МОЛЕКУЛЫ, СВЯЗЫВАЮЩИЕ IL-6

1. Связывающая молекула, которая специфически связывается с IL-6, причем связывающая молекула содержит по меньшей мере одну CDR антитела, где CDR содержит по меньшей аминокислотный остаток, который погружен в полость F229 или в полость F279 на IL-6, когда связывающая молекула связана с IL-6.
2. Связывающая молекула по п. 1, содержащая VL-домен, причем VL-домен имеет аминокислоту в положении 30, в соответствии с Kabat, которая погружена в полость F229 на IL-6, когда связывающая молекула связана с IL-6.
3. Связывающая молекула по п. 2, где аминокислота в положении 30 представляет собой тирозин.
4. Связывающая молекула по любому из предшествующих пунктов, содержащая VH-домен, причем VH-домен имеет аминокислоту в положении 99, в соответствии с Kabat, которая погружена в полость F279 на IL-6, когда связывающая молекула связана с IL-6.
5. Связывающая молекула по п. 4, где аминокислота в положении 99 представляет собой валин.
6. Связывающая молекула по п. 1, которая представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
7. Связывающая молекула по п. 1, содержащая VH-домен, причем VH-домен содержит аминокислотную последовательность HCDR3, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 497-500, 543, 544, 566, 567 и 568.
8. Связывающая молекула по п. 7, где VH дополнительно содержит аминокислотную последовательность HCDR2, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 501-507 и 545-554.
9. Связывающая молекула по п. 7, где VH дополнительно содержит аминокислотную последовательность HCDR1, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 508-512 и 555-562.
10. Связывающая молекула по п. 7, дополнительно содержащая VL-домен, где VL-домен содержит аминокислотную последовательность LCDR3, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 513-524 и 563.
11. Связывающая молекула по п. 10, где VL-домен дополнительно содержит аминокислотную последовательность LCDR2, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 525-535 и 564.
12. Связывающая молекула по п. 10, где VL-домен дополнительно содержит аминокислотную последовательность LCDR1, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 536-542 и 565.
13. Связывающая молекула по п. 6, содержащая VH-домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-232 и 569-571.
14. Связывающая молекула по п. 6, содержащая VL-домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 233-496.
15. Связывающая молекула по п. 6, содержащая: VH-домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-232 и 569-571; и VL-домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 233-496.
16. Связывающая молекула по любому из пп. 1-15, содержащая VH-домен и VL-домен, причем указанный VH-домен содержит гипервариабельные петли H1, Н2 и Н3, где указанный полипептид VH-домена образует пару с VL-доменом, содержащим гипервариабельные петли L1, L2 и L3, где по меньшей мере одна из гипервариабельных петель Н1-Н3 и L1-L3 получена из общепринятого антитела вида Lama путем активной иммунизации вида Lama антигеном IL-6.
17. Связывающая молекула по п. 16, где:
a) по меньшей мере одна из гипервариабельных петель H1, Н2, L1, L2 и L3 обладает спрогнозированной или истинной структурой канонической укладки, которая идентична или, по существу, идентична соответствующей структуре канонической укладки гипервариабельной петли H1, Н2, L1, L2 или L3, которая встречается в антителе человека;
b) каждая из гипервариабельных петель H1 и Н2 обладает спрогнозированной или истинной структурой канонической укладки, которая идентична или, по существу, идентична соответствующей структуре канонической укладки человека;
c) каждая из гипервариабельных петель L1, L2 и L3 обладает спрогнозированной или истинной структурой канонической укладки, которая идентична или, по существу, идентична соответствующей структуре канонической укладки человека;
d) гипервариабельные петли H1 и Н2 образуют комбинацию спрогнозированных или истинных структур канонической укладки, которая идентична или, по существу, идентична комбинации структур канонической укладки, о которой известно, что она встречается в VH-домене человека эмбрионального типа;
e) гипервариабельные петли H1 и Н2 образуют комбинацию структур канонической укладки, соответствующую комбинации структур канонической укладки человека, выбранной из группы, состоящей из 1-1, 1-2, 1-3, 1-4, 1-6, 2-1, 3-1 и 3-5;
f) гипервариабельные петли L1 и L2 образуют комбинации спрогнозированных или истинных структур канонической укладки, которая идентична или, по существу, идентична соответствующей комбинации структур канонической укладки, о которой известно, что она встречается в VL-доменах человека эмбрионального типа;
д) гипервариабельные петли L1 и L2 образуют комбинацию структур канонической укладки, соответствующую комбинации структур канонической укладки человека, выбранной из группы, состоящей из 11-7, 13-7 (А, В, С), 14-7 (А, В), 12-11, 14-11, 12-12, 2-1, 3-1, 4-1 и 6-1;
h) гипервариабельные петли H1 и Н2 образуют комбинацию структур канонической укладки, соответствующую комбинации 3-1 структур канонической укладки человека, встречающейся в структуре антитела человека 1ACY;
i) гипервариабельные петли L1 и L2 образуют комбинацию структур канонической укладки, соответствующую комбинации 6λ-1 структур канонической укладки человека, встречающейся в структуре антитела человека 3MUG; и/или
j) гипервариабельные петли L1, L2 и L3 образуют комбинацию структур канонической укладки, соответствующую комбинации 6λ-1-5 структур канонической укладки человека, встречающейся в структуре антитела человека 3MUG.
18. Связывающая молекула по любому из пп. 1-15, которая:
а) ингибирует связывание IL-6 с рецептором IL-6;
b) ингибирует связывание gp130 с рецептором IL-6;
c) специфично связывается с IL-6 человека и яванского макака;
d) содержит по меньшей мере одну CDR из антитела животного семейства верблюжьих, которое специфично связывается с IL-6;
e) характеризуется показателем EpiBase менее чем приблизительно 10,0;
f) экспрессируется на уровне по меньшей мере 20 мг/мл при временной экспрессии в клетке HEK293;
д) обладает температурой плавления (Tm) более 65°С;
h) ингибирует индуцируемую IL-6 пролиферацию клеток гибридомы В9 с IC50 менее 0,1 пМ;
off
-5
-1
i) связывается с IL-6 человека с константой диссоциации (k, измеренная с помощью поверхностного плазмонного резонанса) менее 2×10 с;
j) представляет собой преобразованный в эмбриональный тип вариант родительского антитела животного семейства верблюжьих, причем указанный преобразованный в эмбриональный тип вариант имеет более высокую температуру плавления, чем родительское антитело животного семейства верблюжьих;
k) содержит по меньшей мере одну CDR из общепринятого антитела ламы без последующего созревания аффинности;
l) имеет время полужизни в сыворотке по меньшей мере 9 суток, предпочтительно, по меньшей мере 15 суток, при введении внутривенно яванскому макаку в формате нативного Fc IgG1; или
m) представляет собой преобразованный в эмбриональный тип вариант родительской связывающей молекулы, где связывающая молекула содержит VH- и VL-домен, и где один или оба из VH- и VL-доменов связывающей молекулы содержат всего от 1 до 10 аминокислотных замен в каркасных областях по сравнению с соответствующими VH- и VL-доменами родительского не являющегося человеческим антитела; и/или
содержит VH- и VL-домен, где один или оба из VH-домена или VL-домена связывающей молекулы обладают идентичностью последовательности 90% или более с одним или несколькими соответствующими доменами VH или VL человека в каркасных областях FR1, FR2, FR3 и FR4.
19. Связывающая молекула по любому из пп. 1-15, содержащая VH-домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-232 и 569-571, где по меньшей мере один остаток глутамина заменен на глутаминовую кислоту.
20. Связывающая молекула по любому из пп. 1-15, содержащая Fc-домен человека с двойной мутацией H433K/N434F.
21. Фармацевтическая композиция, содержащая связывающую молекулу по любому из предшествующих пунктов и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей.
22. Способ лечения связанного с IL-6 заболевания или нарушения, включающий введение индивидууму, нуждающемуся в его лечении, эффективного количества фармацевтической композиции по п. 21.
23. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая связывающую молекулу по любому из предшествующих пунктов.
24. Рекомбинантный вектор экспрессии, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 23.
25. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантный вектор экспрессии по п. 24.