Механизмы генотоксических эффектов в cоматических и генеративных клетках хозяина при гельминтозах

© БЕКИШ В.Я., БЕКИШ О.-Я.Л., 2005

МЕХАНИЗМЫ ГЕНОТОКСИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ В СОМАТИЧЕСКИХ И ГЕНЕРАТИВНЫХ КЛЕТКАХ ХОЗЯИНА ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ

БЕКИШ В.Я., БЕКИШ О.-Я.Л.

УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»; кафедра медицинской биологии и общей генетики

Резюме. В обзоре представлены результаты исследований авторов и данные литературы, показывающие рост повреждений наследственного аппарата соматических и генеративных клеток хозяина, вызванных метаболитами гельминтов in vivo и in vitro. Охарактеризованы возможные механизмы генотоксических эффектов в клетках хозяина при гельминтозных инвазиях. Показано, что генотоксические эффекты в клетках инвазированного хозяина развиваются за счет действия окислительного стресса, эндонуклеаз, РНК-пептидов, ДНК - оплетающих белков, протеаз, ингибиторов протеаз, низкомолекулярных белков и веществ с митогенной активностью гельминтов.

Ключевые слова: гельминты, генотоксичность, соматические и генеративные клетки хозяина.

Abstract. In this review the results of the investigations and literature data showing the growth of damages in hereditary apparatus of host somatic and germ cells caused by helminthes metabolites in vivo and in vitro are presented. Possible mechanisms of host cells genotoxic effects in helminthiasis are described. Genotoxic effects in the cells of invaded host organism are shown to be stimulated by the oxidative stress in host cells, endonucleases, PNA-peptides, DNA-binding proteins, proteases, low molecular proteins and substances with mitogenic activity of the helminthes.

*- Исследование выполнено по договору № Б04-125 от 3.03.04 г. с Белорусским республиканским фондом фундаментальных исследований.

Мутагенные факторы физической, химической и биологической природы могут вызывать в клетках млекопитающих и человека генные мутации, хромосомные перестройки (аберрации), рекомбинации и геномные мутации [8, 35]. Вновь индуцируемые мутации приводят к увеличению наследственной, онкологической и сердечно-сосудистой патологии [8, 14, 19]. Повреждения структур генома, вызываемые воздействием мутагенов, ответственны не менее, чем за половину всех случаев невынашивания беременности, обусловлива-

Адрес для корреспонденции: 210023, г.Витебск, пр.Фрунзе, 27, Витебский государственный

медицинский университет, кафедра медицинской биологии и общей генетики - Бекиш Вл.Я.

ют до 30% задержки умственного развития, не менее 20% врожденных пороков развития и 10% бесплодия супружеских пар, а также сотни генных и с генетической предрасположенностью заболеваний [7, 8, 9]. В Республике Беларусь ежегодно рождается свыше 3500 детей с наследственной и врожденной патологиями, а умершие из них в перинатальном периоде и в детском возрасте составляют 30% младенческой смертности [15]. Мутации в половых клетках представляют наибольшую опасность для человека, поскольку угрожают здоровью будущих поколений [8, 13].

Наименее исследованы биологические мутагены, к которым, наряду с вирусами, бактериями и простейшими, относят секреторно-

экскреторно-соматические продукты (метаболиты) гельминтов. Показано, что описторхоз-ная, шистосомозная, фасциолезная, гименоле-пидозная, тениозная, аскаридозная, трихоце-фалезная и трихинеллезная инвазии сопровождаются кластогенными и анеугенными нарушениями в наследственном аппарате соматических клеток млекопитающих и человека [4].

В 1999 г. нами была выдвинута гипоте-

за, что метаболиты гельминтов могут вызывать нарушения не только в наследственном аппарате соматических клеток хозяина, но и в его генеративных клетках и являться потенциальными мутагенами половых клеток млекопитающих и человека [2]. При проверке гипотезы в экспериментах на животных [3] было установлено, что метаболиты карликовых цепней, личинок токсокар и трихинелл во время инвазии оказывают генотоксическое воздействие на наследственный аппарат клеток хозяина, которое проявляется ростом количества одноцепочечных разрывов, щелочно-лабильных сайтов ядерной ДНК клеток костного мозга и семенников, числа сперматозоидов с поврежденной одноцепочечной молекулой ДНК в семенниках мышей-самцов линии СВА, а также снижением активности сперматогенеза. При экспериментальных гименолепидозе, токсокаро-зе, трихинеллезе в семенниках мышей возрастают уровни микроядросодержащих спермато-гониев, сперматоцитов и сперматид, что обусловлено кластогенным эффектом метаболитов гельминтов. Наиболее выраженные цитогенетические изменения в тканях хозяина, вызванные генотоксическим и кластогенным воздействиями метаболитов карликовых цепней, личинок токсокар и аскарид, трихинелл, отмечаются в периоды высокой биологической активности паразитов (развитие личинок, их миграция, достижение половозрелости) и возрастают за счет увеличения дозы введенного инвазионного материала, взятого при заражении в линейной зависимости [3].

Ведущая роль в повреждении генома хозяина при гельминтозах принадлежит развитию окислительного и нитрозилирующего стресса в его тканях [4, 6]. Нами было показано, что гименолепидозная и токсокарозная инвазии сопровождаются окислительным

стрессом в клетках семенников хозяина, который характеризуется увеличением концентраций продуктов перекисного окисления липидов (малоновый диальдегид, диеновые конъюгаты) и снижением активности ферментов антиоксидантов (каталаза, супероксиддисма-таза) и коррелирует с цитогенетическими повреждениями клеток сперматогенеза [3]. При трихинеллезной инвазии такие изменения наблюдаются сочетано в клетках бедренных мышц и семенников. При инвазии трихинеллами в плазме крыс повышаются концентрации нитритов/нитратов и снижается общая антиоксидатная активность. Эти изменения максимально выражены при миграции личинок паразитов и коррелируют с генотоксическими эффектами инвазии. Тяжесть окислительного и нитрозилирующего стресса в клетках хозяина при трихинеллезе обусловлена дозой введенного инвазионного материала при заражении и возрастает при ее увеличении. Однако повреждения генома хозяина при гельминтозах не могут развиваться только за счет развития окислительного и нитрозилирующе-го стресса.

С точки зрения химического мутагенеза все ксенобиотики, попадающие в организм и обладающие способностью повреждать генетические структуры организма, разделяют на два класса, которые известны как мутагены прямого и непрямого действия [1, 13]. Вещества первого типа атакуют нуклеофильные сайты ДНК, приводя их к изменениям. Вещества второго типа сами по себе генетически неактивны. Тем не менее, попадая внутрь организма, они вызывают мутагенные и канцерогенные эффекты. Их метаболическая активация, как правило, осуществляется в ходе мик-росомального окисления и способствует образованию генотоксических продуктов, которые непосредственно реагируют с мишенями ДНК

[1, 13].

При неоспоримости доказательств повреждений наследственного аппарата соматических и генеративных клеток хозяина при гельминтозах вопрос о наличии в экскреторно-секреторных продуктах гельминтов веществ, обладающих непрямым мутагенным действием, остается открытым.

Нами впервые было показано [5], что белковые соматические продукты (СП) из тканей карликовых цепней, токсокар и секреторно-экскреторно-соматические продукты (СЭСП) личинок трихинелл обладают генотоксическим воздействием на лимфоциты крови доноров, вызывая рост одноцепочечных разрывов, щелочно-лабильных сайтов ядерной молекулы ДНК in vitro. Генотоксический эффект зависел от дозы белковых паразитарных продуктов и достоверно возрастал в 1,66-2,66 раза при ее двукратном увеличении. Результаты наших исследований согласуются с данными S.C. Chow et al. [23], которые установили, что совместное культивировании Т- лимфоцитов человека линии Jurkat с половозрелыми Necator americanus, а также с экскреторно-секреторными белковыми продуктами этого паразита сопровождается повышением уровней фрагментации ДНК клеток. Изменения находились в линейной зависимости от числа паразитов, концентрации белковых продуктов гельминтов и возрастали при их увеличении [23].

Наличие непрямого кластогенного эффекта в паразитарных продуктах установлено нами при проведении опытов с сенсибилизацией [4, 12, 16, 17]. Трехкратная подкожная сенсибилизация СП из тканей карликовых цепней, токсокар и СЭСП личинок Trichinella spiralis обусловливала нарушения в наследственном аппарате как соматических, так и генеративных клеток экспериментальных животных. Это выражалось в увеличении числа эритроцитов с микроядрами в костном мозге, а также в росте уровня микроядросодержащих клеток стадий сперматогенеза в семенниках мышей. Рост повреждений в геноме сенсибилизированных мышей был максимально выражен в течение 1-й недели от начала сенсибилизации. Наиболее подвержены кластогенному воздействию паразитарных продуктов полихроматофильные эритроциты в костном мозге и сперматогонии, сперматоциты в семенниках. Тяжесть повреждений в наследственном аппарате соматических и генеративных клеток сенсибилизированных животных СП токсокар и СЭСП личинок трихинелл возрастала в линейной зависимости при увеличении дозы введенного паразитарного продукта. Ре-

зультаты наших исследований согласуются с данными J. Blaszkowska [20, 22], которой были изучены возможные эмбриотоксическое и тератогенное воздействия выделенного трипсинового ингибитора из тканей Ascaris lumbricoides и а - химотрипсинового ингибитора - из Ascaris suum. Самкам мышей линии BALB/C 5 раз вводили внутрибрюшинно вышеуказанные ингибиторы ферментов с 8-го по 12-й дни беременности, а на 19-й день учитывали гибель и морфологические изменения эмбрионов. Оказалось, что трипсиновый и а - химотрипсиновый ингибиторы аскарид обладают эмбритоксическим и тератогенным действиями. Они достоверно повышали число погибших эмбрионов и вызывали рост числа зародышей с расщелинами нёба, микрогнатиями, сращением ребер, грыжами спинного и головного мозга [20, 22]. Установлены также эмбриотоксические и тератогенные воздействия трипсинового и а - химот-рипсинового ингибиторов из тканей A. suum на эмбрионы курицы [21].

Компоненты соматических и секреторноэкскреторных продуктов гельминтов, обладающих непрямым мутагенным действием на клетки хозяина, до конца не изучены. Однако известно, что в СЭП T. spiralis содержится двуцепочечная эндонуклеазная активность, которая способствует реорганизации мышечных клеток хозяина и вызывает рост двуцепочных разрывов ДНК [33]. В СЭП T. spiralis и Trichinella pseudospiralis также была выделена одноцепочечная внеклеточная эндонуклеаза, которая гидролизировала ДНК и РНК лимфоцитов человека [32]. В ядрах клеток, лизосомах и в секреторных продуктах личинок и половозрелых особей T. spiralis и T. pseudospiralis содержится деоксирибонуклеза II - а, в функции которой входит разрушение ДНК апоптотических и погибших клеток [31]. По мнению D.L. Lee et al. [29], трихинеллы взаимодействуют с клетками хозяина на ядерном уровне, вырабатывая вещества, которые вовлекаются в контроль транскрипции и трансляции ДНК. R.K.M. Leung [30] было установлено, что СЭП личинок T. spiralis способны связываться с геномной ДНК мышей и быков. В 2001 г. C.H. Mak et al. [34] в СЭП личинок T. pseudospiralis выделили ДНК - оп-

летающий белок с моль.м. 30 кДа, который, по мнению авторов, способен вызывать разрывы ДНК, репрессию генов, изменение экспрессии и остановку жизненного цикла клеток хозяина. В геноме Schistosoma mansoni выделен ген SmZFl, кодирующий цинк-содержащий протеин, обладающий сильной ДНК - связывающей активностью [24]. Микрофилярии Brugia pahangi выделяют цитидиндиаминазу, которая обладает РНК - связывающей активностью [18]. Цистицерки Taenia solium секретируют специфические низкомолекулярные РНК - пептиды, способные вызывать генетическую нестабильность в организме хозяина при инвазии, трансформируя эмбриональные клетки сирийских

хомяков, и вызывать рост числа лимфоцитов крови доноров с микроядрами, хромосомными повреждениями in vitro [27, 28]. Механизмы, благодаря которым эти РНК - пептиды вызывают повреждения хромосом и трансформацию клеток млекопитающих, не изучены, однако известно, что другие схожие низкомолекулярные U5 РНК - пептиды способны вызывать хромосомные аберрации и трансформацию клеток мышей in vitro [25, 26].

Известно, что в тканях гельминтов содержатся вещества, стимулирующие деление клеток млекопитающих. Показано, что низкомолекулярные РНК - пептиды, секретируемые свиными цепнями in vivo и in vitro, стимули-

Таблица 1

Наличие протеаз и их ингибиторов в секреторно-экскреторных продуктах гельминтов [4]

Класс Вид Ферменты

гельминтов

Dictyocaulus viviparous Серин-, цистеин- и металопротеазы

Трематоды Fasciola. hepatica Цистеин-протеазы Ба81, Ба82 Катепсин-Ь-протеазы БИе СЬ 1, БИе СЬ 2

Schistosoma mansoni Серин-протеазы Цистеин-эндопептидаза - катепсин В (8шСВ2) Аспарагиновые эндопептидазы - “легумены”

Taenia crassiceps Цистеин-протеаза

Цестоды Echinococcus granulosus Белковый “Антиген 5” с трипсиноподобной активностью

Spirometra erinacei europei Катепсин-Ь-подобная цистеин-протеаза

Ascaris suum Ascaridia galli Катепсиноподобные протеазы

Toxocara canis Катепсин-Ь-подобная цистеин-протеаза Катепсин-2-подобная цистеин-протеаза Аспарагиновая эндопептидаза

Ostertagia ostertagi Металло-, серин-протеазы, катепсин Ь -подобные протеазы

Nippostrongilus brasiliensis 5 протеаз (1 - металоэнзим) Ингибитор протеаз - “ниппостатин”

Нематоды Trichostrongylus vitrinus Серин- и металлопротеазы

Ancylostoma caninum Катепсин-Д аспарагиновые протеазы Ас-АРЯ-1 и №-АРЯ-1 Цинк-зависимая металлоэндопептидаза

Necator americanus катепсин-Д аспарагиновые протеазы Ас-АРЯ-1 и Ка-АРЯ-1

Ancylostoma ceylanicum Цистеин-протеаза

Trichinella spiralis Цинк-зависимая металлопротеаза Серинпротеаза

Trichuris suis Ингибитор серин-протеаз

Brugia malayi Ингибитор серин-протеаз - “Серпин”

руют пролиферацию и продукцию у - интерферона CD4+ и CD8+ T лимфоцитами селезенки мышей [27]. S. Sasagawa et al. [36] показали, что лиофилизированный экстракт из половозрелых A. suum обладает митогенной активностью, увеличивая число митозов Т-лим-фоцитов при концентрации 100 мкг белка на 1 мл культурального содержимого [36]. СП из тканей Toxocara canis проявлял митогенную активность в клетках селезенки мышей и В-лимфоцитах периферической крови человека в концентрациях от 1 до 125 мкг белка на 1 мл культурального содержимого [38].

Непрямым мутагенным воздействием могут обладать различные белки и белковые ферменты (антиферементы, трофагогоны, ги-столизины, тилакогены) гельминтов, экскре-тируемые и секретируемые паразитами в тка-

ни хозяина во время инвазии [10, 11]. Большое значение в жизнедеятельности гельминтов принадлежит протеазам (Табл. 1), которые катализируют разрушение внутренних пептидных связей полипептидов и белков, выполняют различные патологические функции у гельминтов и вовлекаются в различные взаимодействия в системе паразит-хозяин [4]. Протеазы облегчают гельминтам питание, разрушение тканей и выживание в организме хозяине, а также участвуют в уклонении паразита от иммунного ответа хозяина [37]. Сравнительно недавно были открыты и генетически детерминированы новые белки гельминтов, способные ингибировать протеазы человека (Табл. 1). Структурные особенности этих веществ, эк-зон-интронная организация генов, вносят важный вклад в понимание синтеза гельминтами

Одно- и двуцепочечные эндонуклеазы, деокси-рибонуклеазы гельминтов

Низкомолекулярные белки гельминтов S-------------

Низкомолекулярные РНК пептиды

Протеазы и ингибиторы протеаз гельминтов

I

т

Вещества гельминтов с митогенной активностью

Стимуляция

пролиферации

клеток

Возникновение окислительного и нитрозилирующе-го стресса в клетках хозяина

і

Увеличение

вероятности

образования

мутаций

-----7--------

Повреждения наследственного аппарата соматических и генеративных клеток хозяина

3

Генные Одно- и двуцепочечные ^ Хромосомные

мутации разрывы ДНК аберрации

Рис. 1. Предполагаемые механизмы повреждений наследственного аппарата соматических и генеративных клеток хозяина, вызванных метаболитами гельминтов.

ингибиторов протеаз. Ингибиторы ферментов гельминтов вызывают сбалансированный кон -фликт между хозяином и паразитом на молекулярном уровне [39].

На основании данных собственных исследований и данных литературы можно предположить, что гельминты вызывают генотоксические эффекты в соматических и генеративных клетках хозяина за счет секреции и экскреции ферментов в течение инвазии, воздействующих на геномную ДНК хозяина (одно-, двуцепочечные эндонуклеазы, деокси-рибонуклеазы, низкомолекулярные РНК), и ДНК-оплетающих белков (Рис. 1). Гельминты синтезируют также большое количество специфических низкомолекулярных белков и протеаз, функции которых до конца не изучены. Эти вещества могут обладать непрямым генотоксическим действием на клетки хозяина через активацию системы иммунитета с последующим повышением уровней активных форм кислорода и NO. Большая роль в генотоксических эффектах в клетках хозяина при гель-минтозах принадлежит ингибиторам протеаз, так как достоверно установлено, что часть из них (ингибиторы протеаз аскарид) обладают тератогенным действием, которое близко к мутагенному [20, 22]. Однако неизвестны механизмы генотоксического действия ингибиторов протеаз гельминтов. Возможно, тератогенное воздействие связано со сложными процессами в организме хозяина при контакте с ингибиторами протеаз гельминтов и последующим образованием генотоксических продуктов, а также со снижением активности процессов репарации в организме хозяина. Ведущую роль в дестабилизации генома хозяина при гельминтозах оказывает окислительный и нитрозилирующий стресс в организме последнего [4, 6]. Непрямое мутагенное воздействие метаболитов гельминтов может быть обусловлено наличием в них веществ, обладающих митогенной активностью, которые могут приводить к стимуляции пролиферации клеток, нарушениям хода митоза, снижению репаративных возможностей и, как результат, - к увеличению вероятности образования мутаций. Генотоксические эффекты

при гельминтозах приводят к образованию в клетках хозяина первичных повреждений ДНК (образование одно- и двуцепочечных разрывов) с последующим повышением уровней генных и хромосомных мутаций.

Литература

1. Абилев, С.К. Метаболическая активация мутагенов/

С.К. Абилев.// Итоги науки и техники. Общая генетика. Химический мутагенез. - М.: ВИНИТИ, 1986. -Т. 9. - С. 5-96.

2. Бекиш, В.Я. Метаболиты гельминтов как возможные

мутагены половых клеток хозяина/ В.Я. Бекиш.// Вопросы эксп. биологии и медицины: сб. науч. трудов. - Витебск, 1999. - С. 70-73.

3. Бекиш, В.Я. Паразитарные инвазии и способы за-

щиты генома хозяина при гельминтозах.: дисс. ... докт. мед. наук: 03.00.19; 03.00.15/ В.Я. Бекиш; Витебск, 2005. - 316 с.

4. Бекиш, В.Я. Состояние генома хозяина при гельмин-

тозах/ В.Я. Бекиш, О.-Я.Л Бекиш. - Витебск: Изд-во ВГМУ, 2004. - 218 с.

5. Бекиш, В.Я. Генотоксическое и цитотоксическое воз-

действия белковых соматических продуктов гельминтов на лимфоциты крови доноров in vitro/ В.Я. Бекиш., А. Д. Дурнев.//Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2004. - Т. 138.- № 8.

- С. 198-201.

6. Бекиш, О.-Я.Л. Значение свободнорадикальных

процессов в становлении системы паразит - хозяин при гельминтозах/ О.-Я.Л. Бекиш, В.Я. Бекиш.// Новости медико-биологических наук=News of biomedical sciences. - 2004. - № 3.

- С. 103-110.

7. Мониторинг врожденных пороков развития / Н.П

Бочков [и др.] // Рос. вестн. перинотол. и педиатр.

- 1996. - № 2. - С. 20-26.

8. Бочков Н.П. Наследственность человека и мутагены

внешней среды/ Н.П. Бочков, А.Н. Чеботарев. - М.: Медицина, 1989. - 272 с.

9. Дурнев А. Д. Мутагены: скрининг и фармакологичес-

кая профилактика воздействий/ А. Д. Дурнев, С.Б. Середин.- М.: Медицина, 1998. - 328 с.

10. Киршенблат Я. Д. Телергоны - вещества, выделяемые животными в окружающую среду и служащие для воздействия на другие организмы/ Я. Д. Киршенблат // Общая биология. - 1963. - Т. 24.- № 6.

- С. 415-427.

11. Киршенблат Я. Д. Телергоны - химические средства

взаимодействия животных/ Я. Д. Киршенблат.- М.: Наука, 1974. - 126 с.

12. Колмогоров, В.И. Повреждение генома хозяина при

экспериментальном токсокарозе и при сенсибилизации белковым продуктом из тканей Toxocara canis/ В.И. Колмогоров, В.Я. Бекиш // Вестник ВГМУ- 2004. - Т. 3.- № 3. - С. 81-89.

13. Кужир, Т.Д. Антимутагены и химический мутагенез в системах высших эукариот/ Т.Д. Кужир; под. общ. ред. РИ. Гончаровой. - Мн.: Тэхналопя, 1999.

- 267с.

14. Лазюк, Г.И. Морфологические изменения сердца у

плодов с хромосомными болезнями/ Г.И. Лазюк // Пренатальная диагностика. - 2004. - № 3. - С. 197202.

15. Лазюк, Г.И. Профилактика врожденных пороков развития медико-генетической службой/Г.И. Лазюк, О.В.Прибушеня // Здравоохранение. - 2002. -№ 4. - С. 2-4.

16. Лапоухов, Д. А. Мутагенное воздействие секретор-

но-экскреторно-соматического комплекса личинок трихинелл при сенсибилизации на соматические и генеративные клетки мышей/ Д.А. Лапоухов, Р.И. Демидов, В.Я. Бекиш// Совр. пробл. общей мед. и ветерин. паразитологии: тр. IV Меж-дународ. науч. - практич. конф. - Витебск, 2004.

- С. 88-89.

17. Побяржин, В.В. Влияние сенсибилизации белковым

антигеном из тканей Hymenolepis nana var. muris на показатели микроядерного теста у мышей линии СВА/ В.В. Побяржин В.Я. Бекиш// Фунд. науки и достижения клин. медицины и фармации: тез. докл. 57 науч. сессии ВГМУ. - Витебск: ВГМУ, 2002. - C. 4-5.

18. A cytidine deaminase expressed in the post-infective L3 stage of the filarial nematode, Brugia pahangi, has a novel RNA-binding activity/ S. Anant [et al.]// Mol. Biochem. Parasitol. - 1997. - Vol. 88, № 1-2. - P. 105-114.

19. Andreassi, M.G. Coronary atherosclerosis and somatic

mutations: an overview of the contributive factors for oxidative DNA damage/ M.G. Andreassi // Mutat. Res.

- 2003. - Vol. 543. - P. 67-86.

20. Blaszkowska, J. Embryotoxic and teratogenic action of trypsin inhibitor of Ascaris lumbricoides in mice/ J. Blaszkowska // Acta Parasitologica. - 1998. - Vol. 43, № 2. - P. 103-108.

21. Blaszkowska, J. The effect of Ascaris suum homogenate

and its proteolysis inhibitors on chicken embryos/ J.Blaszkowska // Helminthologia. - 1998. - Vol. 35, № 1. - P. 37-42.

22. Blaszkowska, J. The effect of Ascaris tegumental homogenate and ?-chymotrypsin inhibitor isolated from the nematode on mouse pregnancy/J. Blaszkowska // Helminthologia. - 1999. - Vol. 36, №

4. - P. 225-234.

23. Chow, S.C. The human hookworm pathogen Necator americanus induces apoptosis in T lymphocytes/ S.C. Chow, A. Brown, D. Pritchard// Parasite Immunology.

- 2000. - Vol. 22. - P. 29-37.

24. Cloning and characterization of SmZF 1, a gene encoding

a Schistosoma mansoni zinc finger protein / PR. Eleuterio de Souza [et.al.] // Mem. Inst. Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro. - 2001. - Vol. 96, Suppl. - P. 123-130.

25. Blocking of DNA synthesis in vitro by a guanosine 2,3cyclic phosphate: A possible mechanism of chromosome aberrations induced by U5 snRNA/ K. Hamada, K. Yokoro // Mutat. Res. - 1995. - Vol. 326.

- P. 71-82.

26. Herrera L.A. Do helminthes play a role in carcinogenesis?/

L.A.Herrera, P. Ostrosky-Wegman // Trends in Parasitol.

- 2001. - Vol. 17, № 4. - P. 172-175.

27. Immune response impairment, genotoxicity and morphological transformation induced by Taenia solium metacestode/ L.A. Herrera [et.al.] // Mutat. Res.

- 1994. - Vol. 305. - P. 223-228.

28. Induction of DNA damage in human lymphocytes treated with a soluble factor secreted by Taenia solium metacestodes/ L.A. Herrera [et al.] // Teratog. Carcinog. Mutagen. - 2003. - Suppl. 1. - P. 79-83.

29. Trichinella spiralis: antigenic epitopes from the stichocytes detected in the hypertrophic nuclei and cytoplasm of the parasiticed muscle fibre (nurse cell) of the host/ D.L. Lee [et al.] // Parasitology. - 1991. -Vol. 102. - P. 1117-123.

30. Leung, R.K.M. Purification and biological of excretory-

secretory antigens from Trichinella spiralis / R.K.M. Leung; Department of Zoology University of Hong Kong.- Hong Kong, 1995.

31. MacLea, K.S. A family history of deoxyribonuclease II: surprises from Trichinella spiralis and Burkholderia pseudomallei/ K.S. MacLea, R.J. Krieser, A. Eastman // Gene. - 2003. - Vol. 13, № 305(1). - P. 1-12.

32. Mak, C.H. Single-stranded endonuclease activity in the excretory-secretory products of Trichinella spiralis and Trichinella pseudospiralis/ C.H Mak, Y.Y. Chung, R.C. Ko // Parasitology. - 2000. - Vol. 120, Pt. 5. - P. 527-533.

33. Mak, C.H. Characterization of endonuclease activity from excretory-secretory products of a parasitic nematode, Trichinella spiralis/ C.H. Mak, Y.Y. Chung, R.C. Ko // Eur. J. Biochem. - 1999. - Vol. 260, № 2. -P. 477-481.

34. Mak, C.H. DNA-binding activity in the excretory -secretory products of Trichinella pseudospiralis (Nematoda: Trichinelloidea)/ C.H. Mak, R.C. Ko. // Parasitology. - 2001. - Vol. 123. - P. 301-308.

35. Chromosomal aberrations: formation, identification and

distribution/ G. Оbe [et al.] // Mutat. Res. - 2002. -Vol. 504, № 1-2. - P. 17-36.

36. Sasagawa, S. Ascaris suum: lymphocyte mitogenic factor content/ S. Sasagawa, K. Suzuki., T. Fujikura // Exp. Parasitol. - 1987. - Vol. 64, № 1. - P. 71-77.

37. Trap, C. Proteases in helminthic parasites/ C.Trap, P. Boireau // Vet. Res. - 2000. - Vol. 31, № 5. - P. 461-471.

38. B cell mitogenic activity of Toxocara canis adult worm

antigen/ M.Q. Wang [et al.]// Parasite Immunology. -1995. - Vol. 17, № 12. - P. 609-615.

39. Zang, X. Serine proteinase inhibitors from nematodes and the arms race between host and pathogen / X. Zang, R.M. Maizels // Trends Biochem. Sci. - 2001. - Vol. 26, № 3. - P. 191-197.

Поступила 22.11.2005 г. Принята в печать 28.12.2005 г.