Кристаллическая μ-модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-фенокси-фенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-она, способ её получения и фармацевтическая композиция на её основе
CRYSTALLINE Μ-MODIFICATION OF 1-[(3R)-3-[4-AMINO-3-(4-PHENOXY-PHENYL)-1H-PYRAZOLO[3,4-D]PYRIMIDIN-1-YL]-1-PIPERIDYL]-2-PROPENYL-1-ONE, METHOD FOR PRODUCTION THEREOF AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION BASED THEREON

Изобретение относится к органической химии и касается новой кристаллической модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он (ибрутиниб - международное непатентованное название), названной нами μ - модификацией, способа ее получения и фармацевтической композиции на ее основе, которая может быть использована в фармацевтической промышленности и медицине в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза.
Известны замещенные циклические соединения и их фармацевтически приемлемые соли в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона, способы их получения и содержащие их фармацевтические композиции для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза. (WO 2008/039218 А2 от 03.04.2008 г.; WO 2013/138210 А1 от 19.09.2013 г.; CN 103121999 А от 29.05.2013 г.; CN 104447761 А от 25.03.2015 г.; WO 2015/026934 А1 от 26.02.2015 г.; US 2015/0105409 А1 от 16.04.2015 г.; WO 2014/139970 А1 от 18.09.2014 г.; CN 104557946 А от 29.04.2015 г.; CN 103626774 А от 12.03.2014 г.; CN 103534258 А от 22.01.2014 г.; WO 2016/066726 А2 от 06.05.2016 г.; CN 106008526 А от 12.10.2016 г.; CN 101674834 А от 17.03.2010 г. и др.).
Однако в данных патентах синтезируемые вещества не охарактеризованы на предмет их принадлежности к той или иной полиморфной модификации и не определены параметры получаемых порошков. Эти свойства, в конечном итоге, определяют биологическую активность получаемых субстанций.
Известны кристаллические и аморфные фармацевтически приемлемые соли 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, их сольваты и гидраты, включая их различные полиморфные формы, а также сольваты ибрутиниба с различными растворителями и их смеси. (WO 2016/127960 А1 от 18.08.2016 г.; WO 2016/139588 А1 от 9.09.2016 г.; WO 2013/184572 А1 от 12.12.2013 г.; US 2012/0077832 А1 от 29.03.2012 г.; ЕАР 2013/00246 А1 от 30.01.2014 г.; CN 103923084 А от 16.07.2014 г.; WO 2016/025720 А1 от 18.02.2016 г.; WO 2014/022390 А1 от 16.02.2014 г.; WO 2015/145415 А1 от 1.10.2015 г.; WO 2016/079216 А1 от 26.05.2016 г.; WO 2016/207172 А1 от 29.12.2016 г.; WO 2016/160598 А1 от 6.10.2016 г.; US 2012/0077835 А1 от 29.03.2012 г.; US 9422295 В2 от 23.08.2016 г.; CN 106008529 А от 12.10.2016 г.; WO 2017/085628 А1 от 26.05.2017 г.; WO 2012/022444 А1 от 16.02.2012 г. и др.).
Однако все эти формы отличаются от заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он химическим составом - наличием в химической формуле анионов кислот или наличием сольватных молекул.
Наиболее близкими к заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он являются кристаллические полиморфные модификации ибрутиниба: форма А, форма В, форма С, форма D1, Форма В, форма F, форма G, форма K, форма S1, форма S2, форма S3, форма S4, Форма А (в другом источнике этих же авторов - это форма I), форма I, форма II, форма III, форма VI, форма α, форма β, форма γ, форма δ, форма ε, форма ζ и аморфная форма (WO 2013/184572 А1 от 12.12.2013 г.; WO 2016/139588 А1 от 9.09.2016 г.; CN 105646484 А от 8.06.2016 г.; CN 105646498 А от 8.06.2016 г.; CN 105646499 А от 8.06.2016 г.; WO 2016/025720 А1 от 18.02.2016 г.; WO 2017/029586 А1 от 23.02.2017 г.; WO 2015/081180 А1 от 4.06.2015 г.; CN 104327085 А от 8.06.2016 г.; CN 105294696 А от 3.02.2016 г.; CN 106117214 А от 16.11.2016 г.; WO 2015/145415 А1 от 4.06.2015 г.; ЕР 3243824 А1 от 15.11.2017 г. и др.).
отн.
i
max
Известные кристаллические модификации ибрутиниба характеризуются физико - химическими методами анализа такими, как: ядерным магнитным резонансом (ЯМР) - совокупностью химических сдвигов (м.д.), методом рентгенофазового анализа (РФА) - наборами углов (2θ, град.), межплоскостных расстояний (d, ) и их интенсивностью (I, имп./мин; I, = I/I×100, %) или непосредственно рентгенограммами (получение дифрактограмм авторы вышеприведенных патентов проводили на Cu Kα - излучении), термоаналитическими исследованиями (температурами тепловых эффектов) и другими.
Сходство заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, с известными кристаллическими модификациями ибрутиниба заключается в идентичности их химических составов.
отн.
i
max
Отличие заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической и μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, от известных кристаллических модификаций ибрутиниба заключается в различии их дифрактограмм рентгенофазового анализа (РФА): определенного набора углов 2θ (град.) - межплоскостных расстояний (d, ), и их интенсивностью (I, = I/I×100, %).
Известные кристаллические модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он представляют собой порошки белого или почти белого цвета, легко растворимые в диметилсульфоксиде, растворимые в метаноле и практически нерастворимые в воде.
Рассмотренные выше модификации ибрутиниба получают из различных исходных компонентов или одну из другой в растворах, варьируя тип растворителей, условия приготовления растворов, а также условий выделения из органических растворителей или их смесей различными методами, такими, как кристаллизацией из растворов с последующим фильтрованием, промыванием, сушкой на воздухе, вакуумной сушкой, распылительной сушкой или сублимационной сушкой (WO 2013/184572 А1 от 12.12.2013 г.; WO 2016/139588 А1 от 9.09.2016 г.; CN 105646484 А от 8.06.2016 г.; CN 105646498 А от 8.06.2016 г.; CN 105646499 А от 8.06.2016 г.; WO 2016/025720 А1 от 18.02.2016 г.; WO 2017/029586 А1 от 23.02.2017 г.; WO 2015/081180 А1 от 4.06.2015 г.; CN 104327085 А от 8.06.2016 г.; CN 105294696 А от 3.02.2016 г.; CN 106117214 А от 16.11.2016 г.; WO 2015/145415 А1 от 4.06.2015 г.; ЕР 3243824 А1 от 15.11.2017 г.; WO 2017/137446 А1 от 17.08.2017 г.; WO 2016/088074 А1 от 9.06.2016 г.; WO 2016/170545 А1 от 27.10.2016 г.; WO 2017/174044 А1 от 12.10.2017 г.; WO 2016/207172 А1 от 29.12.2016 г. и др.).
Наиболее близким по технической сущности является способ получения аморфной модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, заключающийся в том, что ибрутиниб растворяют в органическом растворителе при температурах 40°С-50°С, используя ультразвук для ускорения растворения, замораживают при -30°С на плите сублимационной установки, лиофилизируют (подвергают сублимационной сушке) при температурах на плите -30°С…+50°С и давлении от 0,150 до 0,020 мбар в течение 48 часов. Скорость замораживания раствора ибрутиниба авторы в материалах патента не указали (WO 2016/079216 А1 от 26.05.2016 г.).
Отличие способа получения заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он от способов получения известных кристаллических и аморфных форм ибрутиниба состоит в том, что раствор ибрутиниба в органическом растворителе при 25-80°С, смешивают с водой в соотношении 1:2-1:4, замораживают при скорости охлаждения не ниже 60 град/мин, подвергают сублимационной сушке и дополнительно отжигают при температурах (90-110)°С в течение (0,5-5,0) часов.
Отличие заявляемой фармацевтической композиции в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза на основе 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он от известной композиции (Государственный Реестр Лекарственных Средств России - Инструкция по применению лекарственного препарата для медицинского применения Имбрувика/Imbruvica) состоит в том, что в качестве действующего вещества используют терапевтически эффективное количество новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он (ибрутиниба).
Целью изобретения является получение новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, разработка способа ее получения и применение ее в фармацевтической композиции в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза.
отн.
i
max
Поставленная цель достигнута настоящим изобретением, а именно получением новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, характеризующейся следующим набором межплоскостных расстояний (d, ) и соответствующих им интенсивностей (I, = I/I×100, %): 15,477 - 42,64%; 11,171  - 19,92%; 9,896 - 17,53%; 8,207 - 35,06%; 7,137 - 28,61%; 6,716 - 27,49%; 6,433 - 39,13%; 6,200 - 36,19%; 5,849 - 35,62%; 5,64l - 43,20%; 5,516 - 43,90%; 5,268 - 46,14%; 5,053 - 49,65%; 4,845 - 59,61%; 4,667 - 70,13%; 4,58l - 63,67%; 4,454 - 69,57%; 4,316 - 59,61%; 4,267 - 57,22%; 4,152 - 100,00%; 4,084 - 73,07%; 3,955 - 53,16%; 3,920 - 50,91%; 3,863 - 47,41%; 3,776 - 52,59%; 3,732 - 39,69%; 3,627 - 35,62%; 3,578 - 39,13%; 3,536 - 34,50%; 3,476 - 35,62%; 3,350 - 43,20%; 3,259 - 31,00%; 3,137 - 29,87%; 3,082 - 32,12%; 2,983 - 25,67%; 2,937 - 25,11%; 2,825 - 22,16%; 2,768 - 19,35%; 2,708 - 20,48%; 2,610 - 16,97%; 2,57l - 15,85%; 2,482 - 16,41%; 2,387 - 17,53%; 2,379 - 16,97%; 2,295 - 17,53%; 2,240 - 14,59%; 2,162 - 14,59%.
Поставленная цель достигнута также разработкой способа получения новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, который состоит в том, раствор ибрутиниба в органическом растворителе при 25-80°С, смешивают с водой в соотношении 1:2-1:4, замораживают при скорости охлаждения не ниже 60 град/мин, подвергают сублимационной сушке и дополнительно отжигают при температурах (90-110)°С в течение (0,5-5,0) часов.
Кроме того, поставленная цель достигнута применением новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-d] пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он для приготовления фармацевтической композиции в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза. Указанная композиция содержит μ - модификацию ибрутиниба в терапевтически эффективном количестве и, по крайней мере, один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, вспомогательное вещество или наполнитель.
Из патентной и научно-технической литературы не известна кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, способ ее получения и применение ее в фармацевтической композиции в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза.
отн.
Нами обнаружена новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, характеризующаяся определенным набором дифракционных максимумов (d, ) и их интенсивностью (I, %), предложены способ ее получения и применение ее для приготовления фармацевтической композиции в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза.
Заявляемая новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он представляет собой легкий порошок белого или почти белого цвета, легко растворимый в диметилсульфоксиде, растворимый в метаноле и практически нерастворимый в воде.
Для пояснения сущности заявляемого технического решения к описанию приложены следующие таблицы и рисунки:
отн.
Таблица 1. Углы 2θ, град., межплоскостные расстояния (d, ) и их интенсивности (I, %) известных модификаций ибрутиниба по литературным источникам.
отн.
Таблица 2. Углы 2θ, град., межплоскостные расстояния (d, ) и их интенсивности (I, %) известной кристаллической формы А ибрутиниба, которую использовали в качестве исходного вещества.
отн.
Таблица 3. Углы 2θ, межплоскостные расстояния (d, ) и их интенсивности (I, %) новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
Таблица 4. Температуры плавления и тепловых эффектов известных модификаций ибрутиниба по литературным источникам.
1
Рис. 1. ЯМР H - спектр известной кристаллической формы А ибрутиниба, которую использовали в качестве исходного вещества.
1
Рис. 2. ЯМР Н - спектр новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
Рис. 3. Дифрактограмма известной кристаллической формы А ибрутиниба, которую использовали в качестве исходного вещества.
Рис. 4. Типичная дифрактограмма новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
Для идентификации полученного вещества был проведен комплекс физико-химических методов анализа.
1
Первоначально, методами ядерного магнитного резонанса (ЯМР Н), и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) была установлена идентичность химических формул известной кристаллической модификации ибрутиниба формы А, которую использовали в качестве исходного вещества, и новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
6
1
Определение химических сдвигов исходного ибрутиниба и полученного из него вещества было проведено в его насыщенном растворе в дейтерированном диметилсульфоксиде (ДМСО-D) на ЯМР-спектрометре высокого разрешения VXR-400 фирмы "VARIAN" (США). Полученные данные приведены на рис. 1 и 2, соответственно. Сравнение результатов, представленных на рис. 1 (исходная субстанция ибрутиниба), с данными, приведенными на рис. 2 [новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он] показывает, что ЯМР - Н - спектры исходного и полученного из него вещества практически идентичны, т.е. полученное вещество является 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло [3,4-d] пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
Хроматографическую подвижность исходной субстанции ибрутиниба формы А, которую использовали в качестве исходного вещества и, полученной из нее, новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он определяли методом ВЭЖХ на хроматографе Shimadzu LC - 20А с детектором SPD-M20A и с колонкой длиной 150 мм, диаметром 4,6 мм, сорбентом Grace Apollo C18 "Agilent" (США) с детектированием при длине волны 260,8 нм. В качестве подвижной фазы В использовали 0,05% раствор трифторуксусной кислоты в ацетонитриле, а подвижной фазы А - 0,05% раствор трифторуксусной кислоты в воде, температура колонки составляла 40°С, а скорость потока - 1,5 мл/мин. Объем испытуемой пробы составил 40 мкл с концентрацией раствора 0,25 мг/мл (исходная субстанция ибрутиниба) и 0,30 мг/мл (новая, не известная ранее, μ - модификация ибрутиниба). Оказалось, что хроматограммы исходной субстанции ибрутиниба, которую использовали в качестве исходного вещества, и новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он содержат по одному пику основного компонента. Величины времен удерживания, в пределах ошибки определения, практически одинаковы. Чистота исследованных образцов, определенных методом ВЭЖХ, составили 99,84% (исходное вещество) и 99,70% (новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация ибрутиниба).
Проведенные методом ВЭЖХ эксперименты, свидетельствуют о том, что при получении новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он из исходного вещества - кристаллической модификации ибрутиниба - формы А, разложения исходного вещества не происходит.
1
Таким образом, экспериментальные результаты ядерного магнитного резонанса (ЯМР-Н) и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) однозначно свидетельствуют о том, что полученное вещество является 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
Для подтверждения того, что полученное вещество является новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификацией 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, были проведены рентгенофазовый анализ (РФА) и термоаналитические исследования.
Рентгенофазовый анализ известной кристаллической модификации ибрутиниба формы А, которую использовали в качестве исходного вещества и полученного из нее вещества проводили на дифрактометре Rigaku D/MAX-2500 (Rigaku, Япония) на CuKα излучении (λ=1,54056 ). Полученные данные РФА для ибрутиниба, который использовали в качестве исходного вещества, приведены в табл. 2 и на рис. 3. Сравнение результатов РФА, представленных в табл. 2 и в табл. 1 (литературные данные), свидетельствует о том, что в качестве исходного вещества была использована известная кристаллическая модификация ибрутиниба - форма А. Результаты рентгенофазового анализа порошка, полученного из известной кристаллической модификации ибрутиниба, представлены в табл. 3 и на рис. 4. Сравнение полученных данных, представленных в табл. 3, табл. 2 и табл. 1, а также на рис. 3, рис. 4, и на рисунках, приведенных в литературных источниках (WO 2013/184572 А1 от 12.12.2013 г.; WO 2016/139588 А1 от 9.09.2016 г.; CN 105646484 А от 8.06.2016 г.; CN 105646498 А от 8.06.2016 г.; CN 105646499 А от 8.06.2016 г.; WO 2016/025720 А1 от 18.02.2016 г.; WO 2017/029586 А1 от 23.02.2017 г.; WO 2015/081180 А1 от 4.06.2015 г.; CN 104327085 А от 8.06.2016 г.; CN 105294696 А от 3.02.2016 г.; CN 106117214 А от 16.11.2016 г.; WO 2015/145415 А1 от 4.06.2015 г.; ЕР 3243824 А1 от 15.11.2017 г. и др.), свидетельствует о том, что полученный порошок ибрутиниба является новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификацией 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
отн.
Таким образом, экспериментальные результаты рентгенофазового анализа однозначно свидетельствуют о том, что полученное вещество является новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификацией 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло [3,4-d] пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он. Она характеризуется, отличной от других кристаллических модификаций ибрутиниба, совокупностью межплоскостных расстояний (d, ) и соответствующих им интенсивностей (I, %): 15,477 - 42,64%; 11,171 - 19,92%; 9,896 - 17,53%; 8,207 - 35,06%; 7,137 - 28,61%; 6,716 - 27,49%; 6,433 - 39,13%; 6,200 - 36,19%; 5,849 - 35,62%; 5,641 - 43,20%; 5,516 - 43,90%; 5,268 - 46,14%; 5,053 - 49,65%; 4,845 - 59,61%; 4,667 - 70,13%; 4,581 - 63,67%; 4,454 - 69,57%; 4,316 - 59,61%; 4,267 - 57,22%; 4,152 - 100,00%; 4,084 - 73,07%; 3,955 - 53,16%; 3,920 - 50,91%; 3,863 - 47,41%; 3,776 - 52,59%; 3,732 - 39,69%; 3,627 - 35,62%; 3,578 - 39,13%; 3,536 - 34,50%; 3,476 - 35,62%; 3,350 - 43,20%; 3,259 - 31,00%; 3,137 - 29,87%; 3,082 - 32,12%; 2,983 - 25,67%; 2,937 - 25,11%; 2,825 - 22,16%; 2,768 - 19,35%; 2,708 - 20,48%; 2,610 - 16,97%; 2,571 - 15,85%; 2,482 - 16,41%; 2,387 - 17,53%; 2,379 - 16,97%; 2,295 -17,53%; 2,240 - 14,59%; 2,162 - 14,59%.
Термоаналитические исследования проводили на термоанализаторе DSC 204 F1 Poenix (NETZSCH) и DSC Q 100 ТА Instruments в токе аргона при повышении температуры 10 град/мин. В качестве держателей образцов использовали алюминиевые кюветы. Навеска пробы составляла 1,2-5,2 мг. Оказалось, что температура плавления исходной субстанции ибрутиниба, которую использовали в качестве исходного вещества составляет 154,2-158,2°С (эндотермический эффект на ДСК - кривой). Такая температура (154-157)°С характерна для известной из литературного источника (WO 2013/184572 А1 от 12.12.2013 г.) кристаллической форме А ибрутиниба. Температура плавления новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он составляет 142,3-151,5°С (эндотермический эффект на ДСК - кривой). Сравнение этой температуры с температурами тепловых эффектов и температурами плавления известных из литературных источников кристаллических модификаций (таблица 4) показывает, что новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он характеризуется, отличной от других модификаций ибрутиниба, температурой плавления равной (142,3-151,5)°С (эндотермический эффект на ДСК - кривой).
Приведенные экспериментальные данные рентгенофазового анализа и термоаналитических исследований однозначно свидетельствуют о том, что полученная новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он характеризуется, отличной от других кристаллических модификаций ибрутиниба, совокупностью межплоскостных расстояний и соответствующих им интенсивностей и температурой плавления (эндотермический эффект на ДСК - кривой).
Способ получения новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, заключается в том, что раствор ибрутиниба в органическом растворителе при 25-80°С, смешивают с водой в соотношении 1:2-1:4, замораживают при скорости охлаждения не ниже 60 град/мин, подвергают сублимационной сушке и дополнительно отжигают при температурах (90-110)°С в течение (0,5-5,0) часов.
Отличие способа получения заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он от способа получения известных кристаллических форм ибрутиниба состоит в том, что раствор ибрутиниба в органическом растворителе при 25-80°С, смешивают с водой в соотношении 1:2-1:4, замораживают при скорости охлаждения не ниже 60 град/мин, подвергают сублимационной сушке и дополнительно отжигают при температурах (90-110)°С в течение (0,5-5,0) часов.
Предложенный способ получения, заключающийся в том, что раствор ибрутиниба в органическом растворителе при 25-80°С, смешивают с водой в соотношении 1:2-1:4, замораживают при скорости охлаждения не ниже 60 град/мин, подвергают сублимационной сушке и дополнительно отжигают при температурах (90-110)°С в течение (0,5-5,0) часов, позволяет получить новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
Приготовление раствора ибрутиниба при повышенных температурах было использовано для ускорения процесса растворения.
Уменьшение температуры раствора ибрутиниба в органическом растворителе ниже 25°С не целесообразно поскольку требует дополнительных затрат энергии на охлаждение системы.
Увеличение температуры раствора ибрутиниба в органическом растворителе выше 80°С также не целесообразно из-за необходимости применения специального оборудования.
Смешивание органического раствора ибрутиниба в органическом растворителе с водой в соотношении менее 1:2 приводит к тому, что в этих условиях образуется одна из известных модификаций ибрутиниба. Получить новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он в чистом виде не удается.
Смешивание органического раствора ибрутиниба в органическом растворителе с водой в соотношении более 1:4 не приводит к увеличению выхода целевого продукта - новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он и лишь удорожает производство.
Уменьшение скорости замораживания ниже 60 град/мин приводит к тому, что скорость криокристаллизации раствора ибрутиниба уменьшается и приближается к равновесному процессу. Это приводит к получению уже известных модификаций. Получить новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он в чистом виде не удается. Отметим, что известный способ замораживания раствора, содержащий ибрутиниб (WO 2016/079216 А1 от 26.05.2016 г.) предполагает замораживание на полке сублимационной установке при -30°С. В этих условиях, как правило, достигают скорости замораживания не более (20-30) град/мин.
-2
Сублимационная сушка замороженного раствора ибрутиниба необходима для получения сухого порошка, который в дальнейшем позволяет формировать собственно новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он. Предпочтительным режимом сублимационной сушки является процесс, который проводят при температурах: на конденсаторе -43°С…-56°С; на продукте -196…+50°С и остаточном давлении в камере (9-3)×10 Торр в течение 22-26 ч.
Уменьшение времени сублимационной сушки меньше 22 ч приводит к получению невысохшего продукта: «порошок ибрутиниба - его замороженный раствор». Система при комнатной температуре плавится, порошок частично растворяется, перекристаллизовывается, образуя известные модификации. Новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он в чистом виде получить не удается.
Увеличение времени сублимационной сушки больше 26 ч нецелесообразно, так как не приводит к увеличению выхода целевого продукта - новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он и лишь удорожает производство.
Дополнительный отжиг продуктов сублимационной сушки при температурах (90-110)°С в течение (0,5-5,0) часов позволяет получить собственно новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он.
Уменьшение температуры дополнительного отжига продуктов сублимационной сушки ниже 90°С приводит к тому, что в этих условиях образуется одна из известных модификаций ибрутиниба. Получить новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он в чистом виде не удается.
Увеличение температуры дополнительного отжига продуктов сублимационной сушки выше 110°С приводит к тому, что в этих условиях образуется одна из известных модификаций ибрутиниба. Получить новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он в чистом виде не удается.
Выдержка продуктов сублимационной сушки при температурах 90-110°С в течение менее 0,5 часов приводит к тому, что в этих условиях образуется одна из известных модификаций ибрутиниба. Получить новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он в чистом виде не удается.
Возможность осуществления предлагаемого изобретения иллюстрируется следующими примерами, но не ограничивается ими.
кип
-2
Пример 1. 50 мл 5,00 мас. % раствора ибрутиниба в органическом растворителе - диметилсульфоксиде (ДМСО), приготовленного из известной кристаллической модификации ибрутиниба - формы А, и диметилсульфоксида марки «ХЧ» ТУ 6-09-3818-77 производства «ООО НПП Викинг», РФ, при 80°С, смешивают с 200 мл воды очищенной по ФС 42-2619-97 (соотношение 1:4) и замораживают со скоростью 60 град./мин вливанием сразу всего объема раствора в предварительно наполненный жидким азотом (Т=-196°С), но не охлажденный предварительно, поддон из нержавеющей стали. Замороженный продукт на поддоне переносят в сублимационную камеру и подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -43°С…-46°С; на продукте -196°С…+50°С и остаточном давлении в камере (8-6)⋅10 Торр в течение 22 ч. Продукт сублимационной сушки - легкий, пушистый порошок белого цвета, помещают в химический термостойкий стакан вместимостью 400 мл, вносят его в предварительно разогретый до 90°С сушильный шкаф и выдерживают при этой температуре в течение 5,0 часов. Выход продукта легкого, порошка белого цвета составил 2,30 г (92,0 мас. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 4 и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, представленными в табл. 3. По данным термоаналитических исследований полученное вещество характеризуется температурой плавления равной 142,3-151,5°С и совпадающей, в пределах ошибки определения, с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло [3,4-d] пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он. По данным ВЭЖХ чистота полученной новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации ибрутиниба составляет 99,67%.
2
-2
кип
Пример 2. 100 мл 2,00 мас. % раствора ибрутиниба в органическом растворителе - метаноле, приготовленного из известной кристаллической модификации ибрутиниба - формы А, и метилового спирта марки «ХЧ» ГОСТ 2222-95 фирмы ООО «Вектон-М», РФ, при 50°С, смешивают с 200 мл воды очищенной по ГФ XIII ФС 2.2.0020.15 ФС (соотношение 1:2) и замораживают со скоростью (2-3)×10 град/мин вливанием раствора небольшими порциями в предварительно охлажденный и наполненный жидким азотом (Т = -196°С) поддон из нержавеющей стали. Замороженный продукт на поддоне переносят в сублимационную камеру и подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -52°С…-56°С; на продукте -196°С…+30°С и остаточном давлении в камере (9-5)⋅10 Торр в течение 26 ч. Продукт сублимационной сушки - легкий, пушистый порошок белого цвета, помещают в химический термостойкий стакан вместимостью 400 мл, вносят его в предварительно разогретый до 110°С сушильный шкаф и выдерживают при этой температуре в течение 0,5 часов. Выход продукта легкого, порошка белого цвета составил 1,88 г (94,0 мас. %). По данным РФА, полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 4 и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, представленными в табл. 3. По данным термоаналитических исследований полученное вещество характеризуется температурой плавления равной (141,8-151,7)°С и совпадающей, в пределах ошибки определения, с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он. По данным ВЭЖХ чистота полученной новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации ибрутиниба составляет 99,72%.
2
-2
кип
Пример 3. 50 мл 0,30 мас. % раствора ибрутиниба в органическом растворителе - ацетонитриле, приготовленного из известной кристаллической модификации ибрутиниба - формы А, и ацетонитрила марки «ХЧ» ТУ 6-094326-76 фирмы «ООО Компонент - Реактив, РФ», при 25°С, смешивают с 150 мл воды очищенной по ГФ XIII ФС 2.2.0020.15 (соотношение 1:3) и замораживают со скоростью примерно 10 град/мин распылением раствора пневматической форсункой при избыточном давлении 0,6 кг/см в реактор, наполненный жидким азотом (Т = -196°С). Замороженный раствор, в виде микрогранул, переносят в поддон из нержавеющей стали и подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -48°С…-54°С; на продукте -196°С…+40°С, и остаточном давлении в камере (6-3)⋅10 Торр в течение 24 ч. Продукт сублимационной сушки - легкий, пушистый порошок белого цвета, помещают в химический термостойкий стакан вместимостью 200 мл, вносят его в предварительно разогретый до 100°С сушильный шкаф и выдерживают при этой температуре в течение 3,0 часов. Выход продукта легкого, порошка почти белого цвета составил 0,14 г (93,0 мас. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 4 и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, представленными в табл. 3. По данным термоаналитических исследований полученное вещество характеризуется температурой плавления равной (142,7-151,2)°С и совпадающей, в пределах ошибки определения, с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он. По данным ВЭЖХ чистота полученной новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации ибрутиниба составляет 99,70%.
Пример 4. К раствору 0,5 кг (1,2939 моль) (3R)-4-Амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидина, синтезированному по известному способу [заявка WO 2017/039425], в 11 л дихлорметана прибавляют при перемешивании 144 г (1,4232 моль) триэтиламина. Полученный раствор охлаждают до 0°С, и к нему прибавляют 123 г (1,3586 моль) акрилоилхлорида в течение 30 минут, поддерживая температуру реакционной смеси не выше +10°С. Далее реакционную смесь перемешивают при 20°С еще 2 ч, после чего переносили в делительную емкость и промывают сначала 2 раза по 6 л 5% водного раствора лимонной кислоты, а затем 10 л концентрированного рассола. Органическую фазу отделяют, дихлорметан отгоняют в вакууме, к остатку прибавляют сухой толуол (12 л). Толуольный раствор упаривают под вакуумом до половины объема, при этом остаточная вода удаляется в форме азеотропа с толуолом. Оставшийся толуольный раствор, содержащий продукт, доводят до кипения при атмосферном давлении, а затем постепенно охлаждают до температуры 45°С в течение часа. В полученный раствор вносят затравку 0,2 г μ-формы ибрутиниба, полученную по предыдущим примерам, и выдерживают при комнатной температуре и медленном перемешивании в течение 14 ч. Образующийся осадок отфильтровывают, промывают на фильтре сухим гептаном (1 л) и высушивают под вакуумом до постоянной массы. Получают 524 г μ-кристаллической формы ибрутиниба. Выход 92%.
Пример 5. Фармацевтическая композиция. Для приготовления 5,00 г известной композиции, включающей в качестве действующего вещества кристаллическую модификацию ибрутиниба и вспомогательные вещества в соотношении (мас. %):
Активное вещество: ибрутиниб
42,42
Целлюлоза микрокристаллическая
45,88
Кроскармеллоза натрия
6,97
Лаурилсульфат натрия
4,24
Магний стеарат
0,49
2,12 г порошка в качестве затравки, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он смешивают в течение 15 минут в керамической ступке с вспомогательными веществами: 2,29 г микрокристаллической целлюлозой (по фармакопее США и Европейской фармакопее), 0,35 г кроскармеллозой натрия (по фармакопее США и Европейской фармакопее), 0,21 г лаурилсульфатом натрия (по фармакопее США и Европейской фармакопее) и 0,03 г магнием стеаратом (по ТУ 6-09-16-1533-90). Полученную смесь подвергали физико-химическим и биологическим методам анализа. По данным РФА в полученной смеси присутствует вещество, которое характеризуется набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической μ - модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло [3,4-d] пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, представленными в табл. 3.
Аналогичным способом и идентичным по составу была приготовлена композиция на основе известной кристаллической модификации ибрутиниба - формы А, которую использовали в качестве исходного вещества. По данным РФА в полученной смеси присутствует вещество, которое характеризуется набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для известной модификации 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, представленными в табл. 2.
Биологические эксперименты проводили на кроликах-самцах массой 2,0-2,5 кг. Для получения надежных результатов в параллельных сериях опытов использовали не менее 5 кроликов. Определение времени появления ибрутиниба в крови проводили методом in vivo при пероральном введении композиции с последующим забором плазмы из вены ушной раковины. Во всех случаях количество вводимого в животное приготовленной смеси составляло 11,79 мг смеси (5,00 мг ибрутиниба). Оказалось, что для композиции, содержащей новую, не известную ранее, кристаллическую μ - модификацию 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он время появления препарата в крови кроликов равно 14±3 мин, а для известной композиции, содержащей в качестве действующего вещества известную кристаллическую модификацию ибрутиниба (форму А) - 26±3 мин.
Таким образом, нами обнаружена новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, предложены способ ее получения и применение ее для приготовления фармацевтической композиции в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза.
отн.
Полученная новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он характеризуется, отличным от известных кристаллических модификаций ибрутиниба набором межплоскостных расстояний (d, ) и соответствующих им интенсивностей (I, %): 15,477 - 42,64%; 11,171 - 19,92%; 9,896 - 17,53%; 8,207 - 35,06%; 7,137 - 28,61%; 6,716 - 27,49%; 6,433 - 39,13%; 6,200 - 36,19%; 5,849 - 35,62%; 5,641 - 43,20%; 5,516 - 43,90%; 5,268 - 46,14%; 5,053 - 49,65%; 4,845 - 59,61%; 4,667 - 70,13%; 4,581 - 63,67%; 4,454 - 69,57%; 4,316 - 59,61%; 4,267 - 57,22%; 4,152 - 100,00%; 4,084 - 73,07%; 3,955 - 53,16%; 3,920 - 50,91%; 3,863 - 47,41%; 3,776 - 52,59%; 3,732 - 39,69%; 3,627 - 35,62%; 3,578 - 39,13%; 3,536 - 34,50%; 3,476 - 35,62%; 3,350 - 43,20%; 3,259 - 31,00%; 3,137 - 29,87%; 3,082 - 32,12%; 2,983 - 25,67%; 2,937 - 25,11%; 2,825 - 22,16%; 2,768 - 19,35%; 2,708 - 20,48%; 2,610 - 16,97%; 2,571 - 15,85%; 2,482 - 16,41%; 2,387 - 17,53%; 2,379 - 16,97%; 2,295 - 17,53%; 2,240 - 14,59%; 2,162 - 14,59%.
Кроме того, новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он отличается повышенной биологической активностью в составе фармацевтической композиции по сравнению с действием известной кристаллической модификации ибрутиниба (форма А), которую использовали в качестве исходного вещества.
Из вышеизложенного можно сделать вывод о том, что заявляемая новая, не известная ранее, кристаллическая μ - модификация 1-[(3R)-3-[4-амино-3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]-1-пиперидил]-2-пропенил-1-он, способ ее получения и применение ее для приготовления фармацевтической композиции в качестве ковалентного селективного ингибитора тирозинкиназы Брутона для лечения мантийноклеточной лимфомы и хронического лимфоцитарного лейкоза являются новыми и удовлетворяют критериям «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».
[1] - WO 2013/184572 A1 от 12.12.2013 г.; [2] - WO 2016/139588 A1 от 9.09.2016 г.; [3] - CN 105646484 А от 8.06.2016 г.; [4] - CN 105646498 А от 8.06.2016 г.; [5] - CN 105646499 А от 8.06.2016 г.; [6] - WO 2016/025720 A1 от 18.02.2016 г.
[7] - WO 2017/029586 A1 от 23.02.2017 г.
[8] - WO 2015/081180 A1 от 4.06.2015 г.; [9] - CN 104327085 А от 8.06.2016 г.; [10] - CN 105294696 А от 3.02.2016 г.; [11] - CN 106117214 А от 16.11.2016 г.
[12] - WO 2015/145415 A2 от 1.10.2015 г.; [13] - ЕР 3243824 Al от 14.11.2017 г.
[13] - ЕР 3243824 A1 от 14.11.2017 г.