Современные подходы к определению концентрации альдостерона в плазме крови в клинической диагностике

© КОЛЛЕКТИВАВТОРОВ, 2014 УДК 615.074

Современные подходы к определению концентрации альдостерона в плазме крови в клинической диагностике

Л.М. Красных1, Г.Ф. Василенко1, В.В. Смирнов12, Е.А. Ельцова2, О.А. Чеча1, О.А. Горошко1

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 127051, Москва, Россия 2Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова, 119991, Москва, Россия

Резюме: Альдостерон — наиболее активный минералокортикостероидный гормон, синтезирующийся в клубочковой зоне надпочечников. Синтез и секреция альдостерона стимулируется низкой концентрацией натрия и высокой концентрацией калия в плазме крови. При этом наиболее важное влияние на секрецию альдостерона оказывает ренин-ангиотен-зивная система. Неконтролируемое повышение содержания альдостерона происходит при первичном альдостеронизме, вызванном альдостерон-секретируемой аденомой коры надпочечников (синдром Конна), а также при вторичном альдостеронизме. В этом случае повышение содержания альдестерона обусловлено повышением активности ренина, что может происходить при стенозе почечных артерий. Одним из распространенных методов определения альдостерона в биожидкостях является радиоиммунный метод анализа, основанный на измерении конкурентного взаимодействия альдестеро-на, испытуемой биожидкости и меченого стандарта гормона с антителами к альдостерону. Однако в последнее время в практике определения альдостерона в плазме крови преобладает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием.

Ключевые слова: альдостерон; первичный и вторичный альдостеронизм; радиоиммунологический анализ; LC-MS/MS.

Библиографическое описание: Красных ЛМ, Василенко ГФ, Смирнов ВВ, Ельцова ЕА, Чеча ОА, Горошко ОА. Современные подходы к определению концентрации альдостерона в плазме крови в клинической диагностике. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения 2014; 3: 13—18.

MODERN APPROACHES TO DEFINING PLASMA ALDOSTERONE LEVELS IN CLINICAL DIAGNOSIS L.M. Krasnykh1, G.F. Vasilenko1, V.V. Smirnov12, E.A. Eltsova2, O.A. Checha1, O.A. Goroshko1

'Federal State Budgetary Institution «Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products» of the Ministry of Health of the Russian Federation, 127051, Moscow, Russia 2I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, 119991, Moscow, Russia Pervy Moscow State Medical University

Abstract: Aldosterone is the most active mineralocorticoids synthesized in zona glomerulosa of adrenal gland. Synthesis and release of aldosterone is stimulated by low sodium concentration and high potassium concentration in blood plasma. Renin-angiotensin system influences the release of aldosterone the most. Primary hyperaldosteronism, caused by aldosterone-release adrenal cortex adenoma (Conn's syndrome), leads to uncontrolled increase of aldosterone levels, as well as to secondary aldosteronism. In this case, the increase of aldosterone levels is stipulated by renin activity increase, which may occur in case of renal artery stenosis. One of the common methods for defining aldosterone levels in biological fluids is radioimmunoassay method, based on measuring competitive interaction between aldosterone, test biological fluid and a tagged hormone standard with antibodies to aldosterone. However, high performance liquid chromatography with mass spectrometric detection for defining plasma aldosterone levels has been preferable recently.

Key words: aldosterone; primary and secondary aldosteronism; radioimmunoassay; LC-MS/MS.

Bibliographic description: Krasnykh LM, Vasilenko GF, Smirnov VV, Eltsova EA, Checha OA, Goroshko OA. Modern approaches to defining plasma aldosterone levels in clinical diagnosis. Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products Bulletin 2014; 3: 13-18.

Гормоны — высокоактивные биологические вещества, вырабатываемые железами внутренней секреции и выделяемые непосредственно в кровь. Они оказывают существенное влияние на обмен веществ в клетках и таким образом на функции всех систем и органов.

Альдостерон — основной минералокортикостероидный гормон коры надпочечников. Почти весь альдостерон находится в крови в свободной форме. Его действие проявляется только после связывания с минералокортикоидными рецепторами в мозге и в

печени. Метаболизируется в печени и в почках. Он вызывает увеличение реабсорбции натрия и хлора в почечных канальцах, активируя амилорид-чув-ствительные натриевые каналы и №+, К+-АТФазу в клеточной мембране, а также усиливает их синтез и встраивание в мембрану, влияет на проницаемость межклеточных контактов, повышает синтез адено-зинтрифосфата (АТФ) в митохондриях [1]. В результате этого наблюдается задержка натрия и хлора в организме, снижение выделения жидкости с мочой, параллельно происходит усиление экскреции калия.

Поэтому альдостерон включен в механизмы регуляции баланса электролитов, поддержания объема жидкости и артериального давления [2].

Регуляция секреции альдостерона связана, главным образом, с системой ренин—ангиотензин—альдостерон, которая активируется при снижении почечного кровотока и уменьшении поступления натрия в почечные канальцы. Кроме того, гиперкалиемия стимулирует, а гипокалиемия подавляет продукцию альдостерона. Повышение уровня адренокортико-тропного гормона (АКТГ) вызывает только кратковременное увеличение секреции альдостерона [3].

Избыток альдостерона вызывает гипокалиемию, метаболический алкалоз, заметную задержку натрия и увеличенную экскрецию калия с мочой, что клинически проявляется артериальной гипертензией, мышечной слабостью, судорогами и парастезиями, сердечной аритмией [4, 5].

Самая частая причина повышения альдостерона — первичный альдостеронизм (синдром Кона) — автономное повышение секреции альдостерона, причиной которого чаще всего является аденома клубочковой зоны коры надпочечников (до 62% от всех наблюдений). Среди страдающих артериальной гипертонией 10—15% составляют больные, у которых причиной гипертонии является первичный альдо-стеронизм. Первичный альдостеронизм встречается чаще у женщин, чем у мужчин (соотношение 3:1), в возрасте 30-50 лет [6].

Вторичный гиперальдостеронизм, представляющий наиболее часто встречающийся тип гипераль-достеронизма - повышение уровня альдостерона, вызываемое повышением активности ренина. Чаще всего это состояние связано с застойной сердечной недостаточностью, циррозом печени с образованием асцита, определенными заболеваниями почек, избытком калия, низконатриевой диетой. Одной из важных причин является стеноз почечной артерии, ответственный за 2-3% всех случаев гипертонии [7].

Для дифференциальной диагностики этих состояний следует учитывать, что при первичном альдо-стеронизме наблюдается повышение уровня альдо-стерона, сочетающееся с низкой активностью ренина в плазме. В отличие от этого, при вторичном альдо-стеронизме обычно наблюдается повышение концентрации альдостерона, сочетающееся с высокой активностью ренина плазмы. Снижение содержания ренина наблюдается при болезни Аддисона [8, 9]

Поскольку ренин и альдостерон очень тесно связаны, часто оба вещества определяются вместе для выяснения причины аномального содержания альдостерона в крови. Скрининговым методом для диагностики первичного альдостеронизма является определение соотношения между концентрацией альдостерона (КАП, измеренной в нг/мл) и активностью ренина плазмы (АРП, измеренной в нг/мл/час). Если коэффициент КАП/АРП более 50, то диагноз первичного альдостеронизма подтверждается. Следу-

ет отметить, что этот тест не является высокоспецифичным. Чувствительность и специфичность метода составляет 89% и 71% соответственно [10].

Таким образом, определение концентрации альдостерона в плазме крови имеет важное значение при постановке диагноза альдостеронизма (первичный, вторичный) и других нарушений. Поскольку суточная продукция альдостерона составляет около 1/200 секреции кортизола, а метаболитам альдостерона сопутствуют дающие одинаковые с ним реакции другие стероиды, следует предъявлять особые требования к чувствительности и специфичности методов исследования.

В клинической практике используется метод радиоиммунологического анализа (РИА) для определения содержания альдостерона в крови и активности ренина в плазме крови [9, 11-13]. Этот метод имеет значительное преимущество перед биологическими и биохимическими методами при определении гормонов, ферментов, полипептидов и многих других веществ, которые находятся в биологических жидкостях в очень малых количествах. РИА основан на законе действия масс и подчиняется правилам химии. При добавлении к раствору с нативным гормоном-антигеном (АГ) меченого антигена (АР) и антитела (АТ) происходит образование двух комплексов: АГ — АТ и АГх — АТ. В качестве специфической воспринимающей системы используются антитела, а в качестве меченого аналога — антигены, меченные радиоактивным изотопом, в основном 1251, 3Н, и др. Для каждого изотопа характерен определенный спектр, являющийся специфической характеристикой изотопа. Причем метка не меняет иммунологической специфичности и способности антигена вступать в реакцию. При взаимодействии антиген—антитело происходит эквивалентное связывание молекул антигена. Если в растворе имеются меченые и немеченые антигены, они связываются антителами в зависимости от процентного соотношения меченого и немеченого антигенов. Поскольку известно, что практически все вещества обладают антигенными свойствами, то возможности использования радиоиммунологического анализа не ограничены [14].

Для анализа альдостерона методом РИА используются готовые наборы отечественных и зарубежных фирм, содержащие в себе: антисыворотку к исследуемому веществу, меченый аналог искомого вещества, набор стандартов (содержит определенные известные концентрации искомого вещества), разделитель (в виде угля, смол или твердых систем), буферные растворы для растворения компонентов) [12].

Пробы плазмы или сыворотки крови берутся и хранятся в определенных условиях замороженными при температуре минус 20 оС. При получении плазмы необходимо использовать в качестве антикоагулянта этилендиаминтетраацетат (ЭДТА), а не гепарин, который блокирует связывание антигена с антителом [11]. К каждому стандартному набору для определения альдостерона прилагается инструкция, обеспе-

чивающая правильное выполнение методики, которая состоит из нескольких этапов:

разлив в пробирки определенного количества плазмы, сыворотки или мочи;

экстракция компонентов из плазмы или сыворотки, мочи;

добавление в определенные пробирки стандартов в разведении;

добавление определенных количеств радиоактивных молекул (антигенов);

добавление определенных количеств специфических антител;

инкубация в определенных условиях;

разделение свободных и связанных фракций;

извлечение свободных и связанных фракций и соответствующее вычисление при помощи радиометрической техники.

При РИА используется радиометрическая техника двух типов в зависимости от характера излучения. Для каждого изотопа характерен определенный спектр, являющийся специфической характеристикой изотопа. При работе с такими изотопами, как 1251, 1311, т.е. при у-излучении используются у-счетчики. р-Счетчики, основанные на измерении излучения от низкоэнергетических радионуклидов, применяются при работе с изотопами типа 3Н, 14С, 32Р. Эти счетчики являются сцинтилляционными, обладают более высокой чувствительностью и эффективностью, чем у-счетчики. Все типы счетчиков имеют цифровые показатели числа импульсов с цифропечатающими устройствами. Встроенные микрокомпьютеры позволяют получать непосредственные результаты в виде концентрации искомого вещества в единице объема путем преобразования совокупности имеющихся данных [15, 9].

РИА отличают:

высокая чувствительность, позволяющая определять концентрации веществ 10-9—10-12 г/мл;

высокая специфичность, точно измеряющая индивидуальные компоненты биологических жидкостей, а не их метаболиты;

высокая точность и воспроизводимость;

возможность одновременно и достаточно быстро проводить большое число анализов.

Высокая чувствительность и селективность РИА всем известны, однако очевидны и его недостатки. Прежде всего — радиоактивность и проблема захоронения отходов. Кроме того, в РИА усложнена стандартизация, так как срок годности наборов зависит от периода полураспада радиоактивного йода—125. РИА представляет собой чувствительный метод, но не очень воспроизводимый, из-за перекрестных реакций с другими подобными по структуре аналитами, что делает этот метод менее надежным. Межлабораторная воспроизводимость РИА очень низка [16].

Это объясняет развитие широкого спектра альтернативных методов, не требующих радиоактивных изотопов и использующих различные физические принципы количественного определения метки. Од-

ним из таких методов анализа является хемилюми-несцентный иммуноанализ. Этот метод на порядок превосходит чувствительность РИА [17—20].

Наибольшее распространение получил твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA). Он более производителен, чем жидкофазные методы. Однако высокую точность измерений обеспечивают специальные анализаторы, а качество микропланшетов часто меняется от партии к партии и даже от лунки к лунке, что влияет на результаты и воспроизводимость анализа [16].

Любой метод иммуноанализа требует для себя технологических разработок, включая высокоспецифичные моноклональные антитела. Осложняет ситуацию наличие в биожидкостях близких по структуре метаболитов [21]. Каждая диагностическая компания конструирует свой вариант метода, что затрудняет стандартизацию и является причиной расхождения в результатах [16].

Для надежного анализа альдостерона с помощью газожидкостной хроматографии требуется проведение дериватизации, так как он термически неустойчив из-за наличия 21-оксигруппы в боковой цепи. Основной путь разрушения — это раскрытие 17-20 связи с образованием 17-кетопроизводных. Таким образом, дериватизация позволяет уменьшить потери, улучшить селективность, повысить чувствительность, но при этом она является основной проблемой ГЖХ [22].В настоящее время определение альдостерона в биожидкостях проводится методом жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (LC-MS/MS) [23—30]. В таблице 1 приведены сводные данные о современных методиках LC-MS/MS (по обзору зарубежных статей).

Масс-спектрометрия — сравнительно новый инструментальный метод. Определение альдостерона проводится в режиме положительной ионизации электрораспылением. Выделение из плазмы проводится методами твердофазной экстракции [25, 26, 28, 29], жидкостной экстракции [23, 24, 30], дериватизации [27].

C помощью метода LC-MS/MS в одной биопробе можно определять концентрацию альдостерона и его метаболита (d7-aldosterone) [28].

При сравнении методов LC-MS/MS и РИА, показана корреляция (г=0,91) между концентрацией альдостерона, однако уровень концентрации альдосте-рона, определенный методом РИА, был значительно выше, чем при LC-MS/MS [23].

Метод LC-MS/MS обеспечивает надежные результаты определения концентрации альдостерона в биожидкостях.

В связи с тем, что секреция ренина, который является одним из факторов, стимулирующих выработку альдостерона, существенно зависит от почечной гемодинамики, при переходе человека из горизонтального положения в вертикальное содержание альдостерона увеличивается в 2—3 раза. В норме содержание альдостерона в крови составля-

Таблица 1

СВОДНЫЕ ДАННЫЕ О СОВРЕМЕННЫХ МЕТОДИКАХ LC-MS/MS

№ Год Название Авторы/ Био- Пробо- Метод Чувст- Аппаратура

п/п изда- Университет/ объект подготовка витель-

ния Страна ность

1 2013 Разработка опреде- Van den Noort M.[29] Plasma Твердо- ХЬС^^ 60pM Spark Symbiosis

ления альдостерона в Больница Медицин- плазма фазная Pharma XLC with

плазме крови методом ского университета экстракция Waters Xevo TQ MS

автоматизированной Гронингена/ (ТФЭ)+

онлайн твердофазной Нидерланды осаждение Waters ACQUITY

экстракции и жидкост- белков + OSM with Water

ной хроматографии - Xevo TQ-S MS

массспектрометрии

2 2012 Количественное опре- Hinchliffe E, Cart- Plasma ТФЭ ИРЬС^^ 26 pmol Waters AcquityTM

деление альдостерона в er S,Owen LJ, плазма ультра-высоко- UPLC system

плазме крови человека Keevil BG [28] эффективная Waters() Xevo

с помощью ультра- Клиническая жидкостная TQS tandem mass

высокоэффективной больница Южного хроматография - spectrometer

жидкостной хромато- Манчестера/ Англия танцемная масс-

графии - тандемной спектрометирия

массспектрометрии

3 2012 Определение альдосте- Van Der Gugten J.G. Serum Экстракция ЬС^^ <22 Shimazdu LC-

рона в сыворотке крови et al. [24] сыво- жидкость/ Жидкостная pmol/l 20AD/CT-20A/SIL-

с помощью ВЭЖХ-МС: Больница святого ротка жидкость хроматография с 20ACHT

метод ЖЖЭ для масс- Павла/Канада (ЖЖЭ) тандемной масс- UFLC

спектрометрической спектрометрией

системы ABSCIEX ABSCIEX API-5000

API-5000 - MS

4 2012 Сверхчувствительный Jarvis M [30] Serum ЖЖЭ ЬС^^ 1 pg/mL Shimadzu

анализ альдостерона AB SCIEX/Canada сыво- Жидкостная Prominence HPLC

в сыворотке крови, Канада ротка хроматография с system

используя систему тандемной масс-

ВЭЖХ-МС/МС AB спектрометрией AB SCIEX Triple

SCIEX Triple Quad™ Quad™ 6500 LC/

6500 MS/MS System

5 2010 Одновременное опре- Taylor P.J et al [26] Plasma ТФЭ + ХЬС^^ 25 pg/mL Quattro Premier

деление альдостерона и Австралия плазма Осаждение triple quadrupole

кортизола с помощью белков mass spectrometer

ВЭЖХ-МС/МС: при-

менение в изучении

дегидратации-регидра-

тации

6 2009 Определение альдосте- Taylor P.J. et al [25] Plasma ТФЭ + ХЬС^^ 69.4 Quattro Premier

рона в плазме крови плазма Осаждение pmol/L tandem

человека с помощью Австралия, Англия белков (2.5 ng/ quadrupole mass

полуавтоматической dL) spectrometer

ВЭЖХ-МС/МС

7 2007 Определение альдо- Turpeinen U. et al Serum ЖЖЭ ЬС^^ 30 Agilent series 1100

стерона в сыворотке с [23] Сыво- pmol/L HPLC system with

помощью ЖХ-МС/МС Лаборатория HUS- ротка a binary

LAB при Клини- pump

ческой больнице API 3000 triple

матери и ребенка quadrupole mass

Университета Хель- spectrometer

синки, Финляндия

ет в положении лежа 7,5—150 пг/мл, в положении стоя — 35—300 пг/мл. Значение нормы альдостерона в крови меняется в зависимости от метода исследования [31].

Концентрация гормонов в крови подвергается значительным колебаниям в течение суток. Во избежание этих колебаний берут анализ периферической крови утром натощак, в условиях физиологического покоя.

Кроме того, многие лекарственные препараты прямо или опосредованно могут изменить продукцию альдостерона, поэтому их прием должен быть пре-

кращен перед проведением исследования (примерно 4—5 периодов полувыведения из организма). Если это невозможно, желательно использовать препараты с минимальным вероятным действием на ренин и аль-достерон (адренергические антагонисты центрального действия и периферические вазодилататоры) [3].

Таким образом, определение концентрации аль-достерона в плазме крови является клинически значимым в диагностике первичного или вторичного альдостеронизма и других заболеваний. Поэтому необходим выбор высокочувствительных и специфических методик для его определения в плазме крови.

ЛИТЕРАТУРА

REFERENCES

10. 11.

12.

13.

14.

15.

16.

17.

18. 19.

20.

21.

22.

23.

24.

Karin M. New twists in gene regulation by glucocorticoid receptor: is DNA binding dispensable. Cell 1998; 93: 487-90.

Calhoun DA, Nishizaka MK, Zaman MA et al. Hyperaldoster amond black and white subjects with resistant hypertension. Hypertension 2002; 40: 892-6.

Баранова ЕИ, Большакова ОО, Беркович ОА. Блокада альдестерона -новая стратегия лечения резистентной артериальной гипертензии. Артериальная гипертензия 2008, 14(3): 203-9.

Беловол АН, Князькова ИИ. Антагонисты альдостероновых рецепторов: клиническая фармакология и терапевтическая эффективность при хронической сердечной недостаточности. Свп" медицини та бюлогП 2012, 1: 13-19.

Dluhy RG, Williams GN. Aldosterone - villain or bystander? N Engl J Med 2004, 351: 8-10.

Dorrian CA, Toole BJ, Alvares-Madrozo S, Kelly A, et al. A screening procedure for primary aldosteronism based on the Diasorin Liaison automated chemiluminescent immunoassay for direct rennin. Ann of Clin Biochem 2010; 47: 195-199.

Подзолков ВИ, Родионов АВ. Первичный гиперальдостеронизм: диагностика и лечение. Артериальная гипертензия 2004, 10(2): 109-13. Ferrari P, Shaw S, Nicod J, et al. Active rennin versus plasma rennin activity to define aldosterone-to-renin ratio for primary aldosteronism. J Hyper-tens 2004; 22: 377-81.

Sealey JE, Gordon RD, Mantero F. Plasma rennin and aldosterone measurements in low rennin hypertensive states. Endocrin&Metab 2005, 16(3): 86-91.

Kaplan NM. The current epidemic of primary aldosteronism: causes and conseguences. J Hypertens 2004, 22: 863-69.

Brochu M, Fethiere J, Roy M et al. Highly sensitive and rapid radioimmu-noassay for aldosterone in plasma and cell culture medium. Clin Biochem 1989, 22: 289-92.

Miller MA, Sangallo GA, Graham A, McGregor GA. Extraction Method and Nonextracted Kit Method Compared for Measuring Plasma Aldosterone. Clinical Chemistry 1997; 43(10): 1995-7. European pharmacopoeia 7.0. V. 1. P. 1169-71.

Stowasser M, Gordon RD. Aldosterone Assays: An Urgent Need for Improvement. Clinical Chemistry 2006; 52(9): 1640-2. Armanini D, Lewicka S, Pratesi C et al. Further studies on the mechanism of the mineralocorticoid action of licorice in humans. J Endocrinol Invest 1996; 19(9): 624-9

Гончаров НП. Значение и роль методов определения гормонов в развитии эндокринологии как общественной науки. Вестник РАМН 2012; 3: 46-9.

Holger Perschel F, Schemer R, Seiler L. et al. Rapid Screening Test for Primary Hyperaldosteronism: Ratio of Plasma Aldosterone to Renin Concentration Determined by Fully Automated Chemiluminescence Immunoassays. Clinical Chemistry September 2004; 50(9): 1650-5. Stabler TV, Siegel AL. Chemiluminescence immunoassay of aldosterone in serum. Clinical Chemistry 1991; 37(11): 1987-9.

Perschel FH, Schemer R, Seiler L et al. Rapid Screening Test for Primary Hyperaldosteronism: Ratio of Plasma Aldosterone to Renin Concentration Determined by Fully Automated Chemiluminescence Immunoassays. Clinical Chemistty 2004; 50(9): 1650-5.

Schirpenbach C, Seiler L, Maser-Gluth C, Beuschlein F, Reincke M, Bidling-maier M. Automated chemiluminescence-immunoassay for aldosterone during dynamic testing: comparison to radioimmunoassays with and without extraction steps. Clin Chem 2006; 52: 1749-55. Kushnir MM, Rockwood AL, Bergquist J. Liquid chromatography-tandem mass spectrometry applications in endocrinology. Mass Spectrom Rev 2010; 29: 480-502.

Stewart PM, Wallace AM, Valentino R, et al. Mineralocorticoid activity of liquorice: 11-beta-hydroxysteroid dehydrogenase deficiency comes of age. Lancet 1987; 8563: 821-4.

Turpeinen U, Hämäläinen E, Sterman UH. Determination of aldesterone in serum by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. J of Chro-matog B 2008; 862(1-2): 113-8.

Van Der Gugten JG, Crawford M, Grant RP, Holmes DT. Supported liquid extraction offers improved sample preparation for aldosterone analysis by liquid chromatography tandem mass spectrometry. J Clin Phthol 2012; 65: 1045-8.

Taylor PJ, Cooper DP, Gordon RD, Stowasser M. Measurement of Aldo-sterone in Human Plasma by Semiautomated HPLC-Tandem Mass Spectrometry. Clinical Chemistry June 2009; 55(6): 1155-62.

10. 11.

12.

13.

14.

15.

16.

17.

18. 19.

20.

21.

22.

23.

24.

25.

26.

Karin M. New twists in gene regulation by glucocorticoid receptor: is DNA binding dispensable. Cell 1998; 93: 487-90.

Calhoun DA, Nishizaka MK, Zaman MA et al. Hyperaldoster amond black and white subjects with resistant hypertension. Hypertension 2002; 40: 892-6.

Baranova EI, Bolshakova OO, Berkovich OA. Aldosterone blockade - a new treatment strategy for resistant hypertension. Arterialnaya gipertenziya 2008, 14(3): 203-9 (in Russian).

Belovol AN, Knyazkova II. Aldosterone receptor antagonists: clinical pharmacology and therapeutic efficacy in chronic heart failure. Svit meditsiny ta biologii 2012, 1: 13-19 (in Russian).

Dluhy RG, Williams GN. Aldosterone - villain or bystander? N Engl J Med 2004, 351: 8-10.

Dorrian CA, Toole BJ, Alvares-Madrozo S, Kelly A, et al. A screening procedure for primary aldosteronism based on the Diasorin Liaison automated chemiluminescent immunoassay for direct rennin. Ann of Clin Biochem 2010; 47: 195-199.

Podzolkov VI, Rodionov AV. Primary aldosteronism: diagnosis and treatment. Arterialnaya gipertenziya 2004, 10(2): 109-13 (in Russian). 8. Ferrari P, Shaw S, Nicod J, et al. Active rennin versus plasma rennin activity to define aldosterone-to-renin ratio for primary aldosteronism. J Hy-pertens 2004; 22: 377-81.

Sealey JE, Gordon RD, Mantero F. Plasma rennin and aldosterone measurements in low rennin hypertensive states. Endocrin&Metab 2005, 16(3): 86-91.

Kaplan NM. The current epidemic of primary aldosteronism: causes and conseguences. J Hypertens 2004, 22: 863-69.

Brochu M, Fethiere J, Roy M et al. Highly sensitive and rapid radioimmu-noassay for aldosterone in plasma and cell culture medium. Clin Biochem 1989, 22: 289-92.

Miller MA, Sangallo GA, Graham A, McGregor GA. Extraction Method and Nonextracted Kit Method Compared for Measuring Plasma Aldosterone. Clinical Chemistry 1997; 43(10): 1995-7. European pharmacopoeia 7.0. V. 1. P. 1169-71.

Stowasser M, Gordon RD. Aldosterone Assays: An Urgent Need for Improvement. Clinical Chemistry 2006; 52(9): 1640-2. Armanini D, Lewicka S, Pratesi C et al. Further studies on the mechanism of the mineralocorticoid action of licorice in humans. J Endocrinol Invest 1996; 19(9): 624-9

Goncharov NP. Importance and role of methods for the determination of hormones in the development of endocrinology as a social science. Vest-nik RAMN 2012; 3: 46-9 (in Russian).

Holger Perschel F, Schemer R, Seiler L. et al. Rapid Screening Test for Primary Hyperaldosteronism: Ratio of Plasma Aldosterone to Renin Concentration Determined by Fully Automated Chemiluminescence Immunoassays. Clinical Chemistry September 2004; 50(9): 1650-5. Stabler TV, Siegel AL. Chemiluminescence immunoassay of aldosterone in serum. Clinical Chemistry 1991; 37(11): 1987-9.

Perschel FH, Schemer R, Seiler L et al. Rapid Screening Test for Primary Hyperaldosteronism: Ratio of Plasma Aldosterone to Renin Concentration Determined by Fully Automated Chemiluminescence Immunoassays. Clinical Chemistty 2004; 50(9): 1650-5.

Schirpenbach C, Seiler L, Maser-Gluth C, Beuschlein F, Reincke M, Bidling-maier M. Automated chemiluminescence-immunoassay for aldosterone during dynamic testing: comparison to radioimmunoassays with and without extraction steps. Clin Chem 2006; 52: 1749-55. Kushnir MM, Rockwood AL, Bergquist J. Liquid chromatography-tandem mass spectrometry applications in endocrinology. Mass Spectrom Rev 2010; 29: 480-502.

Stewart PM, Wallace AM, Valentino R, et al. Mineralocorticoid activity of liquorice: 11-beta-hydroxysteroid dehydrogenase deficiency comes of age. Lancet 1987; 8563: 821-4.

Turpeinen U, Hämäläinen E, Sterman UH. Determination of aldesterone in serum by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. J of Chro-matog B 2008; 862(1-2): 113-8.

Van Der Gugten JG, Crawford M, Grant RP, Holmes DT. Supported liquid extraction offers improved sample preparation for aldosterone analysis by liquid chromatography tandem mass spectrometry. J Clin Phthol 2012; 65: 1045-8.

Taylor PJ, Cooper DP, Gordon RD, Stowasser M. Measurement of Aldo-sterone in Human Plasma by Semiautomated HPLC-Tandem Mass Spectrometry. Clinical Chemistry June 2009; 55(6): 1155-62. Taylor PJ, Rosendal SP, Coombes JS, Gordon RD, Stowasser M. Simulta-

26. Taylor PJ, Rosendal SP, Coombes JS, Gordon RD, Stowasser M. Simultaneous measurement of aldosterone and Cortisol by high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry: Application to de-hydration-rehydration studies. Journal of Chromatography B 2010; 878: 1195-8.

27. Yamashita K, Okuyama M, Nakagawa R, et al. Development of sensitive derivatization method for aldosterone in liquid chromatography-electro-spray ionization tandem mass spectrometry of corticosteroids. J of Chro-matogr A 2008; 1200(2): 114-21.

28. Hinchliffe E, Carter S et al. Quantitation of aldosterone in human plasma by ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2013; Jan 15: 19-23.

29. Van den Noort N. The development of an automated online XLC-MS/MS method for the determination of aldosterone in blood plasma. Amsterdam: UMCG; 2013.

30. Jarvis M. Ultra-Sensitive Analysis of Aldosterone in Serum Using the AB SCIEX Triple Quad™ 6500 LC/MS/MS System. Available from: http://www. absciex.com/Documents/Downloads/Literature/6500_Aldosterone.pdf.

31. Negro A, et al. Liquorice-induced sodium retention. Merely an acquired condition of apparent mineralocorticoid excess? A case report. Ann Ital Med Int 2013; 15(4): 296-300.

neous measurement of aldosterone and cortisol by high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry: Application to de-hydration-rehydration studies. Journal of Chromatography B 2010; 878: 1195-8.

27. Yamashita K, Okuyama M, Nakagawa R, et al. Development of sensitive derivatization method for aldosterone in liquid chromatography-electro-spray ionization tandem mass spectrometry of corticosteroids. J of Chromatogr A 2008; 1200(2): 114-21.

28. Hinchliffe E, Carter S et al. Quantitation of aldosterone in human plasma by ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2013; Jan 15: 19-23.

29. Van den Noort N. The development of an automated online XLC-MS/MS method for the determination of aldosterone in blood plasma. Amsterdam: UMCG; 2013.

30. Jarvis M. Ultra-Sensitive Analysis of Aldosterone in Serum Using the AB SCIEX Triple Quad™ 6500 LC/MS/MS System. Available from: http://www. absciex.com/Documents/Downloads/Literature/6500_Aldosterone.pdf.

31. Negro A, et al. Liquorice-induced sodium retention. Merely an acquired condition of apparent mineralocorticoid excess? A case report. Ann Ital Med Int 2013; 15(4): 296-300.

ОБ АВТОРАХ:_

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации. Российская Федерация, 127051, Москва, Петровский бульвар, 8.

Красных Людмила Михайловна. Начальник отдела клинической фармакоки-нетики Центра клинической фармакологии, канд. биол. наук. Василенко Галина Федоровна. Ведущий научный сотрудник отдела клинической фармакокинетики Центра клинической фармакологии, канд. биол. наук. Смирнов Валерий Валерьевич. Ведущий научный сотрудник отдела клинической фармакокинетики Центра клинической фармакологии, канд. фарм. наук. Чеча Ольга Александрова. Старший научный сотрудник отдела клинической фармакокинетики Центра клинической фармакологии, канд. биол. наук. Горошко Ольга Александровна. Старший научный сотрудник отдела клинической фармакокинетики Центра клинической фармакологии, канд. фарм. наук

AUTHORS:_

Federal State Budgetary Institution «Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products» of the Ministry of Health of the Russian Federation, 8 Petrovsky Boulevard, Moscow, 127051, Russian Federation. Krasnykh LM. Head of Clinical Pharmacokinetics Department of Clinical Pharmacology Center. Candidate of Biological Sciences.

Vasilenko GF. Leading researcher of Clinical Pharmacokinetics Department of Clinical Pharmacology Center. Candidate of Biological Sciences. Smirnov VV. Leading researcher of Clinical Pharmacokinetics Department of Clinical Pharmacology Center. Candidate of Pharmaceutical Sciences. Checha OA. Senior researcher of Clinical Pharmacokinetics Department of Clinical Pharmacology Center. Candidate of Biological Sciences. Goroshko OA. Senior researcher of Clinical Pharmacokinetics Department of Clinical Pharmacology Center. Candidate of Pharmaceutical Sciences.

Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова. Российская Федерация, 119991, Москва, Трубецкая улица, 8 стр. 2.

Ельцова Елена Александровна. Выпускник фармацевтического факультета университета.

АДРЕС ДЛЯ ПЕРЕПИСКИ:_

Красных Людмила Михайловна, lkrasnykhLM59@mail.ru

Статья поступила 14.07.2014 г. Принята к печати 11.08.2014г.

I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, 8/2 Trubetskaya Street, Moscow, 119991, Russian Federation. EltsovaEA. Faculty of Pharmacy graduate.