КАППА-КАРРАГИНАЗА И КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ КАППА-КАРРАГИНАЗУ

1. Выделенный рекомбинантный полинуклеотид, содержащий последовательность, кодирующую пептид каппа-каррагиназы, причем указанная последовательность функционально связана с полинуклеотидом, кодирующим секреторный сигнальный пептид.
2. Выделенный рекомбинантный полинуклеотид по п.1, где указанный полинуклеотид, кодирующий секреторный сигнальный пептид, получен из Грам-положительного микроорганизма.
3. Выделенный рекомбинантный полинуклеотид по п.1, где указанный секреторный сигнальный пептид является сигнальным пептидом AprE.
4. Выделенный рекомбинантный полинуклеотид по п.1, где указанная последовательность, кодирующая указанный каррагиназный фермент, содержит последовательность, которая является кодон-оптимизированной из полинуклеотида, кодирующего каррагиназу дикого типа, полученную из Alteromonas sp.
5. Выделенный полинуклеотид по п.4, где указанная каррагиназа дикого типа получена из Alteromonas carrageenovora.
6. Выделенный полинуклеотид по п.4, где указанный кодон-оптимизированный полинуклеотид по меньшей мере на примерно 70% идентичен SEQ ID NO: 1 или 3.
7. Вектор экспрессии, содержащий экспрессионную кассету, содержащую выделенную полинуклеотидную последовательность по п.1.
8. Вектор экспрессии по п.7, где указанный секреторный сигнальный пептид является сигнальным пептидом AprE.
9. Вектор экспрессии по п.7, где указанная экспрессионная кассета содержит полинуклеотидную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 14 и 15.
10. Клетка-хозяин, трансформированная указанным вектором экспрессии по п.7.
11. Клетка-хозяин Bacillus, содержащая рекомбинантный полинуклеотид, кодирующий гибридный белок, содержащий:
а) сигнальную последовательность; и
b) белок каррагиназы;
где указанная клетка-хозяин секретирует указанный белок каррагиназы из указанной клетки и где указанная клетка-хозяин имеет по меньшей мере один инактивированный протеазный ген.
12. Клетка-хозяин Bacillus по п.11, где указанный белок каррагиназы имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 70% идентична SEQ ID NO: 4.
13. Клетка-хозяин Bacillus по п.11, где указанный по меньшей мере один инактивированный протеазный ген выбран из nprE, aprE, epr, ispA, bpr, vpr, wprA, mpr-ybjF и nprB.
14. Клетка-хозяин Bacillus по п.11, где указанный по меньшей мере один инактивированный протеазный ген выбран из генов nprE, aprE, epr, ispA и bpr.
15. Клетка-хозяин Bacillus по п.11, где указанные инактивированные протеазные гены являются генами nprE и aprE.
16. Клетка-хозяин по п.11, где указанная сигнальная последовательность является сигнальной последовательностью, кодируемой геном aprE B. subtilis.
17. Клетка-хозяин по п.11, где указанная клетка-хозяин Bacillus является клеткой-хозяином B. subtilis.
18. Клетка-хозяин по п.11, где указанный рекомбинантный полинуклеотид функционально связан с промотором и терминатором для образования экспрессионной кассеты.
19. Клетка-хозяин по п.11, где указанный рекомбинантный полинуклеотид находится в геноме указанной клетки-хозяина или в векторе, который автономно реплицируется в указанной клетке-хозяине.
20. Клетка-хозяин по п.11, где указанный рекомбинантный полинуклеотид является кодон-оптимизированным для экспрессии указанного гибридного белка каррагиназы в указанной клетке-хозяине Bacillus.
21. Культура клеток, содержащая:
множество клеток-хозяев Bacillus по п.11 и
культуральную среду.
22. Способ получения белка каррагиназы, включающий:
(а) культивирование клеток-хозяев по п.11; и
(b) получение указанного белка каррагиназы.
23. Способ по п.22, дополнительно включающий стадию сбора указанной произведенной каррагиназы.
24. Способ по п.22, где указанная клетка-хозяин принадлежит к роду Bacillus.
25. Чистящая композиция, содержащие эффективное количество выделенной каппа-каррагиназы, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 70% идентична каппа-каррагиназе SEQ ID NO: 4.
26. Чистящая композиция по п.25, где указанная чистящая композиция является детергентом.
27. Чистящая композиция по п.26, дополнительно содержащая по меньшей мере один дополнительный фермент или ферментное производное.
28. Чистящая композиция по п.27, где указанные по меньшей мере один дополнительный фермент или ферментное производное выбраны из хемицеллюлаз, пероксидаз, протеаз, целлюлаз, ксилиназ, липаз, фосфолипаз, эстераз, кутиназ, пектиназ, кератиназ, редуктаз, оксидаз, оксидоредуктаз, фенолоксидаз, липоксигеназ, лигниназ, пуллуланаз, танназ, пентозаназ, манназ, β-глюканаз, арабинозидаз, гиалуронидаз, хондроитиназ, лакказ и амилаз или их смесей.
29. Способ очистки, включающий стадию контактирования твердой поверхности и/или изделия, включающей ткань, с чистящей композицией по п.25.
30. Способ по п.29, дополнительно включающий стадию отмывки указанной поверхности и/или изделия после контактирования указанной поверхности или материала с указанной чистящей композицией.
31. Способ по п.29, где указанная поверхность и/или изделие, включающее ткань, загрязнено каппа-каррагинаном.
32. Способ по п.29, где указанная поверхность и/или изделие, включающее ткань, загрязнено заправкой для салата, соусом для барбекю и/или мармеладом.