CD123-СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ДЛЯ ИММУНОТЕРАПИИ РАКА

1. CD123-специфический химерный антигенный рецептор (123 CAR), который имеет по меньшей мере одну из полипептидных структур, выбранных из V1, V3 и V5, которые проиллюстрированы на фигуре 2, где указанная структура содержит внеклеточный лигандсвязывающий домен, содержащий VH и VL из моноклонального антитела к CD123, шарнир, трансмембранный домен, цитоплазматический домен, включающий сигнальный домен CD3дзета и костимуляторный домен из 4-1ВВ, где последовательность указанного 123 CAR идентична по меньшей мере на 80% SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, либо SEQ ID NO: 46.
2. CD123-специфический химерный антигенный рецептор (123 CAR), который имеет полипептидную структуру V3, которая проиллюстрирована на фигуре 2, по п. 1, где последовательность указанного 123 CAR идентична по меньшей мере на 80% SEQ ID NO: 44.
3. CD123-специфический химерный антигенный рецептор (123 CAR), который имеет полипептидную структуру V3, которая проиллюстрирована на фигуре 2, по п. 1 или 2, где указанная структура содержит внеклеточный лигандсвязывающий домен, содержащий VH и VL из моноклонального антитела к CD123, которая содержит следующие последовательности CDR:
GFTFTDYY (SEQ ID NO: 67), RSKADGYTT (SEQ ID NO: 68),
ARDAAYYSYYSPEGAMDY (SEQ ID NO: 69) и QNVDSA (SEQ ID NO: 70), SAS (SEQ ID NO: 71), QQYYSTPWT (SEQ ID NO: 72),
и указанная структура содержит:
шарнир, трансмембранный домен, цитоплазматический домен, включающий сигнальный домен CD3дзета и костимуляторный домен из 4-1ВВ.
4. CD123-специфический химерный антигенный рецептор (123 CAR) по п. 1 или 2, в котором указанный внеклеточный лигандсвязывающий домен, содержащий VH и VL, является гуманизированным.
5. CD123-специфический химерный антигенный рецептор (123 CAR) по п. 1 или 2, в котором указанный внеклеточный лигандсвязывающий домен, содержащий VH и VL из моноклонального антитела к CD123, содержит следующую последовательность
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXGFTFTDYYXXXXXXXXXXXXXXXXXIRSKADGYTTXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXARDAAYYSYYSPEGAMDYXXXXXXXXXXX (SEQ ID NO: 73) и/или
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXQNVDSAXXXXXXXXXXXXXXXXXSASXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXQQYYSTPWTXXXXXXXXX (SEQ ID NO: 74), в которой X обозначает аминокислоту.
6. CD123-специфический химерный антигенный рецептор (123 CAR) по п. 1 или 2, в котором указанный внеклеточный лигандсвязывающий домен, содержащий VH и VL из моноклонального антитела к CD123, содержит по меньшей мере одну из следующих последовательностей:
(вариант VH1: SEQ ID NO: 60):
EVKLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFTDYYMSWVRQAPGKGLEWVGLIRSKADGYTTEYSASVKGRFTISRDDSKSILYLQMNSLKTEDTAVYYCARDAAYYSYYSPEGAMDYWGQGTLVTVSS,
(вариант VH2: SEQ ID NO: 61):
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFTDYYMSWVRQAPGKGLEWVGLIRSKADGYTTEYSASVKGRFTISRDDSKSILYLQMNSLKTEDTAVYYCARDAAYYSYYSPEGAMDYWGQGTLVTVSS,
(вариант VH3: SEQ ID NO: 62):
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFTDYYMSWVRQAPGKGLEWVGLIRSKADGYTTEYSASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDAAYYSYYSPEGAMDYWGQGTLVTVSS,
(вариант VH4: SEQ ID NO: 63):
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFTDYYMSWVRQAPGKGLEWVGFIRSKADGYTTEYSASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDAAYYSYYSPEGAMDYWGQGTLVTVSS,
(вариант VH5: SEQ ID NO: 64):
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFTDYYMSWVRQAPGKGLEWVGFIRSKADGYTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDAAYYSYYSPEGAMDYWGQGTLVTVSS,
(вариант VH6: SEQ ID NO: 65):
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFTDYYMSWVRQAPGKGLEWVGLIRSKADGYTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDAAYYSYYSPEGAMDYWGQGTLVTVSS,
(вариант VH7: SEQ ID NO: 66):
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCTASGFTFTDYYMSWVRQAPGKGLEWVGFIRSKADGYTTEYAASVKGRFTISRDDSKSIAYLQMNSLKTEDTAVYYCTRDAAYYSYYSPEGAMDYWGQGTLVTVSS,
(вариант VL1: SEQ ID NO: 54):
MADYKDIVMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQNVDSAVAWYQQKPGKAPKALIYSASYRYSGVPSRFSGRGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYSTPWTFGQGTKVEIKR,
(вариант VL2: SEQ ID NO: 55):
MADYKDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQNVDSAVAWYQQKPGKAPKALIYSASYRYSGVPSRFSGRGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYSTPWTFGQGTKVEIKR,
(вариант VL3: SEQ ID NO: 56):
MADYKDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQNVDSAVAWYQQKPGKAPKALIYSASYRYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYSTPWTFGQGTK VEIKR,
(вариант VL4: SEQ ID NO: 57):
MADYKDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQNVDSAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYSTPWTFGQGTKVEIKR,
(вариант VL5: SEQ ID NO: 58):
MADYKDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQNVDSAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYSTPWTFGQGTKVEIKR и
(вариант VL6: SEQ ID NO: 59):
MADYKDIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQNVDSAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYGQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYSTPWTFGQGTKVEIKR, или их комбинацию.
7. CD123-специфический CAR по п. 1 или 2, в котором указанная структура V3 содержит шарнир СD8альфа и трансмембранный домен.
8. CD123-специфический CAR по п. 1 или 2, в котором указанные VH и VL идентичны по меньшей мере на 80% полипептидной последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 19 и 20.
9. CD123-специфический CAR по п. 1 или 2, дополнительно содержащий другой внеклеточный лигандсвязывающий домен, не специфический в отношении CD123.
10. CD123-специфический CAR по п. 1 или 2, дополнительно содержащий сигнальный пептид, предпочтительно имеющий SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2.
11. Полинуклеотид, кодирующий CD123-специфический химерный антигенный рецептор по одному из пп. 1-10.
12. Экспрессионный вектор, содержащий полинуклеотид по п. 11.
13. Сконструированная иммунная клетка, экспрессирующая на мембране клеточной поверхности CD123-специфический химерный антигенный рецептор по одному из пп. 1-10.
14. Сконструированная иммунная клетка по п. 13, полученная из Т-лимфоцитов, устойчивая к противораковому лекарственному средству и несущая делецию в гене, который кодирует альфа-TCR или бета-TCR.
15. Сконструированная иммунная клетка по одному из пп. 13 или 14, где в указанной сконструированной иммунной клетке экспрессия TCR подавлена.
16. Сконструированная клетка по п. 13 или 14, где в указанной иммунной клетке экспрессия по меньшей мере одного белка ГКГС, предпочтительно β2m или HLA, подавлена.
17. Сконструированная клетка по п. 13 или 14, где указанная клетка изменена в результате мутации для придания устойчивости по меньшей мере к одному иммуносупрессорному лекарственному средству, химиотерапевтическому лекарственному средству или противораковому лекарственному средству.
18. Применение сконструированной клетки по одному из пп. 13-17, в терапии.
19. Применение сконструированной клетки по п. 18, где пациент представляет собой человека.
20. Применение сконструированной клетки по одному из пп. 18 или 19, где состояние представляет собой предзлокачественное или злокачественное связанное с раком состояние, отличающееся присутствием экспрессирующих CD123 клеток.
21. Применение сконструированной клетки по п. 20, где состояние представляет собой состояние, отличающееся избыточным количеством экспрессирующих CD123 клеток.
22. Применение сконструированной клетки по п. 20, где злокачественное раковое состояние представляет собой связанное с гематологическим раком состояние.
23. Применение сконструированной клетки по п. 22, где связанное с гематологическим раком состояние представляет собой лейкоз или злокачественные лимфопролиферативные нарушения.
24. Применение сконструированной клетки по п. 23, где указанный лейкоз выбран из группы, состоящей из острого миелогенного лейкоза, хронического миелогенного лейкоза, мелодиспластического синдрома, острого лимфоидного лейкоза, хронического лимфоидного лейкоза и миелодиспластического синдрома.
25. Применение сконструированной клетки по п. 23 или 24, где указанный лейкоз представляет собой острый миелогенный лейкоз (AML).
26. Применение сконструированной клетки по п. 23, где указанный гематологический рак представляет собой злокачественное лимфопролиферативное нарушение.
27. Применение сконструированной клетки по п. 26, где указанное злокачественное лимфопролиферативное нарушение представляет собой лимфому.
28. Применение сконструированной клетки по п. 27, где указанная лимфома выбрана из группы, состоящей из множественной миеломы, неходжскинской лимфомы, лимфомы Беркитта и фолликулярной лимфомы (мелкоклеточной и крупноклеточной).
29. Способ разрушения клетки гематологического рака, включающий контактирование указанной клетки гематологического рака со сконструированной клеткой по одному из пп. 13-17 в количестве, эффективном для разрушения указанной раковой клетки.
30. Способ создания иммунной клетки, включающий:
(а) получение иммунной клетки,
(б) осуществление экспрессии на поверхности указанной клетки по меньшей мере одного CD123-специфического химерного антигенного рецептора по одному из пп. 1-10.
31. Способ создания иммунной клетки по п. 30, включающий:
(а) получение иммунной клетки,
(б) интродукцию в указанную клетку по меньшей мере одного полинуклеотида, кодирующего указанный CD123-специфический химерный антигенный рецептор,
(в) осуществление экспрессии указанного полинуклеотида в указанной клетке.
32. Способ создания иммунной клетки по п. 30, включающий:
(а) получение иммунной клетки,
(б) интродукцию в указанную клетку по меньшей мере одного полинуклеотида, кодирующего указанный CD123-специфический химерный антигенный рецептор,
(в) интродукцию по меньшей мере одного другого химерного антигенного рецептора, который не является специфическим в отношении CD123.
33. Способ лечения индивидуума, который нуждается в этом, включающий:
(а) получение иммунной клетки, которая экспрессирует на поверхности CD123-специфический химерный антигенный рецептор по одному из пп. 1-10,
(б) введение указанных иммунных клеток указанному пациенту.
34. Способ по п. 33, в котором указанную иммунную клетку получают из донора.
35. Способ по п. 33, в котором указанную иммунную клетку получают из организма самого пациента.