ГЕНЕТИЧЕСКАЯ КОНСТРУКЦИЯ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНОГО НАРУШЕНИЯ ИЛИ ИНСУЛЬТА

1. Рекомбинантный вектор, содержащий генетическую конструкцию, содержащую промотор, функционально связанный с первой кодирующей последовательностью, которая кодирует тирозинкиназный рецептор В (TrkB), и второй кодирующей последовательностью, которая кодирует агонист рецептора TrkB, причем агонист представляет собой зрелый BDNF или зрелый NT-4, причем вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую сигнальный пептид, который усиливает секрецию агониста рецептора TrkB, и причем генетическая конструкция содержит спейсерную последовательность, расположенную между первой и второй кодирующими последовательностями, при этом спейсерная последовательность кодирует пептидный спейсер, который выполнен с возможностью расщепления с образованием таким образом рецептора TrkB и агониста в виде отдельных молекул, для применения в лечении, предупреждении или уменьшения интенсивности нейродегенеративного нарушения.
2. Рекомбинантный вектор по п. 1, причем генетическая конструкция содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую посттранскрипционный регуляторный элемент вируса гепатита сурков (WHPE), причем необязательно WHPE содержит последовательность нуклеиновой кислоты по существу как изложена в SEQ ID No: 57 или 58, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 57 или 58.
3. Рекомбинантный вектор по п. 1 или 2, причем указанная конструкция содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую поли-А-хвост, причем необязательно поли-А-хвост содержит последовательность нуклеиновой кислоты по существу как изложена в SEQ ID No: 59, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 59.
4. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем промотор представляет собой промотор гена человеческого синапсина I (SYN I), причем необязательно промотор содержит нуклеотидную последовательность по существу как изложена в SEQ ID No: 1, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 1.
5. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 1-3, причем промотор представляет собой промотор CAG, причем необязательно промотор содержит нуклеотидную последовательность по существу как изложена в SEQ ID No: 2, 3 или 48, или ее фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 2, 3 или 48.
6. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем спейсерная последовательность предпочтительно содержит и кодирует последовательность вирусного пептидного спейсера, более предпочтительно - последовательность вирусного пептидного спейсера 2А.
7. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем последовательность пептидного спейсера содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 4, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 4.
8. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 1-6, причем спейсерная последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 5, или ее фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 5.
9. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 1-7, причем последовательность пептидного спейсера содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 6, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 6.
10. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 1-6, причем спейсерная последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена под SEQ ID NO. 7, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 7.
11. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 1-7, причем последовательность пептидного спейсера содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 8, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 8.
12. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем первая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую человеческую каноническую изоформу TrkB, причем каноническая изоформа TrkB содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 9, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 9.
13. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем первая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 10, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 10.
14. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем первая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая кодирует изоформу 4 TrkB.
15. Рекомбинантный вектор по п. 14, причем изоформа 4 TrkB содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 11, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 11.
16. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 14 или 15, причем первая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 12, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 12.
17. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем первая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность согласно SEQ ID No: 9, причем один или несколько остатков тирозина в положении 516, 701, 705, 706 и/или 816 SEQ ID No: 9 модифицированы в другой аминокислотный остаток.
18. Рекомбинантный вектор по п. 17, причем по меньшей мере два, три или четыре остатка тирозина в положении 516, 701, 705, 706 и/или 816 в SEQ ID No: 9 модифицированы в другой аминокислотный остаток.
19. Рекомбинантный вектор по п. 18, причем все остатки тирозина в положении 516, 701, 705, 706 и/или 816 в SEQ ID No: 9 модифицированы в другой аминокислотный остаток.
20. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 17-19, причем каждый остаток тирозина модифицирован в глутаминовую кислоту.
21. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 17-20, причем модифицированная форма рецептора TrkB содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 13, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 13.
22. Рекомбинантный вектор по п. 21, причем первая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 14, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 14.
23. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем вторая кодирующая последовательность кодирует нейротрофин-4 (NT-4), который содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 49 или 55, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 49 или 55, и/или вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена в SEQ ID No: 50 или 56, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 50 или 56.
24. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая кодирует зрелый BDNF.
25. Рекомбинантный вектор по п. 24, причем зрелый BDNF содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 18, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 18.
26. Рекомбинантный вектор по п. 25, причем вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 19, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 19.
27. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую сигнальный пептид для агониста рецептора TrkB, наиболее предпочтительно сигнальный пептид для BDNF.
28. Рекомбинантный вектор по п. 27, причем нуклеотидная последовательность кодирует канонический сигнальный пептид для BDNF, причем вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая кодирует сигнальный пептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая изложена с SEQ ID NO. 20, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 20.
29. Рекомбинантный вектор по п. 27, причем вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена в SEQ ID NO. 21, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 21.
30. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую последовательность сигнального пептида, которая изложена в любой из SEQ ID NO. 23, 25, 27 или 29, или причем сигнальный пептид содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в любой из SEQ ID NO. 22, 24, 26 или 28.
31. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем вторая кодирующая последовательность содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую последовательность сигнального пептида, которая изложена в любой из SEQ ID NO. 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 61, 63, 65, 67, 69, 71, 73, 75, 77, 79, 81, 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101 или 103; или причем сигнальный пептид содержит аминокислотную последовательность, которая изложена в любой из SEQ ID NO. 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100 или 102.
32. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем конструкция содержит нуклеотидную последовательность, которая изложена в SEQ ID No: 107 или 108, или фрагмент или вариант по меньшей мере с 65% идентичности последовательности с SEQ ID No: 107 или 108.
33. Рекомбинантный вектор по любому из предыдущих пунктов, причем вектор представляет собой рекомбинантный AAV-вектор (rAAV-вектор).
34. Рекомбинантный вектор по п. 33, причем rAAV представляет собой AAV-1, AAV-2, AAV-3A, AAV-3B, AAV-4, AAV-5, AAV-6, AAV-7, AAV-8, AAV-9, AAV-10 или AAV-11.
35. Рекомбинантный вектор по п. 34, причем rAAV представляет собой rAAV серотипа 2.
36. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 1-35, причем нейродегенеративное нарушение выбрано из группы, состоящей из болезни Александера, болезни Альпера, болезни Альцгеймера, латерального амиотрофического склероза (ALS), телеангиоэктатической атаксии, форм нейронального цероидлипофусциноза, болезни Баттена, губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота (BSE), болезни Канавана, церебрального паралича, синдрома Коккейна, кортико-базальной дегенерации, болезни Крейтцфельда Якоба, лобно-височной лобарной дегенерации, болезни Гоше, болезни Хантингтона, ВИЧ-ассоциированного слабоумия, болезни Кеннеди, болезни Краббе, деменции с тельцами Леви, лизосомальных болезней накопления, нейроборрелиоза, болезни Мачадо Джозефа, заболевания двигательных нейронов, множественной системной атрофии, рассеянного склероза, множественной сульфатазной недостаточности, муколипидозов, нарколепсии, болезни Нимана - Пика типа С, болезни Нимана Пика, болезни Паркинсона, болезни Пелицеуса Мерцбахера, болезни Пика, болезни Помпе, первичного латерального склероза, прионных заболеваний, прогрессирующего надъядерного паралича, болезни Рефсума, болезни Сандхоффа, болезни Шилдера, подострой комбинированной дегенерации спинного мозга на фоне злокачественной анемии, болезни Шпильмейера Фогта Шегрена Баттена, спинально-церебеллярной атаксии, спинальной мышечной атрофии, болезни Стила-Ричардсона-Ольшевского, сухотки спинного мозга и болезни Тея Сакса.
37. Рекомбинантный вектор по любому из пп. 1-35, причем нейродегенеративное нарушение представляет собой болезнь Альцгеймера.
38. Рекомбинантный вектор по п. 37, причем в нейронах снижается фосфорилирование тау-белка.