СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НАРУЖНОГО ГЕНИТАЛЬНОГО ЭНДОМЕТРИОЗА У ПАЦИЕНТОК С БЕСПЛОДИЕМ
DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR EXTERNAL GENITAL ENDOMETRIOSIS IN PATIENTS SUFFERING STERILITY

Настоящее изобретение относится к практической медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для диагностики наружного генитального эндометриоза у пациенток с бесплодием.
Наружный генитальный эндометриоз является одним из наиболее распространенных заболеваний, ассоциируемых с бесплодием. Однако при малых его формах диагностика не инвазивными методами крайне затруднительна.
Эндометриоидные кисты, ретроцервикальный эндометриоз можно верифицировать с помощью бимануального, ультразвукового исследования, магнитно-резонансной томографии, однако наружный эндометриоз тазовой брюшины (малые формы наружного генитального эндометриоза) можно диагностировать только при проведении лапароскопии и последующего гистологического исследования.
Следовательно, после проведения гормонального обследования, тестов функциональной диагностики, оценки проходимости маточных труб, спермограммы решается вопрос о возможной диагностической лапароскопии, чтобы исключить бесплодие, ассоциированное с эндометриозом. Настоящее изобретение позволяет верифицировать наружный генитальный эндометриоз у бесплодных пациенток до оперативного вмешательства и оценить целесообразность проведения диагностической лапароскопии.
Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза путем определения спонтанной НСТ-активности нейтрофилов после их инкубации с плацентарным - 2 микроглобулином фертильности в периферической крови и при показателях ее 24% и более диагностируют наружный генитальный эндометриоз. (Патент РФ №2164687). Основным недостатком данного изобретения является трудоемкость в исполнении.
Поиск нетрудоемкого и достоверного способа диагностики наружного генитального эндометриоза остается актуальным.
В настоящее время широко обсуждается роль окислительного стресса в развитии эндометриоза. В связи с этим представляется интересным изучение маркеров состояния системы антиоксидантной защиты, с помощью которых можно судить о наличии наружного генитального эндометриоза у бесплодных пациенток.
10
10
10
10
Известен способ диагностики состояния системы антиоксидантной защиты у бесплодных пациенток с эндометриозом (Laura Prieto. Analysis of follicular fluid and serum markers of oxidative stress in women with infertility related to endometriosis. /Juan F. Quesada, Olivia Cambero, Alberto Pacheco, Antonio Pellicer, Rosa Codoceo, Juan A. Garcia-Velasco// Fertil Steril - 2012 Jul - V98 (1) - P. 126-30), который является наиболее близким к предлагаемому изобретению. Он основан на определении концентрации таких антиоксидантов, как α-токоферол, аскорбиновая кислота, супероксиддисмутаза в плазме крови у бесплодных пациенток с эндометриозом. Выявлено, что у пациенток с эндометриозом концентрации аскорбиновой кислоты и супеоксиддисмутазы снижены в сравнении с контрольной группой. Обратная тенденция выявлена при измерении концентрации α-токоферола: уровень этого антиоксиданта был выше у пациенток с эндометриозом в сравнении с группой контроля. Однако данный метод не позволяет дать достоверную оценку состояния системы антиоксидантной защиты вследствие того, что уровень α-токоферола определяется коэнзимом Q. Известно, что коэнзим Q восстанавливает антиоксидантную активность α-токоферола. Таким образом, первичным биохимическим маркером снижения протективной активности этого звена системы антиоксидантной защиты является коэнзим Q. Зависимость одного антиоксиданта от другого доказывает необходимость определения концентрации каждого в плазме крови для более достоверной характеристики состояния системы антиоксидантной защиты у данной группы пациенток. Из выше изложенного следует, что определение концентрации α-токоферола в плазме крови без измерения количества коэнзима Q является недостаточным. Этот недостаток может быть преодолен посредством проведения исследований концентрации комплекса параметров - α-токоферола и коэнзима Q10.
10
10
10
10
10
Кроме того, коэнзим Q имеет ряд уникальных свойств: является единственным жирорастворимым эндогенным антиоксидантом, составляющей каждой клетки организма, имеет самый мощный антиоксидантный потенциал. Кроме того, коэнзим Q может восстанавливаться несколькими путями: с участием аскорбата либо при катализе ферментом NAD(Р)Н-хиноноксидоредуктазой (DT-диафоразой). Таким образом антиоксидантная функция коэнзима Q не зависит от присутствия α-токоферола, в то время как концентрация α-токоферола напрямую зависит от концентрации коэнзима Q. Все это еще раз подтверждает целесообразность использования комплекса параметров - α-токоферола и коэнзима Q при проведении исследований для более достоверной оценки антиоксидантного статуса у исследуемой группы пациенток.
Задачей и техническим результатом настоящего изобретения является наиболее достоверная диагностика наружного генитального эндометриоза у бесплодных пациенток.
10
Сущность предлагаемого способа диагностики наружного генитального эндометриоза у пациенток с бесплодием заключается в исследовании уровня коэнзима Q и α-токоферола в плазме крови с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимическим детектированием. Критериями исключения являются наличие у пациентки острых воспалительных процессов и сердечно-сосудистых заболеваний. Забор крови производится во вторую фазу менструального цикла в «окно имплантации» (на 5-7 день после овуляции) до проведения любых хирургических манипуляций.
10
Изобретение поясняется чертежами, где на фиг. 1 представлена ROC-кривая уровня коэнзима Q и α-токоферола в диагностике состояния системы антиоксидантной защиты у бесплодных пациенток с эндометриозом; на фиг. 2 представлена шкала оценки степени тяжести эндометриоза у бесплодных пациенток.
10
У бесплодных пациенток с эндометриозом наблюдается статистически значимое (р<0,01) снижение уровня коэнзима Q: 1,18 (0,98-1,39) мкг/мл против 1,57 (1,23-2,32) мкг/мл у фертильных пациенток (контрольная группа). Сходная тенденция выявлена при исследовании уровня α-токоферола, уровень которого был ниже у пациенток с эндометриозом по сравнению с контрольной группой [18,9 (17,7-21,0) мкг/мл и 24,5 (19,0-27,7) мкг/мл соответственно].
10
10
10
На втором этапе исследования проанализирована концентрация коэнзима Q и α-токоферола в плазме крови пациенток в зависимости от степени тяжести наружного генитального эндометриоза. На этом основании пациентки разделены на две подгруппы по степени тяжести эндометриоза, в соответствии с классификацией Американского общества фертильности, 1996 г. Первую подгруппу составляют пациентки с I и II степенью эндометриоза, вторую подгруппу - с III и IV степенью. Концентрация коэнзима Q в первой подгруппе составляет 1,25 (1,13-1,5) мкг/мл, в то время как во второй подгруппе этот показатель равен лишь 0,85 (0,67-1,03) мкг/мл. Различия между подгруппами следует считать статистически достоверными (р<0,01). Таким образом, уровень плазменного коэнзима Q ниже при большем количестве гетеротопий и глубине инвазии. Сходная тенденция выявлена при исследовании уровня α-токоферола: в первой подгруппе составляет 19,72 (17,75-25,5) мкг/мл, во второй подгруппе этот показатель равен лишь 16,53 (15,9-23,5) мкг/мл.
10
Таким образом, способ диагностики наружного генитального эндометриоза у бесплодных пациенток при помощи исследования содержания коэнзима Q и α-токоферола позволяет не только верифицировать эндометриоз, но и дает возможность судить о его распространенности и глубине инвазии.
10
10
Для выявления пороговых уровней коэнзима Q и α-токоферола, при которых происходит снижение антиоксидантного статуса организма, нами проведен анализ с построением ROC-кривой (от англ. receiver operating characteristic - зависимость количества верно классифицированных положительных объектов от количества неверно классифицированных отрицательных объектов) (фиг. 1). По данным ROC-анализа оптимальное соотношение чувствительности и специфичности (70,83 и 70,00%, соответственно) диагностического теста отмечается при концентрации коэнзима Q менее 1,352 мкг/мл и (75,00 и 80,00%, соответственно) при концентрации α-токоферола менее 21,03 мкг/мл.
10
10
При этом площади под ROC-кривой (AUC - от англ. area under the ROC curve) для коэнзима Q и α-токоферола составили 0,769 и 0,737, соответственно, что характеризует «хорошее» качество диагностической модели. Однако следует отметить, что наибольшая диагностическая ценность в отношении состояния системы антиоксидантной защиты отмечается при исследовании уровня коэнзима Q, что еще раз доказывает значимость его определения в плазме крови у бесплодных пациенток с эндометриозом.
10
10
10
Учитывая высокую диагностическую ценность данного метода, нами создана шкала оценки степени тяжести наружного генитального эндометриоза у бесплодных пациенток (фиг. 2). Данная шкала разделена на зоны. При концентрациях коэнзима Qменее 1,057 мкг/мл и α-токоферола менее 18,00 мкг/мл, что соответствует зоне С, верифицируется тяжелая и средняя степень тяжести (III и IV) наружного генитального эндометриоза (или тяжелые или умеренные формы наружного генитального эндометриоза); при концентрациях коэнзима Q от 1,057 мкг/мл до 1,352 мкг/мл и α-токоферола от 18,00 мкг/мл и до 21,03 мкг/мл, что соответствует зоне В - легкой степени (I и II) (или малой форме наружного генитального эндометриоза); при концентрациях коэнзима Q более 1,352 мкг/мл и α-токоферола более 21,03 мкг/мл, что соответствует зоне А - наружный генитальный эндометриоз исключается.
Пример 1.
Пациентка А., 31 год.
Поступила в гинекологическое отделение с жалобами на отсутствие наступления беременности в течение 1,5 лет при регулярной половой жизни без контрацепции.
Обследована: гормональный профиль в норме, спермограмма мужа - нормозооспермия.
При ультразвуковом исследовании органов малого таза визуализируется эндометриоидная киста правого яичника.
При лапароскопии обнаружено: эндометриоидная киста правого яичника, поверхностный эндометриоз левого яичника, переднематочное и позадиматочное пространства с множественными очагами эндометриоза. Произведено: резекция правого яичника, коагуляция очагов эндометриоза.
Клинический диагноз: Бесплодие I. Эндометриоидная киста правого яичника. Наружный эндометриоз тазовой брюшины II ст.
Диагноз подтвержден гистологически.
Самопроизвольная беременность наступила через 7 месяцев после оперативного вмешательства.
10
Концентрации коэнзима Q и α-токоферола в плазме крови составили 0,790 мкг/мл и 16,967 мкг/мл, что соответствует зоне С и свидетельствует о наличии тяжелой или умеренной форм наружного генитального эндометриоза.
Пример 2.
Пациентка С., 31 год.
Поступила в гинекологическое отделение с жалобами на отсутствие наступления беременности в течение 2 лет при регулярной половой жизни без контрацепции, периодические боли при половом акте.
Обследована: гормональный профиль в норме, спермограмма мужа - нормозооспермия.
При ультразвуковом исследовании органов малого таза визуализируется эндометриоидная киста левого яичника.
При лапароскопии обнаружено: эндометриоидная киста левого яичника, поверхностный эндометриоз правого яичника, переднематочное и позадиматочное пространства с множественными очагами эндометриоза, ретроцервикальный эндометриоз. Произведено: резекция правого яичника, коагуляция и иссечение очагов эндометриоза.
Клинический диагноз: Бесплодие I. Эндометриоидная киста левого яичника. Поверхностный эндометриоз правого яичника. Ретроцервикальный эндометриоз. Наружный эндометриоз тазовой брюшины II-III ст.
Диагноз подтвержден гистологически.
Самопроизвольная беременность наступила через 5 месяцев после оперативного вмешательства.
10
Концентрации коэнзима Q и α-токоферола в плазме крови составили 0,629 мкг/мл и 15,400 мкг/мл, что соответствует зоне С и свидетельствует о наличии тяжелой формы наружного генитального эндометриоза.
Пример 3.
Пациентка П., 30 лет.
Поступила в гинекологическое отделение с жалобами на отсутствие наступления беременности в течение 1,5 лет при регулярной половой жизни без контрацепции.
Обследована: гормональный профиль в норме, спермограмма мужа - нормозооспермия.
При ультразвуковом исследовании органов малого таза патологии не выявлено.
Для уточнения генеза бесплодия проведена лапароскопия.
При лапароскопии обнаружено: поверхностный эндометриоз правого яичника, переднематочное и позадиматочное пространства с единичными очагами эндометриоза. Произведено: коагуляция очагов эндометриоза.
Клинический диагноз: Бесплодие I. Поверхностный эндометриоз правого яичника. Наружный эндометриоз тазовой брюшины I-II ст.
Диагноз подтвержден гистологически.
Самопроизвольная беременность наступила через 4 месяца после оперативного вмешательства.
10
Концентрации коэнзима Q и α-токоферола в плазме крови составили 1,114 мкг/мл и 20,03 мкг/мл, что соответствует зоне В и свидетельствует о наличии у пациентки малых форм наружного генитального эндометриоза.
10
Таким образом, заявляемое изобретение позволит до оперативного вмешательства по маркерам (α-токоферол и коэнзим Q) состояния системы антиоксидантной защиты диагностировать наружный генитальный эндометриоз у пациенток, страдающих бесплодием, то есть решить вопрос о целесообразности лапароскопии.
10
Существенным в проведенном исследовании является исследование состояниия системы антиоксидантной защиты по концентрации и α-токоферола, и коэнзима Q, которые "работают в паре", обеспечивая получение более достоверного способа диагностики наружного генитального эндометриоза у пациенток с бесплодием.