ИНГИБИТОРЫ ПРОЛИЛГИДРОКСИЛАЗЫ
PROLYL HYDROXYLASE INHIBITORS

Приоритет
Настоящая заявка испрашивает приоритет предварительной заявки 61/258914 и предварительной заявки 61/258918, которые, обе, поданы 6 ноября 2009 года, и которые во всей своей полноте включены в настоящий документ посредством ссылки.
Область техники, к которой относится изобретение
В настоящей заявке раскрыты ингибиторы пролилгидроксилазы, которые могут стабилизировать индуцируемый гипоксией фактор-1-альфа (HIF-1α), а также индуцируемый гипоксией фактор-2-альфа (HIF-2α). Также в настоящей заявке раскрыты фармацевтические композиции, содержащие одно или более из раскрытых соединений. Кроме того, далее раскрыты способы стимуляции клеточного иммунного ответа у млекопитающих, как например, усиление фагоцитоза, например, продление жизни фагоцитов, в том числе кератиноцитов, нейтрофилов. Как таковые, раскрытые соединения позволяют реализовать способы лечения заболеваний, которые имеют отношение к иммунному ответу организма.
Сущность изобретения
Раскрытые соединения стабилизируют HIF-1α и HIF-2α, а также другие факторы, которые присутствуют в подвергаемой риску иммунной системе или которые истощены или чрезмерно обременены наличием статуса заболевания и проявлениями статуса заболевания, в том числе сепсиса. Раскрытые соединения могут быть использованы для лечения ракового заболевания и могут быть введены совместно с другими лекарственными средствами при терапии ракового заболевания. В дополнение, раскрытые соединения могут быть использованы для усиления иммунного ответа у млекопитающих, когда их вводят совместно с вакциной, например вакцинами против гриппа, вакцинами против малярии, вакцинами против желтой лихорадки, вакцинами против рака и т.п.
Краткое описание чертежей
фигуре 1
На  представлен нормальный метаболический путь HIF-1α во время нормоксии.
фигуре 2
На  представлено усиление нейтрофильного киллинга бактерии S.aureus (штамм Ньюмана) с помощью 50 мкМ и 200 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, по сравнению с контролем (ДМСО), в течение 60 и 90 минут.
фигуре 3
На  представлено усиление человеческой моноцитарной клеточной линии (U937) против бактерии S.aureus (штамм Ньюмана) с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, по сравнению с необработанными образцами.
фигуре 4
На  представлен средний процент выживаемости бактерий в случае обработанных по сравнению с необработанными U937-клеток после инфицирования с помощью S.aureus (штамм Ньюмана), спустя 1 час после предварительной обработки (черный) или спустя 2 часа (заштрихованный) после предварительной обработки с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII.
фигуре 5
На  представлен средний процент выживаемости бактерий в случае обработанных по сравнению с необработанными U937-клеток после инфицирования двумя штаммами бактерии S.aureus, Ньюман (черный), или резистентной к метициллину S.aureus (MRSA) (заштрихованный), спустя 1 час после предварительной обработки с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII.
фигуре 6
На  представлен средний процент выживаемости бактерий в случае обработанных по сравнению с необработанными U937-клеток после инфицирования двумя штаммами бактерии S.aureus, Ньюман (черный), или MRSA (заштрихованный) и обработки с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII.
фигуре 7
На  представлен средний процент выживаемости бактерий в случае обработанных по сравнению с необработанными U937-клеток после инфицирования двумя штаммами бактерии S.aureus, Ньюман (заштрихованные полосы), или MRSA (черные полосы), с последующей обработкой с помощью 100 мМ мимозина (А), 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII (В), или 2 мг/мл ванкомицина (С), спустя 2 часа после инфицирования.
фигуре 8
На  представлен средний процент выживаемости бактерий в случае обработанных по сравнению с необработанными U937-клеток после инфицирования с помощью S.aureus (Ньюман), без предварительной обработки, спустя 1 час после предварительной обработки или спустя 2 часа после предварительной обработки с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII.
фигуре 9
На  представлен средний процент выживаемости бактерий в случае обработанных по сравнению с необработанными НаСаТ-клеток, инфицированных двумя штаммами бактерии S.aureus, Ньюман (заштрихованные полосы), или MRSA (черные полосы), и за 1 час предварительно обработанных с помощью или ДМСО (контроль), 800 мкМ мимозина, 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, или 1 мкг/мл ванкомицина. Данные указаны спустя 2 часа после обработки.
фигуре 10
На  представлен средний процент выживаемости бактерий в случае обработанных по сравнению с необработанными НаСаТ-клеток, инфицированных двумя штаммами S.aureus, Ньюман (заштрихованные полосы), или MRSA (черные полосы), после предварительной обработки с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII.
фигуре 11
На  представлены позитивная регуляция (активация) экспрессии фосфоглицераткиназы (PGK) в мышиных эмбриональных фибробластах дикого типа в результате обработки с помощью соединения, указанного в таблице VIII, при дозировках, составляющих 1 мкМ (Е), 10 мкМ (F) и 50 мкМ (G), по сравнению с контролем дикого типа (Н), и отсутствие активации экспрессии PGK в HIF-1-нокаутированных клетках в результате обработки с помощью соединения, указанного в таблице VIII, при дозировках, составляющих 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С), и в случае HIF-1-нокаутированного контроля (D). Оба типа клеток обрабатывали в течение 7 часов.
фигуре 12
На  представлены активация экспрессии фосфоглицераткиназы (PGK) в мышиных эмбриональных фибробластах дикого типа в результате обработки с помощью соединения 1-(3-хлорбензил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-она, при дозировках, составляющих 1 мкМ (Е), 10 мкМ (F), по сравнению с контролем дикого типа (G), и отсутствие активации экспрессии PGK в HIF-1-нокаутированных клетках в результате обработки с помощью соединения, указанного в таблице VIII, при дозировках, составляющих 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С), и в случае HIF-1-нокаутированного контроля (D).
фигуре 13
На  представлены активация экспрессии фосфоглицераткиназы (PGK) в мышиных эмбриональных фибробластах дикого типа в результате обработки с помощью соединения, указанного в таблице VIII, при дозировках, составляющих 1 мкМ (Е), 10 мкМ (F) и 50 мкМ (G), по сравнению с контролем дикого типа (Н), и отсутствие активации экспрессии PGK в HIF-1-нокаутированных клетках в результате обработки с помощью соединения, указанного в таблице VIII, при дозировках, составляющих 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С), и в случае HIF-1-нокаутированного контроля (D).
фигуре 14
На  представлены активация экспрессии васкулярного эндотелиального фактора роста (VEGF) в мышиных эмбриональных фибробластах дикого типа в результате обработки с помощью соединения, указанного в таблице VIII, при дозировках, составляющих 1 мкМ (Е), 10 мкМ (F) и 50 мкМ (G), по сравнению с контролем (Н), и отсутствие активации экспрессии VEGF в HIF-1-нокаутированных клетках, обработанных с помощью соединения, указанного в таблице VIII, при дозировках, составляющих 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С), и в случае HIF-1-нокаутированного контроля (D). Оба типа клеток обрабатывали в течение 7 часов.
фигуре 15
Staphylococcus aureus
На  представлены результаты, полученные в примере 11, где 3 группы животных обрабатывали с помощью , чувствительного к антибиотику штамма Ньюмана. Данные показывают значительное уменьшение по размеру повреждений кожи (раны) в случае животных группы 1 (сплошные ромбы (♦)), обработанных с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, по сравнению с животными, получающими болюс ДМСО (сплошные квадраты ()). На фигуре 15 представлены результаты в случае мышей, инфицированных штаммом Ньюмана S. aureus, с последующей обработкой с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, или с помощью ДМСО (контроль), спустя 2 часа после инфицирования. Данные показывают статистически значительное уменьшение размера повреждений кожи (раны) в случае животных, обработанных с помощью соединения, указанного в таблице VIII (сплошные ромбы (♦)), или с помощью ДМСО (сплошные квадраты ()).
На фигуре 16 также представлены результаты, полученные в примере 11, показывающие уменьшение по размеру повреждений кожи (раны) в случае животных группы 1 (сплошные ромбы (♦)), обработанных с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, по сравнению с животными, которые не подвергнуты обработке (сплошные треугольники ()). На фигуре 16 представлены результаты в случае мышей, инфицированных штаммом Ньюмана S. aureus, с последующей обработкой с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, или без обработки, спустя 2 часа после инфицирования. Данные показывают уменьшение размера повреждений кожи (раны) в случае животных, обработанных с помощью соединения, указанного в таблице VIII (сплошные ромбы (♦)), или не подвергнутых обработке (сплошные треугольники ()).
Staphylococcus aureus
Фигура 17 представляет собой диаграмму-гистограмму, которая отображает результаты, полученные в примере 12, где 3 группы животных обрабатывали с помощью , чувствительного к антибиотику штамма Ньюмана [ATCC #25904]. Данные показывают результаты в случае необработанной группы, представленные под обозначением (А), результаты в случае группы, обработанной с помощью ДМСО, представленные под обозначением (В), и результаты в случае группы, обработанной с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, представленные под обозначением (С).
фигуре 18
На  также представлены результаты, полученные в примере 12, где указано число колониеобразующих единиц в почке в случае различных групп: необработанная группа, под обозначением (А); группа, обработанная с помощью ДМСО, под обозначением (В); и группа, обработанная с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII, под обозначением (С).
фигуре 19
Streptococcus pyogenes
На  представлены результаты, полученные в примере 13, где 2 группы животных обрабатывали с помощью NZ131 [штамм М49]. Данные показывают уменьшение по размеру повреждений кожи (раны) в случае животных группы 1 (сплошные треугольники ()), обработанной с помощью 0,5 мг/кг соединения, указанного в таблице VIII, по сравнению с животными, обработанными с помощью наполнителя в качестве контроля (циклодекстран) (сплошные квадраты ()).
Фигура 20
представляет собой диаграмму-гистограмму, которая также отображает результаты, полученные в примере 12, где число колониеобразующих единиц в случае наблюдаемых повреждений кожи у животных, обработанных с помощью наполнителя в качестве контроля (циклодекстран), представлено под обозначением (А), и результаты в случае группы, обработанной с помощью 0,5 мг/кг соединения, указанного в таблице VIII, представлены под обозначением (В).
Подробное описание настоящего изобретения
В настоящем описании и последующих пунктах формулы изобретения должны быть сделаны ссылки на некоторое количество терминов, которые по определению должны иметь следующие значения.
Повсюду в настоящем описании, за исключением иных требований контекста, должно быть понятно, что слово «включать», или вариации, такие как «включают» или «включенный», означает включение установленного целого или стадии, или группы целых или стадий, но не исключение любого другого целого или стадии, или группы целых или стадий.
Следует заметить, что, как используется в настоящем описании и прилагаемых пунктах формулы изобретения, формы единственного числа включают множественные ссылки, если в контексте явно не указано иного. Так, например, ссылка на «носитель» включает смеси двух или более таких носителей и т.п.
Термин «необязательный» или «необязательно» означает, что описанный потом случай или событие может происходить или не происходить и что настоящее описание включает отдельные примеры, где этот случай или событие происходит, и отдельные примеры, где это не происходит.
Под термином «фармацевтически приемлемый» понимают материал, который не является биологически или иным образом нежелательным, т.е. данный материал можно вводить индивидууму вместе с подходящим активным соединением, не вызывая клинически неприемлемых биологических эффектов или взаимодействия вредным образом с любым из других компонентов фармацевтической композиции, в которой он содержится. В данном контексте, диапазоны могут быть выражены как от «примерно» одного конкретного значения и/или до «примерно» другого конкретного значения. Когда такой диапазон точно выражен, другой аспект включает от одного конкретного значения и/или до другого конкретного значения. Подобным образом, когда значения выражены в виде приближений посредством использования антецедента «примерно», должно быть понятно, что конкретное значение образует другой аспект. Далее, должно быть понятно, что конечные точки каждого из диапазонов являются значимыми как по отношению к другой конечной точке, так и независимо от другой конечной точки.
Массовый процент компонента, за исключением совсем иначе конкретно установленного, базируется на общей массе готовой лекарственной формы или композиции, в которую компонент включен.
Под термином «эффективное количество», как используется в данном контексте, подразумевают «количество одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, эффективное при дозировках и в течение периодов времени, необходимых для достижения желательного или терапевтического результата». Эффективное количество можно варьировать в соответствии с факторами, известными в данной области, такими как статус заболевания, возраст, пол и масса тела человека или животного, подвергаемого лечению. Несмотря на то что конкретные схемы приема могут быть описаны в примерах согласно данному контексту, квалифицированному специалисту в данной области должно быть понятно, что схема приема может быть изменена для достижения оптимального терапевтического ответа. Например, несколько разделенных доз может быть введено в течение суток или дозу можно пропорционально снижать, как требуется при крайней необходимости из-за терапевтической ситуации. В дополнение, композиции согласно настоящему изобретению можно вводить так часто, как необходимо для достижения терапевтического количества.
Термин «примесь» или «смесь», обычно используемый в данном контексте, означает физическую комбинацию двух или более различных компонентов.
Термин «эксципиент», используемый в данном контексте, включает любое другое соединение, которое может содержаться в или может быть комбинировано с одним или более из раскрытых ингибиторов, которое не является терапевтически или биологически активным соединением. Как таковой, эксципиент должен быть фармацевтически или биологически приемлемым или подходящим (например, эксципиент обычно должен быть нетоксичным для субъекта). Термин «эксципиент» включает такое отдельное соединение, и также подразумевают, что он включает множество эксципиентов.
Как используется в данном контексте, под термином «субъект» подразумевают индивидуум. Так, термин «субъект» может включать одомашненных животных (например, кошки, собаки и т.д.), поголовье скота (например, крупный рогатый скот, лошади, свиньи, овцы, козы и т.д.), лабораторных животных (например, мышь, кролик, крыса, морская свинка и т.д.) и птиц. Термин «субъект» также может включать млекопитающих, таких как примат или человек.
Под термином «предупреждать», или другими формами этого слова, такими как «предупреждающий» или «предупреждение», подразумевают прекращение конкретного события или признака, стабилизацию или задержку развития или прогрессирования конкретного события или признака или минимизацию изменений, которые происходят при конкретном событии или признаке. Предупреждение не требует сравнения с контролем, так как оно обычно более полное, чем, например, уменьшение. Как используется в данном контексте, что-либо может быть уменьшено, но не предупреждено, однако, что-либо, которое уменьшено, также может быть предупреждено. Также, что-либо может быть предупреждено, но не уменьшено, однако, что-либо, которое предупреждено, однако, также может быть уменьшено. Понятно, что там, где используют слово уменьшение или предупреждение, за исключением конкретно указанного другим образом, использование другого слова также точно раскрыто.
Под термином «уменьшать», или другими формами этого слова, такими как «уменьшающий» или «уменьшение», подразумевают уменьшение события или признака (например, васкулярное просачивание). Понятно, что этот термин является типичным относительно некоторой стандартной или предполагаемой величины, другими словами, он является относительным, однако, он не всегда неизбежно должен иметь отношение к стандартной или относительной величине.
Под термином «лечить», или другими формами этого слова, как например «подвергаемый лечению» или «лечение», используемым в данном контексте, подразумевают, что введение соединения согласно настоящему изобретению ослабляет болезнь или нарушение у хозяина и/или уменьшает, ингибирует или ликвидирует конкретный признак или событие, ассоциированный(ое) с нарушением (например, инфекция, вызываемая микроорганизмом). Так, термин «лечение» включает предупреждение появления у хозяина нарушения, особенно, когда хозяин предрасположен к «приобретению» заболевания, однако, еще не диагностирован в отношении заболевания; ингибирование нарушения; и/или смягчение или реверсирование нарушения. До тех пор, пока способы согласно настоящему изобретению направлены на предупреждение нарушений, понятно, что термин «предупреждать» не требует, чтобы полностью препятствовать статусу заболевания. Скорее, как используется в данном контексте, термин «предупреждение» относится к способности квалифицированного специалиста в данной области идентифицировать популяцию, которая восприимчива к нарушениям, так чтобы введение соединений согласно настоящему изобретению можно было осуществлять до начала заболевания.
Согласно данному контексту, диапазоны могут быть выражены как от «примерно» одного конкретного значения и/или до «примерно» другого конкретного значения. Когда такой диапазон выражен, другой аспект включает от одного конкретного значения и/или до другого конкретного значения. Подобным образом, когда значения выражены в виде приближений посредством использования антецедента «примерно», должно быть понятно, что конкретное значение образует другой аспект. Далее, должно быть понятно, что конечные точки каждого из диапазонов являются значимыми как по отношению к другой конечной точке, так и независимо от другой конечной точки. Также понятно, что имеется некоторое количество значений, раскрытых в данном контексте, и что каждое значение также в данном контексте раскрыто как «примерное» этому конкретному значению в дополнение к самому значению. Например, если раскрыто значение «10», тогда «примерно 10» также раскрыто. Также понятно, что, когда значение раскрыто, тогда «меньше, чем или равное» значению, «больше, чем или равное значению» и возможные диапазоны между значениями также раскрыты, как соответственно понимаемые специалистом в данной области. Например, если раскрыто значение «10», тогда «меньше, чем или равное 10», так же как «больше, чем или равное 10» также раскрыто. Также понятно, что везде данные применимости обеспечены числом различных форматов и что эти данные имеют конечные точки, и исходные точки, и диапазоны для любой комбинации точек данных. Например, если раскрыты конкретная точка данных «10» и конкретная точка данных «15», понятно, что больше, чем или равное, меньше, чем или равное, и равное 10 и 15 рассматриваются раскрытыми, так же как между 10 и 15. Также понятно, что каждая единица между двумя конкретными единицами также является раскрытой. Например, если раскрыты 10 и 15, тогда 11, 12, 13 и 14 также являются раскрытыми.
Под термином «антимикробный» понимают способность лечить или контролировать (например, уменьшать, предупреждать, ингибировать, ухудшать или ликвидировать) рост микроорганизма или выживание при какой-либо концентрации. Подобным образом, термины «антибактериальный», «антивирусный» и «противогрибковый», соответственно, означают способность лечить или контролировать (например, уменьшать, предупреждать, ингибировать, ухудшать или ликвидировать) бактериальный, вирусный и грибковый рост или выживание при какой-либо концентрации.
Термин «анион» означает тип иона и входит в значение термина «ион». «Анион» представляет собой любую молекулу, часть молекулы (например, цвиттер-ион), кластер молекул, молекулярный комплекс, остаток или атом, который имеет «чистый» отрицательный заряд или который может быть создан включающим «чистый» отрицательный заряд. Термин «анион-предшественник», используемый согласно данному контексту, особенно относится к молекуле, которая может быть превращена в анион за счет химической реакции (например, депротонирование).
Термин «катион» означает тип иона и входит в значение термина «ион». «Катион» представляет собой любую молекулу, часть молекулы (например, цвиттер-ион), кластер молекул, молекулярный комплекс, остаток или атом, который имеет «чистый» положительный заряд или который может быть создан включающим «чистый» положительный заряд. Термин «катион-предшественник», используемый согласно данному контексту, особенно относится к молекуле, которая может быть превращена в катион за счет химической реакции (например, протонирование или алкилирование).
Термин «химиотерапевтический агент», используемый в данном контексте, включает любое другое фармацевтически активное соединение, которое может быть использовано в сочетании с раскрытыми ингибиторами HIF-1α-пролилгидроксилазы, например, цитотоксические лекарственные средства, как например 6-гидроксиметилацилфульвен, циклофосфамид, дикарбазин, кармустин, доксорубицин и метотрексат. Другие химиотерапевтические агенты также включают противовоспалительные лекарственные средства, то есть нестероидные противовоспалительные соединения, такие как аспирин.
Если не указано противоположного, формула с химическими связями, представленными только в виде сплошных линий, а не в виде состоящих из клиньев или пунктирных линий, предполагает каждый возможный изомер, например, каждый энантиомер, диастереомер и мезо-соединение, и смесь изомеров, как например рацемическая или масштабированная смесь.
Фактор транскрипции, индуцируемый гипоксией фактор 1 (HIF-1), представляет собой один из ключевых регуляторов гомеостаза кислорода. Он регулирует физиологические ответы на низкие уровни кислорода (гипоксия) и патофизиологию сердечного приступа, рак, инсульт и хроническое заболевание легких. HIF-1 представляет собой гетеродимерный белок, который состоит из двух субъединиц, HIF-1α и HIF-1β. Тогда как HIF-1β конститутивно экспрессируется, экспрессия HIF-1α индуцируется концентрациями кислорода ниже 6%. Гетеродимеры HIF-1 связываются c элементом ответа на гипоксию (HRE), консенсусной последовательностью 5-RCGTG-3. До сих пор идентифицированы отдельные множества HIF-1-регулируемых генов, включая гены, кодирующие белки, принимающие активное участие в ангиогенезе, метаболизме энергии, эритропоэзе, клеточной пролиферации и жизнеспособности, васкулярном ремоделировании и вазомоторном ответе. Следовательно, модуляция активации HIF в клетках является критической для предупреждения, контролирования, лечения или иным образом воздействия на большой ряд заболеваний, статусов заболеваний и состояний.
Индуцируемый гипоксией фактор транскрипции 1-альфа (HIF-1α) играет центральную роль в клеточной адаптации к пониженной кислородной доступности. При гипоксическом стрессе, активированный HIF-1α стремится к гомеостазу кислорода путем не только поддерживания продуцирования внутриклеточной энергии через индукцию ангиогенеза и гликолиза, но и также ограничения расхода энергии посредством ингибирования клеточной пролиферации и репарации ДНК. Обычно, HIF-1α активирует свои гены-мишени, в том числе, ЕРО, VEGF и PGK1, через связывание с ответственным за гипоксию элементом в гене-промоторе (Wang G.L. и др., J. Biol. Chem. (1993); 268, 21513-21518).
HIF-1α при нормальных состояниях здоровья, где клетки имеют достаточное снабжение кислородом, легко превращается в деградированную форму за счет одного из некоторых ферментов, 4-пролилгидроксилазы, в том числе EGLN1 (в данном контексте упоминается как HIFPH2). Как установлено выше, когда клетки подвергаются гипоксии, эта ферментативная трансформация является медленной или всецело прекращается и HIF-1α начинает накапливаться в клетке. Когда происходит это накопление HIF-1α, этот белок комбинируется с HIF-1β с образованием активного комплекса фактора транскрипции HIF-1. Этот фактор транскрипции затем активирует некоторые биологические пути, которые присутствуют, в качестве ответа на гипоксию и способа облегчения состояния организма от гипоксии. Эти ответы включают, в том числе, ангиогенный, эритропоэтический (ЕРО), глюкозный метаболизм PGK, изменение матрикса и усиленную способность фагоцитов отвечать на патогены.
2
На фигуре 1 кратко представлен метаболизм HIF-1α во время нормальных состояний здоровья. HIF-1α-Субъединицы являются нестабильными при нормоксических состояниях; клетки непрерывно синтезируют, и разрушают эти белки. Короткий период полураспада HIF-1α ведет к побочному продукту семейства O- и железо-зависимых пролилгидроксилаз (РН1-3), чье воздействие нацеливает HIFα-субъединицы на разрушение по убиквитин-протеасомному пути через процесс, зависимый от взаимодействия с белком-супрессором опухоли Hippel-Lindau (vHL). На фигуре 1, PHD′s означает пролилгидроксилазы, которые в присутствии аспарагинил-гидроксилазы воздействуют на гидроксилатпролины 402 и 564, так же как аспарагины 804. С этого момента, так как гидроксилированный HIF-1α также предохранен от ассоциации с р300-СРВ вследствие других факторов, убиквитинлигаза начинает метаболизировать гидроксилированный HIF-1α по vHL-пути.
В случае пациентов, где имеется необходимость в стимуляции этого ответа, например, в случае пациентов, нуждающихся в повышенном тканевом кислороде за счет периферического васкулярного заболевания (PVD), ингибирование HIF1-ферментов, например, Egl nine гомолог 1 (HIFPH2), стимулирует собственный для организма ангиогенный ответ без последствий дефицита кислорода. В дополнение, при ишемических заболеваниях, в том числе, CAD и анемии, стимуляция ангиогенной, эритропоэтической и метаболической адаптации может обеспечивать терапевтические благоприятные воздействия. Позитивная регуляция HIF-1α также позволяет реализовать способ усиления иммунитета, например, путем повышения фагоцитирующей способности.
Следовательно, существует давно испытываемая необходимость в способах контролирования активности HIF-1α, что может быть эффективно достигнуто за счет соединений, которые ингибируют ферменты, 4-пролилгидроксилазу, разрушающие HIF-1α. Это ингибирование ферментов, 4-пролилгидроксилазы, в том числе HIFPH2 (также упоминаемый в данном контексте как EGLN1 или PHD2), и HIFPH3 (также упоминаемый в данном контексте как EGLN3 от PHD-3), в связи с этим, позволяет реализовать способ повышения концентрации HIF-1α в клетках и, таким образом, осуществлять обеспечение способами в отношении лечения множества заболеваний или статусов заболеваний.
Согласно настоящей заявке, раскрыты способы лечения одного или более заболеваний, состояний, синдромов и т.п., которые влияют на уровень индуцируемых гипоксией факторов транскрипции. Регуляция этих факторов, как во время гипоксии, так и во время нормоксии, может позволить реализовать способы ребалансирования или регуляции одного или более биологических путей, ассоциированных с анормальными состояниями, в том числе, инвазией организма патогенами, в том числе бактериями, грибами, вирусами и паразитами, анормальной клеточной регуляцией, например рак, ишемия, и побочными эффектами, провоцируемыми вакцинацией.
Нацеливание HIF1-стабилизации в клетках
2
2
HIF-1α нацеливается на деструкцию через пролилгидроксилирование, кислородзависимую модификацию, которую распознают посредством комплекса Е3-убиквитинлигаза, содержащего супрессор опухоли Hippel-Lindau (VHL). Три пролилгидроксилазы, упоминаемые ранее в литературе как EGLN1, EGLN2 и EGLN3 (также известные как идентифицированные у млекопитающих), среди которых EGLN1 (также известная, как HIFPH2 или PHD2) и EGLN3 (также известная как HIFPH3 или PHD3) являются индуцируемыми гипоксией при их уровнях мРНК зависимым от HIF-1α образом. Уровни HIF-1α контролируются у людей этими пролил-4-гидроксилазами за счет гидроксилирования HIF-1α-пролиновых остатков Pro-402 и Pro-564 (Ivan М. и др., (2001) «HIFα targeted for VHL-mediated destruction by proline hydroxylation: implications for O sensung», Science, 292, 464-468; Jaakkola P. и др., (2001) «Targeting of HIF-1α to the von Hippel-Lindau ubiquitylation complex by O-regulated prolyl hydroxylation», Science, 292, 468-472; и Masson N. и др., (2001) «Independent function of two destruction domains in hypoxia-inducible factor-α chains activated by prolyl hydroxylation», EMBO J., 20, 5197-5206). При состояниях гипоксии активность EGLN1 и EGLN3 подавлена.
Стимулируемым за счет повышения клеточной концентрации HIF-1α является продуцирование фосфоглицераткиназы (PGK) и васкулярного эндотелиального фактора роста (VEGF). Показано, что стимуляция VEGF индуцирует образование функциональных неососудов в мышиной роговице и усиленный кровоток в случае модели коронарного артериального заболевания при использовании собаки в качестве модели. Ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы согласно настоящему изобретению обеспечивают усиление экспрессии многочисленных, индуцируемых гипоксией генов, включая VEGF, GAPDH и эритропоэтин (ЕРО). Дополнительно, ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы согласно настоящему изобретению обеспечивают усиление аккумуляции HIF-1α в цитоплазме и ядре. Трансгенные мыши, экспрессирующие конститутивно активный HIF-1α в коже, обладают повышенной кожной васкуляризацией и имеют 13-кратное увеличение уровней VEGF.
Раны
Хронические, неизлечимые раны являются главной причиной пролонгированной болезненности у популяции старых людей. Это, в особенности, случай прикованных к постели или больных диабетом пациентов, у которых развиваются тяжелые, неизлечимые язвы кожи. В множестве из этих случаев замедление в отношении заживления является результатом неадекватного кровоснабжения или в результате непрерывного сжатия или васкулярной закупорки. Плохая капиллярная циркуляция вследствие незначительного артериального атеросклероза или веностаза способствует недостаточности восстановления поврежденной ткани. Такие ткани часто инфицированы микроорганизмами, которые неоспоримо пролиферируют за счет наследственных защитных систем организма, которые требуют хорошо васкуляризованной ткани для эффективного удаления патогенных организмов. В результате, наибольшее терапевтическое вмешательство сосредоточивается на восстановлении кровотока в ишемических тканях, давая, таким образом, питательным элементам и иммунологическим факторам доступ к участку раны.
Настоящее изобретение относится к способам лечения ран и промотируемому заживлению раны у субъекта, включающим введение нуждающемуся в лечении субъекту эффективного количества одного или более из раскрытых соединений.
Настоящее изобретение относится к применению одного или более из раскрытых соединений для использования при получении лекарственного средства в целях лечения ран и промотируемого заживления раны.
Антимикробный агент
in vivo
Ответственный за гипоксию фактор транскрипции HIF-1α является существенным для регуляции воспаления . Как таковое, было раскрыто (Peyssonnaux C. и др., «HIF-1α expression regulates the bactericidal capacity of phagocytes», J. Clinical Investigation, 115(7), cc. 1808-1815 (2005)), что бактериальная инфекция индуцирует экспрессию HIF-1α в миелоидных клетках даже при нормоксических состояниях и что HIF-1α регулирует генерацию критических молекулярных эффекторов иммунной защиты, включая протеазы гранул, антимикробные пептиды, оксид азота и TNF-α. Бактериальная инфекция индуцирует субпопуляцию генов-мишеней HIF-1α, особенно относящихся к микробному киллингу, демонстрируя, таким образом, что HIF-1α выполняет существенную функцию в наследственном иммунитете, отличную от гипоксического ответа. Следовательно, функция HIF-1α является критической для бактериальной активности миелоидной клетки и способности хозяина ограничивать системное распространение инфекции от начального тканевого очага. Повышенная активность HIF-1α-пути вследствие vHL-делеции способствует продуцированию миелоидной клеткой защитных факторов, и улучшает бактерицидную способность. Раскрытые соединения индуцируют HIF-1α-активность и также могут увеличивать бактериальный киллинг и продуцирование NO в HIF-1α-специфической форме. Эти раскрытия позволяют реализовать способы усиления наследственных иммунных ответов на микробную, например бактериальную, инфекцию.
Без ограничения теорией, раскрытые соединения могут увеличивать стабилизацию HIF-1-белка путем воздействия, прямо или непрямо, на один или более клеточных процессов, влияющих на дестабилизацию или метаболизацию клеточных компонентов, которые стабилизируют присутствие HIF-1-белка, защищают его от ингибирования, или на повышение активности белка. Альтернативно, раскрытые соединения могут увеличивать активность HIF-1-белка путем ингибирования или иным образом блокирования активности соединений, которые ингибируют активность HIF-1-белка. По существу, раскрытым в настоящем изобретении является способ улучшения лечения микробных инфекций путем введения вещества, которое повышает активность или уровень по меньшей мере одного HIF-1-белка, субъекту, страдающему от микробной инфекции, или при повышенном риске микробной инфекции.
in vitro
in vivo
ex vivo
В одном аспекте, раскрытыми согласно настоящему изобретению являются способы модуляции активности по меньшей мере одного HIF-1-белка. По существу, раскрытые согласно изобретению способы включают введение в контакт по меньшей мере одного HIF-1-белка или взаимодействующего с HIF-1 белка с одним или более из раскрытых соединений, которые модулируют активность HIF-1-белка, или осуществление контакта между белком и веществом. В одном воплощении, введение в контакт осуществляется . В другом воплощении, введение в контакт осуществляется . В дальнейшем воплощении, введение в контакт осуществляется .
В другом аспекте, раскрытым в настоящем изобретении является способ лечения субъекта, инфицированного или с риском инфекции с помощью микробного агента, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества одного или более из раскрытых соединений. В одном воплощении, соединение повышает количество или активность HIF-1. В другом воплощении, микробным агентом является патоген. Итерации этого воплощения, относящиеся к патогенам, включают бактерии, грибы, простейшие, вирусы, дрожжи и т.п. Еще дальнейшая итерация этого аспекта относится к способу лечения субъекта, инфицированного или с риском инфекции с помощью микробного агента, включающему увеличение активности иммунных клеток субъекта в отношении киллинга микробного патогена.
Одним способом повышения стабилизации HIF-1 является ингибирование активности ферментов, 4-пролилгидроксилазы, которое начинает клеточное разрушение HIF-1α, таким образом, предотвращая HIF-1α от комбинирования с HIF-1β при образовании HIF-1. По существу, раскрытыми в настоящем изобретении являются способы усиления клеточного ответа на статусы заболевания, как например инфекция, например, наличие патогена, такого как бактерия, вирус, паразит, дрожжи, грибы и т.п., за счет повышения фагоцитоза. Также в настоящем изобретении раскрыты способы лечения ракового заболевания за счет усиления клеточного иммунного ответа, например, путем стабилизации HIF-1, таким образом, повышая способность организма к уменьшению размера опухоли. Далее, согласно настоящему изобретению раскрыты способы лечения заболеваний, где иммунный ответ может быть стимулирован путем вакцинации.
Следующую химическую иерархию использовали на всем протяжении данного контекста для описания и раскрытия объема настоящего изобретения и для детального указания и определенного притязания в отношении единиц, которые включают соединения согласно настоящему изобретению, однако, без специфически определенного другим образом, причем термины, используемые в данном контексте, являются такими же, как термины, известные специалисту в данной области. Термин «гидрокарбил» означает любую, базирующуюся на атоме углерода, единицу (органическая молекула), причем вышеуказанные единицы необязательно содержат одну или более органическую(ких) функциональную(ных) группу(групп), включающую(щие) содержащие неорганический атом соли, в том числе, карбоксилаты, соли четвертичного аммония. В пределы широкого значения термина «гидрокарбил» входят классы «ациклический гидрокарбил» и «циклический гидрокарбил», термины, которые используют для разделения гидрокарбильных единиц на циклические и нециклические классы.
2
По отношению к следующим определениям, «циклический гидрокарбил» может содержать только атомы углерода в цикле (карбоциклические и арильные циклы) или может содержать один или более гетероатомов в цикле (гетероциклический и гетероарил). Для «карбоциклических» циклов наименьшее число атомов углерода в цикле составляет 3 атома углерода; циклопропил. Для «арильных» циклов наименьшее число атомов углерода в цикле составляет 6 атомов углерода; фенил. Для «гетероциклических» циклов наименьшее число атомов углерода в цикле составляет 1 атом углерода; диазиринил. Этиленоксид содержит 2 атома углерода и представляет собой С-гетероцикл. Для «гетероарильных» циклов наименьшее число атомов углерода в цикле составляет 1 атом углерода; 1,2,3,4-тетразолил. Последующее представляет собой неисчерпывающее описание терминов «ациклический гидрокарбил» и «циклический гидрокарбил», как используется в данном контексте.
А. Замещенный и незамещенный ациклический гидрокарбил.
Для целей настоящего описания, термин «замещенный и незамещенный ациклический гидрокарбил» включает 3 категории единиц:
1
2
3
3
4
4
4
4
1
1
1
1
2
2
2
3
1) алкил с линейной или разветвленной цепью, неисчерпывающие примеры которого включают метил (С), этил (С), н-пропил (С), изопропил (С), н-бутил (С), втор-бутил (С), изобутил (С), трет-бутил (С) и т.п.; замещенный алкил с линейной или разветвленной цепью, неисчерпывающие примеры которого включают гидроксиметил (С), хлорметил (С), трифторметил (С), аминометил (С), 1-хлорэтил (С), 2-гидроксиэтил (С), 1,2-дифторэтил (С), 3-карбоксипропил (С) и т.п.
2
3
3
3
4
2
4
9
9
2) алкенил с линейной или разветвленной цепью, неисчерпывающие примеры которого включают этенил (С), 3-пропенил (С), 1-пропенил (также, 2-метилэтенил) (С), изопропенил (также, 2-метилэтен-2-ил) (С), бутен-4-ил (С) и т.п.; замещенный алкенил с линейной или разветвленной цепью, неисчерпывающие примеры которого включают 2-хлорэтенил (также, 2-хлорвинил) (С), 4-гидроксибутен-1-ил (С), 7-гидрокси-7-метилокт-4-ен-2-ил (С), 7-гидрокси-7-метилокт-3,5-диен-2-ил (С) и т.п.
2
3
3
7
7
8
9
3) алкинил с линейной или разветвленной цепью, неисчерпывающие примеры которого включают этинил (С), проп-2-инил (также, пропаргил) (С), пропин-1-ил (С) и 2-метилгекс-4-ин-1-ил (С); замещенный алкинил с линейной или разветвленной цепью, неисчерпывающие примеры которого включают 5-гидрокси-5-метилгекс-3-инил (С), 6-гидрокси-6-метилгепт-3-ин-2-ил (С), 5-гидрокси-5-этилгепт-3-инил (С) и т.п.
В. Замещенный и незамещенный циклический гидрокарбил.
Для целей настоящего описания, термин «замещенный и незамещенный циклический гидрокарбил» включает 5 категорий единиц:
1) Термин «карбоциклический» определяют в данном контексте как «охватывающий циклы, содержащие 3-20 атомов углерода, где атомы, содержащиеся в вышеуказанных циклах, ограничены атомами углерода, и, далее, каждый цикл может быть независимо замещен одним или более фрагментом(ами), способным(и) заменять один или более атом(ов) водорода». Последующее представляет собой неисчерпывающие примеры «замещенных и незамещенных карбоциклов», которые охватывают следующие категории:
3
3
3
4
4
4
5
5
5
6
6
7
8
5
6
6
6
i) карбоциклы, имеющие один замещенный или незамещенный углеводородный цикл, неисчерпывающие примеры которых включают циклопропил (С), 2-метилциклопропил (С), циклопропенил (С), циклобутил (С), 2,3-дигидроксициклобутил (С), циклобутенил (С), циклопентил (С), циклопентенил (С), циклопентадиенил (С), циклогексил (С), циклогексенил (С), циклогептил (С), циклооктанил (С), 2,5-диметилциклопентил (С), 3,5-дихлорциклогексил (С), 4-гидроксициклогексил (С) и 3,3,5-триметилциклогекс-1-ил (С);
8
9
9
10
10
ii) карбоциклы, имеющие два или более замещенных или незамещенных конденсированных углеводородных цикла, неисчерпывающие примеры которых включают октагидропенталенил (С), октагидро-1Н-инденил (С), 3а,4,5,6,7,7а-гексагидро-3Н-инден-4-ил (С), декалинил (С), декагидроазуленил (С);
iii) карбоциклы, которые являются замещенными или незамещенными бициклическими углеводородными циклами, неисчерпывающие примеры которых включают бицикло[2.1.1]гексанил, бицикло[2.2.1]гептанил, бицикло[3.1.1]гептанил, 1,3-диметил[2.2.1]гептан-2-ил, бицикло[2.2.2]октанил и бицикло[3.3.3]ундеканил.
2) Термин «арил» определяют в данном контексте как «единицы, включающие, по меньшей мере, один фенильный или нафтильный цикл, и где не имеются гетероарильные циклы или гетероциклы, конденсированные с фенильным или нафтильным циклом, и, далее, каждый цикл может быть независимо замещен одним или более фрагментом(ами), способным(и) заменять один или более атом(ов) водорода». Последующее представляет собой неисчерпывающие примеры «замещенных и незамещенных арильных циклов», которые включают следующие категории единиц:
6
10
6
10
10
6
6
6
6
6
6
6
6
10
10
10
i) замещенные или незамещенные С- или С-арильные циклы; фенильные и нафтильные циклы, замещенные или незамещенные, неисчерпывающие примеры которых включают фенил (С), нафтилен-1-ил (С), нафтилен-2-ил (С), 4-фторфенил (С), 2-гидроксифенил (С), 3-метилфенил (С), 2-амино-4-фторфенил (С), 2-(N,N-диэтиламино)фенил (С), 2-цианофенил (С), 2,6-ди-трет-бутилфенил (С), 3-метоксифенил (С), 8-гидроксинафтилен-2-ил (С), 4,5-диметоксинафтилен-1-ил (С) и 6-цианонафтилен-1-ил (С);
6
10
8
9
ii) С- или С-арильные циклы, конденсированные с 1 или 2 насыщенными циклами, неисчерпывающие примеры которых включают бицикло[4.2.0]окта-1,3,5-триенил (С) и инданил (С).
3) Термины «гетероциклический» и/или «гетероцикл» определяют в данном контексте как «единицы, содержащие один или более циклов, имеющих 3-20 атомов, где, по меньшей мере, один атом, по меньшей мере, в одном цикле, представляет собой гетероатом, выбираемый из азота (N), кислорода (О) или серы (S), или смеси N, O и S, и, далее, где цикл, который содержит гетероатом, также не является ароматическим циклом». Последующее представляет собой неисчерпывающие примеры «замещенных и незамещенных гетероциклов», которые включают следующие категории единиц:
1
2
2
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
4
4
4
4
4
5
5
5
6
8
9
i) гетероциклы, имеющие один цикл, содержащий один или более гетероатом(ов), неисчерпывающие примеры которых включают диазиринил (С), азиридинил (С), уразолил (С), азетидинил (С), пиразолидинил (С), имидазолидинил (С), оксазолидинил (С), изоксазолинил (С), тиазолидинил (С), изотиазолинил (С), оксатиазолидинонил (С), оксазолидинонил (С), гидантоинил (С), тетрагидрофуранил (С), пирролидинил (С), морфолинил (С), пиперазинил (С), пиперидинил (С), дигидропиранил (С), тетрагидропиранил (С), пиперидин-2-онил (валеролактам) (С), 2,3,4,5-тетрагидро-1Н-азепинил (С), 2,3-дигидро-1Н-индол (С) и 1,2,3,4-тетрагидрохинолин (С);
7
7
8
9
10
ii) гетероциклы, имеющие 2 или более циклов, один из которых представляет собой гетероцикл, неисчерпывающие примеры которых включают гексагидро-1Н-пирролизинил (С), 3а,4,5,6,7,7а-гексагидро-1Н-бензо[d]имидазолил (С), 3а,4,5,6,7,7а-гексагидро-1Н-индолил (С), 1,2,3,4-тетрагидрохинолинил (С) и декагидро-1Н-циклоокта[b]пирролил (С).
4) Термин «гетероарил» определяют в данном контексте как «охватывающий один или более циклов, содержащих 5-20 атомов, где, по меньшей мере, один атом, по меньшей мере, в одном цикле, представляет собой гетероатом, выбираемый из азота (N), кислорода (О) или серы (S), или смеси N, O и S, и, где, далее, по меньшей мере, один из циклов, который содержит гетероатом, является ароматическим циклом». Последующее представляет собой неисчерпывающие примеры «замещенных и незамещенных гетероциклов», которые включают следующие категории единиц:
1
2
2
3
3
3
3
3
3
4
4
4
4
5
5
5
i) гетероарильные циклы, содержащие один цикл, неисчерпывающие примеры которых включают 1,2,3,4-тетразолил (С), [1,2,3]триазолил (С), [1,2,4]триазолил (С), триазинил (С), тиазолил (С), 1Н-имидазолил (С), оксазолил (С), изоксазолил (С), изотиазолил (С), фуранил (С), тиофенеил (С), пиримидинил (С), 2-фенилпиримидинил (С), пиридинил (С), 3-метилпиридинил (С) и 4-диметиламинопиридинил (С);
5
5
5
6
6
7
7
8
8
8
8
8
9
9
9
ii) гетероарильные циклы, содержащие 2 или более конденсированных циклов, один из которых представляет собой гетероарильный цикл, неисчерпывающие примеры которых включают 7Н-пуринил (С), 9Н-пуринил (С), 6-амино-9Н-пуринил (С), 5Н-пирроло[3,2-d]пиримидинил (С), 7Н-пирроло[2,3-d]пиримидинил (С), пиридо[2,3-d]пиримидинил (С), 2-фенилбензо[d]тиазолил (С), 1Н-индолил (С), 4,5,6,7-тетрагидро-1Н-индолил (С), хиноксалинил (С), 5-метилхиноксалинил (С), хиназолинил (С), хинолинил (С), 8-гидроксихинолинил (С) и изохинолинил (С).
1
6
6
10
1
6
1
6
5) Связанные циклические С-С-гидрокарбильные единицы (являются ли они карбоциклическими единицами, С- или С-арильными единицами, гетероциклическими единицами или гетероарильными единицами), которые связаны с другим фрагментом, единицей или ядром молекулы, в виде С-С-алкилена. Неисчерпывающие примеры связанных циклических гидрокарбильных единиц включают бензил С-(С), имеющий формулу
a
6
6
1
10
1
6
2
6
3
10
1
3
2
5
1
6
1
10
1
6
где R означает, необязательно, один или более независимо выбираемый(х) заместитель(ей) для водорода. Дальнейшие примеры включают другие арильные единицы, в том числе (2-гидроксифенил)гексил С-(С); нафталин-2-илметил С-(С), 4-фторбензил С-(С), 2-(3-гидроксифенил)этил С-(С), а также замещенные и незамещенные С-С-алкиленкарбоциклические единицы, например циклопропилметил С-(С), циклопентилэтил С-(С), циклогексилметил С-(С). Включенными в эту категорию являются замещенные и незамещенные С-С-алкиленгетероарилы, например 2-пиколил С-(С), имеющие формулу
a
1
12
1
10
1
2
1
3
где R имеет такое же значение, как описано выше. В дополнение, связанные циклические С-С-гидрокарбильные единицы включают С-С-алкиленгетероциклы и алкиленгетероарилы, неисчерпывающие примеры которых включают азиридинилметил С-(С) и оксазол-2-илметил С-(С).
3
20
6
10
1
9
1
9
Для целей настоящего изобретения, карбоциклы имеют С-С; арильные циклы имеют С или С; гетероциклы имеют С-С; и гетероарильные циклы имеют С-С.
Для целей настоящего изобретения и для обеспечения согласованности в описании настоящего изобретения, конденсированные циклы, а также спироциклы, бициклы и т.п., которые содержат один гетероатом, должны быть охарактеризованы и упоминаться в данном контексте как охватываемые циклическим семейством, соответствующим содержащему гетероатом циклу, несмотря на то что квалифицированный специалист может дать альтернативные характеристики. Например, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин, имеющий формулу
считается, для целей настоящего изобретения, гетероциклической единицей. 6,7-Дигидро-5Н-циклопентапиримидин, имеющий формулу
считается, для целей настоящего изобретения, гетероарильной единицей. Когда конденсированный цикл содержит гетероатомы как в насыщенном цикле (гетероцикл), так и в арильном цикле (гетероарил), преобладает арильный цикл, и определяет тип категории, к которой цикл относится согласно данному контексту для целей описания изобретения. Например, 1,2,3,4-тетрагидро[1,8]нафтиридин, имеющий формулу
считается, для целей настоящего изобретения, гетероарильной единицей.
8
3
Термин «замещенный» используется на всем протяжении описания. Термин «замещенный» относится к единицам, описанным в данном контексте как «замещенная единица или фрагмент представляет собой гидрокарбил или фрагмент, является ли он ациклическим или циклическим, который имеет один или более атомов водорода, замещенных заместителем или несколькими заместителями, как описано в данном контексте ниже». Единицы, во время замещения атомов водорода, способны к замене одного атома водорода, двух атомов водорода или трех атомов водорода у гидрокарбила сразу. В дополнение, эти заместители могут замещать два атома водорода у двух смежных атомов углерода с образованием вышеуказанного заместителя, нового фрагмента или единицы. Например, замещенная единица, которой требуется замена одного атома водорода, включает галоген, гидроксил и т.п. Замена двух атомов водорода включает карбонил, оксимино и т.п. Замена двух атомов водорода у смежных атомов углерода включает эпокси и т.п. Замена трех атомов водорода включает циано и т.п. Термин «замещенный», используемый на всем протяжении описания настоящего изобретения, указывает, что гидрокарбильный фрагмент, в том числе ароматический цикл, алкильная цепь, может иметь один или более атомов водорода, замещенных заместителем. Когда фрагмент описывают как «замещенный», может быть замещено любое число атомов водорода. Например, 4-гидроксифенил представляет собой «замещенный ароматический карбоцикл (арильный цикл)», (N,N-диметил-5-амино)октанил представляет собой «замещенный С-алкил с линейной цепью», 3-гуанидинопропил представляет собой «замещенный С-алкил с линейной цепью» и 2-карбоксипиридинил представляет собой «замещенный гетероарил».
Последующее представляет собой неисчерпывающие примеры единиц, которые могут замещать атомы водорода в карбоцикле, ариле, гетероцикле или гетероариле:
1
12
3
12
3
12
1
1
1
1
2
2
2
2
3
3
3
3
3
4
4
4
4
4
4
5
5
6
6
i) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; например метил (С), хлорметил (С), трифторметил (С), аминометил (С), этил (С), гидроксиметил-1-хлорэтил (С), 2-гидроксиэтил (С), 1,2-дифторэтил (С), н-пропил (С), изопропил (С), 3-карбоксипропил (С), циклопропил (С), 2-метилциклопропил (С), н-бутил (С), втор-бутил (С), изобутил (С), трет-бутил (С), циклобутил (С), 2,3-дигидроксициклобутил (С), пентил (С), циклопентил (С), гексил (С) и циклогексил (С), и т.п.;
2
12
3
12
3
12
2
2
3
3
3
4
4
4
5
5
6
9
9
ii) замещенный или незамещенный С-С-алкенил с линейной цепью, С-С-алкенил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкенил; например этенил (С), 2-хлорэтенил (также 2-хлорвинил) (С), 3-пропенил (С), 1-пропенил (также 2-метилэтенил) (С), изопропенил (также 2-метилэтен-2-ил) (С), бутен-4-ил (С), 4-гидроксибутен-1-ил (С), циклобутенил (С), циклопентенил (С), циклопентадиенил (С), циклогексенил (С), 7-гидрокси-7-метилокт-4-ен-2-ил (С) и 7-гидрокси-7-метилокт-3,5-диен-2-ил (С) и т.п.;
2
12
3
12
2
3
3
7
7
8
9
iii) замещенный или незамещенный С-С-алкинил с линейной цепью или С-С-алкинил с разветвленной цепью; например этинил (С), проп-2-инил (также пропаргил) (С), пропин-1-ил (С), 2-метилгекс-4-ин-1-ил (С); 5-гидрокси-5-метилгекс-3-инил (С), 6-гидрокси-6-метилгепт-3-ин-2-ил (С), 5-гидрокси-5-этилгепт-3-инил (С) и т.п.;
6
10
iv) замещенный или незамещенный С- или С-арил; например фенил, 2-хлорфенил, 3-гидроксифенил, 4-нитрофенил, 2-фтор-4-метилфенил, 3,5-динитрофенил, 8-гидроксинафт-1-ил, 6-сульфонилнафт-2-ил и т.п.;
1
9
v) замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; например, как описано далее в данном контексте;
1
11
vi) замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; например, как описано далее в данном контексте;
vii) галоген; например фтор, хлор, бром и иод;
23a
23b
10
x
viii) -[C(R)(R)]OR;
10
R выбирают из группы, состоящей из:
а) -Н;
1
12
3
12
3
12
b) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, С-С-алкила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкила;
6
10
с) замещенного или незамещенного С- или С-арила или алкиленарила;
1
9
d) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла;
1
11
е) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила;
23a
23b
11a
11b
x
ix) -[C(R)(R)]N(R)(R);
11a
11b
R и R, каждый, независимо выбирают из группы, состоящей из:
а) -Н;
12
b) -OR;
12
1
4
R означает водород или С-С-алкил с линейной цепью;
1
12
3
12
3
12
с) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, С-С-алкила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкила;
6
10
d) замещенного или незамещенного С- или С-арила;
1
9
е) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла;
1
11
f) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; или
11a
11b
g) R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы;
23a
23b
13
x
х) -[C(R)(R)]C(О)R;
13
R означает:
1
12
3
12
3
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
14
b) -OR;
14
1
4
6
10
1
9
1
11
R означает водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, замещенный или незамещенный С- или С-арил, замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл, замещенный или незамещенный С-С-гетероарил;
15a
15b
с) -N(R)(R);
15a
15b
15a
15b
1
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы;
23a
23b
16
x
xi) -[C(R)(R)]OC(О)R;
16
R означает:
1
12
3
12
3
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
17a
17b
b) -N(R)(R);
17a
17b
17a
17b
1
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы;
23a
23b
18
19
x
xii) -[C(R)(R)]NRC(О)R;
18
R означает:
а) -Н; или
1
4
3
4
3
4
b) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
19
R означает:
1
12
3
12
3
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
20a
20b
b) -N(R)(R);
20a
20b
20a
20b
1
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы;
23a
23b
x
xiii) -[C(R)(R)]CN;
23a
23b
x
2
xiv) -[C(R)(R)]NO;
23a
23b
21
x
xv) -[C(R)(R)]R;
21
1
10
3
10
3
10
R означает С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил, замещенный 1-21 атомами галогена, выбираемыми из -F, -Cl, -Br или -I;
23a
23b
22
x
2
xvi) -[C(R)(R)]SOR;
22
1
4
3
4
6
10
14
7
15
1
9
1
11
R означает водород, гидроксил, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью или С-С-алкил с разветвленной цепью; замещенный или незамещенный С-, С- или С-арил; С-С-алкиленарил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; или замещенный или незамещенный С-С-гетероарил;
23a
23b
1
4
R и R, каждый, независимо означают водород или С-С-алкил; и
индекс х представляет собой целое число от 0 до 5.
Соединения, раскрытые в данном контексте, включают все солевые формы, например соли обеих основных групп, в том числе аминов, а также соли кислотных групп, в том числе карбоновых кислот. Последующее представляет собой неисчерпывающие примеры анионов, которые могут образовывать соли с основными группами: хлорид, бромид, иодид, сульфат, бисульфат, карбонат, бикарбонат, фосфат, формиат, ацетат, пропионат, бутират, пируват, лактат, оксалат, малонат, малеат, сукцинат, тартрат, фумарат, цитрат и т.п. Последующее представляет собой неисчерпывающие примеры катионов, которые могут образовывать соли с кислотными группами: натрий, литий, калий, кальций, магний, висмут и т.п.
Для целей настоящего описания, термины «соединение», «аналог» и «композиция(смесь веществ)» означают в равной степени вместо одного другой и включают все энантиомерные формы, диастереомерные формы, соли и т.п. и термины «соединение», «аналог» и «композиция».
Ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы
Раскрытые соединения имеют следующую формулу
2
2
1
2
где L выбирают из СН или SO, таким образом получая N-замещенные бензил- или N-замещенные сульфониларил-3-гидроксипиридин-2-(1Н)-оны. Y, R и R далее имеют значения, указанные в данном контексте ниже.
Раскрытые в данном контексте N-замещенные бензил- и N-замещенные сульфониларил-4-аминометилен-3-гидроксипиридин-2-(1Н)-оны, которые являются ингибиторами HIF-1α-пролилгидроксилазы, имеют формулу
1
2
где R и R далее определены в данном контексте ниже.
Алкилпиперизин-1-карбоксилаты
1
4
Одна категория этих соединений относится к С-С-(линейный или разветвленный)алкил-4-{[(1-N-(хлор- или фторзамещенный)-бензил]-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)метил}-пиперазин-1-карбоксилатам, имеющим формулу
1
2
4
1
4
3
4
где Z означает фенильную группу, которая замещена 1-5 атомами галогена, выбираемыми из хлора и фтора, и R и R, взятые вместе, образуют пиперазиновый цикл, который замещен алкилкарбокси, и где R выбирают из С-С-алкила с линейной цепью или С-С-алкила с разветвленной цепью, например, трет-бутил-4-{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
1
2
3
3
4
4
4
2
Один аспект единиц Rотносится к соединениям, где Rозначает трет-бутил (С). Другой аспект единиц Rотносится к соединениям, где Rозначает метил (С). Дальнейший аспект единиц Rотносится к соединениям, где Rозначает этил (С). Еще дальнейший аспект единиц Rотносится к соединениям, где Rвыбирают из н-пропила (С), изопропила (С), н-бутила (С), втор-бутила (С) и изобутила (С). Rне означает водород, следовательно, карбоксилатная единица, имеющая формулу -СОН, определенно исключена из этой категории, но может быть включена в другие категории, как описано в данном контексте ниже.
Z означает фенил, замещенный 1-5 атомами галогена, выбираемыми из фтора и хлора. Один аспект единиц Z относится к соединениям, где Z означает 4-хлорфенил. Другой аспект единиц Z относится к соединениям, где Z выбирают из 2-хлорфенила, 3-хлорфенила, 2-фторфенила, 3-фторфенила или 4-фторфенила. Дальнейший аспект единиц Z относится к соединениям, где Z выбирают из 2,3-дифторфенила, 2,4-дифторфенила, 2,5-дифторфенила, 2,6-дифторфенила, 2,3-дихлорфенила, 2,4-дихлорфенила, 2,5-дихлорфенила и 2,6-дихлорфенила.
Последующее представляет собой неисчерпывающие примеры согласно этой категории:
метил-4-{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
метил-4-{[1-(3-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
метил-4-{[1-(2-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
этил-4-{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
этил-4-{[1-(3-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
этил-4-{[1-(2-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
трет-бутил-4-{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
трет-бутил-4-{[1-(3-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
трет-бутил-4-{[1-(2-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
метил-4-{[1-(4-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
метил-4-{[1-(3-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
метил-4-{[1-(2-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
этил-4-{[1-(4-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
этил-4-{[1-(3-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
этил-4-{[1-(2-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
трет-бутил-4-{[1-(4-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
трет-бутил-4-{[1-(3-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
и
трет-бутил-4-{[1-(2-фторбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат, имеющий формулу
Другая категория соединений относится к N-(незамещенный)-бензил-4-аминометил-3-гидроксипиридин-2-(1Н)-онам, где Z означает незамещенную фенильную группу, имеющим формулу
1
2
где R и R, взятые вместе, образуют замещенный или незамещенный гетероцикл или гетероарильный цикл.
Первый аспект этой категории относится к соединениям, имеющим формулу
1
2
200
1
1
2
2
2
2
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
4
4
4
4
5
5
5
5
6
6
6
9
где R и R, взятые вместе, образуют замещенный или незамещенный гетероцикл или гетероарильный цикл, представленный циклом А, имеющим 2-20 атомов углерода и 1-7 гетероатомов, и R представляет собой 0-40 замещений водорода. Индекс w представляет собой целое число от 0 до 40. Неисчерпывающие примеры циклов включают диазиринил (С), 1,2,3,4-тетразолил (С), азиридинил (С), уразолил (С), [1,2,3]триазолил (С), [1,2,4]триазолил (С), азетидинил (С), пиразолидинил (С), имидазолидинил (С), оксазолидинил (С), изоксазолинил (С), изоксазолил (С), тиазолидинил (С), изотиазолил (С), изотиазолинил (С), оксатиазолидинонил (С), оксазолидинонил (С), гидантоинил (С), 1Н-имидазолил (С), пирролидинил (С), морфолинил (С), пиперазинил (С), пиперидинил (С), пиперидин-2-онил (валеролактам) (С), 7Н-пуринил (С), 9Н-пуринил (С), 6-амино-9Н-пуринил (С), 2,3,4,5-тетрагидро-1Н-азепинил (С), 5Н-пирроло[3,2-d]пиримидинил (С), 7Н-пирроло[2,3-d]пиримидинил (С) и 1,2,3,4-тетрагидрохинолин (С).
200
Каждый R независимо выбирают из группы, состоящей из:
1
12
3
12
3
12
1
1
1
1
2
2
2
2
3
3
3
3
3
4
4
4
4
4
4
5
5
6
6
i) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, С-С-алкила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкила; как, например, метил (С), хлорметил (С), трифторметил (С), аминометил (С), этил (С), гидроксиметил-1-хлорэтил (С), 2-гидроксиэтил (С), 1,2-дифторэтил (С), н-пропил (С), изопропил (С), 3-карбоксипропил (С), циклопропил (С), 2-метилциклопропил (С), н-бутил (С), втор-бутил (С), изобутил (С), трет-бутил (С), циклобутил (С), 2,3-дигидроксициклобутил (С), пентил (С), циклопентил (С), гексил (С) и циклогексил (С) и т.п.;
2
12
3
12
3
12
2
2
3
3
3
4
4
4
5
5
6
9
9
ii) замещенного или незамещенного С-С-алкенила с линейной цепью, С-С-алкенила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкенила; как, например, этенил (С), 2-хлорэтенил (также, 2-хлорвинил) (С), 3-пропенил (С), 1-пропенил (также, 2-метилэтенил) (С), изопропенил (также, 2-метилэтен-2-ил) (С), бутен-4-ил (С), 4-гидроксибутен-1-ил (С), циклобутенил (С), циклопентенил (С), циклопентадиенил (С), циклогексенил (С), 7-гидрокси-7-метилокт-4-ен-2-ил (С) и 7-гидрокси-7-метилокт-3,5-диен-2-ил (С) и т.п.;
1
12
3
12
2
3
3
7
7
8
9
iii) замещенного или незамещенного С-С-алкинила с линейной цепью или С-С-алкинила с разветвленной цепью; как, например, этинил (С), проп-2-инил (также, пропаргил) (С), пропин-1-ил (С), 2-метилгекс-4-ин-1-ил (С); 5-гидрокси-5-метилгекс-3-инил (С), 6-гидрокси-6-метилгепт-3-ин-2-ил (С), 5-гидрокси-5-этилгепт-3-инил (С) и т.п.;
6
10
6
10
10
6
6
6
6
6
6
6
6
10
10
10
iv) замещенного или незамещенного С- или С-арила; как, например, фенил (С), нафтилен-1-ил (С), нафтилен-2-ил (С), 4-фторфенил (С), 2-гидроксифенил (С), 3-метилфенил (С), 2-амино-4-фторфенил (С), 2-(N,N-диэтиламино)фенил (С), 2-цианофенил (С), 2,6-ди-трет-бутилфенил (С), 3-метоксифенил (С), 8-гидроксинафтилен-2-ил (С), 4,5-диметоксинафтилен-1-ил (С), 6-цианонафтилен-1-ил (С) и т.п.;
1
9
1
2
2
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
4
4
4
4
4
5
5
5
v) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла; как, например, диазиринил (С), азиридинил (С), уразолил (С), азетидинил (С), пиразолидинил (С), имидазолидинил (С), оксазолидинил (С), изоксазолинил (С), изоксазолил (С), тиазолидинил (С), изотиазолил (С), изотиазолинил (С), оксатиазолидинонил (С), оксазолидинонил (С), гидантоинил (С), тетрагидрофуранил (С), пирролидинил (С), морфолинил (С), пиперазинил (С), пиперидинил (С), дигидропиранил (С), тетрагидропиранил (С), пиперидин-2-онил (валеролактам) (С) и т.п.;
1
11
1
2
2
3
3
3
3
4
4
4
5
vi) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; как, например, 1,2,3,4-тетразолил (С), [1,2,3]триазолил (С), [1,2,4]триазолил (С), триазинил (С), тиазолил (С), 1Н-имидазолил (С), оксазолил (С), фуранил (С), тиофенеил (С), пиримидинил (С), пиридинил (С) и т.п.;
vii) галогена; например, -F, -Cl, -Br или -I;
37a
37b
24
y
viii) -[C(R)(R)]OR;
24
R выбирают из группы, состоящей из:
а) -Н;
2
12
3
12
3
12
b) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, С-С-алкила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкила;
6
10
7
10
с) замещенного или незамещенного С- или С-арила или C- или C-алкиленарила; как, например, фенил или бензил;
1
9
d) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла;
1
11
2
3
2
3
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
2
3
е) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; например, -ОН, -СНОН, -ОСН, -СНОСН, -ОСНСН, -СНОСНСН, -ОСНСНСН и -СНОСНСНСН;
37a
37b
25a
25b
y
ix) -[C(R)(R)]N(R)(R);
25a
25b
R и R, каждый, независимо выбирают из группы, состоящей из:
а) -Н;
26
b) -OR;
26
1
4
R означает водород или С-С-алкил с линейной цепью;
2
12
3
12
3
12
с) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, С-С-алкила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкила;
6
10
d) замещенного или незамещенного С- или С-арила;
1
9
е) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла;
1
11
f) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; или
25a
25b
2
2
2
3
3
2
3
2
3
2
3
2
3
2
2
2
3
g) R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -NH, -CHNH, -NHCH, -N(CH), -NHOH, -NHOCH, -NH(CHCH), -CHNHCH, -CHN(CH), -CHNH(CHCH) и т.п.;
37a
37b
27
y
х) -[C(R)(R)]C(О)R;
27
R означает:
2
12
3
12
3
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
28
b) -OR;
28
1
4
6
10
1
9
1
11
R означает водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, замещенный или незамещенный С- или С-арил, замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл, замещенный или незамещенный С-С-гетероарил;
29a
29b
с) -N(R)(R);
29a
29b
29a
29b
2
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
3
2
3
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
2
3
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил, замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл, замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -СОСН, -СНСОСН, -ОСНСН, -СНСОСНСН, -СОСНСНСН, -СНСОСНСНСН и т.п.;
37a
37b
30
y
xi) -[C(R)(R)]OC(О)R;
30
R означает:
1
12
1
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил;
31a
31b
b) -N(R)(R);
31a
31b
31a
31b
2
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
3
2
3
2
2
2
3
2
3
3
2
2
3
2
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил, замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл, замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -OC(O)CH, -CHOC(O)CH, -OC(O)NH, -CHOC(O)NH, -OC(O)NHCH, -CHOC(O)NHCH, -OC(O)N(CH), -CHOC(O)N(CH) и т.п.;
37a
37b
32
33
y
xii) -[C(R)(R)]NRC(О)R;
32
R означает:
а) -Н; или
1
4
3
4
3
4
b) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
33
R означает:
2
12
3
12
3
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
34a
34b
b) -N(R)(R);
34a
34b
34a
34b
2
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
3
2
3
2
2
2
3
2
3
3
2
2
3
2
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил, замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл, замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -NHC(O)CH, -CHNHC(O)CH, -NHC(O)NH, -CHNHC(O)NH, -NHC(O)NHCH, -CHNHC(O)NHCH, -OC(O)N(CH), -CHNHC(O)N(CH) и т.п.;
37a
37b
y
2
2
2
xiii) -[C(R)(R)]CN; например, -CN, -CHCN и -CHCHCN;
37a
37b
y
2
2
2
2
2
2
2
xiv) -[C(R)(R)]NO; например, -NO, -CHNO и -CHCHNO;
37a
37b
35
y
2
2
3
3
3
xv) -[C(R)(R)]R; например, -CHF, -CHF, -CF, -CCl и -CBr;
35
1
10
3
10
3
10
R означает С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил, замещенный 1-21 атомами галогена, выбираемыми из -F, -Cl, -Br или -I;
37a
37b
36
y
2
xvi) -[C(R)(R)]SOR;
36
1
4
3
4
6
10
14
7
15
1
9
1
11
2
2
2
2
3
2
2
3
2
6
5
2
2
6
5
R означает водород, гидроксил, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью или С-С-алкил с разветвленной цепью; замещенный или незамещенный С-, С- или С-арил; С-С-алкиленарил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; или замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; например, -SOH, -CHSOH, -SOCH, -CHSOCH, -SOCH и -CHSOCH; и
xvii) два атома водорода у циклического атома углерода могут быть замещены с образованием =О, =S или =NH;
37a
37b
1
4
Rи R, каждый, независимо означают водород или С-С-алкил; и
индекс y представляет собой целое число от 0 до 5.
1
2
1
4
1
4
Первое воплощение этого аспекта относится к соединениям, где R и R, взятые вместе, образуют 5-членный замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл или замещенный или незамещенный С-С-гетероарильный цикл, неисчерпывающие примеры которого включают цикл, выбираемый из группы, состоящей из:
i)
ii)
iii)
iv)
v)
vi)
vii)
viii)
или
ix)
Первая итерация этого воплощения относится к ингибиторам HIF-1α-пролилгидроксилазы, имеющим формулу
200
R представляет собой от 0 до 2 замещений вместо циклического водорода, где замещения вместо водорода независимо выбирают из группы, состоящей из:
1
4
3
4
i) С-С-алкила с линейной цепью или С-С-алкила с разветвленной цепью;
1
4
3
4
ii) С-С-алкокси с линейной цепью или С-С-алкокси с разветвленной цепью;
iii) гидроксила;
iv) циано;
v) нитро;
vi) амино, метиламино или диметиламино;
vii) карбокси, метилкарбокси или этилкарбокси;
viii) формила, ацетила или пропионила;
ix) амидо, метиламидо или диметиламидо;
х) галогена;
xi) гетероцикла или
xii) гетероарила.
Неисчерпывающие примеры этой итерации включают ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы, имеющие формулу
1
2
Следующая итерация этого воплощения относится к ингибиторам HIF-1α-пролилгидроксилазы, где R и R, взятые вместе, образуют 5-членный замещенный или незамещенный гетероцикл или гетероарильный цикл, имеющий более чем один, гетероатом в цикле. Неисчерпывающие примеры включают:
1
2
4
11
4
11
Другое воплощение этого аспекта относится к ингибиторам HIF-1α-пролилгидроксилазы, где R и R, взятые вместе, образуют замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл или замещенный или незамещенный С-С-гетероарильный цикл, неисчерпывающие примеры которых выбирают из группы, состоящей из:
i)
ii)
iii)
iv)
или
v)
Неисчерпывающие примеры этого воплощения включают:
Другая категория соединений имеет формулу
200
где R и индекс w имеют такие же значения, как описано в данном контексте выше. R представляет собой 0-5 замещений вместо водорода, где каждый R независимо выбирают из группы, состоящей из:
1
12
1
12
1
1
1
1
2
2
2
2
3
3
3
3
3
4
4
4
4
4
4
5
5
6
6
i) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкила; как, например, метил (С), хлорметил (С), трифторметил (С), аминометил (С), этил (С), гидроксиметил-1-хлорэтил (С), 2-гидроксиэтил (С), 1,2-дифторэтил (С), н-пропил (С), изопропил (С), 3-карбоксипропил (С), циклопропил (С), 2-метилциклопропил (С), н-бутил (С), втор-бутил (С), изобутил (С), трет-бутил (С), циклобутил (С), 2,3-дигидроксициклобутил (С), пентил (С), циклопентил (С), гексил (С) и циклогексил (С), и т.п.;
2
12
2
12
2
2
3
3
3
4
4
4
5
5
6
9
9
ii) замещенного или незамещенного С-С-алкенила с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкенила; как, например, этенил (С), 2-хлорэтенил (также, 2-хлорвинил) (С), 3-пропенил (С), 1-пропенил (также, 2-метилэтенил) (С), изопропенил (также, 2-метилэтен-2-ил) (С), бутен-4-ил (С), 4-гидроксибутен-1-ил (С), циклобутенил (С), циклопентенил (С), циклопентадиенил (С), циклогексенил (С), 7-гидрокси-7-метилокт-4-ен-2-ил (С) и 7-гидрокси-7-метилокт-3,5-диен-2-ил (С) и т.п.;
2
12
2
3
3
7
7
8
9
iii) замещенного или незамещенного С-С-алкинила с линейной цепью или с разветвленной цепью; как, например, этинил (С), проп-2-инил (также, пропаргил) (С), пропин-1-ил (С), 2-метилгекс-4-ин-1-ил (С); 5-гидрокси-5-метилгекс-3-инил (С), 6-гидрокси-6-метилгепт-3-ин-2-ил (С), 5-гидрокси-5-этилгепт-3-инил (С) и т.п.;
6
10
6
10
10
6
6
6
6
6
6
6
6
10
10
10
iv) замещенного или незамещенного С- или С-арила; как, например, фенил (С), нафтилен-1-ил (С), нафтилен-2-ил (С), 4-фторфенил (С), 2-гидроксифенил (С), 3-метилфенил (С), 2-амино-4-фторфенил (С), 2-(N,N-диэтиламино)фенил (С), 2-цианофенил (С), 2,6-ди-трет-бутилфенил (С), 3-метоксифенил (С), 8-гидроксинафтилен-2-ил (С), 4,5-диметоксинафтилен-1-ил (С), 6-цианонафтилен-1-ил (С) и т.п.;
1
9
1
2
2
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
4
4
4
4
4
5
5
5
v) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла; как, например, диазиринил (С), азиридинил (С), уразолил (С), азетидинил (С), пиразолидинил (С), имидазолидинил (С), оксазолидинил (С), изоксазолинил (С), изоксазолил (С), тиазолидинил (С), изотиазолил (С), изотиазолинил (С), оксатиазолидинонил (С), оксазолидинонил (С), гидантоинил (С), тетрагидрофуранил (С), пирролидинил (С), морфолинил (С), пиперазинил (С), пиперидинил (С), дигидропиранил (С), тетрагидропиранил (С), пиперидин-2-онил (валеролактам) (С) и т.п.;
1
11
1
2
2
3
3
3
3
4
4
4
5
vi) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; как, например, 1,2,3,4-тетразолил (С), [1,2,3]триазолил (С), [1,2,4]триазолил (С), триазинил (С), тиазолил (С), 1Н-имидазолил (С), оксазолил (С), фуранил (С), тиофенеил (С), пиримидинил (С), пиридинил (С) и т.п.;
vii) галогена; например, -F, -Cl, -Br или -I;
23a
23b
10
x
viii) -[C(R)(R)]OR;
10
R выбирают из группы, состоящей из:
а) -Н;
1
12
1
12
b) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкила;
6
10
с) замещенного или незамещенного С- или С-арила или алкиленарила;
1
9
d) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла;
1
11
2
3
2
3
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
2
3
е) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; например, -ОН, -СНОН, -ОСН, -СНОСН, -ОСНСН, -СНОСНСН, -ОСНСНСН и -СНОСНСНСН;
23a
23b
11a
11b
x
ix) -[C(R)(R)]N(R)(R);
11a
11b
R и R, каждый, независимо выбирают из группы, состоящей из:
а) -Н;
12
b) -OR;
12
1
4
R означает водород или С-С-алкил с линейной цепью;
1
12
1
12
с) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкила;
6
10
d) замещенного или незамещенного С- или С-арила;
1
9
е) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла;
1
11
f) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; или
11a
11b
2
2
2
3
3
2
3
2
3
2
3
2
3
2
2
2
3
g) R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -NH, -CHNH, -NHCH, -N(CH), -NHOH, -NHOCH, -NH(CHCH), -CHNHCH, -CHN(CH), -CHNH(CHCH) и т.п.;
23a
23b
13
х
х) -[C(R)(R)]С(О)R;
13
R означает:
1
12
1
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил;
14
b) -OR;
14
1
4
6
10
1
9
1
11
R означает водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, замещенный или незамещенный С- или С-арил, замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл, замещенный или незамещенный С-С-гетероарил;
15a
15b
с) -N(R)(R);
15a
15b
15a
15b
1
12
1
12
6
10
1
9
1
11
3
2
3
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
2
3
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -СОСН, -СНСОСН, -ОСНСН, -СНСОСНСН, -СОСНСНСН, -СНСОСНСНСН и т.п.;
23a
23b
16
х
xi) -[C(R)(R)]ОС(О)R;
16
R означает:
1
12
1
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил;
17a
17b
b) -N(R)(R);
17a
17b
17a
17b
1
12
1
12
6
10
1
9
1
11
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы;
23a
23b
18
19
x
xii) -[C(R)(R)]NRC(О)R;
18
R означает:
а) -Н; или
1
4
1
4
b) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил;
19
R означает:
1
12
1
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил;
20a
20b
b) -N(R)(R);
20a
20b
20a
20b
1
12
1
12
6
10
1
9
1
11
3
2
3
2
2
2
3
2
3
3
2
2
3
2
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -NHC(O)CH, -CHNHC(O)CH, -NHC(O)NH, -CHNHC(O)NH, -NHC(O)NHCH, -CHNHC(O)NHCH, -OC(O)N(CH), -CHNHC(O)N(CH) и т.п.;
23a
23b
x
2
2
2
xiii) -[C(R)(R)]CN; например, -CN, -CHCN и -CHCHCN;
23a
23b
x
2
2
2
2
2
2
2
xiv) -[C(R)(R)]NO; например, -NO, -CHNO и -CHCHNO;
23a
23b
21
x
2
2
3
3
3
xv) -[C(R)(R)]R; например, -CHF, -CHF, -CF, -CCl или -CBr;
21
1
10
1
10
R означает С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкил, замещенный 1-21 атомомами галогена, выбираемыми из -F, -Cl, -Br или -I;
23a
23b
22
x
2
xvi) -[C(R)(R)]SOR;
22
1
4
6
10
14
7
15
1
9
1
11
2
2
2
2
3
2
2
3
2
6
5
2
2
6
5
R означает водород, гидроксил, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью или с разветвленной цепью; замещенный или незамещенный С-, С- или С-арил; С-С-алкиленарил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; или замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; например, -SOH, -CHSOH, -SOCH, -CHSOCH, -SOCH и -CHSOCH;
23a
23b
1
4
R и R, каждый, независимо означают водород или С-С-алкил; и
индекс х представляет собой целое число от 0 до 5.
Неисчерпывающие примеры этой категории включают соединения, имеющие формулу
Дальнейшая категория соединений относится к незамещенным N-бензил-4-аминометил-3-гидроксипиридин-2-(1Н)-онам, имеющим формулу
1
2
где R и R, каждый, независимо выбирают из группы, состоящей из:
i) водорода;
1
10
1
10
ii) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкила;
2
10
2
10
iii) замещенного или незамещенного С-С-алкенила с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкенила;
2
10
iv) замещенного или незамещенного С-С-алкинила с линейной цепью или с разветвленной цепью;
6
10
v) замещенного или незамещенного С- или С-арила;
1
9
vi) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла; или
1
9
vii) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила.
2
1
1
1
1
9
1
9
2
3
4
4
4
4
5
6
1
9
1
9
Первый аспект этой категории относится к ингибиторам HIF-1α-пролилгидроксилазы, где R означает водород, и Rозначает замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл или С-С-гетероарил. В первом воплощении Rозначает замещенную гетероциклическую группу, неисчерпывающие примеры которой включают азиридинил (С), азетидинил (С), пирролидинил (С), морфолинил (С), пиперазинил (С), пиперидинил (С), пиперидин-2-онил (валеролактам) (С) и азепан-2-онил (капролактам) (С), где Rможет быть связан с атомом азота в любом положении в цикле. В дополнение С-С-гетероцикл или С-С-гетероарильный цикл может быть замещен в любом положении, по атому ли углерода цикла или по гетероатому цикла, например, по атому азота цикла. Неисчерпывающие примеры этого воплощения включают:
2
1
3
12
В другом воплощении R означает водород, и Rозначает замещенный или незамещенный С-С-циклоалкил, где циклоалкил может быть замещен в любом положении цикла. Неисчерпывающие примеры этого воплощения включают:
Еще дальнейшая категория соединений относится к незамещенным N-бензил-4-аминометил-3-гидроксипиридин-2-(1Н)-онам, имеющим формулу
1
2
1
10
R и R, каждый, независимо означают водород или замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью или с разветвленной цепью, где алкильная единица может быть замещена одной или более единицей(ами), независимо выбираемой(ыми) из группы, состоящей из:
1
8
1
8
i) С-С-алкокси с линейной цепью, с разветвленной цепью или C-C-циклоалкокси;
ii) гидрокси;
iii) галогена;
iv) циано;
1
8
1
8
v) амино, С-С-моноалкиламино, С-С-диалкиламино;
40
40
1
4
vi) -SR; R означает водород или С-С-алкил с линейной цепью или разветвленной цепью;
6
10
vii) замещенного или незамещенного С- или С-арила;
1
9
viii) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла; или
1
9
ix) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила.
Неисчерпывающие примеры этой категории включают:
Еще дальнейшая категория раскрытых соединений имеет формулу
200
где R и индекс w имеют значения, такие же, как описано в данном контексте выше. R представляет собой 0-5 замещений вместо водорода, где каждый R независимо выбирают из группы, состоящей из:
1
12
3
12
3
12
1
1
1
1
2
2
2
2
3
3
3
3
3
4
4
4
4
4
4
5
5
6
6
i) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, С-С-алкила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкила; как, например, метил (С), хлорметил (С), трифторметил (С), аминометил (С), этил (С), гидроксиметил-1-хлорэтил (С), 2-гидроксиэтил (С), 1,2-дифторэтил (С), н-пропил (С), изопропил (С), 3-карбоксипропил (С), циклопропил (С), 2-метилциклопропил (С), н-бутил (С), втор-бутил (С), изобутил (С), трет-бутил (С), циклобутил (С), 2,3-дигидроксициклобутил (С), пентил (С), циклопентил (С), гексил (С) и циклогексил (С) и т.п.;
2
12
3
12
3
12
2
2
3
3
3
4
4
4
5
5
6
9
9
ii) замещенного или незамещенного С-С-алкенила с линейной цепью, С-С-алкенила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкенила; как, например, этенил (С), 2-хлорэтенил (также, 2-хлорвинил) (С), 3-пропенил (С), 1-пропенил (также, 2-метилэтенил) (С), изопропенил (также, 2-метилэтен-2-ил) (С), бутен-4-ил (С), 4-гидроксибутен-1-ил (С), циклобутенил (С), циклопентенил (С), циклопентадиенил (С), циклогексенил (С), 7-гидрокси-7-метилокт-4-ен-2-ил (С) и 7-гидрокси-7-метилокт-3,5-диен-2-ил (С) и т.п.;
2
12
3
12
2
3
3
7
7
8
9
iii) замещенного или незамещенного С-С-алкинила с линейной цепью или С-С-алкинила с разветвленной цепью; как, например, этинил (С), проп-2-инил (также, пропаргил) (С), пропин-1-ил (С), 2-метилгекс-4-ин-1-ил (С); 5-гидрокси-5-метилгекс-3-инил (С), 6-гидрокси-6-метилгепт-3-ин-2-ил (С), 5-гидрокси-5-этилгепт-3-инил (С), и т.п.;
6
10
6
10
10
6
6
6
6
6
6
6
6
10
10
10
iv) замещенного или незамещенного С- или С-арила; как, например, фенил (С), нафтилен-1-ил (С), нафтилен-2-ил (С), 4-фторфенил (С), 2-гидроксифенил (С), 3-метилфенил (С), 2-амино-4-фторфенил (С), 2-(N,N-диэтиламино)фенил (С), 2-цианофенил (С), 2,6-ди-трет-бутилфенил (С), 3-метоксифенил (С), 8-гидроксинафтилен-2-ил (С), 4,5-диметоксинафтилен-1-ил (С), 6-цианонафтилен-1-ил (С) и т.п.;
1
9
1
2
2
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
4
4
4
4
4
5
5
5
v) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла; как, например, диазиринил (С), азиридинил (С), уразолил (С), азетидинил (С), пиразолидинил (С), имидазолидинил (С), оксазолидинил (С), изоксазолинил (С), изоксазолил (С), тиазолидинил (С), изотиазолил (С), изотиазолинил (С), оксатиазолидинонил (С), оксазолидинонил (С), гидантоинил (С), тетрагидрофуранил (С), пирролидинил (С), морфолинил (С), пиперазинил (С), пиперидинил (С), дигидропиранил (С), тетрагидропиранил (С), пиперидин-2-онил (валеролактам) (С) и т.п.;
1
11
1
2
2
3
3
3
3
4
4
4
5
vi) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; как, например, 1,2,3,4-тетразолил (С), [1,2,3]триазолил (С), [1,2,4]триазолил (С), триазинил (С), тиазолил (С), 1Н-имидазолил (С), оксазолил (С), фуранил (С), тиофенеил (С), пиримидинил (С), пиридинил (С) и т.п.;
vii) галогена; например, -F, -Cl, -Br или -I;
23a
23b
10
x
viii) -[C(R)(R)]OR;
10
R выбирают из группы, состоящей из:
а) -Н;
1
12
3
12
3
12
b) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, С-С-алкила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкила;
6
10
7
10
с) замещенного или незамещенного С- или С-арила или C- или C-алкиленарила;
1
9
d) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла;
1
11
2
3
2
3
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
2
3
е) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; например, -ОН, -СНОН, -ОСН, -СНОСН, -ОСНСН, -СНОСНСН, -ОСНСНСН и -СНОСНСНСН;
23a
23b
11a
11b
x
ix) -[C(R)(R)]N(R)(R);
11a
11b
R и R, каждый, независимо выбирают из группы, состоящей из:
а) -Н;
12
b) -OR;
12
1
4
R означает водород или С-С-алкил с линейной цепью;
1
12
3
12
3
12
с) замещенного или незамещенного С-С-алкила с линейной цепью, С-С-алкила с разветвленной цепью или С-С-циклоалкила;
6
10
d) замещенного или незамещенного С- или С-арила;
1
9
е) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла;
1
11
f) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила; или
11a
11b
2
2
2
3
3
2
3
2
3
2
3
2
3
2
2
2
3
g) R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -NH, -CHNH, -NHCH, -N(CH), -NHOH, -NHOCH, -NH(CHCH), -CHNHCH, -CHN(CH), -CHNH(CHCH) и т.п.;
23a
23b
13
х
х) -[C(R)(R)]С(О)R;
13
R означает:
1
12
3
12
3
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
14
b) -OR;
14
1
4
6
10
1
9
1
11
R означает водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, замещенный или незамещенный С- или С-арил, замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл, замещенный или незамещенный С-С-гетероарил;
15a
15b
с) -N(R)(R);
15a
15b
15a
15b
1
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
3
2
3
2
3
2
2
3
2
2
3
2
2
2
3
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -СОСН, -СНСОСН, -ОСНСН, -СНСОСНСН, -СОСНСНСН, -СНСОСНСНСН и т.п.;
23a
23b
16
х
xi) -[C(R)(R)]ОС(О)R;
16
R означает:
1
12
3
12
3
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
17a
17b
b) -N(R)(R);
17a
17b
17a
17b
1
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы;
23a
23b
18
19
x
xii) -[C(R)(R)]NRC(О)R;
18
R означает:
а) -Н; или
1
4
3
4
3
4
b) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
19
R означает:
1
12
3
12
3
12
а) замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил;
20a
20b
b) -N(R)(R);
20a
20b
20a
20b
1
12
3
12
3
12
6
10
1
9
1
11
3
2
3
2
2
2
3
2
3
3
2
2
3
2
R и R, каждый, независимо означают водород, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью, С-С-алкил с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил; замещенный или незамещенный С- или С-арил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; или R и R, взятые вместе, могут образовывать замещенный или незамещенный цикл, имеющий 3-10 атомов углерода и 0-3 гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы; например, -NHC(O)CH, -CHNHC(O)CH, -NHC(O)NH, -CHNHC(O)NH, -NHC(O)NHCH, -CHNHC(O)NHCH, -OC(O)N(CH), -CHNHC(O)N(CH) и т.п.;
23a
23b
x
2
2
2
xiii) -[C(R)(R)]CN; например, -CN, -CHCN и -CHCHCN;
23a
23b
x
2
2
2
2
2
2
2
xiv) -[C(R)(R)]NO; например, -NO, -CHNO и -CHCHNO;
23a
23b
21
x
2
2
3
3
3
xv) -[C(R)(R)]R; например, -CHF, -CHF, -CF, -CCl и -CBr;
21
1
10
1
10
R означает С-С-алкил с линейной цепью, с разветвленной цепью или С-С-циклоалкил, замещенный 1-21 атомомами галогена, выбираемыми из -F, -Cl, -Br или -I;
23a
23b
22
x
2
xvi) -[C(R)(R)]SOR;
22
1
4
3
4
6
10
14
7
15
1
9
1
11
2
2
2
2
3
2
2
3
2
6
5
2
2
6
5
R означает водород, гидроксил, замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью или С-С-алкил с разветвленной цепью; замещенный или незамещенный С-, С- или С-арил; С-С-алкиленарил; замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл; или замещенный или незамещенный С-С-гетероарил; например, -SOH, -CHSOH, -SOCH, -CHSOCH, -SOCH и -CHSOCH; и
23a
23b
1
4
Rи R, каждый, независимо означают водород или С-С-алкил; и
индекс х представляет собой целое число от 0 до 5.
1
2
1
4
1
4
Один аспект воплощения этой категории относится к ингибиторам HIF-1α-пролилгидроксилазы, где R и R, взятые вместе, образуют 5-членный замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл или замещенный или незамещенный С-С-гетероарильный цикл, неисчерпывающие примеры которого включают цикл, выбираемый из группы, состоящей из:
i)
ii)
iii)
iv)
v)
vi)
vii)
viii)
или
ix)
1
2
4
11
4
11
Другой аспект этой категории относится к ингибиторам HIF-1α-пролилгидроксилазы, где R и R, взятые вместе, образуют замещенный или незамещенный С-С-гетероцикл или замещенный или незамещенный С-С-гетероарильный цикл, неисчерпывающие примеры которого выбирают из группы, состоящей из:
i)
ii)
iii)
iv)
или
v)
Неисчерпывающие примеры этой категории включают соединения, имеющие формулу
Дальнейшая категория раскрытых соединений имеет формулу
1
2
1
10
где R представляет собой 1-5 необязательных замещений вместо атома водорода фенильного цикла, R и R, каждый, независимо означают водород или замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью или с разветвленной цепью, где алкил может быть замещен одной или более единицей(ами), независимо выбираемыми из группы, состоящей из:
1
8
3
8
3
8
i) С-С-алкокси с линейной цепью, С-С-алкокси с разветвленной цепью или С-С-циклоалкокси;
ii) гидрокси;
iii) галогена;
iv) циано;
1
8
1
8
v) амино, С-С-моноалкиламино, С-С-диалкиламино;
40
40
1
4
vi) -SR; R означает водород или С-С-алкил с линейной цепью или с разветвленной цепью;
6
10
vii) замещенного или незамещенного С- или С-арила;
1
9
viii) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла; или
1
9
ix) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила.
Неисчерпывающие примеры этой категории включают
Еще дальнейшая категория раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы относится к соединениям, имеющим формулу
1
2
200
где R и R, взятые вместе, образуют замещенный или незамещенный пиперазиновый цикл; замещения в цикле такие, как определено в данном контексте выше в случае R.
Еще дальнейшая категория описанных ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы имеет формулу
1
2
где R и R, взятые вместе, образуют замещенный или незамещенный гетероцикл или гетероарильный цикл, имеющий 2-20 атомов углерода и 1-7 гетероатомов, где образовавшиеся циклы исключают пиперазиновый цикл.
Также, раскрытыми в данном контексте являются N-замещенные бензил- или N-замещенные сульфониларил-3-гидроксипиридин-2-(1Н)-оны, имеющие формулу
которые могут быть использованы для стимуляции клеточного иммунного ответа у субъекта. В случае этих соединений, Z и L имеют такие же значения, как раскрыто в данном контексте выше. Неисчерпывающие примеры этих соединений включают:
1-(4-хлорбензил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он, имеющий формулу
1-(3-хлорбензил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он, имеющий формулу
и
1-(2-хлорбензил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он, имеющий формулу
Далее, раскрытыми в данном контексте являются N-замещенные бензил- или N-замещенные сульфониларил-5-замещенные-3-гидроксипиридин-2(1Н)-оны, имеющие формулу
где Y представляет собой замещенный или незамещенный фенил, Z и L имеют такие же значения, как указано в данном контексте выше.
Один аспект Y относится к фенильной группе, которая замещена 1-5 атомами галогена, например, Y выбирают из группы, состоящей из 2-хлорфенила, 3-хлорфенила, 2-фторфенила, 3-фторфенила или 4-фторфенила. Дальнейший аспект Y относится к соединениям, где Y выбирают из группы, состоящей из 2,3-дифторфенила, 2,4-дифторфенила, 2,5-дифторфенила, 2,6-дифторфенила, 2,3-дихлорфенила, 2,4-дихлорфенила, 2,5-дихлорфенила и 2,6-дихлорфенила.
Неисчерпывающие примеры соединений согласно этой категории включают 1-(4-хлорбензил)-5-(4-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он, имеющий формулу
Далее, неисчерпывающие примеры включают:
1-(2-хлорбензил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-хлорбензил)-5-(3-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-хлорбензил)-5-(4-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-хлорбензил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-хлорбензил)-5-(3-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-хлорбензил)-5-(4-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-хлорбензил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-хлорбензил)-5-(3-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-фторбензил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-фторбензил)-5-(3-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-фторбензил)-5-(4-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-фторбензил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-фторбензил)-5-(3-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-фторбензил)-5-(4-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-фторбензил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-фторбензил)-5-(3-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-фторбензил)-5-(4-хлорфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-хлорбензил)-5-(2-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-хлорбензил)-5-(3-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-хлорбензил)-5-(4-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-хлорбензил)-5-(2-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-хлорбензил)-5-(3-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-хлорбензил)-5-(4-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-хлорбензил)-5-(2-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-хлорбензил)-5-(3-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-хлорбензил)-5-(3-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-фторбензил)-5-(2-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-фторбензил)-5-(3-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(2-фторбензил)-5-(4-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-фторбензил)-5-(2-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-фторбензил)-5-(3-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(3-фторбензил)-5-(4-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-фторбензил)-5-(2-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он;
1-(4-фторбензил)-5-(3-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он; и
1-(4-фторбензил)-5-(3-фторфенил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он.
Раскрытые соединения систематизированы по нескольким категориям для строго неограничивающей цели описываемых альтернатив в отношении стратегий синтеза для получения подтипов соединений в рамках раскрытых соединений, которые точно не проиллюстрированы примером в данном контексте. Эта ментальная систематизация по категориям не предполагает ничего, что касается увеличивающейся или уменьшающейся биологической активности в отношении любого из соединений или композиций, раскрытых в данном контексте.
Категория I раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы относится к соединениям, имеющим формулу
200
где А представляет собой замещенный или незамещенный гетероцикл или гетероарильный цикл, имеющий 2-20 атомов углерода и 1-7 гетероатомов, R означает 0-40 замещений водорода, R представляет собой 1-5 замещений вместо водорода, как описано в данном контексте выше, и индекс n означает целое число от 1 до 5. В таблице I представлены типичные примеры соединений в соответствии с этой категорией.
Таблица I
<b>№</b>
<b>R</b>
<b>Цикл А</b>
А1
3-метокси
пирролидин-1-ил
А2
3-метокси
3-гидроксипирролидин-1-ил
А3
3-метокси
2-(пиридин-2-ил)пирролидин-1-ил
А4
3-метокси
2-метилкарбоксипирролидин-1-ил
А5
3-метокси
2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил
А6
3-метокси
тиазолидин-3-ил
А7
3-метокси
1Н-имидазол-1-ил
А8
3-метокси
пиперидин-1-ил
А9
3-метокси
4-бензилпиперидин-1-ил
А10
3-метокси
1,4'-бипиперидинил-1'-ил
А11
3-метокси
пиперазин-1-ил
А12
3-метокси
4-бензилпиперазин-1-ил
А13
3-метокси
4-(2-метоксифенил)пиперазин-1-илметил
А14
3-метокси
4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил
А15
3-метокси
1,4-диокса-8-азаспиро[4,5]дек-8-ил
А16
3-метокси
морфолин-4-ил
А17
3-метокси
тиоморфолин-4-ил
А18
3-метокси
азепан-1-ил
А19
3-метокси
азокан-1-ил
А20
3-метокси
3,4-дигидрохинолин-1(2Н)-ил
А21
4-хлор
пирролидин-1-ил
А22
4-хлор
3-гидроксипирролидин-1-ил
А23
4-хлор
2-(пиридин-2-ил)пирролидин-1-ил
А24
4-хлор
2-метилкарбоксипирролидин-1-ил
А25
4-хлор
2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил
А26
4-хлор
тиазолидин-3-ил
А27
4-хлор
1Н-имидазол-1-ил
А28
4-хлор
пиперидин-1-ил
А29
4-хлор
4-бензилпиперидин-1-ил
А30
4-хлор
1,4'-бипиперидинил-1'-ил
А31
4-хлор
пиперазин-1-ил
А32
4-хлор
4-бензилпиперазин-1-ил
А33
4-хлор
4-(2-метоксифенил)пиперазин-1-илметил
А34
4-хлор
4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил
А35
4-хлор
1,4-диокса-8-азаспиро[4,5]дек-8-ил
А36
4-хлор
морфолин-4-ил
А37
4-хлор
тиоморфолин-4-ил
А38
4-хлор
азепан-1-ил
А39
4-хлор
азокан-1-ил
А40
4-хлор
3,4-дигидрохинолин-1(2Н)-ил
А41
4-хлор
4-трет-бутоксикарбонилпиперазин-1-ил
Раскрытые соединения этой категории могут быть получены по методике, указанной в данном контексте ниже, на схеме I, и описанной в примере 1.
Схема I
Реагенты и условия: (а) TBDMSCl, имидазол, ДМФА: комнатная температура, 30 мин.
2
3
Реагенты и условия: (b) (4-хлор)бензилхлорид, CsCO, ТГФ; комнатная температура.
Реагенты и условия: (с) 5 М HCl, EtOH; 30 мин.
2
Реагенты и условия: (d)(i) HCHO, AcOH, трет-Вос-пиперазин, EtOH; 3 суток.
Пример 1
трет-Бутил-{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат (4)
Получение 3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-1Н-пиридин-2-она (1)
2
4
3
1
: 3-гидроксипиридин-2-(1Н)-он (15 г, 135 ммоль) и имидазол (23 г, 338 ммоль) суспендируют в диметилформамиде (200 мл), в инертной атмосфере. Добавляют, по каплям, при комнатной температуре, в течение 30 минут раствор трет-бутилдиметилсилилхлорида (20,5 г, 136 ммоль) в диметилформамиде (200 мл). Реакционную смесь затем оставляют перемешиваться в течение ночи. Полученный раствор потом выливают в воду (300 мл) и смесь экстрагируют трет-бутилметиловым эфиром (3 раза по 500 мл). Объединенный органический слой промывают водой (300 мл), насыщенным солевым раствором (300 мл), затем сушат над NaSO. Растворитель удаляют при пониженном давлении и сырой продукт кристаллизуют из гептанов, получая 16,3 г (выход 53%) желательного продукта.H ЯМР (250 МГц, CDCl) δ м.д. 12,98 (1H, м); 6,91 (1H, дд, J=1, Гц, J=6,8 Гц); 6,81 (1H, дд, J=1,8 Гц, J=7,2 Гц); 6,02-6,007 (1H, м); 0,90 (9H, с) и 0,17 (6H, с).
Получение 3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-1-(3-хлорбензил)-1Н-пиридин-2-она (2):
о
2
3
2
4
при температуре 0С, в инертной атмосфере, раствор 4-хлорбензилхлорида (4,44 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляют, по каплям, к раствору 3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-1Н-пиридин-2-она, 1, (1 г, 4,44 ммоль) и CsCO (2,17 г, 6,66 ммоль) в ТГФ (10 мл). Реакционный раствор оставляют нагреваться до комнатной температуры и продолжают перемешивать в течение ночи. Полученный раствор разбавляют водой (40 мл) и затем экстрагируют с помощью EtOAc (3 раза по 30 мл). Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором (30 мл), затем сушат над NaSO. Растворитель удаляют при пониженном давлении и сырой продукт очищают на силикагеле (EtOAc:гептан - 4:1), получая желательный продукт в виде твердого вещества белого цвета.
Получение 1-(4-хлорбензил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-она (3):
2
4
6
1
к раствору 3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-1-(3-хлорбензил)-1Н-пиридин-2-она, 2, (2,36 г, 10 ммоль) в EtOAc (25 мл) добавляют 5 М раствор HCl (25 мл), при энергичном перемешивании и при комнатной температуре. Реакционную смесь контролируют по ТСХ в отношении исчезновения исходного вещества и завершения реакции в течение 30 минут. Органический слой декантируют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном (2 раза по 50 мл). Объединенные органические слои сушат над NaSO, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Сырой продукт перекристаллизовывают из дихлорметана. Выход является почти количественным.H ЯМР (360 МГц, ДМСО-d) δ м.д. 5,12 (2H, с); 6,13 (1H, т, J=7,04); 6,71 (1H, дд, J=7,04, 1,59); 7,23-7,28 (2H, м); 7,36-7,43 (2H, м); 9,10 (1H, ушир.с).
Получение трет-бутил-{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилата (4):
о
1
3
трет-бутилпиперазин-1-карбоксилат (97,6 ммоль), формальдегид (8 мл 37%-ного раствора, 97,6 ммоль) и уксусную кислоту (8 мл) растворяют в этаноле (350 мл) и раствор перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Добавляют, по каплям, при комнатной температуре, в течение 30 минут раствор 1-(4-хлорбензил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-она, 3, (48,8 ммоль) в этаноле (350 мл). После перемешивания в течение 3 суток добавляют формальдегид (3 мл) и реакционную смесь нагревают до температуры 50С, после чего реакционный раствор концентрируют при пониженном давлении до объема приблизительно 500 мл. Желательный продукт получают путем кристаллизации из этанола.H ЯМР (250 МГц, CDCl) δ м.д. 1,46 (с, 9H); 2,38-2,57 (м, 4H); 3,40-3,49 (м, 4H); 3,51 (с, 2H); 5,13 (с, 2H); 6,13 (д, J=7,16 Гц), 1H); 6,79 (д, J=7,16 Гц, 1H); 7,20-7,41 (м, 4H); 8,33-8,85 (м, 1H).Описанные биологические данные относятся к А41.
Категория II раскрытых ингибиторов пролилгидроксилазы относится к соединениям, имеющим формулу
200
где А представляет собой замещенный или незамещенный гетероцикл или гетероарильный цикл, имеющий 2-20 атомов углерода и 1-7 гетероатомов, и R означает 0-40 замещений вместо водорода. В таблице II представлены типичные примеры соединений в соответствии с этой категорией.
Таблица II
<b>№</b>
<b>Цикл А</b>
В1
пирролидин-1-ил
В2
3-гидроксипирролидин-1-ил
В3
2-(пиридин-2-ил)пирролидин-1-ил
В4
2-метилкарбоксипирролидин-1-ил
В5
2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил
В6
тиазолидин-3-ил
В7
1Н-имидазол-1-ил
В8
пиперидин-1-ил
В9
4-бензилпиперидин-1-ил
В10
1,4'-бипиперидинил-1'-ил
В11
пиперазин-1-ил
В12
4-бензилпиперазин-1-ил
В13
4-(2-метоксифенил)пиперазин-1-илметил
В14
4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил
В15
1,4-диокса-8-азаспиро[4,5]дек-8-ил
В16
морфолин-4-ил
В17
тиоморфолин-4-ил
В18
азепан-1-ил
В19
азокан-1-ил
В20
3,4-дигидрохинолин-1(2Н)-ил
Соединения согласно категории II могут быть получены в соответствии с методикой, указанной на схеме I и описанной в примере 1. Последующее представляет собой дальнейшие примеры ингибиторов согласно категории II.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(пиперидин-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
3
3
18
22
2
2
H-ЯМР (300 МГц, CDOD) δ 1,81 (м, 6H), 3,07 (м, 2H), 3,51 (м, 2H), 4,23 (с, 2H), 5,24 (с, 2H), 6,31 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,35 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, CDOD): δ 85,5; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 21,3, 22,7, 51,8, 52,5, 53,1, 106,4, 117,4, 127,7, 128,0, 128,2, 128,9, 137,3, 147,4, 158,0; ES MS (M+1): 299,12; HRMS: рассчитано для CHNO: 298,38. Найдено (М+1): 299,17.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(морфолин-4-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
17
20
2
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 3,25 (м, 4H), 3,81 (м, 4H), 4,18 (с, 2H), 5,17 (с, 2H), 6,31 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,35 (м, 6H); F-ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ 88,5; С-ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ 51,6, 51,8, 53,4, 63,5, 107,9, 119,1, 127,8, 128,0, 128,2, 128,9, 137,3, 147,5, 158,3; ES MS (M+1): 301,12; HRMS: рассчитано для CHNO: 300,35.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(тиоморфолин-4-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
17
20
2
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,92 (м, 4H), 3,38 (м, 4H), 4,17 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,29 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 9,97 (с, 1H); F-ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ 88,4; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 24,3, 51,9, 53,4, 53,7, 107,9, 110,9, 127,8, 128,0, 128,2, 128,8, 137,2, 147,6, 157,6; ES MS (M+1): 317,14; HRMS: рассчитано для CHNOS: 316,42. Найдено (М+1): 317,13.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(тиазолидин-3-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
18
19
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 3,09 (т, J=6,3 Гц, 2H), 3,42 (т, J=6,3 Гц, 2H), 4,03 (с, 2H), 4,29 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 10,48 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ 87,9; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 28,3, 48,3, 50,1, 56,3, 57,0, 107,4, 122,1, 127,8, 128,2, 128,8, 137,4, 146,3, 157,6; ES MS (M+1): 303,08; Анализ: рассчитано для CHNOSF: С, 51,92; Н, 4,60; N, 6,73; S, 7,70. Найдено: С, 51,67; Н, 4,48; N, 6,69; S, 7,65.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
19
21
3
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,96 (с, 4H), 3,16 (с, 2H), 3,43 (с, 2H), 4,23 (с, 4H), 5,17 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,7; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 22,8, 50,9, 51,8, 53,7, 107,3, 118,0, 128,0, 128,2, 128,9, 137,3, 146,7, 157,6; ES MS (M+1): 285,13; Анализ: рассчитано для CHFNO: С, 57,28; Н, 5,31; N, 7,03. Найдено: С, 57,10; Н, 5,11; N, 7,02.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(4-бензилпиперидин-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
25
28
2
2
H-ЯМР (ДМСО) δ 1,43 (м, 2H), 1,72 (м, 4H), 2,96 (м, 2H), 3,41 (м, 3H), 4,09 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,35 (м, 11H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,8; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 389,21; HRMS: рассчитано для CHNO: 388,50. Найдено (М+1): 389,22.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(4-бензилпиперазин-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
24
27
3
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 3,11 (ушир.с, 4H), 3,81 (с, 2H), 4,18 (с, 2H), 5,15 (с, 2H), 6,24 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 7,46 (м, 5H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,2; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 390,21; HRMS: рассчитано для CHNO: 389,49. Найдено (М+1): 390,21.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(3-гидроксипирролидин-1-ил)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
17
20
2
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,90 (м, 1H), 3,18 (м, 2H), 3,47 (м, 3H), 4,24 (с, 2H), 4,43 (с, 1H), 5,17 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 89,0; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 51,8, 52,6, 61,3, 68,6, 107,4, 117,9, 128,0, 128,2, 128,9, 137,3, 146,7, 157,6; ES MS (M+1): 301,13; HRMS: рассчитано для CHNO: 300,35. Найдено (М+1): 301,15.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(1,4-диокса-8-азаспиро[4,5]дец-8-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
20
24
4
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,90 (м, 4H), 3,11 (м, 2H), 3,43 (м, 2H), 3,93 (с, 4H), 4,19 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 10,01 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,3; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 31,7, 50,7, 51,9, 52,5, 64,5, 101,1, 108,0, 116,5, 127,8, 128,0, 128,3, 128,9, 137,3, 147,5, 157,6; ES MS (M+1): 357,19; HRMS: рассчитано для CHNO: 356,42. Найдено (М+1): 357,18.
1-Бензил-3-гидрокси-4-азепан-1-илметилпиридин-2(1Н)-он
1
19
13
19
24
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,61 (м, 4H), 1,80 (м, 4H), 3,20 (м, 4H), 4,17 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,9; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 22,8, 26,4, 51,8, 53,4, 54,4, 107,6, 117,2, 127,9, 128,0, 128,2, 128,9, 137,3, 147,2, 157,6; ES MS (M+1): 313,18; HRMS: рассчитано для CHNO: 312,41. Найдено (М+1): 313,19.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(азокан-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
20
26
2
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,59 (м, 10H), 3,18 (м, 2H), 3,38 (м, 2H), 4,17 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,9; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 327,2; HRMS: рассчитано для CHNO: 326,43. Найдено (М+1): 327,20.
1-Бензил-3-гидрокси(1,4'-бипиперидинил-1'-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
23
31
3
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,43-1,98 (м, 10H), 2,21 (м, 2H), 3,01 (м, 4H), 3,43 (м, 3H), 4,12 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 9,85 (ушир.с 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,7; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 21,6, 22,9, 23,8, 49,6, 50,5, 51,8, 53,0, 59,5, 108,0, 127,8, 128,0, 128,2, 128,9, 137,3, 147,5, 157,6; ES MS (M+1): 382,4; HRMS: рассчитано для CHNO: 383,51. Найдено (М+1): 382,25.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(3,4-дигидрохинолин-1(2Н)-ил)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
22
22
2
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 3,13 (т, J=6,3 Гц, 2H), 3,52 (м, 2H), 4,28 (с, 2H), 4,41 (с, 2H), 5,18 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,23-7,41 (м, 10H), 10,15 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,9; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 25,4, 49,3, 51,8, 52,7, 52,9, 107,6, 111,6, 116,8, 126,9, 127,0, 127,9, 128,0, 128,1, 128,2, 128,8, 128,9, 131,7, 137,3, 147,3, 157,6; ES MS (M+1): 347,40; HRMS: рассчитано для CHNO: 346,42. Найдено (М+1): 347,17.
Метил-1-[(1-бензил-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)метил]пирролидин-2-карбоксилат
1
19
13
19
22
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,01 (м, 3H), 2,45 (м, 1H), 3,26 (м, 1H), 3,53 (м, 1H), 3,69 (с, 3H), 4,30 (м, 3H), 5,17 (с, 2H), 6,27 (д, 6,9 Гц, 1H), 7,35 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,3; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 343,20; HRMS: рассчитано для CHNO: 342,39. Найдено (М+1)
1-Бензил-3-гидрокси-4-{[2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил]метил}пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
19
24
2
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,71 (м, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,99 (м, 1H), 2,15 (м, 1H), 3,19 (м, 1H), 3,30 (с, 3H), 3,41 (м, 1H), 3,62 (м, 2H), 3,77 (м, 1H), 4,15 (м, 1H), 4,39 (м, 1H), 5,17 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H); 9,60 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,3; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 329,2; HRMS: рассчитано для CHNO: 328,41. Найдено (М+1)
1-Бензил-3-гидрокси-4-{[2-(пиридин-2-ил)пирролидин-1-ил]метил}пиридин-2(1Н)-он
1
19
22
23
3
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,12 (м, 4H), 3,39 (м, 1H), 3,63 (м, 1H), 4,07 (м, 2H), 4,60 (м, 1H), 5,10 (м, 2H), 6,15 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,33 (м, 6H), 7,44 (м, 1H), 8,05 (д, J=8,1 Гц, 1H), 8,59 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,74 (с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,0; ES MS (M+1): 362,22; HRMS: рассчитано для CHNO: 361,44. Найдено (М+1)
1-Бензил-3-гидрокси-4-[4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-илметил]пиридин-2(1Н)-он
1
13
21
22
5
3
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 3,18 (м, 2H), 3,48 (м, 4H), 4,19 (с, 2H), 4,46 (м, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,62 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,35 (м, 6H), 7,48 (м, 1H), 7,68 (м, 1H), 11,5 (ушир.с, 1H); С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 42,1, 50,3, 51,9, 52,5, 108,2, 116,2, 118,0, 128,0, 128,2, 128,9, 129,8, 137,3, 147,4, 157,6, 158,8; ES MS (M+1): 476,09; HRMS: рассчитано для CHClNNO: 411,88. Найдено (М+1): 412,76.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[4-(2-метоксифенил)пиперазин-1-илметил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
24
27
3
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,95 (м, 2H), 3,30 (м, 2H), 3,48 (м, 4H), 3,80 (с, 3H), 4,25 (с, 2H), 5,18 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 6,93 (м, 2H), 7,01 (м, 2H), 7,34 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,5; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 47,2, 51,8, 53,0, 55,3, 108,1, 112,2, 114,8, 116,2, 118,6, 121,2, 123,8, 127,8, 128,0, 128,9, 137,3, 139,6, 147,5, 152,2, 157,6; ES MS (M+1): 405,82; HRMS: рассчитано для CHNO: 405,49. Найдено (М+1): 406,21.
Категория III описанных ингибиторов пролилгидроксилазы относится к соединениям, имеющим формулу
1
2
1
10
R и R, каждый, независимо означают водород или замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью или с разветвленной цепью, где алкил может быть замещен одной или более единицей(ами), независимо выбираемой(ыми) из группы, состоящей из:
1
8
3
8
3
8
i) С-С-алкокси с линейной цепью, С-С-алкокси с разветвленной цепью или С-С-циклоалкокси;
ii) гидрокси;
iii) галогена;
iv) циано;
1
8
1
8
v) амино, С-С-моноалкиламино, С-С-диалкиламино;
40
40
1
4
3
4
vi) -SR; R означает водород или С-С-алкил с линейной цепью или С-С-алкил с разветвленной цепью;
6
10
vii) замещенного или незамещенного С-С-арила;
1
9
viii) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла; или
1
9
ix) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила.
В таблице III, приводимой в данном контексте ниже, представлены неисчерпывающие примеры соединений, включенных в эту категорию.
Таблица III
<b>№</b>
<b>R</b><sup>1</sup>
<b>R</b><sup>2</sup>
С1
бензил
водород
С2
4-метоксибензил
водород
С3
4-фторбензил
водород
С4
4-хлорбензил
водород
С5
4-метилбензил
водород
С6
2-(пиридин-2-ил)этил
водород
С7
[1,3]диоксолан-2-илметил
водород
С8
тетрагидрофуран-2-илметил
водород
С9
2-метоксиэтил
водород
С10
1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил
водород
С11
пиридин-4-илметил
водород
С12
фуран-2-илметил
водород
С13
2-(метилтио)этил
водород
С14
1-фенилэтил
водород
С15
3-имидазол-1-илпропил
водород
С16
циклогептил
водород
С17
4-метилциклогексил
водород
С18
1-бензилпиперидин-4-ил
водород
С19
азепан-2-он-3-ил
водород
С20
1-бензилпирролидин-3-ил
водород
С21
бензил
метил
С22
4-метоксибензил
метил
С23
4-фторбензил
метил
С24
4-хлорбензил
метил
С25
4-метилбензил
метил
С26
2-(пиридин-2-ил)этил
метил
С27
[1,3]диоксолан-2-илметил
метил
С28
тетрагидрофуран-2-илметил
метил
С29
2-метоксиэтил
метил
С30
1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил
метил
С31
пиридин-4-илметил
метил
С32
фуран-2-илметил
метил
С33
2-(метилтио)этил
метил
С34
1-фенилэтил
метил
С35
3-(1Н-имидазол-1-ил)пропил
метил
С36
циклогептил
метил
С37
4-метилциклогексил
метил
С38
1-бензилпиперидин-4-ил
метил
С39
азепан-2-он-3-ил
метил
С40
1-бензилпирролидин-3-ил
метил
Раскрытые соединения этой категории могут быть получены по методике, указанной в данном контексте ниже, на схеме II, и описанной в примере 2.
Схема II
Реагенты и условия: (а)(i) HCHO, EtOH; 0,5 часа; (ii) 3-(1Н-имидазол-1-ил)пропан-1-амин; 2 часа.
Пример 2
1-Бензил-3-гидрокси-4-{[3-(1Н-имидазол-1-ил)пропиламино]метил}пиридин-2(1Н)-он (6)
N-Бензил-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он (5) может быть получен в соответствии с примером 1 путем замены бензилбромидом или бензилхлоридом на стадии (b) (4-хлор)бензилхлорида.
1-Бензил-3-гидрокси-4-{[3-(1Н-имидазол-1-ил)пропиламино]метил}пиридин-2(1Н)-он (6):
N-бензил-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он (5) (250 мг, 1,23 ммоль) и формальдегид (200 мг, 273 экв.) вносят в водный этанол (10 мл) и перемешивают в течение 30 минут. Затем добавляют 3-(1Н-имидазол-1-ил)пропан-1-амин (340 мг, 2,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 12 часов. Растворитель удаляют путем выпаривания и остаток растворяют в метаноле (2 мл) и очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, элюируя смесью вода/ацетонитрил, получая желательный продукт в виде трифторацетатной соли.
1
19
13
19
22
4
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,19 (м, 2H), 2,97 (м, 2H), 4,02 (с, 2H), 4,30 (т, J=6,6 Гц, 2H); 5,17 (с, 2H), 6,30 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,36 (м, 6H), 7,26 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 9,03 (с, 1H), 9,11 (с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,5; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 26,5, 44,0, 46,0, 51,8, 106,8, 118,7, 120,5, 122,2, 127,9, 128,2, 128,9, 135,8, 137,4, 146,0, 158,2; ES MS (M+1): 339,05; HRMS: рассчитано для CHNO: 338,44. Найдено (М+1): 339,18.
Далее следуют неисчерпывающие примеры этого аспекта раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(бензиламинометил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
22
21
3
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 4,01 (с, 2H), 4,20 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,36 (м, 11H), 9,16 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,6; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 321,16; Анализ: рассчитано для CHFNO: С, 60,83; Н, 4,87; N, 6,45. Найдено: С, 60,75; Н, 4,56; N, 6,34.
1-Бензил-3-гидрокси-4-{[(2-(пиридин-2-ил)этиламино]метил}-пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
20
21
3
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 3,26 (м, 2H), 3,37 (м, 2H), 4,08 (с, 2H), 5,17 (с, 2H); 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,38 (м, 6H), 7,86 (д, J=5,7 Гц, 2H), 8,84 (м, 2H), 9,32 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,6; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 31,5, 44,1, 46,3, 51,8, 106,9, 114,8, 127,1, 128,1, 128,8, 137,4, 143,8, 146,1, 155,3, 157,5, 158,4; ES MS (M+1): 336,18; HRMS: рассчитано для CHNO: 335,40. Найдено (М+1): 336,16.
1-Бензил-3-гидрокси-4-{[(тетрагидрофуран-2-илметил)амино]метил}пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
18
22
2
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,56 (м, 1H), 1,86 (м, 2H), 1,99 (м, 1H), 2,92 (м, 1H), 3,05 (м, 1H), 3,80 (м, 2H), 4,09 (м, 3H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H); 8,91 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,5; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 315,16; HRMS: рассчитано для CHNO: 314,38. Найдено (М+1): 315,16.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(2-метоксиэтиламино)метил]пиридин-
2(1Н)-он
1
19
13
16
20
2
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 3,13 (ушир.с, 2H), 3,30 (с, 3H), 3,59 (т, J=5,4 Гц, 2H), 4,02 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 8,91 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,4; С-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 289,13; HRMS: рассчитано для CHNO: 288,34. Найдено (М+1): 289,15.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(1-гидрокси-2-метилпропан-2-иламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
17
22
2
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,27 (с, 6H), 3,49 (с, 2H), 3,95 (с, 2H), 5,17 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 8,47 (ушир.с, 2H), 9,94 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,7; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 303,19; HRMS: рассчитано для CHNO: 302,37. Найдено (М+1): 303,17.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(пиридин-4-илметиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
19
19
3
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 4,07 (с, 2H), 4,32 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H); 7,62 (д, J=5,7 Гц, 2H), 8,71 (д, J=4,5 Гц, 2H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,0; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 322,17; HRMS: рассчитано для CHNO: 321,37. Найдено (М+1): 322,15.
1-Бензил-3-гидрокси-4-{[(фуран-2-илметил)амино]метил}пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
18
18
2
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 4,00 (с, 2H), 4,28 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,27 (д, J=6,9 Гц, 1H), 6,54 (м, 1H), 6,65 (m,1H), 7,34 (м, 6H), 7,80 (м, 1H), 9,27 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,3; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 323,15; HRMS: рассчитано для CHNO: 310,35. Найдено (М+1)
1-Бензил-3-гидрокси-4-{[2-(метилтио)этиламино]метил}пиридин-2(1Н)-он
1
19
16
20
2
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,10 (с, 3H), 2,74 (т, J=6,9 Гц, 2H), 3,16 (т, J=8,1 Гц, 2H), 4,05 (с, 2H), 5,17 (с, 2H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 89,0; ES MS (M+1): 305,14; HRMS: рассчитано для CHNOS: 304,41. Найдено (М+1)
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(4-метоксибензиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
21
22
2
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 3,70 (с, 3H), 3,98 (с, 2H), 4,13 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,28 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,00 (д, J=9,0 Гц, 4H), 7,34 (м, 6H); 9,07 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 89,0; ES MS (M+1): 351,10; HRMS: рассчитано для CHNO: 350,41. Найдено (М+1): 351,17.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(1-фенилэтиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
21
22
2
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,59 (д, J=7,2 Гц, 3H), 3,71-3,93 (м, 2H), 4,45 (м, 1H), 5,15 (с, 2H), 6,28 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,34 (м, 11H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,9; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 19,6, 42,5, 51,7, 58,0, 106,8, 119,3, 128,0, 128,1, 128,2, 128,9, 129,3, 129,4, 137,3, 145,9, 158,3; ES MS (M+1): 335,13; HRMS: рассчитано для CHNO: 334,41. Найдено (М+1): 335,17.
1-Бензил-3-гидрокси-4-(циклогептиламинометил)пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
20
26
2
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,55 (м, 10H), 2,03 (м, 2H), 3,18 (с, 1H), 3,99 (м, 2H), 5,17 (с, 2H), 6,32 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,35 (м, 6H), 8,65 (ушир.с, 2H), 9,98 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,6; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 23,0, 27,2, 30,4, 41,6, 51,7, 58,9, 107,0, 111,7, 127,9, 128,0, 128,2, 128,8, 137,4, 146,0, 157,5; ES MS (M+1): 327,13; HRMS: рассчитано для CHNO: 326,43. Найдено (М+1): 327,20.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(4-метилциклогексиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
20
26
2
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 0,93 (д, J=6,9 Гц, 3H), 1,38 (м, 4H), 1,74 (м, 4H), 2,05 (м, 1H), 3,10 (м, 1H), 4,01 (с, 2H), 5,17 (с, 2H), 6,31 (м, 1H), 7,34 (м, 6H), 8,05 (ушир.с, 2H), 9,98 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,9; ES MS (M+1): 327,14; HRMS: рассчитано для CHNO: 326,43. Найдено (М+1): 372,20.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(1-бензилпиперидин-4-иламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
25
28
3
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,77 (м, 2H), 2,31 (м, 2H), 2,98 (м, 2H), 3,30 (м, 3H), 3,46 (м, 2H), 4,03 (с, 2H), 4,29 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,30 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 7,49 (с, 5H), 9,12 (ушир.с, 1H), 10,05 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,8; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 27,1, 43,4, 51,8, 52,1, 54,2, 54,7, 57,6, 106,9, 118,5, 128,0, 128,1, 128,8, 129,3, 129,8, 130,7, 131,3, 137,3, 146,2, 157,4; ES MS (M+1): 404,56; HRMS: рассчитано для CHNO: 403,52. Найдено (М+1): 404,23.
3-[(1-Бензил-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)метиламино]азепан-2-он
1
19
13
19
23
3
3
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,25 (м, 1H), 1,59 (м, 2H), 1,74 (м, 1H), 1,92 (м, 1H), 2,10 (м, 1H), 3,18 (м, 3H), 4,03 (с, 2H), 4,2 (м, 1H), 5,17 (с, 2H), 6,33 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,34 (м, 6H), 8,31 (т, J=5,4 Гц, 1H), 9,07 (ушир.с, 2H), 9,90 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,4; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 27,0, 27,2, 28,4, 43,4, 51,7, 59,3, 107,1, 118,9, 127,8, 127,9, 128,1, 128,9, 137,4, 146,0, 157,5, 166,3; ES MS (M+1): 342,01; HRMS: рассчитано для CHNO: 341,40. Найдено (М+1): 342,18.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[(1-бензилпирролидин-3-иламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
24
27
3
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,22 (м, 2H), 2,42 (м, 1H), 3,39 (м, 3H), 3,68 (м, 1H), 4,06 (с, 2H), 4,39 (с, 2H), 5,17 (с, 2H), 6,33 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,30-7,52 (м, 11H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,5; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 27,1, 43,4, 51,8, 52,1, 54,2, 54,7, 57,5, 106,9, 118,5, 128,0, 128,8, 129,3, 129,8, 130,7, 131,3, 137,3, 146,2, 157,5; ES MS (M+1): 390,14; HRMS: рассчитано для CHNO: 389,49. Найдено (М+1): 390,21.
(R)-1-Бензил-3-гидрокси-4-[(1-фенилэтиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
21
22
2
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,58 (д, J=6,9 Гц, 3H), 3,74 (м, 2H), 4,44 (м, 1H), 5,14 (с, 2H), 6,23 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,35 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 89,4; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 19,6, 42,6, 51,7, 58,0, 106,9, 118,7, 128,0, 128,1, 128,8, 129,3, 129,4, 137,2, 137,4, 145,9, 157,5; ES MS (M+1): 335,13; Анализ: рассчитано для CHNO: 334,41. Найдено (М+1): 335,31.
1-Бензил-3-гидрокси-4-[([1,3]диоксолан-2-илметилметиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
18
22
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,81 (с, 3H), 3,35 (д, J=3,9 Гц, 2H), 3,89 (м, 2H), 4,01 (м, 2H), 4,21 (м, 2H), 5,17 (с, 2H); 5,27 (т, J=3,9 Гц, 1H), 6,34 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,35 (м, 6H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,5; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ; ES MS (M+1): 331,18; HRMS: рассчитано для CHNO: 330,38. Найдено (М+1): 331,16.
Категория IV раскрытых ингибиторов пролилгидроксилазы относится к соединениям, имеющим формулу
200
где А представляет собой цикл, необязательно замещенный одним или более единиц R. В таблице IV представлены неисчерпывающие примеры этой категории.
Таблица IV
<b>№</b>
<b>Цикл А</b>
D1
пирролидин-1-ил
D2
3-гидроксипирролидин-1-ил
D3
2-(пиридин-2-ил)пирролидин-1-ил
D4
2-метилкарбоксипирролидин-1-ил
D5
2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил
D6
тиазолидин-3-ил
D7
1Н-имидазол-1-ил
D8
пиперидин-1-ил
D9
4-бензилпиперидин-1-ил
D10
1,4'-бипиперидинил-1'-ил
D11
пиперазин-1-ил
D12
4-бензилпиперазин-1-ил
D13
4-(2-метоксифенил)пиперазин-1-илметил
D14
4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил
D15
1,4-диокса-8-азаспиро[4,5]дек-8-ил
D16
морфолин-4-ил
D17
тиоморфолин-4-ил
D18
азепан-1-ил
D19
азокан-1-ил
D20
3,4-дигидрохинолин-1(2Н)-ил
Раскрытые соединения этой категории могут быть получены по методике, указанной в данном контексте ниже, на схеме III, и описанной в примере 3.
Схема III
о
Реагенты и условия: (а)(i) n-BuLi, TsCl, ТГФ; температура от -78С до комнатной температуры, 1 час; (ii) HCl, МеОН; комнатная температура, 1 час.
2
Реагенты и условия: (b) пирролидин, НСНО, НО/EtOH; комнатная температура, 12 часов.
Пример 3
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он (8)
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он (7)
:
о
2
4
2
4
К перемешиваемому раствору 3-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]пиридин-2(1Н)-она (1) (4,66 г, 20,7 ммоль) в безводном ТГФ (150 мл), при поддерживании температуры, равной -78С, в атмосфере сухого азота, добавляют н-бутиллитий (1,6 М раствор в гексане, 21,0 ммоль). Спустя 20 минут добавляют 4-метилбензолсульфонилхлорид (3,95 г, 20,7 ммоль) в виде раствора в ТГФ. Раствор оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение одного часа, добавляют воду (10 мл) и содержимое реакционного сосуда экстрагируют с помощью EtOAc (3 раза), промывают насыщенным солевым раствором (1 раз), сушат над NaSO, и концентрируют. Объединенные органические слои сушат над NaSO и концентрируют. Остаток обрабатывают этанолом (10 мл) и концентрированной HCl (2 мл). Смесь оставляют перемешиваться в течение 1 часа и растворитель удаляют при пониженном давлении, получая желательное соединение в виде твердого вещества белого цвета.
1
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,43 (с, 3H), 6,14 (т, J=6,9 Гц, 1H), 6,76 (дд, J=7,65 Гц, 1,5 Гц, 1H), 7,18 (дд, J=6,6 Гц, 1,8 Гц, 1H), 7,32 (д, J=7,3 Гц, 2H), 7,98 (д, J=7,9 Гц, 2H).
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-(пирролидин-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он (8)
: 1-(4'-метилбензолсульфонил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он (7) (250 мг, 0,94 ммоль) и формальдегид (200 мг, 2,07 ммоль) вносят в водный этанол (10 мл) и перемешивают в течение 30 минут. Затем добавляют пирролидин (149 мг, 2,07 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 12 часов. Растворитель удаляют путем выпаривания и остаток растворяют в метаноле (5 мл) и очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, элюируя смесью вода/ацетонитрил, получая желательный продукт.
1
19
13
17
20
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,87 (м, 2H), 1,99 (м, 2H), 2,44 (с, 3H), 3,09 (м, 2H), 3,40 (м, 2H), 4,19 (с, 2H), 6,51 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,51 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,76 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,98 (д, J=8,1 Гц, 1H), 9,93 (ушир.с, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,4; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 21,5, 22,7, 50,5, 53,7, 108,7, 118,6, 119,4, 128,4, 129,7, 130,1, 133,1, 146,8, 147,7, 156,2; ES MS (M+1): 349,25; HRMS: рассчитано для CHNOS: 348,42. Найдено (М+1): 349,42.
Далее следуют неисчерпывающие примеры ингибиторов пролилгидроксилазы в соответствии с этой категорией.
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-тиазолидин-3-илметилпиридин-2(1Н)-он
1
19
13
16
18
2
4
2
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,43 (с, 3H), 2,94 (т, J=6,6 МГц, 2H), 3,18 (т, J=6,0 Гц, 2H), 3,66 (с, 2H), 4,12 (с, 2H), 6,51 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,51 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,76 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,98 (д, J=8,1 Гц, 1H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 87,9; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 21,5, 21,9, 24,6, 25,8, 50,3, 51,6, 108,7, 118,6, 120,8, 129,7, 130,1, 133,1, 146,9, 148,1, 156,1, 158,4, 158,8; ES MS (M+1): 367,18; HRMS: рассчитано для CHNOS: 366,46. Найдено (М+1): 367,43.
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-азокан-1-илметилпиридин-2(1Н)-он
1
19
13
20
26
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,59 (м, 10H), 2,44 (с, 3H), 3,17 (м, 2H), 3,32 (м, 2H), 4,15 (с, 2H), 6,51 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,51 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,76 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,98 (д, J=8,1 Гц); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,7; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 21,5, 21,9, 23,7, 24,6, 25,8, 50,3, 51,6, 108,7, 118,9, 120,8, 129,8, 130,1, 133,1, 146,9, 148,2, 156,1; ES MS (M+1): 391,18; HRMS: рассчитано для CHNOS: 390,18. Найдено (М+1): 391,23.
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-(4-фенилпиперазин-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он
1
13
23
25
3
5
H-ЯМР (300 МГц,, ДМСО) δ 2,43 (с, 3H), 3,13 (м, 8H), 3,43 (с, 2H), 6,47 (д, J=7,5 Гц, 1H), 6,78 (т, J=7,2 Гц, 1H), 7,21 9 м, 2H), 7,50 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,67 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,97 (д, J=8,4 Гц, 2H); С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 21,5, 42,6, 45,6, 46,2, 50,8, 51,9, 109,6, 116,4, 116,8, 117,7, 120,6, 121,1, 129,5, 129,6, 129,8, 130,1, 133,2, 146,8, 149,5, 156,1; ES MS (M+1): 440,15; HRMS: рассчитано для CHNOS: 439,53. Найдено (М+1): 440,16.
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-[1,4']бипиперидинил-1'-илметилпиридин-2(1Н)-он
1
19
13
23
31
3
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 1,43 (м, 1Н), 1,67 (м, 2H), 1,82 (м, 4H), 2,19 (м, 2H), 2,44 (с, 3H), 2,94 (м, 4H), 3,39 (м, 2H), 3,54 (м, 3H), 4,06 (с, 2H), 6,47 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,51 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,73 (д, 7,8 Гц, 1H), 7,99 (д, J=8,4 Гц, 2H); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,7; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 21,4, 22,9, 23,6, 48,4, 49,5, 59,4, 109,3, 114,8, 117,6, 120,5, 122,7, 129,7, 130,1, 133,1, 146,9, 148,6, 156,2; ES MS (M+1): 446,19; HRMS: рассчитано для CHNOS: 445,58. Найдено (М+1): 446,21.
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-[4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-илметил]пиридин-2(1Н)-он
1
21
25
5
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,44 (с, 3H), 3,17 (м, 2H), 3,46 (м, 4H), 4,17 (с, 2H), 4,45 (м, 2H), 6,77 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,04 (м, 1H), 7,53 (м 2H), 7,68 (м, 2H), 7,98 (м, 2H), 11,3 (ушир.с, 1H); ES MS (M+1): 476,92; HRMS: рассчитано для CHClNOS: 475,95. Найдено (М+1): 476,11.
Категория V HIF-1α-ингибиторов пролилгидроксилазы относится к соединениям, имеющим формулу
1
2
1
10
R представляет собой 1-5 необязательных замещений вместо атома водорода фенильного цикла, R и R, каждый, независимо означают водород или замещенный или незамещенный С-С-алкил с линейной цепью или с разветвленной цепью, где алкил может быть замещен одной или более единицей(ами), независимо выбираемой(ыми) из группы, состоящей из:
1
8
3
8
3
8
i) С-С-алкокси с линейной цепью, С-С-алкокси с разветвленной цепью или С-С-циклоалкокси;
ii) гидрокси;
iii) галогена;
iv) циано;
1
8
1
8
v) амино, С-С-моноалкиламино, С-С-диалкиламино;
40
40
1
4
3
4
vi) -SR; R означает водород или С-С-алкил с линейной цепью или С-С-алкил с разветвленной цепью;
6
10
vii) замещенного или незамещенного С- или С-арила;
1
9
viii) замещенного или незамещенного С-С-гетероцикла; или
1
9
ix) замещенного или незамещенного С-С-гетероарила.
В таблице V представлены неисчерпывающие примеры этой категории ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Таблица V
<b>№</b>
<b>R</b>
<b>R</b><sup>1</sup>
<b>R</b><sup>2</sup>
Е1
4-метил
бензил
водород
Е2
4-метил
4-метоксибензил
водород
Е3
4-метил
4-фторбензил
водород
Е4
4-метил
4-хлорбензил
водород
Е5
4-метил
4-метилбензил
водород
Е6
4-метил
2-(пиридин-2-ил)этил
водород
Е7
4-метил
[1,3]диоксолан-2-илметил
водород
Е8
4-метил
тетрагидрофуран-2-илметил
водород
Е9
4-метил
2-метоксиэтил
водород
Е10
4-метил
1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил
водород
Е11
4-метил
пиридин-4-илметил
водород
Е12
4-метил
фуран-2-илметил
водород
Е13
4-метил
2-(метилтио)этил
водород
Е14
4-метил
1-фенилэтил
водород
Е15
4-метил
3-имидазол-1-илпропил
водород
Е16
4-метил
циклогептил
водород
Е17
4-метил
4-метилциклогексил
водород
Е18
4-метил
1-бензилпиперидин-4-ил
водород
Е19
4-метил
азепан-2-он-3-ил
водород
Е20
4-метил
1-бензилпирролидин-3-ил
водород
Е21
4-метил
бензил
метил
Е22
4-метил
4-метоксибензил
метил
Е23
4-метил
4-фторбензил
метил
Е24
4-метил
4-хлорбензил
метил
Е25
4-метил
4-метилбензил
метил
Е26
4-метил
2-(пиридин-2-ил)этил
метил
Е27
4-метил
[1,3]диоксолан-2-илметил
метил
Е28
4-метил
тетрагидрофуран-2-илметил
метил
Е29
4-метил
2-метоксиэтил
метил
Е30
4-метил
1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил
метил
Е31
4-метил
пиридин-4-илметил
метил
Е32
4-метил
фуран-2-илметил
метил
Е33
4-метил
карбоксиметил
метил
Е34
4-метил
2-(метилтио)этил
метил
Е35
4-метил
1-фенилэтил
метил
Е36
4-метил
3-имидазол-1-илпропил
метил
Е37
4-метил
циклогептил
метил
Е38
4-метил
4-метилциклогексил
метил
Е39
4-метил
1-бензилпиперидин-4-ил
метил
Е40
4-метил
азепан-2-он-3-ил
метил
Е41
4-метил
1-бензилпирролидин-3-ил
метил
Раскрытые соединения этой категории могут быть получены по методике, указанной в данном контексте ниже, на схеме IV, и описанной в примерах 4.
Схема IV
2
Реагенты и условия: (а) бензилбромид, НСНО, НО/EtOH; комнатная температура, 12 часов.
Пример 4
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-[(бензиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он (9)
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-(бензиламинометил)пиридин-2(1Н)-он (9):
1-(4'-метилбензолсульфонил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он (7) (250 мг, 0,94 ммоль) и формальдегид (200 мг, 2,07 ммоль) вносят в водный этанол (10 мл) и перемешивают в течение 30 минут. Затем добавляют бензиламин (229 мг, 2,07 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 12 часов. Растворитель удаляют путем выпаривания и остаток растворяют в метаноле (5 мл) и очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, элюируя смесью вода/ацетонитрил, получая желательный продукт в виде трифторацетатной соли.
1
20
20
2
4
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,44 (с, 3H), 3,96 (с, 2H), 4,16 (с, 2H), 6,69 (д, J=8,1 Гц), 7,40 (м, 7H), 7,52 (м, 1H), 7,73 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,97 (д,J=8,1 Гц, 1H), 9,71 (ушир.с, 2H), 10,44 (ушир.с, 1H); ES MS (M+1): 396,67; HRMS: рассчитано для CHNOS: 384,45. Найдено (М+1): 385,12.
Далее следует неисчерпывающий пример этой категории ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
1-(4'-Метилбензолсульфонил)-3-гидрокси-4-[(2-метоксиэтиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
1
19
13
16
20
2
5
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 2,43 (с, 3H), 3,12 (м, 2H), 3,29 (с, 3H), 3,56 (т, J=5,1 Гц, 2H), 3,99 (с, 2H), 6,51 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,51 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,76 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,98 (д, J=8,1 Гц); F-ЯМР (252 МГц, ДМСО): δ 88,6; С-ЯМР (75 МГц, ДМСО): δ 21,5, 43,8, 46,2, 46,5, 58,5, 67,2, 106,7, 119,2, 120,2, 123,9, 128,4, 129,7, 130,1, 133,1, 146,8, 147,0, 156,0; ES MS (M+1): 353,12; HRMS: рассчитано для CHNOS: 352,41. Найдено (М+1): 353,11.
Категория VI ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы относится к соединениям, имеющим формулу
2
2
где L выбирают из СН или SO, и Z означает замещенный или незамещенный фенил. Неисчерпывающие примеры ингибиторов, в соответствии с этой категорией, указаны в нижеприводимой таблице VI.
Таблица VI
<b>№</b>
<b>L</b>
<b>Z</b>
F1
CH<sub>2</sub>
2-хлорфенил
F2
CH<sub>2</sub>
3-хлорфенил
F3
CH<sub>2</sub>
4-хлорфенил
F4
CH<sub>2</sub>
2-фторфенил
F5
CH<sub>2</sub>
3-фторфенил
F6
CH<sub>2</sub>
4-фторфенил
F7
CH<sub>2</sub>
2,3-дихлорфенил
F8
CH<sub>2</sub>
2,4-дихлорфенил
F9
CH<sub>2</sub>
2,5-дихлорфенил
F10
CH<sub>2</sub>
2,6-дихлорфенил
F11
CH<sub>2</sub>
3,4-дихлорфенил
F12
CH<sub>2</sub>
3,5-дихлорфенил
F13
CH<sub>2</sub>
2,3-дифторфенил
F14
CH<sub>2</sub>
2,4-дифторфенил
F15
CH<sub>2</sub>
2,5-дифторфенил
F16
CH<sub>2</sub>
2,6-дифторфенил
F17
CH<sub>2</sub>
3,4-дифторфенил
F18
CH<sub>2</sub>
3,5-дифторфенил
F19
CH<sub>2</sub>
2-цианофенил
F20
CH<sub>2</sub>
3-цианофенил
F21
CH<sub>2</sub>
4-цианофенил
F22
SO<sub>2</sub>
2-хлорфенил
F23
SO<sub>2</sub>
3-хлорфенил
F24
SO<sub>2</sub>
4-хлорфенил
F25
SO<sub>2</sub>
2-фторфенил
F26
SO<sub>2</sub>
3-фторфенил
F27
SO<sub>2</sub>
4-фторфенил
F28
SO<sub>2</sub>
2,3-дихлорфенил
F29
SO<sub>2</sub>
2,4-дихлорфенил
F30
SO<sub>2</sub>
2,5-дихлорфенил
F31
SO<sub>2</sub>
2,6-дихлорфенил
F32
SO<sub>2</sub>
3,4-дихлорфенил
F33
SO<sub>2</sub>
3,5-дихлорфенил
F34
SO<sub>2</sub>
2,3-дифторфенил
F35
SO<sub>2</sub>
2,4-дифторфенил
F36
SO<sub>2</sub>
2,5-дифторфенил
F37
SO<sub>2</sub>
2,6-дифторфенил
F38
SO<sub>2</sub>
3,4-дифторфенил
F39
SO<sub>2</sub>
3,5-дифторфенил
F40
SO<sub>2</sub>
2-цианофенил
F41
SO<sub>2</sub>
3-цианофенил
F42
SO<sub>2</sub>
4-цианофенил
2
2
Соединения, включаемые в эту категорию, могут быть получены в соответствии со схемой I для Z, означающего СН, и в соответствии со схемой III для Z, означающего SO.
Фармацевтически приемлемые соли
Раскрытые ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы могут быть в форме фармацевтически приемлемой соли. Фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы разработчиком рецептур для получения формы раскрытого ингибитора, которая более совместима с предназначенной доставкой ингибитора субъекту или для совместимости готовой лекарственной формы.
Последующее представляет собой примеры методик для получения фармацевтически приемлемой соли раскрытого ингибитора, трет-бутил{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилата.
Суспензию трет-бутил{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилата (242 мг, 0,56 ммоль) в МеОН (15 мл) кипятят с обратным холодильником до получения гомогенного раствора. Нагревание прекращают и добавляют, пока еще в горячем состоянии, 0,1 н HCl (6,7 мл, 1,2 экв.) и раствор охлаждают до комнатной температуры. Летучие вещества выпаривают при пониженном давлении и аморфный остаток кристаллизуют в ацетоне (5 мл). Твердое вещество собирают путем фильтрации.
Суспензию трет-бутил{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилата (217 мг, 0,5 ммоль) в МеОН (15 мл) кипятят с обратным холодильником до получения гомогенного раствора. Нагревание прекращают и добавляют, пока еще в горячем состоянии, метансульфоновую кислоту (115,2 мг, 1,2 экв.) и раствор охлаждают до комнатной температуры. Летучие вещества выпаривают при пониженном давлении и аморфный остаток кристаллизуют в ацетоне (5 мл). Твердое вещество собирают путем фильтрации.
В таблице VII, приведенной в данном контексте ниже, представлены примеры фармацевтически приемлемых солей трет-бутил{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилата, образованных с органическими и неорганическими кислотами.
Таблица VII
<b>Кислота</b>
<b>Выход</b>
<b>Чистота*</b>
<b>Т.пл. (</b><sup>о</sup><b>С)</b>
<b>Цвет</b>
свободное основание
--
99,3%
183-184
розовый
HCl
90%
99,7%
185-186
белый
H<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>
93%
99,7%
175 (разл.)
слегка розовый
п-толуол-сульфонил
74%
99,8%
185-186
белый
метан-сульфонил
79%
99,9%
155-157
белый
*Анализ путем ВЭЖХ
1
Н-ЯМР-анализ используют для определения формы соли, так, например, мезилатная соль, полученная согласно данному контексту выше, имеет следующую формулу
1
Н-ЯМР-анализ используют для определения, на каком участке молекулы происходит солеобразование. Химические сдвиги для протонов метиленовой группы, соединяющей мостиковой связью пиперазиновый и пиридиноновый циклы, смещены от 3,59 ч./млн в случае свободного основания до 4,31 ч./млн в случае соли. В дополнение, пиперазиновые метиленовые группы, смежные с третичным амином, смещены от 2,50 ч./млн до приблизительно 3,60 ч./млн. Химические сдвиги для остальных протонов в основном являются неизменными. Эти данные указывают, что третичный аминный азот пиперазинового цикла является протонированным в солевых формах. В дополнение, интеграция метильных протонов метансульфонильной единицы относительно ядра соединения указывает на присутствие одного эквивалента кислоты.
о
Разработчик рецептур может определять растворимость фармацевтически приемлемых солей раскрытых ингибиторов любым желательным способом. Следующее представляет собой неисчерпывающий пример методики для оценки растворимости соли раскрытого ингибитора. Суспензию трет-бутил{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилатметансульфоната (26,6 мг) в дистиллированной деионизированной воде (3,0 мл) обрабатывают ультразвуком в течение 20 минут, при температуре водяной бани ниже 25С. Суспензию фильтруют для удаления любой нерастворимой соли. Прозрачный раствор после фильтрации (200 мкл) разбавляют дистиллированной деионизированной водой (800 мкл) и подвергают ВЭЖХ-анализу. Следующее представляет собой результаты для фармацевтически приемлемых солей, указанных выше в таблице VII.
<b>Соль</b>
<b>Растворимость (мг/мл)</b>
<b>Чистота*</b>
свободное основание
~0,001
99,3%
гидрохлорид
5,9
99,7%
гидросульфонат
13,2
99,7%
п-толуолсульфонат
2,3
99,8%
метансульфонат
16,6
99%
*Анализ путем ВЭЖХ
Следующее представляет собой неисчерпывающие примеры других кислот, которые могут быть использованы для образования фармацевтически приемлемых солей раскрытых ингибиторов: ацетат, цитрат, малеат, сукцинат, лактат, глюконат и тартрат.
Далее, раскрытым в данном контексте является способ получения описанных ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, включающий:
а) защиту гидроксильного фрагмента гидроксипиридин-2(1Н)-она для получения защищенного пиридона, имеющего формулу
где W означает защитную группу;
b) введение во взаимодействие защищенного пиридона с соединением, имеющим формулу
где R представляет собой 1-5 замещений вместо водорода, как описано в данном контексте, индекс n представляет собой целое число от 0 до 5, Q представляет собой удаляемую группу,
получая О-защищенный N-бензилпиридон или N-сульфонилфенилпиридон, имеющий формулу
с) удаление защитной группы из О-защищенного N-бензилпиридона или N-сульфонилфенилпиридона, получая N-бензилпиридон или N-сульфонилфенилпиридон, имеющий формулу
d) введение во взаимодействие амина, имеющего формулу
1
2
где R и R имеют такие же значения, как описано в данном контексте, с формальдегидом, получая N-формиламин, имеющий формулу
и
е) введение во взаимодействие N-формиламина, образованного на стадии (d), с N-бензилпиридоном или N-сульфонилфенилпиридоном, образованным на стадии (с), получая соединение, имеющее формулу
Стадия (а): получение О-защищенного гидроксипиридин-2(1Н)-она
Стадия (а) относится к образованию О-защищенного гидроксипиридин-2(1Н)-она, имеющего формулу
W может означать любую защитную группу. Неисчерпывающие примеры защитных групп включают карбаматы, например трет-бутоксикарбонил и метоксикарбонил, алкилсиланы, например триметилсилил и трет-бутилдиметилсилил, и т.п.
Стадия (b): получение О-защищенного N-бензилгидроксипиридин-2(1Н)-она или О-защищенного N-сульфонилфенилгидроксипиридин-2(1Н)-она
Стадия (b) относится к образованию О-защищенного N-бензилгидроксипиридин-2(1Н)-она или О-защищенного N-сульфонилфенилгидроксипиридин-2(1Н)-она, имеющего формулу
Защищенный гидроксипиридин-2(1Н)-он, образованный на стадии (а), вводят во взаимодействие с соединением, имеющим формулу
где Q представляет собой удаляемую группу, способную к элиминированию, у циклического азота защищенного гидроксипиридин-2(1Н)-она.
Стадия (с): получение N-бензил-3-гидроксипиридин-2(1Н)-она или N-сульфонилфенил-3-гидроксипиридин-2(1Н)-она
Стадия (с) относится к образованию N-бензил-3-гидроксипиридин-2(1Н)-она или N-сульфонилфенил-3-гидроксипиридин-2(1Н)-она, имеющего формулу
где О-защищенный N-бензилгидроксипиридин-2(1Н)-он или О-защищенный N-сульфонилфенилгидроксипиридин-2(1Н)-он, образованный на стадии (b), вводят во взаимодействие с одним или более реагентом(ами), подходящим(и) для удаления защитной группы W, по способу, совместимому с любыми R-замещениями вместо водорода в фенильном кольце.
Стадия (d): получение синтона N-формиламина
Стадия (d) относится к образованию синтона N-формиламина, имеющего формулу
N-Формиламин образуется путем введения во взаимодействие амина, имеющего формулу
с формальдегидом или реагентом, способным генерировать формальдегид in situ.
Стадия (е): получение раскрытых ингибиторов HIF-1α- пролилгидроксилазы
Стадия (е) относится к получению конечных раскрытых соединений, имеющих формулу
путем введения во взаимодействие N-формиламина, образованного на стадии (d), с N-бензил-3-гидроксипиридин-2(1Н)-оном или N-сульфонилфенил-3-гидроксипиридин-2(1Н)-оном, образованным на стадии (с).
Готовые лекарственные формы
Лекарственные средства и фармацевтические композиции
Настоящее изобретение, далее, относится к композициям или готовым лекарственным формам, которые пригодны для получения лекарственного средства или фармацевтической композиции. Описанные лекарственные средства или фармацевтические композиции, содержащие раскрытые ингибиторы человеческой белковой HIF-1α-пролилгидроксилазы, могут включать:
а) эффективное количество одного или более ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы согласно настоящему изобретению; и
b) один или более эксципиент(ов).
Заболевания или состояния, опосредованные повышенной стабилизацией HIF-1 путем ингибирования HIF-1α-пролилгидроксилазы, включают PVD, CAD, сердечную недостаточность, ишемию, анемию, заживление раны, противомикробную активность, усиленный фагоцитоз, противораковую активность и усиление эффективности вакцин.
Для целей настоящего изобретения термин «эксципиент» и «носитель» используют попеременно на протяжении всего описания настоящего изобретения, и вышеуказанные термины определены в данном контексте как «ингредиенты, которые используют в практике получения безопасной и эффективной фармацевтической композиции».
Разработчику рецептур понятно, что эксципиенты используют, главным образом, для управления доставкой безопасного, стабильного и функционального фармацевтического средства, служащего не только как часть всего наполнителя для доставки, но также в качестве средства для достижения эффективной абсорбции реципиентом активного ингредиента. Эксципиент может исполнять роль как простую и непосредственную, в качестве инертного наполнителя, или эксципиент, как используется в данном контексте, может быть частью рН-стабилизирующей системы или покрытия для обеспечения доставки ингредиентов безопасно для желудка. Разработчик рецептур также может получать преимущество от того факта, что соединения согласно настоящему изобретению улучшают клеточную активность, фармакокинетические свойства, а также улучшают пероральную биодоступность.
Неисчерпывающие примеры композиций согласно настоящему изобретению включают:
а) от примерно 0,001 мг до примерно 1000 мг одного или более ингибитора(ов) человеческой белковой HIF-1α-пролилгидроксилазы согласно настоящему изобретению; и
b) один или более эксципиент(ов).
Другой пример согласно настоящему изобретению относится к следующим композициям:
а) от примерно 0,01 мг до примерно 100 мг одного или более ингибитора(ов) человеческой белковой HIF-1α-пролилгидроксилазы согласно настоящему изобретению; и
b) один или более эксципиент(ов).
Дальнейший пример согласно настоящему изобретению относится к следующим композициям:
а) от примерно 0,1 мг до примерно 10 мг одного или более ингибитора(ов) человеческой белковой HIF-1α-пролилгидроксилазы согласно настоящему изобретению; и
b) один или более эксципиент(ов).
Еще дальнейший пример композиций согласно настоящему изобретению включает:
а) эффективное количество одного или более ингибитора(ов) человеческой белковой HIF-1α-пролилгидроксилазы согласно настоящему изобретению; и
b) один или более химиотерапевтических агентов или химиотерапевтических соединений, как далее описано в данном контексте.
Еще дальнейший пример композиций согласно настоящему изобретению включает:
а) эффективное количество одного или более ингибитора(ов) человеческой белковой HIF-1α-пролилгидроксилазы согласно настоящему изобретению; и
b) одну или более вакцин для лечения инфекционного заболевания.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения анемии.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения усиления клеточного иммунитета.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения ракового заболевания.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях увеличения стабилизации HIF-1.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения анемии.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения периферического васкулярного заболевания.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения ран.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства, которое является антимикробным.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения атеросклеротических патологических изменений.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения диабета.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения гипертензии.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения заболевания, опосредованного уровнем васкулярного эндотелиального фактора роста (VEGF), глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (GAPDH) и эритропоэтина (ЕРО).
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения нарушения, выбираемого из группы, состоящей из болезни Крона и язвенного колита, псориаза, саркоидоза, ревматоидного артрита, гемангиомы, болезни Ослера-Вебера-Рандю или наследственной геморрагической телангиэктазии, солидных или кровяных опухолей, и синдрома приобретенного иммунодефицита.
Настоящее изобретение, далее, относится к применению одного или более из ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, раскрытых в данном контексте, для получения лекарственного средства в целях лечения нарушения, выбираемого из группы, состоящей из диабетической ретинопатии, дегенерации желтого пятна, ракового заболевания, серповидно-клеточной анемии, саркоида (болезнь Бека), сифилиса, эластической псевдоксантомы, болезни Педжета, венозной окклюзии, артериальной окклюзии, обструктивного заболевания сонной артерии, хронического увеита/витрита, микобактериальных инфекций, болезни Лима, системной красной волчанки, преждевременной ретинопатии, болезни Илза, болезни Бехчета, вызывающих ретинит или хориоидит инфекций, синдрома предполагаемого гистоплазмоза глаза, болезни Беста, миопии (близорукости), ямки диска зрительного нерва, болезни Штаргардта, pars planitis, хронического отслоения сетчатки, синдрома повышенной вязкости, токсоплазмоза, травматических и пост-лазерных осложнений, заболеваний, связанных с покраснением, и пролиферативной витреоретинопатии.
Раскрытые композиции и формы фармацевтических препаратов, содержащие только ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы, или в комбинации с другим лекарственным средством или другим терапевтическим агентом, в том числе химиотерапевтическим агентом или химиотерапевтическим соединением, можно варьировать в соответствии с предназначенным путем введения.
Перорально вводимые готовые лекарственные формы могут быть в форме твердых веществ, жидкостей, эмульсий, суспензий или гелей, или в разовой лекарственной форме, например в виде таблеток или капсул. Таблетки могут быть компаундированы в комбинации с другими, обычно используемыми ингредиентами, такими как тальк, растительные масла, полиолы, камеди, желатин, крахмал и другие носители. Ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы могут быть диспергированы или комбинированы с подходящим жидким носителем в растворах, суспензиях или эмульсиях.
Парентеральные композиции, предназначенные для инъекции, или подкожно, внутримышечно, или внутривенно, могут быть получены в виде жидких или твердых форм для растворения в жидкости до инъекции, или в виде эмульсий. Такие готовые лекарственные формы являются стерильными и жидкости, инъецируемые внутривенно, должны быть изотоническими. Пригодными эксципиентами являются, например, вода, декстроза, физиологический солевой раствор и глицерин.
Введение фармацевтически приемлемых солей веществ, описанных в данном контексте, включено в рамки настоящего изобретения. Такие соли могут быть получены при использовании фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований, включая органические основания и неорганические основания. Соли, получаемые при использовании неорганических оснований, включают соли натрия, калия, лития, аммония, кальция, магния и т.п. Соли, получаемые при использовании фармацевтически приемлемых органических нетоксичных оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, основных аминокислот и т.п. В отношении полезной дискуссии по фармацевтическим солям, см., S.M. Berge и др., Journal of Pharmaceutical Sciences, 66:1-19 (1977), раскрытие которой включено в данный контекст путем ссылки.
Вещества для инъекции могут быть получены в разовой лекарственной форме в ампулах или в контейнерах с множественной дозой. Ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы или композиции, содержащие один или более ингибитор(ов)-HIF-1α-пролилгидроксилазы, которые должны быть доставлены, могут находиться в таких формах, как суспензии, растворы или эмульсии в масле или, предпочтительно, в водных наполнителях. Альтернативно, соль ингибитора HIF-1α-пролилгидроксилазы может находиться в лиофилизированной форме для восстановления, во время доставки, с помощью подходящего наполнителя, такого как стерильная, свободная от пирогена, вода. Обе жидкости, а также лиофилизированные формы, которые должны быть восстановлены, содержат агенты, предпочтительно, буферы, в количествах, необходимых для подходящей корректировки рН инъецируемого раствора. Для любого парентерального применения, особенно, если готовая лекарственная форма должна быть введена внутривенно, общая концентрация растворенных веществ должна быть контролируема для получения изотонической, гипотонической или слабо гипертонической готовой лекарственной формы. Неионные вещества, такие как сахара, являются предпочтительными для крректировки тонуса, и особенно предпочтительной является сахароза. Любая из этих форм может, далее, содержать подходящие для составления рецептуры агенты, такие как крахмал или сахар, глицерин или физиологический раствор. Композиции, на унифицированную дозу, является ли она жидкой или твердой, могут содержать от 0,1% до 99% полинуклеотида.
СПОСОБЫ
Способы, относящиеся к стабилизации HIF-1
Staphylococcus aureus
S. aureus
Ликвидация оккупирующих микроорганизмов зависит первоначально от врожденных иммунных механизмов, которые предварительно существуют у всех индивидуумов и действуют в минуты инфицирования. Типы фагоцитарных клеток, включая макрофаги и нейтрофилы, играют ключевую роль во врожденном иммунитете, так как они могут распознавать, поглощать и разрушать многие патогены без содействия адаптивному иммунному ответу. Эффективность миелоидных клеток во врожденной защите отражает их способность к функционированию в окружающих средах с низким содержанием кислорода. Тогда как давление кислорода в здоровых тканях обычно составляет 20-70 мм рт.ст. (то есть, 2,5-9% кислорода), в ранах и очагах некротической ткани описаны значительно более низкие уровни (< 1% кислорода) (Arnold и др. Br. J. Exp. Pathol., 68, 569 (1987); Vogelberg & Konig, Clin. Investig, 71, 466 (1993); Negus и др., Am. J. Pathol., 150, 1723 (1997)). Также показано (Zinkernagel A.S. и др., «Pharmacologic Augmentation of Hypoxia-Inducible Factor-1α with Mimosine Boosts the Bactericidal Capacity of Phagocytes», J. Infectious Diseases (2008), 197, 214-217), что HIF-1α-агонист мимозин может усиливать способность человеческих фагоцитов и цельной крови убивать играющий главную роль патоген  зависимым от дозы образом и уменьшать размер повреждения в случае мышиной модели инфицирования кожи с помощью .
Макрофаги являются одной популяцией эффекторных клеток, принимающих активное участие в иммунных ответах. Их роль в наследственном иммунитете включает опосредование фагоцитоза, а также высвобождение цитокинов и цитотоксических медиаторов. Они также облегчают развитие приобретенного иммунитета через антигенную презентацию и высвобождение иммуномодуляторных цитокинов. Хотя макрофаги являются иммунными эффекторами, они также способны к инфицированию агентами, такими как бактерии, простейшие, паразиты и вирусы («The Macrophage», под ред. C.E. Lewis и J.O'D. McGee, IRL Press at Oxford University Press, New York, N.Y., 1992). Вирусы, способные к инфицированию макрофагов, включают некоторые РНК-вирусы, как например вирус кори (MV) (например, Joseph и др. J. Virol., 16, 1638-1649, 1975), респираторно-синтициальный вирус (RSV) (Midulla и др. Am. Rev. Respir. Dis., 140, 771-777, 1989) и человеческий тип вируса иммунодефицита ВИЧ-1 (HIV-1) (Meltzer и Gendelman, в книге «Macrophage Biology and Activation» под ред. W. Russell и S. Gordon, Springer-Verlag, New York, N.Y., сс. 239-263 (1992): Potts и др. Virology, 175, 465-476, 1990).
in vivo
in vitro
ex vivo
Раскрытым в данном контексте является способ повышения стабилизации HIF-1 в клетке, включающий введение в контакт клетки ,  или  с эффективным количеством одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Также раскрытыми в данном контексте являются способы увеличения клеточного иммунного ответа человека или млекопитающего, нуждающегося в повышенном клеточном иммунитете, включающие введение человеку или млекопитающему, нуждающемуся в этом, эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Далее, раскрытыми в данном контексте являются способы увеличения клеточного иммунного ответа человека или млекопитающего, диагностированного медицинским состоянием, провоцирующим пониженный клеточный иммунитет, включающие введение человеку или млекопитающему, нуждающемуся в этом, эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Еще далее раскрытыми в данном контексте являются способы увеличения клеточного иммунного ответа человека или млекопитающего, диагностированного медицинским состоянием, провоцирующим пониженный клеточный иммунитет, включающие введение человеку или млекопитающему, нуждающемуся в этом, эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Еще далее раскрытыми в данном контексте являются способы увеличения клеточного иммунного ответа человека или млекопитающего, находящегося в медицинском состоянии, провоцирующим пониженный клеточный иммунитет, включающие введение человеку или млекопитающему, нуждающемуся в этом, эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Как таковые, один или более ингибитор(ов) HIF-1α-пролилгидроксилазы и какие-либо совместно вводимые соединения могут быть введены или вводиться в контакт с клеткой локально, буккально, перорально, внутрикожно, подкожно, через слизистую оболочку в глаз, влагалище, прямую кишку и нос, внутривенно и внутримышечно.
Способы, относящиеся к лечению ракового заболевания
Как используется в данном контексте, раковое заболевание определяется в данном контексте как «анормальный рост клеток, которые имеют тенденцию к пролиферированию в неконтролируемом направлении и, в некоторых случаях, к метастазированию». Как таковые, как метастатические, так и неметастатические раковые заболевания можно подвергать лечению с помощью раскрытых способов.
Раскрытыми являются способы лечения ракового заболевания у человека или млекопитающего, включающие введение человеку или млекопитающему с раковым заболеванием эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Также, раскрытыми в данном контексте являются способы лечения человека или млекопитающего с диагностированным раковым заболеванием путем совместного введения человеку или млекопитающему одного или более химиотерапевтического(их) агента(ов) или химиотерапевтического(их) соединения(ий), вместе с одним или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Следующее представляет собой неисчерпывающие примеры злокачественных и незлокачественных раковых заболеваний:
NUT
острая лимфобластома; острый миелоидный лейкоз; адренокортикальная карцинома; адренокортикальная карцинома у детей; рак аппендикса; базальная клеточная карцинома; внепеченочный рак желчных протоков; рак мочевого пузыря; рак костей; остеосаркома и злокачественная фиброзная гистиоцитома; глиома стволовой части головного мозга у детей; опухоль головного мозга у взрослых; опухоль головного мозга, глиома стволовой части головного мозга у детей; опухоль головного мозга, атипическая тератомная/палочковидная опухоль центральной нервной системы у детей; эмбриональные опухоли центральной нервной системы; мозжечковая астроцитома; церебральная астроцитома/злокачественная глиома; краниофарингиома; эпендимобластома; эпендимома; медуллобластома; медуллоэпителиома; шишковидные паренхимные опухоли промежуточной дифференцировки; супратенториальные первичные нейроэктодермальные опухоли и пинеобластома; зрительного пути и гипоталамическая глиома; опухоли головного и спинного мозга; рак молочной железы; бронхиальные опухоли; лимфома Беркитта; карциноидная опухоль; гастроинтестинальная карциноидная опухоль; атипическая тератомная/палочковидная опухоль центральной нервной системы; эмбриональные опухоли центральной нервной системы; лимфома центральной нервной системы; мозжечковая астроцитома; церебральная астроцитома/злокачественная глиома у детей; рак шеи; хордома у детей; хронический лимфоцитарный лейкоз; хронический миелогенный лейкоз; хронические миелопролиферативные нарушения; рак ободочной кишки; колоректальный рак; краниофарингиома; кожная Т-клеточная лимфома; рак пищевода; опухоли семейства Юинга; внегонадная эмбриональная опухоль; внепеченочный рак желчных протоков; рак глаза, внутриглазная меланома; рак глаза, ретинобластома; рак желчного пузыря; желудочный (желудок) рак; гастроинтестинальная карциноидная опухоль; гастроинтестинальная стромальная опухоль (GIST); внечерепная эмбриональная опухоль; внегонадная эмбриональная опухоль; эмбриональная опухоль яичников; гестационная трофобластическая опухоль; глиома; глиома ствола головного мозга у детей; глиома, церебральная астроцитома у детей; глиома зрительного пути и гипоталамуса у детей; лейкоз волосковых клеток; рак головы и шеи; гепатоцеллюлярный (печень) рак; гистиоцитоз клеток Лангерганса; лимфома Ходжкина; гипофарингеальный рак; глиома гипоталамического и зрительного пути; внутриглазная меланома; опухоли инсулоцитов; рак почки (почечно-клеточный рак); гистиоцитоз клеток Лангерганса; рак гортани; острый лимфобластический лейкоз; острый миелоидный лейкоз; хронический лимфоцитарный лейкоз; хронический миелогенный лейкоз; лейкоз волосковых клеток; рак губы и ротовой полости; рак печени; немелкоклеточный рак легкого; мелкоклеточный рак легкого; лимфома, связанная со СПИДом; лимфома Беркитта; Т-клеточная кожная лимфома; лимфома Ходжкина; лимфома не Ходжкина; первичная лимфома центральной нервной системы; макроглобулинемия Вальденстрема; злокачественная фиброзная гистиоцитома костей и остеосаркома; медуллобластома; меланома; внутриглазная меланома (глаз); карцинома клеток Меркеля; мезотелиома; метастатический чешуйчатый рак шеи со скрытой первичностью; рак полости рта; синдром множественной эндокринной неоплазии (у детей); множественная миелома/неоплазмия плазмацитов; грибковый микоз; миелодиспластические синдромы; миелодиспластические/миелопролиферативные заболевания; хронический миелогенный лейкоз; острый миелоидный лейкоз у взрослых; острый миелоидный лейкоз у детей; множественная миелома; хронические миелопролиферативные нарушения; рак полости носа и околоносовых пазух; носоглоточный рак; нейробластома; немелкоклеточный рак легкого; рак полости рта; рак ротовой полости; ротоглоточный рак; остеосаркома и злокачественная фиброзная гистиоцитома костей; рак яичников; эпителиальный рак яичников; опухоль зародышевых клеток яичников; низкозлокачественная потенциальная опухоль яичников; рак поджелудочной железы; рак поджелудочной железы, опухоли инсулоцитов; папилломатоз; рак щитовидной железы; рак полового члена; фарингеальный рак; феохромоцитома; шишковидные паренхимные опухоли промежуточной дифференцировки; пинеобластома и супратенториальные первичные нейроэктодермальные опухоли; гипофизарная опухоль; неоплазмия плазмоцитов/множественная миелома; плевропульмонарная бластома; первичная лимфома центральной нервной системы; рак простаты; ректальный рак; почечно-клеточный рак (почки); переходно-клеточный рак почечной лоханки и мочеточника; карцинома дыхательных путей, с вовлечением -гена на хромосоме 15; ретинобластома; рабдомиосаркома; рак слюнной железы; саркома, опухоли семейства Юинга; саркома Капоши; саркома мягкой ткани; саркома матки; синдром Сезари; рак кожи (не меланома); рак кожи (меланома); кожная карцинома клеток Меркеля; мелкоклеточный рак легкого; мелкоклеточный рак кишечника; саркома мягкой ткани; карцинома сквамозных клеток, метастатический сквамозный рак шеи со скрытой первичностью; рак желудка (желудочный); супратенториальные первичные нейроэктодермальные опухоли; Т-клеточная кожная лимфома; тестикулярный рак; рак гортани; тимома и карцинома тимуса; рак щитовидной железы; переходно-клеточный рак почечной лоханки и мочеточника; гестационная трофобластическая опухоль; рак уретры; эндометриальный рак матки; саркома матки; вагинальный рак; рак вульвы; макроглобулинемия Вальденстрема и опухоль Вильмса.
Далее раскрытыми в данном контексте являются способы лечения рака у человека или млекопитающего, включающие совместное введение человеку или млекопитающему, вместе с одним или более химиотерапевтическим(и) агентом(ами) или химиотерапевтическим(и) соединением(ями), одного или более из раскрытых ингибитораов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Также, раскрытыми в данном контексте являются способы лечения человека или млекопитающего, диагностированных раковым заболеванием, путем совместного введения человеку или млекопитающему, вместе с одним или более химиотерапевтическим(и) агентом(ами) или химиотерапевтическим(и) соединением(ями), одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
«Химиотерапевтический агент» или «химиотерапевтическое соединение» представляет собой химическое соединение, пригодное для лечения ракового заболевания. Химиотерапевтические агенты против рака, которые могут быть использованы в комбинации с раскрытыми HIF-1α-ингибиторами, включают, но не ограничиваясь этим, митотические ингибиторы (алкалоиды барвинка). Они включают винкристин, винбластин, виндезин и Navelbine™ (винорелбин, 5'-норангидробластин). В еще других воплощениях химиотерапевтические агенты против рака включают ингибиторы топоизомеразы I, такие как камптотециновые соединения. Как используется в данном контексте, «камптотециновые соединения» включают Camptosar™ (иринотекангидрохлорид), Hycamtin™ (топотекангидрохлорид) и другие соединения, производные от камптотецина и его аналогов. Другая категория химиотерапевтических агентов против рака, которые могут быть использованы в способах и композициях, раскрытых в данном контексте, представляет собой производные подофиллотоксина, такие как этопозид, тенипозид и митоподозид. Настоящее изобретение, далее, включает другие химиотерапевтические агенты против рака, известные как алкилирующие агенты, которые алкилируют генетический материал в опухолевых клетках. Эти агенты включают, не исчерпывающим образом, цисплатин, циклофосфамид, азотистый иприт, хлорметин, триметилен-тиофосфорамид, кармустин, бусульфан, хлорамбуцил, белустин, урамустин, хломафазин и дакарбазин. Настоящее изобретение включает антиметаболиты в качестве химиотерапевтических агентов. Примеры этих типов агентов включают цитозинарабинозид, фторурацил, метотрексат, меркаптопурин, азатиоприн и прокарбазин. Дополнительная категория химиотерапевтических агентов против рака, которые могут быть использованы в способах и композициях, раскрытых в данном контексте, включает антибиотики. Примеры включают, не исчерпывающим образом, доксорубицин, блеомицин, дактиномицин, даунорубицин, митрамицин, митомицин, митомицин С и дауномицин. Имеются многочисленные липосомные композиции, коммерчески доступные для этих соединений. Настоящее изобретение, далее, включает другие химиотерапевтические агенты против рака, включая, не исчерпывающим образом, противоопухолевые антитела, дакарбазин, азацитидин, амсакрин, мелфалан, ифосфамид и митоксантрон.
Раскрытые ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы, согласно данному контексту, можно вводить в комбинации с другими противоопухолевыми агентами, включая цитотоксические/антибластомные агенты и антиангиогенные агенты. Цитотоксические/антибластомные агенты определены как агенты, которые разрушают и уничтожают раковые клетки. Некоторые цитотоксические/антибластомные агенты являются алкилирующими агентами, которые алкилируют генетический материал в опухолевых клетках, например цисплатин, циклофосфамид, азотистый иприт, хлорметин, триметилен-тиофосфорамид, кармустин, бусульфан, хлорамбуцил, белустин, урамустин, хломафазин и дакарбазин. Другие цитотоксические/антибластомные агенты представляют собой антиметаболиты для опухолевых клеток, например цитозин-арабинозид, фторурацил, метотрексат, меркаптопурин, азатиоприм и прокарбазин. Другие цитотоксические/антибластомные агенты представляют собой антибиотики, например доксорубицин, блеомицин, дактиномицин, даунорубицин, митрамицин, митомицин, митомицин С и дауномицин. Имеются многочисленные липосомные композиции, коммерчески доступные для этих соединений. Еще другие цитотоксические/антибластомные агенты представляют собой митотические ингибиторы (алкалоиды барвинка). Эти агенты включают винкристин, винбластин и этопозид. Разнообразные цитотоксические/антибластомные агенты включают таксол и его производные, L-аспарагиназу, противоопухолевые антитела, дакарбазин, азацитидин, амсакрин, мелфалан, VM-26, ифосфамид, митоксантрон и виндезин.
Антиангиогенные агенты хорошо известны квалифицированному специалисту в данной области. Подходящие антиангиогенные агенты, для использования в раскрытых способах и композициях, включают анти-VEGF-антитела, включая гуманизированные и химерные антитела, анти-VEGF-аптамеры и антисмысловые олигонуклеотиды. Другие известные ингибиторы ангиогенеза включают ангиостатин, эндостатин, интерфероны, интерлейкин 1 (включая α и β), интерлейкин 12, ретиноевую кислоту и тканевые ингибиторы металлопротеиназы-1 и металлопротеиназы-2 (TIMP-1 и TIMP-2). Также можно использовать малые молекулы, включающие топоизомеразы, такие как разоксан, ингибитор топоизомеразы II с антиангиогенной активностью.
Другие противораковые агенты, которые можно использовать в комбинации с раскрытыми HIF-1α-ингибиторами, включают, но не исчерпывающим образом: ацивицин; акларубицин; акодазолгидрохлорид; акронин; адозелезин; альдеслейкин; алтретамин; амбомицин; аметантронацетат; аминоглутетимид; амсакрин; анастрозол; антрамицин; аспарагиназу; асперлин; азацитидин; азетепа; азотомицин; батимастат; бензодепа; бикалутамид; бизантренгидрохлорид; биснафиддимезилат; бизелезин; блеомицинсульфат; бреквинар-натрий; бропиримин; бисульфан; кактиномицин; калустерон; карацемид; карбетимер; карбоплатин; кармустин; карубицингидрохлорид; карзелезин; цедефингол; хлорамбуцил; циролемицин; цисплатин; кладрибин; криснатолмезилат; циклофосфамид; цитарабин; дакарбазин; дактиномицин; даунорубицингидрохлорид; децитабин; дексормаплатин; дезагуанин; дезагуанинмезилат; диазиквон; доцетаксел; доксорубицин; доксорубицингидрохлорид; дролоксифен; дролоксифенцитрат; дромостанолонпропионат; диазомицин; эдатрексат; эфлорнитингидрохлорид; элсамитруцин; энлоплатин; энпромат; эпипропидин; эпирубицингидрохлорид; эрбулозол; эзорубицингидрохлорид; эстрамустин; эстрамустин-фосфатнатрий; этанидазол; этопозид; этопозидфосфат; этоприн; фадрозолгидрохлорид; фазарабин; фенретинид; флоксуридин; флударабинфосфат; фторурацил; фторцитабин; фосквидон; фостриецин-натрий; гемцитабин; гемцитабингидрохлорид; гидроксимочевину; идарубицингидрохлорид; ифосфамид; илмофозин; интерлейкин II (включая рекомбинантный интерлейкин II, или rIL2); интерферон-альфа-2а; интерферон-альфа-2b; интерферон-альфа-n1; интерферон-альфа-n3; интерферон-бета-I а; интерферон-гамма-I b; ипроплатин; иринотекангидрохлорид; ланреотидацетат; летрозол; леупролидацетат; лиарозолгидрохлорид; лометрексол-натрий; ломустин; лозоксантронгидрохлорид; мазопрокол; маутансин; мехлорэтамингидрохлорид; мегестролацетат; меленгестролацетат; мелфалан; меногарил; меркаптопурин; метотрексат; метотрексат-натрий; метоприн; метуредепа; митиндомид; митокарцин; митокромин; митогиллин; митомалцин; митомицин; митоспер; митотан; митоксантронгидрохлорид; микофенольную кислоту; нокодазол; ногаламицин; ормаплатин; оксисуран; паклитаксел; пегаспаргазу; пелиомицин; пентамустин; пепломицинсульфат; перфосфамид; пипоброман; пипосульфан; пироксантронгидрохлорид; пликамицин; пломестан; порфимер-натрий; порфиромицин; преднимустин; прокарбазингидрохлорид; пиромицин; пиромицингидрохлорид; пиразофурин; рибоприн; роглетимид; сафингол; сафинголгидрохлорид; семустин; симтразен; спарфозат-натрий; спарсомицин; спирогерманийгидрохлорид; спиромустин; спироплатин; стрептонигрин; стрептозоцин; сулофенур; тализомицин; текогаланнатрий; тегафур; телоксантронгидрохлорид; темопорфин; тенипозид; тероксирон; тестолактон; тиамиприн; тиогуанин; тиотепа; тиазофурин; тирапазамин; торемифенцитрат; трестолонацетат; трицирибинфосфат; триметрексат; триметрексат-глюкуронат; трипторелин; тубулозолгидрохлорид; урамустин; уредепа; вапреотид; вертепорфин; винбластинсульфат; винкристинсульфат; виндезин; виндезинсульфат; винепидинсульфат; винглицинатсульфат; винлеурозинсульфат; винорелбинтартрат; винрозидинсульфат; винзолидинсульфат; ворозол; зениплатин; зиностатин; зорубицингидрохлорид.
Другие противораковые лекарственные средства включают, но не исчерпывающим образом: 20-эпи-1,25-дигидроксивитамин D3; 5-этинилурацил; абиратерон; акларубицин; ацилфульвен; адеципенол; адозелезин; альдеслейкин; антагонисты ALL-TK; альтретамин; амбамустин; амидокс; амифостин; аминолевулиновую кислоту; амрубицин; амсакрин; анагрелид; анастрозол; андрографолид; ингибиторы ангиогенеза; антагонист D; антагонист G; антареликс; антидорсализирующий морфогенетический белок-1; антиандроген; карцинома простаты; антиэстроген; антинеопластон; антисмысловые олигонуклеотиды; афидиколинглицинат; генные модуляторы апоптоза; регуляторы апоптоза; апуриновую кислоту; ara-CDP-DL-PTBA; аргининдеаминазу; азулакрин; атаместан; атримустин; аксинастатин-1; аксинастатин-2; аксинастатин-3; азазетрон; азатоксин; азатирозин; производные баккатина-III; баланол; батимастат; BCR/ABL-антагонисты; бензохлорины; бензоилстауроспорин; бета-лактамные производные; бета-алетин; бетакламицин В; бетулиновую кислоту; bFGF-ингибитор; бикалутамид; бисантрен; бисазиридинилспермин; биснафид; бистратен А; бизелезин; брефлат; бропиримин; будотитан; бутионинсульфоксимин; кальципотриол; кальфостин С; производные камптотецина; канарипокс IL-2; капецитабин; карбоксамид-амино-триазол; карбоксиамидотриазол; CaRest M3; CARN 700; ингибитор, производный от хряща; карзелесин; ингибиторы казеинкиназы (ICOS); кастаноспермин; цекропин В; цетрореликс; хлорины; сульфонамид хлорхиноксалин; цикапрост; циспорфирин; кладрибин; аналоги кломифена; клотримазол; коллисмицин А; коллисмицин В; комбретастатин А4; аналог комбретастатина; конагенин; крамбесцидин 816; криснатол; криптофицин 8; производные криптофицина А; курацин А; циклопентантрахиноны; циклоплатам; ципемицин; цитарабиносфосфат; цитолитический фактор; цитостатин; дакликсимаб; децитабин; дегидродидемнин В; деслорелин; дексаметазон; дексифосфамид; дексразоксан; дексверапамил; диазиквион; дидемнин В; дидокс; диэтилнорспермин; дигидро-5-азацитидин; дигидротаксол,9; диоксамицин; дифенилспиромустин; доцетаксел; докозанол; долазетрон; доксифлуридин; дролоксифен; дронабинол; дуокармицин SA; эбселен; экомустин; эдельфозин; эдреколомаб; эфлорнитин; элемен; эмитефур; эпирубицин; эпристерид; аналог эстрамустина; агонисты эстрогена; антагонисты эстрогена; этанидазол; этопозидфосфат; эксеместан; фадрозол; фазарабин; фенретинид; филграстим; финастерид; флавопиридол; флезеластин; флуастерон; флударабин; фтордауноруницин-гидрохлорид; форфенимекс; форместан; фостриецин; фотемустин; гадолинийтексафирин; нитрат галлия; галоцитабин; ганиреликс; ингибиторы желатиназы; гемцитабин; ингибиторы глутатиона; гепсульфам; герегулин; гексаметиленбисацетамид; гиперицин; ибандроновую кислоту; идарубицин; идоксифен; идрамантон; илмофозин; иломастат; имидазоакридоны; имиквимод; иммуностимулирующие пептиды; ингибитор рецептора инсулиноподобного фактора роста-1; агонисты интерферона; интерфероны; интерлейкины; иобенгуан; иододоксорубицин; ипомеанол,4-; ироплакт; ирсогладин; изобенгазол; изогомогаликондрин В; итасетрон; джасплакинолид; кахалалид F; ламелларин-N-триацетат; ланреотид; лейнамицин; ленограстим; лентинансульфат; лептолстатин; летрозол; ингибирующий лейкемию фактор; лейкоцитный альфа-интерферон; лейпролид + эстроген + прогестерон; лейпрорелин; левамизол; лиарозол; аналог линейного полиамина; липофильный дисахарид-пептид; липофильные платиновые соединения; лиссоклинамид-7; лобаплатин; ломбрицин; лометрексол; лонидамин; лозоксантрон; ловастатин; локсорибин; луртотекан; лютецийтексафирин; лизофиллин; литические пептиды; майтансин; манностатин А; маримастат; мазопрокол; маспин; ингибиторы матрилизина; ингибиторы матриксной металлопротеиназы; меногарил; мербарон; метерелин; метиониназу; метоклопрамид; ингибитор MIF; мифепристон; мильтефозин; миримостим; плохо сочетающися двухцепочечные РНК; митогуазон; митолактол; аналоги митомицина; митонафид; митотоксиновый фактор роста фибробластов - сапорин; митоксантрон; мофаротен; молграмостим; моноклональное антитело, человеческий хорионический гонадотрофин; монофосфорильный липид А + миобактериальная клеточная оболочка sk; мопидамол; ген-ингибитор, резистентный к многочисленным лекарственным средствам; терапия множественных опухолей, базирующаяся на супрессоре-1; горчичный противораковый агент; микапероксид В; экстракт микобактериальной клеточной оболочки; мириапорон; N-ацетилдиналин; N-замещенные бензамиды; нафарелин; нагрестип; налоксон + пентазоцин; напавин; нафтерпин; нартограстим; недаплатин; неморубицин; неридроновую кислоту; нейтральную эндопептидазу; нилутамид; низамицин; модуляторы оксида азота; антиоксидант нитроксида; нитруллин; О6-бензилгуанин; остреотид; окиценон; олигонуклеотиды; онапристон; ондансетрон; ондансетрон; орацин; пероральный цитокиновый индуктор; ормаплатин; озатерон; оксалиплатин; оксауномицин; паклитаксел; аналоги паклитаксела; производные паклитаксела; палауамин; пальмитоилризоксин; памидроновую кислоту; панакситриол; паномифен; парабактин; пазеллиптин; пегаспаргазу; пелдезин; пентозанполисульфатнатрий; пентостатин; пентрозол; перфлуброн; перфосфамид; периллиловый спирт; феназиномицин; фенилацетат; ингибиторы фосфатазы; пицибанил; пилокарпингидрохлорид; пирарубицин; пиритрексим; плацетин А; плацетин В; ингибитор активатора плазминогена; платиновый комплекс; платиновые соединения; комплекс платина-триамин; порфимер-натрий; порфиромицин; преднизон; пропилбис-акридон; простагландин J2; ингибиторы протеасомы; иммунный модулятор на основе белка А; ингибитор протеинкиназы С; ингибиторы протеинкиназы С, микроалгал; ингибиторы протеинтирозинфосфатазы; ингибиторы пуриннуклеозидфосфорилазы; пурпурины; пиразолоакридин; конъюгат пиридоксилированный гемоглобин полиоксиэтилен; антагонисты raf; ралтитрексед; рамосетрон; ингибиторы ras-фарнезилпротеинтрансферазы; ингибиторы ras; ингибитор ras-GAP; деметилированный ретеллиптин; этидронат рения Re 186; ризоксин; рибозимы; ретинамид RII; роглетимид; рохитукин; ромуртид; роквинимекс; рубигинон В1; рубоксил; сафингол; саинтопин; SarCNU; саркофитол А; сарграмостим; миметики Sdi 1; семустин; ингибитор 1 физиологического старения; смысловые олигонуклеотиды; ингибиторы сигнальной трансдукции; модуляторы сигнальной трансдукции; белок, связывающий одноцепочечный антиген; сизофиран; собузоксан; борокаптат натрия; фенилацетат натрия; солверол; связывающий соматомедин белок; сонермин; спарфозовую кислоту; спикамицин D; спиромустин; спленопентин; спонгистатин 1; скваламин; ингибитор стволовой клетки; ингибиторы деления стволовой клетки; стипиамид; ингибиторы стромелизина; сульфинозин; антагонист сверхактивного вазоактивного интестинального пептида; сурадиста; сурамин; сваинсонин; синтетические глюкозамингликаны; таллимустин; тамоксифен-метиодид; тауромустин; тазаротен; текогалан-натрий; тегафур; теллурапирилий; ингибиторы теломеразы; темопорфин; темозоломид; тенипозид; тетрахлордекаоксид; тетразомин; талибластин; тиокоралин; тромбопоэтин; миметик тромбопоэтина; тималфазин; агонист рецептора тимопоэтина; тимотринан; тироидный стимулирующий гормон; оловоэтилэтиопурпурин; тирапазамин; титаноценбихлорид; топсентин; торемифен; фактор тотипатентной стволовой клетки; ингибиторы трансляции; третиноин; триацетилуридин; трицирибин; триметрексат; трипторелин; трописетрон; туростерид; ингибиторы тирозинкиназы; тирфостины; ингибиторы UBC; убенимекс; происходящий от мочеполового синуса ингибирующий фактор роста; антагонисты рецептора урокиназы; вапреотид; вариолин В; векторную систему, эритроцитную генную терапию; веларезол; верамин; вердины; вертепорфин; винорелбин; винксалтин; витаксин; ворозол; занотерон; зениплатин; зиласкорб и зиностатин-стималамер. В одном воплощении, противораковое лекарственное средство представляет собой 5-фторурацил, таксол или лейковорин.
Способы, связанные с лечением состояний, вызываемых микроорганизмами
Раскрытым является способ профилактического лечения человека или млекопитающего против инфицирования микроорганизмом, включающий введение человеку или млекопитающему эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Далее, раскрытым является способ снижения вирулентности микроорганизма, когда человек или млекопитающее инфицирован(о) микроорганизмом, включающий введение человеку или млекопитающему эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Еще далее, раскрытым является способ лечения инфекции у человека или млекопитающего, вызванной микроорганизмом, включающий введение человеку или млекопитающему эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Кроме того, далее, раскрытым является способ лечения человека или млекопитающего, диагностированного инфекцией, вызванной микроорганизмом, включающий введение человеку или млекопитающему эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Также раскрытым является способ предупреждения передачи заболевания, вызванного микроорганизмом, от человека или млекопитающего человеку или млекопитающему, включающий введение человеку или млекопитающему эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Кроме того, еще, далее, раскрытым является способ предупреждения инфицирования человека или млекопитающего во время хирургической процедуры, включающий введение человеку или млекопитающему эффективного количества одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Микроорганизм может быть любым неопасным или вирулентным микроорганизмом, как, например, бактерии, вирусы, дрожжи, грибы или паразиты. Ниже приведены неисчерпывающие примеры микроорганизмов, которые могут подвергаться воздействию раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы. Под термином «подвергаться воздействию» подразумевают ослабление, уменьшение или уничтожение вирулентности микроорганизма. Причиной ослабления, уменьшения или уничтожения вирулентности может быть стабилизация HIF-1 и/или увеличивающийся уровень фагоцитоза вследствие введения одного или более из раскрытых ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Aeromonas hydrophilia, Agrobacterium tumefaciens, Bacillus anthracis, Bacillus halodurans, Bacillus subtilis, Bacteroides distasonis, Bacteroides eggerthii, Bacteroides fragilis, Bacteroides ovalus, Bacteroides гомологической группы 3452A, Bacteroides splanchnicus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides vulgatus, Bordetella bronchiseptica, Bordetella parapertussis, Bordetella pertussis, Borrelia burgdorferi, Branhamella catarrhalis, Brucella melitensis, Burkholderia cepacia, Burkholderia pseudomallei, Campylobacter coli, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Caulobacter crescentus, Citrobacter freundii, Clostridium difficile, Clostridium perftingens, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium glutamicum, Corynebacterium ulcerans, Edwardsiella tarda, Enterobacter aerogenes, Erwinia chrysanthemi, Enterobacter cloacae, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia coli, Francisella tularensis, Gardnerella vaginalis, Haemophilus ducreyi, Haemophilus haemolyticus, Haemophilus influenzae, Haemophilus parahaemolyticus, Haemophilus parainfluenzae, Helicobacter pylori, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae, Kluyvera cryocrescens, Legionella pneumophila, Listeria innocua, Listeria monocytogenes, Listeria welshimeri, Methanosarcina acetivorans, Methanosarcina mazei, Morganella morganii, Mycobacterium avium, Mycobacterium intracellulare, Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Mesorhizobium loti, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Providencia stuartii, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Pseudomonas acidovorans, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas alcaligenes, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putida, Ralstonia solanacearum, Salmonella enterica подвида enteridtidis, Salmonella enterica подвида paratyphi, Salmonella enterica подвида typhimurium, Salmonella enterica подвида typhi, Serratia marcescens, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Sinorhizobium meliloti, Staphylococcus aureus, Streptococcus criceti, Staphylococcus epidemmidis, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus intermedius, Stenotrophomonas maltophilia, Staphylococcus saccharolyticus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus sciuri, Streptomyces avermitilis, Streptomyces coelicolor, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Sulfobalblobus soffiataricus, Thermotoga maritima, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Vogesella indigofera, Xanthomonas axonopodis, Xanthomonas campestris, Yersinia enterocolitica, Yersinia intermedia, Yersinia pestis и Yersinia pseudotuberculosis.
Способы, относящиеся к вакцинации или инокуляции
В данном контексте раскрыты способы усиления эффективности вакцины, включающие совместное введение человеку или млекопитающему вакцины в комбинации с одним или более ингибитором(ами) HIF-1α-пролилгидроксилазы.
Неисчерпывающие примеры вакцин представляют собой вакцины для стимуляции антител против гепатита, гриппа, кори, краснухи, столбняка, полиомелита, бешенства и т.п.
in vitro
in vivo
ex vivo
Следовательно, раскрытые способы включают введение, или в случае контактирующих клеток ,  или , одного или более ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы и каких-либо совместно вводимых соединений локально, буккально, перорально, внутрикожно, подкожно, через слизистую оболочку в глаз, влагалище, прямую кишку и нос, внутривенно и внутримышечно.
Методики
Анализ активности EGLN-1
4
4
Активность фермента EGLN-1 (или EGLN-3) определяли, используя масс-спектрометрию (времяпролетная масс-спектрометрия с лазерной матрично-десорбционной ионизацией, MALDI-TOF MS). Рекомбинантный человеческий фермент EGLN-1-179/426 получали, как описано выше и в дополнительных данных. Полноразмерный рекомбинантный человеческий EGLN-3 получали подобным путем, однако, необходимо использование гибрида His-MBP-TVMV-EGLN-3 для анализа, вследствие нестабильности расщепленного белка. В случае обоих ферментов HIF-1α-пептид, соответствующий остаткам 556-574, использовали в качестве субстрата. Реакцию проводили в общем объеме 50 мкл, содержащем TrisCl (5 мМ, рН = 7,5), аскорбат (120 мкМ), 2-оксоглутарат (3,2 мкМ), HIF-1α (8,6 мкМ) и бычий сывороточный альбумин (0,01%). Фермент, количество, предопределенное для гидроксилирования, 20% от субстрата, в течение 20 минут, добавляли для инициирования реакции. Там, где использовали ингибиторы, соединения приготавливали в диметилсульфоксиде в 10-кратной конечной концентрации для анализа. После выдерживания в течение 20 минут при комнатной температуре реакцию прекращали путем переноса 10 мкл реакционной смеси в 50 мкл матричного раствора для масс-спектрометрии (α-циано-4-гидроксикоричная кислота, 5 мг/мл, в смеси 50% ацетонитрил/0,1% TFA, 5 мМ NHPO). Два микролитра смеси наносили на пластину-мишень MALDI-TOF MS для анализа с помощью Applied Biosystems (Foster City, CA) 4700 Proteomics - анализатора MALDI-TOF MS, снабженного Nd:YAG-лазером (355 нм, длительность импульса 3 нс, частота повторения 200 Гц).
50
Гидроксилированный пептидный продукт идентифицировали из субстрата по приросту массы 16 Да. Данные, определяемые в виде процента конверсии субстрата в продукт, анализировали на GraphPad Prism 4 для расчета значений IC (полумаксимальная ингибирующая концентрация).
Твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) VEGF
50
НЕК293-Клетки высевали на 96-луночные, покрытые полилизином, планшеты, по 20000 клеток на лунку, на DMEM (модифицированная по способу Дульбекко среда Игла) (10% FBS, 1% NEAA, 0,1% глутамин). После инкубации в течение ночи клетки промывали с помощью 100 мкл Opti-MEM (Gibco, Carlsbad, CA) для удаления сыворотки. Соединение в ДМСО последовательно разводили (начиная со 100 мкМ) в Opti-MEM и добавляли к клеткам. Кондиционированные среды анализировали на VEGF при использовании набора для иммуноанализа человеческого VEGF Quantikine (R&D Systems, Minneapolis, MN). Величины оптической плотности при 450 нм регистрировали, используя Spectra Max 250 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Данные, определяемые в виде % от DFO-стимуляции, использовали для расчета значений ЕС (вызывающая 50%-ный эффект концентрация) при использовании программного обеспечения GraphPad Prism 4 (San Diego, CA).
Исследование мышиной ишемической задней конечности
о
Всю работу с животными проводили в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных (Национальная Академия наук; Копирайт © 1996). При этих экспериментах использовали самцов мышей С57В1/6 в возрасте 9-10 недель из лаборатории Charles River (Portage, MI). Мышам перорально вводили наполнитель (водный карбонатный буфер, 50 мМ; рН = 9,0) или тестируемое соединение в наполнителе в количестве 50 мг/кг или 100 мг/кг. Животным вводили дозы три раза: день 1: в 8 часов до полудня (АМ) и в 5 часов пополудни (РМ) и в день 2: в 8 часов до полудня. Спустя 1 час после первой дозы осуществляли одностороннее артериальное лигирование под анестезией, используя изофлуран. Бедренную артерию лигировали проксимально к началу подколенной артерии. Контралатеральную конечность подвергали мнимой хирургической процедуре. Осуществляли лигирование переменным образом между правой и левой задними конечностями. Спустя два часа после дозировки 8 АМ в день 2 отбирали кровь через вентрикулярный зонд, пока мыши были анестезированы с помощью изофлурана. Образцы сыворотки для анализа ЕРО получали, используя пробирки для разделения гель-сгустка сыворотки. Сердце, печень и относящиеся к желудку и голени мышцы собирали, мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при температуре -80С вплоть до использования.
Анализ ЕРО мышиной сыворотки
ЕРО мышиной сыворотки детектировали, используя набор для ELISA мышиного Quantikine-эритропоэтина от R&D Systems согласно инструкциям изготовителей.
Вестерн-блоттинг-анализ HIF мышиной ткани
о
о
о
Ткани мышей, сохраняемые при температуре -80С, превращали в порошок с помощью ступки и пестика, охлаждаемых с помощью жидкого азота. Ядерные экстракты приготавливали, используя NE-PER-набор (Pierce Biotechnology). Для иммунопреципитации ядерный экстракт добавляли к моноклональному антителу для HIF-1α (Novus, Littleton, CO) при соотношении ткани к антителу 200:1. Суспензию инкубировали в конической пробирке для микроцентрифуги в течение 4 часов при температуре 4С. Затем в пробирку добавляли белок А/G-связанные агарозные гранулы (40 мкл 50%-ной суспензии). После обработки в поворотном барабане в течение ночи при температуре 4С гранулы промывали 3 раза с помощью забуференного фосфатом физиологического раствора, охлажденного льдом. Затем гранулы приготавливали для электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) с помощью 40 мкл буфера Лэммли для образца. Отделенные во время SDS-PAGE белки переносили на нитроцеллюлозные пластинки с помощью системы XCell-II Blot Module (Invitrogen, Карлсбад, CA). Блоты блокировали с помощью 5% BSA до инкубации вместе с кроличьим антителом для HIF-1α при разведении 1:100 (Novus). Блоты затем промывали с помощью буфера Трис-забуференный физиологический раствор/Твин-20 и инкубировали вместе с вторичным, конъюгированным с пероксидазой хрена, козьим против кроличьего антителом (Pierce, Rockford, IL). Блоты обнаруживали с помощью ECL-реагента (Amersham, Piscataway, NJ). «Образы» блотов улавливали с помощью сканера Epson Expression 1600.
in vivo
В нижеприводимой таблице VIII представлены не ограничивающие объема охраны изобретения примеры  ответа для соединений согласно настоящему изобретению, например ингибирование HIFPH2 (EGLN1) и стимуляция VEGF.
Таблица VIII
№
Соединение
HIFPH2IC<sub>50</sub> (мкМ)
VEGFIC<sub>50</sub> (мкМ)
С17
<img file="00000138.tif" he="15" wi="49" img-content="undefined" img-format="tif" />1-бензил-3-гидрокси-4-[(4-метилциклогексиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
11
27,4
С35
<img file="00000139.tif" he="15" wi="47" img-content="undefined" img-format="tif" />1-бензил-3-гидрокси-4-{[3-(1H-имидазол-1-ил)пропиламино]метил}пиридин-2(1Н)-он
12
42,5
С14
<img file="00000140.tif" he="19" wi="44" img-content="undefined" img-format="tif" />1-бензил-3-гидрокси-4-[1-фенилэтиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
12
20,6
В5
<img file="00000141.tif" he="17" wi="40" img-content="undefined" img-format="tif" />(R)-1-бензил-3-гидрокси-4-{[2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил]метил}пиридин-2(1Н)-он
9
53
C33
<img file="00000142.tif" he="14" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />1-бензил-3-гидрокси-4-{[2-(метилтио)этиламино]метил}пиридин-2(1Н)-он
16
53
В14
<img file="00000143.tif" he="29" wi="43" img-content="undefined" img-format="tif" />1-бензил-3-гидрокси-4-{[4-(6-хлорпиридазин-3-ил)-пиперазин-1-ил]метил}пиридин-2(1Н)-он
11
78
С19
<img file="00000144.tif" he="14" wi="41" img-content="undefined" img-format="tif" />3-[(1-бензил-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)метиламино]азепан-2-он
12
62,9
В9
<img file="00000145.tif" he="21" wi="45" img-content="undefined" img-format="tif" />1-бензил-3-гидрокси-4-[(4-бензилпиперазин-1-ил)метил]пиридин-2(1Н)-он
17
12,6
А18
<img file="00000146.tif" he="16" wi="41" img-content="undefined" img-format="tif" />1-(2-метоксибензил)-3-гидрокси-4-(азепан-1-илметил)пиридин-2(1Н)-он
18
29,2
D10
<img file="00000147.tif" he="26" wi="44" img-content="undefined" img-format="tif" />1-[(4-метилфенил)сульфонил]-3-гидрокси-4-(1,4'-бипиперидин-1'-илметил)пиридин-2(1Н)-он
4,4
27
D14
<img file="00000148.tif" he="30" wi="47" img-content="undefined" img-format="tif" />1-[(4-метилфенил)сульфонил]-3-гидрокси-4-{[4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил]метил}пиридин-2(1Н)-он
12
19
С1
<img file="00000149.tif" he="19" wi="44" img-content="undefined" img-format="tif" />1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-4-[(4-бензиламино)метил]пиридин-2(1Н)-он
12
42
А41
<img file="00000150.tif" he="22" wi="50" img-content="undefined" img-format="tif" />трет-бутил-4-{[1-(4-хлорбензил)-3-гидрокси-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил]метил}пиперазин-1-карбоксилат
14
16,6
Е33
<img file="00000151.tif" he="20" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />2-{[(3-гидрокси-2-оксо-1-тозил-1,2-дигидропиридин-4-ил)метил](метил)амино}уксусная кислота
21
2,1
F3
<img file="00000152.tif" he="13" wi="28" img-content="undefined" img-format="tif" />1-(4-хлорбензил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он
1,2
7,4
F2
<img file="00000153.tif" he="13" wi="35" img-content="undefined" img-format="tif" />1-(3-хлорбензил)-3-гидроксипиридин-2(1Н)-он
5
>100
50
Соединение F2 тестировали далее при использовании анализа ЕРО мышиной сыворотки, описанного в данном контексте выше, и найдено, что в отношении ЕРО ЕС=14 мкМ.
Усиленная нейтрофильная активность
Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus
Один аспект настоящего изобретения относится к усиленной нейтрофильной активности и увеличенной продолжительности жизни нейтрофилов, которые могут обеспечивать раскрытые соединения. Далее, предусматриваются способы и примеры в отношении повышенного фагоцитоза за счет раскрытых соединений. В нижеприводимых примерах клеточный штамм  Ньюмана представляет собой штамм АТСС#25904, и резистентным к метициллину штаммом является штамм АТСС#33591, и клеточная линия U937 представляет собой линию АТСС#CRL-1593.2. НаСаТ-клетки получали по методике Boukamp P. и др., «Normal keratinization in a spontaneously immortalized aneuploid human keratinocyte cell line», J. Cell Biol. (март 1988), 106(3):761-771.
S.Aureus
600
7
Для бактериальных анализов  (ATCC 33591) может быть культивирован на бульоне Тодда-Гевитта (ТНВ) до логарифмической фазы (OD составляет 0,4 или ~5×10 кое/мл) и затем пеллетирован, промыт и ресуспендирован в PBS (забуференнном фосфатом физиологическом растворе) или среде для тканевой культуры RPMI 1640 до желательной концентрации.
S.Aureus
S.Aureus
5
Венозная кровь здоровых волонтеров может быть использована в случае цельной крови и изолирования нейтрофилов. Нейтрофилы могут быть очищены, используя набор PolyMorphPrep (Axis Shield) в соответствии с инструкциями изготовителей. Человеческая моноцитарная клеточная линия U937 может быть культивирована на среде RPMI 1640 плюс 10% фетальной телячьей сыворотки, 1 ммоль/л NaPyr, 10 ммоль/л HEPES и глюкозу. Цельная кровь или фагоцитарные клетки могут быть предварительно инкубированы с мимозином (Sigma-Aldrich)(0-500 мкмоль/л) в течение 2-4 часов, затем подвергнуты контрольному заражению с помощью  (или 10 кое (колониеобразующая единица) в 100 мкл, добавленных к 300 мкл цельной крови, или при MOI (множественность заражения) 1 бактерия/клетка в случае изолированных фагоцитов). Аликвоты затем пассировали на ТНВ-агаре спустя 30 минут (цельная кровь и нейтрофилы) или 60 минут (U937-моноциты) для определения выживания колониеобразующих единиц .
Пример 5
о
Staphylococcus aureus
Изолированные человеческие нейтрофилы предварительно инкубировали в течение 1 часа при температуре 37С с контролем, состоящим из диметилсульфоксида (ДМСО), 50 мкМ и 200 мкМ соединения, указанного в таблице VIII.  (штамм Ньюмана) затем добавляли к нейтрофилам при MOI приблизительно 0,1 (1 бактерия на каждые 10 нейтрофилов). Образцы отбирали в случае 60 минут и 90 минут, где нейтрофилы лизировали водой, и все остающиеся бактерии подсчитывали на агаровых пластинках с бульоном Тодда-Гевитта (ТНВ).
фигуре 2
фигуре 2
S.aureus
На  представлена эффективность указанного в таблице VIII соединения в отношении обеспечения усиленного киллинга  (штамм Ньюмана) в концентрациях 50 мкМ и 200 мкМ по сравнению с контролем. Как можно видеть на , спустя 90 минут после инфицирования, приблизительно половина колониеобразующих единиц отсутствует при концентрации 200 мкМ.
Пример 6
о
TM
2
Staphylococcus aureus
Клетки из человеческой моноцитарной клеточной линии U937 предварительно инкубировали в течение 2 часов, при температуре 37С и в атмосфере с 5% СО, с контролем, состоящим из ДМСО и 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения.  (вирулентный штамм Ньюмана) затем добавляли к клеткам при MOI приблизительно 1 (1 бактерия на каждую 1 клетку). Образцы отбирали спустя 30, 60, 90 и 120 минут после инфицирования. U937-Клетки лизировали с помощью Triton и количество остающихся бактерий подсчитывали на ТНВ-агаровых пластинках.
фигуре 3
S.aureus
S.aureus
Как представлено на , ингибитор 4-пролилгидроксилазы, указанное в таблице VIII соединение, является эффективным в отношении киллинга  по сравнению с контролем (ДМСО). За 120 минут указанное в таблице VIII соединение вызывает составляющую 84% гибель штамма Ньюмана , когда моноцитарные клетки обработаны с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения, таким образом, демонстрируя повышенный фагоцитоз, обусловленный длительным временем жизни нейтрофилов.
Пример 7
2
S.aureus
TM
Два образца клеток из моноцитарной клеточной линии U937 предварительно обрабатывали с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения. Один образец предварительно инкубировали в течение 1 часа, а другой образец предварительно инкубировали в течение 2 часов, оба при температуре 37ºС в атмосфере с 5% СО. Затем к клеткам добавляли  (вирулентный штамм Ньюмана) при MOI приблизительно 1-2 (1-2 бактерии на каждую 1 клетку). Аликвоты клеток отбирали из каждого образца спустя 30, 60, 90 и 120 минут после инфицирования, U937-клетки немедленно лизировали с помощью Triton и все остающиеся бактерии подсчитывали на ТНВ-агаровых пластинках.
фигуре 4
фигуре 4
S.aureus
Как представлено на , моноцитарные клетки U937, предварительно обработанные с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения, в течение 1 часа (черные полосы), почти не имеют присутствующих колониеобразующих единиц спустя 120 минут после инфицирования, тогда как клетки, предварительно обработанные за два часа до инфицирования, имеют наличие приблизительно 15% колониеобразующих единиц, когда сравнивают с клетками, которые не были подвергнуты обработке. В дополнение, на  представлено, что, в пределах 1 часа после подвергания воздействию  (штамм Ньюмана) моноцитарных клеток U937, число присутствующих колониеобразующих единиц значительно снижено относительно клеток, не получающих HIF-1α-ингибитора.
Пример 8
2
S.aureus
S.aureus
TM
Два образца клеток из моноцитарной клеточной линии U937 предварительно обрабатывали с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения в течение 1 часа при температуре 37ºС и в атмосфере с 5% СО. К одному образцу добавляли (штамм Ньюмана), а к другому образцу добавляли резистентный к метилциллину штамм (MRSA). Обе бактерии добавляли при MOI приблизительно 2-3 (2-3 бактерии на каждую 1 клетку). Аликвоты клеток отбирали из каждого образца спустя 30, 60, 90 и 120 минут после инфицирования. U937-клетки немедленно лизировали с помощью Triton, и все остающиеся бактерии подсчитывали на ТНВ-агаровых пластинках.
фигуре 5
фигуре 5
S.aureus
Как представлено на , спустя 120 минут после инфицирования, MRSA-инфицированные клетки имеют только 25% от среднего процента присутствующих колониеобразующих единиц, когда сравнивают с контролем, как представлено черными полосами. Также на  представлено, спустя 60 минут после инфицирования, что штамм Ньюмана  имеет только приблизительно 12% от среднего процента присутствующих колониеобразующих единиц, когда сравнивают с контролем, и почти не имеет присутствующих колониеобразующих единиц спустя 120 минут после инфицирования, как представлено заштрихованными полосами.
Пример 9
S.aureus
S.aureus
TM
Два образца клеток из моноцитарной клеточной линии U937, обработанные с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения, инфицировали с помощью или  (штамм Ньюмана) или резистентного к метициллину  (MRSA). Обе бактерии добавляли при MOI приблизительно 2-3 (2-3 бактерии на каждую 1 клетку). Аликвоты клеток отбирали из каждого образца спустя 30, 60, 90 и 120 минут после инфицирования. U937-клетки немедленно лизировали с помощью Triton, и все остающиеся бактерии подсчитывали на ТНВ-агаровых пластинках.
фигуре 6
S.aureus
Как представлено на , даже без предварительной обработки с помощью указанного в таблице VIII соединения, спустя 60 минут после инфицирования штамм Ньюмана  имеет только 25% от среднего процента присутствующих колониеобразующих единиц, когда сравнивают с контролем, как представлено черными полосами. Штамм MRSA уменьшен до менее чем приблизительно 40% от среднего процента присутствующих колониеобразующих единиц, когда сравнивают с контролем, как представлено заштрихованными полосами.
Пример 10
S.aureus
S.aureus
TM
Три образца клеток из человеческой моноцитарной клеточной линии U937 обрабатывали с помощью 100 мкМ мимозина, 2 мкг/мл ванкомицина или 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения. Каждый образец инфицировали с помощью или  (штамм Ньюмана), или резистентного к метициллину  (MRSA). Обе бактерии добавляли при MOI приблизительно 2-3 (2-3 бактерии на каждую 1 клетку). Спустя 120 минут после заражения отбирали аликвоты из всех шести образцов и U937-клетки немедленно лизировали с помощью Triton и все остающиеся бактерии подсчитывали на ТНВ-агаровых пластинках.
фигуре 7
фигуре 7
Как представлено на , 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения усиливают гибель обоих бактериальных штаммов, то есть S.aureus, Ньюман, (заштрихованные полосы) или MRSA (черные полосы), когда сравнивают с обработанными мимозином клетками. В отношении представленного заштрихованными полосами штамма Ньюмана, как далее представлено на , обработанный с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения, образец имеет низкий средний процент присутствующих колониеобразующих единиц, чем клетки, обработанные ванкомицином. U937-Клетки, инфицированные с помощью MRSA (черные полосы), имеют приблизительно 40% присутствующих колониеобразующих единиц по сравнению с необработанными клетками и менее, чем половину от числа таковых, обработанных мимозином.
фигуре 8
S.aureus
S.aureus
На  представлен средний процент присутствующих колониеобразующих единиц (штамм Ньюмана) по сравнению с контролем в случае человеческих моноцитарных клеток (U937) спустя 30, 60, 90 и 120 минут после инфицирования, когда осуществлена обработка с помощью 10 мкМ соединения, указанного в таблице VIII. Черные полосы означают обработку с помощью указанного в таблице VIII соединения, начиная со времени инфицирования с помощью , заштрихованные полосы означают клетки, предварительно обработанные указанным в таблице VIII соединением, и белые полосы означают клетки, предварительно обработанные за два часа до инфицирования с помощью .
фигуре 9
фигуре 10
S.aureus
S.aureus
S.aureus
На  представлен средний процент присутствующих колониеобразующих единиц спустя 120 минут после инфицирования, по сравнению с ДМСО (контроль), когда НаСаТ-клетки предварительно обрабатывали в течение 1 часа, согласно вышеприведенным примерам, с помощью 800 мкМ мимозина, 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения или 1 мг/мл ванкомицина, с последующей инокуляцией с помощью  (штамм Ньюмана, заштрихованные полосы) и резистентного к метициллину  (MRSA, черные полосы). На  представлен средний процент присутствующих колониеобразующих единиц спустя 30, 60, 90 и 120 минут после инфицирования за счет штамма Ньюмана  (заштрихованные полосы) и MRSA (черные полосы), когда НаСаТ-клетки предварительно обрабатывали в течение 1 часа, согласно вышеприведенным примерам, с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения.
фигуре 11
На  представлена позитивная регуляция (активация) экспрессии фосфоглицераткиназы (PGK) в мышиных эмбриональных фибробластах дикого типа в результате обработки указанным в таблице VIII соединением в дозах 1 мкМ (Е), 10 мкМ (F) и 50 мкМ (G), по сравнению с контролем дикого типа (Н), и недостаточность активации экспрессии PGK в HIF-1-нокаутированных клетках в результате обработки указанным в таблице VIII соединением в дозах 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С) и в случае HIF-1-нокаутированного контроля (D). Оба типа клеток обрабатывали в течение 7 часов.
фигуре 12
На  представлена активация экспрессии фосфоглицераткиназы (PGK) в мышиных эмбриональных фибробластах дикого типа в результате обработки указанным в таблице VIII соединением в дозах 1 мкМ (Е), 10 мкМ (F), по сравнению с контролем дикого типа (G), и недостаточность активации экспрессии PGK в HIF-1-нокаутированных клетках в результате обработки указанным в таблице VIII соединением в дозах 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С) и в случае HIF-1-нокаутированного контроля (D).
фигуре 13
На  представлена активация экспрессии фосфоглицераткиназы (PGK) в мышиных эмбриональных фибробластах дикого типа в результате обработки указанным в таблице VIII соединением в дозах 1 мкМ (Е), 10 мкМ (F) и 50 мкМ (G), по сравнению с контролем дикого типа (Н), и недостаточность активации экспрессии PGK в HIF-1-нокаутированных клетках в результате обработки указанным в таблице VIII соединением в дозах 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С) и в случае HIF-1-нокаутированного контроля (D).
фигуре 14
фигуры 14
Васкулярный эндотелиальный фактор роста (VEGF) зависит от присутствия HIF-1 в клетках. На  представлена позитивная регуляция экспрессии васкулярного эндотелиального фактора роста (VEGF) в мышиных эмбриональных фибробластах дикого типа в результате обработки с помощью указанного в таблице VIII соединения в дозах 1 мкМ (Е), 10 мкМ (F) и 50 мкМ (G) по сравнению с контролем (Н), и недостаточность активации экспрессии VEGF в HIF-1-нокаутированных клетках, обработанных указанным в таблице VIII соединением в дозах 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С) и в случае HIF-1-нокаутированного контроля (D). Оба типа клеток обрабатывали в течение 7 часов. Как видно из , VEGF увеличен, когда вводят дозы 10 мкМ (F) и 50 мкМ (G). В случае HIF-1-нокаутированных клеток не происходит увличения активации PGK, когда HIF-1-нокаутированные клетки обрабатывают с помощью 1 мкМ (А), 10 мкМ (В) и 50 мкМ (С), когда сравнивают с контролем дикого типа (Н) и с HIF-1-нокаутированным контролем (D).
Заживление ран
Пример 11
Двадцати четырех (24) мышей разделяли на три группы. Животным группы 2 вводили бактериальный инокулят (чувствительный к антибиотикам штамм Ньюмана Staphylococcus aureus [ATCC#25904]) путем подкожной инъекции в день 0 и они получали 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения в течение 6 дней, начиная с 2 часов после инфицирования (дни 0-5). Группа 1 получала подкожные инъекции ДМСО. Группа 3 служила в качестве контрольной группы и не подвергалась обработке. Размер повреждения регистрировали ежедневно в течение исследования. Только открытые раны рассматривали в качестве повреждений; опухоли и белые пятна без открытой раны не подвергали измерению в отношении размера повреждения. В день 7 измеряли конечный размер повреждения и мышей умерщвляли для определения бактериальной нагрузки на кожу и почки. В день 7 после инфицирования мышей умерщвляли после измерения конечного размера повреждения и собирали поврежденную кожную ткань и обе почки. Кожу и почки гомогенизировали в забуференном фосфатом физиологическом растворе, последовательно разводили и пассировали на агаровых пластинках Тодда-Гевитта для подсчета колониеобразующих единиц бактерий.
фигуре 15
фигуре 15
S.aureus
На  представлено значительное уменьшение по размеру повреждений кожи (раны) в случае животных группы 1 (сплошные ромбы (♦)), обработанной с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения, по сравнению с животными, обработанными с помощью ДМСО (сплошные квадраты ()). Как представлено на , мышей инфицировали с помощью штамма Ньюмана , затем подвергали обработке с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения или ДМСО (контроль) спустя 2 часа после инфицирования. Данные показывают статистически значительное уменьшение по размеру повреждений кожи (раны) в случае животных, обработанных с помощью указанного в таблице VIII соединения (сплошные ромбы (♦)) или ДМСО (сплошные квадраты ()).
фигуре 16
фигуре 16
S.aureus
На  представлено значительное уменьшение по размеру повреждений кожи (раны) в случае животных группы 1 (сплошные ромбы (♦)), обработанной с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения, по сравнению с необработанными животными (сплошные треугольники ()). Как представлено на , мышей инфицировали с помощью штамма Ньюмана , затем подвергали обработке с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения, или не подвергали обработке спустя 2 часа после инфицирования. Данные показывают уменьшение по размеру повреждений кожи (раны) в случае животных, обработанных с помощью указанного в таблице VIII соединения (сплошные ромбы (♦)) или не подвергнутых обработке (сплошные треугольники ()).
Пример 12
Двадцати четырех (24) мышей разделяли на три группы. Животным группы 1 вводили бактериальный инокулят (чувствительный к антибиотикам штамм Ньюмана Staphylococcus aureus [ATCC#25904]) путем подкожной инъекции в день 0 и они получали 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения в течение 6 дней, начиная с 2 часов после инфицирования (дни 0-5). Группа 2 получала подкожные инъекции ДМСО. Группа 3 служила в качестве контрольной группы и не подвергалась обработке. Размер повреждения регистрировали ежедневно в течение исследования. Только открытые раны рассматривали в качестве повреждений; опухоли и белые пятна без открытой раны не подвергали измерению в отношении размера повреждения. В день 7 после инфицирования мышей умерщвляли после измерения конечного размера повреждения и собирали поврежденную кожную ткань и обе почки. Кожу и почки гомогенизировали в забуференном фосфатом физиологическом растворе, последовательно разводили и пассировали на агаровых пластинках Тодда-Гевитта для подсчета колониеобразующих единиц бактерий.
Фигура 17
представляет собой диаграмму-гистограмму, где представлено число наблюдаемых колониеобразующих единиц на грамм кожной ткани. Прямые линии указывают среднее значение для каждой группы. Результаты в случае необработанной группы представлены под обозначением (А), результаты в случае группы, обработанной с помощью ДМСО, представлены под обозначением (В), и результаты в случае группы, обработанной с помощью указанного в таблице VIII соединения, представлены под обозначением (С).
Фигура 18
представляет собой диаграмму наблюдаемых колониеобразующих единиц, найденных в почках животных. Результаты в случае необработанной группы представлены под обозначением (А), результаты в случае группы, обработанной с помощью ДМСО, представлены под обозначением (В) и результаты в случае группы, обработанной с помощью 10 мкМ указанного в таблице VIII соединения, представлены под обозначением (С). Как видно из этих данных, половина животных, обработанных с помощью ингибитора HIF-1α-пролилгидроксилазы, указанного в таблице VIII, не имеет бактерий в почках, что означает, что указанное в таблице VIII соединение способно системно предотвращать распространение инфекции от раны в почки.
Пример 13
Streptococcus pyogenes
Двадцать (20) мышей разделяли на две группы. Животным группы 1 вводили бактериальный инокулят ( NZ131 [штамм М49]) путем подкожной инъекции в день 0 и предварительно обрабатывали с помощью указанного в таблице VIII соединения один раз в день в течение 4 дней, начиная за 2 часа до инфицирования (дни 0-3). Соединение, указанное в таблице VIII, приготавливали в виде лекарственного средства в циклодекстране и разводили в дистиллированной воде для подкожной инъекции в дозе 0,5 мг/кг. Размер повреждения регистрировали ежедневно в течение исследования. Только открытые раны рассматривали в качестве повреждений; опухоли и белые пятна без открытой раны не подвергали измерению в отношении размера повреждения. В день 4 после инфицирования мышей умерщвляли после измерения конечного размера повреждения и собирали поврежденную кожную ткань и обе почки. Кожу и почки гомогенизировали в забуференном фосфатом физиологическом растворе, последовательно разводили и пассировали на агаровых пластинках Тодда-Гевитта для подсчета колониеобразующих единиц бактерий.
фигуре 19
Фигура 20
Streptococcus pyogenes
На  представлены результаты, полученные в примере 13, где 2 группы животных обрабатывали с помощью  NZ131 [штамм M49]. Данные показывают уменьшение по размеру повреждений кожи (раны) в случае животных группы 1 (сплошные треугольники ()), обработанной с помощью 0,5 мг/кг указанного в таблице VIII соединения, по сравнению с животными, обработанными с помощью наполнителя в качестве контроля (циклодекстран) (сплошные квадраты ()).  представляет собой диаграмму-гистограмму, на которой также представлены результаты, полученные в примере 12, где число колониеобразующих единиц в случае наблюдаемых повреждений кожи у животных, обработанных с помощью наполнителя в качестве контроля (циклодекстран), представлены под обозначением (А) и результаты в случае группы, обработанной с помощью 0,5 мг/кг указанного в таблице VIII соединения, представлены под обозначением (В).
Наборы
Настоящее изобретение также относится к наборам, включающим ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы, доставляемые человеку, млекопитающему или в клетку. Наборы могут содержать одну или более упакованных разовых доз композиции, включающей один или более ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы, доставляемых человеку, млекопитающему или в клетку. Ампулы с разовыми дозами или контейнеры с множественными дозами, в которых упакованы до использования ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы, которые должны быть доставлены, могут включать герметически закрываемый контейнер, заключающий в себе количество полинуклеотида или раствора, содержащего вещество, подходящее для его фармацевтически эффективной дозы, или множество эффективных доз. Ингибитор HIF-1α-пролилгидроксилазы может быть упакован в виде стерильной композиции, и герметически закрываемый контейнер предназначен для сохранения стерильности композиции до использования.
Раскрытые ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы также могут находиться в виде жидкостей, эмульсий или суспензий для доставки активных терапевтических агентов в аэрозольной форме в полости организма, как, например, нос, гортань или бронхиальные проходы. Соотношение ингибиторов HIF-1α-пролилгидроксилазы к другим компаундирующим агентам в этих композициях изменяется, как требует лекарственная форма.
В зависимости от предназначенного способа введения, фармацевтические композиции могут быть в твердой, полутвердой или жидкой лекарственных формах, таких как, например, таблетки, суппозитории, пилюли, капсулы, порошки, жидкости, суспензии, лосьоны, кремы, гели или т.п., предпочтительно в разовой лекарственной форме, подходящей для единичного введения определенной дозировки. Композиции включают, как указано выше, эффективное количество ингибитора HIF-1α-пролилгидроксилазы в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем и, в дополнение, могут включать другие лекарственные агенты, фармацевтические агенты, носители, добавки, разбавители и т.д.
В случае твердых композиций обычные нетоксичные твердые носители включают, например, фармацевтические марки маннита, лактозы, крахмала, стеарата магния, сахарината натрия, талька, целлюлозы, глюкозы, сахарозы, карбоната магния и т.п. Фармацевтически вводимые жидкие композиции могут быть получены, например, путем растворения, диспергирования и т.д. активного соединения, как описывается в данном контексте, и необязательных фармацевтических добавок в эксципиенте, таком, как, например, вода, соляной водный раствор декстрозы, глицерин, этанол и т.п., с получением, таким образом, раствора или суспензии. Если желательно, фармацевтическая композиция, которая должна быть введена, также может содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачиватели или эмульгаторы, буферные агенты для установления рН и т.п., например ацетат натрия, сорбитанмонолаурат, триэтаноламинацетат натрия, триэтаноламинолеат и т.д. Современные способы получения таких лекарственных форм известны или должны быть очевидны квалифицированному специалисту в данной области; например, см. Руководство Remington's Pharmaceutical Sciences, упомянутое выше.
Парентеральное введение, если используют, обычно характеризуется инъекцией. Инъецируемые препараты могут быть получены в стандартных формах или в виде жидких растворов или суспензий, твердых форм, подходящих для растворения или суспендирования в жидкости до инъекции, или в виде эмульсий. Еще недавно рассмотренный подход к парентеральному введению включает использование системы с медленным высвобождением или пролонгированным высвобождением, такой, которая поддерживает постоянный уровень дозировки. См., например, патент США 3710795, который включен в настоящий контекст путем ссылки.
Когда ингибиторы HIF-1α-пролилгидроксилазы должны быть доставлены млекопитающему, другому, чем человек, млекопитающим может быть не являющийся человеком примат, лошадь, свинья, кролик, собака, овца, коза, корова, кот, морская свинка или грызун. Термины человек и животное не означают конкретного возраста или пола. Таким образом, подразумевают, что охвачены взрослые и новорожденные субъекты, а также плоды, являются ли они мужского или женского рода. Термин «пациент», субъект, человек или млекопитающее относится к субъекту, страдающему от заболевания или нарушения. Термин «пациент» включает человека и животных.
Тогда как конкретные воплощения настоящего изобретения проиллюстрированы и описаны, квалифицированному специалисту в данной области должно быть очевидно, что различные другие изменения и модификации могут быть сделаны, не выходя за объем и сущность изобретения. Следовательно, подразумевают включение в прилагаемые пункты формулы изобретения всех таких изменений и модификаций, которые находятся в пределах настоящего изобретения.