АНТИТЕЛА ПРОТИВ РЕЦЕПТОРА ФОЛИЕВОЙ КИСЛОТЫ 1, ИХ ИММУНОКОНЪЮГАТЫ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ

n
1. Иммуноконъюгат, который имеет формулу (A)-[(L)-(C)], где:
(А) представляет собой антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела, которое специфично связывает рецептор фолиевой кислоты 1 человека;
(L) представляет собой линкер и
(C) представляет собой цитотоксический агент;
причем указанный линкер (L) соединяет (A) с (C),
где n представляет собой целое число от 1 до 10; и
при этом антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела содержат:
(a) HC CDR1, содержащий аминокислотную последовательность GYFMN (SEQ ID NO: 1), HC CDR2, содержащий аминокислотную последовательность RIHPYDGDTF (SEQ ID NO: 131), и HC CDR3, содержащий аминокислотную последовательность YDGSRAMDY (SEQ ID NO: 3); и
(b) LC CDR1, содержащий аминокислотную последовательность KASQSVSFAGTSLMH (SEQ ID NO: 7), LC CDR2, содержащий аминокислотную последовательность RASNLEA (SEQ ID NO: 8), и LC CDR3, содержащий аминокислотную последовательность QQSREYPYT (SEQ ID NO: 9).
2. Иммуноконъюгат по п. 1, отличающийся тем, что указанный линкер (L) выбран из группы, состоящей из нерасщепляемого линкера, гидрофильного линкера, линкера на основе двухосновной карбоновой кислоте.
3. Иммуноконъюгат по п. 1, отличающийся тем, что указанный линкер (L) выбран из группы, состоящей из: N-сукцинимидил 4-(малеимидометил) циклогексанкарбоксилата (SMCC); N-сульфосукцинимидил 4-(малеимидометил) циклогексанкарбоксилата (sulfoSMCC); N-сукцинимидил-4-(иодацетил)-аминобензоата (SIAB) и N-сукцинимидил-[(N-малеимидопропионамидо)-тетраэтиленгликолевого] эфира (NHS-PEG4-малеимида).
4. Иммуноконъюгат по п. 1, отличающийся тем, что указанный линкер (L) представляет собой расщепляемый линкер.
5. Иммуноконъюгат по п. 4, отличающийся тем, что указанный линкер (L) выбран из группы, состоящей из: N-сукцинимидил 4-(2-пиридилдитио)пентаноата (SPP) или N-сукцинимидил 4-(2-пиридилдитио)-2-сульфопентаноата (sulfo-SPP); N-сукцинимидил 4-(2-пиридилдитио)бутаноата (SPDB) или N-сукцинимидил 4-(2-пиридилдитио)-2-сульфобутаноата (sulfo-SPDB).
6. Иммуноконъюгат по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что цитотоксический агент выбран из группы, состоящей из: майтансиноида, аналога майтансиноида, бензодиазепина, таксоида, CC-1065, аналога CC-1065, дуокармицина, аналога дуокармицина, калихеамицина, доластатина, аналога доластатина, ауристатина, производного томаимицина и производного лептомицина либо пролекарственной формы указанного цитотоксического агента.
7. Иммуноконъюгат по п. 6, отличающийся тем, что указанный цитотоксический агент представляет собой майтансиноид.
8. Иммуноконъюгат по п. 7, отличающийся тем, что указанный цитотоксический агент представляет собой N(2′)-деацетил-N(2′)-(3-меркапто-1-оксопропил)-майтансин (DM1) или N(2′)-деацетил-N2-(4-меркапто-4-метил-1-оксопентил)-майтансин (DM4).
9. Иммуноконъюгат по п. 7, отличающийся тем, что указанный линкер представляет собой N-сукцинимидил 4-(2-пиридилдитио)-2-сульфобутаноат (sulfo-SPDB) и указанный цитотоксический агент представляет собой N(2′)-деацетил-N2-(4-меркапто-4-метил-1-оксопентил)-майтансин (DM4).
10. Иммуноконъюгат по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что указанные антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела содержат вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11.
11. Иммуноконъюгат по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что указанные антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела содержат легкую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13.
12. Иммуноконъюгат по любому из пп. 1-11, содержащий от 2 до 6 (С) на каждый (А).
13. Иммуноконъюгат по любому из пп. 1-12, отличающийся тем, что указанные антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела содержат: Fab, Fab', F(ab')2, одноцепочечный Fv или scFv, дисульфидно-связанный Fv, интратело, IgG-CH2, минитело, F(ab')3, тетратело, триатело, диатело, DVD-Ig, mAb2, (scFv)2 или scFv-Fc.
14. Иммуноконъюгат по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что указанные антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела связываются с рецептором фолиевой кислоты 1 человека с Kd от приблизительно 1,0 до приблизительно 10 нМ.
15. Иммуноконъюгат по любому из пп. 1-14, отличающийся тем, что указанный иммуноконъюгат подходит для терапии рака, причем указанный рак характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
16. Фармацевтическая композиция, подходящая для терапии рака, содержащая терапевтически эффективное количество иммуноконъюгата по любому из пп. 1-15 и фармацевтически приемлемый носитель, причем указанный рак характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
17. Фармацевтическая композиция по п. 16, отличающаяся тем, что указанный иммуноконъюгат содержит в среднем от приблизительно 3 до приблизительно 4 (С) на каждый (А).
18. Иммуноконъюгат или фармацевтическая композиция по любому из пп. 15-17, отличающиеся тем, что указанный рак выбран из группы, состоящей из рака яичника, рака головного мозга, рака молочной железы, рака матки, рака эндометрия, рака поджелудочной железы, рака почки, рака брюшины и рака легкого.
19. Иммуноконъюгат или фармацевтическая композиция по любому из пп. 15-17, отличающиеся тем, что указанный рак представляет собой рак эндометрия.
20. Иммуноконъюгат или фармацевтическая композиция по любому из пп. 15-17, отличающиеся тем, что указанный рак представляет собой рак брюшины.
21. Способ лечения рака у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества иммуноконъюгата по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по п. 16 или 17, причем указанный рак характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
22. Способ по п. 21, отличающийся тем, что указанный рак выбран из группы, состоящей из рака яичника, рака головного мозга, рака молочной железы, рака матки, рака эндометрия, рака поджелудочной железы, рака почки, рака брюшины и рака легкого
23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что указанный рак представляет собой рак эндометрия.
24. Способ по п. 22, отличающийся тем, что указанный рак представляет собой рак брюшины.
25. Способ ингибирования роста опухоли у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества иммуноконъюгата по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по п. 16 или 17, причем указанная опухоль характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
26. Способ по п. 25, отличающийся тем, что указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из опухоли яичника, опухоли головного мозга, опухоли молочной железы, опухоли матки, опухоли эндометрия, опухоли поджелудочной железы, опухоли почки, опухоли брюшины и опухоли легкого.
27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что указанная опухоль представляет собой опухоль эндометрия.
28. Способ по п. 26, отличающийся тем, что указанная опухоль представляет собой опухоль брюшины.
29. Антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела, специфически связывающиеся с рецептором фолиевой кислоты 1 человека, при этом указанные антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела содержат:
(а) CDR1 тяжелой цепи, содержащий TNYWMQ (SEQ ID NO: 60); CDR2 тяжелой цепи, содержащий AIYPGNGDSR (SEQ ID NO: 61); CDR3 тяжелой цепи, содержащий RDGNYAAY (SEQ ID NO: 62), CDR1 легкой цепи, содержащий RASENIYSNLA (SEQ ID NO: 57); CDR2 легкой цепи, содержащий AATNLAD (SEQ ID NO: 58); и CDR3 легкой цепи, содержащий QHFWASPYT (SEQ ID NO: 59);
(b) CDR1 тяжелой цепи, содержащий TNYWMY (SEQ ID NO: 66); CDR2 тяжелой цепи, содержащий AIYPGNSDTT (SEQ ID NO: 67); CDR3 тяжелой цепи, содержащий RHDYGAMDY (SEQ ID NO: 68); CDR1 легкой цепи, содержащий RASENIYTNLA (SEQ ID NO: 63); CDR2 легкой цепи, содержащий TASNLAD (SEQ ID NO: 64); и CDR3 легкой цепи, содержащий QHFWVSPYT (SEQ ID NO: 65);
(c) CDR1 тяжелой цепи, содержащий SSFGMH (SEQ ID NO: 72); CDR2 тяжелой цепи, содержащий YISSGSSTIS (SEQ ID NO: 73); CDR3 тяжелой цепи, содержащий EAYGSSMEY (SEQ ID NO: 74); CDR1 легкой цепи, содержащий RASQNINNNLH (SEQ ID NO: 69); CDR2 легкой цепи, содержащий YVSQSVS (SEQ ID NO: 70); и CDR3 легкой цепи, содержащий QQSNSWPHYT (SEQ ID NO: 71); или же
(d) CDR1 тяжелой цепи, содержащий TSYTMH (SEQ ID NO: 78); CDR2 тяжелой цепи, содержащий YINPISGYTN (SEQ ID NO: 79); CDR3 тяжелой цепи, содержащий GGAYGRKPMDY (SEQ ID NO: 80); CDR1 легкой цепи, содержащий KASQNVGPNVA (SEQ ID NO: 75); CDR2 легкой цепи, содержащий SASYRYS (SEQ ID NO: 76); и CDR3 легкой цепи, содержащий QQYNSYPYT (SEQ ID NO: 77).
30. Фармацевтическая композиция, подходящая для терапии рака, которая содержит терапевтически эффективное количество антитела или антиген-связывающего фрагмента антитела по п. 29 и фармацевтически приемлемый носитель, при этом указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент содержат Fc-область, выбранную из группы, состоящей из: Fc-области IgG, Fc-области IgE и Fc-области IgA, и где указанный рак характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
31. Диагностическая композиция, подходящая для обнаружения присутствия рецептора фолиевой кислоты 1 человека, при этом указанная диагностическая композиция содержит антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела по п. 29 и дополнительно содержащая метку.
32. Набор, подходящий для лечения рака у субъекта, включающий один или более контейнеров, содержащих антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела по п. 29, при этом указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент содержат Fc-область, выбранную из группы, состоящей из: Fc-области IgG, Fc-области IgE и Fc-области IgA, и где указанный рак характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
33. Способ лечения рака у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела или антиген-связывающего фрагмента антитела по п. 29, или фармацевтической композиции по п. 30, при этом указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент содержат Fc-область, выбранную из группы, состоящей из: Fc-области IgG, Fc-области IgE и Fc-области IgA, и где указанная опухоль характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
34. Способ ингибирования роста опухоли у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела или антиген-связывающего фрагмента антитела по п. 29, или фармацевтической композиции по п. 30, при этом указанное антитело или его антиген-связывающий фрагмент содержат Fc-область, выбранную из группы, состоящей из: Fc-области IgG, Fc-области IgE и Fc-области IgA, и где указанная опухоль характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
n
35. Иммуноконъюгат, подходящий для терапии рака, при этом указанный иммуноконъюгат имеет формулу (A)-[(L)-(C)], при этом:
(А) представляет собой антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела по п. 29; и
(L) представляет собой линкер; и
(C) представляет собой цитотоксический агент;
причем указанный линкер (L) соединяет (A) с (C),
где n представляет собой целое число от 1 до 10; и
при этом указанный рак характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
36. Фармацевтическая композиция, подходящая для терапии рака, содержащая терапевтически эффективное количество иммуноконъюгата по п. 35 и фармацевтически приемлемый носитель, причем указанный рак характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
37. Набор, подходящий для лечения рака у субъекта, содержащий один или более контейнеров, содержащих иммуноконъюгат по любому из пп. 1-15 и 35, причем указанный рак характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
38. Способ лечения рака у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества иммуноконъюгата по п. 35 или фармацевтической композиции по п. 36, причем указанная опухоль характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
39. Способ ингибирования роста опухоли у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества иммуноконъюгата по п. 35 или фармацевтической композиции по п. 36, причем указанная опухоль характеризуется повышенной экспрессией рецептора фолиевой кислоты 1 человека.
40. Выделенный полинуклеотид, где нуклеотидная последовательность указанного полинуклеотида содержит:
(a) SEQ ID NO: 121 и/или SEQ ID NO: 120;
(b) SEQ ID NO: 123 и/или SEQ ID NO: 122;
(c) SEQ ID NO: 125 и/или SEQ NO: 124 и
(d) SEQ ID NO: 127 и/или SEQ ID NO: 126.
41. Вектор, подходящий для экспрессии одного или более полинуклеотидов в клетке-хозяине, при этом указанный вектор содержит полинуклеотид по п. 40.
42. Вектор, подходящий для экспрессии одного или более полинуклеотидов в клетке-хозяине, при этом указанный вектор содержит:
(a) SEQ ID NO: 121 и SEQ ID NO: 120;
(b) SEQ ID NO: 123 и SEQ ID NO: 122;
(c) SEQ ID NO: 125 и SEQ NO: 124 и
(d) SEQ ID NO: 127 и SEQ ID NO: 126.
43. Выделенная клетка-хозяин, подходящая для экспрессии антитела, которое специфически связывается с рецептором фолиевой кислоты 1 человека, при этом указанная выделенная клетка-хозяин содержит выделенный полинуклеотид по п. 40 или вектор по п. 41 или 42.