СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОЖОГОВ РОГОВИЦЫ
METHOD OF TREATING CORNEAL BURNS

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакотерапии глазных болезней, и может быть использовано для консервативного лечения ожогов роговицы.
Предшествующий уровень
Одним из наиболее тяжелых травматических повреждений органа зрения является ожог роговицы. Распространенность ожогов роговицы зависит от степени развития государства и производства, и составляет от 11,5 до 22,1% всех травм органа зрения [Sharma, Namrata, Manpreet Kaur, Tushar Agarwal, Virender Singh Sangwan and Rasik B Vajpayee. Treatment of acute ocular chemical burns. Survey of ophthalmology. 2019; 63(2): 214-235]. Более 40% пострадавших от тяжелых ожогов становятся инвалидами 1-2 групп по зрению [Pargament JM, Armenia J, Nerad JA. Physical and chemical injuries to eyes and eyelids. // Clin Dermatol. 2015;33920:234-237. Черныш В.Ф., Бойко Э.В. Ожоги глаз. Состояние проблемы и новые подходы. 2-е изд. доп. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2017. Куликов А.Н., Черныш В.Ф., Чурашов С.В. О новой классификации ожогов глаз. //Вестник офтальмологии. 2020; 2:134-142. doi.org/10.17116/oftalma2020136021134].
Согласно опубликованным в 2020 году клиническим рекомендациям по лечению ожогов глаз, всем пациентам с первых дней после ожога рекомендовано местное применение глюкокортикостероидов, антибактериальных и/или антисептических средств, препаратов, способствующих регенерации (Декспантенол), антиоксидантных средств и стимуляторов репарации тканей (Метилэтилпиридинол, Солкосерил, депротеинизированный гемодериват крови телят). М-холинолитики рекомендуются пациентам с выраженным роговичным синдромом и/или явлениями циклита. С третьего дня после ожога средней и тяжелой степени с угрозой изъязвления к лечению добавляются инстилляции и/или внутривенные инъекции ингибиторов фибринолиза. В случае повышения внутриглазного давления, пациентам местно назначаются противоглаукомные средства для снижения внутриглазного давления до целевого уровня [http://avo-portal.ru/documents/fkr/odobr/ожоги.pdf].
Важным фактором, приводящим к усугублению повреждения тканей при ожогах, является окислительный стресс. Сразу после воздействия щелочи на ткань роговицы усиливается синтез активных форм кислорода (АФК), антиоксидантная защита роговицы не справляется с их деактивацией, возникает избыток свободных радикалов. В свою очередь, свободные радикалы повреждают мембранные структуры клеток, структурные и функциональные белки, в итоге, клетки роговицы гибнут, происходит утяжеление течения ожогов [Cejkova J., Trosan P., Cejka C. et al. Suppression of alkali-induced oxidative injury in the cornea by mesenchymal stem cells growing on nanofiber scaffolds and transferred onto the damaged corneal surface// Experimental Eye Research. 2013. 116 (2): 312-323].
Известен способ лечения химических ожогов роговицы (RU 2028133 С1).Перед аппликациями лиофилизированной плазмы на роговую оболочку производят сорбцию с поверхности роговицы силикагелем до его увлажнения, после чего смывают его физиологическим раствором, причем манипуляции выполняют 1-2 раза в сутки в течение всего периода, предшествующего эпителизации.
Силикагель является пожаро- и взрывобезопасным, по степени воздействия на организм относится к веществам 3-го класса опасности, однако пыль силикагеля содержит от 10 до 70 % свободного диоксида кремния, при хроническом вдыхании такой пыли возможно развитие болезни легких - силикоза. Поэтому при регулярной работе с силикагелем рекомендуют использовать индивидуальные средства защиты органов дыхания от пыли. Это может являться причиной ограничения использования силикагеля в медицинской практике.
Известен способ лечения ожогов глаз (RU 2038088 С1). Для лечения субконъюнктивально вводят 0,5% раствор эхинохрома.
Однако болезненность манипуляции является ограничением применения указанного способа у ряда пациентов.
Поскольку патогенетически оправдано применение антиоксидантных препаратов для лечения ожогов глаз, то самым близким (прототипом) является способ лечения ожогов глаза (RU 2495651 С1). Проводят инстилляции в конъюнктивальную полость глазных капель 2% раствора Мексидола 2-4 раза в день сразу после ожога и в течение последующих двух недель.
Однако мексидол не обладает антибактериальным действием, и в схеме терапии ожогов необходимо дополнительное использование антибактериальных препаратов для профилактики присоединения вторичной инфекции.
Техническим решением является снижение воспалительной реакции, ускорение эпителизации зоны ожога, предупреждение развития перфораций роговицы и профилактика присоединения вторичной инфекции.
Технический результат достигается тем, что также как и в известном способе в конъюнктивальную полость делают инстилляцию антиоксидантного соединения.
Особенностью заявленного изобретения является то, что в качестве антиоксидантного препарата используют водный раствор лактоферрина 2,5 мг/мл по следующей схеме:
- при щелочном ожоге - по 2 капли 5 раз в день в течение 10 дней;
- при кислотном ожоге - по 1 капле 3 раза в день в течение 14 дней;
- при термическом ожоге - по 1 капле 3 раза в день в течение 28 дней.
Способ поясняется подробным описанием, примерами выполнения и иллюстрациями, на которых изображено:
Фиг. 1 - Роговица кролика сразу после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 2 - Роговица кролика 1 группы 1 сутки после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 3 - Роговица кролика 1 группы 3 сутки после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 4 - Роговица кролика 1 группы 5 сутки после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 5 - Роговица кролика 1 группы 7 сутки после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 6 - Роговица кролика 1 группы 14 сутки после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 7 - Роговица кролика 2 группы 1 сутки после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 8 - Роговица кролика 2 группы 3 сутки после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 9 - Роговица кролика 2 группы 5 сутки после нанесения кислотного ожога.
Фиг. 10 - Роговица кролика сразу после нанесения термического ожога.
Фиг. 11 - Роговица кролика 1 группы 1 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг. 12 - Роговица кролика 1 группы 3 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг. 13 - Роговица кролика 1 группы 5 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг. 14 - Роговица кролика 1 группы 7 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг. 15 - Роговица кролика 1 группы 28 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг. 16 - Роговица кролика 2 группы 1 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг. 17 - Роговица кролика 2 группы 3 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг.18 - Роговица кролика 2 группы 5 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг.19 - Роговица кролика 2 группы 7 сутки после нанесения термического ожога.
Фиг. 20 - Роговица кролика 2 группы 28 сутки после нанесения термического ожога.
Способ осуществляют следующим образом.
Животным при химическом ожоге роговицы проводили лечение раствором лактоферрина в концентрации 2,5 мг/мл по 1-2 капли 3-5 раз в день в течение первых 10 - 28 дней, в зависимости от агента, вызвавшего ожог, и степени его выраженности, а именно:
- при щелочном ожоге - по 2 капли 5 раз в день в течение 10 дней;
- при кислотном ожоге - по 1 капле 3 раза в день в течение 14 дней;
- при термическом ожоге - по 1 капле 3 раза в день в течение 28 дней.
Для исследования эффективности влияния местного применения лактоферрина на заживление ожоговой раны роговицы было проведено экспериментальное исследование.
Пример 1 - Экспериментальное моделирование щелочного ожога средней степени.
Исследование на кроликах-самках породы Шиншилла (вес - 2,0 - 2,2 кг). Экспериментальное моделирование щелочного ожога средней степени тяжести выполнено на 12 кроликах (24 глаза) весом 2,0-2,2кг. Щелочной ожог был вызван аппликацией фильтровальной бумаги в виде круга диаметром 10 мм, смоченного 2,5%-ным раствором гидроксида натрия с экспозицией 5 секунд на роговицу под местной анестезией 0,4% инокаином. После удаления фильтровальной бумаги глаз промывали 0,9% раствором хлористого натрия.
Экспериментальные животные были разделены на четыре группы - три опытных и одну контрольную:
- группа №1: контрольная группа (3 кролика; 6 глаз). Животным проводили инстилляцию изотонического (0,9%) раствора хлористого натрия (по 2 капли 5 раз в день в течение 10 дней);
- группа №2: опытная группа (3 кролика; 6 глаз). Животным проводили инстилляцию лактоферрина в концентрации 0,5 мг/мл (по 2 капли 5 раз в день в течение 10 дней);
- группа №3: опытная группа (3 кролика; 6 глаз). Животным проводили инстилляцию лактоферрина в концентрации 2,5 мг/мл (по 2 капли, 5 раз в день в течение 10 дней);
- группа №4: опытная группа (3 кролика; 6 глаз). Животным проводили инстилляцию лактоферрина в концентрации 5,0 мг/мл (по 2 капли 5 раз в день в течение 10 дней).
Клиническое исследование включало осмотр переднего отрезка глаз с помощью фокального и бокового освещения. Животные наблюдались ежедневно в течение 10-и дней. Оценку состояния глаз проводили по следующим признакам: степень выраженности воспалительной реакции, величина дефекта роговицы, интенсивность помутнения роговицы.
Степень воспалительной реакции оценивали визуально по бальной системе:
- 0 баллов - отсутствие воспалительной реакции;
- 1 балл - незначительная смешанная инъекция конъюнктивы, скудное отделяемое, отсутствие отека окружающей ожог ткани роговицы;
- 2 балла - смешанная инъекция конъюнктивы, умеренное слизисто-гнойное отделяемое, отек бельма и окружающей его ткани роговицы;
- 3 балла - выраженная смешанная инъекция конъюнктивы с хемозом, обильное слизисто-гнойное отделяемое, выраженный отек роговицы.
2
Размер эпителиального дефекта в мм роговицы оценивали по площади эпителиального дефекта после закапывания флюоресцеина (1% раствор; от 3-х до 5-и капель) путем измерения горизонтального и вертикального меридианов калиброметром.
Интенсивность помутнения роговицы в зоне ожога оценивали по бальной шкале:
- 0 баллов - помутнение роговицы в области ожога отсутствует;
- 1 балл - помутнение роговицы в виде «облачка» (ограниченное помутнение роговицы серого цвета, едва уловимое при осмотре);
- 2 балла - помутнение роговицы в виде «пятна» (стойкое ограниченное более интенсивное помутнение роговицы в области ожога роговицы;
- 3 балла - формирование бельма (стойкое помутнение роговицы, обусловленное ее рубцовым изменением).
Статистический анализ проводили с использованием программы Statistica 7.0. Для всех количественных данных вычисляли групповое среднее арифметическое (M) и стандартную ошибку среднего (m). Достоверность отличий между группами данных оценивали с применением t-критерия Стьюдента и U-критерия Манна Уитни, в зависимости от числа наблюдений и характера распределения величин параметров в группе. Различия считали достоверными при р≤0,05 (Таблица 1).
Таблица 1
Динамика развития воспалительной реакции после щелочного ожога роговицы на фоне применения раствора лактоферрина
№ гр
Концентрация лактоферрина, мг/мл
Степень выраженности воспалительной реакции в баллах, сутки после щелочного ожога
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1
Контроль (0,9% раствор хлористого натрия)
2,7±0,2
2,5±0,2
2,2±0,2
1,8±0,2
1,8±0,2
1,5±0,2
1,3±0,3
1,2±0,4
0,8±0,4
0,7±0,3
2
0,5
2,5±0,2
2,0±0,1
1,3±0,2*
0,8±0,3*
0,7±0,2*
0,7±0,2*
0,2±0,1*
0*
0*
0*
3
2,5
1,2±0,2*
1,2±0,2*
0,8±0,2*
0,5±0,2*
0,2±0,1*
0*
0*
0*
0*
0*
4
5,0
2,3±0,2
2,0±0,1
1,2±0,2*
1,5±0,2
1,3±0,3
0,8±0,3*
0,7±0,3
0,5±0,2*
0,2±0,1*
0,2±0,1*
* - различия с контролем достоверны, р≤0,05
Как видно из данных, представленных в таблице 1, у кроликов, которым после щелочного ожога проводили инстилляции препаратом на основе лактоферрина в концентрациях 0,5 мг/мл, 2,5 мг/мл и 5,0 мг/мл (5 раз в день в течение 10 дней), степень воспалительной реакции была существенно ниже, чем у животных в контрольной группе. Наиболее выраженное купирование воспаления было отмечено в опытной группе № 3, в которой животным проводили инстилляции препаратом на основе лактоферрина в концентрации, равной 2,5 мг/мл. У этих кроликов к 6 суткам наблюдений наблюдали полное исчезновение признаков воспалительной реакции (табл. 1).
В таблице 2 представлена динамика эпителизации роговицы в опытных и контрольной группах после щелочного ожога.
Таблица 2
Динамика эпителизации роговицы в опытных и контрольной группах после щелочного ожога
№ гр
Концентрация лактоферрина, мг/мл
Размер эпителиального дефекта роговицы в мм<sup>2</sup>, сутки после щелочного ожога
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1
Контроль (0,9% раствор хлористого натрия)
42,7±5,0
44,8±4,0
43,3±2,0
36,7±5,0
29,2±6,2
19,7±3,0
7,8±2,5
6,0±2,3
4,0±2,1
2,3±1,5
2
0,5
43,3±2,7
28,7±5,3*
13,7±4,7*
5,7±2,3*
3,0±1,2*
1,5±0,8*
0,8±0,7*
0,3±0,2*
0,3±0,2*
0,3±0,2*
3
2,5
35,3±3,6
14,5±2,8*
7,0±2,8*
2,0±1,0*
0,8±0,7*
0,7±0,6*
0,2±0,1*
0,2±0,1*
0,2±0,1*
0,2±0,1*
4
5,0
45,8±3,3
27,3±7,7*
8,7±3,0*
5,8±3,2*
6,0±3,8*
2,2±1,5*
2,2±1,5*
0,8±0,7*
0,7±0,6*
0,2±0,1*
* - различия с контролем достоверны, р≤0,05
Как видно из данных, у кроликов в опытных группах, которым проводили инстилляции препаратом на основе лактоферрина, процесс эпителизации дефекта роговицы протекал существенно быстрее, чем у кроликов в контрольной группе. По этому критерию оценки наилучший терапевтический эффект был достигнут также при использовании препаратом на основе лактоферрина в концентрации 2,5 мг/мл. Так, на 2 сутки лечения у кроликов наблюдали уменьшение эпителиального дефекта роговицы на 59%, а на 10 сутки лечения - 99%. В то время как у животных контрольной группы на 2 сутки наблюдений отмечали увеличение эпителиального дефекта на 5%, а на 10 сутки - уменьшение эпителиального дефекта на 95%.
Динамика степени интенсивности помутнения роговицы в области ожога представлена в таблице 3.
Таблица 3
Динамика степени интенсивности помутнения роговицы в области ожога
№ гр
Концентрация лактоферрина, мг/мл
степень выраженности помутнения роговицы в баллах, сутки после щелочного ожога
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1
Контроль (0,9% раствор хлористого натрия)
2,0±0,1
2,0±0,1
2,0±0,1
2,0±0,1
2,0±0,1
2,0±0,1
2,0±0,1
2,0±0,1
2,0±0,1
2,0±0,1
2
0,5
2,0±0,2
2,0±0,2
1,8±0,2
1,8±0,2
1,7±0,1
1,5±0,1*
1,3±0,1*
1,2±0,1*
1,2±0,1*
1,2±0,1*
3
2,5
2,2±0,2
1,2±0,1*
1,3±0,1*
1,3±0,1*
1,3±0,1*
1,3±0,1*
1,2±0,1*
1,2±0,1*
1,2±0,1*
1,2±0,1*
4
5,0
2,0±0,2
2,0±0,2
2,0±0,2
1,7±0,2
1,7±0,2
1,7±0,2
1,5±0,1*
1,5±0,1*
1,5±0,1*
1,5±0,1*
* - различия с контролем достоверны, р≤0,05
У кроликов в контрольной группе степень интенсивности помутнения роговицы, равная 2-м баллам наблюдалась в течение всего срока наблюдений (11 суток после щелочного ожога). У кроликов в опытных группах, которым проводились инстилляции препарата на основе лактоферрина в концентрациях, равных 0,5 мг/мл, 2,5 мг/мл и 5,0 мг/мл наблюдали некоторое снижение интенсивности помутнения роговицы в зоне ожога. Существенных различий в интенсивности помутнения роговицы в зависимости от концентрации раствора лактоферрина выявлено не было (табл. 3).
Таким образом, оценивая терапевтическую эффективность введения лактоферрина в отношении клинических проявлений ожоговой болезни роговицы глаза, следует отметить значительное снижение степени выраженности воспалительной реакции на ожоговую травму, ускорение регенерации эпителия, снижение степени интенсивности помутнения и размеров зоны поражения при всех исследованных концентрациях препарата. Наилучший лечебный эффект был достигнут при применении раствора лактоферрина в концентрации 2,5 мг/мл.
На 11-е сутки после ожога животные были подвержены эвтаназии. Гистологические препараты исследовали в световом микроскопе серии МС 300 фирмы Micros (Австрия) при увеличениях: 100, 400, 1000.
Результаты гистологического исследования.
При гистологическом исследовании глаз кроликов контрольной группы отмечали отслоение (невысокое) и истончение (всего 2 слоя клеток) эпителиального слоя. Под эпителием было обнаружено скопление экссудата и отмечено разрыхление коллагеновых волокон стромы роговицы (признаки отека).
При гистологическом исследовании глаз кроликов второй группы были выявлены участки отрыва эпителиального слоя роговицы от передней мембраны и стромы. При этом эпителий был очень тонким (состоял из 1-2 рядов базальных клеток) и слабо окрашенным. Признаки регенерации были слабо выражены или отсутствовали. В строме наблюдали несколько рыхлое расположение коллагеновых волокон с округлыми щелями (признаки отека).
При гистологическом исследовании глазных яблок кроликов третьей группы эпителиальный слой роговицы не нарушен. Был выявлен более широкий участок гипертрофированных эпителиальных клеток, состоящий из 5-6 слоев. В строме наблюдали несколько рыхлое расположение коллагеновых волокон (признаки слабовыраженного отека).
При гистологическом исследовании глаз кроликов четвертой группы в области ожога отмечено отслоение (невысокое) и истончение эпителия (наблюдали всего 1 - 2 слоя клеток) роговицы. Клетки эпителия были слабо-окрашены. В строме наблюдали рыхлое расположение коллагеновых волокон (признаки отека).
Таким образом, при гистологическом исследовании глазных яблок контрольных кроликов с химическим ожогом средней степени тяжести наблюдали морфологическую картину экссудативных и деструктивных (альтеративных) воспалительных изменений тканей роговицы в виде отслоения многослойного плоского неороговевающего эпителия, его истончения и ослабления способности к окраске гематоксилином и эозином, отек роговицы. У этих кроликов признаки регенерации эпителия роговицы были выражены слабо и не у всех животных.
При гистологическом исследовании глазных яблок кроликов второй группы установлено, что у этих кроликов гистологические признаки воспалительных изменений в роговице не отличались от воспалительных изменений, выявленных у животных контрольной группы. Имели место воспалительные изменения, соответствующие экссудативной стадии торможения.
При гистологическом исследовании глазных яблок кроликов третьей группы было отмечено торможение экссудативной стадии воспаления роговицы. У всех кроликов наблюдали признаки регенерации роговицы.
При гистологическом исследовании глазных яблок кроликов четвертой группы наблюдали торможение экссудативной стадии воспаления. Однако у этих кроликов, как и у кроликов контрольной группы со щелочным ожогом, признаки регенерации роговицы глаз были менее выражены.
Таким образом, наиболее выраженный терапевтический эффект введения лактоферрина в отношении щелочного ожога роговицы глаза средней степени тяжести наблюдали при использовании лактоферрина в концентрации, равной 2,5 мг/мл. Эта концентрация использовалась для проведения дальнейших исследований.
Пример 2 - Экспериментальное моделирование кислотного ожога центральной оптической зоны роговицы легкой степени.
Исследование на кроликах-самцах породы Шиншилла (вес 3,0-3,5 кг). Экспериментальное моделирование кислотного ожога центральной оптической зоны роговицы легкой степени выполнено на 6 кроликах (12 глаз) весом 3,0-3,5 кг. Кислотный ожог был вызван аппликацией фильтровальной бумаги в виде круга диаметром 6 мм, смоченного 3%-ным раствором уксусной кислоты с экспозицией 15 секунд на роговицу под местной анестезией 0,4% инокаином. После удаления фильтровальной бумаги глаз промывали 0,9% раствором хлористого натрия. Экспериментальные животные были разделены на две группы: опытную и контрольную.
- группа №1: контрольная группа (3 кролика; 6 глаз). Животным проводили инстилляцию изотонического (0,9%) раствора хлористого натрия (по 1 капле 3 раза в день в течение 14 дней);
- группа №2: опытная группа (3 кролика; 6 глаз). Животным проводили инстилляцию лактоферрина в концентрации 2,5 мг/мл по 1 капле 3 раза в день 14 дней;
Сразу после нанесения ожога роговица в месте аппликации фильтровальной бумаги становилась более отечной, первоначально не прокрашивалась флуоресцеином (Фиг.1).
В первой группе (кислотный ожог, инстилляции изотонического (0,9%) раствора хлористого натрия). У животных наблюдался резко выраженный роговичный синдром с 1 по 4 сутки. Начиная с 1 суток после нанесения ожогов роговицы, в пределах обожженной ткани появлялся дефект эпителия роговицы, постепенная эпителизация которого завершалась к 7 суткам (Фиг. 2-5). В исходе (на 14 сутки) у всех животных роговица была полностью прозрачной, не отличалась от интактных животных (Фис. 6).
Вторая группа (инстилляции лактоферрина в концентрации 2,5 мг/мл (по 1 капле 3 раза в день 14 дней). Выраженный роговичный синдром наблюдался на протяжении первых суток. С 1 по 3 сутки после нанесения ожогов роговицы, в пределах обожженной ткани наблюдался легкий отек эпителия роговицы, роговица в месте нанесения ожога прокрашивалась поверхностно только на 1 сутки (Фиг. 7, 8), к 5 суткам у всех животных опытной группы полностью восстанавливалась прозрачность роговицы (Фиг. 9). В исходе (на 14 сутки) у всех животных роговица была полностью прозрачной, не отличалась от интактных животных.
Пример 3 - Экспериментальное моделирование термического ожога центральной оптической зоны роговицы тяжелой степени.
Исследование на кроликах-самцах породы Шиншилла (вес 3,0-3,5 кг). Экспериментальное моделирование термического ожога центральной оптической зоны роговицы тяжелой степени выполнено на 12 кроликах (24 глаза) весом 3,0-3,5 кг. Термический ожог вызывали установкой цилиндра из нержавеющей стали с диаметром основания 6 мм, разогретого до 200 градусов Цельсия, с экспозицией 3 секунды на центральную зону роговицы под местной анестезией 0,4% инокаином. После нанесения ожога глаз промывали 0,9% раствором хлористого натрия. Проводили повторную инстилляцию местного анестетика, после чего проводили скарификацию поврежденного эпителия роговицы. Состояние роговицы сразу после нанесения ожога продемонстрировано на рис. 10. Экспериментальные животные были разделены на две группы: опытную и контрольную.
- группа №1: контрольная группа (6 кроликов; 12 глаз). Животным проводили инстилляцию изотонического (0,9%) раствора хлористого натрия (по 1 капле 3 раза в день в течение 28 дней);
- группа №2: опытная группа (6 кроликов; 12 глаз). Животным проводили инстилляцию лактоферрина в концентрации 2,5 мг/мл по 1 капле 3 раза в день в течение 28 дней;
В первой группе (термический ожог, инстилляции изотонического (0,9%) раствора хлористого натрия (по 1 капле 3 раза в день в течение 28 дней), с 1 по 5 сутки после нанесения ожогов роговицы, в пределах обожженной ткани роговица становилась более отечной, место нанесения ожога тотально окрашивалось 1% раствором флуоресцеина (Фиг. 11, 12). Наблюдалась инфильтрация всей роговицы вокруг ожога, которая постепенно уменьшалась от периферии к центру, прозрачность роговицы вне ожога восстанавливалась с 3 по 7 сутки (Фиг. 12-14). С 1 по 3 сутки развивалась смешанная инъекция бульбарной конъюнктивы, сохранявшаяся до 7-10 суток. Полная эпителизация дефекта в первой группе наблюдалась с 7 по 13 сутки, в среднем - на 9,2±2,1 день. Перфорация роговицы наблюдалась на одном глазу на четвертые сутки (8,33%). В исходе (на 28 сутки) у 5 кроликов (10 глаз) на месте ожога роговицы, наблюдались грубые помутнения, равные по размеру 61±8,3% диаметра цилиндра, с помощью которого наносили ожог (Фиг. 15).
Вторая группа: термический ожог, лечение лактоферрином. С 1 по 4 сутки после нанесения ожогов роговицы, в пределах обожженной ткани роговица становилась более отечной, место нанесения ожога тотально окрашивалось 1% раствором флуоресцеина. Наблюдалась инфильтрация всей роговицы вокруг ожога, которая постепенно уменьшалась, прозрачность роговицы вне ожога восстанавливалась со 2 по 4 сутки (Фиг. 16-17). В течение первых суток развивалась смешанная инъекция бульбарной конъюнктивы, сохранявшаяся до 5-7 суток (Фиг. 18). Полная эпителизация дефекта в первой группе наблюдалась с 6 по 8 сутки, в среднем - на 6,8±0,75день (Фиг. 19). Перфораций не наблюдалось. Размер сформировавшегося к 28 суткам помутнения, в среднем, составил 27±12,1% диаметра цилиндра, с помощью которого наносили ожог (Фиг.20).
Таким образом, инстилляции в конъюнктивальную полость водного раствора лактоферрина 2,5 мг/мл по 1 капле 3 раза в день в течение двадцати восьми дней после тяжелого ожога роговицы способствуют снижению интенсивности воспалительной реакции, уменьшению площади дефекта роговицы, ускорению его заживления, а также формированию менее грубого и меньшего по диаметру помутнения. На фоне лечения препаратом на основе лактоферрина не наблюдается развития перфораций.
Использование изобретения в клинической практике позволит:
- повысить эффективность лечения ожогов роговицы за счет снижения выраженности окислительного стресса;
- ускорить эпителизацию дефектов роговицы;
- снизить степень выраженности воспалительной реакции на ожоговую травму;
- ускорить процесс восстановления дефектов эпителия и стромы роговицы;
- уменьшить интенсивность и площадь помутнения роговицы.