ГЛИКОМОДИФИЦИРОВАННЫЙ ПРЕДСЕРДНЫЙ НАТРИЙУРЕТИЧЕСКИЙ ПЕПТИД

1. Модифицированный пептид, в котором по меньшей мере одно сахарное вещество связано непосредственно через гликозидную связь или через линкерную структуру по меньшей мере с одним пептидом hANP, или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество связано непосредственно через гликозидную связь или через линкерную структуру по меньшей мере с одним из N-конца пептида hANP, C-конца пептида hANP и боковой цепи по меньшей мере одной аминокислоты, входящей в состав пептида.
3. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где пептид hANP представляет собой hANP(1-28), hANP(2-28), hANP(3-28), hANP(1-27), hANP (2-27) или hANP (3-27).
4. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество выбрано по меньшей мере из одного типа моносахарида, дисахарида, трисахарида и гликозидной цепи из 4 или более моносахаридов, связанных через гликозидные связи, и когда множество сахарных веществ содержится в одной молекуле, сахарные вещества могут быть одинаковыми или отличающимися друг от друга.
5. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество является гликозидной цепью из 4 или более моносахаридов, соединенных через гликозидные связи.
6. Модифицированный пептид по п. 5 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество является полученной из гликопротеина N-связанной гликозидной цепью или O-связанной гликозидной цепью, или соответствующей измененной гликозидной цепью.
7. Модифицированный пептид по п. 6 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество является N-связанной гликозидной цепью, включающей структуру гликозидной цепи, представленную следующей формулой, или гликозидную цепь, измененную на восстанавливающем конце:
[Формула 1]
где Gxx является GlcNAc, Glc или Man (в дальнейшем гликозидные цепи, имеющие представленную выше структуру, именуются как "AG(5)", "AG(5-Glc)" и "AG(5-Man)", соответственно, в зависимости от типа Gxx), и "O/N-L" обозначает связывание с линкерной структурой или пептидом hANP через O-гликозидную связь или N-гликозидную связь.
8. Модифицированный пептид по п. 7 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество является гликозидной цепью, включающей структуру гликозидной цепи, представленной следующей формулой:
[Формула 2]
где Gxx является GlcNAc, Glc или Man (в дальнейшем гликозидные цепи, имеющие представленную выше структуру, именуются как "AG(7)", "AG(7-Glc)" и "AG(7-Man)", соответственно, в зависимости от типа Gxx), и "O/N-L" обозначает связывание с линкерной структурой или пептидом hANP через O-гликозидную связь или N-гликозидную связь.
9. Модифицированный пептид по п. 8 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество является гликозидной цепью, включающей структуру гликозидной цепи, представленную следующей формулой:
[Формула 3]
где Gxx является GlcNAc, Glc или Man (в дальнейшем гликозидные цепи, имеющие представленную выше структуру, именуются как "AG(9)", "AG(9-Glc)" и "AG(9-Man)", соответственно, в зависимости от типа Gxx), и "O/N-L" обозначает связывание с линкерной структурой или пептидом hANP через O-гликозидную связь или N-гликозидную связь.
10. Модифицированный пептид по п. 9 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество является гликозидной цепью, включающей структуру гликозидной цепи, представленной следующей формулой:
[Формула 4]
где Gxx является GlcNAc, Glc или Man (в дальнейшем гликозидные цепи, имеющие представленную выше структуру, именуются как "SG", "SG(Glc)" и "SG(Man)", соответственно, в зависимости от типа Gxx), и "O/N-L" обозначает связывание с линкерной структурой или пептидом hANP через O-гликозидную связь или N-гликозидную связь.
11. Модифицированный пептид по любому из пп. 7-10 или его фармацевтически приемлемая соль, где в сахарном веществе Gxx является GlcNAc.
12. Модифицированный пептид по п. 11 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарным веществом является SG.
13. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где 10 или меньше сахарных веществ связано с одним пептидом hANP.
14. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где 1, 2 или 3 сахарных вещества связаны с одним пептидом hANP.
15. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где каждая молекула модифицированного пептида содержит двухвалентный, или с более высокой валентностью, пептид hANP.
16. Модифицированный пептид по п. 3 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество связано через линкерную структуру с пептидом hANP, и линкерная структура является химической структурой, которая имеет связывающую цепь из 3 или более атомов и связана по меньшей мере по одному положению с восстанавливающим концом сахарного вещества через гликозидную связь, и связана по меньшей мере по одному положению с пептидом hANP.
17. Модифицированный пептид по п. 16 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество связано с N-концом и/или с C-концом пептида hANP через линкерную структуру.
18. Модифицированный пептид по п. 17 или его фармацевтически приемлемая соль, где линкерная структура является структурой, имеющей связывающую цепь из 15 или меньше атомов.
19. Модифицированный пептид по п. 18 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид является SG-hANP(1-28) (соединением 2-1), hANP(1-28)-SG (соединением 2-2), SG-hANP(1-28)-SG (соединением 2-7), AG(9)-hANP(1-28) (соединением 2-10), SG-триазол-hANP(1-28) (соединением 2-12), SG-тиоацетамид-hANP(1-28) (соединением 2-25) или AG(5)-hANP(1-28) (соединением 2-26), или получен из любого из этих модифицированных пептидов путем замены сахарного вещества на SG, SG(Glc), SG(Man), AG(5), AG(5-Glc), AG(5-Man), AG(7), AG(7-Glc), AG(7-Man), AG(9), AG(9-Glc), AG(9-Man) или GlcNAc и/или путем замены пептида hANP на hANP(1-28), hANP(2-28), hANP(3-28), hANP(1-27), hANP(2-27) или hANP(3-27).
20. Модифицированный пептид по п. 16 или его фармацевтически приемлемая соль, где линкерная структура включает по меньшей мере одну структуру, выбранную из полиоксиалкиленовой цепи, аминокислоты и олигопептидной цепи, состоящей из 2 или более аминокислот.
21. Модифицированный пептид по п. 20 или его фармацевтически приемлемая соль, где полиоксиалкиленовая цепь, аминокислота и/или олигопептидная цепь, содержащаяся в линкерной структуре, связана через амидную связь с N-концом и/или C-концом пептида hANP.
22. Модифицированный пептид по п. 21 или его фармацевтически приемлемая соль, где полиоксиалкиленовой цепью является ПЭГ.
23. Модифицированный пептид по п. 21 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид является SG-ПЭГ(3)-(SG-)Asn-hANP(1-28) (соединением 2-16), AG(9)-(AG(9)-)Asn-ПЭГ(3)-hANP(1-28) (соединением 2-21), AG(7)-(AG(7)-)Asn-ПЭГ(3)-hANP(1-28) (соединением 2-22), SG-ПЭГ(3)-hANP(1-28)-ПЭГ(3)-SG (соединением 2-24), SG-(SG-)Asn-ПЭГ(11)-hANP(1-28) (соединением 2-27), SG-(SG-)Asn-ПЭГ(11)-ПЭГ(11)-hANP(1-28) (соединением 2-28), SG-ПЭГ(3)-hANP(1-28) (соединением 2-29), SG-ПЭГ(11)-hANP(1-28) (соединением 2-30), SG-*(SG-)Gln-Mal-ПЭГ(3)-hANP(1-28) (соединением 2-31), SG-(SG-)Gln-ПЭГ(3)-Mal-hANP(1-28) (соединением 2-32), SG-(SG-)Asn-(Ser-Gly)3-hANP(1-28) (соединением 2-36) или SG-(SG-)Asn-Gly6-hANP(1-28) (соединением 2-37), или получен из любого из этих модифицированных пептидов путем замены сахарного вещества на SG, SG(Glc), SG(Man), AG(5), AG(5-Glc), AG(5-Man), AG(7), AG(7-Glc), AG(7-Man), AG(9), AG(9-Glc), AG(9-Man) или GlcNAc и/или путем замены пептида hANP на hANP(1-28), hANP(2-28), hANP(3-28), hANP(1-27), hANP (2-27) или hANP (3-27).
24. Модифицированный пептид по п. 20 или его фармацевтически приемлемая соль, где линкерная структура включает по меньшей мере одну аминокислоту, имеющую функциональную группу на боковой цепи, выбранную из аминокислоты, имеющей аминогруппу на боковой цепи, аминокислоту, имеющей SH на боковой цепи, аминокислоты, имеющей карбоксильную группу на боковой цепи, аминокислоты, имеющей гидроксильную группу на боковой цепи, и аминокислоты, имеющей фенол на боковой цепи, и связана по боковой цепи аминокислоты, имеющей функциональную группу на боковой цепи, с сахарным веществом или пептидом hANP.
25. Модифицированный пептид по п. 24 или его фармацевтически приемлемая соль, где линкерная структура включает по меньшей мере одну аминокислоту, имеющую аминогруппу на боковой цепи, и имеет структуру следующей общей формулы (C), в котором сахарное вещество связано с боковой цепью аминокислоты, имеющей аминогруппу на боковой цепи:
[Формула 5]
где GLY обозначает сахарное вещество; Lg обозначает структуру на стороне гликозидной цепи в линкерной структуре и может быть линейным или иметь две или более боковых цепей; GLY и L связаны через O- или N-гликозидную связь; в том случае, если Lg разветвлен, количество GLY, равное количеству концов боковых цепей, может быть связано с ним; и N-(AA) обозначает атом азота, полученный из аминогруппы боковой цепи аминокислоты, имеющей аминогруппу на боковой цепи.
26. Модифицированный пептид по п. 25 или его фармацевтически приемлемая соль, где аминогруппа боковой цепи и α-аминогруппа аминокислоты, имеющей аминогруппу на боковой цепи, образует амидные связи с α-карбоксильными группами других аминокислот.
27. Модифицированный пептид по п. 25 или его фармацевтически приемлемая соль, где аминокислотой, имеющей аминогруппу на боковой цепи, является Lys.
28. Модифицированный пептид по п. 27 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид является SG-(SG-)Lys-Gly-hANP(1-28) (соединением 2-14), [(SG-)Cys-Gly]3-hANP(1-28) (соединением 2-15), SG-Mal-(SG-Mal-)Lys-[SG-Mal-(SG-Mal)Lys-]Lys-ПЭГ(3)-hANP(1-28) (соединением 2-19), [SG2-Mal-(SG2-Mal-)Lys-[SG2-Mal-(SG2-Mal-)-Lys-]Lys-ПЭГ(3)-hANP(1-28) (соединением 2-20), SG-Mal-(SG-Mal-)Lys-hANP(1-28) (соединением 2-33), SG-тиоацетамид-(SG-тиоацетамид-)Lys-ПЭГ-(3)-hANP(1-28) (соединением 2-34) или SG-(SG-)Lys-ПЭГ(3)-hANP(1-28) (соединением 2-35), или получен из любого из этих модифицированных пептидов путем замены сахарного вещества на SG, SG(Glc), SG(Man), AG(5), AG(5-Glc), AG(5-Man), AG(7), AG(7-Glc), AG(7-Man), AG(9), AG(9-Glc), AG(9-Man) или GlcNAc и/или путем замены пептида hANP на hANP(1-28), hANP(2-28), hANP(3-28), hANP(1-27), hANP(2-27) или hANP(3-27).
29. Модифицированный пептид по п. 24 или его фармацевтически приемлемая соль, где линкерная структура включает по меньшей мере одну аминокислоту, имеющую SH группу на боковой цепи, и имеет структуру следующей общей формулы, в которой сахарное вещество связано с боковой цепью аминокислоты, имеющей SH группу на боковой цепи:
[Формула 6]
где GLY обозначает сахарное вещество; Lg обозначает структуру на стороне гликозидной цепи в линкерной структуре и может быть линейным или иметь две или более боковых цепей; GLY и L связаны через O- или N-гликозидную связь; в том случае, если Lg разветвлен, количество GLY, равное количеству концов боковых цепей, может быть связанно с ним; и S обозначает атом серы, полученный из боковой цепи SH группы аминокислоты, имеющей SH группу на боковой цепи.
30. Модифицированный пептид по п. 29 или его фармацевтически приемлемая соль, где аминокислотой, имеющей SH группу на боковой цепи, является Cys.
5
2
5
31. Модифицированный пептид по п. 30 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид является [(SG-)Cys-Gly]-hANP(1-28) (соединением 2-17), [(SG-)Cys-Gly]-hANP(1-28) (соединением 2-18) или SG-Mal-(SG-Mal-)Lys-[SG-Mal-(SG-Mal-)Lys-]Lys-ПЭГ(11)-hANP(1-28) (соединением 2-23), или получен из любого из этих модифицированных пептидов путем замены сахарного вещества на SG, SG(Glc), SG(Man), AG(5), AG(5-Glc), AG(5-Man), AG(7), AG(7-Glc), AG(7-Man), AG(9), AG(9-Glc), AG(9-Man) или GlcNAc и/или путем замены пептида hANP на hANP(1-28), hANP(2-28), hANP(3-28), hANP(1-27), hANP(2-27) или hANP(3-27).
32. Модифицированный пептид по п. 24 или его фармацевтически приемлемая соль, где линкерная структура включает по меньшей мере одну аминокислоту, имеющую карбоксильную группу на боковой цепи, и имеет структуру следующей общей формулы, в которой сахарное вещество связано с боковой цепью аминокислоты, имеющей карбоксильную группу на боковой цепи:
[Формула 7]
где GLY обозначает сахарное вещество; Lg обозначает структуру на стороне гликозидной цепи в линкерной структуре и может быть линейным или иметь две или более боковых цепей; GLY и L связаны через O- или N-гликозидную связь; в том случае, если Lg разветвлен, количество GLY, равное количеству концов боковых цепей, может быть связанно с ним; и CO обозначает CO из боковой цепи аминокислоты, имеющей карбоксильную группу на боковой цепи.
33. Модифицированный пептид по п. 32 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество связано через N-гликозидную связь с карбоксильной группой боковой цепи и с α-карбоксильной группой аминокислоты, имеющей карбоксильную группу на боковой цепи, и связано с другой линкерной структурой или пептидом hANP через α-аминогруппу указанной аминокислоты.
34. Модифицированный пептид по п. 32 или его фармацевтически приемлемая соль, где аминокислотой, имеющей карбоксильную группу на боковой цепи, является Glu, Gln, Asp или Asn.
35. Модифицированный пептид по п. 34 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид является (SG-)Asn-hANP(1-28) (соединением 2-3), (SG-)Asn-hANP(2-28) (соединением 2-4), (SG-)Asn-hANP(3-28) (соединением 2-8), SG-(SG-)Asn-hANP(1-28) (соединением 2-9) или SG-(SG-)Asn-ПЭГ(3)-hANP(1-28) (соединением 2-13), или получен из любого из этих модифицированных пептидов путем замены сахарного вещества на SG, SG(Glc), SG(Man), AG(5), AG(5-Glc), AG(5-Man), AG(7), AG(7-Glc), AG(7-Man), AG(9), AG(9-Glc), AG(9-Man) или GlcNAc и/или путем замены пептида hANP на hANP(1-28), hANP(2-28), hANP(3-28), hANP(1-27), hANP(2-27) или hANP(3-27).
36. Модифицированный пептид по п. 24 или его фармацевтически приемлемая соль, где линкерная структура включает по меньшей мере одну аминокислоту, имеющую фенол на боковой цепи, и имеет структуру следующей общей формулы, в которой сахарное вещество связано с боковой цепью аминокислоты, имеющей фенол на боковой цепи:
[Формула 8]
где GLY обозначает сахарное вещество; Lg обозначает структуру на стороне гликозидной цепи в линкерной структуре и может быть линейным или иметь две или более боковых цепей; GLY и L связаны через O- или N-гликозидную связь; в том случае, если Lg разветвлен, количество GLY, равное количеству концов боковых цепей, может быть связанно с ним; и фенольная группа обозначает фенольную группу из боковой цепи аминокислоты, имеющей фенольную группу на боковой цепи.
37. Модифицированный пептид по п. 36 или его фармацевтически приемлемая соль, где аминокислотой, имеющей фенольную группу на боковой цепи, является Tyr.
38. Модифицированный пептид по п. 37 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид является hANP(1-27)-(SG-)Tyr (соединением 2-6) или получен из модифицированного пептида путем замены сахарного вещества на SG, SG(Glc), SG(Man), AG(5), AG(5-Glc), AG(5-Man), AG(7), AG(7-Glc), AG(7-Man), AG(9), AG(9-Glc), AG(9-Man) или GlcNAc и/или путем замены пептида hANP на hANP(1-28), hANP(2-28), hANP(3-28), hANP(1-27), hANP(2-27) или hANP(3-27).
39. Модифицированный пептид по п. 24 или его фармацевтически приемлемая соль, где линкерная структура включает по меньшей мере одну аминокислоту, имеющую гидроксильную группу на боковой цепи, и имеет структуру следующей общей формулы, в которой сахарное вещество связано через O-гликозидную связь с боковой цепью аминокислоты, имеющей гидроксильную группу на боковой цепи:
[Формула 9]
где GLY обозначает сахарное вещество; и O обозначает атом кислорода из гидроксильной группы боковой цепи аминокислоты, имеющей гидроксильную группу на боковой цепи.
40. Модифицированный пептид по п. 39 или его фармацевтически приемлемая соль, где аминокислотой, имеющей гидроксильную группу на боковой цепи, является Ser.
41. Модифицированный пептид по п. 40 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид является (SG-)Ser-hANP(2-28) (соединением 2-5) или получен из модифицированного пептида путем замены сахарного вещества на SG, SG(Glc), SG(Man), AG(5), AG(5-Glc), AG(5-Man), AG(7), AG(7-Glc), AG(7-Man), AG(9), AG(9-Glc), AG(9-Man) или GlcNAc и/или путем замены пептида hANP на hANP(1-28), hANP(2-28), hANP(3-28), hANP(1-27), hANP(2-27) или hANP(3-27).
42. Модифицированный пептид по любому из пп. 16-41 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид содержит одну или две молекулы SG в качестве сахарного вещества и один hANP(1-28) (SEQ ID NO:1) в качестве пептида hANP, и SG связан с N-концом hANP(1-28) через линкерную структуру, имеющую связывающую цепь из 10 или меньше атомов.
43. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид имеет структуру, представленную формулой одного из следующих соединений 2-1, 2-3, 2-10, 2-11, 2-12, 2-13, 2-14, 2-15, 2-16, 2-25, 2-26, 2-27, 2-29 или 2-30:
[Формула 10]
(Соединение 2-1)
[Формула 11]
(Соединение 2-3)
[Формула 12]
(Соединение 2-10)
[Формула 13]
(Соединение 2-11)
[Формула 14]
(Соединение 2-12)
[Формула 15]
(Соединение 2-13)
[Формула 16]
(Соединение 2-14)
[Формула 17]
(Соединение 2-15)
[Формула 18]
(Соединение 2-16)
[Формула 19]
(Соединение 2-25)
[Формула 20]
(Соединение 2-26)
[Формула 21]
(Соединение 2-27)
[Формула 22]
(Соединение 2-29)
[Формула 23]
(Соединение 2-30)
где hANP представляет собой hANP(1-28), состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1, и связан по N-концу аминокислотной последовательности с линкерной структурой через амидную связь.
44. Соль модифицированного пептида по п. 42 или 43, где фармацевтически приемлемая соль является трифторацетатом или ацетатом.
45. Модифицированный пептид по п. 3 или его фармацевтически приемлемая соль, где сахарное вещество связано с боковой цепью аминокислоты в пептиде hANP, и связанная аминокислота является аминокислотой, отличной от аминокислот в аминокислотных положениях 7-23 в SEQ ID NO:1, содержащейся в пептиде hANP.
46. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид или его фармацевтически приемлемая соль демонстрируют увеличенное время существования в крови по сравнению с немодифицированным hANP(1-28) и сохраняют цГМФ повышающую активность.
47. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид или его фармацевтически приемлемая соль обладают устойчивостью к расщеплению пептида hANP нейтральной эндопептидазой.
48. Модифицированный пептид по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где модифицированный пептид или его фармацевтически приемлемая соль демонстрируют в 3 или больше раз более высокую растворимость в воде, чем немодифицированный hANP(1-28).
49. Лекарственное средство, включающее модифицированный пептид по любому из пп. 1-48 или его фармацевтически приемлемую соль.
50. Лекарственное средство по п. 49, где лекарственное средство является средством для лечения или уменьшения тяжести сердечно-сосудистого заболевания.
51. Способ лечения или уменьшения тяжести сердечно-сосудистого заболевания, включающий введение эффективного количества модифицированного пептида по любому из пп. 1-48 или его фармацевтически приемлемой соли.
52. Применение модифицированного пептида по любому из пп. 1-48 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения или уменьшения тяжести сердечно-сосудистого заболевания.
53. Способ получения модифицированного пептида по любому из пп. 1-48, включающий стадию связывания пептида hANP, сахарного вещества и, в случае необходимости, линкерной молекулы и акцепторного соединения.
54. Способ по п. 53, дополнительно включающий стадию переноса гликозидной цепи на GlcNAc соединение, Glc соединение или Man соединение при помощи Endo-M или соответствующего мутантного фермента.