Спектрально-люминесцентные свойства нанокомпозита на основе иттербиевого комплекса протопорфирина IX и лексан-полимерной матрицы для диагностики новообразований

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

119

чения эффективных лекарственных средств нового поколения, изучению их физико-химических, биологических, фармакологических, технологических свойств для внедрения в практическую медицину при лечении социально значимых заболеваний.

Изложены современные представления о химическом и ферментативном синтезе, выделении из природных источников, создании промышленных технологий получения фосфолипидов различных молекулярных видов. Приведены данные об их строении, биологической, физиологической активности, фармакологических свойствах и возможности использования этих данных для конструирования лекарственных и диагностических препаратов, среди которых особое место отводится липосомальным препаратам. Рассмотрены биофармацевтические технологии на основе фосфолипидов и их применение в разработке медицинских препаратов нового поколения. Сообщаются последние сведения об использовании наноконтейнеров для загрузки классических лекарственных препаратов при создании современных эффективных лекарственных форм для улучшения результатов лечения, создания направленного транспорта к очагам патологии, снижения токсичности, пролонгации действия, повышения растворимости препаратов. Среди названных контейнеров особо выделяются липосомы, наносомальные полимерные формы на основе полибутилцианоакрилатов или полилакти-дов, сферические аморфные наночастицы из тритерпено-идов бересты, нанопористого кремния. Приведены данные по исследованию их биологических и фармакологических свойств. Представлено современное состояние исследований в этой области.

В.М. Шелепова, З.Г. Кадагидзе ЗНАЧЕНИЕ CYFRA 21.1 В ДИАГНОСТИКЕ ПЕРЕХОДНО-КЛЕТОЧНОГО РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ И ВЕРХНИХ МОЧЕВЫВОДЯЩИХ ПУТЕЙ

ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

Введение. Диагностика рака мочевого пузыря (РМП) является непростой задачей: лишь у 40 % больных диагноз устанавливается в течение месяца после обращения к врачу. Есть основания считать, что РМП сопряжен с предраковыми изменениями слизистой оболочки всех мочевых путей. При РМП in situ часто также находят рак in situ мочеточника или рак почечной лоханки (10—60 % случаев). Основным методом диагностики является цистоскопия, но у 9—20 % больных ее проведение невозможно. Цитологическое исследование осадка мочи отличается недостаточной чувствительностью, особенно при высоко- и умеренно-дифференцированных опухолях. Особенностью РМП является то, что более половины пациентов страдают от рецидивов, и им показано длительное наблюдение. Частые обследования, включающие цистоскопию и биопсию, относятся к дорогостоящим и болезненным процедурам. В связи с этим опухолевые маркеры являются перспективным неинвазивным методом в ранней диагностике и лечении РМП и рака верхних мочевыводящих путей (РВМП).

Цель исследования — изучение целесообразности определения уровня CYFRA 21.1 в моче для диагностики РВМП, РМП и его рецидивов.

Материалы и методы. Для определения диагностической значимости СУБИА 21.1 концентрацию маркера измеряли в образцах мочи, полученных от 105 пациентов, которые были разделены на 7 групп по 15 человек в каждой: 1-я — первичные больные РВМП; 2-я — первичные больные РМП; 3-я — пациенты без признаков заболевания после трансуретральной резекции по поводу РМП; 4-я — больные с рецидивами РМП; контрольные группы: 5-я — здоровые доноры; 6-я — пациенты с мочекаменной болезнью (МКБ); 7-я — больные злокачественными опухолями почки. СУБИА 21.1 определяли в образцах утренней мочи электрохемилюминесцентным методом. Результаты нормировались на креатинин мочи.

Результаты. У здоровых доноров среднее значение СУБИА 21.1 составляло 0,159 (0,034-0,328) нг/мкМ креа-тинина; у пациентов с МКБ — 0,619 (0,065-2,459); у больных раком почки — 0,313 (0,073—0,635); у пациентов с РВМП — 48,1 (0,241—457,63), у больных РМП — 2,226 (0,172—210,75). По сравнению с контрольной группой онкологические больные отличались достоверно более высокой концентрацией СУБИА 21.1. При дискриминационном уровне 0,65 нг/мкМ креатинина диагностическая специфичность теста составила 87 %, диагностическая чувствительность в отношении РВМП — 87 %, в отношении РМП — 76 %. В отношении рецидивов РМП диагностическая специфичность составила 82 %, чувствительность — 75 %.

Заключение. СУБИА 21.1 является полезным маркером в диагностике РВМП, а также РМП и его рецидивов. Он не может использоваться в самостоятельном варианте, но может служить дополнительным средством при обследовании людей с высоким риском или с симптомами уро-телиального рака. У больных без признаков заболевания после трансуретральной резекции мониторинг на основе СУБИА 21.1 способствует снижению числа ненужных ци-стоскопий и раннему выявлению рецидива.

И.П. Шилов1, Н.П. Ивановская1, В.М. Маркушев1, В.Д. Румянцева1, К.С. Щамхалов1, А.В. Иванов2, С.А. Ивашов1 СПЕКТРАЛЬНО-ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ СВОЙСТВА НАНОКОМПОЗИТА НА ОСНОВЕ ИТТЕРБИЕВОГО КОМПЛЕКСА ПРОТОПОРФИРИНА IX И ЛЕКСАН-ПОЛИМЕРНОЙ МАТРИЦЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ НОВООБРАЗОВАНИЙ ФИРЭ им. В.А. Котельникова РАН, Фрязино, Московская область;

ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва

Введение. Иттербиевые комплексы порфиринов (ИКП) в последнее время привлекают все большее внимание исследователей, разрабатывающих люминесцентные способы детектирования злокачественных новообразований. Обладая, наряду с другими порфириновыми соединениями, достаточной туморотропностью, они в то же время имеют ряд преимуществ, главное из которых — снижение фотохимической активности. Однако недостатком этого вида металлопорфиринов является их сравнительно невысокая стабильность. Для увеличения диагностического потенциала ИКП необходимо повышать стабильность комплексов и изолировать их от тушащего действия водной среды.

№1 / том 15 / 2016

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

120 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

Цель исследования — изучить влияние дополнительного венной устойчивости, а ионы железа способствуют индук-комплексообразователя — триоктилфосфиноксида (ТОФО) ции выработки активных форм кислорода и инициации и наличия полимерной матрицы типа лексан на спектрально- апоптоза. В данной работе произведена конъюгация нано-люминесцентные характеристики иттербиевого комплекса частиц маггемита с отечественным противоопухолевым диметилового эфира протопорфирина IX (Yb-ДМЭ ПП IX). соединением цитестрола ацетатом (ЦА) и оценено цито-Материалы и методы. Осуществляли синтез лексановых статическое действие конъюгатов на модели клеток рака наночастиц, нагруженных Yb (acac) — ДМЭ ПП IX. Спект- шейки матки человека HeLa. рально-кинетические характеристики в диапазоне 800—1060 нм Цель исследования — сравнительный анализ цитоста-получали с помощью измерительного стробоскопического тической активности ЦА и его комплексов с наночастица-стенда с возбуждением в видимом диапазоне спектра. ми оксида железа на модели рака шейки матки человека Результаты. Используемые для синтеза наночастиц со- HeLa и действия комплексов на экспрессию митохондри-отношения органополимерной и водной фаз позволили альных белков апоптоза Bax и Bcl-2. получить частицы размером от 100 до 200 нм. Полидис- Материалы и методы. Цитотоксическую активность персность суспензий не превышала 11 %, средний диаметр соединений после инкубации с клетками в течение 48 ч частиц составил от 138 до 180 нм при изменении концен- оценивали методом МТТ по параметру IC50 — концентрации трации полимера от 100 до 200 мкг/мл реакционного объ- соединения, вызывающей гибель 50 % клеток. Экспрессию ема. Спектр возбуждения люминесценции Yb3+ во всех мРНК белков Bax и Bcl-2 определяли методом полимераз-исследованных системах представляет собой типичный ной цепной реакции в реальном времени на приборе спектр поглощения металлопорфирина. Спектры эмиссии BioRad IQ5 c интеркалятором SybrGreen. наночастиц в ближнем инфракрасном диапазоне подтвер- Результаты. Цитотоксичность конъюгатов ЦА с нано-ждают, что в них сохраняется типичный для люминесцен- частицами маггемита была в 4,6 раза выше, чем ЦА (р < ции ионов Yb3+ характер: наличие наиболее интенсивной 0,05). Экспрессия проапоптотического белка Вах в клетках полосы в области 980 нм и появление дополнительных HeLa при инкубации с конъюгатами увеличилась в 4,1 ра-полос в области 925 и 1010 нм. Интенсивность и время за по сравнению с контролем, а экспрессия антиапопто-жизни люминесценции иона Yb3+ растут по мере увеличе- тического белка Bcl-2 уменьшилась в 22,8 раза. ЦА как ния содержания ТОФО в полимерной матрице при сниже- самостоятельный препарат увеличивал экспрессию про-нии красной флуоресценции свободного основания пор- апоптотического белка Вах в 5,2 раза по сравнению с кон-фирина в диапазоне 600—720 нм. тролем, экспрессию антиапоптотического белка Bcl-2 по- Заключение. Синтезированы наночастицы на основе нижал в 7,7 раза по сравнению с контролем. лексана — поликарбонатного бисфенольного полимера, Заключение. При конъюгации ЦА с наночастицами с инкорпорированными в него иттербиевыми комплексами маггемита цитотоксичнось ЦА возрастает в 4,6 раза. Один ДМЭ ПП IX. Показано, что включение ИКП в полимер- из механизмов усиления цитостатического действия связан ную матрицу в присутствии дополнительного комплексо- с увеличением подавления экспрессии антиапоптотиче-образователя ТОФО способствует увеличению интенсив- ского белка Bcl-2. ности и времени жизни (вплоть до 17 мкс) люминесценции Yb3+ по сравнению со свободным комплексом. Размер Е.Д. Шишко1, А.А. Фильченков1, М.П. Завелевич1, синтезированных наночастиц (100—200 нм) предполагает Д.Ю. Блохин2, Н.Ф. Гамалея1 возможность их предпочтительного накопления в опухо- ВЛИЯНИЕ ПЛЮРОНИКА F127 левой ткани вследствие проникновения через дефекты НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ЛЕЙКОЗНЫХ КЛЕТОК эндотелия кровеносных сосудов опухоли. ЧЕЛОВЕКА К ФОТОДИНАМИЧЕСКОМУ ВОЗДЕЙСТВИЮ IN VITRO К.Е. Широких1, Т.А. Федотчева1, Н.Л. Шимановский1, ИЭПОР им. Р.Е. Кавецкого НАНУкраины, Киев, Украина: В.Н. Толкачев2, В.М. Ржезников3 2ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва ПОВЫШЕНИЕ ЦИТОСТАТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ Введение. Разработка подходов, направленных на пре-ЦИТЕСТРОЛА АЦЕТАТА ЗА СЧЕТ КОНЪЮГАЦИИ одоление или снижение устойчивости опухолевых клеток С НАНОЧАСТИЦАМИ МАГГЕМИТА к фотодинамической терапии, в том числе с использованием 1ГБОУВПО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» амфифильных триблоковых сополимеров, ингибирующих Минздрава России, Москва: выброс противоопухолевых препаратов через ABC-транспор-2ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва: теры, является новым направлением экспериментальной 3ФГБУЭНЦМинздрава России, Москва фотодинамической терапии. Ранее мы показали, что клетки Введение. Повышение избирательности действия про- Jurkat/A4 с фенотипом множественной лекарственной устой-тивоопухолевых средств и создание таргетных противо- чивости (МЛУ) оказываются более устойчивыми к фотоди-опухолевых препаратов является приоритетным направле- намическому воздействию с фотолоном (хлорин е6) по срав-нием в мировой фармакологии. Таргетного действия можно нению с клетками исходной линии Jurkat. достигнуть путем конъюгации препарата с магнитоуправ- Цель исследования — анализ цитотоксичности и индук-ляемыми наночастицами железа, что позволяет создать ции апоптоза в клетках Jurkat Т-лимфобластного лейкоза локально высокую концентрацию цитостатика. Кроме человека и сублинии Jurkat/A4 с фенотипом МЛУ при фо-того, конъюгация с наночастицами железа позволяет ми- тодинамическом воздействии с хлорином е6 в сочетании новать трансмембранные белки множественной лекарст- с плюроником F127.

№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ