СПОСОБ ОБЕЗВРЕЖИВАНИЯ ЛИЧИНОК ТРИХИНЕЛЛ МЕТОДОМ ЗАМОРАЖИВАНИЯ В ТУШКАХ НЕКОТОРЫХ ПУШНЫХ ЗВЕРЕЙ
METHOD OF NEUTRALISATION OF TRICHINELLA LARVAE BY FREEZING IN THE CARCASS OF SOME FUR-BEARING ANIMALS

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к ветеринарной гельминтологии и санитарии, и может быть использовано для дезинвазии туш некоторых промысловых зверей от трихинеллезной инвазии. Метод обезвреживания также может использоваться в кормопроизводстве при приготовлении привады или кормов из мясного сырья, инвазированного личинками трихинелл как в питомниках охотхозяйств, так и на особо охраняемых территориях.
Трихинеллез - опасное паразитарное заболевание всеядных, плотоядных животных и человека, вызываемое мелкой нематодой рода Trichinella.
Взрослые трихинеллы паразитируют в кишечнике, а их личинки в мышцах. Заражение животных происходит при поедании ими трихинеллезного мяса. В желудке мясо переваривается, и личинки освобождаются из мышц. За два дня они становятся взрослыми, оплодотворяются, после этого самцы погибают, а самки в тонком отделе кишечника внедряются в подслизистую и прикрепляются. На 3-4 день с момента заражения животного самки рождают живых личинок. Током крови личинки разносятся по организму, но развиваются только те из них, которые попадают в поперечно-полосатые мышцы. В мышцах они растут, развиваются, скручиваются в спираль, достигают инвазионной стадии, делая к 25-30 дню с момента заражения два-три витка, а затем замуровываются в капсулу. В таком виде личинки сохраняют свою жизнеспособность до 25 лет. Величина капсул с трихинеллами 0,3-0,4 мм. С целью предупреждения случаев заражения человека зоонозом во многих странах мира изданы специальные законы, категорически запрещающие продажу мяса без предварительной ветеринарно-санитарной экспертизы, и проводится комплекс профилактических мероприятий по обезвреживанию мяса от возбудителя трихинеллеза высокими и низкими температурами или уничтожением [1, 2, 5].
Трихинеллы довольно стойки в тушках убитых и трупах павших инвазированных животных, эти паразиты длительное время (до 5 месяцев и более), не теряя инвазионной способности, переносят зимние холода. При обработке мяса в больших кусках высокой температурой или запекании окороков погибают не все трихинеллы. Существующие способы приготовления шашлыков, колбас и окороков, включая соление, копчение и варку, не могут гарантировать умерщвления трихинелл. Только при температуре в глубоких слоях свинины не ниже плюс 80°C можно надежно обезвредить трихинеллезное мясо.
Долгое время считалось, что низкие температуры не убивают личинок трихинелл в мясе, хотя и действуют на них неблагоприятно. Дикие хищные млекопитающие часто бывают заражены устойчивыми к низким температурам личинками трихинелл. При замораживании в бытовых холодильниках при температуре минус 12°C мяса диких животных личинки трихинелл отдельных холодостойких изолятов трихинелл длительное время остаются жизнеспособными и инвазионными.
Согласно рекомендациям международной комиссии по трихинеллезу (МКТ) [2] для инактивации личинок трихинелл Trichinella spiralis в свинине минимальное время замораживания при минус 17,8°C составляет 106 часов, при минус 23,3°C - 63 часа, а при минус 28,9°C - 35 часов. Замораживание свинины при минус 15°C в зависимости от величины кусков рекомендуется проводить не менее 3-4 недель.
СанПиН 3.2.1333-03 регламентирует замораживание свиных туш при температуре воздуха в камере минус 12°C в течении 10 суток.
Разработка качественного и быстрого способа обезвреживания тушек промысловых животных от трихинеллезной инвазии является актуальной задачей на сегодняшний день по профилактике гельминтозооноза.
Известны способы обезвреживания личинок трихинелл в мышечной ткани: низкими и высокими температурами, посредством соления и копчения, вакуумной сушкой, растворами кислот и щелочей, ионизирующей радиацией, СВЧ-излучением, ультразвуком, с помощью электрических разрядов, высушиванием и длительным хранением мяса. Недостатками применения указанных способов обезвреживания являются длительная экспозиция во времени, наименьшая эффективность обезвреживания, невозможность дальнейшей технологической переработки тушек или требуют дополнительной переработки (измельчения мышечной ткани, рубки на полутуш, измельчение кусков мяса не более 8 см толщиной) для обезвреживания.
Наиболее близким способом является физический метод обезвреживания низкими температурами [5]. Согласно рекомендациям по обезвреживанию свинины, мясных боенских отходов и тушек пушных зверей при обнаружении трихинелл в первой серии опытов (по А.С. Бессонову, 1966) обезвреживание не устойчивых к низким температурам личинок трихинелл проводили только в свином мясе (в обезглавленных и первично обработанных тушах (поросят 3-9,5 мес) и полутушах (свиноматок 14-24 мес) свиней), в приведенных опытах использовали эффективную температуру обезвреживания до минус 50°C.
Цель настоящего изобретения - разработка более быстрого и эффективного способа обезвреживания устойчивых к замораживанию личинок трихинелл в тушках промысловых пушных зверей без проведения дополнительной технологической обработки мясного сырья (разрубки, измельчения в фарш). Второстепенной задачей изобретения была разработка безопасного способа скармливания мясного сырья, которое прекращало бы распространение трихинеллеза с тушками животных, и за счет этого постепенно улучшались санитарно-гигиенические условия и решались некоторые вопросы охраны окружающей среды в питомниках, охотугодьях и на особо охраняемых территориях. А также осуществлялась бы профилактика трихинеллеза у домашних животных, в частности у собак охотничьих, сторожевых, служебных пород.
Сущность изобретения состоит в том, что под действием низкой температуры (минус 70°C) происходит повреждение кристаллами льда клеточных мембран кутикулы личинок гельминта, деструкция внутренних органов и систем паразита, который локализован в капсуле мышечного волокна тушки животного. После воздействия этой температуры личинки трихинелл довольно быстро становятся нежизнеспособны. Этот способ не требует дополнительной подготовки инвазионных тушек для обезвреживания после снятия шкуры. Более того, мышечную ткань обезвреженных тушек животных можно использовать без ограничений в кормлении пушных зверей и птиц, а также для технической переработки (на мясокостную муку) [3].
Предложенный способ обезвреживания мясопродуктов для профилактики трихинеллеза у охотничье-промысловых животных путем глубокой заморозки инвазированных трихинеллами, идущих на корм животных, прост по исполнению, технически осуществим как в лабораториях ветеринарно-санитарной экспертизы, так и на кормокухнях зверохозяйств или в домашних условиях, где есть низкотемпературные морозильники или морозильные камеры. Способ не требует специальной подготовки обслуживающего персонала, так как морозильники используется по своему прямому назначению (глубокая заморозка тушек), а требует только выдерживания предложенных заданных технологических параметров - времени заморозки, веса обрабатываемых мясопродуктов.
Эффективность предлагаемого способа обезвреживания личинок трихинелл в тушках некоторых пушных зверей отражена в следующих примерах.
Пример 1. Устойчивость к низким температурам личинок трихинелл в мышечной ткани обыкновенной лисицы. При изучении резистентности к низким температурам личинок трихинелл, выделенных от обыкновенной лисицы, отстрелянной в Рязанской области, выяснилось, что они долгое время сохраняли жизнеспособность и инвазионность. Тушка лисицы была разделена на пробы толщиной 2-5 см и весом не более 15 г, которые поместили в морозильные камеры при минус 16°C и 23°C. Пробы исследовали через 8, 19, 42, 78, 107, 134, 157 и 192 суток непрерывного замораживания при этих температурных режимах.
При изучении установили, что при замораживании мышечных проб от лисицы обыкновенной при минус 16°C в течение 107 суток количество жизнеспособных личинок трихинелл снизилось с 96% в начале опыта до 80%, а при минус 23°C до 65%. Личинки трихинелл в течение этого периода сохраняли инвазионность, что подтверждалось результатами биопробы на белых мышах.
Однако инвазионность личинок трихинелл после замораживания для мышей - биопробы при одинаковой дозе заражения жизнеспособными личинками (10 личинок трихинелл на 1 г массы животного) уменьшалась: при минус 16°C интенсивность инвазии белых мышей снизилась до 67 личинок на 1 г массы животного, а при минус 23°C до 43 личинок на 1 г массы.
Жизнеспособность личинок трихинелл сохранялась в течение всего периода замораживания - 192 суток при минус 16°C и 134 суток при минус 23°C. Опыт был закончен из-за отсутствия достаточного количества образцов мышечной ткани от лисицы. Высокая морозостойкость личинок трихинелл в мышечной ткани обыкновенной лисицы характеризует их принадлежность к резистентному к отрицательным температурам виду гельминта.
Пример 2. Опыт по обезвреживанию естественно инвазированных капсульными трихинеллами тушек пушных промысловых животных. Инвазированный трихинеллезный материал представлял собой тушки без шкурок разных видов промысловых животных, добываемых в охотхозяйствах (лисицы, енотовидной собаки, куницы). Наличие инвазии и степень инвазированности материала определяли методом компрессорной трихинеллоскопии. Для этого из каждой пробы мышц весом около 50 г, по ходу мышечных волокон изогнутыми ножницами нарезали по 24 среза мышц размером с овсяное зерно (общей массой около 0,7-1,0 г). Срезы сдавливали между стеклами компрессория и микроскопировали при малом увеличении микроскопа. Интенсивность инвазии определялась путем подсчета личинок трихинелл в 1 г мышечной ткани. Во время производственного испытания по обезвреживанию, тушки инвазированных животных изолировались от незараженных тушек, упаковали отдельно друг от друга и завязали в полиэтиленовые пакеты объемом до 30-200 л.
Мешки с тушками зараженных личинками трихинелл животных помещали в отсек морозильной камеры, предварительно включенной перед обезвреживанием (за 8 ч до начала работы). Инвазионный материал в морозильнике выдерживали определенное время в зависимости от вида и массы тушки животного (табл.).
3
Для обезвреживания инвазионного материала следует проводить закладку в морозильник постепенно. В пустую морозильную камеру объемом в 2 5 м закладывали от 30 г до 20 кг. При этом инвазионный материал заполняли постепенно, порционно закладывая по 10 кг, через каждые 4 часа работы морозильной камеры, но не чаще.
Контроль качества обезвреживания инвазионного материала в мышечной ткани животных после оттаивания тушек на жизнеспособность и инвазионность личинок возбудителя трихинеллеза проводили согласно методике определения жизнеспособности и инвазионности личинок трихинелл. При выделении личинок методом переваривания в искусственном желудочном соке оказалось, что выделенные личинки были нежизнеспособны.
Таблица
Обезвреживание тушек промысловых зверей от личинок трихинелл при глубоком замораживании
Вид тушек животных (латинское название)
Масса тушки, кг
Температура обезвреживания, °C
Время экспозиции, ч
1
2
3
4
Лисица обыкновенная (Vulpes vulpes)
3,5-8,0
минус 70
18
Енотовидная собака (Nyctereutes procyonoides)
2,5-9,0
18
Куница каменная, лесная (Martes foina, martes)
0,4-1,8
6
Крыса серая (Ratus norvegicus)
до 0,5
5
Крыса белая лабораторная Vistar (Rat white)
до 0,5
5
Мышь белая лабораторная (Mouse white)
до 0,035
1
Пример 3. Проведение биологической пробы на лабораторных животных после обезвреживания личинок трихинелл глубоким замораживанием. После обезвреживания глубоким замораживанием при минус 70°C естественно инвазированных капсульными личинками трихинелл тушек промысловых животных (лисицы и енотовидной собаки в течение 18 часов, куниц - 6, крыс - 5, мышей - 1) от возбудителя трихинеллеза провели биологическую пробу на лабораторных животных (белых беспородных мышах). В качестве контроля служили трихинеллезные тушки животных, замороженные при минус 23°C в течение такого же периода времени, что и в опытной группе, и тушки, не подверженные замораживанию. Мышечную ткань животных препарировали от костей и измельчали на мясорубке. Готовый фарш закладывали в мельничный газ (размер ячеек 1 мм). Затем мельничный газ с мясным фаршем помещали в свежеприготовленный желудочный сок (на 1 л дистиллированной воды: 10 мл концентрированной соляной кислоты и 3 г пепсина 100000 единиц активности). Соотношение фарша и желудочного сока должно составлять 1:20. Приготовленный для искусственного переваривания мясной фарш в желудочным соке помещали в термостат при 37°C на 18 часов. После экспозиции осадок промывали трижды в дистиллированной воде. Выделенную взвесь личинок трихинелл после искусственного ферментирования из каждой группы животных вводили в дозе 5 личинок на 1 г массы белой беспородной мыши. Далее, лабораторных мышей каждой группы содержали согласно общепринятым санитарно-ветеринарным правилам. Через 45 суток лабораторных животных усыпили с помощью медицинского эфира в кристаллизаторе с притертой крышкой. Для диагностики трихинеллеза у мышей провели компрессорную трихинеллоскопию. В опытной группе лабораторных животных личинки трихинелл в мышечной ткани не развились, в обоих контрольных группах белых мышей личинки капсульной трихинеллы были зарегистрированы.
Предлагаемый способ, включающий в себя применение морозильников с значительно низкой температурой охлаждения, обеспечивает быстрое и эффективное обезвреживание личинок трихинелл в мышечной ткани.
Источники информации
1. Бессонов А.С. Эпизоотология (эпидемиология) и профилактика трихинеллеза. Минтос, Вильнюс, 1972. - 304 с.
2. Бессонов А.С. Рекомендации международной комиссии по трихинеллезу (МКТ) по методам борьбы с трихинеллезом домашних и диких животных, мясо которых употребляется в пищу человеком. // Ветеринария. 2001. - №8. - С.57-63.
3. Ветеринарное законодательство. - М., 1988. - Т.IV. - 162 с.
4. Санитарные Правила и Нормы, 3.2.1333-03. «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации», Москва, 2003 г.
5. Трихинеллез. Научные труды ВАСХНИЛ, Москва «Колос», 1976, 338 с.