СПОСОБ ЭКСПРЕССИИ

1. Способ получения белка посредством микроорганизма, содержащий стадии:
(a) введение в микроорганизм первой экспрессионной конструкции, которая кодирует белок;
(b) введение в микроорганизм второй экспрессионной конструкции, которая кодирует вспомогательную протеазу, которая отличается от белка и которая содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 50% идентична аминокислотной последовательности, обозначенной как SEQ ID NO.1, где вспомогательная протеаза имеет протеолитическую активность;
(c) экспрессию белка и вспомогательной протеазы в микроорганизме.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что белок естественным образом не присутствует в микроорганизме, и/или вспомогательная протеаза естественным образом не присутствует в микроорганизме.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что вспомогательная протеаза замещает по меньшей мере одну кодируемую хромосомой протеазу в микроорганизме, или где вспомогательная протеаза экспрессируется в микроорганизме в дополнение к кодируемым хромосомой протеазам.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что вспомогательная протеаза замещает в микроорганизме по меньшей мере одну кодируемую хромосомой протеазу, которая содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности, указанной как SEQ ID NO.2.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что экспрессия белка усиливается посредством экспрессии вспомогательной протеазы.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что белком является фермент, особенно протеаза, амилаза, целлюлаза, гемицеллюлаза, маннаназа, танназа, ксиланаза, ксантаназа, ксилоглюканаза, β-глюкозидаза, пектиназа, каррагиназа, пергидролаза, оксидаза, оксидоредуктаза или липаза.
7. Способ по одному из пп.1-6, отличающийся тем, что микроорганизмом является бактерия, предпочтительно выбранная из группы родов Escherichia, Klebsiella, Burkholderia, Bacillus, Staphylococcus, Corynebakterium, Arthrobacter, Streptomyces, Stenotrophomonas, Pseudomonas и Vibrio.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что микроорганизм выбирается из группы Escherichia coli, Klebsiella planticola, Burkholderia glumae. Bacillus licheniformis, Bacillus lentus. Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis. Bacillus alcalophilus, Bacillus globigii, Bacillus gibsonii, Bacillus pumilus, Staphylococcus camosus, Corynebacterium glutamicum, Arthrobacter oxidans, Streptomyces lividans, Streptomyces coelicolor, Stenotrophomonas maltophilia и Vibrio metschnikovii.
9. Микроорганизм, получаемый способом, содержащим стадии:
(a) введение в микроорганизм первой экспрессионной конструкции, которая кодирует белок;
(b) введение в микроорганизм второй экспрессионной конструкции, которая кодирует вспомогательную протеазу, которая отличается от белка и которая содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 50% идентична аминокислотной последовательности, обозначенной как SEQ ID NO.1, где вспомогательная протеаза имеет протеолитическую активность.
10. Микроорганизм по п.9, отличающийся тем, что:
(a) белок естественным образом не присутствует в микроорганизме, и/или
(b) вспомогательная протеаза естественным образом не присутствует в микроорганизме, и/или
(c) вспомогательная протеаза замещает по меньшей мере одну кодируемую хромосомой протеазу в микроорганизме, или где вспомогательная протеаза экспрессируется в микроорганизме в дополнение к кодируемым хромосомой протеазам, и/или
(d) экспрессия вспомогательной протеазы усиливает экспрессию белка, и/или
(e) микроорганизмом является бактерия, предпочтительно выбранная из группы родов Escherichia, Klebsiella, Burkholderia, Bacillus, Staphylococcus, Corynebakterium, Arthrobacter, Streptomyces, Stenotrophomonas, Pseudomonas и Vibrio, более предпочтительно выбранная из группы Escherichia coli, Klebsiella planticola, Burkholderia glumae, Bacillus licheniformis, Bacillus lentus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis, Bacillus alcalophilus, Bacillus globigii, Bacillus gibsonii, Bacillus pumilus, Staphylococcus camosus, Corynebacterium glutamicum, Arthrobacter oxidans, Streptomyces lividans, Streptomyces coelicolor, Stenotrophomonas maltophilia и Vibrio metschnikovii.
11. Применение микроорганизма по п.9 или 10 для получения белка, особенно фермента.