Способ диагностики эпителиального и стромального цитомегаловирусного кератита
EPITHELIAL AND STROMAL CYTOMEGALOVIRUS KERATITIS DIAGNOSIS METHOD

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в качестве способа, позволяющего установить окончательный диагноз цитомегаловирусного эпителиального и стромального кератита.
Ближайшим аналогом изобретения является способ диагностики герпесвирусных заболеваний глаз (Патент РФ на изобретение №2400756). Данный способ заключается в определении иммуноглобулинов М (IgM) и G (IgG) к специфичным антигенам цитомегаловируса в слезной жидкости методом иммуноблотинга.
Недостатком указанного способа является получение в некоторых случаях ложноотрицательного результата на наличие в слезной жидкости IgM, и, как следствие, неверная интерпретация клинического диагноза. Также исследование слезной жидкости методом иммуноблотинга требует времени (не менее 2 суток) для получения результатов исследования, использования одноразовых, дорогостоящих тестовых систем, проводится in vitro.
Задачей изобретения является создание способа диагностики цитомегаловирусного эпителиального и стромального кератита.
Техническим результатом заявляемого способа является своевременная и достоверная диагностика цитомегаловирусного стромального и эпителиального кератита, среди схожих по клинической картине кератитов.
Технический результат достигается тем, что диагностику цитомегаловирусного эпителиального и стромального кератита выполняют методом сканирующей лазерной конфокальной микроскопии, проводящейся in vivo и обеспечивающей получение результата исследования непосредственно во время его проведения.
Для проведения данного способа диагностики используют лазерный сканирующий томограф - Heidelberg Retinal Tomographer HRT-III, с насадкой «Rostok Cornea Module» («Heidelberg Engineering»), Германия) с длиной волны 670 нм, областью единовременного сканирования 400×400 мкм. Способ диагностики заключается в проведении сканирования пораженной зоны роговицы, а также области на границе между пораженной зоной роговицы и оптически прозрачной ее частью, с целью обнаружения патогномоничных цитомегалических клеток (условно называемых клетками «совиного глаза»). Указанные клетки характеризуются следующими признаками: округлой формой, наличием крупных гиперрефлективных включений, окруженных гипорефлективной зоной, при этом данные клетки не менее, чем в 1,5 раза должны превышать окружающие клетки по размеру, а также составлять не менее 20 мкм. Размер клеток измеряют, используя программное обеспечение прибора Heidelberg Eye Explorer: выполняется измерение полученного увеличенного изображения клеток сантиметровой линейкой, деления полученной величины на 257,5 с целью получения истинного размера исследуемых клеток в микронах. Величина в 257,5 рассчитана с учетом увеличения получаемого изображения структур роговицы вышеуказанным программным обеспечением.
Способ сканирующей лазерной конфокальной микроскопии позволяет обнаружить патогномоничные цитомегалические клетки и при условии их соответствия вышеуказанным признакам устанавливается окончательный клинический диагноз цитомегаловирусного кератита.
Между совокупностью существенных признаков и достигаемым техническим результатом существует причинно-следственная связь.
Использование лазерной сканирующей конфокальной микроскопии в диагностике цитомегаловирусного кератита позволяет сократить время с момента первичного обращения пациента до установления окончательного клинического диагноза, что делает возможным своевременное начало специфического лечения с применением препаратов, избирательно воздействующих на цитомегаловирус.
Способ поясняется следующими примерами.
Пример 1:
Пациентка Л., 32 года.
В анамнезе: Правый глаз - кератоконус II ст. Левый глаз - проведена сквозная кератопластика 12 лет назад по поводу кератоконуса IV ст.
На момент обращения у пациентки жалобы на слезотечение, болезненность, светобоязнь слева, остро возникшие около 4-х дней назад. При биомикроскопии на левом глазу визуализируются зона помутнения, распространяющаяся на оптическую область роговицы, инфильтрат с перифокальным отеком и участком деэпителизации над ним, выраженный отек роговицы.
При выполнении конфокальной микроскопии с использованием лазерного сканирующего томографа - Heidelberg Retinal Tomographer HRT-Ш, с насадкой «Rostok Cornea Module» («Heidelberg Engineering»), Германия) было проведено сканирование пораженной зоны роговицы, а также области на границе между пораженной зоной роговицы и оптически прозрачной ее частью. На глубине 30 мкм по краю зоны дефекта были обнаружены патогномоничные цитомегалические клетки, характеризующиеся округлой формой, в 1.5 раза большим по отношению к окружающим клеточным структурам размером, наличием крупных гиперрефлективных включений, окруженных гипорефлективной зоной. Проведение морфометрического исследования позволило определить размер обнаруженных клеток, равный 21 мкм, таким образом устанавливая диагноз цитомегаловирусного эпителиального и стромального кератита. Диагноз был подтвержден результатом иммуноферментного анализа (ИФА) крови, результатом которого стало обнаружение высокого титра вируснейтрализующих антител к цитомегаловирусу.
Пример 2:
Пациентка Б., 45 лет.
В течение последнего года после перенесенной коронавирусной инфекции жалобы на рецидивирующие (до 6 раз в год) боль, гиперемию, светобоязнь, ощущение инородного тела.
При биомикроскопии на левом глазу визуализируется стромальное васкуляризированное помутнение, захватывающее оптическую зону роговицы.
При выполнении конфокальной микроскопии с использованием лазерного сканирующего томографа - Heidelberg Retinal Tomographer HRT-III, с насадкой «Rostok Cornea Module» («Heidelberg Engineering»), Германия) было проведено сканирование пораженной зоны роговицы, а также области на границе между пораженной зоной роговицы и оптически прозрачной ее частью. На глубине 40 мкм в зоне помутнения были обнаружены округлые патогномоничные цитомегалические клетки, характеризующиеся округлой формой, в 2 раза большим по отношению к окружающим клеточным структурам размером, наличием крупных гиперрефлективных включений, окруженных гипорефлективной зоной. Проведение морфометрического исследования позволило определить размер обнаруженных клеток равный 45 мкм, таким образом устанавливая диагноз цитомегаловирусного эпителиального и стромального кератита. Диагноз был подтвержден лабораторно при проведении полимеразной цепной реакции биологических жидкостей (слезы и слюны), где были обнаружены ДНК цитомегаловируса.