КОМОПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ РЕКОМБИНАНТНЫЙ ИНГИБИТОР ПРОТЕАЗЫ, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Пероральная фармацевтическая композиция, содержащая терапевтический пептид или терапевтический белок до 100 килодальтон, хелатор двухвалентных катионов и выделенный рекомбинантно экспрессированный ингибитор Боумена-Бирка (BBI).
2. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный рекомбинантно экспрессированный BBI имеет нуклеотидную последовательность, имеющую по меньшей мере 95% идентичности с последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 1.
3. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный рекомбинантно экспрессированный BBI имеет нуклеотидную последовательность, имеющую по меньшей мере 97% идентичности с последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 1.
4. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный рекомбинантно экспрессированный BBI имеет нуклеотидную последовательность, имеющую по меньшей мере 99% идентичности с последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 1.
5. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный рекомбинантно экспрессированный BBI имеет нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1.
6. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный рекомбинантно экспрессированный BBI экспрессирован в дрожжевой системе экспрессии.
7. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 6, характеризующаяся тем, что указанная дрожжевая система экспрессии представляет собой Pichia pastoris.
8. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что указанный состав дополнительно включает ингибитор трипсина, отличный от указанного BBI.
9. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 8, характеризующаяся тем, что указанный ингибитор трипсина представляет собой KTI3.
10. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 9, характеризующаяся тем, что указанный KTI3 химически выделен и очищен по меньшей мере до 85% чистоты, измеренной методом SDS-PAGE, или где указанный KTI3 очищен до содержания белка более 95%, согласно измерению в анализе с бицинхониновой кислотой (BCA).
11. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 9, характеризующаяся тем, что указанный KTI3 экспрессирован рекомбинантно.
12. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-11, характеризующаяся тем, что указанный терапевтический белок можно применять в лечении субъекта с метаболическим заболеванием или нарушением.
13. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-11, характеризующаяся тем, что указанный терапевтический пептид или терапевтический белок выбирается из группы, состоящей из инсулина, гемагглютинина гриппа, нейраминидазы гриппа, глюкагона, интерферона гамма, интерферона бета, интерферона альфа, гормона роста, эритропоэтина, GLP-1 (глюкагонподобного пептида 1), аналога GLP-1, лептина, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF), ренина, релизинг-фактора гормона роста, паратиреоидного гормона, тиреотропного гормона, фолликулостимулирующего гормона, кальцитонина, лютеинизирующего гормона, глюкагона, фактора свертывания крови, фактора, препятствующего свертыванию, предсердного натрийуретического фактора, белка сурфактанта A (SP-A), белка сурфактанта B (SP-B), белка сурфактанта C (SP-C), белка сурфактанта D (SP-D), активатора плазминогена, бомбезина, гемопоэтического фактора роста (колониестимулирующий фактор, множественный), фактора некроза опухоли (TNF), энкефалиназы, RANTES (регулируется при активации, нормальные Т-клетки экспрессируются и секретируются), воспалительного белка макрофагов человека (MIP-1-альфа), сывороточного альбумина, антимюллеровского гормона, релаксина, мышиного гонадотропин-рилизинг гормона, ДНКазы, ингибина, активина, фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), нейротрофического фактора, нейротрофина-3, -4, -5 или -6 (NT-3, NT-4 , NT-5 или NT-6), фактора роста нервов, тробоцитарного фактора роста (PDGF), фактора роста фибробластов, трансформирующего фактора роста (TGF), инсулиноподобного фактора роста-I и -II (IGF- I и IGF-II), дез(1-3)-IGF-I (мозговой IGF-I), белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста-1 (IGFBP-1), IGFBP-2, IGFBP-3, IGFBP-4, IGFBP-5, IGFBP-6, фактора роста кератиноцитов, остеоиндуктивного фактора, костного морфогенетического белка (BMP)-2, ВМР-4, BMP-7, колониестимулирующего фактора (CSF), интерлейкина (IL), супероксиддисмутазы, фактора ускорения распада, члена семейства хемокинов и фактора комплемента.
14. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 13, характеризующаяся тем, что указанный терапевтический пептид или терапевтический белок выбран из группы, состоящей из инсулина и аналога GLP-1.
15. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 13, характеризующаяся тем, что указанный терапевтический пептид или терапевтический белок является иммуномодулятором.
16. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 15, характеризующаяся тем, что указанный терапевтический пептид или терапевтический белок представляет собой Глатирамера ацетат.
17. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-16, характеризующаяся тем, что указанный хелатор представляет собой ЭДТА.
18. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-17, характеризующаяся тем, что указанный состав представляет собой жидкий состав на масляной основе.
19. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 18, дополнительно содержащая полиэтиленгликолевый (ПЭГ) эфир моноглицерида, диглицерида, триглицерида или их смесь.
20. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 19, характеризующаяся тем, что указанный ПЭГ эфир представлен в виде смеси (а) моноацилглицерина, диацилглицерина, триацилглицерина или их смеси; и (b) полиэтиленгликолевого (ПЭГ) эфира жирной кислоты.
8
18
21. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 20, характеризующаяся тем, что часть (а) указанной смеси содержит C-Cмоноацилглицерины, диацилглицерины и триацилглицерины.
8
18
22. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 20, характеризующаяся тем, что часть (b) указанной смеси содержит ПЭГ моноэфиры и диэфиры смеси генетически связанных полипептидных меток C-C жирных кислот или их комбинацию.
8
18
8
18
23. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 20, характеризующаяся тем, что часть (а) указанной смеси содержит C-Cмоноацилглицерины, диацилглицерины и триацилглицерины; часть (b) указанной смеси содержит ПЭГ-32 моноэфиры и диэфиры смеси C-C жирных кислот; причем указанный жидкий состав на масляной основе дополнительно содержит (c) свободный ПЭГ-32; и мас./мас. отношение части (а) указанной смеси к сумме части (b) указанной смеси и (с) составляет от 10:90 до 30:70, включительно.
24. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 23, характеризующаяся тем, что (а), (b) и (с) вместе составляют 8-16 мас./мас.%, включительно от указанного жидкого состава на масляной основе.
25. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 18, характеризующаяся тем, что указанный жидкий состав на масляной основе дополнительно содержит свободный ПЭГ.
26. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-17, характеризующаяся тем, что указанный состав содержит желатин и глицерин.
27. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 18-26, дополнительно содержащая неионогенное поверхностно-активное вещество.
28. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 27, характеризующаяся тем, что указанное неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой поверхностно-активное вещество на основе полисорбата.
29. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 28, характеризующаяся тем, что указанное поверхностно-активное вещество на основе полисорбата представляет собой полисорбат 80.
30. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 29, характеризующаяся тем, что указанный полисорбат 80 составляет 3-10 мас./мас.%, включительно от указанного жидкого состава на масляной основе.
31. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-30, характеризующаяся тем, что указанным маслом является рыбий жир.
32. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-31, характеризующаяся тем, что указанный жидкий состав на масляной основе не содержит воды.
33. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-32, дополнительно включающая покрытие, устойчивое к деградации в желудке.
34. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 33, характеризующаяся тем, что указанное покрытие представляет собой рН-чувствительную капсулу.
35. Пероральная фармацевтическая композиция по п. 33, характеризующаяся тем, что указанное покрытие представляет собой мягкую желатиновую капсулу.
36. Пероральная фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-35 для перорального введения терапевтического белка субъекту.
37. Пероральная фармацевтическая композиция для применения по п. 36, характеризующаяся тем, что указанная пероральная фармацевтическая композиция предотвращает быструю деградацию указанного терапевтического пептида или терапевтического белка у указанного субъекта.
38. Пероральная фармацевтическая композиция для применения по п. 36, характеризующаяся тем, что указанная пероральная фармацевтическая композиция улучшает устойчивую активность перорально вводимых терапевтических пептидов или терапевтических белков у указанного субъекта, или тем, что указанная пероральная фармацевтическая композиция улучшает устойчивую биодоступность перорально вводимых терапевтических пептидов или терапевтических белков у указанного субъекта.
39. Пероральная фармацевтическая композиция для применения по п. 38, характеризующаяся тем, что указанная устойчивая активность или указанная устойчивая биодоступность терапевтических пептидов или терапевтических белков, вводимых перорально, превышает получаемую после применения идентичного в остальном перорального состава, включающего химически очищенный BBI вместо указанного выделенного рекомбинантно экспрессированного BBI.
40. Пероральная фармацевтическая композиция для применения по п. 36, характеризующаяся тем, что указанное применение обеспечивает терапевтически эффективное количество указанного пептида или белка, и где указанный BBI или указанный терапевтический пептид или терапевтический белок до 100 килодальтон или их комбинация предоставлены в указанном составе в более низкой концентрации, чем была бы терапевтически эффективной в идентичном в остальном пероральном составе, включающем химически очищенный BBI вместо указанного выделенного рекомбинантно экспрессированного BBI, и указанное применение обеспечивает сравнимый терапевтический эффект у указанного субъекта.
41. Способ перорального введения терапевтического пептида или терапевтического белка субъекту, причем указанный способ включает этап введения субъекту пероральной фармацевтической композиции по любому из пп. 1-35 с введением за счет этого терапевтического белка субъекту.
42. Способ предотвращения деградации перорально вводимых терапевтических пептидов или терапевтических белков у субъекта, причем указанный способ включает этап введения субъекту пероральной фармацевтической композиции по любому из пп. 1-35.
43. Способ улучшения устойчивой активности перорально вводимых терапевтических пептидов или терапевтических белков у субъекта, причем указанный способ включает этап введения субъекту пероральной фармацевтической композиции по любому из пп. 1-35.
44. Способ улучшения устойчивой биодоступности перорально вводимых терапевтических пептидов или терапевтических белков у субъекта, причем указанный способ включает этап введения субъекту пероральной фармацевтической композиции по любому из пп. 1-35.
45. Способ введения субъекту терапевтически эффективного количества пептида или белка в пероральном составе, причем указанный способ включает получение пероральной фармацевтической композиции, включающей терапевтический пептид или терапевтический белок до 100 килодальтон, хелатор двухвалентных катионов и выделенный рекомбинантно экспрессированный ингибитор Боумена-Бирка (BBI), где указанный BBI, или указанный терапевтический пептид или терапевтический белок до 100 килодальтон, или их комбинация представлены в указанном составе в более низкой концентрации, чем была бы терапевтически эффективной в идентичном в остальном пероральном составе, включающем химически очищенный BBI вместо указанного выделенного рекомбинантно экспрессированного BBI, и достижение сравнимого терапевтического эффекта у указанного субъекта.
46. Способ по п. 45, характеризующийся тем, что указанный рекомбинантно экспрессированный BBI имеет нуклеотидную последовательность, имеющую по меньшей мере 95-99% идентичности с последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 1.
47. Способ по п. 45, характеризующийся тем, что указанный рекомбинантно экспрессированный BBI имеет нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1.
48. Способ по п. 45, характеризующийся тем, что указанный рекомбинантно экспрессированный BBI экспрессируется в дрожжевой системе экспрессии.
49. Способ по п. 48, характеризующийся тем, что указанная система экспрессии дрожжей представляет собой Pichia pastoris.
50. Способ по п. 45, характеризующийся тем, что указанный состав дополнительно включает ингибитор трипсина, отличный от указанного BBI.
51. Способ по п. 50, характеризующийся тем, что указанный ингибитор трипсина представляет собой KTI3.
52. Способ по п. 51, характеризующийся тем, что указанный KTI3 химически выделяется и очищают до по меньшей мере 85% чистоты, измеренной методом электрофореза в полиактиламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE), или тем, что указанный KTI3 очищают до содержания белка более 95%, согласно измерению в анализе BCA.
53. Способ по п. 51, характеризующийся тем, что указанный KTI3 экспрессируют рекомбинантно.
54. Способ по любому из пп. 45-53, характеризующийся тем, что указанный терапевтический белок можно применять в лечении субъекта с метаболическим заболеванием или нарушением.
55. Способ по любому из пп. 45-54, где указанный терапевтический пептид или терапевтический белок выбирают из группы, состоящей из инсулина, гемагглютинина гриппа, нейраминидазы гриппа, глюкагона, интерферона гамма, интерферона бета, интерферона альфа, гормона роста, эритропоэтина, GLP-1 (глюкогонподобного пептида 1), аналога GLP-1, лептина, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF), ренина, релизинг-фактора гормона роста, паратиреоидного гормона, тиреотропного гормона, фолликулостимулирующего гормона, кальцитонина, лютеинизирующего гормона, глюкагона, фактора свертывания крови, фактора, препятствующего свертыванию, предсердного натрийуретического фактора, белка сурфактанта A (SP-A), белка сурфактанта B (SP-B), белка сурфактанта C (SP-C), белка сурфактанта D (SP-D), активатора плазминогена, бомбезина, гемопоэтического фактора роста (колониестимулирующий фактор, множественный), фактора некроза опухоли (TNF), энкефалиназы, RANTES (регулируется при активации, нормальные Т-клетки экспрессируются и секретируются), воспалительного белка макрофагов человека (MIP-1-альфа), сывороточного альбумина, антимюллеровского гормона, релаксина, мышиного гонадотропин-рилизинг гормона, ДНКазы, ингибина, активина, фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), нейротрофического фактора, нейротрофина-3, -4, -5 или -6 (NT-3, NT-4 , NT-5 или NT-6), фактора роста нервов, тробоцитарного фактора роста (PDGF), фактор роста фибробластов, трансформирующего фактора роста (TGF), инсулиноподобного фактора роста-I и -II (IGF- I и IGF-II), дез(1-3)-IGF-I (мозговой IGF-I), белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста-1 (IGFBP-1), IGFBP-2, IGFBP-3, IGFBP-4, IGFBP-5, IGFBP-6, фактора роста кератиноцитов, остеоиндуктивного фактора, костного морфогенетического белка (BMP)-2, ВМР-4, BMP-7, колониестимулирующего фактора (CSF), интерлейкина (IL), супероксиддисмутазы, фактора ускорения распада, члена семейства хемокинов и фактора комплемента.
56. Способ по п. 55, характеризующийся тем, что указанный терапевтический пептид или терапевтический белок выюирают из группы, состоящей из инсулина и аналога GLP-1.
57 Способ по п. 56, характеризующийся тем, что указанный терапевтический пептид или терапевтический белок является иммуномодулятором.
58. Способ по п. 57, характеризующийся тем, что указанный терапевтический пептид или терапевтический белок представляет собой Глатирамера ацетат.
59. Способ по любому из пп. 45-58, характеризующийся тем, что указанный хелатор представляет собой ЭДТА.
60. Способ по любому из пп. 45-59, характеризующийся тем, что указанный состав представляет собой жидкий состав на масляной основе.
61. Способ по п. 60, дополнительно включающий полиэтиленгликолевый (ПЭГ) эфир моноглицерида, диглицерида, триглицерида или их смеси.
62. Способ по п. 61, характеризующийся тем, что указанный ПЭГ эфир представлен в виде смеси (а) моноацилглицерина, диацилглицерина, триацилглицерина или их смеси; и (b) полиэтиленгликолевого (ПЭГ) эфира жирной кислоты.
8
18
63. Способ по п. 62, характеризующийся тем, что часть (а) указанной смеси содержит моноацилглицерины C-C, диацилглицерины и триацилглицерины.
8
18
64. Способ по п. 63, характеризующийся тем, что часть (b) указанной смеси содержит ПЭГ моноэфиры и диэфиры смеси генетически связанных полипептидных меток C-C жирных кислот или их комбинацию.
8
18
8
18
65. Способ по п. 63, характеризующийся тем, что часть (а) указанной смеси содержит C-C моноацилглицерины, диацилглицерины и триацилглицерины; часть (b) указанной смеси содержит ПЭГ-32 моноэфиры и диэфиры смеси C-C жирных кислот; указанный жидкий состав на масляной основе дополнительно включает (c) свободный ПЭГ-32; и мас./мас. отношение части (а) указанной смеси к сумме части (b) указанной смеси и (с) составляет от 10:90 до 30:70, включительно.
66. Способ по п. 65, характеризующийся тем, что (а), (b) и (c) вместе составляют 8-16 мас./мас.%, включительно от указанного жидкого состава на масляной основе.
67. Способ по п. 60, характеризующийся тем, что указанный жидкий состав на масляной основе дополнительно включает свободный ПЭГ.
38. Способ по любому из пп. 60-67, характеризующийся тем, что указанный состав содержит желатин и глицерин.
69. Способ по любому из пп. 45-68, дополнительно включающий неионогенное поверхностно-активное вещество.
70. Способ по п. 69, характеризующийся тем, что указанное неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой поверхностно-активное вещество на основе полисорбата.
71. Способ по п. 70, характеризующийся тем, что указанное поверхностно-активное вещество на основе полисорбата представляет собой полисорбат 80.
72. Способ по п. 71, характеризующийся тем, что указанный полисорбат 80 составляет 3-10 мас./мас.%, включительно от указанного жидкого состава на масляной основе.
73. Способ по любому из пп. 45-72, характеризующийся тем, что указанным маслом является рыбий жир.
74. Способ по любому из пп. 60-73, характеризующийся тем, что указанный жидкий состав на масляной основе не содержит воды.
75. Способ по любому из пп. 45-74, дополнительно включающий покрытие, устойчивое к деградации в желудке.
76. Способ по п. 75, характеризующийся тем, что указанное покрытие представляет собой pH-чувствительную капсулу.
77. Способ по п. 75, характеризующийся тем, что указанное покрытие представляет собой мягкую желатиновую капсулу.