Применение метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата в качестве средства, обладающего противовоспалительной активностью
APPLICATION OF METHYL 5-BENZOYL-6-(4-FLUOROPHENYL)-4-METHOXY-2-THIOXOHEXAHYDROPYRIMIDINE-4-CARBOXYLATE AS AN ANTI-INFLAMMATORY AGENT

1
Изобретение относится к области органической химии, к применению биологически активных соединений класса метил 5-бензоил-6-арил-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилатов, а именно метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилату формулы ():
1
обладающему противовоспалительной активностью, что позволяет предложить его использование в фармакологии и медицине в качестве противовоспалительного лекарственного средства, а также для синтеза новых гетероциклических систем.
Способ синтеза метил 5-бензоил-6-арил-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилатов известен из уровня техники [A four-component Biginelli reaction: new opportunities for the synthesis of functionalized pyrimidines / Gein V. L., Zamaraeva T. M., Gorgopina E.V., Dmitriev M.V. // Химия гетероциклических соединений. - 2020. -Т. 56, № 3.- С. 339-346.]
N
Известны структурные аналоги к заявляемому соединению, проявляющие противовоспалительное действие [Synthesis and pharmacological investigation of 3-(substituted 1-phenylethanone)-4-(substituted phenyl)-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-5-carboxylates / R. V. Chikhale, R. P. Bhole, P. B. Khedekar, K.P. Bhusari // European Journal Medicinal Chemistry. - 2009. - Vol. 44. - P. 3645-3653.; Бузмакова, Н. А. Синтез и противовоспалительная активность ,6-диарил-4-метил-2-тиоксо-1,2,3,6-тетрагидропиримидин-5-карбоксамидов / Н.А. Бузмакова, И.П. Рудакова, Т.М. Замараева // Химико-фармацевтический журнал. - 2021. - Т. 55, № 8. - С. 21 - 24.].
Противовоспалительная активность заявляемого соединения - метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата ранее не была исследована.
Задачей изобретения является изыскание новых соединений, обладающих противовоспалительной активностью, и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.
1
Поставленная задача решается тем, что соединение - метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат () проявляет высокую противовоспалительную активность при низкой токсичности.
Синтезируют заявляемое соединение путем взаимодействия метил 2,4-диоксо-4-фенилбутаноата, 4-фторбензальдегида, тиомочевины в присутствии натрия гидросульфата в метаноле по схеме:
Схема 1
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Получение заявляемого соединения (1).
1
Соединение ()получают взаимодействием 0.005 моль (1,03 г) метил 2,4-диоксо-4-фенилбутаноата, 0.005 моль (0,54 мл) 4-фторбензальдегида, 0.008 моль (0,60 г) тиомочевины в присутствии 0.0067 моль (0,6 г) натрия гидросульфата при кипячении в 15 мл метанола в течение 1 часа. Осадок отфильтровывали, промывали водой, перекристаллизовывали из метилового спирта.
1
Выход соединения () составляет 1,57 г (78%).
1
пл.
Заявляемое соединение () представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в ДМФА, ДМСО, при нагревании - в уксусной кислоте, устойчивое при хранении. Т 288-290°С.
1
d
J
J
J
J
J
6
3
3
20
19
2
4
Выход 3.13 г (78%). Т. пл. 288 - 290°C. Спектр ЯМР Н (ДМСО-), δ, м.д.: 3.14 (с, 3H, CHOCO), 3.23 (с, 3H, CHO), 4.42 (д,  11 Гц, 1H, H-5), 4.99 (д,  11 Гц, 1H, H-6), 7.04 (т,  8.7 Гц, 2H, Ar H), 7.37-7.48 (м, 4H, Ar H), 7.54 (т,  7.2 Гц, 1H, Ar H), 7.64 (д,  7.2 Гц, 2H, Ar H), 8.71 (уш. с, 1H, H-1), 9.24 (уш. с, 1H, H-3). СHFNOS. Вычислено, %: С, 59.69; Н, 4.76; N, 6.96%. Найдено, %: С, 59.84; Н, 4.84; N, 6.83%.
1
d
6
ИК спектр соединения записан на спектрофотометре Specord M-80 в таблетках KBr. Спектр ЯМР Н зарегистрирован на спектрометре Bruker 500 (рабочая частота 500.13 МГц) в ДМСО-, внутренний стандарт - ТМС. Элементный анализ проведен на приборе Perkin Elmer 2400. Температура плавления определена на приборе М-565.
Пример 2. Исследование острой токсичности и противовоспалительной активности заявляемого соединения (1).
Все исследовательские работы с лабораторными животными выполняли в соответствии с общепринятыми этическими нормами обращения с животными, с соблюдением Правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований, действующих на территории РФ [Приказ Министерства здравоохранения Российской федерации от 1 апреля 2016 г № 199н. Зарегистрировано в Министерстве юстиций Российской Федерации 15 августа 2016 г. Регистрационный №43232].
1
В медицинской практике широко используется нимесулид в качестве нестероидного противовоспалительного лекарственного средства, аналогичный по фармакологическому действию заявляемому соединению (), который взят нами в качестве эталона сравнения [Машковский, М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей / М.Д. Машковский. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - С. 848].
50
1
Острую токсичность (ЛД, мг/кг) заявляемого соединения определяли по экспресс-методу В.Б. Прозоровского [Прозоровский, В. Б. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и её ошибки / В. Б. Прозоровский, М. П. Прозоровская, В. И. Демченко // Фармакология и токсикология. - 1978. - № 4. - С. 497-502.]. Внутрибрюшинное введение животным заявляемого соединения в высоких дозах не приводило к их гибели. Согласно классификации токсичности препаратов соединение () относится к классу относительно безвредных веществ [Сидоров, К. К. Фармакология новых промышленных химических веществ. - 1973. -13. - 47 - 51.]. Результаты исследования острой токсичности представлены в таблице 1.
Таблица 1
1
Острая токсичность соединения () и препарата сравнения
Соединение
ЛД<sub>50</sub>, мг/кгв/б
метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат
>4000
Нимесулид
216*
*-данные литературы:
Колла, В. Э. Дозы лекарственных средств и химических соединений для лабораторных животных / В. Э. Колла, Б. Я. Сыропятов. - М.: Медицина. - 1998. - 263 с.
t
P
Исследование противовоспалительной активности проводилось на белых нелинейных крысах обоего пола массой 180-250 г. (контрольная и опытная группы включали по 6 животных) на модели острого воспалительного отёка, вызванного субплантарным (под подошвенный апоневроз) введением в заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% раствора каррагенина (сульфатированный полисахарид из ирландского морского мха). Увеличение объёма стопы, свидетельствующее о развитии отёка, оценивали онкометрически [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А.Н. Миронова, Н.Д. Бунятян, А.Н. Васильева, О.Л. Верстаковой, М.В. Журавлевой, В.К. Лепахина, Н.В. Коробова, В.А. Меркулова, С.Н. Орехова, И.В. Сакаевой, Д.Б. Утешева, А.Н. Яворского. - М.: Гриф и К, 2012. - Ч.1. - 944 с.] до введения и через 3 часа после введения каррагенина. Заявляемое соединения вводили внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг за 30 мин до введения флогогенного агента. Контрольным животным вводили эквиобъёмное количество 2% раствора крахмала. Полученные данные обрабатывали методами математической статистики с помощью -критерия Стьюдента. Эффект считали достоверным при <0,05.
На основе полученных результатов определяли эффект торможения воспаления в процентах к контрольному уровню.
1
Результаты испытаний противовоспалительной активности заявляемого соединения () представлены в таблице 2.
Таблица 2Противовоспалительная активность метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилата
Соединение
Прирост объема стопы через 3 часа, %
% торможения реакции через 3 часа
р по сравнению с контролем
метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат
6,8 ± 1,9
89,7%
p<0,001
Нимесулид
33,9 ± 6,8
48,7%
р<0,001
Контроль
66,1 ± 6,7
-
-
1
Введение флогогенного агента животным вызывало существенное увеличение объема стопы животных к 3-ему часу наблюдения, прирост достигал 66,1% и был принят за контрольную величину. Использование препарата сравнения нимесулида (Нимесил, Лабораториос Менарини С.А., Испания) при аналогичном способе введения и в аналогичной дозе, показало, что процент нарастания каррагенинового отека статистически достоверно снижается по сравнению с контролем до 33,9%. Профилактическое введение заявляемого соединения () вызывало торможение воспалительной реакции по сравнению с контролем. Под его действием процент нарастания каррагенинового отека статистически достоверно снижался до 6,8%, процент торможения воспалительной реакции составил 89,7%, что достоверно превосходит противовоспалительный эффект нимесулида в 1,8 раза (p<0,01), под действием которого уровень торможения отека стопы у крыс составил 48,7%.
1
Таким образом, предлагаемое соединение - метил 5-бензоил-6-(4-фторфенил)-4-метокси-2-тиоксогексагидропиримидин-4-карбоксилат проявляет более высокую противовоспалительную активность по сравнению с эталоном сравнения, а также является относительно безвредным, что делает возможным использование соединения () для создания нового лекарственного средства, обладающего противовоспалительной активностью.