СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТРЕССОУСТОЙЧИВОСТИ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ
METHOD FOR DETERMINING STRESS TOLERANCE OF BROILER CHICKENS

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к птицеводству.
Известен способ определения стрессоустойчивости кур мясного направления продуктивности, заключающийся в том, что тестирование кур на стрессоустойчивость проводят путем отлова птицы и внутрикожного введения 0,1 мл 60-70% раствора скипидара в область бородки. Для оценки результатов исследования проводят отлов птицы через 21-36 часов после введения скипидара, по наличию или отсутствию признаков воспаления - утолщение бородки, более высокая местная температура, выраженная краснота, болезненность при пальпации. При отсутствии перечисленных признаков реакцию оценивают отрицательно и птицу признают стрессоустойчивой. При наличии всех признаков воспаления - утолщение бородки 0,4 см и более, повышение местной температуры на 2°С и более по сравнению с интактной бородкой, выраженная краснота и болезненность - реакцию считают положительной и птицу признают стрессочувствительной. При утолщение бородки менее 0,4 см, слабое покраснение, незначительная болезненность при пальпации и повышения местной температуры менее 2°С по сравнению с интактной бородкой - реакцию оценивают как сомнительную и птицу считают стрессосомнительной [1].
Недостатком известного способа является то, что результаты по стрессоустойчивости можно получить только через 21-36 часов после введения скипидара.
Недостатком известного способа является то, что второй отлов птицы для исследования воспалительной реакции в области бородки приводит к усилению стресса птицы и как следствие к снижению ее продуктивности, что в условиях птицефабрики недопустимо.
Недостатком известного способа является его трудоемкость - отлов птицы, измерение толщины бородки, к тому же способ разработан для определения стрессовой устойчивости взрослой птицы родительского стада, а не цыплят-бройлеров.
Известен способ, предполагающий отбор биологического материала и определение иммуноферментным методом концентрации кортикостерона [2]. При этом отбирают пробы помета через 1-3 часа после последнего воздействия фактора, предположительно вызывающего стресс. Экстракцию кортикостерона проводят 89-91%-ным этиловым спиртом из высушенных и измельченных проб помета. Концентрация кортикостерона в пробе более 50 нмоль/л указывает на активацию гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы организма и служит индикатором стрессового состояния кур мясного направления продуктивности.
Недостатком известного способа является отсутствие четких параметров, информирующих об уровне стрессовой чувствительности, трудоемкость проведения метода тестирования, требующего наличие специализированного оборудования и реактивов, а также особых навыков обслуживающего персонала, следовательно, такой способ может быть применим только на крупных птицефабриках, имеющих собственные иммунологические и биохимические лаборатории.
Известен способ определения стресса и стрессовой чувствительности кур по кинетике величины соотношения гетерофилов и лимфоцитов периферической крови [3]. Установлено, что при развитии состояния стресса этот показатель увеличивается за счет абортивного выброса незрелых клеток гетерофилов из костного мозга в кровяное русло и миграции лимфоцитов из последнего в ткани. Изменения величины соотношения гетерофилов и лимфоцитов коррелируют со сдвигом концентрации кортикостерона в крови птиц и пропорциональны степени действия стресс-факторов различной природы. Показатель соотношения гетерофилов и лимфоцитов может характеризовать три уровня физиологического состояния кур: низкий уровень соответствует значению показателя 0,2; средний уровень соответствует значению показателя 0,5; высокий уровень стресса соответствует значению показателя выше 0,8.
Недостатком данного метода является то, что при воздействии сверхпороговых раздражителей соотношение гетерофилов и лимфоцитов не всегда изменяется адекватно физиологическому состоянию птицы и поэтому не может приниматься как точный показатель стрессовой чувствительности птицы. При этом подсчет форменных элементов в мазках крови птиц является трудоемким процессом и требует высокой квалификации специалиста.
Существует способ диагностики стрессового состояния кур по значению числа эозинофилов и моноцитов в мазках крови [4]. Установлено, что при эозинопении, сопутствующей стрессовой реакции у кур, количество эозинофилов в органах и тканях снижается. В период развития стресса эозинофилы покидают сосудистое русло, а их показатель при этом для стрессоустойчивых кур снижается с 2,8±1,46% до 1,5±1,64%, в свою очередь для стрессочувствительных возрастает с 1,70±1,16% до 2,90±1,91% [5].
Недостатком известного способа является то, что механизм эозинопении в стрессовых ситуациях реализуется не всегда [6]. Поэтому в производственных условиях данный метод не позволяет надежно маркировать стресс, а также является достаточно трудоемким с технической точки зрения.
Наиболее близким техническим решением по способу определения степени стрессирования кур является биохимический способ определения содержания в крови стрессовых гормонов, наиболее информативным из которых для определения степени стрессирования кур является кортикостерон [7].
В известном способе кровь для получения плазмы собирается пункцией подкрыльцовой вены. В плазме крови определяют уровень кортикостерона методом твердофазного конкурентного иммуноферментного анализа с помощью наборов DRG Corticosterone ELISA EIA-4164. При этом показатели уровня кортикостерона в крови через 30 минут после воздействия фактора, вызывающего стресс для стрессочувствительных кур, составляют 130±15 нмоль/л, а для стрессоустойчивых 85±10 нмоль/л [5].
Недостатком известного способа являются резкие и неоднократные изменения концентрации кортикостерона в крови в период стрессирования, не всегда отражающие состояние организма в момент взятия крови. Для исключения стрессирования кур при взятии крови и получения наиболее объективных данных применяется катетеризация крупных кровеносных сосудов кур - подкрыльцовой вены, плечевой вены или артерии, что значительно усложняет методику проведения стрессирования кур и делает практически этот метод неприемлемым в условиях производства.
Недостатком известного способа является то, что для исследования количества кортикостерона в организме птицы необходим набор специальных реагентов DRG Corticosterone ELISA EIA-4164 и лабораторного оборудования, что делает его дорогостоящим.
Недостатком известного способа является то, что исследование содержания кортикостерона в крови птицы проводится соответствующим специалистом, владеющим методикой иммуноферментного анализа и лабораторной базы.
Изобретение направлено на сокращение продолжительности и повышение доступности определения стрессоустойчивости цыплят-бройлеров при одновременном снижении стоимости способа.
Это достигается тем, что определение стрессовой устойчивости проводится путем исследования уровня глюкозы в крови стрессированных цыплят-бройлеров с помощью глюкометра «Accu-Check Performa Nano» в период развития стадии тревоги стресса через 30-50 мин после введения раствора скипидара (стрессора) в количестве 0,1-0,2 мл 60-70% в область бородки.
Концентрация глюкозы в крови 11,5 ммоль/л и более указывает на то, что цыплята-бройлеры являются стрессочувствительными, менее - стрессоустойчивыми. Заявленный способ соответствует критерию изобретения «новизна», поскольку анализ известных технических решений (аналогов) по определению стрессоустойчивости цыплят-бройлеров позволяет сделать вывод об отсутствии в них признаков, сходных с существенными отличительными признаками в заявляемом способе.
Предлагаемый способ определения стрессоустойчивости цыплят-бройлеров был апробирован следующим образом
Пример 1. Для определения стрессоустойчивости цыплят-бройлеров отобрали 219 цыплят кросса «Арбор Эйкерс» в возрасте 34 суток в условиях птицефабрики ООО «Бектыш» (Бектышская птицефабрика).
Для моделирования острого стрессового состояния внутрикожно вводили в бородку 60%-ный раствор скипидара в дозе 0,1 мл. Исследование содержания глюкозы и кортикостерона (прототип) в крови проводили через 30 минут после инъекции скипидара, что соответствует стадии тревоги развития стресса.
Результаты исследований представлены в таблице 1.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что содержание глюкозы в крови в стадии тревоги при стрессе является индикатором стрессовой устойчивости цыплят-бройлеров.
Так, согласно прототипу к стрессоустойчивым относят цыплят-бройлеров, у которых содержание кортикостерона менее 90 нмоль/л, что соответствует содержанию глюкозы 11,4 ммоль/л и менее.
Согласно прототипу к стрессочуствительным относят цыплят-бройлеров, у которых содержание кортикостерона более 115 нмоль/л, что соответствует содержанию глюкозы 11,5 ммоль/л и более.
Следовательно, исследование количества глюкозы в крови стрессированных цыплят-бройлеров через 30 минут после моделирования стресса путем введения в бородку скипидара 60%-ного раствора скипидара в дозе 0,1 мл позволяет достоверно определить стрессоустойчивость птицы.
В результате исследований установлено, что из 219 цыплят 157 голов являются стрессоустойчивые и 69 - стрессочувствительные.
Пример 2. Для определения стрессоустойчивости цыплят-бройлеров отобрали 219 цыплят кросса «Арбор Эйкерс» в возрасте 34 суток в условиях птицефабрики ООО «Бектыш» (Бектышская птицефабрика).
Для моделирования острого стрессового состояния внутрикожно вводили в бородку 70%-ный раствор скипидара в дозе 0,2 мл. Исследование содержания глюкозы и кортикостерона (прототип) в крови проводили через 50 минут после инъекции скипидара.
Согласно прототипу к стрессоустойчивым относят цыплят-бройлеров, у которых содержание кортикостерона менее 90 нмоль/л, что соответствует содержанию глюкозы 11,4 ммоль/л и менее.
Согласно прототипу к стрессочувствительным относят цыплят-бройлеров с содержанием кортикостерона в крови 115 нмоль/л и более, что соответствует содержанию глюкозы 11,5 ммоль/л и более.
Следовательно, исследование количества глюкозы в крови стрессированных цыплят-бройлеров через 50 минут после моделирования стресса путем введения в бородку скипидара 70%-ного раствора скипидара в дозе 0,2 мл позволяет достоверно определить стрессоустойчивость птицы.
Использование предлагаемого способа определения стрессоустойчивости цыплят-бройлеров в сравнении с другими способами имеет следующие преимущества:
1.Определение стрессоустойчивости проводится в течение 30-50 минут.
2. Доступность и простота определения стрессоустойчивости.
3. Отсутствие необходимости в лабораторном оборудовании, оптических и электронных приборах, специальных реактивах, обученного персонала, что позволяет значительно снизить материальные затраты на исследование.
Источники информации
1. Патент 2454861, Российская Федерация, МПК A01K 67/02 Способ определения стрессовой чувствительности кур мясного направления продуктивности / А.В. Мифтахутдинов, А.И. Кузнецов, А.А. Терман, А.Н.; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральская государственная академия ветеринарной медицины", заявл. 2011112543/10, опубл. 10.07.2012. Бюл. №19.
2. Патент 2473215, Российская Федерация, МПК A01K 67/02 Способ определения стрессового состояния кур мясного направления продуктивности / А.В. Мифтахутдинов; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральская государственная академия ветеринарной медицины", заявл. 2011120009/10, опубл. 27.01.2013. Бюл. №3.
3. Gross W.B. Evaluation of the heterophil/lymphocyte ratio as a measure of stress in chickens / W.B. Gross, H.S. Siegel // Avian Diseases 27(4). - 1983. - pp. 972-979.
4. Фисинин В.И., Кравченко H.A. Оптимальные сроки перемещения молодняка и профилактики стресса пересадки // Птицеводство, 1977. - №7. - С. 29-30.
5. Мифтахутдинов А.В. Экспериментальные подходы к диагностике стрессов в птицеводстве // Сельскохозяйственная биология, 2014. - №2. - С. 20-30.
6. Maxwell М.Н., Robertson G.M. The avian heterophil leucocyte: a review // World's Poult. Sci. J., 1998, №54, pp. 155-178.
7. Edens F.W. Modification of corticosterone and glucose responses by sympatholytic agents in young chickens during acute heat exposure / F.W. Edens, H.S. Siegel // Poultry Science. - 1976. - 55:17041. - pp. 71-72.