МАЗЬ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КОЖНОГО ПЕЦИЛОМИКОЗА
OINTMENT FOR SKIN PECILOMYCOSIS

Изобретение относится к фармации, а именно к средствам на основе лекарственного растительного сырья, обладающим противогрибковым действием.
Пециломикоз - грибковое заболевание, обусловленное инфекцией различными видами условно-патогеных грибов рода Paecilomyces, описанное в работе М.А.Ахуновой (Ахунова A.M., Шустова В.И. Клинико-иммунологическая характеристика пециломикоза // Клиническая медицина. - 1991. №3. С.111-115).
Главным резервуаром пециломикозной инфекции в природе является почва, а в организме человека - кровь. Основные пути проникновения пециломикозной инфекции - респираторный, пероральный и трансплацентарный. Грибы рода Paecilomyces сапрофитируют в почве в виде мицелиальной формы, а при попадании в организм человека или животного трансформируются в тканевую паразитическую форму в виде сферул. Зрелая сферула этих грибов - округлые тельца с двухконторной оболочкой, внутри которой заключены эндоспоры. Размеры зрелых сферул варьируют от 10 до 29 мкм, эндоспор от 0,3 до 1,5 мкм. Заболевание сопровождается тяжелыми поражениями жизненно важных органов, которые могут привести к летальному исходу.
В оффицинальной медицине существует множество растений, обладающих противогрибковым действием, одним из них являются листья шалфея (Folia Salviae), которые содержат от 0,5% до 2,5% эфирного масла, в состав которого входит цинеол (до 15%), l-α-туйон, d-β-туйон, d-α-пинен, сальвен, d-борнеол (8-14%), d-камфора, цедрен. Кроме того, листья содержат дубильные вещества, флавоноиды, урсоловую и олеаноловую кислоты, витамин Р, никотиновую кислоту, горечи, фитонциды, уваол, парадифенол. В работе Dragan T. (Chemical Composition and Antimicrobial Characteristic of the Essential Oils Obtained from the Flower, Leaf and Stem of Salvia officinalis L. // Journal of Essential Oil Research. Vol.14, N6, 2002) была изучена антибактериальная активность масла на следующих микроорганизмах: Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Sarcina lutea, Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus niger. Выявлено, что концентрация масла, которая останавливала рост В. Subtilis, составляла 2%, St. Aureus - 0,2%, E. coli и Р. Aeruginosa - 4%. На другие штаммы микроорганизмов масло также оказывало антибактериальное действие.
Задачей изобретения является мазь для лечения кожного пециломикоза.
Поставленная задача решается мазью для лечения кожного пециломикоза, характеризующейся тем, что она содержит 9,0-10,0 г керосинового экстракта, полученного при настаивании в течение двух недель высушенных листьев шалфея лекарственного и авиационного керосина в соотношении 1-4:5, и вазелина до 100,0.
Нижеследующий пример иллюстрирует получение мази.
Методом мацерации в соотношении сырья и экстрагента 1-4:5 получают керосиновый экстракт из высушенных листьев шалфея лекарственного (влажность не более 14%). В стеклянный сосуд темного стекла с плотной крышкой помещают 5,0 высушенных измельченных листьев шалфея лекарственного (степень измельчения 10 мм), заливают авиационным керосином в количестве 25,0 и настаивают в течение 2-х недель в темном месте при периодическом помешивании. Затем полученное извлечение отфильтровывают.
Керосиновый экстракт из высушенных листьев шалфея лекарственного представляет собой прозрачную жидкость темно-зеленого цвета с резким специфическим запахом, которая содержит еще дополнительно 5 неидентифицированных соединений, по сравнению со спиртовым экстрактом шалфея лекарственного.
Далее на водяной бане расплавляют часть вазелина (40,0) и растворяют в нем керосиновый экстракт шалфея лекарственного (10,0). После этого добавляют оставшуюся часть вазелина (до 100,0) и перемешивают до образования однородной консистенции.
Испытание полученной мази на токсичность.
2
Эксперименты проводились на рандоинбредных белых крысах самцах (массой 210-220 г). Группы крыс составляли по 30 особей (по 10 на каждый срок обследования). Мазь шалфейно-керосиновая и чистый шалфейно-керосиновый экстракт наносились на выбритую поверхность кожи животных в количестве 0,2 г ежедневно в течение 30 дней. Площадь аппликации составляла 1 см. В течение первых 14-ти дней эксперимента у подопытных крыс не было зарегистрировано отклонений от контроля по всем биохимическим показателям. Однако после 30-дневного воздействия керосинового экстракта шалфея наблюдались обратимые признаки местно-раздражающего действия в виде гиперемии кожи и появления тонких корочек. При нанесении испытуемой мази такие явления носили единичный характер. При обследовании крыс после аппликации керосиновым экстрактом шалфея наблюдали изменения гематологических показателей (снижение цветового показателя и ускорение процессов свертывания крови). В группе крыс, которым наносилась испытуемая мазь, колебания гематологических и биохимических показателей не отличаются от контрольных групп животных.
Испытание на пециломикозную активность проводили, сравнивая эффективность шалфейно-керосиновой мази с низораловой мазью, используемой при кожном пециломикозе. Сравнение мазей проводили на 60 аутбредных белых крысах-самцах массой 210-230 г.
В общей сложности у 39-х крыс в эксперименте развился кожный пециломикоз. До начала лечения проводили гематологические и биохимические исследования крови животных (таблица 1, 3). Как видно из приводимых данных, у крыс, заразившихся кожным пециломикозом, отмечено в крови уменьшение количества эритроцитов, гемоглобина, общего белка и лейкоцитов, увеличение количества эозинофилов, глюкозы, активности АлАТ, АсАТ, ЩФ.
17 крыс лечили - шалфейно-керосиновой мазью, а 14 крыс - препаратом сравнения - низораловой мазью.
В течение 30 дней ежедневно у 17-ти крыс смазывались шалфейно-керосиновой мазью тонким слоем утром и вечером пораженные участки кожи. У всех животных исчезли фиолетовые участки и наступило выздоровление, такой же эффект получен при лечении 14 крыс низораловой мазью. У животных нормализовалась кровь в группе, которую лечили шалфейно-керосиновой мазью. В группе крыс, леченных низораловой мазью, не наступило нормализации показателей крови (таблицы 2, 4). Таким образом, в отличие от низораловой мази шалфейно-керосиновая мазь обеспечила воздействие не только на местный очаг инфекции, но и очаги, которые развились в легких.
Таблица 1
Результаты исследования крови крыс, зараженных пециломикозом, до применения шалфейно-керосиновой мази.
Показатели крови
До использования мази
контрольная группа, n=8
испытуемая группа, n=17
Гемоглобин, г/л
84,30±0,15
82,20±2,75
Эритроциты, ×10<sup>12</sup> л
3,90±0,18
3,85±0,45
Лейкоциты, ×10<sup>9</sup> л
7,45±0,54
7,54±0,42
Базофилы, %
1,10±0,20
2,10±0,20
Эозинофилы, %
9,60±0,30
9,50±1,70
Палочкоядерные, %
3,70±0,40
3,80±0,30
Сегментоядерные, %
20,50±0,90
19,50±0,80
Лимфоциты, %
61,6±1,40
61,90±1,40
Моноциты,%
3,50±0,30
4,20±0,30
Глюкоза, ммоль/л
9,56±0,40
9,23±0,30
Общий билирубин, мкмоль/л
47,70±0,50
46,40±0,30
Мочевина, ммоль/л
1,26±0,20
1,32±0,30
АлАТ, мкмоль/ч·л
4,59±0,30
4,75±0,20
АсАТ, мкмоль/ч·л
3,35±0,40
3,43±0,30
ЩФ, мкмоль/ч·л
11,15±0,75
11,24±1,40
Таблица 2
Результаты исследования крови крыс, зараженных пециломикозом, при изучении действия шалфейно-керосиновой мази.
Показатели крови
После 30-дневного применения новой мази
контрольная группа, n=8
испытуемая группа, n=17
Гемоглобин, г/л
86,70±3,50
149,50±5,10
Эритроциты, ×10<sup>12</sup> л
4,40±0,50
7,90±0,40
Лейкоциты, ×10<sup>9</sup> л
7,50±0,50
12,70±1,40
Базофилы, %
2,20±0,30
1,70±0,40
Эозинофилы, %
10,50±1,20
3,50±0,20
Палочкоядерные, %
3,70±0,30
3,50±0,40
Сегментоядерные, %
18,30±0,40
26,70±1,70
Лимфоциты, %
61,40±1,50
63,40±1,70
Моноциты, %
3,70±0,20
3,30±0,40
Глюкоза, ммоль/л
10,76±0,50
5,56±0,25
Общий билирубин, мкмоль/л
39,20±0,60
85,70±0,40
Мочевина, ммоль/л
1,23±0,20
3,20±0,40
АлАТ, мкмоль/ч·л
5,12±0,50
1,87±0,40
АсАТ, мкмоль/ч·л
4,12±0,40
0,75±0,07
ЩФ, мкмоль/ч·л
15,06±1,60
2,89±0,35
Таблица 3
Результаты исследования крови крыс, зараженных пециломикозом, до применения низораловой мази (препарат сравнения).
Показатели крови
До использования мази
контрольная группа, n=8
испытуемая группа, n=14
Гемоглобин, г/л
82,±0,20
88,40±3,10
Эритроциты, ×10<sup>12</sup> л
4,30±0,30
3,80±0,30
Лейкоциты, ×10<sup>9</sup> л
7,56±0,50
8,57±0,52
Базофилы, %
2,30±0,20
2,80±0,40
Эозинофилы, %
8,60±0,50
8,50±1,30
Палочкоядерные, %
2,70±0,30
2,70±0,30
Сегментоядерные, %
20,40±1,20
22,10±1,20
Лимфоциты, %
61,70±1,40
57,70±1,80
Моноциты,%
3,90±0,50
4,20±0,40
Глюкоза, ммоль/л
8,15±1,45
10,47±0,70
Общий билирубин, мкмоль/л
47,60±0,50
53,20±0,50
Мочевина, ммоль/л
1,29±0,50
1,35±0,40
АлАТ, мкмоль/ч·л
4,55±0,35
5,29±0,70
АсАТ, мкмоль/ч·л
3,35±0,40
3,65±0,40
ЩФ, мкмоль/ч·л
10,47±0,70
9,45±0,70
Таблица 4
Результаты исследования крови крыс, зараженных пециломикозом, при применении низораловой мази (препарат сравнения).
Показатели крови
После 30-дневного применения низораловой мази
контрольная группа, n=8
испытуемая группа, n=14
Гемоглобин, г/л
85,20±4,10
87,50±2,70
Эритроциты, ×10<sup>12</sup> л
4,50±0,40
4,30±0,50
Лейкоциты, ×10<sup>9</sup> л
7,60±0,50
8,10±0,50
Базофилы, %
2,20±0,30
2,40±0,30
Эозинофилы, %
10,70±1,20
10,70±1,20
Палочкоядерные, %
3,60±0,40
4,10±0,40
Сегментоядерные, %
18,80±0,70
21,70±1,30
Лимфоциты, %
61,90±1,70
57,20±1,70
Моноциты,%
3,20±0,40
4,70±0,50
Глюкоза, ммоль/л
9,36±0,60
9,49±0,70
Общий билирубин, мкмоль/л
39,20±0,80
49,20±0,80
Мочевина, ммоль/л
1,35±0,40
1,65±0,50
АлАТ, мкмоль/ч·л
4,75±0,50
5,15±0,50
АсАТ, мкмоль/ч·л
3,25±0,20
3,42±0,30
ЩФ, мкмоль/ч·л
12,42±1,30
9,95±0,70
Кроме того, в различных целях заражалось от больных пециломикозом животных 40 белых мышей массой 18-20 г различными способами введения культуры пециломицессов грибов: внутрибрюшинно, подкожно и просто внутрь. У 37-ми мышей были поражены грибами хвосты. Их разделили на три группы: 7 составили контрольную, которую не лечили (первая группа), 12 мышей, хвосты которых обрабатывались низораловой мазью (вторая группа), 18 мышей, хвосты которых смазывались шалфейно-керосиновой мазью. В течение 5 дней все 7 мышей первой группы погибли от пециломикоза. Во второй группе погибло 7 мышей на 6 и 7-й день после лечения, в третьей группе все 18 мышей выздоровели. Следовательно, шалфейно-керосиновая мазь обладает не только эффектом лечения кожного пециломикоза, но и выраженным противогрибковым действием.