РАСТЕНИЯ, ИМЕЮЩИЕ УСИЛЕННЫЕ ПРИЗНАКИ, СВЯЗАННЫЕ С УРОЖАЙНОСТЬЮ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

1. Способ усиления признаков, связанных с урожайностью семян, у растений по сравнению с контрольными растениями, предусматривающий увеличение экспрессии в растении последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, увеличивающий урожайность, выбранный из группы, состоящей из: локализованный в ядре полипептид 19/20, содержащий AT-hook мотив (AHL 19/20), GRP (белок, регулирующий рост, где указанный полипептид GRP означает полипептид металлотионеин 2а (МТ2а)),
аланинаминотрансфераза (ААТ)-подобный полипептид и
полипептид аланинаминотрансфераза (ААТ), и при необходимости отбор растений, имеющих усиленные признаки, связанные с урожайностью семян.
2. Способ по п.1, где указанный полипептид, увеличивающий урожайность, представляет собой локализованный в ядре полипептид 19/20, содержащий AT-hook мотив (AHL 19/20), при этом полипептид AHL 19/20 содержит домен, имеющий, по меньшей мере, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или более идентичности аминокислотной последовательности с консервативным доменом (CD), как представлено SEQ ID NO: 36, или указанный полипептид AHL 19/20 содержит: (i) мотив, имеющий, по меньшей мере, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или более идентичности аминокислотной последовательности с AT-hook мотивом, как представлено SEQ ID NO: 37; и (ii) домен, имеющий, по меньшей мере, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или более идентичности аминокислотной последовательности с консервативным доменом растений и прокариот (РРС), как представлено SEQ ID NO: 38.
3. Способ по п.1, где указанный полипептид AHL 19/20 содержит: (i) сигнал ядерной локализации; (ii) AT-hook ДНК-связывающий мотив с записью IPR 014476 в InterPro; и (iii) консервативный домен растений и прокариот (РРС) с записью IPR 005175 в InterPro.
4. Способ по п.1, где указанный полипептид AHL 19/20 при использовании в построении филогенетического дерева AHL, такого как изображенное на Фиг.1 или Фиг.2, объединяется в кластер с группой AHL 19/20 полипептидов, содержащей полипептидную последовательность, как представлено SEQ ID NO: 2, а не с любой другой группой AHL.
5. Способ по п.1, где указанный полипептид, увеличивающий урожайность, имеет в возрастающем порядке предпочтения, по меньшей мере, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или более идентичности аминокислотной последовательности с полипептидом AHL 19/20, как представлено SEQ ID NO: 2, или с любой из полипептидных последовательностей, представленных здесь в Таблице А, или с полипептидом GRP, как представлено SEQ ID NO: 46, или с ААТ-подобным полипептидом, представленным SEQ ID NO: 51, или с ААТ-подобным полипептидом, представленным SEQ ID NO: 56 соответственно.
6. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид AHL 19/20, представлена любой из последовательностей нуклеиновых кислот SEQ ID NO, приведенных в Таблице А, или ее частью, или последовательностью, способной к гибридизации с любой из последовательностей нуклеиновых кислот SEQ ID NO, приведенных в Таблице А.
7. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты кодирует ортолог или паралог любой из полипептидных последовательностей SEQ ID NO, представленных в Таблице А.
8. Способ по п.1, где на указанную увеличенную экспрессию влияют любым одним или более методов из: активационное мечение Т-ДНК, TILLING или гомологичная рекомбинация.
9. Способ по п.1, где на указанную увеличенную экспрессию влияют путем введения и экспрессии в растении последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид AHL 19/20.
10. Способ по п.1, где указанный усиленный признак, связанный с урожайностью семян, означает один или более из: (i) увеличенное число цветков на метелку; (ii) увеличенная общая масса семян на растение; (iii) увеличенное число наполненных семян; или (iv) увеличенный индекс урожайности.
11. Способ по п.2, где указанные усиленные признаки, связанные с урожайностью семян, возникают в растениях, выращенных в условиях сниженной доступности питательных веществ, предпочтительно в условиях сниженной доступности азота, по сравнению с контрольными растениями.
12. Способ по п.11, где указанный усиленный признак, связанный с урожайностью семян, представляет собой один или более из: (i) увеличенная общая урожайность семян на растение, (ii) увеличенное число наполненных семян; или (iii) увеличенный индекс урожайности.
13. Способ по п.2, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты функционально связана с конститутивным промотором, предпочтительно с растительным конститутивным промотором, более предпочтительно с промотором GOS2, наиболее предпочтительно с промотором GOS2 из риса, как представлено SEQ ID NO: 35.
14. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид AHL 19/20, имеет растительное происхождение, предпочтительно из двудольного растения, также предпочтительно из семейства Brassicaceae, наиболее предпочтительно из Arabidopsis thaliana.
15. Растения, их части (включая семена) или растительные клетки, получаемые способом по любому из пп.1-14, где указанное растение, его часть или клетка содержат выделенный трансген нуклеиновой кислоты, кодирующий полипептид, увеличивающий урожайность, выбранный из группы, состоящей из: локализованный в ядре полипептид 19/20, содержащий AT-hook мотив (AHL 19/20), GRP (белок, регулирующий рост, где указанный полипептид GRP означает полипептид металлотионеин 2а (МТ2а)),
аланинаминотрансфераза (ААТ)-подобный полипептид и
полипептид аланинаминотрансфераза (ААТ),
функционально связанный с растительным конститутивным промотором.
16. Конструкция, содержащая:
(а) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид, увеличивающий урожайность, выбранный из группы, состоящей из: локализованный в ядре полипептид 19/20, содержащий AT-hook мотив (AHL 19/20), GRP (белок, регулирующий рост, где указанный полипептид GRP означает полипептид металлотионеин 2а (МТ2а)),
аланинаминотрансфераза (ААТ)-подобный полипептид и
полипептид аланинаминотрансфераза (ААТ), как определено в любом из п.2-7;
(b) одну или более контрольных последовательностей, способных управлять экспрессией последовательности нуклеиновой кислоты (а); и при необходимости
(c) последовательность терминации транскрипции.
17. Конструкция по п.16, где указанная контрольная последовательность представляет собой растительный конститутивный промотор, предпочтительно промотор GOS2, более предпочтительно промотор GOS2, как представлено SEQ ID NO: 35.
18. Применение конструкции по п.16 или 17 в способе получения растений, имеющих усиленные признаки, связанные с урожайностью семян, по сравнению с контрольными растениями, при этом усиленные признаки, связанные с урожайностью семян, представляют собой один или более из: (i) увеличенное число цветков на метелку; (ii) увеличенная общая масса семян на растение; (iii) увеличенное число наполненных семян; или (iv) увеличенный индекс урожайности.
19. Растение, часть растения или растительная клетка, трансформированные конструкцией по п.16 или 17.
20. Способ получения трансгенных растений, имеющих усиленные признаки, связанные с урожайностью семян, по сравнению с контрольными растениями, предусматривающий:
(i) введение и экспрессию в растении, части растения или растительной клетке последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, увеличивающий урожайность, выбранный из группы, состоящей из: локализованный в ядре полипептид 19/20, содержащий AT-hook мотив (AHL 19/20), GRP (белок, регулирующий рост, где указанный полипептид GRP означает полипептид металлотионеин 2а (МТ2а)),
аланинаминотрансфераза (ААТ)-подобный полипептид и
полипептид аланинаминотрансфераза (ААТ), как определено в любом из пп.2-7, под контролем растительного конститутивного промотора; и
(ii) культивирование растительной клетки, части растения или растения в условиях, способствующих росту и развитию растения.
21. Трансгенное растение, имеющее усиленные признаки, связанные с урожайностью семян, по сравнению с контрольными растениями, являющиеся результатом увеличенной экспрессии последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, увеличивающий урожайность, выбранный из группы, состоящей из: локализованный в ядре полипептид 19/20, содержащий AT-hook мотив (AHL 19/20), GRP (белок, регулирующий рост, где указанный полипептид GRP означает полипептид металлотионеин 2а (МТ2а)),
аланинаминотрансфераза (ААТ)-подобный полипептид и
полипептид аланинаминотрансфераза (ААТ), как определено в любом из пп.2-7, функционально связанной с растительным конститутивным промотором, или клетка трансгенного растения, или часть трансгенного растения, полученные из указанного трансгенного растения.
22. Трансгенное растение по пп.15, 19 или 21, где указанное растение представляет собой сельскохозяйственную культуру, или однодольное растение, или зерновую культуру, такую как рис, кукуруза, пшеница, ячмень, просо, рожь, тритикале, сорго и овес, или клетка трансгенного растения, полученная из указанного трансгенного растения.
23. Заготавливаемые части, содержащие последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид, увеличивающий урожайность, выбранный из группы, состоящей из: локализованный в ядре полипептид 19/20, содержащий AT-hook мотив (AHL 19/20), GRP (белок, регулирующий рост, где указанный полипептид GRP означает полипептид металлотионеин 2а (МТ2а)),
аланинаминотрансфераза (ААТ)-подобный полипептид и
полипептид аланинаминотрансфераза (ААТ),
растения по п.22, где указанные заготавливаемые части являются предпочтительно семенами.
24. Продукты, полученные из растения по п.22 и/или из заготавливаемых частей растения по п.23.
25. Применение последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, увеличивающий урожайность, выбранный из группы, состоящей из: локализованный в ядре полипептид 19/20, содержащий AT-hook мотив (AHL 19/20), GRP (белок, регулирующий рост, где указанный полипептид GRP означает полипептид металлотионеин 2а (МТ2а)),
аланинаминотрансфераза (ААТ)-подобный полипептид и
полипептид аланинаминотрансфераза (ААТ), как определено в любом из пп.2-7, в усилении признаков, связанных с урожайностью семян, содержащих один или более из: (i) увеличенное число цветков на метелку; (ii) увеличенная общая масса семян на растение; (iii) увеличенное число наполненных семян; или (iv) увеличенный индекс урожайности.
26. Применение по п.25, где указанные усиленные признаки, связанные с урожайностью семян, проявляются в условиях сниженной доступности питательных веществ, предпочтительно в условиях сниженной доступности азота.