Матриксные металлопротеиназы и их ингибиторы в развитии фиброза почек при сахарном диабете

Матриксные металлопротеиназы и их ингибиторы в развитии фиброза почек при сахарном диабете

Проф. И.А. БОНДАРЬ, д.м.н. В.В. КЛИМОНТОВ*

The role of matrix metalloproteinases and their inhibitors in the development of renal fibrosis in the patients with diabetes mellitus

I.A. BONDAR', V.V. KLIMONTOV

Кафедра эндокринологии Новосибирского государственного медицинского университета

Накопление компонентов внеклеточного матрикса в клубочках и интерстиции почек является характерной особенностью диабетической нефропатии. Основную роль в катаболизме внеклеточного матрикса играют матриксные металлопротеиназы (ММП). Активность этих ферментов регулируется группой ингибиторов, включающей тканевые ингибиторы металлопротеиназ, ингибитор активатора плазминогена-1 и другие. Исследования in vitro и in vivo показали, что снижение активности ММП и/или повышение экспрессии тканевых ингибиторов ММП в клубочковых и канальцевых клетках приводит к подавлению катаболизма компонентов внеклеточного матрикса в условиях гипергликемии. Циркулирующие и экскретируемые с мочой ММП и их ингибиторы изучаются как новые потенциальные маркеры фиброза почек при диабете. Направленная активация ММП и нейтрализация их ингибиторов может быть перспективным подходом к лечению диабетической нефропатии.

Ключевые слова: диабетическая нефропатия, матриксные металлопротеиназы.

The accumulation of components of extracellular matrix in the glomerular and interstitial compartments of the kidneys is a characteristic feature of diabetic nephropathy. The leading role in the extracellular matrix catabolism is played by matrix metalloproteinases (MMP). The activity of these enzymes is regulated by a group of inhibitors including tissue metalloproteinase inhibitors, plasminogen activator inhibitor-1, etc. Both in vivo and in vitro studies have demonstrated that a reduction of MMP activities and/or an increase of expression of MMP tissue inhibitors in the glomerular and tubular cells result in the suppression of catabolism of the components of extracellular matrix under the hyperglycemic conditions. Both circulating and urinary MMP as well as their inhibitors are considered to be new potential markers of renal fibrosis associated with diabetes mellitus. It is concluded that the directed activation of MMP and neutralization of their inhibitors provide a promising tool for the treatment of diabetic nephropathy.

Key words: diabetic nephropathy, matrix metalloproteinases.

Расшифровка механизмов развития фиброза почек при сахарном диабете (СД) остается одной из актуальных задач. Накопление компонентов внеклеточного матрикса в клубочках и интерстиции почек, составляющее основу развития фиброза, начинается еще до появления клинических признаков диабетической нефропатии (ДН) [1]. Установлено, что гипергликемия запускает синтез компонентов матрикса (коллагена, протеогликанов, фибронек-тина и др.) в различных участках нефрона. Этот эффект реализуется через протеинкиназу С, продукты гликирования, окислительный стресс, фиброгенные факторы роста и цитокины [2, 3]. В последние годы большее внимание уделяется нарушениям катаболизма матрикса в «диабетических» почках. Ведущая роль в этом процессе принадлежит ферментам из группы матриксных металлопротеиназ (ММП).

Цель настоящего обзора — обобщить данные о роли ММП и их ингибиторов в развитии фиброза почек при СД. Поиск данных осуществлен по базам данных Medline/Pubmed и eLibrary.

Общая характеристика ММП и их ингибиторов

ММП. Семейство белков MMП (матриксинов) относится к надсемейству цинковых металлопро-теиназ. Большинство ММП синтезируется как пре-пробелки и секретируется как проферменты. Активация проMMП осуществляется под действием плазмина или других MMП. Лишь отдельные представители металлопротеиназ, известные как MMП мембранного типа, секретируются в функционально активной форме [4].

В настоящее время известно более 30 MMП, объединенных в 6 различных групп (табл. 1). Они различаются молекулярной структурой, субстратной специфичностью и распределением в тканях. Наиболее изучены ферменты группы желатиназ — ММП-2 и ММП-9. Именно этим ферментам принадлежит ведущая роль в расщеплении коллагена IV типа и других компонентов матрикса в почках. ММП из группы коллагеназ, стромелизинов и ма-трилизинов также участвуют в расщеплении компонентов матрикса. ММП мембранного типа яв-

© И.А. Бондарь, В.В. Климонтов, 2012 ПРОБЛЕМЫ ЭНДОКРИНОЛОГИИ, 1, 2012

*klimontov@mail.ru

Таблица 1. Группы MMП [1, 11, 24]

Группа

Ферменты

Субстраты

Коллагеназы Желатиназы

Стромелизины

Матрилизины

ММП мембранного типа

Другие ММП_

ММП-1, -8, -13, -18 ММП-2, -9

ММП-3

МТ1-, МТ-2, МТ-3, МТ4-, МТ5-, МТ-6-ММП (или ММП-14, -15, -16, -17, -24, -25 соответственно) ММП-11, -12, -19, -20, -21, -22, -23а, -23Ь, 28

Коллагены I, II и III типов Коллагены IV и V типа, денатурированные коллагены, ламинин, некоторые хемокины Фибронектин, ламинин, коллагены, эластин

Компоненты ВКМ, некоторые клеточно-поверхностные молекулы

Другие ММП (участвуют в превращении латентных ММП в их активные формы) Разные

Примечание. ВКМ — внеклеточный матрикс.

Таблица 2. Субстратная специфичность ТИМП-1, -2, -3, -4 [1, 24]

Ингибитор

Субстрат

ТИМП-1 Образует нековалентный комплекс со всеми активными ММП, за исключением МТ1-, МТ3-, МТ5-ММП. Наибольшая аффинность — к ММП-1, -2, -8, -13, -18, стромелизину-1. Образует комплекс с ММП-9, блокируя ее активацию стромелизинами

ТИМП-2 Активен в отношении всех ММП, с высокой специфичностью ингибирует ММП-2

ТИМП-3 Ингибирует преимущественно ММП-1, -2, -3, -9. Обладает высокой аффинностью к компонентам матрикса, проявляет ингибиторную активность в местах связывания с ними

ТИМП-4 Ингибирует разные ММП, в наибольшей степени — ММП-2_

ляются рецепторами и активаторами других ММП и обеспечивают протеолиз в околоклеточном пространстве. Группа «других» ММП включает разные пептидазы, которые секретируются единичными типами тканей и клеток или экспрессируются в особых ситуациях [5, 6].

Ингибиторы ММП. Активность ММП в физиологических условиях регулируется рядом специфических ингибиторов, прежде всего тканевыми ингибиторами металлопротеиназ (ТИМП). В настоящее время хорошо изучены ТИМП-1, ТИМП-2, ТИМП-3 и ТИМП-4, которые различаются по специфическому действию на металлопротеиназы (табл. 2). Так, ТИМП-1 наиболее активно ингибирует ММР-9, в то время как ТИМП-2 подавляет активность ММП-2 [5].

Важным ингибитором ММП является ингибитор активатора плазминогена 1-го типа (ИАП-1), способный блокировать активаторы плазминогена тканевого и урокиназного типов и препятствовать образованию плазмина. Блокируя плазминообразо-вание, ИАП-1 препятствует активации ММП. Другой механизм его подавляющего действия связан со способностью соединяться с активатором плазминогена урокиназного типа. Это предотвращает индуцированную урокиназой активацию МТ1-ММП, с помощью которой образуется функционально активная форма ММП-2 [4]. Активность ММП также может подавляться а2-макроглобулином, мегзином и другими ингибиторами [4, 7].

Экспрессия и функции MMП и их ингибиторов

в почках

Экспрессия ММП и их ингибиторов. В физиологических условиях в почках синтезируются ММП-2, -3, -9, -13, -14, -15, -24, -25, -27 и -28, а также ТШР-1, -2 и -3. Эти молекулы экспрессируются многими типами клеток: мезангиальными, эндотелиальными, эпителиальными, гладкомышечными, фибробласта-ми, однако их распределение не всегда равномерно. ММП-2, ММП-3, ММП-9 выявляются на протяжении всего нефрона. ММП-13 и ММП-14 экс-прессируются в основном в клубочках. Преимущественно канальцевую локализацию имеет ММП-24. ТИМП-1, ТИМП-2 выявляются в клубочках и канальцах [5, 6]. Преимущественно в мезангиоцитах синтезируется мегзин [7].

Функции ММП. Баланс между активностью ММП и их ингибиторов играет большую роль в эмбриональном развитии почек, в частности, в не-фроногенезе. Во «взрослых» почках ММП участвуют в ремоделировании внеклеточного матрикса, что важно для поддержания структурной и функциональной целостности клубочков и интерсти-ция. ММП регулируют обмен матрикса, катализируя распад его компонентов, а также изменяя активность факторов роста и сигнальных молекул [8]. Кроме того, ММП и их ингибиторы участвуют в регуляции апоптоза и пролиферативной активности нефроцитов [9]. Нарушение баланса в системе ММП и их ингибиторов является одним из меха-

низмов развития ряда острых и хронических заболеваний почек [5, 6, 9—11].

MMП и их ингибиторы в патогенезе ДН

Исследования in vitro. Проведенные в 90-х гг. прошлого века исследования [12, 13] показали, что высокий уровень глюкозы тормозит деградацию компонентов внеклеточного матрикса в мезангиоцитах. Отчасти этот эффект объясняется снижением активности ММП-2 [14]. Хотя в условиях избытка глюкозы экспрессия ММП-2 в мезангиоцитах может повышаться, процесс активации фермента замедлен [15]. Изменения синтеза ММП зависят от длительности воздействия глюкозы. Например, в подоцитах мыши высокая концентрация глюкозы увеличивает экспрессию и активность ММП-9 на 2—3-й день культивирования, однако после 5-го дня активность фермента снижается [16].

Снижение активности ММП при избытке глюкозы может быть результатом повышения продукции их ингибиторов. Показано, что в мезангиоцитах глюкоза повышает экспрессию ТИМП-1 и ТИМП-3 [17], а также ингибитора ММП мегзина [7]. В эпите-лиоцитах проксимальных канальцев повышенный уровень глюкозы стимулирует синтез ТИМП-2 и снижает синтез и активность ММП-2 [18]. В фибро-бластах коркового вещества почки избыток глюкозы повышает экспрессию ИАП-1 [19].

Влияние гипергликемии на синтез ММП и их ингибиторов усугубляют продукты гликирования и факторы роста. Поздние продукты гликирования снижают экспрессию ММП-7 в мезангиоцитах. Этот эффект блокируют антитела к трансформирующему фактору роста р (ТФР-р) [20]. Продукты гликиро-вания повышают экспрессию генов ТИМП-3 и ИАП-1 [21]. В свою очередь ИАП-1 усиливает сигнал ТФР-р [22]. Последний снижает синтез ММП-2 и повышает синтез ТИМП-2 в мезангиоцитах [14]. В канальцевых клетках ТФР-р и ангиотензин II оказывают такой же эффект [18]. Тормозящее влияние глюкозы и ТФР-р на катаболизм матрикса в мезан-гиоцитах резко усиливает фактор роста соединительной ткани (ФРСТ), повышающий экспрессию ТИМП-1 и ТИМП-3 [17]. Инсулиноподобный фактор роста 1 (ИФР-1) снижает активность ММП-2 в мезангиоцитах [23].

Гликирование компонентов матрикса при диабете тормозит их деградацию. Показано, что накопление продуктов гликирования в мезангии клубочков почти вдвое снижает активность ММП, секре-тируемых мезангиальными клетками [15]. Гликиро-ванный коллаген снижает продукцию мезангиоци-тами ММР-2 и повышает продукцию ТИМП-1 [24].

Исследования на моделях СД у животных. В почках крыс со стрептозотоциновым СД

[25]. Экспрессия ММП-2 возрастает, но активность фермента снижается [26]. Обнаружена связь между экспрессией белка Ets-1 — активатора генов ММП и экспрессией ММП-2 [27]. Экспрессия ММП-9 оказалась повышенной через 8 нед после индукции стрептозотоцинового СД [28] и сниженной через 6 мес после начала диабета [26]. У мышей линии db/db (модель СД 2-го типа) на ранних стадиях нефропатии обнаружено снижение экспрессии а- и p-меприна — металлопротеиназ щеточной каймы проксимальной канальцев. У мышей линии db/db с выраженной нефропатией и у крыс со стрептозото-ционовым СД содержание а-меприна отрицательно коррелировало с выраженностью поражения почек [29]. На другой модели СД 2-го типа (мыши линии Kkay), обнаружено повышение содержания и экспрессии ММП-9 в клубочках [30].

Интересно, что в почках плодов крыс с СД значительно снижена активность ММП-2 и ММП-9, а экспрессия ТФР-р и ФРСТ, напротив, повышена. Это может способствовать нарушениям нефроно-генеза и предопределять повышенную склонность к развитию патологии почек после рождения [31].

Синтез ингибиторов ММП в почках при диабете увеличивается. У крыс со стрептозотоциновым СД обнаружено увеличение экспрессии ТИМП-1 [25, 26] и ТИМП-2 [18, 27]. Повышение экспрессии ТИМП-2 в клубочках и канальцах почек положительно коррелировало с альбуминурией и отрицательно — с экспрессией ММП-2 [18]. Соотношение ММП-2/ТИМП-2 в клубочках и тубулоинтерстиции в свою очередь было обратно связано с содержанием коллагена IV типа [27].

Изменения синтеза ИАП-1 в почках при диабете не изучены, однако они могут иметь важное значение в развитии ДН. Показано, что нокаут гена ИАП-1 у мышей приводит к уменьшению выраженности диабетического гломерулосклероза [32]. У мышей с отсутствием гена ИАП-1 не увеличивается альбуминурия и ниже уровень ТФР-р в корковом веществе почек по сравнению с животными с диабетом и сохранным синтезом ИАП-1 [22].

Исследования у пациентов с СД. Данные об изменениях активности ММП и их ингибиторов у больных с ДН фрагментарны. В почках пациентов с СД 2-го типа выявлено снижение экспрессии ММП-2 [33], ММП-7 [20] и повышение экспрессии МТ5-ММП [34]. Некоторые исследователи зафиксировали связь между изменениями активности ММП и их ингибиторов с почечным фиброзом. Т. Cornish и соавт. [35] выявили снижение содержания ММП-1 и ТИМП-1 у больных СД со скоростью клубочко-вой фильтрации ниже 30 мл/мин и отметили обратную связь между интенсивностью окрашивания на ММП-1 и выраженностью фиброза клубочков. По данным D. Suzuki и соавт. [36], экспрессия ММП-3 и ТИМП-1 в клубочках почек наиболее вы-

Механизмы подавления катаболизма компонентов ВКМ в почках при СД.

ММП — металлопротеиназы, ТФР-р — трансформирующий фактор роста в, ФРСТ — фактор роста соединительной ткани, ИФР-1 — инсулиноподобный фактор роста-1, ВКМ — внеклеточный матрикс.

сока у больных СД с начальной степенью расширения мезангия; по мере развития гломерулосклероза она снижается; экспрессия ММП-3 и ТИМП-1 в тубулоинтерстиции коррелирует с выраженностью интерстициального фиброза.

Таким образом, результаты экспериментов in vitro, in vivo на моделях СД, а также исследования у больных с ДН свидетельствуют о сложных нарушениях регуляции синтеза ММП и их ингибиторов в почках в условиях гипергликемии. Некоторую противоречивость данных можно объяснить многоком-понентностью системы катаболизма внеклеточного матрикса, сложностью ее регуляции, возможностью фазных изменений на разных стадиях поражения почек. Вместе с тем не вызывает сомнений, что дисбаланс между синтезом и активностью ММП и их ингибиторов способствует нарушениям процессов ремоделирования матрикса и развитию фиброза клубочков и тубулоинтерстиция почек при СД (рис. 1).

MMP и их ингибиторы как потенциальные

диагностические маркеры ДН

Содержание ММП и их ингибиторов в крови. В ряде исследований зафиксировано повышение содержания ММП в плазме у больных СД. В частности, найдено повышение уровня ММП-2 при СД 1-го типа [37], ММП-9 при СД 2-го типа [38]. В последнем случае повышение уровня ММП-9 оказалось предиктором микроальбуминурии. Соотношение ММП-9/ТИМП-1 и ММП-2/ТИМП-2 у больных СД2 с нефропатией было вдвое выше, чем у пациентов с нормальной функцией почек [39]. Однако ММП могут поступать в кровоток не только из почек, но и из других органов, в частности, из сте-

нок сосудов. У больных с ДН найдено увеличение содержания ММП-2 и особенно ММП-9 в стенках артерий [40], установлена связь между повышением ММП-2 в крови, протеинурией и выраженностью атеросклероза сонных артерий [41].

Экскреция ММП и их ингибиторов с мочой. О нарушениях синтеза ММП и их ингибиторов при патологии почек можно судить по изменениям экскреции этих веществ с мочой. У больных СД1 повышение экскреции ММП-2 связано с развитием микроальбуминурии [37]. У больных СД2 найдена связь между экскрецией ММП-9, альбуминурией [42, 43] и функцией почек [43]. Имеются данные о повышении экскреции ММП-14 у пациентов с ДН [44]. Показано, что экскреция ТИМП-1 при ДН коррелирует с альбуминурией и выраженностью поражения клубочков [45].

Таким образом, определение содержания ММП и их ингибиторов в плазме и моче является новым подходом к оценке процессов ремоделирования внеклеточного матрикса при СД. Значение различных ММП и их ингибиторов как потенциальных маркеров фиброза почек при ДН необходимо доказать в клинических исследованиях с морфологическим контролем.

MMP и их ингибиторы как новые мишени

для нефропротекции

Сахарснижающие препараты. Устранение гипергликемии, по-видимому, нормализует катаболизм матрикса при СД. Показано, что инсулин повышает способность мезангиоцитов расщеплять компоненты внеклеточного матрикса, вероятно, за счет активации ММП-2 [46]. Инсулинотерапия предупреждает повышение экспрессии ТИМП-1 и снижение деградации матрикса в почечных клубочках у крыс с экспериментальным СД [17].

Тиазолидинедионы также влияют на катаболизм матрикса. Пиоглитазон снижает активность ММП-9 и секрецию ТИМП-1 и ТИМП-2 в культивируемых фибробластах [47]. У крыс со стрептозо-тоциновым СД троглитазон тормозит синтез ИАП-1 в почках [48]. Известно, что тиазолидиндионы оказывают антиальбуминурический эффект у больных СД2 [49]. Однако способность тиазолидиндионов тормозить развитие фиброза почек при СД остается недоказанной.

Блокаторы ренин-ангиотензиновой системы. Пе-риндоприл уменьшает степень подавления активности ММП-2 и ММП-9 и снижает синтез ТИМП-1 у крыс со стрептозотоциновым СД [26]. Эналаприл препятствует снижению экспрессии а- и р-меприна (металлопротеиназы щеточной каймы проксимальных канальцев) и уменьшает экскрецию а-меприна с мочой у мышей с СД линии ёЬ/ёЬ [29]. Лозартан предотвращает повышение экспрессии Т!МП-2 в почках крыс с экспериментальным СД [50].

Селективные модуляторы активности ММП. Выяснение роли ММП и их ингибиторов в развитии ДН открывает перспективы направленного воздействия на эти молекулы с целью нефропротекции. Показано, что инсерция гена ММП-1 предупреждает развитие фиброза почек у мышей со стрептозо-тоциновым СД [51]. In vitro антитела к ТИМП-1 в значительной степени блокируют подавляющие эффекты глюкозы на деградацию компонентов ма-трикса в мезангиоцитах [17]. Таким образом, направленная активация ММП и/или нейтрализация их ингибиторов может оказаться перспективным подходом к лечению ДН.

Заключение

Дисбаланс между активностью ММП и их ингибиторов играет важную роль в развитии ДН.

ЛИТЕРАТУРА

1. Шестакова М.В., Дедов И.И. Сахарный диабет и хроническая болезнь почек. М: МИА 2009.

2. Бондарь И.А., Климонтов В.В. Изменения обмена коллагена при диабетической нефропатии. Пробл эндокринол 2005; 2: 23—28.

3. Forbes J.M., FukamiK, CooperM.E. Diabetic nephropathy: where hemodynamics meets metabolism. Exp Clin Endocrinol Diabet 2007; 115: 2: 69—84.

4. Соловьева Н.И. Матриксные металлопротеиназы и их биологические функции. Журн биоорган химии 1998; 24: 217— 226.

5. Бобкова И.Н., Козловская Л.В., Ли О.А. Роль матриксных металлопротеиназ в патогенезе заболеваний почек. Тер арх 2008; 6: 86—90.

6. Catania J.M., Chen G., Parrish A.R. Role of matrix metallopro-teinases in renal pathophysiologies. Am J Physiol Renal Physiol 2007; 292: 3: F905—F911.

7. Ohtomo S., Nangaku M, Izuhara Y. et al. The role of megsin, a serine protease inhibitor, in diabetic mesangial matrix accumulation. Kidney Int 2008; 74: 6: 768—774.

8. Lenz O., Elliot S.J., Stetler-Stevenson W.G. Matrix metalloprotei-nases in renal development and disease. J Am Soc Nephrol 2000; 11: 3: 574—581.

9. Tveita A., Rekvig O.P., Zykova S.N. Glomerular matrix metallo-proteinases and their regulators in the pathogenesis of lupus nephritis. Arthritis Res Ther 2008; 10: 6: 229.

10. Keeling J., Herrera G.A. Human matrix metalloproteinases: characteristics and pathologic role in altering mesangial homeostasis. Microsoc Res Tech 2008; 71: 5: 371—379.

11. Thrailkill K.M., Clay Bunn R, Fowlkes J.L. Matrix metalloprotei-nases: their potential role in the pathogenesis of diabetic neph-ropathy. Endocrine 2009; 35: 1: 1—10.

12. Leehey D.J., SongR.H., Alavi N, Singh A.K. Decreased degrada-tive enzymes in mesangial cells cultured in high glucose media. Diabetes 1995; 44: 8: 929—935.

13. McLennan S.V., Yue D.K., Turtle J.R. Effect of glucose on matrix metalloproteinase activity in mesangial cells. Nephron 1998; 79: 3: 293—298.

14. Singh R., Song R.H., Alavi N. et al. High glucose decreases matrix metalloproteinase-2 activity in rat mesangial cells via transforming growth factor-beta1. Exp Nephrol 2001; 9: 4: 249—257.

Сниженная активность ММП и/или повышенный синтез ингибиторов ММП (ТИМП, ИАП-1 и др.) в нефроцитах способствует уменьшению катаболизма компонентов внеклеточного матрикса и создает биохимическую основу для развития фиброза клубочков и интерстиция почек. Гипергликемия играет ведущую роль в развитии нарушений катаболизма матрикса при СД. Дальнейшее изучение изменений активности ММП и их ингибиторов открывает перспективу разработки новых методов диагностики и лечения диабетического поражения почек.

Работа выполнена в рамках научного проекта, поддержанного грантом Президента Российской Федерации по государственной поддержке молодых российских ученых — докторов наук (грант МД-5725.2010.7).

15. McLennan S.V., Martell S.K., Yue D.K. Effects of mesangium gly-cation on matrix metalloproteinase activities: possible role in diabetic nephropathy. Diabetes 2002; 51: 8: 2612—2618.

16. Bai Y., WangL, Li Y. et al. High ambient glucose levels modulates the production of MMP-9 and alpha5 (IV) collagen by cultured podocytes. Cell Physiol Biochem 2006; 17: 1—2: 57—68.

17. McLennan S. V., Wang X. Y, Moreno V. et al. Connective tissue growth factor mediates high glucose effects on matrix degradation through tissue inhibitor of matrix metalloproteinase type 1: implications for diabetic nephropathy. Endocrinology 2004; 145: 12: 5646—5655.

18. Han S.Y., Jee Y.H., Han K.H. et al. An imbalance between matrix metalloproteinase-2 and tissue inhibitor of matrix metalloprotei-nase-2 contributes to the development of early diabetic nephropathy. Nephrol Dial Transplant 2006; 21: 9: 2406—2416.

19. Qi W., Poronnik P., Young B. et al. Human cortical fibroblast responses to high glucose and hypoxia. Nephron Physiol 2004; 96: 4: p121—p129.

20. McLennan S.V., Kelly D.J., Schache M. et al. Advanced glycation end products decrease mesangial cell MMP-7: a role in matrix accumulation in diabetic nephropathy? Kidney Int 2007; 72: 4: 481—488.

21. Lee M.P., Sweeney G. Insulin increases gelatinase activity in rat glomerular mesangial cells via ERK- and PI-3 kinase-dependent signalling. Diabet Obes Metab 2006; 8: 3: 281—288.

22. Nicholas S.B., Aguiniga E, Ren Y. et al. Plasminogen activator inhibitor-1 deficiency retards diabetic nephropathy. Kidney Int 2005; 67: 4: 1297—1307.

23. Lupia E., Elliot S.J., Lenz O. et al. IGF-1 decreases collagen degradation in diabetic NOD mesangial cells: implications for diabetic nephropathy. Diabetes 1999; 48: 8: 1638—1644.

24. Anderson S.S., Wu K, Nagase H. et al. Effect of matrix glycation on expression of type IV collagen, MMP-2, MMP-9 and TIMP-1 by human mesangial cells. Cell Adhes Commun 1996; 4: 2: 89— 101.

25. Yang Q, Xie R.J., Yang T. et al. Transforming growth factor-beta1 and Smad4 signaling pathway down-regulates renal extracellular matrix degradation in diabetic rats. Chin Med Sci J 2007; 22: 4: 243—249.

26. McLennan S.V., Kelly D.J., Cox A.J. et al. Decreased matrix degradation in diabetic nephropathy: effects of ACE inhibition on the

expression and activities of matrix metailoproteinases. Diabetolo-gia 2002; 45: 2: 268—275.

27. Liu D.X., Liu X.M., Su Y, Zhang X.J. Renal expression of proto-oncogene Ets-1 on matrix remodeling in experimental diabetic nephropathy. Acta Histochem 2010.

28. Yao X.M., Ye S., Zai Z. M. et al. Simvastatin protects diabetic rats against kidney injury through the suppression of renal matrix metalloproteinase-9 expression. J Endocrinol Invest 2010; 33: 5: 292—296.

29. Mathew R., Futterweit S., Valderrama E. et al. Meprin-alpha in chronic diabetic nephropathy: interaction with the renin-an-giotensin axis. Am J Physiol Renal Physiol 2005; 289: 4: F911— F921.

30. Qing-Hua G., Ju-Ming L., Chang-Yu P. et al. The kidney expression of matrix metalloproteinase-9 in the diabetic nephropathy of Kkay mice. J Diabet Complicat 2008; 22: 6: 408—412.

31. Van Huyen J.P., Viltard M., Nehiri T. et al. Expression of matrix metalloproteinases MMP-2 and MMP-9 is altered during neph-rogenesis in fetuses from diabetic rats. Lab Invest 2007; 87: 7: 680—689.

32. Seo J.Y., Park J., Yu M.R. et al. Positive feedback loop between plasminogen activator inhibitor-1 and transforming growth factor-beta! during renal fibrosis in diabetes. Am J Nephrol 2009; 30: 6: 481—490.

33. Del Prete D., AnglaniF., Forino M. et al. Down-regulation ofglom-erular matrix metalloproteinase-2 gene in human NIDDM. Dia-betologia 1997; 40: 12: 1449—1454.

34. Romanic A.M., Burns-Kurtis C.L., Ao Z. et al. Upregulated expression of human membrane type-5 matrix metalloproteinase in kidneys from diabetic patients. Am J Physiol Renal Physiol 2001; 281: 2: F309—F317.

35. Cornish T.C., Bagnasco S.M., Macgregor A.M. et al. Glomerular protein levels of matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 are lower in diabetic subjects. J Histochem Cytochem 2009; 57: 11: 995—1001.

36. Suzuki D., Miyazaki M., Jinde K. et al. In situ hybridization studies of matrix metalloproteinase-3, tissue inhibitor of metalloprotei-nase-1 and type IV collagen in diabetic nephropathy. Kidney Int 1997; 52: 1: 111 — 119.

37. Thrailkill K.M., Bunn R.C., Moreau C.S. et al. Matrix metallopro-teinase-2 dysregulation in type 1 diabetes. Diabetes Care 2007; 30: 9: 2321—2326.

38. Ebihara I., Nakamura T., Shimada N., Koide H. Increased plasma metalloproteinase-9 concentrations precede development of mi-croalbuminuria in non-insulin-dependent diabetes mellitus. Am J Kidney Dis 1998; 32: 4: 544—550.

39. Rysz J., Banach M., Stolarek R.A. et al. Serum matrix metallopro-teinases MMP-2 and MMP-9 and metalloproteinase tissue inhibitors TIMP-1 and TIMP-2 in diabetic nephropathy. J Nephrol 2007; 20: 4: 444—452.

40. Chung A.W., Yang H.H., Sigrist M.K. et al. Matrix metalloprotei-nase-2 and -9 exacerbate arterial stiffening and angiogenesis in diabetes and chronic kidney disease. Cardiovasc Res 2009; 84: 3: 494—504.

41. Nagano M., Fukami K., Yamagishi S. et al. Circulating matrix metalloproteinase-2 is an independent correlate of proteinuria in patients with chronic kidney disease. Am J Nephrol 2009; 29: 2: 109—115.

42. Tashiro K., Koyanagi I., Ohara I. et al. Levels of urinary matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and renal injuries in patients with type 2 diabetic nephropathy. J Clin Lab Anal 2004; 18: 3: 206— 210.

43. van der Zijl N.J., Hanemaaijer R., Tushuizen M.E. et al. Urinary matrix metalloproteinase-8 and -9 activities in type 2 diabetic subjects: A marker of incipient diabetic nephropathy? Clin Biochem 2010; 43: 7—8: 635—639.

44. Lauhio A., Sorsa T., Srinivas R. et al. Urinary matrix metalloproteinase -8, -9, -14 and their regulators (TRY-1, TRY-2, TATI) in patients with diabetic nephropathy. Ann Med 2008; 40: 4: 312— 320.

45. Kanauchi M, Nishioka H., Nakashima Y. et al. Role of tissue inhibitors of metalloproteinase in diabetic nephropathy. Nippon Jinzo Gakkai Shi 1996; 38: 3: 124—128.

46. Lee M.P., Sweeney G. Insulin increases gelatinase activity in rat glomerular mesangial cells via ERK- and PI-3 kinase-dependent signalling. Diabet Obes Metab 2006; 8: 3: 281—288.

47. Zafiriou S., Stanners S.R., Saad S. et al. Pioglitazone inhibits cell growth and reduces matrix production in human kidney fibro-blasts. J Am Soc Nephrol 2005; 16: 3: 638—645.

48. Nicholas S.B., Kawano Y., Wakino S. et al. Expression and function of peroxisome proliferator-activated receptor-gamma in mesangial cells. Hypertension 2001; 37: 2: Pt 2: 722—727.

49. Sarafidis P.A., Stafylas P.C., Georgianos P.I. et al. Effect of thiazo-lidinediones on albuminuria and proteinuria in diabetes: a meta-analysis. Am J Kidney Dis 2010; 55: 5: 835—847.

50. DingH.L., Xu M.T., Guo Y. et al. Effect of losartan on the mRNA expressions of MT3-MMP and TIMP-2 in diabetic kidneys. Rev Diabet Stud 2005; 2: 4: 216—220.

51. Aoyama T., Yamamoto S., Kanematsu A. et al. Local delivery of matrix metalloproteinase gene prevents the onset of renal sclerosis in streptozotocin-induced diabetic mice. Tissue Eng 2003; 9: 6: 1289—1299.