Состояние иммунной системы у детей с хроническими воспалительными заболеваниями легких

ЛИТЕРАТУРА

1. Потапов А.С. Влияние инфракрасной лазеротерапии на состояние местного иммунитета при хроническом гастрите у детей / А.С.Потапов, Р.П. Нарциссов. // Рос. журн. гастроэнтерол., ге-патол., колопроктол. - 1998. - №4. - С. 106-108.

2. Жильников Д.В. Лазерная терапия у детей с хроническим активным гастродуоденитом. / Д.В.Жильников, В.Ф.Барыбин, И.А.Захарова. // Гастробюллетень. - 2001. - № 2-3. - С. 36.

3. Сравнение действия лазерного светодиодного облучения крови при лечении эндогенной интоксикации/ Пастухова Н.К., Чаленко В.В., Жемков В.Ф., Савинов И.П. // Лазерная медицина. - 1997. - Т. 1, вып. 2. - С. 32.

4. Калинина Е.Е. Применение низкоинтенсивного лазерного излечения в комплексном лечении хронического обструктивного бронхита. / Е.Е.Калинина, Н.А.Жук, В.Г.Ананченко. // Лазерная медицина. - 1997. -Т.1, вып. 2. - С. 29-30.

5. Никитин А.В. Лазеротерапия в гастроэнтерологии / А.В.Никитин, В.В.Лахин, И.А.Гришина. //Лазерная медицина. - 1997. - Т.1, вып. 2 - С. 31

6. Илларионов В.Е. Основы лазерной терапии. / В.Е.Илларионов, В.И.Козлов, П.И.Чалый-М., 1992.-219 с.

7. Егоршина Д.А. Действие излучения лазера малой мощности на клетки ткани паренхимы легкого./ Д.А. Егоршина. - М., 1987. - 125 с.

8. Опыт применения внутрисосудистого лазерного облучения крови в комплексном лечении хронических неспецифических заболеваний легких / Кумейко О.В., Хазов С.В., Краснощеков

А.А. и др. // Лазерная медицина. - 2000. - Т. 4, вып. 3. - С. 37-38.

9. Парменова Л.П. Диагностические критерии эндогенной интоксикации у детей с заболеваниями верхних отделов пищеварительного тракта./ Л.П.Парменова // Второй Российский конгресс «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии». - М., 2003. - С. 36-37.

10. Современные иммунные и метаболические аспекты гастроэнтерологических заболеваний у детей / Переслегина И.А., Ипатов Ю.П., Маянская Ю.Б. и др. // Педиатрия - 1997. - №1. -С. 22-23.

11. Сопоставление различных подходов к определению продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропанольных экстрактах крови / Волчегорский Й.А., Налимов А.Г., Яро-винский Б.Г. и др. // Вопр. мед. химии. - 1989. -№1. - С. 127-131.

12. Андреева Л.И. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобар-битуровой кислотой / Л.И.Андреева, Л.А.Кожемякин А.А. Кишкун // Лаб. дело. -1988.-№11.-С. 41-43.

13. Промыслов М.Ш. Модификация метода определения суммарной антиоксидантной активности сыворотки крови./ М.Ш.Промыслов, М.Л.Демчук // Вопр. мед. химии. - 1990. - №4. -

C. 90-92.

14. Амиров Н.Б. Применение лазерного воздействия для лечения внутренних болезней /

Н.Б. Амиров // Казан, мед. журн. -2001. - Т.82, №5 - С. 369-372.

15. Lethal photosensibilization of Helicobacter species / Millson Ch., Wilson М., McRobert A. et al. // Photodynamic therapy of cancer. - Ed. Brault

D. - London. - 1998. - P. 174-180.

УДК 612.017.11:616.24-002.2-053.2 Б.Ц. Цыбенова, Б.И. Кузник СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЛЕГКИХ

Читинская государственная медицинская академия

Целью исследования явилось, комплексное изучение состояния клеточного, гуморального иммунитета во взаимосвязи с уровнем цитокинов у детей с хроническими воспалительными заболеваниями легких. Обследовано 42 ребенка в возрасте от 7 до 14 лет, больных хроническими воспалительными заболеваниями легких. У детей, больных хроническими заболеваниями легких, имелось напряжение клеточного и истощение гуморального иммунитета, уменьшалось содержание лимфоцитов, способных ад-

гезировать тромбоциты, повышался уровень ИЛ -1/3, ИЛ-8, ФИО а, ИФа, ИФуи ИЛ-4, нарушалась взаимосвязь между уровнем провоспалителъных цитокинов и ИЛ - 4.

Ключевые слова: заболевания легких хронические, иммунитет, цитокины, дети.

CONDITION OF AN IMMUNE SYSTEM FOR CHILDREN WITH BY CHRONIC INFLAMMATORY DISEASES MILD

B.C. Cibenova, B.I. Kuznik

The aim of the research was an integrated study of the condition of cellular and humoral immunity in inter-astion with the level of cytokines in children with chronic inflammatory pulmonary diseases.

42 patients in the aged from 7 to 14 with chronic inflammatory pulmonary diseases were studied. According to the data obtained the children with CIPD showed intense of cellular and depressed humoral immunity, decreased count of lymphocytes capable ofplatelet adhesion, increased levels of IL-1 /3, IL-8, TNF-a, IFNa, IFNyand IL-4, impaired interrelations between the levels of proinflammatory cytokines and IL-4.

Key words: chronic lung disease, immunity, cytokines, children.

Хронические заболевания органов дыхания у детей являются одной из важнейших проблем современной педиатрии [7, 13, 6, 8]. Нередко бронхолегочные болезни, начавшись у детей, продолжаются в зрелом возрасте, приводят больных к инвалидности, а иногда к драматическим исходам [8].

Независимо от причины развития хронического воспалительного очага в легких последствия его весьма существенны для развития организма ребенка. Поражение одной из систем жизнеобеспечения приводит к постоянному интоксикационному синдрому, гипоксии, изменениям в системе иммунитета.

Целью исследования явилось комплексное изучение состояния клеточного, гуморального иммунитета во взаимосвязи с уровнем цитокинов у детей с хроническими воспалительными заболеваниями легких.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование иммунитета проведено у 42 детей, в возрасте от 7 до 14 лет, больных хроническими воспалительными заболеваниями легких

Нами изучено содержание лейкоцитов, лимфоцитов и их субпопуляции у здоровых и больных детей. Субпопуляции лимфоцитов выявляли методом непрямой поверхностной иммунофлуоресценции [1]; показатель лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии, относящийся к функ-

циональным тестам оценки иммунокомпетен-ных клеток, вычисляли по способу Ю.А. Вит-ковского и соавт. [3]; иммуноглобулины классов А, М, в определяли методом радиальной иммунодиффузии (Манчини в., 1965); для определения концентрации цитокинов (ИЛ-1р, ИЛ-8, ФНОа, ИФа, ИФу и ИЛ-4) использовали метод твердофазного ИФА с помощью двойных антител и пероксидазы хрена с использованием реактивов фирмы «Цитокин» (Санкт-Петербург). Перечисленные параметры исследовались в динамике - до начала лечения и спустя 2 недели.

Проведенные наблюдения показали, что у больных с ХВЗЛ количество лейкоцитов в среднем оставалось в пределах нормы. Отмечался относительный и абсолютный лимфоци-тоз. Вместе с тем относительное количество зрелых Т—лимфоцитов было уменьшено. Относительное количество Т-хелперов по сравнению с нормой было снижено, а абсолютное количество было повышенным (не достоверно), относительное и абсолютное число ЦТЛ - повышено, из-за чего оказался сниженным имму-норегуляторный индекс. Относительное число МК-клеток оставалось в пределах нормы, тогда как абсолютное количество было значительно увеличено (табл. 1).

Представленные нами данные, в основном, совпадают с результатами исследований других авторов [2, 15, 12, 5, 4] и свидетельствуют о том, что у больных с ХВЗЛ имеется напряжение клеточного иммунитета. В то же время у обследуемых больных выявлено нарушения в соотношении СЭ4+/СВ8+, что является явно неблагоприятным признаком.

В последнее, десятилетие появились сведения о контактных взаимодействиях тромбоцитов и лейкоцитов,

Таблица 1

Показатели клеточного иммунитета у здоровых детей и больных ХВЗЛ

Изучаемые показатели Здоровые

Лейкоциты, в 1 мкл 7211+197,4 7864,3+403,8

Лимфоциты, % 28,9±0,4 40,3+2,1***

В 1 мкл 1991,1 ±83,5 2963,1±149,3***

СОЗ+ зрелые Т-лимфоциты, % 56,1±0,5 43,6±0,9***

В 1 мкл 1117,3±46,9 1277,8±63,8

СБ4+ Т-хелперы, % 33,1+0,6 25,0±0,9***

В 1 мкл 659,3±30,9 739,3±42,96

СБ8+(ЦТЛ) Т-лимфоциты, % 20,6±0,9 23,1±0,7*

В 1 мкл 409,4±17,4 687,7±42,4***

СЮ 16+ 1ЧК-клетки, 10,8±0,3 11,9±1,2

В 1 мкл 212,1 ±9,2 349,5±30,5*** Р<0,001

Иммунорегуляторный индекс СБ4+/СБ8+ 1,61±0,03 1,08±0,02***

Число лимфоцитарно - тромбоцитарных коагрегатов, % 15,9±0,7 11,5±0,4***

Примечание: Р- достоверность различий со здоровыми детьми Р<0,05*; Р<0,001*** (критерий

Стьюдента).

Таблица 2

Состояние гуморального иммунитета у детей, больных ХВЗЛ

Показатель Здоровые

СБ22+, % В 1 мкл 21, 1±1,2 437,0±14,1 26,6+0,8 778,3±41,7 Р<0,001 Кс+А+М/В-л 32,4±1,3 11,67±1,02 Р<0,001

І§ г/л 11,6±1,3 6,51±0,52 Р<0,001 Кв/В-л 26,5±0,9 9,41±0,87 Р<0,001

А, г/л 1,5±0,2 0,94±0,05 Р<0,05 Кд/В-л 3,4±0,1 1,4+0,11 Р<0,001

^ М, г/л 1,08±0,2 0,60±0,05 Р<0,05 Км /В-Л 2,5+0,1 0,87±0,09 Р<0,001

Примечание: Р- достоверность различий со здоровыми детьми.

в которых интенсивность адгезии коррелирует со сдвигами в иммунной системе и реакцией эндотелиальной стенки сосудов.В отдельной серии экспериментов изучена функция лимфоцитарно -тромбоцитарной адгезии (табл. 1).

Установлено, что в норме лимфоциты способны к. спонтанному розеткообразованию с тромбоцитами. Доказано, что клетками, взаимодействующими с кровяными пластинками, являются Т-хелперы, а при стимуляции ИЛ-2 и Ж-лимфоциты [3, 17, 18].

У больных с ХВЗЛ выявлялась пониженная способность лимфоцитов образовывать коагрега-ты с тромбоцитами. Указанные изменения про-

являются на фоне снижения относительного количества Т- и повышения относительного и абсолютного количества В-лимфоцитов, что свидетельствует как о нарушениях в системе иммунитета, так и гемостаза [3, 17, 18].

Наряду с изменениями Т-клеточного звена иммунитета у больных, нами отмечены существенные сдвиги в гуморальном иммунитете (табл. 2). У больных с ХВЗЛ, по сравнению со здоровыми детьми, наблюдалось понижение концентрации ^А, ^М, 1§0. Полученные данные можно расценить как проявления относительного гуморального иммунодефицита, на

фоне повышения относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов.

Для более детального изучения гуморального иммунитета были использованы коэффициенты, опубликованные Земсковым А.М. и др., (1993) в модификации, предложенной Б.И. Кузником (2002), поскольку абсолютные показатели уровня основных классов иммуноглобулинов не дают истинного представления о состоянии гуморального иммунитета. О последнем, на наш взгляд, можно было бы судить по той концентрации иммуноглобулинов, которые способен синтезировать один В-лимфоцит, переходя в плазматические клетки. Для этого мы ввели коэффициенты, которые рассчитываются по формуле:

К= —---------------- --------------------------

Чем больше коэффициент, тем напряженнее гуморальный иммунитет, чем меньше коэффициент, тем сильнее истощение гуморального иммунитета или сильнее выражена неполноценность В-лимфоцитов (табл. 2).

Как следует из полученных данных, при ХВЗЛ имеется значительное снижение всех изучаемых нами коэффициентов, что свидетельствует о несостоятельности гуморального иммунитета. Особенно резко снижен К0/в - лимф (в 2,8 раза). Это значит, что если в норме один В-лимфоцит способен синтезировать 26,5 мг/мл 1§С, то в патологической ситуации он синтезирует всего 9,4 мг/мл Примерно в одинаковой степени выявленные сдвиги касаются Км и КА (интенсив-

ность синтеза уменьшается в 2,4 раза). Суммарный коэффициент синтеза иммуноглобулинов Кс+а+м снижается в 2,8 раза.

Выраженное истощение гуморального иммунитета свидетельствует о тяжелом течении заболевания, что является основанием для назначения иммуномодулирующей терапии.

В следующей серии наблюдений мы изучили, как изменяется содержание основных провоспалительных и противовоспалительных цитокинов у больных с ХВЗЛ (табл. 3).

У больных ХВЗЛ повышается содержание всех изучаемых провоспалительных цитокинов и уровня ИЛ-4. Так концентрация ИЛ-1Р увеличивается в 7, ИЛ-8 - в 6, ФНОа - в 11, ИФа и ИФу- в-4, а ИЛ-4 - в 3 раза. Более значительное повышение уровня ИЛ-1Р и ФНОа связано с их более выраженным системным эффектом. Довольно значительное увеличение уровня цитокинов не вызывает удивления. Известно, что содержание провоспалительных и противовоспалительных цитокинов всегда возрастает при воспалении [9, 14, 16, 10, 11].

Таким образом, развитие хронического воспалительного процесса в легких сопровождается значительной продукцией цитокинов, что свидетельствует о высокой антигенной стимуляции клеток - продуцентов.

По предложению Б.И. Кузника, мы ввели коэффициенты для расчета отношения провоспалительных цитокинов к противовоспалительным. Для этого предложено ввести 5 коэффициентов: Кил -ф/ил - 4 -рассчитывался делением уровня ИЛ-1 р на ИЛ-4,

Таблица 3

Содержание цитокинов и коэффициентов, характеризующих соотношение провоспалительных цитокинов и ИЛ-4 у детей, больных ХВЗЛ, пкг/мл

Цитокины Здоровые

ИЛ-1Р 34,0+2,5 251,9±11,3 Р<0,001 Кил-1 р/ИЛ-4 0,69+0,09 1,78±0,16 Р<0,001

ИЛ-8 42,5+1,7 274,2+23,4 Р<0,001 Кил- 8/ИЛ-4 0,94+0,05 1,88±0,2 Р<0,001

ФНОа 35,3±3,2 390,9±13,7 Р<0,001 КфНОа/ИЛ-4 0,83+0,09 2,79±0,23 Р<0,001

ИФа 30,6±4,3 131, 1±16,7 Р<0,001 КиФа/ИЛ-4 0,5910,09 1,07+0,21 Р<0,05

ИФу 33,7+3,2 162,3+38,5 Р<0,01 КиФу/ИЛ-4 0,67±0,07 1,23±0,36

ИЛ-4 50,8±4,7 174,6±13,9 Р<0,001

Примечание: Р- достоверность различий со здоровыми детьми.

Кил- 8/ил -4 - по той же методике по отношению к ИЛ-8, Кфноа/ил- 4- рассчитывался делением ФНОа на уровень ИЛ-4, КИфа/Ил-4- рассчитывался делением ИФа на ИЛ-4 и, наконец, КИФу/ил-4- определялся делением ИФу на уровень ИЛ-4 (табл. 3). Увеличение или уменьшение коэффициентов у больных по сравнению со здоровыми должно свидетельствовать не только о сдвигах в содержании провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, но и о нарушении их взаимосвязи.

Как следует из полученных данных, при ХВЗЛ имеется значительное повышение всех изучаемых нами коэффициентов, что свидетельствует о преобладающем влиянии провоспалительных цитокинов над противовоспалительными, обеспечивающими ликвидацию патологического процесса.

ВЫВОДЫ

При ХВЗЛ у детей падает относительное и увеличивается абсолютное содержание Т-лимфоцитов, несущих маркеры CD3+, CD4+, а также В-лимфоцитов (CD22+) и резко уменьшается иммунорегуляторный индекс. У больных ХВЗЛ уменьшается содержание лимфоцитов, способных адгезировать тромбоциты.

У пациентов понижается содержание IgA, IgG и IgM. Коэффициенты, характеризующие способность продуцировать одним В-лимфоцитов иммуноглобулины класса А, М и G, резко снижаются.

Одновременно у больных детей повышается уровень ИЛ-1р, ИЛ-8, ФНОа, ИФа, ИФу и ИЛ-4, а также нарушается нормальная взаимосвязь между уровнем провоспалительных цитокинов и противовоспалительным цитокином ИЛ-4.

ЛИТЕРАТУРА

1. Барышников А.Ю. Моноклональные антитела серии ИКО к дифференцировочным антигенам лимфоцитов человека //Гематол. трансфузиология,- 1990,- №8,- С.4-7.

2. Борисова А.М. Иммунитет у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких // Рос. мед. журнал,- 1997,- №1,-

С. 15-21.

3. Витковс'кий Ю.А., Кузник Б.И., Солпов

A.В. Феномен лимфоцитарно -тромбоцитарного разеткообразования // Иммунология. -1999. - №4 -с.35-37.

4. Земсков А.М., Земсков В.М., Золоедов

B.И. Иммунокоррекция при заболеваниях легких // Иммунология,- 1998,- №4,- с.40-44.

5. Иллек Я.Ю., Скобелев В.А., Галкин В.Н. Иммунные нарушения у больных хронической пневмонией, подвергавшихся резекции пораженных участков легких //Педиатрия,- 2001. -№5.-С.34-38.

6. Ильина Е.С. Организация пульмонологи-.ческой помощи детям с бронхолегочной патологией //Российский вестник перинатологии и педиатрии.-2002.-№1.-С.23-27.

7. Каганов С.Ю., Розинова Н.Н. Пульмонология детского возраста и ее насущные проблемы // Российский вестник перинатологии и пе-диатрии.-2000.- Т.45, № 6,- С.6-11.

8. Каганов С.Ю., Розинова Н.Н., Лев Н.С. Современные вопросы определения и классификации клинических форм инфекционновоспалительных заболеваний легких у детей // Педиатрия.-2004.-№1.-С.

9. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. СПб. Изд-во «Гиппократ». -1998,- 156 с.

10. Кузник Б.И. Физиология и патология системы крови // Чита. - 2002. -319 с.

11. Кузник Б.И., Хавинсон В.Х., Витков-ский Ю.А., и др. Применение пептидных биорегуляторов в хирургии и онкологии. - Чита,-2001.- 325 с.

12. Нестерова И.В., Шадрин С.А., Баюки-на А.В. Ликопид в программе иммунореабилитации детей, больных муковисцидозом // Иммунология.- 2000,- №1,- С.42-46.

13. Рачинский С.В., Волков И.К. Хронические воспалительные бронхолегочные заболевания у детей // Медицинская газета -5.10.2001,- №75,- с.-9., 10.10.2001,- №76,- с.8-9„ 12.10.2001.-№77,- с.9.

14. Симбирцев А.С. Биология семейства интерлейкина I человека // Иммунология. - 1998. -№ 3. - С. 9.-17.

15. Смирнов А.В. Иммунный статус у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких и возможность его коррекции адаптогенами // 9 Национальный конгресс по болезням органов дыхания: Тез. докл. - Москва. - 1999.-С.150

16. Фрейдлин И.С. Иммунная система и ее дефекты.-С-Пб.:НТФФ«Полисан».-1998.-112 .

17. Vitkovsky Yu., Kuznik В., Solpov А. Role of interleukine-2 in lymphocytes rosette formation with platelet / Platelets 2000, Symposium. 18-22 May -2000. Ma”ale Hashamisha, Israel.- P. 32.

18. Vitkovsky Yu., Solpov A., Kuznik B. Cy-tocine influence on lymphocyte-platelet adhesion // Thrombosis and Haemostasis. - 2001. - P. 2711.