ИММУНОКОНЪЮГАТЫ, НАПРАВЛЕННЫЕ НА CD138, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Иммуноконъюгат, содержащий:
(a) сконструированное антитело против мишени,
(i) состоящее по существу из антиген-связывающего участка (ABR) против CD138 нечеловеческого антитела, или
(ii) содержащее антиген-связывающий участок (ABR) против CD138, где указанный антиген-связывающий участок получен из нечеловеческого антитела,
дополнительный участок антитела, где, по меньшей мере, часть дополнительного участка антитела получена из человеческого антитела, и
(b) эффекторную молекулу,
где указанный иммуноконъюгат гомогенно направлен на клетки, экспрессирующие CD138.
2. Иммуноконъюгат по п.1, где указанная эффекторная молекула присоединена к указанному сконструированному антителу против мишени через линкер.
3. Иммуноконъюгат по п.1, где указанный линкер представляет собой расщепляемый линкер, предпочтительно содержащий дисульфидную связь.
4. Иммуноконъюгат по пп.1, 2 или 3, где указанная эффекторная молекула обеспечивает стерическое затруднение между антителом против мишени и указанной эффекторной молекулой.
D
5. Иммуноконъюгат по п.1, где иммуноконъюгат имеет значение K менее 2,6.
6. Иммуноконъюгат по п.1, где эффекторная молекула представляет собой, по меньшей мере, один майтансиноид, таксан или CC1065, или их аналог.
7. Иммуноконъюгат по п. 6, где эффекторная молекула представляет собой, по меньшей мере, один майтансиноид.
8. Иммуноконъюгат по п. 7, где, по меньшей мере, один майтансиноид представляет собой DM1, DM3 или DM4.
9. Иммуноконъюгат по п. 4, где указанная эффекторная молекула представляет собой DM4.
10. Иммуноконъюгат по п. 1, где указанный иммуноконъюгат связывает CD138 с вариацией нацеливания менее чем 150%, 140%, 130%, 120%, 110%, 100%, 90%, 80%, 70%, 60% или 50%.
11. Иммуноконъюгат по п. 1, где ABR содержит:
(a) CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи, включающий аминокислотные остатки 99-111 последовательности SEQ ID NO: 1, и
(b) CDR3 вариабельного участка легкой цепи, включающий аминокислотные остатки 89-97 последовательности SEQ ID NO: 2, соответственно.
12. Иммуноконъюгат по п. 11, где ABR дополнительно содержит:
(a) CDR1 и CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи, включающие аминокислотные остатки 31-35 и 51-68 последовательности SEQ ID NO: 1, и/или
(b) CDR1 и CDR2 вариабельного участка легкой цепи, включающие аминокислотные остатки 24-34 и 50-56 последовательности SEQ ID NO: 2, соответственно.
13. Иммуноконъюгат по п. 11, где указанный дополнительный участок антитела содержит:
(a) аминокислотные остатки 123-448 последовательности SEQ ID NO: 1, и/или
(b) аминокислотные остатки 108-214 последовательности SEQ ID NO: 2, соответственно
и их мутации, которые
(i) поддерживают или снижают антитело-зависимую цитотоксичность и/или комплемент-зависимую цитотоксичность сконструированного антитела против мишени и/или
(ii) стабилизируют сконструированное антитело против мишени.
14. Иммуноконъюгат по п. 11, где средство против мишени, направленное против CD138, включает выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность тяжелой цепи иммуноглобулина, или ее часть, где указанная тяжелая цепь иммуноглобулина, или ее часть, по меньшей мере, на 70% идентична последовательности SEQ ID NO:1.
15. Иммуноконъюгат по п. 14, где константный участок указанной тяжелой цепи иммуноглобулина, или его указанной части, представляют собой константный участок изотипа IgG4.
16. Способ лечения множественной миеломы у субъекта, включающий:
получение иммуноконъюгата по п. 14 и
введение указанному субъекту указанного иммуноконъюгата в количестве, эффективном для лечения множественной миеломы.
17. Способ по п. 16, где указанное средство против мишени содержит последовательность легкой цепи, по меньшей мере, на 70% идентичную последовательности SEQ ID NO:2.
18. Способ опосредованный иммуноконъюгатом доставки лекарственного средства, включающий:
получение иммуноконъюгата по п.15 и
введение указанного иммуноконъюгата в терапевтически эффективном количестве, где указанный изотип IgG4 снижает ADCC, комплемент-зависимую цитотоксичность и/или Fc-опосредованное нацеливание печеночного FcR.
19. Способ ингибирования, замедления и/или предотвращения роста опухолевых клеток в клеточной культуре, включающий
введение в указанную клеточную культуру количества иммуноконъюгата по п. 1, 4 или 14, эффективного для ингибирования, замедления и/или предотвращения роста опухолевых клеток.
20. Способ по п. 19, где указанное эффективное количество индуцирует гибель опухолевых клеток, экспрессирующих CD138, или прекращение непрерывного клеточного цикла в указанных клетках, и, необязательно, во вспомогательных клетках, которые не экспрессируют CD138, в особенности, в клетках стромы опухоли.
21. Способ по п. 19, где указанные клетки указанной клеточной культуры получают от ракового пациента и, после введения указанного эффективного количества указанного иммуноконъюгата, клетки указанной клеточной культуры реимплантируют указанному раковому пациенту.
22. Способ по п. 19, где клетки указанной клеточной культуры выделяют у пациента, страдающего гематологическим злокачественным заболеванием и/или солидной опухолью, которые содержат клетки, экспрессирующие CD138.
23. Способ по п. 21, где указанный раковый пациент страдает одним или несколькими из: множественной миеломы, карциномы яичника, карциномы почки, карциномы желчного пузыря, карциномы молочной железы, рака простаты, рака легкого, карциномы толстой кишки, ходжкинской и неходжкинской лимфомы, хронического лимфолейкоза (CLL), острого лимфобластного лейкоза (ALL), острого миелобластного лейкоза (AML), саркомы твердой ткани или карциномы толстой кишки.
24. Способ по п. 23, где указанный пациент страдает множественной миеломой.
25. Способ ингибирования, замедления и/или предотвращения роста опухоли, содержащей CD138 опухолевые клетки, и/или распространения опухолевых клеток такой опухоли у пациента, нуждающегося в этом, включающий
введение указанному пациенту, по меньшей мере, одного иммуноконъюгата по п.п. 1, 4 или 14 в количестве, ингибирующем или уменьшающем рост указанной опухоли и/или распространение указанных опухолевых клеток,
где указанный иммуноконъюгат ингибирует, замедляет или предотвращает рост и/или распространение указанных опухолевых клеток.
26. Способ по п. 25, где указанный пациент страдает гематологическим злокачественным заболеванием и/или солидной опухолью, которые содержат клетки, экспрессирующие CD138.
27. Способ по п. 26, где указанный пациент страдает одним из следующих: множественной миеломой, карциномой яичника, карциномой почки, карциномой желчного пузыря, карциномой молочной железы, раком простаты, раком легкого, карциномой толстой кишки, ходжкинской и неходжкинской лимфомой, хроническим лимфолейкозом (CLL), острым лимфобластным лейкозом (ALL), острым миелобластным лейкозом (AML), саркомой твердой ткани или карциномой толстой кишки.
28. Способ по п. 27, где заболевание представляет собой множественную миелому.
29. Способ по п. 25, где указанная эффекторная молекула указанного иммуноконъюгата представляет собой токсин, цитотоксический фермент, низкомолекулярное цитотоксическое средство, порообразующее средство, модификатор биологического ответа, фермент, активирующий пролекарство, антитело, цитокин или радионуклид.
2
2
30. Способ по п. 25, где указанный иммуноконъюгат вводят в одной дозе, составляющей примерно от 5 мг/м до 300 мг/м.
2
2
31. Способ по п. 25, где указанный иммуноконъюгат вводят, по меньшей мере, в двух дозах, составляющих от примерно 5 мг/м до примерно 300 мг/м, необязательно с часовыми, суточными, недельными интервалами, или их сочетаниями.
32. Способ ингибирования, замедления и/или предотвращения роста опухоли и/или распространения клеток злокачественной опухоли у пациента, нуждающегося в этом, включающий
(a) введение указанному пациенту, по меньшей мере, одного иммуноконъюгата по п.п. 1, 4 или 14 в количестве, ингибирующем, замедляющем или предотвращающем рост опухоли и/или распространение опухолевых клеток; и
(b) введение указанному пациенту одного или нескольких цитотоксических средств и/или облучения в количестве, эффективном для уменьшения опухолевой нагрузки,
где указанный иммуноконъюгат ингибирует, замедляет или предотвращает рост и/или распространение опухолевых клеток, включающих клетки, экспрессирующие CD138.
33. Способ по п. 32, где (a) и (b) проводят последовательно, используя два следующих друг за другом режима лечения.
34. Способ по п. 32, где иммуноконъюгат из (a) и, по меньшей мере, одно цитотоксическое средство из (b) вводят совместно.
35. Способ по пп. 32, 33 или 34, где цитотоксическое средство представляет собой мефалан, винкристин, доксорубицин, дексаметазон, циклофосфамид, этопозид, цитарабин, цисплатин, талидомид, преднизон, талидомид, бортезомид, леналидомид, сорафениб, ромидепсин, или их сочетания.
36. Способ по пп. 32, 33 или 34, где цитотоксическое средство получают на основе антитела.
37. Способ лечения субъекта, имеющего состояние, которое может улучшаться в результате подавления выживания клеток миеломы, включающий:
(a) получение, по меньшей мере, одного иммуноконъюгата по пп. 1, 4 или 14, и
(b) введение иммуноконъюгата субъекту с целью селективного уменьшения выживания или роста указанных клеток миеломы у указанного субъекта.
38. Фармацевтическая композиция, содержащая иммуноконъюгат по пп. 1, 4 или 14, для ингибирования, замедления и/или предотвращения роста опухолей и/или распространения опухолевых клеток, и один или несколько фармацевтически приемлемых наполнителей.
39. Фармацевтическая композиция по п. 38, дополнительно содержащая, по меньшей мере, одно цитотоксическое средство.
40. Фармацевтическая композиция по п. 39, где цитотоксическое средство представляет собой мефалан, винкристин, доксорубицин, дексаметазон, циклофосфамид, этопозид, цитарабин, цисплатин, талидомид, преднизон, талидомид, бортезомид, леналидомид, сорафениб, ромидепсин, или их сочетания.
41. Фармацевтическая композиция по п. 39, где цитотоксическое средство получают на основе антитела.
42. Набор, содержащий в отдельных контейнерах фармацевтические композиции для применения в сочетании для ингибирования, замедления и/или предотвращения роста опухолей и/или распространения опухолевых клеток, где один контейнер содержит эффективное количество фармацевтической композиции по п. 38, а другой контейнер содержит вторую фармацевтическую композицию, содержащую эффективное количество дополнительного средства, предпочтительно цитотоксического средства, для ингибирования, замедления и/или предотвращения роста опухолей и/или распространения опухолевых клеток, и один или несколько фармацевтически приемлемых наполнителей.
43. Набор по п. 42, где указанное средство, входящее в состав указанной второй фармацевтической композиции, выбрано из группы, состоящей из мефалана, винкристина, доксорубицина, дексаметазона, циклофосфамида, этопозида, цитарабина, цисплатина, талидомида, преднизона, талидомида, бортезомида, леналидомида сорафениба, ромидепсина и их сочетания, или получено на основе антитела.
44. Способ ингибирования, замедления и/или предотвращения роста опухоли, содержащей CD138-опухолевые клетки, и/или распространения опухолевых клеток такой опухоли у субъекта, нуждающегося в этом, включающий
(a) получение иммуноконъюгата по п. 1, где сконструированное антитело направленное против CD138 присоединено к эффекторной молекуле через расщепляемый линкер, где указанная эффекторная молекула стерически затруднена, и
(b) введение указанному субъекту иммуноконъюгата (a) в количестве, ингибирующем, замедляющем и/или предотвращающем рост указанной опухоли и/или распространение указанных опухолевых клеток, где (a) ингибирующая активность указанного иммуноконъюгата в отношении роста опухоли превышает ингибирующую активность незатрудненного аналога примерно на 10%, примерно на 20%, примерно на 30%, примерно на 40% или больше.
45. Способ по п. 44, где ингибирующая активность в отношении роста опухоли незатрудненного аналога иммуноконъюгата, содержащего нерасщепляемый линкер, превышает ингибирующую активность в отношении роста опухоли незатрудненного аналога иммуноконъюгата, содержащего расщепляемый линкер, по меньшей мере, примерно на 5%, по меньшей мере, примерно на 10%, примерно до 15%.
46. Способ по одному из п. 44 или 45, где указанный расщепляемый линкер содержит дисульфидную связь.
47. Способ по п. 44 или 45, где указанная эффекторная молекула представляет собой DM4.
2
2
48. Способ по п. 44 или 45, где иммуноконъюгат вводят субъекту, по меньшей мере, в одной дозе, составляющей примерно от 5 мг/м до 300 мг/м.
49. Способ по п. 44 или 45, где иммуноконъюгат вводят указанному субъекту в нескольких дозах, и где вводимый таким образом иммуноконъюгат обладает ингибирующей активностью в отношении роста опухоли, которая превышает ингибирующую активность незатрудненного аналога примерно на 20%, примерно на 30%, примерно на 40%, примерно на 50%, примерно на 60%, примерно на 70%, примерно на 80%, примерно на 90% или более.
50. Способ по п. 49, где указанный расщепляемый линкер содержит дисульфидную связь.
51. Способ по п. 49, где указанная эффекторная молекула представляет собой DM4.
52. Способ по п. 49, где указанные несколько доз вводят с интервалами в 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 часов, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 дней, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 недель.
2
2
53. Способ по п. 49, где указанный иммуноконъюгат вводят в дозах, составляющих от примерно 5 мг/м до примерно 300 мг/м.
54. Способ уменьшения числа клеток, находящихся в непосредственном или опосредованном контакте с опухолевыми клетками, экспрессирующими CD138, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий:
введение указанному субъекту, по меньшей мере, одного иммуноконъюгата по пп. 1, 4 или 14 в количестве, эффективном для уменьшения числа указанных клеток, находящихся в непосредственном или опосредованном контакте с указанными опухолевыми клетками, экспрессирующими CD138.
55. Способ по п. 54, где указанные клетки, находящиеся в непосредственном или опосредованном контакте с опухолевыми клетками, экспрессирующими CD138, состоят из клеток, гетерогенно экспрессирующих CD138, клеток, не экспрессирующих CD138, и/или клеток, недоступных для эффективного количества, по меньшей мере, одного указанного иммуноконъюгата.
56. Способ по п. 54, где указанные клетки представляют собой клетки, находящиеся в непосредственном контакте с опухолевыми клетками, экспрессирующими CD138, или присоединенные к опухолевым клеткам, экспрессирующим CD138.
57. Способ уменьшения числа клеток, находящихся в непосредственном или опосредованном контакте с опухолевыми клетками, экспрессирующими CD138, включающий:
введение в указанные опухолевые клетки и указанные клетки, находящиеся в непосредственном или опосредованном контакте с указанными опухолевыми клетками, по меньшей мере, одного иммуноконъюгата по п.п. 1, 4 или 14, в количестве, эффективном для уменьшения числа указанных клеток, находящихся в непосредственном или опосредованном контакте с указанными опухолевыми клетками, экспрессирующими CD138.