СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВИЧ-АССОЦИИРОВАННОЙ ДИАРЕИ
METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING HIV-ASSOCIATED DIARRHOEA

Родственные заявки
По данной заявке испрашивается приоритет согласно предварительной заявке 61/408, 622, поданной 31 октября 2010; предварительной заявке США 61/409,335, поданной 2 ноября 2010; предварительной заявке США 61/416,249, поданной 22 ноября 2010 и предварительной заявке США 61/434, 379, поданной 19 января 2011 года. Все содержание каждой из этих заявок включено в настоящее описание посредством ссылки.
Уровень техники
Диарея остается важной проблемой для ВИЧ-инфицированных субъектов в эпоху высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ), негативно сказывающейся на качестве жизни, несмотря на широкое использование антидиарейных препаратов. Причин тому множество и они включают ВИЧ-энтеропатию, чрезмерное развитие нетипичных микробных агентов, злокачественность распространенных кишечных патогенов и побочные эффекты собственно ВААРТ терапии (Kartalija 1999).
В то время как определения и способы отчетности меняются, установлено, что около половины всех ВИЧ-СПИД субъектов имеют диарею в какой-то момент во время их болезни. Хотя заболеваемость диареей не изменялась в течение внедрения ВААРТ, этиологии диареи значительно изменилась с ростом неинфекционных причин и снижения оппортунистических инфекционных заболеваний.
Лечение диареи поможет в повышении общей эффективности противовирусной лекарственной терапии, а также качества жизни, и контроля потери массы у ВИЧ-положительных больных. Диарея может привести к снижению приверженности антиретровирусному лечению и/или привести к необходимости переключения АРВ схем. Диарея также сопровождается снижением уровня антиретровирусных лекарственных препаратов, что подтверждает, что адекватное лечение улучшит абсорбцию АРВ препаратов. На популяционном уровне соблюдение режима лечения лекарственными препаратами и поддержание адекватного уровня АРВ важны для минимизации развития лекарственно устойчивых штаммов вируса. Таким образом, ассоциированная с лекарственными препаратами диарея у ВИЧ-положительных больных представляет собой важную и неудовлетворенную клиническую потребность, требующую более эффективного тактики ведения. В настоящее время предписанное лечение эффективно только частично или осложняется нежелательными побочными эффектами, такими как запор и возможностью привыкания. Разработка лекарственного средства для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи с низким потенциалом для лекарственного взаимодействия, влияния на метаболизм лекарственных препаратов или аддиктивного потенциала, могла бы привести значительной пользе для ВИЧ-инфицированных субъектов.
Сущность изобретения
В настоящем изобретении описываются способы профилактики, облегчения и/или лечения диареи. В одном из вариантов представленные в настоящем изобретении способы предотвращают, облегчают или лечат ВИЧ-ассоциированную диарею и диарею, ассоциированную с высокоактивной антиретровирусной терапией (ВААРТ).
В одном аспекте, представленном в настоящем изобретении, способы лечения ВИЧ-ассоциированной диареи или диареи, ассоциированной с высокоактивной антиретровирусной терапией (ВААРТ) у ВИЧ-инфицированного субъекта, включают введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение около 500 мг в день; введение около 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день; введение около 250 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом.
В одном аспекте в настоящем изобретении представлены способы лечения консистенции испражнений у ВИЧ-инфицированного субъекта, включающие введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение около 500 мг в день; введение около 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день; введение около 250 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом.
В одном аспекте в настоящем изобретении представлены способы улучшения консистенции испражнений у ВИЧ-инфицированного субъекта, включающие введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение около 500 мг в день; введение около 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день; введение около 250 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом.
В одном аспекте в настоящем изобретении представлены способы облегчения водянистой диареи у ВИЧ-инфицированного субъекта, включающий введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение около 500 мг в день; введение около 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день; введение около 250 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом.
В одном аспекте в настоящем изобретении представлены способы снижения количества испражнений в день у ВИЧ-положительных субъекта, включающий введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение около 500 мг в день; введение около 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день; введение около 250 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом.
В одном варианте осуществления введение происходит между около 1 месяца и около 5 месяцев. В одном варианте осуществления введение происходит между около 1 месяца и около 6 месяцев. В одном варианте осуществления введение происходит около 6 месяцев. В другом варианте осуществления введение происходит 6 или более месяцев.
В одном варианте осуществления введение происходит от около 3 дней до 5 месяцев. В одном варианте осуществления введение происходит от около 3 дней до 6 месяцев.
В одном варианте осуществления улучшение симптомов начинается на 3 день.
В одном варианте осуществления улучшение симптомов увеличивается с более длинной продолжительностью введения после 3 дня.
В одном из вариантов осуществления, субъект европеоид или имеет латиноамериканское происхождение.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят в течение 8 дней.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят от промежутка между 8 и 24 неделями до промежутка от 8 дней до 26 недель.
В одном варианте осуществления субъект считается вылеченным, если субъект демонстрирует уменьшение количества испражнений в день на одно или более, уменьшение количества водянистых испражнений в день, улучшение ежедневной оценки боли или дискомфорта в животе, улучшение ежедневной оценки консистенции испражнений, улучшение оценки консистенции испражнений (от водянистого к сформированному), уменьшение числа дней в неделю, в которые субъекты испытывают неотложные позывы к дефекации, уменьшение числа дней в неделю, в которые субъекты испытывают недержание кала, или уменьшение незапланированных визитов по поводу значительного ухудшения диареи.
В одном варианте осуществления субъект считается вылеченным, если субъект демонстрирует улучшение оценки для ежедневной консистенции испражнений.
В одном варианте осуществления субъект считается вылеченным, если субъект демонстрирует снижение консистенции испражнений.
В одном варианте осуществления субъект считается вылеченным, если субъект демонстрирует уменьшение количества водянистых испражнений за день.
В одном варианте осуществления субъект считается вылеченным, если субъект демонстрирует снижение количества испражнений за день.
В одном варианте осуществления, увеличение или уменьшение симптомов измеряется от исходного уровня.
В одном варианте осуществления введение происходит в течение около 5 месяцев. В другом варианте осуществления введение происходит в течение около 6 месяцев.
В одном варианте осуществления введение происходит около 5 месяцев или дольше. В другом варианте осуществления введение происходит около 6 месяцев или дольше.
В одном варианте осуществления введение происходит в течение продолжительности ВИЧ-инфекции.
В одном варианте осуществления ответ на лечение увеличивается после того, как крофелемер вводили в течение более 4 месяцев.
Другие варианты осуществления раскрыты ниже.
Краткое описание чертежей
На Фиг.1 показаны субъекты с клиническим ответом в перекрестном исследовании фазы без плацебо-контроля на выборке для оценки безопасности.
На Фиг.2 показаны субъекты с ответом по консистенции испражнений в перекрестном исследовании фазы без плацебо-контроля на выборке для оценки безопасности.
На Фиг.3 изображен анализ подгруппы, показывающий разницу в результатах лечения в процентах субъектов, ответивших на лечение (крофелемер 125 мг два раза сутки в сравнении с плацебо) с соответствующими доверительными интервалами и p-величинами.
Подробное описание изобретения
Раскрытые в настоящем изобретении способы включал и введение эффективных количеств проантоцианидиновых полимеров, например, крофелемера, субъектам, например, с ВИЧ-ассоциированной диареей или с диареей, ассоциированной с высокоактивной антиретровирусной терапией (ВААРТ).
Проантоцианидины представляют собой группу конденсированных танинов. Сырые экстракты из лекарственных растений, например, Pycanthus angolenis и Baphia Nitida, как было показано, обладают антидиарейными свойствами в испытаниях на животных (Onwukaeme and Anuforo, 1993, Discovery and Innovation, 5:317; Onwukaeme and Lot, 1991, Phytotherapy Res., 5:254). Сырые экстракты, которые содержат танины, в частности, экстракты из стручков рожкового дерева и сладкого каштана, были предложены в качестве профилактики или лечения (патент США №5043160; Европейский патент №481396).
Проантоцианидины содержат по меньшей мере два или более мономерных звеньев, которые могут быть одинаковыми или различными мономерными структурами. Мономерные единицы (общее название "лейкоантоцианидин"), как правило, являются мономерными флавоноидами, которые включают катехины, эпикатехины, галлокатехины, галлоэпикатехины, флавонолы, флавонолы и флаван-3,4-диолы, лейкоцианидины и антоцианидины. Таким образом, полимерные цепи основываются на различных структурных единицах, которые создают значительные вариации полимерных проантоцианидинов и большое число возможных изомеров (Hemingway et al., 1982, J.С.S. Perkin, 1:1217). Более крупные полимеры флавоноид-3-оловых единиц являются преобладающими в большинстве растений, и как было найдено, обладают средней молекулярной массой более 2000 дальтон, содержащие 6 или более единиц (Newman et al., 1987. Mag. Res. Chem., 25:118).
Проантоцианидиновые полимеры были найдены в самых разнообразных растениях, особенно растениях с древесным характером роста (например, Croton spp.и Calophyllum spp.). Большое количество различных видов деревьев Croton, в том числе Croton sakutaris, Croton gossypifolius, Croton palanostima, Croton lechleri, Croton erythrochilus и Croton draconoides, найденные в Южной Америке, продуцируют красный вязкий латексный сок, называемый Sang re de Dra go или "Dragon′s Blood". Патент США №5211944 впервые описал выделение водорастворимых проантоцианидиновых полимерных композиции из Croton spp.и применение композиции в качестве антивирусного агента (см. также Ubillas et al., 1994, Phytomedicine, 1:77). Было показано, что проантоцианидиновая полимерная композиция обладает антивирусной активностью против различных вирусов, включая респираторно-синцитиальный, вирусы гриппа, парагриппа и герпеса. Патент США №5211944 также раскрывает выделение водорастворимой проантоцианидиновой полимерной композиции из Calophyllum inophylum и применение этой композиции в качестве противовирусного агента.
Типичные проантоцианидиновые полимерные композиции, используемые в способах, представленных в настоящем изобретении, предпочтительно выделяют из Croton spp. или Calophyllum spp любым способом, известным в данной области техники. Например, проантоцианидиновая полимерная композиция может быть выделена из Croton spp. или Calophyllum spp. по способу, раскрытому в патенте США №5211944 или в Ubillas et al., 1994, Phytomedicine 1: 77-106.
Проантоцианидиновые полимерные композиции, используемые в способах, представленных в настоящем изобретении, также могут быть получены in vitro с использованием синтетических методик.
В одном конкретном варианте осуществления проантоцианидиновая полимерная композиция, используемая в способах, представленных в настоящем изобретении, является крофелемером.
Крофелемер представляет собой олигомерный проантоцианидин, экстрагированный и очищенный из красного вязкого латекса растения Croton lechleri семейства Euphorbiace. Растение широко распространено по всей тропической Центральной и Южной Америке и широко известно этноботаникам и местным целителям своими целебными свойствами (McRae 1988), в том числе для лечения диареи. Крофелемер, как полагают, оказывает свой антидиарейный эффект через люминальную блокаду CFTR (муковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости) хлоридного (Cl-) канала. Крофелемер продемонстрировал активность in vitro против холерного токсина, форсколина, E coli LT и STa токсин-опосредованной секреции Cl-, и для нормализации аккумуляции электролита и жидкости в СТ-получавших лечение мышах (Gabriel 1999, Fischer 2004, Adam 2005) через его эффекты на CFTR-канал. Крофелемер также значительно улучшал секреторную диарею у людей вследствие энтеротоксигенной E. coli (DiCesare 2002), которая также, как полагают, вызывает секреторную диарею посредством активации CFTR (Kunzelmann 2002). Блокада CFTR-канала, как можно ожидать, имеет негативные последствия у человека, даже напоминая муковисцидоз. Тем не менее, крофелемер практически не имеет системной биодоступности у человека. Во время исследований результаты показали, что крофелемер мало или вообще не абсорбируется из желудочно-кишечного тракта, и что крофелемер хорошо переносится здоровыми мужскими особями. Таким образом, местом приложения действия крофелемера является местное применение в желудочно-кишечном тракте.
Крофелемер (CAS 148465-45-6) является олигомерными проантоцианидином с различной длиной цепи, получаемым из Dragon′s Blood Croton lecheri семейства молочайных. Крофелемер имеет среднюю молекулярную массу от около 1500 дальтон до около 2900 дальтон. Мономеры, содержащие крофелемер, включают катехин, эпикатехин, галлокатехин и эпигаллокатехин. Длина цепи крофелемера находится в диапазоне от около 3 до около 30 единиц со средней длиной цепи около 8 единиц. Структура крофелемера показана ниже.
R=H или OH
n=3-30
Где средний n=6.
Другой способ выделения крофелемера можно найти в патентной публикации США №2005/0019389, содержание которой явным образом включено в настоящий патент.
В других вариантах осуществления исходный латекс, получаемый из видов Croton или видов Calophyllum, или экстракта, полученного из видов Croton или видов Calophyllum, являются полезными в способах, представленных в настоящем изобретении. Примеры экстрактов описаны в Persinos et al., 1979, J. Pharma. Sci. 68:124 and Sethi, 1977, Canadian J. Pharm. Sci. 12:7.
«Улучшить», «улучшение», «оздоровление» или подобное от носится, например, детектируемым улучшениям или детектируемым изменениям в соответствии с оздоровлением, которое происходит у субъекта, или по меньшей мере у меньшей части субъектов, например, по меньшей мере у около 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 100%, или в интервале приблизительно между любыми двумя из этих значений. Такие улучшения или изменения можно наблюдать у получавших лечение (леченых) субъектов по сравнению с субъектами, не получавших лечение крофелемером, где необработанные субъекты имеют или могут получить такое же или аналогичное заболевание, состояние, симптом или подобное вышеперечисленному. Улучшение заболевания, состояния, симптома или параметра анализа может быть определено субъективно или объективно, например посредством самооценки субъекта(ов), по оценке врача или посредством проведения соответствующего анализа или измерения. Улучшение может быть временным, длительным или постоянным или оно может изменяться в соответствующее время в процессе или после того, как крофелемер введут субъекту или используют в анализе или другим описанным в настоящем изобретении способом или цитируемой ссылке, например, в сроки, описанные ниже, или около 1 часа после введения или использования крофелемера до приблизительно 7 дней, 2 недели, 28 дней или 1, 3, 6, 9 месяцев или более после того, как субъект(ы) получил подобную обработку.
"Модуляция", например, симптома, уровня или биологической активности молекулы или т.п., означает, например, что симптом или активность или тому подобное, детектируемо увеличивается или уменьшается. Такое увеличение или уменьшение может наблюдаться у получавших лечение субъектов по сравнению с субъектами, не обработанными крофелемером, где необработанные субъекты имеют или могут получить такое же или аналогичное заболевание, состояние, симптом или подобное перечисленному. Такие увеличения или уменьшения могут быть по меньшей мере около 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 100%, 150%, 200%, 250%, 300%, 400%, 500%, 1000% или более, или в любом диапазоне между любыми двумя из этими значениями. Модуляция может быть определена субъективно или объективно. Модуляция может быть временной, длительной или постоянной или она может варьироваться в соответствующее время в процессе или после того, как крофелемер введут субъекту или используют в анализе или другим описанным в настоящем изобретении способом или цитируемой ссылке, например, в сроки, описанные ниже, или около 1 часа после введения или использования крофелемера до приблизительно 2 недель, 28 дней, 3, 6, 9 месяцев или более после того, как субъект(ы) получил крофелемер.
Выражение "профилактически эффективное количество" соединения означает количество крофелемера, которое является эффективным, после одной или нескольких доз введения субъекту для предотвращения или лечения диареи, например, ВИЧ-ассоциированной диареи.
Используемый в настоящем изобретении термин "субъект" включает организмы, которые способны страдать ВИЧ диареей или ВААРТ ассоциированной диареей или которые могли бы извлечь пользу из введения крофелемера, как описано в настоящем изобретении, таких как люди и животные, не принадлежащих человеческому роду. Термин "животные, не принадлежащие человеческому роду" включает всех позвоночных, например, млекопитающих, таких как приматы, кроме человека, других млекопитающих, например, грызунов и овец, собак и коров, подверженных риску ВИЧ ассоциированной диареи или ВААРТ ассоциированной диареи. Субъект с риском ВИЧ ассоциированной диареи или ВААРТ ассоциированной диареи означает включение субъекта с риском развития или заражения инфекцией ВИЧ
Выражение "профилактически эффективное количество" соединения означает количество крофелемера, которое является эффективным после одной или нескольких доз введения субъекту, для предотвращения или лечения диареи.
Термин "введение" или "вводимый" включает в себя способы введения крофелемера в субъект для осуществления предназначенной им функции. Примеры способов введения, которые могут быть использованы, включают инъекции, пероральный, ингаляции, вагинальный, ректальный и трансдермальный. Фармацевтические препараты могут определяться формой, подходящей для каждого способа введения. Например, эти препараты вводятся в форме таблетки или капсулы, инъекции, ингаляции, мази или суппозитория. Введение также может осуществляться посредством инъекции, инфузии или ингаляции; местно посредством лосьона или мази, а также ректально посредством суппозиториев. Предпочтительным является пероральное введение. В зависимости от способа введения, крофелемер может быть покрыт или он может быть помещен в выбранный материал для защиты от природных условий, которые могут отрицательно влиять на его способность выполнять свои функции. Крофелемер можно вводить отдельно или в сочетании с любым другим препаратом или препаратами, как описано выше, или с фармацевтически приемлемым носителем или с обоими. Типичные формы с кишечнорастворимыми оболочками крофелемера описаны, например, в патенте США 7556831.
Введение "в комбинации с" одним или более дополнительными терапевтическими препаратами включает в себя одновременное (совместное) и последовательное введение в любом порядке.
Как должно быть очевидно специалистам в данной области техники, полезная in vivo дозировка для введения и конкретного способа введения может варьироваться в зависимости от возраста, массы и вида подвергающегося лечению млекопитающего, конкретных используемых соединений и/или конкретного использования, для которых эти соединения применяются. Определение эффективной дозировки, то есть уровней дозировки, необходимых для достижения желаемого результата, может быть достигнуто специалистами в этой области техники с помощью стандартных фармакологических методов и в соответствии с данными, представленными в настоящем патенте. Что касается крофелемера, крофелемер может быть выгодно вводить по 125 мг два раза в день для лечения водянистой диареи, если менее водянистое испражнение желательно в течение недели. Целесообразно также подвергать лечению по 500 мг два раза в день, если желательно улучшение консистенции испражнений.
Термин "получение", как в "получении крофелемера" предназначен для включения приобретения, синтеза, выделения, экстракции или иного обретения крофелемера. Выражение "профилактически эффективное количество" соединения означает количество крофелемера, которое является эффективным после введения одной или нескольких доз субъекту для предотвращения или лечения индикации. В одном варианте осуществления назначением является ВИЧ-ассоциированная диарея.
Способы лечения
В настоящем изобретении приведены способы лечения, предупреждения или облегчения диареи или симптомов, вызванных ВИЧ-инфекцией или ВААРТ терапии ВИЧ-инфекции, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества крофелемера. Типичная диарея, которая может быть вылечена или предотвращена с использование способов, описанных в настоящем изобретении, включает ВИЧ ассоциированную диарею или диарею, ассоциированную с высокоактивной антиретровирусной терапией.
В одном из вариантов осуществления лечение ВИЧ-ассоциированной диареи включает улучшение следующих симптомов ВИЧ-ассоциированной диареи или ВААРТ ассоциированной диареи, в том числе, например, уменьшение количества испражнений в день (частота), уменьшение количества водянистые испражнения в день, уменьшение частоты симптомов (неотложность позыва, недержание кала), снижение тяжести симптомов (боли в животе или дискомфорта), снижение ежедневной оценки консистенции испражнений (водянистый до сформированный), или уменьшение консистенции испражнений, что ведет к оформленному испражнению от водянистого испражнения.
В одном конкретном варианте осуществления, излечение определяется как два или меньше водянистых испражнений в неделю. В частности, излечение определяется как два или меньше водянистых испражнений в неделю в течение по меньшей мере двух из четырех недель лечения крофелемером.
В других конкретных вариантах осуществления излечение может также включать, например, снижение на одно или больше количества испражнений в день, уменьшение количества водянистого испражнения в день, улучшение ежедневной оценки боли в животе или дискомфорта, улучшение ежедневной оценки для консистенции испражнений, уменьшение числа дней в неделю, в которые субъекты испытывают неотложность позыва, уменьшение числа дней в неделю, в которые субъекты испытывали недержание кала, или уменьшение незапланированных визитов по поводу значительного ухудшения диареи.
В одном аспекте в настоящем изобретении приведены способы лечения ВИЧ-ассоциированной диареи или диареи, ассоциированной с высокоактивной антиретровирусной терапией (ВААРТ) у ВИЧ-положительных субъектов. Излечение диареи может включать, например, снижение количества испражнений в день на одно или более испражнений, уменьшение количества водянистого испражнения в день, улучшение ежедневной оценки боли в животе или дискомфорта, улучшение ежедневной оценки для консистенции испражнений, уменьшение консистенции испражнений, уменьшение числа дней в неделю, в которые субъекты испытывали неотложность позыва, уменьшение числа дней в неделю, в которые субъекты испытывали недержание кала, или снижение уменьшение незапланированных визитов по поводу значительного ухудшения диареи.
В одном аспекте в настоящем изобретении приведены способы лечения консистенции испражнений у ВИЧ-инфицированного субъекта, где субъект считается вылеченным, если есть улучшение в ежедневной оценке для консистенция испражнений и/или уменьшение оценки для консистенция испражнений, измеряемых в течение дня или дней или недель. Это снижение может измеряться от исходного уровня. Исходный уровень может быть определен в ближайшие дни недели до лечения крофелемером. Лечение включает в себя введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом.
В одном аспекте в настоящем изобретении представлены способы улучшения консистенции испражнений у ВИЧ-инфицированного субъекта, в которых субъект считается вылеченным, если есть улучшение в консистенции испражнений и/или уменьшение консистенции испражнений в течение дня или нескольких дней или недель. Это увеличение может быть измерено от исходного уровня. Исходный уровень может быть определен в ближайшие дни недели до лечения крофелемером. Лечение включает в себя введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом.
В одном аспекте в настоящем изобретении представлены способы облегчения водянистой диареи у ВИЧ-инфицированного субъекта, где субъект считается вылеченным, если субъект испытывает уменьшение количества водянистого испражнения в день и/или в течение нескольких дней, недели или недель введения крофелемера. Это снижение может быть измерено от исходного уровня. Исходный уровень может быть определен в ближайшие дни недели до лечения крофелемером. Лечение включает в себя введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом.
В одном аспекте в настоящем изобретении представлены способы уменьшения количества испражнений в день, в которых субъект считается вылеченным, если наблюдается снижение количества испражнений в день при измерении от исходного уровня. Исходный уровень может быть определен в ближайшие дни недели до лечения крофелемером.
Лечение включает в себя введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту, нуждающемуся в этом. Крофелемер можно вводить, например, один раз в день, два раза в день, три раза в день, или в четыре раза или более часто при необходимости в день. Крофелемер можно вводить в дозах, например, от около между 25 мг два раза в день до около 3000 мг трижды в день, предпочтительно Крофелемер вводят от около 125 мг до около 1000 мг в день. В другом варианте Крофелемер вводят от 125 мг два раза в день до 500 мг два раза в день в зависимости от симптомов. В другом варианте осуществления Крофелемер вводят 125 мг два раза в день. В другом варианте осуществления Крофелемер вводят 500 мг два раза в день. Крофелемер может быть введен перорально, например, в форме таблеток, порошковообразной форме, жидкой форме или в капсулах.
В конкретных вариантах осуществления субъекту вводят 250, 500 или 1000 мг в день крофелемера.
В конкретных вариантах осуществления субъекту вводят 125, 250 или 500 мг р.о. два раза в день (перорально два раза в день). Другие подходящие дозы для способов могут быть определены медицинским работником или субъектом. Количество крофелемера вводимого ежедневно может быть увеличено или уменьшено в расчете на массу, возраст, состояние здоровья, пол и медицинское состояние субъекта. Специалист в данной области техники сможет определить нужную дозу для субъекта на основе настоящего описания и данных, представленных в примерах, которые следуют ниже.
В других вариантах осуществления субъекту вводят крофелемер в течение 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24 или более недель, или 26 или более недель. В одном варианте осуществления субъекту вводят Крофелемер в течение заболевания. Продолжительность лечения может варьироваться в зависимости от типа и продолжительности заболевания, и соответствующая продолжительность лечения может быть легко определена специалистом в данной области техники, имеющим выгоду от этого раскрытия. Лечение может быть до инфицирования, во время инфекции или после подозрения на инфекцию и в течение периода времени, предложенного врачом, чтобы уменьшить или устранить диарею.
Субъекты, нуждающиеся в этом, включают субъектов, имеющие или такие, которые являются чувствительными к или которые имеют ВИЧ-ассоциированную диарею или ВААРТ ассоциированную диарею.
Используемый в настоящем изобретении термин терапевтически эффективное количество означает количество, эффективное при введении в организм человека или животного, не являющимся человеком, чтобы обеспечить терапевтические преимущества, такие как улучшение симптомов, например, в количестве, эффективном для уменьшения симптомов ВИЧ-ассоциированной диареи.
Согласно некоторым вариантам осуществления, крофелемер может быть введен в комбинации с другими соединениями, включая, например, антидиарейные препараты или анти-ВИЧ препараты, включая, например, антиретровирусные препараты.
Согласно одному аспекту в настоящем изобретении представлены способы лечения ВИЧ-ассоциированной диареи или диареи, ассоциированной с высокоактивной антиретровирусной терапией (ВААРТ) у ВИЧ-положительного субъекта, который предварительно использовал ингибиторы протеазы, включающие: введение от около 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение около 500 мг в день; введение около 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день; введение около 250 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту мужского пола, нуждающемся в этом. Используемый в настоящем изобретении термин "предварительно использующий" включает, например, субъектов, которые использовали ингибиторы протеазы (ИП) до терапии крофелемером или, перекрываясь с терапией крофелемером, но использование ИП начали до первой дозы терапии крофелемером.
Фармацевтические препараты
Кроме того, приведенные в настоящем изобретении фармацевтические композиции содержат эффективное количество крофелемера, описанного в настоящем изобретении, и фармацевтически приемлемый носитель. В дополнительном варианте осуществления эффективное количество является эффективным для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи и/или ВААРТ-ассоциированной диареи.
Примеры получения и применения крофелемера были описаны в патенте США 7556831, патенте США 20070254050 и патентной публикации США 20080031984, каждый из которых включен в настоящее описание посредством ссылки во всей их полноте.
Один вариант осуществления включает фармацевтические композиции, содержащие крофелемер и фармацевтически приемлемый носитель.
Фармацевтические композиции, описанные в настоящем изобретении, могут также содержать вспомогательные вещества, например, один или более разбавитель, связующее вещество, смазывающее вещество, дезинтегрирующий агент, краситель, ароматизатор или подсластитель. Композиции могут быть составлены для выбранных покрытых и непокрытых таблеток, твердых и мягких желатиновых капсул, драже, пастилок, вафельных листов, гранул и порошков в запечатанном пакете. Например, композиции могут быть составлены для местного применения, например, мази, помады, кремы, гели и лосьоны.
В некоторых вариантах осуществления эти фармацевтические композиции, являются пригодными для местного или перорального введения субъекту. В других вариантах осуществления, как подробно описано ниже, фармацевтические композиции могут быть специально приготовлены для введения в твердой или жидкой форме, в том числе адаптированной для следующих целей: (1) пероральное введение, например, большие дозы (водные или неводные растворы или суспензии), таблетки, болюсы, порошки, гранулы, пасты, (2) парентеральное введение, например, посредством подкожной, внутримышечной или внутривенной инъекции, как например, стерильный раствор или суспензия, (3) местное применение, например, в качестве крема, мази или спрея наносится на кожу, (4) интравагинально или ректально, например, в виде пессария, крема или пены или (5) аэрозоль, например, в виде водного аэрозоля липосомного препарата или твердых частиц, содержащих соединения.
Выражение "фармацевтически приемлемый" относится к крофелемеру, как описано в настоящем изобретении, к композициям, содержащим крофелемер, и/или лекарственным формам, которые, в рамках тщательной медицинской оценки, являются удобными для использования в контакте с тканями человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, соразмерных с разумным соотношением польза/риск.
Выражение "фармацевтически приемлемый носитель" включает фармацевтически приемлемое вещество, композицию или носитель, такие как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, вспомогательное вещество, растворитель или инкапсулирующий материал, участвующие в перемещении и транспортировке химического вещества от одного органа или части тела к другому органу или части тела. Каждый носитель должен быть "приемлемым" в смысле совместимости с другими ингредиентами композиции и не вредным для пациента. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают: (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; (4) порошкообразный трагакант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) вспомогательные вещества, такие как масло какао и воски для суппозиториев; (9) масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновая кислота, (16) апирогенную воду; (17) изотонический солевой раствор, (18), раствор Рингера, (19) этиловый спирт; (20) фосфатные буферные растворы, а также (21) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических препаратах.
Смачивающие агенты, эмульгаторы и смазывающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, разделительные средства, покрывающие агенты, подсластители, вкусовые добавки и ароматизаторы, консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композициях.
Примеры фармацевтически приемлемых антиоксидантов включают: (1) водорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, гидрохлорид цистеина, бисульфат натрия, метабисульфит натрия, сульфит натрия и тому подобное, (2) растворимые в масле антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутилгидроксианизол (БОА), бутилгидрокситолуол (БОТ), лецитин, пропилгаллат, альфа-токоферол и тому подобное, и (3) металл хелатирующие агенты, такие как лимонная кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), сорбит, винная кислота, фосфорная кислота, и тому подобное.
Композиции, содержащие крофелемер, включают композиции, пригодные для перорального, назального, местного (включая буккальное и сублингвальное), ректального, вагинального, аэрозольного и/или парентерального введения. Композиции могут быть удобно представлены в форме единичной дозы и могут быть приготовлены любыми способами, известными в области фармации. Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с веществом носителя для получения единичной дозированной формы, будет варьироваться в зависимости от организма, подлежащего лечению, от конкретного способа введения. Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с веществом носителя для получения единичной дозированной формы, как правило, будет таким количеством соединения, которое дает терапевтический эффект. Как правило, из ста процентов, это количество будет варьироваться от около 0,01% до около 99% активного ингредиента, например, от около 5% до около 70% или от около 10% до около 30%.
Жидкие лекарственные формы для перорального или ректального введения крофелемера могут включать в себя, например, фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активному ингредиенту, жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбитана и смеси вышеперечисленного.
Суспензии, помимо крофелемера могут содержать суспендирующие агенты, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбита, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант и смеси вышеперечисленного. Лекарственные формы для местного или трансдермального введения крофелемера могут включать, например, порошки, спреи, мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, растворы, пластыри и ингаляции. Мази, пасты, кремы и гели могут содержать в дополнение к крофелемеру вспомогательные вещества, такие как животные и растительные жиры, масла, воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремниевую кислоту, тальк и оксид цинка или смеси вышеперечисленного. Порошки и спреи могут содержать, в дополнение к крофелемеру, вспомогательные вещества, такие как лактоза, тальк, кремниевую кислоту, гидроксид алюминия, силикаты кальция и полиамидный порошок или смеси вышеперечисленных веществ. Спреи могут дополнительно содержать обычные пропелленты, например хлорфторуглеводороды и летучие незамещенные углеводороды, такие как бутан и пропан.
Примеры подходящих водных и неводных носителей, которые могут быть использованы в фармацевтических композициях, могут включать, например, воду, этанол, полиолы (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.п.) и подходящие смеси вышеперечисленного, растительные масла, такие как оливковое масло, и инъецируемые органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, посредством использования инкапсулирующих веществ, такого как лецитин, посредством поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсий и посредством использования поверхностно-активных веществ.
В одном варианте осуществления крофелемер используется с кишечнорастворимой оболочкой, чтобы защитить его от деградации в кислой среде желудка и/или от взаимодействия с белками, такими как пепсин в желудке, например, кишечнорастворимые защитные составы. В конкретном варианте осуществления крофелемер применяется в виде таблеток. В еще одном варианте, применяются таблетки с кишечнорастворимой оболочкой, например, Eudragit. В одном варианте осуществления крофелемер формулируется как гранула с кишечнорастворимой оболочкой или гранула в кишечнорастворимой капсульной оболочке. В другом варианте крофелемер формулируется как композиция с замедленным высвобождением.
В некоторых вариантах осуществления композиция составлена с соединением или соединениями, которые нейтрализуют желудочную кислоту. Альтернативно, фармацевтические композиции, содержащей композицию, вводят либо одновременно или последовательно с или после введения фармацевтической композиции, которая нейтрализует желудочную кислоту. Соединения, такие как антациды, которые могут быть использованы для нейтрализации желудочной кислоты включают, но не ограничены ими, карбонат алюминия, гидроксид алюминия, основной азотнокислый висмут, основной салицилат висмута, карбонат кальция, дигидроксиалюминия натрия карбонат, магалдрат, карбонат магния, гидроксид магния, оксид магния и смеси вышеперечисленного. Соединения, которые способны снижать секрецию желудочной кислоты и/или способны снижать кислотность желудочной жидкости, хорошо известны в данной области техники и включают, но не ограничиваются ими, антациды (гидроксид алюминия, карбонат глицинат алюминия, оксид магния, гидроксид магния, карбонат магния, карбонат кальция, бикарбонат натрия), блокаторы желудочной кислоты и комбинации любого из вышеуказанных. В общем, любой препарат, который был одобрен для продажи соответствующим правительственным агентством, и способен уменьшить продуцирование желудочной кислоты и/или снижения кислотности желудочной жидкости, можно вводить в комбинации с ингибиторной молекулой, такой как крофелемер, в соответствии с способами, представленными в настоящем патенте.
В конкретном варианте осуществления, где крофелемер не покрыт кишечнорастворимой оболочкой, крофелемер смешивают с одним или большим количеством соединений, которые способны снижать секрецию желудочной кислоты и/или способны уменьшать кислотность желудочной жидкости. В конкретном варианте осуществления, крофелемер формулируется в композиции контролируемого высвобождения (с замедленным высвобождением), такой как Merck GEM, Alza OROS, восковой матрикс (высвобождение на первых порах откладывается до тех пор пока композиция не пройдет из желудка в кишечник).
Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтические композиции крофелемера, содержащие композицию вместе с фармацевтически приемлемым носителем, в дозе, которая является терапевтически эффективной в лечении ВИЧ-ассоциированной диареи или ВААРТ диареи. В одном варианте осуществления непосредственно спрессованный крофелемер (например, который может быть непосредственно спрессован без вспомогательных веществ в таблетку с фармацевтически приемлемой твердостью и истираемостью) спрессован в таблетки, при необходимости с лубрикантом, таким как, но не ограничиваясь им, стеарат магния, покрывают кишечнорастворимой оболочкой. Эти препараты могут быть приготовлены способами, известными в данной области техники, см., например, способы, описанные в Remington′s Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., ed. Alfonso R. Gennaro, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1990.
В конкретном варианте осуществления проантоцианидиновая полимерная композиция содержит крофелемер (CAS 148465-45-6).
В еще одном варианте осуществления композицию покрывают кишечнорастворимой оболочкой. Кишечнорастворимые оболочки являются покрытиями, которые остаются нетронутыми в желудке, но растворяются и высвобождают содержимое лекарственной формы как только достигают тонкого кишечника. Большое количество кишечнорастворимых оболочек получают из ингредиентов, которые имеют кислотные группы, такие, что при очень низких значениях pH в желудке, т.е. при pH от 1,5 до 2,5, кислотные группы являются не ионизированными и оболочка остается в недиссоциированной, нерастворимой форме. При более высоких значениях pH, например, в среде кишечника, кишечнорастворимая оболочка превращается в ионизированную форму, которая может раствориться, освобождая молекулу ингибитора. Другие Кишечнорастворимые оболочки остаются неизменными, пока они не деградируют под действием ферментов в тонком кишечнике, а другие распадаются после определенного воздействия влаги, так что оболочка остаются неизменной пока проходит через тонкий кишечник.
Полимеры, которые могут быть использованы для получения кишечнорастворимых оболочек включают, но не ограничиваются ими, шеллак, ацетат фталаты крахмала и амилозы, сополимеры стирола и малеиновой кислоты, ацетат сукцинат целлюлозы, ацетат фталат целлюлозы (CAP), фталат поливинилацетата (PVAP), фталат гидроксипропилметилцеллюлозы (сорта HP-50 и HP-55), этилцеллюлозу, жиры, бутилстеарат и сополимеры метакриловой кислоты и сложных эфиров метакриловой кислоты с ионизируемыми кислотными группами. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит полимерную проантоцианидиновую композицию и полимер для кишечнорастворимой оболочки Eudragit L 30D, анионный сополимер метакриловой кислоты и метилакрилата со средней молекулярной массой 250000 дальтон. В другом варианте полимерной кишечнорастворимой оболочкой является Eudragit L 30D-55. Нанесение кишечнорастворимой оболочки для композиции крофелемера может быть выполнена любым способом, известным в данной области техники для нанесения кишечнорастворимых оболочек. Например, но не в качестве ограничения, кишечнорастворимые полимеры могут быть нанесены с использованием органических растворителей на основе растворов, содержащих от 5 до 10% масса/масса полимера для нанесения опрыскиванием и до 30% масса/масса полимера для дражирования. Растворители, которые обычно используются, включают, но не ограничиваются этим, ацетон, смеси ацетон/этилацетат, смеси метиленхлорид/метанол и тройные смеси, содержащих эти растворители. Некоторые кишечнорастворимые полимеры, такие как сополимеры метакриловой кислоты и сложных эфиров метакриловой кислоты могут быть нанесены с использованием воды в качестве диспергатора. Летучесть системы растворителей должна быть приспособлена для предотвращения прилипания вследствие липкости и для предотвращения высокой пористости оболочки вследствие преждевременного высыхания распыленных капелек или осаждения полимера после испарения растворителя.
В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, содержащая крофелемер формулируется как гранулы или порошок (микросферы с диаметром 300-5001) с кишечнорастворимой оболочкой, снабженные либо в твердыми желатиновыми оболочками капсул, либо суспендированными в пероральный раствор для педиатрического введения. Порошок или гранулы с кишечнорастворимой оболочкой могут быть также смешиваться с пищей, особенно для педиатрического введения.
Гранулы и порошок могут быть получены с использованием любого способа, известного в данной области техники, таких как, но не ограничиваясь ими, кристаллизация, распылительная сушка или любым способом измельчения, например, с помощью высокоскоростного миксера/гранулятора. Типичные составы могут быть найдены, например, в следующих патентах США и заявках на патент США №7341744; USSN 11/510, 152, и USSN 12/175, 131.
Вне зависимости от выбранного способа введения, крофелемер формулируется в фармацевтически приемлемых лекарственных формах с помощью способов, известных специалистам в данной области техники.
В лечении комбинированной терапией как соединения, так и другой лекарственный препарат(ы) вводят млекопитающим (например, людям, мужчинам или женщинам) способами, известными в данной области техники. Агенты могут быть введены в виде разовой дозированной формы или в виде отдельных лекарственных форм. Эффективные количества других терапевтических препаратов хорошо известны специалистам в данной области техники. Тем не менее, вполне укладывается в компетенции специалистов в данной области техники, чтобы определить диапазон оптимально эффективного количества других терапевтических препаратов. В одном варианте осуществления, в котором другой терапевтический препарат вводят животному, эффективное количество соединения является меньшим, чем его эффективное количество в случае, если другой терапевтический препарат не вводят. В другом варианте осуществления эффективное количество препарата является меньшим, чем его эффективное количество в случае, если соединение не вводится. Таким образом, нежелательные побочные эффекты, связанные с высокими дозами любого препарата могут быть сведены к минимуму. Другие потенциальные преимущества (включая без ограничений улучшенные режимы дозирования и/или снижение стоимости препарата) будут очевидны для специалистов в данной области техники.
В различных вариантах осуществления лекарственные препараты (например, профилактические или терапевтические препараты), вводят менее чем за 5 минут друг от друга, менее чем за 30 минут друг от друга, один час, с интервалом приблизительно 1 часа, с интервалом приблизительно 1 до приблизительно 2 часов, с интервалом приблизительно 2 часа до около 3 часов, с интервалом приблизительно 3 часов до около 4 часов, с интервалом приблизительно 4 часов до около 5 часов, с интервалом приблизительно 5 часов до около 6 часов, с интервалом приблизительно 6 часов до приблизительно 7 часов, с интервалом приблизительно семь часов до около 8 часов, с интервалом приблизительно 8 часов до около 9 часов, с интервалом приблизительно 9 часов до приблизительно 10 часов, с интервалом приблизительно 10 часов до приблизительно 11 часов, с интервалом приблизительно 11 часов до приблизительно 12 часов, с интервалом приблизительно 12 часов до 18 часов, с интервалом 18 часов до 24 часов, с интервалом 24 часов до 36 часов, с интервалом 36 часов до 48 часов, с интервалом 48 часов до 52 часов, с интервалом 52 часов до 60 часов, с интервалом 60 часов до 72 часов, с интервалом 72 часа до 84 часов, с интервалом 84 часов до 96 часов друг от друга, или 96 часов до 120 часов часть. В одном или нескольких вариантах осуществления два или более терапии вводят в течение посещения же пациента.
Наборы
Настоящее изобретение также обеспечивает наборы, например, наборы для лечения диареи, например, ВИЧ-ассоциированной диареи у субъекта. Наборы могут содержать, например, крофелемер или фармацевтическую композицию, содержащую крофелемер, и указания по применению препарата. Указания по применению препарата могут содержать информацию по назначению, информацию о дозировках, информацию о хранении и тому подобное.
Инструкция на этикетке включают в себя, например, инструкцию принимать крофелемер не менее 3 дней для лечения ВИЧ-ассоциированной или ВААРТ-ассоциированной диареи. В инструкции можно также прочитать, например, применять от 125 мг два раза в день до 500 мг два раза в день крофелемер до регрессии симптомов или в течение 24 недель для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи. В инструкции можно также прочитать, например, применять 125 мг два раза в день крофелемера до регрессии симптомов или в течение 24 недель для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи. В инструкции можно также прочитать, например, применять 500 мг крофелемера два раза в день до регрессии симптомов или в течение 24 недель для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи.
Инструкция на этикетке может дополнительно или альтернативно включать, например, инструкцию принимать крофелемер от 125 мг два раза в день до 500 мг два раза в день крофелемера до регрессии симптомов или в течение 26 недель для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи. В инструкции можно также прочитать, например, принимать 125 мг крофелемера два раза в день до регрессии симптомов или в течение 26 недель для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи. В инструкции можно также прочитать, например, принимать 250 мг крофелемера два раза в день до регрессии симптомов или в течение 26 недель для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи. В инструкции можно также прочитать, например, принимать 500 мг крофелемера два раза в день до регрессии симптомов или в течение 26 недель для лечения ВИЧ-ассоциированной диареи.
ПРИМЕРЫ
Следует иметь в виду, что настоящее изобретение не должно быть истолковано как ограничивающее примерами, которые здесь описываются, а скорее, настоящее изобретение следует истолковывать как включающее любые и все воплощения, обеспеченные настоящим изобретением, и все эквивалентные варианты в пределах квалификации специалиста в данной области техники.
Пример 1: Легочные эффекты перорально введенного крысам крофелемера
Трем группам из восьми самцов крыс вводили крофелемер в соответствующих уровнях дозы 60, 200 и 600 мг/кг. Дополнительная группа из восьми крыс-самцов служила в качестве контрольных животных и им вводили носитель, очищенную воду. Крофелемер и носитель вводили в дозе 10 мл/кг. Еще одна группа из восьми крыс-самцов получала препарат положительного контроля баклофен в дозе 100 мг/кг, дозовый объем 15 мл/кг. Крофелемер, препарат положительного контроля, и носитель вводили всем группам через желудочный зонд.
Наблюдения за смертностью, заболеваемостью, травмами, а также за наличием пищи и воды проводили по меньшей мере, два раза в день для всех животных. Клинические исследования проводили перед введением дозы, приблизительно через 1 час после введения дозы, и после завершения периодов легочного мониторинга (приблизительно через 4 часа после введения дозы). Массу тела измеряли и записывали до дозирования (День 1). Функцию легких (частота дыхания, дыхательный объем и минутный объем) контролировали в течение приблизительно 1 часа до введения дозы для определения исходного уровня и в течение приблизительно 4 часов после введения дозы. После периодов легочного мониторинга всех животных умерщвляли и тушки отбрасывали без дополнительной оценки.
Крофелемер, введенный перорально самцам крыс в дозах 60, 200 и 600 мг/кг, не производил каких-либо эффекты на смертность или количественные респираторные конечные критерии оценки на протяжении всего исследования. Что касается основных респираторных конечных критериев оценки, оцениваемых в данном исследовании, пероральное введение крофелемера не дало никаких неблагоприятных эффектов у крыс при дозах вплоть до 60 мг/кг.
Пример 2: 13-Недельное исследование пероральной токсичности крофелемера, введенного мышам
Трем группам из 15 самцов и 15 самок мышей вводили крофелемер при соответствующих дозовых уровнях 40, 400 и 1200 мг/кг/день. Еще одна группа из 15 животных/пол служила в качестве контроля и получила носитель, очищенную воду. Носитель или крофелемер вводили всем группам в дозе 10 мл/кг. Кроме того, четыре группы по восемь или 39 животных/пол/группа выступала в качестве токсикокинетических (ТК) животных и получали контроль или крофелемер таким же способом, что и основные исследовательские группы при соответствующих дозовых уровнях 0, 40, 400 или 1200 мг/кг/день. Вследствие смертности животным основных исследований и ТК-животным при 1200 мг/кг/день вводили крофелемер до 55 или 56 дней, соответственно.
Наблюдения за заболеваемостью, смертностью, травмами, а также доступностью пищи и воды проводили два раза в день для всех животных. Подробные клинические наблюдения по клиническим признакам проводили еженедельно по всем основным изучаемым животным. Массу тела измеряли и записывали еженедельно для всех животных. Потребление продуктов питания измеряли и записывали еженедельно по всем основным изучаемым животным. Офтальмоскопические исследования проводили предварительного и до аутопсии для всех основных изучаемых животных. Образцы крови для оценки клинической патологии отбирали из животных основного исследования в крайнем случае и при терминации. Образцы крови для определения концентрации в плазме крофелемера отбирали из назначенных ТК-животных в назначенных временных точках в дни 1, 56 и 91. После отбора крови ТК-животных умерщвляли и тушки отбрасывали за исключением назначенных животных при 1200 мг/кг/день. Токсикокинетические параметры определяли для крофелемера из данных зависимости концентрации от времени в исследуемых образцах. При окончании исследования, после вскрытия проводили исследования и массу органов записывали для всех животных основного исследования и предназначенных ТК-животных при 1200 мг/кг/день. Ткани исследовали микроскопически для животных основного исследования при 0, 400 и 1200 мг/кг/день. Начиная с 7 дня, ограниченные исследования общего вскрытия осуществляли на любом ТК-животном, подвергнутом эвтаназии в терминальном состоянии или найденном мертвыми в попытке определить причину смерти. Ткани собирали и сохраняли для возможного будущего исследования от животных основного исследования при 40 мг/кг/день и предназначенных ТК-животным при 1200 мг/кг/день.
Пероральное введение через зонд крофелемера два раза в день при 0, 40 или 400 мг/кг/день в течение 13 недель или 1200 мг/кг/день в течение 8 недель мышам переносится только самками при дозе 40 мг/кг/день. Крофелемер-связанные смертность зафиксировали у одного самца в дозе 40 мг/кг/день, а у обоих полов при 400 и 1200 мг/кг/день. Крофелемер-связанные эффекты, касающиеся массы тела, проявлялись при ≥400 мг/кг/день у обоих полов и эффекты, касающиеся потребления пищи, проявлялись в дозе 40 мг/кг/сут у самок и ≥400 мг/кг/день у обоих полов. Клиническая патология, масса органа и макроскопические эффекты наблюдались у обоих полов при 1200 мг/кг/день. Вследствие смертности в дозе 40 мг/кг/день, невозможно было определить уровень не наблюдаемого вредного воздействия (УННВВ) у самцов, однако УННВВ определен как 40 мг/кг/сут у самок.
Пример 3: Нейробихевиоральная оценка перорально введенного крысам крофелемера
Трем группам из шести самцов крыс вводили крофелемер в соответствующих уровнях дозы 60, 200 и 600 мг/кг. Еще одна группа из шести самцов крыс служила в качестве контроля и получала носитель, очищенную воду. Другая дополнительная группа из шести самцов крыс получала препарат положительного контроля, хлорпромазин гидрохлорид в дозе 20 мг/кг. Крофелемер, препарат положительного контроля или носитель вводили всем группам один раз через желудочный зонд в дозе 10 мл/кг.
Наблюдения за заболеваемостью, смертностью, травмами, а также доступностью пищи и воды проводили по меньшей мере два раза в день для всех животных. Клинические наблюдения проводились после каждого исследования по набору стандартных тестов (FOB). FOB-оценки проводили перед введением дозы и приблизительно через 1 и 24 часа после введения дозы. Массу тела измеряли и записывали перед введением дозы в день 1. При изучении действия все животные были подвергнуты эвтаназии и тушки отбрасывали без дополнительной оценки.
Крофелемер, вводимый перорально самцам крыс в дозах 60, 200 и 600 мг/кг, не производил каких-либо эффектов на смертность, клинические наблюдения, массу тела, или любых из проведенных нейроповеденческих измерений. Таким образом, по отношению к основным нейроповеденческим конечным точкам, оцениваемым в данном исследовании, пероральное введение крофелемера не дало никаких эффектов у крыс при дозах вплоть до 600 мг/кг.
Пример 4: Влияние перорального введения крофелемера на моторную функцию кишечника у крыс
Трем группам из восьми самцов крыс вводили крофелемер в соответствующих уровнях дозы 60, 200 и 600 мг/кг. Еще одна группа из восьми крыс-самцов получала препарат положительного контроля, морфин, при уровне дозы 20 мг/кг. Дополнительной группой из восьми крыс-самцов служила в качестве контроля и получала носитель, очищенную воду. Носитель, препарат положительного контроля или крофелемер вводили во всех группах через желудочный зонд один раз в день 1 исследования в дозе 10 мл/кг. Приблизительно через 1 час после введения пробного завтрака, 5% угольную суспензию в 10% аравийской камеди в деионизированной воде вводили всем животным через желудочный зонд в дозе 10 мл/кг.
Наблюдения за заболеваемостью, смертностью, травмой и доступностью пищи (за исключением периодов во время голодания) и воды проводили по меньшей мере два раза в день для всех животных. Клинические наблюдения проводили до дозирования и до терминации. Массу тела измеряли и записывали перед введением дозы в день 1. Приблизительно через 30 минут после введения пробного завтрака всех животных умерщвляли, тонкий кишечник удаляли хирургическим путем, и измеряли общую длину кишечника и расстояние, которое прошел уголь. Трупы отбрасывали без дополнительной оценки.
Крофелемер, введенный перорально самцам крыс в дозах 60, 200 или 600 мг/кг не приводил к смертности или каким-либо клинических наблюдениям. Крофелемер-связанное дозозависимое снижение желудочно-кишечной перистальтики было отмечено во всех группах, получавших лечение крофелемером, но статистически значимое снижение было отмечено только после доз в 200 и 600 мг/кг. Вследствие низких значений извлечения уровни доз фактически вводимых животным в 60 и 200 мг/кг группах были 51 и 169 мг/кг, соответственно.
Пример 5: Сердечно-сосудистые эффекты перорального введенного крофелемера у собак породы Бигль
Подобным образом четырем самцам собак породы Бигль вводили контрольный препарат в виде таблеток плацебо в желатине номер 12 Torpac lock ring gelatin capsules (0 мг/кг) и крофелемер в дозах приблизительно 60, 200 и 600 мг/кг в соответствии с принципами построения таблицы модифицированного латинского квадрата по трем символам - животное/пол/лечебная доза для каждой недели с последующим по меньшей мере 7 дневным периодом вымывания препарата до завершения полного курса лечения животного со всеми вышеупомянутыми дозировками. Контрольный препарат и крофелемер вводили всем животным перорально в желатиновой капсуле.
Животные были ранее хирургическим образом оборудованы радиопередатчиками для измерения температуры тела, артериального давления, частоты сердечных сокращений и электрокардиограммы (ЭКГ). Температура тела, систолическое, диастолическое и среднее артериальное давление, частоту сердечных сокращений и ЭКГ (продолжительность QRS и PP, PR и QT интервалов) непрерывно контролировали по меньшей мере за 2 часа до дозирования и по меньшей мере до 20 часов после после использования препарата. За девять дней до первого введения не получавших лечение животных непрерывно контролировали по сердечно-сосудистыми конечными точками по меньшей мере 22 часа. Эти данные использовали при расчете корригированного QT интервала на протяжении всего исследования.
Наблюдения за заболеваемостью, смертностью, травмой, а также доступностью пищи и воды проводили по меньшей мере два раза в день для всех животных. Клинические наблюдения проводили до дозирования и после завершения периода мониторинга состояния сердечно-сосудистой системы. Массу тела измеряли и записывали ежедневно перед каждым введением. По окончании исследования животных переводили в вольеры для проживания.
Крофелемер, введенный перорально кобелям в дозах 60, 200 и 600 мг/кг не приводил к смертности, ни к каким-либо изменениям в ЭКГ на протяжении всего исследования. После доз 200 и 600 мг/кг исследуемый препарат приводил к клиническим появлениям красных, черных или коричневых испражнений; мягких, водянистых, и/или слизистых каловых масс, и/или к наличию черных или коричневых загрязнений (фекального происхождения) на полу клеток, где содержались животные. Зато при этом в отношении всех физиологических параметров, характеризующих состояние сердечно-сосудистой системы, уровень не наблюдаемого вредного воздействия (УННВВ) соответствовал дозе 600 мг/кг.
+
Пример 6: Влияние крофелемера на ток калиевых каналов hERG К в клетках НЕК-293
Канал hERG стабильно экспрессировался в субклоне (HEK-293/hERG) НЕК-293 клеточной линии. Эффект крофелемера измеряли на максимальной амплитуде следового тока. Этот параметр определяли по токовым кривым, полученным из фиксированного потенциала клеток HEK-293/hERG, используя методику патч-зажима в конфигурации целой клетки.
Крофелемер исследовали при 5 концентрациях для первой серии экспериментов: 0,001 мкМ, 0,01 мкМ, 0,1 мкМ, 1,0 мкМ и 10.0 мкМ и 6 концентрациях для второй серии экспериментов: 0,1 мкМ, 0,3 мкМ, 1 мкМ, 3 мкМ, 10 мкМ и 30 мкМ. Препарат положительного контроля исследовали при 10 мкМ. Препаратом отрицательного контроля была деионизированная вода.
Крофелемер ингибировал следовой ток hERG дозозависимым образом. Установленные величины IC50 были 1,79 мкМ для первой серии экспериментов и 1,75 мкМ для второй серии экспериментов. Цизаприд (положительный контроль, 10 мкМ) ингибирует следовой ток hERG в среднем на 99,67% и 100,47% для первой и второй серий экспериментов соответственно, что согласуется с его известным фармакологическим действием.
Пример 7: Влияние пищи на фармакокинетику крофелемера 500 мг
В общей сложности 28 субъектов были зарегистрированы в этом исследовании. Субъектов рандомизировали на 1 день в соотношении 1:1 в группы 1 (голодали, затем питались) или группа 2 (питались затем голодали). Рандомизацию стратифицировали по полу. Каждый субъект получал разовую дозу крофелемера 500 мг (перорально в виде таблеток 2×250 мг) с пищей с высоким содержанием жира (крофелемер кормленные) и после голодания (крофелемер голодные). Периоды исследований голодания/кормления были разделены 7 днями. Последовательность голодания/кормления или кормления/голодания дозирования на дни 1 и 8 определяли посредством рандомизации на день 1.
Образцы крови для фармакокинетического анализа крофелемера забирали перед использованием препарата и вплоть до 48 ч после использования одной дозы препарата как у голодного, так и у накормленного.
В течение периода исследования влияния питания, субъектов кормили в течение ночи (без пищи в течение приблизительно 9,5 часа) до введения завтрака высокой жирности (крофелемер кормленные), или не кормили в течение ночи в течение 10 часов до введения одной дозы исследуемого препарата (крофелемер голодные).
Оценки схемы лечения на относительную биодоступность крофелемера были основаны на сравнении плазменных концентрации крофелемера по каждой фазе исследования. Образцы цельной крови забирали в следующие моменты времени (фактическое время отбора крови записывали в первичную документацию/электронную историю болезни): дни 1 и 8: перед использованием препарата (приблизительно 1 час перед дозированием) и через 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 24, 30, 36, 42 и 48 ч после использования препарата.
Фармакокинетический/фармакодинамический (PK/PD) анализ предназначался для осуществления с использованием всех субъектов, которые имели парные ЭКГ и концентрации в плазме для крофелемера. PK/PD фармакокинетический/ фармакодинамический анализ не был проделан вследствие недостаточного количества фармакокинетических PK данных.
Этот анализ был также разработан для оценки взаимосвязи между концентрацией крофелемера и QTcF (интервал QT с корректировкой Фридериция). Однако было найдено, что только три образца имеют концентрации выше LLOQ (нижний предел количественного обнаружения), равной 50 нг/мл, таким образом, отношение концентрации крофелемера к QTcF не могло быть оценено.
Средний исходный уровень корректировал изменение частоты сердечных сокращений, показывающий снижение частоты сердечных сокращений равное -1,1 количество ударов в минуту и -1,0 количество ударов в минуту для крофелемер голодных и кормленных, соответственно, через 4 часа. Средний исходный уровень корректировал изменение частоты сердечных сокращений, показывающий увеличение частоты сердечных сокращений, равное 3,5 количество ударов в минуту и 1,6 количество ударов в минуту для крофелемер голодных и кормленных, соответственно, через 12 часов. Изменения частоты сердечных сокращений не имели клинического значения. Не существовало никаких выбросов тахикардии или брадикардии у крофелемер голодных и кормленных.
Пример 8: Эффективность и безопасность крофелемера для лечения ВИЧ-ассоциированный диареи
Настоящее исследование проводили, чтобы определить, будет ли лечение крофелемером 125 мг, 250 мг и 500 мг внутрь (перорально), два раза в день улучшать частоту, консистенцию и неотложность позыва дефекации у субъектов с ВИЧ-ассоциированной диареей по сравнению с плацебо. Субъекты мужского и женского рода в возрасте ≥18 лет, с ВИЧ-1 инфекцией, подтвержденной стандартными серологическими тестами и/или вирусной нагрузкой и историей диареи продолжительностью не менее 1 месяца.
Исследование было рандомизированное, двойное слепое, в параллельных группах, плацебо-контролируемое и многоцентровое. Исследование проводилось в две стадии. Обе стадии состояли из 10+4 дневной, односторонне слепой, плацебо скрининговой фазы; с последующей рандомизацией и 31-дневной, двойной слепой, плацебо-контролируемой фазы лечения и завершились 20-недельной фазой дополнительного лечения без плацебо-контроля. На стадии I (стадия подбора дозы), двойная слепая фаза имела четыре ответвления: три дозы крофелемера (125 мг два раза в день, 250 мг два раза в день, до 500 мг два раза в день) и плацебо два раза в день. Шансы получить крофелемер или плацебо составляли 3:1 (1:1:1:1). Субъекты на продлении введения крофелемера в фазе дополнительного лечения получали ту же дозу препарата, или для группы, получавшей плацебо, проводилась повторная рандомизация к одной из трех вышеупомянутых доз препарата. После того, как стадия I завершалась, проводили промежуточный анализ, и доза крофелемера, которая, очевидно, работает лучше, безопаснее, и/или лучше переносится, чем другие, была выбрана для использования исключительно на стадии II. Стадия II будет иметь только два ответвления в двойной слепой, плацебо-контролируемой фазе лечения: выбранная доза крофелемера (крофелемер 125 мг) и плацебо. Шансы на получение крофелемера или плацебо будет равным 1:1. Всем животным пролонгации в 20-недельной фазе дополнительного лечения без плацебо-контроля в стадии II была назначена ранее выбранная доза крофелемера. В течение как стадии I, так и стадии II субъекты сначала будут входить в односторонне слепое плацебо скрининговую фазу продолжительностью 10+4 дня, в течение которой измеряли частоту дефекации, консистенцию и неотложность позыва. Антиретровирусная терапия и лечение связанных с ней состояний (в том числе профилактическое назначение антибиотиков для пневмоцистной пневмонии (PCP) или инфекции, должна оставаться на неизменном уровне от четырех недель до скрининга через плацебо-контролируемые фазы лечения. О любых изменениях в антиретровирусной терапии в любой точке исследования должно быть сообщено на сайт и документировано в индивидуальную регистрационную карту.
Основные анализы эффективности были основаны на данных из 4-недельного периода оценки эффективности плацебо-контролируемой фазы лечения. Анализ первичной конечной точки был основан на выборке «все пациенты, начавшие получать лечение» (ITT), и будет сравниваться доля субъектов, ответивших на лечение в группе плацебо, с долей субъектов, ответивших на лечение, в группе крофелемер 125 мг. Первичным критерием эффективности был клинический ответ, определяемый как два или менее водянистого испражнения в неделю в течение по меньшей мере двух из четырех недель после 4-недельного периода оценки эффективности в популяции ITT. Вторичными переменными эффективности в течение 4-недельного периода оценки эффективности в популяции ITT были:
Количество испражнений в день
Количество водянистых испражнений в день;
Оценка для ежедневной боли в животе или дискомфорта;
Оценка для ежедневной консистенции испражнений;
Количество дней в неделю, в которые субъекты испытывали неотложный позыв;
Количество дней в неделю, в которые субъекты испытывали недержание кала и
Доля субъектов, совершающих незапланированный визит по поводу значительного ухудшения диареи, или клинически значимого обострении диареи в течение 4-недельного периода оценки эффективности.
Это исследование состояло из стадии выбора дозы, периода промежуточного анализа и стадии оценки дозы.
Стадия I: Стадия выбора дозы
Субъектов рандомизировали 1:1:1:1, приблизительно по 50 субъектов на группу лечения: крофелемер 125 мг перорально два раза в день; крофелемер 250 мг перорально два раза в день; крофелемер 500 мг перорально два раза в день и плацебо перорально два раза в день. Крофелемер 125 мг, 250 мг и 500 мг или плацебо, вводили в виде таблеточной комбинации перорально два раза в день с жидкостям, по меньшей мере за полчаса до завтрака и ужина.
Фаза двойного слепого, плацебо-контролируемого лечения состояла из начального 3-дневного вводного периода (дни от -3 до -1), а затем 4-недельного периода оценки эффективности (дни с 1 по 28). Вводный период гарантировал, что эффект исследуемого препарата был установлен перед тем, как начался 4-недельный период оценки эффективности.
Субъекты, которые завершили плацебо-контролируемую фазу лечения вступили в 20-недельную без плацебо-контроля фазу дополнительного лечения. Субъекты в группах: крофелемер 125 мг перорально два раза в день, крофелемер 250 мг перорально два раза в день, крофелемер или 500 мг два раза в день продолжали получать эти лекарственные препараты в течение фазы лечения без плацебо-контроля; субъектов, которые получали плацебо повторно рандомизировали для получения или крофелемера 125 мг перорально два раза в день, крофелемера 250 мг перорально два раза в день или 500 мг перорально два раза в день (1:1:1). В течение 20-недельной фазы дополнительного лечения не существовало никакого риска осложнений от плацебо, и субъектам было разрешено без ограничений (при необходимости) использование ADM (анти-диарейные лекарственные средства).
Стадия I заканчивалась, когда около 50 субъектов рандомизировали в каждую из четырех групп лечения. Регистрацию останавливали при приблизительно 50 субъектах на группу лечения до тех пор пока не были завершены промежуточный анализ и принятие решения для стадии II.
Промежуточный анализ
Промежуточный анализ выполняли, когда приблизительно 50 субъектов (фактическое количество в таблицах, которые следуют ниже) рандомизировали в каждой из четырех групп лечения и завершали плацебо-контролируемый период лечения или терминировали исследования (не в любом случае, чтобы включить 14-дневный период после использования препарата для телефонного звонка для оценки побочных эффектов). На основе оценки эффективности и безопасности субъекты отбирались для продолжения одной из доз крофелемера наряду с плацебо в стадии II.
Стадия II: Стадия оценки дозы
Как только промежуточный анализ был завершен, регистрация возобновилась. Субъектов обследовали на пригодность для рандомизации на основе критериев на стадии I. Субъектов, которые входят в фазу двойного слепого, плацебо-контролируемого лечения в стадии II, рандомизировали в одну из двух групп лечения: крофелемер 125 мг перорально два раза в день или плацебо перорально два раза в день.
Крофелемер 125 мг, 250 мг и 500 мг или подобранное плацебо вводили в виде таблеточной комбинации перорально два раза в день с жидкостями по меньшей мере за полчаса до завтрака и ужина.
Целью стадии оценки дозы было определение доли ВИЧ-положительных больных, испытывающих облегчение диареи с крофелемером 125 мг перорально два раза в день по сравнению с плацебо перорально два раза в день во время плацебо-контролируемые фазы лечения. Другими целями были оценка эффектов крофелемера 125 мг перорально два раза в день по сравнению с плацебо на:
i. Количество испражнений в день (частота)
ii. Количество водянистых испражнений в день
iii. Симптом частоты (неотложный позыв, недержание кала)
iv. Тяжесть симптомов (боли или дискомфорт в животе), а также
v. Ежедневная оценка консистенции испражнений.
Соотношение рандомизации к крофелемеру 125 мг перорально два раза в день или плацебо перорально два раза в день 1:1. Субъекты, которые завершили фазу двойного слепого лечения, принимали участие в 20-недельной фазы дополнительного лечения без плацебо-контроля и получали крофелемер 125 мг перорально два раза в день. Субъекты, которых зачислили в стадию I, и которые получали либо крофелемер 125 мг перорально два раза в день, либо 250 мг перорально два раза в день, либо 500 мг перорально два раза в день, оставались на ранее назначенной дозе. Тем не менее, субъектам вновь назначали крофелемер 125 мг перорально два раза в день, если по мнению исследователя, ответ на или толерантность к их текущей дозе были неадекватными. Лечение оставалось слепым во время этого периода лечения, в том числе оставалась возможность того, что субъекты переводились на ту же дозу, которую они первоначально принимали.
Все исследовательские процедуры, выполненные на стадии I, не совпадали с процедурами стадии II.
Субъектов, рандомизированных в течение стадий I и II, объединяли и включали в расчеты объема выборки и анализ эффективности и безопасности.
Следующие критерии использовали для сбора данных для оценки эффективности крофелемера на ВИЧ-ассоциированную диарею.
Определения дневника исследования (IVRS, система интерактивного голосового ответа)
Диарея включает в себя частые жидкие или водянистые испражнения.
Дефекации определяется как поход в ванную комнату с удалением испражнений; число дефекаций означает число походов в ванную с удалением испражнений.
- водянистые испражнения определяется как испражнения, которые могут литься;
- жидкое испражнение определяется как мягкая без формы или очертаний;
- сформированное испражнение определяется как испражнение, подобное мягкой колбасе;
- твердой испражнение определяется как испражнение, подобное жесткой или комковатой колбасе; и
- очень твердое испражнение определяется как твердые комки или орешки, которые трудно выходят.
Неотложный позыв определяется как необходимость спешить в ванную для дефекации.
Недержание кала определяется как утечка или прохождение испражнения в нежелательное время (две чайные ложки или большее количества испражнений).
Боль или дискомфорт в животе определяется как боль, спазмы или вздутие живота, которые является неудобными и/или препятствующими нормальной деятельности.
Образцы испражнений
Каждый образец собирают и анализируют по следующим параметрам:
Визит 0
- Токсин Clostridium difficile;
- Кишечные патогены, анализ O&P (Ova and Parasites);
- Лямблии-специфический антиген методом ИФА; и
- Модифицированная краска для прокрашивания кислотоустойчивых бактерий для Cryptosporidium, Cyclospora и Isospora;
- Лактоферрин (качественный) и
- Скрытая кровь.
Визит 3
- Токсин Clostridium difficile;
- Кишечные патогены, анализ O&P (Ova and Parasites);
- Лямблии-специфический антиген методом ИФА; и
- Модифицированная краска для прокрашивания кислотоустойчивых бактерий для Cryptosporidium, Cyclospora и Isospora;
Визиты 4, 5, 6, 7 и 8
- Токсин Clostridium difficile;
- Кишечные патогены, анализ O&P (Ova and Parasites);
- Лямблии-специфический антиген методом ИФА;
- Модифицированная краска для прокрашивания кислотоустойчивых бактерий для Cryptosporidium, Cyclospora и Isospora;
Анализ показателя первичной эффективности
Первичная конечная точка эффективности клинического ответа; субъекты классифицируются как отвечающие, если они сообщили о двух или менее водянистых испражнений в неделю, в течение по меньшей мере двух из четырех недель периода оценки эффективности фазы плацебо-контролируемого лечения.
Анализ вторичных параметров, характеризующих эффективность
По каждому субъекту, средний исходный уровень, средний за недели от 1 до 4, и изменение от исходного уровня рассчитывают для следующих переменных:
- Количество испражнений в день;
- Количество водянистых испражнений в день;
- Ежедневная оценка боли или дискомфорта в животе;
- Ежедневная оценка консистенции испражнений;
- Количество дней в неделю, в которые субъекты испытывали неотложный позыв; и
- Количество дней в неделю, в которые субъекты испытывали недержание кала.
Каждый из вторичных непрерывных переменных будут проанализированы как процент изменения по сравнению с исходным уровнем.
Ежедневной оценке боли или дискомфорта в животе присваивали оценку следующим образом: нет=0, слабые=1, умеренные=2, тяжелые=3, чем больше оценка, тем хуже боли или дискомфорт. Оценку консистенции испражнений присваивали следующим образом: 1=очень твердый, 2=твердый, 3=сформированный, 4=жидкий, 5=водянистый для каждой дефекации.
Оценку консистенции испражнений вычисляли по среднему значению этих оценок каждый день.
Приведенная ниже таблица 1 показывает исходные характеристики для плацебо-контролируемой фазы лечения, в том числе диагностированные причины диареи, количество лимфоцитов CD4 и категория клеток CD4. Эта таблица показывает, что субъекты в каждой группе были похожи.
Таблица 1
Исходные характеристики в фазе плацебо-контролируемого лечения
Исходные характеристики болезни
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг* (N=138)
Крофелемер 250 мг (N=54)
Крофелемер 500 мг (N=47)
Все дозы Крофелемер (N=239)
Причина диареи
Антиретровирусная терапия
104 (75,4%)
104 (75,4%)
37 (68,5%)
30 (63,8%)
171 (71,5%)
ВИЧ-инфекции кишечника
33 (23,9%)
32 (23,2%
15 (27,8%)
15 (31,9%)
62 (25,9%)
Другое
1 (0,7%)
2 (1,4%)
2 (3,7%)
2 (4,3%)
6 (2,5%)
Количество CD4 клеток
n
138
137
54
46
237
Среднее
530,5
497,8
425,2
481,7
478,1
SD
244,79
230,88
226,13
275,18
239,81
Медиана
518,5
479,0
374,0
421,5
429,0
Минимальное
76
111
100
149
100
Максимальное
1298
1183
1095
1734
1734
Категория лимфоцитов CD4
<404
39 (28,3%)
55 (39,9%)
29 (53,7%)
21 (44,7%)
105 (3,9%)
>=404
99 (71,7%)
32 (59,4%)
25 (46,3%)
25 (53,2%)
132 (55,2%)
[1] В качестве исходных была взята средняя ежедневных данных из 7 дней до дня первой дозы препарата рандомизированного исследования.
[2] В качестве исходных была взята средняя ежедневная оценка консистенции испражнений за 7 дней до дня первой дозы препарата рандомизированного исследования.
Ежедневная оценка=(1* количество очень твердых испражнений +2* количество твердых испражнений +3* количество сформированных испражнений +4* количество жидких испражнений +5* количество водянистых испражнений)/(количество общих испражнений).
[3] В качестве исходных была взята средняя ежедневная оценка за 7 дней до дня первой дозы препарата рандомизированного исследования, нет=0, слабая=1, умеренная=2, твердая=3.
[4] Исходные=7*А/В, А=количество дней с событием в течение 7 дней до дня первой дозы препарата рандомизированного исследования, В=количество дней с непропущенными оценками.
В таблице 2, приведенной ниже, приводятся дополнительные исходные характеристики плацебо-контролируемой фазы лечения, в том числе применение антибиотиков в ходе исследования.
Таблица 2
Исходные характеристики в фазе плацебо-контролируемого лечения
Исходные характеристики болезни
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг* (N=138)
Крофелемер 250 мг (N=54)
Крофелемер 500 мг (N=47)
Все дозы Крофелемер (N=239)
Использование новой схемы приема антибиотика во время плацебо-контролируемой фазы
Да
14 (10,1%)
9 (6,5%)
2 (3,7%)
1 (2,1%)
12 (5,0%)
Нет
124 (89,9%)
129 (92,5%)
52 (96,3%)
46 (97,9%)
227 (95,0%)
Таблицы 3 и 3a, приведенные ниже, показывают процент субъектов с клиническим ответом, например, улучшение водянистой диареи в плацебо-контролируемой фазе лечения, и изменение в ответе по сравнению с исходным значением, как функцию времени, соответственно. Как видно из таблицы 3, все три группы лечения со стадии I были статистически значимыми для лечения водянистой диареи, а также в объединенной группе субъектов с дозой 125 мг на обеих стадиях. Таблица За представляет данные, показывающие, что, независимо от группы лечения, первичная конечная точка (клинический ответ) демонстрировала чувствительность, последовательно коррелирующую с другими ежедневными оценками, полученными в исследовании изменений в оценке симптомов. Субъекты, ответившие на лечение, т.е. субъекты с ≤2 водянистых испражнений в неделю имели достоверно большее улучшение в ежедневной оценки тяжести симптомов, чем не реагирующие на лечение в каждую неделю в течение всего исследования.
Таблица 3
Первичная конечная точка эффективности: процент субъектов с клиническим ответом в плацебо-контролируемой фазе лечения
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг* (N=136)
Крофелемер 250 мг (N=54)
Крофелемер 500 мг (N=46)
Стадия I
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
1/50 (2,0%)
9/44 (20,5%)
5/54 (9,3%)
9/46 (19,6%)
Разница в лечении (по сравнению с плацебо)
18,5%
7,3%
17,6%
1-Сторонняя 97,5% ДИ (доверительный интервал) (1)
(6,0%, <sup>00</sup>)
(-1,7%, <sup>00</sup>)
(5,3%, <sup>00</sup>)
1-Сторонняя P-значение (по сравнению с плацебо) [1]
0,0019
0,0563
0,0024
Исходным уровнем
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
11/138 (8,0%)
24/136 (17,6%)
Разница в лечении (по сравнению с плацебо)
9,6%
1-Сторонняя 97,5% ДИ (1)
(1,2%, <sup>00</sup>)
1-Сторонняя P-значение (по сравнению с плацебо) [1]
0,0096
Таблица 3а
Восприимчивость первичной конечной точки (клинического ответа)
Неделя
Клинический ответ<sup>a</sup>: Еженедельный субъект, ответивший на лечение
Клинический ответ<sup>a</sup>: Еженедельный субъект, не ответивший на лечение
Разность
P-значение
Ежедневный опрос
Среднее изменение по сравнению с исходным (±SD)
Среднее изменение по сравнению с исходным (±SD)
Субъект, ответивший на лечение субъект, не ответивший на лечение
Неделя 1
Ежедневные водянистые испражнения
-1,75 (0,901)
-0,51 (1,296)
-1,24
<0,0001
Ежедневная консистенция испражнений<sup>b</sup>
-1,08 (0,589)
-0,19 (0,381)
-0,90
<0,0001
Ежедневная боль в животе<sup>c</sup>
-0,41 (0,651)
-0,11 (0,493)
-0,30
0,0217
Неотложный позыв<sup>d</sup>
-2,97 (2,299)
-0,75 (1,908)
-2,22
<0,0001
Недержание кала<sup>e</sup>
-1,48 (2,007)
-0,43 (1,867)
-1,06
0,0144
Ежедневная частота испражнений
-1,13 (1,299)
-0,31 (1,810)
-0,83
<0,0001
Неделя 2
Ежедневные водянистые испражнения
-2,03 (1,184)
-0,53 (1,392)
-1,50
<0,0001
Ежедневная консистенция испражнений<sup>b</sup>
-1,14 (0,672)
-0,17 (0,379)
-0,97
<0,0001
Ежедневная боль в животе<sup>c</sup>
-0,61 (0,701)
-0,12 (0,494)
-0,49
<0,0001
Неотложный позыв<sup>d</sup>
-2,79 (2,418)
-0,79 (2,014)
-2,00
<0,0001
Недержание кала<sup>e</sup>
-1,71 (2,071)
-0,44 (1,982)
-1,27
<0,0001
Ежедневная частота испражнений
-1,18 (1,331)
-0,34 (1,851)
-0,83
<0,0001
Неделя 3
Ежедневные водянистые испражнения
-2,00 (1,280)
-0,65 (1,408)
-1,35
<0,0001
Ежедневная консистенция испражнений<sup>b</sup>
-1,20 (0,734)
-0,22 (0,382)
-0,98
<0,0001
Ежедневная боль в животе<sup>c</sup>
-0,51 (0,668)
-0,17 (0,517)
-0,34
0,0016
Неотложный позыв<sup>d</sup>
-3,41 (2,215)
-0,98 (2,253)
-2,43
<0,0001
Недержание кала<sup>e</sup>
-1,65 (2,228)
-0,64 (2,121)
-1,01
0,0015
Ежедневная частота испражнений
-1,20 (1,314)
-0,41 (1,992)
-0,79
<0,0001
Неделя 4
Ежедневные водянистые испражнения
-1,89 (1,058)
-0,68 (1,430)
-1,21
<0,0001
Ежедневная консистенция испражнений<sup>b</sup>
-1,07(0,645)
-0,24 (0,410)
-0,83
<0,0001
Ежедневная боль в животе<sup>c</sup>
-0,48 (0,658)
-0,19 (0,533)
-0,28
0,0058
Неотложный позыв<sup>d</sup>
-3,11 (2,411)
-0,99 (2,166)
-2,12
<0,0001
Недержание кала<sup>e</sup>
-1,75 (2,140)
-0,57 (2,085)
-1,18
<0,0001
Ежедневная частота испражнений
-1,07 (1,086)
-0,43 (2,039)
-0,64
<0,0001
a Клинический ответ через неделю определяли как ≤2 водянистых испражнений в течение данной недели.
b Ответ по консистенции испражнений определяли как ежедневная оценка консистенции испражнений<4 в течение данной недели
c Боль и дискомфорт в животе оценка: 0=нет, 1=слабые, 2=умеренные и 3=серьезные.
d Количество дней в неделю с неотложным позывом=7*А/В, где А=количество дней с неотложным позывом в течение недели, и В=количество дней с оценками за неделю.
e Количество дней в неделю с недержание кала=7*А/В, где А=количество дней с недержание кала в неделю, а В=количество дней с оценками за неделю.
f P-значения получали из критерия суммы рангов Уилкоксона для сравнения групп субъектов, ответивших на лечение в сравнении с группами субъектов, не ответивших на лечение.
В таблице 4, приведенной ниже, показаны несколько недель с клиническим ответом субъектов в исследовании. Как будет показано ниже, субъекты, принимавшие 500 мг два раза в день, имели больше недель ответа на лечение.
Таблица 4
Количество недель с клиническим ответом в плацебо-контролируемой фазе лечения
Количество недель с ответом
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг* (N=136)
Крофелемер 250 мг (N=54)
Крофелемер 500 мг (N=46)
Стадия I
Количество субъектов
N=50
N=44
N=54
N=46
Неделя 0
43 (86,0%)
32 (72,7%)
41 (75,9%)
25 (60,9%)
Неделя 1
6 (12,0%)
2 (4,5%)
8 (14,8%)
9 (19,6%)
Неделя 2
2 (4,5%)
2 (3,7%)
4 (8,7%)
Неделя 3
4 (9,1%)
2 (3,7%)
4 (8,7%)
Неделя 4
1 (2,0%)
3 (6,8%)
1 (1,9%)
1 (2,2%)
Крофелемер по сравнению с плацебо [1]
Отношение шансов
2,41
2,02
4,21
95% ДИ
(0,84, 6,87)
(0,74, 5,56)
(1,56, 11,33)
p-значение
0,1011
0,1727
0,0045
Таблица 5, приведенная ниже, показывает субъектов с клиническим ответом по месяцам. Как видно из таблицы, отвечающие субъекты и уровень ответов возрастает по мере увеличения времени введения крофелемера субъекту.
Таблица 5
Субъекты с ежемесячным клиническим ответом по месяцам в фазе дополнительного лечения без плацебо-контроля
Субъекты, ответившие на лечение в фазе дополнительного лечения без плацебо-контроля
Крофелемер 125 мг* (N=219) n (%)
Крофелемер 250 мг (N=68) n (%)
Крофелемер 500 мг (N=50) n (%)
Все дозы Крофелемер (N=337) n (%)
Месяц 1
87/218 (39,9%)
19/68 (27,9%)
14/50 (28,0%)
120/336 (35,7%)
Месяц 2
99/208 (47,6%)
31/60 (51,7%)
19/48 (39,6%)
149/316 (47,2%)
Месяц 3
111/198 (56,1%)
30/58 (51,7%)
17/47 (36,2%)
158/303 (52,1%)
Месяц 4
99/178 (55,6%)
27/54 (50,0%)
20/44 (45,5%)
146/276 (52,9%)
Месяц 5
90/155 (58,1%)
30/53 (56,6%)
17/42 (40,5%)
137/250 (54,8%)
В таблице 6, представленной ниже, показан процент субъектов с ответом на Крофелемер по консистенции испражнений. Как видно из таблицы 6, субъекты, которым вводили 500 мг и 250 мг два раза день, отвечали лучше, чем 125 мг два раза день или 250 мг два раза день.
Таблица 6
Процент субъектов с ответом по консистенции испражнений в плацебо-контролируемой фазе лечения
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг* (N=136)
Крофелемер 250 мг (N=54)
Крофелемер 500 мг (N=46)
Стадия I
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
11/50 (22,0%)
14/44 (31,8%)
20/54 (37,0%)
23/46 (50,0%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо
9,8%
15,0%
28,0%
1-Сторонняя 97,5% ДИ[1]
(-8,1%, <sup>00</sup>)
(-2,6%, <sup>00</sup>)
(-8,8%, <sup>00</sup>)
1-Сторонняя P-значение (по сравнению с плацебо)[1]
0,1412
0,0470
0,0021
Исходным уровнем
Субъект, ответивший на лечение - nNi (%)
49/186 (35,5%)
53/136 (39,0%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо
3,5%
1-Сторонняя 97,5% ДИ [1]
[-5,0%, <sup>00</sup>)
1-Сторонняя P-значение (по сравнению с плацебо) [1]
0,1428
Таблица 7, приведенная ниже, показывает количество месяцев клинического ответа у субъектов на крофелемер в исследовании. Таблица 7 снова демонстрирует, что чем дольше лечение, тем лучше ответ на лечение.
Таблица 7
Количество месяцев с клиническим ответом в группе в фазе дополнительного лечения без плацебо-контроля
Количество недель с ответом
Крофелемер 125 мг* (N=219)
Крофелемер 250 мг (N=66)
Крофелемер 500 мг (N=50)
0 месяцев
69 (31,5%)
25 (36,8%)
25 (50,0%)
1 месяц
31 (14,2%)
6 (8,8%)
4 (8,0%)
2 месяца
19 (8,7%)
10 (14,7%)
4 (8,0%)
3 месяца
29 (13,2%)
7 (10,3%)
3 (6,0%)
4 месяца
25 (11,4%)
10 (14,7%)
4 (8,0%)
5 месяцев
46 (21,0%)
10 (14,7%)
10 (20,0%)
В таблице 8, приведенной ниже, показан процент субъектов европеоидов и латиноамериканского происхождения и всех других рас с клиническим ответом. Эта таблица показывает, что европеоидная и латиноамериканская популяции, получившие крофелемер, хорошо реагировали на лечение.
Таблица 8:
Процент субъектов с клиническим ответом по расам в плацебо-контролируемой фазе лечения
Раса: белые/латиноамериканцы
Плацебо (N=83)
Крофелемер 125 мг* (N=84)
Крофелемер 250 мг (N=44)
Крофелемер 500 мг (N=38)
Стадия I
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
0/36 (0,0%)
7/31 (22,6%)
3/44 (6,8%)
8/38 (21,1%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо [95% ДИ]
22,6% [7,9%, 37,3%]
6,5% [-0,6%, 14,3%]
21,1% [8,14%, 34,0%]
P-значение по сравнению с плацебо [1]
0,0030
0,2481
0,0053
Исходным уровнем
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
6/83 (7,2%)
19/84 (22,6%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо [95% ДИ]
15,4% [4,9%, 25,9%]
P-значение (по сравнению с плацебо) [1]
0,0083
Раса: Другие
Плацебо (N=55)
Крофелемер 125 мг* (N=52)
Крофелемер 250 мг (N=10)
Крофелемер 500 мг (N=8)
Стадия I
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
1/14 (7,1%)
2/13 (15,4%)
2/10 (20,0%)
1/8 (12,5%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо[95% ДИ] 8,2%
8,2% [-15,6%, 32,0%]
12,9% [-15,4%, 41,1%]
5,4% [-21,2%, 32,0%]
P-значение по сравнению с плацебо[1]
0,5956
0,5504
1,0000
Сводные данные
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
5/55 (9,1%)
5/52 (9,6%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо[95% ДИ]
0,5% [-10,5%, 11,6%]
P-значение (по сравнению с плацебо) [1]
1,0000
Примечание: Клинический ответ определяли как <=2 водянистых испражнений в неделю в течение по меньшей мере 2 из 4 недели оценки эффективности.
Примечание: процент рассчитывали на Ni, количестве субъектов, вошедших в стадию или объединение.
В другом исследовании 400 субъектов с хронической ВИЧ-ассоциированной диареей лечили крофелемером или плацебо в течение 7 дней в стационаре. Крофелемер вводили в дозе 250 мг и 500 мг в виде таблеток с кишечнорастворимой оболочкой или 500 мг гранул с кишечнорастворимой оболочкой четыре раза в день, по сравнению с подобранным плацебо. С субъектами, которые ответили на лечение, продолжили исследования в трехнедельной слепой амбулаторной фазе. Разница в уменьшении массы между испражнениями субъектов, получающих крофелемер, и субъектов, получающих плацебо, не была статистически значимой по данным анализа первичной эффективности.
Тем не менее, повторный анализ этих данных показал, что приблизительно 50% исследуемой популяции не имело водянистую диарею при включении в исследование. Оценка популяции с водянистой диареей и неотложным позывом в исходных данных показали статистически значимое улучшение частоты испражнений и массы (p<0,05) при лечении. Изменения в аномальных (водянистых и жидких) испражнениях были даже больше, со значительными (p<0,015) улучшениями в аномальных массе и частоте испражнений, наблюдаемых на 7 день. Приблизительно 3 дня были необходимы для того, чтобы антидиарейные эффекты крофелемера стабилизировались.
Таблица 9, приведенная ниже, показывает дополнительные подтверждающие данные, показывающие, что крофелемер 125 мг, 250 мг и 500 мг были эффективны в лечении ВИЧ-ассоциированной диареи.
Таблица 9
Первичная конечная точка эффективностиПроцент субъектов с клиническим ответом*
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг (N=136)
Крофелемер 250 мг (N=54)
Крофелемер 500 мг (N=46)
Стадия 1
Субъект, ответивший на лечение
1/50 (2,0%)
9/44 (20,5%)
5/54 (9,3%)
9/46 (19,6%)
Разница в лечении
18,50%
7,30%
17,60%
Стадия 2
Субъект, ответивший на лечение
10/88 (11,4%)
15/92 (16,3%)
Разница в лечении
4,90%
Сводные данные
Субъект, ответивший на лечение
11/138 (8,0%)
24/136 (17,6%)
Разница в лечении
9,60%
1-Сторонняя 97,5% ДИ
(1,2%, ∞)
1-Сторонняя P-значение (по сравнению с плацебо)
0,0096
* ≤2 водянистых испражнений/нед. в течение ≥2 из 4 недель 4-недельного плацебо-контролируемого периода
Таблица 10, приведенная ниже, показывает, что крофелемер является особенно эффективным в лечении мужчин с ВИЧ-ассоциированной диареей. Анализ дополнительной подгруппы показан на Фиг.1. Первичную конечную точку проанализировали в подгруппах, определенных по демографическим и исходным характеристикам для оценки соответствия результатам лечения. На Фиг.1 приводится суммарная информация о каждом из этих анализов подгрупп, показывая разницу в лечении в процентах от субъектов, ответивших на лечение (крофелемер 125 мг два раза в день в сравнении с плацебо) с соответствующими доверительными интервалами и p-значениями. Как показано на чертеже, в эффективность по консистенции наблюдалась по всем подгруппам; более высокий процент субъектов, получавших крофелемер 125 мг два раза в день демонстрировали клинический ответ по сравнению с плацебо по всех проанализированных подгруппах.
Таблица 10
Эффекты различных демографических и исходных характеристик - Пол*
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг (N=136)
Пол: Мужской
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
9/116 (7,8%)
22/115 (19,1%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо [95% ДИ]
11,40% [2,7%, 20,1%]
P-значение 0,0124 по сравнению с плацебо
0,0124
Пол: Женский
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
2/22 (9,1%)
2/21 (9,5%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо [95% ДИ]
0,40% [-16,9%, 17,8%]
P-значение по сравнению с плацебо
1
* Клинический ответ определяли как <=2 водянистых испражнений в неделю в течение по меньшей мере 2 из 4 недели оценки эффективности. Выборка «все пациенты, начавшие получать лечение».
В соответствии с одним аспектом в настоящем изобретении представлены способы лечения ВИЧ-ассоциированной диареи или диареи, ассоциированной с высокоактивной антиретровирусной терапией, у ВИЧ-положительных субъекта мужского пола, включающий введение около от 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение около 500 мг в день; введение около 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день; введение около 250 мг два раза в день, или введением 500 мг два раза в день крофелемера субъекту мужского пола, нуждающемуся в этом.
Таблица 11, приведенная ниже, показывает, что субъект принимающий ингибиторы протеазы отвечали особенно хорошо на лечение крофелемером.
Таблица 11
Эффекты различных демографических и исходных характеристик - предварительное использованием ингибиторов протеазы*
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг (N=136)
Использование ИП при скрининге - да:
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
6/97 (6,2%)
15/86 (17,4%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо [95% ДИ]
11,30% [1,9%, 20,6%]
P-значение 0,0204 по сравнению с плацебо
0,0204
Использование ИП при скрининге - нет:
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni(%)
5/41 (12,2%)
9/50 (18,0%)
Разница в лечении по сравнению с плацебо [95% ДИ]
5,80% [-8,8%, 20,4%]
P-значение 0,5638 по сравнению с плацебо
0,5638
*Клинический ответ определяли как <=2 водянистых испражнений в неделю в течение по меньшей мере 2 из 4 недели оценки эффективности. Выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»
В соответствии с одним аспектом в настоящем изобретении представлены способы лечения ВИЧ-ассоциированной диареи или диареи, ассоциированной с высокоактивной антиретровирусной терапией (ВААРТ), у ВИЧ-положительного субъекта, который предварительно использовал ингибиторы протеазы, включающий введение около от 250 мг до около 1000 мг в день; введение около 250 мг в день; введение около 500 мг в день; ведение около 1000 мг в день; введение около 125 мг два раза в день; введение около 250 мг два раза в день или введение 500 мг два раза в день крофелемера субъекту мужского пола, который в этом нуждается. Используемый в настоящем изобретении термин "предварительно использовал" включает, например, субъектов, которые использовали ингибиторы протеазы (ИП) до терапии крофелемером или перекрываясь с терапией крофелемером, но использование ИП начиналось до первой дозы терапии крофелемером.
Таблица 12
Вторичные конечные точки эффективности Выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»
Водянистые испражнения/день
- Нет различий между лечением 125 мг по сравнению с плацебо
- Стадия 1: численно больше в 500 мг по сравнению с плацебо (-0,91/день по сравнению с -0,62/день, p=0,0713)
Оценка консистенции испражнений
- Значительное улучшение по сравнению с 125 мг Pbo (-0,35 в сравнении с -0,25, p=0,0168)
Ежедневная боль/дискомфорт в животе
- Отсутствие различий между лечением 125 мг по сравнению с плацебо
- Стадия 1: 125 мг по сравнению с плацебо (-0,35 против -0,13, p=0,0170)
Дней/недель с неотложным позывом
- Нет различий между 125 мг по сравнению с плацебо
Дней/недель с недержанием кала
- Численные различия для 125 мг по сравнению с плацебо (-0,96 против -0,55, p=0,0643)
Испражнений/день
- Нет различий между лечением 125 мг по сравнению с плацебо
Фиг.1 и таблица 13 показывают субъектов с клиническим ответом в перекрестной без плацебо-контроля фазы популяции пациентов, отбиравшихся для анализа безопасности. PC = Плацебо-контролируемая фаза и PF = фаза без плацебо-контроля. Эти данные показывают, что субъекты, ранее получавшие плацебо, показали резкое увеличение эффективности, когда они были переведены на 125 мг крофелемера. Эти данные также показывают, что эффективность крофелемера продолжает расти с увеличением продолжительности использования.
Таблица 13
Субъекты с клиническим ответом перекреста с фазой без плацебо-контроля, популяция, отбиравшаяся для анализа безопасности
Месяц
Статистика<sup>1</sup>
Плацебо (N=126)
Крофелемер 125 мг (N=99)
Крофелемер 250 мг (N=15)
Крофелемер 500 мг (N=12)
Месяц 1
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
11/126 (8,7%)
36/99 (36,4%)
3/15 (20,0%)
2/12 (16,7%)
Отношение шансов (95% ДИ)
0,17 (0,09, 0,32)
P-значение (по сравнению с плацебо в PC)
<,0001
Месяц 2
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
42/95 (44,2%)
8/15 (53,3%)
2/12 (16,7%)
Отношение шансов (95% ДИ)
0,12 (0,06, 0,24)
P-значение (по сравнению с плацебо в PC)
<,0001
Месяц 3
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
48/89 (53,9%)
5/14 (35,7%)
2/11 (18,2%)
Отношение шансов (95% ДИ)
0,07 (0,03,0,15)
P-значение (по сравнению с плацебо в PC)
<,0001
Месяц 4
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
43/77 (55,8%)
5/13 (38,5%)
2/9 (22,2%)
Отношение шансов (95% ДИ)
0,07 (0,03, 0,15)
P-значение (по сравнению с плацебо в PC)
<,0001
Месяц 5
Субъект, ответивший на лечение - n/Ni (%)
37/67 (55,2%)
6/13 (46,2%)
1/8 (12,5%)
Отношение шансов (95% ДИ)
0,07 (0,03, 0,16)
P-значение (по сравнению с плацебо в PC)
<,0001
<sup>1</sup>Соотношение субъектов, ответивших на лечение, и P-величины, полученной из оценки параметров с эффектом для лечения и района.
Таблица 14
Субъекты с ответом по консистенции испражнений*
Выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»
Плацебо (N=138)
Крофелемер 125 мг (N=136)
Крофелемер 250 мг (N=54)
Крофелемер 500 мг (N=46)
Стадия 1
Субъект, ответивший на лечение
11/50 (22,0%)
13/44 (31,8%)
20/54 (37,0%)
23/46 (50,0%)
Разница в лечении
9,80%
15,00%
28,00%
Стадия 2
Субъект, ответивший на лечение
38/88 (43,2%)
39/92 (42,4%)
Разница в лечении
-0,80%
Исходным уровнем
Субъект, ответивший на лечение
49/138 (35,5%)
53/136 (39,0%)
Разница в лечении
3,50%
* <4 оценка консистенции испражнений по меньшей мере 2 из 4 недель оценки эффективности.
Фиг.2 и таблица 14 показывают субъектов с ответом по консистенции испражнений в перекрестной модели с фазой без плацебо-контроля в популяции, отбиравшейся для анализа безопасности. PC = Плацебо-контролируемая фаза и PF = фаза без плацебо-контроля. Эти данные показывают, что субъекты предварительно получавшие плацебо, демонстрировали резкое увеличение эффективности, когда они были переведены на 125 мг крофелемера. Эти данные также показывают, что эффективность крофелемера продолжает расти с увеличением длительности использования.
Таблица 15
Субъекты с аномальными результатами ЭКГ
Выборка для оценки безопасности
Характеристика, n (%)
Плацебо (N=137)
Крофелемер 125 мг (N=130)
Крофелемер 250 мг (N=54)
Крофелемер 500 мг (N=42)
Все дозы Крофелемер (N=226)
Аномальные после исходного уровня
35 (25,5%)
34 (26,2%)
18 (33,3%)
13 (31,0%)
65 (28,8%)
ЭКГ результаты<sup>1</sup>
Интервал QT (мс)
>450 с исходным уровнем ≤450
2 (1,5%)
4 (3,1%)
1 (1,9%)
0
5 (2,2%)
>480 с исходным уровнем ≤1480
1 (0,7%)
0
1 (1,9%)
0
1 (0,4%)
>500 с исходным уровнем ≤500
0
0
1 (1,9%)
0
1 (0,4%)
Изменение от исходного уровня 30-60
9 (6,6%)
4 (3,1%)
6 (11,1%)
3 (7,1%)
13 (5,8%)
Изменение от исходного уровня >60
4 (2,9%)
1 (0,8%)
2 (3,7%)
0
3 (1,3%)
Корректировка интервала QT линейной регрессии (мс)
>450 с исходным уровнем ≤450
2 (1,5%)
4 (3,1%)
1 (1,9%)
0
5 (2,2%)
>480 с исходным уровнем ≤480
1 (0,7%)
0
1 (1,9%)
0
1 (0,4%)
>500 с исходным уровнем ≤500
0
0
1 (1,9%)
0
1 (0,4%)
Изменение от исходного уровня 30-60
7 (5,1%)
4 (3,1%)
6 (11,1%)
3 (7,1%)
13 (5,8%)
Изменение от исходного уровня >60
4 (2,9%)
1 (0,8%)
2 (3,7%)
0
3 (1,3%)
Корректировка интервала QT Fridericias (мс)
>450 с исходным уровнем ≤450
6 (4,4%)
1 (0,8%)
2 (3,7%)
0
3 (1,3%)
>480 с исходным уровнем ≤480
1 (0,7%)
1 (0,8%)
0
0
1 (0,4%)
>500 с исходным уровнем ≤500
1 (0,7%)
0
0
0
0
Изменение от исходного уровня 30-60
3 (2,2%)
5 (3,8%)
2 (3,7%)
1 (2,4%)
8 (3,5%)
Изменение от исходного уровня >60
4 (2,9%)
0
1 (1,9%)
0
1 (0,4%)
Корректировка интервала QT Bazett (мс)
>450 с исходным уровнем ≤450
8 (5,8%)
4 (3,1%)
2 (3,7%)
0
6 (2,7%)
>480 с исходным уровнем ≤480
2 (1,5%)
2 (1,5%)
1 (1,9%)
0
3 (1,3%)
>500 с исходным уровнем ≤500
2 (1,5%)
0
0
0
0
Изменение от исходного уровня 30-60
7 (5,1%)
8 (6,2%)
3 (5.6%)
1 (2,4%)
12 (5,3%)
Изменение от исходного уровня >60
3 (2,2%)
1 (0,8%)
1 (1.9%)
0
2 (0,9%)
Таблица 15 показывает, что крофелемер безопасно давать субъектам, и что не существует никаких проблем с интервалом QT, связанных с его применением. Это неожиданно и выигрышно по сравнению с другими молекулами, используемые для лечения диареи и IBS (синдрома раздраженного кишечника), которые, как известно, связаны с проблемами QT.
Приведенные выше данные и чертежи, продемонстрировали, что доля субъектов, клинически ответивших на лечение, была значительно выше в группе крофелемер 125 мг по сравнению с плацебо (p=0,0096; сводные данные). Субъекты, переключившиеся с плацебо на крофелемер при заключении плацебо-контролируемой фазы достигали уровня клинического ответа между 36,4% и 55,8% для каждого из 5 месяцев фазы без плацебо-контроля (p<0,0001; для данных, собранных до закрытия). Оценки консистенции испражнений значительно улучшились у субъектов, получающих 125 мг крофелемера по сравнению с плацебо (p=0,0168; сводные данные). Количество дней в неделю, в которые субъекты испытывали недержание кала, уменьшилось у субъектов, получающих 125 мг крофелемера по сравнению с плацебо (p=0,0643; сводные данные). Также было продемонстрировано, что крофелемер хорошо переносится и продемонстрировано, что профиль безопасности сопоставим с плацебо и никаких клинически значимых различий в оценках безопасности выявлено не было.
Таблица 16
Исследования с целью определения оптимальной дозы для лечения d-IBS (синдрома раздраженного кишечника с диареей): Все рандомизированные субъекты
Дизайн:
P2, R, DB, PC, Исследования с целью определения оптимальной дозы для лечения d-IBS
Лечение:
125, 250, 500 мг два раза в день крофелемер или плацебо в течение 12 недель
N:
125 мг: 62, 250 мг: 60, 250 мг: 62, Плацебо: 61
Первичная конечная точка
Ежедневная консистенция испражнений
Результат:
Определения Римского фонда<sup>1</sup>
Месяц 1 =2,6%
Лечение Δ, 125 мг доза
Месяц 2 =9,0%
Месяц 3 =10,7%
Все 3 месяца: отношение шансов
1.51 (0,78, 2,92)
FDA определении<sup>2</sup>
Месяц 1 =0,6%
Лечение Δ, 125 мг доза
Месяц 2 =2,2%
Месяц 3 =-4,4%
Все 3 месяца: отношение шансов
1,09 (0.54, 2,20)
<sup>1</sup>Субъект, отвечавший на лечение еженедельно по консистенции испражнений по критериям Римского фонда: Субъекты с <25% дней с жидким или водянистым испражнением на данной неделе. На основе Ad Hoc Table 1.11.
<sup>2</sup>Субъект, отвечавший на лечение еженедельно по консистенции испражнений по критериям FDA: Субъекты со средней еженедельной оценкой консистенции испражнений <4 (4=жидкий стул)
Таблица 16 показывает, что крофелемер является эффективным для лечения d-IBS. Она также показывает, что крофелемер является эффективным для лечения аномальной консистенция испражнений, связанных с d-IBS.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS по меньшей мере в течение одного месяца. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS от одного месяца до двух месяцев или дольше. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальных консистенции испражнений, связанной с d-IBS от около одного месяца и до трех месяцев или дольше.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS, по меньшей мере один месяц около 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS от одного месяца до двух месяцев или дольше около 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальной консистенции испражнений, связанный с d-IBS от одного месяца до трех месяцев или дольше около 125 мг два раза в день.
Таблица 17
Исследование с целью определения оптимальной дозы для лечения d-IBS. Все рандомизированные субъекты женского пола
Дизайн:
Р2, R, DB, PC, исследование с целью определения оптимальной дозы для лечения IBS D
Лечение:
125, 250, 500 мг два раза в день крофелемер или плацебо в течение 12 недель
N
(125 мг 125 мг: 46, Плацебо: 46 женщины):
Первичная конечная точка
Ежедневная консистенция испражнений
Результат:
Определения Римского фонда<sup>1</sup>
Месяц 1 =6,5%
Лечение Δ, 125 мг дозы
Месяц 2 =10,8%
Месяц 3 =10,8%
Все 3 месяца: отношение шансов
1,88 (0,87, 4,06)
FDA определении<sup>2</sup>
Месяц 1 =-2,1%
Лечение Δ, 125 мг дозы
Месяц 2 =2,2%
Месяц 3 =-4,4%
Все 3 месяца: отношение шансов
1,20 (0,52, 2,75)
<sup>1</sup>Субъект, отвечавший на лечение еженедельно по консистенции испражнений по критериям Римского фонда: Субъекты с <25% дней с жидким или водянистым испражнением на данной неделе. На основе Ad Hoc Table 1.11.
<sup>2</sup>Субъект, отвечавший на лечение еженедельно по консистенции испражнений по критериям FDA: Субъекты со средней еженедельной оценкой консистенции испражнений <4 (4=жидкий стул)
Таблица 17 показывает, что крофелемер является эффективным для лечения d-IBS, особенно для лечения d-IBS у женщин. Она также демонстрирует, что крофелемер является эффективным для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS, особенно для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS у женщин.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS у женщин в течение по меньшей мере одного месяца при 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS у женщин от одного месяца до двух месяцев около 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения аномальной консистенции испражнений, связанной с d-IBS у женщин от одного месяца до трех месяцев или дольше около 125 мг два раза в день.
Таблица 18
Исследование с целью определения оптимальной дозы для лечения d-IBS у женщин. Все рандомизированные субъекты.
Дизайн:
Р2, R, DB, PC, исследование с целью определения оптимальной дозы d-IBS у женщин
Лечение:
125 мг два раза в день крофелемер или плацебо в течение 12 недель
N:
125 мг: 120, плацебо: 120
Первичная конечная точка
Ежедневная боль в животе<sup>1</sup>
Итого:
Плацебо (N=120)
125 мг (N=120)
P-значение
Месяц 1
66 (55,0%)
75 (62,5%)
0,2316
Месяц 2
61 (50,8%)
82 (68,3%)
0,0059
Месяц 3
65 (54,2%)
79 (65,8%)
0,0662
Все 3 месяца
Отношение шансов 1,67 (1,03, 2,70), p=0,0357
<sup>1</sup>Субъекты, ответившие на лечение еженедельно по поводу боли в животе определяется как субъекты с по меньшей мере 30% улучшением по сравнению с исходной оценкой боли в животе в данную неделю
Таблица 18 показывает, что крофелемер является эффективным для лечения d-IBS, особенно для лечения d-IBS у женщин. Он также демонстрирует, что крофелемер является эффективным для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, особенно для лечения боли в животе, связанной с d-IBS у женщин.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS по меньшей мере в течение одного месяца.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS от одного месяца до двух месяцев или дольше. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS от около одного месяца и до около трех месяцев или дольше.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS по меньшей мере в течение одного месяца около 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS от одного месяца до двух месяцев или дольше около 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS от одного месяца до трех месяцев или дольше около 125 мг два раза в день.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS у женщин, по меньшей мере в течение одного месяца при 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS у женщин от одного месяца до двух месяцев около 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения d-IBS у женщин от одного месяца до трех месяцев или дольше около 125 мг два раза в день.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS по меньшей мере в течение одного месяца.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, от одного месяца до двух месяцев или дольше. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, от около одного месяца и до около трех месяцев или дольше.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, по меньшей мере в течение одного месяца около 125 мг два раза в день.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, от одного месяца до двух месяцев или дольше около 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, от одного месяца до трех месяцев или дольше около 125 мг два раза в день.
В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, у женщин по меньшей мере один месяц при 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, у женщин от одного месяца до двух месяцев около 125 мг два раза в день. В одном варианте осуществления крофелемер вводят для лечения боли в животе, связанной с d-IBS, у женщин от одного месяца до трех месяцев или дольше около 125 мг два раза в день.
Пример 10: Двойное слепое, рандомизированное, плацебо-контролируемое исследование стадии II для оценки безопасности и эффективности перорально вводимого крофелемера для симптоматического лечения диареи у субъектов с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД)
Это исследование было рандомизированное, двойное слепое, многоцентровое (2 исследовательских центра), плацебо-контролируемое исследование в параллельных группах, предназначенное для оценки эффективности и безопасности крофелемера 500 мг гранул у субъектов с ВИЧ-ассоциированной диареей. Основными целями исследования было оценить безопасность и эффективность перорально вводимого крофелемера в течение 96 часов для симптоматического лечения диареи у больных СПИДом. Вторичные цели были: 1) охарактеризовать концентрацию хлорид-ионов в испражнениях и ежедневный выход хлорида в испражнениях у больных СПИДом с диареей, 2) сравнить концентрацию хлорид-ионов в испражнениях и ежедневный выход хлорида в испражнений у больных СПИДом с диареей, получавших крофелемер или плацебо, 3) оценить консистенцию испражнений у больных СПИДом с диареей, получавших крофелемер или плацебо.
Существовало 3 периода оценки в ходе исследования: 1) 24-часовой период скрининга в стационаре для того, чтобы была уверенность, что субъекты соответствовали всем критериям включения в исследование, во время которого оценивались исходные испражнения, 2) 4-дневный период стационарного лечения, в ходе которого все субъекты получали назначенное лечение 4 раза в день (дни 1-4), субъектов выписывали из больницы после 96 часов лечения при условии клинической стабильности; и 3) визит контрольного наблюдения 7-9 дней после выписки из больницы. Использование ADM (анти-диарейных лекарственных средств) не было разрешено во время исследования.
Эффективность измерений включала оценку массы кала и частоту (испражнений), частоты аномальных испражнений, DGIS, MORE, массы тела, время рецидивов диарея, число раннего отсева (субъектов, прекративший медицинское наблюдение или лечение) (до завершения 4 дня лечения).
Конечными точками эффективности в данном исследовании были следующие:
Первичной конечной точкой эффективности в этом исследовании было изменение общей суточной массы кала в период лечения. Вторичные конечные точки эффективности в данном исследовании были: частота аномальных испражнений, определяемых как водянистый или мягкий стул (изменения в ежедневной частоте аномальных испражнений), частота испражнений (изменение частоты ежедневных испражнений), DGIS (изменение от исходного уровня в DGIS на каждый день [дни от 1 до 4]), концентрация хлорида в испражнении (мг хлорида/г массы испражнений, изменение в ежедневной концентрации хлорида в испражнении) и измерение оценки облегчения, где MORE было максимальное из: a) времени от начала периода лечения до первого аномального испражнения b) максимальное время между аномальными испражнениями или с) времени между последним аномальным испражнением и концом периода лечения. DGIS была ежедневная суммой среднего значения оценки симптомов для каждого из 7 симптомов (тошнота, рвота, боль в животе и/или судороги, избыточный газ, неотложность позыва, тенезмы и недержание), оцениваемой четыре раза в день. Симптомы оценивались по 4-балльной шкале от 0=отсутствует до 3=сильная. В общей сложности 85 субъектов включили в исследование в 2 исследовательских центрах. Два субъекта в каждой из 2 групп лечения выбыли до завершения стационарного лечения.
Все рандомизированные субъекты (N=85) получили по меньшей мере 1 дозу исследуемого препарата и были включены в анализ эффективности.
Таблица 19
Демография
ХарактеристикаКатегория или статистика
Плацебо (N=42)
Крофелемер 500 мг гранулы (N=43)
Возраст, лет
Среднее (±SD)
38,9 (7,6)
41,0 (8,8)
Медиана
36
40
Min, Max
27, 55
21, 60
Пол, N (%)
Мужской
41 (97,6))
42 (97,7)
Женский
1 (2,4)
1 (2,3)
Раса, N (%)
Европеоидная
26 (61,9)
32 (74,4)
Латиноамериканская
7 (16,7)
6 (14,0)
Афроамериканская
7 (16,7)
5 (11,6)
Другие
2 (5,0)
0
Сокращения: ITT = выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»; Max = максимум; Min = минимум, SD = стандартное отклонение.
Количество несформированных (например, мягкие или водянистый) испражнений/день в начале исследования (скрининг [день 0]), и в течение недели до исходного значения и тяжесть заболевания представлены в таблице. Среднее значение (±SD) несформированных испражнения/день до лечения составляло 5,5 (3,3) в группе плацебо и 4,6 (2,6) в группе крофелемер. Большинство субъектов имели легкую (3-4 испражнений/день) или умеренную (5-8 испражнений/день) тяжесть заболевания как исходные данные. Пять субъектов в группе крофелемер и 4 субъекта в группе плацебо имели тяжелую диарею (>9 испражнений/день).
Таблица 20
Оценка исходных данных диареи: (выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»)
ХарактеристикаКатегория или статистика
Плацебо (N=42)
Крофелемер 500 мг гранулы (N=43)
Несформированные испражнения в течение 24 часов перед первой дозой исследуемого препарата (скрининг [День 0]), испражнения/день
Среднее значение (±SD)
5,6 (2,9)
4,6 (2,5)
Медиана
5
4
Min, Max
1, 6
0, 10
Несформированные испражнения в течение недели до первой дозы исследуемого препарата (скрининг [День 0]), испражнения/день
Среднее значение (±SD)
5,5 (2,9)
5,1 (2,3)
Медиана
6
5
Min, Max
1, 15
2, 10
Серьезность диареи, n (%)
Легкая (3-4 испражнений/день)
10 (40,0)
15 (57,1)
Умеренная (5-8 испражнений/день)
13 (52,0)
8 (30,8)
Тяжелая (>9 испражнениях/день)
2 (8,0)
3 (11,5)
Сокращения: ITT = выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»; Max = максимум; Min = минимум, SD = стандартное отклонение.
Сопутствующие антиретровирусные препараты получало большинство субъектов (71 из 85); 36 из 42 (85,7%) в группе плацебо и 35 из 43 (81,4%) в группе крофелемер.
Ингибиторы протеазы получали 69,4% субъектов. Одновременное применение антиретровирусных препаратов, включая ингибиторы протеазы, было сбалансировано между группами.
Анализ первичной эффективности изменялся в общей суточной массе испражнений во время 4-дневного стационарного периода лечения. Первичная конечная точка снижения массы испражнений является подходящей мерой степени водянистой диареи у субъектов с ВИЧ-ассоциированной диареей вследствие высокого содержания воды в диарее, испытываемой этими субъектами.
Как показано в таблице 21, было значительно большее снижение массы испражнений от исходного уровня к 4-му дню (последний день лечения) в группе крофелемер по сравнению с плацебо (p=0,0335 по обобщенной линейной модели) в популяции ITT. Анализ повторных измерений данных длительного наблюдения в течение 4-дневного периода лечения не показали значительного улучшения в группе крофелемер по сравнению с плацебо; p=0,4108 для изменений общей массы испражнений.
Таблица 21
Изменение массы испражнений
В стационаре
Плацебо (n=42)
Крофелемер 500 мг гранулы (N=43)
p-значение (по сравнению с плацебо)<sup>a</sup>
Масса испражнений на исходном уровне (г)
Среднее значение (±SD)
730,9 (720,14)
861,3 (604,67)
0,3832
Медиана
547,0
707,7
Min, Max
206, 4701
220, 3407
Категории массы испражнений на исходном уровне, n(%)
Низкая (≤740 г)
28 (66,7)
24 (55,8)
02725
Высокая (>740 г)
14 (33,3)
19 (44,2)
Изменение массы испражнений: исходный уровень к дню 4 (г)
Среднее значение (±SD)
-192,4 (381,57)
-401,3 (531,65)
0,0335
Медиана
-232,8
-267,5
Min, Max
-1319, 683
-1815, 854
Сокращения: ITT = выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»; Max = максимум; Min = минимум, SD = стандартное отклонение.а P-значение для сравнения исходных данных представлено в виде ковариации из обобщенной линейной модели с центрированным анализом. P-значение для процентного сравнения исходных данных представлено в виде ковариации из СМН теста (тест Кохрана-Мантеля-Хензеля) с центрированным анализом. Оценки и P-значения происходят из обобщенной линейной модели для результата отличающегося от исходного в отношении к независимым переменным: лечение, центрированный анализ, исходные данные (значение=низкая для ≤740 г и высокая для >740 г для массы испражнений), а также для связей между лечением и величиной исходных данных (например, если значение P>0,15 - такая взаимосвязь рассматривается как недостоверная).
Эффект крофелемера в уменьшении массы испражнений было более выраженным в подгруппе субъектов с исходной массой испражнений >740 г по сравнению с субъектами с исходной массы испражнений ≤740 г (p-значения для различий по сравнению с плацебо составляли 0,0202 [>740 г подгруппа] по сравнению с 0,6820 [≤740 г подгруппа]). Существовало значительно больше уменьшений по сравнению с исходными данными массы испражнений на 3 день в группе крофелемер по сравнению с плацебо (p=0,0128).
Результаты вторичной эффективности
Значительно большее снижение частоты аномальных испражнений (то есть, водянистых или мягких испражнений) от исходного уровня к 4-й дню наблюдалось в группе крофелемер по сравнению с плацебо (p=0,0069 обобщенно-линейная модель) в выборке «все пациенты, начавшие получать лечение». Анализ повторных измерений данных длительного наблюдения в течение всего периода лечения также указывает на значительно большее снижение в группе крофелемер по сравнению с плацебо, p=0,0330 изменений частоты аномальных испражнений. Кроме того, субъекты в группе крофелемер имели значительно большее снижение частоты аномальных испражнений от исходного уровня ко 2-му дню (p=0,0454), а также от исходного уровня к 3-му дню (p=0,0064) по сравнению с субъектами в группе плацебо.
Таблица 22
Частота аномальных испражнений
В стационаре
Плацебо (n=42)
Крофелемер 500 мг гранулы (N=43)
p-значение (по сравнению с плацебо)<sup>а</sup>
Частота аномальных испражнения) в испражнения/день; испражнений (мягкие или водянистые исходном состоянии; аномальные
Среднее значение (±SD)
4,8 (2,12)
4,9 (2,58)
0,9933
Медиана
4,0
4,0
Min, Max
3, 12
2, 14
Категории частоты аномальных испражнений в исходном состоянии, n (%)
Низкая (≤5/день)
30 (71,4)
32 (74,4)
0,7847
Высокая (>5/день)
12 (28,6)
11 (25,6)
Изменение частоты аномальных испражнений: исходный уровень ко дню 4; аномальные испражнения/день
Среднее значение (±SD)
-2,1 (1,94)
-2,8 (2,23)
0,0069
Медиана
-2,0
-3,0
Min, Max
-6, 4
-11, 2
Сокращения: ITT = выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»; Max = максимум; Min = минимум, SD = стандартное отклонение.а P-значение для сравнения исходных данных представлено в виде ковариации из обобщенной линейной модели с центрированным анализом. P-значение для процентного сравнения исходных данных представлено в виде ковариации из СМН теста (тест Кохрана-Мантеля-Хензеля) с центрированным анализом. Оценки и P-значения происходят из обобщенной линейной модели для результата отличающегося от исходного в отношении к независимым переменным: лечение, центрированный анализ, исходные данные (значение=низкая для ≤5/день и высокая для >5/день частота аномальных испражнений), а также для связей между лечением и величиной исходных данных (например, если значение P>0,15 - такая взаимосвязь рассматривается как недостоверная).
Эффект крофелемер в снижении частоты аномальных испражнений было более выраженным в подгруппе с высоким количеством аномальных испражнений в начале исследования (>5/день) по сравнению с подгруппой с низким количеством аномальных испражнений в начале исследования (≤5/день, p-значения для разницы по сравнению с плацебо были 0,0041 [>5/день подгруппа] по сравнению с 0,8184 [≤5/день подгруппа]).
Значительно большее снижение частоты испражнений (т.е. сформированных, водянистых и мягких испражнений) от исходного уровня к дню 4 наблюдалось в группе крофелемер по сравнению с плацебо (p=0,0046 обобщенно-линейная модель) выборке «все пациенты, начавшие получать лечение» (табл.23). Анализ повторных измерений данных длительного наблюдения в течение всего периода лечения также указывает на значительно большее снижение в группе крофелемер по сравнению с плацебо, p=0,0236 для изменения частоты испражнений.
Эффект крофелемера в уменьшении частоты испражнений было более выраженным в подгруппе с большим числом испражнений в начале исследования (>5/день) по сравнению с подгруппой с низким количеством испражнений в начале исследования (≤5/день) (p-значения для различий по отношению к плацебо были 0,0019 [>5/день подгруппа] по сравнению с 0,7912 [≤5/день подгруппа]).
Таблица 23
Частота испражнений
В стационаре
Плацебо (n=42)
Крофелемер 500 мг гранулы (N=43)
p-значение (по сравнению с плацебо)<sup>a</sup>
Частота испражнений в исходном состоянии: испражнений/день
Среднее значение (±SD)
5,1 (2,22)
5,0 (2,46)
0,8442
Медиана
4,0
4,0
Min, Max
3, 12
2, 14
Категории частоты испражнений в исходном состоянии, n (%)
Низкая (≤5/день)
27 (64,3)
32 (74,4)
Высокая (>5/день)
15 (35,7)
11 (25,6)
0,2850
Изменение частоты испражнений: исходное состояние к дню 4: испражнений/день
Среднее значение (±SD)
-1,7 (1,92)
-2,5 (2,45)
0,0116
Медиана
-2,0
-2,5
Min, Max
-5, 5
-10, 2
Сокращения: ITT = выборка «все пациенты, начавшие получать лечение»; Max = максимум; Min = минимум, SD = стандартное отклонение.а P-значение для сравнения исходных данных представлено в виде ковариации из обобщенной линейной модели с центрированным анализом. P-значение для процентного сравнения исходных данных представлено в виде ковариации из СМН теста (тест Кохрана-Мантеля-Хензеля) с центрированным анализом. Оценки и P-значения происходят из обобщенной линейной модели для результата отличающегося от исходного в отношении к независимым переменным: лечение, центрированный анализ, исходные данные (значение = низкая для ≤5/день и высокая для >5/день частота испражнений), а также для связей между лечением и величиной исходных данных (например, если значение P>0,15 - такая взаимосвязь рассматривается как недостоверная).
Группа крофелемер имела значительно большее снижение частоты испражнений по сравнению с исходными значениями до ко дню 2 (p=0,0223), а также от исходного уровня ко дню 3 (p=0,0140) по сравнению с плацебо.
Ежедневная оценка желудочно-кишечных симптомов
В анализе повторных измерений данных длительного наблюдения в течение стационарного периода (т.е. изменение от исходных значений на каждый день в дни 1-4), статистический тренд, показывающий более значительное улучшение в оценке DGIS, наблюдался в группе крофелемер по сравнению с плацебо (p=0,0559).
Концентрации хлорида в испражнениях
-
Концентрации хлорида в испражнениях измеряли в этом исследовании, так как антисекреторный, антидиарейный эффект крофелемера, вероятно является следствием ингибирования CFTR-канала и CACC в просвете желудочно-кишечного тракта; это ингибирование блокирует секрецию люминального CT и сопровождающуюся потерю большого объем воды при секреторной диареи (Fischer 2004; Tradtrantip 2010), таким образом, уменьшенная секреция люминального Cl должна привести к снижению концентрации хлорида в испражнениях. Субъекты в группе крофелемер имели значительно большее снижение концентрации хлорида в испражнениях от исходного уровня ко дню 4 по сравнению с плацебо (p=0,0024 по обобщенной линейной модели) среди субъектов с данными по хлориду в испражнениях (плацебо n=25, крофелемер n=26). Среднее значение (±SD) изменения от исходного уровня ко дню 4 составляло 0,123 (0,7138) мг/г в группе плацебо и -0,245 (0,5556) мг/г в группе крофелемер.
Все публикации, патенты и патентные заявки, цитируемые в настоящем изобретении, включены в настоящее изобретение посредством ссылки во всей их полноте.