СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩИЕ ЭРИТРОПРОТЕКТОРНЫМ ДЕЙСТВИЕМ ПРИ ОТРАВЛЕНИИ ФЕНИЛГИДРАЗИНОМ
ERYTHROPROTECTIVE AGENT FOR PHENYLHYDRAZINE POISONING

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается средств, применяемых в терапии при отравлении фенилгидразином.
Известно средство, обладающее эритропротекторным действием - экстракт левзеи сафлоровидной [1].
Задачей изобретения является расширение арсенала средств, применяемых в терапии при отравлении фенилгидразином.
Поставленная задача решается применением гибридных макромолекулярных соединений (ГМС).
ГМС синтезированы по разработанной методике [2, 3] и представляют собой растворимые в воде продукты химической модификации 3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропионовой кислотой (КФ) гидроксилсодержащих полимеров: декстрана ((1→6)-α-D-глюкан) с молекулярной массой 40 кДа (Д) и полиэтиленгликоля с молекулярной массой 20 кДа (ПЭГ).
Д-КФ - O-(3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропионил)-(1→6)-α-D-глюкан, содержание КФ 10,8 масс.%.
ПЭГ-КФ - полиэтиленгликоля бис-3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-пропионат, содержание КФ 2,7 масс.%.
Известно, что Д-КФ и ПЭГ-КФ проявляют свойства антиоксидантов [2-7], повышают выживаемость животных при острой кровопотере [5], улучшают реологические свойства крови на модели гипервязкости крови [6, 7].
Применение Д-КФ и ПЭГ-КФ в качестве средств, обладающих эритропротекторным действием при отравлении фенилгидразином, в литературе не описано.
Принципиально новым в предлагаемом изобретении является то, что в качеств средств, применяемых в терапии при отравлении фенилгидразином, используют Д-КФ, ПЭГ-КФ. Данный вид активности соединений явным образом не вытекает для специалиста из уровня техники. Д-КФ, ПЭГ-КФ можно применять в терапии при отравлении фенилгидразином.
Таким образом, данное техническое решение соответствует критериям изобретения: "новизна", "изобретательский уровень", "промышленная применимость".
Новые свойства Д-КФ, ПЭГ-КФ были найдены экспериментальным путем.
Эксперименты проведены на 33 крысах-самцах линии Вистар массой 350-430 г.
Животные были разделены на 4 группы: 1 - интактная (n=8), 2 - контроль (физиологический раствор) (n=9), 3 - опытная 1 (Д-КФ) (n=8), 4 - опытная 2 (ПЭГ-КФ) (n=8).
Модель фенилгидразиновой интоксикации воспроизводили путем однократного введения крысам фенилгидразина в дозе 50 мг/кг внутрибрюшинно. Кровь для исследования забирали из общей сонной артерии под эфирным наркозом на 4-й день эксперимента. В качестве стабилизатора использовали 3,8% раствор цитрата натрия в соотношении с кровью 1:9. Измеряли следующие параметры, характеризующие реологические свойства крови: гематокрит, спонтанную агрегацию эритроцитов, деформируемость эритроцитов.
Исследуемые соединения вводили ежедневно (в течение 4 дней, первый раз - через 1 час после отравления фенилгидразином) в хвостовую вену крысы в дозе 10 мг/кг в объеме 0,2 мл. Физиологический раствор вводили в эквиобъемном количестве.
1/2
Агрегацию эритроцитов исследовали силлектометрическим методом [8]. Для характеристики агрегационной способности эритроцитов (АЭ) использовали показатель полупериода кривой агрегации Т. Исследование деформируемости эритроцитов осуществляли методом лазерной дифрактометрии [9]. Для количественной оценки деформируемости эритроцитов рассчитывали индекс деформируемости эритроцитов (ИДЭ).
Статистическую обработку проводили с помощью ПСП "Statistica for Windows 6.0". Рассчитывали среднее значение, стандартную ошибку среднего значения; для выявления межгрупповых различий использовали непараметрический критерий Mann-Whitney U-test.
Результаты исследований представлены в примерах.
1/2
Пример 1. В контрольной группе животных к 4-м суткам после однократного введения фенилгидразина крысам Вистар наблюдалось увеличение T на 95% и снижение ИДЭ на 37% (табл. контроль).
Таким образом, однократное внутрибрюшинное введение фенилгидразина крысам приводило к выраженной интоксикации, характеризующиеся нарушением АЭ и снижением ДЭ.
1/2
1/2
Пример 2. В группе животных, получавших Д-КФ, наблюдалось увеличение T на 69% и снижение ИДЭ на 19% по сравнению с интактными показателями. По сравнению с контрольными значениями, введение - Д-КФ уменьшало T на 14% и повышало ИДЭ на 28% (табл. Д-КФ).
Таким образом, на модели фенилгидразиновой интоксикации курсовое внутривенное введение КФ-Д в дозе 10 мг/кг оказало выраженное эритропротекторное действие, проявляющееся в улучшении АЭ и ИДЭ по сравнению с контролем.
1/2
Пример 3. В группе животных, получавших ПЭГ-КФ, наблюдалось увеличение Т на 80% и снижение ИДЭ на 20% по сравнению с интактными показателями. По сравнению с контрольными значениями введение ПЭГ-КФ повышало ИДЭ на 28% (табл. ПЭГ-КФ).
Таким образом, на модели фенилгидразиновой интоксикации курсовое внутривенное введение ПЭГ-КФ в дозе 10 мг/кг оказало выраженное эритропротекторное действие, проявляющееся в повышении ИДЭ по сравнению с контролем.
Таблица
Влияние внутривенного введения Д-КФ и ПЭГ-КФ (10 мг/кг, 4 дня) на T<sub>1/2</sub> и ИДЭ при фенилгидразиновой интоксикации
Группа
T<sub>1/2</sub>, c
ИДЭ, отн.ед.
Интактная группа (n=8)
21,1±2,1
0,396±0,013
Контроль (n=9)
41,2±3,8<sup>#</sup>
0,250±0,012<sup>#</sup>
Д-КФ (n=8)
35,6±2,2<sup>#*</sup>
0,320±0,025<sup>#</sup>*
ПЭГ-КФ (n=8)
38,0±1,1<sup>#</sup>
0,317±0,023<sup>#*</sup>
Примечание: <sup>#</sup> - различия достоверны с интактной группой (р<0,05);
* - различия достоверны в сравнении с контролем (р<0,05).
Источники информации
1. Плотников М.Б., Алиев О.И., Васильев А.С., Плотникова A.M., Карпова Г.В., Абрамова Е.В. Эритропротекторное действие экстракта левзеи сафлоровидной при интоксикации фенилгидразином у крыс. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 2005, Приложение 1. - С.73-75.
2. Арефьев Д.В., Белостоцкая И.С., Вольева В.Б. и др. Гибридные макромолекулярные антиоксиданты на основе гидрофильных полимеров и пространственно-затрудненных фенолов. // Изв. РАН. Сер. хим. - 2007. - Т.4. - С.751.
3. Aref'ev D., Domnina N., Komarova E., Bilibin A. Sterically hindered phenol-dextran conjugates: synthesis and radical scavenging activity. // Eur. Polym. J. - 1999. - Vol.35. - P.279.
4. Сергеева О.Ю., Домнина Н.С., Хрусталева Р.С. и др. Гибридные макромолекулярные фенольные антиоксиданты. Свойства и применение в медицине. // VII междунар. симп. по фенольным соединениям: фундаментальные и прикладные аспекты. - М., 2009. - С.245-246.
5. Патент РФ №2273483. Домнина Н.С., Хрусталева Р.С., Сергеева О.Ю. и др. Водорастворимый полимерный антиоксидант, плазмозаменитель с антиокислительной и антирадикальной активностью (варианты) и способ поддержания уровня артериального давления и процессов антиоксидантной защиты в организме при острой кровопотере. - Бюлл. №10, 2006.
6. Патент РФ №2425683. Плотников М.Б., Алиев О.И., Попова Е.В., Домнина Н.С. Средства, обладающие гемореологической активностью. - Бюлл. №22, 2011.
nd
7. Effects of Hybrid Macromolecular Phenolic Antioxidants on Rheological Characteristics of Blood in Rats. / Popova E.V., Plotnikov M.B., Aliev O.I. and all. // 2 Annual Russian-Korean Conference "Current issues of natural products chemistry and biotechnology", Novosibirsk, 2010. - P.115.
8. Плотников М.Б., Алиев О.И., Попель Ф.В. Модификация микроколориметра МКМФ-1 для регистрации агрегации эритроцитов. // Клин. лаб. диагностика. 1995. - №3. - С.457-458.
9. Evans E., Mohandas N. Developments in red cell rheology at the institut de pathologie cellulaire. // Blood Cells. - 1986. - Vol.12. - P.43-45.