ПРОИЗВОДНЫЕ 6-ФЕНИЛ-1Н-ИМИДАЗО[4,5,-с] ПИРИДИН-4-КАРБОНИТРИЛА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ КАТЕПСИНА К И S
6-PHENYL-1H-IMIDAZO[4,5-c]PYRIDINE-4-CARBONITRILE DERIVATIVES AS CATEPSIN K AND S INHIBITORS

Настоящее изобретение относится к производным 6-фенил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила, к фармацевтическим композициям, содержащим указанные производные, а также к применению таких производных для получения лекарственного средства для лечения связанных с катепсином S и/или катепсином К заболеваний, таких как остеопороз, атеросклероз, воспаление, и иммунных нарушений, таких как ревматоидный артрит, и хронической боли, такой как невропатическая боль.
Цистеинпротеазы представляют собой класс пептидаз, характеризующихся присутствием остатка цистеина в каталитическом сайте фермента, и эти протеазы связаны с нормальной деградацией и процессингом белков. Многие патологические нарушения или заболевания являются результатом аномальной активности цистеинпротеаз, такой как сверхэкспрессия или повышенная активация. Цистеинкатепсины, например катепсины B, K, L, S, V, F, являются классом липосомальных ферментов, которые участвуют в различных нарушениях, включающих в себя воспаление, ревматоидный артрит, остеоартрит, остеопороз, опухоли, коронарное заболевание, атеросклероз, аутоиммунные заболевания и инфекционные заболевания.
Катепсин S экспрессируется главным образом в антигенпредставляющих клетках и играет основную роль в представлении антигенов за счет деградации инвариантной цепи, которая ассоциирована с главным комплексом гистосовместимости класса II. Мыши с дефицитом катепсина S обнаруживали заметную резистентность к развитию индуцированного коллагеном артрита и аутоиммунной миастении ((Nakagawa et al., Immunity, 10, 207, 1999; Yang et al., 174, 1729, 2005). Обнаружено, что катепсин S расщепляет все основные компоненты внеклеточной матрицы и принимает участие в патогенной реакции, которая приводит к атеросклерозу, эмфиземе и хроническому обструктивному заболеванию легких ((Shi et al., Immunity, 10, 197, 1999; Zheng et al., J Clin. Invest., 106, 1081, 2000). Катепсин S также служит признаком боли (WO 2003020278).
Катепсин К обладает сильной коллагенолитической, эластазной и желатиназной активностями (Bromme et al., J. Biol. Chem, 271, 2126-2132, 1996) и преимущественно экспрессируется в остеокластах (Bromme and Okamoto, Biol. Chem. Hopp-Seyler, 376, 379-384, 1995). Он расщепляет ключевые белки матрикса костей, в том числе коллаген типа I и II (Kaffienah et al., Biochem. J. 331, 727-732, 1998), желатин, остеопонтин и остеонектин, и как таковой принимает участие в метаболизме внеклеточного матрикса, необходимом для нормального роста и ремоделирования костной ткани (Bossard et al., J. Biol. Chem. 271, 12517-12524, 1996). Ингибирование катепсина К должно привести к уменьшению опосредуемой остеокластами резорбции костей. Ингибиторы катепсина К могут, следовательно, представлять собой новые терапевтические агенты для лечения у человека патологических состояний, таких как остеопороз.
Sukhova et al. (J. Clin. Invest. 102, 576-583, 1998) показали, что клетки (макрофаги), которые мигрируют в развивающиеся атеросклеротические бляшки человека и аккумулируются в них, также синтезируют активные эластазы катепсины К и S. Разрушение матрикса, особенно в волокнистом покрытии таких бляшек, является критическим процессом в дестабилизации атеросклеротического повреждения. Поэтому метаболизм компонентов внеклеточного матрикса, коллагена и эластина, которые придают структурную целостность волокнистому покрытию при повреждении, может критически влиять на клинические проявления атеросклероза, такие как тромбоз коронарной артерии в результате разрыва атеросклеротической бляшки. Ингибирование катепсинов К и/или S у мест бляшек, склонных к разрыву, может поэтому представлять собой эффективный путь предотвращения таких случаев. Производные 4-аминопиримидин-2-карбонитрила были описаны как ингибиторы катепсина К и/или S в международной патентной заявке WO 03/020278 (Novartis Pharma GMBH), в то время как структурно родственные производные 4-аминопиримидин-2-карбонитрила недавно описаны в WO 04/000819 (ASTRAZENECA AB) в качестве ингибиторов катепсина S. Таким же образом пирролопиримидины были описаны в качестве ингибиторов катепсина К и/или S в WO 03/020721 (Novartis Pharma GMBH) и WO 04/000843 (ASTRAZENECA AB). Недавно карбонитрилзамещенные бициклические азотсодержащие ароматические системы описаны в международной патентной заявке WO 05/085210 (Ono Pharmaceutical Co.) в качестве ингибиторов цистеинпротеазы, полезных при лечении остеопороза.
В данной области сохраняется потребность в дополнительных ингибиторах катепсина, особенно потребность в соединениях, обладающих предпочтительной ингибирующей активностью в отношении катепсина S по сравнению с катепсином К.
С этой целью настоящее изобретение предлагает производные 6-фенил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила, имеющие формулу I
1-4
где R представляет собой необязательный орто- или мета-заместитель, выбранный из галогена и (С)алкилокси;
1
1-4
1-4
3
R представляет собой (C)алкил, (C)алкилокси, галоген или CF;
2
1-4
1-4
R представляет собой H, (C)алкил, (C)алкилокси или галоген;
3
2
n
5
6
R представляет собой H или (CH)-NRR;
4
1-6
7
8
9
R представляет собой H или (C)алкил, необязательно замещенный COOR или NRR;
5
6
3-8
2-6
1-6
3
3-8
6-10
1-6
6-10
10
11
12
13
14
13
2
1-4
R и R независимо представляют собой H, (C)циклоалкил, хинуклидин-3-ил, (C)алкенил или (C)алкил, необязательно замещенный галогеном, CF, (C)циклоалкилом, (C)арилом, 5- или 6-членной гетероарильной группой, OH, (C)алкилокси, (C)арилокси, COOR, CONRR, NRR или NRSO(C)алкилом; или
5
6
2
15
1-4
3-8
16
17
18
19
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее 1 или несколько гетероатомов, выбранных из O, S, SO и NR, причем кольцо необязательно замещено оксо, (C)алкилом, (C)циклоалкилом, NRR или CONRR;
7
1-4
R представляет собой H или (C)алкил;
8
9
1-4
1-4
3-8
R и R представляют собой независимо Н, (C)алкил (необязательно замещенный ди(C)алкиламино) или (C)циклоалкил; или
8
9
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из O и S;
10
1-4
R представляет собой H или (C)алкил;
11
12
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил; или
11
12
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из O и S;
13
14
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил; или
13
14
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из O и S;
15
1-4
1-4
1-4
21
22
20
21
22
R представляет собой H, (C)алкил (необязательно замещенный OH, (C)алкилокси, ди(C)алкиламино или CONRR), фенил, пиридил, COR или CONRR;
16
17
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил; или
16
17
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из О и S;
18
19
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил;
20
1-4
3-8
1-4
R представляет собой H, (C)алкил, (C)циклоалкил, (C)алкилокси или фурил;
21
22
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил; или
21
22
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из O и S;
n равно 0 или 1;
или их фармацевтически приемлемые соли.
Соединения являются ингибиторами катепсина S и катепсина K и поэтому их можно применять для получения лекарственного средства для лечения остеопороза, атеросклероза, воспаления и иммунных нарушений, таких как ревматоидный артрит, и хронической боли, такой как невропатическая боль.
1-6
Термин «(C)алкил», применяемый в определении формулы I, означает разветвленную или неразветвленную алкильную группу, имеющую 1-6 атомов углерода, такую как гексил, пентил, 3-метилбутил, бутил, изобутил, третичный бутил, пропил, изопропил, этил и метил.
1-4
Термин «(C)алкил» означает разветвленную или неразветвленную алкильную группу, имеющую 1-4 атомов углерода, такую как бутил, изобутил, третичный бутил, пропил, этил и метил.
1-6
1-6
В термине «(C)алкилокси» «(C)алкил» имеет ранее указанные значения.
2-6
Термин «(C)алкенил», применяемый в определении формулы I, означает разветвленную или неразветвленную алкенильную группу, имеющую 1-6 атомов углерода, такую как 2-гексенил, 2-пентенил, 3-метил-2-бутенил, 2-пропенил (аллил), 1-метилэтенил (β-аллил) или этенил.
3-8
Термин «(C)циклоалкил» означает циклоалкильную группу, имеющую 3-8 атомов углерода, такую как циклооктил, циклогептил, циклогексил, циклопентил, циклобутил и циклопропил.
Термин «хинуклидин-3-ил» означает 1-азабицикло[2,2,2]окт-3-ил.
6-10
Термин «(C)арил» означает радикал, полученный из ароматической группы, имеющей 6-10 атомов углерода, такой как, например, фенил и нафтил.
5
6
Термин «5- или 6-членная гетероарильная группа», применяемая в определении R и R, означает ароматическое 5- или 6-членное кольцо, имеющее 1-3 гетероатома, выбранные из атомов азота, кислорода и серы. Примерами таких гетероарильных групп являются пиридил, имидазолил, пиразолил, пиримидинил, тиазолил, изотиазолил, оксазолил, изоксазолил, тиенил, оксадиазолил и тому подобное. Предпочтительными гетероарильными группами являются 2-пиридил, 3-пиридил, 1,3-тиазол-2-ил, 1,2-оксазол-3-ил и 5-метилизоксазол-3-ил.
5
6
2
15
В определении формулы I R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, такое как кольцо азетидина, пирролидина, пиперидина или 1Н-азепина. Такие кольца могут содержать 1 или несколько дополнительных гетероатомов, выбранных из О, S, SO или NR, с образованием таких колец, как кольцо морфолина, тиоморфолина, 4-диоксо-4-тиоморфолина, гексагидро-1,4-оксазепина, пиперазина, гомопиперазина, имидазолидина или тетрагидротиазола.
8
9
В определении формулы I R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, такое как кольцо азетидина, пирролидина, пиперидина или 1Н-азепина. Такие кольца могут дополнительно содержать гетероатом, выбранный из О и S, с образованием таких колец, как кольцо морфолина, тиоморфолина, гексагидро-1,4-оксазепина или тетрагидротиазола.
11
12
В определении формулы I R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, такое как кольцо азетидина, пирролидина, пиперидина или 1Н-азепина. Такие кольца могут дополнительно содержать гетероатом, выбранный из О и S, с образованием таких колец, как кольцо морфолина, тиоморфолина, гексагидро-1,4-оксазепина или тетрагидротиазола.
13
14
В определении формулы I R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, такое как кольцо азетидина, пирролидина, пиперидина или 1Н-азепина. Такие кольца могут дополнительно содержать гетероатом, выбранный из О и S, с образованием таких колец, как кольцо морфолина, тиоморфолина, гексагидро-1,4-оксазепина или тетрагидротиазола.
16
17
В определении формулы I R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, такое как кольцо азетидина, пирролидина, пиперидина или 1Н-азепина. Такие кольца могут дополнительно содержать гетероатом, выбранный из О и S, с образованием таких колец, как кольцо морфолина, тиоморфолина, гексагидро-1,4-оксазепина или тетрагидротиазола.
21
22
В определении формулы I R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, такое как кольцо азетидина, пирролидина, пиперидина или 1Н-азепина. Такие кольца могут дополнительно содержать гетероатом, выбранный из О и S, с образованием таких колец, как кольцо морфолина, тиоморфолина, гексагидро-1,4-оксазепина или тетрагидротиазола.
Термин «галоген» означает F, Cl, Br или I. Когда атом галогена является заместителем у алкильной группы, F является предпочтительным. Предпочтительной галогензамещенной алкильной группой является трифторметил.
В одном варианте осуществления изобретение предлагает соединения согласно формуле I
где R отсутствует;
1
1-4
1-4
3
R представляет собой (C)алкил, (C)алкилокси или CF;
2
1-4
1-4
R представляет собой H, (C)алкил, (C)алкилокси;
3
2
n
5
6
R представляет собой H или (CH)-NRR;
4
1-6
7
8
9
R представляет собой H или (C)алкил, необязательно замещенный COOR или NRR;
5
6
3-8
2-6
1-6
3
3-8
6-10
1-6
6-10
10
11
12
13
14
R и R независимо представляют собой H, (C)циклоалкил, (C)алкенил или (C)алкил, необязательно замещенный галогеном, CF, (C)циклоалкилом, (C)арилом, 5- или 6-членной гетероарильной группой, OH, (C)алкилокси, (C)арилокси, COOR, CONRR или NRR; или
5
6
2
15
1-4
16
17
18
19
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее 1 или несколько гетероатомов, выбранных из O, S, SO и NR, причем кольцо необязательно замещено оксо, (C)алкилом, NRR или CONRR;
7
1-4
R представляет собой H или (C)алкил;
8
9
1-4
3-8
R и R представляют собой независимо Н, (C)алкил или (С)циклоалкил; или
8
9
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из O и S;
10
1-4
R представляет собой H или (C)алкил;
11
12
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил; или
11
12
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из O и S;
13
14
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил; или
13
14
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из O и S;
15
20
21
22
R представляет собой H, фенил, пиридил, COR или CONRR;
16
17
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил; или
16
17
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из О и S;
18
19
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил;
20
1-4
R представляет собой H, (C)алкил или фурил;
21
22
1-4
R и R представляют собой независимо H или (C)алкил; или
21
22
R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-8-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, необязательно дополнительно содержащее гетероатом, выбранный из O и S, и
n равно 0 или 1;
3
4
с условием, что один из R и R представляет собой H;
или их фармацевтически приемлемые соли.
1
3
2
1-4
1
3
2
Предпочтительными в изобретении являются те соединения согласно формуле I, у которых R представляет собой CF. Затем предпочтительными являются соединения формулы I, у которых R представляет собой (С)алкилокси. Особенно предпочтительными являются соединения по изобретению, у которых R представляет собой CF и R представляет собой этокси.
Особенно предпочтительными производными 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила по изобретению являются
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- [4-циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)имидазо[4,5-c]пиридин-1-ил]уксусная кислота;
- [4-циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)имидазо[4,5-c]пиридин-1-ил]масляная кислота;
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-(3-оксопиперазин-1-илметил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 2-(1,1-диоксотиазолидин-3-илметил)метил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1-(2-морфолин-4-илэтил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1-(2-пиперидин-1-илэтил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 1-(2-диметиламиноэтил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1-(3-морфолин-4-илпропил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 1-(3-диметиламинопропил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил и
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(2-гидроксиэтиламино)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 1-этил-2-(пиридин-4-иламинометил)-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-[4-(2-гидроксиэтил)-3-оксопиперазин-1-илметил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил;
- 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-оксоимидазолидин-1-илметил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил или его фармацевтически приемлемая соль.
В следующем аспекте изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим производное 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила, имеющее общую формулу I, или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными средствами.
1
2
2
4
4
4
1
Производные 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила общей формулы I можно получить, как показано на схеме 1, селективным цианированием 4-амино-2,6-дихлор-3-нитропиридина (II) цианидом меди с получением 4-амино-6-хлор-2-циано-3-нитропиридина (III). Катализируемое палладием сочетание промежуточного соединения (III) с арилбороновыми кислотами или соединениями арилолова, где арильные группы замещены R, R и R, причем каждый имеет ранее указанные значения, дает в качестве продукта производные 4-амино-2-циано-3-нитро-6-фенилпиридина формулы (IV). Восстановление нитрогруппы промежуточного соединения (IV) порошком Fe или SnCl в кислотных условиях или катализируемым палладием гидрированием дает производное 2-циано-3,4-диамино-6-фенилпиридина формулы (V) в качестве продукта. Обработка соединения (V) триэтилортоформиатом в присутствии в качестве катализатора кислоты Льюиса, например трифлата (трифторметансульфоната)иттербия, дает производное 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила формулы (VI). Дальнейшее превращение N-положения соединений формулы (VI) можно осуществить прямым алкилированием в основных условиях соединением формулы RX, где R имеет значения, указанные ранее, и где Х представляет собой уходящую группу, такую как Br, Cl, OMs или OTf, или алкилированием в условиях Мицунобу соединением формулы RX, где Х представляет собой ОН.
Схема 1
4
1-6
8
9
1
2
Производные 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила общей формулы I, где R представляет собой (С)алкильную группу, замещенную NRR, можно преимущественно получить из соответствующего бромидного производного формулы VIII (схема 2), где R, R и R имеют значения, указанные ранее, и где m равно 1-5. Прямое замещение бромида соединения (VIII) либо первичным либо вторичным амином в подходящем растворителе, таком как диметилсульфоксид, диметилформамид, метанол или тетрагидрофуран, при подходящей температуре дает соединение общей формулы (IX) в качестве продукта.
Схема 2
4
1-6
Производные 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила общей формулы I, где R представляет собой (С)алкильную группу, замещенную функциональной группой карбоновой кислоты, можно преимущественно получить из соответствующего сложноэфирного производного гидролизом, промотированным гидроксидом лития или гидроксидом натрия, как показано на схеме 3.
Схема 3
2
5
6
5
6
1
2
В альтернативном способе для введения аминогруппы в 2-положение 1Н-имидазо[4,5-c]пиридиновой части соединение, имеющее формулу (XII), можно синтезировать путем, указанным на схеме 4. Восстановление нитрогруппы 4-амино-6-хлор-2-циано-3-нитропиридина (III) либо Fe, либо SnCl в кислотных условиях или катализируемое палладием гидрирование дает в качестве продукта 6-хлор-2-циано-3,4-диаминопиридин (Х). Обработка соединения (Х) хлоридом дихлорметилен-N,N'-RR-замещенного аммония, где R и R имеют значения, указанные ранее, в смеси хлороформ/ацетонитрил при температуре кипения дает производное 2-амино-6-хлор-4-циано-1Н-имидазо[4,5-c]пиридина формулы (XI). Катализируемое палладием или другим переходным металлом сочетание соединения формулы (XI) либо с арилбороновой кислотой, либо арилоловом, где арильные группы замещены R, R и R, имеющими значения, указанные ранее, дает производное 2-амино-6-фенил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила формулы (XII) в качестве требуемого продукта.
Схема 4
3
1
2
Еще в одном способе введения группы R в 2-положение 1Н-имидазо[4,5-c]пиридиновой части соединение, имеющее формулу (XIII), можно синтезировать конденсацией производного 2-циано-3,4-диамино-6-фенилпиридина формулы (V), где R, R и R имеют значения, указанные ранее, с подходящей кислотой, ацилхлоридом, ортоформиатом или альдегидом при различных условиях, как показано на схеме 5.
Схема 5
3
1-6
5
6
Производные 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила общей формулы I, где R представляет собой (С)алкильную группу, замещенную NRR, можно преимущественно получить из соответствующего хлорзамещенного алкилпроизводного формулы XIII, как показано на схеме 6. Замещение хлорида соединений (XIII) различными первичными или вторичными аминами дает требуемый продукт (XIV).
Схема 6
Еще в одном способе соединения общей структуры XIV, где n равно 3, можно преимущественно получить из соединения XIII, где n равно 1, способом, указанным на схеме 7. Реакция XIII с трифенилфосфином в подходящем растворителе, например ацетонитриле, дает реагент Виттига XV. Реакция реагента Виттига XV с хлорацетальдегидом в присутствии 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена (DBU) в качестве основания дает замещенный аллилхлорид XVI в качестве продукта. Замещение хлорида дает соединения XVII и гидрирование XVII с применением палладия на угле в качестве катализатора дает соединения XIV, у которых n равно 3.
Схема 7
3
4
2
Производные 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила общей формулы I, где оба из R и R не являются водородом, можно получить согласно схеме 8. Алкилирование соединения III с применением алкилиодида или -бромида и карбоната калия в качестве основания в подходящем растворителе, например ацетонитриле или ДМФА, дает соединение XIX в качестве продукта. Сочетание по реакции Сузуки XIX с арилбороновой кислотой с применением производных палладия в качестве катализатора дает соединение ХХ в качестве продукта. Восстановление нитро в NH соединения ХХ с применением способа, описываемого на схеме 1, дает соединение XXI. Циклизация с применением способа, описываемого на схеме 5, дает продукт XXII и замещение хлорида амином способом, показываемым на схеме 6, дает требуемые соединения XXIII.
Схема 8
1
2
Еще в одном способе соединения с различными значениями R, R и R общей формулы I можно получить синтетическим путем, указанным на схеме 9. Восстановление соединения XIX с применением способа, описанного на схеме 1, дает соединение XXIV. Образование кольца имидазола способом схемы 5 дает соединение XXV. Сочетание по способу Сузуки XXV с различными арилбороновыми кислотами дает требуемый продукт, описываемый общей формулой I.
Схема 9
3
4
5
6
7
8
При получении производного 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила общей формулы I, в которой группа R или R содержит атом азота основной аминогруппы (либо в форме NRR, либо NRR), такой атом азота должен быть временно защищен, например, лабильной под действием кислоты трет-бутилоксикарбонильной (Вос) защитной группой. Другие подходящие защитные группы для функциональных групп, которые должны быть временно защищены во время синтеза, известны в данной области, например, из публикации Wuts, P.G.M. and Greene, T.W.: Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York, 1999.
Производные 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила по изобретению, которые могут быть в форме свободного основания, можно выделить из реакционной смеси в форме фармацевтически приемлемой соли. Фармацевтически приемлемые соли, такие как кислотно-аддитивные соли, можно далее получить обработкой свободного основания формулы I органической или неорганической кислотой, такой как, но без ограничения перечисленным, хлорид водорода, бромид водорода, иодид водорода, серная кислота, фосфорная кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, метансульфоновая кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота и аскорбиновая кислота.
Подходящими солями производных 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила формулы I, у которых присутствует карбоксилатная группа, могут быть соли щелочных металлов, такие как соль натрия, калия или лития, или может быть соль, полученная из комбинации с органическим основанием, таким как триметиламин, триэтиламин и тому подобное.
Соединения по изобретению могут существовать в сольватированных, а также в несольватированных формах, включая гидратированные формы. В общем, сольватированные формы являются эквивалентными несольватированным формам и предполагается, что они включены в объем настоящего изобретения. Соединения по настоящему изобретению могут существовать в аморфных формах, но могут быть также возможны многочисленные кристаллические формы. В общем, все кристаллические формы являются эквивалентными для применений, рассматриваемых настоящим изобретением, и, как предполагается, находятся в объеме данного изобретения.
1
2
4
14
20
22
Производные 6-фенил-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила по изобретению и их соли могут содержать центр хиральности в одной или нескольких боковых цепях R, R, R-R, R-R и их, следовательно, можно получить в виде чистого энантиомера или в виде смеси энантиомеров или в виде смеси, содержащей диастереомеры. Методы асимметричного синтеза, при помощи которых получают чистые стереоизомеры, хорошо известны в данной области, например синтез с хиральной индукцией или синтез из хиральных промежуточных соединений, энантиоселективные ферментативные превращения, разделение стереоизомеров или энантиомеров с применением хроматографии на хиральных средах. Такие методы описаны, например, в Chirality in Industry (edited by A.N.Collins, G.N.Sheldrake and J. Crosby, 1992; John Wiley).
Обнаружено, что соединения по изобретению являются ингибиторами катепсина S и катепсина К человека и их можно поэтому в следующем аспекте изобретения применять в терапии и особенно для получения лекарственного средства для лечения аутоиммунного заболевания, хронического обструктивного заболевания легких, боли, остеопороза, атеросклероза и родственных, зависимых от катепсина S и катепсина К нарушений, таких как астма и IBD.
Соединения по изобретению можно вводить энтерально или парентерально и для людей предпочтительно с суточной дозой 0,001-100 мг на 1 кг массы тела, предпочтительно 0,01-10 мг на 1 кг массы тела. Смешанные с фармацевтически приемлемыми вспомогательными средствами, например, как описано в стандартной ссылке Gennaro et al., Remington's Pharmaceutical Sciences, (20th ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2000, see especially Part 5: Pharmaceutical Manufacturing), соединения можно прессовать в твердые дозированные лекарственные формы, такие как пилюли, таблетки, или превращать в капсулы или суппозитории. При помощи фармацевтически приемлемых жидкостей соединения можно также применять в форме раствора, суспензии, эмульсии, например, для применения в виде препаратов для инъекции или в виде спрея, например, для применения в виде назального спрея.
Для получения дозированных лекарственных форм, например таблеток, предполагается применение общепринятых добавок, таких как наполнители, красящие средства, полимерные связывающие вещества и тому подобное. В общем, можно применять любую фармацевтически приемлемую добавку, которая не препятствует функционированию активных соединений.
Подходящие носители, с которыми можно вводить композиции, включают в себя лактозу, крахмал, производные целлюлозы и тому подобное, или их смеси, применяемые в подходящих количествах.
Изобретение далее иллюстрируется нижеследующими примерами.
Способы
Общие химические методики
1
Все реагенты либо приобретены из обычных коммерческих источников либо синтезированы согласно литературным методикам с применением коммерческих источников. Спектры протонного ЯМР (Н ЯМР) получали на спектрометре Bruker DPX 400 и отсчеты проводили от внутреннего стандарта ТМС. Масс-спектры регистрировали на Shimadzu LC-8A (HPLC) PE Sciex API 150EX LCMS. Анализ аналитической ЖХ-МС с обращенной фазой проводили на колонке С18 LUNA (5 мкм; 30×4,6 мм) при градиентных условиях (от смеси 90% воды/0,1% муравьиной кислоты до смеси 90% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты) при скорости потока 4 мл/мин.
Аббревиатуры:
Диметилформамид (ДМФА), N-метилпирролидинон (NMP), дихлорметан (DCM), диметилсульфоксид (ДМСО), тетрагидрофуран (ТГФ), 1,2-диметоксиэтан (DME), высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), диизопропилэтиламин (DIPEA), триэтиламин (ТЕА), уширенный (ушир.), синглет (с), дублет (д), триплет (т), трифторуксусная кислота (TFA), трет-бутилоксикарбонил (Вос), метансульфонат (MsO), трифторметансульфонат (TfO).
Пример 1
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
A: 4-Бром-1-этокси-3-трифторметилбензол
1
3
Перемешиваемую суспензию 4-бром-3-трифторметилфенола (117,6 г, 0,49 моль), иодэтана (77,6 г, 0,49 моль) и карбоната калия (101,2 г, 0,73 моль) в ацетонитриле (600 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 2,5 час. Смесь концентрируют при пониженном давлении перед распределением между дихлорметаном (1 литр) и водой (1 литр). Органическую фазу собирают и сушат над сульфатом магния перед концентрированием при пониженном давлении, получая при этом 4-бром-1-этокси-3-трифторметилбензол (126,97 г). H ЯМР (CDCl): δ 7,66 (с, 1H), 7,56 (д, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,09 (кв, 2H), 1,44 (т, 3H).
В: 4-Этокси-3-трифторметилфенилбороновая кислота
1
6
Раствор 4-бром-1-этокси-3-трифторметилбензола (21,25 г, 90,8 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (120 мл) продувают азотом, охлаждают до -78°С и по каплям добавляют BuLi (2,5 М раствор в гексанах, 39,96 мл, 99,9 ммоль), поддерживая температуру ниже -70°С. Смесь перемешивают в течение 5 минут перед добавлением триизопропилбората (17,9 г, 95,36 ммоль) в виде одной порции. Перемешивание продолжают при -78°С в течение 30 мин перед предоставлением смеси возможности нагреться до комнатной температуры. Реакционную смесь гасят добавлением 10 мл уксусной кислоты, растворенной в 150 мл воды, перед концентрированием при пониженном давлении для удаления тетрагидрофурана. Осадок собирают фильтрованием, растворяют в этилацетате и сушат над сульфатом натрия. Очистку достигают перекристаллизацией из смесей этилацетат/гексан, получая при этом 4-этокси-3-трифторметилфенилбороновую кислоту (10 г). H ЯМР (ДМСО-d): δ 8,08 (с, 1H), 8,01 (д, 1H), 7,2 (д, 1H), 4,18 (кв, 2H), 1,34 (т, 3H).
С: 4-Амино-6-хлор-3-нитропиридин-2-карбонитрил
1
Перемешиваемую суспензию 4-амино-1,6-дихлор-3-нитропиридина (17,5 г, 84,1 ммоль) и цианида меди(I) (15,1 г, 168,3 ммоль) в 170 мл 1-метил-2-пирролидинона опускают в масляную баню, предварительно нагретую до 180°С, и перемешивание продолжают в течение 30 мин. Смеси дают возможность охладиться и разбавляют этилацетатом (700 мл) и водой (700 мл) и образовавшуюся суспензию фильтруют. Органический слой отделяют и далее промывают водой (500 мл) и 0,1 н. HCl (500 мл). Органический слой затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая при этом коричневое твердое вещество, которое промывают диэтиловым эфиром и дихлорметаном, получая при этом 4-амино-6-хлор-3-нитропиридин-2-карбонитрил (8 г). H ЯМР (ДМСО): δ 8,8-7,7 (ушир.с, 2H), 7,18 (с, 1H).
D: 4-Амино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-3-нитропиридин-2-карбонитрил
1
Перемешиваемую смесь 4-амино-6-хлор-3-нитропиридин-2-карбонитрила (1 г, 5,04 ммоль), 4-этокси-3-трифторметилфенилбороновой кислоты (1,33 г, 6,04 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (~500 мг, 10 мол.%), карбоната калия (2,09 г, 15,12 ммоль) и ТГФ (10 мл) дегазируют (освобождают от воздуха) в потоке азота перед нагреванием в микроволновом устройстве Smith при 150°С в течение 10 мин. Сырую смесь концентрируют при пониженном давлении для удаления ТГФ перед распределением между этилацетатом и водой. Органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении, получая при этом темно-коричневое масло. Растирание его с диэтиловым эфиром дает светло-коричневое твердое вещество, которое фильтруют и сушат в потоке воздуха, получая при этом 4-амино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-3-нитропиридин-2-карбонитрил (900 мг). H ЯМР (ДМСО): δ 8,25-8,1 (м, 3H), 7,63 (с, 1H), 7,44 (д, 2H), 4,27 (кв, 2H), 1,38 (т, 3H).
Е: 3,4-Диамино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрил
1
В колбу, содержащую 4-амино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-3-нитропиридин-2-карбонитрил (5 г, 14,2 ммоль) и 10% Pd-C (влажный) (5 г), в атмосфере азота добавляют этилацетат (500 мл). Сосуд продувают водородом и содержимое его перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 час перед фильтрованием через слой целита с последующим концентрированием при пониженном давлении, получая при этом 3,4-диамино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрил (2,5 г). H ЯМР (ДМСО): δ 8,02 (м, 2H), 7,31 (д, 1H), 7,14 (с, 1H), 6,1 (ушир.с, 2H), 5,69 (ушир.с, 2H), 4,25 (кв, 2H), 1,35 (т, 3H). МС m/z 323,3 (М+1).
F: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
Перемешиваемую суспензию 3,4-диамино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрила (4,4 г, 13,7 ммоль), трифлата иттербия (173 мг, 2 мол.%), триэтилортоформиата (6,08 г, 41,1 ммоль) и ацетонитрила (50 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. Твердый осадок собирают фильтрованием и промывают небольшим количеством ацетонитрила, получая при этом 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (2,6 г). H ЯМР (ДМСО): δ 8,67 (с, 1H), 8,47 (с, 1H), 8,36 (м, 2H), 7,49 (д, 1H), 4,26 (кв, 2H), 1,38 (т, 3H). МС m/z 333,3 (М+1).
Пример 2
Метиловый эфир [4-циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)имидазо[4,5-c]пиридин-1-ил]уксусной кислоты
1
К раствору 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (пример 1; 200 мг, 0,6 ммоль) и метилбромацетата (276,2 мг, 1,81 ммоль) в диметилформамиде (4 мл) добавляют карбонат цезия (325,5 мг, 1,81 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. Смесь концентрируют при пониженном давлении для удаления диметилформамида перед распределением между этилацетатом (200 мл) и водой (200 мл). Органический слой собирают и сушат над сульфатом натрия перед очисткой на колонке с 10 г диоксида кремния и элюированием диэтиловым эфиром. Продукт затем промывают небольшим количеством диэтилового эфира и сушат в потоке воздуха, получая при этом метиловый эфир [4-циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)имидазо[4,5-c]пиридин-1-ил]уксусной кислоты (110 мг). H ЯМР (ДМСО): δ 8,76 (с, 1H), 8,64 (с, 1H), 8,39 (д, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 5,44 (с, 2H), 4,27 (кв, 2H), 3,75 (с, 3H), 1,38 (т, 3H). МС m/z 405,7 (М+1).
Пример 3
[4-Циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)имидазо[4,5-c]пиридин-1-ил]уксусная кислота
1
К раствору метилового эфира [4-циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)имидазо[4,5-c]пиридин-1-ил]уксусной кислоты (110 мг, 0,27 ммоль) в смеси 1:1 диметилформамида (2 мл) и воды (2 мл) добавляют гидроксид лития (19 мг, 0,81 ммоль), растворенный в 200 мкл воды. Для улучшения растворения добавляют дополнительно 2 мл диметилформамида. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин перед подкислением до рН 12 н. раствором HCl и фильтрованием. Полученное твердое вещество промывают эфиром перед растворением в ацетоне и концентрированием при пониженном давлении для удаления остаточных органических растворителей и получения [4-циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)имидазо[4,5-c]пиридин-1-ил]уксусной кислоты (100 мг). H ЯМР (ДМСО): δ 8,76 (с, 1H), 8,64 (с, 1H), 8,37 (м, 3H), 7,43 (д, 1H), 5,31 (с, 2H), 4,27 (кв, 2H), 1,38 (т, 3H); МС m/z 391,7 (М+1).
Пример 4
[4-Циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)имидазо[4,5-c]пиридин-1-ил]масляная кислота
1
Данное соединение получают из 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (пример 1) с применением метил-4-бромбутирата вместо метилбромацетата и с применением способов, описанных в примерах 2 и 3. H ЯМР (ДМСО): δ 8,69 (м, 2H), 8,43-8,38 (м, 2H), 7,42 (д, 1H), 4,44 (т, 2H), 4,27 (кв, 2H), 2,29 (т, 2H), 2,11 (м, 2H), 1,38 (т, 3H). МС m/z 419,5 (М+1).
Пример 5а
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(изобутиламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
A: 2-Хлорметил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
К раствору 3,4-диамино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрила (1,86 г, 5,78 ммоль) и 2-хлор-1,1,1-триэтоксиэтана (3,41 г, 17,3 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) добавляют трифлат иттербия (180 мг, 5 мол.%) и смесь кипятят с обратным холодильником на протяжении ночи. Смесь концентрируют при пониженном давлении перед распределением между этилацетатом и водой. Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют перед добавлением диэтилового эфира. Осадок фильтруют и сушат в потоке воздуха, получая при этом 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-(хлорметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (1,2 г). H ЯМР (ДМСО): δ 8,42 (с, 1H), 8,38 (д, 1H), 8,34 (с, 1H), 7,40 (д, 1H), 5,05 (с, 2H), 4,26 (кв, 2H), 1,38 (т, 3H). МС m/z 381,1 (М+1).
B: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(изобутиламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
Раствор 2-хлорметил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (20 мг, 0,06 ммоль) и изобутиламина (21 мг, 0,3 ммоль) в диметилсульфоксиде (500 мкл) нагревают в микроволновом устройстве Creator при 120°С в течение 5 мин. Смесь фильтруют и очищают препаративной ВЭЖХ, получая при этом 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-(изобутиламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (11,6 мг). H ЯМР (MeOD) δ 8,31 (с, 1H), 8,28-8,26 (м, 2H), 7,28 (д, 1H), 4,45 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,13 (д, 2H), 2,16 (м, 1H), 1,45 (т, 3H), 1,11 (д, 6H). МС m/z 418,6 (М+1).
Для получения нижеследующих соединений далее применяют методику, описанную в примере 5В, с использованием подходящих производных аминов.
5b: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(2-феноксиэтиламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,3-8,25 (м, 3H), 7,32-7,26 (м, 3H), 7,03-6,96 (м, 3H), 4,78 (с, 2H), 4,39 (т, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,76 (т, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 482,4 (М+1).
5c: 2-(3-Ацетамидопирролидин-1-илметил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил))-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,29-8,24 (м, 3H), 7,27 (д, 2H), 4,92 (с, 2H), 4,51 (м, 1H), 4,23 (кв, 2H), 3,96-3,85 (м, 2H), 3,75-3,61 (м, 2H), 2,54 (м, 1H), 2,19 (м, 1H), 1,99 (с, 3H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 473,3 (М+1).
5d: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(3-оксопиперазин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (ДМСО) δ 8,36-8,31 (м, 3H), 7,81 (с, NH), 7,39 (д, 1H), 4,26 (кв, 2H), 3,98 (с, 2H), 3,21-3,15 (м, 4H), 2,73 (м, 2H), 1,38 (т, 3H). МС m/z 445,5 (М+1).
5e: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-{[2-(2-оксоимидазолидин-1-ил)этиламино]метил}-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,29-8,24 (м, 3H), 7,27 (д, 1 H), 4,73 (с, 2H), 4,22 (кв, 2H), 3,64-3,47 (м, 8H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 474,3 (М+1).
5f: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(N,N-диметилкарбамоилметиламино)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,26 (м, 3H), 7,28 (д, 1H), 4,72 (с, 2H), 4,35 (с, 2H), 4,26 (кв, 2H), 3,05 (с, 3H), 3,03 (с, 3H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 447,3 (М+1).
5g: 2-(1,1-Диоксотиазолидин-3-илметил)метил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,30-8,22 (м, 3H), 7,28 (д, 1H), 4,54 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 4,22 (м, 1H), 4,13 (м, 1H), 3,56 (м, 1H), 3,40 (м, 1H), 3,24 (м, 2H), 2,17 (м, 1H), 2,33 (м, 1H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 480,0 (М+1).
5h: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(4-N,N-диметилкарбамоилпиперазин-1-ил)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,29-8,26 (м, 3H), 7,26 (д, 1H), 4,72 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,56-3,48 (м, 8H), 2,90 (с, 6H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 502,3.
5i: 2-(3-Диметиламиноазетидин-1-илметил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,38-8,34 (м, 3H), 7,331 (д, 1H), 5,16 (м, 1H), 5,08 (с, 1H), 4,81 (с, 2H), 4,77 (м, 1H), 4,49 (м, 1H), 4,25 (кв, 2H), 3,47 (с, 3H), 3,42 (с, 1H), 3,31 (с, 3H), 1,46 (кв, 3H). МС m/z 445,5 (М+1).
5j: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-{[(5-метилизоксазол-3-илметил)амино]метил}-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,30-8,24 (м, 3H), 7,25 (д, 1H), 6,33 (с, 1H), 4,74 (с, 2H), 4,56 (с, 2H), 4,22 (кв, 2H), 2,46 (с, 3H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 457,8 (М+1).
5k: 2-Аминометил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5,c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,26 (м, 3H), 7,29 (д, 1H), 4,54 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 362,6 (М+1).
5l: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-метиламинометил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,26 (м, 3H), 7,26 (д, 1H), 4,64 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 2,95 (с, 3H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 376,6 (М+1).
5m: 2-Диметиламинометил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,25 (м, 3H), 7,28 (д, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,14 (с, 6H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 390,6 (М+1).
5n: (4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(4-карбамоилпиперидин-1-ил)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,29-8,24 (м, 3H), 7,25 (д, 1H), 4,76 (с, 2H), 4,22 (кв, 2H), 3,84-3,81 (м, 2H), 3,35-3,30 (м, 2H), 2,64 (м, 1H), 2,16-2,07 (м, 4H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 473,3 (М+1).
5о: 2-[(N-Аллил-N-метиламино)метил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,30-8,25 (м, 3H), 7,27 (д, 2H), 6,08 (м, 1H), 5,69 (м, 2H), 4,79 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 4,05 (д, 2H), 3,09 (с, 3H), 1,46 (кв, 3H). МС m/z 416,8 (М+1).
5p: 2-(4-Ацетилпиперазин-1-илметил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,28-8,23 (м, 3H), 7,26 (с, 1H), 4,65 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,88 (м, 4H), 3,44-3,30 (м, 4H), 2,16 (с, 3H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 473,3 (М+1).
5q: 6-(4-Этокси-3-трифторметил)фенил)-2-[(4-этоксикарбонилпиперазин-1-ил)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,26-8,20 (м 3H), 7,25 (д, 1H), 4,52 (с, 2H), 4,24-4,13 (м, 4H), 3,75 (м, 4H), 3,23 (м, 4H), 1,45 (т, 3H), 1,26 (т, 3H). МС m/z 503,0 (М+1).
5r: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-{[3-(2-оксопирролидин-1-ил)пропиламино]метил}-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,25 (м, 3H), 7,27 (д, 1H), 4,67 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,53 (т, 2H), 3,46 (т, 2H), 3,29 (м, 2H), 2,42 (т, 2H), 2,13-2,03 (м, 4H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 487,5 (М+1).
5s: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-пирролидин-1-илпиперидин-1-ил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,23 (м, 3H), 7,29 (д, 1H), 4,35 (с, 2H), 4,24 (кв, 2H), 3,68-3,45 (м, 6H), 3,21-3,10 (м, 2H), 2,86-2,81 (м, 2H), 2,39-1,90 (м, 7H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 499,4 (М+1).
5t: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[4-(фуран-2-илкарбонил)пиперазин-1-илметил]-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,26 (с, 1H), 8,23 (д, 1H), 8,18 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 7,24 (д, 1H), 7,09 (м, 1H), 6,59 (м, 1H), 4,4 (с, 2H), 4,21 (кв, 2H), 4,04 (м, 4H), 3,18 (м, 4H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 525,7 (М+1).
5u: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(2-метоксиэтиламино)метил]-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,32-8,26 (м, 3H), 7,29 (д, 1H), 4,69 (с, 2H), 4,24 (кв, 2H), 3,77 (м, 2H), 3,53 (м, 2H), 3,46 (с, 3H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 420,3 (М+1).
5v: 2-(2,6-Диметилпиперидин-1-илметил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)]-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,26 (м, 3H), 7,28 (д, 1H), 4,9-4,6 (м, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,89-3,71 (м, 2H), 2,07-1,63 (м, 6H), 1,61-1,32 (м, 9H). МС m/z 459,0 (M+1,5).
5w: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-{[(фуран-2-илметил)амино]метил}-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,30-8,25 (м, 3H), 7,66 (с, 1H), 7,27 (д, 1H), 6,7 (м, 1H), 6,52 (м, 1H), 4,62 (с, 2H), 4,56 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 442,5 (М+1).
5x: 2-[(Циклопропилметиламино)метил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,26 (м, 3H), 7,28 (д, 1H), 4,68 (с, 2H), 3,17 (д, 2H), 1,45 (т, 3H), 1,21 (м, 1H), 0,77 (м, 2H), 0,48 (м, 2H). МС m/z 416,5 (М+1).
Пример 6а
2-[(1-Азабицикло[2.2.2]окт-3-иламино)метил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
Раствор 2-хлорметил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (20 мг, 0,06 ммоль), дигидрохлорида 3-аминохинуклидина (22,9 мг, 0,12 ммоль) и триэтиламина (18,2 мг, 0,18 ммоль) в диметилсульфоксиде (500 мкл) нагревают в микроволновом устройстве Creator при 120°С в течение 5 мин. Смесь фильтруют и очищают препаративной ВЭЖХ, получая при этом 2-[(1-азабицикло[2.2.2]окт-3-иламино)метил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (14,8 мг). H ЯМР (MeOD) δ 8,34-8,27 (м, 3H), 7,29 (д, 2H), 4,95 (с, 2H), 4,29-4,21 (м, 3H), 4,00 (м, 1H), 3,86-3,69 (м, 5H), 2,46 (м, 1H), 2,27-2,10 (м, 4H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 471,8 (М+1).
Для получения нижеследующих соединений далее применяют методику, описанную в примере 6, с использованием подходящих производных аминов:
6b: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-{[(тиазол-2-илметил)амино]метил}-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,27 (м, 3H), 7,92 (д, 1H), 7,75 (д, 1H), 7,28 (д, 1H), 4,89 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 459,6 (М+1).
6c: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(карбамоилметиламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,31-8,25 (м, 3H), 7,28 (д, 1H), 4,18 (ушир.с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 4,07 (ушир.с, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 419,4 (М+1).
6d: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(пиридин-4-иламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,28-8,22 (м, 5H), 7,27 (д, 1H), 6,93 (м, 2H), 5,75 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 439,5 (М+1).
Пример 7
А: 6-Хлор-2-диметиламино-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
Порошок железа (8,5 г) добавляют маленькими порциями к раствору 4-амино-6-хлор-2-циано-3-нитропиридина в МеОН (90 мл) и концентрированной хлористоводородной кислоте (30 мл) в течение 20 мин. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение еще 30 мин. После охлаждения реакционную смесь делают основной концентрированным водным аммиаком до рН 10. Смесь экстрагируют этилацетатом (200 мл × 5), объединенный органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия, растворитель удаляют в вакууме, получая при этом неочищенный продукт (4 г), который применяют для следующей стадии без дополнительной очистки. Указанный выше неочищенный продукт (0,33 г) добавляют к хлороформу (5 мл) и ацетонитрилу (20 мл) с последующим добавлением хлорида дихлорметилендиметиламмония (0,33 г). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 час. После охлаждения твердый продукт, 6-хлор-2-диметиламино-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил, собирают фильтрованием. H ЯМР (MeOD) δ 7,61 (с, 1H), 3,37 (с, 3H), 3,30 (с, 3H).
В: 2-Диметиламино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
Суспензию 6-хлор-2-диметиламино-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (100 мг, 0,45 ммоль), 4-этокси-3-трифторметилфенилбороновой кислоты (198 мг, 0,88 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (50 мг, ~10 мол.%) и карбоната калия (193,0 мг, 1,39 ммоль) в ТГФ (3 мл) нагревают до 130°С в течение 6 мин в микроволновом устройстве Smith. Сырую смесь концентрируют при пониженном давлении для удаления ТГФ перед распределением между этилацетатом и водой. Органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Вещество затем растворяют в ДМСО и очищают в виде аликвот препаративной ВЭЖХ. Нужные фракции собирают и концентрируют, получая при этом белое твердое вещество, которое промывают простым эфиром, получая при этом 2-диметиламино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (5,0 мг). H ЯМР (ДМСО) δ 8,24 (м, 2H), 7,84 (с, 1H), 7,35 (д, 1H), 4,24 (кв, 2H), 3,19 (с, 6H), 1,37 (т, 3H). МС m/z 376,7 (М+1).
Пример 8
А: 4-Амино-6-(4-метокси-3-трифторметилфенил)-3-нитропиридин-2-карбонитрил
1
Перемешиваемую смесь 4-амино-6-хлор-3-нитропиридин-2-карбонитрила (152 мг, 0,76 ммоль), 4-метокси-3-трифторметилфенилбороновой кислоты (332 мг, 1,51 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (115 мг, 10 мол.%), карбоната калия (418 мг, 3,03 ммоль) и ТГФ (5 мл) дегазируют в потоке азота перед нагреванием в микроволновом устройстве Smith Creator при 150°С в течение 10 мин. Сырую смесь концентрируют при пониженном давлении для удаления ТГФ перед распределением между этилацетатом (20 мл) и водой (20 мл). Органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении, получая при этом темно-коричневое масло. Смесь флэш-хроматографируют на диоксиде кремния (картридж Combiflash 10 г, от смеси 7:3 гептан/этилацетат до смеси 1:1 гептан/этилацетат), получая при этом 68 мг 4-амино-6-(4-метокси-3-трифторметилфенил)-3-нитропиридин-2-карбонитрила в виде оранжевого твердого вещества. H ЯМР (ДМСО) δ 8,25 (д, 1H), 8,18 (м, 2H), 7,62 (с, 2H), 7,46 (д, 1H), 3,99 (с, 3H). МС m/z 339,3 (М+1).
В: 3,4-Диамино-6-(4-метокси-3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрил
1
4-Амино-6-(4-метокси-3-трифторметилфенил)-3-нитропиридин-2-карбонитрил (65 мг, 0,19 ммоль) суспендируют в метаноле (1,5 мл) и по каплям добавляют концентрированную HCl (0,5 мл) (экзотермический эффект). Суспензию перемешивают при добавлении порциями порошка железа (37 мг, 0,67 ммоль) (экзотермический эффект) и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 час. Смесь выливают в воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (20 мл). Органические слои сушат и упаривают, затем флэш-хроматографируют на диоксиде кремния (картридж Combiflash 4 г, смесь 7:3 гептан/этилацетат), получая при этом 29 мг 3,4-диамино-6-(4-метокси-3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрила в виде бледно-коричневого твердого вещества. H ЯМР (ДМСО) δ 8,08-8,01 (м, 2H), 7,05-7,00 (м, 2H), 3,94 (с, 3H). МС m/z 309,7 (M+1).
С: 6-(4-Метокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3,4-Диамино-6-(4-метокси-3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрил (20 мг, 0,065 ммоль) суспендируют в толуоле (1 мл), в виде одной порции добавляют триэтилортоформиат (12 мг, 0,078 ммоль) и смесь кипятят с обратным холодильником на протяжении ночи. Смесью очищают препаративной ЖХ-МС, получая при этом 7 мг 6-(4-метокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил в виде белого твердого вещества. H ЯМР (ДМСО) δ 8,68 (с, 1H), 8,45-8,35 (м, 2H), 8,31 (с, 1H), 7,40 (д, 1H), 3,98 (с, 3H). МС m/z 319,1 (М+1).
Пример 9а
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(2-морфолин-4-илэтил)-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-4-карбонитрил
А: 1-(2-Бромэтил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (300 мг, 0,90 ммоль) растворяют в ТГФ (10 мл), добавляют 2-бромэтанол (225 мг, 1,80 ммоль) с последующим добавлением бетаина (738 мг, 1,80 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 час. Добавляют дополнительно 0,5 эквивалента бетаина (0,45 ммоль, 162 мг) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение дополнительного часа. Смесь распределяют между этилацетатом (20 мл) и водой (20 мл). Органический слой сушат и упаривают, затем флэш-хроматографируют на диоксиде кремния (картридж Combiflash 10 г, от DCM до 1% метанола в DCM), получая при этом белое твердое вещество, которое является смесью N-1- и N-3-алкилированных продуктов. Смесь флэш-хроматографируют на диоксиде кремния (картридж Flashmaster 10 г, от толуола до 20% этилацетата в толуоле), получая при этом 130 мг 1-(2-бромэтил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила в виде белого твердого вещества. H ЯМР (ДМСО) δ 8,80 (с, 1H), 8,74 (с, 1H), 8,48-8,39 (м, 2H), 7,44 (д, 1H), 4,88 (т, 2H), 4,29 (кв, 2H), 4,05 (т, 2H), 1,40 (т, 3H).
В: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(2-морфолин-4-илэтил)-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-4-карбонитрил
1
3
1-(2-Бромэтил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (92 мг, 0,21 ммоль) растворяют в ДМФА (2 мл) и добавляют морфолин (91 мг, 1,05 ммоль). Смесь нагревают до 120°С в течение 5 мин в микроволновом устройстве Smith. Смесь разбавляют метанолом (5 мл) и пропускают через картридж SCX 5 г, затем элюируют 2 М аммиаком в этаноле, получая при этом 62 мг 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1-(2-морфолин-4-илэтил)-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-4-карбонитрила в виде прозрачного масла. H ЯМР (CDCl) δ 8,26-8,15 (м, 3H), 7,87 (с, 1H), 7,08 (д, 1H), 4,35 (т, 2H), 4,20 (кв, 2H), 3,69 (м, 4H), 2,82 (т, 2H), 2,52 (м, 4H), 1,48 (т, 3H). МС m/z 446,4 (М+1).
Для получения нижеследующих соединений далее применяли методику, описанную в примере 9, с использованием подходящих производных аминов.
9b: 1-[2-(Циклопропилметиламино)этил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,23 (м, 2H), 8,18 (с, 1H), 7,92 (с, 1H), 7,11 (д, 1H), 4,35 (т, 2H), 4,20 (кв, 2H), 3,14 (т, 2H), 2,50 (д, 2H), 1,48 (т, 3H), 0,88 (м, 1H), 0,48 (м, 2H), 0,08 (м, 2H). МС m/z 430,5 (М+1).
9c: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(2-этиламиноэтил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,29-8,18 (м, 3H), 7,92 (с, 1H), 7,12 (д, 1H), 4,35 (т, 2H), 4,20 (кв, 2H), 3,12 (т, 2H), 2,67 (кв, 2H), 1,49 (т, 3H), 1,08 (т, 3H). МС m/z 404,7 (М+1).
9d: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(2-пиперидин-1-илэтил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,28-8,22 (м, 2H), 8,19 (с, 1H), 7,92 (с, 1H), 7,12 (д, 1H), 4,32 (т, 2H), 4,22 (кв, 2H), 2,74 (т, 2H), 2,45 (м, 4H), 1,59-1,43 (м, 9H). МС m/z 444,5 (М+1).
9e: Соль трифторуксусной кислоты 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1-(2-пирролидин-1-илэтил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,57 (с, 1H), 8,51 (с, 1H), 8,39 (м, 2H), 7,30 (д, 1H), 4,88 (м, 2H), 4,24 (кв, 2H), 3,86 (т, 2H), 3,79-3,58 (м, 2H), 3,24 (м, 2H), 2,35-1,95 (м, 4H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 430,5 (М+1).
9f: 1-(2-Диметиламиноэтил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,26-8,23 (м, 2H), 8,18 (с, 1H), 7,88 (с, 1H), 7,11 (д, 1H), 4,31 (т, 2H), 4,21 (кв, 2H), 2,75 (т, 2H), 2,31 (с, 6H), 1,49 (т, 3H). МС m/z 404,7 (М+1).
9g: 1-[2-(2-Диметиламиноэтиламино)этил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,97 (м, 1H), 8,78 (м, 1H), 8,43 (м, 2H), 7,29 (д, 1H), 4,99 (м, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,79 (м, 2H), 3,60 (м, 4H), 2,96 (с, 6H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 447,4 (М+1).
Пример 10а
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(3-морфолин-4-илпропил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
А: 1-(3-Бромпропил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (500 мг, 1,51 ммоль) растворяют в ТГФ (20 мл), добавляют 3-бромпропанол (396 мг, 3,0 ммоль) с последующим добавлением бетаина (1,23 г, 2,0 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 час. Добавляют дополнительно 0,5 эквивалента бетаина (0,45 ммоль, 162 мг) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение дополнительных 16 час. Смесь распределяют между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл). Органический слой сушат и упаривают, затем флэш-хроматографируют на диоксиде кремния (картридж Combiflash 40 г, от толуола до 40% этилацетата в толуоле), получая при этом 520 мг белого твердого вещества. Смесь растирают с эфиром, затем образовавшееся твердое вещество промывают эфиром (20 мл), получая при этом 310 мг 1-(3-бромпропил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила в виде белого твердого вещества. H ЯМР (ДМСО) δ 8,30-8,22 (м, 2H), 8,18 (с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,13 (д, 1H), 4,56 (т, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,48 (т, 2H), 2,48 (м, 2H), 1,50 (т, 3H).
В: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(3-морфолин-4-илпропил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
1-(3-Бромпропил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил растворяют в ДМФА (0,5 мл) и добавляют морфолин (19 мг, 0,22 ммоль). Смесь нагревают до 120°С в микроволновом устройстве Smith Creator. Смесь разбавляют метанолом и пропускают через картридж SCX, затем элюируют 2 М аммиаком в метаноле. Смесь затем очищают препаративной ВЭЖХ и ацетонитрил удаляют при пониженном давлении. Образовавшийся водный раствор делают основным бикарбонатом натрия, экстрагируют DCM (5 мл), затем органические слои сушат и упаривают, получая при этом 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1-(3-морфолин-4-илпропил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил в виде белого твердого вещества (8 мг). H ЯМР (CDCl) δ 8,25 (д, 1H), 8,18 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,89 (с, 1H), 7,11 (д, 1H), 4,42 (т, 2H), 4,21 (кв, 2H), 3,71 (м, 4H), 2,37 (м, 4H), 2,26 (т, 2H), 2,08 (м, 2H), 1,49 (т, 3H). МС m/z 460,6 (М+1).
Для получения нижеследующих соединений далее применяли методику, описанную в примере 10, с использованием подходящих производных аминов.
10b: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(3-этиламинопропил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,27 (д, 1H), 8,20 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,12 (д, 1H), 4,45 (т, 2H), 4,21 (кв, 2H), 2,61 (м, 4H), 2,06 (м, 2H), 1,50 (т, 3H), 1,10 (т, 3H). МС m/z 404,7 (М+1).
10c: 1-[3-(Циклопропилметиламино)пропил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,27 (д, 1H), 8,20 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,13 (д, 1H), 4,46 (т, 2H), 4,21 (кв, 2H), 2,61 (т, 2H), 2,42 (д, 2H), 2,07 (м, 2H), 1,49 (т, 3H), 0,91 (м, 1H), 0,48 (м, 2H), 0,10 (м, 2H). МС m/z 444,8 (М+1).
10d: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(3-пиперидин-1-илпропил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,26 (д, 1H), 8,20 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,92 (с, 1H), 7,12 (д, 1H), 4,40 (т, 2H), 4,21 (кв, 2H), 2,37-2,25 (м, 4H), 2,20 (т, 2H), 2,05 (м, 2H), 1,67-1,40 (м, 9H). МС m/z 459,0 (М+1).
10e: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-1-(3-пирролидин-1-илпропил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,36 (д, 1H), 8,20 (с, 1H), 8,13 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,12 (д, 1H), 4,43 (т, 2H), 4,21 (кв, 2H), 2,45 (м, 4H), 2,38 (т, 2H), 2,08 (м, 2H), 1,80 (м, 4H), 1,49 (т, 3H). МС m/z 444,8 (М+1).
10f: 1-(3-Диметиламинопропил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,29 (д, 1H), 8,21 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,12 (д, 1H), 4,41 (т, 2H), 4,32 (кв, 2H), 2,26-2,16 (м, 8H), 2,05 (м, 2H), 1,49 (т, 3H). МС m/z 418,6 (М+1).
10g: 1-(3-трет-Бутиламинопропил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил; соединение в виде соли трифторуксусной кислоты
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,53 (с, 1H), 8,43 (с, 1H), 8,36 (м, 2H), 7,30 (д, 1H), 4,57 (т, 2H), 4,26 (кв, 2H), 3,11 (м, 2H), 2,30 (м, 2H), 1,48 (т, 3H), 1,37 (с, 9H). МС m/z 446,4 (М+1).
Пример 11а
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
А: 2-Хлорметил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3,4-Диамино-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрил (1 г, 3,1 ммоль) растворяют в ацетонитриле (20 мл) и добавляют трифлат иттербия (38 мг, 0,062 ммоль) и 2-хлор-1,1,1-триэтоксиэтан (1,83 г, 9,3 ммоль). Смесь кипятят с обратным холодильником на протяжении ночи. Смесь упаривают при пониженном давлении, распределяют между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл) и органический слой сушат, затем упаривают при пониженном давлении, получая при этом темно-коричневое масло. Растирание его с DCM (50 мл) дает 495 мг 2-хлорметил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила в виде светло-коричневого твердого вещества. H ЯМР (ДМСО) δ 8,47-8,33 (м, 3H), 7,41 (д, 1H), 5,05 (с, 2H), 4,26 (кв, 2H), 1,38 (т, 3H). МС m/z 381,1 (М+1).
В: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
2-Хлорметил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (20 мг, 0,053 ммоль) растворяют в ДМФА и добавляют N-метилпиперазин (26 мг, 0,26 ммоль). Смесь нагревают до 120°С в течение пяти минут в микроволновом устройстве Smith Creator. Смесь разбавляют метанолом (4 мл) и загружают на картридж SCX. Картридж промывают три раза метанолом (5 мл), затем элюируют 2 М аммиаком в метаноле. Аммиак в метаноле удаляют упариванием при пониженном давлении, затем смесь очищают препаративной ВЭЖХ, получая при этом 8 мг 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила в виде белого твердого вещества. H ЯМР (MeOH) δ 8,28-8,20 (м, 2H), 8,13 (с, 1H), 7,26 (д, 1H), 4,22 (кв, 2H), 3,92 (с, 2H), 2,67 (м, 8H), 2,38 (с, 3H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 445,5 (М+1).
Для получения нижеследующих соединений далее применяли методику, описанную в примере 11, с использованием подходящих производных аминов.
11b: 2-Циклогексиламинометил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,31-8,26 (м, 3H), 7,28 (д, 1H), 4,66 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,35 (м, 1H), 2,25-2,22 (м, 2H), 1,95-1,92 (м, 2H), 1,75 (м, 1H), 1,53-1,26 (м, 8H). МС m/z 444,5 (М+1).
11c: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(2,2,2-трифторэтиламино)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,27-8,22 (м, 2H), 8,15 (с, 1H), 7,26 (д, 1H), 4,30 (с, 2H), 4,22 (кв, 2H), 3,47 (кв, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 444,4 (М+1).
11d: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(3-фенилпропиламино)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,31-8,26 (м, 3H), 7,32-7,14 (м, 6H), 4,64 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,26 (м, 2H), 2,78 (т, 2H), 2,14 (м, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 480,3 (М+1).
11e: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[1,4]оксазепан-4-илметил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,31-8,24 (м, 3H), 7,27 (д, 1H), 4,88 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,99 (м, 2H), 3,87 (м, 2H), 3,77-3,69 (м, 4H), 2,26 (м, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 446,4 (М+1).
11f: 2-(Бензиламинометил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,31-8,25 (м, 3H), 7,59-7,49 (м, 5H), 7,28 (д, 1H), 4,64 (с, 2H), 4,49 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 452,1 (М+1).
11g: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(фенетиламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,33-8,25 (м, 3H), 7,40-7,26 (м, 6H), 4,69 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,54 (т, 2H), 3,14 (т, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 466,3 (М+1).
11h: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(2-гидроксиэтиламино)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,32-8,27 (м, 3H), 7,29 (д, 1H), 4,70 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,92 (м, 2H), 3,41 (м, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 406,5 (М+1).
11i: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(2-амино-1,1-диметил-2-оксоэтиламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,32-8,28 (м, 3H), 7,29 (д, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 1,75 (с, 6H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 447,3 (М+1).
11j: 2-Циклопропиламинометил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,30-8,25 (м, 3H), 7,27 (д, 1H), 4,73 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,00 (м, 1H), 1,45 (т, 3H), 0,98 (м, 4H). МС m/z 402,4 (М+1).
11k: 2-(трет-Бутиламинометил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,28-8,20 (м, 2H), 8,13 (с, 1H), 7,27 (д, 1H), 4,22 (м, 4H), 1,45 (т, 3H), 1,30 (с, 9H). МС m/z 418,4 (М+1).
11l: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-морфолин-4-илметил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ 8,20 (м, 2H), 8,00 (ушир.с, 1H), 7,10 (д, 1H), 4,21 (кв, 2H), 3,99 (с, 2H), 3,81 (м, 4H), 2,68 (м, 4H), 1,48 (т, 3H). МС m/z 432,4 (М+1).
11m: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-фенилпиперазин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,31-8,24 (м, 3H), 7,33-7,26 (м, 3H), 7,08 (д, 2H), 6,97 (м, 1H), 4,80 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,67 (м, 4H), 3,55 (м, 4H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 507,3 (М+1).
11n: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-{[(пиридин-2-илметил)амино]метил}-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,68 (д, 1H), 8,31-8,24 (м, 3H), 7,92 (т, 1H), 7,53 (дд, 1H), 7,46 (м, 1H), 7,28 (д, 1H), 4,76 (с, 2H), 4,65 (с, 2H), 4,23 (м, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 453,3 (М+1).
11o: 2-[(2-Диметиламиноэтиламино)метил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,33-8,25 (м, 2H), 8,22 (с, 1H), 7,28 (д, 1H), 4,38 (с, 2H), 4,23 (кв, 2H), 3,37 (м, 2H), 3,31 (м, 2H), 3,02 (с, 6H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 433,5 (М+1).
11p: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-пиридин-4-илпиперазин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,32-8,24 (м, 2H), 8,20 (с, 1H), 8,16 (д, 2H), 7,28 (д, 1H), 7,20 (д, 2H), 4,27-4,20 (м, 4H), 3,92-3,86 (м, 4H), 3,02 (м, 4H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 508,4 (М+1).
11q: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[(2-пиридин-2-илэтиламино)метил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,84 (м, 2H), 8,31-8,25 (м, 3H), 8,12 (м, 2H), 7,28 (д, 1H), 4,77 (с, 2H), 4,24 (кв, 2H), 3,80 (т, 2H), 3,50 (т, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 467,4 (М+1).
Пример 12
А: 4-Амино-3-нитро-6-(3-(трифторметил)фенил)пиридин-2-карбонитрил
Перемешиваемую суспензию 4-амино-6-хлор-3-нитропиридин-2-карбонитрила (1,0 г, 5,04 ммоль), 3-(трифторметил)фенилбороновой кислоты (1148 мг, 6,04 ммоль) и карбоната калия (2,08 г, 15,1 ммоль) в ТГФ (16 мл) дегазируют азотом перед добавлением палладийтетракистрифенилфосфина (582 мг, 0,50 ммоль). Образовавшуюся суспензию нагревают до 150°С в течение 5 мин с применением микроволнового устройства Creator. Реакционную смесь фильтруют через целит и концентрируют в вакууме. Остаточное коричневое масло хроматографируют на колонке с силикагелем с применением дихлорметана в качестве элюента, получая при этом указанное в заголовке соединение в виде желтого твердого вещества (300 мг).
1
H ЯМР (MeOD): δ 8,32 (с, 1H), 8,27 (д, 1H), 7,81 (д, 1H), 7,72 (т, 1H), 7,63 (с, 1H).
В: 3,4-Диамино-6-(3-(трифторметил)фенил)пиридин-2-карбонитрил
1
К перемешиваемой суспензии 4-амино-3-нитро-6-(3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрила (300 мг, 0,97 ммоль) в этилацетате (80 мл) добавляют 10% палладий на угле (влажный) (300 мг, 2,82 ммоль). Содержимое сосуда продувают водородом (баллон) и перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 час. Реакционную смесь фильтруют через целит и концентрируют в вакууме, получая при этом указанное в заголовке соединение в виде темно-оранжевого твердого вещества (240 мг, 89%). H ЯМР (MeOD): δ 8,15 (с, 1H), 8,04 (д, 1H), 7,58-7,65 (м, 2H), 7,18 (с, 1H). МС m/z 279,3 (М+1).
С: 6-(3-Трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3,4-Диамино-6-(3-(трифторметил)фенил)пиридин-2-карбонитрил (120 мг, 0,43 ммоль) суспендируют в ацетонитриле (5 мл) и сосуд с суспензией продувают азотом. Добавляют трифлат иттербия (5 мг, 0,009 ммоль) и триэтилортоформиат (214 мкл, 1,29 ммоль) и образовавшуюся оранжевую суспензию кипятят с обратным холодильником в течение 1 час. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, получая при этом указанное в заголовке соединение в виде желтого твердого вещества (116 мг). H ЯМР (MeOD): δ 8,55 (с, 1H), 8,35-8,41 (м, 3H), 7,71-7,76 (м, 2H). МС m/z 288,9 (М+1).
D: 1-Этил-6-(3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
К перемешиваемому раствору 6-(3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (50 мг, 0,17 ммоль) в ацетонитриле (1 мл) добавляют карбонат цезия (62 мг, 0,19 ммоль) и иодэтан (15 мкл, 0,19 ммоль). Образовавшуюся суспензию перемешивают при комнатной температуре на протяжении ночи. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и фильтруют через гидрофобную фритту и концентрируют в вакууме. Остаточное оранжевое масло растирают с эфиром (5 мл) и образовавшийся осадок фильтруют и сушат, получая при этом указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого твердого вещества (4 мг). H ЯМР (MeOD): δ 8,56 (с, 1H), 8,52 (с, 1H), 8,46 (с, 1H), 8,41 (д, 1H), 7,71-7,74 (м, 2H), 4,46-4,51 (кв, 2H), 1,57-1,61 (т, 3H). МС m/z 317,0 (М+1).
Пример 13а
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(пиридин-3-иламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
Раствор 2-хлорметил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (20 мг, 0,052 ммоль), диизопропилэтиламина (28,4 мкл, 0,16 ммоль) и 3-аминопиридина (9,8 мг, 0,1 ммоль) в диметилсульфоксиде (500 мкл) нагревают в микроволновом устройстве Creator при 120°С в течение 5 мин. Смесь фильтруют и очищают препаративной ВЭЖХ, получая при этом указанное в заголовке соединение. H ЯМР (MeOH) δ 8,3-8,2 (м, 5H), 7,76-7,74 (м, 2H), 7,27 (д, 1H), 6,07 (с, 2H) 4,23 (кв, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 439,1 (М+1).
Для получения нижеследующих соединений далее применяли методику, описанную выше, с использованием подходящих производных аминов.
13b: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(пиридин-2-иламинометил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,33-8,23 (м, 3H), 8,08 (д, 1H), 8,00 (т, 1H), 7,30 (д, 1H), 7,22 (д, 1H), 7,01 (т, 1H), 5,83 (с, 2H), 4,24 (кв, 2H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 439,1 (М+1).
13c: N-(2-{[4-Циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-2-илметил]амино}этил)метансульфонамид
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,32-8,28 (м, 3H), 7,30 (д, 2H), 4,72 (с, 2H), 4,25 (кв, 2H), 3,56-2,96 (м, 4H), 3,04 (с, 3H), 1,46 (кв, 3H). МС m/z 483,5 (М+1).
13d: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-оксоимидазолидин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (ДМСО) δ 8,37-8,26 (м, 3H), 8,21 (с, 1H), 7,40 (д, 1H), 4,27 (кв, 2H), 4,20 (с, 2H), 4,15 (с, 2H), 1,38 (т, 3H). МС m/z 431,9 (М+1).
13e: 2-[4-(2-Диметиламиноэтил)-3-оксопиперазин-1-илметил]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,31-8,25 (м, 2H), 8,20 (с, 1H), 7,28 (д, 1H), 4,23 (кв, 2H), 4,07 (с, 2H), 3,78 (т, 2H), 3,52 (т, 2H), 3,42-3,35 (м, 4H), 2,98 (м, 8H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 516,3 (М+1).
13f: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[4-(2-гидроксиэтил)-3-оксопиперазин-1-илметил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,31-8,24 (м, 2H), 8,18 (с, 1H), 7,28 (д, 1H), 4,23 (кв, 2H), 4,16 (с, 2H), 3,74 (т, 2H), 3,61 (т, 2H), 3,54 (т, 2H), 3,47 (с, 2H), 3,06 (т, 2H), 1,46 (тм, 3H). МС m/z 489,4 (М+1).
13g: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(3,3,4-триметилпиперазин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,27 (с, 1H), 8,25 (д, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,24 (д, 1H), 4,23 (кв, 2H), 3,99 (с, 2H), 3,41-3,35 (ушир.м, 2H), 3,19-3,10 (ушир.м, 1H), 2,98-2,0 (ушир.м, 1H), 2,82 (с, 3H), 2,69-2,59 (ушир.м, 1H), 2,57-2,48 (ушир.м, 1H), 1,50-1,40 (м, 9H). МС m/z 473,5 (М+1).
13h: 2-{[(5-Диметиламинометилфуран-2-илметил)амино]метил}-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,36-8,28 (м, 3H), 7,29 (д, 2H), 7,05 (д, 1H), 6,73 (д, 1H), 5,00 (с, 2H), 4,98 (с, 2H), 4,27-4,22 (м, 4H), 3,34-3,30 (м, 6H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 499,6 (М+1).
13i: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[4-(2-метоксиэтил)пиперазин-1-илметил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,28 (с, 1H), 8,25 (д, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,27 (д, 1H), 4,24 (кв, 2H), 4,04 (с, 2H), 3,74 (т, 2H), 3,65-3,2 (ушир.м, 8H), 3,15-2,6 (ушир.м, 4H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 489,5 (М+1).
13j: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[4-(3-гидроксипропил)пиперазин-1-илметил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,28 (с, 1H), 8,25 (д, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,27 (д, 1H), 4,24 (кв, 2H), 4,05 (с, 2H), 3,7 (т, 2H), 3,7-3,4 (ушир.м, 2H), 3,4-2,55 (ушир.м, 6H), 1,96 (м, 2H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 489,5 (М+1).
13k: 2-{4-[4-Циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-2-илметил]пиперазин-1-ил}-N-изопропилацетамид
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,28 (с, 1H), 8,27 (д, 1H), 8,17 (с, 1H), 7,27 (д, 1H), 4,23 (кв, 2H), 4,08 (с, 2H), 4,02 (м, 1H), 3,89 (с, 2H), 3,44 (ушир.с, 4H), 3,29 (ушир.с, 4H), 1,46 (т, 3H), 1,18 (д, 6H). МС m/z 530,3 (М+1).
13l: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-илметил]-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,28 (с, 1H), 8,26 (д, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,24 (д, 1H), 4,23 (кв, 2H), 4,05 (с, 2H), 3,90 (т, 2H), 3,65-2,65 (ушир.м, 10H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 475,5 (М+1).
13m: 2-{[(2-Диметиламиноэтил)метиламино]-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,30 (с, 1H), 8,25 (д, 1H), 8,22 (1, 1H), 7,29 (д, 1H), 4,24 (кв, 2H), 4,11 (с, 2H), 3,38 (т, 2H), 3,03 (м, 8H), 2,50 (с, 3H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 447,5 (М+1).
13n: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-изопропилпиперазин-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,26 (с, 1H), 8,21 (д, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,25 (д, 1H), 4,22 (кв, 2H), 4,04 (с, 3H), 3,59-3,39 (м, 3H), 3,31-3,12 (ушир.м, 4H), 2,81-2,64 (ушир.м, 2H), 1,46 (т, 3H), 1,39 (д, 6H). МС m/z 473,5 (М+1).
13o: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(4-метил[1,4]диазепан-1-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,29 (с, 1H), 8,25 (д, 1H), 8,19 (с, 1H), 7,28 (д, 1H), 4,26-4,21 (м, 4H), 3,53-3,46 (ушир.м, 4H), 3,19 (т, 2H), 3,00 (т, 2H), 2,97 (с, 3H), 2,13 (м, 2H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 459,6 (М+1).
4
13p: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(1-оксо-1λ-тиоморфолин-4-илметил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (MeOH) δ 8,28-8,24 (м, 2H), 8,17 (с, 1H), 7,28 (д, 2H), 4,23 (кв, 3H), 3,48-3,36 (м, 2H), 3,20-3,00 (м, 6H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 464,3 (М+1).
6
13q: 2-(1,1-Диоксо-1λ-тиоморфолин-4-илметил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
H ЯМР (ДМСО) δ 8,39-8,25 (м, 3H), 7,40 (д, 1H), 4,26 (кв, 2H), 4,11 (с, 2H), 3,18 (м, 4H), 3,08 (м, 4H), 1,36 (кв, 3H). МС m/z 480,3 (М+1).
Пример 14
6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(3-морфолин-4-илпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-4-карбонитрил
А: [4-Циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-2-илметил]трифенилфосфонийхлорид
2-Хлорметил-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (100 мг, 0,26 ммоль) и трифенилфосфин в ацетонитриле нагревают до 60°С и перемешивают на протяжении ночи. Реакционную смесь концентрируют и растирают с эфиром, получая при этом светло-желтое твердое вещество. МС m/z 607,5 (М).
В: 2-(3-Хлорпропенил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
Раствор [4-циано-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-2-илметил]трифенилфосфонийхлорида (167,2 мг, 0,26 ммоль), хлорацетальдегида (50% в воде) (32,6 мг, 0,41 ммоль) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена (62,4 мг, 0,41 ммоль) растворяют в смеси 1:1 ТГФ:этанол (4 мл) при комнатной температуре на протяжении ночи. Смесь концентрируют и очищают препаративной ВЭЖХ, получая при этом указанное в заголовке соединение. МС m/z 407,5 (М+1).
С: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(3-морфолин-4-илпропенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
Раствор 2-(3-хлорпропенил)-6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (23 мг, 0,05 ммоль), морфолина (16,1 мг, 0,15 ммоль) в ДМСО (500 мкл) нагревают до 120°С в течение 5 мин. Смесь очищают с применением ионообменной хроматографии, получая при этом указанное в заголовке соединение.
МС m/z 458,9 (М+1).
D: 6-(4-Этокси-3-трифторметилфенил)-2-(3-морфолин-4-илпропил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
В колбу, содержащую раствор 6-(4-этокси-3-трифторметилфенил)-2-(3-морфолин-4-илпропенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (16 мг) в этаноле, добавляют 5% Pd/C (5 мг) и через колбу продувают водород. Смесь перемешивают в течение 1 час перед фильтрованием и очисткой препаративной ВЭЖХ, получая при этом указанное в заголовке соединение. H ЯМР (MeOH) δ 8,32-8,25 (м, 2H), 8,17 (с, 1H), 7,30 (д, 1H), 4,24 (кв, 2H), 4,20-3,84 (ушир.м, 4H), 3,65-3,60 (ушир.м, 2H), 3,40 (т, 2H), 3,22 (м, 4H), 2,40 (м, 2H), 1,45 (т, 3H). МС m/z 460,7 (М+1).
Пример 15а
2,2,2-Трифторацетат 2-((4-(пиридин-4-ил)пиперазин-1-ил)метил)-6-(3-(трифторметил)фенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
A: 2-(Хлорметил)-6-(3-(трифторметил)фенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
К раствору 3,4-диамино-6-(3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрила (1,6 г) и 2-хлор-1,1,1-триэтоксиэтана (3,41 г) в ацетонитриле (40 мл) добавляют трифлат иттербия (180 мг, 5 мол.%) и смесь кипятят с обратным холодильником на протяжении ночи. Смесь концентрируют при пониженном давлении перед распределением между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл). Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют перед добавлением диэтилового эфира (20 мл). Осадок отделяют фильтрованием и сушат в потоке воздуха, получая при этом указанное в заголовке соединение. H ЯМР (MeOD) δ 8,40 (с, 1H), 8,32-8,38 (м, 2H), 8,13-8,15 (д, 2H), 7,68-7,78 (м, 2H), 4,96 (с, 2H). МС m/z 337,5, 339,1 (М+1).
В: 2,2,2-Трифторацетат 2-((4-(пиридин-4-ил)пиперазин-1-ил)метил)-6-(3-(трифторметил)фенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
1
Раствор 2-(хлорметил)-6-(3-(трифторметил)фенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (15 мг, 0,045 ммоль) и 1-(4-пиридил)пиперазина (36 мг, 0,223 ммоль) в диметилсульфоксиде (500 мкл) нагревают в микроволновом устройстве Creator при 120°С в течение 5 мин. Смесь фильтруют и очищают препаративной ВЭЖХ, получая при этом указанное в заголовке соединение. H ЯМР (MeOD) δ 8,40 (с, 1H), 8,32-8,34 (м, 2H), 8,13-8,15 (д, 2H), 7,68-7,78 (м, 2H), 7,18-7,2 (д, 2H), 4,11 (с, 2H), 3,82-3,88 (м, 4H), 2,85-2,91 (м, 4H). МС m/z 464,1 (М+1).
Для получения нижеследующих соединений далее применяли методику, описанную выше, с использованием подходящих производных аминов.
15b: 2,2,2-Трифторацетат 2-((2-гидроксиэтиламино)метил)-6-(3-(трифторметил)фенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,41 (с, 2H), 8,35-8,37 (д, 1H), 7,70-7,77 (м, 2H), 4,73 (с, 2H), 3,92-3,94 (т, 2H), 3,42-3,45 (т, 2H). МС m/z 362,8 (М+1).
15c: 2,2,2-Трифторацетат 2-((пиридин-4-иламино)метил)-6-(3-(трифторметил)фенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
1
H ЯМР (MeOD) δ 8,40 (с, 1H), 8,37 (с, 1H), 8,34-8,36 (д, 1H), 8,22-8,24 (м, 2H), 7,71-7,76 (м, 2H), 6,92-6,94 (м, 2H), 5,77 (с, 2H). МС m/z 395,1 (М+1).
Пример 16а
Бистрифторацетат 1-этил-2-(4-метилпиперазин-1-илметил)-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
А: 6-Хлор-4-этиламино-3-нитропиридин-2-карбонитрил
1
6
При комнатной температуре карбонат калия (3,06 г) порциями добавляют к раствору 4-амино-6-хлор-3-нитропиридин-2-карбонитрила (4,0 г) в ДМФА (60 мл). К смеси по каплям добавляют раствор этилиодида (3,46 г) в ДМФА (20 мл), затем смесь перемешивают в течение 24 час при комнатной температуре и концентрируют при пониженном давлении. Остаток распределяют между водой (50 мл) и этилацетатом (100 мл). Водный слой экстрагируют этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли (3×50 мл), затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на силикагеле (элюент: дихлорметан), получая при этом указанное в заголовке соединение (2,94 г) в виде желтых кристаллов (т.пл. = 120°С). H ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,67 (ушир.с, 1H); 7,46 (с, 1H); 3,51 (кв, J=8 Гц, 2H); 1,21 (т, J=8 Гц, 3H). МС m/z: 227/229 (M+1).
В: 4-Этиламино-3-нитро-6-(3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрил
1
6
Тетракис(трифенилфосфин)палладий (2,78 г) добавляют в атмосфере азота к смеси 6-хлор-4-этиламино-3-нитропиридин-2-карбонитрила (10,9 г), 4-трифторметилфенилбороновой кислоты (10,0 г) в дегазированном диоксане (500 мл) и 2 М водном растворе карбоната калия (60 мл). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 час, затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток распределяют между этилацетатом (300 мл) и водой (300 мл). Водный слой экстрагируют этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на силикагеле (элюент: DCM, затем смесь DCM/ацетон, 95/5), получая при этом указанное в заголовке соединение (10,4 г, 64%). H ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,59 (ушир.с, 1H); 8,50-8,40 (м, 2H); 7,91 (д, J=8 Гц, 1H); 7,79 (т, J=7 Гц, 1H); 7,74 (с, 1H); 3,65 (кв, J=7 Гц, 2H); 1,24 (т, J=7 Гц, 3H). МС m/z: 337 (М+1).
С: 3-Амино-4-этиламино-6-(3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрил
1
6
При 0°С раствор дигидрата хлорида олова (30,2 г) в концентрированной водной HCl (150 мл) добавляют по каплям на протяжении 2 час к раствору 4-этиламино-3-нитро-6-(3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрила (5,0 г) в ДМФА (100 мл). Смесь далее перемешивают в течение 1 час при 5°С, затем наливают к смеси льда (900 г) и гидроксида калия (440 г), экстрагируют этилацетатом (2×1,4 л). Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли (700 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая при этом указанное в заголовке соединение (4,56 г) в виде твердого вещества. H ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,30-8,20 (м, 2H); 7,75-7,60 (м, 2H); 7,08 (с, 1H); 6,11 (т, J=6 Гц, 1H); 5,95 (ушир.с, 2H); 3,4-3,3 (м, 2H); 1,27 (т, J=7 Гц, 3H).
D: 2-Хлорметил-1-этил-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
6
Трифлат иттербия (1,16 г, 1,8 ммоль) и 2-хлор-1,1,1-триметоксиэтан (7,56 мл, 56,0 ммоль) добавляют к раствору 3-амино-4-этиламино-6-(3-трифторметилфенил)пиридин-2-карбонитрила (5,73 г, 18,7 ммоль) в ацетонитриле (150 мл). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 48 час, затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток распределяют между этилацетатом и водой. Органический слой сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток растирают с диэтиловым эфиром, фильтруют, получая при этом указанное в заголовке соединение (5,92 г, 87%) в виде твердого вещества. H ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,85 (с, 1H); 8,50-8,00 (м, 2H); 7,90-7,70 (м, 2H); 5,26 (с, 2H); 4,55-4,45 (м, 2H); 1,48 (т, J=7 Гц, 3H). МС m/z: 365 (М+1).
Е: Бистрифторацетат 1-этил-2-(4-метилпиперазин-1-илметил)-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
2
3
4
1
1-Метилпиперазин (30 мг) добавляют к раствору триэтиламина (76 мкл) и 2-хлорметил-1-этил-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (0,100 г) в ацетонитриле (4 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 час, затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток хроматографируют препаративной ВЭЖХ (элюент: НО+0,05% TFA/CHCN + 0,05% TFA), получая при этом указанное в заголовке соединение (156 мг). H ЯМР (MeOD) δ: 8,53 (с, 1H); 8,48 (с, 1H); 8,42 (д, J=8 Гц, 1H); 7,80-7,70 (м, 2H); 4,58 (кв, J=7 Гц, 2H); 4,10 (с, 2H); 3,6-3,4 (м, 2H); 3,3-3,1 (м, 4H); 2,94 (с, 3H); 2,8-2,6 (м, 2H); 1,57 (т, J=7 Гц, 3H). МС m/z: 429 (М+1).
С применением такой же экспериментальной методики получают нижеследующие соединения.
16b: Бистрифторацетат 1-этил-2-(4-пиридин-4-илпиперазин-1-илметил)-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
1
4
H ЯМР (MeOD) δ: 8,58 (с, 1H); 8,52 (с, 1H); 8,45 (д, J=8 Гц, 1H); 8,19 (д, J=8 Гц, 2H); 7,80-7,65 (м, 2H); 7,23 (д, J=8 Гц, 2H); 4,64 (кв, J=7 Гц, 2H); 4,17 (с, 2H); 3,75-3,65 (м, 4H); 2,80-2,65 (м, 4H); 1,61 (т, J=7 Гц, 3H).
16c: Трифторацетат 2-[(циклопропилметиламино)метил]-1-этил-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила
1
4
H ЯМР (MeOD) δ: 8,63 (с, 1H); 8,53 (с, 1H); 8,48 (д, J=8 Гц, 1H); 7,70-7,60 (м, 2H); 4,84 (с, 2H); 4,52 (кв, J=7 Гц, 2H); 3,24 (д, J=8 Гц, 2H); 1,55 (т, J=7 Гц, 3H); 1,35-1,20 (м, 1H); 0,85-0,75 (м, 2H); 0,55-0,50 (м, 2H). МС m/z: 400 (М+1).
16d: 1-Этил-2-(пиридин-4-иламинометил)-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
6
4-Аминопиридин (26 мг, 0,27 ммоль) добавляют к раствору диизопропилэтиламина (0,24 мл, 1,37 ммоль) и 2-хлорметил-1-этил-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (0,100 г, 0,27 ммоль) в ДМФА (3 мл). Смесь нагревают при 80°С в течение 2 час, затем фильтруют. Осадок промывают водой, затем изопропиловым эфиром, сушат, получая при этом указанное в заголовке соединение (55 мг, 47%) в виде твердого вещества (т.пл. = 340°C). H ЯМР (ДМСО-d) δ: 8,84 (с, 1H); 8,6-8,5 (м, 2H); 8,31 (д, J=8 Гц, 2H); 7,9-7,7 (м, 2H); 6,97 (д, J=8 Гц, 2H); 5,98 (с, 2H); 4,51 (кв, J=7 Гц, 2H); 1,45 (т, J=7 Гц, 3H). MC m/z: 423 (М+1).
16e: 2-(2(R,S)-Циклогексилпирролидин-1-илметил)-1-этил-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ: 8,3-8,2 (м, 2H); 7,88 (с, 1H); 7,69 (д, J=8 Гц, 1H); 7,64 (т, J=8 Гц, 1H); 4,7-4,4 (м, 2H); 4,22 (д, J=14 Гц, 1H); 3,82 (д, J=14 Гц, 1H); 2,7-2,6 (м, 1H); 2,5-2,3 (м, 2H); 1,9-1,4 (м, 13H); 1,2-0,9 (м, 5H). MC m/z: 482 (М+1).
16f: 2-(4-Циклопропанкарбонил-[1,4]диазепан-1-илметил)-1-этил-6-(3-трифторметилфенил)-1H-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ: 8,3-8,2 (м, 2H); 7,89 (с, 1H); 7,69 (д, J=8 Гц, 1H); 7,63 (т, J=8 Гц, 1H); 4,55-4,45 (м, 2H); 4,1-4,0 (м, 2H); 3,8-3,6 (м, 4H); 2,95-2,75 (м, 4H); 1,95-1,85 (м, 2H); 1,75-1,65 (м, 1H); 1,54 (т, J=7 Гц, 3H); 1,05-0,95 (м, 2H); 0,8-0,7 (м, 2H). МС m/z: 497 (М+1).
Пример 17а
1-Этил-6-(3,4-дихлорфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
А: 3-Амино-6-хлор-4-этиламинопиридин-2-карбонитрил
1
6
При 0°С раствор дигидрата хлорида олова (25,9 г) в концентрированном водном HCl (76 мл) добавляют по каплям на протяжении 40 мин к раствору 6-хлор-4-этиламино-3-нитропиридин-2-карбонитрила (2,9 г) в ДМФА (70 мл). Смесь перемешивают в течение 2,5 час, затем наливают к смеси льда (400 г) и 50% гидроксида натрия (400 мл), экстрагируют этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои промывают 2 н. гидроксидом натрия (700 мл), затем насыщенным раствором соли (3×100 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на силикагеле (элюент: дихлорметан/этилацетат, 9/1), получая при этом указанное в заголовке соединение (2,0 г) в виде белых кристаллов (т.пл. = 150°С). H ЯМР (ДМСО-d) δ: 6,46 (с, 1H); 6,42 (ушир.с, 1H); 6,02 (ушир.с, 2H); 3,20 (кв, J=8 Гц, 2H); 1,26 (т, J=8 Гц, 3H). МС m/z: 197/199 (М+1).
B: 6-Хлор-1-этил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
13
3
3
Трифлат иттербия (75 мг) добавляют к раствору 3-амино-6-хлор-4-этиламинопиридин-2-карбонитрила (1,41 г) в триэтилортоформиате (50 мл). Смесь нагревают при 120°С и при перемешивании в течение 2,5 час, затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток хроматографируют (элюент: дихлорметан/этилацетат, 9/1), получая при этом твердое вещество, которое растирают с диэтиловым эфиром и фильтруют, получая при этом указанное в заголовке соединение (0,973 г, 66%) в виде белых кристаллов (т.пл. = 138°С). H ЯМР (CDCl) δ: 8,17 (с, 1H); 7,62 (с, 1H); 4,31 (кв, J=8 Гц, 2H); 1,62 (т, J=8 Гц, 3H). C ЯМР (CDCl) δ: 147,5, 143,8, 142,9, 141,7, 124,0, 114,1, 109,2, 40,9, 15,2.
С: 1-Этил-6-(3,4-дихлорфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
4
3
3
3
1
Тетракис(трифенилфосфин)палладий (15 мг) добавляют в атмосфере азота к смеси 6-хлор-1-этил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрила (42 мг), 3,4-дихлорфенилбороновой кислоты (152 мг) и фторида цезия (100 мг) в DME (2 мл) и метаноле (1 мл). Смесь нагревают при 80°С в течение 24 час, затем фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают с применением метода препаративной ЖХ-МС (элюент: А: NHHCO, 10 мМ/В: CHCN), получая при этом указанное в заголовке соединение (30 мг) в виде белого твердого вещества. H ЯМРR (CDCl) δ: 8,20-8,15 (м, 2H); 7,94 (д, J=8 Гц, 1H); 7,91 (с, 1H); 7,58 (д, J=8 Гц, 1H); 4,37 (кв, J=7 Гц, 2H); 1,65 (т, J=7 Гц, 3H). МС m/z: 317/319 (М+1).
Описанную выше методику применяют с использованием подходящих производных бороновых кислот для синтеза нижеследующих производных.
17b: 1-Этил-6-(4-хлор-3-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
3
H ЯМР (CDCl) δ: 8,36 (с, 1H); 8,23 (д, J=8 Гц, 1H); 8,19 (с, 1H); 7,95 (с, 1H); 7,65 (д, J=8 Гц, 1H); 4,39 (кв, J=7 Гц, 2H); 1,66 (т, J=7 Гц, 3H). МС m/z: 351/353 (М+1).
17c: 1-Этил-6-(3,5-дихлорфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
4
H ЯМР (MeOD) δ: 8,59 (с, 1H); 8,55 (с, 1H); 8,17 (с, 2H); 7,52 (с, 1H); 4,47 (кв, J=7 Гц, 2H); 1,58 (т, J=7 Гц, 3H). МС m/z: 317/319 (М+1).
Пример 18
6-(2-Этокси-5-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
А: 6-Хлор-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
Данное соединение синтезируют таким же путем, как для соединения 17а, стадия В, исходя из 6-хлор-3,4-диаминопиридин-2-карбонитрила. H ЯМР (ДМСО) δ: 8,72 (с, 1H), 8,06 (с, 1H).
В: 6-Хлор-2-тетрагидропиранил-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
6-Хлор-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (1 г) растворяют в этилацетате (20 мл). К указанному выше раствору добавляют 3,4-дигидро-2Н-пиран (1 мл) и гидрат толуолсульфоновой кислоты (50 мг). Смесь нагревают при 60°С в течение 10 час, затем промывают бикарбонатом натрия (5%, 10 мл). Органический слой сушат над сульфатом натрия, растворитель удаляют, получая при этом указанное в заголовке соединение. H ЯМР (ДМСО) 8,92 (с, 1H), 8,30 (с, 1H), 5,81 (д, 1H), 4,00 (м, 1H), 3,78 (м, 1H), 2,18 (м, 1H), 2,07 (м, 1H), 1,67 (м, 4H).
С: 6-(2-Этокси-5-трифторметилфенил)-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
Колбу, содержащую 6-хлор-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (60 мг), (2-этокси-5-трифторметилфенил)бороновую кислоту (59,2 мг), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (10,5 мг), трициклогексилфосфин (7,7 мг), герметизируют и продувают азотом перед добавлением диоксана (615 мкл). Смесь дегазируют продуванием азота через смесь перед добавлением раствора фосфата калия (83,0 мг) в воде (305 мкл). Смесь нагревают до 100°С и энергично перемешивают на протяжении ночи. Сырую смесь фильтруют через слой диоксида кремния перед добавлением этилацетата (30 мл) и воды (50 мл). Слой этилацетата концентрируют перед очисткой на колонке с 10 г диоксида кремния с элюированием смесью 40% этилацетат/гептан, получая при этом указанное в заголовке соединение. МС m/z 417,5 (М+1).
D: 6-(2-Этокси-5-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил
1
6-(2-Этокси-5-трифторметилфенил)-1-(тетрагидропиран-2-ил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил (67 мг) и гидрат пара-толуолсульфоновой кислоты (10 мг) добавляют в метанол (5 мл) и DCM (5 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре на протяжении ночи перед концентрированием и очисткой препаративной ВЭЖХ, получая при этом 6-(2-этокси-5-трифторметилфенил)-1Н-имидазо[4,5-c]пиридин-4-карбонитрил. H ЯМР (MeOH) δ 8,55 (с, 1H), 8,48 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,70 (д, 1H), 7,29 (д, 1H), 4,26 (кв, 2H), 1,46 (т, 3H). МС m/z 333,1 (М+1).
Пример 19
Методика анализа катепсина S
Ингибирующую активность соединений по изобретению подтверждали измерением in vitro ингибирования рекомбинантного катепсина S человека следующим образом. К 384-луночному титрационному микропланшету добавляют 10 мкл 100 мкМ раствора испытуемого соединения в буфере для анализа (100 мМ ацетат натрия, рН 5,5, 5 мМ EDTA, 5 мМ дитиотреит) с 10% диметилсульфоксидом (ДМСО), плюс 20 мкл 250 мкМ раствора субстрата Z-Val-Val-Arg-AMC (7-амидокумариновое производное трипептида N-бензилоксикарбонил-Val-Val-Arg-OH) в буфере для анализа и 45 мкл буфера для анализа. Затем в лунке добавляют 25 мкл 2 мг/л раствора активированного рекомбинантного катепсина S человека в буфере для анализа, получая при этом конечную концентрацию ингибитора 10 мкМ.
50
50
50
50
50
Ферментативную активность определяют измерением флуоресценции выделенного аминометилкумарина при 440 нМ с применением возбуждения при 390 нМ в течение 20 мин. Ферментативную активность в процентах вычисляют сравнением данной активности с активностью раствора, не содержащего ингибитор. Соединения затем подвергают анализу с применением кривой зависимости доза-реакция для определения величин IC для активных соединений (где IC является концентрацией испытуемого соединения, вызывающей 50% ингибирование ферментативной активности). Соединения по изобретению обычно имеют pIC (отрицательный логарифм концентрации IC) для ингибирования катепсина S человека больше, чем 6. Большинство соединений по изобретению имеют значение pIC больше, чем 7, например, приведенные в качестве примеров соединения примеров 1, 3, 4, 5d, 5g, 9a, 9d, 9f, 10a, 10f, 11a, 11h, 13d, 13l.
Пример 20
Методика анализа катепсина К
Ингибирующую активность соединений по изобретению доказывали in vitro измерением ингибирования рекомбинантного катепсина К человека следующим образом. К 384-луночному титрационному микропланшету добавляют 5 мкл 100 мкМ раствора испытуемого соединения в буфере для анализа (100 мМ ацетат натрия, рН 5,5, 5 мМ EDTA, 5 мМ дитиотреит) с 10% диметилсульфоксида (ДМСО), плюс 10 мкл 100 мкМ раствора субстрата Z-Phe-Arg-AMC (7-амидокумариновое производное дипептида N-бензилоксикарбонил-Phe-Arg-OH) в буфере для анализа и 25 мкл буфера для анализа. Затем в лунку добавляют 10 мкл раствора 1 мг/л активированного рекомбинантного катепсина К человека в буфере для анализа, получая при этом конечную концентрацию ингибитора 10 мкМ.
50
50
50
50
Ферментативную активность определяют измерением флуоресценции выделенного аминометилкумарина при 440 нМ с применением возбуждения при 390 нМ в течение 10 мин. Ферментативную активность в процентах вычисляют сравнением данной активности с активностью раствора, не содержащего ингибитор. Соединения затем подвергают анализу с применением кривой зависимости доза-реакция для определения величин IC для активных соединений (где IC является концентрацией испытуемого соединения, вызывающей 50% ингибирование ферментативной активности). Соединения по изобретению обычно имеют pIC (отрицательный логарифм концентрации IC) для ингибирования катепсина К человека между 5 и 7.