Влияние иммунотерапии на активность перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у больных хроническим пиелонефритом единственной почки в раннем послеоперационном периоде

УДК 616.61-007.21-002.2-089.1-085.37

влияние иммунотерапии на активность перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у больных хроническим пиелонефритом единственной почки в раннем послеоперационном периоде

В. А. Бычковских

Челябинская государственная медицинская академия, г. Челябинск

В исследовании приняли участие 67 больных хроническим пиелонефритом единственной почки. Содержание продуктов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты оценивалось трижды — до операции, на 2—3-е и 9—12-е сутки после операции. У части больных в дополнение к базисной терапии использован иммуномодулятор бестим на 2—3-е сутки после операции, результаты оценивались на 9—12-е сутки с момента хирургического лечения. Полученные результаты исследования указывают на активность перекисного окисления липидов, на нарушение баланса между про- и антиоксидантной реакциями. Бестим обладает противовоспалительным действием, уменьшает активность процессов пероксидации, не оказывает побочных эффектов и может быть рекомендован в состав комплексной терапии при лечении больных хроническим пиелонефритом единственной почки.

Ключевые слова: единственная почка, хронический пиелонефрит, оперативное лечение, перекис-ное окисление липидов, иммунотерапия.

ВВЕДЕНИЕ

Самым частым заболеванием единственной почки является хронический пиелонефрит, который составляет 65—80%. Возрастает частота скрыто текущих форм, трудных для диагностики и терапии. Многочисленные литературные данные свидетельствуют о том, что хронический пиелонефрит единственной почки является наиболее частой причиной хронической почечной недостаточности и выхода больных на инвалидность. Актуальность проблемы заключается также в том, что количество нефрэктомий не имеет тенденции к снижению [2, 6, 8, 12].

В настоящее время показано, что в патогенезе многих заболеваний человека ведущую роль играет окислительный стресс — разбалансировка окислительных и антиокислительных процессов в организме в сторону преобладания окисления [5, 10, 11]. Он раз-

вивается в случае недостаточной активности эндогенной антиоксидантной защиты (АОЗ) при избыточном поступлении высокоактивных окислителей извне или интенсификации образования реактивных метаболитов в самом организме. Процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) и АОЗ являются важным регуляторным механизмом для реализации согласованной работы мембранно-связанных ферментов и клетки в целом [5, 10, 11].

У больных хроническим пиелонефритом установлено изменение функционального состояния антиоксидантной системы на фоне активации процессов перекисного окисления липидов [11]. Наряду с известными лекарственными препаратами для коррекции нарушений системы ПОЛ и АОЗ в последнее время изучается возможность использования иммуномодуляторов [7, 9, 11]. Авторами установлено, что иммуномодулятор полиоксидо-

ний подавляет образование внеклеточных форм кислорода, стимулирует их внутриклеточное образование, вызывая гибель бактерий в клетке.

Одним из препаратов, который ранее не применялся при пиелонефрите у больных с единственной почкой, является новый синтетический дипептид — бестим, разработанный ГНЦ НИИ особо чистых биопрепаратов (г. С.-Петербург), обладающий выраженными иммуностимулирующими свойствами, а также стимулирует регенерацию, влияет на клеточный метаболизм. Бестим успешно прошел клинические испытания. Есть сообщения об эффективном использовании препарата при хламидиозе [2], туберкулезе [12]. С успехом применяли бестим с целью коррекции вторичной иммунной недостаточности у пациентов, иммунизированных вакциной против гепатита [1], для профилактики послеоперационных инфекционных воспалительных осложнений [7]. В исследованиях не выявлено побочных действий бестима, что является особенно важным для пациентов с хроническим пиелонефритом единственной почки.

Цель исследования — изучение влияния иммуномодулятора бестим на перекисное окисление липидов и антиоксидантную защиту у больных хроническим пиелонефритом единственной почки в раннем послеоперационном периоде.

Материалы и методы

ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проводилось на клинической базе кафедры хирургических болезней и урологии, НИИ иммунологии и ЦНИЛ Челябинской государственной медицинской академии. Отбор больных для исследования осуществлялся в соответствии с клиническими критериями включения и исключения. Наряду с общепринятыми методами исследования при хроническом пиелонефрите единствен-68

ной почки у больных изучались показатели перекисного окисления липидов и антиокси-дантной защиты.

При статистической обработке полученного материала применялся непараметрический критерий Манна—Уитни с поправкой йейтса, если условия нормальности распределения не выполнялись. При анализе качественных признаков проводили построение таблиц сопряженности с вычислением %2 или одностороннего точного критерия Фишера. Различия считали значимыми при p<0,05. Математическая обработка результатов исследования проводилась с использованием пакета прикладных программ «Statistica for Windows 6.0», «Exel 7.0».

Содержание продуктов ПОЛ и АОЗ оценивалось трижды — до операции, на 2—3-е и 9—12-е сутки после операции. Изучали первичные общие полиеновые, диеновые конъ-югаты (ДК), вторичные кетодиеновые и сопряженные триены (КД и СТ), шиффовые основания (ШО). Их значения определяли в гептан-изопропановых фракциях. В гептане экстрагируются в основном нейтральные жиры, а в изопропаноле — фосфолипиды. Определялись уровень С-реактивного белка (СРБ), содержание церулоплазмина и катала-зы в сыворотке крови, активность суперок-сиддисмутазы (СОД). Для определения продуктов ПОл использовалась методика И. А. Волчегорского с соавт. (1989). Определение активности каталазы в сыворотке крови и эритроцитах проводилось по методике М. А. Королюк (1988), исследование церуло-плазмина в сыворотке крови — по методу Ревина, активности СОД — по С. Чевари и соавт. (1985). При определении С-реактивно-го белка в сыворотке крови использовался анти-СРБ-латекс-реагент.

Пиелонефрит как заболевание полипатогенетическое требует комплексного подхода к лечению.

Всем больным, которые вошли в группы исследования, были выставлены показания для хирургического лечения. В I группе (больные хроническим пиелонефритом единственной почки — 30 чел.) выполнено 9 эндоскопических операций, 12 чрескожных и 9 открытых. Во II группе (больные хроническим пиелонефритом, имеющие две почки,— 30 чел.) проведено 7 эндоскопических, 12 чрескожных и 11 открытых операций. В группу контроля включено 27 практически здоровых лиц.

В послеоперационном периоде все больные получали базовую антибактериальную терапию (с учетом посева мочи на микрофлору и чувствительность к антибактериальным препаратам), препараты, улучшающие микроциркуляцию в оперированной почке (трентал, канефрон), обезболивающие препараты, при необходимости — инфузионную терапию.

На сегодня доказано [2, 6, 9, 12], что одной базовой терапии для лечения хронического пиелонефрита недостаточно. Нами в дополнение к базовой терапии у части пациентов в послеоперационном периоде использован новый отечественный иммуномодуля-тор бестим. В I группе его получали 19 пациентов, во II — 17. Препарат вводили внутримышечно по 100 мкг в течение 5 дней. Перед введением сухой препарат разводили 4 мл физиологического раствора. Лечение бестимом у больных начинали со 2—3-го дня после хирургического вмешательства. Результаты лечения оценивались на 9—12-й день с момента хирургического лечения.

Результаты и их обсуждение

Нами был проведен сравнительный анализ биохимических показателей пациентов с хроническим пиелонефритом единственной почки и имеющих две почки до и после назначения бестима, а также с показателями

больных, не использовавших бестим, и практически здоровых лиц.

В связи с этим одной из задач исследования явилось определение в сыворотке крови пациентов с хроническим пиелонефритом единственной почки содержания продуктов ПОЛ и показателей АОЗ в сравнении с аналогичными показателями при хроническом пиелонефрите пациентов, имеющих две почки, в предоперационном периоде. Для оценки активности воспалительного процесса определяли уровень СРБ в сыворотке крови больных. Было установлено, что у пациентов с единственной почкой в активную фазу воспаления происходило достоверное увеличение содержания СРБ в сравнении с практически здоровыми лицами и с больными с латентной фазой пиелонефрита. Необходимо отметить, что уровень изучаемого острофазового белка у пациентов с единственной почкой в латентную фазу и у пациентов с двумя почками в активную и латентную фазы воспаления соответствовал показателям практически здоровых лиц.

Представляло интерес определение содержания церулоплазмина в сыворотке крови больных, поскольку церулоплазмин является центральным антиоксидантом плазмы крови и также относится к белкам острой фазы воспаления. Сопоставление этого показателя продемонстрировало, что у пациентов с пиелонефритом единственной почки и у пациентов с двумя почками в активную фазу воспаления уровень церулоплазмина превышал показатели здоровых лиц и больных в латентную фазу воспаления.

Полученные результаты свидетельствуют об активности воспалительного процесса у всех пациентов в активную фазу пиелонефрита, но у больных с единственной почкой показатели активности более выражены. Данный факт подтверждается наличием у них лейкоцитоза и увеличением числа ней-трофилов.

При исследовании продуктов ПОЛ достоверных различий по их содержанию между сравниваемыми группами пациентов как в активную, так и в латентную фазу воспаления не выявлено.

В то же время содержание гептан-растворимых общих полиеновых (ОП) и первичных продуктов ПОЛ (диеновых конъюгат) в сыворотке крови пациентов с пиелонефритом единственной почки и пациентов с двумя почками превышало этот показатель практически здоровых лиц.

Уровень гептан-растворимых продуктов ПОЛ (кетодиеновые и сопряженные триены) соответствовал уровню практически здоровых людей во всех сравниваемых группах больных. По содержанию изопропанол-ра-створимых продуктов ПОЛ достоверных отличий между сравниваемыми группами больных не выявлено.

При этом уровень общих полиеновых продуктов у пациентов с пиелонефритом единственной почки в активную фазу достоверно превышал таковой у практически здоровых лиц. У остальных больных имелась лишь тенденция к повышению этого показателя.

Содержание первичных ДК и вторичных КД и СТ изопропанол-растворимых продуктов ПОЛ у всех сравниваемых групп больных было повышенным, но наиболее высокие показатели были зарегистрированы у пациентов с единственной почкой в активную фазу.

Интересно отметить, что у больных с разными фазами течения пиелонефрита отмечалось относительное снижение гептан-растворимых продуктов ПОЛ в сравнении с практически здоровыми лицами, тогда как относительное содержание изопропанол-растворимых продуктов (ДК, КД, СТ) несколько превышало показатели здоровых.

В целом, характеризуя показатели ПОЛ, можно отметить увеличение продуктов пере-кисного окисления липидов, особенно за-

метное у пациентов с единственной почкой. Данный факт указывает на активацию сво-боднорадикального окисления и подтверждается ранее полученными нами результатами увеличения в сыворотке крови этих пациентов концентрации С3 компонента комплемента, ИЛ-8 и ИНФ-у.

Учитывая, что на развитие патологического процесса оказывает прямое влияние система антиоксидантной защиты, нами проведена оценка взаимодействия про- и анти-оксидантных систем.

Полученные результаты показали, что активность супероксиддисмутазы у всех пациентов ниже, чем у здоровых лиц. При этом только у больных пиелонефритом единственной почки в активную фазу данное снижение достоверно.

Было установлено, что у больных с единственной почкой и двумя почками в активную фазу уровень церулоплазмина, обладающего СОД-активностью, был повышен. Возможно, данное повышение является компенсаторной реакцией организма в ответ на активацию свободнорадикального окисления. Но также известно, что при активации свободнорадикального окисления церуло-плазмин может переходить из антиоксидан-та в прооксидант и выступать в роли белка острой фазы воспаления.

Исследования показали, что активность каталазы в сыворотке крови у всех обследованных больных превышала показатели практически здоровых лиц, а в эритроцитах активность этого фермента была сниженной. Значимых отличий в показателях сравниваемых групп больных не было зарегистрировано. Принимая во внимание полученные результаты и то, что каталаза является внутриклеточным ферментом, можно предполагать, что пиелонефрит сопровождается разрушением клеточных мембран и повышенным выходом фермента в сыворотку крови.

Для оценки баланса между про- и антиок-сидантной системами был рассчитан коэффициент антиоксидантной защиты (КАОЗ). Данный показатель у всех обследованных больных был снижен. Более значительное снижение коэффициента было отмечено у больных с единственной почкой в активную фазу.

Таким образом, полученные результаты указывают на активность ПОЛ у больных пиелонефритом, а также на нарушение баланса между про- и антиоксидантной системами. У пациентов с единственной почкой до операции выявленные нарушения были более значимые.

В послеоперационном периоде с целью коррекции иммунных нарушений нами у части больных был использован иммуномо-дулятор бестим.

При оценке влияния этого препарата на содержание СРБ в сыворотке крови больных хроническим пиелонефритом единственной почки в раннем послеоперационном периоде было установлено, что его использование в послеоперационном периоде способствовало снижению содержания СРБ, уровень которого на 9—12-е сутки после операции приближался к уровню практически здоровых людей (табл.).

На 9—12-е сутки у пациентов, не принимавших бестим, содержание СРБ также значительно снижалось, но при этом превышало уровень практически здоровых людей.

У пациентов с двумя почками применение бестима приводило к достоверному снижению содержания СРБ в сыворотке крови на 9—12-е сутки после операции. У больных, не использовавших бестим в послеоперационном периоде, зарегистрирована лишь тенденция к снижению изучаемого показателя.

Анализ влияния бестима на процессы ПОЛ у пациентов с единственной почкой показал, что применение данного иммуномоду-лятора в послеоперационном периоде не

оказывало значительного влияния на уровень продуктов ПОЛ в сыворотке крови и активность ферментов-антиоксидантов.

Достоверные различия отмечены лишь по абсолютному содержанию изопропанол-растворимых общих полиеновых и диеновых конъюгатов у больных, не применявших бестим. У пациентов с двумя почками применение препарата приводило к достоверному снижению изопропанол-растворимых первичных (ДК) и вторичных (КД с СТ) продуктов ПОЛ, что связано, вероятно, с достоверным увеличением активности СОД и более высоким уровнем у них содержания церуло-плазмина — центрального антиоксиданта плазмы крови.

У пациентов с единственной почкой применение бестима не оказывало влияния на коэффициент антиоксидантной защиты (КАОЗ), тогда как у больных с двумя почками применение бестима приводило к достоверному увеличению этого коэффициента на 9—12-е сутки после операции. У больных, не применявших иммуномодулятор, КАОЗ на 9—12-е сутки после операции достоверно снижался.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что применение имму-номодулятора бестим у пациентов с хроническим пиелонефритом единственной почки приводит к снижению содержания СРБ в сыворотке крови, что, наряду со снижением лейкоцитоза, может свидетельствовать о купировании воспалительного процесса. Подобный эффект бестима отмечен и у больных с двумя почками.

Менее значительное влияние бестим оказывал на содержание продуктов ПОЛ в сыворотке крови у пациентов с единственной почкой, что может свидетельствовать о снижении адаптационных возможностей у данной группы больных.

Достоверное снижение содержания изо-пропанол-растворимых ДК и КД с СТ продук-

Таблица

Влияние бестима на активность перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у больных

пиелонефритом единственной почки

Показатели Больные пиелонефритом единственной почки Больные пиелонефритом с двумя почками Здоровые

На 2—3-е сутки На 9—12-е сутки Р На 2—3-е сутки На 9—12-е сутки Р

Бестим

Общие полиеновые кислоты (Е220) гептан 2,15+0,79 1,80+0,44 1,76+0,22 1,55+0,45 Н/д 1,57+0,16 1,45+0,12 1,65+0,20 1,31+0,24 Н/д 0,88+0,06

изопропа-нол 4,37+0,43 6,11+1,28 4,35+0,35 3,66+0,40 Р2_4<0,05 4,20+0,29 4,75+0,70 3,67+0,21 3,71+0,34 Н/д 3,31+0,29

Диеновые конъюгаты (Е232) гептан 1,16+0,36 1,17+0,34 1,11+0,15 1,01+0,33 Н/д 0,96+0,12 0,90+0,11 1,01+0,15 0,79+0,16 Н/д 0,59+0,05

изопропа-нол 2,41+0,24 3,85+0,83 2,33+0,18 1,91+0,22 РЬ2<0,05 Р2_4<0,05 2,31+0,20 2,74+0,35 1,71+0,12 1,86+0,21 Рьз<0,05 1,38+0,28

Кетодиеновые, сопряженные с триеновыми (Е278) гептан 0,28+0,15 0,33+0,07 0,25+0,05 0,32+0,05 Н/д 0,19+0,05 0,21+0,04 0,25+0,04 0,12+0,03 Р34=0,06 Рьз<0,05 0,12+0,02

изопропа-нол 1,94+0,21 2,69+0,57 1,68+0,14 1,40+0,12 Н/д 1,72+0,18 1,73+0,19 1,11+0,06 1,22+0,17 Рьз<0,05 0,78+0,10

Е232/220 гептан 0,58+0,04 0,64+0,04 0,63+0,02 0,58+0,10 Н/д 0,60+0,02 0,58+0,04 0,58+0,03 0,59+0,04 Н/д 0,74+0,11

изопропа-нол 0,56+0,03 0,63+0,03 0,54+0,02 0,53+0,03 Н/д 0,54+0,02 0,76+0,23 0,46+0,02 0,49+0,03 Рьз<0,05 0,49+0,10

Е278/220 гептан 0,10+0,02 0,15+0,01 0,12+0,02 0,13+0,00 Н/д 0,09+0,01 0,13+0,02 0,14+0,02 0,07+0,01 Р3_4=0,05 Рьз<0,05 0,15+0,03

изопропа-нол 0,45+0,03 0,44+0,02 0,40+0,03 0,41+0,05 Н/д 0,40+0,03 0,50+0,14 0,32+0,02 0,33+0,04 Рьз<0,05 0,28+0,03

Каталаза, мкат/л сыворотки крови 23,0+2,6 16,3+3,4 25,5+2,1 20,3+4,0 Н/д 22,2+1,9 23,2+1,9 24,0+2,1 24,3+3,2 Н/д 19,2+0,9

эритро-цитов 37,7+19,5 18,4+2,2 22,2+2,1 19,1+2,9 Н/д 19,2+1,5 18,8+1,8 17,6+1,4 19,5+1,8 Н/д 26,3+0,9

Супероксиддисмутаза, усл. ед./мл 0,77+0,12 1,12+0,18 0,79+0,16 0,76+0,18 Н/д 0,56+0,11 0,94+0,14 0,69+0,10 0,73+0,13 РЬ2<0,05 1,26+0,07

Церулоплазмин, мг/л 324+20 350+63 336+22 362+16 Н/д 289+16 313+13 314+10 325+19 Н/д 276+5

С-реактивный белок, мг/л 24,6+6,3 47,2+6,3 7,7+1,3 12,3+6,0 Рьз<0,05 28,5+11,4 12,0+2,5 8,5+2,4 5,8+0,6 Рьз<0,005 6,7+0,8

КАОЗ, усл. ед. 0,49+0,11 0,43+0,05 0,69+0,17 0,65+0,13 Н/д 0,72+0,25 0,80+0,14 0,76+0,10 0,55+0,11 Рьз<0,05 Р2_4<0,05 1,5+0,21

о 1=1 сг

Примечание. Р

— достоверность различий между группами.

тов в сыворотке крови больных пиелонефритом, имеющих две почки, и увеличение КАОЗ у них свидетельствуют о больших резервных возможностях данной группы больных в послеоперационном периоде.

Выводы

Полученные результаты исследования указывают на активацию ПОЛ у больных хроническим пиелонефритом единственной почки, на нарушение баланса между про- и антиоксидантной системами.

Бестим, включенный в состав комплексной терапии хронического пиелонефрита в раннем послеоперационном периоде, обладает противовоспалительным действием, уменьшает активность процессов пероксида-ции, не оказывает побочных эффектов и, следовательно, может быть рекомендован в состав комплексной терапии при лечении больных хроническим пиелонефритом единственной почки.

Библиографический список

1. Абрамова М. М. Влияние бестима и бета-лейкина на иммунный статус больных с вторичным иммунодефицитным состоянием при вакцинации против вирусного гепатита/М. М. Абрамова, А С. Симбирцев, И. И. Долгушин//Цитокины и воспаление.— 2004.— Т. 3.— № 4.— С. 29—35.

2. Аль-шукри С. Х. Терапия больных хроническим пиелонефритом/С. Х. Аль-шукри// Урол. и нефр.— 1996.— № 3.— С. 17—20.

3. Заболотных Н. В. Активирующее действие бестима на состояние макрофагов при экспериментальном туберкулезе различной тяжести течения/Н. В. Заболотных//Про-блемы туберкулеза и болезни легких.— 2003.— № 10.— С. 53—56.

4. Зиганшин О. Р. Влияние бестима на иммунологические показатели эякулята у мужчин с хроническими уретритами и простатитами/О. Р. Зиганшин, И. И. Долгушин, А В. Корнеев///Иммунология Урала: Матер. III конф. иммунологов Урала, 2003.— С. 88—90.

5. Зенков Н. К. Окислительный стресс/ Н. К. Зенков, В. З. Лопаткин, Е. Б. Меньшикова.— М.: Медицина, 2001.— 158 с.

6. Калугина Г. В. Хронический пиелонефрит/Г В. Калугина, М. С. Клушанцева, Л. Ф. Шехаб//Урология.— 2001.— № 6.— С. 3—6.

7. Карпов И. А. Особенности патогенеза, клинических проявлений и лечения осложнений после реконструктивно-восстановительных операций: автореф. дис. ... д-ра мед. наук/И. А. Карпов,— Челябинск, 2009.— 257 с.

8. Пепенин С. В. Клинико-морфологические особенности пиелонефрита единственной почки: автореф. дис. ... канд. мед. наук/С. В. Пепенин.— Киев, 2003.— 39 с.

9. Применение полиоксидония в лечении калькулезного пиелонефрита/Н. И. Ка-зенко, В. А. Жмуров, А. А. Боровский и др.// Урология.— 2001.— № 6.— С. 3—6.

10. Семищева А А. Метаболизм фосфолипи-дов и биологические мембраны/А. А Семищева, Ю. П. Козлов.— Иркутск: Изд-во Иркутского университета, 1998.— 88 с.

11. Султанобаев В. Р. Значение функционального состояния антиоксидантной системы в клинико-патологических проявлениях хронического пиелонефрита: автореф. дис. ... канд. мед. наук/В. Р. Султанобаев.— Тюмень, 1993.— 28 с.

12. Тиктинский О. Л. Пиелонефриты/ О. Л. Тиктинский, С. Н. Калинина.— СПб.: Медиа-Пресс, 1996.— 256 с.

методы диагностики и технологии

V. A. Bychkovskikh

immunotherapy influence on lipid peroxidation activity and antioxidant protection in patients with chronic pyelonephritis of solitery kidney in early postoperative period

67 patients with chronic pyelonephritis of the solitary kidney participated in investigation. Product of lipid peroxidation and antioxidant protection content was assessed thrice — before the operation, on the 2nd —3rd day and 9 th—12 th day after the operation. In some patients basic therapy was added by immunomodulator bes-tim on the 2nd—3rd day after the operation; results were estimated on the 9 th—12 th day from the moment of surgical treatment. The obtained

results of investigation demonstrated lipid peroxidation activity, disbalance between pro-and antioxidant reactions. Bestim possesses anti-inflammatory effect, reduces peroxidation activity, has no side effects and can be used in complex therapy for treatment of patients with chronic pyelonephritis of the solitary kidney.

Keywords: solitary kidney, chronic pyelonephritis, operative treatment, lipid peroxidation, immunotherapy.

Контактная информация: Бычковских Владимир Анатольевич, канд. мед. наук, доцент Челябинской государственной медицинской академии, 454092, г. Челябинск, ул. Воровского, 64, тел. 8 (351) 268-32-81

Материал поступил в редакцию 20.08.2010