СПОСОБ И КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ УСИЛЕННЫХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ/АНТИКАТАБОЛИЧЕСКИХ И РЕГЕНЕРАТИВНЫХ СРЕДСТВ ИЗ АУТОЛОГИЧНОЙ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ

1. Способ получения аутологичной композиции, применимой в лечении млекопитающего, страдающего повреждением и/или травмой соединительных тканей, хроническим тендинозом, хроническими разрывами мышц, хроническими дегенеративными нарушениями суставов и/или воспалительными нарушениями кожи, включающий следующие стадии:
получение противовоспалительного/антикатаболического компонента аутологичной композиции, содержащего ИЛ-1ra и TIMP, включающее следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
помещение крови в пробирку;
инкубацию крови при температуре от приблизительно 37°C до приблизительно 39°C в течение приблизительно 24 часов;
центрифугирование крови для разделения крови на супернатантный компонент и клеточную фракцию;
сбор супернатантного компонента противовоспалительного/антикатаболического компонента;
получение регенеративного компонента аутологичной композиции, включающее следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
помещение крови в пробирку, включающую количество приблизительно 4% лимонной кислоты;
центрифугирование крови для отделения богатого тромбоцитами плазматического компонента от крови;
сбор богатого тромбоцитами плазматического компонента; и
смешивание супернатантного компонента противовоспалительного/антикатаболического компонента с богатым тромбоцитами плазматическим компонентом для получения аутологичной композиции.
2. Способ по п.1, где пробирка является вакуумной пробиркой, сделанной из стекла.
3. Способ по п.1, где пробирка является вакуумной пробиркой, сделанной из полистирола.
++
4. Способ по п.1, где стадия получения противовоспалительного/антикатаболического компонента аутологичной композиции, содержащей ИЛ-1ra и TIMP, дополнительно включает стадию культивирования крови в присутствие Ca для облегчения продукции ИЛ-1ra.
++
5. Способ по п.4, где кровь культивируют со стерильным раствором хлорида кальция, содержащим от приблизительно 0,64 до приблизительно 0,72 мМ Ca, в соотношении 9:1 посредством добавления раствора с использованием стерильного шприца и иглы непосредственно в пробирку с аутологичной физиологической жидкостью перед стадией инкубации.
6. Способ по п.4, дополнительно включающий стадию добавления стерильного воздуха в пробирку, содержащую кровь, для повышения продукции ИЛ-1ra.
7. Способ по п.1, где стадию центрифугирования крови для разделения крови на супернатантный компонент и клеточную фракцию осуществляют в течение приблизительно от 10 до 20 минут при приблизительно от 4000 до 10000 об./мин.
8. Способ по п.7, где стадию центрифугирования крови для разделения крови на супернатантный компонент и клеточную фракцию осуществляют в течение приблизительно 10 минут при приблизительно 4000 об./мин.
9. Способ по п.1, где супернатант компонент разделяют на аликвоты и хранят для последующего использования.
10. Способ по п.1, где супернатант компонент разделяют на аликвоты и замораживают для последующего использования.
3
3
:
11. Способ по п.1, где стадия помещения крови в пробирку, содержащую количество приблизительно 4% лимонной кислоты, включает достижение соотношения 9,5 частей цельной крови (9,5 см)0,5 частей (0,5 см) 4% лимонной кислоты.
12. Способ по п.1, где стадию центрифугирования крови для отделения богатого тромбоцитами плазматического (PRP) компонента от крови осуществляют в течение приблизительно 30 секунд при приблизительно 7500 об./мин. для выделения PRP-фракции.
13. Способ по п.1, где фракцию лейкоцитарной пленки добавляют в регенеративный компонент в качестве дополнительного источника VEGF для стимуляции развития новых кровеносных сосудов.
14. Способ по п.1, где стадия смешивания супернатантного компонента с богатым тромбоцитами плазматическим компонентом для получения аутологичной композиции включает смешивание супернатантного компонента с богатым тромбоцитами плазматическим компонентом в соотношении 1:1.
15. Способ по п.1, где млекопитающее является человеком.
16. Аутологичная композиция для лечения поврежденных и/или травмированных соединительных тканей, хронического тендиноза, хронических разрывов мышц, и/или хронических дегенеративных нарушений суставов, и воспалительных нарушений кожи у млекопитающего, полученная способом по любому из пп.1-14.
17. Аутологичная композиция для лечения поврежденных и/или травмированных соединительных тканей, хронического тендиноза, хронических разрывов мышц, и/или хронических дегенеративных нарушений суставов, и воспалительных нарушений кожи у млекопитающего, содержащая противовоспалительный/антикатаболический компонент, содержащий супернатантный компонент, полученный из аутологичной крови млекопитающего, указанный противовоспалительный/антикатаболический компонент, включающий ИЛ-1ra и TIMP, при этом композиция дополнительно содержит регенеративный компонент, содержащий богатую тромбоцитами плазму, полученную из млекопитающего.
18. Аутологичная композиция по п.17, где богатая тромбоцитами плазма включает ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-13, PDGF, TGF-β и VEGF.
19. Аутологичная композиция по п.17, где композиция содержит противовоспалительный/антикатаболический компонент и регенеративный компонент в соотношении 1:1.
20. Аутологичная композиция по п.17, где регенеративный компонент дополнительно включает фракцию лейкоцитарной пленки.
21. Применение аутологичной композиции по любому из пп.16-20 для лечения поврежденных и/или травмированных соединительных тканей, хронического тендиноза, хронических разрывов мышц, и/или хронических дегенеративных нарушений суставов, и воспалительных нарушений кожи у млекопитающего.
22. Способ лечения млекопитающего, страдающего повреждением и/или травмой соединительных тканей, хроническим тендинозом, хроническими разрывами мышц и/или хроническими дегенеративными нарушениями суставов и воспалительными нарушениями кожи, включающий следующие стадии:
получение противовоспалительного/антикатаболического компонента аутологичной композиции, содержащего ИЛ-1ra и TIMP, включающее следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
помещение крови в пробирку;
инкубацию крови при температуре от приблизительно 37°C до приблизительно 39°C в течение приблизительно 24 часов;
центрифугирование крови для разделения крови на супернатантный компонент и клеточную фракцию; и
сбор супернатантного компонента противовоспалительного/антикатаболического компонента;
получение регенеративного компонента аутологичной композиции, включающее следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
помещение крови в пробирку в присутствие приблизительно 4% лимонной кислоты;
центрифугирование крови для отделения богатого тромбоцитами плазматического компонента от цельной крови; и
сбор богатого тромбоцитами плазматического компонента;
смешивание супернатантного компонента с богатым тромбоцитами плазматическим компонентом для получения аутологичной композиции; и
введение аутологичной композиции млекопитающему.
23. Способ получения аутологичной композиции, применимой в лечении поврежденных и/или травмированных соединительных тканей у млекопитающего, включающий следующие стадии:
получение противовоспалительного/антикатаболического компонента аутологичной композиции, содержащего ИЛ-1ra и TIMP, включающее следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
добавление количества цитрата натрия в пробирку;
помещение крови в пробирку;
инкубацию крови при температуре от приблизительно 37°C до приблизительно 39°C в течение приблизительно 24 часов;
центрифугирование крови для разделения крови на супернатантный компонент и клеточную фракцию; и
сбор супернатантного компонента противовоспалительного компонента;
получение регенеративного компонента аутологичной композиции, включающее следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
помещение крови в пробирку, включающую количество приблизительно 4% лимонной кислоты;
центрифугирование крови для отделения богатого тромбоцитами плазматического компонента от крови; и
сбор богатого тромбоцитами плазматического компонента; и
смешивание супернатантного компонента противовоспалительного/антикатаболического компонента с богатым тромбоцитами плазматическим компонентом для получения аутологичной композиции.
24. Способ по п.23, где на стадии получения противовоспалительного/антикатаболического компонента цитрат натрия является приблизительно 4%-ным раствором цитрата натрия, и его добавляют в пробирку для достижения соотношения приблизительно 0,5:9,5 4%-ного раствора цитрата натрия и крови после помещения указанной крови в указанную пробирку.
25. Способ лечения поврежденных и/или травмированных соединительных тканей, хронического тендиноза, хронических разрывов мышц, и/или хронических дегенеративных нарушений суставов, и воспалительных нарушений кожи у млекопитающего, включающий следующие стадии:
получение противовоспалительного/антикатаболического компонента аутологичной композиции, содержащего ИЛ-1ra и TIMP, включающее следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
добавление цитрата натрия в пробирку;
помещение крови в пробирку;
инкубацию крови при температуре от приблизительно 37°C до приблизительно 39°C в течение приблизительно 24 часов;
центрифугирование крови для разделения крови на супернатантный компонент и клеточную фракцию; и
сбор супернатантного компонента противовоспалительного/антикатаболического компонента;
получение регенеративного компонента аутологичной композиции, включающее следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
помещение крови в пробирку, включающую количество приблизительно 4% лимонной кислоты;
центрифугирование крови для отделения богатого тромбоцитами плазматического компонента от крови;
сбор богатого тромбоцитами плазматического компонента;
смешивание супернатантного компонента с богатым тромбоцитами плазматическим компонентом для получения аутологичной композиции; и
введение аутологичной композиции млекопитающему.
26. Способ по п.25, где на стадии получения противовоспалительного/антикатаболического компонента цитрат натрия является приблизительно 4%-ным раствором цитрата натрия, и его добавляют в пробирку для достижения соотношения приблизительно 0,5:9,5 4%-ного раствора цитрата натрия и крови после помещения указанной крови в указанную пробирку.
27. Способ получения аутологичной композиции для лечения поврежденных и/или травмированных соединительных тканей, хронического тендиноза, хронических разрывов мышц, и/или хронических дегенеративных нарушений суставов, и воспалительных нарушений кожи у млекопитающего, включающий следующие стадии:
сбор крови из млекопитающего;
добавление цитрата натрия в пробирку;
помещение крови в пробирку;
инкубацию крови при температуре от приблизительно 37°C до приблизительно 39°C в течение приблизительно 24 часов;
центрифугирование крови для разделения крови на супернатантный компонент и клеточную фракцию; и
сбор супернатантного компонента.
28. Способ по п.27, где на стадии получения противовоспалительного/антикатаболического компонента цитрат натрия добавляют в пробирку для достижения соотношения приблизительно 1:20 цитрата натрия и крови после помещения указанной крови в указанную пробирку.
29. Способ лечения поврежденных и/или травмированных соединительных тканей, хронического тендиноза, хронических разрывов мышц, и/или хронических дегенеративных нарушений суставов, и воспалительных нарушений кожи у индивидуума, включающий следующие стадии:
сбор крови индивидуума,
добавление цитрата натрия в пробирку;
помещение крови в пробирку;
инкубацию крови при температуре от приблизительно 37°C до приблизительно 39°C в течение приблизительно 24 часов;
центрифугирование крови для разделения крови на супернатантный компонент и клеточную фракцию;
сбор супернатантного компонента; и
введение супернатантного компонента индивидууму.
30. Способ по п.29, где цитрат натрия является приблизительно 4%-ным раствором цитрата натрия, и его добавляют в пробирку для достижения соотношения приблизительно 0,5:9,5 4%-ного раствора цитрата натрия и крови после помещения указанной крови в указанную пробирку.
31. Аутологичная композиция по п.17, где противовоспалительный/антикатаболический компонент содержит цитрат натрия.
32. Аутологичная композиция по п.31, где цитрат натрия является приблизительно 4%-ным раствором цитрата натрия.