КИТАЙСКАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩИЕСЯ В КОМПОЗИЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ЭКСТРАКТЫ НАСЕКОМЫХ И СПОСОБЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОМПОЗИЦИИ
CHINESE THERAPEUTIC COMPOSITION, THERAPEUTIC INSECT EXTRACTS CONTAINED IN CONTAINING AND METHODS OF PREPARING COMPOSITION

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение касается Китайского лекарственного состава для лечения кардиоваскулярных и цереброваскулярных болезней, лекарственных экстрактов насекомых, содержащихся в составе, и способов приготовления такого состава.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Коронарная болезнь имеет отношение к накоплению атероматозных бляшек на стенках коронарных сосудов, из-за которых суживается просвет сосудов или блокируется кровоток, что является причиной миокардиальной ишемии и гипоксии. Коронарная болезнь или коронарный спазм рассматривается в рамках ишемической болезни сердца (ИБС).
Профессор Иилинг Bу впервые сформулировал и применил на практике Коллатеральную Теорию Китайской медицинской науки для изучения патогенеза ИБС и успешно разработал капсулу "Tongxinluo", содержаую лекарственные экстракты насекомых пяти видов, включая скорпиона (Buthus martensii Karsch), сороконожку (Scolopendra subspinipes mutilans L. Koch), эуполифага или стелеофага (Eupolyphaga sinensis Walker), пиявку (Whitmania pigra Whitman) и цикаду (Cryptotympana pustulata Fabricius), для лечения коронарной болезни и стенокардии. Капсула "Tongxinluo" обладает особым лечебным действием при ИБС, стенокардии, церебральных тромбозах и т.п., и защищена патентом Китая No. ZL 01131203.3. Для приготовления капсулы "Tongxinluo" использовали экстракты скорпиона, пиявки, сороконожки, эуполифага или стелеофага, цикады, корня женьшеня (Раnах ginseng С.А. Меу), готового ладана (Boswellia carterii Birdw., В. bhaw-dijiana Birdw), корня пиона красного (Paeonia lactiflora Pal), древесины сандалового дерева душистого (Dalbergia odorifera T. Chen), древесины сандалового дерева белого (Santalum album L.), борнеола и семян Ziziphi spinosae (Ziziphus jujuba Mill. var. spinosa (Bunge) Нu ex H.F.Chou), причем пять видов лекарственных экстрактов насекомых, т.е. скорпиона, многоножки, эуполифага или стелеофага, пиявки и цикады, используют совместно для активации циркуляции крови и устранения обструкции в сосудах, уменьшения газов и облегчения судорог. Капсула "Tongxinluo" оказывает положительное действие при лечении коронарной болезни и стенокардии, особенно вариантной стенокардии.
Существует множество проблем, связанных с получением и применением лечебных экстрактов насекомых, включая такие как неполная идентифицикация большинства активных компонентов, отсутствие современных процессов выделения и очистки, отсутствие разработанных стандартов и т.д., поэтому в предшествующем уровне техники лечебное сырье для получения лекарственных экстрактов на основе насекомых обычно измельчали в порошок традиционным способом дробления, и затем вводили в лекарственное средство. Однако в традиционном способе дробления есть несколько недостатков: 1) клеточную структуру лечебных экстрактов насекомых не разрушить таким образом, что затрудняет высвобождение активных компонентов или проникновение их через клеточные мембраны; 2) вследствие влияния механического воздействия во время процесса дробления температура измельченных веществ может достигать 80 градусов и выше, что оказывает негативное влияние на устойчивость белковых активных компонентов лечебных экстрактов насекомых; 3) разные части лечебных экстрактов насекомых характеризуются разными степенями дробления, и, следовательно, из-за разницы в размерах частиц происходит неравномерное распределение лекарственных экстрактов насекомых и влияет на равномерность структуры продукта. Эти недостатки напрямую влияют на устойчивость активных компонентов в лекарственном составе и усвоение их организмом человека, в связи с чем лечебное действие лекарственной композиции может проявляться неполностью.
CN 1593623A (Заявка на патент Китая No. 200410049615.Х) описывает распадающуюся в ротовой полости таблетку "Tongxinluo" и способ ее приготовления. Упомянутая таблетка, распадающаяся в ротовой полости, включает по массе 15-70 частей водных экстрактов скорпиона, многоножки, эуполифага или стелеофага, пиявки и цикады, 1-12 частей спиртовых экстрактов корня женьшеня и корня пиона красного, 10-100 частей соединения включения борнеола и фармацевтические эксципиенты соответственно. Особенности приготовления указанной таблетки: для лекарственных веществ на основе трав применяется способ абсорбции макропористой смолой для удаления примесей, тогда как пять видов лекарственных экстрактов насекомых получают способом ультразвуковых колебаний, концентрируют и разделяют способом роторно-пленочного разделения.
Используя вышеупомянутый метод ультразвуковых колебаний, осуществляемый при комнатной температуре, невозможно получить некоторые из активных компонентов, потому что для этого необходима относительно высокая температура. Именно поэтому такой способ приготовления не только влияет на лечебные свойства лекарственной композиции, но и вызывает напрасный расход дорогостоящих лечебных экстрактов насекомых.
Традиционно при приготовлении Китайских лекарственных средств, известных из уровня техники, сырье для производства лекарственных экстрактов на основе насекомых обычно подвергали непосредственному дроблению, декокции водой (95-100°С), экстракции при нагревании с 60% этанолом (60°С) и солевой экстракции при нагревании (60°С) и т.д. Среди этих способов обработки экстракция при более низких температурах не позволяет выделить активные компоненты в достаточной степени, и декокция водой (95-100°С) может разрушить некоторые из активных компонентов.
В настоящее время необходимо усовершенствовать способ выделения лечебных экстрактов насекомых, известный из уровня техники, а главным образом разрабатывать новые методики выделения лечебных экстрактов насекомых, комбинирующие в себе экстракцию как при более низкой, так и при более высокой температурах, в зависимости от того, какие лекарственные вещества необходимо экстрагировать.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
После многолетних исследований изобретатель обнаружил, что низкотемпературный метод выделения активных компонентов лечебных экстрактов насекомых, таких как скорпион (Buthus martensii Karsch), многоножка (Scolopendra subspinipes mutilans L. Koch), эуполифаг или стелеофаг (Eupolyphaga sinensis Walker), пиявка (Whitmania pigra Whitman) и цикада (Cryptotympana pstulata Fabricius), весьма ограничен, далек от уровня достаточной или полной экстракции; после низкотемпературной динамической экстракции с обратным холодильником (т.е. под уменьшенным давлением при использовании вакуумной системы, для понижения температуры кипения и кипения растворителя при относительно низкой температуре, что позволяет избежать разложения активных компонентов лекарственных веществ, как при более высокой температуре, экстрагировать чувствительные к высоким температурам компоненты лекарственных веществ, уменьшить стоимость производства и загрязнение окружающей среды и сократить период производства) осадок от декокции затем подвергается экстракции при более высокой температуре. Лечебное воздействие полученных экстрактов значительно улучшено по сравнению с полученными при использовании просто низкотемпературной экстракции или непосредственного дробления, а также дозу лекарства и раздражение желудка можно снизить.
Поэтому одной из задач изобретения является обеспечение китайской лекарственной композиции для лечения кардиоваскулярных и цереброваскулярных заболеваний, обеспечение лечебных экстрактов насекомых, содержащихся в композиции, и способа приготовления композиции, который бы обладал преимуществами относительно предшествующего уровня техники.
Процесс приготовления Китайской лекарственной композиции согласно настоящему изобретению для лечения кардиоваскулярных и цереброваскулярных заболеваний включает отбор насекомых, включая скорпиона, многоножку, эуполифага или стелеофага, пиявку, цикаду, далее корня женьшеня (Рапах ginseng С.А.Меу), готового ладана (Boswellia carterii Birdw., В. Bhaw-dijiana Birdw.), корня пиона красного (Paeonia lactiflora Pall.), коры сандалового дерева душистого (Dalbergia odorifera T. Chen), коры сандалового дерева белого (Santalum album L.), борнеола и семян ziziphi spinosae (Ziziphus jujuba Mill. var. spinosa (Bunge) Hu ex H.F.Chou) согласно предписанным количествам/пропорциям, экстракция вышеупомянутых неочищенных лекарственных веществ и смешивание полученных экстрактов для формирования лекарства; причем получение экстрактов скорпиона, многоножки, эуполифага или стелеофага, пиявки и цикады включает следующие этапы: (1) дробление лечебных экстрактов насекомых на крупные частицы; (2) добавление к ним 8-12-кратного количества воды, и перемешивание при нагревании до 25-65°С и экстрагирование 1-3 раза, каждый раз по 1-5 часов, разделение экстрактов от осадка декокции; (3) добавление к осадку воды объемом в 8-12-кратном количестве к весу осадка и перемешивание при нагревании до 70-100°С и затем экстрагирование 1-3 раза, каждый раз по 1-3 часа, разделение экстрактов от осадка декокции; (4) смешивание экстрактов, полученных вышеописанным способом, концентрирование, высушивание полученных экстрактов, для получения конечных лечебных экстрактов насекомых.
Другая задача настоящего изобретения заключается в обеспечении состава Китайской лекарственной композиции, приготовленного как описано выше, в форме любой таблетки, выбранной из таблеток, распадающихся в ротовой полости, дисперсивных таблеток, шипучих таблеток, капсул, пилюль, гранул, жидких лекарств для орального приема, микропилюль, микрокапсул и спреев.
Кроме того, еще одной задачей настоящего изобретения является обеспечение способа получения лекарственных экстрактов насекомых. Указанные лекарственные экстракты насекомых включают экстракты скорпиона, многоножки, эуполифага или стелеофага, пиявки и цикады, а способ включает следующие стадии: (1) дробление лечебных экстрактов насекомых на крупные частицы; (2) добавление воды объемом в 8-12-кратном количестве к весу лечебных экстрактов в крупные частицы, перемешивание при нагревании до 25-65°С и экстрагирование 1-3 раза, каждый раз по 1-5 часов, отделение экстрактов от осадка декокции; (3) добавление к осадку воды объемом в 8-12-кратном количестве к весу осадка, перемешивание при нагревании до 70-100°С и экстрагирование 1-3 раза, каждый раз 1-3 часа, отделение экстрактов от осадка декокции; (4) смешивание, концентрирование и высушивание полученных экстрактов для получения конечных лечебных экстрактов насекомых.
В связи с этим еще одна задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы обеспечить лечебные экстракты, полученные вышеописанным методом, причем лечебные экстракты насекомых характеризуются оттенками цвета от коричнево-желтого до темно-желтого, обладают едким запахом и соленым вкусом.
Ниже следует подробное описание настоящего изобретения.
Китайская лекарственная композиция согласно настоящему изобретению включает следующие компоненты: корень женьшеня 3-10 г, пиявка 3-11 г, эуполифаг или стелеофаг 5-10 г, готовый ладан 1-5 г, корень пиона красного 3-9 г, древесина сандалового дерева душистого 1-5 г, древесина сандалового дерева белого 1-5 г, скорпион 3-9 г, цикада 3-12 г, многоножка 1-3 г, борнеол 1-7 г, и семя Ziziphi spinosae 3-10 г. Для более детального описания см. ZL 01131203.3.
Ступенчатую экстракцию пяти лекарственных экстрактов: скорпиона, многоножки, эуполифага или стелеофага, пиявки и цикады можно производить как отдельно, так и вместе. Ступенчатая экстракция указанных веществ подробно описана ниже:
Этап (1):
Указанное сырье для производства лекарственных экстрактов на основе насекомых дробят на крупные частицы размером 18-40 меш, предпочтительно 24 меш.
Этап (2):
Воду объемом в 8-12-кратном количестве, предпочтительно 10 кратном количестве, по отношению к весу сырья для производства лекарственных экстрактов на основе насекомых добавляют к крупным частицам; смесь нагревают до 25-65°С; и экстрагируют 1-3 раза, предпочтительно 2 раза, каждый раз по 1-5 часов, предпочтительно 3 часа; экстракт отделяют от осадка декокции. В некоторых методиках приготовления на этом этапе может использоваться метод низкотемпературной водной экстракции, низкотемпературной динамической экстракции или ультразвуковой экстракции и т.д. При использовании метода низкотемпературной водной экстракции предпочтительна температура экстракции около 50°С. При использовании метода низкотемпературной динамической экстракции экстракцию проводят при перемешивании и при пониженном давлении, таком как вакуум от 0,05 до 0,1 МПа, чтобы снизить температуру кипения воды, что позволяет провести экстракцию более быстро и более полно. При использовании ультразвуковой экстракции необходим надлежащий контроль выходной мощности и частоты колебаний ультразвукового устройства: подходящая выходная мощность поддерживается в диапазоне 200-10000 В, предпочтительно 250-8000 В, более предпочтительно 1000-6000 В, и еще более предпочтительно 2000-6000 В, и подходящая частота колебаний ультразвукового устройства поддерживается в пределах 20-80 кГц, предпочтительно 20-60 кГц, более предпочтительно 30-50 кГц; в лабораторных условиях можно использовать мощность 200-2000 В и частоту колебаний 20-80 кГц; тогда как в промышленности ультразвуковую экстракцию можно проводить при мощности 2000-10000 В и частоте колебаний 20-80 кГц, предпочтительно 3000-8000 В и 30-60 кГц, поддерживая температуру в желаемом диапазоне. Предпочтительной температурой экстракции является температура 30-50°С, и более предпочтительной является температура около 40°С.
Этап (3):
Воду объемом в 8-12-кратном количестве, предпочтительно 10-кратном количестве, по отношению к весу оставшейся смеси добавляют к оставшейся смеси этапа (2); смесь нагревают до 70-100°С, предпочтительно до 95°С и экстрагируют 1-3 раза, предпочтительно 2 раза, каждый раз по 1-3 часа, предпочтительно по 2 часа. Экстракт отделяют от осадка декокции.
Этап (4):
3
Полученные экстракты смешивают, концентрируют и высушивают для получения конечных указанных лекарственных экстрактов насекомых. Процесс концентрации на данном этапе выполняют при 50-60°С, чтобы сконцентрировать экстракты на прозрачном пластыре плотностью 1.05-1.10 г/см. Процесс высушивания выполняют при 50-60°С, высушивая прозрачный пластырь при пониженном давлении.
В приготовлении Китайской лекарственной композиции экстракция из корня женьшеня включает без ограничения любой из следующих методов:
1. Корень женьшеня экстрагируют с обратным холодильником 40-95% этанолом, взятом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня женьшеня 1-3 раза, каждый раз в течение 1-2 часов, экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов и осадок после рецикла этанола высушивают концентрированием или высушивают распылением для получения конечного экстракта корня женьшеня.
2. Корень женьшеня экстрагируют с обратным холодильником 40-95% этанолом, взятом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня женьшеня 1-3 раза, каждый раз в течение 1-2 часов, экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этилового спирта. Для растворения экстрактов добавляют воду, взятую в объеме 6-8 количеств по отношению к весу корня женьшеня. Раствор пропускают через предварительно обработанную макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 3-8 раз водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку промывают 40-95% этанолом, и элюент концентрируют для восстановления этанола, и высушивают при пониженном давлении или распылением для получения конечных экстрактов корня женьшеня.
3. Корень женьшеня экстрагируют с обратным холодильником 40-95% этанолом, взятым в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня женьшеня 1-3 раза, каждый раз в течение 1-2 часов, экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этилового спирта. Для растворения экстрактов добавляется вода в объеме 6-8 количеств по отношению к весу корня женьшеня. Раствор пропускают через предварительно обработанную макропористую смоляную колонку. Колонку промывают полностью 3-8 раз водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку промывают 40-95% этанолом и затем элюент пропускают через колонку, заполненную оксидом алюминия. Колонку промывают 40-80% этанолом, и элюент концентрируют для восстановления этанола, и высушивают (например, высушивают распылением) для получения конечных экстрактов корня женьшеня.
4. Корень женьшеня экстрагируют с обратным холодильником водой в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня женьшеня 1-3 раза, каждый раз в течение 1-3 часов, экстракты смешивают, фильтруют и концентрируют до объема 2-4 количеств по отношению к весу корня женьшеня. Будучи еще горячей (40-80°С), концентрированную жидкость разбавляют этанолом до получения концентрации этанола 40-90%, и оставляют раствор на 12 часов и более. Затем отбирают надосадочную жидкость и этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Для растворения экстрактов добавляют воду объемом 6-8 количеств по отношению к весу корня женьшеня. Раствор пропускают через макропористую смоляную колонку. Колонку промывают сначала водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку полностью промывают 3-8 раз 40-95% этанолом, и элюент пропускают через колонку, заполненную оксидом алюминия. Колонку полностью промывают 3-6 раз 40-80% этанолом, и элюент концентрируют для восстановления этанола, и высушивают при пониженном давлении или распылением для получения конечных экстрактов корня женьшеня.
Согласно способу приготовления Китайской лекарственной композиции, обладающей изобретательским уровнем, экстракция корня пиона красного включает без ограничения любой из следующих способов:
1. Корень пиона красного экстрагируется с обратным холодильником 40-90% этанолом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня пиона красного 1-4 раза, каждый раз в течение 1-3 часов. Экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов и осадок после рецикла этанола концентрируют и высушивают (возможно распылением) для получения конечного экстракта корня пиона красного.
2. Корень пиона красного экстрагируют с обратным холодильником 40-90% этанолом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня пиона красного 1-3 раза, каждый раз в течение 1-2 часа. Экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Для растворения экстрактов добавляют воду в объеме 6-8 количеств по отношению к весу корня пиона красного. Раствор пропускают через предварительно обработанную макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 3-8 раз водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку полностью промывают 3-8 раз 30-90% этанолом, и элюент концентрируют после восстановления этанола, и высушивают при пониженном давлении или распылением для получения конечного экстракта корня пиона красного.
3. Корень пиона красного экстрагируют с обратным холодильником 40-90% этанолом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня пиона красного 1-3 раза, каждый раз в течение 1-2 часов. Экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запах этанола. Для растворения экстрактов добавляют воду в объеме 6-8 количеств по отношению к весу корня пиона красного. Раствор пропускают через предварительно обработанную макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 3-8 раз водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку полностью промывают 3-8 раз 30-90% этанолом, и спиртовой элюент пропускают через колонку, заполненную оксидом алюминия. Колонку промывают 30-80% этанолом, и элюент концентрируют выделением этанола, и высушивают при пониженном давлении или распылением для получения конечного экстракта корня пиона красного.
4. Корень пиона красного экстрагируют с обратным холодильником водой в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня пиона красного 1-3 раза, каждый раз в течение 1-2 часов. Экстракты смешивают и концентрируют до объема 2-4 количеств по отношению к весу корня пиона красного. Будучи еще горячей (40-80°С), концентрированную жидкость разбавляют этанолом до концентрации этанола 60-85%, и оставляют раствор более чем на 12 часов. Затем отбирают надосадочную жидкость и восстанавливают этанол из экстрактов до появления запаха этанола. Для растворения экстрактов добавляют воду в объеме 6-8 количеств по отношению к весу корня пиона красного. Раствор пропускают через предварительно обработанную макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают водой 3-8 раз до обесцвечивания, и водный элюент удаляют. Затем колонку полностью промывают 3-8 раз 30-90% этанолом, и элюент пропускают через колонку, заполненную оксидом алюминия. Колонку 3-6 раз полностью промывают 30-80% этанолом, и элюент концентрируют выделением этанола, и высушивают при пониженном давлении или распылением до получения конечного экстракта корня пиона красного.
5. Корень пиона красного экстрагируют с обратным холодильником 40-90% этанолом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу корня пиона красного 1-3 раза, каждый раз в течение 1-2 часов. Экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Экстракты растворяют в 6-8 объемах воды по отношению к весу корня пиона красного и оставляют более чем на 12 часов. Отбирают надосадочную жидкость и пропускают через предварительно обработанную макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 3-8 раз водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку полностью промывают 3-8 раз 30-90% этанолом, и спиртовой элюент пропускают через колонку, заполненную оксидом алюминия. Колонку промывают 40-80% этанолом, и элюент концентрируют после восстановления этанола, и высушивают при пониженном давлении или распылением до получения конечного экстракта корня пиона красного.
В приготовлении Китайской лекарственной композиции экстракция семян Ziziphi spinosae включает без ограничения любой из следующих способов:
1. Семена Ziziphi spinosae экстрагируют с обратным холодильником 40-90% этанолом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу семян Ziziphi spinosae 1-3 раза, каждый раз по 1-3 часа. Экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов и оставшийся экстракт концентрируют при пониженном давлении и высушивают (возможно, распылением), до получения конечного экстракта семян Ziziphi spinosae.
2. Семена Ziziphi spinosae экстрагируют с обратным холодильником 40-90% этанолом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу семян Ziziphi spinosae 1-3 раза, каждый раз по 1-3 часа. Экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Для растворения экстрактов добавляли воду в объеме 6-8 количеств по отношению к весу семян Ziziphi spinosae. Раствор пропускают через предварительно обработанную макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 3-8 раз водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку полностью промывают 3-8 раз 30-90% этанолом, и элюент концентрируют после восстановления этанола и высушивают (например, распылением) до получения конечного экстракта семян Ziziphi spinosae.
3. Семена Ziziphi spinosae экстрагируют с обратным холодильником 40-90% этанолом в объеме 4-12 количеств по отношению к весу семян Ziziphi spinosae 1-3 раза, каждый раз по 1-3 часа. Экстракты смешивают и фильтруют. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Экстракты растворяют в 6-8 объемах воды по отношению к весу семян Ziziphi spinosae и оставляют более чем на 12 часов. Отбирают надосадочную жидкость и пропускают через предварительно обработанную макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 3-8 раз водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку 3-8 раз полностью промывают 30-90% этанолом, и элюент пропускают через колонку, заполненную оксидом алюминия. Колонку промывают 40-80% этанолом и элюент концентрируют после восстановления этанола и высушивают при пониженном давлении или распылением до получения конечного экстракта семян Ziziphi spinosae.
4. Семена Ziziphi spinosae экстрагируют с обратным холодильником водой в объеме 4-12 количеств по отношению к весу семян Ziziphi spinosae 1-3 раза, каждый раз в течение 1-3 часов. Экстракты смешивают и концентрируют до объема 2-4 количеств по отношению к весу семян Ziziphi spinosae. Будучи еще горячей (40-80°С), концентрированную жидкость разбавляют этанолом до достижения концентрации этанола 60-85% и полученный раствор оставляют более чем на 12 часов. Отбирают надосадочную жидкость и этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Для растворения экстрактов добавляют воду в объеме 6-8 количеств по отношению к весу семян Ziziphi spinosae. Колонку полностью промывают 6-8 раз водой до обесцвечивания и водный элюент удаляют. Затем колонку полностью промывают 3-8 раз 30-90% этанолом, и элюент пропускают через колонку, заполненную оксидом алюминия. Колонку полностью промывают 3-6 раз 30-80% этанолом, и элюент концентрируют после восстановления этанола и высушивают при пониженном давлении или распылением до получения конечного экстракта семян Ziziphi spinosae.
В приготовлении Китайской лекарственной композиции экстракция древесины сандалового дерева душистого включает без ограничения любой из следующих способов:
1. Для получения эфирного масла древесину сандалового дерева душистого подвергают перегонке с 4-15 объемами воды по отношению к весу древесины сандалового дерева душистого, в течение более чем 4 часов. Летучее эфирное масло собирают для получения конечного экстракта древесины сандалового дерева душистого.
2
2. Древесину сандалового дерева душистого подвергают сверхкритической СO экстракции, используя в качестве модификатора 70%-100% этанол в количестве 10-50% по отношению к весу древесины сандалового дерева душистого. Экстракт собирают и высушивают до получения конечного экстракта древесины сандалового дерева душистого.
3. Летучее эфирное масло экстрагируют из древесины сандалового дерева душистого петролейным эфиром, взятым в объеме 4-15 количеств по отношению к весу древесины сандалового дерева душистого 4 раза, и летучее эфирное масло собирают, получая при этом конечный экстракт древесины сандалового дерева душистого.
В приготовлении Китайской лекарственной композиции экстракция древесины сандалового дерева белого включает без ограничения любой из следующих методов:
1. Для получения летучего эфирного масла древесину сандалового дерева белого подвергают дистилляции с 4-15 объемами воды по отношению к весу древесины сандалового дерева белого, в течение более чем 4 часов. Летучее эфирное масло собирают, получая при этом конечный экстракт древесины сандалового дерева белого.
2
2. Древесину сандалового дерева белого подвергают сверхкритической СO экстракции, используя в качестве модификатора 70%-100% этанол в количестве 10-50% по отношению к весу древесины сандалового дерева белого.
Экстракт собирают и высушивают до получения конечного экстракта древесины сандалового дерева белого.
3. Летучее эфирное масло экстрагируют из древесины сандалового дерева белого петролейным эфиром, взятым в объеме 4-15 количеств по отношению к весу древесины сандалового дерева белого 4 раза, и летучее эфирное масло собирают, получая при этом конечный экстракт древесины сандалового дерева душистого.
В приготовлении Китайской лекарственной композиции экстракция подготовленного ладана включает без ограничения любой из следующих методов:
1. Для получения летучего эфирного масла подготовленный ладан подвергают дистилляции с 4-15 объемами воды по отношению к весу подготовленного ладана в течение более чем 4 часов. Летучее эфирное масло собирают, получая при этом конечный экстракт подготовленного ладана.
2. Для получения летучего эфирного масла подготовленный ладан подвергают дистилляции с 4-15 объемами воды по отношению к весу подготовленного ладана в течение более чем 4 часов. Летучее эфирное масло собирают, отходы лиофилизируют; летучее эфирное масло и лиофильно высушенные отходы являются экстрактами подготовленного ладана.
2
3. Подготовленный ладан подвергают сверхкритической СO экстракции, используя в качестве модификатора 70%-100% этанол в количестве 10-50% по отношению к весу подготовленного ладана. Экстракт собирают и высушивают до получения конечного экстракта подготовленного ладана.
4. Летучее эфирное масло экстрагируют из подготовленного ладана петролейным эфиром, взятым в объеме 4-15 количеств по отношению к весу подготовленного ладана 4 раза, и летучее эфирное масло собирают, получая при этом конечный экстракт подготовленного ладана.
5. Для получения летучего эфирного масла подготовленный ладан подвергают дистилляции с 4-15 объемами воды по отношению к весу подготовленного ладана в течение более чем 4 часов, отходы подвергают экстракции этанолом в объеме 4-15 количеств по отношению к весу отходов. Раствор этанола смешивают и концентрируют, высушивают при пониженном давлении или лиофилизируют, получая летучее эфирное масло и высушенные продукты в качестве конечных экстрактов подготовленного ладана.
При приготовлении Китайской лекарственной композиции соединение включения борнеола готовится по следующей методике: заданное количество борнеола измельчают до крупных частиц размером 60 меш; полиэтиленгликоль PEG-6000 в 1-3-кратном количестве по отношению к весу борнеола плавят при нагревании до 60-80°С, после чего добавляют порошок борнеола при интенсивном перемешивании. После охлаждения при более низкой температуре смесь измельчают в мелкий порошок, как, например, размером 60 меш, в результате получая соединение включения борнеола.
В ходе подготовки Китайской лекарственной композиции, кроме лекарственного сырья на основе насекомых, остальные семь лекарственных веществ, входящих в состав композиции, предпочтительнее экстрагировать или готовить в соответствии со следующими этапами:
- заданное количество корня женьшеня измельчают до крупных частиц и экстрагируют с обратным холодильником 70% этанолом, взятом в объеме 10 количеств по отношению к весу корня женьшеня 2 раза, каждый раз по 2 часа, температура экстракции 95°С, и экстракты смешивают. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Добавляют 10 объемов воды по отношению к весу корня женьшеня. Раствор оставляют в течение 12 часов, затем фильтруют. Фильтрат пропускают через предварительно обработанную АВ-8 макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 4 раза водой до обесцвечивания, и водный элюент удаляют. Затем колонку 5 раз полностью промывают 70% этанолом, элюент концентрируют, затем высушивают распылением до получения конечного экстракта корня женьшеня;
- заданное количество корня пиона красного измельчают до крупных частиц и экстрагируют с обратным холодильником 50% этанолом, взятым в объеме 10 количеств по отношению к весу корня пиона красного 2 раза, каждый раз по 2 часа, при температуре экстракции 95°С, и экстракты смешивают. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Добавляют 8 объемов воды по отношению к весу корня пиона красного. Раствор оставляют на 12 часов, затем фильтруют. Фильтрат пропускают через предварительно обработанную АВ-8 макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 5 раз водой до обесцвечивания, и водный элюент удаляют. Затем колонку полностью промывают 5 раз 70% этанолом, элюент концентрируют, затем высушивают распылением до получения конечного экстракта корня пиона красного;
- заданное количество семян Ziziphi spinosae измельчали до крупных частиц и экстрагируют с обратным холодильником 80% этанолом, взятым в объеме 10 количеств по отношению к весу семян Ziziphi spinosae 2 раза, каждый раз по 2 часа, при температуре экстракции 95°С, и экстракты смешивают. Этанол восстанавливают из экстрактов до появления запаха этанола. Добавляют 8 объемов воды по отношению к весу семян Ziziphi spinosae. Раствор оставляют на 12 часов, затем отфильтровывают. Фильтрат пропускают через предварительно обработанную АВ-8 макропористую смоляную колонку. Колонку полностью промывают 4 раза водой до обесцвечивания, и водный элюент удаляют. Затем колонку 5 раз полностью промывают 80% этанолом, элюент концентрируют, затем высушивают распылением до получения конечного экстракта семян Ziziphi spinosae;
- заданное количество древесины сандалового дерева душистого подвергают перегонке с водой в объеме 8 количеств по отношению к весу древесины сандалового дерева душистого в течение 6 часов для получения летучего эфирного масла;
- заданное количество древесины сандалового дерева белого подвергают перегонке с водой в объеме 8 количеств по отношению к весу древесины сандалового дерева белого в течение 4 часов для получения летучего эфирного масла;
- заданное количество подготовленного ладана подвергают перегонке с водой в объеме 8 количеств по отношению к весу подготовленного ладана в течение 6 часов, и собирают летучее эфирное масло; отходы подвергают экстракции этанолом, взятым в 6-кратном объеме по отношению к весу подготовленного ладана 2 раза, каждый раз в течение 1 часа. Спиртовые экстракты смешивают, затем концентрируют и высушивают при пониженном давлении;
- заданное количество борнеола измельчают до крупных частиц и добавляют в двойной объем расплавленного субстрата PEG-6000 по отношению к весу борнеола при интенсивном перемешивании. Смесь охлаждают при более низкой температуре, как, например, 0-20°С, и измельчают в мелкий порошок.
Для экстракции упомянутого сырья для Китайской лекарственной композиции в указанной макропористой смоляной колонке использовались макропористые смолы, выбранные из D101, ЕКА-9, DA201, DM130, WLD-3, HPD-400, HPD-450, HPD-500 и АТ-8; указанная колонка, наполненная оксидом алюминия, может быть наполнена оксидом алюминия в кислой, основной или нейтральной формах.
Для экстракции упомянутого сырья для Китайской лекарственной композиции указанные экстракты корня женьшеня содержат не меньше чем 10-60% общих сапонинов момордики корня женьшеня. Указанные экстракты корня пиона красного содержат не менее 15-70% общих сапонинов корня пиона красного. Указанные экстракты семян Ziziphi spinosae содержат не менее 10-60% общих сапонинов момордики семян Ziziphi spinosae.
Процесс экстракции согласно настоящему изобретению предполагает, что указанные древесина сандалового дерева душистого, древесина сандалового дерева белого и подготовленный ладан могут подвергать экстракции как по отдельности, так и два или три из них вместе.
Конечный продукт Китайской лекарственной композиции, полученный согласно вышеописанному способу, может быть получен в виде таблеток любой формы, таблеток, распадающихся в ротовой полости, шипучих таблеток, капсул, пилюль, гранул, растворов для перорального применения, микропиллюль, микрокапсул или спрея. Эксципиенты, включенные в композицию согласно настоящему изобретению, могут быть выбраны из любых дезинтегрирующих веществ, наполнителей, лубрикантов, адгезивов, абсорбентов, диспергаторов, ПАВ, суспензий, консервантов, красителей, антиоксидантов, суспендирующих средств, увлажнителей, солюбилизаторов или их смесей.
Для получения лекарственного сырья на основе насекомых используют насекомых, выбранных из группы, включающей скорпиона, многоножку, эуполифага или стелеофага, пиявку и цикаду. Экстракты этих пяти насекомых можно получать как вместе, так и отдельно. Этапы экстракции приведены выше в настоящем описании, и не нуждаются в повторении.
По сравнению с известным уровнем техники настоящее изобретение сочетает в себе способы низкотемпературной и высокотемпературной экстракции, что позволяет получать лекарственные экстракты насекомых с большей эффективностью. Лечебное воздействие полученных экстрактов значительно улучшено по сравнению экстрактами, полученными посредством только низкотемпературной экстракции, и тем самым значительно сократилось количество насекомых, необходимых для приготовления лекарственной композиции. Китайская лекарственная композиция согласно настоящему изобретению обладает преимуществами в обеспечении эффективного процесса приготовления, неожиданного и значительного лечебного воздействия, и необходимости меньших доз, и т.д. Из сравнительных исследований фармакодинамики было установлено, что составы композиции согласно настоящему изобретению более эффективны для лечения миокардиальной ишемии, агрегации тромбоцитов, при лечении ишемической болезни сердца, инфаркта миокарда и т.п.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ РЕАЛИЗАЦИИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Хотя в следующем ниже подробном описании способ и составы настоящего изобретения будут описаны в отношении некоторых предпочтительных вариантов реализации, должно быть понятно, что настоящее изобретение не должно быть ограничено только этими вариантами реализации.
Пример 1
Этот пример описывает особый способ получения лекарственных экстрактов насекомых, согласно настоящему изобретению, и Китайскую лекарственную композицию в виде капсул, содержащую эти экстракты.
Заданные количества: пиявки 2075 г, эуполифага или стелеофага 1375 г, сороконожки 275 г, скорпиона 1375 г и цикады 1375 г - измельчали на крупные частицы размером 24 меш. Добавляли воду в 10-кратном объеме по отношению к весу указанного лекарственного сырья на основе насекомых, смесь нагревали до 60°С, и подвергали динамической экстракции в течение 3 часов. Экстракты и отходы экстракции разделяли. К отделенным отходам добавляли воду в 8-кратном объеме, и смесь нагревали до 60°С и подвергали динамической экстракции в течение 2 часов. Экстракты и отходы экстракции снова разделяли. К отходам добавляли воду в 10-кратном объеме по отношению к весу отходов, и смесь нагревали до 95°С и проводили динамическую экстракцию в течение 2 часов.
3
Затем полученные экстракты и отходы разделяли. Еще раз добавляли к отделенным отходам экстракции воду в 8-кратном объеме по отношению к весу отходов, и смесь нагревали до 95°С, и подвергали динамической экстракции в течение 1 часа. Экстракты и отходы разделяли снова. Четыре водных экстракта смешивали и концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,20 г/см(измеренной при 40°С) при 55°С с помощью сферического вакуум-концентрационного резервуара (Метод: QN-500, изготовленный по Вэньчжоу Лихун Light Industry Machinery Co, Ltd). Прозрачный пластырь высушивали при 60°С в вакуумной сушильной печи (Метод: DGT2006, изготовленные по Chongping Hengda Instruments Manufacture Co. Ltd). Получали конечные лекарственные экстракты насекомых весом 1180 г.
Заданное количество корня женьшеня - 1100 г подвергали экстракции с обратным холодильником 70% этанолом в 10-кратном, 8-кратном и 6-кратном объеме по отношению к весу корня женьшеня соответственно; время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции равнялась 95°С. Экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов до появления запаха спирта. Добавляли воду в 10-кратном объеме по отношению к весу корня женьшеня (мл/г). Раствор оставляли на 12 часов и отфильтровывали. Фильтрат пропускали через предварительно обработанную АВ-8 макропористую смоляную колонку (изготовленную Wuxi Xuelang Chemical Equipments Co. Ltd), соотношения корня женьшеня и смолы составляло 1:2 (г/мл), а соотношение ширины колонки к ее длине составляло 1:9. Колонку полностью промывали 4-кратным объемом воды до обесцвечивания и водный элюент удаляли. Затем колонку полностью промывали 5-кратным объемом 70% этанола, и элюент концентрировали и высушивали распылением до получения очищенного экстракта корня женьшеня весом 40,5 г.
3
Заданное количество корня пиона красного - 950 г, измельчали до крупных частиц и подвергали экстракции с обратным холодильником 10-, 8-, или 6-кратным объемом 50% этанола по отношению к весу корня пиона красного соответственно, время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции - 95°С, и полученные экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов, и оставшийся раствор концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,18 г/см (измеренной при 55°С) и высушивали распылением до получения конечного экстракта корня пиона красного весом 250 г.
3
Заданное количество семян Ziziphi spinosae - 925 г измельчали до крупных частиц и подвергали экстракции с обратным холодильником 8-, 8- и 6-кратным объемом 80% этанола по отношению к весу семян Ziziphi spinosae соответственно, время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции - 95°С. Экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов, и оставшийся раствор концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,18 г/см (измеренной при 50°С) и высушивали распылением до получения конечного экстракта семян Ziziphi spinosae весом 130 г.
3
Заданные количества древесины сандалового дерева душистого (475 г) и сандалового дерева белого (450 г) подвергали перегонке с водяным паром в течение 6 часов для получения летучего эфирного масла. Получали 11 мл эфирного масла древесины сандалового дерева душистого и белого, и водные экстракты концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,18 г/см(измеренной при 50°С) и высушивали распылением до получения конечного экстракта древесины сандалового дерева душистого и белого весом 18 г.
Заданное количество подготовленного ладана (450 г) измельчали в мелкий порошок с размером частиц 60 меш.
Заданное количество борнеола (275 г) измельчали до мелких частиц и добавляли в расплавленный субстрат PEG-6000 (полиэтиленгликоль-6000, доступный из Tianjin Guangfu Fine Chemical Institution). Добавляли вышеупомянутое эфирное масло, и смесь хорошо перемешивали, выливали, охлаждали в морозильной камере и измельчали в порошок с размером частиц 60 меш. В результате получали 556 г соединения включения борнеола и эфирного масла.
Вышеупомянутые лекарственные экстракты насекомых, корня женьшеня, корня пиона красного, семян Ziziphi spinosae, древесины сандалового дерева душистого и сандалового дерева белого смешивали и гранулировали с 70% этанолом, затем добавляли порошок подготовленного ладана и соединения включения борнеола и эфирного масла, хорошо перемешивали и заполняли смесью 20000 капсул. В результате получили китайскую лекарственную композицию, приготовленную по способу согласно настоящему изобретению, которую назвали "S1".
Пример 2
Этот пример описывает особый способ получения лекарственных экстрактов насекомых согласно настоящему изобретению и Китайской лекарственной композиции в виде таблеток, содержащих эти экстракты.
3
Заданные количества пиявки (2075 г), эуполифага или стелеофага (1375 г), сороконожки (275 г), скорпиона (1375 г) и цикады (1375 г) измельчали до крупных частиц размером 24 меш. Добавляли воду в 10-, 8- и еще раз 8-кратном объеме по отношению к весу этих лекарственных экстрактов насекомых соответственно. Смесь трижды подвергали ультразвуковой экстракции (250 Вт, 40 кГц и 35°С), время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно. Водные экстракты смешивали. Добавляли воду в 10- и 8-кратном объеме по отношению к весу отходов соответственно, и смесь нагревали до 95°С, и экстрагировали в течение 2 часов и 1 часа соответственно. Полученные пять экстрактов смешивали и концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,18 г/см (измеренной при 40°С) при таких же условиях концентрации, высушивания, как и в примере 1. Прозрачный пластырь высушивали при более низкой температуре при пониженном давлении. В результате получали конечные экстракты пиявки, эуполифага или стелеофага, сороконожки, скорпиона и цикады весом 1175 г.
3
Заданное количество корня женьшеня (1100 г) подвергали экстракции с обратным холодильником 70% этанолом в 10-, 8-, 6-кратном количестве по отношению к весу корня женьшеня соответственно, время экстракции 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции 95°С. Экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов, и оставшийся раствор концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,10 г/см (измеренной при 50°С), высушивали распылением до получения спиртового экстракта корня женьшеня весом 220 г.
3
Заданное количество корня пиона красного (950 г) измельчали до крупных частиц и подвергали экстракции с обратным холодильником 10-, 8-, 6-кратным объемом воды по отношению к весу корня пиона красного соответственно, время экстракции составило 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции 99°С, экстракты смешивали и концентрировали до объема 1900 мл. Добавляли 70% этанол, и раствор оставляли на 12 часов. Отбирали надосадочную жидкость, и восстанавливали из нее этанол. Оставшийся раствор концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,10 г/см (измеренной при 50°С) и высушивали распылением до получения конечного экстракта корня пиона красного весом 230 г.
3
Заданное количество семян Ziziphi spinosae (925 г) измельчали до крупных частиц и подвергали экстракции с обратным холодильником 10-, 8- и 6-кратным объемом воды по отношению к весу семян Ziziphi spinosae соответственно, время экстракции составило 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции составила 99°. Водные экстракты смешивали и концентрировали до объема, в 2 раза большего по отношению к весу семян Ziziphi spinosae (мл/г). Будучи еще горячей (60°С), концентрированную жидкость разбавляли 80% этанолом, и раствор оставляли на 12 часов. Затем отбирали надосадочную жидкость, и восстанавливали этанол из экстрактов до появления запаха спирта. Оставшийся раствор концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,10 г/см (измеренной при 50°С) и высушивали распылением до получения конечного экстракта семян Ziziphi spinosae весом 105 г.
3
Заданные количества древесины сандалового дерева душистого (475 г) и сандалового дерева белого (450 г) подвергали перегонке с водой для получения эфирного масла в течение 6 часов. В результате получали 11 мл эфирного масла, водные экстракты концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,10 г/см (измеренной при 50°С) и высушивали распылением, до получения водных экстрактов древесины сандалового дерева душистого и сандалового дерева белого весом 18 г.
Заданное количество подготовленного ладана (450 г) измельчали в мелкий порошок.
275 г борнеола измельчали в мелкий порошок.
Вышеупомянутые лекарственные экстракты насекомых, корня женьшеня, корня пиона красного, семян Ziziphi spinosae, древесины сандалового дерева душистого и древесины сандалового дерева белого измельчали в мелкий порошок размером 80 меш, затем перемешивали с порошком подготовленного ладана и гранулировали с 70% этанолом. После высушивания растворенную в некотором количестве этанола, смесь борнеола и эфирного масла разбрызгивали в гранулированную смесь, и герметично закрывали на полчаса. Смесь прессовали в 20000 таблеток. В результате получали состав Китайской лекарственной композиции, приготовленной по способу согласно настоящему изобретению.
Пример 3
Этот пример описывает особый способ приготовления лекарственных экстрактов насекомых согласно изобретению и Китайскую лекарственную композицию в виде легких капсул, содержащих эти экстракты.
3
Заданные количества пиявки (2075 г), эуполифага или стелеофага (1375 г), сороконожки (275 г), скорпиона (1375 г) и цикады (1375 г) измельчали до крупных частиц размером 24 меш. Добавляли воду в 10-, 8- и снова 8-кратном объеме по отношению к указанному сырью для получения лекарственных экстрактов насекомых соответственно. Смесь трижды подвергали ультразвуковой экстракции (1500 Вт, 40 кГц и 40°С), время экстракции составляло 3 часа, 2 часа и 2 часа соответственно. Водные экстракты смешивали. К отходам экстракции добавляли воду в 10- и 8-кратном объеме по отношению к весу отходов, экстрагировали при 98°С, время экстракции составляло 2 часа и 1 час соответственно. Полученные пять экстрактов смешивали и концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,10 г/см (измеренной при 40°С) при таких же условиях концентрации, высушивания, как и в примере 1. Прозрачный пластырь высушивали при 55°С при пониженном давлении. В результате получали 1170 г водных экстрактов пиявки, эуполлифага или стелеофага, скорпиона, сороконожки и цикады.
Заданное количество корня женьшеня (1100 г) подвергали экстракции с обратным холодильником 70% этанолом в 10-, 8-, 6-кратном объеме по отношению к весу корня женьшеня соответственно, время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции составляла 95°С. Экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов до появления запаха спирта. Добавляли воду в 10-кратном объеме по отношению к весу корня женьшеня. Раствор оставляли на 12 часов и отфильтровывали. Фильтрат пропускали через предварительно обработанную АВ-8 макропористую смоляную колонку (изготовленную Wuxi Xuelang Chemical Instrument), соотношение корня женьшеня к смоле составляло 1:2 (г/мл), отношение ширины колонки к длине 1:9. Колонку полностью промывали водой 4 раза до обесцвечивания и водный элюент удаляли. Затем колонку полностью промывали 5 раз 70% этанолом, и элюент концентрировали и высушивали до получения очищенного экстракта корня женьшеня весом 40.5 г.
Заданное количество корня пиона красного (950 г) измельчали до крупных частиц и подвергали экстракции с обратным холодильником 10-, 8-, 6-кратным объемом 50% этанола по отношению к весу корня пиона красного соответственно, время экстракции составило 2 часа, 1,5 час и 1 час соответственно, температура экстракции - 95°С. Экстракты смешивали. Этанол восстанавливали до появления запаха спирта. Добавляли 10-кратный объем воды по отношению к весу корня пиона красного. Раствор оставляли на 12 часов и отфильтровывали. Фильтрат пропускали через предварительно обработанную АВ-8 макропористую смоляную колонку (изготовленную Wuxi Xuelang Chemical Instrument), соотношение корня женьшеня к смоле составляло 1:2,2 (г/мл), отношение ширины колонки к длине 1:8. Колонку полностью промывали 4 раза водой до обесцвечивания, водный элюент удаляли. Затем колонку полностью промывали 6 раз 70% этанолом, и элюент концентрировали и высушивали распылением, до получения очищенного экстракта корня пиона красного весом 92,5 г.
Заданное количество семян Ziziphi spinosae (925 г) измельчали до крупных частиц и подвергали экстракции с обратным холодильником 8-, 8- и 6-кратным объемом 80% этанола по отношению к весу семян Ziziphi spinosae соответственно, время экстракции составило 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции - 95°С. Экстракты смешивали. Добавляли воду в 10-кратном объеме по отношению к весу семян Ziziphi spinosae. Раствор оставляли на 12 часов и отфильтровывали. Фильтрат пропускали через предварительно обработанную D-101 макропористую смоляную колонку (изготовленную Wuxi Xuelang Chemical Instrument), соотношение семян Ziziphi spinosae к смоле составило 1:2 (г/мл), отношение ширины колонки к длине - 1:8. Колонку полностью промывали 4 раза водой до обесцвечивания, и водный элюент удаляли. Затем колонку полностью промывали 6 раз объемом 80% этанола, и элюент концентрировали и высушивали распылением до получения 32 г очищенного экстракта семян Ziziphi spinosae.
Заданные количества древесины сандалового дерева душистого (475 г), сандалового дерева белого (450 г), подготовленного ладана подвергали перегонке с водой до получения эфирного масла в течение 6 часов. В результате получали 24 мл эфирного масла древесины сандалового дерева душистого, сандалового дерева белого и подготовленного ладана.
Заданное количество борнеола 275 г измельчали в мелкий порошок.
Вышеупомянутые экстракты, эфирное мало и борнеол хорошо перемешивали и добавляли 1,9-кратное количество растительного масла по отношению к весу полученных экстрактов. Смесь хорошо перемалывали с помощью коллоидной мельницы и формовали 20000 легкорастворимых капсул. Доза для приема внутрь: 3 раза в день по 2-4 капсулы.
Пример 4
Этот пример описывает особый способ получения лекарственных экстрактов насекомых согласно изобретению и Китайской лекарственной композиции в виде пилюль, содержащих эти экстракты.
3
Заданные количества пиявки (2075 г), эуполифага или стелеофага (1375 г), сороконожки (275 г), скорпиона (1375 г) и цикады (1375 г) измельчали до крупных частиц размером 24 меш и экстрагировали раздельно. Этапы экстракции для каждого лекарственного экстракта следующее: добавляли 10-, 8-кратный объем воды по отношению к весу соответствующего вещества, температура экстракции составила 60°С, время экстракции - 3 часа и 2 часа соответственно. Экстракт отделяли от отходов экстракции. Отходы дважды подвергали экстракции: добавляли 10- и 8-кратный объем воды по отношению к весу отходов соответственно, температура экстракции составляла 98°С, время экстракции - 2 часа и 1 час соответственно. Полученные четыре водных экстракта смешивали и концентрировали на прозрачном пластыре плотностью 1,08 г/см (измеренной при 40°С) при таких же условиях концентрации, высушивания, как и в примере 1. Прозрачный пластырь высушивали при 50°С при пониженном давлении до получения водных экстрактов указанных лекарственных экстрактов насекомых. В результате получали водные экстракты пиявки, эуполифага или стелеофага, сороконожки, скорпиона и цикады весом 481 г, 262 г, 50 г, 255 г и 152 г соответственно, и общее количество лекарственных водных экстрактов насекомых составляло 1200 г.
Заданное количество корня женьшеня (1100 г) подвергали экстракции с обратным холодильником 10-, 8- и 6-кратным объемом 70% этанола по отношению к весу корня женьшеня соответственно, время экстракции составило 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции 95°С. Экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов до появления запаха спирта. Добавляли 10-кратный объем воды по отношению к весу корня женьшеня. Раствор оставляли на 12 часов и отфильтровывали. Фильтрат пропускали через предварительно обработанную АВ-8 макропористую смоляную колонку (изготовленную Wuxi Xuelang Chemical Instrument), соотношение корня женьшеня к смоле составляло 1:2 (г/мл), отношение ширины колонки к длине - 1:9. Колонку полностью промывали 4 раза водой до обесцвечивания, и водный элюент удаляли. Затем колонку полностью промывали 5 раз 70% этанолом, и элюент пропускали через глиноземную колонку (весовые пропорции корня женьшеня и глинозема 1:1), затем колонку промывали 50% этанолом, элюент концентрировали до отсутствия запаха этанола и высушивали распылением до получения очищенных экстрактов корня женьшеня весом 34,5 г.
Заданное количество корня пиона красного (950 г) измельчали до крупных частиц и подвергали экстракции с обратным холодильником 10-, 8- и 6-кратным объемом 50% этанола по отношению к весу корня пиона красного соответственно, время экстракции составляло 2 часа, 1,5 часа и 1 час соответственно, температура экстракции составляла 95°С. Экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов. Надосадочную жидкость пропускали через предварительно обработанную АВ-8 макропористую смоляную колонку, соотношение корня пиона красного к смоле составило 1:2,3 (г/мл), отношение ширины колонки к длине - 1:10. Колонку полностью промывали 5 раз водой до обесцвечивания, и водный элюент удаляли. Затем колонку полностью промывали 8 раз 50% этанолом, элюент концентрировали и высушивали распылением до получения очищенных экстрактов корня пиона красного весом 94,5 г.
Заданное количество семян Ziziphi spinosae (925 г) измельчали до крупных частиц и подвергали экстракции с обратным холодильником 8-, 8- и 6-кратным объемом 80% этанола по отношению к весу семян Ziziphi spinosae соответственно, время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, температура экстракции составляла 95°С. Экстракты смешивали. Надосадочную жидкость пропускали через предварительно подготовленную HPD-400 макропористую смоляную колонку (изготовленную Cangzhou Enbao Chemical Со. Ltd), соотношение вещества к смоле составило 1:2 (г/мл), отношение ширины колонки к длине - 1:8. Колонку полностью промывали 5 раз водой до обесцвечивания, и водный элюент удаляли. Затем колонку полностью промывали 7 раз 80% этанолом, и элюент концентрировали и высушивали распылением до получения очищенных экстрактов семян Ziziphi spinosae весом 34 г.
2
Заданное количество древесины сандалового дерева душистого (475 г), сандалового дерева белого (450 г) и подготовленного ладана (450 г) экстрагировали методом суперкритичной СО экстракции, и 95% этанол в объеме 30% по отношению к
вышеупомянутым лекарственным веществам добавляли в качестве модификатора. Экстракт собирали и в результате получали 205 г экстракта.
Заданное количество борнеола (275 г) измельчали в мелкий порошок.
Вышеупомянутые экстракты, эфирное масло и борнеол хорошо перемешивали. Субстрат PEG6000 после плавления перемешивали со смесью в отношении 1:2. Полученную смесь выдерживали при 70°С, добавляли борнеол и эфирное масло и хорошо перемешивали. Получившуюся конечную смесь по каплям сливали в жидкий парафин в качестве охлаждающего агента со скоростью 40 капель в минуту и капли собирали, удаляя жидкий парафин с помощью фильтровальной бумаги. В результате получали 200000 пилюль, масса каждой из которых составляла 27 мг. Доза для приема внутрь: 2-3 раза в день по 20-40 пилюль.
Сравнительный пример 1
Этот сравнительный пример описывает способ получения капсул Китайской лекарственной композиции, используя порошки лекарственных экстрактов насекомых.
Заданное количество пиявки (103,75 г), эуполифага или стелеофага (68,75 г), сороконожки (13,75 г), скорпиона (68,75 г), цикады (68,75 г) измельчали механически до получения 318 г порошка с размером частиц 80 меш.
Заданное количество корня женьшеня (55 г) измельчали и экстрагировали 10-, 8- и 6-кратным объемом 70% этанола по отношению к весу корня женьшеня соответственно, время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов и осадок концентрировали, высушивали распылением до получения конечного экстракта корня женьшеня весом 11 г.
Заданное количество корня пиона красного (47,5 г) измельчали и экстрагировали 10-, 8-, 6-кратным объемом 50% этанола по отношению к весу корня пиона красного соответственно, время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно. Экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов и осадок концентрировали и высушивали распылением до получения конечного экстракта корня пиона красного весом 12,8 г.
Заданное количество семян Ziziphi spinosae (46,25 г) измельчали и экстрагировали
10-, 8- и 6-кратным объемом 80% этанола по отношению к весу семян Ziziphi spinosae соответственно, время экстракции составляло 2 часа, 2 часа и 1 час соответственно, экстракты смешивали. Этанол восстанавливали из экстрактов и осадок концентрировали и высушивали распылением до получения 6,5 г конечного экстракта семян Ziziphi spinosae.
Заданные количества древесины сандалового дерева душистого (23,75 г), и древесины сандалового дерева белого (22,50 г) подвергали перегонке с водой в течение 6 часов. В результате получали эфирное масло 0,5 мл.
Заданное количество подготовленного ладана (22,50 г) измельчали в мелкий порошок с размером частиц 60 меш.
Заданное количество борнеола (275 г) измельчали на мелкие частицы и добавляли 14 г расплавленного субстрата PEG-6000 (полиэтиленгликоль-6000, из Tianjin guangfu fine chemical institution). Затем добавляли вышеупомянутое эфирное масло, и смесь хорошо перемешивали, сливали, охлаждали в морозильной камере и измельчали в порошок с размером частиц 60 меш. В результате получали 27,5 г соединения включения борнеола и эфирного масла.
Вышеупомянутые лекарственные экстракты насекомых, корня женьшеня, корня пиона красного, семян Ziziphi spinosae, древесины сандалового дерева душистого и сандалового дерева белого смешивали и гранулироввали с 70% этанолом, и затем добавляли порошок подготовленного ладана, соединений включения борнеола и эфирного масла, перемешивали хорошо и заполняли составом 1000 капсул. В результате получали продукт D1 Китайской медицинской композиции.
Сравнительный пример 2
Этот сравнительный пример описывает способ приготовления лекарственных экстрактов насекомых с помощью низкотемпературной ультразвуковой экстракции и Китайской лекарственной композиции, содержащей эти экстракты.
Заданное количество пиявок (103,75 г), эуполифага или стелеофага (68,75 г), сороконожки (13,75 г), скорпиона (68,75 г), цикады (68,75 г) измельчали в мелкий порошок с размером частиц 24 меш. Мелкие частицы помещали в резервуар для ультразвуковой экстракции, и добавляли 6-кратный объем воды по отношению к весу этих веществ. Смесь экстрагировали ультразвуком в течение 50 минут, выходная мощность и ультразвуковая частота состаляли 250 Вт, 40 кГц соответственно. Температура экстракции составляла 20°С, и экстракцию проводили 3 раза. Экстракты смешивали и отфильтровывали. Фильтрат концентрировали методом роторно-пленочного разделения при температуре 65°С, высушивали до получения водного экстракта весом 32 г.
Количество и приготовление корня женьшеня, корня пиона красного, семян Ziziphi spinosae, древесины сандалового дерева душистого, древесины сандалового дерева белого, такие же, как в примере 1.
Вышеупомянутые лекарственные экстракты насекомых, корня женьшеня, корня пиона красного, семян Ziziphi spinosae, древесины сандалового дерева душистого, древесины сандалового дерева белого смешивали и гранулировали с 70% этанолом, и затем добавляли порошок подготовленного ладана, соединений включения борнеола и эфирного масла, тщательно перемешивали и заполняли таким составом 1000 капсул. В результате получали продукт D2 Китайской медицинской композиции.
Сравнительный пример 3
Этот сравнительный пример описывает приготовление капсул Китайской лекарственной композиции, используя порошки лекарственных экстрактов насекомых.
Заданное количество пиявки (103,75 г), эуполифага или стелеофага (68,75 г), сороконожки (13,75 г), скорпиона (68,75 г), цикады (68,75 г) измельчали механически до получения 318 г порошка с размером частиц 80 меш.
Количество и приготовление корня женьшеня, корня пиона красного, семян Ziziphi spinosae, древесины сандалового дерева душистого, древесины сандалового дерева белого такие же, как в примере 1.
Вышеупомянутые лекарственные экстракты насекомых, корня женьшеня, корня пиона красного, семян Ziziphi spinosae, древесины сандалового дерева душистого, древесины сандалового дерева белого смешивали и гранулировали с 70% этанолом, и затем добавляли порошок подготовленного ладана, соединения включения борнеола и эфирного масла, тщательно перемешивали и заполняли этим составом 1000 капсул. В результате получали продукт D3 Китайской медицинской композиции.
Экспериментальная часть
Сравнительный эксперимент 1
Этот сравнительный эксперимент описывает воздействие Китайской медицинской композиции, приготовленной разными способами, на острую ишемию миокарда у крыс.
Классификация и назначение: для капсул S1, приготовленных в примере 1, доза составляет 1,2 г лекарственного сырья/кг, 0,6 г лекарственного сырья/кг и 0,3 г лекарственного сырья/кг соответственно; для капсул D1, D2, D3, приготовленных в сравнительных примерах 1-3, доза составляет 0,6 г/кг, дополнительно создавали группу фиктивного лечения и контрольную группу моделей.
Экспериментальные животные: SD крысы, чистые, 112 животных всего, половина женских и половина мужских особей, весом 220-240 г каждая, купленные у Beijing Vital River, лицензия No. SCXK(Beijing) 2002-0003.
Метод моделирования и определения модели: спустя 30 минут после последнего введения лекарства животных подвергали анестезии уретаном, снимали ЭКГ до хирургической операции. На коже делали продольный разрез около 2 см по левой среднеключичной линии, мышечный слой между 3 и 4 ребрами рассекали тупым путем, вскрывали грудную клетку и перикард, на правую сторону грудной клетки осторожно надавливали, выводя сердце на поверхность, и ниткой 0 накладывали лигатуру на переднюю нисходящую артерию (в фиктивно оперируемой группе лигатуру не накладывали) по левому краю легочной артерии и нижнему краю ушка левого предсердия на 1 мм через тонкий миокард, сердце помещали обратно в грудную полость с быстрым закрытием грудной клетки.
Свежее сердце извлекали из сердечной полости вместе с остатками крови, промывали физ. раствором. Воду впитывали фильтровальной бумагой. Сердце взвешивали после удаления экстракардиальных тканей, таких как жир и сосуды, и замораживали при -4°С в течение 1 часа. Вдоль атриовентрикулярной перегородки сверху вниз вентрикулярную мышцу нарезают параллельно на кусочки толщиной 0,1 см. После того как кусочки мышцы промыли физраствором, их помещали в 1% ТТС раствор (приготовленный из рН 7,4 фосфатного буфера), окрашивали в нагретой до 37°С водяной бане в течение 15 минут, и немедленно промывали дистиллированной водой после окрашивания для удаления излишка красителя. Инфарктные и неинфарктные области разделяли и взвешивали для расчета количества случаев инфаркта миокарда. Одновременно делали фотографии окрашенных кусочков сердечной мышцы, и применяли систему анализа изображений для исследования общей площади миокарда и области инфаркта миокарда. Характерные изображения ишемии миокарда оставляли для расчета процентного соотношения случаев инфаркта миокарда.
Статистический метод: данные эксперимента представляли средним значением ± стандартным отклонением , для запуска Т-теста использовали программное обеспечение SPSS 11.5. Т - приблизительная модель стандартного нормального распределения, как основная концепция статистики.
Экспериментальные результаты: подробные результаты отображены в таблице 1.
Анализ: сравнивая с модельной группой и D1-D3, средне- и высокодозированные группы S1 очевидно снижали процент ишемического миокарда по отношению к сердцу (Р<0.05 или Р<0.01); по сравнению с модельной группой и D1-D3, низко, средне- и высокодозированные группы S1 очевидно снижают удельный вес миокардиальной ишемии по отношению к сердцу (Р<0.05). Р является вероятностью, основной концепцией статистики, используемой для описания возможности происхождения случайных событий.
Таблица 1
Группа
Число животных
Доза, г лекарства/кг
Процентная область миокардиальной ишемии
Удельный вес ИБС
Фиктивно оперируемая группа
14
0.0±0.0
0.0±0.0
Модельная группа
14
8.8±4.9<sup>ΔΔ</sup>
13.2±3.7<sup>ΔΔ</sup>
S1 группа
14
1.20
2.7±2.2*аbc
8.2±3.2**
S1 группа
14
0.60
3.3±1.2*
8.6±3.1*
S1 группа
14
0.30
3.8±1.3*
8.7±5.1
D1 группа
14
0.60
4.5±1.3
10.7±2.7
D2 группа
14
0.60
5.2±2.0
11.2±3.3
D3 группа
14
0.60
4.9±2.1
9.8±2.3
Комментарии: Сравнивая с модельной группой *Р<0.05; **Р<0.01
Сравнивая с фактически оперируемой группой <sup>ΔΔ</sup>P<0.01
Сравнивая с D1 группой а Р<0.05
Сравнивая с D2 группой b P<0.05
Сравнивая с D3 группой с Р<0.05
Сравнительный эксперимент 2
Этот эксперимент описывает воздействие Китайской лекарственной композиции, приготовленной разными способами, на фокальную церебральную ишемию крыс.
Классификация и назначение: для капсул S1, приготовленных в примере 1, доза составляет 2,4 г лекарственного сырья/кг в день, 1,2 г лекарственного сырья/кг в день и 0,6 г лекарственного сырья/кг в день, относительно доз принимаемых человеком 4,557 г лекарственного сырья в день, например 0,076 г лекарственного сырья/кг массы тела (стандартный вес 60 кг). Для капсул D1, D2, D3, приготовленных в сравнительных примерах 1-3, доза составляет 1,2 г лекарственного сырья/кг в день соответственно, дополнительно создавали группу для фиктивного лечения и контрольную группу моделей.
Экспериментальные животные: здоровые Wistar крысы, стерильные, из 140 особей пополам женских и мужских, весом 160-180 г каждая, купленные у Beijing Vital River, лицензия No. SCXK(Beijing) 2002-0003, сертификат качества №0048343.
Метод моделирования и определения модели: после анестезии хлоралгидратом крыс фиксировали в положении на боку. Кроме группы, подвергаемой фиктивной операции, все группы оперировали следующим образом: в середине между глазной щелью и наружным слуховым проходом вырезали маленькое отверстие, височную мышцу обнажали, закрепляли зажимами, для того чтобы разделить ее на 2 слоя, осторожно, стараясь не повредить лицевой нерв. Большую часть плоской кости обнажали, затем просверливали отверстие на 2 мм ниже суставной части скуловой дуги и плоской кости. Под операционным микроскопом открывали краниальное окно около 2 мм в диаметре с использованием маленького прямого зажима, чтобы выделить мозговую артерию. Капали 10 мл 50% раствора трихлорида железа на маленькие кусочки фильтровальной бумаги, и бумагу помещали на мозговую артерию. Примерно через 30 минут артерия становилась темной, фильтровальную бумага удаляли, и окружающие ткани промывали физраствором. Крыс содержали в клетке после послойного ушивания раны. Группу, оперированную фиктивно, подвергали тем же воздействиям, кроме воздействия трихлорида железа. Через 24 часа после операции дренировали сонную артерию, кровь из сонной артерии сливали, и мозг обезглавленных животных вынимали, включая обонятельный центр, мозжечок и ствол мозга. Корону разрезали на 5 частей 4 разрезами. Первый разрез производили в средней точке между передним полюсом мозга и зрительным перекрестом, второй разрез - по зрительному перекресту, третий - по артерии мягкой оболочки мозга, четвертый - между артерией мягкой оболочки мозга и затылочной долей мозга. Участки мозга окрашивали красным тетразолием (ТТС). После окрашивания здоровые ткани приобретали красный цвет, инфарктные - белый. Каждую область мозга переносили на алюминиевую фольгу однородной плотности, и зоны инфаркта осторожно отделяли. Процентным соотношением массы инфарктных тканей по отношению ко всему мозгу и половине мозга (с хирургической стороны) определяли масштаб инфаркта (%).
Результаты эксперимента: мозг обезглавленных крыс вынимали через 24 часа после операции, окрашивали ТТС. Области инфаркта взвешивали и сравнивали. Подробные результаты представлены в таблице 2.
Таблица 2
Группа
Доза
Число крыс
Процент области инфаркта на половине мозга, %
Процент инфаркта мозга во всем мозге, %
Фиктивно оперируемая группа
-
10
0±0
0±0
Модельная группа
-
10
9.02±2.01<sup>ΔΔ</sup>
4.44±1.03<sup>ΔΔ</sup>
S1 группа
2.4 г/кг
10
3.63±1.87**abc
2.23±1.10**
S1 группа
1.2 г/кг
10
5.81±2.60*
2.98±1.21*
S1 группа
0.6 г/кг
10
7.15±1.85*
3.55±0.98*
D1 группа
1.2 г/кг
10
6.44±1.23
3.42±0.83
D2 группа
1.2 г/кг
10
5.33±1.10
2.89±0.94
D3 группа
1.2 г/кг
10
6.52±2.12
3.22±1.02
Комментарии: Сравнивая с модельной группой *Р<0.05; **Р<0.01
Сравнивая с фиктивно оперируемой группой <sup>ΔΔ</sup>P<0.01
Сравнивая с D1 группой а Р<0.05
Сравнивая с D2 группой b P<0.05
Сравнивая с D3 группой с Р<0.05