ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКИЙ СПОСОБ ДИАГНОСТИРОВАНИЯ АУТОИММУННОГО СИСТЕМНОГО СКЛЕРОЗА (SSc) И СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКИ (SLE)

1. Способ диагностирования in vitro системного склероза (SSc) и/или системной красной волчанки (SLE) у субъекта, включающий стадии:
- взаимодействия тестируемого образца биологической жидкости, взятого у указанного субъекта, с реагентом на основе экстракта клеточных ядер млекопитающих, предварительно иммобилизованным на твердой подложке, в условиях, позволяющих связывание антиген-антитело;
- взаимодействия эталонного образца с дополнительным реагентом на основе клеточного экстракта млекопитающих, предварительно иммобилизованного на твердой подложке, в условиях, позволяющих связывание антиген-антитело;
- промывания;
- добавления средств детектирования, которые способны обнаружить связывание антиген-антитело, если оно имеет место, и получения значений детектирования;
- сравнения значений детектирования для тестируемого образца биологической жидкости и эталонного образца сыворотки для получения среднего значения кратности увеличения реакционной способности;
- проверки того, выше или ниже среднее значение кратности увеличения реакционной способности заранее определенного порогового значения.
2. Способ по п. 1, где тестируемый образец биологической жидкости представляет собой кровь, плазму сыворотки,
необязательно подвергнутый хранению, замораживанию или лиофилизации.
3. Способ по п. 1 или 2, где реагент на основе экстракта клеточных ядер млекопитающих получен из клеток, входящих в группу, состоящую из: клеток линии CHO, клеток линии HeLa, клеток линии 293 и клеток линии MRC-5.
4. Способ по п. 1, где реагент на основе экстракта клеточных ядер получен путем:
a) сбора клеток млекопитающих,
b) суспендирования собранных клеток млекопитающих в растворе, который способен осуществлять лизис клеток, оставляя интактные ядра, с получением лизата клеток млекопитающих с интактными ядрами;
c) осаждения центрифугированием лизата клеток млекопитающих и промывания осажденных интактных ядер;
d) лизиса ядер в соответствующем растворе с получением лизата клеточных ядер млекопитающих и
e) ультразвуковой обработки и центрифугирования лизата ядер с отбрасыванием нерастворимого вещества.
5. Способ по п. 4, где раствор согласно b) представляет собой буферированный гипотонический раствор с низким содержанием солей, дополненный смесью ингибиторов протеазы.
6. Способ по п. 4 или 5, где раствор согласно d) представляет собой буферированный гипертонический раствор с высоким содержанием солей, дополненный смесью ингибиторов протеазы.
7. Способ по п. 1, где средства детектирования представляют
собой вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой.
8. Способ по п. 7, где вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой, представляют собой антитела против человеческих IgG, конъюгированные с пероксидазой.
9. Способ по п. 1, где пороговое значение составляет приблизительно 1,35 раз по сравнению с эталоном.
10. Способ по п. 1 для идентификации наличия сосудистых изъязвлений при SSc и явления Рейно при SLE.
11. Способ по п. 1, где SSc принадлежит к группе, состоящей из: ранней формы SSc, ограниченной кожной формы SSc, диффузной формы SSc, CREST.
12. Набор для диагностики системного склероза (SSc) и/или системной красной волчанки (SLE) согласно способу по любому из предшествующих пунктов.