Зараженность Ixodes persulcatus Schulze (аcari: Ixodidae) возбудителями болезни Лайма в Карелии

Труды Карельского научного центра РАН Выпуск 13. Петрозаводск, 2008. С. 41-44

ЗАРАЖЕННОСТЬ IXODES PERSULCATUS SCHULZE (ACARI: IXODIDAE) ВОЗБУДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНИ ЛАЙМА В КАРЕЛИИ

С. В. БУГМЫРИН 1, Л. Ю. РОМАНОВА 2, Л. А. БЕСПЯТОВА 1, Л. А. БУРЕНКОВА 2, Ю. С. КОРОТКОВ 2, Е. П. ИЕШКО 1,

Г. Г. КАРГАНОВА 2

1 Институт биологии Карельского научного центра РАН

2 ГУ Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М. П. Чумакова РАМН

Приводятся данные по зараженности таежного клеща боррелиями в 2008 г. в четырех районах Республики Карелия. Методом ПЦР-анализа обследовано 733 экз. имаго голодных клещей I. persulcatus, собранных с растительности на флаг. Зараженность боррелиями (Borrelia burgdorferi sensu lato) клещей в среднем по Карелии составила 18,3 ± 3,4%. Наиболее напряженная ситуация складывается в Кондопожском районе республики, где высокая численность клещей сочетается с высокой встречаемостью у них боррелий.

S. V BUGMYRIN, L. Yu. ROMANOVA, L. A. BESPYATOVA, L. A. BURENKOVA, Yu. S. KOROTKOV, E. P IESHKO, G. G. KARGANOVA. SIMULTANEOUS INFECTION OF IXODES PERSULCATUS WITH AGENTS OF LIME’S DISEASE IN THE KARELIA

The data on the Borrelia burgdorferi sensu lato prevalence on the taiga tick in Karelia are received. The tick imagoes (733 spm.) are investigated by the PCR method. The prevalence Borrelia on ticks in the Karelia has made 18.3 ± 3.4 %. The most intense situation develops in the Kondopoga region, where high number of ticks is combined with high prevalence of Borrelia.

Ключевые слова: иксодовые клещи, Borrelia burgdorferi, ПЦР.

Болезнь Лайма (иксодовый клещевой бор-релиоз) является широко распространенным трансмиссивным заболеванием,возбудителем которого являются спирохеты Borrelia burgdorferi sensu lato. К настоящему времени известно двенадцать видов боррелий, принадлежащих к комплексу Borrelia burgdorferi sensu lato, пять из которых распространены в России: B. burgdorferi sensu stricto, B. afzelii, B. garinii,

B. valaisiana и B. lusitaniae (Коренберг и др., 2002). На европейской территории ведущую роль в циркуляции этих видов спирохет в природе играют иксодовые клещи рода Ixodes.

Республика Карелия относится к числу эндемичных территорий по клещевому борре-лиозу (КБ) и занимает одно из ведущих мест в

России по этому заболеванию (Государственный доклад, 1993-2008).

Главными факторами, определяющими напряженность очага КБ, являются численность основных переносчиков (иксодовых клещей) и их зараженность боррелиями. Целью настоящего исследования было оценить степень зараженности голодных имаго иксодовых клещей из разных районов Карелии.

Материал и методы

Материалом для исследований послужили сборы иксодовых клещей, выполненные в мае -июне 2008 г. в четырех административных районах Республики Карелия: Прионежском (рис. 1:

Рис. 1. Карта-схема района исследования, точками указаны места сборов иксодовых клещей; обозначения в тексте

точки 2, 4, 5, 6), Кондопожском (рис. 1: точка 1), Олонецком (рис. 1: точка 7, 8) и Медвежьегорском (рис. 1: точки: 3, 9, 10). Изучение видового состава и численности иксодовых клещей проводили методом их сбора с растительности на флаг. Всего пройдено около 80 флаго-км. Прижизненное определение вида клещей - визуально с помощью бинокуляра (Дубинина и др., 2007).

На зараженность методом ПЦР-анализа обследовано 733 экз. имаго голодных клещей I. persulcatus. Предварительно клещей промывали в 96%- м этиловом спирте и дважды в физиологическом растворе со смесью антибиотиков (пенициллин, стрептомицин). Клещей растирали в отдельных ступках с добавлением 200 мкл среды 199 на Эрле со смесью антибиотиков. Для последующего выделения РНК боррелий 587 клещевых суспензий группировали в пулы от 2 до 5 особей в каждом, 146 экз. исследовали индивидуально.

Выделение нуклеиновых кислот проводили с помощью комплекта реагентов «РИБО-сорб» («АмплиСенс», Россия)» и «Комплекта для выделения РНК/ДНК из сыворотки или плазмы крови» («Литех», Россия). Для реакции обратной транскрипции использовали набор случайных гексонуклеотидов («Синтол», Россия), обратную транскриптазу M-MLV и буфер фирмы «Promega», согласно предложенному фирмой протоколу.

При постановке ПЦР для определения комплиментарной рибосомальной 16S РНК ДНК боррелий комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato использовали пару праймеров: LD1, LD2 (Marconi, 1992).

Результаты и обсуждение

В Карелии обитает 6 видов иксодовых клещей: Ixodes persulcatus P. Sch., I. ricinus L.,

0

I. apronophorus P Sch., I. trianguliceps Bir., I. lividus Koch., I. uriae White (Бобровских, 1989). Эпидемиологическое значение имеют два вида с пастбищным типом паразитирования: таежный клещ I. persulcatus и европейский лесной I. ricinus - основные векторы клещевого энцефалита и боррелиоза на Северо-Западе России (Коренберг и др., 2002). Также имеются данные, свидетельствующие о зараженности боррелиями типичного широко распространенного паразита мелких млекопитающих I. trianguliceps (Горелова и др., 1996).

В 2008 г. во всех районах в сборах был отмечен только один вид - I. persulcatus, численность которого варьировала от 1 до 29,5 экз. на флаго-км (табл.). Таежный клещ является более эффективным и опасным переносчиком клещевого боррелиоза, чем I. ricinus (Алексеев, 1993).

Зараженность клещей боррелиями (Borrelia burgdorferi sensu lato) в 2008 г. в среднем по Ка-

релии составила 18,3 ± 3,4%. Боррелии не были обнаружены только на периферии ареала: севере Медвежьегорского района (табл.). Невысокая зараженность клещей (4,5%) отмечена в Ботаническом саду г. Петрозаводска. В остальных районах встречаемость боррелий в клещах была достаточно высокой - 12-21%. Наиболее напряженная ситуация складывается в Кондопожском районе республики, где высокая численность клещей сочетается с высокой встречаемостью у них боррелий. Численность зараженных клещей в этом районе составляла 6,4 экз. на флаго-км.

По данным Республиканского центра гигиены и эпидемиологии (Государственный доклад, 1993-2008) зараженность боррелиями клещей, снятых с людей и доставленных из природы, за период с 2002 по 2007 г. не опускалась ниже 8% и в среднем составила 14,2% (рис. 2). Высокий уровень зараженности

Численность и зараженность боррелиями имаго иксодовых клещей в 2008 г. в Карелии

№ точки Численность Количество Зараженность

Район I. persulcatus, экз. на флаго-км обследованных клещей клещей боррелиями, %

1 Кондопожский р-н, д. Гомсельга 29,5 303 21 ,б ± б,1

2 Прионежский р-н , г. Петрозаводск (Ботанический сад) 7,3 22 4,5 ± 4,4

3 Медвежьегорский р-н, о-ва Кижского архипелага 12,8 180 20,0 ± б,8

4 Прионежский р-н, д. Педасельга 14,2 б5 1б,7 ± 8,8

Б Прионежский р-н, с. Шелтозеро 5,8

б Прионежский р-н, с. Ладва 4,2 38 18,4 ± б,3

7 Олонецкий р-н, п. Видлица 2,3 22 12,5 ± б,7

8 Олонецкий р-н, п. Нурмалица 1,0

g Медвежьегорский р-н, п. Паданы 13,9 58 0

10 Медвежьегорский р-н, д. Юккогуба 2,2 18 0

Примечание. № точки - в соответствии с рисунком.

Т 20

<D

" 18 І

§

16 е2 О О

14 I

Он

12 Я

10 S

<D

5

4- 8 л

- 6

- 4

- 2

с:

о

Рис. 2. Динамика заболеваемости населения КБ и численности иксодовых клещей в Карелии (Г осударственный доклад, 1993-2008):

1 - количество случаев заболевания человека КБ

0

клещей боррелиями сохранялся в годы как с низкой, так и с высокой численностью основного переносчика - таежного клеща (рис. 2). Основными резервуарными хозяевами боррелий служат различные виды мелких млекопитающих и птиц (Коренберг и др., 2002; Ковалевский и др., 2004; Gern et al., 1998). Высокая численность этих животных, а также широкий круг потенциальных переносчиков (Hubalek et al., 1998) определяют устойчивость функционирования очага КБ.

Работа выполнена при финансовой поддержке ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям научно-технологического комплекса России на 2007-2012 годы» (№ 02.512.11.2171) и фонда РФФИ (№ 08-04-98822-р_север_а; 08-04-90720-моб_ст).

Литература

Алексеев А. Н., 1993. Система клещ - возбудитель и ее эмерджентные свойства. СПб.: Зоол. ин-т РАН. 203 с.

Бобровских Т. К., 1989. Иксодовые клещи Карелии. Петрозаводск: Карельский филиал АН СССР. 85 с.

Горелова Н. Б., Коренберг Э. И., Ковалевский Ю. А. и др., 1996. Изоляция боррелий от клеща Ixodes trianguliceps (Ixodidae) и возможное значение этого вида в эпизоотологии иксодовых клещевых

боррелиозов // Паразитология. Т. 30, вып. 1.

С. 13-18.

Государственный доклад о состоянии окружающей природной среды Республики Карелия 1992-2007 гг., 1993-2008. Петрозаводск.

Дубинина Е. В., Волцит О. В., Алексеев А. Н., 2007. Упрощенный способ прижизненного различия двух видов клещей рода Ixodes в симпатрических очагах смешанных инфекций // РЭТ-инфо. Июнь, № 2. С.24-27

Ковалевский Ю. В., КоренбергЭ. И., Горелова Н. Б., 2004. Многолетняя динамика эпизоотического процесса природных очагов иксодовых клещевых боррелиозов в горнотаежных лесах Среднего Урала // Паразитология. Т. 38, вып. 2. C. 105-120.

Коренберг Э. И., Горелова Н. Б., Ковалевский Ю. В., 2002. Основные черты природной очаговости клещевых боррелиозов в России // Паразитология. Т. 36, вып. 3. С. 177-187.

Gern L., Estrada Pena A., Frandsen F. et al., 1998. European reservoir hosts of Borrelia burgdorferi sensu lato // Zentralblatt fur Bakteriologie, Mikrobiologie und Hygiene. A. 287, N 3. P. 196-204.

HubalekZ., Halouzka J., Juricova Z., 1998. Investigation of haematophagous arthropods for borreliae -summarized data, 1988-1996 // Folia Parasitologia. Vol. 45, N 1. Р. 67-72.

Marconi R. T., Garon C. F., 1992. Development of polymerase chain reaction primer sets for diagnosis of Lyme disease and for species-specific identification of Lyme disease isolates by 16S rRNA signature nucleotide analysis // Journal of Clinical Microbiology. Vol. 30, N 11. P. 2830-2834.