Гипотеза проявления физиологической активности гумусовых веществ в аспекте процесса гумификации

Таким образом, использование регуляторов роста растений и гуминовых удобрений в технологии возделывания сои в условиях Ростовской области позволило увеличивать урожайность зерна на 2060% и улучшать качество продукции. Наибольший эффект был получен при некорневой обработке растений сои по двум основным фазам развития растения (4-5 листьев и бутонизация цветения) кремнийорганическим препаратом Энергия-М в дозе 15 мг/га: прибавка на минеральном агрофоне составила 52,4% и 57,9% на органоминеральном.

Литература

1. Вакуленко В.В., Шаповал О. А. Новые регуляторы роста в сельскохозяйственном производстве // Агро XXI, 2001, № 2. - С. 2-4.

2. Воронков М.Г., Дьяков В.М., Силатраны. - Новосибирск: Наука, 1978. - 208 с.

3. Кефели В.И., Прусакова Л.Д. Химические регуляторы роста растений. - М.: Знание, сер. Биология, 1985, № 7. - 63 с.

4. Яхин О.И., Лубянов А.А., Яхин И.А. Биостимуляторы в агротехнологиях: проблемы, решения, перспективы // Агрохимический вестник, 2016, № 1. - С. 15-21.

5. Петриченко В.Н., Логинов С.В., Туркина О.С. Снижение содержания тяжелых металлов в овощной продукции путем некорневых обработок регуляторами роста растений // Агроэкология, 2015, № 4. - С. 23-31.

6. Петриченко В.Н., Логинов С.В., Туркина О.С. Кремнийсодержащие препараты на атрановой основе: практика и перспективы применения в растениеводстве России // Бутлеровские сообщения, 2015, № 9. - С. 49-65.

7. Петриченко В.Н., Логинов С.В. Применение регуляторов роста растений нового поколения на овощных культурах // Агрохимический вестник, 2010, № 2. - С. 24-26.

8. Рекомендации по технологии возделывания сои. Минсельхоз РФ. РСС. РАСХН. ВНИИМК им. В.С. Пустовой-та. - Коллектив авторов. - Краснодар, 2008. - 56 с.

9. Шабалдас О.Г., Панков Ю.А., Жигальцова И.А. Сорта сои и влияние удобрений на их продуктивность // Аграрная наука, 2008, № 5. - С. 15-18.

УДК 631.41

ГИПОТЕЗА ПРОЯВЛЕНИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГУМУСОВЫХ ВЕЩЕСТВ В АСПЕКТЕ ПРОЦЕССА ГУМИФИКАЦИИ

!А.А. Комаров, д.с.-х.н., 2А.А. Комаров

1 Агрофизический институт, e-mail: Zelenydar@mail.ru 2Ленинградский НИИСХ «Белогорка», e-mail: Zelenydar@mail.ru

Представлена гипотеза, объясняющая проявление физиологической активности многообразных гумусовых веществ, образующихся в процессе трансформации органического вещества в гумус. Проанализировано структурное и физиологическое сходство разных фрагментов гумусовых веществ с природными фитогормонами, имеющими в своей основе единую ароматическую матрицу, берущую начало из наиболее устойчивых к разложению лигнифицированных остатков растений. Показано, что трансформацию органического вещества в гумус можно условно разделить на три этапа. На первом этапе в процессе окислительно-гидролитической трансформации лигниновые структуры ароматизируются, карбоксилируются и деметоксилируются, приобретая свойства аналогов гуминовых кислот. Образующиеся при этом лигногуминовые кислоты (ЛГК) структурно и физиологически схожи с природными гиббереллинами. На втором этапе при включении азота в структуру ЛГК формируются соединения индольного типа - близкие природным ауксинам. Заключительный этап характеризуется насыщением ароматической матрицы азотом, при этом азот включается не только в периферии, но и встраивается в гете-роцикл, формируя структуры близкие природным цитокининам.

Ключевые слова: органическое вещество, трансформация, физиологическая активность, гумусовые вещества.

HYPOTHESIS OF HUMIC SUBSTANCES PHYSIOLOGICAL ACTIVITY DEMONSTRATION

IN ASPECT OF HUMIFICATION PROCESS

lDr.Sci. A.A. Komarov, 2A.A. Komarov

lAgrophysical Scientific-Research Institute, e-mail: Zelenydar@mail.ru 2 Leningrad Scientific-Research Institute for Agriculture «Belogorka», e-mail: Zelenydar@mail.ru

A hypothesis is presented explaining the manifestation of the physiological activity of the various humic substances formed during the transformation of organic matter into humus. The structural and physiological similarity of different fragments of humic substances with natural phytohormones, which have as their basis a single aromatic matrix, originating from the most resistant to decomposition of lignifiedplant remains, is analyzed. It is shown that the transformation of organic matter into humus can be conditionally divided into three stages. At the first stage, during the oxidation-hydrolytic transformation, lignin structures are aromatized, carboxylated and demethoxylated, acquiring the properties of analogues of humic acids. The resulting lignohumic acids (LGA) are structurally and physiologically similar to natural gibberellins. At the second stage, when nitrogen is included, indole type compounds are formed in the structure of LGA - they are close to natural auxins. The final stage is characterized by saturation of the aromatic matrix with nitrogen, while nitrogen is not only included in the periphery, but is also built into the heterocycle, forming structures close to natural cytokinins.

Keywords:

Широкое использование в практике растениеводства и животноводства различных гуминовых удобрений (ГУ) и гуминовых препаратов (ГП) ставит перед учеными задачу - разобраться в механизме проявления физиологической активности гумусовых веществ на растения. Актуальность исследования обусловлена тем, что, не смотря на инициацию теории и практики исследования действия гумусовых веществ (ГВ), начатую еще в 50-х годах прошлого века, механизм их действия на растения и другие живые объекты до сих пор однозначно не описан.

В чем же основная проблема? Прежде всего необходимо отметить, что ГВ как специфические соединения образуются только в процессе гумификации [1]. Поэтому рассмотрение механизма действия этих специфических гумусовых соединений на живые объекты необходимо проводить в аспекте изучения самого процесса трансформации органических соединений в гумус, например, моделируя этот процесс в условиях почвенных и химико-технологических моделей. Кроме того, ГВ и их структурные аналоги из почв, торфов, углей и других органических веществ, имеющих в своем составе ароматическую основу, представляющую собой сополимеризованное ядро гумуса, выделяют различными способами [2-5]. Образующиеся при этом разнообразные гумусовые соединения представлены сложной смесью высокомолекулярных и низкомолекулярных веществ, состав которых и соотношение компонентов весьма разнообразно. Для того, чтобы оценить вклад тех или иных гумусовых соединений в совокупное физиологическое воздействие на растения, животных, микроорганизмы и другие биообъекты необходимо выделить и идентифицировать стабильный по составу источник их получения; разработать тест-систему оценки фи-

зиологической активности образующихся продуктов, выбрать оптимальную технологию извлечения физиологически активных соединений на каждом фиксированном этапе процесса; оценить вклад образующихся на разных стадиях процесса соединений в их совокупное и индивидуальное влияние на физиологические процессы, идентифицировать образующиеся физиологические активаторы.

Ранее мы отмечали [2], что физиологическая реакция растений на обработку их гуматами в области концентраций, рекомендуемых производителями (0,1-0,001%), может быть вызвана стресс-реакцией гуматов на растительные объекты, что связывают с изменением кислотности растворов. Однако физиологический отклик растений на гуматы проявляется не только в области рекомендуемых концентраций (от 1 до 10-3%), но также в области как низких (10-5-10-7), так и сверхнизких (менее 10-7%) концентраций [3]. Ниже представлен рисунок, где согласно методике [4] проведена оценка физиологической активности гуматов при различных концентрациях. Наблюдаемый специфический физиологический отклик растений на обработку гуматами при концентрации 10-5-10-7% уже невозможно объяснить простым стресс-эффектом. Для объяснения механизмов физиологического действия гума-тов на растения в области низких концентраций потребовались дополнительные экспериментальные и теоретические исследования.

Для изучения физиологической активности гумусовых веществ нами была разработана новая концепция, в основе которой физиологическое действие формирующихся соединений рассматривалось в динамике процесса их формирования (гумификации). При этом для изучения как механизма гумификации, так и сопряженного с ним механизма действия образующихся на разных этапах процесса

140

120

100

80

60

40

20

Физиологическая активность,%

— /_

Л,

-9 -8

-6 -5

-1 1

0

Проявление физиологической активности гумата при различных концентрациях

По оси абсцисс - концентрация от 1 до 10-9%, по оси ординат - физиологический отклик на данную концентрацию, %; контроль (0) - вода.

соединений использовали комплексный подход. Так, для выяснения структурных особенностей и продуктов трансформации, образующихся на всех этапах процесса моделирования, применяли комплекс классических и современных методов, включая: элементный и групповой анализы, гидролиз, окисление, хроматографию, спектроскопию в различных областях спектра. Молекулярная структура промежуточных соединений в процессе трансформации, а также конечных продуктов каждой модельной реакции формирования гуминовых кислот была изучена методами ИК-спетрометрии, ЯМР, хроматографии и др. Фракционирование препаратов по молекулярным массам проводили на сефадексах. Оценку «хвостов» - низкомолекулярных кислот проводили с привлечением различных методов хроматографии.

Теоретической основой представленной концепции стали эксперименты, разрабатываемые на протяжении многих лет в Ленинградском сельскохозяйственном институте (Санкт-Петербургский государственный аграрный университет) под руководством Л.Н. Александровой. Особенность ступенчато-поэтапной гипотезы гумификации по Л.Н. Александровой заключается в том, что за основу формируемого ядра гумуса автором был выбран лигнин. Основанием для выбора служило то, что это наиболее устойчивый природный биополимер, причем, согласно ее воззрениям, лигнин в процессе разложения растительных остатков не деструкти-ровался до простых мономеров, а постепенно трансформировал всю свою молекулярную структуру в специфические гумусовые вещества, формируя основу - ядро гумуса [1, 3].

Вторым положением представленной концепции является рассмотрение физиологической активно-

сти гумусовых веществ на основе теории и практики, разрабатываемой на протяжении многих лет Л.А. Христевой и ее школой [6-8].

Для изучения этапов формирования гумуса и физиологического действия, образующихся на каждом этапе соединений на растения, использовался метод химико-технологических моделей [3, 9]. Основываясь на том, что основой формирующегося ядра гумуса служит природный биополимер - лигнин, изучали процесс его трансформации в динамике. В изучаемых моделях формирования гумуса, в отличие от всех других моделей получения биоактивных гуматов, трансформация лигнина проводилось поэтапно, моделируя естественный процесс его формирования в природной среде, причем на первом этапе в среде без азота. Это позволило искусственно разделить течение процесса на различные этапы, в том числе рассмотреть возможность формирования лигниновой безазотистой ядерной части гумуса, названной «матрицей» [9].

Моделирование окислительно-гидролитической трансформации лигнина (использовался гидролизный лигнин - ГЛ) проводили в специально разработанном для этой цели реакторе. Реактор был обеспечен перемешивающим устройством, куда помещался лигнин и 2% раствор гидроксида натрия, гидромодуль 1:10. Процесс трансформации вели в контролируемом режиме постепенно повышая температуру, давление и интенсивность аэрации в реакторе с различным (фиксированном) временным режимом (2, 4, 6, 10 час) для каждой отдельной стадии. В процессе трансформации ГЛ образовывались гетерогенные по своему составу компоненты, представляющие собой смесь высокомолекулярных соединений и низкомолекулярных

фрагментов деструкции. При этом в экстракт переходила смесь всех растворимых в щелочи продуктов трансформации лигнина. Эти соединения именовали как продукты деструкции лигнина или ДЛ-препараты [3, 9].

Из общей реакционной смеси выделяли гумусовые и гумусоподобные соединения. Для этого путем коагуляции и выделения осадка растворы с ДЛ-препаратами подкисляли кислотой до рН 1,0-1,5 и нагревали на водяной бане при 70°С. В отфильтрованном осадке оставалась фракция органических веществ, представленная высокомолекулярными соединениями, которые впервые [10] были промаркированы как промежуточные соединения трансформации лигнина в гумус или лигногуминовые кислоты (ЛГК). Кислый фильтрат после удаления осадка экстрагировался сначала диэтиловым эфиром (Эф-экстракт), а затем метилэтилкетоном (МЭК-экстракт). Эти экстракты были представлены низкомолекулярными продуктами деструкции ГЛ.

В модельном эксперименте установлено, что процесс окислительно-гидролитической трансформации ГЛ протекает в направлении деметоксили-рования и карбоксилирования высокомолекулярной лигниновой матрицы без ее расщепления до низкомолекулярных фрагментов. Даже в довольно жестких условиях окисления (при 150-180°С) происходила лишь незначительная деструкция лигнина до низкомолекулярных веществ. Во всех режимах окислительной трансформации ГЛ выход высокомолекулярных соединений был наибольшим. Полученные данные подтверждают обоснованность гипотезы гумификации, предложенную Л.Н. Александровой [1], которая утверждала, что первый элементарный процесс гумификации есть окислительное кислотообразование, т.е. формирование системы гумусовых кислот. Причем процессу окислительного кислотообразования подвергаются не мономеры, а высокомолекулярные продукты разложения растительных остатков (прежде всего лигнин), вследствие чего образующиеся гумусовые кислоты уже на первых этапах существования представляют собой высокомолекулярные соединения.

Накопление в процессе трансформации лигнина высокомолекулярных лигногуминовых кислот сопровождалось изменением кислотности оксидов на 0,8-1,8 единицы рН. Определялось оно увеличением в составе лигнина содержания кислых, преимущественно карбоксильных групп, количество которых возрастало более чем в 10 раз. Одновременно с карбоксилированием наблюдался процесс деметок-силирования. Выделенные на первом этапе трансформации соединения - ЛГК по сравнению с гуми-новыми кислотами почв менее деметоксилированы, что указывает на незавершенность процессов трансформации лигнина в гумус [3, 9]. Вероятно, что на этом основании ЛГК можно рассматривать

как ароматическую лигниновую безазотистую матрицу.

При фракционировании натриевых солей лигно-гуминовых кислот на сефадексах выявлено их четкое распределение на ряд фракций. Во всех препаратах, независимо от глубины окисления, наиболее высокое содержание приходилось на долю высокомолекулярных фракций.

Анализ эфирных и метилэтилкетоновых экстрактов с помощью хроматографии показал, что в низкомолекулярных продуктах деструкции лигнина присутствуют такие кислоты, как янтарная, лимонная, уксусная, муравьиная, оксибензойные, все изомеры фталевой, изомеры бензол-трикарбоновых, промеллитовая, ванилиновая и сиреневая [3]. В процессе трансформации ГЛ идентифицировались преимущественно те фенолкарбо-новые кислоты, которые являются наиболее объемными в почвах. Это также указывает на некоторое сродство выбранной нами модели с биогенной трансформацией лигнина.

Выделенные лигниновые препараты были близки к природным гуминовым кислотам по основным критериям оценки гумусовых веществ: элементному составу, наличию функциональных групп, мо-лекулярно-массовому распределению, оптической плотности и характеру ИК-спектров. По особенностям химического и физико-химического состава сходство ГК и ЛГК было очевидным, исключение составляло почти полное отсутствие азота в составе ЛГК [3, 9]. Поскольку введение азота в данной модели не предусматривалось, то в ней оценивались только результаты трансформации лигниновой безазотистой матрицы.

Таким образом, в первой изученной модели было экспериментально показано, что основой гумуса может служить лигниновая матрица. Полученные в процессе трансформации лигнина соединения могут выступать в роли промежуточных модельных продуктов на пути трансформации лигнина в гумус. Демонстрируемый в модели механизм первичной гидролитической деструкции органических остатков с последующим трансформационным изменением скелетной структуры лигнина (без его расщепления до мономеров) подтверждает указанную Л.Н. Александровой [1] направленность процесса гумификации. Развивая эти воззрения и интегрируя их с достижениями химии лигнина, можно констатировать, что изучение процессов окислительной трансформации ГЛ в условиях модельных химических экспериментов позволяет дополнить и уточнить данные о возможных механизмах превращения лигниновых веществ в гумусовые.

Сопряженно с вышеприведенными экспериментами оценивали физиологическую активность соединений, образующихся на разных этапах трансформации [3, 4, 10].

Для физиологической оценки использовали как стандартные методики, так и разработанные специально для этих целей биотесты [4]. Оценку проводили для всех препаратов, выделенных на каждой стадии процесса в градиентах концентраций от 0,1 (10-1) до 10-8%.

В диссертационной работе И.В. Ковалева [11] было доказано, что «лигнин высших растений принимает участие в специфических соединениях гумуса почв, причем, как алифатических, так и ароматических их частей». Используя высокоинформативные системы анализа на 13С ЯМР-спектрах 44 гуминовых кислот, была показана высокая корреляция содержания продуктов окисления лигнина в почве с площадью пиков лигниновых структур при 147 ppm и 56 ррт, что служит безусловным доказательством участия последних в формировании гумуса почв. Отмечено, что с течением времени доля ароматического углерода лигниновой природы увеличивается за счет уменьшения его количества в периферийной части молекул.

Таким образом, можно считать экспериментально доказанным то, что ядро гумуса формируется из различных сочетаний лигниновых фенольных структур. Это еще «юный гумус». Причем такие структуры весьма напоминают ароматическую основу гиббереллинов. Гиббереллино-подобный эффект действия гуминовых препаратов подтвержден в работе Pizzeghello D., Nicolini G., Nardi S. [12]. Сходство подобных структур с гиббереллинами не только в структурной идентификации. В экспериментах по поэтапному моделированию формирования гумуса [3, 9, 10, 13], было показано, что выделенные на этой стадии гумусовые вещества (названные лигногуминовыми кислотами) обладают высокой физиологической активностью, причем в области тех концентраций, которые соответствуют оптимальным концентрациям действия естественных фитогормонов растений.

Если рассматривать лигногуматы с позиций химической кинетики, то их можно характеризовать как модельные соединения первой стадии трансформации органического вещества в гумус. На их основе были созданы и широко используются в практике сельскохозяйственного производства гу-миновые удобрения серии «Лигногумат». Отличительная черта этих удобрений от других гуминовых удобрений и препаратов в том, что для их получения использовалась наукоемкая основа окислительно-гидролитической трансформации лигнифи-цированного растительного материала с получением сополимеризованных (средне- и высокомолекулярных) лигниновых структур в сопряженном процессе деметоксилирования и карбоксилирования [3, 13]. Причем, образующиеся лигногуминовые кислоты имеют ароматический каркас с минимальным содержанием азота. В этом отношении струк-

турные фрагменты соединений ЛГК близки структуре гиббереллинов. Структурно-химическое подобие лигногуматов и гиббереллинов предполагает исследование физиологической реакции ЛГК прежде всего с позиций физиологической гибберелли-новой активности.

Вторым элементарным звеном гумификации является формирование азотистой части молекул гуминовых кислот. Наряду с обогащением гумифи-цирующихся остатков карбоксильными группами (карбоксилирование) происходит изменение содержания в них азота и форм его соединений. При гумификации растительных остатков, особенно богатых белками, происходит постепенное снижение содержания азота в образовавшихся ГК. Если же гумифицированные вещества бедны азотом, то содержание последнего в продуктах гумификации постепенно нарастает. По мере развития процесса гумификации снижается доля гидролизируемых форм соединений азота и нарастает относительное содержание более устойчивых, негидролизуемых компонентов, в том числе и азота гетероциклических соединений.

На следующей стадии формирования гумуса происходит дальнейшая сополимеризация и поликонденсация фенольных фрагментов в ядерную основу гумуса (ароматическое ядро уплотняется) и начинает накапливать азот, сначала на периферии, затем и в ароматической матрице. Идентифицированные ароматические фрагменты этой стадии трансформации фенольных соединений в почве близки к индольным структурам. Проведенные исследования показывают, что гумусовые вещества, полученные на этой стадии трансформации, обладают ауксиноподобной физиологической реакцией на растения. Ауксиноподобный эффект ГВ отмечен в работах [13-15].

Следующий этап - дальнейшая гумификация новообразованных гумусовых кислот. Сущность этого положения заключается в том, что трансформация молекул ГК происходит непрерывно, от зарождения молекулы до полной их минерализации. Какой-либо конечной стадии нет, конечного продукта не образуется. В ходе этого этапа молекулы постепенно приобретают черты, наиболее характерные для гуминовых кислот. В таком состоянии, подвергаясь только медленной минерализации, они могут находиться в почве сотни и тысячи лет. Это подтверждается результатами определения возраста гуминовых кислот методами радиоуглеродного (14С) датирования. На последнем этапе ГК или постепенно минерализуются, или распадаются на структурные фрагменты, вновь участвуют в синтезе гуминовых кислот. Схема Л.Н. Александровой хорошо объясняет многие известные экспериментальные данные, в частности полидисперсность ГК, динамику изменения молекулярных масс.

Заключительная стадия формирования гумуса -полимеризация и поликонденсация фенольных фрагментов ядра гумуса с включением в гетероцикл азота. Накопленный таким образом в матрице гумуса азот устойчив к разложению и является основным почвенным резервом, характеризующим хорошо окультуренные почвы. Образующиеся на этой стадии гумусовые соединения фенольной природы обладают цитокининовой реакцией. Экспериментально подтверждена цитокининовая реакция гуматов [16]. Основываясь на технологии окислительного аммонолиза уже производят гуминовые препараты с цитокининовой активностью [17, 18].

Представлена концепция (в виде гипотезы) в которой сделана попытка объяснить меняющийся феномен физиологической активности гумусовых веществ в процессе трансформации лигнифицированных растительных остатков в гумус. Таким образом фенольная основа гумино-вых веществ предопределяет не только устойчивость этого природного соединения в почве, но

и специфику его физиологического действия на растения. Структурное и физиологическое сходство разных фрагментов гумусовых веществ с природными фитогормонами объясняет специфику изменения физиологической реакции гумусовых веществ, формирующихся из исходных лигнифицированных растительных остатков в гумус. Трансформацию органического вещества в гумус можно условно разделить на три этапа. На первом этапе лигниновые структуры приобретают свойства аналогов гуминовых кислот в процессе карбоксилирования и деметоксилиро-вания. Образующиеся промежуточные лигногу-миновые кислоты имеют структурные и физиологическое сходство с природными гибберелли-нами. На второй стадии, при включении азота в структуру ЛГК, формируются соединения близкие природным ауксинам. Заключительный этап формирования гумуса характеризуется насыщением ароматической матрицы азотом, формируя структуры близкие природным цитокининам.

Литература

1. Александрова Л.Н. Органическое вещество почвы и процессы его трансформации. - Л.: Наука, 1980. - 288 с.

2. Комаров А.А. Некоторые рассуждения о действии гуминовых препаратов на растения // Агрохимический вестник, 2009, № 6. - С. 28-29.

3. Комаров А.А. Роль гидролизного лигнина в плодородии почв и питании растений: дисс. д.с. -х.н.: 06.01.03. -СПб.: АФИ, 2004. - 386 с.

4. Комаров А.А. Экспресс-метод оценки содержания физиологически активных соединений и почвоутомления субстратов // Сельскохозяйственная биология, 2002, № 5. - С. 118-120.

5. Мотовилов Л.В., Берман О.Н. и др. Гуматы - экологически чистые стимуляторы роста и развития растений // Химия в сельском хозяйстве, 1995, № 4. - С. 12-13.

6. Христева Л.А. Физиологическая функция гуминовой кислоты в процессах обмена веществ высших растений / Гуминовые удобрения. - Харьков, 1957. - С. 95-108.

7. Христева Л.А., Реутов В.А., Лукьяненко Н.В. и др. Применение гумата натрия в качестве стимулятора роста / Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Т. IV. - Днепропетровск, 1973. - С. 308-310.

8. Христева Л.А. Стимулирующее влияние гуминовой кислоты на рост высших растений и природа этого явления / Гуминовые удобрения. - Харьков, 1957. - С. 75-93.

9. Комаров А.А. Моделирование процесса трансформации гидролизного лигнина и выделение лигногуминовых кислот // Почвоведение, 2005, № 6. - С. 664-671.

10. Сибарова М.Н., Комаров А.А. Раскин М.Н., Ефимов В.Н. Способ стимулирования роста сельскохозяйственных культур. А.С. 1336966 (СССР) / Научно-производств. гидр. объед. и ЛСХИ. Приоритет 25.09.85, - Бюлл. № 34, 15.09.87.

11. Ковалев И.В. Биохимия лигнина в почвах: дисс. д.с.-х.н. - М., 2016. - 386 с.

12. Pizzeghello D., Nicolini G., Nardi S. Hormone-like activity of humic substances in Fagus sylvaticae forests // New Phytologist, 2001, Vol. 151 (3). - Р. 647-657.

13. Комаров А.А., Сибарова М.Н., Ефимов В.Н. Окислительно-гидролитическая трансформация гидролизного лигнина и выделение лигногуминовых кислот // Биологические науки, 1991, № 10. - С. 14-22.

14. Muscolo A., Cutrupi S., Nardi S. IAA detection in humic substances // Soil Biology and Biochemistry, 1998, Vol. 30 (8-9). - Р. 1199-1201.

15. Удинцев С.Н., Бурмистрова Т.И., Заболотская А.В., Жилякова Т.П. Механизмы индукции резистентности растений к фитопатогенам гуминовыми веществами // Вестник Томского государственного университета. Биология, 2011, № 4 (16). - С. 100-107.

16. Рожанская О.А., Полюдина Р.И., Потапов Д.А., Шилова Т.В. Влияние нанобиокомпозитов на морфогенез растений семейства крестоцветных in vitro и in agro [Электронный ресурс]: Режим доступа: http://www.kgau.ru/new/all/uni/01/.

17. Комаров А.А., Баева С.С., Якушев В.В. Новое органо-минеральное удобрение «Стимулайф» направленного физиологического действия / Материалы Всерос. научно-практ. конф. «Совершенствование системы регистрационных испытаний агрохимикатов». - М., 2009. - С. 16-18.

18. Комаров А.А., Комаров А.А. Фенольная основа гуминовых веществ и физиологическое действие на растения / Сборник материалов IX Международный Симпозиум «Фенольные соединения: фундаментальные и прикладные аспекты». - М., 2015. - С. 305-307.