БИ- ИЛИ ПОЛИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ПОЛИПЕПТИДЫ, СВЯЗЫВАЮЩИЕ ПОВЕРХНОСТНЫЕ АНТИГЕНЫ ИММУННЫХ ЭФФЕКТОРНЫХ КЛЕТОК И АНТИГЕНЫ HBV ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИЙ BV И АССОЦИИРОВАННЫХ С НИМИ СОСТОЯНИЙ

1. Полипептид, содержащий
(a) первый набор из шести определяющих комплементарность областей (CDR), скомпонованный для связывания первого антигена; и
(b) (ba) второй набор из шести CDR, скомпонованный для связывания второго антигена; или
(bb) лиганд, способный связываться со вторым антигеном;
где
(i) указанный первый антиген выбран из малого поверхностного антигена вируса гепатита B (HBV); среднего поверхностного антигена HBV и большого поверхностного антигена HBV; и
(ii) указанный второй антиген выбран из поверхностных антигенов, презентируемых иммунными эффекторными клетками, такими как натуральные киллеры (NK) и цитотоксические T-лимфоциты (CTL),
и где указанные CDR являются частью иммуноглобулиновых доменов.
2. Полипептид по п.1, где
(a) указанный первый набор из шести CDR содержится в первом scFv-фрагменте; и/или
(b) (ba) указанный второй набор из шести CDR содержится во втором scFv-фрагменте; или
(bb) указанный лиганд представляет собой иммунолиганд, предпочтительно способный связываться с NKG2D, NKp30/NCR3, 4-1 BB или OX40.
3. Полипептид по п.1 или 2, где указанный первый набор из шести CDR связывает эпитоп указанного первого антигена, причем эпитоп расположен
(a) в указанном малом поверхностном антигене HBV;
(b) в части указанного большого поверхностного антигена HBV, которая не содержится в указанном малом поверхностном антигене HBV; или
(c) в части указанного большого поверхностного антигена HBV, структура которой отличается от указанного малого поверхностного антигена HBV.
4. Полипептид по любому из пп.1-3, где указанный поверхностный антиген, презентируемый иммунными эффекторными клетками, выбран из CD3, CD28, 4-1 BB, OX40, CD16, CD56, NKG2D и NKp30/NCR3.
5. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, где указанный полипептид дополнительно содержит область димеризации, где указанная область димеризации обеспечивает ковалентную и/или нековалентную димеризацию.
6. Полипептид по любому из пп.2-5, где указанный полипептид дополнительно содержит спейсерную область, причем указанная спейсерная область предпочтительно содержит CH2-домен и CH3-домен, при этом указанная спейсерная область расположена между
(i) указанным первым scFv-фрагментом и
(ii) указанным вторым scFv-фрагментом или указанным рекомбинантным лигандом в аминокислотной последовательности указанного полипептида,
c
и в указанный CH2-домен и/или указанный CH3-домен предпочтительно внесены мутации в одном или нескольких положениях для снижения или устранения связывания F-рецепторов.
7. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, где
(a) указанный первый набор из шести CDR имеет последовательности SEQ ID NO: 1-6, 7-12 или 13-18; и/или
(b) указанный второй набор из шести CDR имеет последовательности SEQ ID NO: 19-24, 25-30, 31-36 или 37-42,
где в каждом наборе из шести CDR порядок CDR является следующим: CDR1 тяжелой цепи, CDR2 тяжелой цепи, CDR3 тяжелой цепи, CDR1 легкой цепи, CDR2 легкой цепи и CDR3 легкой цепи.
8. Полипептид по любому из предшествующих пунктов, где указанный полипептид содержит или состоит из аминокислотной последовательности по любому из SEQ ID NO: 43-46 или аминокислотной последовательности, которая проявляет по меньшей мере 80% идентичность с любой из SEQ ID NO: 43-46 при условии, что CDR указанной аминокислотной последовательности, проявляющей по меньшей мере 80% идентичность, идентичны SEQ ID NO: 1-6, 7-12, 13-18, 19-24, 25-30, 31-36 или 37-42 соответственно.
9. Нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид по любому из предшествующих пунктов.
10. Комплекс, содержащий или состоящий из первого и второго полипептидов, причем указанные первый и второй полипептиды определены в любом из пп.1-8, где
(a) между указанным первым и указанным вторым полипептидами существует по меньшей мере ковалентная связь, предпочтительно по меньшей мере один дисульфидный мостик между остатком Cys указанного первого полипептида и остатком Cys указанного второго полипептида; или
(b) указанный первый и указанный второй полипептиды связаны друг с другом нековалентно.
11. Композиция, содержащая или состоящая из одного или нескольких полипептидов по любому из пп.1-8 и/или одного или нескольких комплексов по п.10 при условии, что по меньшей мере два полипептида содержатся в указанной композиции, причем эти два полипептида отличаются друг от друга в отношении первого антигена и/или второго антигена, с которым они связываются.
12. Композиция по п.11, где указанные два полипептида представляют собой
(a) (i) полипептид, связывающийся с малым или большим поверхностным антигеном HBV и CD3; и
(ii) полипептид, связывающийся с малым или большим поверхностным антигеном HBV и CD28;
или
(b) (i) полипептид, связывающийся с малым или большим поверхностным антигеном HBV и CD16; и
(ii) полипептид, связывающийся с малым или большим поверхностным антигеном HBV и CD56.
13. Комплекс по п.1 или композиция по п.11 или 12, где указанный комплекс и указанная композиция содержат или состоят из четырехвалентного антитела, которое является биспецифическим, триспецифическим или тетраспецифическим.
14. Фармацевтическая композиция, содержащая или состоящая из одного или нескольких полипептидов по любому из пп.1-8, одного или нескольких комплексов по п.10 или 13 и/или одной или нескольких композиций по любому из пп.11-13.
15. Один или несколько полипептидов по любому из пп.1-8, один или несколько комплексов по п.10 или 13 и/или одна или несколько композиций по любому из пп.11-13 для применения в способе лечения или предупреждения инфекции HBV и/или состояния, вызываемого указанной инфекцией HBV, причем указанное состояние, вызванное указанной инфекцией HBV, выбрано из цирроза печени, печеночно-клеточной карциномы и рака печени, причем указанный рак печени характеризуется экспрессией одного или нескольких поверхностных антигенов HBV.
in vitro
vivo,
16. Иммунная эффекторная клетка  или ex  которая имеет полипептид по любому из пп.1-8, или комплекс по п.10 или 13, связанные с поверхностным антигеном указанной иммунной эффекторной клетки.