РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pPicZαA/BChE, СОДЕРЖАЩАЯ ГЕН БУТИРИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ ЧЕЛОВЕКА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БУТИРИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ ЧЕЛОВЕКА В МЕТИЛОТРОФНЫХ ДРОЖЖАХ PICHIA PASTORIS ДЛЯ ТЕРАПИИ ОТРАВЛЕНИЙ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИМИ ТОКСИНАМИ

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pPicZαA/BChE, кодирующая БуХЭ человека, состоящая из плазмиды pPicZαA и нуклеотидной последовательности синтетического гена БуХЭ человека, содержащая индуцибельный промотор гена алкогольоксидазы АОХ1 дрожжей P. pastoris дикого типа, нативный терминатор и сигнал полиаденилирования АОХ1 гена, последовательность гена Sh ble, продукт которого обеспечивает устойчивость трансформантов к антибиотику зеоцину, а также нуклеотидную последовательность сигнального пептида альфа-фактора из S.cerevisiae, необходимую для секреции экспрессируемых продуктов в культуральную среду.
2. Штамм-продуцент P. pastoris GS115/BChE/a2, полученный в результате трансформации клеток P. pastoris линии GS115 рекомбинантной плазмидной ДНК pPicZαA/BChE.
3. Способ получения бутирилхолинэстеразы человека на основе штамма-продуцента GS115/BChE/a2 в условиях кислотности культуральной среды рН 7.6, стартовой оптической плотности 3.0 о.е. и режиме добавления метанола: стартовая концентрация метанола 0.5%, 1 сут без внесения метанола (1 сут), через 48 ч - 0.1% (2 сут), через 72 ч и далее по 0.2% (3-7 сут).