Фенологические наблюдения за популяцией подвальных комаров в эпидемически активном микроочаге лихорадки Западного Нила в городе Саратове

34

ЗНиСО

март №3

завершался в пробах с бульоном Мартена (9 ч), тогда как в пробах с водой формирование зрелой биопленки происходило лишь спустя 48 ч.

Таким образом, в результате проведенных исследований нам удалось определить оптимальный твердый субстрат (покровные стекла) и среды культивирования (водопроводная, речная вода, PBS, солевая среда) для моделирования условий формирования биопленок холерными вибрионами в лабораторных условиях. На примере двух атоксигенных штаммов V. cholerae показано, что применение данной модели позволяет проследить все известные стадии этого процесса — от адгезии отдельных клеток до образования стабильной многослойной структуры (рис. 2).

Преимущество покровных стекол перед широко используемыми большинством исследователей полистироловыми планшетами [2, 4, 6] состоит в возможности не только констатировать факт способности того или иного штамма к формированию биопленки, но и увидеть ее структуру с помощью обычного светового (люминесцентного) микроскопа. В дальнейшем мы намерены использовать описанный подход для изучения биопленок, образуемых токсигенными штаммами холерных вибрионов, в условиях in vivo и in vitro.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ежова М.И. и др. Холерные вибрионы О1 серогруппы, выделенные из воднви объектов Ростова-на-Дону в ходе мониторинга в 2008—2012 гг. / М.И. Ежова, В.Д. Кругли-ков, А.С. Водопьянов [и др.] //Проблемы особо опасных инфекций. 2013. Вып. 4. С. 56—59.

2. Ильина Т.С. и др. Биопленки как способ существования бактерий в окружающей среде и организме хозяина: феномен, генетический контроль и системы регуляции их развития. / Т.С. Ильина, Ю.М. Романова, А.Л. Гинцбург //Генетика. 2004. Т. 40. № 11. С. 1445—1456.

3. Колякина А.В. и др. Сравнительное изучение углеводной специфичности лектиновых рецепторов холерных вибрионов при образовании биопленки на поверхности жидких питательных сред. / А.В. Колякина, Е.М. Курбатова, Н.Р. Телесманич [и др.] //Холера и патогенные для человека вибрионы: Матер. совещ. и пробл. комиссии. Ростов-на-Дону, 2008. Вып. № 21. С. 67—72.

4. Куликалова Е.С. и др. Способность холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп к образованию биопленки в эксперименте / Е.С. Куликалова, Л.Я. Урбанович, А.С. Марамович [и др.] //Холера и патогенные для человека вибрионы: Матер. пробл. комиссии. Ростов-на-Дону. 2009. Вып. № 22. С. 90—92.

5. Сайфитдинова А.Ф. Двумерная флуоресцентная микроскопия для анализа биологических образцов: Учебно-методическое пособие. СПб., 110 с.

6. Смирнова Т.А. и др. Структурно-функциональная характеристика бактериальных биопленок. / Т.А. Смирнова, Л.В. Диденко, Р.Р. Азибекян [и др.] //Микробиология. 2010. Т. 79. № 4. С. 435—446.

7. Татаренко О.А. и др. Влияние некоторых факторов на формирование биопленки токсигенными и атоксиген-ными холерными вибрионами Эль-Тор. / О.А. Татаренко, Л.П. Алексеева, Н.Р. Телесманич [и др.] //Эпидемиология и инфекционные болезни. 2012. № 5. С. 36—40.

8. Безопасность работы с микроорганизмами I—II группы патогенности (опасности): СП 1.3.3118—13.

Контактная информация:

Ътгова Светлана Викторовна, тел.: 8 (863) 2 402703, e-mail: svetatitova@bk.ru

Contact information: Titova Svetlana, phone: 8 (863) 2 402703, e-mail: svetatitova@bk.ru

-

УДК 616.995.7

ФЕНОЛОГИЧЕСКИЕ НАБЛЮДЕНИЯ ЗА ПОПУЛЯЦИЕЙ ПОДВАЛЬНЫХ КОМАРОВ В ЭПИДЕМИЧЕСКИ АКТИВНОМ МИКРООЧАГЕ ЛИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА В

ГОРОДЕ САРАТОВЕ

А.М. Поршаков, С.А. Яковлев, К.С. Захаров, В.А. Сафронов, А.Н. Матросов, В.Н. Чекашов, М.М. Шилов, Т.В. Князева, А.А. Кузнецов

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»», г. Саратов, Россия

В статье представлены результаты фенологических наблюдений за популяцией подвальных комаров Culexpipiens в урбанизированных биоценозах г. Саратова. Дано описание биоценоза и факторов, способствующих развитию всех стадий комаров внутри подвальных помещений. Установлена высокая численность комаров и личинок в подвальньх помещениях жильх домов, расположенных на территории выявленного очага лихорадки западного Нила (ЛЗН). Ключевые слова: кровососущие комары, синантропные популяции комаров, лихорадка Западного Нила.

A.M. Porshakov, S.A. Yakovlev, K.S. Zakharov, V.A. Safronov, A.N. Matrosov, V.N. Chekashov, M.M. Shilov, T.V. Knyazeva, A.A. Kuznetsov  PHENOLOGICAL SURVEILLANCE OVER THE POPULATION OF BASEMENT MOSQUITOES FOUND IN EPIDEMICALLY ACTIVE MICRO-FOCUS OF WEST NILE FEVER IN SARATOV  FSHE «Russian Scientific Research Anti-Plague Institute «Microbe»», Saratov, Russia.

Represented are the results of phenological surveillance over the population of basement mosquitoes Culex pipiens, carried out in urbanized biocoenoses of Saratov. Characterized are the biocoenoses themselves and the factors that contribute to the progress of all the growth-stages of mosquitoes inside the basement units. Identified has been high abundance rate of both mosquitoes and their wrigglers in basements of residential buildings situated in the territory of the allocated West Nile fever (WNF) focus. Key words: blood-sucking mosquitoes, synanthropic populations of mosquitoes, West Nile fever.

Заболевания населения лихорадкой Западного Нила (ЛЗН) на территории Саратовской области с нарастающим итогом начали регистрировать с 2010 г. Зафиксировано 11 случаев заболевания ЛЗН в 2012 г., 31- в 2013 г., более 90 % больных -

г-Ь

городские жители [2, 5]. По результатам эпидемического расследования, проведенного по каждому случаю заболевания ЛЗН, были выявлены предположительные места заражения. Большинство случаев (61 %) связаны с нападением комаров по

март №3

35

г-Ь

месту жительства: в многоэтажных домах с затопленными подвалами или в частных малоэтажных постройках в непосредственной близости от них [6]. Приведенные особенности заражения людей и выявление в популяции комаров циркуляции вируса Западного Нила (ВЗН) вызвали особый интерес к численности и характеру распределения Culexpipiens (далее Cx. pipiens) в г. Саратове. В ходе исследований в разные месяцы (сентябрь—ноябрь, январь—февраль) от личинок и имаго были выделены антигены ВЗН, установлена и подтверждена трансфазовая и трансовариальная передача вируса внутри популяции [4].

Цель работы — фенологическое наблюдение за численностью личинок и имаго подвальных комаров, в популяции которых была установлена циркуляция ВЗН.

Материалы и методы. Объектом фенологических наблюдений были подвальные комары Culex pipiens. Учет численности имаго и личинок осуществляли регулярно (ежемесячно) в одном и том же подвале. Работа проводилась с сентября 2013 по июнь 2014 г.

Учет численности личиночных стадий комаров в затопленном подвале проводили в трех разных помещениях, визуально отличающихся по количеству личинок (много, средне и мало). В каждом из них личинки учитывали в трех точках. Суммарное количество личинок из всех точек и помещений пересчитывали на 1 м2.

Учеты численности имаго комаров осуществляли в трех помещениях, также визуально отличающихся по численности насекомых. Окрыленных комаров учитывали на потолке, над дверными проемами, около отдушин, а также на стенах в 10—20 см над уровнем воды, где обсыхали вновь выплодившиеся насекомые. Подсчитывали комаров, сидящих на площади 1 м2 в 3—4-х местах, затем суммировали

число насекомых со всех точек и рассчитывали среднее количество комаров на 1 м2.

Для изучения процесса выплода комаров в затопленном подвале был установлен стационарный имагоуловитель (ловушка для отлова вылетающих амфибиотических насекомых), сконструированный так, что выплодившиеся из куколок комары остаются внутри ловушки и не имеют возможности разлета и питания [4].

Замеры температур среды обитания (воздух, вода) имаго и личинок комаров производились с помощью автономных регистраторов температур DS1921H/Z Thermochron iButton высокого разрешения (диапазон измерения температуры: 15—46 °С, точность измерения: ±1 °С). Встроенные часы реального времени (RTC) и таймер с точностью хода ±2 мин в месяц обеспечивали запись температур каждые три часа. За время исследования в трех помещениях было размещено 6 регистраторов температуры, замеры проводились с ноября 2013 по февраль 2014 г. В каждом отсеке было установлено по два датчика, одному регистратору температуры воды и воздуха.

Результаты и обсуждение. Фенологические наблюдения проводили с сентября 2013 по июнь 2014 г. в затопленном подвальном помещении многоэтажного жилого дома (в июле подвал был осушен). Уровень воды в обследованном подвале достигал 60 см. При визуальном осмотре было выявлено несколько причин, по которым происходило подтопление подвальных помещений:

— протечка труб с холодным водоснабжением, что обеспечивало общее повышение уровня воды во всех помещениях подвала,

— протечка труб с горячим водоснабжением и труб отопительных коммуникаций, что способствовало прогреву воды в затопленных помещениях и создавало оптимальные условия для развития

Рис. 1. Температура воздуха и воды внутри подвальных помещений с ноября 2013 по март 2014 года

36

ЗНиСО

март №3

2500

:ооо

Й 1500

и

о

1000

500

& и

2446

266 . 2356

\ 157 у

\ 1 133 Л 373 / ** \ \ 976

7: к 6 V/ „ V ✓ 8: г" ЦЗА »

4( 56 "*„ 3 - - ~ - - ✓ 4 506 -1' ч ?3 326 \ \ 207 76 N - - -1 58

; сентябрь октябрь декабрь Д янв.яи. феыхшь м;пп апрель тй июнь I Месяц

7

2013

Г

2014

Год

численность комаров

ЧПСШШНОСТЪ шшннок

Рис.2. Средняя плотность личинок и имаго комаров в подвальных помещениях с сентября 2013 по июнь 2014 года

ц

личиночных стадий комаров. Расположение в подвале отопительных систем также обеспечивало прогрев воздуха, что благоприятно сказывалось на жизнедеятельности имаго комаров,

— протечка труб канализационной системы создавала постоянный приток воды с содержанием большого количества органических веществ, что благоприятствовало питанию и, в конечном итоге, развитию личинок Сх. р1р1вт. Важно отметить, что в помещениях, где отсутствовала подпитка канализационными стоками, численность личинок находилась на низком уровне.

Температура воды в различных помещениях в течение периода наблюдений находилась в диапазоне от 18,5 до 6,9 °С средняя температура составила 23,1 °С (рис. 1). Оптимальная температура для развития личиночных стадий отмечается в пределах 15—28 °С [1]. Температура воздуха в подвальных помещениях колебалась от 20,8 до 29,7 °С, средняя температура составила 25,5 °С. Такие температуры являются оптимальными для имаго, а так же для репликации вируса в слюнных железах комаров. Известно, что накопление вируса в концентрации, достаточной для заражения при температуре 23,5—30 °С происходит за 11—15 дней [3].

Благодаря описанным условиям внутри подвальных помещений сформировался благоприятный микроклиматический биотоп для развития всех стадий комаров вида Сх. р1р1вт. По данным учета, в обследованных подвалах плотность личинок в разные месяцы варьировалась от 70 до 3 700 экз. на 1 м2. В каждом сборе присутствовали все стадии преимагинального развития, что свидетельствует о постоянно происходящем выплоде комаров.

Плотность комаров на стенах и потолке подвалов варьировалась от 70 до 1 200 экз. на 1 м2. Пик численности комаров отмечался в апреле, их среднее количество на 1 м2 составило 1 136. Плотность комаров в различных помещениях в апреле была от 680 до 1 580 экз. на 1 м2 (рис. 2).

Снижение плотности личинок и имаго комаров внутри подвальных помещений в мае было связано

с началом разлета имаго комаров из подвала в открытые биотопы, а так же с ремонтными работами и частичным осушением затопленных отсеков.

Наблюдение за процессом выплода комаров проводилось с помощью стационарного имагоуло-вителя. Он был установлен в затопленном подвальном помещении со средней плотностью личинок 3 500 экз. на 1 м2. Выемку выплодившихся комаров проводили не реже одного раза в неделю в течение 21 дня. За этот период было собрано 2 450 экз. комаров Сх. р1р1вт. Таким образом, с поверхности воды, равной 0,5 м2, произошел вылет почти 2 500 насекомых. Всего было сделано 3 выборки, первая из которых проводилась на 5-й день после установки ловушки. Наиболее массовый выплод комаров отмечался на 14-й день и составил 51 %. Большое количество личинок и постоянно происходящий выплод имаго также свидетельствуют о наличии оптимальных условий в закрытом биотопе для всех стадий развития комаров. Среди выбранных на 21-й день комаров было обнаружено 12 самок, отложивших первую порцию яиц без кровососания (автогения), что подтверждает следующий факт: в подвальных помещениях при отсутсвии возможности кровососания численность популяции Сх. р1р1вт поддерживается за счет автогенных кладок.

Заключение. Неблагополучные по санитарному состоянию дома с затопленными подвалами — места массового обитания и размножения комаров Сх. р1р1вт, выплод которых отмечался на протяжении всего периода наблюдения. Благоприятные температурные условия для обитания подвальной популяции комаров и репликации вируса могут способствовать возникновению зимних (при залете комаров из подвала в подъезды и квартиры) и ранневесенних (при разлете комаров) случаев заболевания ЛЗН.

ЛИТЕРАТУРА

1. Виноградова Е.Б. Городские комары, или «Дети подземелья». М.—СПб.: «Товарищество научных изданий КМК», 2004. 96 с.

2. Красовская Т.Ю. и др. Первые случаи лихорадки Западного Нила на территории Саратовской области / Т.Ю. Кра-

март №3

37

^^ 4.

r-Ь

совская, Е.В. Найденова, Н.И. Миронова [и др.]. //Саратовский научно-медицинский журнал. 2013. Т. 9. № 3. С. 495—501.

Львов Д.Н. и др. Лихорадка Западного Нила: по материалам вспышек в Волгоградской области в 1999—2002 гг. / Д.Н. Львов, В.Б. Писарев, В.А. Петров [и др.]. 2004. 104 с.

Поршаков А.М. и др. Роль комаров комплекса Culex pipiens в сохранении вируса лихорадки Западного Нила в урбанизированных биоценозах Саратова / А.М. Поршаков, С.А. Яковлев, К.С. Захаров [и др.] //Проблемы особо опасных инф. 2014. Вып. 2. С. 66—68. Путинцева Е.В. и др. Особенности эпидемической ситуации по лихорадке Западного Нила в 2013 г. в мире и на территории Российской Федерации и прогноз ее развития в 2014 г.

УДК 616-093/-098

/ Е.В. Путинцева, В.А. Антонов, В.П. Смелянский [и др.] //Проблемы особо опасных инф. 2014. Вып. 2. С. 33—39.

6. Яковлев С.А. и др. Эпизоотологический мониторинг и неспецифическая профилактика заболеваний лихорадкой Западного Нила в Саратовской области / С.А. Яковлев, К.С. Захаров, А.М. Поршаков [и др.] //Пест-менеджмент. 2014. № 1 (89). С. 23—30.

Контактная информация:

Поршаков Александр Михайлович, тел.: 8 (927) 146-46-95, e-mail: pam_82@mail.ru

Contact information:

Porshakov Alexander, рЬопе: 8 (927) 146-46-95, e-mail: pam_82@mail.ru

ЦИРКУЛЯЦИЯ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ В КАРАЧАЕВО-ЧЕРКЕССКОМ РЕСПУБЛИКАНСКОМ ПЕРИНАТАЛЬНОМ ЦЕНТРЕ

Х.Х. Батчаев, Т.Д. Пилипенко, Л.Г. Середа, В.И. Арапова ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Карачаево-Черкесской Республике», г. Черкесск, Россия

Проведен мониторинг циркуляции микроорганизмов, выделенных за 6 месяцев в 2012 г. от новорожденных в Республиканском перинатальном центре (РПЦ) г. Черкесска. Выявлено наличие нозокомиальных штаммов Klebsiella pneumoniae и Enterococcus faecium, обладающих полирезистентностью к антибиотикам.

Ключевые слова: внутрибольничные инфекции, антибиотикорезистентность, клебсиелла, энтерококки.

Kh.Kh. Batchaev, T.D. Pilipenko, L.G. Sereda, V.l. Arapova  CIRCULATION OF ANTIBIOTIC-RESISTANT MICROORGANISMS IN KARACHAY-CHERKESSIA REPUBLICAN PERINATAL CENTER  FBHE «Center of Hygiene and Epidemiology in Karachay-Cherkessia Republic», Cherkessk, Russia

Monitored the circulation of microorganisms isolated for 6months 2012 from newborns in Karachaevo-Cherkes republican perinatal center. The presence of nozocomial strains of Klebsiella pneumoniae and Enterococcus faecium, have polyresistance to antibiotics. Key words: nosocomial infections, resistance to antibiotics, klebsiella, enterococci.

Внутрибольничные инфекции (ВБИ) из-за их широкого распространения продолжают сохранять актуальность в лечебно-профилактических учреждениях (ЛПУ), вызывая различные осложнения, увеличивая длительность пребывания больных в стационаре. В ЛПУ формируются резервуары мультирезистентных штаммов с повышенными вирулентными свойствами. Именно поэтому обеспечение постоянного наблюдения за циркулирующими в различных типах стационаров микроорганизмами и определение лекарственной устойчивости возбудителей ВБИ остается важным этапом профилактики госпитальных инфекций, которые, как правило, вызываются условно-патогенными бактериями.

Цель работы — изучение чувствительности к антимикробным препаратам у микроорганизмов, циркулирующих в Республиканском перинатальном центре (РПЦ) г. Черкесска.

В 2012 г. при обследовании фекалий 380 новорожденных в возрасте от 3 дней до 1 месяца, переведенных с различными диагнозами из РПЦ в отделение патологии новорожденных (ОПН) и неонатальное отделение реанимации и интенсивной терапии (НОРИТ) за 6 месяцев у 81 (21,3 %) младенцев выделена Klebsiella pneumonia (далее K. pneumoniae). За анализируемый период у 196 новорожденных исследовано отделяемое трахео-бронхиального дерева (ТБД) и зева, в 41 материале изолирована K. pneumoniae (20,9 %).

В материалах из ТБД и зева новорожденных в монокультуре также выделялись Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter cloacae, Staphylococcus spp, Enterococcus spp, Escherichia coli, но устойчивостью к антибиотикам обладали только ¿.pneumoniae и Enterococcus faecium (далее E. faecium).

Изучение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам проводилось методом диффузии в агар с использованием бумажных дисков (диско-диффузионный метод) к нижеприведенным группам антибактериальных препаратов.

Для Enterococcus spp:

— бета-лактамам: бензилпенициллин, ампициллин, имипенем;

— аминогликозидам: гентамицин;

— макролидам: эритромицин;

— тетрациклинам: тетрациклин;

— фторхинолонам: ципрофлоксацин;

— рифампицинам: рифампицин;

— оксазолидонам: линезолид;

— гликопептидам: ванкомицин.

Для K. pneumoniae:

— бета-лактамам: имипенем, ампициллин, цеф-тазидим, цефазолин, цефотаксим, амоксициллин/ клавуланат;

— аминогликозидам: амикацин, гентамицин;

— тетрациклинам: тетрациклин;

— фторхинолонам: офлоксацин, ципрофлок-сацин;