Развитие клеток крови в мезонефросе сеголеток осетровых рыб

УДК 597-111:597.442

О. В. Ложниченко, В. П. Загрийчук Астраханский государственный технический университет

РАЗВИТИЕ КЛЕТОК КРОВИ В МЕЗОНЕФРОСЕ СЕГОЛЕТОК ОСЕТРОВЫХ РЫБ

Данные об образовании клеток крови у осетровых рыб в литературе крайне противоречивы. В фундаментальных работах Н. Т. Ивановой [1], А. А. Заварзина [2], Л. Г. Житеневой [3] рассмотрены процессы кроветворения у акуловых, карповых, сельдевых рыб и производителей осетровых. Указываются кроветворные органы, но не приводится качественный и количественный состав клеток этих органов. Противоречивы данные и о развивающихся клеточных рядах в данных органах. Так, А. Држевина [4] относит почку к органам лимфогранулопоэза. И. Н. Остроумова [5], не разделяя этого мнения, утверждает, что эритроциты образуются и в почке. Н. Т. Иванова [1] отмечает, что главную роль в кроветворении костистых рыб играет почка, и в этом органе происходит лимфогранулопоэз и эритропоэз. В связи с этим целью исследования явилось изучение развития клеток крови в мезонефросе сеголеток осетровых рыб.

Материал и методы исследования

Работа выполнена в Астраханском государственном техническом университете на кафедре гидробиологии и общей экологии в течение 2004-2006 гг. Объектом исследования служили сеголетки севрюги (Acipenser stellatus Pallas), белуги (Huso huso L.), осетра (Acipenser gulden-stadti Brandt), полученные заводским методом. Материал обрабатывали методами классической гистологии [6]. Для изучения строения органов и тканей парафиновые блоки нарезали на стандартном микротоме сагиттально. Серии срезов толщиной 5-6 микрон окрашивали гематоксилин-эозином.

Результаты исследования

У сеголеток осетровых в возрасте пяти месяцев активного питания мезонефрос имел форму параллельных тяжей и состоял из мезонефральных телец, почечных канальцев, окруженных гемопоэтической тканью. Толщина почечных тяжей была максимальной у белуги, причем на протяжении всей почки она менялась - была уже в головной и хвостовой частях - 6,17 ± 0,12 мм и расширялась в туловищной - 8,77 ± 0,33 мм. У сеголеток осетра ширина головной и хвостовой частей была равна 4,97 ± 0,11 мм, в туловищной - 7,04 ± 0,27 мм, у севрюги соответственно 3,22 ± 0,04 и 6,41 ± 0,37 мм. Мезонефральные тельца состояли из почечных капсул и сосудистых клубочков, окруженных мочевым пространством, которое занимало основной объем капсулы и отграничивалось от стромы органа однослойным плоским париетальным эпителием. Интересно, что мезонефральные тельца, мочевое пространство широко варьировали по форме в пределах одного вида, а также имели и межвидовые особенности. Особенно динамично это проявлялось у сеголеток белуги - почечные тельца были намного крупнее, чем у осетра и севрюги, вытянутой или шарообразной формы. Самые маленькие тельца, в два раза меньше, принадлежали сеголеткам севрюги. Кроме того, мочевое пространство зачастую было небольшим именно в крупных почечных тельцах. В расположении телец закономерностей выявлено не было: они могли образовывать группы по 3-5 телец, соприкасаясь друг с другом полюсами, стенками капсул, встречались и одиночные мезонефральные тельца.

Иногда среди почечных телец нормальной формы в мезонефросе осетровых были отмечены тельца с атипичной формой или имелись гипертрофированные клубочки капилляров. Гипертрофия почечных клубочков сопровождалась набуханием клеток, гиперклеточностью и отложением фибрина в капиллярных петлях.

Кроме того, некоторые мочевые полости белуги и осетра были заполнены пенистыми массами, предположительно - белком. У севрюги полости мочевых капсул были чистыми. Измененные почечные тельца составили у белуги 15 %, у осетра - 11 %, у севрюги - 5 % от числа всех почечных телец.

Канальцевая часть мезонефронов сеголеток осетровых рыб была представлена отходящими от почечных телец канальцами 1 типа, которые продолжались в канальцы 2 типа, далее -в канальцы 3 типа, в вольфов проток открывался каналец 4 типа.

Наиболее широкими канальцами 1 типа были канальцы у белуги; у осетра и севрюги они были в 2 раза меньше и уже. Основная площадь канальцев приходилась на кубический эпителий, на долю просветов - менее 20 %. Канальцы 2 типа у всех исследованных рыб были выстланы однослойным призматическим эпителием, в просветах имелись белковые массы. Некоторые канальцы (около 30 %) имели чистые просветы. Безьядерные эпителиоциты встречались редко -в 9 % канальцев, при этом некоторые клетки были увеличены в размерах. Канальцы 2 типа, совершая изгиб, продолжались в канальцы 3 типа. Дистальные канальцы в почках сеголеток осетровых были уже, чем проксимальные канальцы. Их стенка была образована однослойным кубическим эпителием. В почках сеголеток белуги дистальные канальцы были наибольших размеров по сравнению с канальцами других видов осетровых. Эти канальцы продолжались в канальцы 4 типа, которые, в свою очередь, впадали в вольфов проток. Эти канальцы были выстланы кубическим эпителием. Кроме того, в межканальцевой ткани имелись небольшие кровоизлияния.

Анализ межканальцевой ткани сеголеток осетровых показал, что среди ретикулярных клеток у всех исследуемых видов превалировали активные ретикулярные клетки, максимальное количество которых у белуги составило 96,1 %, диаметр - 6,35 ± 0,12 мкм; у осетра - 95,8 %, диаметр - 5,98 ± 0,16 мкм; у севрюги - 95,2 %, наименьший диаметр - 5,37 ± 0,11 мкм. Доля молодых ретикулярных клеток у сеголеток была невысокой, но среди них количество малоактивных ретикулярных клеток оказалось выше, чем переходных и покоящихся ретикулярных клеток: у белуги - 2,2 %, диаметр - 7,05 ± 0,11 мкм; у осетра - 2,4 %, диаметр - 6,79 ± 0,12 мкм; у севрюги - 2,6 %, диаметр - 6,13 ± 0,09 мкм. Переходные ретикулярные клетки составили у всех видов рыб 1,0 %, покоящихся ретикулярных клеток было в равном количестве у белуги и осетра - 0,8 %, наибольшее количество у севрюги - 1,2 %.

Качественный состав кровяных островков и развивающихся клеток крови был следующим: количество полустволовых и унипотентных клеток-предшественниц уменьшилось у сеголеток белуги (2,6 %, диаметр - 15,85 ± 0,24 мкм и 2,1 %, диаметр - 10,79 ± 0,2 мкм) и осетра (3,7 %, диаметр - 15,12 ± 0,18 мкм, 2,9 %, диаметр - 10,03 ± 0,16 мкм), у севрюги количество родоночальных клеток оставалось по-прежнему высоким - 4,0 и 4,3 % соответственно.

Необходимо отметить, что более половины этих клеток было найдено в вентральной части почки - 67,51 %, в средней ее части - 31,29 %, меньше всего в дорсальной - 1,2 %. Кроме того, наибольшее количество гемогистобластов и гемоцитобластов отмечено у сеголеток вокруг почечных канальцев 3 типа: 37,1 % - у белуги, 33,9 % - у осетра, 35,8 % - у севрюги; вокруг почечных телец: 29,6 % - у белуги, 31,4 % - у осетра, 27,6 % - у севрюги; рядом с почечными канальцами 2 типа: 27,8 % - у белуги, 26,9 % - у осетра, 27,3 % - у севрюги. Крайне редко клетки-предшественницы встречались вокруг почечных канальцев 1 и 4 типов. Микроокружением по-лустволовых клеток были активные ретикулярные клетки в количестве 1 : 12.

Доля клеток IV класса сократилась: у белуги количество лимфобластов, миелобластов, эритробластов - в 2 раза, их было 2,0; 3,2 и 2,0 % соответственно, у осетра количество лимфобластов (2,6 %), миелобластов (5,4 %) и эритробластов (2,0 %) значительно не сократилось, у сеголеток севрюги уменьшилось вдвое число монобластов (1,1 %), незначительно уменьшилось количество лимфобластов (2,2 %) и миелобластов (6,2 %), количество эритробластов увеличилось - 3,2 %. Монобласты у всех исследуемых видов осетровых составили не более 1,0 %.

Среди клеток созревающего класса доминировали клетки белой крови - гранулоциты, они составили одну четвертую от числа всех развивающихся клеток крови, причем численно эозинофильные клетки превалировали над нейтрофильными. Кроме того, следует отметить, что среди гранулоцитов были идентифицированы сегментоядерные эозинофилы: белуга - 1,6 %, осетр -1,1 %, севрюга - 0,6 % и палочкоядерные нейтрофилы: белуга - 1,0 %; осетр - 1,3 %; севрюга -

0,8 %. Среди зрелых клеток наиболее высокое процентное соотношение имели лимфоциты, причем их наибольшее количество наблюдалось у белуги - 20,7 %, наименьшее - у севрюги -13,9 %. Необходимо также указать, что в мезонефросе сеголеток осетровых рыб отмечена дальнейшая дифференцировка лимфоцитов - были выявлены плазматические клетки.

Микроокружением клеток крови у сеголеток служили только активные ретикулярные клетки в соотношении 1 : 6 для бластных форм, 1 : 4 - для созревающих клеток и 1 : 2 - для зрелых клеток крови, расстояние между клетками крови и их микроокружением не изменилось и осталось на уровне 45-дневных мальков.

Необходимо добавить, что в кроветворной ткани мезонефроса было найдено 14 крупных макрофагов у белуги, 9 - у осетра и 7 - у севрюги. Они располагались в медиальной, реже - латеральной части туловищной почки в непосредственной близости от почечной вены или кровеносных сосудов.

Таким образом, мезонефрос сеголеток осетровых рыб к возрасту пяти месяцев активного питания был сформированным органом и имел дефинитивные черты строения. Качественный анализ кроветворной ткани показал, что у сеголеток белуги и осетра состав развивающихся клеток крови близок к таковому у взрослых рыб, у сеголеток севрюги доля молодых клеток еще на довольно высоком уровне, но общие тенденции такие же, как у осетра и белуги. Мезонефрос является универсальным кроветворным органом, в котором происходит развитие всех клеточных рядов. Кроме того, с возрастом количество полустволовых и унипотентных клеток находилось на довольно высоком уровне.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Иванова Н. Т. Атлас клеток крови рыб. Сравнительная морфология и классификация форменных элементов крови рыб. - М.: Легкая и пищ. пром-сть, 1982. - 184 с.

2. Заварзин А. А. Основы сравнительной гистологии. - Л.: Изд-во Ленинград. ун-та, 1985. - 400 с.

3. Житенева Л. Д., Рудницкая О. А., Калюжная Т. И. Эколого-гематологические характеристики некоторых видов рыб: Справ. - Ростов н./Д., 1997. - 150 с.

4. Drzewina A. Contribution a l etude du tissue Lymphoid des ichthiopsides.These de Paris. - 1905. - P. 13-22.

5. Остроумова И. Н. Показатели крови и кроветворения в онтогенезе // Изв. Всесоюз. НИИ озерного и речного хоз-ва. - Т. 43, вып. 3. - 1957. - С. 64-67.

6. Волкова О. В., Елецкий Ю. К. Основы гистологии с гистологической техникой. - М.: Медицина. -1989. - 234 с.

Статья поступила в редакцию 25.12.2006

BLOOD CELLS DEVELOPMENT IN MESONEPHROS OF ONE-YEAR OLD STURGEON SPECIES

О. V. Lozhnichenko, V. P. Zagrichuk

Specific species characteristics of blood semi-stem and unipotent cells development are found out in the paper. By the age of 5 month, the base of sturgeon fish reticular tissues is composed of active reticular cells, what is characteristic for older species. Mesonephros of one-year old sturgeon species is a universal hemopoietic organ, where the formation of all cellular rows takes place. The part of semi- stem blood cells of one-year old species is rather high.