Влияние спиртовой вытяжки лабазника вязолистного на состояние системы крови после введения цитостатика

ВЛИЯНИЕ СПИРТОВОЙ ВЫТЯЖКИ ЛАБАЗНИКА ВЯЗОЛИСТНОГО НА СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ КРОВИ ПОСЛЕ

ВВЕДЕНИЯ ЦИТОСТАТИКА

С.Г. Аксиненко, А.В. Горбачева, В.Г. Пашинский

НИИ фармакологии Томского научного центра СО РАМН

Особенностью химиотерапии опухолей является малый терапевтический интервал, в этом отношении цитостатики, даже в рекомендованных для клинического применения дозировках, небезопасны для организма [1, 3]. Отсутствие строгой избирательности у антибластомных препаратов приводит к развитию целого комплекса осложнений, выраженность и клинические проявления которых зависят от биологической активности используемых цитостатиков [2]. Одним из наиболее серьезных осложнений химиотерапии является гипоплазия кроветворения. Степень и продолжительность депрессии гемопоэза варьируют при применении различных противоопухолевых препаратов [4].

Арсенал гемостимулирующих средств, имеющихся в распоряжении современной фармакологии, по ряду параметров не соответствует требованиям, предъявляемым к препаратам для использования в медицине [8]. Наиболее перспективными с точки зрения терапевтического действия, низкой токсичности и способности усиливать антибластомный эффект противоопухолевых средств являются, по-видимому, гемостимуляторы растительного происхождения.

Целью исследования нашей работы было изучить влияние спиртовой вытяжки из надземной части лабазника вязолистного Filipéndula ulmaria (L.) Maxim, на восстановление процессов гемопоэза в условиях миелодепрессии, вызванной введением цитостатиков.

Материал и методы

Эксперименты проводили на мышах-самцах линии СВА массой 18—20 г. Животные первой категории (конвенциальные линейные мыши) получены из коллекционного фонда НИЛ экспериментального биомоделирования СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2004. №4

НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН (сертификат имеется). Животных содержали на обычном пищевом рационе в условиях вивария. Умерщвление мышей производили, соблюдая правила поведения работ с использованием экспериментальных животных, путем дислокации шейных позвонков [9].

Надземная часть лабазника вязолистного была собрана в окрестностях г. Томска в июле 2000 г. Настойку надземной части лабазника вязолистного готовили в соответствии с требованиями ГФ XI (1990) при следующем соотношении компонентов: надземная часть лабазника вязолистного — 10%, 40° спирт этиловый — 90%. Опытной группе настойку надземной части лабазника вязолистного в дозе 5 мл/кг вводили ежедневно внутрижелудочно через зонд за 5 дней до инъекции циклофосфана и затем продолжали вводить до окончания эксперимента. Контрольная группа животных в эквивалентном режиме получала дистиллированную воду. Б каждой группе было по б животных. Циклофос-фан вводили однократно внутрибрюшинно в 1/2 максимально переносимой дозы (МПД) -125 мг/кг. Определение величины МПД для цитостатика проводили методом пробит-анализа по Литчфилду и Вилкоксону [10].

На 2, 4—8, 11-е сут после инъекции цикло-фосфана в костном мозге бедренных костей выявляли общее количество миелокариоцитов и число ретикулоцитов в периферической крови. Определение показателей периферической крови и костного мозга осуществляли стандартными гематологическими методами [5—7]. Полученные результаты обрабатывали статистически, значимость различий между группами определяли, используя параметрический (критерий Стьюдента) и непараметрический (критерий Вилкоксона — Манна — Уитни) методы [10].

Влияние спиртовой вытяжки лабазника вязолистного на состояние системы крови после _________________________________введения цитостатика______________________________________

Влияние настойки лабазника вязолистного на показатели костномозгового кроветворения

Срок исследования, сут Общее число ми елокари оцитов Незрелые ІІГ Зрелые НГ Лимфолные клетки Эритроидные клетки

Фон 12,03 ± 0,87 0,68 ±0,13 5,16 ±030 5,14+039 0,88 ± 022

2 Контрольная группа 1,32 ±0,21 - 0,31 ±0,11 1,00 ±021 -

Опытная группа 1,63 ±0^1 - 0,43 ±0,12 1,21 ±021 -

А Контрольная группа 4,01 ±0,19 2,66 ±0,16 0,38 ± 0,08 0,63 ± 0,05 0,34 ± 0,07

*т Опытная группа 4,98 ± 0,25* 2,66 ±0,15 0,88 ± 0,08* 0,83 ± 0,08* 0,60 ± 0,03*

Контрольная группа 7,32 ± 0,32 2,48 ±0,18 3,80 ± 0,49 0,99 ± 0,12 0,05 ±0,01

Опьгтая группа 9,12 ±0,32* 3,37 ±0,19* 4,23 ±0,22 1,35 ±0,10* 0,15 ±0,02*

Л Контрольная группа 10,11 ±0,53 1,57 ±0,17 7,56 ±039 0,93 ± 0,08 0,03 ±0,01

и Опытная группа 12,21 ± 0,61* 2,87 ±0,32* 7,76 ±0,40 1,46 ±0,15* 0,13 ±0,03*

7 Контрольная группа 9,39 ± 0,50 1,09 ±0,14 6,92 ±0,48 1.11 ±0,16 0,05 ±0,01

Опытная группа 12,96 ± 1,21* 1,65 ±0,19* 9,96 ± 1,02* '1,23 ±023 0,08 ± 0,03

з Контрольная группа 10,39 ±0,62 0,98 ±0,14 8,40 ± 0,46 0,86 ±0,14 0,10 ±0,01

Опытная группа 13,65 ±0,35* 1,18 ±0,15 11.04 ±0,51* 1,21 ±0,11* 0,16 ±0,03

11 Контрольная группа 7,22 ±0,35 0,52 ±0,12 4,28 ± 025 1,85±0,11 0,32 ±0,05

11 Опытная группа 10,81 ± 0,60* 0,88 ±0,10* 6,20 ± 0,60* 2,34 ±0,10* 1,03 ±0,18*

Примечание.“* - различия статистически значимы гю сравнению с контролем (р<0,05).

Результаты и обсуждение

У мышей, получавших циклофосфан в 1/2 МПД, развивается выраженная гемодепрессия. Так, на 2-е сут после введения цитостатика наблюдается значительное уменьшение общего количества кариоцитов по сравнению с интакт-ной группой. Гипоплазия костного мозга была обусловлена снижением числа зрелых нейтро-фильных гранулоцитов и лимфоидных клеток в 19,3 и 5 раз соответственно по сравнению с фоновыми значениями, а также эритрокарици-тов и незрелых гранулоцитов, вплоть до полного исчезновения на препаратах костного мозга (таблица). Выраженное угнетение процессов костномозгового кроветворения приводит к развитию у мышей панцитопенического состояния, характеризующегося значительным снижением на 4-е сут эксперимента ретикулоцитов и всех форм лейкоцитов в периферической крови.

Введение настойки надземной части лабазника вязолистного вызывало стимуляцию регенерации костномозгового эритро- и грануло-цитопоэза. Так, общее количество миелокари-оцитов после назначения спиртового экстракта лекарственного растения на 4—8-е, 11-е сут эксперимента оказалось достоверно выше (в 1,2— 1,5 раза) по сравнению с животными контрольной группы. Увеличение на 26—45% коли-

чества костномозговых нуклеаров на 5—7-е, 11-е сут наблюдения происходило за счет стимуляции процессов восстановления числа незрелых форм нейтрофильных гранулоцитов и лимфоидных клеток (4—6, 8,11-е сут исследования) (таблица). Значительное усиление в 1,3—1,4 раза, в костном мозге пролиферации и дифференци-ровки незрелых нейтрофильных гранулоцитов в зрелые наблюдалось на 7—11-е сут с достоверным увеличением их выхода в периферическую кровь на 5,7,11-е сут эксперимента по сравнению с аналогичными значениями в контроле. Кроме того, на 4—6-е, 11-е сут наблюдения в костном мозге у мышей, получавших спиртовую вытяжку изучаемого растения, в 1,8—3 раза увеличивалось число эритроидных клеток. При исследовании периферического звена эритро-на у животных после назначения настойки лабазника на 7—11-е сут эксперимента было зафиксировано значительное увеличение (в 1,2— 1,8 раза) числа ретикулоцитов по сравнению с мышами, получавшими воду.

Таким образом, применение спиртовой вытяжки лабазника вязолистного после введения цитостатика позволяет значительно ускорить процессы восстановления костномозгового кроветворения и увеличить количество зрелых эритроцитов и ретикулоцитов в периферической крови.

СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2004. №4

Литература

1. Блохин Н.Н., Переводчикова Н.И. Химиотерапия опухолевых заболеваний. М., 1984. 384 с.

2. Гершанович М.Л. Осложнения при химио- и гормо нотерапии злокачественных опухолей. М., 1982.224 с.

3. Гольдберг В.Е., Дыгай A.M., Новицкий В.В. Рак лег кого и система крови. Томск, 1992. 236 с.

4. Гольдберг В.Е., Дыгай A.M., Карпова Г.В. и др. О механизмах стимулирующего влияния D-глюкуроновой кислоты на процессы костномозгового гранулоцитопоэза вусловиях цитостатической миелодепрессии// Бюл. экспе-рим. биол. и мед. 1993. № 4. С. 350-352.

5. Гольдберг В.Е., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. Томск, 1992. 272 с.

6. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и рас познавания патологических процессов. Л., 1978.124 с.

7. Лабораторные методы исследования в клинике: Спра вочник / Под ред. В.В. Меньшикова. М., 1983. 426 с.

8. Пашинский ВТ., Яременко К.В. Проблемы онколо гической фармакологии. Томск, 1983. 202 с.

9. Руководство по экспериментальному (доклиническо му) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000. 364 с.

10. УрбахВ.Ю. Статистический анализ в биологичес ких исследованиях. М., 1975. 175 с.

Поступила 26.12.03