РАСТЕНИЯ, ИМЕЮЩИЕ ИЗМЕНЕННЫЕ АГРОНОМИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ В УСЛОВИЯХ ОГРАНИЧЕНИЯ АЗОТА, И РОДСТВЕННЫЕ КОНСТРУКТЫ И СПОСОБЫ ВОВЛЕЧЕНИЯ ГЕНОВ, КОДИРУЮЩИХ ПОЛИПЕПТИДЫ LNT2 И ИХ ГОМОЛОГИ

1. Растение, включающее в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт, включающий полинуклеотид, функционально связанный, по меньшей мере, с одним регуляторным элементом, где указанный полинуклеотид кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32, и где указанное растение проявляет повышенную выносливость к азотному стрессу по сравнению с контрольным растением, не включающим указанный рекомбинантный ДНК-конструкт.
2. Растение по п.1, где растение является растением маиса или растением сои.
3. Растение, включающее в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт, включающий:
(a) полинуклеотид, функционально связанный, по меньшей мере, с одним регуляторным элементом, где указанный полинуклеотид кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32; или
(b) супрессорный ДНК-конструкт, включающий, по меньшей мере, один регуляторный элемент, функционально связанный со:
(i) всей (всем) или частью: (A) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32, или (B) полного дополнения последовательности нуклеиновой кислоты (b)(i)(A); или
(ii) областью, полученной из всей или части смысловой цепи или антисмысловой цепи целевого гена интереса, причем указанная область имеет последовательность нуклеиновой кислоты, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с указанной всей или частью смысловой цепи или антисмысловой цепи, из которой указанная область получена, и где указанный целевой ген интереса кодирует полипептид LNT2,
и где указанное растение проявляет изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению с контрольным растением, не включающим указанный рекомбинантный ДНК-конструкт.
4. Растение по п.3, где растение является растением маиса или растением сои.
5. Растение по п.3, где указанное растение проявляет указанное изменение указанной, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению, в условиях ограничения азота, с указанным контрольным растением, не включающим указанный рекомбинантный ДНК-конструкт.
6. Растение по п.5, где растение является растением маиса или растением сои.
7. Растение по п.3, где указанная, по меньшей мере, одна агрономическая характеристика выбрана из группы, включающей зеленость, урожайность, скорость роста, биомассу, сырой вес при созревании, сухой вес при созревании, урожайность плодов, урожайность семян, общее содержание азота в растении, содержание азота в плодах, содержание азота в семенах, содержание азота в вегетативной ткани, содержание аминокислот в целом растении, содержание свободных аминокислот в вегетативной ткани, содержание свободных аминокислот в плодах, содержание свободных аминокислот в семенах, общее содержание белка в растении, содержание белка в плодах, содержание белка в семенах, содержание белка в вегетативной ткани, выносливость к засухе, поглощение азота, устойчивость к корневому полеганию, процентное отношение массы урожая к полной массе растений, стеблевое полегание, высоту растения, высоту початка и длину початка.
8. Растение по п.7, где растение является растением маиса или растением сои.
9. Растение по п.3, где указанное растение проявляет увеличение указанной, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению с указанным контрольным растением.
10. Растение по п.9, где растение является растением маиса или растением сои.
11. Способ повышения выносливости растения к азотному стрессу, в котором:
(a) вводят в регенерируемую растительную клетку рекомбинантный ДНК-конструкт, включающий полинуклеотид, функционально связанный, по меньшей мере, с одной регуляторной последовательностью, где полинуклеотид кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32; и
(b) регенерируют трансгенное растение из регенерируемой растительной клетки после стадии (a), где трансгенное растение включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт и проявляет повышенную выносливость к азотному стрессу по сравнению с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
12. Способ по п.11, в котором дополнительно:
(c) получают растение-потомок, полученное из трансгенного растения, где указанное растение-потомок включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт и проявляет повышенную выносливость к азотному стрессу по сравнению с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
13. Способ оценки выносливости растения к азотному стрессу, в котором:
(a) вводят в регенерируемую растительную клетку рекомбинантный ДНК-конструкт, включающий полинуклеотид, функционально связанный, по меньшей мере, с одной регуляторной последовательностью, где полинуклеотид кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32;
(b) регенерируют трансгенное растение из регенерируемой растительной клетки после стадии (a), где трансгенное растение включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт; и
(c) оценивают трансгенное растение на выносливость к азотному стрессу по сравнению с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
14. Способ по п.13, в котором дополнительно:
(d) получают растение-потомок, полученное из трансгенного растения, где растение-потомок включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт; и
(e) оценивают растение-потомок на выносливость к азотному стрессу по сравнению с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
15. Способ оценки выносливости растения к азотному стрессу, в котором:
(a) вводят в регенерируемую растительную клетку рекомбинантный ДНК-конструкт, включающий полинуклеотид, функционально связанный, по меньшей мере, с одной регуляторной последовательностью, где полинуклеотид кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32;
(b) регенерируют трансгенное растение из регенерируемой растительной клетки после стадии (a), где трансгенное растение включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт;
(c) получают растение-потомок, полученное из трансгенного растения, где растение-потомок включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт; и
(d) оценивают растение-потомок на выносливость к азотному стрессу по сравнению с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
16. Способ определения изменения агрономической характеристики у растения, в котором:
(a) вводят в регенерируемую растительную клетку рекомбинантный ДНК-конструкт, включающий полинуклеотид, функционально связанный, по меньшей мере, с одной регуляторной последовательностью, где полинуклеотид кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32;
(b) регенерируют трансгенное растение из регенерируемой растительной клетки после стадии (a), где трансгенное растение включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт; и
(c) определяют, проявляет ли трансгенное растение изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
17. Способ по п.16, в котором дополнительно:
(d) получают растение-потомок, происходящее из трансгенного растения, где растение-потомок включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт; и
(e) определяют, проявляет ли растение-потомок изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
18. Способ по п.16, где на указанной стадии определения (c) определяют, проявляет ли трансгенное растение изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению, в условиях ограничения азота, с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
19. Способ по п.17, где на указанной стадии определения (e) определяют, проявляет ли растение-потомок изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению, в условиях ограничения азота, с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
20. Способ определения изменения агрономической характеристики у растения, в котором:
(a) вводят в регенерируемую растительную клетку рекомбинантный ДНК-конструкт, включающий полинуклеотид, функционально связанный, по меньшей мере, с одной регуляторной последовательностью, где полинуклеотид кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32;
(b) регенерируют трансгенное растение из регенерируемой растительной клетки после стадии (a), где трансгенное растение включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт;
(c) получают растение-потомок, полученное из трансгенного растения, где растение-потомок включает в своем геноме рекомбинантный ДНК-конструкт; и
(d) определяют, проявляет ли растение-потомок изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
21. Способ по п.20, где на указанной стадии определения (d) определяют, проявляет ли трансгенное растение изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению, в условиях ограничения азота, с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
22. Способ определения изменения агрономической характеристики у растения, в котором:
(a) вводят в регенерируемую растительную клетку супрессорный ДНК-конструкт, включающий, по меньшей мере, один регуляторный элемент, функционально связанный со:
(i) всей (всем) или частью: (A) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32, или (B) полного дополнения последовательности нуклеиновой кислоты (b)(i)(A); или
(ii) областью, полученной из всей или части смысловой цепи или антисмысловой цепи целевого гена интереса, причем указанная область имеет последовательность нуклеиновой кислоты, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с указанной всей или частью смысловой цепи или антисмысловой цепи, из которой указанная область получена, и где указанный целевой ген интереса кодирует полипептид LNT2;
(b) регенерируют трансгенное растение из регенерируемой растительной клетки после стадии (a), где трансгенное растение включает в своем геноме супрессорный ДНК-конструкт; и
(c) определяют, проявляет ли трансгенное растение изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению с контрольным растением, не включающим супрессорный ДНК-конструкт.
23. Способ по п.22, где на указанной стадии определения (c) определяют, проявляет ли трансгенное растение изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению, в условиях ограничения азота, с контрольным растением, не включающим супрессорный ДНК-конструкт.
24. Способ по п.22, в котором дополнительно:
(d) получают растение-потомок, полученное из трансгенного растения, где растение-потомок включает в своем геноме супрессорный ДНК-конструкт; и
(e) определяют, проявляет ли растение-потомок изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению с контрольным растением, не включающим супрессорный ДНК-конструкт.
25. Способ по п.24, где на указанной стадии определения (e) определяют, проявляет ли растение-потомок изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению, в условиях ограничения азота, с контрольным растением, не включающим супрессорный ДНК-конструкт.
26. Способ определения изменения агрономической характеристики у растения, в котором:
(a) вводят в регенерируемую растительную клетку супрессорный ДНК-конструкт, включающий, по меньшей мере, один регуляторный элемент, функционально связанный со:
(i) всей (всем) или частью: (A) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 20, 24, 26, 28, 30 или 32, или (B) полного дополнения последовательности нуклеиновой кислоты (b)(i)(A); или
(ii) областью, полученной из всей или части смысловой цепи или антисмысловой цепи целевого гена интереса, причем указанная область имеет последовательность нуклеиновой кислоты, по меньшей мере, на 50% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с указанной всей или частью смысловой цепи или антисмысловой цепи, из которой указанная область получена, и где указанный целевой ген интереса кодирует полипептид LNT2;
(b) регенерируют трансгенное растение из регенерируемой растительной клетки после стадии (a), где трансгенное растение включает в своем геноме супрессорный ДНК-конструкт и проявляет изменение, по меньшей мере, одного агрономического признака по сравнению с контрольным растением, не включающим супрессорный ДНК-конструкт;
(c) получают растение-потомок, происходящее из трансгенного растения, где растение-потомок включает в своем геноме супрессорный ДНК-конструкт; и
(d) определяют, проявляет ли растение-потомок изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению с контрольным растением, не включающим супрессорный ДНК-конструкт.
27. Способ по п.26, где на указанной стадии определения (d) определяют, проявляет ли трансгенное растение изменение, по меньшей мере, одной агрономической характеристики по сравнению, в условиях ограничения азота, с контрольным растением, не включающим рекомбинантный ДНК-конструкт.
28. Выделенный полинуклеотид, включающий:
(i) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 85% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 24 или 26; или
(ii) полное дополнение последовательности нуклеиновой кислоты (i).
29. Выделенный полинуклеотид по п.28, где указанный полипептид имеет аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 90% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 24 или 26.
30. Выделенный полинуклеотид по п.28, где указанный полипептид имеет аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 95% идентичную, на основе способа выравнивания Clustal V, по сравнению с SEQ ID NO: 18, 24 или 26.
31. Выделенный полинуклеотид по п.28, где полипептидная последовательность включает SEQ ID NO: 18, 24 или 26.
32. Выделенный полинуклеотид по п.28, где последовательность нуклеиновой кислоты включает SEQ ID NO: 17, 23 или 25.