Молекулярные механизмы проникновения вируса Эбола в пермиссивные клетки

УДК 616.328.8

Т.Е.Сизикова, В.Н.Лебедев, В.Б.Пантюхов, С.В.Борисевич

молекулярные механизмы проникновения вируса эбола в пермиссивные клетки

ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Сергиев Посад,

Российская Федерация

Вирус Эбола, являющийся представителем рода Ebolavirus семейства Filoviridae, вызывает у человека лихорадку с летальностью до 90 %. Представители рода Ebolavirus инфицируют многие виды клеток млекопитающих. Недавно проведенные исследования показали, что при проникновении вируса Эбола в клетку задействованы многочисленные белковые взаимодействия и молекулярные механизмы, часть из которых являются уникальными для филовирусов, а некоторые используются всеми вирусными гликопротеинами. Клеточные факторы, используемые филовирусами при их проникновении в пермиссивные клетки, полностью не изучены. Целью данного обзора является анализ особенности проникновения вируса Эбола в пермиссивные клетки на молекулярном уровне. Проникновение вируса Эбола в клетки инициируется взаимодействием вирусного гликопротеина с одним или несколькими рецепторами на поверхности клетки-хозяина. Главные клеточные факторы, задействованные в процессе проникновения филовирусов в клетки, это факторы прикрепления (клеточные лектины и Т-клеточный муцин 1 (TIM-1) человека), сигнальные факторы (рецепторы тирозинкиназы и а5Р1-интегрин), эндолизосомальные факторы клетки-хозяина (катепсины B и L, а также белок Неймана-Пика C1). Изучение особенностей проникновения вируса в клетки открывает потенциальные подходы к созданию средств профилактики и лечения болезни, вызванной вирусом Эбола.

Ключевые слова: вирус Эбола, филовирусы, проникновение вируса, эндоцитоз, факторы присоединения, сигнальные факторы, эндолизосомальные факторы, клетка-хозяин.

T.E.Sizikova, V.N.Lebedev, V.B.Pantyukhov, S.V.Borisevich Molecular Mechanisms of Ebola Virus Entry into Permissive Cells

The 48th Central Research Institute of the RF Ministry of Defense, Sergiev Possad, Russian Federation

Ebola virus, representative of the Ebolavirus genus, Filoviridae family, causes severe hemorrhagic fever in humans, with lethality rates amounting up to 90 %. The members of Ebolavirus genus infect a broad range of mammalian cells. Recent studies indicate that entry of Ebola virus into cells requires a series of cellular protein interactions and molecular mechanisms, some of which are unique to filoviruses, while others are commonly used by all viral glycoproteins. The cellular factors deployed by filoviruses for their entry into permissive cells are defined incompletely. The aim of this review is to analyze peculiarity of the Ebola virus penetration into permissive cells at molecular level. The Ebola virus entry into cells is initiated by the interaction of viral glycoprotein with one or more receptors on the surface of host-cell. The main host-cell factors, involved in filovirus entry, are: attachment factors (cell lectins and human T-cell mucin 1 (TIM-1)), signaling factors (tyrosinkinase receptors and a5P1-integrin), and endolisosomal host-cell factors (cathepsins B and L and Niemann-Pick C1 protein. The study of the complex set of virus entry events provides potential avenues for the development of antiviral therapies against Ebola fever.

Key words: Ebola virus, hemorrhagic fever, filovirus, virus entry, endocytosis, attachment factors, signaling factors, endolisosomal factors, host-cell.

Лихорадка Эбола, вызываемая представителями рода Ebolavirus семейства Filoviridae, является особо опасной вирусной инфекционной болезнью, характеризующейся шоком, геморрагиями, мультиорганной недостаточностью и заканчивающейся летально в 50-90 % случаев [23].

Род Ebolavirus включает пять видов, в состав каждого из которых входит по одному возбудителю (Zaire ebolavirus, Sudan ebolavirus, Tai forest ebolavirus, Bundibugio ebolavirus, Reston ebolavirus) [15, 16].

Филовирусы представляют угрозу для здравоохранения, что особенно ярко продемонстрировала крупнейшая эпидемическая вспышка лихорадки Эбола, начавшаяся в декабре 2013 г. в Гвинее и продолжающаяся до сих пор [2]. На начало мая 2015 г. от болезни погибло свыше 15 тыс. человек.

Строение вируса Эбола сходно с таковым для

других представителей семейства Filoviridae. Вирион содержит нефрагментированную «минус» РНК, содержащую приблизительно 19000 нуклеотидов и кодирующую 7 структурных и 1 неструктурный белок. Порядок генов на геноме: З'-концевая лидерная область, гены нуклеопротеина (ОТ), вирусных белков УР35, УР40, гликопротеина ^Р), УР30, УР24, РНК-зависимой РНК-полимеразы ^ белок), 5'-конец. ОТ, белки УР30, УР35 и L ассоциированы с вирусной геномной РНК в рибонуклеопротеиновый комплекс. L белок и белок УР35 образуют полимеразный комплекс, который транскрибирует и реплицирует вирусный геном [1].

Несмотря на то, что в настоящее время хорошо изучены многие молекулярно-биологические характеристики филовирусов, до сих пор недостаточно изучены факторы вирулентности и патогенеза болез-

ней, вызываемых данной группой возбудителей.

Целью данного обзора является анализ особенностей проникновения вируса Эбола в пермиссив-ные клетки на молекулярном уровне.

Детальное изучение патогенеза филовирусов предполагает знание механизма взаимодействия последних с чувствительными клетками.

Первым этапом жизненного цикла филовирусов в макроорганизме является проникновение возбудителя в чувствительные клетки. Выявление вирусных и клеточных факторов, вовлеченных в данный процесс, во многом определяет пути поиска эффективных средств экстренной профилактики и лечения филовирусных инфекций [11].

Ответственным за адсорбцию вирионов на чувствительные клетки является гликопротеин - единственный структурный белок липопротеидной оболочки, а потому становится единственной мишенью для вируснейтрализующих антител. Следовательно, определение конкретных участков гликопротеина, ответственных за вход в клетку, является необходимым для создания эффективных вакцин и других медицинских средств защиты. В настоящее время идентифицированы ключевые механизмы каскада взаимодействий, обеспечивающих проникновение филовирусов в клетки. Некоторые из них использованы при создании противовирусных препаратов, обладающих противовирусной активностью in vitro и in vivo при использовании мелких лабораторных животных [3, 4, 5, 21, 24].

Гликопротеин филовирусов относится к классу 1 белков, проникающих через мембрану. Данный белок в процессе репродукции филовируса в клетке формируется из гликопротеина-предшественника (GP0). При транспорте последнего в аппарат гольджи происходит преобразование предшественника белка в две субъединицы (поверхностная субъединица GP1 и трансмембранная субъединица GP2). Обе субъединицы остаются связанными дисульфидными связями (GP12), и тримеры гетеродимеров GP1-GP2 образуют шипики на оболочке вириона [29]. Субъединица GP1 гликопро-теина GP12 позволяет филовирусам проникать в эндо-сому при условиях, благоприятных для формирования активной формы гликопротеина GP1

Субъединица GP2 гликопротеина GP12 содержит формирующий петлю N-концевой участок из 45 аминокислотных остатков. Данный участок формируется благодаря дисульфидной связи между молекулами цистеина в положениях 511 и 556. Коровая гидрофобная последовательность, состоящая из 16 аминокислотных участков и расположенная в пределах данного участка, инициирует процесс проникновения филовирусов через эндосомальную мембрану чувствительных клеток [17, 18].

гликопротеин филовирусов является высоко-гликозилированным и содержит многочисленные сайты для гликозилирования. Мутагенный анализ и исследования структуры гликопротеина филови-русов на атомном уровне показали его сходство (по

присутствию остатков цистеина в областях, обеспечивающих присоединение к клеточной мембране) со многими другими вирусными гликопротеинами, в том числе вируса иммунодефицита человека и вируса гриппа [17]. Белки указанного класса формируют тримеры, располагающиеся перпендикулярно клеточной мембране. Каждый мономер содержит ^концевую поверхностную субъединицу, содержащую рецептор-связывающий участок, С-концевую трансмемранную последовательность, связанную с оболочкой вируса, белок, обеспечивающий проникновение через мембрану инфицированных клеток и два гептидных повторяющихся участка.

Рецептор-связывающий участок осуществляет взаимодействие гликопротеина с хозяйскими клетками [28, 30, 31]. Данный участок локализован на Оконце гликопротеина и является относительно консервативным среди представителей семейства Filoviridae (уровень гомологии по первичной структуре белка между вирусами Марбург и Эбола составляет 47 %) [14].

Белок, обеспечивающий проникновение через мембрану инфицированных клеток, играет важнейшую роль при инфицировании вирусом чувствительных клеток. K.Коnduru а1. [13] в клетках млекопитающих экспрессировали внеклеточный участок гликопротеина вируса Эбола-Заир, взаимодействующий с Fc-фрагментом человеческого иммуноглобулина изотипа G1 (ZEBOVGP-Fc), и показали, что глико-протеин вызывает расщепление и процессинг фу-ринового комплекса. данные процессы происходят при естественном взаимодействии гликопротеина с чувствительными клетками. У белых мышей, вну-трибрюшинно иммунизированных ZEBOVGP-Fc (первая иммунизация в дозе 100 мкг с полным адъю-вантом Фрейнда, последующие иммунизации в дозе 25 мкг с неполным адъювантом Фрейнда на 21, 45, 60-е сутки), развивался Т-клеточный иммунитет в отношении гликопротеина вируса Эбола. Животные были защищены от инфицирования заведомо летальной дозой вируса Эбола (1000 БОЕ), проведенного через 74 дня после первой иммунизации.

^концевой гептидный повторяющийся участок (HR1) гликопротеина GP2 является высокоорганизованной альфа-геликообразной структурой, которая служит платформой для посадки гликопротеина GP1 и содержит остатки, необходимые для связывания с другими участками HR1.

Гептидный повторяющийся участок НЯ2 расположен около С-конца гликопротеина GP2. При проникновении гликопротеина GP2 через клеточную мембрану гептидные повторяющиеся участки формируют петлю, состоящую из трех участков HR1 и трех участков HR [17, 18].

На первой стадии инфекции основными мишенями являются мононуклеарные фагоциты, в частности, макрофаги и дендритные клетки селезенки, лимфатических узлов и печени [27]. Инфицирование этих клеток не только приводит к амплификации ви-

руса и его быстрому распространению в организме, но и к массовому выбросу цитокинов (цитокиновый шторм), обуславливая развитие ряда патологических процессов, что является характерной чертой филови-русной инфекции [10].

Вторичными клетками-мишенями филовирус-ной инфекции являются клетки фибробластов и эндо-телиальные клетки различных внутренних органов, в том числе печени, почек и тестикул. Репродукция вируса в этих клетках сопровождается их лизисом. Репродукция вируса Эбола в васкулярном эндотелии приводит к появлению геморрагий при инфекции человека, но не низших приматов [9]. Помимо фибробластов и эндотелиальных клеток к филовирусной инфекции чувствительны почти все виды клеток, ввиду этого вирусы Марбург и Эбола можно выделить из всех исследуемых тканей [7, 9]. Единственными нечувствительными к филовирусам клетками являются лимфоциты, поскольку они не содержат рецепторов для вирусного гликопротеина, что играет немаловажную роль в патогенезе лихорадки Эбола [8].

проникновение оболочечных вирусов в чувствительные клетки начинается с прикрепления вируса к клеточной оболочке, которое часто осуществляется за счет относительно неспецифического взаимодействия вирусного гликопротеина с клеточными факторами связывания [11]. Вход фило-вирусов в организм регулирует широкий спектр хозяйских клеток. Наиболее распространенными способами проникновения вирусов в чувствительные клетки являются кальвеолин-зависимый эндоцитоз, клатрин-зависимый эндоцитоз и макропиноцитоз [12]. При входе филовирусов в клетки задействованы все три механизма. Ранее считали, что наиболее значимым является кальвеолин-зависимый эндоцитоз [6]. Однако в исследованиях G.Simmons et al. [26] это положение не нашло подтверждения. В настоящее время считают, что основным механизмом проникновения филовирусов в чувствительные клетки является макропиноцитоз [24, 25].

Важно отметить, что процесс входа филовиру-сов в чувствительные клетки определяют различные молекулярные механизмы, часть из которых является общей для всех оболочечных вирусов, а некоторые - уникальными для представителей семейства Filoviridae [12]. Для прочного связывания вириона и последующего его проникновения через клеточную мембрану необходимо наличие в последней высокоспецифичных факторов связывания. Это факторы, ответственные за прикрепление вируса, а также сигнальные факторы, индуцирующие подготовку проникновения вируса через клеточную мембрану и эн-долизосомальные факторы.

Проникновение филовирусов в инфицированные клетки обеспечивают:

- факторы, ответственные за прикрепление вируса к клеточной мембране. Сюда входят: клеточные лектины DC-SIGN (в дендритных клетках, макрофагах, тромбоцитах), DC-SIGNR (в эндотели-

альных клетках плаценты, печени, лимфатических узлов), LSECtin (в синусоидальных эндотелиальных клетках печени, лимфатических узлов и костного мозга), ASPGR-1 (в гепатоцитах), hMCL (в моноцитах и предшественниках макрофагов), человеческий Т-клеточный муцин (TIM-1) (в эпителиальных клетках) [12]. Следует отметить, что мутации в глико-протеине филовирусов могут привести к утрате способности прикрепления вируса к чувствительным клеткам. Так, вирусподобные частицы, содержащие мутантный гликопротеин вируса Эбола, были неспособны проникать в различные клетки человека, в том числе в такие антигенпрезентирующие клетки, как макрофаги и дендритные. В то же время данные частицы сохранили способность к проникновению в антиген-презентирующие клетки мышей CD 11b+ [19];

- сигнальные факторы, к которым относятся рецепторы тирозинкиназы и а^-интегрин (трансмембранный гликопротеин, состоящий из двух субъединиц (а и ß)) [11];

- эндолизосомальные хозяйские клеточные факторы (катепсины B и L), в состав которых входят сериновая, аспарагиновая и цистеиновая протеазы, белок Неймана-Пика [11].

Удельный вес указанных факторов является различным. Исследование влияния на репродукцию вируса Эбола в чувствительных клетках in vitro и in vivo катепсинов B и L выявило, что катепсин B оказывал положительный эффект на внедрение вируса Эбола-Заир в чувствительные клетки [20]. Интересно отметить, что на аналогичный процесс для других представителей рода Ebolavirus (Sudan ebolavirus, Taiforest ebolavirus, Bundibugio ebolavirus, Reston ebolavirus) ни катепсин B, ни катепсин L влияния не оказывали. при изучении влияния катепсинов B и L на процесс репродукции вируса Эбола-заир in vivo использовали мышей, инфицированных адаптированным к данным животным вариантом возбудителя. Установлено, что чувствительность животных контрольной группы не отличалась от таковой для групп животных с отсутствием катепсина B и/или катепсина L. Различий не выявлено ни по уровню репродукции вируса, ни по среднему сроку гибели животных [20].

по данным зарубежных специалистов, именно белок неймана-пика является критическим для филовирусов рецептором [22]. Человеческий белок неймана-пика обладает всеми свойствами вирусного рецептора: он придает чувствительность к филовирусной инфекции нечувствительных к возбудителям данного семейства клеток рептилий, содержит участок, обеспечивающий прямое специфическое связывание с гликопротеином филовирусов. Очищенный белок Неймана-Пика связывает только расщепленную форму гликопротеина, которая образуется при входе вируса в клетку.

следовательно, на основании представленной информации можно предложить следующие направления (таблица) создания профилактических средств, направленных на предотвращение первых

Перспективные направления создания профилактических средств, направленных на предотвращение взаимодействия вируса Эбола

с пермиссивными клетками

Воздействие препарата на Мишень Место нахождения Направленность действия препаратов, используемых в качестве профилактических средств

Клеточные структуры Лектины типа С: DC-SIGN DC-SIGNR LSECtin ASPGR-1 hMCL Дендритные клетки, макрофаги, тромбоциты Эндотелиальные клетки плаценты, печени, лимфатических узлов Синусоидальные эндотелиальные клетки, печень, лимфатические узлы, костный мозг Гепатоциты Моноциты и предшественники макрофагов Блокаторы лектинов типа С

Т-клеточный муцин Эпителиальные клетки Блокатор Т-клеточного муцина

Сигнальные факторы: рецепторы тирозинкиназы, а^-интегрин Клеточные мембраны Блокаторы сигнальных факторов

Эндолизосомальные хозяйские клеточные факторы « Препараты, интерферирующие с катапсина-ми (например, ингибитор катапсина СА074,

Катепсин B « относящейся к классу дипептиднитрилов)

Катепсин L «

Белок Неймана-Пика С1 Эндоплазматический ретикулум Ингибитор белка Неймана-Пика Ш8666А,

Вирусные структуры Гептидные повторяющиеся участки HR1 и HR2 Гликопротеин вируса Препараты, блокирующие взаимодействие HR1 и HR2

Клеточные и вирусные структуры Макропиноцитоз Гликопротеин вируса, клеточные мембраны Препараты, блокирующие процесс макро-пиноцитоза

этапов инфекции, вызываемой вирусом Эбола (этапы адсорбции вируса на клетку и проникновения вируса в пермиссивные клетки).

проведенные лабораторные и доклинические испытания препаратов указанных классов выявили, что многие не обладают (или обладают минимальной) цитоксичностью, что обычно является существенным фактором, ограничивающим применение ряда антивирусных химиопрепаратов. поэтому дальнейшее изучение противовирусной эффективности перечисленных в таблице классов препаратов, наряду с разработкой высокоэффективных вакцин и средств экстренной профилактики и лечения, будет важным этапом борьбы с представляющей глобальную угрозу для здравоохранения болезнью, вызванной вирусом эбола.

Авторы подтверждают отсутствие конфликта финансовых/нефинансовых интересов, связанных с написанием статьи.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Albarino C.G., Shoemaker T., Khristova M.L., Wamala J.F., Muyembe J.J., Balinandi S., Tumusiime A., Campbell S., Cannon D., Gibbons A., Bergeron E., Bird B., Dodd K., Spiropoulou C., Erickson B.R., Guerrero L., Knust B., Nichol S.T., Rolhn P.E., Stroher U. Genomic analysis of filoviruses associated with four viral hemorrhagic fever outbreaks in Uganda and the Democratic Republic of the Congo in 2012. Virology. 2013; 442:97-100.

2. Baize S., Pannetier D., Oestereich L., Rieger T., Koivogui L. Emergence of Zaire Ebola Virus Disease in Guinea. N. Engl. J. Med. 2014; 371(15):1418-25.

3. Barrientos L.G., OKeefe B.R., Bray M., Sanches A., Gronenborn A.M., Boyd M.R. Cyanovirin-N binds to viral surface glycoprotein, G 1,2 and inhibits infectivity of Ebola virus. Antivirus Res. 2003; 58:47-56.

4. Basu A., Li B., Mills D.M., Panchal R.G., Cardinale S.C., Butler M.M., Peet N.P. Identification of small molecule entry inhibi-

tor for filoviruses. J. Virol. 2011; 85:3106-19.

5. Cote M., Misasi J., Ren T., Bruches A., Lee K., Filone C.M., Hensley L., Li Q., Ory D., Chandran K. Small molecule inhibitors reveal Niemann-Pick C1 is essential for Ebola virus infection. Nature. 2011; 477:344-8.

6. Empig C.J., Goldsmith M.A. Associacion of the calveola vesicular system with cellular entry by filoviruses. J. Virol. 2003; 76:5266-70.

7. Feldmann H., Geisbert T.W. Ebola hemorrhagic fever. Lancet. 2011; 377:849-62.

8. Geisbert T.W., Hensley L.E., Gibb T.R., Steele K.E., Jaax N.K., Jahrling P.B. Apoptosis induced in vitro and in vivo during infection by Ebola and Marburg viruses. Lab. Invest. 2000; 80:171-86.

9. Geisbert T.W., Hensley L.E., Larsen T., Young H.A., Reed D.S., Geisbert J.B., Scott D.P., Kagan E., Jahrling P.B., Davis K.J. Pathogenesis of Ebola hemorrhagic fever in cynomolgus macaques: evidence that dendritic cells are early and sustained targets of infection. Am. J. Pathol. 2003; 163:2347-70.

10. Hartman A.L., Towner J.S., Nichol S.T. Ebola and Marburg hemorrhagic fever. Clin. Lab. Med. 2010; 30:161-77.

11. Hofmann-Winkler H., Kaup F., Pohlman S. Host cell factors in filovirus entry; novel players, new insights. Viruses. 2012; 4:3336-62.

12. Hunt C.L., Lennenmann N.J., Maury W. Filovirus entry: a novelty in the viiralfusion world. Viruses. 2012; 4:258-75.

13. Konduru K., Bradfute S.B., Jasquess J., Manangeeswaran M., Nakamura S., Morshed S., Wood S.C., Bavary S., Kaplan G.G. Ebola virus glycoprotein Fc fusion protein confer protection against lethal challenge in vaccinated mice.

14. Kuhn J.H., Radoshitzky S.R., Guth A.C., Warfield K.L., Li W., Vincent M.J., Towner J.S., Nichol S.T., Bavary S., Choe H. Conserved receptor-binding domains of Lake Victoria marburgvirus and Zaire ebolavirus bind a common receptor. J. Biol. Chem. 2006; 281:15951-8.

15. Kuhn J.H., Becker S., Ebihara H., Geisbert T.W., Johnson K.M., Kawaoka Y., Lipkin W.I., Negredo A.I., Netesov S.V., Nichol S.T., Palacios G., Peters C.J., Tenorio A., Volchkov V.E., Jahrling P.B. Proposal for a revised taxonomy of the family Filoviridae: Classification, names of taxa and viruses, and virus abbreviations. Arch. Virol. 2010; 155:2083-103.

16. Kuhn J.H., Bao Y., Bavari S., Becker S., Bradfute S., Brauburger K., Rodney Brister J., Bukreyev A.A., Cai Y., Chandran K., Davey R.A., Dolnik O., Dye J.M., Enterlein S., Gonzalez J.P., Formenty P., Freiberg A.N., Hensley L.E., Hoenen T., Honko A.N., Ignatyev G.M., Jahrling P.B., Johnson K.M., Klenk H.D., Kobinger G., Lackemeyer M.G., Leroy E.M., Lever M.S., Mühlberger E., Netesov S.V., Olinger G.G., Palacios G., Patterson J.L., Paweska

J.T., Pitt L., Radoshitzky S.R., Ryabchikova E.I., Saphire E.O., Shestopalov A.M., Smither S.J., Sullivan N.J., Swanepoel R., Takada A., Towner J.S., van der Groen G., Volchkov V.E., Volchkova V.A., Wahl-Jensen V., Warren T.K., Warfield K.L., Weidmann M., Nichol S.T. Virus nomenclature below the species level: a standardized nomenclature for filovirus strains and variants rescued from cDNA. Arch. Virol. 2014; 159(5):1229-37.

17. Lee J.E., Fusco M.L., Hessell A.J., Oswald W.B., Burton

D.R., Saphire E.O. Structure of Ebola virus glycoprotein bound to an antibody from a human survivor.

18. Lee J.E., Saphire E.O. Ebolavirus glycoprotein structure and mechanism of entry. Future Virol. 2009; 4:621-35.

19. Martinez O., Ndungo E., Tantral L., Miller E.H., Leung L.W., Chandran K., Basler C.F. A mutation in the Ebola virus envelope glycoprotein restricts viral entry in a host species- and cell-type - specific manner. J. Virol. 2013; 87:3324-34.

20. Marzi A., Reinheckel T., Feldmann H. Cathepsis B and L are not required for Ebola virus replication. PLoS Negl. Trop. Dis. 2012; 6:1-9.

21. Muller E.H., Harrison J.S., Radoshitzky S.R., Huggins C.D., Chi X., Dong L., Kuhn J.H., Bavari S., Lai J.R., Chanran K. Inhibition of Ebola virus entry by a C-peptide targeted to endosomes. J. Biol. Chem. 2011; 286:15854-61.

22. Muller E.H., Obernoster G., Raaben M., Herbert A.S., Deffieu M.S., Krishnan A., Ndungo E., Sandesara R.G., Carette J.E., Kuehne A.I., Ruthel G., Pfeffer S.R., Due J.R., Whelan S.P., Brummelkamp T.R., Chandran K. Ebola virus entry requires the host-programmed recognition of an intracellular recognition of an intracellular receptor. EMBO J. 2012; 31:1947-60.

23. Sanchez A., Geisbert T.W., Feldmann H. Filoviridae: Marburg and Ebola Viruses. In: Fields virology. Philadelphia, PA, USA: Lippincott Williams and Wilkins; 2007. R 1279-304.

24. Saseed M.F., Kolokoltsov A.A., Freiberg A.N., Holbrook M.R., Davey R.A. Phosphoinositide-3 kinase -act pathway controls cellular entry of Ebola virus. PLoS Pathog. 2008; 4(8):1-11.

25. Saseed M.F., Kolokoltsov A.A., Albrecht T., Davey R.A. Cellular entry of Ebola virus involves uptake by macropinocytosis-like mechanism and subsequent trafficking through early and late en-dosomes. PLoS Pathog. 2010; 6(9):1-15.

26. Simmons G., Rennekamp A.J., Chai N., Vandenberghe L.H., Riley J.L., Bates P. Folate receptor alpha and calveola are not required for Ebola virus glycoprotein-mediated virus infection. J. Virol. 2003; 77:13433-8.

27. Stroher U., West E., Bugany H., Klenk H.D., Schnittler H.J., Feldman H. Infection and activation of monocytes by Marburg and Ebola viruses. J. Virol. 2001; 75:11025-33.

28. Takada A., Robinson G., Goto H., Sanchez A., Murty R.G., Whitt M.A., Kawaoka Y.A. A system for functional analysis of Ebola virus glycoprotein. Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1997; 94:14764-9.

29. Volchkov V.E., Feldmann H., Volchkova V.A., Klenk H.D. Processing of Ebola virus glycoprotein be polyprotein convertase fu-rin. Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1998; 95:5762-7.

30. Wool-Lewis R.J., Bates P. Characterization of Ebola virus entry bu using pseudotyped viruses: identification of receptor - deficient cell lines. J. Virol. 1998; 72(4):3155-60.

31. Yang Z.Y., Duckers H.J., Sullivan N.J., Sanchez A., Nabel

E.G., Nabel G.J. Identification of the Ebola virus glycoprotein as main viral determinant of vascular cell cytotoxicity and injury. Nat. Med. 2000; 6:886-9.

References

1. Albarino C.G., Shoemaker T., Khristova M.L., Wamala J.F., Muyembe J.J., Balinandi S., Tumusiime A., Campbell S., Cannon D., Gibbons A., Bergeron E., Bird B., Dodd K., Spiropoulou C., Erickson B.R., Guerrero L., Knust B., Nichol S.T., Rollin P.E., Stroher U. Genomic analysis of filovi-ruses associated with four viral hemorrhagic fever outbreaks in Uganda and the Democratic Republic of the Congo in 2012. Virology. 2013; 442:97-100.

2. Baize S., Pannetier D., Oestereich L., Rieger T., Koivogui L. Emergence of Zaire Ebola Virus Disease in Guinea. N. Engl. J. Med. 2014; 371(15):1418-25.

3. Barrientos L.G., OKeefe B.R., Bray M., Sanches A., Gronenborn A.M., Boyd M.R. Cyanovirin-N binds to viral surface glycoprotein, G 1,2 and inhibits infectivity of Ebola virus. Antivirus Res. 2003; 58:47-56.

4. Basu A., Li B., Mills D.M., Panchal R.G., Cardinale S.C., Butler M.M., Peet N.P. Identification of small molecule entry inhibitor for filoviruses. J. Virol. 2011; 85:3106-19.

5. Cote M., Misasi J., Ren T., Bruches A., Lee K., Filone C.M., Hensley L., Li Q., Ory D., Chandran K. Small molecule inhibitors reveal Niemann-Pick C1 is essential for Ebola virus infection. Nature. 2011; 477:344-8.

6. Empig C.J., Goldsmith M.A. Associacion of the calveola vesicular system with cellular entry by filoviruses. J. Virol. 2003; 76:5266-70.

7. Feldmann H., Geisbert T.W. Ebola hemorrhagic fever. Lancet. 2011; 377:849-62.

8. Geisbert T.W., Hensley L.E., Gibb T.R., Steele K.E., Jaax N.K., Jahrling P.B. Apoptosis induced in vitro and in vivo during infection by Ebola and Marburg viruses. Lab. Invest. 2000; 80:171-86.

9. Geisbert T.W., Hensley L.E., Larsen T., Young H.A., Reed D.S., Geisbert J.B., Scott D.P., Kagan E., Jahrling P.B., Davis K.J. Pathogenesis

of Ebola hemorrhagic fever in cynomolgus macaques: evidence that dendritic cells are early and sustained" targets of infection. Am. J. Pathol. 2003; 163:2347-70.

10. Hartman A.L., Towner J.S., Nichol S.T. Ebola and Marburg hemorrhagic fever. Clin. Lab. Med. 2010; 30:161-77.

11. Hofmann-Winkler H., Kaup F., Pohlman S. Host cell factors in filovirus entry; novel players, new insights. Viruses. 2012; 4:3336-62.

12. Hunt C.L., Lennenmann N.J., Maury W. Filovirus entry: a novelty in the viiralfusion world. Viruses. 2012; 4:258-75.

13. Konduru K., Bradfute S.B., Jasquess J., Manangeeswaran M., Nakamura S., Morshed S., Wood S.C., Bavary S., Kaplan G.G. Ebola virus glycoprotein Fc fusion protein confer protection against lethal challenge in vaccinated mice. Vaccine. 2011; 29:2968-77.

14. Kuhn J.H., Radoshitzky S.R., Guth A.C., Warfield K.L., Li W., Vincent M.J., Towner J.S., Nichol S.T., Bavary S., Choe H. Conserved receptor-binding domains of Lake Victoria marburgvirus and Zaire ebolavirus bind a common receptor. J. Biol. Chem. 2006; 281:15951-8.

15. Kuhn J.H., Becker S., Ebihara H., Geisbert T.W., Johnson K.M., Kawaoka Y., Lipkin W.I., Negredo A.I., Netesov S.V., Nichol S.T., Palacios G., Peters C.J., Tenorio A., Volchkov V.E., Jahrling P.B. Proposal for a revised taxonomy of the family Filoviridae: Classification, names of taxa and viruses, and virus abbreviations. Arch. Virol. 2010; 155:2083-103.

16. Kuhn J.H., Bao Y., Bavari S., Becker S., Bradfute S., Brauburger K., Rodney Brister J., Bukreyev A.A., Cai Y., Chandran K., Davey R.A., Dolnik O., Dye J.M., Enterlein S., Gonzalez J.P., Formenty P., Freiberg A.N., Hensley L.E., Hoenen T., Honko A.N., Ignatyev G.M., Jahrling P.B., Johnson K.M., Klenk H.D., Kobinger G., Lackemeyer M.G., Leroy E.M., Lever M.S., Mühlberger E., Netesov S.V., Olinger G.G., Palacios G., Patterson J.L., Paweska J.T., Pitt L., Radoshitzky S.R., Ryabchikova E.I., Saphire E.O., Shestopalov A.M., Smither S.J., Sullivan N.J., Swanepoel R., Takada A., Towner J.S., van der Groen G., Volchkov V.E., Volchkova V.A., Wahl-Jensen V., Warren T.K., Warfield K.L., Weidmann M., Nichol S.T. Virus nomenclature below the species level: a standardized nomenclature for filovirus strains and variants rescued from cDNA. Arch. Virol. 2014; 159(5):1229-37.

17. Lee J.E., Fusco M.L., Hessell A.J., Oswald W.B., Burton D.R., Saphire E.O. Structure of Ebola virus glycoprotein bound to an antibody from a human survivor. Nature. 2008; 454:177-82.

18. Lee J.E., Saphire E.O. Ebolavirus glycoprotein structure and mechanism of entry. Future Virol. 2009; 4:621-35.

19. Martinez O., Ndungo E., Tantral L., Miller E.H., Leung L.W., Chandran K., Basler C.F. A mutation in the Ebola virus envelope glycoprotein restricts viral entry in a host species- and cell-type - specific manner. J. Virol. 2013; 87:3324-34.

20. Marzi A., Reinheckel T., Feldmann H. Cathepsis B and L are not required for Ebola virus replication. PLoS Negl. Trop. Dis. 2012; 6:1-9.

21. Muller E.H., Harrison J.S., Radoshitzky S.R., Huggins C.D., Chi X., Dong L., Kuhn J.H., Bavari S., Lai J.R., Chanran K. Inhibition of Ebola virus entry by a C-peptide targeted to endosomes. J. Biol. Chem. 2011; 286:15854-61.

22. Muller E.H., Obernoster G., Raaben M., Herbert A.S., Deffieu M.S., Krishnan A., Ndungo E., Sandesara R.G., Carette J.E., Kuehne A.I., Ruthel G., Pfeffer S.R., Due J.R., Whelan S.P., Brummelkamp T.R., Chandran K. Ebola virus entry requires the host-programmed recognition of an intracellular recognition of an intracellular receptor. EMBO J. 2012; 31:1947-60.

23. Sanchez A., Geisbert T.W., Feldmann H. Filoviridae: Marburg and Ebola Viruses. In: Fields virology. Philadelphia, PA, USA: Lippincott Williams and Wilkins; 2007. P. 1279-304.

24. Saseed M.F., Kolokoltsov A.A., Freiberg A.N., Holbrook M.R., Davey R.A. Phosphoinositide-3 kinase -act pathway controls cellular entry of Ebola virus. PLoS Pathog. 2008; 4(8):1-11.

25. Saseed M.F., Kolokoltsov A.A., Albrecht T., Davey R.A. Cellular entry of Ebola virus involves uptake by macropinocytosis-like mechanism and subsequent trafficking through early and late endosomes. PLoS Pathog. 2010; 6(9):1-15.

26. Simmons G., Rennekamp A.J., Chai N., Vandenberghe L.H., Riley J.L., Bates P. Folate receptor alpha and calveola are not required for Ebola virus glycoprotein-mediated virus infection. J. Virol. 2003; 77:13433-8.

27. Stroher U., West E., Bugany H., Klenk H.D., Schnittler H.J., Feldman H. Infection and activation of monocytes by Marburg and Ebola viruses. J. Virol. 2001; 75:11025-33.

28. Takada A., Robinson G., Goto H., Sanchez A., Murty R.G., Whitt M.A., Kawaoka Y.A. A system for functional analysis of Ebola virus glyco-protein. Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1997; 94:14764-9.

29. Volchkov V.E., Feldmann H., Volchkova V.A., Klenk H.D. Processing of Ebola virus glycoprotein be polyprotein convertase furin. Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1998; 95:5762-7.

30. Wool-Lewis R.J., Bates P. Characterization of Ebola virus entry bu using pseudotyped viruses: identification of receptor - deficient cell lines. J. Virol. 1998; 72(4):3155-60.

31. Yang Z.Y., Duckers H.J., Sullivan N.J., Sanchez A., Nabel E.G., Nabel G.J. Identification of the Ebola virus glycoprotein as main viral determinant of vascular cell cytotoxicity and injury. Nat. Med. 2000; 6:886-9.

Authors:

Sizikova T.E., Lebedev V.N., Pantyukhov V.B., Borisevich S.V. The 48th Central Research Institute of the RF Ministry of Defense, Sergiev Possad, Russian Federation

Об авторах:

Сизикова Т.Е., Лебедев В.Н., Пантюхов В.Б., Борисевич С.В. «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны. Российская Федерация, Сергиев Посад.

Поступила 24.03.15.