Клетки трофобласта подавляют пролиферативную активность NK-клеток при беременности

Международная конференция «Репродуктивная медицина: взгляд молодых — 2016» International conference "Reproductive medicine: young scientists' overlook — 2016"

вития легких. Выстилка мешочков была образована кубическим эпителием, иногда гетерогенна и демонстрировала метаплазию при развитии плоского эпителия. В паренхиме обнаруживались многочисленные беспросветные эпителиальные тяжи и отсутствовали взаимоотношения сосудистого аппарата и респираторных элементов. В целом в легких не были сформированы структурные условия для эффективного газообмена.

Почки крысят находились на этапе метанеф-рогенной бластемы, когда паренхима образована ветвящимся дивертикулом вольфого протока. Нефроны не обнаруживались. В печени развитая кроветворная активность, портальный аппарат и гепатобилиарная системы не были сформированы, печеночные балки отсутствовали. Головной мозг был представлен мозговыми

пузырями с объемными полостями. В хрящевых моделях костей отсутствовали очаги оссифика-ции: не индуцирована даже остеоидная стадия остеогистогенеза.

Выводы

Эксперимент по моделированию рака желудка самок при наступлении беременности позволил дать оценку патогенетического значения усугубляющих друг друга последовательно формируемых условий интоксикации и канцерогенеза для процессов морфогенеза плода. Доказан факт пролонгации эмбриотипии в плодном периоде.

Исследование выполнено за счет гранта Правительства Оренбургской области (Постановление № 465-п от 17.06.2015).

КЛЕТКИ ТРОФОБЛАСТА ПОДАВЛЯЮТ ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ NK-КЛЕТОК ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ

© А.Н. Викнянщук, студ., В.А. Михайлова, н. с., К.Л. Белякова, студ., Л.В. Колударова, студ., Е.В. Хохлова, студ.

ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», отдел иммунологии, лаборатория межклеточных взаимодействий, г Санкт-Петербург, Россия

Актуальность проблемы

NK-клетки играют важную роль в процессе подготовки эндометрия к имплантации. Количество NK-клеток в эндометрии закономерно изменяется в ходе менструального цикла, а также в течение беременности. Одним из возможных механизмов накопления NK-клеток в эндометрии является их пролиферация in situ. При беременности клетки трофобласта регулируют функциональную активность NK-клеток. В настоящее время недостаточно изучено влияние клеток трофобласта на пролиферацию NK-клеток.

Цель исследования: оценить влияние клеток трофобласта на пролиферативную активность NK-клеток при беременности.

Материалы и методы исследования

Обследовано 20 здоровых небеременных женщин в пролиферативной фазе менструального цикла (группа 1), 19 здоровых небеременных женщин в секреторной фазе менструального цикла (группа 2) и 20 женщин с физиологическим течением беременности на сроке 6-7 недель (группа 3). В лунки плоскодонного 96-луночного планшета с монослоем клеток линии JEG-3 вносили мононуклеары периферической крови и ре-комбинантный человеческий IL-2. После 7 суток инкубации оценивали относительное количество NK-клеток (CD56+) с помощью проточного цитофлюориметра (BD FACSCanto II, США).

Пролиферативную активность NK-клеток оценивали по интенсивности экспрессии маркерного белка пролиферации Ю-67 (в относительных единицах флуоресценции).

Результаты исследования

При добавлении ^-2 во всех исследуемых группах наблюдали увеличение пролифера-тивной активности NK-клеток по сравнению со спонтанным уровнем (интенсивность экспрессии маркерного белка пролиферации Ю-67 NK-клетками в присутствии ^-2 (относительные единицы флуоресценции); результаты представлены в виде: медиана {нижний квартиль; верхний квартиль}: группа 1 — 2698 {2030; 3280}, группа 2 — 2498 {2050,5; 7419,5}, группа 3 — 12481 {2644; 18900}; спонтанный уровень: группа 1 — 438 {170; 945}, группа 2 — 512 {216; 1286}, группа 3 — 1138 {507; 1453}. Достоверность различий внутри групп р< 0,001). В присутствии клеток трофобласта пролиферативная активность NK-клеток была ниже по сравнению со спонтанным уровнем (интенсивность экспрессии маркерного белка пролиферации Ю-67 NK-клетками в присутствии клеток трофобласта (относительные единицы флуоресценции): группа 1 — 162 {89; 204}, группа 2 — 168,5 {97; 486}, группа 3 — 485 {145,5; 1044}. Достоверность различий внутри групп от спонтанного уровня:

ЖУРИАЛЪ АКПИЕРСШ " ЖЕНСШХЪ БОЛМНЕЙ

ТОМ LXVСПЕЦВЫПУСК 2016

ISSN 1684-0461

ФУНДАМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

79

р < 0,001 для групп 1 и 2; р < 0,01 для группы 3). Пролиферативная активность NK-клеток, стимулированных ^-2, была ниже в присутствии клеток трофобласта по сравнению со стимуляцией ^-2 в отсутствие клеток трофобласта (интенсивность экспрессии маркерного белка пролиферации Ю-67 NK-клетками в присутствии ^-2 и клеток трофобласта (относительные единицы флуоресценции): группа 1 — 578 {490; 813}, группа 1 — 810 {601; 1412}, группа 1 — 2895 {920; 4205}. Достоверность различий внутри групп от культивирования в присутствии ^-2: р < 0,001). Данное ингибирующее действие клеток трофобласта было выражено слабее в отношении NK- клеток женщин группы 2 по сравнению с группой 1 (р < 0,05). Пролиферативная активность NK- клеток женщин группы 3 в присутствии ^-2 была примерно в 5 раз выше по сравнению с группами 1 (р < 0,001) и 2 (р < 0,01). В присутствии клеток трофобласта наблюдали ингибирование пролиферации стимулированных ^-2 NK-клеток женщин группы 3 (р < 0,001), однако базальный уровень пролифе-

рации в данном случае был выше по сравнению с группами 1 (p < 0,001) и 2 (p < 0,001).

Выводы

Клетки трофобласта ингибируют как спонтанную, так и индуцированную IL-2 пролиферацию NK-клеток in vitro при беременности и вне беременности. Ингибирующее действие клеток трофобласта на пролиферацию NK-клеток выражено в различной степени в зависимости от фазы менструального цикла. В секреторной фазе менструального цикла NK-клетки периферической крови более устойчивы к ингибирующему действию клеток трофобласта по сравнению с пролифера-тивной фазой. NK-клетки периферической крови беременных женщин обладают повышенной пролиферативной активностью по сравнению с NK- клетками небеременных женщин. Этот факт свидетельствует в пользу активированного состояния NK-клеток при беременности. Предактивация NK-клеток при беременности может способствовать их повышенной устойчивости к ингибирую-щему действию со стороны клеток трофобласта.

ИССЛЕДОВАНИЯ ВЛИЯНИЯ НА МОРФОЛОГИЮ КЛЕТОК ЭНДОМЕТРИЯ КВАНТОВЫХ ТОЧЕК НА ОСНОВЕ ЦИНКА © Д.М. Галиева 1, студ., А.О. Дробинцева 2, с. н. с.

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, г. Санкт-Петербург, Россия;

2 ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», г Санкт-Петербург, Россия

Актуальность проблемы

В последние два десятилетия в связи с развитием методов визуализации биологических объектов особое внимание стали привлекать полупроводниковые нанокристаллы различного типа, в особенности квантовые точки (КТ). КТ — это полупроводниковые флуоресцентные кристаллы, размер ядра которых составляет от единиц до десятков нанометров, а количество атомов 500-10 000. Этот новый вид флуорофоров обладает уникальными оптическими свойствами, устойчивостью к фотообесцвечиванию, широким спектром поглощения и узким спектром излучения, возможностью регулирования излучения за счет изменения размеров частиц. Перечисленные физико-химические и оптические свойства и особенности КТ напрямую зависят от метода получения. Их можно использовать практически во всех сферах, в которых нашли широкое применение современные полупроводники. В первую очередь КТ широко применяются в диагностических целях. В частности, их можно присоединять к биомолекулам (антитела, пептиды, белки или ДНК). А эти соединения могут быть образованы так, чтобы находить другие молекулы. В настоящее время разрабатываются

методики снабжения КТ антителами, имеющими сродство к поверхностным антигенам опухолевых клеток.

Наибольшей популярностью в качестве материала для синтеза КТ последние 10 лет пользуется кадмий, однако из-за того, что он относится к группе тяжелых металлов с высокой токсичностью, ученые пытаются применять для своих целей более безвредные материалы. В нашей работе исследовались КТ на основе цинка, которые могут стать в будущем идеальными флуорофорами для сверхчувствительной, многоцветной детекции биологических объектов и медицинской диагностики.

Цель исследования: исследовать влияние на морфологию клеток эндометрия нового вида квантовых точек ZnSe, легированных марганцем (Mn) и стабилизированных молекулами меркаптопро-пионовой кислоты (МПК) in vitro.

Материалы и методы исследования

Для достижения поставленной цели на кафедре микро- и наноэлектроники СПбГЭТУ ЛЭТИ были созданы растворы наночастиц ZnSe: Mn, покрытых молекулами МПК, методом коллоидного синтеза в жидкой фазе.

ЖУРНАЛ! АКУШЕРСТВА - ЖЕНСКИХЪ БОЛМНЕЙ

ТОМ LXVСПЕЦВЫПУСК 2016

ISSN 1684-0461