Генетические факторы риска развития гуморального иммунного ответа на антигены систем hla и HPA у гематологических больных с множественными трансфузиями тромбоцитов

«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ИММУНОГЕНЕТИКИ И ТКАНЕВОГО ТИПИРОВАНИЯ»

Санкт-Петербург 24-25 июня 2015 г.

нотипов системы Резус (RH-TYPE) и вариантов антигена Dweak (Weak D-TYPE) производства фирмы «BAG» (Германия).

Результаты. В 2014 году определение фенотипа эритроцитов системы Резус выполнено у 3205 человек, из них антиген Dweak выявлен у 64 (2 %). Генотипирование для идентификации типов антигена Dweak проведено у 32 человек, у которых выявлено 7 типов Dweak (таблица).

Чаще у обследованных лиц встретились типы Dweak type 3 (46,9 %) и Dweak type 1 (28, 1 %). Остальные 5 типов антигена Dweak имели следующие частоты: Dweak type 2-9,4 %, Dweak type 20-6,25 %, Dweak type 4.2 (DAR), Dweak type 6, Dweak type — по 3,1 % каждый. Dweak-положи-тельные лица чаще имели фенотип Ccee (75 %). Реже встречались фенотипы ССее (9,4 %), ссЕе (6,25 %), ссее (3,1 %).

Таблица.

Частота типов антигена D weak и фенотипов антигенов системы Резус

у D weak-положительных лиц.

Типы антигена D weak Количество Фенотипы

Абс. % CcDwee CCDwee ccDwee ccDw Ee Ccdee

1 9 28,125 9 0 0 0 0

2 3 9,375 1 0 0 2 0

3 15 46,875 13 2 0 0 0

4.2, DAR 1 3,125 0 0 1 0 0

6 1 3,125 1 0 0 0 0

15 1 3,125 0 1 0 0 0

20 2 6,25 0 0 0 0 2

Всего в абс.цифрах: 32 24 3 1 2 2

Всего в % 100 75 9,375 3,125 6,25 6,25

Большой интерес представили два человека, у которых был определен фенотип Ccdee, и только молекулярным методом можно было идентифицировать генотип как Сс Dweak type 20 ee. Можно предположить, что у этих двух людей гаплотипы были Cde/ce Dweak type 20, поскольку у лиц белой расы чаще встречается именно гаплотип Cde. Если это положение верно, то антиген С будет находиться в положении транс и супрессировать экспрессию антигена Dweak type 20.

Заключение. Современные молекулярные методы исследования позволяют идентифицировать редкие аллели генов ИНО, продукты которых выявляются серологическими методами как слабый антиген О. При очень слабой выраженности антигена Dweak вследствие малого количества антигенных детерминант на эритроците или супрессии находящимися в позиции транс антигенами С серологические методы бессильны в его выявлении.

Головкина Л. Л., Пушкина Т.Д., Михайлова Е. А., Паровичникова Е. Н., Савченко В. Г.

ФГБУ Гематологический Научный Центр Минздрава России, Москва

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ РИСКА РАЗВИТИЯ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА НА АНТИГЕНЫ СИСТЕМ HLA И HPA У ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ С МНОЖЕСТВЕННЫМИ ТРАНСФУЗИЯМИ ТРОМБОЦИТОВ

Введение. Аллоиммунизация больных затрудняет проведение заместительной трансфу-зионной терапии гемокомпонентами. Образование антител к антигенам систем HPA (Human Platelet Antigens) и HLA (Human Leukocyte Antigens) I класса является иммунологическим осложнением при переливании тромбоцитов.

Известно, что за инициацию гуморального иммунного ответа отвечают HLA II класса. HLA-рестрикция аллоиммунизации недостаточно изучена в трансфузиологии.

Цель работы: изучить ассоциацию. HLA и НРА генотипов с антителогенезом на антигены систем HLA и НРА у гематологических больных

ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XI, № 2, 2015

с множественными трансфузиями тромбоцитов.

Методы: Генотипирование HLA-DRB1, — DQB1 низкого и высокого разрешения прай-мерами фирм Dynal, Protrans, BAG и НРА-1, —2,—3,—4,—5,—6,—15 праймерами фирм BAG, Protrans. методом PCR-SSP, стандартный микролимфоцитотоксический тест, метод им-муноферментного анализа с нативными и модифицированными (лишенными HLA) тромбоцитами. Тромбоциты HPA-типированных доноров использовали для выявления специфичностей анти-НРА антител. Статистические методы непараметрической статистики применяли для расчета достоверности результатов. HLA гапло-типы определяли методом наибольшего правдоподобия с использованием программы Арлекин.

Результаты: Аллоиммунизация к антигенам систем HLA и HPA была выявлена у 70 % больных AA и МДС, 35,5 % больных ОМЛ и 15 % больных ОЛЛ. По частоте антителогене-за нозологические формы заболевания можно ранжировать как: АА + МДС-ОМЛ-ОЛЛ. Параллельное исследование наличия анти-HLA антител и HLA генотипирование выполнено у 124 больных (39 AA+МДС, 36 ОЛЛ и 49 ОМЛ). Анти- HLA антитела выявлены у 48 пациентов (20 AA, 22 ОМЛ и 6 ОЛЛ). Генетическими факторами риска образования анти-HLA антител являются HLA-DQB1*02 и HLA-DQB 1*03:01 с генами суперсемьи HLA-DRB3*01 (HLA-DRB1*03,—*11,—12,—*13,—*14): 18/20 больных AA и 13/22 больных ОМЛ с анти-HLA антителами, и 6/19 больных AA и 7/27 больных

ОМЛ без антител имели ген HLA-DQB1*03:01 (р < 0,001 и р = 0,04, соответственно). У больных с анти-HLA антителами чаще выявляли гаплотип ^А^КВ1*13:03,— DQB1*03:01: 5/20 больных АА (р = 0,047), 4/22 больных ОМЛ (р = 0,035) и 3/6 больных ОЛЛ (р = 0,01). 10/22 больных ОМЛ с анти-HLA антителами и 4/27 без антител имели еще один ген HLA-DQB1*02 (р = 0,027). Гены ^А^КВ1*15 и ^А^В1*06 обладали протективным действием на антителообразова-ние у больных ОМЛ: 13/27 больных без анти-HLA антител и 3/22 больных с антителами были HLA-DRB1*15 положительными (р = 0,015); соответственно корреляция с HLA-DQB1*06 составила 19/27 и 7/22 (р = 0,016) (таблица). Параллельное исследование анти-НРА анти-телогенеза и HLA генотипа было выполнено у 114 больных (46 с АА+МДС, 56 с ОЛЛ и 12 с ОМЛ), из них антитела были выявлены только у 33. Специфичность анти-НРА антител смогли установить у 24 больных. Выявлены следующие гаплотипы, предрасполагающие к образованию специфических анти-НРА антител: анти-НРА-1Ь у НРА-1 а/1а больных — HLA-DRB1*07:01,— DQB1*02; анти-НРА-5Ь у НРА-5а/5а больных — HLA-DRB1*13:01, — DQB1*06 и НЬА-DRB1*13:03,— DQB1*03:01, анти-НРА-2Ь у НРА-2а/2а больных — HLA-DRB1*15,— DQB1*06:02/*06:14.

Заключение: HLA и НРА генотипы являются важными и информативными маркерами предрасположенности к аллоиммунизации у больных с множественными трансфузиями тромбоцитов.

Грачева Л. А., Харламова Л. А., Петрова Л. В., Румянцев А. Г., Валов А. Л., Бологое А. А.

ФГБУ «Российская детская клиническая больница» Минздрава России, Москва

СПОСОБ УМЕНЬШЕНИЯ ВЛИЯНИЯ ПРЕДСУЩЕСТВУЮЩИХ АНТИ-HLA АНТИТЕЛ НА ОТТОРЖЕНИЕ ТРАНСПЛАНТАТА АЛЛОГЕННОЙ ПОЧКИ

Введение. Оценка влияния предсуществую-щих анти-HLA антител на успех трансплантации аллогенных почек, а также изучение способа отмены влияния антител на отторжение пересаженных органов, является актуальной проблемой современной медицины.

Цель. Оценить влияние предсуществующих анти-HLA антител с различным процентом панель-реактивных антител (сPRA) на функцию трансплантата аллогенных почек у детей; оценить функцию трансплантата аллогенных почек в 1, 2, 6, 12, 18, 24 мес. после трансплантации;

оценить влияние ритуксимаба, добавленного в качестве дополнительного компонента в индукционную фазу терапии, на функцию трансплантата аллогенных почек.

Материалы и методы. Было обследовано 116 детей