Кигютнык эритрогрлммы у животных. Подвергнутых инглляционному воздействию хлорировлнныгх углеводородов и орглнических рлстворителей

Кудрявцев В.П., Шакирова Э.Д., Абзалов Р.Р., Шакиров Д.Ф.

КИСЛОТНЫЕ ЭРИТРОГРАММЫ У животных, ПОДВЕРГНУТЫХ ИНГАЛЯЦИОННОМУ ВОЗДЕЙСТВИЮ ХЛОРИРОВАННЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ И ОРГАНИЧЕСКИХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», г. Уфа

Эритрограммы, подобно лейкоформуле, позволяют рассматривать распределение всей совокупности эритроцитов по отдельным группам клеток, имеющих различную плотность и физиологический возраст. Распределение отдельных групп эритроцитов по кислотной стойкости определяется физико-химическими свойствами и составом отдельных компонентов мембран - липидов и белков. Нарушения функций мембран во многих случаях не только результат, но и первооснова патологических изменений в клетке и организме в целом.

Целью настоящего исследования явилось изучение эритрограммы у крыс, подвергнутых воздействию хлорированных углеводородов и органических растворителей.

Материал и методы исследования. В эксперименте на белых беспородных крысах массой 180-220 г моделировано острое и хроническое 4-х часовое ингаляционное воздействие хлорированных углеводородов и органических растворителей (бензинрастворитель марки БР-1 в концентрации 100,0 мг/м3, дихлорметан в концентрации 50,0 мг/м3, 1,2-дихлорэтан и 1,4-диоксан в концентрации 10,0 мг/м3). Животных забивали декапитацией на 1-3-5-7 и 14-е сутки после затравки, а также на 1-2-3-4-е месяцы после поступления ксено-биотиков. Контрольные животные находились в тех же условиях, но без воздействия экотоксикантов.

Результаты и обсуждение. Данные, полученные при остром и хроническом ингаляциионном воздействии экотоксикантов в испытуемой концентрации показали, при изучении осмотической резистентности эритроцитов (ОРЭ) у подопытных крыс в зависимости от чувствительности к осмотическому лизису были выявлены три группы эритроцитов: высоко-, слабо- и среднерезистентные. Высокорезистентные эритроциты - молодые, недавно выброшенные в кровяное русло клетки, а слаборезистентные - старые клетки. Дисперсия свойств высокорезистентной группы эритроцитов у подопытных крыс была в 1,5-3,5 раза выше, чем у интактных. Общий сдвиг вариационной кривой для высоко- и слаборезистент-ных форм эритроцитов в опыте значимо выявляется в зависимости от вида и интенсивнос-ти воздействия на 3-5-е сутки после однократного воздействия экотоксикантов, а при многократном - через месяц. При этом наблюдается снижение верхней границы резистентности эритроцитов при общем увеличении числа циркулирующих эритроцитов, что, бесспорно, является компенсаторной реакцией на токсическое воздействие. Существенное увеличение числа слаборезистентных форм эритроцитов в опыте свидетельствует об интенсивном износе эритроцитов у подопытных крыс из-за изменений в структуре их мембран. При изучении кислотной резистентности эритроцитов (КРЭ) в той же концентрации однократно на 1-3-и сутки и многократно на 1-й месяц в зависимости от вида и интенсивности воздействия регистрируются сдвиги гемолизной кривой влево, а в дальнейшем этот сдвиг нарастает, а, следовательно, сокращается время гемолиза 50% клеток. Абсолютные показатели интактных животных колебались в следующих пределах: Ушах - 0,47-0,50% клеток/сек, 50 - 448-474 сек, 100 - 750-780 сек. Выброс в кровь эритроцитов из депо отмечается уже через сутки после воздействия экотоксикантов, что регистрируется по накоплению доли физиологически молодых клеток. Максимальная скорость гемолиза снижается при остром воздействии на 25% по отношению к контролю для бензина марки БР-1, на 16% для дихлорметана, на 21% и 22% для 1,2-дихлорэтана и 1,4-диоксана, а при хроническом - на 43% для бензина, на 28% для дихлорметана, на 33% и 36% для дихлорэтана и 1,4-диоксана. Снижение максимальной скорости гемолиза сопровождается удлинением времени наступления гемолиза 50% клеток при влиянии паров дихлорметана и диоксана-1,4 и 100% клеток - паров дихлорэтана и бензина. При воздействии паров дихлорметана эти показатели нарастают незначительно, а пары бензина, дихлорэтана и диоксана-1,4 - напротив, вызывают более быстрый гемолиз. Следовательно, прочность мембран эритроцитов периферической крови после поступления ксенобиотиков, особенно, бензина марки БР-1 снижается, что подтверждается также и более низким содержанием эритроцитов в крови. Через сутки после попадания экотоксикантов в организм

максимальная скорость гемолиза возрастает и приближается контрольным цифрам. Нарастание максимальной скорости гемолиза происходит на фоне повышенного содержания эритроцитов в периферической крови, что подчёркивает снижение прочности мембран всей совокупности эритроцитов, т.к. эритроцитоз вызван в, основном, выбросом из депо физиологически молодых клеток, которые характеризуются высокой стойкостью к гемолизу. Стойкая эритропения, отмечаемая через месяц после ингаляции экотоксикантов, указывает на истощение резервов депо эритроци-тов. Эритропения, вероятно, способствует стимуляции эритропоэза, что подтверждается увеличением доли физиологически молодых форм эритроцитов, характеризующихся повышенной стойкостью к гемолитикам. Время полного гемолиза эритроцитов за счёт физиологически молодых клеток, увеличивается через месяц после поступления эктоксикан-тов соответственно на 43%, 28%, 33% и 36% по отношению к контролю.

Пары бензина-растворителя в концентрации 100,0 мг/м3 во всём исследуемом диапазоне через сутки при однократном и через месяц при многократном поступлении в организм вызывает стойкую лейкопению. Пары бензина изменяют распределение эритроцитов по устойчивости к действию гемолитика: максимальная скорость гемолиза была снижена с 0,52% клеток/сек (интактные животные) до 0,24% клеток/сек, а время полного гемолиза возрастает соответственно с 760 до 880 сек. Так как время установления максимальной скорости гемолиза по отношению к норме не изменялась, можно предположить, что пары бензина в концентрации 10,0 мг/м3 не вызывают существенных изменений и прочности мембран эритроцитов, а удлинение времени полного гемолиза клеток происходит за счёт выброса молодых клеток из депо, что подтверждается некоторой тенденцией к повышению содержания эритроцитов в периферической крови. Более высокие концентрации бензина безусловно вызывают снижение кислотной стойкости, что было зарегистрировано через сутки после воздействии концентрации 50,0 мг/м3. Отсутствие существенных изме-нений эритрограмм через сутки после воздействия в концентрации 10,0 мг/м3, очевидно, отражает равновесие процессов выброса физиологически молодых клеток, стойких к гемо-лизу, из депо, и общего снижения устойчивости эритроцитов периферической крови.

Изучение действия паров дихлорэтана и диоксана-1,4 в диапазоне доз 0,01-0,1 и 1,0 мг/м3 показывает, что только концентрация 10,0 мг/м3 вызывает, как статистически значимое увеличение содержания лейкоцитов и эритроцитов, так и существенные сдвиги в гемолитической стойкости эритроцитов. Время гемолиза 50 и 100% клеток было увеличено соответственно на 21% и 22%, 33% и 36% по сравнению с контролем, а максимальная скорость гемолиза снижена и установлена на 40 секунд позже, что

обусловлено, по-видимому, выбросом эритроцитов из депо, о чём свидетельствует, как накопление числа эритроцитов в периферической крови, так и повышение устойчивости мембран эритроцитов к действию гемолитика. Повышение устойчивости мембран отражается сдвигом кривой гемолиза вправо, что характеризует повышение прочности мембран всей совокупности эритроцитов.

Эритрограммы при действии дихлорметана в концентрации 50,0 мг/м3 полностью соответствуют изменениям гемолитической стойкости эритроцитов при действии паров дихлорэтана в концентрации 10,0 мг/м3, через сутки при однократном воздействии и через месяц при многократном поступлении, что позволяет говорить о возможности мембраннопротеинового эффекта дихлорметана в концентрации 50,0 мг/м3, а увеличение концентрации до 100,0 мг/м3 приводит к значительному снижению стойкости всей популяции эритроцитов, что проявляется в сокращении времени наступлении максимальной скорости Гемолиза на 28% и времени полного гемолиза на 21% по сравнению с интактными животными.

Таким образом, однократное воздействие экотоксикантов приводит к изменениям в периферической картине крови, которые отражают как общую реакцию организма на местное действие экотоксикантов (адаптивный выброс эритроцитов и лейкоцитов), так и действие на клеточном уровне, которое характеризуется изменением устойчивости мемабран эритроцитов к кислотному гемолизу. Кислотные эритрограммы отражают влияние токсикантов на мембраны эритроцитов, что выражается в их изменении, проявляющиеся уже на ранних сроках воздействия.