МЫШЬ С ОБЩЕЙ ЛЕГКОЙ ЦЕПЬЮ

1. Генетически модифицированная мышь, которая эксперссирует вариабельные домены тяжелой и легкой цепей иммуноглобулина человека, где вариабельные домены легкой цепи человека экспрессируются из единственной перегруппированной Vκ1-39/Jκ последовательности человека, присутствующей в зародышевой линии мыши, при этом перегруппированная Vκ1-39/Jκ последовательность человека содержит генный сегмент Vκ1-39 зародышевой линии человека и генный сегмент Jκ зародышевой линии человека, при этом:
(а) вариабельные домены легкой цепи иммуноглобулина человека экспрессируются из последовательности, которая идентична или является соматически гипермутированным вариантом перегруппированной Vκ1-39/Jκ последовательности человека;
(b) у мыши отсутствует эндогенный локус вариабельной области легкой цепи к иммуноглобулина мыши, способный к перегруппировке и формированию гена, кодирующего вариабельную область к мыши;
(c) мышь экспрессирует общую легкую цепь иммуноглобулина человека для множества тяжелых цепей человека, и общая легкая цепь происходит из указанной единственной перегруппированной Vκ1-39/Jκ последовательности человека; и
(d) у мыши присутствует В-клетка, экспрессирующая антитело, которое специфически связывается с представляющим интерес антигеном, где антитело содержит указанную общую легкую цепь и тяжелую цепь иммуноглобулина, получаемую на основе перегруппировки вариабельных генных сегментов тяжелой цепи иммуноглобулина человека, выбранных из группы, состоящей из генных сегментов VH2-5, VH3-23, VH3-30, VH4-59 и VH5-51.
2. Генетически модифицированная мышь по п. 1, у которой генный сегмент Jκ зародышевой линии человека представляет собой Jκ5.
3. Генетически модифицированная мышь по п. 1, при этом 90-100% эндогенных неперегруппированных генных сегментов VH мыши замещены:
(i) по меньшей мере 12 функциональными неперегруппированными генными сегментами VH человека;
(ii) по меньшей мере 18 неперегруппированными генными сегментами VH человека;
(iii) по меньшей мере 39 неперегруппированными генными сегментами VH человека;
(iv) по меньшей мере 80 неперегруппированными генными сегментами VH человека; или
(v) по меньшей мере 81 неперегруппированными генными сегментами VH человека.
4. Генетически модифицированная мышь по п. 1, которая экспрессирует:
(а) тяжелую цепь, содержащую вариабельный домен иммуноглобулина человека и константную область иммуноглобулина мыши; и/или
(b) антитело, содержащее легкую цепь, включающую вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина человека и константный домен легкой цепи иммуноглобулина мыши, и тяжелую цепь, включающую вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина человека и константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина мыши.
5. Генетически модифицированная мышь по п. 1, где генный сегмент Vκ человека функционально связан с последовательность промотора иммуноглобулина.
6. Генетически модифицированная мышь по п. 5, где последовательность промотора представляет собой последовательность промотора иммуноглобулина человека.
7. Клетка, выделенная из генетически модифицированной мыши по любому из пп. 1-6.
8. Клетка по п. 7, где клетка представляет собой В-клетку.
9. Гибридома, полученная из генетически модифицированной мыши по любому из пп. 1-6.
10. Способ получения антитела, включающий иммунизацию мыши по любому из пп. 1-6 представляющим интерес антигеном и применение одной или более генной(ых) последовательности(ей) вариабельной области иммуноглобулина человека из мыши для получения антитела.
11. Способ по п. 10, в котором применение одной или более генной(ых) последовательности(ей) вариабельной области иммуноглобулина человека из мыши для получения антитела включает:
экспрессию в одной клетке:
(а) первой последовательности вариабельной области иммуноглобулина человека, полученной из мыши, при этом генная последовательность вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека слита с генной последовательностью константной области иммуноглобулина человека; и
(b) генной последовательности вариабельной области легкой цепи иммуноглобулина человека, полученной из единственной перегруппированной Vκ1-39/Jκ последовательности человека, при этом генная последовательность вариабельной области легкой цепи иммуноглобулина человека слита с генной последовательностью константной области легкой цепи иммуноглобулина человека;
поддержание клетки в условиях, достаточных для экспрессии полностью человеческого антитела, и
выделение антитела.
12. Способ по п. 11, где способ дополнительно включает экспрессию в той же одной клетке второй генной последовательности вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека, при этом вторая генная последовательность вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека слита с генной последовательностью константной области иммуноглобулина человека, где первая генная последовательность вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека кодирует вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина человека, распознающий первый эпитоп, и вторая генная последовательность вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека кодирует вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина человека, распознающий второй эпитоп, и при этом первый эпитоп и второй эпитоп не являются идентичными.
13. Способ по п. 12, первый и второй эпитопы являются различными эпитопами одного и того же антигена; или
где первый эпитоп является эпитопом первого антигена и второй эпитоп является эпитопом второго антигена.
14. Применение мыши по любому из пп. 1-6 в получении антитела.
15. Применение по п. 14, где антитело представляет собой полностью человеческое антитело.
16. Применение по п. 14, где антитело представляет собой биспецифическое антитело.
17. Применение по п. 15, где антитело представляет собой биспецифическое антитело.
18. Способ получения биспецифического антитела человека, включающий получение генных последовательностей вариабельной области иммуноглобулина человека из В клеток мыши по любому из пп. 1-6 и получение антитела с указанными последовательностями.
19. Применение мыши по любому из пп. 1-6 для продукции клетки, которая экспрессирует биспецифическое антитело человека, при этом последовательности вариабельной области тяжелой цепи биспецифического антитела человека экспрессируются из генных последовательностей вариабельной области тяжелой цепи биспецифического антитела человека, полученной из В клеток мыши.
20. Применение по п. 19, где клетка содержит:
(а) единственную генную последовательность вариабельной области легкой цепи иммуноглобулина человека, кодирующую вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина человека, получаемую из перегруппированной Vκ1-39/Jκ последовательности человека, где генная последовательность вариабельной области легкой цепи иммуноглобулина человека слита непосредственно или через линкер с генной последовательностью константной области легкой цепи иммуноглобулина человека, с образованием гена, кодирующего легкую цепь иммуноглобулина человека;
(b) первую генную последовательность вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека, получаемую из первой В клетки мыши, кодирующую первый вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина человека, где первая генная последовательность вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека слита непосредственно или через линкер с генной последовательностью константной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека, с образованием гена, кодирующего первую тяжелую цепь иммуноглобулина человека, где первый вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина человека распознает первый эпитоп; и
(c) вторую генную последовательность вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека, получаемую из второй В клетки мыши, кодирующую второй вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина человека, где вторая генная последовательность вариабельной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека слита непосредственно или через линкер с генной последовательностью константной области тяжелой цепи иммуноглобулина человека, с образованием гена, кодирующего вторую тяжелую цепь иммуноглобулина человека, где второй вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина человека распознает второй эпитоп и специфически не распознает первый эпитоп,
при этом каждую из первой и второй тяжелых цепей иммуноглобулина ассоциируют с легкой цепью иммуноглобулина человека (а).
21. Применение по п. 20, первый и второй эпитопы являются различными эпитопами одного и того же антигена; или
где первый эпитоп является эпитопом первого антигена и второй эпитоп является эпитопом второго антигена.
22. Применение мыши по любому из пп. 1-6 для идентификации вариабельного домена тяжелой цепи иммуноглобулина человека, присутствующей в тяжелой цепи иммуноглобулина человека, которая ассоциирована с единственной легкой цепью.