Оценка экспрессии CD34 в печени больных алкогольным циррозом печени до и после аутотрансплантации стволовых клеток

20

Материалы III Международного Симпозиума «Актуальные вопросы клеточных технологий»

нейральных стволовых клеток человека биофизическим и биохимическим путем. При биофизическом способе получения иМСК клеточные культуры обрабатывали электромагнитным полем КВЧ-диапазона (Гапеев А.Б. с соавт., 2008). Для получения иМСК биохимическим путем использована предобработка МСК индукторами апоптоза (ИА): белками рицином и вискумином. Для экспериментов in vitro и in vivo использована перевиваемая культура глиомы С6 крысы. Лечение in vivo проведено на 20 взрослых крысах-самцах линии Вис-тар с экспериментальной глиомой С6 полушария головного мозга (опытная группа). 1 -я контрольная группа (А-группа) — 7 животных с глиомой С6 без лечения и 2-я контрольная группа ( Б-группа) — 7 крыс с глиомой С6 с трансплантированными в опухоль нативными ГСК и ИСК. 3-я контрольная группа — интрацеребральное введение в опухоль рицина (С-группа). ЦРТ проводилась через 7 сут. после стереотаксической имплантации глиомы Сб.

Результаты. На модели терапии глиобластомы in vitro (совместное культивирование клеток глиомы и культуры иГСК в течении 7 сут.) доказана возможность развития инструктивного апоптоза в клетках опухоли мозга и показана высокая терапевтическая эффективность предложенного клеточного препарата с заданными свойствами: количество клеток глиомы С6 уменьшилось на 52%. Продемонстрирована регуляция и управление ростом клеток глиомы С6 крыс in vitro. In vivo получились крайне противоречивые результаты: в опытной группе клеточные системы иГСК увеличили рост глиомы С6 почти в 2 раза по сравнению с А-груп-пой, а в Б-группе объем опухоли был меньше на 1/3 по сравнению с группой А, но в С-группе выявлен тотальный некроз мозгового вещества в зоне имплантации рицина и в корковых областях. Представлены иммуно-химические и гистологические признаки развития инструктивного апоптоза в клетках опухоли in vitro и in vivo вызванного иГСК и иНСК. Парадоксальный феномен увеличения опухоли мозга после действия иГСК и ИСК in vivo ( феномен «отдачи») объясняется их ранним апоптозом и тем, что клетки не успевают равномерно распределиться по опухоли. Мы не получили достоверных эффектов терапии глиомы С6 от применения иГСК, полученных при использовании электромагнитных полей КВЧ диапазона.

Заключение. ЦРТ в эксперименте показывает возможность терапии ГОГМ. иГСК и иНСК in vitro позволяют осуществлять внутриклеточное биоуправление и внутритканевую регуляцию опухолевого роста ГОГМ и уменьшить рост глиомы С6 более чем на 50% по сравнению с контролем. In vivo требуется изменить режимы ЦРТ и использовать иГСК и иНСК с имплантируемыми нанокапсулами (со сроками биодеградации не менее 10 сут.). Технология ЦРТ может быть эффективной при целом ряде неврологических заболеваний.

Г.Р. Бурганова, С.Р. Абдулхаков, А.А. Гумерова,

И.М. Газизов, Т.С. Йылмаз, М.А. Титова,

А.Х. Одинцова, А.П. Киясов Оценка экспрессии CD34 в печени больных алкогольным циррозом печени до и после аутотрансплантации стволовых клеток

ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет», Казань, Россия guzel.burganova@gmail.com

G.R. Burganova, S.R. Abdulkhakov, А.А. Gumerova,

I.М. Gazizov, T.S. Yilmaz, M.A. Titova, A.Kh. Odintcova,

A.P. Kiassov

Evaluation of CD34 expression in liver

in alcoholic liver cirrhosis after autologous stem cell

transplantation

Одним из важнейших механизмов формирования фиброза печени является капилляризация синусоидов, которая отражает прогрессирование фиброза и возможности его обратного развития. CD34 — маркер эндотелиальных и гемопоэтических стволовых клеток — отсутствует в эндотелии синусоидов в нормальной печени и появляется в этих клетках только при капилля-ризации синусоидов. Одним из новых и перспективных подходов к лечению заболеваний печени является клеточная терапия с использованием аутогенных стволовых клеток (СК).

Целью исследования было оценить экспрессию CD34 в печени больных алкогольным циррозом печени до и через 3 и 12 мес. после аутотрансплантации стволовых клеток.

Материал и методы. Исследования проведены в рамках программы «Развитие клеточной медицины в Республике Татарстан». Биоптаты печени 10 больных циррозом печени (класс А по Чайлд-Пью), полученные до введения в чревный ствол аутогенных СК и через 3 и 12 мес. после процедуры, окрашивали иммуногистохимически с антителами к CD34.

Результаты. До трансплантации СК мы наблюдали выраженную экспрессию CD34 в ткани печени, преимущественно в области портальных трактов и пери-портальных инфильтратов. Кроме этого, окрашивались клетки в области порто-портальных и порто-централь-ных септ, а также единичные клетки в паренхиме печени.

Через 3 мес. после трансплантации число CD34-позитивных клеток резко уменьшилось, но они также в основном локализовались вокруг портальных трактов.

Через 12 мес. мы вновь наблюдали увеличение числа С034-позитивных клеток, однако, их количество не достигало начального уровня. Количество CD34-позитивных клеток коррелировало с выраженностью воспалительной инфильтрации.

Выводы: полученные нами данные свидетельствуют о том, что трансплантация аутогенных гемопоэтических СК в чревный ствол пациентам с алкогольным циррозом печени является эффективной процедурой: трансплантированные СК способны восстанавливать структуру эндотелия синусоидов, уменьшая выраженность их капилляризации. Однако эта процедура должна быть проведена повторно в течение одного года.

Клеточная трансплантология и тканевая инженерия Том V, № 3, 2010