркером является ФРФ–23 в образце мочи животного.
В некоторых вариантах осуществления уровень магния связан в обратной зависимости с уровнями ФРФ–23 у животного. В некоторых вариантах осуществления пониженный уровень магния указывает на повышенный уровень ФРФ–23 у животного. В некоторых вариантах осуществления повышенный уровень магния указывает на пониженный уровень ФРФ–23 у животного.
В некоторых вариантах осуществления способ диагностики и лечения животного с риском хронической болезни почек (ХБП) также включает стадии: определения количества ФРФ–23 в образце крови животного; сравнение количества ФРФ–23 с третьим заданным референтным значением; где заданное референтное значение основано на среднем уровне ФРФ–23 в крови в контрольной популяции и где более высокий уровень ФРФ–23 по сравнению со вторым заданным референтным значением указывает на более высокую вероятность эффективного лечения.
В некоторых вариантах осуществления биомаркер включает, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер. В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер выбирают из почечных биомаркеров, раскрытых в публикации США № 2012/0077690 A1, публикации США № 2013/0323751 A1, публикациях EP 3112871 A1, EP 2462445 A1 и EP 3054301 A1. В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер выбирают из группы, включающей фосфат, креатинин, азот мочевины крови (АМК) и паратиреоидный гормон (ПТГ). В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер выбирают из группы, включающей фосфат, креатинин, азот мочевины крови (АМК), паратиреоидный гормон (ПТГ), симметричный диметиларгинин (СДМА (SDMA)), систолическое давление крови, калий, общий кальций, гиалуроновую кислоту, рецептор смерти 5, трансформирующий фактор роста β1, ферритин, бета–глобин, каталазу, альфа–глобин, рецептор эпидермального фактора роста пути субстрата 8, предшественник изоформы муцина, эзрин, дельта–глобин, моезин, изоформу фосфопротеина, аннексин A2, миоглобин, гемопексин, ингибитор сериновой протеиназы, ингибитор сериновой пептидазы, предшественник антигена CD14, белок–предшественник изоформы фибронектина, белок–предшественник ангиотензиногена, предшественник компонента комплемента, карбоангидразу, предшественник уромодулина, фактор H комплемента, компонент 4 BP комплемента, гепарансульфат–протеогликан 2, olfactomedian–4, богатый лейцином альфа–2 гликопротеин, белок 167 безымянного пальца, интер–альфа–ингибитор глобулина H4, гепарансульфат–протеогликан 2, N–ацилсфингозинаминогидролаза, ингибитор сериновой протеиназы член 1 клады A, муцин 1, изоформу 1 кластерина, прикрепленный сигнальный белок 1 мозговой обильной оболочки, дипептидазу 1, белок–предшественник изоформы 5 фибронектина 1, белок–предшественник ангиотензиногена, карбоангидразу, предшественник уромодулина, ингибитор металлопротеиназ 2, белок 7, связывающий инсулиноподобный фактор роста, иммуноглобулин A, иммуноглобулин G1, иммуноглобулин G2, альфа–1 антитрипсин, Р–компонент сывороточного амилоида, фактор роста гепатоцитов, молекулу 1 межклеточной адгезии, бета–2–гликопротеин 1, интерлейкин–1–бета, нейтрофильную эластазу, член 11В надсемейства рецепторов факторов некроза опухоли, интерлейкин–11, катепсин D, C–C мотив хемокина 24, C–X–C мотив хемокина 6, C–C мотив хемокина 13, C–X–C мотив хемокинов–1, –2 и –3, матрилизин, альфа–цепь рецептора интерлейкина–2, белок–3, связывающий инсулиноподобный фактор роста, макрофагальный колониестимулирующий фактор 1, аполипопротеин C–I, аполипопротеин C–II, фибриноген альфа–цепи, фибриноген А–альфа–цепи, кининоген, интер–альфа–ингибитор H4 (ITIH4), кератин типа I цитоскелета 10, цистатин А, цистатин B и их комбинации.
В некоторых вариантах осуществления уровень магния связан в обратной зависимости с кровяным давлением животного. В некоторых вариантах осуществления пониженный уровень магния указывает на повышенное кровяное давление, гипертензию и/или повышенный риск развития гипертензии у животного. В некоторых вариантах осуществления повышенный уровень магния указывает на пониженное кровяное давление у животного. В некоторых вариантах осуществления низкий уровень магния по сравнению со средним уровнем в группе животного указывает на гипертензию или повышенный риск развития гипертензии у животного. В некоторых вариантах осуществления кровяное давление выбирают из группы, включающей систолическое давление, диастолическое давление, системное артериальное давление, среднее артериальное давление, пульсовое артериальное давление, системное венозное давление, давление в легочной артерии и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления кровяное давление измеряют как систолическое давление. В некоторых вариантах осуществления кровяное давление измеряют как диастолическое давление.
В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер находится в крови животного. В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер находится в сыворотке животного. В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер находится в плазме животного. В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер находится в образце мочи животного.
В некоторых вариантах осуществления способ диагностики и лечения животного с риском хронической болезни почек (ХБП) также включает определение количества, по меньшей мере одного дополнительного биомаркера в образце крови и сравнение количества, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера с четвертым заданным референтным значением. В некоторых вариантах осуществления количество, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера, находящееся выше четвертого заданного референтного значения, указывает на более высокую вероятность эффективного лечения. В некоторых вариантах осуществления количество, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера, находящееся ниже четвертого заданного референтного значения, указывает на более высокую вероятность эффективного лечения.
В некоторых вариантах осуществления заданное референтное значение биомаркера может быть основано на среднем количестве биомаркера в тестируемой крови у контрольной популяции. Контрольная популяция может представлять собой группу, по меньшей мере, из 3, предпочтительно, по меньшей мере, из 10, более предпочтительно, по меньшей мере, из 50 животных схожего генетического фона, возраста и среднего состояния здоровья.
В некоторых вариантах осуществления первое заданное референтное значение магния в образце крови составляет меньше чем приблизительно 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 2% или 1% от среднего количества магния в крови у контрольной популяции. В некоторых вариантах осуществления первое заданное референтное значение магния в образце крови составляет меньше чем приблизительно 50% от среднего количества магния в крови у контрольной популяции. В некоторых вариантах осуществления второе заданное референтное значение магния в образце крови составляет больше чем приблизительно 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 250%, 300%, 400%, 500%, 600%, 700%, 800%, 900% или 1000% от среднего количества магния в крови у контрольной популяции. В некоторых вариантах осуществления второе заданное референтное значение магния в образце крови составляет больше чем приблизительно 120% от среднего количества магния в крови у контрольной популяции.
В некоторых вариантах осуществления третье заданное референтное значение ФРФ–23 в образце крови составляет больше чем приблизительно 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 250%, 300%, 400%, 500%, 600%, 700%, 800%, 900% или 1000% от среднего количества ФРФ–23 в крови у контрольной популяции. В некоторых вариантах осуществления второе заданное референтное значение ФРФ–23 в образце крови составляет больше чем приблизительно 150% от среднего количества ФРФ–23 в крови у контрольной популяции.
В некоторых вариантах осуществления количества биомаркеров у животного могут быть определены и выражены количественно с помощью любых средств, известных в данной области. В некоторых вариантах осуществления количество магния определяют с помощью масс–спектроскопии, например, с помощью сочетания сверхэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс–спектрометрией и ионизацией электрораспылением (UPLC–ESI–MS/MS) или с помощью масс–спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ICP–MS), флуоресцентным методом или люминесцентным методом. В некоторых вариантах осуществления для определения количества магния используют Magnesium Green, Mag–Fura–2 и/или Mag–Indo–1.
В некоторых вариантах осуществления количество ФРФ–23 определяют с помощью метода обнаружения на основе антител. В некоторых вариантах осуществления антитело к ФРФ–23 используют для определения количества ФРФ–23. В некоторых вариантах осуществления количество ФРФ–23 определяют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). В некоторых вариантах осуществления количество ФРФ–23 определяют с помощью сэндвич–варианта ELISA.
В некоторых вариантах осуществления могут быть использованы другие методы определения, такие как другие спектроскопические методы, хроматографические методы, методики с мечеными атомами или количественные химические методы. В некоторых вариантах осуществления количество биомаркеров у животного и референтные значения определяют одним и тем же методом.
3. СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы лечения или задержки прогрессирования хронической болезни почек (ХБП) у животного, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах осуществления способ включает обеспечение животного композицией, содержащей магний или его соль, для лечения животного.
Композиции и способы раскрытого в настоящее время объекта изобретения могут быть полезны для ряда млекопитающих, включая не относящихся к человеку млекопитающих, таких как не относящиеся к человеку приматы (например, обезьяны, шимпанзе и т.д.), домашние питомцы/животные–компаньоны (например, собаки, кошки, лошади и т.д.), сельскохозяйственные животные (например, козы, овцы, свиньи, крупный рогатый скот и т.д.), лабораторные животные (например, мыши, крысы и т.д.) и дикие животные и животные в зоопарке (например, волки, медведи, олени и т.д.).
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытого в настоящее время объекта изобретения, например, животным является моногастричное животное (то есть, млекопитающее, имеющее один желудок), такое как, например, примат, не являющийся человеком, собака, кошка, кролик, лошадь или свинья.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытого в настоящее время объекта изобретения животным является плотоядное млекопитающее, то есть, употребляющее мясо млекопитающее.
В других вариантах осуществления раскрытого в настоящее время объекта изобретения животным является всеядное млекопитающее, то есть, млекопитающее, которое употребляет как растения, так и мясо.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления субъектом является кошка или собака.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления субъект имеет риск хронической болезни почек.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления не известно, что субъект имеет риск хронической болезни почек.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления субъект страдает от хронической болезни почек.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления не известно, что субъект страдает хронической болезнью почек.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления субъект находится на лечении хронического заболевания почек. В некоторых неограничивающих вариантах лечение представляет собой диетотерапию.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы лечения или задержки прогрессирования хронической болезни почек (ХБП) у животного, где способ включает: определение количества магния в образце крови животного; сравнение количества магния с заданным референтным значением; где заданное референтное значение основано на среднем уровне магния в крови у контрольной популяции; и обеспечение животного композицией, содержащей магний или его соль, для лечения животного, если количество магния ниже заданного референтного значения.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы лечения или задержки прогрессирования хронической болезни почек (ХБП) у животного, нуждающегося в этом, где животное имеет дефицит магния по сравнению с заданным референтным значением, и способ включает: введение композиции, содержащей эффективное количество магния или его соли, и где заданное референтное значение основано на среднем уровне магния в крови в контрольной популяции.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы лечения или задержки прогрессирования хронической болезни почек (ХБП) у животного, нуждающегося в это, где способ включает: определение количества магния в образце крови животного; сравнение количества магния с заданными референтными значениями; где заданные референтные значения основаны на средних уровнях магния в крови у контрольной популяции; и обеспечение животного схемой лечения, если количество магния находится ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения.
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает способы диагностики и лечения животных с риском хронической болезни почек (ХБП), где способ включает: получение образца крови животного; определение количества магния в образце крови животного; сравнение количества магния с заданными референтными значениями; где заданные референтные значения основаны на средних уровнях магния в крови у контрольной популяции; диагностирование животного, как имеющего риск ХБП, если количество магния находится ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения; и обеспечение животного схемой лечения, если количество магния находится ниже первого заданного значения или выше второго заданного референтного значения.
В некоторых вариантах осуществления способ также включает стадии определения количества ФРФ–23 в образце крови животного; сравнение количества ФРФ–23 с третьим заданным референтным значением; где заданное референтное значение основано на среднем уровне ФРФ–23 в крови у контрольной популяции и где более высокий уровень ФРФ–23 по сравнению со вторым заданным референтным значением указывает на более высокую вероятность эффективного лечения.
В некоторых вариантах осуществления способ диагностики и лечения животного с риском хронической болезни почек (ХБП) также включает определение количества, по меньшей мере одного дополнительного биомаркера в образце крови и сравнение количества, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера с четвертым заданным референтным значением. В некоторых вариантах осуществления количество, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера, находящееся выше четвертого заданного референтного значения, указывает на более высокую вероятность эффективного лечения. В некоторых вариантах количество, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера, находящееся ниже четвертого заданного референтного значения, указывает на более высокую вероятность эффективного лечения.
В некоторых вариантах осуществления способ по любому из предыдущих пунктов также включает: определение количества, по меньшей мере одного дополнительного биомаркера, выбираемого из группы, включающей фосфат, креатинин, азот мочевины крови (АМК) и паратиреоидный гормон (ПТГ), в образце крови и сравнение количества, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера с четвертым заданным референтным значением, где количество фосфата, креатинина, азота мочевины крови (АМК) и/или паратиреоидного гормона (ПТГ) выше четвертого заданного референтного значения указывает на более высокую вероятность эффективного лечения.
В некоторых вариантах осуществления четвертое заданное референтное значение одного дополнительного биомаркера составляет больше чем приблизительно 110% или больше среднего значения одного дополнительного биомаркера в контрольной популяции (то есть, на 10% выше среднего значения). В других вариантах осуществления, четвертое заданное референтное значение одного дополнительного биомаркера составляет больше чем приблизительно 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 250%, 300%, 400%, 500%, 600%, 700%, 800%, 900%, 1000% или больше от среднего значения одного дополнительного биомаркера в контрольной популяции.
В некоторых вариантах осуществления способ также включает поддержание животного на композиции в течение достаточного периода времени, чтобы снизить количество ФРФ–23 у животного.
В некоторых вариантах осуществления способы, предложенные в раскрытом в настоящее время объекте изобретения, также включают: определение кровяного давления животного, сравнение кровяного давления с пятым заданным референтным значением и введение схемы профилактики или лечения гипертензии, если кровяное давление выше чем пятое заданное референтное значение. В некоторых вариантах осуществления кровяное давление выбирают из группы, включающей систолическое давление, диастолическое давление, артериальное системное давление, среднее артериальное давление, пульсовое артериальное давление, венозное системное давление, давление в легочной артерии и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления кровяным давлением является систолическое давление. В некоторых вариантах осуществления кровяным давлением является диастолическое давление.
В некоторых вариантах осуществления пятое заданное референтное значение кровяного давления составляет больше чем приблизительно 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200% или больше от среднего кровяного давления в контрольной популяции. В некоторых вариантах осуществления пятое заданное референтное значение составляет больше чем приблизительно 120% от среднего кровяного давления в контрольной популяции.
В некоторых вариантах осуществления схема лечения включает, по меньшей мере, одну схему лечения, выбираемую из группы, включающей диетотерапию, гемодиализ, заместительную почечную терапию, выведение повреждающих почки соединений, трансплантацию почки, откладывание или исключение повреждающих почки процедур, введение модифицирующего диуретика и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления схема лечения включает, по меньшей мере, одну схему лечения, выбираемую из группы, включающей введение композиции, содержащей эффективное количество магния или его соли, снижение потребления фосфата, снижение потребления белка, введение полиненасыщенных жирных кислот, проведение терапии фосфатным связующим, введение калия, снижение потребления натрия с пищей, введение щелочных добавок и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления схема лечения включает любые способы лечения, описанные в публикации Jonathan D. Forster, «Update on Mineral and Bone Disorders in Chronic Kidney Disease», Vet Clin North Am Small Anim Pract. 2016 Nov;46(6):1131–49, содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей ее полноте.
В некоторых вариантах осуществления схема лечения представляет собой диетотерапию. В некоторых вариантах осуществления диетотерапия включает диету, выбираемую из группы, включающей высокомагниевую диету, низкофосфорную диету, низкобелковую диету, малосолевую диету, высококалиевую диету, диету с полиненасыщенными жирными кислотами (PUFA) и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления диетотерапия представляет собой одну из диетотерапий, описанных в публикации Elliott et al., «Dietary therapy for feline chronic kidney disease», Encyclopedia of feline clinical nutrition, 2–nd edition, 2015, содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей ее полноте.
В некоторых вариантах осуществления композиция представляет собой пищевой продукт для домашних животных. В некоторых вариантах осуществления количество магния находится в интервале приблизительно между 200 и 500 мг/1000 ккал.
В некоторых вариантах осуществления композиция представляет собой диетическую добавку. В некоторых вариантах осуществления количество магния, добавленного к пищевому продукту для домашних животных, находится в интервале приблизительно между 50 и 200 мг/1000 ккал.
В некоторых вариантах осуществления магний в композиции находится в количестве приблизительно от 10 до 1000 мг/ккал. Например, но не в порядке ограничения, магний может присутствовать в количестве приблизительно от 10 до 100 мг/ккал, приблизительно от 20 до 100 мг/ккал, приблизительно от 10 до 200 мг/ккал, приблизительно от 20 до 200 мг/ккал, приблизительно от 50 до 100 мг/ккал, приблизительно от 50 до 200 мг/ккал, приблизительно от 50 до 300 мг/ккал, приблизительно от 100 до 200 мг/ккал, приблизительно от 100 до 300 мг/ккал, приблизительно от 100 до 400 мг/ккал, приблизительно от 100 до 500 мг/ккал, приблизительно от 200 до 500 мг/ккал, приблизительно от 300 до 500 мг/ккал, приблизительно от 200 до 600 мг/ккал, приблизительно от 200 до 700 мг/ккал, приблизительно от 200 до 800 мг/ккал, приблизительно от 300 до 600 мг/ккал, приблизительно от 300 до 700 мг/ккал, приблизительно от 300 до 800 мг/ккал, приблизительно от 400 до 600 мг/ккал, приблизительно от 400 до 700 мг/ккал, приблизительно от 400 до 800 мг/ккал или приблизительно от 500 до 800 мг/ккал. В некоторых вариантах осуществления магний в композиции находится в количестве приблизительно от 200 до 500 мг/ккал, например, приблизительно в количестве 300 мг/ккал. В некоторых вариантах осуществления магний в композиции находится в количестве приблизительно от 50 до 200 мг/ккал, например, приблизительно в количестве 100 мг/ккал.
Магний, используемый в композиции и способах раскрытого в настоящее время объекта изобретения, может находиться в форме соли магния или координационного комплекса магния.
−
−
−
2−
2−
−
−
−
3−
2−
−
−
2−
−
2+
3
3
3
4
4
3
2
4
В некоторых вариантах осуществления магний представляет собой магниевую соль, например, но без ограничения, ацетат, соль ТФУК или формиат. В некоторых вариантах осуществления магниевая соль содержит анион (−) (например, но без ограничения, анион аминокислоты, Cl, F, Br, O, CO, HCO, OH, NO, PO, SO, CHCOO, HCOO, CO и CN), связанный ионной связью с Mg.
В некоторых вариантах осуществления магний находится в форме неорганической соли магния. В некоторых вариантах осуществления магний представляет собой оксид магния. В некоторых вариантах оксид магния присутствует в количестве не больше чем 0,25% масс. от массы композиции (например, корма для домашних животных или диетической добавки), предоставляемой животному. В некоторых вариантах осуществления оксид магния присутствует в количестве не больше чем 0,22% масс. от массы композиции. В некоторых вариантах оксид магния находится в количестве не больше чем 0,2% масс. от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления магний находится в форме органической соли магния.
В некоторых вариантах осуществления магниевое соединение представляет собой координационный комплекс магния. В некоторых вариантах осуществления координационный комплекс магния представляет собой хлорофилл. В некоторых вариантах осуществления соединение магния представляет собой хлорофилл a, хлорофилл b, хлорофилл c1, хлорофилл c2, хлорофилл d, хлорофилл f или их комбинацию.
В некоторых вариантах осуществления магний можно скармливать животному трижды каждый день, дважды в день, один раз в день, один раз каждые два дня, один раз каждые три дня, один раз каждые пять дней, один раз каждые шесть дней, один раз в неделю, один раз каждые две недели, раз в три недели или раз в месяц. В некоторых вариантах осуществления магний можно давать животному один или несколько раз в день. Например, но не в порядке ограничения, магний можно вводить один раз, два раза, три, четыре, пять или больше раз в день. В некоторых вариантах осуществления магний можно давать животному постоянно, например, когда животное держат на постоянно доступном запасе кормовой композиции для домашних животных, содержащей магний.
4. ГОТОВЫЕ ПРОДУКТЫ
В некоторых неограничивающих вариантах осуществления раскрытый в настоящее время объект изобретения предлагает продукты, подходящие для лечения или задержки прогрессирования хронической болезни почек (ХБП). В некоторых вариантах осуществления продукт представляет собой кормовую композицию для домашних животных. В некоторых вариантах осуществления кормовая композиция для домашних животных содержит эффективное количество магния. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных может находиться в форме соли магния или координационного комплекса магния. В некоторых вариантах осуществления магний находится в любой из форм, описанных в разделе 3 подробного описания.
В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве приблизительно от 10 до 1000 мг/ккал. Например, но не порядке ограничения, магний может находиться в количестве приблизительно от 10 до 100 мг/ккал, приблизительно от 20 до 100 мг/ккал, приблизительно от 10 до 200 мг/ккал, приблизительно от 20 до 200 мг/ккал, приблизительно от 50 до 100 мг/ккал, приблизительно от 50 до 200 мг/ккал, приблизительно от 50 до 300 мг/ккал, приблизительно от 100 до 200 мг/ккал, приблизительно от 100 до 300 мг/ккал, приблизительно от 100 до 400 мг/ккал, приблизительно от 100 до 500 мг/ккал, приблизительно от 200 до 500 мг/ккал, приблизительно от 300 до 500 мг/ккал, приблизительно от 200 до 600 мг/ккал, приблизительно от 200 до 700 мг/ккал, приблизительно от 200 до 800 мг/ккал, приблизительно от 300 до 600 мг/ккал, приблизительно от 300 до 700 мг/ккал, приблизительно от 300 до 800 мг/ккал, приблизительно от 400 до 600 мг/ккал, приблизительно от 400 до 700 мг/ккал, приблизительно от 400 до 800 мг/ккал или приблизительно от 500 до 800 мг/ккал. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве приблизительно от 200 до 500 мг/ккал, например, приблизительно 300 мг/ккал. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве приблизительно от 50 до 200 мг/ккал, например, приблизительно в количестве 100 мг/ккал.
В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве приблизительно от 10 до 1000 мг на суточную порцию или стандартную дозу. Например, но не в порядке ограничения, магний может находиться в количестве приблизительно от 10 до 500 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 10 до 400 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 10 до 300 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 10 до 200 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 20 до 200 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 30 до 200 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 40 до 200 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 50 до 200 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 50 до 150 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 50 до 140 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 50 до 130 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 50 до 120 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 500 до 110 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 50 до 100 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 10 до 50 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 100 до 150 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 150 до 200 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 100 до 200 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 100 до 300 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 100 до 400 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 100 до 500 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 200 до 500 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 300 до 500 мг на суточную порцию или стандартную дозу, приблизительно от 200 до 800 мг на суточную порцию или стандартную дозу или приблизительно от 500 до 1000 мг на суточную порцию или стандартную дозу. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве приблизительно от 20 до 200 мг на суточную порцию или стандартную дозу, например, приблизительно 100 мг на суточную порцию или стандартную дозу. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве приблизительно от 50 до 100 мг на суточную порцию или стандартную дозу, например, приблизительно 75 мг на суточную порцию или стандартную дозу. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве приблизительно от 60 до 90 мг на суточную порцию или стандартную дозу.
В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве приблизительно от 0,001 до 10% масс. от массы кормовой композиции для домашних животных. Например, но не в порядке ограничения, магний может находиться в количестве приблизительно от 0,001 до 0,01% масс. от массы композиции, приблизительно от 0,01 до 0,1% масс., приблизительно от 0,1 до 1% масс., приблизительно от 1 до 10% масс., приблизительно от 0,01 до 0,5% масс., приблизительно от 0,01 до 0,25% масс., приблизительно от 0,01 до 0,2% масс., приблизительно от 0,01 до 0,15% масс., приблизительно от 0,01 до 0,1% масс., приблизительно от 0,01 до 0,05% масс., приблизительно от 0,1 до 0,15% масс., приблизительно от 0,1 до 0,2% масс., приблизительно от 0,1 до 0,25% масс., приблизительно от 0,1 до 0,5% масс., приблизительно от 0,5 до 1% масс., приблизительно от 0,1 до 2% масс., приблизительно от 0,1 до 5% масс., приблизительно от 0,1 до 10% масс., приблизительно от 2 до 10% масс. и приблизительно от 5 до 10% масс. от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве не больше чем приблизительно 0,25% масс. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве не больше чем приблизительно 0,2% масс. В некоторых вариантах осуществления магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве не больше чем приблизительно 0,15% масс. В некоторых вариантах магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве не больше чем приблизительно 0,1% масс. В некоторых вариантах магний в кормовой композиции для домашних животных находится в количестве не больше чем приблизительно 0,05% масс.
В некоторых вариантах осуществления кормовую композицию для домашних животных по раскрытому в настоящее время объекту изобретения можно давать животному трижды каждый день, дважды каждый день, один раз в день, один раз каждые два дня, один раз каждые три дня, один раз каждые четыре дня, один раз каждые пять дней, один раз каждые шесть дней, один раз в неделю, один раз каждые две недели, один раз каждые три недели или один раз каждый месяц. В некоторых вариантах осуществления кормовую композицию для домашних животных можно давать животному один раз или несколько раз в день. Например, но не в порядке ограничения, кормовая композиция для домашних животных может быть введена один, два, три, четыре, пять или больше раз в день. В некоторых вариантах осуществления кормовую композицию для домашних животных можно давать животному постоянно, например, когда животное поддерживается на постоянно доступном запасе кормовой композиции для домашних животных.
В некоторых вариантах осуществления рецептура раскрытого в настоящее время объекта изобретения может также содержать дополнительный активный агент. Неограничивающие примеры дополнительных активных агентов, которые могут присутствовать в рецептуре раскрытого в настоящее время объекта изобретения, включают питательное вещество (например, аминокислоты, белки, жирные кислоты, карбогидраты, сахара, нуклеиновые кислоты, нуклеотиды, витамины, минералы и др.), антиангиогенное средство, стероид, ингибитор mTOR (например, эверолимус), бета–блокатор (например, пропранолол) и/или средство, которое снижает кровяное давление.
В некоторых вариантах осуществления кормовая композиция для домашних животных может также содержать добавки, известные в данной области техники. В некоторых вариантах осуществления такие добавки присутствуют в количествах, которые не ухудшают цель и эффект, обеспечиваемые раскрытым в настоящее время объектом изобретения. Примеры предполагаемых добавок включают, но без ограничения, вещества, которые функционально полезны для улучшения почечной функции, вещества со стабилизирующим эффектом, органолептические вещества, технологические добавки, вещества, которые усиливают поедаемость, красящие вещества и вещества, которые обеспечивают питательные преимущества. В некоторых вариантах осуществления стабилизирующие вещества включают, но без ограничения, вещества, которые, как правило, увеличивают срок годности композиции. В некоторых вариантах осуществления такие вещества включают, но без ограничения, консерванты, синергисты и секвестранты, консервирующие газы, стабилизаторы, эмульгаторы, загустители, желирующие агенты и увлажнители. В некоторых вариантах осуществления эмульгаторы и/или загустители включают, например, желатин, простые эфиры целлюлозы, крахмал, сложные эфиры крахмала, простые эфиры крахмала и модифицированные крахмалы.
В некоторых вариантах осуществления добавки для окрашивания, поедаемости и питательных целей включают, например, красители; оксид железа, хлорид натрия, цитрат калия, хлорид калия и другие пищевые соли; витамины; минералы; и вкусо–ароматические добавки. Количество таких добавок в композиции, как правило, составляет приблизительно до 5% (сухой основы композиции).
В некоторых вариантах осуществления кормовая композиция для домашних животных представляет собой биологически активную добавку. В некоторых вариантах осуществления биологически активные добавки включают, например, корм, используемый с другим кормом для улучшения питательного баланса или эффективности в целом. В некоторых вариантах осуществления биологически активные добавки включают композиции, которые вводят в неразбавленном виде в качестве добавки к другим кормам, обеспечивают свободу выбора с другими частями рациона животного, которые доступны отдельно, или которые разбавляют и смешивают с обычным кормом животного для получения полноценного корма. AAFCO, например, предлагает обсуждение добавок в публикации the American Feed Control Officials, Incorp. Official Publication, p. 220 (2003). Добавки могут находиться в различных формах, включая, например, порошки, жидкости, сиропы, пилюли, капсулированные композиции и др.
В некоторых вариантах осуществления кормовая композиция для домашних животных является лакомством. В некоторых вариантах осуществления лакомства включают, например, композиции, которые побуждают животное есть не во время приема пищи. В некоторых вариантах осуществления кормовая композиция для домашних животных представляет собой лакомство для собак, например, жевательные кости. Лакомства могут быть питательными, где композиция содержит одно или несколько питательных веществ, и могут, например, иметь состав, описанный выше для корма. Непитательные лакомства охватывают любые другие нетоксичные лакомства.
В некоторых вариантах осуществления магний по раскрытому в настоящее время объекту изобретения может быть введен в композицию во время переработки рецептуры, например, при проведении смешения и/или после смешения других компонентов композиции. Распределение этих компонентов в композиции может быть выполнено обычными средствами.
В некоторых вариантах осуществления кормовые композиции для домашних животных по раскрытому в настоящее время объекту изобретения могут быть получены в законсервированной или влажной форме с использованием обычных способов получения корма для домашних животных. В некоторых вариантах осуществления измельченные белковые ткани животного (например, млекопитающего, птицы и/или рыбы) смешивают с другими ингредиентами, включающими рыбий жир, злаковые зерна, другие сбалансированные по питательным веществам ингредиенты, специальные добавки (например, витаминные и минеральные смеси, неорганические соли, целлюлозу и свекловичный жом, объемообразующие агенты и т.п.), и также добавляют воду в количестве, достаточном для переработки. Эти ингредиенты смешивают в емкости, приемлемой для нагревания, пока компоненты смешивают. Нагревание смеси может быть выполнено с использованием любого подходящего метода, такого как, например, прямое впрыскивание пара или с использованием емкости, снабженной теплообменником. После добавления последнего ингредиента смесь нагревают до температуры в интервале приблизительно от 50 до 212°F (122–414°С). Температуры за пределами этого интервала допустимы, но могут быть промышленно непрактичными без применения других технологических добавок. При нагревании до подходящей температуры материал, как правило, будет находиться в форме густой жидкости. Густой жидкостью заполняют консервные банки. Накладывают крышку и герметично закрывают контейнер. Затем закрытую консервную банку помещают в обычное оборудование для стерилизации содержимого. Как правило, стерилизация может быть выполнена при температурах больше чем приблизительно 230°F (446°С) в течение соответствующего времени, которое зависит, например, от используемой температуры и композиции.
В некоторых вариантах осуществления кормовые композиции для домашних животных по раскрытому в настоящее время объекту изобретения могут быть приготовлены в сухой форме с использованием обычных способов. В некоторых вариантах осуществления сухие ингредиенты, включающие, например, источники животного белка, источники растительного белка, зерно и т.д., измельчают и смешивают вместе. В некоторых вариантах осуществления затем добавляют смоченные или жидкие ингредиенты, включающие жиры, масла, источники животного белка, воду и т.д., и смешивают с сухой смесью. В некоторых вариантах осуществления смесь затем перерабатывают в сухой корм или аналогичные сухие кусочки. В некоторых вариантах осуществления кормовая композиция для домашних животных представляет собой сухой корм. В некоторых вариантах осуществления сухой корм получают с использованием экструзионного способа, в котором смесь сухих и влажных ингредиентов подвергают механической обработке при высоком давлении и высокой температуре, принудительно пропускают через небольшие отверстия и разрезают на гранулы сухого корма с помощью вращающегося ножа. В некоторых вариантах осуществления влажные гранулы сухого корма затем сушат и необязательно покрывают одним или несколькими локальными покрытиями, которые могут включать, например, отдушки, жиры, масла, порошки и т.п. В некоторых вариантах осуществления гранулы сухого корма также могут быть изготовлены из теста с использованием процесса выпечки, а не экструзии, когда тесто помещают в форму перед обработкой сухим жаром.
В некоторых вариантах осуществления лакомства по раскрытому в настоящее время объекту изобретения могут быть получены, например, с помощью процессов экструзии или выпечки аналогично экструзии и выпечке, описанным выше для сухого корма.
Примеры
Раскрытый в настоящее время объект изобретения можно лучше понять со ссылкой на приведенные ниже примеры, которые представлены в качестве примера изобретения, но не в порядке ограничения.
Ниже перечислены используемые сокращения:
ХБП (CKD) – хроническая болезнь почек
ХБП–МКН (CKD–MBD) – Синдром минеральных и костных нарушений при хронической болезни почек
ФЭ (FE) – фракционная экскреция
ФРФ–23 (FGF–23) – фактор роста фибробластов 23
3
–
HCO венозная концентрация бикарбоната
ОР (HR) – отношение рисков
IRIS – Международное общество изучения заболеваний почек (International Renal Interest Society)
ОШ (OR) – отношение шансов
ПТГ (PTH) – паратиреоидный гормон
СКД (SBP) – систолическое кровяное давление
ОПМ (USG) – относительная плотность мочи
Пример 1: Общий магний представляет собой прогностический фактор времени выживания у кошек с хронической болезнью почек
Гипомагниемию ассоциируют с пониженным временем выживания у людей с хронической болезнью почек (ХБП). Известно немного о прогностическом значении магния при кошачьей ХБП. Целью данного исследования является оценка того, связана ли общая концентрация магния в плазме при диагнозе ХБП со временем выживания у кошек. Также изучено влияние концентрации фактора роста фибробластов 23 (ФРФ–23) с учетом недавних данных, подтверждающих, что она является важным прогностическим фактором при кошачьей ХБП.
Концентрации общего магния (tMg) измеряют на хранящихся образцах гепаринизированной плазмы, полученных у кошек с диагнозом азотемической ХБП. Клинические данные представлены в виде медианы [25–й, 75–й процентиль]. Кошек распределяют по квартилям (MgQ1–4) на основании tMg и проводят сравнение начального уровня переменных между группами с помощью однофакторного дисперсионного анализа ANOVA. Две многовариантные регрессионные модели Кокса используют для оценки полезности tMg в плазме при диагнозе азотемической ХБП в качестве прогностического фактора времени выживания (смертность по всем причинам): модель 1, включающая возраст, плазменный креатинин, фосфат, интактный паратиреоидный гормон, альбумин, tMg и диагноз гипертензии, в качестве категориальных переменных, и объем осажденных клеток (ООК (PCV)) в качестве непрерывной переменной; и модель 2, включающая ФРФ–23 в качестве категориальной переменной, помимо переменных, включенных в модель 1.
Сто шестьдесят (160) кошек на стадии 2 (n=110) и стадии 3 (n=50) ХБП по категории IRIS включают в это ретроспективное обсервационное когортное исследование. Медианный tMg в исследовании равен 2,04 [1,85, 2,24] мг/дл, интервал 1,29–2,90 мг/дл. Кошки в квартили MgQ1 имеют значительно более высокую концентрацию ФРФ–23 (2008,7 [762,1, 8194,4] пг/мл) по сравнению со всеми тремя верхними квартилями, которые не сильно отличаются друг от друга (MgQ2: 895,3 [455,0, 1948,2]; MgQ3: 493,9 [344,2, 2035,5]; MgQ4: 477,8 [316,9, 975,7] пг/мл, P<0,001). Кошки в MgQ1 и MgQ3 отличаются по возрасту (Q1: 16,4 [14,1, 18,7]; Q3: 13,4 [12,0, 15,9] лет, P=0,022) и по концентрации фосфата (Q1: 5,15 [3,89, 6,54]; Q3: 4,09 [3,50, 5,05] мг/дл, P=0,013). Концентрация креатинина отличается только между MgQ3 и MgQ4 (MgQ3: 2,37 [2,14, 2,68]; MgQ4: 2,68 [2,38, 3,30] мг/дл, P=0,029). В регрессионной модели Кокса 1 выживаемость позитивно связана с ООК (P<0,001) и отрицательно связана с возрастом (P<0,001), креатинином (P=0,003), tMg (P=0,007) и диагнозом гипертензии (P=0,046). Кошки в MgQ2 имеют повышенный риск смерти в сравнении как с MgQ1 (отношение рисков (ОР (HR)): 0,434, P=0,003), так и MgQ4 (ОР: 0,433, P=0,002). В модели 2 выживаемость положительно связана с ООК (P<0,001) и отрицательно связана с возрастом (P<0,001), ФРФ–23 (P=0,004), гипертензией (P=0,014) и tMg (P=0,036). Кошки в MgQ2 имеет значительно сниженный риск смертности по сравнению с MgQ4 (ОР: 0,452, P=0,005), но не по сравнению с MgQ1 (ОР: 0,622, P=0,126).
В заключение, более высокая плазменная концентрация магния при диагнозе ХБП связана с повышенным риском смертности по всем причинам после учета влияния ФРФ–23. Промежуточные концентрации магния улучшают выживаемость. Кошки, отличающиеся низкой концентрацией магния, находятся при повышенном риске смертности по всем причинам (модель 1), но этот повышенный риск, по–видимому, связан с более высокими концентрациями ФРФ–23 по сравнению с квартилями с более высоким магнием (модель 2). Необходимы дополнительные исследования, чтобы изучить, является ли магний модифицируемым фактором риска и может ли зависимость между концентрациями магния и ФРФ–23 привести к разработке новых стратегий контроля кошачьей ХБП.
Пример 2: Преимущества перорального восполняющего введения магния при контроле синдрома минерально–костных нарушений (МКН) при хронической болезни почек (ХБП) у кошек
Данные ретроспективного исследования среди 160 кошек с хронической болезнью почек (ХБП) показывают, что концентрации магния в плазме связаны с выживаемостью. Как низкие, так и высокие концентрации магния при диагнозе ХБП имеют более высокие отношения рисков, чем нормальные концентрации в одновариантном регрессионном анализе Кокса. Однако, хотя высокие уровни магния остаются независимо связанными с пониженным временем выживаемости, повышенный риск смерти в группе с низким магнием оказывается связан со значительно более высокими концентрациями фактора роста фибробластов 23 (ФРФ–23) в этой группе (ФИГ. 1), так что ФРФ–23, а не низкий сывороточный магний, остается в многовариантной модели. Линейная регрессия показывает, что общий магний представляет собой независимый прогностический фактор концентрации ФРФ–23. Проспективные исследования необходимы, чтобы изучить, может ли восполняющее введение магния снизить уровни ФРФ–23 и улучшить время выживания у кошек с низкими концентрациями магния при диагнозе ХБП. Таким образом, проводят исследование, чтобы определить, снижает ли пероральное восполняющее введение магния сывороточный ФРФ–23, что может быть новым подходом для контроля минерально–костного нарушения у кошачьих пациентов с ХБП.
Цели исследования
Основная цель состоит в том, чтобы определить, снижает ли пероральное восполняющее введение магния кошкам с диагнозом азотемической ХБП и сопутствующей низкой концентрацией магния в плазме концентрацию ФРФ–23 в плазме у таких животных.
Второй целью является 1) определение, улучшает ли магниевый статус пероральное восполняющее введение магния и до какой степени; 2) установление корреляций между восполняющим введением магния и изменениями других клинико–паталогических переменных (фосфат, ионизированный кальций, ПТГ, кальцитриол, калий, систолическое давление крови); и 3) оценка возникновения возможных побочных эффектов восполняющего введения магния (то есть,гипермагниемия, струвитная мочекаменная болезнь, диарея).
Протокол исследования
Регистрация
Для клинических исследований отбирают кошек с азотемической ХБП и гипомагниемией. Скрининговая предварительная проверка включает: 1) биохимию плазмы (в том числе общий тироксин и общий магний), гематокрит и общий белок; 2) анализ мочи; 3) измерение систолического кровяного давления; и 4) измерение ФРФ–23 и ПТГ в плазме.
Критериями включения являются: 1) диагноз стабильной азотемической ХБП на стадии 2 или 3 по IRIS; 2) концентрация общего магния в плазме <0,80 ммоль/л; и 3) стабильная диета в течение последних 2 месяцев (во время исследования изменение диеты не допускается).
Критериями исключения являются: 1) гипертиреоз (концентрация общего тироксина <40 нмоль/л); 2) диагноз гипертензии; 3) кристаллы струвита, идентифицированные при анализе мочи (если моча концентрирована, то это является обычным для наблюдаемых кристаллов струвита; исключение применяют только при наличии большого количества кристаллов); 4) воспалительное заболевание нижнего отдела мочевыводящих путей у кошек (FLUTD) в течение последнего года; или 5) применение желудочно–кишечных фосфатных связующих.
Лечение
С согласия владельца кошкам проводят пероральное восполняющее введение магния, состоящее из 63,6–90,1 мг элементарного магния в день, с кормом предпочтительно в виде глицината магния.
В частности, диету для кошек дополняют 100 мг глицината магния (Mg Glycinate) на килограмм массы тела, что эквивалентно 14,1 мг Mg/кг. Например, кошке весом 5 кг требуется около 200 ккал в день, она должна потреблять 70 мг/1000 ккал в день. Магниевую добавку добавляют при имеющемся в наличии магнии в корме для кошек, что приводит к интервалу 260–330 мг Mg/1000 ккал в рационе кошек.
Последующее врачебное наблюдение
Оценку проводят через 4–6 недель перорального восполняющего введения магния. Во время такого визита измеряют систолическое кровяное давление и получают образцы крови и мочи. Участие в исследовании прерывают, если 1) кошка отказывается принимать восполняющее введение магния; 2) кошка отказывается есть почечную диету, когда восполняют магний, так что почечная диета составляет меньше чем 50% суточного источника калорий; 3) общая концентрация магния в плазме превышает 1,0 ммоль/л; 4) в осадке мочи замечены кристаллы магний–аммоний фосфата; 5) у кошки развивается диарея; 6) у кошки развивается сильное паталогическое состояние, отличное от азотемической ХБП, которое требует дополнительного лечения или гарантирует эвтаназию; 7) отмечены побочные эффекты, которые требуют прекращения питания, например, ионизированная гиперкальциемия с сопутствующими клиническими признаками; или 8) владелец не может принести кошку для последующих контрольных приемов.
Анализ
Влияние перорального восполняющего введения магния на магниевый и ФРФ–23 статус определяют по 1) изменению в плазме концентрации общего магния относительно начального уровня и 2) изменению в плазме концентрации ФРФ–23 относительно начального уровня.
Влияние перорального восполняющего введения магния на другие параметры, вовлеченные в кошачью ХБП, определяют по 1) изменению концентрации интактного ПТГ в плазме относительно начального уровня; 2) изменению концентрации кальцитриола в плазме относительно начального уровня; 3) изменению концентрации фосфата в плазме относительно начального уровня; 4) изменению в систолическом кровяном давлении относительно начального уровня; и 5) изменению концентрации калия в цельной крови относительно начального уровня.
Результаты
ФИГ. 1 иллюстрирует концентрации ФРФ–23 в плазме у кошек с азотемической ХБП на стадии 2–3 по классификации IRIS, распределенных по квартилям в зависимости от концентрации общего магния в плазме. Медианная концентрация общего магния составляет 0,84 [0,75, 0,92] ммоль/л. Кошки в квартили с самым низким магнием имеют значительное более высокую концентрацию ФРФ–23 (2008,7 [762,1, 8194,4] пг/мл) по сравнению со всеми тремя верхними квартилями, которые не сильно отличаются друг от друга (MgQ2: 895,3 [455,0, 1948,2]; MgQ3: 493,9 [344,2, 2035,5]; MgQ4: 477,8 [316,9, 975,7] пг/мл, P<0,005). Пунктирная линия означает верхнюю границу референтного интервала плазменного ФРФ–23 у гериатрических кошек (700 пг/мл). Ось Y на ФИГ. 1 находится на логарифмической шкале.
Влияние магниевой добавки на общий магний, ФРФ–23 и фосфат в образцах крови кошек с азотемической ХБП на стадии 2–3 по категории IRIS, показано на ФИГ. 2A–2C. ФИГ. 2A показывает общий сывороточный Mg до и после восполняющего введения у 4 кошек. ФИГ. 2B показывает сывороточный ФРФ–23 до и после восполняющего введения Mg. Восполняющее введение Mg связано с сильным снижением ФРФ–23 у 3 из 4 кошек. ФРФ–23 представляет собой маркер накопления сывороточного фосфора и снижение ФРФ–23 коррелирует со снижением прогрессирования почечного заболевания. ФИГ. 2C показывает сывороточный фосфат до и после восполняющего введения.
ФИГ. 3A–3I также показывают влияние магниевой добавки на общий магний (A), ФРФ–23 (B), креатинин (C), симметричный диметиларгинин (СДМА (SDMA)) (D), фосфат (E), систолическое давление крови (F), калий (G), кальций (H) и паратиреоидный гормон (ПТГ) (I) у кошек с азотемической ХБП на стадии 2–3 по IRIS.
Пример 3 – Результаты изучения прогностической важности общего магния в плазме в когорте кошек с азотемической хронической болезнью почек
В данном примере исследуют распространенность и факторы риска в случае магниевых нарушений у кошек с азотемической ХБП, взаимосвязь tMg в плазме с ФРФ–23 и другими клинико–паталогическими переменными и прогностическое значение магниевых нарушений для смертности по всем причинам и снижения функции почек в когорте кошек с азотемической ХБП.
Методы
Субъекты
Кошек идентифицируют по записям гериатрических клиник для кошек, которые проведены в двух службах общей практики в центре Лондона (People’s Dispensary for Sick Animals in Bow и Beaumont Sainsbury Animal Hospital in Camden). Принадлежащие клиенту кошки возрастом ≥9 лет посещали эти клиники для общей проверки здоровья, и кошек, у которых диагностирована азотемическая ХБП, выбирают для контроля их заболевания. Кошки, включенные в это исследование, составляют часть более широкой предназначенной для наблюдения группы, для которой получено согласие владельца и получено одобрение Комитета по этике и благосостоянию Королевского колледжа ветеринаров (Ethics and Welfare Committee of the Royal Veterinary College).
Группу из 120 практически здоровых кошек, наблюдавшихся в период с сентября 2001 г. по сентябрь 2013 г., выбирают для установления референтного интервала для tMg в плазме у пожилых кошек. Кошки считаются очевидно здоровыми, если не обнаружено значительных отклонений в анамнезе, при медицинском освидетельствовании или в анализах крови и мочи, а также, если не было назначено никаких лекарств. Для включения в исследование должен быть доступен сохраненный образец гепаринизированной плазмы для измерения tMg.
Когорту кошек, у которых диагностирована азотемическая ХБП между августом 1999 и июлем 2013, выбирают для изучения клинической значимости начального уровня плазменного tMg при кошачьей ХБП. Критериями для диагноза азотемической ХБП являются концентрация плазменного креатинина ≥2 мг/дл в сочетании с относительной плотностью мочи (ОПМ (USG)) <1,035, или концентрация плазменного креатинина ≥2 мг/дл на 2 последовательных случаях с интервалом 2–4 недели. Для включения в исследования данные по концентрации плазменного ФРФ–23 и сохраненный остаточный образец гепаринизированной плазмы для измерения tMg должны быть доступны от момента диагноза ХБП. Кошки с клиническими признаками гипертиреоза, концентрацией общего тироксина в плазме >40 нмоль/л, с терапевтическим лечением гипертиреоза, с сахарным диабетом или с лечением кортикостероидами исключают из анализа. Кошек, получавших бесилат амлодипина для лечения системной гипертензии, включают.
Сбор данных
3
–
88
89
Посещения клиники включают историю и общее медицинское освидетельствование, измерение систолического кровяного давления (СКД (SBP)) и забор крови и мочи. Данные по начальному уровню на дату диагноза азотемической ХБП получают из электронных записей клиники и включают возраст, породу, пол, массу тела, оценку состояния тела в баллах (ОСТ (BCS)), систолическое давление крови (СКД), концентрацию общего тироксина в плазме, ООК, рутинные параметры биохимии плазмы (концентрации общего белка, альбумина, глобулина, креатинина, натрия, калия, хлорида, фосфата и общего кальция), концентрацию ионизированного кальция, венозный бикарбонат (HCO) и значения pH, концентрации кальцидиола, кальцитриола, ФРФ–23 и ПТГ в плазме, ОПМ, данные посева мочи, соотношение белок/креатинин в моче и значение фракционной экскреции (ФЭ (FE)) магния. Также фиксируют дату смерти и произошло ли прогрессирование азотемии (определено ниже). Аномальные или отсутствующие данные из электронных данных проверяют путем ознакомления с физическим состоянием пациента. Степень тяжести ХБП и фосфатный статус классифицируют в соответствии указаниями International Renal Interest Society (IRIS). Систолическое кровяное давление оценивают с использованием доплеровского метода, и обратную офтальмоскопию проводят у всех кошек, у которых идентифицировано СКД>160 мм.рт.ст. Системную гипертензию определяют, как СКД>170 мм.рт.ст., по меньшей мере, на 2 случаях с интервалом 1–2 недели или однократное СКД>160 мм.рт.ст. одновременно с повреждением органа–мишени глаза.
90
4,32
91
92
31
93
94
33
Образцы крови получают посредством венопункции яремной вены и образцы мочи посредством цитоцентеза. Общий магний измеряют в остаточной гепаринизированной плазме, хранившейся при –80°C в лаборатории, которая также проводила рутинные биохимические анализы. ФРФ–23 и ПТГ измеряют в ЭДТА–плазме с использованием одобренных методов ELISA и имуннорадиометрического анализа, соответственно. Для измерения ФРФ–23 разбавляют с помощью нулевого стандарта для достижения чтения на стандартной кривой. Анализ ПТГ имеет предел обнаружения 5,2 пг/мл, и образцам с концентрацией ниже этого значения присваивают произвольную концентрацию ПТГ 2,6 пг/мл. Данные для ионизированного кальция, газов венозной крови и метаболитов витамина D доступны только для некоторых кошек. Концентрацию ионизированного кальция и газы крови измеряют в негепаринизированной цельной крови с использованием портативного анализатора непосредственно после венопункции. Метаболиты витамина D измеряют в независимой лаборатории. Анализ мочи включает амбулаторное измерение ОПМ с помощью рефрактометрии, анализ тест–полосками и микроскопическое исследования осадка мочи. Биохимию мочи проводят в коммерческой лаборатории.Значение фракционной экскреции определяют с использованием методики однократного забора образца.
Статистический анализ
95
t
Статистический анализ проводят с использованием пакета программ для статистической обработки данных. Для все представленных анализов проводят двусторонние тесты проверки значимости с альфа–уровнем ≤0,05 определения статистической значимости. Непрерывные клинические данные представляют в виде среднего значения (СО (SD)) или в виде медианы [25–й, 75–й процентили] в зависимости от ситуации. Распределение численных переменных оценивают на нормальность с помощью теста Шпиро–Уилка и визуального изучения графиков Q–Q. Начальные характеристики между группами сравнивают с использованием или –критерия для независимых выборок (2 группы), или однофакторного дисперсионного анализа ANOVA с апостериорным сравнением Бонферрони (≥3 groups) для непрерывных переменных с нормальным распределением, или с использованием U–теста Манна–Уитни (2 группы) или критерия Краскела–Уоллиса, после чего следует U–тест Манна–Уитни с поправкой по методу Бонферрони (≥3 группы) для переменных со скошенным распределением. Пропорции сравнивают с использованием точного критерия Фишера.
Распространенность и факторы, связанные с магниевыми нарушениями
Кошек делят по категориям на 3 группы на основании нижней и верхней границ полученного референтного интервала для tMg в плазме у пожилых кошек, который рассчитан с использованием параметрического метода (то есть, среднее±2СО (SD)). Распространенность гипомагниемии и гипермагниемии при диагнозе азотемической ХБП рассчитывают с использованием этого референтного интервала, начальных характеристик среди сравниваемых 3 магниевых групп и бинарной логистической регрессии, проводимой для изучения факторов риска или для гипомагниемии или для гипермагниемии. Переменные, сильно связанные с этими условиями, вводят в многовариантную модель бинарной логистической регрессии. Окончательную модель получают путем обратного исключения вручную. Критерий адекватности модели оценивают с помощью теста Хосмера–Лемешоу. Результаты представляют в виде отношения шансов (ОШ (OR); 95% доверительный интервал (ДИ)(CI)).
Корреляция общего магния в плазме с ФРФ–23 в плазме и с другими клинико–паталогическими переменными
Проводят сравнение концентрации ФРФ–23 в плазме между гипомагниемическими, нормомагниемическими и гипермагниемическими кошками в пределах каждой стадии по категории IRIS, а также между кошками с tMg в плазме ниже и выше медианы (<2,04 мг/дл и ≥2,04 мг/дл) в нормофосфатемических и гиперфосфатемических подгруппах (на основании IRIS мишеней для плазменного фосфата для каждой стадии) кошек на стадии 2 и 3 по IRIS.
4
Рассчитывают коэффициент корреляции Пирсона (r) для оценки связи между tMg в плазме и логарифмически преобразованной концентрацией ФРФ–23 (натуральный логарифм [ln]). Проводят частичную корреляцию, чтобы измерить степень связанности между этими двумя переменными, с удаленными затрудняющими интерпретацию эффектами ln[креатинин] и ln[фосфат], оба известных прогностических фактора ФРФ–23 в плазме.
Строят одновариантные обобщенные линейные модели, скорректированные для стадии IRIS, чтобы изучить, какие переменные связаны с плазменным tMg как непрерывной переменной. Возраст, массу, ООК, плазменный альбумин, натрий, калий, хлорид, общий кальций, концентрации ln[ФРФ–23], ln[ПТГ], ln[креатинин], ln[фосфат] и ln[UPC] оценивают в качестве ковариант. Стадию IRIS и статус гипертензии вводят в качестве фиксированных факторов. Коварианты, связанные с плазменным tMg с альфа–уровнем <0,10, оценивают на статистическое взаимодействие со стадией IRIS и вводят в многовариантную модель линейной регрессии, включающую любые эффекты значимого взаимодействия. Окончательную модель регрессии получают путем обратного исключения. Допущения нормальности и линейной зависимости между переменными проверяют путем визуального изучения гистограмм остатков и диаграмм разброса данных остатков относительно подобранных значений. Результаты записывают в виде коэффициента регрессии (β; 95% ДИ).
Корреляция общего магния в плазме с выживаемостью
ое
P
Чтобы оценить, связан ли плазменный tMg с выживаемостью, в анализ выживаемости включают всех зарегистрированных кошек, для которых данные диагноза азотемической ХБП определены в виде начального уровня, смертность по всем причинам является рассматриваемым событием и цензурирование выполнено для кошек, которые утрачены для последующего медицинского наблюдения или которые были еще живы на 1 июля 2016 г. Кошек, потерянных для последующего наблюдения, цензурируют по последней дате, когда они были живы. Кривую Каплана–Мейера нормомагниемической группы сравнивают с кривыми Каплана–Мейера гипомагниемических и гипермагниемических кошек с использованием логарифмического рангового критерия, и отношения рисков (ОР) рассчитывают с помощью одновариантной инвариантной по времени модели пропорциональных рисков Кокса. Чтобы скорректировать возможные искажающие факторы, проведена оценка связей с выживаемостью следующих начальных переменных с помощью одновариантного регрессионного анализа Кокса: концентрации в плазме tMg, креатинина, фосфата, общего кальция, натрия, хлорида, калия, альбумина, ФРФ–23 и ПТГ, возраст, ООК, масса тела, ОСТ, статус гипертензии, ОПМ и UPC (отношение белок/креатинин в моче). Плазменный ПТГ логарифмически преобразовывают из–за его сильно скошенного распределения. Непрерывные переменные делят на категории, если не выполнено предположение пропорциональных рисков, оцениваемых путем изучения кривых Каплана–Мейера и оценки статистического взаимодействия каждой переменной со временем. Деление на группы основано на клинически значимых пределах, если это возможно (плазменный tMg, статус гипертензии, ОСТ), или тертилях (фосфат, ФРФ–23, натрий, ОПМ, вес). Никакой подстановки пропущенных данных не проводят. Переменные, связанные с выживаемость с альфа–уровнем <0,10, оценивают с точки зрения взаимодействия с магниевым статусом, и в последствии вводят в многовариантный анализ с помощью любого статистически значимого эффекта взаимодействия (<0,05). Окончательную многовариантную модель получают путем обратного исключения вручную. Общее соответствие модели Кокса проверяют с помощью визуального изучения графика остатков Кокса–Снелла. Результаты представлены в виде ОР (95% ДИ).
Учитывая нелинейную зависимость с коэффициентами смертности, плазменный tMg проверяют в качестве категориальной переменной, разделенной на нижнюю и верхнюю границы полученного референтного интервала в основном анализе. Чтобы исследовать влияние на выживаемость плазменного tMg на числовой шкале, проводят субанализ. Кошек делят с помощью медианного расщепления tMg, и вместо введения в виде категориальной переменной tMg вводят в полностью скорректированную модель Кокса в виде непрерывной переменной.
96
34,97
Кроме того, изучают предустановленное взаимодействие между концентрацией магния в плазме и фосфатным статусом в корреляции со смертностью по всем причинам. Кошек на стадии 2 и 3 ХБП по IRIS делят, исходя из фосфатного статуса, в соответствии с рекомендациями IRIS по контрольным показателям фосфата и путем медианного расщепления плазменного tMg. Это приводит к следующим 4 категориям: нормофосфатемическая–(более низкий магний) (NP–LM: IRIS нормофосфатемическая; магний в плазме <2,04 мг/дл), нормофосфатемическая–(более высокий магний) (NP–HM: IRIS нормофосфатемические; магний в плазме ≥2,04 мг/дл), гиперфосфатемическая–(более низкий магний) (HP–LM: IRIS гиперфосфатемическая; магний в плазме <2,04 мг/дл), и гиперфосфатемическая–(более высокий магний) (HP–HM: IRIS гиперфосфатемическая; магний в плазме ≥2,04 мг/дл). Статистическое взаимодействие между магнием и фосфатом в отношении выживаемости изучают путем сравнения рисков 4 фосфат–магниевых групп с использованием одновариантной регрессии Кокса. Группу NP–HM выбирают в качестве объединенной эталонной категории отсутствия воздействия для расчета относительного избыточного риска из–за взаимодействия (RERI, то есть, разницы между ожидаемым риском и наблюдаемым риском) группы HP–LM.
Корреляция общего магния в плазме с прогрессированием ХБП
Связан ли магниевый статус с прогрессированием ХБП оценивают с использованием бинарной логистической регрессии. Кошек делят на 2 группы: группа прогрессирующей ХБП, которая показывает увеличение >25% концентрации креатинина в плазме в пределах первых 12 месяцев диагноза, и группа стабильной ХБП, которая не показывает увеличения. Только стабильных кошек с последующим наблюдением ≥12 месяцев включают в этот анализ. Магниевый статус, плазменный креатинин, фосфат, общий кальций, калий, альбумин, ln[ФРФ–23] и ln[ПТГ], возраст, ООК, массу тела, ОСТ, статус гипертензии, ОПМ и UPC включают в одновариантную бинарную логистическую регрессию. Переменные, связанные с прогрессированием болезни с альфа–уровнем <0,10 в одновариантном анализе, вносят в многовариантную регрессию. Окончательную модель получают путем обратного исключения вручную. Критерий адекватности оценивают с помощью теста Хосмера–Лемешоу. Результаты представлены в виде ОШ (OR) (95% ДИ). Предустановленное взаимодействие между концентрацией магния в плазме и фосфатным статусом в корреляции с прогрессированием ХБП изучают путем сравнения ОШ 4 фосфат–магниевых групп (определенных выше) с использованием одновариантной логистической регрессии.
Результаты
P
P
P
P
Для изучения корреляций между концентрацией общего магния в плазме с плазменным ФРФ–23, смертностью по всем причинам и прогрессированием болезни у кошки с азотемической ХБП проанализированы записи 174 принадлежащих клиенту кошек на 2–4 стадии ХБП по категории IRIS. Возможные корреляции начальной концентрации магния в плазме с концентрацией ФРФ–23 и рисками смерти и развитие болезни исследуют с использованием, соответственно, линейной, Кокса и логистической регрессии у когорты кошек с азотемической ХБП из учреждения общей практики (1999–2013). Результаты указывают на то, что концентрация общего магния в плазме (референтный интервал 1,73–2,57 мг/дл) находится в обратной связи с плазменным ФРФ–23 при контролировании концентрации креатинина в плазме (коэффициент частной корреляции –0,50; <0,001). Гипомагниемию наблюдают у 12% (20/174) кошек, и она независимо связана с повышенным риском смерти (скорректированное отношение рисков 2,40; 95% доверительный интервал [ДИ] 1,18–4,86; =0,016). Нескорректированные корреляции гипермагниемии (показатель распространения 6%; 11/174 кошек) с выживаемостью (отношение рисков 2,88; 95% ДИ 1,54–5,38; =0,001) и гипомагниемии с прогрессированием ХБП (отношение шансов 17,68; 95% ДИ 2,04–153,59; =0,009) теряют значимость при многовариантном анализе.
Определение 95% референтного интервала для концентрация общего магния в плазме у пожилых кошек
Эталонная популяция состоит из 53 котов и 67 кошек с 1 некастрированным самцом и 1 нестерилизованной кошкой. Кошки следующих пород: домашняя короткошерстная (n=97), домашняя длинношерстная (n=12), бирманская (n=4), по 2 каждой из персидской, британской короткошерстной и русской голубой и 1 британская голубая. Дополнительные характеристики можно найти в таблице 1. Распределение плазменного tMg, как определено, является распределением по Гауссу со средней концентрацией 2,15 (СО 0,209) мг/дл, приводящее к 95% референтному интервалу 1,73–2,57 мг/дл (0,71–1,06 ммоль/л).
Таблица 1:
Характеристики 120 практически здоровых кошек возрастом ≥9 лет, от которых получают референтный интервал для концентрации общего магния в плазме
Переменная(референтный интервал)
Медиана[25<sup>й</sup>, 75<sup>й</sup> процентиль]
n
Возраст (лет)
12,4 [11,1, 14,0]
120
Масса (кг)
4,51 [3,81, 5,20]
120
Креатинин (0,23–2,00 мг/дл)
1,45 [1,32, 1,65]
120
ОПМ (≥1,035)
1,048 [1,040, 1,058]
80
Фосфат (2,79–6,81 мг/дл)
3,85 [3,28, 4,30]
120
Общий кальций (8,2–11,8 мг/дл)
9,8 [9,4, 10,2]
120
Общий белок (6,0–8,0 г/дл)
7,7 [7,3, 8,0]
120
Альбумин (2,5–4,5 г/дл)
3,3 [3,0, 3,4]
120
ООК (30–45%)
38 [35, 41]
120
Натрий (145–157 мэкв/л)
152 [152, 154]
120
Калий (3,5–5,5 мэкв/л)
3,9 [3,7, 4,2]
120
Хлорид (100–124 мэкв/л)
119 [117, 121]
120
СКД (<160 мм.рт.ст.)
136 [120, 150]
120
ОПМ (USG) – относительная плотность мочи; ООК (PCV) – объем осажденных клеток; СКД (SBP) – систолическое кровяное давление.
Общий магний в плазме у кошек с азотемической ХБП
5,8
Всего у 517 кошек между августом 1999 и июлем 2013 диагностируют азотемическую ХБП, из которых 96 кошек было исключено по следующим причинам: сопутствующий гипертиреоз (n=79), нет соответствия критериям исследования для диагноза ХБП (n=16) или введение преднизолона (n=1). Из 421 отвечающих требованиям кошек 88 кошек не имеют остаточного образца плазмы для измерения tMg, у 157 кошек не хватает начальной информации о концентрации ФРФ–23 в плазме и 2 образца сильно гемолизированы. Таким образом, 174 кошки включают в данное исследование, некоторые из которых были включены в предыдущие исследования. Никаких значительных различий не наблюдается между начальными характеристиками 174 включенных кошек и 247 отвечающих требованиям кошек, которые исключены из анализа из–за отсутствия остаточного образца плазмы или измерения плазменного ФРФ–23 (данные не показаны).
Исследуемая выборка состоит из 88 самок, из которых 1 не стерилизована, и 86 самцов, из которых 3 не кастрированы. Домашняя короткошерстная является самой распространенной породой (n=127), за ней идет домашняя длинношерстная (n=20), персидская (n=10), бирманская (n=7), британская короткошерстная (n=2), сиамская (n=2), и по 1 каждой из числа абиссинской, американской короткошерстной, шиншиллы, оцикета, русской голубой и тиффани. Согласно системе стадирования Международного общества изучения заболеваний почек (IRIS) у 114 кошек была стадия 2, у 50 кошек стадия 3 и у 10 кошек стадия 4 ХБП. Исследуемая выборка старше, чем группа кошек, от которых был получен референтный интервал для плазменного tMg (среднее значение 14,4 лет, СО 3,2 относительно 12,7 лет, СО 2,2, соответственно).
Распространенность и факторы, связанные с нарушениями магниевого статуса
Медиана плазменного tMg исследуемой выборки равна 2,07 [1,87, 2,26] мг/дл (интервал 1,29–5,79). Двенадцать из 174 кошек имеют диагноз гипомагниемии (коэффициент распространения 12%; 95% ДИ 7–17) и 11 кошек диагноз гипермагниемии (коэффициент распространения 6%; 95% ДИ 3–10). Гипермагниемию наблюдают преимущественно у кошек с 4 стадией по IRIS (ФИГ. 4). Начальные характеристики кошек с гипомагниемией, нормомагниемией и гипермагниемией показаны в таблице 2.
P
P
P
2
Факторы риска, связанные с нарушениями магниевого статуса, можно найти в таблице 3. Многовариантная регрессия показывает, что более высокий плазменный ln[ФРФ–23] (ОШ 2,07; 95% ДИ 1,48–2,90; <0,001) и диагноз системной гипертензии (ОШ 4,24; 95% ДИ 1,41–12,78; =0,010) независимо связаны с гипомагниемией у кошек с ХБП (Nagelkerke R, 0,30). Медианный плазменный tMg подгруппы кошек с системной гипертензией равен 1,97 [1,69, 2,14] мг/дл по сравнению с 2,09 [1,90, 2,29] мг/дл у нормотензивной группы (=0,004). Многовариантный анализ не проводят в случае гипермагниемии из–за относительно низкого числа гипермагниемических случаев.
Таблица 2:
Характеристики кошек с азотемической ХБП, распределенных по группам в соответствии с магниевым статусом
<b>Переменная</b><b>(референтный интервал)</b>
<b>Гипомагниемические</b><b>(n=20)</b>
<b>Нормомагниемические</b><b>(n=143)</b>
<b>Гипермагниемические</b><b>(n=11)</b>
Общий магний(1,73–2,57 мг/дл)
1,57 [1,41, 1,66]
20
2,07 [1,92, 2,24]
143
2,87 [2,70, 3,60]
11
Возраст (года)
16,6 [15,0, 18,2]<sup>a</sup>
19
14,8 [12,0, 16,2]
130
12,0 [9,8, 15,0]<sup>b</sup>
11
Вес (кг)
2,98 [2,51, 3,56]<sup>a</sup>
19
3,92 [3,14, 4,61]<sup>b</sup>
142
3,63 [3,25, 4,20]
9
ОСТ (BCS) (1–9)
3 [3, 4]
10
4 [3, 5]
90
3 [3, 5]
5
Пол (самцы, n [%])
7 (35)
20
72 (50)
143
7 (64)
11
Альбумин (2,5–4,5 г/дл)
3,0 [2,8, 3,3]
20
3,1 [2,9, 3,3]
143
3,0 [2,9, 3,3]
11
Кальцидиол (65–170 нмоль/л)
–
0
141 [122, 184]
14
105 [–]
2
Кальцитриол (90–342 пмоль/л)
–
0
418 [351, 463]
13
362 [–]
2
Хлорид (100–124 мэкв/л)
117 [116, 119]
20
118 [116, 120]
143
117 [114, 122]
11
Креатинин (0,23–2,00 мг/дл)
2,85 [2,32, 4,03]<sup>a</sup>
20
2,48 [2,25, 2,96]<sup>a</sup>
143
4,82 [2,65, 5,47]<sup>b</sup>
11
ФРФ–23 (56–700 пг/мл)
4950 [1931, 15893]<sup>a</sup>
20
637 [351, 1941]<sup>b</sup>
143
2658 [684, 8582]
11
Избыток ФРФ–23 (n[%])
18 (90)<sup>a</sup>
20
68 (48)<sup>b</sup>
143
8 (73)
11
Глобулин (2,5–4,5 г/дл)
4,4 [4,1, 4,9]<sup>a</sup>
20
4,7 [4,3, 5,3]
143
4,8 [4,5, 6,2]<sup>b</sup>
11
HCO<sub>3</sub><sup>–</sup> (17–24 мэкв/л)
21 [19, 25]
5
20 [18, 22]
37
20 [–]
3
Ионизированный кальций (1,19–1,37 ммоль/л)
1,28 [1,16, 1,34]
5
1,30 [1,26, 1,33]
38
1,16 [–]
3
ООК (30–45%)
30 [24, 34]
20
34 [30, 37]
141
32 [23, 34]
11
Венозное pH (7,21–7,44)
7,35 [7,32, 7,38]
5
7,33 [7,29, 7,38]
37
7,33 [–]
3
Фосфат (2,79–6,81 мг/дл)
5,51 [4,47, 6,93]<sup>a</sup>
20
4,43 [3,75, 5,39]<sup>b</sup>
143
6,16 [4,46, 9,54]<sup>a</sup>
11
Гиперфосфатемия (% [n])
14 (70)
20
64 (45)
143
7 (64)
11
Калий (3,5–5,5 мэкв/л)
3,9 [3,7, 4,4]
20
4,1 [3,7, 4,3]
143
4,0 [3,4, 4,8]
11
Гипокалиемия (n [%])
2 (10)
20
17 (12)
143
3 (27)
11
Гиперкалиемия (n [%])
0 (0)
20
0 (0)
143
1 (9)
11
ООК (2,6–17,6 пг/мл)
46,3 [12,5, 93,0]<sup>a</sup>
17
15,2 [6,5, 31,2]<sup>b</sup>
138
25,0 [11,7, 81,9]
10
ВПГПТ (SRHPT) (n [%])
12 (71)
17
67 (49)
138
6 (60)
10
СКД (<160 мм.рт.ст.)
153 [134, 163]
20
142 [128, 156]
143
136 [128, 150]
11
Гипертензия (n [%])
9 (45)<sup>a</sup>
20
26 (18)<sup>b</sup>
143
2 (18)
11
Натрий (145–157 мэкв/л)
154 [153, 155]
20
153 [152, 155]
143
151 [150, 156]
11
Общий кальций (8,2–11,8 мг/дл)
10,7 [10,1, 11,0]<sup>a</sup>
20
10,2 [9,7, 10,5]
143
9,6 [9,4, 10,4]<sup>b</sup>
11
Общий белок (6,0–8,0 г/дл)
7,6 [7,1, 7,9]<sup>a</sup>
20
7,8 [7,5, 8,3]<sup>b</sup>
143
8,2 [7,6, 9,1]<sup>b</sup>
11
UPC (<0,20)
0,31 [0,27, 0,61]<sup>a</sup>
13
0,17 [0,12, 0,32]<sup>b</sup>
115
0,50 [0,23, 1,19]<sup>a</sup>
9
UPC <0,20 (n [%])
1 (8)<sup>a</sup>
13
70 (61)<sup>b</sup>
115
1 (11)<sup>a</sup>
9
UPC >0,40 (n [%])
5 (39)
13
21 (18)<sup>a</sup>
115
5 (56)<sup>b</sup>
9
ОПМ (≥1,035)
1,016[1,014, 1,020]
19
1,018[1,016, 1,021]
136
1,016[1,014, 1,018]
10
ФЭ магния (%)
6,8 [4,0, 8,6]<sup>a</sup>
7
5,0 [2,2, 5,4]<sup>b</sup>
12
–
0
Прогрессирование ХБП (n [%])
7 (88)<sup>a</sup>
8
19 (28)<sup>b</sup>
67
3 (75)
4
Время выживания (дни)
147 [52, 328]<sup>a</sup>
19
559 [205, 879]<sup>b</sup>
122
125 [50, 423]<sup>a</sup>
11
Последующее наблюдение (дни)
152 [53, 336]<sup>a</sup>
20
546 [207, 890]<sup>b</sup>
143
125 [50, 423]<sup>a</sup>
11
Год постановки диагноза
2008 [2004, 2011]
20
2009 [2007, 2011]
143
2008 [2003,2012]
11
Данные представлены в виде медианы [25
, 75
процентиль] или коэффициента распространения (n[%]). Строки с разными надстрочными буквами значительно отличаются друг от друга. ОСТ (BCS) – оценка состояния тела в баллах; ФРФ–23 (FGF–23) – фактор роста фибробластов 23; HCO
, венозный; ООК (PCV) – объем осажденных клеток; ПТГ (PTH) – паратиреоидный гормон; ВПГПТ (SRHPT) – вторичный почечный гиперпаратиреоз; СКД (SBP) – систолическое давление крови; UPC – отношение белок/креатинин в моче; ОПМ (USG) – относительная плотность мочи; ФЭ (FE) – фракционная экскреция.
й
й
–
3
Таблица 3:
Результаты одновариантной бинарной логистической регрессии, определяющей факторы риска для гипомагниемии (n=20) и гипермагниемии (n=11) у 174 кошек с азотемической ХБП
Концентрация ФРФ–23 в плазме и статус гипертензии при многовариантном анализе остаются независимыми факторами риска в случае гипомагниемии. Никакой многовариантной регрессии не проводят в случае гипермагниемии.
<b>Одновариантный анализ</b>
<b>n</b>
<b>ОШ (OR) (95% ДИ)</b>
<b></b><b><i>P</i></b><b></b>
<b>Гипомагниемия</b>
ln[ФРФ–23] (пг/мл)
163
1,99 (1,46–2,73)
<0,001
Вес (кг)
161
0,25 (0,11–0,55)
0,001
Диагноз гипертензии
163
3,68 (1,38–9,79)
0,009
Фосфат (мг/дл)
163
1,26 (1,05–1,51)
0,013
ln[ПТГ] (пг/мл)
155
1,77 (1,13–2,77)
0,013
ООК (%)
161
0,92 (0,85–0,99)
0,028
Креатинин (мг/дл)
163
1,48 (1,04–2,12)
0,032
Возраст (лет)
149
1,20 (1,01–1,42)
0,033
Общий кальций (мг/дл)
163
1,86 (1,03–3,38)
0,041
<b>Гипермагниемия</b>
Креатинин (мг/дл)
154
2,22 (1,36–2,63)
0,001
UPC
124
2,72 (1,37–5,37)
0,004
Фосфат (мг/дл)
154
1,33 (1,09–1,61)
0,006
ООК (%)
152
0,90 (0,82–0,99)
0,029
Возраст (лет)
141
0,81 (0,66–0,99)
0,044
ОШ (OR) – отношение шансов; 95% ДИ – 95% доверительный интервал; ФРФ–23 (FGF–23) – фактор роста фибробластов 23; ПТГ (PTH) – паратиреоидный гормон; ООК (PCV) – объем осажденных клеток; UPC – отношение белок/креатинин в моче.
Корреляция общего магния в плазме с ФРФ–23 в плазме и с другими клинико–паталогическими переменными
r
P
r
P
Гипомагниемические кошки имеют более высокие концентрации ФРФ–23, чем нормомагниемические кошки в пределах каждой стадии IRIS (ФИГ. 5). Концентрации креатинина и фосфата в плазме между магниевыми группами сильно не отличаются. Никакой корреляции не выявлено между плазменным tMg и ln[ФРФ–23] (–0,06; =0,425). Однако контролирование плазменных креатинина и фосфата приводит к сильной обратной корреляции между плазменным tMg и ФРФ–23 (частный  –0,50; <0,001). Одновариантные и многовариантные результаты из обобщенной линейной модели представлены в таблице 4. Фактор роста фибробластов 23 является существенным независимым прогностическим фактором магния на всех 3–х стадиях по IRIS с наиболее сильным влиянием на стадии 4.
P
P
В подгрупповом анализе нормофосфатемических и гиперфосфатемических кошек (на основании мишеней IRIS для плазменного фосфата для каждой стадии) концентрация ФРФ–23 в плазме является значительно более высокой у кошек с более низким плазменным tMg по сравнению с кошками с более высоким плазменным tMg (ФИГ. 6). В обобщенной линейной модели, скорректированной для стадии IRIS, ln[ФРФ–23] связан отрицательно с плазменным tMg как у нормофосфатемических кошек (β –0,11; 95% ДИ от –0,17 до –0,05; =0,001), так и гиперфосфатемических кошек (β –0,17; 95% ДИ от –0,24 до –0,10; <0,001).
Таблица 4:
Обобщенная линейная модель для идентификации прогностических факторов концентрации общего магния в плазме (мг/дл)
<b>Переменная</b>
<b>β (95% ДИ)</b>
<b>n</b>
<b>Одновариантный анализ</b><sup><b>*</b></sup>
Стадия по категории IRIS
IRIS 2
2,04 (от 1,97 до 2,11)
114
IRIS 3
2,04 (от 1,93 до 2,16)
50
IRIS 4
3,01 (от 2,76 до 3,26)
10
Возраст (лет)
–0,02 (от –0,04 до –0,01)
160
Вес (кг)
0,09 (от 0,02 до 0,15)
170
ln[ПТГ] (пг/дл)
–0,05 (от –0,10 до 0,00)
165
Хлорид (мэкв/л)
0,01 (от –0,00 до 0,03)
174
Гипертензия
–0,19 (от –0,33 до –0,04)
174
ln[Креатинин] (мг/дл)
IRIS 2
0,17 (от –0,56 до 0,90)
114
IRIS 3
0,27 (от –0,33 до 0,87)
50
IRIS 4
1,57 (от 1,05 до 2,08)
10
ln[ФРФ–23] (пг/мл)
IRIS 2
–0,10 (от –0,16 до –0,05)
114
IRIS 3
–0,06 (от –0,11 до –0,00)
50
IRIS 4
–0,76 от (–0,93 до –0,60)
10
Альбумин (г/дл)
IRIS 2
0,10 (от –0,11 до 0,33)
114
IRIS 3
0,27 (от –0,02 до 0,57)
50
IRIS 4
2,67 (от 1,89 до 3,45)
10
Калий (мэкв/л)
IRIS 2
0,08 (от –0,06 до 0,23)
114
IRIS 3
0,02 (от –0,17 до 0,21)
50
IRIS 4
0,84 (от 0,57 до 1,12)
10
Общий кальций (мг/дл<b>)</b>
IRIS 2
–0,05 от (–0,15 до 0,04)
114
IRIS 3
–0,06 (от –0,20 до 0,07)
50
IRIS 4
–0,97 (от –1,32 до –0,63)
10
<b>Многовариантная модель (n=160)</b>
Стадия по категории IRIS
IRIS 2
2,83 (от 1,97 до 3,70)
106
IRIS 3
2,90 (от 1,59 до 4,20)
46
IRIS 4
10,80 (от 7,87 до 13,72)
8
Возраст (лет)
–0,03 (от –0,04 до –0,01)
ln[ФРФ–23] (пг/мл)
IRIS 2
–0,11 (от –0,16 до –0,06)
IRIS 3
–0,10 (от –0,16 до –0,03)
IRIS 4
–0,44 (от –0,65 до –0,24)
ln[Креатинин] (мг/дл)
IRIS 2
0,63 (от 0,04 до 1,22)
IRIS 3
0,68 (от 0,08 до 1,29)
IRIS 4
1,48 (от 1,05 до 1,90)
Общий кальций (г/дл)
IRIS 2
–0,02 (от –0,10 до 0,06)
IRIS 3
–0,06 (от –0,17 до 0,05)
IRIS 4
–0,59 (от –0,97 до –0,21)
2
*
R многовариантной модели=0,69. Все переменные учитывают на стадии IRIS. β – коэффициент регрессии; 95% ДИ – 95% доверительный интервал; IRIS – International Renal Interest Society; ln[ПТГ] – логарифмически преобразованная концентрация паратиреоидного гормона в плазме; ln[ФРФ–23] – логарифмически преобразованная концентрация фактор роста фибробластов 23 в плазме.
Корреляция общего магния в плазме с выживаемостью
ого
В течение всего периода последующего наблюдения 270,4 «пациент–годы» (медиана 1,3 [0,5, 2,3] лет) 150 кошек умерло, 20 были потеряны для последующего наблюдения и 4 выжило после 1 июля 2016 г. Риск смертности по всем причинам в первые 12 месяцев после диагностирования азотемической ХБП составляет 43% (72/167) для всей выборки, 35% (48/136) для кошек с нормомагниемией на начальном уровне, 80% (16/20) для кошек с гипомагниемией и 73% (8/11) для кошек с гипермагниемией. Частота случаев смертности по всем причинам составляет 0,56 на «пациент–год» для всех кошек, 0,48 на «пациент–год» для кошек с нормомагниемией и 1,34 на «пациент–год» для кошек с гипомагниемией и кошек с гипермагниемией при диагнозе ХБП.
P
Характеристики начального уровня трех магниевых категорий можно найти в таблице 5. Цензурирование проводят у 16% (23/143) нормомагниемических кошек, 5% (1/20) гипомагниемических кошек и ни у одной из гипермагниемических кошек. Доля цензурированных случаев отличается незначительно между магниевыми категориями (=0,240). Регрессия Кокса указывает на то, что гипомагниемия и гипермагниемия связаны с повышенным риском смерти (Таблица 5A и ФИГ. 7). После учета возможных искажающих факторов гипомагниемия остается независимым прогностическим фактором смертности. Статистически значимых различий не выявлено между характеристиками начального уровня для кошек, введенных в окончательную модель регрессии (n=119), и характеристиками начального уровня для кошек, отклоненных из–за отсутствующей информации (n=55, данные не показаны).
P
P
P
Принятый в качестве непрерывной переменной в полностью скорректированной модели плазменный tMg связан в обратной зависимости со смертностью у кошек с плазменным tMg <2,07 мг/дл (ОР 0,04; 95% ДИ 0,01–0,27; =0,001; n=57; среднее значение tMg 1,83 мг/дл). Связь является нелинейной и незначительной у кошек с tMg ≥2,07 мг/дл (ОР 0,67; 95% ДИ 0,24–1,85; =0,438; n=65; среднее значение tMg 2,37 мг/дл). В наиболее высокой квартили, однако, tMg сильно коррелирует со смертностью (tMg ≥2,26 мг/дл; ОР 0,12; 95% ДИ 0,02–0,76; =0,025; n=31, среднее значение tMg 2,62 мг/дл).
P
P
P
P
Предустановленное взаимодействие между концентрацией магния в плазме и фосфатным статусом в контексте смертности по всем причинам изучают с помощью одновариантного анализа пропорциональных рисков Кокса. Кошки, которые являются гиперфосфатемическими для стадии IRIS при диагнозе ХБП (n=85), имеют повышенный риск смерти (ОР 1,57; 95% ДИ 1,13–2,16; =0,007) по сравнению с нормофосфатемическими кошками (n=89). Однако с учетом концентрации плазменного магния только гиперфосфатемические кошки с более низким плазменным магнием имеют сильно повышенный риск смерти в сравнении с нормофосфатемическими кошками (NP–HM: ОР 0,53; 95% ДИ 0,33–0,84; =0,008, и NP–LM: ОР 0,51; 95% ДИ 0,31–0,83; =0,007), а также с гиперфосфатемическими кошками с более высоким плазменным магнием (HP–HM: ОР 0,60; 95% ДИ 0,36–0,99; =0,043). При сравнении группы NP–HM в качестве объединенной эталонной категории без воздействия, наблюдают отклонение от аддитивности с избыточным относительным риском 0,79 в группе HP–LM, подтверждая взаимодействие между магнием и фосфатом в отношении выживаемости (таблица 5B).
Таблица 5:
Результаты инвариантной по времени регрессии Кокса, идентифицирующей начальный уровень прогностических факторов смертности у кошек с азотемической ХБП.
A. Результаты одновариантной и многовариантной регрессии основного анализа.
B. Результаты одновариантного субанализа, оценивающего заранее определенное взаимодействие между фосфатом и магнием.
<b>n</b>
<b>ОР (HR)</b>
<b>95% ДИ (CI)</b>
<b></b><b><i>P</i></b><b></b>
<b>Одновариантные результаты</b>
Нормомагниемия
143
<0,001
гипомагниемия
20
2,92
1,78–4,82
<0,001
гипермагниемия
11
2,88
1,54–5,38
0,001
ФРФ–23 (<460 пг/мл)
56
<0,001
460–1800 пг/мл
58
1,12
0,75–1,69
0,583
>1800 пг/мл
60
2,69
1,80–4,01
<0,001
Возраст (лет)
160
1,09
1,03–1,16
0,003
Вес (≤3,20 кг)
57
<0,001
3,21–4,15 кг
57
0,57
0,38–0,84
0,005
≥4,16 кг
56
0,40
0,26–0,60
<0,001
ОСТ (идеальный вес)
26
0,015
Недостаточный вес
65
2,03
1,23–3,37
0,006
Лишний вес
14
1,25
0,60–2,61
0,545
Альбумин (г/дл)
174
0,38
0,22–0,67
0,001
Креатинин (мг/дл)
174
1,48
1,32–1,65
<0,001
ООК (%)
172
0,91
0,88–0,94
<0,001
Фосфат (<4,00 мг/дл)
57
0,001
4,00–5,26 мг/дл
58
1,15
0,77–1,72
0,486
≥5,27 мг/дл
59
2,09
1,41–3,10
<0,001
ln[ПТГ] (пг/мл)
164
1,17
1,01–1,36
0,043
Нормотензивные кошки
137
Диагноз гипертензии
37
1,51
1,03–2,23
0,036
ОПМ (≤1,016)
66
0,031
1,017–1,019
45
0,68
0,45–1,03
0,068
≥1,020
54
0,62
0,42–0,91
0,014
UPC
137
1,74
1,34–2,25
<0,001
<b>Взаимодействие с магниевым статусом</b>
Креатинин (мг/дл)
0,019
нормомагниемия
143
1,82
1,47–2,24
<0,001
гипомагниемия
20
1,23
0,97–1,56
0,092
гипермагниемия
11
1,69
1,09–2,65
0,020
UPC
0,030
нормомагниемия
115
1,62
1,18–2,23
0,003
гипомагниемия
13
1,30
0,54–3,12
0,555
гипермагниемия
9
6,13
1,13–33,29
0,036
<b>Многовариантная модель (n=122)</b>
Нормомагниемия
101
0,017
гипомагниемия
12
2,74
1,35–5,55
0,005
гипермагниемия
9
1,66
0,74–3,70
0,221
Возраст (лет)
119
1,18
1,08–1,28
<0,001
Креатинин (мг/дл)
119
1,29
1,12–1,49
0,001
ООК (%)
119
0,92
0,89–0,96
<0,001
UPC
119
2,28
1,45–3,60
<0,001
<b>B.</b>
<b>Фосфат–магниевая группа </b>
NP–HM
46
0,025
NP–LM
42
0,97
0,61–1,53
0,887
HP–HM
41
1,14
0,71–1,80
0,592
HP–LM
35
1,90
1,19–3,04
0,008
RERI=1,90–0,97–1,14+1=0,79
ОР (HR) – отношение рисков; 95% ДИ (CI) – 95% доверительный интервал; ФРФ–23 (FGF–23) – фактор роста фибробластов 23; ОСТ (BCS) – оценка состояния тела в баллах; ООК (PCV) – объем осажденных клеток; ПТГ (PTH) – паратиреоидный гормон; ОПМ (USG) – относительная плотность мочи; UPC – отношение белок/креатинин в моче; NP – нормофосфатемические; HP – гиперфосфатемические; LM – более низкий плазменный магний; HM – более высокий плазменный магний; RERI – избыточный относительный риск из–за взаимодействия.
Связь общего магния в плазме с прогрессированием ХБП
2
P
P
Восемьдесят одна кошка имеет достаточный период врачебного наблюдения для включения в анализ прогрессирования заболевания, из которых 29 кошек (36%) показывают прогрессирование ХБП в пределах первых 12 месяцев постановки диагноза. Значительно более высокая доля гипомагниемических кошек имеет прогрессирующую ХБП (таблица 2). Гипомагниемия связана с повышенными шансами прогрессирующего заболевания в одновариантном логистическом регрессионном анализе, но влияние магния теряет значение после поправки на дополнительные переменные. Только более высокий начальный уровень плазменного ФРФ–23 остается выраженным прогностическим фактором, связанным с риском прогрессирующей ХБП в окончательной модели регрессии (Nagelkerke R, 0,21; таблица 6). Никакой статистически значимой разницы в риске прогрессирования заболевания не выявлено ни между гиперфосфатемическими и нормофосфатемическими кошками (=0,194), ни между 4 фосфат–магниевыми группами (=0,628). Поэтому влияние объединенного воздействия магния и фосфата в плазме в отношении прогрессирующей ХБП в дальнейшем не изучалось.
Таблица 6:
Результаты одновариантной бинарной логистической регрессии, идентифицирующей прогностические факторы прогрессирующей ХБП в пределах первых 12 месяцев постановки диагноза азотемической ХБП у кошек. С многовариантной регрессией независимым фактором риска прогрессирования болезни остается только ln[ФРФ–23].
<b>Одновариантный анализ</b>
<b>n</b>
<b>ОШ (OR) (95% ДИ)</b>
<b></b><b><i>P</i></b><b></b>
Нормомагниемия
67
0,010
гипомагниемия
8
17,68 (2,04–153,59)
0,009
гипермагниемия
4
7,58 (0,74–77,48)
0,088
ln[ФРФ–23] (пг/мл)
79
1,90 (1,29–2,80)
0,001
ООК (%)
79
0,87 (0,79–0,96)
0,004
Креатинин (мг/дл)
79
2,65 (1,26–5,56)
0,010
Фосфат (мг/дл)
79
1,33 (1,01–1,74)
0,043
Альбумин (г/дл)
79
0,19 (0,04–0,95)
0,043
ОШ (OR) – отношение шансов; 95% ДИ (CI) – 95% доверительный интервал; ФРФ–23 (FGF–23) – фактор роста фибробластов 23; ООК (PCV) – объем осажденных клеток
Обсуждение
Результаты для наблюдаемой когорты показывают обратную зависимость между концентрациями tMg в плазме и ФРФ–23 в плазме у кошек с азотемической ХБП. Наблюдают значительную независимую корреляцию между гипомагниемией и повышенным риском смертности по всем причинам. Получено недостаточно данных по независимой корреляции между магниевым статусом и риском прогрессирующей ХБП. При дополнительном анализе выявлена возможная связь между гипомагниемией и системной гипертензией, и риск смерти, связанный с гиперфосфатемией, оказывается пониженным из–за более высокого плазменного tMg.
3
35,36
35,37–39
39,40
41
Распределение нарушений магниевого статуса по разным стадиям ХБП, установленное при исследовании, сравнивают с распределением, представленным перед этим среди меньшего числа кошек. Гипермагниемия, как полагают, является результатом неспособности почек фильтровать достаточное количество магния, и она найдена преимущественно у кошек с тяжелой дисфункцией почек. Гипомагниемия при ХБП, как считают, является вторичной относительно нарушенного кишечного всасывания или повышенной почечной экскреции магния, с истощением костных и мышечных запасов. Экскреция магния с мочой оказывается выше у кошек с гипомагниемией, что может подтверждать почечную потерю магния в качестве основной причины. Однако это основано на небольшом числе наблюдений, а методу точечной выборки, используемому для оценки ФЭ магния у кошек, не хватает точности.
42–51
39,52–57
58
59,60
61,62
63,64
98,65–68
Гипомагниемия независимо связана с системной гипертензией. Магний играет активную роль в сосудистом сопротивлении через различные механизмы, такие как регулирование внутриклеточной концентрации кальция, образование оксида азота и кальцификация сосудов. Зависимость между магнием и кровяным давлением хорошо известна в медицине человека, а инфузия магния у собак приводила к снижению сосудистого сопротивления и СКД. Гиперальдостеронизм обычно наблюдают у азотемических кошек с системной гипертензией, и может иметь место возможная связь между гипомагниемией и гипертензией, поскольку альдостерон стимулирует экскрецию магния с мочой, тогда как магний ингибирует высвобождение альдостерона. Никакой информации по концентрации альдостерона в плазме не доступно для кошек, включенных в данное исследование. Гипокалиемия и гипокальциемия связаны с дефицитом магния у кошек, собак и людей, но не являются частыми сопутствующими установленными нарушениями в когорте.
69
30,31,70
69,71
72
73,74
75
76
77
Обратная корреляция плазменного tMg с ФРФ–23 найдена в выборке кошек с ХБП и ранее идентифицирована у больных ХБП людей на гемодиализе. Результаты исследования на крысах подтверждают, что концентрация ФРФ–23 в плазме зависит от потребления магния с пищей, и пациенты на гемодиализе, получающие магний–содержащие слабительные или фосфатные связующие, имеют более низкие концентрации ФРФ–23 в сыворотке, чем пациенты, не принимающие п/о магний. С другой стороны, исследование, изучающее влияние перорального восполняющего введения магния на склонность к кальцификации сыворотки у человека на стадии 3 и 4 ХБП, сообщает об отсутствии значительного снижения концентрации ФРФ–23. Лежащие в основе механизмы зависимости между магнием и ФРФ–23 еще предстоит выяснить, но можно предположить, что ФРФ–23 влияет на почечную обработку магния, поскольку, как также показано, он регулирует тубулярный фосфат, реабсорбцию кальция и натрия. Альдостерон стимулирует экспрессию ФРФ–23 остеобластами, так что альтернативно гиперальдостеронизм, или в качестве причины или как вторичный по отношению к гипермагниемии, возможно, может способствовать более высокой циркуляции ФРФ–23.
5–7
78
25,28
24,26
27
6,7
21
2,79,80
5
Гипомагниемия при диагнозе азотемической ХБП является независимым прогностическим фактором смертности у кошек. В предыдущих исследованиях по выживанию на кошках с ХБП не оценивали влияние магниевого статуса, хотя как гипомагниемия, так и гипермагниемия связаны со снижением выживаемости у кошек, госпитализированных в отделении интенсивной терапии. Многочисленные наблюдательные исследования у больных ХБП людей сообщают о связи между гипомагниемией и повышенной смертностью как у больных на гемодиализе, так и у больных с ХБП, не требующей диализа. Более того, риск смерти, связанный с гиперфосфатемией, оказывается измененным за счет концентрации магния у пациентов на гемодиализе. Гиперфосфатемия является широко известным фактором риска при кошачьей ХБП, и результаты подтверждают, что более высокий магний снижает риск смерти, связанной с гиперфосфатемией у кошек. Возможным объяснением может быть ингибирующая роль магния на индуцированную фосфатом сосудистую кальцификацию, хотя есть лишь скудные сообщения о кальцификации мягких тканей и сосудов у кошек с ХБП. Кроме того, как фосфат, так и магний влияют на плазменный ФРФ–23, который идентифицирован как важный прогностический фактор у кошек с ХБП, хотя он и не остается значимым прогностическим фактором выживаемости в анализе, представленном в данном случае. Начальный уровень ФРФ–23 не включен в вышеупомянутые модели выживаемости в случае людей с ХБП. Более высокий риск смерти, связанной с гипермагниемией у кошек, исчезает после поправки на дополнительные переменные и возможно вызван его преобладанием на терминальной стадии ХБП. Следует отметить, однако, что эти результаты основаны на небольшом числе наблюдений, что приводит к широкому 95% доверительному интервалу.
24
23
23
8,81–83
Гипомагниемия является фактором риска для прогрессирования азотемии у кошек, но аналогично людям зависимость исчезает при многовариантном анализе. Более того, магний, как показано, подавляет фосфат–индуцированное поражение мышиных проксимальных тубулярных клеток, и снижение степени почечной дисфункции, связанной с гиперфосфатемией у больных ХБП людей. Хотя зависимость между гиперфосфатемией и почечным фиброзом широко известна у кошек с ХБП, в настоящем исследовании не найдено доказательства влияния ни гиперфосфатемии на прогрессирование болезни, ни взаимодействия между магнием и фосфатом в отношении прогрессирования азотемии. На такие анализы могло бы оказать влияние короткое время жизни кошек с магниевыми нарушениями, так как демонстрация прогрессирующего увеличения плазменного креатинина более затруднительна при коротком последующем наблюдении.
Плазменный tMg измеряют после зачисления кошек в когорту, поэтому процесс выборки был слепым относительно рассматриваемого воздействия. Однако выбирают только кошек с данным по плазменному ФРФ–23. На этот потенциальный источник ошибки случайного выбора направлено сравнение данных начального уровня включенных кошек и кошек, исключенных из–за отсутствия информации. Распространенность гипомагниемии и гипермагниемии возможно недооценена, так как такие степени частоты заболевания оценивают на один момент времени, а не в данный интервал времени, хотя кошки с такими нарушениями отличаются более высокими рисками смерти.
24
19
65,84
35,39,85
Истинные влияния гипомагниемии и гипермагниемии на прогрессирование и выживаемость возможно недооценено из–за ошибки в классификации случайной выборки. Во–первых, группирование кошек по разным магниевым категориям на основании одного измерения начального уровня могло бы ввести ошибку регрессионного разбавления. Начальная концентрация магния ниже у пациентов–людей, что будет выявлять гипермагниемию по ходу их ХБП, но каким образом плазменный магний меняется во времени у кошек с ХБП не известно. Во–вторых, tMg состоит из 3 фракций: ионизированный, связанный с белком и образующий комплекс магний. Статус ионизированного магния переоценивают c помощью tMg у кошачьих реципиентов почечных трансплантатов и у кошек с сахарным диабетом, следовательно, кошки с ионизированной гипомагниемией могли быть включены в нормомагниемическую категорию, что могло бы внести недифференциальную ошибку в классификацию, если эффекты, наблюдаемые с низким магнием, обусловлены статусом ионизированного магния, а не tMg. Однако только 1% магния в организме располагается во внеклеточной жидкости, и не существует единого мнения о том, отражает ли наилучшим образом магниевый статус измерение tMg или биологически активного ионизированного магния, и между этими методами нет хорошего соответствия. Хотя проводят многовариантный анализ, вероятность остаточного искажения не может быть исключена, и неполная информация по метаболитам витамина D, газов крови, костных показателей и концентрации альдостерона в плазме препятствует исследованию зависимостей между магнием и этими переменными.
24,26,28,69,71
В ходе исследования выявлено, что низкий общий магний в плазме связан с более высокими концентрациями ФРФ–23 в плазме и пониженной выживаемостью при кошачьей ХБП, что согласуется с результатами исследований, посвященных изучению взаимосвязи tMg с ФРФ–23 и выживанию у человека с ХБП. Эти наблюдения сделаны специалистами общей практики на принадлежащих клиентам кошках с естественной ХБП, и должны быть актуальны для других популяций домашних кошек. Однако многочисленные наблюдения проведены на относительно небольшой когорте кошек и поэтому полученные результаты требуют подтверждения другими исследованиями на других популяциях кошек. Последующие измерения плазменного tMg могли бы обеспечить продольный анализ корреляций, изученных в этом исследовании, и были бы особенно полезны для оценки зависимости между плазменным магнием и прогрессированием азотемии. Полученные результаты позволяют предположить, что плазменный магний следует добавлять к обычной панели биохимии плазмы, оцениваемой у кошек с ХБП, так как этот аналит дает дополнительную прогностическую информацию и помогает идентифицировать кошек с выраженными минерально–костными нарушениями.
Ссылки
1. Lulich JP, Osborne CA, Obrien TD, et al. Feline Renal–Failure – Questions, Answers, Questions. Comp Cont Educ Pract 1992; 14:127.
2. DiBartola SP, Rutgers HC, Zack PM, et al. Clinicopathologic findings associated with chronic renal disease in cats: 74 cases (1973–1984). Journal of the American Veterinary Medical Association 1987; 190:1196–1202.
3. Barber PJ, Elliott J. Feline chronic renal failure: calcium homeostasis in 80 cases diagnosed between 1992 and 1995. The Journal of small animal practice 1998; 39:108–116.
4. Geddes RF, Finch NC, Elliott J, et al. Fibroblast growth factor 23 in feline chronic kidney disease. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2013; 27:234–241.
5. Geddes RF, Elliott J, Syme HM. Relationship between Plasma Fibroblast Growth Factor–23 Concentration and Survival Time in Cats with Chronic Kidney Disease. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2015; 29:1494–1501.
6. King JN, Tasker S, Gunn–Moore DA, et al. Prognostic factors in cats with chronic kidney disease. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2007; 21:906–916.
7. Boyd LM, Langston C, Thompson K, et al. Survival in cats with naturally occurring chronic kidney disease (2000–2002). Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2008; 22:1111–1117.
8. Chakrabarti S, Syme HM, Elliott J. Clinicopathological variables predicting progression of azotemia in cats with chronic kidney disease. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2012; 26:275–281.
9. Goldman R, Bassett SH. Phosphorus Excretion in Renal Failure. Journal of Clinical Investigation 1954; 33:1623–1628.
10. Slatopolsky E. The intact nephron hypothesis: the concept and its implications for phosphate management in CKD–related mineral and bone disorder. Kidney international Supplement 2011:S3–8.
11. Isakova T, Wahl P, Vargas GS, et al. Fibroblast growth factor 23 is elevated before parathyroid hormone and phosphate in chronic kidney disease. Kidney Int 2011; 79:1370–1378.
12. Moe S, Drueke T, Cunningham J, et al. Definition, evaluation, and classification of renal osteodystrophy: a position statement from Kidney Disease: Improving Global Outcomes (KDIGO). Kidney Int 2006; 69:1945–1953.
13. Geddes RF, Finch NC, Syme HM, et al. The role of phosphorus in the pathophysiology of chronic kidney disease. Journal of veterinary emergency and critical care 2013; 23:122–133.
14. Barber PJ, Rawlings JM, Markwell PJ, et al. Effect of dietary phosphate restriction on renal secondary hyperparathyroidism in the cat. The Journal of small animal practice 1999; 40:62–70.
15. Elliott J, Rawlings JM, Markwell PJ, et al. Survival of cats with naturally occurring chronic renal failure: effect of dietary management. The Journal of small animal practice 2000; 41:235–242.
16. Ross SJ, Osborne CA, Kirk CA, et al. Clinical evaluation of dietary modification for treatment of spontaneous chronic kidney disease in cats. Journal of the American Veterinary Medical Association 2006; 229:949–957.
17. Plantinga EA, Everts H, Kastelein AM, et al. Retrospective study of the survival of cats with acquired chronic renal insufficiency offered different commercial diets. The Veterinary record 2005; 157:185–187.
18. Geddes RF, Elliott J, Syme HM. The effect of feeding a renal diet on plasma fibroblast growth factor 23 concentrations in cats with stable azotemic chronic kidney disease. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2013; 27:1354–1361.
19. Jahnen–Dechent W, Ketteler M. Magnesium basics. Clinical kidney journal 2012; 5:i3–i14.
20. Sakaguchi Y, Hamano T, Nakano C, et al. Association between Density of Coronary Artery Calcification and Serum Magnesium Levels among Patients with Chronic Kidney Disease. PloS one 2016; 11:e0163673.
21. Louvet L, Buchel J, Steppan S, et al. Magnesium prevents phosphate–induced calcification in human aortic vascular smooth muscle cells. Nephrology, dialysis, transplantation: official publication of the European Dialysis and Transplant Association – European Renal Association 2013; 28:869–878.
22. Van Laecke S, Marechal C, Verbeke F, et al. The relation between hypomagnesaemia and vascular stiffness in renal transplant recipients. Nephrology, dialysis, transplantation: official publication of the European Dialysis and Transplant Association – European Renal Association 2011; 26:2362–2369.
23. Sakaguchi Y, Iwatani H, Hamano T, et al. Magnesium modifies the association between serum phosphate and the risk of progression to end–stage kidney disease in patients with non–diabetic chronic kidney disease. Kidney Int 2015.
24. Van Laecke S, Nagler EV, Verbeke F, et al. Hypomagnesemia and the risk of death and GFR decline in chronic kidney disease. The American journal of medicine 2013; 126:825–831.
25. Sakaguchi Y, Fujii N, Shoji T, et al. Hypomagnesemia is a significant predictor of cardiovascular and non–cardiovascular mortality in patients undergoing hemodialysis. Kidney Int 2014; 85:174–181.
26. Kanbay M, Yilmaz MI, Apetrii M, et al. Relationship between serum magnesium levels and cardiovascular events in chronic kidney disease patients. American journal of nephrology 2012; 36:228–237.
27. Sakaguchi Y, Fujii N, Shoji T, et al. Magnesium modifies the cardiovascular mortality risk associated with hyperphosphatemia in patients undergoing hemodialysis: a cohort study. PloS one 2014; 9:e116273.
28. Ishimura E, Okuno S, Yamakawa T, et al. Serum magnesium concentration is a significant predictor of mortality in maintenance hemodialysis patients. Magnesium research: official organ of the International Society for the Development of Research on Magnesium 2007; 20:237–244.
29. Iguchi A, Watanabe Y, Iino N, et al. Serum magnesium concentration is inversely associated with fibroblast growth factor 23 in haemodialysis patients. Nephrology 2014; 19:667–671.
30. Matsuzaki H, Kajita Y, Miwa M. Magnesium deficiency increases serum fibroblast growth factor–23 levels in rats. Magnesium research: official organ of the International Society for the Development of Research on Magnesium 2013; 26:18–23.
31. Matsuzaki H, Katsumata S, Maeda Y, et al. Changes in circulating levels of fibroblast growth factor 23 induced by short–term dietary magnesium deficiency in rats. Magnesium research: official organ of the International Society for the Development of Research on Magnesium 2016; 29:48–54.
32. Williams TL, Elliott J, Syme HM. Calcium and phosphate homeostasis in hyperthyroid cats: associations with development of azotaemia and survival time. The Journal of small animal practice 2012; 53:561–571.
33. Lefebvre HP, Dossin O, Trumel C, et al. Fractional excretion tests: a critical review of methods and applications in domestic animals. Veterinary clinical pathology/American Society for Veterinary Clinical Pathology 2008; 37:4–20.
34. de Mutsert R, Jager KJ, Zoccali C, et al. The effect of joint exposures: examining the presence of interaction. Kidney Int 2009; 75:677–681.
35. Bateman S. Disorders of Magnesium: Magnesium Deficit and Excess. In: DiBartola SP, ed. Fluid, Electrolyte, and Acid–Base Disorders in Small Animal Practice. St. Louis, Missouri: Elsevier Saunders; 2012:212–229.
36. Navarro–Gonzalez JF, Mora–Fernandez C, Garcia–Perez J. Clinical implications of disordered magnesium homeostasis in chronic renal failure and dialysis. Seminars in dialysis 2009; 22:37–44.
37. Blaine J, Chonchol M, Levi M. Renal control of calcium, phosphate, and magnesium homeostasis. Clinical journal of the American Society of Nephrology: CJASN 2015; 10:1257–1272.
38. Barnes BA, Mendelson J. The measurement of exchangeable magnesium in dogs. Metabolism: clinical and experimental 1963; 12:184–193.
39. de Baaij JH, Hoenderop JG, Bindels RJ. Magnesium in man: implications for health and disease. Physiological reviews 2015; 95:1–46.
40. Pham PC, Pham PA, Pham SV, et al. Hypomagnesemia: a clinical perspective. International journal of nephrology and renovascular disease 2014; 7:219–230.
41. Finco DR, Brown SA, Barsanti JA, et al. Reliability of using random urine samples for "spot" determination of fractional excretion of electrolytes in cats. American journal of veterinary research 1997; 58:1184–1187.
42. Touyz RM, Milne FJ, Reinach SG. Intracellular Mg2+, Ca2+, Na2+ and K+ in platelets and erythrocytes of essential hypertension patients: relation to blood pressure. Clinical and experimental hypertension Part A, Theory and practice 1992; 14:1189–1209.
43. Kisters K, Krefting ER, Spieker C, et al. Increased Na+ and decreased Mg2+ intracellular concentrations in vascular smooth muscle cells from spontaneously hypertensive rats. Clinical science 1998; 95:583–587.
44. Yogi A, Callera GE, Antunes TT, et al. Vascular biology of magnesium and its transporters in hypertension. Magnesium research: official organ of the International Society for the Development of Research on Magnesium 2010; 23:S207–215.
45. Cunha AR, Medeiros F, Umbelino B, et al. Altered vascular structure and wave reflection in hypertensive women with low magnesium levels. Journal of the American Society of Hypertension: JASH 2013; 7:344–352.
46. Meema HE, Oreopoulos DG, Rapoport A. Serum magnesium level and arterial calcification in end–stage renal disease. Kidney Int 1987; 32:388–394.
47. Cheng PT, Grabher JJ, LeGeros RZ. Effects of magnesium on calcium phosphate formation. Magnesium 1988; 7:123–132.
48. Pearson PJ, Evora PR, Seccombe JF, et al. Hypomagnesemia inhibits nitric oxide release from coronary endothelium: protective role of magnesium infusion after cardiac operations. The Annals of thoracic surgery 1998; 65:967–972.
49. Satake K, Lee JD, Shimizu H, et al. Effects of magnesium on prostacyclin synthesis and intracellular free calcium concentration in vascular cells. Magnesium research: official organ of the International Society for the Development of Research on Magnesium 2004; 17:20–27.
50. Salem S, Bruck H, Bahlmann FH, et al. Relationship between Magnesium and Clinical Biomarkers on Inhibition of Vascular Calcification. American journal of nephrology 2012; 35:31–39.
51. Ishimura E, Okuno S, Kitatani K, et al. Significant association between the presence of peripheral vascular calcification and lower serum magnesium in hemodialysis patients. Clinical nephrology 2007; 68:222–227.
52. Joffres MR, Reed DM, Yano K. Relationship of magnesium intake and other dietary factors to blood pressure: the Honolulu heart study. The American journal of clinical nutrition 1987; 45:469–475.
53. Ma J, Folsom AR, Melnick SL, et al. Associations of serum and dietary magnesium with cardiovascular disease, hypertension, diabetes, insulin, and carotid arterial wall thickness: the ARIC study. Atherosclerosis Risk in Communities Study. Journal of clinical epidemiology 1995; 48:927–940.
54. Resnick LM, Bardicef O, Altura BT, et al. Serum ionized magnesium: relation to blood pressure and racial factors. American journal of hypertension 1997; 10:1420–1424.
55. Kass L, Weekes J, Carpenter L. Effect of magnesium supplementation on blood pressure: a meta–analysis. European journal of clinical nutrition 2012; 66:411–418.
56. Joosten MM, Gansevoort RT, Mukamal KJ, et al. Urinary magnesium excretion and risk of hypertension: the prevention of renal and vascular end–stage disease study. Hypertension 2013; 61:1161–1167.
57. Geiger H, Wanner C. Magnesium in disease. Clinical kidney journal 2012; 5:i25–i38.
58. Nakayama T, Nakayama H, Miyamoto M, et al. Hemodynamic and electrocardiographic effects of magnesium sulfate in healthy dogs. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 1999; 13:485–490.
59. Jepson RE, Syme HM, Elliott J. Plasma renin activity and aldosterone concentrations in hypertensive cats with and without azotemia and in response to treatment with amlodipine besylate. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2014; 28:144–153.
60. Jensen J, Henik RA, Brownfield M, et al. Plasma renin activity and angiotensin I and aldosterone concentrations in cats with hypertension associated with chronic renal disease. American journal of veterinary research 1997; 58:535–540.
61. Barr CS, Lang CC, Hanson J, et al. Effects of adding spironolactone to an angiotensin–converting enzyme inhibitor in chronic congestive heart failure secondary to coronary artery disease. The American journal of cardiology 1995; 76:1259–1265.
62. Sontia B, Montezano AC, Paravicini T, et al. Downregulation of renal TRPM7 and increased inflammation and fibrosis in aldosterone–infused mice: effects of magnesium. Hypertension 2008; 51:915–921.
63. Ichihara A, Suzuki H, Saruta T. Effects of magnesium on the renin–angiotensin–aldosterone system in human subjects. The Journal of laboratory and clinical medicine 1993; 122:432–440.
64. Atarashi K, Matsuoka H, Takagi M, et al. Magnesium ion: A possible physiological regulator of aldosterone production. Life sciences 1989; 44:1483–1489.
65. Wooldridge JD, Gregory CR. Ionized and total serum magnesium concentrations in feline renal transplant recipients. Veterinary surgery: VS 1999; 28:31–37.
66. Kimmel SE, Waddell LS, Michel KE. Hypomagnesemia and hypocalcemia associated with protein–losing enteropathy in Yorkshire terriers: five cases (1992–1998). Journal of the American Veterinary Medical Association 2000; 217:703–706.
67. Huang CL, Kuo E. Mechanism of hypokalemia in magnesium deficiency. Journal of the American Society of Nephrology: JASN 200718:2649–2652.
68. Yamamoto M, Yamaguchi T, Yamauchi M, et al. Acute–onset hypomagnesemia–induced hypocalcemia caused by the refractoriness of bones and renal tubules to parathyroid hormone. Journal of bone and mineral metabolism 2011; 29:752–755.
69. Iguchi A, Watanabe Y, Iino N, et al. Serum magnesium concentration is inversely associated with fibroblast growth factor 23 in haemodialysis patients. Nephrology 2014; 19:667–671.
70. van Angelen AA, San–Cristobal P, Pulskens WP, et al. The impact of dietary magnesium restriction on magnesiotropic and calciotropic genes. Nephrology, dialysis, transplantation: official publication of the European Dialysis and Transplant Association – European Renal Association 2013; 28:2983–2993.
71. Covic A, Passlick–Deetjen J, Kroczak M, et al. A comparison of calcium acetate/magnesium carbonate and sevelamer–hydrochloride effects on fibroblast growth factor–23 and bone markers: post hoc evaluation from a controlled, randomized study. Nephrology, dialysis, transplantation: official publication of the European Dialysis and Transplant Association – European Renal Association 2013; 28:2383–2392.
72. Bressendorff I, Hansen D, Schou M, et al. Oral Magnesium Supplementation in Chronic Kidney Disease Stages 3 and 4: Efficacy, Safety, and Effect on Serum Calcification Propensity–A Prospective Randomized Double–Blinded Placebo–Controlled Clinical Trial. Kidney International Reports 2017; 2:380–389.
73. Andrukhova O, Zeitz U, Goetz R, et al. FGF–23 acts directly on renal proximal tubules to induce phosphaturia through activation of the ERK1/2–SGK1 signaling pathway. Bone 2012; 51:621–628.
74. Shimada T, Urakawa I, Yamazaki Y, et al. FGF–23 transgenic mice demonstrate hypophosphatemic rickets with reduced expression of sodium phosphate cotransporter type IIa. Biochemical and biophysical research communications 2004; 314:409–414.
75. Andrukhova O, Smorodchenko A, Egerbacher M, et al. FGF–23 promotes renal calcium reabsorption through the TRPV5 channel. The EMBO journal 2014; 33:229–246.
76. Andrukhova O, Slavic S, Smorodchenko A, et al. FGF–23 regulates renal sodium handling and blood pressure. EMBO molecular medicine 2014; 6:744–759.
77. Zhang B, Umbach AT, Chen H, et al. Up–regulation of FGF–23 release by aldosterone. Biochemical and biophysical research communications 2016; 470:384–390.
78. Toll J, Erb H, Birnbaum N, et al. Prevalence and incidence of serum magnesium abnormalities in hospitalized cats. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2002; 16:217–221.
79. Barber PJ. Parathyroid gland function in the ageing cat [PhD Thesis]. In: Royal Veterinary College. London: University of London; 1998:289.
80. McLeland SM, Lunn KF, Duncan CG, et al. Relationship among serum creatinine, serum gastrin, calcium–phosphorus product, and uremic gastropathy in cats with chronic kidney disease. Journal of veterinary internal medicine/American College of Veterinary Internal Medicine 2014; 28:827–837.
81. Ross LA, Finco DR, Crowell WA. Effect of dietary phosphorus restriction on the kidneys of cats with reduced renal mass. American journal of veterinary research 1982; 43:1023–1026.
82. Chakrabarti S, Syme HM, Brown CA, et al. Histomorphometry of feline chronic kidney disease and correlation with markers of renal dysfunction. Veterinary pathology 2013; 50:147–155.
83. Lawson J, Elliott J, Wheeler–Jones C, et al. Renal fibrosis in feline chronic kidney disease: known mediators and mechanisms of injury. Veterinary journal 2015; 203:18–26.
84. Norris CR, Nelson RW, Christopher MM. Serum total and ionized magnesium concentrations and urinary fractional excretion of magnesium in cats with diabetes mellitus and diabetic ketoacidosis. Journal of the American Veterinary Medical Association 1999; 215:1455–1459.
85. Elin RJ. Assessment of magnesium status for diagnosis and therapy. Magnesium research: official organ of the International Society for the Development of Research on Magnesium 2010; 23:S194–198.
86. Gonella M, Ballanti P, Della Rocca C, et al. Improved bone morphology by normalizing serum magnesium in chronically hemodialyzed patients. Mineral and electrolyte metabolism 1988; 14:240–245.
87. Turgut F, Kanbay M, Metin MR, et al. Magnesium supplementation helps to improve carotid intima media thickness in patients on hemodialysis. International urology and nephrology 2008; 40:1075–1082.
88. International Renal Interest Society Guidelines: IRIS Staging of CKD. http://iris–kidney.com/guidelines/staging.html
89. Parks Electronic Doppler Model 811B; Perimed UK, Bury St Edmunds, UK.
90. Idexx laboratories, Wetherby, UK.
91. FGF–23 ELISA Kit, Kainos Laboratories, Tokyo, Japan.
92. Total intact PTH immunoradiometric assay – coated bead version, 3KG600, Scantibodies, Santee, CA, USA.
93. iSTAT 1 point–of–care analyzer, Abbott Point of Care Inc., Princeton, NJ, USA.
94. Michigan State University Diagnostic Center for Population and animal Health, Lansing, MI.
95. IBM SPSS Statistics for Windows, Version 24, IBM Corp., Armonk, NY, USA and GraphPad Prism 7, GraphPad Software, La Jolla, CA, USA.
96. International Renal Interest Society Guidelines: Treatment Recommendations for CKD in Cats (2015). http://www.iris–kidney.com/guidelines/recommendations.html
97. RERI=HRHP–LM – HRNP–LM – HRHP–HM+1
98. Dupha N. Serum magnesium abnormalities in a small animal intensive care unit population. J Vet Intern Med 1994; 8: 157 (abstract).
Хотя раскрытый в настоящее время объект изобретения и его преимущества описаны подробно, следует понимать, что различные изменения, замены и поправки могут быть выполнены без отступления от сути и объема изобретения, определенного прилагаемой формулой изобретения. Более того, объем настоящей заявки, как полагают, не ограничен конкретными вариантами способа, оборудования, производства, композиции объекта, средств, методов и стадий, описанных в описании. Специалист в данной области техники легко поймет из описания раскрытого в настоящее время объекта изобретения, что способы, оборудование, производство, композиции объекта, средства, методы или стадии, существующие в настоящее время или которые будут разработаны позднее, которые выполняют по существу такие же функции или дают, по существу, такой же результат, что и соответствующие варианты осуществления, описанные в данном документе, могут быть использованы в соответствии с раскрытым в настоящее время объектом изобретения. Соответственно, прилагаемая формула изобретения предполагает включение таких способов, оборудования, производства, композиций объекта, средств, методов или этапов.
Патенты, заявки на патент, публикации, описания продуктов и протоколы цитируют по всей этой заявке и их раскрытия включены в данный документ посредством ссылки во всей их полноте для всех целей.