ПРОТИВООЖОГОВОЕ СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ НАСТОЯ ЛИСТЬЕВ ОСИНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ, ЦВЕТКОВ КАЛЕНДУЛЫ ЛЕКАРСТВЕННОЙ, РОМАШКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ
ANTI-BURN AGENT BASED ON ASPEN LEAVES, FLOWERS OF CALENDULA, WILD CAMOMILE

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к лекарственным средствам на растительной основе с выраженным заживляющим, противовоспалительным действием на основе биологического сырья.
Уровень техники
Важность разработки противоожоговых препаратов определяется тем, что частота термических ожогов остается постоянно высокой, а несмотря на разработку и внедрение значительного количества противоожоговых препаратов, не существует средств, полностью восстанавливающих структуру и функции пораженных ожогом тканей. Таким образом, вопрос эффективности терапии как ожогов, так и ожоговой болезни остается актуальным и своевременным.
Ожоги всех видов тяжести, как правило, сопровождаются нарушением кислотно-щелочного равновесия, синтеза и ресинтеза белков, проявлением ферментных реакций распада, что в совокупности приводит к некрозу тканей, экссудативным реакциям, образованию грануляционной ткани.
При изучении доступных источников (научная литература, патенты) обнаружены сведения о множестве противоожоговых и раневых покрытий, находящихся на различных этапах разработки. Анализ данных свидетельствует о разнообразии покрытий по происхождению, форме, функциональным качествам, компонентному составу.
Наибольшую противоожоговую эффективность проявляют препараты, имеющие консистенцию геля или эмульсии, поскольку они легко наносятся на ожоговую поверхность и легко впитываются. Характер консистенции обеспечивается технологией получения лекарственного средства.
Задача настоящего изобретения заключается в создании эффективного противоожогового средства наружного применения, обладающего широким спектром действия. В заявляемом средстве отсутствуют токсические компоненты, но присутствуют настой листьев осины обыкновенной, настой цветков ромашки лекарственной, настой цветков календулы лекарственной, а также эфирное масло лаванды лекарственной и ряд других компонентов.
Имеется ряд средств, близких по технической сущности к заявляемому средству.
Известно противоожоговое средство, являющееся композицией веществ растительного происхождения на основе масляных экстрактов ряда растений (зверобой продырявленный, облепиха крушиновидная, ромашка аптечная, крапива двудомная). Показано выраженное ранозаживляющее и противоожоговое действие этого средства [14]. Недостатком известного средства является сложность технологического процесса его приготовления, включающего обработку части компонентов первоначально этанолом, а в последующем - растительным маслом.
Известно противоожоговое средство, содержащее нерафинированное подсолнечное масло, корень лопуха и цветы ромашки. Средство приготовляется путем месячного настаивания высушенного растительного сырья на нерафинированном растительном масле [11]. Это средство обладает обезболивающей и ранозаживляющей активностью, препятствует образованию келоидных рубцов и способствует восстановлению кожного покрова. Недостатком известного средства является длительность технологического процесса его изготовления.
Известно противоожоговое средство, представляющее собой суспензию лишенных оболочки клеток Spirulina platensis. Предложено применение свежевыращенных клеток Spirulina platensis в качестве активного начала противоожоговых средств, причем применяют свежевыращенные клетки, лишенные клеточных оболочек. При этом средство оказалось эффективным при термических, химических и солнечных ожогах, включая ожоги волосистой части головы [12]. К недостаткам метода можно отнести сложность выращивания клеток Spirulina platensis и лишение их оболочек.
Известно ранозаживляющее средство, содержащее стеариновую кислоту, растительное масло, анестезин, левомицетин, консервант, пластификатор, жировую основу, эмульгатор, дистиллированную воду, при этом оно дополнительно содержит шерстные спирты, масла касторовое и шиповника, стеарат цинка, 70%-ный спиртовой экстракт фитосбора (кора дуба: цветки календулы: цветочные корзинки ромашки аптечной: листья крапивы - 1:3:2:1 мас. ч.) и Na-соли жирных кислот шерстного жира [9]. Недостатком данного ранозаживляющего средства является то, что не все количество воды, находящееся в составе средства, эмульгировано, что вызывает расслоение эмульсии.
Известна мазь для лечения ожогов, содержащая левомицетин, анестезин, экстракт алоэ, ланолин, вазелин, при этом она дополнительно содержит раствор гидрокортизона 2,5%-ного, новокаин, витамин А 0,72%-ный, витамин Е 20%-ный, эктерицид [10]. Недостатками данной мази для лечения ожогов являются высокая себестоимость, аллергические действия, вызываемые антибиотиками.
Наиболее близким к предлагаемому техническим решением является способ получения биологически активной субстанции из эмбрионально-яичной массы для приготовления противоожоговой пластины и противоожоговая пластина на его основе. Авторами предложен способ получения биологически активной субстанции из эмбрионально-яичной массы для приготовления противоожоговой пластины, включающий гомогенизацию куриного яйца, при этом перед гомогенизацией куриное яйцо инкубируют в течение 9 суток, причем на 5, 6, 7 сутки куриное яйцо облучают в течение 30 с при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт, с последующим охлаждением в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С и фасованием, отличающийся тем, что дополнительно готовят однородную массу, содержащую медицинский желатин, отвар календулы и ромашки, антибиотические средства, анестезин, амарантовое масло, глицерин, бриллиантовый зеленый и после гомогенизации проводят обработку гомогената ультразвуком, при этом обработку гомогената ультразвуком проводят в ультразвуковом диспергаторе, затем проводят ультрамикрофильтрацию через фильтры диаметром 0,2 мкм, причем перед ультрамикрофильтрацией к полученному гомогенату 1:1 добавляют смесь 0,1%-ного раствора натрия бензойнокислого и 0,1%-ного раствора калия сорбиновокислого в равных частях, а для получения однородной массы предварительно медицинский желатин в количестве 3,5-4 г заливают отваром календулы и отваром ромашки в соотношении 1:1 до 100 мл, выдерживают в течение 55-60 мин при температуре 20-25°С, затем помещают на водяную баню при температуре 65-70°С до полного растворения желатина, после чего в раствор с желатином добавляют антибиотические средства, в качестве которых берут 0,2-0,5 г амикацина, 0,3-0,4 г фурацилина, анестезина 0,9-1,0 г, амарантового масла 0,9-1,0 мл, глицерина 2,5-3,0 мл, бриллиантового зеленого 0,4-0,5 мл с последующим перемешиванием в гомогенизаторе в течение 4-5 мин, затем к полученной однородной массе приливают 48-50 мл биологически активной субстанции из эмбрионально-яичной массы и перемешивают в гомогенизаторе в течение 5-7 мин, полученную массу разливают по 15 мл в специальную емкость диаметром 10 см и высотой 1 см, помещают в термостат на 3,5-4 ч при температуре 37-39°С, затем охлаждают в течение 1-2 суток до застывания в форме пластин. Противоожоговая пластина на основе биологически активной субстанции из эмбрионально-яичной массы, включающая эмбрионально-яичную массу, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит биологически активную субстанцию на основе эмбрионально-яичной массы и однородную массу, включающую амарантовое масло, бриллиантовый зеленый, анестезин, желатин, глицерин и антибиотические средства, причем в качестве антибиотических средств используют амикацин и фурацилин [14]. К недостаткам получения биологически активной субстанции из эмбрионально-яичной массы относится сложность приготовления, обработки и фильтрации гомогената и потенциальная аллергенность ее компонентов.
Раскрытие изобретения
Задачей настоящего изобретения является расширение спектра противоожоговых средств и создание на основе растительного сырья лекарственного средства, обладающего высоким терапевтическим эффектом воздействия.
Одной из актуальных тенденций развития современной медицины является обращение к фитотерапии (лечению растениями) как средству лечения заболеваний, в том числе ран различного происхождения, ожогов разной степени тяжести, воспалений и повреждений кожи и слизистых тканей. Ценность лекарственных растений заключается в том, что они, как правило, малотоксичны и мягко воздействуют на организм, при этом терапевтический эффект от их использования достаточно высок.
Решение поставленной задачи достигается тем, что предлагаемое противоожоговое средство содержит настой листьев осины обыкновенной, настои цветков ромашки лекарственной и цветков календулы лекарственной, эфирного масла лаванды лекарственной и масла миндальных орехов.
Технический результат, который может быть получен с помощью предлагаемого изобретения, сводится к повышению противоожоговых, противовоспалительных, регенерирующих свойств при отсутствии аллергического действия.
Технический результат достигается с помощью противоожогового препарата (см. табл.1), содержащего настой листьев осины обыкновенной, ромашки лекарственной, календулы лекарственной, эфирное масло лаванды лекарственной, масло миндальных орехов, желатин кристаллический, фурацилин, анестезин и глицерин, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Осуществление изобретения
Готовят средство противоожогового действия, которое содержит следующее соотношение компонентов, мас.%: настой листьев осины обыкновенной - 31; настой цветков ромашки лекарственной - 30,5; настой цветков календулы лекарственной - 30; эфирное масло лаванды лекарственной - 0,60; масло миндальных орехов - 0,60; желатин кристаллический - 3,66; фурацилин - 0,60; анестезин - 0,60; глицерин -2,44.
Благодаря выбранному количественному соотношению компонентов состав имеет оптимальную для использования консистенцию, т.е. не застывает, образуя корку, и не растекается по поверхности обрабатываемой раны.
Вязкость препарата (мази) при указанных количественных соотношениях компонентов соответствует фармакологическим свойствам мазевого препарата, приготовленного на водорастворимой основе. Его лечебные функции оптимальны, медикаментозные данные соответствуют требованиям для препаратов данной группы.
Предлагаемый препарат готовят следующим образом.
Приготовляются настои листьев осины обыкновенной, цветков ромашки лекарственной и календулы лекарственной путем нагрева 15 г растительного субстрата каждого вида в 250 мл водопроводной воды в стеклянной посуде на кипящей водяной бане в течение 15 мин с дальнейшим настаиванием в течение 45 мин при комнатной температуре. По окончании настаивания настои дважды фильтруются через сменные ватно-марлевые фильтры, охлаждаются в течение 120 мин при температуре 25°С, после чего помещаются в холодильную камеру при температуре 3,1°С.
Для приготовления мази 6 г кристаллического желатина заливается 49,2 г настоем календулы, 50,0 г настоем ромашки и 50,84 г настоя осины до 150 мл, выдерживается в герметичной посуде 60 мин при температуре 25°С, после чего в той же посуде помещается в воздушный термостат при температуре 55°С на 45 мин, до полного растворения желатина. После растворения желатина к смеси добавляется 0,98 г порошка фурацилина, 0,98 г порошка анестезина, 1 г масла миндаля, 4 г глицерина и 1 г эфирного масла лаванды с последующим перемешиванием в герметично закрытом гомогенизаторе в течение 7 мин, до получения однородной массы, после чего смесь разливается по герметичным стеклянным емкостям, охлаждается при температуре 25°С в течение 90 мин, а затем помещается в холодильную камеру при температуре 3,1°С.
Фурацилин - антибактериальное вещество, действующее на различные грамположительные и грамотрицательные бактерии. Применяется наружно для лечения и предупреждения гнойно-воспалительных процессов [1].
+
2+
Анестезин (бензокаин) - местный анестетик для поверхностной анестезии. Уменьшает проницаемость клеточной мембраны для Na, вытесняет Са из рецепторов, расположенных на внутренней поверхности мембраны, блокирует проведение нервных импульсов. Препятствует возникновению болевых импульсов в окончаниях чувствительных нервов и их проведению по нервным волокнам. При нанесении на поверхность слизистой оболочки полости рта действие развивается через 1 мин [5].
Ромашка лекарственная оказывает противовоспалительное, спазмолитическое и умеренное противомикробное действие [7].
Цветки календулы оказывают противовоспалительное, антисептическое действие при воспалительных заболеваниях [6].
Желатин - обратимо коагулирующий коллоид, получаемый из фибриллярного белка коллагена путем вываривания в воде шкур животных, костей, хрящей или сухожилий, т.е. материала, в котором содержится коллаген. Почти 20% веса желатина составляет аминокислота глицин. Получение желатина сходно с получением клея, но вываривание в процессе приготовления желатина длится не столь долго и не приводит к полной деградации коллагена до жидких конечных продуктов. Желатин способствует ускорению коллагенизации раны в процессе заживления [8].
Листья осины обыкновенной оказывают противовоспалительное, антиоксидантное и обезболивающее действие [14].
Эфирное масло лаванды лекарственной оказывает противомикробное, противовоспалительное, противоаллергическое действие, способствует ускорению заживления повреждений кожи и уменьшению болевых ощущений [3].
Масло миндальных орехов активирует метаболические процессы в соединительной ткани, стимулирует выработку коллагена, ускоряя коллагенизацию раны при заживлении [2].
Глицерин способствует повышению гидратации кожи, облегчает зуд, препятствует развитию воспаления. При изготовлении средств наружного применения глицерин также используется в качестве пластификатора, способствующего сохранению однородной структуры препарата [4].
Результат испытания противоожоговой мази на белых лабораторных крысах линии Вистар в сравнительном аспекте.
Исследование проведено на самцах в возрасте 6 месяцев, у которых моделируется термический ожог кожи спины с помощью раскаленного над спиртовкой металлического шпателя. При этом к крысам применяется эфирный наркоз. У всех экспериментальных животных ожог соответствует II-IIIA степени. Исследование проводилось в течение 25 суток. Фрагменты кожи для гистологического исследования выделяли на 7, 11, 17 и 25 сутки.
Для оценки влияния противоожоговой мази на репаративные процессы в коже при ожогах, а также на процесс воспаления после ожога было сформировано 3 группы животных. Непосредственно после моделирования ожога поврежденную кожу спины смазывали:
- Контроль (n=20) - крысы с ожогом II-III степени, ничем не смазывали;
- I группа (n=20) - крысы с ожогом II-III степени, смазывали мазью «Левомеколь», выбранной в качестве препарата сравнения;
- II группа (n=20) - крысы с ожогом II-III степени, смазывали предлагаемой мазью.
В процессе исследования влияния предлагаемой противоожоговой мази на морфофункциональное состояние животных после моделирования ожога получены следующие результаты:
В контрольной группе после выхода из наркоза и на протяжении всего эксперимента состояние животных было тяжелым. Крысы отказывались от корма и воды, шерстный покров животных был взъерошен. Шесть крыс контрольной группы пали со второго по седьмой день наблюдения, при признаках выраженной интоксикации. За остальными наблюдали до 25 дня, учитывая при этом внешний вид зоны повреждения.
Внешний осмотр ожоговой поверхности показал, что зоны повреждения у крыс контрольной группы отечны, лишены шерсти, с признаками коагуляционного некроза. У всех животных контрольной группы некротизированные участки с неровными краями и тенденцией к распространению на прилежащие участки кожной поверхности. У значительной части животных наблюдаются изъязвления. До 14 дня исследования демаркационный вал по периферии всего поврежденного участка у большинства крыс отсутствует или слабо заметен и прерывист. Признаков эпителизации не отмечено.
К 7 суткам наблюдения в контрольной группе отмечается формирование коричнево-серого струпа. При гистологическом исследовании под ним отмечается некроз эпителия, волосяных фолликулов, в ряде случаев окруженный зоной геморрагического пропитывания, выраженный отек. Очаги некроза отмечаются в участках прилежащей к ране мышечной ткани
К 11 суткам отмечались случаи отторжения струпа, уменьшение очагов некроза, уменьшение плотности инфильтратов. К 17 суткам струп к ране прилегает фрагментарно, под ним лежит грануляционная ткань, имеющая признаки волокнисто-клеточной. По краям раны отмечается плоский многорядный эпителий. К 25 суткам исследования у выживших животных этой группы на месте ожога макроскопическая картина существенно не меняется (Рис. 1).
Во I и II экспериментальных группах животных выжили все крысы. При этом большая часть крыс со вторых суток начала пить воду, а с третьих-четвертых суток приступила к приему пищи. По периферии ожога наблюдается четко выраженная зона демаркационного воспаления, резко отделяющая эту зону от здоровой кожи.
В I группе на 7 сутки наблюдается плотное прикрепление струпа к раневой поверхности. По результатам гистологического исследования определяется некроз эпителия. На 11 сутки струп сохраняется, микроскопически определяется некроз с выраженной инфильтрацией. К 17 суткам исследования струп сохраняется только на отдельных участках раны, гистологически определяется слабая эпителизация по краям и периферическим участкам раны (Рис. 2).
К 25 суткам исследования на периферии раны отмечаются полоски плоского эпителия, но в центре и в глубине раны фиксируются разрастания незрелой грануляционной ткани клеточно-волокнистого строения (Рис. 3).
Во II группе, где применялось заявляемое противоожоговое средство, на 7 сутки исследования отмечается плотно прилегающий к раневой поверхности струп, при гистологическом исследовании под струпом отмечаются некроз эпителия, мышечных волокон, отек. На 11 день исследования струп прилегает к ране на отдельных участках, по результатам гистологического исследования отмечаются очаги некроза в дерме (Рис. 4).
Начиная с 17 дня исследования, струп прилегает к ожоговой поверхности фрагментарно, очагов некроза не наблюдается, отмечается эпителизация дермы за счет тяжей плоского эпителия. К 25 суткам исследования отмечены сформированные полоски двух-трехрядного эпителия (Рис. 5).
Проведенное исследование позволяет сделать вывод о том, что к 25 суткам под действием заявляемого препарата происходит эпителизация поверхностной ожоговой раны, что свидетельствует о преимуществе предлагаемой противоожоговой мази в лечении ожогов II-IIIA степени.
Для изучения динамики процессов репаративной регенерации в поврежденной ткани оценивались также гематологические и биохимические показатели крови. Из результатов гематологического анализа следует, что в послеожоговый период происходит постепенная нормализация исследованных гематологических параметров (количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина крови), но в группе животных, где применялось заявляемое противоожоговое средство, этот процесс протекает более интенсивно, и нормализация гематологических показателей завершается к 17 суткам наблюдения, в то время как во второй группе - к 25, а в контроле к концу эксперимента исследованные параметры все еще выше нормальных значений (Табл. 2).
Результаты биохимических исследований также свидетельствуют о том, что нормализация исследованных показателей во II группе животных протекает быстрее, чем в группе, где применялся препарат сравнения, а также быстрее и успешнее, чем в контроле (Табл. 3).
Предлагаемое изобретение по сравнению с другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:
- повышение противовоспалительных, регенерирующих, антиоксидантных и антимикробных свойств;
- отсутствие аллергического действия;
- является экологически чистым препаратом.
Источники информации
1. Abbas O.L. An in vivo comparison of commonly used topical antimicrobials on skin graft healing after full-thickness burn injury / O.L. Abbas, H. Borman, T. Bahar, N.M. Ertas, M. Haberal // Journal of burn care & research. - 2015. -Vol. 36. - №2. - P. 47-54.
2. Ahmad Z. The uses and properties of almond oil / Z. Ahmad // Complementary therapies in clinical practice. - 2010. - Vol. 16. - №1. - P. 10-12.
3. Altaei D.T. Topical lavender oil for the treatment of recurrent aphthous ulceration / D.T. Altaei // American journal of dentistry. - 2012. - Vol. 25. - №1. - P. 39-43.
4. Aramwit P. Improvement of physical and wound adhesion properties of silk sericin and polyvinyl alcohol dressing using glycerin / P. Aramwit, J. Ratanavaraporn, T. Siritientong // Advances in Skin & Wound Care. - 2015. - Vol. 28. - №8 - P. 358-367.
5. Araujo De, D.R. Bioadhesive films containing benzocaine: correlation between in vitro permeation and in vivo local anesthetic effect / D.R. de Araujo, C. Padula, C.M. Cereda, G.R. Tofoli, R.B. Brito Jr, E. de Paula et al. // Pharmaceutical research. - 2010. - Vol. 27. - №8. - P. 1677-1686.
6. Chandran P.K. Effect of Calendula officinalis flower extract on acute phase proteins, antioxidant defense mechanism and granuloma formation during thermal burns / P.K. Chandran, R. Kuttan // Journal of Clinical Biochemistry & Nutrition. - 2008. - №43. - P. 58-64.
7. Jarrahi M. Evaluation of topical Matricaria chamomilla extract activity on linear incisional wound healing in albino rats / M. Jarrahi, A.A. Vafaei, A.A. Taherian, H. Miladi, A. Rashidi Pour // Natural product research. - 2010. - Vol. 24. - №8. - P. 697-702.
8. Morimoto N. Exploratory clinical trial of combination wound therapy with a gelatin sheet and platelet-rich plasma in patients with chronic skin ulcers: study protocol / N. Morimoto, N. Kakudo, M. Matsui, T. Ogura, Т. Hara, K. Suzuki et al. / BMJ Open. - 2015. - Vol. 5. - №5. - e007733.
9. Пат. RU 2040252. Ранозаживляющее средство. Ермолова Л.С., Морозова Р.П., Ермоленко Н.И., Дулаев Э.Х., Кожухова В.В., опубл. 25.07.1995.
10. Пат. RU 2128500. Мазь Б.И. Варфоломеева для лечения ожогов. Варфоломеев Б.И., Ибрагимов Б.А., опубл. 10.04.1999.
11. Пат. RU 2159628. Противоожоговое средство и способ его приготовления. Малеева Г.Л., опубл. 27.11.2000.
12. Пат. RU 2174404. Противоожоговое средство. Ириков В.А., опубл. 10.10.2001.
13. Пат. RU 2325175. Мазь для лечения ожогов, кожных заболеваний и заживления ран. Самитина Е.К., Самитин Д., опубл. 27.05.2008.
14. Пат RU 2433171. Способ получения биологически активной субстанции из эмбрионально-яичной массы для приготовления противоожоговой пластины и противоожоговая пластина на его основе. Тимченко Л.Д., Ржепаковский И.В., Вакулин В.Н., Затона Е.Г., Походенко М.В., опубл. 10.11.2011.
15. Турецкова В.Ф. Осина обыкновенная как перспективный источник получения препаратов противоязвенного и противовоспалительного действия / В.Ф. Турецкова, И.Ю. Лобанова, С.С. Рассыпнова, Н.М. Талыкова // Бюллетень сибирской медицины. - 2011. - №5. - С. 106-111.