СУЛЬФОНАМИДНАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ
SULPHONAMIDE PHARMACEUTICAL COMPOSITION

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
[1] Это изобретение относится к сульфонамидной фармацевтической композиции, и к ее получению и применению в фармацевтической промышленности.
Уровень техники изобретения
[2] Рак сегодня является распространенным заболеванием в мире. Большинство раковых заболеваний диагностируется на поздней стадии, и уровень излечения является низким. Большинство используемых в текущий момент противораковых лекарственных средств имеют токсические побочные эффекты, включающие в себя потерю волос, рвоту, снижение уровня лейкоцитов в крови, подавление функции костного мозга, и снижение функции иммунной системы. Главной причиной является то, что эти лекарственные средства действуют на некоторую часть цикла клеточного метаболизма, и они действуют на раковые клетки не селективно относительно здоровых клеток. В том случае, когда они убивают раковые клетки, они также повреждают и здоровые клетки, в частности, те здоровые клетки, которые подвергаются быстрому метаболизму.
[3] Сульфонамидные соединения применяются в клинической практике в качестве противомикробного средства в течение десятилетий. Сегодня, они по-прежнему являются одними из наиболее часто используемых противомикробных средств, уступающих только антибиотикам, ввиду их широкого антибактериального спектра, стабильности, простоты применения и низкой цены. По мере проведения более глубоких исследований, ученые обнаружили, что сульфонамидные соединения имеют более широкий диапазон биологической активности, включая их диуретический эффект, антитироидный эффект, антидиабетический эффект, антигипогликемический эффект, и их способность лечить катаракту. В последние годы, приводится большой ряд сульфонамидных соединений с противоопухолевой активностью, и многие из их числа прошли клинические испытания. Эти соединения действуют на различные молекулярные мишени и проявляют значительную биологическую активность. Некоторые соединения проявляют высокую селективность и специфичность в отношении различных мишеней.
[4] Механизмы действия этих сульфонамидных соединений разнообразны, они включают прерывание полимеризации тубулина, блокирование нормального клеточного цикла, ингибирование карбоангидразы, ингибирование зависимых от фолиевой кислоты ферментов, ингибирование метионин-аминопептидазы и гистон-деацетилазы, и ингибирование фактора роста клеток эндотелия сосудов и так далее.
[5] Китайский патент ZL97108988.4 раскрывает состав и способ получения инъекционных препаратов на основе сульфонамидных соединений.
[6] Соединения включают:
или
2
5
где R=H, CH, или .
[7] Предпочтительно, сульфонамидные соединения выбирают из:
.
[8] Состав является следующим:
Упомянутое сульфонамидное соединение
10%~80%
PEG-400 (полиэтиленгликоль-400)
10%~60%
1,2-пропандиол
5%~30%
Субериновая кислота
1%~20%
Пара-толуолсульфоновая кислота
1%~15%
Диметилсульфоксид
0%~20%
Этанол
0%~20%
[9] В ходе использования вышеупомянутого состава в получении пара-толуолсульфонамидных инъекционных препаратов, случайным образом обнаружено, что вышеупомянутый состав имеет низкую стабильность, обычно кристаллизуется после длительного периода хранения, и также он вызывает сильное раздражение на участке инъекции.
[10] Приведенные выше исследования состава и способа получения показывают, что проблемы обусловлены субериновой кислотой и пара-толуолсульфоновой кислотой. Данное изобретение эффективно решает задачи путем замены субериновой кислоты себациновой кислотой, и путем замены пара-толуросульфоновой кислоты 2-этил-1,3-гександиолом.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[11] Настоящее изобретение решает проблемы, касающиеся низкой растворимости и легкости кристаллизации, имеющих отношение к известным инъекционным составам, в результате улучшения состава и способа получения инъекционных препаратов на основе сульфонамидных соединений. Сравнительное испытание токсичности также показывает, что состав настоящего изобретения является менее токсичным и более безопасным для применения в клинической практике.
[12] Целью данного изобретения является обеспечение инъекционного состава, содержащего сульфонамидное соединение, изготовленного с использованием следующих веществ:
Исходные вещества
Процентное содержание по массе
Сульфонамидное соединение
20%-40%
PEG-400 (полиэтиленгликоль-400)
20%-40%
1,2-пропандиол
5%-10%
Себациновая кислота
2%-5%
2-этил-1,3-гександиол
10%-20%
Диметилсульфоксид
0-10%
Безводный этанол
0-10%
[13] Если рассматривать полиэтиленгликоль-400 (PEG-400), 1,2-пропандиол, себациновую кислоту, 2-этил-1,3-гександиол, диметилсульфоксид и этанол, то только диметилсульфоксид и этанол являются расходными (необязательными), другие же являются необходимыми.
[14] Сульфонамидное соединение выбирают из одного соединения или из смеси двух или более соединений, взятых в любом соотношении, выбираемых из следующего:
или
2
5
где R=H, CH, или .
[15] Предпочтительно, сульфонамидное соединение выбирают из:
.
[16] Предпочтительно, инъекционный состав по настоящему изобретению изготавливают из следующих исходных веществ:
Исходные вещества
Процентное содержание по массе
Пара-толуолсульфонамид
20%-40%
PEG-400 (полиэтиленгликоль-400)
20%-40%
1,2-пропандиол
5%-10%
Себациновая кислота
2%-5%
2-этил-1,3-гександиол
10%-20%
Диметилсульфоксид
0-10%
Безводный этанол
0-10%
[17] Более предпочтительно, инъекционный состав по этому изобретению изготавливают из следующих исходных веществ:
Исходные вещества
Процентное содержание по массе
Пара-толуолсульфонамид
30%
PEG-400 (полиэтиленгликоль-400)
30%
1,2-пропандиол
8%
Себациновая кислота
4%
2-этил-1,3-гександиол
15%
Диметилсульфоксид
5%
Безводный этанол
8%
[18] Настоящее изобретение улучшает известные инъекционные составы в результате удаления субериновой кислоты и добавления солюбилизатора 2-этил-1,3-гександиола. Комбинация PEG-400, 2-этил-1,3-гександиола и 1,2-пропандиола позволяет снижать количество 1,2-пропандиола в инъекционном составе, с уменьшением посредством этого раздражения на участке инъекции.
[19] Другой целью этого изобретения является обеспечение способа получения инъекционного препарата.
[20] Получение инъекционного препарата по этому изобретению включает в себя следующие стадии:
1) Помещают заданное количество сульфонамидного соединения, PEG-400, и 2-этил-1,3-гександиола в контейнер, медленно перемешивают при 85°С-95°С с получением смешиваемого раствора, Раствора А, для последующего использования;
2) Помещают заданное количество себациновой кислоты и 1,2-пропандиола, в отдельный контейнер, медленно перемешивают при 85°С-95°С с получением смешиваемого раствора, Раствора В, для последующего использования;
3) Смешивают Раствор А и Раствор В при одновременном поддерживании температуры при 85°С-95°С, и перемешивают с получением гомогенного раствора для последующего использования;
4) Помещают заданное количество диметилсульфоксида и небольшое количество безводного этанола в контейнер, перемешивают и тщательно смешивают с получением гомогенного раствора, Раствора С, для последующего использования;
5) Охлаждают смесь Раствора А и Раствора В до 60°С, добавляют в эту смесь Раствор С, перемешивают и тщательно смешивают перед охлаждением до комнатной температуры, добавляют оставшееся количество безводного этанола и тщательно смешивают;
6) Фильтруют с помощью микропористой мембраны с размером пор 0,45 мкм, разделяют на аликвоты в ампулы объемом 5 мл и запаивают ампулы; и
7) Стерилизуют при 121°С в течение 30 минут.
[21] Благотворные эффекты настоящего изобретения дополнительно проиллюстрированы с помощью следующих экспериментов.
Таблица 1. Сравнение состава по настоящему изобретению с составом, раскрытым в CN1073415C
Настоящее Изобретение
Пример 2 в CN1073415C
Пара-толуолсульфонамид
30%
Пара-толуолсульфонамид
30%
PEG-400
30%
PEG-400
33,5%
1,2-пропандиол
8%
1,2-пропандиол
16,4%
Себациновая кислота
4%
Субериновая кислота
8,2%
2-этил-1,3-гександиол
15%
Пара-толуолсульфоновая кислота
3,7%
Диметилсульфоксид
5%
Диметилсульфоксид
6,7%
Безводный этанол
8%
Этанол
1,5%
[22] Настоящее изобретение предоставляет усовершенствование на основе известного уровня техники (прототипа CN1073415C). Как показано в приведенной выше таблице, состав по настоящему изобретению дает следующие усовершенствования в сравнении с составом, раскрытым в Примере 2 Китайского патента CN1073415C:
1. Использование себациновой кислоты вместо субериновой кислоты
2. Использование 2-этил-1,3-гександиола вместо пара-толуолсульфоновой кислоты.
[23] В результате выполнения упомянутых выше улучшений, это изобретение решает круг вопросов, связанных с известным составом, таких как низкая стабильность.
[24] Благотворные эффекты настоящего изобретения дополнительно проиллюстрированы с помощью следующих исследований.
[25] Эксперимент 1. Изучение результатов Китайского патента CN1073415С
[26] Сравнительные исследования проводят на инъекционных препаратах, приготовленных в соответствии с примерами, раскрытыми в патенте CN1073415С.
Исходные вещества
Пример 1
Пример 2
пара-толуолсульфонамид
30%
40%
PEG-400
33,5%
40%
1,2-пропандиол
16,4%
10%
Субериновая кислота
8,2%
3%
пара-толуолсульфоновая кислота
3,7%
2%
Диметилсульфоксид
6,7%
3%
Этанол
1,5%
2%
Стабильность
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, кристаллы выпадают в осадок
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, кристаллы выпадают в осадок
LD50 (50%-ная летальная доза)
12,54 мг/кг
11,30 мг/кг
[27] Результаты показывают, что кристаллы выпадают в осадок при хранении инъекционного препарата в холодильнике в течение некоторого периода времени, и это сильно нарушает стабильность инъекционного препарата. После выявления вышеупомянутых проблем, авторы этого изобретения проводят исследование в отношении состава и обнаруживают, что снижение стабильности, по всей видимости, вызвано присутствием субериновой кислоты и пара-толуолсульфоновой кислоты в составе, по следующим причинам:
Эффект от присутствия PEG-400 в составе является следующим: действует в качестве водорастворимого растворителя с повышением совместимости инъекционного препарата с тканями в теле.
Эффект от присутствия 1,2-пропандиола в составе является следующим: действует в качестве водорастворимого растворителя с повышением совместимости инъекционного препарата с тканями в теле и ингибирует кристаллизацию.
Эффект от присутствия субериновой кислоты в составе является следующим: она представляет собой кислоту, содержащую только два химических элемента, и действует в качестве жирорастворимого растворителя с повышением растворимости пара-толуолсульфонамида в смешанном растворителе инъекционного препарата и с ингибированием кристаллизации.
Эффект от присутствия пара-толуолсульфоновой кислоты в составе является следующим: она представляет собой ароматическую сульфоновую кислоту, и действует с повышением растворимости пара-толуолсульфонамида в смешанном растворителе инъекционного препарата, и с ингибированием кристаллизации.
Эффект от присутствия диметилсульфоксида в составе является следующим: он действует в качестве амфифильного растворителя с повышением растворимости пара-толуолсульфонамида в смешанном растворителе инъекционного препарата, и с ингибированием кристаллизации.
Эффект от присутствия этанола в составе является следующим: действует в качестве амфифильного растворителя с повышением растворимости пара-толуолсульфонамида в смешанном растворителе инъекционного препарата, и с корректировкой общего объема раствора благодаря его хорошей текучести.
[28] Авторы изобретения проводят следующие эксперименты для дополнительного обоснования вышеупомянутых заключений:
Вышеупомянутые проблемы, по-прежнему, существуют в том случае, когда авторы корректируют количество других исходных веществ при одновременном сохранении количества субериновой кислоты и пара-толуолсульфоновой кислоты постоянным.
Исходные вещества
Формула 1
Формула 2
Формула 3
Формула 4
пара-толуолсульфонамид
30%
40%
3 0%
40%
PEG-400
33,5%
40%
/
/
PEG-200
/
/
33,5%
40%
1,2-пропандиол
16,4%
10%
/
/
Глицерин
/
/
16,4%
10%
Субериновая кислота
8,2%
3%
8,2%
3%
пара-толуолсульфоновая кислота
3,7%
2%
3,7%
2%
Диметилсульфоксид
6,7%
3%
/
/
Диметилформамид
/
/
6,7%
3%
Безводный этанол
1,5%
2%
Вода для инъекционного препарата
/
/
1,5%
2%
Стабильность
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, кристаллы выпадают в осадок
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, кристаллы выпадают в осадок
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, кристаллы выпадают в осадок
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, кристаллы выпадают в осадок
[29] Результаты показывают, что проблема, по-прежнему, существует в том случае, когда состав корректируют при одновременном поддержании того же самого количества субериновой кислоты и пара-толуолсульфоновой кислоты. Авторы дополнительно подтверждают то, что субериновая кислота и пара-толуолсульфоновая кислота являются причиной проблемы стабильности.
[30] Авторы изобретения заменяют субериновую кислоту и пара-толуолсульфоновую кислоту.
[31] Эксперимент 2. Скрининговый Эксперимент
[32] Для замены субериновой кислоты и пара-толуолсульфоновой кислоты посредством различных веществ при поддержании других условий неизменными, процесс скрининга представляет собой следующее:
Скрининговый Эксперимент
Исходные вещества
Рецептура A
Рецептура B
Рецептура C
Рецептура D
Рецептура E
РецептураF
пара-толуолсульфонамид
30%
40%
30%
40%
30%
40%
PEG-400
33,5%
40%
33,5%
40%
33,5%
40%
1,2-пропандиол
16,4%
10%
16,4%
10%
16,4%
10%
Себациновая кислота
/
/
8,2%
3%
/
/
Азелаиновая кислота
/
/
/
/
8,2%
3%
Субериновая кислота
8,2%
3%
/
/
/
/
2-этил-1,3-гександиол
/
/
/
/
3,7%
2%
Гександиол
/
/
3,7%
2%
/
/
пара-Толуолсульфоновая кислота
3,7%
2%
/
/
/
/
Диметилсульфоксид
6,7%
3%
6,7%
3
6,7%
3%
Безводный этанол
1,5%
2%
1,5%
2%
1,5%
2%
Стабильность
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, небольшие кристаллы выпадают в осадок
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, небольшие кристаллы выпадают в осадок
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, осадок не выпадает, раствор является прозрачным
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, осадок не выпадает, раствор является прозрачным
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, осадок не выпадает, раствор является прозрачным
При хранении при 4°С±2°С в течение 10 дней, осадок не выпадает, раствор является прозрачным
[33] Результаты показывают, что использование себациновой кислоты вместо субериновой кислоты или использование 2-этил-1,3-гександиола вместо пара-толуолсульфоновой кислоты может решить проблемы, связанные с известным способом. Однако, поскольку дозировка в известном составе не является научно обоснованной, способ получения включает в себя чрезмерно длительный процесс растворения, поэтому два состава объединяют, и определяют количество каждого исходного вещества в рецептуре.
[34] Эксперимент 3. Скрининговые эксперименты в отношении количества исходных веществ.
Исходные вещества
Рецептура I
Рецептура II
Рецептура III
Рецептура IV
Рецептура V
Рецептура VI
пара-Толуолсульфонамид
30%
40%
30%
25%
30%
40%
PEG-400
33,5%
40%
40%
35%
30%
30%
1,2-propanediol
16,4%
10%
5%
7%
8%
10%
Себациновая кислота
2%
2%
5%
4%
4%
2%
2-этил-1,3-гександиол
8%
3%
10%
15%
15%
18%
Диметилсульфоксид
6,7%
3%
5%
7%
5%
0
Безводный этанол
1,5%
2%
5%
7%
8%
0
Время растворения
8 мин
10 мин
4 мин
3 мин
5 мин
3,8 мин
[35] Результаты показывают, что хотя все исходные вещества растворяются в составах Рецептур I и II, требуемое для этого время является сравнительно длительным, тогда как для составов Рецептур III-VI, исходные вещества растворяются быстрее, и конечный раствор является чистым и прозрачным.
[36] Кроме того, настоящее изобретение дополнительно сравнивают с существующими фармацевтическими инъекционными препаратами.
День 10
[37] Три образца берут из образцов каждого Примера, выбранного из Примера 1, Примера 5, Примера 6, и Примера 7 (то есть, Состав III-VI) по настоящему изобретению (обозначенных как Образцы A-D), и три образца берут из приготовленного самостоятельно образца Примера 2 из патента CN1073415С (обозначенного как Образец Е). Все образцы хранят при 4°С±2°С в течение 10 дней, и образцы изучают в День 0, День 5, и  на предмет выпадения в осадок кристаллов. Результаты показаны в Таблице 2:
Таблица 2: Сравнение выпадения в осадок кристаллов в Составе III-VI по настоящему изобретению и в образцах Примера патента CN1073415С
Образец
День 0
День 5
День 10
A1
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
A2
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
A3
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
B1
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
B2
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
B3
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
C1
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
C2
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
C3
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
D1
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
D2
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
D3
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
E1
Чистый и прозрачный раствор
Выпадение в осадок мелких кристаллов
Выпадение в осадок кристаллов
E2
Чистый и прозрачный раствор
Выпадение в осадок мелких кристаллов
Выпадение в осадок кристаллов
E3
Чистый и прозрачный раствор
Чистый и прозрачный раствор
Выпадение в осадок мелких кристаллов
[38] Как показано в приведенной выше таблице, Составы III-VI по настоящему изобретению демонстрируют значительное повышение стабильности при 4°С в сравнении с приготовленным самостоятельно образцом Примера 2 из патента CN1073415С. Раствор является чистым и прозрачным после 10-дневного хранения, и кристаллы не выпадают в осадок.
[39] Эксперимент по исследованию Стабильности с ускоренной деградацией препарата:
[40] Образцы берут из образцов Примера 1, Примера 5, Примера 6, и Примера 7 (то есть, Состав III-VI) по настоящему изобретению (обозначенных как Образцы A-D), и из приготовленного самостоятельно образца Примера 2 патента CN1073415С (обозначенного как Образец Е), и хранят при температуре 40°С±2°С и относительной влажности (RH) 75%±5%. Оценивают релевантные свойства, и результаты представляют в приведенной ниже таблице:
Обр.
Элементы испытания
День 0
Месяц 1
Месяц 2
Месяц 3
Месяц 6
A
Видимое постороннее вещество
Совместимое
Совместимое
совместимое
совместимое
совместимое
РелевантноеВещество
Наибольшая Единичная Примесь （ %）
0,058
0,031
0,074
0,078
0,096
Общее содержание примесей（ %）
0,136
0,269
0,294
0,346
0,401
Содержание
99,77
99,57
99,17
98,08
98,05
B
Видимое постороннее вещество
Совместимое
Совместимое
совместимое
совместимое
совместимое
РелевантноеВещество
Наибольшая Единичная Примесь （ %）
0,058
0,078
0,079
0,086
0,097
Общее содержание примесей（ %）
0,136
0,155
0,217
0,263
0,415
Содержание
99,77
99,61
99,56
98,70
98,57
C
Видимое постороннее вещество
Совместимое
Совместимое
совместимое
совместимое
совместимое
РелевантноеВещество
Наибольшая Единичная Примесь （ %）
0,058
0,042
0,050
0,070
0,088
Общее содержание примесей（ %）
0,136
0,137
0,315
0,391
0,436
Содержание
99,77
99,67
99,49
99,18
98,87
D
Видимое постороннее вещество
совместимое
Совместимое
совместимое
совместимое
совместимое
РелевантноеВещество
Наибольшая Единичная Примесь （ %）
0,058
0,046
0,074
0,082
0,085
Общее содержание примесей（ %）
0,136
0,253
0,319
0,326
0,421
Содержание
99,77
99,27
99,10
98,88
98,81
E
Видимое постороннее вещество
Совместимое
Совместимое
совместимое
совместимое
совместимое
РелевантноеВещество
Наибольшая Единичная Примесь （ %）
0,058
0,067
0,119
0,131
0,168
Общее содержание примесей（ %）
0,136
0,253
0,571
0,644
0,850
Содержание
99,77
99,46
99,06
98,59
97,36
[41] Как показано в приведенной выше таблице, Составы III-IV по настоящему изобретению являются значительно более стабильными после хранения при температуре 40°С±2°С, относительной влажности (RH) 75%±5% в течение 6 месяцев в сравнении с образцом Примера 2 патента CH1073415С. Скорости роста содержания наибольшей единичной примеси и общего содержания примесей являются медленнее, и присутствует меньшее количество примесей. Скорости деградации исходных веществ являются также медленнее, и имеет место меньшая деградация для Составов III-IV.
ПРИМЕРЫ
[42] Последующие примеры включены для дополнительной иллюстрации настоящего изобретения. Это не следует рассматривать как ограничение настоящего изобретения.
[43] Пример 1: Инъекционный препарат
Исходные вещества
Процентное содержание по массе
Пара-толуолсульфонамид
30%
PEG-400
30%
1,2-пропандиол
8%
Себациновая кислота
4%
2-этил-13-гександиол
15%
Диметилсульфоксид
5%
Безводный этанол
8%
[44] Способ получения:
1) Помещают заданное количество сульфонамидного соединения, PEG-400, и 2-этил-1,3-гександиола в контейнер, медленно перемешивают при 85°С-95°С с получением смешиваемого раствора, Раствора А, для последующего использования;
2) Помещают заданное количество себациновой кислоты и 1,2-пропандиола, в отдельный контейнер, медленно перемешивают при 85°С-95°С с получением смешиваемого раствора, Раствора В, для последующего использования;
3) Смешивают Раствор А и Раствор В при одновременном поддерживании температуры при 85°С-95°С, и перемешивают с получением гомогенного раствора для последующего использования;
4) Помещают заданное количество диметилсульфоксида и небольшое количество безводного этанола в контейнер, перемешивают и тщательно смешивают с получением гомогенного раствора, Раствора С, для последующего использования;
5) Охлаждают смесь Раствора А и Раствора В до 60°С, добавляют в эту смесь Раствор С, перемешивают и тщательно смешивают перед охлаждением до комнатной температуры, добавляют оставшееся количество безводного этанола и тщательно смешивают;
6) Фильтруют с помощью микропористой мембраны с размером пор 0,45 мкм, разделяют на аликвоты в ампулы объемом 5 мл и запаивают ампулы; и
7) Стерилизуют при 121°С в течение 30 минут.
[45] Целью добавления безводного этанола в этот состав является регулирование общего объема конечного раствора, и дополнительное регулирование общего содержания лекарственного средства в составе. Таким образом, количество безводного этанола, которое должно быть добавлено на Стадии 4, должно быть слегка меньше, чем заданное количество.
[46] Пример 2. Сравнительное испытание на безопасность
[47] С использованием мышей в качестве модели на животном, образец Примера 1, представляющий собой пара-толуолсульфонамидный инъекционный препарат, сравнивают с образцом Примера 2 из патента CN1073415С в результате введения однократной внутривенной инъекции в хвостовую вену для сравнительного испытания на токсичность. Результаты показаны ниже:
[48] Коэффициент смертности животного является ниже для образца Примера 1. LD50 для образца Примера 2 из патента CN1073415С составляет 11,30 мг/кг, (95% CI=9,47-13,13 мг/кг). LD50 для образца Примера 1 по настоящему изобретению составляет 18,10 мг/кг (95% CI=15,2-21,0 мг/кг). После усовершенствования текущего изобретения, то есть, замены пара-толуолсульфоновой кислоты посредством 2-этил-1,3-гександиола, LD50 для лекарственного средства повышается на 60% (P < 0,01), значительно снижая тем самым токсичность инъекционного препарата.
[49] Пример 3. Эксперимент по анализу эффективности
[50] Образец Примера 1 по настоящему изобретению испытывают на животных. Таблица 2 показывает эффект от внутримышечной инъекции образца Примера 1 на развитие рака легких у мышей.
Таблица 2. Эффект от внутримышечной инъекции образца Примера 1 на развитие рака легких у мышей
Гр.
Лечение
Дозировка (/кг/сут×10сут)
Число Субъектов
Масса Тела
Средняя масса опухоли(X±SD) (г)
Степень ингибирования опухоли (%)
Значение P*
Начало
Конец
Начало
Конец
1
Образец отрицательного контроля
2,0 мл
11
11
20,7
27,9
3,52±0,62
0,0
>0,05
Растворитель (контроль)
2,0 мл
11
11
20,5
25,1
2,91±0,58
17,3
<0,01
CTX
18,0 мл
11
11
20,8
25,0
1,82±0,41
48,3
<0,01
Пример 1
0,5 мл
11
11
21,9
25,4
1,81±0,25
48,6
<0,01
Пример 1
1,0 мл
11
11
21,3
25,2
1,46±0,74
58,5
<0,01
Пример 1
2,0 мл
11
11
20,2
24,0
1,25±0,72
64,5
<0,01
2
Обоазец отрицательного контроля
2,0 мл
11
11
20,4
27,7
2.49±0,58
0,0
>0,05
Растворитель (контроль)
2,0 мл
11
11
21,5
28,9
2,69±0,56
-8,0
<0,01
CTX
18,0 мл
11
11
21,6
28,8
1,54±0,27
38,2
<0,01
Пример 1
0,5 мл
11
11
21,9
25,6
2,15±0,87
13,7
<0,01
Пример 1
1,0 мл
11
11
21,0
25,8
2,00±0,82
19,7
<0,01
Пример 1
2,0 мл
11
11
21,6
25,6
1,59±0,64
36,1
<0,01
3
Образец отрицательного контроля
2,0 мл
11
11
21,0
27,6
2,51±0,46
0,0
>0,01
Растворитель (Контроль)
2,0 мл
11
11
21,4
28,5
1,82±0,74
27,5
<0,01
CTX
18,0 мл
11
11
21,7
27,4
1,02±0,35
59,4
<0,01
Пример 1
0,5 мл
11
11
21,8
25,9
1,67±0,95
33,5
<0,01
Пример 1
1,0 мл
11
11
21,1
25,3
1,43±0,74
43,0
<0,01
Пример 1
2,0 мл
11
11
20,3
25,6
1,02±0,57
59,4
<0,01
[51] Результаты экспериментов показывают, что:
1) При дозировке 0,5 мл, 1,0 мл, 2 мл, и 2,0 мл/кг/сут×10сут, образец Примера 1 имеет различные уровни противоупухолевого эффекта в отношении трансплантированной у мышей опухоли легких. Противоопухолевый эффект повышается по мере увеличения дозировки.
2) При дозировке 2,0 мл/кг/сут×10сут, образец Примера 1 не дает противоопухолевый эффект в отношении рака печени у мышей и саркомы S-180 у мышей.
3) Это демонстрирует то, что выбранные дозировки для образца Примера 1 имеют значительный противоопухолевый эффект в отношении рака легких у мышей.
4) Инъекционный препарат Примера 1 имеет высокий терапевтический индекс в отношении рака у мышей.
[52] Пример 4. Клинические Испытания.
[53] Неконтролируемое клиническое испытание инъекционного препарата Примера 1 (инъекционного препарата на основе пара-толуолсульфонамида (PTS)) в случае местного введения внутриопухолевой инъекции пациентам, страдающим тяжелой формой окклюзии (обструкции) дыхательных путей вследствие рака легких центрального типа.
[54] Клинические исследования инъекционного препарата на основе PTS, проведенные в Гуанчжоуском институте респираторных заболеваний и в 21 клиническом научно-исследовательском институте, утвержденном в Министерстве здравоохранения, позволяют прийти к следующим заключениям:
[55] 89 Пациентов отбирают для проведения клинического испытания PTS. Из них, 10 пациентов исключают, 7 пациентов исключают из анализа и используют только для проведения оценки на безопасность (либо по причине того, что субъекты не соответствуют критериям включения, либо по той причине, что исследователь имеет нарушение клинических протоколов). В итоге всего 72 пациента включают в анализ эффективности.
[56] Из этих 72 субъектов, имеющих возраст между 23-79, 59 пациентов являются мужчинами, и 13 из них являются женщинами. Статистические данные по субъектам на основе их стадии рака легких: 46 случаев в фазе IV, 22 случая в стадии IIIb, 4 случая в стадии IIIa. Статистические данные по субъектам на основе локации опухоли: 6 случаев локации в дыхательных путях, 28 случаев локации в левом главном бронхе, 30 случаев локации в правом главном бронхе, и 8 случаев локации в правом промежуточном бронхе.
[57] Результаты по эффективности:
[58] 72 пациента с центральным раком легких по истечении 2-4 недель лечения посредством инъекционного препарата на основе PTS, вводимого местно в опухоль-мишень:
[59] Преобладающий индекс эффективности: частота объективного ответа интралюминального мишеневидного очага - согласно критериям оценки объективного ответа при солидных опухолях (RECIST): на основе обследования методом компьютерной томографии (CT), частота объективного ответа составляет 68,08% в пределах 7 дней с момента последнего лечения, и 48,61% по истечении 30 дней с момента периода завершения лечения, соответственно.
[60] Преобладающий индекс эффективности: частота объективного ответа интралюминального мишеневидного очага - согласно стандарту Всемирной Организации Здравоохранения (WHO): на основе обследования методом компьютерной томографии (CT), частота объективного ответа интралюминального мишеневидного очага составляет 77,78% в пределах 7 дней с момента последнего лечения, и 54,17% по истечении 30 дней с момента периода завершения лечения, соответственно.
[61] Преобладающий индекс эффективности: частота улучшения состояния в случае опухолевой закупорки люминальной полости, с применением обследования методом компьютерной томографии (CT), частота улучшения состояния в случае окклюзии вследствие находящейся в полости опухоли составляет 70,45% в пределах 7 дней с момента последнего лечения, и 70,47% по истечении 30 дней с момента периода завершения лечения.
[62] Индекс клинической пользы: В сравнении с исходным уровнем на этапе включения, показатель функции легких FEV1 указывает на статистически значимое улучшение, с частотой улучшения состояния у 34,72% пациентов в пределах 7 дней после последнего введения и у 18,06% пациентов по истечении 30 дней после периода завершения лечения; общая частота обратного расширения легких для пациентов с ателектазом по различным долям составляет 44,44% (20/45). Локация по нисходящей частоте обратного расширения легких распределяется следующим образом: 50,00% приходятся на среднюю долю правого легкого, 43,75% приходятся на левое легкое, 42,11% приходятся на нижнюю долю левого легкого, 38,46% приходятся на нижнюю долю правого легкого, 35,00% приходятся на левостороннюю долю языка, и 25,00% приходятся на верхнюю долю правого легкого.
[63] Анализ общей эффективности показывает, что мишеневидные очаги значительно сокращаются в объеме после введения внутриопухолевой инъекции PTS, с частотой объективного ответа и частотой улучшения состояния в случае окклюзии вследствие находящейся в полости опухоли, близкими к 70%; индекс клинической пользы FEV1 улучшается более, чем на 30%, частота легочного обратного расширения улучшается более, чем на 40%. Упомянутые выше индексы непосредственно показывают, что пациенты имеют уменьшение мишеневидных очагов после лечения PTS, окклюзия их дыхательных путей уменьшается, указывая на то, что респираторные функции и качество жизни значительно улучшаются после лечения PTS.
[64] Результаты по безопасности:
[65] На протяжении всего хода клинического испытания, проводимого на 89 субъектах, никто из них не испытывает подавление функции костного мозга, реакции желудочно-кишечного тракта или другие обычно наблюдаемые нежелательные реакции, сопутствующие системной химиотерапии.
[66] На протяжении всего хода клинического испытания, отслеживают показатели жизненно важных функций, данные медицинского осмотра физического состояния, результаты исследования крови, результаты биохимического исследования крови, результаты иммунологического исследования и данные электрокардиограммы, и не выявляют статистически значимые изменения.
[67] Это демонстрирует то, что внутриопухолевая инъекция PTS имеет небольшое системное воздействие на пациентов.
[68] Пример 5. Инъекционный препарат
Исходные вещества
Процентное содержание по массе
пара-Толуолсульфонамид
40%
PEG-400
30%
1,2-пропандиол
10%
Себациновая кислота
2%
2-этил-1,3-гександиол
18%
Такой же способ получения, что и в Примере 1.
[69] Пример 6. Инъекционный препарат
Исходные вещества
Процентное содержание по массе
пара-толуолсульфонамид
30%
PEG-400
40%
1,2-пропандиол
5%
Себациновая кислота
5%
2-этил-1,3-гександиол
10%
Диметилсульфоксид
5%
Безводный этанол
5%
Такой же способ получения, что и в Примере 1.
[70] Пример 7. Инъекционный препарат
Исходные вещества
Процентное содержание по массе
пара-Толуолсульфонамид
25%
PEG-400
35%
1,2-пропандиол
7%
Себациновая кислота
4%
2-этил-1,3-гександиол
15%
Диметилсульфоксид
7%
Безводный этанол
7%
Такой же способ получения, что и в Примере 1.