СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОНОСАХАРИДОВ В ВАГИНАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ

3
3
Способ определения моносахаридов в вагинальной жидкости, отличающийся тем, что используют метод газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием для анализа образцов, подготовленных путем высушивания 10 см вагинального смыва при температуре 30°C в течение 24 ч для получения сухого остатка, затем получают триметилсилильные производные моносахаридов по следующей схеме: навеска сухого остатка массой 35 мг обрабатывают 300 мкл смеси N, О-бис-(триметилсилил)-ацетамида, триметилхлорсиланом, N-триметилсилилимидазолом в соотношении 3:2:3 (Sylon BTZ, Supelco) и 40 мкл N, О-бис-(триметилсилил)-трифторацетамида, приготовленную смесь выдерживают в виале при 80°C в течение 15 мин, затем полученные производные исследуют на хромато-масс-спектрометре с масс-селективным детектором при температуре аналитического интерфейса 280°C и температуре испарителя 280°C; разделение осуществляют на кварцевой капиллярной колонке HP-5MS длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, толщина пленки неподвижной фазы 0,25 мкм при программировании температуры: 120°C в течение 5 мин, далее нагревают со скоростью 10°C/мин до 130°C, выдерживают систему - 0 мин, далее со скоростью 3°C/мин до 210°C - 0 мин, затем со скоростью 15°C/мин до 240°C - 0 мин, со скоростью 3°C/мин до 265°C - 10 мин и со скоростью 15°C/мин до 295°C - 15 мин, время анализа - 70 мин, скорость потока газа-носителя (гелия) - 1 см/мин, средняя линейная скорость газа-носителя - 37,6 см/сек, диапазон сканирования m/z 45.0-350.0 а.е.м., объем вводимой пробы - 5 мкл; для идентификации ТМС-производных моносахаридов по их масс-спектрам используют базу данных NIST, входящих в состав штатной программы обработки данных масс-спектрометра; определяют 1,2,3,4,6-пентакис-O-(триметилсилил)-глюкопираноза, 2,3,4,5,6-пентакис-O-(триметилсилил)-D-галактоза, тетракис (триметилсилиловый) эфир L(-)-фукозы, 5-(триметилсилил)-глюкоза, 5-(триметилсилил)-D-галактоза, 1,2,3,4-тетракис-O-(триметилсилил)-.beta.-D-ксилопираноза, 1,2,3,4,6-пентакис-O-(триметилсилил) гексапираноза, 1,2,3,4,6-пентакис-O-(триметилсилил)-.alpha.-D-галактопираноза, 2,3,4,5,6-пентакис-O-(триметилсилил)-талоза, 2,3,4,5,6-пентакис-О-(триметилсилил)-D-манноза, пер-TMC фукоза, 1,2,3,4,6-пентакис-O-(триметилсилил)-D-маннопираноза.