КОНЬЮГАТЫ АМАТОКСИНА С УЛУЧШЕННЫМИ СВЯЗЯМИ

1. Конъюгат аматоксина формулы (I)
где:
R1 означает H или OH;
R2 означает H или OH;
2
R3 означает NH или OH;
1-6
R4 означает OH или OC алкил; и
R5 означает L-T, где L означает линкер; и T означает мишень-связывающий фрагмент.
2. Конъюгат аматоксина по п.1, где линкер соединен с мишень-связывающим фрагментом через фрагмент мочевины.
3. Конъюгат аматоксина по п.2, где мишень связывающий фрагмент соединен с линкером L через аминогруппу, имеющуюся в мишень-связывающем фрагменте, где указанная аминогруппа образует часть упомянутого фрагмента мочевины.
4. Конъюгат аматоксина по п.1, где линкер имеет длину от 1 до 8 атомов, в том числе от 1 до 6 атомов, более конкретно от 1 до 4 атомов и наиболее конкретно от 2 до 4 атомов.
5. Конъюгат аматоксина по п.2, где линкер имеет длину от 1 до 8 атомов, в том числе от 1 до 6 атомов, более конкретно от 1 до 4 атомов и наиболее конкретно от 2 до 4 атомов.
6. Конъюгат аматоксина по любому из пп.1-5, где линкер L представляет собой необязательно замещенные алкилен, гетероалкилен, алкенилен, гетероалкенилен, алкинилен, гетероалкинилен, циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен, гетероарилен, аралкилен, или гетероаралкиленовую группу.
7. Конъюгат аматоксина по любому из пп.1-5, где линкер L включает фрагмент, выбранный из следующих фрагментов: фрагмент дисульфида, простого эфира, амина, сложного эфира, карбоксамида, уретана и мочевины.
8. Конъюгат аматоксина по п.1, где мишень-связывающий фрагмент специфично связывается с эпитопом, который присутствует на опухолевых клетках, в том числе где мишень-связывающий фрагмент специфично связывается с эпитопом молекулы адгезии эпителиальных клеток (EpCAM).
9. Конъюгат аматоксина по п.2, где мишень-связывающий фрагмент специфично связывается с эпитопом, который присутствует на опухолевых клетках, в том числе где мишень-связывающий фрагмент специфично связывается с эпитопом молекулы адгезии эпителиальных клеток (EpCAM).
10. Конъюгат аматоксина по п.4, где мишень-связывающий фрагмент специфично связывается с эпитопом, который присутствует на опухолевых клетках, в том числе где мишень-связывающий фрагмент специфично связывается с эпитопом молекулы адгезии эпителиальных клеток (EpCAM).
11. Конъюгат аматоксина по п.5, где мишень-связывающий фрагмент специфично связывается с эпитопом, который присутствует на опухолевых клетках, в том числе где мишень-связывающий фрагмент специфично связывается с эпитопом молекулы адгезии эпителиальных клеток (EpCAM).
12. Конъюгат аматоксина по п.1, где мишень-связывающий фрагмент выбран из группы, состоящей из:
(i) антитела или его антиген-связывающего фрагмента;
(ii) антитело-подобного белка; и
(iii) аптамера нуклеиновой кислоты.
13. Конъюгат аматоксина по п.12, где мишень-связывающий фрагмент представляет собой антитело или его антиген-связывающий фрагмент, выбранный из: диатела, тетратела, нанотела, химерного антитела, деиммунизированного антитела, гуманизированного антитела и человеческого антитела.
2
14. Конъюгат аматоксина по п.12, где антиген-связывающий фрагмент выбран из группы, состоящей из Fab, F(ab′), Fd, Fv, одноцепочечного фрагмента Fv и Fvs с дисульфидными связями (dsFv).
2
15. Конъюгат аматоксина по п.13, где антиген-связывающий фрагмент выбран из группы, состоящей из Fab, F(ab′), Fd, Fv, одноцепочечного фрагмента Fv и Fvs с дисульфидными связями (dsFv).
16. Конъюгат аматоксина по любому из пп.1-5, 8-11 и 13-15 для применения в качестве лекарственного средства.
17. Конъюгат аматоксина по любому из пп.1-5, 8-11 и 13-15 для применения в лечении ракового заболевания у пациента, где указанное раковое заболевание выбрано из группы, состоящей из рака поджелудочной железы, холангиокарциномы, рака груди, колоректального рака, рака легких, рака простаты, рака яичников, рака желудка, рака почек, злокачественной меланомы, лейкемии и злокачественной лимфомы.
18. Фармацевтическая композиция, включающая конъюгат аматоксина по любому из п.п.1-17 и дополнительно включающая один или несколько фармацевтически приемлемых разбавителей, носителей, эксципиентов, наполнителей, связующих веществ, смазывающих веществ, средств, способствующих скольжению, дезинтегрирующих средств, адсорбентов и/или консервантов.
19. Молекула конъюгации с аматоксином формулы (I), где заместители R1-R4 соответствуют определениям, данным в п.1, и R5=L-X, где L означает линкер, и X представляет собой уходящую группу, которая может быть замещена нуклеофильной группой мишень-связывающего фрагмента.
20. Молекула конъюгации с аматоксином по п.19, где X означает уходящую группу, которая может быть замещена первичной аминогруппой.
21. Молекула конъюгации с аматоксином по п.19 или 20, где группа X выбрана из: т-бутилокси, сукцинимидилокси, 1-O-сукцинимидилокси-3-сульфоната (-сульфо-NHS), -O-(4-нитрофенилокси), -O-(3-нитрофенилокси), -O-(2,4-динтирофенилокси), -O-(2,4-дихлор-6-нитрофенилокси), -пентафторфенилокси, пентахлорфенилокси, -O-(2,4,5-трихлорфенилокси), -O-(3,4-дигидро-3-гидрокси-4-оксо-1,2,3-бензотриазин-3-ила), -O-(эндо-1-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксимид-1-ила), 1-фталимидоилокси, -1-бензотриазолилокси, -1-(7-азабензотриазолил)окси и -N-имидазолила.
22. Способ синтеза конъюгата аматоксина по любому из пп.1-17, включающий стадию взаимодействия молекулы конъюгации с аматоксином по любому из пп.19-21 с мишень-связывающим фрагментом, включающим нуклеофильную группу.
23. Способ по п.22, где указанная нуклеофильная группа представляет собой первичную аминогруппу.
24. Способ лечения ракового заболевания у пациента, включающий стадию введения указанному пациенту конъюгата аматоксина по любому из пп.1-17 или фармацевтической композиции по п.18.
25. Способ по п.24, где указанное раковое заболевание выбрано из группы, состоящей из рака поджелудочной железы, холангиокарциномы, рака груди, колоректального рака, рака легких, рака простаты, рака яичников, рака желудка, рака почек, злокачественной меланомы, лейкемии и злокачественной лимфомы.