СПОСОБЫ ДЕТЕКЦИИ АНТИ-ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНЫХ НЕЙТРАЛИЗУЮЩИХ АНТИТЕЛ

1. Способ, включающий стадии:
(i) смешивания сыворотки от субъекта, иммунизированного экспериментальной вакциной HCMV (human cytomegalovirus, цитомегаловирус человека), с HCMV, содержащим флуоресцентную метку, для получения смеси;
(ii) контакта клетки-хозяина, восприимчивой к инфекции HCMV, при условиях, подходящих для инфицирования смесью со стадии (i).
(iii) оценки уровня флуоресценции клетки-хозяина, находившейся в контакте с указанной смесью, методом проточной цитометрии; и
(iv) определения уровня инфицирования клетки-хозяина на основе измеренного уровня флуоресценции.
2. Способ по п. 1, где иммунизированный субъект является человеком.
3. Способ по п. 1, где сыворотка содержит нейтрализующие антитела к HCMV.
4. Способ по п. 1, где экспериментальная вакцина HCMV содержит ВПЧ (вирусоподобная частица).
5. Способ по п. 4, где ВПЧ содержит один или более из гликопротеинов gB, gH, gH-G и белка рр65 HCMV.
6. Способ по п. 1, где флуоресцентная метка представляет собой флуоресцентный белок.
7. Способ по п. 6, где флуоресцентный белок выбран из группы, состоящей из зеленого флуоресцентного белка, синего флуоресцентного белка, голубого флуоресцентного белка, желтого флуоресцентного белка и их комбинаций.
8. Способ по п. 6, где флуоресцентный белок представляет собой зеленый флуоресцентный белок.
9. Способ по п. 1, где HCMV, содержащий флуоресцентную метку, представляет собой вирусный штамм TB40-GFP.
10. Способ по п. 1, где HCMV, содержащий флуоресцентную метку, представляет собой вирусный штамм AD169-GFP.
11. Способ по п. 1, где смесь со стадии (i) инкубируют по меньшей мере 15 минут, по меньшей мере 30 минут, по меньшей мере 1 час или по меньшей мере 2 часа перед стадией (i¡).
12. Способ по п. 1, где клетка-хозяин, восприимчивая к инфицированию HCMV представляет собой фибробласт.
13. Способ по п. 12, где фибробласт представляет собой фибробласт крайней плоти человека (HFF).
14. Способ по п. 1, где клетка-хозяин, восприимчивая к инфицированию HCMV представляет собой эпителиальную клетку.
15. Способ по п. 14, где эпителиальная клетка представляет собой пигментированную эпителиальную клетку сетчатки (ARPE-19).
16. Способ по п. 1, где стадию оценки (iii) выполняют высокопроизводительным способом.
17. Способ по п. 1, где стадия оценки (iii) включает сравнение уровня флуоресценции со стандартным уровнем.
18. Способ по п. 17, где стандартный уровень представляет собой ранее определенный уровень.
19. Способ по п. 17, где стандартный уровень представляет собой параллельный стандартный уровень.
20. Способ по любому из пп. 1-19, дополнительно включающий определение титра нейтрализующих антител к HCMV в сыворотке по результатам стадии определения.
21. Способ по п. 20, дополнительно включающий оценку эффективности экспериментальной вакцины HCMV по результатам стадии определения.
22. Способ по п. 21, дополнительно включающий отбор экспериментальной вакцины HCMV в качестве вакцины, которая индуцирует нейтрализующие антитела, если уровень флуоресценции клетки-хозяина, находившейся в контакте с указанной смесью, ниже стандартного уровня флуоресценции.
23. Способ по п. 1, где стадия контакта (ii) включает инкубацию в течение по меньшей мере 1 часа, по меньшей мере 2 часов, по меньшей мере 3 часов, по меньшей мере 4 часов, по меньшей мере 5 часов, по меньшей мере 6 часов, по меньшей мере 7 часов или по меньшей мере 8 часов.
24. Способ по п. 1, где клетку-хозяина дополнительно наблюдают в течение инфицирования с помощью визуальной оценки клеточной морфологии (например, клеточного набухания и округления) или с помощью визуальной оценки флуоресценции (например, детектируя флуоресценцию с помощью устройства, такого как флуоресцентный микроскоп).
25. Способ по п. 24, где визуальная оценка клеточной морфологии включает наблюдение за клеточным набуханием и округлением.
26. Способ по п. 24, где визуальная оценка флуоресценции включает детекцию флуоресценции.
27. Способ по п. 26, где флуоресценцию детектируют с помощью флуоресцентного микроскопа.
28. Способ по п. 1, где оценивают уровень флуоресценции ядра клетки-хозяина.
29. Способ по п. 1, где оценивают уровень флуоресценции всей клетки-хозяина.
30. Способ по п. 1, дополнительно включающий стадию количественного определения уровня флуоресценции клетки-хозяина.