Использование цитохимического анализа в биомедицинской антропологии

Литература

1. Алексеев, В.П. Краниометрия. Методика антропологических исследований /В.П. Алексеев, Г.Ф. Дебец.- М.: Наука, 1964.- 128 с.

2. Гайворонский, А.И. Краниологические обоснования оперативных доступов к структурам задней черепной ямки с использованием эндовидиомониторинга /А.И. Гайворонский// Морфология.- 2007.- №6.- С. 70-74.

3. Доронина, Г.А. Комплексная морфометрическая характеристика внутреннего основания черепа: Автореф. дис. ... канд. мед. Наук / Г. А. Доронина.- СПб., 2001.

4. Коновалов, А.Н. Компьютерная томография в нейрохирургической клинике / А.Н. Коновалов, В.Н. Корниенко.- М.: Медицина, 1985.- 293 с.

5. Кушель, Ю.В. Краниотомия (хирургическая техника) / Ю.В. Кушель, В.Е. Семин.- М.: «Антидор», 1998.- 79 с.

6. Сперанский, В.С. Основы медицинской краниологии / В.С. Сперанский.- М.: Медицина, 1988.- 288 с.

7. Тиглиев, Г.С. Внутричерепные менингиомы / Г.С. Тигли-ев, В.Е. Олюшин, А.Н. Кондратьев.- Спб.: изд. РНХИ им. проф.

А. Л. Поленова, 2001.- 560 с.

8. Хлебников, В.В. Типы костного рельефа задней черепной ямки. Канд. Дис / В.В. Хлебников.- Саратов, 1938.

9. Samii M, Tatagiba M: Strategies in Neurologic Surgery. V.2, number2, 1994, 43 pp.

10. Yasargil MG: Microneurosurgery (vol.lVB). Thieme Medical Publishers, Inc.: New York, 1996, 552 pp.

MORFOMETRICAL CHARACTERISTIC OF FORMS OF THE CRANIAL FOSSA POSTERIOR TO THE SPIRAL COMPUTER TOMOGRAFY AND THEIR IMPORTANCE IN OPTIMIZATION OF APPROASHES

S.V.ISHKOV Medical academy and regional clinical hospital

There has been carried out (performed) morphometry of bone basis of cranial fosse posterior (CFP) on spiral computer tomograms in 116 patients without pathology of skull and brain bones with the aim of optimizations of approaches to different parts of CFP. Fundamental morphometric parameters of CFP (length, width, depth) have been determined. By variants of combination of extreme values of these parameters 5of the most often met forms of CFP (long narrow deep, long broad small, long narrow small, long broad deep, short narrow small) have been chosen; linear and angular morphometric features have been given. Morphometric parameters being of importance for individual planning of approaches to the parts of CFP were noted.

Key words: cranial fosse posterior, spiral computer tomography, approaches.

УДК 572:543.9

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЦИТОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА В БИОМЕДИЦИНСКОЙ АНТРОПОЛОГИИ

Т.В. КАЗАКОВА*, В.В.ФЕФЕЛОВА**, А.Ю. ЕРМОШКИНА**,

Т.П. КОЛОСКОВА***, Ю.А. ФЕФЕЛОВА*

Цель работы - оценить возможность использования цитохимического анализа для изучения соматотипических особенностей метаболических характеристик лимфоцитов периферической крови мужчин. В клетках иммунной системы юношей, имеющих низкие значения абсолютных показателей мышечной и жировой масс тела установлена высокая активность гидролитических ферментов и низкая активность сукцинатдегидрогеназы лимфоцитов. При стрессе степень изменчивости параметров клеток иммунной системы характеризуется конституциональными особенностями. Независимо от пола лица, имеющие высокий процент жировой массы в соме, обладают относительной инертностью метаболических параметров клеток иммунной системы.

Ключевые слова: соматотип, лимфоцит, цитохимия

* Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1.

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научноисследовательский институт медицинских проблем Севера» Сибирского отделения Российской академии медицинских наук, 660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, 3.

Сибирский государственный технологический университет, 660049, г. Красноярск, пр. Мира, 82.

Здоровый современный человек и изменчивость его здоровья в зависимости от возраста, пола, конституции, этно-территориальной принадлежности, профессии, экологической обстановки являются объектом изучения биомедицинской антропологии. Конституция является результатом сложного взаимодействия наследственных и средовых факторов в ходе реализации генетической программы развития. За основу конституционального типа традиционно принимается морфологический критерий - соматотип. Состав тела, рассматриваемый как соотношение его тканевых компонентов (жировой, мышечной и костной масс), наиболее полно отражает состояние и характер обменных процессов в организме. В свою очередь различия в строении тела связаны с физиологическими и биохимическими особенностями.

В результате исследований ряда авторов [9] было обосновано положение, согласно которому по метаболическим параметрам иммунокомпетентных клеток можно судить о направленности обменных процессов организма в целом.

Цель исследованя — оценить возможность использования цитохимического анализа для изучения соматотипических особенностей метаболических характеристик лимфоцитов периферической крови мужчин.

Материал и методы исследования. Проведено антропометрическое обследование с последующим определением сома-тотипа 179 мужчин юношеского возраста - студентов Красноярского государственного медицинского университета.

Антропометрическое обследование проводилось с помощью стандартизированного набора антропометрических инструментов по методике, принятой в НИИ антропологии МГУ им. М.В. Ломоносова и включало измерение 29 параметров и оценку компонентного состава сомы по формулам J. Mateika [5]. Диагностика типа телосложения (соматотипа) проводилась по методу В.П. Чтецова [8].

Состояние соматического здоровья оценивалось на основании данных «Паспорта здоровья студента», содержащего результаты плановых медицинских обследований врачами разных профилей и по данным анамнеза. Из группы обследуемых были исключены лица, болевшие и получавшие профилактические прививки в течение двух предыдущих месяцев. На момент обследования показатели лейкограммы находились в пределах нормы.

Исследование параметров клеток иммунной системы проводилось дважды: в спокойном состоянии (межсессионный период) и в состоянии эмоционального стресса (непосредственно перед началом экзамена). Список экспериментальных процедур одобрен биоэтическим комитетом Красноярского государственного медицинского университета и соответствовало требованиям Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации об этических принципах проведения медицинских исследований с участием людей в качестве субъектов (2000 г.). В обследовании участвовали добровольцы, предварительно заполнившие информированное согласие. Кровь для исследования брали утром натощак. В мазках крови для изучения метаболических особенностей клеток иммунной системы выявляли активность сукцинат-дегидрогеназы (СДГ) в лимфоцитах, кислой фосфатазы в лимфоцитах (КФЛ) и нейтрофильных гранулоцитах (КФГ) цитохимическими методами [9]. Метаболические параметры клеток иммунной системы отражают течение обменных процессов в организме в целом [3].

Полученные результаты подвергнуты статистической обработке с применением пакета прикладных программ «Statistica 6.0 for Windows» [7]. Каждый показатель оценивался на нормальность распределения по тесту Колмагорова-Смирнова. Для всех количественных данных производился подсчет среднего арифметического (М), среднего квадратичного отклонения (5), ошибки средней арифметической (m). Достоверность различий определялась с помощью t-критерия Стьюдента-Фишера для выборок с параметрическим распределением в доверительном интервале более 95% и критерия Манна-Уитни при асимметричном распределении. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали равным 0,05.

Результаты и их обсуждение. Активность внутриклеточных ферментов имеет генетически запрограмированную «норму реакции», но вместе с тем зависит от нейрогуморальных воздействий на внутриклеточный метаболизм и лимитируется обеспеченностью фермента специфичными для него метаболитами и кофакторами. У мужчин грудного соматотипа (табл. 1) выявлена наиболее низкая активность СДГ в лимфоцитах, которая состави-

ла 6,6±0,5 гранул/кл., что достоверно ниже показателей мужчин мускульного и неопределенного, а также брюшного соматотипов. Известно, что у мужчин неопределенного соматотипа установлены высокие показатели активности ферментов, характеризующих деятельность пентозного шунта, глицерофосфатного челночного цикла в процессе работы которых нарабатываются субстраты и кофакторы для пластических синтезов, реакций биологического окисления/ Коэффициенты вариации, асимметрии и эксцесса не имели соматотипических различий. Коэффициент эксцесса (Е), характеризующий избыток или недостаток в популяции клеток с нормальной (близкой к средней) активностью фермента, укладывался в оптимальный диапазон у всех соматотипов, кроме брюшного. Такие изменения в структуре популяции лимфоцитов у лиц брюшного соматотипа могут свидетельствовать о значительном напряжении «работы» клетки, а тем самым и о «напряжении» адаптационных возможностей организма в целом [6].

Исследование показателей активности кислой фосфатазы (КФ) - маркерного фермента лизосом позволило установить, что самая низкая (среди других соматотипов) активность КФ и в лимфоцитах и в гранулоцитах зафиксирована у лиц брюшного соматотипа, что может свидетельствовать о преобладании синтетических процессов над катаболическими у мужчин данного соматотипа.

У мужчин грудного соматотипа зарегистрирована наиболее высокая активность КФ, что сочеталось с низкой активностью СДГ в лимфоцитах. Такое сочетание энзиматической активности СДГ и КФ считается показателем неблагоприятного состояния метаболизма клеток иммунной системы и может отражаться на их функциональном состоянии.

Поскольку лимфоциты переносят информацию о формировании метаболических процессов и являются «энзиматическим зеркалом организма» [9], то выявленные различия метаболических параметров клеток иммунной системы в определенной степени отражают метаболические особенности основных компонентов сомы.

Таблица 1

Показатели активности СДГ лимфоцитов (Р), коэффициента вариации (V), асимметрии (А), эксцесса (Е) и КФ лимфоцитов и нейтрофилов у мужчин разных соматотипов в покое

Цитохимические показатели СДГ Соматотип

Грудной п = 41 М±т 1 Мускульный п = 66 М±т 2 Брюшной п = 30 М±т 3 Неопределенный п = 42 М±т 4

0, гранул/кл. 6,6±0,5 8,4±0,5 р 1-7 =0,018 8,0±0,7 8,7±0,8 р 1^ =0,029

А 0,8±0,2 0,9±0,1 1,2±0,2 0,8±0,2

Е 0,2±0,4 0,2±0,26 1,6±0,9 0,2±0,5

V 80,2±8,2 93,4±6,4 92,3±10,8 78,3±10,6

КФЛ, ед. Kaplow 124,9±4,0 108,9±3,9 р 1-7 =0,008 104,4±6,3 р 1-, =0,005 114,2±4,6

КФГ, ед. Kaplow 178,1±6,1 175,3±5,4 169,4±6,7 173,8±5,6

Обучение в вузах сопряжено с постоянными умственноэмоциональными нагрузками, которые еще более возрастают в период экзаменационной сессии, приобретая окраску психоэмоционального стресса. Эмоционально-стрессовые ситуации способны снижать общие адаптационные резервы организма, вызывать психофизиологическую дисгармонию, инициировать или усиливать психосоматические заболевания [4]. Возможность проявления каждого конкретного симптома при стрессе связана с психосоматической конституцией человека. Конституция обусловливает концентрацию различных «стрессорных» гормонов крови и, следовательно, возможность их повреждающего действия [1],что влечет за собой изменение параметров метаболизма.

В условиях экзаменационной сессии нами проведено исследование метаболической активности лейкоцитов.

Изменения активности СДГ лимфоцитов, КФЛ и КФГ представлены в таблице 2. Наиболее низкие показатели активности СДГ лимфоцитов при стрессе зарегистрированы у мужчин неопределенного соматотипа, активность СДГ у лиц грудного и мускульного соматотипов была несколько выше. СДГ лимфоцитов у представителей брюшного соматотипа в условиях стресса была выше аналогичного показателя мужчин грудного и неопределенного соматотипов.

Проведя сравнительный анализ активности СДГ в межсессионный период и в период экзаменационной сессии, установлена следующая динамика: независимо от типа телосложения выяв-

лено снижение активности энергетического фермента цикла Кребса, степень снижения различна и связана с типом телосложения. Так, у мужчин грудного соматотипа активность СДГ в среднем уменьшилась в 1,29 раза, мускульного - 1,53, брюшного - в 1,12, неопределенного - в 1,89 раза. Снижение активности СДГ при стрессе сопровождалось увеличением коэффициентов асимметрии, эксцесса и вариации, однако эти изменения не достигали уровня статистической значимости

Таблица 2

Показатели активности СДГ лимфоцитов (Р), коэффициента вариации (V), асимметрии (А), эксцесса (Е) и КФ лимфоцитов и нейтрофилов у мужчин разных соматотипов при стрессе

Цитохимические Соматотип

показатели Грудной п = 41 М±т Мускульный п = 66 М±т Брюшной п = 30 М±т Неопределенный п = 42 М±т

СДГ 1 2 3 4

0, гранул/кл. 5,1±0,9 5,5±1,1 7,2±0,5 4,6±0,8

А 1,1±0,3 1,1±0,2 1,4±0,4 2,1±0,6

Е 1,7±1,2 1,4±0,6 2,3±1,5 5,2±2,6

V 93,2±12,8 101,1±8,3 114,7±24,4 129,4±37,1

КФЛ, ед. Kaplow 97,5±9,2 78,7±5,7 99,2±9,4 104,1±6,9 p 2^ =0,007

КФГ, ед. Kaplow 163,8±14,2 143,6±5,1 169,8±8,7 p 7-3 =0,000 142,3±7,6 p 3^ =0,023

При действии на организм стрессорных факторов в клетке увеличиваются размеры и количество лизосом, повышается проницаемость их мембран, что сопровождается изменением активности лизосомальных ферментов. Реакция лизосомально-вакуолярного аппарата может быть избирательной в зависимости от силы, характера и длительности воздействия [2].

У мужчин мускульного соматотипа при стрессе по сравнению с другими типами телосложения выявлена наиболее низкая активность КФ как в лимфоцитах, так и в нейтрофильных гранулоцитах. Представители неопределенного соматотипа характеризовались максимальной активностью КФЛ и наиболее низкой КФГ. Показатели активности КФГ в период экзаменационной сессии у мужчин брюшного соматотипа были достоверно выше показателей мускульного и неопределенного типов телосложения.

Сопоставление показателей КФ в межсессионный период и во время экзаменационной сессии выявило снижение активности КФЛ у мужчин всех соматотипов, но статистически достоверная разница зарегистрирована только у грудного и мускульного типов. Реакция КФЛ мужчин, имеющих высокое содержание жира в соме, т.е. брюшного и неопределенного соматотипов, была инертной в период стресса. Активность КФГ при стрессе снизилась у мужчин грудного, мускульного и неопределенного сомато-типов и не изменилась у мужчин брюшного соматотипа.

Исследованы изменения метаболической активности клеток иммунной системы по отношению к исходному уровню. Все полученные показатели имели отрицательные значения, что свидетельствует об уменьшении значений изученных параметров при стрессе. С учетом исходного уровня выявлены наиболее выраженные изменения активности КФЛ и КФГ у мужчин мускульного соматотипа, а также значительное снижение СДГ лимфоцитов у данной группы и лиц неопределенного типа телосложения. У мужчин брюшного соматотипа степень изменений метаболических характеристик клеток иммунной системы была выражена меньше, чем у других соматотипов.

Таким образом, выявленные нами изменения параметров клеток иммунной системы в экзаменационную сессию позволяют говорить о взаимосвязи физической конституции с типом реагирования на внешние воздействия, в частности на психоэмоциональный стресс.

Выводы:

1. Использование цитохимического анализа в изучении конституции человека позволило выявить соматотипические особенности метаболической активности клеток иммунной системы.

2. В клетках иммунной системы мужчин, имеющих низкие значения абсолютных показателей мышечной и жировой масс тела установлена высокая активность гидролитических ферментов и низкая активность сукцинатдегидрогеназы лимфоцитов.

3. Наиболее выраженные реакции на стресс цитохимических параметров наблюдались у мужчин мускульного соматотипа, поскольку большинство исследованных метаболических показателей клеток иммунной системы в данной группе характеризовалось

статистически значимыми изменениями. В то время как для брюшного соматотипа установлен инертный тип реагирования.

Литература

1. Апанасенко, Г.Л. Медицинская валеология / Г.Л. Апанасенко, Л. А. Попова // Ростов н/Д.: Феникс, 2000. - 248 с.

2. Ефремов, А.В. Роль лизосомальных ферментов в генезе ведущих клинико-патофизиологических синдромов: факты и гипотезы / А. В. Ефремов, Л. А. Руяткина, О. В. Цыганкова, З.Г.Бондарева // Патол. физиология и эксперим. терапия.- 2007.-№ 1.- С. 18-21.

3. Захарова, Л.Б. Метаболические и регуляторные показатели лимфоцитов крови - универсальные маркеры для оценки интенсивности реакций организма на различные воздействия / Л.Б. Захарова // Вопросы сохранения и развития здоровья населения Севера и Сибири: матер. итог. науч.-практ. конф.- Красноярск, 2002.- С. 11-13.

4. Кушнерова, Н.Ф. Профилактика стрессовых состояний у студентов очной формы обучения / Н.Ф. Кушнерова, С.Е. Фоменко, Ю.А. Рахманин // Гигиена и санитария.- 2007.- № 4.- С. 47^9.

5. Мартиросов, Э.Г. Технологии и методы определения состава тела человека / Э.Г. Мартиросов, Д.В. Николаев, С.Г. Руднев.- М.: Наука, 2006.- 248 с.

6. Поборский, А.Н. Особенности вегетативной регуляции и цитохимического статуса лимфоцитов у детей перед началом обучения в школе / А.Н. Поборский // Физиология человека.-2007.- № 1.- С. 55-62.

7. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва- М.: МедиаСфера, 2002.- 312 с.

8. Чтецов, В.П. Опыт объективной диагностики соматических типов на основе измерительных признаков у мужчин /

В.П. Чтецов, Н.Ю. Лутовинова, М.И. Уткина // Вопр. антропологии.- 1978.- Вып. 78.- С. 3-22.

9. Шищенко, В.М. Диагностические и прогностические возможности клинической цитохимии /В.М. Шищенко// РАМН; НЦ здоровья детей РАМН.- М., 2005.- 74 с.

USE THE CYTOCHEMICAL ANALYSIS IN BIOMEDICAL ANTHROPOLOGY

T.V. KAZAKOVA, V.V. FEFELOVA, A. YU. ERMOSHKINA,

T.P. KOLOSKOVA, YU.A. FEFELOVA

Krasnoyarsk State Medical University named after prof. V.F. Voino-Yasenetsky Federal state fiscal agency "Research Institute of Medical Problems of the North" Siberian department of Russian Academy of Medical Sciences Siberian State Technological University

Purpose of the work to evaluate the possibility of using of cyto-chemical analysis to study the metabolic characteristics of somatotyp-ical features of peripheral blood lymphocytes of men. High activity of hydrolytic enzymes and low activity of succinatedehydrogenase lymphocytes was established in the immune system cells of the young men with low values of absolute indicesof muscle and fat body mass is set high activity of hydrolytic enzymes, and low activity of succina-tedehydrogenase lymphocytes. Degree of variation of immune system cells is characterized by constitutional peculiarities in stress. Regardless of sex the person with the highest percentage of fat mass in the soma are the relativeinactivity metabolic parameters of immune system cells.

Key words: somatotype, lymphocyte, cytochemistry.

УДК: 617.52-071

КРАНИОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛИЦЕВОЙ АСИММЕТРИИ У ПАЦИЕНТОВ С ДИСТАЛЬНОЙ ОККЛЮЗИЕЙ ПО ДАННЫМ ФРОНТАЛЬНОЙ ТЕЛЕРЕНТГЕНОГРАФИИ

А.С. КАРПОВА*

Обследовано 20 пациентов европейской внешности с дистальной окклюзией и отсутствием внешних признаков асимметрии. Оценку лицевой асимметрии проводили, используя фронтальную телерентгенограмму и сравнивая с таблицами средних значений цефаломет-рических показателей для лиц европейской внешности с ортогнати-ческим прикусом.

* ГБОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н.Бурденко Минздравсоцразвития Российской Федерации». 394000, г. Воронеж, ул. Студенческая 10, тел (4732) 53-05-36

Ключевые слова: фротальная телерентгенограмма, лицевая асимметрия.

Сагиттальные аномалии окклюзии зубных рядов уже на ранних этапах формирования прикуса сопровождаются значительными морфологическими, функциональными и эстетическими нарушениями. Эстетические нарушения могут проявляться в виде лицевой асимметрии. При этом вопросы эстетики лица пациентов явно недооценивают [6]. Проведенные социальнопсихологические исследования показали, что эстетика лица оказывает существенное влияние на качество жизни человека [3]. Когда речь идет о привлекательности, характеристики восприятия формы и очертания лица, признанного привлекательным, должны быть универсальными, причем для разных мировых культур, независимо от таких параметров, как возраст, пол и т.д. [10]. Привлекательность и хорошая эстетика лица связаны с определенными пропорциями и симметрией [7]. Асимметрия лица является его индивидуальной характеристикой, отличающейся своими показателями, как отмечает Anma М., даже у однояйцовых близнецов. Однако определить только с помощью клинического обследования, когда нормальная асимметрия становиться ненормальной невозможно, поэтому врачу-ортодонту необходимы дополнительные методы исследования с применением фронтальной цефалометрии.

Особенности строения зубных рядов и костей лицевого черепа изучены достаточно подробно, однако диагностика нарушений строения лицевого скелета остается сложной из-за большого числа методик анализа телерентгенограмм. Цефалометрические данные фронтальных телерентгенограмм, основное достоинство которых состоит в возможности количественной оценки роста лицевого скелета и его изменений, не могут быть единственным критерием при планировании ортодонтического лечения, но могут быть одним из наиболее информативных методов диагностики. Важным моментом ортодонтической диагностики является выявление связи между аномалией окклюзии, скелетными нарушениями и эстетикой лица, которое возможно при измерении фронтальных телерентгенограмм. Так, по данным Богатырькова Д.В. с соав., асимметрия лица встречается лишь в 1,3-2% случаев, тогда как ученые Университета Северной Каролины выявили явные признаки асимметрии лица в 34% обследованных пациентов, а Farkas L.G. и Chung G., используя специальные антропометрические методы, обнаружили асимметрию у всех обследованных лиц. Наиболее часто встречающейся и трудно диагностируемой формой лицевой асимметрии является скелетная форма, которая сопровождает аномалии зубочелюстной системы [2,8]. При этом асимметрия лицевого скелета в различной степени, как отмечает Слабковская А.Б., характерна для всех аномалий [4]. Основным же способом ее диагностики является анализ телерентгенограмм в прямой проекции.

Материалы и методы исследования. Асимметрия лицевого скелета изучалась на телерентгенограммах в прямой проекции. Важным условием точности измерений и полученных выводов, в том числе построения диагноза, является идентичность условий получения снимков пациента. Для идентичной ориентации и фиксации головы пациента, при проведении ТРГ использовали цефалостат, входящий в конструкцию рентгеновского аппарата и предназначенный для производства телерентгенограмм. Голова пациента ориентировалась по франкфуртской горизонтали - линии, соединяющей кожные точки нижнего края глазницы и верхнего края наружного слухового прохода. Перед экспозицией проверяли точность смыкания зубов в положении центральной окклюзии и предупреждали пациента о необходимости соблюдать неподвижность во время съёмки. Прямые ТРГ получались нами в положении пациента сидя. При съемке добивались образования перпендикулярности плоскостей рентгеновской пленки, франкфуртской и сагиттальной.

Для получения ТРГ использовались кассеты размером 24x30 см. Кончик носа пациента ориентировали в центр кассеты, рентгеновский луч направлялся горизонтально на затылочный бугор, строго посередине линии, соединяющей правый и левый наружные слуховые проходы. Ориентирами для ее проведения служили ушные фиксаторы цефалостата. Пациента предупреждали о необходимости соблюдения неподвижности во время съемки. При съёмке черепа в обязательном порядке использовался защитный экран и просвинцованный резиновый фартук, закрывающий все части тела до шейного отдела позвоночника