СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ УРОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ С ПРИМЕНЕНИЕМ СЕЛЕКТИВНЫХ МОДУЛЯТОРОВ АНДРОГЕНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ
METHODS OF TREATING UROLOGICAL DISORDERS USING SELECTIVE ANDROGEN RECEPTOR MODULATORS

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к способам лечения, предотвращения, снижения и/или подавления урологических нарушений, таких как недержание мочи, включая недержание мочи при напряжении и дисфункции тазового дна, путем введения соединения согласно настоящему изобретению, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов.
Уровень техники
Дисфункции тазового дна затрагивают тазовую область пациентов, от них страдают миллионы мужчин и женщин. У женщин тазовая область включает различные анатомические структуры, такие как матка, прямая кишка, мочевой пузырь, уретра и влагалище. Эти анатомические структуры поддерживаются и фиксируются на месте сложной системой тканей, таких как мышцы и связки. Если эти ткани повреждаются, растягиваются или ослабляются по каким-то другим причинам, происходит сдвиг анатомических структур тазовой области. Некоторые из дисфункций тазового дна включают цистоцеле, пролапс влагалища, влагалищную грыжу, ректоцеле, энтероцеле, утероцеле и/или уретроцеле.
Дисфункции тазового дна часто вызывают недержание мочи (НМ).
Недержание мочи определяется как утрата контроля над мочевым пузырем Тяжесть варьирует от эпизодического подтекания мочи при кашле или чихании, до настолько неожиданных и сильных позывов к мочеиспусканию, что человек не успевает добраться до туалета. Это явление имеет физиологическую причину (обычно опущение тазового дна) с потерей эффекта природного анатомического клапана, обеспечивающего адекватный контроль над мочевым пузырем, что приводит к ослаблению сфинктера: у женщин это зачастую является последствием деторождения. Оно возникает, когда внутреннее давление в мочевом пузыре выше, чем сопротивление уретры. Есть информация, что недержание мочи обычно является результатом снижения способности контролировать уретру вследствие опущения мочевого пузыря, растяжения тазовых мышц, включая мышцу, поднимающую задний проход, и бульбокавернозных мышц, а также слабости сфинктера уретры.
Существует несколько типов недержания мочи: недержание при напряжении возникает, когда движения тела оказывают неожиданное давление на мочевой пузырь; императивное недержание возникает, когда человек не может сдерживать мочеиспускание достаточно долго, чтобы вовремя добраться до туалета, из-за чувствительности мускулатуры мочевого пузыря, и в случаях, когда моча подтекает из пузыря из-за внешних факторов, таких как медицинские состояния, включая рак мочевого пузыря, воспаление мочевого пузыря, обструкцию выходного отверстия мочевого пузыря, камни в мочевом пузыре или инфекцию мочевого пузыря; рефлекторное недержание возникает вследствие анкилозирующей параплегии; недержание переполнения возникает вследствие атонического паралича; психогенное недержание возникает как результат деменции; и нейрогенное недержание возникает из-за повреждения нервов, управляющих мочевыводящими путями.
Недержание при напряжении имеет место, когда моча подтекает в ходе выполнения упражнений, кашля, смеха, подъема тяжелых предметов или других движений тела, приводящих к давлению на мочевой пузырь. Это самый распространенный тип проблем с контролем над мочевым пузырем у молодых женщин и женщин среднего возраста. В некоторых случаях это связано с последствиями деторождения. Оно также может начаться приблизительно в период менопаузы.
Недержание мочи при напряжении (стрессовое недержание мочи, SUI) может сосуществовать с императивным недержанием мочи (ИНМ, UUI) и в этом случае называется смешанным недержанием мочи. Императивное недержание мочи является частью комплекса, известного как гиперактивный или гиперчувствительный мочевой пузырь, который включает симптомы частоты и/или императивности с ИНМ или без него. 75% пациентов с недержанием составляют пожилые женщины.
Недержанием мочи при напряжении (НМПН, стрессовое недержание, SUI), непроизвольным истечением мочи при видах активности, которые повышают абдоминальное давление (например, кашель, чихание, физические упражнения) страдают до 35% взрослых женщин (Luber KM. The definition, prevalence, and risk factors for stress urinary incontinence. Rev Urol (suppl.) 2004; 6: S3). Недержание мочи и дисфункции тазового дна являются серьезными проблемами со здоровьем у женщин, особенно по мере старения.
Существуют различные средства лечения, которые можно применять для лечения недержания мочи при напряжении у женщин (Rovner ES, Wein AJ. Treatment options for stress urinari incontinence. Reviews in Urology 2004, 6: S29-S47). Коррекция поведения и физиотерапия тазового дна часто применяются в качестве первичных подходов к лечению, несмотря на то, что часто в итоге наиболее эффективными оказываются хирургические процедуры (например, петли, «подвешивание» шейки мочевого пузыря). Также на рынке представлены биологические и другие материалы для введения в уретру для лечения недостаточности внутреннего сфинктера (ISD, НВС), являющейся причиной симптомов недержания мочи при напряжении. В исследовании инъекций аутологичного жира в сфинктер уретры, улучшение наблюдалось только у 22% пациентов, при том, что доля улучшений после инъекций плацебо составила 21% (Lee PE, Kumg RC, Drutz HP. Periurethral autologous fat injection as a treatment for female stress urinary incontinence- a randomized double-blind controlled trial. J Urol 2001, 165: 153-158). Тем не менее, инъекции мышечных стволовых клеток (AMDC) представляют собой перспективный новый способ лечения недержания мочи при напряжении, проходящий в настоящее время клинические испытания. В исследовании AMDC с повышением дозы, где AMDC вводили путем инъекции в сфинктер уретры, в дневниках всех групп, получавших разные дозы, было зафиксировано значительное уменьшение подтеканий при напряжении через 12 месяцев, но только у пациентов, получавших самую высокую дозу AMDC, снижение средней массы прокладки было статистически значимым (Peters KM, Dmochowski RR, Carr LK, Magali R, Kaufman MR, Sirls LT, Herschorn S, Birch C, Kultgen PL, Chancellor MB. Autologous muscle derived cells for treatment of stress urinary incontinence in women. J Urol 2014, 192: 469-476.). Также исследуются фармакологические средства лечения недержания мочи при напряжении, для которых получены различные результаты. В исследовании дулоксетина (селективного ингибитора обратного захвата серотонина) медианное значение частоты эпизодов недержания в группе плацебо снижалось на 41%, а в группе, получавшей дулоксетин в дозе 20 мг/день, на 54%, в случае дулоксетина в дозе 40 мг/день, на 59%, и на 64% в группе, получавшей дулоксетин в дозе 80 мг/день (Norton PA, Zinner NR, Yalcin I, Bump RC. Duloxetine urinary incontinence study group. Duloxetine versus placebo in the treatment of stress urinary incontinence. Am J Obstet Gynecol 2002, 187: 40-48). Dmochowski с коллегами также продемонстрировали статистически значимое снижение частоты эпизодов недержания при лечении дулоксетином в сравнении с плацебо (50% против 27%, соответственно) (Dmochowski RR, Miklos JR, Norton PA, с соавт. для группы исследования дулоксетина при недержании мочи. Duloxetine versus placebo for the treatment North America women with stress urinary incontinence. J Urol 2003, 170: 1259-1263).
Было обнаружено, что расслабление мышц тазового дна коррелирует с симптомами нижних мочевыводящих путей. Мышцы тазового дна и нижних мочевыводящих путей имеют критическое значение для поддержки органов таза и мочеиспускания, а с другой стороны считается, что повреждение мышц и недостаточность гормональной стимуляции вносят некоторый вклад в пролапс и недержание мочи. Соответственно, предпринимаются попытки повысить силу и улучшить функцию мышц тазового дна, особенно у женщин старше репродуктивного возраста и у пожилых женщин, чтобы ослабить, если не устранить симптомы нижних мочевыводящих путей (в частности, недержание мочи, частое мочеиспускание и ночную полиурию). Однако физиотерапия тазового дна (PT, ФТ) зачастую менее эффективна, чем более агрессивное лечение, такое как хирургическое лечение (Labrie J, Berghmans BLCM, Fischer K, Milani A, van der Wijk I, с соавт. Surgery versus physiotherapy for stress urinary incontinence. NEJM 2013, 369, 1124-1133). Проспективное рандомизированное исследование ФТ в сравнении с хирургическим вмешательством показало, что 49% женщин в группе ФТ перешли к хирургическому лечению. Другие исследования показали, что через 3 - 15 лет от 25 до 50% женщин, которых первоначально лечили с использованием физиотерапии, также перешли к хирургическому лечению (Cammu H, Van Lylen M, Blockeel C, Kaufman L, Amy J-J. Who will benefit from pelvic floor muscle training for stress urinary incontinence? Am J Obstet Gynecol 2004, 191: 1152-1157; Lamers BHC, van der Vaart CH. Medium-term efficacy of pelvic floor muscle training for female urinary incontinence in daily practice. Int Urogynecol J Pelvic Floor Dysfunct 2007, 18: 301-307; Kvarstein BK, Nygaard I. Lower urinary tract symptoms и pelvic floor muscle exercise adherence after 15 years. Obstet Gynecol 2005, 105: 999-1005). Однако хирургическое вмешательство значительно более инвазивно и связано с риском осложнений (Brubaker L, Norton PA, Albo ME, Chai TC, Dandreo KJ. Adverse events over two years after retropubic or transobturator midurethral sling surgery: findings from the Trial of Midurethral Slings (TOMUS) study. Am J Obstet Gynecol 2011, 205: 498.e1-498.e6).).
Повышение количества андрогенов может представлять собой новое средство лечения для повышения реактивности мышц тазового дна и улучшения объективных и субъективных результатов для недержания мочи при напряжении. Фундаментальная научная литература указывает на то, что гладкомышечные клетки мочеполовой системы женщины содержат экспрессированные андрогеновые рецепторы (Berman JR, Almeida FG, Jolin J, с соавт. Correlation of androgen receptors, aromatase, and 5-alpha reductase in the human vagina with menopausal status Fertil Steril 2003, 79: 925-931), и что и мышца, поднимающая задний проход, и сфинктер уретры, содержащие большие количества андрогеновых рецепторов (Copas P, Bukovsky A, Asbury B, с соавт. Estrogen, progesterone, and androgen receptor expression in levator ani muscle and fascia. J Women Helath Gend Based Med 2001, 10: 785-795; Celayir, S, Ilce Z, Dervisoglu S. The sex hormone receptors in the bladder in childhood-1: Preliminary report in male subjects. Eur J Pediatr Surg 2002, 12: 312-317), чувствительны к андрогенам (Nnodim JO. Quantitative study of the effects of denervation and castration on the levator ani muscle of the rat Anat Rec 1999, 255: 324-333, Nnodim JO. Testosterone mediates satellite cell activation in denervated rat levator ani muscle. Anat Rec 2001, 263: 19-24).
Андрогеновые рецепторы в тазовом дне/уретре
Парауретральный внеклеточный матрикс является мишенью половых стероидных гормонов, однако его эффекты не очень хорошо изучены. Андрогены стимулируют синтез коллагена и подавляют его разрушение, что приводит к повышению плотности коллагеновых волокон (Shin MH, Rhie GE, Park CH, Kim KH, Cho KH, Eun HC с соавт. Modulation of collagen metabolism by the topical application of dehydroepiandrosterone to human skin. J Invest Dermatol 2005, 124: 315-323; Berger L, El-Alfy M, Martel C, Labrie F. Effects of dehydroepiandrosterone, Premarin and Acolbifene on histomorphology и sex steroid receptors in the rat vagina. J Steroid Biochem Mol Biol 2005, 96: 201-215). Андрогеновые рецепторы экспрессируются в большом количестве и в мышечных, и в стромальных клетках мышцы, поднимающей задний проход, и ее фасции у женщин (Copas P, Bukovsky A, Asbury B, с соавт. Estrogen, progesterone и androgen receptor expression in levator anu muscle and fascia. J Women Health Gend Based Med 2001, 10: 785-795), и считается, что мышца, поднимающая задний проход, является одной из наиболее чувствительных к андрогенам тканей в организме.
Влияние анаболических стероидов
Влияние тестостерона на уродинамические характеристики и гистопатоморфологию мышц тазового дна изучали с использованием моделей недержания мочи при напряжении на крысах. Было обнаружено, что тестостерон повышает значения давления, при которых происходит истечение мочи, и значительно увеличивает размер мышечных волокон у крыс, получивших лечение, что указывает на то, что тестостерон обладает как профилактическим, так и лечебным действием в моделях недержания мочи при напряжении на крысах (Mammadov R, Sinsir A, Tuglu I, Eyren V, Gurer E, Ozyurt C. The effect of testosterone treatment on urodynamic findings and histopathomorphology of pelvic floor muscles in female rats with experimentally induced stress urinary incontinence. Int Urol Nephrol 2011, 43: 1003-1008). Поскольку уровни свободного тестостерона также были выше в группе, получавшей лечение, есть повод задуматься о побочных эффектах применения дополнительного стероидного тестостерона у женщин с недержанием мочи при напряжении.
Анаболические эффекты андрогенов у мужчин широко исследуются, но об их роли и применении у женщин известно меньше. Предшествующие исследования показали, что уровни андрогенов в моче были значительно выше у пациентов в постменопаузе с недержанием мочи при напряжении, чем у пациентов в постменопаузе без недержания мочи при напряжении (Jung BH, Bai SW, Chung BC. Urinary profile of endogenous steroids in postmenopausal women with stress urinary incontinence. J Reprod Med 2001, 46: 969-974). Кроме того, ультразвуковое исследование промежности выявило положительную связь концентраций метаболитов андрогенов в моче этих пациентов с опущением мочевого пузыря (Bai SW, Jung Bh, Chung BS, с соавт. Relationship between urinary profile of the endogenous steroids and postmenopausal women with stress urinary incontinence. Neurourol Urodynam 2003, 22: 198-204). Aizawa K с соавт. и другие авторы опубликовали данные, демонстрирующие, что увеличение массы мышц в результате силовых тренировок или упражнений обусловлено, по меньшей мере частично, местными концентрациями андрогенов и экспрессией ферментов, отвечающих за синтез андрогенов (Aizawa K, Iemitsu M, Maeda S, Mesaki N, Ushida T, Akimoto T. Endurance exercise training enhances local sex steroidogenesis in skeletal muscle. Medicine и science in sports и exercise 2011, 43(11): 2072-2080). Эти сведения подкрепляют мнение о том, что упражнения на укрепление мышц тазового дна улучшают симптомы НМПН за счет местного повышения уровней андрогенов. Эти и другие исследования указывают на то, что андрогены, возможно, играют значительную роль в НМПН, и на то, что метаболиты андрогенов, возможно, участвуют в расслаблении мускулатуры мочевого пузыря (Bai SW, Jung Bh, Chung BC, с соавт. Relationship between urinary endogenous steroid metabolites и lower urinary tract function in postmenopausal women. Yonsei Med J 2003, 44: 279-287). Это расслабляющее воздействие на мочевой пузырь возможно связано с повышающей регуляцией синтазы оксида азота андрогенами, которая приводит к повышению продукции оксида азота. Влияние андрогенов на нижние мочевыводящие пути и тазовое дно является сложным и возможно зависит от анаболических эффектов, гормональной модуляции, экспрессии рецепторов, модуляции оксида азота или комбинации этих факторов (Ho MH, Bhatia NN, Bhasin S. Anabolic effects of androgens on muscles of female pelvic floor and lower urinary tract. Current Opinion in Ostetrics & Gynecology 2004, 16(5): 405-409).
Интригующие данные были получены в исследованиях с участием женщин с синдромом поликистозных яичников (PCOS, СПКЯ). СПКЯ представляет собой нарушение, связанное с повышенным количеством андрогенов (>70 нг/дл против 15-50 нг/дл у здоровых женщин в пременопаузе), и клинические исследования продемонстрировали, что СПКЯ может устранять риск НМ, наблюдаемый у тучных женщин. Кроме того, у тучных женщин с СПКЯ распространенность НМ близка к таковой у женщин с индексом массы тела, считающимся нормальным (Montezuma T, Antonio FI, Rosa de Silva AC, Sa MF, Ferriani RA, Ferreira CH. Assessment of symptoms of недержание мочи in women with polycystic ovary syndrome. Clinics (Sao Paulo, Brazil) 2011, 66(11): 1911-1915). В отдельном исследовании ни одна из женщин с СПКЯ не страдала НМ в отличие от соответствующих контролей (18,6% с НМ), несмотря на то, что различий в силе мышц тазового дна не было (Antonio FI, Bo K, Ferriani RA, Sa MF, Rosa de Silva, AC, Ferreira CH. Pelvic floor muscle strength and urinary incontinence in hyperandrogenic women with polycystic ovary syndrome. Int Urogynecol J 2013, 24(10): 1709-1714). Эти исследования подтверждают предположение о том, что у женщин с более высокими уровнями андрогенов или, возможно, женщин, получающих лечение селективным ингибитором андрогеновых рецепторов (SARM), будут обнаружены улучшения симптоматики НМ.
Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов
Несмотря на то, что анаболические стероиды, возможно, увеличивают массу и силу мышц, отсутствие биодоступности при пероральном введении и известные потенциальные риски ограничивают их применение. Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов (SARM) обладают большим потенциалом для достижения полезных эффектов, аналогичных эффектам лечения стероидами (увеличение мышечной массы, уровня холестерин/триглицериды, метаболизма глюкозы и плотности костей) с меньшими нежелательными эффектами, такими как гирсутизм и акне, у женщин.
4е
Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов обеспечить новую терапевтическую альтернативу для дисфункций тазового дна и нижних мочевыводящих путей, поскольку и тестостерон, и его более эффективный метаболит, образуемый 5-α редуктазой, дигидротестостерон (ДГТ), оказывают анаболическое действие на мышцы. Потенциал селективных модуляторов анаболических рецепторов в качестве средства лечения недержания мочи при напряжении подтверждается исследованиями, которые показали, что давление закрытия уретры представляет собой фактор, наиболее сильно связанный с недержанием мочи при напряжении (Delancey JO, Miller JM, Kearney R, Howard D, Reddy P, Umek W, Guire KE, Margulies RU, Ashton-Miller JA. Vaginal birth and de novo stress incontinence: Relative contributions of urethral dysfunction and mobility. Obstet Gynecol 2007 (2Pt I): 354-362; Delancy JO, Trowbridge ER, Miller JM, Morgan DM, Guire K, Fenner DE. Weadock WJ, Ashton-Miller JA. Stress urinary incontinence: Relative importance of urethral support and urethral closure pressure. J Urol 2008, 179(6): 2286-2290). Это открытие подтверждается как морфологическими, таки и электромиоэрафическими (ЭМГ) данными. В исследованиях с визуализацией было обнаружено, что поперечно-полосатый сфинктер уретры у женщин с недержанием мочи при напряжении меньше, чем у контрольных субъектов, контролирующих тазовые органы (Athanasiou S, Khullar V, Boos K, Salvatore S, Cardozo L. Imaging the urethral sphincter with three-dimensional ultrasound. Obstet Gynecol 1999, 94(2): 295-301; Morgan DM, Umek W, Guire K, Morgan HK, Garabrant A, DeLancey JO. Urethral sphincter morphology и function with and without stress inconsistance. J Urol 2009, 182(1): 203-209). В электромиографических исследованиях сфинктеры женщин с недержанием мочи при напряжении демонстрируют меньшие амплитуды ЭМГ и более короткие продолжительности потенциала моторной единицы, чем контроли без недержания (Kenton K, Mueller E, Bmaker L. Continent women have better urethral neuromuscular function than those with stress insontinence. Int Urogynecol J. 2011, 22(12): 1479-1484; Takahashi S, Homnia Y, Fujishiro T, Hosaka Y, Kitamura, T, Kawabe K. Electromyographic study of the striated urethral sphincter in type 3 stress insontinence: Evidence of myogenic-dominant damages. Urology 2000, 56(6): 946-950), что указывает в первую очередь на миогенные изменения. Кроме того, хорошо известно, что восстановление мускулатуры тазового дна (МТД) является эффективным средством лечения недержания мочи при напряжении SUI (Hay-Smith J, Berghmans B, Burgio K, Dumoulin C, Hagen S, Moore K, Nygaard I, N’dow J (2009), документ 12 комитета по консервативному лечению взрослых (Committee 12 adult conservative management). В: Abrams P, Cardozo L, Khoury S, Wein A (изд) Incontinence, 4изд. Health Publications Ltd., Париж). Восстановление мышц тазового дна может быть эффективным, поскольку оно укрепляет не только мышцы тазового дна, но укрепляет и поперечно-полосатый сфинктер. Эту идею подтверждает недавняя публикация, в которой сообщается, что на основании ультразвукового исследования (УЗ), 12-недельная программа упражнений для МТД давала значительное увеличение площади поперечного разреза уретры на уровне поперечно-полосатого сфинктера у женщин среднего возраста (McLean L, Varette K, Gentilcore-Saulnier B, Harvey MA, Baker K, Sauerbrei E. Pelvic floor muscle training in women with stress urinary incontinense causes hypertrophy urethral sphincter и reduces bladder neck mobility during coughing. Neurourol Urodyn 2013, 32(8): 1096-n02. doi: 10,1002/nau,22343). Из-за ограниченного разрешения ультразвуковых изображений авторы не смогли определить, какая часть уретры гипертрофирована. Исследователи предположили, что восстановление МТД у пожилых женщин с НМПН, возможно, поддерживало поперечно-полосатый сфинктер уретры, что приводило к измеряемой гипертрофии, заметной при ЯМР-исследовании.
В более позднем исследовании Madill дополнил сведения, полученные группой McLean (Madill SJ, Pontbriand-Drolet S, Tang A, Dumoulin C. Changes in urethral sphincter size following rehabilitation in older women with stress urinay incontinenct. Int Urogynecol J 2014, September, предпечатная электронная публикация). Используя метод ЯМР они смогли дифференцировать гладкомышечный слой и слой поперечно-полосатых мышц сфинктера и определили, что у пожилых женщин изменения возникали в основном в поперечно-полосатом сфинктере уретры. Эти сведения указывают на то, что поперечно-полосатый сфинктер уретры не только взаимодействует с мышцами тазового дна в процессе автоматических и произвольных сокращений [Nnodim JO. Quantitative study of the effects of denervation и castration on the levator ani muscle of the rat. Anat Rec 1999, 255: 324-333; Nnodim JO. Testosterone mediates satellite cell activation in denervated rat levator ani muscle. Anat Rec 2001, 263: 19-24; Celayir, S, Ilce Z, Dervisoglu S. The sex hormone receptors in the bladder in childhood-1: Preliminary report in male subjects. Eur J Pediatr Surg 2002, 12: 312-317], но что восстановление МТД также обеспечивает напряжение поперечно-полосатого сфинктера уретры, достаточное для того чтобы обеспечить гипертрофию мышц в результате тренировок t (Madill SJ, Pontbriand-Drolet S, Tang A, Dumoulin C. Changes in urethral sphincter size following rehabilitation in older women with stress urinary incontinence. Int Urogynecol J 2014, Сентябрь, предпечатная электронная публикация).
В настоящее время разрабатываются селективные модуляторы андрогеновых рецепторов (SARM) для пациентов с атрофией мышц, вторичной по отношению к диагностированному раку. Было показано, что этот класс лекарственных средств стимулирует рост скелетной мускулатуры как и традиционные анаболические стероиды, но не вызывает нежелательных побочных эффектов. Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов, такие как соединение формулы IX, являются биодоступными и тканеселективными при пероральном введении, в то время как тестостерон и другие анаболические стероиды также обладают ограниченной биодоступностью при пероральном введении и доступны только в формах для трансдермального и внутримышечного введения, которые потенциально могут вызывать кожные реакции и колебания концентрации тестостерона в сыворотке крови. Селективные ингибиторы андрогеновых рецепторов могут демонстрировать положительные эффекты анаболических средств без известных связанных с ними рисков (Mohler ML, Bohl CE, Jones A, с соавт. Nonsteroidal selective androgen receptor modulators (SARMs): Dissociating the anabolic и androgenic activities of the androgen receptor for therapeutic benefit. J Med Chem 2009, 52(12): 3597-3617).
3
В тканях мочеполовой системы у мужчин и женщин активно экспрессируются андрогеновые рецепторы (AR, АР). Андрогены оказывают анаболическое влияние на эти ткани, включая мышцу, поднимающую задний проход, и бульбокавернозные мышцы, которые относятся к мышцам тазового дна. Анаболические эффекты андрогенов, возможно, играют важную роль в предотвращении и лечении урологических нарушений, включая недержание мочи, дисфункции нижних отделов мочевыводящих путей и дисфункции тазового дна. Самые современные средства лечения недержания мочи (НМ) модулируют нервную систему и включают неселективные антихолинергические средства, такие как оксибутинин и пропантелин, или антимускариновесредства, такие как толтеродин, троспий, солифенацин, дарифенацин и фезотерадин. Адренергические модуляторы для НМ включают трициклические антидепрессанты (например, имипрамин и амитриптилин) и агонисты β-адренергических рецепторов (например, мирабегрон). Другие средства для лечения недержания мочи представляют собой миорелаксанты (например, для расслабления детрузора), такие как флавоксат и дицикломин. Ботулинические токсины, такие как онаботулотоксин A применяются при нейрогенном НМ. Несмотря на то, что Управление США по надзору в сфере пищевых продуктов и лекарственных средств (FDA) одобрило ряд средств для лечения НМ, сохраняется потребность в новых агентах с новыми механизмами действия. Применение нестероидных андрогенов для укрепления тазового дна и поддержки структур мочеполовой системы представляет собой один из таких новых подходов к лечению недержания мочи.
Недавно, используя в качестве модели, имитирующей недержание мочи при напряжении, крыс с удаленными яичниками, исследователи показали, что применение селективного модулятора андрогеновых рецепторов (GSK2849466A) обеспечило повышение базального уретрального давления (UBP, БУД) и амплитуды ответов уретры при чихании (AURS) на 64% и 74%, соответственно, по сравнению с контролем, получавшим нейтральную среду. Кроме того, у всех крыс (8/8) в группе, получавшей в качестве лечения нейтральную среду, наблюдалось подтекание жидкости при чихании, в то время как в группе, получавшей в качестве лечения селективный модулятор андрогеновых рецепторов, только у одной крысы (1/8) наблюдалось такое подтекание после аналогичной провокации. Гистологическое исследование выявило обращение атрофии мышц уретры у животных в группе, получавшей селективный модулятор андрогеновых рецепторов, по сравнению с контрольной группой. Это предварительное исследование in vivo дает дополнительное подтверждение возможности применения селективных модуляторов андрогеновых рецепторов для лечения недержания мочи при напряжении (Kadekawa с соавт., AUA Annual Meeting 2015, Новый Орлеан, Лос-Анджелос, США. PD27-11).
Раскрытие изобретения
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у субъекта, включающий введение указанному субъекту соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IA:
,
IA
где
2
3
3
2
3
3
2
2
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CH, CF, OH, CN, NO, NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, алкил, арилалкил, OR, NH, NHR, N(R) или SR;
3
2
3
3
3
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CN, NO, COR, COOH, CONHR, CF, Sn(R), или R вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, образует систему конденсированных колец, представленную структурой:
или
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой CF,F, Br, Cl, I, CN или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
n представляет собой целое число в диапазоне 1-4; и
m представляет собой целое число в диапазоне 1-3;
или его оптического изомера, фармацевтически приемлемой соли, гидрата или любой их комбинации.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложен способ снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, включающий введение указанному субъекту соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IA:
,
IA
где
2
3
3
2
3
3
2
2
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CH, CF, OH, CN, NO, NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, алкил, арилалкил, OR, NH, NHR, N(R) или SR;
3
2
3
3
3
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CN, NO, COR, COOH, CONHR, CF, Sn(R), или R вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, образует систему конденсированных колец, представленную структурой:
или
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой CF,F, Br, Cl, I, CN или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
n представляет собой целое число в диапазоне 1-4; и
m представляет собой целое число в диапазоне 1-3;
или его оптического изомера, фармацевтически приемлемой соли, гидрата или любой их комбинации.
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна у субъекта, включающий введение указанному субъекту соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IA:
,
IA
где
2
3
3
2
3
3
2
2
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CH, CF, OH, CN, NO, NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, алкил, арилалкил, OR, NH, NHR, N(R) или SR;
3
2
3
3
3
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CN, NO, COR, COOH, CONHR, CF, Sn(R), или R вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, образует систему конденсированных колец, представленную структурой:
или
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой CF,F, Br, Cl, I, CN или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
n представляет собой целое число в диапазоне 1-4; и
m представляет собой целое число в диапазоне 1-3;
или его оптического изомера, фармацевтически приемлемой соли, гидрата или любой их комбинации.
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию или овариэктомию, включающий введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IA:
,
IA
где
2
3
3
2
3
3
2
2
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CH, CF, OH, CN, NO, NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, алкил, арилалкил, OR, NH, NHR, N(R) или SR;
3
2
3
3
3
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CN, NO, COR, COOH, CONHR, CF, Sn(R), или R вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, образует систему конденсированных колец, представленную структурой:
или
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой CF,F, Br, Cl, I, CN или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
n представляет собой целое число в диапазоне 1-4; и
m представляет собой целое число в диапазоне 1-3;
или его оптического изомера, фармацевтически приемлемой соли, гидрата или любой их комбинации.
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает способ увеличения размера и/или массы мышц тазового дна у субъекта, включающий введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IA:
,
IA
где
2
3
3
2
3
3
2
2
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CH, CF, OH, CN, NO, NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, алкил, арилалкил, OR, NH, NHR, N(R) или SR;
3
2
3
3
3
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CN, NO, COR, COOH, CONHR, CF, Sn(R), или R вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, образует систему конденсированных колец, представленную структурой:
или
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой CF,F, Br, Cl, I, CN или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
n представляет собой целое число в диапазоне 1-4; и
m представляет собой целое число в диапазоне 1-3;
или его оптического изомера, фармацевтически приемлемой соли, гидрата или любой их комбинации.
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает способ увеличения размера и/или массы сфинктера уретры у субъекта, включающий введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IA:
,
IA
где
2
3
3
2
3
3
2
2
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CH, CF, OH, CN, NO, NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, алкил, арилалкил, OR, NH, NHR, N(R) или SR;
3
2
3
3
3
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CN, NO, COR, COOH, CONHR, CF, Sn(R), или R вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, образует систему конденсированных колец, представленную структурой:
или
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой CF,F, Br, Cl, I, CN или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с беззольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
n представляет собой целое число в диапазоне 1-4; и
m представляет собой целое число в диапазоне 1-3;
или его оптического изомера, фармацевтически приемлемой соли, гидрата или любой их комбинации.
Краткое описание фигур
Объект, рассматриваемый как изобретение, указан отдельно и заявлен в явном виде в заключительной части настоящего описания. Тем не менее, настоящее изобретение, как с точки зрения его организации, таки и с точки зрения механизма действия, а также его задачи, признаки и преимущества, можно лучше понять, обратившись к нижеследующему подробному описанию в совокупности с предлагающимися к нему чертежами, на которых:
На Фигуре 1 показано увеличение массы мышцы, поднимающей задний проход, у крыс, получавших лечение соединениями - селективными модуляторами андрогеновых рецепторов (соединение формулы X, соединение формулы IX) согласно настоящему изобретению, в сравнении с неактивным соединением, аналогичным по структуре селективному модулятору андрогеновых рецепторов (R-изомер соединения формулы IX или (R)-IX): Крыс Sprague Dawley (n=5; масса 200 г) кастрировали и лечили в течение 14 дней путем подкожного введения (незакрашенные столбцы), 3 мг/день соединения формулы X (столбцы с точками), соединения формулы IX (столбцы со штриховкой), неактивного (R)-IX (серые столбцы) и дигидротестостерона (черные столбцы). После умерщвления животных органы взвешивали и выражали полученные значения как чистые значения массы органа. Значения выражали в виде среднего ± стандартное отклонение. Увеличение размера и силы мышц тазового дна считается одним из механизмов влияния селективных андрогеновых рецепторов на недержание мочи.
На Фигуре 2 показаны тканеселективные фармакологические эффекты соединения формулы XI, описанные в Примере 10.
На Фигуре 3 показаны результаты теста Хершбергера соединений согласно настоящему изобретению, как описано в Примере 17. AUC представляет собой площадь под кривой концентрация-время.
На Фигуре 4 показано влияние селективных модуляторов андрогеновых рецепторов на массу тела. Массу тела измеряли в дни 0 (исходный уровень) и 28 (после лечения) лечения у мышей с удаленными яичниками, которые получали два селективных модулятора андрогеновых рецепторов (S-изомер формулы IX (IX) и формулы VIII (VIII)). Статистически значимые различия в массе тела между группами отсутствовали (n=5-7/группу); mpk это мг лекарственного средства на кг массы тела; М.т – масса тела.
На фигуре 5A и фигуре 5B показано влияние селективных ингибиторов андрогенных рецепторов на сухую массу тела, измеренную методом магнитного резонанса (МРТ). Сухую массу тела измеряли в дни 0 (исходный уровень) и 28 (после лечения) лечения у мышей с удаленными яичниками, которые получали два селективных модулятора андрогеновых рецепторов (S-изомер формулы IX (IX) и формулы VIII (VIII)). Хотя в группах лечения, получавших селективный ингибитор андрогеновых рецепторов наблюдали тенденцию к повышению массы в зависимости от дозы, статистическая значимость в группах лечения не достигалась (n=5-7/группу). VIII эффективнее, чем IX, повышал сухую массу (сравнение средних между группами и необработанных значений сухой массы). «Сух.» обозначает сухую массу тела; mpk это мг лекарственного средства на кг массы тела.
На Фигуре 6 показано влияние селективных модуляторов андрогеновых рецепторов на массу копчиковой мышцы (COC). После 28 дней лечения животных умерщвляли, извлекали мышцы тазового дна под увеличением и взвешивали на микровесах. На COC сильно влияла овариэктомия (OVX), которая приводила к ~50% снижению массы. N=10-14 (Копчиковые мышцы с обеих сторон тазового дна выделяли и взвешивали). Все группы статистически значимо отличались от животных после овариэктомии. Однако различий между группами лечения выявлено не было. Р-значения явно указывают на то, что соединение формулы VIII более эффективно, чем соединение формулы IX. Исследуя мышцы под микроскопом, ветеринар обнаружил, что копчиковые мышцы животных, получавших лечение селективными модуляторами андрогеновых рецепторов, были сильнее васкуляризированы, чем мышцы контрольных животных с удаленными яичниками, и даже чем мышцы интактных контрольных животных. Мг/кг это мг лекарственного средства на кг массы тела; COC обозначает «копчиковая».
На Фигуре 7 показано влияние селективных модуляторов андрогеновых рецепторов на массу лобково-копчиковой мышцы (Pc, ЛК). После 28 дней лечения животных умерщвляли, под увеличением извлекали мышцы тазового дна и взвешивали на микровесах. Овариэктомия оказывала лишь умеренное влияние на массу лобково-копчиковой мышцы, вызывая снижение ее массы на ~15-20%. N=10-14 (Извлекали и взвешивали лобково-копчиковые мышцы с обеих сторон тазового дна). Все группы статистически значимо отличались от животных после овариэктомии. Однако различий между группами лечения выявлено не было. Из-за маленького размера мышцы и минимального влияния овариэктомии, вариативность данных выше, чем для копчиковой мышцы. Исследуя мышцы под микроскопом, ветеринар обнаружил, что лобково-копчиковые мышцы животных, получавших лечение селективными модуляторами андрогеновых рецепторов, были сильнее васкуляризированы, чем мышцы контрольных животных с удаленными яичниками, и даже чем мышцы интактных контрольных животных. mpk это мг лекарственного средства на кг массы тела; НО – это нейтральная основа; COC(Копч.) это копчиковый; Pc (ЛК) – это лобково-копчиковая.
На Фигуре 8 показано влияние селективных модуляторов андрогеновых рецепторов на суммарную массу мышц тазового дна. После 28 дней лечения животных умерщвляли, мышцы тазового дна извлекали под увеличением и взвешивали на микровесах. На указанной фигуре приведена суммарная масса COC, Pc и IL. Суммарная масса мышцы, поднимающей задний проход и копчиковой мышцы, отражает тенденцию, наблюдаемую в самых крупных мышцах (COC), в соответствии с которой овариэктомия приводила к ~50% снижению массы. N=10-14 (извлекали и взвешивали мышцы тазового дна с обеих сторон). Все группы статистически значимо отличались от животных после овариэктомии. Однако различий между группами лечения выявлено не было. Р-значения явно указывают на то, что соединение формулы VIII более эффективно, чем соединение формулы IX. Исследуя мышцы под микроскопом, ветеринар обнаружил, что копчиковые мышцы животных, получавших лечение селективными модуляторами андрогеновых рецепторов, были сильнее васкуляризированы, чем мышцы контрольных животных с удаленными яичниками, и даже чем мышцы интактных контрольных животных.
На фигуре 9 показана экспрессия миостатина и FBxo32 в РНК, выделенной из копчиковой мышцы после 28 дней лечения. Экспрессию миостатина и FBxo32 измеряли с использованием ПЦР в реальном времени и нормировали по GAPDH.
Следует понимать, что для простоты и ясности иллюстрации элементы, показанные на фигурах, могут быть изображены непропорционально. Например, в целях ясности размеры некоторых элементов могут быть увеличены по сравнению с другими элементами. Кроме того, в тех случаях, когда это уместно, на фигурах могут использоваться одинаковые численные значения для обозначения соответствующих аналогичных элементов.
Подробное описание изобретения
Нижеследующее подробное описание содержит многочисленные частные детали, целью которых является обеспечение полного понимания изобретения. Однако для специалиста в данной области понятно, что изобретение можно осуществить без этих конкретных деталей. С другой стороны, хорошо известные способы, процедуры и компоненты не описываются подробно, чтобы не затруднять понимание изобретения.
Настоящее изобретение обеспечивает способы лечения, предотвращения, уменьшения или подавления урологических нарушений. В другом варианте реализации это изобретение обеспечивает способ: (a) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи (НМ), (b) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна; и (c) снижения частоты или уменьшения тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (d) обеспечения замещения андрогенов у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (e) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания кала, (g) увеличения размера и/или массы мышц тазового дна, (h) увеличения размера/силы сфинктера уретры, (i) улучшения профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; и (j) улучшения давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении, включающий введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, согласно настоящему изобретению.
В одном варианте реализации неограничивающие примеры урологических нарушений включают: недержание мочи, недержание мочи при напряжении, психогенное недержание мочи, императивное недержание мочи, рефлекторное недержание мочи, недержание мочи при переполнении, нейрогенное недержание мочи, недержание мочи при напряжении вызванное дисфункцией мочевого пузыря, гиперактивный/гиперчувствительный мочевой пузырь, энурез, ночную полиурию, цистит, уролиты, дисфункцию предстательной железы, дисфункцию почек или инфекцию мочевыводящих путей.
Урологические нарушения включают гиперактивность мочевого пузыря, которая может быть следствием нестабильности детрузора или гиперрефлексии мочевого пузыря. Триггерные факторы могут включать повышенную активность переферических афферентных нервных окончаний или сниженный подавляющий контроль в центральной нервной системе и/или в периферических ганглиях. Изменения структуры или функции мышцы-детрузора, такие как возбудимость мышечных клеток вследствие денервации, также может играть некоторую роль в патогенезе нарушений, связанных с наполнением.
В одном варианте реализации урологические нарушения представляют собой заболевания мочевого пузыря, включая следующие, но не ограничиваясь ими: гиперактивный/гиперчувствительный мочевой пузырь, недержание мочи при переполнении, недержание мочи при напряжении вызванное дисфункцией мочевого пузыря, уретры или центральной/переферической нервной системы.
В одном варианте реализации урологические нарушения относятся к нарушениям предстательной железы, включая «дисфункцию предстательной железы», которая представляет собой абнормальное состояние, возникающее в тазовой области мужчин, характеризующееся, например, половой дисфункцией у мужчин и/или симптомами, связанными с мочеиспусканием, но не ограничиваясь ими. Это нарушение может проявляться в форме воспаления мочеполовой системы (например, воспаления гладкомышечных клеток), как при некоторых распространенных заболеваниях предстательной железы, включая простатит, доброкачественную гиперплазию предстательной железы и рак, например, аденокарциному или карциному предстательной железы.
В одном варианте реализации урологические нарушения относятся к дисфункциям почек, кистозным заболеванием мозгового вещества почек, системным заболеваниям и заболеваниям, поражающим канальцы и интерстиций, а также к другим сосудистым нарушениям.
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у субъекта, включающий введение указанному субъекту соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, согласно настоящему изобретению или его оптического изомера, фармацевтически приемлемой соли, гидрата или любой их комбинации.
В другом варианте реализации недержание мочи включает недержание при напряжении, императивное недержание, рефлекторное недержание, недержание переполнения, нейрогенное недержание мочи, психогенное недержание или их комбинацию. В другом варианте реализации недержание мочи представляет собой недержание при напряжении. В другом варианте реализации недержание мочи представляет собой императивное недержание. В другом варианте реализации недержание мочи представляет собой рефлекторное недержание. В другом варианте реализации недержание мочи представляет собой недержание переполнения. В другом варианте реализации недержание мочи представляет собой психогенное недержание.
Недержание кала представляет собой неожиданный выход твердого или жидкого стула или слизи из прямой кишки. Причиной недержания кала может быть повреждение одной или обеих мышц сфинктера. В случае повреждения или ослабления этих мышц, называемых внутренней и внешней мышцами сфинктера, они могут оказаться недостаточно сильны для того, чтоб удерживать анус закрытым и предотвращать вытекание кала. Причинами повреждения сфинктеров могут быть травма, повреждения при родах, операция по удалению рака и операция по удалению геморроя.
В одном варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают лечение, предотвращение, уменьшение или подавление недержания кала, включающее введение соединения формул I-XIV согласно настоящему изобретению.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложен способ снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию; включающий введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, согласно настоящему изобретению или его оптический изомер, фармацевтически приемлемая соль, гидрат, или любая их комбинация.
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна у субъекта; включающий введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, согласно настоящему изобретению или его оптический изомер, фармацевтически приемлемая соль, гидрат, или любая их комбинация.
В другом варианте реализации дисфункции тазового дна включают цистоцеле, пролапс влагалища, влагалищную грыжу, ректоцеле, энтероцеле, утероцеле, уретроцеле или их комбинацию. В другом варианте реализации дисфункция тазового дна представляет собой цистоцеле. В другом варианте реализации дисфункция тазового дна представляет собой пролапс влагалища. В другом варианте реализации дисфункция тазового дна представляет собой влагалищную грыжу. В другом варианте реализации дисфункция тазового дна представляет собой ректоцеле. В другом варианте реализации дисфункция тазового дна представляет собой энтероцеле. В другом варианте реализации дисфункция тазового дна представляет собой утероцеле. В другом варианте реализации дисфункция тазового дна представляет собой уретроцеле.
Женщины после гистерэктомии/овариэктомии обычно получают дополнительные эстрогены. У многих женщин развиваются симптомы недостатка тестостерона, от которых они страдают и которые не распознаются и не лечатся. Лечение дополнительным тестостероном у женщин после гистерэктомии/овариэктомии не только может улучшить качество жизни в терминах сексуального либидо, сексуального удовольствия и хорошего самочувствия, но, как и дополнительный эстроген, способствует предотвращению остеопороза и недержания мочи. Селективные ингибиторы андрогеновых рецепторов могут обеспечить замещение андрогенов у женщин после гистерэктомии/овариэктомии без гепатотоксических или вирилизирующих побочных эффектов, присущих тестостерону и другим стероидным андрогенам.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложен способ повышения уровней андрогенов у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, включающий введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, согласно настоящему изобретению или его оптического изомера, приемлемой соли, гидрата или любой их комбинации. В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию.
В одном варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, согласно настоящему изобретению в комбинации с физиотерапией недержания мочи при напряжении. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в комбинации с хирургическими методами лечения недержания мочи при напряжении. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в комбинации со слингами (петлями) для лечения недержания мочи и другими медицинскими устройствами для лечения недержания мочи при напряжении.
Соединения, являющиеся селективными модуляторами андрогеновых рецепторов
(SARM)
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное в: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) повышении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении, представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы I, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
I
2
X представляет собой связь, O, CH, NH, S, Se, PR, NO или NR;
G представляет собой O или S;
3
T представляет собой OH, OR, -NHCOCH, или NHCOR;
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF,CHF,CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
1
3
2
2
3
2
3
2
3
R представляет собой CH, CHF,CHF,CF, CHCH, или CFCF;
2
3
3
2
3
3
2
2
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CH, CF, OH, CN, NO, NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, алкил, арилалкил, OR, NH, NHR, N(R) или SR;
3
2
3
3
3
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CN, NO, COR, COOH, CONHR, CF, Sn(R), или R вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, образует систему конденсированных колец, представленную структурой:
или
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой CF,F, Br, Cl, I, CN или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
n представляет собой целое число в диапазоне 1-4; и
m представляет собой целое число в диапазоне 1-3.
1
3
2
3
3
2
2
2
В одном варианте реализации G в формуле I представляет собой O. В другом варианте реализации X в формуле I представляет собой O. В другом варианте реализации T в формуле I представляет собой OH. В другом варианте реализации R в формуле I представляет собой CH. В другом варианте реализации Z в формуле I представляет собой NO. В другом варианте реализации Z в формуле I представляет собой CN. В другом варианте реализации Y в формуле I представляет собой CF. В другом варианте реализации Y в формуле I представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле I представляет собой CN. В другом варианте реализации Q в формуле I представляет собой галоген. В другом варианте реализации Q в формуле I представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле I представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле I представляет собой NHCOCH. В другом варианте реализации Q в формуле I представляет собой CN, и R представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле I представляет собой Cl и R представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле I находится в параположении. В другом варианте реализации Z в формуле I находится в параположении. В другом варианте реализации Y в формуле I в метаположении. В одном варианте реализации заместитель Qнаходится в параположении кольца B, а заместитель Rв метаположении кольца B.
3
Заместители Z, Y и R могут находиться в любом положении кольца, несущего эти заместители (далее «кольцо A»). В одном варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Y в метаположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A, и заместитель Y в метаположении кольца A.
2
2
Заместители Q и R могут находиться в любом положении кольца, несущего эти заместители (далее, «кольцо B»). В одном варианте реализации заместитель Qнаходится в параположении кольца B. В другом варианте реализации заместитель Rв метаположении кольца B. В другом варианте реализации заместитель Qпредставляет собойCN и находится в параположении кольца B.
2
3
В настоящем документе предполагается, что все целые числа m и n больше 1, заместители R и R не ограничиваются одним конкретным заместителем, а могут представлять собой любую комбинацию заместителей, перечисленных выше.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IA, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
,
IA
где
2
3
3
2
3
3
2
2
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CH, CF, OH, CN, NO, NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, алкил, арилалкил, OR, NH, NHR, N(R) или SR;
3
2
3
3
3
R представляет собой H, F, Cl, Br, I, CN, NO, COR, COOH, CONHR, CF, Sn(R), или R вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, образует систему конденсированных колец, представленную структурой:
или
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой CF,F, Br, Cl, I, CN или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С:
n представляет собой целое число в диапазоне 1-4; и
m представляет собой целое число в диапазоне 1-3.
2
3
3
2
2
В другом варианте реализации Z в формуле IA представляет собой NO. В другом варианте реализации Z в формуле IA представляет собой CN. В другом варианте реализации Y в формуле IA представляет собой CF. В другом варианте реализации Y в формуле IA представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле IA представляет собой CN. В другом варианте реализации Q в формуле IA представляет собой галоген. В другом варианте реализации Q в формуле IA представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле IA представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле IA представляет собой NHCOCH. В другом варианте реализации Q в формуле IA представляет собой CN, и R представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле IA представляет собой Cl, и R представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле IA находится в параположении. В другом варианте реализации Z в формуле IA находится в параположении. В другом варианте реализации Y в формуле IA в метаположении.
3
Заместители Z, Y и R могут находиться в любом положении кольца, несущего эти заместители (далее «кольцо A»). В одном варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Y в метаположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A, и заместитель Y в метаположении кольца A.
2
2
2
Заместители Q и R могут находиться в любом положении кольца, несущего эти заместители (далее, «кольцо B»). В одном варианте реализации заместитель Qнаходится в параположении кольца B. В другом варианте реализации заместитель Rв метаположении кольца B. В одном варианте реализации заместитель Qнаходится в параположении кольца B, а заместитель Rв метаположении кольца B. В другом варианте реализации заместитель Qпредставляет собой CN и находится в параположении кольца B.
2
3
В настоящем документе предполагается, что все целые числа m и n больше 1, заместители R и R не ограничиваются одним конкретным заместителем, а могут представлять собой любую комбинацию заместителей, перечисленных выше.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы II, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
II
2
где X представляет собой связь, O, CH, NH, Se, PR, или NR;
G представляет собой O или S;
3
T представляет собой OH, OR, -NHCOCH, или NHCOR;
2
Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой I, CF, Br, Cl или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, HF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH; и
1
3
3
2
3
2
3
R представляет собой CH, CF, CHCH, или CFCF.
1
3
2
3
3
1
3
3
1
3
2
3
3
В одном варианте реализации G в формуле II представляет собой O. В другом варианте реализации X в формуле II представляет собой O. В другом варианте реализации T в формуле II представляет собой OH. В другом варианте реализации R в формуле II представляет собой CH. В другом варианте реализации Z в формуле II представляет собой NO. В другом варианте реализации Z в формуле II представляет собой CN. В другом варианте реализации Y в формуле II представляет собой CF. В другом варианте реализации Y в формуле II представляет собой галоген. В другом варианте реализации Y в формуле II представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле II представляет собой CN. В другом варианте реализации Q в формуле II представляет собой галоген. В другом варианте реализации Q в формуле II представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле II представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле II представляет собой NHCOCH. В другом варианте реализации Q в формуле II находится в параположении. В другом варианте реализации Z в формуле II находится в параположении. В другом варианте реализации Y в формуле II в метаположении. В другом варианте реализации G в формуле II представляет собой O, T представляет собой OH, R представляет собой CH, X представляет собой O, Z представляет собой CN, Y представляет собой CF или галоген и Q представляет собой CN, F, или Cl. В другом варианте реализации G в формуле II представляет собой O, T представляет собой OH, R представляет собой CH, X представляет собой O, Z представляет собой NO, Y представляет собой CF и Q представляет собой NHCOCH, F или Cl.
Заместители Z и Y могут находиться в любом положении кольца, несущего эти заместители (далее «кольцо A»). В одном варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Y в метаположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A, и заместитель Y в метаположении кольца.
Заместитель Q может находиться в любом положении кольца, несущего этот заместитель (далее, «кольцо B»). В одном варианте реализации заместитель Qнаходится в параположении кольца B. В другом варианте реализации заместитель Qпредставляет собой CN и находится в параположении кольца B.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры у субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IIA, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
,
IIA
2
где Z представляет собой NO, CN, COR, COOH или CONHR;
3
3
Y представляет собой I, CF, Br, Cl или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
и
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF, CHF, CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH.
2
3
3
В другом варианте реализации Z в формуле IIA представляет собой NO. В другом варианте реализации Z в формуле IIA представляет собой CN. В другом варианте реализации Y в формуле IIA представляет собой CF. В другом варианте реализации Y в формуле IIA представляет собой галоген. В другом варианте реализации Y в формуле IIA представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле IIA представляет собой CN. В другом варианте реализации Q в формуле IIA представляет собой галоген. В другом варианте реализации Q в формуле IIA представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле IIA представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле IIA представляет собой NHCOCH. В другом варианте реализации Q в формуле IIA находится в параположении. В другом варианте реализации Z в формуле IIA находится в параположении. В другом варианте реализации Y в формуле IIA в метаположении.
Заместители Z и Y могут находиться в любом положении кольца, несущего эти заместители (далее «кольцо A»). В одном варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Y в метаположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A, и заместитель Y в метаположении кольца A.
Заместитель Q может находиться в любом положении кольца, несущего этот заместитель (далее, «кольцо B»). В одном варианте реализации заместитель Qнаходится в параположении кольца B. В другом варианте реализации заместитель Qпредставляет собой CN и находится в параположении кольца B.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы III, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
,
III
где
2
Z представляет собой NO, CN, COOH, COR, NHCOR или CONHR;
3
3
3
Y представляет собой CF, F, I, Br, Cl, CN, C(R) или Sn(R);
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
и
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF,CHF,CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH.
2
3
3
3
2
3
3
В одном варианте реализации Z в формуле III представляет собой NO. В другом варианте реализации Z в формуле III представляет собой CN. В другом варианте реализации Y в формуле III представляет собой CF. В другом варианте реализации Y в формуле III представляет собой Cl. В другом варианте реализации Y в формуле III представляет собой галоген. В другом варианте реализации Q в формуле III представляет собой CN. В другом варианте реализации Q в формуле III представляет собой галоген. В другом варианте реализации Q в формуле III представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле III представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле III представляет собой NHCOCH. В другом варианте реализации Z представляет собой CN, Y представляет собой CF или галоген, и Q представляет собой CN, F, или Cl. В другом варианте реализации Z представляет собой NO, Y представляет собой CF, и Q представляет собой NHCOCH, F или Cl.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении, представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, формулы IV, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
,
IV
2
где X представляет собой связь, O, CH, NH, S, Se, PR, NO или NR;
G представляет собой O или S;
1
3
2
2
3
2
3
2
3
R представляет собой CH, CHF,CHF,CF, CHCH, или CFCF;
3
T представляет собой OH, OR, -NHCOCH, или NHCOR;
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF,CHF,CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH;
A представляет собой кольцо, выбранное из:
и
B представляет собой кольцо, выбранное из:
и
2
Z представляет собой NO, CN, COOH, COR, NHCOR или CONHR;
3
3
3
Y представляет собой CF, F, I, Br, Cl, CN, C(R)илиSn(R);
1
2
3
3
3
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q и Q независимо представляют собой водород, алкил, галоген, CF, CN, C(R), Sn(R), N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR, или
или
;
3
4
3
3
3
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
Q и Q независимо друг от друга представляют собой водород, алкил, галоген, CF, CN, C(R), Sn(R), N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
1
W представляет собой O, NH, NR, NO или S; и
2
W представляет собой N или NO.
1
3
2
3
1
1
1
1
3
1
1
3
2
3
1
3
В одном варианте реализации G в формуле IV представляет собой O. В другом варианте реализации X в формуле IV представляет собой O. В другом варианте реализации T в формуле IV представляет собой OH. В другом варианте реализации R в формуле IV представляет собой CH. В другом варианте реализации Z в формуле IV представляет собой NO. В другом варианте реализации Z в формуле IV представляет собой CN. В другом варианте реализации Y в формуле IV представляет собой CF. В другом варианте реализации Y в формуле IV представляет собой галоген. В другом варианте реализации Y в формуле IV представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле II представляет собой CN. В другом варианте реализации Q в формуле IV представляет собой F. В другом варианте реализации Q в формуле IV представляет собой Cl. В другом варианте реализации Q в формуле IV представляет собой NHCOCH. В другом варианте реализации Q в формуле IV находится в параположении. В другом варианте реализации Z в формуле IV находится в параположении. В другом варианте реализации Y в формуле IV в метаположении. В другом варианте реализации G в формуле IV представляет собой O, T представляет собой OH, R представляет собой CH, X представляет собой O, Z представляет собой NO или CN, Y представляет собой CF или галоген, и Q представляет собой CN, F, Cl или NHCOCH.
Заместители Z и Y могут находиться в любом положении кольца, несущего эти заместители (далее «кольцо A»). В одном варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Y в метаположении кольца A. В другом варианте реализации заместитель Z находится в параположении кольца A, и заместитель Y в метаположении кольца A.
1
2
1
2
1
2
1
2
Заместители Q и Q могут находиться в любом положении кольца, несущего эти заместители (далее, «кольцо B»). В одном варианте реализации заместитель Qнаходится в параположении кольца B. В другом варианте реализации заместитель Q представляет собой H. В другом варианте реализации заместитель Qнаходится в параположении кольца B, и заместитель Q представляет собой H. В другом варианте реализации заместитель Qпредставляет собой CN и находится в параположении кольца B, и заместитель Q представляет собой H, Cl, или F.
В другом варианте реализации кольцо A и кольцо B не могут одновременно являться бензольными кольцами.
Как предусмотрено в настоящем документе, другие конкретные варианты реализации соединений согласно настоящему изобретению, включенные в объем настоящего изобретения, которые пригодны для: (a) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления урологических нарушений; (b) лечения, предотвращения, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ); (c) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна и/или (d) снижения частоты или уменьшения тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания; (ii) средняя ночная частота мочеиспускания; (iii) общие эпизоды недержания мочи; (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию; (e) обеспечения андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию; (f) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию; (g) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания кала; (h) увеличения размера и/или массы мышц тазового дна; (i) увеличения размера/силы сфинктера уретры; (j) улучшения профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшения давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении, представляют собой соединения, являющиеся селективными ингибиторами андрогеновых рецепторов, формул V или VI, и/или их аналоги, производные, изомеры, метаболиты, фармацевтически приемлемые соли, фармацевтические продукты, гидраты, N-оксиды, кристаллы, полиморфы, пролекарства или любые комбинации перечисленного:
V
или
,
VI
2
3
3
3
3
2
3
2
2
2
где Q представляет собой CN, алкил, галоген, N(R), NHCOCH, NHCOCF, NHCOR, NHCONHR, NHCOOR, OCONHR, CONHR, NHCSCH, NHCSCF, NHCSR, NHSOCH, NHSOR, OR, COR, OCOR, OSOR, SOR или SR;
или Q вместе с бензольным кольцом, к которому он присоединен, представляет собой систему конденсированных колец, представленную структурой A, B или C:
<b></b>А
В
С;
и
2
2
3
2
3
R представляет собой алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF,CHF,CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или OH.
3
В одном варианте реализации Q в формулах V или VI представляет собой CN. В одном варианте реализации Q в формулах V или VI представляет собой галоген. В одном варианте реализации Q в формулах V или VI представляет собой F. В одном варианте реализации Q в формулах V или VI представляет собой Cl. В одном варианте реализации Q в формулах V или VI представляет собой NHCOCH.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, представленное структурой формулы VII, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
,
VII
3
где Z представляет собой Cl или CF.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное в: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, представленное структурой формулы VIII, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
VIII
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, представленное структурой формулы IX, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
IX.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное в: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, представленное структурой формулы X, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
X.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, представленное структурой формулы XI, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
XI.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, представленное структурой формулы XII, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
XII.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, представленное структурой формулы XIII, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
XIII.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению, эффективное при: (a) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении урологических нарушений, (b) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи (НМ), (c) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении дисфункций тазового дна и/или (d) снижении частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечении андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечении, предотвращении, уменьшении или подавлении недержания кала, (h) увеличении размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличении размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшении профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшении давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении; представляет собой соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, представленное структурой формулы XIV, и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, кристалл, полиморф, пролекарство или любую их комбинацию:
XIV.
В одном варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение аналога соединения формул I, IA, II, IIA, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII и/или XIV (I-XIV). В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение производного соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение изомера соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение метаболита соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение фармацевтически приемлемой соли соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение фармацевтического продукта соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение гидрата соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение N-оксида соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение полиморфа соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение кристалла соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение пролекарства соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение комбинации любого из аналога, производного, метаболита, изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, гидрата, N-оксида, полиморфа, кристалла или пролекарства соединения формул I-XIV.
В одном варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формул I-XIV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы I. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы IA. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы II. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы IIA. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы III. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы IV. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы V. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы VI. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы VII. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы VIII. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы IX. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы X. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы XI. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы XII. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы XIII. В другом варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение соединения формулы XIV.
Соединения согласно настоящему изобретению, либо отдельно, либо в составе фармацевтической композиции, полезны для: (a) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления урологических нарушений, (b) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи (НМ), (c) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна и/или (d) снижения частоты или уменьшении тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к лечению урологических нарушений. Соответственно, настоящее изобретение обеспечивает способ: (a) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи (НМ), (b) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна и/или (c) снижения частоты или уменьшения тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию; путем введения указанному субъекту терапевтически эффективного количества селективного модулятора андрогеновых рецепторов формул I-XIV согласно настоящему изобретению и/или его аналога, производного, изомера, метаболита, фармацевтически приемлемого соли, фармацевтического продукта, гидрата, N-оксида, кристалла, полиморфа, пролекарства или любой комбинации перечисленного, как описано в настоящем документе.
В настоящем документе термин «изомер» включает оптические изомеры и аналоги, структурные изомеры и аналоги, конформационные изомеры и аналоги и т.п., но не ограничивается перечисленным. В настоящем тексте термин «изомер» может также называться «энантиомером» с сохранением всех качеств и свойств «изомера».
В одном варианте реализации настоящее изобретение включает применение различных оптических изомеров селективного модулятора андрогеновых рецепторов. Для специалиста понятно, что селективные модуляторы андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению содержат по меньшей мере один хиральный центр. Соответственно, селективные модуляторы андрогеновых рецепторов, применяемые в способах согласно настоящему изобретению, могут существовать и выделяться в оптически активных или рацемических формах. Некоторые соединения также могут проявлять полиморфизм. Предполагается, что настоящее изобретение охватывает любые рацемические, оптически активные, полиморфные или стереоизомерные формы или любые их комбинации, которые обладают свойствами, полезными для лечения связанных с андрогенами состояний, описанных в настоящем документе. В одном из вариантов реализации селективные модуляторы андрогеновых рецепторов являются чистыми (R)-изомерами. В другом варианте реализации селективные модуляторы андрогеновых рецепторов являются чистыми (S)-изомерами. В другом варианте реализации селективные модуляторы андрогеновых рецепторов представляют собой смесь (R)- и (S)-изомеров. В другом варианте реализации селективные модуляторы андрогеновых рецепторов представляют собой рацемическую смесь, содержащую равное количество (R)- и (S)-изомеров. В данной области хорошо известно, как получить оптически активные формы (например, путем разделения рацемической формы с использованием методик перекристаллизации, путем синтеза из оптически активных исходных материалов, путем хирального синтеза или хроматографического разделения с использованием хиральной неподвижной фазы).
Изобретение включает «фармацевтически приемлемые соли» соединений согласно настоящему изобретению, которые могут быть получены путем осуществления реакции соединения согласно настоящему изобретению с кислотой или основанием.
Изобретение включает фармацевтически приемлемые соли аминозамещенных соединений с органическими и неорганическими кислотами, например, лимонной кислотой и хлороводородной кислотой. Изобретение также включает N-оксиды амин-содержащих заместителей соединений, описанных в настоящем документе. Фармацевтически приемлемые соли также могут быть получены из фенольных соединений путем обработки неорганическими основаниями, например, гидроксидом натрия. Также могут быть получены сложные эфиры указанных фенольных соединений с алифатическими и ароматическими карбоновым кислотами, например, сложные эфиры уксусной кислоты и бензойной кислоты.
Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединений формул I-XIV могут быть получены из неорганической кислоты или из органической кислоты. В одном варианте реализации примеры неорганических солей соединений согласно настоящему изобретению представляют собой бисульфаты, бораты, бромиды, хлориды, гемисульфаты, гидроброматы, гидрохлораты, 2-гидроксиэтилсульфонаты (гидроксиэтансульфонаты), йодаты, йодиды, изотионаты, нитраты, персульфаты, фосфаты, сульфаты, сульфаматы, сульфанилаты, сульфоновые кислоты (алкилсульфонаты, арилсульфонаты, замещенные галогеном алкилсульфонаты, замещенные галогеном арилсульфонаты), сульфонаты и тиоцианаты.
В одном варианте реализации примеры органических солей соединений согласно настоящему изобретению могут быть выбраны из алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоциклических и сульфоновых классов органических кислот, примерами которых являются ацетаты, аргинины, аспартаты, аскорбаты, адипаты, антранилаты, альгенаты, алканкарбоксилаты, замещенные алкнкарбоксилаты, альгинаты, бензолсульфонаты, бензоаты, бисульфаты, бутираты, бикарбонаты, битартраты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, циклогексилсульфаматы, циклопентанпропионаты, кальцийэдетаты, камсилаты, карбонаты, клавуланаты, циннаматы, дикарбоксилаты, диглюконаты, додецилсульфонаты, дигидрохлориды, деканоаты, энантаты, этансульфонаты, эдетаты, эдисилаты, эстолаты, эзилаты, фумараты, формеаты, фториды, галактуронаты глюконаты, глутаматы, гликолаты, глюкорат, глюкогептаноаты, глицерофосфаты, глюцептаты, гликолиларсанилаты, глютараты, глутаматы, гептаноаты, гексаноаты, гидроксималеаты, гидроксикарбоновые кислоты, гексилрезорцинаты, гидроксибензоаты, гидроксинафтоат, гидрофлюораты, лактаты, лактобионаты, лаураты, малаты, малеаты, метиленбис(бета-оксинафтоат), малонаты, соли миндальной кислоты, мезилаты, метансульфонаты, метилюромиды, метилнитраты, метилсульфонаты, монокалиймалеаты, мукаты, монокарбоксилаты, нафталинсульфонаты, 2-нафталинсульфонаты, никотинаты, напсилаты, N-метилглюкамины, оксалаты, октаноаты, олеаты, памоаты, фенилацетаты, пикраты, фенилбензоаты, пивалаты, пропионаты, фталаты, фенилацетат, пектинаты, фенилпропионаты, пальмитаты, пантотенаты, полигалактураты, пируваты, соли хинной кислоты, салицилаты, сукцинаты, стеараты, сульфанилат, субацетаты, тартраты, теофиллинацетаты, н-толуолсульфонаты (тозилаты), трифторацетаты, терефталаты, таннаты, теоклаты, тригалоацетаты, триэтиодид, трикарбоксилаты, ундеканоаты и соли валериановой кислоты.
В одном варианте реализации соли могут быть получены обычными средствами, такими как осуществление реакции продукта в форме свободного основания или свободной кислоты с одним или более эквивалентами подходящей кислоты или основания или среде, в которой соль не растворяется, в растворителе, таком как вода, который удаляют под вакуумом или сублимацией, или путем обмена ионов существующей соли на другой ион или с использованием подходящей ионообменной смолы.
Далее настоящее изобретение включает производные селективных модуляторов андрогеновых рецепторов. Термин «производные» представляет собой эфирные производные, кислотные производные, амидные производные, сложноэфирные производные и т.п., но не ограничивается перечисленным. Дополнительно настоящее изобретение включает гидраты селективных модуляторов андрогеновых рецепторов. Термин «гидрат» представляет собой гемигидрат, моногидрат, дигидрат, тригидрат и т.п., но не ограничивается перечисленным.
Далее настоящее изобретение включает метаболиты селективных модуляторов андрогеновых рецепторов. Термин «метаболит» обозначает любое вещество, образующееся из другого вещества в результате метаболизма или метаболического процесса.
Далее настоящее изобретение включает фармацевтические продукты селективных модуляторов андрогеновых рецепторов. Термин «фармацевтический продукт» обозначает композицию, подходящую для фармацевтического применения (фармацевтическую композицию) в соответствии с приведенным в настоящем документе определением.
Далее настоящее изобретение включает пролекарства селективных модуляторов андрогеновых рецепторов. Термин «пролекарство» обозначает вещество, которое может превращаться in vivo в биологически активный агент в результате таких реакций как гидролиз, этерификация, деэтерификация, активация, образование соли и т.п.
Далее настоящее изобретение включает кристаллы селективных модуляторов андрогеновых рецепторов. Далее, согласно настоящему изобретению, предложены полиморфа селективных модуляторов андрогеновых рецепторов. Термин «кристалл» обозначает вещество в кристаллическом состоянии. Термин «полиморф» относится к конкретному кристаллическому состоянию вещества, обладающему определенными физическими свойствами, такими как рентгеноструктурные характеристики, ИК-спектры, температура плавления и т.п.
В одном варианте реализации настоящего изобретения способ: (a) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления урологических нарушений у субъекта, (b) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи (НМ) у субъекта, (c) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна у субъекта, (d) снижения частоты или уменьшения тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечения андроген-заместительной терапия у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания кала, (h) увеличения размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличения размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшения профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшения давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении, включающий этап введения субъекту селективного модулятора андрогеновых рецепторов формул I-XIV согласно настоящему изобретению и/или его аналога, производного, изомера, метаболита, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, гидрата, N-оксида, кристалла, полиморфа, пролекарства или любой комбинации перечисленного. В одном варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола.
2
2
3
2
3
Заместитель R определен в настоящем документе как алкил, галогеналкил, дигалогеналкил, тригалогеналкил, CHF,CHF,CF, CFCF, арил, фенил, галоген, алкенил или гидроксил (OH).
«Алкильная» группа относится к насыщенному алифатическому углеводороду, включая алкильные группы с линейной цепью, разветвленной цепью и циклические алкильные группы. В одном варианте реализации алкильная группа содержит 1-12 атомов углерода. В другом варианте реализации алкильная группа содержит 1-7 атомов углерода. В другом варианте реализации алкильная группа содержит 1-6 атомов углерода. В другом варианте реализации алкильная группа содержит 1-4 атомов углерода. Алкильная группа может быть незамещенной или замещенной одной или более группами, выбранными из галогена, гидрокси, алкокси, карбонила, амидо, алкиламидо, диалкиламидо, нитро, амино, алкиламино, диалкиламино, карбокси, тио и тиоалкила.
«Галогеналкильная» группа относится к алкильной группе, соответствующей определению выше, которая замещена одним или более атомами галогена, например, F, Cl, Br или I.
«Арильная» группа относится к ароматической группе, содержащей по меньшей мере одну карбоциклическую ароматическую группу или гетероциклическую ароматическую группу, которая может быть незамещенной или замещенной одной или более группами, выбранными из галогена, галогеналкила, гидрокси, алкокси, карбонила, амидо, алкиламидо, диалкиламидо, нитро, амино, алкиламино, диалкиламино, карбокси или тио или тиоалкила. Неограничивающими примерами арильных колец являются фенил, нафтил, пиранил, пирролил, пиразинил, пиримидинил, пиразолил, пиридинил, фуранил, тиофенил, тиазолил, имидазолил, изоксазолил и т.п.
«Гидроксильная» группа относится к группе OH. «Алкенильная» группа относится к группе, содержащей по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь. Гало-группа или галоген относится к F, Cl, Br или I.
«Арилалкильная» или «аралкильная» группа относится к алкилу, связанному с арилом, где алкил и арил соответствуют определениям выше. Примером аралкильной группы является бензильная группа.
Биологическая активность селективных модуляторов андрогеновых рецепторов
Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов, описанные в настоящем документе, представляют собой новый класс соединений согласно настоящему изобретению, обладающих анаболической активностью, в частности, в мышце, поднимающей задний проход, которая представляет собой мышцу тазового дна. Поскольку лечение недержания мочи включает повышение силы мышц, селективные модуляторы андрогеновых рецепторов применяются в настоящем изобретении для лечения дисфункций тазового дна и, в частности, недержания мочи. Соединения согласно настоящему изобретению обладают тканеспецифическим профилем миоанаболической активности нестероидных лигандов андрогеновых рецепторов. Кроме того, соединения согласно настоящему изобретению не ароматизируются, не обладают вирилизующими свойствами и для них не характерна кросс-реактивность с эстрогеновыми рецепторами (ER, ЭР) и прогестероновыми рецепторами PR(ПР).
Как предполагается в настоящем документе, замещенные соответствующим образом селективные модуляторы андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению полезны для: (a) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления урологических нарушений у субъекта, (b) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи (НМ) у субъекта, (c) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна у субъекта; или (d) снижения частоты или уменьшения тяжести по меньшей мере одного из следующих симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи: (i) средняя дневная частота мочеиспускания, (ii) средняя ночная частота мочеиспускания, (iii) общие эпизоды недержания мочи, (iv) эпизоды недержания при напряжении и (v) эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию, (e) обеспечения андроген-заместительной терапия у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (f) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, (g) лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания кала, (h) увеличения размера и/или массы мышц тазового дна, (i) увеличения размера/силы сфинктера уретры, (j) улучшения профиля уретрального давления субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении и (k) улучшения давления закрытия уретры субъекта, страдающего недержанием мочи при напряжении.
Длина уретры у женщин составляет приблизительно 4 см (а у мужчин длина уретры составляет 22 см). Она проходит в соединительной ткани, поддерживающей переднюю часть влагалища. Уретра состоит из внутренней эпителиальной выстилки, губчатого подслизистого слоя, среднего гладкомышечного слоя и внешнего слоя фиброэластической соединительной ткани. Губчатый подслизистый слой содержит густое сплетение сосудов, отвечающее, частично, за обеспечение нормального давления закрытия уретры. Гладкие мышцы уретры и фиброэластическая соединительная ткань, действуя по окружности, вносят свой вклад в давление закрытия, создаваемое подслизистым слоем. Соответственно, все структурные компоненты уретры, включая сфинктер, образованный поперечно-полосатыми мышцами, вносят свой вклад в ее способность адаптироваться и предотвращать подтекание мочи.
Женская уретра состоит из 4 отдельных слоев ткани, которые удерживают ее в закрытом состоянии. Внутренняя слизистая оболочка поддерживает влажность эпителия и мягкость уретры. Губчатая сосудистая оболочка образует слизь, играющую важную роль в функционировании слизистого барьера. Сдавливание средней мышечной оболочкой способствует работе механизма поддержания уретры закрытой в покое. Внешний серозно-мышечный слой вносит дополнительный вклад в давление закрытия, создаваемое мышечным слоем.
Гладкие мышцы уретры располагаются продольно и по косой, с небольшим количеством круговых волокон. Иннервация холинергическая и альфаадренергическая. Продольные мышцы возможно участвуют в укорочении и открытии уретры при опорожнении. Косые и круговые волокна вносят вклад в закрытие уретры в спокойном состоянии.
Уретра имеет сложную поперечно-полосатую мускулатуру. Нет единого мнения по поводу компонентов и их ориентации. Обеспечивающий волевое сокращение сфинктер уретры представляет собой группу круговых мышечных волокон и мышечные петли в тазовом дне. Самый внутренний слой, развитый в проксимальных двух третях уретры, составляет сфинктер уретры. Дистальнее преобладают сжиматель уретры и уретровагинальный сфинктер.
Эти две мышцы отходят от антеролатеральной части дистальной половины к дистальной трети уретры и перекрывают ее переднюю или вентральную поверхность. Эти поперечно-полосатые мышцы функционируют одним блоком. Благодаря тому, что они состоят в основном из медленно сокращающихся мышечных волокон, эти мышцы идеально выполняют функцию поддержания закрытого состояния уретры в покое. Вероятно, эти мышцы действительно поддерживают закрытое состояние уретры в покое, однако они особенно известны своим участием в произвольном закрытии и рефлекторном закрытии уретры в острых состояниях (например, при кашле, чихании, смехе) повышенного абдоминального давления. Медиальная пубовисцеральная часть комплекса, поднимающего задний проход, является основным звеном в активном закрытии шейки мочевого пузыря и уретры в аналогичных ситуациях.
Задняя стенка уретры лежит во внутритазовой соединительной ткани и поддерживается ей. Внутритазовая соединительная ткань представляет собой область, связанную с мембраной промежности вентрально и латерально относительно мышц, поднимающих задний проход, дуговым тазовым сухожилием fascia pelvis (тазовая фасция). Сухожилие fascia pelvis представляющее собой уплотнение соединительной ткани, которое лежит с двух сторон от нижней части лобковой кости вдоль соединения фасции внутренней запирательной мышцы и мышцы, поднимающей задний проход, собирается вблизи седалищной ости. Эта ткань обеспечивает дополнительную поддержку уретры, шейки мочевого пузыря и основания мочевого пузыря.
Считают, что дефекты этой ткани приводят к развитию цистоцеле и гиперподвижности уретры. Считается, что поддержку этой области и тазового дна в целом обеспечивает, в первую очередь, комплекс мышцы, поднимающей задний проход. Считается, что в состоянии покоя основным механизмом поддержки является постоянный тонус, обеспечиваемый медленно сокращающимися мышечными волокнами. Как и группы мышц сфинктера уретры, быстро сокращающиеся волокна, мышцы, поднимающей задний проход, вносят вклад в быструю остановку потока мочи в ходе произвольной защитной реакции. При резком повышении абдоминального давления сильные сокращения этих быстро сокращающихся волокон леватора поднимают тазовое дно и стягивают слои соединительной такни, что обеспечивает поддержку тазового дна.
В отличие от анатомии мужчин, у которых шейка мочевого пузыря и простата имеют внутренний мочевой сфинктер, у женщин внутренний сфинктер является, скорее, функциональным, а не анатомическим. Внутренний сфинктер у женщин образован шейкой пузыря и проксимальным отделом уретры. Зато внешний сфинктер у женщин (т.е., рабдосфинктер) обладает очень сильным действием на женскую уретру.
Женская уретра имеет внутренний сфинктер и внешний сфинктер. Внутренний сфинктер представляет собой скорее функциональной понятие, чем обособленное анатомическое образование. Внешний сфинктер – это та мышца, которую укрепляют упражнениями Кегеля.
В одном варианте реализации неограничивающие примеры «урологического нарушения» согласно настоящему документу включают недержание мочи, недержание мочи при напряжении, психогенное недержание мочи, императивное недержание мочи, рефлекторное недержание мочи, недержание мочи при переполнении, нейрогенное недержание мочи, недержание мочи при напряжении, вызванные дисфункцией мочевого пузыря, гиперактивностью/гиперчувствительностью мочевого пузыря, энурез, ночную полиурию, цистит, уролиты, дисфункцию предстательной железы, дисфункцию почек или инфекцию урогенитального тракта.
В одном варианте реализации неограничивающие примеры «недержания мочи» в настоящем документе включают недержание при напряжении, императивное недержание, рефлекторное недержание, недержание переполнения, нейрогенное недержание мочи, психогенное недержание или их комбинацию.
В одном варианте реализации неограничивающие примеры «дисфункция тазового дна» в настоящем документе включают цистоцеле, пролапс влагалища, влагалищную грыжу, ректоцеле, энтероцеле, утероцеле, и/или уретроцеле.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу лечения, предотвращения, уменьшения или подавления урологических нарушений у субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации урологические нарушения включают недержание мочи, недержание мочи при напряжении, психогенное недержание мочи, императивное недержание мочи, рефлекторное недержание мочи, недержание мочи при переполнении, нейрогенное недержание мочи, недержание мочи при напряжении, вызванное дисфункцией мочевого пузыря, гиперактивностью/гиперчувствительностью мочевого пузыря, энурез, ночную полиурию, цистит, уролиты, дисфункцию предстательной железы, дисфункцию почек или инфекцию урогенитального тракта. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину в постменопаузе. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую гистерэктомию. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую удаление яичников. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи (НМ) у субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации недержание мочи представляет собой недержание при напряжении, императивное недержание, рефлекторное недержание, недержание переполнения, нейрогенное недержание мочи, психогенное недержание или любую их комбинацию. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину в постменопаузе. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую гистерэктомию. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую удаление яичников. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи при напряжении (SUI, НМПН) у субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину в постменопаузе. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую гистерэктомию. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую удаление яичников. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу лечения, предотвращения, уменьшения или подавления дисфункций тазового дна у субъекта включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации дисфункция тазового дна представляет собой цистоцеле, пролапс влагалища, влагалищную грыжу, ректоцеле, энтероцеле, утероцеле, уретроцеле или любую их комбинацию. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину в постменопаузе. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую гистерэктомию. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую удаление яичников. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу снижения частоты или уменьшения тяжести симптомов у субъекта, страдающего недержанием мочи, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации симптомы представляют собой высокую среднюю дневную частоту мочеиспускания, высокую среднюю ночную частоту мочеиспускания, эпизоды недержания мочи, эпизоды недержания при напряжении, эпизоды неотложных позывов к мочеиспусканию или любую их комбинацию. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину в постменопаузе. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую гистерэктомию. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую удаление яичников. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу обеспечения андроген-заместительной терапии у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания мочи у женщин, перенесших гистерэктомию и овариэктомию, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу лечения, предотвращения, уменьшения или подавления недержания кала у субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину в постменопаузе. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую гистерэктомию. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую удаление яичников. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу увеличения размера и/или массы мышц тазового дна у субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации мышцы включают мышцы, поднимающие задний проход. В другом варианте реализации мышцы включают седалищно-копчиковую мышцу. В другом варианте реализации мышцы включают копчиковую мышцу (COC). В другом варианте реализации мышцы включают лобково-копчиковую мышцу (Pc, ЛК). В другом варианте реализации мышцы включают подвздошно-копчиковую мышцу (ПК, IL). В другом варианте реализации мышцы включают мышцу, поднимающую задний проход, седалищно-копчиковую мышцу, копчиковую мышцу (COC), лобково-копчиковую мышцу (Pc), подвздошно-копчиковую мышцу (IL) или любую их комбинацию. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъекта женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъекта мужского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину в постменопаузе. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую гистерэктомию. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую удаление яичников. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к способу увеличения размера и/или массы сфинктера уретры у субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, являющегося селективным модулятором андрогеновых рецепторов, в соответствии с настоящим изобретением. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект женского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой субъект мужского пола. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину в постменопаузе. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую гистерэктомию. В другом варианте реализации субъект представляет собой женщину, перенесшую овариэктомию. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы IX. В другом варианте реализации соединение представляет собой соединение формулы VIII. В другом варианте реализации терапевтически эффективное количество составляет 3 мг в день.
Стероидные гормоны являются одним из примеров маленьких гидрофобных молекул, которые диффундируют непосредственно через плазматическую мембрану клетки-мишени и связываются с внутриклеточными сигнальными рецепторами. Эти рецепторы имеют сходную структуру и образуют суперсемейство внутриклеточных рецепторов (или суперсемейство рецепторов стероидных гормонов). Рецепторы стероидных гормонов включают следующие рецепторы, но не ограничиваются ими: прогестероновые рецепторы, эстрогеновые рецепторы, андрогеновые рецепторы, рецепторы глюкокортикоидов и рецепторы металлокортикоидов. В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к андрогеновым рецепторам. В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к агонистам андрогеновых рецепторов. В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к прогестероновым рецепторам. В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к антагонистам прогестероновых рецепторов.
Помимо связывания лиганда с рецептором, рецепторы можно заблокировать, чтобы предотвратить связывание с лигандом. Если соединение связывается с рецептором, трехмерная структура вещества вписывается в пространство, образуемое рецептором, в конфигурации кольцо-шар в шарнире. Чем лучше шар вписывается в кольцо, тем плотнее он удерживается. Это явление называется аффинностью. Если аффинность какого-либо соединения выше, чем у исходного гормона, оно будет конкурировать с этим гормоном и чаще связываться с сайтом связывания. После связывания сигнал через рецептор может быть передан в клетку, что вызовет тот или иной ответ клетки. Это называется активацией. После активации активированный рецептор напрямую регулирует транскрипцию конкретных генов. Но соединения и рецептор могут обладать некоторыми свойствами, отличными от аффинности, для активации клетки. Между веществом и атомами рецепторов могут образовываться химические связи. В некоторых случаях это приводит к изменению конфигурации рецептора и этого достаточно для запуска процесса активации (т.н. трансдукция или передача сигнала).
В одном варианте реализации антагонист рецептора представляет собой вещество, которое связывается с рецептором и инактивирует его. В одном варианте реализации селективный модулятор андрогеновых рецепторов представляет собой молекулу, которая in vivo проявляет тканевую специфичность, активируя сигнальную активность андрогеновых рецепторов (AR, АР) в анаболических тканях (мышцы, кости и т.д.) в большей степени, чем в андрогенных тканях. Соответственно, в одном варианте реализации селективные модуляторы андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению пригодны для связывания рецепторов стероидных гормонов и их активации. В одном варианте реализации соединение, являющееся селективным модулятором андрогеновых рецепторов, согласно настоящему изобретению представляет собой агонист, который связывается с андрогеновым рецептором. В другом варианте реализации соединение обладает высокой аффинностью к андрогеновому рецептору.
Тесты для определения являются ли соединения согласно настоящему изобретению агонистами или антагонистами АР хорошо известны специалистам в данной области. Например, агонистическую активность в отношении АР можно выявить, отслеживая способность селективных модуляторов андрогеновых рецепторов поддерживать и/или стимулировать рост андрогенной ткани, содержащей АР, такой как предстательная железа и семенные пузырьки, мерой которой является масса, у кастрированных животных. Антагонистическую активность в отношении АР можно выявить, отслеживая способность селективных модуляторов андрогеновых рецепторов подавлять рост ткани, содержащей АР, у интактных животных, противодействовать эффектам тестостерона у кастрированных животных.
Андрогеновый рецептор (AR, АР) представляет собой андрогеновый рецептор любого вида, например, млекопитающего. В одном варианте реализации андрогеновый рецептор представляет собой андрогеновый рецептор человека. Соответственно, в другом варианте реализации селективные модуляторы андрогеновых рецепторов обратимо связываются с андрогеновым рецептором у человека. В другом варианте реализации селективные модуляторы андрогеновых рецепторов обратимо связываются с андрогеновым рецептором у млекопитающего.
В настоящем тексте термин «селективный модулятор андрогеновых рецепторов» (SARM) используется для обозначения, в одном варианте реализации, молекулы, которая демонстрирует тканевую специфичность in vivo, активируя сигнальную активность андрогеновых рецепторов в анаболических тканях (мышцы, кости и т.д.) в большей степени, чем в андрогенных тканях. В другом варианте реализации селективный модулятор андрогеновых рецепторов селективно связывается с андрогеновым рецептором. В другом варианте реализации селективный модулятор андрогеновых рецепторов селективно влияет на сигнал через андрогеновый рецептор. В одном варианте реализации селективный модулятор андрогеновых рецепторов является частичным агонистом. В одном варианте реализации селективный модулятор андрогеновых рецепторов является тканеселективным агонистом, или, в некоторых вариантах реализации, тканеселективным антагонистом.
50
50
В одном варианте реализации эффекты селективного модулятора андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению реализуются тканезависимым образом. В одном варианте реализации селективный модулятор андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению будет характеризоваться значением ICилиECв отношении АР, определенным в тестах на трансактивацию АР, известных в данной области, или, в других вариантах реализации, как описано в настоящем документе.
В настоящем тексте термин «лечение» представляет собой лечение, обеспечивающее ремиссию нарушения. В настоящем тексте термины «уменьшение», «снижение» и «подавление» имеют свое обычное значение уменьшения или снижения. В настоящем тексте термин «прогрессирование» обозначает увеличение объема или тяжести, продвижение, рост или ухудшение. В настоящем тексте термин «рецидив» обозначает возвращение болезни после ремиссии. В настоящем тексте термин «замедление» обозначает остановку, задержку, снижение скорости, отсрочивание, удерживание или обращение.
В настоящем тексте термин «введение» относится к приведению субъекта в контакт с соединением согласно настоящему изобретению. В настоящем тексте введение может осуществляться in vitro, т.е., в пробирке, или in vivo, т.е., в клетках или тканях живых организмов, например, людей. В одном варианте реализации настоящее изобретение включает введение соединения согласно настоящему изобретению субъекту.
В одном варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту один раз в неделю. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту дважды в неделю. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту три раза в неделю. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту четыре раза в неделю. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту пять раз в неделю. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту ежедневно. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту несколько раз в день. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту еженедельно. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту один раз в две недели. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему изобретению вводят субъекту ежемесячно.
В одном варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение селективного модулятора андрогеновых рецепторов в виде единственного активного ингредиента. Но также в объем настоящего изобретения включены способы лечения, предотвращения, уменьшения или подавления урологических нарушений, которые включают введение селективных модуляторов андрогеновых рецепторов в комбинации с одним или более терапевтическими агентами. В одном варианте реализации терапевтический агент в комбинации с селективным модулятором андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению включает: неселективные антихолинергические средства, такие как оксибутинин и пропантелин, или антимускариновые агенты, такие как толтеродин, троспий, солифенацин, дарифенацин и фезотерадин.
3
В одном варианте реализации терапевтический агент в комбинации с селективным модулятором андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению включает: адренергические модуляторы для лечения недержания мочи, такие как трициклические антидепрессанты (например, имипрамин и амитриптилин) и агонисты β-адренергических рецепторов (например, мирабегрон).
В одном варианте реализации терапевтический агент в комбинации с селективным модулятором андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению включают: мышечные релаксанты (например, для расслабления мышцы-сжимателя), такие как флавоксат и дицикломин, или ботулинические токсины, такие как онаботулотоксин A.
В одном варианте реализации способы согласно настоящему изобретению включают введение фармацевтической композиции (или фармацевтического препарата, эти термины в настоящем тексте равнозначны), содержащей селективный модулятор андрогеновых рецепторов согласно настоящему изобретению и/или его аналог, производное, изомер, метаболит, фармацевтический продукт, гидрат, N-оксид, полиморф, кристалл, пролекарство или любую их комбинацию и подходящий носитель или разбавитель.
Фармацевтические композиции
В настоящем документе «фармацевтическая композиция» обозначает терапевтически эффективные количества селективного модулятора андрогеновых рецепторов совместно с подходящими разбавителями, консервантами, солюбилизаторами, эмульгаторами, адъювантами и/или носителями. «Терапевтически эффективное количество» в настоящем документе относится к количеству, которое обеспечивает терапевтический эффект в отношении данного состояния и для данного режима применения. Такие композиции представляют собой жидкие или лиофилизированные или высушенные иным образом препараты и включают разбавители с различным составом (например, Tris-HCI., ацетат, фосфат), pH и ионной силой буфера, добавки, такие как альбумин или желатин для предотвращения адсорбции к поверхностям, детергенты (например, Tween 20, Tween 80, Pluronic F68, соли желчных кислот), солюбилизаторы (например, глицерин, полиэтиленглицерин), антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота, метабисульфин натрия), консерванты (например, Тимеросал, бензиловый спирт, парабены), вещества, объемообразующие вещества или модификаторы тоничности (например, лактоза, маннитол), ковалентное присоединение полимеров, таких как полиэтиленгликоль, к белку, комплексообразование с ионами металлов, или включением материала в или на дисперсные препараты полимерных соединений, таких как полимолочная кислота, полигликолевая кислота, гидрогели и т.д., или на липосомы, микроэмульсии, мицеллы, однослойные или многослойные пузырьки, тени эритроцитов или сферопласты). Такие композиции будут влиять на физическое состояние, растворимость, стабильность, скорость высвобождения in vivo и скорость выведения in vivo. Композиции с контролируемым и пролонгированным высвобождением включают препарат в липофильных депо (например, жирных кислотах, восках, маслах).
Также настоящее изобретение предусматривает дисперсные композиции, покрытые полимерами (например, полоксамерами или полоксаминами). Другие варианты реализации композиций согласно изобретению включают дисперсные формы, защитные покрытия, ингибиторы протеаз или вещества, усиливающие проницаемость, для различных путей введения, включая парентеральное, легочное, назальное и пероральное. В одном варианте реализации фармацевтическую композицию вводят парентерально, в область раковой опухоли, через слизистые оболочки, трансдермально, внутримышечно, внутривенно, внутрикожно, подкожно, интраперитонеально, интравентрикулярно, интравагинально, интракранеально и в опухоль.
Далее, упоминаемые в настоящем документе «фармацевтически приемлемые носители» хорошо известны специалистам в данной области и включают 0,01-0,1 M и предпочтительно 0,05 M фосфатный буфер или приблизительно 0,8% раствор хлорида натрия, но не ограничиваются перечисленными. Кроме того, такие фармацевтически приемлемые носители могут представлять собой водные или неводные растворы, суспензии и эмульсии. Примерами неводных растворителей являются пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие оливковое масло, и подходящие для инъекций органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Водные носители включают воду, водно-спиртовые растворы, эмульсии или суспензии, включая раствор хлорида натрия и забуференные среды.
Основы для парентерального введения включают раствор хлорида натрия, декстрозу Ringer, декстрозу и хлорид натрия, раствор Ringer с лактатом и нелетучие масла. Основы для внутривенного введения включают составы для посполнения жидкости и питательных веществ, составы для восполнения электролитов, такие как составы на основе декстрозы Ringers декстроза и т.п. Также могут присутствовать консерванты и другие добавки, такие как, например, антимикробные средства, антиоксиданты, хелатирующие агенты и т.д.
Известно, что соединения, модифицированные путем присоединения водорастворимых полимеров, таких как полиэтиленгликоль, сополимеры полиэтиленгликоля и полипропиленгликоль, карбоксиметилцеллюлоза, декстран, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон или полипролин, имеют большую продолжительность полужизки в крови после внутривенной инъекции, чем соответствующие немодифицированные соединения (Abuchowski с соавт., 1981; Newmark с соавт., 1982; и Katre с соавт., 1987). Такие модификации могут также повышать растворимость соединений в водных растворах, устранять агрегацию, улучшать физическую и химическую стабильность соединения и значительно снижать иммуногенность и реакционную способность соединения. В результате желаемая биологическая активность in vivo может быть достигнута при введении таких продуктов присоединения с меньшей частотой или в более низких дозах, по сравнению с немодифицированным соединением.
В еще одном варианте реализации доставка фармацевтической композиции может осуществляться в форме с контролируемым высвобождением. Например, агент можно вводить с использованием внутривенной инфузии, имплантируемого осмотического насоса, трансдермального пластыря, липосом или других средств введения. В одном варианте реализации может применяться насос (см. Langer, выше; Sefton, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201 (1987); Buchwald с соавт., Surgery 88:507 (1980); Saudek с соавт., N. Engl. J. Med. 321:574 (1989)). В другом варианте реализации могут применяться полимерные материалы. В еще одном варианте реализации возможно помещение системы контролируемого высвобождения вблизи от мишени терапии, например, мозга, в результате чего потребуется лишь часть системной (см., например, Goodson, in Medical Applications of Controlled Release, сыше, том 2, стр. 115-138 (1984)). Другие системы контролируемого высвобождения обсуждаются в обзоре Langer (Science 249:1527-1533 (1990)).
Фармацевтический препарат может содержать только селективный модулятор андрогеновых рецепторов или может дополнительно включать фармацевтически приемлемый носитель, и может быть в твердой или жидкой форме, такой как таблетки, порошки, капсулы, гранулы, растворы, суспензии, эликсиры, эмульсии, гели, кремы, или суппозитории, включая ректальные и уретральные суппозитории. Фармацевтически приемлемые носитель и включают камеди, крахмалы, сахара, целлюлозные материалы и их смеси. Фармацевтический препарат, содержащий селективный модулятор андрогеновых рецепторов, можно вводить субъекту, путем, например, подкожной имплантации гранулы; в другом варианте реализации гранула обеспечивает контролируемое высвобождение селективного модулятора андрогенового рецептора в течение продолжительного периода времени. Препарат также может быть введен путем внутривенной, внутриартериальной или внутримышечной инъекции жидкого препарата, перорального введения жидкого или твердого препарата или путем топического применения. Введение также можно осуществлять с применением ректального суппозитория или уретрального суппозитория.
Фармацевтические препараты согласно изобретению могут быть получены с использованием известных способов растворения, смешивания, гранулирования и формования таблеток. Для целей перорального применения селективные модуляторы андрогеновых рецепторов или их физиологически приемлемые производные, такие как соли, сложные эфиры, N-оксиды и т.п. смешивают с добавками, обычно применяемыми для это цели, такие как основы, стабилизаторы или инертные разбавители, и преобразуют обычными способами в подходящие для введения формы, такие как таблетки, таблетки с покрытием, твердые или мягкие желатиновые капсулы, растворы в воде спирте или масле. Примерами подходящих инертных основ являются обычные основы для таблеток, такие как лактоза, сахароза, или кукурузный крахмал, в комбинации со связующими, такими как трагакантовая камедь, кукурузный крахмал, желатин, с разрыхлителями, такими как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота, или со смазывающими веществами, такими как стеаровая кислота или стеарат магния.
Примерами подходящих масляных основ являются масла растительного или животного происхождения, такие как подсолнечное масло или масло из печени рыб. Препараты могут быть представлены как форме сухих, так и в форме влажных гранул. Для парентерального введения (подкожных, внутривенных, интраартериальных или внутримышечных инъекций), селективные модуляторы андрогеновых рецепторов или их физиологически приемлемые производные, такие как соли, сложные эфиры, N-оксиды и т.п. при необходимости преобразуют в форму раствора, суспензии или эмульсии с применением обычных веществ, которые подходят для этой цели, например, солюбилизаторов и других вспомогательных веществ. Примерами являются стерильные жидкости, такие как вода и масла с добавлением поверхностно-активного вещества и других фармацевтически приемлемых вспомогательных вещества, или без них. Примерами масел является вазелин, масла животного, растительного или синтетического происхождения или минеральное масло. Обычно предпочтительными жидкими носителями являются вода, солевой раствор, водный раствор декстрозы и аналогичные растворы сахаров и гликоли, такие как пропиленгликоли или полиэтиленгликоль, особенно для растворов для инъекций.
Приготовление фармацевтических композиций, которые содержат активный компонент, хороши известно в данной области. Такие композиции могут быть приготовлены в форме аэрозолей активных компонентов, доставляемых в носоглотку, или в формах для инъекций в виде жидких растворов или суспензий; но также могут быть приготовлены твердые формы, подходящие для растворения в жидкости до введения путем инъекции. Препарат также может быть эмульгирован. Активный терапевтический ингредиент часто смешивают с вспомогательными веществами, которые являются фармацевтически приемлемыми и совместимыми с активным ингредиентом. Подходящими вспомогательными веществами являются, например, вода, солевой раствор, декстроза, глицерин, этанол или подобные вещества или любая их комбинация.
Дополнительно композиция может содержать небольшие количества вспомогательных веществ, такие как смачивающие вещества или эмульгаторы, вещества, которые повышают эффективность активного ингредиента.
Активный компонент может быть включен в композицию в нейтрализованной форме фармацевтически приемлемых солей. Фармацевтически приемлемые соли включают соли присоединения кислот (образованные со свободными аминогруппами молекулы полипептида или антитела), которые образуются с неорганическими кислотами, такими как, например, соляная или фосфорная кислоты, или такими органическими кислотами как уксусная, щавелевая, винная, миндальная и т.п. Соли, образованные свободными карбоксильными группами могут также быть получены из неорганических оснований, таких как, например, гидроксиды натрия, калия, аммония, кальция или железа, и таких органических оснований как изопропиламин, триметиламин, 2-этиламино этанол, гистидин, прокаин и т.п.
Для топического применения на поверхностях тела с использованием, например, кремов, гелей, капель и т.п., селективные модуляторы андрогеновых рецепторов или их физиологически приемлемые производные, такие как соли, сложные эфиры, N-оксиды и т.п. готовят и применяют в форме растворов, суспензий, или эмульсий в физиологически приемлемом разбавителе с фармацевтическим носителем или без него.
В другом варианте реализации доставка активного соединения может осуществляться в пузырьке, в частности, в липосоме (см. Langer, Science 249:1527-1533 (1990), Treat с соавт., в Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer, Lopez- Berestein и Fidler (изд), Liss, New York, стр. 353-365 (1989); Lopez-Berestein, ibid., pp. 317-327; общ. информацию см. там же).
Для применения в медицине соли селективных модуляторов андрогеновых рецепторов будут представлять собой фармацевтически приемлемые соли. Но другие соли могут быть полезны для получения соединений согласно настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей. Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединений согласно настоящему изобретению включают соли присоединения кислот, которые могут, например, быть получены путем смешивания раствора соединения согласно изобретению с раствором фармацевтически приемлемой кислоты, такой как хлороводородная кислота, серная кислота, метансульфоновая кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, уксусная кислоты, бензойная кислота, щавелевая кислота, лимонная кислота, винная кислота, карбоновая кислота или фосфорная кислота.
В одном варианте реализации термин «примерно» относится к отклонению в диапазоне 0,0001-5% от указанного значения или диапазоне значений. В одном варианте реализации термин «примерно» относится к отклонению в диапазоне 1 -10% от указанного значения или диапазоне значений. В одном варианте реализации термин «примерно» относится к отклонению до 25% от указанного значения или диапазоне значений.
В некоторых вариантах реализации термин «содержит» или его грамматические варианты относится к включению указанного активного агента, такого как соединение согласно настоящему изобретению, а также включению других активных агентов и фармацевтически приемлемых носителей, вспомогательных веществ, мягчительных веществ, стабилизаторов и. других компонентов, известных в фармацевтической промышленности. В некоторых вариантах реализации термин «состоящий по существу из» относится к композиции, единственным активным ингредиентом которой является указанный активный ингредиент, но в которую могут быть включены другие компоненты для стабилизации, консервации состава и т.д., но которые не связаны непосредственно с терапевтическим действием указанного активного ингредиента. В некоторых вариантах реализации термин «состоящий по существу из» может относиться к компонентам, которые механизм реализации терапевтического эффекта у которых отличается от механизма указанного активного ингредиента. В некоторых вариантах реализации термин «состоящий по существу из» может относиться к соединениям, которые оказывают некоторое терапевтическое действие и принадлежат к классу соединений, отличному от указанного активного ингредиента. В некоторых вариантах реализации термин «состоящий по существу из» может относиться к компонентам, которые оказывают некоторое терапевтическое действие и принадлежат к классу соединений, отличному от указанного активного ингредиента, действуя по другому механизму действия, например, и представляющим вариант реализации настоящего изобретения; в частности, полипептиды, содержащие Т-клеточные эпитопы, присутствующие в композиции, могут быть смешаны с полипептидами, содержащими B-клеточные эпитопы. В некоторых вариантах реализации термин «состоящий по существу из» может относиться к компонентам, которые способствуют высвобождению активного ингредиента. В некоторых вариантах реализации термин «состоящая» относится к композиции, которая содержит активный ингредиент и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.
Далее, в настоящем тексте термин «содержащий» используется для обозначения того, что система включает все перечисленные элементы, но при этом не исключаются другие, которые могут быть необязательными. Под фразой «состоящий по существу из» понимают способ, который включает указанные элементы, но не включает другие элементы, которые могут оказывать значительное влияние на реализацию способа. Соответственно «состоящий из» исключает возможность присутствия более чем следовых количеств других элементов. Варианты реализации, определяемые этими терминами включены в объем настоящего изобретения.
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает комбинированные препараты. В одном варианте реализации термин «комбинированный препарат» обозначает конкретно «набор компонентов» в том смысле, что введение компонентов комбинации, определенных выше, может осуществляться раздельно или с применением различных комбинированных препаратов с различными количествами компонентов комбинации, т.е., одновременно, параллельно, раздельно или последовательно. Так, в некоторых вариантах реализации введение компонентов набора компонентов может быть одновременным или с временными промежутками, т.е. в разные моменты времени с одинаковыми или различными временными интервалами для каждого компонента набора компонентов. В некоторых вариантах реализации возможно введение компонентов комбинации при определенном соотношении общих количеств компонентов комбинации в комбинированном препарате. В одном варианте реализации комбинированный препарат может быть модифицирован, например, для того, чтобы удовлетворить потребности некоторой подгруппы пациентов, подвергаемых лечению, или потребности единственного пациента, причем особые потребности могут быть обусловлены конкретным заболеванием, тяжестью заболевания, возрастом, полом или массой тела, что может быть легко определено специалистом.
В одном варианте реализации термин в единственном числе, обозначаемый в оригинальном тексте на английском языке артиклями «a» или «an», или обозначенный словом «один» обозначает по меньшей мере один. В одном варианте реализации фраза «два или более» может обозначать любое значение, соответствующее конкретной цели. В одном варианте реализации «примерно» может включать отклонение от указанного значения на + 1%, или, в некоторых вариантах реализации, - 1%, или, в некоторых вариантах реализации, ± 2,5%, или, в некоторых вариантах реализации, ± 5%, или, в некоторых вариантах реализации, ± 7,5%, или, в некоторых вариантах реализации, ± 10%, или, в некоторых вариантах реализации, ± 15%, или, в некоторых вариантах реализации, ± 20%, или, в некоторых вариантах реализации, ± 25%.
Примеры ниже приведены для того, чтобы более полно проиллюстрировать предпочтительные варианты реализации изобретения. При этом их ни в коем случае нельзя рассматривать как информацию, ограничивающую объем изобретения.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1
Применение SARM для увеличения мышц тазового дна
Как обсуждалось выше, ослабление и/или атрофия мышцы, поднимающей задний проход, может приводить к нестабильности тазового дна и неспособности к поддержанию закрытия уретры при временном повышении абдоминального давления, что приводит к недержанию мочи при напряжении. Мышца, поднимающая задний проход, и другие мышцы тазового дна, такие как сфинктер уретры, чрезвычайно чувствительны к анаболическому действию андрогенов [Hershberger с соавт., Myotrophic activity of 19-nortestosterone and other steroids determined by modified levator ani muscle method. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. (1953) 83: 175-180; Ho с соавт., Anabolic effects of androgens on muscles of female pelvic floor and lower urinary tract. Curr. Opin. Obstet. Gynecol. (2004) 16: 405-409].
Лечение ДГТ, либо соединением формулы X и соединением формулы IX in vivo вызывает гипертрофию мышцы, поднимающей задний проход, как показано на фиг. 1. Крысы линии Спрег-Доули (n = 5; масса тела 200 г), которые были кастрированы и в течение 14 дней получали лечение подкожно: основой (незакрашенные столбцы); 3 мг/день Формулы X (выделенные пунктиром столбцы), Формулы IX (заштрихованные столбцы), неактивным соединением пропанамида (R)-IX (столбцы серого цвета) и ДГТ (столбцы черного цвета). После умерщвления органы взвешивали и регистрировали как необработанные значения массы органов. Приведены средние значения ± стандартное отклонение.
АР широко распространен во многих структурах мочеполовой системы, и андрогены могут оказывать другие благоприятные эффекты на обеспечение удержания мочи или компенсацию недержания. Аналогичным образом, гладкие мышцы уретры, предположительно, также укрепляются при применении SARM.
ПРИМЕР 2
Нестероидные тканеселективные модуляторы андрогеновых рецепторов (SARM) увеличивают массу и улучшают архитектуру мышц тазового дна у самок мышей с удаленными яичниками
Андрогеновый рецептор (АР) представляет собой лиганд-активируемый транскрипционный фактор, критически важный для роста и развития мышц, костей, эндокринных и репродуктивных органов. В отсутствие лиганда (т.е. эндогенных андрогенов) АР поддерживается в форме неактивного комплекса за счет взаимодействий с белками теплового шока (HSP) и корепрессорами. При связывании лиганда (например, тестостерона или дигидротестостерона) указанные HSP отсоединяются от АР, что приводит к изменению его конформации, последующей димеризации и ядерной локализации АР. Димер АР связывается с элементами гормонального ответа (HRE) на промоторе гормонально-чувствительного гена, стимулирует различные коактиваторы и общие транскрипционные факторы, и индуцирует транскрипцию целевого гена. Хотя многие ткани включают клетки, содержащие АР, и считаются андроген-чувствительными, одной из тканей, содержащих АР в максимальной концентрации, является мышца, поднимающая задний проход. Мышца, поднимающая задний проход, наряду с другими мышцами тазового дна реагирует на присутствие андрогенов, и указанные андрогены, действуя через АР, могут значительно увеличивать размер и массу указанных мышц.
Тазовое дно состоит из поперечнополосатых мышц, которые поддерживают мочевой пузырь, матку и прямую кишку. Специфические мышцы тазового дна включают, в первую очередь, мышцу, поднимающую задний проход, и седалищно-копчиковую мышцу (также известную как копчиковая), по имеющимся данным отличающиеся, как упоминалось выше, относительно высоким уровнем экспрессии АР.
Цель указанного исследования заключается в оценке эффекта селективных модуляторов андрогеновых рецепторов (SARM) на массу мышц и генную экспрессию в мышцах тазового дна.
Материалы и методы:
Самкам мышей (n = 5–7) возрастом 6–8 недель, приобретенным в Джексоновской лаборатории (JAX), проводили овариэктомию (OVX) или ложную операцию. Через 20 дней после овариэктомии начинали лечение согласно описанию в таблице ниже. Соединения формул IX и VIII растворяли в ДМСО/ПЭГ 300 (15:85) и вводили через желудочный зонд. Показатели массы тела и МРТ для оценки общей сухой массы тела регистрировали в начале и в конце лечения. Животные получали лечение на протяжении 28 дней, затем их умерщвляли, извлекали мышцы тазового дна, взвешивали и помещали на хранение для экстракции РНК и белка. Экспрессию генов, вовлеченных в катаболизм и анаболизм мышц измеряли путем анализа мРНК. Концентрации лекарственных средств в сыворотке измеряли посредством ЖХ-МС/МС. Статистический анализ выполняли с помощью программного обеспечения JMP Pro с применением однофакторного дисперсионного анализа.
№ группы
Лечение (мг/кг/день), п/о
Хирургическое вмешательство
1
Основа
Интактные
2
Основа
овариэктомия
3
0,5 мг IX
овариэктомия
4
2,5 мг IX
овариэктомия
5
5 мг IX
овариэктомия
6
0,5 мг VIII
овариэктомия
7
2,5 мг VIII
овариэктомия
8
5 мг VIII
овариэктомия
Исследование генной экспрессии: Фиксированные в формалине ткани гомогенизировали с помощью тканевого гомогенизатора FastPrep, и выделяли РНК с применением набора для выделения РНК Qiagen. РНК количественно определяли и использовали 1 мкг РНК из каждого образца для синтеза кДНК с применением набора для синтеза кДНК от Life Technologies. ОТ-ПЦР в реальном времени проводили с праймерами Taqman и зондом от Life Technologies на аппарате ABI-7900 для ПЦР в реальном времени. Экспрессию различных генов нормировали по ГАФДГ.
Экстракция плазмы для соединения формулы IX и соединения формулы VIII: После размораживания образцов аликвоты сыворотки мышей объемом 100 мкл из каждого образца смешивали с 200 мкл ацетонитрила, содержащего соединение формулы XIII в концентрации 200 нМ, в качестве внутреннего стандарта. После тщательного перемешивания на вортексе каждого образца в течение 15 секунд образец центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 минут. Приблизительно 200 мкл супернатанта забирали для анализа методом ЖХ-МС/МС.
Построение стандартной кривой: Концентрация исходного раствора соединений формул IX и VIII согласно настоящему изобретению составляла 100 мкМ в ДМСО. Готовили разведение 1:50 с контрольной сывороткой мыши и добавляли 200 мкл 2 мкМ раствора в первую микроцентрифужную пробирку. По 100 мкл контрольной сыворотки мыши добавляли в следующие 7 микроцентрифужных пробирок. Переносили 100 мкл из пробирки 1 (2 мкМ) в пробирку 2, перемешивали на вортексе и продолжали проводить 2-кратные разведения вплоть до пробирки 7. В каждую пробирку добавляли 200 мкл ацетонитрила, содержащего 200 нМ соединение формулы XIII, в качестве внутреннего стандарта. После перемешивания на вортексе и центрифугирования переносили 200 мкл для анализа методом ЖХ-МС/МС. Диапазон концентраций для каждой стандартной кривой составлял от 1 мкМ до 0,0078 мкМ.
18
18
TM
Анализ ЖХ-МС/МС: Анализ соединений формул IX и VIII согласно настоящему изобретению в сыворотке выполняли с применением системы ЖХ-МС/МС, состоящей из аппарата для ВЭЖХ Agilent 1100 с масс-спектрометром MDS/Sciex 4000 Q-Trap™. Разделение проводили с применением аналитической колонки C (Alltima, 2,1×100 мм, 3 мкм) с защитой предколонкой C (Phenomenex™, внутр. диаметр картриджа с держателем 4,6 мм). Подвижная фаза включала канал A (95% ацетонитрил + 5% воды + 0,1% муравьиной кислоты) и канал C (95% воды + 5% ацетонитрила + 0,1% муравьиной кислоты); осуществляли изократический процесс при скорости потока 0,4 мл/мин. Общая продолжительность анализа для соединения формулы IX составляло 4,5 мин; введенный объем составлял 10 мкл. Общая продолжительность анализа для соединения формулы VIII также составляла 4,5 мин; введенный объем составлял 10,0 мкл. Сканирование методом мониторинга множественных реакций (MRM) проводили при значениях параметра «газовая завеса», равном 30 для соединения формулы IX и 25 для соединения формулы VIII; при средних значениях параметра «газ для соударений» для соединения формулы IX и высоких для соединения формулы VIII; значении для газа-распылителя и вспомогательных газов, равном 60, и температуре источника 550°C для обоих соединений. Молекулярные ионы получали с использованием значения напряжения ионного распыления (IS), равного 4200 В (режим отрицательных ионов). Оптимизировали потенциал декластеризации (DP), входной потенциал (EP), энергию соударения (CE), массу дочерних ионов и потенциал на выходе из ячейки (CXP), используя значения -20,0, -10,0, -30,0 и -15,0, соответственно, для массовой пары 388,1/118,1 (соединение формулы IX). Оптимизировали потенциал декластеризации (DP), входной потенциал (EP), энергию соударения (CE), массу дочерних ионов и потенциал на выходе из ячейки (CXP), используя значения -95,9, -9,94, -40,0 и -15,0, соответственно, для массовой пары 354,0/118,1 (соединение формулы VIII).
Гистология: Мышцы тазового дна заливали в парафин, и окрашивали срезы на коллаген (трихром по Массону) и эластин (по Ван-Гизону). При исследовании окрашивания оценивали патологию длины волокон и интенсивность окрашивания.
Результаты:
Копчиковая мышца (COC) (расположенная постериальнее мышцы, поднимающей задний проход) и мышца, поднимающая задний проход (лобково-копчиковая мышца (Pc) + подвздошно-копчиковая мышца (IL)) представляют собой два важнейших элемента тазового дна, обеспечивающие опору и функционирование. Копчиковая мышца и мышца, поднимающая задний проход, или LA (Pc+IL), наряду с плато леваторов поддерживают тазовое дно и образуют тазовую диафрагму. Самой большой из трех мышц является копчиковая мышца, затем следуют копчиковая мышца и подвздошно-копчиковая мышца. У мышей масса копчиковой мышцы равна суммарной массе или превышает суммарную массу лобково-копчиковой мышцы и подвздошно-копчиковой мышцы.
Согласно описанию выше, цель указанных исследований заключалась в изучении эффекта двух селективных модуляторов андрогеновых рецепторов на мышцы тазового дна. Общая масса тела животных, получавших лечение указанными селективными модуляторами андрогеновых рецепторов, умеренно, хотя и статистически незначимо, возрастала (фиг. 4). Аналогичным образом, показатели МРТ свидетельствуют о тенденции к возрастанию общей сухой массы тела при увеличении дозы (фиг. 5). Однако, как и в случае с массой тела, указанная тенденция в отношении сухой мышечной массы не достигала значимых значений.
Мышцы тазового дна у мышей имеют незначительный размер, что затрудняет визуализацию без увеличения. Для повышения разрешения тазовые области мышей после умерщвления животных на 2 суток погружали в формалин, после чего препарировали под микроскопом, а также проводили точное определение массы. Извлекали копчиковую мышцу, лобково-копчиковую мышцу и подвздошно-копчиковую и взвешивали, используя микровесы с чувствительностью до микрограммов.
Из трех типов мышц наибольшей чувствительностью к овариэктомии (OVX) отличалась копчиковая мышца. После овариэктомии масса копчиковой мышцы снижалась приблизительно на 50% по сравнению с интактными животными (фиг. 6). Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов обеспечивали дозозависимое увеличение копчиковой мышцы при минимальных p-значениях, составляющих всего 0,0001. Уменьшение лобково-копчиковой мышцы при овариэктомии было более умеренным (фиг. 7). Несмотря на это, Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов значимо повышали массу лобково-копчиковой мышцы относительно контролей с овариэктомией (p <0,05). Суммарная масса подвздошной мышцы, лобково-копчиковой мышцы и подвздошно-копчиковой мышцы также значимо увеличивалась при лечении селективными модуляторами андрогеновых рецепторов по сравнению с животными после овариэктомии (p <0,001) (фиг. 8).
Оценка экспрессии выбранных генов в копчиковой мышце с применением ПЦР в реальном времени показывает, что после овариэктомии значимо увеличивалась экспрессия двух катаболических генов, гена миостатина и Fbxo32, или MAFbx (фиг. 9). Лечение селективным модулятором андрогеновых рецепторов устраняло указанное увеличение экспрессии этих генов с восстановлением уровней экспрессии до наблюдаемых у интактных контрольных животных, что указывает на блокирование селективными модуляторами андрогеновых рецепторов катаболических путей мышц с увеличением массы и силы мышц.
Концентрации лекарственных средств измеряли в сыворотке с применением ЖХ-МС/МС; продемонстрировано дозозависимое увеличение концентрации селективного модулятора андрогеновых рецепторов (Таблица 1).
Животных умерщвляли через 24 часа после введения последней дозы для измерения стационарной концентрации. Несмотря на более низкую концентрацию в сыворотке, соединение формулы VIII увеличивало массу мышц эффективнее соединения формулы IX.
Таблица 1: Концентрации селективного модулятора андрогеновых рецепторов в сыворотке после 28 дней лечения.
Лекарственное средство
Доза (мг/кг массы тела)
Средний показатель (нМ)
Стандартная ошибка (нМ)
Основа
-
НПКО
НПКО
IX
0,5
861,75
32,84
IX
2,5
3852
292,21
IX
5
6065
663,98
VIII
0,5
429
71,13
VIII
2,5
2436
210,13
VIII
5
4100
198,24
НПКО – ниже предела количественного определения
Заключение:
Впервые было проведено исследование, убедительно демонстрирующее, что соединения формул IX и VIII потенциально способны увеличивать массу мышц тазового дна, уменьшившуюся после овариэктомии. Указанное увеличение размера этих критически важных тазовых мышц указывает на потенциальную возможность применения для лечения женщин, страдающих недержанием мочи при напряжении.
Данные для мышей указывают на то, что копчиковая мышца, предположительно, является основной мышцей, затрагиваемой действием эстрогенов. Мышцы, поднимающие задний проход (Pc+IL) имеют меньший размер, чем копчиковая мышца, и циркулирующие эстрогены оказывают на них минимальное действие. Поскольку обе мышцы, как мышца, поднимающая задний проход, так и копчиковая мышца, важны для поддержания архитектуры тазового дна, компенсация относящихся к любой из них или к обеим нарушений имеет жизненно важное значение, какая бы из указанных мышц ни была затронута. P-значение указывает на то, что соединение формулы VIII может представлять собой лучшее лекарственное средство для увеличения мышц тазового дна, чем соединение формулы IX.
Резюме:
Цели: Оценка эффекта нестероидных селективных ингибиторов андрогеновых рецепторов на мышцы тазового дна у самок мышей после овариэктомии и идентификация дозы, укрепляющей мышцы тазового дна без увеличения сухой массы.
Методы: Самкам мышей возрастом 6–8 недель (n = 6–8 животных на группу) проводили овариэктомию (OVX) или ложную операцию. Через месяц после проведения овариэктомии, когда уровни гормонов в сыворотке был минимальными, оценивали состав тела с применением МРТ и начинали лечение основой или двумя селективными ингибиторами андрогеновых рецепторов методом «доза – эффект». Через 28 дней после лечения повторно оценивали состав тела, умерщвляли животных и взвешивали мышцы тазового дна. Концентрацию лекарственного средства в сыворотке измеряли с применением ЖХ-МС/МС. Срезы мышц окрашивали на коллаген и эластин для оценки влияния селективного модулятора андрогеновых рецепторов на архитектуру. Данные анализировали с использованием однофакторного дисперсионного анализа ANOVA с последующим применением критерия Тьюки.
Результаты: Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов в дозах, использованных в указанном исследовании, не вызывали значимого увеличения массы тела или общей сухой массы тела. После овариэктомии значимо, более чем на 50%, снижалась масса копчиковой мышцы; масса повздошно-копчиковой мышцы снижалась на 30%, а общая масса мышц тазового дна снижалась на 50%; применение селективных модуляторов андрогеновых рецепторов устраняло все вышеперечисленные изменения с возвращением до уровней, наблюдаемых у интактных животных. Увеличение мышц тазового дна прямо коррелировало с концентрацией лекарственного средства в сыворотке. Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов ингибировали катаболические гены, например, ген миостатина и MuRF1. При гистологических исследованиях обнаруживаются гипертрофированные волокна мышц тазового дна у получавших лечение селективными модуляторами андрогеновых рецепторов животных
Заключение: Селективные модуляторы андрогеновых рецепторов потенциально способны обеспечивать увеличение массы и улучшение архитектуры мышц тазового дна и могут представлять собой потенциальный вариант лечения недержания мочи.
ПРИМЕР 3
Соединения формулы IX в качестве средства лечения недержания мочи при напряжении (SUI, НМПН) у женщин:
Клиническое исследование для проверки концепции
Проводили одноцентровое исследование для проверки концепции и осуществимости с описанием эффекта 3 мг S-изомера соединения формулы IX (соединение IX) у субъектов-женщин в постменопаузе, страдающих недержанием мочи при напряжении.
Первичная цель: Описание эффекта лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на число эпизодов недержания при напряжении в сутки по оценке на основании 3-дневного дневника мочеиспусканий.
Вторичные цели:
- Описание эффекта лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на число мочеиспусканий в сутки по оценке на основании 3-дневного дневника мочеиспусканий.
- Описание эффекта лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на объем мочи на одно мочеиспускание по оценке на основании 3-дневного дневника мочеиспусканий.
- Описание эффекта лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на недержание мочи при напряжении по оценке на основании суточного теста со взвешиванием прокладок (pad-теста).
- Описание влияния лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на недержание мочи при напряжении по оценке на основании профиля уретрального давления (ПУД).
- Описание эффекта лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на недержание мочи при напряжении по оценке с применением стресс-теста мочевого пузыря.
- Описание влияния лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на описываемые пациентами симптомы недержания мочи при напряжении по оценке с применением опросника при недержании мочи MESA Urinary Questionnaire.
- Описание влияния лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на сообщаемую пациентами оценку тяжести недержания мочи при напряжении по шкале общей оценки тяжести (Patient Global Impression of Severity, PGI-S)
- Описание влияния лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на сообщаемую пациентами оценку улучшения по шкале общей оценки улучшения (Patient Global Impression of Improvement Scale, PGI-I).
- Описание влияния лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на описываемые пациентами признаки мочеполового дистресса по оценке с применением опросника Urinary Distress Inventory Questionnaire (UDI-6).
- Описание влияния лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на основании описываемого пациентами влияния недержания мочи на качество жизни по оценке с применением опросника влияния недержания мочи (Incontinence Impact Questionnaire, IIQ-7).
- Описание влияния лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на описываемую пациентами сексуальную функцию на основании заполненного опросника для оценки женской сексуальной функции (Female Sexual Function Index Questionnaire, FSFI).
- Описание влияния лечения соединением IX продолжительностью 12 недель на мышцы тазового дна по оценке с применением МРТ.
Цели безопасности: Описание профиля безопасности соединения IX при пероральном приеме в дозе 3 мг ежедневно у субъектов, страдающих SUI.
Целевая популяция: Взрослые женщины в постменопаузе, страдающие SUI.
Продолжительность исследования: 12 недель
Число субъектов/Продолжительность участия: До 35 субъектов. Продолжительность участия каждого субъекта в исследовании может составлять до 5 месяцев.
Показания для применения продукта: Соединение IX тестировалось в качестве лечения при истощении мышечной ткани, связанном с кахексией при раковом заболевании, однако в настоящее время не зарегистрировано для продажи.
Инструкции по применению продукта: Субъектам дают указание принимать одну мягкую гелевую капсулу с дозой 3 мг в сутки перорально, независимо от приема пищи.
Статистический анализ: Указанное исследование представляет собой исследование для проверки концепции и осуществимости; таким образом, расчет мощности исследования не требовался. Соответственно, набирают до 35 субъектов, отвечающих критериям включения/исключения, пока лечение не будет завершено у 30 субъектов. Для исследования изменений первичных и вторичных результатов в исходный момент времени и при окончании лечения используют описательную статистику. Первичным показателем эффективности служит уменьшение числа эпизодов недержания при напряжении в сутки. Вторичные показатели эффективности включают уменьшение числа мочеиспусканий в сутки, объем мочеиспусканий, массу прокладки в суточном тесте с прокладками, ответы на валидированные опросники, изменения показателей ПУД, изменения сексуальной функции и изменения мышц тазового дна по оценке с применением МРТ. Безопасность определяют на основании числа и типа нежелательных явлений, зарегистрированных во время лечения. Могут испытываться различные методы подстановок данных.
Предварительные исследования, связанные с недержанием мочи при напряжении: Обширные клинические данные относительно применения соединения IX представлены ниже; однако, существуют как доклинические, так и клинические данные, говорящие в пользу специального исследования применения соединения IX для лечения недержания мочи при напряжении. Согласно доклиническим данным соединение IX, в том числе, проявляет андрогенную и анаболическую активность в моделях на самцах и самках крыс. При применении соединения IX стабильно наблюдалось увеличение массы тела, в частности, массы мышц, у самок крыс. В модели на самцах крыс при уровнях тестостерона в сыворотке после кастрации (аналогичных возможным ожидаемым уровням у самок), соединение IX демонстрировало способность индуцировать гипертрофию мышцы, поднимающей задний проход, до уровня, составляющего приблизительно 120% от уровня у интактных самцов. Указанные исследования в совокупности позволяют приблизительно представить ожидаемый эффект соединения IX, поскольку к настоящему времени отсутствуют данные исследований гипертрофии мышцы, поднимающей задний проход, или недержания мочи при напряжении в моделях на женщинах. В двух исследованиях III фазы (G300504 и G300505) соединение IX в дозе 3 мг в сутки приводило к умеренному увеличению (приблизительно на 1,7%) сухой массы тела, при отсутствии дифференциального эффекта у самцов и у самок. На основании указанных доклинических и клинических анализов ожидался значимый рост/увеличение объема мышцы, поднимающей задний проход, у женщин, страдающих SUI, что также может приводить к облегчению связанных симптомов; соответственно, на этом сфокусировано описанное в настоящем документе исследование.
КОНЕЧНЫЕ ТОЧКИ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Первичная конечная точка: Изменение частоты ежедневных эпизодов недержания мочи при напряжении от исходного момента времени до 12 недели.
Вторичные конечные точки:
1. Изменение частоты ежедневных мочеиспусканий от исходного момента времени до 12 недели.
2. Изменение объема мочи на одно мочеиспускание от исходного момента времени до 12 недели.
3. Изменение массы прокладки в суточном тесте с прокладками от исходного момента времени до 12 недели.
4. Изменение показателей максимального давления закрытия уретры от исходного момента времени до 12 недели.
5. Изменение истечения мочи (да/нет) в стресс-тесте мочевого пузыря от исходного момента времени до 12 недели по оценке при (a) кашле, и/или (b) проведении пробы Вальсальвы.
6. Изменение общего показателя в разделе недержания при напряжении в опроснике при недержании мочи MESA Urinary Questionnaire от исходного момента времени до 12 недели.
7. Изменение по шкале общей оценки тяжести (PGI-S) от исходного момента времени до 12 недели.
8. Оценка по шкале общей оценки улучшения (PGI-I) на 12 неделе.
9. Изменение общего показателя в опроснике по мочеполовому дистрессу (Urinary Distress Inventory, UDI-6) от исходного момента времени до 12 недели.
10.Изменение общего показателя в опроснике влияния недержания (Incontinence Impact Questionnaire, IIQ-7) от исходного момента времени до 12 недели.
11.Изменение общего индекса женской сексуальной функции (Female Sexual Function Index, FSFI) от исходного момента времени до 12 недели, а также изменение показателей в подразделах: либидо, возбуждения, увлажнения, оргазма, удовлетворения и боли.
12.Изменение мышц тазового дна от исходного момента времени до 12 недели по оценке с применением МРТ. Могут количественно оцениваться область хиатуса поднимающей мышцы, переднезадний диаметр и поперечный диаметр, и другие релевантные параметры.
Постменопауза определена как клинически подтвержденное наступление у субъектов-женщин спонтанной, медицинской или вызванной хирургическим вмешательством менопаузы до начала указанного исследования. Также исследуют продолжительность эффекта лечения путем оценки валидированных показателей через 4 недели после введения последней дозы. В указанное исследование включают до 35 субъектов.
ПРИМЕР 4
Синтез соединения формулы VIII
°
1
13
-1
26
2
4
6
2
2
2
6
D
9
13
3
(2R)-1-метакрилоилпирролидин–2-карбоновая кислота. D-пролин, 14,93 г, 0,13моль) растворяли в 71 мл 2н. раствора NaOH и охлаждали в ванне со льдом; полученный щелочной раствор разбавляли ацетоном (71 мл). Раствор в ацетоне (71 мл) метакрилоил хлорида (13,56 г, 0,13моль) и 2 н. раствор NaOH (71 мл) одновременно добавляли на протяжении 40 мин к водному раствору D-пролина в ванне со льдом. РН смеси поддерживали на уровне 10-11C на протяжении добавления метакрилоила хлорида. После перемешивания (3 ч, комнатная температура (КТ)) смесь выпаривали под вакуумом при температуре при 35-45°C чтобы удалить ацетон. Полученный раствор промывали этиловым эфиром и подкисляли до pH 2 концентрированной HCl. Кислую смесь насыщали хлоридом натрия (NaCl) и экстрагировали этилацетатом (100 мл x 3). Объединенные экстракты сушили над NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный продукт в виде бесцветного масла. Перекристаллизация этого масла из этилового эфира и гексанов давала 16,2 г (68%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления102-103°C; ЯМР-спектр этого соединения продемонстрировал существование двух ротамеров указанного в заголовке соединения. H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 5,28 (s) и 5,15 (s) для первого ротамера, 5,15 (s) и 5,03 (s) для второго ротамера (общ. 2H для обоих ротамеров, винил CH), 4,48-4,44 для первого ротамера, 4,24-4,20 (m) для второго ротамера (общ. 1H для обоих ротамеров, CH в хиральном центре), 3,57-3,38 (m, 2H, CH), 2,27-2,12 (1H, CH), 1,97-1,72 (m, 6H, CH, CH, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ для основного ротамера 173,3, 169,1, 140,9, 116,4, 58,3, 48,7, 28,9, 24,7, 19,5: для минорного ротамера 174,0, 170,0, 141,6, 115,2, 60,3, 45,9, 31,0, 22,3, 19,7; IR (KBr) 3437 (OH), 1737 (C=O), 1647 (CO, COOH), 1584, 1508, 1459, 1369, 1348, 1178 см; [α]+80,8° (c = 1, MeOH); анал. расч. для CHNO: C 59,00, H 7,15, N 7,65. Эксп.: C 59,13, H 7,19, N 7,61.
1
13
-1
26
6
a
b
2
2
6
D
9
12
3
(3R,8aR)-3-бромметил-3-метил-тетрагидро-пирроло[2,1-c][1,4]оксазин-1,4-дион. Раствор NBS (23,5 г, 0,132моль) в 100 мл диметилформамида добавляли по каплям к перемешиваемому раствору (метил-акрилоил)-пирролидина (16,1 г, 88 ммоль) в 70 мл диметилформамида в атмосфере аргона при к.т. и перемешивали полученную смесь 3 дня. Растворитель удаляли под вакуумом и осаждали твердое желтое вещество. Твердое вещество суспендировали в воде, перемешивали в течение ночи при к.т., фильтровали и сушили, в результате чего получали 18,6 г (81%) (после сушки вес уменьшался ~ 34%) указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества: температура плавления 152-154°C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 4,69 (dd, J = 9,6 Гц, J = 6,7 Гц, 1H, CH в хиральном центре), 4,02 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,86 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,53-3,24 (m, 4H, CH), 2,30-2,20 (m, 1H, CH), 2,04-1,72 (m, 3H, CH и CH), 1,56 (s, 2H, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ 167,3, 163,1, 83,9, 57,2, 45,4, 37,8, 29,0, 22,9, 21,6; IR (KBr) 3474, 1745 (C=O), 1687 (C=O), 1448, 1377, 1360, 1308, 1227, 1159, 1062см; [α]+124,5 ° (c = 1,3, хлороформ); анал. расч. для CHBrNO: C 41,24, H 4,61, N 5,34. Эксп.: C 41,46, H 4,64, N 5,32.
нагреваниес обр. хол(R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропропановая кислота
3
2
4
6
a
b
D
4
7
3
1
-1
26
(2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановая кислота. Смесь бромлактона (18,5 г, 71 ммоль) в 300 мл 24% растворе HBr нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. Полученный раствор разбавляли солевым раствором (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл x 4). Объединенные экстракты промывали насыщенным NaHCO (100 мл x 4). Водный раствор подкисляли концентрированной HCl до pH=1, и затем экстрагировали этилацетатом (100 мл x 4). Объединенный органический раствор сушили на NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом досуха. Перекристаллизация из толуола давала 10,2 г (86%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления107-109 °C); H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 3,63 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 3,52 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 1,35 (s, 3H, Me); IR (KBr) 3434 (OH), 3300-2500 (COOH), 1730 (C=O), 1449, 1421, 1380, 1292, 1193, 1085 см; [α]+10,5° (c = 2,6, MeOH); анал. расч. для CHBrO: C 26,25, H 3,86. Эксп.: C 26,28, H 3,75.
3
3
4
Синтез (2R)-3-бром-N-(3-хлор-4-цианофенил)-2-гидрокси-2-метилпропанамида. Тионилхлорид (7,8 г, 65,5 ммоль) добавляли по каплям к охлажденному раствору (ниже 4°C) (R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты (9,0 г, 49,2моль) в 50 мл ТГФ в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч в тех же условиях. К смеси добавляли EtN (6,6 г, 65,5моль) и перемешивали в течение 20 мин в тех же условиях. Через 20 мин добавляли 4-амино-2-хлорбензонитрил (5,0 г, 32,8 ммоль) и 100 мл ТГФ, после чего смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое обрабатывали 100 мл воды, экстрагировали этилацетатом (2×150 мл). Объединенные органические экстракты промывали последовательно насыщенным раствором NaHCO (2×100 мл) и солевым раствором (300 мл). Органический слой сушили на MgSO и концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое очищали колоночной хроматографией с использованием смеси EtOAc/гексан (50:50), в результате чего получали 7,7 г (49,4%) целевого соединения в виде коричневого твердого вещества.
1
3
3
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,7 (s, 3H, CH), 3,0 (s, 1H, OH), 3,7 (d, 1H, CH), 4,0 (d, 1H, CH), 7,5 (d, 1H, ArH), 7,7 (d, 1H, ArH), 8,0 (s, 1H, ArH), 8,8 (s, 1H, NH). MS:342,1 (M+23). Температура плавления 129°C.
2-пропанол
2
3
2
3
4
2
2
Синтез (S)-N-(3-Хлор-4-цианофенил)-3-(4-цианофенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамид (Соединение формулы VIII). Смесь бромамида (2,0 г, 6,3 ммоль), безводного KCO (2,6 г, 18,9 ммоль) в 50 мл ацетона нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Полученное твердое вещество обрабатывали 4-цианофенолом (1,1 г, 9,5 ммоль) и безводным KCO (1,7 г, 12,6 ммоль) в 50 мл 2-пропанола нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Остаток обрабатывали 100 мл воды, а затем экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные экстракты в EtOAc промывали последовательно 10% раствором NaOH (4×100 мл) и солевым раствором. Органический слой сушили на MgSO, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло, которое очищали колоночной хроматографией с использованием смеси EtOAc/гексан (50:50), в результате чего получали твердое вещество. Твердое вещество перекристаллизовывали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 1,4 г (61,6%) (S)-N-(3-хлор-4-цианофенил)-3-(4-цианофенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде бесцветного твердого вещества.
1
+
°
3
3
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,61 (s, 3H, CH), 3,25 (s, 1H,OH), 4,06 (d, J = 9,15 Гц, 1H, CH), 4,50 (d, J = 9,15 Гц, 1H, CH), 6,97 – 6,99 (m, 2H, ArH), 7,53-7,59 (m, 4H, ArH), 7,97 (d, J = 2,01 Гц, 1H, ArH), 8,96 (s, 1H, NH). рассчитанная масса: 355,1, [M+Na] 378,0. Температура плавления: 103-105C.
ПРИМЕР 5
Доклинические исследования анаболических и андрогенных фармакологических свойств соединения формулы VIII на интактных и кастрированных самцах крыс
Исследовали анаболическую и адренергическую эффективность соединения формулы VIII, вводимого ежедневно путем орального гаважа. S-изомер соединения формулы VIII синтезировали и исследовали, как описано в настоящем описании.
Материалы и методы:
Самцов крыс Спрег-Доули массой приблизительно 200 г приобретали в Harlan Bioproducts for Science (Индианаполис, Индиана, США). Животных держали при 12-часовом свето-темновом цикле с неограниченным доступом к пище (рацион для стерилизуемых мышей/крыс 7012C LM-485, Harlan Teklad, Мэдисон, шт. Висконсин, США) и воде. Исследовали анаболическую и андрогенную активность соединения формулы VIII на интактных животных, а также оценивали зависимость доза-ответ в острых экспериментах на животных с удаленными яичками (ORX). Также оценивали регенеративные эффекты соединения формулы VIII в хроническом эксперименте на крысах с уделенными яичками (9 дней).
Для этого исследования исследуемый продукт взвешивали и растворяли 10% ДМСО (Fisher), разбавленного полиэтиленгликолем PEG 300 (Acros Organics, Нью-Джерси, США) для получения определенных дозировок. Животных содержали в группах по 2 - 3 животных на группу. Животных случайным образом распределяли в одну из семи групп, включающих 4-5 животных на группу. Контрольные группы (интактные и с удаленными яичниками) ежедневно получали нейтральную основу. Соединение формулы VIII вводили перорально путем гаважа в дозах 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день как для групп с интактными животными, так и для групп животных с удаленными яичками. В соответствующих случаях животных кастрировали в первый день исследования. Лечение соединением формулы VIII начинали через девять дней после удаления яичников после удаления яичек и осуществляли ежедневно путем орального гаважа в течение 14 дней.
Животных умерщвляли под действием анестезии (кетамин/ксиалзин, 87:13 мг/кг/день) и регистрировали массу тела. Дополнительно вентральную долю предстательной железы, семенные пузырьки и мышцу, поднимающую задний проход, удаляли, взвешивали по отдельности, нормировали на массу тела, и выражали в процентах от интактного контроля. Для сравнения отдельных групп, получавших различные дозы, с контрольной группой использовали Т-критерий Стьюдента. Значимость определяли a priori с Р-значением < 0,05. В качестве меры андрогенной активности определяли значения массы вентральной доли предстательной железы и семенных пузырьков, а массу мышцы, поднимающей задний проход, определяли в качестве меры анаболической активности. Брали кровь из брюшной аорты, центрифугировали и замораживали сыворотку при -80ºC, а потом определяли уровни гормонов в сыворотке. Определяли концентрации лютеинизирующего гормона (ЛГ) и фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) в сыворотке.
Результаты:
Был проведен ряд исследований зависимости доза-ответ на интактных и кастрированных крысах с целью оценки активности и эффективности соединения формулы VIII как в андрогенных тканях (предстательная железа и семенные пузырьки), так и в анаболических тканях (мышца, поднимающая задний проход). У интактных животных лечение соединением формулы VIII приводило к снижению массы предстательной железы и семенных пузырьков, а масса мышцы, поднимающей задний проход, значительно увеличивалась. Масса мышцы, поднимающей задний проход, после лечения соединением формулы VIII составляла 107% ± 5%, 103% ± 7%, 97% ± 7%, 103% ± 5%, 118% ± 7% и 118% ± 7% от интактных контролей после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1 мг/день, соответственно. Значения массы предстательной железы составляли 103% ± 10%, 99% ± 10%, 58% ± 10%, 58% ± 15%, 65% ± 20%, и 77% ± 23% от интактных контролей после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Это значимые результаты, поскольку современные андрогенные терапевтические средства противопоказаны некоторым группам пациентам из-за пролиферативных эффектов, вызываемых андрогенами в тканях предстательной железы и молочных желез. Однако многим пациентами из этих групп были бы полезны анаболические эффекты, оказываемые этими тканями на мышцы и кости. Поскольку соединение формулы VIII продемонстрировало тканеспецифичные анаболические эффекты, оно может дать возможность лечить пациентов, которым раньше были противопоказаны андрогены.
У кастрированных животных с удаленными яичками значения массы предстательной железы после лечения соединением формулы VIII составляли 12% ± 2%, 17% ± 6%, 31% ± 3%, 43% ± 15%, 54% ± 17%, 58% ± 10% и 73% ± 12% от интактных контролей после применения доз 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Аналогично, значения массы семенных пузырьков составляли 10% ± 2%, 10% ± 3%, 13% ± 4%, 21% ± 6%, 43% ± 8%, 51% ± 9%, и 69% ± 14% интактных контролей после применения доз 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Было зафиксировано значительное увеличение массы мышцы, поднимающей задний проход, во всех группах, получавших разные дозы исследуемого соединения, по сравнению с интактными контролями. Значения массы мышцы, поднимающей задний проход, составляли 40% ± 5%, 52% ± 8%, 67% ± 9%, 98% ± 10%, 103% ± 12%, 105% ± 12% и 110% ± 17% от интактных контролей в группах, получавших дозу 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1,0 мг/день, соответственно.
Максимальная стимуляция мышцы, поднимающей задний проход, при применении тестостерона пропионата (TP, ТП) и S-3-(4-ацетиламинофенокси)-2-гидрокси-2-метил-N-(4-нитро-3-трифторметилфенил)пропионамида (соединение формулы XII) составляла 104% и 101%, соответственно. Эти данные показывают, что соединение формулы VIII продемонстрировано значительно более высокую эффективность и активность, чем TP и соединение формулы XII. Взятые вместе, эти данные показывают, что соединение формулы VIII способно стимулировать рост мышц в присутствии или в отсутствие тестостерона и при этом оказывать антипролиферативное воздействие на предстательную железу. Эти данные показывают, что соединение формулы VIII восстанавливают утраченную мышечную массу у пациентов с саркопенией и кахексией. Кроме того, антипролиферативные эффекты соединения формулы VIII в предстательной железе могут дать некоторым группам пациентов, которым к настоящее время противопоказаны андрогены, доступ к анаболическим средствам.
Анаболические соотношения получали путем сравнения массы мышц и предстательной железы у кастрированных крыс. Полученные значения составляли 3,02, 2,13, 2,27, 1,90, 1,83 и 1,51 после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1 мг/день, соответственно.
У животных, получавших 1 мг/день соединения формулы VIII, масса предстательной железы составляла 77% ± 23%, а масса мышцы, поднимающей задний проход, составляла 118% ± 7% от значений интактного контроля, соответственно. Соединение формулы VIII поддерживало массу предстательной железы после удаления яичек на уровне 73 ± 12% от интактных контролей, и массу мышцы, поднимающий задний проход, на уровне 110± 17% интактных контролей. Производная формулы VIII доза, составляющая, 0,1 мг/день может восстановить мысу мышцы, поднимающей задний проход, до 100%, но при этом такая доза восстановила бы только 43 ± 15% массы предстательной железы.
ПРИМЕР 6
Синтез соединения формулы IX
°°
1
13
-1
26
2
4
6
2
2
2
6
D
9
13
3
(2R)-1-метакрилоилпирролидин–2-карбоновая кислота. D-пролин, 14,93 г, 0,13моль) растворяли в 71 мл 2н. раствора NaOH и охлаждали в ванне со льдом; полученный щелочной раствор разбавляли ацетоном (71 мл). Раствор в ацетоне (71 мл) метакрилоил хлорида (13,56 г, 0,13моль) и 2 н. раствор NaOH (71 мл) одновременно добавляли в течение 40 мин к водному раствору D-пролина в ванне со льдом. РН смеси поддерживали на уровне 10-11на протяжении добавления метакрилоила хлорида. После перемешивания (3ч, КТ), смесь выпаривали под вакуумом при температуре при 35-45°C чтобы удалить ацетон. Полученный раствор промывали этиловым эфиром и подкисляли до pH 2 концентрированной HCl. Кислую смесь насыщали хлоридом натрия (NaCl) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенные экстракты сушили над NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный продукт в виде бесцветного масла. Перекристаллизация этого масла из этилового эфира и гексанов давала 16,2 г (68%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления102-103°C); ЯМР-спектр этого соединения продемонстрировал существование двух ротамеров указанного в заголовке соединения. H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 5,28 (s) и 5,15 (s) для первого ротамера, 5,15 (s) и 5,03 (s) для второго ротамера (общ. 2H для обоих ротамеров, винил CH), 4,48-4,44 для первого ротамера, 4,24-4,20 (m) для второго ротамера (общ. 1H для обоих ротамеров, CH в хиральном центре), 3,57-3,38 (m, 2H, CH), 2,27-2,12 (1H, CH), 1,97-1,72 (m, 6H, CH, CH, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ для основного ротамера 173,3, 169,1, 140,9, 116,4, 58,3, 48,7, 28,9, 24,7, 19,5: для минорного ротамера 174,0, 170,0, 141,6, 115,2, 60,3, 45,9, 31,0, 22,3, 19,7; IR (KBr) 3437 (OH), 1737 (C=O), 1647 (CO, COOH), 1584, 1508, 1459, 1369, 1348, 1178 см; [α]+80,8° (c = 1, MeOH); анал. расч. для CHNO: C 59,00, H 7,15, N 7,65. Эксп.: C 59,13, H 7,19, N 7,61.
КТNBS/ДМФА
1
13
-1
26
6
a
b
2
2
6
D
9
12
3
(3R,8aR)-3-бромметил-3-метил-тетрагидро-пирроло[2,1-c][1,4]оксазин-1,4-дион. Раствор NBS (23,5 г, 0,132моль) в 100 мл диметилформамида добавляли по каплям к перемешиваемому раствору (метил-акрилоил)-пирролидина (16,1 г, 88 ммоль) в 70 мл диметилформамида в атмосфере аргона при к.т. и перемешивали полученную смесь 3 дня. Растворитель удаляли под вакуумом, и осаждали твердое желтое вещество. Твердое вещество суспендировали в воде, перемешивали в течение ночи при к.т., фильтровали и сушили, в результате чего получали 18,6 г (81%) (после сушки вес уменьшался ~ 34%) указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества: температура плавления152-154°C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 4,69 (dd, J = 9,6 Гц, J = 6,7 Гц, 1H, CH в хиральном центре), 4,02 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,86 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,53-3,24 (m, 4H, CH), 2,30-2,20 (m, 1H, CH), 2,04-1,72 (m, 3H, CH и CH), 1,56 (s, 2H, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ 167,3, 163,1, 83,9, 57,2, 45,4, 37,8, 29,0, 22,9, 21,6; IR (KBr) 3474, 1745 (C=O), 1687 (C=O), 1448, 1377, 1360, 1308, 1227, 1159, 1062см; [α]+124,5 ° (c = 1,3, хлороформ); анал. расч. для CHBrNO: C 41,24, H 4,61, N 5,34. Эксп.: C 41,46, H 4,64, N 5,32.
3
2
4
6
a
b
D
4
7
3
1
-1
26
(2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановая кислота. Смесь бромлактона (18,5 г, 71 ммоль) в 300 мл 24%го HBr нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. Полученный раствор разбавляли солевым раствором (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×4). Объединенные экстракты промывали насыщенным NaHCO (100 мл×4). Водный раствор подкисляли концентрированной HCl до pH=1 и затем экстрагировали этилацетатом (100 мл×4). Объединенный органический раствор сушили на NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом досуха. Перекристаллизация из толуола давала 10,2 г (86%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления107-109 °C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 3,63 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 3,52 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 1,35 (s, 3H, Me); IR (KBr) 3434 (OH), 3300-2500 (COOH), 1730 (C=O), 1449, 1421, 1380, 1292, 1193, 1085 см; [α]+10,5° (c = 2,6, MeOH); анал. расч. для CHBrO: C 26,25, H 3,86. Эксп.: C 26,28, H 3,75.
3
3
4
2
2
2
2
Синтез (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида. Тионилхлорид (46,02 г, 0,39моль) добавляли по каплям к охлажденному раствору (ниже 4°C) (R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты (51,13 г, 0,28моль) в 300 мл ТГФ в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч в тех же условиях. К смеси добавляли EtN (39,14 г, 0,39моль) и перемешивали в течение 20 мин в тех же условиях. Через 20 мин 5-амино-2-цианобензотрифторид (40,0 г, 0,21моль), 400 мл ТГФ добавляли, после чего смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое обрабатывали 300 мл воды, экстрагировали этилацетатом (2×400 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO (2×300 мл) и солевым раствором (300 мл). Органический слой сушили на MgSO и концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое очищали колоночной хроматографией с использованием CHCl/EtOAc (80:20), в результате чего получали твердое вещество. Это твердое вещество перекристаллизовывали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 55,8 г (73,9%) (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде светло-желтого твердого вещества.
1
-
°
3
3
2
2
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,66 (s, 3H, CH), 3,11 (s, 1H, OH), 3,63 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 4,05 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 7,85 (d, J = 8,4 Гц, 1H, ArH), 7,99 (dd, J = 2,1, 8,4 Гц, 1H, ArH), 8,12 (d, J = 2,1 Гц, 1H, ArH), 9,04 (bs, 1H, NH). рассчитанная масса: 349,99, [M-H] 349,0. Температура плавления: 124-126C.
(2<i>R</i>)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]- 2-гидрокси-2-метилпропанамид
(S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4- цианофенокси-2-гидрокси-2-метилпропанамид
2
3
4
2
2
2
2
Синтез (S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-цианофенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамида (Соединение формулы IX). Смесь бромамида ((2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида, 50 г, 0,14моль), безводного KCO (59,04 г, 0,43моль), 4-цианофенола (25,44 г, 0,21моль) в 500 мл 2-пропанола нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Полученный остаток обрабатывали 500 мл воды, а затем экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные экстракты в EtOAc промывали 10% раствором NaOH (4×200 мл) и солевым раствором. Органический слой сушили на MgSO, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло, которое обрабатывали 300 мл этанола и активированным углем. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1ч, после чего горячую смесь фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло. Это масло очищали колоночной хроматографией с использованием CHCl/EtOAc (80:20), в результате чего получали масло, которое кристаллизовали из CHCl/гексан, в результате чего получали 33,2 г (59,9%) (S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-цианофенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде бесцветного твердого вещества (типа хлопка).
1
-
3
3
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,63 (s, 3H, CH), 3,35 (s, 1H,OH), 4,07 (d, J = 9,04 Гц, 1H, CH), 4,51 (d, J = 9,04 Гц, 1H, CH), 6,97-6,99 (m, 2H, ArH), 7,57-7,60 (m, 2H, ArH), 7,81 (d, J = 8,55 Гц, 1H, ArH), 7,97 (dd, J = 1,95, 8,55 Гц, 1H, ArH), 8,12 (d, J = 1,95 Гц, 1H, ArH), 9,13 (bs, 1H, NH). Рассчитанная масса: 389,10, [M-H] 388,1. Температура плавления: 92-94°C.
ПРИМЕР 7
Андрогенная и анаболическая активность у интактных крыс и крыс с удаленными яичками соединения формулы IX
Материалы и методы:
Самцов крыс Спрег-Доули массой приблизительно 200 г приобретали в Harlan Bioproducts for Science (Индианаполис, Индиана, США). Животных держали при 12-часовом свето-темновом цикле с неограниченным доступом к пище (рацион для стерилизуемых мышей/крыс 7012C LM-485, Harlan Teklad, Мэдисон, шт. Висконсин, США) и воде. Исследовали анаболическую и андрогенную активность соединения формулы IX у интактных животных, а также зависимость доза-ответ в остром эксперименте у животных после удаления яичек (ORX). Также оценивали регенеративные эффекты соединения формулы IX в хроническом эксперименте (9 дней) на крысах с удаленными яичками (ORX).
Соединение взвешивали и растворяли в 10% ДМСО (Fisher), разбавленным ПЭГ300 (Acros Organics, Нью-Джерси, США) и получали соответствующие концентрации с разными дозировками. Животных содержали в группах по 2-3 животных в группе. Интактных животных и животных с удаленными яичками случайным образом распределяли в одну из семи групп, состоящих из 4-5 животных на группу. Контрольные группы (интактные и с удаленными яичниками) ежедневно получали нейтральную основу. Соединение формулы IX вводили перорально путем гаважа в дозах 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1 мг/день как для групп с интактными животными, так и для групп животных с удаленными яичками.
Кастрированных животных (в первый день исследования) случайным образом распределяли в группы (4-5 животных/группу) для введения до 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1 мг/день для определения зависимости доза-ответ. Введение начинали через девять дней после удаления яичек и осуществляли ежедневно путем орального гаважа в течение 14 дней. Животных умерщвляли под действием анестезии (кетамин/ксиалзин, 87:13 мг/кг/день) после введения соответствующих доз соединения в течение 14 дней и регистрировали их массу тела. Дополнительно извлекали вентральную долю предстательной железы, семенные пузырьки и мышцу, поднимающую задний проход, взвешивали по отдельности, нормировали на массу тела и выражали в процентах от интактного контроля. Для сравнения отдельных групп, получавших различные дозы, с контрольной группой использовали Т-критерий Стьюдента. Значимость определяли a priori с Р-значением < 0,05. В качестве меры андрогенной активности определяли значения массы вентральной доли предстательной железы и семенных пузырьков, и массу мышцы, поднимающей задний проход, определяли в качестве меры анаболической активности. Брали кровь из брюшной аорты, центрифугировали и замораживали сыворотку при -80ºC, а потом определяли уровни гормонов в сыворотке. Определяли концентрации лютеинизирующего гормона (ЛГ) и фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) в сыворотке.
Результаты:
У интактных животных масса предстательной железы после обработки соединением формулы IX составляла 111% ± 21%, 88% ± 15%, 77% ± 17%, 71% ± 16%, 71% ± 10% и 87% ± 13% от интактных контролей при применении доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Аналогично, масса семенных пузырьков снижалась до 94% ± 9%, 77% ± 11%, 80% ± 9%, 73% ± 12%, 77% ± 10% и 88% ± 14% интактных контролей при использовании доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1 мг/день, соответственно. Наблюдали значительное увеличение значений масс мышцы, поднимающей задний проход, но во всех группах дозирования, по сравнению с интактными контролями. Значения массы мышцы, поднимающей задний проход, составляли 120% ± 12%, 116% ± 7%, 128% ± 7%, 134% ± 7%, 125% ± 9% и 146% ± 17% интактных контролей в группах, получающих дозы 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1,0 мг/день, соответственно.
max
50
max
50
Соединение IX обеспечивало частичное поддержание массы предстательной железы после удаления яичек. Масса предстательной железы у контрольных животных с удаленными яичками, получавших нейтральную среду, снижалась до 5% ± 1% интактных контролей. При дозах 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1,0 мг/день, соединение формулы IX поддерживало значение массы предстательной железы на уровне 8% ± 2%, 20% ± 5%, 51% ± 19%, 56% ± 9%, 80% ± 28% и 74 ± 12,5% от интактных контролей, соответственно. У кастрированных контрольных животных масса семенных пузырьков снизилась до 13% ± 2% интактных контролей. Соединения формулы IX обеспечивало частичное поддержание массы семенных пузырьков у животных с удаленными яичками. Значения массы семенных пузырьков от животных, получавших лекарственное соединение, составляли 12% ± 4%, 17% ± 5%, 35% ± 10%, 61% ± 15%, 70% ± 14%, и 80% ± 6% интактных контролей при дозах 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1,0 мг/день, соответственно. У контрольных животных с удаленными яичками масса мышцы, поднимающей задний проход, снижалась до 55% ± 7% интактных контролей. Мы наблюдали анаболический эффект в мышце, поднимающей задний проход, у животных, получавших соединения формулы IX. Соединения формулы IX обеспечивали полное сохранение массы мышцы, поднимающей задний проход, в дозах > 0,1 мг/день. Дозы > 0,1 мг/день приводили к значительному увеличению массы мышцы, поднимающей задней проход, по сравнению со значениями у интактных контролей. Значения массы мышцы, поднимающей задний проход, выраженные в процентной доле от интактных контролей, составили 59% ± 6%, 85% ± 9%, 112% ± 10%, 122% ± 16%, 127 ± 12% и 129,66 ± 2% для групп, получающих дозы 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1,0 мг/день, соответственно. Значения E и ED определяли в каждой ткани с использованием нелинейного анализа в WinNonlin. Значения E составили 83% ± 25%, 85% ± 11%, и 131% ± 2% для предстательной железы, семенных пузырьков и мышцы, поднимающей задний проход, соответственно. ED в предстательной железе, семенных пузырьках, и мышце, поднимающей задний проход, составила 0,09 ± 0,07, 0,17 ± 0,05, и 0,02 ± 0,01 мг/день, соответственно.
ПРИМЕР 8
Синтез соединения формулы X
°
1
13
-1
26
2
4
6
2
2
2
6
D
9
13
3
(2R)-1-Метакрилоилпирролидин–2-карбоновая кислота. D-пролин, 14,93 г, 0,13моль) растворяли в 71 мл 2н. раствора NaOH и охлаждали в ванне со льдом; полученный щелочной раствор разбавляли ацетоном (71 мл). Раствор в ацетоне (71 мл) метакрилоил хлорида (13,56 г, 0,13моль) и 2 н. раствор NaOH (71 мл) одновременно добавляли на протяжении 40 мин к водному раствору D-пролина в ванне со льдом. РН смеси поддерживали на уровне 10-11C на протяжении добавления метакрилоила хлорида. После перемешивания (3ч, КТ) смесь выпаривали под вакуумом при температуре 35-45°C чтобы удалить ацетон. Полученный раствор промывали этиловым эфиром и подкисляли до pH 2 концентрированной HCl. Кислую смесь насыщали хлоридом натрия (NaCl) и экстрагировали этилацетатом (100 мл x 3). Объединенные экстракты сушили над NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный продукт в виде бесцветного масла. Перекристаллизация этого масла из этилового эфира и гексанов давала 16,2 г (68%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления102-103°C; ЯМР-спектр этого соединения продемонстрировал существование двух ротамеров указанного в заголовке соединения. H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 5,28 (s) и 5,15 (s) для первого ротамера, 5,15 (s) и 5,03 (s) для второго ротамера (общ. 2H для обоих ротамеров, винил CH), 4,48-4,44 для первого ротамера, 4,24-4,20 (m) для второго ротамера (общ. 1H для обоих ротамеров, CH в хиральном центре), 3,57-3,38 (m, 2H, CH), 2,27-2,12 (1H, CH), 1,97-1,72 (m, 6H, CH, CH, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ для основного ротамера 173,3, 169,1, 140,9, 116,4, 58,3, 48,7, 28,9, 24,7, 19,5: для минорного ротамера 174,0, 170,0, 141,6, 115,2, 60,3, 45,9, 31,0, 22,3, 19,7; IR (KBr) 3437 (OH), 1737 (C=O), 1647 (CO, COOH), 1584, 1508, 1459, 1369, 1348, 1178 см; [α]+80,8° (c = 1, MeOH); анал. расч. для CHNO: C 59,00, H 7,15, N 7,65. Эксп.: C 59,13, H 7,19, N 7,61.
1
13
-1
26
6
a
b
2
2
6
D
9
12
3
(3R,8aR)-3-бромметил-3-метил-тетрагидро-пирроло[2,1-c][1,4]оксазин-1,4-дион. Раствор NBS (23,5 г, 0,132моль) в 100 мл диметилформамида добавляли по каплям к перемешиваемому раствору (метил-акрилоил)-пирролидина (16,1 г, 88 ммоль) в 70 мл диметилформамида в атмосфере аргона при к.т. и перемешивали полученную смесь 3 дня. Растворитель удаляли под вакуумом и осаждали твердое желтое вещество. Твердое вещество суспендировали в воде, перемешивали в течение ночи при к.т., фильтровали и сушили, в результате чего получали 18,6 г (81%) (после сушки вес уменьшался ~ 34%) указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества: температура плавления152-154°C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 4,69 (dd, J = 9,6 Гц, J = 6,7 Гц, 1H, CH в хиральном центре), 4,02 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,86 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,53-3,24 (m, 4H, CH), 2,30-2,20 (m, 1H, CH), 2,04-1,72 (m, 3H, CH и CH), 1,56 (s, 2H, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ 167,3, 163,1, 83,9, 57,2, 45,4, 37,8, 29,0, 22,9, 21,6; IR (KBr) 3474, 1745 (C=O), 1687 (C=O), 1448, 1377, 1360, 1308, 1227, 1159, 1062см; [α]+124,5 ° (c = 1,3, хлороформ); анал. расч. для CHBrNO: C 41,24, H 4,61, N 5,34. Эксп.: C 41,46, H 4,64, N 5,32.
3
2
4
6
a
b
D
4
7
3
1
-1
26
(2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановая кислота. Смесь бромлактона (18,5 г, 71 ммоль) в 300 мл 24% раствора HBr нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. Полученный раствор разбавляли солевым раствором (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×4). Объединенные экстракты промывали насыщенным NaHCO (100 мл×4). Водный раствор подкисляли концентрированной HCl до pH=1, и затем экстрагировали этилацетатом (100 мл×4). Объединенный органический раствор сушили на NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом досуха. Перекристаллизация из толуола давала 10,2 г (86%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления107-109 °C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 3,63 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 3,52 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 1,35 (s, 3H, Me); IR (KBr) 3434 (OH), 3300-2500 (COOH), 1730 (C=O), 1449, 1421, 1380, 1292, 1193, 1085 см; [α]+10,5° (c = 2,6, MeOH); анал. расч. для CHBrO: C 26,25, H 3,86. Эксп.: C 26,28, H 3,75.
3
3
4
2
2
2
2
Синтез (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида. Тионилхлорид (46,02 г, 0,39моль) добавляли по каплям к охлажденному раствору (ниже 4°C) (R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты (51,13 г, 0,28моль) в 300 мл ТГФ в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч в тех же условиях. К смеси добавляли EtN (39,14 г, 0,39моль) и перемешивали в течение 20 мин в тех же условиях. Через 20 мин добавляли 5-амино-2-цианобензотрифторид (40,0 г, 0,21моль), 400 мл ТГФ, после чего смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое обрабатывали 300 мл воды, экстрагировали этилацетатом (2×400 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO (2×300 мл) и солевым раствором (300 мл). Органический слой сушили на MgSO и концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое очищали колоночной хроматографией с использованием CHCl/EtOAc (80:20), в результате чего получали твердое вещество. Это твердое вещество перекристаллизовывали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 55,8 г (73,9%) (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде светло-желтого твердого вещества.
1
-
°
3
3
2
2
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,66 (s, 3H, CH), 3,11 (s, 1H, OH), 3,63 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 4,05 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 7,85 (d, J = 8,4 Гц, 1H, ArH), 7,99 (dd, J = 2,1, 8,4 Гц, 1H, ArH), 8,12 (d, J = 2,1 Гц, 1H, ArH), 9,04 (bs, 1H, NH). рассчитанная масса: 349,99, [M-H] 349,0. Температура плавления: 124-126C.
(2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамид(S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-фторфенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамид2-бутанон
2
3
4
2
2
2
2
Синтез (S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-фторфенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамида (соединение формулы X). Смесь бромамида ((2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида, 50 г, 0,14моль), безводного KCO (59,04 г, 0,43моль), 4-фторфенола (18,83 г, 0,17моль) в 500 мл 2-бутанона нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Полученный остаток обрабатывали 500 мл воды, а затем экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные экстракты в EtOAc промывали 10% раствором NaOH (4×200 мл) и солевым раствором. Органический слой сушили на MgSO, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло, которое обрабатывали 300 мл этанола и активированным углем. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1ч, после чего горячую смесь фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло. Это масло очищали колоночной хроматографией с использованием CHCl/EtOAc (80:20), в результате чего получали масло, которое кристаллизовали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 40,2 г (75,2%) (S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-фторфенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде бесцветного твердого вещества.
1
-
3
3
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,60 (s, 3H, CH), 3,41 (s, 1H, OH), 3,96 (d, J = 9,0 Гц, CH), 4,45 (d, J = 9,0 Гц, CH), 6,85-6,90 (m, 2H, ArH), 6,97-7,03 (m, 2H, ArH), 7,82 (d, J = 8,4 Гц, 1H, ArH), 7,98 (dd, J = 8,4, 2,1 Гц, 1H, ArH), 8,11 (d, J = 2,1 Гц, ArH), 9,14 (bs, 1H, NH); рассчитанная масса: 382,1 [M – H]; Температура плавления 143-144°C.
ПРИМЕР 9
Синтез соединения формулы XI
°
1
13
-1
26
2
4
6
2
2
2
6
D
9
13
3
(2R)-1-метакрилоилпирролидин–2-карбоновая кислота. D-пролин, 14,93 г, 0,13моль) растворяли в 71 мл 2н. раствора NaOH и охлаждали в ванне со льдом; полученный щелочной раствор разбавляли ацетоном (71 мл). Раствор в ацетоне (71 мл) метакрилоила хлорида (13,56 г, 0,13моль) и 2 н. раствор NaOH (71 мл) одновременно добавляли на протяжении 40 мин к водному раствору D-пролина в ванне со льдом. РН смеси поддерживали на уровне 10-11C на протяжении добавления метакрилоила хлорида. После перемешивания (3ч, КТ) смесь выпаривали под вакуумом при температуре при 35-45°C чтобы удалить ацетон. Полученный раствор промывали этиловым эфиром и подкисляли до pH 2 концентрированной HCl. Кислую смесь насыщали хлоридом натрия (NaCl) и экстрагировали этилацетатом (100 мл x 3). Объединенные экстракты сушили над NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный продукт в виде бесцветного масла. Перекристаллизация этого масла из этилового эфира и гексанов давала 16,2 г (68%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления102-103 °C; ЯМР-спектр этого соединения продемонстрировал существование двух ротамеров указанного в заголовке соединения. H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 5,28 (s) и 5,15 (s) для первого ротамера, 5,15 (s) и 5,03 (s) для второго ротамера (общ. 2H для обоих ротамеров, винил CH), 4,48-4,44 для первого ротамера, 4,24-4,20 (m) для второго ротамера (общ. 1H для обоих ротамеров, CH в хиральном центре), 3,57-3,38 (m, 2H, CH), 2,27-2,12 (1H, CH), 1,97-1,72 (m, 6H, CH, CH, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ для основного ротамера 173,3, 169,1, 140,9, 116,4, 58,3, 48,7, 28,9, 24,7, 19,5: для минорного ротамера 174,0, 170,0, 141,6, 115,2, 60,3, 45,9, 31,0, 22,3, 19,7; IR (KBr) 3437 (OH), 1737 (C=O), 1647 (CO, COOH), 1584, 1508, 1459, 1369, 1348, 1178 см; [α]+80,8° (c = 1, MeOH); анал. расч. для CHNO: C 59,00, H 7,15, N 7,65. Эксп.: C 59,13, H 7,19, N 7,61.
1
13
-1
26
6
a
b
2
2
6
D
9
12
3
(3R,8aR)-3-бромметил-3-метил-тетрагидро-пирроло[2,1-c][1,4]оксазин-1,4-дион. Раствор NBS (23,5 г, 0,132моль) в 100 мл диметилформамида добавляли по каплям к перемешиваемому раствору (метил-акрилоил)-пирролидина (16,1 г, 88 ммоль) в 70 мл диметилформамида в атмосфере аргона при к.т. и перемешивали полученную смесь 3 дня. Растворитель удаляли под вакуумом, и осаждали твердое желтое вещество. Твердое вещество суспендировали в воде, перемешивали в течение ночи при к.т., фильтровали, и сушили, в результате чего получали 18,6 г (81%) (после сушки вес уменьшался ~ 34%) указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества: температура плавления152-154°C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 4,69 (dd, J = 9,6 Гц, J = 6,7 Гц, 1H, CH в хиральном центре), 4,02 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,86 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,53-3,24 (m, 4H, CH), 2,30-2,20 (m, 1H, CH), 2,04-1,72 (m, 3H, CH и CH), 1,56 (s, 2H, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ 167,3, 163,1, 83,9, 57,2, 45,4, 37,8, 29,0, 22,9, 21,6; IR (KBr) 3474, 1745 (C=O), 1687 (C=O), 1448, 1377, 1360, 1308, 1227, 1159, 1062см; [α]+124,5 ° (c = 1,3, хлороформ); анал. расч. для CHBrNO: C 41,24, H 4,61, N 5,34. Эксп.: C 41,46, H 4,64, N 5,32.
3
2
4
6
a
b
D
4
7
3
1
-1
26
(2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановая кислота. Смесь бромлактона (18,5 г, 71 ммоль) в 300 мл 24% раствора HBr нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. Полученный раствор разбавляли солевым раствором (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл x 4). Объединенные экстракты промывали насыщенным NaHCO (100 мл x 4). Водный раствор подкисляли концентрированной HCl до pH = 1, и затем экстрагировали этилацетатом (100 мл x 4). Объединенный органический раствор сушили на NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом досуха. Перекристаллизация из толуола давала 10,2 г (86%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления107-109 °C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 3,63 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 3,52 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 1,35 (s, 3H, Me); IR (KBr) 3434 (OH), 3300-2500 (COOH), 1730 (C=O), 1449, 1421, 1380, 1292, 1193, 1085 см; [α]+10,5° (c = 2,6, MeOH); анал. расч. для CHBrO: C 26,25, H 3,86. Эксп.: C 26,28, H 3,75.
3
3
4
2
2
2
2
Синтез (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида. Тионилхлорид (46,02 г, 0,39моль) добавляли по каплям к охлажденному раствору (ниже 4°C) (R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты (51,13 г, 0,28моль) в 300 мл ТГФ в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч в тех же условиях. К смеси добавляли EtN (39,14 г, 0,39моль) и перемешивали в течение 20 мин в тех же условиях. Через 20 мин добавляли 5-амино-2-цианобензотрифторид (40,0 г, 0,21моль), 400 мл ТГФ, после чего смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое обрабатывали 300 мл воды, экстрагировали этилацетатом (2×400 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO (2×300 мл) и солевым раствором (300 мл). Органический слой сушили на MgSO и концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое очищали колоночной хроматографией с использованием CHCl/EtOAc (80:20), в результате чего получали твердое вещество. Это твердое вещество перекристаллизовывали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 55,8 г (73,9%) (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде светло-желтого твердого вещества.
1
-
°
3
3
2
2
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,66 (s, 3H, CH), 3,11 (s, 1H, OH), 3,63 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 4,05 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 7,85 (d, J = 8,4 Гц, 1H, ArH), 7,99 (dd, J = 2,1, 8,4 Гц, 1H, ArH), 8,12 (d, J = 2,1 Гц, 1H, ArH), 9,04 (bs, 1H, NH). рассчитанная масса: 349,99, [M-H] 349,0. Температура плавления: 124-126C.
2
3
4
2
2
2
2
Синтез (S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-хлорфенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамида (соединение формулы XI). Смесь бромамид-((2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида, 50 г, 0,14моль), безводного KCO (59,04 г, 0,43моль), 4-хлорфенола (21,60 г, 0,17моль) в 500 мл 2-бутанона нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Полученный остаток обрабатывали 500 мл воды, а затем экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные экстракты в EtOAc промывали 10% раствором NaOH (4×200 мл) и солевым раствором. Органический слой сушили на MgSO, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло, которое обрабатывали 300 мл этанола и активированным углем. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1ч, после чего горячую смесь фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло. Это масло очищали колоночной хроматографией с использованием CHCl/EtOAc (80:20), в результате чего получали масло, которое кристаллизовали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 40,86 г (73,2%) (S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-хлорфенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамид в виде бесцветного твердого вещества (типа хлопка).
1
-
3
3
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,63 (s, 3H, CH), 3,35 (s, 1H, OH), 4,07 (d, J = 9,04 Гц, 1H, CH), 4,51 (d, J = 9,0 Гц, 1H, CH), 6,97-6,99 (m, 2H, ArH), 7,57-7,60 (m, 2H, ArH), 7,81 (d, J = 8,5 Гц, 1H, ArH), 7,97 (dd, J = 2,0, 8,5 Гц, 1H, ArH), 8,12 (d, J = 2,0 Гц, 1H, ArH), 9,13 (bs, 1H, NH); рассчитанная масса: 398,1 [M - H] .
ПРИМЕР 10
Андрогенная и анаболическая активность соединений согласно настоящему изобретению формул X и XI у интактных крыс и крыс с удаленными яичками
Животные. Не достигших зрелости крыс Спрег-Доули массой от 90 до 100 г приобретали в Harlan Biosciences (Индианаполис, Индиана, США). Животных держали при 12-ч свето-темновом цикле с неограниченным доступом к еде и воде.
Дизайн исследования. Крыс случайным образом разделяли на группы лечения. За один день до начала лекарственного лечения крыс по одной извлекали из клетки, взвешивали и анестезировали путем внутрибрюшинного введения смеси кетамин/ксилазин (87/13 мг/кг/день; приблизительно 1 мл на кг). После достижения подходящего уровня анастезии (т.е. отсутствия реакции на щипок за палец на ноге) животным ставили ушную метку для идентификации. Затем животных помещали на стерильный поддон, протирали их живот и мошонку бетадином и 70% спиртом. Через разрез по срединной линии мошонки удаляли яички, для лигирования супратестикулярной ткани перед удалением каждого яичка накладывали стерильный шов. Место хирургического вмешательства закрывали стерильными зажимами для ран и очищали этот участок бетаином. Животным давали восстановиться на стерильном поддоне (до восстановления способности стоять) и возвращали в клетку.
Через 24 часа животных снова анестезировали смесью кетамин/ксилазин, и помещали осмотический насос/насосы Alzet (модель 2002) под кожу в лопаточной области. В данном примере лопаточную область брили и очищали (бетадин и спирт) и делали небольшой разрез (1 см) стерильным скальпелем. После введения осмотического насоса рану закрывали стерильным зажимом для ран из нержавеющей стали. Животным давали восстановиться и возвращали в их клетку. Осмотические насосы содержали соответствующее средство, растворенное в полиэтиленгликоле 300 (PEG300). Осмотические насосы наполняли соответствующим раствором за один день до имплантации. Животных ежедневно проверяли на наличие признаков острой токсичности (например, летаргия, лохматая шерсть).
После 14 дней лекарственного лечения крыс анестезировали смесью кетамин/ксилазин. Затем животных умерщвляли путем обескровливания под анестезией. Образцы крови брали путем венепункции брюшной аорты и использовали для полного анализа клеточного состава крови. Часть крови помещали в отдельную пробирку, центрифугировали при 12 000g в течение 1 минуты, отделяли слой плазмы и замораживали при–20°C. Извлекали вентральные доли предстательной железы, семенные пузырьки, мышцу, поднимающую задний проход, печень, почки, селезенку, легкие и сердце, очищали их от посторонней ткани, взвешивали и помещали в сосуды, содержащие 10% забуференного нейтрального формалина. Законсервированные ткани отправляли на гистопатологический анализ.
Для целей анализа данных массы всех органов нормировали на массу тела и исследовали на наличие статистически значимой разницы методом однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA). Значения массы предстательной железы и семенных пузырьков использовали в качестве показателей для оценки андрогенной активности, а массы мышцы, поднимающей задний проход, использовали для оценки анаболической активности.
Аффинность связывания соединения формулы X составляет 3,3 ±0,08 нМ. Аффинность связывания соединения формулы XI составляет 3,4±0,08 нМ.
Андрогенную и анаболическую активность соединения формулы X исследовали в модели с использованием кастрированых крыс после 14 дней лечения.
Соединение формулы X продемонстрировало тканеспецифичные фармакологические эффекты у кастрированных самцов крыс, причем эффективность в анаболических тканях (т.е. мышце, поднимающей задний проход) была выше, чем в андрогенных тканях (т.е., в предстательной железе и семенных пузырьках) (Таблица 2). Соединение формулы X продемонстрировало низкую фармакологическую активность в предстательной железе (8,7± 1,39% от интактного животного при дозе 1,0 мг/день) и семенных пузырьках (10,7± 0,91% от интактного животного при дозе 1,0 мг/день), что указывает на то, что в этих тканях оно действует как слабый частичный агонист. Следует отметить, что соединение формулы X продемонстрировало высокую анаболическую активность в дозе 1,0 мг/день, обеспечивая восстановление мышцы, поднимающей задний проход, до уровня, равного 75,2± 9,51% от наблюдаемого у интактных животных.
Таблица 2. Средние значения массы (среднее арифметическое ± стандартное отклонение) органов для соединения формулы X
предстательная железа
мышца, поднимающая задний проход
семенные пузырьки
Интактный контроль
100 ± 11,28
100 ± 12,12
100 ± 2,48
Кастрированный контроль
7,6 ± 0,68
45,9 ± 10,84
8,4 ± 1,05
0,10 мг/день
6,4 ± 0,82
54,9 ± 5,77
8,8 ± 1,18
0,25 мг/день
5,7 ± 0,61
61,0 ± 5,23
7,6 ± 1,37
0,50 мг/день
6,2 ± 0,56
55,0 ± 9,23
9,3 ± 1,57
0,75 мг/день
7,6 ± 0,74
68,9 ± 8,46
9,8 ± 3,65
1,00 мг/день
8,7 ± 1,39
75,2 ± 9,51
10,7 ± 0,91
Андрогенную и анаболическую активность соединения формулы XI изучали на модели с использованием кастрированных крыс через 14 дней после введения.
Как показано на Фигуре 2, значения массы предстательной железы, семенных пузырьков и мышцы, поднимающей задний проход, у кастрированных, получавших в качестве лечения нейтральную основу крыс значительно снижалась из-за прекращения выработки эндогенных андрогенов. Экзогенное введение тестротерона пропионата, андроэргического и анаболического стероида, дозозависимым образом повышает массу предстательной железы, семенных пузырьков и мышцы, поднимающей задний проход, у кастрированных крыс. Лечение соединением формулы XI приводило к дозозависимому увеличению массы предстательной железы, семенных пузырьков и мышцы, поднимающей задний проход. По сравнению с тестостероном пропионатом соединение формулы XI показало более низкую эффективность и собственную активность в отношении увеличения массы предстательной железы и семенных пузырьков, но более низкую эффективность и собственную активность в отношении увеличения массы мышцы, поднимающей задний проход. В частности, соединение формулы XI в низкой дозе 0,3 мг/день обеспечивало поддержание массы мышцы, поднимающей задний проход, у кастрированных крыс на том же уровне, что и у интактных животных. Соответственно, соединение формулы XI представляет собой эффективное нестероидное анаболическое средство с более низкой андрогенной активностью, но более высокой анаболической активностью, чем тестостерон пропионат.
ПРИМЕР 11
Синтез (S) энантиомера соединения формулы XII
Синтез (2R)-1-метакрилоилпирролидин-2-карбоновой кислоты. 72-литровую колбу с механической мешалкой и впускным отверстием для инертной атмосферы помещали в охлаждающую ванну. Колбу помещали в атмосферу аргону и помещали в нее 5000 г (43,4 моль) D-пролина [ICN лот № 7150E, ≥99%], 11,9 л 4 н. NaOH и 12 л ацетона. Эту смесь охлаждали до 5ºC на ванне со льдом. Готовили раствор 4548,8 г (43,5 моль) метакрилоила хлорида [Aldrich, лот № 12706HO, 98+%] в 12,0 л ацетона. Раствор метакрилоил хлорида и 11,9 л 4 н. раствора NaOH одновременно добавляли к реакционной смеси в 72-литровой колбе. На протяжении добавления поддерживали температуру ниже 10ºC, а pH реакционной смеси поддерживали на уровне выше или равном10. pH поддерживали путем добавления более быстрого или более медленного добавления 4 н. NaOH, в зависимости от pH раствора. Время добавления составляло приблизительно 2 ч и 40 мин. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали в течение ночи и давали ей нагреться до к.т.
Ацетон удаляли на роторном испарителе и экстрагировали водную смесь трет-бутилметиловым эфиром (28,0 л). Эту смесь затем подкисляли концентрированной HCl (6568,1 г) до pH ниже 2. Продукт выделяли путем экстракции в метиленхлориде (3×20 л). Экстракты концентрировали на роторном испарителе. Добавляли трет-бутилметиловый эфир (10 л) и концентрировали на роторном испарители чтобы осуществить замену растворителя. Добавляли дополнительное количество трет-бутилметиловый эфир (10 л) чтобы осадить продукт. Ванну роторного испарителя загружали льдом и давали продукту кристаллизоваться. Кристаллический продукт собирали и выделяли фильтрацией. Масса после сушки в вакуумной печи при 50ºC составила 4422,2 г (55,6% выход).
Синтез (3R,8R)-3-бромметил-3-метил-тетрагидропироло[2,1-c][1,4]оксазин-1,4-диона. На 50л колбу устанавливали механическую мешалку, впуск для инертной атмосферы и охлаждающее устройство. Колбу помещали в атмосферу аргона и помещали в нее 4410,0 г (24,1 моль) (2R)-1-метакрилоилпирролидин-2-карбоновой кислоты и 8,8 л диметилформамида. Затем медленно добавляли NBS (6409,6 г, 36,0 моль) в течение периода продолжительностью 2 ч и 7 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение по меньшей мере 8 ч. Добавляли воду (20,0 л) чтобы осадить продукт. Продукт оставляли перемешиваться в течение по меньшей мере 4 ч, что приводило к кристаллизации. Кристаллический продукт собирали и выделяли фильтрацией. Масса после сушки в вакуумной печи при 50ºC составила 5532,1 г (87,7% выход).
мол.масса:262,10
Синтез (2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты. На 50л колбу устанавливали механическую мешалку, вход для инертной атмосферы и нагреватель. Колбу помещали в атмосферу аргона и помещали в нее 5472,3 г (20,8 моль) (3R,8R)-3-бромметил-3-метил-тетрагидропироло[2,1-c][1,4]оксазин-1,4-диона и 14,175 л деионизованной воды и 14,118,4 г 48% HBr. Реакционную смесь нагревали до 102ºC в течение 6ч и давали остыть до 31ºC. К реакционной смеси добавляли солевой раствор (20 L) и экстрагировали продукт с использованием 6 x 20,4 литров трет-бутилметилового эфира. Органические слои объединяли и концентрировали с использованием роторного испарителя. В роторный испаритель помещали толуол (4,0 л). Продукт сушили путем перегонки толуола. Эту смесь концентрировали при помощи роторного испарителя. Продукт перекристаллизовывали из толуола (45,0 л) путем нагревания до 100ºC, чтобы растворить продукт. Колбу охлаждали на льду и давали продукту кристаллизоваться. Кристаллический продукт собирали фильтрацией и промывали толуолом (3,4 л). Масса после сушки в вакуумной печи при 50ºC составляла 3107,0 г (81,3% выход).
Синтез N-[4-нитро-3-(трифторметил)фенил]-(2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропанамида. На 50-литровую колбу устанавливали механическую мешалку, впускное устройство для инертной атмосферы и охлаждающее устройство. Колбу помещали в атмосферу аргона и помещали в нее 2961,5 г (16,2 моль) (2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты и 9,0 л ТГФ. Колбу охлаждали на льду до температуры ниже 5ºC. В реакционную колбу через капельную воронку медленно добавляли тионилхлорид (1200 мл, 16,4 моль), растворенный в 6,0 л ТГФ. Температуру реакционной смеси поддерживали на уровне ниже или равном 10ºC. Время добавления составляло 1 ч и 10 мин. Реакционную смесь оставляли перемешиваться еще на 2 ч и 50 мин. Затем добавляли 2359,4 г (11,4 моль) 4-нитро-3-трифторметиланилина (Aldrich, 98%) и 3,83 л триэтиламина в 6,0 л ТГФ в течение периода продолжительностью 3 ч и 5 мин. Температуру реакционной колбы поддерживали на уровне ниже или равном 10ºC. Ванну со льдом удаляли и оставляли реакционную смесь перемешиваться в течение 30 мин. При помощи колбонагревателя нагревали реакционную смесь до 50ºC в течение 15 ч и 10 мин. После завершения реакции, которое определяли методом ТСХ-анализа, реакционную смесь охлаждали до температуры ниже 30ºC и добавляли 7,5 л деионизованной воды. Водный слой удаляли и проводили вторую промывку водой (7,5 л). Затем органический слой промывали три раза 10% бикарбонатом (8,1 л) до достижения pH выше 7.
Растворитель удаляли на роторном испарителе. Добавляли толуол (3,0 л), а затем удаляли его на роторном испарителе чтобы высушить неочищенный продукт. Продукт растворяли в 2,0 л толуол при 65ºC. После охлаждения продукт кристаллизовался. Кристаллический продукт собирали и выделяли фильтрацией. Влажный остаток на фильтре промывали 1,0 литром толуола. Масса после сушки в вакуумной печи при 50ºC составила 3751,0 г (70,3% выход).
Синтез S-3-(4-ацетиламинофенокси)-2-гидрокси-2-метил-N-(4-нитро-3-трифторметилфенил) пропионамида (Соединение формулы XII). На 22л колбу устанавливали механическую мешалку, впускное устройство для инертной атмосферы и охлаждающее устройство. Колбу помещали в атмосферу аргона и помещали в нее 1002,8 г (2,70 моль) N-[4-нитро-3-(трифторметил)фенил]-(2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропанамида, 4,0 л ТГФ и 454,2 г (3,00 моль) 4-ацетамидофенола (Aldrich, 98%). При перемешивании в колбу добавляли 1769,9 г карбоната цезия (Aldrich, 99%). Колбу нагревали с обратным холодильником в течение по меньшей мере 8 ч и следили за ходом реакции методом ТСХ [силикагель, дихлорметан/гексан 3:1, эпоксид Rf=0,5]. После завершения реакции колбе давали остыть до к.т.
°
Добавляли воду чтобы растворить карбонат и добавляли этилацетат чтобы облегчить разделение фаз. Водную фазу отделяли как ненужную. Органическую фазу промывали второй порцией воды. Органический слой переносили в роторный испаритель и удаляли растворитель. Растворитель заменяли на этанол, помещая этанол в колбу для выпаривания вращением и удаляя некоторое количество этанола чтобы удалить весь этилацетат. Раствор в этилацетате добавляли в воду чтобы осадить продукт. Неочищенный продукт собирали фильтрацией и промывали водой. Продукт переносили обратно в роторный испаритель для кристаллизации. Этилацетат помещали в колбу для роторного испарителя для замены растворителя на этилацетат. Этилацетат удаляли под вакуумом, получая сухой продукт. Добавляли минимальное количество этилацетата, чтобы растворить продукт при 60ºC. Добавляли трет-бутилметиловый эфир, чтобы кристаллизовать продукт. После охлаждения продукт собирали фильтрацией и промывали трет-бутилметиловым эфиром. Влажный остаток на фильтре помещали обратно в роторный испаритель и загружали этанол. Замена растворителя в этаноле приводило к удалению остатка трет-бутилметилового эфира. Фильтрация раствора в этаноле в воду приводила к перекристаллизации продукта. После перемешивания продукт собирали фильтрацией и промывали водой. Масса после сушки в вакуумной печи при 50C составила 52%.
1
13
6
a
b
6
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 10,62 (s, 1H, NH), 9,75 (s, 1H, NH), 8,56 (d, J = 1,9 Гц, 1H, ArH), 8,36 (dd, J = 9,1 Гц, J = 1,9 Гц, 1H, ArH), 8,18 (d, J = 9,1 Гц, 1H, ArH), 7,45-7,42 (m, 2H, ArH), 6,85-6,82 (m, 2H, ArH), 6,25 (s, 1H, OH), 4,17 (d, J = 9,5 Гц, 1H, CHH), 3,94 (d, J = 9,5 Гц, 1H, CHH), 1,98 (s, 3H, Me), 1,43 (s, 3H, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ 174,6 (C=O), 167,7, 154,2, 143,3, 141,6, 132,8, 127,4, 123,0, 122,7 (q, J = 33,0 Гц), 122,1 (q, J = 271,5 Гц), 120,1, 118,3 (q, J = 6,0 Гц), 114,6, 74,9, 73,8, 23,8, 23,0.
ПРИМЕР 12
Доклинические исследования анаболических и андрогенных фармакологических свойств соединения формулы XII у интактных и кастрированных самцов крыс
Самцов крыс Спрег-Доули приобретали в Harlan Biosciences (Индианаполис, Индиана, США). Животных содержали при 12ч свето-темновом цикле с неограниченным доступом к пище и воде. Все исследования на животных прошли проверку и были одобрены. Молодых самцов крыс Спрег-Доули массой од 187 до 214 г случайным образом распределяли в 9 групп по 5 животных. За день до начала лекарственного лечения у групп с 4 по 6 и групп с 7 по 9 через разрез по срединной линии мошонки удаляли яички с одной стороны или с двух сторон, соответственно. Группы с 1 по 3 не подвергались хирургическому вмешательству. Все препараты давали животными в виде свежеприготовленных растворов в полиэтиленгликоле 300 (PEG 300). Группы 4 и 7 получали в качестве лечения только нейтральную основу (т.е., PEG 300). Животным в группах 3, 6, и 9 вводили тестостерона пропионат (TP, 0,5 мг/день) путем имплантации подкожных осмотических насосов (Модель 2002, Durect Corporation, Пало-Альто, CA). Животным в группах 2, 5, и 8 вводили соединение формулы XII (0,5 мг/день) путем имплантации подкожных осмотических насосов. После 14 лекарственного лечения крыс взвешивали, анестезировали и умерщвляли. Извлекали и взвешивали вентральные доли предстательной железы, семенные пузырьки и мышцу, поднимающую задний проход. Также извлекали осмотические насосы, чтобы убедиться в корректности их функционирования. Значения массы всех органов нормировали на массу тела и исследовали на присутствие статистически значимых различий с использованием однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA), с заданным a priori альфа-значением, соответствующим p < 0,05. Значения массы предстательной железы и семенных пузырьков использовали в качестве показателей для оценки андрогенной активности, а массу мышцы, поднимающей задний проход, использовали для оценки анаболической активности. Статистический анализ параметров полного клинического анализа крови или анализа химического состава сыворотки, в соответствующих случаях, осуществляли методом однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с заданным a priori альфа-значением, соответствующим p<0,05.
Результаты:
Как показано в Таблице 3 у интактных животных соединение формулы XII снижало размер предстательной железы до 79% от наблюдаемого у контрольных животных, при отсутствии статистически значимых изменений в размере семенных пузырьков или мышцы, поднимающей задний проход. Соединение формулы XII снижало размер предстательной железы и семенных пузырьков до 75% и 79%, соответственно, и увеличивало размер мышцы, поднимающей задний проход, до 108% от наблюдаемых у не получавших лечения животных в одним удаленным яичком. Эти результаты демонстрируют, что соединение формулы XII действует как частичный агонист в предстательной железе и семенных пузырьках и как полный агонист в мышце, поднимающей задний проход. Никаких отрицательных побочных эффектов отмечено не было.
Таблица 3. Сравнение андрогенных и анаболических эффектов соединения формулы XII и тестостерона пропионата (TP) у интактных крыс, крыс с одним удаленным яичком и кастрированных крыс (% от интактного контроля, n=5).
Органы
Контроль
Соединение формулы <b>XII</b>
TP
(0,5 мг/день)
(0,5 мг/день)
Интактные животные
100,00 ± 13,13
79,41 ± 9,32*<sup>†</sup>
97,45 ± 10,82
Предстатель-ная железа
Животные содним удаленным яичком
86,42 ± 19,52
74,69 ± 8,44*<sup>†</sup>
98,57 ± 7,98
Кастрированные животные
7,19 ± 1,25
32,55 ± 11,65*<sup>†‡</sup>
76,78 ± 10,43*<sup>‡</sup>
Семенные пузырьки
Интактные животные
100,00 ± 18,84
90,54 ± 12,10
103,95 ± 13,23
Животные содним удаленным яичком
102,93 ± 7,47
78,55 ± 13,58<sup>†‡</sup>
114,19 ± 23,81
Кастрированные животные
8,97 ± 1,23
16,47 ± 5,21*<sup>†‡</sup>
63,48 ± 17,05*<sup>‡</sup>
Мышца, поднимаю-щая задний проход
Интактные животные
100,00 ± 12,69
109,15 ± 14,68
95,61 ± 9,34
Животные содним удаленным яичком
92,94 ± 7,83
108,10 ± 8,92<sup>‡</sup>
98,63 ± 10,47
Кастрированные животные
42,74 ± 5,22
100,65 ± 10,86<sup>‡</sup>
87,27 ± 10,25<sup>‡</sup>
* p<0,05 по сравнению с группой интактных контролей.
†
p<0,05 по сравнению с TP при том же типе хирургического вмешательства (т.е., у интактных животных, животных с одним удаленным яичником или кастрированных животных).
‡
p<0,05 по сравнению с контрольной группой при том же типе хирургического вмешательства.
ПРИМЕР 13
Синтез (S) энантиомера соединения формулы XIII
°
1
13
-1
26
2
4
6
2
2
2
6
D
9
13
3
(2R)-1-метакрилоилпирролидин–2-карбоновая кислота. D-пролин, 14,93 г, 0,13моль) растворяли в 71 мл 2н. раствора NaOH и охлаждали в ванне со льдом; полученный щелочной раствор разбавляли ацетоном (71 мл). Раствор метакрилоил хлорида (13,56 г, 0,13моль) в ацетоне (71 мл) и 2 н. раствор NaOH (71 мл) одновременно добавляли на протяжении 40 мин к водному раствору D-пролина в ванне со льдом. РН смеси поддерживали на уровне 10-11C на протяжении добавления метакрилоила хлорида. После перемешивания (3ч, КТ) смесь выпаривали под вакуумом при температуре при 35-45°C чтобы удалить ацетон. Полученный раствор промывали этиловым эфиром и подкисляли до pH 2 концентрированной HCl. Кислую смесь насыщали хлоридом натрия (NaCl) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенные экстракты сушили над NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный продукт в виде бесцветного масла. Перекристаллизация этого масла из этилового эфира и гексанов давала 16,2 г (68%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления102-103°C; ЯМР-спектр полученного соединения продемонстрировал существование двух ротамеров указанного в заголовке соединения. H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 5,28 (s) и 5,15 (s) для первого ротамера, 5,15 (s) и 5,03 (s) для второго ротамера (общ. 2H для обоих ротамеров, винил CH), 4,48-4,44 для первого ротамера, 4,24-4,20 (m) для второго ротамера (общ. 1H для обоих ротамеров, CH в хиральном центре), 3,57-3,38 (m, 2H, CH), 2,27-2,12 (1H, CH), 1,97-1,72 (m, 6H, CH, CH, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ для основного ротамера 173,3, 169,1, 140,9, 116,4, 58,3, 48,7, 28,9, 24,7, 19,5: для минорного ротамера 174,0, 170,0, 141,6, 115,2, 60,3, 45,9, 31,0, 22,3, 19,7; IR (KBr) 3437 (OH), 1737 (C=O), 1647 (CO, COOH), 1584, 1508, 1459, 1369, 1348, 1178 см; [α]+80,8° (c = 1, MeOH); анал. расч. для CHNO: C 59,00, H 7,15, N 7,65. Эксп.: C 59,13, H 7,19, N 7,61.
1
13
-1
26
6
a
b
2
2
6
D
9
12
3
(3R,8aR)-3-бромметил-3-метил-тетрагидро-пирроло[2,1-c][1]оксазин-1,4-дион. Раствор NBS (23,5 г, 0,132моль) в 100 мл диметилформамида добавляли по каплям к перемешиваемому раствору (метил-акрилоил)-пирролидина (16,1 г, 88 ммоль) в 70 мл диметилформамида в атмосфере аргона при к.т. и перемешивали полученную смесь 3 дня. Растворитель удаляли под вакуумом и осаждали твердое желтое вещество. Твердое вещество суспендировали в воде, перемешивали в течение ночи при к.т., фильтровали и сушили, в результате чего получали 18,6 г (81%) (после сушки вес уменьшался ~ 34%) указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества: температура плавления152-154°C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 4,69 (dd, J = 9,6 Гц, J = 6,7 Гц, 1H, CH в хиральном центре), 4,02 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,86 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHH), 3,53-3,24 (m, 4H, CH), 2,30-2,20 (m, 1H, CH), 2,04-1,72 (m, 3H, CH и CH), 1,56 (s, 2H, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ 167,3, 163,1, 83,9, 57,2, 45,4, 37,8, 29,0, 22,9, 21,6; IR (KBr) 3474, 1745 (C=O), 1687 (C=O), 1448, 1377, 1360, 1308, 1227, 1159, 1062см; [α]+124,5 ° (c = 1,3, хлороформ); анал. расч. для CHBrNO: C 41,24, H 4,61, N 5,34. Эксп.: C 41,46, H 4,64, N 5,32.
3
2
4
6
a
b
D
4
7
3
1
-1
26
(2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановая кислота. Смесь бромлактона (18,5 г, 71 ммоль) в 300 мл 24% HBr нагревали с обратным холодильником в течение 1 h. Полученный раствор разбавляли солевым раствором (200 мл), и экстрагировали этилацетатом (100 мл×4). Объединенные экстракты промывали насыщенным NaHCO (100 мл×4). Водный раствор подкисляли концентрированной HCl до pH=1, и затем экстрагировали этилацетатом (100 мл×4). Объединенный органический раствор сушили на NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом досуха. Перекристаллизация из толуола давала 10,2 г (86%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления107-109 °C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 3,63 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 3,52 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 1,35 (s, 3H, Me); IR (KBr) 3434 (OH), 3300-2500 (COOH), 1730 (C=O), 1449, 1421, 1380, 1292, 1193, 1085 см; [α]+10,5° (c = 2,6, MeOH); анал. расч. для CHBrO: C 26,25, H 3,86. Эксп.: C 26,28, H 3,75.
3
3
4
2
2
2
2
Синтез (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида. Тионилхлорид (46,02 г, 0,39моль) добавляли по каплям к охлажденному раствору (ниже 4°C) (R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты (51,13 г, 0,28моль) в 300 мл ТГФ в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч в тех же условиях. К смеси добавляли EtN (39,14 г, 0,39моль) и перемешивали в течение 20 мин в тех же условиях. Через 20 мин добавляли 5-амино-2-цианобензотрифторид (40,0 г, 0,21моль), 400 мл ТГФ, после чего смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое обрабатывали 300 мл воды, экстрагировали этилацетатом (2×400 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO (2×300 мл) и солевым раствором (300 мл). Органический слой сушили на MgSO и концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое очищали колоночной хроматографией с использованием CHCl/EtOAc (80:20), в результате чего получали твердое вещество. Это твердое вещество перекристаллизовывали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 55,8 г (73,9%) (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде светло-желтого твердого вещества.
1
-
°
3
3
2
2
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,66 (s, 3H, CH), 3,11 (s, 1H, OH), 3,63 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 4,05 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 7,85 (d, J = 8,4 Гц, 1H, ArH), 7,99 (dd, J = 2,1, 8,4 Гц, 1H, ArH), 8,12 (d, J = 2,1 Гц, 1H, ArH), 9,04 (bs, 1H, NH). рассчитанная масса: 349,99, [M-H] 349,0. Температура плавления: 124-126C.
2-пропанол
2
3
2
3
4
2
2
Синтез (S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-циано-3-фторфенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамида (Соединение формулы XIII). Смесь бромамида (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамид (2,0 г, 5,70 ммоль) и безводного KCO (2,4 г, 17,1 ммоль) в 50 мл ацетона нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Полученное твердое вещество обрабатывали 2-фтор-4-гидроксибензонитрилом (1,2 г, 8,5 ммоль) и безводным KCO (1,6 г, 11,4 ммоль) в 50 мл 2-пропанола и нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Остаток обрабатывали 100 мл воды, а затем экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные экстракты в EtOAc последовательно промывали 10% раствором NaOH (4×100 мл) и солевым раствором, Органический слой сушили на MgSO, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло, которое кристаллизовали из CHCl/гексан, в результате чего получали 0,5 г (23%) (S)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-3-(4-циано-3-фторфенокси)-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде бесцветного твердого вещества.
1
+
°
3
3
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,63 (s, 3H, CH), 3,34 (bs, 1H,OH), 4,08 (d, J = 9,17 Гц, 1H, CH), 4,50 (d, J = 9,17 Гц, 1H, CH), 6,74 – 6,82 (m, 2H, ArH), 7,50-7,55 (m, 1H, ArH), 7,81 (d, J = 8,50 Гц, 1H, ArH), 7,97 (q, J = 2,03, 8,50 Гц, 1H, ArH), 8,11 (d, J = 2,03 Гц, 1H, ArH), 9,12 (s, 1H, NH). рассчитанная масса: 407,1, [M+Na] 430,0. Температура плавления: 124-125C.
ПРИМЕР 14
Доклинические исследования анаболических и андрогенных фармакологических свойств соединения формулы XIII у интактных и кастрированных самцов крыс.
Исследовали анаболическую и андрогенную эффективность соединения формулы XIII, вводимого ежедневно путем перорального гаважа. S-изомер соединения (соединение формулы XIII) синтезировали и исследовали как описано в настоящем документе.
Материалы и методы:
Самцов крыс Спрег-Доули массой приблизительно200 г приобретали в Harlan Bioproducts for Science (Индианаполис, Индиана, США). Животных держали при 12-часовом свето-темновом цикле с неограниченным доступом к пище (рацион для стерилизуемых мышей/крыс 7012C LM-485, Harlan Teklad, Мэдисон, шт. Висконсин, США) и воде.
Для этого исследования исследуемый продукт взвешивали и растворяли 10% ДМСО (Fisher), разбавленного полиэтиленгликолем PEG 300 (Acros Organics, Нью-Джерси, США) для получения определенных дозировок. Животных содержали в группах по 2 - 3 животных на группу. Животных случайным образом распределяли в одну из семи групп, включающих 4 - 5 животных на группу. Контрольные группы (интактные и с удаленными яичниками) ежедневно получали нейтральную основу. Соединение формулы XIII вводили перорально путем гаважа в дозах 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день как для групп с интактными животными, так и для групп животных с удаленными яичками. В соответствующих случаях животных кастрировали в первый день исследования. Лечение соединением формулы XIII начинали через девять дней после удаления яичников после удаления яичек и осуществляли ежедневно путем орального гаважа в течение 14 дней.
Животных умерщвляли под действием анестезии (кетамин/ксиалзин, 87:13 мг/кг/день) и регистрировали массу тела. Дополнительно вентральную долю предстательной железы, семенные пузырьки и мышцу, поднимающую задний проход, удаляли, взвешивали по отдельности, нормировали на массу тела и выражали в процентах от интактного контроля. Для сравнения отдельных групп, получавших различные дозы, с контрольной группой использовали Т-критерий Стьюдента. Значимость определяли a priori с Р-значением < 0,05. В качестве меры андрогенной активности определяли значения массы вентральной доли предстательной железы и семенных пузырьков, а массу мышцы, поднимающей задний проход, определяли в качестве меры анаболической активности. Брали кровь из брюшной аорты, центрифугировали и замораживали сыворотку при -80ºC, а потом определяли уровни гормонов в сыворотке. Определяли концентрации лютеинизирующего гормона (ЛГ) и фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) в сыворотке.
Результаты:
Был проведен ряд исследований зависимости доза-ответ на интактных и кастрированных крысах с целью оценки активности и эффективности соединения формулы XIII как в андрогенных тканях (предстательная железа и семенные пузырьки), так и в анаболических тканях (мышца, поднимающая задний проход). У интактных животных лечение соединением формулы XIII приводило к снижению массы предстательной железы и семенных пузырьков, а масса мышцы, поднимающей задний проход, значительно увеличивалась. Масса мышцы, поднимающей задний проход, после лечения соединением формулы XIII составляла 116% ± 7%, 134% ± 8%, 134% ± 21%, 134% ±11%, 142% ± 10%, и 147% ± 10% от интактных контролей после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1 мг/день, соответственно. Значения массы предстательной железы составляли 98% ± 21%, 99% ± 8%, 85% ± 18%, 98% ± 22%, 126% ± 17% и 126% ± 17% от интактных контролей после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Также значения массы семенных пузырьков составили 115% ± 12%, 109% ± 17%, 106% ± 13%, 121% ± 11%, 157% ± 5%, и 136% ± 3% интактных контролей после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Это значимые результаты, поскольку современные андрогенные терапевтические средства противопоказаны некоторым группам пациентам из-за пролиферативных эффектов, вызываемых андрогенами в тканях предстательной железы и молочных желез. Однако многим пациентами из этих групп были бы полезны анаболические эффекты, оказываемые этими тканями на мышцы и кости. Поскольку соединение формулы XIII продемонстрировало тканеспецифичные анаболические эффекты, оно может дать возможность лечить пациентов, которым раньше были противопоказаны андрогены.
У кастрированных животных значения массы предстательной железы после лечения соединением формулы XIII составляли 24% ± 4%, 37% ± 9%, 50% ± 11%, 88% ± 16%, 132% ± 16% и 118 ± 12% от интактных контролей после применения доз 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Аналогично, значения массы семенных пузырьков составляли 15% ± 2%, 25% ± 9%, 67% ± 20%, 113% ± 6%, 155% ± 16% и 160% ± 7% интактных контролей после применения доз 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Было зафиксировано значительное увеличение массы мышцы, поднимающей задний проход, во всех группах, получавших разные дозы исследуемого соединения, по сравнению с интактными контролями. Значения массы мышцы, поднимающей задний проход, составляли 71% ± 4%, 101% ± 15%, 125% ± 20%, 126% ± 14%, 151 ± 9%, и 143 ± 17% от интактных контролей в группах, получавших дозу 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1,0 мг/день, соответственно. Неожиданно было обнаружено, что только введение 0,03 мг/день обеспечивало полное восстановление массы мышцы, поднимающей задний проход.
max
50
Максимальная стимуляция массы мышцы, поднимающей задний проход, при сравнимом введении тестостерона пропионата (TP, ТП) и S-3-(4-ацетиламинофенокси)-2-гидрокси-2-метил-N-(4-нитро-3-трифторметилфенил)пропионамида (соединение формулы XII) составляло 104% и 101%, соответственно, что указывает на значительно более высокую эффективность и активность соединения формулы XIII. В совокупности эти данные показывают, что соединение формулы XIII восстанавливает утраченную мышечную массу, что в некоторых вариантах реализации обеспечивает ценную возможность применения у пациентов с саркопенией или кахексией или другими атрофическими заболевания или нарушениями. Кроме того, антипролиферативные эффекты соединения формулы XIII в предстательной железе могут дать некоторым группам пациентов, которым к настоящее время противопоказаны андрогены, доступ к анаболическим средствам. Полученные значения E составляли 147% ± 10%, 188% ± 135%, и 147% ± 10% для предстательной железы, семенных пузырьков и мышцы, поднимающей задний проход, соответственно. ED в предстательной железе, семенных пузырьках, и мышце, поднимающей задний проход, составила 0,21 ± 0,04, 0,2 ± 0,04, и 0,03 ± 0,01 мг/день, соответственно.
ПРИМЕР 15
Синтез (S) Энантиомер соединения формулы XIV
°
1
13
-1
26
2
4
6
2
2
2
6
D
9
13
3
(2R)-1-метакрилоилпирролидин–2-карбоновая кислота. D-пролин, 14,93 г, 0,13моль) растворяли в 71 мл 2н. раствора NaOH и охлаждали в ванне со льдом; полученный щелочной раствор разбавляли ацетоном (71 мл). Раствор в ацетоне (71 мл) метакрилоил хлорида (13,56 г, 0,13моль) и 2 н. раствор NaOH (71 мл) одновременно добавляли на протяжении 40 мин к водному раствору D-пролина в ванне со льдом. РН смеси поддерживали на уровне 10-11C на протяжении добавления метакрилоила хлорида. После перемешивания (3ч, КТ), смесь выпаривали под вакуумом при температуре при 35-45°C чтобы удалить ацетон. Полученный раствор промывали этиловым эфиром и подкисляли до pH 2 концентрированной HCl. Кислую смесь насыщали хлоридом натрия (NaCl) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенные экстракты сушили над NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный продукт в виде бесцветного масла. Перекристаллизация этого масла из этилового эфира и гексанов давала 16,2 г (68%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления102-103°C; ЯМР-спектр полученного соединения продемонстрировал существование двух ротамеров указанного в заголовке соединения. H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 5,28 (s) и 5,15 (s) для первого ротамера, 5,15 (s) и 5,03 (s) для второго ротамера (общ. 2H для обоих ротамеров, винил CH), 4,48-4,44 для первого ротамера, 4,24-4,20 (m) для второго ротамера (общ. 1H для обоих ротамеров, CH в хиральном центре), 3,57-3,38 (m, 2H, CH), 2,27-2,12 (1H, CH), 1,97-1,72 (m, 6H, CH, CH, Me); C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d) δ для основного ротамера 173,3, 169,1, 140,9, 116,4, 58,3, 48,7, 28,9, 24,7, 19,5: для минорного ротамера 174,0, 170,0, 141,6, 115,2, 60,3, 45,9, 31,0, 22,3, 19,7; IR (KBr) 3437 (OH), 1737 (C=O), 1647 (CO, COOH), 1584, 1508, 1459, 1369, 1348, 1178 см; [α]+80,8° (c = 1, MeOH); анал. расч. для CHNO: C 59,00, H 7,15, N 7,65. Эксп.: C 59,13, H 7,19, N 7,61.
(3R,8aR)-3-бромметил-3-метил-тетрагидро-пирроло[2,1-c][1,4]оксазин-1,4-дион. Раствор N-бромсукцинимида (NBS) (23,5 г, 0,132моль) в 100 мл диметилформамида добавляли по каплям к перемешиваемому раствору (метил-акрилоил)-пирролидина (16,1 г, 88 ммоль) в 70 мл диметилформамида в атмосфере аргона при к.т. и перемешивали полученную смесь 3 дня. Растворитель удаляли под вакуумом и осаждали твердое желтое вещество. Твердое вещество суспендировали в воде, перемешивали в течение ночи при к.т., фильтровали и сушили, в результате чего получали 18,6 г (81%) (после сушки вес уменьшался ~ 34%) указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества: температура плавления152-154°C; 1H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 4,69 (dd, J = 9,6 Гц, J = 6,7 Гц, 1H, CH в хиральном центре), 4,02 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHHa), 3,86 (d, J = 11,4 Гц, 1H, CHHb), 3,53-3,24 (m, 4H, CH2), 2,30-2,20 (m, 1H, CH), 2,04-1,72 (m, 3H, CH2 и CH), 1,56 (s, 2H, Me); 13C-ЯМР (75 МГц, ДМСО-d6) δ 167,3, 163,1, 83,9, 57,2, 45,4, 37,8, 29,0, 22,9, 21,6; IR (KBr) 3474, 1745 (C=O), 1687 (C=O), 1448, 1377, 1360, 1308, 1227, 1159, 1062см-1; [α]D26 +124,5 ° (c = 1,3, хлороформ); анал. расч. для C9H12BrNO3: C 41,24, H 4,61, N 5,34. Эксп.: C 41,46, H 4,64, N 5,32.
3
2
4
6
a
b
D
4
7
3
1
-1
26
(2R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановая кислота. Смесь бромлактона (18,5 г, 71 ммоль) в 300 мл 24% раствора HBr нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. Полученный раствор разбавляли солевым раствором (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×4). Объединенные экстракты промывали насыщенным NaHCO (100 мл×4). Водный раствор подкисляли концентрированной HCl до pH=1, и затем экстрагировали этилацетатом (100 мл×4). Объединенный органический раствор сушили на NaSO, фильтровали через целит и выпаривали под вакуумом досуха. Перекристаллизация из толуола давала 10,2 г (86%) целевого соединения в виде бесцветных кристаллов: температура плавления107-109 °C; H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 3,63 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 3,52 (d, J = 10,1 Гц, 1H, CHH), 1,35 (s, 3H, Me); IR (KBr) 3434 (OH), 3300-2500 (COOH), 1730 (C=O), 1449, 1421, 1380, 1292, 1193, 1085 см; [α]+10,5° (c = 2,6, MeOH); анал. расч. для CHBrO: C 26,25, H 3,86. Эксп.: C 26,28, H 3,75.
3
3
4
2
2
2
2
Синтез (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида. Тионилхлорид (46,02 г, 0,39моль) добавляли по каплям к охлажденному раствору (ниже 4°C) (R)-3-бром-2-гидрокси-2-метилпропановой кислоты (51,13 г, 0,28моль) в 300 мл ТГФ в атмосфере аргона. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч в тех же условиях. К смеси добавляли EtN (39,14 г, 0,39моль) и перемешивали в течение 20 мин в тех же условиях. Через 20 мин добавляли 5-амино-2-цианобензотрифторид (40,0 г, 0,21моль), 400 мл ТГФ, после чего смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при к.т. Растворитель удаляли при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое обрабатывали 300 мл воды, экстрагировали этилацетатом (2×400 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO (2×300 мл) и солевым раствором (300 мл). Органический слой сушили на MgSO и концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество, которое очищали колоночной хроматографией с использованием CHCl/EtOAc (80:20), в результате чего получали твердое вещество. Это твердое вещество перекристаллизовывали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 55,8 г (73,9%) (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамид в виде светло-желтого твердого вещества.
1
-
°
3
3
2
2
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,66 (s, 3H, CH), 3,11 (s, 1H, OH), 3,63 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 4,05 (d, J = 10,8 Гц, 1H, CH), 7,85 (d, J = 8,4 Гц, 1H, ArH), 7,99 (dd, J = 2,1, 8,4 Гц, 1H, ArH), 8,12 (d, J = 2,1 Гц, 1H, ArH), 9,04 (bs, 1H, NH). рассчитанная масса: 349,99, [M-H] 349,0. Температура плавления: 124-126C.
Формула XIV
2
3
2
3
4
2
2
Синтез (S)-3-(4-хлор-3-фторфенокси)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-2-гидрокси-2-метилпропанамида (соединение формулы XIV). Смесь бромамида (2R)-3-бром-N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-2-гидрокси-2-метилпропанамида (2,0 г, 5,70 ммоль) и безводного KCO (2,4 г, 17,1 ммоль) нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Полученное твердое вещество обрабатывали 4-хлор-3-фторфенолом (1,3 г, 8,5 ммоль) и безводным KCO (1,6 г, 11,4 ммоль) в 50 мл 2-пропанола и нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали твердое вещество. Остаток обрабатывали 100 мл воды, а затем экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные экстракты в EtOAc последовательно промывали 10% раствором NaOH (4×100 мл) и солевым раствором. Органический слой сушили на MgSO, а затем концентрировали при пониженном давлении, в результате чего получали масло, которое очищали колоночной хроматографией с использованием смеси EtOAc/гексан (50:50), в результате чего получали твердое вещество, которое перекристаллизовывали из смеси CHCl/гексан, в результате чего получали 1,7 г (70,5%) (S)-3-(4-хлор-3-фторфенокси)-N-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-2-гидрокси-2-метилпропанамида в виде бесцветного твердого вещества.
1
-
3
3
H-ЯМР (CDCl/тетраметилсилан) δ 1,60 (s, 3H, CH), 3,28 (s, 1H, OH), 3,98 (d, J = 9,05 Гц, 1H, CH), 6,64 – 6,76 (m, 2H, ArH), 7,30 (d, J = 8,67 Гц, 1H, ArH), 7,81 (d, J = 8,52 Гц, 1H, ArH), 7,96 (q, J = 2,07, 8,52 Гц, 1H, ArH), 8,10 (d, J = 2,07 Гц, 1H, ArH), 9,10 (s, 1H, NH). рассчитанная масса: [M-H] 414,9. Температура плавления: 132-134°C.
ПРИМЕР 16
Доклинические исследования анаболических и андрогенных фармакологических свойств соединения формулы XIV у интактных и кастрированных самцов крыс
Исследовали анаболическую и андрогенную эффективность соединения формулы XIV вводимого ежедневно путем перорального гаважа. S-изомер соединения формулы XIV синтезировали и исследовали, как описано в настоящем документе
Материалы и методы:
Caмцов крыс Спрег-Доули массой приблизительно200 г приобретали в Harlan Bioproducts for Science (Индианаполис, Индиана, США). Животных держали при 12-часовом свето-темновом цикле с неограниченным доступом к пище (рацион для стерилизуемых мышей/крыс 7012C LM-485, Harlan Teklad, Мэдисон, шт. Висконсин, США) и воде. Исследовали анаболическую и андрогенную активность соединения формулы XIV на интактных животных, а также оценивали зависимость доза-ответ в острых экспериментах на животных с удаленными яичками (ORX). Также оценивали регенеративные эффекты соединения формулы VIII исследовали в хроническом эксперименте на крысах с удаленными яичками (9 дней).
Для этого исследования исследуемый продукт взвешивали и растворяли 10% ДМСО (Fisher), разбавленного полиэтиленгликолем PEG 300 (Acros Organics, Нью-Джерси, США) для получения определенных дозировок. Животных содержали в группах по 2 - 3 животных на группу. Животных случайным образом распределяли в одну из семи групп, включающих 4 - 5 животных на группу. Контрольные группы (интактные и с удаленными яичниками) ежедневно получали нейтральную основу. Соединение формулы XIV вводили перорально путем гаважа в дозах 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день как для групп с интактными животными, так и для групп животных с удаленными яичками. В соответствующих случаях животных кастрировали в первый день исследования. Лечение соединением формулы XIV начинали через девять дней после удаления яичников после удаления яичек и осуществляли ежедневно путем орального гаважа в течение 14 дней.
Животных умерщвляли под действием анестезии (кетамин/ксиалзин, 87:13 мг/кг/день) и регистрировали массу тела. Дополнительно вентральную долю предстательной железы, семенные пузырьки и мышцу, поднимающую задний проход, удаляли, взвешивали по отдельности, нормировали на массу тела и выражали в процентах от интактного контроля. Для сравнения отдельных групп, получавших различные дозы, с контрольной группой использовали Т-критерий Стьюдента. Значимость определяли a priori с Р-значением < 0,05. В качестве меры андрогенной активности определяли значения массы вентральной доли предстательной железы и семенных пузырьков, а массу мышцы, поднимающей задний проход, определяли в качестве меры анаболической активности. Брали кровь из брюшной аорты, центрифугировали и замораживали сыворотку при -80ºC, а потом определяли уровни гормонов в сыворотке. Определяли концентрации лютеинизирующего гормона (ЛГ) и фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) в сыворотке.
Результаты:
Был проведен ряд исследований зависимости доза-ответ на интактных и кастрированных крысах с целью оценки активности и эффективности соединения формулы XIV как в андрогенных тканях (предстательная железа и семенные пузырьки), так и в анаболических тканях (мышца, поднимающая задний проход). У интактных животных лечение соединением формулы XIV приводило к снижению массы предстательной железы и семенных пузырьков, а масса мышцы, поднимающей задний проход, значительно увеличивалась. Масса мышцы, поднимающей задний проход, после лечения соединением формулы XIV составляла 100% ± 10%, 98% ± 7%, 110% ± 5%, 110% ± 5%, 125% ± 10%, и 129% ± 10% от интактных контролей после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1 мг/день, соответственно. Значения массы предстательной железы составляли 117% ± 20%, 98% ± 15%, 82% ± 20%, 62% ± 5%, 107% ± 30%, и 110% ± 14% от интактных контролей после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Это значимые результаты, поскольку современные андрогенные терапевтические средства противопоказаны некоторым группам пациентам из-за пролиферативных эффектов, вызываемых андрогенами в тканях предстательной железы и молочных желез. Однако многим пациентами из этих групп были бы полезны анаболические эффекты, оказываемые этими тканями на мышцы и кости. Поскольку соединение формулы XIV продемонстрировало тканеспецифичные анаболические эффекты, оно может дать возможность лечить пациентов, которым раньше были противопоказаны андрогены.
У кастрированных животных с удаленными яичками значения массы предстательной железы после лечения соединением формулы XIV составляли 10% ± 3%, 12% ± 3%, 26% ± 7%, 39% ± 6%, 60% ± 14%, 88% ± 16%, и 123% ± 22% от интактных контролей после применения доз 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Аналогично, значения массы семенных пузырьков составляли 11% ± 1%, 11% ± 1%, 11% ± 1%, 27% ± 14%, 58% ± 18%, 86% ± 12%, и 100% ± 8% интактных контролей после применения доз 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75, и 1 мг/день, соответственно. Было зафиксировано значительное увеличение массы мышцы, поднимающей задний проход, во всех группах, получавших разные дозы исследуемого соединения, по сравнению с интактными контролями. Значения массы мышцы, поднимающей задний проход, составляли 48% ± 8%, 50% ± 5%, 62% ± 6%, 89% ± 10%, 118% ± 6%, 134% ± 8% и 129% ± 14% от интактных контролей в группах, получавших дозу 0, 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1,0 мг/день, соответственно.
Соединение формулы XIV продемонстрировало анаболическое соотношение у кастрированных крыс, равное 4,10, 2,39, 2,28, 1,97, 1,53, 1,05, после применения доз 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 0,75 и 1 мг/день, соответственно.
Фармакологические показатели после применения 1 мг/день соединения формулы XIV показали, что масса предстательной железы составила 110% ± 14% от интактного контроля, а масса мышцы, поднимающей задний проход, составила 129% ± 10% от интактного контроля. Соединение формулы XIV поддерживала массу предстательной железы после удаления яичек на уровне 123 ± 22% интактных контролей, а мышцы, поднимающей задний проход, на уровне 129± 14% от интактных контролей. Дозы в диапазоне от 0,1 мг/день до 0,3 мг/день соединения формулы XIV на 100% восстанавливали массу мышцы, поднимающей задний проход, а массу простаты на 39 - 60%.
ПРИМЕР 17
Доклиническое исследование анаболических и андрогенных фармакологических свойств соединений согласно настоящему изобретению
max
max
Тесты Хершбергера, описанные выше для формул VIII-XIV, проводили также с соединениями H-1, H-2, H-3, & H-4, как показано на Фигуре 3; данные вместе с результатами по связыванию АР для некоторых случаев, представлены в Таблице 4. Приведенные значения E рассчитывали в программе Win Non-Lin. Графики E от AUC показывают, что для соединения – селективные ингибиторы андрогеновых рецепторов могут обладать различной анаболической эффективностью в отношении мышцы, поднимающей задний проход.
Таблица 4: Тесты Хершбергера
Идентификатор соединения
X
K<sub>i </sub>(нМ)
E<sub>max</sub> в мышце, поднимающей задний проход
<b>H-1</b>
F
6,1±0,1
75±4
<b>H-2</b>
Cl
8,6±1,2
136±9
<b>H-3</b>
Br
13±2
64±4
<b>H-4</b>
I
23±2
95±7
Хотя в настоящем документе показаны и описаны некоторые признаки изобретения, специалист сможет придумать многочисленные модификации, замены, изменения и эквиваленты. Соответственно, предполагается, что предлагающаяся формула изобретения охватывает все таким модификации и изменения, находящиеся в рамках сущности изобретения.