Композиции и способы для повышения или усиления трансдукции векторов для генной терапии и для удаления или снижения иммуноглобулинов

1. Способ лечения субъекта, нуждающегося в лечении заболевания, вызванного потерей функции или активности белка, включающий: (a) введение данному субъекту рекомбинантного вирусного вектора, содержащего гетерологичный полинуклеотид, кодирующий белок или пептид, который обеспечивает или дополняет функцию или активность белка; и (b) введение данному субъекту такого количества протеазы или гликозидазы, которое эффективно для разрушения или расщепления и/или ингибирования или снижения эффекторной функции антител, связывающихся с данным рекомбинантным вирусным вектором и/или белком или пептидом, кодируемым гетерологичным полинуклеотидом.
2. Способ лечения субъекта, нуждающегося в лечении заболевания, вызванного приростом функции, активности или экспрессии белка, включающий: (a) введение данному субъекту рекомбинантного вирусного вектора, содержащего гетерологичный полинуклеотид, из которого транскрибируется нуклеиновая кислота, которая ингибирует, снижает или уменьшает степень прироста функции, активности или экспрессии данного белка; и (b) введение данному субъекту протеазы или гликозидазы, эффективной для разрушения или расщепления и/или ингибирования или снижения эффекторной функции антител, связывающихся с данным рекомбинантным вирусным вектором.
3. Способ лечения субъекта, нуждающегося в лечении заболевания, вызванного потерей функции или активности белка, включающий: (a) введение данному субъекту протеазы или гликозидазы, эффективной для разрушения или расщепления и/или ингибирования или снижения эффекторной функции антител, связывающихся с вирусным вектором; и (b) введение данному субъекту рекомбинантного вирусного вектора, содержащего гетерологичный полинуклеотид, кодирующий белок или пептид, который обеспечивает или дополняет функцию или активность данного белка.
4. Способ лечения субъекта, нуждающегося в лечении заболевания, вызванного приростом функции, активности или экспрессии белка, включающий: (a) введение данному субъекту протеазы или гликозидазы, эффективной для разрушения или расщепления и/или ингибирования или снижения эффекторной функции антител, связывающихся с вирусным вектором; и (b) введение данному субъекту рекомбинантного вирусного вектора, содержащего гетерологичный полинуклеотид, из которого транскрибируется нуклеиновая кислота, которая ингибирует, снижает или уменьшает степень прироста функции, активности или экспрессии данного белка.
5. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 90 дней после выполнения стадии (a).
6. Способ по п. 1, при этом данная протеаза включает цистеиновую протеазу или тиоловую протеазу.
7. Способ по п. 1, при этом данная протеаза включает протеазу из Streptococcus pyogenes, Streptococcus equi или Mycoplasma canis.
8. Способ по п. 1, при этом данная протеаза включает IdeS или ее модифицированный вариант, приведенный в какой-либо из SEQ ID NO: 3-18, 23 или 48.
9. Способ по п. 1, при этом данная гликозидаза включает эндогликозидазу.
10. Способ по п. 9, при этом данная эндогликозидаза содержит последовательность, приведенную в какой-либо из SEQ ID NO: 44-47.
11. Способ по п. 1, при этом данная протеаза или гликозидаза разрушает или расщепляет и/или ингибирует или снижает эффекторную функцию человеческих антител.
12. Способ по п. 1, при этом данный вирусный вектор включает лентивирусный вектор, аденовирусный вектор или аденоассоциированный вирусный (AAV) вектор.
13. Способ по п. 12, при этом данный лентивирусный вектор включает белки оболочки, с которыми связываются антитела.
14. Способ по п. 12, при этом данный AAV-вектор включает белки капсида, с которыми связываются антитела.
15. Способ по п. 12, при этом данный AAV-вектор включает капсидные белки VP1, VP2 и/или VP3, с которыми связываются антитела.
16. Способ по п. 12, при этом данный AAV-вектор содержит капсидный белок VP1, VP2 и/или VP3, последовательность которого на 60% и более идентична последовательности капсидного белка VP1, VP2 и/или VP3, выбранного из группы, состоящей из капсидных белков AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV3B, AAV-2i8, Rh10, Rh74, SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2 VP1, VP2 и/или VP3.
17. Способ по п. 12, при этом данный AAV-вектор содержит капсидный белок VP1, VP2 и/или VP3, последовательность которого на 100% идентична последовательности капсидного белка VP1, VP2 и/или VP3, выбранного из группы, состоящей из капсидных белков AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV3B, AAV-2i8, Rh10, Rh74, SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2 VP1, VP2 и/или VP3.
18. Способ по п. 1, при этом у данного субъекта имеются антитела, которые связываются с указанным вирусным вектором.
19. Способ по п. 1, при этом у данного субъекта отсутствуют антитела, которые связываются с указанным вирусным вектором.
20. Способ по п. 1, при этом у данного субъекта имеются антитела, которые связываются с белком или пептидом, кодируемым гетерологичным полинуклеотидом.
21. Способ по п. 1, при этом данные антитела включают IgG, IgM, IgA, IgD и/или IgE.
22. Способ по п. 1, дополнительно включающий определение наличия, количественного содержания или эффекторной функции связывающих вирусный вектор антител, присутствующих у данного субъекта, перед выполнением стадии (а), после выполнения стадии (а), но перед выполнением стадии (b) и/или после выполнения стадий (а) и (b).
23. Способ по п. 1, дополнительно включающий анализ биологического образца от данного субъекта на наличие, содержание или эффекторную функцию связывающих вирусный вектор антител, присутствующих в данном образце, перед выполнением стадии (а), после выполнения стадии (а), но перед выполнением стадии (b) и/или после выполнения стадий (а) и (b).
24. Способ по п. 23, при этом биологический образец от субъекта представляет собой продукт крови.
25. Способ по п. 1, при этом данный способ приводит к снижению на 20-50%, 50-75%, 75-90%, 90-95% или 95% и более антител, связывающихся с вирусным вектором.
26. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:100000, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 100 000 частей буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
27. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:50000, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 50 000 частей буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
28. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:10000, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 10 000 частей буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
29. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:1000, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 1 000 частей буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
30. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:100, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 100 частях буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
31. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:10, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 10 частях буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
32. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:5, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 5 частях буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
33. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:4, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 4 частях буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
34. Способ по п. 23, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:3, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 3 частях буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
35. Способ по п. 1, при этом данные антитела, связывающиеся с вирусным вектором, присутствующие в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляют менее 1:2, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 2 частях буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
36. Способ по п. 1, при этом доля антител, связывающихся с вирусным вектором, присутствующих в биологическом образце или продукте крови от данного субъекта, составляет менее 1:1, причем 1 часть данного биологического образца или продукта крови, разведенная в 1 части буфера, вызывает 50%-ю нейтрализацию вирусного вектора.
37. Способ по п. 1, дополнительно включающий определение наличия или количественного содержания антител, связывающихся с полипептидом или пептидом, кодируемым данным гетерологичным полинуклеотидом, после выполнения стадии (a), но перед выполнением стадии (b) и/или после выполнения стадий (a) и (b).
38. Способ по п. 2, дополнительно включающий определение наличия или количественного содержания антител, связывающихся с данной нуклеиновой кислотой, после выполнения стадии (a), но перед выполнением стадии (b) и/или после выполнения стадий (a) и (b).
39. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 60 дней до или после стадии (a).
40. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 45 дней до или после стадии (a).
41. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 30 дней до или после стадии (a).
42. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 21 дня до или после стадии (a).
43. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 14 дней до или после стадии (a).
44. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 7 дней до или после стадии (a).
45. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 72 часов до или после стадии (a).
46. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 48 часов до или после стадии (a).
47. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 24 часов до или после стадии (a).
48. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 12 часов до или после стадии (a).
49. Способ по п. 1, при этом стадия (b) выполняется в пределах 6 часов до или после стадии (a).
50. Способ по п. 1, при этом субъект страдает заболеванием легких (напр., муковисцидозом), нарушением свертываемости крови (напр., гемофилией A либо гемофилией B с ингибирующими антителами или без них), талассемией, заболеванием крови (напр., анемией), болезнью Альцгеймера, болезнью Паркинсона, болезнью Хантингтона, боковым амиотрофическим склерозом (ALS), эпилепсией, лизосомной болезнью накопления (напр., аспартилглюкозаминурией, болезнью Баттена, поздним инфантильным восковидным липофусцинозом нейронов 2-го типа (CLN2), цистинозом, болезнью Фабри, болезнью Гоше I, II или III типа, болезнью накопления гликогена II (болезнью Помпе), GM2-ганглиозидозом I типа (болезнью Тея-Сакса), GM2-ганглиозидозом II типа (болезнью Сандхоффа), муколипидозом I-го (сиалидозом I или II типа), II (I-клеточной болезнью), III (псевдо-болезнью Гурлера) или IV типа, болезнью накопления мукополисахаридов (болезнью Гурлера или ее вариантом, Хантера, Санфилиппо типа A, B, C, D, Моркио типа A или B, болезнью Марото-Лами или Слая), болезнью Ниманна-Пика типа A/B, C1 или C2, болезнью Шиндлера типа I или II, наследственным ангионевротическим отеком (HAE), болезнью накопления меди или железа (напр., болезнью Вильсона или болезнью Менкеса), недостаточностью лизосомальной кислой липазы, неврологическим или нейродегенеративным заболеванием, раком, диабетом 1-го или 2-го типа, недостаточностью аденозиндезаминазы, метаболическим дефектом (напр., болезнью накопления гликогена), заболеванием твердых органов (напр., головного мозга, печени, почек, сердца) либо инфекционным вирусным (напр., гепатитом B или C, ВИЧ и т.п.), бактериальным или грибковым заболеванием.
51. Способ по п. 1, при этом субъект страдает нарушением свертываемости крови.
52. Способ по п. 1, при этом субъект страдает гемофилией A, гемофилией A с ингибирующими антителами, гемофилией B, гемофилией B с ингибирующими антителами, недостаточностью какого-либо фактора свертывания крови: VII, VIII, IX, X, XI, V, XII, II, фактора фон Виллебранда либо комбинированной недостаточностью FV/FVIII, талассемией, недостаточностью эпоксидоредуктазы C1 витамина K или недостаточностью гамма-карбоксилазы.
53. Способ по п. 1, при этом заболевание представляет собой анемию, кровотечение, связанное с травмой, повреждением, тромбозом, тромбоцитопенией, инсультом, коагулопатией, диссеминированным внутрисосудистым свертыванием (DIC); чрезмерную антикоагуляцию в связи с гепарином, низкомолекулярным гепарином, пентасахаридом, варфарином, низкомолекулярными антитромботическими средствами (напр., ингибиторами FXa) или патологией тромбоцитов типа синдрома Бернара-Сулье, тромбастении Гланцманна или недостаточности пула накопления.
54. Способ по п. 1, при этом гетерологичный полинуклеотид кодирует белок, выбранный из группы, состоящей из инсулина, глюкагона, гормона роста (GH), паратиреоидного гормона (PTH), рилизинг-фактора гормона роста (GRF), фолликулостимулирующего гормона (FSH), лютеинизирующего гормона (LH), хорионического гонадотропина человека (hCG), фактора роста сосудистого эндотелия (VEGF), ангиопоэтина, ангиостатина, колониестимулирующего фактора гранулоцитов (GCSF), эритропоэтина (EPO), фактора роста соединительной ткани (CTGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF), кислого фактора роста фибробластов (aFGF), эпидермального фактора роста (EGF), трансформирующего фактора роста-α (TGF-α), тромбоцитарного фактора роста (PDGF), инсулиноподобных факторов роста I и II (IGF-I и IGF-II), TGF-β, активинов, ингибинов, костного морфогенного белка (BMP), фактора роста нервов (NGF), нейротрофического фактора головного мозга (BDNF), нейротрофинов NT-3 и NT4/5, цилиарного нейротрофического фактора (CNTF), нейротрофического фактора из линии глиальных клеток (GDNF), неуртурина, агрина, нетрина-1 и нетрина-2, фактора роста гепатоцитов (HGF), эфринов, ноггина, белка sonic hedgehog и тирозингидроксилазы.
55. Способ по п. 1, при этом гетерологичный полинуклеотид кодирует белок, выбранный из группы, состоящей из тромбопоэтина (TPO), интерлейкинов (от IL-1 до IL-36), белкового хемоаттрактанта моноцитов, ингибирующего фактора лейкемии, колониестимулирующего фактора гранулоцитов-макрофагов, лиганда Fas, факторов некроза опухолей α и β, интерферонов α, β и γ фактора стволовых клеток, лиганда flk-2/flt3, IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, химерных иммуноглобулинов, гуманизированных антител, одноцепочечных антител, Т-клеточных рецепторов, химерных Т-клеточных рецепторов, одноцепочечных Т-клеточных рецепторов, молекул MHC класса I и класса II.
56. Способ по п. 1, при этом гетерологичный полинуклеотид кодирует CFTR (трансмембранный регуляторный белок муковисцидоза), фактор свертывания крови (фактор XIII, фактор IX, фактор VIII, фактор X, фактор VII, фактор VIIa, белок C и т.п.), активатор функции факторов свертывания крови, антитело, специфичный для пигментного эпителия сетчатки белок в 65 кДа (RPE65), эритропоэтин, рецептор LDL, липопротеинлипазу, орнитинтранскарбамилазу, β-глобин, α-глобин, спектрин, α-антитрипсин, аденозиндезаминазу (ADA), переносчик металлов (ATP7A или ATP7), сульфамидазу, фермент, участвующий в лизосомной болезни накопления (ARSA), гипоксантин-гуанинфосфорибозилтрансферазу, β-25-глюкоцереброзидазу, сфингомиелиназу, лизосомальную гексозаминидазу, дегидрогеназу разветвленных кетокислот, гормон, фактор роста, инсулиноподобный фактор роста 1 или 2, тромбоцитарный фактор роста, эпидермальный фактор роста, фактор роста нервов, нейротрофический фактор 3 или 4, нейротрофический фактор мозга, глиальный фактор роста, трансформирующий фактор роста α или β, цитокин, α-интерферон, β-интерферон, γ-интерферон, интерлейкин-2, интерлейкин-4, интерлейкин-12, колониестимулирующий фактор гранулоцитов-макрофагов, лимфотоксин, продукт суицидного гена, тимидинкиназу вируса простого герпеса, цитозиндезаминазу, дифтерийный токсин, цитохром P450, дезоксицитидинкиназу, фактор некроза опухолей, белок лекарственной устойчивости, белок-супрессор опухолей (напр., p53, Rb, Wt-1, NF1, Гиппеля - Линдау (VHL), палочковидный белок аденоматозного полипоза (APC)), пептид с иммуномодулирующими свойствами, толерогенный или иммуногенный пептид или белок Tregitope или hCDR1, инсулин, глюкокиназу, гуанилатциклазу 2D (LCA-GUCY2D), белок-1 Rab escort (хороидеремия), LCA 5 (LCA-леберцилин), орнитин-аминотрансферазу кетокислот (дугообразная атрофия), ретиношизин-1 (X-связанный ретиношизис), USH1C (синдром Ашера 1C), ГТФазу X-связанного пигментного ретинита (XLRP), MERTK (AR-формы пигментного ретинита), DFNB1 (коннексин-26, глухота), ACHM 2, 3 или 4 (ахроматопсия), PKD-1 или PKD-2 (поликистоз почек), TPP1, CLN2, сульфатазу, N-ацетилглюкозамин-1-фосфаттрансферазу, катепсин A, GM2-AP, NPC1, VPC2, белок-активатор сфинголипидов, одну или несколько нуклеаз типа цинковых пальцев для редактирования генома либо одну или несколько донорных последовательностей, используемых в качестве матриц для репарации при редактировании генома.
57. Способ по п. 2, при этом данный гетерологичный полинуклеотид кодирует ингибирующую нуклеиновую кислоту.
58. Способ по п. 57, при этом данная ингибирующая нуклеиновая кислота выбра-на из группы, состоящей из киРНК, антисмысловой молекулы, миРНК, РНКи, рибозимов и кшРНК.
v
2
59. Способ по п. 57, при этом данная ингибирующая нуклеиновая кислота связывается с геном, транскриптом гена или транскриптом гена, связанного с болезнью полинуклеотидных повторов, выбранным из группы, состоящей из гена хантингтина (HTT), гена, связанного с дентаторубропаллидолуисной атрофией (атрофина 1, ATN1), андрогенового рецептора на Х-хромосоме при спинобульбарной мышечной атрофии, атаксина-1, -2, -3 и -7 человека, потенциал-зависимого кальциевого канала Ca2.1 P/Q (CACNA1A), TATA-связывающего белка, противоположной цепи атаксина-8 (ATXN8OS), β-изоформы регуляторной субъединицы B в 55 кДа сериновой/треониновой протеинфосфатазы 2A при спиноцеребеллярной атаксии (тип 1, 2, 3, 6, 7, 8, 12, 17), FMR1 (умственной отсталости-1 при ломкой X) при синдроме ломкой X-хромосомы, FMR1 (умственной отсталости-1 при ломкой X) при синдроме связанного с ломкой X-хромосомой тремора/атаксии, FMR1 (умственной отсталости-2 при ломкой X) или 2-го представителя семейства AF4/FMR2 при умственной отсталости типа ломкой XE; протеинкиназы миотонина (MT-PK) при миотонической дистрофии; фратаксина при атаксии Фридрейха; мутантного гена супероксиддисмутазы 1 (SOD1) при боковом амиотрофическом склерозе; гена, участвующего в патогенезе болезни Паркинсона и/или болезни Альцгеймера; аполипопротеина B (APOB) и пропротеинконвертазы субтилизин/кексин типа 9 (PCSK9) при гиперхолестеринемии; Tat ВИЧ, гена трансактиватора транскрипции вируса иммунодефицита человека при ВИЧ-инфекции; TAR ВИЧ, гена элемента ответа трансактиватора вируса иммунодефицита человека при ВИЧ-инфекции; рецептора CC-хемокинов (CCR5) при ВИЧ-инфекции; белка нуклеокапсида вируса саркомы Рауса (RSV) при инфекции RSV; специфичной для печени микроРНК (miR-122) при инфицировании вирусом гепатита C; p53 при острой почечной недостаточности, вызванной острым повреждением почек или задержкой функции трансплантата почки или повреждением почек; протеинкиназы N3(PKN3) на поздних стадиях рецидивирующих или метастатических солидных злокачественных опухолей; LMP2, также известного как β-субъединица протеасом типа 9 (PSMB 9), при метастатической меланоме; LMP7, также известного как β-субъединица протеасом типа 8 (PSMB 8), при метастатической меланоме; MECL1, также известного как β-субъединица протеасом типа 10 (PSMB 10), при метастатической меланоме; фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) при солидных опухолях; белка веретена кинезина при солидных опухолях; супрессора апоптоза B-клеточной CLL/лимфомы (BCL-2) при хронической миелоидной лейкемии; рибонуклеотидредуктазы М2 (RRM2) при солидных опухолях; фурина при солидных опухолях; киназы-1 типа polo (PLK1) при опухолях печени; диацилглицерин-ацилтрансферазы 1 (DGAT1) при инфицировании гепатитом C; β-катенина при семейном аденоматозном полипозе; β-адренорецептора при глаукоме; RTP801/Redd1, также известного как белок транскрипта 4, индуцируемый повреждением ДНК, при диабетическом макулярном отеке (DME) или возрастной дегенерации желтого пятна; рецептора I фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR1) при возрастной дегенерации желтого пятна или хориоидальной неоваскуляризации; каспазы-2 при неартеритной ишемической зрительной нейропатии; мутантного белка N17K кератина 6A при врожденной пахионихии; генома/последовательностей генов вируса гриппа A при инфицировании гриппом; генома/последовательностей генов коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома (SARS) при инфицировании SARS; генома/последовательностей генов респираторно-синцитиального вируса при респираторно-синцитиальной вирусной инфекции; генома/последовательностей генов филовируса Эбола при инфекции Эбола; генома/последовательностей генов вируса гепатита B и C при инфицировании гепатитом B и C; генома/последовательностей генов вируса простого герпеса (HSV) при инфекции HSV; генома/последовательностей генов коксакивируса B3 при инфицировании вирусом Коксаки B3; глушения патогенного аллеля гена (аллелеспецифичного глушения) типа торсина A (TOR1A) при первичной дистонии, специфичного для аллелей класса I и HLA при трансплантации; и мутантного гена родопсина (RHO) при аутосомно-доминантном наследственном пигментном ретините (adRP).
60. Способ по п. 1, при этом белок, кодируемый гетерологичным полинуклеотидом, включает нуклеазу для редактирования генов.
61. Способ по п. 60, при этом нуклеаза для редактирования генов включает нуклеазу типа цинковых пальцев (ZFN) или эффекторную нуклеазу типа активатора транскрипции (TALEN).
62. Способ по п. 61, при этом нуклеаза для редактирования генов включает функциональную CRISPR-Cas9 типа II.
63. Способ по п. 1, при этом стадия (a) и/или стадия (b) выполняется два или несколько раз.
64. Способ по п. 1, при этом субъектом является человек.
65. Упаковка, в которой помещаются:
(a) рекомбинантный вирусный вектор, содержащий гетерологичный полинуклеотид, который кодирует белок или пептид;
(b) протеаза или гликозидаза, которая разрушает или расщепляет антитела; и
(c) этикетка с инструкциями по выполнению способа по п. 1, причем (a) и (b) находятся в отдельных контейнерах или же в одном и том же контейнере.
66. Упаковка, в которой помещаются:
(a) рекомбинантный вирусный вектор, содержащий гетерологичный полинуклеотид, из которого транскрибируется нуклеиновая кислота, которая ингибирует, уменьшает или снижает экспрессию белка;
(b) протеаза или гликозидаза, которая разрушает или расщепляет антитела; и
(c) этикетка с инструкциями по выполнению способа по п. 1, причем (a) и (b) находятся в отдельных контейнерах или же в одном и том же контейнере.
67. Способ лечения заболевания с помощью вектора для генной терапии, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества полипептида фермента, разрушающего G иммуноглобулин.