АНТИТЕЛА К РЕЦЕПТОРУ ГЛЮКОКОРТИКОИД-ИНДУЦИРОВАННОГО ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ (GITR) И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Изолированное гуманизированное моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые связываются с человеческим рецептором глюкокортикоид-индуцированного фактора некроза опухоли (GITR), содержащие:
a. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4;
b. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8;
c. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12;
d. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16;
e. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20;
f. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24;
g. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28;
h. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32;
i. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36;
g. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40; или
k. вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 44.
2. Изолированное гуманизированное моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит:
(a) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 45, 46 или 47, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 48, 49 или 50;
(b) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 51, 52 или 53, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 54, 55 или 56;
(c) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 57, 58 или 59, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 60, 61 или 62;
(d) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 63, 64 или 65, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 66, 67 или 68;
(e) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 69, 70 или 71, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 72, 73 или 74;
(f) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 75, 76 или 77, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 78, 79 или 80;
(g) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 81, 82 или 83, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 84, 85 или 86;
(h) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 87, 88 или 89, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 90, 91 или 92;
(i) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 93, 94 или 95, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 96, 97 или 98;
(g) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 99, 100 или 101, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 102, 103 или 104; или
(k) вариабельную определяющую комплементарность область тяжелой цепи 1, 2 или 3 (VH-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 105, 106 или 107, соответственно; и вариабельную определяющую комплементарность область легкой цепи 1, 2 или 3 (VL-CDR), содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO. 108, 109 или 110,
где указанные антитело или антителосвязывающий фрагмент связываются с человеческим рецептором глюкокортикоид-индуцированного фактора некроза опухоли (GITR).
3. Антитело по п. 1, где указанное антитело является моновалентным или бивалентным.
4. Антитело по п. 1, где указанное антитело представляет собой одноцепочечное антитело.
-5
-12
5. Антитело по п. 1, где указанное антитело имеет аффинность связывания в интервале от 10 M до 10 M.
6. Антитело по п. 1, где указанное антитело имеет константную область тяжелой цепи IgG4.
7. Антитело по п. 1, где Fc область содержит мутации по положениям аминокислот 234 и 235.
8. Антитело по п. 7, где мутациями являются L234A и L235A.
9. Антитело по п. 1, где указанное антитело представляет собой биспецифическое антитело, которое также связывается с опухолеассоциированным антигеном, цитокином или рецептором клеточной поверхности.
10. Антитело по любому одному из предшествующих пунктов, связанное с терапевтическим средством.
11. Антитело по п. 10, где указанное терапевтическое средство представляет собой токсин, радиоактивную метку, миРНК, малую молекулу или цитокин.
12. Клетка, продуцирующее антитело по любому одному из пп. 1-11.
13. Способ истощения регуляторных Т-клеток у субъекта, включающий в себя введение нуждающемуся субъекту композиции, содержащей антитело по любому одному из пп. 1-11.
14. Способ усиления иммунного ответа на антиген, включающий в себя введение нуждающемуся субъекту композиции, содержащей антитело по любому одному из пп. 1-11.
15. Способ по п. 14, где указанный антиген представляет собой вирусный антиген, бактериальный антиген или опухолеассоциированный антиген.
16. Способ по п. 14, где указанное введение указанного антитела вызывает увеличение антигенспецифичной активности Т-клеток.
17. Способ по п. 14, где указанное введение указанного антитела вызывает увеличение цитотоксичности NK-клеток.
18. Способ по п. 14, дополнительно включающий в себя введение указанному субъекту IL-15.
19. Способ лечения или снятия симптома злокачественного новообразования, включающий в себя введение нуждающемуся субъекту композиции, содержащей антитело по любому одному из пп. 1-11.
20. Способ по п. 19, где указанное злокачественное новообразование является злокачественным новообразованием, в котором GITR или его лиганд, GITR-L, сверхэкспрессируется.
21. Способ по п. 20, включающий в себя дополнительное введение указанному субъекту цитокина или химиотерапевтического средства.
22. Способ по п. 21, где цитокин представляет собой IL-15.
23. Нуклеиновая кислота, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43.
24. Нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид с SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44.
25. Полипептид, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44.
26. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту п. 23 или 24.
27. Клетка, содержащая вектор по п. 26.