СИСТЕМА ОЧИСТКИ, СОДЕРЖАЩАЯ АЛЬФА-АМИЛАЗУ И ПРОТЕАЗУ

1. Чистящая композиция, содержащая:
(a) альфа-амилазу c аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2; и
(b) протеазу,
где композиция обеспечивает более высокую степень очистки, чем соответствующие композиции, не содержащие альфа-амилазы или протеазы.
2. Чистящая композиция по п.1, где по меньшей мере одним дополнительным ферментом является субтилизин.
3. Чистящая композиция по п.2, где по меньшей мере одним дополнительным ферментом является субтилизин BPN' или его вариант.
4. Чистящая композиция по п.3, где по меньшей мере одним дополнительным ферментом является вариант Y217L субтилизина BPN'.
5. Чистящая композиция по п.1, которая также содержит по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество.
6. Чистящая композиция по по.1, которая также содержит по меньшей мере один дополнительный фермент, выбранный из группы, состоящей из липазы, кутиназы, карбогидразы, целлюлазы, пектиназы, маннаназы, арабиназы, галактаназы, ксиланазы, оксидазы, пергидролазы, пектат-лиазы и пероксидазы.
7. Чистящая композиция по по.1, где альфа-амилаза получена из родительской альфа-амилазы, выбранной из группы, состоящей из BASE, ACE, ACE-Q и ACE-QK.
8. Чистящая композиция по п.1, где альфа-амилаза представляет собой зрелую форму варианта альфа-амилазы, обладающую амилазной активностью и содержащую замену в одном или нескольких положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 1, 2, 3, 4, 5, 7, 15, 16, 17, 18, 19, 22, 25, 26, 28, 29, 30, 32, 35, 36, 37, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 59, 60, 70, 71, 72, 73, 75, 78, 83, 87, 90, 91, 93, 94, 95, 104, 105, 107, 108, 110, 112, 113, 116, 118, 125, 126, 128, 129, 130, 131, 134, 136, 138, 142, 144, 147, 149, 150, 152, 154, 156, 158, 160, 161, 162, 165, 166, 168, 169, 170, 172, 174, 177, 178, 182, 183, 185, 189, 192, 195, 197, 201, 202, 203, 207, 210, 214, 217, 221, 228, 234, 236, 237, 246, 250, 254, 255, 257, 264, 267, 269, 270, 272, 275, 279, 283, 284, 298, 301, 303, 305, 306, 310, 311, 314, 318, 319, 320, 322, 323, 336, 337, 338, 339, 340, 344, 359, 374, 375, 376, 377, 379, 381, 382, 393, 394, 399, 401, 407, 408, 419, 433, 436, 438, 444, 447, 448, 451, 453, 459, 465, 470, 475, 476, 483 и 484;
где положения соответствуют аминокислотным остаткам аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2; и
где замена природного аминокислотного остатка в одном или нескольких положениях другим аминокислотным остатком приводит к получению варианта альфа-амилазы с показателем эффективности >1,0, являющимся показателем стабильности, и показателем эффективности >1,0, являющимся показателем активности.
9. Чистящая композиция по п.8, где вариант альфа-амилазы содержит замену в одном или нескольких положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 7, 29, 35, 53, 60, 72, 87, 108, 116, 126, 128, 129, 130, 131, 134, 136, 138, 142, 156, 161, 165, 178, 182, 185, 189, 192, 195, 197, 202, 210, 214, 217, 221, 234, 246, 269, 303, 310, 337, 340, 374, 401 и 438, где замена природного аминокислотного остатка другим аминокислотным остатком приводит к получению варианта альфа-амилазы с показателем эффективности >1,5, являющимся показателем активности, и показателем эффективности >1,0, являющимся показателем стабильности.
10. Чистящая композиция по п.8, где вариант альфа-амилазы содержит замену в одном или нескольких положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 2, 7, 22, 25, 28, 30, 37, 70, 75, 83, 87, 91, 93, 108, 128, 160, 165, 178, 182, 183, 217, 269, 270, 279, 283, 298, 305, 306, 310, 320, 374, 375, 376, 407, 419, 475 и 476, где замена природного аминокислотного остатка другим аминокислотным остатком приводит к получению варианта альфа-амилазы с показателем эффективности >1,5, являющимся показателем стабильности, и показателем эффективности >1,0, являющимся показателем активности.
11. Чистящая композиция по п.8, где вариант альфа-амилазы содержит замену в одном или нескольких положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 83, 125, 128, 131, 160, 178, 182, 183, 185, 189, 279, 305, 319, 320, 379, 407, 433, 453, 475, 476 и 483.
12. Чистящая композиция по любому из пп.1-7, где альфа-амилаза представляет собой зрелую форму варианта альфа-амилазы, содержащую замену в одном или нескольких положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 83, 125, 128, 131, 160, 178, 182, 183, 185, 189, 279, 305, 319, 320, 379, 407, 433, 453, 475, 476 и 483, где положения соответствуют аминокислотным остаткам в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2, и где такая замена дает по меньшей мере один благоприятный эффект, выбранный из группы, состоящей из повышенной эффективности очистки, повышенной стабильности в моющем средстве, повышенной термостабильности и повышенного уровня экспрессии белка.
13. Чистящая композиция по любому из пп.1-7, где альфа-амилаза представляет собой зрелую форму варианта альфа-амилазы, содержащую замену в одном или нескольких положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 5, 32, 83, 95, 154, 214, 221, 228, 322, 401, 407, 419, 444, 447, 459, 470, 483 и 484;
где положения соответствуют аминокислотным остаткам в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2, и
где замена природного аминокислотного остатка другим аминокислотным остатком приводит к получению варианта альфа-амилазы с показателем эффективности 0,5 или выше в отношении активности при pH 8, активности при pH 10, активности при 16°C и активности при 32°C, и показателем эффективности 0,5 или выше в отношении стабильности в моющем средстве и в отношении термостабильности.
14. Чистящая композиция по п.8, где вариант альфа-амилазы также содержит замену в положении 243, соответствующем положению в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
15. Чистящая композиция по п.8, где вариант альфа-амилазы также содержит делецию в положении 180 и/или в положении 181, соответствующим положениям в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
16. Чистящая композиция по п.1, где вариант альфа-амилазы получен из родительской альфа-амилазы, имеющей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 75% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13 и SEQ ID NO:14.
17. Чистящая композиция по п.1, где вариант альфа-амилазы имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
18. Чистящая композиция по п.1, где вариант альфа-амилазы имеет последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
19. Чистящая композиция по п.1, где вариант альфа-амилазы имеет последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
20. Чистящая композиция по п.1, где указанный вариант содержит замену в одном или нескольких положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 128, 178, 182, 185 и 189, соответствующих положениям в аминокислотной последовательности SEQ ID:2, где замена приводит к повышению эффективности очистки или к повышению стабильности в моющем средстве.
21. Чистящая композиция по п.1, где указанный вариант альфа-амилазы содержит:
(a) аланин в положении 125,
цистеин в положении 128,
изолейцин в положении 131,
изолейцин в положении 165,
лейцин в положении 178,
глицин в положении 182,
тирозин в положении 202,
аргинин в положении 305,
треонин в положении 319 или
аргинин в положении 475;
(b) замены N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K и по меньшей мере одну дополнительную замену, выбранную из группы, состоящей из S125A, T131I, T165I, F202Y и D319T; или
(c) замены N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K,
S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K, или
S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K;
где вариант также, но необязательно, содержит замену в положении 243, и/или делецию в положении 180, и/или в положении 181; и
где положения соответствуют положениям аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2.
22. Чистящая композиция по п.1, где указанный вариант альфа-амилазы содержит замену в положении 475.
23. Чистящая композиция по п.1, где указанный вариант альфа-амилазы содержит замену в положении 243, и/или делецию в положении 180, и/или в положении 181.
24. Чистящая композиция по п.1, где указанный вариант альфа-амилазы содержит замену в положении 243, и/или делецию в положении 180, и/или в положении 181.
25. Чистящая композиция по п.1, где композиция обеспечивает степень очистки, которая превышает степень очистки, наблюдаемую при применении соответствующих композиций, не содержащих альфа-амилазы или протеазы, где указанную степень очистки определяют при температуре примерно ниже 25°C.
26. Чистящая композиция по п.1, где композиция обеспечивает степень очистки, которая превышает степень очистки, наблюдаемую при применении соответствующих композиций, не содержащих альфа-амилазы или протеазы, где степень очистки определяют при температуре примерно ниже 20°C.
27. Чистящая композиция по п.1, где в композиции альфа-амилаза и протеаза присутствуют в комбинации.
28. Способ очистки ткани или жесткой поверхности, где способ предусматривает приведение в контакт ткани или жесткой поверхности с чистящей композицией по любому из предыдущих пунктов.
29. Способ по п.28, где способ осуществляют при температуре примерно ниже 25°C.
30. Способ по п.29, где способ осуществляют при температуре примерно ниже 20°C.