ХЛОРПРОПОКСИПРОИЗВОДНЫЕ 7-ОКСИ-КУМАРИНА, ОБЛАДАЮЩИЕ ТРАНКВИЛИЗИРУЮЩИМ И ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫМ ДЕЙСТВИЕМ
CHLOROPROPOXY DERIVATIVES OF 7-OXO-COUMARIN, HAVING TRANQUILISING AND HEPATOPROTECTIVE ACTION

Изобретение относится к области медицины. Оно касается биологически активных соединений, а именно хлорпропоскипроизводных 7-окси-кумарина, или умбеллиферона (7-окси-5,6-бензо-альфа-пирона).
50
У этих соединений в молекуле нет атома азота, они обладают транквилизирующим и гепатопротекторным действием при низкой токсичности (LD более 1 г/кг).
Известен препарат диазепам, он относится к группе бензодиазепинов, химическое название - 7-хлор-2,3-дигидро-1-метил-5-фенил-1Н-1,4-бензодиазепин-2-он [Машковский М.Д. Лекарственные средства, т.1, 1987, стр.72; «Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России», 1999, стр.Е70]. Препарат обладает транквилизирующим действием, его механизм действия связан с усилением тормозного влияния GABA в ЦНС за счет повышения чувствительности GABA-рецепторов к медиатору в результате стимуляции бензодиазепиновых рецепторов. Ряд его побочных реакций связан именно с механизмом действия, с химической структурой вещества, молекула которого в семичленном цикле содержит два атома азота. Препарат проявляет, в частности, миорелаксирующее действие, что не всегда актуально в процессе лечения. Желательно иметь для лечения препараты с узконаправленным действием.
Препарат с гепатопротекторным действием Розанол взят в качестве препарата сравнения в испытаниях заявляемого изобретения. Розанол - препарат растительного происхождения [Машковский М.Д. Лекарственные средства, т.1, 1987, стр.517]. Он обладает способностью уменьшать спазмы желчевыводящих и мочевыводящих путей, обладает умеренной антибактериальной активностью. Препарат противопоказан при тяжелых поражениях паренхимальных органов, при острых воспалительных процессах в желче- и мочевыводящих путях.
Производные 5,6-бензо-альфа-пирона изучают давно с целью использования в качестве лекарственных препаратов. Так, известно, что циклические аминопроизводные 5,6-бензо-альфа-пирона обладают транквилизирующими и антидепрессивными свойствами [авт.св. №1623152, дата приор. 26.12.88 г.]. Соединения этого ряда имеют формулу
2
где радикал R всегда содержит атом азота.
Индивидуальная чувствительность пациентов к азотсодержащим препаратам ограничивает применение этих веществ.
Цель изобретения - поиск новых производных 7-окси-кумарина (умбеллиферона), обладающих повышенной транквилизирующей активностью и отчетливым гепатопротекторным действием, причем при низкой токсичности, чтобы быть применимыми на практике.
Задача решена с помощью синтетических соединений, содержащих в молекуле атом хлора при отсутствии в молекуле азота, общая формула этих соединений
где
2
1
3
1) 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон, где R=R=H; R=СН;
1
2
2
2
2
2) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, где R=H; R и R=-CH-CH-CH-;
1
2
3) 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=R=R=H;
3
1
2
4) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=СН; R=R=H.
Поиск среди синтезированных производных 5,6-бензо-α-пирона был нацелен на соединения, молекулы которых не содержат азота.
Были изучены на проявление транквилизирующего и гепатопротекторного действия ранее синтезированные и описанные соединения 7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон и 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон(№1, №3).
У этих соединений (1, 3), ранее известных как флюоресцентная метка для определения третичных аминосоединений (АС №1149596, дата приор. 07.07.1983) и как вещества с антикальциевой активностью (патент РФ №2242471, дата приор. 31.07.2003), были выявлены искомые биологические активности. Таким образом, эти соединения являются препаратами с повышенной транквилизирующей активностью и заметным гепатопротекторным действием (результаты представлены в таблицах испытаний). Проверка их токсичности показала, что они низкотоксичны и, следовательно, могут быть применимы в практической медицине.
Химические соединения с аналогичной структурой, но разными радикалами-заместителями могут обладать разными биологическими свойствами.
Были синтезированы и изучены новые производные 7-окси-кумарина, а именно
1
2
2
2
2
2) 7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, где R=H; R и R=-CH-CH-CH-
3
1
2
4) 7-(2'-метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, где R=СН; R=R=H.
Новые синтезированные соединения проявляют транквилизирующие и гепатопротекторные свойства, т.е. задача решена положительно.
Общая методика синтеза
Метод O-алкилирования умбеллиферона и очистки продукта реакции модифицирован и отличается от стандартного способа по изобретению, описанного в авт. св. №1623152, что позволяет повысить выход конечного заданного продукта на 20% и снизить образование побочных соединений.
f
Реакцию алкилирования и получение 7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирона проводят в спиртовой среде при кипячении и перемешивании, по окончании алкилирования реакционную массу упаривают от спирта. Остаток растворяют в бензоле и экстрагируют непрореагировавший умбеллиферон 2% водным раствором соды. Чистоту полученного продукта реакции определяют с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ на силуфоле, УФ 254, в системе гептан:ацетон (3:2); R продукта 0,46). Раствор упаривают в вакууме и необходимые соединения выделяют с помощью разбавления остатка эфиром или гексаном. Получают белое кристаллическое вещество с выходом 70%.
Характеристики полученных соединений.
ЯМР-спектры соответствуют заявляемым структурам.
пл
1. 7-(3'-Хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон, t 81-82°С.
1
6
2
3
2
2
ЯМР Н (ДМСО d) δ, м.д.: 2,19-2,25 (М, 2Н, СН), 2,38 (С, 3Н, СН), 3,77-3,80 (т, 2Н, CH), 4,17-4,20 (т, 2Н, СН), 6,13 (С, СН), 6,90-6,91 (М, 2М, Av), 7,59-7,62 (М, 1М, Av).
пл
2. 7-(3'-Хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон, t 129-130°С.
15
15
3
CHClO. Мол.вес 278,73. В %: С 64.64; Н 5.42; Cl 12.72; О 17.22.
Найдено: С 64.81, Н 5.31.
1
6
2
2
2
2
2
2
ЯМР Н (хлороформ d) δ, м.д.: 2,16-2,30 (М, 4Н, CH, CH), 2,83-2,90 (М, 2Н, СН), 2,98-3,06 (М, 2Н, CH), 3,68-3,73 (М, 2Н, СН), 4,13-4,20 (М, 2Н, CH), 6,89-6,93 (М, 2Н, Av), 7,30-7,49 (М, 1Н, Av).
пл
3. 7-(3'-Хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, t 54-56°С.
1
6
2
2
2
ЯМР Н (ДМСО d) δ, м.д.: 2,19-2,25 (М, 2Н, СН), 3,77-3,80 (т, 2Н, CH), 4,19-4,22 (М, 2Н, СН), 6,23-6,25 (Д, 1Н-СН=), 6,91-6,97 (М, 2H,-CH=, Av), 7,58-7,61 (д, 1Н, Av), 7,93-7,96 (д, 1Н, Av).
пл
4. 7-(2'-Метил-3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон, t 66-68°С.
13
13
3
CHClO. Мол.вес 252,69. В %: С 61.79; Н 5.19; Cl 14.03; О 18.99.
Найдено: С 61.32, Н 5.29.
1
6
3
2
2
ЯМР Н (ДМСО d) δ, м.д.: 1,05-1,07 (д, 3Н, СН), 2,29-2,34 (М, 1Н, СН), 3,72-3,73 (М, 2Н, СН), 3,99-4,01 (М, 2Н, CH), 6,25-6,27 (д, 1Н, -СН=), 6,92-6,96 (М, 2Н, -СН=, Av), 7,58-7,60 (д, 1Н, Av), 7,93-7,96 (д, 1Н, Av).
Испытания транквилизирующего действия соединений.
50
Новые соединения (1, 2, 3, 4) в пяти дозах (0,1-20 мг/кг массы животного) внутрибрюшинно вводят белым мышам по 12 особей в каждой группе. Контрольной группе животных вводят равновеликий объем физиологического раствора. Через 30 минут после этого мышам вводят внутривенно тиопентал натрия от пороговой дозы 15 мг/кг и учитывают количество уснувших животных (боковое положение), по которому рассчитывают 50%-ную эффективную дозу (ЭД). Результаты испытания потенцирующего действия приведены в таблице 2.
50
Из данных этой таблицы рассчитывают по методу Личфильда и Уилкоксона ЭД, которая составила в мг/кг: соединение 1 - 32,0t1,4; соединение 2 - 38,1t1,4; соединение 3 - 40,3t2,3; соединение 4 - 45,4t1,8.
50
В данных испытаниях вещества дозировались в величинах, составляющих 0,5 ЭД. Из таблицы 3 видно, что предложенные соединения в большей степени, чем диазепам, восстанавливают вертикальную и горизонтальную составляющие двигательной активности в стрессовых условиях, нормализуют вегетативные проявления стресса, показателями которых являются число дефекаций и грумминг.
50
Данные о токсичности соединений 1-4 (по параметру средней летальной дозы ЛД), получены в опытах на белых мышах при внутривенном и пероральном путях введения заявляемых соединений. Данные представлены в таблице 1.
Для оценки взаимосвязи между отдельными паттернами поведения в тесте «открытого поля» результаты испытаний, проведенные как и в предыдущем случае, с некоторым расширением учитываемых паттернов, обрабатывают на ЭВМ с вычислением коэффициента Спирмена между отдельными паттернами поведения индивидуально для каждого животного, затем усредняют их. Коэффициенты Спирмена приводятся при Р=0,05. Результаты испытания приведены в таблице 4. Из таблицы 4 следует, что соединение 1 усиливает корреляционную связь между «побежками» и «вставаниями», снижает корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «побежки». Соединение 2 вызывает подобную зависимость между отдельными паттернами, но повышает корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «вставание». Соединение 3 усиливает связь между «побежками» и вставанием». Соединение 4 вызывает увеличение связи между «вставанием» и «сидением на месте», уменьшение связи между паттернами «вставание» и «грумминг», что свидетельствует о преимущественно угнетающем действии соединения. Все соединения ослабляют корреляционную связь между паттернами «дефекация» и «сидение на месте», что дополнительно доказывает наличие транквилизирующего действия.
Анксиолитическую активность испытуемых соединений изучают по тесту конфликтной ситуации. В опытах на 12 мышах-самцах и таком же количестве контрольных животных учитывали количество подхода к поилке и наказуемых взятий воды. Для этого животных, лишенных воды, помещали в камеру, состоящую из двух отсеков, в одном из которых имеется электродный пол и поилка. Животное помещали в отсек без электродного пола, при перемещении его в отсек с электродным полом и подходе к поилке на пол подавали электрический ток с заданными параметрами, которые строго выдерживают в течение всего опыта. Результаты испытаний приведены в таблице 5. Соединения обладают более выраженной анксиолитической активностью, чем диазепам.
Миореласирующее действие оценивают по методу вращающегося стержня. В таблице 6 приведены данные об удержании на стержне мышей при введении различных доз испытуемых соединений (испытания в каждой группе проводятся на 12 мышах). Установлено, что новые соединения практически лишены миорелаксирующих свойств.
Гепатозащитное действие соединений.
Гепатозащитное действие хлорпропоксипроизводного 7-окси-кумарина (умбеллиферона) оценивали по
- выживаемости животных;
- изменениям антитоксической функции печени (продолжительность гексеналового сна);
- экскреторной функции печени (бромсульфалеиновая проба);
- активности ферментов (АсАТ, АлАТ, ЩФ, ГГТ) в сыворотке крови;
- по изменениям белкового обмена;
- гистологическим изменениям ткани печени.
Выживаемость животных.
4
Гепатозащитное действие соединений 1-4 проявилось в том, что выживаемость животных, которым вводили ежедневно по 50 или 250 мг/кг на фоне введения CCl, была почти в 2 раза выше (90%), чем в контроле (55%), и на 15% выше, чем у животных, получавших Розанол в дозе 30 мг/кг в течение месяца (таблица 8).
Состояние антитоксической функции печени (продолжительность гексеналового сна).
Соединения 1-4 в указанных дозах способствовали восстановлению антитоксической и секреторной функций печени: продолжительность гексеналового сна сократилась с 88±5 мин в контроле до 59±4 мин в опыте. Секреция бромсульфалеина у подопытных животных возросла в два раза по сравнению с контролем.
Состояние активности ферментообразовательной функции печени.
Соединения 1-4 в дозе 10 мг/кг и особенно 50 мг/кг достоверно проявили защитное действие, что сказалось на активности АсАТ, АлАТ, ЩФ и ГГТ. В этих опытах эффект соединений 1-4 в дозе 10 мг/кг был сопоставим с эффектом препарата сравнения Розанола в дозе 30 мг/кг (таблица 9).
4
О благоприятном влиянии соединений 1-4 на белковообразовательную функцию печени при длительном его применении можно судить по данным, представленным в таблице 10: соединения 1-4 при затравке CCl способны поддерживать белковообразовательную функцию печени практически на уровне интактных животных, предупреждать снижение концентрации альбуминов в крови и сохранять соотношение альбуминов и глобулинов на уровне, близком к таковому у интактных животных (таблица 10).
Морфологические показатели состояния печени.
4
4
Морфологические исследования печени крыс после введения CCl и лечения соединениями 1-4 показали отчетливые различия. Введение CCl у контрольных животных вызывал тяжелые дистрофические изменения в печени, выраженность которых начинала убывать с 15 суток, но не достигала полного восстановления даже к концу месяца, в то время как при лечении соединениями 1-4 параллельно с процессами повреждения уже на 7-9-й день отмечались компенсаторно-приспособительные процессы. Интенсивность их усиливалась и намного опережала картину восстановления у контрольных животных. У животных, получавших соединения 1-4, были отмечены более ранние сроки обратного развития процессов повреждения, которые сочетались с ядерными изменениями, отражающими интенсивность процессов компенсации.
Контрольная группа
7 дней. Тотальное поражение печени, выраженное с различной интенсивностью в пределах одного наблюдения. Повреждения преимущественно центральных отделов долек, реже - практически всей территории долек, исключая перипортальную зону. Гепатоциты - в состоянии мелко- и крупнокапельной жировой дистрофии, встречаются участки гидропической дистрофии. На этом фоне группы и отдельные гепатоциты в состоянии некробиоза, некроза, баллонной дистрофии. Клеточная реакция на некроз и дистрофию минимальна, в основном вокруг центральных вен. Портальные тракты - без особенностей. Кровенаполнение неравномерное, единичные диапедезные кровоизлияния. В некоторых участках периферических долек - гипертрофия ядер гепатоцитов и единичные митозы.
Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4
7 дней. Во всех наблюдениях преобладает мелко- и крупнокапельная жировая дистрофия, четко ограниченная центральными отделами долек. Некроз гепатоцитов отсутствует. В ряде случаев наряду с жировой имеется гидропическая дистрофия.
Контрольная группа
15 дней. Масштаб и интенсивность жировой дистрофии значительно снижены, имеет место очаговое распространение, четко ограниченное центром долек. Преобладает зернистая и очаговая гидропическая дистрофия. Встречаются очаговые внутридольковые лимфомакрофагальные инфильтраты. Отчетливо видно набухание и умеренная гиперплазия ретикулоэндотелия.
Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4
15 дней. Жировая дистрофия отсутствует или она носила мелкоочаговый характер в отдельных участках срезов. Преобладает очаговая гидропическая дистрофия. Значительно возрастает в сравнении с 7 днем исследования число клеток с гипертрофированными ядрами, которые расположены на протяжении всей дольки, но преобладают в периферических отделах. В портальных трактах небольшие лимфоидные инфильтраты.
Контрольная группа
21 день. Во всех наблюдениях на небольшом протяжении очаговая гидропическая дистрофия гепатоцитов. В большинстве участков сохранено радиальное расположение балок, лишь местами их дискомплексация. В периферических отделах долек значительное число гепатоцитов с гипертрофированными ядрами, встречаются группы двуядерных клеток. Портальные тракты несколько утолщены, подчеркивают границы долек, в них слабо выраженная лимфоидная инфильтрация.
Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4
21 день. Очаговая гидропическая и зернистая дистрофия, преимущественно в центральных отделах долек, там же слабо выраженные проявления дискомплексации гепатоцитов. По периферии долек большинство клеток с выраженной гипертрофией и гиперхромностью ядер, встречается значительное число двуядерных клеток. Портальные тракты со слабо выраженным склерозом, слабо выраженной лимфоидной инфильтрацией.
Контрольная группа
28 день. Преобладают дольки с радиальным расположением балок, в которых имеется слабо и умеренно выраженная зернистая дистрофия. В отдельных дольках - очаговая гидропическая дистрофия гепатоцитов. В периферических отделах долек - значительное число гепатоцитов с гипертрофией ядер, встречаются группы двуядерных клеток. Портальные тракты несколько утолщены, подчеркивают границы долек со слабо выраженной лимфоидной инфильтрацией. Признаки нарушения дольковой архитектоники и внутридолького склероза отсутствуют.
Подопытная группа - лечебное введение соединений 1-4
28 день. Явления дистрофии, в основном гидропической и зернистой, нерегулярны, слабо выражены. Еще более возрастает полиморфизм ядер периферических отделов долек за счет гипертрофии и гиперхроматоза ядер большинства гепатоцитов. Портальные тракты подчеркивают границы долек, благодаря тенденции к склерозу и лимфоидной инфильтрации.
Таким образом, при сравнительном изучении ткани печени животных контрольных и опытных групп в указанные сроки после введения четыреххлористого углерода и лечения соединениями 1-4 выяснились следующие особенности характера и течения патологических процессов:
- четыреххлористый углерод в использованной дозировке и сроках воздействия вызывал в паренхиме печени повреждения, которые проявлялись в виде дистрофических, некробиотических и в меньшей степени некротических изменений. Преобладающим и интенсивно выраженным видом дистрофии в контрольной группе была жировая дистрофия с поражением центральных отделов долек. При лечебном введении соединений 1-4 и, особенно при введении этого вещества с профилактической и лечебной целью, преобладающим типом дистрофии были зернистая и гидропическая;
- наиболее интенсивными дистрофические изменения были на 7-й день исследования; на 15-й день их выраженность была значительно снижена, даже в контрольной группе;
- наименее выраженными дистрофические изменения были в группе животных с профилактическим и лечебным применением соединений 1-4, к 15 дню они были уже слабо выраженными и непостоянными;
- в сроки 21, 28 дней во всех группах опыта и в контроле проявления повреждения практически отсутствовали или имели мелкоочаговый характер;
- параллельно с процессами повреждения в ткани печени развивались компенсаторно-приспособительные процессы. Однако в контрольной группе они возникали только на 15 день, а в опытных - уже на 7 сутки. В опытных группах, особенно при введении соединений 1-4 с профилактической и лечебной целью, интенсивность их значительно нарастала и ядерные изменения в виде гипертрофии, гиперхроматиз ма, двуядерности имели распространенный характер;
- стромальные и клеточные реакции были выражены незначительно как в контроле, так и в опытных группах. В контрольной группе, в отличие от опытных, на 15 сутки возникала активность ретикулоэндотелия, и был выражен склероз портальных трактов с их лимфоидной инфильтрацией.
4
Таким образом, степень повреждения и динамика течения патологических процессов в сравниваемых группах свидетельствовали о более интенсивных и тяжелых формах повреждения ткани печени CCl в контрольной группе, более поздних сроках обратного их развития, менее выраженных ядерных изменениях гепатоцитов, характерных для компенсаторно-приспособительных реакций в ответ на повреждение. При сравнении опытных групп характерным являются менее тяжелые, обратимые формы повреждения гепатоцитов, меньшая степень их распространения, отсутствие некроза, более ранние сроки обратного развития процессов повреждения и постоянное сочетание повреждения с ядерными изменениями, отражающими интенсивность процессов компенсации. Наиболее отчетливо эти явления наблюдались в серии опытов с введением соединений 1-4 в качестве профилактического и лечебного средства.
Вариабельность количественных и качественных характеристик описанных процессов позволяет говорить об определенных тенденциях и существенных различиях их течения в контрольных и опытных группах.
Из приведенных примеров видно, что алифатические производные проявляют незначительное миорелаксирующее действие и значительно отличаются от наиболее активного транквилизатора диазепама, что свидетельствует об их пониженном побочном эффекте.
Таким образом, алифатические хлорпропоксипроизводные 5,6-бензо-α-пирона оказывают выраженное транквилизирующее действие и по анксиолитической активности превосходят таковую у диазепама. Кроме того, они проявляют гепатопротекторное действие без побочных эффектов (таблицы 8, 9, 10).
Таблица 1
Токсичность новых соединений
Соединение №
Химическое название
ЛД<sub>90</sub>, мг/кг, Р=0,05
Внутрибрюшинно
Перорально
1
7-(3'-хлорпропокси)-4-метил-5,6-бензо-α-пирон
185,0
522,0
2
7-(3'-хлорпропокси)-3,4-триметилен-5,6-бензо-α-пирон
220,0
610,0
3
7-(3'-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон
250,0
690,0
4
7-(2'-метил-3-хлорпропокси)-5,6-бензо-α-пирон
100,0
302,0
Таблица 2
Потенцирование действия гексенала (15 мг/кг) соединениями 1-4
Доза соединения 1, мг/кг (соединение 1)
0, шт. (контроль)
10
20
30
40
50
Заснуло мышей
0, шт.
0
0
2
6
8
0, %
0
0
17,0
50,0
67,8
Доза соединения 1, мг/кг (соединение 2)
0, шт. (контроль)
0,025
0,05
0,1
0,25
2,0
Заснуло мышей
0, шт.
0
5
6
8
12
0, %
0
42,0
50,0
67,0
100,0
Доза соединения 1, мг/кг
0, шт. (контроль)
0,1
0,25
0,5
1,0
2,0
(соединение 3)
Заснуло мышей
0, шт.
1
3
5
10
12
0, %
8,0
25,0
41,0
83,0
100,0
Доза соединения 1, мг/кг (соединение 4)
0, шт. (контроль)
0,025
0,75
1,0
1,5
2,0
Заснуло мышей
0, шт.
0
10
11
12
12
0, %
0
83,3
92,0
100,0
100,0
Таблица 3
Результаты сравнительных испытаний транквилизирующего действия
Вещество
К контролю, %
побежки
вставания
дефекации
грумминг
Физиологический раствор
28,2±4,4
6,1+1,1
280,2+12,3
2,2+0,4
Диазепам
71,6±9,2
82,4±9,7
46,5±6,9
105,7±11,5
Соединение 1
90,3±9,6
102,4±6,9
82,1±5,4
126,4±2,6
Соединение 2
95,5±8,9
108,5±8,2
50,2±5,1
117,1±12,8
Соединение 3
100,1±0,7
100,2±1,0
46,5±7,2
104,6±10,9
Соединение 4
119,3±0,1
106,8±9,7
40,4±6,7
100±9,2
Таблица 5
Сравнительные испытания анксиолитической активности соединений (I) и диазепама (прототипа)
Испытуемое соединение
Доза, мг/кг
Количество
Подход
Наказуемое взятие воды
Контроль
-
16
4
Соединение 1
1,0
19
15
5,0
29
16
10,0
36
20
Соединение 2
0,5
16
14
1,0
32
17
Соединение 3
0,5
24
10
1,0
30
18
Соединение 4
0,5
36
12
1,0
28
15
Диазепам
1,0
32
18
Таблица 6
Испытания стимулирующих центральную нервную систему (антидепресивных) свойств соединений 1-3 и соединения-аналога
Вещество
Доза, мг/кг
Общее время иммобилизации, М+м
Т, Р=0,05
Бидистиллированная вода (контроль)
350,0±19,9
Соединение 1
0,5
302,6±20,2
1,4
1,0
252,0±15,6
3,9
Соединение 2
0,5
324,6±16,8
0,1
1,0
250,2±12,4
4,2
Соединение 3
0,5
312,4±13,0
1,6
1,0
201,0±12,6
6,2
Соединение-аналог
0,5
344,6±11,4
0,2
1,0
286,0±18,2
2,0
Таблица 7
Миорелаксирующее действие соединений I, II, III и аналога
Вещество
Количество мышей, удержавшихся на стержне, при введении соединений в дозе, мг/кг
1
5
10
100
125
150
Соединение 1
12
11
8
6
6
2
Соединение 2
12
8
6
2
0
0
Соединение 3
12
8
7
1
0
0
Соединение 4
12
7
5
1
0
0
Диазепам
6
1
0
0
0
0
Таблица 8
Выживаемость крыс с подострым токсическим поражением печени, леченных соединениями 1-4 и Розанолом
Серия опытов и дозы
Число крыс в серии, принятое за 100%
Из них выжило
Число, абс.
В процентах
Интактные
20
20
100
CCl<sub>4</sub>, 2 мл/кг через день в течение месяца
20
11
55
CCl<sub>4</sub>, 2 мл/кг, по схеме + соединения 1-4 20 мг/кг ежедневно в течение месяца
20
15
75
CCl<sub>4</sub> 2 мл/кг по схеме + соединения 1-4 50 мг/кг ежедневно в течение месяца
20
18
90
CCl<sub>4</sub> 2 мл/кг по схеме Розанол 30 мг/кг ежедневно в течение месяца
20
15
75
Таблица 9
Влияние соединений 1-4 и Розанола на активность ферментов сыворотки крови у крыс с подострым токсическим поражением печени (среднее из 15 в каждой серии)
Серия опытов и дозы
АсАТ, мкмоль/л
АлАТ, мкмоль/л
ЩФ, нмоль/с.л
ГГТ, нмоль/с.л
Интактные
0,42±0,06
0,36±0,02
581,48±0,2
548,2±0,1
CCl<sub>4</sub>, 2 мл/кг через день в течение месяца
2,33±0,03*
2,16±0,01*
1695,48±0,2*
1839,12±0,8*
CCl<sub>4</sub>, 2 мл/кг по схеме +
1,48±0,05*<sup>аб</sup>
1,88±0,02*<sup>аб</sup>
1048,31±0,3*<sup>аб</sup>
826,12±0,5*<sup>аб</sup>
соединения 1-4, 10 мг/кг ежедневно в течение месяца
CCl<sub>4</sub>, 2 мл/кг по схеме + соединения 1-4 50 мг/кг ежедневно в течение месяца
1,18±0,02*<sup>аб</sup>
0,98±0,02*<sup>аб</sup>
933,15±0,6*<sup>аб</sup>
483,41±0,2аб
CCl<sub>4</sub> 2 мл/кг по схеме Розанол 30 мг/кг ежедневно в течение месяца
1,33±0,02*<sup>a</sup>
1,13±0,01*<sup>a</sup>
1008,10±0,3*<sup>а</sup>
516,16±0,4<sup>a</sup>
Примечание: * - р≤0,05 по отношению к интактным животным;
<sup>а</sup> - р≤0,05 по отношению к контрольной группе животных;
<sup>б</sup> - р≤0,05 по отношению к группе животных, получавшим Розанол.