БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ШТАММЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ БОРЬБЫ С БОЛЕЗНЬЮ РАСТЕНИЯ
BACTERIAL STRAINS AND THEIR USE IN PLANT DISEASE CONTROL

По настоящей заявке испрашивается приоритет по предварительной заявке U.S. № 62/320840, поданной 11 апреля 2016 г., и по предварительной заявке U.S. № 62/211282, поданной 28 августа 2015, которые обе во всей своей полноте включены в настоящее изобретение в качестве ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к бактериальным штаммам и популяциям для борьбы с болезнью растения и/или улучшения представляющего интерес агротехнического признака растения.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Болезни растений приводят к большим потерям в сельском хозяйстве. Проявления могут находиться в диапазоне от слабовыраженных признаков до катастрофического повреждения растения, что может привести к значительным экономическим и социальным последствиям. Необходимы способы эффективной борьбы с болезнями растений и вызывающими их патогенами.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к композициям и способам борьбы с болезнью растения и/или для улучшения по меньшей мере одного представляющего интерес агротехнического признака растения. Такие композиции и способы включают группу агентов для биологического регулирования или бактериальных штаммов, которая обеспечивают борьбу с одним или большим количеством патогенов, которые вызывают болезнь растения, и/или улучшает по меньшей мере один представляющий интерес агротехнический признак. Биологические агенты или бактериальные штаммы можно использовать в качестве инокулята для растений. Настоящее изобретение также относится к способам выращивания растения, восприимчивого к болезни растения и способам и композициям для борьбы с болезнью растения. Настоящее изобретение также относится к способам и композициям увеличения устойчивости к болезни растений. Настоящее изобретение также относится к способам и композициям для улучшения жизнеспособности растения и/или улучшения по меньшей мере одного представляющего интерес агротехнического признака.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фиг. 1 представлено подавления развития азиатской ржавчины сои (ASR) на цельном растении в климатических камерах разными бактериальными штаммами. Фунгицид азоксистробин и (+) контрольный штамм добавляли в качестве положительных контролей, а AFS006 и инокулированный контроль были отрицательными контролями.
Pythium
На фиг. 2 представлено количество проростков (густота стояния) на акр при использовании бактериальных штаммов AIP061892 и AIP079428. На фиг. 2 показано, что AIP061892 и AIP079428 приводят примерно к 2-кратному увеличению прорастания по сравнению с инокулированным  контролем.
Rhizoctonia
solani
На фиг. 3 представлено количество проростков (густота стояния) на акр при использовании бактериальных штаммов AIP061892 и AIP079428. На фиг. 3 показано, что AIP061892 приводит к 50% восстановлению прорастания по сравнению с инокулированным  контролем.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
I. Обзор
Настоящее изобретение относится к композициям и способам для улучшения по меньшей мере одного представляющего интерес агротехнического признака и/или улучшения жизнеспособности растения, и/или для борьбы с одной или большим количеством болезней растения. Биологический агент, агент для биологического регулирования, бактериальный штамм, модифицированный бактериальный штамм, модифицированный биологический агент, или модифицированный агент для биологического регулирования или его активный вариант используются в настоящем изобретении для описания микроорганизма, который используют для борьбы с вызывающими болезнь патогенами растений и/или улучшения по меньшей мере одного представляющего интерес агротехнического признака, и/или улучшения жизнеспособности растения.
II. Бактериальные штаммы
Bacillus drentensis
Bacillus thuringiensis
Bacillus flexus
Bacillus frigoritolerans
Bacillus subtilus subsp. Subtilus
Burkholderia vietnamiensis
Bacillus thuringiensis
Bacillus acidiceler
illus simplex
Настоящее изобретение относится к различным агентам для биологического регулирования или бактериальным штаммам, которые можно использовать для борьбы с одной или большим количеством болезней растения и/или улучшения по меньшей мере одного представляющего интерес агротехнического признака и/или улучшения жизнеспособности растения. Такие бактериальные штаммы включают AIP27511 (штамм), AIP35174 (штамм, AIP25773 (штамм), AIP15251 (штамм), AIP61892 (штамм), AIP79428 (штамм), AIP14931 (штамм), AIP39589 (штамм) и AIP36895 (штамм Bac). Настоящее изобретение относится к популяциям клеток, включающих один или большее количество из следующих: AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895, а также популяциям спор, образованных из каждого из этих штаммов, или любым их препаратам.
Таким образом, различные бактериальные штаммы и/или пестицидные композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, включают в качестве активного ингредиента (a) популяцию клеток, включающую один или большее количество из следующих: AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895 или активный вариант любого из них, или (b) популяцию спор, образованных из одного или большего количества из следующих: AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895, или активного варианта любого из них.
AIP27511 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67082.
AIP35174 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67084.
AIP25773 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67085.
AIP15251 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67083.
AIP61892 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67089.
AIP79428 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67081.
AIP14931 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67088.
AIP39589 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67087.
AIP36895 депонирован в Patent Depository of the National Center for Agricultural Utilization Research Agricultural Research Service, U.S. Department of Agriculture, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604 U.S.A. 6 августа 2015 г. и ему присвоен номер NRRL No. B-67086.
Каждый из депозитов, указанных выше, сохранен в соответствии условиями Будапештского договора о признании депонирования микроорганизмов для целей патентной процедуры. Каждый депозит совершен в основном для удобства специалистов в данной области техники и не служит признанием того, что депозит необходим в соответствии с 35 U.S.C. 112.
Термин "изолированная" включает бактерию, спору или другой объект или вещество, которое (1) было выделено по меньшей мере из некоторых из компонентов, с которыми оно было связано при первоначальном образовании (в природе или в экспериментальной установке) и/или (2) получено, приготовлено, очищено и/или изготовлено вручную человеком. Изолированные бактерии можно отделить по меньшей мере примерно от 10%, примерно 20%, примерно 30%, примерно 40%, примерно 50%, примерно 60%, примерно 70%, примерно 80%, примерно 90% или большего количества других компонентов, с которыми оно было первоначально связано.
При использовании в настоящем изобретении вещество является "чистым", если оно в основном не содержит другие компоненты. Термины "очищать", "очищение" и "очищают" означают бактерию, спору или другой материал, который был выделен по меньшей мере из некоторых из компонентов, с которыми оно было связан или когда он был первоначально получен или образован (например, в природе или в экспериментальной установке), или через некоторое время после его первоначального получения. Бактерию, спору или популяцию бактерий или популяцию спор можно считать очищенной, если она выделена по время или после получения, например, из материала или среды, содержащей бактерию или популяцию бактерий или спор, и очищенная бактерия или популяция бактерий или спор может содержать другие материалы в количестве, составляющем примерно до 10%, примерно 20%, примерно 30%, примерно 40%, примерно 50%, примерно 60%, примерно 70%, примерно 80%, примерно 90% или более примерно 90% все же считать очищенной. В некоторых вариантах осуществления очищенные бактерии или споры и популяции бактерий или популяцию спор обладают чистотой, составляющей более примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или более примерно 99%. В предпочтительных вариантах осуществления культура бактерий не содержит другие виды бактерий в количествах, которые обнаруживаются с помощью обычных бактериологических методик.
6
7
8
5
11
5
10
5
12
5
6
6
7
7
8
8
9
9
10
10
11
11
12
5
6
7
8
9
10
11
12
"Популяция" означает группу или набор, который включает два или большее количество элементов (т.е. 10, 100, 1000, 10000, 1×10, 1×10 или 1×10, или более). В настоящем изобретении предложены различные композиции, которые включают популяцию по меньшей мере одного бактериального штамма. В предпочтительных вариантах осуществления популяция по меньшей мере одного из бактериальных штаммов (т. е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895 или активного варианта любого из них, или споры или предспоры, или комбинация клеток, предспор и/или спор, образованная из одного или большего количества из следующих: AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895 или активного варианта любого из них) включает концентрацию, равную по меньшей мере от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10КОЕ/мл, от примерно 10КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл, от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл, от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл, от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл, от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл, от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл, от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл, от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл, от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл. В других вариантах осуществления концентрация бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта включает равную по меньшей мере примерно 10КОЕ/мл, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/мл, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/мл, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/мл, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/мл, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/мл, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/мл, или по меньшей мере примерно 10 КОЕ/мл.
"Спора" означает по меньшей мере одну покоящуюся (при нанесении), но жизнеспособную репродуктивную единицу вида бактерии. Неограничивающие способы, с помощью которых споры получают из каждого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895 (или вариантов любого из них) раскрыты в другом разделе настоящего изобретения. Также следует отметить, что популяции, раскрытые в настоящем изобретении могут включать комбинацию бесспоровых клеток и предспор (клетки на промежуточной стадии образования спор); комбинацию предспор и спор; или комбинацию предспор, бесспоровых клеток и/или спор.
Композиции, включающие бактериальный штамм (т.е. по меньшей мере один из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895 или активный вариант любого из них, или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) могут дополнительно включать сельскохозяйственно приемлемый носитель. Термин "сельскохозяйственно приемлемый носитель" включает любой материал, который облегчает нанесение композиции на предназначенный для этого объект (т.е. на растение или часть растения, восприимчивого к представляющей интерес болезни растения (т.е. к азиатской ржавчине сои (ASR), или к любой другой болезни, раскрытой в настоящем изобретении, или на растение или часть растения для улучшения представляющего интерес агротехнического признака). Носители, использующиеся в композициях для нанесения на растения и части растений, предпочтительно являются нефитотоксичными или лишь слабо фитотоксичными. Подходящий носитель может быть твердым, жидким или газообразным в зависимости от желательного препарата. В одном варианте осуществления носители включают полярные или неполярные жидкие носители, такие как вода, минеральные масла и растительные масла. Дополнительные носители раскрыты в другом разделе настоящего изобретения.
A. Активные варианты бактериального штамма
Настоящее изобретение также относится к активным вариантам AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895. Такие варианты сохраняют способность бороться с одной или большим количеством болезней растения (т.е. уменьшают тяжесть болезни и/или уменьшают развитие болезни) и/или бороться с одним или большим количеством патогенов растений. В некоторых вариантах осуществления варианты сохраняют способность бороться с одной или большим количеством микозов растения и/или с одним или большим количеством патогенных грибов. В других вариантах осуществления варианты сохраняют способность бороться с ASR.
Активные варианты различных бактериальных штаммов, предлагаемых в настоящем изобретении, включают, например, любой изолят или мутант AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895.
В предпочтительных вариантах осуществления бактериальный штамм совместим с биоцидом. Биоцид является химическим соединением, которое может бороться с организмом химическими или биологическими средствами. Биоциды включают пестициды, такие как фунгициды; гербициды; инсектициды, другие химикаты для защиты растений и т.п. Такие соединения подробно обсуждены в другом разделе настоящего изобретения. Бактериальный штамм совместим с биоцидом, если бактериальный штамм способен выживать и/или размножаться в присутствии эффективного количества представляющего интерес биоцида. В случаях, когда бактериальный штамм несовместим с представляющим интерес биоцидом, при желании способы можно использовать для модификации бактериального штамма для придания представляющей интерес совместимости. Такие способы получения модифицированных бактериальных штаммов включают методики селекции и/или методики трансформации.
"Модифицированный бактериальный штамм" означает популяцию, в которой штамм модифицирован (путем селекции и/или трансформации) для придания одного или большего количества дополнительных представляющих интерес признаков. В некоторых случаях модифицированный бактериальный штамм включает любой из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них. В предпочтительных вариантах осуществления модифицированный бактериальный штамм совместим с представляющим интерес биоцидом, включая, но не ограничиваясь только ею, устойчивость к гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений. Модифицированные устойчивые к биоциду штаммы обладают такими же идентификационными признаками, как исходный чувствительный штамм, с тем отличием, что они значительно более устойчивы к конкретному гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений. Их идентификацию легко провести путем сопоставления с характеристиками известного чувствительного штамма. Таким образом, настоящее изобретение относится к изолированным популяциям модифицированных бактериальных штаммов.
Увеличение устойчивости к биоциду (т.е. например, устойчивость к гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений) означает способность организма (т.е. бактериальной клетки или споры) выживать и размножаться после воздействия дозы биоцида (например, гербицида, фунгицида, пестицида или другого химиката для защиты растений), которая обычно летальна для немодифицированного организма или значительно подавит рост немодифицированного организма. В предпочтительных вариантах осуществления увеличение устойчивости к биоциду продемонстрировано в присутствии сельскохозяйственно эффективного количества биоцида.
В таких случаях модифицированный бактериальный штамм, обладающий устойчивостью к одному или большему количеству биоцидов, применим для увеличения конкурентоспособности бактериальных штаммов, в особенности по сравнению с другими микробными агентами, которые не устойчивы к гербицидам, фунгицидам, пестицидам или другим химикатам для защиты растений. Поэтому композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, включают измененные с помощью селекции или генной инженерии бактериальные штаммы и модифицированные популяции бактериальных штаммов. Эти бактериальные штаммы или модифицированные бактериальные штаммы можно использовать в качестве инокулята для растений. Их также можно наносить путем нанесения опрыскиванием непосредственно на надземные части растений и можно смешать с гербицидом или другим химикатом, для придания устойчивости к которому они были модифицированы.
Таким образом, активные варианты бактериальных штаммов, раскрытые в настоящем изобретении, включают например, модифицированный штамм, так что активный вариант обеспечивает борьбу с болезнью растения, и также могут размножаться в присутствии по меньшей мере одного биоцида.
Escherichia coli
J. Mol. Biol.
Current Protocols in Molecular Biology
et al.
J. Chem. Technol. Biotechnol.
Рекомбинантные бактериальные штаммы, обладающие устойчивостью к гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений, можно получить по методикам генной инженерии и такие измененные с помощью или рекомбинантные бактериальные штаммы выращивают для получения модифицированной популяции бактериальных штаммов. Рекомбинантный бактериальный штамм получают путем введения полинкулеотидов в бактериальную клетку-хозяина путем трансформации. Способы трансформации микроорганизмов известны и доступны в данной области техники. См. в целом Hanahan, D. (1983) Studies on transformation of  with plasmids  166, 557-77; Seidman, C.E. (1994) в: , Ausubel, F.M.  eds., John Wiley and Sons, NY; Choi et al. (2006) J. Microbiol. Methods 64:391-397; Wang et al. 2010. 85:775-778. Трансформация может происходить путем естественного поглощения депротеинизированной ДНК компетентными клетками из их среды в лаборатории. Альтернативно, клетки можно сделать компетентными путем обработки двухвалентными катионами на холоде, путем электропорации, путем воздействия полиэтиленгликоля, путем обработки волокнистыми наночастицами или по другим методикам, хорошо известным в данной области техники.
Гены устойчивости к гербициду для использования в трансформации рекомбинантного бактериального штамма включают, но не ограничиваются только ими, гены детоксификация фумонизина (патент U.S. № 5792931); мутанты ацетолактатсинтазы (ALS), которые приводят к устойчивости к гербицидам, в частности, гербицидам типа сульфонилмочевины, такие как мутации S4 и/или Hra; ингибиторы глутаминсинтазы, такие как фосфинотрицин или баста (например, ген bar); и устойчивость к глифосату (ген EPSPS); устойчивость к глуфосинату и HPPD (WO 96/38576, патенты U.S. №№ 6758044; 7250561; 7935869; и 8124846), или другие такие гены, известные в данной области техники. Раскрытия WO 96/38576, патента U.S. № 5792931, патента U.S. № 6758044; патента U.S. № 7250561; патента U.S. № 7935869; и патента U.S. № 8124846 включены в настоящее изобретение в качестве ссылки. Ген bar кодирует устойчивость к гербициду баста, ген nptII кодирует устойчивость к антибиотикам канамицину и генетицину и мутанты гена ALS кодируют устойчивость к сульфонилмочевиновым гербицидам, включая хлорсульфурон, метсульфурон, сульфометурон, никосульфурон, римсульфурон, флазасульфурон, сульфосульфурон и триасульфурон, и имидазолиноновым гербицидам, включая имазетапир, имазахин, имазапир и имазаметабенз.
Для идентификации и получения модифицированной популяции бактериальных штаммов путем селекции бактериальные штаммы выращивают в присутствии гербицида, фунгицида, пестицида или другого химиката для защиты растений в качестве селекционного давления. Восприимчивые агенты погибают, а устойчивые агенты выживают и размножаются без конкуренции. Поскольку бактериальные штаммы выращивают в присутствии гербицида, фунгицида, пестицида или другого химиката для защиты растений, устойчивые бактериальные штаммы успешно размножаются и становятся преобладающими в популяции, которая становится модифицированной популяцией бактериальных штаммов. Способы селекции устойчивых штаммов известны и включают патенты U.S. №№ 4306027 и 4094097, которые включены в настоящее изобретение в качестве ссылки. Активный вариант бактериального штамма, включающий модифицированную популяцию бактериальных штаммов, обладает такими же идентификационными признаками, как исходный чувствительный штамм, с тем отличием, что они значительно более более устойчивы к конкретному гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений. Таким образом, их идентификацию легко провести путем сопоставления с характеристиками известного чувствительного штамма.
Другие активные варианты различных бактерий, предлагаемые в настоящем изобретении, можно идентифицировать с использованием, например, методик, с помощью которых определяют близкородственность между 16S рибосомными РНК, методик идентификации групп образовавших производные и функционально идентичных или близко идентичных штаммов, включающих мультилокусное секвенирование-типирование (MLST), деревья сцепленных общих генов, выравнивание полного генома (WGA), среднюю нуклеотидную идентичность и метрику расстояния MinHash (Mash).
et al.
BMC Biology
et al.
BMC Biology
В одном объекте активные варианты бактериального штамма (штаммов) AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895 включают штаммы, которые близкородственны с любым из раскрытых штаммов, что установлено по методике Bishop MLST классификации микрорганизмов, описаной в публикации Bishop  (2009)  7(1)1741-7007-7-3. Таким образом, в предпочтительных вариантах осуществления активный вариант бактериального штамма, раскрытого в настоящем изобретении включает бактериальный штамм, который попадает по меньшей мере в 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%. 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 98,5%, 98,8%, 99%, 99,1%, 99,2%, 99,3%, 99,4%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8% или 99,9% порога отсечения последовательности по данным методики классификации микрорганизмов Bishop, описаной в публикации Bishop  (2009)  7(1)1741-7007-7-3, которая во всей своей полноте включена в настоящее изобретение в качестве ссылки. Активные варианты бактерий, идентифицированные по таким методикам, сохраняют способность улучшать по меньшей мере один агротехнический признак при нанесении эффективного количества на растение, часть растения или участок выращивания, включая, например, уменьшение тяжести болезни растения и/или уменьшения развития болезни растения.
et al.
PNAS USA
et al.
PNAS
et al.
Nucleic Acids Research
et al.
PNAS USA
В другом объекте активный вариант бактериального штамма (штаммов), раскрытого в настоящем изобретении включает штаммы, которые близкородственны с любым из раскрытых штаммов, что установлено по методике средней нуклеотидной идентичности (ANI) методики классификации микроорганизмов. ANI (см., например, Konstantinidis, K.T., , (2005)  102(7):2567-72; и Richter, M., , (2009)  106(45):19126-31) и варианты (см., например, Varghese, N.J., ,  (July 6, 2015): gkv657) основана на суммировании среднего количества нуклеотидов, общих для геномов штаммов, которые выровнены с помощью WGAs. Таким образом, в предпочтительных вариантах осуществления активный вариант бактериального штамма AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, раскрытого в настоящем изобретении включает бактериальный штамм, который попадает по меньшей мере в 90%, 95%, 96%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 98,8%, 99%, 99,5% или 99,8% порога отсечения последовательности по данным методики ANI классификации микрорганизмов, описаной в публикации Konstantinidis, K.T., , (2005)  102(7):2567-72, которая во всей своей полноте включена в настоящее изобретение в качестве ссылки. Активные варианты бактерий, идентифицированные по таким методикам, сохраняют способность улучшать по меньшей мере один агротехнический признак при нанесении эффективного количества на растение, часть растения или участок выращивания, включая, например, уменьшение тяжести болезни растения и/или уменьшение развития болезни растения.
et al.,
Int J Syst Evol Microbiol.
В другом объекте активные варианты изолированного бактериального штамма (штаммов), раскрытого в настоящем изобретении, включают штамм(ы), который близкородственен с любым из указанных выше штаммов (например, близкородственен с AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895) на основании идентичности последовательностей 16S рДНК. См. Stackebrandt E,  "Report of the ad hoc committee for the re-evaluation of the species definition in bacteriology," 52(3):1043-7 (2002) относительно использования идентичности последовательностей 16S рДНК для определения близкородственности бактерий. В одном варианте осуществления этот по меньшей мере один штамм по меньшей мере на 95% идентичен с любым из указанных выше штаммов на основании идентичности последовательностей 16S рДНК, по меньшей мере на 96% идентичен с любым из указанных выше штаммов на основании идентичности последовательностей 16S рДНК, по меньшей мере на 97% идентичен с любым из указанных выше штаммов на основании идентичности последовательностей 16S рДНК, по меньшей мере на 98% идентичен с любым из указанных выше штаммов на основании идентичности последовательностей 16S рДНК, по меньшей мере на 98,5% идентичен с любым из указанных выше штаммов на основании идентичности последовательностей 16S рДНК, по меньшей мере на 99% идентичен с любым из указанных выше штаммов на основании идентичности последовательностей 16S рДНК, по меньшей мере на 99,5% идентичен с любым из указанных выше штаммов на основании идентичности последовательностей 16S рДНК или по меньшей мере на 100% идентичен с любым из указанных выше штаммов на основании идентичности последовательностей 16S рДНК. Активные варианты бактерий, идентифицированные по таким методикам, сохраняют способность улучшать по меньшей мере один агротехнический признак при нанесении эффективного количества на растение, часть растения или участок выращивания, включая, например, уменьшение тяжести болезни растения и/или уменьшение развития болезни растения.
et al.
Genome Biology
et al.
Метрика расстояния MinHash (Mash) представляет собой методику сопоставления, в которой определены пороги для иерархической классификации микроорганизмов с высоким разрешением и для которой необходимо небольшое количество параметров и стадий (Ondov  (2016)  17:132). Расстояние Mash строго соответствует методике средней нуклеотидной идентичности (ANI) для иерархической классификации (см. публикацию Konstantinidis, K.T.  (2005) PNAS USA 102(7):2567-72, которая во всей своей полноте включена в настоящее изобретение в качестве ссылки). Это означает, что ANI, составляющая 97%, примерно равна расстоянию Mash, равному 0,03, так что значения, приведенные в качестве подходящих порогов для классификации в литературе по ANI, можно прямо использовать для расстояния Mash.
Активные варианты бактериального штамма (штаммов), раскрытые в настоящем изобретении, включают штаммы, которые близкородственны с любым из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895 на основании расстояния Minhash (Mash) между полными геномными последовательностями ДНК. Таким образом, в предпочтительных вариантах осуществления активный вариант бактериального штамма, раскрытого в настоящем изобретении включает бактериальные штаммы, обладающие геномом с расстоянием Mash до раскрытых штаммов, равным менее примерно 0,015. В других вариантах осуществления активный вариант бактериального штамма, раскрытого в настоящем изобретении включает расстояние, равное менее примерно 0,005, 0,010, 0,015, 0,020, 0,025 или 0,030. Геном, поскольку он связан с расстоянием Mash, включает и бактериальную хромосомную ДНК, и бактериальную плазмидную ДНК. В других вариантах осуществления активный вариант бактериального штамма обладает геномом с расстоянием до раскрытых штаммов, превышающим пороговое значение расстояния Mash, которое больше, чем несходство, обусловленное технической погрешностью. В других случаях активный вариант бактериального штамма обладает геномом с расстоянием до раскрытых штаммов, превышающим пороговое значение расстояния Mash, которое больше, чем несходство, обусловленное технической погрешностью, и обладает расстоянием Mash, равным менее примерно 0,015. В других случаях активный вариант бактериального штамма обладает геномом с расстоянием до раскрытых штаммов, превышающим пороговое значение расстояния Mash, которое больше, чем несходство, обусловленное технической погрешностью, и обладает расстоянием Mash, равным менее примерно 0,005, 0,010, 0,015, 0,020, 0,025 или 0,030.
et al.
PNAS USA
ISMEJ
Genome Research
Genome Research
et al.
PNAS USA
При использовании в настоящем изобретении "больше технической погрешности" означает, что оно больше расстояния Mash между двумя штаммами, что обусловлено погрешностями в сборках геномов, при условии, что все сопоставляемые геномы ДНК секвенированы с покрытием по меньшей мере 20× с использованием технологии Illumina HiSeq 2500 секвенирования ДНК м геномы являются по меньшей мере на 99% полными при установленном содержании примесей, равном менее 2%. Хотя 20× покрытие является установившимся в данной области термином, отметим, что примером 20× покрытия является следующий: для генома размером 5 мегаоснований (MB), 100 MB ДНК секвенирования для данного генома необходимо для обеспечения секверирования с покрытием 20× в среднем для каждого положения вдоль генома. Для использования при расчет полноты генома имеется много подходящих последовательностей маркерных генов, включая наборы, приведенные в публикациях Campbell  (2013)  110(14):5540-45, Dupont et al. (2012) 6:1625-1628 и the CheckM framework (Parks et al. (2015)  25:1043-1055); каждая из которых во всей своей полноте включена в настоящее изобретение в качестве ссылки. Примесь определяется, как выраженное в процентах типичное количество однокопийных маркерных генов, которые обнаруживаются во множестве копий в данной геномной последовательности (например, в публикации Parks et al. (2015)  25:1043-1055); каждая из которых во всей своей полноте включена в настоящее изобретение в качестве ссылки. Полноту и содержание примесей рассчитывают с использованием одного и того же набора маркерных генов. Если не указано иное, набором маркеров, использованным для исследования полноты и содержания примесей является набор, приведенный в публикации Campbell  (2013)  110(14):5540-45, которая включена в настоящее изобретение в качестве ссылки.
et al.
Genome Biology
Типичными стадиями для получения оценки расстояния между рассматриваемыми геномами являются следующие: (1) Следует получить геномы, обладающие качеством, достаточным для сопоставления. Геном достаточного качества определяется, как геномная сборка, образованная с последовательностью ДНК, достаточной для обеспечения по меньшей мере 20× покрытия генома с использованием технологии Illumina HiSeq 2500. Для сопоставления с заявленным микробным геномом геном должен быть полным не менее, чем на 99%, при содержании примесей, равном менее 2%. (2) Геномы следует сопоставлять по методике Minhash, как это показано в публикации Ondov  (2016)  17:132, которая во всей своей полноте включена в настоящее изобретение в качестве ссылки. Если не указано иное, используют следующие параметры: размер "эскиза" равен 1000 и "длина k-мера" равна 21. (3) Подтверждение того, что расстояние Mash между этими 2 геномами равно менее 0,005, 0,010, 0,015, 0,020, 0,025 или 0,030. Активные варианты бактерий, идентифицированные по таким методикам, сохраняют способность улучшать по меньшей мере один агротехнический признак при нанесении эффективного количества на растение, часть растения или участок выращивания, включая, например, уменьшение тяжести болезни растения и/или уменьшение развития болезни растения.
III. Препараты
Бактериальные штаммы, предлагаемые в настоящем изобретении (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) можно приготовить в виде клеточной массы, смачивающихся порошков, пеллеты клеток, дустов, гранул, дисперсии, сухого порошка, жидких продуктов на водной или масляной основе и т.п. Такие препараты в дополнение к носителям и другим агентам включают бактерии, предлагаемые в настоящем изобретении, или их активный вариант. Препараты можно использовать в разных способах, раскрытых в другом разделе настоящего изобретения.
Бактериальные штаммы, раскрытые в настоящем изобретении, и их активные варианты можно приготовить так, чтобы они включали по меньшей мере один или большее количество из следующих: средство, увеличивающее объем, растворитель, стимуляторы самопроизвольности, носители, эмульгаторы, диспергирующие средства, средства защиты от замерзания, загустители и/или вспомогательные вещества.
Примеры типичных препаратов включают растворимые в воде жидкости (SL), эмульгирующиеся концентраты (EC), эмульсии в воде (EW), концентраты суспензии (SC, SE, FS, OD), диспергирующиеся в воде гранулы (WG), гранулы (GR) и концентраты капсул (CS); WG; GR; BB; SG; ZC, эти и другие возможные типы препаратов описаны, например, в публикациях Crop Life International и в Pesticide Specifications, Manual on development and use of FAO and WHO specifications for pesticides, FAO Plant Production and Protection Papers - 173, prepared by the FAO/WHO Joint Meeting on Pesticide Specifications, 2004, ISBN: 9251048576. Препараты могут включать активные агрохимические соединения кроме одного или большего количества соединений, предлагаемых в настоящем изобретении.
Препараты или формы для нанесения различных бактериальных штаммов или их активных вариантов могут включать, но не ограничиваются только ими, вспомогательные вещества, такие как средства, увеличивающие объем, растворители, стимуляторы самопроизвольности, носители, эмульгаторы, диспергирующие средства, средства защиты от замерзания, биоциды, твердые носители, поверхностно-активные вещества, загустители и/или другие вспомогательные вещества, такие как адъюванты. Адъювант в этом контексте представляет собой компонент, который усиливает биологическое действие препарата, причем сам компонент не оказывает биологическое воздействие. Примерами адъювантов являются агенты, которые стимулируют удерживание, распределение, прилипание к поверхности листа или проникновение.
Неограничивающими примерами средств, увеличивающих объем, являются, например, вода, полярные и неполярные органические химические жидкости, например, из классов ароматических и неароматических углеводородов (такие как парафины, алкилбензолы, алкилнафталины, хлорбензолы), спирты и полиолы (которые при необходимости также могут быть замещены, превращены в простые эфиры и/или сложные эфиры), кетоны (такие как ацетон, циклогексанон), сложные эфиры (включая жиры и масла) и простые (поли)эфиры, незамещенные и замещенные амины, амиды, лактамы (такие как N-алкилпирролидоны) и лактоны, сульфоны и сульфоксиды (такие как диметилсульфоксид). Если использующимся средством, увеличивающим объем, является вода, также можно использовать, например, органические растворители в качестве вспомогательных растворителей. Важными неограничивающими примерами жидких растворителей являются: ароматические соединения, такие как ксилол, толуол или алкилнафталины, хлорированные ароматические соединения и хлорированные алифатические углеводороды, такие как хлорбензолы, хлорэтилены или метиленхлорид, алифатические углеводороды, такие как циклогексан или парафины, например, фракции нефти, минеральные и растительные масла, спирты, такие как бутанол или гликоль и также их простые и сложные эфиры, кетоны, такие как ацетон, метилэтилкетон, метилизобутилкетон или циклогексанон, сильно полярные растворители, такие как диметилформамид и диметилсульфоксид и также вода. В принципе, можно использовать любой подходящий растворитель. Неограничивающими примерами растворителей являются, например, ароматические углеводороды, такие как ксилол, толуол или алкилнафталины, например, хлорированные ароматические или алифатические углеводороды, такие как хлорбензол, хлорэтилен или метиленхлорид, например, алифатические углеводороды, такие как циклогексан, например, парафины, фракции нефти, минеральные и растительные масла, спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол, бутанол или гликоль, например и также их простые и сложные эфиры, кетоны, такие как ацетон, метилэтилкетон, метилизобутилкетон или циклогексанон, например, сильно полярные растворители, такие как диметилсульфоксид и вода.
Неограничивающие примеры подходящих носителей включают, например, соли аммония и измельченные природные минералы, такие как каолины, глины, тальк, мел, кварц, аттапульгит, монтмориллонит или диатомовая земля и измельченные синтетические минералы, такие как тонкоизмельченный диоксид кремния, оксид алюминия и природные или синтетические силикаты, смолы, воска и/или твердые удобрения. Также можно использовать смеси таких носителей. Носители, подходящие для гранул, включают следующие: например, дробленые и фракционированные природные минералы, такие как кальцит, мрамор, пемза, сепиолит, доломит, и также синтетические гранулы из неорганической и органической муки, и также гранулы их органического материала, такого как опилки, бумага, скорлупа кокосовых орехов, сердцевины кукурузных початков и черешки листьев табака.
Также можно использовать сжиженные газообразные средства, увеличивающие объем, или растворители. Неограничивающими примерами являются такие средства, увеличивающие объем или носители, которые при нормальной температуре и нормальном давлении являются газообразными, примерами являются пропелленты для аэрозолей, такие как галогенированные углеводороды, и также бутан, пропан, азот и диоксид углерода. Примерами эмульгаторов и/или пенообразователей, диспергирующих средств или смачивающих агентов, обладающих ионными или неионными характеристиками, или смесей этих поверхностно-активных веществ, являются соли полиакриловой кислоты, соли лигносульфоновой кислоты, соли фенолсульфоновой кислоты или нафталинсульфоновой кислоты, поликонденсаты этиленоксида с жирными спиртами или с жирными кислотами или с жирными аминами, с замещенными фенолами (предпочтительно алкилфенолами или арилфенолами), соли эфиров сульфоянтарной кислоты, производные таурина (предпочтительно алкилтаураты), фосфаты полиэтоксилированных спиртов или фенолов, эфиры жирной кислоты и полиолов и производные соединений, содержащих сульфаты, сульфонаты и фосфаты, примерами являются алкиларилполигликолевые эфиры, алкилсульфонаты, алкилсульфаты, арилсульфонаты, гидролизаты белков, отработанные растворы лигнинсульфита и метилцеллюлоза. Присутствие поверхностно-активного вещества благоприятно, если одно из активных соединений и/или один из инертных носителей нерастворим в воде и если нанесение проводят в воде.
Другие вспомогательные вещества, которые могут содержаться в препаратах и в образованных из них формах для нанесения, включают красящие вещества, такие как неорганические пигменты, примерами являются оксид железа, оксид титана, прусская синяя и органические красители, такие как ализариновые красители, азокрасители и металлофталоцианиновые красители и питательные вещества и питательные микроэлементы, такие как соли железа, марганца, бола, меди, кобальта, молибдена и цинка.
Также могут содержаться стабилизаторы, такие как низкотемпературные стабилизаторы, консерванты, антиоксиданты, светостабилизаторы или другие агенты, которые повышают химическую и/или физическую стабильность. Кроме того, могут содержаться пенообразователи или противовспениватели.
Кроме того, препараты и образованные из них формы для нанесения также могут включать в качестве дополнительных вспомогательных веществ клеящие средства, такие как карбоксиметилцеллюлоза, натуральные и синтетические полимеры в порошкообразной, гранулированной или латексной форме, такие как гуммиарабик, поливиниловый спирт, поливинилацетат и также натуральные фосфолипиды, такие как цефалины и лецитины, и синтетические фосфолипиды. Другие возможные вспомогательные вещества включают минеральные и растительные масла.
Может существовать возможность того, что в препаратах и в образованных из них формах для нанесения, содержатся другие вспомогательные вещества. Примеры таких добавок включают отдушки, защитные коллоиды, связующие, клеящие вещества, загустители, тиксотропные вещества, средства, обеспечивающие проницаемость, стимуляторы удерживания, стабилизаторы, секвестранты, комплексообразующие реагенты, влагоудерживающие средства и распределяющие средства. Вообще-то, активные соединения можно объединить с любой твердой или жидкой добавкой, обычно использующейся для приготовления.
Подходящие стимуляторы удерживания включают все такие вещества, которые снижают динамику поверхностного натяжения, такие как диоктилсульфосукцинат, или увеличивают вязкоэластичность, такие как, например, полимеры гидроксипропилгуара.
Подходящие средства, обеспечивающие проницаемость, в контексте настоящего изобретения включают все такие вещества, которые обычно используют для увеличения проникновения активных агрохимических соединений в растения. Средства, обеспечивающие проницаемость, в этом контексте определяются так, что из (обычно водной) жидкости для нанесения и/или из наносимого опрыскиванием покрытия они могут проникать в кутикулу растения и увеличивать подвижность активных соединений в кутикуле. Эту характеристику можно исследовать по методике, описанной в литературе (Baur et al., 1997, Pesticide Science 51: 131-152). Примеры включают алкоксилаты спиртов, такие как этоксилаты жирных кислот кокосового масла (12), эфиры жирных кислот, такие как метиловые эфиры жирных кислот рапсового или соевого масло, алкоксилаты жирных аминов, такие как таллоуаминэтоксилат (15), или соли аммония и/или фосфония, такие как, например, сульфат аммония или дигидрофосфат аммония.
4
11
5
11
5
10
5
12
5
6
6
7
7
8
8
9
9
10
10
11
11
12
5
6
7
8
9
10
11
12
4
Различные композиции и препараты, раскрытые в настоящем изобретении могут содержать некоторое количество бактериального штамма, такого как AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них. Такое количество может обладать концентрацией бактериального штамма, равной по меньшей мере от примерно 10 до примерно 10, по меньшей мере от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10КОЕ/г, от примерно 10КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г или от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г. В других вариантах осуществления концентрация бактериального штамма включает равную по меньшей мере примерно 10КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г. Такие концентрации бактериального штамма могут быть в любом препарате представляющего интерес типа, включая, например, смачивающийся порошок, высушенный распылительной сушкой препарат или клеточную массу.
5
11
7
10
7
11
6
10
6
11
11
12
5
10
5
12
5
6
6
7
7
8
8
9
9
10
10
11
11
12
5
6
7
8
9
10
11
12
13
Клеточные массы и смачивающиеся порошки и высушенные распылительной сушкой препараты могут включать бактериальный штамм, такой как AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них. Количество бактериального штамма может обладать концентрацией бактериального штамма, равной по меньшей мере от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г, от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г или от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г. В некоторых вариантах осуществления концентрация бактериального штамма включает равную по меньшей мере примерно 10КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г, по меньшей мере примерно 10 КОЕ/г или по меньшей мере примерно 10КОЕ/г.
При использовании в настоящем изобретении "клеточная масса" включает популяцию клеток, которую отцентрифугировали и/или отфильтровали или сконцентрировали иным образом.
5
7
4
8
4
5
5
6
6
7
7
8
Настоящее изобретение также относится к семени с покрытием, которое включает семя и покрытие на семени, где покрытие включает по меньшей мере один бактериальный штамм, такой как AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где указанный бактериальный штамм или его активный вариант содержится на семени в количестве, равном от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10КОЕ/семя, от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10КОЕ/семя, от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10 КОЕ/семя, от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10 КОЕ/семя, от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10 КОЕ/семя или от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10 КОЕ/семя. Различные представляющие интерес растения раскрыты в другом разделе настоящего изобретения.
Покрытие на семени может дополнительно включать по меньшей мере одно питательное вещество, по меньшей мере один гербицид или по меньшей мере один пестицид, или по меньшей мере один биоцид. См., например, публикации заявок US 20040336049, 20140173979 и 20150033811.
Различные препараты, раскрытые в настоящем изобретении могут быть стабильны в течение не менее 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350 дней, 1,5 лет, 2 лет или дольше. Стабильный означает, что препарат сохраняет жизнеспособные бактерии и/или сохраняет эффективное количество биологически активных бактерий. В одном варианте осуществления стабильный препарат сохраняет по меньшей мере примерно 1%, примерно 10%, примерно 20%, примерно 30% примерно 40%, примерно 50%, примерно 60%, примерно 70%, примерно 80% или примерно 90% содержащихся в препарате КОЕ/г к данному времени хранения по сравнению с количеством КОЕ/г, образовавшимся сразу после получения препарата. В другом варианте осуществления стабильный препарат сохраняет по меньшей мере примерно от 30% до 80%, примерно 50% до примерно 80%, примерно 60% до примерно 70%, примерно 70% до примерно 80%, примерно 40% до примерно 50%, примерно 50% до примерно 60%, примерно 60% до примерно 70% биологической активности препарата к данному времени хранения по сравнению с биологической активностью препарата сразу после получения. В другом варианте осуществления стабильный препарат к данному времени хранения сохраняет по меньшей мере примерно 30%, 45%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% биологической активности по сравнению с биологической активностью препарата сразу после получения. В еще одном варианте осуществления стабильный препарат сохраняет любую комбинацию жизнеспособности и биологической активности, указанных выше.
Препараты предпочтительно содержат от 0,00000001% до 98 мас.% активного соединения или, особенно предпочтительно, от 0,01% до 95 мас.% активного соединения, более предпочтительно от 0,5% до 90 мас.% активного соединения в пересчете на массу препарата.
Содержание активного соединения в формах для нанесения, полученных из препаратов, могут меняться в широких пределах. Концентрация активного соединения в формах для нанесения обычно может составлять от 0,00000001% до 95 мас.% активного соединения, предпочтительно от 0,00001% до 1 мас.% в пересчете на массу формы для нанесения. Нанесение проводят обычным образом с учетом форм для нанесения.
Кроме того, бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант можно смешать с биоцидом, таким как фунгицид, инсектицид или гербицид, для увеличения его активности или активности химиката, к которому он добавлен. В некоторых случаях комбинация бактериального штамма и химиката может обладать синергетической активностью, когда смесь этих двух систем обладает активностью, которая превышает ожидающуюся простую аддитивную активность.
В предпочтительных вариантах осуществления бактериальный штамм или его активный вариант совместим с сельскохозяйственными химикатами, использующимися для улучшения характеристик биоцидов. Такие сельскохозяйственные химикаты включают антидоты, поверхностно-активные вещества, клеящие средства, распределяющие средства, средства защиты от УФ-излучения и суспендирующие и диспергирующие средства. Антидоты являются химикатами, которые улучшают или модифицируют характеристики гербицидов. Поверхностно-активные вещества, распределяющие средства и клеящие средства являются химикатами, включаемыми в сельскохозяйственные препараты для опрыскивания, которые меняют механические характеристики препарата для опрыскивания (например, путем изменения поверхностного натяжения или увеличения проницаемости кутикулы). Средства защиты от УФ-излучения улучшают характеристики сельскохозяйственных биоцидов путем уменьшения разложения ультрафиолетовым излучением. Суспендирующие и диспергирующие средства улучшают характеристики биоцидов путем изменения их свойств в баке для опрыскивания. В случаях, когда бактериальный штамм или активный вариант несовместим с представляющим интерес сельскохозяйственным химикатом, при желании способы можно использовать для модификации бактериального штамма для придания представляющей интерес совместимости. Такие способы получения модифицированных бактериальных штаммов включают методики селекции и/или методики трансформации.
Бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, можно использовать для значительного улучшения по меньшей мере одного представляющего интерес агротехнического признака (т.е. ослабления болезни, такой как ASR или вызванная другим представляющим интерес патогенным грибом). Бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, можно использовать с другими пестицидами в эффективной объединенной программе борьбы с вредителями. В одном варианте осуществления агент для биологического регулирования популяции можно смешать с известными пестицидами таким образом, как описано в WO 94/10845, которая включена в настоящее изобретение в качестве ссылки.
3
3
4
2
3
2
4
2
3
2
3
3
3
2
5
2
2
3
8
2
3
Неограничивающие примеры соединений и композиций, которые можно добавить к препарату, включают, но не ограничиваются только ими, ацетилтрибутилцитрат [трибутиловый эфир 2-(ацетилокси)лимонной кислоты]; агар; скорлупа миндаля; шелуха миндаля; альфа-циклодекстрин; алюмосиликат; алюмосиликат магния [алюминиево-магниевая соль кремниевой кислоты]; силикат алюминия-калия-натрия [алюминиево-калиево-натриевая соль кремниевой кислоты]; силикат алюминия; алюмосиликат натрия [алюминиево-натриевая соль кремниевой кислоты]; алюмосиликат натрия (1:1:1)[ алюминиево-натриевая соль кремниевой кислоты (H4SiO4) (1:1:1)]; бензоат аммония [аммониевая соль бензойной кислоты]; стеарат аммония [аммониевая соль октадекановой кислоты]; амилопектин, гидролизованный кислотой 1-октенилбутандиоат; амилопектин, гидро-1-октадеценилбутандиоат; костяной клей; аскорбилпальмитат; глина аттапульгитового типа; пчелиный воск; бентонит; натриевое производное бентонита; бета-циклодекстрин; костная мука; отруби; панировочные сухари; (+)-бутиллактат; [н-бутиловый эфир (S)-молочной кислоты]; бутиллактат [н-бутиловый эфир молочной кислоты]; бутилстеарат [бутиловый эфир октадекановой кислоты]; известковый сланец; кальцит (Ca(Co)); ацетат кальция; моногидрат ацетата кальция [моногидрат кальциевой соли уксусной кислоты]; бензоат кальция [кальциевая соль бензойной кислоты]; карбонат кальция; цитрат кальция [кальциевая соль лимонной кислоты]; октаноат кальция; оксид-силикат кальция (CaO(SiO)); силикат кальция [кальциевая соль кремниевой кислоты]; стеарат кальция [кальциевая соль октадекановой кислоты]; сульфат кальция; дигидрат сульфата кальция; полугидрат сульфата кальция; канареечное семя; уголь; диоксид углерода; карбоксиметилцеллюлоза [карбоксиметиловый эфир целлюлозы]; картон; карнаубский воск; камедь цератонии стручковой [камедь плодов рожкового дерева]; каррагенан; казеины; касторовое масло; гидрированное касторовое масло; кошачьи консервы; целлюлоза; ацетат целлюлозы; натриевая соль целлюлозы, смесь с карбоксиметиловым эфиром целлюлозы; целлюлозная пульпа; регенерированная целлюлоза; сыр; хлорофилл a; хлорофилл b; цитрусовая мука; лимонная кислота; моногидрат лимонной кислоты; цитрусовый пектин; цитрусовая пульпа; раковины моллюсков; какао; мука из шелухи какао; шелуха какао; жир печени трески; кофейная гуща; печенье; пробка; стержни кукурузных початков; хлопок; мука из жмыха семян хлопчатника; крупа из нашелушенной пшеницы; моноэфир декановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом; декстрины; диглицерилмоноолеат [эфир 9-октадеценовой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; диглицерилмоностеарат [моноэфир 9-октадекановой кислоты с бис(пропандиолом)]; дилаурин [диэфир додекановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; дипальмитин [диэфир гексадекановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; дикалийцитрат [дикалиевая соль лимонной кислоты]; динатрийцитрат [динатриевая соль лимонной кислоты]; декагидрат динатрийсульфата; диатомовая земля (менее 1% кристаллического диоксида кремния); моноэфир додекановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом; доломит; кора дугласии; яичная скорлупа; яйца; (+)-этиллактат [этиловый эфир (S)-молочной кислоты]; этиллактат [этиловый эфир молочной кислоты]; полевой шпат; рыбная мука; рыбий жир (не соответствующий требованиям 40 CFR 180.950); фуллерова земля; фумаровая кислота; гамма-циклодекстрин; желатины; геллановая камедь; клей (в виде деполимеризованного животного коллагена); глицерин [1,2,3-пропантриол]; глицеринмоноолеат [2,3-дигидроксипропиловый эфир (Z)-9-октадеценовой кислоты]; глицерилдикаприлат [диэфир октановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; глицерилдимиристат [диэфир тетрадекановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; глицерилдиолеат [диэфир (9Z)-9-октадеценовой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; глицерилдистеарат; глицерилмономиристат [моноэфир тетрадекановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; глицерилмонооктаноат [моноэфир октановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; глицерилмоноолеат [моноэфир (9Z)-9-октадеценовой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; глицерилмоностеарат [моноэфир октадекановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; глицерилстеарат [эфир октадекановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; гранит; гуаровая камедь; гуммиарабик; трагакантовая камедь; гипс; гематит (FeO); гуминовая кислота; гидрированное хлопковое масло; гидрированное рапсовое масло; гидрированное соевое масло; гидроксиэтилцеллюлоза [2-гидроксиэтиловый эфир целлюлозы]; гидроксипропилцеллюлоза [2-гидроксипропиловый эфир целлюлозы]; гидроксипропилметилцеллюлоза [2-гидроксипропилметиловый эфир целлюлозы]; оксид железа-магния (FeMgO); оксид железа (FeO); оксид железа (FeO); оксид железа (FeO4); оксид железа (FeO); изопропиловый спирт [2-пропанол]; изопропилмиристат; каолин; лактоза; моногидрат лактозы; ланолин; латексный каучук; лауриновая кислота; лецитины; экстракт из корня солодки; известь (химическая) доломитовая; известняк; льняное масло; карбонат магния [магниевая соль угольной кислоты (1:1); бензоат магния; оксид магния; моногидрат оксида-силиката магния (MgO(SiO)); силикат магния; гидрат силиката магния; оксид магния-кремния (MgSiO); стеарат магния [магниевая соль октадекановой кислоты]; сульфат магния; гептагидрат сульфата магния; яблочная кислота; экстракт солода; солодовая мука; мальтодекстрин; метилцеллюлоза [метиловый эфир целлюлозы]; слюда; минералы группы слюды; молоко; N/A мука из проса; минеральное масло (U.S.P.); 1-монолаурин [2,3-дигидроксипропиловый эфир додекановой кислоты]; 1-мономиристин [2,3-дигидроксипропиловый эфир тетрадекановой кислоты]; мономиристин [диэфир декановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; мономальмитин [моноэфир гексадекановой кислоты с 1,2,3-пропантриолом]; моноцитрат калия [монокалиевая соль лимонной кислоты; моноцитрат натрия [мононатриевая соль лимонной кислоты]; монтмориллонит; миристиновая кислота; нефелиновый сиенит; азот; мясо нутрии; нейлон; калиевая соль октановой кислоты; натриевая соль октановой кислоты; миндальное масло; масло из ростков пшеницы; олеиновая кислота; раковины устриц; пальмовое масло; гидрированное пальмовое масло; пальмитиновая кислота [гексадекановая кислота]; парафиновый воск; арахисовое масло; арахисовая скорлупа; арахис; сфагнум; пектин; перлит; вспученный перлит; гипс; полиэтилен; полиглицерилолеат; полиглицерилстеарат; ацетат калия [калиевая соль уксусной кислоты]; безводный алюмосиликат; бензоат калия [калиевая соль бензойной кислоты]; бикарбонат калия [монокалиевая соль угольной кислоты]; хлорид калия; цитрат калия [калиевая соль лимонной кислоты]; гумат калия [калиевые соли гуминовых кислот]; миристат калия калиевая соль [тетрадекановой кислоты]; олеат калия [калиевая соль (9Z)-9-октадеценовой кислоты; рицинолеат калия [монокалиевая соль 12-гидрокси-(9Z,12R)-9-октадеценовой кислоты]; сорбат калия [калиевая соль сорбиновой кислоты]; стеарат калия [калиевая соль октадекановой кислоты]; сульфат калия; сульфат калия [монокалиевая соль серной кислоты]; 1,2-пропиленкарбонат [4-метил-1,3-диоксолан-2-он]; пемза; пигмент краснокочанной капусты (получен из кочанов съедобной краснокочанной капусты путем прессования с использованием только подкисленной воды); щепа можжевельника виргинского; кормовая мука; каучук; опилки; сланец; аморфный пирогенный диоксид кремния (не содержащий кристаллов); аморфный осажденный диоксид кремния и гель; диоксид кремния (не содержащий кристаллов); силикагель; осажденный силикагель, не содержащий кристаллов; гидрат диоксида кремния; стеклообразный диоксид кремния; магниевая соль кремниевой кислоты (HSiO) (1:1); мыло (растворимые в воде натриевые или калиевые соли жирных кислот, полученные омылением жиров и масел или нейтрализацией жирных кислот); килайя [сапонин килайи]; тальк; ацетат натрия [натриевая соль уксусной кислоты]; альгинат натрия; бензоат натрия [натриевая соль бензойной кислоты]; бикарбонат натрия; натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы [натриевая соль карбоксиметилового эфира целлюлозы]; хлорид натрия; цитрат натрия; гумат натрия [натриевые соли гуминовых кислот]; олеат натрия; рицинолеат натрия [мононатриевая соль (9Z,12R)-12-гидрокси-9-октадеценовой кислоты]; стеарат натрия [натриевая соль октадекановой кислоты]; сульфат натрия; сорбит [D-глюцит]; соевый белок; лецитины сои [лецитины сои]; шелуха соевых бобов; жмых соевых бобов; соевая мука; стеариновая кислота [октадекановая кислота]; сера; сиропы, гидрированный гидролизованный крахмал; тетраглицерилмоноолеат [моноэфир (9Z)-9-октадеценовой кислоты с тетраглицерином]; трицитрат кальция [кальциевая соль лимонной кислоты (2:3)]; триэтилцитрат [триэтиловый эфир лимонной кислоты; трицитрат калия трикалиевая соль [лимонной кислоты]; моногидрат трицитрата калия [моногидрат трикалиевой соли лимонной кислоты]; тринатрийцитрат [лимонной кислоты тринатриевая соль]; дигидрат тринатрийцитрата [дигидрат тринатриевой соли лимонной кислоты]; пентагидрат тринатрийцитрата [пентагидрат тринатриевой соли лимонной кислоты]; ультрамарин синий [C.I. Pigment Blue 29]; мочевина; ванилин; вермикулит; винный уксус (в растворе не более 8% уксусной кислоты); витамин C [L-аскорбиновая кислота]; витамин; мука из скорлупы грецких орехов; скорлупа грецких орехов; пшеница; пшеничная мука; масло из зародышей пшеницы; сыворотка; светлое минеральное масло (нефтяное); винтергриновое масло; волластонит (Ca(SiO3)); шерсть; ксантановая камедь; дрожжи; цеолиты (за исключением эриоцита (регистрационный № CAS 66733-21-9)); цеолиты NaA; оксид цинка-железа; оксид цинка (ZnO); и стеарат цинка [цинковая соль октадекановой кислоты].
IV. Способы применения
Бактериальные штаммы или модифицированные бактериальные штаммы или их активные варианты, предлагаемые в настоящем изобретении, можно использовать для любого вида растения для улучшения представляющего интерес агротехнического признака. Представляющие интерес агротехнические признаки включают любой признак, который улучшает жизнеспособность растения или коммерческую ценность. Неограничивающие примеры представляющих интерес агротехнических признаков включают увеличение биомассы, увеличение устойчивости к засухе, тепловую устойчивость, устойчивость к гербициду, устойчивость к засухе, устойчивость к насекомым, устойчивость к грибам, устойчивость к вирусам, устойчивость к бактериям, мужскую стерильность, устойчивость к низким температурам, устойчивость к действию солей, повышение урожайности, увеличение эффективности усвоения питательных веществ, увеличение эффективности усвоения азота, увеличение устойчивости к стрессу, вызванному недостатком азота, увеличение содержания поддающихся ферментации углеводов, уменьшение содержания лигнина, увеличение содержания антиоксиданта, увеличение эффективности усвоения воды, увеличение мощности, увеличение эффективности прорастания, более раннее или усиленное цветение, увеличение биомассы, увеличение отношения биомассы корней к биомассе ростков, увеличение удерживания воды в почве или их комбинация. В другом случае представляющий интерес агротехнический признак включает изменение содержания масла, изменение содержания белка, изменение углеводного состава семян, изменение состава масла в семенах и изменение состава белков в семенах, устойчивость к химикатам, устойчивость к низким температурам, задержку увядания, устойчивость к болезни, устойчивость к засухе, увеличение массы колосьев, усиление роста, улучшение жизнеспособности, устойчивость к низким температурам, устойчивость к гербициду, устойчивость к травоядным, улучшение фиксации азота, улучшение усвоения азота, улучшение структуры корней, увеличение эффективности усвоения воды, увеличение биомассы, увеличение длины корней, увеличение массы семени, увеличение длины проростков, повышение урожайности, повышение урожайности при ограниченном содержании воды, увеличение массы ядра, увеличение содержания влаги в ядре, устойчивость к металлам, увеличение количества колосьев, увеличение количества ядер в колосе, увеличение количества стручков, усиление питания, устойчивость к патогену, устойчивость к вредителям, увеличение способности к фотосинтезу, устойчивость к действию солей, ремонтантность, увеличение мощности, увеличение массы зрелых семян в сухом состоянии, увеличение массы зрелых семян в сыром состоянии, увеличение количества зрелых семян в пересчете на растение, увеличение содержания хлорофилла, увеличение количества стручков в пересчете на растение, увеличение длины стручков в пересчете на растение, уменьшение количества увядших листьев в пересчете на растение, уменьшение количества сильно увядших листьев в пересчете на растение и увеличение количества неувядших листьев в пересчете на растение, заметное модулирование метаболитов, заметное модулирование содержания транскриптов или заметное модулирование протеомы по сравнению с эталонным растением.
В одном неограничивающем варианте осуществления бактериальный штамм или его активный вариант, предлагаемый в настоящем изобретении, можно использовать уменьшения или сокращения содержания вредителя растения. "Вредители" включают, но не ограничивается только ими, насекомые, грибы, бактерии, нематоды, акариды, патогенные простейшие, паразитирующих на животных возбудители фасцилеза и т.п. В одном неограничивающем варианте осуществления бактериальный штамм или его активный вариант, предлагаемый в настоящем изобретении, можно использовать для любого вида растения, восприимчивого к болезни растения. "Растение, восприимчивое к болезни растения" означает, что патоген-возбудитель (возбудители) болезни растения может заразить растение.
Zea mays
Brassica
B. napus, B. rapa, B. juncea
Brassica
Medicago sativa
Oryza sativa
Secale cereale
Sorghum bicolor, Sorghum vulgare
Pennisetum glaucum
Panicum miliaceum
Setaria italica
Eleusine coracana
Helianthus annuus
Carthamus tinctorius
Triticum aestivum
Glycine max
Nicotiana tabacum
Solanum tuberosum
Arachis hypogaea
Gossypium barbadense
Gossypium hirsutum
Ipomoea batatus
Manihot esculenta
Coffea
Cocos nucifera
Ananas comosus
Citrus
Theobroma cacao
Camellia sinensis
Musa
Persea americana
Ficus casica
Psidium guajava
Mangifera indica
Olea europaea
Carica papaya
Vitus
Fragaria ananassa
Prunus
Malus domestica
Citrus sinensis
Anacardium occidentale
Macadamia integrifolia
Prunus amygdalus
Beta vulgaris
Saccharum
Примеры представляющих интерес видов растений включают, но не ограничиваются только ими, кукурузу (),  sp. (например, ), в особенностит виды , использующиеся в качестве источника масла, люцерну (), рис (), рожь (), сорго (), просо (например, просо африканское (), просо посевное (), просо итальянское (), просо пальчатое ()), подсолнечник (), сафлор (), пшеницу (), сою (), табак (), картофель (), арахис (), хлопчатник (,), батат (), маниок (), кофе ( spp.), кокос (), ананас (), цитрусовые деревья ( spp.), какао (), чай (), банан ( spp.), авокадо (), инжир (), гуаву (), манго (), оливу (), папайю (), виноград (spp.), землянику (), вишню ( spp.), яблоню (), апельсин () кешью (), макадамию (), миндаль (), сахарную свеклу (), сахарный тростник ( spp.), овес, ячмень, овощи, декоративные растения и хвойные деревья.
Lycopersicon esculentum
Lactuca sativa
Phaseolus vulgaris
Phaseolus limensis
Lathyrus
Cucumis
C. sativus
C. cantalupensis
C. melo
Rhododendron
Macrophylla гортензия
Hibiscus rosasanensis
Rosa
Tulipa
Narcissus
Petunia hybrida
Dianthus caryophyllus
Euphorbia pulcherrima
Овощи включают следующие: томаты (), латук (например, ), зеленую фасоль (), лимскую фасоль (), горохи ( spp.) и представителей рода , такие как огурец (), канталупа () и мускатная дыня (). Декоративные растения включают азалию ( spp.), гортензию (), гибискус (), розы ( spp.), тюльпан ( spp.), желтый нарцисс ( spp.), петунию (), гвоздику (), пуансеттию () и хризантему.
Pinus taeda
Pinus elliotii
Pinus ponderosa
Pinus contorta
Pinus radiata
Pseudotsuga menziesii
Tsuga canadensis
Picea glauca
Sequoia sempervirens
Abies amabilis
Abies balsamea
Thuja plicata
hamaecyparis nootkatensis
Хвойные деревья, которые можно использовать при практическом осуществлении настоящего изобретения, включают, например, сосны, такие как сосна ладанная (), сосна Эллиота (), сосна желтая (), сосна скрученная широкохвойная () и сосна лучистая (); лещадь тисолистная (); тсуга канадская (); ель ситхинская (); секвойя вечнозеленая (); ели настоящие, такие как пихта благородная () и пихта бальзамическая (); и кедры, такие как туя () и кипарисовик нутканский (C). В предпочтительных вариантах осуществления растениями, рассматриваемыми в настоящем изобретении, являются культурные растения (например, кукуруза, люцерна, подсолнечник, крестоцветные, соя, хлопчатник, сафлор, арахис, сорго, пшеница, просо, табак и т.п.). В других вариантах осуществления растения кукурузы и сои являются оптимальными и в других вариантах осуществления растения кукурузы являются оптимальными.
Другие представляющие интерес растения включают зерновые растения, которые дают представляющие интерес семена, масличные растения и бобовые растения. Представляющие интерес семена включают семена зерновых, таких как кукуруза, пшеница, ячмень, рис, сорго, рожь и т.п. Масличные растения включают хлопчатник, сою, сафлор, подсолнечник, крестоцветные, маис, люцерну, пальму, кокос и т.п. Бобовые растения включают фасоль, горохи и сухие бобовые. Бобы включают гуар, плоды рожкового дерева, пажитник, сою, фасоль обыкновенную, горох коровий, фасоль золотистую, лимскую фасоль, конские бобы, чечевицу, нут и т.п.
A. Неограничивающие примеры вредители растений
Примеры болезней растений, которые можно лечить или ослаблять, или предупреждать, включают, но не ограничиваются только ими, болезни растений, вызванные грибами, вирусами или вироидами, бактериями, насекомыми, нематодами, простейшими и т.п. Примеры микозов растений, если указать только некоторые, включают, но не ограничиваются только ими, азиатскую ржавчину сои (ASR), серую гниль, пятнистость листьев, селенофомозную пятнистость листьев, бурую пятнистость, комплекс черной ножки, бурую пятнистость, черную коросту, корневую гниль, belly rot, ризоктониоз, настоящую мучнистую росу, антракнозную пятнистость листьев, ложную мучнистую росу, питиозную гниль корней, фитофторозную гниль, фузариоз колоса, синдром внезапной гибели (SDS), фузариозный вилт, стеблевую гниль кукурузы,бурую ржавчину, черную ржавчину, желтую ржавчину, ржавчину пшеницы, ржавчину, паршу яблони, вертициллиозный вилт, бактериальный ожог и бурую гниль.
Патогены растений, рассматриваемые в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются только ими, вирусы или вироиды, бактерии, насекомые, нематоды, грибы и т.п.
В предпочтительных вариантах осуществления бактериальными штаммами, предлагаемыми в настоящем изобретении, являются такие, которые направлены на один или большее количество патогенов растений. Например, различные бактериальные штаммы, предлагаемые в настоящем изобретении, направлены на один или большее количество патогенных грибов, которые вызывают болезнь растения. Например, любой из бактериальных штаммов, предлагаемых в настоящем изобретении, или его активный вариант может обладать фунгицидной активностью по отношению к одному, двум, трем, четырем, пяти, большему количеству патогенных грибов и/или микозов, описанных в настоящем изобретении.
Botrytis spp.,
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria spp., Alternaria solani, Rhizoctonia spp., Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum spp, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Mycosphaerella spp., Phomopsis spp., Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium spp., Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Penicillium spp., Phakopsora
Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Sclerotium spp., Sclerotinia ssp., Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia spp., Monilinia fructicola, Monilinia lax и Monilinia fructigena.
Способы и композиции, раскрытые в настоящем изобретении можно использовать для борьбы с одной или большим количеством патогенных грибов. Патогенным грибом может быть, но не ограничивается только ими, гриб, выбранный из группы, включающей  sp.,
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalis
В некоторых вариантах осуществления патогенный гриб выбран из группы, включающей  и
Phakopsora
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae
В других вариантах осуществления патогенным грибом является  sp., включая и/или.
Achoroia grisella
Acleris gloverana
Acleris variana
Adoxophyes orana
Agrotis ipsilon
Alabama argillacea
Alsophila pometaria
Amyelois transitella
Anagasta kuehniella
Anarsia lineatella
Anisota senatoria
Antheraea pernyi
Anticarsia gemmatalis
Athetis mindara
Bombyx mori
Bucculatrix thurberiella
Cadra cautella
Cochylls hospes
Colias eurytheme
Corcyra cephalonica
Cydia latiferreanus
Cydia pomonella
Datana integerrima
Dendrolimus sibericus
Diaphania hyalinata
Diaphania nitidalis
Diatraea grandiosella
Diatraea saccharalis
Ennomos subsignaria
Eoreuma loftini
Esphestia elutella
Erannis tilaria
Estigmene acrea
Eulia salubricola
Eupocoellia ambiguella
Eupoecilia ambiguella
Euproctis chrysorrhoea
Euxoa messoria
Galleria mellonella
Grapholita molesta
Harrisina americana
Helicoverpa subflexa
Helicoverpa zea
Heliothis virescens
Hemileuca oliviae
Homoeosoma electellum
Hyphantia cunea
Keiferia lycopersicella
Lambdina fiscellaria fiscellaria
Lambdina fiscellaria lugubrosa
Leucoma salicis
Lobesia botrana
Loxostege sticticalis
Lymantria dispar
Macalla thyrisalis
Mamestra brassicae
Mamestra configurata
Manduca quinquemaculata
Manduca sexta
Maruca testulalis
Melanchra picta
Operophtera brumata
Ostrinia nubilalis
Paleacrita vernata
Papilio cresphontes
Pectinophora gossypiella
Phryganidia californica
Phyllonorycter blancardella
Pieris napi
Pieris rapae
Plathypena Scabra
Platynota flouendana
Platynota stultana
Platyptilia carduidactyla
Plodia interpunctella
Plutella xylostella
Pontia protodice
Pseudaletia unipuncta
Pseudoplasia includens
Sabulodes aegrotata
Schizura concinna
Sitotroga cerealella
Spilonta ocellana
Thaurnstopoea pityocampa
Tinsola bisselliella
Trichoplusia hi
Udea rubigalis
Xylomyges curiails
Yponomeuta padella
В предпочтительных вариантах осуществления бактериальными штаммами, предлагаемыми в настоящем изобретении, являются такие, которые направлены на одно или большее количество насекомых или насекомых-вредителей. Термин "насекомые" или "насекомые-вредители" при использовании в настоящем изобретении означает насекомых и других сходных вредителей, таких как, например, отряда Acari, включая, но не ограничиваясь только ими, mites и ticks. Насекомые-вредители, рассматриваемые в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются только ими, насекомые отряда Lepidoptera, например, , , , , , , , , , , , , , Archips sp., Argyrotaenia sp., , , , , Choristoneura sp., , , , , , , , Desmiafeneralis, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , Malacosoma sp., , , , , , , , Orgyia sp., , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , Spodoptera sp., , , , ,  и .
Ostrinia nubilalis
Agrotis ipsilon
Helicoverpa zeae
Spodoptera frugiperda
Diatraea grandiosella
Elasmopalpus lignosellus
Diatraea saccharalis
Diabrotica virgifera virgifera
Diabrotica longicornis barberi
Diabrotica undecimpunctata howardi
Cyclocephala borealis
Cyclocephala immaculata
Popillia japonica
Chaetocnema pulicaria
Sphenophorus maidis
Rhopalosiphum maidis
Anuraphis maidiradicis
Blissus leucopterus leucopterus
Melanoplus femurrubrum
Melanoplus sanguinipes
Hylemya platura
Agromyza parvicornis
Anaphothrips obscrurus
Solenopsis milesta
Tetranychus urticae
Chilo partellus
Spodoptera frugiperda
Helicoverpa zea
Elasmopalpus lignosellus
Feltia subterranea
Phyllophaga crinita
Eleodes, Conoderus
Oulema melanopus
Chaetocnema pulicaria
Sphenophorus maidis
Rhopalosiphum maidis
Sipha flava
Blissus leucopterus leucopterus
Contarinia sorghicola
Tetranychus cinnabarinus
Tetranychus urticae
Pseudaletia unipunctata
Spodoptera frugiperda
Elasmopalpus lignosellus
Agrotis orthogonia
Elasmopalpus lignosellus
Oulema melanopus
Hypera punctata
Diabrotica undecimpunctata howardi
Schizaphis graminum
Macrosiphum avenae
Melanoplus femurrubrum
Melanoplus differentialis
Melanoplus sanguinipes
Mayetiola destructor
Sitodiplosis mosellana
Meromyza americana
Hylemya coarctata
Frankliniella fusca
Cephus cinctus
Aceria tulipae
Cylindrocupturus adspersus
Smicronyx fulus
Smicronyx sordidus
Suleima helianthana
Homoeosoma electellum
Zygogramma exclamationis
Bothyrus gibbosus
Neolasioptera murtfeldtiana
Heliothis virescens
Helicoverpa zea
Spodoptera exigua
Pectinophora gossypiella
Anthonomus grandis
Aphis gossypii
Pseudatomoscelis seriatus
Trialeurodes abutilonea
Lygus lineolaris
Melanoplus femurrubrum
Melanoplus differentialis
Thrips tabaci
Franklinkiella fusca
Tetranychus cinnabarinus
Tetranychus urticae
Diatraea saccharalis
Spodoptera frugiperda
Helicoverpa zea
Colaspis brunnea
Lissorhoptrus oryzophilus
Sitophilus oryzae
Nephotettix nigropictus
Blissus leucopterus leucopterus
Acrosternum hilare
Pseudoplusia includens
Anticarsia gemmatalis
Plathypena scabra
Ostrinia nubilalis
Agrotis ipsilon
Spodoptera exigua
Heliothis virescens
Helicoverpa zea
Epilachna varivestis
Myzus persicae
Empoasca fabae
Acrosternum hilare
Melanoplus femurrubrum
Melanoplus differentialis
Hylemya platura
Sericothrips variabilis
Thrips tabaci
Tetranychus turkestani
Tetranychus urticae
Ostrinia nubilalis
Agrotis ipsilon
Schizaphis graminum
Blissus leucopterus leucopterus
Acrosternum hilare
Euschistus servus
Jylemya platura
Mayetiola destructor
Petrobia latens
Vrevicoryne brassicae
Phyllotreta cruciferae
Phyllotreta striolata
Phyllotreta nemorum
Meligethes aeneus
Meligethes rufimanus
Meligethes nigrescens
Meligethes canadianus
Meligethes viridescens
Leptinotarsa decemlineata
Насекомые-вредители также включают насекомых, выбранные из отрядов Diptera, Hymenoptera, Lepidoptera, Mallophaga, Homoptera, Hemiptera, Orthroptera, Thysanoptera, Dermaptera, Isoptera, Anoplura, Siphonaptera, Trichoptera, Coleoptera и т.п.; в особенности Lepidoptera. Насекомые-вредители основных культурных растении, рассматриваемые в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются только ими: Маис: , мотылек кукурузный; , совка-ипсилон; , совка кукурузная; , совка травяная; , огневка кукурузная юго-западная; , мотылек малый кукурузный; , огневка тростниковая; западный кукурузный жук, например, ; северный кукурузный корневой жук, например, ; блошка 11-точечная Говарда, например, ; Melanotus spp., проволочники; , северный кукурузный жук (личинка жука); , южный кукурузный жук (личинка жука); , хрущик японский; , земляная кукурузная блошка; , долгоносик кукурузный; , тля кукурузная; , тля кукурузная корневая; , земляной клоп; , кобылка красноногая; , миграционный кузнечик; , личинка мухи ростковой; , кукурузная минирующая муха; , трипс злаковый; , муравей-вор; , клещик паутинный двупятнистый; Сорго: , сорговый точильщик; , совка травяная; , совка кукурузная; , малый мотылек кукурузный; , granulate cutworm; , личинка жука;  и Aeolus spp., проволочники; , пьявица красногрудая; , земляная кукурузная блошка; , долгоносик кукурузный; ; тля кукурузная; , тля желтая сахарного тростника; земляной клоп, например, ; , галлица сорговая; , красный паутинный клещ; , клещик паутинный двупятнистый; Пшеница: , совка луговая; , совка травяная; , мотылек малый кукурузный; , совка прямоугольная; , мотылек малый кукурузный; , пьявица красногрудая; , слоник листовой клеверный; блошка 11-точечная Говарда, например, ; тля ячменная; , тля злаковая обыкновенная; , тля злаковая; , краснобедрая кобылка; , кобылка отличительная; , миграционный кузнечик; , гессенская мушка; , галлица злаковая оранжевая; , личинка американской меромизы; , муха озимая; , трипс табачный; , пилильщик хлебный американский; , луковичный клещ тюльпанов; Подсолнечник: , подсолнечниковый стеблевой долгоносик; , красный долгоносик подсолнечника; , серый долгоносик подсолнечника; , листовертка подсолнечниковая; , огневка подсолнечниковая; , совка подсолнечниковая восклицательная; , жук морковный; , галлица подсолнечниковая; Хлопчатник: , табачная листовертка; , совка хлопковая; , совка малая; , розовый коробочный червь; долгоносик хлопковый, например, ; , тля хлопковая; , блошка хлопковая; , белокрылка окаймленная; , клоп луговой; , краснобедрая кобылка; , кобылка отличительная; , трипс луковый; , трипс табачный; , красный паутинный клещ; , клещик паутинный двупятнистый; Рис: , огневка сахарного тростника; , совка травяная; , совка кукурузная; , grape colaspis; , долгоносик рисовый водяной; , долгоносик рисовый; , цикадка зеленая рисовая; земляной клоп, например, ; , клоп-щитник; Соя: , пяденица соевая; , гусеница, вредящая соевым культурам; , совка клеверная; , мотылек кукурузный; , совка-ипсилон; , совка малая; , табачная листовертка; , совка хлопковая; , мексиканский жук; , тля персиковая зеленая; , цикадка картофельная; , клоп-щитник; , краснобедрая кобылка; , кобылка отличительная; , личинка мухи ростковой; , трипс соевый; , трипс луковый; , клещик паутинный атлантический; , клещик паутинный двупятнистый; Ячмень: , мотылек кукурузный; , совка-ипсилон; , тля злаковая обыкновенная; земляной клоп, например, ; , клоп-щитник; , щитник коричневый; , личинка мухи ростковой; , гессенская мушка; , петробия многоядная; масличный рапс: , тля капустная; , блошка крестоцветная; , блошка полосатая; , блошка земляная светлоногая; , рапсовый цветоед; и цветоеды , ,  и ; Картофель: , колорадский жук.
Lygus hesperus
Lygus lineolaris
Lygus pratensis
Lygus rugulipennis
Popp
Lygus pabulinus
Calocoris norvegicus
Orthops compestris
Plesiocoris rugicollis
Cyrtopeltis modestus
Cyrtopeltis notatus
Spanagonicus albofasciatus
Diaphnocoris chlorinonis
Labopidicola allii
Pseudatomoscelis seriatus
Adelphocoris rapidus
Poecilocapsus lineatus
Blissus leucopterus
Nysius ericae
Nysius raphanus
Euschistus servus
Nezara viridula
Araecerus fasciculatus
Acanthoscelides obtectus
Bruchus rufmanus
Bruchus pisorum
Zabrotes subfasciatus
Diabrotica balteata
Cerotoma trifurcata
Diabrotica virgifera
Epitrix cucumeris
Chaetocnema confinis
Hypera postica
Anthonomus quadrigibbus
Sternechus paludatus
Hypera brunnipennis
Sitophilus granaries
Craponius inaequalis
Sitophilus zeamais
Conotrachelus nenuphar
Euscepes postfaciatus
Maladera castanea
Rhizotrogus majalis
Macrodactylus subspinosus
Tribolium confusum
Tenebrio obscurus
Tribolium castaneum
Tenebrio molitor
Способы и композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, также можно использовать для борьбы с Hemiptera, такими как , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , Eurygaster, Coreidae, Pyrrhocoridae, Tinidae, Blostomatidae, Reduviidae и Cimicidae. Представляющие интерес вредители также включают , ложнослоник кофейный; , зерновка фасолевая; , зерновка бобовая красноногая; , зерновка гороховая; , бразильская бобовая зерновка; , жук-блошка окаймленная; , листоед бобовый; , мексиканский кукурузный корневой жук; , potato земляная блошка; , sweet potato flea beetle; , долгоносик люцерновый; , цветоед яблонный четырехбугорчатый; , bean stalk weevil; , долгоносик египетский люцерновый; , долгоносик амбарный обыкновенный; , grape curculio; , кукурузный долгоносик; , плодовый долгоносик; , бататовый долгоносик; , хрущик азиатский садовый; , европейский хрущ; , бронзовка золотистая; , малый мучной хрущак; , большой темный хрущак; , хрущак каштановый; , большой мучной хрущак.
Heterodera glycines
Heterodera schachtii
Heterodera avenae
Globodera rostochiensis
Globodera pailida
Нематоды включают parasitic нематоды, такие как яванская галловая, цистообразующие и ранящие нематоды, включая Heterodera spp., Meloidogyne spp. и Globodera spp.; в особенности представители цистообразующих нематод, включая, но не ограничиваясь только ими,  (соевая цистообразующая нематода);  (свекловичная цистообразующая нематода);  (зерновая цистообразующая нематода); и  и  (картофельные цистообразующие нематоды). Ранящие нематоды включают Pratylenchus spp.
J. Econ. Entomol.
Пестицидную активность композиций, предлагаемых в настоящем изобретении, можно исследовать на насекомых-вредителях на ранних стадиях развития, например, когда образуются личинки или другие незрелые формы. Насекомых можно выращивать в полной темноте при температуре, равной от примерно 20°C до примерно 30°C, и относительной влажности, равной от примерно 30% до примерно 70%. Биологические исследования можно проводить, как описано в публикации Czapla and Lang (1990) 83 (6): 2480-2485. Методики выращивания насекомых личинок и проведения диологических исследований хорошо известны специалисту с общей подготовкой в данной области техники.
В других вариантах осуществления бактериальные штаммы или их активные варианты (т. е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) обеспечивают борьбу по меньшей мере с одним, двумя, тремя, четырьмя, пятью или большим количеством микозов и/или патогенных грибов, описанных в настоящем изобретении.
В других вариантах осуществления бактериальные штаммы или их активные варианты (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) обеспечивают борьбу по меньшей мере с одним, двумя, тремя, четырьмя, пятью или большим количеством микозов, выбранных из группы, включающей азиатскую ржавчину сои, серую гниль, пятнистость листьев, селенофомозную пятнистость листьев, бурую пятнистость, комплекс черной ножки, бурую пятнистость, черную коросту, корневую гниль, belly rot, ризоктониоз, настоящую мучнистую росу, антракнозную пятнистость листьев, ложную мучнистую росу, питиозную гниль корней, фитофторозную гниль, фузариоз колоса, SDS, фузариозный вилт, стеблевую гниль кукурузы, бурую ржавчину, черную ржавчину, желтую ржавчину, ржавчину пшеницы, ржавчину, паршу яблони, вертициллиозный вилт, бактериальный ожог и бурую гниль.
В других вариантах осуществления бактериальный штамм или его активный вариант (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) обеспечивают борьбу по меньшей мере с одним, двумя, тремя, четырьмя, пятью или большим количеством микозов, выбранных из группы, включающей азиатскую ржавчину сои, серую гниль, селенофомозную пятнистость листьев, бурую пятнистость, комплекс черной ножки, бурую пятнистость, настоящую мучнистую росу, антракнозную пятнистость листьев, ложную мучнистую росу, питиозную гниль корней, фитофторозную гниль, фузариоз колоса, SDS и паршу яблони.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae
Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
В других вариантах осуществления бактериальные штаммы или их активные варианты (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) обеспечивают борьбу по меньшей мере с одним, двумя, тремя, четырьмя, пятью большим количеством патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  sp.,, и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa.
В других вариантах осуществления бактериальные штаммы или их активные варианты (т. е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) обеспечивают борьбу по меньшей мере с одним, двумя, тремя, четырьмя, пятью большим количеством патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и
Phakopsora.
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
Phakopsora pachyrhizi.
В других вариантах осуществления бактериальные штаммы или их активные варианты (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) обеспечивают борьбу по меньшей мере с одним, двумя или всеми  В других вариантах осуществления бактериальный штамм или модифицированные биологические агенты, раскрытые в настоящем изобретении (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) обеспечивают борьбу по меньшей мере с одним или всеми и/или В других способах бактериальные штаммы или модифицированные бактериальные штаммы, раскрытые в настоящем изобретении (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) обеспечивают борьбу с
B. Способы лечения или предупреждения болезни растения
12
16
4
16
5
11
Настоящее изобретение относится к способам лечения или предупреждения болезни растения, включающим нанесение на растение, у которого имеется болезнь растения или опасность возникновения болезни растения эффективного количества по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, где бактериальный штамм обеспечивает борьбу с патогеном растения, который вызывает болезнь растения. В некоторых вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант может включать по меньшей мере один из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них; или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество бактериального штамма или его активного варианта включает равное по меньшей мере примерно от 10 до 10 КОЕ/га или менее, примерно от 10 до 10 КОЕ/га или менее, примерно от 10 до 10 КОЕ/га.
В некоторых способах, бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант представляет собой антипатогенный агент, который лечит или предупреждает одну, две, три, четыре, пять или большее количество болезней растений. В других способах бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант представляет собой фунгицидный агент, который лечит или предупреждает один, два, три, четыре, пять или большее количество микозов растений. Бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант можно использовать для любых видов растений, восприимчивых к представляющей интерес болезни растения.
Bortrytis cinerea
Bortrytis cinerea
Rhizoctonia solani
Rhizoctonia solani
Colletotrichum cereal
Apiognomonia errabunda
Apiognomonia veneta
Colletotrichum gloeosporiodes
Discula fraxinea
Colletotrichum cereal
Apiognomonia errabunda
Apiognomonia veneta
Colletotrichum gloeosporiodes
Discula fraxinea,
Примеры болезней, вызванных патогенными грибами, описанными в настоящем изобретении, приведены в таблице 1. Также приведены неограничивающие примеры типичных видов культурных растений, которые восприимчивы к болезням растений, вызванным патогенами. Например, в таблице 1 показано, что  вызывает серую гниль на цветковых культурных растениях. Поэтому бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант, который обеспечивает борьбу с , можно наносить на растение, у которого имеется серая гниль или опасность возникновения серой гнили, для лечения или предупреждения серой гнили у растения. Аналогичным образом, в таблице 1 показано, что  вызывает комплекс черной ножки в кукурузе, комплекс черной ножки в сое, бурую пятнистость в дерне и комплекс черной ножки в декоративных растениях. Поэтому бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант, который обеспечивает борьбу с , можно наносить на растение, у которого имеется комплекс черной ножки или опасность возникновения комплекса черной ножки и/или бурой пятнистости, для лечения или предупреждения комплекса черной ножки, и/или бурой пятнистости у растения. В качестве другого примера в таблице 1 показано, что , , , ,  вызвываю антракнозную пятнистость листьев. Поэтому бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант, который обеспечивает борьбу с одним или большим количеством следующих: , , , ,  можно наносить на растение, у которого имеется антракнозная пятнистость листьев или опасность возникновения антракнозной пятнистости листьев, для лечения или предупреждения антракнозной пятнистости листьев у растения.
Таблица 1
Патоген-возбудитель
Болезнь
Виды культурных растений
Botrytis cinerea
Серая гниль
Все цветковые культурные растения
Cersospora spp
Пятнистость листьев
Декоративные растения
Cercospora sojina
Селенофомозная пятнистость листьев
Сои
Cercospora beticola
свекла, шпинат, мангольд
Alternaria solani
Бурая пятнистость
Пасленовые растения
Rhizoctonia solani
Комплекс черной ножки
Кукуруза
Rhizoctonia solani
Комплекс черной ножки
Соя
Rhizoctonia solani
Бурая пятнистость
Дерн
Rhizoctonia solani
Комплекс черной ножки
Декоративные растения
Rhizoctonia solani
Черная короста
картофель
Rhizoctonia solani
Корневая гниль
сахарная свекла
Rhizoctonia solani
belly rot
Тыква
Rhizoctonia solani
Ризоктониоз
Рис
Blumeria graminis f. sp. Tritici
Настоящая мучнистая роса
Пшеница
Erysiphe necator
Настоящая мучнистая роса
Виноград
Podosphaera xanthii
Настоящая мучнистая роса
Тыква
Golovinomyces cichoracearum
Настоящая мучнистая роса
Декоративные растения
Erysiphe lagerstroemiae
Настоящая мучнистая роса
Декоративные растения
Sphaerotheca pannosa
Настоящая мучнистая роса
Декоративные растения
Colletotrichum cereale
Антракнозная пятнистость листьев
Дерн/травы/злак
Apiognomonia errabunda
Антракнозная пятнистость листьев
Дерн/травы/злак
Apiognomonia veneta
Антракнозная пятнистость листьев
Дерн/травы/злак
Colletotrichum gloeosporiodes
Антракнозная пятнистость листьев
Дерн/травы/злак
Discula fraxinea
Антракнозная пятнистость листьев
Дерн/травы/злак
Plasmopara viticola
Ложная мучнистая роса
Виноград
Pseudoperonospora cubensis
Ложная мучнистая роса
Тыква
Peronospora belbahrii
Ложная мучнистая роса
Базилик
Bremia lactucae
Ложная мучнистая роса
Латук
Peronospora lamii
Ложная мучнистая роса
Колеус
Plasmopara obduscens
Ложная мучнистая роса
Недотроги
Pythium cryptoirregulare
Комплекс черной ножки
Декоративные растения
Pythium aphanidermatum
Питиозная гниль корней/комплекс черной ножки
дерн/декоративные растения/пропашная культура
Pythium irregulare
Комплекс черной ножки
дерн/декоративные растения/пропашная культура
Pythium sylvaticum
Комплекс черной ножки
дерн/декоративные растения/пропашная культура
Pythium myriotylum
Комплекс черной ножки
дерн/декоративные растения/пропашная культура
Pythium ultimum
Питиозная гниль корней/комплекс черной ножки
дерн/декоративные растения/пропашная культура
Phytophthora capsici
тыква/перец
Phytophthora nicotianae
декоративные растения
Phytophthora infestans
Фитофторозная гниль
пасленовое растение
Phytophthora tropicalis
декоративные растения/перцы/тропические орехоплодные деревья
Phytophthora sojae
Соя
Fusarium graminearum
Фузариоз колоса
Злаки-пшеница
Fusarium solani
SDS
Соя
Fusarium oxysporum
Фузариозный вилт
Травянистые растения
Fusarium graminicola
Стеблевая гниль кукурузы
Маис
Gibberella zeae
Стеблевая гниль кукурузы
Маис
Colletotrichum graminicola
Стеблевая гниль кукурузы
Маис
Phakopsora pachyrizi
Азиатская ржавчина сои
Соя
Puccinia triticina
Бурая ржавчина
Злаки
Puccinia recondita
Черная ржавчина
Злаки
Puccinia striiformis
Желтая ржавчина
Злаки
Puccinia graminis
Ржавчина пшеницы
Злаки
Puccinia spp.
Ржавчина
Декоративные растения
Venturia inaequalis
Парша яблони
Яблоня
Verticillium spp
Вертициллиозный вилт
Все
Erwinia amylovora
Бактериальный ожог
Семейство розоцветные
Monilinia fructicola
Бурая гниль
Косточковые плоды
Monilinia laxa
Бурая гниль
Косточковые плоды
Monilinia fructigena
Бурая гниль
Косточковые плоды
12
16
Настоящее изобретение также относится к способам лечения или предупреждения азиатской ржавчины сои (ASR), включающим нанесение на растение, у которого имеется ASR или опасность возникновения ASR, эффективного количества по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, включающего AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них; или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта включает равное по меньшей мере примерно от 10 до 10 КОЕ/га и бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант обеспечивает борьбу с патогеном растения, который вызывает ASR. В одном варианте осуществления эффективное количество по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, предлагаемого в настоящем изобретении, используют для некорневого нанесения на растение для лечения или предупреждения ASR.
Glycine max
Phaseolus vulgaris
Phaseolus limensis
Phaseolus lunatus
Vigna unguiculata
Pachyrhizus erosus
Бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант или модифицированный бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, можно использовать для любых видов растений, восприимчивого к ASR. "Растение, восприимчивое к азиатской ржавчине сои (ASR)" означает, что патоген-возбудитель (патогены) ASR способен заразить растение. Примеры видов растений, восприимчивых к ASR включают, но не ограничиваются только ими, сою (), фасоль обыкновенную (), такие как зеленую фасоль и фасоль многоцветковую, лимскую фасоль (), масляные бобы (), горох коровий (), кайанусы (Cajanus cajan), пахиризусы, такие как хикама (). В предпочтительном варианте осуществления используют растение сои.
Phakopsora
Phakopsora
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae
Как дополнительно подробно описано в настоящем изобретении, в предпочтительных вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант обеспечивает борьбу с одним или большим количеством грибов, которые вызывают ASR (такими как, например,). ASR вызывается одним или большим количеством патогенных грибов рода . В неограничивающих вариантах осуществления патогенными грибами, которые вызывают ASR, являются или . Патоген ASR хорошо приспособлен для рассеивания на большие расстояния, поскольку споры могут легко переноситься ветром, что делает его идеальным средством для распространения на новые, не зараженные ржавчиной регионы. Первичным средством распространения являются споры, которые могут легко переноситься ветром и с каплями дождя. Эти патогены являются облигатными патогенами, жизнеспособными и размножающимися только на живых хозяевах. В выращиваемой сое первыми симптомами являются светло-коричневые многоугольные поражения размером от 2 до 5 мм на верхней поверхности листа. Эти поражения развиваются в вулканообразные поражения, известные, как пустулы, которые появляются на нижней поверхности листа, где образуются уредоспоры.
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
В других вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант обеспечивает борьбу с . В других вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант обеспечивает борьбу с Различные методики исследования для определения такой активности раскрыты в другом разделе настоящего изобретения.
Термин "лечить" или "лечение" или его производные включает значительное подавление, замедление или обращение прогрессирования патологического состояния, значительное ослабление симптомов патологического состояния или существенное предупреждение появления симптомов или патологических состояний, обусловленных патогеном, который вызывает болезнь растения.
Термины "борьба с патогенами" и "защита растения от патогена" означают одно или большее количество из следующих: подавление или уменьшение роста, прорастания, размножения и/или распространения представляющего интерес патогена; и/или уничтожение, удаление, разрушение, или проводимое иным образом уменьшение наличия и/или активности представляющего интерес патогена. Само по себе растение, обработанное бактериальным штаммом, предлагаемым в настоящем изобретении, может продемонстрировать уменьшение тяжести болезни или уменьшение развития болезни в присутствии патогенов растений на статистически значимое количество.
Термин "предупреждение" и его варианты означают заблаговременное противодействие росту бактерий, грибов, вирусов, насекомых или других вредителей, распространению, заражению, прорастанию споры и росту гифов. В этом случае композицию наносят до воздействия патогенов.
Термины "улучшать" и "улучшение" относятся к улучшению состояния обработанного растения, вызванное композициями и способами, предлагаемыми в настоящем изобретении. Улучшение может проявляться в виде уменьшения роста патогена и/или увеличения у пораженного растения высоты, массы, количества листьев, корневой системы или урожайности. В целом термин означает улучшение физиологического состояния пораженного растения.
Термин "подавлять" и все варианты этого термина включает ограничение или прекращение роста бактерий, грибов, вирусов, нематод, насекомых или любых других вредителей, а также прорастания споры.
Термин "исключение" относится к существенному истреблению или удалению бактерий, грибов, вирусов, нематод, насекомых или любых других вредителей вследствие их взаимодействия с композицией, предлагаемой в настоящем изобретении, необязательно, в соответствии со способами, предлагаемыми в настоящем изобретении, описанными ниже.
Термины "задерживание", "замедление" и все их варианты включают замедление прогрессирования роста бактерий, грибов, вирусов, нематод, насекомых или любых других вредителей и прорастания споры. Выражение "задержка начала" интерпретируется, как предупреждение или замедление прогрессирования роста бактерий, грибов, вирусов, нематод, насекомых или любых других вредителей, заражения, инфицирования, прорастание споры и роста гифов в течение периода времени, в котором рост, заражение, инфицирование, прорастание споры и рост гифов указанных бактерий, грибов, вирусов, нематод, насекомых или любых других вредителей не прогрессирует по мере развития или проявляется позже, чем при отсутствии обработки, предлагаемой в настоящем изобретении.
et al.
Fitopatol. Bras.
Растение, часть растения или участок выращивания, обработанный бактериальным штаммом, предлагаемым в настоящем изобретении, или его активным вариантом, может продемонстрировать уменьшение тяжести болезни или уменьшение развития болезни в присутствии патогенов растений на статистически значимое количество. Уменьшение тяжести болезни или уменьшение развития болезни может составлять от примерно 10% до примерно 20%, от примерно 20% до примерно 30%, от примерно 30% до примерно 40%, от примерно 40% до примерно 50%, от примерно 50% до примерно 60%, от примерно 60% до примерно 70%, от примерно 70% до примерно 80%, от примерно 80% до примерно 90% или от примерно 90% до примерно 100% по сравнению с необработанными контрольными растениями. В других случаях растение, обработанное бактериальным штаммом, предлагаемым в настоящем изобретении, или его активным вариантом, может продемонстрировать уменьшение тяжести болезни или уменьшение развития болезни в присутствии патогена растения по меньшей мере примерно на 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или примерно на 100% более значительное по сравнению с необработанными контрольными растениями. Методики оценки тяжести болезни растения известны и включают, измерение выраженной в процентах площади пораженного листа (Godoy  (2006)31(1) 63-68 или измерение количества урединиумов (см. пример 1).
"Антипатогенные композиции" или "антипатогенные" означает, что композиции способны подавлять проникший патогенный организм, бороться с ним, предупреждать его проникновение и/или уничтожать его. В предпочтительных вариантах осуществления антипатогенная композиция ослабляет симптомы болезни, вызванные воздействием патогена, на статистически значимое количество, включая, например, от по меньшей мере примерно 10% до по меньшей мере примерно 20%, по меньшей мере от примерно 20% до примерно 50%, по меньшей мере от примерно 10% до примерно 60%, по меньшей мере от примерно 30% до примерно 70%, по меньшей мере от примерно 40% до примерно 80% или по меньшей мере от примерно 50% до примерно 90% или более. Следовательно, способы, предлагаемые в настоящем изобретении, можно использовать для защиты растений от болезни, в особенности от тех болезней, которые вызваны патогенами растений.
et al.
Plant Biology
Исследования по определению антипатогенной активности хорошо известны в данной области техники, как и методики количественной оценки устойчивости к болезни растений после заражения патогеном. См., например, патент U.S. № 5614395, который включен в настоящее изобретение в качестве ссылки. Такие методики включают, определение зависимости от времени среднего диаметра повреждения, биомассы патогена и общего содержания пораженных тканей растения. Например, растение, экспрессирующее антипатогенный полипептид или на поверхность которого нанесена антипатогенная композиция, характеризуется уменьшением некроза тканей (т.е. диаметра поражения) или уменьшением количества погибших растений после воздействия патогена по сравнению с контрольными растениями, которое не обрабатывали антипатогенной композицией. Альтернативно, антипатогенную активность можно оценить по уменьшению биомассы патогена. Например, растение экспрессирующее антипатогенный полипептид или на поверхность которого нанесена антипатогенная композиция, воздействуют представляющим интерес патогеном. По истечении некоторого времени отбирают образцы инокулированных патогеном тканей и экстрагируют РНК. Отношение содержания специфического транскрипта РНК патогена к содержанию специфического транскрипта растения позволяет определить количество биомассы патогена. См., например, публикацию Thomma  (1998)  95:15107-15111, которая включена в настоящее изобретение в качестве ссылки.
in vitro
et al.
Plant Biology
in vitro
et al.
Plant Mol. Biol.
et al.
J. Biol. Chem.
Кроме того, антипатогенные исследования  включают, например, нанесение антипатогенной композиции в различных концентрациях на бумажный диск и помещение диска на агар, содержащий суспензию представляющего интерес патогена. После инкубации вокруг дисков образуются четкие зоны подавления, в которых находится антипатогенный полипептид в эффективной концентрации (Liu  (1994)  91:1888-1892, которая включена в настоящее изобретение в качестве ссылки). Кроме того, для исследования антипатогенных характеристик композиции  можно использовать микроспектрофотометрический анализ (Hu  (1997)  34:949-959 and Cammue  (1992)  267: 2228-2233, обе публикации включены в настоящее изобретение в качестве ссылки).
C. Способы придания устойчивости к болезни растений и/или улучшения жизнеспособности растения и/или улучшения представляющего интерес агротехнического признака
12
16
Настоящее изобретение также относится к композициям и способам придания устойчивости растения к болезни, вызванной патогенами растений. Соответственно, композиции и способы также применимы для защиты растений от патогенных грибов, вирусов, нематод и насекомых. Настоящее изобретение относится к способам придания устойчивости к болезни, вызванной патогеном растения, включающим нанесение на растение, которое восприимчиво к болезни растения, вызванной патогеном растения, эффективного количества по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта. В некоторых вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант может включать по меньшей мере один из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них; или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них. В некоторых вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант обеспечивает защитную реакцию на патоген, который вызывает болезнь растения. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта включает равное по меньшей мере примерно от 10 до 10 КОЕ/га.
Защитная реакция растения может проявиться после нанесения бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта на растение, но до воздействия патогена и/или после воздействия патогена на растения, обработанное бактериальным штаммом, предлагаемым в настоящем изобретении, или его активным вариантом.
В некоторых способах, бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант придает устойчивость к одному, двум, трем, четырем, пяти или большему количеству патогенов растений, описанных в настоящем изобретении. В других способах бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант придает устойчивость к одному, двум, трем, четырем, пяти или большему количеству патогенных грибов растений, описанных в настоящем изобретении.
12
16
"Устойчивость к болезни" означает, что у растения не возникают симптомы болезни, которые появляются вследствие взаимодействий растение-патоген. Это означает, что предупреждено возникновение болезни растений и связанных с ней симптомов вследствие воздействия патогенов или, альтернативно, симптомы болезни, вызванные патогеном, сведены к минимуму или ослаблены по сравнению с контролем. Настоящее изобретение также относится к способам улучшения жизнеспособности растения и/или улучшения представляющего интерес агротехнического признака, включающим нанесение на растение эффективного количества по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, или его активного производного. В некоторых вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант может включать по меньшей мере один из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них; или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта включает равное по меньшей мере примерно от 10 до 10 КОЕ/га.
"Улучшенная жизнеспособность растения" означает, если указать только некоторые, увеличенный рост и/или урожайность растения, увеличение устойчивости к стрессу и/или увеличение устойчивости к гербициду. Увеличение устойчивости к стрессу означает усиление способности растения ослаблять или предупреждать симптомы, связанные с одним или большим количеством стрессов. Стресс может представлять собой биотический стресс, который возникает вследствие повреждения растений другими живыми организмами, такими как патоген (например, бактерии, вирусы, грибы, паразиты), насекомые, нематоды, сорняки, культурные или местные растения. Стресс также может представлять собой абиотический стресс, такой как обусловленный экстремальными температурами (высокими или низкими), сильными ветрами, засухой, соленостью, химической токсичностью, воздействием окислителей, наводнением, торнадо, пожарами, радиацией и воздействием тяжелых металлов. Неограничивающие примеры улучшенных агротехнических признаков раскрыты в другом разделе настоящего изобретения. В предпочтительных вариантах осуществления эффективное количество бактериального штамма или его активного варианта улучшает жизнеспособность растения или улучшает представляющий интерес агротехнический признак на статистически значимое количество, включая, например, составляющее от по меньшей мере примерно 10% до по меньшей мере примерно 20%, по меньшей мере от примерно 20% до примерно 50%, по меньшей мере от примерно 10% до примерно 60%, по меньшей мере от примерно 30% до примерно 70%, по меньшей мере от примерно 40% до примерно 80% или по меньшей мере от примерно 50% до примерно 90% или более.
D. Способы нанесения на растение или часть растения
Бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант наносят в эффективном количестве. Эффективное количество бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, является количеством, достаточным для борьбы с патогеном, лечением, предупреждением, подавлением патогена, который вызывает болезнь растения, и/или уменьшения тяжести болезни растения или уменьшения развития болезни растения. В других вариантах осуществления эффективное количество бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, является количеством, достаточным для улучшения представляющего интерес агротехнического признака и/или стимулирования или увеличения жизнеспособности растения, роста или урожайности растения, восприимчивого к болезни. Норма расхода бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, необходимая для улучшения представляющего интерес агротехнического признака, может меняться в зависимости от патогена, с которым проводят борьбу, защищаемого культурного растения, эффективности бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, тяжести болезни, климатических условий и т.п.
7
16
7
11
7
16
12
13
13
14
14
15
15
16
16
17
4
14
5
13
6
12
9
11
9
11
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
7
12
Обычно норма расхода бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта равна от 10 до 10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар. В других вариантах осуществления при инокуляции в поле норма расхода бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта равна от 3×10до 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар. (Это соответствует примерно от 1 кг до 10 кг приготовленного материала на гектар). В других вариантах осуществления при инокуляции в поле норма расхода бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта равна от 3×10до 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар; от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар, от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар, от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар, от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар, от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар; от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар; от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар; от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар; от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар; или от примерно 1×10 до примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар. В других вариантах осуществления при инокуляции в поле норма расхода бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта равна по меньшей мере примерно 1×10, примерно 1×10, примерно 1×10, примерно 1×10, примерно 1×10, примерно 1×10, примерно 1×10, примерно 1×10, примерно 1×101×10, примерно 1×10, 1×10, примерно 1×10 или примерно 1×10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар. В других вариантах осуществления при инокуляции в поле норма расхода бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта равна от по меньшей мере 1×10до по меньшей мере примерно 1×10 КОЕ/га. В предпочтительных вариантах осуществления наносимый бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант включает штамм, депонированный как AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активное производное любого из них, или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного производного любого из них.
Любое подходящее для сельского хозяйства количество биоцида можно наносить в комбинации с бактериальным штаммом, предлагаемым в настоящем изобретении, или его активным вариантом, раскрытым в настоящем изобретении. Способы определения эффективного количества бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта включают, например, установление любого статистически значимого усиления борьбы с патогеном или вредителем, обеспечиваемого биоцидом. Способы оценки такой борьбы известны. Кроме того, рассматривается статистически значимое улучшение жизнеспособности растения, урожайности и/или роста, который происходит после нанесения эффективного количества бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, по сравнению с жизнеспособностью растения, урожайностью и/или ростом, который наблюдается, когда не наносят бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант.
Настоящее изобретение также относится к способу борьбы с патогеном или подавления роста патогена растения, который вызывает болезнь растения, путем нанесения композиции, включающей по меньшей мере один бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант, предлагаемый в настоящем изобретении (т. е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них). "Нанесение" означает взаимодействие эффективного количества бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта с растением, частью растения, участком выращивания, семенами и/или сорняком вместе с одним или большим количеством бактериальных штаммов, предлагаемых в настоящем изобретении, или его активным вариантом, так чтобы проявлялся желательный результат. Кроме того, нанесение бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта можно проводить до высевания культурного растения (например, высевания в почву семян или растений). В предпочтительном варианте осуществления нанесение бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта представляет собой некорневое нанесение. Поэтому в другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу борьбы с патогеном или подавления роста патогена растения путем нанесения популяции бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта на среду, в которой может расти патоген растения. Нанесение можно проводить на растение, части растения, на семена защищаемых растений или на почву, в которой растет или будет расти защищаемой растение. Нанесение на растение или части растения можно проводить до или после сбора урожая. Нанесение на семена следует проводить до высевания семян.
Alternaria
Alternaria
solani
Colletotrichum
.
Mycosphaerella
Phomopsis
Cercospora
Botrytis
Botrytis
cinerea.
В некоторых вариантах осуществления эффективное количество по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, предлагаемого в настоящем изобретении, используют для некорневого нанесения с целью борьбы с патогенами или подавления роста одного или большего количества патогенов, выбранных из группы, включающей  spp., , spp,  spp.,  spp.,  spp.,  spp. и
Rhizoctonia spp., Rhizoctonia solani, Fusarium
., Sclerotium spp., Sclerotinia spp., Sclerotinia sclerotiorum, Phytopthora
.
Pythium
В других вариантах осуществления эффективное количество по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, предлагаемого в настоящем изобретении, наносят на почву, в которой растет или будет расти защищаемой растение, для борьбы с патогенами или подавления роста одного или большего количества патогенов, выбранных из группы, включающей sppspp иspp.
Monolinia
., Penicillium spp., Botrytis
Botrytis
cinerea
В некоторых вариантах осуществления эффективное количество по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, предлагаемого в настоящем изобретении, наносят на растение после сбора урожая для борьбы с патогенами или подавления роста одного или большего количества патогенов, выбранных из группы, включающей spp ssp. и.
При использовании в настоящем изобретении термин растение включает клетки растения, протопласты растения, культуры клеток растения, из которых можно восстановить растения, каллюсы растения, куски растения и клетки растения, которые являются неповрежденными в растениях или частях растений, такие как эмбрионы, пыльца, семяпочки, семена, листья, цветки, ветви, плоды, зерна, колосья, сердцевины початков, мякина, стебли, корни, кончики корней, пыльники и т.п. Зерно означает зрелое зерно, выращенное фермерами не для выращивания растения или воспроизводства вида.
В предпочтительных вариантах осуществления нанесение бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или споры или предспоры, или комбинации клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или его активного варианта) проводят на листья растения сои. Режим времени нанесения может меняться в зависимости от условий и географического положения. В предпочтительных вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант наносят на стадии R1 (стадия начала цветения) развития сои или можно наносить ранее в зависимости от времени начала ASR и тяжести болезни.
В других вариантах осуществления нанесение биоцида на культурное растение, участок выращивания или поле следует понимать так, что одно или большее количество из следующих: конкретное поле, культурное растение, семена и/или сорняк обрабатывают одним или большим количеством бактериальных штаммов, предлагаемых в настоящем изобретении, или его активным вариантом и одним или большим количеством биоцидов, так чтобы обеспечивался желательный результат.
12
16
Настоящее изобретение относится к различным способам борьбы с патогеном растения, который вызывает болезнь растения, на участке выращивания, содержащем растение, восприимчивое к болезни растения. Способ включает посадку на участке выращивания семян или растений, восприимчивых к болезни растения; и нанесение на растение, восприимчивое к болезни, семена или участок выращивания растения, восприимчивого к болезни растения, эффективного количества по меньшей мере одного бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного производного любого из них, или споры или предспоры, или комбинации клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или его активного варианта), где эффективное количество бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта обеспечивает борьбу с болезнью растения без значительного влияния на культурное растение. В предпочтительных вариантах осуществления эффективное количество включает равное по меньшей мере примерно от 10 до 10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар.
12
16
Настоящее изобретение также относится к способу выращивания растения, восприимчивого к болезни растения. Способ включает нанесение на растение, восприимчивое к болезни, семена или участок выращивания растения, восприимчивого к болезни, эффективного количества композиции, включающей по меньшей мере один бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант. В некоторых вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант может включать по меньшей мере один из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них; или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них. Различные эффективные количества бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта раскрыты в другом разделе настоящего изобретения и в одном неограничивающем примере эффективное количество бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта включает равное по меньшей мере примерно от 10 до 10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар.
12
16
Настоящее изобретение относится к способам повышения урожайности растения. "Урожайность" растения означает качество и/или количество биомассы, образованной растением. "Биомасса" означает любой измеримый растительный продукт. Увеличение образованной биомассы означает любое повышение урожайности измеримого растительного продукта. Повышение урожайности может включать любое статистически значимое увеличение, включая, но не ограничиваясь только ими, составляющее не менее 1% увеличение, не менее 3% увеличение, не менее 5% увеличение, не менее 10% увеличение, не менее 20% увеличение, не менее 30%, не менее 50%, не менее 70%, не менее 100% или большее повышение урожайности по сравнению с растением, не обработанным бактериальным штаммом, предлагаемым в настоящем изобретении, или его активным вариантом. Настоящее изобретение также относится к способу повышения урожайности растения и включает нанесение на сельскохозяйственную культуру или участок выращивания эффективного количества композиции, включающей по меньшей мере один бактериальный штамм, включающий AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 и AIP36895, или активный вариант любого из них, спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где указанное эффективное количество включает равное по меньшей мере примерно от 10 до 10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар и где указанная композиция обеспечивает борьбу с патогеном растения и тем самым повышает урожайность.
При использовании в настоящем изобретении "участок выращивания" включает любой участок, на котором желательно выращивать растение. Такие участки выращивания включают, но не ограничиваются только ими, поле, на котором выращивают растение (такое как поле для культурного растения, залежь, лесной участок, управляемые леса, поле для выращивания плодов и овощей и т.п.), теплицу, климатическую камеру и т.п.
5
7
4
8
4
5
5
6
6
7
7
8
Настоящее изобретение также относится к семени с покрытием, которое включает семя и покрытие на семени, где покрытие включает по меньшей мере один бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант. В некоторых вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант может включать по меньшей мере один из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них; или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них. В некоторых вариантах осуществления указанный бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант содержится на семени в количестве, равном от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10КОЕ/семя, от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10КОЕ/семя, от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10 КОЕ/семя, от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10 КОЕ/семя, от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10 КОЕ/семя или от примерно 10 КОЕ/семя до примерно 10 КОЕ/семя. Покрытие для семени можно наносить на любое представляющее интерес семя (т.е. однодольное или двудольное). Различные представляющие интерес растения раскрыты в другом разделе настоящего изобретения.
Покрытие для семени может дополнительно включать по меньшей мере одно питательное вещество, по меньшей мере один гербицид или по меньшей мере один пестицид, или по меньшей мере один биоцид. См., например, US App Pub. 20040336049, 20140173979 и 20150033811.
В других вариантах осуществления представляющее интерес растение (т.е. растение, восприимчивое к болезни растения) и/или участок выращивания, включающий растение, можно обработать комбинацией эффективного количества бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта и эффективного количества биоцида. "Обработка комбинацией" или "нанесение комбинации" бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта и биоцида на растение, участок выращивания или поле следует понимать, что одно или большее количество из следующих: конкретное поле, растение и/или сорняки обрабатывают эффективным количеством одного или большего количества бактериальных штаммов, предлагаемых в настоящем изобретении, или его активного варианта и одним или большим количеством биоцидов, так чтобы обеспечивался желательный результат. Кроме того, нанесение одного или большего количества бактериальных штаммов, предлагаемых в настоящем изобретении, или его активного варианта и биоцида можно проводить до высевания культурного растения (например, высевания в почву семян или растений). Кроме того, нанесение бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта и биоцида может быть одновременным или нанесение можно проводить в разные моменты времени (последовательно), так чтобы обеспечивался желательный результат.
В одном неограничивающем варианте осуществления активный вариант включает бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, который устойчив к одному или большему количеству биоцидов. В предпочтительных вариантах осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант (т.е. AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, или спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них) устойчив к глифосату. В таких способах растение, культурное растение или участок выращивания обрабатывают комбинацией эффективного количества бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, который устойчив к глифосату, и эффективного количества глифосата, где эффективное количество глифосата является таким, что обеспечивает селективную борьбу с сорняками при отсутствии значительного повреждения культурного растения.
В другом неограничивающем варианте осуществления активный вариант включает бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, который устойчив к глуфосинату. В таких способах растение, культурное растение или участок выращивания обрабатывают комбинацией эффективного количества бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта, который устойчив к глуфосинату, и эффективного количества глуфосината, где эффективное количество глуфосината является таким, что обеспечивает селективную борьбу с сорняками при отсутствии значительного повреждения культурного растения. В таких вариантах осуществления эффективное количество бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта достаточно для обеспечения статистически значимого увеличения жизнеспособности растения, урожайности и/или роста по сравнению с жизнеспособностью растения, урожайностью, и/или ростом, который наблюдается, когда бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант, который не был модифицирован для придания устойчивости к глуфосинату, в такой же концентрации наносят в комбинации с эффективным количеством глуфосината или его активного производного. В другом варианте осуществления бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант включает эффективное количество AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, или споры или предспоры, или комбинации клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них.
V. Биоциды для использования в комбинации с бактериальными штаммами, предлагаемыми в настоящем изобретении, или их активными вариантами
Как показано в другом разделе настоящего изобретения, бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант можно использовать в комбинации с биоцидом (т.е. гербицидом, фунгицидом, пестицидом или другим химикатом для защиты растений). В таких случаях бактериальный штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, или его активный вариант совместим с представляющим интерес биоцидом.
"Устойчивость к гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений или устойчивость к гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений" означает способность организма (т.е. растения и/или бактериального штамма, предлагаемого в настоящем изобретении, или его активного варианта и т.п.) выживать и размножаться после воздействия дозы гербицида, фунгицида, пестицида или другого химиката для защиты растений, которая обычно летальна для организма дикого типа.
Гербициды, которые можно использовать в различных способах и композициях, раскрытых в настоящем изобретении, включают глифосат, ингибиторы ACCase (арилоксифеноксипропионат (FOPS)); ингибиторы ALS (сульфонилмочевина (SU)), имидазолинон (IMI), пиримидины (PM)); ингибитор белка микротрубочки (динитроанилин (DNA)); синтетические ауксины (феноксильные (P)), бензойную кислоту (BA), карбоновую кислоту (CA)); ингибитор фотосистемы II (триазин (TZ)), триазинон (TN), нитрилы (NT), бензотиадиазиноны (BZ), мочевины (US)); ингибитор EPSP синтазы (глицины (GC)); ингибитор синтеза глутамина (фосфиновую кислоту (PA)); ингибитор DOXP синтазы (изоксазолидинон (IA)); ингибитор HPPD (пиразол (PA)), трикетон (TE)); ингибиторы PPO (дифениловый эфир (DE), N-фенилфталимид (NP) (арилтриазинон (AT)); ингибиторы VLFA (хлорацетамид (CA)), оксиацетамид (OA)); ингибитор фотосистемы I (бипиридилии (BP)); и т.п.
Пестициды, которые можно использовать в различных способах и композициях, раскрытых в настоящем изобретении, включают имидаклоприд клотианидин, арилпиразолы (WO2007103076); фосфорорганические соединения, фенилпиразол, пиретроидные карбамоилоксимы, пиразолы, амидины, галогенированные углеводороды, карбаматы и их производные, тербуфос, хлорпирифос, фипронил, хлорэтоксифос, телфутрин, карбофуран, имидаклоприд, тебупиримфос (патент U.S. № 5849320).
N
Фунгициды, которые можно использовать в различных способах и композициях, раскрытых в настоящем изобретении, включают алифатические азотсодержащие фунгициды (бутиламин, цимоксанил, додицин, додин, гуазатин, иминоктадин); амидные фунгициды (бензовиндифлупир, карпропамид, хлораниформетан, цифлуфенамид, диклоцимет, диклоцимет, димоксистробин, фенаминстробин, феноксанил, флуметовер, фураметпир, изофетамид, изопиразам, мандестробин, мандипропамид, метоминостробин, орисастробин, пентиопирад, прохлораз, хиназамид, силтиофам, трифорин); ациламинокислотные фунгициды (беналаксил, беналаксил-M, фуралаксил, металаксил, металаксил-M, перфуразоат, валифеналат); анилидные фунгициды (беналаксил, беналаксил-M, биксафен, боскалид, карбоксин, фенгексамид, флуксапироксад, изотианил, металаксил, металаксил-M, метсульфовакс, офурац, оксадиксил, оксикарбоксин, пенфлуфен, пиракарболид, седаксан, тифлузамид, тиадинил, вангард); бензанилидные фунгициды (беноданил, флутоланил, мебенил, мепронил, салициланилид, теклофталам); фуранилидные фунгициды (фенфурам, фуралаксил, фуркарбанил, метфуроксам); сульфонанилидные фунгициды (флусульфамид); бензамидные фунгициды (бензогидроксамовая кислота, флуопиколид, флуопирам, тиоксимид, трихламид, зариламид, зоксамид); фурамидные фунгициды (циклафурамид, фурмециклокс); фенилсульфамидные фунгициды (дихлофлуанид, толилфлуанид); сульфонамидные фунгициды (амисулбром, циазофамид); валинамидные фунгициды (бентиаваликарб, ипроваликарб); фунгициды - антибиотики (ауреофунгин, бластицидин-S, циклогексимид, гризеофульвин, касугамицин, мороксидин, натамицин, полиоксины, полиоксорим, стрептомицин, валидамицин); стробилуриновые фунгициды (флуоксастробин, мандестробин); метоксиакрилат стробилуриновые фунгициды (азоксистробин, бифуджундзи, кумоксистробин, эноксастробин, флуфеноксистробин, джиаксиангджунджи, пикоксистробин, пираоксистробин); метоксикарбанилатные стробилуриновые фунгициды (пираклостробин, пираметостробин, триклопирикарб); метоксииминоацетамидные стробилуриновые фунгициды (димоксистробин, фенаминстробин, метоминостробин, орисастробин); метоксииминоацетатные стробилуриновые фунгициды (крезоксим-метил, трифлоксистробин); ароматические фунгициды (бифенил, хлординитронафталины, хлоронеб, хлороталонил, крезол, диклоран, фенджунтонг, гексахлорбензол, пентахлорфенол, квинтоцен, пентахлорфеноксид натрия, текназен, трихлортринитробензолы); мышьяксодержащие (асомат, урбацид); арилфенил кетонные фунгициды (метрафенон, пириофенон); бензимидазольные фунгициды (албендазол, беномил, карбендазим, хлорфеназол, ципендазол, дебакарб, фуберидазол, мекарбинзид, рабензазол, тиабендазол); фунгициды - предшественники бензимидазола (фурофанат, тиофанат, тиофанат-метил); бензотиазольные фунгициды (бенталурон, бентиаваликарб, бентиазол, хлобентиазон, пробеназол); растительные фунгициды (аллицин, берберин, карвакрол, карвон, остол, сангвинарин, сантонин); мостиковые дифениловые фунгициды (битионол, дихлорофен, дифениламин, гексахлорофен, паринол); карбаматные фунгициды (бентиаваликарб, фурофанат, йодокарб, ипроваликарб, пикарбутразокс, пропамокарб, пирибенкарб, тиофанат, тиофанат-метил, толпрокарб); бензимидазолилкарбаматные фунгициды (албендазол, беномил, карбендазим, ципендазол, дебакарб, мекарбинзид); карбанилатные фунгициды (диэтофенкарб, пираклостробин, пираметостробин, триклопирикарб); коназольные фунгициды, коназольные фунгициды (имидазолы) (климбазол, клотримазол, имазалил, окспоконазол, прохлораз, трифлумизол); коназольные фунгициды (триазолы) (азаконазол, бромуконазол, ципроконазол, диклобутразол, дифеноконазол, диниконазол, диниконазол-M, эпоксиконазол, этаконазол, фенбуконазол, флухинконазол, флусилазол, флутриафол, фурконазол, фурконазол-цис, гексаконазол, имибенконазол, ипконазол, метконазол, миклобутанил, пенконазол, пропиконазол, протиоконазол, хинконазол, симеконазол, тебуконазол, тетраконазол, триадимефон, триадименол, тритиконазол, униконазол, униконазол-P); содержащие медь фунгициды (аципетакс-медь, бордосская жидкость, бургундская жидкость, cмесь Cheshunt, ацетат меди, основной карбонат меди, гидроксид меди, нафтенат меди, олеат меди, оксихлорид меди, силикат меди, сульфат меди, основной сульфат меди, хромат меди-цинка, куфранеб, купробам, оксид меди(I), манкоппер, оксин-коппер, сайсентонг, тиодиазол-медь); цианакрилатные фунгициды (бензамакрил, фенамакрил); дикарбоксимидные фунгициды (фамоксадон, фторимид); дихлорфенил дикарбоксимидные фунгициды (хлозолинат, дихлозолин, ипродион, изоваледион, миклозолин, процимидон, винклозолин); фталимидные фунгициды (каптафол, каптан, диталимфос, фолпет, тиохлорфенфим); динитрофенольные фунгициды (бинапакрил, динобутон, динокап, динокап-4, динокап-6, мептилдинокап, диноктон, динопентон, диносульфон, динотербон, DNOC); дитиокарбаматные фунгициды (амобам, асомат, азитирам, карбаморф, куфранеб, купробам, дисульфирам, фербам, метам, набам, текорам, тирам, урбацид, зирам); циклические дитиокарбаматные фунгициды (дазомет, этем, мильнеб); полимерные дитиокарбаматные фунгициды (манкоппер, манкозеб, манеб, метирам, поликарбамат, пропинеб, зинеб); дитиолановые фунгициды (изопротиолан, сайджунмао); фумигантные фунгициды (дисульфид углерода, дициан, простой дитиоэфир, метилбромид, метилйодид, тетратиокарбонат натрия); гидразидные фунгициды (бенхинокс, сайджунмао); имидазольные фунгициды (циазофамид, фенамидон, фенапанил, глиодин, ипродион, изоваледион, перфуразоат, триазоксид); коназольные фунгициды (имидазолы) (климбазол, клотримазол, имазалил, окспоконазол, прохлораз, трифлумизол); неорганические фунгициды (азид калия, тиоцианат калия, азид натрия, сера, см. также содержащие медь фунгициды, см. также неорганические ртутьсодержащие фунгициды); ртутьсодержащие фунгициды; неорганические ртутьсодержащие фунгициды (хлорид ртути(II), оксид ртути(II), хлорид ртути(I)); ртутьорганические фунгициды ((3-этоксипропил)меркурбромид, этилмеркурацетат, этилмеркурбромид, этилмеркурхлорид, этилмеркур-2,3-дигидроксипропилмеркаптид, этилмеркурфосфат, -(этилмеркур)-п-толуолсульфонанилид, гидраргафен, 2-метоксиэтилмеркурхлорид, метилмеркурбензоат, метилмеркурдициандиамид, метилмеркурпентахлорфеноксид, 8-фенилмеркуроксихинолин, фенилмеркурмочевина, фенилмеркурацетат, фенилмеркурхлорид, фенилмеркурпроизводное пирокатехина, фенилмеркурнитрат, фенилмеркурсалицилат, тиомерсал, толилмеркурацетат); морфолиновые фунгициды (альдиморф, бензаморф, карбаморф, диметоморф, додеморф, фенпропиморф, флуморф, тридеморф); фосфорорганические фунгициды (ампропилфос, диталимфос, EBP, эдифенфос, фосетил, гексилтиофос, инезин, ипробенфос, изопамфос, кеджунлин, фосдифен, пиразофос, толклофос-метил, триамифос); оловоорганические фунгициды (декафентин, фентин, трибутилоловооксид); оксатииновые фунгициды (карбоксин, оксикарбоксин); оксазольные фунгициды (хлозолинат, дихлозолин, дразоксолон, фамоксадон, гимексазол, метазоксолон, миклозолин, оксадиксил, оксатиопипролин, пиризоксазол, винклозолин); полисульфидные фунгициды (полисульфид бария, полисульфид кальция, полисульфид калия, полисульфид натрия); пиразольные фунгициды (бензовиндифлупир, биксафен, фенпиразамин, флуксапироксад, фураметпир, изопиразам, оксатиопипролин, пенфлуфен, пентиопирад, пираклостробин, пираметостробин, пираоксистробин, рабензазол, седаксан); пиридиновые фунгициды (боскалид, бутиобат, дипиритион, флуазинам, флуопиколид, флуопирам, паринол, пикарбутразокс, пирибенкарб, пиридинитрил, пирифенокс, пиризоксазол, пироксихлор, пироксифур, триклопирикарб); пиримидиновые фунгициды (бупиримат, дифлуметорим, диметиримол, этиримол, фенаримол, феримзон, нуаримол, триаримол); анилинопиримидиновые фунгициды (ципродинил, мепанипирим, пириметанил); пиррольные фунгициды (диметахлон, фенпиклонил, флудиоксонил, фторимид); четвертичные аммониевые фунгициды (берберин, сангвинарин); хинолиновые фунгициды (этоксихин, галакринат, 8-гидроксихинолинсульфат, хинацетол, хиноксифен, тебуфлохин); хиноновые фунгициды (хлоранил, дихлон, дитианон); хиноксалиновые фунгициды (хинометионат, хлорхинокс, тиохинокс); тиадиазольные фунгициды (этридиазол, сайсентонг, тиодиазол-медь, тиазолат цинка); тиазольные фунгициды (этабоксам, изотианил, метсульфовакс, октилинон, оксатиопипролин, тиабендазол, тифлузамид); тиазолидиновые фунгициды (флутанил, тиадифтор); тиокарбаматные фунгициды (метасульфокарб, протиокарб); тиофеновые фунгициды (этабоксам, изофетамид, силтиофам); триазиновые фунгициды (анилазин); триазольные фунгициды (амисулбром, битертанол, флуотримазол, триазбутил); коназольные фунгициды (триазолы) (азаконазол, бромуконазол, ципроконазол, диклобутразол, дифеноконазол, диниконазол, диниконазол-M, эпоксиконазол, этаконазол, фенбуконазол, флухинконазол, флусилазол, флутриафол, фурконазол, фурконазол-цис, гексаконазол, хуанджунджуо, имибенконазол, ипконазол, метконазол, миклобутанил, пенконазол, пропиконазол, протиоконазол, хинконазол, симеконазол, тебуконазол, тетраконазол, триадимефон, триадименол, тритиконазол, униконазол, униконазол-P); триазолопиримидиновые фунгициды (аметоктрадин); мочевинные фунгициды (бенталурон, пенцикурон, хиназамид); цинксодержащие фунгициды (аципетакс-цинк, хромат меди-цинка, куфранеб, манкозеб, метирам, поликарбамат, полиоксорим-цинк, пропинеб, нафтенат цинка, тиазолат цинка, трихлорфеноксид цинка, зинеб, зирам); неклассифицированные фунгициды (ацибензолар, аципетакс, аллиловый спирт, бензалконийхлорид, бетоксазин, бромталонил, хитозан, хлорпикрин, DBCP, дегидроуксусная кислота, дикломезин, диэтилпирокарбонат, этилицин, фенаминосульф, фенитропан, фенпропидин, формальдегид, фурфураль, гексахлорбутадиен, метилизотиоцианат, нитростирол, нитротал-изопропил, OCH, пентахлорфениллаурат, 2-фенилфенол, фталид, пипералин, пропамидин, проквиназид, пирохилон, ортофенилфеноксид натрия, спироксамин, сультропен, тициофен, трициклазол) или мефеноксам.
Неограничивающие варианты осуществления настоящего изобретения включают следующие:
1. Композиция, включающая:
(a) по меньшей мере один из бактериальных штаммов AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; и/или
(b) по меньшей мере одну из следующих: спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015;
5
12
5
12
где указанный бактериальный штамм, спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор или активный вариант любой из них содержится в концентрации, равной от примерно 10 КОЕ/г до примерно 10КОЕ/г или от примерно 10 КОЕ/мл до примерно 10КОЕ/мл, и где эффективное количество указанной композиции бактериального штамма улучшает представляющий интерес агротехнический признак растения или обеспечивает борьбу с патогеном растения, который вызывает болезнь растения.
2. Композиция по варианту осуществления 1, где болезнью растения является микоз растения.
3. Композиция по варианту осуществления 1 или 2, где болезнью растения является азиатская ржавчина сои (ASR).
5
10
5
10
4. Композиция по любому из вариантов осуществления 1-3, где указанный бактериальный штамм или его активный вариант содержится в концентрации, равной от примерно 10КОЕ/г до примерно 10 КОЕ/г или от примерно 10КОЕ/мл до примерно 10 КОЕ/мл.
5. Композиция по любому из вариантов осуществления 1-4, где указанная композиция представляет собой клеточную массу.
6. Композиция по любому из вариантов осуществления 1-5, где указанная композиция представляет собой смачивающийся порошок.
7. Композиция по любому из вариантов осуществления 1-6, где указанный патоген растения включает по меньшей мере один патогенный гриб.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae
Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
8. Композиция по варианту осуществления 7, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  sp.,, и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa.
9. Композиция по варианту осуществления 8, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
10. Композиция по варианту осуществления 8, где указанный патоген растения представляет собой или
Phakopsora pachyrhizi
11. Композиция по варианту осуществления 10, где указанный патоген представляет собой .
12. Композиция, включающая клеточную массу, включающую:
(a) по меньшей мере один из бактериальных штаммов AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; и/или,
(b) по меньшей мере одну из следующих: спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015;
где эффективное количество указанной композиции бактериального штамма улучшает представляющий интерес агротехнический признак растения или обеспечивает борьбу с патогеном растения, который вызывает болезнь растения.
13. Композиция по варианту осуществления 12, где болезнью растения является микоз растения.
14. Композиция по любому из вариантов осуществления 12-13, где болезнью растения является азиатская ржавчина сои.
15. Композиция по любому из вариантов осуществления 12-14, где патоген растения включает по меньшей мере один патогенный гриб.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
16. Композиция по варианту осуществления 15, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  sp.,  и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa
17. Композиция по варианту осуществления 16, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и.
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
18. Композиция по варианту осуществления 16, где указанный патоген растения представляет собой или
Phakopsora pachyrhizi.
19. Композиция по варианту осуществления 18, где указанный патоген растения представляет собой
20. Композиция, включающая смачивающийся порошок, включающий
(a) по меньшей мере один из бактериальных штаммов AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; и/или,
(b) по меньшей мере одну из следующих: спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015;
где эффективное количество указанной композиции бактериального штамма улучшает представляющий интерес агротехнический признак растения или обеспечивает борьбу с патогеном растения, который вызывает болезнь растения.
21. Композиция по варианту осуществления 20, где болезнью растения является микоз растения.
22. Композиция по варианту осуществления 20 или 21, где патоген растения включает по меньшей мере один патогенный гриб.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
23. Композиция по варианту осуществления 22, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  sp.,  и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa.
24. Композиция по варианту осуществления 23, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
25. Композиция по варианту осуществления 23, где указанный патоген растения представляет собой или
Phakopsora pachyrhizi.
26. Композиция по варианту осуществления 25, где указанный патоген растения представляет собой
27. Композиция по любому из вариантов осуществления 20-26, где указанный активный вариант устойчив по отношению по меньшей мере к одному гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений.
28. Композиция по варианту осуществления 27, где указанный активный вариант выбран при воздействии гербицида, фунгицида, пестицида или другого химиката для защиты растений и устойчив к указанному гербициду, фунгициду, пестициду или другому химикату для защиты растений.
29. Композиция по любому из вариантов осуществления 27-29, где указанный активный вариант трансформирован обеспечивающим устойчивость к гербициду геном, придающим бактериальному штамму, предлагаемому в настоящем изобретении, или его активному варианту, устойчивость к гербициду, и где указанный бактериальный штамм обеспечивает борьбу с патогеном растения, который вызывает болезнь растения.
30. Композиция по варианту осуществления 29, где патоген растения вызывает ASR.
31. Композиция по любому из вариантов осуществления 27-30, где указанный гербицид выбран из группы, включающей глифосат, глуфосинат (ингибитор глутаминсинтазы), сульфонилмочевину и имидазолиноновые гербициды (ингибиторы синтеза аминокислот с разветвленной цепью).
32. Изолированная биологически чистая культура бактериального штамма, включающая:
(a) AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; или,
(b) спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015.
33. Изолированная биологически чистая культура по варианту осуществления 33, где указанный бактериальный штамм устойчив к биоциду, выбранному из группы, включающей гербицид, фунгицид, пестицид или химикату для защиты растений, где указанная культура получена выращиванием в присутствии указанного биоцида и где указанный бактериальный штамм обеспечивает борьбу с патогеном, который вызывает болезнь растения.
34. Изолированная биологически чистая культура по варианту осуществления 33, где указанная биологически чистая культура способна расти в присутствии глифосата.
35. Изолированная биологически чистая культура по любому из вариантов осуществления 33-34, где болезнью растения является микоз растения.
36. Изолированная биологически чистая культура по варианту осуществления 35, где болезнью растения является ASR.
37. Изолированная биологически чистая культура по любому из вариантов осуществления 33-36, где патоген растения включает по меньшей мере один патогенный гриб.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
38. Изолированная биологически чистая культура по варианту осуществления 37, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  sp.,  и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa.
39. Изолированная биологически чистая культура по варианту осуществления 38, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
40. Изолированная биологически чистая культура по варианту осуществления 38, где указанный патоген растения представляет собой или
Phakopsora pachyrhizi.
41. Изолированная биологически чистая культура по варианту осуществления 40, где указанный патоген растения представляет собой
42. Бактериальная культура, выращенная из
(a) AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; или,
(b) споры или предспоры, или комбинации клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015;
где указанная бактериальная культура обладает антипатогенной активностью к патогену растения, который вызывает болезнь растения, и способна расти в присутствии глуфосината или эффективное количество указанной бактериальной культуры улучшает представляющий интерес агротехнический признак растения.
43. Бактериальная культура по варианту осуществления 42, где болезнью растения является микоз растения.
44. Бактериальная культура по варианту осуществления 43, где болезнью растения является ASR.
45. Бактериальная культура по любому из вариантов осуществления 42-44, где патоген растения включает по меньшей мере один патогенный гриб.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae
Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
46. Бактериальная культура по варианту осуществления 45, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  sp., ,  и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa.
47. Бактериальная культура по варианту осуществления 46, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
48. Бактериальная культура по варианту осуществления 46, где указанный патоген растения представляет собой или
Phakopsora pachyrhizi.
49. Бактериальная культура по варианту осуществления 48, где указанный патоген растения представляет собой
50. Способ выращивания растения, восприимчивого к болезни растения, или улучшения представляющего интерес агротехнического признака растения, включающий нанесение на растение
(a) эффективного количества по меньшей мере одного из бактериальных штаммов AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; и/или,
12
16
(b) эффективного количества по меньшей мере одной из следующих: споры или предспоры, или комбинации клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895 или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; где указанное эффективное количество равно по меньшей мере примерно от 10 до 10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар и где указанное эффективное количество обеспечивает борьбу с патогеном растения, который вызывает болезнь растения, или улучшает представляющий интерес агротехнический признак.
51. Способ по варианту осуществления 50, где указанный способ повышает урожайность растения, восприимчивого к болезни растения.
52. Способ по варианту осуществления 50 или 51, где болезнью растения является болезнь растения, вызванная патогенным грибом.
53. Способ по варианту осуществления 52, где болезнью растения является азиатская ржавчина сои (ASR).
54. Способ по любому из вариантов осуществления 50-53, где патоген растения включает по меньшей мере один патогенный гриб.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
55. Способ по варианту осуществления 54, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  sp.,  и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa.
56. Способ по варианту осуществления 55, где указанный патоген растения включает один или большее количество патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
57. Способ по варианту осуществления 55, где указанный патоген растения представляет собой или
Phakopsora pachyrhizi.
58. Способ по варианту осуществления 57, где указанный патоген растения представляет собой
59. Способ борьбы с патогеном растения, который вызывает болезнь растения, на участке выращивания, включающий:
(a) посадку на участке выращивания семян или растений, восприимчивых к болезни растения; и
(b) нанесение на растение, восприимчивое к болезни растения эффективного количества по меньшей мере одного бактериального штамма, включающего
(i) AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активный вариант любого из них; или,
12
16
(ii) спору или предспору, или комбинацию клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; и где указанное эффективное количество равно по меньшей мере примерно от 10 до 10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на гектар.
60. Способ по варианту осуществления 59, где указанное растение восприимчиво к микозу растения.
61. Способ по варианту осуществления 60, где указанное растение восприимчиво к азиатской ржавчине сои (ASR).
62. Способ по варианту осуществления 61, где указанным растением, восприимчивым к ASR, является соя.
63. Способ по любому из вариантов осуществления 59-62, где указанная композиция обеспечивает борьбу с одним или большим количеством патогенных грибов.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae
Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
64. Способ по варианту осуществления 63, где один или большее количество патогенных грибов выбраны из группы, включающей  sp.,,  и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa.
65. Способ по варианту осуществления 64, где указанная композиция обеспечивает борьбу с одним или большим количеством патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
66. Способ по варианту осуществления 64, где один или большее количество патогенных грибов представляют собой или
Phakopsora pachyrhizi.
67. Способ по варианту осуществления 66, где один или большее количество патогенных грибов представляют собой
68. Способ по любому из вариантов осуществления 59-67, где указанный способ дополнительно включает нанесение эффективного количества биоцида, где указанное эффективное количество биоцида обеспечивает селективную борьбу с представляющим интерес организмом при отсутствии значительного повреждения сельскохозяйственной культуры.
69. Способ по варианту осуществления 68, где бактериальный штамм или его активный вариант и биоцид наносят одновременно.
70. Способ по варианту осуществления 68, где бактериальный штамм или его активный вариант и биоцид наносят последовательно.
71. Способ по любому из вариантов осуществления 68-70, где биоцидом является фунгицид.
72. Способ получения модифицированного бактериального штамма, включающий:
(a) получение популяции по меньшей мере одного бактериального штамма, включающей AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895, или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015, где указанный бактериальный штамм восприимчив к представляющему интерес биоциду;
(b) выращивание указанного бактериального штамма в присутствии представляющего интерес биоцида; и,
(c) выбор модифицированного бактериального штамма, обладающего повышенной устойчивостью к указанному представляющему интерес биоциду.
73. Способ по варианту осуществления 72, где указанное выращивание включает повышение концентрации биоцида во времени.
74. Способ по варианту осуществления 72 или 73, где указанным биоцидом является глифосат или глуфосинат.
75. Способ лечения или предупреждения болезни растения, включающий нанесение на растение, у которого имеется болезнь растения или опасность возникновения болезни растения эффективного количества:
(a) по меньшей мере одного из бактериальных штаммов AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895 или активный вариант любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; и/или
12
16
(b) по меньшей мере одной из следующих: спора или предспора, или комбинация клеток, предспор и/или спор любого из AIP27511, AIP35174, AIP25773, AIP15251, AIP61892, AIP79428, AIP14931, AIP39589 или AIP36895 или активного варианта любого из них, где активный вариант включает бактериальный штамм, обладающий геномом с расстоянием Mash, равным примерно 0,015; где указанное эффективное количество равно по меньшей мере примерно от 10 до 10 КОЕ/га и где указанный бактериальный штамм обеспечивает борьбу с патогеном растения, который вызывает болезнь растения.
76. Способ по варианту осуществления 75, где бактериальный штамм или его активный вариант лечит или предупреждает одну или большее количество болезней растений.
77. Способ по варианту осуществления 76, где одна или большее количество болезней растений включают один или большее количество микозов растений.
78. Способ по варианту осуществления 77, где один или большее количество микозов растений представляют собой азиатскую ржавчину сои (ASR).
79. Способ по любому из вариантов осуществления 75-78, где бактериальный штамм или его активный вариант обеспечивает борьбу с одним или большим количеством патогенов.
80. Способ по варианту осуществления 79, где один или большее количество патогенов включают один или большее количество патогенных грибов.
Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora
Phakopsora meibomiae
Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Erwinia amylovora, Monilinia fructicola, Monilinia lax
Monilinia fructigena.
81. Способ по варианту осуществления 80, где один или большее количество патогенных грибов выбраны из группы, включающей  sp.,,  и
Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereal, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi
Venturia inaequalisa.
82. Способ по варианту осуществления 81, где указанная композиция обеспечивает борьбу с одним или большим количеством патогенных грибов, выбранных из группы, включающей  и
Phakopsora pachyrhizi
Phakopsora meibomiae.
83. Способ по варианту осуществления 81, где один или большее количество патогенных грибов представляют собой или
Phakopsora pachyrhizi.
84. Способ по варианту осуществления 83, где один или большее количество патогенных грибов представляют собой
Приведенные ниже примеры представлены для иллюстрации, а не для ограничения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1:
Материалы и методики
2
Растительный материал: Восприимчивый сорт сои Williams 82 использовали при исследовании штамма по методике отделенных от стебля изолированных листьев (Twizeyimana and Hartman, 2010) и с использованием цельного растения в климатических камерах. Вкратце, методика заключалась в следующем: семена сои высевали в 18-клеточные пластмассовые вставки, которые заполняли не содержащей почву смесью (Sunshine Mix, LC1; Sun Gro Horticulture Inc., Bellevue, WA) и помещали в ящик для рассады. Клетки при высевании удобряли пеллетами медленного высвобождения (Osmocote 19-6-12; 2 пеллеты на см). Ящики держали в климатической камере (Percival Scientific, Inc., Boone, IA) при относительной влажности (RH), равной 70%, с суточным циклом 14 ч при освещении и 10 ч в темноте при 24 и 20°C соответственно.
2
2
2
2
2
Бактериальные штаммы: Бактериальные штаммы высевали в планшеты в среде Luria Bertani или в жидкой культуре, среде CHA, которая в 1 л содержала NaCl (5 г), триптон (10 г), питательный бульон (8 г), CaCl (0,14 мМ), MgCl.6HO (0,2 мМ) и MnCl.4HO (0,01 мМ) и очищали и получали отдельные колонии. Отдельные колонии охарактеризовывали морфологически или с помощью молекулярных методик.
Phakopsora pachyrhizi
Изолят : Изолят FL07-1 использовали при всех инокуляциях. Изолят представляет собой изолят одинаковых спор, полученных ин инфицированных листьев сои, собранных в Gadseden County, Флорида в 2007 г.
Исследование штамма:
8
4
-2
-1
P. pachyrhizi
P. pachyrhizi
P. pachyrhizi
Исследование отделенных от стебля изолированных листьев: Вкратце, методика заключалась в следующем: диски листьев (диаметром 3 см каждый) опрыскивали с помощью 120 мкл бактериального штамма (1×10 спор/мл воды) . Диски листьев инокулировали с помощью 120 мкл суспензии спор (1×10 спор/мл стерильной дистиллированной воды)  через сутки после нанесения бактериального штамма. Нанесение инокулятов бактериального штамма и проводили с помощью атомизатора, присоединенного к воздушному компрессору (Twizeyimana and Hartman, 2010). Диски листьев помещали верхней стороной вниз на насыщенную 20×20 см фильтровальную бумагу (Whatman International Ltd., Kent, England) в пластмассовом контейнере (Blister Box 20×20 см, Placon, Madison, WI); в одном контейнере использовали 2 куска фильтровальной бумаги. Контейнеры с дисками листьев инкубировали в темноте в течение 12 ч, затем в цикле 13 ч при освещении (380 мкмоль мс) и 11 ч в темноте внутри камеры с тканями (Percival Scientific, Inc.) при 23°C и 95% RH. До инкубации контейнеры помещали в мешки с застежкой-молнией (Webster Industries, Peabody, MA). Схема эксперимента представляла собой рандомизированный полный блок с 2 репликами и его повторяли один раз.
P. pachyrhizi
Исследование цельного растения: Бактериальные штаммы выбирали по данным начального скрининга (проводимого с использованием дисков листьев) на основании количества содержащихся урединиумов и исследовали на цельных растениях в климатических камерах. При этом исследовании, когда растения были на стадии V2 (Fehr et al. 1971), первый полностью раскрывшийся трехлепестковый лист опрыскивали бактериальным штаммом и инокуляцию с помощью  проводили на следующий день, как это описано при исследовании отделенных от стебля изолированных листьев. Опрысканные растения держали в климатической камере при 75% RH с суточным циклом 14 ч и 10 ч при освещении и в темноте при 22°C и 24°C соответственно. Схема эксперимента представляла собой рандомизированный полный блок с 3 репликами и его повторяли один раз.
Сбор данных и результаты:
При обоих исследованиях количества урединиумов (число урединиумов) в круге диаметром 1 см регистрировали через 14 дней после инокуляции. 9 бактериальных штаммов, которые содержали <10 урединиумов в круге диаметром 1 см, после исследования цельного растения в климатической камере выбирали для исследования в поле (фиг. 1 и таблица 2).
Таблица 2. 9 бактериальных штаммов, выбранных после исследования цельного растения в климатических камерах
№
AIP
Штаммы
1
14931
<i>Bacillus thuringiensis</i>
2
15251
<i>Bacillus frigoritolerans</i>
3
25773
<i>Bacillus flexus</i>
4
27511
<i>Bacillus drentensis</i>
5
35174
<i>Bacillus cereus</i>
6
36895
<i>Bacillus simplex</i>
7
39589
<i>Bacillus acidiceler</i>
8
61892
<i>Bacillus subtilis </i>subsp.<i> Subtilis</i>
9
79428
<i>Burkholderia vietnamiensis</i>
Пример 2. Методики инкубации
2
2
2
2
2
Бактериальные штаммы инкубировали в средах CHA, которые в 1 л содержали NaCl (5 г), триптон (10 г), питательный бульон (8 г), CaCl (0,14 мМ), MgCl.6HO (0,2 мМ) и MnCl.4HO (0,01 мМ). В таблице 3 указаны время инкубации, полученная концентрация бактерий (КОЕ/мл) и степень спорообразования в %.
Таблица 3
Штамм
Среда
Время инкубации (ч)
Концентрация (КОЕ/мл)
Спорообразование
AIP23364
CHA
40
5e9
Не определяли
AIP 27511
CHA
50
1,25e9
50%
AIP 35174
CHA
50
1e9
80%
AIP 25773
CHA
50
8,3e8
100%
AIP 15251
CHA
50
8,4e8
Споры не образуются
AIP 61892
CHA
50
1,3e9
90%
AIP 79428
CHA
50
5e9
Споры не образуются
AIP 14931
CHA
50
2e8
50%
AIP 39589
CHA
46,5
8,7e8
<sup>2</sup>100% промежуточных
AIP 36895
CHA
48
6,2e8
Споры не образуются
2
Образование предспоры, не образуется эндоспора.
Пример 3. Исследования в поле различных бактериальных штаммов или их активных вариантов
Различные бактериальные штаммы, указанные в таблице 2 наносят на сою в поле. Средства для обработки наносят по 16,8 галлон/акр и обработки проводят с обеспечением равномерного покрытия растения в соответствии с общим руководством по обработке ASR. Первую обработку проводят на стадии R1, а последующую обработку проводят через 14 дней и 28 дней после первой обработки. Конкретные виды обработки описаны ниже.
Обработки:
1. Необработанная делянка
2. Инокулированная делянка
3. Квадрис по 6,2 унция/акр
4. Квадрис по 2,1 унция/акр
5. AIP27511 по 7,5 г/л
6. AIP35174 по 7,5 г/л
7. AIP25773 по 7,5 г/л
8. AIP15251 по 7,5 г/л
9. AIP61892 по 7,5 г/л
10. AIP79428 по 7,5 г/л
11. AIP14931 по 7,5 г/л
12. AIP39589 по 7,5 г/л
13. AIP36895 по 7,5 г/л
Пример 4. Исследования в поле различных бактериальных штаммов или их активных вариантов
Различные бактериальные штаммы, указанные в таблице 2, наносят на сою в поле. Бактериальные штаммы для обработки наносят по 20 галлон/акр и обработки проводят с обеспечением равномерного покрытия растения в соответствии с общим руководством по обработке ASR. Первую обработку проводят на стадии R1, а последующую обработку проводят через 14 дней после первой обработки. Конкретные виды обработки описаны ниже.
Обработки:
1. Необработанная делянка
2. Инокулированная делянка
3. Квадрис по 6,2 унция/акр
4. Квадрис по 2,1 унция/акр
5. AIP27511 по 7,5 г/л
6. AIP35174 по 7,5 г/л
7. AIP25773 по 7,5 г/л
8. AIP15251 по 7,5 г/л
9. AIP61892 по 7,5 г/л
10. AIP79428 по 7,5 г/л
11. AIP14931 по 7,5 г/л
12. AIP39589 по 7,5 г/л
13. AIP36895 по 7,5 г/л
Rhizoctonia
Пример 5. Исследование возбудителя черной ножки - модельная обработка семян сои в бороздах
Rhizoctonia solani
Размалывали зерна, зараженные в возрасте 11-14 дней. Размолотый инокулят просеивали через сито №10 для удаления всех недостаточно размолотых зерен. Размолотые просеянные инфицированные зерна добавляли к средам Fafard Superfine Germination по 1,5 г размолотого инокулята на 1 л почвенной смеси. Смесь инокулята и 1 л воды на 75 л сред для прорастания помещали в бетономешалку и перемешивали до эффективного включения среды. Среду с эффективно включенным инокулятом помещали во второй контейнер для хранения с крышкой и до использования при анализе хранили при 20°C в течение 18 ч.
Лотки для высевания с 606 ячейками заполняли инокулированными средами для прорастания, не уплотняя среды слишком сильно. В каждую из 606 ячеек помещали по 1 семени на глубину от 1,5 до 2 см и при нанесении средств для обработки в виде жидкого препарата отверстия для посадки оставляли открытыми. Отдельные ячейки для выращивания обрабатывали одним из повторно суспендированных штаммов, указанных в таблице 1, по 3 мл ячейка/семя. Средство для обработки наносили прямо сверху на семена. После нанесения средства для обработки ящики немного встряхивали для закрывания отверстий для посадки. Лотки для высевания немного поливали и помещали на ящик во влажную камеру. Через 3-4 дня проверяли влажность в ящиках и при необходимости немного поливали, чтобы ячейки были равномерно увлажнены. После полива влажную камеру заменяли.
Сбор данных и результаты:Через 10-12 дней проводили исследование для определения количества проросших семян. Для каждой обработки данные представляли в виде выраженной в % доли проросших семян за вычетом 6 семян. Для исследования в поле выбирали 8 штаммов со степенями прорастания >50% и сопоставляли с неинокулированным контролем (таблица 4).
R. solani
Таблица 4. Бактериальные штаммы, обладающие активностью по отношению к , использованные при исследовании прорастания семян сои.
AIP
Степень прорастания, %
Количество реплик
AIP061892
64
8
AIP079428
58
7
Не инокулировали
86
22
Инокулировали
27
22
Пример 6. Методики приготовления различных бактериальных штаммов
Культуру, полученную в примере 2, центрифугировали в течение 20 мин при 10000 об/мин и получали таблетку. Надосадочную жидкость выливали и к предыдущей таблетке добавляли еще один объем жидкости с культурой и повторно центрифугировали (это делали для уменьшения количества пробирок для центрифуги, необходимых для каждой собранной порции).
w
Конечный материал получали путем добавления 5% (в пересчете на массу таблетки) глицерина к таблетке клеток с последующим перемешиванием шпателем. 20 мас.% Microcel E помещали в кухонный комбайн и к ним добавляли глицерин/таблетку. Это вещество в течение не более 10 с перемешивали с помощью насадки с острой кромкой кухонного комбайна. Продукт сушили в течение ночи при 40°C до a, равного примерно 0,3.
Пример 7. Исследование в теплице бактериальных штаммов для борьбы с азиатской ржавчиной сои
Растительный материал и бактериальные штаммы: В этих экспериментах использовали сорт Williams 82. Бактериальные штаммы получали следующим образом. Бульон с ферментированной культурой центрифугировали и таблетку взвешивали. На каждые 100 г материала таблетки добавляли 5 г глицерина (5% от массы таблетки). Таблетку с глицерином перемешивали вручную до получения однородной смеси. Всего 20 г (20 мас.% массы клеток) microcell-E (Imery's Celite) помещали в кухонный комбайн, снабженный ножевой насадкой Sabatier. Клеточную массу глицерин и microcell-E кратковременно гомогенизировали до получения частично высушенной крошкообразной структуры. Этот конечный продукт распределяли по алюминиевым лоткам и сушили при 40°C в течение ночи. После высушивания продукта до обеспечения активности воды, равной 0,3 или менее, его размалывали и просеивали, и хранили при 4°C.
Phakopsora pachyrhizi
Изолят : Изолят FL07-1, описанный выше, использовали в экспериментах в Иллинойсе и смеси спор, собранных в 2014 и 2015 гг., использовали в экспериментах во Флориде.
2
5
Исследование штамма в теплице: В Иллинойсе проводили 2 исследования в 2 теплицах, в которых было обеспечена биологическая безопасность. В теплицах были установлены следующие условия: температура 22±2°C при 16-часовом периоде освещения с дополнительным освещением лампами высокой интенсивности 1000 Вт (Sylvania, Danvers, MA). Семена Williams 82 высевали в не содержащую почву смесь (Sunshine Mix, LC1; Sun Gro Horticulture Inc.) в 5-дюймовые горшки и при высевании удобряли пеллетами медленного высвобождения (Osmocote 19-6-12; от 1 до 2 пеллет на см). После всхода растения прореживали до 1 растения в горшке и схема эксперимента представляла собой рандомизированный полный блок с 4 репликами для каждой обработки. Растения в соответствии с методикой опрыскивали штаммами на стадии роста V2 (Fehr et al. 1971) и их инокулировали суспензией спор изолята FL07-1 (1×10 спор/мл стерильной дистиллированной воды) до стока с использованием ручного опрыскивателя на следующий день после нанесения штамма. Инокулированные растения держали во влажной камере в течение ночи и затем переносили в тепличный стеллаж для изучения развития симптомов. Через 14 дней растения повторно обрабатывали в соответствии с методикой. Через 6 дней после второй обработки регистрировали степень развития ржавчины.
P. pachyrhizi
Во Флориде семена Williams 82 высевали в пластмассовые горшки диаметром 22,8 см, содержащие Metro Mix 300 (Sun GroHorticultural Distributors Inc., Bellevue, WA). Растения держали в стеклянной теплице, в которой не было ржавчины, на металлических стеллажах при средней температуре, равной 26°C, и средней относительной влажности, равной 61%. После всхода растения прореживали до 1 растения в горшке. Схема эксперимента представляла собой рандомизированный полный блок с 3 репликами для каждой обработки. Растения в соответствии с методикой опрыскивали штаммами на стадии роста R1 (Fehr et al. 1971) и инокулировали на следующий день смесью . Повторно обрабатывали штаммами через 14 дней после первых обработок. Степень развития ржавчины регистрировали, когда растения находились на стадии R4 или 5.
Сбор данных: В Иллинойсе степень развития ржавчины определяли путем подсчета количества спорообразующих урединиумов в произвольно выбранном круге диаметром 1 см каждого листа из инокулированных трехлепестковых листьев. Данные приведены в таблице 5. Во Флориде регистрировали степень развития ржавчины сои для случайным образом выбранного растения. Данные приведены в таблице 6.
Таблица 5. Количество спорообразующих урединиумов в круге ткани, обработанных разными бактериальными штаммами листьев диаметром 1 см в эксперименте в теплице, проведенном в Иллинойсе. (-) Означает "не определяли". Образцы, обозначенные разными буквами (например, a, ab, b, c, cd, d, e), обладали статистически значимо различающимися значениями.
Штамм
Количество спорообразующих урединиумов в круге диаметром 1 см
Исследование 1
Исследование 2
AIP039589
4,2 b
3,5 ab
AIP027511
-
-
AIP035174
3,0 ab
17,8 d
AIP025773
10,3
-
AIP015251
7,0 c
15,2 d
AIP061892
5,1 b
3,6 ab
AIP079428
-
4,2 b
AIP014931
7,8 c
24,1 e
AIP036895
-
-
Фунгицид (квадрис)
0 a
0 a
Инокулированный контроль
12,7 d
28,5 e
Таблица 6. Выраженная в процентах степень развития ржавчины растений сои, обработанных разными бактериальными штаммами в эксперименте в парнике, проведенном во Флориде. (-) Означает "не определяли". Образцы, обозначенные разными буквами (например, a, ab, b, c, cd, d, e), обладали статистически значимо различающимися значениями.
Штамм
Средняя степень развития ржавчины, %
AIP039589
13,3 b
AIP027511
-
AIP035174
17,1 bc
AIP025773
15,9 bc
AIP015251
21,0 d
AIP061892
11,0 b
AIP079428
-
AIP014931
23,8 d
AIP036895
-
Фунгицид (квадрис)
1,3 a
Инокулированный контроль
22,4 d
Пример 8. Исследования борьбы с азиатской ржавчиной сои в поле во Флориде
P. pachyrhizi
et al.
P. pachyrhizi
Исследования в поле проводили во Флориде в 2015 г. в North Florida Research and Education Center in Quincy. Во время исследования средняя месячная температура от июля до сентября равнялась от 24 до 27°C. Растительный материал, бактериальные штаммы и изолят  были аналогичны описанным для эксперимента в теплице во Флориде (пример 7). В соответствии с методикой опрыскивали штаммами на стадии роста R1 роста (Fehr , 1971) и инокулировали на следующий день смесью , после чего происходило естественное природное заражение. Повторно обрабатывали штаммами через 14 дней после первой обработки.
Выраженную в процентах степень развития ржавчины сои регистрировали для случайным образом выбранного растения на стадии R5-. Данные приведены в таблице 7.
Таблица 7. Степень развития ржавчины сои в процентах для растений, обработанных разными бактериальными штаммами в поле для эксперимента, проведенного во Флориде. (-) Означает "не определяли". Образцы, обозначенные разными буквами (например, a, ab), обладали статистически значимо различающимися значениями.
Штаммы
Средняя степень развития ржавчины, %
AIP039589
-
AIP027511
-
AIP035174
6,4 ab
AIP025773
3,4 a
AIP015251
3,9 a
AIP061892
3,6 a
AIP079428
-
AIP014931
2,9 a
AIP036895
-
Фунгицид (квадрис)
2,5 a
Инокулированный контроль
5,8 ab
Rhizoctonia
Пример 9. Исследование возбудителя черной ножки - модельная обработка семян сои в бороздах
Rhizoctonia solani
Размалывали зерна, зараженные в возрасте 11-14 дней. Размолотый инокулят просеивали через сито №10 для удаления всех недостаточно размолотых зерен. Размолотые просеянные инфицированные зерна добавляли к средам Fafard Superfine Germination по 1,5 г размолотого инокулята на 1 л почвенной смеси. Смесь инокулята и 1 л воды на 75 л сред для прорастания помещали в бетономешалку и перемешивали до эффективного включения среды. Среду с эффективно включенным инокулятом помещали во второй контейнер для хранения с крышкой и до использования при анализе хранили при 20°C в течение 18 ч.
Лотки для высевания с 606 ячейками заполняли инокулированными средами для прорастания, не уплотняя среды слишком сильно. В каждую из 606 ячеек помещали по 1 семени на глубину от 1,5 до 2 см и при нанесении средств для обработки в виде жидкого препарата отверстия для посадки оставляли открытыми. Отдельные ячейки для выращивания обрабатывали одним из повторно суспендированных штаммов, указанных в таблице 1, по 3 мл ячейка/семя. Средство для обработки наносили прямо сверху на семена. После нанесения средства для обработки ящики немного встряхивали для закрывания отверстий для посадки. Лотки для высевания немного поливали и помещали на ящик во влажную камеру. Через 3-4 дня проверяли влажность в ящиках и при необходимости немного поливали, чтобы ячейки были равномерно увлажнены. После полива влажную камеру заменяли.
:
Сбор данных и результатыСбор данных и результаты:Через 10-12 дней проводили исследование для определения количества проросших семян. Для каждой обработки данные представляли в виде выраженной в % доли проросших семян за вычетом 6 семян.
Пример 10. Исследования в поле различных бактериальных штаммов для борьбы с различными патогенными грибами
Различные бактериальные штаммы, указанные в таблице 2, наносят на культурные растения, указанные в таблице 8, в поле в соответствии с современной агротехникой, указанной в таблице 8, с обеспечением равномерного покрытия растений и в соответствии с надлежащей агротехникой. Средства наносят для предупреждения и/или лечения по графику, соответствующему болезни.
Таблица 8
Культурное растение
Патоген
Норма расхода
Объем при обработке
Количество обработок
Промежуток времени между обработками/график
Все культурные растения
Серая гниль
5 г/л
25-200 галлон/акр
от 1 до 10
от 7 до 14 дней
Декоративные культуры
Церкоспорозная пятнистость листьев
5 г/л
100-300 галлон/акр
от 1 до 4
от 7 до 14 дней
Соя
Церкоспорозная пятнистость листьев
5 г/л
5-20 галлон/акр
от 1 до 3
V7, R1, R3, R5
Свекла, шпинат, мангольд
Церкоспорозная пятнистость листьев
5 г/л
15-50 галлон/акр
от 3 до 6
от 7 до 14 дней
Пасленовые культурные растения
Бурая пятнистость
5 г/л
15-50 галлон/акр
от 4 до 10
от 7 до 14 дней
Виноград
Настоящая мучнистая роса
5 г/л
15-50 галлон/акр
от 3 до 8
от 7 до 14 дней
Тыква
Настоящая мучнистая роса
5 г/л
от 2 до 8
от 7 до 14 дней
Дерн/другие травы
Антракнозная пятнистость листьев
5 г/л
87-120 галлон/акр
от 2 до 6
от 7 до 14 дней
Виноград
Ложная мучнистая роса
5 г/л
50-100 галлон/акр
от 2 до 6
от 7 до 14 дней
Листовая зелень
Ложная мучнистая роса
5 г/л
от 25 до 75 галлон/акр
от 2 до 6
от 7 до 14 дней
Базилик
Ложная мучнистая роса
5 г/л
25-75 галлон/акр
от 2 до 6
от 7 до 14 дней
Декоративные растения
Фитофторозная гниль
5 г/л
100-300 галлон/акр
от 2 до 6
от 7 до 14 дней
Тыква/перцы
Фитофторозная гниль
5 г/л
25-100 галлон/акр
от 2 до 10
от 7 до 14 дней
Пасленовые культурные растения
Фитофторозная гниль
5 г/л
25-100 галлон/акр
от 2 до 10
от 7 до 14 дней
Соя
Фитофторозная гниль
5 г/л
5-20 галлон/акр
от 1 до 3
от V4 до R5
Соя
Ржавчина
5 г/л
5-20 галлон/акр
от 1 до 4
от V4 до R5
Семейство розоцветные
Бактериальный ожог
5 г/л
20-100 галлон/акр
от 1 до 3
До/после цветения
Яблоня
Парша яблони
5 г/л
20-100 галлон/акр
от 1 до 5
от 7 до 14 дней
Косточковые плоды
Бурая гниль
5 г/л
20-100 галлон/акр
от 1 до 3
До/после цветения и завязывания плода
Рис
Ризоктониоз
5 г/л
5-20 галлон/акр
от 1 до 3
До закрытия листового полога
Злаки
Фузариоз колоса
5 г/л
5-20 галлон/акр
от 1 до 2
Стадия роста по шкале Фикса 7, 9, и/или 10,51
Конкретные виды обработки описаны ниже.
Перечень видов некорневой обработки для борьбы с патогеном: бурая пятнистость
6-10 обработок
Объем при обработке: 100 галлон/акр
Перечень видов обработки:
1. Неинокулированная необработанная делянка
2. Инокулированная делянка
3. Химическое средство борьбы, выбранное кооператором, использованное в соответствии с инструкциями на упаковке
4. Химическое средство борьбы Serenade, использованное в соответствии с инструкциями на упаковке
5. Экспериментальное биологическое средство (средства) некорневой обработки по 5 г/л с добавлением Capsil по 3 унций/100 галлонов.
Пример 11. Исследования в поле различных бактериальных штаммов или их активных вариантов для борьбы с различными патогенными грибами с использованием средства для обработки семян
Различные бактериальные штаммы, указанные в таблице 2, наносят на культурные растения, указанные в таблице 9, в качестве средства для обработки семян до высевания в поле. Бактериальные штаммы для обработки наносят с для предупредительной борьбы с болезнями и при нормах расхода, указанных в таблице 10. Конкретные виды обработки описаны ниже.
Таблица 9
Соя
Канола
Пшеница
Зерна хлебных злаков
Маис
Тыква
Хлопчатник
Пасленовые культурные растения
Свекла
Листовая зелень
Вертициллиозный вилт
Подсолнечник масличный и семенной
Перечень видов экспериментальной обработки семян
1. Неинокулированная делянка
2. Инокулированная делянка
3. Соответствующее болезни средство обработки семян Chemical Check, выбранное и использованное кооператором
4. Экспериментальное биологическое средство (средства) обработки семян
Таблица 10
Культурное растение
Патоген
Норма расхода
Тип обработки
Пропашные культуры/овощи
Pythium
от 10e4 до 10e12
Обработка семян
Пропашные культуры/овощи
Phytophthora
от 10e4 до 10e12
Обработка семян
Пропашные культуры/овощи
Фузариозный вилт
от 10e4 до 10e12
Обработка семян
Пропашные культуры/овощи
Синдром внезапной гибели сои
от 10e4 до 10e12
Обработка семян
Пропашные культуры/овощи
Rhizoctonia solani
от 10e4 до 10e12
Обработка семян
Пропашные культуры/овощи
Вертициллиозный вилт
от 10e4 до 10e12
Обработка семян
Пропашные культуры/овощи
Стеблевая гниль кукурузы
от 10e4 до 10e12
Обработка семян
Пример 12. Исследования в поле различных бактериальных штаммов или их активных вариантов для борьбы с различными патогенными грибами с использованием обработки в бороздах
Различные бактериальные штаммы или их активные варианты, указанные в таблице 1, наносят на культурные растения, указанные в таблице 9, в качестве средства обработки борозд во время высевания для предупредительной борьбы с болезнями и при нормах расхода, указанных в таблице 11. Конкретные виды обработки описаны ниже.
Перечень видов экспериментальной обработки в бороздах:
1. Неинокулированная делянка
2. Инокулированная делянка
3. Биологическое средство (средства) обработки в бороздах 5 г/л+Capsil по 6 унций/100 галлонов по 15 галлон/акр
4. Соответствующее болезни средство обработки в бороздах Chemical Check, выбранное и использованное кооператором.
Таблица 11
Культурное растение
Патоген
Норма расхода
Объем при обработке
Пропашные культуры/овощи
Pythium
5 г/л
от 2 до 15 галлон/акр
Пропашные культуры/овощи
Phytophthora
5 г/л
от 2 до 15 галлон/акр
Пропашные культуры/овощи
Фузариозный вилт
5 г/л
от 2 до 15 галлон/акр
Пропашные культуры/овощи
Синдром внезапной гибели сои
5 г/л
от 2 до 15 галлон/акр
Пропашные культуры/овощи
Rhizoctonia solani
5 г/л
от 2 до 15 галлон/акр
Пропашные культуры/овощи
Вертициллиозный вилт
5 г/л
от 2 до 15 галлон/акр
Пропашные культуры/овощи
Стеблевая гниль кукурузы
5 г/л
от 2 до 15 галлон/акр
Пример 13. Методика биологической борьбы путем обработки семян штаммом
Препарат для обработки семян получали смешиванием 10 г приготовленного штамма с добавлением 30 мл воды и с добавлением 15 мл полимера Unicoat. Взвешенное количество семян помещали в стерилизованный керамический сосуд. Добавляли количество раствора для обработки семян, соответствующее массе семян (0,05 мл/25 г семян), смесь встряхивали в течение 60 с или пока на семенах не образовывалось видимое равномерное покрытие. Семена одним слоем на фольге помещали в жаровню и выдерживали в вытяжном шкафу при ламинарном потоке воздуха в течение 1 ч или до высыхания семян. После высыхания семян их помещали в герметичный контейнер и хранили при КТ.
Пример 14. Препараты смачивающегося порошка
100 г Клеточной массы каждого из штаммов, указанных ниже в таблице 12, смешивали с 5 г глицерина и 20 г синтетического силиката кальция с использованием кухонного комбайна. Это вещество сушили при 40°C до обеспечения активности воды, равной менее 0,30, и затем оно содержало количество КОЕ/г, указанное в таблице 12. Высушенный порошкообразный препарат хранили в вакууме в пакетах из майлара при 22°C. Высушенный порошкообразный препарат сохранял фунгицидную активность.
Таблица 12
Название штамма
КОЕ/г смачивающегося порошка
AIP14931
1,16×10<sup>11</sup>
AIP15251
1,47×10<sup>11</sup>
AIP25773
6,90×10<sup>10</sup>
AIP35174
1,23×10<sup>11</sup>
AIP61892
6×10<sup>10</sup>
AIP79428
4,73×10<sup>9</sup>
Пример 15. Исследования Pythium в поле.
Бактериальные штаммы AIP061892 и AIP079428 наносили в качестве средства для обработки семян на сою сорта W3103. Все бактериальные штаммы готовили в виде смачивающегося порошка, как описано в примере 14, и затем преобразовывали в средства для обработки семян путем объединения 10 г приготовленного бактериального штамма с 30 мл воды и 15 мл полимера для нанесения покрытия на семена (Unicoat) и затем встряхивали до образования однородного раствора. Готовый раствор наносили на 1 кг семян сои и ему давали высыхать в вытяжном шкафу при ламинарном потоке воздуха в течение 12 ч.
Pythium
Инокулят  выращивали на зернах проса и наносили в борозды по 1,25 г/фут и наносили при высевании обработанных семян сои по 130000 семян на акр в день 1. Полную густоту стояния определяли через 17 дней. Конкретные виды обработки описаны ниже.
Обработки:
1. Необработанная делянка
2. Инокулированная делянка
3. Квадрис по 0,4 жидкая унция/акр
4. Средство обработки семян AIP061892
5. Средство обработки семян AIP079428
На фиг. 2 представлено количество проростков (густота стояния) на акр. На фиг. 2 показано, что AIP061892 и AIP079428 приводят примерно к 2-кратному увеличению прорастания по сравнению с инокулированным контролем.
Rhizoctonia
solani
Пример 16. Исследования в поле.
Бактериальные штаммы AIP061892 и AIP079428 наносили в качестве средства для обработки семян на сою сорта W3103. Все бактериальные штаммы готовили в виде смачивающегося порошка, как описано в примере 14 и затем преобразовывали в средства для обработки семян путем объединения 10 г приготовленного бактериального штамма с 30 мл воды и 15 мл полимера для нанесения покрытия на семена (Unicoat) и затем встряхивали до образования однородного раствора. Готовый раствор наносили на 1 кг семян сои и ему давали высыхать в вытяжном шкафу при ламинарном потоке воздуха в течение 12 ч.
Rhizoctonia
solani
Инокулят  выращивали на зернах проса и наносили в борозды по 1,25 г/фут и наносили при высевании обработанных семян сои по 130000 семян на акр в день 1. Полную густоту стояния определяли через 17 дней. Конкретные виды обработки описаны ниже.
Обработки:
1. Необработанная делянка
2. Инокулированная делянка
3. Квадрис по 0,4 жидкая унция/акр
4. Средство обработки семян AIP061892
5. Средство обработки семян AIP079428
На фиг. 3 представлено количество проростков (густота стояния) на акр. На фиг. 3 показано, что AIP061892 приводит к 50% восстановлению прорастания по сравнению с инокулированным контролем.
Все публикации и заявки на патенты, указанные в описании, характеризуют уровень подготовки специалистов в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Все публикации и заявки на патенты включены в настоящее изобретение в качестве ссылки в такой степени, как если бы каждая отдельная публикация и заявка на патент была специально и по отдельности указана, как включенная в настоящее изобретение в качестве ссылки.
Хотя выше настоящее изобретение подробно описано в качестве иллюстрации и примера для ясного понимания, очевидно, что в объеме прилагаемой формулы изобретения моно внести некоторые изменения и модификации.