КОНСТРУКЦИИ НУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ВЕКТОРЫ ДЛЯ ГЕНОТЕРАПИИ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ ВИЛЬСОНА И ДРУГИХ СОСТОЯНИЙ

1. Конструкция нуклеиновой кислоты, которая содержит:
нуклеотидную последовательность эукариотического промотора;
нуклеотидную последовательность, кодирующую укороченную медь-транспортирующую АТФазу 2 (ATP7B), в которой N-концевые участки HMA1, HMA2, HMA3 и HMA4, ассоциированные с тяжелыми металлами, полностью удалены, а HMA 5 и HMA 6 оставлены неудаленными и
последовательность сигнала полиаденилирования.
2. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 1, где делеция в укороченном ATP7B включает аминокислоты с 57 до 486 из последовательности SEQ.ID.NO.2.
3. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1 или 2, где аминокислотная последовательность укороченной медь-транспортирующей АТФазы 2 представляет собой SEQ.ID.NO.7.
4. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 3, где нуклеотидная последовательность, кодирующая укороченную медь-транспортирующую АТФазу 2, выбрана из группы, состоящей из:
кодирующей последовательности CDS из SEQ.ID.NO.6, основания 473-3580;
последовательности SEQ.ID.NO.8; и
последовательности, где по меньшей мере 827, по меньшей мере 879, по меньшей мере 931, или по меньшей мере 983 из кодонов, кодирующих укороченную медь-транспортирующую АТФазу 2, идентичны кодонам кодирующей последовательности SEQ.ID.NO.8.
5. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-4, где нуклеотидная последовательность эукариотического промотора представляет собой нуклеотидную последовательность промотора гена α1-антитрипсина, или последовательность химерного промотора, которая содержит последовательность промотора гена α1-антитрипсина в сочетании с энхансерным элементом гена альбумина.
6. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-5, где нуклеотидная последовательность эукариотического промотора представляет собой последовательность, ограниченную основаниями 156-460 SEQ.ID.NO.1 (AAT), или SEQ.ID.NO.5 (EalbPa1AT).
7. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-6, где конструкция дополнительно содержит последовательности 5'ITR и 3'ITR вируса.
8. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.7, где последовательности 5'ITR и 3'ITR принадлежат аденоассоциированному вирусу (AAV).
9. Конструкция нуклеиновой кислоты по п. 8, где последовательности 5'ITR и 3'ITR AAV относятся к серотипу, выбранному из группы, состоящей из AAV1, AAV2, и AAV4, предпочтительно, к серотипу AAV2.
10. Экспрессирующий вектор, который содержит конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9.
11. Экспрессирующий вектор по п. 10, где вектор представляет собой вектор на основе AAV.
12. Клетка-хозяин, содержащая конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9 или экспрессирующий вектор по любому из пп. 10-11.
13. Вирусная частица, которая содержит конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9, или экспрессирующий вектор по любому из пп. 10-11.
14. Вирусная частица по п. 13, где вирусная частица содержит капсидные белки AAV.
15. Вирусная частица по п. 12, где вирусная частица содержит капсидные белки серотипа AAV, выбранного из группы, состоящей из AAV1, AAV5, AAV7, AAV8, AAV9 и AAV10, предпочтительно, из серотипа AAV8 или AAV9.
16. Вирусная частица по п. 15, где последовательности 5'ITR и 3'ITR в конструкции нуклеиновой кислоты относятся к серотипу AAV2, а капсидные белки относятся к серотипу AAV8.
17. Фармацевтическая композиция, которая содержит конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9, экспрессирующий вектор по любому из пп. 10-11, клетку-хозяина по п. 12 или вирусную частицу по любому из пп. 13-16, и фармацевтически приемлемый носитель.
18. Набор, включающий конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9, экспрессирующий вектор по любому из пп. 10-11, клетку-хозяина по п. 12 или вирусную частицу по любому из пп. 13-16 или фармацевтическую композицию по п. 17 в одном или нескольких контейнерах, необязательно дополнительно включающий инструкции или упаковочные материалы, которые описывают, как вводить пациенту конструкцию нуклеиновой кислоты, вектор, клетку-хозяина, вирусную частицу или фармацевтическую композицию.
19. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9, экспрессирующий вектор по любому из пп. 10-11, клетка-хозяин по п. 12 или вирусная частица по любому из пп. 13-16, для применения в качестве лекарственного средства.
20. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9, экспрессирующий вектор по любому из пп. 10-11, клетка-хозяин по п. 12 или вирусная частица по любому из пп. 13-16 или фармацевтическая композиция по п. 17, для применения для лечения состояния, вызванного недостаточностью или нарушением функции медь-транспортирующей АТФазы 2, предпочтительно, для лечения болезни Вильсона.
21. Применение конструкции нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9, экспрессирующего вектора по любому из пп. 10-11, клетки-хозяина по п. 12 или вирусной частицы по любому из пп. 13-16 в препарате лекарственного средства для применения для лечения состояния, вызванного недостаточностью или нарушением функции медь-транспортирующей АТФазы 2, предпочтительно, для лечения болезни Вильсона.
22. Способ для лечения состояния, вызванного недостатком или нарушенной функцией медь-транспортирующей АТФазы 2, предпочтительно, для лечения болезни Вильсона у пациента, который включает введение пациенту терапевтически эффективного количества конструкции нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9, экспрессирующего вектора по любому из пп. 10-11, клетки-хозяина по п. 12, вирусной частицы по любому из пп. 13-16 или фармацевтической композиции по п. 17.
23. Способ получения вирусных частиц по любому из пп. 13-16, включающий стадии:
культивирования клетки-хозяина по п. 12 в среде для культивирования; и
получения вирусных частиц из клеточной культуры супернатанта и/или внутри клеток.
24. Применение конструкции нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9 или экспрессирующего вектора по любому из пп. 10-11 для получения вирусных частиц.