СЕЛЕКТИВНОЕ ВВЕДЕНИЕ РАДИОАКТИВНОЙ МЕТКИ В БИОМОЛЕКУЛЫ

1. Способ введения атома фтора в биомолекулу, включающий:
1) предоставление линкера, содержащего тиол-реакционноспособный конец и азидо- или алкин-реакционноспособный конец;
2) взаимодействие тиол-реакционноспособного конца линкера с биомолекулой, содержащей по меньшей мере одну тиоловую группу или ее реакционноспособное производное; и
3) последующее взаимодействие азидо- или алкин-реакционноспособного конца линкера с фторзамещенной азидной или алкиновой группой.
2. Способ по п.1, где биомолекула имеет более 50 аминокислотных остатков.
3. Способ по п.1, где биомолекула представляет собой аффитело.
4. Способ по п.1, где тиол-реакционноспособный конец выбран из группы малеимидо, галогеналифатической группы, галогенароматической группы, галогенциклоалифатической группы, (галогенацетил)алкильной группы, (галогенацетил)циклоалкильной группы, (галогенацетил)арильной группы, винилсульфоновой группы, акрилоильной группы, группы эпокси, азиридиновой группы и дисульфидной группы, способной к тиол-обменной реакции с тиоловой группой.
5. Способ по п.1, где по меньшей мере одна тиоловая группа содержит цистеиновый остаток или тиолсодержащую искусственную аминокислоту.
6. Способ по п.1, где тиол-реакционноспособный конец линкера представляет собой группу малеимидо.
7. Способ по п.1, где реакционноспособное производное биомолекулы получают путем обработки биомолекулы восстановителем.
8. Способ по п.1, где линкер выбран из:
.
9. Способ по п.1, где линкер получают способом, включающим взаимодействие аминного соединения с карбоновой кислотой или активированным сложноэфирным соединением для образования линкера; где аминное соединение содержит азидо- или алкин-реакционноспособную функциональную группу, а карбоновая кислота или активированное сложноэфирное соединение содержит тиол-реакционноспособную функциональную группу.
18
19
18
10. Способ по любому из пп.1-9, где фторзамещенный азид или алкин включает F-замещенный азид или алкин либо F-замещенный азид или алкин, предпочтительно F-замещенный азид или алкин.
11. Способ введения атома фтора в биомолекулу, включающий:
1) взаимодействие тиол-реакционноспособного конца Mal-алкинового бифункционального линкера с биомолекулой, содержащей по меньшей мере одну тиоловую группу; и
2) последующее взаимодействие алкиновой группы с фторзамещенной азидной группой.
12. Способ введения атома фтора в биомолекулу, включающий:
1) взаимодействие тиол-реакционноспособного конца Mal-азидного бифункционального линкера с биомолекулой, содержащей по меньшей мере одну тиоловую группу; и
2) последующее взаимодействие азидной группы с фторзамещенной алкиновой группой.
18
19
18
13. Способ по п.11, где фторзамещенная азидная группа включает F-замещенную азидную или F-замещенную азидную группу, предпочтительно F-замещенную азидную группу.
18
19
18
14. Способ по п.12, где фторзамещенная алкиновая группа включает F-замещенную алкиновую или F-замещенную алкиновую группу, предпочтительно F-замещенный алкин.
15. Биоконъюгат, содержащий структурные единицы, полученные из:
1) биомолекулы, содержащей по меньшей мере одну тиоловую группу; и
2) линкера;
где линкер получают способом, включающим взаимодействие аминного соединения, содержащего азидо- или алкин-реакционноспособную функциональную группу, с карбоновой кислотой или активированным сложным эфиром, содержащими тиол-реакционноспособную функциональную группу.
2
2
16. Биоконъюгат по п.15, где активированный сложный эфир включает структуру: L-M-COR; где L включает тиол-реакционноспособную функциональную группу или ее защищенное производное; М представляет собой двухвалентное связующее звено; и R представляет собой ОН или активирующую группу.
1
1
17. Биоконъюгат по п.15, где аминное соединение включает структуру: G-J-R; где G представляет собой амин, J представляет собой двухвалентное связующее звено, и R представляет собой азидо- или алкин-реакционноспособную функциональную группу.
18. Биоконъюгат по п.15, где биомолекула представляет собой аффитело.
19. Биоконъюгат по п.17, где связующее звено получают способом, включающим взаимодействие аминного соединения, содержащего азидо- или алкин-реакционноспособную функциональную группу, с карбоновой кислотой или активированным сложноэфирным соединением, содержащими тиол-реакционноспособную функциональную группу.
1
20. Линкерная структура, включающая формулу L-M-CO-NH(R)-J-G,
где L представляет собой тиол-реакционноспособную функциональную группу;
М и J представляют собой двухвалентные связующие звенья;
1
R представляет собой Н, алифатический радикал, ароматический радикал или циклоалифатический радикал; и
G представляет собой азидо- или алкин-реакционноспособную функциональную группу.
21. Линкерная структура по п.20, где линкер выбран из:
.