ЛЕЧЕНИЕ КАХЕКСИИ
CACHEXIA THERAPY

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Данная заявка заявляет приоритет по предварительной заявке на патент США №61/538309, поданной 23 сентября 2011 г.
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0002] Настоящее изобретение в целом относится к областям медицины, онкологии, обмена веществ и иммунологии. Более конкретно настоящее изобретение относится к применению средств, таких как антитела (Ab), которые специфически связываются с интерлейкином-1α (IL-1α), для лечения одного или нескольких симптомов кахексии.
ПРЕДПОСЫЛКИ
[0003] Кахексия представляет собой состояние, характеризующееся потерей веса, мышечной атрофией, анорексией, утомляемостью и слабостью. Оно обычно наблюдается у больных с хроническими прогрессирующими заболеваниями, такими как СПИД, гормональная недостаточность, хроническая обструктивная болезнь легких (COPD), застойная сердечная недостаточность (CHF), туберкулез (ТВ) и рак. При кахексии снижение употребления пищи по сравнению с расходом энергии приводит к потере веса. Даже при надлежащем парентеральном питании нарушения обмена углеводов, белков и жиров приводят к продолжительной мобилизации и неэффективному насыщению тканей организма. Физиологические механизмы, которые вызывают кахексию, остаются мало изученными, несмотря на то, что кахектин/TNF или другие воспалительные цитокины были достаточно изучены.
[0004] Парентеральное питание может помочь сохранить вес тела кахексичных больных, но не предотвратить потерю сухой мышечной массы. Стероиды (особенно прогестерон-подобные лекарственные средства) могут увеличить аппетит и обратить процесс утраты веса, хотя опять же нет доказательств, что они обращают потерю мышечной массы. Гуманизированные антитела к IL-6 оценивали в качестве средства для лечения кахексии в клиническом испытании с участием больных раком легкого. Антитела, как оказалось, являлись хорошо переносимыми и безопасными, уменьшали проявления легочных симптомов, снимали усталость и снижали скорость потери сухой массы тела. Однако они не обращали этот процесс.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
[0005] Настоящее изобретение основано на открытии того, что средство, которое специфически воздействует на IL-1α, может уменьшать проявления симптомов кахексии у больных людей - в том числе обращать процесс потери сухой массы тела (или сухой мышечной ткани (LBT)) и увеличивать время выживания онкологических больных, имеющих связанную с кахексией потерю сухой массы тела. Впервые показано, что целенаправленно воздействующее на цитокин средство может увеличить сухую массу тела у субъекта-человека с кахексией и увеличить выживание больных раком, имеющих связанную с кахексией потерю сухой массы тела.
[0006] Соответственно, настоящее изобретение предлагает способ лечения кахексии у субъекта-человека, предусматривающий введение субъекту фармацевтической композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель и некоторое количество целенаправленно воздействующего на IL-1α средства, эффективного для уменьшения интенсивности симптомов кахексии. Также в настоящее изобретение включен способ увеличения времени выживания субъекта-человека с кахексией путем введения субъекту фармацевтической композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель и некоторое количество целенаправленно воздействующего на IL-1α средства, эффективного для увеличения времени выживания субъекта.
[0007] Целенаправленно воздействующее на IL-1α средство может быть антителом к IL-1α, таким как моноклональное Ab к IL-1α (mAb). Ab к IL-1α может быть mAb, обозначаемым как MABp1 (описание этого антитела смотри в заявке на патент США 13/225029, поданной 2 сентября 2011 г.) или mAb, которое включает один или несколько определяющих комплементарность участков (CDR) MABp1.
[0008] Фармацевтическую композицию можно вводить субъекту путем инъекции, подкожно, внутривенно или внутримышечно. В способе доза, вводимая больному, может составлять по меньшей мере 0,05 (к примеру, по меньшей мере 0,05, 0,10, 0,25, 0,5, 0,75, 1, 2, 3, 4 или 5) мг/кг веса тела.
th
[0009] Если не определено иначе, все технические термины, используемые в этом документе, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в данной области, к которой принадлежит настоящее изобретение. Общепринятые определения биологических терминов можно найти в следующей литературе: Rieger et al., Glossary of Genetics: Classical and Molecular, 5th edition, Springer-Verlag: New York, 1991; и Lewin, Genes V, Oxford University Press: New York, 1994. Общепринятые определения медицинских терминов можно найти в Stedman's Medical Dictionary, 27 Edition, Lippincott, Williams & Wilkins, 2000.
2
[0010] Как используется в данном документе, "Ab" представляет собой иммуноглобулин (Ig), раствор идентичных или гетерогенных Ig или смесь Ig. "Ab" может также относиться к фрагментам и разработанным вариантам Ig, таким как Fab-, Fab'- и F(ab')-фрагменты; и scFv, гетероконъюгатам на основе Ab и аналогичным синтетическим молекулам, в которых используют полученные из Ig CDR, чтобы придать антигенную специфичность. "mAb" представляют собой Ab, экспрессированные одной клональной В-клеточной линией, или популяцию молекул Ab, которые содержат только один вид антигенсвязывающего центра, способного вступать в иммунную реакцию с определенным эпитопом определенного антигена. "Поликлональные Ab" представляют собой смесь гетерогенных Ab. Как правило, поликлональное Ab будет включать множество различных молекул Ab, которые связываются с определенным антигеном, причем по меньшей мере несколько различных Ab вступают в иммунную реакцию с различными эпитопами антигена. Как используется в данном документе, поликлональное Ab может представлять собой смесь двух или более mAb.
[0011] "Антигенсвязывающий участок" Ab содержится в вариабельной области Fab-участка Ab и представляет собой участок Ab, который обеспечивает антигенную специфичность Ab (т.е., как правило, трехмерный карман, образованный CDR тяжелых и легких цепей Ab). "Fab-участок" или "Fab-область" является фрагментом Ig, образованным в результате протеолитического расщепления папаином, который содержит антигенсвязывающий участок этого Ig. "Участок, не являющийся Fab" представляет собой такой участок Ab, который не входит в Fab-участок, например "Fc-участок" или "Fc-область". "Константная область" Ab представляет собой такой участок Ab, который находится за пределами вариабельной области. "Эффекторный участок" Ab, который является участком Ab, ответственным за связывание с другими компонентами иммунной системы, которые способствуют иммунному ответу, как правило, входит в константную область. Так, например, участок Ab, который связывается с компонентами комплемента или Fc-рецепторами (не посредством своего антигенсвязывающего участка), является эффекторным участком этого Ab.
[0012] По отношению к белковой молекуле, такой как Ab, выражение "очищенный" означает отделенный от компонентов, которые в природе сопутствуют таким молекулам. Как правило, Ab или белок очищен, если по меньшей мере приблизительно 10% (например, 9%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98%, 99%, 99,9% и 100%) по весу не содержат белков, не являющихся Ab, или других встречающихся в природе органических молекул, с которыми он связан в природе. Чистота может быть измерена с помощью любого подходящего способа, например колоночной хроматографии, электрофореза в полиакриламидном геле или с помощью HPLC-анализа. Химически синтезированный белок или другой рекомбинантный белок, продуцируемый в клетках типа, отличного от типа клеток, в которых он встречается в природе, является "очищенным".
d
5
6
7
8
9
10
11
12
[0013] Под выражениями "связывать", "связывается" или "реагирует с" подразумевают, что одна молекула распознает и прилипает к определенной второй молекуле в образце, но в основном не распознает и не прилипает к другим молекулам в образце. Как правило, Ab, которое "специфически связывается" с другой молекулой, характеризуется K большей чем приблизительно 10, 10, 10, 10, 10, 10, 10 или 10 л/моль в отношении этой другой молекулы.
[0014] "Терапевтически эффективным количеством" является количество, которое способно оказывать желаемый с медицинской точки зрения эффект у получавшего лечение животного или человека (например, уменьшение интенсивности или предупреждение заболевания или симптома заболевания или увеличение выживаемости или продолжительности жизни).
[0015] Хотя способы и материалы, подобные или эквивалентные описанным в данном документе, могут быть использованы при осуществлении на практике или тестировании настоящего изобретения, подходящие способы и материалы описаны ниже. Все публикации, заявки на патент, патенты и другие ссылочные материалы, упомянутые в данном документе, включены во всей своей полноте посредством ссылки. В случае конфликтной ситуации настоящее описание, в том числе определения, будет принято во внимание. Кроме того, конкретные варианты осуществления, рассматриваемые ниже, являются только иллюстративными и, как подразумевается, не являются ограничивающими.
ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0016] На фиг. 1 изображена кривая Каплана-Мейера, на которой показано время выживания среди больных и данные по увеличению LBT по результатам DEXA при скрининге и последующем наблюдении (n=18).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
[0017] Настоящее изобретение охватывает композиции и способы для уменьшения интенсивности одного или нескольких симптомов кахексии у субъекта и/или увеличения времени выживания субъекта с кахексией. Описанные ниже предпочтительные варианты осуществления иллюстрируют адаптацию этих композиций и способов. Тем не менее, из описания этих вариантов осуществления могут быть созданы и/или осуществлены на практике другие аспекты настоящего изобретения на основе описания, представленного ниже.
Общая методология
th
th
[0018] Способы, включающие традиционные иммунологические и молекулярно-биологические методики, описаны в данном документе. Иммунологические способы (например, анализы для обнаружения и локализации комплексов антиген-Ab, иммунопреципитация, иммуноблоттинг и т.п.) в целом известны в данной области и описаны в методических научных трудах, таких как Current Protocols in Immunology, Coligan et al., ed., John Wiley & Sons, New York. Методики молекулярной биологии, подробно описаны в научных трудах, таких как Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., vol. 1-3, Sambrook et al., ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 2001; и Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel et al., ed., Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York. Способы, связанные с Ab, описаны в Handbook of Therapeutic Abs, Dubel, S., ed., Wiley-VCH, 2007. Общие способы консервативного лечения описаны в McPhee and Papadakis, Current Medical Diagnosis and Treatment 2010, 49 Edition, McGraw-Hill Medical, 2010; и Fauci et al., Harrison's Principles of Internal Medicine, 17 Edition, McGraw-Hill Professional, 2008.
Лечение кахексии
[0019] Композиции и способы, описанные в данном документе, можно применять для лечения кахексии у субъекта-млекопитающего путем введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей некоторое количество целенаправленно воздействующего на IL-1α средства, эффективного для уменьшения по меньшей мере одного признака кахексии у субъекта и/или увеличения времени выживания субъекта-млекопитающего с кахексией (в частности, кахексией, связанной с раком). Субъектом-млекопитающим может быть любой субъект, страдающий кахексией, включая людей, собак, кошек, лошадей, крупный рогатый скот, овец, коз и свиней. Субъектом-человеком могут быть мужчины, женщины, взрослые, дети или пожилые люди (65 лет и старше). Субъектом-млекопитающим может быть субъект с раком (в частности, с метастатическим раком; солидными раковыми опухолями и формами рака со стадией II, III или IV), инфекцией HIV, ТВ, COPD, CHF, хронической почечной недостаточностью, гормональным нарушением, тяжелой травмой (например, ожогами), усиленным обменом веществ (например, устойчивым повышением сердечного ритма, превышающим нормальный для данного субъекта по меньшей мере на 6 уд./мин), чрезмерной активностью симпатической нервной системы, состоянием гипервоспаления (например, повышенными уровнями CRP, повышенными уровнями IL-6, повышенными уровнями TNFα и/или повышенными уровнями IFNγ), потерей веса >5 фунтов за предыдущих 2 месяца и/или ежедневным потреблением калорий из расчета <20 кал/кг. Субъектами с раком могут быть субъекты с ожидаемой продолжительностью жизни менее 24, 18, 12 или 6 месяцев. Субъектом также может быть субъект, который получает или получал лечение стероидами, пищевыми добавками и/или стимуляторами аппетита.
[0020] Любой симптом кахексии, интенсивность которого возможно уменьшить путем введения целенаправленно воздействующего на IL-1α средства, может быть мишенью. Примеры таких симптомов включают слабость, утомляемость, желудочно-кишечные расстройства, нарушения сна/бодрствования, боль, вялость, одышка, сонливость, депрессия, недомогание, анорексия, потеря веса, атрофия мышц и потеря сухой массы тела. Уменьшение, если его измерять в процентах, может составлять по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80 или 90%. Такие симптомы, как слабость, утомляемость, боль, вялость, депрессия и недомогание могут быть оценены с помощью методик, известных в данной области (например, с помощью тестов, таких как общая оценка качества жизни по EORTC, опросник депрессии Бека, шкала Занга для самооценки депрессии, шкала депрессии согласно Центру эпидемиологических исследований, шкала депрессии Гамильтона и самостоятельное предоставление сведений пациентом). Для оценки анорексии, мышечной массы или оценки сухой массы тела могут быть использованы сканирование посредством двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DEXA), анализ биоэлектрического сопротивления (BIA), непрямая калориметрия, ведение пищевого дневника и аналогичные известные способы.
[0021] Увеличенное время выживания субъекта-млекопитающего с кахексией может превышать по меньшей мере на 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150 или 200% ожидаемую продолжительность жизни субъекта. Предполагаемая продолжительность жизни субъекта с конкретным заболеванием, связанным с кахексией, может быть вычислена известными способами, например, путем усреднения накопленных данных. Предполагаемое время выживания больных раком может быть определено с помощью известных способов, например, как описано в Llobera et al., Eur. J. Cancer, 36: 2036, 2000 и McCusker et al., J. Chron. Dis., 37: 377, 1984.
Антитела и другие средства, целенаправленно воздействующие на IL-1α
9
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
[0022] Любое Ab подходящего типа или другое биологическое средство (например, слитый белок, включающий IL-1α-связывающий компонент, такой как рецептор IL-1), которое специфически связывается с IL-1α и уменьшает признаки кахексии у субъекта и/или увеличивает время выживания субъекта-млекопитающего с кахексией, может быть использовано в настоящем изобретении. Например, используемым Ab к IL-1α может быть mAb, поликлональное Ab, смесь mAb или фрагмент Ab или разработанная Ab-подобная молекула, такая как scFv. Ка Ab предпочтительно составляет по меньшей мере 1×10 М или более (например, более 9×10 М, 8×10 М, 7×10 М, 6×10 М, 5×10 М, 4×10 М, 3×10 М, 2×10 М или 1×10 М). В предпочтительном варианте осуществления в настоящем изобретении используют полностью человеческое mAb, которое включает (i) антигенсвязывающую вариабельную область, которая характеризуется очень высокой аффинностью связывания (например, по меньшей мере нано- или пикомолярную) с IL-1α человека, и (ii) константную область. Человеческое Ab предпочтительно представляет собой IgG1, хотя оно может относиться к другому изотипу, такому как IgM, IgA или IgE, или подклассу, такому как IgG2, IgG3 или IgG4. Одним примером особенно пригодного mAb является MABp1, специфичное в отношении IL-1α mAb IgG1, описанное в заявке на патент США с серийным номером 12/455458, поданной 1 июня 2009 года. Другими пригодными mAb являются mAb, которые включают по меньшей мере один, а предпочтительно все CDR MABp1. CDR могут быть определены в соответствии с известными способами, такими как описанные в Ofran et al., J. Immunol., 181: 6230, 2008; и Antibody Engineering Volume 2, 2d edition, Konterman and Dubel (eds), Springer, 2010.
[0023] Поскольку В-лимфоциты, которые экспрессируют Ig, специфичный в отношении IL-1α человека, встречаются в природных условиях у людей, в настоящее время предпочтительным является способ индуцирования mAb, предполагающий сначала выделять такой В-лимфоцит у субъекта, а затем иммортализировать его таким образом, что он сможет непрерывно реплицироваться в культуре. Субъекты, не имеющие большого количества встречающихся в природе В-лимфоцитов, которые экспрессируют Ig, специфичный в отношении IL-1α человека, могут быть иммунизированы одним или несколькими антигенами, IL-1α человека, для увеличения количества таких В-лимфоцитов. Человеческие mAb получают путем иммортализации клетки, секретирующей человеческое Ab (например, человеческой плазматической клетки). См., например, патент США №4634664.
[0024] В иллюстративном способе осуществляют скрининг одного или нескольких (например, 5, 10, 25, 50, 100, 1000 или более) субъектов-людей на наличие в их крови такого Ab, специфичного в отношении IL-1α человека. Те субъекты, у которых экспрессируется необходимое Ab, можно затем использовать в качестве доноров В-лимфоцитов. В одном возможном способе периферическую кровь получают от донора-человека, у которого имеются В-лимфоциты, которые экспрессируют Ab, специфичное в отношении IL-1α человека. Такие В-лимфоциты затем выделяют из образца крови, например, путем сортировки клеток (например, сортировки флуоресцентно-активированных клеток, "FACS", или сортировки клеток с помощью магнитных гранул), для того, чтобы отобрать В-лимфоциты, экспрессирующие Ig, специфичные в отношении IL-1α человека. Эти клетки затем можно иммортализировать путем вирусной трансформации (например, при помощи EBV) или путем слияния с другой иммортализованной клеткой, такой как клетка миеломы человека, в соответствии с известными методиками. В-лимфоциты этой популяции, которые экспрессируют Ig, специфичный в отношении IL-1α человека, затем могут быть выделены методами серийных разведений (например, клетки в лунках титрационного микропланшета, которые являются положительными в отношении Ig, специфичного в отношении IL-1α человека, отбирают и пересевают и процесс повторяют до тех пор, пока не будет выделена необходимая клональная линия). См., например, Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103, Academic Press, 1986. Предпочтительными являются те клональные клеточные линии, которые экспрессируют Ig, характеризующиеся по меньшей мере наномолярной или пикомолярной аффинность связывания с IL-1α человека. MAb, секретируемые этими клональными клеточными линиями, могут быть очищены из культуральной среды или биологической жидкости (например, асцитической) с помощью традиционных процедур очистки Ig, таких как осаждение солями, эксклюзионная, ионообменная и аффинная хроматография.
2
2
[0025] Хотя иммортализованные В-лимфоциты можно использовать в культурах in vitro для непосредственного получения mAb, в некоторых случаях может быть необходимо использовать гетерологичные системы экспрессии для получения mAb. См., например, способы, описанные в заявке на патент США №11/754899. Например, гены, кодирующие mAb, специфичные в отношении IL-1α человека, можно клонировать и вводить в вектор экспрессии (например, вектор экспрессии на основе плазмиды) для экспрессии в гетерологичной клетке-хозяине (например, клетках СНО, клетках COS, клетках миеломы и клетках E.coli). Благодаря тому что Ig включают тяжелую (Н) и легкую (L) цепи в конфигурации HL, гены, кодирующие каждую из них, могут быть отдельно выделены и экспрессированы в разных векторах.
[0026] Химерные mAb (например, "гуманизированные" mAb), которые представляют собой антигенсвязывающие молекулы, имеющие различные участки, полученные от различных видов животных (например, вариабельная область Ig мыши, слитая с константной областью Ig человека), можно использовать в настоящем изобретении, несмотря на то что они обычно являются менее предпочтительными в связи с большей вероятностью того, что у субъекта разовьется ответ против Ab. Такие химерные Ab могут быть получены способами, известными в данной области. См., например, Morrison et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA, 81: 6851, 1984; Neuberger et al., Nature, 312: 604, 1984; Takeda et al., Nature, 314: 452, 1984. Аналогичным образом, Ab могут быть гуманизированы способами, известными в данной области. Например, mAb с желаемой специфичностью связывания могут быть гуманизированы различными производителями или как описано в патентах США №5693762; №5530101 или 5585089.
[0027] Можно обеспечивать созревание аффинности MAb, описанных в данном документе, для того чтобы повышать или иным образом изменять их специфичность связывания посредством известных способов, таких как шаффлинг VH- и VL-доменов (Marks et al. Bio/Technology 10: 779-783, 1992), случайный мутагенез остатков гипервариабельных (HVR) и/или каркасных областей (Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci. USA 91: 3809-3813, 1994; Schier et al. Gene 169: 147-155, 1995; Yelton et al. J. Immunol. 155: 1994-2004, 1995; Jackson et al., J. Immunol. 154(7): 3310-9, 1995; и Hawkins et al, J. Mol. Biol. 226: 889-896, 1992). Варианты аминокислотной последовательности Ab могут быть получены путем внесения соответствующих изменений в нуклеотидную последовательность, кодирующую Ab. Кроме того, модификации в последовательностях нуклеиновых кислот, кодирующих mAb, могут быть внесены (например, без изменения аминокислотной последовательности mAb) для увеличения получения mAb в определенных системах экспрессии (например, устранение интронов и/или оптимизация кодонов для данной системы экспрессии). MAb, описанные в данном документе, могут также быть модифицированы путем конъюгации с другим белком (например, другим mAb) или небелковой молекулой. Например, mAb может быть конъюгировано с водорастворимым полимером, таким как полиэтиленгликоль, или углеродной нанотрубкой (см., например, Kam et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102: 11600-11605, 2005). См. заявку на патент США №11/754899.
[0028] Предпочтительно для того, чтобы обеспечить введение высоких титров mAb, специфичного в отношении IL-1α человека, субъекту с минимальными побочными эффектами, композиции mAb по настоящему изобретению являются по меньшей мере на 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,9 или более процентов по весу чистыми (не включающими какие-либо наполнители). Композиции mAb по настоящему изобретению могут включать только один тип mAb (т.е. тип mAb, полученный из одной клональной линии В-лимфоцитов) или могут включать смесь двух или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более) различных типов mAb.
[0029] В то время как Ab, специфичные по отношению к IL-1α, описанные выше, являются предпочтительными для использования в настоящем изобретении, в некоторых случаях другие средства, которые специфически воздействуют на IL-1α, могут быть использованы, если их введение приводит к уменьшению признаков кахексии. Эти другие средства могут включать небольшие органические молекулы, аптамеры, пептиды и белки, которые специфически связываются с IL-1α (например, анакирна или рилонацепт).
Фармацевтические композиции и способы
[0030] Композиции Ab к IL-1α можно вводить животным или людям в фармацевтически приемлемых носителях (например, стерильном физиологическом растворе), которые выбраны на основе способа и пути введения и стандартной фармацевтической практики. Список фармацевтически приемлемых носителей, а также фармацевтических составов можно найти в Remington's Pharmaceutical Sciences, стандартном руководстве в данной области, и в USP/NF. Другие вещества могут быть добавлены в композиции и осуществлены другие этапы для стабилизации и/или сохранения композиций и/или для облегчения введения их субъекту.
[0031] Например, композиции Ab могут быть лиофилизированы (см. Draber et al., J. Immunol. Methods. 181: 37, 1995; и PCT/US 90/01383); растворены в растворе, содержащем ионы натрия и хлорид-ионы; растворены в растворе, содержащем один или несколько стабилизирующих средств, таких как альбумин, глюкоза, мальтоза, сахароза, сорбит, полиэтиленгликоль и глицин; отфильтрованы (например, с помощью 0,45 и/или 0,2-микронного фильтра); приведены в контакт с бета-пропиолактоном и/или могут быть растворены в растворе, содержащем бактерицидное средство (например, детергент, органический растворитель и смесь детергента и органического растворителя).
[0032] Композиции Ab можно вводить животным или людям любым подходящим способом. Как правило, такое введение будет парентеральным (например, внутривенным, подкожным, внутримышечным или внутрибрюшинным введением). Композиции можно также вводить непосредственно в целевую зону путем, например, инъекции. Другие способы доставки, например доставка с помощью липосом или диффузия из устройства, пропитанного композицией, известны в данной области. Композицию можно вводить в виде одного болюса, многократных инъекций или путем непрерывной инфузии (например, внутривенно или путем перитонеального диализа).
[0033] Терапевтически эффективным количеством является количество, которое способно оказывать желаемый с медицинской точки зрения эффект у получавшего лечение животного или человека. Эффективным количеством композиций Ab к IL-1α является количество, которое проявляет клиническую эффективность у пациентов, которую оценивают уменьшением одного или нескольких признаков кахексии, описанных выше. Как хорошо известно в области медицины, дозировка для любого животного или человека зависит от многих факторов, включая размер субъекта, площадь поверхности тела, возраст, конкретную композицию, которую предполагается вводить, пол, время и путь введения, общее состояние здоровья и другие лекарственные средства, вводимые одновременно. Предпочтительные дозы находятся в диапазоне от приблизительно 0,2 до 20 (например, 0,05, 0,10, 0,15, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20 или 40) мг/кг веса тела. Дозу можно вводить повторно, например один раз в час, один раз в день, два раза в неделю, один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели или один раз в месяц. Предпочтительно вводят 2 или более (например, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более) доз.
ПРИМЕРЫ
TM
Пример 1 - Xilonix
TM
[0034] Xilonix представляет собой стерильный жидкий состав для инъекций, содержащий 15 мг/мл MABp1 в стабилизирующем изотоническом буфере (pH 6,4). Каждый 10-мл флакон сыворотки из боросиликатного стекла I типа содержит 4, 5 или 10 мл состава и запечатан с помощью 20-мм пробки из бутиловой резины от Daikyo Flurotec и отламывающейся алюминиевой крышки. Продукт хранится при 5±3°C, допускаются отклонения до комнатной температуры. Точный состав лекарственного средства приведен ниже.
Способ введения
[0035] Рассчитанный объем отбирают из флакона (ов), содержащего (содержащих) лекарственное средство (mAb), с помощью подходящего шприца. Лекарственное средство затем вводят инъекцией в небольшой мешок для IV введения, содержащий 100 мл физиологического раствора (0,9% NaCl) и перемешивают, переворачивая. Разбавленный лекарственный препарат можно хранить при комнатной температуре в течение 3 часов до введения и проводить инфузию в течение 1-часового периода, осуществляют наблюдение субъекта на предмет признаков реакции на инфузию. Инфузию вытесняют по меньшей мере 30 мл физиологического раствора, чтобы доставить любой продукт, который мог удерживаться в инфузионном наборе.
[0036] Пример 2. Улучшения относительно композиции тела, употребления пищи и качества жизни у больных с поздними стадиями рака на фазе I исследования MABp1, полностью человеческого моноклонального антитела к IL-1α.
[0037] Предпосылки. Провоспалительный цитокин IL-1α играет важную роль в синдроме анорексии-кахексии, сложном нарушении обмена веществ, связанном с потерей мышечной массы и патологической воспалительной реакцией. MABp1 представляет собой первое полностью человеческое моноклональное антитело к IL-1α с высокой степенью аффинности в отношении его. Был определен эффект MABp1 в отношении композиции тела, употребления пищи и качества жизни в когорте больных фазы I.
[0038] Способы. I фазу открытого испытания, впервые проводимого на людях, по изучению MABp1 проводили с участием больных с резистентным метастатическим заболеванием, у которых не достигли эффекта с помощью в среднем 5 режимов предшествующей терапии и у которых не осталось варианта терапии, который бы, как ожидалось, обеспечил бы эффект. Пациентам вводили MABp1 внутривенно в дозе, соответствующей одному из 4 уровней (0,25, 0,75, 1,25, 3,75 мг/кг), один раз в 3 недели. Для оценки анорексии-кахексии использовали серийные данные сканирования посредством двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DEXA), анализа биоэлектрического сопротивления (BIA), непрямой калориметрии, пищевых дневников и опросника качества жизни Европейской организации исследования и лечения рака (EORTC QLQ-C30). Композицию тела, употребление пищи и качество жизни сравнивали между исходным уровнем и циклом 3.
2
[0039] Предварительные результаты. Исходными характеристиками 36 включенных в исследование больных были: средний возраст 60, женщин 20 (56%), колоректальные злокачественные новообразования 14 (40%), медианный вес 61 кг (межквартильный размах 57-80 кг), медианное значение индекса массы тела 24 (21-29 кг/м) и 32/33 (97%) с повышенным обменом веществ. Из 24 больных, которые были повторно обследованы, была достигнута общая частота ответа 37% (9/24) в соответствии с критериями RECIST (определяемых как стабилизация заболевания или улучшение в течение ≥3 месяцев). Из этих 24 больных 18 выполнили в соответствии с графиком сканирование DEXA как при скрининге, так и в течение 8-недельного последующего наблюдения с целью оценки. Анализ исходных и последующих данных сканирования DEXA позволил сделать существенное открытие, что у большинства больных наблюдалась инверсия кахексии. При последующем наблюдении у 67% (12/18) больных наблюдалось объективное увеличение сухой мышечной ткани (LBT). См. Таблицу 1 ниже. У больных, ответивших на лечение, наблюдалось среднее увеличение LBT 1,57±1,95 кг (p=0,017) по сравнению с их исходными значениями. С другой стороны, среднее изменение LBT среди 6 больных, не ответивших на лечение, составило -0,82±0,47 кг. Увеличение LBT у больных, ответивших на лечение, по сравнению с больными, не ответившими на лечение, составило 2,39±1,7 кг (p=0,001).
[0040] Выводы. Как известно, инверсия потери LBT не происходит у больных с резистентным метастатическим заболеванием. В литературе отсутствуют сообщения о средстве, способном обеспечивать увеличение LBT при резистентном метастатическом заболевании. В текущем исследовании у большинства больных, которые были включены в исследование, наблюдалась значительная потеря массы тела до включения. Тем не менее несколько больных, ответивших на лечение, набрали достаточный LBT по прошествии 8 недель лечения, что привело к большей массе тела, чем та, которая наблюдалась за 26 недель до начала исследования.
[0041] Примечательно, что те больные, которые набрали LBT во время лечения, также в среднем потеряли 0,4 кг жировой массы. Прирост сухой мышечной ткани с одновременной потерей жировой массы в значительной мере указывает на кардинальные перемены в регуляции использования энергии обмена веществ - начиная с мобилизации мышц в качестве источника энергии и заканчивая утилизацией жиров и синтезом мышечной ткани.
[0042] Другие результаты. У 7/14 (50%) больных с данными BIA также наблюдалось увеличение мышечной массы (медиана 1,4 кг, Q1-Q3 1,1-1,8 кг). Ежедневное среднее потребление калорий увеличилось у 8/13 (62%) больных на медианное значение 362 ккал (Q1-Q3 234-922 ккал). При сравнении исходных данных и данных цикла 3 аппетит согласно EORTC улучшился у 5/20 (25%) больных (медианное значение улучшения 33/100, Q1-Q3 33-33) и остался прежним у остальных 15/20 (75%) больных. Общее качество жизни согласно EORTC улучшилось у 7/20 (36%) (медианное значение улучшения 20/100, Q1-Q3 8-25) и осталось прежним у 8/20 (40%) больных.
Пример 3. Анализ когорты колоректальной формы.
[0043] У большинства больных, включенных в испытание и получавших лечение в испытании, описанном в Примере 2, имелся резистентный метастатический колоректальный рак (14 из 42). Из 18 субъектов, которых оценивали с помощью DEXA, у 7 имелась метастатическая колоректальная карцинома и 5 из этих 7 ответили увеличением LBT. Среднее увеличение LBT для всех этих 7 субъектов составило 3%, а для тех, кто ответил, среднее увеличение составило 4,6%. У субъектов, включенных в данное испытание, также оценивали реакцию опухоли с использованием RECIST 1.1. В связи с этим некоторые субъекты прекратили участие из-за радиографического подтверждения прогрессирования заболевания. Среди 14 субъектов с колоректальной карциномой медианное значение продолжительности жизни составляло 129 дней (4,3 месяца), при этом 4 отдельных значения были отброшены. У 10/14 (71%) больных, которые получали по меньшей мере 3 дозы исследуемого лекарственного средства, медианное значение длительности выживания составляло 224 дня (7,5 месяцев). Медианное значение длительности выживания также сильно коррелировало с увеличением LBT. У 5 (36%) больных, у которых имелись объективные свидетельства увеличения LBT в неделю 8 по сравнению с исходным значением, медианное значение длительности выживания составляло 474 дня (15,8 месяцев). С другой стороны, у 9 больных, у которых не наблюдалось никаких свидетельств увеличения LBT, медианное значение времени выживания составляло 72 дня (2,4 месяца). Исходя из данных исследований, проведенных в аналогичных популяциях, ожидаемое общее время выживания для больных с резистентным колоректальным раком составляет приблизительно 4,6 месяца (Jonker, D., et al. Cetuximab for the Treatment of Colorectal Cancer. N Engl J Med 2006; 357: 2040-8).
Пример 4. Краткое изложение более поздних результатов в отношении выживания в более поздний момент времени
[0044] В общей сложности 42 больных (57% женщин, медианный возраст 61 год) с поздней стадией рака, резистентного в среднем к 5 предыдущим схемам системной химиотерапии, были включены в исследование, описанное в Примере 2. Колоректальная карцинома, как было установлено, являлась наиболее распространенной злокачественной опухолью, обнаруживаемой у трети (14/42) от общей численности популяции исследования. В то время как 23 (55%) больных завершили 3 или более циклов, были получены исходные данные измерений DEXA и данные измерений DEXA в конце цикла 3 для 18 больных. В общей сложности было зарегистрировано 18/42 (43%) смертельных исходов по данным анализа. Средняя длительность выживания составляла 278±38 дней при срединном значении времени выживания 161 день.
Пример 5. Время выживания больных, ответивших на лечение, по сравнению с таковым больных, не ответивших на лечение
[0045] В исследовании, описанном в Примере 2, в общей сложности 18 больным провели измерение DEXA, осуществляемое при скрининге и на день 15 цикла 3, из которых 12/18 (67%) были ответившими на лечение (изменение LBT ≥0 кг). Как показано на Фиг. 1, общая длительность выживания среди больных, ответивших на лечение, составляла 377±286 (в среднем 339) дней и 313±226 (медианное значение 277) дней для субъектов, не ответивших на лечение. В группе ответивших на лечение данные 8 больных были отброшены, и имели место 4 случая смерти. Среди не ответивших на лечение 5/6 больных умерли (логранговый критерий, p=0,143).
Другие варианты осуществления
[0046] Следует понимать, что в то время, как настоящее изобретение было описано в сочетании с его подробным описанием, вышеприведенное описание предназначено для иллюстрации и не ограничивает объем настоящего изобретения, которое определено объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации охвачены объемом следующей формулы изобретения.