АНТИДИАБЕТИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ

1. Композиция, содержащая молекулу FGF21, ковалентно присоединенную к антигенсвязывающему центру антитела или к его антигенсвязывающему фрагменту через линкер.
2. Композиция по п.1, где линкер ковалентно присоединен к молекуле FGF21 через боковую цепь связывающего остатка по аминокислоте в положении 79, 125 или 129 в соответствии с нумерацией SEQ ID NO:1.
3. Композиция по п.2, где остаток 129 представляет собой цистеин, и линкер ковалентно присоединен к тиольной группе цистеина 129.
4. Композиция по п.1, где линкер содержит формулу X-Y-Z; где X представляет собой биологически совместимую связывающую цепь, включающую любой атом, выбранный из группы, состоящей из C, H, N, O, P, S, F, Cl, Br и I, и может содержать полимер или блок-сополимер, и является ковалентно связанным со связывающим остатком, где линкер является линейным, Y представляет собой возможно присутствующую группу распознавания, содержащую по меньшей мере кольцевую структуру; и Z представляет собой группировку присоединения, содержащую ковалентную связь с аминокислотной боковой цепью в антигенсвязывающем активном центре антитела.
5. Композиция по п.4, где Y имеет возможно замещенную структуру:
или
где a, b, c, d и e независимо представляют собой углерод или азот; f представляет собой углерод, азот, кислород или серу;
6. Композиция по п.5, где Y представляет собой фенил.
7. Композиция по п.4, где Z имеет формулу
,
ковалентно присоединенную к антителу, и q=1 или 2.
8. Композиция по п.7, где q=2.
9. Композиция по п.4, где X представляет собой группу, содержащую три компонента; Xp-Xs-Xy, где Xp представляет собой группу, специфически адаптированную таким образом, чтобы быть способной присоединиться к боковой цепи связывающего остатка белка FGF21, Xs представляет собой спейсерную область группы X, и Xy представляет собой группу, адаптированную для связывания с группой Y.
10. Композиция по п.9, где Xy выбран из амидной связи, енаминовой связи или гуанидиниевой связи.
11. Композиция по п.10, где Xy имеет формулу:
12. Композиция по п.4, где Xp содержит формулу:
13. Композиция по п.4, где Xs выбран из группы, состоящей из
, , , , , , и ,
где n=1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10, и m присутствует или отсутствует.
14. Композиция по п.13, где Xs содержит формулу:
15. Композиция по п.14, содержащая формулу:
где антитело связано по антигенсвязывающему активному центру антитела, S-FGF21 представляет собой ковалентную связь с тиол-несущей боковой цепью связывающего остатка, n=1 или 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10; и m присутствует или отсутствует.
16. Композиция по п.13, содержащая формулу:
,
где антитело связано по антигенсвязывающему активному центру антитела, S-FGF21 представляет собой ковалентную связь с тиол-несущей боковой цепью связывающего остатка, и n=1 или 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10.
17. Композиция по п.15 или 16, где n=1, 2, 3 или 4.
18. Композиция по п.17, содержащая формулу:
,
где антитело связано по антигенсвязывающему активному центру антитела, и S-FGF21 связан по тиол-несущей боковой цепи связывающего остатка.
19. Композиция по п.1, где линкер ковалентно конъюгирован с ε-аминогруппой лизина 93 тяжелой цепи антитела в соответствии с нумерацией Кабата.
2
v
v
v
H
L
H
L
H
L
20. Композиция по п.1, где антитело представляет собой полноразмерное антитело, Fab, Fab′, F(ab′), F, dsF, scF, V, V, диатело, минитело, содержащее домены V и V из h38c2 или m38C2, либо полноразмерное антитело, содержащее домены V и V из h38c2 или m38C2, и константный домен, выбранный из группы, состоящей из IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, и может представлять собой h38C2 IgG1.
21. Композиция по п.1, где антитело представляет собой альдолазное антитело.
L
22. Композиция по п.21, где альдолазное антитело содержит область V, содержащую SEQ ID NO:27.
H
23. Композиция по п.22, где альдолазное антитело содержит область V, содержащую SEQ ID NO:28.
24. Композиция по п.23, где альдолазное антитело содержит легкую цепь, содержащую SEQ ID NO:25.
25. Композиция по п.24, где альдолазное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO:26.
26. Композиция по п.1, где молекула FGF21 содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15 и SEQ ID NO:16.
27. Композиция по п.1, где молекула FGF21 содержит последовательность SEQ ID NO:3.
28. Композиция по п.1, где молекула FGF21 содержит последовательность SEQ ID NO:10.
29. Композиция по п.28, содержащая формулу
,
где антитело связано по антигенсвязывающему активному центру и содержит SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26, и S-FGF21 представляет собой тиол-несущую боковую цепь Cys129 в SEQ ID NO:10.
30. Композиция по п.1, содержащая формулу
,
где антитело связано по антигенсвязывающему активному центру и содержит SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26, и S-FGF21 представляет собой тиол-несущую боковую цепь Cys125 в SEQ ID NO:7.
31. Композиция по п.1, содержащая формулу
,
где антитело связано по антигенсвязывающему активному центру и содержит SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26, и S-FGF21 представляет собой тиол-несущую боковую цепь Cys79 в SEQ ID NO:12.
32. Композиция, содержащая молекулу FGF21, ковалентно связанную с группировкой, увеличивающей период полувыведения, через связывающий остаток, соответствующий остатку номер 79, 125 или 129 в соответствии с нумерацией SEQ ID NO:1.
33. Композиция, выбранная из группы, состоящей из SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12 и SEQ ID NO:13.
34. Композиция, содержащая молекулу FGF21, ковалентно присоединенную к антигенсвязывающему активному центру антитела через линкер, где линкер ковалентно присоединен к боковой цепи связывающего остатка в FGF21, образуя комплекс конъюгированный белок-антитело, таким образом, что комплекс конъюгированный белок-антитело обладает по меньшей мере одной из следующих характеристик:
1/2
(а) T в плазме крови после SC (подкожной) инъекции по меньшей мере приблизительно 30 ч в мышиных моделях,
(б) эффективностью меньше чем приблизительно 4 нМ в анализе Glut1 Taqman, и
отличающаяся тем, что комплекс конъюгированный белок-антитело имеет формулу: ,
где антитело связано по антигенсвязывающему активному центру и содержит SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26, и S-FGF21 представляет собой тиол-несущую боковую цепь Cys125 в SEQ ID NO:7 либо Cys129 в SEQ ID NO:10.
35. Композиция, содержащая молекулу FGF21, ковалентно присоединенную к антигенсвязывающему активному центру антитела через линкер, где линкер ковалентно присоединен к боковой цепи связывающего остатка в FGF21 с образованием комплекса конъюгированный белок-антитело, таким образом, что комплекс конъюгированный белок-антитело обладает по меньшей мере одной из следующих характеристик:
1/2
(а) T в плазме крови после SC инъекции по меньшей мере приблизительно 33 ч в мышиных моделях,
1/2
(б) T в плазме крови после SC инъекции по меньшей мере приблизительно 35 ч в крысиных моделях,
1/2
(в) T в плазме крови после SC инъекции по меньшей мере приблизительно 45 ч в моделях приматов,
(г) эффективностью меньше чем приблизительно 3 нМ в анализе Glut1 Taqman, и
отличающаяся тем, что комплекс конъюгированный белок-антитело имеет формулу:,
где антитело связано по антигенсвязывающему активному центру и содержит SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26, и S-FGF21 представляет собой тиол-несущую боковую цепь Cys129 в SEQ ID NO:10.
36. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-35 в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.
37. Способ лечения диабета, состояний, связанных с диабетом, ожирения, дислипидемии, гипертензии, гепатостеатоза или сердечно-сосудистого заболевания; либо контроля или уменьшения массы; либо гликемического контроля; либо увеличения секреции инсулина, уровней HDL (липопротеинов высокой плотности) или уровней неэтерифицированных свободных жирных кислот или адипсина; либо уменьшения уровней глюкозы крови, глюкагона, триглицеридов, фруктозамина, холестерина низкой плотности или C-реактивного белка; включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из п.1-35 или фармацевтической композиции по п.36.
38. Применение композиции по любому из п.1-35 или фармацевтической композиции по п.36 для изготовления лекарственного средства для лечения состояний, связанных с диабетом, ожирения, дислипидемии, гипертензии, гепатостеатоза или сердечно-сосудистого заболевания; либо контроля или уменьшения массы; либо гликемического контроля; либо увеличения секреции инсулина, уровней HDL или уровней неэтерифицированной свободной жирной кислоты; либо уменьшения уровней глюкозы крови, глюкагона, триглицеридов, фруктозамина, холестерина низкой плотности или C-реактивного белка.