Вилочковая железа в постнатальном онтогенезе белых крыс

леваниях и других патологических состояниях / Е. Е. Дубинина, А. В. Пустыгина // Биомедицинская химия. - 2007. - № 4. - С. 351-371.

5. Кондратенко, Е. И. Циркадианные особенности интенсивности перекисного окисления ли-пидов у инфантильных и половозрелых белых крыс в условиях световой депривации / Е. И. Кондратенко, И. А. Малышева, Н. А. Ефремова // Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря : мат-лы VII Международной научной конференции (г. Астрахань, 13-14 октября 2004 г.). - Астрахань : ИД «Астраханский университет», 2004. - С. 60-62.

6. Мажитова, М. В. Свободнорадикальные процессы и антиоксидантная защита разных отделов центральной нервной системы на этапах постнатального онтогенеза белых крыс в норме и при действии промышленных серосодержащих поллютантов : автореф. дис. ... д-ра биол. наук / М. В. Мажитова. - Астрахань, 2012. - 44 с.

7. Стальная, И. Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная // Современные методы в биохимии / сост. И. Д. Стальная, Т. Т. Гаришвили - М. : Медицина, 1977. - С. 66-68.

8. Стефани, Д. В. Клеточные мембраны при иммунном ответе / Д. В. Стефани, И. И. Зернов // Проблемы мембранной патологии в педиатрии / сост. Д. В. Стефани, И. И. Зернов. - М. : Медицина, 1984.- С. 151-161.

9. Теплый, Д. Л. Особенности морфологической картины сыворотки крови мышей разных возрастных групп при экспериментальном стрессе / Д. Л. Теплый, Н. А. Аюпова // Естественные науки : журнал фундаментальных и прикладных исследований. - 2005. - № 10. - С. 47-50.

10. Ohkawa, H. Assay for lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric acid reaction / H. Oh-kawa, N. Ohishi, K. Yagi // Anal. Biochem. - 1979. - Vol. 95, № 2. - P. 351-358.

Рожкова Ирина Семеновна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры ботаники, фармакогнозии и фармацевтической технологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.

Теплый Давид Львович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой физиологии и морфологии человека и животных, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет» России, Россия, 414056, г. Астрахань, ул. Татищева, д. 20а, тел.: (8512) 25-17-09, е-mail: aspu@aspu.ru.

Фельдман Бронислав Владимирович, доктор биологических наук, заведующий кафедрой ботаники, фармакогнозии и фармацевтической технологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, е-mail: agma@astranet.ru.

УДК 611.438:612.65

© И.С. Рожкова, Д.Л. Теплый, Б.В. Фельдман, М.Н. Тризно, 2013

И.С. Рожкова1, Д.Л. Теплый2, Б.В. Фельдман1, М.Н. Тризно1

ВИЛОЧКОВАЯ ЖЕЛЕЗА В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ БЕЛЫХ КРЫС

:ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России 2ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет»

Представлены данные по нормальному строению вилочковой железы белых крыс-самцов в постнаталь-ном онтогенезе. Выявлена возрастная динамика изменения морфометрических параметров и установлены периоды ускоренного развития железы. Создана база биометрических характеристик тимуса крысы в норме.

Ключевые слова: онтогенез, вилочковая железа, морфология.

I.S. Rozhkova, D. L. Teplyi, B.V. Feldman, M.N. Trizno THE THYMUS GLAND OF THE WHITE RATS IN POSTNATAL ONTOGENESIS

The data of normal structure of thymus gland in white rat-males of the postnatal ontogenesis were found. The changes of morphometrical parameters were submitted and the periods of accelerated development in gland were established. It was created the database characterizing the standard sizes of the thymus of white rat.

Key words: ontogenesis, thymus, morphology.

Введение. Вилочковая железа (тимус) является центральным органом иммунной системы, от состояния и активности которой во многом зависит выраженность защитных реакций всего организма. В большинстве работ, посвященных ее изучению, рассматривается строение тимуса без учета возрастной и вариантной морфологии [3, 4]. Данное обстоятельство может явиться причиной не вполне объективной оценки данных, полученных в процессе экспериментальных исследований этого органа. Вышесказанное диктует необходимость выявления как возрастных различий в строении тимуса, так и периода с наиболее высоким уровнем его функциональной активности, что позволит определить оптимальные сроки экспериментального экзогенного воздействия для получения достоверных результатов при изучении влияния повреждающих факторов.

Цель: установить закономерности динамики морфологии и морфометрических характеристик вилочковой железы белых крыс на различных этапах постнатального онтогенеза.

Материалы и методы исследования. Объектом исследования служили самцы беспородных белых крыс, которых содержали в условиях вивария при свободном доступе к пище и воде. В зависимости от возраста животные были разделены на три группы: 1 группа: молодые крысы - от 15 дней до 1 месяца, 2 группа: половозрелые крысы - 6-месячного возраста, 3 группа: старые крысы - 24-месячного возраста. После наркотизации животных этаминалом натрия (препарат вводился внутри-брюшинно в дозе 5 мг на 100 г массы тела) производили декапитацию. Выделенный тимус фиксировали в растворе Карнуа. После проводки по восходящей батарее спиртов орган заливали в парафин. Депарафинизированные срезы толщиной до 5 мкм окрашивали 0,1 % водным раствором крезилвио-лета по Нисслю. Диаметр ядер тимоцитов измеряли в плоскости оптического среза, проходящего через ядрышко. В каждом случае изучалось не менее 100 клеток [1].

Микроскопический анализ, морфометрию и фотографирование препаратов проводили с помощью микроскопа системы «Биолам» и окуляр - микрометра МОВ-1-15 х (Россия) при общем увеличении х 600. Микрофотографии получены с помощью цифровой фотокамеры Mercury Cyber Pix E-560 М (Япония) и монокулярного оптического адаптера. Цифровой материал обрабатывался статистически с использованием программного пакета Microsoft Office Excel. Вычисляли среднее арифметическое, ошибку среднего арифметического, относительную массу, темп роста, а также оценивалась достоверность средних величин по критерию Стьюдента (t).

Результаты исследования. Установлено, что вилочковая железа окружена соединительнотканной капсулой и в большинстве случаев состоит из двух долей. В трех случаях (4,3 %) обнаружена трехдолевая форма тимуса.

С момента рождения тимус располагается за грудиной в вентральном средостении, и его топография изменяется в процессе постнатального онтогенеза. У крыс в возрасте до 3 недель каудальный полюс вилочковой железы находится на уровне третьего межреберья. К 6 месяцам каудальный полюс достигает своего дефинитивного положения, прикрывая ушко правого предсердия.

Краниальный полюс тимуса у молодых крыс выступает над уровнем яремной вырезки грудины, что в более позднем возрасте наблюдается достаточно редко. К латеральным поверхностям органа прилежат внутренние яремные вены, париетальная плевра, лимфатические узлы и крупное скопление жировой клетчатки, объем которой нарастает к периоду половозрелости, достигая максимума у старых крыс.

У новорожденных крыс средняя масса тимуса составила 7,10 ± 0,33 мг, у молодых крыс она увеличивается до 238,2 ± 0,03 мг и в дальнейшем не изменяется.

При световой микроскопии тимуса выявляется его дольчатое строение. Размеры долек тимуса достигают максимума у молодых крыс и уменьшаются к периоду наступления половой зрелости. Дольки железы разделяются прослойками соединительной ткани, пучки которой ответвляются от тонкой капсулы органа и проникают на разную глубину внутрь органа. Отдельные дольки имеют поперечный размер от 0,2 до 5 мкм, нередко сливаются друг с другом, образуя древовидные ветвления. В дольках отчетливо различаются наружное, более темное корковое вещество и центральное, более светлое мозговое вещество. В зависимости от соотношения эпителиальных и лимфоидных клеток и их функционального состояния тимоцитов в дольке тимуса выделяют 4 зоны. Первая зона - это наружный подкапсулярный слой. В ней в 1-3 слоя располагаются большие лимфоциты и бластные клетки, для которых характерны высокая митотическая активность. Эпителиальные клетки имеют ти-

пичную звездчатую или веретенообразную форму, образуя широко петлистую сеть вокруг кровеносных сосудов, где обнаруживаются и макрофаги. В этой зоне происходит образование Т-лимфоцитов из светлых клеток.

Вторая зона - внутренний кортикальный слой, или собственно корковое вещество тимуса. Здесь накапливаются образовавшиеся Т-лимфоциты, формируя специфические антигенные детерминанты.

Корковое вещество тимуса представлено несколькими слоями средних и малых лимфоцитов, содержание которых колеблется от 60 до 85 %. Лимфоидные клетки наружной части корковой зоны (обычно это лимфобласты) расположены в 3-4 слоя, диаметр клеток - около 7 мкм. В более глубоких отделах этой зоны встречаются макрофаги. Если субкапсулярно можно видеть делящиеся клетки, а также лимфобласты, то внутри коркового вещества находятся главным образом потомки лимфобластов - неделящиеся малые тимусные лимфоциты, расположенные вблизи дендритных корковых эпителиальных клеток. Корковые эпителиальные клетки имеют звездчатую форму за счет длинных и тонких цитоплазматических отростков. Последние соединяются друг с другом с помощью десмосом и образуют «сеточку», где располагаются тимоциты коркового вещества. Ядро тимоцитов овальное, площадь ядра в среднем у молодых крыс составляет 930,00 ± 0,86 мкм2, у половозрелых - 770,00 ± 1,22 мкм2, у старых животных 550,00 ± 1,01 мкм2.

Третья зона - мозговое вещество, которое постепенно расширяется после рождения крысы. У группы молодых крыс площадь мозгового слоя преобладает над площадью коркового. Мозговое вещество является местом выхода Т-лимфоцитов из органа через венулы в кровоток. Здесь обильно представлены эпителиально-ретикулярные клетки (5-20 %). Количество лимфоидных клеток в мозговом слое меньше, чем в корковом веществе, и в основном это лимфоциты среднего диаметра. Эпителиальные клетки этого слоя могут формировать эпителиальные тяжи, фолликулоподобные структуры, расположенные вокруг шарообразных тимических телец. Эпителиальная сеть, в отличие от таковой в корковом веществе, становится широкоячеистой. Наблюдаются гипертрофированные клетки. Многочисленные лимфоциты имеют средние размеры. Тимические тельца представлены концентрическими скоплениями продолговатых и веретенообразных клеток с большим ядром. Размер телец колеблется: у молодых крыс он составляет в среднем около 60 мкм, у половозрелых 300-320 мкм. У старых животных, на фоне возрастной инволюции тимуса, тельца отличаются большой вариабельностью размера от 80 до 250 мкм. Соединительнотканная строма тимуса у молодых крыс представлена как соединительнотканными, так и эпителиальными элементами. При этом удельная длина коллаге-новых и ретикулярных волокон в паренхиме и ширина междольковых прослоек относительно стабильна. На этом этапе онтогенеза дольки тимуса имеют вид многоугольников.

У половозрелых животных плотность стромы увеличивается. Этот процесс происходит на фоне увеличения ширины междольковых перегородок и удельной длины коллагеновых волокон в паренхиме, что объясняется расширением междольковых соединительнотканных структур и началом интенсивного жирового перерождения органа. Отдельные участки коркового вещества оказываются заключенными внутри мозгового вещества в виде мелких округлых долек, называемыми В.А. Забродиным [2, 5], корковыми узелками. Эпителиоретикулоциты соединяются между собой с помощью десмосом, в результате чего формируется сеть, в которой находятся лимфоциты различной степени зрелости. Гипертрофированные эпителиальные клетки с обширной цитоплазмой имеют вытянутое, часто неправильной формы ядро, по периферии которого сконцентрирован хроматин в виде небольших глыбок. Именно эти клетки образуют свободную сеть, густо заполненную лимфоцитами. Корковый слой инволюирующего тимуса заселен редкими лимфоцитами и содержит наполненные жировыми вакуолями многочисленные макрофаги. Отмечается инфильтрация мозгового и коркового вещества плазматическими клетками. Наблюдается нарушение тесных соприкосновений между тимо-цитами и эпителиальными клетками.

Четвертая зона тимуса образована периваскулярной соединительной тканью, окружающей сосуды мозгового вещества. Это конечный путь для Т-лимфоцитов и, возможно, первое место встречи с экстратимусным окружением, с чужеродными антигенами. Эпителиальные клетки стромы тимуса примыкают к кровеносным капиллярам, окружая их с помощью своих отростков, формируя тем самым узкие канальцы для прохождения капилляров. При этом между эпителиальной мембраной и капиллярами находится периваскулярное пространство, заполненное тканевой жидкостью и содержащее лимфоциты, макрофаги, плазматические и жировые клетки, фибробласты, форменные элементы крови. В результате формируется гематотимусный барьер, между тканевыми структурами тимуса и кровеносным руслом органа. Согласно литературным данным, именно он препятствует проникновению антигенов, но в то же время является проницаемым для клеток лимфоидного ряда. Считается,

что такая избирательная проницаемость гематотимусного барьера связана с отсутствием окружающей кровеносные сосуды базальной мембраны.

Заключение. Тимусу принадлежит ведущая роль в регуляции популяции Т-лимфоцитов. Тимус является открытой системой в связи с миграцией клеток в субкапсулярной зоне и мозговом веществе. Поэтому максимальные возрастные изменения происходят именно в этих компонентах долек. Степень изменения параметров тимуса, а также изменение его клеточного состава коррелируют с возрастом животных.

Список литературы

1. Автандилов, Г. Г. Медицинская морфометрия / Г. Г. Автандилов. - Москва: Медицина, 1990. - 384 с.

2. Забродин, В. А. Анатомия лимфоидной, лимфатической системы и эндокринных желез. Учебное пособие / В. А. Забродин, Е. С. Толстенкова, В. Я. Юрчинский. - Смоленск: Изд-во СГМА, 2011. - 64 с.

3. Кветной, И. М. Нейроиммуноэндокринология тимуса / И. М. Кветной, А. А. Ярилин,

B. О. Полякова, И. В. Князькин. - СПб.: ДЕАН, 2005. - 160 с.

4. Наумова, Е. М. Влияние АКТГ на местный нейромедиаторный гомеостаз тимуса / Е. М. Наумова, В. Е. Сергеева, С. А. Ястребова // Здравоохранение Чувашии. - 2005. - № 2. -

C.44-50.

5. Юрчинский В. Я. Сравнительный анализ тимуса позвоночных животных / В. Я, Юрчин-ский, В. А. Забродин // Морфология. - Т. 133, № 2. - 2008. - С. 161.

Рожкова Ирина Семеновна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры ботаники, фармакогнозии и фармацевтической технологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.

Теплый Давид Львович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой физиологии и морфологии человека и животных, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет» России, Россия, 414056, г. Астрахань, ул. Татищева, д. 20а, тел.: (8512) 25-17-09, е-mail: aspu@aspu.ru.

Фельдман Бронислав Владимирович, доктор биологических наук, заведующий кафедрой ботаники, фармакогнозии и фармацевтической технологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, е-mail: agma@astranet.ru.

Тризно Матвей Николаевич, кандидат медицинских наук, ассистент кафедры анатомии человека, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел. (8512) 52-53-21, e-mail: agma@astranet.ru.

УДК [616.12-008.331.1-06:616.891]:612.112]:57.084.1(045) © Т.П. Романова, И.О. Бугаева, Е.Б. Родзаевская, И.А. Уварова, 2013

Т.П. Романова, И.О. Бугаева, Е.Б. Родзаевская, И.А. Уварова

УЧАСТИЕ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ В ПРОЦЕССЕ ФОРМИРОВАНИЯ СТРЕСС-ИНДУЦИРОВАННЫХ ПОВРЕЖДЕНИЙ СЕРДЦА ПРИ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ

ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава России

В экспериментах на гипертензивных крысах изучена роль метаболических изменений лейкоцитов периферической крови под воздействием стрессорных факторов и характер кардиоваскулярных нарушений. Показано, что артериальная гипертензия сопровождается изменениями обменных процессов в лейкоцитах крови, а повышение их функциональной активности при стрессе может способствовать развитию повреждения мембран кардиомиоцитов и эндотелиоцитов, вызывая необратимые повреждения миокарда.

Ключевые слова: стресс, артериальная гипертензия, лейкоциты, миокард.