ПИРАЗОЛОПИРИМИДИНЫ И РОДСТВЕННЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ КАК СК2 ИНГИБИТОРЫ
PYRAZOLOPYRIMIDINES AND RELATED HETEROCYCLES AS CK2 INHIBITORS

Перекрестная ссылка на родственные заявки
Данная заявка объявляет приоритет предварительной заявки США за номером 61/266,801 от 4 декабря 2009 года под названием "ПИРАЗОЛОПИРИМИДИНЫ И РОДСТВЕННЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ КАК ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ"; и предварительной заявки США за номером 61/354,165 от 11 июня 2010 года под названием "ПИРАЗОЛОПИРИМИДИНЫ И РОДСТВЕННЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ КАК CK2 ИНГИБИТОРЫ"; содержания которых инкорпорированы здесь путем отсылки во всей полноте для всех целей.
Область изобретения
Данное изобретение касается, отчасти, молекул, обладающих некоторыми биологическими активностями, которые включают, но не ограничиваясь этим, ингибирование пролиферации клеток, и модулирования некоторых протеинкиназных активностей. Молекулы данного изобретения модулируют, например, протеинкиназу CK2 (которая здесь называется CK2) и полезны для лечения состояний, связанных прямо или косвенно с CK2 активностями, например, рака, воспалительных состояний, инфекционных нарушений, боли, иммунологических расстройств, нейродегенеративного нарушения (такого как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона) и т.д. Данное изобретение также касается, отчасти, способов использования таких соединений и фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.
Уровень техники
Протеинкиназа CK2 (ранее называемая казеинкиназой II, на которую здесь ссылаются как на "CK2") является вездесущей и хорошо сохранившейся протеин серин/треонин киназой. Данный холоэнзим обычно находится в тетрамерных комплексах, состоящих из двух каталитических (альфа и/или альфа') субъединиц и двух регуляторных (бета) субъединиц. CK2 имеет ряд физиологических мишеней и участвует во множестве клеточных функций, включая поддержание жизнеспособности клеток. Уровень CK2 в нормальных клетках жестко контролируется, и считается, что она играет роль в росте и пролиферации клеток. Ингибиторы CK2, полезные для лечения некоторых типов рака, описаны в PCT/US2007/077464, PCT/US2008/074820, PCT/US2009/35609.
Преобладание и важность CK2, так же как эволюционный анализ ее последовательности, предполагают, что это древний энзим в эволюционном масштабе; его долговечность может объяснять, почему он стал важным в таком большом количестве биохимических процессов, и почему CK2 от хозяев был даже кооптирован инфекционными патогенами (например, вирусами, протозоа) как интегральная часть их биохимических систем выживания и жизненного цикла. Эти самые характеристики объясняют, почему ингибиторы CK2, как предполагается, полезны во множестве медицинских терапий, как здесь обсуждено. Поскольку CK2 играет центральную роль во многих биологических процессах, как резюмировано Guerra & Issinger, Curr. Med. Chem., 2008, 15:1870-1886, ингибиторы CK2, включая описанные здесь соединения, должны быть полезными в лечении множества заболеваний и расстройств.
Раковые клетки обнаруживают увеличение содержания CK2, и недавно полученные данные предполагают, что CK2 вызывает сильное подавление апоптоза клеток путем защиты регуляторных протеинов от опосредованной каспазами деградации. Анти-апоптотическая функция CK2 может вносить вклад в ее способность участвовать в трансформации и генезисе опухолей. В частности, CK2, как было показано, ассоциируется с острым и хроническим миелоидным лейкозом, лимфомой и множественной миеломой. Кроме того, повышенная CK2 активность наблюдалась в твердых опухолях ободочной кишки, прямой кишки и молочной железы, при плоскоклеточном раке легких и головы и шеи (SCCHN), аденокарциномах легких, ободочной кишки, прямой кишки, почек, молочной железы и предстательной железы. Ингибирование CK2 малой молекулой, как сообщается, индуцирует апоптоз раковых клеток поджелудочной железы и клеток гепатоцеллюлярной карциномы (HegG2, Нер3, HeLa раковые клеточные линии); и CK2 ингибиторы драматическим образом сенсибилизировали RMS (рабдомиосаркома) опухоли до апоптоза, индуцированного TRAIL. Таким образом, отдельный ингибитор CK2 или в комбинации с TRAIL или лигандом для TRAIL рецептора будет полезен для лечения RMS, наиболее распространенной саркомы мягких тканей у детей. Кроме того, как было найдено, повышенный уровень CK2 хорошо коррелирует с агрессивностью неоплазии, и лечение CK2 ингибитором данного изобретения снизит, таким образом, тенденцию к перерастанию доброкачественных образований в злокачественные или к метастазированию злокачественных опухолей.
В отличие от других киназ и сигнальных путей, где мутации часто ассоциируются со структурными изменениями, которые обусловливают потерю регуляторного контроля, повышенный уровень CK2 активности, как представляется, обусловлен, в общем, повышенным уровнем регуляции (апрегуляцией) или гиперэкспрессией активного протеина, а не изменениями, которые влияют на уровни активации. Гуэрра (Guerra) и Исингер (Issinger) постулируют, что это может быть вызвано регуляцией путем агрегации, поскольку уровни активности плохо коррелируют с мРНК уровнями. Избыточная активность CK2 была выявлена во многих видах рака, включая SCCHN опухоли, опухоли легких, опухоли молочной железы и другие. Id.
Было показано, что повышенная CK2 активность при раке кишечника коррелирует с повышенной злокачественностью. Аберрантная экспрессия и активность CK2, как сообщалось, промотируют увеличение нуклеарных уровней NF-каппаВ в раковых клетках молочной железы. CK2 активность заметно повышена у пациентов с острым миелобластным лейкозом (AML) и хроническим миелолейкозом (CML) во время бластного криза, указывая на то, что ингибитор CK2 должен быть особенно эффективным в этих условиях. Выживание клеток множественной миеломы, как было показано, основывается на высокой активности CK2, и ингибиторы CK2 были цитотоксичными по отношению к ММ клеткам.
В литературе представлены четкие свидетельства того, что ингибирование CK2 коррелирует с эффективностью против опухолевых клеток. Например, CK2 ингибитор ингибировал рост мышиных р190 клеток лимфомы. Его взаимодействие с Bcr/Abl, как сообщалось, играет важную роль в пролиферации Bcr/Abl экспрессирующих клеток, указывая на то, что ингибиторы CK2 могут быть полезны в лечении Bcr/Abl-позитивных лейкозов. Ингибиторы CK2, как было показано, ингибируют прогрессирование кожных папиллом, ксенотрансплантатов рака предстательной и молочной железы у мышей и пролонгируют выживание трансгенных мышей, которые экспрессируют простата-промоторы. Id.
Недавно был сделан обзор роли CK2 в различных нераковых болезненных процессах. Смотри работу Guerra & Issinger, Curr. Med. Chem., 2008, 15:1870-1886. Все большее количество данных указывает на то, что CK2 задействована в критических заболеваниях центральной нервной системы, включая, например, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и редкие нейродегенеративные расстройства, такие как деменция при болезни Гуама-Паркинсона, синдром делеции хромосомы 18, прогрессирующий надъядерный паралич, болезнь Куфса или болезнь Пика. Предполагается, что селективное CK2-опосредованное фосфорилирование тау белков может быть задействовано в прогрессирующей нейродегенерации болезни Альцгеймера. Кроме того, недавно выполненные исследования предполагают, что CK2 играет роль в ухудшении памяти и ишемии мозга, последний эффект, очевидно, опосредуется CK2 регуляторным действием на PI3K пути выживания.
CK2, как было показано, включена в модуляцию воспалительных расстройств, например, острой или хронической боли воспалительного характера, гломерулонефрита и аутоиммунных заболеваний, включая, например, множественный склероз (MS), системную красную волчанку, ревматоидный артрит и болезнь Стилла. Она позитивно регулирует функцию серотонин 5-НТ3 рецепторного канала, активирует гемоксигеназу типа 2 и усиливает активность нейрональной окисноазотной синтазы. Селективный CK2 ингибитор, как сообщалось, сильно снижает болевую реакцию мышей при введении в ткань спинного мозга перед тестированием на боль. Он фосфорилирует фосфолипазу А2 секреторного типа IIA из синовиальной жидкости RA пациентов и модулирует секрецию DEK (нуклеарный ДНК-связывающий протеин), представляющую собой провоспалительную молекулу, которую находят в синовиальной жидкости пациентов с болезнью Стилла. Таким образом, ингибирование CK2, как предполагается, контролирует развитие воспалительных патологий, таких как здесь описаны, и раскрытые здесь ингибиторы, как показано в данном документе, эффективно излечивают боль в моделях на животных.
Протеинкиназа CK2, как было также показано, играет роль в нарушениях сосудистой системы, таких как, например, атеросклероз, ламинарное напряжение при сдвиге и гипоксия. CK2, как было также показано, играет роль в нарушениях скелетных мышц и костной ткани, таких как кардиомиоцитная гипертрофия, пониженная инсулиновая индукция и минерализация костной ткани. В одном исследовании ингибиторы CK2 были эффективны в замедлении ангиогенеза, индуцированного фактором роста в культивированных клетках. Более того, в модели ретинопатии, CK2 ингибитор в комбинации с октреотидом (аналог соматостатина) снижал образование неоваскулярных пучков; таким образом, описанные здесь CK2 ингибиторы могут быть эффективными в сочетании с соматостатиновым аналогом для лечения ретинопатии.
CK2, как также было показано, фосфорилирует GSK, тропониновую и миозиновую легкую цепь; таким образом, CK2 важна в физиологии скелетных мышц и костной ткани, и связана с заболеваниями, поражающими мышечную ткань.
Имеющиеся данные предполагают, что CK2 также задействована в развитии и регулировании жизненного цикла протозойных паразитов, таких как, например, Theileria parva, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Herpetomonas muscarum muscarum, Plasmodium falciparum, Trypanosoma brucei, Toxoplasma gondii и Schistosoma mansoni. Многочисленные исследования подтвердили роль CK2 в регулировании клеточной подвижности протозойных паразитов, существенной для инвазии в клетки хозяина. Активация CK2 или избыточной активности CK2, как было показано, имеет место в хозяевах, инфицированных Leishmania donovani, Herpetomonas muscarum muscarum, Plasmodium falciparum, Trypanosoma brucei, Toxoplasma gondii и Schistosoma mansoni. Действительно, ингибирование CK2, как было показано, блокирует инфекцию Т. cruzi.
CK2, как также было показано, взаимодействует с и/или фосфорилирует вирусные белки, ассоциирующиеся с вирусом иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1), вирусом папиломы человека и герпесным симплексным вирусом, в дополнение к другим типам вируса (например, цитомегаловирус человека, вирусы гепатита С и В, вирус болезни Борна, аденовирус, вирус Коксаки, коронавирус, вирус инфлюэнцы и опоясывающего лишая). CK2 фосфорилирует и активирует ВИЧ-1 обратную транскриптазу и протеазы in vitro и in vivo и промотирует патогенность вируса иммунодефицита обезьяны-человека (SHIV), модели для ВИЧ. Таким образом, ингибиторы CK2 способны снижать патогенные эффекты модели ВИЧ инфекции. CK2 также фосфорилирует многие протеины герпесного симплексного вируса и многих других вирусов, и некоторые данные предполагают, что вирусы воспринимают CK2 как фосфорилирующий фермент для их важных белков жизненного цикла. Таким образом, ингибирование CK2, как предполагается, "отпугивает" инфекцию и развитие вирусных инфекций, которые зависят от CK2 хозяина в плане собственных жизненных циклов.
CK2 является необычной по разнообразию биологических процессов, на которые она действует, и отличается от большинства киназ также и другими свойствами: она существенно активна, может использовать АТР или GTP, и ее уровень повышен в большинстве опухолей и быстро разрастающихся тканей. Кроме того, если многие ингибиторы киназы влияют на множество киназ, увеличивая вероятность эффектов вне мишени или изменчивость в отношении индивидуальных субъектов, уникальные структурные особенности CK2 позволяют создавать в высокой степени CK2-специфические ингибиторы. По всем этим причинам, CK2 является особенно интересной мишенью для разработки лекарств, и данное изобретение представляет высокоэффективные ингибиторы CK2, полезные в лечении множества различных заболеваний и расстройств, опосредованных или связанных с избыточными, аберрантными или нежелательными уровнями CK2 активности.
Соединения Формулы I, как было найдено, являются активными в отношении CK2, так же как и к одному или нескольким Pim протеинам. Теперь найдено, что соединения Формулы (II) и (II') обычно более активны к CK2 и обладают также меньшей активностью к Pim киназам. Не вдаваясь в теорию, можно предположить, что их физиологические активности вытекают из их активности к CK2.
Данное изобретение представляет новые соединения Формул (II) и (II'), так же, как и Формул IIa, IIa', II-Th и II-Th', и фармацевтические композиции, содержащие эти соединения. Новые соединения Формулы II, которые родственны соединениям Формулы I, проявляют удивительно более высокую активность к CK2 и сниженную Pim активность, и, таким образом, преимущественно используются для лечения состояний, чувствительных к CK2 ингибированию, таких, как здесь описаны. Поэтому соединения Формулы II полезны для лечения состояний, опосредованных или связанных с избыточной активностью CK2, со сниженной вероятностью побочных эффектов, обусловленных ингибированием других киназ.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение представляет, отчасти, химические соединения, обладающие некоторыми биологическими активностями, которые включают, но не ограничиваясь этим, ингибирование пролиферации клеток, ингибирование ангиогенеза и модулирование протеинкиназных активностей. Эти молекулы модулируют протеинкиназную CK2 (CK2) и/или PIM активность, и обычно более селективны в отношении CK2 активности, чем другие киназы, по сравнению со схожими соединениями, которые не имеют аминогруппы, показанной в Формуле (II) или (II'). Эти соединения влияют на биологические функции, которые включают, но не ограничиваясь этим, ингибирование переноса гамма фосфата от АТР к белковому или пептидному субстрату, ингибирование ангиогенеза, ингибирование пролиферации клеток и индуцирование апоптоза клеток, например. Настоящее изобретение также представляет, отчасти, способы получения новых химических соединений и их аналогов, и способы использования этих соединений. Также представлены композиции, включающие эти молекулы в комбинации с другими материалами, включая другие терапевтические агенты, и способы использования таких соединений.
Соединения общей формулы (I), как было показано, ингибируют Pim и CK2 (PCT/US2010/035657):
1
4
где данная бициклическая кольцевая система, содержащая Z-Z, является ароматической;
1
2
1
2
одна из Z и Z является С, другая из Z и Z является N;
3
4
5
Z и Z являются, независимо, CR или N,
5
1
где R может быть Н или R;
1
7
8
R представляет собой Н, гало, CN, замещенный, при необходимости, С1-С4 алкил, замещенный, при необходимости, С2-С4 алкенил, замещенный, при необходимости, С2-С4 алкинил, замещенный, при необходимости, С1-С4 алкокси или -NRR,
7
8
где R и R, каждая, выбираются, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила, и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила,
7
8
7
8
или R и R, взятые вместе с N из -NRR, образуют замещенное, при необходимости, 5-8-членное кольцо, которое содержит, при необходимости, дополнительный гетероатом, который выбирается из N, О и S, как член кольца;
2
R представляет собой Н, гало, CN, или замещенную, при необходимости, группу, которая выбирается из С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила и С2-С4 алкинила;
3
4
R и R выбираются, независимо, из Н и замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила;
6
6
Х является NR, О или S, где R является Н или замещенной, при необходимости, группой, которая выбирается из С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила и С2-С4 алкинила;
Y является О или S;
9
10
9
9
9
10
11
n
W представляет собой замещенный, при необходимости, арил, замещенный, при необходимости, гетероарил, или -NRR, -OR, S(O)R, замещенный, при необходимости, связанный с углеродом гетероциклил, замещенный, при необходимости, С3-С8 циклоалкил или CRRR,
где n является 0, 1 или 2, и
9
10
R и R, каждая, выбирается, независимо, из H, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, арила, замешенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила,
9
10
9
10
или R и R, взятые вместе с N из -NRR, образуют замещенное, при необходимости, 5-8-членное кольцо, которое содержит, при необходимости, дополнительный гетероатом, который выбирается из N, О и S, как кольцевой член, и
11
R выбирается из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила.
Соединения Формулы I ингибируют Pim и CK2 и часто ингибируют также другие киназы. Для использования в виде фармацевтических препаратов полезно выбирать соединения, которые ингибируют один основной таргетный энзим или рецептор при минимальном влиянии на другие пути или мишени, поскольку биохимические эффекты вне мишени могут вызвать непредсказуемые побочные эффекты. Теперь было найдено, что соединения Формул (II) и (II'), которые родственны соединениям Формулы I, сохраняют высокие уровни CK2 активности, и действительно часто более активны в отношении CK2, чем другие соединения, подобные Формуле I, и тем не менее, они обычно более селективны в отношении CK2, чем к Pim киназам. Кроме того, их селективность в отношении CK2, превышающая другие киназы в широком спектре киназ, также улучшена, в общем, по сравнению с соединениями Формулы I. Таким образом, соединения Формулы (II) или (II') представляют особенно полезный класс соединений для описанных здесь способов лечения, поскольку они селективны к CK2 и ингибируют меньше других киназ, что снижает риск побочных эффектов.
или
где:
3
4
5
Z и Z, каждая, представляет, независимо, N или CR или СН;
5
2
n
2
каждая R выбирается, независимо, из гало, CN, R, -OR, -S(O)R, COOR, CONR и NR,
2
где каждая R выбирается, независимо, из Н и замещенного, при необходимости, С1-С4 алкила, и две R группы из NR могут быть соединены вместе с образованием 5-6-членного гетероциклического кольца, которое, при необходимости, является замещенным и может включать дополнительный гетероатом, который выбирается из N, О и S, как член кольца;
2
3
4
R, R и R, каждая, выбирается, независимо, из Н и замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила;
2
Х представляет О, S, или NR;
10
Y является О или S или NR;
10
7
8
где R выбирается из Н, CN, замещенного, при необходимости, С1-С4 алкила, замещенного, при необходимости, С2-С4 алкенила, замещенного, при необходимости, С2-С4 алкинила, замещенного, при необходимости, С1-С4 алкокси, и -NRR,
Z является О или S;
7
8
7
7
8
7
8
7
7
8
7
8
n
m
m
m
m
n
L может быть связью, -CR=CR-, -C≡C-, -NR-, -O-, -S(O)- или (CRR), -(CRR)-NR-, -(CRR)-O- или -(CRR)-S(O)-;
7
8
7
7
7
8
7
8
9
n
W представляет собой замещенный, при необходимости, С1-С10 алкил, замещенный, при необходимости, арил, замещенный, при необходимости, гетероарил, -NRR, -OR, S(O)R, CONRR, замещенный, при необходимости, гетероциклил, замещенный, при необходимости, С3-С8 циклоалкил, замещенный, при необходимости, С2-С10 алкенил, замещенный, при необходимости, С2-С10 алкинил или CRRR,
7
8
9
где каждая R и R и R выбирается, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С6 алкокси, замещенного, при необходимости, С1-С6 алкиламино, замещенного, при необходимости, С1-С6 диалкиламино, замещенного, при необходимости, гетероциклила, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, С3-С8 циклоалкила, замещенного, при необходимости, С4-С10 циклоалкилалкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила;
8
9
7
или R и R, взятые вместе, могут представлять =O (оксо) или =N-OR или =N-CN;
7
8
7
8
или R и R, взятые вместе с N из -NRR, могут образовывать замещенную, при необходимости, 5-10-членную гетероциклическую или гетероароматическую кольцевую систему, которая содержит, при необходимости, дополнительный гетероатом, который выбирается из N, О и S, как член кольца;
7
8
7
8
при условии, что не более одной из R и R в -NRR выбирается из группы, состоящей из алкокси, алкиламино, диалкиламино и гетероциклила;
каждая n равняется, независимо, 0, 1 или 2;
каждая m равняется, независимо, 1, 2, 3 или 4;
1A
1B
R и R, каждая, выбираются, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, гетероциклила, замещенного, при необходимости, циклоалкила, замещенного, при необходимости, циклоалкилалкила, замещенного, при необходимости, гетероциклоалкилалкила, замещенного, при необходимости, арилалкила или замещенного, при необходимости, 5-6-членного арильного кольца, содержащего до двух гетероатомов, как членов кольца;
1A
1B
1A
1B
или R и R в -NRR могут быть взяты вместе с образованием замещенной, при необходимости, 5-8-членной моноциклической или 5-10-членной бициклической гетероарильной или гетероциклической группы, содержащей до двух дополнительных гетероатомов, которые выбираются из N, О и S, как члены кольца;
и фармацевтически приемлемые соли этих соединений.
Предпочтительным классом соединений Формулы II являются соединения Формулы (IIa) или (IIa'):
или
2
4
1B
7
7
8
7
8
7
7
8
7
8
3
3
n
m
m
где R является Н, Me или CF; R является Н, Me или CF; Х является О, S или NH; Y является О или S; R есть такой, как описано для Формулы II; L является связью, -NR-, -О- или -S(O)-, (CRR), или она может представлять -(CRR)-NR-; m равняется 1-4, и n равняется 0-2; и W выбирается из замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, гетероарила и -NRR, где R и R являются такими, как определено для Формулы II.
Специфические варианты воплощения соединений данного изобретения включают тиофен-содержащие соединения Формул (II-Th) и (II-Th'):
или
Th
0-2
2
2
2
где R выбирается из Н, гало, замещенного, при необходимости, С1-С6 алкила, CN, S(O)R, -SONR, COOR, CONR и C(O)R,
где каждая R является, независимо, Н, гало, CN или замещенным, при необходимости, членом, который выбирается из группы, состоящей из С1-С6 алкила, С1-С6 алкокси, С1-С6 алкиламино, ди(С1-С6)алкиламино, С3-С8 циклоалкила, С4-С10 циклоалкилалкила, С5-С8 гетероциклила, С6-С10 гетероциклилалкила, арила, арилалкила, С5-С6 гетероалкила и С6-С10 гетероалкилалкила;
и две R на одном и том же атоме или на соседних атомах могут образовывать замещенное, при необходимости, гетероциклическое кольцо, которое содержит дополнительный гетероатом, который выбирается из N, О и S;
и другие структурные особенности являются такими, как определено для Формулы IIa выше.
Данное изобретение включает фармацевтически приемлемые соли соединений Формул II, II', IIa, IIa', II-Th, и II-Th', так же как и нейтральные соединения.
Данное изобретение также представляет фармацевтические композиции, содержащие такие соединения плюс один или несколько фармацевтически приемлемых носителей или наполнителей, и способы использования этих соединений и композиций для лечения определенных состояний, как описано здесь далее.
Кроме того, данное изобретение представляет промежуточные соединения Формулы (III), которые полезны для получения описанных здесь соединений, и способы использования этих промежуточных соединений для приготовления соединений Формулы (II);
1A
1B
2
4
3
4
где R, R, R, R, Z, Z, L и W являются такими, как определено для Формулы (II) выше, или в некоторых вариантах воплощения, они отвечают соответствующим элементам, определенным для Формулы (IIa) выше;
1
2
1
2
одна из Z и Z представляет N, и другая из Z и Z представляет С;
и круги внутри двух данных колец указывают, что оба кольца являются ароматическими.
Данный способ включает реакцию соединения Формулы (III) с гидантоином или схожим 5-членным гетероциклическим соединением Формулы (IV):
3
где R, X, Y и Z являются такими, как определено для Формулы (II) или (II'),
при условиях, которые промотируют конденсацию данных двух соединений.
Обычно, условия реакции включают подходящий растворитель и основание, при необходимости, каталитическое количество основания, но могут использоваться стехиометрические или большие количества основания. Подходящими основаниями являются те, которые способны депротонировать соединение Формулы (IV), промотируя конденсацию с соединением Формулы (III), и вторичные амины, которые способны реагировать с альдегидами Формулы (III) с образованием иминиевых частиц. Подходящие основания включают С1-С4 алкоксиды, металлические гидриды, третичные амины, такие как триэтиламин или диизопропил этиламин, DABCO, DBU и подобные; и подходящие вторичные аминные основания включают пиперидин, морфолин, пиперазин, N-метилпиперазин, пирролидин и подобные. Подходящие растворители включают полярные апротонные растворители, такие как NMP, ДМФ, ДМСО, DMA и диоксан; так же как и протонные растворители, такие как С1-С10 спирты и диолы, например, этанол, пропанол, изопропанол, этиленгликоль, пропиленгликоль, метоксиэтанол и подобные. Могут использоваться и смеси таких растворителей, так же как и смеси одного или нескольких таких растворителей с менее полярным органическим растворителем для промотирования растворимости реагентов. Выбор подходящих растворителей и оснований для этих реакций может легко сделать обычный специалист-практик в данной области.
1-2
1-2
В некоторых вариантах воплощения соединений Формулы (III), -L-W представляет группу формулы -S(O)R, где R представляет собой алкил, циклоалкил, арил, гетероарил, или схожую группу, и данный продукт является соединением Формулы (II) или (II'), имеющим ту же самую -L-W группу. Такие соединения обычно используются для получения других соединений формулы (II) или (II'), поскольку составляющая формулы -S(O)R является легко отщепляемой группой, и может быть легко замещена нуклеофилами, такими как первичный или вторичный амины, для введения других -L-W групп. Таким образом, другим способом для синтеза соединений данного изобретения является реакция соединения Формулы (V),
1-2
где -L-W представляет группу формулы -S(O)R, где R является замещенной, при необходимости, группой, которая выбирается из С1-С6 алкила, С3-С8 циклоалкила, С4-С10 циклоалкилалкила, С6-С10 арила, С5-С6 гетероарила, С7-С12 арилалкила, и С6-С12 гетероарилалкила;
и другие переменные являются такими, как определено для формул (III) и (IV) выше;
с нуклеофильным соединением формулы
W'-L'-H
7
где L' выбирается из NR, О и S; и
7
8
9
W' является замещенным, при необходимости, арилом, замещенным, при необходимости, гетероарилом, замещенным, при необходимости, гетероциклилом, замещенным, при необходимости, С3-С8 циклоалкилом, замещенным, при необходимости, С2-С10 алкенилом, замещенным, при необходимости, С2-С10 алкинилом или CRRR,
7
8
9
где R, R и R являются такими, как определено выше для Формулы II,
при подходящих условиях, как здесь описано, с получением соединения Формулы (V'):
.
Также здесь представлены фармацевтические композиции, содержащие соединение Формулы I или II, как здесь описано, и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель, или два или более фармацевтически приемлемых носителей и/или наполнителей. Фармацевтические композиции, содержащие, по меньшей мере, одно из этих соединений, могут быть использованы в способах лечения, таких как описанные здесь.
Соединения Формул I и II, как здесь описано, связываются с и ингибируют некоторые киназные протеины, которые, как предполагается, являются основой их фармацевтической активности. В некоторых вариантах воплощения, данный протеин является CK2 протеином, таким как CK2 протеин, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1, 2 или 3, или ее существенно идентичный вариант, например.
SEQ ID NO:1 (NP_001886; казеинкиназа II альфа 1 субъединичный изоформ a [Homo sapiens])
SEQ ID NO:2 (NP_808227; казеинкиназа II альфа 1 субъединичный изоформ a [Homo sapiens])
SEQ ID NO:3 (NP_808228: казеинкиназа II альфа 1 субъединичный изоформ b [Homo sapiens])
Существенно идентичные варианты этих последовательностей включают протеины, имеющие, по крайней мере, 90% гомологию последовательности с одной из приведенных, предпочтительно, по крайней мере, 90% идентичность последовательности; и имеющие, по крайней мере, 50% уровня in vitro киназной активности определенной последовательности при типичных условиях анализа.
Данное изобретение включает способы модуляции активности CK2 протеина, или in vitro или ex vivo. Подходящие способы включают контактирование системы, содержащей данный протеин, с описанным здесь соединением, в количестве, эффективном для модулирования активности данного протеина. В некоторых вариантах воплощения, активность данного протеина ингибируется, и иногда данный протеин является CK2 протеином, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:3, или ее существенно идентичный вариант, например. В некоторых вариантах воплощения, CK2 находится в клетке или ткани; в других вариантах воплощения, она может находиться в бесклеточной системе.
Представлены также способы ингибирования пролиферации клеток, которые включают контактирование клеток с описанным здесь соединением в количестве, эффективном для ингибирования пролиферации данных клеток. Данные клетки иногда находятся в клеточной линии, такой как раковая клеточная линия (например, линия раковых клеток молочной железы, раковых клеток предстательной железы, раковых клеток поджелудочной железы, раковых клеток легких, гемопоэтического рака, колоректального рака, рака кожи, рака яичника). В некоторых вариантах воплощения, раковая клеточная линия отвечает раку молочной железы, раку предстательной железы или поджелудочной железы Данные клетки иногда находятся в ткани, могут быть в субъекте, иногда в опухоли и иногда в опухоли в субъекте. В некоторых вариантах воплощения, данный способ дополнительно включает индуцирование апоптоза клеток. Иногда данные клетки являются клетками от субъекта с дегенерацией желтого пятна.
Также представлены способы лечения состояния, связанного с аберрантной пролиферацией клеток, которые включают назначение описанного здесь соединения субъекту, нуждающемуся в этом, в количестве, эффективном для лечения данного состояния пролиферации клеток. В некоторых вариантах воплощения, данное состояние клеточной пролиферации является раком, связанным с опухолью, например, твердой или циркулирующей. В некоторых случаях рак является раком молочной железы, предстательной железы, поджелудочной железы, легких, колоректальным раком, кожи или яичника, В некоторых вариантах воплощения, состояние пролиферации клеток является раком без опухоли, таким как гемопоэтический рак, например, включая лейкозы, например, множественную миелому и лимфомы. В некоторых вариантах воплощения, состояние пролиферации клеток является дегенерацией желтого пятна.
Данное изобретение также включает способы лечения рака или воспалительного расстройства, или других нарушений, описанных здесь, которые опосредуются избыточной активностью одной или нескольких из этих киназ, у субъекта, который нуждается в таком лечении, включающие: введение данному субъекту терапевтически эффективного количества терапевтического агента, полезного для лечения такого расстройства; и введение данному субъекту молекулы, описанной здесь, например, соединение ингибирует CK2 в количестве, которое является эффективным для усиления желательного эффекта данного терапевтического агента. В некоторых вариантах воплощения, данная молекула, которая ингибирует CK2, является соединением Формулы I или Формулы II, или Формулы II', или (IIa), или (IIa'), или их фармацевтически приемлемой солью. В некоторых вариантах воплощения, необходимым эффектом данного терапевтического агента, который усиливается молекулой, ингибирующей CK2, является усиление апоптоза в, по крайней мере, одном типе клеток. В некоторых вариантах воплощения, данная клетка является раковой клеткой, и данное соединение является соединением Формулы (II) или (IIa), которое является сильным ингибитором (IC-50 менее приблизительно 100 нМ, например) CK2. Предпочтительно, данное соединение имеет IC-50 в отношении Pim менее приблизительно 30 нМ, и является селективным в отношении CK2 по сравнению с Pim киназами. В некоторых вариантах воплощения, IC-50 для ингибирования CK2 ниже, по крайней мере, в десять раз, чем активность относительно Pim; в предпочтительных вариантах воплощения, данное соединение имеет IC-50 для CK2, которое ниже, чем его IC-50 для, по крайней мере, одного из Pim-1, Pim-2 и Pim-3 приблизительно в 100 раз или более.
В некоторых вариантах воплощения, данный терапевтический агент и молекула, которая ингибирует CK2, вводятся, по сути, в одно и то же время. Иногда терапевтический агент и молекула, которая ингибирует CK2, используются субъектом одновременно. Терапевтический агент и молекула, которая ингибирует CK2, могут быть объединены в одну фармацевтическую композицию в некоторых вариантах воплощения; в других вариантах воплощения, вышеуказанное используется в виде отдельных композиций.
Представлены также композиции, включающие соединение, описанное здесь, и изолированный протеин. Данный протеин является в некоторых случаях CK2 протеином, таким как CK2 протеин, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:3 или ее существенно идентичный вариант, например. В некоторых вариантах воплощения, данным протеином является Pim протеин. Некоторые композиции включают описанное здесь соединение в комбинации с клеткой. Данные клетки могут быть клетками из клеточной линии, такой как раковая клеточная линия. В последних вариантах воплощения, раковая клеточная линия отвечает в некоторых случаях раку молочной железы, раку предстательной железы, раку поджелудочной железы, раку легких, гематопоэтическому раку, колоректальному раку, раку кожи, раку яичника.
Эти и другие варианты воплощения данного изобретения рассмотрены в последующем описании.
Краткое описание фигур
Фигура 1 изображает соединение Формулы I, как здесь описано, и показывает его IC50 в отношении CK2 (7 нМ) и PIM1 (351 нМ), и также показывает график ингибирования панели из 108 киназ с целью иллюстрации его селективности в отношении этих киназ, относительно других киназ.
Фигура 2 изображает соединение Формулы II, как здесь описано, и показывает, что оно более активно к CK2 (3 нМ), менее активно к PIM1 (1310 нМ), и, в общем, более селективно к различным киназам, чем соединение на Фигуре 1.
Фигура 3 представляет схему синтеза для получения некоторых соединений данного изобретения, содержащих тиофеновое кольцо.
Фигура 4 иллюстрирует синтезы некоторых пиразолотриазинов данного изобретения.
Фигура 5 иллюстрирует способы синтеза для введения различных нуклеофильных групп в пиразоло-триазиновую кольцевую систему для получения соединений данного изобретения.
Фигура 6 иллюстрирует общие пути синтеза для приготовления некоторых пиразоло-триазиновых соединений данного изобретения.
Фигура 7 изображает общий синтетический способ для получения различных имидазо-пиразиновых кольцевых систем и для получения некоторых соединений данного изобретения.
Фигура 8 изображает ряд вариаций пиразоло-триазиновых соединений в рамках данного изобретения.
Фигура 9 представляет способы получения некоторых имидазо-пиридазиновых соединений в рамках данного изобретения.
Фигура 10 иллюстрирует общий способ модифицирования некоторых замещенных соединений данного изобретения с целью придания им дополнительных свойств.
Фигура 11 изображает дополнительные способы модификации заместителей на соединениях данного изобретения.
Фигура 12 иллюстрирует альтернативные схемы синтеза для получения некоторых соединений данного изобретения.
Фигура 13 изображает образование амидного соединения изобретения из соответствующего карбоновокислотного соединения.
Фигура 14 изображает способ восстановительного аминирования для введения некоторых групп в соединения настоящего изобретения.
Способы осуществления изобретения
Соединения настоящего изобретения активируют биологические функции, которые включают, но не ограничиваясь этим, ингибирование пролиферации клеток, снижение ангиогенеза, предупреждение или снижение воспалительных реакций и боли и модулирование некоторых иммунных реакций. Такие соединения модулируют CK2 активность, как показывают приведенные здесь данные. Поэтому такие соединения могут использоваться во множестве применений обычным специалистом в данной области. Например, описанные здесь соединения могут быть использованы, например, для (i) модулирования активности протеинкиназы (например, CK2 активности), (ii) модулирования пролиферации клеток, (iii) модулирования апоптоза и/или (iv) лечения заболеваний, связанных с пролиферацией клеток (например, путем использования одного соединения или совместного использования с другой молекулой). В частности, соединения Формулы (II) и (IIa) могут использоваться для модуляции CK2 активности, in vitro или in vivo, и для лечения нарушений, связанных с избыточными или нежелательными уровнями CK2 активности, включая рак, некоторые воспалительные расстройства, сосудистые нарушения, некоторые скелетные и мышечные нарушения и инфекции, такие как протозойные патологические инфекции и некоторые вирусные инфекции.
Определения:
Термины "а" и "an" не обозначают ограничение количества, а, скорее, обозначают присутствие, по крайней мере, одного из предметов, на которые ссылаются. Термины "а" и "an" используются взаимозаменяемо с "одним или несколькими" или "по крайней мере, с одним". Термин "или" или "и/или" используется как функциональное слово для указания того, что два слова или выражения должны использоваться совместно или отдельно. Термины "включающий", "имеющий", "включая", и "содержащий" следует рассматривать как неограничивающие термины (т.е. имеют значение "включая, но не ограничиваясь этим"). Границы всех областей, относящиеся к тому самому компоненту или свойству, являются инклюзивными и могут комбинироваться друг с другом независимо.
Термины "соединение(я) данного изобретения", "эти соединения", "такое соединение(я)", "данное соединение(я)", и "настоящее соединение(я)" касаются соединений, охватываемых раскрытыми здесь структурными формулами, например, Формула (I), (II), (II'), (IIa), (IIa'), (IIb), (IIb'), (IIc), (II-Th) и (II-Th'), включает любые специфические соединения в рамках этих формул, структура которых здесь раскрыта. Соединения могут быть идентифицированы либо по их химической структуре и/или по химическому названию. Когда данная химическая структура и химическое название вступают в противоречие, химическая структура имеет решающее значение в идентификации данного соединения. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут модулировать, т.е. ингибировать или усиливать, биологическую активность CK2 протеина, Pim протеина или того и другого, и поэтому на них также ссылаются здесь как на "модулятор(ы)" или "CK2 и/или Pim модулятор(ы)". Соединения Формул (I), (II), (II'), (IIa), (IIa'), (IIb), (IIb'), (IIc), (II-Th) и (II-Th'), включающие любые специфические соединения, т.е. виды, описанные здесь, являются иллюстративными "модуляторами".
Описанные здесь соединения могут содержать один или несколько хиральных центров и/или двойных связей, и поэтому могут существовать как стереоизомеры, такие как изомеры с двойными связями (т.е. геометрические изомеры, такие как Е и Z), энантиомеры или диастереомеры. Данное изобретение включает все изолированные стереоизомерные формы (такие как энантиомерно чистые изомеры, Е и Z изомеры и т.д.), так же как и смеси стереоизомеров в различных степенях хиральной чистоты или процентного содержания Е и Z, включая рацемические смеси, смеси диастереомеров и смеси E и Z изомеров. Соответственно, химические структуры, изображенные здесь, охватывают все возможные энантиомеры и стереоизомеры иллюстрируемых соединений, включая стереоизомерно чистую форму (например, геометрически чистую, энантиомерно чистую или диастереомерно чистую) и энантиомерные и стереоизомерные смеси. Энантиомерные и диастереомерные смеси могут быть разделены на свои энантиомерные или стереоизомерные компоненты с использованием способов разделения или способов хирального синтеза, хорошо известных специалистам в данной области. Данное изобретение включает все изолированные стереоизомерные формы, так же как и смеси стереоизомеров в различных степенях хиральной чистоты, включая рацемические смеси. Оно охватывает также различные диастереомеры. Могут появляться другие структуры, изображающие специфический изомер, но это сделано просто для удобства и не предполагает ограничения данного изобретения изображенным олефиновым изомером. Когда химическое название не определяет изомерную форму данного соединения, оно означает любую возможную изомерную форму или смеси таких изомерных форм соединения.
Данные соединения могут также существовать в нескольких таутомерных формах, и изображение здесь одного таутомера приводится лишь для удобства, и понятно также, что оно охватывает другие таутомеры показанной формы. Соответственно, изображенные здесь химические структуры охватывают все возможные таутомерные формы иллюстрируемых соединений. Термин "таутомер", как здесь используется, касается изомеров, которые легко переходят один в другой, так что они могут сосуществовать в равновесии. Например, кетон и энол являются двумя таутомерными формами данного соединения. В другом примере, замещенная 1,2,4-триазольная производная может существовать в, по крайней мере, трех таутомерных формах, как показано ниже: .
Описания соединений настоящего изобретения ограничены принципами химической связи, известными специалистам в данной области. Соответственно, там, где группа может быть замещена одним или несколькими заместителями, эти заместители выбираются таким образом, чтобы отвечать принципам химической связи и дать соединения, которые являются, по сути, стабильными и/или известными обычным специалистам в данной области как вероятно нестабильные при условиях окружающей среды, таких как водная, нейтральная среда и некоторые известные физиологические условия. Например, гетероциклоалкил или гетероарил присоединен к оставшейся части молекулы через кольцевой гетероатом в соответствии с принципами химической связи, известными специалистам в данной области, что исключает получение, по сути, нестабильных соединений.
Соединения настоящего изобретения часто имеют ионизируемые группы, необходимые для их получения в виде солей. В этом случае, когда делается ссылка на данное соединение, очевидно, что может использоваться также фармацевтически приемлемая соль. Эти соли могут быть кислыми солями присоединения, включая неорганические или органические кислоты, или данные соли, в случае кислотных форм соединений данного изобретения, могут быть получены из неорганических или органических оснований. Во многих случаях, данные соединения получают или используют как фармацевтически приемлемые соли, приготовленные как продукты присоединения фармацевтически приемлемых кислот или оснований. Подходящие фармацевтически приемлемые кислоты и основания хорошо известны в данной области, такие как хлористоводородная, серная, бромистоводородная, уксусная, молочная, лимонная или виннокаменная кислоты для образования кислых солей присоединения, и гидроксид калия, гидроксид натрия, гидроксид аммония, кофеин, различные амины и подобные для образования основных солей. Способы получения соответствующих солей хорошо известны в данной области. В некоторых случаях, соединения могут содержать как кислотную, так и основную функциональную группу, и в этом случае они могут иметь две ионизируемые группы, и, тем не менее, не иметь результирующего заряда. Стандартные способы получения фармацевтически приемлемых солей и их препаратов хорошо известны в данной области, и раскрыты во многих публикациях, включая, например, работу "Remington: The Science and Practice of Pharmacy", A. Gennaro, ed., 20th edition, Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA.
"Сольват", как здесь используется, означает соединение, образованное путем сольватации (комбинация молекул растворителя с молекулами или ионами растворенного вещества) или агрегации, которая состоит из иона или молекулы растворенного вещества, т.е. соединения данного изобретения, с одной или несколькими молекулами растворителя. Когда растворителем служит вода, соответствующий сольват является "гидратом". Примеры гидратов включают, но не ограничиваясь этим, гемигидрат, моногидрат, дигидрат, тригидрат, гексагидрат и т.д. Рядовым специалистам в данной области следует помнить, что данная фармацевтически приемлемая соль и/или промедикамент настоящего соединения может также существовать в сольватной форме. Сольват обычно образуется путем гидратации, которая является либо частью процедуры приготовления настоящего соединения, либо происходит вследствие природной абсорбции влаги безводным соединением настоящего изобретения.
Термин "сложный эфир" означает любой сложный эфир настоящего изобретения, в котором любая из -СООН функциональных групп данной молекулы замещена -COOR функциональной группой, где R составляющая данного эфира является любой углеродсодержащей группой, которая образует стабильную эфирную составляющую, включая, но не ограничиваясь этим, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, арил, арилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил и его замещенные производные. Гидролизуемые эфиры настоящих соединений являются соединениями, карбоксилы которых присутствуют в форме гидролизуемых эфирных групп. То есть, эти эфиры являются фармацевтически приемлемыми и могут подвергаться гидролизу до соответствующей карбоновой кислоты in vivo. Эти эфиры могут быть обычными сложными эфирами, включая низшие алканоилоксиалкил эфиры, например, пивалоилоксиметиловый и 1-пивалоилоксиэтиловый эфиры; низшие алкоксикарбонилалкиловые эфиры, например, метоксикарбонилоксиметиловый, 1-этоксикарбонилоксиэтиловый и 1-изопропилкарбонилоксиэтиловый эфиры; низшие алкоксиметиловые эфиры, например, метоксиметиловые эфиры, лактониловые эфиры, бензофуранкето эфиры, тиобензофуранкето эфиры; низшие алканоиламинометиловые эфиры, например, ацетиламинометиловые эфиры. Другие эфиры также могут быть использованы, такие как бензиловые эфиры и цианометиловые эфиры. Другие примеры этих эфиров включают: (2,2-диметил-1-оксипропилокси)метиловые эфиры; (1RS)-1-ацетоксиэтиловые эфиры, 2-[(2-метилпропилокси)карбонил]-2-пентениловые эфиры, 1-[[(1-метилэтокси)карбонил]-окси]этиловые эфиры; изопропилоксикарбонилоксиэтиловые эфиры, (5-метил-2-оксо-1,3- диоксол-4-ил) метиловые эфиры, 1-[[(циклогексилокси)карбонил]окси] этиловые эфиры; 3,3-диметил-2-оксобутиловые эфиры. Специалистам в данной области очевидно, что гидролизуемые эфиры соединений настоящего изобретения могут быть образованы на свободных карбоксилах указанных соединений путем использования обычных способов. Репрезентативные сложные эфиры включают пивалоилоксиметиловые эфиры, изопропилоксикарбонилоксиэтиловые эфиры и (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метиловые эфиры.
Термин "промедикамент" касается предшественника фармацевтически активного соединения, где сам предшественник может быть или может не быть фармацевтически активным, но, после введения будет превращаться либо метаболическим путем, либо иным способом в фармацевтически активное соединение или необходимое лекарство. Например, промедикамент может быть сложным эфиром, простым эфиром или амидной формой фармацевтически активного соединения. Различные типы промедикаментов были получены и раскрыты для множества фармацевтических препаратов. Смотри, например, работу, Bundgaard, H. and Moss, J., J. Pharm. Sci. 78:122-126 (1989). Таким образом, рядовому специалисту в данной области известны обычно применяемые способы органического синтеза для получения таких промедикаментов.
nd
"Защитная группа" касается группировки атомов, которая при присоединении к реакционной функциональной группе в молекуле маскирует, снижает или предотвращает реакционность данной функциональной группы. Примеры защитных групп можно найти в работах Green et al., "Protective Groups in Organic Chemistry", (Wiley, 2 ed. 1991) и Harrison et al., "Compendium of Synthetic Organic Methods", Vols. 1-8 (John Wiley and Sons, 1971-1996). Репрезентативные амино защитные группы включают, но не ограничиваясь этим, формил, ацетил, трифтороацетил, бензил, бензилоксикарбонил, ("CBZ"), трет-бутоксикарбонил ("Boc"), триметилсилил ("TMS"), 2-триметилсилил-етансульфонил ("SES"), тритил и замещенные тритильные группы, аллилоксикарбонил, 9-флуоренилметилоксикарбонил ("FMOC"), нитро-вератрилоксикарбонил ("NVOC") и подобные. Репрезентативные гидрокси защитные группы включают, но не ограничиваясь этим, такие, где данная гидрокси группа является либо ацилированной или алкилированной, такая как бензил, и тритиловые эфиры, так же как и алкилэфиры, тетрагидропираниловые эфиры, триалкилсилиловые эфиры и аллиловые эфиры.
Как здесь используется, "фармацевтически приемлемый" означает пригодный для использования в контакте с тканями людей и животных без избыточной токсичности, раздражения, аллергической реакции и такого подобного, соизмеримый с разумным отношением выгода/риск, и эффективный в плане предполагаемого использования в рамках разумного медицинского решения.
"Наполнитель" касается разбавителя, адъюванта, носителя или носителя, с которым вводится соединение.
"Эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" является таким количеством настоящего соединения, при котором достигается благоприятный результат, когда данное соединение используется пациентом, или, как альтернатива, таким количеством соединения, которое обладает необходимой активностью in vivo или in vitro. В случае пролиферативных нарушений, благоприятный клинический исход включает снижение степени или тяжести симптомов, ассоциирующихся с данным заболеванием или расстройством, и/или увеличение продолжительности и/или качества жизни пациента по сравнению с отсутствием лечения. Например, для субъекта с раком "благоприятный клинический исход" включает уменьшение массы опухоли, снижение скорости роста опухоли, снижение метастаза, уменьшение тяжести симптомов, связанных с данным видом рака, и/или увеличение долголетия субъекта по сравнению с отсутствием лечения. Точное количество соединения, назначаемого субъекту, будет зависеть от типа и тяжести данного заболевания или состояния и от характеристик данного пациента, таких, как общее состояние здоровья, возраст, пол, вес тела и переносимость лекарств. Оно также будет зависеть от степени, тяжести и типа пролиферативного заболевания. Специалист в данной области сможет определить подходящие дозы в зависимости от этих и других факторов.
Как здесь используется, термины "алкил" "алкенил" и "алкинил" включают прямоцепные, с разветвленными цепями и циклические моновалентные гидрокарбильные радикалы и их комбинации, которые содержат только С и Н, когда они являются незамещенными. Примеры включают метил, этил, изобутил, циклогексил, циклопенилэтил, 2-пропенил, 3-бутинил и подобные. Полное число углеродных атомов в каждой такой группе иногда здесь указывается, например, когда данная группа может содержать до десяти атомов углерода, она может быть представлена как 1-10С или как С1-С10 или С1-10. Когда гетероатомы (обычно N, О и S) замещают углеродные атомы, как в гетероалкильных группах, например, числа, описывающие данную группу, хотя еще записываются как, например, С1-С6, они представляют сумму числа углеродных атомов в данной группе плюс число таких гетероатомов, которые включены как заместители углеродных атомов в остове данного кольца или цепи, которые описываются. Там, где включено кольцо, очевидно, что данная группа содержит, по крайней мере, три углеродных атома, поскольку 3-членное кольцо является наименьшим размером для кольца.
Обычно, алкильные, алкенильные и алкинильные заместители данного изобретения содержат 1-10С (алкил) или 2-10С (алкенил или алкинил), или 3-10С, когда включено кольцо. Предпочтительно они содержат 1-8С (алкил) или 2-8С (алкенил или алкенил) или 3-8С, когда включено кольцо. В некоторых случаях они содержат 1-4С (алкил) или 2-4С (алкенил или алкинил). Отдельная группа может включать более одного типа кратной связи, или более одной кратной связи; такие группы включены в определение термина "алкенил", когда они содержат, по крайней мере, одну двойную связь углерод-углерод, и включены в термин "алкинил", когда они содержат, по крайней мере, одну тройную связь углерод-углерод; однако, при условии, что присутствие кратных связей не приводит к образованию ароматического кольца.
Алкильная, алкенильная и алкинильная группы часто замещены, при необходимости, до такой степени, что замещение имеет химический смысл.
"Замещенный, при необходимости", как здесь используется, указывает, что данная конкретная группа или группы, которые описаны, могут не иметь неводородных заместителей, или данная группа или группы могут иметь один или несколько неводородных заместителей. Если не указано иное, полное число таких заместителей, которое может присутствовать, равняется числу Н атомов, присутствующих в незамещенной форме описываемой группы. Там, где необязательный заместитель присоединен через двойную связь, такой как карбонильный кислород (=O), данная группа занимает две имеющиеся валентности, так что полное число заместителей, которые могут быть включены, уменьшено в соответствии с числом наличных валентностей.
"Замещенный," когда используется для модификации определенной группы или радикала, означает, что один или несколько атомов водорода данной определенной группы или радикала, каждый, независимо один от другого, замещены одинаковыми или разными заместителями.
a
-
b
b
-
c
c
b
b
b
b
-
b
b
-
b
-
b
-
b
b
b
b
b
b
-
b
b
c
c
b
c
c
b
b
-
b
b
b
b
b
b
b
-
b
b
b
b
b
c
c
b
b
b
b
b
c
c
a
b
a
c
b
c
c
c
b
b
b
3
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
Группы заместителей, полезные для замещения насыщенных углеродных атомов в определенной группе или радикале, включают, но не ограничиваясь этим, -R, гало, -О, =O, -OR, -SR, -S, =S, -NRR, =NR, =N-OR, тригалометил, -CF, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO, =N, -N, -S(O)R, -S(O)NR, -S(O)O, -S(O)OR, -OS(O)R, -OS(O)O, -OS(O)OR, -P(O)(O), -P(O)(OR)(O), -P(О)(OR)(OR), -C(O)R, -C(S)R, -C(NR)R, -C(O)O, -C(O)OR, -C(S)OR, -C(O)NRR, -C(NR)NRR, -OC(O)R, -OC(S)R, -OC(O)O, -OC(O)OR, -OC(S)OR, -NRC(O)R, -NRC(S)R, -NRC(O)O, -NRC(O)OR, -NRC(S)OR, -NRC(O)NRR, -NRC(NR)R и -NRC(NR)NRR, где R выбирается из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, гетероалкила, циклогетероалкила, арила, арилалкила, гетероарила и гетероарилалкила; каждая R является, независимо, водородом или R; и каждая R является, независимо, R или, как альтернатива, данные две R могут быть взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-, 5-, 6- или 7-членного циклогетероалкила, который может, при необходимости, включать от 1 до 4 одинаковых или различных дополнительных гетероатомов, которые выбираются из группы, состоящей из О, N и S. В качестве специфических примеров, -NRR, как подразумевается, включает -NH, -NH-алкил, N-пирролидинил и N-морфолинил. В качестве другого специфического примера, замещенный алкил, как подразумевается, включает -алкилен-O-алкил, -алкилен-гетероарил, -алкилен-циклогетероалкил, -алкилен-C(O)OR, -алкилен-С(O)NRR и -СН-СН-С(O)-СН. Одна или несколько групп заместителей, взятых совместно с атомами, с которыми они связаны, может образовывать циклическое кольцо, включая циклоалкил и циклогетероалкил.
a
-
b
b
-
c
c
b
-
b
b
-
b
-
b
-
b
b
b
b
b
b
-
b
b
c
c
b
c
c
b
b
-
b
b
b
b
b
b
b
-
b
b
b
b
b
c
c
b
b
b
b
b
c
c
a
b
c
3
2
3
2
2
2
2
2
2
2
Подобно этому, группы заместителей, полезные для замещения ненасыщенных углеродных атомов в определенной группе или радикале, включают, но не ограничиваясь этим, -R, гало, -О, -OR, -SR, -S, -NRR, тригалометил, -CF, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO, -N, -S(O)R, -S(O)O, -S(O)OR, -OS(O)R, -OS(O)O, -OS(O)OR, -P(O)(O), -P(O)(OR)(O), -P(O)(OR)(OR), -C(O)R, -C(S)R, -C(NR)R, -C(O)O, -C(O)OR, -C(S)OR, -C(O)NRR, -C(NR)NRR, -OC(O)R, -OC(S)R, -OC(O)O, -OC(O)OR, -OC(S)OR, -NRC(O)R, -NRC(S)R, -NRC(O)O, -NRC(O)OR, -NRC(S)OR, -NRC(O)NRR, -NRC(NR)R и -NRC(NR)NRR, где R, R и R являются такими, как определено ранее.
a
-
b
b
-
c
c
b
-
b
b
-
b
-
b
-
b
b
b
b
b
b
b
b
c
c
b
c
c
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
b
c
c
b
b
b
b
b
c
c
a
b
c
3
2
2
2
2
2
2
2
2
Группы заместителей, полезные для замещения атомов азота в гетероалкильной и циклогетероалкильной группах, включают, но не ограничиваясь этим, -R, -О, -OR, -SR, -S, -NRR, тригалометил, -CF, -CN, -NO, -NO, -S(O)R, -S(O)O, -S(O)OR, -OS(O)R, -OS(O)O, -OS(O)OR, -P(O)(O), -P(O)(OR)(O), -P(O)(OR)(OR), -C(O)R, -C(S)R, -C(NR)R, -C(O)OR, -C(S)OR, -C(O)NRR, -C(NR)NRR, -OC(O)R, -OC(S)R, -OC(O)OR, -OC(S)OR, -NRC(O)R, -NRC(S)R, -NRC(O)OR, -NRC(S)OR, -NRC(O)NRR, -NRC(NR)R и -NRC(NR)NRR, где R, R и R являются такими, как определено ранее.
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
Алкильная, алкенильная и алкинильная группы могут, как альтернатива или дополнительно, быть замещены С1-С8 ацилом, С2-С8 гетероацилом, С6-С10 арилом, С3-С8 циклоалкилом, С3-С8 гетероциклилом или С5-С10 гетероарилом, каждый из которых может быть замещен одной или несколькими R, гало, =O, =N-CN, =N-OR, =NR, OR, NR, SR, SOR, SONR, NRSOR, NRCONR, NRCSNR, NRC(=NR)NR, NRCOOR, NRCOR, CN, C≡CR, COOR, CONR, OOCR, COR и NO, где каждая R является, независимо, Н, С1-С8 алкилом, С2-С8 гетероалкилом, С1-С8 ацилом, С2-С8 гетероацилом, С2-С8 алкенилом, С2-С8 гетероалкенилом, С2-С8 алкинилом, С2-С8 гетероалкинилом, С3-С8 гетероциклилом, С4-С10 гетероциклилалкилом, С6-С10 арилом, или С5-С10 гетероарилом, и каждая R замещена, при необходимости, одной или несколькими (обычно до трех) гало, =O, =N-CN, -N-OR', =NR', OR', NR', SR', SOR', SONR', NR'SOR', NR'CONR', NR'CSNR', NR'C(=NR')NR', NR'COOR', NR'COR', CN, C≡CR', COOR', CONR', OOCR', COR' и NO, где каждая R' является, независимо, Н, С1-С8 алкилом, С2-С8 гетероалкилом, С1-С8 ацилом, С3-С8 гетероциклилом, С2-С8 гетероацилом, С6-С10 арилом или С5-С10 гетероарилом.
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
Там, где любой из этих заместителей содержит две R или R' группы на тех же самых или соседних атомах (например, -NR, или -NR-C(O)R), данные две R или R' группы могут быть, при необходимости, взяты вместе с атомом(ами) в группе заместителя, к которой они присоединены, с образованием кольца, имеющего 5-8 кольцевых членов, которые могут включать другой гетероатом как член кольца (N, О или S), могут быть замещены одной или несколькими гало, =0, =N-CN, =N-OR, =NR, OR, NR, SR, SOR, SONR, NRSOR, NRCONR, NRCSNR, NRC(=NR)NR, NRCOOR, NRCOR, CN, C≡CR, COOR, CONR, OOCR, COR и NO, где каждая R представляет собой, независимо, Н, С1-С8 алкил, С2-С8 гетероалкил, С1-С8 ацил, С2-С8 гетероацил, С2-С8 алкенил, С2-С8 гетероалкенил, С2-С8 алкинил, С2-С8 гетероалкинил, С3-С8 гетероциклил, С4-С10 гетероциклилалкил, С6-С10 арил или С5-С10 гетероарил, и каждая R замещена, при необходимости, гало, =O, =N-CN, =N-OR', =NR', OR', NR', SR', SOR', SONR', NR'SOR', NR'CONR', NR'CSNR', NR'C(=NR')NR', NR'COOR', NR'COR', CN, C≡CR', COOR', CONR', OOCR', COR' и NO, где каждая R' представляет собой, независимо, Н, С1-С8 алкил, С2-С8 гетероалкил, С1-С8 ацил, С3-С8 гетероциклил, С2-С8 гетероацил, С6-С10 арил или С5-С10 гетероарил, и каждая из заместимых групп на R' может быть замещена одной или несколькими (например, до трех) гало, пиперидинилом, пирролидинилом, пиперазинилом, морфолинилом, CN, С1-С4 алкокси, ОН, ОАс, NH, С1-С4 алкил амином, ди(С1-С4 алкил)амином, NHAc, NHCOOMe, NHCOOEt, NHCOOtBu, NHSOMe, SMe, SOMe, SONH, SONMe, COOH, CONH, COOMe, COOEt, CONHMe или CONMe.
a
a
"Ацетиленовые" заместители представляют собой 2-10С алкинильные группы, которые содержат, по крайней мере, одну тройную связь углерод-углерод, и замещены, при необходимости, описанными здесь группами, подходящими для алкильных групп; в некоторых вариантах воплощения, данные алкинильные группы имеют формулу -C≡C-R, где R представляет собой Н или С1-С8 алкил, С2-С8 гетероалкил, С2-С8 алкенил, С2-С8 гетероалкенил, С2-С8 алкинил, С2-С8 гетероалкинил, С1-С8 ацил, С2-С8 гетероацил, С6-С10 арил, С5-С10 гетероарил, С7-С12 арилалкил или С6-С12 гетероарилалкил.
a
a
a
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
Каждая R группа замещена, при необходимости, одним или несколькими заместителями, которые выбираются из гало, =O, =N-CN, =N-OR', =NR', OR', NR', SR', SOR', SONR', NR'SOR', NR'CONR', NR'CSNR', NR'C(=NR')NR', NR'COOR', NR'COR', CN, COOR', CONR', OOCR', COR' и NO, где каждая R' представляет собой, независимо, Н, С1-С6 алкил, С2-С6 гетероалкил, С1-С6 ацил, С2-С6 гетероацил, С6-С10 арил, С5-С10 гетероарил, С7-12 арилалкил или С6-12 гетероарилалкил, каждый из которых замещен, при необходимости, одной или несколькими группами, которые выбираются из гало, CN, С1-С4 алкила, С2-С4 гетероалкила, С1-С6 ацила, С1-С6 гетероацила, С1-С4 алкокси, С1-С4 алкиламино, ди(С1-С4 алкил)амино, гидрокси, амино и =O; и где две R' могут быть соединены с образованием 3-7-членного кольца, содержащего, при необходимости, до трех гетероатомов, которые выбираются из N, О и S. В некоторых вариантах воплощения, R из -C≡C-R является Н или Me.
"Гетероалкил", "гетероалкенил" и "гетероалкинил" и такое подобное определены подобно соответствующим гидрокарбильным (алкил, алкенил и алкинил) группам, но термины 'гетеро' касаются групп, которые содержат 1-3 О, S или N гетероатома или их комбинации в пределах остовного остатка; так, по крайней мере, один атом углерода соответствующей алкильной, алкенильной или алкинильной группы замещен одним из определенных гетероатомов с образованием, соответственно, гетероалкильной, гетероалкенильной или гетероалкинильной группы. Типичные и предпочтительные размеры для гетероатомов алкильной, алкенильной и алкинильной групп, в общем, те же самые, что и для соответствующих гидрокарбильных групп, и заместители, которые могут присутствовать на данных гетероатомах, являются теми же самыми, которые описаны выше для гидрокарбильных групп. По причинам химической стабильности, также очевидно, если не оговорено иное, что такие группы не включают более двух соседних гетероатомов, за исключением того, где оксо группа присутствует на N или S как в нитро или сульфонильной группе.
Хотя "алкил", как здесь используется, включает циклоалкильную и циклоалкилалкильную группы, термин "циклоалкил" может быть здесь использован для описания карбоциклической неароматической группы, которая соединена через кольцевой углеродный атом, и "циклоалкилалкил" может быть использован для описания карбоциклической неароматической группы, которая соединена с данной молекулой через алкильный линкер.
Схожим образом, "гетероциклил" может быть использован для описания неароматической циклической группы, которая содержит, по крайней мере, один гетероатом (обычно выбранный из N, О и S) как кольцевой член и которая соединена с данной молекулой через кольцевой атом, который может быть С (углерод-связанный) или N (азот-связанный); и "гетероциклилалкил" может быть использован для описания такой группы, которая связана с другой молекулой через линкер. Данный гетероциклил может быть полностью насыщенным или частично насыщенным, но неароматическим. Размеры и заместители, которые подходят для циклоалкильной, циклоалкилалкильной, гетероциклильной и гетероциклилалкильной групп являются такими же самыми, как описанные выше для алкильных групп. Гетероциклильные группы обычно содержат 1, 2 или 3 гетероатома, которые выбираются из N, О и S в качестве кольцевых атомов; и N или S могут быть замещены группами, которые обычно находятся на этих атомах в гетероциклических системах. Как здесь используется, эти термины также включают кольца, которые содержат двойную связь или две, пока данное кольцо, которое присоединено, не является ароматическим. Замещенные циклоалкильная и гетероциклильная группы также включают циклоалкильное или гетероциклильное кольца, слитые с ароматическим кольцом или гетероароматическим кольцом, при условии, что точка присоединения данной группы является точкой присоединения к циклоалкильному или гетероциклильному кольцу, а не к ароматическому или гетероароматическому кольцу.
Подобно алкильным группам, описанные здесь циклоалкильная и гетероциклильная группы могут быть замещены до такой степени, которая разрешена соображениями их валентности и стабильности, которые хорошо знакомы специалистам в данной области. Заместители для циклоалкильного и гетероциклильного колец или кольцевых систем включают те, что здесь описаны как подходящие для помещения на алкильные группы.
2
Как здесь используется, "ацил" охватывает группы, включающие алкил, алкенил, алкинил, арил или арилалкил радикалы, присоединенные к одному из двух наличных валентных положений карбонильного углеродного атома, и гетероацил касается соответствующих групп, где, по крайней мере, один углерод, отличный от карбонильного углерода, замещен гетероатомом, выбранным из N, О и S. Так, гетероацил включает, например, -C(=O)OR и -C(=O)NR, так же как и -С(=O)-гетероарил.
Ацильная и гетероацильная группы связаны с любой группой или молекулой, к которой они присоединены через открытую валентность карбонильного углеродного атома. Обычно, они являются С1-С8 ацильными группами, которые включают формил, ацетил, пивалоил и бензоил, и С2-С8 гетероацильными группами, которые включают метоксиацетил, этоксикарбонил и 4-пиридиноил. Гидрокарбильные группы, арильные группы и гетероформы таких групп, которые включают ацильную или гетероацильную группу, могут быть замещены заместителями, описанными здесь как подходящие, в общем, заместители для каждого соответствующего компонента данной ацильной или гетероацильной группы.
"Ароматическая" составляющая или "арильная" составляющая касается моноциклической или слитой бициклической составляющей, которая обладает хорошо известными свойствами ароматичности; примеры включают фенил и нафтил. Схожим образом, "гетероароматический" и "гетероарильный" касается такой моноциклической или слитой бициклической кольцевых систем, которые содержат как кольцевые члены один или несколько гетероатомов, выбранных из О, S и N. Включение гетероатома допускает ароматичность в 5-членных кольцах, так же как и 6-членных кольцах. Типичные гетероароматические системы включают моноциклические С5-С6 ароматические группы, такие как пиридил, пиримидил, пиразинил, тиенил, фуранил, пирролил, пиразолил, тиазолил, оксазолил, триазолил, триазинил, тетразолил, тетразинил и имидазолил, и слитые бициклические составляющие, образованные путем слияния одной из этих моноциклических групп с фенильным кольцом или с любой из гетероароматических моноциклических групп с образованием С8-С10 бициклической группы, такой как индолил, бензимидазолил, индазолил, бензотриазолил, изохинолил, хинолил, бензотиазолил, бензофуранил, пиразолопиридил, хиназолинил, хиноксалинил, циннолинил и подобные. Любая моноциклическая или слитая кольцевая бициклическая система, которая имеет характеристики ароматичности в рамках электронного распределения по данной кольцевой системе, включена в это определение. Оно также включает бициклические группы, где, по крайней мере, кольцо, которое прямо присоединено к оставшейся части молекулы, имеет характеристики ароматичности. Обычно, данные кольцевые системы содержат 5-12 кольцевых атомов и до четырех гетероатомов, которые выбираются из N, О и S. Во многих случаях, моноциклические гетероарилы содержат 5-6 кольцевых членов и до трех таких гетероатомов, и бициклические гетероарилы содержат 8-10 кольцевых членов и до четырех таких гетероатомов. Число и расположение гетероатомов в таких кольцах согласуется с хорошо известными ограничениями ароматичности и стабильности, где стабильность требует, чтобы данная гетероароматическая группа была достаточно устойчивой, чтобы выдерживать воздействие воды без быстрого разложения.
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
Арильная и гетероарильная составляющие могут быть замещены множеством заместителей, включая С1-С8 алкил, С2-С8 алкенил, С2-С8 алкинил, С5-С12 арил, С1-С8 ацил и их гетероформы, каждый из которых может быть сам дополнительно замещен; другие заместители для арильной и гетероарильной составляющих включают гало, OR, NR, SR, SOR, SONR, NRSOR, NRCONR, NRCSNR, NRC(=NR)NR, NRCOOR, NRCOR, CN, C≡CR, COOR, CONR, OOCR, COR и NO, где каждая R представляет собой, независимо, Н, С1-С8 алкил, С2-С8 гетероалкил, С2-С8 алкенил, С2-С8 гетероалкенил, С2-С8 алкинил, С2-С8 гетероалкинил, С3-С8 гетероциклил, С4-С10 гетероциклилалкил, С6-С10 арил, С5-С10 гетероарил, С7-С12 арилалкил или С6-С12 гетероарилалкил, и каждая R замещена, при необходимости, как описано выше для алкильных групп. Группы заместителей на арильной или гетероарильной группе могут быть, конечно, дополнительно замещены описанными здесь группами, как подходящими для каждого типа таких заместителей или для каждого компонента данного заместителя. Так, например, арилалкильный заместитель может быть замещен на арильной части описанными здесь заместителями, как типичными для арильных групп, и он может быть дополнительно замещен на алкильной части описанными здесь заместителями, как типичными или подходящими для алкильных групп. Там, где группа заместителя содержит две R группы на одном и том же или соседнем атомах (например, -NR, или -NR-C(O)R), данные две R группы могут быть взяты вместе с атомом(ами) в группе заместителя, к которому они присоединены, с образованием кольца, имеющего 5-8 кольцевых членов, которые могут быть замещены, как разрешено для самой R, и могут содержать дополнительный гетероатом (N, О или S) как кольцевой член.
Схожим образом, "арилалкил" и "гетероарилалкил" касаются ароматических и гетероароматических кольцевых систем, которые связаны с их точкой присоединения чрез линкерную группу, такую как алкилен, включая замещенный или незамещенный, насыщенный или ненасыщенный, циклический или ациклический линкеры. Обычно, данный линкер является С1-С8 алкилом или его гетероформой. Эти линкеры могут также включать карбонильную группу, делая их, таким образом, способными предоставлять заместителей как ацильную или гетероацильную составляющую. Арильное или гетероарильное кольцо в арилалкильной или гетероарилалкильной группе может быть замещено теми же самыми заместителями, которые описаны выше для арильных групп. Предпочтительно, арилалкильная группа включает фенильное кольцо, замещенное, при необходимости, группами, определенными выше для арильных групп, и С1-С4 алкилен, который является незамещенным или замещенным одной или двумя С1-С4 алкильными группами или гетероалкильными группами, где данная алкильная или гетероалкильная группы могут, при необходимости, циклизироваться с образованием кольца, такого как циклопропан, диоксолан или оксациклопентан. Схожим образом, гетероарилалкильная группа, предпочтительно, включает С5-С6 моноциклическую гетероарильную группу, которая, при необходимости, замещена группами, описанными выше, как типичные заместители на арильных группах, и С1-С4 алкилен, который является незамещенным или замещенным одной или двумя С1-С4 алкильными группами или гетероалкильными группами, или она включает замещенное, при необходимости, фенильное кольцо или С5-С6 моноциклический гетероарил и С1-С4 гетероалкилен, который является незамещенным или замещенным одной или двумя С1-С4 алкильной или гетероалкильной группами, где данные алкильная или гетероалкильная группы могут, при необходимости, циклизироваться с образованием кольца, такого как циклопропан, диоксолан или оксациклопентан.
Там, где арилалкильная или гетероарилалкильная группа описана как, при необходимости, замещенная, данные заместители могут быть либо на алкильной или гетероалкильной части или на арильной или гетероарильной части данной группы. Заместители, которые присутствуют, при необходимости, на алкильной или гетероалкильной части, являются, в общем, теми же самыми, которые описаны выше для алкильных групп; заместители, которые присутствуют, при необходимости, на арильной или гетероарильной части, являются, в общем, теми же самыми, которые описаны выше для арильных групп.
"Арилалкильные" группы, как здесь используется, являются гидрокарбильными группами, если они являются незамещенными, и описываются общим числом углеродных атомов в данном кольце и алкилене или схожем линкере. Так, бензильная группа является С7-арилалкильной группой, и фенилэтил является С8-арилалкилом.
"Гетероарилалкил", как описано выше, касается составляющей, включающий арильную группу, которая присоединена через линкерную группу, и отличается от "арилалкила" тем, что, по крайней мере, один кольцевой атом данной арильной составляющей или один атом в линкерной группе является гетероатомом, который выбирается из N, О и S. Гетероарилалкильные группы описаны здесь в соответствии с полным числом атомов совместно в кольце и линкере, и они включают арильные группы, связанные через гетероалкильный линкер; гетероарильные группы, связанные через гидрокарбильный линкер, такой как алкилен; и гетероарильные группы, связанные через гетероалкильный линкер. Так, например, С7-гетероарилалкил может включать пиридилметил, фенокси и N-пирролилметокси.
2
n
2
"Алкилен", как здесь используется, касается дивалентной гидрокарбильной группы; поскольку она дивалентна, она может связывать вместе две другие группы. Обычно, это касается -(СН)-, где n равняется 1-8, и, предпочтительно, n равняется 1-4, хотя там, где это определено, алкилен может быть также замещен другими группами, и может иметь другую длину, и свободные валентности не обязательно должны быть в противоположных концах цепи. Так, -СН(Ме)- и -С(Ме)- могут также называться алкиленами, как и циклическая группа, такая как циклопропан-1,1-диил. Там, где алкиленовая группа замещена, заместители включают такие группы, которые обычно присутствуют на алкильных группах, как описано выше.
x
x
В общем, любая алкильная, алкенильная, алкинильная, ацильная или арильная, или арилалкильная группа или любой гетероформ одной из этих групп, которые содержатся в заместителе, могут сами быть замещены, при необходимости, дополнительными заместителями. Природа этих заместителей схожа с природой тех заместителей, которые перечислялись в отношении самих первичных заместителей, если данные заместители не описаны иным образом. Так, где вариантом, например, R является алкил, этот алкил может быть, при необходимости, замещен остальными заместителями, перечисленными как варианты для R, где это имеет химический смысл, и где это не нарушает пределы размеров, предоставленные для самого алкила, например, алкил, замещенный алкилом или алкенилом, просто расширит верхний предел числа углеродных атомов для этих вариантов, и это не включено. Однако, алкил, замещенный арилом, амино, алкокси, =O и таким подобным, будет включен в объем данного изобретения, и атомы этих групп заместителей не входят в число, используемое для описания данной алкильной, алкенильной и т.д. группы, которая описывается. Там, где число заместителей не определено, каждая такая алкильная, алкенильная, алкинильная, ацильная или арильная группа может быть замещена рядом заместителей в соответствии с наличными валентностями; в частности, любая из этих групп может быть замещена, например, атомами фтора при наличии любого числа свободных валентностей.
"Гетероформ", как здесь используется, касается производной группы, такой как алкил, арил или ацил, где, по крайней мере, один углеродный атом указанной карбоциклической группы замещен гетероатомом, который выбирается из N, О и S. Так, гетероформами алкила, алкенила, алкинила, ацила, арила и арилалкила являются гетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероацил, гетероарил и гетероарилалкил, соответственно. Очевидно, что обычно соединены последовательно не более двух N, О или S атомов, за исключением, когда оксо группа присоединена к N или S с образованием нитро или сульфониловой группы.
"Гало", как здесь используется, включает фторо, хлоро, бромо и йодо. Часто предпочтение отдается фторо и хлоро.
"Амино", как здесь используется, касается NH2, но там, где амино описывается как "замещенный" или "замещенный, при необходимости", данный термин включает NR'R", где каждая R' и R" представляет собой, независимо, Н или является алкильной, алкенильной, алкинильной, ацильной, арильной или арилалкильной группами или гетероформой одной из этих групп, и каждая из алкильной, алкенильной, алкинильной, ацильной, арильной или арилалкильной групп или гетероформа одной из этих групп замещена, при необходимости, заместителями, описанными здесь, как подходящими для данной соответствующей группы. Данный термин также включает формы, где R' и R" взяты вместе с N, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного кольца, которое может быть насыщенным, ненасыщенным или ароматическим и которое содержит 1-3 гетероатома, которые выбираются, независимо, из N, О и S как кольцевые члены, и которое замещено, при необходимости, заместителями, описанными как подходящие для алкильных групп, или, если NR'R" является ароматической группой, она замещена, при необходимости, заместителями, описанными как типичные для гетероарильных групп.
Как здесь используется, термин "карбоцикл", "карбоциклил" или "карбоциклический" касается циклического кольца, содержащего только углеродные атомы в данном кольце, тогда как термин "гетероцикл" или "гетероциклический" касается кольца, содержащего гетероатом. Данный карбоциклил может быть полностью насыщенным или частично насыщенным, но не ароматическим. Например, данный карбоциклил включает циклоалкил. Карбоциклическая и гетероциклическая структуры охватывают соединения, имеющие моноциклическую, бициклическую или мультициклическую кольцевые системы; и такие системы могут смешиваться с ароматическим, гетероциклическим и карбоциклическим кольцами. Смешанные кольцевые системы описаны в соответствии с кольцом, которое присоединено к остальной части соединения, которое описывается; например, там, где W представляет 1,2,3,4-тетрагидронафт-1-ил, данная группа будет охвачена замещенной, при необходимости, циклоалкильной или карбоциклической группой, тогда как группа 1,2,3,4-тетрагидронафт-6-ил будет входить в замещенные, при необходимости, ароматические группы.
Как здесь используется, термин "гетероатом" касается любого атома, который не является углеродом или водородом, такого как азот, кислород или сера. Когда он является частью остовы или скелета цепи или кольца, гетероатом должен быть, по крайней мере, дивалентным, и он обычно выбирается из N, О, Р и S.
Иллюстративные примеры гетероциклов и гетероарилов включают, но не ограничиваясь этим, тетрагидрофуран, 1,3-диоксолан, 2,3-дигидрофуран, пиран, тетрагидропиран, бензофуран, изобензофуран, 1,3-дигидро-изобензофуран, изоксазол, 4,5-дигидроизоксазол, пиперидин, пирролидин, пирролидин-2-он, пиррол, пиридин, пиримидин, окстагидро-пирроло[3,4 b]пиридин, пиперазин, пиразин, морфолин, тиоморфолин, имидазол, имидазолидин 2,4-дион, 1,3-дигидробензимидазол-2-он, индол, тиазол, бензотиазол, тиадиазол, тиофен, тетрагидро тиофен 1,1-диоксид, диазепин, триазол, гуанидин, диазабицикло[2.2.1]гептан, 2,5- диазабицикло[2.2.1]гептан, 2,3,4,4а,9,9а-гексагидро-1Н-β-карболин, оксиран, оксетан, тетрагидропиран, диоксан, лактоны, азиридин, азетидин, пиперидин, лактамы и могут также охватывать гетероарилы. Другие иллюстративные примеры гетероарилов включают, но не ограничиваясь этим, фуран, пиррол, пиридин, пиримидин, имидазол, бензимидазол и триазол.
Варианты воплощения соединений:
В одном варианте воплощения, соединения данного изобретения имеют общую формулу (I):
1
4
где данная бициклическая кольцевая система, содержащая Z-Z, является ароматической;
1
2
1
2
одна из Z и Z является С, другая из Z и Z является N;
3
4
5
Z и Z являются, независимо, CR или N,
5
1
где R может быть Н или R;
1
7
8
R представляет собой Н, гало, CN, замещенный, при необходимости, С1-С4 алкил, замещенный, при необходимости, С2-С4 алкенил, замещенный, при необходимости, С2-С4 алкинил, замещенный, при необходимости, С1-С4 алкокси или -NRR,
7
8
где R и R, каждая, выбираются, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила,
7
8
7
8
или R и R, взятые вместе с N из -NRR, образуют замещенное, при необходимости, 5-8-членное кольцо, которое содержит, при необходимости, дополнительный гетероатом, который выбирается из N, О и S как кольцевой член;
2
R является Н, гало, CN или замещенной, при необходимости, группой, которая выбирается из С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила и С2-С4 алкинила;
3
4
R и R, каждая, выбирается, независимо, из Н и замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила;
6
6
Х является NR, О или S, где R является Н или замещенной, при необходимости, группой, которая выбирается из С1-С4 алкила, С2-С4 алкенила и С2-С4 алкинила;
Y является О или S;
9
10
9
9
9
10
11
n
W представляет собой Н, замещенный, при необходимости, арил, замещенный, при необходимости, гетероарил или -NRR, -OR, S(O)R, замещенный, при необходимости, связанный с углеродом гетероциклил, замещенный, при необходимости, С3-С8 циклоалкил или CRRR,
где n равняется 0, 1 или 2,
9
10
R и R, каждая, выбираются, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила, замещенного, при необходимости, гетероарилалкила и замещенного, при необходимости, гетероциклила,
9
10
9
10=
или R и R, взятые вместе с N из -NRR, образуют замещенное, при необходимости, 5-8-членное кольцо, которое содержит, при необходимости, дополнительный гетероатом, который выбирается из N, О и S как кольцевой член, и
11
R выбирается из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила;
или фармацевтически приемлемые соли, сольваты и/или промедикаменты этих соединений.
1
2
1
2
1
2
Соединения данного изобретения характеризуются бициклической ароматической гетероциклической кольцевой системой, содержащей два или более азотных атома: один N атом показан, и одна из Z и Z также является N. В некоторых представляющих интерес вариантах воплощения, Z является N и Z является С; в других вариантах воплощения, Z является C и Z является N.
3
4
3
4
4
3
3
4
При необходимости, Z и/или Z может также быть N. В некоторых вариантах воплощения, они обе являются С; в других вариантах воплощения, Z является N и Zявляется С; и в других вариантах воплощения, Z является N и Z является С; тогда как в других вариантах воплощения, Z и Z обе являются N.
2
Кроме того, соединения данного изобретения содержат другую гетероциклическую группу, связанную с данной бициклической группой, и эта дополнительная гетероциклическая группа содержит амидную связь внутри кольца плюс дополнительный карбонил или тиокарбонил (С=O или C=S). Дополнительная гетероциклическая группа связана с бициклической группой через экзоциклическую метиленовую группу (spуглерод), которая присоединена к пятичленному кольцу данной бициклической группы.
6
6
6
6
Эта дополнительная гетероциклическая группа содержит X, который может быть NR, О или S. В некоторых вариантах воплощения, он является NR, и R часто является Н или малой алкильной группой, такой как Me. Предпочтительно, NR является NH. В других вариантах воплощения, Х является О. В некоторых вариантах воплощения, Х является S.
Эта дополнительная гетероциклическая группа замещена =Y; в некоторых вариантах воплощения, Y является О и в некоторых вариантах воплощения Y является S.
3
3
3
Дополнительная гетероциклическая группа также содержит NR, и R в этой группе может быть Н или малым алкилом, таким как Me. В некоторых вариантах воплощения, она является замещенной алкильной группой, такой как формил, ацетил, пропионил, бензоил и подобные. Предпочтительно, R является Н.
2
4
4
sp углерод, соединяющий данные две гетероцикличесие группы, является CR, где R может быть Н или малым алкилом; в предпочтительных вариантах воплощения, она является Н.
2
2
3
2
Пятичленное кольцо данной бициклической группы замещено R. Она может быть Н, гало или малым алкилом, таким как Me, Et, CF, -CHOMe, винил или ацетилен. В предпочтительных вариантах воплощения, R является Н.
1
1
1
7
8
8
3
2
2
3
Шестичленное кольцо данной бициклической группы замещено R. Она может представлять множество групп, включая Н, гало или замещенный, при необходимости, алкил, амин или алкокси группу. В некоторых вариантах воплощения, она является Н, гало или малым алкилом, таким как Me, Et, CF, -СНОМе, винил или ацетилен. В некоторых вариантах воплощения, R является Н, гало, Me, NHMe, NMe, CF или CN. В других вариантах воплощения, R является -NRR. В других вариантах воплощения, Rявляется С3-6 циклоалкилом.
3
Шестичленное кольцо данной бициклической группы также замещено группой W. Это может предоставлять область различных свойств, с сохранением в то же время необходимых протеинкиназных модуляторных активностей. В некоторых вариантах воплощения, W является замещенной, при необходимости, арильной или гетероарильной группой, которую часто выбирают из фенила, пиридила, пиримидинила и пиразинила. В частности, она может быть замещенной, при необходимости, фенильной группой. В специфических вариантах воплощения, W является фенилом, замещенным одной-двумя группами; в некоторых вариантах воплощения, данная фенильная группа замещена, по крайней мере, одной группой, отличной от Н, такой как F, Cl, Me, CF, CN, ОМе, СООН или СООМе, в орто или мета положении относительно точки, в которой фенил соединен с бициклической группой.
Специфические варианты воплощения замещенного фенила, который может быть W, включают 2-фторофенил, 3-фторофенил, 3-карбоксилфенил и 3-(СООМе)-фенил.
9
10
9
10
9
10
9
9
10
10
9
9
10
В других вариантах воплощения, W может быть группой формулы -NRR, где Rи R являются такими, как описано выше. Обычно, R и R не являются обе Н. В некоторых из этих вариантов воплощения, R является Н, Me или ацильной группой, такой как формил, ацетил, метоксиацетил, бензоил или трифтороацетил; такие ацилированные соединения могут быть активными как ингибиторы киназы или они могут служить промедикаментами для соединений, где R является Н. В этих вариантах воплощения, R может быть замещенной, при необходимости, алкильной группой, или арильной или гетероарильной группой, такой как фенил, пиридинил, пиримидинил, пиразинил и подобные, которые могут быть, при необходимости, замещены. Подходящие замещенные, при необходимости, алкильные группы включают С1-С6 алкилы, например, метил, этил, бутил, пропил, изопропил, t-бутил, фтороэтил, метоксиэтио, изобутил и подобные. В некоторых вариантах воплощения, арильная или гетероарильная группа замещена, по крайней мере, одной не-Н группой заместителя. R может также быть такой арильной или гетероарильной группой, которая присоединена к NR через С1-С4 алкиленовую цепь; например, она может быть имидазолилметилом, фенилэтилом и подобными. В специфических вариантах воплощения, данный арил является фенилом, и он замещен, по крайней мере, одним не-Н заместителем часто в положении, которое является мета или пара относительно точки, где данный фенил соединен с N из NRR.
Заместителем(ями) на этой арильной или гетероарильной группе могут быть гало, С1-С4 алкильная или С1-С4 алкокси группы, или арильная или гетероарильная группы, такие как имидазол, фенил, пиридил, пиразолил, триазолил и подобные; или они могут быть С5-С8 гетероциклическими группами, такими как морфолин, пиперидин, пиперазин и подобные. В некоторых вариантах воплощения, данное арильное кольцо (например, фенил), представленное R10, замещено группой формулы R'2N-(CH2)p-L-, где p равняется 0-3, L является связью, О, S или NR" (R" является Н или С1-С4 алкилом), и каждая R' является, независимо, Н или С1-С6 алкилом, который, при необходимости, замещен, и где данные две R' группы могут, при необходимости, циклизироваться с образованием кольца, которое может включать дополнительный гетероатом (N, О или S) в качестве кольцевого члена. Репрезентативные примеры этой версии R10 включают диметиламино; 4-метилпиперазинил; 4-морфолинил; 4-морфолинометил; 4-Ме-пиперазиноэтил; диметиламинометил; диэтиламинометил; диметиламиноэтокси и подобные.
10
10
Как альтернатива, R может быть арилалкильной или гетероарилалкильной группой, такой как замещенная, при необходимости, бензильная группа. В некоторых вариантах воплощения Формулы I, R является замещенным, при необходимости, связанным с углеродом гетероциклилом.
9
10
9
10
Как альтернатива, W может быть -NRR, где R и R, взятые вместе с N, образуют кольцо, которое в некоторых вариантах воплощения является замещенным, при необходимости, 5-8-членным кольцом, которое содержит, при необходимости, N, О или S как дополнительный кольцевой член. Иллюстративные кольца включают пиперидин, пиперазин, гомопиперазин, морфолин, тиоморфолин, пирролидин, пирролидинон и подобные. В некоторых вариантах воплощения, заместителями на таких кольцах являются С1-4 алкил или гетероарил.
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, W является Н.
В Формуле I, X и Y, каждый, представляет гетероатом, и они могут быть одинаковыми или разными. В некоторых вариантах воплощения, Y является О, тогда как Х является S или NH, или NMe или О; в других вариантах воплощения, Y является S, тогда как Х является S, или NH, или Nme, или О. Там, где Х является NR6, R6 может быть H, метилом, этилом, метоксиэтилом и подобными; в предпочтительных вариантах воплощения, R6 является Н или Me.
Соединения настоящего изобретения включают соединения Формулы I, которые имеют особенности, специально описанные ниже, или любую комбинацию этих особенностей.
1
2
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, Z является N и Z является С.
3
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, Z является N.
4
5
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, Z является CR.
6
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, Х является NR или S.
2
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, R является Н или Me.
3
4
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, R и R обе являются Н.
1
3
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, R является Н, Me, гало, ОМе или CF.
1
7
8
8
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, R является -NRR, где R является С3-6 циклоалкилом.
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, Y является О.
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, Y является S.
9
10
10
В некоторых вариантах воплощения Формулы I, W является -NH-A, где А является замещенным, при необходимости, фенилом. В альтернативных вариантах воплощения вышеуказанных соединений, W представляет собой замещенный, при необходимости, гетероарил. В специфических вариантах воплощения этого типа, W может быть замещенным, при необходимости, фенилом. В некоторых вариантах воплощения Формулы I, W является Н. В других вариантах воплощения Формулы I, W является -NRR, где R представляет собой замещенный, при необходимости, гетероциклил.
В другом варианте воплощения, соединения Формулы (I) имеют структурные Формулы (II) или (II'), как показано ниже (включая IIa, IIa', IIb, IIb', II-TH и II-TH'). Эти соединения, обычно, более селективны в отношении CK2, и обладают высокой активностью к CK2.
или
где:
3
4
5
Z и Z, каждая, представляет N или CR, или СН;
5
n
2
2
каждая R выбирается, независимо, из гало, -CN, -R, -OR, -S(O)R, -COOR, -CONR и -NR,
где каждая R выбирается, независимо, из Н и замещенного, при необходимости, С1-С4 алкила, или, как альтернатива, две R группы, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют замещенное, при необходимости, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, которое содержит, при необходимости, один или несколько дополнительных гетероатомов, которые выбираются из N, О и S в качестве кольцевых членов;
2
3
4
R, R и R, каждая, выбираются, независимо, из Н и замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила;
2
Х представляет О, S или NR;
10
Y является О или S или NR;
10
7
8
где R выбирается из Н, CN, замещенного, при необходимости, С1-С4 алкила, замещенного, при необходимости, С2-С4 алкенила, замещенного, при необходимости, С2-С4 алкинила, замещенного, при необходимости, С1-С4 алкокси и -NRR,
Z является О или S;
7
8
7
7
8
7
8
7
7
8
7
8
n
m
m
m
m
n
L является связью, -CR=CR-, -С≡С-, -NR-, -O-, -S(O)-, -(CRR)-, -(CRR)-NR-, -(CRR)-O- или -(CRR)-S(O)-;
7
8
7
7
7
8
7
8
9
n
W является замещенным, при необходимости, С1-С10 алкилом, замещенным, при необходимости, С1-С10 гетероалкилом, замещенным, при необходимости, арилом, замещенным, при необходимости, гетероарилом, -NRR, -OR, -S(O)R, -CONRR, замещенным, при необходимости, гетероциклилом, замещенным, при необходимости, карбоциклилом, замещенным, при необходимости, С2-С10 алкенилом, замещенным, при необходимости, С2-С10 алкинилом или -CRRR;
7
8
9
где каждая R и R и R выбирается, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, гетероалкила, замещенного, при необходимости, карбоциклила, замещенного, при необходимости, гетероциклила, замещенного, при необходимости, карбоциклилалкила, замещенного, при необходимости, гетероциклилалкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила;
8
9
7
или R и R, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют =O (оксо) или =N-OR или =N-CN;
7
8
7
8
m
или R и R, взятые вместе на отдельном углеродном атоме или на соседних связанных углеродных атомах (CRR), либо отдельно, либо как часть другой группы, образуют 3-8-членное карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо;
7
8
или R и R, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют замещенное, при необходимости, 5-10-членное гетероциклическое или гетероарильное кольцо, которое содержит, при необходимости, один или несколько дополнительных гетероатомов, которые выбираются из N, О и S в качестве кольцевых членов;
7
8
7
8
при условии, что не более, чем одна из R и R в -NRR выбирается из группы, состоящей из алкокси, алкиламино, диалкиламино и гетероциклила;
каждая n равняется, независимо, 0, 1 или 2;
каждая m равняется, независимо, 1, 2, 3 или 4; и
1A
1B
R и R, каждая, выбираются, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, гетероалкила, замещенного, при необходимости, гетероциклила, замещенного, при необходимости, карбоциклила, замещенного, при необходимости, карбоциклилалкила, замещенного, при необходимости, гетероциклилалкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила или замещенного, при необходимости, гетероарилалкила;
1A
1B
или R и R, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют замещенное, при необходимости, 5- 8-членное моноциклическое или 5- 10-членное бициклическое гетероарильное или гетероциклическое кольцо, содержащее до двух дополнительных гетероатомов, которые выбираются из N, О и S в качестве кольцевых членов;
и фармацевтически приемлемые соли, сольваты и/или промедикаменты этих соединений.
В одном варианте воплощения Формулы (II) или (II'), замещенным, при необходимости, карбоциклилом является замещенный, при необходимости, С3-С8 циклоалкил; замещенным, при необходимости, карбоциклилакилом является замещенный, при необходимости, С4-С10 циклоалкилалкил; и замещенным, при необходимости, гетероалкилом является замещенный, при необходимости, С1-С6 алкокси, замещенный, при необходимости, С1-С6 алкиламино или замещенный, при необходимости, С1-С6 диалкиламино.
7
7
7
7
n
В одном варианте воплощения Формулы (II) или (II'), -L-M является -NHR, -ORили -S(O)R; n равняется 0, 1, или 2; и R является замещенным, при необходимости, С1-С10 алкилом, замещенным, при необходимости, гетероалкилом, замещенным, при необходимости, арилом, замещенным, при необходимости, гетероарилом, замещенным, при необходимости, арилалкилом, замещенным, при необходимости, гетероарилалкилом, замещенным, при необходимости, карбоциклилом, замещенным, при необходимости, гетероциклилом, замещенным, при необходимости, карбоциклилалкилом или замещенным, при необходимости, гетероциклилалкилом.
7
8
7
8
В одном варианте воплощения Формулы (II) или (II'), -L-M является -NRR; и R и R, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют замещенный, при необходимости, гетероциклил, который содержит, при необходимости, один или несколько дополнительных гетероатомов в качестве кольцевых членов.
В одном варианте воплощения Формулы (II) или (II'), -L-M является замещенным, при необходимости, арилом, замещенным, при необходимости, гетероарилом, замещенным, при необходимости, карбоциклилом или замещенным, при необходимости, гетероциклилом.
1A
1B
1A
1B
2
2
В одном варианте воплощения Формулы (II) или (II'), R и R выбираются, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, гетероциклила, замещенного, при необходимости, циклоалкила, замещенного, при необходимости, циклоалкилалкила, замещенного, при необходимости, гетероциклилалкила, замещенного, при необходимости, арилалкила или замещенного, при необходимости, 5-6-членного арильного кольца, содержащего до двух гетероатомов в качестве кольцевых членов. Предпочтительно, аминная группа -NRR в соединениях Формул (II) или (IIa) и II' или IIa' не является -NH, -NHMe или -NMe.
1A
1A
1A
1A
Соответственно, R может быть выбрана из Н, С1-С4 алкила и С1-С6 ацила, где данные алкил и ацил при необходимости, замещены. Во многих вариантах воплощения, R является Н; в других вариантах воплощения, она является, иногда. Me, или замещенным, при необходимости, С1-С4 алкилом. В некоторых вариантах воплощения, R является замещенной, при необходимости, С1-С6 ацильной группой, в частности, такой, которая может легко отщепляться при мягких условиях, такой как метоксиацетил, гидроксиацетил, или альфа-амино ацильной группой, которые могут действовать как промедикаменты для соединений, где R является Н.
1A
1A
1B
1B
1A
1B
1B
2
1-4
Во многих случаях, R в этой аминной группе -NRR является Н и R является замещенной или незамещенной группой, которая выбирается из С2-С8 алкила, С3-С8 циклоалкила, арила, арилалкила, гетероарила, гетероарилалкила, гетероциклила и гетероциклилалкила. Обычно, этим арилом является фенил; гетероарил касается 5-6-членного кольца, содержащего до трех гетероатомов, которые выбираются из N, О и S в качестве кольцевых членов; и гетероциклил касается 3-8-членного кольца, содержащего, по крайней мере, один гетероатом, и, при необходимости, два гетероатома для 6-8-членных колец, как кольцевые члены, где данные гетероатомы выбираются из N, О и S; и их -алкильные- версии (арилалкил, гетероарилалкил и гетероциклилалкил) обычно включают специфическую циклическую группу, связанную через алкиленовый линкер, такой как (CH), с атомом азота из NRR. В некоторых вариантах воплощения, Rвключает, по крайней мере, одно кольцо, имеющее 3-8 кольцевых членов.
1B
Примеры подходящих R групп включают этил, изопропил, t-бутил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, тетрагидрофуранил, пиперидинил, пирролдинил, циклопропилметил, циклобутилметил, фенил и подобные, каждый из которых может быть незамещенным или замещенным с участием до трех заместителей. Некоторые предпочтительные варианты воплощения включают циклопропил, изопропил, t-бутил и циклобутил.
1B
2
2
Специфические примеры замещенных R групп включают 2,2,2-трифтороэтил, 2-метокси-этил, 2-этоксиэтил, метоксиметил, 2-аминоэтил, 2-(N-морфолино)этил, 3-гидроксипропил, 3-диметиламинопропил, 3-метоксипропил, 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, ацетил, бензоил, фенил, замещенный -СООН, -СООМе, -COOEt, -CONH, -CONMe, и
2
2
2
2
2
2
2
где Q представляет функциональную группу, такую как -ОН, -OR, -СООН, -COOR, -NH, -NHR, -NR, -CONH, -CONHR, -CONR, -SR, -S(O)R, -SOR, -SONR, -C(O)R, -NRC(O)R, -NRC(O)OR, -OC(O)OR, -OC(O)NR,
где каждая R является, независимо, Н или замещенной, при необходимости, С1-С4 алкильной группой, и две R, присутствующие на одной и той же функциональной группе, могут быть взяты вместе с образованием 5-8-членного, замещенного, при необходимости, кольца, которое может содержать до двух гетероатомов, выбранных из N, О и S в качестве кольцевых членов.
1A
1B
1B
1B
1A
1B
1A
2
m
2
2
Там, где один или несколько заместителей присутствуют на этих R, R или Rгруппах, часто эти заместители выбираются из гало, OR", N(R"), S(O)R", COOR", CON(R"), CN, фенила, пиридинила, пирролидинила и подобных, где каждая R" выбирается, независимо, из Н и С1-С4 алкила, замещенного, при необходимости, одной или несколькими группами, которые выбираются из ОН, С1-С4 алкокси, гало, NH, С1-С4 алкиламина и ди(С1-С4)алкил амина, и пиперидина, пирролидина, морфолина или фурана; и m равняется 0-2. Часто R включает, по крайней мере, одно кольцо, такое как гетероциклильное, циклоалкильное или арильное кольцо. Предпочтительным вариантом воплощения R в аминной группе -NRR в Формулах (II) и (II') является циклопропил, и предпочтительным вариантом воплощения R является Н.
7
8
7
7
8
7
8
7
7
8
7
8
7
8
7
7
8
n
n
m
m
m
n
m
2
2
2
2
2
В соединениях Формулы (II), и (II'), и (IIa), или (IIa') L может быть связью, -CR=CR-, -C≡C; -NR-, -O-, -S(O)- или (CRR), или она может быть -(CRR)-NR-, -(CRR)-O-, или -(CRR)-S(O)-. Обычно, где L присоединена к W у гетероатома W, L будет связью или одним из углеводородных линкеров, таких как (CRR). Однако, варианты воплощения данного изобретения включают соединения, где -L-W является также группой формулы -NR-NRR. Некоторые примеры подходящих групп для L включают -СН=СН-, -С≡С-, -NH-, NMe, -O-, -S-, -S(O)- и -CHNH-. Там, где L присоединена к W у гетероатома W, L во многих случаях является СН или (СН).
Фигуры 1 и 2 иллюстрируют улучшенную селективность, найденную для соединений Формулы II. Фигура 1 изображает соединение Формулы I, которое является сильным ингибитором CK2. В пробах на ингибирование панели из 108 киназ это соединение при концентрации 1 микромоль является сильным ингибитором множества различных киназ. Как сравнение, Фигура 2 показывает схожее соединение Формулы II, имеющее замещенную аминогруппу как дополнительный заместитель на шестичленном кольце бициклического ядра. Это соединение является более сильным как ингибитор CK2, чем схожее соединение на Фигуре 1; оно менее активно как ингибитор PIM1; и как показывает анализ киназой панели, оно менее активно в отношении многих других киназ, чем соединение Фигуры 1. Относительно мало киназ ингибируются более чем на 80% амино-замещенным соединением Формулы II, при сравнении с пропорцией киназных ингибиторов, обнаруживающих схожие уровни ингибирования неаминированным соединением Формулы 1. Эта улучшенная селективность наблюдается для широкого набора аминных групп заместителей, как демонстрируют данные в Таблицах 1 и 2 и дополнительные данные в настоящей заявке.
Специфические варианты воплощения соединений настоящего изобретения включают соединения Формулы IIa и/или IIa':
или
где
2
3
3
R является Н, СН или CF;
3
4
5
Z и Z, каждая, представляют, независимо, N или CR, или СН;
5
2
n
2
где каждая R выбирается, независимо, из гало, -CN, -R, -OR, -S(O)R, -COOR, -CONR и -NR,
где каждая R выбирается, независимо, из Н и замещенного, при необходимости, С1-С4 алкила, или данные две R группы, взятые в месте с атомом азота, к которому они присоединены, образуют замещенное, при необходимости, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, которое содержит один или несколько дополнительных гетероатомов, выбранных из N, О и S в качестве кольцевых членов;
4
3
3
R является Н, СН или CF;
Х является О, S или NH;
Y является О или S;
1B
R выбирается из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, гетероалкила, замещенного, при необходимости, гетероциклила, замещенного, при необходимости, циклоалкила, замещенного, при необходимости, циклоалкилалкила, замещенного, при необходимости, гетероциклилалкила, замещенного, при необходимости, арилалкила или замещенного, при необходимости, гетероарила;
7
7
8
7
8
7
n
m
m
L является связью, -NR-, -O-, -S(O)-, (CRR), или -(CRR)-NR-;
m равняется 1, 2, 3 или 4;
n равняется 0, 1 или 2;
7
8
W выбирается из замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, гетероарила и -NRR,
7
8
где каждая R и R выбирается, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С6 алкокси, замещенного, при необходимости, С1-С6 алкиламино, замещенного, при необходимости, С1-С6 диалкиламино, замещенного, при необходимости, гетероциклила, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, С3-С8 циклоалкила, замещенного, при необходимости, С4-С10 циклоалкилалкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила;
7
8
7
8
m
и R и R, взятые вместе на отдельном атоме углерода или на соседних соединенных углеродных атомах (CRR) либо отдельно, либо как часть другой группы, образуют 3-8-членное кольцо, которое содержит один или несколько гетероатомов в качестве кольцевых членов;
7
8
или R и R, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют замещенную, при необходимости, 5-10-членную гетероциклическую или гетероарильную кольцевую систему, которая содержит, при необходимости, дополнительный гетероатом, выбранный из N, О и S в качестве кольцевого члена; и
7
8
7
8
при условии, что не более одной из R и R в -NRR выбирается из группы, состоящей из алкокси, алкиламино, диалкиламино и гетероциклила.
2
4
2
4
3
3
В вышеупомянутых соединениях Формулы (IIa) или (IIa'), R и R выбираются из Н, СН и CF. В некоторых вариантах воплощения, R является Н. В некоторых вариантах воплощения, R является Н.
В вышеупомянутых соединениях Формулы (IIa) или (IIa'), Y является О или S. В предпочтительных вариантах воплощения, Y является О.
В вышеупомянутых соединениях Формулы (IIa) или (IIa'), Х может быть S, О или NH. Во многих случаях, Х является NH или S. В некоторых вариантах воплощения, Х является NH.
3
4
3
4
4
В вышеупомянутых соединениях Формулы (IIa) или (IIa'), Z и Z часто выбираются из N и СН. В некоторых вариантах воплощения, одним из этих кольцевых членов является N и другим СН. В альтернативных вариантах воплощения, обе Z и Zявляются N. В еще других вариантах воплощения, Z и Z обе являются СН.
3
4
3
4
3
4
3
4
В некоторых соединениях Формулы IIa, Z может быть N, тогда как Z является СН; или Z может быть N, тогда как Z также является N. В некоторых соединениях Формулы IIa', Z может быть СН, тогда как Z является N; как альтернатива, Z может быть N, тогда как Z является N или СН.
3
3
В вышеупомянутых соединениях Формулы (IIa) или (IIa'), R, в случае ее присутствия, может быть Н или замещенным, при необходимости, алкилом. Часто, R является Н.
Z может быть О или S; в предпочтительных вариантах воплощения, Z является О.
В случае присутствия, m во многих случаях равняется 1 или 2.
2
4
В этих соединениях Формулы IIa и/или IIa', R и R во многих случаях обе являются Н.
1B
1B
1B
В вышеупомянутых соединениях Формулы IIa и/или IIa', R может быть, при необходимости, замещена С1-С10 алкилом, при необходимости, замещена гетероциклилом, при необходимости, замещена циклоалкилом, при необходимости, замещена циклоалкилалкилом, при необходимости, замещена гетероциклилалкилом, при необходимости, замещена арилалкилом, или при необходимости, замещена 5-6-членным арильным кольцом, содержащим до двух гетероатомов как кольцевых членов. В некоторых вариантах воплощения, R является С3-С6 циклоалкилом или 3-6-членной гетероциклической группой, такой как пиперидин или С1-С3 алкильная группа, замещенная одним из этих колец, и, при необходимости, замещена. Специфические варианты воплощения R включают циклопропил, циклопропилметил, 4-пиперидинил и замещенный 4-пиперидинил, например, 4-пиперидинил, замещенный ацильной группой, такой как ацетил, у N-1. Другие варианты воплощения включают замещенный, при необходимости, фенил.
7
7
7
7
n
В вышеупомянутых соединениях Формулы (IIa) или (IIa'), -L-M является -NHR, -OR или -S(O)R; n равняется 0, 1 или 2; и R представляет собой замещенный, при необходимости, С1-С10 алкил, замещенный, при необходимости, гетероалкил, замещенный, при необходимости, арил, замещенный, при необходимости, гетероарил, замещенный, при необходимости, арилалкил, замещенный, при необходимости, гетероарилалкил, замещенный, при необходимости, карбоциклил, замещенный, при необходимости, гетероциклил, замещенный, при необходимости, карбоциклилалкил или замещенный, при необходимости, гетероциклилалкил.
7
8
7
8
В вышеупомянутых соединениях Формулы (IIa) или (IIa'), -L-M является -NRR; и R и R, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием замещенного, при необходимости, гетероциклила, который содержит, при необходимости, один или несколько дополнительных гетероатомов как кольцевых членов.
В вышеупомянутых соединениях Формулы (IIa) или (IIa'), -L-M является замещенным, при необходимости, арилом, замещенным, при необходимости, гетероарилом, замещенным, при необходимости, карбоциклилом или замещенным, при необходимости, гетероциклилом.
В вышеупомянутых соединениях Формулы IIa и/или IIa', L обычно является связью или NH. Когда L является NH, W может быть замещенной, при необходимости, группой, которая выбирается из фенила, фенилалкила, гетероциклила, циклоалкила и циклоалкилалкила.
3
3
В вышеупомянутых соединениях Формулы IIa и/или IIa', W во многих случаях является замещенным, при необходимости, фенилом, арилалкилом, циклоалкилом, гетероарилом, циклоалкилалкилом или гетероциклической группой. Специфические примеры включают замещенный, при необходимости, фенил; замещенный, при необходимости, фенилметил; замещенный, при необходимости, 1-фенилэтил; циклопропилметил; 1-циклопропилэтил; пиперидинил и морфолинил. Некоторые предпочтительные заместители для фенильных групп W включают гало, CN, Me, CF, ОМе, OCF и гетероарильные группы, такие как пиразол или пиррол, или имидазол.
3
4
Когда L является связью, W представляет собой во многих случаях замещенный, при необходимости, арил, гетероарил или гетероциклильную группу. Удивительно высокая гибкость была продемонстрирована среди групп, которые могут быть представлены W в Формулах II, II' и (IIa) или (IIa'). Арильная и гетероарильная группы подходят для W и могут быть незамещенными или замещенными. Примеры подходящих ароматических групп включают фенил, пиридинил, пиримидинил, тиенил (тиофеновое кольцо), фуранил, оксазол, изоксазол, тиазол, изотиазол, оксадиазол, тиадиазол, триазол и подобные, так же как индол, бензимидазол, бензофуран, бензопиразол, имидазол, пиррол, пиразол и подобные. Отметим, что последняя группа (индол, бензимидазол, бензофуран, бензопиразол, имидазол, пиррол, пиразол) содержит 5-членный азотный гетероцикл и может быть связана с L через С или N, как результат. В некоторых вариантах воплощения, W представляет одну из этих ароматических групп, которая включает 5-членное кольцо, и W присоединена через N данного 5-членного кольца к L, и L является связью, так что W эффективно присоединена непосредственно к кольцу, содержащему Z и Z. Подходящие заместители для всех этих арильных или гетероарильных групп включают те, которые описаны здесь как подходящие для таких ароматических групп.
Когда W является ароматической группой, L является в некоторых случаях связью, NH, или О. Особенно интересным вариантом воплощения является соединение Формулы II, II', (IIa) или (IIa'), где L является связью или NH, и W является замещенным, при необходимости, фенилом или замещенным, при необходимости, тиениловым кольцом. В вариантах воплощения, где L является связью, во многих случаях желательно, чтобы положение каждого кольцевого атома данного арильного кольца, соседнее с точкой присоединения для L, было незамещенным (т.е. любой соседний атом(ы) углерода будет СН), так что необязательные заместители на W в таких соединениях часто, когда они присутствуют, размещены в положениях 3, 4 или 5 фенильного кольца (в предположении того, что положение 1 присоединено к L), или в положениях 4 или 5 тиенилового кольца, когда L присоединена к положению 2, и в позиции 5 тиениловой группы, когда L присоединена в положении 3. Примеры этих W групп включают:
где каждая А представляет присутствие необязательного заместителя (или более одного, где кольцевая валентность позволяет больше) на углероде, не имеющем явно присоединенного Н.
3
2
3
3
2
2
3
2
2
Там, где W является ароматической группой, допускается широкий набор заместителей, и это дает высокие уровни киназной активности. Подходящие заместители включают описанные здесь заместители как подходящие, в общем, для введения в ароматические группы. Некоторые из пригодных заместителей для этих ароматических групп W включают гало (особенно, F или С1), алкил (например, С1-С4 алкил, такой как метил, этил, изопропил или циклопропил); алкокси (особенно С1-С4 алкилокси); галоалкил (например, CF, -CHCF); галоалкокси (например, -OCF, -OCFH, OCHCF и подобные); CN, -ОН, алкинил (например, -ССН, ССМе и подобные); гетероциклилметил (например, N-пиперидинилметил, N-пирролидинилметил, N-морфолинилметил и т.д.); гидроксиметил, аминометил, диметиламинометил, метиламинометил; замещенный С1-С4 алкокси, такой как метоксиэтокси, этоксиметокси, трифтороэтокси, 2-(N-морфолино)этокси, 2-(N-пирролидинил)этокси, 2-(пиперидинил)этокси и подобные; ацильные группы формулы -С(O)-Х, где Х представляет -OR, -NR или -R, где каждая R выбирается, независимо, из Н или замещенного, при необходимости, члена, который выбирается из С1-С4 алкила, 3-8-членного циклоалкила или гетероциклила и 5-6-членного арила или гетероарила, содержащего до 3 гетероатомов, которые выбираются из N, О и S в качестве кольцевых членов, и где две R на одной группе (например, две R из -NR) могут быть взяты вместе с образованием замещенного, при необходимости, 5-8-членного кольца, содержащего до двух гетероатомов, выбранных из N, О и S в качестве кольцевых членов; гетероциклические группы, такие как морфолин, тетрагидрофуран, пиперидин, пирролидин, 4-Ме-N-пиперазинил, N-пиперазинил, 4-ацетил-N-пиперазинил и подобные.
Обыкновенно, ароматическая группа W будет иметь 1-2 заместителя, или она будет незамещенной; и обычно заместители, когда они присутствуют, расположены как описано выше, так что кольцевые атомы, соседние с местом присоединения L, являются незамещенными (СН). Когда L отличается от связи, заместители на W могут быть в любом положении, и часто будут в положениях орто и/или пара по отношению к точке присоединения W к L.
Как альтернатива, W может быть гетероциклической группой, такой как пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, пиперазинил, тиоланил и подобные, каждая из которых может быть незамещенной или замещенной одним-четырьмя заместителями. Подходящие заместители для этих групп включают таковые, которые описаны выше как подходящие для гетероциклических групп. Отметим, что даже когда L является NR или NH, W может представлять гетероциклические группы, такие как 1-пиперидинил или 4-морфолинил, где L связана с гетероатомом (N) данной гетероциклической группы, так же как с C этой гетероциклической группы.
2
Там, где L является NH, W может также быть арилалкилом, или циклоалкилалкилом, или гетероциклилалкилом, и алкильная часть W может быть, например, С1-С4. Там, где L включает алкильную часть, она может быть прямоцепной (например, этилен, пропилен, бутилен), или она может быть замещенной алкиленовой цепью, что приводит к образованию потенциально хирального углеродного линкера. Там, где L является хиральной группой этого типа, например, когда L является -CH(R)- или -CH-CH(R)-, где R не является Н (например, R является метилом или этилом), L может быть либо в R конфигурации либо в S конфигурации, где эти термины используются в своем обычном стереохимическом смысле, или она может быть представлена как смесь изомеров, включая рацемическую смесь. В некоторых вариантах воплощения, такой хиральный центр, присутствующий в L, будет в S конфигурации. В других вариантах воплощения, он может быть в R конфигурации.
7
8
7
7
7
8
7
8
9
7
8
9
7
8
7
8
n
Как альтернатива, W может быть группой формулы или -NRR, -OR, S(O)R, CONRR или CRRR, где каждая R, и R, и R выбирается, независимо, из Н, замещенного, при необходимости, С1-С10 алкила, замещенного, при необходимости, арила, замещенного, при необходимости, арилалкила, замещенного, при необходимости, гетероарила и замещенного, при необходимости, гетероарилалкила; или R и R, взятые вместе с N из -NRR, могут образовывать замещенную, при необходимости, 5-10-членную гетероциклическую или гетероароматическую кольцевую систему, которая содержит, при необходимости, дополнительный гетероатом, выбранный из N, О и S в качестве кольцевого члена.
7
8
7
8
7
8
2
2
2
В вариантах воплощения, где W является -NRR, L во многих случаях является связью, и R и R, взятые вместе с N из -NRR, могут образовывать замещенную, при необходимости, 5-10-членную гетероциклическую или гетероароматическую кольцевую систему, которая содержит, при необходимости, дополнительный гетероатом, выбранный из N, О и S в качестве кольцевого члена. Такие подходящие кольца включают, например, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, тиоморфолинил, диазепинил и морфолинил, каждый из которых может быть замещен до такой степени, при которой образуются относительно водоустойчивые структуры. Подходящие заместители включают, например, оксо (=O), С1-С4 алкил, -ОН, -CN, гало (особенно, F или Cl), COOR, CONR, SR, -S(O)R, -SOR, -NR, гидроксиалкил, -OR, метоксиалкил (например, метоксиметил), где каждая R является, независимо, Н или замещенным, при необходимости, С1-С4 алкилом, и где две R на одной группе могут быть взяты вместе с образованием замещенного, при необходимости, 5-8-членного кольца, содержащего до двух гетероатомов, которые выбираются из N, О и S в качестве кольцевых членов.
В некоторых вариантах воплощения соединений Формулы (II), и (II'), и (IIa) или (IIa') -L-W является группой формулы -NH-Ar, где Ar представляет замещенную, при необходимости, ароматическую группу. Подходящие ароматические кольца для этой группы включают фенил, нафтил, пиридинил, пиримидинил, тиенил (тиофеновое кольцо), фуранил, индолил, бензофуранил, бензотиенил, бензопиразолил, бензимидазолил, бензоксазол, бензотиазол и подобные. Подходящие заместители для этих арильной или гетероарильной групп включают таковые, которые описаны здесь как подходящие для таких ароматических групп.
2
2
2
В некоторых вариантах воплощения, W является замещенной, при необходимости, циклоалкильной группой, содержащей, обычно, 3-8 кольцевых атомов в моноциклической структуре или 8-10 кольцевых атомов в бициклической структуре. Примеры включают 1,2,3,4-тетрагидронафт-1-ил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, декалин и подобные. Эти группы замещены, при необходимости, как описано здесь; в некоторых вариантах воплощения, циклоалкильное кольцо будет замещено одной или несколькими (например, до трех) группами, которые выбираются из гало, гидрокси, оксо (=O), COOR, CONR, SR, -S(O)R, -SOR, -NR, гидроксиалкила, -OR, метоксиалкила (например, метоксиметила), С1-С4 алкила, где каждая R является, независимо, Н или замещенным, при необходимости, С1-С4 алкилом, и где две R на одной группе могут быть взяты вместе с образованием замещенного, при необходимости, 5-8-членного кольца, содержащего до двух гетероатомов, которые выбираются из N, О и S в качестве кольцевых членов.
Конкретные варианты воплощения соединений данного изобретения включают тиофен-содержащие соединения Формул (II-Th) и (II-Th'):
или
Th
0-2
2
2
2
где R выбирается из Н, гало, замещенного, при необходимости, С1-С6 алкила, CN, S(O)R, -SONR, COOR, CONR и C(O)R,
где каждая R является, независимо, Н, гало, CN или замещенным, при необходимости, членом, который выбирается из группы, состоящей из С1-С6 алкила, С1-С6 алкокси, С1-С6 алкиламино, ди(С1-С6)алкиламино, С3-С8 циклоалкила, С4-С10 циклоалкилалкила, С5-С8 гетероциклила, С6-С10 гетероциклилалкила, арила, арилалкила, С5-С6 гетероалкила и С6-С10 гетероалкилалкила;
и две R на одном и том же атоме или соседних соединенных атомах могут образовывать замещенное, при необходимости, гетероциклическое кольцо, которое может содержать дополнительный гетероатом, выбранный из N, О и S как кольцевой член;
и другие структурные особенности являются такими, как определено для Формулы IIa выше.
Th
Тиениловое (тиофеновое) кольцо в Формулах II-Th и II-Th' может быть присоединено к бициклическому ядру либо в положении 2, либо в положении 3 данного тиофенового кольца, когда положение, замещенное R, определяется как положение 5, и кольцевая сера занимает положение 1. В некоторых вариантах воплощения, соединение осуществляется в положении 2 тиениловой группы, и в альтернативных вариантах воплощения, соединение осуществляется в положении 3 данной тиениловой группы.
2
4
В этих соединениях Формул II-Th и II-Th', R и R являются обе во многих случаях Н.
В вышеупомянутых соединениях Формул II-Th и II-Th', X является, предпочтительно, NH.
В вышеупомянутых соединениях Формул II-Th и II-Th', Y часто является О.
3
В вышеупомянутых соединениях Формул II-Th и II-Th', Z часто является N.
4
В вышеупомянутых соединениях Формул II-Th и II-Th', Z может быть СН или N.
1B
1B
1B
В вышеупомянутых соединениях Формул II-Th и II-Th', R может быть замещенным, при необходимости, С1-С10 алкилом, замещенным, при необходимости, гетероциклилом, замещенным, при необходимости, циклоалкилом, замещенным, при необходимости, циклоалкилалкилом, замещенным, при необходимости, гетероциклилалкилом, замещенным, при необходимости, арилалкилом или замещенным, при необходимости, 5-6-членным арильным кольцом, содержащим до двух гетероатомов как кольцевых членов. В некоторых вариантах воплощения, R является С3-С6 циклоалкилом или 3-6-членной гетероциклической группой, такой как пиперидин или С1-С3 алкильная группа, замещенная одним из этих колец, и она является, при необходимости, замещенной. Специфические варианты воплощения R включают циклопропил, циклопропилметил, 4-пиперидинил и замещенный 4-пиперидинил, например, 4-пиперидинил, замещенный ацильной группой, такой как ацетил, в N-1. Другие варианты воплощения включают замещенный, при необходимости, фенил.
TH
3
2
В этих соединениях, R может быть гало (F, Cl, Br), CF, CN, C1-C6 алкилом, С1-С3 алкилом, замещенным гетероциклилом или гетероциклиламино, COOR или COONR.
В одном варианте воплощения настоящего изобретения, соединения Формулы (IIa) или (IIa') имеют структурные Формулы (IIb) или (IIb'):
или
где
2
4
3
3
R и R являются, независимо, Н, СН или CF;
4
Z является N или СН;
8A
7
7
7
7
n
-L-M является -NRR, -NHR, -OR, или -S(O)R;
n равняется 0, 1, или 2; и
7
R является замещенным, при необходимости, С1-С10 алкилом, замещенным, при необходимости, гетероалкилом, замещенным, при необходимости, арилом, замещенным, при необходимости, гетероарилом, замещенным, при необходимости, арилалкилом, замещенным, при необходимости, гетероарилалкилом, замещенным, при необходимости, карбоциклилом, замещенным, при необходимости, гетероциклилом, замещенным, при необходимости, карбоциклилалкилом или замещенным, при необходимости, гетероциклилалкилом, замещенным, при необходимости, арилом, замещенным, при необходимости, гетероарилом, замещенным, при необходимости, карбоциклилом или замещенным, при необходимости, гетероциклилом; или
7
8A
R и R, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют замещенный, при необходимости, гетероциклил, который содержит, при необходимости, один или несколько дополнительных гетероатомов как кольцевые члены.
В одном варианте воплощения настоящего изобретения, соединения Формулы (II) имеют структурную Формулу (IIc):
,
где
2
Х является О, S или NR;
3
C
2
R является -(CH)-X;
C
X является гидроксилом или группой, имеющей структурные формулы (a), (b), (c) или (d):
, , , ;
1
2
3a
L и L, каждая, являются ковалентной связью, -О- или -NR-;
1a
2a
4a
4a
R и R, каждая, является, независимо, водородом, алкилом, гетероалкилом, гетероарилом, гетероциклилом, алкенилом, алкинилом, арилалкилом, гетероарилалкилом, гетероциклилалкилом, -алкилен-С(О)-О-R или -алкилен-O-С(O)-O-R; и
3a
4a
R и R, каждая, являются, независимо, водородом, алкилом, гетероалкилом, циклилалкилом, гетероциклилом, арилом, гетероарилом, алкенилом, алкинилом, арилалкилом, гетероциклилалкилом или гетероарилалкилом;
3
L является ковалентной связью или алкиленом;
5a
5a
6a
7a
7a
3
Y является OR, NRR или C(O)OR при условии, что когда Y является C(O)OR, L не является ковалентной связью; и
5a
6a
7a
5a
6a
R, R и R, каждая, представляют собой, независимо, водород, алкил, арилалкил, арил, гетероалкил, алкилгетероарил, гетероциклил или гетероарил; или, как альтернатива, R и R, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклильное кольцо, которое содержит, при необходимости, один или несколько дополнительных гетероатомов, выбираемых, независимо, из N, О, и S.
2
3
C
C
2
В одном варианте воплощения Формулы (IIc), X является NR; R является -(СН)-X; и X является гидроксилом или группой, имеющей структурную формулу (b): .
2
4
В одном варианте воплощения Формулы (IIc), R и R являются водородом.
1B
В одном варианте воплощения Формулы (IIc), R является замещенным, при необходимости, С1-С10 алкилом, циклоалкилом или циклоалкилалкилом.
7
7
8
В одном варианте воплощения Формулы (IIc), -L-W является -OR или -NRR.
7
8
В одном варианте воплощения Формулы (IIc), R является замещенным, при необходимости, арилом или замещенным, при необходимости, гетероарилом; и R является Н.
8
В одном варианте воплощения Формулы (IIc), R является замещенным, при необходимости, фенилом.
3
5a
5a
6a
В одном варианте воплощения Формулы (IIc), L является ковалентной связью; и Y является OR или NRR.
3
2
2
3
2
3
3
3
3
1
1
Соединения данного изобретения также включают соединения, обогащенные изотопами атомов, включенных в описанные здесь структуры. Например, описанные соединения, как предполагается, включают версии, где один или несколько Н атомов обогащены, предпочтительно, более тяжелым изотопом водорода (дейтерий или тритий). В частности, там, где любое из вышерассмотренных соединений содержит метальную группу (Me), может быть использована обогащенная метальная группа, содержащая дейтерий при уровнях, значительно превышающих относительное природное содержание. Например, -СН может быть замещена -CHD, или -CHD, или -CD, где каждая D представляет дейтерий, присутствующий вместо Н, и указывает, что D присутствует вместо Н в, по крайней мере, приблизительно 50% молекул пробы данного соединения. Особый интерес представляют соединения, включающие -N(R)Me или -NMe, где Me может присутствовать как CD. Вариация соединений, описанных здесь, особенно интересна, поскольку присутствие CD вместо СН может оказывать значительное влияние на скорости метаболизма N-метильной группы, таким образом, соединение, содержащее CD, может иметь улучшенные фармакокинетические свойства по сравнению с необогащенным соединением. Соответственно, описанные здесь алкильные группы, как предполагается, включают группы, обогащенные дейтерием, и соединения, содержащие метальную группу на N, как специально указывается, включают обогащенную дейтерием метальную группу на N.
Соединения настоящего изобретения во многих случаях имеют ионизируемые группы, позволяющие получать соли. В этом случае, если где-либо делается ссылка на данное соединение, очевидно, что может быть также использована фармацевтически приемлемая соль. Эти соли могут быть кислыми солями присоединения, включая неорганические или органические кислоты, или данные соли могут, в случае кислотных форм соединений настоящего изобретения, быть получены из неорганических или органических оснований. Во многих случаях, данные соединения получают или используют как фармацевтически приемлемые соли, полученные в виде продуктов присоединения фармацевтически приемлемых кислот или оснований. Подходящие фармацевтически приемлемые кислоты и основания хорошо известны в данной области, такие как хлористоводородная, серная, бромистоводородная, уксусная, молочная, лимонная или виннокаменная кислоты для образования кислых солей присоединения и гидроксид калия, гидроксид натрия, аммоний гидроксид, кофеин, различные амины и подобные для образования основных солей. Способы приготовления соответствующих солей хорошо известны в данной области. В некоторых случаях, данные соединения могут содержать как кислотную, так и основную функциональную группу, и в этом случае они могут иметь две ионизируемые группы, и, тем не менее, не имеют результирующего заряда.
Использование соединений:
В другом аспекте, данное изобретение представляет фармацевтическую композицию, включающую любое из вышеописанных соединений, смешанных с фармацевтически приемлемым наполнителем.
В другом аспекте, данное изобретение представляет способ лечения рака, сосудистого расстройства, воспаления, инфекции, боли или иммунологического нарушения, который включает назначение субъекту, который нуждается в этом, эффективного количества любого из вышеописанных соединений.
Соединения данного изобретения полезны как медикаменты и полезны для производства медикаментов, включая медикаменты для лечения раскрытых здесь состояний, таких как рак, воспалительные состояния, инфекции, боль и иммунологические нарушения.
Термины "лечить" и "лечение", как здесь используется, касаются улучшения, послабления, снижения и удаления симптомов заболевания или состояния. Отобранные молекула или соединение, описанные здесь, могут быть в терапевтически эффективном количестве в препарате или медикаменте, которое является таким количеством, что может дать биологический эффект, такой как апоптоз некоторых клеток (например, раковых клеток), снижение пролиферации некоторых клеток, или привести у улучшению, послаблению, снижению или удалению симптомов заболевания или состояния, например. Данные термины также могут касаться снижения скорости или остановки пролиферации клеток (например, замедление или остановка роста опухолей) или уменьшения числа пролиферирующих раковых клеток (например, удаление части или всей опухоли).
Эти термины также применимы для снижения титра микроорганизма в системе (т.е. клетке, ткани, или субъекте), инфицированной микроорганизмом, уменьшения скорости распространения микробов, уменьшения числа симптомов или влияния симптома, связанного с микробной инфекцией и/или удаления обнаружимых количеств данных микробов из системы. Примеры микроорганизмов включают, но не ограничиваясь этим, вирусы, бактерии и грибки.
Соединения настоящего изобретения обладают активностями для модуляции протеинкиназ, в частности, CK2 активности и/или Pim активности. В некоторых вариантах воплощения, соединения изобретения специфическим образом ингибируют активность CK2, но не Pim, например, более чем 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20 или 10 кратное различие между CK2 ингибированием и Pim ингибированием. В некоторых вариантах воплощения, соединения специфическим образом ингибируют активность Pim, но не Ck2, например, более чем 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20 или 10 кратное различие между Pim ингибированием и CK2 ингибированием. В некоторых вариантах воплощения, соединения данного изобретения ингибируют активность CK2 так же, как и Pim.
Соединения данного изобретения могут быть использованы для модулирования активности CK2 и/или Pim, например, ингибирования активности CK2 и/или Pim в клетке, например, in vivo или in vitro. В некоторых вариантах воплощения, соединения данного изобретения могут быть использованы для модуляции активности CK2, например, ингибирования активности CK2 без значительного влияния или изменения активности Pim. В некоторых вариантах воплощения, соединения данного изобретения могут быть использованы для модуляции активности Pim, например, ингибирования активности Pim без значительного влияния или изменения активности CK2. В некоторых вариантах воплощения, соединения изобретения могут быть использованы для модуляции активности CK2 и Pim, например, ингибирования активности CK2 и Pim.
Таким образом, соединения данного изобретения полезны для лечения инфекций, обусловленных некоторыми патогенными микроорганизмами, включая протозойные и вирусы. Таким образом, изобретение представляет способы лечения протозойных заболеваний, таких как протозойный паразитоз, включая инфекции, обусловленные паразитными простейшими, ответственными за неврологические заболевания, такие как шизофрения, паранойя и энцефалит, у иммунодефицитных пациентов, так же как и болезни Шагаса. Оно также представляет способы лечения различных вирусных заболеваний, включая вирус иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1), вирусы папилломы человека (HPVs), вирус простого герпеса (HSV), вирус Эпштейна-Барр (ЦМВ), цитомегаловирус человека, вирусы гепатита С и В, вирус инфлюэнцы, вирус болезни Борна, аденовирус, вирус Коксаки, коронавирус и вирус опоясывающего лишая. Способы лечения этих заболеваний включают назначение субъекту, который нуждается в этом, эффективного количества соединения Формулы II или Формулы II'.
Как здесь используется, термин "апоптоз" касается программы внутреннего клеточного самоуничтожения или самоубийства. Как реакция на пусковой стимул, клетки испытывают каскад событий, включая сморщивание клеток, раздутие клеточных мембран и хроматическую конденсацию и фрагментацию. Эти события являются кульминационными в превращении клеток в кластеры связанных с мембранами частиц (апоптотические тела), которые потом поглощаются макрофагами.
Данное изобретение, отчасти, представляет фармацевтические композиции, включающие, по крайней мере, одно соединение в рамках данного изобретения, как здесь описано, и способы использования описанных здесь соединений.
Кроме того, изобретение, отчасти, представляет способы идентификации молекулы-кандидата, взаимодействующей с CK2, которые включают контактирование композиции, содержащей CK2 протеин и молекулы, описанной здесь, с молекулой-кандидатом и определение того, является ли количество описанной здесь молекулы, которая взаимодействует с протеином, модулированным, в соответствии с чем молекула-кандидат, модулирующая данное количество описанной здесь молекулы, которая взаимодействует с протеином, идентифицируется как молекула-кандидат, которая взаимодействует с данным протеином.
Кроме того, данным изобретением представлены также способы модулирования некоторых протеинкиназных активностей. Протеинкиназы катализируют перенос гамма фосфата из аденозинтрифосфата в серии или треонин аминокислоту (серин/треонин протеинкиназа), тирозин аминокислоту (тирозин протеинкиназа), тирозин, серии или треонин (протеинкиназа с двойной специфичностью) или гистидин аминокислоту (гистидин протеинкиназа) в пептидном или протеиновом субстрате. Таким образом, здесь включены способы, которые включают контактирование системы, содержащей протеинкиназный протеин, с соединением, описанным здесь, в количестве, эффективном для модулирования (например, ингибирования) активности данной протеинкиназы. В некоторых вариантах воплощения, активностью протеинкиназы является каталитическая активность данного белка (например, катализирование переноса гамма фосфата от аденозинтрифосфата к пептидному или протеиновому субстрату). В некоторых вариантах воплощения, представлены способы идентификации молекулы-кандидата, которая взаимодействует с протеинкиназой, включающие: контактирование композиции, содержащей протеинкиназу и описанное здесь соединение, с молекулой-кандидатом при условиях, когда данное соединение и протеинкиназа взаимодействуют, и определение того, является ли данное количество соединения, которое взаимодействует с протеинкиназой, модулированным относительно контрольного взаимодействия между данным соединением и протеинкиназой без молекулы-кандидата, в соответствии с чем молекула-кандидат, которая модулирует данное количество соединения, взаимодействующая с протеинкиназой, относительно контрольного взаимодействия, идентифицируется как молекула-кандидат, которая взаимодействует с данной протеинкиназой. Системы в таких вариантах воплощения могут быть бесклеточной системой или системой, содержащей клетки (например, in vitro). Данные протеинкиназа, соединение или молекула в некоторых вариантах воплощения имеют связь с твердой фазой. В некоторых вариантах воплощения, взаимодействие между соединением и протеинкиназой обнаруживается посредством обнаружимой метки, где в некоторых вариантах воплощения данная протеинкиназа содержит обнаружимую метку, и в некоторых вариантах воплощения данное соединение содержит обнаружимую метку. Взаимодействие между данным соединением и протеинкиназой иногда обнаруживается без обнаружимой метки.
Представлены также композиции, включающие протеинкиназу и соединение, описанное здесь. В некоторых вариантах воплощения, протеинкиназа в данной композиции является серин-треониновой протеинкиназой. В некоторых вариантах воплощения, протеинкиназа в данной композиции является или содержит субъединицу (например, каталитическую субъединицу, SH2 домен, SH3 домен) CK2. В некоторых вариантах воплощения, данная композиция является бесклеточной, и в некоторых случаях данная протеинкиназа является рекомбинантным протеином.
Протеинкиназа может быть из любого источника, такого как клетки млекопитающего, обезьяны или человека, например. Примеры серин-треониновых протеинкиназ, которые могут быть ингибированы или могут быть потенциально ингибированы раскрытыми здесь соединениями включают, без ограничения, человеческие версии CK2 или CK2α2. Серин-треонин протеинкиназа иногда является членом подсемейства, содержащим одну или несколько следующих аминокислот в положениях, соответствующих таковым, которые перечислены в CK2 человека: лейцин в положении 45, метионин в положении 163 и изолейцин в положении 174. Нуклеотидные и аминокислотные последовательности для протеинкиназ и реагентов общедоступны (например, World Wide Web URLs www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez/ и www.Invitrogen.com, последние посещения 2 декабря 2009 года).
Данное изобретение также, отчасти, представляет способы лечения состояния, связанного с аберрантной пролиферацией клеток. Например, представлены способы лечения состояния пролиферации клеток у субъекта, которые включают назначение описанного здесь соединения субъекту, который нуждается в этом, в количестве, эффективном для лечения состояния пролиферации клеток. Данным субъектом может быть лабораторное животное (например, грызун, собака, кот, обезьяна), имеющее, при необходимости, опухоль, такую как ксенотрансплантированная опухоль (например, опухоль человека), например, или может быть человек. Состояние пролиферации клеток иногда представляет собой опухоль, например, твердую или циркулирующую опухоль, или неопухолевый рак, включая, но не ограничиваясь этим, колоректальный рак, рак молочной железы, легких, печени, поджелудочной железы, лимфатических узлов, ободочной кишки, предстательной железы, мозга, головы и шеи, кожи, печени, почек, крови и сердца (например, лейкоз, лимфома, карцинома).
Соединения и композиции данного изобретения могут использоваться отдельно или в сочетании с противораковыми или другими агентами, такими как паллиативные агенты, которые обычно назначаются пациенту, подвергающемуся лечению от рака, как здесь далее будет описано.
Также представлены способы лечения состояния, связанного с воспалением или болью. Например, представлены способы для лечения боли у субъекта, которые включают назначение описанного здесь соединения субъекту, который нуждается в этом, в количестве, эффективном для лечения данной боли. Также представлены способы лечения воспаления у субъекта, которые включают назначение описанного здесь соединения субъекту, который нуждается в этом, в количестве, эффективном для лечения данного воспаления. Субъектом может быть лабораторное животное (например, грызун, собака, кот, обезьяна), например, или может быть человек. Состояния, связанные с воспалением и болью, включают, без ограничения, кислотный рефлюкс, изжогу, акне, аллергии и чувствительность к аллергенам, болезнь Альцгеймера, астму, атеросклероз, бронхит, кардит, чревную болезнь, хроническую боль, болезнь Крона, цирроз, колит, деменцию, дерматит, диабет, болезнь сухих глаз, отек, эмфизему, экзему, фибромиалгию, гастроэнтерит, гингивит, сердечные болезни, гепатит, повышенное сердечное давление, инсулинорезистентность, интерстициальный цистит, боль в суставах/артрит/ревматоидный артрит, метаболический синдром (синдром X), миозит, нефрит, ожирение, остеопению, гломерулонефрит (GN), ювенильное кистозное заболевание почек и поликистоз почек типа I (NPHP), остеопороз, болезнь Паркинсона, деменцию при болезни Гуама-Паркинсона, надъядерный паралич, болезнь Куфса и болезнь Пика, так же как нарушение памяти, ишемию мозга и шизофрению, периодонтальную болезнь, множественный артериит, полихондрит, псориаз, склеродерму, синусит, синдром Шегрена, синдром раздраженной толстой кишки, системный кандидоз, тендонит, инфекции мочевыводящих путей, вагинит, воспалительный рак (например, воспалительный рак молочной железы) и тому подобное.
Способы для определения и мониторинга здесь влияния соединений на боль или воспаление известны. Например, поведение лабораторных животных со стимулированной формалином болью может прослеживаться после введения описанного здесь соединения для оценки лечения боли (например, Li et al., Pain 115(1-2):182-90 (2005)). Кроме того, модулирование провоспалительных молекул (например, IL-8, GRO-альфа, МСР-1, TNFальфа и iNOS) может мониториться после введения описанного здесь соединения для оценки лечения воспаления (например, Parhar et al., Int J Colorectal Dis. 22(6):601-9 (2006)), например. Также представлены способы для определения того, уменьшает ли данное соединение воспаление или боль, которые включают контактирование системы с описанным здесь соединением, в количестве, эффективном для модулирования (например, ингибирования) активности болевого сигнала или воспалительного сигнала.
Также представлены способы для идентификации соединения, которое уменьшает воспаление или боль, которые включают: контактирование системы с соединением Формулы II или Формулы II'; и детектирование болевого сигнала или воспалительного сигнала, посредством чего соединение, которое модулирует болевой сигнал относительно контрольной молекулы, идентифицируется как соединение, которое снижает воспаление или боль. Неограничивающими примерами болевых сигналов является поведение при стимулированной формалином боли, и примеры сигналов воспаления включают, без ограничения, уровень провоспалительной молекулы. Таким образом, данное изобретение касается, отчасти, способов модулирования ангиогенеза у субъекта, и способов лечения состояния, связанного с аберрантным ангиогенезом у субъекта, пролиферативной диабетической ретинопатии.
CK2, как было также показано, играет роль в патогенезе атеросклероза, и может предупреждать атерогенез путем поддержания ламинарного со сдвиговым напряжением течения. CK2 играет роль в васкуляризации, и, как было показано, опосредует индуцированную гипоксией активацию гистон деацетилаз (HDACs). CK2 также включена в заболевания, связанные со скелетными мышцами и костной тканью, включая, например, кардиомицитную гипертрофию, сердечную недостаточность, нарушенную инсулиновую индукцию и инсулинорезистентность, гипофосфатемию и неадекватную минерализацию костной матрицы.
Так, в одном аспекте, данное изобретение представляет способы лечения каждого из этих состояний, включающие назначение субъекту, который нуждается в таком лечении, эффективного количества CK2 ингибитора, такого как соединение Формулы II или Формулы II', как здесь описано.
Данное изобретение также отчасти касается способов модуляции иммунной реакции у субъекта, и способов лечения состояния, связанного с аберрантной иммунной реакцией у субъекта. Так, представлены способы для определения того, модулирует ли здесь данное соединение иммунную реакцию, которые включают контактирование системы с описанным здесь соединением, в количестве, эффективном для модуляции (например, ингибирования) иммунной реакции или сигнала, связанного с иммунной реакцией. Сигналы, связанные с иммуномодуляторной активностью, включают, например, стимуляцию пролиферации Т-клеток, подавление или индукцию цитокинов, включая, например, интерлейкины, интерферон-γ и TNF. Способы оценки иммуномодуляторной активности известны в данной области.
Также представлены способы лечения состояния, связанного с аберрантной иммунной реакцией у субъекта, которые включают назначение описанного здесь соединения субъекту, который нуждается в этом, в количестве, эффективном для лечения данного состояния. Состояния, характеризующиеся аберрантной иммунной реакцией, включают, без ограничения, отторжение трансплантанта органа, астму, аутоиммунные заболевания, включая ревматоидный артрит, рассеянный склероз, миастению, системную красную волчанку, склеродерму, полимиозит, смешанное заболевание соединительной ткани (MCTD), болезнь Крона и язвенный колит. В некоторых вариантах воплощения, иммунная реакция может модулироваться путем использования здесь соединения совместно с молекулой, которая модулирует (например, ингибирует) биологическую активность члена mTOR пути или члена родственного пути (например, mTOR, PI3 киназы, AKT). В некоторых вариантах воплощения, молекула, модулирующая биологическую активность члена mTOR пути или члена родственного пути, представляет собой рапамицин. В некоторых вариантах воплощения, здесь представлена композиция, содержащая описанное здесь соединение в комбинации с молекулой, которая модулирует биологическую активность члена mTOR пути или члена родственного пути, такой как, например, рапамицин.
Композиции и способы применения
В другом аспекте, данное изобретение представляет фармацевтические композиции (т.е. препараты). Фармацевтические композиции могут включать соединение любой из Формул (I), (II), (II'), (IIa), (IIa'), (IIb), (IIb'), (II-Th) и (II-Th'), как здесь описано, которое смешано с, по крайней мере, одним фармацевтически приемлемым наполнителем или носителем. Во многих случаях, данная композиция включает, по крайней мере, два фармацевтически приемлемых наполнителя или носителя.
Хотя композиции и способы настоящего изобретения будут обычно использоваться в терапии для человеческих пациентов, они могут быть также применены в ветеринарной медицине для лечения схожих или идентичных болезней. Данные композиции могут, например, использоваться для лечения млекопитающих, включая, но не ограничиваясь этим, приматов и домашних животных. Например, эти композиции могут использоваться для лечения травоядных. Композиции настоящего изобретения включают геометрические и оптические изомеры одного или нескольких медикаментов, где каждый медикамент является рацемической смесью изомеров или одного или нескольких очищенных изомеров.
Фармацевтические композиции, подходящие для использования в настоящем изобретении, включают композиции, где данные активные ингредиенты содержатся в эффективном количестве для достижения предполагаемых целей. Определение эффективных количеств находится в компетенции специалистов в данной области, особенно в свете представленного здесь детального описания.
Соединения настоящего изобретения могут существовать как фармацевтически приемлемые соли. Настоящее изобретение включает такие соли. Термин "фармацевтически приемлемые соли", как представляется, включает соли активных соединений, которые получены с использованием относительно нетоксичных кислот или оснований, в зависимости от конкретных составляющих заместителей, которые находятся на описанных здесь соединениях. Когда соединения настоящего изобретения содержат относительно кислые функциональные группы, основные соли присоединения могут быть получены путем контактирования нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством необходимого основания либо в чистом виде, либо в подходящем инертном растворителе. Включены основные соли присоединения, такие как натриевая, калиевая, кальциевая, аммониевая, органическая амино или магниевая соль, или схожая соль. Когда соединения настоящего изобретения содержат относительно основные функциональные группы, кислые соли присоединения могут быть получены путем контактирования нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством необходимой соли, либо в чистом виде либо в подходящем инертном растворителе. Примеры приемлемых кислых солей присоединения включают полученные из неорганических кислот, подобных хлористоводородной, бромистоводородной, азотной, угольной, моногидрогенкарбонатной, фосфорной, моногидрогенфорфорной, дигидрогенфосфорной, серной, моногидрогенсульфурной, йодистоводородной или фосфористой кислотам и такого подобного, так же как соли, полученные из относительно нетоксичных органических кислот, например, уксусной, пропионовой, изомасляной, малеиновой, малоновой, бензойной, янтарной, субериновой, фумаровой, молочной, миндалевой, фталевой, бензолсульфоновой, п-толуолсульфоновой, лимонной, виннокаменной, метансульфоновой и подобных. Также включены соли аминокислот, такие как аргинат и такое подобное, и соли органических кислот, подобных глюкуроновой или галактуроновой кислотам, и подобные (смотри, например, Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19). Некоторые специфические соединения настоящего изобретения содержат как основную так и кислотную функциональные группы, что дает возможность превращать данные соединения либо в основную, либо в кислую соль присоединения.
Примеры применимых солевых форм включают гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, метансульфонаты, нитраты, малеаты, ацетаты, цитраты, фумараты, тартраты (например, (+)-тартраты, (-)-тартраты или их смеси, включая рацемические смеси), сукцинаты, бензоаты и соли аминокислот, таких как глютаминовая кислота. Эти соли могут быть получены способами, известными специалистам в данной области.
Нейтральные формы данных соединений, предпочтительно, регенерируются путем контактирования данной соли с основанием или кислотой, и выделения материнского соединения обычным способом. Материнская форма данного соединения отличается от различных солевых форм некоторыми физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях.
1-5
Фармацевтически приемлемые сложные эфиры в настоящем изобретении касаются нетоксичных эфиров, предпочтительно, алкилэфиров, таких как метиловый, этиловый, пропиловый, изопропиловый, бутиловый, изобутиловый или пентиловый эфиры, из которых предпочтение отдается метиловому эфиру. Однако, при желании, могут применяться другие эфиры, такие как фенил-С алкил. Эфирные производные некоторых соединений могут действовать как промедикаменты, которые, при абсорбции в кровотоке теплокровного животного, могут расщепляться таким способом, что выделяют лекарственную форму и обеспечивают улучшенную терапевтическую эффективность.
Некоторые соединения настоящего изобретения могут существовать в несольватированных формах, так же, как и в сольватированных формах, включая гидратные формы. В общем, сольватированные формы эквивалентны несольватированным формам и охватываются настоящим изобретением. Некоторые соединения настоящего изобретения могут существовать в мультикристаллической или аморфной формах. В общем, все физические формы эквивалентны для использования, предусмотренного настоящим изобретением и, как предполагается, охватываются настоящим изобретением.
При использовании в виде терапевтического средства, описанные здесь соединения часто используются с физиологически приемлемым носителем. Физиологически приемлемым носителем является композиция, к которой может быть добавлено данное соединение для его растворения или, иным образом, облегчения его употребления. Примеры физиологически приемлемых носителей включают, но не ограничиваясь этим, воду, солевой раствор, физиологический буферный солевой раствор.
13
14
125
14
Если не указано иное, изображенные здесь структуры, как предполагается, включают соединения, которые отличаются только присутствием одного или нескольких изотопно обогащенных атомов. Например, соединения, имеющие представленные структуры, за исключением замещения водорода дейтерием или тритием, или замещения углерода C- или C-обогащенным углеродом, входят в объем данного изобретения. Соединения настоящего изобретения могут также содержать неприродные соотношения атомных изотопов у одного или нескольких атомов, которые составляют такие соединения. Например, данные соединения могут быть мечены радиоактивными изотопами, такими как, например, тритий (3Н), йод-125 (I) или углерод-14 (C). Все изотопные вариации соединений настоящего изобретения, радиоактивные или нет, охватываются данным изобретением.
Кроме солевых форм, настоящее изобретение представляет соединения в форме промедикаментов. Промедикаментами соединений, описанных здесь, являются соединениями, которые легко поддаются химическим изменениям при физиологических условиях, с образованием соединений настоящего изобретения. Кроме того, промедикаменты могут быть конвертированы в соединения настоящего изобретения с помощью химических или биохимических способов в ex vivo среде. Например, промедикаменты могут быть медленно конвертированы в соединения настоящего изобретения при помещении в резервуар трансдермального петча с подходящим ферментом или химическим реагентом.
Соединение настоящего изобретения может быть составлено в виде фармацевтической композиции. Затем такая фармацевтическая композиция может использоваться перорально, парентерально, с помощью ингаляционного спрея, ректально или местным образом в виде унифицированных препаратов, содержащих обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители, при необходимости. Количество активного ингредиента, которое может комбинироваться с материалами носителя для получения отдельной лекарственной формы, варьирует в зависимости от млекопитающего-хозяина, подвергающегося лечению, и конкретного способа использования. Местное применение может также включать использование трансдермальной схемы, такой как, например, трансдермальные петчи или ионтофорезные устройства. Термин парентеральный, как здесь используется, включает подкожные инъекции, внутривенную, внутримышечную, интрастернальную или инфузионную схемы. Составление лекарственных форм рассмотрено, например, в работе Hoover, John E., REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, Mack Publishing Co., Easton, Pa.; 1975. Другие примеры составления лекарственных форм можно найти в работе Liberman, H. A. and Lachman, L., Eds., PHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980.
Препараты для инъекций, например, стерильные водные или масляные суспензии для инъекций, могут быть составлены в соответствии с известными методами с использованием подходящих диспергаторов или смачивающих агентов и суспендирующих агентов. Данный стерильный препарат для инъекций может также представлять собой стерильный раствор для инъекций или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, как раствор в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых наполнителей и растворителей, которые могут применяться, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, как растворитель или суспендирующая среда обычно применяются также стерильные нелетучие масла. Для этой цели может быть использовано любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, в приготовлении препаратов для инъекций находят применение жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. Могут использоваться диметилацетамид, поверхностно-активные вещества, включая ионные и неионные детергенты, полиэтиленгликоли. Также полезны смеси растворителей и смачивающих агентов, такие как рассмотренные выше.
Суппозитории для ректального использования данного лекарства могут быть приготовлены путем смешивания лекарства с подходящим нераздражающим наполнителем, таким как масло какао, синтетические моно-, ди- или триглицериды, жирные кислоты и полиэтиленгликоли, которые находятся в твердом состоянии при обычных температурах, но в жидком состоянии при ректальной температуре, и поэтому будут плавиться в прямой кишке и выделять лекарство.
Твердые лекарственные формы для перорального использования могут включать капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах соединения этого изобретения обычно комбинируются с одним или несколькими адъювантами, подходящими для указанной схемы использования. При использовании внутрь соединение данного изобретения может смешиваться с лактозой, сахарозой, крахмальным порошком, целлюлозными эфирами алкановых кислот, целлюлоза алкильными эфирами, тальком, стеариновой кислотой, стеаратом магния, оксидом магния, натриевой и кальциевой солями фосфорной и серной кислот, желатином, аравийской камедью, альгинатом натрия, поливинлпирролидоном и/или поливиниловым спиртом, и затем таблетироваться или инкапсулироваться для удобного использования. Такие капсулы или таблетки могут содержать препарат с контролируемым выделением, что может быть осуществлено в дисперсии активного соединения в гидроксипропилметил целлюлозе. В случае капсул, таблеток и пилюль, лекарственные формы могут также включать буферные агенты, такие как цитрат натрия, магний или кальций карбонат, или бикарбонат. Таблетки и пилюли могут также быть изготовлены с энтеросолюбильными покрытиями.
Для терапевтических целей, препараты для парентерального использования могут быть в форме водных или неводных изотонических стерильных растворов или суспензий для инъекций. Эти растворы и суспензии могут быть приготовлены из стерильных порошков или гранул с использованием одного или нескольких носителей или разбавителей, упоминавшихся для применения в препаратах для перорального использования. Соединение данного изобретения может растворяться в воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, этаноле, кукурузном масле, хлопковом масле, арахисовом масле, кунжутном масле, бензиловом спирте, хлориде натрия и/или разных буферах. Другие адъюванты и способы использования хорошо и широко известны в фармацевтической области.
Жидкие лекарственные формы для перорального использования могут включать фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как вода. Такие композиции могут также включать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульсификаторы и суспендирующие агенты, и подсластители, ароматизаторы и отдушки.
Схема приема с использованием соединений настоящего изобретения в сочетании с противораковым агентом выбирается в соответствии с множеством факторов, включая тип, вид, возраст, вес, пол и медицинское состояние данного пациента; тяжесть состояния, которое подвергается лечению; схему приема лекарства; почечную и печеночную функции пациента; и применяемое конкретное соединение или его соль, или эфир. Учет этих факторов лежит в пределах компетенции обычного квалифицированного клинициста с целью определения терапевтически эффективных дозовых количеств, назначаемых субъекту, который нуждается в безотлагательной комбинационной терапии.
[Я полагаю, что эти параграфы являются повторениями параграфа 0184-0187]. В некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения, данное соединение является соединением Формулы (I)a, и в некоторых вариантах воплощения является соединением Формулы (I)b.
Любой подходящий препарат соединения, описанного выше, может быть приготовлен для использования с помощью способов, известных в данной области. Выбор полезных наполнителей или носителей может осуществляться без неуместного экспериментирования, исходя из необходимой схемы использования и физических свойств назначаемого соединения.
Может быть задействована любая подходящая схема использования, как определено лечащим врачом, включая, но не ограничиваясь этим, пероральную, парентеральную, внутривенную, внутримышечную, трансдермальную, местную или подкожную схемы. В зависимости от субъекта, который подвергается лечению, схема использования и необходимый тип лечения - например, предупреждение, профилактика, терапия; препараты составляются способами, согласующимися с этими параметрами. Приготовление подходящих препаратов для каждой схемы использования известно в данной области. Сводку таких способов приготовления препаратов можно найти в книге Remington's Pharmaceutical Sciences, последнее издание, Mack Publishing Co., Easton, PA. Препарат из каждого вещества или комбинации двух веществ часто включает разбавитель, так же как и, в некоторых случаях, адъюванты, буферы, консерванты и тому подобное. Назначаемые вещества могут также использоваться в липосомных композициях или как микроэмульсии.
Для инъекции, препараты могут быть приготовлены в удобных формах как жидкие растворы или суспензии, или твердые формы, подходящие для растворения или суспендирования в жидкости перед введением инъекции, или как эмульсии. Подходящие наполнители включают, например, воду, солевой раствор, декстрозу, глицерин и тому подобное. Такие композиции могут также содержать некоторые количества нетоксичных дополнительных веществ, таких как смачивающие агенты или эмульсификаторы, буферные рН агенты и тому подобное, такие как, например, ацетат натрия, сорбитан монолаурат и так далее.
Разработаны также различные системы пролонгированного выделения, и они могут быть применены к соединениям данного изобретения. Смотри, например, патент США за номером 5,624,677, способы которого инкорпорированы здесь путем отсылки.
Системное использование может также включать относительно неинвазивные способы, такие как использование суппозиториев, трансдермальных петчей, трансмукозальной доставки и интраназального использования. Пероральное использование также подходит для соединений данного изобретения. Подходящие формы включают сиропы, капсулы, таблетки, как это подразумевается в данной области.
Для введения субъектам-животным или человеческим субъектам, соответствующая дозировка описанных выше соединений составляет во многих случаях 0,01-15 мг/кг, и иногда 0,1-10 мг/кг. В некоторых вариантах воплощения, подходящая доза соединения данного изобретения для взрослого пациента будет составлять между 1 и 1000 мг на дозу, часто между 10 и 300 мг, и данная доза может использоваться 1-4 раза в сутки. Дозовые уровни зависят от природы данного состояния, эффективности лекарства, состояния пациента, решения практикующего врача и частоты и способа использования; оптимизация таких параметров находится в рамках обычного уровня квалификации в данной области.
Терапевтические комбинации:
Соединения данного изобретения могут использоваться отдельно или в комбинации с другим терапевтическим агентом. Изобретение представляет способы лечения состояний, таких как рак, воспаление и иммунные расстройства, путем назначения субъекту, который нуждается в таком лечении, терапевтически эффективного количества терапевтического агента, полезного для лечения указанного нарушения, и назначения тому же самому субъекту терапевтически эффективного количества модулятора настоящего изобретения, т.е. соединения данного изобретения. Терапевтический агент и модулятор могут вводиться совместно, либо как отдельные терапевтические композиции или смешанные в одну фармацевтическую композицию. При "совместном использовании", терапевтический агент и модулятор могут также использоваться раздельно, включая разное время и с разной периодичностью. Данный модулятор может использоваться по любой известной схеме, такой как перорально, внутривенно, внутримышечно, через нос и тому подобное; и терапевтический агент может также использоваться по любой обычной схеме. Во многих вариантах воплощения, по крайней мере, один и, при необходимости, оба из модулятора и терапевтического агента могут использоваться перорально. Предпочтительно, данный модулятор является ингибитором, и он может ингибировать либо одну из CK2 и Pim, или обе из них, обеспечивая описанные здесь эффекты лечения.
В некоторых вариантах воплощения, "модулятор", как описано выше, может использоваться в комбинации с терапевтическим агентом, который может действовать путем связывания с участками ДНК, которые могут образовывать квадруплексные структуры. В таких вариантах воплощения, терапевтические агенты обладают противораковой активностью сами по себе, но их активность усиливается, когда они используются в комбинации с модулятором. Этот синергический эффект позволяет использовать данный терапевтический агент в меньших дозах, хотя при этом достигается эквивалентный или более высокий уровень, по крайней мере, одного желательного эффекта.
Модулятор может быть в отдельности активным для лечения рака. Для описанных выше комбинационных терапий, при использовании в комбинации с терапевтическим агентом, доза модулятора будет во многих случаях двукратно-десятикратно ниже, чем доза, требуемая, когда данный модулятор используется один для лечения того же самого состояния или субъекта. Определение подходящего количества модулятора для использования в комбинации с терапевтическим агентом легко осуществляется с помощью известных в данной области способов.
Соединения и композиции данного изобретения могут использоваться в комбинации с противораковым или другими агентами, такими как паллиативные агенты, которые обычно назначаются пациенту, который подвергается лечению от рака. Такие "противораковые агенты" включают, например, классические химиотерапевтические агенты, так же как и молекулярно нацеленные терапевтические агенты, биотерапевтические агенты и радиотерапевтические агенты.
Когда соединение или композиция данного изобретения используется в комбинации с противораковым агентом, настоящее изобретение представляет, например, одновременное, разнесенное или чередующееся лечение. Так, соединение данного изобретения может быть использовано в то же самое время, что и противораковый агент, в той же самой фармацевтической композиции; соединение данного изобретения может использоваться до противоракового агента или данный противораковый агент может использоваться до использования соединения данного изобретения, например, с временным лагом, составляющим секунды, минуты, часы, сутки или недели.
В примерах с разнесенным лечением может применяться курс терапии с соединением данного изобретения, затем курс терапии с противораковым агентом, или может использоваться обратный порядок лечения, и могут также применяться несколько серий терапий с использованием каждого компонента. В некоторых примерах настоящего изобретения, один компонент, например, соединение изобретения или противораковый агент, вводится млекопитающему, тогда как другой компонент или его производные продукты остаются в кровотоке данного млекопитающего. Например, настоящее соединение может вводиться, тогда как противораковый агент или его производные продукты остаются в кровотоке, или противораковый агент может использоваться, тогда как настоящее соединение или его производные остаются в кровотоке. В других примерах, второй компонент используется после того, как весь или большая часть первого компонента или его производных покинула кровоток данного млекопитающего.
Соединение данного изобретения и противораковый агент могут использоваться в одной и той же лекарственной форме, например, оба используются как внутривенные растворы, или они могут использоваться в разных лекарственных формах, например, одно соединение может применяться местно, а другое перорально. Обычный специалист в данной области сможет разобраться, какие комбинации агентов будут полезны, исходя из конкретных характеристик лекарств и вида рака.
Противораковые агенты, используемые в комбинации с соединениями настоящего изобретения, могут включать агенты, выбранные из любого из известных обычному специалисту в данной области классов, включая, но не ограничиваясь этим, антимикротубулярные агенты, такие как дитерпеноиды и барвинковые (vinca) алкалоиды; платиновые координационные комплексы; алкилирующие агенты, такие как азотистые иприты, оксазафосфорины, алкилсульфонаты, нитрозомочевины и триазены; антибиотические агенты, такие как антрациклины, актиномицины и блеомицины; ингибиторы топоизомеразы II, такие как эпиподофиллотоксины; антиметаболиты, такие как пуриновые и пиримидиновые аналоги и анти-фолат соединения; ингибиторы топоизомеразы I, такие как камптотецины; гормоны и гормональные аналоги; ингибиторы пути сигнальной трансдукции; ингибиторы нерецепторного тирозин киназного ангиогенеза; иммунотерапевтические агенты; про-апоптотические агенты; ингибиторы индукции клеточного цикла; и другие агенты, описанные ниже.
Антимикротубулярные или антимитотические агенты являются фаза специфическими агентами, которые обычно активны против микротубул опухолевых клеток в фазе М или фазе митоза клеточного цикла. Примеры антимикротубулярных агентов включают, но не ограничиваясь этим, дитерпеноиды и барвинковые алкалоиды.
Агенты, полученные из растительных алкалоидов и терпеноидов, включают митотические ингибиторы, такие как винбластин, винкристин, виндезин и винорелбин из барвинковых алкалоидов; и микротубулярные полимерные стабилизаторы, такие как таксаны, включая, но не ограничиваясь этим, паклитаксел, доцетаксел, ларотаксел, ортатаксел и тезетаксел.
Дитерпеноиды, которые получают из природных источников, являются фаза специфическими противораковыми агентами, которые, как полагают, действуют в G2/M фазах клеточного цикла. Считается, что дитерпеноиды стабилизируют p-тубулин субъединицу микротубул путем связывания с этим протеином. Как представляется, демонтаж этого протеина, ингибируемый митозом, затем останавливается, и следует гибель клетки.
Примеры дитерпеноидов включают, но не ограничиваясь этим, таксаны, такие как паклитаксел, доцетаксел, ларотаксел, ортатаксел и тезетаксел. Паклитаксел является природным дитерпеновым продуктом, выделенным из тихоокеанского тиса Taxus brevifolia, и он есть в продаже в виде раствора для инъекций TAXOL. Доцетаксел является полусинтетической производной паклитаксела, см. выше, полученной с использованием природного предшественника, 10-деацетил-баккатин III, экстрагированного из иголок европейского тисового дерева. Доцетаксел имеется в продаже в виде раствора для инъекций как TAXOTERE.
Барвинковые (Vinca) алкалоиды являются фаза специфическими противоопухолевыми агентами, полученными из барвинкового растения. Как полагают, барвинковые алкалоиды действуют в М фазе (митоз) клеточного цикла путем специфического связывания с тубулином. Как следствие, связанная молекула тубулина неспособна полимеризоваться в микротубулы. Митоз, как считают, останавливается в метафазе с последующей гибелью клетки. Примеры барвинковых алкалоидов включают, но не ограничиваясь этим, винбластин, винкристин, виндезин и винорелбин. Винбластин, винкалейкобластина сульфат, имеется в продаже как VELBAN в виде раствора для инъекций. Винкристин, винкалейкобластин 22-оксо-сульфат, имеется в продаже как ONCOVIN в виде раствора для инъекций. Винорелбин имеется в продаже как раствор для инъекций винорелбина тартрата (NAVELBINE) и является полусинтетической производной барвинкового алкалоида.
Платиновые координационные комплексы являются противораковыми агентами, неспецифичными в отношении фазы, которые интерактивны с ДНК. Платиновые комплексы, как считается, входят в опухолевые клетки, подвергаются гидратации и образуют внутри- и межцепочечные поперечные связи с ДНК, вызывая вредные биологические эффекты по отношению к опухоли. Координационные комплексы на основе платины включают, но не ограничиваясь этим, цисплатин, карбоплатин, недаплатин, оксалиплатин, сатраплатин и (SP-4-3)-(цис)-амминдихлоро-[2-метилпиридин] платина(II). Цисплатин, цис-диамминдихлороплатина, имеется в продаже как PLATINOL в виде раствора для инъекций. Карбоплатин, платина, диаммин [1,1-циклобутан-дикарбоксилат(2-)-0,0'], имеется в продаже как PARAPLATIN в виде раствора для инъекций.
Алкилирующие агенты являются, в общем, неспецифичными в отношении фазы агентами, и обычно являются сильными электрофилами. Обычно, алкилирующие агенты образуют ковалентные связи, путем алкилирования, с ДНК через нуклеофильные составляющие молекул ДНК, такие как фосфат, амино, сульфгидрил, гидроксил, карбоксил и имидазольные группы. Такое алкилирование прерывает нуклеиновокислотную функцию, что ведет к гибели клетки. Примеры алкилирующих агентов включают, но не ограничиваясь этим, алкил сульфонаты, такие как бусульфан; этилениминовые и метилмеламиновые производные, такие как альтретамин и тиотепа; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, циклофосфамид, эстрамуцин, ифосфамид, мехлортамин, мелфалан и урамустин; нитрозомочевины, такие как кармустин, ломустин, и стрептозоцин; триазены и имидазотетразины, и имидазотетразины, такие как дакарбазин, прокарбазин, темозоламид и темозоломид. Циклофосфамид, 2-[бис(2-хлороэтил)-амино]тетрагидро-2Н-1,3,2-оксазафосфорин 2-оксид моногидрат, имеется в продаже в виде раствора для инъекций или таблеток как CYTOXAN. Мелфалан, 4-[бис(2-хлороэтил)амино]-L-фенилаланин, имеется в продаже как раствор для инъекций или таблетки под названием ALKERAN. Хлорамбуцил, 4-[бис(2-хлороэтил)амино]-бензолбутановая кислота, имеется в продаже как LEUKERAN таблетки. Бусульфан, 1,4-бутандиол диметансульфонат, имеется в продаже как MYLERAN TABLETS. Кармустин, 1,3-[бис(2-хлороэтил)-1-нитрозомочевина, имеется в продаже в виде отдельных ампул лиофилизированного материала как BiCNU, 5-(3,3-диметил-1-триазено)-имидазол-4-карбоксамид, имеется в продаже в виде отдельных ампул материала как DTIC-Dome. Кроме того, алкилирующие агенты включают (а) химиотерапевтические агенты на основе платины, подобные алкилирующим агентам, такие как цисплатин, карбоплатин, недаплатин, оксалиплатин, сатраплатин, и (SP-4-3)-(цис)-амминдихлоро-[2-метилпиридин] платина(II); (b) алкил сульфонаты, такие как бусульфан; (с) производные этиленимина и метилмеламина, такие как альтретамин и тиотепа; (d) азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, циклофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, трофосамид, преднимустин, мелфалан и урамустин; (е) нитрозомочевины, такие как кармустин, ломустин, фотемустин, нимустин, ранимустин и стрептозоцин; (f) триазены и имидазотетразины, такие как дакарбазин, прокарбазин, темозоламид и темозоломид.
Противоопухолевые антибиотики являются агентами, неспецифичными по отношению к фазе, которые, как полагают, связываются с или вклиниваются в ДНК. Это может дать стабильные ДНК комплексы или привести к разрыву цепочек, что прерывает обычную функцию нуклеиновых кислот, и это ведет к гибели клетки. Примеры противоопухолевых антибиотических агентов включают, но не ограничиваясь этим, антрациклины, такие как даунорубицин (включая липосомный даунорубицин), доксорубицин (включая липосомный доксорубицин), эпирубицин, идарубицин и валрубицин; родственные стрептомицинам агенты, такие как блеомицин, актиномицин, митрамицин, митомицин, порфиромицин; и митоксантрон. Дактиномицин, также известный как актиномицин D, имеется в продаже в форме для инъекций как COSMEGEN. Даунорубицин, (8S-цис-)-8-ацетил-10-[(3-амино-2,3,6-тридеокси-а-L-ликсогексопиранозил)окси]-7,8,9,10-тетрагидро-6,8,11-тригидрокси-1-метокси-5,12-нафтацендион гидрохлорид, имеется в продаже в виде липосомной формы для инъекций как DAUNOXOME или как препарат для инъекций CERUBIDINE. Доксорубицин, (8S,10S)-10-[(3-амино-2,3,6-тридеокси-α-L-ликсогексопиранозил)окси]-8-гликолоил, 7,8,9,10-тетрагидро-6,8,11-тригидрокси-1-метокси-5,12-нафтацендион гидрохлорид, имеется в продаже в форме для инъекций как RUBEX или ADRIAMYCIN RDF. Блеомицин, смесь цитотоксичных гликопептидных антибиотиков, выделенных из штамма Streptomyces verticil/us, имеется в продаже как BLENOXANE.
Ингибиторы топоизомеразы включают ингибиторы топоизомеразы I, такие как камптотецин, топотекан, иринотекан, рубитекан и белотекан; и ингибиторы топоизомеразы II, такие как этопозид, тенипозид и амсакрин.
Ингибиторы топоизомеразы II включают, но не ограничиваясь этим, эпиподофиллотоксины, которые являются фаза специфическими противоопухолевыми агентами, полученными из растения мандрагоры. Эпиподофиллотоксины обычно влияют на клетки в S и G2 фазах клеточного цикла путем образования тернарного комплекса с топоизомеразой II и ДНК, обусловливающего разрывы ДНК цепочек. Разрывы цепочек накапливаются, и следует гибель клетки. Примеры эпиподофиллотоксинов включают, но не ограничиваясь этим, этопозид, тенипозид и амсакрин. Этопозид, 4'-деметил-эпиподофиллотоксин 9[4,6-0-(R)-этилиден-β-D-глюкопиранозид], имеется в продаже в виде раствора для инъекций или капсул как VePESID и обычно известен как VP-16. Тенипозид, 4'-деметил-эпиподофиллотоксин 9[4,6-0-(R)-тенилиден-β-D-глюкопиранозид], имеется в продаже в виде раствора для инъекций как VUMON и он обычно известен как VM-26.
Ингибиторы топоизомеразы I включают камптотецин и производные камптотецина. Примеры ингибиторов топоизомеразы I включают, но не ограничиваясь этим, камптотецин, топотекан, иринотекан, рубитекан, белотекан и различные оптические формы (т.е. (R), (S) или (R,S)) 7-(4-метилпиперазино-метилен)-10,11-этилендиокси-камптотецин, как описано в патентах США за номерами 6,063,923; 5,342,947; 5,559,235; 5,491,237 и находящейся на рассмотрении патентной заявке США за номером 08/977,217 от 24 ноября 1997 года. Иринотекан HCl, (4S)-4,11-диэтил-4-гидрокси-9-[(4-пиперидинопиперидино)-карбонилокси]-1Н-ирано[3',4',6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-3,14(4Н,12Н)-дион гидрохлорид, имеется в продаже в виде раствора для инъекций CAMPTOSAR. Иринотекан является производной камптотецина, которая связывается, совместно с активным метаболитом 8N-38, с топоизомеразным I-ДНК комплексом. Топотекан HCl, (S)-10- [(диметиламино)метил]-4-этил-4,9-дигидрокси-1Н-пирано[3',4',6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-3,14-(4Н,12Н)-дион моногидрохлорид, имеется в продаже как раствор для инъекций HYCAMTIN.
Антиметаболиты включают (а) пуриновые аналоги, такие как флударабин, кладрибин, хлородезоксиаденозин, клофарабин, меркаптопурин, пентостатин и тиогуанин; (b) пиримидиновые аналоги, такие как фтороурацил, гемицитабин, капецитабин, цитарабин, азацитидин, эдатрексат, флоксуридин и троксацитабин; (с) антифолаты, такие как метотрексат, пеметрексед, ралтитрексед и триметрексат. Антиметаболиты также включают ингибиторы тимидилат синтазы, такие как фтороурацил, ралтитрексед, капецитабин, флоксуридин и пеметрексед; и ингибиторы рибонуклеотид редуктазы, такие как кларибин, клофарабин и флударабин. Антиметаболитные неопластные агенты являются фаза специфическими противоопухолевыми агентами, которые обычно действуют в S фазе (ДНК синтез) клеточного цикла путем ингибирования ДНК синтеза или путем ингибирования синтеза пуриновых или пиримидиновых оснований и ограничения таким образом синтеза ДНК. В результате, S фаза не продвигается, и следует гибель клетки. Антиметаболиты включают пуриновые аналоги, такие как флударабин, кладрибин, хлородезоксиаденозин, клофарабин, меркаптопурин, пентостатин, эритрогидроксинониладенин, флударабина фосфат и тиогуанин; пиримидиовые аналоги, такие как фтороурацил, гемцитабин, капецитабин, цитарабин, азацитидин, эдатрексат, флоксуридин и троксацитабин; антифолаты, такие как метотрексат, пеметрексед, ралтитрексед и триметрексат. Цитарабин, 4-амино-1-р-D-арабинофуранозил-2 (1Н)-пиримидинон, имеется в продаже как CYTOSAR-U и обычно известен как Ara-C. Меркаптопурин, 1,7-дигидро-6Н-пурин-6-тион моногидрат, имеется в продаже как PURINETHOL. Тиогуанин, 2-амино-1,7-дигидро-6Н-пурин-6-тион, имеется в продаже как TABLOID. Гемцитабин, 2'-деокси-2',2'-дифтороцитидин моногидрохлорид (п-изомер), имеется в продаже как GEMZAR.
Гормональная терапия включает (а) андрогены, такие как флуоксиместерон и тестолактон; (b) антиандрогены, такие как бикалутамид, ципротерон, флутамид и нилутамид; (с) ароматические ингибиторы, такие как аминоглутетимид, анастрозол, экземестан, форместан и летрозол; (d) кортикостероиды, такие как дексаметазон и преднизон; (е) эстрогены, такие как диэтилстилбестрол; (f) антиэстрогены, такие как фулвестрант, ралоксифен, тамоксифен и торемифин; (g) LHRH агонисты и антагонисты, такие как бусерелин, гозерелин, лейпролид и трипторелин; (h) прогестины, такие как медроксипрогестерона ацетат и мегестрола ацетат; и (i) тироидные гормоны, такие как левотироксин и лиотиронин. Гормоны и гормональные аналоги являются полезными соединениями для лечения рака, где имеется связь между данным гормоном(ами) и ростом и/или отсутствием роста раковой опухоли. Примеры гормонов и гормональных аналогов, полезных в лечении рака, включают, но не ограничиваясь этим, андрогены, такие как флуоксиместерон и тестолактон; антиандрогены, такие как бикалутамид, ципротерон, флутамид и нилутамид; ингибиторы ароматазы, такие как аминоглутетимид, анастрозол, экземестан, форместан, воразол и летрозол; кортикостероиды, такие как дексаметазон, преднизон и преднизолон; эстрогены, такие как диэтилстилбестрол; антиэстрогены, такие как фулвестрант, ралоксифен, тамоксифен, торемифин, дролоксифен и йодоксифен, так же как селективные эстроген рецепторные модуляторы (SERMS), такие как описанные в патентах США за номерами 5,681,835, 5,877,219 и 6,207,716; 5α-редуктазы, такие как финастерид и дутастерид; гонадотропин-выделяющий гормон (GnRH) и его аналоги, которые стимулируют выделение лютеинизирующего гормона (LH) и/или фолликулостимулирующего гормона (FSH), например, LHRH агонисты и антагонисты, такие как бузерелин, гозерелин, лейпролид и трипторелин; прогестины, такие как медроксипрогестерона ацетат и мегестрола ацетат; и тироидные гормоны, такие как левотироксин и лиотиронин.
Ингибиторы пути сигнальной трансдукции являются такими ингибиторами, которые блокируют или ингибируют химический процесс, который вызывает внутриклеточные изменения, такие как пролиферация клеток или дифференцировка. Ингибиторы сигнальной трансдукции, полезные в настоящем изобретении, включают, например, ингибиторы рецепторных тирозин киназ, нерецепторных тирозин киназ, блокаторов SH2/SH3 доменов, серин/треониновых киназ, фосфотидил инозитол-3 киназ, мио-инозитольной передачи сигналов и Ras онкогенов.
Молекулярно конъюгированные агенты включают (а) ингибиторы рецепторной тирозин киназы ('RTK'), такие как ингибиторы EGFR, включая эрлотиниб, гефитиниб и нератиниб; ингибиторы VEGFR, включающие вандетаниб, семаксиниб и цедираниб; и ингибиторы PDGFR; дополнительно включены RTK ингибиторы, которые действуют на множественных рецепторных сайтах, такие как лапатиниб, которые ингибируют как EGFR и HER2, так же как те ингибиторы, которые действуют в каждом С-наборе, PDGFR и VEGFR, включая, но не ограничиваясь этим, акситиниб, сунитиниб, сорафениб и тоцераниб; также включены ингибиторы BCR-ABL, с-набора и PDGFR, такие как иматиниб; (b) FKBP савязывающие агенты, такие как иммунодепрессивные макролидные антибиотики, включая бафиломицин, рапамицин (сиролимус) и эверолимус; (с) агенты генной терапии, антисмысловые терапевтические агенты и модуляторы генной экспрессии, такие как ретиноиды и рексиноиды, например, адапален, бексаротен, транс-ретиноевая кислота, 9-цис-ретиноевая кислота и N-(4-гидроксифенил)ретинамид; (d) направленные на фенотип терапевтические агенты, включая моноклональные антитела, такие как алемтузумаб, бевацизумаб, цетуксимаб, ибритумомаб тиуксетан, ритуксимаб и трастузумаб; (е) иммунотоксины, такие как гемтузумаб озогамицин; (f) радиоиммуноконъюгаты, такие как 131I-тозитумомаб; и (g) раковые вакцины.
Несколько протеин тирозин киназ катализируют фосфорилирование специфических тирозильных остатков в различных протеинах, задействованных в регуляции роста клеток. Такие протеин тирозин киназы могут быть широко классифицированы как рецепторные или нерецепторные киназы. Рецепторные тирозин киназы являются трансмембранными протеинами, имеющими экстрацеллюлярный лиганд связывающий домен, трансмембранный домен и тирозин киназный домен. Рецепторные тирозин киназы задействованы в регуляции роста клеток и иногда называются рецепторами фактора роста.
Неподходящая или неконтролируемая активация многих из этих киназ, например, посредством гиперэкспрессии или мутации, как было показано, приводит к неконтролируемому росту клеток. Соответственно, аберрантная активность таких киназ связана со злокачественным ростом ткани. Следовательно, ингибиторы таких киназ могут дать способы лечения рака.
Рецепторы фактора роста включают, например, рецептор эпидермального фактора роста (EGFr), рецептор тромбоцитарного фактора роста (PDGFr), erbB2, erbB4, рецептор эндотелиального фактора роста сосудов (VEGFr), тирозин киназу с иммуноглобулин-подобным и гомологичным эпидермальному фактору роста доменами (TIE-2), рецептор инсулиноподобного фактора роста -I (IGFI), фактор, стимулирующий макрофаговую колонию (cfms), ВТК, ckit, cmet, рецепторы фактора роста фибробластов (FGF), Trk рецепторы (TrkA, TrkB и TrkC), эфриновые (eph) рецепторы и RET протоонкоген.
Несколько ингибиторов ростовых рецепторов разрабатываются, и они включают антагонисты лигандов, антитела, ингибиторы тирозин киназы и антисмысловые олигонуклеотиды. Рецепторы фактора роста и агенты, которые ингибируют функцию рецепторного фактора роста, описаны, например, в работах Kath, John С., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6):803-818; Shawver et al., Drug Discov. Today (1997), 2(2):50-63; и Lofts, F. J. et al., "Growth factor receptors as targets". New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, ed. Workman, Paul and Kerr, David, CRC press 1994, London. Специфические примеры ингибиторов рецепторных тирозин киназ включают, но не ограничиваясь этим, сунитиниб, эрлотиниб, гефитиниб и иматиниб.
Тирозин киназы, которые не являются рецепторными киназами фактора роста, называются нерецепторными тирозин киназами. Нерецепторные тирозин киназы, полезные в настоящем изобретении, которые являются мишенями или потенциальными мишенями противораковых лекарств, включают cSrc, Lck, Fyn, Yes, Jak, cAbl, FAK (фокальная адгезионная киназа), брютонсову (Brutons) тирозин киназу и Bcr-Abl. Такие нерецепторные киназы и агенты, которые ингибируют функцию нерецепторной тирозин киназы, описаны в работах Sinh, S. and Corey, S.J., J. Hematotherapy & Stem Cell Res. (1999) 8(5):465-80; и Bolen, J.B., Brugge, J.S., Annual Review of Immunology. (1997) 15:371-404.
SH2/SH3 доменные блокаторы являются агентами, которые разрывают SH2 или SH3 доменные связи во множестве энзимов или адапторных протеинов, включая PI3-K р85 субъединицу, киназы Src семейства, адапторные молекулы (Shc, Crk, Nck, Grb2) и Ras-GAP. SH2/SH3 домены как мишени для противораковых лекарств, обсуждены в работе Smithgall, Т.Е., J. Pharmacol. Toxicol. Methods. (1995), 34(3):125-32. Ингибиторы серин/треониновых киназ, включая блокаторы MAP киназного каскада, которые включают блокаторы Raf киназ (rafk), митогенную или экстрацеллюлярно регулируемую киназу (MEKs) и экстрацеллюлярно регулируемые киназы (ERKs); и блокаторы членов протеин киназ С семейства, включающие блокаторы PKCs (альфа, бета, гамма, эпсилон, мю, ламбда, йота, зета). IkB киназное семейство (IKKa, IKKb), киназы семейства PKB, члены AKT киназного семейства и TGF бета рецепторные киназы. Такие серин/треониновые киназы и их ингибиторы описаны в работах Yamamoto, Т., Тауа, S., Kaibuchi, K., J. Biochemistry. (1999) 126(5):799-803; Brodt, P, Samani, A, & Navab, R, Biochem. Pharmacol. (2000) 60:1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F., Cancer Surv. (1996) 27:41-64; Philip, P.A, and Harris, AL, Cancer Treat. Res. (1995) 78:3-27; Lackey, K. et al. Bioorg. Med. Chem. Letters, (2000) 10(3):223-226; патент США за номером 6,268,391; и Martinez-Lacaci, I., et al., Int. J. Cancer (2000), 88(1):44-52. Ингибиторы членов Фосфадитил инозитол-3 киназного семейства, включая блокаторы PI3-киназы, ATM, ДНК-PK и Ku, также полезны в настоящем изобретении. Такие киназы обсуждены в работах Abraham, RT. Current Opin. Immunol. (1996), 8(3):412-8; Canman, C.E., Lim, D.S., Oncogene (1998) 17(25):3301-8; Jackson, S.P., Int. J. Biochem. Cell Biol. (1997) 29(7):935-8; и Zhong, H. et al., Cancer Res. (2000) 60(6):1541-5. Также полезными в настоящем изобретении являются Мио-инозитол сигнальные ингибиторы, такие как блокаторы фосфолипазы C и Миоинозитоловые аналоги. Такие сигнальные ингибиторы описаны в работе Powis, G., and Kozikowski A, (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, ed., Paul Workman and David Kerr, CRC Press 1994, London.
Другая группа ингибиторов пути сигнальной трансдукции представляет ингибиторы Ras онкогена. Такие ингибиторы включают ингибиторы фарнезилтрансферазы, геранил-геранил трансферазы и СААХ протеазы, так же как антисмысловые олигонуклеотиды, рибозимы и иммунотерапии. Такие ингибиторы, как было показано, блокируют ras активацию в клетках, содержащих мутантный ras дикого типа, действуя таким образом как антипролиферативные агенты. Ингибирование ras онкогена обсуждено в работах Scharovsky, O.G., Rozados, V.R, Gervasoni, SI, Matar, P., J. Biomed. Sci. (2000) 7(4):292-8; Ashby, M.N., Curr. Opin. Lipidol. (1998) 9(2):99-102; и Oliff, A., Biochim. Biophys. Acta, (1999) 1423(3):C19-30.
Как указывалось выше, антитела-антагонисты к связыванию лиганда рецепторной киназы могут также служить ингибиторами сигнальной трансдукции. Эта группа ингибиторов пути сигнальной трансдукции включает использование гуманизированных антител к экстрацеллюлярному лиганд связывающему домену рецепторных тирозин киназ. Например, Имклон (Imclone) C225 EGFR специфическое антитело (смотри Green, М.С. et al., Cancer Treat. Rev., (2000) 26(4):269-286); Герцептин (Herceptin) erbB2 антитело (смотри Stern, DF, Breast Cancer Res. (2000) 2(3):176-183); и 2СВ VEGFR2 специфическое антитело (смотри Brekken, R.A. et al., Cancer Res. (2000) 60(18):5117-24).
Ингибиторы ангиогенеза нерецепторной киназы могут также найти применение в настоящем изобретении. Ингибиторы связанных с ангиогенезом VEGFR и TIE2 обсуждены выше в отношении к ингибиторам сигнальной трансдукции (оба рецептора являются рецепторными тирозин киназами). Ангиогенез, в общем, связан с erbB2/EGFR сигнализацией, поскольку ингибиторы erbB2 и EGFR, как было показано, ингибируют ангиогенез, главным образом, VEGF экспрессию. Таким образом, комбинация erbB2/EGFR ингибитора с ингибитором ангиогенеза имеет смысл. Соответственно, ингибиторы нерецепторной тирозин киназы могут быть использованы в комбинации с EGFR/erbB2 ингибиторами настоящего изобретения. Например, антитела против VEGF, которые не распознают VEGFR (рецепторную тирозин киназу), но связываются с данным лигандом; маломолекулярные ингибиторы интегрина (альфау бета3), которые будут ингибировать ангиогенез; эндостатин и ангиостатин (не-RTK) могут также оказаться полезными в комбинации с раскрытыми ингибиторами erb семейства. (Смотри работы Bruns, CJ et al., Cancer Res. (2000), 60(11):2926-2935; Schreiber AB, Winkler ME, & Derynck R., Science (1986) 232(4755):1250-53; Yen L. et al., Oncogene (2000) 19(31):3460-9).
Агенты, используемые в иммунотерапевтических методах, могут также быть полезны в комбинации с соединениями формулы (I). Имеется ряд иммунологических стратегий для генерации иммунной реакции против erbB2 или EGFR. Эти стратегии лежат, в общем, в сфере вакцинаций опухолей. Эффективность иммунологических подходов может быть значительно усилена посредством совместного ингибирования erbB2/EGFR сигнальных путей с использованием маломолекулярного ингибитора. Обсуждение иммунологического/вакцинационного подхода против erbB2/EGFR можно найти в работах Reilly RT, et al., Cancer Res. (2000) 60(13):3569-76; и Chen Y, et al., Cancer Res. (1998) 58(9):1965-71.
Агенты, используемые в про-апоптотических методах (например, bcl-2 антисмысловые олигонуклеотиды) могут также использоваться в комбинации настоящего изобретения. Члены Bcl-2 семейства протеинов блокируют апоптоз. Поэтому повышение уровня регуляции (апрегуляция) bcl-2 связано с химиорезистентностью. Исследования показали, что эпидермальный фактор роста (EGF) стимулирует анти-апоптотические члены bcl-2 семейства. Таким образом, стратегии, разработанные для понижения уровня регуляции (даунрегуляция) экспрессии bcl-2 в опухолях, продемонстрировали клиническую эффективность и теперь они находятся в фазе II/III испытаний, то есть Genta's G3139 bcl-2 антисмысловой олигонуклеотид. Такие про-апоптотические стратегии, с использованием стратегии антисмыслового олигонуклеотида для bcl-2, обсуждены в работах Waters JS, et al., J. Clin. Oncol. (2000) 18(9):1812-23; и Kitada S, et al. Antisense Res. Dev. (1994) 4(2):71-9.
Ингибиторы сигнальной системы клеточного цикла ингибируют молекулы, включенные в контроль данного клеточного цикла. Семейство протеинкиназ, называемых циклин зависимыми киназами (CDKs), и их взаимодействие с семейством протеинов, называемых циклинами, контролирует продвижение через клеточный цикл эукариотических клеток. Согласованная активация и инактивация различных циклин/CDK комплексов необходима для нормального продвижения через данный клеточный цикл. Несколько ингибиторов сигнальной системы клеточного цикла разрабатываются. Например, примеры циклин зависимых киназ, включая CDK2, CDK4 и CDK6 и ингибиторов для них описаны, например, в работе RosaniaGR & Chang Y-T., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(2):215-30.
Другие молекулярно конъюгированные агенты включают FKBP связывающие агенты, такие как иммунодепрессивные макролидные антибиотики, рапамицин; агенты генной терапии, антисмысловые терапевтические агенты и модулятры генной экспрессии, такие как ретиноиды и рексиноиды, например, адапален, бексаротен, трансретиноевая кислота, 9-цисретиноевая кислота и N-(4 гидроксифенил)ретинамид; фенотип-направленные терапевтические агенты, включая: моноклональные антитела, такие как алемтузумаб, бевацизумаб, цетуксимаб, ибритумомаб тиуксетан, ритуксимаб и трастузумаб; иммунотоксины, такие как гемтузумаб озогамицин, радиоиммуноконъюгаты, такие как 131-тозитумомаб; и раковые вакцины.
Противоопухолевые антибиотики включают (а) антрациклины, такие как даунорубицин (включая липосомный даунорубицин), доксорубицин (включая липосомный доксорубицин), эпирубицин, идарубицин и валрубицин; (b) родственные стрептомицину агенты, такие как блеомицин, актиномицин, митрамицин, митомицин, порфиромицин; и (с) антрацендионы, такие как митоксантрон и пиксантрон. Антрациклины имеют три механизма действия: они вклиниваются между базовыми парами ДНК/РНК цепочки; ингибируют топоизомераза II энзим; и создают опосредованные железом радикалы свободного кислорода, которые разрушают ДНК и клеточные мембраны. Антрациклины обычно характеризуются как ингибиторы топоизомеразы II.
Моноклональные антитела включают, но не ограничиваясь этим, мышиные, химерные или частично или полностью гуманизированные моноклональные антитела. Такие терапевтические антитела включают, но не ограничиваясь этим, антитела, направленные к опухолевым или раковым антигенам либо на поверхности клетки либо внутри данной клетки. Такие терапевтические антитела также включают, но не ограничиваясь этим, антитела, направленные на мишени или пути, прямо или косвенно связанные с CK2. Терапевтические антитела могут дополнительно включать, но не ограничиваясь этим, антитела, направленные на мишени или пути, которые прямо взаимодействуют с мишенями или путями, связанными с соединениями настоящего изобретения. В одном варианте воплощения, терапевтические тела включают, но не ограничиваясь этим, противораковые агенты, такие как абаговомаб, адекатумумаб, афутузумаб, алацизумаб пегол, алемтузумаб, алтумомаб пентетат, анатумомаб мафенатокс, аполизумаб, бавитуксимаб, белимумаб, бевацизумаб, биватузумаб мертанзин, блинатумомаб, брентуксимаб ведотин, кантузумаб мертанзин, катумаксомаб, цетуксимаб, цитатузумаб богатокс, циксутумумаб, кливатузумаб тетраксетан, конатумумаб, дацетузумаб, детумомаб, экромексимаб, эдреколомаб, элотузумаб, эпратузумаб, эртумаксомаб, этарацизумаб, фарлетузумаб, фигитумумаб, фрезолимумаб, галиксимаб, глембатумумаб ведотин, ибритумомаб тиуксетан, интетумумаб, инотузумаб озогамицин, ипилимумаб, иратумумаб, лабетузумаб, лексатумумаб, линтузумаб, лукатумумаб, лумиликсимаб, мапатумумаб, матузумаб, милатузумаб, митумомаб, наколомаб тафенатокс, наптумомаб эстафенатокс, нецитумумаб, нимотузумаб, офатумумаб, оларатумаб, опортузумаб монатокс, ореговомаб, панитумумаб, пемтумомаб, пертузумаб, пинтумомаб, притумумаб, рамуцирумаб, рилотумумаб, ритуксимаб, робатумумаб, зибротузумаб, такатузумаб тетраксетан, таплитумомаб паптокс, тенатумомаб, тицилимумаб, тигатузумаб, тозитумомаб, трастузумаб, тремелимумад, тукотузумаб целмолейкин, велтузумаб, волоциксимаб, вотумумаб, залутумумаб и занолимумаб (). В некоторых вариантах воплощения, такие терапевтические антитела включают алемтузумаб, бевацизумаб, цетуксимаб, даклизумаб, гемтузумаб, ибритумомаб тиуксетан, пантитумумаб, ритуксимаб, тозитумомаб и трастузумаб; в других вариантах воплощения, такие моноклональные антитела включают алемтузумаб, бевацизумаб, цетуксимаб, ибритумомаб тиукситан, ритуксимаб и трастузумаб; как альтернатива, такие антитела включают даклизумаб, гемтузумаб и пантитумумаб. В еще другом варианте воплощения, терапевтические антитела, полезные в лечении инфекций, включают, но не ограничиваясь этим, афелимомаб, эфунгумаб, эксбивирумаб, фелвизумаб, форавирумаб, ибализумаб, либивирумаб, мотавизумаб, небакумаб, пагибаксимаб, паливизумаб, панобакумаб, рафивирумаб, раксибакумаб, регавирумаб, сквирумаб, тефибазумаб, тувирумаб () и уртоксазумаб (). В дополнительном варианте воплощения, терапевтические антитела могут быть полезными в лечении воспаления и/или аутоиммунных заболеваний, включая, но не ограничиваясь этим, адалимумаб, атлизумаб, аторолимумаб, азелизумаб, бапинезумаб, базиликсимаб, бенрализумаб, бертилимумаб, безилезомаб, бриакинумаб, канакинумаб, цеделизумаб, цертолизумаб пегол, кленоликсимаб, даклизумаб, денозумаб, экулизумаб, эдобакомад, эфализумаб, эрлизумаб, фезакинумаб, фонтолизумаб, фрезолимумаб, гантенерумаб, гавилимомаб, голимумаб, гомиликсимаб, инфликсимаб, инолимомаб, келиксимаб, лебрикизумаб, лерделимумаб, меполизумаб, метелимумаб, мурономаб-CD3, натализумаб, окрелизумаб, одулимомаб, омализумаб, отеликсизумаб, пасколизумаб, приликсимаб, резлизумаб, ритуксимаб, ронтализумаб, ровелизумаб, руплизумаб, сифалимумаб, сиплизумаб, соланезумаб, стамулумаб, тализумаб, танезумаб, теплизумаб, тоцилизумаб, торализумаб, устекинумаб, ведолизумаб, вепалимомаб, визилизумаб, занолимумаб и золимомаб аритокс.В еще другом варианте воплощения, такие терапевтические антитела включают, но не ограничиваясь этим, адалимумаб, базиликсимаб, цертолизумаб пегол, экулизумаб, эфализумаб, инфликсимаб, муромонаб-CD3, натализумаб и омализумаб. Как альтернатива, данное терапевтическое тело может включать абциксимаб или ранибизумаб. В общем, терапевтическое антитело неконъюгировано или конъюгировано с радионуклидом, цитокином, токсином, активирующим лекарство энзимом или с наполненной лекарствомом липосомой.
2
Akt ингибиторы включают 1L6-гидроксиметил-хиро-инозитол-2-(R)-2-O-метил-3-O-октадецил-sn-глицерокарбонат, SH-5 (Calbiochem Cat. No. 124008), SH-6 (Calbiochem Cat. No. Cat. No. 124009), Calbiochem Cat. No. 124011, трицирибин (Triciribine) (NSC 154020, Calbiochem Cat. No. 124012), 10-(4'-(N-диэтиламино)бутил)-2-хлорофеноксазин, Cu(II)Cl(3-формилхромон тиосемикарбазон), 1,3-дигидро-1-(1-((4-(6-фенил-1Н-имидазо[4,5-g]хиноксалин-7-ил)фенил)метил)-4-пиперидинил)-2Н-бензимидазол-2-он, GSK690693 (4-(2-(4-амино-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-1-этил-7-{[(3S)-3-пиперидинилметил]окси}-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-4-ил)-2-метил-3-бутин-2-ол), SR13668 ((2,10-дикарбетокси-6-метокси-5,7-дигидро-индоло[2,3-b] карбазол), GSK2141795, перифозин (Perifosine), GSK21110183, XL418, XL147, PF-04691502, BEZ-235 [2-метил-2-[4-(3-метил-2-оксо-8-хинолин-3-ил-2,3-дигидро-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)-фенил]-пропионитил], РХ-866 ((уксусная кислота (1S,4E,10R,11R,13S,14R)-[4-диаллиламинометилен-6-гидрокси-1-метоксиметил-10,13-диметил-3,7,17-триоксо-1,3,4,7,10,11,12,13,14,15,16,17-додекагидро-2-окса-циклопента[а]фенантрен-11-ил эфир)), D-106669, CAL-101, GDC0941 (2-(1Н-индазол-4-ил)-6-(4-метансульфонил-пиперазин-1-илметил)-4-морфолин-4-ил-тиено[3,2-d]пиримидин), SF1126, SF1188, SF2523, TG100-115 [3-[2,4-диамино-6-(3-гидроксифенил)птеридин-7-ил]фенол]. Ряд этих ингибиторов, таких как, например, BEZ-235, РХ-866, D106669, CAL-101, GDC0941, SF1126, SF2523, также идентифицированы в данной области как PI3K/mTOR ингибиторы; дополнительные примеры, такие как PI-103 [3-[4-(4-морфолинилпиридо[3',2':4,5]фуро[3,2-d]пиримидин-2-ил]фенол гидрохлорид], хорошо известны специалистам в данной области. Дополнительные хорошо известные PI3K ингибиторы включают LY294002 [2-(4-морфолинил)-8-фенил-4Н-1-бензопиран-4-он] и вортманнин. mTOR ингтбиторы, известные специалистам в этой области, включают темзиролимус, дефоролимус, сиролимус, эверолимус, зотаролимус и биолимус А9. Репрезентативное подмножество таких ингибиторов включает темзиролимус, дефоролимус, зотаролимус и биолимус А9.
HDAC ингибиторы включают (i) гидроксамовые кислоты, такие как трихостатин А (Trichostatin А), вориностат (vorinostat) (субероиланилид гидроксамовая кислота (SAHA)), панобиностат (panobinostat) (LBH589) и белиностат (belinostat) (PXD101) (ii) циклические пептиды, такие как трапоксин В (trapoxin В), и депсипептиды, такие как ромидепсин (romidepsin) (NSC 630176), (iii) бензамиды, такие как MS-275 (3-пиридилметил-N-{4-[(2-аминофенил)-карбамоил]-бензил}-карбамат), CI994 (4-ацетиламино-N-(2-аминофенил)-бензамид) и MGCD0103 (N-(2-аминофенил)-4-((4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)метил)бензамид, (iv) электрофильные кетоны, (v) алифатические кислотные соединения, такие как фенилбутират и вальпроевая кислота.
Hsp90 ингибиторы включают бензохинон ансамицины, такие как гелданамицин, 17-DMAG (17-диметиламино-этиламино-17-деметоксигелданамицин), танеспимицин (17-AAG, 17-аллиламино-17-деметоксигелданамицин), ЕС5, ретаспимицин (IPI-504, 18,21-дидегидро-17-деметокси-18,21-дидеоксо-18,21-дигидрокси-17-(2-пропениламино)-гелданамицин), и гербимицин; пиразолы, такие как ССТ 018159 (4-[4-(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил)-5-метил-1Н-пиразол-3-ил]-6-этил-1,3-бензолдиол); макролиды, такие как радикокол; так же, как и BIIB021 (CNF2024), SNX-5422, STA-9090 и AUY922.
Разнообразные агенты включают алтретамин, триоксид мышьяка, нитрат галлия, гидроксимочевину, левамизол, митотан, октреотид, прокарбазин, сурамин, талидомид, леналидомид, фотодинамические соединения, такие как метоксален и натрий порфимер, и протеасомные ингибиторы, такие как бортезомиб.
Биологические терапевтические агенты включают: интерфероны, такие как интерферон-α2а и интерферон-α2b, и интерлейкины, такие как алдеслейкин, денилейкин дифтитокс и опрелвекин.
Кроме этих противораковых агентов, которые, как предполагается, действуют против раковых клеток, предусмотрены также комбинационные терапии, включающие использование протекторных или вспомогательных агентов, включая: цитопротекторные агенты, такие как армифостин, дексразонксан и месна, фосфонаты, такие как пармидронат и золедроновая кислота, и стимулирующие факторы, такие как эпоэтин, дарбэпоэтин, филграстим, ПЭГ-филграстим, и саргрпмостим.
Примеры
Следующие примеры иллюстрируют и не ограничивают данное изобретение.
Пример 1. Синтез 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амина
В реакционную колбу вводили 5,7-дихлоропиразоло[1,5-а]пиримидин (3 г, 16 ммоль) совместно с раствором гидроксида аммония (48 мл). Данную гетерогенную смесь кипятили при 85°С в течение 12 часов с обратным холодильником. После охлаждения до комнатной температуры, данную смесь фильтровали, промывали водой и высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин, собирали в виде беловатого твердого вещества с 88% выходом. LCMS (М+1=169)
Пример 2. Синтез трет-бутил 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-илкарбамата
3
4
В реакционную колбу добавляли 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин (2,4 г, 14,1 ммоль) к дихлорометану (35 мл) совместно с ди-трет-бутил дикарбонатом (3,7 г, 17 ммоль), триэтиламином (2,4 мл, 17 ммоль) и DMAP (100 мг, 0,8 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов, затем разбавляли DCM, промывали насыщенным раствором NaHCO (3x), затем промывали рассолом. Органический слой выделяли, осушивали над безводным MgSO, фильтровали и выпаривали досуха. Продукт, трет-бутил 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-илкарбамат, собирали в виде беловатого твердого вещества с 98% выходом. LCMS (M-t-бутил = 213)
Пример 3. Синтез трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-илкарбамата
3
К трет-бутил 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-илкарбамату (3,7 г, 13,8 ммоль) в ДМФ (36 мл) добавляли по каплям POCl (7,7 мл, 82,9 ммоль) при 0°С. После завершения добавления, данную реакционную смесь оставляли подогреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 8 часов. Затем реакцию гасили путем медленного добавления к охлажденному льдом 6N NaOH. Данную смесь разбавляли водой, затем твердое вещество собирали путем фильтрации. Твердое вещество промывали несколько раз водой и высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-илкарбамат, собирали в виде твердого вещества с 27% выходом. Данный продукт не ионизировался на LCMS, пока его сначала не подвергали депротектированию с использованием TFA/DCM (1:1). LCMS (M+1=197)
Пример 4. Синтез 7-амино-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-илкарбамат (1,1 г, 3,8 ммоль) добавляли к 1,4-диоксану (15 мл) совместно с 3-хлороанилином (2,4 мл, 22,6 ммоль) и моногидратом п-толуолсульфоновой кислоты (73 mg, 0,4 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 95°С в течение 12 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и фильтровали. Анализ восстановленного твердого вещества методом жидкостной хроматографии/масс спектрометрии (LCMS) дал массу продукта (М+1=288), так же как и продукта с хлороанилин иминной массой (М+1=397). Для полного превращения этой смеси в необходимый продукт твердое вещество растворяли в 6 мл МеОН/конц. Раствор HCl (1:1) и нагревали при 60°С в течение 1,5 часов. Реакцию гасили путем медленного добавления охлажденного льдом 6N NaOH. Смесь разбавляли водой, затем твердое вещество собирали путем фильтрации. Твердое вещество промывали еще несколько раз водой, затем высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, 7-амино-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид, собирали в виде оранжево-красного твердого вещества с выходом 38%. LCMS (M+1=288)
Пример 5. Синтез 5-((7-амино-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
В реакционной склянке добавляли 7-амино-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид (411 мг, 1,4 ммоль) к этанолу (5,2 мл) совместно с гидантоином (143 мг, 1,4 ммоль) и пиперидином (141 мкл, 1,4 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 60 минут в микроволновой печи. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Твердую фазу собирали путем фильтрации, промывали водой и холодным этанолом. Материал высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, 5-((7-амино-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион, извлекали в виде красного твердого вещества с 54% выходом. LCMS (M+1=370)
Пример 6. Синтез N-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)пиперидин-4-карбоксамида
В реакционной склянке 5-((7-амино-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион (15 мг, 0,04 ммоль) добавляли к ДМФ (0,2 мл) совместно с HBTU (30 мг, 0,08 ммоль), DIEA (28 мкл, 0,16 ммоль) и 1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-4-карбоновой кислотой (18 мг, 0,08 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 часов, затем нагревали при 95°С в течение 4 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали водой, 1N раствором HCl, и снова водой. Затем материал растворяли в 5% DCM/MeOH и очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Выделенные фракции объединяли и выпаривали досуха. Материал растворяли в 1 мл TFA/DCM (1:1) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли путем выпаривания под током азота. И неочищенный материал промывали 1N NaOH, затем водой. Твердое вещество собирали путем фильтрации и высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, N-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидозолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)пиперидин-4-карбоксамид, извлекали в виде твердого вещества с 2% выходом. LCMS (М+1=481).
Таблица 1 ниже представляет биологические активности Примеров 5 и 6, перечисленные как Соединения А1 и В1.
Пример 7. Синтез 5-хлоро-N-циклопропилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амина
3
2
4
К 5,7-дихлоропиразоло[1,5-а]пиримидину (200 мг, 1,06 ммоль) в ACN добавляли EtN (148 мкл, 1,06 ммоль) и циклопропиламин (75 мкл, 1,06 ммоль). Данную реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 80°С в течение ночи. Смесь концентрировали под сниженным давлением, растворяли в DCM и промывали в воде. Результирующий органический слой осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением с получением 156 мг 5-хлоро-N-циклопропилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амина (70% выход). LCMS (М+1=209)
Пример 8. Синтез 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
3
3
2
4
К 5-хлоро-N-циклопропилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амину (156 мг, 0,75 ммоль) в ДМФ добавляли POCl (205 мкл, 2,25 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Для гашения избытка POCl добавляли лед, затем смесь нейтрализовали 1М NaOH. Добавляли DCM, и продукт трижды экстрагировали. Органический слой осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением с получением 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. Некоторое количество остаточного ДМФ удалить не удалось. LCMS (М+1=237)
Пример 9. Синтез 5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
К 5-хлоро-7-(никлопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (177 мг, 0,75 ммоль) в 1,4-диоксане добавляли 3-хлороанилин (397 мкл, 3,75 ммоль). Данную смесь нагревали в микроволновке при 120°С в течение 60 минут. Осадок отфильтровывали, и фильтрат очищали методом препаративной тонкослойной хроматографии (1%MeOH/DCM) с получением 26 мг (11% выход) of 5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. LCMS (М+1=328)
Пример 10. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (26 мг, 0,08 ммоль) в EtOH добавляли гидантоин (8 мг, 0,08 ммоль) и пиперидин (8 мкл, 0,08 ммоль). Данную смесь перемешивали при 70°С в течение недели. Нерастворившиеся вещества отфильтровывали, и фильтрат концентрировали под сниженным давлением. Затем фильтрат растворяли в МеОН и выделяли методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=410)
Пример 11. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-фторофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (0,2 г, 0,59 ммоль) суспендировали в этаноле (2 мл). Добавляли 3-фтороанилин (189 мг, 1,48 ммоль), затем 4М HCl/диоксан (0,3 мл, 1,18 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 6 часов, и затем летучие вещества удаляли в вакууме. Остаток разбавляли водой (10 мл), и рН устанавливали на уровне 12 путем добавления 6М NaOH. Данный раствор перемешивали в течение 0,5 часа, затем осадок, представляющий собой смесь трет-бутил циклопропил(5-(3-фторофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)карбамата и соответствующего имина, выделяли путем фильтрации и высушивали в вакууме. Данный имин подвергали гидролизу путем растворения в метаноле (9 мл), 1,4-диоксане (3,6 мл) и 6М HCl (9 мл), и нагревали при 60°С в течение 5 часов. Данный раствор выливали на лед (50 мл), и величину рН устанавливали на уровне 12 путем добавления 6М NaOH. Осадок выделяли путем фильтрации и высушивали в вакууме с получением трет-бутил циклопропил(5-(3-фторофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата (172 мг, 93%). LCMS (M+1=312)
Пример 12. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-фторофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Гидантоин (69 мг, 0,69 ммоль) и пиперидин (69 мкл, 0,69 ммоль) добавляли к 7-(циклопропиламино)-5-(3-фторофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (72 мг, 0,23 ммоль), растворенному в этаноле (1,1 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С. Через 15 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (5 мл), и осадок собирали и промывали 1:1 этанол: вода (5 мл). Твердое вещество ярко-желтого цвета высушивали в вакууме с получением (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-фторофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион (25 мг, 10% из трех стадий). LCMS (М+1=507)
Соединения, описанные в последующей Таблице 2А, были получены с использованием химических методов, схожих с проиллюстрированными в Примере 11 и Примере 12. Все соединения анализировались методом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 2B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 2А.
Пример 13. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3,5-дифторофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
2
3
2
3,5-дифтороанилин (29 мг, 0,22 ммоль), CsCO (67 мг, 0,21 ммоль) добавляли к трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамату (50 мг, 0,15 ммоль), растворенному в 1,4-диоксане (1 мл). Затем добавляли рацемический BINAP (6 мг, 0,06 ммоль) и палладий (II) ацетат (4 мг, 0,04 ммоль). Данную смесь герметизировали и подвергали облучению при 110°С в течение 20 минут в микроволновой печке. Добавляли EtO (3 мл), и раствор фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный осадок растворяли в дихлорометане (1,5 мл) и трифтороуксусной кислоте (1,5 мл). Через 1 час данный раствор концентрировали под потоком воздуха. Остаток растирали с 20% 2-пропанол/гексанами. Продукт фильтровали с получением 7-(циклопропиламино)-5-(3,5-дифторофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида (39 мг, 80%). LCMS (М+1=330)
Соединения, описанные в последующей Таблице 3, получали с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 13. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS).
Пример 14. Синтез (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(3,5-дифторофениламино)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диопа
Гидантоин (28 мг, 0,28 ммоль) и пиперидин (42 мкл, 0,42 ммоль) добавляли к 7-(циклопропиламино)-5-(3,5-дифторофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (52 мг, 0,16 ммоль), растворенному в этаноле (1 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С. Через 12 часов, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (2 мл), и осадок собирали и промывали 1:1 этанол:вода (5 мл). Твердое вещество высушивали в вакууме с получением (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(3,5-дифторофениламино)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (18 мг, 28% из трех стадий). LCMS (М+1=440)
Соединения, описанные в последующих таблицах, были получены с использованием химических способов, подобных проиллюстрированным в Примере 14. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 4B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 4А.
Соединения, описанные в последующей Таблице 5, были получены в соответствии с общей схемой, приведенной ниже, с использованием химических способов, схожих с Примером 13 и Примером 14.
Пример 15. Синтез 5-(3-хлоро-4-фторофениламино)-7-(циклопропилметиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
2
К трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил (циклопропилметил) карбамату (50 мг, 0,14 ммоль) в 1 мл 1,4 диоксана добавляли карбонат цезия (65 мг, 0,2 ммоль), Pd(ОАс) (4 мг, 0,006 ммоль), (±)-BINAP (5 мг, 0,009 ммоль), 3-хлоро-4-фтороанилин (31 мг, 0,21 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 110°С в течение 20 минут. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду, и продукт экстрагировали эфиром. Затем органический слой концентрировали при сниженном давлении, и неочищенный продукт растворяли в 1:1 смеси дихлорометана и трифтороуксусной кислоты при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали 10 мл дихлорометана. К данной реакционной смеси добавляли эфир/гексаны (1:1), и колбу обрабатывали ультразвуком в течение 10 минут, а затем фильтровали с получением желтого осадка. Осадок промывали гексаном с получением 5-(3-хлоро-4-фторофениламино)-7-(циклопропилметиламино) пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. LCMS (М+1=460)
Пример 16. Синтез 5-((5-(3-хлоро-4-фторофениламино)-7-(циклопропилметиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-(3-хлоро-4-фторофениламино)-7-(циклопропилметиламино) пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (40 мг, 0,09 ммоль) в 1,0 мл этанола добавляли гидантоин (9 мг, 0,09 ммоль) и пиперидин (8 мкл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С всю ночь, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и промывали этанолом с получением 20 мг (31% выход) (7)-5-((5-(3-хлоро-4-фторофениламино)-7-(циклопропилметиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен) имидазолидин-2, 4-диона в виде желтого порошка. LCMS (M+1=442)
Соединения, описанные в последующих таблицах, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 15 и Примере 16. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 6B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 6А.
Пример 17. Синтез трет-бутил 5-азидо-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
К трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамату (500 мг, 1,5 ммоль) в диметилформамиде добавляли азид натрия (150 мг, 2,3 ммоль), затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем реакционную смесь распределяли между этилацетатом/водой. Органический слой собирали, осушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под высоким вакуумом с получением трет-бутил 5-азидо-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата. Неочищенный продукт переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS (М+1=344)
Пример 18. Синтез 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Данный неочищенный продукт, трет-бутил 5-азидо-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат, подвергался гидрированию с использованием 10 вес.% палладия на углероде в этаноле. Данную реакционную смесь перемешивали под атмосферой водорода в течение 3 часов. Смесь фильтровали через целит и обрабатывали ультразвуком 1:1 смесью этилацетата и гексана. Желтое твердое вещество фильтровали и высушивали под сниженным давлением, и растворяли в (1:1) DCM/TFA при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь промывали водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали дихлорометаном. Органический слой концентрировали и высушивали под высоким вакуумом с получением 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида как продукта 310 мг (95% выход на трех стадиях). LCMS (М+1=218)
Пример 19. Синтез (Z)-5-((5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (75 мг, 0,34 ммоль) в 1,0 мл этанола добавляли гидантоин (34 мг, 0,34 ммоль) и пиперидин (33 мкл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и желтый осадок отфильтровывали, промывали этанолом с получением 45 мг (44% выход) Z)-5-((5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (M+1=300)
Пример 20. Синтез метил 7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-илкарбамата
К 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (50 мг, 0,23 ммоль) в 1,0 мл тетрагидрофурана добавляли метилхлороформиат (35 мкл, 0,46 ммоль) и DIEA (39 мкл). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 1 часа. Реакционную смесь распределяли между этилацетат/водой. Органический слой собирали, осушивали над сульфатом натрия и концентрировали под высоким вакуумом с получением метил 7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-илкарбамата. Неочищенный продукт переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS (M+1=276)
Пример 21. Синтез (Z)-метил 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-илкарбамата
К метил 7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-илкарбамату (33 мг, 0,12 ммоль) в 1,0 мл этанола добавляли гидантоин (12 мг, 0,12 ммоль) и пиперидин (11 мкл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение двух часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, желтый осадок отфильтровывали и промывали этанолом с получением 15 мг (40% выход) (2)-метил 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-илкарбамата. LCMS (М+1=358)
Пример 22. Синтез N-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)циклопропанкарбоксамида
К 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (стадия b) (58 мг, 0,266 ммоль) в 1,0 мл тетрагидрофурана добавляли циклопропан карбонил хлорид (38 мкл, 0,419 ммоль) и DIPEA (39,0 мкл). Данную реакционную смесь нагревали при 60°С в течение одного часа. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, органический слой осушивали под сульфатом натрия, концентрировали под высоким вакуумом с получением N-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил) циклопропан карбоксамида. Неочищенный продукт переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS (М+1=286)
Пример 23. Синтез (Z)-N-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)циклопропанкарбоксамида
К N-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)циклопропанкарбоксамиду (74 мг, 0,26 ммоль) в 1,0 мл этанола добавляли гидантоин (26 мг, 0,26 ммоль) и пиперидин (24 мкл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение двух часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали и разбавляли МеОН. Продукт очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 14 мг (20% выход) (Z)-N-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)циклопропанкарбоксамида. LCMS (М+1=368)
Описанные в последующей таблице соединения были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 20 и Примере 16. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 7B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 7А.
Пример 24. Синтез 5-((5-(хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
2
2
+
Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (0,5 г, 1,48 ммоль) растворяли в ледяной уксусной кислоте (5 мл). Добавляли NaOAc (1,21 г, 14,8 ммоль) и гидантоин (356 мг, 3,56 ммоль), и данную реакционную смесь помещали в 110°С баню на 4 суток. Раствор охлаждали до комнатной температуры, и добавляли воду (15 мл). Осадок отфильтровывали и затем растирали с этанолом (5 мл) и затем с CHCl (5 мл) с получением (Z)-5-((5-(хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (202 мг, 43%). LCMS (ES): >85% чистоты, m/z 319 [M+1].
Пример 25. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(4,4-дифторопиперидин-1-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
(Z)-5-((5-(хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион (25 мг, 0,08 ммоль) суспендировали в NMP (0,2 мл). Добавляли 4,4-дифторопиперидин гидрохлорид (60 мг, 0,38 ммоль) и диизопропилэтиламин (67 мкл, 0,38 ммоль), и реакцию облучали в микроволновой печи при 140°С в течение 20 минут. Данный продукт очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(4,4-дифторопиперидин-1-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (5,9 мг, 14%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 404 [M+1].
Пример 26. Синтез 5-(циклопентиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
2
3
2
4
+
Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (1,0 эквивал., 105 мг, 0,312 ммоль) растворяли в ДМФ (1 мл) в склянке. Добавляли KCO (1,5 эквивал., 64 мг, 0,463 ммоль) и циклопентиламин (1,5 эквивал., 46 мкл, 0,465 ммоль), и смесь перемешивали при 50°С в течение одного часа. Добавляли дополнительное количество циклопентиламина (1,5 эквивал., 46 мкл, 0,465 ммоль), и данную смесь перемешивали при 70°С в течение 2 часов. Добавляли воду, и результирующий осадок отфильтровывали и высушивали с получением 130 мг твердого вещества. Это твердое вещество перемешивали в HCl 4N в диоксане (4 мл) при комнатной температуре в течение 4 часов. Добавляли метанол (1 мл) и водную 6N HCl (2 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Данную реакционную смесь затем перемешивали в течение ночи при 60°С до полного гидролиза имина. Реакцию нейтрализовали 6N NaOH, и соединение экстрагировали метиленхлоридом. После осушивания над NaSO и выпаривания летучих веществ данный материал растирали в этилацетате с образованием твердого вещества. 5-(циклопентиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид выделяли в виде твердого вещества путем фильтрации (21 мг). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 286 [М+Н].
Пример 27. Синтез 5-((5-(циклопентиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона.
+
5-(циклопентиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид (1,0 эквивал., 20 мг, 0,070 ммоль) смешивали в склянке с гидантоином (2,8 эквивал., 20 мг, 0,20 ммоль) в этаноле (0,3 мл). Добавляли пиперидин (2,9 эквивал., 20 мкл, 0,202 ммоль), и смесь перемешивали при 90°С в течение 3 часов. Данную смесь охлаждали, осадок фильтровали, промывали этанолом и высушивали. (Z)-5-((5-(циклопентиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион выделяли в виде твердого вещества (25 мг, 100%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 368 [М+Н].
Соединения, перечисленные в последующей Таблице 6, являются Примером 25, Примером 26 и Примером 27.
Пример 28. Синтез (R,Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-фторопирролидин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
(R,Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-фторопирролидин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион получали с использованием химических способов, схожих с использованными для получения (Z)-5-((5-(циклопентиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. Соединение выделяли в виде твердого вещества (84 мг, 75% выход). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 372 [М+Н].
Пример 29. Синтез (Z)-5-((5-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетата
2
3
+
5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (1,0 эквивал., 113 мг, 0,335 ммоль) смешивали в склянке с транс-трет-бутил 4-аминоциклогексилкарбаматом (1,0 эквивал., 81 мг, 0,335 ммоль) и KCO (5,0 эквивал., 232 мг, 1,68 ммоль) в ДМФ (1 мл). Данную смесь перемешивали при 70°С в течение 2,5 часов. Добавляли воду, твердое вещество отфильтровывали и высушивали. Соединение обрабатывали гидантоином (3,0 эквивал., 100 мг), пиперидином (3,0 эквивал., 100 мкл) в этаноле (2 мл) при 85-90°С в течение 4,5 часов. Добавляли воду, и твердое вещество фильтровали и высушивали. Неочищенное твердое вещество суспендировали в метиленхлориде (5 мл) и трифтороуксусной кислоте (1 мл), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Летучие вещества выпаривали. Остаток растворяли в метаноле и воде, и подвергали очистке способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии. После выпаривания по технологии Genevac (Z)-5-((5-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат был выделен в виде желтого твердого вещества (96 мг, 56% выход). LCMS (ES): >99% чистоты, m/z 397 [М+Н]. Обнаружены два изомера (соотношение: 97,5% и 2,5%).
Следующие соединения были получены с использованием химических способов, схожих с использованным в Примере 26, Примере 27, Примере 28 и Примере 29. Соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 9B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 9А.
Пример 30. Схематический синтез N-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)ацетамида
+
(Z)-5-((5-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат (1,0 эквивал., 10 мг, 0,0196 ммоль) и DIEA (1,2 эквивал., 4 мкл, 0,0229 ммоль) растворялись в NMP (0,1 мл). Добавляли уксусный ангидрид (1,0 эквивал., 2 мкл, 0,0211 ммоль), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду, и результирующий осадок отфильтровывали и высушивали с получением N-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)ацетамида в виде твердого вещества (8 мг). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 439 [М+Н].
Пример 31. Синтез 3-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)-1,1-диметилмочевина 2,2,2-трифтороацетата
+
(Z)-5-((5-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат (10 мг) и DIEA (1,2 эквивал., 4,1 мкл) смешивались в безводном NMP (0,1 мл). Добавляли диметилкарбаминовый хлорид (1,0 эквивал., 1,8 мкл), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли NMP (1,5 мл) и несколькими каплями воды. Данное соединение очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии и выделяли после выпаривания по технологии Genevac. 3-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)-1,1-диметилмочевина 2,2,2-трифтороацетат. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 468 [М+Н]. Z:E соотношение: 86:13
Следующие молекулы были получены с применением химических способов, схожих с описанными в Примере 30 и Примере 31, с использованием соответствующих аминов и ангидридов или ацил хлоридов, сульфамоил хлоридов, сульфонил хлоридов или хлороформиатов. Соединения подвергали очистке способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии, выделяли после выпаривания по технологии Genevac, и анализировали способом LCMS. В Таблице 10B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 10А.
Следующие молекулы в Таблице 10 были получены с использованием химических способов, схожих с способами в Примере 26, Примере 27, Примере 28 и Примере 29.
Пример 32. Синтез трет-бутил 5-(бензилтио)-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
+
Диизопропилэтиламин (256 мкл, 1,48 ммоль) добавляли к трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-д]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамату (250 мг, 0,74 ммоль), суспендированному в этаноле (2,5 мл). Добавляли бензилмеркаптан (191 мкл, 1,48 ммоль), и данную реакционную смесь гомогенизировали через ~2 минуты. Через 10 минут реакционную смесь разбавляли этанолом (3 мл), и осадок фильтровали и промывали этанолом (10 мл) с получением трет-бутил 5-(бензилтио)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата (148 мг, 47%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 425 [M+1].
Пример 33. Синтез 5-((5-(бензилтио)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
Гидантоин (67 мг, 0,67 ммоль) и пиперидин (66 мкл, 0,67 ммоль) добавляли к трет-бутил 5-(бензилтио)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамату (95 мг, 0,22 ммоль), растворенному в этаноле (1,1 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С. Через 15 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (5 мл), и осадок собирали и промывали 1:1 этанол:вода (10 мл), и затем этанолом (3 мл). Ярко-желтое твердое вещество осушивали в вакууме с получением (Z)-5-((5-(бензилтио)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (75 мг, 66%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 507 [М+1].
2
+
5-((5-(бензилтио)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион (60 мг, 0,15 ммоль) растворяли в дихлорометане (1 мл) и трифтороуксусной кислоте (1 мл). Через 1 час раствор концентрировали под потоком воздуха. Остаток растирали с EtO (3 мл), и осадок собирали с получением (2)-5-((5-(бензилтио)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (59 мг, 98%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 407 [М+1].
В Таблице 11 - структура, мкМ
Пример 34. Синтез 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (440 мг, 1,86 ммоль) в EtOH добавляли тиазолидин-2,4-дион (458 мг, 3,91 ммоль) и пиперидин (208 мкл, 2,05 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение ночи. К данной реакционной смеси добавляли изопропанол (3 мл) совместно с 218 мг тиазолидин-2,4-диона и 94 мкл пиперидина. Температуру повышали до 90°С, и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение ночи. Осадок фильтровали в горячем и растворенном в МеОН виде. К данной реакционной смеси добавляли 1М HCl (1 мл), и смесь обрабатывали ультразвуком. Осадок отфильтровывали и промывали МеОН с получением 340 мг (54% выход) 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона в виде желтого порошка. LCMS (М+1=336)
Пример 35. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
К 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диону (20 мг, 0,06 ммоль) в NMP добавляли 3-хлороанилин (38 мкл, 0,36 ммоль) и несколько гранул п-толуолсульфоновой кислоты. Данную реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 180°С в течение 1,5 часов. Реакционную смесь фильтровали и очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии, затем препаративной тонкослойной жидкостной хроматографии (1%MeOH/DCM) с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона в виде желтого твердого вещества. LCMS (M+1=427)
Пример 36. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(изобутиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
К 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диону (30 мг, 0,09 ммоль) в NMP добавляли 2-метилпропан-1-амин (20 мг, 0,268 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 130°С в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли МеОН и очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((7-(циклопропиламино)-5-(изобутиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=373)
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 36. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 12B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 12А.
Пример 37. Синтез трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
2
4
К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (4,52 г, 19,15 ммоль) в метиленхлориде (80 мл) добавляли триэтиламин (3,2 мл, 23 ммоль), диметиламинопиридин (350 мг, 2,87 ммоль), и ди-1-бутилдикарбонат (12,53 г, 57,44 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 минут. Реакционную смесь переносили в делительную воронку, промывали 1X НО, 2Х соляным раствором, осушивали над MgSO, фильтровали, и выпаривали досуха с получением маслянистого остатка. Неочищенный материал очищали способом силикагелевой хроматографии (0%-20% этилацетат/гексаны) с получением 5,68 г (88% выход) трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата. LCMS (M+1=337)
Пример 38. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
2
3
К 5 трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил (циклопропил)карбамату (650 мг, 1,93 ммоль) в 14 мл 2:1 смеси 1,2-диметоксиэтан/ EtOH добавляли 3-гидроксифенилбороновую кислоту (399 мг, 2,89 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (112 мг, 0,096 ммоль), и 2М водный раствор NaCO (2,9 мл, 5,79 ммоль). Данную смесь перемешивали при 85°С в течение 1 часа. Летучие вещества удаляли путем роторного выпаривания, и остаток очищали способом силикагелевой хроматографии (0%-30% EtOAc/гексаны) с получением 400 мг трет-бутил циклопропил (3-формил-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата. (52%). LCMS (M+1=395)
Пример 39. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
К трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамату (400 мг, 1,01 ммоль) в метиленхлориде (20 мл) добавляли TFA (10 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Летучие вещества удаляли путем роторного выпаривания, и остаток очищали способом силикагелевой хроматографии (0%-40% EtOАс/гексаны) с получением 103 мг 7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло [1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. (35%). LCMS (М+1=295)
Пример 40. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло [1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (100 мг, 0,340 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли пиперидин (67 мкл, 0,680 ммоль), и гидантоин (34 мг, 0,34 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Образовавшееся твердое вещество выделяли путем фильтрации с получением 70 мг 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. (55%). LCMS (M+1=377)
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 38, Примере 39 и Примере 40. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 13B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 13А.
Синтез 5-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-фторобензойной кислоты
Та же процедура, что и в [Примере 38]. LCMS (М+1=441)
Пример 41. Синтез 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-фторобензойной кислоты
Та же процедура, что и в [Примере 39]. LCMS (M+1=341)
Пример 42. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(4-фторо-3-(морфолин-4-карбонил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
4
К 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-фторобензойной кислоте (75 мг, 0,22 ммоль в ДМФ (3 мл) добавляли EDCI (46 мг, 0,24 ммоль), HOBt (33 мг, 0,24 ммоль), и морфолин (21 мг, 0,24 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали IX насыщенным раствором бикарбоната натрия, 2Х соляным раствором, осушивали над MgSO, фильтровали и выпаривали досуха с получением 92 мг 7-(циклопропиламино)-5-(4-фторо-3-(морфолин-4-карбонил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. LCMS (M+1=410)
Пример 43. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(4-фторо-3-(морфолин-4-карбонил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Та же процедура, что и в [Примере 40]. LCMS (M+1=492)
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 42 и Примере 43. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 14 В представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 14А.
Пример 44. Синтез трет-бутил циклопропил(5-(2-фторопиридин-4-ил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
2
3
К трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамату (1 г, 3 ммоль) в 29 мл 2:1 смеси 1,2-диметоксиэтан/ EtOH добавляли 2-фторопиридин-4-бороновую кислоту (500 мг, 3,55 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (173 мг, 0,15 ммоль), и 2М водный раствор NaCO (4,4 мл, 8,9 ммоль). Данную смесь перемешивали при 85°С в течение 8 часов. Летучие вещества удаляли путем роторного выпаривания, и остаток очищали способом силикагелевой хроматографии (35% EtOAc/гексаны) с получением 324 мг трет-бутил циклопропил(5-(2-фторопиридин-4-ил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата (28% выход). LCMS (М+1=398)
Пример 45. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
К трет-бутил циклопропил(5-(2-фторопиридин-4-ил)-3-формилпиразоло-[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамату (320 мг, 0,82 ммоль) в метиленхлориде (3 мл) добавляли TFA (3 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Летучие вещества удаляли путем роторного выпаривания, и к остатку добавляли 1N NaOH, чтобы сделать его основным. Остаток собирали путем фильтрации, промывали водой и высушивали под вакуумом с получением 180 мг 7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида (74%). LCMS (M+1=298)
Пример 46. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
К 7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (30 мг, 0,1 ммоль) в EtOH (1 мл) добавляли пиперидин (13 мкл, 0,1 ммоль), и тиазолидин-2,4-дион (12 мг, 0,1 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 2 часов. Образовавшееся твердое вещество выделяли путем фильтрации, промывали водой, затем этанолом. Извлеченное твердое вещество дополнительно очищали путем промывки 20% метанол/дихлорометан с получением 9 мг 5-((7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона (23%). LCMS (M+1=397)
Соединения, описанные в последующей таблице, получали с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 44, Примере 45 и Примере 46. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 15B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 15А.
Пример 47. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен-2-тиоксотиазолидин-4-она
К 7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (30 мг, 0,1 ммоль) в EtOH (1 мл) добавляли пиперидин (13 мкл, 0,1 ммоль), и роданин (13 мг, 0,1 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 2 часов. Образовавшееся твердое вещество выделяли путем фильтрации, промывали водой и затем этанолом. Извлеченное твердое вещество дополнительно очищали путем промывки 20% метанол/дихлорометан с получением 15 мг 5-((7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен-2-тиоксотиазолидин-4-она (35%). LCMS (М+1=413)
Пример 48. Синтез трет-бутил 4-(5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилата
В реакционную колбу вводили 5,7-дихлоропиразоло[1,5-а]пиримидин (896 мг, 4,8 ммоль) совместно с трет-бутил 4-аминопиперидин-1-карбоксилатом (954 мг, 4,8 ммоль), триэтиламином (664 мкл, 4,8 ммоль), и ацетонитрилом (16 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 12 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, фильтровали и промывали водой. Продукт, трет-бутил 4-(5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилат, собирали в виде твердого вещества с количественным выходом и высушивали под вакуумом в течение ночи. LCMS (М+1=352)
Пример 49. Синтез трет-бутил 4-(5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилата
3
К трет-бутил 4-(5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилату (1,7 г, 4,8 ммоль) в ДМФ (36 мл), добавляли по каплям при комнатной температуре POCl (7,7 мл, 82,9 ммоль). После завершения добавления, реакционную смесь перемешивали в течение 8 часов. Затем данную реакцию гасили путем медленного добавления к охлажденному льдом 6N NaOH. Смесь разбавляли водой, и твердое вещество собирали путем фильтрации. Твердое вещество промывали несколько раз водой, затем высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, трет-бутил 4-(5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилат, собирали в виде твердого вещества с 48% выходом. LCMS (М+1=380)
Пример 50. Синтез трет-бутил 4-(5-(3-хлорофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилата
Трет-бутил 4-(5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилат (876 мг, 2,3 ммоль) добавляли к 1,4-диоксану (6 мл) совместно с 3-хлороанилином (1,5 мл, 13,9 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты моногидратом (44 мг, 0,23 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 95°С в течение 12 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и фильтровали. Твердое вещество промывали 1N NaOH, затем водой и высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, трет-бутил 4-(5-(3-хлорофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилат, собирали и дополнительно очищали путем рекристаллизации из этилацетат/гексанов (74% выход). LCMS (M+1=471)
Пример 51. Синтез трет-бутил 4-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилата
В реакционной колбе, трет-бутил 4-(5-(3-хлорофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилат (811 мг, 1,7 ммоль) добавляли к этанолу (6,3 мл) совместно с гидантоином (172 мг, 1,7 ммоль) и пиперидином (170 мкл, 1,7 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 12 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали водой и холодным этанолом. Материал высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, трет-бутил 4-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилат, извлекали в виде красного твердого вещества с 67% выходом после дополнительной очистки путем рекристаллизации из этилацетат/гексанов. LCMS (М+1=553)
Пример 52. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Трет-бутил 4-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилат (640 мг, 1,2 ммоль) растворяли в 10 мл TFA/DCM (1:1) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем гасили путем добавления к охлажденному льдом 6N NaOH. Данную смесь разбавляли водой, затем водный слой декантировали. Органический слой разбавляли гексанами и фильтровали. Продукт, 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион, собирали в виде твердого вещества с количественным выходом. LCMS (М+1=453)
Пример 53. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-(циклопропанкарбонил)пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (30 мг, 0,066 ммоль) в ТГФ добавляли циклопропил карбонил хлорид (5 мкл, 0,04 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Затем реакционную смесь концентрировали, разбавляли МеОН, и очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-(циклопропанкарбонил)пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=521)
Пример 54. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-пивалоилпиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Та же процедура, что и в [Примере 53]. LCMS (M+1=537)
Пример 55. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-(3,3-диметилбутаноил)пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Та же процедура, что и в [Примере 53]. LCMS (M+1=551)
Пример 56. Синтез 4-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)-N,N-диметилпиперидин-1-карбоксамида
Та же процедура, что и в [Примере 53]. LCMS (М+1=524)
Пример 57. Синтез метил 4-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-карбоксилата
Та же процедура, что и в [Примере 53], за исключением того, что в качестве растворителя использован ДМФ. LCMS (М+1=511)
Пример 58. Синтез метил 2-(4-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)пиперидин-1-ил)ацетата
Та же процедура, что и в [Примере 53], за исключением того, что в качестве растворителя использован ДМФ. LCMS (M+1=525)
Пример 59. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-(2-гидроксипропил)пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (30 мг, 0,066 ммоль) в ДМФ добавляли 1-хлоро 2-пропанол (7 мкл, 0,13 ммоль) и йодид калия (11,0 мг, 0,066 ммоль). Данную смесь нагревали до 120°С и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли МеОН, и очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-(2-гидроксипропил)пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=511)
Пример 60. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-(2-гидроксиэтил)пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 59]. LCMS (M+1=497)
Пример 61. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-(пиридин-2-илметил)пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (30 мг, 0,066 ммоль) в ДМФ добавляли 2-(бромометил) пиридин бромистый водород (26,0 мг, 0,103 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли МеОН, и очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-(пиридин-2-илметил)пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=544)
Пример 62. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-изопропилпиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (20 мг, 0,04 ммоль) в ТГФ и АсОН (4,8 мг, 0,08 ммоль) добавляли ацетон (2,0 мл, 0,2 ммоль) и натрий триацетокси борогидрид (85,0 мг, 0,4 ммоль). Данную смесь нагревали при 60°С в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия. Смесь экстрагировали этилацетатом и осушивали над сульфатом натрия. Затем данную смесь разбавляли МеОН, и очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-изопропилпиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=495)
Пример 63. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-этилпиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (30 мг, 0,06 ммоль) в ТГФ и АсОН (4,8 мг, 0,08 ммоль) добавляли ацетальдегид (2,0 мл, 0,2 ммоль) и натрий триацетокси борогидрид (85,0 мг, 0,4 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли МеОН, и очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-этилпиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (M+1=481)
Пример 64. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-изобутилпиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (30 мг, 0,06 ммоль) в ТГФ и АсОН (4,8 мг, 0,08 ммоль) добавляли изобутилальдегид (2,2 мл, 0,2 ммоль) и натрий триацетокси борогидрид (85,0 мг, 0,4 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Смесь концентрировали, разбавляли МеОН, и очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(1-изобутилпиперидин-4-иламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=509)
Соединения, описанные в последующей таблице, получали с использованием химических способов, подобных проиллюстрированным в Примерах, описанных выше. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 17B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 17А.
Пример 65. Синтез 7-(бензилтио)-5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидина
В реакционную колбу загружали 5,7-дихлоропиразоло[1,5-а]пиримидин (4,1 г, 22 ммоль) совместно с бензилмеркаптаном (2,8 мл, 22 ммоль), триэтиламином (3,1 мл, 22 ммоль), и ацетонитрилом (71 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, затем разбавляли водой, фильтровали и промывали водой. Продукт, 7-(бензилтио)-5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин, собирали в виде твердого вещества с 96% выходом после высушивания под вакуумом в течение ночи. LCMS(M+1=276)
Пример 66. Синтез 7-(бензилтио)-N-(3-хлорофенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-амина
В реакционную колбу загружали 7-(бензилтио)-5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин (3,45 г, 12,5 ммоль) совместно с 3-хлороанилином (3,3 мл, 31,3 ммоль), 4N HCl в диоксане (3,1 мл, 12,5 ммоль), и этанолом (42 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 12 часов, затем охлаждали до комнатной температуры. Избыток растворителя удаляли под вакуумом, и остаток разбавляли водой. Данную смесь делали основной с помощью 3N NaOH, фильтровали и промывали водой. Продукт, 7-(бензилтио)-N-(3-хлорофенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-амин, собирали в виде твердого вещества с 90% выходом после высушивания под вакуумом в течение ночи. LCMS (М+1=376)
Пример 67. Синтез 7-(бензилтио)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
3
К 7-(бензилтио)-N-(3-хлорофенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-амину (4,1 г, 11,3 ммоль) в ДМФ (42 мл), по каплям добавляли POCl (6,3 мл, 67,6 ммоль) при комнатной температуре. После завершения добавления данную реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. Затем реакцию гасили путем медленного добавления охлажденного льдом 6N NaOH. Смесь разбавляли водой, и твердое вещество собирали путем фильтрации. Твердое вещество промывали несколько раз водой, затем высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, 7-(бензилтио)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид, собирали в виде твердого вещества с 83% выходом. LCMS (М+1=395)
Пример 68. Синтез 5-((7-(бензилтио)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
В реакционной колбе, 7-(бензилтио)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид (3,7 г, 9,3 ммоль) добавляли к этанолу (31 мл) совместно с гидантоином (933 мг, 9,3 ммоль) и пиперидином (920 мкл, 9,3 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 3 суток, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали водой, 50% этанол/вода, и затем 100% этанолом. Данный материал высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, 5-((7-(бензилтио)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион, извлекали в виде желтого твердого вещества с 92% выходом. LCMS (M+1=477)
Пример 69. Синтез 5-((7-(бензилсульфинил)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
В реакционной колбе, 5-((7-(бензилтио)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион (4,1 г, 8,6 ммоль) добавляли к дихлорометану (86 мл) совместно с м-хлоропербензойной кислотой (5,9 г, 34,4 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали дихлорометаном и высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, 5-((7-(бензилсульфинил)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион, извлекали в виде ярко-желтого твердого вещества с количественным выходом. LCMS (М+1=493)
Соединения, описанные в последующей таблице, получали с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примерах, приведенных выше. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 18B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 18А.
Пример 70. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(2-гидроксиэтил амино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 5-((7-(бензилсульфинил)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (15 мг, 0,0304 ммоль) в NMP добавляли 2-аминоэтанол (14,6 мкл, 0,242 ммоль). Данную смесь нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 20 минут. К реакционной смеси добавляли воду, и осадок собирали путем фильтрации. Осадок промывали метанолом с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(2-гидроксиэтиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=414). Схожие продукты (показаны ниже) были также получены в виде осадков путем добавления воды, тогда как другие реакционные смеси подвергались очистке способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением соответствующих продуктов.
Пример 71. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиридин-3-илметиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, как и в [Примере 70]. LCMS (M+1=461)
Пример 72. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиридин-4-илметиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=461)
Пример 73. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(2-(диметиламино)этиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=441)
Пример 74. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(изопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (М+1=412)
Пример 75. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(2-гидроксипропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=428)
Пример 76. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклобутиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=424).
Пример 77. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(2-морфолиноэтиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (М+1=483)
Пример 78. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пиридин-2-илметил амино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=461)
Пример 79. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(3-(диметиламино)-2,2-диметилпропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=483)
Пример 80. Синтез трет-бутил 2-((5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)метил)пирролидин-1-карбоксилата
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (М+1=553)
Пример 81. Синтез трет-бутил 4-((5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)метил)пиперидин-1-карбоксилата
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=568)
Пример 82. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(2,2,2-трифтороэтиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=452)
Пример 83. Синтез 5-((7-(1Н-пиразол-3-иламино)-5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=436)
Пример 84. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(пирролидин-3-ил амино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 70]. LCMS (M+1=439)
Соединения, описанные в последующей таблице, были приготовлены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 70. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 19B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 19А.
Пример 85. Синтез трет-бутил 3-(5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоата
В реакционную колбу загружали 5,7-дихлоропиразоло[1,5-а]пиримидин (1,6 г, 8,2 ммоль) совместно с трет-бутил 3-аминобензоатом (1,7 г, 8,7 ммоль), триэтиламином (1,2 мл, 8,6 ммоль), и t-бутиловым спиртом (22 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 6 часов, затем разбавляли водой, фильтровали и промывали водой. Продукт, трет-бутил 3-(5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоат, собирали в виде твердого вещества с количественным выходом после высушивания под вакуумом в течение ночи. LCMS (М+1=345)
Пример 86. Синтез трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоата
В реакционную колбу загружали трет-бутил 3-(5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоат (2,9 г, 8,2 ммоль) совместно с 3-хлороанилином (2,2 мл, 20,6 ммоль), 4N HCl в диоксане (2,6 мл, 10,4 ммоль), и t-бутиловый спирт (41 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 2 суток, затем охлаждали до комнатной температуры. Данную смесь разбавляли водой, делали основной с помощью 3N NaOH, фильтровали и промывали водой. Продукт, трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоат, собирали в виде твердого вещества с 55% выходом после высушивания под вакуумом в течение ночи. LCMS (M+1=436)
Пример 87. Синтез трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоата
3
К трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоату (965 мг, 2,2 ммоль) в ДМФ (8,2 мл) по каплям при комнатной температуре добавляли POCl (1,2 мл, 13,3 ммоль). После завершения добавления данную реакционную смесь перемешивали в течение 3 суток при комнатной температуре. Затем реакцию гасили путем медленного добавления охлажденного льдом 6N NaOH. Смесь разбавляли водой, и твердое вещество собирали путем фильтрации. Твердое вещество промывали еще несколько раз водой, затем высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоат, собирали в виде твердого вещества с 12% выходом после очистки способом колоночной хроматографии на кремнеземе с использованием 5% ацетон/дихлорометана как элюента. LCMS (М+1=464)
Пример 88. Синтез трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоата
В реакционной колбе, трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоат (122 мг, 0,3 ммоль) добавляли к этанолу (1,3 мл) вместе с гидантоином (26 мг, 0,3 ммоль) и пиперидином (26 мкл, 0,3 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 2 часов в микроволновой печи, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали водой, 50% этанол/вода, и затем 100% этанолом. Материал высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоат, извлекали в виде твердого вещества с 69% выходом. LCMS (М+1=546).
Пример 89. Синтез 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензойной кислоты
Трет-бутил 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоат (97 мг, 0,2 ммоль) растворяли в 2 мл TFA/DCM (1:1) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Избыток растворителя и TFA удаляли путем выпаривания под потоком азота. Остаток разбавляли водой, затем смесь фильтровали. Продукт, 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензойную кислоту, собирали в виде твердого вещества с 85% выходом. LCMS (М+1=490)
Пример 90. Синтез трет-бутил 4-(3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоил)пиперазин-1-карбоксилата
В реакционной колбе, 3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензойную кислоту (30 мг, 0,06 ммоль) добавляли к ДМФ (0,5 мл) вместе с HOBt (9,2 мг, 0,06 ммоль), триэтиламином (8,4 мкл, 0,06 ммоль) и трет-бутил пиперазин-1-карбоксилатом (11,2 мг, 0,06 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 минут, затем добавляли EDC (11,5 мг, 0,06 моль). Реакционная смесь перемешивалась еще в течение часа, затем ее разбавляли водой и фильтровали. Восстановленное твердое вещество промывали большим количеством воды и затем этанолом. Продукт, трет-бутил 4-(3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоил)пиперазин-1-карбоксилат, собирали в виде твердого вещества с 73% выходом. LCMS (М+1=658)
Пример 91. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(3-(пиперазин-1-карбонил)фениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Трет-бутил 4-(3-(5-(3-хлорофениламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-иламино)бензоил)пиперазин-1-карбоксилат (27 мг, 0,04 ммоль) растворяли в 2 мл TFA/DCM (1:1) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Избыток растворителя и TFA удаляли путем выпаривания под потоком азота. Остаток разбавляли водой, и смесь затем фильтровали. Полученное твердое вещество промывали водой, затем 50% этанолом. Продукт, 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(3-(пиперазин-1-карбонил)фениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион, собирали в виде твердого вещества с 21% выходом. LCMS (М+1=558)
Пример 92. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(3-(3-(диметиламино)пирролидин-1-карбонил)фениламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 90]. LCMS (М+1=586)
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примерах, описанных выше. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 20B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 20А.
Пример 93. Синтез 3-((7-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрила
3
4
4
2
4
В реакционную колбу загружали 5,7-дихлоропиразоло[1,5-а]пиримидин (452 мг, 2,4 ммоль) вместе с (3-цианобензил)цинк(II) бромидом (6 мл, 3,75 ммоль, 0,625М в ДМФ), Pd(PPh) (110 мг, 0,1 ммоль), и ДМФ (10 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 часов, затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь выливали в насыщенный водный раствор NHCl со льдом и экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты промывали водой, насыщенным раствором NaCl, и затем осушивали над NaSO. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали способом колоночной хроматографии на кремнеземе с использованием 35% этилацетат/гексаны как элюента. Продукт, 3-((7-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрил, извлекали с 64% выходом. LCMS (М+1=269)
Пример 94. Синтез 3-((7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрила
В реакционную колбу загружали 3-((7-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрил (400 мг, 1,5 ммоль) вместе с циклопропиламином (115 мкл, 1,6 ммоль), триэтиламином (230 мкл, 1,6 ммоль), и ацетонитрилом (3 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 часов при 80°С, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, фильтровали и промывали водой. Продукт, 3-((7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрил, собирали в виде твердого вещества с 83% выходом после высушивания под вакуумом в течение ночи. LCMS (М+1=290)
Пример 95. Синтез 3-((7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрила
3
К 3-((7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрилу (69 мг, 0,24 ммоль) в ДМФ (0,6 мл), добавляли POCl (130 мкл, 1,4 ммоль) при комнатной температуре. После завершения введения, реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем реакцию гасили путем добавления к охлажденному льдом 6N NaOH. Смесь разбавляли водой, и твердое вещество собирали путем фильтрации. Твердое вещество промывали еще несколько раз водой и высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, 3-((7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрил, собирали в виде твердого вещества с 37% выходом. LCMS (М+1=318)
Пример 96. Синтез 3-((7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрила
В реакционной колбе, 3-((7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрил (28 мг, 0,09 ммоль) добавляли к этанолу (0,5 мл) вместе с гидантоином (9 мг, 0,09 ммоль) и пиперидином (9 мкл, 0,09 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 30 минут в микроволновой печи, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали водой, 50% этанол/вода, и затем 100% этанолом. Материал высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукт, 3-((7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)метил)бензонитрил, извлекали в виде твердого вещества с 34% выходом. LCMS (M+1=400)
В Таблице 21 - структура, мкМ
Пример 97. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
2
3
К трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамату (650 мг, 1,93 ммоль) в 14 мл 2:1 смеси 1,2-диметоксиэтан/ EtOH добавляли 3-гидроксифенил бороновую кислоту (399 мг, 2,89 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (112 мг, 0,096 ммоль), и 2М водный раствор NaCO (2,9 мл, 5,79 ммоль). Данную смесь перемешивали при 85°С в течение 1 часа. Летучие вещества удаляли путем роторного выпаривания, и остаток очищали способом силикагелевой хроматографии (0%-30% EtOAc/гексаны) с получением 400 мг трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата. (52%). LCMS (М+1=395)
Пример 98. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
К трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамату (400 мг, 1,01 ммоль) в метиленхлориде (20 мл) добавляли TFA (10 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Летучие вещества удаляли путем роторного выпаривания, и остаток очищали способом силикагелевой хроматографии (0%-40% EtOAc/гексаны) с получением 103 мг 7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. (35%). LCMS (M+1=295)
Пример 99. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К 7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (100 мг, 0,34 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли пиперидин (67 мкл, 0,68 ммоль), и гидантоин (34 мг, 0,34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Образовавшееся твердое вещество выделяли путем фильтрации с получением 70 мг 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (55%). LCMS (М+1=377)
Пример 100. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=463).
Пример 101. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=363)
Пример 102. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-(тифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=445)
Пример 103. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-(гидроксиметил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=409)
Пример 104. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-(гидроксиметил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=309)
Пример 105. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-(гидроксиметил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=391)
Пример 106. Синтез метил 3-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензоата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=437)
Пример 107. Синтез метил 3-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензоата
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=337)
Пример 108. Синтез метил 3-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензоата
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=419)
Пример 109. Синтез метил трет-бутил циклопропил(3-формил-5-С3-(метилсульфонил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=457)
Пример 110. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-(метилсульфонил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (М+1=357)
Пример 111. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-(метилсульфонил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=439)
Пример 112. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-(N-метилсульфамоил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=472)
Пример 113. Синтез 3-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-N-метилбензолсульфонамида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=372)
Пример 114. Синтез 3-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-N-метилбензолсульфонамида
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=454)
Пример 115. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-(метилсульфонамидо)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=472)
Пример 116. Синтез N-(3-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)фенил)метансульфонамида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=372)
Пример 117. Синтез N-(3-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)фенил)метансульфонамида
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=454)
Пример 118. Синтез трет-бутил циклопропил(5-(3-(диметиламино)фенил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (М+1=422)
Пример 119. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-(диметиламино)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=322)
Пример 120. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-(диметиламино)фенил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=404)
Пример 121. Синтез трет-бутил 5-(3-цианофенил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=404)
Пример 122. Синтез 3-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензонитрила
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (М+1=304)
Пример 123. Синтез 3-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензонитрила
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=386)
Пример 124. Синтез трет-бутил циклопропил(5-(3-фторофенил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=397)
Пример 125. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-фторофенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=297)
Пример 126. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-фторофенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=379)
Пример 127. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(пиридин-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=380)
Пример 128. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(пиридин-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=280)
Пример 129. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(пиридин-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=362)
Пример 130. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(пиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (М+1=380)
Пример 131. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(пиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=280)
Пример 132. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(пиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=362)
Пример 133. Синтез трет-бутил циклопропил(5-(2-фторопиридин-4-ил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=398)
Пример 134. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (М+1=298)
Пример 135. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(2-фторопиридин-4-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=380)
Пример 136. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(4-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=395)
Пример 137. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(4-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=295)
Пример 138. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(4-гидроксифенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=377)
Пример 139. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-(морфолинометил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=478)
Пример 140. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-(морфолинометил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=378)
Пример 141. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-(морфолинометил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=460)
Пример 142. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(3-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=491)
Пример 143. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(3-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=391)
Пример 144. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(3-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)фенил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=473)
Пример 145. Синтез трет-бутил 5-(3-(ацетамидометил)фенил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=450)
Пример 146. Синтез N-(3-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло(1,5-а]пиримидин-5-ил)бензил)ацетамида
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (М+1=350)
Пример 147. Синтез N-(3-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензил)ацетамида
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (M+1=432)
Пример 148. Синтез 5-(3-(аминометил)фенил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
2
2
2
2
4
К трет-бутил 5-(3-(ацетамидометил)фенил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамату (50 мг, 0,111 ммоль) добавляли 1 мл 4М HCl в 1,4-диоксане и 1 мл НО. Данную реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 16 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли HO. К данной реакционной смеси добавляли 5М NaOH для установления рН до >10, затем данную смесь экстрагировали CHCl. Органический слой собирали, осушивали над MgSO, фильтровали и выпаривали досуха с получением 24 мг 5-(3-(аминометил)фенил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида(70%). LCMS (М+1=308)
Пример 149. Синтез 5-((5-(3-(аминометил)фенил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=390)
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примерах 98 и 99. Все соединения анализировали способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 22B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 22А.
Пример 150. Синтез метил 5-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоксилата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (М+1=443)
Пример 151. Синтез метил 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоксилата
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=343)
Пример 152. Синтез метил 5-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоксилата
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=425)
Пример 153. Синтез трет-бутил 5-(5-цианотиофен-2-ил)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
Такая же процедура, что и в [Примере 97]. LCMS (M+1=410)
Пример 154. Синтез 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбонитрила
Такая же процедура, что и в [Примере 98]. LCMS (M+1=310)
Пример 155. Синтез 5-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбонитрила
Такая же процедура, что и в [Примере 99]. LCMS (М+1=392)
Пример 156. Синтез 5-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты
2
3
4
2
2
К трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил (циклопропил)карбамату (1 г, 2,97 ммоль) в 30 мл 2:1 смеси 1,2-диметоксиэтан/ EtOH добавляли 2-карбокситиофен-5- бороновую кислоту (766 мг, 4,45 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (171 мг, 0,148 ммоль), и 2М водный раствор NaCO (4,45 мл, 8,91 ммоль). Данную смесь перемешивали при 95°С в течение 3 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и распределяли между 2N NaOH и этилацетатом. Слои разделяли, и водный слой подкисляли до рН<3 с помощью концентрированной HCl. Водный слой экстрагировали (3x) метиленхлоридом. Объединенные органические слои промывали соляным раствором, осушивали над MgSO, фильтровали и выпаривали досуха с получением 450 мг 5-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты. Некоторое количество дополнительного материала, которое находилось в первом этилацетатном слое, очищали способом силикагелевой хроматографии (0%-20% МеОН/CHCl) с получением еще 550 мг 5-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты (79%). LCMS (М+1=429)
Пример 157. Синтез 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты
2
2
2
2
К 5-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоте (1 г, 2,33 ммоль) добавляли 8 мл 4М HCl в диоксане и еще 5 мл диоксана. Данную реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 2 часов, охлаждали до комнатной температуры и распределяли между CHCl и HO. Эмульсию, которая образовалась между слоями, отфильтровывали и ополаскивали НО. Извлеченное твердое вещество высушивали под вакуумом с получением 627 мг 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты в виде красного твердого вещества (82%). LCMS (М+1=329)
Пример 158. Синтез 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-N-(3-метоксипропил)тиофен-2-карбоксамида
3
4
К 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоте (30 мг, 0,091 ммоль), EDCI (19 мг, 0,10 ммоль), EtN (14 мкл, 0,10 ммоль), и HOBt (14 мг, 0,10 ммоль) в 2 мл ДМФ, предварительно перемешанной в течение 5 минут, добавляли 3-метоксипропиламин (10 мкл, 0,10 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой, соляным раствором, осушивали над MgSO, фильтровали и выпаривали досуха с получением 30 мг 5-(7-(никлопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-N-(3-метоксипропил)тиофен-2-карбоксамида (83%). LCMS (M+1=400)
Пример 159. Синтез 5-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-N-(3-метоксипропил)тиофен-2-карбоксамида
К 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-N-(3-метоксипропил)тиофен-2-карбоксамиду (30 мг, 0,075 ммоль) в EtOH (1 мл) добавляли пиперидин (20 мкл, 0,150 ммоль), и гидантоин (10 мг, 0,075 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 85°С в течение 3 часов. Образовавшееся твердое вещество выделяли путем фильтрования с получением 5-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-N-(3-метоксипропил)тиофен-2-карбоксамида. LCMS (М+1=482)
Пример 160. Синтез 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоксамида
3
4
К 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоте (40 мг, 0,122 ммоль), HATU (70 мг, 0,183 ммоль), HOBt (4 мг, 0,024 ммоль) и DIEA (85 мкл, 0,488 ммоль) в 2 мл ДМФ добавляли хлорид аммония (20 мг, 0,366 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали насыщенным раствором NaHCO, соляным раствором, осушивали над MgSO, фильтровали и выпаривали досуха с получением 42 мг 5-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоксамида(100%). LCMS (М+1=328).
Пример 161. Синтез 5-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоксамида
Такая же процедура, что и в [Примере 159]. LCMS (М+1=410)
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 158 и Примере 159. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 23B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 23А.
Пример 162. Синтез 4-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты
2
3
2
2
2
2
+
Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)(циклопропил)карбамат (0,5 г, 1,48 ммоль) и имеющийся в продаже (Combi-Blocks) 2-карбокситиофен-4-бороновой кислоты пинаконовый эфир (754 мг, 2,97 ммоль) растворяли в ацетонитриле. Добавляли 2М NaCO (1 мл), и данный раствор обезгаживали струей N в течение 10 минут. Добавляли PdCldppf⋅CHCl (60 мг, 0,07 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 1,5 ч. Данный раствор разбавляли 1,5N NaOH (80 мл) и фильтровали через целит. Величину рН фильтрата устанавливали на уровне рН=3 путем добавления 6М HCl. Результирующий осадок фильтровали и высушивали в вакууме с получением 4-(7-(трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты (473 мг, 74%) в виде коричневато-желтоватого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 429 [M+1].
Пример 163. Синтез 4-(7-(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты
2
+
4-(7-(Трет-бутоксикарбонил(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновую кислоту (473 мг, 1,10 ммоль) растворяли в дихлорометане (5 мл) и трифтороуксусной кислоте (3 мл). Через 1 час темно-красный раствор концентрировали под потоком воздуха. Красное масло растирали с EtO (5 мл), и осадок фильтровали с получением 4-(7-(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты (321 мг, 88%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 329 [М+1].
Пример 164. Синтез (Z)-4-(7-(циклопропил)амино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты
+
Гидантоин (292 мг, 2,92 ммоль) и пиперидин (285 мкл, 2,89 ммоль) добавляли к 4-(7-(циклопропил)амино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоте (315 мг, 0,96 ммоль), растворенной в этаноле (5 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С. Через 15 часов, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли водой (10 мл). Величину рН устанавливали на уровне рН=3 путем добавления 1N HCl. Желтый осадок собирали и промывали 1:1 этанол:вода (10 мл) и затем этанолом (10 мл). Твердое вещество высушивали в вакууме с получением (Z)-4-(7-(циклопропил)амино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновой кислоты (362 мг, 92%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 411 [M+1].
Пример 165. Синтез (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(5-(2,6-диметилморфолин-4-карбонил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
2
+
(Z)-4-(7-(Циклопропил)амино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)тиофен-2-карбоновую кислоту (1,0 эквивал., 34 мг, 0,0828 ммоль) смешивали в склянке с HOBt.HO (2,0 эквивал., 22 мг, 0,163 ммоль), 2,6 диметилморфолином (смесь изомеров, 4,0 эквивал., 41 мкл, 0,333 ммоль), DIEA (2,0 эквивал., 29 мкл, 0,166 ммоль) и NMP (0,5 мл). Добавляли EDCI (2,0 эквивал., 32 мг, 0,166 ммоль), и данную смесь перемешивали при 70°С в течение 1 часа. Добавляли воду, и результирующий осадок фильтровали и высушивали. Материал растирали в смеси этилацетата и гексанов, фильтровали и высушивали в вакууме с получением (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(5-(2,6-диметилморфолин-4-карбонил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона в виде желтого твердого вещества (26 мг, 62% выход). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 508 [М+1].
Следующие соединения были получены с использованием условий, схожих с химическими способами, описанными в Примере 165. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS.) В Таблице 24B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 24А.
Пример 166. Синтез 5-(гидроксиметил)тиофен-2-бороновой кислоты
5-(Гидроксиметил)тиофен-2-бороновая кислота была получена из имеющейся в продаже 5-формилтиофен-2-бороновой кислоты (Combi-Blocks) в соответствии с процедурой, описанной в патентной заявке WO2007/118137.
Пример 167. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата
2
3
2
3
4
2
3
4
+
Замечание: DME и 2М NaCO обезгаживались потоком N в раздельных склянках перед добавлением. Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)(циклопропил)карбамат (1,5 г, 4,45 ммоль) растворяли в DME (40 мл). Добавляли неочищенную 5-(гидроксиметил)тиофен-3-бороновую кислоту (1,4 г, 8,9 ммоль), затем Pd(PPh) (510 мг, 0,45 ммоль) и, наконец, 2М NaCO (6,7 мл, 13,3 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали до 90°С в течение 2 часов. Раствор распределяли между EtOAc (100 мл) и 0,5N HCl (100 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2×75 мл). Органику промывали соляным раствором (250 мл), осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали способом колоночной флеш-хроматографии (30-45% EtOAc/гексаны) и затем растирали с гексанами (3×10 мл) с получением трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата (984 мг, 53%) в виде беловатого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 415 [M+1].
Пример 168. Синтез 5-(5-(бромометил)тиофен-2-ил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
3
4
+
Бромистый водород (48% в воде, 5 мл) добавляли по каплям к трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)карбамату (980 мг, 2,4 ммоль), суспендированному в дихлорометане (5 мл). Раствор тотчас же приобрел темно-коричневую окраску и гомогенизировался после добавления. Данную реакционную смесь нагревали до 40°С в течение 4 часов, затем разбавляли дихлорометаном (10 мл). Жидкость декантировали, и смолистый остаток промывали дихлорометаном (3×10 мл). Объединенные жидкости промывали последовательно насыщенным NaHCO (20 мл) и соляным раствором (20 мл), и затем осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растирали с гексанами и затем очищали способом флеш колоночной хроматографии (10-20% EtOAc/гексаны) с получением 5-(5-(бромометил)тиофен-2-ил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-карбальдегида (300 мг, 34%) в виде желтого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 378 [M+1].
Пример 169. Синтез (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(5-пирролидин-1-илметил)тиофен-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
Карбонат калия (30 мг, 0,20 ммоль) добавляли к 5-(5-(бромометил)тиофен-2-ил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (25 мг, 0,07 ммоль), растворенному в ДМФ (0,7 мл). Добавляли пирролидин (6 мкл, 0,07 ммоль), и данную реакционную смесь нагревали до 60°С в течение 4 часов. Добавляли воду (3 мл), и оранжевый осадок отфильтровывали и высушивали в вакууме с получением 7-(циклопропиламино)-5-(5-(пирролидин-1-илметил)тиофен-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-карбальдегида (13 мг, 54%), который использовался без дополнительной очистки. LCMS (ES): >85% чистоты, m/z 368 [М+1].
+
Гидантоин (3 мг, 0,03 ммоль) и пиперидин (3 мкл, 0,03 ммоль) добавляли к 7-(циклопропиламино)-5-(5-(пирролидин-1-илметил)тиофен-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (12 мг, 0,03 ммоль), растворенному в этаноле (0,5 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С. Через 15 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли водой (3 мл). Осадок собирали и промывали 1:1 этанол:вода (3 мл) и высушивали в вакууме с получением (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(5-пирролидин-1-илметил)тиофен-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (2,8 мг, 9% из двух стадий). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 450 [М+1].
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 168 и Примере 169.
Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 25B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 25А.
Пример 170. Синтез 5-(гидроксиметил)тиофен-3-бороновой кислоты
5-(гидроксиметил)тиофен-3-бороновую кислоту получали из имеющейся в продаже 5-формилтиофен-3-бороновой кислоты (Combi-Blocks) в соответствии с процедурой, описанной в патентной заявке WO2007/118137.
Пример 171. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)карбамата
2
3
2
3
4
2
3
4
3
1
+
Замечание: DME и 2М NaCO обезгаживали потоком N в раздельных колбах перед добавлением. Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)(циклопропил)карбамат (750 мг, 2,22 ммоль) растворяли в DME (22 мл). Добавляли неочищенную 5-(гидроксиметил)тиофен-3-бороновую кислоту (880 мг, 5,57 ммоль), затем Pd(PPh) (256 мг, 0,22 ммоль) и, наконец, 2М NaCO (3,3 мл, 6,60 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали до 90°С в течение 2 ч. Данный раствор распределяли между EtOAc (100 мл) и 0,5N HCl (100 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2×75 мл). Органику промывали соляным раствором (250 мл), осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (30-45% EtOAc/гексаны) и затем растирали с гексанами (3×10 мл) с получением трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамата (638 мг, 69%) в виде беловатого твердого вещества. Н NMR (CDCl, 400 MHz) δ: 10.34 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.11 (d, 1H, J=1.6 Hz), 7.76 (d, 1H, J=1.6 Hz), 7.18 (s, 1H), 4.93 (bs, 2H), 3.30 (dddd, 1H, J=6.8, 6.8, 3.6, 3.6 Hz), 2.15 (bs, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.85-0.92 (m, 2H), 0.63-0.70 (m, 2H). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 415 [M+1].
Пример 172. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-карбальдегид 2,2,2,-трифтороацетата
Трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)карбамат (20 мг, 0,05 ммоль) растворяли в дихлорометане (0,5 мл) и трифтороуксусной кислоте (0,5 мл). Через 1 час данный раствор концентрировали под потоком воздуха. Остаток очищали посредством препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 7-(циклопропиламино)-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-карбальдегид 2,2,2-трифтороацетата (4,8 мг, 23%).
Пример 173. Синтез 5-(5-(бромометил)тиофен-3-ил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-карбальдегида
3
4
3
1
+
Бромистый водород (48% в воде, 2,5 мл) добавляли по каплям к трет-бутил циклопропил(3-формил-5-(5-(гидроксиметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)карбамату (561 мг, 1,35 ммоль), суспендированному в дихлорометане (3,5 мл). Данный раствор сразу же приобретал темно-коричневую окраску и гомогенизировался после добавления. Данную реакционную смесь нагревали до 40°С в течение 3 ч, затем разбавляли дихлорометаном (10 мл). Жидкость декантировали, и смолистый остаток промывали дихлорометаном (3×10 мл). Объединенные жидкости промывали последовательно насыщенным NaHCO (20 мл) и соляным раствором (20 мл), и затем осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растирали с гексанами и затем очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (15-40% EtOAc/гексаны) с получением 5-(5-(бромометил)тиофен-3-ил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида (105 мг, 20%) в виде желтого твердого вещества. Н NMR (CDCl, 400 MHz) δ: 10.26 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.12 (d, 1H, J=1.6 Hz), 7.80 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.65 (bs, 1H), 4.80 (s, 2H), 2.81 (m, 1H), 1.03-1.09 (m, 2H), 0.84-0.89 (m, 2H). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 378 [M+1].
Пример 174. Синтез (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(5-пирролидин-1-илметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
Карбонат калия (30 мг, 0,20 ммоль) добавляли к 5-(5-(бромометил)тиофен-3-ил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (25 мг, 0,07 ммоль), растворенному в ДМФ (0,7 мл). Добавляли пирролидин (6 мкл, 0,07 ммоль), и данную реакционную смесь нагревали до 50°С в течение 1,25 ч. Добавляли воду (3 мл), и оранжевый осадок фильтровали и высушивали в вакууме с получением 7-(циклопропиламино)-5-(5-(пирролидин-1-илметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-карбальдегида (13 мг, 54%), который использовался без дополнительной очистки. LCMS (ES): >85% чистоты, m/z 368 [M+1].
+
Гидантоин (3 мг, 0,03 ммоль) и пиперидин (3 мкл, 0,03 ммоль) добавляли к 7-(циклопропиламино)-5-(5-(пирролидин-1-илметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-карбальдегиду (12 мг, 0,03 ммоль), растворенному в этаноле (0,5 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С. Через 15 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем разбавляли водой (3 мл). Осадок собирали и промывали 1:1 этанол:вода (3 мл) и высушивали в вакууме с получением (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(5-пирролидин-1-илметил)тиофен-3-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (2,8 мг, 9% из двух стадий). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 450 [М+1].
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 174. Все соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 26В представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 26А.
Химические способы, представленные на Фигуре 3, могут использоваться для получения аналогов 7, замещенных метильной группой. Имеющаяся в продаже бороновая кислота 1 может подвергаться реакции с трет-бутил 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбаматом 2 при условиях реакции Сузуки (Suzuki) для метилкетона 3. Это соединение 3 может реагировать с различными замещенными аминами 4 при условиях восстановительного аминирования, таких как условия, описанные в US2007/244094, или условия реакции, описанные в European Journal of Medicinal Chemistry, vol 32, 1997, 143-150, для получения соединений 5. Соединение 5 может быть превращено в альдегид 6 при условиях Вильсмайера (Vilsmeier). Соединение 6 может быть превращено в соединение 7 путем реакции с гидантоином и пиперидином в этаноле.
Молекулы в последующей Таблице 27 могут быть получены с использованием схожих химических способов.
Пример 175. Синтез 6-бромо-N-циклопропилимидазо[1,2-а]пиразин-8-амина
4
3
1
+
Диизопропилэтиламин (2,4 мл, 13,62 ммоль) и циклопропиламин (943 мкл, 13,62 ммоль) добавляли к имеющемуся в продаже (Ark Pharm, Inc.) 6,8-дибромоимидазо[1,2-а]пиразину (2,51 г, 9,08 ммоль), растворенному в 2-пропаноле (9 мл). Данный раствор помещали в 80°С масляную баню. Через 4,5 ч летучие вещества удаляли в вакууме. Коричневый остаток распределяли между дихлорометаном (50 мл) и водой (50 мл). Органический слой промывали дополнительно водой (50 мл) и затем соляным раствором (50 мл). Органический слой осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали путем фильтрации через короткую силикагелевую пробку (40% EtOAc/гексаны), и фильтрат концентрировали в вакууме с получением 6-бромо-N-циклопропилимидазо[1,2-а]пиразин-8-амина (2,19 г, 95%) в виде светло-коричневого твердого вещества. Н NMR (CDCl, 400 MHz) δ: 7.61 (s, 1H), 7.46 (d, 1H, J=1.2 Hz), 7.44 (d, 1H, J=1.2 Hz), 6.26 (bs, 1H), 3.02 (dddd, 1H, J=7.2, 7.2, 7.2, 3.6 Hz), 0.89-0.95 (m, 2H), 0.64-0.69 (m, 2H). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 254 [M+1].
Пример 176. Синтез трет-бутил 6-бромоимидазо[1,2-а]пиразин-8-ил(циклопропил)карбамата
4
3
1
+
6-бромо-N-циклопропилимидазо[1,2-а]пиразин-8-амин (0,5 г, 1,98 ммоль) растворяли в дихлорометане (8 мл). Последовательно добавляли ди-трет бутил дикарбонат (733 мг, 3,35 ммоль), DMAP (5 мг, 0,02 ммоль) и пиридин (0,4 мл). Через 12 часов данный раствор разбавляли EtOAc (50 мл) и затем промывали последовательно 1N HCl (50 мл), 1N NaOH (50 мл), и соляным раствором (50 мл). Органический слой осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растирали с гексанами (5 мл) с получением трет-бутил 6-бромоимидазо[1,2-а]пиразин-8-ил(циклопропил) карбамата (337 мг, 48%) в виде беловатого твердого вещества. Н NMR (CDCl, 400 MHz) δ: 8.18 (s, 1H), 7.78 (d, 1H, J=0.8 Hz), 7.67 (d, 1H, J=0.8 Hz), 3.25 (dddd, 1H, J=6.8, 6.8, 3.6, 3.6 Hz), 1.20 (s, 9H), 0.78-0.86 (m, 2H), 0.71-0.77 (m, 2H). LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 354 [M+1].
Пример 177. Синтез 6-бромо-8-(циклопропиламино)имидазо[1,2-a]пиразин-3-карбальдегида
4
+
Оксихлорид фосфора(V) (3,9 мл, 42,68 ммоль) добавляли по каплям к безводному ДМФ (16 мл) при 0°С. 6-бромо-N-циклопропилимидазо[1,2-а]пиразин-8-амин (900 мг, 3,56 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (24 мл) и добавляли в течение двух минут. Раствор помещали в 85°С масляную баню на 5 ч. Раствор охлаждали до 0°С, и добавляли концентрированную HCl (30 мл). Смесь подщелачивали до рН=10 w/3N NaOH (~175 мл). Данную смесь экстрагировали дихлорометаном (3×250 мл), и органику промывали соляным раствором (500 мл). Органический слой осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (30% EtOAc/гексаны) с получением 6-бромо-8-(циклопропиламино)имидазо[1,2-а]пиразин-3-карбальдегида (490 мг, 49%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 282 [M+1].
Пример 178. Синтез трет-бутил 6-бромо-3-формилимидазо[1,2-a]пиразин-8-ил(циклопропил)карбамата
4
3
1
+
Ди-трет-бутил дикарбонат (1,16 г, 5,30 ммоль) и DMAP (21 мг, 0,18 ммоль) добавляли к раствору 6-бромо-8-(циклопропиламино)имидазо[1,2-а]пиразин-3-карбальдегида (994 мг, 3,50 ммоль) в дихлорометане (15 мл). Через 2,5 часа данный раствор распределяли между EtOAc (100 мл) и водой (100 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc (2×75 мл). Органику промывали соляным раствором (250 мл), осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (30% EtOAc/гексаны) с получением трет-бутил 6-бромо-3-формилимидазо[1,2-а]пиразин-8-ил(циклопропил)карбамата (1,17 г, 87%) в виде коричневой пены. Н NMR (CDCl, 400 MHz) δ: 10.05 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 3.25 (dddd, 1H, J=6.8, 6.8, 4.0, 4.0 Hz), 1.22 (s, 9H), 0.85-0.90 (m, 2H), 0.69-0.75 (m, 2H). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 382 [M+1].
Пример 179. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-6-(3-трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамата
2
3
3
4
4
+
Смешивали трет-бутил 6-бромо-3-формилимидазо[1,2-а]пиразин-8-ил(циклопропил)карбамат (130 мг, 0,34 ммоль), 3-(трифторометокси)фенил бороновую кислоту (105 мг, 0,51 ммоль), 3М NaCO (1,1 мл, 3,4 ммоль) и DME (4,5 мл). Раствор обезгаживали струей N2 в течение 10 минут. Добавляли Pd(PPh), и данный раствор кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. Раствор распределяли между дихлорометаном (25 мл) и водой (25 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали дихлорометаном (2×25 мл). Органику промывали соляным раствором (50 мл), осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (30-45% EtOAc/гексаны) с получением трет-бутил циклопропил(3-формил-6-(3-трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамата (96 мг, 61%) в виде ярко-желтого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 463 [M+1].
Пример 180. Синтез трет-бутил циклопропил(6-(3-трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамата
+
Трет-бутил циклопропил(6-(3-трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамат (77%) был синтезирован по способу, аналогичному описанному в Примере 179. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 435 [М+1].
Пример 181. Синтез трет-бутил циклопропил(6-(3-фторофенил)-3-формилимидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамата
+
Трет-бутил циклопропил(6-(3-фторофенил)-3-формилимидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамат (28%) был синтезирован по способу, аналогичному описанному в Примере 183. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 435 [M+1].
Пример 182. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-6-(3-(морфолинометил)фенил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамата
2
3
3
4
4
+
Смешивали трет-бутил 6-бромо-3-формилимидазо[1,2-a]пиразин-8-ил(циклопропил)карбамат (100 мг, 0,26 ммоль), 4-[3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил]морфолин (118 мг, 0,39 ммоль), 3М NaCO (1,3 мл, 2,60 ммоль) и DME (3,5 мл). Данный раствор обезгаживали струей N3 в течение 10 минут. Добавляли Pd(PPh), и данный раствор кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. Раствор распределяли между дихлорометаном (25 мл) и водой (25 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали дихлорометаном (2×25 мл). Органику промывали соляным раствором (50 мл), осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством препаративной тонкослойной хроматографии (5% МеОН/дихлорометан) с получением трет-бутил циклопропил(3-формил-6-(3-(морфолинометил)фенил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамата (60 мг, 48%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 478 [M+1].
Пример 183. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-6-((триметилсилил)этинил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамата
3
4
4
+
В 15 мл напорной трубке триэтиламин (912 мкл, 6,56 ммоль) добавляли к трет-бутил 6-бромо-3-формилимидазо[1,2-a]пиразин-8-ил(циклопропил)карбамату (250 мг, 0,66 ммоль), растворенному в безводном ДМФ (2,2 мл). Данный раствор обезгаживали струей N2 в течение 10 минут. Добавляли триметилсилилацетилен (927 мкл, 6,56 ммоль), Pd(PPh) (76 мг, 0,07 ммоль), и меди(I) йодид (25 мг, 0,13 ммоль), и данную реакционную смесь герметизировали и нагревали до 65°С в течение 24 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и затем промывали 10% соляным раствором (4×50 мл) и соляным раствором (50 мл). Органику осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (30% EtOAc/гексаны) с получением трет-бутил циклопропил(3-формил-6-((триметилсилил)этинил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамата (186 мг, 71%) в виде коричневого пенистого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 400 [М+1].
Пример 184. Синтез трет-бутил циклопропил(3-формил-6-((фенилэтинил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамата
+
Трет-бутил циклопропил(3-формил-6-((фенилэтинил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамат (64%) был синтезирован по способу, аналогичному описанному в Примере 183. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 403 [М+1].
Пример 185. Синтез трет-бутил циклопропил(6-этинил-3-формилимидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамата
4
+
Карбонат калия (86 мг, 0,63 ммоль) добавляли к трет-бутил циклопропил(3-формил-6-((триметилсилил)этинил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамату (50 мг, 0,13 ммоль), растворенному в метаноле (2,5 мл). Через 2 часа летучие вещества удаляли в вакууме. Остаток распределяли между дихлорометаном (10 мл) и водой (10 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали дихлорометаном (2×10 мл). Органику промывали соляным раствором (30 мл), осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (30% EtOAc/гексаны) с получением трет-бутил циклопропил(6-этинил-3-формилимидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамата (20 мг, 50%) в виде желтого пенистого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 327 [M+1].
Пример 186. Синтез трет-бутил циклопропил(3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-(3-трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамата
+
Гидантоин (33 мг, 0,33 ммоль) и пиперидин (33 мкл, 0,33 ммоль) добавляли к трет-бутил циклопропил(3-формил-6-(3-трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамату (50 мг, 0,11 ммоль), суспендированному в этаноле (0,5 мл). Данную реакционную смесь герметизировали и облучали в микроволновой печи при 80°С в течение 12 часов. Данный осадок отфильтровывали и промывали этанолом (3 мл) с получением (Z)-трет-бутил циклопропил(3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-(3-трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)карбамата (18 мг, 30%) в виде ярко-желтого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 545 [М+1].
Пример 187. Синтез 5-((8-циклопропиламино)-6-(3-(трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-a]пиразин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Трет-бутил циклопропил(3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-(3-трифторометокси)фенил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамат (15 мг, 0,03 ммоль) растворяли в дихлорометане (0,5 мл) и трифтороуксусной кислоте (0,5 мл). Через 1 час данный раствор концентрировали под струей воздуха. Остаток очищали посредством препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением (Z)-5-((8-циклопропиламино)-6-(3-(трифторометокси)фенил) имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (0,9 мг, 8%).
Пример 188. Синтез трет-бутил циклопропил(3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-(фенилэтинил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамата
+
Гидантоин (24 мг, 0,24 ммоль) и пиперидин (24 мкл, 0,24 ммоль) добавляли к трет-бутил циклопропил(3-формил-6-((фенилэтинил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамату (24 мг, 0,06 ммоль), растворенному в этаноле (1 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 12 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Осадок отфильтровывали и промывали этанолом (3 мл) с получением (Z)-трет-бутил циклопропил(3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-(фенилэтинил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамата (12 мг, 43%) в виде оранжевого/желтого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 485 [М+1].
Пример 189. Синтез (Z)-5-((8-(циклопропиламино)-6-(фенилэтинил)имидазо[1,2-a]пиразин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
2
(Z)-трет-бутил циклопропил(3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-(фенилэтинил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамат (12 мг, 0,03 ммоль) растворяли в дихлорометане (0,3 мл) и трифтороуксусной кислоте (0,3 мл). Через 1 час данный раствор концентрировали под струей воздуха. Остаток растирали с EtO и фильтровали с получением (Z)-5-((8-(циклопропиламино)-6-(фенилэтинил)имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (6 мг, 63%) в виде ярко-желтого твердого вещества.
Пример 190. Синтез (Z)-5-((8-(циклопропиламино)-6-(3-морфолинометил)фенил)имидазо[1,2-a]пиразин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетата
4
+
Гидантоин (152 мг, 1,50 ммоль) и пиперидин (150 мкл, 1,50 ммоль) добавляли к трет-бутил циклопропил(3-формил-6-(3-(морфолинометил)фенил)имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамату (60 мг, 0,13 ммоль), растворенному в этаноле (1 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 4 суток и затем разбавляли водой (10 мл). Супернатант декантировали и экстрагировали дихлорометаном (2×15 мл). Органику промывали соляным раствором (30 мл), осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме до желтого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 560 [M+1].
Неочищенное твердое вещество растворяли в дихлорометане (0,5 мл) и трифтороуксусной кислоте (0,5 мл). Через 1 час данный раствор концентрировали под струей воздуха. Остаток очищали посредством препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением (Z)-5-((8-(циклопропиламино)-6-(3-морфолинометил)фенил)имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетата (5,5 мг, 8% из двух стадий).
Пример 191. Синтез (Z)-5-((8-циклопропиламино)-6-(3-фторофенил)имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Гидантоин (18 мг, 0,17 ммоль) и пиперидин (17 мкл, 0,17 ммоль) добавляли к трет-бутил циклопропил(6-(3-фторофенил)-3-формилимидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)карбамату (23 мг, 0,06 ммоль), растворенному в этаноле (0,3 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 18 ч, и затем концентрировали в вакууме до желтого твердого вещества. Неочищенное твердое вещество растворяли в дихлорометане (0,5 мл) и трифтороуксусной кислоте (1,5 мл). Через 1 час данный раствор концентрировали под струей воздуха. Остаток растирали с этанолом и фильтровали с получением (Z)-5-((8-циклопропиламино)-6-(3-фторофенил)имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона в виде оранжевого/желтого твердого вещества (2,4 мг, 10% из двух стадий).
Пример 192. Синтез родственных соединений
Соединения в последующей таблице были получены с помощью вышеописанных способов, путем выбора подходящих исходных материалов, как это очевидно для специалистов в данной области. В Таблице 28B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 28А.
1
2
2
3
3
2
Описанные на Фигуре 7 химические способы могут быть использованы для получения аналогов, замещенных трифторометильной группой. Имеющийся в продаже 2-амино-3,5-дибромопиразин и имеющийся в продаже 3-бромо-1,1,1-трифтороацетон могут реагировать друг с другом при 50°С в растворителе, таком как диоксин (условия ранее описаны в WO2003/82817), с получением соединения 3. Соединение 3 может реагировать с амином RNH с получением 4. Этот материал может быть защищен boc группой путем реакции 4 с реагентом, таким как BocO, с получением 5. Этот материал может быть дополнительно превращен в 6 при вильсмайеровских (vilsmeir) условиях в присутствии POCl. Соединение 6 может реагировать с различными реагентами, такими как бороновые кислоты или эфиры W-В(OR), при условиях Сузуки (Suzuki) с образованием молекулы 7.
5
6
5
5
Другие аналоги 7 могут быть получены путем нагревания 6 с аминами или анилинами RRNH, спиртами или фенолами ROH, тиолами или тиофенолами RSH, в присутствии основания или кислоты. Соединение 8 может быть получено путем нагревания 7 с гидантоином в этаноле в присутствии основания, такого как пиперидин.
Общие способы
Если не указано иное, различные заместители данных соединений определяются таким же способом как и соединение формулы II/II' данного изобретения.
Описанные на Фигуре 4 и Фигуре 5 химические способы могут быть использованы для получения различных замещенных соединений Формулы II.
7
8
4
Замещенный аминопиразол 1 может реагировать с изотиоцианатом 2 с образованием промежуточного соединения 3. Соединение 3 может быть циклизировано с 4 в присутствии основания, такого как гидроксид натрия. Соединение 4 может быть алкилировано R7Гало в присутствии основания. Соединение 5 может быть превращено в соединение 6 с использованием оксихлорида фосфора. Молекула 7 может быть получена путем присоединения амина RRNH к молекуле 6 в растворителе, таком как NMP или ДМФ. Соединение 8 может быть получено путем реакции соединения 7 с ДМФ и оксихлоридом фосфора при условиях реакции Вильсмайера (Vilsmeier). Альдегид 8 может быть превращен в две стадии в замещенный кетон 8b по реакции с реактивом Гриньяра (Grignard) RMgX, с последующей реакцией с окислителем, таким как DCC, или с использованием условий реакции Шверна (Swern).
Соединение 8 и 8а, или 8b и 8а может реагировать при нагревании в растворителе, таком как этанол, и в присутствии основания, такого как пиперидин, с образованием соединения 9. Окисление 9 окислителем, таким как мета-хлоропербензойная кислота или оксон, может дать соединение 10, которое может содержать разные количества сульфида (n=0), сульфоксида (n=1) или сульфона (n=2).
Химические способы, представленные на Фигуре 5, могут быть использованы для получения различных замещенных аналогов соединений формулы II.
7
8
7
8
2
7
2
3
7
Соединение 10 может смешиваться при комнатной температуре или нагреваться с аминами RRNH с образованием соединения 11. Соединение 10 может реагировать с гидразинами RRN-NH с образованием соединения 12. Соединение 10 может реагировать со спиртами или фенолами ROH в присутствии основания, такого как NaH или KCO с образованием соединения 13. Соединение 10 может реагировать с тиолами или тиофенолами RSH, с основанием или без него, с образованием соединения 14.
7
7
2
3
2
3
Химические способы, описанные на Фигуре 6, могут быть использованы для получения аналогов, замещенных арильной или гетероарильной группами. Соединение 7 может реагировать с бороновыми эфирами или кислотами W-B(OR) или оловоорганическими соединениями W-Sn(R) в присутствии три(2-фурил)фосфина, медь(I)тиофен-2-карбоксилата и Pddba, или с использованием условий, описанных ранее в Organic Letters 2002, vol 4(6), pp.979-981. Соединение 15 может быть превращено в соединение 18 с использованием химических способов, схожих с описанным на Фигуре 4.
Пример 193. Синтез 2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4(3Н)-она
+
Данный материал был получен в соответствии с процедурой, опубликованной в патенте США под номером 3846423. Анализ способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS) (ES): >95% чистоты, m/z 183 [М+Н].
Пример 194. Синтез 4-хлоро-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазина
+
В круглодонной колбе, снабженной магнитной мешалкой, 2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4(3Н)-он (1,0 эквивал., 10,43 г, 57,24 ммоль) суспендировали в ацетонитриле (100 мл). Добавляли оксихлорид фосфора (4,0 эквивал., 21 мл, 229,4 ммоль) и триэтиламин (1,05 эквивал., 8,4 мл, 60,27 ммоль), и данную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3,5 часов, и в конце этого периода LCMS указал на завершение реакции. Смесь охлаждали и медленно выливали в колотый лед (конечный полный объем составлял около 600 мл). Твердое вещество фильтровали, промывали водой и высушивали в вакуумной печи с получением 4-хлоро-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазина в виде желтовато-коричневого твердого вещества (8,15 г, 71% выход). LCMS (ES): >97% чистоты, m/z 201 [М+Н].
Пример 195. Синтез N-циклопропил-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-амина
+
4-хлоро-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин (1,0 эквивал., 6,26 г, 31,19 ммоль) суспендировали в безводном NMP (50 мл). По каплям, с помощью шприца добавляли циклопропиламин (1,5 эквивал., 3,2 мл, 46,26 ммоль). Внутренняя температура повысилась до 47°С. Данную смесь перемешивали без какого-либо наружного охлаждения в течение 1 часа. Добавляли дополнительное количество циклопропиламина (1 мл), и смесь перемешивали еще в течение 1,5 часов. Данную смесь медленно выливали в воду (500 мл) при перемешивании. Результирующее твердое вещество фильтровали, промывали водой и высушивали в вакуумной печи с получением N-циклопропил-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-амина в виде желтовато-коричневого твердого вещества (5,44 г, 79% выход). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 222 [М+Н].
Следующие молекулы были получены с использованием химических способов, схожих с представленными в Примере 195. Соединения анализировались способом LCMS.
Пример 196. Синтез 4-(циклопропиламино)-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-карбальдегида
+
N-циклопропил-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-амин (1,0 эквивал., 3,10 г, 14,00 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (50 мл) под атмосферой азота. По каплям добавляли оксихлорид фосфора (5,0 эквивал., 6,4 мл, 69,9 ммоль) в течение 5 минут. Внутренняя температура повысилась до 45°С. Данную реакционную смесь перемешивали на масляной бане при 70°С в течение 4,5 часов. Смесь охлаждали и вводили по каплям в раствор 6N NaOH (150 мл), охлажденный на ледяной бане. Скорость введения регулировалась таким образом, чтобы внутренняя температура водного NaOH была ниже 16°С. В конце введения, данную смесь нейтрализовали путем медленного добавления 6N HCl до достижения рН=5-6. Результирующее твердое вещество фильтровали, промывали водой и высушивали в вакуумной печи в течение ночи. 4-(циклопропиламино)-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-карбальдегид был выделен в виде желто-коричневого твердого вещества (9,26 г, 93%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 250 [М+Н].
Следующие молекулы были получены с использованием химических способов, схожих с приведенными в Примере 196. Соединения анализировались способом LCMS.
Пример 197. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
4-(циклопропиламино)-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-карбальдегид (1,0 эквивал., 3,00 г, 12,03 ммоль) суспендировали в этаноле (40 мл). Добавляли гидантоин (1,5 эквивал., 1,81 г, 18,08 ммоль) и пиперидин (1,5 эквивал., 1,78 мл, 18,01 ммоль). Данную смесь кипятили с обратным холодильником при энергичном магнитном перемешивании в течение 3 часов. После охлаждения реакционной смеси осадок отфильтровывали, промывали этанолом, затем смесью этанола и воды (1:1). После высушивания в вакууме, (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион был выделен в виде желтого твердого вещества (3,80 г, 95%). LCMS (ES): >85% чистоты, m/z 332 [М+Н].
Следующие молекулы были получены с использованием химических способов, схожих с приведенными в Примере 197. Соединения анализировались способом LCMS.
Пример 198. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
+
(Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион (1,0 эквивал., 3,00 г, 9,05 ммоль) суспендировали в дихлорометане (150 мл). Добавляли m-cpba (77% чистоты по шкале, 5,0 эквивал., 10,1 г, 45,06 ммоль), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь разбавляли путем добавления дихлорометана (500 мл). Твердое вещество фильтровали и промывали дихлорометаном. После высушивания (1:1) смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(никлопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона была выделена в виде желтого твердого вещества (2,67 г, 81%). LCMS (ES): >85% чистоты, m/z 364 [М+Н] и m/z 398 [М+Н]. Данная смесь была использована на следующей стадии без какого-либо разделения данных молекул.
Следующие смеси сульфонов и сульфоксидов были получены с использованием химических способов, схожих с приведенными в Примере 198. Соединения анализировались способом LCMS.
Пример 199. Синтез (Z)-5-((2-(3-хлорофениламино)-4-(циклопропиламино)-пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона.
+
(1:1) смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (15 мг) смешивалась с 3-хлороанилином (0,1 мл) в NMP (0,2 мл), и данную смесь нагревали в микроволновой печи при 120°C в течение 15 минут. Добавляли метанол, и результирующее твердое вещество отфильтровывали и высушивали с получением (Z)-5-((2-(3-хлорофениламино)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона в виде твердого вещества (7 мг). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 411 [М+Н].
Пример 200. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(циклопропилметиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен) имидазолидин-2,4-диона
+
(1:1) смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (36 мг) суспендировали в NMP (0,2 мл). Добавляли циклопропилметиламин (88 мкл), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Добавляли воду и метиленхлорид, и результирующий осадок фильтровали. После растирания в смеси этилацетата и гексанов, (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(циклопропилметиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион был выделен в виде желтого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 355 [М+Н].
Пример 201. Синтез (Z)-5-((2-(3-хлорофенокси)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
2
3
+
(1:1) Смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (1,0 эквивал., 25 мг, 0,0704 ммоль) объединяли в склянке с 3-хлорофенолом (5,0 эквивал., 45 мг, 0,35 ммоль) и KCO (5,0 эквивал., 48 мг, 0,347 ммоль) в NMP (0,2 мл). Данную смесь перемешивали при 90°С в течение 1 часа. Добавляли воду, и результирующее твердое вещество фильтровали и высушивали. Растирание в смеси этилацетата и гексанов с последующей фильтрацией дало (Z)-5-((2-(3-хлорофенокси)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион в виде желто-коричневого твердого вещества (20 мг, 69%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 412 [М+Н].
Пример 202. Синтез (1r,4r)-4-(4-(циклопропиламино)-8-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-иламино)-N-метилциклогексанкарбоксамида
2
+
(1r,4r)-4-(4-(циклопропиламино)-8-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-иламино)циклогексанкарбоновую кислоту (1 эквивал., 12 мг, 0,028 ммоль) смешивали в NMP (0,4 мл) с метиламин гидрохлоридом (8 эквивал., 15 мг, 0,225 ммоль), HOBt.HO (2 эквивал., 8 мг, 0,056 ммоль), DIEA (4 эквивал., 14 мкл, 0,113 ммоль) и EDCI (4 эквивал., 22 мг, 0,113 ммоль). Данную смесь перемешивали при 70°С в течение 2,5 часов. Добавляли воду, и осадок фильтровали с получением (1r,4r)-4-(4-(циклопропиламино)-8-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-иламино)-N-метилциклогексанкарбоксамида. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 440 [М+Н].
Пример 203. Синтез (1r,4r)-4-(4-(циклопропиламино)-8-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-иламино)циклогексанкарбоксамида
2
+
(1r,4r)-4-(4-(Циклопропиламино)-8-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-иламино)циклогексанкарбоновую кислоту (1 эквивал., 12 мг, 0,028 ммоль) смешивали в NMP (0,4 мл) с хлоридом аммония (8 эквивал., 12 мг, 0,225 ммоль), HOBt.HO (2 эквивал., 8 мг, 0,056 ммоль), DIEA (4 эквивал., 14 мкл, 0,113 ммоль) и EDCI (4 эквивал., 22 мг, 0,113 ммоль). Данную смесь перемешивали при 70°С в течение 2,5 часов. Добавляли воду, и осадок фильтровали с получением (1r,4r)-4-(4-(циклопропиламино)-8-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-иламино)циклогексанкарбоксамида. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 426 [M+H].
Пример 204. Синтез (Z)-5-((2-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
(1:1) Смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (1,0 эквивал., 16 мг, 0,0451 ммоль) подвергалась реакции с транс-1,4-диаминоциклогексаном (20,0 эквивал., 103 мг, 0,902 ммоль) в NMP (0,4 мл) при комнатной температуре в течение 3 часов. Добавляли воду и метанол, и данный материал очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Выпаривание по технологии Genevac дало (Z)-5-((2-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат (15 мг). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 398 [М+Н].
Пример 205. Синтез трет-бутил циклопропил(2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-ил)карбамата
4
+
Ди-трет-бутил дикарбонат (327 мг, 1,50 ммоль) и DMAP (6 мг, 0,05 ммоль) добавляли к N-циклопропил 2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-амину (221 мг, 1 ммоль), растворенному в дихлорометане (4 мл). Через 15 часов данный раствор разбавляли EtOAc (100 мл) и промывали последовательно водой (3×100 мл) и соляным раствором (100 мл). Органический слой осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме до оранжевого масла. Остаток очищали способом колоночной флеш-хроматографии (10% EtOAc/гексаны) с получением трет-бутил циклопропил(2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-ил)карбамата (368 мг, 79%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 322 [М+1].
Пример 206. Синтез трет-бутил циклопропил(2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-ил)карбамата
2
2
3
2
2
4
4
2
+
Замечание: ТГФ обезгаживали струей N в течение 10 минут в отдельной колбе. Смешивали трет-бутил циклопропил(2-(метилтио)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-ил)карбамат (100 мг, 0,31 ммоль), 3-(трифторометокси)фенил бороновую кислоту (154 мг, 0,74 ммоль), три(2-фурил)фосфин (86 мг, 0,37 ммоль), медь(1)тиофен-2-карбоксилат (167 мг, 0,88 ммоль), Pddba (24 мг, 0,03 ммоль). Колбу откачивали и повторно наполняли N. Добавляли ТГФ (3,7 мл), и данную реакционную смесь нагревали до 50°С в течение 5 суток. Раствор разбавляли EtO (40 мл) и промывали 10% NHOH (3×30 мл). Органический слой осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Твердый остаток растирали с EtO и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (2.5-5% EtOAc/гексаны) с получением трет-бутил циклопропил(2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-ил)карбамата (116 мг, 85%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 436 [M+1].
Пример 207. Синтез 4-(циклопропиламино)-2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-карбальдегида
+
+
Трет-бутил циклопропил(2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-4-ил)карбамат растворяли в дихлорометане (0,7 мл) и трифтороуксусной кислоте (0,7 мл). Через 1 час данный раствор концентрировали под струей воздуха с получением неочищенного 4-(циклопропиламино)-2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-карбальдегида, который использовался без дополнительной очистки. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 336 [M+1]. 4-(циклопропиламино)-2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-карбальдегид (87 мг, 0,26 ммоль) растворяли в ДМФ (0,8 мл). По каплям добавляли оксихлорид фосфора(V) (318 мкл, 3,47 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 70°С. Через 6 часов данный раствор добавляли по каплям к 6М NaOH (~10 мл), охлажденному до 0°С. Величину рН устанавливали на уровне 7 путем добавления 12N HCl. Осадок отфильтровывали и высушивали в вакууме с получением 4-(циклопропиламино)-2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-карбальдегида (71 мг, 75%) в виде желто-коричневого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 364 [M+1].
Пример 208. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-a][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
(Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(3-(трифторометокси)фенил)пиразоло[1,5-a][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион был получен с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 197. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 446 [M+1].
Следующие соединения были получены с использованием химических способов, описанных в Примере 199, Примере 200, Примере 201, Примере 202, Примере 203, Примере 204, Примере 205, Примере 206, Примере 207 и Примере 208, с использованием подходящих реагентов. Общие способы для получения таких соединений включены в представленные здесь Фигуры 3-14. Реагенты, несущие две реакционные аминные группы использовались, в общем, как моно-Вос защищенные. Защитная группа была удалена путем реакции с трифтороуксусной кислотой в метиленхлориде перед очисткой. Соединения выделялись посредством фильтрации после добавления воды или метанола. Некоторые соединения очищались посредством препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии и выделялись как TFA соли после выпаривания по технологии Genevac. Соединения анализировались способом жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LCMS). В Таблице 33B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 33А.
Схема 1
Соединения, описанные в последующей таблице, могут быть получены с использованием химических способов, описанных на Фигуре 7.
Следующие молекулы могут быть получены с использованием химических способов, схожих с представленными в Примере 206, Примере 207 и Примере 208.
2
3
Молекулы, описанные на Фигуре 8, были получены с использованием химических способов, описанных в Примере 201, с использованием оснований, таких как KCO или гидрид натрия.
Другие
8
7
4
2
4
Химические способы, описанные на Фигуре 9, могут быть использованы для получения аналогов формулы 11. 4-бромо-6-хлоропиридазин-3-амин 1 может подвергаться реакции с 2 с использованием условий, аналогичных получению, описанному в патентной заявке WO2009/100375 с образованием соединения 3. Соединение 3 может реагировать с амином RRNH с образованием соединения 4. Соединение 4 может превращаться в соединение 5 путем нуклеофильных замещений аминами, анилинами, спиртами, фенолами или тиофенолами, в присутствии основания, или путем превращений, катализируемых переходными металлами, таких как сочетание Сузуки (Suzuki) с бороновой кислотой или эфирами формулы WB(OR). Соединение 5 может быть превращено в соединение 6 путем восстановления LiAlH. Спирт 6 может быть превращен в альдегид 7 путем окисления DCC или при условиях Шверна (Swern). Соединение 5 может реагировать с металлоорганическим реагентом, иллюстрируемым реактивом Гриньяра (Grignard) RMgX, с получением вторичного спирта 8. Это соединение может быть превращено в алкилкетон 9 при условиях, аналогичных условиям, используемым для превращения 6 в 7. Соединения 7 и 9 оба могут быть превращены в соединение 11 путем конденсации с 10 в растворителе, таком как этанол, и в присутствии основания, такого как пиперидин.
Соединения, описанные в последующей таблице, могут быть получены с использованием химических способов, описанных на Фигуре 9.
Фигуры 10-14 иллюстрируют другие синтетические способы, которые могут использоваться для получения соединений данного изобретения.
Пример 209. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
3
2
4
Стадия А. К 5,7-дихлоропиразоло[1,5-а]пиримидину (200 мг, 1,06 ммоль) в ацетонитриле добавляли EtN (148 мкл, 1,06 ммоль) и циклопропиламин (75 мкл, 1,06 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение ночи. Смесь концентрировали под сниженным давлением, растворяли в дихлорометане и промывали водой. Результирующий органический слой осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением с получением 156 мг 5-хлоро-N-циклопропилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амина (70% выход). LCMS (M+1=209)
3
3
2
4
Стадия В. К 5-хлоро-N-циклопропилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амину (156 мг, 0,75 ммоль) в ДМФ добавляли POCl (205 мкл, 2,25 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Для гашения POCl добавляли лед, и затем данную смесь нейтрализовали 1 М NaOH. Добавляли дихлорометан, и продукт экстрагировали три раза. Органический слой осушивали над NaSO и концентрировали под сниженным давлением с получением 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. Некоторое количество остаточного ДМФ удалить не удалось. LCMS (М+1=237)
Стадия С. К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (177 мг, 0,75 ммоль) в 1,4-диоксане добавляли 3-хлороанилин (397 мкл, 3,75 ммоль). Данную смесь нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 60 минут. Осадок отфильтровывали, и фильтрат обрабатывали способом тонкослойной хроматографии (1% метанол/дихлорометан) с получением 26 мг (11% выход) 5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. LCMS (М+1=328)
Стадия D. К 5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (26 мг, 0,08 ммоль) в EtOH добавляли гидантоин (8 мг, 0,08 ммоль) и пиперидин (8 мкл, 0,08 ммоль). Данную смесь перемешивали при 70°С в течение 3 суток. Нерастворившиеся вещества отфильтровывали, и фильтрат концентрировали под сниженным давлением. Затем фильтрат растворяли в метаноле и очищали способом высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=410)
Пример 210. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(изобутиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Стадия А. К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (440 мг, 1,86 ммоль) в EtOH добавляли тиазолидин-2,4-дион (458 мг, 3,91 ммоль) и пиперидин (208 мкл, 2,05 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение ночи. Утром добавляли 3 мл изопропанола, вместе с 218 мг тиазолидин-2,4-диона, 94 мкл пиперидина. Температуру повышали до 90°С и оставляли на ночь. Осадок фильтровали в горячем состоянии и растворяли в метаноле. Добавляли 1 мл 1М HCl, и смесь обрабатывали ультразвуком. Осадок фильтровали и промывали метанолом с получением 340 мг (54% выход) 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона в виде желтого порошка. LCMS (М+1=336)
Стадия В. К 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диону (30 мг, 0,09 ммоль) в N-метилпирролидиноне (NMP) добавляли 2-метилпропан-1-амин (20 мг, 0,268 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 130°С в течение ночи. Смесь разбавляли метанолом и обрабатывали способом высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((7-(циклопропиламино)-5-(изобутиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=373)
Пример 211. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(2-гидроксипропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Титульное соединение было получено с использованием способа, аналогичного описанному в Примере 210. LCMS (M+1=375)
Пример 212. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(диэтиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Титульное соединение было получено с использованием способа, аналогичного описанному в Примере 210. LCMS (М+1=373)
Пример 213. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(диметиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Титульное соединение было получено с использованием способа, аналогичного описанному в Примере 210. LCMS (M+1=345).
Пример 214. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(метил(1-метилпирролидин-3-ил)амино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Титульное соединение было получено с использованием способа, аналогичного описанному в Примере 210. LCMS (М+1=414)
Пример 215. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(2-фтороэтиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Титульное соединение было получено с использованием способа, аналогичного описанному в Примере 210. LCMS (M+1=363)
Пример 216. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(4-метил-1,4-диазепан-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Титульное соединение было получено с использованием способа, аналогичного описанному в Примере 210. LCMS (M+1=414)
Пример 217. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(2-(диэтиламино)этиламино)-пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Титульное соединение было получено с использованием способа, аналогичного описанному в Примере 210. LCMS (М+1=416)
Пример 218. Синтез 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
К 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диону (20 мг, 0,06 ммоль) в NMP добавляли 3-хлороанилин (38 мкл, 0,36 ммоль) и несколько гранул п-толуолсульфоновой кислоты. Данную реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 180°С в течение 1,5 часов. Смесь фильтровали и обрабатывали способом высокоэффективной жидкостной хроматографии, затем препаративной тонкослойной хроматографии (1% метанол/дихлорометан) с получением 5-((5-(3-хлорофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона в виде желтого твердого вещества. LCMS (M+1=427)
Пример 219. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-2,5-диметилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Стадия А. 7-(циклопропиламино)-2,5-диметилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид получали из N-циклопропил-2,5-диметилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амина с использованием способов, аналогичных описанным в Примере 209, стадия В. LCMS (M+1=231)
Стадия В. К 7-(циклопропиламино)-2,5-диметилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (0,25 ммоль) в ДМФ добавляли тиазолидин-2,4-дион (88 мг, 0,75 ммоль) и пиперидин (25 мкл, 0,25 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь обрабатывали способом высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением 5-((7-(циклопропиламино)-2,5-диметилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=330)
Пример 220. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)тиазолидин-2,4-диона
Стадия А. 7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид получали из N-циклопропилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амина с использованием способов, описанных в Примере 219, стадия А. LCMS (М+1=203)
Стадия В. Титульное соединение было получено из 7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида с использованием способов, аналогичных описанным в Примере 219, стадия В, за исключением того, что данный продукт выделялся путем фильтрации, промывался метанолом и высушивался на воздухе. LCMS (М+1=302)
Пример 221. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Стадия А. К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (400 мг, 1,70 ммоль) в EtOH добавляли гидантоин (186 мг, 1,86 ммоль) и пирролидин (14 мкл, 0,17 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение выходных дней. Осадок фильтровали и высушивали на воздухе с получением 180 мг (33% выход) 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=319).
3
Стадия В. К 5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (30 мг, 0,09 ммоль) в 1,4-диоксане добавляли 1-(пиридин-2-ил)пиперазин (58 мкл, 4,10 ммоль) и EtN (13 мкл, 0,09 ммоль). Затем данную реакционную смесь нагревали при 120°С в течение 35 минут в микроволновой печке. Растворитель удаляли под сниженным давлением, и смесь растворяли в метаноле. Твердое вещество выделяли путем фильтрации, затем высушивали на воздухе с получением 11 мг (26% выход) 5-((7-(циклопропиламино)-5-(4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=446)
Пример 222. Синтез 5-((7-(циклопропиламино)-5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Титульное соединение было получено с использованием способов, аналогичных описанным в Примере 221, стадия В, со следующим изменением. Растворитель удалялся под сниженным давлением, и данную смесь растворяли в метаноле. Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали под сниженным давлением с получением 18 мг (48% выход) продукта в виде желтого твердого вещества. LCMS (М+1=397)
Пример 223. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(3,4-диметилбензиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
Раствор (3,4-диметилфенил)метанамина в NMP (106 мкл, 0,4 М, 1,5 эквивал., 0,042 ммоль) переносили в стеклянный реакционный сосуд. Добавляли раствор (1:1) смеси (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона в NMP (100 мкл, 0,282 М, 1,0 эквивал., 0,0282 ммоль). Данную смесь нагревали при 80°С в течение 5 часов. Добавляли NMP (0,7 мл), и данный раствор подвергали очистке способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Выпаривание по технологии Genevac дало (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(3,4-лиметилбензиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион в виде твердого вещества (5,8 мг). LCMS (ES): >85% чистоты, m/z 419 [М+Н].
Пример 224. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(1-(пиридин-2-ил)этиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
(2:1) смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (1,0 эквивал., 3,6 г, 10,08 ммоль) суспендировали в 2-пропаноле (40 мл). Добавляли Rac-1-пиридинил-2-ил-этиламин (2,0 эквивал., 2,47 г, 20,22 ммоль), и данную смесь перемешивали при 90°С в течение 6,5 часов. Смесь охлаждали, и твердое вещество выделяли путем фильтрации. После высушивания в вакуумной печи, (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(1-(пиридин-2-ил)этиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион был выделен в виде бледно-желтого твердого вещества (3,60 г, 88%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 406 [М+Н].
Соединения в последующей таблице были получены с использованием процедур, описанных в Примере 223, Примере 224, Примере 199 и Примере 200. Когда в качестве соли использовался аминный реагент, к данной реакционной смеси добавляли стехиометрическое количество DIEA. В Таблице 37B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 37А.
Пример 225. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(1Н-имидазол-1-ил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
Смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино) -2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а] [1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (10 мг, 0,028 ммоль) смешивали с имидазолом (6 мг, 0,084 ммоль) в изопропаноле (1 мл). Данную смесь перемешивали при 80°С в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и результирующее твердое вещество отфильтровывали и промывали изопропанолом. Твердое вещество высушивали под вакуумом с получением (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(1Н-имидазол-1-ил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона в виде желтого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 352 [M+H].
Пример 226. Синтез (Z)-1-(4-(циклопропиламино)-8-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-5-карбоновой кислоты
+
Смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (10 мг, 0,028 ммоль) смешивали с 1Н-бензо[d]имидазол-5-карбоновой кислотой (20 мг, 0,140 ммоль) в изопропаноле (1 мл). Данную смесь перемешивали при нагревании в микроволновой печи при 150°С в течение 20 минут. Растворитель удаляли с получением (Z)-1-(4-(циклопропиламино)-8-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-5-карбоновой кислоты как неочищенной смеси, которую переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 446 [М+Н].
Пример 227. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(5-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
К (Z)-1-(4-(циклопропиламино)-8-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-5-карбоновой кислоте (15 мг, 0,034 ммоль) в ДМФ (2 мл) добавляли EDCI (65 мг, 0,34 ммоль), HOBt (46 мг, 0,34 ммоль), и 1-этилпиперазин (44 мкл, 0,34 ммоль). Данную смесь перемешивали при 50°С в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через PTFE фильтр и очищали способом масса-направленной LC/MS с получением (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(5-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона в виде TFA соли. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 542 [M+H].
Пример 228. Синтез (Z)-1-(4-(циклопропиламино)-8-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-ил)-1Н-имидазол-4-карбальдегида
+
Смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (20 мг, 0,056 ммоль) смешивали с 1Н-имидазол-4-карбальдегидом (16 мг, 0,168 ммоль) в изопропаноле (2 мл). Данную смесь перемешивали при микроволновом нагревании при 150°С в течение 20 минут. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и растворитель удаляли путем роторного выпаривания с получением (Z)-1-(4-(циклопропиламино)-8-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-ил)-1Н-имидазол-4-карбальдегида в виде неочищенной смеси, которую переносили на последующую стадию без дополнительной очистки. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 380 [М+Н].
Пример 229. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(4-(пирролидин-1-илметил)-1Н-имидазол-1-ил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К (Z)-1-(4-(циклопропиламино)-8-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-2-ил)-1Н-имидазол-4-карбальдегиду (7 мг, 0,018 ммоль) в DCE (1 мл) добавляли пирролидин (10 мг, 0,144 ммоль) и натрий триацетоксиборогидрид (36 мг, 0,144 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при микроволновом нагревании при 120°С в течение 10 минут. Разбавляли ДМСО (1 мл) и фильтровали через PTFE фильтр. Очищали способом масса-направленного LC/MS с получением (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(4-(пирролидин-1-илметил)-1Н-имидазол-1-ил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона в виде TFA соли. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 435 [М+Н]+
Соединения в последующей таблице были получены с использованием химических способов, описанных в Примерах 225-229. В Таблице 38B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 38А.
Пример 230. Синтез (Z)-5-((2-(3-хлорофенокси)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
2
3
+
(1:1) Смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (1,0 эквивал., 25 мг, 0,0704 ммоль) смешивали в склянке с 3-хлорофенолом (5,0 эквивал., 45 мг, 0,35 ммоль) и KCO (5,0 эквивал., 48 мг, 0,347 ммоль) в NMP (0,2 мл). Данную смесь перемешивали при 90°С в течение 1 часа. Добавляли воду, и результирующее твердое вещество фильтровали и высушивали. Растирание в смеси этилацетата и гексанов с последующей фильтрацией дало (Z)-5-((2-(3-хлорофенокси)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион в виде желто-коричневого твердого вещества (20 мг, 69%). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 412 [М+Н].
Следующие соединения были получены с использованием химических способов, описанных в Примере 230. В Таблице 39B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 39А.
Пример 231. Синтез (Z)-5-((2-(бензилокси)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Бензиловый спирт (14,2 мкл, 0,138 ммоль) растворяли в NMP (0,2 мл). Добавляли гидрид натрия (60%, 5,5 мг, 0,138 ммоль), и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Добавляли (1:1) смесь (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона и (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (10 мг, 0,027 ммоль), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Добавляли воду, и материал экстрагировали этилацетатом. После концентрирования на роторном испарителе, добавление метанола дало осадок, который фильтровали и высушивали. (Z)-5-((2-(бензилокси)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион был выделен в виде твердого вещества (5,6 мг). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 392 [М+Н]+.
Следующие соединения были получены с использованием условий, схожих с таковыми в Примере 231. В Таблице 40B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 40А.
Пример 232. Синтез 3-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)-1,1-диметилмочевина 2,2,2-трифтороацетата
(Z)-5-((5-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат (10 мг) и DIEA (1,2 эквивал., 4,1 мкл) смешивали в безводном NMP (0,1 мл). Добавляли диметилкарбаминовый хлорид (1,0 эквивал., 1,8 мкл), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли NMP (1,5 мл) и несколькими каплями воды. Данное соединение очищали посредством препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии и выделяли после выпаривания по технологии Genevac. 3-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)-1,1-диметилмочевина 2,2,2-трифтороацетат.LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 468 [M+H]+. Z:E отношение: 86:13.
Пример 233. Синтез N-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)ацетамида
(Z)-5-((5-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат (1,0 эквивал., 10 мг, 0,0196 ммоль) и DIEA (1,2 эквивал., 4 мкл, 0,0229 ммоль) растворяли в NMP (0,1 мл). Добавляли уксусный ангидрид (1,0 эквивал., 2 мкл, 0,0211 ммоль), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду, и результирующий осадок фильтровали и высушивали с получением N-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)ацетамида в виде твердого вещества (8 мг). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 439 [M+H]+.
Пример 234. Синтез N-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)пропионамид 2,2,2-трифтороацетата
Z)-5-((5-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат (1,0 эквивал., 10 мг, 0,0195 ммоль) суспендировали в NMP (0,05 мл). Добавляли NMP раствор пропионовой кислоты (1,2 эквивал., 60 мкл 0,4 М раствор, 0,0234 ммоль), HOBt (1,5 эквивал., 4 мг, 0,030 ммоль), DIEA (2,5 эквивал., 8 мкл, 0,048 ммоль) и EDCI (1,5 эквивал., 6 мг, 0,03 ммоль), и данную смесь перемешивали при 70°С в течение 1,5 часов. Добавляли воду и NMP, и продукт очищали способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Выпаривание по технологии Genevac дало N-((1r,4r)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((Z)-(2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло [1,5-а]пиримидин-5-иламино)циклогексил)пропионамид 2,2,2-трифтороацетат (2,8 мг). LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 453 [М+Н]+.
Пример 235. Синтез (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-((1r,4r)-4-(изобутиламино)циклогексиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетата
3
(Z)-5-((2-((1r,4r)-4-аминоциклогексиламино)-4-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат (1,0 эквивал., 10 мг, 0,025 ммоль) суспендировали в дихлороэтане. Добавляли изобутиральдегид (4 эквивал., 9,2 мкл, 0,101 ммоль), DIEA (1,0 эквивал., 0,025 ммоль) и NaBH(OAc) (4 эквивал., 21 мг, 0,101 ммоль), и данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь разбавляли водой и NMP, и подвергали очистке способом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Выпаривание по технологии Genevac дало (Z)-5-((4-(циклопропиламино)-2-((1r,4r)-4-(изобутиламино)циклогексиламино)пиразоло[1,5-а][1,3,5]триазин-8-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион 2,2,2-трифтороацетат в виде твердого вещества (4,6 мг). LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 454 [М+Н]+.
Соединения в последующей таблице были получены с использованием процедур, описанных в Примерах 232-235 и Примерах 30 и 31, с использованием подходящих исходных аминов и карбоновых кислот, ацил хлоридов, сульфамоил хлоридов, сульфонил хлоридов, изоцианатов и хлороформиатов. В Таблице 41B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 41А.
Пример 236. Синтез (Z)-5-((5-(3-хлорофенокси)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
2
4
+
Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (1,0 эквивал., 49 мг, 0,145 ммоль) смешивали в склянке с NMP (0,2 мл), 3-хлорофенолом (5,0 эквивал., 93 мг, 0,274 ммоль) и карбонатом калия (5,0 эквивал., 100 мг, 0,723 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Добавляли воду, и результирующий смолистый материал экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу осушивали над NaSO, и летучие вещества удаляли в вакууме. Результирующий NMP раствор подвергали реакции с HCl 4N раствором в диоксане (5 мл) при комнатной температуре в течение одного часа, в конце которого мониторинг по способу LCMS указал на завершение данной реакции. Реакционную смесь обрабатывали водой и 6N NaOH и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Твердое вещество фильтровали и высушивали с получением неочищенного 5-(3-хлорофенокси)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида в виде твердого вещества (31 мг). Данный материал нагревали с гидантоином (30 мг), пиперидином (30 мкл) в этаноле (1 мл) в склянке при 90°С в течение семи часов. Добавляли воду, и данный материал фильтровали, промывали этанолом, смесью этанол/вода и высушивали. (Z)-5-((5-(3-хлорофенокси)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион был выделен в виде твердого вещества (43 мг, 38% из 2 стадий).). LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 411 [М+Н].
Следующие соединения были получены с использованием химических способов, описанных в Примере 236. В Таблице 42B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 42А.
Пример 237. Синтез 4-(2-(2-хлоро-3-нитрофенокси)этил)морфолина
2
3
2
4
2-хлоро-3-нитрофенол (1 г, 5,8 ммоль) растворяли в ДМФ (6 мл). Добавляли KCO (1,6 г, 11,5 ммоль), и данный раствор изменял цвет от желтого к красному. Добавляли 4-(2-хлороэтил)морфолин гидрохлорид (1,07 г, 5,8 ммоль), и раствор перемешивали в течение 15 часов. Реакционную смесь выливали в НО (30 мл) и экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Органику промывали IN NaOH (100 мл) и соляным раствором (100 mL) и затем осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 4-(2-(2-хлоро-3-нитрофенокси)этил)морфолина (1,4 г, 87%) в виде золотистого масла.
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 237. Все соединения анализировались способом LCMS.
Пример 238. Синтез 2-хлоро-3-(2-морфолиноэтокси)анилина
2
4-(2-(2-хлоро-3-нитрофенокси)этил)морфолин (873 мг, 3,1 ммоль) растворяли в толуоле (12 мл). Аммоний формиат (866 мг, 13,7 ммоль) растворяли в НО (12 мл) и добавляли. Добавляли порошок железа (<10 микрон, 766 мг, 13,7 ммоль), и данную реакционную смесь помещали на 120°С масляную баню. Через 1,25 ч раствор охлаждали до 23°С и фильтровали через целитовую подушку с элюированием 10% МеОН/дихлорометан (250 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме, и остаток очищали способом колоночной флеш-хроматографии с получением 2-хлоро-3-(2-морфолиноэтокси)анилина (503 мг, 75%) в виде золотистого масла.
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 238. Все соединения анализировались способом LCMS.
Пример 239. Синтез 2-хлоро-4-(1H-пиразол-1-ил)анилина
2
3
2-хлоро-4-йодоанилин (760 мг, 3 ммоль), N,N-диметилэтилендиамин (96 мкл, 0,9 ммоль), 1H-пиразол (430 мг, 6,3 ммоль) растворяли в ДМФ (3,8 мл). Добавляли CsCO (1,86 г, 5,7 ммоль) и CuI (57 мг, 0,3 ммоль), и данную реакционную смесь помещали на 140°С масляную баню. Через 3 часа летучие вещества удаляли в вакууме. Остаток разбавляли дихлорометаном и очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (1% МеОН/дихлорометан) с получением 2-хлоро-4-(1H-пиразол-1-ил)анилина (540 мг, 93%) в виде золотисто-коричневого масла, которое кристаллизовалось в течение ночи при -20°С.
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 239. Все соединения анализировались способом LCMS.
Пример 240. Синтез 1-(3-хлоро-4-нитрофенил)-4-метилпиперазина
2
3
2
2-хлоро-4-фторонитробензол (1 г, 5,7 ммоль) растворяли в ДМФ (10 мл). Добавляли 1-метилпиперазин (760 мкл, 6,8 ммоль) и затем KCO (1,57 г, 11,4 ммоль), данную реакционную смесь помещали на 100°С масляную баню. Через 1 ч данный раствор охлаждали до 23°С, затем добавляли к воде (75 мл). Осадок фильтровали, промывали НО (≈25 мл), затем высушивали в течение ночи (50°С, 25 мм Hg) с получением 1-3-хлоро-4-нитрофенил)-4-метилпиперазина (1,28 г, 88%) в виде твердого вещества с цветом кукурузы.
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 240. Все соединения анализировались способом LCMS.
Пример 241. Синтез 2-хлоро-4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилина
2
2
4
1-3-хлоро-4-нитрофенил)-4-метилпиперазин (414 мг, 1,62 ммоль) растворяли в толуоле (6,5 мл). Аммоний формиат (461 мг, 7,3 ммоль) растворяли в НО (6,5 мл) и добавляли. Добавляли порошок железа (<10 микрон, 408 мг, 7,3 ммоль), и данную реакционную смесь помещали на 120°С масляную баню. Через 1,25 ч данный раствор охлаждали до 23°С и фильтровали через целитовую подушку с элюированием 10% МеОН/дихлорометан (250 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме, и остаток распределяли между HO (25 мл) и EtOAc (25 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc (6×25 мл) и затем дихлорометаном (3×25 мл). Органику осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 2-хлоро-4-(4-метилпиперазин-1-ил)анилина (157 мг, 43%) в виде светло-коричневого твердого вещества.
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 241. Все соединения анализировались способом LCMS.
Пример 242. Синтез (Z)-трет-бутил 5-хлоро-3-((2,5диоксоимидазолидин-4-илидин)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
1
+
3
Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (5,05 г, 15 ммоль) растворяли в безводном ТГФ (100 мл). Затем добавляли диэтил 2,5-диоксоимидазолидин-4-илфосфонат (5,33 г, 22,5 ммоль) и NaOt-bu (1,87 г, 19,5 ммоль). После перемешивания в течение 3 суток при 23°С добавляли дополнительное количество диэтил 2,5-диоксоимидазолидин-4-илфосфоната (3,5 г) и NaOt-bu (1,44 г). После перемешивания еще в течение 24 часов летучие вещества удаляли в вакууме. Остаток перемешивали в течение 4 часов в i-PrOH (50 мл) и воде (250 мл), и затем фильтровали с получением неочищенного трет-бутил 5-хлоро-3-((2,5диоксоимидазолидин-4-илидин)метил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата (5,64 г, 90%) в виде смеси Z:E изомеров (5,3:1). Неочищенное твердое вещество разбавляли i-PrOH (110 мл) и кипятили с обратным холодильником. Раствор фильтровали и затем охлаждали с получением (Z)-трет-бутил 5-хлоро-3-((2,5диоксоимидазолидин-4-илидин)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата (3,58 г, 57%) в виде ярко-оранжевого твердого вещества двумя порциями. Н NMR (CDCl, 400 MHz) δ: 10.37 (bs, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.02 (bs, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 3.26 (dddd, 1H, J=6.8, 6.8, 3.2, 3.2 Hz), 1.43 (s, 9H), 0.87-0.94 (m, 2H), 0.62-0.68 (m, 2H). LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 419 [M+1].
Диэтил 2,5-диоксоимидазолидин-4-илфосфонат получали в соответствии с процедурой в работе Meanwell, et al. J. Org. Chem. 1991, 56, 6897.
Пример 243. Синтез (Z)-5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
2
+
(Z)-трет-бутил 5-хлоро-3-((2,5диоксоимидазолидин-4-илидин)метил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (3,20 г, 7,66 ммоль) суспендировали в дихлорометане (30 мл). Медленно добавляли трифтороуксусную кислоту (30 мл), и раствор стал гомогенным. Через 1 час летучие вещества удаляли в вакууме. Остаток растирали в EtO (100 мл), и ярко-желтое твердое вещество отфильтровывали с получением (Z)-5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (2,42 г, 99%). LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 319 [М+1].
Пример 244. Синтез (Z)-N-(3-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-иламино)фенил)ацетамида
2
3
2
+
(Z)-5-((5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-дион (75 мг, 0,23 ммоль) суспендировали в 1,4-диоксане (1,6 мл). Затем добавляли N-(3-аминофенил)ацетамид (52 мг, 0,35 ммоль), CsCO (105 мг, 0,32 ммоль), (±)-BINAP (9 мг, 0,06 ммоль) и палладий(II) ацетат (7 мг, 0,04 ммоль). Данную смесь герметизировали и облучали при 120°С в течение 30 минут в микроволновой печи. Добавляли HO (8 мл), и осадок отфильтровывали и высушивали. Неочищенный остаток очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (2,5-3,5% МеОН/дихлорометан) с получением (Z)-N-(3-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)фенил)ацетамида (12 мг, 12%) в виде ярко-желтого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 433 [M+1].
Соединения, описанные в последующей таблице, получали с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примерах 242-244. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 43B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 43А.
Пример 245. Синтез (Z)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)-N-(2-(диэтиламино)этил)-3-фторобензамид2,2,2,-трифтороацетата
+
(Z)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)-3-фторобензойную кислоту (25 мг, 0,06 ммоль) суспендировали в ДМФ (0,2 мл). Последовательно добавляли EDCI (13 мг, 0,7 ммоль), HOBt (11 мг, 0,7 ммоль), триэтиламин (10 мкл, 0,7 ммоль), и N, N-диэтилэтилендиамин (8 мкл, 0,7 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали до 65°С. Через 1 час раствор разбавляли ДМСО (1 мл) и очищали способом высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой с получением (Z)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)-N-(2-(диэтиламино)этил)-3-фторобензамид 2,2,2-трифтороацетата (29 мг, 76%). LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 536 [M+1].
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 245. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 44B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 44А.
Пример 246. Синтез 4-(7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрил гидрохлорида
+
5-хлоро-N-циклопропилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин (208 мг, 1 ммоль) суспендировали в EtOH (1 мл). Добавляли 4-аминобензонитрил (236 мг, 2 ммоль) и затем конц. HCl (125 мкл, 1,5 ммоль), и данную реакционную смесь помещали на 95°С масляную баню. Через 24 часа добавляли дополнительное количество конц. HCl (62 мкл). Через еще 24 часа реакционную смесь охлаждали до 23°С, и фильтровальную лепешку промывали EtOH (2 мл) с получением 4-(7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрил гидрохлорида (205 мг, 63%) в виде светло-коричневого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 291 [M+1].
Пример 247. Синтез 4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила
3
2
+
4-(7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрил гидрохлорид (205 мг, 0,62 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1 мл), и данный раствор охлаждали до 0°C с помощью наружной ледяной бани. По каплям добавляли POCl (115 мкл, 1,25 ммоль), и внутреннюю температуру поддерживали на уровне <5°С. После добавления ледяную баню удаляли. Через 5 часов раствор выливали в HO (20 мл), и величину рН доводили до 11 путем добавления 6N NaOH. Данный раствор перемешивали в течение 1 часа, и осадок отфильтровывали. Неочищенный продукт растирали с EtOH (7 мл), фильтровали и высушивали под высоким вакуумом (1 мм Hg) с получением 4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-5-иламино)бензонитрила (129 мг, 64%) в виде оранжевого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 319 [М+1].
Пример 248. Синтез (Z)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила
+
4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрил (75 мг, 0,24 ммоль) суспендировали в EtOH (2,4 мл). Добавляли гидантоин (36 мг, 0,35 ммоль) и пиперидин (36 мкл, 0,35 ммоль), и данную реакционную смесь нагревали до 80°С. Через 15 часов раствор фильтровали в теплом состоянии, и фильтровальную лепешку промывали теплым EtOH (3 мл) с получением (Z)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-иламино)бензонитрила (76 мг, 80%) в виде ярко-желтого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 401 [M+1].
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примерах 246-248. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 45В представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 45А.
Пример 249. Синтез трет-бутил 5-(2-бромо-4-цианофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
2
4
+
Трет-бутил 5-хлоро-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (225 мг, 0,67 ммоль) и 4-амино-3-бромобензонитрил (197 мг, 1 ммоль) растворяли в безводном ТГФ (4,5 мл). Одной порцией добавляли натрий трет-бутоксид (96 мг, 1 ммоль). Через 1,5 ч реакционную смесь выливали в HO (25 мл) и экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Органику промывали соляным раствором (1×100 мл), осушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Желто-коричневое твердое вещество очищали посредством колоночной флеш-хроматографии (30% EtOAc/гексаны) с получением трет-бутил 5-(2-бромо-4-цианофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата (106 мг, 32%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 497 [M+1].
Пример 250. Синтез 3-бромо-4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-5-иламино)бензонитрила
2
Трет-бутил 5-(2-бромо-4-цианофениламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (105 мг, 0,21 ммоль) растворяли в дихлорометане (2 мл), и добавляли трифтороуксусную кислоту (2 мл). Через 1 час данную реакционную смесь концентрировали досуха, и остаток растирали с EtO. Желтое твердое вещество собирали и высушивали с получением 3-бромо-4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила 2,2,2-трифтороацетата (72 мг, 67%).
Пример 251. Синтез (Z)-3-бромо-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-иламино)бензонитрила
+
4-(7-(никлопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-a]пиримидин-5-иламино)бензонитрил 2,2,2-трифтороацетат (72 мг, 0,14 ммоль) суспендировали в EtOH (2,4 мл). Добавляли гидантоин (17 мг, 0,17 ммоль) и пиперидин (33 мкл, 0,34 ммоль), и данную реакционную смесь нагревали до 80°С. Через 15 часов данный раствор фильтровали в теплом состоянии, и фильтровальную лепешку промывали теплым EtOH (3 мл) с получением (Z)-3-бромо-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила (60 мг, 89%) в виде ярко-желтого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 479 [M+1].
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примерах 249-251. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 46B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 46А.
Пример 252. Синтез (Z)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((1-метил-2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила
3-метилимидазолидин-2,4-дион был получен в соответствии с процедурой, известной в литературе, изложенной в Eur. JOC 2002, 1763.
2
2
+
4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрил (51 мг, 0,16 ммоль) суспендировали в EtOH (1,6 мл). Добавляли 3-метилимидазолидин-2,4-дион (28 мг, 0,24 ммоль) и пиперидин (24 мкл, 0,24 ммоль), и данную реакционную смесь нагревали до 80°С. Через 15 часов данный раствор разбавляли НО (2 мл) и фильтровали. Фильтровальную лепешку промывали 50% HO/50% EtOH (3 мл) и затем высушивали в вакууме (~1 мм Hg) с получением (Z)-4-(7-(циклопропиламино)-3-((1-метил-2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила (45 мг, 68%) в виде ярко-желтого твердого вещества. LCMS (ES): >90% чистоты, m/z 415 [M+1].
Соединения, описанные в последующей таблице, были получены с использованием химических способов, схожих с проиллюстрированными в Примере 252. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 47B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 47А.
Пример 253. Синтез (Z)-3-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-илокси)бензонитрила
2
3
2
2
(Z)-трет-бутил 5-хлоро-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (75 мг, 0,18 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,6 мл). Добавляли 3-хлоро-4-гидроксибензонитрил (41 мг, 0,27 ммоль) и KCO (75 мг, 0,54 ммоль). Через 24 часа к реакционной смеси добавляли НО (3,5 мл), и ярко-желтый осадок фильтровали и высушивали. Неочищенное твердое вещество растворяли в дихлорометане (1 мл) и трифтороуксусной кислоте (1 мл). Через 1 час данную реакционную смесь концентрировали до сухого состояния, и остаток растирали с EtO (3 мл) и фильтровали с получением (Z)-3-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-илокси)бензонитрила (45 мг, 57% из двух стадий) в виде ярко-желтого твердого вещества.
Пример 254. Синтез (Z)-5-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-3-(гидроксиметил)имидазолидин-2,4-диона
+
К (Z)-5-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (500 мг, 1,17 ммоль) в ацетонитриле (15 мл) и пиридине (1,5 мл) добавляли формальдегид (37% aq) (5,0 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при 65°С в течение 5 минут. Охлаждали до комнатной температуры и отфильтровывали результирующее твердое вещество. Промывали водой и высушивали под вакуумом с получением 450 мг (84%) (Z)-5-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-3-(гидроксиметил)имидазолидин-2,4-диона в виде желтого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 458 [M+1].
Пример 255. Синтез (Z)-5-((4-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)метокси)-5-оксопентановой кислоты
+
К (Z)-5-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-3-(гидроксиметил)имидазолидин-2,4-диону (100 мг, 0,218 ммоль) в пиридине (4,5 мл) добавляли глутаровый ангидрид (125 мг, 1,095 ммоль), и DMAP (3 мг, 0,022 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 75°С в течение ночи, и после этого срока реакция не была завершена. Добавляли глутаровый ангидрид (125 мг, 1,095 ммоль) и DMAP (3 мг, 0,022 ммоль) и перемешивали еще в течение 16 часов при 75°С. Охлаждали до 0°С на ледяной бане и добавляли 6М HCl до уровня рН меньше 3, что определяли с помощью рН бумаги. Твердое вещество отфильтровывали и промывали 0,1М HCl. Высушивали под вакуумом с получением 40 мг (32%) (Z)-5-((4-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)метокси)-5-оксопентановой кислоты в виде желтого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 572 [M+1].
Пример 256. Синтез (Z)-(4-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)метил 3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропаноата
4
2
2
+
К (Z)-5-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-3-(гидроксиметил)имидазолидин-2,4-диону (100 мг, 0,218 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавляли 3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропановую кислоту (75 мг, 0,436 ммоль), дициклогексилкарбодиимид (90 мг, 0,436 ммоль), и DMAP (4,0 мг, 0,33 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем разбавляли этилацетатом, и промывали 1X водой, 3Х соляным раствором. Органический слой осушивали MgSO, фильтровали и абсорбировали на силикагеле. Неочищенный материал очищали способом колоночной хроматографии с градиентным элюированием 0-10% MeOH/CHCl. Чистые фракции объединяли, и растворитель удаляли. Этот материал кристаллизовали из этилацетата и гексана с получением 35 мг (26%) (Z)-(4-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)метил 3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропаноата в виде желтого твердого вещества. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 612 [М+1].
Пример 257. Синтез (Z)-(4-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)метил 2-аминоацетата
4
2
2
+
К (Z)-5-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-3-(гидроксиметил)имидазолидин-2,4-диону (100 мг, 0,218 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавляли Boc-Gly-OH (153 мг, 0,873 ммоль), дициклогексилкарбодиимид (180 мг, 0,873 ммоль), и DMAP (13 мг, 0,109 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем разбавляли этилацетатом и промывали 1X 1М HCl и затем 3Х соляным раствором. Органический слой осушивали MgSO, фильтровали и абсорбировали на силикагеле. Неочищенный материал очищали способом колоночной хроматографии с градиентным элюированием 5-15% EtOAc/CHCl. Чистые фракции объединяли, и растворитель удаляли. К данному остатку добавляли 4М HCl/диоксан (4 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Удаляли избыток HCl/диоксан. К остатку добавляли диэтиловый эфир, и суспензию обрабатывали ультразвуком. Результирующее твердое вещество отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром. Высушивали под вакуумом с получением 23 мг (21%) (Z)-(4-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)метил 2-аминоацетата хлористого водорода в виде желтого твердого вещества. (LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 515 [М+1].
Следующие молекулы были получены с использованием химических способов, схожих с синтезом в вышеприведенных примерах. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 48B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 48А.
Пример 258. Синтез 5-((5-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метил)имидазолидин-2,4-диона
+
К (Z)-5-((5-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (40 мг, 0,091 ммоль) в реакционном сосуде высокого давления Парра добавляли уксусную кислоту (6,0 мл) и 10% Pd/C (20 мг). Реакционный сосуд помещали на шейкер Парра при 55 фунт/кв.дюйм на трое суток. Фильтровали через целит и очищали масса-направленным LC/MS с получением 5-((5-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метил)имидазолидин-2,4-диона в виде TFA соли. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 444 [M+1].
Пример 259. Синтез 2-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)фенола
+
К 5-хлоро-N-циклопропилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амину (500 мг, 2,396 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли 4-амино-2-хлорофенол (516 мг, 3,59 ммоль) и затем концентрированную HCl (0,218 мл, 2,64 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при температуре кипения в течение 4 суток. Удаляли 5 мл EtOH на роторном испарителе и затем добавляли 5 мл диэтилового эфира. Результирующее твердое вещество отфильтровывали и ополаскивали диэтиловым эфиром. Высушивали под атмосферой азота с получением 582 мг (77%) 2-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)фенола в виде HCl соли. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 316 [M+1].
Пример 260. Синтез 5-(3-хлоро-4-гидроксифениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
+
К 2-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)фенолу (582 мг, 1,84 ммоль) в ДМФ (4,5 мл), охлажденному до 0°С, добавляли по каплям оксихлорид фосфора (0,514 мл, 5,52 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали, подогревая до 45°С в течение 3 часов. Затем охлаждали до 0°С и медленно добавляли к охлажденному льдом раствору 2М NaOH при перемешивании. После завершения, данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Результирующее твердое вещество отфильтровывали и промывали водой с получением 412 мг (65%) 5-(3-хлоро-4-гидроксифениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. LCMS (ES): >95% чистоты, m/z 344 [М+1].
Пример 261. Синтез 5-(3-хлоро-4-(3-(диметиламино)пропокси)фениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
2
3
4
+
К 5-(3-хлоро-4-гидроксифениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (100 мг, 0,291 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавляли KCO (100 мг, 0,727 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 16 часов. Разбавляли EtOAc и экстрагировали в 2М HCl. Водный слой подщелачивали до рН 14 с помощью 2М NaOH и экстрагировали 2Х EtOAc. Органический слой промывали 3Х соляным раствором и осушивали MgSO. Фильтровали и очищали способом колоночной хроматографии с градиентным элюированием 10%-30% МеОН/EtOAc. Объединенные чистые фракции дали 45 мг (36%) 5-(3-хлоро-4-(3-(диметиламино)пропокси)фениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида. LCMS (ES): m/z 429 [М+1].
Пример 262. Синтез (Z)-5-((5-(3-хлоро-4-(3-(диметиламино)пропокси)фениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
+
К 5-(3-хлоро-4-(3-(диметиламино)пропокси)фениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (79 мг, 0,184 ммоль) в EtOH (3 мл) добавляли пиперидин (22 мкл, 0,221 ммоль), затем гидантоин (21 мг, 0,202 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при 85°С в течение 6 часов. Растворитель удаляли путем роторного выпаривания, и остаток разбавляли 3 мл воды. Суспензию обрабатывали ультразвуком, и результирующее твердое вещество отфильтровывали и промывали водой, затем 1:1 смесью EtOH/вода. Материал высушивали под вакуумом с получением 62 мг (Z)-5-((5-(3-хлоро-4-(3-(диметиламино)пропокси)фениламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (ES): m/z 511 [M+1].
Соединения, перечисленные в Таблице 49А, получали в соответствии с описанными выше процедурами. В Таблице 49B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 49А.
Пример 263. Синтез 7-(циклопропиламино)-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (4,0 г, 16,87 ммоль) в диметилформамиде добавляли тиометоксид натрия (3,54 г, 50,5 ммоль), и данную реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали, добавляли воду, перемешивали в течение 15 минут и отфильтровывали белый осадок, который после высушивания дал 7-(циклопропиламино)-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид (3,60 г, 86% выход). LCMS (М+1=249)
Пример 264. Синтез (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Вышеуказанный продукт, 7-(циклопропиламино)-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид, растворяли в 20,0 мл этанола, добавляли гидантоин (2,82 г, 28,17 ммоль) и пиперидин (2,70 мл). Данную реакционную смесь нагревали до 80°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали, и желтый осадок отфильтровывали, промывали этанолом, высушивали с получением (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона 4,18 г (90% выход). LCMS (М+1=331)
Пример 265. Синтез (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-метилсульфонил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (стадия b) (4,2 г, 12,68 ммоль) в 40,0 мл дихлорометана добавляли мета-хлоропероксибензойную кислоту (8,75 г, 50,7 ммоль), и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли еще 10,0 мл дихлорометана, обрабатывали ультразвуком в течение 10 минут и затем фильтровали желтый осадок с получением (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (3,7 г, 73% выход). LCMS (М+1=363)
Пример 266. Синтез (S,Z)-5-((5-(1-(3-хлорофенил)этиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (стадия c) (10 мг, 0,0275 ммоль) в 200 мкл NMP добавляли (S)-1-(3-хлорофенил)этанамин (23,2 мкл, 0,165 ммоль), и данную реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 20 минут. Смесь концентрировали и разбавляли МеОН и очищали посредством препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением (S,Z)-5-((5-(1-(3-хлорофенил)этиламино)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона LCMS (М+1=438).
Бензиламиновые аналоги, показанные ниже, были получены с использованием процедур, проиллюстрированных выше, или способов, описанных ранее в Примерах 27, 28 и 29. В Таблице 50B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 50А.
Пример 267. Синтез 5,7-дихлоро-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидина
Под атмосферой азота натрий (3,5 г, 151 ммоль) добавляли к этанолу (125 мл) малыми порциями и перемешивали при комнатной температуре до растворения всего натрия. Раствор 3-аминопиразола (12,5 г, 150 ммоль) в этаноле (20 мл) и диэтил метилмалонат (26 мл, 153 ммоль) вводили по каплям, последовательно, в вышеуказанный раствор. Данную смесь кипятили с обратным холодильником при 90°С в течение 10 часов, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали под вакуумом. К данному твердому веществу добавляли холодную 5N НС1, и результирующее твердое вещество собирали путем фильтрации под вакуумом. Промежуточное соединение, 6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5,7-диол, извлекали в виде беловатого твердого вещества с 72% выходом (17,9 г). Этот материал был использован на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS (М+1=166)
3
2
4
Под атмосферой азота, оксихлорид фосфора (160 мл, 1,72 моль) и диметиланилин (16 мл, 132 ммоль) добавляли последовательно к полученному выше промежуточному соединению (16 г, 97 ммоль). Данную смесь нагревали при 110°С в течение 4 часов, затем избыток POCl был удален под вакуумом. Остаток делали щелочным с помощью 3N NaOH раствора (рН=9-10) и экстрагировали этилацетатом (3х). Объединенные органические слои осушивали над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали способом силикагелевой хроматографии (100% DCM) с получением 15,8 граммов твердого желтого продукта, 5,7-дихлоро-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин (81% выход). LCMS (М+1=203)
Пример 268. Синтез 5-хлоро-7-(циклопропиламино)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
В реакционную колбу вводили 5,7-дихлоро-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин (5 г, 25 ммоль) вместе с циклопропиламином (1,8 мл, 25 ммоль), триэтиламином (3,5 мл, 25 ммоль), и ацетонитрилом (87 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, затем нагревали при 85°С в течение еще 6 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, фильтровали и промывали водой. Промежуточное соединение, 5-хлоро-N-циклопропил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин, дополнительно очищали способом силикагелевой хроматографии (10% этилацетат/гексаны) с получением 4,8 граммов белого твердого вещества (86% выход). LCMS (М+1=223)
К промежуточному соединению (3,6 г, 16 ммоль), выделенному выше, в ДМФ (59 мл), медленно добавляли оксихлорид фосфора (9 мл, 96 ммоль) при комнатной температуре. Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов, затем гасили путем добавления 6N NaOH раствора. Величину рН данной смеси доводили с помощью 6N HCl до рН=7-9. Твердое вещество извлекали путем фильтрации и промывали водой. Продукт, 5-хлоро-7-(циклопропиламино)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид, очищали путем рекристаллизации из этилацетата/гексанов с получением белого твердого вещества с 73% выходом (2,9 г). LCMS(M+1=251)
Пример 269. Синтез трет-бутил 5-хлоро-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
2
4
К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (2,9 г, 11,7 ммоль) в метиленхлориде (22 мл) добавляли триэтиламин (2 мл, 14 ммоль), диметиламинопиридин (100 мг, 0,8 ммоль), и ди-t-бутилдикарбонат (3,1 г, 14 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов. Реакционную смесь переносили в делительную воронку, промывали 1X HO, 2Х соляным раствором, осушивали над MgSO, фильтровали и выпаривали до сухого состояния с получением маслянистого остатка. Неочищенный материал очищали способом силикагелевой хроматографии (25% этилацетат/гексаны) с получением светло-оранжевого твердого вещества (3,6 г, 88% выход), трет-бутил 5-хлоро-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата. LCMS (М+1=351)
Пример 270. Синтез 3-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила
2
3
2
К 4-амино-3-хлоробензонитрилу (52 мг, 0,34 ммоль), CsCO (130 мг, 0,4 ммоль) добавляли трет-бутил 5-хлоро-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (100 мг, 0,29 ммоль), растворенный в 1,4-диоксане (1,1 мл). Затем добавляли рацемический BINAP (11 мг, 0,017 ммоль) и палладий(II) ацетат (8 мг, 0,011 ммоль). Данную смесь герметизировали и облучали при 110°С в течение 60 минут в микроволновой печи. Добавляли EtO (3 мл), и данный раствор фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный осадок растворяли в дихлорометане (1,5 мл) и трифтороуксусной кислоте (1,5 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа раствор концентрировали под струей воздуха. Неочищенный материал очищали посредством силикагелевой хроматографии (3% ацетон/дихлорометан) с получением продукта, 3-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила (34 мг, 33% выход). LCMS (М+1=367)
Пример 271. Синтез 3-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолин-4-илиден)метил)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила
Гидантоин (2,7 мг, 0,027 ммоль) и 3-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрил (10 мг, 0,027 ммоль) растворяли в этаноле (0,4 мл) вместе с пиперидином (3 мкл, 0,03 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С.Через 10 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, и осадок собирали и промывали водой, 1:1 этанол:вода, затем этанолом. Ярко-желтое твердое вещество высушивали в вакууме с получением 3-хлоро-4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-иламино)бензонитрила (7 мг, 58% выход). LCMS (М+1=449)
Следующие молекулы были получены с использованием химических способов, схожих с синтезом в приведенных выше примерах. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 51B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 51A.
Пример 272. Синтез 5-хлоро-7-(циклопропиламино)-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
В реакционную колбу вводили 5,7-дихлоро-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин (2 г, 10 ммоль) вместе с циклопропиламином (0,7 мл, 10 ммоль), триэтиламином (1,4 мл, 10 ммоль), и ацетонитрилом (30 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, фильтровали и промывали водой. Промежуточное соединение, 5-хлоро-N-циклопропил-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин, высушивали под вакуумом с получением 1,85 граммов белого твердого вещества (83% выход). LCMS (М+1=223)
К промежуточному соединению (1,9 г, 8,3 ммоль), выделенному выше, в ДМФ (31 мл), медленно добавляли оксихлорид фосфора (4,6 мл, 49,7 ммоль) при комнатной температуре. Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов, затем гасили путем добавления к 6N NaOH раствору. Величину рН данной смеси доводили с помощью 6N HCl до рН=7-9. Твердое вещество извлекали путем фильтрации и промывали водой. Продукт, 5-хлоро-7-(циклопропиламино)-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид, получали в виде белого твердого вещества с 80% выходом (1,7 г). LCMS (М+1=251)
Пример 273. Синтез трет-бутил 5-хлоро-3-формил-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
2
4
К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (1,7 г, 6,7 ммоль) в метиленхлориде (13 мл) добавляли триэтиламин (1,1 мл, 8 ммоль), диметиламинопиридин (100 мг, 0,8 ммоль), и ди-t-бутилдикарбонат (1,8 г, 8 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов. Реакционную смесь переносили в делительную воронку, промывали 1Х НО, 2Х соляным раствором, осушивали над MgSO, фильтровали и выпаривали досуха с получением маслянистого остатка, который затвердевал при выстаивании. Продукт, трет-бутил 5-хлоро-3-формил-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат, извлекали в виде беловатого твердого вещества с 82% выходом (1,9 г). LCMS (М+1=351)
Пример 274. Синтез 5-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фениламино)-7-(циклопропиламино)-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
2
3
2
К 4-(1Н-пиразол-1-ил)анилину (54 мг, 0,34 ммоль) добавляли CsCO (130 мг, 0,4 ммоль), трет-бутил 5-хлоро-3-формил-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (100 мг, 0,29 ммоль), растворенный в 1,4-диоксане (1,1 мл). Затем добавляли рацемический BINAP (11 мг, 0,017 ммоль) и палладий(II) ацетат (8 мг, 0,011 ммоль). Данную смесь герметизировали и облучали при 110°С в течение 60 минут в микроволновой печи. Добавляли EtO (3 мл), и данный раствор фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток растворяли в дихлорометане (1,5 мл) и трифтороуксусной кислоте (1,5 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа раствор концентрировали под струей воздуха. Неочищенный материал очищали способом силикагелевой хроматографии (15% ацетон/дихлорометан) с получением продукта, 5-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фениламино)-7-(циклопропиламино)-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида (24 мг, 23% выход). LCMS (М+1=374)
Пример 275. Синтез 5-((5-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фениламино)-7-(циклопропиламино)-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Гидантоин (3 мг, 0,03 ммоль) и 5-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фениламино)-7-(циклопропиламино)-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид (12 мг, 0,03 ммоль) растворяли в этаноле (0,4 мл) вместе с пиперидином (3 мкл, 0,03 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в микроволновой печи в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, и осадок собирали и промывали водой, 1:1 этанол:вода, затем этанолом. Желтое твердое вещество высушивали в вакууме с получением 5-((5-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фениламино)-7-(циклопропиламино)-2-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (9,5 мг, 65% выход). LCMS (М+1=456)
Таблица 52.
Биологические активности Примера 275:
CK2: IC50 (мкМ)
PIM2: % инг. (2.5 мкМ)
>1
43.426
Пример 276. Синтез 7-хлоро-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила
Под атмосферой азота, 2-циано-3,3-бисметилтио-2-акриловый метиловый эфир (6 г, 29,5 ммоль) добавляли к этанолу (40 мл) вместе с 3-аминопиразолом (2,6 г, 31 ммоль), и данную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2,5 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и осадок собирали путем фильтрации под вакуумом. Твердое вещество промывали этанолом и высушивали под вакуумом с получением 7-гидрокси-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила с 67% выходом (4,1 г). Этот материал использовался на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS (M+1=207)
3
2
4
Под атмосферой азота, оксихлорид фосфора (9,4 мл, 101,3 ммоль) и диметиланилин (2,6 мл, 20,3 ммоль) добавляли последовательно к промежуточному соединению, 7-гидрокси-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрилу, полученному выше (4,1 г, 19,7 ммоль). Данную смесь нагревали при 110°С в течение 4 часов, затем избыток POCl удаляли под вакуумом. Остаток делали основным с помощью 3N NaOH раствора (рН=9-10) и экстрагировали этилацетатом (3х). Объединенные органические слои осушивали над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем рекристаллизации из этилацетата/гексанов с получением продукта, 7-хлоро-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила (80% выход). LCMS (М+1=225)
Пример 277. Синтез 7-(циклопропиламино)-3-формил-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила
В реакционную колбу вводили 7-хлоро-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрил (3,1 г, 13,7 ммоль) вместе с циклопропиламином (0,96 мл, 13,7 ммоль), триэтиламином (1,9 мл, 13,7 ммоль), и ацетонитрилом (30 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при 85°С в течение 10 часов, затем смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, фильтровали и промывали водой. Промежуточное соединение, 7-(циклопропиламино)-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрил, дополнительно очищали путем рекристаллизации из этилацетата/гексанов с получением 3 граммов с 89% выходом. LCMS (М+1=246)
К промежуточному соединению (3 г, 12,2 ммоль), выделенному выше, в ДМФ (45 мл), медленно добавляли оксихлорид фосфора (13,7 мл, 146 ммоль) при комнатной температуре. Данную реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение 10 часов, охлаждали до комнатной температуры и гасили путем добавления к 6N NaOH раствору. Величину рН данной смеси доводили с помощью 6N HCl до рН=7-9. Твердое вещество извлекали путем фильтрации и промывали водой. Продукт, 7-(циклопропиламино)-3-формил-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрил, получали в виде твердого вещества с 38% выходом (1,28 г). LCMS (М+1=274)
Пример 278. Синтез 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-5-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила и 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-5-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила
Гидантоин (366 мг, 3,7 ммоль) и 7-(циклопропиламино)-3-формил-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрил (1 г, 3,7 ммоль) растворяли в этаноле (18,5 мл) вместе с пиперидином (3,7 мл, 3,7 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С. Через 10 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, и осадок собирали и промывали водой, 1:1 этанол/вода, затем этанолом. Желтое твердое вещество высушивали в вакууме с получением промежуточного соединения, 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-5-(метилтио)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила (1,1 г, 83% выход). LCMS (М+1=356)
Промежуточное соединение (1,1 г, 3,04 ммоль) смешивали с м-хлоропербензойной кислотой (1,9 г, 7,6 ммоль) в дихлорометане (12 мл). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали дихлорометаном, затем высушивали под вакуумом в течение ночи. Продукты, 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-5-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрил и 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-5-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрил, получали в виде желтого твердого вещества с количественным выходом. LCMS (М+1=372) и LCMS (M+1=388)
Пример 279. Синтез 5-(1-(3-хлорофенил)этиламино)-7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила
Смесь 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-5-(метилсульфонил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила и 7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-5-(метилсульфинил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила (20 мг) смешивали с (R)-1-(3-хлорофенил)этанамином (33 мг) в i-пропаноле (0,5 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 90°С в микроволновой печи в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли водой, фильтровали и промывали водой, затем 20% смесью этанол/вода. Твердое вещество высушивали под высоким вакуумом с получением 2 мг продукта, 5-(1-(3-хлорофенил)этиламино)-7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-6-карбонитрила. LCMS (М+1=463)
Следующие молекулы были получены с использованием химических способов, схожих с синтезом в приведенных выше примерах. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 53B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 53А.
Пример 280. Синтез 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрила
В реакционной колбе, 2-(пиперазин-1-ил)никотинонитрил (22 г, 0,11 ммоль) смешивали с 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегидом (27 мг, 0,11 ммоль) в ДМФ (0,5 мл) вместе с карбонатом калия (32 мг, 0,23 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 95°С в течение 12 часов, затем распределяли между водой и этилацетатом. Органический слой промывали водой, затем насыщенным раствором NaCl. Этилацетатный слой выделяли, осушивали безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали до сухого состояния. Продукт, 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрил, извлекали с 35% выходом (16 мг) после рекристаллизации из этилацетата/гексанов. LCMS (М+1=389)
Пример 281. Синтез 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрила
Гидантоин (4 мг, 0,04 ммоль) и 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрил (16 мг, 0,04 ммоль) растворяли в этаноле (0,5 мл) вместе с пиперидином (4 мкл, 0,04 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 12 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, и осадок собирали и промывали водой, 1:1 этанол:вода, затем этанолом. Желтое твердое вещество дополнительно очищали путем рекристаллизации из этилацетата/гексанов и высушивали в вакууме с получением 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрила (2 мг, 21% выход). LCMS (М+1=471)
Следующие молекулы были получены с использованием химических способов, схожих с синтезом в вышеприведенных примерах. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 54B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 54А.
Пример 282. Синтез 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрила
Трет-бутил 5-хлоро-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамат (60 мг, 0,17 ммоль) смешивали с 2-(пиперазин-1-ил)никотинонитрилом (64 мг, 0,34 ммоль) в i-пропаноле (1 мл). Данную реакционную смесь нагревали при 90°С в микроволновой печи в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в (1:1) TFA/DCM (4 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выпаривали до сухого состояния, гасили 3N NaOH, фильтровали, промывали водой и высушивали под вакуумом. Продукт, 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрил, дополнительно очищали посредством препаративной тонкослойной жидкостной хроматографии с использованием 5% ацетон/дихлорометан в качестве элюента (40 мг, 58% выход). LCMS (М+1=403)
Пример 283. Синтез 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрила
Гидантоин (7,5 мг, 0,08 ммоль) и 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрил (15 мг, 0,04 ммоль) растворяли в этаноле (0,5 мл) вместе с пиперидином (8 мкл, 0,08 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 1 часа в микроволновой печи. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, и осадок собирали и промывали водой, 1:1 этанол:вода, затем этанолом. Желтое твердое вещество высушивали в вакууме с получением 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрила (3 мг, 17% выход). LCMS (М+1=485)
Пример 284. Синтез 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,4-диоксотиазолидин-5-илиден)метил)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрила
В реакционной колбе, тиазолидин-2,4-дион (9 мг, 0,08 ммоль) и 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-формил-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрил (15 мг, 0,04 ммоль) растворяли в этаноле (0,5 мл) вместе с пиперидином (8 мкл, 0,08 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 1 часа в микроволновой печи. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, и осадок собирали и промывали водой, 1:1 этанол:вода, затем этанолом. Желтое твердое вещество высушивали в вакууме с получением 2-(4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,4-диоксотиазолидин-5-илиден)метил)-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-ил)никотинонитрила (10 мг, 54% выход). LCMS (М+1=502)
Следующие молекулы получали с использованием химических способов, схожих с синтезом в вышеприведенных примерах. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 55B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 55А.
Пример 285. Синтез трет-бутил 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(2-морфолинопропил)карбамата
В реакционную колбу вводили 5,7-дихлоропиразоло[1,5-а]пиримидин (3,2 г, 17 ммоль) вместе с 2-морфолинопропан-1-амином (2,4 г, 17 ммоль), триэтиламином (2,3 мл, 17 ммоль), и ацетонитрилом (56 мл). Данную реакционную смесь перемешивали при 85°С в течение 12 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, фильтровали и промывали водой. Промежуточное соединение, 5-хлоро-Н-(2-морфолинопропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин, высушивали под вакуумом с получением 3,8 граммов беловатого твердого вещества (77% выход). LCMS (М+1=296)
2
4
К 5-хлоро-N-(2-морфолинопропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амину (3,8 г, 13 ммоль) в метиленхлориде (50 мл) добавляли триэтиламин (2,1 мл, 15 ммоль), диметиламинопиридин (200 мг, 1,6 ммоль), и ди-t-бутилдикарбонат (3,3 г, 15 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов. Реакционную смесь переносили в делительную воронку, промывали 1X НО, 2Х соляным раствором, осушивали над MgSO, фильтровали и выпаривали до сухого состояния с получением маслянистого остатка, который затвердевал при выстаивании. Продукт, трет-бутил 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(2-морфолинопропил)карбамат, был извлечен в виде беловатого твердого вещества с 39% выходом (5,1 ммоль). LCMS (М+1=396).
Пример 286. Синтез N5-(5-хлоро-2-фторофенил)-N7-(2-морфолинопропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5,7-диамина
К трет-бутил 5-хлоропиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(2-морфолинопропил)карбамату (396 мг, 1 ммоль), 5-хлоро-2-фтороанилину (145 мкл, 1,2 ммоль), и LiHMDS (2,2 мл, 2,2 ммоль, 1М в ТГФ) добавляли X-Phos (11 мг, 0,024 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (18 мг, 0,02 ммоль). Данную смесь герметизировали и облучали при 65°С в течение 60 минут в микроволновой печи. Данную реакционную смесь гасили 1N HCL (2 мл) и затем нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Смесь экстрагировали этилацетатом и промывали насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой собирали, осушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали до сухого состояния. Неочищенный остаток растворяли в дихлорометане (2 мл) и трифтороуксусной кислоте (2 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа раствор концентрировали под струей азота. Неочищенный материал нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия, затем очищали способом силикагелевой хроматографии (75% этилацетат/гексаны) с получением продукта, N5-(5-хлоро-2-фторофенил)-N7-(2-морфолинопропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5,7-диамина (84 мг, 21% выход). LCMS (М+1-405)
Пример 287. Синтез 5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(2-морфолинопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
В реакционной колбе, N5-(5-хлоро-2-фторофенил)-N7-(2-морфолинопропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5,7-диамин (84 мг, 0,21 ммоль) растворяли в ДМФ (0,9 мл), затем медленно добавляли оксихлорид фосфора (58 мкл, 0,62 ммоль) при комнатной температуре. Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 суток, затем гасили путем добавления к 6N NaOH раствору. Величину рН данной смеси доводили с помощью 6N HCl до рН=7-9. Твердое вещество извлекали посредством фильтрации и промывали водой. Продукт, 5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(2-морфолинопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид, очищали посредством препаративной тонкослойной хроматографии (5% ацетон/дихлорометан) с получением 37 мг необходимого продукта (41% выход). LCMS (М+1=433)
Пример 288. Синтез 5-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(2-морфолинопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Гидантоин (7 мг, 0,07 ммоль) и 5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(2-морфолинопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид (15 мг, 0,035 ммоль) растворяли в этаноле (0,5 мл) вместе с пиперидином (7 мкл, 0,07 ммоль). Данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 1 часа в микроволновой печи. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, и осадок собирали и промывали водой, 1:1 этанол:вода, затем этанолом. Желтое твердое вещество высушивали в вакууме с получением 5-((5-(5-хлоро-2-фторофениламино)-7-(2-морфолинопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона (5 мг, 28% выход). LCMS (М+1=515)
Следующие молекулы были получены с использованием химических способов, схожих с синтезом в приведенных выше примерах. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 56B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 56А.
Пример 289. Синтез трет-бутил 4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-карбоксилата
К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (500 мг, 2,11 ммоль) в диметилформамиде добавляли 1-Вос-пиперазин (1,17 г, 6,33 ммоль), карбонат калия (583 мг, 4,21 ммоль) и ди-изопропил этиламин (0,41 мл, 2,5 ммоль). Данную смесь нагревали до 80°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали, добавляли воду и фильтровали белый осадок с получением трет-бутил 4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-карбоксилата (655 мг, 80% выход). LCMS (М+1=387)
Пример 290. Синтез (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(пиперазин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
Вышеуказанный продукт, трет-бутил 4-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-карбоксилат (250 мг, 0,645 ммоль), растворяли в 2,0 мл этанола, добавляли гидантоин (129 мг, 1,288 ммоль) и пиперидин (127 мкл). Данную реакционную смесь нагревали до 80°С в течение трех часов. Данную реакционную смесь охлаждали, и желтый осадок фильтровали, промывали этанолом, высушивали с получением (Z)-трет-бутил 4-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиперазин-1-карбоксилата (264 мг, 87% выход). Вышеуказанный продукт дополнительно растворяли в 1:1 смеси DCM:TFA и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Смесь концентрировали и высушивали с получением желтого твердого вещества, (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(пиперазин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен) имидазолидин-2,4-диона. LCMS (М+1=369)
Пример 291. Синтез (Z)-5-((5-(4-(2-циклопропилацетил)пиперазин-1-ил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона
К (Z)-5-((7-(циклопропиламино)-5-(пиперазин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диону (стадия b) (10 мг, 0,027 ммоль) в 50,0 мкл NMP добавляли НОВТ (4,4 мг, 0,032 ммоль), циклопропил уксусную кислоту (60 мкл в 0,02М NMP растворе), DIPEA (9,5 мкл, 0,067 ммоль) и EDC (7,8 мг, 0,040 ммоль). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь разбавляли метанолом и обрабатывали способом высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением (Z)-5-((5-(4-(2-циклопропилацетил)пиперазин-1-ил)-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил)метилен)имидазолидин-2,4-диона. LCMS (M+1=451)
Соединения, перечисленные в последующей Таблице 57А, были получены в соответствии с процедурами, описанными выше. В Таблице 57B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 57А.
Пример 292. Синтез трет-бутил 5-азидо-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил(циклопропил)карбамата
К 5-хлоро-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (4,0 г, 16,87 ммоль) в диметилформамиде добавляли азид натрия (1,56 г, 23,9 ммоль), и данную реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали, добавляли воду, и белый осадок фильтровали и высушивали с получением 5-азидо-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида (2,95 г, 75% выход). LCMS (M+1=244)
Пример 293. Синтез 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида
Вышеуказанный продукт, 5-азидо-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегид (1,09 г, 4,46 ммоль), подвергали гидрированию с использованием 10% вес.% палладия на углероде в этаноле. Данную реакционную смесь перемешивали под атмосферой водорода в течение 6 часов. Смесь фильтровали через целит и обрабатывали ультразвуком с 1:1 смесью этилацетата и гексана. Светло-желтое твердое вещество фильтровали и высушивали с получением 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегида как продукта 750 мг (85% выход). LCMS (M+1-218)
Пример 294. Синтез (Z)-N-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-фторобензамида
К 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (стадия b) (30 мг, 0,138 ммоль) в 1,0 мл тетрагидрофурана, с перемешиванием под атмосферой азота, добавляли 2-фторо бензоил хлорид (33 мкл, 0,275 ммоль) и DIPEA (28,8 мкл). Данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой, органический слой осушивали под сульфатом натрия, концентрировали в высоком вакууме с получением N-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-фторобензамида. Неочищенный продукт дополнительно растворяли в 1,0 мл этанола, добавляли гидантоин (41,2 мг, 0,411 ммоль) и пиперидин (40,0 мкл). Данную реакционную смесь нагревали до 80°С в течение трех часов. Реакционную смесь охлаждали, и желтый осадок фильтровали, промывали этанолом с получением 10 мг (40% выход, две стадии) (Z)-N-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-фторобензамида. LCMS (М+1=422)
Пример 295. Синтез (Z)-4-циано-N-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензамида
К 5-амино-7-(циклопропиламино)пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбальдегиду (стадия b) (30 мг, 0,138 ммоль) в 1,0 мл ацетонитрила добавляли HATU (104 мг, 0,273 ммоль), 3-циано бензойную кислоту (30 мг, 0,203 ммоль) и DIPEA (48,0 мкл). Данную реакционную смесь нагревали до 80°С в течение пяти часов. Реакционную смесь охлаждали, и светло-желтый осадок фильтровали, промывали ацетонитрилом с получением 4-циано-N-(7-(циклопропиламино)-3-формилпиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензамида. Неочищенный продукт дополнительно растворяли в 1,0 мл этанола, добавляли гидантоин (10 мг, 0,01 ммоль) и пиперидин (9,5 мкл). Данную реакционную смесь нагревали до 80°С в течение трех часов. Реакционную смесь охлаждали, и осадок фильтровали, промывали этанолом с получением 7 мг (40% выход, две стадии) (Z)-4-циано-N-(7-(циклопропиламино)-3-((2,5-диоксоимидазолидин-4-илиден)метил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)бензамида. LCMS (М+1=429)
Следующие соединения получали с использованием химических способов, схожих с синтезом в вышеприведенных примерах с соответствующими кислотами, хлороформиатами или изоцианатами. Все соединения анализировались способом LCMS. В Таблице 58B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 58А.
Следующие соединения были получены с использованием химических способов, описанных в настоящей заявке. В Таблице 59B представлены биологические активности соединений, перечисленных в Таблице 59А.
Следующие соединения в Таблице 60 могут быть получены с использованием химических способов, описанных в настоящей заявке:
Соединения 3 были получены по реакции соединения 1 с бороновой кислотой 2 с использованием условий реакции сочетания Сузуки, как показано ниже (Схема 2).
Следующие соединения (Таблица 61) могут быть получены с использованием химических способов, описанных на Схеме 2.
Соединения 5 (как показано на Схеме 3 ниже) были получены из соединения 4 с использованием химических способов, описанных в патентной заявке US2004/0019058. Соединение 5 может быть превращено в молекулу 6 с использованием промежуточных соединений и химических способов, описанных выше. Депротектирование 6 с использованием реактивов, таких как N,N-диметилбарбитуровая кислота и палладиевый катализатор, может привести к получению 7.
Соединение 7 (как показано на Схеме 4 ниже) может быть превращено в молекулы 8, 9, 10, 11 и 12 с использованием химических способов, известных специалистам в данной области.
Следующие соединения в Таблице 62 могут быть получены с использованием химических способов, описанных в настоящей заявке:
Соединения 3 были получены путем реакции соединения 1 с бороновой кислотой 2 с использованием условий реакции сочетания Сузуки (Suzuki) (как показано на Схеме 5 ниже).
Следующие соединения в Таблице 63 могут быть получены с использованием химических способов, описанных на Схеме 5:
Соединения 2 были получены по реакции соединения 1 с использованием условий восстановительного аминирования (как показано на Схеме 6 ниже).
Следующие соединения в Таблице 64 могут быть получены с использованием химических способов, описанных на Схеме 6:
Способы биологических испытаний:
Биологический Пример А
Способ CK2 анализа
Модуляторную активность соединений, описанных здесь, оценивали в in vitro бесклеточных CK2 пробах с использованием следующего способа.
В конечном реакционном объеме 50 мкл, CK2 ααββ (4 нг, 8,5 мл) инкубировали с различными концентрациями испытываемых соединений в ДМСО (1 мкл, 2% по объему), 20 мМ MOPS рН 7,2, 10 мМ EGTA, 0,15 М NaCl, 10 мМ DTT, 0,002% Brij-35, 200 мкМ RRRDDDSDDD, 10 мМ ацетат Mg, ATP 15 мкМ и 0,33% (по объему) ([γ-33P]АТР: маточный 1 мКи/100 мкл; 3000 Ки/ммоль (Perkin Elmer)). Реакции поддерживались в течение 40 минут при 23°С. Реакции гасили 100 мкл 0,75% фосфорной кислоты, затем переносили на и фильтровали через фосфоцеллюлозную фильтровальную пластинку (Millipore, MSPH-N6B-50). После промывания каждой ячейки 4 раза 0,75% фосфорной кислотой, в каждую ячейку вводили сцинтилляционную жидкость (20 мкл), и остаточную радиоактивность измеряли с использованием люминесцентного счетчика Wallac.
Биологический Пример В
Способ PIM-1 анализа
Для анализа PIM-1 киназной активности соединений данного изобретения использовалась следующая процедура. В данной области известны и другие способы для анализа PIM-1 и других PIM киназ, также как и способы для анализа активности против различных киназ для киназной панели, упомянутой на Фигурах 1 и 2.
33
В конечном объеме реакции 50 мкл, рекомбинантный PIM-1 (1 нг) инкубировали с 12 мМ MOPS рН 7,0, 0,4 мМ ЭДТА, глицерином 1%, brij 35 0,002%, 2-меркаптоэтанолом 0,02%, BSA 0,2 мг/мл, 100 мкМ KKRNRTLTK, 10 мМ ацетата магния, 15 мкМ ATP, [γ-P-АТР] (удельная активность приблизит.500 имп. в мин./пмоль), ДМСО 4% и тестируемое ингибиторное соединение при необходимой концентрации. Данную реакцию инициировали путем добавления магний ATP смеси. После 40 минут инкубирования при 23°С реакции гасили путем добавления 100 мкл 0,75% фосфорной кислоты, и меченый пептид собирали посредством фильтрации через фосфоцеллюлозную фильтровальную пластинку. Пластинку промывали 4 раза 0,075% фосфорной кислотой (100 мкл на ячейку) и затем, после добавления сцинтилляционной жидкости (20 мкл на ячейку), остаточную радиоактивность измеряли с помощью сцинтилляционного счетчика.
Биологический Пример С
Способ PIM-2 анализа
2
33
Испытываемые соединения, растворенные и разбавленные в ДМСО (2 мкл), добавляли к реакционной смеси, содержащей 10 мкл 5Х реакционного буфера (40 мМ MOPS рН 7,0, 5 мМ ЭДТА), 10 мкл раствора рекомбинантного человеческого PIM2 (4 нг PIM-2, растворенного в буфере для разбавления (20 мМ MOPS рН 7,0; ЭДТА 1 мМ; 5% глицерин; 0,01% Brij 35; 0,1%; 0,1% 2-меркаптоэтанол; 1 мг/мл BSA)) и 8 мкл воды. Реакции инициировали путем добавления 10 мкл ATP раствора (49% (15 мМ MgCl; 75 мкМ АТР) 1% ([γ-P]АТР: маточный 1 мКи/100 мкл; 3000 Ки/ммоль (Perkin Elmer)) и 10 мкл субстратного пептидного раствора (RSRSSYPAGT, растворенного в воде при концентрации 1 мМ). Данные реакции поддерживали в течение 10 минут при 30°С. Реакции гасили с помощью 100 мкл 0,75% фосфорной кислоты и затем переносили на и фильтровали через фосфоцеллюлозную фильтровальную пластинку (Millipore, MSPH-N6B-50). После промывания каждой ячейки 4 раза 0,75% фосфорной кислотой в каждую ячейку вводили сцинтилляционную жидкость (20 мкл), и остаточную радиоактивность измеряли с использованием люминесцентного счетчика Wallac.
Биологический Пример D
Модуляторная активность в отношении пролиферации клеток
Ниже представлен протокол репрезентативной пробы на пролиферацию клеток с использованием красителя аламар голубой (Alamar Blue) (сохраняется при 4°С, используют 20 мкл на ячейку).
96-ячеечное планшетное устройство и обработка соединений
a. Клетки делят и подвергают трипсинизации.
b. Подсчитывают клетки с использованием гемоцитометра.
c. Засевают 4000-5000 клеток на ячейку в 100 мкл среды и помещают в 96-ячеечный планшет в соответствии со следующей схемой планшета. Добавляют клеточную культуральную среду только в ячейки B10-В12. Ячейки B1-В9 содержат клетки, но соединение к ним не добавляют.
1 2 3
4 5 6
7 8 9
10 11 12
А
ПУСТЫЕ
В
Соединение не добавляется
Только среднее
С
10 нМ
100 нМ
1 мкМ
10 мкМ
Контроль
D
10 нМ
100 нМ
1 мкМ
10 мкМ
Соед1
Е
10 нМ
100 нМ
1 мкМ
10 мкМ
Соед2
F
10 нМ
100 нМ
1 мкМ
10 мкМ
Соед3
G
10 нМ
100 нМ
1 мкМ
10 мкМ
Соед4
Н
ПУСТЫЕ
d. Добавляют 100 мкл 2Х лекарственного разбавления в каждую ячейку в концентрации, указанной на вышеприведенной схеме планшета. В то же самое время добавляют 100 мкл среды в контрольные ячейки (ячейки В10-В12). Полный объем составляет 200 мкл /ячейку.
2
е. Инкубируют в течение четырех (4) суток при 37°С, 5% CO в увлажненном инкубаторе.
f. Добавляют 20 мкл реактива аламар голубой (Alamar Blue) в каждую ячейку.
2
g. Инкубируют в течение четырех (4) часов при 37°С, 5% CO в увлажненном инкубаторе.
h. Записывают флуоресценцию при длине волны возбуждения 544 нм и длине волны эмиссии 590 нм с использованием микропланшетного ридера.
В данных пробах клетки культивировались с испытываемым соединением в течение приблизительно четырех суток, затем к клеткам добавляли краситель, и флуоресценция невосстановленного красителя обнаруживалась приблизительно через четыре часа. В данных пробах могут использоваться различные типы клеток (например, НСТ-116 клетки колоректального рака человека, РС-3 клетки рака предстательной железы человека, MDA-MB231 клетки рака молочной железы человека, K-562 клетки хронического миелоидного лейкоза (CML) человека, MiaPaca клетки рака поджелудочной железы человека, MV-4 клетки острого миелоидного рака человека, и BxPC3 клетки аденокарциномы поджелудочной железы человека).
Активности соединений настоящего изобретения, испытанных в этих in vitro и клеточных пробах, представлены в Таблицах 1А и 2А ниже. Соединения, перечисленные в Таблицах 1А и 2А, являются Примерами и видами, описанными выше.
Цитирование вышеуказанных патентов, патентных заявок, публикаций и документов не является признанием того, что вышеизложенное имеет отношение к предшествующему заделу в этой области, также как и признанием в отношении содержания или даты этих публикаций или документов. Более того, содержания данных патентов, патентных заявок, публикаций и документов, цитированных здесь, инкорпорированы путем отсылки в своей полноте для всех целей в такой же мере, как если бы каждое в отдельности и все они были специально инкорпорированы путем отсылки.
В отношении предыдущего могут быть сделаны модификации без отхода от основных аспектов данного изобретения. Хотя настоящее изобретение детально описано со ссылкой на один или несколько специфических вариантов воплощения, рядовым специалистам в данной области очевидно, что в отношении вариантов воплощения, специально раскрытых в данной заявке, могут быть сделаны изменения, и тем не менее, эти модификации и улучшения находятся в рамках объема и сути данного изобретения. Данное изобретение, описанное здесь в иллюстративном плане, может быть соответствующим образом применено на практике в отсутствии любого(ых) элемента(ов), который(е) здесь специально не раскрыт(ы). Так, например, в каждом рассмотренном здесь случае любой из терминов "включающий", "состоящий, главным образом, из", и "состоящий из" может быть заменен любым из двух других терминов. Таким образом, термины и выражения, которые были здесь задействованы, используются как термины описания, а не ограничения, не исключены и эквиваленты свойств, показанных и описанных здесь, или их части, и нужно осознавать, что в рамках данного изобретения возможны различные модификации.