СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ЛИПИДОВ ИЗ ЛИПИДСОДЕРЖАЩЕЙ БИОМАССЫ

1. Способ выделения липида, содержащего полиненасыщенные жирные кислоты (PUFA), из биомассы, предусматривающий следующие стадии:
a) обеспечение суспензии биомассы, содержащей клетки, которые содержат липид, содержащий PUFA;
b) необязательно лизирование клеток биомассы;
c) концентрирование суспензии до общего содержания сухого вещества (TDM), составляющего от 20 до 60 вес. %, если суспензия имеет более низкое содержание TDM;
d) регулирование температуры в суспензии от 20°C до 100°C, предпочтительно от 25, 30, 40, 50 или 60°C до 100°C, более предпочтительно от 65°C до 95°C, в частности от 70 до 90°C;
e) поддержание температуры в диапазоне, указанном в (d), в течение по меньшей мере 1 часа, предпочтительно в течение по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 часов, более предпочтительно в течение периода от 1 до 36 часов, в частности в течение периода от 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 часов до 36 часов, более предпочтительно от 10 до 24 часов, при добавлении всего от 7,5 до 25 моль, предпочтительно от 8,5 до 22 моль, в частности от 10 до 20, более предпочтительно от 11 до 18, наиболее предпочтительно от 12 до 17 моль эквивалента основания к 10 кг всего сухого вещества, содержащегося в суспензии.
2. Способ выделения липида, содержащего полиненасыщенные жирные кислоты (PUFA), из биомассы по п. 1, предусматривающий следующие стадии:
a) обеспечение суспензии биомассы, содержащей клетки, которые содержат липид, содержащий PUFA;
b) необязательно лизирование клеток биомассы;
c) концентрирование суспензии до общего содержания сухого вещества (TDM), составляющего от 20 до 60 вес. %, если суспензия имеет более низкое содержание TDM;
d) регулирование температуры в суспензии от 20°C до значения ниже 80°C, предпочтительно температуры от 25°C до значения ниже 60°C, более предпочтительно от 25°C до 58°C, в частности от 30°C до 55°C, наиболее предпочтительно температуры от 30°C до 50°C;
e) поддержание температуры в диапазонах, указанных в (d), в течение по меньшей мере 1 часа, предпочтительно в течение по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 часов, более предпочтительно в течение периода от 1 до 36 часов, в частности в течение периода от 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 часов до 36 часов, более предпочтительно от 10 до 24 часов, при добавлении всего от 7,5 до 25 моль, предпочтительно от 8,5 до 22 моль, в частности от 10 до 20, более предпочтительно от 11 до 18, наиболее предпочтительно от 12 до 17 моль эквивалента основания к 10 кг всего сухого вещества, содержащегося в суспензии.
3. Способ выделения липида, содержащего полиненасыщенные жирные кислоты (PUFA), из биомассы по п. 1, предусматривающий следующие стадии:
a) обеспечение суспензии биомассы, содержащей клетки, которые содержат липид, содержащий PUFA;
b) необязательно лизирование клеток биомассы;
c) концентрирование суспензии до общего содержания сухого вещества (TDM), составляющего от 20 до 60 вес. %, если суспензия имеет более низкое содержание TDM;
d) регулирование температуры в суспензии от 20°C до 100°C, предпочтительно от 25, 30, 40 или 50°C до 100°C, более предпочтительно от 60°C до 95°C, в частности от 70 до 90°C;
e) поддержание температуры в диапазонах, указанных в (d), в течение периода менее 10 часов, в частности в течение периода от 1 до менее 10 часов, предпочтительно не более 8 часов, в частности от 1 или 2 до 8 часов, более предпочтительно не более 6 часов, в частности от 1, 2 или 3 до 6 часов, при добавлении всего от 7,5 до 25 моль, предпочтительно от 8,5 до 22 моль, в частности от 10 до 20, более предпочтительно от 11 до 18, наиболее предпочтительно от 12 до 17 моль эквивалента основания к 10 кг общего содержания сухого вещества, содержащегося в суспензии.
4. Способ по любому из предыдущих пунктов, где pH на стадии (e) поддерживают на уровне ниже 11,5, предпочтительно ниже 11, более предпочтительно на уровне ниже 10,5, в частности в диапазоне от 7,5 до 11,5, предпочтительно в диапазоне от 8 до 11, более предпочтительно в диапазоне от 8 до 10,5, в частности в диапазоне от 8,0 до 10,0.
5. Способ выделения липида, содержащего полиненасыщенные жирные кислоты (PUFA), из биомассы по п. 1, предусматривающий следующие стадии:
a) обеспечение суспензии биомассы, содержащей клетки, которые содержат липид, содержащий PUFA;
b) необязательно лизирование клеток биомассы;
c) концентрирование суспензии до общего содержания сухого вещества (TDM), составляющего от 20 до 60 вес. %, предпочтительно от 25 до 60 вес. %, в частности от 30 до 60 вес. %, если суспензия имеет более низкое содержание TDM;
d) регулирование температуры в суспензии от 25°C до 100°C, предпочтительно от 30, 40 или 50°C до 100°C, более предпочтительно от 60°C до 95°C, в частности от 70 до 90°C;
e) поддержание температуры в диапазонах, указанных в (d), в течение по меньшей мере 1 часа, предпочтительно в течение по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 часов, более предпочтительно в течение периода от 1 до 36 часов, в частности в течение периода от 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 часов до 36 часов, более предпочтительно от 10 до 24 часов, при добавлении всего от 7,5 до 25 моль, предпочтительно от 8,5 до 18,5 моль, в частности от 10 до 17, более предпочтительно от 11 до 16, наиболее предпочтительно от 12 до 15 моль эквивалента основания к 10 кг общего содержания сухого вещества, содержащегося в суспензии, при этом pH композиции постоянно поддерживают на уровне ниже 9,0, предпочтительно на уровне ниже 8,5, в частности поддерживают в диапазоне от 8,0 до 8,9, более предпочтительно в диапазоне от 8,0 до 8,5.
6. Способ по любому из предыдущих пунктов, где основание выбрано из гидроксидов, в частности гидроксида натрия, гидроксида лития, гидроксида калия и/или гидроксида кальция, и/или карбонатов, в частности карбоната натрия, карбоната калия и/или карбоната магния, и/или бикарбонатов, в частности бикарбоната лития, бикарбоната натрия и/или бикарбоната калия, при этом предпочтительным является гидроксид натрия.
7. Способ по любому из пп. 1-3 или 5, где концентрирование суспензии на стадии (c) осуществляют путем выпаривания воды при температуре не выше 100°C, предпочтительно от 70°C до 100°C, более предпочтительно от 80°C до 90°C.
8. Способ по любому из пп. 1-6, где суспензия, обеспечиваемая на стадии (a), уже характеризуется общим содержанием сухого вещества, составляющим от 20 до 60 вес. %, предпочтительно от 25 до 60 вес. %, более предпочтительно от 30 до 55 вес. %.
9. Способ по любому из предыдущих пунктов, где для лизирования клеток не применяют солей или применяют лишь малые их количества, где термин «малые количества» предпочтительно означает, что соли добавляют в количестве менее 0,1 г/л ферментационного бульона.
10. Способ по любому из предыдущих пунктов, где для лизирования клеток не применяют органических растворителей или применяют лишь малые их количества, где термин «малые количества» предпочтительно означает, что органические растворители добавляют в количестве менее 0,1 г/л ферментационного бульона.
11. Способ по любому из предыдущих пунктов, где лизирование клеток биомассы осуществляют ферментативно, механически, химически и/или физически.
12. Способ по любому из пп. 1-8, где стадии (d) и (e) осуществляют без предварительного лизирования клеток биомассы.
13. Способ по любому из предыдущих пунктов, предусматривающий в качестве дополнительной стадии собирание масла, содержащего PUFA, где собирание масла, содержащего PUFA, предпочтительно включает нейтрализацию деэмульгированной суспензии и последующее отделение полученной таким образом маслосодержащей легкой фазы от тяжелой фазы, содержащей воду, соли, остаточное масло и клеточный дебрис.
14. Способ по любому из предыдущих пунктов, где суспензию обеспечивают в виде ферментационного бульона с плотностью биомассы, составляющей предпочтительно по меньшей мере 80, 100, 120 или 140 г/л.
15. Способ по любому из предыдущих пунктов, где клетки, которые содержат липид, содержащий PUFA, выбраны из водорослей, грибов, простейших, бактерий, микроводорослей, растительных клеток и их смесей, где микроводоросли предпочтительно выбраны из царства Stramanopiles, в частности семейства Thraustochytrids, предпочтительно рода Schizochytrium.