СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ НЕВРОПАТИЧЕСКОЙ БОЛИ И СВЯЗАННЫХ С НЕЙ СИНДРОМОВ
METHOD OF TREATING NEUROPATHIC PAIN AND ASSOCIATED WITH IT SYNDROMES

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к способам лечения невропатической боли. В частности, настоящее изобретение относится к способам лечения или предупреждения невропатической боли и связанных с ней симптомов посредством введения препарата ибудиласта (ibudilast), далее (3-изобутирил-2-изопропилпиразоло[1,5-a]пиридина).
Уровень техники изобретения
В последние годы тактика борьбы с болью стала сферой повышенного внимания в профессиональной медицине, что отчасти можно объяснить увеличением доли пожилых людей в населении, проблемами, связанными с образом жизни, и ростом числа больных, которые по имеющимся сообщениям страдают от болей. Боль - это и сенсорное и эмоциональное переживание, которое, как правило, связано с повреждением или воспалением тканей. Типично боли подразделяют на две общие категории: острую боль и хроническую боль. Оба вида боли различаются по этиологии, патофизиологии, диагностике и, что наиболее важно, по способам лечения.
Острая боль продолжается недолго и, как правило, бывает обусловлена легко распознаваемой причиной. Пациенты, страдающие острой болью, как правило, дают хорошую ответную реакцию на лекарственные средства. В отличие от этого, при хронической боли, которая по медицинским критериям определяется как боль, продолжающаяся от 3 до 6 месяцев или дольше, часто не удается найти явную патологию в организме, хотя больные на самом деле могут страдать от затяжной боли, которая продолжается в течение месяцев или даже лет после начального повреждения. Если острая боль в основном поддается медикаментозному лечению, то хроническую боль, как правило, лечить намного труднее, и обычно такое лечение требует внимания специалиста. По данным Американской Ассоциации хронической боли более 86 миллионов американцев страдают хроническими болями, а вопросы медицинской стратегии и тактики при хронической боли уже давно отнесены к неудовлетворенным потребностям. В большинстве случаев хроническая боль по своей природе является невропатической (также называемой невралгией). Например, невропатическая боль может проявляться как чувство жжения, прокола или удара.
К сожалению, тактика ведения пациентов с невропатической болью в лучшем случае противоречива и часто малоэффективна. Отчасти это объясняется субъективной природой боли, но также связано с плохой диагностикой, особенно в тех случаях, когда хроническая боль не имеет четкой связи с повреждением нерва или другой органической патологией. Кроме того, если оценивать исторические перспективы, надо признать, что разработано слишком мало лекарственных средств для лечения хронической боли, если таковые вообще существуют. Вместо этого современные лекарственные средства, используемые для лечения хронической боли, “заимствованы” из практики лечения других заболеваний: чаще всего это противоэпилептические лекарственные средства и антидепрессанты.
Лекарственные средства первого ряда для лечения хронической боли включают опиоиды, анальгетики, такие как габапентин, а также трициклические антидепрессанты. При длительном применении опиоидов могут наблюдаться нежелательные побочные эффекты, например толерантность к лекарственному средству, химическая зависимость и даже физиологическое привыкание. Из всех схем лечения хронической боли, используемых в настоящее время, в лучшем случае 30% эффективны, давая значительное облегчение боли, но со временем и их эффективность может утрачиваться. Хотя существует много фармакологических средств для лечения невропатической боли, радикальный метод терапии до сих пор не найден.
В тех случаях, когда лечение одним препаратом оказывается безуспешным, часто пробуют переходить на комбинированную терапию второго ряда. Например, такая комбинированная терапия может заключаться в использовании опиоидного агента вместе с вспомогательным анальгетиком, хотя относительные дозы каждого из лекарственных средств часто являются предметом длительных клинических исследований по методу проб и ошибок. Во многих случаях необходима тройная лекарственная терапия. Такая терапия обычно подразумевает комбинацию трициклического антидепрессанта, противосудорожного средства и системного введения анестетика местного действия. Однако если для лечения необходимо использовать несколько фармакологических средств, то дисциплина пациентов в выполнении врачебных назначений значительно снижается. Недавно были опубликованы результаты рандомизированного научного исследования по использованию комбинации морфина и габапентина для подавления неврогенной боли (Gilron, I., et al., New Eng. J. of Medicine, Vol. 352: 1281-82, No. 13, March 31, 2005).
Кроме того, важно учитывать не только общее облегчение боли, но и тип облегчения боли. Например, хроническая боль в типичном случае рассматривается как аллодиния или гипералгезия. Аллодиния - это ощущение боли при воздействии стимула, который в норме не считается болевым. Обычно аллодиния обусловлена физическим стимулом, в связи с чем она рассматривается как тактильная или механическая аллодиния. Гипералгезия - это ненормально усиленное ощущение боли при воздействии обычного болевого стимула. Гипералгезия наблюдается при воздействии многих стимулов, но чаще всего представляет собой реакцию пациента на тепловые и холодовые стимулы. Важно отметить мнение врачей о том, что современные лекарственные средства более эффективны в облегчении гипералгезии, в то время как большинство больных страдают от аллодинии, особенно механической аллодинии.
Помимо плохой и/или непостоянной эффективности эти препараты обладают несколькими другими нежелательными свойствами, например неблагоприятными побочными эффектами, недостаточной длительностью действия, а также большими сложностями в подборе и титровании доз.
Самый частый побочный эффект неопиумных лекарственных средств - это седативный эффект или сонливость. По данным, которые можно почерпнуть из упаковочных вкладышей таких лекарственных средств, седативный эффект проявляется у 20-30% больных. Как упоминалось выше, самой группой риска, страдающей от хронической боли, являются люди пожилого возраста. Для пожилых людей выраженный и стабильный седативный эффект связан с риском других осложнений, главным образом, с нарушением двигательной функции. Такое нарушение двигательной функции может проявляться частыми падениями и неспособностью выполнять повседневные дела, например управлять автомобилем.
Недостаточная длительность действия также считается ограничением для большинства лекарственных средств. Это особенно важно, поскольку боль, и особенно ночная боль, может привести к депрессии, бессоннице и другим патологическим проявлениям, снижающим общее качество жизни больного. Результаты одного недавнего исследования позволяют думать о том, что для больных с хронической болью, а также сопутствующей большой депрессией и бессонницей характерен самый высокий уровень нарушений, связанных с болью. Кроме того, в этом исследовании было обнаружено, что бессонница при отсутствии большой депрессии также проявляет ассоциацию с сильной физической болью и недомоганием (Wilson et al., Clin. J. Pain. 2002 Mar-Apr; 18(2): 77-83). Следовательно, способность длительно облегчать боли, в том числе в ночное время, - это важный фактор эффективности лекарственных средств от невропатической боли. Лекарственные средства для облегчения боли, в частности габапентин, для достижения лечебного эффекта необходимо принимать один или даже несколько раз в ночное время - это нарушает сон и ухудшает общее качество жизни больных.

И, наконец, подбор дозы основных лекарственных средств, в частности габапентина, может представлять немалые трудности. Например, рекомендуемая стартовая доза габапентина для взрослых при постгерпетической невралгии составляет одноразовый прием 300 мг в 1-й день, 600 мг во 2-й день (2 раза по 300 мг) и 900 мг в 3-й день (3 раза по 300 мг). Если эти дозы не приносят облегчения, возможно последующее титрование суточной дозы до 1800 мг (принимаемой тремя дробными частями в день) вплоть до достижения лечебного эффекта. В проведенных клинических исследованиях по изучению эффективности был продемонстрирован сопоставимый эффект разных доз в диапазоне от 1800 до 3600 мг в день (полная информация по предписанию лекарственного средства Neurontin в США). Примерно столь же сложные схемы подбора доз с аналогичными трудностями характерны для других противоэпилептических лекарственных средств и антидепрессантов - они затрудняют четкое выполнение врачебных предписаний, увеличивая шансы на неправильное дозирование и даже передозировку препаратов. Кроме того, отмена таких лекарственных средств также сопряжена с рядом проблем. Например, в полной информации о предписании Neurontin в США указано следующее: “…При снижении дозы, отмене препарата или его замене на другое лекарственное средство требуются постепенные изменения, занимающие не менее 1 недели”.
Невропатическую боль (НБ) обычно рассматривают как хроническое состояние с нарушением адаптации, при котором источником боли служит патология нервов, причем часто интенсивность боли намного превосходит масштабы этой патологии. Патология нервов может быть обусловлена физическим повреждением, например травмой или химическим повреждением, например, в результате химиотерапии (например, Паклитаксол). Невропатическая боль такого типа - это важный компонент множества синдромов разнообразной этиологии, общим признаком которых является развитие длительного и резко выраженного болевого статуса. К числу таких состояний относятся повреждение спинного мозга, постгерпетическая невралгия, диабетическая невропатия, фантомные боли в конечностях, боли в культе при образовании невромы, постишемическая боль (удар), фибромиалгия, рефлекторная симпатическая дистрофия (РСД), синдром сложных региональных болей (ССРБ), невропатическая боль, индуцированная химиотерапией рака, грыжи межпозвонковых дисков, невралгия тройничного нерва и другие.
Однако недавно было установлено, что невропатическая боль может проявляться и при отсутствии явного повреждения на уровне нервов. К таким состояниям относятся СПИД и боли по типу зеркального отображения. Существование явной хронической боли при отсутствии распознаваемой нервной патологии породило рост интереса к роли глиальных клеток в проявлении невропатического болевого статуса (Watkins and Maier (2004) Drug Disc. Today: Ther. Strategies 1(1): 83-88). В более узком смысле недавние исследования показали, что глиальные клетки способствуют высвобождению нейротрансмиттеров, передающих болевую информацию в спинной мозг, и, что производит еще большее впечатление, выбросу веществ, которые усиливают возбудимость болевых нейронов в спинном мозге. Эти вещества, так называемые провоспалительные цитокины, создают и поддерживают чрезмерную или патологическую болевую реакцию. Блокирование активации глии снижает активность провоспалительных цитокинов и приводит к обратному развитию патологической боли. Пока не существует официально разрешенных к применению лекарственных средств, механизм лечебного действия которых при невропатической боли, предположительно, связан с ослаблением патологических эффектов глии. Молекулы, которые играют роль аттенюаторов глии, могут иметь большое значение для лечения невропатической боли.
Маленькая молекула, ибудиласт, (3-изобутирил-2-изопропилпиразоло[l,5-a]пиридин) является неизбирательным ингибитором циклического нуклеотида фосфодиэстеразы (ФДЭ) (Fujimoto, T., et al., J. of Neuroimmunology, 95 (1999) 35-92). Ибудиласт также действует как антагонист рецепторов LTD4 с противовоспалительным эффектом, антагонист PAF (фактора активации тромбоцитов), и сосудорасширяющий агент (Thompson Current Drug Reports). Полагают, что ибудиласт приводит в действие нейропротективный механизм в центральной нервной системе млекопитающих, по-видимому, через подавление активации глиальных клеток (Mizuno et al. (2004) Neuropharmacology 46: 404-411). Ибудиласт широко используется в Японии для облегчения симптомов, связанных с ишемическим инсультом или бронхиальной астмой. Маркетинговые показания для ибудиласта в Японии включают его применение в качестве вазодилататора, средства для лечения аллергии, регенерации тканей глаза, лечения глазных заболеваний, в том числе аллергических (Thompson Current Drug Reports). В недавних клинических исследованиях изучалось его использование при лечении рассеянного склероза, воспалительного заболевания центральной нервной системы (News.Medical.Net; Pharmaceutical News, 2 Aug 2005). Несмотря на то, что в доступной литературе описано применение ибудиласта по многим показаниям, насколько известно заявителю, его использование для лечения невропатической боли и связанных с ней состояний, включая аллодинию, до сих пор остается практически не исследованным.
В свете вышеуказанных недостатков в современных подходах к лечению хронической боли существует настоятельная потребность в улучшении композиций лекарственных средств и методов лечения боли, в частности невропатической боли и связанных с ней симптомов, особенно невропатической боли, связанной с определенными состояниями, например фибромиалгией, кроме прочего, такие подходы в идеале должны преодолеть одну или более проблем, связанных с существующими методами лечения хронической боли. Данное изобретение соответствует этим потребностям.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Представленное изобретение связано с новым подходом к лечению невропатической боли и основано на неожиданном открытии того факта, что невропатическую боль можно с успехом лечить или предупреждать, применяя ибудиласт. Используя стандартные модели невропатической боли, изобретатели обнаружили, что системное применение ибудиласта эффективно для предупреждения и ослабления, если не полного устранения хронической невропатической боли, например, связанной с разными синдромами. В некоторых случаях применение ибудиласта может обеспечить эффективное лечение состояний, связанных с невропатической болью, которые не поддаются существующим методам терапии. Кроме того, было обнаружено, что ибудиласт эффективен для значительного ослабления механической аллодинии, причем этот эффект продолжается и в ночное время - таким образом ибудиласт имеет значительное преимущество перед существующими лекарственными средствами от хронической боли, в частности габапентином. Столь длительный лечебный эффект нехарактерен для большинства лекарственных средств, применяемых при невропатической боли.
Таким образом, в одном отношении это изобретение создает способ лечения млекопитающих, которые страдают невропатической болью, посредством введения таким субъектам терапевтически эффективного количества ибудиласта.
В одном варианте изобретения этот способ включает стадию выбора млекопитающего, страдающего невропатической болью с последующим введением этому субъекту начальной терапевтической дозы ибудиласта, достаточно эффективной для достижения максимальной концентрации ибудиласта в плазме порядка 100-125 нг/мл и выше, в результате чего субъект будет испытывать облегчение (т.е. или ослабление, или уменьшение, или элиминацию, или обратное развитие невропатической боли).
К млекопитающим, которые могут быть отобраны для такого лечения, относятся субъекты, страдающие постгерпетической невралгией, невралгией тройничного нерва и невропатической болью, сопровождающей любое патологическое состояние из следующей группы состояний: герпес, ВИЧ-инфекция, травматическое повреждение нерва, удар, постишемическое состояние, фибромиалгия, рефлекторная симпатическая дистрофия, синдром сложных региональных болей и невропатическая боль, индуцированная химиотерапией рака.
В одном или более альтернативных вариантов изобретения начальная терапевтическая доза ибудиласта - это такая доза, которая достаточна для достижения максимальной концентрации ибудиласта в плазме 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275 или 300 нг/мл.
Еще в одном варианте этого способа ибудиласт применяется в суточных дозах, варьирующихся от 30 до 200 мг в день или от 30 до 100 мг в день.
Терапевтическая доза может быть достигнута при однократном ежедневном приеме (т.е. в разовой дозе), двукратном ежедневном приеме (т.е. двумя дробными дозами), трехкратном ежедневном приеме или при использовании многократных доз за определенный промежуток времени: несколько дней, несколько недель или даже несколько месяцев. Такое введение типично в течение промежутка времени, достаточного для достижения нужного результата: уменьшения, а в идеальном случае, элиминации или даже обратного развития невропатической боли. Примерные варианты продолжительности лечения: по меньшей мере, около одной недели, от 1 недели до 1 месяца, от двух недель до 2 месяцев, примерно до 6 месяцев, примерно до 12 месяцев и даже дольше. В одном особом варианте изобретения лечение продолжается от примерно 1 недели до примерно 50 недель.
В предпочтительном варианте способа введение лекарственного средства продолжается в течение такого времени, которое позволяет достичь нужного результата, т.е. элиминации невропатической боли.
Еще в одном варианте изобретения введение ибудиласта дает эффект снижения интенсивности невропатической боли, испытываемой субъектом, по меньшей мере, в течение 16 часов после приема лекарственного средства.
В следующем варианте способа введение ибудиласта не сопровождается приемом противорвотного средства.
В следующем варианте способа ибудиласт используется в комбинации, по меньшей мере, еще с одним средством, эффективным при лечении боли. К числу таких лекарственных средств, среди прочих, относятся габапентин, мемантин, прегабалин, морфин и родственные опиаты, каннабиноиды, трамадол, ламотригин, карбамазепин, дулоксетин, милнаципран и трициклические антидепрессанты. В предпочтительном варианте второе лекарственное средство, используемое для лечения невропатической боли, имеет другой механизм действия, нежели ибудиласт.
Еще в одном варианте ибудиласт, применяемый самостоятельно или как часть комбинированной терапии, вводится в организм либо системно, либо центрально (например, интратекально, т.е. в спинномозговую жидкость, окружающую спинной мозг). Такое введение ибудиласта создает новый механизм ослабления патологических болезненных состояний, потенциально связанный с супрессией глиальной активации.
Согласно еще одному варианту изобретения ибудиласт вводится в организм системно, например через внутривенный, подкожный, оральный, интраназальный, сублингвальный или другие системные пути, и применяется для субъектов млекопитающих, например для людей в целях лечения невропатической боли, например невропатического болевого синдрома.
В другом аспекте изобретение предусматривает композицию или комбинацию для лечения невропатической боли. Композиция включает комбинацию следующих компонентов: (i) ибудиласт и (ii), по меньшей мере, один дополнительный агент, эффективный для лечения невропатической боли, причем каждый из компонентов либо входит в единую композицию или дозированную форму (например, смесь), либо представляет собой отдельный объект (например, в наборе).
Композиция в данном изобретении может произвольно включать один или более фармацевтически приемлемых наполнителей.
В следующем аспекте изобретение предусматривает набор, состоящий из комбинации лекарственных средств для лечения невропатической боли или связанного с ней синдрома и включающий (i) ибудиласт и (ii), по меньшей мере, один дополнительный агент, эффективный для лечения невропатической боли, причем эти компоненты могут использоваться одновременно, последовательно или по отдельности.
Имеется в виду, что любой из описанных здесь признаков изобретения применим к любому и каждому из описанных здесь вариантов, если специально не указано иное.
Дополнительные цели, преимущества и новые признаки изобретения будут представлены в последующем описании и отчасти будут очевидными для людей, сведущих в данной области при прочтении, либо могут быть поняты в результате практического использования данного изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
ФИГ.1 представляет период действия лекарственного средства и дозовую зависимость лечебной реакции по ослаблению механической аллодинии при интраперитонеальном (и/п) введении ибудиласта два раза в день с использованием крысиной модели невропатической боли на фоне хронического констриктивного повреждения (ХКП), описанной в примере 1. Боль индицируется по 50% порогу отмены при оценке по волокнам фон Фрея (von Frey). Точки данных отображают средние величины со стандартной ошибкой (+/-). Имитация с 35% ПЭГ в солевом растворе  ХКП 35% ПЭГ400 в солевом растворе  ХКП с 10 мг/кг ибудиласта  ХКП с 7,5 мг/кг ибудиласта  ХКП с 2,5 мг/кг ибудиласта  n=4 на группу при имитации и ≥ 5 на группу при ХКП. *=p < 0,05 по сравнению с векторным контролем по t-критерию Стьюдента.
ФИГ.2 представляет период действия лекарственного средства и дозовую зависимость лечебной реакции по ослаблению механической аллодинии при оральном введении ибудиласта два раза в день с использованием крысиной модели невропатической боли на фоне хронического констриктивного повреждения (ХКП), описанной в примере 1. Боль индицируется по 50% порогу отмены при оценке по волокнам фон Фрея. Точки данных отображают средние величины со стандартной ошибкой (+/-). Имитация с векторным контролем (10% HCO-60, 10% ПЭГ400, солевой раствор) (закрашенный кружок); ХКП с векторным контролем (незакрашенный треугольник); ХКП с 50 мг/кг ибудиласта (закрашенный треугольник). n ≥ 5 на группу. *=p < 0,05 по сравнению с векторным контролем по t-критерию Стьюдента.
ФИГ.3 представляет период действия лекарственного средства и ослабление механической аллодинии при двукратном ежедневном в/б введении ибудиласта на крысиной модели невропатической боли Чанга с определением по 50% порогу отмены при оценке по волокнам фон Фрея. Подробности эксперимента представлены в примере 2. Точки данных включают средние величины с интервалом стандартной ошибки (+/-). Имитация с 35% ПЭГ в солевом растворе  имитация с 10 мг/кг ибудиласта  ХКП с 10 мг/кг ибудиласта  n≥5 на группу.
ФИГ.4A и 4B представляют период действия механической аллодинии на крысиной модели невропатической боли, индуцированной таксолом с определением по 50% порогу отмены. См. пример 3. Ибудиласт вводили два раза в день, а аллодинию измеряли перед утренним введением ибудиласта. ФИГ.4A отображает ослабление аллодинии после полного развития невропатии, индуцированной таксолом. Данные представляют средние показатели аллодинии на обеих задних лапах. Точки данных отображают средние величины со стандартной ошибкой (±): таксол + 35% ПЭГ в солевом растворе  таксол + 7,5 мг ибудиласта (закрашенный кружок). n ≥ 5 на группу для животных с аллодинией и ≥2 на группу для животных в контрольной группе без воздействия таксола. Точки данных по средним величинам в группе ибудиласта на 22-й, 24-й и 25-й день статистически значимо отличаются от векторного контроля по t-критерию Стьюдента. ФИГ.4B представляет материалы другого исследования и отображает предупреждение развития аллодинии в той ситуации, когда лечение ибудиластом (как на ФИГ.4A) начиналось в самой ранней стадии развития невропатии, индуцированной химиотерапией рака (на 12-й день после начала лечения таксолом). Точки данных представляют средние величины со стандартной ошибкой (±) при измерении аллодинии на задней конечности. Контрольные животные (крысы), которым не вводили таксол, но вводили вектор таксола, а затем вектор ПЭГ в солевом растворе (треугольник) или ибудиласт (ромб) сравнивались с крысами, получавшими таксол, а затем ПЭГ/вектор (черный квадрат) или ибудиласт два раза в день из расчета 7,5 мг/кг интраперитонеально (кружок).
ФИГ.5A и 5B представляют фармакокинетику ибудиласта и его распределение в тканях у крыс после интраперитонеального (5A) или орального (5B) введения этого лекарственного средства, как это описано в примере 4. Точки данных представляют среднюю концентрацию ибудиласта в каждой точке времени и в каждой репрезентативной ткани. Плазма и ткани указаны на вставке-легенде к фигуре. N=3 крысы на точку времени. Описаны фармакокинетические параметры нелинейного анализа по программе WinNonlin.
ФИГ.6 представляет иммунохимию глиального фибриллярного кислого белка (GFAP) в поясничном отделе спинного мозга у контрольных крыс с ХКП (вектор) и у животных, получавших ибудиласт. Начиная с восьмого дня после хирургического ХКП, крысы получали ибудиласт (7,5 мг/кг) или векторный контроль (35% ПЭГ в солевом растворе) и/п два раза в день в течение 5 дней. Изображенные слайды представляют результаты обследования 4 животных в каждой группе эксперимента при 40-кратном увеличении. Левая сторона = животное из группы векторного контроля; правая сторона = животное, получавшее ибудиласт.
Подробное описание изобретения
th
th
Практика использования данного изобретения подразумевает, если не указано иное, традиционные методы химии, биохимии и фармакологии при наличии достаточной компетентности в этих областях. Эти методы полностью объясняются в литературе. См., например, A.L. Lehninger, Biochemistry (Worth Publishers, Inc., современное дополнение); Morrison and Boyd, Organic Chemistry (Allyn and Bacon, Inc., современное дополнение); J. March, Advanced Organic Chemistry (McGraw Hill, современное дополнение); Remington: The Science and Practice of Pharmacy, A. Gennaro, Ed., 20 Ed.; Goodman & Gilman The Pharmacological Basis of Therapeutics, J. Griffith Hardman, L.L. Limbird, A. Gilman, 10 Ed.
Таким образом, все цитируемые здесь, как выше, так и ниже, публикации, патенты и патентные заявки включены в описание изобретения во всей своей полноте в качестве ссылки.
Определения
Прежде чем описывать данное изобретение во всех подробностях, необходимо понимать, что оно не ограничивается особыми способами введения, особыми контингентами больных и т.п., поскольку и те, и другие могут меняться, что будет видно далее из сопровождающих описаний и иллюстраций.
Необходимо заметить, что используемые в описании изобретения и в пунктах формулы изобретения формы существительных в единственном числе включают множественные объекты ссылки, если из контекста четко не следует иное. Так, например, ссылка на “лекарственное средство” включает как одно лекарственное средство, так и два или более аналогичных или других лекарственных средств, ссылка на “необязательный наполнитель” относится как к одному наполнителю по выбору, так и к двум или более аналогичных или других наполнителей по выбору и т.п.
В описаниях и составлении формулы данного изобретения будет использована следующая терминология в соответствии с приведенными ниже определениями.
“Фармацевтически приемлемый наполнитель или носитель” - это наполнитель, который может необязательно включаться в композиции, заявленные в данном изобретении, не вызывая у больного значительных неблагоприятных токсикологических эффектов.
Термин “фармацевтически приемлемая соль” включает, но не ограничиваясь ими, соли аминокислот, соли, приготовленные на основе неорганических кислот, такие как хлорид, сульфат, фосфат, дифосфат, бромид и нитрат, либо соли, приготовленные из соответствующей неорганической кислоты в любой из вышеуказанных форм, например гидрохлорид и т.д., либо соли, приготовленные на основе органических кислот, например малат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, этилсукцинат, цитрат, ацетат, лактат, метансульфонат, бензоат, аскорбат, паратолуолсульфат, пальмоат, салицилат и стеарат, а также эстолат, глуцептат и лактобионат. Сходным образом, соли, содержащие фармацевтически приемлемые катионы, включают, но не ограничиваясь ими, натрий, калий, кальций, алюминий, литий и аммоний (в том числе, замещенный аммоний).
Термины “активная молекула” или “активный агент” в данном тексте подразумевают любой агент, лекарственное средство, соединение, композицию вещества или смесь, производящие определенный, часто полезный, фармакологический эффект, который может быть продемонстрирован in vivo или in vitro. К таковым относятся пищевые продукты, пищевые добавки, питательные вещества, пищевые продукты с включенными в композиции добавками, лекарственные средства, вакцины, антитела, витамины и другие полезные агенты. В данном тексте эти термины означают любое физиологически или фармакологически активное вещество, производящее местный или системный эффект в организме пациента.
Термины “по существу ” или “главным образом” означают почти полное количество, например 95% и более.
Термины “необязательный” или “необязательно” означают, что описанный вслед за ними факт может произойти или не произойти, таким образом, описание включает такие случаи, когда факт происходит, и такие случаи, когда факт не происходит.
Термин “патологическая боль” означает любую боль, причина которой носит характер патологии, например функциональные расстройства и/или патологические изменения, повреждения, ожоги и т.п. Одна из форм патологической боли - это “невропатическая боль”, которая представляет собой боль, изначально связанную с повреждением нерва, но продолжающуюся или осложняющуюся под воздействием других механизмов, включая активацию глиальных клеток. Примеры патологической боли включают, но не ограничиваясь ими, термическую или механическую гипералгезию, термическую или механическую аллодинию, диабетическую боль, боль, возникающую из-за раздраженного кишечника или других заболеваний внутренних органов, боль при эндометриозе, фантомные боли в конечностях, синдромы сложной региональной боли, фибромиалгию, боль в нижней части спины, раковую боль, боль в результате инфекции, воспаления или травмы периферических нервов либо центральной нервной системы, боль при рассеянном склерозе, боль при ущемлении и т.п.
Термин “гипералгезия” означает чрезмерно усиленное ощущение боли, т.е. боль в результате повышенной болевой чувствительности. Примеры гипералгезии включают, но не ограничиваясь ими, холодовую или тепловую гипералгезию.
“Гипалгезия” (или “гипоалгезия”) - это пониженное ощущение боли.
“Аллодиния” - это боль, возникающая в результате воздействия нормального (не вредного) стимула на кожу или на поверхность тела. Примеры аллодинии включают, но не ограничиваясь ими, холодовую или тепловую аллодинию, тактильную или механическую аллодинию и т.п.
“Ноцицепция” определяется в этом тексте как чувство боли. Термином “ноцицептор” в этом тексте определяется структура, опосредующая ноцицепцию. Ноцицепция может представлять собой результат воздействия физического стимула, например механического, электрического, термического или химического. Ноцицепторы представлены практически во всех тканях организма.
“Аналгезия” в этом тексте определяется как обезболивание без потери сознания. “Анальгетик” - это агент или лекарственное средство, способное облегчать боль опять-таки без потери сознания.
Термин “центральная нервная система” или “ЦНС” означает совокупность всех клеток и тканей головного и спинного мозга позвоночных. Таким образом, этот термин включает, но не ограничиваясь ими, нейронные клетки, глиальные клетки, астроциты, спинномозговую жидкость (СМЖ), интерстициальные пространства и т.п.
“Глиальные клетки” - это различные клетки ЦНС, также известные под названиями микроглия, астроциты и олигодендроциты.
Термины “субъект”, “индивид” или “пациент ” используются в этом тексте взаимозаменяемо для обозначения позвоночных, преимущественно, млекопитающих. Млекопитающие включают, но не ограничиваясь ими, мышиных, грызунов, обезьян, человека, сельскохозяйственных животных, спортивных животных и домашних животных.
Термины “фармакологически эффективное количество” или “терапевтически эффективное количество” композиции или агента в этом тексте обозначают нетоксическое, но достаточное для достижения нужной лечебное реакции, в частности уменьшения или обратного развития невропатической боли, количество лекарственной композиции или агента. Точное количество, необходимое для достижения этой цели, подвержено индивидуальной вариабельности от субъекта к субъекту в зависимости от биологического вида, возраста и общего состояния здоровья субъекта, от тяжести состояния, по поводу которого проводится лечение, от конкретного лекарственного средства или лекарственных средств, используемых с этой целью, от способа введения в организм и т.п. Соответствующее “эффективное” количество в каждом конкретном случае может быть определено на основе обычной компетентности в данной области с использованием стандартного экспериментального подхода и информации, изложенной в этом тексте.
Термин “около” (примерно), особенно в отношении данного количества, означает допустимое отклонение на пять процентов в сторону увеличения или уменьшения.
“Лечение” или “терапия” невропатической боли включает (1) предупреждение боли, т.е. предотвращение развития боли или ее развитие с меньшей интенсивностью у субъекта, предрасположенного к боли, но пока еще не испытывающего боли, (2) подавление боли, т.е. приостановка развития или обратное развитие боли или (3) облегчение боли, т.е. уменьшение боли, испытываемой субъектом, в количественном измерении.
Под “лечением существующей боли” подразумевается смягчение, ослабление или обратное развитие невропатической боли у субъекта, который испытывает боль на протяжении, по меньшей мере, 24 часов, 24-96 часов и более, например, 25 … 30 … 35 … 40 … 45 … 48 … 50 … 55 … 65 … 72 … 80 … 90 … 96 … 100 и т.д. часов.
Методы лечения невропатической боли
Как было описано выше, заявители открыли, что ибудиласт удивительно эффективен при лечении невропатической боли, например невропатической боли, связанной с определенными синдромами, в частности с вирусными невралгиями (герпес, СПИД), с диабетической невропатией, с фантомными болями в конечностях, с болями в культе/невромами, с постишемической болью (удар), с фибромиалгией, с рефлекторной симпатической дистрофией (РСД), с синдромом сложных региональных болей (ССРБ), с раковыми болями, с грыжами межпозвонковых дисков, с невралгией тройничного нерва, с невропатической болью, индуцированной химиотерапией рака и т.п. Основываясь на результатах исследований с использованием стандартных моделей боли, как это описано в данном тексте, заявители обнаружили, что введение ибудиласта в разных количествах и не слишком часто, например один раз в день, дает удивительный эффект, обеспечивая вполне измеримое снижение тяжести невропатической боли и, особенно, измеримое снижение тяжести, если не обратное развитие определенных типов невропатической боли, такой как механическая аллодиния. Дополнительные признаки изобретения описаны в этом документе.
Ибудиласт
Способы лечения невропатической боли, предлагаемые данным изобретением, основаны на введении молекулы ибудиласта. Ибудиласт - это молекула соединения с небольшой молекулярной массой (230,3), имеющая структуру, которая показана ниже.
14
18
2

Ссылки на ибудиласт также содержатся в банке данных ChemBank ID 3227, CAS # 50847-11-5 и в справочнике Beilstein под ссылочным номером 5-24-03-00396. Молекулярная формула ибудиласта: CHNO. Ибудиласт также известен под разными химическими названиями, включая 2-метил-1-(2-(1-метилэтил)пиразоло(1,5-a)пиридин-3-ил)-1-пропанон; 3-изобутирил-2-изопропилпиразоло(1,5-a)пиридин и 1-(2-изопропил-пиразоло[1,5-a]пиридин-3-ил)-2-метилпропан-1-он. Другие синонимы ибудиласта включают Ибудиластум (Ibudilastum - латинское название), BRN 0656579, KC-404, MN-166. Синонимическое торговое название ибудиласта - Ketas. Подразумевается, что ибудиласт, упоминаемый в данном тексте, включает любую фармацевтически приемлемую солевую пролекарственную форму (например, соответствующий кеталь), сольваты и т.п. в соответствии с указаниями по введению в предназначенной форме.
2+
Ибудиласт - это неизбирательный нуклеотидный ингибитор фосфатдиэстеразы (ФДЭ) с наибольшей активностью в отношении ФДЭ-3 и ФДЭ-4, кроме того, по имеющимся данным, он обладает антагонистической активностью в отношении LTD4 и фактора активации тромбоцитов. Его профиль выглядит эффективно противовоспалительным и уникальным по сравнению с другими ингибиторами ФДЭ и противовоспалительными средствами. ФДЭ катализирует гидролиз фосфодиэфирной связи 3'-углерода с образованием соответствующего 5'-нуклеотидного монофосфата. Таким образом регулируется клеточная концентрация циклических нуклеотидов. Поскольку внеклеточные рецепторы многих гормонов и нейротрансмиттеров используют циклические нуклеотиды в качестве вторичных мессенджеров (посредников), ФДЭ также регулирует ответную реакцию клеток на эти внеклеточные сигналы. Существует, по меньшей мере, восемь классов ФДЭ: Ca/кальмодулинзависимые ФДЭ (ФДЭ1); цГМФ-стимулируемые ФДЭ (ФДЭ2); цГМФ-ингибируемые ФДЭ (ФДЭ3); цАМФ-специфические ФДЭ (ФДЭ4); цГМФ-связывающие ФДЭ (ФДЭ5); фоторецепторные ФДЭ (ФДЭ6); цАМФ-специфические ФДЭ с высоким сродством (ФДЭ7) и цГМФ-специфические ФДЭ с высоким сродством (ФДЭ9). Ибудиласт подавляет воспаление, действуя на воспалительные клетки (например, глиальные клетки) и приводя к супрессии выброса как провоспалительных, так и нейроактивных медиаторов. К вышеупомянутому относятся следующие ссылки: Obernolte, R., et al. (1993) "The cDNA of a human lymphocyte cyclic-AMP phosphodiesterase (PDE IV) reveals a multigene family" Gene 129: 239-247; Rile, G., et al. (2001) "Potentiation of ibudilast inhibition of platelet aggregation in the presence of endothelial cells" Thromb. Res. 102: 239-246; Souness, J.E., et al. (1994) “Possible role of cyclic AMP phosphodiesterases in the actions of ibudilast on eosinophil thromboxane generation and airways smooth muscle tone” Br. J. Pharmacol. Ill: 1081-1088; Suzumura, A., et al. (1999) "Ibudilast suppresses TNFα production by glial cells functioning mainly as type III phosphodiesterase inhibitor in CNS" Brain Res. 837: 203-212; Takuma, K., et al. (2001) "Ibudilast attenuates astrocyte apoptosis via cyclic GMP signaling pathway in an in vitro reperfusion model" Br. J. Pharmacol. 133: 841-848.
Как было указано выше, ссылки на любые описанные здесь лекарственные средства (одно или более), в особенности на ибудиласт, охватывают там, где это применимо, любые энантиомеры и смеси энантиомеров, включая рацемические смеси, пролекарства, фармацевтически приемлемые солевые формы, гидраты (например, моногидраты, дигидраты и т.д.), сольваты, разные физические формы (например, кристаллические твердые вещества, аморфные сухие вещества), метаболиты и т.п.
Способ введения
max
max
max
Как было указано выше, данное изобретение направленно на способ лечения млекопитающих, страдающих от невропатической боли, путем введения терапевтически эффективной дозы ибудиласта. Такое введение эффективно для снижения тяжести боли, испытываемой субъектом, т.е. для ослабления или даже обратного развития невропатической боли, что демонстрируют сопровождающие примеры. Ибудиласт предпочтительно вводят в начальной дозе, эффективной для достижения его максимальной концентрации в плазме (C), по меньшей мере, 100 нг/мл, 125 нг/мл, 150 нг/мл, 175 нг/мл, 200 нг/мл, 225 нг/мл, 250 нг/мл, 300 нг/мл и выше. В предпочтительном варианте изобретения ибудиласт вводят в дозе, эффективной для достижения C не менее 125 нг/мл. Еще более предпочтительно вводить ибудиласт в начальной терапевтической дозе, которая коррелируется с обнаруживаемой эффективностью и ассоциирована с C, по меньшей мере, порядка 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700 или 1800 нг/мл и выше.
Способ, связанный с данным изобретением, в некоторых случаях включает стадию подбора субъекта, страдающего невропатической болью, причем эта стадия предшествует лечению субъекта ибудиластом. Такие субъекты в типичном случае отбираются из числа субъектов, страдающих постгерпетической невралгией, невралгией тройничного нерва и невропатической болью, ассоциированной с состоянием, которое относится к группе состояний, включающей герпес, ВИЧ, травматическое повреждение нерва, удар, постишемию, фибромиалгию, рефлекторную симпатическую дистрофию, синдром сложных региональных болей, повреждение спинного мозга, фантомные боли в конечностях, рассеянный склероз, ишиалгию и невропатическую боль ракового происхождения, либо индуцированную противораковой химиотерапией. В некоторых случаях отобранный для лечения субъект, который страдает невропатической болью, принадлежит к числу субъектов с нормальной природной выработкой инсулина (т.е. не болен диабетом).
Как можно увидеть из сопровождающих примеров, способ, предлагаемый данным изобретением, эффективен не только для значительного ослабления невропатической боли, например механической аллодинии, но даже для ее обратного развития. Вскоре после начала лечения ибудиластом его введение в терапевтически эффективной дозе демонстрирует стабильный лечебный эффект: облегчение боли носит стойкий и длительный характер. Таким образом, в отличие от многих других лекарственных средств против невропатической боли, представленных на современном фармацевтическом рынке, ибудиласт дает стойкий лечебный эффект по ослаблению невропатической боли, который продолжается всю ночь. Например, терапевтически эффективная доза ибудиласта дает лечебный эффект в отношении невропатической боли, который продолжается, по меньшей мере, 4 часа, 6 часов, 8 часов, 10 часов, 12 часов, 16 часов, 18 часов и даже 20 часов или более. Такая эффективность ибудиласта при его оральном введении один раз в сутки, которая наблюдалась в исследованиях на животных и которая ожидается применительно к человеку, исходя из фармакокинетических проекций формы ибудиласта с длительным высвобождением, весьма маловероятна при использовании обычной формы ибудиласта с рекомендованной частотой (два или три раза в день) по существующим клиническим показаниям.
Ибудиласт также можно применять в комбинации с каким-либо дополнительным средством, эффективным при лечении невропатической боли. В предпочтительном варианте изобретения механизм действия такого дополнительного средства принципиально отличается от механизма действия ибудиласта. Примерами таких лекарственных средств являются габапентин, мемантин, прегабалин, морфин и родственные опиаты, каннабиноиды, трамадол, ламотригин, лидокаин, карбамазепин, дулоксетин, милнаципран и трициклические антидепрессанты. Как отмечено в примере 1, введение ибудиласта в комбинации с типичным обезболивающим лекарственным средством, морфином, не сопровождается снижением лечебной эффективности каждого из лекарственных средств: ибудиласт не снижает опиатного обезболивающего эффекта морфина, а морфин не снижает лечебный эффект ибудиласта. Комбинированная терапия обладает такой лечебной эффективностью, которая превосходит известные эффекты каждого из лекарственных средств, применяемого в одиночку.
Как показано в примере 3, эффективность ибудиласта заключается не только в ослаблении невропатии, индуцированной противораковой химиотерапией, но и в том, что он предупреждает развитие такой невропатии. Примерами химиотерапевтических средств, способных вызывать невропатию у раковых больных, являются таксол, винбластин и винкристин. Введение ибудиласта эффективно для ослабления или обратного развития невропатической боли, связанной с химиотерапией рака такими лекарственными средствами.
Еще одно достоинство данного изобретения заключается в том, что введение ибудиласта в терапевтически эффективной дозировке для лечения невропатической боли удивительным образом позволяет избежать связанной с такой терапией рвоты у пациентов, которая могла бы ожидаться при использовании рекомендованных терапевтических доз. В соответствии с этим в одном из вариантов изобретения применение ибудиласта не сопровождается приемом противорвотного средства. Т.е. исходя из результатов, полученных на животных моделях, ожидается, что в определенных случаях лечебный эффект у человека будет наблюдаться при таких схемах дозирования ибудиласта, которые вообще не вызывают рвоты или могут вызывать ее в начале лечения (например, после введения нескольких начальных доз ибудиласта), но по завершении этого начального периода (длящегося 1, 2, 3, 4 или 5 дней), рвота перестает быть проблемой.
Способ лечения, основанный на данном изобретении, имеет дополнительное преимущество перед существующими методами терапии невропатической боли, поскольку другие современные препараты для лечения невропатической боли обладают выраженным седативным побочным эффектом, в то время как ибудиласт не обладает таким эффектом.
Предпочтительные способы доставки ибудиласта в организм для лечения невропатической боли включают системную или локализованную доставку, т.е. прямую доставку в центральную нервную систему. Такие способы включают, но не ограничиваясь ими, оральный, внутриартериальный, интратекальный (внутриоболочечный), интраспинальный (внутриспинномозговой), внутримышечный, интраперитонеальный (внутрибрюшинный), внутривенный, интраназальный и ингаляционный пути.
В частности, лекарственную форму на основе ибудиласта, рекомендуемую в данном изобретении, можно вводить в лечебных целях любым подходящим способом без ограничений, включая оральный, ректальный, назальный, топический (включая чрескожный, аэрозольный, буккальный и сублингвальный), вагинальный, парентеральный (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный и внутрикожный), интратекальный и пульмональный. Разумеется, предпочтительный способ введения варьируется в зависимости от состояния и возраста реципиента, от конкретного синдрома невралгии и от специфической комбинации используемых лекарственных средств.
Предпочтительный способ введения ибудиласта - это его прямая доставка в нервную ткань, в частности в периферические нервы, сетчатку, ганглии заднего корешка, нервно-мышечное соединение, а также в ЦНС, в частности в целевые глиальные клетки спинного мозга посредством инъекции, например, в вентрикулярную область, а также в полосатое тело (в частности, в хвостатое ядро или в путамен полосатого тела), в спинной мозг и нервно-мышечное соединение при помощи иглы, катетера или подобного устройства с использованием общепринятых нейрохирургических методик, в частности стереотаксической инъекции (см., например, Stein et al., J. Virol. 73: 3424-3429, 1999; Davidson et al., PNAS 97: 3428-3432, 2000; Davidson et al., Nat. Genet. 3: 219-223, 1993; и Alisky and Davidson, Hum. Gene Ther. 11: 2315-2329, 2000).
Наиболее предпочтительный способ доставки лекарственного средства в целевые клетки спинномозговой глии - это, скорее, его интратекальное введение, чем непосредственное введение в ткань спинного мозга.
Еще один предпочтительный способ введения лекарственной композиции на основе ибудиласта, предлагаемый в данном изобретении, - это его доставка в нейроны ганглиев задних корешков (ГЗК), в частности, посредством инъекции в эпидуральное пространство с последующей диффузией в ГЗК. Например, лекарственную композицию на основе ибудиласта можно вводить в организм посредством интратекального канюлирования при условии диффузии ибудиласта в ГЗК. См., например, Chiang et al., Acta Anaesthesiol Sin. (2000) 38: 31-36; Jain, К.K., Expert Opin. Investig. Drugs (2000) 9: 2403-2410.
Еще один способ введения лекарственного средства в ЦНС основан на системе доставки с усилением конвекции (CED). При таком способе введения ибудиласт может попадать в многочисленные клетки в самых обширных областях ЦНС. Для введения ибудиласта можно использовать любое устройство, усиливающее конвекцию. В предпочтительном варианте такое устройство представляет собой осмотический насос или инфузионный насос. Как осмотические, так и инфузионные насосы поступают в продажу от разных поставщиков, например от корпорации Alzet, корпорации Hamilton, Alza, Inc., Пало-Альто, Калифорния. В типичном варианте лекарственная композиция на основе ибудиласта, предлагаемая данным изобретением, вводится при помощи устройства CED следующим образом. Катетер, канюли или другое инъекционное устройство вводят в ткань ЦНС субъекта, выбранного для лечения. Стереотаксические карты и устройства для позиционирования выпускаются, например, компанией ASI Instruments, Уоррен, Мичиган. Позиционирование также можно проводить при помощи анатомических карт, полученных на основе КТ и/или МРТ, что помогает точнее вводить инъекционное устройство в выбранную целевую точку. Подробное описание доставки лекарственных средств при помощи технологии CED приведено в патенте США № 6309634, полностью включенном в этот документ в качестве ссылки.
Если лекарственная композиция ибудиласта, предложенная в данном изобретении, содержит более одного активного агента, ее можно вводить в виде единой смеси, содержащей комбинацию ибудиласта и, по меньшей мере, еще одного активного средства, эффективного при лечении невропатической боли. С точки зрения дисциплины пациентов и простоты применения, такой подход предпочтителен, поскольку пациенты часто негативно настроены по отношению к приему множества разных таблеток или лекарственных форм, что иногда приходится делать по несколько раз в день на протяжении всего курса лечения. Альтернативный, хотя и менее предпочтительный способ применения лекарственных средств в данном изобретении заключается в параллельном приеме разных лекарственных форм. В тех случаях, когда лекарственные средства, входящие в терапевтическую композицию, предлагаемую данным изобретением, вводятся в виде разных лекарственных форм и требуется их сопутствующее применение, ибудиласт и каждое из дополнительных лекарственных средств можно вводить в организм или одновременно, или последовательно (в любом порядке), или раздельно.
Дозировки
Терапевтические дозы, которые можно определить эмпирически, могут варьироваться в зависимости от конкретного состояния, подлежащего лечению, от индивидуальных особенностей субъекта, а также от эффективности и токсичности каждого из активных агентов, входящих в композицию. Фактическая вводимая доза будет варьироваться в зависимости от возраста, веса и общего состояния субъекта, а также от тяжести состояния, по поводу которого проводится лечение, от экспертной оценки лечащего врача и от конкретной комбинации лекарственных средств, назначенных пациенту.
Терапевтически эффективные дозы лекарственных средств определяются специалистами, компетентными в данной области, и подбираются по индивидуальной потребности в каждом конкретном случае. В целом, терапевтически эффективное количество ибудиласта, имея в виду общую суточную дозу при ежедневном применении, может изменяться в следующих пределах: от примерно 0,1 до 200 мг в день, более предпочтительно 1-200 мг в день, 30-200 мг в день, 1-100 мг в день, 30-100 мг в день, 30-300 мг в день, 1-60 мг в день, 1-40 мг в день или 1-10 мг в день, причем возможно введение ибудиласта как в разовой суточной дозе, так и в виде нескольких дробных доз в течение дня. Предпочтительные дозы превышают уровень 10 мг × 2 или 3 раза в день. Иначе говоря, предпочтительная общая суточная доза ибудиласта превышает 20 мг или 30 мг при ежедневном применении. Суточную дозу ибудиласта можно выбирать из следующих вариантов: 30 мг в день, 40 мг в день, 50 мг в день, 60 мг в день, 70 мг в день, 80 мг в день, 90 мг в день, 100 мг в день и выше. В зависимости от выбранной суточной дозы и конкретного состояния, по поводу которого проводится лечение, лекарственное средство можно вводить один, два или три раза в день на протяжении нескольких дней, недель, месяцев и даже лет, а иногда и на протяжении всей жизни больного. Типичные схемы лечения имеют продолжительность, по меньшей мере, около недели, от примерно 1 до 4 недель, от 1 до 3 месяцев, от 1 до 6 месяцев, от 1 до 50 недель, от 1 до 12 месяцев или более.
Говоря более конкретно, разовая доза любой композиции, предлагаемой в данном изобретении, или активного агента может быть использована в разных схемах и графиках в зависимости от экспертной оценки лечащего врача, потребностей пациента и т.д. Специфический график дозирования будет хорошо известен специалистам с обычным уровнем компетентности в данной области или может быть определен экспериментально при помощи обычных стандартных методов. Типичные дозовые графики терапии включают следующие варианты: без ограничения, введение пять раз в день, четыре раза в день, три раза в день, два раза в день, один раз в день (при ежедневном применении), а также через день, три раза в неделю, два раза в неделю, один раз в неделю, два раза в месяц, один раз в месяц и т.д.
Подходы к лечению невропатической боли
Современные методы обезболивающей терапии нацелены, прежде всего, на нейроны, которые играют роль реле при передаче болевых сигналов. Эти нейроны представляют собой часть давно описанного и эволюционно консервативного пути у позвоночных, который передает сигналы с периферии в соматосенсорную кору. В научной литературе накапливаются предположительные данные о том, что нейроны - это не единственное звено в развитии постоянных болевых состояний (Watkins and Maier (2003) Nat. Rev. Drug Discov. 2: 973-85). На хорошо отработанных животных моделях было установлено, что глиальные клетки (микроглия и астроциты) являются ключевыми звеньями в развитии невропатической боли (Wieseler-Frank et al. (2004) Neurochem. Int. 45: 389-95), причем их участие подразумевается и в патогенезе невропатической боли у человека (Watkins and Maier (2002) Physiol. Rev. 82: 981-1011).
Активация глии происходит под воздействием разных стимулов, таких как иммунные провокации, инфекция и/или периферическое воспаление и вещества, высвобождаемые при пролонгированной межнейронной трансмиссии (в частности, нейротрансмиттеры, субстанция P, фракталкин и т.д.). В результате активации функция глии значительно изменяется, что сопровождается усиленным высвобождением нейроактивных веществ. Эти вещества также увеличивают прирост нервной трансмиссии, усиливая афферентные сигналы и, таким образом, обостряя болевые ощущения.
Данные экспериментальных исследований показали, что активация глии и последующие за ней события играют ключевую роль при попытках облегчения боли у экспериментальных животных. Например: (i) введение провоспалительных цитокинов (активаторов глии), в частности интерлейкина-1β (IL-1β) или α-фактора тканевого некроза (TNFα), обостряют существующие невропатии; (ii) фармакологическая блокада глиальной активации блокирует и/или реверсирует облегчение боли в каждой изученной животной модели; (iii) облегчение боли может быть блокировано и/или реверсировано за счет антагонизма нейроактивных веществ, высвобождаемых активированной глией; (iv) болевые реакции у здоровых животных не изменяются ни при блокаде глиальной активации, ни в результате антагонизма провоспалительных продуктов; (v) глиальные клетки также высвобождают другие нейроактивные вещества, включая провоспалительные цитокины, возбуждающие аминокислоты и простагландины, которые могут усиливать невропатическую боль.
Ибудиласт - это мощный супрессор глиальной активации (Mizuno et al. (2004) Neuropharmacology 46: 404-411). Установлено, что ибудиласт с эффектом дозовой зависимости подавляет выработку оксида азота (NO), реактивных разновидностей кислорода, интерлейкина (IL)-1β, IL-6 и фактора опухолевого некроза (TNF) и в то же время усиливает в активированной микроглие выработку ингибиторного цитокина, IL-10 и дополнительных нейротрофных факторов, включая фактор роста нервов (NGF), глиальный нейротрофный фактор (GDNF) и нейротрофин (НТ)-4. Таким образом, было установлено, что опосредованная ибудиластом нейропротекция связана, главным образом, с ингибированием воспалительных медиаторов и повышающей регуляцией нейротрофных факторов.
При системном введении ибудиласт проникает через гемато-энцефалический барьер (Sugiyama et al. (1993) No To Shinkei 45(2): 139-42; фиг.5), таким образом снимая потребность в более инвазивных способах введения, чтобы обеспечить доступ к центральным участкам воспаления, вовлеченным в патогенез невропатической боли. К числу других известных соединений, способных ослаблять глиальную активацию, относятся флуороцитрат и миноциклин, которые продемонстрировали свою эффективность на экспериментальных моделях невропатической боли у грызунов. Однако оба препарата неприемлемы для лечения людей. Флуороцитрат нельзя применять для людей, поскольку он может блокировать глиальное поглощение возбуждающих аминокислот (Berg-Johnsen et al. (1993) Exp. Brain Res. 96(2): 241-6), важную функцию глии в поддержании нормального гомеостаза ЦНС. Миноциклин, хотя и потенциально полезен в предупреждении глиальной активации, по-видимому, не реверсирует существующее облегчение глиальной боли (Raghavendra et al. (2003) J. Pharmacol. and Exp. Therapeutics 306: 624-630). Следовательно, представленное здесь открытие эффективности ибудиласта при невропатической боли при системном введении на хорошо переносимом дозовом уровне является основой уникальной терапии.
Взятые вместе глия и ее провоспалительные продукты могут предоставить возможности для разработки новых стратегий в борьбе с болью. Из всех веществ, высвобождаемых активированной глией, критическое значение для этого типа облегчения боли имеют провоспалительные цитокины (особенно IL-10 и TNFα). Таким образом, в соответствии с еще одним вариантом изобретения введение ибудиласта эффективно для блокирования выброса провоспалительных цитокинов.
Модели боли
Способность ибудиласта лечить невропатическую боль можно оценить при помощи любой стандартной модели боли, известной в данной области. Примеры таких моделей приведены ниже.
Модель индуцированной каррагенаном гипералгезии лап у животных
: Тест с каррагенаном на гипералгезию лап представляет собой модель воспалительной боли. Подкожную инъекцию каррагенана проводят в левую заднюю лапу крыс. Крысам вводят выбранное для тестирования лекарственное средство или до инъекции каррагенана, например за 30 минут, или после инъекции каррагенана, например через два часа. Затем, через три часа после инъекции каррагенана, у каждого животного с помощью аналгезиметра исследуют чувствительность лап к давлению. См. Randall et al., Arch. Int. Pharmacodyn. (1957) 111: 409-419.
166
При помощи этого теста можно изучать эффекты избранных лекарственных агентов в отношении индуцированного каррагенаном отека лап. Этот тест (см. Vinegar et al., J. Phamacol. Exp. Ther. (1969) : 96-103) позволяет оценить способность испытуемого соединения поворачивать вспять или предупреждать формирование отека, вызываемого инъекцией каррагенана в лапу. Тест на отек лап проводят с использованием плетизмометра для измерения лап. После введения выбранного агента раствор каррагенана вводят подкожной инъекцией в латеральную подушечку стопы на подошвенной поверхности левой задней лапы. Через три часа после инъекции каррагенана при помощи плетизмометра измеряют объем обработанной лапы (левой) и объем необработанной лапы (правой).
Филаментный тест фон Фрея
: Влияние соединений на механическую аллодинию можно определить при помощи филаментного теста фон Фрея у крыс с тугим лигированием спинального нерва L-5: на модели болевой периферической невропатии. Хирургическую процедуру проводят в соответствии с описанием Kim et al., Pain (1992) 50: 355-363. Для оценки механической аллодинии используют калиброванную серию волокон фон Фрея (Chaplan et al., J. Neurosci. Methods (1994) 53: 55-63). Волокна повышенной жесткости прикладывают перпендикулярно к среднеподошвенной поверхности в зоне распределения ветвей седалищного нерва на левой задней лапе. Волокна медленно вдавливают до появления их изгиба, а затем удерживают в течение 4-6 секунд. Порядок наложения волокон и число попыток определяют по методу Диксона вверх-вниз (Chaplan et al., выше). Позитивным ответом считаются вздрагивание, облизывание и отдергивание лапы со стороны наложения лигатуры.
Хроническое констриктивное повреждение
: У крыс с хроническим констриктивным повреждением (ХКП), как это описано ниже, можно оценивать реакции по типу тепловой и холодовой аллодинии, а также ощущения механической аллодинии. Одностороннюю мононевропатию у крыс можно вызвать, используя модель хронического констриктивного повреждения, описанную в публикации Bennett et al., Pain (1988) 33: 87-107. ХКП у крыс, находящихся в состоянии анестезии, вызывают следующим образом. Латеральную поверхность каждой задней лапы крыс выбривают и отшелушивают нолвасаном. Используя асептическую методику, на латеральной поверхности задней лапы в середине бедра делают надрез. Двуглавую мышцу бедра тупо расслаивают, обнажая седалищный нерв. На правой задней лапе у каждой крысы накладывают четыре тугие лигатуры (например, из хромового кетгута 4,0; Ethicon, Johnson & Johnson, Сомервилл, Нью-Джерси), расположенные вокруг седалищного нерва на расстоянии друг от друга около 1-2 мм. На левой стороне у каждой крысы делают идентичный разрез за тем исключением, что лигатуры на седалищный нерв не накладывают (контрольная имитация). Расслоенную мышцу закрывают непрерывным швом, например 4-0 Викрил (Johnson & Johnson, Сомервилл, Нью-Джерси), а кожный разрез закрывают раневыми скобками. В целях идентификации крыс метят ушными бирками, после чего их возвращают в вольер для животных.
Модель невропатической боли у крыс Чанга
: У крыс с повреждением спинального нерва (например, лигированием, поперечным рассечением), как это описано ниже, можно оценивать реакции по типу тепловой и холодовой аллодинии, а также ощущения механической аллодинии. Подробности этой методики исходно были описаны в публикации SH Kim and JM Chung, Pain (1992) 50: 355-363.
Тест Харгривза
: Тест Харгривза (Hargreaves et al., Pain (1998) 32: 77-88) также представляет собой модель боли, вызываемой лучистым теплом. Крыс с ХКП тестируют на тепловую гипералгезию по меньшей мере через 10 дней после операции. Аппарат для тестирования представляет собой конструкцию с приподнятой стеклянной платформой, нагревающейся до 80-82°F. За один раз восемь крыс, представляющих все группы тестирования, помещают под индивидуальные перевернутые пластмассовые колпаки на стеклянный пол платформы по меньшей мере за 15 минут до проведения теста. Источник лучистого тепла, размещенный под стеклом, направляет излучение на подошвенную поверхность задних лапок каждой крысы. Подача теплового излучения продолжается до тех пор, пока крыса не начинает отдергивать лапки (время ожидания болевой реакции), или пока не проходит 20 секунд. Такой же тест проводится и на контрольной имитации оперированной конечности. На каждой лапке попеременно проводят от двух до четырех пробных попыток с интервалом между ними по меньшей мере 5 минут. Средняя величина по всем попыткам и представляет собой время ожидания болевой реакции (отдергивания лапки).
Холодовая модель аллодинии
: Конструкция аппарата и методики поведенческого тестирования подробно описаны в публикации Gogas et al., Analgesia (1997) 3: 111-118. Аппарат для тестирования холодовой аллодинии у крыс с невропатией (ХКП) состоит из плексигласовой камеры с металлической пластиной, расположенной на расстоянии 6 см от дна камеры. Камеру наполняют льдом и водой на 2,5 см выше металлической пластины, поддерживая температуру бани на уровне 0-4°C во время всего эксперимента. Каждую крысу помещают в камеру по отдельности, включают таймер и измеряют время ожидания болевой реакции, с точностью до десятой доли секунды. “Ответ” определяют как быстрое и полное выдергивание правой задней лапки с наложенной лигатурой из воды, когда животное находится в стационарном состоянии (не вертится). Болевым ответом не считают чрезмерную хромоту, когда животное бегает по камере и вертится. Базисные показатели времени ожидания до выдергивания конечности с лигатурой из воды для подопытных животных в типичном случае составляют 7-13 секунд. Максимальное время погружения составляет 20 секунд с 20-минутным интервалом между попытками.
Дополнительная информация о моделях невропатической боли представлена в следующих публикациях. Bennett GJ, Xie YK (1988) "A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man" Pain 33: 87-107; Chaplan SR, Bach FW, Pogrel JW, Chung JM, Yaksh TL (1994) "Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw" J. Neurosci. Meth. 53: 55-63; Fox A., Gentry C., Patel S., Kesingland A., Bevan S. (2003) "Comparative activity of the anti-convulsants oxcarbazepine, carbamazepine, lamotrigin and gabapentin in a model of neuropathic pain in the rat and guinea-pig" Pain 105: 355-362; Milligan ED, Mehmert KK, Hinde JL, Harvey LOJ, Martin D., Tracey KJ, Maier SF, Watkins LR (2000) "Thermal hyperalgesia and mechanical allodynia produced by intrathecal administration of the Human Immunodeficiency Virus-1 (HIV-1) envelope glycoprotein, gpl20" Brain Res. 861: 105-116; De Vry J., Kuhl E., Franken-Kunkel P., Eckel G. (2004) "Tharmacological characterization of the chronic constriction injury model of neuropathic pain" Eur. J. Pharmacol. 491: 137-148. Polomano RC, Mannes AJ, Clark US, Bennett GJ (2001) "A painful peripheral neuropathy in the rat produced by the chemotherapeutic drug, paclitaxel" Pain 94: 293-304.
Формулировки изобретения
В дополнение к включению ибудиласта терапевтическая формулировка изобретения может необязательно содержать один или более из описанных ниже компонентов.
Наполнители/носители
В дополнение к ибудиласту лекарственные композиции для лечения невропатической боли, предлагаемые в данном изобретении, могут также содержать один или более фармацевтически приемлемых наполнителей или носителей. Типичные примеры наполнителей включают (без ограничения) полиэтиленгликоль (ПЭГ), гидрогенизированное касторовое масло (ГКМ), кремофоры, углеводороды, крахмалы (например, кукурузный крахмал), неорганические соли, противомикробные агенты, антиоксиданты, связующие вещества/наполнители, поверхностно-активные вещества, смазки (например, стеарат кальция или магния), глиданты, например, тальк, вещества, вызывающие дезинтеграцию, разбавители, буферы, кислоты, основания, пленочные покрытия, комбинации вышеперечисленных веществ и т.п.
Лекарственная композиция данного изобретения может включать один и более углеводородов, таких как сахар, производное сахара, такое как альдит, альдоновую кислоту, эстерифицированный сахар и/или полимер сахара. Специфические углеводородные наполнители включают, например, моносахариды, такие как фруктоза, мальтоза, галактоза, глюкоза, D-манноза, сорбоза и т.п., дисахариды, такие как лактоза, сахароза, трегалоза, целлобиоза и т.п., полисахариды, такие как раффиноза, мелезитоза, мальтодекстрины, декстраны, крахмалы и т.п., а также альдиты, такие как маннит, ксилит, мальтит, лактит, ксилит, сорбит (глюцит), пиранозил сорбит, миоинозит и т.п.
Также пригодны для использования в лекарственных композициях данного изобретения картофельный крахмал и крахмалы на основе кукурузы, такие как натрия крахмалгликолят и прямо сжимающийся модифицированный крахмал.
К числу других репрезентативных наполнителей относятся неорганические соли или буферы, такие как лимонная кислота, хлорид натрия, хлорид калия, сульфат натрия, нитрат калия, фосфат натрия одноосновный, фосфат натрия двухосновный, а также их комбинации.
Лекарственная композиция данного изобретения, содержащая ибудиласт, может также включать противомикробный агент, например, для профилактики или сдерживания роста микробов. Примерами противомикробных агентов, пригодных для данного изобретения (не ограничиваясь ими), являются хлорид бензалкония, хлорид бензетония, бензиловый спирт, хлорид цетилпиримидина, хлорбутанол, фенол, фенилэтиловый спирт, фенилртутьнитрат, тимерсол и их комбинации.
Композиция данного изобретения может также содержать один или более антиоксидантов. Антиоксиданты используются для того, чтобы предотвратить окисление, т.е. ухудшение качества лекарственного(ых) средства (средств) или других компонентов препарата. К числу подходящих антиоксидантов для использования в данном изобретении относятся, в частности, аскорбилпальмитат, бутилированный гидроксианизол, бутилированный гидрокситолуол, фосфорноватистая кислота, монотиоглицерин, пропилгаллат, бисульфит натрия, сульфоксилат формальдегид натрия, метабисульфит натрия, а также их комбинации.
К дополнительным наполнителям относятся поверхностно-активные вещества, такие как полисорбаты, в частности “Tween 20” и “Tween 80”, и плуроники (ПАВ), такие как F68 и F88 (оба поставляются компанией BASF, Mount Olive, Нью-Джерси), сложные эфиры сорбитана, липиды (в частности, фосфолипиды, такие как лецитин и другие фосфатидилхолины и фосфатидилэтаноламины), жирные кислоты и жирные сложные эфиры, стероиды, такие как холестерин, и хелирующие агенты, такие как ЭДТА, цинк и другие подходящие катионы.
Кроме того, композиция данного изобретения может необязательно включать одну и более кислот или одно и более оснований. Примерами кислот, которые можно использовать в лекарственной композиции данного изобретения, не ограничиваясь ими, являются кислоты, выбранные из группы, состоящей из соляной кислоты, уксусной кислоты, фосфорной кислоты, лимонной кислоты, яблочной кислоты, молочной кислоты, муравьиной кислоты, трихлоруксусной кислоты, азотной кислоты, перхлорной кислоты, серной кислоты, фумаровой кислоты, а также их комбинаций. Примеры подходящих оснований включают, не ограничиваясь ими, основания, выбранные из группы, которая состоит из гидроксида натрия, ацетата натрия, гидроксида аммония, гидроксида калия, ацетата аммония, ацетата калия, фосфата натрия, фосфата калия, цитрата натрия, формиата натрия, сульфата натрия, сульфата калия, фумарата калия, а также их комбинаций.
Количество любого индивидуального наполнителя в лекарственной композиции будет варьироваться в зависимости от роли наполнителя, дозовой потребности для компонентов активного агента, а также особых свойств конкретной лекарственной композиции. В типичном случае оптимальное количество любого индивидуального наполнителя определяется посредством стандартных экспериментов, т.е. приготовления композиций, содержащих разное количество наполнителя (от малого до большого) с последующим изучением их стабильности и других параметров, а также с определением диапазона, в котором можно достичь оптимального лечебного эффекта при отсутствии значительных побочных эффектов.
Однако, в целом, наполнитель будет представлен в лекарственной композиции в количестве от примерно 1% до примерно 99% по массе, предпочтительнее, от примерно 5% до примерно 98% по массе, и еще предпочтительнее, от примерно 15% до примерно 95% по массе. В целом, количество наполнителя в лекарственной композиции с ибудиластом, предлагаемой данным изобретением, выбирается из следующих вариантов: по меньшей мере, около 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или даже 95% по массе.
th
nd
rd
Эти вышеупомянутые фармацевтические наполнители наряду с прочими наполнителями описаны в следующих публикациях: "Remington: The Science & Practice of Pharmacy", 19 ed., Williams & Williams (1995); "Physician's Desk Reference", 52 ed., Medical Economics, Montvale, NJ (1998); Kibbe, A.H., Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3 Edition, American Pharmaceutical Association, Washington, D.C., 2000.
Другие активные вещества
Лекарственная композиция (или набор) в соответствии с данным изобретением может включать, кроме ибудиласта, один или более дополнительных активных агентов, способных давать лечебный эффект при невропатической боли. В предпочтительном варианте такой активный агент обладает иным механизмом действия, нежели ибудиласт. К таким активным агентам относятся габапентин, мемантин, прегабалин, морфин и родственные опиаты, каннабиноиды, трамадол, ламотригин, карбамазепин, дулоксетин, милнаципран и трициклические антидепрессанты.

2+
Габапентин, так же известный как Neurontin, структурно связан с нейротрансмиттером ГАМК. Несмотря на структурную связь с ГАМК, габапентин не взаимодействует с рецепторами ГАМК, не превращается метаболически в ГАМК или агониста ГАМК, а также не является ингибитором поглощения или распада ГАМК. Габапентин не проявляет активности на уровне ГАМКA- или ГАМКB-рецепторов для транспортных средств поглощения ГАМК а мозге, а вместо этого взаимодействует с высокоаффинным сайтом связывания в мембранах мозга (добавочная субъединица потенциалочувствительных каналов Ca). Точный механизм действия не известен, известно только, что физиологическое место действия - головной мозг. Структура габапентина позволяет ему легко проходить через гематоэнцефалический барьер. В экспериментах in vitro габапентин проявляет много фармакологических эффектов, включая модулирование действия ГАМК-синтетического фермента, увеличение несинаптических ответов на ГАМК в нервной ткани, а также снижение выброса некоторых моноаминных нейротрансмиттеров. Доза габапентина при ежедневном применении в типичном случае варьируется от примерно 600 до 2400 мг в день, предпочтительнее, от примерно 900 до 1800 мг в день, причем эта доза принимается дробными частями, например три раза в день. Распространенными дозовыми формами габапентина являются капсулы по 300 или 400 мг или таблетки по 600 или 800 мг.
Активный агент мемантин - это антагонист рецептора. Считается, что мемантин действует как низко- или среднеаффинный неконкурентный (с открытым каналом) антагонист рецептора N-метил-D-аспартата (NMDA), связывающий катионные каналы, управляемые рецепторами NMDA. Рекомендуемая ежедневная доза в типичном случае варьируется от примерно 5 до 20 мг.
Опиат, морфин, проявляет свои эффекты за счет активации опиатных рецепторов, которые широко распространены в мозге и других соматических тканях. После того как опиат попадает в мозг, он быстро активирует опиатные рецепторы, расположенные во многих участках мозга, продуцируя эффект, который связан с вовлеченным участком мозга. Существует несколько типов опиатных рецепторов, в частности дельта-, мю- и каппа-рецепторы. Опиаты и эндорфины действуют, блокируя болевые сигналы посредством связывания рецепторного сайта мю.
1
1
1
2
Каннабиноиды, в частности тетрагидроканнабинол, вступают в связь с каннабиноидными рецепторами, упоминаемыми как CB. Рецепторы CB расположены в мозге и периферических тканях. В большом количестве рецепторы СВ присутствуют в центральной нервной системе, превышая уровень почти всех рецепторов нейротрансмиттеров. Был также идентифицирован дополнительный подтип каннабиноидных рецепторов, получивший название “CB”. См., например, Martin, B.R., et al., The Journal of Supportive Oncology, Vol. 2, Number 4, July/August 2004.
Хотя механизм действия опиоида трамадола еще полностью не выяснен, считается, что он проявляет свои эффекты через модулирование ГАМК-эргических, норадренергических и серотонергических систем. Установлено, что трамадол и его метаболит, известный как M1, связывают мю-опиоидные рецепторы, т.е. распространяют свой эффект на ГАМК-эргическую трансмиссию, подавляя обратное поглощение 5-HT и норадреналина. Считается, что существует и второй механизм действия, поскольку обезболивающие эффекты трамадола не полностью блокируются антагонистом мю-опиоидных рецепторов налоксоном. Типичные дозы при ежедневном применении варьируются от примерно 50 до 100 мг каждые 4-6 часов, причем общая суточная доза не должна превышать 400 мг.
Ламотригин - это фенилтриазин, стабилизирующий нейронные мембраны посредством блокирования потенциалочувствительных каналов натрия, которые ингибируют выброс глютамата и аспартата (возбуждающих аминокислотных нейротрансмиттеров). Ежедневная доза ламотригина в типичных случаях варьируется от 25 мг в день до 500 мг в день. Типичные ежедневные дозы включают 50 мг в день, 100 мг в день, 150 мг в день, 200 мг в день, 300 мг в день и 500 мг в день, не превышая 700 мг в день.
Карбамазепин действует, блокируя потенциалочувствительные каналы натрия. Типичная доза для взрослых варьируется от 100 до 200 мг один или два раза в день при ежедневном приеме до повышенной суточной дозы 800-1200 мг, обычно принимаемой дробными частями 2-3 раза в день.
Дулоксетин - это мощный ингибитор поглощения серотонина и норэпинефрина нейронами, а также слабый ингибитор обратного поглощения допамина. Типичная ежедневная доза варьируется от примерно 40 до 60 мг при однократном приеме в течение дня или 20-30 мг 2 раза в день.
Милнаципран действует как ингибитор обратного поглощения серотонина и норэпинефрина. Типичная ежедневная доза варьируется от примерно 500 до 100 мг один или два раза в день.
Описанные здесь дозы должны восприниматься только как общее руководство, а точное количество вторичного активного агента, используемого при комбинированной терапии в сочетании с ибудиластом, конечно же, должно быть определено индивидуально в зависимости от таких факторов, как целевая группа пациентов, конкретный симптом или синдром невропатической боли, подлежащий лечению, потенциальный синергизм между активными агентами при комбинированной терапии и т.п., причем это количество определяется специалистом, компетентным в данной области, на основе приведенных в описании указаний.
Рецептуры лекарственных средств с длительной доставкой

В предпочтительном варианте изобретения лекарственные композиции подбираются таким образом, чтобы улучшить стабильность ибудиласта и удлинить период его полувыведения. Например, ибудиласт может доставляться в организм в композиции лекарственных рецептур с длительным высвобождением. Лекарственные композиции с контролируемым или длительным высвобождением изготавливают, соединяя ибудиласт с носителем или разбавителем, такими как липосомы, с нерассасывающимися герметичными полимерами, такие как сополимеры этиленвинилацетата и сополимеры Hytrel, с разбухающими полимерами, такими как гидрогели, или с рассасывающимися полимерами, такими как коллаген, а также с некоторыми поликислотами или полиэфирами, такими как использующиеся для изготовления рассасывающихся шовных материалов. Кроме того, ибудиласт можно инкапсулировать, адсорбировать и/или сцеплять с носителями в виде частиц. Примеры носителей включают вещества, извлеченные из полимеров полиметилметакрилата, а также микрочастицы, извлеченные из поли(лактидов) и поли(лактид-согликозидов), известных как ПЛГ. См., например, Jeffery et al., Pharm. Res. (1993) 10: 362-368; and McGee et al., J. Microencap. (1996).
Формы доставки
Композиции с ибудиластом, описанные здесь, охватывают все типы рецептур и особенно те, которые пригодны для системного или интратрахеального введения. Лекарственные формы для орального применения включают таблетки, лепешки, капсулы, сиропы, оральные суспензии, эмульсии, гранулы и шарики. Альтернативные рецептуры включают аэрозоли, трансдермальные пластыри, гели, кремы, мази, суппозитории, порошки или лиофилизаты, подлежащие восстановлению, а также жидкости. Примеры подходящих разбавителей для восстановления твердых композиций, например, перед инъекцией включают бактериостатическую воду для инъекций, 5% водный раствор декстрозы, забуференный фосфатный солевой раствор, раствор Рингера, физиологический раствор, стерильную воду, деионизированную воду, а также их комбинации. Что касается жидких фармацевтических композиций, то имеются в виду растворы и суспензии. В предпочтительном варианте композиция с ибудиластом, предлагаемая данным изобретением, это композиция для перорального введения.
Обращаясь к формам для пероральной доставки, следует отметить, что таблетки можно изготавливать давлением или прессованием, включая в них необязательно один или более дополнительных ингредиентов или присадок. Компрессионные таблетки изготавливают, например, в подходящей таблетирующей машине, причем активные ингредиенты в сыпучей форме, такие как порошок или гранулы, необязательно смешивают со связующим веществом (например, повидоном, желатином, гидроксипропилметилцеллюлозой), со скользящим веществом, инертным разбавителем, консервантом, дезинтегрирующим агентом (например, крахмалгликолятом натрия, сшитым повидоном, сшитой карбоксиметилцеллюлозой) и/или с поверхностно-активным либо диспергирующим агентом.
Прессованные таблетки изготавливаются, например, прессованием в подходящей таблетирующей машине посредством смешивания порошковых компонентов, увлажненных инертным жидким разбавителем. Таблетки могут необязательно быть покрытыми оболочкой или рифлеными, а также составляться таким образом, чтобы обеспечить медленное или контролируемое высвобождение активных ингредиентов, для чего используется, например, гидроксипропилметилцеллюлоза, которая в разных пропорциях создает нужный профиль высвобождения. Таблетки необязательно могут быть покрыты оболочкой, такой как тонкая пленка, слой сахара или энтеросолюбильное (растворимое в кишечнике) покрытие, обеспечивающее высвобождение не в желудке, а в других отделах пищеварительного тракта. Процессы, оборудование и изготовители промежуточных продуктов для таблеток и капсул хорошо известны специалистам в данной области.
Композиции для местного применения в полости рта включают лепешки, содержащие активные ингредиенты, обычно вкусовую основу, такую как сахароза и гуммиарабик или трагакантовая камедь, а также пастилки, содержащие активные ингредиенты в инертной основе, в частности в желатине и глицерина или в сахарозе и гуммиарабике.
Фармацевтическая композиция для местного применения может также быть составлена как мазь, крем, суспензия, лосьон, порошок, раствор, паста, гель, спрей, аэрозоль или масло.
В альтернативном варианте лекарственная рецептура может представлять собой форму пластыря (например, трансдермального пластыря) или повязки, в частности бандажа или липкого пластыря, импрегнированного активными ингредиентами и, необязательно, одним и более наполнителей или разбавителей. Рецептуры для местного применения могут включать соединение, усиливающее абсорбцию или пенетрацию ингредиентов через кожу или другие пораженные ткани, это могут быть, в частности, диметилсульфоксидем бисаболол, олеиновая кислота, изопропил миристат и D-лимолен в числе немногих веществ такого рода.
В эмульсиях маслянистая фаза состоит из известных ингредиентов, смешанных известным способом. Наряду с тем, что эта фаза может представлять собой только эмульсификатор (эмульгатор), она в предпочтительном варианте содержит смесь, по меньшей мере, одного эмульсификатора с жиром и/или маслом. В предпочтительном варианте гидрофильный эмульсификатор вводится в композицию вместе с липофильным эмульсификатором, играющим роль стабилизатора. Взятые вместе эмульсификатор(ы) со стабилизатором(ами) или без создают так называемый эмульгирующий воск, а этот воск вместе с маслом и/или жиром создает так называемую эмульгирующую мазевую основу, которая образует дисперсную маслянистую фазу лекарственных рецептур в форме кремов. Типичные эмульгаторы и стабилизаторы эмульсий включают Tween-60, Span-80, цетостеариловый спирт, миристиловый спирт, глицерилмоностеарат и лаурилсульфат натрия.
Рецептуры для ректального применения в типичном случае имеют форму суппозиториев с подходящей основой, которая состоит, например, из масла какао или салицилата.
Рецептуры для вагинального применения обычно выпускаются в форме суппозиториев, тампонов, кремов, гелей, паст, пенок или спреев.
Рецептуры для назального применения, в которых носителем служит твердое вещество, включают крупный порошок, например, с размером частиц порядка 20-500 микронов. Такие композиции обычно вводятся посредством быстрого вдоха через носовой ход, например, из контейнера с порошком, удерживаемого поблизости от носа. В альтернативном варианте композиция для назального применения может выпускаться в форме жидкости, например назального спрея или назальных капель.

Аэрозольные композиции для ингаляции могут выпускаться в виде сухого порошка (например, пригодного для введения при помощи сухопорошкового ингалятора) или, альтернативно, в виде жидкой формы, например, для небулайзера. Небулайзеры для введения аэрозольных растворов представлены моделями AERx™ (Aradigm), Ultravent (Mallinkrodt) и Acorn II (Marquest Medical Products). Композиция согласно изобретению может также вводиться при помощи находящегося под внутренним давлением мерного дозового ингалятора (МДИ), например, марки Ventolin, содержащего раствор или суспензию комбинации описанных здесь лекарственных средств в фармацевтически инертном жидком пропелленте, например хлорфторуглеводе или фторуглеводе.
Рецептуры, пригодные для парентерального введения, включают водные и неводные изотонические стерильные растворы для инъекций, а также водные и неводные стерильные суспензии.
Парентеральные рецептуры, предлагаемые в данном изобретении, могут, необязательно, содержать однодозовые или многодозовые герметично закрытые контейнеры, например ампулы и флаконы, и могут храниться в лиофилизированном состоянии, когда непосредственно перед использованием в них требуется добавлять стерильный жидкий носитель, например воду для инъекций. Импровизированные растворы и суспензии для инъекций могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток вышеописанных типов.
Композиция данного изобретения также может представлять собой форму с длительным высвобождением, позволяющую каждому компоненту лекарственного средства высвобождаться или всасываться более медленно по сравнению с обычными рецептурами. Рецептуры с длительным высвобождением могут использовать пролекарственные формы активного агента, системы доставки лекарственного средства с замедленным высвобождением, такие как липосомы или полимерные матрицы, гидрогели или ковалентные присадки к полимерам с активным агентом, например полиэтиленгликоль.
В дополнение к ингредиентам, подробно упомянутым выше, рецептуры данного изобретения могут, необязательно, включать другие агенты, традиционно применяемые в сфере фармацевтики, представлять собой специальные виды рецептур, например форм для перорального введения. Кроме того, композиции для перорального введения могут включать такие дополнительные агенты, как подсластители, загустители или ароматизирующие вещества.
Композиции данного изобретения могут также быть приготовлены в форме, подходящей для применения в ветеринарии.
Наборы
В этом документе также представляется набор, содержащий, по меньшей мере, одну комбинированную композицию данного изобретения с прилагаемой к нему инструкцией по применению.
Например, в тех случаях, когда лекарственные средства, входящие в рецептуру, вводятся в индивидуальных или смешанных дозовых формах, набор обязательно содержит ибудиласт в дополнение к каждому из лекарственных средств, входящих в набор, который предлагается данным изобретением, а также инструкции по применению этого набора. Компоненты лекарственного средства могут быть упакованы любым подходящим способом, при том условии, что упаковка вместе с инструкцией по применению будут четко указывать, каким образом необходимо ввести каждый из компонентов набора.
Например, для иллюстративного набора, содержащего ибудиласт и габапентин, может быть предусмотрено использование его в течение любого подходящего периода времени, например одного дня. В частности, репрезентативный набор для первого дня может включать соответствующие разовые дозы ибудиласта и габапентина. Если каждое из лекарственных средств необходимо принимать два раза в день, набор может включать в соответствии с первым днем два ряда разовых доз ибудиласта и габапентина вместе с инструкциями по времени введения. Альтернативный вариант заключается в том, что если разные лекарственные средства, входящие в набор, отличаются друг от друга по времени приема или числу разовых доз, то все эти различия должны быть четко отражены на упаковке и в инструкциях по применению. Различные варианты, относящиеся к вышеописанному, могут быть легко представлены в воображении, что, разумеется, зависит от конкретной комбинации лекарственных средств, используемых для лечения вместе с ибудиластом, их соответствующих разовых доз, рекомендованных доз, целевой группы пациентов и т.п. Форма упаковки может соответствовать любой традиционной фармацевтической упаковке и использовать такие характерные признаки, как различные цвета, оберточную бумагу, защиту от несанкционированного доступа, блистерную упаковку, вкладыши с влагопоглотителем и т.п.
Необходимо понять, что поскольку данное изобретение было описано вместе с предпочтительными специфическими вариантами его использования, то вышеупомянутое описание, а также последующие примеры, предназначенные для иллюстрации, не ограничивают сферу применения этого изобретения. Другие аспекты, достоинства и модификации в пределах сферы применения данного изобретения будут очевидны для специалистов, компетентных в той области, к которой относится это изобретение.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1
ВЛИЯНИЕ ИБУДИЛАСТА НА МЕХАНИЧЕСКУЮ АЛЛОДИНИЮ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ НА КРЫСИНОЙ МОДЕЛИ НЕВРОПАТИЧЕСКОЙ БОЛИ ПО ТИПУ ХКП
Влияние ибудиласта на механическую аллодинию оценивалось на крысиной модели невропатической боли, обусловленной хроническим констриктивным повреждением (ХКП).
МЕТОДЫ
Испытуемые агенты:
Ибудиласт в виде чистого порошка был получен от компании Sigma (St. Louis, MO) или от компании Haorui Pharma (Edison, Нью-Джерси). Из этого порошка ежедневно готовили раствор для внутрибрюшинного (в/б) введения. Соответствующее количество ибудиласта растворяли в 100% полиэтиленгликоле (ПЭГ) 400 (Sigma), а затем разбавляли стерильным физиологическим раствором (0,9% для инъекций) до конечной концентрации ПЭГ400 35%.
Введение испытуемого вещества
: Ибудиласт вводили в дозах 2,5 мг/кг (0,9 мл/кг из 2,8 мг/мл в 35% ПЭГ/физиологическом растворе), 7,5 мг/кг (2,7 мл/кг из 2,8 мг/мл в 35% ПЭГ/физиологическом растворе) или 10 мг/кг два раза в день (3,7 мл/кг из 2,7 мг/мл в 35% ПЭГ/физиологическом растворе) каждое утро (обычно 8 часов) и после полудня (обычно 3 часа дня). При исследовании оральной эффективности ибудиласт вводили в дозе 50 мг/кг в 10% растворе HCO-60, 10% ПЭГ 400, физиологическом растворе или могли вводить в дозе 21-25,5 мг/кг (7-8 мл/кг из 3 мг/мл в 35% ПЭГ/физиологическом растворе), что также приводило к ослаблению механической аллодинии у крыс с ХКП. Стабильность и концентрацию лекарственного средства оценивали при помощи ЖХВР/МС/МС.
Животные
: Во всех экспериментах были использованы свободные от патогенных возбудителей взрослые самцы крыс линии Sprague-Dawley весом 280-350 г (Harlan Labs). Крыс содержали в помещениях с контролируемой температурой (23±3°C) и освещением (соотношение светлого и темного времени 12:12 в течение 0700 часов) с достаточным количеством стандартного корма для грызунов и воды, которые животные могли потреблять без ограничений. Поведенческое тестирование проводили во время светового цикла.
Хроническое констриктивное повреждение (ХКП)
: ХКП создавали на уровне середины бедра правой задней конечности. Четыре стерильные рассасывающиеся лигатуры из хирургического хромового кетгута (кутикулярный 4-0 хромовый кетгут 27" режущий FS-2, компания Этикон, Сомервилл, Нью-Джерси) туго затягивались вокруг осторожно выделенного седалищного нерва под анестезией изофлураном (производитель Phoenix Pharm., St. Joseph, MO). Седалищные нервы у контрольных крыс с имитационной операцией обнажали, но не перевязывали. Расположение лигатур в типичном варианте верифицировали после умерщвления животных посредством визуального осмотра. Рандомизацию на группы альтернативной терапии и начало лечения осуществляли через 7-8 дней после операции.
Поведенческие оценки в тесте фон Фрея
: Тест фон Фрея проводили в зоне иннервации подкожной вены задней лапки ветвями седалищного нерва. Логарифмическую серию из 10 калиброванных моноволокон Semmes-Weinstein (волоски фон Фрея; Stoelting, Wood Dale, Иллинойс) случайным образом накладывали на правые задние лапки животных, чтобы определить пороговую жесткость интенсивности стимула, необходимую для вызова ответной реакции отдергивания лапки. Логарифмическую жесткость волосков определяли как значение десятичного логарифма (миллиграммы × 10). Десять стимулов продемонстрировали следующие логарифмические величины жесткости (значения в миллиграммах заключены в скобки): 3,61 (407 мг), 3,84 (692 мг), 4,08 (1202 мг), 4,17 (1479 мг), 4,31 (2041 мг), 4,56 (3630 мг), 4,74 (5495 мг), 4,93 (8511 мг), 5,07 (11749 мг) и 5,18 (15136 мг). Диапазон моноволокон, использованных в этих экспериментах (0,407-15,136 г) продуцирует логарифмически градуированный уклон. Интерполированные данные по 50% порогу ответной реакции выражались как интенсивность стимула в десятичных логарифмах (миллиграммы × 10) или как граммовое усилие волокна. Определение оценок проводили до (базисный уровень) и после внутрибрюшинного введения лекарственного средства через определенные промежутки времени. Лица, проводившие поведенческое тестирование, не были осведомлены о принадлежности животных к альтернативным группам терапии (слепой метод тестирования). Ответные реакции животных были использованы для вычисления 50% порога отдергивания лапки (абсолютный порог) посредством подгонки Гауссовой интегральной психометрической функции по методу приближения с максимальным правдоподобием, поскольку такой метод подгонки позволяет провести параметрический статистический анализ.
ИССЛЕДОВАНИЯ И РЕЗУЛЬТАТЫ
Изучение выбора дозы:
Предварительные исследования были нацелены на оценку толерантности крыс к разовым и многократным внутрибрюшинным дозам ибудиласта. Ибудиласт в в/б дозах > 20 мг/кг на 35% ПЭГ/физиологическом растворе, вводившийся в объеме ≤ 5 мл/кг, вызывал у крыс неблагоприятные поведенческие эффекты, продолжавшиеся до 1 часа. К их числу относились вытягивание головы, увеличение частоты дыханий, наблюдавшиеся время от времени вращательное поведение, вокализация и летаргия. Крысы, получавшие только носитель, в тех же дозовых объемах, не проявляли никаких неблагоприятных эффектов. В отличие от этого, животные в целом хорошо переносили в/б дозы ≤ 15 мг/кг.
Изучение острой эффективности
: В начальной стадии исследования небольшая выборка животных (3-4 особи на группу; группы - имитационный контроль, ХКП с введением носителя, ХКП с введением ибудиласта) была протестирована на острое снижение тяжести аллодинии после одноразового в/б введения испытуемого агента в дозе 10-15 мг/кг. Механическую аллодинию количественно измеряли на исходном уровне (непосредственно перед введением дозы лекарственного средства), а также через 1, 2, 4 и 16 часов после введения лекарственного средства. Крысы с ХКП, получавшие ибудиласт, продемонстрировали снижение аллодинии по сравнению с контрольными животными, получавшими только носитель. Аллодиния определяется как болевая реакция отдергивания в ответ на нормальный безвредный стимул. Этот результат был очевиден через 1 час, достигал максимума через 2 часа с последующим возвратом животных в начальное состояние через 16 часов (фактические данные не представлены, но см. также ФИГ.1). Важно отметить, что не наблюдалось изменений в пороге отдергивания лапки у контрольных животных (с имитацией ХКП) после введения ибудиласта, а это указывало на то, что эффективность снижения невропатической боли у крыс с ХКП не связана с явной анестезией.
Многодневное изучение эффективности при невропатической боли
: Принимая во внимание результаты предварительного изучения острой эффективности, свидетельствовавшие о транзиторном эффекте, заявители провели 1-недельное исследование, в ходе которого животным (4 особи в группе с имитацией повреждения и 5-8 особей в группах с ХКП) два раза в день вводили внутрибрюшинно либо ибудиласт в дозах 2,5; 7,5 или 10 мг/кг, либо носитель (35% ПЭГ/физиологический раствор) с последующим мониторингом механической аллодинии через определенные промежутки времени после введения испытуемого лекарственного средства. После введения утренней дозы были проверены точки времени +1 час и +2 часа. Тестирование перед введением очередной дозы проводили ежедневно приблизительно через 16 часов после предыдущей вечерней дозы с той целью, чтобы оценить длительность лечебного эффекта.
Как показано на ФИГ.1, лечение ибудиластом ослабляло величину аллодинии у крыс с ХКП. Примечательно, что обратное развитие боли было значимым и биологически, и статистически, стабильно проявляясь через +2 часа после введения дозы лекарственного средства. Кроме того, в течение двух дней лечения по этой схеме с двухразовым введением лекарственного средства эффект проявлялся в более устойчивом виде при использовании доз свыше 2,5 мг/кг, так что обратное развитие невропатической боли было явным на протяжении 16 часов после введения ибудиласта. Столь длительная эффективность нехарактерна для большинства лекарственных средств против невропатической боли и не обязательно может быть предсказана на основе фармакокинетического профиля.
Изучение ослабления активации глиальных клеток у крыс с ХКП при лечении ибудиластом
: В конце пятидневного исследования животные (4 особи на группу) из контрольной группы с ХКП, получавшей только носитель, и из группы с ХКП, получавшей ибудиласт, были умерщвлены с последующим выделением ткани спинного мозга в поясничном отделе и ее окрашиванием при помощи антител, реактивных против глиального фибриллярного кислого протеина (ГФКП) для оценки активации астроцитов по методике, описанной в публикации BA Winkelstein and JA DeLeo, Brain Research (2002) 956: 294-301. ФИГ.6 отображает типичный профиль окрашивания у животных с ХКП, получавших носитель. Увеличенные (активированные) астроциты, типично наблюдаемые у особей с невропатической болью (в данном случае у крыс с ХКП), действительно были обнаружены в группе ХКП. В отличие от этого, представленное здесь репрезентативное изображение от крыс, получавших ибудиласт, демонстрирует хорошее ослабление аллодинии. У животных, получавших ибудиласт, наблюдалась пониженная активация глиальных клеток, измеряемая по окрашиванию ГФКП.
Изучение оральной эффективности
: Было предпринято пятидневное исследование, в ходе которого животным (8 особей на группу) два раза в день вводили перорально ибудиласт в дозе 21 мг/кг или носитель (35% ПЭГ в физиологическом растворе), в течение двух дней и затем дозу ибудиласта увеличивали до 25,5 мг/кг на оставшиеся три дня. Тестирование на механическую аллодинию до и после введения лекарственного средства проводили с разными интервалами по времени в 1-й, 3-й и 5-й день эксперимента. После введения утренней дозы фиксировали наблюдения в точках +1 час и +2 часа. В эти же дни проводили тестирование перед введением очередной дозы, чтобы оценить длительность лечебного эффекта. У животных, получавших ибудиласт, наблюдалось ослабление аллодинии, которое проявлялось уже через 4 часа после введения первой дозы и носило длительный характер (сохранялось от вечерней дозы до тестирования перед введением утренней дозы на следующий день) после двух дней лечения (данные не представлены).
Кроме того, была проведена оценка эффективности ибудиласта в 1-недельном исследовании, в ходе которого крысам (n ≥ 6 на группу) лекарственное средство вводили перорально только один раз в день (около 9 часов утра). Композиция носителя была подобрана следующим образом: 10% HCO-60, 10% PEG400 в физиологическом растворе. Как показано на ФИГ.2, пероральное введение ибудиласта значительно уменьшало величину аллодинии у крыс с ХКП уже после 2 дней лечения (вскоре после получения утренней дозы), причем лечебный эффект сохранялся в течение всей последующей ночи, что наблюдалось на протяжении 7 дней исследования.
Фармакокинетика. Изучение корреляции концентраций ибудиласта в плазме с лечебным эффектом
max
max
1/2
max
: На здоровых крысах было проведено фармакокинетическое исследование при внутрибрюшинном и пероральном введении ибудиласта, направленное на оценку корреляции между уровнем лекарственного средства в плазме и изменениями механической аллодинии (т.е. эффективность при невропатической боли). После введения лекарственного средства (нулевая точка времени) у 3 крыс на каждую точку времени брали серийные образцы крови в шести точках времени, распределенных от 5 минут до 6 часов после введения дозы, выделяли плазму, в которой и определяли содержание ибудиласта по методу жидкостной хроматографии высокого разрешения и двухмерной масс-спектрометрии (ЖХ/МС/МС), описанному в примере 4 с порогом чувствительности ≤1 нг/мл. Максимальная концентрация ибудиласта в плазме (C) проявляла корреляцию с первыми указаниями на ослабление аллодинии после в/б введения лекарственного средства в дозе 2,5 мг/кг, причем максимальная концентрация в плазме достигала 125 нг/мл. Наблюдалась значительная эффективность при невропатической боли при в/б введении в дозе 7,5 мг/кг, которая проявляла корреляцию с максимальной средней концентрацией в плазме, достигавшей 1714 нг/мл. При пероральном введении в дозе 21 мг/кг с носителем ПЭГ400 в физиологическом растворе или 50 мг/кг с носителем 10% HCO-60/10% ПЭГ/физиологический раствор четко определяемая и статистически значимая эффективность наблюдалась при средней максимальной концентрации в плазме 325 нг/мл (фиг.5B) или 387 г/мл соответственно. Кроме того, фармакокинетический-фармакодинамический анализ по таким параметрам как C, площадь под кривой (ППК) и время полувыведения (t) показал, что величина C имеет ключевое значение при оценке эффективности.
Выгоды комбинированной терапии в сочетании с морфином
: Было проведено исследование эффективности ибудиласта на крысах с ХКП, в ходе которого животным два раза в день внутрибрюшинно вводили ибудиласт в дозе 7,5 мг/кг на носителе 35% ПЭГ в физиологическом растворе, один или в комбинации с подкожным введением морфина в дозе 1 мг/кг (комбинированное лечение проводили в течение нескольких дней). Обратное развитие аллодинии при комбинированном лечении было более выражено по сравнению с контролем (морфин и пустой носитель), причем комбинация морфин+ибудиласт оказалась более эффективной, чем каждое из лекарственных средств поодиночке (данные не представлены). Следовательно, при комбинированном лечении ибудиласт не дает отрицательного эффекта в отношении механизма действия опиатов и, наоборот, т.е. комбинированная терапия усиливает изолированный эффект каждого из двух лекарственных средств. Сходные результаты ожидаются при совместном использовании ибудиласта с другими лекарственными средствами против невропатической боли, включая габапентин, симбалту и др.
ВЫВОДЫ
В классической апробированной модели невропатической боли (ХКП у крыс), где главным показателем для оценки эффективности является механическая аллодиния, системное ежедневное введение ибудиласта (внутрибрюшинно или перорально) с частотой один или два раза в день приводило к заметному ослаблению аллодинии. В дополнение к этому было установлено, что ибудиласт можно комбинировать с другими лекарственными средствами против невропатической боли, в частности с морфином, причем лечебный эффект такой комбинации превосходит эффекты каждого из лекарственных средств поодиночке.
max
max
max

Концентрация ибудиласта в плазме при его системном введении, коррелирующаяся с эффективностью лечения невропатической боли, также проявляет корреляцию с максимальной концентрацией в плазме (C) ≥125 нг/мл, которая превышает концентрации в плазме, типично наблюдаемые у больных с астмой или послеинсультным состоянием, которые получают лечение ибудиластом. Рекомендуемые и наиболее часто применяемые в лечебной практике схемы лечения ибудиластом подразумевают его введение в дозе 10 мг два или три раза в день, приводящее к C 25 нг/мл (упаковочный вкладыш Ketas) или C 45 нг/мл в стабильной фазе при многодозовом введении (Z Cai-Li et al., 2003. Acta Pharmacol. Sin. 4: 342-343). Основываясь на приведенных здесь данных, можно ожидать, что реальные дозы ибудиласта для оптимального лечения невропатической боли у взрослых (при использовании препарата Ketas и других непатентованных лекарственных средств этого типа) будут превышать 10 мг два или три раза в день.
При иммунореактивной окраске на ГФКП ткани спинного мозга от крыс, испытывающих невропатическую боль (процедура ХКП), было показано, что активация тромбоцитов, типично наблюдаемая после повреждения нерва, снижалась при системном (в/б) применении ибудиласта. Кроме того, снижение иммунореактивности ГФКП проявляло корреляцию с эффективностью ибудиласта в снижении тяжести механической аллодинии.
ПРИМЕР 2
ВЛИЯНИЕ ИБУДИЛАСТА НА МЕХАНИЧЕСКУЮ АЛЛОДИНИЮ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ НА КРЫСИНОЙ МОДЕЛИ НЕВРОПАТИЧЕСКОЙ БОЛИ ЧАНГА
Влияние ибудиласта на механическую аллодинию оценивалось на крысиной модели невропатической боли Чанга.
МЕТОДЫ
Испытуемые агенты
: Композиции с ибудиластом от Haorui и Sigma были приготовлены так, как это описано выше. Ибудиласт вводили два раза в день в дозе 10 мг/кг (3,7 мл/кг из 2,7 мг/мл 35% ПЭГ в физиологическом растворе) внутрибрюшинно, каждое утро (обычно в 8 часов) и после полудня (обычно в 3 часа дня).
Животные
: Во всех экспериментах были использованы свободные от патогенных возбудителей взрослые самцы крыс линии Wistar весом 150-200 г (Elevage Janvier). Крыс содержали в помещениях с контролируемой температурой (23 ± 3°C) и освещением (соотношение светлого и темного времени 12:12 в течение < 0700 часов) с достаточным количеством стандартного корма для грызунов и воды, которые животные могли употреблять без ограничений. Поведенческое тестирование проводили во время светового цикла.
Модель Чанга
: Крысы были анестезированы изофлураном (введение 4-5% и поддержание 2-3% в 100% кислороде), после чего им проводили надрез на уровне L4-S2 для обнажения спинальных нервов L5 и L6 слева. Вокруг каждого нерва туго затягивали лигатуру. После этого на раны накладывали швы. Крысы получали инъекцию кламоксила, после чего им предоставляли достаточное время для выздоровления. Животные в группе имитационного контроля подвергались такой же хирургической процедуре за тем исключением, что нервы не лигировались.
Поведенческие оценки в тесте фон Фрея
: Тест фон Фрея проводили так же, как это было описано выше для модели ХКП.
ИССЛЕДОВАНИЯ И РЕЗУЛЬТАТЫ
Многодневное изучение эффективности при невропатической боли
: Было предпринято 3-дневное исследование, в ходе которого животным (3-4 особи в группе с имитацией повреждения и 5 особей в группе с аномалией Чанга) два раза в день вводили ибудиласт в дозе 10 мг/кг, либо пустой носитель (35% ПЭГ в физиологическом растворе) с последующим мониторингом механической аллодинии через определенные промежутки времени после введения испытуемого лекарственного средства. После введения утренней дозы были проверены точки времени +1 час, +2 часа и +4 часа. Кроме того, каждый день проводили тестирование перед введением очередной дозы лекарственного средства, чтобы оценить длительность лечебного эффекта.
Как показано на ФИГ.3, лечение ибудиластом ослабляло величину аллодинии у крыс с аномалией Чанга. Примечательно, что длительное ослабление боли манифестировало в точке времени +2 часа после очередной дозы, начиная со 2-го дня лечения по двухразовой схеме введения лекарственного средства. Кроме того, очевидно, что в течение двух дней терапии по этой двухразовой схеме лечебный эффект становился более длительным, и обратное развитие невропатической боли определялось через 16 часов после приема предыдущей дозы ибудиласта (тестирование перед введением очередной дозы).
ВЫВОДЫ
Результаты описанных здесь исследований с использованием еще одной классической модели невропатической боли свидетельствуют о том, что системное введение ибудиласта крысам с аномалией Чанга ослабляет механическую аллодинию. Важно отметить, что в некоторой степени кратковременное ослабление аллодинии, наблюдаемое после его первого ведения, становится длительным уже на второй день при схеме лечения с двухразовым ежедневным введением лекарственного средства.
ПРИМЕР 3
ВЛИЯНИЕ ИБУДИЛАСТА НА МЕХАНИЧЕСКУЮ АЛЛОДИНИЮ В ЭКСПЕРИМЕНТАХ НА КРЫСИНОЙ МОДЕЛИ НЕВРОПАТИЧЕСКОЙ БОЛИ, ИНДУЦИРОВАННОЙ ТАКСОЛОМ
Влияние ибудиласта на механическую аллодинию оценивалось на крысиной модели невропатической боли, индуцированной таксолом, как это описано ниже.
МЕТОДЫ
Испытуемые агенты
: Композиции с ибудиластом были приготовлены так, как это описано выше. Ибудиласт вводили в дозе 7,5 мг/кг (2,7 мл/кг из 2,8 мг/мл 35% ПЭГ в физиологическом растворе) внутрибрюшинно, каждое утро (обычно в 8 часов) и после полудня (обычно в 3 часа дня).
Животные
: Во всех экспериментах были использованы свободные от патогенных возбудителей взрослые самцы крыс линии Sprague-Dawley весом 280-350 г (Harlan Labs). Крыс содержали в помещениях с контролируемой температурой (23±3°C) и освещением (соотношение светлого и темного времени 12:12 в течение 0700 часов) с достаточным количеством стандартного корма для грызунов и воды, которые животные могли употреблять без ограничений. Поведенческое тестирование проводили во время светового цикла.
Модель таксола

: Невропатическую боль индуцировали введением 4 в/б инъекций 1 мг/кг таксола (Paclitaxel, накопленная доза 4 мг/кг) в разные дни (0-й, 2-й, 4-й и 6-й). Атака невропатической боли была максимально выраженной примерно на 19-й день после введения таксола (0-й день). Контрольное введение пустого носителя ибудиласта начинали или в 19-й день (парадигма лечения), или в 12-й день (парадигма профилактики). Результаты лечения в отношении аллодинии определяли перед утренним введением носителя или ибудиласта.
Поведенческие оценки в тесте фон Фрея
: Тест фон Фрея проводили в зоне иннервации подкожной вены задней лапки ветвями седалищного нерва, как это было описано выше для исследований на модели ХКП. Оценочное тестирование всегда проводили по утрам перед введением очередной утренней дозы ибудиласта.
ИССЛЕДОВАНИЯ И РЕЗУЛЬТАТЫ
Многодневное изучение эффективности при невропатической боли
: Ибудиласт в дозе 7,5 мг/кг вводили два раза в день в течение 7 дней, начиная с 20-го дня после первой дозы таксола (0-й день). Механическую аллодинию оценивали каждый день перед введением первой дозы ибудиласта.
Как показано на ФИГ.4, лечение ибудиластом ослабляло величину аллодинии у крыс, получавших таксол. Схема лечения с двухразовым ежедневным введением ибудиласта поддерживала ослабление аллодинии на протяжении всего периода терапии, о чем свидетельствовало увеличение порога реакции отдергивания лапки, определявшееся каждый день перед приемом очередной дозы лекарственного средства. Прекращение лечения ибудиластом приводило к возвращению крыс в исходное состояние аллодинии в течение одного дня.
Предупреждение невропатии, индуцированной таксолом
: Второе исследование было проведено практически по идентичной схеме с многодневным исследованием, описанным выше, за тем исключением, что введение ибудиласта или пустого носителя в контрольной группе начиналось на 12-й день, т.е. сразу после четкого проявления первых призраков аллодинии. Лечение ибудиластом предотвращало дальнейшее развитие невропатии и ослабляло начальные проявления аллодинии до такого уровня, который незначимо отличался от контрольной группы животных, не подвергавшихся токсичной химиотерапии.
ВЫВОДЫ
Результаты описанных здесь исследований с использованием модели невропатической боли свидетельствуют о том, что системное введение ибудиласта крысам, получавшим таксол, ослабляет механическую аллодинию. Ослабление аллодинии при двухразовом ежедневном введении ибудиласта носит длительный характер (т.е. продолжается всю ночь вплоть до контрольного тестирования на следующее утро), причем после отмены лечения крысы возвращаются в исходное состояние аллодинии. Важно отметить, как это показано на ФИГ.4В, что лечение ибудиластом может предупреждать развитие невропатии (в данном случае аллодинии), индуцированной противораковой химиотерапией (таксолом). Можно ожидать, что такие наблюдения, полученные на модели невропатической боли, индуцированной противораковой химиотерапией, будут распространяться и на другие варианты химиотерапии рака, способные приводить к развитию невропатии у пациентов.
Механическая аллодиния - это частое и тяжелое осложнение невропатической боли, наблюдаемое и на животных моделях, и у людей, страдающих хронической невропатической болью. Таким образом, описанные здесь результаты представляют первое известное открытие возможностей терапевтического использования ибудиласта для лечения разных синдромов и типов хронической невропатической боли у млекопитающих, особенно таких синдромов, характерным симптомом которых является механическая аллодиния.
ПРИМЕР 4
ФК ИБУДИЛАСТА В ПЛАЗМЕ И ЕГО РАСПРЕДЕЛЕНИЕ В ТКАНЯХ КРЫС
Фармакокинетика ибудиласта и его распределение в плазме, мышцах, головном и спинном мозге крыс изучались следующим образом.
МЕТОДЫ
Испытуемые агенты
: Ибудиласт готовили в 15% этаноле на физиологическом растворе. Стабильность и концентрацию лекарственного средства оценивали при помощи ЖХВР/МС/МС (жидкостной хроматографии высокого разрешения и двумерной масс-спектрометрии).
Животные
: Во всех экспериментах были использованы свободные от патогенных возбудителей взрослые самцы крыс линии Sprague-Dawley весом 280-350 г (Harlan Labs). Крыс содержали в помещениях с контролируемой температурой (23 ± 3°C) и освещением (соотношение светлого и темного времени 12:12 в течение 0700 часов) с достаточным количеством стандартного корма для грызунов и воды, которые животные могли употреблять без ограничений. Поведенческое тестирование проводили во время светового цикла.
Анализ ФК
: Крысам (3 особи на группу) вводили ибудиласт в дозе 5 мг/кг внутрибрюшинно, а через 5, 15, 60, 180 и 420 минут после введения лекарственного средства у животных собирали образцы плазмы, мышц, головного и спинного мозга.
Анализ концентрации в тканях
: Раствор ибудиласта (Haorui) с концентрацией 0,5 мг/мл в диметилсульфоксиде использовали в качестве рабочего материала. Этот раствор готовили из порошкового ибудиласта, предоставленного с испытуемыми образцами, и использовали в качестве рабочего материала. Калибровку стандартов в плазме осуществляли, разводя каждую заготовку 0,5 мг/мл 1:100 в плазме крыс до концентрации 5000 нг/мл (5 мкл+495 мкл) с последующим разведением до 2,29 нг/мл посредством трехкратного серийного разведения плазмой. Стандарты 3, 5 и 7 использовали как варианты низких, средних и высоких образцов контроля качества соответственно.
Калибровочные стандарты, образцы контроля качества и образцы исследуемой плазмы готовили для впрыскивания ЖХВР посредством преципитации 25 мкл плазмы в трехкратном объеме (75 мкл) ледяного ацетонитрила, содержащего 50 нг/мл дифенгидрамина и 100 нг/мл декстрометорфана в качестве внутренних стандартов. Образцы тканей готовили для впрыскивания ЖХВР посредством добавления 1 мкл воды на 1 мг ткани в трехкратном объеме (относительно воды) ледяного ацетонитрила, содержащего 50 нг/мл дифенгидрамина и 100 нг/мл декстрометорфана в качестве внутренних стандартов, а затем гомогенизировали материал в электрическом гомогенизаторе. После центрифугирования в течение 30 минут с ускорением 6100g 40 мкл каждой надосадочной жидкости разводили в 200 мкл 0,2% водного раствора муравьиной кислоты и проводили анализ в следующих условиях ЖХ/МС/МС:
ЖХВР:
Система Shimadzu VP
Мобильная фаза:
0,2% раствор муравьиной кислоты в воде (A) и в метаноле (B)
Колонка:
Защитный картридж Peeke Scientific DuraGel G C<sub>18</sub> 2×10 мм
Объем впрыскивания:
100 мкл
Градиент:
5-95% B в течение 2 минут после 0,75-минутного отмывания
Скорость потока:
400 мкл/мин
Масс-спектрометр:
Applied Biosystems/MDS SCIEX API 3000
Интерфейс:
Турбоионное распыление (ESI) при 400°C
Способ ионизации:
Позитивный ион
Ионы Q1/Q3:
231,2/161,2 для ибудиласта
ИССЛЕДОВАНИЯ И РЕЗУЛЬТАТЫ
max
max
Внутрибрюшинное введение ибудиласта дает его хорошую концентрацию в плазме, которая снижается от пиковой величины (C) двухфазным образом. Ибудиласт хорошо распределяется в периферийных (например, мышцы) и в центральных (например, головной и спинной мозг) тканях (ФИГ.5A). Максимальная концентрация (C) в плазме и тканях ЦНС составляла примерно 1 мкг/мл после в/б введения ибудиласта в дозе примерно 5 мг/кг в вышеописанной форме. Период полувыведения ибудиласта варьировался от 100 до 139 минут во всех тканевых компартментах.
ВЫВОДЫ
Основываясь на вышеописанных данных, можно видеть, что ибудиласт хорошо распределяется в периферийных и центральных тканях, причем его тканевая кинетика после однократного введения соответствует таковой в компартменте плазмы. Фармакокинетическое исследование ибудиласта, приготовленного на 35% ПЭГ 400 в физиологическом растворе и вводимого крысам перорально в дозе 21 мг/кг, показано на ФИГ.5B. Рецептура, доза и способ введения были выбраны на основе предыдущих результатов, полученных заявителями, демонстрирующих ослабление аллодинии у крыс с ХКП при аналогичных условиях. Фармакокинетические параметры, полученные при анализе концентрации в плазме в зависимости от профиля времени, представлены в таблице ниже графика. Следовательно, такие параметры отражают корреляцию фармакокинетических параметров с эффективностью ослабления невропатической боли.
ПРИМЕР 5
ПРОСПЕКТИВНОЕ, ДВОЙНОЕ СЛЕПОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ НА ЛЮДЯХ С КОНТРОЛЕМ ПЛАЦЕБО ПО ИЗУЧЕНИЮ ЛЕЧЕБНЫХ ЭФФЕКТОВ ИБУДИЛАСТА ПРИ НЕВРОПАТИЧЕСКОЙ БОЛИ
Цель этого исследования заключалась в сравнении балльных оценок по болевому индексу визуальной аналоговой шкалы (VASPI) перед началом лечения и в конце лечения, а также в выявлении различий этих оценок между группами альтернативной терапии. Кроме того, в исследовании оценивались безопасность, переносимость и фармакокинетика ибудиласта.
МЕТОД
Это было двойное слепое исследование. В начале исследования (первые 7 дней) был проведен вводный период терапии плацебо по одинарному слепому принципу. Во 2-й день исследования его участники в последовательном порядке были распределены на подгруппы, получившие разовую дозу ибудиласта 10 мг, 20 мг, 30 мг или 40 мг. Образцы материала для фармакокинетического анализа были получены на 2-й день исследования. Балльные оценки VASPI фиксировались ежедневно. На 8-й день исследования те субъекты, которые продемонстрировали положительную реакцию на лечение во вводном периоде, определявшуюся по изменению начальных балльных оценок VASPI на 30%, были прикреплены к группе плацебо на следующие 14 дней. Субъекты, не реагировавшие на лечение плацебо во вводном периоде, были рандомизированы для последующего лечения ибудиластом по разным схемам: два раза в день или три раза в день. Кроме того, были предусмотрены три дозовые когорты (20 мг, 30 мг и 40 мг) с включением в каждую когорту по 20 субъектов. Когорты заполнялись в последовательном порядке: первая когорта была составлена из субъектов, получавших 20 мг ибудиласта 2 или 3 раза в день, вторая когорта - из субъектов, получавших 30 мг ибудиласта 2 или 3 раза в день, а третья когорта - из субъектов, получавших 40 мг ибудиласта 2 или 3 раза в день. Повышение дозы с переводом в более высокие когорты осуществлялось в пропорциональной зависимости от удовлетворительных показателей безопасности и переносимости лечения в когортах низшего уровня. Сообщаются данные о неблагоприятных явлениях, результатах клинико-лабораторных обследований и об оценках по шкале градаций токсичности NIH (или ее эквиваленту для ЕU). Для поддержания слепого характера проводимой терапии все пациенты получали лекарственное средство три раза в день, начиная с 8-го дня исследования по 21-й день, включительно.
В дни взятия образцов для фармакокинетического анализа субъекты находились в исследовательском центре (1-й, 2-й, 8-й, 9-й, 21-й и 22-й дни).
Обследованная выборка: Субъекты мужского и женского пола с диабетической невропатией или с синдромом сложных региональных болей. Критерии включения: информированные больные, подписавшие добровольное согласие, лица мужского и женского пола в возрасте от 18 до 70 лет, пациенты с диагнозом диабетической невропатии или синдрома сложных региональных болей, установленным, по меньшей мере, за 6 месяцев до начала исследования, балльная оценка VASPI 4 или выше за 2 недели до исследования. Женщины с детородным потенциалом для включения в исследование должны были или быть хирургически стерилизованными, или использовать эффективный способ контрацепции. Для субъектов женского пола с детородным потенциалом в 1-й день исследования был необходим отрицательный результат теста на беременность. Критерии исключения: субъекты с заведомой гиперчувствительностью к ибудиласту или его компонентам, субъекты с наличием в анамнезе любого состояния, способного нарушить абсорбцию, метаболизм или экскрецию лекарственного средства, субъекты с анамнезом психического заболевания, привыкания к лекарственным средствам, злоупотребления наркотиками или алкоголем, субъекты, сдававшие донорскую кровь в пределах 90 дней до начала исследования или имевшие проблемы, связанные с донорством, субъекты с признаками наличия гепатита B, ВИЧ или положительным результатом скрининга на наркотики, беременные женщины или кормящие матери, а также субъекты, уже получавшие испытуемое лекарственное средство не более чем за 90 дней до начала исследования.
Оценки по ходу исследования включали безопасность, в частности неблагоприятные явления, результаты клинико-лабораторного обследования, показатели жизненно важных функций, ЭКГ в 12 отведениях и фармакокинетику.
Образцы крови (1,5 мл) для анализа на ибудиласт собирались у субъектов с целью определения уровня лекарственного средства в плазме. Перед проведением анализов образцы замораживали при температуре -20 или -70°C.
Таблица
<b>График дозирования лекарств для субъектов</b><b>и проведения оценочных обследований</b>
Скрининг(день 0)
Разовая доза
Множественные дозы
День 22
день 1
день 2
дни 3-7
день 8
день 9
день 21
Добровольное согласие информированного субъекта
×
Медицинский анамнез
×
VASPI
×
×
×
×
×
×
Шкала невропатической боли
×
×
×
×
×
×
Врачебный осмотр
×
×
Клиническая лаборатория (клинический и биохимический анализ крови, уринализис)
×
×
Тестна беременность
×
×
Гепатит B, ВИЧ, скринингна наркотики
×
Только функциональные пробы печени
×
ЭКГ
×
×
×
Жизненно важные функции (АД и частота сердечных сокращений)
×
×
×
×
×
×
Получение доз лекарственного средства*
×
×
×
×
×
×
Время взятия ФК образцов
Перед дозой лекарственного средства - время 0 (например, 8:00)
×
×
×
×
×
30 минут (например, 8:30)
×
×
1 час (например, 9:00)
×
×
×
×
2 часа (например, 10:00)
×
×
×
×
4 часа (например, 12:00)
×
×
×
×
6 часов (например, 14:00)
×
×
8 часов (например, 16:00)
×
×
×
×
12 часов (например, 20:00)
×
×
16 часов (например, 24:00)
24 часа (например, 8:00 7-го дня)
×
28 часов (например, 12:00 7-го дня)
×
32 часа (например, 16:00 7-го дня)
×
Неблагоприятные явления
×
×
×
×
×
×
Сопутствующие лекарственные средства
×
×
×
×
×
×
* В дни 1-7 одноразовые дозы в 8:00, в дни 8-20 дозы при двух дозах в день: в 8:00 и 20:00, при трех дозах в день время получения доз - 8:00, 14:00 и 20:00.
Взятие крови для анализов проводится перед получением дозы лекарственного средства. Время приема пищи - 9:00, 13:00 и 18:00.