ШТАММ STREPTOMYCES CARPATICUS ДЛЯ ЗАЩИТЫ ОТ НАСЕКОМЫХ-ВРЕДИТЕЛЕЙ, ГРИБНЫХ, ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ И СТИМУЛЯЦИИ РОСТА ТОМАТОВ
STRAIN OF STREPTOMYCES CARPATICUS FOR PROTECTION AGAINST INSECT PESTS, FUNGAL, VIRAL DISEASES AND STIMULATION OF TOMATO GROWTH

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и биотехнологии и может быть использовано для получения биопрепаратов. Штамм Streptomyces carpaticus К-11 депонирован в Ведомственной коллекции сельскохозяйственного назначения ФГБНУ ВНИИСХМ под регистрационным номером RCAM 04697 и обладает выраженными инсектоакарицидными, фунгицидными, противовирусными и фитостимулирующими свойствами. Изобретение позволяет повысить рост и урожайность растений.
Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии, в частности к штамму Streptomyces carpaticus К-11 (депонирован в Ведомственной коллекции сельскохозяйственного назначения ФГБНУ ВНИИСХМ, коллекционный номер RCAM 04697) для защиты растений от возбудителей вирусной инфекции - вируса огуречной мозаики (ВОМ) Cucumber mosaic virus (CMV), вируса мозаики томата (ВМТо) Tomato mosaic virus (TMV); насекомых-вредителей - бахчевой тли Aphis gossypii Glover., бобовой (свекловичной) тли Aphis ƒabae Black., люцерновой тли Aphis crassivora Koch., табачного трипса Thrips tabaci Lind., черноусого трипса Thrips nigropilosus Uz., хлопковой совки Heliothis armigera Hbn., паутинного клеща Tetranychus urticae Koch; микромицетов-фитопатогенов родов Fusarium, Alternaria, Pythium; стимуляции роста и повышения урожайности растений томата.
Штамм может быть использован для получения биопрепарата для защиты от насекомых-вредителей, вирусных и грибных болезней, а также в растениеводстве как стимулятор роста и развития растений томата.
Известен штамм Streptomyces hygroscopicus subsp. ЦКМ В-4561 (см. патент РФ №2243259, 2004 г.), обладающий спектром действия на фитопатогенные микроорганизмы и проявляющий инсектицидные свойства, вызывая гибель личинок 1 возраста колорадского жука Leptinotarsa decemlineata и гусениц Galleria mellonella.
Недостатками данного штамма является отсутствие ростстимулирующих и противовирусных свойств, а также ограниченный спектр действия в отношении насекомых-вредителей растений.
Известен штамм микроорганизмов Streptomyces chrysomallus ВИЗР Р-21 (см. патент РФ №2226214, 2004 г.), проявляющий активность против грибных и вирусных болезней растений с фитостимулирующим действием.
Недостатками использования данного штамма являются отсутствие инсектоакарицидной активности и значительно узкий спектр действия на возбудителей вирусной инфекции, представленный вирусом мозаики костра на ячмене в условиях вегетационного опыта.
Наиболее близким к предлагаемому штамму (прототипом) является штамм Streptomyces globisporus К-35/15 (см. патент РФ №2630661, 2017 г.), используемый для защиты растений от вредных насекомых-фитофагов, в том числе колорадского жука, паутинных клещей, тлей. Существенным недостатком данного штамма является отсутствие активности на возбудителей вирусных болезней растений.
Технической задачей изобретения является выделение штамма, обладающего выраженными инсектоакарицидными, противовирусными, фунгицидными и фитостимулирующими свойствами и способствующего повышению урожайности растений томата.
Техническим результатом от использования изобретения является защита от насекомых-вредителей, вирусных и грибных фитопатогенов, стимуляция роста растений томата с помощью предлагаемого штамма. Он достигается тем, что в качестве средства для защиты и стимуляции роста растений томата предлагается штамм Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697. Штамм был выделен из бурых полупустынных солончаковых почв Наримановского района Астраханской области, при высеве на питательные среды (крахмально-казеиновая среда, сусло-агар, картофельный агар) и в последующем в чистую культуру методом последовательных пересевов по общепринятой методике [Нетрусов, А.И. Практикум по микробиологии: учеб. пособие для высших учеб. заведений / А.И. Нетрусов, М.А. Егорова, Л.М. Захарчук [и др.]; под ред. А.И. Нетрусова. - М.: Академия, 2005. - 352 с].
Филогенетическое положение штамма проведено на основании секвенирования гена 16S рРНК в ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии» (ВНИИСХМ).
Штамм Streptomyces carpaticus К-11 депонирован в Ведомственной коллекции сельскохозяйственного назначения 16.11.2017 г., коллекционный номер RCAM 04697. Справка о депонировании штамма прилагается.
Штамм Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками.
1. Культурально-морфологические признаки
Спороносцы прямые или извилистые, короткие. Споры овальные и шаровидные с гладкой оболочкой, размером 0,7-1,0×1,0-1,1 мкм. На крахмально-казеиновой среде колонии округлые, уплощенные, слабоскладчатые, с мучнистой поверхностью (d=4 мм). Воздушный мицелий темно-коричневый. Субстратный мицелий вишнево-красный. Пигмент на среду не влияет. На сусло-агаре колонии мелкие (d=1,5 мм), округлые. Воздушный мицелий светло-коричневый, субстратный мицелий желто-бурый. Среда не окрашена. На картофельном агаре колонии округлые, уплощенные (d=5 мм). Воздушный мицелий светло-серый, субстратный мицелий темно-коричневый. Меланоидные растворимые пигменты отсутствуют. Оптимальная температура роста 28°С. Оптимальное значение рН 7,0-7,1.
2. Физиолого-биохимические признаки
Штамм не выделяет сероводород. Хорошо усваивает органический азот (дрожжи, пептон). Восстанавливает нитраты в нитриты, пептонизирует молоко. Растет на среде с глюкозой, мальтозой, фруктозой, сахарозой, лактозой, маннитом. Нет роста на среде с ксилозой, арабинозой, раффинозой, ионозитом.
Генетические особенности штамма: штамм не нуждается в факторах роста, стабилен и не является генетически модифицированным.
3. Условия культивирования
Для наращивания биомассы штамм культивируют при температуре 28°С на картофельном отваре в течение 3х суток.
4. Хранение штамма
Для хранения штамма используют метод периодических пересевов (4-6 раз в год) на сусло-агаре. Культивирование после пересева ведут при температуре 28°С в течение 7-14 дней. Затем культуру хранят в холодильнике при температуре +4°С. Штамм хранится в коллекции кафедры Биотехнологии, зоологии и аквакультуры ФГБОУ ВО «Астраханский государственный университет», в испытательной лаборатории филиала ФГБУ «Россельхозцентр» по Астраханской области, а также в Ведомственной коллекции сельскохозяйственного назначения ФГБНУ ВНИИСХМ.
Применение штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 Пример 1. Исследование фитотоксичности и фитостимуляции суспензии штамма Streptomyces carpaticus K-l 1 RCAM 04697 в лабораторных условиях.
9
Для исследования фитотоксичности и фитостимуляции использовали суспензию штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 с титром клеток 10 КОЕ/мл. Штамм культивировали на картофельном отваре при температуре t=28°С на перемешивающем устройстве (120 об/мин) в течение 3-х суток.
Фитотоксичность и фитостимуляцию [ГОСТ 33777-2016. Вещества поверхностно-активные. Метод определения фитотоксичности на семенах высших растений] штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 проверяли в лабораторных опытах на семенах томата сорта Новичок розовый (ГОСТ Р 52171 - 2003. Партия №243 ВСХОЗ). Семена помещали в чашки Петри с фильтровальной бумагой и ватой (влажные камеры). Предварительно проводили стерилизацию семян, обработав 70% этанолом в течение 3-5 мин, после чего отмывали 3 раза стерильной дистиллированной водой. В каждую камеру помещали 30 семян, которые увлажняли суспензией штамма. Всего в опыте было испытано 360 семян. Контрольные семена замачивали в водопроводной воде. Культивирование проводили в люминостате при температуре 25°С. Учет всхожести проводили на 7-е и 14-е сутки. Биометрические показатели растений томата определяли на 21-е сутки. В ходе опыта измеряли длину корешка и стебля, а также биомассу каждого растения вместе с семенными оболочками. Результаты представлены в таблице 1.
Анализ полученных данных показал, что штамм Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 не токсичен для томатов. Всхожесть обработанных семян через 7 суток экспозиции была на 26,1% больше, чем в контроле, через 14 суток - на 22,2% (табл. 1). Биомасса растений при обработке суспензией штамма превышает контроль в среднем на 5,8 мг. Длина корня и стебля при бактеризации штаммом выше на 2,4 см и 1,5 см, чем в контроле, соответственно.
Пример 2. Исследование инсектоакарицидной активности суспензии штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 в лабораторных условиях.
9
Инсектицидную активность в лабораторных условиях определяли по методике, разработанной Л.П. Ворониной (1988) в лаборатории микробиологической защиты растений Всероссийского института защиты растений (ГНУ ВИЗР), которая основана на контактном взаимодействии препарата и тест-объекта. На фильтровальную бумагу, помещенную в чашку Петри диаметром 90 мм, наносили 1,5 мл исследуемого вещества (суспензии штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 с титром клеток 10КОЕ/мл на картофельном отваре, подсаживали 30 особей тест-объектов: бахчевой тли (A. gossypii), бобовой тли (A. ƒabae), люцерновой тли (А. crassivora), табачного трипса (Т. tabaci), черноусого трипса (Т. nigropilosus), хлопковой совки (Н. armigera). Опыт проводили в четырехкратной повторности.
9
Лабораторные опыты по определению акарицидной активности суспензии штамма проводили на подвижных стадиях клеща. Паутинного клеща Т. urticae, используемого в качестве тест-объекта, разводили в лаборатории на фасоли кустовых сортов при 25-27°С, относительной влажности 70-90% и 18-часовом световом дне. Для питания клеща и постановки опыта получали зеленую массу фасоли. Семена проращивали при температуре 25±2°С и естественном освещении в течение 3-4 дней в кюветах на марле, смоченной водой и закрытые сверху бумагой с 5-ю отверстиями для проростков фасоли. Когда растения достигали 12-18 см в высоту, их использовали для питания клещей и постановки опытов. Листья, заселенные клещами, погружали пинцетом на 2 секунды в суспензию штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 с титром клеток 10 на картофельном отваре в количестве 1 мл (расход 0,5 мл на каждую сторону листа). Контролем служили растения с клещами, обработанные водой. Учет погибших насекомых проводили через 2, 4 и 24 часа.
Тест-объекты выращивали в лаборатории вирусных, бактериальных и грибных болезней сельскохозяйственных культур филиала ФГБУ «Россельхозцентр» по Астраханской области. Наличие данных насекомых на территории Астраханской области подтверждают обзоры «Обзор фитосанитарного состояния посевов сельскохозяйственных культур в 2017 году и прогноз на 2018 год. - г. Астрахань. - 2017 г. - 52 с.», «Обзор фитосанитарного состояния посевов сельскохозяйственных культур в 2016 году и прогноз на 2017 год. - г. Астрахань. - 2016 г. - 50 с.».
Инсектоакарицидную активность выражали в процентах, с учетом гибели тест-объектов в контроле. В качестве контроля использовали водопроводную воду. Опыты проводились в четырехкратной повторности.
Расчет инсектоакарицидной активности осуществляли по формуле Аббота, % (при сопоставлении с контролем): С=100 (Ва-Ab) / Аа, где С - процент смертности вредителей с поправкой на контроль, %;
А и а - общее число особей в опытном варианте и контроле соответственно, штук; В и b - количество погибших особей в опытном варианте и контроле соответственно, штук. Результаты представлены в таблице 2.
В результате проведенного анализа установлено, что суспензия исследуемого штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 обладает высокой инсектоакарицидной активностью (табл. 2).
Пример 3. Исследование противовирусной активности суспензии штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 в лабораторных условиях.
Противовирусную активность суспензии штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 исследовали на рассаде томата сорта «Новичок» розовый в индикаторной лаборатории при светоустановках филиала ФГБУ «Россельхозцентр» по Астраханской области.
Рассаду выращивали в пластмассовых горшочках объемом - 0,3 л, на дне которых делали отверстия для улучшения водновоздушного режима в корнеобитаемом слое. Полив рассады проводился вручную.
Рассада томата была искусственно заражена на стадии 3-4 настоящих листьев вирусами огуречной мозаики (ВОМ) и мозаики томата (ВМТо) путем нанесения на листовые пластинки инокулюмов, полученных путем растирания пестиком инфицированных фитовирусами растений.
Обработку рассады суспензией штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 проводили двукратно методом опрыскивания через 7 дней после контаминации возбудителями вирусной инфекции. Интервал времени между обработками составил 5 дней. Контрольные растения опрыскивали водопроводной водой, а опытные - суспензией штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697. Повторность опыта четырехкратная (по 20 растений в каждом варианте).
Выявление пораженности вирусной инфекцией на томате и идентификация фитовирусов проводилась визуальным, индикаторным и серологическим методами через 3 суток после второй обработки.
Для идентификации вирусной инфекции использовали тестирующий набор растений-индикаторов, приобретенных в Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт табака, махорки и табачных изделий Российской академии сельскохозяйственных наук», включающий виды: Nicotiana glutinosa L., Nicotiana sylvestris Speg. Et Comes., Nicotiana rustica L., Nicotiana tabacum L.v. Samsun 959, Nicotiana debney Domin., Datura stramonium L., Gomphrena globosa L., а также томаты (Lycopersicon esculentum Mill. L.) сорта Новичок. Искусственное заражение листьев растений-индикаторов вирусной инфекцией осуществляли на стадии 3-4 настоящих листьев аналогично методу заражения рассады растений. В дальнейшем растения содержались при светоустановке. Наблюдения за индикаторами начинали через 1-2 дня после заражения и проводили регулярно в течение четырех недель, исследуя, как зараженные листья, так и молодые, отрастающие вновь. Признаки местной реакции появлялись через 3-12 дней после контаминации, системной реакции - через 7-30 дней.
Для подтверждения зараженности фитовирусами проводили серологический (иммунохроматографический) анализ с использованием иммунострипов фирмы Flashkits (США) [ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний]. Для этого часть листа (0,15 г) исследуемого растения помещали в пакет с буфером и разминали его. Иммунострип помещали в пакет, погружая только 0,5 см в буферный раствор с инокулюмом до метки «sample» и оставляли на 3-5 минут до появления результата.
Идентификацию отобранных образцов томата сорта «Новичок розовый» на предмет вирусоносительства проводили в лаборатории вирусных, бактериальных и грибных болезней сельскохозяйственных культур филиала ФГБУ «Россельхозцентр» по Астраханской области. Результаты представлены в таблице 3.
Из таблицы 3 следует, что суспензия исследуемого штамма оказывает высокую активность на ВОМ (40,0%) и на ВМТо (32,5%).
Пример 4. Исследование фунгицидных свойств суспензии штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697.
9
Фунгицидные свойства суспензии штамма исследовали с помощью метода лунок на фитопатогенных грибах Fusarium graminearum, Fusarium sporotrichioides, Fusarium culmorum, Fusarium poae, Alternaria tenuissima, Pythium ultimum, предоставленных ФГБНУ ВНИИСХМ. В лунки помещали суспензию штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 в концентрации 10 КОЕ/мл, в качестве контроля вносили дистиллированную воду. Опыт проводили в 4-х повторностях. В таблице 4 показан диаметр зоны задержки роста грибов суспензией исследуемого штамма.
Анализ полученных данных показал высокую фунгицидную активность штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697. Спектр зон подавления роста фитопатогенных грибов колеблется в пределах от 17,1 до 32,6 мм. Наибольший диаметр зоны задержки роста гриба отмечен при использовании суспензии штамма по отношению к Alternaria tenuissima - 32,6 мм и Fusarium sporotrichioides - 31,4 мм (при микроскопировании отмечен лизис мицелия и усиленное спороношение).
Пример 5. Исследование применения суспензии штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 для защиты от насекомых - вредителей, грибных и вирусных болезней, а также стимуляции роста и повышения урожайности в открытом грунте на растениях томата.
Испытания проведены в открытом грунте на территории филиала ФГБУ «Россельхозцентр» по Астраханской области на томате Ажур F1 (Агрофирма «СеДеК»; Партия №95784; Дата фасовки: 02.2016 г.; Срок реализации: до 12.2018 г.), который является раннеспелым гибридом (100-110 дней) и предназначен для открытого грунта. Образцы растений размещали на 1-рядковых делянках, с междурядьями - 70 см и расстоянием между растениями в ряду - 30 см. Повторность опыта - четырехкратная, каждый вариант включал 50 растений, всего было высажено 400 растений. Продолжительность эксперимента составила 6 месяцев.
Предпосевная обработка почвы включала перекопку на глубину 23-25 см. Закладку опыта осуществили методом организованных повторений с разбросным способом их размещения [Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований) / А.Б. Доспехов // 5-е изд., доп. и перераб. - М.: АГРОПромиздат, 1985 - 351 с].
Опыт состоял из следующих вариантов:
Контроль:
- Замачивание семян в водопроводной воде на 1 час перед посевом однократно. После обработки семена просушивали на марлевой ткани в течение 2 часов.
- Опрыскивание растений водопроводной водой трехкратно (вторая, третья и четвертая обработки) на стадиях бутонизации, начала плодоношения и активного плодоношения.
Обработка суспензией штамма:
9
- Замачивание семян в суспензии штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 с титром клеток каждого штамма - 10 КОЕ/мл на картофельном отваре на 1 час. После обработки семена были просушены на марлевой ткани в течение 2 часов, не промывая.
- Опрыскивание растений трехкратно (вторая, третья и четвертая обработки) суспензией штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 на стадиях бутонизации, начала плодоношения и активного плодоношения.
После первой обработки (замачивание семян) растения, обработанные суспензией штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 взошли на 5-7 день, контрольные растения - на 8-10 день.
Фенологические показатели фитостимулирующей активности исследовались в период уборки (конец плодоношения). Результаты представлены в таблице 5.
Результаты, указанные в таблице 4, свидетельствуют о том, что всхожесть обработанных семян через 7 суток экспозиции на 36,6%, через 14 суток - на 34,4% больше, чем в контроле. Биомасса растений при обработке суспензией штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 превышает контроль в среднем на 1,3 кг. Длина корня при бактеризации штаммом выше на 16,1 см, чем в контроле. Длина стебля в опытном варианте превышает контроль в среднем на 20,2 см. Рассаду высаживали в открытый грунт на стадии 3-4 настоящих листьев.
9
Следовательно, суспензия штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 в концентрации 10 КОЕ/мл оказывает фитостимулирующее воздействие на томаты.
В результате фитосанитарного мониторинга за насекомыми-вредителями в течение всего вегетационного опыта на испытательном участке выявлено, что основные виды фитофагов принадлежат к отрядам Homoptera, Thysanoptera и Lepidoptera [Пикушова, Э.А. Определитель вредителей сельскохозяйственных культур по повреждениям растений для юга России: учеб. пособие / Э.А. Пикушова, Т.Е. Анцупова, A.M. Девяткин // Краснодар. - 2012. - 130 с]. Все идентифицированые виды, обнаруженные на опытном участке - полифаги, повреждающие широкий спектр культурных и сорных растений, которые являются переносчиками болезней растений, в частности, вирусной природы. Сопутствующий состав насекомых был представлен паутинным клещом Т. urticae и трипсом Т. tabaci.
В вариантах с обработкой суспензией штамма Streptomyces carpaticus K-11 RCAM 04697 наблюдалась значительная гибель насекомых (табл. 6).
В связи с тем, что тли - являются основными переносчиками вирусной инфекции на посадках томата, был проведен более детальный учет численности имаго тлей на опытном участке после трех инсектицидных обработок суспензией штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697. Инсектоакарицидную активность выражали в процентах с учетом гибели насекомых - вредителей в контроле.
Учет численности имаго тлей на кустах томата проводился через 24 часа после обработки. Анализ полученных данных показал, что наибольшая концентрация тлей до обработок была отмечена в среднем ярусе. Результаты представлены в таблице 6.
По данным таблицы 6 установлено, что максимальная инсектоакарицидная активность исследуемого штамма после трехкратной обработки томата наблюдалась на A. gossypii (98,2%) и Т. urticae (97,5%). Наименьшая смертность наблюдалась на Т. tabaci (87,3%). Инсектоакарицидная активность остальных насекомых-вредителей не превышала 94,8%.
Выявление пораженности вирусной инфекцией на томате и идентификация фитовирусов на испытательном участке проводилась визуальным, индикаторным и серологическим методами.
В ходе полевых испытаний были использованы тест-полоски (иммунострипы) для идентификации важнейших вирусных болезней томата, распространенных на территории Астраханской области - вируса огуречной мозаики и вируса мозаики томата. Тестирование одного образца составило 10-15 минут.
По результатам обследований основные очаги вирусной инфекции томата фиксировались в контрольном варианте. Единичные случаи проявления вирусных болезней встречались на томатах обработанных суспензией штамма.
Для уточнения видового состава вирусной инфекции, возможных переносчиков и резерваторов, проводился отбор образцов с симптомами вирусоносительства.
Инфекционность болезни была доказана путем заражения растения-хозяина - томата сорта «Новичок» L. esculentum инокулюмом растения-индикатора - N. debney, на котором наблюдалась системная мозаика разной суровости и деформация листьев. Инокулюм, полученный путем растирания пестиком инфицированных фитовирусами листьев N.debney, наносили на молодые листовые пластинки томата.
Для определения видового состава вирусной инфекции был заражен набор индикаторов: N. glutinosa, N. sylvestris, N. tabacum V. samsun 959, N. debney, D. stramonium, L. esculentum, C. Sativus, C. digitata.
1
В результате проведенной идентификации отобранных образцов с опытного участка на томате Ажур F были обнаружены два возбудителя вирусной инфекции - ВОМ и ВМТо. Интенсивность проявления данных вирусов в контрольных вариантах, носила эпифитотийный характер. Однако в вариантах с обработкой суспензией штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 также встречались очаги вирусной инфекции (табл. 7).
В ходе проведения фитосанитарного мониторинга через 5 суток после четвертой обработки методом опрыскивания был использован экспресс-метод диагностики болезней томата иммунохроматографическим методом на иммунострипах для выявления и подтверждения визуальной идентификации вирусных фитопатогенов (табл. 7).
Результаты иммунохроматографического анализа на иммунострипах, приведенные в таблице 6, свидетельствуют о проявлении противовирусной активности суспензии штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697. Таким образом, зафиксировано снижение распространенности ВОМ на 54% и ВМТо на 46%, по сравнению с контролем.
Определение фунгицидных свойств суспензии штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 в открытом грунте проведено после второго пролива под корень - 29 июня (табл. 9).
По данным, представленным в таблице 9 установлено, что в контроле количество растений с симптомами фузариоза и альтернариоза составляет 12% и 6%, соответственно. У растений, обработанных суспензией штамма, симптомы данных болезней отсутствуют, а титр микроорганизмов р. Fusarium и p. Alternaria в ризосферной почве на 3 и 2 порядка ниже, чем в контроле, что свидетельствует о высокой фунгицидной активности исследуемого штамма.
Сбор урожая на испытательном участке начался 11 июля. Дата последнего сбора урожая - 17 сентября. За весь период вегетации томата было проведено 10 сборов. Результаты представлены в таблице 8.
Из таблицы 8 следует, что урожайность томатов в варианте с обработкой штаммом Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 в 4,41 раза превышает контроль, а количество урожайных кустов при обработке суспензией штамма Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 в 1,4 раза выше контрольного варианта.
Анализ полученных данных свидетельствует о том, что штамм Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 обладает выраженными инсектоакарицидными и фитостимулирующими свойствами, сдерживает распространение вирусных и грибных болезней растений и, соответственно, снижает их вредоносность, способствуя получению высокого урожая.
9
Таким образом, можно сделать заключение о том, что штамм Streptomyces carpaticus К-11 RCAM 04697 с титром клеток 10 КОЕ/мл является перспективным агентом агробиотехнологии, на основе которого планируется разработка микробиологического препарата.
Источники информации
1. Патент РФ №2243259, 2004.
2. Патент РФ №2226214, 2004.
3. Патент РФ №2630661, 2017 (прототип).