АНАЛИЗ СВЯЗЫВАНИЯ

1. Способ определения активности связывания с ГКГС класса II средства, содержащего белок гена активации лимфоцитов 3 (LAG-3) или его фрагмент, производное или аналог, при этом указанный способ включает в себя определение связывания белка LAG-3, его фрагмента, производного или аналога с молекулами ГКГС класса II с использованием биослойной интерферометрии (BLI).
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что включает в себя определение связывания белка LAG-3, его фрагмента, производного или аналога с молекулами ГКГС класса II, присутствующими на клетках, экспрессирующих ГКГС класса II.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что белок LAG-3, его фрагмент, производное или аналог иммобилизованы на слое реагента зонда BLI, и клетки, экспрессирующие ГКГС класса II, находятся в растворе.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что клетки, экспрессирующие ГКГС класса II, присутствуют при плотности, по меньшей мере, 1E6/мл, предпочтительно, по меньшей мере, 4E6/мл или 8E6/мл.
5. Способ по п. 3 или 4, отличающийся тем, что слой реагента предварительно обрабатывают блокирующим реагентом, чтобы минимизировать неспецифическое связывание клеток, экспрессирующих ГКГС класса II, со слоем реагента.
6.  Способ по п. 5, отличающийся тем, что блокирующий реагент содержит альбумин, предпочтительно бычий сывороточный альбумин (БСА).
7. Способ по любому из пп. 2-6, отличающийся тем, что клетки, экспрессирующие ГКГС класса II, представляют собой клетки Raji.
8. Способ по любому из пп. 2-7, отличающийся тем, что клетки, экспрессирующие ГКГС класса II, представляют собой оттаявшие, готовые к использованию клетки, полученные из замороженного исходного раствора.
9. Способ по любому из предыдущих пунктов, который включает определение степени связывания белка LAG-3, фрагмента, производного или аналога с молекулами ГКГС класса II для множества различных концентраций белка LAG-3, его фрагмента, производного или аналога, и генерирование кривой доза-ответ для скоростей связывания.
10. Способ по любому из предыдущих пунктов, который дополнительно включает определение активности связывания с ГКГС класса II контрольного образца белка LAG-3 или его фрагмента, производного или аналога путем определения связывания белка, фрагмента, производного или аналога эталонного образца LAG-3 с молекулами ГКГС класса II с использованием BLI в тех же условиях, которые используются для определения связывания средства белка LAG-3, его фрагмента, производного или аналога, и сравнение активности связывания ГКГС класса II, определенной для эталонного образца, с активностью связывания ГКГС класса II, определенной для средства.
11. Способ по п. 10, отличающийся тем, что активность связывания с ГКГС класса II контрольного образца установлена как 100%.
12. Способ по п. 10 или 11, отличающийся тем, что контрольный образец содержит белок LAG-3 или его фрагмент, производное или аналог, который был обработан для снижения его активности связывания с ГКГС класса II.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что белок LAG-3, его фрагмент, производное или аналог эталонного образца дегликозилирован, хранится при 37°С в течение по меньшей мере 12 дней, окисляется, денатурируется кислотным или щелочным воздействием, или подвергается воздействию света в течение не менее 5 дней.
14. Сенсор для BLI для определения активности связывания с ГКГС класса II белка LAG-3 или его фрагмента, производного или аналога, который содержит слой реагента, на котором иммобилизированы белок LAG-3 или его фрагмент, производное или аналог.
15. Сенсор по п. 14, отличающийся тем, что указанный слой реагента предварительно обработан блокирующим реагентом для минимизации неспецифического связывания клеток, экспрессирующих ГКГС класса II, со слоем реагента.
16. Сенсор по п.15, отличающийся тем, что указанный блокирующий реагент содержит альбумин, предпочтительно БСА.
17. Набор для определения активности связывания с ГКГС класса II белка LAG-3 или его фрагмента, производного или аналога, который включает зонд BLI, имеющий слой реагента, на котором белок LAG-3 или его фрагмент, производное или аналог иммобилизованы, а также клетки, экспрессирующие ГКГС класса II.
18. Набор по п. 17, отличающийся тем, что слой реагента зонда BLI предварительно обработан блокирующим реагентом, чтобы минимизировать неспецифическое связывание клеток, экспрессирующих ГКГС класса II, со слоем реагента.
19. Набор по п. 18, отличающийся тем, что блокирующий реагент содержит альбумин, предпочтительно БСА.
20. Набор по любому из пп. 17-19, отличающийся тем, что клетки, экспрессирующие ГКГС класса II, представляют собой замороженные клетки.
21. Набор по любому из пп. 17-20, отличающийся тем, что клетки представляют собой клетки Raji.
22. Набор по любому из пп. 17-21, отличающийся тем, что клетки присутствуют при плотности, по меньшей мере, 1E6/мл, предпочтительно, по меньшей мере, 4E6/мл или 8E6/мл.
23. Набор по любому из пп.17-22, который дополнительно включает эталонный образец, содержащий белок LAG-3 или его фрагмент, производное или аналог.
24. Набор по п. 23, отличающийся тем, что активность связывания c ГКГС класса II эталонного образца известна.