СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЦЕНТРИРОВАННЫХ ВОДНЫХ ДИСПЕРСИЙ НЕМОДИФИЦИРОВАННЫХ ФУЛЛЕРЕНОВ
METHOD OF PRODUCING CONCENTRATED AQUEOUS DISPERSIONS OF NON-MODIFIED FULLERENES

Область техники
84
Изобретение относится к физической химии, а именно к получению углеродсодержащих наноматериалов. Изобретение может использоваться в производстве биологически активных добавок к пище для улучшения внутреннего состояния организма. Изобретение может быть также использовано для производства препаратов для мягкой антираковой терапии, и, кроме того, в качестве контрастных веществ в клинической диагностике с использованием фуллеренов, содержащих парамагнитные вещества (например, C·Gd), и косметической промышленности.
В настоящее время внимание уделяется проблеме использования фуллеренов в медицине и фармакологии: для доставки внутрь клетки и размещения на поверхности клеточных мембран различных веществ (антибиотики, витамины, гормоны, фрагменты ДНК). Уже сейчас найдены условия синтеза противовирусных и противораковых препаратов на основе фуллеренов. Одна из трудностей при решении этих проблем - создание водорастворимых нетоксичных соединений фуллеренов, которые могли бы вводиться в организм человека и доставляться кровью в орган, подлежащий терапевтическому воздействию. В силу этого большой интерес представляет получение водных дисперсий немодифицированных фуллеренов, не содержащих опасных компонентов, а также способов контроля их качества.
Уровень техники
Известен способ прямого диспергирования для получения водных дисперсий немодифицированных фуллеренов (Cheng X., Kan А.T., Tomson M.В. // J. Chem. Eng. Data. - 2004. - V. 49, N 3. - P. 675-683), который заключается в следующем: к образцу фуллерена добавляют деионизованную воду и подвергают длительной ультразвуковой обработке или длительному перемешиванию. Однако это способ является весьма длительным и требует высоких затрат как при ультразвуковой обработке, так и перемешивания. При этом величины получаемых концентраций препаратов водных дисперсий фуллеренов весьма низкие не более 10 мкг/мл. Размеры частиц получаемых дисперсий весьма большие (>100 нм), общий выход водной дисперсий низок - менее 25%.
60
70
Известен, принятый за наиболее близкий аналог, способ получения водной дисперсии смесей немодифицированных фуллеренов С и С путем замены растворителя (Способ получения молекулярных растворов гидратированных фуллеренов в водной среде. Патент Украины №93706, дата приоритета 16.10.2008. Mode of production of molecular solution of hydrated fullerenes in aqueous medium. UA patent N93706, priority date 10/16/2008), который заключается в следующем.
60
1. Готовят раствор фуллерена С в толуоле с концентрацией 0.2 мг/мл.
2. К объему полученного толуольного раствора фуллеренов добавляют равный объем деионизированной воды.
3. Полученную двухфазную систему подвергают ультразвуковому диспергированию при помощи ультразвуковой бани до полного удаления в течение нескольких часов органического растворителя.
4. Полученный раствор фильтруют через микропористый фильтр с диаметром пор 0.22 мкм. Оценка концентрации фуллеренов в водной дисперсии - не более 1.4 мг/мл.
5. Срок хранения препарата водной дисперсии при температуре не более 4°C не более двух лет.
Достоинства этого способа получения водной дисперсии фуллеренов состоят в том, что ее получают без использования реакций химической модификации и без участия третьего компонента. Однако прототип имеет ряд существенных недостатков.
1. Использование токсичных органических растворителей в соотношении 1:1 к объему получаемой водной дисперсии неизбежно увеличивает общее количество диспергированного органического растворителя и токсичность получаемых растворов.
2. Нет данных о концентрации остаточного органического растворителя в получаемой дисперсии, поскольку в способ не включен метод контроля.
3. Концентрация получаемых водных дисперсий достаточно мала <10 мг/л, что не дает возможность их использования для многих практических целей (медицина, косметология, пищевая промышленность).
4. Точная концентрация фуллерена неизвестна, поскольку не проводят прямое измерение количества углерода в получаемых растворах, а оценивают ее, полагая полный переход фуллерена в процессе замены растворителя.
60
5. Для получения более концентрированных растворов применяется упаривание, однако доказательств не разрушения водных дисперсий фуллеренов нет, и этот способ проверен только для фуллерена С.
6. Использование одностадийной степени очистки от недиспергировавших молекул фуллерена не всегда достаточно для полного удаления нерастворенного вещества из получаемых растворов.
Раскрытие изобретения
Предлагаемое изобретение решает задачу создания способа получения высококонцентрированных водных дисперсий немодифицированных индивидуальных фуллеренов из их растворов в органических растворителях путем замены растворителя на воду с контролем концентрации фуллерена в получаемом растворе и контроле остаточного содержания органического растворителя.
60
70
84
60
70
84
60
70
84
Поставленная задача решается разработкой способа получения водных дисперсий немодифицированных фуллеренов путем замены органического растворителя при помощи ультразвуковой обработки истинных растворов фуллеренов C, C, C в органических растворителях, новизна которого заключается в получении водных дисперсий для всех наиболее распространенных индивидуальных фуллеренов C, C, C, а также любых их смесей из органических растворителей различных классов (толуол, бензол, тетрахлорметан, 1,2-дихлорбензол, 1,3,5-триметилбензол), достижении общей концентрации фуллерена в получаемой водной дисперсии до 150, 90, 60 мг/мл для фуллеренов С, С, C соответственно (при этом содержание органического растворителя в получаемом растворе - не более 1 миллионной доли), за счет суммарного времени ультразвуковой обработки 250 ч (10.5 суток) и использования высокой мощности ультразвукового излучателя (до 0.3 кВт), в более полном отделении недиспергировавших частиц фуллерена за счет двойной фильтрации получаемых водных дисперсий последовательно при помощи фильтра Шотта и микропористых фильтров с диаметром микропор 0.45 и 0.20 мкм, соответственно. Кроме того, необходим контроль концентрации фуллерена в получаемой водной дисперсии при помощи испытания на общий углерод с одновременным испытанием на остаточный органический растворитель при помощи сорбционного концентрирования с последующим определением при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием по стандартным методикам.
60
70
84
Наилучшие результаты по результирующей концентрации фуллерена получают при использовании электрической мощности ультразвукового излучателя в интервале 0.2-0.3 кВт. Использовано два типа ультразвукового излучателя - прямой (диспергирование в ультразвуковой ванне) и зондовый (погружение ультразвукового излучателя в двухфазную смесь фуллерен в органическом растворителе-вода). Использование погружного зонда необходимо в тех случаях, в которых невозможно получение дисперсии в конических колбах в ваннах открытого типа. Увеличение мощности приводит к увеличению общего выхода концентраций водных дисперсий и снижению времени ультразвуковой обработки. Способ применим для всех промышленно выпускаемых фуллеренов С, С, C или их смесей и для всех исходных органических растворителей (1,2-дихлорбензол, 1,3,5-триметилбензол (мезитилен), бензол, толуол), в которых растворимость фуллеренов превышает 5 мг/мл, так как при более низкой растворимости общая концентрация фуллерена в полученной дисперсии будет весьма малой, что потребует за собой дополнительные стадии концентрирования. В качестве реакционного сосуда можно использовать практически любую лабораторную посуду при толщинах стекла реакционного сосуда не более 3.5 мм, потому что при толщине стекла реакционного сосуда более 3.5 мм весьма плохо происходит процесс ультразвуковой обработки двухфазной системы органический растворитель - вода. Наиболее оптимально с точки зрения получения водных дисперсий фуллеренов использовать конические плоскодонные колбы. Кроме того, кипячение полученного водного раствора в течение 15 мин до полного удаления остатков органического растворителя позволяет снизить количество остаточного органического растворителя в водной дисперсии. Объем получаемой водной дисперсии может варьироваться от 100 мл до 20000 мл, в зависимости от типа используемой ультразвуковой ванны. Необходимо использовать подход двойной фильтрации для получения более узкого распределения частиц по размерам, а также улучшения оптических характеристик водной дисперсии фуллеренов (ВДФ) (меньшее рассеяние света). Кроме того, возможно использовать любой тип воды, в котором содержание металлов ниже одной части на миллион, таким критериям удовлетворяют - дистиллированная, деионизованная, сверхчистые воды, а также различного рода воды для медицинских инъекций.
70
84
60
60
70
84
60
70
60
70
84
Общее содержание фуллерена без дополнительного концентрирования выше, чем в прототипе, а для фуллерена С и C данные получены впервые, но находятся на таком же, что и для С уровне содержаний. Получаемые заявленным способом водные дисперсии фуллеренов С, С, C имеют фрактальные размеры не более 150 нм (после двукратной фильтрации при помощи фильтра Шотта и микропористых фильтров). Стабильность полученных дисперсий без изменения параметров подтверждена различными методами испытаний - регистрацией УФ/видимых спектров поглощения получаемых водных дисперсий (Фиг. 1 - для водной дисперсии фуллерена С, полученной из бензола, Фиг. 2 - для водной дисперсии фуллерена С, полученной из толуола), а также испытаниями при помощи фотонно-корреляционной спектроскопии. Причем спектры поглощения имеют характеристические полосы для водных дисперсий фуллеренов С - 349, 268, 220 нм, для С - 486, 387, 248, 218 нм, для C - 660 нм соответственно. Показано отсутствие скоагулировавших частиц в течение не менее двух лет после получения. Срок хранения водной дисперсии более двух лет, что больше чем у прототипа.
60
70
В таблице 1 приведены показатели характеристик получаемых водных дисперсий фуллеренов по предлагаемому способу замены растворителя. Получение водных дисперсий фуллеренов по предлагаемому способу позволяет увеличить общий выход дисперсии, а также общую концентрацию фуллеренов С и С по сравнению с прототипом. Таким образом, наилучшие условия получения водных дисперсий - максимальная величина электрической мощности ультразвуковой ванны (до 0.3 кВт), время озвучивания выбрано так, что весь толуол испаряется, и концентрация водной дисперсии максимальна.
Испытания содержания фуллерена в получаемой водной дисперсии проводят при помощи анализатора общего углерода по стандартным методикам к приборам. Контроль остаточного растворителя в получаемой водной дисперсии фуллерена проводят способом сорбционного концентрирования с использованием патрона, после чего проводят испытание на использованный растворитель при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием по стандартным методикам определения соответствующего органического вещества (растворителя) в водных растворах.
60
70
84
Таким образом, технический результат предлагаемого изобретения заключается в увеличении концентрационных характеристик водных дисперсий фуллеренов. Кроме того, предлагаемое изобретение позволяет получить водную дисперсию фуллеренов не только С, но и С, C, что дает получение широкого круга продуктов на основе фуллерена.
Краткое описание чертежей (Фигур)
60
Фиг. 1. Спектр поглощения водной дисперсии фуллерена С, получен из бензола.
70
Фиг. 2. Спектр поглощения водной дисперсии фуллерена С, получен из толуола.
Осуществление изобретения
Приведенные ниже примеры подтверждают, но не ограничивают заявляемый способ.
70
ПРИМЕР 1. Получение концентрированной водной дисперсии фуллерена С из его толуольных растворов
70
При помощи аналитических весов отбирают пробу фуллеренов С (ЗАО "Инновации Ленинградских институтов и предприятий", чистота 99+%) растворяют в 100 мл толуола (х.ч.). Затем полученный раствор вносят в коническую колбу, добавляют 1000 мл деионизованной воды (класс I) и подвергают ультразвуковому озвучиванию (электрическая мощность 0.3 кВт, тип ванны открытый ЗАО «Град-Технолоджи» 180-35) в течение 23 дней в течение 12 ч ежедневно (суммарно 250 ч) до полного испарения органического растворителя в данном случае (толуола). Затем полученный раствор кипятят в течение 15 мин с использованием магнитной мешалки с подогревом для удаления оставшегося количества неиспарившегося органического растворителя (температурный выход на стационар 12 мин). После раствор фильтруют при помощи фильтра Шотта с использованием колбы Бунзена, отделяя не перешедшие частицы фуллерена в водный раствор. Затем полученный раствор вновь фильтруют при помощи микропористого фильтра с диаметром микропор 0.45 и 0.20 мкм. После чего проводят определение концентрации фуллерена в водном растворе при помощи анализатора общего органического углерода, рассчитывая общий выход дисперсии, а также контроль остаточного содержания органического растворителя при помощи сорбционного концентрирования в комплексе с ВЭЖХ-МС по стандартным протоколам. Определение общего органического углерода в водных средах методом высокотемпературного сжигания на оборудовании Elementar Anlysensysteme GmbH «Vario Macro CHN/CHNS».
60
Для фуллерена С способ дает аналогичные результаты. Результаты представлены в таблице 1.
60
ПРИМЕР 2. Получение концентрированной водной дисперсии фуллерена С из его бензольных растворов
60
При помощи аналитических весов отбирают пробу фуллерена С (ЗАО "Инновации Ленинградских институтов и предприятий" частота 99.5% сублимированный) растворяют в 1 мл бензола (х.ч.). Затем полученный раствор вносят в пробирку (из кварцевого стекла толщиной не более 4 мм), добавляют 10 мл дистиллированной воды и подвергают ультразвуковому озвучиванию (тип ванны открытый ЗАО «Град-Технолоджи» 28-35, электрическая мощность до 0.11 кВт) в течение 10 ч до полного испарения бензола. Затем полученный раствор прокипятили в течение 15 минут на магнитной мешалке с подогревом (температурный выход на стационар 12 мин). После раствор фильтруют при помощи фильтра Шотта с использованием колбы Бунзена, отделяя не перешедшие частицы фуллерена в водный раствор. Затем полученный раствор вновь фильтруют при помощи микропористого фильтра с диаметром микропор 0.45 и 0.20 мкм. После чего проводят определение концентрации фуллерена в водном растворе при помощи анализатора общего органического углерода (Shimadzu TOC-L Series, а также контроль остаточного содержания органического растворителя при помощи сорбционного концентрирования в комплексе с (ВЭЖХ-МС Agilent 1200/MS1100) определением.
60
70
ПРИМЕР 3. Получение концентрированной водной дисперсии фуллеренов С и С из их раствора в 1,2-дихлорбензоле
60
70
60
70
При помощи аналитических весов отбирают пробу неразделенной смеси фуллеренов С и С (ЗАО "Инновации Ленинградских институтов и предприятий" частота С 75±5% С 25±5%) растворяют в 1 мл 1,2-дихлорбензоле (х.ч.). Затем полученный раствор вносят в пробирку (из кварцевого стекла), добавляют 10 мл сверхчистой воды и подвергают ультразвуковому озвучиванию (открытый тип ультразвуковой ванны ЗАО «Град-Технолоджи» 28-35, электрическая мощность до 0.11 кВт) в течение 250 ч до полного испарения 1,2-дихлорбензола. Затем полученный раствор кипятят в течение 15 минут на магнитной мешалке с подогревом (температурный выход на стационар 12 мин). Далее раствор фильтруют при помощи фильтра Шотта с использованием колбы Бунзена, отделяя не перешедшие в водный раствор частицы фуллерена. Далее, раствор еще раз фильтруют при помощи микропористого фильтра с диаметром микропор 0.45 и 0.20 мкм. После чего проводят определение концентрации фуллерена в водном растворе при помощи анализатора общего органического углерода (Shimadzu TOC-L Series), а также контроль остаточного содержания органического растворителя при помощи сорбционного концентрирования в комплексе с хромато-масс-спектрометрическим (ВЭЖХ-МС Agilent 1200/MS1100) определением.
70
ПРИМЕР 4. Получение концентрированной водной дисперсии фуллерена С из его раствора в мезитилене (1,3,5-триметилбензоле)
70
60
При помощи аналитических весов отбирают пробу фуллерена С (ЗАО "Инновации Ленинградских институтов и предприятий", чистота 99+%) растворяют в 1 мл толуола (х.ч.). Затем полученный раствор вносят в кварцевую пробирку, добавляют 10 мл бидистиллированной воды и подвергают ультразвуковому озвучиванию при помощи ультразвукового зонда (BioLogics, Inc. США, модель 150VT, электрическая мощность до 0.15 кВт) в течение 1 ч до полного испарения органического растворителя, мезитилена. Затем полученный раствор кипятят в течение 15 мин с использованием магнитной мешалки с подогревом в мерном стакане (из боросиликатного стекла) для удаления оставшегося количества неиспарившегося органического растворителя (температурный выход на стационар 12 мин). Затем полученный раствор вновь фильтруют при помощи микропористого фильтра с диаметром микропор 0.45 и 0.20 мкм. Далее проводят определение концентрации фуллерена в водном растворе при помощи анализатора общего органического углерода, рассчитывая общий выход дисперсии, а также контроль остаточного содержания органического растворителя при помощи сорбционного концентрирования в комплексе с ВЭЖХ-МС по стандартным протоколам. Определение общего органического углерода в водных средах методом высокотемпературного сжигания на оборудовании Elementar Anlysensysteme GmbH «Vario Macro CHN/CHNS». Для фуллерена С способ дает аналогичные результаты.
60
ПРИМЕР 5. Получение концентрированной водной дисперсии фуллерена С из его толуольных растворов
60
При помощи аналитических весов отбирают пробу фуллерена С (ЗАО "Инновации Ленинградских институтов и предприятий" частота 99.5% сублимированный) растворяют в 100 мл бензола (х.ч.). Затем полученный раствор вносят в коническую колбу (из силикатного стекла толщиной не более 4 мм), добавляют 1000 мл воды для инъекций и подвергают ультразвуковому озвучиванию (тип ванны открытый ЗАО «Град-Технолоджи» 180-35, электрическая мощность до 0.9 кВт) в течение 24 ч до полного испарения бензола. Затем полученный раствор прокипятили в течение 15 минут на магнитной мешалке с подогревом (температурный выход на стационар 12 мин). После раствор фильтруют при помощи фильтра Шотта с использованием колбы Бунзена, отделяя не перешедшие частицы фуллерена в водный раствор. Затем полученный раствор вновь фильтруют при помощи микропористого фильтра с диаметром микропор 0.45 и 0.20 мкм. После чего проводят определение концентрации фуллерена в водном растворе при помощи анализатора общего органического углерода (Shimadzu TOC-L Series), а также контроль остаточного содержания органического растворителя при помощи сорбционного концентрирования в комплексе с (ВЭЖХ-МС Agilent 1200/MS1100) определением.
84
ПРИМЕР 6. Получение концентрированной водной дисперсии фуллерена С из его толуольных растворов
84
84
При помощи аналитических весов отбирают пробу фуллеренов C (Aldrich Fullerene-C 98%, CAS Number 135113-16-5) растворяют в 100 мл толуола (х.ч.). Затем полученный раствор вносят в коническую колбу, добавляют 1000 мл деионизованной воды (класс I) и подвергают ультразвуковому озвучиванию (электрическая мощность 0.9 кВт, тип ванны открытый ЗАО «Град-Технолоджи» 180-35) в течение 23 дней в течение 12 ч ежедневно (суммарно 250 ч) до полного испарения органического растворителя в данном случае (толуола). Затем полученный раствор кипятят в течение 15 мин с использованием магнитной мешалки с подогревом для удаления оставшегося количества неиспарившегося органического растворителя (температурный выход на стационар 12 мин). После раствор фильтруют при помощи фильтра Шотта с использованием колбы Бунзена, отделяя не перешедшие частицы фуллерена в водный раствор. Затем полученный раствор вновь фильтруют при помощи микропористого фильтра с диаметром микропор 0.45 и 0.20 мкм. После чего проводят определение концентрации фуллерена в водном растворе при помощи анализатора общего органического углерода, рассчитывая общий выход дисперсии, а также контроль остаточного содержания органического растворителя при помощи сорбционного концентрирования в комплексе с ВЭЖХ-МС по стандартным протоколам. Определение общего органического углерода в водных средах методом высокотемпературного сжигания на оборудовании Elementar Anlysensysteme GmbH «Vario Macro CHN/CHNS».
84
ПРИМЕР 7. Получение концентрированной водной дисперсии фуллеренов С из их раствора в 1,2-дихлорбензоле
84
84
При помощи аналитических весов отбирают пробу неразделенной смеси фуллеренов С (Aldrich Fullerene-C 98%, CAS Number 135113-16-5) растворяют в 10 мл 1,2-дихлорбензоле (х.ч.). Затем полученный раствор вносят в пробирку (из кварцевого стекла), добавляют 100 мл сверхчистой воды и подвергают ультразвуковому озвучиванию (открытый тип ультразвуковой ванны ЗАО «Град-Технолоджи» 28-35, электрическая мощность до 0.11 кВт) в течение 250 ч до полного испарения 1,2-дихлорбензола. Затем полученный раствор кипятят в течение 15 мин на магнитной мешалке с подогревом (температурный выход на стационар 12 мин). Далее раствор фильтруют при помощи фильтра Шотта с использованием колбы Бунзена, отделяя не перешедшие в водный раствор частицы фуллерена. Далее раствор еще раз фильтруют при помощи микропористого фильтра с диаметром микропор 0.45 и 0.20 мкм. После чего проводят определение концентрации фуллерена в водном растворе при помощи анализатора общего органического углерода (Shimadzu TOC-L Series, а также контроль остаточного содержания органического растворителя при помощи сорбционного концентрирования в комплексе с хромато-масс-спектрометрическим (ВЭЖХ-МС Agilent 1200/MS1100) определением.