СТАБИЛЬНЫЕ КОМПОЗИЦИИ НЕЙРОАКТИВНЫХ ПЕПТИДОВ
STABLE COMPOSITIONS OF NEUROACTIVE PEPTIDES

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Настоящая заявка заявляет приоритет по предварительной заявке на патент США №61/984216, поданной 25 апреля 2014 года, полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0002] Центральная нервная система (ЦНС) млекопитающих использует множество нейроактивных пептидов для проведения специализированных сигналов в головном мозге и спинном мозге, включая нейроактивные пептиды соматостатин, холецистокинин, VIP (вазоактивный интестинальный полипептид), вещество Р, энкефалин, нейропептид Y (NPY), нейротензин, TRH, ССК и динорфин. (The Biochemical Basis of Neuropharmacology, Cooper, Bloom и Roth, 5th ed., Oxford University Press, New York, 1986). Тщательное выяснение сложных сигнальных путей, действующих в ЦНС, привело к установлению специфических рецепторов, модулируемых указанными нейроактивными пептидами, представляющих важные терапевтические мишени для лечения различных расстройств, связанных с ЦНС.
[0003] N-Метил-D-аспартатный (NDMA) рецептор (NMDAR) является одним из таких рецепторов, который представляет собой особый интерес, поскольку задействован в широком спектре расстройств ЦНС.NMDAR участвует в нейродегенеративных расстройствах, включая связанную с инсультом гибель клеток головного мозга, конвульсивные расстройства и обучение и память. NMDAR играет также центральную роль в модулирования нормальной синаптической трансмиссии, синаптической пластичности и эксайтотоксичности в центральной нервной системе. NMDAR дополнительно участвует в долговременной потенциации (LTP). LTP представляет собой постоянное упрочнение нейронных связей, лежащее в основе обучения и памяти (см. Bliss and Collingridge, 1993, Nature 361:31-39).
++
++
[0004] Установлены несколько соединений, оказывающих двойственный (агонист/антаногист) эффект на рецептор NDMA через аллостерические сайты. Указанные соединения называют «частичными агонистами». В присутствии принципиального лиганда сайта частичный агонист вытесняет некоторые лиганды и, следовательно, снижает поток Ca через рецептор. В отсутствие или при сниженном содержании принципиального лиганда сайта частичный агонист увеличивает поток Ca через рецепторный канал.
[0005] Недавно описан улучшенный частичный агонист NMDAR, получивший название GLYX-13 или рапастинель. GLYX-13 представлен структурой:
,
18
31
5
6
с молекулярной массой: 413,47 и химической формулой: CHNO. GLYX-13 демонстрирует ноотропное, нейропротекторное и антиноцицептивное действие и усиливает способность к обучению, запоминанию и познаванию in vivo.
[0006] Несмотря на выявление ряда терапевтических эффектов GLYX-13, сохраняется потребность в способах эффективной доставки GLYX-13 для обеспечения эффективного прохождения GLYX-13 через гематоэнцефалический барьер и эффективной абсорбции в требуемом центре действия для усовершенствованного лечения расстройств ЦНС типа депрессии, невропатической боли или тревожного расстройства. Кроме того, желательно, чтобы доставляемая лекарственная форма была стабильной (т.е. не подверженной разложению) в водной среде.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
+
[0007] В настоящем описании представлены стабильные композиции (например, водные композиции), подходящие для внутривенной инъекции, которые содержат пептид GLYX и/или его производное, и/или его соль (например, пептид GLYX-13 и/или его производное, и/или его соль; например, пептид GLYX, имеющий следующую формулу:  или его соль). Варианты реализации могут включать одно или более следующих преимуществ. В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут улучшать клиническую доставку или введение пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего формулу, представленную выше, или его соли) в кровеносную систему посредством IV инъекции, что приводит к более эффективной доставке пептида GLYX в головной мозг и, следовательно, в один или более активных центров в головном мозге, связанных с лечением расстройств ЦНС, таких как депрессия, невропатическая боль или тревожное расстройство. В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут демонстрировать улучшенную стабильность при хранении, например, обеспечивая меньшую восприимчивость пептидов GLYX к разложению в водной среде. Композиции, описанные в настоящем документе, могут дополнительно содержать один или более фармацевтически приемлемых фрагментов (например, включая, но не ограничиваясь ими, буфер, смешиваемый с водой растворитель, вспомогательное вещество, фармацевтически приемлемые анионы (например, хлорид-ион) и катионы (например, Н)), которые обеспечивают один или более физических и/или химических свойств указанных композиций. Например, один или более фармацевтически приемлемых фрагментов могут представлять собой кислоту (например, хлористоводородную кислоту, например, диссоциированную хлористоводородную кислоту), ее сопряженное основание (иногда упоминаемое в настоящем документе как «буфер», например, хлорид-ион) или их комбинацию, и могут присутствовать в количестве, достаточном для сохранения определенного рН. Специалистам в данной области техники понятно также, что композиции, описанные в настоящем документе, могут дополнительно содержать, при необходимости, комбинацию двух или более активных дополнительных ингредиентов.
[0008] В одном аспекте настоящее описание относится к стабильной водной композиции, подходящей для внутривенной инъекции, содержащей соединение, представленное формулой: , или его фармацевтически приемлемую соль. Такие композиции могут дополнительно содержать одну или более кислот, один или более буферов и/или одно или более вспомогательных веществ.
[0009] В одном аспекте настоящее описание относится к стабильной водной композиции, подходящей для внутривенной инъекции, содержащей: (i) от 60 мг/мл до около 200 мг/мл (например, от около 125 мг/мл до около 175 мг/мл; например около 150 мг/мл или около 75 мг/мл) фармацевтически активного соединения, имеющего формулу: ; или его фармацевтически приемлемой соли; (ii) воду для инъекций; и (iii) кислоту; где стабильная водная композиция имеет рН от около 3,9 до около 5,5 при 25°С.
[0010] В другом аспекте настоящее описание относится к емкости (например, предварительно заполненному шприцу или пробирке), содержащей определенное количество любой из стабильных водных композиций, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации указанное количество является извлекаемым в виде по меньшей мере одной однократной дозы. В некоторых вариантах реализации однократная доза может иметь объем от около 1 мл до около 4 мл (например, 3 мл).
[0011] В дополнительном аспекте настоящее описание относится к предварительно заполненному шприцу, который содержит однократную дозу любой из стабильных водных композиций, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации однократная доза может иметь объем от около 1 мл до около 4 мл (например, 3 мл).
[0012] В одном аспекте настоящее описание относится к композиции, которая содержит: (i) около 150 мг/мл соединения, представленного формулой: ; (ii) воду для инъекций; и (iii) хлористоводородную кислоту, где указанная композиция имеет рН от около 4,1 до около 4,7 при 25°С.
[0013] В одном аспекте настоящее описание относится к фармацевтически приемлемой дозе, подходящей для инъекции, содержащей: (i) около 450 мг соединения, представленного формулой: ; (ii) воду; и кислоту, обеспечивающую хлорид-ионы в водной композиции, где указанная доза имеет рН около 4,5 и объем около 3 мл. В некоторых вариантах реализации доза может находиться в шприце или пробирке.
[0014] В одном аспекте настоящее описание относится к фармацевтически приемлемой дозе, подходящей для инъекции, содержащей: (i) около 225 мг соединения, представленного формулой: ; (ii) воду для инъекций; и хлористоводородную кислоту, где указанная доза имеет рН около 4,5 и объем около 3 мл. В некоторых вариантах реализации доза может находиться в шприце или пробирке.
[0015] В другом аспекте настоящее описание относится к стабильной водной композиции, подходящей для внутривенной инъекции, содержащей от около 100 мг/мл до около 200 мг/мл (например, от около 125 мг/мл до около 175 мг/мл, от около 140 мг/мл до около 160 мг/мл или около 150 мг/мл) соединения, имеющего формулу: , или его фармацевтически приемлемой соли; где указанная композиция имеет рН от около 3,5 до около 6,5 (например, от около 3,5 до около 5,5, от около 3,9 до около 5,5, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,2 до около 5,0, от около 4,2 до около 4,8, около 4,0, около 4,5) при 25°С. В некоторых вариантах реализации водная композиция может дополнительно содержать кислоту (например, хлористоводородную кислоту) и/или буфер (например, хлорид-ион), и/или одно или более вспомогательных веществ.
+
2
2
2
2
2
2
[0016] Варианты реализации могут включать одну или более следующих характерных особенностей. Стабильная водная композиция может содержать от около 200 мг до около 500 мг (например, около 450 мг; около 375; или около 225 мг) фармацевтически активного соединения. Стабильная водная композиция может иметь рН около 4,5 при 25°С. Стабильная водная композиция может содержать по меньшей мере одно из: Н, протонированной формы фармацевтически активного соединения и/или их комбинацию. Кислота может быть выбрана из группы, состоящей из фумаровой кислоты, яблочной кислоты, молочной кислоты, хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, уксусной кислоты, лимонной кислоты, фосфорной кислоты, азотной кислоты, серной кислоты и аскорбиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации кислота обеспечивает хлорид-ионы в водной композиции (например, хлористоводородная кислота). В некоторых вариантах реализации при введении пациенту дозы стабильной водной жидкой композиции, содержащей около 150 мг/мл фармацевтически активного соединения и имеющей объем около 3 мл, у указанного пациента достигается физиологическая осмоляльность, которая составляет от около 800 мОсмоль/кг до около 900 мОсмоль/кг. В других вариантах реализации при введении пациенту дозы стабильной водной жидкой композиции, содержащей около 75 мг/мл фармацевтически активного соединения и имеющей объем около 3 мл, у указанного пациента достигается физиологическая осмоляльность, которая составляет от около 375 мОсмоль/кг до около 475 мОсмоль/кг. Композиция может иметь минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из циклопролинтреонина (дикетопиперазина), Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 10 дней при комнатной температуре или через 20 дней при комнатной температуре. Композиция может иметь минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из дикетопиперазина, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 1 месяц при 0°С или ниже. Композиция может иметь менее около 2% дикетопиперазина и/или Pro-Thr-NH относительно площади пика GLYX-13, полученной с помощью ВЭЖХ, через 3 месяца при 40°С. Композиция может иметь менее около 1% или менее около 0,5% дикетопиперазина и/или Pro-Thr-NH относительно площади пика GLYX-13, полученного с помощью ВЭЖХ, через 3 недели при 40°С. Композиция может быть получена способом, который включает: (i) обеспечение первой комбинации, содержащей фармацевтически активное соединение и воду; и (ii) приведение в контакт первой комбинации с хлористоводородной кислотой или ее источником в количестве, достаточном для достижения рН от около 3,9 до около 5,5.
2
2
2
2
2
2
2
[0017] Варианты реализации могут включать одну или более следующих характерных особенностей. Композиция может дополнительно содержать кислоту, выбранную из группы, состоящей из хлористоводородной кислоты, фосфорной кислоты и серной кислоты. Композиция может дополнительно содержать буфер. В некоторых вариантах реализации буфер выбран из группы, состоящей из хлорид-иона, иона натрия, иона калия и иона аммония. В других вариантах реализации буфер выбран из группы, состоящей из ацетата, цитрата, фосфата, сукцината, карбоната, бикарбоната и малеиновой кислоты и ее солей. Композиция может иметь рН от около 3,9 до около 5,5 (например, 4,5) при 25°С. В некоторых вариантах реализации при введении композиции достигается физиологическая осмоляльность от около 500 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмол/кг (например, от около 600 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг или от 850 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг). Композиция может содержать минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из циклопролинтреонина (т.е. дикетопиперазина), пролин-треонин-дикетопиперазина, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 10 дней при комнатной температуре. Композиция может содержать минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из циклопролинтреонина, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 20 дней при комнатной температуре. Композиция может содержать минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из циклопролинтреонина, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 1 месяц при 0°С или ниже. Композиция может содержать минимальное количество дикетопиперазина и/или Pro-Thr-NH.
[0018] В дополнительном аспекте настоящее описание относится к предварительно наполненному шприцу, содержащему стабильную водную композицию, содержащую от около 350 мг до около 800 мг (например, от около 400 мг до около 750 мг, от около 350 мг до около 500 мг, от около 350 мг до около 450 мг, от около 400 мг до около 500 мг, около 400 мг, около 450 мг, от около 600 мг до около 800 мг, от около 700 мг до около 800 мг, около 750 мг) соединения, представленного формулой: , или его фармацевтически приемлемой соли; в водном растворе объемом от около 2 мл до около 6 мл (например, от около 2,5 мл до около 5 мл, от около 2 мл до около 4 мл, от около 2,5 мл до около 3,5 мл, около 2,7 мл, около 3 мл, от около 4 мл до около 6 мл, от около 4,5 мл до около 5,5 мл, около 5 мл). В некоторых вариантах реализации водная композиция может дополнительно содержать кислоту (например, хлористоводородную кислоту) и/или буфер (например, хлорид-ион), и/или одно или более вспомогательных веществ.
2
2
2
2
2
2
2
[0019] Варианты реализации могут включать одну или более следующих характерных особенностей. В некоторых вариантах реализации водная композиция может содержать от около 400 мг до около 750 мг соединения или соли и необязательно иметь от около 2,5 мл до около 5 мл водного раствора. В некоторых вариантах реализации водная композиция может содержать от около 350 мг до около 500 мг (например, от около 350 мг до около 450 мг или от около 400 мг до около 500 мг) соединения или соли и необязательно иметь от около 2 мл до около 4 мл водного раствора. Например, водная композиция может иметь около 400 мг соединения или соли в водном растворе объемом около 2,7 мл. В качестве другого примера, водная композиция может содержать около 450 мг соединения или соли в водном растворе объемом около 3 мл. В других вариантах реализации водная композиция может содержать от около 600 мг до около 800 мг (например, от около 700 мг до около 800 мг) соединения или соли и необязательно иметь от около 4 мл до около 6 мл водного раствора. Например, водная композиция может содержать около 750 мг соединения или соли в водном растворе объемом около 5 мл. Водная композиция может иметь рН от около 3,9 до около 5,5 (например, 4,5) при 25°С. Композиция может содержать минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из дикетопиперазина, пролин-треонин-дикетопиперазина, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 10 дней при комнатной температуре. Композиция может содержать минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из пролин-треонин-дикетопиперазина, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, чреез 20 дней при комнатной температуре. Композиция может содержать минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из дикетопиперазина, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 1 месяц при 0°С или ниже. Композиция может содержать минимальное количество пролин-треонин-дикетопиперазина и/или Pro-Thr-NH.
+
[0020] В одном аспекте настоящего описания представлена композиция, содержащая соединение, представленное формулой: ; воду (например, воду для инъекций); и хлорид-ион, где указанная композиция имеет рН от около 3,5 до около 6,5 (например, от около 3,5 до около 5,5, от около 3,9 до около 5,5, от около 3,5 до около 4,5, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,2 до около 5,0, от около 4,2 до около 4,8, около 4,0, около 4,5 при комнатной температуре). Варианты реализации могут включать одну или более следующих характерных особенностей. Композиция может содержать от около 100 мг/мл до около 200 мг/мл (например, 150 мг/мл) соединения. В некоторых вариантах реализации разлагается менее 2% соединения через 21 день при 40°С. В некоторых вариантах реализации композиция содержит минимальное количество дикетопиперазина. В других вариантах реализации композиция содержит минимальное количество пролин-треонинамида. Вода может представлять собой воду для инъекций. Катионный противоион может представлять собой Н, протонированную форму соединения или их комбинацию.
+
[0021] В другом аспекте настоящего описания представлена композиция, состоящая по существу из и/или состоящая из соединения, представленного формулой: ; воду (например, воду для инъекций); и хлорид-ион, где указанная композиция имеет рН от около 3,5 до около 6,5 (например, от около 3,5 до около 5,5, от около 3,9 до около 5,5, от около 3,5 до около 4,5, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,2 до около 5,0, от около 4,2 до около 4,8, около 4,0, около 4,5 при комнатной температуре). Варианты реализации могут включать одну или более следующих характерных особенностей. Композиция может содержать от около 100 мг/мл до около 200 мг/мл (например, 150 мг/мл) соединения. В некоторых вариантах реализации разлагается менее 2% соединения через 21 день при 40°С. В некоторых вариантах реализации композиция содержит минимальное количество дикетопиперазина. В других вариантах реализации композиция содержит минимальное количество пролин-треонинамида. Вода может представлять собой воду для инъекций. Катионный противоион может представлять собой Н, протонированную форму соединения или их комбинацию.
[0022] В одном аспекте настоящего описания представлена стабильная водная композиция, подходящая для внутривенной инъекции, содержащая: соединение, представленное формулой:
или его фармацевтически приемлемую соль; и от около 0,5 до около 1,2 молярного процента (например, от около 0,6 до около 1,0 молярного процента) соли, такой как хлорид натрия, в водном растворе.
[0023] В другом аспекте настоящего описания представлена стабильная водная композиция, подходящая для внутривенной инъекции, содержащая:
соединение, представленное формулой:  или его фармацевтически приемлемую соль; буфер» и необязательно смешиваемый с водой сорастворитель.
2
2
2
2
[0024] Варианты реализации могут включать одну или более из следующих характерных особенностей. В некоторых вариантах реализации буфер может быть выбран из группы, состоящей из ацетата, цитрата, фосфата, сульфата, сукцината, карбоната, бикарбоната, аргинина и малеиновой кислоты и ее солей. В других вариантах реализации буфер может представлять собой анион, выбранный из группы, состоящей из хлорида, сульфата и фосфата. В других вариантах реализации буфер представляет собой лимонную кислоту. Сорастворитель может быть выбран из группы, состоящей из полиэтиленгликоля, глицерина, этанола, полипропиленгликоля и N,N-диметилацетамида (например, полиэтиленгликоля, имеющего молекулярную массу от около 200 до около 900 Да, или полиэтиленгликоля, имеющего молекулярную массу около 400 Да). рН композиции может составлять от около 4,5 до около 6,0 при 25°С. Композиция может содержать менее 0,5 масс. процента дикетопиперазина или Pro-Thr-NH через 10 дней (например, менее 0,1 масс. процента дикетопиперазина или Pro-Thr-NH через 10 дней). Композиция может содержать менее 0,5 масс. процента Thr-Pro-Pro-NH через 10 дней (например, менее 0,1 масс. процента Thr-Pro-Pro-NH через 10 дней).
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0025] На фиг. 1 представлено образование примесей (% площади пролин-треонин-дикетопиперазина, RRT 0,43) с течением времени в зависимости от рН описанной композиции.
[0026] На фиг. 2 представлено образование примесей (% площади пролин-треонин-амида, RRT 0,57) с течением времени в зависимости от рН описанной композиции.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
[0027] Настоящее описание отчасти относится к стабильным композициям (например, водным композициям), которые подходят для внутривенной инъекции и содержат пептид GLYX и/или его производное, и/или его соль (например, пептид GLYX-13 и/или его производное, и/или его соль; например, пептид GLYX, имеющий следующую формулу:  или его фармацевтически приемлемую соль). Варианты реализации могут включать одно или более следующих преимуществ. В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут улучшать клиническую доставку или введение пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, или его соли; например, пептида GLYX, имеющего формулу, представленную выше, или его соли) в кровеносную систему посредством IV инъекции, что приводит к более эффективной доставке пептида GLYX в головной мозг и, следовательно, в один или более активных центров в головном мозге, связанных с лечением расстройств ЦНС, таких как депрессия, невропатическая боль или тревожное расстройство. В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут демонстрировать улучшенную стабильность при хранении, например, обеспечивая меньшую восприимчивость пептидов GLYX к разложению в водной среде. Композиции, описанные в настоящем документе, в некоторых вариантах реализации могут содержать одно или более фармацевтически приемлемых соединений (например, включая, но не ограничиваясь ими, буфер, смешиваемый с водой растворитель и/или вспомогательное вещество), которые обеспечивают одно или более физических и/или химических свойств описанных композиций. Например, одно или более фармацевтически приемлемых соединений, которые могут образовывать часть рассматриваемой композиции, могут быть выбраны из группы, состоящей из кислоты (например, хлористоводородной кислоты), ее сопряженного основания (иногда упоминаемого в настоящем документе как «буфер», например, хлорид-ион) или их комбинации, и могут присутствовать в количествах, достаточных для поддержания определенного рН. Специалистам в данной области техники понятно также, что композиции, описанные в настоящем документе, могут дополнительно содержать, при необходимости, комбинацию двух или более активных дополнительных ингредиентов.
[0028] Химическая и физическая стабильность и/или фармацевтическая приемлемость описанных композиций могут быть определены с помощью технологий, хорошо известных специалистам в данной области техники. Так, например, химическая стабильность компонентов может быть определена с помощью ВЭЖХ анализа и/или цвету внешнего вида, например, после продолжительного хранения продукта. Данные физической стабильности могут быть получены с помощью других обычных аналитических приемов.
[0029] Термин «около» в контексте настоящего документа означает приблизительно, примерно, грубо или ориентировочно. При использовании термина «около» в отношении числового диапазона, он модифицирует указанный диапазон, расширяя его границы выше и ниже указанных далее числовых значений. В данном контексте термин «включает» означает «включает, но не ограничивается».
Пептиды
[0030] В данном контексте термин «пептид GLYX» относится к пептиду, имеющему активность частичного агониста/антагониста в отношении глицинового сайта NMDAR. Пептиды GLYX могут быть получены общеизвестными рекомбинантными или синтетическими способами, такими как описаны в патентах США 5763393 и 4086196, включенных в настоящий документ посредством ссылки. Иллюстративные пептиды GLYX, рассматриваемые как составная часть описанных лекарственных форм, в некоторых вариантах реализации могут включать один или более из пептидов, перечисленных в таблице 1:
[0031] «GLYX-13» представлен следующей формулой:
и полиморфы, стереоизомеры, гидраты, сольваты, свободные основания и/или подходящие солевые формы описанного выше соединения.
[0032] Например, описанные композиции могут демонстрировать эффективность при лечении многих неврологических заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, психиатрические заболевания и интрацеребральные инфекции.
[0033] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, имеют рН от около 3,5 до около 7 при 25°С. В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, имеют рН от около 4 до около 7 при 25°С.(например, от около 3,5 до около 6,5, от около 3,5 до около 5,5, от около 4 до около 6, от около 3,9 до около 5,5, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,2 до около 5,0, от около 4,2 до около 4,8, около 4,0, около 4,5) при 25°С. В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, имеют рН от около 4,2 до около 5,0 (например, от около 4,2 до около 4,8, от около 4,3 до около 4,7, от около 4,4 до около 4,6). Например, описанные композиции в некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, имеют рН около 4,5.
[0034] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать мене около 100 мг/мл пептида GLYX и/или его производного, и/или его соли (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего следующую формулу:  или его соли). В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать от около 25 мг/мл до коло 95 мг/мл (например, от около 25 мг/мл до около 75 мг/мл или от около 25 мг/мл до около 55 мг/мл) пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу). В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат от около 30 мг/мл до около 50 мг/мл пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли). В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат от около 35 мг/мл до около 45 мг/мл пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли). В других вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат 60 мг/мл пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли).
[0035] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат от около 100 мг/мл до около 500 мг/мл пептида GLYX и/или его производного, и/или его соли (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего следующую формулу: или его соли). В некоторых вариантах реализации композиции содержат от около 100 мг/мл до около 300 мг/мл (например, от около 100 мг/мл до около 200 мг/мл, от около 100 мг/мл до около 150 мг/мл соединения, от около 100 мг/мл до около 125 мг/мл) пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли). В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат от около 100 мг/мл до около 200 мг/мл (например, от около 125 мг/мл до около 175 мг/мл, от около 140 мг/мл до около 160 мг/мл, от около 145 мг/мл до около 155 мг/мл или около 150 мг/мл) пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли). В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат около 150 мг/мл пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли) и имеют рН от около 4 до около 5, например, около 4,5 при 25°С. Такие композиции, например, могут быть клинически приемлемыми для IV применения (например, при введении таких композиций достигается или поддерживается требуемая физиологическая осмоляльность; см., например, параметры осмоляльности, описанные в параграфах [0032] и [0036]-[0038]).
[0036] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать от около 350 мг до около 800 мг (например, от около 400 мг до около 750 мг, от около 350 мг до около 500 мг, от около 350 мг до около 450 мг, от около 400 мг до около 500 мг, около 400 мг, около 450 мг, от около 600 мг до около 800 мг, от около 700 мг до около 800 мг, около 750 мг) пептида GLYX и/или его производного, и/или его соли (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего следующую формулу:  или его соли).
[0037] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать от около 2 мл до около 6 мл (например, от около 2,5 мл до около 5 мл, от около 2 мл до около 4 мл, от около 2,5 мл до около 3,5 мл, около 2,7 мл, около 3 мл, от около 4 мл до около 6 мл, от около 4,5 мл до около 5,5, около 5 мл) водного раствора.
[0038] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать от около 350 мг до около 800 мг (например, от около 400 мг до около 750 мг, от около 350 мг до около 500 мг, от около 350 мг до около 450 мг, от около 400 мг до около 500 мг, около 400 мг, около 450 мг, от около 600 мг до около 800 мг, от около 700 мг до около 800 мг, около 750 мг) пептида GLYX и/или его производного, и/или его соли (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего следующую формулу:  или его соли) в водном растворе объемом от около 2 мл до около 6 мл (например, от около 2,5 мл до около 5 мл, от около 2 мл до около 4 мл, от около 2,5 мл до около 3,5 мл, около 2,7 мл, около 3 мл, от около 4 мл до около 6 мл, от около 4,5 мл до около 5,5 мл, около 5 мл).
[0039] Например, композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать от около 350 мг до около 500 мг (например, от около 350 мг до около 450 мг, от около 400 мг до около 500 мг, около 400 мг или около 450 мг) пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли) в водном растворе объемом от около 2 мл до около 4 мл, от около 2,5 мл до около 3,5 мл, около 2,7 мл, около 3 мл (например, около 400 мг пептида или соли в водном растворе объемом около 2,7 мл; или около 450 мг пептида или соли в водном растворе объемом около 3 мл). В некоторых вариантах реализации композиции имеют рН от около 4 до около 5, например, около 4,5 при 25°С, и/или при введении указанных композиции достигается или поддерживается требуемая физиологическая осмоляльность; см., например, параметры осмоляльности, описанные в параграфах [0032] и [0036]-[0038].
[0040] В качестве другого примера, композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать от около 600 мг до около 800 мг (например, от около 700 мг до около 800 мг, около 750 мг) пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли) в водном растворе объемом от около 4 мл до около 6 мл, от около 4,5 мл до около 5,5 мл, около 5 мл) (например, около 750 мг пептида или соли в водном растворе объемом около 5 мл). В некоторых вариантах реализации композиции имеют рН от около 4 до около 5, например, около 4,5 при 25°С, и/или при введении указанных композиции достигается или поддерживается требуемая физиологическая осмоляльность; см., например, параметры осмоляльности, описанные в параграфах [0032] и [0036]-[0038].
[0041] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут храниться в шприце (например, стеклянном или пластиковом шприце объемом 5 мл). В настоящему документе предусмотрен, например, шприц, содержащий описанное соединение.
[0042] В некоторых вариантах реализации концентрация пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли), которую используют в композициях, описанных в настоящем документе, может, например, зависеть от физиологической осмоляльности, которую получают при введении. Например, при более низких концентрациях, например, менее около 100 мг/мл или менее около 90 мг/мл или около 70 мг/мл пептида GLYX композиции могут быть гипотоническими (осмоляльность ниже физиологической). Гипотонические композиции могут приводить к неблагоприятным реакциям у пациента при введении, например, гипотонический раствор для инъекции может вызывать расширение и разрушение кровяных клеток, известное также как гемолиз. При более высоких концентрациях, например, более 200 мг/мл пептида GLYX, композиции (например, водные растворы) могут быть гипертоническими. Гипертонические композиции могут приводить к неблагоприятным реакциям у пациента при введении, например, к сморщиванию и зазубриванию кровяных клеток.
[0043] В некоторых вариантах реализации представлены способы введения и/или лечения расстройства (например, депрессии), причем при введении композиций, описанных в настоящем документе, поддерживают или достигают физиологическую осмоляльность от около 200 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг (например, от около 200 мОсмоль/кг до около 500 мОсмоль/кг, от около 500 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг, от около 600 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг, от около 800 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг, от около 850 мОсмоль/кг до около 850 мОсмоль/кг или от около 800 мОсмоль/кг до около 900 мОсмоль/кг). В некоторых из указанных вариантов реализации продолжительность введения составляет менее 8 часов. В некоторых вариантах реализации описанные способы предусматривают продолжительность времени инъекции от около 1 минуты до около 5 минут на дозу композиции. В других вариантах реализации описанные способы предусматривают продолжительность времени инъекции менее 1 минуты (например, от около 1 секунды до около 55 секунд, от около 5 секунд до около 55 секунд, от около 5 секунд до около 45 секунд, от около 5 секунд до около 30 секунд, от около 5 секунд до около 15 секунд).
[0044] В настоящем документе описаны, например, композиции, имеющие концентрацию пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соли) от около 60 мг/мл до около 200 мг/мл или от около 100 мг/мл до около 200 мг/мл (например, около 150 мг/мл или около 75 мг/мл). Предусмотренные способы лечения включают введение таких композиций, причем при введении, например, около 150 мг/мл GLYX-13 получают физиологическую осмоляльность от около 800 до 1100 мОсмоль/кг (или от около 820 до 880 мОсмоль/кг), или при введении, например, около 75 мг/мл GLYX-13 получают физиологическую осмоляльность от около 375 до 475 мОсмоль/кг.
[0045] В других вариантах реализации описанные композиции могут содержать органическую кислоту или другую кислоту, например, одну или более из фумаровой кислоты, яблочной кислоты, молочной кислоты, хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, уксусной кислоты, лимонной кислоты, фосфорной кислоты, азотной кислоты, серной кислоты, аскорбиновой кислоты, муравьиной кислоты, пропионовой кислоты, масляной кислоты, валериановой кислоты, капроновой кислоты, щавелевой кислоты, бензойной кислоты, угольной кислоты, фенола, мочевой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, трифторметансульфоновой кислоты или карбоновой кислоты (где, например, описанная композиция содержит хлористоводородную кислоту), при этом композиция имеет рН от около 4 до около 7 (например, от около 3,5 до около 6,5, от около 3,5 до около 5,5, от около 4 до около 6, от около 3,9 до около 5,5, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,2 до около 5,0, от около 4,2 до около 4,8, около 4,0, около 4,5) при 25°С. Например, описанная композиция может содержать водный раствор GLYX-13, где указанная композиция доведена до рН около 4,5 (или, например, от 4,1 до около 5,5 при 25°С) с помощью кислоты, полученной с концентрацией 5 н., например, 5 н. HCl. Предусмотренные способы лечения включают введение таких композиций, причем при введении получают физиологическую осмоляльность от около 480 до около 960 мОсмоль/кг. Например, предусмотрены композиции, имеющие концентрацию GLYX-13 от 120 до 150 мг/мл с осмоляльностью при введении (при продолжительности введения, например, менее 8 часов, менее 4 часов, например, от 1 минуты до около 8 часов или от около 1 до 5 минут на дозу), составляющей от около 290 до 360 мОсмоль/кг.
[0046] Предусмотрены также композиции, которые содержат, например, буфер (например, кислоту, например, хлористоводородную кислоту, или хлорид-ионы) и имеют рН от около 4 до около 7 (например, от около 3,5 до около 6,5, от около 3,5 до около 5,5, от около 4 до около 6, от около 3,9 до около 5,5, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,2 до около 5,0, от около 4,2 до около 4,8, около 4,0, около 4,5) при 25°С. Представлены способы лечения, которые включают введение такой композиции пациенту посредством инъекции, так что время инъекции/введения составляет от около 5 секунд до около 5 минут (например, от около 5 секунд до около 2 минут, от около 5 секунд до около 1 минуты, от около 5 секунд до около 55 секунд, от около 5 секунд до около 45 секунд, от около 5 секунд до около 30 секунд, от около 5 секунд до около 15 секунд) и приводит к достижению физиологической осмоляльности от около 580 до около 720 мОсмоль/кг.
[0047] В настоящем документе описаны, например, композиции, которые имеют концентрацию пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, например, в параграфе [0027], или его соли), составляющую от около 100 мг/мл до около 200 мг/мл (например, около 150 мг/мл). Предусмотренные способы лечения включают введение таких композиций, так что при введении получают физиологическую осмоляльность от около 500 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг (например, от около 600 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг, от около 800 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг, от около 850 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг).
[0048] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат кислоту, например, хлористоводородную кислоту, и имеют рН от около 4 до около 7 (например, от около 3,5 до около 6,5, от около 3,5 до около 5,5, от около 4 до около 6, от около 3,9 до около 5,5, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,2 до около 5,0, от около 4,2 до около 4,8, около 4,0, около 4,5) при 25°С. Предусмотренные способы лечения включают введение таких композиций, так что при введении получают физиологическую осмоляльность от около 500 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг (например, от около 600 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг, от около 800 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг, от около 850 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг). Например, композиции, описанные в настоящем документе, могут иметь концентрацию пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, например, в параграфе [0027], или его соли), составляющую от около 125 мг/мл до около 175 мг/мл (например, около 150 мг/мл) с осмоляльностью при введении от около 600 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг (например, от около 800 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг, от около 850 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг). В некоторых из указанных вариантов реализации композиции вводят с продолжительностью введения, например, менее 8 часов, менее 4 часов; например, от менее одной минуты до 8 часов, 4 часов, 2 часов, 1 часа или 0,5 часа; от около 1 минуты до около 8 часов, 4 часов, 2 часов, 1 часа или 0,5 часа; от около 1 минуты до около 5 минут, менее одной минуты, например, от около 1 секунды до около 55 секунд, от около 5 секунд до около 55 секунд, от около 5 секунд до около 45 секунд, от около 5 секунд до около 30 секунд, от около 5 секунд до около 15 секунд) на дозу.
[0049] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат, например, буфер (например, кислоту, например, хлористоводородную кислоту, или хлорид-ионы) и имеют рН от около 3,5 до около 6 (например, от около 3,9 до около 5,5, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,2 до около 5,0, от около 4,2 до около 4,8, около 4,0, около 4,5) при 25°С. Представлены способы лечения, которые включают введение такой композиции пациенту посредством инъекции, так что время инъекции/введения составляет от около 5 секунд до около 5 минут (например, от около 5 секунд до около 2 минут, от около 5 секунд до около 1 минуты, менее одной минуты, например, от около 1 секунды до около 55 секунд, от около 5 секунд до около 55 секунд, от около 5 секунд до около 45 секунд, от около 5 секунд до около 30 секунд, от около 5 секунд до около 15 секунд) и приводит к достижению физиологической осмоляльности от около 600 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг (например, от около 800 мОсмоль/кг до около 1000 мОсмоль/кг, от около 850 мОсмоль/кг до около 950 мОсмоль/кг).
2
2
2
2
[0050] Описанные водные композиции стабильны в том отношении, что соединение не подвергается быстрому разложению или разрушению в растворе с течением времени. Так, в некоторых вариантах реализации описанная композиция содержит минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из цикло-Pro-Thr (пролин-треонин-дикетопиперазина), Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 10 дней или более, через 30 дней или более, через 40 дней или более, или через 60 дней, или 90 дней или более при комнатной температуре. В некоторых других вариантах реализации описанная композиция содержит минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из цикло-Pro-Thr, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 20 дней при комнатной температуре. Например, описанные композиции могут содержать минимальное количество соединения:
2
2
[0051] В некоторых других вариантах реализации описанная композиция содержит минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из цикло-Pro-Thr, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 3 месяца при температуре от около 0°С до 10°С (например, от около 2°С до 8°С, около 5°С), 6 месяцев при температуре от около 0°С до 10°С (например, от около 2°С до 8°С, около 5°С), через 9 месяцев при температуре от около 0°С до 10° (например, от около 2°С до 8°С, около 5°С), через 12 месяцев при температуре от около 0°С до 10°С (например, от около 2°С до 8°С, около 5°С), через 5 месяцев при температуре от около 0°С до 10°С (например, от около 2°С до 8°С, около 5°С) или даже через 24 месяца или более при температуре от около 0°С до 10°С (например, от около 2°С до 8°С, около 5°С).
[0052] В некоторых вариантах реализации буфер выбран из группы, состоящей из ацетата, цитрата, фосфата, янтарной кислоты, карбоната, бикарбоната и малеиновой кислоты и ее солей. В другом варианте реализации буфер представляет собой соль, выбранную из группы, состоящей из хлорида, натрия, калия и аммония. В другом варианте реализации пептид GLYX (например, пептид GLYX-13 и/или его производное, и/или его соль; например, пептид GLYX, имеющий следующую формулу:  или его соль) может сам действовать как буфер (например, с pKa от около 7 до около 7,5). В указанных вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, содержат пептид GLYX (например, пептид GLYX-13 и/или его производное, и/или его соль; например, пептид GLYX, имеющий представленную выше формулу, или его соль) и кислоту (например, для получения требуемого рН), выбранную из группы, состоящей из хлористоводородной кислоты, фосфорной кислоты или серной кислоты (например, хлористоводородную кислоту).
+
+
[0053] В другом варианте реализации представлена водная композиция, которая состоит по существу из воды, пептида GLYX (например, пептида GLYX-13 и/или его производного, и/или его соли; например, пептида GLYX, имеющего представленную выше формулу, или его соль) и кислоты. В некоторых вариантах реализации композиции содержат катионный противоион, который выбран из группы, состоящей из H,, протонированной формы пептида, одной или более протонированных форм любого одного или более продуктов разложения, описанных в настоящем документе, или их комбинации. В некоторых вариантах реализации катионный противоион выбран из группы, состоящей из Н и протонированной формы пептида или их комбинации. В некоторых вариантах реализации композиции по существу не содержат катионных источников, отличных от тех, которые описаны выше, например, катионов металлов, экзогенных протонированных аминокислот или пептидов, ионов тетраалкиламмония и других поглотителей протонированной кислоты.
[0054] В некоторых вариантах реализации композиции по существу не содержат анионов, отличных от хлорида, например, по существу не содержат ацетата и других карбоксилатсодержащих фрагментов, бромида, йодида, сульфатсодержащих фрагментов, сульфинатсодержащих фрагментов и фосфатсодержащих фрагментов.
[0055] В некоторых вариантах реализации в описанной композиции присутствует сорастворитель, и он выбран из группы, состоящей из полиэтиленгликоля, глицерина, этанола, полипропиленгликоля и N,N-диметилацетамида. Например, в некоторых вариантах реализации сорастворитель представляет собой полиэтиленгликоль, имеющий молекулярную массу от около 200 до около 900 Да. В некоторых вариантах реализации сорастворитель представляет собой полиэтиленгликоль, имеющий молекулярную массу около 400 Да, например, от около 400 Да до около 700 Да, например, 200, 300, 400, 500, 500, 700 или 800 Да.
2
2
2
2
[0056] В некоторых вариантах реализации описанная композиция содержит минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из цикло-Pro-Thr, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 1 неделю, 10 дней, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 2 месяца, 3 месяца, 4 месяца, 5 месяцев, 6 месяцев, 9 месяцев, 1 год, 2 года или более при температуре от около 2 до около 8°С. В другом варианте реализации описанная композиция содержит минимальное количество одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из цикло-Pro-Thr, Thr-Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr, Pro-Pro-Thr-NH, Thr-Pro, Pro-Thr, Pro-Thr-NH, пролина и/или треонина, через 1 неделю, 10 дней, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 2 месяца, 3 месяца, 4 месяца, 5 месяцев или 6 месяцев, 12 месяцев или более при 25°С.
[0057] В другом варианте реализации описанная композиция содержит менее 0,5 масс. процента (или, например, менее 0,7 масс. процента, или менее 1 масс. процента, менее 2 масс. процентов, менее 3 масс. процентов, менее 4 масс. процентов, например, от около 1 до 3 масс. процентов) Thr-Pro-Pro-Thr (дезамид GLYX-13) через 3 месяца или через 6 месяцев, или через 12 месяцев, или более. В другом варианте реализации композиция содержит менее 0,1 масс. процента Thr-Pro-Pro-Thr через около 10 дней или через около 20 дней, или через около 30 дней.
[0058] В другом варианте реализации описанная композиция содержит менее 0,5 или менее около 0,6 масс. процента (или, например, менее около 1,2 масс. процента, или менее около 0,7 масс. процента, менее 1 масс. процента, менее 2 масс. процентов, менее 3 масс. процентов, менее 4 масс. процентов, менее 5 масс. процентов, менее 6 масс. процентов, менее 7 масс. процентов, где массовый процент примеси представляет собой процент от фармацевтически активного соединения, например, GLYX-13) цикло-Pro-Thr через 3 месяца или через 6 месяцев, или через 12 месяцев, 24 месяца или более при 8°С. В другом варианте реализации описанная композиция содержит менее около 0,5 масс. процента цикло-Pro-Thr через около 10 дней или через около 20 дней, или через около 30 дней при 40°С. В другом варианте реализации композиции могут содержать до около 5 масс. процентов, например, от около 0,01 до около 5 масс. процентов, например, от около 4 до около 5 масс. процентов дикетопиперазина при введении.
2
2
[0059] В другом варианте реализации описанная композиция содержит менее около 0,5 масс. процента (или, например, менее около 0,7 масс. процента или менее около 1 масс. процента) Pro-Thr-NH через 10 дней или через 20 дней, или через 30 дней, или более. В другом варианте реализации композиция содержит менее 0,3 масс. процента Pro-Thr-NH через около 10 дней или через около 20 дней, или через около 30 дней при 40°С.
[0060] В некоторых вариантах реализации описанная композиция содержит менее около 0,5 масс. процента (или, например, менее около 0,1 масс. процента, или менее 0,4 масс. процента, или менее 1 масс. процента Thr-Pro-Pro через 10 дней или через 20 дней, или через 30 дней. В другом варианте реализации композиция содержит менее 0,1 масс. процента Thr-Pro-Pro через около 10 дней или через около 20 дней, или через около 30 дней при 40°С.
[0061] Описанные композиции стабильны в том отношении, что соединение не подвергается быстрому разложению или разрушению в растворе с течением времени. В некоторых вариантах реализации быстро разлагается или разрушается менее 5% (например, менее 4%, менее 3%, менее 2%, менее 1%, менее 0,5%) соединения в растворе с течением времени (например, через 10 или более дней) при температуре, которая равна, ниже или выше комнатной температуры.
[0062] В некоторых вариантах реализации быстро разлагается или разрушается менее 5% (например, менее 4%, менее 3%, менее 2%, менее 1%, менее 0,5%) соединения в растворе через 10 дней или более, через 20 дней или более, через 30 дней или более, через 40 дней или более, через 50 дней или более, через 60 дней или более, или через 90 дней или более (например, через 20 дней или более) при температуре, которая выше комнатной температуры (например, 30°С, 35°С, 40°С, 45°С; например, 40°С). В одном из вариантов реализации быстро разлагается или разрушается менее 5% (например, менее 4%, менее 3%, менее 2%, менее 1%, менее 0,5%) соединения в растворе через 21 день при 40°С.
[0063] В других вариантах реализации быстро разлагается или разрушается менее 5% (например, менее 4%, менее 3%, менее 2%, менее 1%, менее 0,5%) соединения в растворе через 10 дней или более, через 30 дней или более, через 60 дней или более, через 90 дней или более, через 6 месяцев или более, или через один год или более при комнатной температуре.
[0064] В других вариантах реализации быстро разлагается или разрушается менее 5% (например, менее 4%, менее 3%, менее 2%, менее 1%, менее 0,5%) соединения в растворе через 1 месяц при 0°С или ниже, через 3 месяца при 0°С или ниже, через 6 месяцев при 0°С или ниже, через 9 месяцев при 0°С или ниже, через 12 месяцев при 0°С или ниже, через 18 месяцев при 0°С или ниже, или через 24 месяца или более при 0°С или ниже.
[0065] В некоторых вариантах реализации композиции, описанные в настоящем документе, могут демонстрировать одну или более характеристик стабильности, указанных выше.
[0066] В некоторых вариантах реализации композиции содержат минимальные количества одного или обоих продуктов разложения, дикетопиперазина и пролин-треонин-амида. В других вариантах реализации композиции содержат минимальные количества одного или более продуктов разложения, выбранных из группы, состоящей из дикетопиперазина, пролин-треонин-амида и любого одного или более других продуктов разложения, описанных в настоящем документе.
[0067] В некоторых вариантах реализации композиции содержат менее 1 масс. процента (например, менее 0,7 масс. процента, менее 0,5 масс. процента, менее 0,4 масс. процента, менее 0,3 масс. процента) дикетопиперазина через 10 дней или более, через 20 дней или более, через 30 дней или более, через 40 дней или более, через 50 дней или более, через 60 дней или более, или через 90 дней или более (например, через 20 дней или более) при температуре, которая выше комнатной температуры (например, 30°С, 35°С, 40°С, 45°С; например, 40°С). В одном из вариантов реализации композиции содержат менее 0,7 масс. процента, менее 0,4 масс. процента или менее 0,3 масс. процента дикетопиперазина через 21 день в растворе при 40°С. В другом варианте реализации композиции могут содержать до около 5 масс. процентов дикетопиперазина при введении. Значения массовых процентов, представленные выше, определяют по следующему уравнению: (масса примеси) / (масса остального соединения) * 100.
[0068] В некоторых вариантах реализации композиции содержат менее 1 масс. процента (или, например, менее 0,7 масс. процента, менее 0,5 масс. процента, менее 0,4 масс. процента, менее 0,3 масс. процента, менее 0,2 масс. процента или менее 0,1 масс. процента) пролин-треонин-амида через 10 дней или более, через 20 дней или более, через 30 дней или более, через 40 дней или более, через 50 дней или более, через 60 дней или более, или через 90 дней или более (например, через 20 дней или более) при температуре, которая выше комнатной температуры (например, 30°С, 35°С, 40°С, 45°С; например, 40°С). В одном из вариантов реализации композиции содержат менее 0,3 масс. процента или менее 0,2 масс. процента пролин-треонин-амида через 21 день в растворе при 40°С. Значения массовых процентов, представленные выше, определяют по следующему уравнению: (масса пролин-треонин-амида) / (масса остального соединения) * 100.
[0069] В некоторых вариантах реализации композиции получают по способам, которые включают (i) обеспечение первой комбинации, содержащей соединение и воду; (ii) приведение в контакт первой комбинации с хлористоводородной кислотой или ее источником в количестве, достаточном для достижения рН от около 3,5 до около 6,5.
[0070] Варианты реализации могут включать любую из характерных особенностей, описанных выше, а также любую комбинацию двух или более характерных особенностей, описанных выше.
Способы
[0071] Настоящее описание отчасти относится к применению описанных внутривенных композиций GLYX-13 для лечения различных других неврологических состояний, которые предположительно можно лечить в соответствии со способами настоящего описания. Иллюстративные патологические состояния включают, но не ограничиваются ими, нарушение способности к обучению, аутическое расстройство, расстройство гиперактивности с дефицитом внимания, тревожное расстройство, депрессию, мигрень, синдром Туретта, фобию, посттравматическое стрессовое расстройство, деменцию, СПИД-деменцию, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, спастичность, миоклонию, мышечный спазм, биполярное расстройство, невропатическую боль, расстройства, связанные со злоупотреблением психоактивными веществами, недержание мочи, инсульт, ишемию, эпилепсию и шизофрению.
[0072] Предусмотренные способы включают способ лечения аутизма и/или расстройства аутического спектра у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение пациенту эффективного количества описанной композиции (например, композиции, описанной выше). В одном из вариантов реализации предусмотрен способ уменьшения симптомов аутизма у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение пациенту эффективного количества описанной композиции. Например, при введении композиция может обеспечивать уменьшение частоты возникновения одного или более симптомов аутизма, таких как избегание визуального контакта, неспособность к социализации, дефицит внимания, плохое настроение, гиперактивность, патологическое восприятие звуков, неправильная речь, нарушение сна и персеверация. Указанное снижение частоты возникновения может быть измерено относительно частоты возникновения у пациента, не проходившего лечение, или у субъектов, не проходивших лечение.
[0073] В некоторых вариантах реализации пациенты, страдающие от аутизма, страдают также от другого медицинского состояния, такого как синдром ломкой X-хромосомы, туберозный склероз, синдром врожденной краснухи и нелеченая фенилкетонурия.
[0074] В другом варианте реализации предусмотрены способы лечения расстройства у пациента, нуждающегося в этом, где указанное расстройство выбрано из группы, состоящей из: эпилепсии, СПИДа и/или СПИД-деменции, болезни Паркинсона, множественной системной атрофии, прогрессирующего надъядерного паралича, атаксии Фридриха, аутизма, синдрома ломкой Х-хромосомы, туберозного склероза, расстройства дефицита внимания, оливо-понто-церебеллярной атрофии, церебрального паралича, медикаментозного неврита зрительного нерва, периферической нейропатии, миелопатии, ишемической ретинопатии, глаукомы, остановки сердца, поведенческих расстройств и расстройств импульсного контроля, которые включают введение описанного соединения, например, GLYX-13. В настоящем документе предусмотрен также способ лечения кашля, например, неконтролируемого кашля, включающий введение композиции GLYX-13 пациенту, нуждающемуся в этом.
[0075] Например, в настоящем документе представлены способы лечения доброкачественной роландической эпилепсии, лобнодолевой эпилепсии, младенческих судорог, ювенильной миоклонической эпилепсии, синдрома Леннокса-Гасто, синдрома Ландау-Клефнера, синдрома Драве, прогрессирующей миоклонической эпилепсии, рефлекторной эпилепсии, синдрома Расмуссена, височной эпилепсии, лимбической эпилепсии, эпилептического статуса, абдоминальной эпилепсии, выраженной билатеральной миоклонии, катамениальной эпилепсии, расстройства джексоновской эпилепсии, болезни Лафора и/или светочувствительной эпилепсии, включающие введение эффективного количества описанной композиции.
[0076] В одном из вариантов реализации в настоящем документе предусмотрены способы лечения расстройства дефицита внимания, ADHD (расстройства гиперактивности с дефицитом внимания), шизофрении (например, шизоаффективных расстройств, бредовых расстройств, например, параноидального типа, шизофрении гебефренического и/или кататонического типа), биполярного расстройства (включая биполярное расстройство I, биполярное расстройство II, циклотимию), пограничного расстройства личности, тревожного расстройства (включая социальное тревожное расстройство, избегающее расстройство личности), обсессивно-компульсивного расстройства, облегчения опиатной, никотиновой и/или алкогольной зависимости (например, способ лечения такой зависимости или облегчения побочных эффектов отказа от такой зависимости), повреждения спинного мозга, диабетической ретинопатии, травматического повреждения головного мозга, лобно-височной деменции, посттравматического стрессового синдрома и/или хореи Хантингтона у пациента, нуждающегося в этом, которые включают введение описанной композиции. Например, пациенты, страдающие от шизофрении, зависимости (например, алкогольной или опиатной), аутизма (и расстройств аутического спектра), хореи Хантингтона, травматического повреждения головного мозга, повреждения спинного мозга, посттравматического стрессового синдрома или диабетической ретинопатии, могут страдать вследствие измененной экспрессии или функции рецептора NMDA.
[0077] Например, в настоящем документе представлен способ лечения шизофрении, например, негативных и когнитивных симптомов шизофрении у пациента, страдающего от них, включающий введение терапевтически эффективного количества описанной композиции.
[0078] В настоящем документе предусмотрен способ лечения инсульта и/или ишемии, например, ишемического инсульта, ишемии головного мозга, преходящего ишемического приступа, ишемии сердца и/или инфаркта миокарда у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение фармацевтически эффективного количества описанной композиции.
[0079] В настоящем документе представлен также способ модулирования экспрессии гена-мишени аутизма в клетке, включающий приведение в контакт указанной клетки с эффективным количеством описанной композиции. Экспрессия гена аутизма может быть, например, выбрана из АВАТ, АРОЕ, CHRNA4, GABRA5, GFAP, GRIN2A, PDYN и PENK. В другом варианте реализации представлен способ модулирования синаптической пластичности у пациента, страдающего от расстройства, связанного с синаптической пластичностью, включающий введение пациенту эффективного количества описанной композиции.
[0080] В другом варианте реализации представлен способ лечения болезни Альцгеймера или, например, лечения потери памяти, например, сопровождающей болезнь Альцгеймера на ранней стадии, у пациента, нуждающегося в этом, включающий ведение описанной композиции. В настоящем документе представлен также способ модулирования амилоидного белка Альцгеймера (например, бела-амилоидного пептида, например, изоформы А 1-42), in vitro или in vivo (например, в клетке), включающий приведение в контакт указанного белка с эффективным количеством описанной композиции. Например, в некоторых вариантах реализации описанная композиция может блокировать способность такого амилоидного белка ингибировать долгосрочную потенциацию в гиппокампальных срезах, а также апоптическую гибель нейронных клеток. В некоторых вариантах реализации описанная композиция может обеспечивать нейропротекторные свойства для пациента, страдающего от болезни Альцгеймера, нуждающегося в этом, например, может обеспечивать терапевтический эффект на гибель нейронных клеток, связанных с поздней стадией болезни Альцгеймера.
[0081] В настоящем документе предусмотрено также применение описанной композиции GLYX-13 для обработки клинически релевантного антидепрессанта и анксиолитика и для лечения депрессии и тревожного расстройства в целом.
[0082] В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение по меньшей мере частично относится к применению описанной композиции GLYX-13 отдельно или в комбинации с одним или более антидепрессантами, такими как трициклические антидепрессанты, MAO-I, SSRI и ингибиторы двойного и тройного захвата, и/или анксиолитиками для производства лекарственного средства для лечения депрессии, тревожного расстройства и/или других родственных заболеваний, включая обеспечение облегчения депрессии, тревожного расстройства и предотвращение рецидива депрессии и тревожного расстройства. Иллюстративные лекарства, которые могут быть использованы в комбинации с пептидом GLYX, включают анафранил, адапин, авентил, элавил, норпрамин, памелор, пертофран, синекван, сурмонтил, тофранил, вивактил, парнат, нардил, марплан, целекса, лексапро, лувокс, паксил, прозак, золофт, велбутрин, эффексор, ремерон, симбалта, десирел (тразодон) и людиомил. Следует понимать, что в некоторых вариантах реализации введение описанной композиции GLYX-13 может действовать быстрее, чем совместно вводимый антидепрессант, и, следовательно, такое совместное введение (например, введение GLYX-13 в качестве неотложной или экстренной меры при инициации схемы введения другого, медленнее действующего антидепрессанта примерно в то же время) может иметь особенное преимущество в распространенной ситуации, в которой второй антидепрессант действует медленнее.
[0083] В настоящем документе предусмотрены также способы лечения депрессии, которые включают введение описанной композиции в комбинации (например, одновременно или последовательно) с другим нефармакологическим средством лечения, таким как психотерапия, электроконвульсивная терапия, стимуляция блуждающего нерва и/или транскраниальная магнитная стимуляция.
[0084] Предполагают, что в соответствии с данным аспектом настоящего описания можно лечить многочисленные депрессивные состояния без ухудшения поведения или двигательной координации, а также без инициации или промотирования судорожной активности. Иллюстративные депрессивные состояния, которые предположительно можно лечить в соответствии с данным аспектом описания, включают, но не ограничиваются ими, большое депрессивное расстройство, дистимическое расстройство, психотическую депрессию, послеродовую депрессию, предменструальный синдром, предменструальной дисфорическое расстройство, сезонное аффективное расстройство (SAD), тревожное расстройство, расстройство настроения, депрессии, вызванные хроническими медицинскими состояниями, такими как рак или хроническая боль, химиотерапия, хронический стресс, посттравматические стрессовые расстройства, риск суицида и биполярное расстройство (или маниакально-депрессивное расстройство). Следует понимать, что депрессия, вызванная биполярным расстройством, может быть упомянута как биполярная депрессия. Кроме того, пациенты, страдающие от любой формы депрессии, зачастую испытывают тревогу. Различные симптомы, связанные с тревожным расстройством, включают, среди прочих, страх, панику, учащенное сердцебиение, затруднение дыхания, усталость, тошноту и головные боли. Предполагают, что способы настоящего описания могут быть использованы для лечения тревожного расстройства и любых ее симптомов.
[0085] В настоящем документе представлены также способы лечения депрессии при лечении невосприимчивых пациентов или при лечении резистентной депрессии, например, пациентов, страдающих от депрессивного расстройства, которые не отвечают и/или не отвечали на адекватные курсы по меньшей мере одного или по меньшей мере двух других антидепрессивных соединений или терапевтических средств. Например, в настоящем документе представлен способ лечения депрессии при лечении невосприимчивого пациента, включающий а) необязательную идентификацию пациента как невосприимчивого к лечению и b) введение указанному пациенту эффективной дозы описанной композиции GLYX-13.
[0086] В одном из вариантов реализации в настоящем документе представлены способы неотложного лечения симптомов депрессии у пациента, нуждающегося в этом, включающие введение эффективного количества GLYX-13, например, в виде однократной единичной дозы, например, внутривенно или подкожно. Указанные способы могут облегчать по меньшей мере один симптом депрессии у пациента спустя около 2 недель или менее, 1 неделю или менее, 1 день или менее, или 1 час или менее (например, 15 минут или менее, полчаса или менее) после указанного введения. В некоторых вариантах реализации указанные способы могут облегчать по меньшей мере один симптом депрессии у пациента в течение около 1 дня или более, 1 недели или более, или 2 недель или более после указанного введения. Например, в настоящем документе представлен способ, включающий введение эффективного количества GLYX-13 пациенту, страдающему от депрессии, где у указанного пациента по существу облегчен по меньшей мере один симптом депрессии существенно раньше после первого введения GLYX-13, по сравнению с тем же пациентом, которому вводили антидепрессивное соединение, не являющееся GLYX-13. Специалистам в данной области техники понятно, что такие способы неотложного введения могут иметь преимущество в клинических или амбулаторных условиях.
[0087] Симптомы депрессии и их облегчение могут быть оценены врачом или психологом, например, посредством изучения психического состояния. Симптомы включают мысли о безысходности, членовредительство или суицид и/или отсутствие позитивных мыслей или планов.
[0088] В некоторых вариантах реализации пациент представляет собой человека, например, педиатрического пациента.
[0089] В некоторых вариантах реализации предусмотренные способы относится к применению описанных композиций отдельно или в комбинации с одним или более другими агентами для изготовления лекарственного средства для лечения депрессии или другого подразумеваемого показания.
[0090] GLYX-13 может обеспечивать высокий терапевтический индекс. Например, GLYX-13 может быть терапевтически эффективным в диапазоне внутривенной дозы от около 1 до около 10 мг/кг. В некоторых вариантах реализации атаксия не возникает, например, в дозе 500 мг/кг, внутривенно
[0091] В одном из вариантов реализации указанный способ включает введение одной дозы или одной или более доз описанной композиции. В некоторых вариантах реализации у пациента наблюдают существенное улучшение через 12 часов, через 1 день, через 1 неделю, через 2 дня, через 3 дня, через 4 дня, через 5 дней, через 6 дней или даже через 8 дней после введения одной (однократной) дозы.
[0092] Терапевтически эффективное количество описанной композиции, необходимое для применения в терапии, варьируется в зависимости от природы состояния, подлежащего лечению, продолжительности требуемого периода лечения, возраста и состояния пациента, и в конечном итоге определяется лечащим врачом. Однако, в целом, лекарственные формы, используемые для лечения взрослого человека, обычно составляют от около 10 мг/мл до около 70 мг/мл или от 70 до 200 мг/мл. В некоторых вариантах реализации описанные лекарственные формы могут обеспечивать доставку пациенту от около 0,5 до 2 грамм в сутки GLYX-13. Множество факторов могут обусловливать введение описанной композиции в широком диапазоне доз. При введении в комбинации с другими терапевтическими агентами, может быть обеспечена относительно более низкая доза описанных композиций. В результате лекарственная форма описанной композиции может составлять от около 10 мг/мл до около 70 мг/мл или, например, от около 70 мг/мл до около 200 мг/мл. Доза описанной композиции может представлять собой любую дозу, включая, но не ограничиваясь ими, около 10 мг/мл, 15 мг/мл, 20 мг/мл, 25 мг/мл, 30 мг/мл, 35 мг/мл, 40 мг/мл, 45 мг/мл, 50 мг/мл, 55 мг/мл, 60 мг/мл, 65 мг/мл или 70 мг/мл. В качестве обычных лекарственных форм описаны также более концентрированные растворы, включая 80 мг/мл, 100 мг/мл, 125 мг/мл, 150 мг/мл или 200 мг/мл. Необходимая доза может быть для удобства введена в виде одной дозы или в виде нескольких доз, вводимых с соответствующими интервалами, например, в виде двух, трех, четырех или более субдоз в сутки. Фармацевтические композиции согласно настоящему описанию, подходящие для парентерального введения, включают рассматриваемую композицию в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми стерильными, изотоническими водными или неводными растворами, дисперсиями, суспензиями или эмульсиями, или стерильными порошками, которые могут быть восстановлены в стерильные растворы или дисперсии для инъекций непосредственно перед применением, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические агенты, растворимые вещества, которые поддерживают изотоничность препарата с кровью предполагаемого реципиента, или суспендирующие агенты, или загустители.
[0093] Примеры подходящих водных и неводных носителей, которые могут быть использованы в фармацевтических композициях согласно настоящему описанию, включают воду, этанол, многоатомные спирты (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.п.) и их подходящие смеси, растительные масла, такие как оливковое масло, и органические сложные эфиры для инъекций, такие как этилолеат, и циклодекстрины. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, с помощью материалов покрытия, таких как лецитин, сохраняя требуемый размер частиц в случае дисперсий, и с помощью поверхностно-активных веществ.
[0094] После подробного описания настоящего изобретения оно станет более понятно со ссылкой на следующие примеры, которые включены лишь с целью иллюстрации некоторых аспектов и вариантов реализации настоящего изобретения, и никоим образом не предназначены для ограничения настоящего изобретения.
ПРИМЕР 1. GLYX-13, 60 мг/мл в солевом растворе, рН от 6,5 до 7,0
[0095] Получали 90 г/л раствор хлорида натрия в воде для инъекций в соответствии с фармакопеей США, USP (WFI).
Получение 180 мг/мл раствора GLYX-13
[0096] Добавляли воду для инъекций USP (WFI) в емкость для смешивания до количества, эквивалентного 20% конечной требуемой (QS) массы, и записывали точную добавленную массу. Перемешивали раствор и добавляли рассчитанное количество уксусной кислоты, USP, в емкость для смешивания. Количество уксусной кислоты составляло от 0,9 до 1,0 молярного эквивалента относительно целевого количества GLYX-13 в партии препарата.
[0097] Добавляли рассчитанное количество свободного основания GLYX-13 в емкость для смешивания и записывали точную добавленную массу. Продолжали перемешивание в течение 15-30 минут.
[0098] Прекращали перемешивание и добавляли рассчитанное количество 90 г/л солевого раствора в емкость для перемешивания. Количество NaCl должно быть равно количеству, необходимому для достижения концентрации 9 г/л в готовом препарате.
Получение 60 мг/мл раствора GLYX-13
[0099] Переносили все содержимое емкости для смешивания в полимерный смесительный пакет или в большую смесительную емкость из нержавеющей стали. Перемешивали в течение 15-30 минут. Добавляли достаточное количество WFI к раствору для достижения конечного целевого объема. Проверяли содержание GLYX-13 с помощью ВЭЖХ и измеряли рН. Если рН выходил за пределы диапазона 6,6-6,9, регулировали рН с помощью уксусной кислоты или NaOH. Готовая партия должна содержать, на литр раствора, 60 грамм GLYX-13 и от 6 до 6,4 грамм уксусной кислоты в 0,9% растворе хлорида натрия; рН должен составлять от 6,5 до 7,0.
Стерилизация и наполнение пробирок
[00100] Раствор стерилизовали асептической фильтрацией через следующие три фильтра, расположенные последовательно: предварительная фильтрация через фильтр 0,45 мкм, затем через два фильтра 0,22 мкм. Каждую пробирку наполняли 20 мл (от 20 до 20,5 мл) нерасфасованного стерильного раствора, пробирки закрывали пробками и крышками. Каждая пробирка содержала 1,2 грамм GLYX-13 в 20 мл раствора.
ПРИМЕР 2. GLYX-13 в буферных растворах
[00101] А. Получали 0,1 М буферный раствор Tris («TrisHCl-7,0») в воде, рН 7,0, используя HCl для регулирования рН.
Получение 60 мг/мл раствора GLYX-13
[00102] Добавляли примерно 75% требуемого объема буфера TrisHCl-7,0 в емкость для перемешивания. На каждый литр требуемого объема партии взвешивали 60 г свободного основания GLYX-13 и добавляли в емкость для перемешивания. Перемешивали в течение 15 минут. Измеряли рН. Если рН выходил за пределы диапазона (7,0±0,05), регулировали, соответственно, с помощью HCl или NaOH. Добавляли достаточное количество TrisHCl-7,0 для достижения конечного объема партии. Готовый нерасфасованный раствор должен содержать, на литр раствора, 60 грамм свободного основания GLYX-13 в 0,1 М буфере трис(гидроксиметил)аминометан/HCl, рН 7,0.
Стерилизация и наполнение пробирок
[00103] Стерилизовали через фильтр и наполняли пробирки так, как описано выше. Каждая пробирка содержала 1,2 грамм GLYX-13 в 20 мл раствора (GLYX-13 60 мг/мл, буфер трис(гидроксиметил)аминометан/HCl, рН 7,0).
[00104] В. 60 мг/мл в цитратном буферном растворе, рН 5,6: Получали 0,1 М раствор тринатриевой соли лимонной кислоты в воде и при необходимости доводили рН до 5,6 с помощью HCl и NaOH.
Получение 60 мг/мл раствора GLYX-13
[00105] Добавляли примерно 75% требуемого объема партии буфера из лимонной кислоты/цитрата натрия, рН 5,6, в емкость для перемешивания. На каждый литр требуемого объема партии взвешивали 60 г свободного основания GLYX-13 и добавляли в емкость для перемешивания. Перемешивали в течение 15 минут. Измеряли рН. Если рН выходил за пределы диапазона (5,6±0,05), регулировали, соответственно, с помощью HCl или NaOH. Добавляли достаточное количество буфера из лимонной кислоты/цитрата натрия (рН 5,6) для достижения конечного объема партии. Готовый нерасфасованный раствор должен содержать, на литр раствора, 60 грамм свободного основания GLYX-13 в 0,1 М буфере из лимонной кислоты/цитрата натрия, рН 5,6.
С. Стерилизация и наполнение пробирок
[00106] Стерилизовали через фильтр и наполняли пробирки так, как описано выше. Каждая пробирка содержала 1,2 грамм GLYX-13 в 20 мл раствора. (GLYX-13 в буфере из лимонной кислоты/цитрата натрия, рН 5,6)
С. GLYX-13, 200 мг/мл в буферном растворе Tris, рН 7,5
[00107] А. Получали 0,1 М буферный раствор Tris («TrisHCl-7,5») в воде, рН 7,5, используя HCl для регулирования рН.
[00108] В. Получение 200 мг/мл раствора GLYX-13
[00109] Добавляли примерно 50% требуемого объема буфера TrisHCl-7,5 в емкость для перемешивания. На каждый литр требуемого объема партии взвешивали 200 г свободного основания GLYX-13 и добавляли в емкость для перемешивания. Перемешивали в течение 15 минут. Измеряли рН. Если рН выходил за пределы диапазона (7,5±0,05), регулировали, соответственно, с помощью HCl или NaOH. Добавляли достаточное количество TrisHCl-7,5 для достижения конечного объема партии. Готовый нерасфасованный раствор должен содержать, на литр раствора, 200 грамм свободного основания GLYX-13 в 0,1 М буфере трис(гидроксиметил)аминометан/HCl, рН 7,5.
Стерилизация и наполнение пробирок
[00110] Стерилизовали через фильтр и наполняли пробирки так, как описано выше. Каждую пробирку наполняли 5 мл (от 4,85 до 5,15 мл) нерасфасованного стерильного раствора, закрывали пробкой и крышкой. Каждая пробирка содержала 1 грамм GLYX-13 в 10 мл раствора. (GLYX-13, 200 мг/мл в буфере трис(гидроксиметил)аминометан/HCl, рН 7,5)
D. GLYX-13, 200 мг/мл в буферном растворе Tris и 40% растворе ПЭГ400, рН 7,5
[00111] Получали 0,1 М буферный раствор Tris («TrisHCl-7,5») в воде, рН 7,5, используя HCl для регулирования рН.
Получение 200 мг/мл раствора GLYX-13
[00112] Добавляли примерно 20 л 0,2 М буфера TrisHCl-7,5 в емкость для перемешивания. В емкость добавляли 40 л ПЭГ400 и перемешивали в течение 30 минут. Взвешивали 20 кг свободного основания GLYX-13 и добавляли в емкость для перемешивания. Перемешивали в течение от 0,5 до 2 часов. Брали образец и измеряли рН. Если рН выходил за пределы диапазона (7,5±0,05), регулировали, соответственно, с помощью HCl или NaOH. Добавляли достаточное количество TrisHCl-7,5 (примерно 30 л) для достижения конечного объема партии 100 л. Готовый нерасфасованный раствор должен содержать, на литр раствора, 200 грамм свободного основания GLYX-13 и 40% ПЭГ400 в 0,1 М буфере трис(гидроксиметил)аминометан/HCl, рН 7,5.
Стерилизация и наполнение пробирок
[00113] Стерилизовали через фильтр и наполняли пробирки так, как описано выше. Каждую пробирку наполняли 10 мл (от 10 до 10,5 мл) нерасфасованного стерильного раствора, закрывали пробкой и крышкой. Каждая пробирка содержала 2 грамм GLYX-13 в 10 мл раствора. (GLYX-13, 200 мг/мл в 40% полиэтиленгликоле 400 (ПЭГ400), в буфере трис(гидроксиметил)аминометан/HCl, рН 7,5)
ПРИМЕР 3. Стабильность GLYX-13 I.V. Растворы
[00114] Стабильность GLYX-13 испытывали с помощью ВЭЖХ, используя представленные ниже условия.
Аналитический метод ВЭЖХ
[00115] Колонка: RP-C18 ODS 2, (5 мкм, 80А, 4,6×250 мм)
[00116] ЭлюентА: 13,4 г дигидрофосфата калия и 4,4 г натриевой соли 1-гептансульфоновой кислоты в 1600 мл воды. Доводили рН до 2,5 с помощью о-фосфорной кислоты. Разбавляли водой до 2 л.
[00117] ЭлюентВ: 1400 мл метанола и 600 мл воды.
[00118] Градиент: от 20% В до 70% В за 25 мин.; от 70% В до 20% В за 3 мин.; 0% В в течение 8 мин.
[00119] Скорость потока: 1 мл/мин.
[00120] Обнаружение: УФ (220 нм)
[00121] Введение пробы: 20 мкл 1 мг/мл раствора
[00122] Температура: окружающей среды
[00123] Время удерживания GLYX-13 составляло от 12,0 до 12,8 минуты. Thr-Pro-Pro-Thr (ТРРТ = дезаминированный GLYX-13) имел время удерживания от 14,9 до 15,1 минуты. Thr-Pro-Pro (ТРР) имел время удерживания от 4,8 до 5,2 минуты. Пики примесей, использованные в указанном способе, анализировали по проценту (%) площади относительно пика GLYX-13 и не выражали в масс./масс. процентах.
ПРИМЕР 4. Композиции с низким рН
[00124] GLYX-13 составляли в композицию с концентрацией 150 мг/мл и доводили до определенного рН с помощью уксусной кислоты или хлористоводородной кислоты. Затем композиции подвергали условиям ускоренного исследования стабильности (2 месяца при 40°С). В таблице 1 представлено обобщение основных характеристик, ограничивающих стабильность, в зависимости от рН и противоионов (уксусная кислота и HCl).
[00125] В таблице 1 показано, что HCl в качестве противоиона стабилизирует композицию по сравнению с уксусной кислотой. При рН 5,0 содержание примесей в 10 раз ниже, а % заявленного содержания (150 мг) GLYX-13 почти на 50% выше в растворе HCl, по сравнению с раствором в уксусной кислоте (см. Формы АА-5 в сравнении с HCl-5). Кроме того, растворы с более низким рН являются более стабильными, чем растворы с высоким рН: следует отметить, что в растворах HCl содержание примесей существенно ниже, а % заявленного содержания (150 мг) GLYX-13 существенно выше при низком рН (4 и 5), по сравнению с раствором с более высоким рН (8) (см. композиции HCl-4 и HCl-5 по сравнению с Формой HCl-8).
ПРИМЕР 5. Исследование стабильности в шприце/контейнере
[00126] Целью данного исследования было определение стабильности состава GLYX-13 150 мг/мл в шприцах и пробирках. Исследовали четыре различные комбинации шприца и уплотнительного кольца, а также одну конфигурацию пробирки и пробки.
[00128] Перистальтический насос Flexicon, оснащенный трубкой Flexicon, калибровали для доставки определенных заполняющих объемов на основании плотности раствора лекарственного средства. Плотность раствора лекарственного средства при 25°С составляла 1,044 г/мл. Стеклянные шприцы наполняли 5,1 мл или 5,32 г раствора, а полимерные шприцы наполняли 5,14 мл или 5,37 г раствора. В каждый шприц добавляли дополнительное количество раствора для учета объема, удерживаемого компонентами шприца/пробки, который не может быть доставлен. Каждую пробирку наполняли 5,32 г раствора для учета объема, остающегося в пробирке.
[00129] Стабильность раствора лекарственного средства сравнивали с раствором плацебо, которым заполняли такие же комбинации контейнеров/закупоривающих устройств. Образцы хранили при -20°С, 2-8°С, 25°С и 40°С в течение времени, указанного в таблицах 3-6.
[00130] Легенда обозначений результатов испытаний, представленных в таблицах:
[00131] Образцы, содержащие активное соединение в концентрации 150 мг/мл:
[00132] А = рН, внешний вид, количественный анализ/родственные примеси, цвет, доставляемый объем (для всех испытаний потребовался 1 шприц для каждой точки времени).
[00133] В = доставляемый объем, HIAC, осмоляльность и оптическое вращение (для каждой точки времени потребовалось 5 шприцов).
[00134] Образцы, содержащие плацебо:
[00135] А = рН, внешний вид, количественный анализ/родственные примеси, цвет (потребовался 1 шприц для каждой точки времени).
[00136] В = доставляемый объем, HIAC (для каждой точки времени потребовалось 5 шприцов).
[00137] Испытания и спецификации шприцов из примеров проводили в следующих выборочных точках времени. В каждой точке времени проводили не все испытания: рН, внешний вид, количественный анализ/родственные примеси, цвет, доставляемый объем, распределение частиц по размеру (HIAC), осмоляльность и оптическое вращение.
[00138] Результаты испытаний и спецификации шприцов и пробирок, полученные в испытании стабильности, представлены в таблице 7. Испытание проводили в первоначальный момент времени и через 4, 8, 12 и 24 недели. Образцы, взятые через 2 недели, замораживали и испытывали в то же время, что и 4-недельные образцы. Образцы, взятые через 6 недель, замораживали и испытывали в то же время, что и 8-недельные образцы.
[00139] Шприцы хранили в пакетах, так что при хранении они оставались в горизонтальном положении. Около 65 пробирок хранили в вертикальном положении, и 55 пробирок хранили в перевернутом положении. Перевернутые образцы извлекали через 4, 8, 12 и 24 недели хранения при каждых условиях. В каждый момент времени добавляли дополнительные шприцы.
[00140] Между конфигурациями шприцевого контейнера/закупоривающего устройства не было существенной разницы. Все конфигурации контейнера/закупоривающего устройства соответствовали критерию приемлемости для определения внешнего вида, подлинности, количественного анализа, регламентированных родственных примесей, общего содержания родственных примесей, рН (активного), твердых частиц (активных) и объема на контейнер. Содержание отдельных нерегламентированных родственных примесей и общее содержание нерегламентированных родственных примесей через 4 и 8 недель во всех конфигурациях контейнера/закупоривающего устройства в некоторых случаях не соответствовало критерию приемлемости.
ПРИМЕР 6. Испытание стабильности
Исследуемые и контрольные препараты:
[00141] Лекарственное вещество GLYX-13; и 5 М растворы хлористоводородной кислоты; метанол; пробирка объемом 10 мл с отверстием 20 мм; пробка для растворов Daikyo 20 мм; шприцевые фильтры 0,2 мкм Millex-GV
Метод ВЭЖХ
Колонка: Waters Spherisorb ODS2, 3 мкм, 4,6×250 мм, №дет.PSS832115
Подвижная фаза А: 2,2 г/л гептансульфоновой кислоты, 6,7 г/л дигидрофосфата калия, рН 2,5
Подвижная фаза В: 70/30 метанол/вода
Промывание иглы: вода
Температура колонки: 40±1°С
Температура образца: 4±1°С
Длина волны: 210 нм
Время хроматографирования: 50 мин.
Скорость потока: 1,0 мл/мин.
Градиент:
Испытание
[00142] Получали четыре состава для исследования растворения лекарства (таблица 2). Каждый состав получали в объеме 35 мл с содержанием 5,25 г GLYX-13.
[00143] Каждый состав получали добавлением лекарственного средства в стакан и доводя объем до около 26 мл с использованием очищенной воды. рН регулировали, используя 5 М HCl, которую добавляли с небольшими приращениями. Раствор перемешивали в течение 10 минут после каждой регулировки и перемешивали в течение 30 минут после достижения требуемого рН. рН раствора проверяли через 30 минут и при необходимости регулировали. Когда изменения рН уже не наблюдали, объем раствора доводили до 35 мл с помощью очищенной воды. Каждым составом наполняли пробирки (2,5 мл/пробирка), закрывали пробкой и крышкой. Составы хранили при 40°С в течение 3 недель, и еженедельно брали образцы. Все еженедельные образцы исследовали на внешний вид, измеряли рН, проводили количественный анализ и определение родственных примесей с помощью ВЭЖХ анализа.
[00144] Данные анализировали с помощью подходящего программного обеспечения, предназначенного для количественного анализа и определения примесей методом ВЭЖХ. В таблице 3 представлено обобщение данных стабильности в 3 еженедельных точках испытаний. Примесь 1 (RRT 0,43) представляет собой циклопролинтреонин («дикетопиперазин»). Примесь 2 (RRT 0,57) представляет собой пролин-треонин-амид. На фиг.1 показано образование примеси 1 (RRT 0,43) с течением времени в зависимости от рН. На фиг. 2 показано образование примеси 2 (RRT 0,57) с течением времени в зависимости от рН. Все данные указаны как % от площади пика GLYX-13, а не как масс./масс. %.
[00145] Представленные выше примеры демонстрируют, что растворы, выдержанные при низком рН и нейтральном рН, являются более стабильными, чем растворы, выдержанные при высоком рН. Например, % (150 мг) GLYX-13 существенно выше при низком рН (4 и 5) по сравнению с раствором с более высоким рН (7) (см. Формы HCl-4 и HCl-5 в сравнении с Формой HCl-7); уровни двух регламентированных примесей существенно увеличиваются при повышении рН, а общее содержание примесей в растворах GLYX-13 с низким рН, хранившихся при 40°С в течение 3 недель, в 3 раза ниже при рН 4, чем в растворе с рН 7.
[00146] Результаты демонстрируют, что стабильность раствора GLYX-13 обратно пропорциональна рН. Скорость образования примесей при рН 7 примерно в 6 раз выше, чем скорость при рН 4. Такое улучшение стабильности пептида в HCl при низком рН, например, от около 4 до около 5, по сравнению с нейтральным рН (6-8, например, 7), является неожиданным, отчасти поскольку пептиды обычно подвергаются гидролизу при низком рН в HCl. Кроме того, снижение концентрации GLYX-13/увеличение содержания продуктов разложения GLYX-13, наблюдаемое во время испытаний стабильности, было менее выраженным для составов, полученных с HCl, чем для составов, полученных с уксусной кислотой.
[00147] Пример 6. Исследование кислот.
[00148] Целью данного исследования была проверка влияния типа кислоты, используемой для регулирования рН, на стабильность рапастинеля (GLYX-13) в концентрации 150 мг/мл.
[00149] Раствор рапастинеля 150 мг/мл получали из порошка рапастинеля, растворенного в воде, и рН доводили до 4,5 с помощью 5 н. HCl. В указанном протоколе описано получение 150 мг/мл раствора рапастинеля с регулированием рН до 4,5 с помощью 10 различных типов кислоты, полученных в концентрациях 5 н., за исключением случаев, указанных ниже.
[00150] I. Получение кислоты
[00151] А. 5 н. раствор HCl. В данном испытании использовали 5 н. раствор HCl, полученный ранее.
[00152] В. Раствор фумаровой кислоты
Молекулярная масса фумаровой кислоты = 116,07 × 5 н. = 580,35 мг/мл × 250 мл = 145087,5 мг. Фумаровая кислота слабо растворима в воде, поэтому раствор получали с концентрацией около максимальной растворимости, и использовали концентрированные растворы рапастинеля (450 мг/мл) для облегчения регулирования рН.
[00153] С. Раствор яблочной кислоты
Молекулярная масса яблочной кислоты = 134,09 × 5 н. = 670,45 мг/мл × 250 мл = 167612,5 мг
Молекулярная масса яблочной кислоты = 116,07 × 5 н. = 580,35 мг/мл × 250 мл = 145087,5 мг. Яблочная кислота слабо растворима в воде, поэтому раствор получали с концентрацией около максимальной растворимости, и использовали концентрированные растворы рапастинеля (450 мг/мл) для облегчения регулирования рН.
[00154] D. Раствор молочной кислоты
Раствор получали с концентрацией около максимальной растворимости, и использовали концентрированные растворы рапастинеля (450 мг/мл) для облегчения регулирования рН.
[00155] Е. 5 н. раствор уксусной кислоты (250 мл)
Молекулярная масса уксусной кислоты = 60,05 × 5 н. = 300,25 × 250 мл = 75062,5 мг
1. Добавляли 75,06 г уксусной кислоты в мерную колбу объемом 250 мл.
2. Добавляли необходимое количество очищенной воды до 250 мл и тщательно перемешивали.
[00156] F. 5 н. раствор лимонной кислоты (250 мл)
Молекулярная масса лимонной кислоты = 192,12 × 5 н. = 960,6 × 250 мл = 240150 мг
1. Добавляли 240,15 г лимонной кислоты в мерную колбу объемом 250 мл.
2. Добавляли необходимое количество очищенной воды до 250 мл и тщательно перемешивали.
[00157] G. 5 н. раствор фосфорной кислоты (250 мл)
Молекулярная масса фосфорной кислоты = 98 × 5 н. = 490 × 250 мл = 122500 мг
1. Добавляли 122,5 г фосфорной кислоты в мерную колбу объемом 250 мл.
2. Добавляли необходимое количество очищенной воды до 250 мл и тщательно перемешивали.
[00158] Н. 5 н. раствор азотной кислоты (250 мл)
Молекулярная масса азотной кислоты = 63,01 × 5 н. = 315,05 × 250 мл = 78762,5 мг
1. Добавляли 78,76 г азотной кислоты в мерную колбу объемом 250 мл.
2. Добавляли необходимое количество очищенной воды до 250 мл и тщательно перемешивали.
[00159] I. 5 н. раствор серной кислоты (250 мл)
Молекулярная масса серной кислоты = 98,08 × 5 н. = 490,4 × 250 мл = 122600 мг
1. Добавляли 122,6 г серной кислоты в мерную колбу объемом 250 мл.
2. Добавляли необходимое количество очищенной воды до 250 мл и тщательно перемешивали.
[00160] J. 5 н. раствор аскорбиновой кислоты (250 мл)
Молекулярная масса аскорбиновой кислоты = 176,12 × 5 н. = 880,6 × 250 мл = 220150 мг
1. Добавляли 220,15 г аскорбиновой кислоты в мерную колбу объемом 250 мл.
2. Добавляли необходимое количество очищенной воды до 250 мл и тщательно перемешивали.
[00161] II. Получение раствора рапастинеля 150 мг/мл
Растворы рапастинеля, 150 мг/мл, получали в объеме 250 мл. Теоретическое количество необходимого рапастинеля составляет 37,5 г на 250 мл раствора. Фактическую массу рапастинеля корректировали на основании эффективности, остаточного содержания влаги, общего содержания примесей, остаточного содержания растворителей и остатка после прокаливания (таблица 12).
Таблица 12.
Данные о корректировании общего количества рапастинеля.
Общее содержание примесей
Содержание воды (%)
Остаточные растворители
Остаток после прокаливания
Эффективность (%)
1,52
3,3
0,3632
н.д.
99,1
100+1,52+3,3+0,3632=105,18 37,5 г ×1,0518=39,44 г; поправка на эффективность: 100-99,1=0,9;
39,44×1,009=39,79 г рапастинеля необходимо для получения партии объемом 250 мл.
1. Получали 10 различных партий рапастинеля, растворов 150 мг/мл, путем растворения 39,79 г рапастинеля примерно в 180 мл очищенной воды.
2. Проверяли и записывали рН раствора лекарственного средства.
3. Регулировали рН каждого раствора до 4,5 с помощью разных кислот для каждой партии.
a. Постепенно добавляли кислоту и записывали объем кислоты, добавленной при каждом добавлении.
b. Записывали рН раствора после каждого добавления кислоты.
4. Перемешивали раствор в течение 1 часа после достижения рН 4,5.
5. Проверяли и записывали рН через 1 час.
6. При необходимости регулировали рН до 4,5, используя соответствующую кислоту для данного раствора. Записывали объем добавленной кислоты и конечный рН.
7. Добавляли необходимое количество очищенной воды до 250 мл, тщательно перемешивали и записывали рН.
8. Фильтровали каждый раствор через систему вакуум-фильтрации с фильтром 0,2 мкм.
9. Использовали один образец каждого раствора как образец с Т=0 для анализов ВЭЖХ.
10. Хранили каждый раствор при 40°С и брали один образец из каждой партии после хранения в течение 2 недель и 4 недель. Замораживали 2-недельные и 4-недельные образцы до появления возможности их совместного испытания.
11. Образцы исследовали на рН, внешний вид, количественный анализ/содержание родственных примесей, цвет, доставляемый объем, распределение частиц по размеру (HIAC), осмоляльность и оптическое вращение.
ЭКВИВАЛЕНТЫ
[00162] Специалистам в данной области понятны, или с применением не более чем стандартного экспериментирования ими могут быть установлены многочисленные эквиваленты конкретных вариантов реализации настоящего изобретения, описанного в данном документе. Такие эквиваленты считают входящими в следующую формулу изобретения. Выданные патенты, заявки и ссылки, цитированные в настоящем документе, включены в настоящий документ в таком же объеме, как если бы каждый из них был специально и в отдельности включен посредством ссылки. В случае возникновения противоречий следует руководствоваться настоящим описанием, включая определения. Кроме того, материалы, способы и примеры являются лишь иллюстративными, и их не следует рассматривать как ограничительные.