СПОСОБ ДОКЛИНИЧЕСКОГО ТЕСТИРОВАНИЯ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

in vitro
1. Способ тестирования предполагаемого или известного иммуномодулирующего лекарственного средства для активации T-клеток, который включает стадию приведения в контакт культуры мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) с предварительно определяемым количеством предполагаемого или известного иммуномодулирующего лекарственного средства  и наблюдение активации T-клеток в культуре PBMC, используя систему считывания, при контакте с предполагаемым или известным иммуномодулирующим лекарственным средством, где плотность клеток предварительной культуры PBMC корректируют так, чтобы сделать возможным межклеточный контакт PBMC, и где предварительную культуру PBMC культивируют в течение по меньшей мере 12 ч.
2. Способ по п.1, где система считывания наблюдает в культуре PBMC высвобождение по меньшей мере одного цитокина из PBMC, наблюдает пролиферацию клеток или представляет собой другую подходящую систему считывания, такую как система считывания изменений экспрессии гена, экспрессии белка и/или посттрансляционных модификаций.
3. Способ по п.1, где стадию предварительного культивирования осуществляют посредством хранения культуры PBMC в течение по меньшей мере 24 ч, предпочтительно, по меньшей мере 36 ч, более предпочтительно, по меньшей мере 45 ч, при температуре от 35°C до 40°C, предпочтительно, от 36°C до 38°C, в отсутствие иммуномодулирующих лекарственных средств и до контакта с иммуномодулирующим лекарственным средством, подлежащим тестированию.
6
6
7
5
2
6
2
6
2
4. Способ по п.1, где плотность клеток в культуре PBMC во время стадии предварительного культивирования составляет по меньшей мере 2×10/мл, предпочтительно по меньшей мере 5×10/мл, более предпочтительно по меньшей мере 10/мл или по меньшей мере 4×10/см, предпочтительно по меньшей мере 10/см, наиболее предпочтительно по меньшей мере 2×10/см.
Mycoplasma arthritidis
Yersinia pseudotuberculosis
5. Способ по п.1, где иммуномодулирующее лекарственное средство представляет собой иммуностимулирующее лекарственное средство, такое как антитело, предпочтительно моноклональное антитело, в частности специфичное к CD28 человека суперагонистическое моноклональное антитело, или выбранное из группы, состоящей из лектинов, таких как конканавалин A (ConA) или фитогемагглютинин (PHA), природных экстрактов, содержащих лектины, таких как экстракт эхинацеи или экстракт омелы, суперантигенов, таких как стафилококковый эндотоксин B (SEB), стафилококковый эндотоксин A (SEA), токсин синдрома токсического шока-1 (TSST-1), стафилококковых пиогенов, таких как стафилококковый пиогенный энтеротоксин B (SPEB), суперантигенов, продуцируемых микоплазмами, такими как , или бактериями черной чумы, такими как , суперантигенов, продуцируемых определенными патогенными вирусами, такими как ЭБВ или ВИЧ-1.
6. Способ по п.1, где наблюдаемый цитокин выбирают из группы, состоящей из TNF, IF-γ, IL-1β, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL12p70, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-21, IL-35 и LT и их сочетаний.
7. Способ по п.1, где предварительно культивированную культуру PBMC дополнительно приводят в контакт с предполагаемым лекарственным средством для ослабления высвобождения по меньшей мере одного цитокина, одновременно с приведением в контакт культуры PBMC с известным иммуномодулирующим, в частности, стимулирующим лекарственным средством или впоследствии после предварительно определяемого периода времени или прежде за предварительно определяемый период времени, где дополнительно наблюдают высвобождение цитокинов.
8. Способ по п.7, где предварительно определяемый период времени находится в диапазоне от 10 с до 12 ч, предпочтительно в диапазоне от 10 с до 1 ч.
9. Способ по п.7, где предполагаемым лекарственным средством для ослабления высвобождения цитокинов является кортикостероид.
10. Способ по п.7, где предполагаемым лекарственным средством для ослабления высвобождения цитокинов является иммуносупрессорное лекарственное средство, выбранное из группы, состоящей из рапамицина или ингибиторов кальциневрина, таких как циклоспорин A, воклоспорин или такролимус.
11. Способ лечения, ослабления или профилактики цитокинового шторма при введении специфичного к CD28 человека суперагонистического моноклонального антитела, включающий введение кортикостероида, рапамицина и/или ингибитора кальциневрина.
12. Способ по п.11, где антителом является TGN1412.
13. Способ по п.11, где кортикостероидом является дексаметазон и/или метилпреднизолон.
14. Способ по п.11, где ингибитором кальциневрина является циклоспорин A, воклоспорин и/или такролимус.