СИСТЕМА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НЕПРОЦЕССИРОВАННОГО И ЧАСТИЧНО ПРОЦЕССИРОВАННОГО НЕЙРОТОКСИНА ТИПА А

1. Способ определения количества частично процессированного и/или непроцессированного нейротоксин А полипептида (BoNT/A) в растворе, содержащем процессированный и частично процессированный и/или непроцессированный BoNT/A, при этом способ содержит стадии:
i) контактирование образца указанного раствора с захватывающим антителом, которое специфически связывается с частично процессированным и непроцессированным BoNT/A в условиях, допускающих связывание указанного антитела с указанными частично процессированным и непроцессированным BoNT/A, в результате чего формируется комплекс, и
ii) определение количества комплекса, образованного на стадии i), где количество комплекса является показателем количества частичного процессированного и/или непроцессированного BoNT/A в указанном растворе,
где захватывающее антитело получено способом, который содержит:
a) контактирование поликлональной антисыворотки из животного, которое было иммунизировано пептидным иммуногеном, содержащим аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, со следующими захватывающими пептидами SLD, LDK и YNK в условиях, допускающих формирование захватывающих комплексов, содержащих неспецифические антитела, составленных поликлональной антисывороткой и захватывающими пептидами;
b) извлечение захватывающих комплексов из поликлональной антисыворотки;
c) контактирование поликлональной антисыворотки с пептидом, содержащим SEQ ID NO: 1, в условиях, допускающих формирование комплекса, содержащего указанный выше пептид и антитело, которое специфически связывается с непроцессированным или частично процессированным нейротоксин полипептидом;
d) извлечение комплекса, образованного на стадии с), из антисыворотки; и
e) высвобождение антитела, которое специфически связывается с непроцессированным или частично процессированным нейротоксин полипептидом, из указанного комплекса.
2. Способ по п.1, в котором указанный иммуноген дополнительно содержит KLH.
3. Способ по п.2, в котором указанный KLH связывается с пептидом, имеющим последовательность SEQ ID NO: 1, через линкер N-[гамма-малеимидобутирилокси]сукцинимидный эфир (ГМБС).
4. Способ по п.1, в котором указанные условия на стадии i) включают присутствие детергента.
5. Способ по п.4, в котором указанный детергент представляет собой Tween 20.
6. Способ по п.4, в котором указанный детергент присутствует в концентрации в диапазоне от 0,01% (об./об.) до 10% (об./об.).
7. Способ по п.6, в котором указанная концентрация находится в диапазоне от 0,2% (об./об.) до 0,8% (об./об.) или в диапазоне от 0,3% (об./об.) до 0,6% (об./об.).
8. Способ по п.1, в котором указанные условия на стадии i) включают присутствие физиологического раствора с фосфатным буфером или трис буфером.
9. Способ по п.8, в котором указанный раствор содержит NaCl в концентрации в диапазоне от 150 до 350 мМ.
10. Способ по п.9, в котором указанная концентрация находится в диапазоне от 200 до 300 мМ.
11. Способ по любому из п.п.1-10, в котором указанная стадия ii) включает сравнение количества комплекса со стандартом, благодаря чему найденные количества комплекса могут быть соотнесены с заданными количествами непроцессированного BoNT/A полипептида.
12. Устройство для определения количества частично процессированного и/или непроцессированого нейротоксин А полипептида (BoNT/A) в растворе, содержащем процессированные и частично процессированные и/или непроцессированные BoNT/A полипептиды, которое содержит:
i) блок анализа, содержащий захватывающее антитело, которое описано в любом из п.п.1-3, где блок анализа предусматривает контактирование образца указанного раствора с указанным захватывающим антителом, и
ii) блок оценки, содержащий систему считывания для определения количества комплекса, образованного в блоке анализа, и систему обработки данных, которая предусматривает вычисление количества частично процессированных и/или непроцессированных BoNT/A полипептидов в указанном растворе на основании выявленного количества комплекса.
13. Набор для определения количества частично процессированного и/или непроцессированного нейротоксин А полипептида (BoNT/A) в растворе, содержащем процессированные и частично процессированные и/или непроцессированные BoNT/A полипептиды, который содержит захватывающее антитело по любому из п.п.1-3.
14. Набор по п.13, где указанный набор дополнительно содержит по меньшей мере одно маркирующее вещество для определения количества комплекса, содержащего захватывающее антитело и процессированные и непроцессированные и/или частично процессированные BoNT/A полипептиды.