СПОСОБЫ ЗАХВАТА ПРЕДСТАВЛЯЮЩИХ ИНТЕРЕС ЧАСТИЦ ИЗ СМЕСИ

1. Способ захвата представляющих интерес вирусоподобных частиц из смеси, включающий использование расширяющегося слоя адсорбента; где указанный способ включает этапы (a) предоставления расширяющегося слоя адсорбента; (b) приведения смеси, содержащей материалы разрушенных клеток-хозяев, в контакт с адсорбентом так, что вирусоподобные частицы в смеси связываются с адсорбентом; (c) необязательной отмывки адсорбента и (d) необязательной элюции вирусоподобных частиц из адсорбента.
2. Способ по п. 1, где вирусоподобные частицы содержат белок вируса гриппа.
3. Способ по п. 2, где вирусоподобные частицы содержат гемагглютинин; соответственно подтип гемагглютинина, выбранный из группы, состоящей из H1, H2, H3, H4, H5, H6, H7, H8, H9, H10, H11, H12, H13, H14, H15 или H16 или комбинации двух или более из них.
4. Способ по п. 1, где смесь содержит разрушенные растительные клетки; соответственно где растение представляет собой растение табака, инфильтрированное молекулами нуклеиновой кислоты, транзиторно экспрессирующими в растении белок, где указанный белок находится в вирусоподобных частицах; более соответственно где смесь представляет собой или ее получают из надземных частей растения.
5. Способ по любому из пп. 1-4, где гранулы содержат, состоят или по существу состоят из материала, выбранного из группы, состоящей из пластмассы, метакрилата, анионообменного материала, диэтиламиноэтила, катионообменного материала, полисахарида, диоксида кремния, поли(стиролдивинил)бензола, полиакриламида, керамики и их производных или комбинации двух или более из них, соответственно, где гранулы содержат, состоят или по существу состоят из полисахарида, выбранного из группы, состоящей из целлюлозы, агарозы и декстрана и их производных или комбинации двух или более из них.
6. Способ по п. 5, где гранулы содержат инертную сердцевину, которая содержит, состоит или по существу состоит из материала, выбранного из группы, состоящей из кварца, диоксида кремния, сплава Nd-Fe-B, нержавеющей стали, оксида циркония, диоксида циркония, силикатов металлов, боросиликатов металлов, керамик, включая диборид титана, карбид титана, диборид циркония, карбид циркония, карбид вольфрама, карбид кремния, нитрид алюминия, нитрид кремния, нитрид титана, оксид иттрия, порошок металлического кремния и дисилицид молибдена; оксидов и сульфидов металлов, включая оксиды магния, алюминия, титана, ванадия, хрома, циркония, гафния, марганца, железа, кобальта, никеля, меди и серебра; оксидов неметаллов; солей металлов, включая сульфат бария; металлических элементов, включая вольфрам, цирконий, титан, гафний, ванадий, хром, марганец, железо, кобальт, никель, индий, медь, серебро, золото, палладий, платину, рутений, осмий, родий и иридий, и сплавов металлических элементов, таких как сплавы, формируемые между указанными металлическими элементами, и их производные или комбинации двух или более из них.
7. Способ по п. 5, где размер гранул, которые связывают представляющие интерес частицы, составляет приблизительно от 25 мкм до 100 мкм; соответственно приблизительно 50 мкм.
8. Способ по любому из пп. 1-4, где указанный способ включает этап предварительного захвата, включающий применение первого расширяющегося слоя адсорбента; соответственно где размер гранул составляет приблизительно от 125 мкм до 250 мкм; более соответственно приблизительно 150 мкм.
9. Способ по любому из пп. 1-4, где адсорбент содержит, состоит или по существу состоит из лиганда; соответственно где лиганд содержит, состоит или по существу состоит из лиганда, выбранного из группы, состоящей из (i) бензиламина или его производного; (ii) алкиламина или его производного; (iii) алкениламина или его производного; (iv) алкиниламина или его производного; (v) алкоксиамина или его производного и (vi) амина моно- или бициклических ароматических или гетероароматических групп или его производного, или комбинации двух или более из них; или где лиганд содержит, состоит или по существу состоит из анионообменной смолы; соответственно где анионообменная смола содержит, состоит или по существу состоит из ионообменной смолы на основе диэтиламиноэтилцеллюлозы или содержит, состоит или по существу состоит из ионообменной смолы на основе диэтиламиноэтилцеллюлозы-декстрана.
10. Способ по любому из пп. 1-4, где электропроводность смеси до контакта с адсорбентом составляет приблизительно от 1 мСм/см до 10 мСм/см; и/или pH смеси до контакта с адсорбентом составляет приблизительно от pH 6,0 до pH 8,0.
11. Способ по любому из пп. 1-4, где степень расширения расширяющегося слоя находится в диапазоне приблизительно от 1 до 5; и смесь проходит через расширяющийся слой при линейной скорости потока в диапазоне приблизительно от 1 см/мин до 15 см/мин.
12. Способ захвата представляющих интерес вирусоподобных частиц из смеси, включающий этапы:
(i) предоставления расширяющегося слоя адсорбента, содержащего диэтиламиноэтилцеллюлозу-декстран, в колонке, где плотность адсорбента составляет приблизительно от 2,5 г/мл до 3,5 г/мл, и где средний размер частиц адсорбента составляет приблизительно 50;
(ii) уравновешивания материала смолы при pH в диапазоне приблизительно от pH 6,0 до 8,0;
(iii) предоставления смеси, содержащей растительный материал табака, где электропроводность указанной смеси составляет приблизительно от 2 мСм/см до 3 мСм/см;
(iv) внесения смеси в колонку при скорости потока приблизительно 2,5 см/мин для связывания вирусоподобных частиц, и где степень расширения расширяющегося слоя в колонке составляет приблизительно 2;
(v) отмывки загруженной колонки с использованием буфера с pH в диапазоне приблизительно от pH 6,0 до 8,0; и
(vi) элюции связанных представляющих интерес частиц из колонки в одной или нескольких фракциях.
13. Способ по п. 12, где этап (iii) включает (a) предоставление целых растений табака, транзиторно экспрессирующего белок, находящийся в вирусоподобных частицах; (b) разрушение клеток листьев и стеблей растений табака с получением растительного материала из табака и (c) регулировку pH и электропроводности смеси посредством разбавления буфером или деионизированной водой.
14. Способ по п. 12, дополнительно включающий перед этапом (iv) этап, включающий фильтрацию смеси после этапа (iii) и включающий фильтрование смеси после этапа (iii) с применением первого расширяющегося слоя адсорбентов, содержащих полиэтиленимин, где размер гранул составляет приблизительно 150 мкм, с удалением из смеси нежелательных веществ.
15. Расширяющийся слой адсорбента, содержащий обратимо связанные с ним вирусоподобные частицы.
16. Применение расширяющегося слоя адсорбента для захвата представляющих интерес вирусоподобных частиц из смеси, где смесь получают из растения, транзиторно экспрессирующего белок, где указанный белок находится в вирусоподобных частицах.