КАРБАМАТЫ И КАРБАМИДЫ, ИНДУЦИРУЮЩИЕ ПРОИЗВОДСТВО ЦИТОКИНОВ
CYTOKINES PRODUCTION-INDUCING CARBAMATES AND UREAS

Цитокины, такие как G-CSF, M-CSF, GM-CSF (факторы стимул ции колонии) и IL-1, IL-3, IL-6 (интерлейкины) могут стимулировать гемопоэз (кроветворение) при заболевани х, св занных с повреждением костного мозга и таким образом ускор ть выздоровление при нейтропении, как сообщили Metcalf, D., Science, 529 (1991) и H.G. Klingemann и H.J. Deeg, CIPS, 14,243, (1989), а также G. Mortsyn и A.W.Burgess, Cancer Research 48,5624 (1988).
Было сообщено, что участки натуральной бактериальной оболочки клетки и синтетические липопептиды, которые имитируют оболочку клетки, обладают иммуностимулирующими свойствами, как описано J.Freund, Adv. Tubercl. Res., 1, 130, (1956); F. Ellouz, A.Adam, R.Ciorbaru and E.Lederer Biochem. Biophys. Res. Commun. , 59, 1317, (1974); V. St. Georgiev, Medicinal Res. Rev., 11, 81, (1991) и I.Azuma, Int. J.Immunopharmac., 14,487 (1992).
Конкретно, были идентифицированы определенные соединени , которые, по-видимому, индуцируют образование CSF и могут способствовать восстановлению костного мозга после миелосупрессии, вызванной химиотерапией или радиацией. Эти соединени  включают такие, как пимелаутид (RP-40639), как сообщено F. Floch'h, J.Bouchaudon, C.Fizames, A.Zerial, G.Dutruc- Rosset and G.H.Werner, CIPS, 763 (1984) и в Патенте FR-2, 482, 961, (1981); Муроктазин (Daiichi Seiyaku Co.) I.Azuma, Int.J. Immunopharmac, 14, 487 (1992); R.Nakajima Y.Yshida, K.Akahane, M.Sekiguchi and Y.Osada, Arzneim.-Forsch. , 41, 60, (1991); Scrip, 22, 1655 (1991); и Патент EP-135, 788, (1985); и FK-156 и FK-565 (Fujisawa), как сообщено S.Izumi, K.Nakahara, T.Gotoh, S. Hashimoto, T.Kino, M.Okuhara, H.Aoki, and H.Imanaka, J.Antibiotics, 566, (1983); R.Nakamura, K.Nakahara, H.Aori, Agric. Biol. Chem., 48, 2579 (1984); H. Keiji, H.Takeno, S.Okada, О.Nakguchi, Y.Kitaura, and M. Hashimoto, Tetrahedron Lett., 23, 693 (1982) and Патент США 4, 349, 466 и 4,666,890.
Патент США 4,666,890 раскрывает синтетический трипептид, который, как сообщено, обладает активностью как иммуномодул тор, скорее дл  применени  в качестве противоопухолевого агента, чем в качестве адьюванта при химиотерапии.
2
Компоненты оболочки клетки, о которых сообщалось, и их синтетические аналоги все  вл ютс  пептидами, включающими составл ющую D-глутаминовой кислоты (D-Glu) y-св занную либо с лизином (Lys), либо с диаминопимеловой кислотой (Apm), с дополнительными пептидными св з ми или алифатическими ацильными группами, расположенными по бокам двух концов.
Новые карбаматы и карбамиды, раскрытые в данном изобретении, представл ют первые примеры непептидных аналогов бактериальных компонентов оболочки клетки и не содержат обычную дл  предшествующей уровню D-Glu составл ющую.
К тому же, тогда как предыдущим уровнем предусматриваетс  отсутствие разветвлени  на основной цепи пептида, данное изобретение включает разветвленные аналоги, которые сохран ют желаемую активность при синтезе в специфической конфигурации, и метод синтеза этих хиральных разветвленных аналогов.
1
1
20
2
3
1
6
3
2
b
c
4
Краткое описание изобретени  Данное изобретение относитс  к уретанам (карбаматам) и мочевинам (карбамидам) формулы: где R выбираетс  из группы, состо щей из водорода, замещенной или незамещенной (C-C) алкил группы, замещенной или незамещенной циклоалкил группы, замещенной или незамещенной циклоалкилалкил группы, винил группы, ацетилен группы, замещенной или незамещенной амино группы, замещенной или незамещенной ациламино группы, замещенной или незамещенной арил группы, замещенной или незамещенной аралкил группы, замещенной или незамещенной арилоксигруппы, замещенной или незамещенной алкоксиарил группы, замещенной или незамещенной алкоксиаралкил группы и замещенной или незамещенной моноциклической или бициклической гетероциклической группы, содержащей от 1 до 4 атомов, выбранных из группы, состо щей из атомов азота, серы и кислорода; R и R независимо выбираютс  из водорода, замещенного или незамещенного (C-C) алкила, замещенного или незамещенного алкоксиалкила, замещенного или незамещенного циклоалкила, замещенного или незамещенного циклоалкилалкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного аралкила, замещенного или незамещенного алкоксиаралкила, винила, ацетилена и замещенного или незамещенного моноциклического или бициклического гетероцикла, содержащего от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из группы, состо щей из атомов азота, серы и кислорода при условии что, в случае R, гетероатомы в названном гетероцикле не св заны непосредственно с -CH- группой -CH-X- остатка; R, R и R независимо выбираютс  из карбокси или защищенного карбокси, карбокси или защищенного карбоксинизшего алкила и карбоксиамида; X  вл етс  кислородом или азотом; R представл ет атом P или амино защитную группу и их фармацевтически приемлемые соли.
1
20
Ниже даютс  конкретные случаи различных упом нутых выше определений и специфические примеры, подпадающие под эти определени : (a) (C-C) алкил группой может быть линейна  или разветвленна  низша  алкил группа, имеюща  от 1 до 20 атомов углерода, така  как метил группа, этил группа, пропил группа, изопропил группа, бутил группа, изобутил группа, втор-бутил группа, трет-бутил группа, пентил группа, неопентил группа, изопентил группа, гексил группа, изогексил группа и так далее.
(b) Циклоалкил группа может быть циклоалкил группой, имеющей от 3 до 6 атомов углерода, такой как циклопропил группа, циклобутил группа, циклопентил группа или циклогексил группа.
(c) Циклоалкилалкил группа может быть циклоалкилалкил группой, имеющей от 4 до 12 атомов углерода, такой как циклопропилметил группа, циклобутилметил группа, циклопентилметил группа, циклогексилметил группа, 1-циклопропилэтил группа, 2-циклопропилэтил группа, 1-циклобутиэтил группа, 2-циклобутилэтил группа, 1-циклопентилэтил группа, 2-циклопентилэтил группа, 1-циклогексилэтил группа, 3-циклогексилпропил группа, 3-циклопентилпропил группа, 4-циклогексилбутил группа, 4-циклопентилбутил группа, 4-циклопентилпентил группа или 4-пентилциклогексил группа.
3
2
31
3
2
21
2
3
2
15
2
3
2
41
(d) Ациаламино группа может быть ациламино группой, в которой ацильна  составл юща  происходит от кислоты, такой как органическа  карбонова  кислота или угольна  кислота, кажда  из которых еще, в частности, включает алифатическую, ароматическую и/или гетероциклическую группу в свою молекулу. Эти ацильные составл ющие включают алифатические ацильные группы, имеющие ацильную группу, происход щую от алифатической кислоты и включающей: алканоил (например, формил, ацетил, пропионил, бутирил, изобутирил, валерил, изовалерил, пивалоил, гексаноил, α-этилгексаноил, гептаноил, лауроил, стеароил, доказаноил, группу формулы: CH(CH)CO, [CH(CH)]CHCO, [CH(CH)] CHCO, CH(CH)CO и т.д.); низший алкоксикарбонил (например, метоксикарбонил, этоксикарбонил, пропоксикарбонил, бутоксикарбонил, т-бутоксикарбонил, т-пентоксикарбонил и т.д.) и тому подобные. Ацильна  составл юща  может также быть ароматическим ацилом, означающим ацильную группу, происход щую от кислоты, имеющей замещенную или незамещенную арильную группу, в которой арильна  группа может включать фенил, толил, ксилил, нафтил и тому подобные, и ее подход щие примеры иллюстрируютс  следующими: ароил (например, бензоил, толуоил, ксилоил, нафтоил, фталоил и т.д.); аралкоксикарбонил (например, бензилоксикарбонил, бензгидролоксикарбонил, тритилоксикарбонил, α- нафтилметоксикарбонил, и т. д.) и тому подобные. Ацильна  составл юща  может также быть гетероциклической ацильной группой, означающей ацильную группу, происход щую от кислоты, имеющей гетероциклическую группу, и включает: гетероциклический карбонил, в котором гетероциклическа  составл юща   вл етс  5-6-членным гетероциклом, содержащим по крайней мере от одного до четырех гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы (например, тиеноил, фуроил, пирролекарбонил, 5-оксо-2- пирролидинкарбонил, никотиноил и т.д.) и тому подобные.
(e) Арил группа может быть арил группой, имеющей от 6 до 15 атомов углерода, такой как фенил группа, дифенилил группа, 1-нафтил группа или 2-нафтил группа.
(f) Аралкил группа может быть аралкил группой, имеющей от 7 до 15 углеродных атомов, такой как бензил группа, 1-нафтилметил группа, 2-нафтилметил группа, 5,6,7,8-тетрагидро-1-нафтил группа, 5,6,7,8-тетрагидро-2-нафтил группа, фенетил группа, 3-фенилпропил группа или 4-фенилбутил группа.
(g) Арилокси группа может быть арилокси группой, имеющей от 6 до 15 углеродных атомов, такой как фенокси группа, дифенилокси группа, 1-нафтилокси группа, или 2-нафтилокси группа.
(h) Алкоксиарил или алкоксиаралкил группа может быть алкоксиарил или алкоксиаралкил группой, имеющей от 6 до 21 углеродных атома, такой как бензопил группа, или алкоксифенилметил группа.
(i) Моноциклическа  или бициклическа  гетероциклическа  группа, содержаща  от 1 до 4 гетеро атомов, выбранных из группы, состо щей и атомов азота, серы и кислорода, может быть гетероциклической группой, имеющей от 4 до 15 углеродных атомов, такой как пирролил группа, фурил группа, тиенил группа, пиридил группа, имидазолил группа, пиразолил группа, тиазолил группа, изотиазолил группа, изоксазолил группа, офксазолил группа, пиразинил группа, пиримидинил группа, пиридазинил группа, индолил группа, хинолил группа, изохинолил группа, фталазинил группа, нафтидинил группа, хиноксалинил группа, хиназолинил группа, 1,4-бензодиоксанил группа, 1,3-бензодиоксанил группа, 1,2,3- триазолил группа, 1,3,4-триазолил группа, 1,3,4-тиадиазолил группа, 1,2,3-тиадиазолил группа, тетразолил группа, тетрагидрофуранил группа, тетрагидротиенил группа, пирролидинил группа, имидазолидинил группа, 2-имидазолинил группа, морфолинил группа, морфолино группа, пиперизин N-окись группа, пиперазин N-окись группа, морфолин N-окись группа, морфолино группа низшего алкила, така  как N-метилморфолино группа, N-этилморфолино группа, пиперазинил группа, пиперидино группа, пиперидинил группа, тиоморфолино группа или тиоморфолинил группа.
Заместител ми в вышеупом нутых группах (а) - (i) могут быть: атом галогена, такой как атом хлора, атом фтора или атом брома, гидроксил группа; низша  алкильна  группа, така  как метил группа, этил группа, пропил группа, изопропил группа, бутил группа, изобутил группа, втор-бутил группа или трет-бутил группа; низша  алкокси группа, така  как метокси группа, этокси группа, пропокси группа, изопропокси группа, бутокси группа, изобутокси группа, втор-бутокси группа или трет-бутокси группа; арилокси группа, така  как фенокси группа, 1- нафтилокси группа или 2-нафтилокси группа; аралкилокси группа, така  как бензилокси группа, фенетилокси группа, 1-нафтиометилокси группа или 2-нафтилметилокси группа; амино группа; моно- или ди-низша  алкиламино группа, така  как метиламино группа, этиламино группа, пропиламино группа, изопропиламино группа, бутиламино группа, втор-бутиламино группа, изобутил-амино группа, трет-бутиламино группа, диметиламино группа или диэтиламино группа, ариламино группа, така  как фениламино группа, 1-нафтиламино группа или 2-нафтиламино группа; аралкиламино группа, така  как бензиламино группа, фенетиламино группа, 1-нафтилметиламино группа или 2-нафтилметиламино группа; карбоксил группа; формил группа; низша  алкосикарбонил группа, така  как метоксикарбонил группа, этоксикарбонил группа, пропоксикарбонил группа, изопропоксикарбонил группа, бутоксикарбонил группа, вторбутоксикарбонил группа, изобутоксикарбонил группа или третбутоксикарбонил группа; арилоксикарбонил группа, така  как феноксикарбонил группа, 1-нафтилоксикарбонил группа или 2-нафтилоксикарбонил группа, аралкилоксикарбонил группа, така  как бензилоксикарбонил группа, фенетилоксикарбонил группа, 1- нафтилметилоксикарбонил группа, или 2-нафтилметилоксикарбонил группа; меркапто группа; низша  алкилтио группа, така  как метилтио группа, этилтио группа, пропилтио группа, изопропилтио группа, бутилтио группа, вторбутилтио группа, изобутилтио группа или трет-бутилтио группа; арилтио группа, така  как фенилтио группа, 1-нафтилтио группа или 2-нафтилтио группа; аралкилтио группа, така  как бензилтиогруппа, фенетилтиогруппа, 2-нафтилметилтио группа или 2-нафтилметилтио группа; арилсульфинил группа, така  как фенилсульфинил группа, 1-нафтилсульфинил группа или 2-нафтилсульфенил группа; аралкилсульфинил группа, така  как бензилсульфинил группа, фенетилсульфинил группа, 1-нафтилметилсульфинил группа или 2-нафтилметилсульфинил группа; низша  алкилсульфонил группа, така  как метилсульфонил группа, этилсульфонил группа, пропилсульфонил группа, изопропилсульфонил группа, бутилсульфонил группа, изобутилсульфонил группа, втор-бутилсульфонил группа или трет- бутилсульфонил группа; арилсульфонил группа, така  как фенилсульфонил группа, 1-нафтилсульфонил группа или 2-нафтилсульфонил группа; аралкилсульфонил группа, така  как бензилсульфонил группа, фенетилсульфонил группа, 1-нафтилметилсульфонил группа или 2-нафтилметилсульфонил группа; или моноциклическа  или бициклическа  гетероциклическа  группа, имеюща  от 4 до 15 углеродных атомов и 1-4 гетеро атома, выбранных из кислорода, азота и серы, така  как пирролил группа, фурил группа, тиенил группа, пиридил группа, имидазолил группа, пиразолил группа, тиазолил группа, изотиазолил группа, изоксазолил группа, оксазолил группа, пиразинил группа, пиримидинил группа, пиридазинил группа, индолил группа, хинолил группа, изохинолил группа, фталазинил группа, нафтидинил группа, хиноксалинил группа, хиназолинил группа, 1,4- бензодиоксанил группа, 1,3-бензодиоксанил группа, 1,2,3-триазолил группа, 2,3,4-триазолил группа, 1,3,4-тиадиазолил группа, 1,2,3-тиадиазолил группа, тетразолил группа, тетрагидрофуранил группа, тетрагидротиенил группа, пирролидинил группа, имидазолидинил группа, 2-имидазолинил группа, морфолинил группа, морфолино группа, мофолин N-окись группа, низша  алкил морфолино группа, така  как N-метиморфолино группа, N-этиморфолино группа или N-пропилморфолино группа, пиперазинил группа, пиперидино группа, пиперидинил группа, тиоморфолино группа или тиоморфолинил группа.
1
6
Примерительно к данному тексту "низший алкил" означает C-C алкил группу.
Защитные группы дл  защищенного карбокси или защищенного карбокси низшего алкила включают любые обычные защитные группы дл  карбокси групп, обычно используемые специалистами в технике химии пептидов и амино кислот, такие как группы, найденные в T.Greene, "Protecting Groups in Organic Synthesis", J.Wiley and Sons, 1981.
Эти группы включают сложные силил эфиры, сложные алифатические эфиры и сложные ароматические эфиры, такие как триметилсилил, т-бутилдиметилсилил, ацетил, бензоил и тому подобные.
Защитна  группа дл  защищенной амино группы включает любую обычную защитную группу дл  амино групп, обычно используемую специалистами в технике химии пептидов и аминокислот, такую как группа, найденна  в T.Greene, supra, pp. 218- 287.
Подход ща  защитна  группа выбираетс  так, чтобы услови  ее сн ти  были совместимы с другими структурными особенност ми соединени . Подход щие защитные группы включают ацил группы, такие как треб-бутоксикарбонил или бензилоксикарбонил и тому подобные.
1
1
20
2
3
1
6
2
b
c
4
Подробное описание изобретени  Согласно приведенному выше общему описанию, соединени  Формулы I, которые  вл ютс  предпочтительными, представл ют собой соединени , в которых: R выбираетс  из группы состо щей из замещенной или незамещенной (C-C) алкил группы, замещенной и незамещенной циклоалкил группы, замещенной и незамещенной циклоалкилалкил группы, замещенной или незамещенной арил группы, замещенной или незамещенной аралкил группы, замещенной или незамещенной арилокси группы, замещенной или незамещенной алкоксиарил группы и замещенной или незамещенной алкоксиаралкил группы, где арил составл юща  в вышеприведенных группах выбираетс  из замещенного или незамещенного фенила; R и R независимо выбираютс  из водорода и замещенного и незамещенного (C-C) алкила; R, R и R независимо выбираютс  из карбокси или защищенного карбокси, карбокси или защищенного карбокси низшего алкила и карбоксиамида; X  вл етс  кислородом или азотом и R  вл етс  H или амино защитной группой.
1
4
14
2
8
4
8
1
6
2
3
1
6
2
b
c
4
Кроме того, наиболее предпочтительными соединени ми Формулы I согласно данному изобретению  вл ютс  те соединени  Формулы I, в которых: R выбираетс  из группы, состо щей из (C-C) алкил группы, циклоалкил группы, (C-C) алкил замещенной циклоалкил группы, фенил группы, бензил группы, (C-C) алкилфенилгруппы и (C-C) алкил или алкоксифенилметил групп; R и R независимо выбираютс  из водорода и (C-C) алкила; R, R и R независимо выбираютс  из: карбокси или защищенной карбокси, карбокси или защищенный карбокси низший алкил и карбоксиамид; X  вл етс  кислородом или азотом и R  вл етс  H или амино защитной группой.
1
a
3
2
b
c
4
Особенно наиболее предпочтительными соединени ми Формулы I  вл ютс  те соединени , в которых: R выбираетс  из группы, состо щей из н-гексил группы, 4-н-пентил циклогексил группы; R и R независимо выбираютс  из водорода и метила; R, R и R  вл ютс  карбокси; X  вл етс  кислородом или азотом и R  вл етс  Н.
3
1
2
Особенно предпочтительными  вл ютс  те соединени  Формулы I, имеющие D-алло-треон конфигурацию как следует ниже: в которых R  вл етс  метил и R и R такие, как определено выше.
2
b
c
4
Также особенно предпочтительными  вл ютс  те соединени , имеющие следующую стереохимию в диаминопимелилаланиновой части молекулы: в которых R  вл етс  метилом и R, R и R  вл ютс  такими, как определено выше.
3
a
b
c
1
2
4
В отношении стереохимии следующие соединени  Формулы I  вл ютс  особенно наиболее предпочтительными: где R и R представл ют метил, X  вл етс  кислородом, R, R, R, R, R - такие, как определено выше.
Карбаматы и карбамиды типа 1, которые  вл ютс  предметом данного изобретени , создаютс  путем конвергентного синтеза (см. Схему I).
o
Левовращающий (X=0, спирт 2b, или X=NH, амин 2с) и правовращающий (амин 3) фрагменты, несущие соответствующие защитные группы (примеры обычно используемых амино защитных групп наход тс  в T.Greene, "Protecting Groups in Organic Synthesis", J.Wiley and Sons, 1981, p.p. 218-287) на многочисленных функциональных группах, приготовл ютс  раздельно. Соединение 2 первоначально подвергаетс  реакции с активированным карбонильным эквивалентом, YC(=0)Y, таким как фосген, трифосген, аддукт фосген/пиридин, трихлорметил хлороформиат, или 1,1'-карбонилдиимидазол, обычно при 0C и образующеес  промежуточное соединение 2y соедин етс  с 3 образу  карбамат 1а (X=O) или карбамид 1b (X=NH), соответственно.
Или же иначе, амин 3 первоначально подвергаетс  реакции с YC(=O)Y и образующеес  промежуточное соединение соедин етс  с 2, образу  1a и 1b. Везде примен емые защитные группы удал ютс  при стандартных услови х дл  того, чтобы получить соединени  типа 1 с незамаскированными функциональными группами.
Левовращающие фрагменты: Дл  синтеза левовращающего фрагмента 2а выполн етс  селективное N-ацилирование амино спирта 5 использованием подход щего ацилирующего агента 4 в услови х щелочной среды.
Если нет готового, заданный ацилирующий агент приготавливают из соответствующей кислоты 4а, которую в свою очередь можно получить окислением 6 или окислительным расщеплением 2с-1 по общеприн тым методикам (см. Схему II).
2
2
2
Соединени  2c (2a, где R=COH) превращаютс  в сложный эфир 2е или амид 2f в услови х кислой среды, использованием подход щего спирта (R''OH) или амина (R''NH), соответственно. Или же иначе, 2с этерифицируют, использу  алкирующий агент R''Y в услови х щелочной среды (см. Схему III).
3
Спирты 2с с различными R боковыми цеп ми приготавливают в соответствии со Схемой IV.
Спирт 2j защищают соответствующей защитной группой (тогда как NH остаетс  свободной, защищают как циклический N,O-ацеталь вместе с OH, или блокируют отдельной амино защитной группой), и сложный эфир 8 восстанавливают до альдегида 9 в одну стадию (Garner and Park, J. Org. Chem., 1987, 52, 2361) или в две стадии через восстановление до спирта и обратное окисление, использу  общеприн тые методики.
3
Добавление соответствующего органометаллического реагента R М к альдегиду дает 10 как отдельный диастереомер или смесь двух диастереомеров, полученный исходный материал 2j  вл етс  не рацемическим.
Сн тие защиты первичного спирта (и NH, если блокирована) дл  получени  11, с последующим селективным окислением (согласно Skarzewski, et. al, Tetrahedron Lett. , 1990, 31, 2177) с последующим стандартным окислением образующегос  альдегида (согласно Mehltretter, et. al., J.Amer. Chem. Soc., 1950, 73, 2424) дает 2c.
Или же иначе, вторичный спирт в 10 защищают и селективно снимают защиту с первичного спирта (и NH, если блокирована) в образующемс  12 с целью получени  13.
Использу  общеприн тые методики, последнее соединение окисл ют до 14, которое превращают в 2c. Первичные и вторичные спиртовые функциональные группы в 11 также защищают последовательно, чтобы получить 12 (W = Н).
3
Результирующее превращение из 2j в 2c включает инверсию конфигурации при углероде α в отношении карбоксильной группы, путем транспозиции карбоксил и спиртовой составл ющих, и введение R группы в β положение, дл  хиральности. Диастереомеры 10, 12 или 13 могут быть разделены хроматографически.
Таким образом, 2j R конфигурации в α положении могут давать 2с диастереомеры S, R (α,β) и S,S (α,β) конфигурации и 2j S конфигурации могут давать 2с диастереомеры RR (α,β) и R,S (α,β) конфигурации.
Или иначе, 11 или 12 могут быть приготовлены из 5j согласно схеме V. Амин полностью блокируют двум  защитными группами или циклической защитной группой, чтобы получить 15. Конверси  15 через 16 через 17 до 19 представл ет такую же реакционную последовательность, что и описанна  выше дл  перехода 8 через 9 через 10 в 12. Амино защитные группы в 17 или 19 удал ютс  дл  получени  18 или 20, соответственно. Последние ацилируют получа  11 или 12.
Дл  синтеза левовращающего фрагмента 2b ацилирование амина 21 в услови х щелочной среды приводит к 22. Первичный амид подвергаетс  перегруппировке до амина 2b (согласно London et. al., J.Org. Chem. 1984, 49, 4272; Waki, et, al. , Synthesis, 1981, 53, 266; или Koser, et., al., J.Org. Chem., 1988, 53, 5158), (см. Схему VI).
2
2
2
Соединени  2g (2b, где R=COH) превращают в сложный эфир 2h или амид 2i (показано в Схеме VII) в услови х кислотной среды, использу  подход щий спирт (R''OH) или амин (R''NH), соответственно. Или иначе, амин 2g защищают как карбамат BOC или CBZ; кислоту превращают в сложный эфир или амид в услови х щелочной среды; и защитную группу удал ют, получа  2h и/или 2i.
3
Амины 2g с различным R алкильными боковыми цеп ми приготавливают согласно Схеме VIII. Спирт 10 получают согласно Схеме IV или путем восстановлени  имеющейс  в наличии кислоты 2с, с последующей защитой образующегос  первичного спирта 11.
Соединение 10 затем превращают по общеприн тым методикам в азид 24 через промежуточное соединение 23. Азидна  составл юща  восстанавливаетс  до амина (25) путем каталитического гидрировани , и последний защищают, получа  26.
2
Или иначе, окисление 10 по стандартной методике дает 27. Восстановительное амидирование кетона с соответствующим амином (W'''NH) дает 28, который в свою очередь превращают в 26 (W'''=алкил, W''=алкоксикарбонил), путем дальнейшей защиты как карбамата или в 26 (W''=алкоксикарбонил, W'''=H) путем сн ти  защиты (до 25=) и повторной защиты.
Сн тие защиты первичного спирта в 26 (и амида NH, если блокирован) дл  получени  29, с последующим окислением дает 30, как в Схеме IV дл  превращени  13 в 14. Амино защитную группу(ы) снимают дл  получени  2g.
Полученные в конце диастереоизомеры из 10 или 28 могут быть разделены хроматографически на одной из промежуточных (28, 26 или 29) стадий.
Или иначе, 26 может быть приготовлено из 17 согласно Схеме IX. Превращени  17 в 31 в 32 в 33 в 34, или 17 в 35 в 36 в 34 представл ют такие же последовательности реакций, как описаны выше дл  10 в 23 в 24 в 25 в 26, или 10 в 27 в 28 в 26, соответственно. Амино защитные группы W и W' удал ют, чтобы получить 37. Последнее ацилируют, получа  26.
Правовращающие фрагменты: Фрагмент 3 приготавливают присоединением кислоты (или защищенной кислоты) 38 к соответствующему амину 39 с последующим селективным сн тием защиты промежуточного соединени  40 (см. Схему X).
Кислоты 38 или амиды 40 приготавливают в соответствии с Kolodziejczyk, et. al (Int. J. Pept. Prot. Res., 1992, 39, 382; и ссылки в нем), Jurgens (Tetrahedron Lett, 1992, 33, 4727; и ссылки в нем), Williams (J. Org. Chem., 1992, 33, 4727; и ссылки в нем), Hashimoto (Tetrahedron Lett, 1982, 23, 693; и ссылки в нем), или согласно Схеме XI. Глутаминовую кислоту (41, хиральную или рацемическую) защищают при стандартных услови х, получа  42, которое в свою очередь конденсируют с формальдегидом дл  получени  43.
Последнее соединение восстанавливают до альдегида 44 по методике, использующей один реактор. Конденсаци  типа Виттига-Хорнера-Эммонса альдегида с реагентом типа 45 (приготовленным согласно Schmidt, et. al, Synthesis, 1984, 53) дает 46. Реакци  лактона с подход щим амином 39 (если нет в наличии, приготовленным по методикам, описанным в "Synthesis of Optically Active α- Amino Acids", R.M. Williams, Ed., Pergamon Press, 1989; и ссылки в нем), сопровождающа с  потерей формальдегида, приводит к образованию 47. Каталитическое гидрирование двойной св зи дает 40.
Когда используют хиральное соединение 41 в качестве исходного материала, то диастереомеры 40 раздел ют путем фракционной кристаллизации или хроматографии. Соотношение полученных диастереомеров зависит от выбора защитных групп, катализатора гидрировани , и реакционных условий [Knonles, et. al., J. Amer. Chem. Soc. 99, 5947 (1988); Ojima and Suzuki, Tetrahedron Lett., 21, 1239 (1980)].
2
2
Так, 41 S конфигурации дает диастереомеры 40, несущие S,S и S,R конфигурацию на Аpm, и 41 R конфигурации может давать диастереомеры 40, несущие R,S и R,R конфигурацию на Apm.
Реакции осуществл ют в растворителе, соответствующем примен емым реагентам и материалам и подход щем дл  выполн емых превращений. Специалисту в технике органического синтеза пон тно, что присутствие различных функциональных групп в молекуле должно соответствовать предполагаемым химическим превращени м.
Это потребует часто правильного выбора относительно последовательности реакционных стадий, защитных групп, если необходимы, и условий сн ти  защиты.
Заместители в исходных материалах могут быть несовместимыми с некоторыми услови ми реакций. Такие ограничени  к заместител м, которые совместимы с услови ми реакций, будут очевидны дл  специалистов в технике.
Фармацевтически приемлемые соли включают как неорганические соли металлов так и органические соли, список которых приведен в Remingron's Pharmaceutical Sciences, 17th Edition, pg. 1418 (1985).
Специалистам в технике хорошо известно, что соответствующа  форма соли выбираетс  на основании физической и химической стабильности, текучести, гигроскопичности и растворимости.
По приведенным выше причинам предпочитаемые соли данного изобретени  включают соли кали , натри , кальци , магни  и аммони .
Некоторые соединени , описанные в приведенных выше схемах, имеют центры асимметрии. Данное изобретение включает все стереоизомеры соединений или свободные от других стереоизомеров или смешанные с другими стереоизомерами в некотором соотношении и таким образом включает, к примеру, рацемическую смесь энантиомеров, а также и диастереомерную смесь изомеров.
Новые соединени  данного изобретени  полезны благодар  их способности индуцировать образование цитокинов и восстанавливать костный мозг после химиотерапии, как показали следующие испытани .
Описание приготовлени  образцов Биологических Проб Интерлейкина 6(IL-6) дл  структурно-функционального анализа - Испытуемые соединени  раствор ют в воде и примен ют подкожно в 0.2 мл, чтобы доставить дозу 0.1-10 мг/кг.
Плохо растворимые соединени  сначала раствор ют в 100% этаноле и затем довод т до соответствующей концентрации в воде.
4
o
Через четыре часа после инъекции мышам спускают кровь и вливают сыворотку. IL-6 зависимую линию клеток 7TD1 используют дл  приготовлени  пробы серийных разбавлений сывороток IL-6 содержимого. 7TD1 клетки (1 • 10) помещают в  чейки микротитра и инкубируют при 37C в течение 72 часов со стандартным рекомбинантом дл  мышей IL-6 или с разбавлени ми сыворотки, которые будут испытыватьс .
3
3
По прошествии последних 6 часов, клетки получают импульс с H-Tdr (мкКи). Затем клетки собирают и определ ют степень пролиферации по поглощению H-Tdr, измеренному путем жидкостной сцинтилл ционной спектрометрии. Концентрацию IL-6 в сыворотке рассчитывают из стандартных кривых, использующих рекомбинант IL-6 от RGD Systems Ins., и привод т в единицах IL-6 активности, как определено изготовителем.
Проверка фактора стимул ции колоний гранулоцита (GCSF) - Биопроба на GCSF выполн етс  идентичным IL-6 испытанию способом за тем исключением, что используетс  GCSF зависима  лини  клеток NFS-60 вместо IL-6 зависимой 7TD1 линии клеток.
Дл  испытани  специфичности пробы используют нейтрализующее моноклональное антитело дл  GCSF мыши.
-5
Испытани  образующего колонию Гранулоцит-Макрофага (CFU-GM) - Мышей обрабатывают 150 мг/кг 5-FU и, спуст  24 часа, начинаетс  обработка испытуемым соединением. В последующие дни мышей забивают путем сворачивани  шейного позвоночника, и бедренные кости отдел ют в стерильных услови х. Бедренные кости промывают 1 мл охлажденной льдом среды (Iscove's среда, дополненна  20% FCS, 1% пеницилин-стрептомицина, 1% глутамина и 5 • 10 М 2-меркаптоэтанола).
5
Клетки костного мозга (5 • 10) затем помещают в 12 х 75 мм чашки дл  тканевых культур в 3 мл теплой ararose (3%) в Iscove's среде со 100 ед/мл мышиного рекомбинанта GM-CSF, приобретенного от Genzyme (Boston, МА).
o
2
Чашки инкубируют в течение 7 дней при 37C в 5% CO. Спуст  7 дней, колонии из 50 клеток и более перечисл ют под препаровальной лупой.
Испытание сывороточного фактора стимул ции колоний (CSF) - Дл  определени  наличи  CSF активности в сыворотке, введенной с испытуемыми соединени ми, используют испытание, которое определ ет активность фактора стимул ции колонии, но не делает различи  между различными типами факторов стимул ции колонии. Клетки костного мозга приготавливают, как описано выше дл  CFU-GM испытани .
Затем клетки инкубируют в м гком агаре с 0.3% конечной концентрацией сыворотки, вз той из мышей через 4 часа после инъекции с испытуемыми соединени ми.
o
5
5
После 7 дней инкубации при 37C число образующих колонию (CFU) клеток на 10 высе нных на чашки клеток костного мозга определ ют путем подсчета колоний из более чем 50 клеток под препаровальной лупой. Данные привод тс , как CFU/10 клеток костного мозга.
Испытание циркул ции нейтрофила - Мышей обрабатывают 5-FU (150 мг/кг) и, спуст  24 часа, начинают ежедневно обрабатывать испытуемым соединением. Мышам ежедневно спускают кровь путем заглазничной пункции в гепаризинированные капилл рные трубки. Циркулирующие количества WBC определ ют с помощью счетчика культур. Мазки крови подкрашивают раствором Wright-Geimsz и процент циркул ции нейтрофилов определ ют дифференциальным подсчетом под микроскопом.
5-Фторурацил (5- FU) Индуцированна  Нейтропени  у мышей - Мышей обрабатывают внутрибрюшинно 150 мг/кг агента химиотерапии 5-FU, который вызывает резкое снижение нейтрофилов в периферической крови после 5-6 дней.
Через 24 часа после введени  дозы начинают обработку испытуемыми соединени ми. Вли ние испытуемых соединений на восстановление клеток, предшествующих нейтрофилам, определ ют путем CFU-GM испытани . Восстановление циркулирующих нейтрофилов сопровождаетс  дифференциальным окрашиванием периферической крови.
Дельта испытание - Мышей обрабатывают единичной дозой 5-FU (150 мг/кг внутрибрюшинно). Спуст  24 часа, клетки костного мозга удал ют и расщепл ют в 2 аликвотах. Одну аликвоту высеивают непосредственно в м гкий агар с 15 нг/мл IL-1 и 250 ед/мл GM-CSF.
Через 14 дней определ ют число колоний (CFU-1). Вторую аликвоту клеток помещают в культуру в жидкой среде с единичными факторами роста или лекарственные препараты или комбинации каждого с целью проверки способности агентов расшир ть совокупность образующих колонию клеток.
После 7 дней в культуре в жидкой среде эти клетки собирают и высеивают в м гкий агар с IL-1 и GM-CSF как и с первой аликвотной пробой.
Через 14 дней определ ют число колоний во второй аликвоте, (CFU-2). Соотношение или дельта рассчитываетс  как CFU-2/CFU-1, и это соотношение используют, чтобы установить способность факторов роста и/или лекарственных препаратов, используемых в жидкой фазе, индуцировать рост образующих колонию клеток (CFU) или дифференцировкой от пред- CFU до CFU.
Результаты - Испытуемые соединени  способны индуцировать продуцирование IL-6 в сыворотке мышей за врем  в пределах 4 часов при единичной подкожной инъекции (Таблица 1). Аналогично, также обнаруживаетс  активность сыворотки CSF с этими соединени м на мышах (Таблица 2).
Испытание IL-6 выполн ют количественным методом и используют дл  определени  относительной активности. CSF испытание осуществл етс  при единичной концентрации сыворотки и  вл етс  поэтому качественным по природе.
Показано, что типичное соединение (Пример 28) также индуцирует GCSF в сыворотке и инъецированных мышей (Таблица 3). Показано, что характерные соединени  (Примеры 28, 32 и 84) вызывают восстановление нейтрофилов в 5-FU обработанных мышах (Таблица 4). Характерное соединение (Пример 28) увеличивает восстановление нейтрофилов периферической крови, которому предшествует увеличение CFU-GM, предшественников нейтрофилов в костном мозге (Таблица 5), показыва  таким образом, что испытуемые соединени  оказывают воздействие на костный мозг.
Типичное соединение (Пример 28) также вызывает IL-6 и GCSF продуцирование в сыворотке 5-FU обработанных приматов (Таблица 6). Характерное соединение (Пример 32) ускор ет восстановление нейтрофилов у приматов, обработанных химиотерапевтическим агентом цитоксан (Таблица 7).
Выдел ют группы, обработанные испытуемыми соединени ми, чтобы контролировать соответствующие уровни выздоровлени : на 7 сутки против 10 суток дл  группы, обработанной только цитоксаном.
Таким образом, испытуемые соединени  вызывают аналогичный спектр цитокинов и облегченное восстановление нейтрофилов как у приматов, так и у мышей.
Характерное соединение (Пример 28) действует синергитически in vitro (в лабораторном сосуде) с кроветворным C-kit (набор) лигандом фактора роста (KL), увеличива  рост клеток - предшественников костного мозга (Таблица 8).
Это к тому же подтверждает предположение, что данные соединени  действуют таким образом, что увеличивают рост предшествующих нейтрофилам клеток в костном мозге.
Испытуемые соединени  активны также в ускорении восстановлени  нейтрофилов у 5-FU обработанных мышей, когда ввод тс  орально (через рот) (Таблица 9), как показано на характерных соединени х (Примеры 28 и 32).
Клиническа  значимость - Данные, собранные на описанных испытуемых соединени х, показали, что они способны вызывать эндогенное продуцирование факторов роста (IL-6 и GCSF), которые, как известно, регулируют продуцирование нейтрофилов в костном мозге.
Эти соединени  могут быть использованы терапевтически дл  восстановлени  нейтрофилов после химиотерапии злокачественных новообразований, радиационной терапии, трансплантации костного мозга или инфекций.
В добавок, соединени  могут быть использованы в комбинации с рекомбинантными факторами роста дл  усилени  активности молекул рекомбинанта.
Кроме того, эти соединени  могут быть полезны при лечении злокачественных опухолей, СПИДа, апластической анемии, миелодиспластического синдрома, инфекционных заболеваний и дл  усилени  иммунной реакции. В отличии от рекомбинантных факторов роста, испытуемые соединени  эффективны, когда принимаютс  орально.
Мыши (10/группу) получили единичную подкожную инъекцию испытуемого соединени , и кровь забрана спуст  4 часа. GCSF уровни в сыворотке определ ют с помощью биопроб, использу  GCSF зависимую линию клеток NES-60 (см. Таблицу 3).
Группы из 5 мышей, обработанные 5-FU при 150 мг/кг и начина  от 24 часов после этого ежедневно обрабатываемые испытуемым соединением подкожно при 0.1 мг/кг. Приведены данные на третий день после 5-FU обработки (см. Таблицу 5).
Группы из 3 cynomolgous обезь н обрабатываютс  5-FU при 125 мг/кг и, начина  от 24 часов, после этого обрабатываютс  испытуемым соединением подкожно при 0.05 мг/кг. Данные приведены дл  сывороток, вз тых через 4 часа после обработки испытуемым соединением (см. Таблицу 6).
Группы из 4 cynomolgous обезь н обрабатывают на день 1 и день 0 цитоксаном при 60 мг/кг. Начина  от 24 часов после введени  второй дозы цитоксана, одну группу обрабатывают ежедневно подкожно мг/кг испытуемого соединени  и другую - только средой (вода) (см. Таблицу 7).
Клетки костного мозга из 5-FU обработанных мышей используют дл  обогащени  ранних клеток предшественника. Клетки расщепл ют в 2 аликвотах, как описано в методологическом разделе дл  "дельта испытани ". Увеличение складок определ ют путем измерени  воздействи  на 7 день in vitro инкубацией клеток с тканевой культурной средой и/или К фактора роста на образующие колонию клетки (CFU).
Число CFUS затем сравнивают с образованием колонии свежими клетками костного мозга, которые не инкубировались in vitro, чтобы определить возрастание складок. Испытуемое соединение используют in vitro при 0.5 мгк/мл (см. Таблицу 8).
Группы из 5 мышей обрабатывают 150 мг/кг 5-FU. Спуст  сутки, начинаетс  ежедневное оральное введение дозы испытуемых соединений и продолжаетс  в течение 10 дней. Приведенные данные соответствуют 6 дню после 5-FU обработки (см. Таблицу 9).
Когда соединени  примен ютс  дл  приведенных выше целей, они могут быть смешаны с одним или более фармацевтически приемлемыми носител ми, например, растворител ми, разбавител ми и тому подобными, и могут быть назначены орально в таких формах, как таблетки, капсулы, способные к дисперсии порошки, гранулы, или суспензии, содержащие, например, приблизительно от 0.05 до 5% суспендирующего агента, сиропы, содержащие, например, приблизительно от 10 до 50% сахара, и эликсиры, содержащие, например, приблизительно от 20 до 50% этанола, и тому подобные, или парентерально в форме стерильных растворов дл  инъекций или суспензий, содержащих приблизительно от 0.05 до 5% суспендирующего агента в изотонической среде.
Такие фармацевтические препараты могут содержать, например, приблизительно от 0.05 до 90% активного ингредиента в комбинации с носителем, наиболее часто приблизительно между 5% и 60% по весу.
Эффективна  доза активного ингредиента, котора  примен етс , может варьироватьс  в зависимости от конкретного употребл емого соединени , способа назначени  и жесткости условий в которых будет проводитьс  лечение.
Однако, в основном, удовлетворительные результаты получаютс , когда соединени  изобретени  назначаютс  в виде ежедневных доз в количестве приблизительно от 15 мгк до 100 мкг/кг веса тела животного, предпочтительно вводимого раздельными дозами от двух до четырех раз в день или в выдержанной реализуемой форме.
Дл  наиболее крупных млекопитающих обща  ежедневна  доза составл ет приблизительно от 1 до 20 мгк. Формы дозировки, подход щие дл  внутреннего применени , содержат приблизительно от 5 мкг до 25 мгк активного соединени  в тесной смеси с твердым или жидким фармацевтически приемлемым носителем.
Эта схема приема лекарственного средства может быть изменена дл  обеспечени  оптимального терапевтического эффекта. Например, несколько раздельных доз может назначатьс  ежедневно или может быть пропорционально снижена как указано, с учетом терапевтической ситуации.
Эти активные соединени  могут назначатьс  как орально, так и внутривенно, внутримышечно или подкожно. Твердые носители включают крахмал, лактозу, дикальций фосфат, микрокристаллическую целлюлозу и каолин, тогда как жидкие носители включают стерильную воду, полиэтилен гликоли, неионные поверхностно-активные вещества и пригодные в пищу масла, такие как кукурузное, арахисовое и кунжутное масла, как соответствующие природе активного ингредиента и конкретной форме желаемого введени .
Могут быть выгодно включены адъюванты, обычно примен емые в приготовлении фармацевтических композиций, такие как корригирующие агенты, красители, консервирующие агенты, и антиоксиданты, например витамин E, аскорбинова  кислота, ВНТ, ВНА.
Предпочтительными фармацевтическими композици ми, с точки зрени  легкости приготовлени  и применени ,  вл ютс  твердые композиции, в частности, таблетки и твердо-наполненные или жидко-наполненные капсулы. Предпочтительно, оральное применение соединений.
Эти активные соединени  также могут назначатьс  парентерально или внутрибрюшинно.
Растворы или суспензии этих активных соединений в форме свободного основани  или фармакологически приемлемой соли могут быть приготовлены в воде соответственно смешанной с сурфактантом (поверхностно-активным веществом), таким как гидроксипропилцеллюлоза. Дисперсии также могут быть приготовлены в глицерине, жидких полэтиленгликол х и их смес х в маслах.
При обычных услови х хранени  и использовани  эти препараты содержат предохранительные вещества дл  предотвращени  роста микроорганизмов.
Фармакологические формы, удобные дл  использовани  в качестве инъекций, включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки дл  импровизированного приготовлени  стерильных растворов или дисперсий дл  инъекции.
Во всех случа х форма должна быть стерильна и должна быть жидкой, чтобы было легко заполнить шприц. Она должна быть стабильной в услови х изготовлени  и хранени  и должна быть предохраненной от заражающего воздействи  микроорганизмов, таких как бактерии и грибки.
Носитель может быть растворителем или дисперсионной средой, содержащей, например, воду, этанол, полиспирт (например, глицерин, пропилен гликоль и жидкий полиэтилен гликоль), подход щие их смеси, и растительные масла.
2
2
Сокращени  IL: интерлейкин CSF: фактор стимул ции колонии G: (гранулоцит) -, М (макрофаг)-, и GM: (гранулоцит - макрофаг) CSF'S AL: аланин Apm: 2,6-диаминопимелова  кислота Lys: лизин Ser: серин Thr: треонин BOC: т-бутоксикарбонил BOP: бензотриазолилокситрис (диметиламино) фосфоний гексафторофосфат CBZ: карбобензилокси TFA: трифторуксусна  кислота MS: молекул рные сита TEA: триэтиламин DMAP: диметиламинопиридин T.F.A.: трифтороуксусна  кислота В спектрах NMR:m: мультиплет (NMR) S: синглет d: дуплет t: триплет q: квартет dd: двойной дуплет br: уширенный сигнал dq: двойной квартет ddd: тройной дуплет m.p.: температура плавлени  I.R. - UK-спектр fine structure -тонка  структура multiplets - мультиплет overlapping - перекрывающийс  apparent - кажущийс  Соединени  данного изобретени  и их приготовление могут быть лучше пон ты из приведенных далее примеров, но не ограничиваютс  ими.
o
В приведенных далее примерах, если не оговорено особо, продукты раздел ют путем мгновенной (флэш) хроматографии на силикагеле-60 (230-400 меш.). Чистоту продуктов определ ют путем ТСХ на силикагеле GF (250 мм). Точки плавлени  определ ют на приборе дл  определени  температуры правлени  и не корректируют (все температуры в C).
4
Если не оговорено особо, ПМР (300 МГц) спектр получают дл  растворов в дейтерохлороформе (1% внутренний стандарт, MeSi; посто нные св зи приведены в Hz единицах (Гц)). Реакции, требующие безводных условий, выполн ют в атмосфере аргона, использу  растворители в бутылках с изолирующими перегородками.
Органические растворы высушивают над сульфатом магни  или сульфатом натри , и растворители удал ют при пониженном давлении на роторном испарителе.
o
Пример 1 N-(1-оксогептил)-D-алло-Треонин (2с-1) Раствор н-гептаноил хлорида (440 мл, 2.83 ммол ) в ТГФ (250 мл) добавл ют по капл м, за период в 30 мин, к охлажденной (-5 до 0C), тщательно перемешиваемой смеси D-алло-Thr (300 мг, 2.51 ммол ) и 2H водн. NaOH (3.5 мл, 7.0 миллиэквивал.) в ТГФ (4.0 мл).
Образующуюс  смесь перемешивают в течение 2 ч при той же самой температуре и в течение всей ночи при комнатной температуре. Летучие соединени  удал ют, и остаток разбавл ют водой и подкисл ют, использу  конц. HCl. Смесь экстрагируют ЕtOАс, и объединенный органический раствор промывают раствором соли, высушивают, фильтруют и концентрируют, чтобы получить неочищенный 2с-1 (420 мг, содержащий 10% избыток гептаноил реагента), который затвердевает при сто нии.
3
NMR "дельта" 1.28 (d, J = 6.5, 3H), 4.20 (m, 1H), 4.61 (dd, J = 3.4, 6.6, 1H), 6.56 (br d, J= 6.9, 1H); [α]26D-38±2 (CHCl).
18
27
4
Пример 2 N-(1-оксогептил)-D-Треонин (2с-2) D-Thr (2.50 г, 20.99 ммол ) превращают в 2с-2, следу  методике, описанной в Примере 1: NMR δ 1.22 (d, J = 6.4, 3H), 4.45 (m, 1H), 4.55 (dd, J = 1.9, 8.3, 1H), 6.30-6.80 (br s, variable, > 2H), 6.88 (br d, J = 8.3, 1H); MS (HR-EI) m/z 321.1939 (M calcd. for CHNO, 321.1940).
Здесь и далее: variable - переменна  величина calcd. - рассчитан.
Пример 3 N-(1-оксогептил)-L-алло-Треонин (2с-3) L-алло-Thr (150 мг, 1.26 ммол ) превращают в 2с-3, следу  методике, описанной в Примере 1: NMR тот же самый, что и дл  2с-1.
Пример 4 N-(1-оксогептил)-L-Треонин (2с-4) L-Thr (300 мг, 2.51 ммол ) превращают в 2с-4, следу  методике, описанной в Примере 1: ПМР тот же самый, что 2с-2.
3
3
2
2
3
AB
AX
BX
4
4
Пример 5 N-(1-оксогептил)-D-Серии (2с-5) D-Ser (6.00 г, 57.09 ммол ) превращают в 2с-5, следу  методике, описанной в Примере 1. Сырой продукт очищают хроматографически (2 х 21 см колонка, градиент 1% CHOH и 0.5% HOAc до 3% CHOH и 2% HOAc в CHCl): ЯМР (CDOD) δ 0.90 (t, J = 6.8, 3 H), 1.32 (m, 6 H), 1.63 (m, 2 H), 2.27 (apparent t, J ≈ 7.5, 2H), 3.81 and 3.89 (AB of ABX, J = 11.2, J = 4.1, J = 5.0, 2Н), 4.49 (X of ABX, J 4.2, 4.8, 1H); MS (Cl, NH) m/z 218 (M + H), 235 (M + NH)]; [α]26D-8±1 (MeOH).
o
3
2
2
4
Пример 6 N-[транс(4-пентилциклогексил)карбонил]-D-алло-Треонин (2с-6) Раствор транс-4-пентилциклогексан карбоновой кислоты (198 мг, 1.0 ммол ) в сухом толуоле (1 мл) обрабатывают оксалил хлоридом (760 мг, 5.9 ммол ) при 0C и смесь перемешивают в течение 2 ч при той же самой температуре и 1 ч при комнатной температуре. Избыток реагента удал ют при пониженном давлении. Раствор сырого хлорангидрида в сухом ацетонитриле (2 мл) добавл ют к смеси D-алло-Thr (100 мг, 0.84 ммол ), 2HNaOH (600 мкл, 1.20 миллиэкв.) и TEA (85 мг, 0.85 ммол ) в ТГФ (1.5 мл), согласно методике, описанной в Примере 1. Сырой продукт 2с-6 очищают хроматографически (1.5 х 18 см колонка, 5% CHOH и 0.4% HOAc в CHCl): NMR δ 0.88 (t, J ≈ 7, 3H), 4.15 (m. 1H), 4.54 (m, 1H), 6.49 (d, 1H); MS (Cl, CH) m/z 300 (M + H).
3
2
2
16
23
5
3
o
Пример 7 N-[(4-бутоксифенил)ацетил]-D-алло-Треонин (2с-7) 4-бутоксифенилуксусную кислоту (288 мг, 1.38 ммол ) превращают в хлорангидрид и добавл ют к D-алло-Thr (150 мг, 1.26 ммол ) дл  получени  2с-9, согласно методике, описанной в Примере 6. Сырой продукт очищают хроматографически (2.5 х 18 см колонка, градиент 4% CHOH и 0.3% HOAc в CHCl):, NMR δ 0.96 (t, J = 7.4, 3 H), 1.14 (d, J + 5.8, 3 H), 1.47 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 3.53 (br s, 2H), 3.91 (t, J ≈ 6.5, 2H), 4.10 (br s, 1H), 4.53 (br s, 1H), 4.90 (br s, > 2 H), 6.76 (br d, J = 6.0, 1H), 6.84 (d, J + 8.4, 2 H), 7.13 (d, J + 8.4, 2 H); MS (HR-EI) m/z 309.1567 (M calcd. for CHNO, 309.1576; [α]26D-26±2 (CHCl); m.p. 90-94C.
2
3
o
o
Пример 8 N-(1-оксогептил)-D-алло-Треонин Фенилметил сложный эфир (2е-1) Сырой 2с-1 (420 мг, 1.82 ммол ) раствор ют в ДМФ (18 мл) и обрабатывают твердым NHCO (321 мг, 3.82 ммол ), и образующуюс  смесь перемешивают в течение 1 ч при 70-75C. Смесь охлаждают до 40-50C и обрабатывают бензилбромидом (1.13 мл, 9.31 ммол ).
o
o
2
18
27
4
3
Перемешивание продолжают в течение 2 ч при 40C и 18 ч при температуре окружающей среды. Летучие продукты удал ют, и остаток поглощаетс  HO/EtOAc. Органический слой отдел ют, промывают раствором соли, высушивают, отфильтровывают и упаривают. Очистка сырого продукта путем хроматографии (2 х 24 см колонка, 3 : 1, гексан/EtOAc) дает белый твердый продукт, который характеризуетс  как 2е-1 (506 мг, 1.57 ммол ): NMR δ 0.88 (apparent t, J = 6.8, 3 H), 1.09 (d, J = 6.4, 3H), 1.20-1.40 (m, 6 H), 1.55-1.74 (m, 2H), 2.27 (apparent t, J ≈ 7.5, 2H), 3.20-3.80 (br s, variable, 1H), 4.21 (dq, J = 3.3, 6.4, 1H), 4.74 (dd, J = 3.3, 6.8, 1H), 5.20 and 5.23 (AB, J = 12.2, 2H), 6.43 (br d, J = 6.5, 1H), 7.36 (m, 5H); MS (HR-EI) m/z 321.1939 (M calcd. for CHNO, 321.1940); [α]26D-29±2 (CHCl); m.p. 70-73C.
Пример 9 N-(1-оксогептил)-D-Треонин Фенилметил сложный эфир (2е-2).
18
28
4
3
o
Бензилирование сырого продукта 2с-2, согласно методике примера 8, дает 2е-2. Сырой твердый продукт очищают хроматографически (3.0 х 39 см колонка, 3 : 1 гексан/EtOAc): NMR δ 0.88 (apparent t, J ≈ 6.8, 3H), 1.20 (d, J = 6.4, 3H), 1.23-1.38 (m, 6H), 1.60-1.71 (m, 2H), and 1.55-1.95 (overlapping br s, variable, > 1H), 2.28 (apparent t, J ≈ 7.6, 2H), 4.37 (dq, J = 2.4, 6.4, 1H), 4.67 (dd, J = 2.4, 8.9, 1H), 5.19 and 5.22 (AB, J = 12.3, 2H), 6.21 (br d, J ≈ 9, 1H), 7.35 (m, 5H). MS (HR-EI) m/z 322.2011 (M + H calcd. for CHNO, 322.2019); [α]26D/-9±1 (CHCl); m.p. 77-80C.
18
27
4
3
o
Здесь и далее: overlapping - перекрывание Пример 10 N-(1-оксогептил)-L-алло-Треонин Фенилметил сложный эфир (2е-3) Бензилирование сырого продукта 2с-3, согласно методике Примера 8, дает 2е-3. Сырой твердый продукт очищают хроматографически (2,5 х 28 см колонка, 4: 1 гексан/EtOAc): NMR: тот же самый, что и дл  2е-1; MS (HR-EI) m/z 321.1935 (M calcd. for CHNO, 321.1940); [α]26D+25+2 (CHCl); m.p. 70-73C.
18
27
4
3
o
Пример 11 N-(1-оксогептил)-L-Треонин Фенилметил сложный эфир (2е-4) Бензилирование сырого продукта 2с-4, согласно методике Примера 8, дает 2е-4. Твердый продукт очищают хроматографически (2.0 х 20 см колонка, градиент от 4:1 до 3:1 гексан/EtOAc): ПМР тот же самый, что и дл  2е-2; MS (HR-EI) m/z 321.1947 (M calcd. for CHNO, 321.1940); [α]26D-9±2 (CHCl); m.p. 78-80C.
Пример 12 N-(1-оксогептил)-D-Серии Фенилметил сложный эфир (2е-5).
Бензилирование 2с-5, согласно методике Примера 8, дает 2е-5.
AB
AX
BX
X-NH
AX
DX
17
25
4
3
o
NMR δ 0.88 (apparent t, J ≈ 6.8, 3H), 1.20-1.40 (m, 6 H), 1.55-1.70 (m, 2H), 2.25 (apparent t, J ≈ 7.7, 2H), 2.45 and 2.80 (br s, 1 H), 3,92 and 3.99 (AB of ABX, J = 11.2, J = 3.4, J = 4.0, 1 H), 4.72 (ddd, apparent quintet, J = 7.3, J≈ J 3.7, 1H), 5.21 (apparent s, small AB side signals, 2H), 6.46 (br d, J = 7.1, 1H), 7.36 (m, 5 H); MS (HR-EI) m/z 307.1792 (M calcd. for CHNO, 307.1801); [α]26D-11±1 (CHCl); m.p. 62-66C.
3
2
2
Здесь и далее: quintet - квинтет small AB side signals - небольшие AB боковые сигналы Пример 13 N-[транс(4-пентилциклогексил)карбонил] -D-алло-Треонин Фенилметилметил сложный эфир (2е-6) Бензилирование 2с-6, согласно методике Примера 8, с последующей хроматографией (2 x 18 см колонка, 0.5% CHOH в CHCl) дает 2е-6.
AB
23
35
4
3
o
NMR δ 0.88 (m, 5 H), 1.07 (d, J = 6.4, 3H), 1.10-1.35 (m, 8 H), 1.35-1.55 (m, 2H), 1.64 (br s, 1H), 1.64-1.97 (m, 4H), 2.14 (m, 1H), 3.67 (br s, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.73 (dd, J = 3.2 and 6.7, 1H), 5.18 and 5.25 (AB, J = 12.2, 2H), 6.44 (d, J = 6.6, 1H); MS (HR-EI) m/z 389.2566 (M calcd. for CHNO, 389.2566); [α]26D-24±2 (CHCl); m.p. 130-34C.
Пример 14 N-[(4-бутоксифенил)ацетил]-D-алло-Треонин Фенилметил сложный эфир (2е-7) Бензилирование 2с-7, согласно методике Примера 8, с последующей хроматографией (2х20 см колонка, 3:1 гексан/EtOAc) дает 2е-7.
4
3
o
NMR δ 1.00 (m, 6H), 1.50 (m, 2H), 1.76 (m, 2H), 3.38 (br s, 1H), 3.56 (apparent s, small AB side signals, 2H), 3.95 (apparent t, J = 6.5, 2H), 4.15 (m, 1H) 4.72 (dd, J = 7.0 and 3.4, 1H), 5.13 and 5.19 (AB, J = 12.2, 2H), 6.38 (br d, J = 6.8, 1H), 6.87 (d, J = 8.7, 2H), 7.15 (d, J = 8.6, 2 H); MS (Cl, CH) m/z 400 (M + H); [α]26D-18±2 (CHCl); m.p. 80-83C.
Пример 15 (R)-3-(Гидрокси-N-(1-оксогептил)-D-норвалин фенилметил сложный эфир (2е-8) Бензилирование 2с-8 из Примера 51, согласно методике Примера 8, дает 2е-8.
Пример 16 (S)-3-(Гидрокси-N-(1-оксогептил)-D-норвалин фенилметил сложный эфир (2е-9) Бензилирование 2с-9 из Примера 52, согласно методике Примера 8, дает 2е-9.
2
6
2
6
Пример 17 N-[N-[(1,1-диметилэтокси)карбонил] -N-[фенилметокси) карбонил]-(R)-6-[(фенилметокси)карбонил]-L-лизил-D-Аланин Фенилметил сложный эфир (40b) Смесь N-[N-[(1,1-диметилэтокси)карбонил] -N- [(фенилметокси)карбонил] -(R)-6-[(метокси)карбонил] -L-лизил-D-Аланин 4-нитро фенилметил сложного эфира (40а, Kolodziejczyk, et. al., Int. J. Pept. Prot. Res., 1992, 39, 382, 683 мг, 1.06 ммол ), 4A молекул рных сит (2,15 г, дробленые), ТГФ (10.5 мл), и бензилового спирта (11.0 мл, 105,6 ммол ) перемешивают в течение 30 мин и затем обрабатывают титан (IV) изопропилатом (82 мкл, 0.27 миллиэкв.).
o
37
46
3
9
Образующуюс  смесь нагревают в течение 24 ч при 85-90C. Твердые продукты отфильтровывают через инфузорную землю, и растворитель удал ют. Избыток бензилового спирта удал ют перегонкой в аппарат Kugelrohr'2 (приблизительно 1000 мкм давление, 50-75с). Неочищенное оранжевое масло хроматографируют (2.5 х 31 см колонка), градиент 4:1-2:1 гексан/ EtOAc), получа  40b (633 мг, 88% выход): NMR δ 1.39 (d, J = 7.2, 3H), 1.43 (s, 9 H), 1.40-1.67 (m, 4H), 1.84 (br s, 2H), 4.07 (br s, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.58 (apparent quintet, 1H), 5.0 (br d, 1H), 5.07-5.25 (m, 6H), 5.43 (br d, J = 7.9, 1H), 6.68 (br d, 1H), 7.33 (m); MS (HR-FAB) m/z 676.3232 (M + H, calcd. for СHNO, 676.3234).
6
o
3
Пример 18 N-[N-[(фенилметокси)-карбонил]-(R)-6-(фенилметокси)-карбонил] -L-лизил] -D-Аланин Фенилметил сложный эфир (3b) Раствор 40b (251 мг, 0.37 ммол ) в ТГФ (870 мкл) перемешивают в течение 30 мин при 0C. ТГФ удал ют, и масло поглощают EtOAc и промывают насыщенным NaHCO раствором. Высушивание и удаление растворител  дает 3b (225 мг, незначительный избыток), который используют в последующих реакци х без дополнительной обработки: NMR δ 1.39 (d, 3H) and 1.20-1.70 (overlapping m, 4H), 1.82 (br s, 2H), 3.23 (br s, variable, 2H), 3.33 (br s, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.47 (apparent quintet, 1H), 5.03-5.13 (m, 5 H), 5.27 (br d, 1H), 7.35 (m, 15H), 7.95 (br d, 1 H); MS (FAB) m/z 576 (M + H), 598 (M + Na).
*
*
2
6
o
Пример 19 R-(R,R)]-N-[N-[[3-оксо-2-[(1-оксогептил) амино]-1-метил-3-(фенилметокси)-пропокси] карбонил] -N-[(фенилметокси)карбонил] -(R)-6-[(фенилметокси)карбонил]-L-лизил]-D- Аланин Фенилметил сложный эфир (1a-1) Раствор 2е-1 (173.6 мг, 0,54 ммол ) в ТГФ (тщательно закупоренный растворитель, дополнительно осушенный над 3 MS 1.45 мл) добавл ют к избытку охлажденного фосгена (1.92 М раствор в толуоле; 1.40 мл, 2,63 ммол ), поочередно с ТЕА (81 мкл, 0.58 ммол ) за период 15 мин при 0C.
Образующуюс  молочную смесь перемешивают дополнительно 15 мин при той же самой температуре и 5 ч при комнатной температуре.
3
Смесь дегазируют аргоном в течение 30 мин и перемешивают под давлением аспиратора в течение 30 мин. Остаток обрабатывают раствором свежеприготовленного 3b (0.37 ммол ) в CHCN (дополнительно осушенном, как в случае ТГФ, 2.9 мл) и затем TEA (81 мкл, 0.58 ммол ), оба добавлены все сразу. Бела  суспензи  перемешиваетс  в течение ночи при температуре окружающей среды.
2
2
51
63
4
12
Смесь поглощают EtOAc/HO и раздел ют слои. Водную фазу экстрагируют EtOAc дважды, и объединенную органическую фазу промывают раствором соли, высушивают, отфильтровывают и упаривают. Очистка продукта путем хроматографии (3 х 30 см колонка, градиент 2:1-1:2 гексан/EtOAc) дает белый воск, который идентифицируетс  как 1a-1: NMR δ 0.86 (m, 3H), 1.11 (d, J = 6.4, 3H), 1.20-1.40 (m, 8 H), 1.42 (d, J = 7.3, 3H), 1.50-1.75 (m, 4H, с перекрывающим HO сигналом), 1.75-2.05 (br d, 2H), 2.20 (m, 2H), 4.15 (br s, 1H), 4.47 (br s, 1H), 4.62 (apparent quintet, 1H), 4.87 (apparent br d, J ≈ 6, 1H), 5.00-5.20 (m, 9 H), 5.23 (m, 1H), 5.37 (br d, 1H), 6.40 (br d, 1H), 7.33 (m, 20H), 7.77 (br d, 1H); NS (HR-FAB) m/z 923.4420 (M + H, calcd. for CHNO, 923.4442).
*
*
2
6
2
51
63
4
12
Пример 20 [S-(R,S)]-N-[N-[3-оксо-2-[(1-оксогептил)амино]- 1-метил-3-(фенилметокси)-пропокси] карбонил] -N-[(фенилметокси)карбонил] -(R)-6-[фенилметокси)карбонил]-L-лизил]-D- Аланин Фенилметил сложный эфир (1a-2) Соединение 2е-2 (20 мг, 0.062 ммол ) соедин етс  с 3b (0.043 ммол ), согласно методике Примера 19. Очистка сырого продукта (1.5 х 21 см колонка, 2:1 гексан/EtOAc) дает белый воск, который характеризуетс  как 1а-2: NMR δ 0.87 (m, 3H), 1.25 and 1.23-1.38 (overlapping d, J = 6.2, 3H and m, 8 H), 1.40 (d, J = 7.2, 3H), 1.55-1.75 (m, 4H, with overlapping HO signal), 1.75-1.90 (m, 2H), 2.29 (n, 2H), 4.08 (br s, 1H), 4.83 (br s, 1H), 4.58 (apparent quintet, 1H), 4.83 (br d, 1H), 5.05-5.30 (m, 9H), 5.35 (br s, 1H), 5.68 (br s, 1H), 6.30 (br s, 1H), 6.62 (br s, 1H), 7.33 (m, 20 H); MS (HR-FAB) m/z 923.4455 (M + H, calcd. for CHNO, 923.4442).
*
2
6
51
62
4
12
Пример 21 [S-(R)]-N-[N-[3-оксо-2-[(1-оксогептил)амино]-1- метил-3-(фенилметокси)-пропокси] карбонил] -N-[(фенилметокси)карбонил] -(R)-6-[(фенилметокси)карбонил]-L-лизил]-D- Аланин Фенилметил сложный эфир (1а-3) Соединение 2е-3 (27.4 мг, 0.085 ммол ) соедин етс  с 3b (0.06 ммол ), согласно методике Примера 19. Очистка сырого продукта (1.5 х 16 см колонка, 2:1 гексан/EtOAc) дает белый воск, который идентифицируетс  как 1а-3: NMR δ 0.86 (m, 3H), 1.20-1.35 (m, 1H), 1.39 and 1.35-1.57 (overlapping d, J = 7.1, 3H, and m, 4 H), 1.75-1.95 (br s, 2H), 2.10-2.30 (m, 2H), 4.08 (br m, 1H), 4.37 (br s, 1H), 4.57 (apparent quintet, J = 7.3, 1H), 4.70-5.30 (overlapping multiplets, 10 H), 5.93 (br d, 1H), 6.50 (br d, 1H), 6.63 (br d, J = 7, 1H), 7.05 (m, 1H), 7.34 (m, 20 H); MS (HR-FAB) m/z 945.4281 (M + Na, calcd. for CHNONa, 945.4262).
*
*
2
6
2
51
62
4
12
Пример 22 [R-(R, S)] -N-[N-[[3-оксо-2-[(1-оксогептил) амино] -1-метил-3-(фенилметокси)-пропокси] карбонил] -N-[(фенилметокси)карбонил] -(R)-6-[(фенилметокси)карбонил]-L-лизил]-D- Аланин Фенилметил сложный эфир (1a-4) Соединение 2е-4 (27.6 мг, 0.085 ммол ) присоедин ют к 3b (0.06 ммол ), согласно методике Примера 19. Очистка сырого продукта (1.5 х 16 см колонка, градиент 2:1-1:1 гексан/EtOAc) дает белый воск, который идентифицируетс  как 1а-4: NMR δ 0.86 (m, 3H), 1.25 and 1.25-1.40 (overlapping d, J = 6.5, 3 and m, 11H), 1.42 (d, J = 7.0, 3H), 1.53-1.73 (m, 4 H, with overlapping HO signal), 1.73-1.95 (br s, 2H), 2.27 apparent t, J ≈ 7.5, 2H), 4.12 (br s, 1H), 4.38 (br s, fine structure, 1H), 4.58 (br s, 1H), 4.81 (br d, 1H), 5.03-5.23 (m, 8 H), 5.23-5.48 (m, 3H), 6.41 (br d, 1H), 6.71 (br d, 1H), 7.33 (m, 20H); MS (HR-FAB) m/z 945.4271 (M + Na, calcd. for CHNONa, 945.4262).
2
6
50
61
4
12
Пример 23 (R)-N-[N-[[3-оксо-2-[(1-оксогептил)амино] -3-(фенилметокси)-пропокси] карбонил] -N-[(фенилметокси)карбонил] -(R)-6- [(фенилметокси)карбонил]-L-лизил]-D-Аланин Фенилметил сложный эфир (1a-5) Соединение 2е-5 (99 мг, 0.32 ммол ) присоедин етс  к 3b (0.21 ммол ), согласно методике Примера 19. Очистка сырого продукта (2 х 21 см колонка, градиент 2: 1-1:1 толуол/диэтиловый эфир) дает белый воск, который характеризуетс  как 1a-5: NMR δ 0.88 (m, 3H), 1.20-1.38 (m, 8 H), 1.39 (d, J = 7.2, 3 H), 1.50-1.66 (m, 4 H), 1.85 (br s, 2H), 2.21 (apparent t, J ≈ 7.6, 2H), 4.09 (br s, 1H), 4.23-4.51 (m, 3H), 4.58 (apparent quintet, J = 7.3, 1H), 4.90 (br s, 1H), 5.05-5.25 (m, 9H), 5.55 (br t, 1H), 6.55 (br d, 1H), 6.90 (br d, 1H); 7.33 (m, 20H); MS (HR-FAB) m/z 909.4270 (M + H, calcd. for CHNO, 909.4285).
*
*
2
6
56
70
4
12
Пример 24 [R-(R, R)] -N-[N-[[1-метил-3-оксо-2-[[4-пентил- циклогексил)карбонил] амино] -3-(фенилметокси)-пропокси] карбонил] - N-[фенилметокси)карбонил]-(R)-6-[(фенилметокси)карбонил] -L- лизил] -D-Аланин Фенилметил сложный эфир (1a-6) Соединение 2е-6 (33 мг, 0.085 ммол ) присоедин етс  к 3b (0.06 ммол ), согласно методике Примера 19. Очистка сырого продукта (1.5 х 17 см колонка, 2:1 гексан/EtOAc) дает белый воск, который характеризуют как 1a-6: NMR δ 0.87 (m, 5 h), 1.10 (d, J = 6.6, 3H), 1.10-1.43 (m, 15 H), 1.43 (d, J = 7.3, 3H), 1.70-2.20 (m, 7 H), 4.15 (m, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.64 (m, 1H), 4.89 (br d, J = 8.3, 1H), 5.03-5.30 (m, 9H), 5.37 (br d, 1H), 6.43 (br d, 1H), 7.33 (m, 20H), 7.34 (br d, 1H); MS (HR-FAB) m/z 1013.4903 (M + Na, calcd for CHNONa, 1013.4888).
*
*
2
6
56
64
4
12
Пример 25 [R-(R, R)] -N-[N-[[4-бутилфенил) ацетил] амино] -1-метил-3-оксо-3-(фенилметокси)пропокси] карбонил] -N-[(фенилметокси)карбонил] -(R)-6-[(фенилметокси)карбонил]- L-лизил]-D-Аланин Фенилметил сложный эфир (1a-7) Соединение 2е-7 (34 мг, 0.085 ммол ) присоедин етс  к 3b (0.06 ммол ), согласно методике Примера 19. Очистка сырого продукта (1.5 х 14 см колонка, 2:1 гексан/EtOAc) дает белый воск, который характеризуетс  как 1a-7: NMR δ 0.97 (m, 6 H), 1.10-1.60 (m, overlapping d, J = 7.3, 9H), 1.65-2.03 (m, 4 H), 3.45 (m, 2H), 3.92 (apparent t, J = 6.5, 2H), 4.15 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.62 (apparent quintet, J = 7.3, 1H), 4.86 (br d, J = 8.0, 1H), 5.05-5.25 (m, 9 H), 5.42 (br d, J = 7.5, 1H), 6.33 (br d, 1H), 6.84 (d, J = 8.5, 2H), 7.13 (d, J = 8.5, 2H), 7.33 (m, 20 H), 7.89 (br d, 1H); MS (HR-FAB) m/z 1023.4368 (M + Na, calcd. for CHNONa, 1023.4368).
*
*
2
6
Пример 26 [R-(R,R)]-N-[N-[[1-Этил-3-оксо-2-[1-оксогептил) амино]-3-(фенилметокси)-пропокси] карбонил] -N-[(фенилметокси) карбонил] -(R)-6-[(фенилметокси)карбонил]-L-лизил]-D-Аланин Фенилметил сложный эфир (1a-8) Соединение 2е-8 (99 мг, 0.32 ммол ) присоедин етс  к 3b (0.21 ммол ), согласно методике Примера 19.
*
*
2
6
*
*
2
2
2
Пример 27 [S-(R,S)]-N-[N-[[1-Этил-3-oкco-2-[(1-окcoгептил амино]-3-(фенилметокси)-пропокси] карбонил] -N- [(фенилметокси)карбонил] -(R)-6-[(фенилметокси)карбонил]-L- лизил]-D-Аланин Фенилметил сложный эфир (1a-9) Пример 28 [R-(R, R)] -N-[(R)-6-карбонил-N-[[(2-карбокси-1- метил-2[(1-оксогептил)амино]этокси]карбонил]-L-лизил-D-Аланин (1a-11) Раствор 1a-1 (140 мг, 0.15 ммол ) в EtOAc/EtOH (5 мл : 15 мл) гидрируют над Pd(OH) (катализатор Pearlman's 20% на C, 100 мг) использу  прибор Parr'a при начальном давлении 70 psi (11,95 кг/см.
3
22
39
4
10
После 5.5 ч фильтраци  и упаривание дают бесцветное стекло. Последнее обрабатывают диэтиловым эфиром и стенки колбы протирают, чтобы получить белый кристаллический порошок. Эфирный раствор удал ют с помощью шприца и твердый продукт промывают двум  или более порци ми диэтилового эфира, высушивают и характеризуют как 1a-11: NMR (CDOD) δ 0.89 (m, 3H), 1.22 (d, J = 6.5, 3 H), 1.24-1.39 (m, 6 H), 1.42 (d, J = 7.3, 3H), 1.45-1.99 (m, 8H), 2.26 (t, J ≈ 7.5, 2H), 3.62 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 4.89 (br s for ОН, NH; one hidden CH signal), 5.14 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 519.2671 (M + H calcd. for СHNO, 519.2666).
*
*
2
3
22
39
4
10
где: one nidder CH - один скрытый CH Signal - сигнал Пример 29 [S-(R, S)] -N-[(R)-6-карбокси-N- [[2-карбокси-1-метил- 2-[(1-оксогептил)амино]этокси]карбонил]-L-лизил]-D-Аланин (1a-12) Гидрирование соединени  1a-2 (37 мг, 0.04 ммол ), согласно методике Пример 28, дает 1a-12: NMR (CDOD) δ 0.90 (m, 3H), 1.26 (d, J = 6.3, 3H), 1.2-1.38 (m, 6 H), 1.40 (d, J = 7.2, 3H), 1.44-1.73 (m, 5 H), 1.73-2.05 (m, 3H), 2.33 (apparent t, J ≈ 7.3, 2H), 3.92 (m, 1H), 4.16 (br s, 1H), 4.38 (m, 1 H), 4.64 (m, 1 H), 5.31 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 519.2671 (M + H calcd. for CHNO, 519.2666).
*
*
2
3
22
39
4
10
Пример 30 [S-(R, R)] -N-[(R)-6-карбокси-N- [[2-карбокси-1-метил-2-[(1-оксогептил)амино]этокси]карбонил]- L-лизил]-D-Аланин (1a-13) Гидрирование соединени  1a-3 (22.0 мг, 0.024 ммол ), согласно методике Примера 28, дает 1a-13: NMR (CDOD) δ 0.91 (m, 3H), 1.19-1.45 [overlapping d (J = 6.5, at 1. 25 d), m, and d (J = 7.3, at 1.39 d), 12H], 1.47-1.72 (m, 5H), 1.72-2.10 (m, 3H), 2.29 (apparent t, J = 7.5, 2H), 3.68 (m, 1H), 4.20 (m, 1H, 5.17 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 519.2651 (M + H calcs. for СHNO, 519.2666).
*
*
2
3
22
39
4
10
Пример 31 [R-R, S)] -N-[(R)-6-карбокси-N- [[2-карбокси-1-метил-2- [(1-оксогептил)амино]этокси]карбонил]-L-лизил]-D-Аланин (1a-14) Гидрирование соединени  1a-4 (36.6 мг, 0.04 ммол ) согласно методике Примера 28, дает 1a-14: NMR (CDOD) δ 0.90 (m, 3H), 1.22-1.36 [overlapping d (J = 6.2, at 1.24 d) and m, 12H], 1.36-2.02 (m, 8H, 2.32 (m, 2H), 3.60-3.80 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 5.30 (br s, 1H); MS (HR-FAB) m/z 519.2667 (M + H calcd. for CHNO, 519.2666).
2
3
21
37
4
10
Пример 32 (R)-N-[(R)-6-карбокси-N-[[2-карбокси-2-[(1- оксогептил)амино] этокси] карбонил]-L-лизил]-D-Аланин (1a-15) Гидрирование соединени  1a-5 (247 мг, 0.27 ммол ), согласно методике Примера 28, дает 1a-15: NMR (CDOD) δ 0.90 (m, 3H), 1.16-1.46 [overlapping d (J = 7.0, at 1.40 d) and m, 9H], 1.46-2.05 (m, 8 H), 2.25 (m, 2H), 3.69 (br s, 1H), 4.11 (br s, 1H), 4.36 (m, 3H), 4.63 (br s, 1H); MS (HR-FAB) m/z 505.2505 (M + H calcd. for СHNO, 505.2509).
2
3
27
46
4
10
Пример 33 [(R)-6-карбокси-N-[[2-карбокси-1-метил-2-[(4- пентилциклогексил)карбонил]амино]этокси]карбонил]-L-лизил]-D-Аланин (1a-16) Гидрирование соединени  1a-6 (17 мг, 0.017 ммол ), согласном методике Примера 28, дает 1a-16: NMR (CDOS) δ 0.90 (m, 5H), 1/10-1.75 [m, 19H, с overlapping 1.23 (d, J = 6.6) and 1.45 (d, J = 7.4)], 1.75-2.05 (m, 8H), 2.24 (m, 1H), 3.60 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.90 (m, 1H, under OH signal) 5.14 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 609.3099 (M + Na, calcd. for CHNONa, 609.3112).
2
3
27
41
4
11
Где: under OH signal - под OH сигналом Пример 34 N-[N-[[2-[[4-Бутоксифенил)ацетил] амино] -2-карбокси-1- метилэтокси] карбонил]-(R)-6-карбокси-L-лизил]-D-Аланин (1a-17) Гидрирование соединени  1a-7 (33 мг, 0.034 ммол ), согласно методике Примера 28, дает 1a-17: NMR (CDOD) δ 0.99 (m, 3H), 1.10-2.05 (m, 16H), 3.55 (m, 2H), 3.65 (m, 1H), 3.96 (m, 2H), 4.07 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.90 (m, 1H, under OH signal), 5.18 (m, 1H), 6.85 (m, J = 8.6, 2H), 7.22 (m, J = 8.6, 2H); MS (HR-FAB) m/z 597.2757 (M + H, calcd. for CHNO, 597.2772).
*
*
2
Пример 35 [S-(R, R)] -N-[(R)-6-карбокси-N-[[1- [карбокси[(1-оксогептил)амино] метил]пропокси]карбонил]-L-лизил]-D- Аланин (1a-18) Гидрирование соединени  1a-8 (247 мг, 0,27 ммол ), согласно методике Примера 28, дает 1a-18.
*
*
2
11
21
4
3
Пример 36 [S-(R, S)] -N-[(R)-6-карбокси-N-[[1- [карбокси[(1-оксогептил)амино] метил]пропокси]карбонил]-L-лизил]-D-Аланин (1a-19) Гидрирование соединени  1a-9 (247 мг, 0.27 ммол ), согласно методике Примера 28, дает 1a-19 Пример 37 N-(1-оксогептил)-L-Серин Метил сложный эфир (2j) Хлоргидрат L-серин метилового эфира превращают в 2j, согласно методике, описанной в Примере 1: NMR δ 0.89 (t, J = 6.9, 3H), 1.30 (m, 6H), 1.65 (m, 2H), 2.28 (apparent t, J ≈ 7.5, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.96 (m, 2H), 4.69 (m, 1H), 6.80 (br d, 1H); MS (HR-EI) m/z 231.1465 (m calcd. for CHNO, 231.1459); [α]26D+22±1(CHCl).
Пример 38 (S)-2,2-Диметил-3-(1-оксогептил)-4-оксазолидинкарбоновой кислоты Метиловый эфир (8a) Соединение 2j (320 мг, 1.38 ммол ) и n-TSA (40 мг) растворили в сухом ацетоне (2 мл) и 2,2-диметоксипропане (2 мл).
2
3
3
Образующийс  раствор нагревают в течение ночи до кипени  с обратным холодильником. Добавл ют твердый KCO, и летучие продукты удал ют при пониженном давлении дл  получени  остатка. Мгновенна  хроматографи  (2 х 21 см колонка, 6:1 гексан/EtOAc) остатка дает 8а в виде масла: NMR δ 0.88 (m, 3H), 1.29 (m, 6H), 1.57 (s, 3H), 1.62 (m, 2H), 1.70.(s, 3H), 2.15 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 4.20 (m, 2H), 4.46 (m, 1H); [α]26D= -47 ± 1 (CHCl).
Пример 39 (R)-2,2-Диметил-3-(1-оксогептил)-4-оксазолидинметанол Раствор 8а (296 мг, 1.09 ммол ) в сухом диэтиловом эфире (1 мл) обрабатывают боргидридом лити  (2 М раствор в ТГФ, 0.55 мл, 1.09 миллиэкв.) в атмосфере аргона. Смесь перемешивают в течение 3 ч при нагревании до кипени  с обратным холодильником и 18 ч при комнатной температуре.
2
13
25
3
3
Образующуюс  смесь разбавл ют диэтиловым эфиром и резко охлаждают при смешении с холодным метанолом. Летучие продукты удал ют, и остаток поглощают EtOAc/HO. Проведенные операции привод т к образование неочищенного спирта, который очищают хроматографически (2:1 гексан/EtOAc): NMR δ 0.88 (m, 3H), 1.30 (m, 6H), 1.54 (s, 3H), 1.62 (s, 3H), 2.35 (m, 2H), 3.30-4.40 (complex m, 6H); MS (HR-EI) m/z 243.1837 (M calcd. for СHNO 243.1840); [α]26D= -5 ± 1 (CHCl).
2
2
2
2
2
2
o
o
Где: complex - комплексный Пример 40 (S)-2,2-Диметил-3-(1-оксогептил)-4-оксазолидин- карбоксальдегид (9а) Раствор оксалил хлорида (105 мкл, 1.23 ммол ) в CHCl (2.75 мл) охлаждают до -60C. Добавл ют раствор ДМСО (192 мкл) в CHCl (0.55 мл) за период 5 мин, и образующуюс  молочную смесь перемешивают в течение 15 мин при -60C. К смеси добавл ют спирт Примера 39 (133 мг, 0.55 ммол ) в CHCl (0.55 мл) за период 5 мин.
o
o
2
2
2
Бане дают возможность нагретьс  до -20C (20 мин), и прозрачный раствор перемешивают 20 мин при -20C. Добавл ют триэтиламин (0.77 мл) и HO (3.4 мл), и смесь перемешивают в течение 5 минут при температуре окружающей среды. Обработка CHCl дает сырое масло, которое очищают хроматографически (1.5 х 20 см, 3:1 одновременно), получа  9а: NMR δ 0.85 (m, 3Н), 1.30 (m, 6Н), 1.60 (s, 3H), 1.60-1.70 (m, 2H), 1.70 (s, 3Н), 2.00-2.40 (m, 2H), 4.00-4.30 (m, 3Н), 9.65 (d, J ≈ 1, 1H).
o
Пример 41 (4S)-L-Этил-2,2-диметил-3-(1-оксогептил)-4- оксазолидинметанол (10a) Раствор 9а в диэтиловом эфире (1 мл) добавл ют по капл м к охлажденному (5C) раствору EtMgBr (3 M в диэтиловом эфире, 0.36 мл). Охлаждающую баню убирают, и к смеси добавл ют кристаллический иод, и перемешивание продолжают в течение 1.5 ч при комнатной температуре.
4
Образовавшуюс  смесь разбавл ют EtOAc и промывают насыщенным водным раствором NHCl. Водную фазу повторно экстрагируют, и объединенный органический раствор высушивают и упаривают дл  получени  сырого 10а: NMR δ 0.88 (m, 3H), 1.05 (m, 3H), 1.30 (m, 6H), 1.45 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.50-1.75 (m, 5H), 2.10-2.60 (m, 2H), 3.50-4,50 (m, 4H); MS (EI) m/z 271 (M).
*
*
*
*
o
2
2
3
Пример 42 R-(R,S) и S-(R,R)-N-[2-гидрокси-1-(гидроксиметил)бутил Гептанамид Сырой 10а (107 мг, 0.39 ммол ) раствор ют в охлажденном TFA (0.38 мл), содержащем HO (≈ 1%), и раствор перемешивают 45 мин при 0. Летучие продукты удал ют, и остаток поглощаетс  EtOAc и промываетс  насыщенным NHCO и раствором соли.
2
2
12
25
3
После высушивани  и удалени  растворител  11a (2:1 смесь диастереомеров) выдел ют хроматографически (1.5 х 18 см, 2% MeOH в CHCl): NMR δ 0.85-1.05 (m, 6H), 1.30 (m, 6H), 2.23 (m, 2H), 3.65-4.05 (m, 4H), 6.20 and 6.40 (two broad d, 2:1 ratio, respectively, 1H); MS (HR-EI) m/z 231/1887 (M calcd. for CHNO, 231.1940).
*
*
2
2
Где: two broad - два широких ratio, respectively - соотношение, соответственно Пример 43 [S-(R, R)] -N-[1-[[[(1,1-Диметилэтил)дифенилсилил]-окси] метил]-2-гидроксибутил]Гептанамид (10c) Смесь 11а (1.0 ммол ), т-бутилдифенилсилил хлорида (1.2 ммол ), TEA (1.2 ммол ) и DMAP (0.04 ммол ) в CHCl (1.5 мл) перемешивают 20 ч при комнатной температуре согласно S. K. Chaudhary and О. Hernander (Tetrahedron Lett., 1979, 99).
2
2
2
4
Образующуюс  смесь распредел ют между CHCl и HO. Слои раздел ют, и органическую фазу промывают насыщенным раствором NHCl и высушивают. Удаление растворител  дает смесь, которую очищают хроматографически. Менее пол рный продукт идентифицируетс  как 10c.
*
*
Пример 44 [R-(R, S)] -N-[1-[[[(1,1-Диметилэтил)дифенилсилил]- окси]метил]-2-гидроксибутил] Гептанамид (10d) Более пол рный изомер, выделенный в Примере 43, характеризуетс  как 10d.
*
*
+
-
4
2
Пример 45 [S-(R, R)] -N-[1-[[[(1,1-Диметилэтил)дифенилсилил] - окси] метил]-2-(фенилметокси)-бутил Гептанамид (2d) Раствор 10c в ДМФ (0.60 мл) и BnBr (0.96 мл, 8 ммолей) обрабатывают н-BuNI (37 мг, 0.1 ммол ). Дисперсию NH (60% в масле, 1.3 миллиэкв.) добавл ют порци ми к раствору за период 1 час. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Эфирна  обработка дает сырой масл ный продукт, который очищают хроматографически. Основной продукт характеризуетс  как 12с.
*
*
Пример 46 [S-(R, S)-N-[1-[[[(1,1-Диметилэтил)дифенилсилил] - окси] метил] -2-((фенилметокси)бутил Гептанамид (12d) Соединение 12d приготавливают из 10d, использу  методику Примера 45.
*
*
+
-
4
Пример 47 [S-(R,R)]-N-[1-Гидроксиметил)-2-(фенилметокси)бутил] Гептанамид (13с) Соединение 12с (1 ммоль) раствор ют в ТГФ (1.1 мл) и обрабатывают н-BuNF раствором (1H в ТГФ, 3.0 мл; (согласно F.J.Corey and A. Venkate's warlu, J. Amer. Chem. Soc., 1972, 94, 6190).
После 40 мин при комнатной температуре реакцию прекращают резким охлаждением льдом, и смесь распредел ют между диэтиловым эфиром и водой. Водный слой повторно экстрагируют диэтиловым эфиром, и объединенные органические слои промывают раствором соли, высушивают и растворитель удал ют, получа  13с, который очищают хроматографически.
*
*
Пример 48 [R-(R,S)]-N-[1-Гидроксиметил-2-(фенилметокси)-бутил] Гептанамид (13d) Соединение 13d приготавливают из 12d по методике, описанной в Примере 47.
Пример 49 N-(1-Оксогептил)-3-(фенилметокси)-трео-D-Норвалин (14c).
Спирт 13с (1 ммоль) в ДМФ (4 мл) обрабатывают пиридиний дихроматом (3,5 миллиэкв), согласно методике (Corey and Schmidt, Tetrahedron Lett., 1979, 399). После 18 ч смесь выливают на лед. Обработка диэтиловым эфиром дает 14с, который очищают хроматографически.
Пример 50 N-(1-Оксогептил)-3-(фенилметокси)-эритро-D-Норвалин (14d) Соединение 14d приготавливаетс  из 13d согласно методике Примера 49.
Пример 51 3-Гидрокси-N-(1-оксогептил)-трео-D-Норвалин (2с-8) Раствор 14с в EtOAc/EtOH гидрируют согласно методике Примера 28. Сырой продукт идентифицируетс  как 2с-8 и используют в Примере 15.
Пример 52, 3-Гидрокси-N-(1-оксогептил)-эритро-D-Норвалин (2с-9) Соединение 2с-9 приготавливают из 14d, согласно методике Примера 51. Неочищенный продукт используют в Примере 16.
2
3
Пример 53 N-(1-оксигептил)-D-Аспарагин (22a) D-Аспарагин 21a (4.5 г, 29.9 ммол ) превращают в 22а, согласно методике Примера 1. Смесь воды и ТГФ используют в качестве растворител , и 2H водный NaOH замен ют смесью триэтиламина и 0.5 H NaHCO. Сырой твердый продукт очищают перекристаллизацией из смеси метиловый спирт-диэтиловый эфир.
3
11
21
2
4
NMR (CDOD) δ 0.90 (t, 3H), 1.61 (m, 2H), 2.23 (t, 2H), 2.75 (m, 2H), 4.71 (dd, 1H); MS (LR-CI) m/z 245 (M+H) calcd for CHNO 245.
Пример 54 3-Амино-N-(1-оксогептил)-D-Аланин (2g-1) Соединение 22а (2.21 г, 9.0 ммол ) добавл ют к раствору бис-(трифторацетокси)иодобензола (5.83 г, 13.57 ммол ) в 51 мл N,N-диметилформамида и 41 мл воды. Смесь перемешивают 15 мин и обрабатывают пиридином (1.46 мл, 18.09 ммол ).
3
10
21
2
3
Образующийс  раствор перемешивают 18 ч при комнатной температуре. Летучие продукты удал ют, и остаток разбавл ют 90 мл воды. Смесь промывают 3 х 50 мл диэтиловым эфиром. Водный слой отдел ют и упаривают. Растирание образующейс  жидкости с диэтиловым эфиром дает белый твердый продукт, который характеризуетс  как 2g-1: NMR (CDOH) δ 0.61 (t, 3H), 1.35 (m, 2H), 2.05 (t, 2H), 3.0-3.2 (m, 2H), 4.40 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 217.1555 (M+H, calcd for CHNO, 217.1552).
Пример 55 3-Амино-N-(1-оксогептил)-D-Аланин Фенил Метиловый эфир Моногидрохлорид (2h-1) Ацетил хлорид (3.05 мл, 42.87 мл) добавл ют по капл м за период 10 мин к охлажденному льдом раствору бензилового спирта (10 мл, 96.63 ммол ).
Образующийс  раствор перемешивают дополнительно 30 мин. Затем лед ную баню убирают и добавл ют соединение 2-1 (1.32 г, 6,12 ммол ). Раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, и летучие продукты удал ют перегонкой Kugelrohr'a.
3
17
27
2
3
Остаток обрабатывают диэтиловым эфиром и затем перекристаллизовывают из этилового спирта, получа  белый твердый продукт, который идентифицируетс  как 2h-1: NMR (CDCl) 0.75 (t, 3H), 1.45 (m, 2H), 2.20 (t, 2H), 3.40 (m, 2H), 4.80 (br s, 1H), 5.10 (s, 2H), 7.62 (br s, 1H); MS (HR-FAB) m/z 30.2017 (M + H, calcd for CHNO 307.2022).
*
*
Пример 56 [S-(R,R)]-N-[2-Гидрокси-1-(гидроксиметил)пропил]- гептанамид (11с) К раствору (2е-2) (1.0 г, 3.11 ммол ) в диэтиловом эфире, с подогревом, добавл ют по капл м при комнатной температуре раствор борогидрида лити  (1.60 мл, 3,2 ммол ) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь нагревают до кипени  с обратным холодильником в течение 3 часов, разбавл ют диэтиловым эфиром и медленно обрабатывают метанолом до прекращени  шипени .
Летучие продуты удал ют, получа  остаток, который распредел ют между водой и этил ацетатом. Органический слой отдел ют, промывают раствором соли, высушивают и отфильтровывают. Фильтрат упаривают до остаточного масла, которое очищают хроматографически, использу  элюирующую смесь 3:1 этил ацетат-гексан, и получают 560 мг желаемого продукта в виде масла.
11
24
3
NMR δ 1.20 (d, 3H), 1,65 (m, 2H), 2.26 (t, 2H), 4.19 (q, 1H), 6.23 (br d, 1H). MS (CI) m/z 218 (M+H calc'd for CHNO 218).
*
*
Пример 57 [S-(R, R)] -N-[1-[[[(1,1-Диметилэтил)диметилсилил]- окси]метил]-2-гидроксипропил]гептанамид (10c) Смесь 11с, (1.945 г) т-бутилдиметилсилил хлорида, (1.4165 г) триэтиламина (951 мг, 1.31 мл) и 4-диметиламинопиридина (42.76 мг) в 13 мл метилен хлорида перемешивают в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавл ют метилен хлоридом и добавл ют воду. Органический слой отдел ют, промывают водой, высушивают и упаривают, получа  3.25 г остаточного масла, которое очищают хроматографически, элюиру  смесью 1:5 этил ацетат/гексан, получа  2.30 г желаемого продукта в виде масла.
17
38
3
NMR δ 0.08 (d, 6H), 0,89 (t, 3H), 0.90 (s, 9H), 1.16 (d, 3H), 1.65 (m, 2H), 2.24 (t, 2H), 3.47 (s, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.85 (s, 2H), 4.28 (q, 1H), 6.13 (brd, 1H); MS (FAB) m/z = 332 (M + H calc'd for CHNOSi 332).
Пример 58 (S)-N-[1-[[[(1,1-диметилэтил)диметилсилил] -окси]метил]-2- оксогептил]-Гептанамид (27c) Смесь (10с) (2.30 г, 6.94 ммол ) и пиридин дихромата (10.62 г, 28,2 ммол ) в 20 мл N,N-диметилформамида перемешивают в атмосфере аргона в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавл ют 100 мл воды и экстрагируют этил ацетатом (3 х 40 мл). Органический слой отдел ют, промывают водой и раствором соли, высушивают и упаривают, получа  1.87 г остаточной коричневой жидкости. Жидкость очищают хроматографически, использу  1: 6 этил ацетат/гексан, и получают 997 мг желаемого продукта в виде масла.
17
36
3
NMR δ 0.83 (s, 9H), 1.61 (m, 2H), 2.22 (t, 2H), 2.23 (s, 3H), 3.82 (dd, 1H), 4.09 (dd, 1H), 4.57 (m, 1H), 6.42 (brd, 1H); MS (FAB) m/z 330 (M+H calc'd for CHNOSi 330).
*
*
Пример 59 [R-(R, S)] -N-[1-[[[(1,1-диметилэтил)диметилсилил] - окси] метил]-2-[((фенилметил)амино]пропил]-Гептанамид (28с) Смесь 27с (960 мг, 2.91 ммол ) в 5 мл метилового спирта, содержащего молекул рные сита, перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин.
Во врем  перемешивани  добавл ют цианоборгидрид натри  (365 мг) и реакционную смесь перемешивают в атмосфере аргона в течение 18 ч. Реакционную смесь отфильтровывают и упаривают, получа  остаток, который распредел ют между этил ацетатом и водным бикарбонатом натри .
Органический слой отдел ют, промывают раствором соли, и высушивают и упаривают до получени  1.224 г остаточной желтой жидкости. Остаток очищают хроматографически, использу  2:5 этил ацетат/гексан дл  получени  561.2 мг желаемого продукта 28с в виде масла.
24
44
2
2
NMR 0.84 (s, 9H), 1.09 (s, 3H), 1.61 (m, 2H), 2.20 (t, 2H), 3.08 (m, 1H), 6.22 (brd, 1H), 7.32 (m, 5H); MS (HR-FAB) m/z 421.3245 (M + H calc'd for CHNOSi 421.3250).
*
*
Пример 60 [R-(R, R)-N-[1-[[[(1,1-диметилэтил)диметилсилил] -окси] метил] -2-[(фенилметил)амино]пропил]-Гептанамид (28d) Дальнейша  элюаци  хроматографической колонки в Примере 59 дает 239.4 mg желаемого продукта 28d в виде масла.
24
44
2
2
NMR δ 0.84 (s, 9H), 1.18 (d, 3H), 1.61 (m, 2H), 2.18 (t, 2H), 2.80 (m, 1H), 6.47 (brd, 1H), 7.31 (m, 5H); MS (HR-FAB) m/z 421.3253 (M + H calc'd for CHNOSi 421.3250).
*
*
2
Пример 61 [R-(R, S)]-N-[2-Амино-1-[[[(1,1-диметилэтил)диметилсилил]- окси]метил] пропил]-Гептанамид (25с) Смесь 28с (208.6 г, 0.50 ммол ) и 104 мг Pd(OH) в 15 мл метилового спирта встр хивают в аппарате Парра в атмосфере водорода в течение 18 ч. Реакционную смесь отфильтровывают через инфузорную землю и фильтрат концентрируют дл  получени  169 мг желаемого продукта 25с в виде масла.
NMR δ 0.84 (s, 9H), 1.05 (d, 3H), 1.60 (m, 2H), 2.10 (t, 2H), 3.31 (m, 1H), 6.47 (br d, 1H).
*
*
Пример 62 [S-(R, R)]-N-[2-Амино-1-[[[(1,1-диметилэтил) диметилсилил]-окси]метил] пропил]-Гептанамид (25с) Соединение 25d приготавливают из 28d, согласно методике, используемой дл  приготовлени  25с.
*
*
o
Пример 63 [S-(R, S)] -[3-[[(1,1-Диметилэтил)диметилсилил] -1- метил]-2-[(1-оксогептил)аминопропил]Фенил Метиловый эфир Карбаминовой Кислоты (26с) К раствору 25с (164 мг, 0.496 ммоль) в 1 мл метилен хлорида при 0C в атмосфере аргона добавл ют триэтиламин (201 мг, 276.5 мкл, 1.98 ммол ) с последующим добавлением по капл м бензил хлорформиата (169 мг, 142 мкл, 0.992 ммол ). Реакционной смеси дают нагретьс  до комнатной температуры и затем перемешивают в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавл ют метилен хлоридом и добавл ют воду.
Органический слой отдел ют, промывают раствором соли, высушивают и концентрируют дл  получени  230 мг остаточного палево- желтого масла. Остаток очищают хроматографически, использу  1:5 этил ацетат/гексан, чтобы получить 92 мг желаемого продукта 26с.
25
45
2
4
NMR δ 0.90 (s, 9H), 1.21 (d, 3H), 1.56 (m, 2H), 2.09 (t, 2H), 3.69 (2dd, 2H), 3.84 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 5.07 (q, 2H), 5,17 (d, 1H), 6.15 (br d, 1H), 7.34 (m, 5H), MS (FAB); m/z 465 (M+H calc'd for CHNOSi 465).
*
*
Пример 64 [R-(R, R)]-[3-[[(1,1-Диметилэтил)диметилсилил]-окси]-1- метил]-2-[(1-оксогептил)аминопропил]Фенил Метиловый Эфир Карбаминовой Кислоты (26d) Соединение 25d защищают, согласно методике использованной дл  приготовлени  26с, получа  26d.
*
*
Пример 65 [S-(R, S)] -[3-Гидрокси-1-метил-2-[(1-оксогептил) амино]пропил]-Карбаминовой Кислоты Фенилметиловый Эфир (29с) Соединение 26с десилилируют, согласно методике Примера 47, дл  получени  29с.
*
*
Пример 66 [R-(R, R)] -[3-Гидрокси-1-метил-2-[(1-оксогептил)амино] пропил]-Карбаминовой Кислоты Фенилметиловый Эфир (29d) Соединение 26d десилилируют, как в Примере 65, получа  29d.
*
*
Пример 67 [S-(R, S)]-2-[(1-Оксогептил)амино]-3-[[(фенилметокси)карбонил]амино]-Бутанова  Кислота (30с) Окисление соединени  29с, согласно методике Примера 49, дает 30с.
*
*
Пример 68 [R-(R, R)]-2-[(1-Оксогептил) амино]-3-[[(фенилметокси) карбонил]амино] -Бутанова  Кислота (30d) Соединение 29d превращают в 30d, согласно Примеру 67.
*
*
Пример 69 [R-(R,S)]-3-Амино-2-[(1-оксогептил)амино]-3-Бутанова  Кислота (2g-2) Гидрирование 30с, согласно Примеру 28, дает соединение 2g-2.
*
*
Пример 70 [R-(R,R)]-3-Амино-2-[(1-оксогептил)амино]-3-Бутанова  Кислота (2g-3) Соединение 30d превращаетс  в 2g-3, согласно Примеру 69.
*
*
Пример 71 [R-(R, S)]-3-Амино-2-[(1-оксогептил)амино]-3-Бутановой Кислоты Метиловый Эфир Этерификаци  2g-2, согласно Примеру 55, с использованием MeOH в качестве спирта, дает 2h-2 в виде его хлористоводородной соли.
*
*
Пример 72 [R-(R, R)]-3-Амино-2-[(1-оксогептил)амино]-Бутановой Кислоты Метиловый Эфир (2h-3) Соединение 2g-3 этерифицируют, как в Примере 71, дл  получени  2h-3 в виде его хлористоводородной соли.
Пример 73 (S)-5-оксо-3-[(фенилметокси)карбонил] -4-оксазолидин- пропанова  кислота (43с) Смесь 100 г (355 ммол ) N-бензилоксикарбонил-L-Glu (42с) и 213 г параформальдегида нагревают до кипени  с обратным холодильником в толуоле (1 л).
Через 4 ч образующийс  раствор охлаждают до комнатной температуры и экстрагируют насыщенным раствором бикарбоната натри  (5 х 150 мл).
Водные слои объедин ют, затем распредел ют с 400 мл этил ацетата и подкисл ют твердым бисульфатом натри . Слои раздел ют, и органически слой высушивают над сульфатом магни , затем концентрируют, получа  89.72 г неочищенной кислоты в виде в зкого желтого масла: NMR δ 7.38 (m, 5H), 5.6 (brs, 1H), 5.21 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.41 (t, J = 6 Hz, 1H), 2.6-2.1 (m, 4H).
o
Пример 74 (S)-5-оксо-3-(фенилметокси)карбонил]-4-Оксазолидин- пропаналь (44с) Раствор 27 г (92.7 ммол ) сырой кислоты (43с) в 200 мл ТГФ охлаждают до 0C и добавл ют по капл м 13 мл (10.7 мг, 141 ммоль) комплекса боран-метил сульфид через дополнительную воронку. Реакционной смеси дают нагретьс  постепенно до комнатной температуры и перемешивают в течение 12 ч.
o
Образующуюс  смесь концентрируют при пониженном давлении, получа  белый стеклообразный материал, который поглощают 500 мл метилен хлорида и обрабатывают пиридин хлорохроматом (61 г, 281 ммоль) при 0C в присутствии ЗА молекул рных сит. Смеси дают нагретьс  до комнатной температуры и перемешивают в течение 3 ч.
Смесь профильтровывают через инфузорную землю с диэтиловым эфиром (200 мл), затем концентрируют. Остаток поглощают диэтиловым эфиром и отфильтровывают снова через инфузорную землю с диэтиловым эфиром, затем концентрируют, получа  13.22 г неочищенного альдегида в виде светло-зеленого масла: NMR δ 9.80 (br s, 1H), 7.40 (m, 5H), 5.55 (br s, 1H), 5.20 (m, 3H), 4.38 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.6-2.1 (m, 4H).
o
Пример 75 4-[4-[[1,1-диметилэтокси)карбонил] амино] -5-метокси-5-оксо -3-пентенил] -5-оксо-3-оксазолидин-карбоновой кислоты Фенилметиловый эфир (46с) К раствору 15.1 г фосфоната 45 в 300 мл метилен хлорида при -78C добавл ют по капл м 102 мл 0.5 М раствора гексаметилдисилиламида кали  в ТГФ. Реакционную смесь перемешивают 10 мин и к раствору энол та добавл ют 18 г неочищенного альдегида в 30 мл метилен хлорида.
Смесь перемешивают в течение 3 ч пока происходит нагревание до комнатной температуры. Реакционную смесь резко охлаждают 100 мл охлажденной воды и экстрагируют 2х300 мл диэтилового эфира. Органические экстракты объедин ют и промывают 200 мл воды и 50 мл раствора соли.
После высушивани  над сульфатом магни  объем уменьшают. Остаток хроматографируют, использу  переменный градиент гексан/этил ацетат. E изомер (2.4 г) вымываетс  первым с последующими 15.4 г желаемого Z изомера 46с.
NMR δ 1.45 (s, 9H); 2.00-2.40 (М, 4H); 3.74 (s, 3H); 4.36 (b t, 1H); 5.20 (М, 4H); 5.54 (b s, 1H); 6.43 (b t, 1H); 7.37 (m, 5H).
-1
+
+
4
4
8
4
8
2
IR (neat)cm: 3350(s), 1800(s), 1740(s); MS(CI): m/z 466 (M + NH); 410 (M-CH); 349 (M-CHCO + H)); [α]26D+68±1.
6
2
o
o
Где: neat - чистый Пример 76 (Z)-N-5,6-Дидегидро-N-(1,1диметилэтокси)-карбонил]-6- (метоксикарбонил)-N-(фенилметокси)-карбонил] -L-лизил] -D-аланина Метиловый Эфир (47с) Смесь 3.3 г D-аланин метилового эфира и 7.1 г 46с нагревают при 140C в течение 10 мин, затем другие 1.6 г D-аланин метилового эфира добавл ют. Hагревание дополнительно продолжают при 140C еще 10 мин.
После охлаждени  до температуры окружающей среды сырой продукт хроматографируют на силикагеле, использу  переменный градиент гексан/этил ацетат. Выдел ют очищенный продукт (6.7 г). Материал кристаллизуют из смеси гексан-диэтиловый эфир, получа  5.8 г желаемого продукта 47с в виде твердого вещества.
13
-1
+
+
+
+
+
+
o
3
2
2
3
3
2
3
3
3
2
3
3
2
2
4
8
4
8
2
4
8
NMR δ 1.43 (s, d, 12H); 1.80-2.10 (m, 2H); 2.23-2.36 (m, 2H); 3.72 (s, 3H); 3.76 (s, 3H); 4.15-4.27 (m, 1H); 4.50-4.60 (m, 1H); 5.11 (b s, 2H); 5.76 (b s, 1H); 6.38 (b s, 1H); 6.47 (b t, 1H); 6.81 (b s, 1H); 7.34 (m, 5H) C-NMR: 17.82 (-CHCH; 24.33 (-CH-CH); 28.02 (С(CH)); 30.99 (-CHCH=C); 47.94 (-CHCH); 52.17 (-OCH); 52.29 (-OCH); 54.28 (OCCHNH); 66.93 (-CHAr); 80.43 (-ОС(CH)); 126.57 (-HNC=C); 127.86 (phenyl ring carbon); 127.94 (phenyl ring carbon); 128.12 (phenyl ring carbon); 128.28 (phenyl ring carbon); 135.98 (phenyl ring carbon); 153.45 (OCONH); 156.21 (OCONH-); 165.13 (-CONH-); 171.04 (-CO-); 172.99 (-CO-). IR (KBr, cm) 3300 (s); 1720 (s); 1690 (s); 1650 (s); 1510 (s); MS (CI) m/z 522 (MH) 466 (MH-CC); 422 (MH-CHCO) MS (FAB) m/z 544 (M + Na); 522 (MH); 466 (MH-CH); Anal Calcd: C, 57.57; H, 6.76; N, 8.06; Found: C, 56.98; H, 6.66; N, 7.88 [α]26D/-7±1; m.p. 120-121C.
6
2
2
Где: phenyl ring carbon - углерод фенильного кольца Found - найдено Пример 77 N-[N-[(1,1-Диметилэтокси)карбонил]-(R)-6-(метоксикарбонил)- N-(фенилметокси)карбонил]-L-лизил]-D-Аланина Метиловый Эфир (40с) Раствор 8.5 г 47с в 25 мл уксусной кислоты и 250 мл ТГФ гидрируют при 48 psi (17.44 кг/см) водорода над 0.5 г (бицикло (2.2.1.)гептан-2,5-диен[2S, 3S]бис(дифенилфосфино)бутан)родий (I) перхлората в течение 18 ч.
Реакционную смесь отфильтровывают и упаривают до получени  остатка. Остаток хроматографируют, использу  переменный градиент гексан/этил ацетат дл  получени  7.9 г выделенного продукта в виде остатка. Множественные кристаллизации дают 2.6 г диастереомерно чистого 40с.
3
3
2
2
2
3
3
2
2
2
2
3
3
3
2
3
3
2
4
8
2
2
13
-1
+
+
+
o
6
NMR δ (CDCl) 1.40 (d, J = 6Hz, 3H); 1.43 (s, 9H); 1.60-1.97 (m, 6H); 3.73 (s, 3H); 3.74 (s, 3H); 4.12-4.37 (m, 2H); 4.52-4.61 (m, 1H); 5.12 (bs, 3H); 5.44-5.55 (b s, 1H); 6.73 (b s, 1H); 7.36 (b s, 5H); C-NMR: "дельта" 18.02 (-CH -CH); 21.12 (CH-CH-CH); 28.23 (-ОС(CH)); 31.87 (-CH-CH-); 32.39 (-CHCH-); 47.99 (-CHCH); 52.23 (-OCH); 52.38 (-OCH); 52.75 (OCCHN); 54.41 (OCCHN); 67.01 (-OCHAr); 79.97 (-ОС(CH)); 127.99 (phenyl ring carbon); 128.09 (phenyl ring carbon); 128.44 (ArCH); 136.13 (ArCC); 155.48 (OCONH); 156.23 (OCONH); 171.10 (-CONH-); 173.03 (-CO-2X); IR (KBr(cm): 3340 (s); 1760 (s); 1740 (s); 1680 (s); 1660 (s); 1660 (s); 1520 (s); MS (FAB) m/z 546 (M + Na); 524 (MH); 424 (MH-CHCO); Anal. Calcd: C, 57,35; H, 7.12; N, 8.03; Found: C, 57.23; H, 7.27; N, 8.03; rotation [α]25D-9±1; m.p. 120-121C Пример 78 N-[N-[(1,1-Диметилэтокси)карбонил] -R-6-(метоксикарбонил) -L-лизил]-D-Аланина Метиловый Эфир (3c) Раствор 40с (248 мг, 0.47 ммол ) в метаноле (8 мл) гидрируют над Pd(OH), согласно Примеру 28. Спуст  3 ч, фильтраци  и упаривание дают некрашенное стекло.
3
NMP (CDCl) δ 3.50 (m, 1H), 3.80 (s, 6H), 4.30 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 5.15 (d, 1H), 7.85 (br s, 1H).
6
2
2
5
Пример 79 N-[N-[(1,1-Диметилэтокси)карбонил] -6-(метоксикарбонил) -N-[[[3-оксо-2-[(1-оксогептил)амино] -3-(фенилметокси)пропил] амино]карбонил]-L-лизил]-D-аланин (1b-1) Раствор 30 (94,5 мг, 0.24 ммол ) в высушенном ТГФ (3А сита, 0.8 мл) добавл ют по капл м в атмосфере аргона к смеси 1,1'-карбонилдиимидазола (39.34 мг, 0.24 ммол , высушенного над PO) в 1.8 мл высушенного ТГФ. Смесь перемешивают в течение 2ч и добавл ют 2-1 (83.3 мг, 0.24 ммол ) и TEA (34 ul, 0.24 мм).
Образующуюс  смесь перемешивают 18 ч при температуре окружающей среды. Смесь разбавл ют водой и экстрагируют этил ацетатом. Органический слой отдел ют, промывают раствором соли, высушивают, отфильтровывают и упаривают до получени  остатка. Остаток очищают хроматографически, элюиру  1-2% метанолом в хлороформе и получа  109.3 мг 1b-1 в виде белого продукта.
35
56
5
11
NMR δ 0.88 (t, 3H), 2.22 (t, 2H), 3.59 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 4.26 (m, 1H), 4.52 (t, 1H), 4.63 (m, 1H), 5.32 (d, 2H), 5.63 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.20 (d, 1H); MS (HR-FAB) m/z 722.3980 (M + H, calcd for СHNO 722.3976).
2
o
Пример 80 N-[6-метоксикарбонил)N-[[[3-оксо-2-[1-оксогептил)- амино]-3-(фенилметокси)пропил] амино] карбонил] -L-лизил-D- аланина метиловый эфир (1b-2) К 16 мг 1b-1 под аргоном при 0C добавл ют 100 мкл TFA с последующим перемешиванием в течение 1 ч. Летучие продукты упаривают, получа  11.1 мг 1b-2.
3
30
48
5
9
NMR (CDOD) δ 0.80 (t, 3H), 1.30 (d, 3H), 2.15 (t, 2H), 3.32 (m, 1H), 3.56 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.95 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.30 (q, 1H), 4.38 (m, 1H), 5.07 (d, 2H), 7.28 (m, 5H); MS (HR-FAB) m/z 622.3435 (M + H, calcd for CHNO 622.3452).
2
2
2
Пример 81 N-[N-[[[2-карбокси-2-[(1-оксогептил)амино] этил] - амино] карбонил] -N-[(1,1-диметилэтокси)карбонил] -6- (метоксикарбонил)-L-лизил-D-аланина метиловый эфир (1b-3) К 70 мг 1b-1 в 7 мл метилового спирта добавл ют 31 мг Pd(OH) на углероде и реакционную смесь гидрируют в течение 4 ч согласно Примеру 28. Реакционную смесь отфильтровывают через слой инфузорной земли. Фильтрат концентрируют дл  получени  53.8 мг 1b-3 в виде стекла.
3
28
50
5
11
NMR (CDOD) δ 0.80 (t, 3H), 2.15 (t, 2H), 3.32 (m, 1H) 3.56 (m, 1H), 3.60 (s, 6H), 3.95 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.30 (q, 1H), 4.38 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 632.3493 (M + H, calcd for CHNO 632.3506).
2
o
Пример 82 N-[N-[[[2-карбокси-2-[(1-оксогептил)амино] этил] -амино] карбонил]-6-(метоксикарбонил)-L-лизил-D-Аланина метиловй эфир (1b-3) К 40.2 мг 1b-3 в атмосфере аргона при 0C добавл ют 300 мкл TFA в соответствии с методикой Примера 80. Летучие продукты упаривают, и концентрат высушивают в течение всей ночи, получа  47 мг 1b-4.
3
23
42
5
9
NMR (CDOD) δ 0.80 (t, 3H), 1.30 (d, 3H), 2.15 (t, 2H), 3.28 (m, 1H), 3.56 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.95 (m, 1H), 4.13 (m, 1H), 4.31 (q, 1H), 4.43 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 532.2972 (M + H, calcd for CHNO 532.2983).
2
6
Пример 83 N-[6-карбокси-N-[[[-карбокси-2-[(1-оксогептил)амино] этил]-амино]карбонил]-N-[(1,1-диметилэтокси)карбонил]-L-лизил -D-аланин (1b-5) К раствору 135.9 мг 1b-1 в 2.7 мл метилового спирта добавл ют 104 мг карбоната кали  и 0.9 мл воды с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 20 часов. Реакционную смесь упаривают до получени  остатка, который раствор ют в 1 мл воды и подкисл ют 1 Н HCl до pH 2.
Реакционную смесь перемешивают в течение 5 минут и экстрагируют 2х этил ацетатом. Объединенные органические экстракты промывают раствором соли, высушивают и упаривают, получа  106 мг остатка. Остаток растирают с 3х5 мл диэтилового эфира, и эфир декантируют. Твердый остаток высушивают, получа  91.7 мг продукта 1b-5 в виде белого твердого продукта.
3
26
46
5
11
NMR (CDOD) δ 0.80 (t, 3H), 2.15 (t, 2H), 3.32 (m, 1H), 3.56 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 4.15 (m, 1H), 4.30 (q, 1H), 4.38 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 604.3200 (M + H, calcd for CHNO 604.3194).
2
Пример 84 N-[6-карбокси-N-[[[2-карбокси-2-[1-оксогептил)амино]- этил]амино]карбонил]-L-лизил]-D-аланин (1b-11) 85.9 мг 1b-5 в атмосфере аргона обрабатывают 500 мкл TFA, согласно Примеру 80. Летучие продукты упаривают до получени  остатка, который обрабатывают диэтиловым эфиром 3х, и эфир декантируют. Остаток высушивают дл  получени  77.9 мг 1b-11 в виде белого твердого продукта.
3
21
38
5
9
NMR (CDOD) δ 0.80 (t, 3H), 2.16 (t, 2H), 3.22 (br s, 5H), 3.58 (m, 2H), 2.85 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.30 (d, 1H), 4.40 (m, 1H); MS (HR-FAB) m/z 526.2482 (M+H, calcd for CHNO 526.2489).
*
*
6
2
Пример 85 [S-(R, S)]-N-[N-[(1,1- Диметилэтокси)карбонил-N-[[[3- метокси-[[[3-метокси-1-метил-3-оксо-2-[(1-оксогептил)амино] - пропил] амино] карбонил]-(R)-6-(метоксикарбонил)-L-лизил-D-Аланин (1b-6) Амин 2h-2 соедин етс  с амином 3с, согласно методике, описанной в Примере 79. Карбамид очищают хроматографически и идентифицируют как 1b-6.
*
*
6
2
Пример 86 [R-(R, R)] -N-[N-[(1,1- Диметилэтокси)карбонил-N-[[[3- метокси-1-метил-3-оксо-2-[(1-оксогептил)амино]- пропил]аминокарбонил]-(R)-6-(метоксикарбонил)-L-лизил]-D-Аланина Метиловый Эфир (1b-7) Амин 2h-3 превращают в карбамид 1b-7, согласно Примеру 85.
*
*
2
6
Пример 87 [S-(R, S)] -N-[(R)-6-карбокси-N- [[[2-карбокси-1-метил-2-[(1-оксогептил)амино] -этил]амино]карбонил]- N-(1,1-диметилэтокси)карбонил]-L-лизил]-D-Аланин (1b-8) Гидролиз 1b-6, согласно методике Примера, 83 дает 1b-8.
*
*
2
6
Пример 88 [R-(R, R)] -N-[(R)-6-карбокси-N- [[[2-карбокси-1-метил-2-[(1-оксогептил)амино] -этил]амино]карбонил]- N-(1,1-диметилэтокси)карбонил]-L-лизил]-D-Аланин (1b-9) Гидролиз 1b-7, согласно Примеру 87, дает 1b-9.
*
*
2
Пример 89 [S-(R, S)] -N-[(R)-6-карбокси-N-[[[2- карбокси-1-метил-2-[(1-оксогептил)амино]-этил]амино]карбонил]-L- лизил-D-Аланин (1b-12) Деблокирование амино группы 1b-8, согласно методике Примера 84, дает 1b-12.
*
*
2
Пример 90 [R-(R, R)] -N-[(R)-6-карбокси-N- [[[2-карбокси-1-метил-2-[(1-оксогептил)амино]-этил]амино]карбонил]- L-лизил]-D-Аланина (1b-13) Соединени  1b-9 снимают защиту, согласно методике Примера 89, получа  1b-13.