СПОСОБ СКРИНИНГА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ НА ОСНОВЕ КЛЕТОК И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ

1. Способ скринингового анализа лекарственных веществ на основе клеток, включающий следующие этапы:
культивирование популяции клеток в культуральной среде,
определение как минимум двух моментов времени мониторинга в зависимости от как минимум одного фактора из: типа клеток, физиологических характеристик клеток, физиологических характеристик формируемой ткани, механизма действия лекарственного вещества и культуральной среды,
обработка лекарственными веществами культивируемых клеток по меньшей мере в один момент обработки,
мониторинг влияния указанного лекарственного вещества на клетки или сформированные ткани как минимум в два указанных момента времени мониторинга.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные моменты времени мониторинга выбирают из группы, состоящей из:
момента времени, относящегося к ранней стадии определенной клетки, предпочтительно между четырьмя и семью днями культивирования клеток в среде, и
момента времени для поздней стадии, предпочтительно между четырнадцатью и семнадцатью днями после культивирования клеток в среде, и
в момент времени, определенный по отсутствию или присутствию специфических физиологических характеристик, например, гипоксии или изменению кинетики роста клеток, и
момента времени, относящегося к измерению эффективности лекарственного вещества после периода восстановления без лекарственного вещества.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мониторинг пролиферации клеток продолжается от одного до семи дней или более, после прекращения обработки лекарственным веществом.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки культивируют в среде, которая включает структурное соединение и линкерное соединение, предпочтительно включающее разветвленный полиэтиленгликоль с винилсульфоновыми концевыми группами и пептид, содержащий по меньшей мере два цистеина или две общие тиоловые группы, обеспечивающие полимеризацию трехмерного матрикса.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанная трехмерная среда способствует трехмерному росту находящихся в ней клеток, предпочтительно сфероидному росту.
6. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанное трехмерное окружение помещают в резервуар, такой как устройство для заливки гелей или стандартное устройство для культивирования клеток, предпочтительно 384-луночный культуральный планшет.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки выбирают из группы включающей любой тип клеток, клеточную линию, дифференцированную клетку и раковую клетку, такую как раковая клетка толстого кишечника, поджелудочной железы и яичника.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки представляют собой клетки, рост которых стимулируется обработкой лекарственным веществом.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что лекарственные вещества выбирают из группы, состоящей из:
i) любого химического, природного или синтетического вещества и любого вещества известных панелей лекарственных веществ; или
ii) любой комбинации веществ согласно i);
iii) любого вещества/веществ согласно i) или ii), в растворе или в комбинации с любым носителем, наночастицей или средством доставки.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мониторинг характеристик клеток осуществляется путем анализа метаболической активности,
и/или анализа способом проточной цитометрии,
и/или анализа содержания ДНК,
и/или количественного анализа белков,
и/или подсчета клеток,
и/или анализа изображений,
и/или анализа уровней маркеров гипоксии и ангиогенеза,
и/или анализа уровней рибонуклеиновой кислоты (РНК),
и/или анализа уровней экспрессии белков,
и/или анализа способом масс-спектрометрии,
и/или анализа способом иммуногистохимии.
11. Способ по пп. 1-10, отличающийся тем, что определяют максимальную переносимую дозу лекарственного вещества для данного типа клеток.
12. Способ по пп. 1-10, отличающийся тем, что определяют минимальную эффективную дозу лекарственного вещества для данного типа клеток.
13. Применение способа по пп. 1-12 для оценки:
i) перепрограммирования дифференцированных клеток под действием применяемого вещества и
ii) дифференцировки стволовых клеток под действием применяемого вещества.