СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ
TREATMENT METHOD

Область техники, к которой относится настоящее изобретение
Настоящее изобретение относится к соединениям, которые ингибируют EZH2/EZH1, и их применению для лечения воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками.
Уровень техники настоящего изобретения
Посттрансляционные модификации белков играют важную роль в регуляции передачи сигналов от рецепторов, ремодулировании хроматина и генной транскрипции. Данные модификации включают ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, убиквитинирование, сумоилирование. EZH (усилитель zeste гомолога) 1 и 2 представляют собой каталитические субъединицы поликомб репрессорного комплекса 2 (PRC2) и обладают метилтрансферазной активностью, которая может катализировать метилирование лизиновых аминокислот (Margueron R, Reinberg D: The Polycomb complex PRC2 and its mark in life. Nature. 2011 Jan 20;469 (7330):343-9).
EZH1 и EZH2 играют важную роль в эпигенетическом длительном «сайленс» генной экспрессии ди- или триметилированием лизина 27 гистона H3 (H3K27me2/3). Гистон H3 представляет собой один из пяти основных гистоновых белков, являющихся частью структуры хроматина в эукариотических клетках. Хроматин представляет собой сложную комбинацию ДНК и белков, которые образует хроматин. Его обнаруживают внутри ядра эукариотических клеток и подразделяют на гетерохроматин (конденсированный) и эухроматин (деспирализованный). Основными структурными элементами хроматина являются нуклеосомы, каждая из которых состоит из 146 пар оснований ДНК, обвивающих гистоновый октамер, который состоит из 2 копий каждого из H2A, H2B, H3 и H4. Функции хроматина заключаются в упаковке ДНК в меньшем объеме, соответствующем клетке, уплотнении ДНК, обеспечивая митоз и мейоз, и он служит в качестве механизма контроля генной экспрессии и ДНК репликации. Хроматиновую структуру контролирует серия посттрансляционных модификаций гистоновых белков, в частности гистонов H3 и H4, и чаще всего в "гистоновых хвостах", которые выступают за границы основной хроматиновой структуры. Связывание ферментов и белков-адапторов с посттрансляционной модификацией в гистоновых хвостах регулирует хроматиновую динамику и генную экспрессию. Считают, что H3K27me3 подавляет генную экспрессию рекрутингом гистоновых деацетилаз к модифицированным нуклеосомам и блокировкой транскрипционной элонгации полимеразой II. Таким образом, ингибирование ферментативной активности EZH1 и EZH2 может приводить в результате к уменьшению H3K27me3 и активации целевых генов.
В добавление к его ядерной функции при модификации гистона H3 EZH2 вовлечен в регуляцию передачи сигнала, которая ведет к полимеризации актина в цитоплазме клеток (Su IH, Dobenecker MW, Dickinson E, Oser M, Basavaraj A, Marqueron R, Viale A, Reinberg D, Wiilfing C, Tarakhovsky A: Polycomb group protein ezh2 controls actin polymerization and cell signaling. Cell. 2005 May 6;121(3):425-36). Реорганизация актинового цитоскелета критически способствует T-клеточной реакции облегчением взаимодействия T-клеток с антиген представляющими клетками или клетками-мишенями. Кроме того, ремоделирование актина играет важную роль в миграции и подвижности T-клеток в процессе их притока в области воспаления. Обнаружено, что часть EZH2 белка локализована в цитоплазме T-клеток и взаимодействует с малой ГТФазной VAV1, которая участвует в ремоделировании актина. Генетическое выключение EZH2 приводило в результате к нарушенной полимеризации актина в T-клетках, активированных Т-клеточными рецепторами, или на границе раздела T-клетка - представляющая антиген клетка. Более того, полимеризация актина, вызванная EZH2 сверхэкспрессией, зависела от метилтрансферазной активности EZH2. Пролиферация T-клеток в ответ на TCR также нарушалась в отсутствии EZH2. Таким образом, ингибирование EZH1 и/или EZH2 может подавлять активность T-клеток.
+
+
+
Зрелые T-клетки реагируют на пептидные антигены в присутствии подходящего дополнительного стимулирования представляющими антиген клетками. Они обладают способностью отличать свое и чужое как следствие отбора ТКР репертуара, специфичного для чужеродных антигенов в тимусе, индукции толерантности собственных активированных T-клеточных клонов на периферии и контролировать T-клеточную активацию собственным антигеном регуляторными T-клетками. T-клетки обеспечивают защиту от различных классов патогенов регулированием различных типов адаптивных иммунных ответов, как следствие экспрессии различных наборов цитокинов и других растворимых и связанных с клеткой продуктов. Кроме того, они действуют как принципиальные амплификаторы и стимуляторы подходящих воспалительных и эффекторных реакций в клетках врожденной иммунной системы и неиммунных клетках. Тогда как данные согласованные иммунные реакции могут обеспечивать мощную защиту от патогенов, они могут также приводить к воспалению, связанному с нежелательными иммунными реакциями против своих антигенов и экзогенных антигенов и симбиотических микроорганизмов, а также сопутствующему повреждению хозяина в качестве побочного эффекта иммунных реакций против патогенов. CD8 T-клетки могут разрушать клетки, содержащие внутриклеточные патогены, но могут также способствовать повреждению тканей и секретировать провоспалительные цитокины, например, TNF и IFNg. CD4 T-клетки могут обладать различными функциями при воспалении, в зависимости от их профилей экспрессии специфических цитокинов. CD4 Th1 клетки являются важными для выведения внутриклеточных патогенов, но также играют критическую роль при воспалении в силу экспрессии TNF и IFNg. Также было показано, что экспрессирующие IL-17 CD4 Th17 клетки, которые опосредуют нейтрофилию и ремоделирование и восстановление ткани, участвуют во многих воспалительных заболеваниях. CD4 Th2 клетки участвуют в аллергической реакции за счет экспрессии IL-13, IL-5 и IL-4, которые опосредуют гиперреактивность дыхательных путей, рекрутинг эозинофилов и IgE продуцирование. Таким образом, активацию T-клеток считают центральной для многих воспалительных иммунных заболеваний. Соответственно, соединения, которые ингибируют EZH1 и/или EZH2 активность и подавляют активацию T-клеток, могли бы быть пригодны для лечения воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками.
Об ингибиторах EZH1/EZH2, которые являются пригодными для лечения, сообщается в PCT заявках PCT/US2011/035336, PCT/US2011/035340 и PCT/US2011/035344.
Сущность настоящего изобретения
Настоящее изобретение относится к способу лечения воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками, или аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками, который включает введение нуждающемуся в лечении человеку эффективного количества соединения, которое ингибирует EZH2 и/или EZH1, или его фармацевтически приемлемой соли.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к соединению или его фармацевтически приемлемой соли, которое ингибирует EZH2 и/или EZH1, для применения в лечении воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками, или аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками.
В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения или его фармацевтически приемлемой соли, которое ингибирует EZH2 и/или EZH1, в получении лекарственного средства для лечения воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками, или аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками.
Краткое описание чертежей
1
2
+
Фигура 1: EZH/EZh ингибиторы нарушают CD4 T-клеточную пролиферацию, вызванную T-клеточными рецепторами. Коэффициент деления рассчитывали CFSE флуоресценцией на 6 день после стимулирования 10 мкг/мл αCD3 + 2 мкг/мл αCD28. Данные представлены в виде среднего ± среднеквадратичная ошибка среднего, n=4.
1
2
+
Фигура 2: EZH/EZH ингибиторы нарушают продуцирование эффекторных цитокинов, вызванный T-клеточными рецепторами, в CD4 T-клетках. Продуцирование цитокинов измеряли через 72 часа после стимулирования 10 мкг/мл αCD3 + 2 мкг/мл αCD28. Данные представлены в виде среднего ± среднеквадратичная ошибка среднего, n=4.
1
2
+
Фигура 3: EZH/EZH ингибиторы нарушают IL-2 продуцирование, вызванное T-клеточными рецепторами, в CD4 T-клетках. IL-2 продуцирование измеряли через 18 часов после стимулирования 10 мкг/мл αCD3 + 2 мкг/мл αCD28. Данные представлены в виде среднего ± среднеквадратичная ошибка среднего, n=4.
1
2
50
+
Таблица 1: EZH/EZH ингибиторы нарушают продуцирование эффекторных цитокинов, вызванное T-клеточными рецепторами, в CD4 T-клетках. Продуцирование цитокинов измеряли через 72 часа после стимулирования 10 мкг/мл αCD3 + 2 мкг/мл αCD28. Данные представлены в виде pIC ± средняя квадратичная ошибка среднего; n=4.
Подробное описание настоящего изобретения
Настоящее изобретение относится к способу лечения воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками, как описано выше.
Настоящее изобретение относится к способу лечения аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками, как описано выше.
Настоящее изобретение относится к способу лечения воспалительного иммунного заболевания, опосредованного T-клетками, или аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками, который включает введение нуждающемуся в лечении человеку эффективного количества соединения формулы (I)
,
где
1
8
2
8
2
8
3
8
3
8
1
8
2
8
5
8
5
8
1
8
2
8
6
10
1
8
2
8
1
8
2
8
1
8
2
8
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
a
a
a
a
b
X и Z выбраны независимо из группы, состоящей из водорода, (C-C)алкила, (C-C)алкенила, (C-C)алкинила, незамещенного или замещенного (C-C)циклоалкила, незамещенного или замещенного (C-C)циклоалкил-(C-C)алкила или -(C-C)алкенила, незамещенного или замещенного (C-C)циклоалкенила, незамещенного или замещенного (C-C)циклоалкенил-(C-C)алкила или -(C-C)алкенила, (C-C)бициклоалкила, незамещенного или замещенного гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного гетероциклоалкил-(C-C)алкила или -(C-C)алкенила, незамещенного или замещенного арила, незамещенного или замещенного арил-(C C)алкила или -(C-C)алкенила, незамещенного или замещенного гетероарила, незамещенного или замещенного гетероарил(C-C)алкила или -(C-C)алкенила, галогена, циано, -COR, -COR, -CONRR, -CONRNRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -NRNRR, -NRNRC(O)R, -NRNRC(O)NRR, -NRNRC(O)OR, -OR, -OC(O)R и -OC(O)NRR;
Y представляет собой H или галоген;
1
a
a
a
b
a
a
b
1
8
2
8
2
8
3
8
3
8
1
8
2
8
5
8
5
8
1
8
2
8
6
10
2
8
1
8
1
8
2
8
1
8
2
8
2
R представляет собой (C-C)алкил, (C-C)алкенил, (C-C)алкинил, незамещенный или замещенный (C-C)циклоалкил, незамещенный или замещенный (C-C)циклоалкил-(C-C)алкил или -(C-C)алкенил, незамещенный или замещенный (C-C)циклоалкенил, незамещенный или замещенный (C-C)циклоалкенил-(C-C)алкил или -(C-C)алкенил, незамещенный или замещенный (C-C)бициклоалкил, незамещенный или замещенный гетероциклоалкил или -(C-C)алкенил, незамещенный или замещенный гетероциклоалкил-(C-C)алкил, незамещенный или замещенный арил, незамещенный или замещенный арил-(C-C)алкил или -(C-C)алкенил, незамещенный или замещенный гетероарил, незамещенный или замещенный гетероарил-(C-C)алкил или -(C-C)алкенил, -COR, -COR, -CONRR, -CONRNRR;
2
1
8
1
8
1
3
R представляет собой водород, (C-C)алкил, трифторметил, алкокси или галоген, в которых указанный (C-C)алкил может быть замещен одной или двумя группами, выбранными из: амино и (C-C)алкиламино;
7
1
3
R представляет собой водород, (C-C)алкил или алкокси;
3
a
b
1
8
R представляет собой водород, (C-C)алкил, циано, трифторметил, -NRR или галоген;
6
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
a
a
a
a
b
1
8
2
8
2
2
8
3
8
3
8
1
8
5
8
5
8
1
8
6
10
1
8
1
8
1
8
2
2
2
2
2
R выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, (C-C)алкила, (C-C)алкенила, -B(OH), замещенного или незамещенного (C-C)алкинила, незамещенного или замещенного (C-C)циклоалкила, незамещенного или замещенного (C-C)циклоалкил-(C-C)алкила, незамещенного или замещенного (C-C)циклоалкенила, незамещенного или замещенного (C-C)циклоалкенил-(C-C)алкила, (C-C)бициклоалкила, незамещенного или замещенного гетероциклоалкила, незамещенного или замещенного гетероциклоалкил-(C-C)алкила, незамещенного или замещенного арила, незамещенного или замещенного арил-(C-C)алкила, незамещенного или замещенного гетероарила, незамещенного или замещенного гетероарил-(C-C)алкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -CONRNRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -NRNRR, -NRNRC(O)R, -NRNRC(O)NRR, -NRNRC(O)OR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR;
1
8
2
8
2
8
1
6
1-2
1
6
1-2
1
6
1-2
1
8
3
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
1
4
1
4
c
c
c
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
где любая (C-C)алкильная, (C-C)алкенильная, (C-C)алкинильная, циклоалкильная, циклоалкенильная, бициклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из группы, состоящей из -O(C-C)алкил(R), -S(C-C)алкил(R), -(C-C)алкил(R), (C-C)алкилгетероциклоалкила, (C-C)циклоалкилгетероциклоалкила, галогена, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (С-C)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, арил(С-C)алкила и гетероарил(С-C)алкила;
1
4
1
4
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
где любая арильная или гетероарильная группа указанного арила, гетероарила, арил(С-C)алкила или гетероарил(С-C)алкила необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (C-C)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(О)R и -OC(O)NRR;
a
b
1
8
2
8
2
8
3
8
5
8
6
10
1
8
2
8
2
8
1
4
1
4
1
4
1
4
2
2
1
4
2
1
4
1
4
1
4
2
1
4
2
2
2
1
4
2
1
4
1
4
каждый R и R независимо представляет собой водород, (C-C)алкил, (C-C)алкенил, (C-C)алкинил, (C-C)циклоалкил, (C-C)циклоалкенил, (C-C)бициклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, где указанная (C-C)алкильная, (C-C)алкенильная, (C-C)алкинильная, циклоалкильная, циклоалкенильная, бициклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из галогена, гидроксила, (C-C)алкокси, амино, (C-C)алкиламино, ((C-C)алкил)((C-C)алкил)амино, -COH, -CO(C-C)алкила, -CONH, -CONH(C-C)алкила, -CON((C-C)алкил)((C-C)алкила), -SO(С-C)алкила, -SONH, -SONH(C-C)алкила или -SON((C-C)алкил)((C-C)алкила);
c
a
b
a
a
a
a
a
b
a
1
4
2
2
2
каждый Rнезависимо представляет собой (C-C)алкиламино, -NRSOR, -SOR, -SOR, -NRC(O)OR, -NRR или -COR;
a
b
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
3
8
или R и R, взятые вместе с азотом, с котором они соединены, представляют собой 5-8 членное насыщенное или ненасыщенное кольцо, необязательно содержащее дополнительный гетероатом, выбранный из кислорода, азота и серы, где указанное кольцо необязательно замещено 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (С-C)алкила, (С-C)галогеналкила, амино, (C-C)алкиламино, ((C-C)алкил)((C-C)алкил)амино, гидроксила, оксо, (C-C)алкокси и (C-C)алкокси(C-C)алкила, где указанное кольцо необязательно конденсировано с (C-C)циклоалкильным, гетероциклоалкильным, арильным или гетероарильным кольцом;
a
b
3
8
или R и R, взятые вместе с азотом, с котором они соединены, представляют собой 6- - 10-членную мостиковую бициклическую кольцевую систему, необязательно конденсированную с (C-C)циклоалкильным, гетероциклоалкильныи, арильным или гетероарильным кольцом;
или его соли.
Настоящее изобретение также относится к вышеуказанному способу, где соединение формулы (I) дополнительно определяют в одной из подгрупп ниже:
Подгруппа (I)(A)
1
8
3
8
a
b
a
X и Z выбраны из группы, состоящей из (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, -NRR и -OR;
Y представляет собой H или F;
1
1
8
3
8
R выбран из группы, состоящей из (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, гетероциклоалкила, арила и гетероарила;
2
1
8
1
8
1
3
R представляет собой водород, (C-C)алкил, трифторметил, алкокси или галоген, в которых указанный (C-C)алкил может быть замещен одной или двумя группами, выбранными из: амино и (C-C)алкиламино;
7
1
3
R представляет собой водород, (C-C)алкил или алкокси;
3
a
b
1
8
R выбран из группы, состоящей из водорода, (C-C)алкила, циано, трифторметила, -NRR и галогена;
6
a
a
b
a
b
1
8
3
8
2
8
2
2
2
R выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, циано, трифторметила, амино, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, арила, гетероарила, ациламино, (C-C)алкинила, арилалкинила, гетероарилалкинила, -SOR, -SONRR и -NRSOR;
1
8
3
8
2
8
1
6
1-2
1
6
1-2
1
6
1-2
1
8
3
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
1
4
1
4
c
c
c
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
Где любая (C-C)алкильная, (C-C)циклоалкильная, (C-C)алкинильная, арилалкинильная, гетероарилалкинильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из -O(C-C)алкил(R), -S(C-C)алкил(R), -(C-C)алкил(R), (C-C)алкилгетероциклоалкила, (C-C)циклоалкил-гетероциклоалкила, галогена, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (С-C)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, арил(С-C)алкила и гетероарил(С-С)алкила;
c
a
b
a
a
a
a
a
b
a
1
4
2
2
2
каждый R независимо представляет собой (С-C)алкиламино, -NRSOR, -SOR, -SOR, -NRC(O)OR, -NRR или -COR;
a
b
1
8
2
8
2
8
3
8
5
8
6
10
1
8
2
8
2
8
1
4
1
4
1
4
1
4
2
2
1
4
2
1
4
1
4
1
4
2
1
4
2
2
2
1
4
2
1
4
1
4
каждый R и R независимо представляет собой водород, (C-C)алкил, (C-C)алкенил, (C-C)алкинил, (C-C)циклоалкил, (C-C)циклоалкенил, (C-C)бициклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, где указанная (C-C)алкильная, (C-C)алкенильная, (C-C)алкинильная, циклоалкильная, циклоалкенильная, бициклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из галогена, гидроксила, (C-C)алкокси, амино, (C-C)алкиламино, ((C-C)алкил)((C-C)алкил)амино, -COH, -CO(C-C)алкила, -CONH, -CONH(C-C)алкила, -CON((C-C)алкил)((C-C)алкила), -SO(C-C)алкила, -SONH, -SONH(C-C)алкила и -SON((C-C)алкил)((C-C)алкила);
a
b
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
3
8
или R и R, взятые вместе с азотом, с котором они соединены, представляют собой 5-8 членное насыщенное или ненасыщенное кольцо, необязательно содержащее дополнительный гетероатом, выбранный из кислорода, азота и серы, где указанное кольцо необязательно замещено 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (C-C)алкила, (C-C)галогеналкила, амино, (C-C)алкиламино, ((C-C)алкил)((C-C)алкил)амино, гидроксила, оксо, (C-C)алкокси и (C-C)алкокси(C-C)алкила, где указанное кольцо необязательно конденсировано с (C-C)циклоалкильным, гетероциклоалкильным, арильным или гетероарильным кольцом;
a
b
3
8
или R и R, взятые вместе с азотом, с котором они соединены, представляют собой 6- - 10-членную мостиковую бициклическую кольцевую систему, необязательно конденсированную с (C-C)циклоалкильным, гетероциклоалкильным, арильным или гетероарильным кольцом. Арильная или гетероарильная группа в данной конкретной подгруппе A выбрана независимо из группы, состоящей из фурана, тиофена, пиррола, оксазола, тиазола, имидазола, пиразола, оксадиазола, тиадиазола, триазола, тетразола, бензофурана, бензотиофена, бензоксазола, бензотиазола, фенила, пиридина, пиридазина, пиримидина, пиразина, триазина, тетразина, хинолина, циннолина, хиназолина, хиноксалина и нафтиридина или других арильных или гетероарильных групп, следующих далее:
,
где в (1),
1
8
A представляет собой O, NH, или S; B представляет собой CH или N, и C представляет собой водород или C-C алкил; или
,
где в (2),
1
8
D представляет собой N или C, необязательно замещенный водородом или C-C алкилом; или
,
где в (3),
2
2
E представляет собой NH или CH; F представляет собой O или CO; и G представляет собой NH или CH; или
,
где в (4),
J представляет собой O, S или CO; или
,
где в (5),
Q представляет собой CH или N;
M представляет собой CH или N; и
1
8
3
8
2
2
2
2
2
1
8
3
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
b
L/(5) представляет собой водород, галоген, амино, циано, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, -COR, -COR, -CONRR, -CONRNRR, -SOR, -SONRR, -NRR, -NRC(O)R, -NRSOR, -NRSONRR, -NRNRR, -NRNRC(O)R, -NRNRC(O)NRR, -OR, где любая (C-C)алкильная, (C-C)циклоалкильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (С-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (С-C)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR; где Rи R определяют как выше; или
,
где в 6,
2
L/(6) представляет собой NH или CH; или
,
где в 7,
1
8
3
8
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
M/(7) представляет собой водород, галоген, амино, циано, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, гетероциклоалкил, -COR, -COR, -CONRR, -CONRNRR, -SOR, -SONRR, -NRR, -NRC(O)R, -NRSOR, -NRSONRR, -NRNRR, -NRNRC(O)R, -NRNRC(O)NRR, -OR,
1
8
3
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
b
где любая (C-C)алкильная, (C-C)циклоалкильная, гетероциклоалкильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (С-С)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (С-С)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR; где R и R определяют как выше; или
,
где в (8),
2
P представляет собой CH, NH, O, или S; Q/(8) представляет собой CH или N; и n равно 0-2; или
,
где в (9),
S/(9) и T(9) представляет собой C, или S/(9) представляет собой C, и T(9) представляет собой N, или S/(9) представляет собой N, и T/(9) представляет собой C;
R представляет собой водород, амино, метил, трифторметил, галоген;
1
8
3
8
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
b
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
U представляет собой водород, галоген, амино, циано, нитро, трифторметил, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, -COR, -COR, -CONRR, -SOR, -SONRR, -NRR, -NRC(O)R, -NRSOR, -NRSONRR, -NRNRR, -NRNRC(O)R, -OR, 4-(1H-пиразол-4-ил),
1
8
3
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
где любая (C-C)алкильная, (C-C)циклоалкильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (С-С)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (С-С)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR;
a
b
где R и R определяют как выше.
Подгруппа (I)(B)
1
8
3
8
a
b
a
X и Z выбраны независимо из группы, состоящей из (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, -NRR и -OR;
Y представляет собой H;
1
1
8
3
8
R представляет собой (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил или гетероциклоалкил;
2
1
3
1
3
1
3
R представляет собой водород, (C-C)алкил или галоген, в которых указанный (C-C)алкил может быть замещен одной или двумя группами, выбранными из: амино и (C-C)алкиламино;
7
1
3
R представляет собой водород, (C-C)алкил или алкокси;
3
1
8
R представляет собой водород, (C-C)алкил или галоген;
6
a
a
b
a
b
1
8
3
8
2
8
2
2
2
R представляет собой водород, галоген, циано, трифторметил, амино, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, арил, гетероарил, ациламино, (C-C)алкинил, арилалкинил, гетероарилалкинил, -SOR, -SONRR или -NRSOR;
1
8
3
8
2
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
1
4
1
4
1
8
2
8
2
8
3
8
5
8
6
10
1
8
2
8
2
8
1
4
1
4
1
4
1
4
2
2
1
4
2
1
4
1
4
1
4
2
1
4
2
2
2
1
4
2
1
4
1
4
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
b
где любая (C-C)алкильная, (C-C)циклоалкильная, (C-C)алкинильная, арилалкинильная, гетероарилалкинильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из галогена, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (C-C)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, арил(C-C)алкила и гетероарил(С-C)алкила; каждый R и R независимо представляет собой водород, (C-C)алкил, (C-C)алкенил, (C-C)алкинил, (C-C)циклоалкил, (C-C)циклоалкенил, (C-C)бициклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, где указанная (C-C)алкильная, (C-C)алкенильная, (C-C)алкинильная, циклоалкильная, циклоалкенильная, бициклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из галогена, гидроксила, (C-C)алкокси, амино, (C-C)алкиламино, ((C-C)алкил)((C-C)алкил)амино, -COH, -CO(С-C)алкила, -CONH, -CONH(C-C)алкила, -CON((C-C)алкил)((C-C)алкила), -SO(С-C)алкила, -SONH, -SONH(C-C)алкила и -SON((C-C)алкил)((C-C)алкила);
a
b
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
3
8
или R и R, взятые вместе с азотом, с котором они соединены, представляют собой 5-8 членное насыщенное или ненасыщенное кольцо, необязательно содержащее дополнительный гетероатом, выбранный из кислорода, азота и серы, где указанное кольцо необязательно замещено 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (С-С)алкила, (С-С)галогеналкила, амино, (С-С)алкиламино, ((С-С)алкил)((С-С)алкил)амино, гидроксила, оксо, (С-С)алкокси и (С-С)алкокси(С-С)алкила, где указанное кольцо необязательно конденсировано с (C-C)циклоалкильным, гетероциклоалкильным, арильным или гетероарильным кольцом;
a
b
3
8
или R и R, взятые вместе с азотом, с котором они соединены, представляют собой 6- 10-членную мостиковую бициклическую кольцевую систему, необязательно конденсированную с (C-C)циклоалкильным, гетероциклоалкильным, арильным или гетероарильным кольцом. Арил и гетероарил в данном определении выбраны из группы, состоящей из фурана, тиофена, пиррола, оксазола, тиазола, имидазола, пиразола, оксадиазола, тиадиазола, триазола, тетразола, бензофурана, бензотиофена, бензоксазола, бензотиазола, фенила, пиридина, пиридазина, пиримидина, пиразина, триазина, тетразина, хинолина, циннолина, хиназолина, хиноксалина и нафтиридина или соединения или другой арильной или гетероарильной группы, следующего типа:
,
где в (1),
1
8
A представляет собой O, NH, или S; B представляет собой CH или N, и C представляет собой водород или C-C алкил; или
,
где в (2),
1
8
D представляет собой N или C, необязательно замещенный водородом или С-C алкилом; или
,
где в (3),
2
2
E представляет собой NH или CH; F представляет собой O или CO; и G представляет собой NH или CH; или
,
где в (4),
J представляет собой O, S или CO; или
,
где в (5),
Q представляет собой CH или N; M представляет собой CH или N; и
1
8
3
8
2
2
2
2
2
1
8
3
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
L/(5) представляет собой водород, галоген, амино, циано, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, -COR, -COR, -CONRR, -CONRNRR, -SOR, -SONRR, -NRR, -NRC(O)R, -NRSOR, -NRSONRR, -NRNRR, -NRNRC(O)R, -NRNRC(O)NRR, -OR, где любая (C-C)алкильная, (C-C)циклоалкильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (С-С)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (С-С)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR,
a
b
где R и R определяют как выше; или
,
где в 6,
2
L/(6) представляет собой NH или CH; или
,
где в 7,
1
8
3
8
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
M/(7) представляет собой водород, галоген, амино, циано, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, гетероциклоалкил, -COR, -COR, -CONRR, -CONRNRR, -SOR, -SONRR, -NRR, -NRC(O)R, -NRSOR, -NRSONRR, -NRNRR, -NRNRC(O)R, -NRNRC(O)NRR, -OR,
1
8
3
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
b
где любая (C-C)алкильная, (C-C)циклоалкильная, гетероциклоалкильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (С-С)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR; где R и R определяют как выше; или
,
где в (8),
2
P представляет собой CH, NH, O, или S; Q/(8) представляет собой CH или N; и n равно 0-2; или
,
где в (9),
S/(9) и T(9) представляет собой C, или S/(9) представляет собой C, и T(9) представляет собой N, или S/(9) представляет собой N, и T/(9) представляет собой C;
R представляет собой водород, амино, метил, трифторметил, галоген;
1
8
3
8
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
b
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
b
a
a
b
a
U представляет собой водород, галоген, амино, циано, нитро, трифторметил, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, -COR, -COR, -CONRR, -SOR, -SONRR, -NRR, -NRC(O)R, -NRSOR, -NRSONRR, -NRNRR, -NRNRC(O)R, -OR, 4-(1H-пиразол-4-ил),
1
8
3
8
1
6
3
8
5
8
1
6
2
2
2
2
2
a
a
a
b
a
a
a
a
b
a
b
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
a
b
a
a
a
b
a
b
где любая (C-C)алкильная, (C-C)циклоалкильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из (С-С)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)циклоалкенила, (С-С)галогеналкила, циано, -COR, -COR, -CONRR, -SR, -SOR, -SOR, -SONRR, нитро, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(O)NRR, -NRC(O)OR, -NRSOR, -NRSONRR, -OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR, где R и R определяют как выше.
Подгруппа (I)(C)
X представляет собой метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, фенил, трифторметил, тетрагидропиран, гидроксиметил, метоксиметил или бензил;
Y представляет собой H;
Z представляет собой метил, этил, н-пропил, изопропил, трифторметил или бензил;
1
R представляет собой изопропил, трет-бутил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, (1-метилэтил)циклопропил, 1,1-диоксо-тетрагидротиофен-3-ил, 1-Me-пиперидин-4-ил, тетрагидрофуран-3-ил, тетрагидропиран-4-ил, N,N-диметил-1-пропанаминил, бензил, или 4-пиридил;
2
1
3
1
3
1
3
R представляет собой водород, (C-C)алкил или галоген, в которых указанный (C-C)алкил может быть замещен одной или двумя группами, выбранными из: амино и (C-C)алкиламино;
7
1
3
R представляет собой водород, (C-C)алкил или алкокси;
3
R представляет собой H, метил или Br; и
6
R представляет собой метил, бис(1,1-диметилэтил), бис(1-метилэтил), циклопропил, пропил, диметиламино, этиламино, (2-гидроксиэтил)амино, 2-пропен-1-иламино, 1-пиперазинил, 1-пиперидинил, 4-морфолинил, 4-пиперидиниламино, тетрагидро-2H-пиран-4-иламино, фениламино, (фенилметил)амино, (4-пиридинилметил)амино, [2-(2-пиридиниламино)этил]амино, 2-(диметиламино)этил]амино, 4-пиридиниламино, 4-(аминокарбонил)фенил]амино, 3-гидрокси-3-метил-1-бутин-1-ил, 4-пиридинилэтинил, фенилэтинил, 2-фуранил, 3-тиенил; 1H-пиразол-4-ил, 1 H-индазол-5-ил, 1H-индазол-6-ил, 3-метил-1H-индазол-5-ил, 1H-1,2,3-бензотриазол-5-ил, 2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензимидазол-5-ил, 2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-5-ил, 2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-6-ил, 2,1,3-бензоксадиазол-5-ил, 2-амино-6-хиназолинил, 2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидро-5-пиримидинил, 2-амино-5-пиримидинил, 7-оксо-1,5,6,7-тетрагидро-1,8-нафтиридин-3-ил, фенил, 2-метилфенил, 2-нитрофенил, 2-фенилэтил, 3-аминофенил, 4-аминофенил, 4-хлорфенил, 4-фторфенил, 4-(метилокси)фенил, 3-(ацетиламино)фенил, 4-(ацетиламино)фенил, 4-(аминокарбонил)фенил, 4-(1H-пиразол-4-ил)фенил, 4-(аминосульфонил)фенил, 4-(метилсульфонил)фенил, 4-[(диметиламино)сульфонил]фенил, 4-[(метиламино)карбонил]фенил, 4-[(метиламино)сульфонил]фенил, 4-[(метилсульфонил)амино]фенил, 3-пиридинил, 4-пиридинил, 2-(4-морфолинил)-4-пиридинил, 2-амино-4-пиридинил, 5-(метилокси)-3-пиридинил, 5-(метилсульфонил)-3-пиридинил, 5-[(циклопропилсульфонил)амино]-6-(метилокси)-3-пиридинил, 5-[(фенилсульфонил)амино]-3-пиридинил, 6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил, 6-(4-морфолинил)-3-пиридинил, 6-(ацетиламино)-3-пиридинил, 6-(диметиламино)-3-пиридинил, 6-(метилокси)-3-пиридинил, 6-[(метиламино)карбонил]-3-пиридинил, 6-[(метиламино)сульфонил]-3-пиридинил, 6-метил-3-пиридинил, 4-пиридинилокси.
Настоящее изобретение также относится к способу лечения воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками, или аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками, который включает введение нуждающемуся в лечении человеку эффективного количества соединения, которое выбрано из группы, включающей:
6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-фенил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензимидазол-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[2-(4-метил-1-пиперазинил)-4-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензимидазол-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-циклопентил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-фенил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4-циклопропил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-4-(1-метилэтил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4-циклобутил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-[(4-метил-2-оксо-6-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-фенил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(6-(2-оксопирролидин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(2-метилпиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(2-метилпиримидин-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-метилпиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-((диметиламино)метил)фенил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(6-морфолинoпиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(3-((метилсульфонил)метил)фенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(2-метилпиримидин-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(2-аминопиримидин-5-ил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(6-аминопиридин-3-ил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-(диметиламино)пиридин-3-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(6-(пирролидин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-фторфенил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(4-(4-изопропилпиперазин-1-ил)фенил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(1H-индазол-6-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{3-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(метилокси)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(2-метил-5-пиримидинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(6-амино-3-пиридинил)-N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[6-(диметиламино)-3-пиридинил]-N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(6-метил-3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[1-(2-пиридинилметил)-1H-пиразол-4-ил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[1-(2-тиенилметил)-1H-пиразол-4-ил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(3-(метилсульфамидометил)фенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4-бензил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(6-ацетамидопиридин-3-ил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(6-ацетамидопиридин-3-ил)-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(1-(2-морфолинoэтил)-1H-пиразол-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(2-метил-3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[5-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(6-метил-3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-(3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-циклопентил-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-циклобутил-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклобутил-6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопропил-6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопропил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(метилокси)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[3-(метилсульфонил)фенил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-циклопентил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(2-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-4,4ʹ-бипиридин-3-ил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-{[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-{[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-2-оксо-4-(1-пирролидинил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-2-оксо-4-(фениламино)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-[6-(метилокси)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[6-(ацетиламино)-3-пиридинил]-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(4-фторфенил)-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[4-(ацетиламино)фенил]-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
метил 4-[4-({[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-6-ил]бензоат;
метил 5-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]-2-пиридинкарбоксилат;
метил 3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]бензоат;
6-бром-N-((6-этил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((6-бензил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-((6-циклобутил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-({6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил}метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-({6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил}метил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-({6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил}метил)-6-[2-(4-метил-1-пиперазинил)-4-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-({6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил}метил)-6-(3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-({6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил}метил)-6-[6-(4-морфолинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-циклопропил-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопропил-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопропил-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(2-(пиперазин-1-ил)пиридин-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(2-(пиперазин-1-ил)пиридин-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопропил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
метил 4-[4-({[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-6-ил]бензоат;
метил 3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]бензоат;
метил 5-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]-2-пиридинкарбоксилат;
1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4-бензил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-({2-[6-(циклопропилсульфонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон;
3-({2-[6-(циклопропилсульфонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-2-оксо-4-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-6-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-хлор-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{3-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-4-(4-морфолинилметил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-йод-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-йод-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-этил-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-пропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-({2-[6-хлор-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон;
3-({2-[6-хлор-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-6-метил-4-пропил-2(1H)-пиридинон;
3-({2-[6-хлор-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-6-метил-4-пропил-2(1H)-пиридинон;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-фтор-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-({2-[6-фтор-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-6-метил-4-пропил-2(1H)-пиридинон;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(1H-тетразол-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(2H-тетразол-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-циано-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-хлор-1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-хлор-1-(1-метилэтил)-N-({6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил}метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-хлор-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(4-(морфолинoметил)фенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(3-фтор-4-(морфолинoметил)фенил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(4-((1H-пиразол-1-ил)метил)фенил)-3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(2-фторфенил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-[6-(метилокси)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-(3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(метилокси)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-6-{4-[(диметиламино)метил]фенил}-1-(1-метилэтил)-N-({6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил}метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-1-(1-метилэтил)-N-({6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил}метил)-6-[6-(метилокси)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-1-изопропил-N-((4-(метоксиметил)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(4-(трифторметил)фенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(6-(трифторметил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(3-фторфенил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-6-(3,5-дифторфенил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-6-(3,4-дифторфенил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-фтор-3-гидроксифенил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-фтор-3-метоксифенил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(4-метоксифенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(3-метоксифенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-6-(3-циано-4-фторфенил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-фенил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-фторфенил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(3-фтор-4-морфолинoфенил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-фторпиридин-3-ил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-хлор-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-циклопропил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-хлор-1-циклопентил-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-циано-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-4-(1-метилэтил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(4-{[2-(диметиламино)этил]окси}фенил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-фтор-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-фтор-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-фтор-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-фтор-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(4-пиридазинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(6-фенил-3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[3-(аминометил)фенил]-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[5-(4-морфолинилкарбонил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-4-(1-метилэтил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(6-формил-3-пиридинил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-циклопропил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(4-(2-(диметиламино)этил)фенил)-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3,6-дибром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-4-[4-({[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-6-ил]-L-фенилаланин;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(1H-имидазол-1-илметил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[2-(4-метил-1-пиперазинил)-1,3-тиазол-5-ил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-{6-[(9aS)-гексагидропиразино[2,1-c][1,4]оксазин-8(1H)-ил]-3-пиридинил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(5,6,7,8-тетрагидро-1,8-нафтиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[6-(4-этил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{6-[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]-3-пиридинил}-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-морфолинилметил)-2-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-морфолинил)-2-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(6-метил-2-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[2-(4-морфолинил)-4-пиримидинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(2-пиримидинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{6-[(диметиламино)метил]-2-пиридинил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(6-амино-2-пиридинил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[2-амино-6-(4-морфолинил)-4-пиримидинил]-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[2-(метиламино)-4-пиримидинил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(4-пиримидинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[2-(этиламино)-4-пиримидинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(2-амино-4-пиримидинил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(1H-бензимидазол-5-ил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(3-амино-1H-индазол-6-ил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(1-метил-1H-индазол-6-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(5-метил-1H-индазол-6-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(4-этил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{6-[4-(1-метилэтил)-1-пиперазинил]-3-пиридинил}-1H-индол-4-карбоксамид;
6-хлор-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-4-(1-метилпропил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-4-(1-метилпропил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-4-(1-метилпропил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(6-хлор-3-пиридинил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(1H-имидазол-1-ил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[6-(4-циклопропил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{6-[2-(диметиламино)этил]-3-пиридинил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{3-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-{6-[(3R,5S)-3,5-диметил-1-пиперазинил]-3-пиридинил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{6-[3-(диметиламино)-1-пирролидинил]-3-пиридинил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилпропил)-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метилгексагидро-1H-1,4-диазепин-1-ил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-пиперидинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-((6-(трифторметил)пиридин-2-ил)метил)-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(пиридазин-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-хлор-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(3R)-тетрагидро-3-фуранил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-2-оксо-4-(1H-пиразол-1-илметил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-2-оксо-4-(1H-пиразол-1-илметил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(3-пиридинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[(аминокарбонил)амино]-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилпропил)-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилпропил)-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1R)-1-метил-2-(метилокси)этил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1S)-1-метил-2-(метилокси)этил]-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1S)-1-метил-2-(метилокси)этил]-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1S)-1-метил-2-(метилокси)этил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-{6-[(метиламино)метил]-3-пиридинил}-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[6-(2,6-диметил-4-морфолинил)-3-пиридинил]-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(2-метил-4-морфолинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(7-оксо-5,6,7,8-тетрагидро-1,8-нафтиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(пиридазин-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-фтор-1-изопропил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
(R)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
(S)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-(1-метоксипропан-2-ил)-3-метил-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-(1-(диметиламино)пропан-2-ил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(1H-пиразолo[3,4-b]пиридин-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-(2-(диметиламино)пропил)-3-метил-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1-(пентан-2-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(1H-пиразолo[4,3-c]пиридин-6-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-метил-3-({2-[3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(1,2,3,6-тетрагидро-4-пиридинил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-пропил-2(1H)-пиридинон;
6-(1H-бензо[d]имидазол-2-ил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-(2-(диметиламино)пропил)-3-метил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-(2-(диметиламино)пропил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
(R)-6-бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид; и
(S)-6-бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1S)-1-метилпропил]-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1R)-1-метилпропил]-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(3-((диметиламино)метил)фенил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{3-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1S)-1-метилпропил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{3-[(диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1R)-1-метилпропил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-(2-оксопиперазин-1-ил)фенил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(1-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-метил-3-[(2-{3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-ил}-2-оксоэтил)амино]-4-пропил-2(1H)-пиридинон;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(2-(пиперазин-1-ил)пиримидин-5-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(1H-пиразол-4-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(5-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
4-[4-({[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-6-ил]-L-фенилаланин;
6-[6-(аминометил)-3-пиридинил]-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(3-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
4-[4-({[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-6-ил]бензойную кислоту;
3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]бензойную кислоту;
5-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]-2-пиридинкарбоновую кислоту;
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4-бензил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4-бензил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-метил-3-({2-[3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(4-пиперидинил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-4-пропил-2(1H)-пиридинон;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(2-пиперидинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопропил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-6-(циклопропилсульфонил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид;
3-({2-[6-(циклопропилсульфонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон;
3-({2-[6-(циклопропилсульфонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-ил]-2-оксоэтил}амино)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон;
1-циклопентил-6-(циклопропилсульфонил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбоксамид;
1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-((диметиламино)метил)пиперидин-1-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(3-((диметиламино)метил)пирролидин-1-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
1-циклопентил-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(пирролидин-1-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(1,1-диоксидотиоморфолинo)-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(пиридин-3-иламино)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-(4-фторфенил)пиперидин-1-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-фторпиперидин-1-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-(3-фторфенил)пиперидин-1-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4-этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(4-морфолинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(4-морфолинил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{[3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-пиразол-5-ил]амино}-1H-индол-4-карбоксамид;
(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 6-(2-диметиламиноэтокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновую кислоту;
(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 1-изопропил-6-[2-(4-метил-пиперазин-1-ил)-этокси]-1H-индол-4-карбоновую кислоту;
(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 1-изопропил-6-(2-морфолин-4-илэтокси)-1H-индол-4-карбоновую кислоту;
(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 1-изопропил-6-(2-пиперазин-1-илэтокси)-1H-индол-4-карбоновую кислоту;
N-{[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-{[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-2-оксо-4-(1-пирролидинил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-(1-метилэтил)-N-{[6-метил-2-оксо-4-(фениламино)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-{3-[(диметиламино)метил]фенил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-бром-3-метил-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-бром-3-метил-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-бром-3-метил-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1-(1-метилпропил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((6-амино-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-1-изопропил-3-метил-N-((4-метил-6-(метиламино)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{6-[(2R)-2-метил-1-пиперазинил]-3-пиридинил}-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(3,4-диметил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(гексагидропирроло[3,4-b]пиррол-5(1H)-ил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(гексагидропирроло[3,4-b]пиррол-5(1H)-ил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(3,3-диметил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{6-[(2S)-2-метил-1-пиперазинил]-3-пиридинил}-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{6-[(1S,4S)-2,5-диазабицикло[2,2,1]гепт-2-ил]-3-пиридинил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{6-[(1R,4R)-2,5-диазабицикло[2,2,1]гепт-2-ил]-3-пиридинил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-{6-[(2S,5S)-2,5-диметил-1-пиперазинил]-3-пиридинил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-[6-(3,8-диазабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-3-пиридинил]-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-((2R,5R)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(6-{[(2R,6S)-2,6-диметил-4-морфолинил]метил}-3-пиридинил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{6-[(4-метил-1-пиперазинил)метил]-3-пиридинил}-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-морфолинилметил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-бром-N-((6-(гидроксиметил)-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
N-((6-(аминометил)-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
3-Метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-карбоновую кислоту;
3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]пропионовую кислоту;
6-(2-аминоэтил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{3-[(диметиламино)метил]-4-фторфенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(4,5-дигидро-1H-имидазол-2-ил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
[4-({[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-6-ил]бороновую кислоту;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(гидроксиметил)-3-пиридинил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(3-оксетанил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]амино}-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{[(4-метил-1-пиперазинил)карбонил]амино}-1H-индол-4-карбоксамид;
6-{[3-(диметиламино)пропил]тио}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-(3-гидрокси-3-метил-1-бутин-1-ил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(3-гидрокси-3-метил-1-бутин-1-ил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
6-(циклопропилэтинил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-7-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид;
7-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид;
N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-хлор-1-изопропил-2,3-диметил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид;
6-хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид; и
2-(2-аминоэтил)-6-хлор-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид, или их фармацевтически приемлемую соль.
Как применяют в настоящем изобретении, термин "необязательно" обозначает то, что последовательно описанное событие (события) могут происходить или могут не происходить, и он включает и событие (события), которое происходит, и событие (события), которое не происходит.
1
6
1
3
1
3
1
3
Как применяют в настоящем изобретении, если не определено иначе, фраза "необязательно замещенный" или ее вариант обозначает необязательное замещение, включая множественные степени замещения, одной или более замещающими группами. Фраза не следует понимать как дублирующую замещения, описанные и показанные в настоящем изобретении. Примеры необязательных замещающих групп включают ацил, C-Cалкил, C-Cалкилсульфонил, C-Cалкокси, C-Cалкоксикарбонил, циано, галоген, галогеналкил, гидроксил, оксо и нитро.
Термин "независимо" обозначает то, что когда более чем один заместитель выбран из ряда возможных заместителей, данные заместители могут быть одинаковыми или отличными.
"Эффективное количество" обозначает такое количество лекарственного средства или фармацевтического агента, которое будет вызывать биологическую или медицинскую реакцию ткани, системы, животного или человека, которую добивается, например, исследователь или клиницист. Более того, термин "терапевтически эффективное количество" обозначает любое количество, которое, по сравнению с соответствующим субъектом, который не получает данное количество, приводит в результате к улучшенному лечению, излечиванию, предотвращению или облегчению заболевания, расстройства или побочного эффекта, или заболевания в процессе развития заболевания или расстройства. Термин также включает в свой объем количества, эффективные для улучшения нормальной физиологической функции.
1
8
Как применяют в настоящем изобретении термин "алкил" относится к углеводородному радикалу с нормальной или разветвленной цепью, содержащему указанное количество атомов углерода, так, например, как применяют в настоящем изобретении, термины "C-Cалкил" относится к алкильной группе, содержащей, по меньшей мере, 1 и вплоть до 8 атомов углерода, соответственно. Примеры данных алкильных групп с нормальной или разветвленной цепью, пригодные в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются, метил, этил, н-пропил, изопропил, изобутил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, н-гексил, н-гептил и н-октил и разветвленные аналоги последних 5 нормальных алканов.
1
8
3
2
3
3
3
Термин "алкокси", как применяют в настоящем изобретении, обозначает -O(C-Cалкил), включая -OCH, -OCHCH и -OC(CH) и подобные в соответствии с определением алкила выше.
1
8
3
2
3
Термин "алкилтио", как применяют в настоящем изобретении, обозначает -S(C-Cалкил), включая -SCH, -SCHCH и подобные в соответствии с определением алкила выше.
1
8
Термин "ацилокси" обозначает -OC(O)C-Cалкил и подобные в соответствии с определением алкила выше.
1
8
"Ациламино" обозначает -N(H)C(O)C-Cалкил и подобные в соответствии с определением алкила выше.
"Арилокси" обозначает -O(арил), -O(замещенный арил), -O(гетероарил) или -O(замещенный гетероарил).
"Ариламино" обозначает -NH(арил), -NH(замещенный арил), -NH(гетероарил) или -NH(замещенный гетероарил) и подобные.
Когда применяют термин "алкенил" (или "алкенилен"), он относится к нормальным или разветвленным углеводородным цепям, содержащим указанное количество атомов углерода и, по меньшей мере, 1 и вплоть до 5 углерод-углерод двойных связей. Примеры включают этенил (или этенилен) и пропенил (или пропенилен).
Когда применяют термин "алкинил" (или "алкинилен"), он относится к нормальным или разветвленным углеводородным цепям, содержащим указанное количество атомов углерода и, по меньшей мере, 1 и вплоть до 5 углерод-углерод тройных связей. Примеры включают этинил (или этинилен) и пропинил (или пропинилен).
"Галогеналкил" относится к алкильной группе, которая замещена одним или более галогеновыми заместителями, подходяще от 1 до 6 заместителями. Галогеналкил включает трифторметил.
3
8
3
8
Когда применяют "циклоалкил", он относится к неароматическому, насыщенному, циклическому углеводородному кольцу, содержащему указанное количество атомов углерода. Так, например, термин "C-Cциклоалкил" относится к неароматическому углеводородному кольцу, содержащему от трех до восьми атомов углерода. Примеры "C-Cциклоалкильных" групп, пригодных в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил.
5
8
Термин "C-Cциклоалкенил" относится к неароматическому моноциклическому карбоциклическому кольцу, содержащему указанное количество атомов углерода и вплоть до 3 углерод-углерод двойных связей. "Циклоалкенил" включает в качестве примера циклопентенил и циклогексенил.
3
8
Когда применяют "C-Cгетероциклоалкил", он обозначает неароматическое гетероциклическое кольцо, содержащее указанное количество кольцевых атомов, причем насыщенное, или содержащее одну или более степеней ненасыщенности и содержащее одно или более замещений гетероатомом, независимо выбранным из O, S и N. Данное кольцо может быть необязательно конденсировано с одним или более другим "гетероциклическим" кольцом (кольцами) или циклоалкильным кольцом (кольцами). Примеры показаны в настоящем изобретении ниже.
5
10
5
7
5
6
6
8
12
9
10
Как применяют в настоящем изобретении, термин "арил", если не определено иначе, обозначает ароматическую углеводородную кольцевую систему. Кольцевая система может быть моноциклической или конденсированной полициклической (например, бициклической, трициклической и т.д.), замещенной или незамещенной. В различных вариантах осуществления, моноциклическое арильное кольцо представляет собой C-C, или C-C, или C-C, где данное количество атомов углерода относится к количеству атомов углерода, которые образуют кольцевую систему. C кольцевая система, т.е. фенильное кольцо, представляет собой подходящую арильную группу. В различных вариантах осуществления, полициклическое кольцо представляет собой бициклическую арильную группу, когда подходящие бициклические арильные группы представляют собой C-C или C-C. Нафтильное кольцо, которое содержит 10 атомов углерода, представляет собой подходящую полициклическую арильную группу. Подходящие заместители для арила, если не определено иначе, описаны ниже в определении "необязательно замещенный".
Как применяют в настоящем изобретении, термин "гетероарил", если не определено иначе, обозначает ароматическую кольцевую систему, содержащую углерод (углероды) и, по меньшей мере, один гетероатом. Гетероарил может быть моноциклическим или полициклическим, замещенным или незамещенным. Моноциклическая гетероарильная группа содержит 1-4 гетероатома в кольце, тогда как полициклический гетероарил может содержать в себе 1-10 гетероатомов. Полициклическое гетероарильное кольцо может содержать конденсированные, спиро или мостиковые кольцевые соединения, например, бициклический гетероарил представляет собой полициклический гетероарил. Бициклические гетероарильные кольца могут содержать 8-12 атомов. Моноциклические гетероарильные кольца могут содержать 5-8 атомов (углеродов и гетероатомов). Примеры гетероарильных групп включают бензофуран, бензотиофен, фуран, имидазол, индол, изотиазол, оксазол, пиразин, пиразол, пиридазин, пиридин, пиримидин, пиррол, хинолин, хиназолин, хиноксалин, тиазол и тиофен. Подходящие заместители для гетероарила, если не определено иначе, описаны ниже в определении "необязательно замещенный".
Настоящее изобретение относится к способам лечения или предотвращения аутоиммунных и воспалительных состояний и заболеваний, которые можно облегчать ингибированием EZH1 и/или EZH2 и, посредством этого, например, регулировать степень экспрессии генов-мишеней, активирующих и подавляющих метилирование, или регулировать активность сигнальных белков. Способ может включать введение человеку, например, нуждающемуся в лечении человеку, терапевтически эффективного количества агента, описанного в настоящем изобретении.
Таким образом, в одном аспекте обеспечивают применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли, которое ингибирует EZH2 и/или EZH1 (т.е. EZH2 и/или EZH1 ингибитор), для получения лекарственного средства для лечения воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками, или аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками.
В следующем аспекте обеспечивают способ лечения воспалительных иммунных заболеваний, опосредованных T-клетками, или аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками, у человека, включающий введение терапевтически эффективного количества EZH1 и/или EZH2 ингибитора.
Воспаление представляет собой группу сосудистых, клеточных и нейрологических реакций на травму. Воспаление может характеризовать как перемещение воспалительных клеток, таких как моноциты, нейтрофилы и гранулоциты, в тканях. Это обычно связано с ослабленным функционированием эндотелиального барьера и отечностью тканей.
Воспаление можно классифицировать или как острое или как хроническое. Острое воспаление представляет собой первичную реакцию тела на вредоносные стимулы и достигается усиленным перемещением плазмы и лейкоцитов из крови в поврежденные ткани. Каскад биохимических процессов распространяет и доводит до полного развития воспалительную реакцию, включая местную сосудистую систему, иммунную систему и различные клетки в поврежденной ткани. Длительное воспаление, известное как хроническое воспаление, приводит к растущему сдвигу типа клеток, которые присутствуют в месте воспаления, и характеризуется одновременным разрушением и заживанием ткани в результате воспалительного процесса.
При возникновении как часть иммунной реакции на инфекцию или как острая реакция на травму, воспаление может быть полезным и обычно является самоограничивающимся. Однако воспаление может быть вредным в некоторых условиях. Это включает создания избыточного воспаления в ответ на инфекционные агенты, которое может приводить к значительному повреждению органов и смерти (например, при сепсисе). Более того, хроническое воспаление обычно является вредным и является причиной различных хронических заболеваний, вызывая серьезное и необратимое повреждение тканей. В данном случае, иммунная реакция часто направлена против своих тканей (аутоиммунитет), хотя хронические реакции на чужеродные антигены могут также приводить к повреждению собственных тканей.
Следовательно, цель противовоспалительной терапии заключается в ослаблении данного воспаления, ингибировании аутоиммунитета при его наличии и создании возможности для протекания физиологического процесса или заживления и восстановления ткани.
Агенты можно применять для лечения воспаления любой ткани и органов тела, включая скелетно-мышечное воспаление, сосудистое воспаление, нервное воспаление, воспаление системы пищеварения, глазное воспаление, воспаление репродуктивной системы и другое воспаление, как приводится ниже.
Скелетно-мышечное воспаление относится к любому воспалительному состоянию скелетно-мышечной системы, в частности тем состояниям, затрагивающим суставы скелета, включая суставы рук, запястья, локтей, плеч, челюсти, позвоночника, шеи, бедра, колена, лодыжки и ног, и состояниям, затрагивающим ткани, соединяющие мышцы с костями, такие как жилы. Примеры скелетно-мышечного воспаления, которое можно лечить соединениями настоящего изобретения, включают артрит (включая, например, остеоартрит, псориатический артрит, анкилозирующий спондилоартрит, острый и хронический инфекционный артрит, артрит, связанный с подагрой и псевдоподагрой, и ювенильный идиопатический артрит), тендинит, синовит, тендовагинит, бурсит, фиброзит (фибромиалгию), эпикондилит, миозит и остеит (включая, например, болезнь Паджета, лобковый остит и фиброзную генерализованную остеодистрофию).
Глазное воспаление относится к воспалению любой структуры глаза, включая глазное веко. Примеры глазного воспаления, которое можно лечить в настоящем изобретении, включают блефарит, блефарохалазис, конъюнктивит, дакриоаденит, кератит, сухой кератоконъюнктивит (сухость глаз), склерит, трихиаз и увеит.
Примеры воспаления нервной системы, которое можно лечить в настоящем изобретении, включают энцефалит, синдром Гийена-Барре, менингит, нейромиотонию, нарколепсию, рассеянный склероз, миелит и шизофрению.
Примеры воспаления сосудистой или лимфатической системы, которое можно лечить в настоящем изобретении, включают атеросклероз, артрит, флебит, васкулит и лимфангит.
Примеры воспалительных заболеваний пищеварительной системы, которые можно лечить в настоящем изобретении, включают холангит, холецистит, энтерит, энтероколит, гастрит, гастроэнтерит, илеит и проктит.
Примеры воспалительных заболеваний репродуктивной системы, которое можно лечить в настоящем изобретении, включают цервицит, хориоамнионит, эндометрит, эпидидимит, омфалит, оофорит, орхит, сальпингит, тубоовариальный абсцесс, уретрит, вагинит, вульвит и вульводинию.
Агенты можно применять для лечения аутоиммунных заболеваний, имеющих воспалительный компонент. Данные заболевания включают острую рассеянную генерализованную алопецию, болезнь Бехчета, болезнь Шагаса, синдром хронической усталости, вегетативную дистонию, энцефаломиелит, болезнь Бехтерева, апластическую анемию, гнойный гидраденит, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный оофорит, целиакию, болезнь Крона, сахарный диабет типа 1, гигантоклеточный артериит, синдром Гудпасчера, болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, болезнь Хашимото, болезнь Геноха-Шенлейна, болезнь Кавасаки, красную волчанку, микроскопический колит, микроскопический полиартериит, смешанное заболевание соединительной ткани, рассеянный склероз, миастению, опсо-миоклональный синдром, неврит зрительного нерва, атрофическую форму аутоиммунного тиреоидита, пузырчатку, узелковый полиартериит, полимиалгию, синдром Рейтера, синдром Шегрена, височный артериит, гранулематоз Вегенера, тепловой вариант аутоиммунной гемолитической анемии, интерстициальный цистит, болезнь Лайма, очаговую склеродермию, саркоидоз, склеродермию, неспецифический язвенный колит и витилиго.
Агенты можно применять для лечения аллергических заболеваний, опосредованных T-клетками, включающих воспалительную компоненту. Данные заболевания включают контактная гиперчувствительность, контактный дерматит (включая контактный дерматит в результате контакта с сумахом укореняющимся), крапивницу, кожные аллергии, респираторные аллергии (сенную лихорадку, аллергический ринит) и глютен-чувствительную энтеропатию (глютеиновую болезнь).
Другие воспалительные заболевания, которое можно лечить в настоящем изобретении, включают, например, аппендицит, дерматит, дерматомиозит, эндокардит, фиброзит, гингивит, глоссит, гепатит, гнойный гидраденит, ирит, ларингит, мастит, миокардит, нефрит, отит, панкреатит, паротит, перикардит, перитонит, фарингит, плеврит, пневмонию, простатит, пиелонефрит и стоматит, отторжение трансплантата (включая органы, такие как почки, печень, сердце, легкие, поджелудочная железа (например, островковые клетки), костный мозг, роговица, тонкая кишка, аллотрансплантанты кожи, гомотрансплантанты кожи и ксенотрансплантанты клапанов сердца, сывороточная болезнь и реакция трансплантат против хозяина), острый панкреатит, хронический панкреатит, острый респираторный дистресс-синдром, синдром Сезари, врожденную гиперплазию надпочечников, негнойный тиреоидит, гиперкальциемию, связанную с раком, пузырчатку, буллезный герпетиформный дерматит, тяжелую эритему, эксфолиативный дерматит, себорейный дерматит, сезонный или круглогодичный аллергический ринит, бронхиальную астму, контактный дерматит, атопический дерматит, гиперчувствительность к препаратам, аллергический конъюнктивит, кератит, опоясывающий герпес с поражением глаза, ирит и иридоциклит, хориоретинит, неврит зрительного нерва, симптоматический саркоидоз, химиотерапии прогрессирующего и диссеминированного туберкулеза легких, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру у взрослых, вторичную тромбоцитопению у взрослых, приобретенную (аутоиммунную) гемолитическую анемию, лейкоз и лимфомы у взрослых, острый детский лейкоз, региональный энтерит, аутоиммунный васкулит, рассеянный склероз, хроническую обструктивную болезнь легких, отторжение трансплантата твердого органа, сепсис.
Предпочтительное лечение включает любое из видов лечения отторжения трансплантата, псориатического артрита, множественного склероза, диабета 1 типа, астмы, системной красной волчанки, хронического заболевания легких и воспаления, сопровождающегося инфекционными заболеваниями (например, сепсис).
Обычно, но не всегда, соли соединения для применения в настоящем изобретении представляют собой фармацевтически приемлемые соли. Соли, включенные в термин "фармацевтически приемлемые соли", относятся к нетоксичным солям соединений настоящего изобретения. Соли соединений настоящего изобретения могут включать соли присоединения кислоты. В общем, соли получают из фармацевтически приемлемых неорганических и органических кислот. Более конкретные примеры подходящих солей кислот включают малеиновую, хлористоводородную, бромистоводородную, серную, фосфорную, азотную, хлорную, фумаровую, уксусную, пропионовую, янтарную, гликолевую, муравьиную, молочную, олеиновую, винную, лимонную, пальмитиновую, малоновую, гидроксималеиновую, фенилуксусную, глутаминовую, бензойную, салициловую, фумаровую, толуолсульфоновую, метансульфоновую (мезилат), нафталин-2-сульфоновую, бензолсульфоновую, гидроксинафтойную, иодистоводородную, яблочную, тероевую, дубильную и подобные.
Другие типичные соли включают ацетатную, бензолсульфонатную, бензоатную, бикарбонатную, бисульфатную, битартратную, боратную, эдетат кальция, камзилатную, карбонатную, клавуланатную, цитратную, дигидрохлоридную, эдизилатную, эстолатную, эзилатную, фумаратную, глюцептатную, глюконатную, глутаматную, гликоллиларсанилатную, гексилрезорцинатную, гидробромидную, гидрохлоридную, гидроксинафтоатную, иодидную, изетионатную, лактатную, лактобионатную, лауратную, малатную, малеатную, манделатную, мезилатную, метилсульфатную, монокалиевую малеатную, мукатную, напсилатную, нитратную, оксалатную, памоатную (эмбонатную), пальмитатную, пантотенатную, фосфатную/ дифосфатную, полигалактуронатную, салицилатную, стеаратную, субацетатную, сукцинатную, сульфатную, таннатную, тартратную, теоклатную, тозилатную, триэтиодидную и валератную соли.
Другие соли, которые не являются фармацевтически приемлемыми, могут быть пригодными в получении соединений для применения в настоящем изобретении. Данные соли, такие как оксалатная или трифторацетатная, тогда как сами они не являются фармацевтически приемлемыми, могут быть пригодными для получения солей, пригодных в качестве промежуточных соединений в получении соединений настоящего изобретения и их фармацевтически приемлемых солей.
Фармацевтические композиции можно приспосабливать для введения подходящим путем, например, пероральным (включая буккальный или сублингвальный), ректальным, назальным, местным (включая буккальный, сублингвальный или трансдермальный), вагинальным или парентеральным (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный или внутрикожный) путем. Данные композиции можно получить любым известным способом в области фармацевтики, например, смешением соединения формулы (I) с носителем (носителями) или вспомогательным веществом (вспомогательными веществами).
Фармацевтические композиции, приспособленные для перорального введения, можно предоставлять в виде дискретных единиц, таких как капсулы или таблетки; порошки или гранулы; растворы или суспензии в водных или неводных жидкостях; пищевые пены или взбитые массы; или жидкие эмульсии масло в воде или жидкие эмульсии вода в масле.
Капсулы получают приготовлением порошковой смеси, как описано выше, и заполнением полученных желатиновых оболочек. Регуляторы сыпучести и смазочные вещества, такие как коллоидная двуокись кремния, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или твердый полиэтиленгликоль, можно добавлять к порошковой смеси перед стадией заполнения. Разрыхлитель или агент, улучшающий растворение, такой как агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия, можно также добавлять для увеличения доступности лекарственного средства при проглатывании капсулы.
Более того, при желании или необходимости, подходящие связующие, смазочные вещества, разрыхлители и красители можно также вводить в смесь. Подходящие связующие включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, сахаристые вещества из кукурузы, природные и синтетические камеди, такие как аравийская камедь, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, воски и подобные. Смазочные вещества, применяемые в данных лекарственных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и подобные. Разрыхлители включают, без ограничения, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и подобные. Таблетки формулируют, например, получением порошковой смеси, гранулированием или комкованием, добавлением смазывающего вещества и разрыхлителя и прессованием в таблетки. Порошковую смесь получают смешением соединения, подходящим образом измельченного, с разбавителем или основой, как описано выше, и необязательно, со связующим, таким как карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин или поливинилпирролидон, замедлителем растворения, таким как парафин, ускорителем поглощения, таким как четвертичная соль, и/или абсорбирующим агентом, таким как бентонит, каолин или фосфат дикальция. Порошковую смесь можно гранулировать формующей головкой для таблеток посредством добавления стеариновой кислоты, стеаратной соли, талька или минерального масла. Затем, смазанную смесь прессуют в таблетки. Соединения для применения в настоящем изобретении можно также комбинировать с свободнотекучим инертным носителем и прессовать в таблетки непосредственно без прохождения стадии гранулирования или комкования. Можно обеспечивать прозрачное или непрозрачное покрытие, состоящее из защитного слоя шеллака, покрытие из сахарного или полимерного материала и глянцевое покрытие из воска. Красители можно добавлять к данным покрытиям для идентификации различных единичных доз.
Пероральные жидкости, такие как раствор, сиропы и эликсиры, можно получить в виде единичной дозовой формы так, чтобы указанное количество содержало предварительно определенное количество соединения формулы (I). Сиропы можно получить растворением соединения в подходящем ароматизированном водном растворе, тогда как эликсиры получают при применении нетоксичной спиртовой среды. Суспензии можно получить диспергированием соединения в нетоксичной среде. Можно также добавлять агенты, способствующие растворению, и эмульгаторы, такие как этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленсорбитоловые эфиры, консерванты, ароматические добавки, такие как перечная мята, или природные подсластители или сахарин или другие искусственные подсластители, и подобные.
При необходимости, единичные фармацевтические композиции для перорального введения можно микроинкапсулировать. Состав можно также получить для продления или замедления высвобождения, например, нанесением покрытия или включением частиц материала в полимеры, воск или подобные.
Фармацевтические композиции, приспособленные для ректального применения, можно предоставлять в виде суппозиториев или в виде клизм.
Фармацевтические композиции, приспособленные для вагинального введения, можно предоставлять в виде пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спрея.
Фармацевтические составы, приспособленные для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные растворы для инъекции, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты и растворенные вещества, которые придают композиции изотоничность крови предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие агенты и загустители. Фармацевтические композиции можно предоставлять в контейнерах с одной дозой или множеством доз, например, запаянные ампулы и пробирки, и их можно хранить в лиофилизированном состоянием, требующим только добавления стерильного водного носителя, например, воды для инъекций, непосредственно перед применением. Приготовленные для немедленного приема растворы и суспензии для инъекции можно получить из стерильных порошков, гранул и таблеток.
Ясно, что в добавление к ингредиентам, упомянутым конкретно выше, фармацевтические композиции могут содержать другие агенты, общепринятые в данной области техники, принимая во внимание тип рассматриваемого состава, например, те, что подходят для перорального введения, могут содержать ароматизаторы.
Терапевтически эффективное количество соединения для применения в настоящем изобретении будет зависеть от ряда факторов, включая, например, возраст и вес предполагаемого реципиента, определенного заболевания, требующего лечения и его тяжести, свойств состава и пути введения, и будет, в конце концов, определяться на усмотрение специалиста, прописывающего лекарственное лечение. Однако эффективного количества соединения формулы (I) для лечения анемии будет обычно находиться в диапазоне 0,001-100 мг/кг веса тела реципиента в день, подходяще в диапазоне 0,01-10 мг/кг веса тела в день. Для 70 кг взрослого млекопитающего фактическое количество в день будет подходящим в диапазоне 7-700 мг, и данное количеством можно вводить в виде одной дозы в день или в виде ряда (такого как две, три, четыре, пять или шесть) поддоз в день так, чтобы суммарная дневная доза была такой же. Эффективное количество соли или сольвата и т.д. можно определить как часть эффективного количества соединения формулы (I) per se. Предусмотрено, что аналогичные дозы могли бы подходить для лечения других заболеваний, которые указаны выше.
Эксперименты
Химические данные
Соединения настоящего изобретения автоматически называли компьютерной программой, например, ISISdraw, ChemDraw или eLNB. Специалисту в данной области техники ясно, что могут иметься небольшие отличия химических названий, сгенерированных различным программным обеспечением. Соединения настоящего изобретения можно получить рядом способов, включая стандартную химию. Любая ранее определенная переменная будет продолжать иметь ранее определенное значение, если не указано иначе. Типичные общие способы получения описаны ниже, и далее конкретные соединения настоящего изобретения, как получено, приведены в примерах.
Соединения общей формулы (I) можно получить способами, известными в данной области органического синтеза, как описано в части следующих схем получения. На всех схемах, описанных ниже, ясно, что защитные группы для чувствительных или реакционноспособных групп, применяют при необходимости согласно общим принципам химии. С защитными группами манипулируют согласно стандартным способам органического синтеза (T. W. Green и P. G. M. Wuts (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons). Данные группы удаляют на удобной стадии получения соединения, применяя способы, которые являются известными специалисту в данной области техники. Подбор способов, а также условий и порядка проведения реакций должны согласовываться с получением соединений формулы (I). Специалисту в данной области техники известно, присутствует ли в соединениях формулы (I) стереоцентр. Соответственно, настоящее изобретение включает оба возможных стереоизомера и включает не только рацемические соединения, но также отдельные энантиомеры. Также включенными в настоящем изобретении являются полностью или частично дейтерированные формы соединений настоящего изобретения. Когда соединение требуется в виде отдельного энантиомера, его можно получить стереоспецифическим синтезом или разделением конечного продукта или любого подходящего промежуточного соединения. Разделение конечного продукта, промежуточного соединения или исходного соединения можно осуществлять подходящим способом, известным в данной области техники. Смотри, например, Stereochemistry of Organic Compounds E. L. Eliel, S. H. Wilen, and L. N. Mander (Wiley-lnterscience, 1994).
ПРИМЕРЫ
Общие экспериментальные способы
Следующие сокращения применяют во всех экспериментах, и они имеют следующие значения:
BINAP
2,2ʹ-бис(дифенилфосфино)-1,1ʹ-бинафтил
ca.
приблизительно
CDCl<sub>3</sub>-d
хлороформ-d
CD<sub>3</sub>OD-d<sub>4</sub>
метанол-d<sub>4</sub>
Cs<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>
карбонат цезия
CHCl<sub>3</sub>
хлороформ
ACN
ацетонитрил
CH<sub>3</sub>CN
ацетонитрил
Celite
зарегистрированный товарный знак Celite Corp. брэнда диатомитовой земли
DBU
1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен
DCE
дихлорэтан
DCM
хлористый метилен
DME
1,2-диметоксиэтан
DMF
N,N-диметилформамид
DIEA
диизопропилэтиламин
DMSO-d<sub>6</sub>
диметилсульфоксид-d<sub>6</sub>
EtOAc
этилацетат
EDC
гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида
<sup>1</sup>H NМR
протонный ядерный магнитный резонанс
HCl
хлористоводородная кислота
HOAT
1-гидрокси-7-азабензотриазол
HPLC
высокоэффективная жидкостная хроматография
IPA
2-пропанол
K<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>
карбонат калия
KOH
гидроксид калия
LC/MS
жидкостная хроматография/масс-спектроскопия
MgSO<sub>4</sub>
сульфат магния
MeOH
метанол
MTBE
метил трет-бутиловый эфир
MS
масс-спектрометрия
NaOH
гидроксид натрия
Na<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>
сульфат натрия
NH<sub>4</sub>OH
гидроксид аммония
NMM
4-метилморфолин
NMP
N-метил-2-пирролидон
Pd/C
палладий (10% по весу) на угле
PdCl<sub>2</sub>(dppf)-CH<sub>2</sub>Cl<sub>2</sub>
дихлорметановый комплекс дихлорида 1,1ʹ-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(II)
Pd(Ph<sub>3</sub>P)<sub>4</sub>
тетракис(трифенилфосфин)палладий(0)
SOCl2
тионилхлорид
SPhos
2-дициклогексилфосфино-2ʹ,6ʹ-диметоксибифенил
TFA
трифторуксусная кислота
THF
тетрагидрофуран
TLC
тонкослойная хроматография
Следующее руководство применяют ко всем экспериментальным способам, описанным в настоящем изобретении. Все реакции проводили при положительном давлении азота, применяя высушенную в сушильном шкафу стеклянную посуду, если не указано иначе. Указанные температуры являются внешними (т.е. температурами бани) и приблизительными. Чувствительные к воздуху и влаге жидкости переносили через шприц. Реагенты применяли в полученном виде. Применяемые растворители представляли собой растворители, перечисленные продавцами как "безводные". Молярности, приведенные для реагентов в растворах, являются приблизительными, и их применяли без предварительного титрования относительно соответствующего стандарта. Все реакции перемешивали магнитным мешальником, если не указано иначе. Нагревание осуществляли, применяя лабораторные нагревательные бани, содержащие силиконовое масло, если не указано иначе. Реакции, проводимые при микроволновом облучении (0-400 Вт при 2,45 ГГц), осуществляли применяя Biotage Initiator™ 2,0 прибор с Biotage СВЧ EXP пробирками (0,2-20 мл) и септой и крышками. Применяемый уровень облучения (т.е. высокий, нормальный, низкий), основанный на растворителе и ионном заряде, основывался на спецификации продавца. Охлаждение до температуры ниже -70°C осуществляли, применяя сухой лед/ацетон или сухой лед/2-пропанол. Сульфат магния и сульфат натрия, применяемые в качестве осушителей, были безводными, и их применяли взаимозаменяемо. Растворители, описанные как удаляемые "в вакууме" или "при пониженном давлении", удаляли на роторном испарителе.
Препаративную хроматографию на силикагеле с нормальными фазами осуществляли, применяя или Teledyne ISCO CombiFlash Companion прибор с RediSep или ISCO Gold картриджами с силикагелем (4 г - 330 г), или Analogix IF280 прибор SF25 с картриджами с силикагелем (4 г - 300 г), или Biotage SP1 прибор с HP картриджами с силикагелем (10 г - 100 г). Очистку обращено-фазной ВЭЖХ осуществляли, применяя YMC-pack колонку (ODS-A 75×30 мм) в качестве твердой фазы, если не указано иначе. Подвижную фазу 25 мл/мин A (ацетонитрил-0,1%TFA): B (вода-0,1% TFA), 10-80% градиент A (10 мин) применяли с УФ-детекцией при 214 нМ, если не указано иначе.
PE Sciex API 150 одноквадрупольный масс-спектрометр (PE Sciex, Thornhill, Ontario, Canada) эксплуатировали, применяя электроспрей ионизацию в режиме детектирования положительных ионов. Распыляющий газ получали из генератора чистого воздуха (Balston Inc., Haverhill, MA, USA) и доставляли при 65 ф/кв.дюйм, и «газовая завеса» представляла собой азот высокой чистоты, полученный из сосуда Дьюара для жидкого азота при 50 ф/кв.дюйм. Напряжение, применяемое на электроспрей игле, составляло 4,8 кВ. Отверстие устанавливали на 25 В, и масс-спектрометр сканировали при скорости 0,5 скана/секунда, применяя шаг массы 0,2 аем и собирая профильные данные.
2
3
Способ A LCMS. Образцы вводили в масс-спектрометр, применяя CTC PAL автоматический дозатор (LEAP Technologies, Carrboro, NC), снабженный hamilton 10 мкл шприцом, который осуществлял введение в Valco 10-портовый впускной клапан. ВЭЖХ насос представлял собой Shimadzu LC-10ADvp (Shimadzu Scientific Instruments, Columbia, MD), функционирующий при 0,3 мл/мин и линейном градиенте 4,5% A - 90% B в течение 3,2 минут с 0,4 минутной выдержкой. Подвижная фаза состояла из 100% (HO 0,02% TFA) в емкости A и 100% (CHCN 0,018% TFA) в емкости B. Стационарная фаза представляет собой Aquasil (C18), и размеры колонки были 1 мм × 40 мм. Обнаружение осуществляли в УФ при 214 нм, испарительное рассеяние света (ELSD) и MS.
2
3
Способ B, LCMS. Альтернативно, применяли Agilent 1100 аналитическую ВЭЖХ систему с LC/MS, и она функционировала при 1 мл/мин и линейном градиенте 5% A - 100% B в течение 2,2 минут с 0,4 минутной выдержкой. Подвижная фаза состояла из 100% (HO 0,02% TFA) в емкости A и 100% (CHCN 0,018% TFA) в емкости B. Стационарная фаза представляла собой Zobax (C8) с 3,5 мкм размером частиц, и размеры колонки были 2,1 мм ×50 мм. Обнаружение осуществляли в УФ при 214 нм, испарительное рассеяние света (ELSD) и MS.
3
Способ C, LCMS. Альтернативно, применяли MDSSCIEX API 2000, снабженный капиллярной колонкой (50×4,6 мм, 5 мкм). ВЭЖХ осуществляли на Agilent-1200 серии UPLC системе, снабженной колонкой Zorbax SB-C18 (50×4,6 мм, 1,8 мкм), элюируя CHCN: аммонийацетатным буфером. Реакции осуществляли в СВЧ-печи (CEM, Discover).
1
H-NMR спектры регистрировали при 400 МГц, применяя Bruker AVANCE 400 МГц прибор, с ACD Spect manager v. 10, применяемой для переработки. Указанные мультиплетности представляют собой: s=синглет, d=дублет, t=триплет, q=квартет, quint= квинтет, sxt= секстет, m=мультиплет, dd = дублет дублетов, dt=дублет триплетов и т.д., и br показывает уширенный сигнал. Все ЯМР регистрировали в DMSO, если не указано иначе.
3
3
2
Аналитическая ВЭЖХ: продукты анализировали Agilent 1100 аналитической хроматографической системой с 4,5×75 мм Zorbax XDB-C18 колонкой (3,5 мкм) при 2 мл/мин с 4 минутным градиентом от 5% CHCN (0,1% муравьиная кислота) до 95% CHCN (0,1% муравьиная кислота) в HO (0,1% муравьиная кислота) и 1 минутной выдержкой.
Соединения формулы (I) можно получить согласно схеме 1 или аналогичными способами. Метил 6-бром-1H-индол-4-карбоксилат (I) алкилировали алкилгалогенидом в присутствии основания (например, гидрида натрия) или спиртом в присутствии хлорида (цианометил)триметилфосфония и основания (например, гидрида натрия), получая соединения формулы II. Омыление эфира водным основанием давало соединения формулы III, которые конденсировали с различными аминометилпиридонами IV, применяя стандартные конденсирующие реагенты пептидной химии (например, EDC, HOAT, NMM), получая соединения формулы V. Катализируемое палладием кросс-сочетание различных бороновых кислот (или боронатов) с V давало соединения формулы VI.
Схема 1
Следующие примеры приведены только с иллюстративной целью, и не предполагается, что они ограничивают объем настоящего изобретения. Соединения называли, применяя ACD Name программное обеспечение [Advanced Chemistry Development, Inc., (ACD/Labs), Toronto, Canada. (http://www.acdlabs.com/products/name lab/)].
Пример 1
6-Бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
1a) Метил 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат
4
4
К охлажденному (0°C) раствору твердого метил 6-бром-1H-индол-4-карбоксилата (1,0 г, 3,94 ммоль) в N,N-диметилформамиде (25 мл) добавляли гидрид натрия (0,173 г, 4,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 минут, после чего добавляли 2-бромпропан (0,554 мл, 5,90 ммоль). Затем, реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и выдерживали в течение ночи. LCMS показало приблизительно 25% оставшегося исходного вещества. Реакционную смесь грели при 45°C в течение 4 часов, но дальнейшего превращения не наблюдали. Реакционную колбу помещали обратно в баню со льдом и перемешивали в течение 15 минут. Затем, добавляли избыток NaH (60%), перемешивали в течение 10 минут, и затем добавляли 2-бромпропан (избыток). Баню со льдом удаляли, и реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. Приблизительно половину реакционного объема удаляли в вакууме и выливали в насыщенный NHCl (200 мл). Продукт экстрагировали эфиром (×2), и объединенные органические фракции промывали соляным раствором, сушили (MgSO) и концентрировали. Очистка колоночной хроматографией (80 г Isco колонка с силикагелем; градиент B: 5-25%, A: гексан, B: этилацетат) давала метил 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (0,53 г, 1,718 ммоль, 43,7% выход).
1b) 6-Бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
4
К раствору метил 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилата (0,52 г, 1,756 ммоль) в метаноле (15 мл) и тетрагидрофуране (3 мл) добавляли 3 M NaOH (1,756 мл, 5,27 ммоль) через шприц по каплям (в течение 2 минут). Раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 2 часов, после чего LCMS показало только 12% превращение в продукт. Затем, добавляли 1,5 мл 3 M NaOH, и раствор выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. LCMS показало полное превращение в продукт. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток растворяли в воде и медленно подкисляли 1 M HCl (выпадает осадок). Экстрагировали EtOAc (×2), органические фракции объединяли и сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (0,50 г, 1,737 ммоль, 99% выход) в виде белого твердого остатка.
1c) 6-Бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
6
К смеси 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновой кислоты (0,71 г, 2,52 ммоль), 3-(аминометил)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинона (0,575 г, 3,77 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазола (0,514 г, 3,77 ммоль) и EDC (0,724 г, 3,77 ммоль) в диметилсульфоксиде (20 мл) быстро добавляли через шприц N-метилморфолин (1,107 мл, 10,07 ммоль). Твердый остаток медленно растворялся, и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь медленно выливали в смесь льда и воды (300 мл), перемешивали в течение 10 минут, затем оставляли отстояться в течение 10 минут. Твердый остаток фильтровали и промывали водой (100 мл), сушили на воздухе в течение 15 минут, затем сушили в вакуумной печи при 45°C в течение 4 часов, получая 6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид (0,82 г, 1,871 ммоль, 74,4% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,39-1,46 (м, 6H), 2,09-2,15 (м, 3H), 2,21 (с, 3H), 4,32 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,82 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 5,88 (с, 1H), 6,86 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,51 (д, J=1,77 Гц, 1H), 7,62 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,92 (с, 1H), 8,31 (т, J=4,93 Гц, 1H), 11,55 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H] 416,0.
Пример 2
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
6
1
+
Смесь 6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамида (0,10 г, 0,240 ммоль), 1-метил-4-[5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридинил]пиперазина (0,087 г, 0,288 ммоль) и фосфата калия (трехосновного) (0,153 г, 0,721 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) и воде (0,5 мл) дегазировали N в течение 10 минут, после чего добавляли PdCl(dppf)-CHCl (0,029 г, 0,036 ммоль). Реакционную смесь герметично закрывали и грели при 100°C в течение 2 часов. Затем, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и оставляли отстояться в течение ночи, после чего ее разбавляли EtOAc, фильтровали через целит, промывали EtOAc и концентрировали в вакууме. Очистка остатка колоночной хроматографией (12 г Isco GOLD колонка с силикагелем; градиент B: 5-90%; A: дихлорметан, B: 10% хлороформ, содержащий 2 M аммиак в метаноле) давала N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид (94 мг, 0,180 ммоль, 74,8% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,46 (д, J=6,57 Гц, 6H), 2,12 (с, 3H), 2,17-2,28 (м, 6H), 2,38-2,46 (м, 4H), 3,49-3,57 (м, 4H), 4,37 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,86-4,98 (м, 1H), 5,88 (с, 1H), 6,87 (д, J=3,03 Гц, 1H), 6,93 (д, J=8,84 Гц, 1H), 7,58 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,65 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,87 (с, 1H), 7,98 (дд, J=8,97, 2,65 Гц, 1H), 8,28 (т, J=5,05 Гц, 1H), 8,57 (д, J=2,27 Гц, 1H), 11,55 (с, 1H). MS(ES) [M+H] 513,3.
Примеры 3 - xx (см. в конце описания) получали способами, описанными выше для примеров 1 и 2, или их стандартными модификациями, исходя из требуемых 4-аминометилпиридонов и 6-замещенных-4-индолeкарбоксилатов. Стандартные модификации включают, но не ограничиваются, обмен между собой бромидного и боронатного партнеров по конденсации для реакции конденсации по Судзуки или применение одно- или многостадийной реакции, проводящейся в одном реакционном сосуде без выделения промежуточных соединений, в которой боронат образуется in situ.
Пример 264
N-((4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид
2
3
2
2
4
6
1
К перемешиваемому раствору 6-бром-N-((1,2-дигидро-4,6-диметил-2-оксопиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамида (2 г, 4,65 ммоль) в DMF (100 мл) добавляли 1-метил-4-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин (1,55 г, 5,12 ммоль), с последующим добавлением раствора карбоната натрия (1,23 г, 11,62 ммоль) в воде (10 мл), и содержимое дегазировали аргоном в течение 30 минут. После этого, добавляли PdCl(PPh) (326 мг, 0,464 ммоль), и содержимое снова дегазировали аргоном в течение 10 минут. Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали, получая неочищенный продукт (2,8 г). Неочищенное соединение очищали колоночной хроматографией на силикагеле (100-200 меш, элюент: 0-10% MeOH: DCM), и полученный продукт дополнительно растирали с диэтиловым эфиром (100 мл), получая заявленное в заголовке соединение в виде грязно-белого твердого остатка (1,2 г, 50%). H ЯМР (DMSO-d,400 МГц): δ 1,493 (д, J=6,4 Гц, 6H), 2,092 (с, 3H), 2,286 (с, 3H), 2,409 (с, 3H), 2,424 (с, 3H), 2,632 (с, 4H), 3,621 (с, 4H), 4,603-4,685 (м, 3H), 5,880 (с, 1H), 6,606 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,016 (с, 1H), 7,261 (с, 1H), 7,433 (с, 1H), 7,675-7,704 (дд, J=9 Гц, 2,4 Гц, 1H), 8,425 (д, J=2,0 Гц, 1H), 11,699 (шир.с, 1H); LCMS (ES+): 525,23 [М-Н].
Пример 265
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
4
6
1
6-Бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид (1,9 г, 4,42 ммоль), 1-[5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридинил]пиперазин (1,277 г, 4,42 ммоль) и фосфат калия (трехосновный) (2,81 г, 13,25 ммоль) помещали в 150 мл сосуд высокого давления, с последующим добавлением 1,4-диоксана (40 мл) и воды (10,00 мл). Суспензию перемешивали и дегазировали в атмосфере N в течение 15 минут (эмульсия). Затем добавляли к PdCl(dppf)-CHCl аддукту (0,361 г, 0,442 ммоль) и дегазировали в течение 2 минут. Реакционную колбу герметично закрывали, и содержимое грели при кипячении с обратным холодильником в течение 2 часов. Суспензию фильтровали, и диоксан удаляли в вакууме. Полученное в результате масло распределяли между 300 мл этилацетата и 100 мл воды, и слои разделяли. Добавляли обесцвечивающий уголь, и через 10 минут органический слой фильтровали через тонкий слой силикагеля. Добавляли 300 мл 1 M HCl и нейтрализовали NaOH (до pH ~9). Содержимое экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, промывали соляным раствором, сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Продукт суспендировали в диэтиловом эфире и фильтровали. Заявленное в заголовке соединение выделяли в виде желтого твердого остатка (950 мг, 41% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,49 (шир.с, 1H), 8,52 (д, J=2,27 Гц, 1H), 8,15 (т, J=5,05 Гц, 1H), 7,95 (дд, J=2,53, 8,84 Гц, 1H), 7,73 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,29 (с, 1H), 7,19 (д, J=1,52 Гц, 1H), 6,93 (д, J=9,09 Гц, 1H), 5,87 (с, 1H), 4,85 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 4,35 (д, J=5,05 Гц, 2H), 3,49-3,63 (м, 4H), 2,81-3,02 (м, 4H), 2,24 (с, 3H), 2,16 (с, 3H), 2,11 (с, 3H), 1,43 (д, J=6,57 Гц, 6H); LCMS = 513,3 (MH+).
Пример 266
6-Бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
1
6
В реакционную колбу добавляли последовательно 6-бром-1-(втор-бутил)-3-метил-1H-индол-4-карбоновую кислоту (1,33 г, 4,29 ммоль), 3-(аминометил)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон (1,213 г, 6,43 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (0,875 г, 6,43 ммоль), EDC (1,233 г, 6,43 ммоль), с последующим добавлением DMSO (30 мл, через шприц), и затем N-метилморфолина (1,886 мл, 17,15 ммоль, через шприц). Содержимое герметично закрывали и перемешивали при комнатной температуре, и твердый остаток постепенно растворялся. Содержимое перемешивали при комнатной температуре в течение 32 часов и, затем медленно разбавляли в 220 мл смеси воды и льда при перемешивании. Содержимое перемешивали в течение 10 минут, и затем оставляли на дополнительные 10 минут. Содержимое фильтровали, и отфильтрованный остаток промывали дополнительным количеством воды (50 мл). Затем твердый остаток сушили на воздухе в течение 10 минут, и затем в вакуумной печи при 50°C в течение в сумме 23 часов. Продукт собирали в количестве 1,75 г (87%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,69 (т, J=7,33 Гц, 3H), 1,36 (д, J=6,57 Гц, 3H), 1,77 (дкв., J=10,29, 7,09 Гц, 2H), 2,12 (д, J=9,09 Гц, 6H), 2,21 (с, 3H), 4,30 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,43-4,56 (м, 1H), 5,86 (с, 1H), 6,99 (д, J=1,52 Гц, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,77 (д, J=1,77 Гц, 1H), 8,25 (т, J=4,93 Гц, 1H), 11,49 (шир.с, 1H); LCMS = 444,1 (MH+).
Примеры 267 и 268
(S)-6-Бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (пример 267) и (R)-6-бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (пример 268)
1
6-Бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (рацемическая смесь, 1,9 г) разделяли хиральной ВЭЖХ (колонка: Chiralpak AD-H, 5 микрон, 50 мм ×250 мм, УФ детекция: 240 нМ, скорость потока: 100 мл/мин, T= 20ºC, элюент: 60:40:0,1 н-гептан:этанол:изопропиламин (изократическая)). Для каждого прогона 100 мг рацемического соединения растворяли в 30 объемах (3,0 мл) теплого этанола с добавлением нескольких капель изопропиламина. В сумме осуществляли 19 прогонов. Полное разделение пиков наблюдали для каждого прогона. Изомер, который элюировался через 8,3-10,1 минуты, собирали (с последующим концентрированием) в виде белого твердого остатка, который сушили при 50°C (<5 мм Hg), получая 901 мг, и определяли, что он является S изомером* (пример 267; хиральная ВЭЖХ: >99,5% чистота (R изомер не обнаруживали). Изомер, который элюировался через 10,8-13,0 минут, собирали в виде белого твердого остатка, который сушили при 50°C (<5 мм Hg), получая 865 мг, и определяли, что он является R изомером* (пример 268; хиральная ВЭЖХ: 99,2% чистота; 0,4% обнаружение S изомера). H ЯМР и LCMS соответствовали исходному рацемату. * Абсолютную конфигурацию определяли независимым получением каждого энантиомера из соответствующих имеющихся в продаже спиртов реакцией Мицунобу. Приписываемая стереохимия также соответствовала анализу вибрационным круговым дихроизмом (VCD).
Пример 269
1-(втор-Бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
6
1
+
В реакционную пробирку добавляли последовательно 6-бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (0,15 г, 0,338 ммоль), 1-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин (0,127 г, 0,439 ммоль) и фосфат калия (трехосновный) (0,287 г, 1,350 ммоль), с последующим добавлением 1,4-диоксана (3 мл) и воды (0,75 мл). Суспензию перемешивали в атмосфере N, дегазируя в течение 10 минут и, затем добавляли PdCl(dppf)-CHCl аддукт (0,028 г, 0,034 ммоль). Реакционную пробирку герметично закрывали, помещали в термоблок при 95°C и перемешивали в течение 1,5 часов. Содержимое удаляли из термоблока и охлаждали до комнатной температуры. Водный слой удаляли со дна реакционной пробирки пипеткой. Реакционную смесь разбавляли в EtOAc (20 мл), с последующим добавлением 0,2 г каждого из Thiol-3 silicycle смолы и силикагеля. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток сушили при высоком вакууме в течение 1 часа. Содержимое очищали хроматографией на силикагеле (сухая загрузка, элюент: A: дихлорметан, B: 10% (2M аммиак в метаноле) в хлороформе, градиент B: 8-95%). Полученный твердый остаток получали упариванием TBME и сушили в вакуумной печи при 45°C в течение 18 часов. Продукт собирали в количестве 129 мг (70%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,73 (т, J=7,33 Гц, 3H), 1,40 (д, J=6,57 Гц, 3H), 1,80 (дкв., J=10,07, 7,08 Гц, 2H), 2,11 (с, 3H), 2,14-2,19 (м, 3H), 2,24 (с, 3H), 2,76-2,85 (м, 4H), 3,41-3,49 (м, 4H), 4,35 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,54-4,67 (м, 1H), 5,87 (с, 1H), 6,88 (д, J=8,84 Гц, 1H), 7,17 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H), 7,73 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,91 (дд, J=8,84, 2,53 Гц, 1H), 8,16 (т, J=5,05 Гц, 1H), 8,50 (д, J=2,53 Гц, 1H), 11,48 (шир.с, 1H); LCMS MH =527,3.
Пример 270
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1S)-1-метилпропил]-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
4
2
4
6
1
+
В 30 мл микроволновую пробирку добавляли (S)-6-бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (100 мг, 0,225 ммоль), 1-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин (85 мг, 0,293 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (DME) (3 мл), воду (1,000 мл) и карбонат натрия (0,338 мл, 0,675 ммоль), и смесь дегазировали в течение 5 минут барботированием азота. Добавляли PdCl(dppf)-CHCl аддукт (14,70 мг, 0,018 ммоль), и пробирку герметично закрывали. Смесь облучали (микроволны) при 140°C в течение 10 минут. Смесь концентрировали, и остаток растворяли в MeOH и фильтровали. Фильтрат очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ (элюент: 25% ACN/HO, 0,1% NHOH - 60% ACN/HO, 0,1% NHOH), получая 91 мг продукта в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,70-0,78 (м, 3H), 1,37-1,44 (м, 3H), 1,75-1,87 (м, 2H), 2,11 (с, 3H), 2,16 (с, 3H), 2,22-2,27 (м, 3H), 2,77-2,85 (м, 4H), 3,41-3,49 (м, 4H), 4,35 (д, J=5,31 Гц, 2H), 4,56-4,68 (м, 1H), 5,87 (с, 1H), 6,88 (д, J=8,84 Гц, 1H), 7,17 (д, J=1,52 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H), 7,73 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,91 (дд, J=8,84, 2,53 Гц, 1H), 8,16 (т, J=5,05 Гц, 1H), 8,50 (д, J=2,53 Гц, 1H); LCMS: 527,8 (MH).
Пример 271
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1R)-1-метилпропил]-6-[6-(1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
4
2
4
6
1
В 30 мл микроволновую пробирку добавляли (R)-6-бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (100 мг, 0,225 ммоль), 1-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин (85 мг, 0,293 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (DME) (3 мл), воду (1000 мл) и карбонат натрия (0,338 мл, 0,675 ммоль), и смесь дегазировали в течение 5 минут барботированием азотом. Добавляли PdCl(dppf)-CHCl аддукт (14,70 мг, 0,018 ммоль), и пробирку герметично закрывали. Смесь облучали (микроволны) при 140°C в течение 10 минут. Смесь концентрировали, и остаток растворяли в MeOH и фильтровали. Фильтрат очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ (элюент: 25% ACN/HO, 0,1% NHOH - 60% ACN/HO, 0,1% NHOH), получая 90 мг продукта в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,73 (м, 3H), 1,41 (д, J=6,57 Гц, 3H), 1,81 (тд, J=7,14, 2,91 Гц, 2H), 2,11 (с, 3H), 2,15-2,20 (м, 3H), 2,24 (с, 3H), 2,77-2,83 (м, 4H), 3,41-3,49 (м, 4H), 4,35 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,54-4,68 (м, 1H), 5,87 (с, 1H), 6,88 (д, J=8,84 Гц, 1H), 7,17 (д, J=1,52 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H), 7,73 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,91 (дд, J=8,84, 2,53 Гц, 1H), 8,16 (т, J=5,05 Гц, 1H), 8,50 (д, J=2,27 Гц, 1H); LCMS: 527,7 (MH+).
Пример 272
1-(втор-Бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(3-((диметиламино)метил)фенил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
6
1
В реакционную пробирку последовательно добавляли 6-бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (0,15 г, 0,338 ммоль), гидрохлорид N,N-диметил-1-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метанамина (0,131 г, 0,439 ммоль) и фосфат калия (трехосновный) (0,287 г, 1,350 ммоль), с последующим добавлением 1,4-диоксана (4 мл) и воды (0,75 мл). Суспензию перемешивали в атмосфере N, дегазируя в течение 10 минут, и затем добавляли PdCl(dppf)-CHCl аддукт (0,028 г, 0,034 ммоль). Реакционную пробирку герметично закрывали, помещали в термоблок при 95°C и перемешивали в течение 1,5 часов. Содержимое удаляли из термоблока и охлаждали до комнатной температуры. Водный слой удаляли со дна реакционной пробирки пипеткой. Реакционную смесь разбавляли в EtOAc (20 мл) с последующим добавлением 0,2 г каждого из Thiol-3 silicycle смолы и силикагеля. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток сушили при высоком вакууме в течение 1 часа. Содержимое очищали хроматографией на силикагеле (сухая загрузка, элюент: A: дихлорметан, B: 10% (2M аммиак в метаноле) в хлороформе; градиент B: 8-95%). Полученный твердый остаток получали упариванием TBME, получая пену, и сушили в вакуумной печи при 45°C в течение 18 часов. Продукт собирали в количестве 116 мг (65%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,73 (т, J=7,33 Гц, 3H), 1,41 (д, J=6,57 Гц, 3H), 1,82 (дкв., J=9,85, 7,16 Гц, 2H), 2,08-2,12 (м, 3H), 2,15-2,21 (м, 9H), 2,24 (с, 3H), 3,44-3,49 (м, 2H), 4,35 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,57-4,70 (м, 1H), 5,86 (с, 1H), 7,19-7,26 (м, 2H), 7,30 (с, 1H), 7,36-7,44 (м, 1H), 7,58-7,65 (м, 2H), 7,76 (д, J=1,26 Гц,H), 8,21 (т, J=5,05 Гц, 1H), 11,47 (с, 1H); LCMS M+H=499,3.
Пример 273
6-{3-[(Диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1S)-1-метилпропил]-1H-индол-4-карбоксамид
3
6
1
(S)-6-Бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (100 мг, 0,23 ммоль), N,N-диметил-1-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метанамин·HCl (100 мг, 0,34 ммоль) и тетракиспалладий (26 мг, 0,023 ммоль) в DMF/вода (3 мл:1 мл) перемешивали в течение 10 минут в атмосфере азота. Добавляли карбонат цезия (220 мг, 0,68 ммоль), и нерастворимую смесь облучали (микроволны) при 150°C в течение 15 минут. Содержимое упаривали, растворяли в DCM/MeOH (1:1), и наносили на силикагель и очищали, применяя хроматографию на силикагеле (элюент: DCM/MeOH/NH4OH, градиент 0-80:20:2 в DCM). Выделенный продукт вначале обрабатывали EtOAc вместе с некоторым количеством гексана. Затем, продукт растворяли в MeOH и очищали обращено-фазовой ВЭЖХ (30×100 Varian Polaris C18 колонка, элюент: 10-80% градиент MeCN в воде с 0,1% TFA). Фракции с продуктом объединяли, большую часть растворителя упаривали и добавляли насыщенный раствор NaHCO. Выпавший осадок фильтровали, сушили на воздухе в течение 15 минут, и сушили в вакуумном шкафу в течение ночи. Твердый продукт собирали в количестве 87 мг (75%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,38 (шир.с, 1H), 8,23 (т, J=4,67 Гц, 1H), 7,77 (д, J=1,01 Гц, 1H), 7,60-7,64 (м, 2H), 7,40 (т, J=7,58 Гц, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,20-7,26 (м, 2H), 5,87 (с, 1H), 4,59-4,68 (м, 1H), 4,36 (с, 1H), 4,35 (с, 1H), 3,46 (с, 2H), 2,24 (с, 3H), 2,18 (с, 9H), 2,11 (с, 3H), 1,76-1,88 (м, 2H), 1,41 (д, J=6,57 Гц, 3H), 0,74 (т, J=7,33 Гц, 3H); LCMS: 499,4 (MH+).
Пример 274
6-{3-[(Диметиламино)метил]фенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-[(1R)-1-метилпропил]-1H-индол-4-карбоксамид
4
3
6
1
(R)-6-Бром-1-(втор-бутил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (100 мг, 0,23 ммоль), N,N-диметил-1-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метанамин·HCl (100 мг, 0,34 ммоль) и тетракиспалладий (26 мг, 0,023 ммоль) в DMF/вода (3 мл :1 мл) перемешивали в течение 10 минут в атмосфере азота. Добавляли карбонат цезия (220 мг, 0,68 ммоль), и нерастворимую смесь облучали (микроволны) при 150°C в течение 15 минут. Содержимое упаривали, растворяли в DCM/MeOH (1:1) и наносили на силикагель и очищали, применяя хроматографию на силикагеле (элюент: DCM/MeOH/NHOH, градиент 0-80:20:2 в DCM). Выделенный продукт вначале обрабатывали EtOAc вместе с некоторым количеством гексана. Затем, продукт растворяли в MeOH и очищали обращено-фазовой ВЭЖХ (30×100 Varian Polaris C18 колонка, элюент: 10-80% градиент MeCN в воде с 0,1% TFA). Фракции с продуктом объединяли, большую часть растворителя упаривали и добавляли насыщенный раствор NaHCO. Осадок, который выпадал, фильтровали, сушили на воздухе в течение 15 минут, и сушили в вакуумном шкафу в течение ночи. Твердый продукт собирали в количестве 85 мг (75%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,48 (с, 1H), 8,21 (т, J=5,05 Гц, 1H), 7,77 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,60-7,66 (м, 2H), 7,41 (т, J=7,58 Гц, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,25 (д, J=7,58 Гц, 1H), 7,22 (д, J=1,52 Гц, 1H), 5,87 (с, 1H), 4,60-4,68 (м, 1H), 4,36 (с, 1H), 4,35 (с, 1H), 3,49 (шир.с, 2H), 2,24 (с, 3H), 2,19 (д, J=8,84 Гц, 9H), 2,11 (с, 3H), 1,77-1,88 (м, 2H), 1,41 (д, J=6,57 Гц, 3H), 0,74 (т, J=7,33 Гц, 3H); LCMS: 499,4 (MH+).
Пример 275
1-Циклопентил-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
4
2
4
6
1
В 30 мл микроволновую пробирку добавляли 6-бром-1-циклопентил-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (80 мг, 0,175 ммоль), 1-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин (65,9 мг, 0,228 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (DME) (3 мл), воду (1000 мл) и карбонат натрия (0,263 мл, 0,526 ммоль), и смесь дегазировали в течение 5 минут барботированием азотом. Добавляли PdCl(dppf)-CHCl аддукт (11,45 мг, 0,014 ммоль), и пробирку герметично закрывали. Смесь облучали (микроволны) при 140°C в течение 10 минут. Смесь концентрировали, и остаток растворяли в MeOH и фильтровали. Фильтрат очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ (элюент: 25% ACN/HO, 0,1% NHOH - 60% ACN/HO, 0,1% NHOH), получая 72 мг продукта в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,65-1,89 (м, 6H), 2,08-2,19 (м, 8H), 2,24 (с, 3H), 2,76-2,84 (м, 4H), 3,40-3,48 (м, 4H), 4,35 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,92-5,04 (м, 1H), 5,87 (с, 1H), 6,88 (д, J=8,84 Гц, 1H), 7,19 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,74 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,91 (дд, J=8,84, 2,53 Гц, 1H), 8,15 (т, J=5,05 Гц, 1H), 8,51 (д, J=2,53 Гц, 1H); LCMS: 539,8 (MH+).
Некоторые примеры получали как выше из бороновой кислоты (или бороната), содержащей Boc-защищенный амин. Данные примеры требовали удаления Boc-защитной группы, давая заявленные в заголовке соединения.
Пример 276
1-Изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид
3
4
2
2
6
1
+
К суспензии 1,1-диметилэтил 4-{5-[1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]-2-пиридинил}-1-пиперазинкарбоксилата (70 мг, 0,112 ммоль) в дихлорметане (2 мл) добавляли TFA (0,5 мл, 6,49 ммоль), и смесь перемешивали в течение 1 часа. Смесь концентрировали, и остаток обрабатывали насыщенным водным NaHCO раствором и фильтровали. Твердый остаток очищали, применяя колоночную хроматографию (силикагель, 0-15% (9:1 MeOH/NHOH)/CHCl), получая 1-изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид (51 мг, 84%) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,91 (м, 3H), 1,47 (д, J=4,00Гц, 6H), 1,53-1,60 (м, 2H), 2,14 (с, 3H), 2,89-2,98 (м, 4H), 3,51-3,59 (м, 4H), 4,40 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,93 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 5,92 (с, 1H), 6,87 (д, J=3,03 Гц, 1H), 6,94 (д, J=8,84 Гц, 1H), 7,60 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,66 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,88 (с, 1H), 8,00 (дд, J=8,84, 2,53 Гц, 1H), 8,28 (т, J=5,05 Гц, 1H), 8,58 (д, J=2,27 Гц, 1H). MS: (M+H)=527,2.
Примеры 277-285 получали способами, описанными выше для примеров 276, или их стандартными вариантами, исходя из требуемого N-Boc защищенного соединения (см. в конце описания).
Некоторые примеры получали как выше из бороновой кислоты (или бороната), содержащей алкиловый эфир. Данные примеры требовали омыления эфира, давая соответствующие карбоновые кислоты.
Пример 286
4-[4-({[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-6-ил]бензойная кислота
1
+
6
К раствору метил 4-[4-({[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-6-ил]бензоата (30 мг, 0,062 ммоль) в MeOH (2 мл) и THF (1 мл) добавляли 3н NaOH (0,031 мл, 0,185 ммоль). Реакционную смесь грели при 50°C в течение 12 часов, после чего ее охлаждали до температуры окружающей среды и обрабатывали кислой ледяной водой, доводя pH до 6. Твердый остаток фильтровали и промывали несколько раз водой и 8:2 кислой смесью (pH=2) ледяная вода:MeOH. Очистка обращено-фазовой Gilson ВЭЖХ (10-80%, ацетонитрил/вода + 0,1% TFA, YMC ODS-A C18 колонка 75×30 мм ID S-5 мкм, 12 нМ колонка 7 минут) давала заявленное в заголовке соединение (12 мг, 0,024 ммоль, 39,5% выход) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 12,91 (шир.с, 1H), 11,48 (шир.с, 1H), 8,23 (т, J=5,05 Гц, 1H), 8,02 (д, J=8,34 Гц, 3H), 7,87-7,94 (м, 4H), 7,38 (с, 1H), 7,32 (д, J=1,52 Гц, 1H), 5,87 (с, 1H), 4,91 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 4,36 (д, J=4,80 Гц, 2H), 2,24 (с, 3H), 2,18 (с, 3H), 2,11 (с, 3H), 1,44 (д, J=6,57 Гц, 6H). MS(ES) [M+H] 486,1.
Примеры 287-288 получали способами, описанными выше, например, 286, или их стандартными вариантами, исходя из требуемого алкилэфира (см. в конце описания)
Пример 289
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
6
1
+
В колбу в атмосфере N добавляли 10% палладий на угле (0,028 г, 0,026 ммоль) и этанол (1 мл) (для увлажнения катализатора). Затем, в колбу помещали 6-бром-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид (0,11 г, 0,264 ммоль), этанол (4 мл) и тетрагидрофуран (1 мл). Суспензию перемешивали в атмосфере N, затем вакуумировали и заполняли H (баллон) и перемешивали в течение ночи. Затем, реакционную смесь помещали обратно в атмосферу N и разбавляли смесью 10% метанол/дихлорметан. Добавляли целит, и смесь перемешивали в течение 15 минут, фильтровали через слой целита, промывали смесью 10% метанол/дихлорметан и концентрировали. Остаток растворяли в диметилсульфоксиде и ацетонитриле (с 0,1% трифторуксусной кислотой и очищали Gilson препаративной ВЭЖХ (Sunfire 30×75 мм; градиент B: 15-75%; A: вода + 0,1% TFA; B: ацетонитрил + 0,1% TFA). Полученный в результате остаток растворяли в смеси 10% метанол/дихлорметан и обрабатывали Silicycle карбонатной смолой (1,5 г). Смесь перемешивали в течение 30 минут, фильтровали через целит, промывали смесью 10% метанол/дихлорметан и концентрировали. Остаток растворяли в дихлорметане и обрабатывали метил трет-бутиловым эфиром. Растворители удаляли в потоке N, и твердый остаток сушили в вакуумной печи при 45°C в течение 18 часов, получая N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид (56 мг, 0,159 ммоль, 60% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,41-1,48 (м, 6H), 2,09-2,15 (м, 3H), 2,24 (с, 3H), 4,35 (д, J=5,31 Гц, 2H), 4,79 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 5,88 (с, 1H), 6,84 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,11-7,18 (м, 1H), 7,39 (д, J=6,57 Гц, 1H), 7,58 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,65 (д, J=8,34 Гц, 1H), 8,08 (т, J=5,31 Гц, 1H), 11,54 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H] 338,6.
Примеры 290-295 получали способами, описанными выше, например, 289, или их стандартными вариантами, исходя из требуемого 6-галогениндола, алкена или CBz-защищенного амина (см. в конце описания).
Пример 296
1-Циклопропил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид
2
6
1
+
В пробирку в потоке N добавляли трифторметансульфонат меди (II) (0,084 г, 0,233 ммоль), метансульфинат натрия (0,056 г, 0,467 ммоль), DMSO (1,3 мл) и N,N-диметилэтилендиамин (0,053 мл, 0,490 ммоль). Темно-синюю реакционную смесь перемешивали в течение 5 минут, затем добавляли 6-бром-1-циклопропил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (0,10 г, 0,233 ммоль). Пробирку герметично закрывали и грели при 120°C в течение 3 часов, после чего ее разбавляли водой (50 мл). Смесь экстрагировали 30% THF/EtOAc (×2) (необходимо нагревать для разложения эмульсии). Объединенные органические фракции сушили над сульфатом магния, фильтровали через целит и концентрировали. Очистка остатка колоночной хроматографией (12 грамм Isco GOLD колонка с силикагелем; градиент B:5-85%; A:дихлорметан, B: 10% (2 M аммиак в MeOH) в хлороформе) давала 1-циклопропил-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксамид (83 мг, 0,184 ммоль, 79% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,50 (с, 1H), 8,38 (т, J=5,1 Гц, 1H), 8,06 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,46 (дд, J=7,8, 1,3 Гц, 2H), 5,87 (с, 1H), 4,34 (д, J=5,1 Гц, 2H), 3,52 (тт, J=7,0, 3,6 Гц, 1H), 3,20 (с, 3H), 2,23 (с, 3H), 2,11 (с, 3H), 2,14 (с, 3H), 1,09 (м, 2H), 0,96 (м, 2H). MS(ES) [M+H] 427,8.
Примеры 297-302 получали способами, описанными выше, например, 296 или их стандартными вариантами, исходя из требуемого 6-броминдола (см. в конце описания).
Схема 2
Пример 303
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбоксамид
a) 4-Бром-1-(1-метилэтил)-6-(трифторметил)-1H-индол
3
2
4
1
+
К раствору 4-бром-6-(трифторметил)-1H-индола (1 г, 3,79 ммоль) в DMF (6 мл) добавляли 60% гидрид натрия (0,182 г, 4,54 ммоль), и смесь перемешивали в течение 30 минут. Добавляли 2-бромпропан (0,533 мл, 5,68 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи. Затем, реакцию прекращали 10% NaHCO и экстрагировали EtOAc (×3). Экстракт сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали, применяя колоночную хроматографию (силикагель, 0-100% EtOAc/гексан), получая заявленное в заголовке соединение (460 мг, 40%) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,56-1,61 (м, 6H), 4,66-4,79 (м, 1H), 6,65 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,27-7,31 (м, 1H), 7,45 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,63 (с, 1H). MS: (M+H)=306,2.
b) 1-Изопропил-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбонитрил
2
2
4
1
+
В 10-мл СВЧ пробирку добавляли 4-бром-1-(1-метилэтил)-6-(трифторметил)-1H-индол (330 мг, 1,078 ммоль), дицианоцинк (146 мг, 1,240 ммоль), DMF (4 мл) и воду (0,040 мл), и смесь дегазировали в течение 5 минут барботированием N. Добавляли s-Phos (48,7 мг, 0,119 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) (49,4 мг, 0,054 ммоль). Пробирку герметично закрывали, и смесь грели при 120°C в течение 2,5 часов. Добавляли 1н NaOH (3 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (×3). Экстракт сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали, применяя колоночную хроматографию (силикагель, 0-70% EtOAc/гексан), получая заявленное в заголовке соединение (210 мг, 77%) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,61 (м, 6H), 4,79 (септ., J=6,69 Гц, 1H), 6,84 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,59 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,88 (с, 1H). MS: (M+H)=253,2.
c) 1-Изопропил-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
1
+
6
К раствору 1-(1-метилэтил)-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбонитрила (180 мг, 0,714 ммоль) в этаноле (5 мл) добавляли 10% гидроксид натрия (5 мл, 0,714 ммоль), и смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь концентрировали, удаляя EtOH, и водную фазу подкисляли, применяя 1н HCl, до pH ~4. Осадок собирали фильтрованием и сушили при высоком вакууме, получая заявленное в заголовке соединение (167 мг, 86%) в виде коричневого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,43-1,60 (м, 6H), 4,96-5,13 (м, 1H), 7,11 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,89-8,05 (м, 2H), 8,25 (с, 1H), 13,15 (шир.с, 1H). MS: (M+H)=272,0.
d) N-((4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
6
К раствору 1-(1-метилэтил)-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбоновой кислоты (40 мг, 0,147 ммоль) в диметилсульфоксиде (1 мл) добавляли 3-(аминометил)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон (41,7 мг, 0,221 ммоль), N-метилморфолин (0,065 мл, 0,590 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (40,1 мг, 0,295 ммоль) и EDC (56,5 мг, 0,295 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи. Смесь гасили водой (5 мл) и перемешивали в течение 10 минут. Осадок собирали фильтрованием и сушили при высоком вакууме, получая заявленное в заголовке соединение (39 мг, 63%) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,47 (м, 6H), 2,13 (с, 3H), 2,23 (с, 3H), 4,36 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,99 (дт, J=13,20, 6,66 Гц, 1H), 5,89 (с, 1H), 6,98 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,68 (с, 1H), 7,86 (д, J=3,28 Гц, 1H), 8,08 (с, 1H), 8,45 (т, J=4,93 Гц, 1H), 11,56 (с, 1H). MS: (M+H)=406,1.
Пример 304
1-Изопропил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
6
Заявленное в заголовке соединение получали, применяя способы, как описано для N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-6-(трифторметил)-1H-индол-4-карбоксамида. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,91 (т, J=8,00 Гц 3H), 1,39-1,63 (м, 8H), 2,14 (с, 3H), 4,39 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,99 (дт, J=13,26, 6,76 Гц, 1H), 5,92 (с, 1H), 6,98 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,68 (с, 1H), 7,87 (д, J=3,03 Гц, 1H), 8,08 (с, 1H), 8,44 (т, J=5,05 Гц, 1H), 11,57 (с, 1H). MS: (M+H)=434,1.
Схема 3
Пример 305
N-((4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-((диметиламино)метил)пиперидин-1-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
a) 6-(4-((Диметиламино)метил)пиперидин-1-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
2
6
1
+
В 10-мл СВЧ пробирку добавляли 6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (100 мг, 0,338 ммоль), 1,4-диоксан (2 мл), N,N-диметил-1-(4-пиперидинил)метанамин (52,8 мг, 0,371 ммоль) и трет-бутоксид натрия (71,4 мг, 0,743 ммоль), и смесь дегазировали в течение 5 минут. Добавляли хлор(2-дициклогексилфосфино-2ʹ,4ʹ,6ʹ-триизопропил-1,1ʹ-бифенил)[2-(2-аминоэтил)фенил]Pd(11)Me-трет-бутилэфирный аддукт (13,96 мг, 0,017 ммоль), и пробирку герметично закрывали. Смесь перемешивали при 98°C при перемешивании в течение 20 часов. Затем, смесь концентрировали, и остаток очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ (Gemini 5u C18(2) 100A, AXIA; 30×100 мм 5 микрон; (30 мл/минута, 7%ACN/HO, 0,1% муравьиная кислота - 37% ACN/HO, 0,1% муравьиная кислота), получая заявленное в заголовке соединение (65 мг, 54%) в виде бледно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,19-1,34 (м, 2H), 1,39 (д, J=6,57 Гц, 6H), 1,58-1,71 (м, 1H), 1,82 (д, J=11,87 Гц, 2H), 2,23-2,31 (м, 10H), 2,66 (тд, J=11,94, 1,89 Гц, 2H), 3,57-3,71 (м, 2H), 4,70 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 7,09 (д, J=2,02 Гц, 1H), 7,15 (дд, J=9,60, 1,52 Гц, 2H). MS: (M+H)=358,2.
b) N-((4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-((диметиламино)метил)пиперидин-1-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
6
1
+
К раствору 6-{4-[(диметиламино)метил]-1-пиперидинил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновой кислоты (62 мг, 0,173 ммоль) в диметилсульфоксиде (1 мл) добавляли 3-(аминометил)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон (42,5 мг, 0,225 ммоль), N-метилморфолин (0,095 мл, 0,867 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (47,2 мг, 0,347 ммоль) и EDC (66,5 мг, 0,347 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи. Смесь очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ (Gemini 5u C18(2) 100A, AXIA; 30×100 мм 5 микрон; 30 мл/минут, 8% ACN/HO, 0,1% муравьиная кислота - 38% ACN/HO, 0,1% муравьиная кислота), получая заявленное в заголовке соединение (52 мг, 55%) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) м.д. 1,26 (м, 2H), 1,35-1,41 (м, 6H), 1,57-1,71 (м, 1H), 1,80 (д, J=11,12 Гц, 2H), 2,10 (д, J=10,36 Гц, 6H), 2,22 (с, 3H), 2,26-2,33 (м, 8H), 2,57-2,72 (м, 2H), 3,61 (д, J=12,13 Гц, 2H), 4,31 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,58-4,72 (м, 1H), 5,86 (с, 1H), 6,69 (д, J=2,02 Гц, 1H), 6,92 (д, J=1,77 Гц, 1H), 7,05 (д, J=1,01 Гц, 1H), 7,92-7,99 (м, 1H). MS:(M+H)=492,1.
Примеры 306-317 получали способами, описанными выше, например, 305, или их стандартными вариантами, применяя требуемый амин (см. в конце описания).
Схема 4
Пример 318
(6-Метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 6-(2-диметиламино-этокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты
a) Метиловый эфир 6-(2-диметиламино-этокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты
3
К охлажденной (0°C) смеси метилового эфира 6-гидрокси-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (700 мг, 3 ммоль), 2-диметиламиноэтанола (320 мг, 3,60 ммоль) и PPh (948 мг, 3,60 ммоль) в THF (10 мл) добавляли DEAD (620 мг, 3,60 ммоль) и перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя 2% MeOH в хлороформе, получая заявленное в заголовке соединение (550 мг, 60%) в виде бесцветной смолы. LCMS (ES+): m/z= 305,36[M+H].
b) 6-(2-Диметиламино-этокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
2
4
К раствору метилового эфира 6-(2-диметиламино-этокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (500 мг, 1,64 ммоль) в THF (5 мл) добавляли LiOH·HO (200 мг, 4,93 ммоль) в воде (5 мл), реакционную смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 5 часов, после чего THF удаляли при пониженном давлении. Оставшуюся смесь подкисляли 1н HCl (pH ~6) и экстрагировали 10% MeOH в хлороформе (4×30 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным NaSO и концентрировали, получая 6-(2-диметиламино-этокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновую кислоту (400 мг), которую применяли в следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS (ES+): m/z= 291,30 [M+H].
c) (6-Метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 6-(2-диметиламино-этокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты
2
2
4
6
1
К охлажденной (0°C) смеси 6-(2-диметиламино-этокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (400 мг, 1,37 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли EDC·HCl (310 мг, 1,65 ммоль) и HOBt·HO (250 мг, 1,65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 минут, затем добавляли DIPEA (1,2 мл, 6,89 ммоль) и 3-аминометил-6-метил-4-пропил-1H-пиридин-2-он (240 мг, 1,37 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов, после чего ее разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали DCM (2×15 мл). Объединенный DCM слой сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, элюируя 3% MeOH в хлороформе, и затем дополнительно очищали препаративной ВЭЖХ, получая (6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 6-(2-диметиламино-этокси)-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (120 мг, 19%) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 0,92-0,88 (т, 3H), 1,43-1,41 (д, J=6,8 Гц, 6H), 1,56 (м, 2H), 2,12 (с, 3H), 2,22 (с, 6H), 2,55-2,53 (м, 2H), 2,06 (м, 2H), 4,11-4,09 (т, 2H), 4,36-4,34 (д, J=4,8 Гц, 2H), 4,76-4,73 (м, 1H), 5,90 (с, 1H), 6,74-6,73 (д, J=2,8 Гц, 1H), 7,04 (с, 1H), 7,20 (с, 1H), 7,43-7,42 (д, J=3,2 Гц, 1H), 8,10-8,07 (шир.с, 1H), 11,55 (шир.с, 1H). LCMS (ES+): m/z= 453,23 [M+H].
Примеры 319-320 получали способами, описанными выше, например,  318, или их стандартными вариантами, применяя требуемый спирт (реакция Мицунобу) и аминометилпиридон (см. в конце описания).
Пример 321
(6-Метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 1-изопропил-6-(2-пиперазин-1-илэтокси)-1H-индол-4-карбоновой кислоты
3
6
1
К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира 4-(2-{1-изопропил-4-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)карбамоил]-1H-индол-6-илокси}этил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (280 мг, 0,472 ммоль; полученному, следуя способу примера xx) в дихлорметане (15 мл) добавляли TFA (1,5 мл) при комнатной температуре, и затем перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, разбавляли водой (20 мл), и промывали полученный в результате водный слой диэтиловым эфиром (2×15 мл). Водный слой подщелачивали (pH ~8) насыщенным водным NaHCO раствором и экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенный органический слой промывали соляным раствором (2×25 мл) и концентрировали. Очистка препаративной ВЭЖХ давала (6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-илметил)амид 1-изопропил-6-(2-пиперазин-1-илэтокси)-1H-индол-4-карбоновой кислоты (48 мг, 20%) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 0,93 (т, 3H), 1,42 (д, 6H, J=6,8 Гц), 1,57 (м, 2H), 2,14 (с, 3H), 2,45-2,2 (м, 4H), 2,68 (т, 2H), 2,75 (т, 4H), 4,15-4,19 (м, 2H), 4,35 (д, 2H), 4,78-4,72 (м, 1H), 5,91 (с, 1H), 6,73 (д, 1H), 7,03 (с, 1H), 7,24 (с, 1H), 7,42 (д, 1H), 8,12 (т, 1H), 11,58 (шир.с, 1H). LCMS (ES+): m/z= 494,57 [M+H].
Схема 5
Пример 322
N-{[4-(Этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид
a) 4-Хлор-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
5
3
3
4
6
1
+
Применяя 100 мл круглодонную колбу с обратным холодильником, PCl (6,7 г, 32 ммоль), POCl (3,0 мл, 32 ммоль) и 30 мл CHCl(сухой) перемешивали в течение 5 минут (смотри: Heterocycles, vol. 60, No. 6, 2003, 1461-1468). Добавляли 4-гидрокси-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (4 г, 26,6 ммоль) и перемешивали в течение 2 часов при 80°C. Реакцию прекращали в горячем состоянии и выливали в 1 л стакан со 100 "г" льда, 24 мл NHOH, pH по индикаторной бумаге составлял 8-9. Перемешивали 5 минут и фильтровали. Промывали твердый остаток водой. Твердый остаток суспендировали в этаноле и фильтровали и промывали этанолом. Получали 4-хлор-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (1,7 г, 9,58 ммоль, 40% выход) H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 12,85 (шир.с, 1H), 6,53 (с, 1H), 2,28 (с, 3H). MS(ES) [M+H] 168,9.
b) 4-(Этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
1
+
6
В 10 мл микроволновую пробирку добавляли 4-хлор-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (750 мг, 4,45 ммоль) и метанол (1 мл), затем добавляли этиламин (5,56 мл, 11,12 ммоль). Добавляли одну каплю концентрированной HCl, и пробирку закрывали крышкой, и реакционную смесь облучали микроволновым излучением до 120°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали, и твердый остаток фильтровали и промывали холодным MeOH. Получали 4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (500 мг, 2,77 ммоль, 62,2% выход) H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,05 (шир.с, 1H), 7,11 (шир.с, 1H), 5,78 (шир.с, 1H), 3,22-3,32 (м, 2H), 2,11 (с, 3H), 1,10 (т, J=7,07 Гц, 3H). MS(ES) [M+H] 177,8.
c) 1,1-Диметилэтил {[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}карбамат
2
4
3
3
6
1
+
В 250 мл круглодонную колбу в атмосфере N добавляли 4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (500 мг, 2,82 ммоль) в твердом виде, затем добавляли метанол (50 мл) и охлаждали до 0°C в бане со льдом. Затем, добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (1,310 мл, 5,64 ммоль), и суспензию перемешивали в течение 5 минут. Добавляли гексагидрат хлорида никеля (335 мг, 1,411 ммоль) в твердом виде, с последующим добавлением NaBH (747 мг, 19,75 ммоль) в твердом виде (3 порциями - при перерыве в 1 минуту между добавлениями b/c она становилась черной, и выделялся газ). После добавления и перемешивания при 0°C в течение ~10 минут, баню со льдом удаляли, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. На следующее утро реакционную смесь гасили диэтилентриамином (0,613 мл, 5,64 ммоль) через шприц, и смесь продолжали перемешивать 20 минут. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и обрабатывали насыщенным NaHCO и перемешивали 10 минут. Смесь переносили в делительную воронку, и органический слой отделяли и промывали (×2) насыщенным NaHCO. Органический слой концентрировали в вакууме до твердого остатка. Твердый остаток перемешивали 5% MeOH/вода (50 мл), затем фильтровали. Твердый остаток промывали 5% MeOH/вода и водой (×2) и сушили, получая 1,1-диметилэтил {[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}карбамат (500 мг, 1,599 ммоль, 56,7% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 10,64 (шир.с, 1H), 7,08 (шир.с, 1H), 6,25 (шир.с, 1H), 5,64 (с, 1H), 3,96 (д, J=6,06 Гц, 2H), 3,09-3,18 (м, 2H), 2,06 (с, 3H), 1,38 (с, 9H), 1,14 (т, 3H). [M+H] 282,5.
d) 6-Бром-N-{[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
6
В 50 мл круглодонную колбу добавляли 1,1-диметилэтил {[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}карбамат (500 мг, 1,777 ммоль) и дихлорметан (DCM) (20,00 мл). Добавляли TFA (1,095 мл, 14,22 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3,5 часов. LCMS показала деблокирование. Реакционную смесь упаривали и упаривали с DCM. Добавляли в круглодонную колбу диметилсульфоксид (DMSO) (20 мл), с последующим добавлением 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновой кислоты (501 мг, 1,777 ммоль), к раствору добавляли N-метилморфолин (1,172 мл, 10,66 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (363 мг, 2,67 ммоль) и EDC (511 мг, 2,67 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную смесь выливали в ледяную воду (10 мл) и перемешивали в течение 20 минут и оставляли на 10 минут и фильтровали. Твердый остаток промывали водой (10 мл). Очистка твердого остатка обращено-фазовой Gilson ВЭЖХ (10-90% ацетонитрил/вода + 0,1% TFA, YMC ODS-A C18 колонка 75×30 мм ID S-5 мкм, 12 нМ колонка 7 минут) давала требуемый продукт в виде белого твердого остатка после нейтрализации 0,1н NaOH и упаривания и осаждения из воды, 6-бром-N-{[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид (240 мг, 0,523 ммоль, 29,4% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 10,70 (с, 1H), 8,87 (м, 1H), 7,93 (с, 1H), 7,57-7,71 (м, 2H), 6,89 (д, J=3,28 Гц, 1H), 6,71 (м, 1H), 5,66 (с, 1H), 4,82 (м, 1H), 4,34 (д, J=5,81 Гц, 2H), 3,12-3,23 (м, 2H), 2,08 (с, 3H), 1,43 (д, J=6,57 Гц, 6H), 1,18 (т, 3H). MS(ES) [M+H] 445,1.
e) N-{[4-(Этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
6
1
+
В 20 мл микроволновую пробирку добавляли 6-бром-N-{[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид (70 мг, 0,170 ммоль) и 1-метил-4-[5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридинил]пиперазин (59,9 мг, 0,198 ммоль). Добавляли PdCl(dppf)-CHCl аддукт (14,67 мг, 0,018 ммоль) и бикарбонат натрия (45,3 мг, 0,539 ммоль), с последующим добавлением 1,2-диметоксиэтана (DME) (5 мл) и воды (2 мл). Пробирку герметично закрывали, и реакционную смесь нагревали до 85°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали и упаривали. Остаток растворяли в метанол/DMSO и фильтровали через акродиск и очищали обращено-фазовой Gilson ВЭЖХ (5-80% ацетонитрил/вода + 0,1% TFA, YMC ODS-A C18 колонка 75×30 мм ID S-5 мкм, 12 нМ колонка, 6 минут). Требуемые фракции собирали и упаривали из 0,1н NaOH, что давало требуемый продукт, N-{[4-(этиламино)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид (57 мг, 0,101 ммоль, 56,2% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 10,68 (с, 1H), 8,89 (т, J=5,94 Гц, 1H), 8,66 (д, J=2,02 Гц, 1H), 8,09 (дд, J=8,59, 2,02 Гц, 1H), 7,91 (с, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,60 (д, J=3,03 Гц, 1H), 6,99 (д, J=8,84 Гц, 1H), 6,89-6,96 (м, 2H), 5,66 (с, 1H), 4,85-4,98 (м, 1H), 4,39 (д, J=5,81 Гц, 2H), 3,63 (шир.с, 4H), 3,11-3,24 (м, 2H), 2,7 (шир.с, 4H), 2,08 (с, 3H), 1,47 (д, J=6,57 Гц, 6H), 1,20 (т, 3H). MS(ES) [M+H] 542,4.
Примеры 323-324 получали способами, описанными выше, например, 322, или их стандартными вариантами, применяя требуемый амин (см. в конце описания).
Пример 325
N-((6-Амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
a) трет-Бутил (5-((6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамидо)метил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамат
1
+
+
6
К перемешиваемому раствору трет-бутил (5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамата (0,40 г, 1,496 ммоль), 6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (0,44 г, 1,486 ммоль) и HOAt (0,21 г, 1,543 ммоль) в DMF (25 мл) добавляли EDC свободное основание (0,25 г, 1,610 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем упаривали досуха в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-30% EtOAc в гексане), получая продукт, трет-бутил (5-((6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамидо)метил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамат (0,81 г, 1,485 ммоль, 99% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 9,42 (с, 1H), 8,41 (т, J=4,8 Гц, 1H), 7,77 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,33 (с, 1H), 7,21 (с, 1H), 6,99 (д, J=1,8 Гц, 1H), 4,40 (д, J=5,1 Гц, 2H), 3,81 (с, 3H), 2,35 (с, 3H), 2,10 (д, J=1,0 Гц, 3H), 1,47 (с, 9H), 1,38 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES) m/e 545,2 [M+H].
b) N-((6-Амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
2
2
3
2
4
4
2
2
2
2
3
6
1
+
+
К перемешиваемому раствору трет-бутил (5-((6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамидо)метил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамата (0,80 г, 1,467 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) добавляли по каплям при комнатной температуре TMSI (0,50 мл, 3,67 ммоль). Присоединяли обратный холодильник, и реакционную смесь продували N и нагревали до 70°C. После перемешивания в течение 30 минут LCMS показал, что реакция завершилась (89% чистота с 11% возможного йодированного побочного продукта в качестве единственной примеси). Через 1 час реакционную смесь гасили MeOH (5 мл) и перемешивали в течение 30 минут. Прозрачный коричневый раствор упаривали досуха в вакууме, растворяли в CHCl, промывали водным NaSO (образовывался осадок, который отфильтровывали), сушили (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-10 г, 0-7% (5% NHOH/MeOH) в CHCl) давала продукт, N-((6-амино-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (59,6 мг, 0,138 ммоль, 9,4% выход) в виде белого твердого остатка. Обратите внимание: позднее было показано, что осадок, который отфильтровывали при промывке водным NaSO, содержит продукт. Данный твердый остаток промывали водой и сушили в вакууме, получая дополнительное количество продукта в виде грязно-белого твердого остатка (602 мг, 1,4 ммоль, 95%, 100% чистота LCMS). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 10,59 (шир.с, 1H), 8,13 (т, J=4,4 Гц, 1H), 7,76 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,33 (с, 1H), 6,99 (д, J=1,5 Гц, 1H), 5,83 (шир.с, 2H), 5,19 (с, 1H), 4,74 (дт, J=6,6, 13,3 Гц, 1H), 4,22 (д, J=4,8 Гц, 2H), 2,14 (с, 3H), 2,11 (с, 3H), 1,39 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES)m/e 431,1 [M+H].
Примеры 326-334 получали способами, описанными выше, например, 325, или их стандартными вариантами, применяя требуемый амин (см. в конце описания).
Пример 335
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{6-[(2R)-2-метил-1-пиперазинил]-3-пиридинил}-1H-индол-4-карбоксамид
a) (R)-трет-Бутил 4-(5-(4-(((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)карбамоил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-6-ил)пиридин-2-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат
4
1
+
Добавляли 6-(6-хлорпиридин-3-ил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (131 мг, 0,283 ммоль), (R)-трет-бутил 3-метилпиперазин-1-карбоксилат (70,8 мг, 0,354 ммоль), трет-бутоксид натрия (59,8 мг, 0,623 ммоль) и 1,4-диоксан (2 мл) в микроволновую пробирку и дегазировали в течение 10 минут. Добавляли Pd XPhos (10,45 мг, 0,014 ммоль) и нагревали при 100°C в течение 16 часов. Концентрировали, добавляли DCM и воду. Фильтровали, фазы разделяли. Экстрагировали водную фазу еще два раза DCM. Объединяли DCM экстракты и промывали водой, соляным раствором, сушили (MgSO), фильтровали и упаривали DCM. Остаток очищали Biotage (0%-5% MeOH:DCM; 10 г-HP-колонка с силикагелем). Получали 28 мг заявленного в заголовке соединения. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,16 (д, J=6,32 Гц, 3H), 1,44-1,57 (м, 15H), 2,06 (с, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,39 (с, 3H), 2,87-3,36 (м, 3H), 3,57 (с, 1H), 3,86-4,30 (м, 3H), 4,50 (д, J=9,35 Гц, 1H), 4,58-4,79 (м, 3H), 5,87 (с, 1H), 6,64 (д, J=8,59 Гц, 1H), 7,01 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,76 (д, J=8,08 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,27 Гц, 1H), 12,42 (шир.с, 1H). LCMS: [M+H] 627,5.
b) N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-{6-[(2R)-2-метил-1-пиперазинил]-3-пиридинил}-1H-индол-4-карбоксамид
2
3
4
1
+
Добавляли трифторуксусную кислоту (1 мл, 12,98 ммоль) к раствору (R)-трет-бутил 4-(5-(4-(((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)карбамоил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-6-ил)пиридин-2-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (57 мг, 0,091 ммоль) в DCM (3 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Концентрировали на роторном испарителе. Распределяли между DCM и насыщенным NaCO, разделяли и промывали DCM фазу водой, соляным раствором, сушили (MgSO), фильтровали и упаривали на роторе DCM. Получали 25 мг заявленного в заголовке соединения в виде коричневого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,19 (д, 2H), 1,46-1,59 (м, 6H), 2,21 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,83 (дд, J=12,13, 3,54 Гц, 1H), 2,96-3,29 (м, 4H), 3,90 (шир.с, 1H), 4,47-4,76 (м, 5H), 6,00 (с, 1H), 6,51 (д, J=8,59 Гц, 1H), 7,05 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,68 (дд, J=8,72, 2,40 Гц, 1H), 8,43 (д, J=2,27 Гц, 1H), 10,11-12,70 (м, 1H). LCMS: [M+H] 527,5.
Примеры 336-346 получали способами, описанными выше, например, 335, или их стандартными вариантами, применяя требуемый амин (см. в конце описания).
Пример 347
N-((4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
6
К раствору N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(6-формилпиридин-3-ил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамида (100 мг, 0,219 ммоль) в DCM (10 мл) и метаноле (2 мл) добавляли пирролидин (0,035 мл, 0,438 ммоль), с последующим добавлением сульфата натрия (31,1 мг, 0,219 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов, после чего добавляли боргидрид натрия (16,57 мг, 0,438 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и при 45°C в течение 2 часов. Реакционную смесь гасили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой упаривали. Очистка обращено-фазовой Gilson ВЭЖХ (10-60% ацетонитрил/вода + 0,1% TFA, YMC ODS-A C18 колонка 75×30 мм ID S-5 мкм, 12 нМ колонка 7 минут), с последующим выделением и экстракцией EtOAc/0,1н NaOH, давала N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-6-(6-(пирролидин-1-илметил)пиридин-3-ил)-1H-индол-4-карбоксамид в виде желтой пены, которую получали упариванием органического слоя (68 мг, 0,125 ммоль, 57,0% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,48 (шир.с, 1H), 9,06 (д, J=2,02 Гц, 1H), 8,30 (дд, J=8,08, 2,27 Гц, 1H), 8,20 (т, J=5,18 Гц, 1H), 7,94 (д, J=1,26 Гц, 1H), 7,60 (д, J=8,08 Гц, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,32 (с, 1H), 5,88 (с, 1H), 4,92-4,89 (м, 1H), 4,59 (д, J=5,56 Гц, 2H), 4,36 (д, J=5,05 Гц, 2H), 3,34 (шир.с, 4H), 2,25 (с, 3H), 2,17 (д, J=1,01 Гц, 3H), 2,11 (с, 3H), 1,99 (шир.с, 4H), 1,45 (д, J=6,57 Гц, 6H). LCMS: [M+H] = 512,3.
Примеры 348-350 получали способами, описанными выше, например, 347, или их стандартными вариантами, применяя требуемый амин(см. в конце описания).
Пример 351
6-Бром-N-((6-(гидроксиметил)-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
a) 6-Бром-N-((6-(гидроксиметил)-2-метокси-4-метилпиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
6
1
+
К перемешиваемому раствору (5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метанола (0,29 г, 1,591 ммоль), 6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (0,48 г, 1,621 ммоль) и HOAt (0,22 г, 1,616 ммоль) в дихлорметане (15 мл) и DMF (5 мл) добавляли свободное основание EDC (0,30 г, 1,932 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, затем упаривали досуха в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-20% EtOAc в CHCl), получая продукт, 6-бром-N-((6-(гидроксиметил)-2-метокси-4-метилпиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (0,73 г, 1,586 ммоль, 100% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 8,46 (т, J=4,9 Гц, 1H), 7,77 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,33 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,99 (д, J=1,5 Гц, 1H), 6,90 (с, 1H), 5,31 (т, J=5,9 Гц, 1H), 4,74 (квин., J=6,6 Гц, 1H), 4,45 (д, J=5,1 Гц, 1H), 4,43 (д, J=5,8 Гц, 2H), 3,83 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,10 (с, 3H), 1,38 (д, J=6,8 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 460,2 [M+H].
b) 6-Бром-N-((6-(гидроксиметил)-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
6
1
+
+
К перемешиваемому раствору 6-бром-N-((6-(гидроксиметил)-2-метокси-4-метилпиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамида (500 мг, 1,086 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли 6н HCl (15 мл, 15,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере N с нагреванием при 80°C в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали досуха в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 4% MeOH в CHCl). Чистые фракции объединяли и упаривали досуха в вакууме. Растирали с небольшим количеством воды, фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме, получая продукт, 6-бром-N-((6-(гидроксиметил)-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (189 мг, 0,423 ммоль, 39,0% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 11,30 (с, 1H), 8,27 (т, J=4,9 Гц, 1H), 7,76 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,33 (с, 1H), 7,01 (д, J=1,8 Гц, 1H), 6,05 (с, 1H), 5,38 (т, J=5,9 Гц, 1H), 4,74 (дт, J=6,7, 13,2 Гц, 1H), 4,32 (д, J=5,1 Гц, 2H), 4,25 (д, J=5,8 Гц, 2H), 2,26 (с, 3H), 2,13 (с, 3H), 1,39 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES) m/e 446,1 [M+H].
Пример 352
N-((6-(Аминометил)-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
a) трет-Бутил ((5-((6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамидо)метил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамат
1
+
6
К перемешиваемому раствору трет-бутил ((5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамата (0,55 г, 1,955 ммоль), 6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (0,63 г, 2,127 ммоль) и HOAt (0,27 г, 1,984 ммоль) в дихлорметане (20 мл) и DMF (5 мл) добавляли EDC свободное основание (0,34 г, 2,190 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем упаривали досуха в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-40% EtOAc в гексане), получая продукт, трет-бутил ((5-((6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамидо)метил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамат (1,07 г, 1,912 ммоль, 98% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 8,47 (т, J=4,8 Гц, 1H), 7,76 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,35 (т, 1H), 7,33 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,99 (д, J=1,5 Гц, 1H), 6,67 (с, 1H), 4,74 (квин., J=6,6 Гц, 1H), 4,44 (д, J=4,8 Гц, 2H), 4,08 (д, J=6,3 Гц, 2H), 3,85 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 2,10 (с, 3H), 1,41 (с, 9H), 1,38 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 559,3 [M+H].
b) N-((6-(Аминометил)-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
2
4
2
2
2
2
6
1
+
К перемешиваемому раствору трет-бутил ((5-((6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамидо)метил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамата (500 мг, 0,894 ммоль) в тетрагидрофуране (THF) (5 мл) добавляли 6н HCl (15 мл, 15,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере N с нагреванием при 80°C в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали досуха в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-40 г, 0-10% (5% NHOH в MeOH) в CHCl). Чистые фракции объединяли и упаривали досуха в вакууме. Растворяли в небольшом количестве CHCl, высаживая медленным добавлением гексана, фильтровали, промывали гексаном и сушили в вакууме, получая продукт, N-((6-(аминометил)-4-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (328 мг, 0,736 ммоль, 82% выход) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 8,26 (т, J=5,1 Гц, 1H), 7,76 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,33 (д, J=1,0 Гц, 1H), 7,01 (д, J=1,5 Гц, 1H), 6,01 (с, 1H), 5,77 (с, 0H), 4,74 (квин., J=6,6 Гц, 1H), 4,32 (д, J=5,1 Гц, 2H), 3,46 (с, 2H), 2,25 (с, 3H), 2,14 (с, 3H), 1,39 (д, J=6,8 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 445,2 [M+H].
Пример 353
3-Метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-карбоновая кислота
1
+
6
В 5 мл микроволновую пробирку добавляли 6-циано-3-метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид (100 мг, 0,247 ммоль), измельчали и добавляли KOH (41,6 мг, 0,742 ммоль), с последующим добавлением этанола (8 мл), реакционную смесь облучали микроволновым излучением при 145°C в течение 22 часов. Реакционную смесь выливали в кислую ледяную воду (20 мл) и перемешивали в течение 20 минут. Добавляли EtOAc, и смесь перемешивали в течение дополнительных 10 минут. Слои разделяли, и большая часть продукта была в EtOAc, который упаривали. Остаток растворяли в MeOH (1 мл), и соединение высаживали льдом и фильтровали, получая продукт, 3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-карбоновую кислоту (70 мг, 0,160 ммоль, 64,9% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,49 (шир.с, 1H), 8,18 (с, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,53 (д, J=7,58 Гц, 2H), 5,90 (с, 1H), 4,76-4,90 (м, 1H), 4,36 (д, J=4,80 Гц, 2H), 2,55 (шир.с, 1H), 2,18 (с, 3H), 2,13 (с, 3H), 1,52-1,61 (м, 2H), 1,44 (д, J=6,57 Гц, 6H), 0,94 (т, J=7,33 Гц, 3H). MS(ES) [M+H] 423,8.
Пример 354
3-[3-Метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]пропановая кислота
a) Этил (2E)-3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]-2-пропеноат
1
+
6
Следуя общему способу, описанному выше для кросс-сочетания по Сузуки (смотри пример 2), получали этил (2E)-3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]-2-пропеноат (120 мг, 0,234 ммоль, 53,6% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,49 (с, 1H), 8,12 (т, J=4,93 Гц, 1H), 7,97 (д, J=1,01 Гц, 1H), 7,74 (д, J=15,92 Гц, 1H), 7,43 (с, 1H), 7,27 (д, J=1,26 Гц, 1H), 6,61 (д, J=15,92 Гц, 1H), 5,90 (с, 1H), 4,78-4,86 (м, 1H), 4,35 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,19 (кв., J=7,07 Гц, 2H), 2,53-2,58 (м, 2H), 2,14 (д, J=11,12 Гц, 6H), 1,53-1,62 (м, 2H), 1,43 (д, J=6,82 Гц, 6H), 1,27 (т, J=7,07 Гц, 3H), 0,93-0,97 (м, 3H). MS(ES) [M+H] 477,9.
b) Этил 3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]пропаноат
2
2
2
2
6
1
+
В 50 мл колбу добавляли этил (2E)-3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]-2-пропеноат (120 мг, 0,251 ммоль) и этанол (10 мл). Добавляли PdOH (70,6 мг, 0,503 ммоль), и реакционную смесь дегазировали N в течение 15 минут, затем барботировали H (из баллона), и реакционную смесь перемешивали в течение 12 часов. Реакционную смесь продували N в течение 30 минут, и затем фильтровали через аэродиск и упаривали. Остаток суспендировали в MeOH/вода (2 мл/4 мл) и фильтровали и промывали водой, получая белый осадок, этил 3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]пропаноат (70 мг, 0,146 ммоль, 58,1% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,49 (шир.с, 1H), 7,90 (шир.с, 1H), 7,34 (с, 1H), 7,21 (с, 1H), 6,82 (с, 1H), 5,90 (с, 1H), 4,63-4,73 (м, 1H), 4,34 (д, J=4,55 Гц, 2H), 4,04 (кв., J=7,07 Гц, 2H), 2,92 (т, J=7,33 Гц, 2H), 2,64 (т, J=7,45 Гц, 2H), 2,55-2,62 (м, 2H), 2,12 (с, 6H), 1,52-1,62 (м, 2H), 1,40 (д, J=6,32 Гц, 6H), 1,16 (т, J=7,07 Гц, 3H), 0,94 (т, J=7,20 Гц, 3H). MS(ES) [M+H] 479,8.
c) 3-[3-Метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]пропановая кислота
1
+
6
Следуя общему способу, описанному выше для кросс-сочетания по Сузуки (смотри пример 2), получали 3-[3-метил-1-(1-метилэтил)-4-({[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]амино}карбонил)-1H-индол-6-ил]пропановую кислоту (45 мг, 0,095 ммоль, 64,9% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 12,05 (шир.с, 1H), 11,49 (шир.с, 1H), 7,88-7,95 (м, 1H), 7,34 (с, 1H), 7,20 (с, 1H), 6,82 (с, 1H), 5,90 (с, 1H), 4,64-4,73 (м, 1H), 4,34 (д, J=4,80 Гц, 2H), 2,89 (т, J=7,71 Гц, 2H), 2,55-2,60 (м, 4H), 2,12 (с, 6H), 1,53-1,61 (м, 2H), 1,40 (д, J=6,57 Гц, 6H), 0,92-0,96 (м, 3H). MS(ES)[M+H] 451,9.
Пример 355
6-(2-Аминоэтил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
a) 6-[2-({[(1,1-Диметилэтил)окси]карбонил}амино)этил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
4
В стеклянную толстостенную колбу добавляли метил 6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (1,00 г, 2,77 ммоль), трет-бутил-N-[2-(трифторборануидил)этил]карбамат калия (900 мг, 3,58 ммоль), карбонат цезия (3,2 г, 9,82 ммоль), толуол (24 мл) и воду (8 мл). Смесь перемешивали и продували N. К реакционной смеси добавляли ацетат палладия (II) (40 мг, 0,178 ммоль) и RuPhos (160 мг, 0,342 ммоль), реакционную смесь закрывали крышкой и перемешивали при 95°C в течение 18 часов. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь растворяли в EtOAc, разбавляли водой и фильтровали, удаляя нерастворимые вещества. Органическую фазу удаляли, сушили (MgSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0 - 20% EtOAc в гексане) давала метиловый эфир.
1
+
6
К эфиру в THF (10 мл) и MeOH (30 мл) добавляли 1н NaOH (10 мл, 10 ммоль). Раствор перемешивали при кипячении с обратным холодильником при 80°C в течение 24 часов (медленное омыление). После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь концентрировали в вакууме, нейтрализовали 1н HCl (10 мл), растирали с водой, фильтровали и сушили в вакууме, получая продукт, 6-[2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)этил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (865 мг, 2,31 ммоль, 83,0% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12,69 (шир.с, 1H), 7,43 (с, 1H), 7,31 (с, 1H), 7,25 (с, 1H), 6,89 (т, J=5,6 Гц, 1H), 4,71 (дт, J=6,6, 13,3 Гц, 1H), 3,23-3,10 (м, 2H), 2,80 (т, J=7,3 Гц, 2H), 2,30 (с, 3H), 1,42 (д, J=6,6 Гц, 6H), 1,37 (с, 9H). MS(ES)+ m/e 361,2 [M+H].
b) Гидрохлоридная соль 6-(2-Аминоэтил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамида
2
2
4
2
2
2
6
2
1
+
К перемешиваемой суспензии 6-[2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)этил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновой кислоты (500 мг, 1,387 ммоль), HCl соли 3-(аминометил)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинона (340 мг, 1,802 ммоль), HOAt (245 мг, 1,800 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли N-метилморфолин (200 мкл, 1,819 ммоль) и EDC свободное основание (280 мг, 1,804 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали досуха и очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-40 г, 0-10% CHCl/20%(5% NHOH в MeOH) в CHCl). Чистые фракции объединяли и упаривали досуха. Растирали с 50% MeOH в воде, фильтровали и сушили в вакууме, получая Boc защищенный продукт в виде грязно-белого твердого остатка. Boc защищенный продукт суспендировали в небольшом объеме MeOH (2 мл) и обрабатывали 4н HCl в диоксане (25 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали досуха, растирали с EtO, фильтровали и сушили в вакууме, получая продукт, 6-(2-аминоэтил)-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид (460 мг, 1,067 ммоль, 77% выход) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d + DO) δ 8,05 (т, J=5,2 Гц, 1H), 8,00 (шир.с, 2H), 7,39 (д, J=1,0 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H), 6,86 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,93 (с, 1H), 4,69 (дт, J=6,6, 13,3 Гц, 1H), 4,34 (д, J=5,1 Гц, 2H), 3,06 (дд, J=5,8, 7,6 Гц, 2H), 3,01-2,91 (м, 2H), 2,25 (с, 3H), 2,13 (с, 3H), 2,12 (с, 3H), 1,41 (д, J=6,8 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 394,9 [M+H].
Пример 356
6-{3-[(Диметиламино)метил]-4-фторфенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
a) Метил 6-(4-фтор-3-формилфенил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат
2
2
2
2
4
6
1
+
В стеклянный сосуд высокого давления добавляли метил 6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (500 мг, 1,612 ммоль), 4-фтор-3-формилбензолбороновую кислоту (375 мг, 2,233 ммоль), фосфат калия (1,1 г, 5,18 ммоль), диоксан (12 мл) и воду (3 мл). Реакционную смесь продували N и добавляли PdCl(dppf)-CHCl аддукт (120 мг, 0,147 ммоль). Реакционную смесь закрывали крышкой и перемешивали при 110°C в течение 4 часов. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь разбавляли водой, экстрагировали EtOAc, промывали соляным раствором, сушили (MgSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-50% EtOAc в гексане) давала продукт, метил 6-(4-фтор-3-формилфенил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (560 мг, 1,585 ммоль, 98% выход) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 10,30 (с, 1H), 8,24-8,13 (м, 2H), 8,10 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,75 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,57-7,46 (м, 2H), 4,98 (квин., J=6,6 Гц, 1H), 3,91 (с, 3H), 2,31 (с, 3H), 1,46 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 354,2 [M+H].
b) 6-{3-[(Диметиламино)метил]-4-фторфенил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
2
2
2
4
2
2
К перемешиваемому раствору метил 6-(4-фтор-3-формилфенил)-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилата (550 мг, 1,556 ммоль) в CHCl (25 мл) добавляли 2н диметиламин в THF (3,0 мл, 6,00 ммоль) и уксусную кислоту (170 мкл, 2,97 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа добавляли порциями триацетоксиборгидрид натрия (1,0 г, 4,72 ммоль) в течение 10 минут. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. LCMS показала продукт, а также значительное количество спирта и одного неидентифицированного побочного продукта. Реакционную смесь очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-50% CHCl/20%(5% NHOH в MeOH) в CHCl). Последняя фракция содержала требуемый продукт, и ее объединяли и упаривали досуха. Растирание с гептаном, фильтрование и сушка в вакууме давали продукт, метиловый эфир (0,25 г, 0,65 ммоль, 41%) в виде грязно-белого твердого остатка.
1
+
6
Эфир растворяли в THF (15 мл) и MeOH (5 мл) и обрабатывали 1н NaOH (4 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником (80°C масляная баня) в течение ночи. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Нейтрализация 1н HCl (4 мл) приводила к выпадению продукта, который растирали с небольшим количеством холодной воды, фильтровали и сушили в вакууме, получая продукт, 6-{3-[(диметиламино)метил]-4-фторфенил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (210 мг, 0,570 ммоль, 36,6% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 12,84 (шир.с, 1H), 10,80 (шир.с, 1H), 8,18 (дд, J=2,0, 7,1 Гц, 1H), 8,12 (с, 1H), 8,01-7,85 (м, 1H), 7,76 (д, J=1,3 Гц, 1H), 7,49 (с, 1H), 7,43 (т, J=9,1 Гц, 1H), 4,95 (дт, J=6,6, 13,1 Гц, 1H), 4,43 (шир.с, 2H), 2,80 (с, 6H), 2,34 (с, 3H), 1,46 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 369,0 [M+H].
c) 6-{3-[(Диметиламино)метил]-4-фторфенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
6
К перемешиваемой суспензии 6-{3-[(диметиламино)метил]-4-фторфенил}-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновой кислоты (210 мг, 0,570 ммоль), HCl соли 3-(аминометил)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинона (140 мг, 0,742 ммоль) и HOAt (100 мг, 0,735 ммоль) в DMF (15 мл) добавляли N-метилморфолин (82 мкл, 0,746 ммоль) и EDC свободное основание (110 мг, 0,709 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре и концентрировали практически досуха в вакууме. Добавляли воду до выпадения продукта. Суспензию растирали, фильтровали, промывали холодной водой, затем водой, сушили в вакууме, получая продукт, 6-{3-[(диметиламино)метил]-4-фторфенил}-N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид (186 мг, 0,370 ммоль, 64,9% выход) в виде светло-коричневого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 11,47 (шир.с, 1H), 8,15 (т, J=4,9 Гц, 1H), 8,04 (д, J=5,3 Гц, 1H), 7,90-7,86 (м, 1H), 7,39 (т, J=9,2 Гц, 1H), 7,35 (с, 1H), 7,27 (д, J=1,3 Гц, 1H), 5,87 (с, 1H), 4,88 (дт, J=6,6, 13,3 Гц, 1H), 4,36 (д, J=5,1 Гц, 2H), 4,26 (шир.с, 2H), 2,69 (с, 6H), 2,24 (с, 3H), 2,17 (с, 3H), 2,11 (с, 3H), 1,44 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 503,0 [M+H].
Пример 357
6-(4,5-Дигидро-1H-имидазол-2-ил)-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
6
В 10-мл СВЧ пробирку добавляли 6-циано-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамид (33 мг, 0,088 ммоль), этилендиамин (1 мл, 14,81 ммоль) и пентасульфид фосфора (0,585 мг, 2,63 мкмоль), и смесь дегазировали в течение 5 минут. Пробирку герметично закрывали, и смесь грели при 120°C в СВЧ-печи. Смесь концентрировали, и остаток очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ в кислых условиях, получая 32 мг продукта в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) м.д. 1,46 (м, 6H), 2,11 (с, 3H), 2,17 (с, 3H), 2,24 (с, 3H), 4,35 (д, J=5,05 Гц, 2H), 4,75 (квин., J=6,69 Гц, 1H), 5,87 (с, 1H), 7,49-7,60 (м, 2H), 8,16-8,26 (м, 2H), 8,39 (с, 1H). MS: (M+H)=419,9.
Примеры 358-366 получали, следуя общим способам, описанным выше, и/или общепринятым синтетическим способам (см. в конце описания).
Схема 6
Пример 367
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-7-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
a) Метил 7-метил-1H-индол-4-карбоксилат
2
3
4
1
В атмосфере N 7-метил-1H-индол-4-карбоновую кислоту (1 г, 5,71 ммоль), серную кислоту (300 мкл, 5,63 ммоль) и метанол (50 мл) грели при кипячении с обратным холодильником в течение 10 часов. MeOH удаляли в вакууме, и остаток растворяли в 30 мл DCM. Раствор промывали водой и насыщенным NaHCO, сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (Biotage; 0%-100% EtOAc:Hex; 25 г-HP-силикагельная колонка), получая заявленное в заголовке соединение. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 2,59 (с, 3H), 4,00 (с, 3H), 7,08 (д, J=7,58 Гц, 1H), 7,20 7,26 (м, 1H), 7,38 (т, J=2,78 Гц, 1H), 7,88 (д, J=7,58 Гц, 1H), 8,32 (шир.с, 1H).
b) Метил 7-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат
4
1
+
К охлажденному (баня со льдом/водой) раствору метил 7-метил-1H-индол-4-карбоксилата (260 мг, 1,374 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли гидрид натрия (43,4 мг, 1,718 ммоль). Через 10 минут добавляли 2-йодпропан (0,151 мл, 1,512 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов. LCMS показала, что реакция завершилась только на 10%. Добавляли гидрид натрия (43,4 мг, 1,718 ммоль), с последующим добавлением 2-йодпропана (0,151 мл, 1,512 ммоль). Через 2 часа LCMS показала, что реакция прошла на 15%. Добавляли дополнительное количество гидрида натрия (43,4 мг, 1,718 ммоль) и перемешивали в течение 5 минут, затем добавляли дополнительное количество 2-бромпропана (0,142 мл, 1,512 ммоль). Грели при 70°C в течение 16 часов. LCMS показала, что реакция завершилась на 50%. Концентрировали реакционную смесь. Добавляли DCM и промывали водой и соляным раствором, сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (Biotage; 0%-100% DCM:Hex; 25 г-HP-силикагельная колонка), получая 137 мг заявленного в заголовке соединения. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,48-1,60 (м, 6H), 2,78 (с, 3H), 3,94-4,02 (м, 3H), 5,17 (дт, J=13,20, 6,66 Гц, 1H), 6,96 (д, J=7,83 Гц, 1H), 7,28 1H, 7,40 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,81 (д, J=7,58 Гц, 1H). MS(ES) [M+H]232,1.
c) 7-Метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
4
1
+
К раствору метил 7-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилата (137 мг, 0,592 ммоль) в этаноле (30 мл) добавляли 1н гидроксид натрия (2,369 мл, 2,369 ммоль). Смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 2 часов, после чего ее концентрировали. Остаток растворяли в воде (20 мл) и подкисляли добавлением 1н HCl. Смесь экстрагировали DCM (4×30 мл), и объединенные экстракты промывали водой и соляным раствором, сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали, получая 104 мг заявленного в заголовке соединения. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,55 (д, 6H), 2,82 (с, 3H), 5,11-5,28 (м, 1H), 7,00 (д, J=7,83 Гц, 1H), 7,31 (д, J=3,54 Гц, 1H), 7,44 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,89 (д, J=7,58 Гц, 1H). MS(ES) [M+H]218,3.
d) N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-7-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамид
4
1
+
Добавляли 7-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (52 мг, 0,239 ммоль), 3-(аминометил)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинон (56,4 мг, 0,299 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (65,2 мг, 0,479 ммоль), EDC (92 мг, 0,479 ммоль) и N-метилморфолин (0,105 мл, 0,957 ммоль) к диметилсульфоксиду (DMSO) (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляли 25 мл воды и перемешивали в течение 10 минут. Отфильтровывали осадок. Растворяли осадок в DCM, промывали водой, сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (Biotage; 0%-20% градиент MeOH:DCM; 10 г-HP-силикагельная колонка), получая 55 мг N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-7-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксамида. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,49 (д, 6H), 2,24 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,75 (с, 3H), 4,63 (д, J=4,55 Гц, 2H), 5,17 (дт, J=13,20, 6,66 Гц, 1H), 5,97 (с, 1H), 6,91 (д, J=7,58 Гц, 1H), 7,01 (д, J=3,54 Гц, 1H), 7,29 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,39 (д, J=7,33 Гц, 1H), 7,69 (шир.с, 1H), 12,59 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H] 352,4.
Пример 368
7-Метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
7-Метил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индол-4-карбоксамид получали, следуя способу примера 367. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 0,95-1,07 (м, 3H), 1,50 (д, J=6,57 Гц, 6H), 1,63 (кв.т, J=7,56, 7,36 Гц, 2H), 2,27 (с, 3H), 2,68-2,82 (м, 5H), 4,64 (д, J=2,53 Гц, 2H), 5,17 (дкв., J=6,82, 6,65 Гц, 1H), 6,04 (с, 1H), 6,91 (д, J=7,58 Гц, 1H), 7,00 (д, J=3,54 Гц, 1H), 7,31 (д, J=3,54 Гц, 1H), 7,39 (д, J=7,33 Гц, 1H), 7,64 (шир.с, 1H), 12,13 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H] 380,2.
Схема 7
Пример 369
1-(1-Метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид
a) 7-(Метилокси)-1-(фенилсульфонил)-1H-индол
4
1
+
К охлажденному (баня с водой и льдом) раствору 7-(метилокси)-1H-индола (3 г, 20,38 ммоль) в DMF (100 мл) добавляли порциями гидрид натрия (0,618 г, 24,46 ммоль). Через 15 минут добавляли по каплям раствор бензолсульфонилхлорида (3,94 мл, 30,6 ммоль) в 20 мл DMF. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов, после чего его концентрировали. Остаток растворяли в DCM (100 мл) и промывали водой и соляным раствором, сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (Biotage; 0%-100% DCM:Hex; 50 г-HP-силикагельная колонка), получая 3,65 г заявленного в заголовке соединения. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 3,65 (с, 3H), 6,60-6,75 (м, 2H), 7,08-7,22 (м, 2H), 7,40-7,62 (м, 3H), 7,77-7,92 (м, 3H). MS(ES) [M+H] 288,0.
b) Метил 7-(метилокси)-1-(фенилсульфонил)-1H-индол-4-карбоксилат
4
1
+
К охлажденной (0°C) суспензии хлорида алюминия (8,47 г, 63,5 ммоль) в DCM (100 мл) добавляли по каплям оксалилхлорид (5,56 мл, 63,5 ммоль). После перемешивания в течение 30 минут добавляли по каплям раствор 7-(метилокси)-1-(фенилсульфонил)-1H-индола (3,65 г, 12,70 ммоль) в DCM (15 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, после чего ее выливали в соляной раствор и экстрагировали DCM. DCM экстракты сушили над MgSO, фильтровали и упаривали досуха. Добавляли 100 мл MeOH к остатку и грели при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. Смесь концентрировали, и остаток очищали колоночной хроматографией (Biotage; 0%-100% DCM:Hex; 50 г-HP-силикагельная колонка), получая 2,3 г заявленного в заголовке соединения. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 3,70 (с, 3H), 3,95 (с, 3H), 6,67 (д, J=8,59 Гц, 1H), 7,41 (д, J=3,79 Гц, 1H), 7,46-7,53 (м, 2H), 7,54-7,62 (м, 1H), 7,79-7,86 (м, 2H), 7,94 (д, J=8,59 Гц, 1H), 7,98 (д, J=3,54 Гц, 1H). MS(ES) [M+H] 346,0.
c) Метил 1-(1-метилэтил)-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксилат
4
1
+
К охлажденному (баня с водой и льдом) раствору метил 7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксилата (350 мг, 1,706 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли гидрид натрия (56,0 мг, 2,217 ммоль). Через 10 минут добавляли 2-йодпропан (0,188 мл, 1,876 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, с последующим нагреванием при 50°C в течение 2 часов. Затем, реакционную смесь охлаждали в бане с водой и льдом и добавляли дополнительные количества гидрида натрия (56,0 мг, 2,217 ммоль) и 2-йодпропана (0,188 мл, 1,876 ммоль). Реакционную смесь грели при 50°C в течение 3 часов, после чего ее концентрировали. Остаток растворяли в DCM и промывали водой и соляным раствором, сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали, получая 400 мг заявленного в заголовке соединения. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,49 (д, 6H), 3,95 (с, 3H), 4,01 (с, 3H), 5,46 (дт, J=13,39, 6,69 Гц, 1H), 6,66 (д, J=8,34 Гц, 1H), 7,15 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,34 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,87 (д, J=8,34 Гц, 1H). MS(ES) [M+H] 248,2.
d) 1-(1-Метилэтил)-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоновая кислота
4
1
Добавляли 1н гидроксид натрия (6,47 мл, 6,47 ммоль) к раствору метил 1-(1-метилэтил)-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксилата (400 мг, 1,618 ммоль) в этаноле (30 мл) и грели при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. EtOH удаляли в вакууме, и остаток растворяли в 20 мл воды. Подкисляли раствор добавлением 1н HCl и экстрагировали DCM. Объединенные DCM экстракты промывали водой и соляным раствором, сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали, получая 350 мг заявленного в заголовке соединения. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,51 (д, 6H), 4,03 (с, 3H), 5,47 (дт, J=13,39, 6,69 Гц, 2H), 6,70 (д, J=8,34 Гц, 2H), 7,23 (д, J=3,28 Гц, 2H), 7,37 (д, J=3,03 Гц, 2H), 7,99 (д, J=8,34 Гц, 2H). MS(ES) [M+H]+234,0.
e) 1-(1-Метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
Добавляли 1-(1-метилэтил)-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (160 мг, 0,686 ммоль), 3-(аминометил)-6-метил-4-пропил-2(1H)-пиридинон (186 мг, 0,857 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (187 мг, 1,372 ммоль), EDC (263 мг, 1,372 ммоль) и N-метилморфолин (0,302 мл, 2,74 ммоль) к DMSO (10 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляли 25 мл воды и перемешивали в течение 10 минут. Отфильтровывали осадок и сушили в вакууме. Твердый остаток очищали колоночной хроматографией (Biotage; 0%-15% градиент MeOH:DCM; 10 г-HP-силикагельная колонка), получая 165 мг 1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамида. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,01 (т, 3H), 1,45 (д, J=6,57 Гц, 6H), 1,63 (м, J=7,45, 7,45, 7,45, 7,45, 7,33 Гц, 2H), 2,24 (с, 3H), 2,74 (т, J=7,58 Гц, 2H), 3,96 (с, 3H), 4,64 (шир.с, 2H), 5,45 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 5,97 (с, 1H), 6,62 (д, J=8,08 Гц, 1H), 6,94 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,24 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,53 (д, J=8,08 Гц, 1H), 7,74 (шир.с, 1H), 12,46 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H] 395,7.
Пример 370
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид
1
+
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1-(1-метилэтил)-7-(метилокси)-1H-индол-4-карбоксамид получали, следуя способу примера 369. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 1,45 (д, 6H), 2,21 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 3,96 (с, 3H), 4,63 (д, J=5,56 Гц, 2H), 5,35-5,57 (м, 1H), 5,94 (с, 1H), 6,61 (д, J=8,34 Гц, 1H), 6,94 (д, J=3,28 Гц, 1H), 7,23 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,52 (д, J=8,08 Гц, 1H), 7,66 (шир.с, 1H), 12,73 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H] 368,1.
Пример 371
6-Хлор-1-изопропил-2,3-диметил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид
a) Метил 6-хлор-1-изопропил-2,3-диметил-1H-индол-4-карбоксилат
2
4
6
1
+
К перемешиваемому раствору метил 2-бром-6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилата (0,50 г, 1,451 ммоль), триметилбороксина (0,30 мл, 2,146 ммоль) и карбоната калия (0,31 г, 2,243 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) в атмосфере N добавляли тетракиспалладий (0,18 г, 0,156 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 18 часов. Через 3 часа добавляли дополнительные 100 мкл триметилбороксина. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, растворяли в EtOAc, промывали водой, сушили (MgSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-10% EtOAc в гексане) давала продукт, метил 6-хлор-1-изопропил-2,3-диметил-1H-индол-4-карбоксилат (0,33 г, 1,180 ммоль, 81% выход) в виде прозрачного густого масла. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 7,80 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,28 (д, J=1,8 Гц, 1H), 4,81 (дт, J=6,9, 13,9 Гц, 1H), 3,87 (с, 3H), 2,39 (с, 3H), 2,13 (с, 3H), 1,51 (д, J=7,1 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 280,1 [M+H].
b) 6-Хлор-1-изопропил-2,3-диметил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид
+
К перемешиваемому раствору метил 6-хлор-1-изопропил-2,3-диметил-1H-индол-4-карбоксилата (320 мг, 1,144 ммоль) в метаноле (12 мл) и тетрагидрофуране (THF) (4 мл) добавляли 1н NaOH (4 мл, 4,00 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником (70°C масляная баня) в течение 18 часов. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, разбавляли водой, подкисляли 1н HCl (4 мл), фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме, получая карбоновую кислоту (0,30 г, 1,14 ммоль, 100%) в виде светло-желтого остатка. MS(ES)+ m/e 266,1 [M+H].
2
2
2
2
6
1
+
К карбоновой кислоте, полученной выше, добавляли 3-(аминометил)-6-метил-4-пропилпиридин-2(1H)-он (230 мг, 1,276 ммоль), HOAt (160 мг, 1,176 ммоль), дихлорметан (12 мл) и N,N-диметилформамид (4,00 мл) для растворения. При перемешивании добавляли EDC свободное основание (210 мг, 1,353 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали досуха в вакууме, затем очищали хроматографией на силикагеле (SF25-40 г, 50-100% EtOAc в CHCl). Чистые фракции объединяли и упаривали в вакууме. Оставшийся осадок растирали с 25% CHCl в гексане, фильтровали, промывали с гептаном и сушили в вакууме, получая продукт, 6-хлор-1-изопропил-2,3-диметил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид (431 мг, 1,007 ммоль, 88% выход) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 11,49 (с, 1H), 8,16 (т, J=5,1 Гц, 1H), 7,58 (д, J=1,8 Гц, 1H), 6,82 (д, J=1,8 Гц, 1H), 5,89 (с, 1H), 4,75 (дт, J=6,9, 13,9 Гц, 1H), 4,31 (д, J=5,1 Гц, 2H), 2,52 (2H под DMSO), 2,33 (с, 3H), 2,12 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 1,61-1,51 (м, 2H), 1,49 (д, J=6,8 Гц, 6H), 0,94 (т, J=7,3 Гц, 3H). MS(ES)+ m/e 428,3 [M+H].
Пример 372
6-Хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид
a) Метил 6-хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат
2
2
2
4
4
2
2
6
2
1
+
+
К перемешиваемой смеси метил 2-бром-6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилата (1,0 г, 2,90 ммоль), ((диметиламино)метил)трифторбората калия (0,5 г, 3,03 ммоль) и фосфата калия (1,9 г, 8,95 ммоль) (продували N)) в диоксане (3 мл) и воде (3 мл) добавляли ацетат палладия (II) (25 мг, 0,111 ммоль) и sPhos (90 мг, 0,219 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение 18 часов в атмосфере N. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и водой, и фильтровали, удаляя нерастворимый осадок. EtOAc фазу удаляли, сушили (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-40 г, 0-2% (5% NHOH/MeOH) в CHCl). Фракции с продуктом объединяли, упаривали досуха в вакууме, получая продукт, метил 6-хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат (0,45 г, 1,394 ммоль, 48,0% выход) в виде светло-желтого масла (чистота только 84% LCMS). Его применяли как есть в следующей реакции. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 7,82 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,28 (д, J=1,8 Гц, 1H), 4,96 (дт, J=7,1, 14,1 Гц, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,52 (с, 2H), 2,17 (с, 3H), 2,16 (с, 6H), 1,53 (д, J=7,1 Гц, 6H). MS(ES)+m/e 323,2 [M+H], 278,1 [M+H] -45 (HNMe).
b) Гидрохлоридная соль 6-хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновой кислоты
2
6
2
1
+
+
К метил 6-хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилату (0,44 г, 1,363 ммоль) добавляли 6н HCl (20 мл, 120 ммоль). Реакционную смесь продували N, присоединяли обратный холодильник, нагревали до 80°C и перемешивали в течение 18 часов. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли равным объемом воды, промывали EtOAc и упаривали досуха в вакууме, получая продукт, гидрохлоридную соль 6-хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (0,42 г, 1,216 ммоль, 89% выход) в виде бежевого твердого остатка. (86% чистота LCMS, содержит ~10% дезхлорного побочного продукта из предыдущей стадии) Применяли как есть в следующей стадии. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 13,19 (шир.с, 1H), 10,45 (шир.с, 1H), 7,90 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,33 (д, J=1,8 Гц, 1H), 4,91 (квин., J=6,9 Гц, 1H), 4,58 (д, J=5,6 Гц, 2H), 2,79 (д, J=4,8 Гц, 6H), 2,34 (с, 3H), 1,58 (д, J=6,8 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 309,2 [M+H], 264,1 [M+H] -45 (HNMe).
c) 6-Хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид
4
2
2
6
1
+
К гидрохлоридной соли 6-хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (0,42 г, 1,216 ммоль), 3-(аминометил)-6-метил-4-пропилпиридин-2(1H)-ону (0,22 г, 1,221 ммоль) и HOAt (0,17 г, 1,249 ммоль) добавляли дихлорметан (16 мл), N,N-диметилформамид (4 мл) и N-метилморфолин (135 мкл, 1,228 ммоль). Смесь перемешивали и добавляли EDC свободное основание (0,20 г, 1,288 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали досуха в вакууме и очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-8% (5% NHOH в MeOH) в CHCl). Чистые фракции объединяли, упаривали досуха, затем растворяли в 20% EtOAc в гексане. Соскребали выкристаллизовавшийся продукт, который фильтровали и промывали с гексаном, получая продукт, 6-хлор-2-((диметиламино)метил)-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид (362 мг, 0,769 ммоль, 63,2% выход) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 11,49 (с, 1H), 8,24 (т, J=4,9 Гц, 1H), 7,61 (д, J=1,8 Гц, 1H), 6,83 (д, J=1,8 Гц, 1H), 5,89 (с, 1H), 4,91 (квин., J=7,0 Гц, 1H), 4,31 (д, J=5,1 Гц, 2H), 3,47 (с, 2H), 2,52 (2H под DMSO), 2,14 (с, 6H), 2,12 (с, 3H), 2,10 (с, 3H), 1,62-1,53 (м, 2H), 1,51 (д, J=7,1 Гц, 6H), 0,94 (т, J=7,3 Гц, 3H). MS(ES)+ m/e 471,3 [M+H].
Пример 373
2-(2-Аминоэтил)-6-хлор-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид
a) Метил 2-(2-((трет-бутоксикарбонил)амино)этил)-6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат
2
3
2
2
4
К перемешиваемой смеси метил 2-бром-6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилата (0,37 г, 1,074 ммоль), (2-((трет-утоксикарбонил)амино)этил)трифторбората калия (0,30 г, 1,195 ммоль) и CsCO (1,0 г, 3,07 ммоль) (продували N) в толуоле (12 мл) и воде (4 мл) добавляли ацетат палладия (II) (20 мг, 0,089 ммоль) и RuPhos (80 мг, 0,171 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 95°C и перемешивали в течение 18 часов в атмосфере N. LCMS все еще показывало исходное соединение. Добавляли вторую порцию ацетата палладия (II) (20 мг, 0,089 ммоль) и RuPhos (80 мг, 0,171 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 95°C в течение следующих 18 часов. LCMS показала, что реакция на данный момент по большей части завершилась. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и водой, и фильтровали, удаляя нерастворимые вещества. EtOAc фазу удаляли, сушили (MgSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-25% EtOAc в гексане). Три фракции собирали. Первая фракция содержала значительное количество дебромидного продукта, вторая фракция представляла собой смесь неизвестных соединений, и последняя фракция содержала продукт (обратите внимание; противоположный порядок относительно ТСХ).
1
+
6
Фракции с продуктом объединяли, упаривали досуха в вакууме, растирали с гексаном, фильтровали и сушили в вакууме, получая продукт, метил 2-(2-((трет-бутоксикарбонил)амино)этил)-6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат (148 мг, 0,362 ммоль, 33,7% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 7,81 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,28 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,00 (т, J=5,6 Гц, 1H), 3,87 (с, 3H), 3,07 (кв., J=6,7 Гц, 2H), 2,97-2,85 (м, 2H), 2,13 (с, 3H), 1,56 (д, J=7,1 Гц, 6H), 1,36 (с, 9H). MS(ES)+ m/e 409,2 [M+H].
b) 2-(2-Аминоэтил)-6-хлор-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамид
+
К 3-метил-1H-индол-4-карбоксилату (140 мг, 0,342 ммоль) в метаноле (9 мл) и тетрагидрофуране (3 мл) добавляли 1н NaOH (2 мл, 2,000 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником (70°C масляная баня) в течение 18 часов (реакция протекала очень медленно при 60°C только с 1 мл 1н NaOH). Реакционную смесь концентрировали в вакууме, разбавляли водой, подкисляли 1н HCl (2 мл), фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме, получая карбоновую кислоту (0,14 г, 0,354 ммоль, 100%) в виде белого твердого остатка. MS(ES)+ m/e 395,0 [M+H].
2
2
+
К карбоновой кислоте, полученной выше, добавляли 3-(аминометил)-6-метил-4-пропилпиридин-2(1H)-он (80 мг, 0,444 ммоль), HOAt (60 мг, 0,441 ммоль), дихлорметан (12 мл) и N,N-диметилформамид (3,00 мл) для растворения. При перемешивании добавляли EDC свободное основание (70 мг, 0,451 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали досуха в вакууме, затем очищали хроматографией на силикагеле (SF25-40 г, 50-100% EtOAc в CHCl), получая Boc защищенный конечный продукт (0,20 г, 3,59 ммоль, 100%) в виде белого твердого остатка. MS(ES)+ m/e 557,3 [M+H].
2
+
Остаток, полученный выше, растворяли в MeOH (5 мл), затем обрабатывали при перемешивании раствором 4н HCl в диоксане (10 мл, 40,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут, затем упаривали досуха в вакууме. Твердый остаток растирали с EtO, фильтровали, промывали с гексаном и сушили в вакууме, получая продукт, гидрохлоридную соль 2-(2-аминоэтил)-6-хлор-1-изопропил-3-метил-N-((6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1H-индол-4-карбоксамида (161 мг, 0,326 ммоль, 95% выход) в виде светло-желтого твердого остатка. MS(ES)+ m/e 457,2 [M+H].
Промежуточные соединения
Промежуточное соединение 1
Гидрохлорид 3-(аминометил)-4,6-диметил-2(1H)-пиридинона
2
1
Палладий на угле (10%) (3,24 г) помещали в 2л сухую Parr колбу и добавляли небольшое количество уксусной кислоты. Затем добавляли 4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-карбонитрил (30 г, 202,7 ммоль), ацетат натрия (30,75 г, 375,0 ммоль), оксид платины (0,218 г) и уксусную кислоту (1 л). Колбу закрывали крышкой, помещали в Parr аппарат и встряхивали в атмосфере H (100 ф/кв.дюйм) в течение 2 дней. Реакционную смесь фильтровали. Растворитель удаляли, получая остаток, который обрабатывали 150 мл концентрированной HCl, и образовавшийся осадок фильтровали. Желтый фильтрат концентрировали. К неочищенному соединению добавляли 30 мл концентрированной HCl и 150 мл EtOH, содержимое охлаждали до 0°C и перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Образовавшийся осадок фильтровали, промывали холодным EtOH, эфиром и сушили. Продукт собирали в количестве 36 г. Данную порцию объединяли с другими порциями, полученными в меньшем масштабе, и растирали с эфиром, получая 51 г чистого соединения. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 11,85 (шир.с, 1H), 8,13 (шир.с, 3H), 5,93-6,01 (м, 1H), 3,72-3,80 (м, 2H), 2,22 (с, 3H), 2,16 (с, 3H).
Промежуточное соединение 2
3-(Аминометил)-6-метил-4-(трифторметил)-2(1H)-пиридинон
2
2
6
1
В высушенную 500 мл Parr колбу, снабженную впускным отверстием для азота, добавляли ацетат натрия (1,502 г, 18,30 ммоль), 10% палладий на угле (1,579 г, 0,742 ммоль), оксид платины (IV) (0,011 г, 0,049 ммоль) и небольшое количество уксусной кислоты для увлажнения катализатора в потоке азота. Затем, добавляли 2-гидрокси-6-метил-4-(трифторметил)-3-пиридинкарбонитрил (2,0 г, 9,89 ммоль), с последующим добавлением уксусной кислоты (175 мл) в атмосфере азота. Содержимое герметично закрывали, помещали в Parr шейкер и оставляли реагировать при 40 ф/кв.дюйм H в течение приблизительно 6 часов, поддерживая H при 20-40 ф/кв.дюйм (колбу перезаполняли дважды). Колбу продували азотом, и реакционную смесь фильтровали через целит, и остаток на фильтре дополнительно промывали небольшим количеством уксусной кислоты. Летучие компоненты удаляли в вакууме, получая остаток, который сушили при высоком вакууме в течение 45 минут. Твердый остаток суспендировали в концентрированной HCl (12 мл), перемешивали и фильтровали. Прозрачный фильтрат концентрировали в вакууме, и остаток сушили при высоком вакууме. Объединенный твердый остаток суспендировали в концентрированной HCl (2 мл) и разбавляли EtOH (13 мл). Содержимое встряхивали и хранили при приблизительно 0°C (холодильник) в течение 30 минут, получая белый осадок. Осадок фильтровали и промывали холодным этанолом (5 мл). Осадок фильтровали и сушили в вакуумной печи в течение 1 часа, получая 3-(аминометил)-6-метил-4-(трифторметил)-2(1H)-пиридинон (0,95 г, 40%). LCMS E-S (M+H) = 206,9. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 2,31 (с, 3H), 3,40-3,62 (м, 2H), 3,87 (д, J=5,05 Гц, 2H), 8,12-8,37 (м, 3H).
Промежуточное соединение 3
3-(Аминометил)-4-циклогексил-6-метил-2(1H)-пиридинон
3a) 4-Циклогексил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
2
2
6
1
К перемешиваемой суспензии CrCl (58 г, 472,8 ммоль) в THF (1500 мл) добавляли THF раствор (500 мл) 1,1-дихлор-2-пропанона (10 г, 78,8 ммоль) и циклогексанкарбальдегид (8,84 г, 78,8 ммоль). Реакционную смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 2 часов, и затем гасили добавлением 1,0 M HCl. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток (10 г) добавляли к раствору DMSO (150 мл), содержащему трет-BuOK (7,5 г, 65,7 ммоль) и цианоацетамид (6,1 г, 72,3 ммоль), и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли дополнительное количество трет-BuOK (22,5 г, 197,1 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в атмосфере кислорода в течение дополнительного 1 часа. Содержимое продували аргоном, разбавляли 4 объемами HO, и затем 5 объемами 4н HCl, которые добавляли медленно. Реакционную смесь фильтровали, промывали водой и сушили, получая 4-циклогексил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (4,5 г, 32%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 6,25 (с, 1H), 2,61-2,65 (м, 1H), 2,22 (с, 3H), 1,66-1,79 (м, 4H), 1,24-1,46 (м, 6H).
3b) 3-(Аминометил)-4-циклогексил-6-метил-2(1H)-пиридинон
4
2
6
1
К охлажденному в ледяной бане THF (100 мл) раствору продукта стадии 1 (2 г, 9,26 ммоль) добавляли NaBH (0,81 г, 21,3 ммоль) и I (2,3 г, 9,26 ммоль), и смесь перемешивали в течение 30 минут. Затем, реакционную смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов, и затем охлаждали до комнатной температуры. После охлаждения до 0°C, реакционную смесь подкисляли медленным добавлением 3н HCl (1 мл). Реакционную смесь концентрировали в вакууме, и неочищенный продукт очищали обращено-фазовой ВЭЖХ, получая 3-(аминометил)-4-циклогексил-6-метил-2(1H)-пиридинон в виде твердого остатка (0,5 г, 25%). LCMS E-S (M+H) = 221,1. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,8-11,9 (шир.с, 1H), 7,80-7,93 (шир.с, 3H), 6,07 (с, 1H), 3,69 (с, 2H), 2,67-2,75 (м, 1H), 2,17 (с, 3H), 1,58-1,72 (м, 5H), 1,19-1,41 (м, 5H).
Промежуточное соединение 4
3-(Аминометил)-4-циклопропил-6-метил-2(1H)-пиридинон
1
6
Заявленное в заголовке соединение получали аналогичным способом, как описано для 3-(аминометил)-4-циклогексил-6-метил-2(1H)-пиридинона (промежуточное соединение 3), применяя 4-циклопропил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (5 г, 28,7 ммоль). Получали: 0,50 г (10%). LCMS E-S (M+H) = 179,1. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,76-11,78 (шир.с, 1H), 7,82-7,92 (шир.с, 3H), 5,61 (с, 1H), 3,94-3,99 (м, 2H), 2,11 (с, 3H), 1,98-2,05 (м, 1H), 0,95-1,01 (м, 2H), 0,74-0,79 (м, 2H).
Промежуточное соединение 5
3-(Аминометил)-6-метил-4-пропил-2(1H)-пиридинон
5a) 6-Метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
2
6
1
К раствору DMSO (300 мл), содержащему трет-BuOK (20 г, 178 ммоль) и цианоацетамид (16,5 г, 196 ммоль), добавляли (3E)-3-гептен-2-он (20 г, 178 ммоль), и содержимое перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли дополнительное количество трет-BuOK (60 г, 534 ммоль), и реакционную смесь помещали в атмосферу кислорода на следующий 1 час. Реакционную смесь продували аргоном, разбавляли 4 объемами HO, и затем 5 объемами 4н HCl, которые добавляли медленно. Реакционную смесь фильтровали, промывали водой и сушили, получая 6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (10 г, 32%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 12,25-12,40 (шир.с, 1H), 6,18 (с, 1H), 2,53 (т, 2H), 2,22 (с, 3H), 1,57-1,64 (м, 2H), 0,84 (т, 3H).
5b) 3-(Аминометил)-6-метил-4-пропил-2(1H)-пиридинон
1
6
Заявленное в заголовке соединение получали аналогичным способом, как описано для 3-(аминометил)-4-циклогексил-6-метил-2(1H)-пиридинона (промежуточное соединение 3), применяя 6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (2 г, 11,2 ммоль). Получали: 1,2 г (60%). LCMS E-S (M+H) = 181,1. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 7,85-7,95 (шир.с, 3H), 5,99 (с, 1H), 3,80-3,85 (м, 2H), 2,42 (т, 2H), 2,14 (с, 3H), 1,43-1,49 (м, 2H), 0,86 (т, 3H).
Промежуточное соединение 6
3-(Аминометил)-6-метил-4-фенил-2(1H)-пиридинон
1
6
Заявленное в заголовке соединение получали аналогичным способом, как описано для 3-(аминометил)-6-метил-4-пропил-2(1H)-пиридинона (промежуточное соединение 5), применяя (3E)-4-фенил-3-бутен-2-он (20 г, 137 ммоль). LCMS E-S (M+H) = 215,0. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 12,2-12,3 (шир.с, 1H), 7,88-8,00 (шир.с, 3H), 7,43-7,51 (м, 3H), 7,29-7,38 (м, 2H), 6,08 (с, 1H), 3,67-3,70 (м, 2H), 2,23 (с, 3H).
Промежуточное соединение 7
3-(Аминометил)-6-метил-4-(1-метилэтил)-2(1H)-пиридинон
1
6
Заявленное в заголовке соединение получали аналогичным способом, как описано для 3-(аминометил)-6-метил-4-пропил-2(1H)-пиридинона (промежуточное соединение 5), применяя (3E)-5-метил-3-гексен-2-он (20 г, 137 ммоль). LCMS E-S (M+H) = 181,1. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,8-11,9 (шир.с, 1H), 7,86-7,96 (шир.с, 3H), 6,10 (с, 1H), 3,82-3,86 (м, 2H), 3,02-3,09 (м, 1H), 2,17 (с, 3H), 1,08 (д, 6H).
Промежуточное соединение 8
3-(Аминометил)-4-метил-6-пропил-2(1H)-пиридинон
8a) 4-Метил-2-оксо-6-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
2
2
3
2
4
6
1
К раствору NaNH (32,5 г, 862 ммоль) в безводном эфире (500 мл) при 30°C добавляли по каплям смесь этилового эфира масляной кислоты (50 г, 431 ммоль) и ацетона (37,5 г, 646,5 моль). После добавления, реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов. Реакционную смесь выливали в ледяную воду при перемешивании. Добавляли дополнительное количество эфира, и слои разделяли. Водный слой подкисляли до pH 5,0 2н HCl, и затем до pH 7,5 NaCO. Затем, водный слой экстрагировали эфиром. Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт, 2,4-гептандион (20 г, 156 ммоль) и 2-цианоацетамид (13,12 г, 156 ммоль) суспендировали в EtOH (160 мл) при 75°C, с последующим добавлением пиперидина (13,2 г, 156 ммоль). Содержимое перемешивали и грели при кипячении с обратным холодильником в течение 1 часа. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Собранный твердый остаток суспендировали в воде и перемешивали в течение 1 часа. Смесь фильтровали и сушили, получая 4-метил-2-оксо-6-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (11 г, 40%). LCMS E-S (M+H) = 181,1. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 12,3-12,4 (шир.с, 1H), 6,25 (с, 1H), 3,64 (с, 3H), 2,50 (т, 2H), 1,63 (м, 2H), 0,94 (т, 3H).
8b) 3-(Аминометил)-4-метил-6-пропил-2(1H)-пиридинон
1
6
Ацетат натрия (3,5 г, 42,6 ммоль), палладий на угле (0,81 г) и оксид платины (0,1 г) помещали в высушенную Parr колбу, продутую азотом, с последующим добавлением небольшого количества уксусной кислоты (для увлажнения катализатора). Раствор 4-метил-2-оксо-6-пропил-1,2-дигидропиридин-3-карбонитрила (5 г, 28 ммоль) в уксусной кислоте добавляли в Parr колбу, с последующим добавлением уксусной кислоты (200 мл). Колбу закрывали крышкой, помещали в Parr аппарат и гидрировали при 45 ф/кв.дюйм в течение 12 часов. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ, получая заявленное в заголовке соединение (TFA соль) в количестве 4,1 г (87%). LCMS E-S (M+H)) = 181,1. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 11,8-11,9 (шир.с, 1H), 7,83-7,88 (шир.с, 3H), 5,99 (с, 1H), 3,77-3,81 (м, 2H), 2,37 (т, 2H), 1,53 (м, 2H), 0,83 (т, 3H).
Промежуточное соединение 9
Гидрохлорид 3-(аминометил)-6-циклопропил-4-метил-2(1H)-пиридинона
9a) 1-Циклопропил-1,3-бутандион
4
3
1
К перемешиваемому раствору THF (100 мл) добавляли трет-бутоксид калия (5,60 г, 49,5 ммоль), с последующим добавлением смеси циклопропилметилкетона (3,27 мл, 33 ммоль) и этилацетата (9,69 мл, 99 ммоль) в 30 мл THF при 35°C, через капельную воронку в течение 25 минут. Содержимое грели и перемешивали при 60°C. Через 3 часа содержимое переставали нагревать и охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь аккуратно разбавляли 30 мл 2н HCl и перемешивали в течение 10 минут. Смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (3×50 мл), и объединенные органические слои промывали соляным раствором (1×50 мл). Органический слой сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (элюент: 0-15% EtOAc в гексане) с хорошим разделением давала 1-циклопропил-1,3-бутандион в виде светло-желтого масла, 3,9 г с ~75% чистотой (остаточный растворитель), с суммарным выходом 70%. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ м.д. 0,89-0,96 (м, 2H), 1,09-1,15 (м, 2H), 1,59-1,69 (м, 1H), 2,04 (с, 3H), 5,63 (с, 1H), 15,5-16,0 (шир.с, 1H).
9b) 6-Циклопропил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
1
3
К перемешиваемому раствору этанола (5 мл) добавляли 1-циклопропил-1,3-бутандион (505 мг, 3,00 ммоль) и цианоацетамид (252 мг, 3,00 ммоль), и гетерогенное содержимое грели до перехода в гомогенное состояние (приблизительно 75°C). Добавляли пиперидин (0,395 мл, 4,00 ммоль), и смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 30 минут. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, что приводило к выпадению осадка. Твердый осадок фильтровали и откладывали. Фильтрат концентрировали в вакууме, и маслообразный остаток обрабатывали минимальным количеством EtOAc, и затем 10 мл гексана, получая вторую порцию твердого вещества. Порции твердого продукта объединяли, суспендировали в воде (7 мл), интенсивно перемешивали и фильтровали в вакууме, получая 6-циклопропил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил в виде практически белого твердого остатка (380 мг, 73%). LCMS E-S (M+H) = 175,1. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ м.д. 1,01-1,09 (м, 2H), 1,28 (дд, J=8,59, 2,27 Гц, 2H), 1,95-2,01 (м, 1H), 2,43 (с, 3H), 5,82 (с, 1H).
9c) 1,1-Диметилэтил [(6-циклопропил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамат
2
2
4
4
3
3
4
6
1
6-Циклопропил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (0,35 г, 2,01 ммоль) добавляли к метанолу (20 мл), и перемешиваемое содержимое охлаждали до -10°C. Затем, добавляли ди-трет-бутилоксикарбонил (0,933 мл, 4,02 ммоль), и суспензию перемешивали в течение 15 минут. Затем, добавляли к NiCl-6HO (0,055 г, 0,201 ммоль) в твердом виде и перемешивали в течение 5 минут. Затем, добавляли 6 порциями NaBH (0,532 г, 14,06 ммоль) с 5 минутным интервалом между каждым добавлением. Затем, баню со льдом удаляли, и содержимое перемешивали с нагреванием до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до -10°C, с последующим добавлением еще 3 порций NaBH (0,532 г, 14,06 ммоль). Баню со льдом удаляли, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Содержимое гасили добавлением диэтилэтиленамина (0,218 мл, 2,01 ммоль) и перемешивали в течение 45 минут при комнатной температуре. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток суспендировали в EtOAc и насыщенном NaHCO. Органический слой промывали дополнительным количеством NaHCO. Слои разделяли, и органический слой сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (элюент: 10% метанол в дихлорметане). Собранный продукт сушили при высоком вакууме в течение 1 часа, и затем обрабатывали эфиром и фильтровали. После сушки в вакуумной печи при 45°C в течение 2 часов собирали 1,1-диметилэтил[(6-циклопропил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамат (0,28 г, 50%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,73-0,80 (м, 2H), 0,88-0,96 (м, 2H), 1,36 (с, 9H), 1,70-1,82 (м, 1H), 2,11 (с, 3H), 3,95 (д, J=5,31 Гц, 2H), 5,66 (с, 1H), 6,51 (т, J=4,80 Гц, 1H), 11,50 (шир.с, 1H).
9d) Гидрохлорид 3-(аминометил)-6-циклопропил-4-метил-2(1H)-пиридинона
1
6
1,1-Диметилэтил[(6-циклопропил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамат (0,28 г, 1,006 ммоль) добавляли к EtOAc (9 мл) и метанолу (1,0 мл). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 5 минут, с последующим добавлением 4 M HCl в диоксане (5,03 мл, 20,12 ммоль), и содержимое перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем, летучие компоненты удаляли в вакууме, получая твердый остаток. Твердый остаток растирали с эфиром, фильтровали и сушили в вакуумной печи при 45°C в течение 4 часов. Собирали заявленное в заголовке соединение (0,22 г, 100% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,78-0,86 (м, 2H), 0,95-1,03 (м, 2H), 1,83 (тт, J=8,46, 5,05 Гц, 1H), 2,16-2,22 (м, 3H), 3,75 (кв., J=5,47 Гц, 2H), 5,79 (с, 1H), 8,02 (шир.с, 3H), 11,92 (шир.с, 1H).
Промежуточное соединение 10
Гидрохлорид 3-(аминометил)-4-этил-6-метил-2(1H)-пиридинона
10а) Гекс-3-ен-2-он
1
3
К перемешиваемому раствору 1-(трифенилфосфоранилиден)-2-пропанона (100 г, 307 ммоль) в DCM (500 мл) добавляли пропиональдегид (140 мл, 1929 ммоль) при комнатной температуре. Затем, реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь контролировали ТСХ. Растворитель (DCM) отгоняли стандартной отгонкой. Затем, остаток перегоняли, применяя фракционную перегонку в вакууме (~450 мбар), и выделяли требуемый продукт. Заявленное в заголовке соединение, гекс-3-ен-2-он (20 г, 66%) собирали при 110°C. H ЯМР (CDCl,400 МГц) δ м.д. 1,071-1,121 (т, 3H, J=7,4 Гц), 2,250-2,299 (м, 5H), 6,054-6,094 (д, 1H, J=16 Гц), 6,823-6,895 (м, 1H).
10b) 4-Этил-1,2-дигидро-6-метил-2-оксопиридин-3-карбонитрил
1
3
К перемешиваемому раствору трет-BuOK (22,85 г, 204,08 ммоль) и цианоацетамида (18,8 г, 224,1 ммоль) в DMSO (300 мл) добавляли гекс-3-ен-2-он (20 г, 204,08 ммоль) в атмосфере аргона при комнатной температуре. Затем, реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, и затем добавляли дополнительное количество трет-BuOK (68,5 г, 612,05 ммоль). Аргон заменяли на кислород, и смесь перемешивали в течение 48 часов при комнатной температуре в присутствии кислорода. Реакцию контролировали ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и разбавляли водой (100 мл), с последующим добавлением 4н HCl (120 мл). Смесь перемешивали в течение 15 минут, и полученный в результате твердый остаток фильтровали. Твердый остаток промывали водой (1 л) и сушили, получая заявленное в заголовке соединение, 4-этил-1,2-дигидро-6-метил-2-оксопиридин-3-карбонитрил (10,5 г, 31%), в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ м.д. 1,148-1,185 (т, 3H, J=7,4 Гц), 2,237 (с, 3H), 2,557-2,614 (м, 2H), 6,211 (с, 1H), 12,330 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H]+ 161,06. MS(ES).
10c) 3-(Аминометил)-4-этил-6-метилпиридин-2(1H)-он
3
6
1
+
К суспензии никеля Ренея (6 г) в метаноле (200 мл) добавляли 4-этил-1,2-дигидро-6-метил-2-оксопиридин-3-карбонитрил (10 г, 61,7 ммоль) и метанольный аммиак (750 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре под давлением водорода (80 ф/кв.дюйм) в течение 48 часов. Реакционную смесь фильтровали через целит и промывали метанолом (250 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали фильтровальной колонкой, применяя силикагель (60-120 меш), элюируя 10% MeOH в CHCl, получая 3-(аминометил)-4-этил-6-метилпиридин-2(1H)-он (5,6 г, 54%) в виде грязно-белого твердого остатка. H ЯМР (DMSO-D, 400 МГц) (свободный амин): δ м.д. 1,063-1,101 (т, 3H, J=7,6 Гц), 2,101 (с, 3H), 2,412-2,449 (м, 2H), 3,448 (с, 2H), 5,835 (с, 1H). MS(ES)[M+H] 167,06.
10d) Гидрохлорид 3-(Аминометил)-4-этил-6-метилпиридин-2(1H)-она
1
+
6
3-(Аминометил)-4-этил-6-метилпиридин-2(1H)-он, (5,6 г, 33 ммоль) суспендировали в DCM (560 мл) и нерастворимое содержимое/частицы фильтровали. Фильтрат концентрировали и сушили. Остаток растворяли в DCM (10 мл) и добавляли при 0°C 4 M HCl в 1,4-диоксане (16 мл, 66 ммоль) и перемешивали в течение 10 минут, после чего реакционную смесь концентрировали при высоком вакууме и сушили. Полученный в результате неочищенный твердый остаток растирали с гексаном (150 мл) и фильтровали. Твердый остаток сушили в вакууме. Собирали гидрохлорид 3-(аминометил)-4-этил-6-метилпиридин-2(1H)-она (5,9 г, 86%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d)δ м.д. 1,082-1,120 (т, 3H, J=7,6 Гц), 2,179 (с, 3H), 2,503-2,544 (м, 2H), 3,785-3,798 (д, 2H, J=5,2 Гц), 6,024 (с, 1H), 7,985 (шир.с, 2H), 11,858 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H] 167,2.
Промежуточное соединение 11
3-(Аминометил)-6-этил-4-метил-2(1H)-пиридинон
11a) 4-Этил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
3
2
2
6
1
К раствору трет-BuOK (17,2 г, 153 ммоль) и цианоацетамида (13 г, 153 ммоль) в CHCN (225 мл) добавляли (3E)-3-гексен-2-он (15 г, 153 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляли дополнительное количество трет-BuOK (51,4 г), и N заменяли на кислород. После перемешивания в течение 1 часа без внешнего охлаждения, смесь разбавляли 4н HCl, которую добавляли медленно и с хорошим перемешиванием. Смесь фильтровали, промывали EtOH, сушили, получая 6-этил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (5 г, 21%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12,33 (шир.с, 1H), 6,18 (с, 1H), 2,45 (кв., 2H), 2,30 (с, 3H), 1,11 (т, 3H).
11b) 3-(Аминометил)-6-этил-4-метил-2(1H)-пиридинон
4
2
4
6
1
К охлажденному в бане со льдом THF раствору (200 мл) 6-этил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрила (7 г, 43,2 ммоль) добавляли NaBH (4,2 г, 108 ммоль) и I (11,2 г, 43,2 ммоль), и содержимое перемешивали в течение 30 минут. Затем, реакционную смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и аккуратно нейтрализовали медленным добавлением 4н HCl при 0°C. Смесь сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Продукт очищали ВЭЖХ, получая 3-(аминометил)-6-этил-4-метил-2(1H)-пиридинон в виде TFA соли (1,9 г, 26,4%). LCMS MH+ = 167,1 H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,82 (шир.с, 1H), 7,82 (шир.с, 3H), 5,97 (с, 1H), 3,75-3,77 (м, 2H), 2,39 (кв., 2H), 2,17 (с, 3H), 1,09 (т, 3H).
Промежуточное соединение 12
3-(Аминометил)-6-метил-4,4ʹ-бипиридин-2(1H)-он
12a) (2Z)-3-Гидрокси-1-(4-пиридинил)-2-бутен-1-он
2
3
6
1
К раствору этил 4-пиридинкарбоксилата (30 г, 198 ммоль) и ацетона (34,58 г, 595 ммоль) в THF (150 мл) медленно добавляли NaOMe (12,87 г, 238 ммоль) при 35-40°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем грели при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, получая твердый остаток, который промывали трет-BuOMe, и растворяли в HO. Раствор подкисляли уксусной кислотой, и полученный в результате маслообразный продукт экстрагировали CHCl. Растворитель удаляли в вакууме, и получали неочищенный продукт (12 г, 37%), и его применяли без дополнительной очистки. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8,73 (д, 2H), 7,76 (д, 2H), 6,63 (с, 1H), 2,21 (с, 3H); обратите внимание: енольный OH не проявляется.
12b) 6-Метил-2-оксо-1,2-дигидро-4,4ʹ-бипиридин-3-карбонитрил и 4-метил-6-оксо-1,6-дигидро-2,4ʹ-бипиридин-5-карбонитрил
2
2
6
1
К раствору (2Z)-3-гидрокси-1-(4-пиридинил)-2-бутен-1-она (8 г, неочищенный, 49 ммоль) и цианоацетамида (4,12 г, 49 ммоль) в безводном EtOH (100 мл) добавляли пиперидин (4,17 г, 49 ммоль) в атмосфере N при 75°C. Смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 1 часа, и затем охлаждали до комнатной температуры. После фильтрования, твердый остаток собирали и промывали HO, получая неочищенный продукт (4 г) в виде двух изомеров. После разделения ВЭЖХ получали 1,8 г 6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-4,4ʹ-бипиридин-3-карбонитрила и 1,2 г 4-метил-6-оксо-1,6-дигидро-2,4ʹ-бипиридин-5-карбонитрила. Идентичность 6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-4,4ʹ-бипиридин-3-карбонитрила устанавливали nOE анализом. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12,79 (шир.с, 1H), 8,75 (д, 2H), 7,58 (д, 2H), 6,37 (с, 1H), 2,31 (с, 3H).
12c) 3-(Аминометил)-6-метил-4,4ʹ-бипиридин-2(1H)-он
4
2
6
2
1
К охлажденному в бане со льдом THF (100 мл) раствору 6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-4,4ʹ-бипиридин-3-карбонитрила (4 г, 18,9 ммоль) добавляли NaBH (1,43 г, 37,9 ммоль) и I (4,81 г, 18,9 ммоль), и смесь перемешивали в течение 0,5 часов. Затем, реакционную смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до 0°C, реакционную смесь доводили до pH 5 4н HCl. Смесь концентрировали в вакууме, получая неочищенное соединение, которое очищали ВЭЖХ, получая 3-(аминометил)-6-метил-4,4ʹ-бипиридин-2(1H)-он (1,9 г, 31%) в виде TFA соли. LCMS MH+= 216,0 H ЯМР (400 МГц, DMSO-dв DO) δ 8,87 (д, 2H), 7,87 (д, 2H), 6,13 (с, 1H), 3,65 (шир.с, 2H), 2,17 (с, 3H).
Промежуточное соединение 13
3-(Аминометил)-6-циклобутил-4-метил-2(1H)-пиридинон
13a) Этилциклобутанкарбоксилат
2
4
2
2
4
3
3
1
К раствору циклобутанкарбоновой кислоты (50 г, 500 ммоль) в EtOH (1,2 л) медленно добавляли HSO (20 мл) при комнатной температуре. Раствор перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи, и затем охлаждали и выливали в HO. Водный слой экстрагировали эфиром. Объединенные органические слои промывали соляным раствором, сушили над NaSO и концентрировали в вакууме, получая этилциклобутанкарбоксилат в виде бесцветного масла (44 г, 69%). H ЯМР (400 МГц, CDCl-d) δ 4,04 (кв., 2H), 3,04 (м, 1H), 2,12 (м, 4H), 1,88 (м, 2H), 1,18 (т, 3H).
13b) 1-Циклобутил-1,3-бутандион
2
2
2
3
2
4
3
3
1
К раствору NaNH (11,7 г, 91 ммоль) в безводном эфире (150 мл) в атмосфере N при 30°C добавляли по каплям смесь этилциклобутанкарбоксилата (19,2 г, 150 ммоль) и ацетона (21,75 г, 375 ммоль). После добавления, реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов, затем выливали в ледяную воду при перемешивании. Добавляли эфир, и непрореагировавшие компоненты экстрагировали в органическую фазу. Прозрачный водный экстракт подкисляли до pH 5,0 2н HCl, и затем до pH 7,5 NaCO. Раствор экстрагировали эфиром. Объединенные органические слои сушили (NaSO), фильтровали и концентрировали, получая неочищенный продукт, 1-циклобутил-1,3-бутандион (9,7 г, 76%), который применяли в следующей стадии без дополнительной очистки. H ЯМР (400 МГц, CDCl-d) δ 5,42 (с, 1H), 3,66 (с, 1H), 2,11-2,23 (м, 4H), 2,02 (с, 3H), 1,93-1,99 (м, 2H).
13c) 6-Циклобутил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил и 4-циклобутил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
1
6
2
К раствору 1-циклобутил-1,3-бутандиона (1,5 г, 10,7 ммоль) и цианоацетамида (1,07 г, 12,8 ммоль) в EtOH (25 мл) добавляли пиперидин (1,08 г, 12,8 ммоль) при 75°C. После добавления, смесь перемешивали с нагреванием до кипения. Через 1 час смесь охлаждали до комнатной температуры, после чего образовывался осадок. Содержимое фильтровали, и отфильтрованный осадок суспендировали в воде и перемешивали в течение 1 часа. Гетерогенную смесь фильтровали и сушили, получая смесь 6-циклобутил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрила и 4-циклобутил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрила (1,14 г, 57%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d в DO) δ 12,15-12,30 (шир.с, 2H), 6,39 (с, 1H), 6,34 (с, 1H), 2,40-2,28 (м, 7H), 2,23-2,25 (м, 3H), 2,18-2,21 (м, 4H), 1,99-2,11 (м, 2H), 1,84-1,90 (м, 2H).
13d) 3-(Аминометил)-6-циклобутил-4-метил-2(1H)-пиридинон и 3-(аминометил)-4-циклобутил-6-метил-2(1H)-пиридинон
4
2
6
1
К охлажденному в бане со льдом THF (100 мл) раствору 6-циклобутил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрила и 4-циклобутил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрила (6 г, 32 ммоль) добавляли NaBH (2,73 г, 71,8 ммоль) и I (8,3 г, 32 ммоль), и смесь перемешивали в течение 30 минут. Затем, реакционную смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения до 0°C, реакционную смесь доводили до pH 5 6н HCl. Содержимое сушили, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали ВЭЖХ, получая смесь 3-(аминометил)-6-циклобутил-4-метил-2(1H)-пиридинона и 3-(аминометил)-4-циклобутил-6-метил-2(1H)-пиридинона (5,6 г, 91%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,60-11,70 (шир.с, 2H), 7,85 (шир.с, 4H), 6,15 (с, 1H), 6,03 (с, 1H), 3,72-3,79 (м, 2H), 3,29-3,33 (м, 2H), 2,16 (с, 6H), 2,05-2,10 (м, 6H), 1,88-1,93 (м, 4H), 1,69-1,79 (м, 4H).
13e) 1,1-Диметилэтил [(6-циклобутил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамат и 1,1-диметилэтил [(4-циклобутил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамат
2
6
1
К охлажденному в бане со льдом раствору 3-(аминометил)-6-циклобутил-4-метил-2(1H)-пиридинона и 3-(аминометил)-4-циклобутил-6-метил-2(1H)-пиридинона (3,5 г, 18 ммоль) в THF (10 мл) и DMF (10 мл) добавляли BocO (4,68 г, 21,8 ммоль) и триэтиламин (5,4 г, 54 ммоль). Затем, содержимое перемешивали в течение 30 минут при 30°C. Реакционную смесь гасили добавлением ледяной воды, после чего выпадал осадок. Реакционную смесь фильтровали и сушили, получая смесь неочищенных продуктов. Неочищенные продукты разделяли ВЭЖХ, получая 1,1-диметилэтил [(6-циклобутил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамат (2,1 г, 20%) и 1,1-диметилэтил [(4-циклобутил-6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамат (1 г, 9,5%). Данные для 1,1-диметилэтил [(6-циклобутил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамата: H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,28 (шир.с, 1H), 6,49 (шир.с, 1H), 5,86 (шир.с, 1H), 3,85 (шир.с, 2H), 1,97-2,14 (м, 7H), 1,87-1,94 (м, 1H), 1,72-1,77 (м, 1H), 1,28 (с, 9H).
13f) Гидрохлорид 3-(аминометил)-6-циклобутил-4-метил-2(1H)-пиридинона
1
6
Раствор 1,1-диметилэтил [(6-циклобутил-4-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]карбамата (2,1 г, 7,2 ммоль) в 4н HCl (в 15 мл 1,4-диоксана) нагревали до 60°C в течение 1 часа. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали и сушили, получая 3-(аминометил)-6-циклобутил-4-метил-2(1H)-пиридинон в виде HCl соли (1,95 г, 90%). LCMS MH+ = 193,1 H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,70 (шир.с, 1H), 8,01 (с, 3H), 6,04 (с, 1H), 3,74 (д, 2H), 3,32-3,39 (м, 1H), 2,22 (с, 3H), 2,17-2,20 (м, 2H), 2,06-2,11 (м, 2H), 1,85-1,95 (м, 1H), 1,71-1,79 (м, 1H).
Промежуточное соединение 14
3-(Аминометил)-6-метил-4-[(метилокси)метил]-2(1H)-пиридинон
14a) 1-(Метилокси)-2,4-пентандион
2
4
3
3
1
К раствору натрия (5,83 г, 243,3 ммоль) в сухом толуоле (62,5 мл) добавляли этил(метилокси)ацетат (24 г, 203,4 ммоль) при -5°C. После перемешивания в течение 3 часов медленно добавляли ацетон (14 г, 231,4 ммоль), после чего смесь становилась коричневой и вязкой. Затем, добавляли 72 мл трет-бутилметилового эфира, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов, после чего выпадала натриевая соль. После сбора и промывки дополнительным количеством трет-бутилметилового эфира, натриевую соль растворяли в 46 мл 20% HSO. Содержимое экстрагировали трет-бутилметиловым эфиром, и органические слои концентрировали, получая 1-(метилокси)-2,4-пентандион (9,76 г, 36,9%). H ЯМР (400 МГц, CDCl-d) δ 5,76 (с, 1H), 3,96 (с, 2H), 3,38 (с, 3H), 2,07 (с, 3H).
14b) 6-Метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
1
6
1-(Метилокси)-2,4-пентандион (9,51 г, 73,12 ммоль) и цианоацетамид (6,17 г, 73,12 ммоль) растворяли в EtOH (76 мл) и нагревали до перехода в гомогенное состояние (приблизительно 75°C). Добавляли пиперидин (6,25 г, 73,12 ммоль), и реакционную смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 20 минут, с последующим охлаждением до комнатной температуры. Содержимое фильтровали, получая твердый остаток, который суспендировали в 140 мл воды и интенсивно перемешивали в течение 20 минут. Гетерогенную смесь фильтровали, получая 6-метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (7,8 г, 65,6%). LCMS MH+ = 179,0 H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12,47 (шир.с, 1H), 6,26 (с, 1H), 4,40 (с, 2H), 3,29 (с, 3H), 2,25 (с, 3H).
14c) 3-(Аминометил)-6-метил-4-[(метилокси)метил]-2(1H)-пиридинон
1
6
6-Метил-4-[(метилокси)метил]-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (1,000 г, 5,61 ммоль) суспендировали в уксусной кислоте (150 мл), и раствор пропускали через H-cube аппарат, снабженный картриджем с Ni Ренея, при скорости 1 мл/мин при 50 ф/кв.дюйм и 60°C. Через 18 часов уксусную кислоту удаляли при пониженном давлении, и оставшийся остаток растворяли в MeOH. Метанольный раствор пропускали через 0,2 мкм тефлоновый шприцевой фильтр. Метанольный фильтрат очищали обращено-фазовой ВЭЖХ (Gemini 50×100 5 мкм колонка. Пробег 1: 3 минуты, 90-10%. Пробег 2: 5 минут 0-10%. Пробег 3: 10 минут, 0-20%. Фракции с продуктом концентрировали досуха на Genevac HT-4 аппарате, получая 3-(аминометил)-6-метил-4-[(метилокси)метил]-2(1H)-пиридинон в виде бледно-серого восковидного остатка (900 мг, 70,2% выход) LCMS MH+ = 183,0 H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8,40 (шир.с, 1H), 6,10 (с, 1H), 4,39 (с, 2H), 3,66 (шир.с, 2H), 3,32 (с, 3H), 2,19 (с, 3H).
Промежуточное соединение 15
3-(Аминометил)-6-метил-4-(фенилметил)-2(1H)-пиридинон и 3-(аминометил)-4-метил-6-(фенилметил)-2(1H)-пиридинон
15a) 1-Фенил-2,4-пентандион
2
2
3
3
1
К раствору NaNH (19,02 г, 480 ммоль) в безводном эфире (400 мл) в атмосфере N при -5°C добавляли по каплям этилфенилацетат (19,2 г, 150 ммоль), и затем ацетон (21,23 г, 370 ммоль) при интенсивном перемешивании. После добавления, реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем, смесь подкисляли до pH 4,0-5,0 1н HCl. Органический слой отделяли и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле, получая 1-фенил-2,4-пентандион (18,32 г, 44%). H ЯМР (400 МГц, CDCl-d) δ 15,49 (шир.с, 1H), 7,33-7,45 (м, 5H), 5,53 (с, 1H), 3,66 (с, 2H), 2,10 (с, 3H).
15b) 6-Метил-2-оксо-4-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил и 4-метил-2-оксо-6-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
1
6
1-Фенил-2,4-пентандион (18,32 г, 104 ммоль) и цианоацетамид (8,74 г, 104 ммоль) растворяли в EtOH (104 мл) и нагревали до перехода в гомогенное состояние (приблизительно 75°C). Добавляли пиперидин (8,86 г, 104 ммоль), и реакционную смесь грели при кипячении с обратным холодильником в течение 15-30 минут, с последующим охлаждением до комнатной температуры, после чего образовывался осадок. Гетерогенное содержимое фильтровали, получая твердый остаток, который суспендировали в 200 мл воды и интенсивно перемешивали в течение 20 минут. Гетерогенную смесь фильтровали, получая 6-метил-2-оксо-4-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил и 4-метил-2-оксо-6-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (12,06 г, 52%). LCMS MH+ = 225,1 H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) (смесь соединений) δ 7,21-7,31 (м, 10H), 6,06 (с, 2H), 3,89 (с, 2H), 3,79 (с, 2H), 2,24 (с, 3H), 2,15 (с, 3H).
15c) 3-(Аминометил)-6-метил-4-(фенилметил)-2(1H)-пиридинон и 3-(аминометил)-4-метил-6-(фенилметил)-2(1H)-пиридинон
1
1
6
6
Ацетат натрия (6,14 г, 74,8 ммоль), Pd/C (0,65 г, 1 ммоль) и оксид платины (II) (45 мг, 1 ммоль) помещали в высушенной Parr колбе, снабженной впускным отверстием для азота. Добавляли небольшое количество уксусной кислоты для увлажнения катализатора. Добавляли в колбу раствор 6-метил-2-оксо-4-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрила и 4-метил-2-оксо-6-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрила (6 г, 26,7 ммоль) в уксусной кислоте (300 мл). Содержимое герметично закрывали и гидрировали на Parr шейкере при 45 ф/кв.дюйм в течение 12 часов. Реакционную смесь фильтровали и промывали уксусной кислотой. Фильтрат удаляли при пониженном давлении. Остаток промывали метанолом и фильтровали, получая неочищенную смесь 3-(аминометил)-6-метил-4-(фенилметил)-2(1H)-пиридинона и 3-(аминометил)-4-метил-6-(фенилметил)-2(1H)-пиридинона. Реакцию проводили дважды, получая суммарное выделенное количество 14,5 г. К раствору полученной выше неочищенной смеси продуктов (4,0 г, 17,5 ммоль) в THF (10 мл) и DMF (10 мл) добавляли ангидрид ди-трет-бутоксикарбонила (5,0 г, 23,4 ммоль) и триэтиламин (5,2 г, 52,5 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали с нагреванием до комнатной температуры, и затем перемешивали в течение дополнительных 4 часов. Содержимое разбавляли ледяной водой, и затем фильтровали. Собранный остаток сушили, и продукты разделяли ВЭЖХ, получая 1,2 г 1,1-диметилэтил {[4-метил-2-оксо-6-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}карбамата H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,55-1,60 (шир.с, 1H), 7,20-7,29 (м, 5H), 5,85 (с, 1H), 3,92 (с, 2H), 3,90 (с, 2H), 2,10 (с, 3H), 1,32 (с, 9H) и 1,0 г 1,1-диметилэтил {[6-метил-2-оксо-4-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}карбамата (H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,50-11,55 (шир.с, 1H), 7,18-7,25 (м, 5H), 5,75 (с, 1H), 4,02 (с, 2H), 3,85 (с, 2H), 2,05 (с, 3H), 1,32 (с, 9H).
15d) Гидрохлорид 3-(аминометил)-4-метил-6-(фенилметил)-2(1H)-пиридинона
1
6
Раствор 1,1-диметилэтил {[4-метил-2-оксо-6-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}карбамата (1,2 г, 3,66 ммоль) в 4н HCl (в 15 мл 1,4 диоксана) нагревали до 60°C в течение 1 часа. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали и сушили, получая 3-(аминометил)-4-метил-6-(фенилметил)-2(1H)-пиридинон в виде HCl соли (0,725 г, 87%). LCMS MH+= 229,1 H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,9-12,0 (шир.с, 1H), 7,99 (шир.с, 3H), 7,20 (с, 5H), 5,97 (с, 1H), 3,72-3,75 (м, 4H), 2,17 (с, 3H).
15e) Гидрохлорид 3-(аминометил)-6-метил-4-(фенилметил)-2(1H)-пиридинона
1
6
Раствор 1,1-диметилэтил {[6-метил-2-оксо-4-(фенилметил)-1,2-дигидро-3-пиридинил]метил}карбамата (1,0 г, 3,0 ммоль) в 4н HCl (в 15 мл 1,4 диоксана) нагревали до 60°C в течение 1 часа. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали и сушили, получая 3-(аминометил)-6-метил-4-(фенилметил)-2(1H)-пиридинон в виде HCl соли (0,600 г, 86%). LCMS MH+= 229,1 H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,9-12,0 (шир.с), 1H), 8,03 (шир.с), 3H), 7,16-7,30 (м, 5H), 5,84 (с, 1H), 3,91 (с, 2H), 3,81 (с, 2H), 2,10 (с, 3H).
Промежуточное соединение 16
3-(Аминометил)-6-метил-4-(4-морфолинилметил)-2(1H)-пиридинон
a) 5-(4-Морфолинил)-3-пентин-2-он
3
2
2
4
2
4
6
1
+
К охлажденному (-40°C, CHCN/CO) раствору 4-(2-пропин-1-ил)морфолина (2,2 г, 17,58 ммоль) в THF (5 мл) добавляли по каплям через шприц в атмосфере N раствор 2 M хлорида изопропилмагния в THF (10 мл, 20,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, затем добавляли одной порцией раствор N-метокси-N-метилацетамида (2,2 мл, 20,69 ммоль) в THF (5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов (медленно нагревая до комнатной температуры), гасили водным NHCl, экстрагировали EtOAc, промывали соляным раствором, сушили (NaSO), фильтровали и упаривали досуха в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-80% EtOAc в гексане). Чистые фракции объединяли и упаривали досуха, получая продукт, 5-(4-морфолинил)-3-пентин-2-он (2,09 г, 12,50 ммоль, 71,1% выход) в виде желтого масла. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 3,62-3,57 (м, 4H), 3,56 (с, 2H), 2,49-2,43 (м, 4H), 2,34 (с, 3H). MS(ES)+ m/e 168,0 [M+H].
b) 6-Метил-4-(4-морфолинилметил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил
2
2
2
2
2
2
4
2
2
6
1
+
К перемешиваемому раствору 21 % по весу этоксида натрия (4,2 г, 12,96 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли 2-цианоацетамид (1,1 г, 13,08 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 минут, затем добавляли к реакционной смеси одной порцией раствор 5-(4-морфолинил)-3-пентин-2-она (2,0 г, 11,96 ммоль) в EtOH (реакционная смесь быстро становилась темно-красной). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, нейтрализовали 6н HCl (2,17 мл, 13,02 ммоль) и упаривали досуха в вакууме. Сушили в вакууме в течение ночи. Оставшийся темный остаток растирали с раствором (9:1) CHCl, MeOH (50 мл), отфильтровывали от нерастворимых веществ, промывали (9:1) CHCl, MeOH, и фильтрат упаривали досуха в вакууме. Темный остаток растирали с раствором (1:1) EtOAc в гексане, фильтровали, промывали (1:1) EtOAc в гексане и сушили в вакууме, получая коричневый твердый остаток (удаляли большую часть неполярных примесей с большой подвижностью). Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-15% CHCl/20%(5% NHOH в MeOH) в CHCl). Чистые фракции объединяли, упаривали досуха, растирали с гексаном и сушили в вакууме, получая продукт, 6-метил-4-(4-морфолинилметил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрил (0,90 г, 3,86 ммоль, 32,3% выход) в виде светло-коричневого твердого остатка.H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12,44 (шир.с, 1H), 6,34 (с, 1H), 3,63-3,56 (м, 4H), 3,48 (с, 2H), 2,45-2,36 (м, 4H), 2,27 (с, 3H). MS(ES)+ m/e 234,1 [M+H].
c) 3-(Аминометил)-6-метил-4-(4-морфолинилметил)-2(1H)-пиридинон
2
6
3
1
+
+
Прозрачный раствор 6-метил-4-(4-морфолинилметил)-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинкарбонитрила (0,60 г, 2,57 ммоль) в HOAc (20 мл) обрабатывали на H-Cube аппарате (50 ф/кв.дюйм, 60°C, 1 мл/мин, картридж с никелем Ренея) в течение 18 часов в течение ночи. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали досуха, растворяли в небольшом количестве MeOH и обрабатывали 4н HCl в диоксане (5 мл, 20,00 ммоль). Смесь упаривали досуха в вакууме (при упаривании начинал выпадать осадок), растирали с EtO, фильтровали и сушили в вакууме, получая продукт, 3-(аминометил)-6-метил-4-(4-морфолинилметил)-2(1H)-пиридинон (0,76 г, 2,450 ммоль, 95% выход) в виде светло-серого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 6,39 (с, 1H), 4,28 (с, 2H), 3,99 (с, 2H), 3,87 (шир.с, 4H), 3,27 (шир.с, 4H), 2,22 (с, 3H). MS(ES)+ m/e 238,0 [M+H] (слабый), 221,3 [M+H] -NH (сильный).
Промежуточное соединение 17
трет-Бутил (5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамат
a) Этил 4-этокси-2-оксопент-3-еноат
2
2
пл
1
+
+
К перемешиваемому раствору этил 2,4-диоксопентаноата (36,5 г, 231 ммоль) и триэтилортоформиата (41 мл, 246 ммоль) в этаноле (60 мл) добавляли хлорид аммония (3,7 г, 69 ммоль). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. LCMS показала, что реакция по большей части завершилась. (Гидролиз при LCMS до некоторой степени?) Реакционную смесь концентрировали в вакууме. Оставшееся в результате масло растворяли в EtO (300 мл), фильтровали, удаляя нерастворимые вещества, промывали EtO и концентрировали в вакууме. Продукт получали молекулярной перегонкой в вакууме (Т 70-77°C при 0,09 мм Hg), получая продукт, этил 4-этокси-2-оксопент-3-еноат (36,5 г, 47,3 ммоль, 79% выход) в виде светло-желтого масла. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ 6,24 (с, 1H), 4,32 (кв., J=7,2 Гц, 2H), 4,02 (кв., J=6,9 Гц, 2H), 2,41 (с, 3H), 1,41 (т, J=7,1 Гц, 3H), 1,39 (т, J=7,2 Гц, 3H). MS(ES)+ m/e 186,8 [M+H], 208,8 M+Na.
b) Этил 5-циано-4-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-карбоксилат
1
+
6
К перемешиваемому раствору этил 4-этокси-2-оксопент-3-еноата (22,5 г, 121 ммоль) и 2-цианоацетамида (9,0 г, 107 ммоль) в ацетоне (250 мл) добавляли карбонат калия (15,8 г, 114 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником (85°C масляная баня) в течение 10 часов (в реакции образовывался осадок в темно-красном растворе). Суспензию добавляли к холодному 1н HCl (230 мл) во льду. После перемешивания в течение 30 минут, суспензию фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме, получая продукт, этил 5-циано-4-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-карбоксилат (14,51 г, 70,4 ммоль, выход 65,7%) в виде светло-розового твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 12,60 (шир.с, 1H), 7,05 (шир.с, 1H), 4,34 (кв., J=7,1 Гц, 2H), 2,45 (с, 3H), 1,32 (т, J=7,1 Гц, 3H). MS(ES)+ m/e 206,8 [M+H].
c) Этил 5-циано-6-метокси-4-метилпиколинат
2
2
2
2
2
2
2
4
2
2
6
1
+
К перемешиваемой суспензии этил 5-циано-4-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-карбоксилата (2,0 г, 9,70 ммоль) в CHCl (25 мл) добавляли тетрафторборат триметилоксония (2,0 г, 13,52 ммоль). Реакционную смесь промывали CHCl и перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов (реакционная смесь, в конце концов, светлеет). К реакционной смеси добавляли 1н NaOH (75 мл). После перемешивания в течение 10 минут смесь выливали в делительную воронку. CHCl фазу удаляли, сушили (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix SF25-40 г, 50-100% CHCl в гексане) давала продукт, этил 5-циано-6-метокси-4-метилпиколинат (1,13 г, 5,13 ммоль, 52,9% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 7,75 (с, 1H), 4,37 (кв., J=7,1 Гц, 2H), 4,03 (с, 3H), 2,55 (с, 3H), 1,33 (т, J=7,2 Гц, 3H). MS(ES)+ m/e 221,2[M+H].
d) 5-Циано-6-метокси-4-метилпиколиновая кислота
1
+
6
К перемешиваемому раствору этил 5-циано-6-метокси-4-метилпиколината (1,0 г, 4,54 ммоль) в MeOH (30 мл) и THF (10 мл) добавляли 6н NaOH (2 мл, 12,00 ммоль). Суспензию нагревали до 60°C и перемешивали в течение 2 часов (реакционная смесь сразу же светлела). LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали практически досуха. Суспензию нейтрализовали 6н HCl (2 мл) разбавляли водой, фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме, получая продукт, 5-циано-6-метокси-4-метилпиколиновую кислоту (0,76 г, 3,95 ммоль, 87% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 13,65 (шир.с, 1H), 7,73 (с, 1H), 4,03 (с, 3H), 2,54 (с, 3H). MS(ES)+ m/e 192,9[M+H].
e) трет-Бутил (5-циано-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамат
1
6
К перемешиваемому раствору 5-циано-6-метокси-4-метилпиколиновой кислоты (0,75 г, 3,90 ммоль) в трет-бутаноле (25 мл) добавляли триэтиламин (0,7 мл, 5,02 ммоль). После того как реакционная смесь становилась прозрачной, добавляли DPPA (1 мл, 4,64 ммоль) по каплям в течение 5 минут. Реакционную смесь медленно нагревали до 100°C и перемешивали в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали досуха в вакууме. Очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-20% EtOAc в гексане), получая, после растирания и фильтрования из гексана, продукт, трет-бутил (5-циано-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамат (0,61 г, 2,317 ммоль, 59,4% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,20 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 3,91 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 1,48 (с, 9H). MS(ES)+ m/e 264,0.
f) трет-Бутил (5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамат
4
2
2
6
1
+
Прозрачный раствор трет-бутил (5-циано-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамата (0,60 г, 2,279 ммоль) в HOAc (5 мл) и этаноле (20 мл) обрабатывали на H-Cube аппарате (50 ф/кв.дюйм, 40°C, 1 мл/мин, картридж с никелем Ренея) в течение 18 часов. LCMS показала, что реакция завершилась (86% чистота). Реакционную смесь упаривали досуха в вакууме. Очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-12% (5% NHOH/MeOH) в CHCl). Чистые фракции объединяли и упаривали досуха в вакууме, получая продукт, трет-бутил (5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)карбамат (0,42 г, 1,571 ммоль, 68,9% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 9,33 (с, 1H), 7,16 (с, 1H), 3,80 (с, 3H), 3,57 (с, 2H), 2,28 (с, 3H), 1,46 (с, 9H). MS(ES)+ m/e 268,1 [M+H].
Промежуточное соединение 18
[5-(Аминометил)-4-метил-6-(метилокси)-2-пиридинил]метанол
a) 6-(Гидроксиметил)-2-метокси-4-метилникотинонитрил
4
2
4
2
2
6
1
+
К перемешиваемой суспензии этил 5-циано-6-метокси-4-метилпиколината (5,0 г, 22,70 ммоль) и хлорида кальция (10 г, 90 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) и этаноле (50,0 мл) при 0°C в бане со льдом добавляли боргидрид натрия (2,5 г, 66,1 ммоль). Реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 часов. Образуется большое количество осадка, и LCMS показала, что реакция завершилась. Добавляли равный объем EtOAc, и реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. Суспензию фильтровали через слой целита и промывали EtOAc. Фильтрат переносили в делительную воронку, промывали водным NHCl, соляным раствором, сушили (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix, SF40-120 г, 0-30% EtOAc в CHCl) давала продукт, 6-(гидроксиметил)-2-метокси-4-метилникотинонитрил (3,75 г, 21,05 ммоль, 93% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 7,16 (с, 2H), 5,61 (т, J=5,8 Гц, 1H), 4,51 (д, J=5,8 Гц, 2H), 3,94 (с, 3H), 2,47 (с, 3H). MS(ES)+ m/e 179,1 [M+H].
b) (5-(Аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метанол
4
2
2
3
+
+
Прозрачный раствор 6-(гидроксиметил)-2-метокси-4-метилникотинонитрила (0,50 г, 2,81 ммоль) в HOAc (5 мл) и этаноле (20 мл) обрабатывали на H-Cube аппарате (50 ф/кв.дюйм, 40°C, 1 мл/мин, картридж с никелем Ренея) в течение 18 часов в течение ночи. LCMS показала, что реакция завершилась (неочищенная смесь содержала 57% продукта и 43% димерного побочного продукта). Реакционную смесь упаривали досуха в вакууме. Очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-40 г, 0-12% (5% NHOH в MeOH) в CHCl) (пошаговый градиент до 8%, элюируя димерный побочный продукт, затем до 12%, элюируя продукт). Чистые фракции объединяли и упаривали досуха в вакууме, получая продукт, (5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метанол (0,30 г, 1,646 ммоль, 58,7% выход) в виде белого твердого остатка. MS(ES)+ m/e 183,1 [M+H], 166,1 [M+H] -NH.
Промежуточное соединение 19
трет-Бутил ((5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамат
a) 6-((1,3-Диоксоизоиндолин-2-ил)метил)-2-метокси-4-метилникотинонитрил
1
6
К перемешиваемому раствору 6-(гидроксиметил)-2-метокси-4-метилникотинонитрила (1,50 г, 8,42 ммоль), фталимида (1,3 г, 8,84 ммоль) и трифенилфосфина (2,3 г, 8,77 ммоль) в тетрагидрофуране (THF) (50 мл) при 0°C в бане со льдом добавляли по каплям DIAD (1,8 мл, 9,26 ммоль). В пределах минуты образовывалась белая суспензия. Добавляли дополнительное количество THF (~50 мл), обеспечивая перемешивание. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали досуха в вакууме. Оставшийся твердый остаток растирали с небольшим объемом EtOAc, фильтровали, промывали небольшим объемом EtOAc, затем сушили в вакууме, получая продукт, 6-((1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)метил)-2-метокси-4-метилникотинонитрил (2,12 г, 6,90 ммоль, 82% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8,00-7,92 (м, 2H), 7,92-7,87 (м, 2H), 7,15 (с, 1H), 4,86 (с, 2H), 3,74 (с, 3H), 2,43 (с, 3H). MS(ES)+ m/e 308,2.
b) трет-Бутил ((5-циано-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамат
2
2
2
6
1
К перемешиваемой мелкодисперсной суспензии 6-((1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)метил)-2-метокси-4-метилникотинонитрила (2,1 г, 6,83 ммоль) в этаноле (100 мл) добавляли моногидрат гидразина (1,4 мл, 28,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. LCMS показала, что реакция прошла. Густую белую суспензию фильтровали, прессовали сухой, промывали EtOH, и фильтрат упаривали досуха в вакууме. Оставшийся твердый остаток растворяли в дихлорметане (50 мл), фильтровали, удаляя дополнительное количество нерастворимых веществ, и промывали CHCl. К прозрачному фильтрату при перемешивании добавляли BocO (1,809 мл, 7,79 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60, 0-10% EtOAc в гексане). Чистые фракции объединяли и упаривали досуха, получая продукт, трет-бутил ((5-циано-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамат (1,42 г, 5,12 ммоль, 74,9% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 7,48 (т, J=6,1 Гц, 1H), 6,91 (с, 1H), 4,16 (д, J=6,1 Гц, 2H), 3,96 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 1,41 (с, 9H). MS(ES)+ m/e 278,2.
c) трет-Бутил ((5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамат
4
2
2
6
1
+
Прозрачный раствор трет-бутил ((5-циано-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамата (0,65 г, 2,344 ммоль) в HOAc (5 мл) и этаноле (20 мл) обрабатывали на H-Cube аппарате (50 ф/кв.дюйм, 40°C, 1 мл/мин, картридж с никелем Ренея) в течение 18 часов в течение ночи. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали досуха в вакууме. Очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-10% (5% NHOH/MeOH) в CHCl). Чистые фракции объединяли и упаривали досуха в вакууме, получая продукт, трет-бутил ((5-(аминометил)-6-метокси-4-метилпиридин-2-ил)метил)карбамат (0,58 г, 2,061 ммоль, 88% выход) в виде прозрачного густого масла. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 7,31 (т, J=6,1 Гц, 1H), 6,63 (с, 1H), 4,06 (д, J=6,3 Гц, 2H), 3,84 (с, 3H), 3,61 (с, 2H), 2,29 (с, 3H), 1,53 (шир.с, 2H), 1,41 (с, 9H). MS(ES)+ m/e 282,2 [M+H].
Промежуточное соединение 20
1
6
Заявленное в заголовке соединение получали аналогичным способом, как описано для 3-(аминометил)-4-этил-6-метил-2(1H)-пиридинона (промежуточное соединение 10c). LCMS (ES+) m/z = 195,22 (M+H). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 0,809-0,774 (т, 3H, J=6,8 Гц), 1,113-1,097 (д, 3H, J=6,4 Гц), 1,504-1,468 (т, 2H, J=7,2 Гц), 2,184 (с, 3H), 2,839-2,822 (д, 1H, J=6,8 Гц), 3,822 (с, 2H), 6,059 (с, 1H), 8,315 (шир.с, 2H).
Схема 8
Промежуточное соединение 21
Метил 6-бром-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат
a) 5-Бром-2-метил-3-нитробензойная кислота
2
4
1
-
К перемешиваемому раствору 2-метил-3-нитробензойной кислоты (300 г, 1647 ммоль) в концентрированной HSO(1,5 л) добавляли 1,3-дибром-5,5-диметил-2,4-имидазолидиндион (258 г, 906 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакционную смесь медленно добавляли к ледяной воде (4 л), и выпадал осадок. Твердый остаток отфильтровывали и промывали водой (1,2 л), петролейным эфиром (1 л) и сушили, получая заявленное в заголовке соединение в виде белого твердого остатка (411 г, 96%), который применяли без дополнительной очистки. H ЯМР (DMSO, 400 МГц): δ 2,446 (с, 3H), 8,136 (с, 1H), 8,294 (с, 1H). LCMS (ES-) m/z = 257,93 (M-H).
b) Метил 6-бром-1H-индол-4-карбоксилат
3
2
4
6
1
К перемешиваемому раствору 5-бром-2-метил-3-нитробензойной кислоты (140 г, 538,4 ммоль) в DMF (550 мл) добавляли DMF-DMA (599 мл, 4846 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 115°C в течение 18 часов. Затем, реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток (176 г, 536,5 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (696 мл) и добавляли к суспензии железа (329,2 г, 5902 ммоль) в уксусной кислоте (1,4 л) при 50°C. После завершения добавления, реакционную смесь перемешивали при 80-90°C в течение 4 часов. Затем, реакционную смесь фильтровали через слой целита. Фильтрат выливали в ледяную воду (1 л) и экстрагировали диэтиловым эфиром (3×700 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным NaHCO, соляным раствором и сушили над безводным NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (элюент: 10% этилацетат в петролейном эфире) и получали заявленное в заголовке соединение в виде твердого остатка (80 г, 59%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц) δ: 3,980 (с, 3H), 7,168 (д, J=3,2 Гц, 1H), 7,334 (д, J=3,2 Гц, 1H), 7,734 (с, 1H), 8,017 (с, 1H), 8,384 (шир.c, 1H); LCMS (ES-)m/z = 251,9 (M-H).
c) Метил 6-бром-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору метил 6-бром-1H-индол-4-карбоксилата (100 г, 393,7 ммоль) в DMF (800 мл) добавляли 2-йодпропан (160 г, 944,8 ммоль), с последующим добавлением порциями гидрида натрия (20,4 г, 511,8 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Разбавляли реакционную смесь холодной водой и экстрагировали этилацетатом (200 мл ×4), наконец, органический слой промывали холодной водой, соляным раствором, раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный осаток, который очищали колоночной хроматографией, применяя силикагель (60-120 меш) с 5% EtOAC:петролейный эфир в качестве элюента, получая метил 6-бром-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат (65 г, 55,7%) в виде твердого остатка. H ЯМР (CDCl, 400 МГц) δ 1,53 (д, 6H, J=6,4 Гц), 3,973 (с, 3H), 4,598-4,664 (м, 1H), 7,111 (д, 1H, J=2,4 Гц), 7,338 (д, 1H, J=2,8 Гц), 7,711 (с, 1H), 7,987 (с, 1H).
d) 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
4
К раствору метил 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилата (0,52 г, 1,756 ммоль) в метаноле (15 мл) и тетрагидрофуране (3 мл) добавляли 3 M NaOH (1,756 мл, 5,27 ммоль) через шприц по каплям (в течение 2 минут). Раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 2 часов, после чего LCMS показала только 12% превращение в продукт. Затем, добавляли 1,5 мл 3 M NaOH, и раствор выдерживали при комнатной температуре в течение ночи. LCMS показала полное превращение в продукт. Удаляли летучие компоненты в вакууме, и растворяли остаток в воде и медленно подкисляли 1 M HCl (выпадает твердый остаток). Экстрагировали EtOAc (×2), объединяли органические фракции и сушили над MgSO. Фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (0,50 г, 1,737 ммоль, 99% выход) в виде белого твердого остатка.
+
Альтернативно, алкилирование индольного азота можно осуществлять следующим способом: к охлажденной (0°C) суспензии метил 6-бром-1H-индол-4-карбоксилата (10 г, 39,4 ммоль) и хлорида (цианометил)(триметил)фосфония (14,91 г, 98 ммоль) в THF (400 мл) добавляли 2-пропанол (6,06 мл, 79 ммоль), с последующим добавлением гидрида натрия (3,46 г, 87 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов, после чего LCMS не показала образование продукта. Грели при 50°C в течение 18 часов. LC/MS показала завершение реакции. Фильтровали реакционную смесь и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли хлористым метиленом и пропускали через слой силикагеля (промывали хлористым метиленом). Очистка флэш-хроматографией (Analogix SF65-200 г; 5-10% EtOAc/гексан) давала метил 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (9,7 г, 31,4 ммоль, 80% выход). MS(ES) [M+H] 296,2, 298,4.
Примеры 22-23 получали способами, описанными выше для промежуточного соединения 16, или их стандартными вариантами, исходя из требуемой 2-метил-3-нитробензойной кислоты (см. в конце описания).
Схема 9
Промежуточное соединение 24
Метил 6-бром-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат
24a) Метил 6-бром-3-формил-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору DMF (1,04 л) добавляли при 0°C POCl (40,3 г, 263 ммоль) и перемешивали в течение 20 минут. Затем, добавляли к реакционной смеси при 0°C метил 6-бром-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат (85 г, 219,5 ммоль) в DMF (260 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Разбавляли реакционную смесь холодной водой и доводили pH до ~8, применяя 2н NaOH раствор, экстрагировали этилацетатом (4×1 л). Органический слой промывали холодной водой, соляным раствором, сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении, получая требуемый продукт, метил 6-бром-3-формил-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат (65 г, 91,3%). H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 1,588 (д, 6H, J=6,8 Гц), 3,994 (с, 3H), 4,634-4,701 (м, 1H), 7,760 (д, 1H, J=1,6 Гц), 7,958 (д, 1H, J=1,6 Гц), 8,122 (с, 1H), 10,446 (с, 1H). LC-MS (ES+) m/z = 324,02 (M+H).
24b) Метил 6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору метил 6-бром-3-формил-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилата (60 г,185 ммоль) в DMF (220 мл) добавляли моногидрид п-толуолсульфокислоты (4,57 г, 24 ммоль), п-толуолсульфонилгидразид (44,8 г, 240 ммоль), с последующим добавлением сульфолана (220 мл). Смесь перемешивали при 100°C в течение 1 часа. Содержимое охлаждали до комнатной температуры и затем, добавляли порциями цианоборгидрид натрия (46,5 г, 740 ммоль) в течение 25 минут. Затем, смесь перемешивали при 100°C в течение 2 часов. Затем, реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали 20% EtOAc:петролейный эфир, наконец, органический слой промывали холодной водой, соляным раствором, сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенное соединение очищали колоночной хроматографией, применяя силикагель (100-200 меш) и 20% DCM:петролейный эфир в качестве элюента, получая требуемый продукт, метил 6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат (24 г, 89,2% чистота), (16 г, и 62,2% чистота). H ЯМР (CDCl, 400 МГц) δ 1,486 (д, J=6,4 Гц, 6H), 2,361 (с, 3H), 3,947 (с, 3H), 4,535-4,602 (м, 1H), 7,080 (с, 1H), 7,619 (с, 1H), 7,684 (с, 1H). LCMS (ES+) m/z = 310,07(M+H).
24c) 6-Бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
4
6
1
К перемешиваемому раствору метил 6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилата (24 г, 77,4 ммоль) в этаноле (400 мл) добавляли гидроксид натрия (4,02 г, 100,6 ммоль), воду (11 мл), и смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 6 часов. Этанол отгоняли, и остаток разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом (40 мл), доводили водный слой до pH ~3 1н HCl и экстрагировали этилацетатом (3×250 мл), наконец, органический слой промывали соляным раствором, сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный остаток промывали петролейным эфиром, фильтровали твердый остаток и сушили, получая требуемый продукт, 6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновую кислоту (20,6 г, 89,8%). H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 1,407 (д, J=6,4 Гц, 6H), 2,296 (с, 3H), 4,754-4,819 (м, 1H), 7,455 (с, 1H), 7,472 (с, 1H), 7,938 (с, 1H), 12,950 (шир.с, 1H). LCMS(ES+) m/z= 296,15 (M+H).
Промежуточное соединение 25
6-Бром-1-(втор-бутил)-3-метил-1H-индол-4-карбоновая кислота
a) Метил 6-бром-1-втор-бутил-1H-индол-4-карбоксилат
2
4
3
1
К перемешиваемой суспензии гидрида натрия (5,66 г, 141,7 ммоль) в DMF (100 мл) добавляли раствор метил 6-бром-1H-индол-4-карбоксилата (4) (30 г, 118,1 ммоль) в DMF (50 мл) при 0°C и перемешивали в течение 20 минут. Затем, добавляли при 0°C 2-бромбутан (29,1 г, 212,5 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли холодной водой и экстрагировали этилацетатом (4×150 мл). Объединенный органический слой промывали холодной водой (150 мл), соляным раствором (100 мл) и сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный остаток, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле (60-120 меш), применяя 5% EtOAc:петролейный эфир в качестве элюента, получая заявленное в заголовке соединение, метил 6-бром-1-втор-бутил-1H-индол-4-карбоксилат 5 (14 г, 40,1%) в виде бледно-желтого твердого остатка. H ЯМР (CDCl, 400 МГц) δ 0,843-0,870 (м, 3H), 1,512 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,844-1,926 (м, 2H), 3,976 (с, 3H), 4,333-4,385 (м, 1H), 7,132 (д, J=3,2 Гц, 1H), 7,302 (д, J=3,6 Гц, 1H), 7,707 (с, 1H), 7,984 (д, J=1,6 Гц, 1H).
b) Метил 6-бром-1-втор-бутил-3-формил-1H-индол-4-карбоксилат
3
2
4
3
1
POCl (8,3 г, 54,3 ммоль) добавляли при 0°C к безводному DMF (230 мл) в круглодонной колбе и перемешивали в течение 30 минут. Затем, добавляли к реакционной смеси при 0°C раствор метил 6-бром-1-втор-бутил-1H-индол-4-карбоксилата 5 (14 г, 45,3 ммоль) в DMF (60 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. Реакционную смесь разбавляли холодной водой, доводили pH до ~8, применяя 2н NaOH раствор, и экстрагировали этилацетатом (4×200 мл). Объединенный органический слой промывали холодной водой (2×100 мл), соляным раствором (100 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении, получая требуемый продукт, метил 6-бром-1-втор-бутил-3-формил-1H-индол-4-карбоксилат 6 (15,2 г, 99%) в виде бледно-желтого твердого остатка. Его применяли как есть в следующей стадии без очистки. H ЯМР (CDCl, 400 МГц) δ 0,831-0,859 (м, 3H), 1,515-1,574 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,729-1,972 (м, 2H), 3,997 (с, 3H), 4,394-4,445 (м, 1H), 7,756 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,958 (д, J=2 Гц, 1H), 8,079 (с, 1H), 10,452 (с, 1H).
c) Метил 6-бром-1-втор-бутил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору метил 6-бром-1-втор-бутил-3-формил-1H-индол-4-карбоксилата (15 г, 44,6 ммоль) в DMF (115 мл) добавляли моногидрат п-толуолсульфокислоты (1,1 г, 5,8 ммоль), п-толуолсульфонилгидразид (10,8 г, 58 ммоль), с последующим добавлением сульфолана (115 мл) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, обрабатывали порциями цианоборгидридом натрия (11,9 г, 178,5 ммоль) в течение 5 минут и перемешивали при 100°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и перемешивали при той же температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали 30% EtOAc:петролейный эфир. Органический слой промывали холодной водой (100 мл), соляным раствором (100 мл) и сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный остаток, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле (100-200 меш), применяя 5% EtOAc: петролейный эфир в качестве элюента, получая заявленное в заголовке соединение, метил 6-бром-1-втор-бутил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат (7,88 г, 54,6%) в виде бледно-желтой смолы. H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 804-0,841 (т, J=7,4 Гц, 3H), 1,454-1,470 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,865-1,884 (м, 2H), 2,363 (с, 3H), 3,950 (с, 3H), 4,265-4,316 (м, 1H), 7,038 (с, 1H), 7,609 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,671 (д, J=2 Гц, 1H). MS (ES+): 324,19 [M+H] ион присутствует.
d) 6-Бром-1-(втор-бутил)-3-метил-1H-индол-4-карбоновая кислота
1
6
Метил 6-бром-1-(втор-бутил)-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат (3,24 г, 9,99 ммоль) растворяли в метаноле (30 мл) и тетрагидрофуране (THF) (7 мл). Содержимое перемешивали в течение 5 минут, и затем добавляли через капельную воронку водный 3н NaOH (19,99 мл, 60,0 ммоль) в течение 3 минут. Содержимое быстро превращалось в желтую суспензию, и ее перемешивали при комнатной температуре в течение 65 часов. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток растворяли в воде (60 мл). Содержимое промывали эфиром (1×50 мл). Водный слой охлаждали в бане со льдом и доводили pH до 3-4 1M HCl, после чего выпадал маслянистый осадок. Содержимое экстрагировали EtOAc (2×60 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали через целит и концентрировали в вакууме. Полученный остаток обрабатывали TBME, концентрировали в вакууме, и затем сушили при высоком вакууме, получая желтую пену в количестве 3,08 г (93%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,70 (т, J=7,33 Гц, 3H), 1,39 (д, J=6,82 Гц, 3H), 1,71-1,86 (м, 2H), 2,30 (с, 3H), 4,48-4,62 (м, 1H), 7,40-7,49 (м, 2H), 7,96 (д, J=1,77 Гц, 1H), 12,99 (с, 1H); LCMS = 310,0/312,0 (MH+).
Примеры 26-27 получали способами, описанными выше для промежуточного соединения 16, или их стандартными вариантами, исходя из требуемого 6-замещенного индола (см. в конце описания).
Промежуточное соединение 28
6-Бром-1-циклопропил-1H-индол-4-карбоновая кислота
a) Метил 6-бром-1-циклопропил-1H-индол-4-карбоксилат
4
6
1
В высушенной в сушильном шкафу 100 мл RBF, снабженной магнитным мешальником, септой и впускным отверстием для азота, добавляли метил 6-бром-1H-индол-4-карбоксилат (0,508 г, 2,0 ммоль) и 1,2-дихлорэтан (7 мл). Раствор перемешивали в течение 15 минут, затем добавляли циклопропилбороновую кислоту (0,344 г, 4,00 ммоль) и карбонат натрия (0,424 г, 4,00 ммоль). Разбавляли ацетат меди (II) (0,363 г, 2,000 ммоль) и 2,2ʹ-бипиридин (0,312 г, 2,000 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (12 мл), смесь нагревали и добавляли горячую суспензию к реакционной смеси. Реакционную смесь грели при 70°C и контролировали LCMS. Останавливали нагревание через 6 часов и перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. Добавляли к реакционной смеси насыщенный NHCl и воду. Экстрагировали DCM (×2). Объединенные органические фракции промывали соляным раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка остатка колоночной хроматографией (24 г Isco колонка с силикагелем; градиент B: 3-25%. A:гексан. B:этилацетат) давала метил 6-бром-1-циклопропил-1H-индол-4-карбоксилат (0,43 г, 1,433 ммоль, 71,6% выход) в виде желтого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,96-1,01 (м, 2H), 1,06-1,12 (м, 2H), 3,52 (дт, J=7,20, 3,47 Гц, 1H), 3,90 (с, 3H), 6,85-6,91 (м, 1H), 7,57 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,82 (д, J=1,77 Гц, 1H), 8,04 (д, J=1,01 Гц, 1H). MS(ES) [M+H]+294,1.
b) 6-Бром-1-циклопропил-1H-индол-4-карбоновая кислота
1
6
К раствору метил 6-бром-1-циклопропил-1H-индол-4-карбоксилата (0,43 г, 1,462 ммоль) в MeOH (12 мл) и THF (3 мл) добавляли 3 M NaOH (1,949 мл, 5,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре, после чего летучие компоненты удаляли в вакууме. Остаток разбавляли водой и медленно подкисляли 1н HCl до pH 4-5, затем экстрагировали EtOAc (×2). Объединенные органические экстракты промывали соляным раствором, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали, получая 6-бром-1-циклопропил-1H-индол-4-карбоновую кислоту (0,376 г, 1,315 ммоль, 90% выход) в виде бледно-желтого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,92-1,01 (м, 2H), 1,05-1,12 (м, 2H), 3,51 (тт, J=7,07, 3,66 Гц, 1H), 6,89 (д, J=2,53 Гц, 1H), 7,52 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,80 (д, J=1,77 Гц, 1H), 7,99 (д, J=1,01 Гц, 1H), 13,05 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H]+280,1.
Промежуточное соединение 29
6-Бром-1-циклобутил-1H-индол-4-карбоновая кислота
a) Метил 6-бром-1-циклобутил-1H-индол-4-карбоксилат
+
В высушенную в сушильном шкафу 100 мл RBF, снабженную магнитным мешальником, септой, впускным отверстием для азота, добавляли метил 6-бром-1H-индол-4-карбоксилат (1,0 г, 3,94 ммоль) и хлорид (цианометил)(триметил)фосфония (1,491 г, 9,84 ммоль). Добавляли к THF (40 мл) и перемешивали суспензию в течение 5 минут. Реакционную смесь охлаждали баней со льдом в течение 10 минут, затем добавляли циклобутанол (0,616 мл, 7,87 ммоль), с последующим добавлением порциями гидрида натрия (0,346 г, 8,66 ммоль). Баню со льдом удаляли, и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 45 минут, затем грели при 50°C в течение 18 часов. LCMS показала большое количество исходного соединения. Грели при 75°C в течение 24 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем выливали в воду (200 мл) и экстрагировали EtOAc (×2). Объединенные органические фракции сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Очистка остатка колоночной хроматографией (40 г Isco колонка с силикагелем; градиент B: 2-25%; A:гексан, B: EtOAc) давала метил 6-бром-1-циклобутил-1H-индол-4-карбоксилат (0,3 г, 25% выход, ~45% чистота по ВЭЖХ). MS(ES) [M+H] 308,2.
b) 6-Бром-1-циклобутил-1H-индол-4-карбоновая кислота
1
+
6
К раствору этил 6-бром-1-циклобутил-1H-индол-4-карбоксилата (0,3 г, 0,973 ммоль) (неочищенный остаток из стадии выше) в MeOH (8 мл) и THF (2 мл) добавляли 3 M NaOH (1,298 мл, 3,89 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов, после чего летучие компоненты удаляли в вакууме. Остаток разбавляли водой и медленно подкисляли 1н HCl до pH 3-4. Твердый остаток фильтровали и сушили при высоком вакууме в течение 16 часов, получая 6-бром-1-циклобутил-1H-индол-4-карбоновую кислоту (0,21 г, 0,535 ммоль, 55,0% выход). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,79-1,89 (м, 2H), 2,34-2,46 (м, 2H), 3,84 (с, 1H), 5,08 (т, J=8,21 Гц, 1H), 6,99 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,75-7,79 (м, 1H), 7,81 (д, J=3,03 Гц, 1H), 8,01-8,05 (м, 1H), 13,03 (шир.с, 1H). MS(ES) [M+H] 294,1.
Промежуточное соединение 30
1-Изопропил-3-метил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
2
2
6
1
В 30-мл СВЧ пробирку добавляли метил 6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (490 мг, 1,580 ммоль), метансульфиновую кислоту (212 мг, 2,054 ммоль), DMSO (7 мл), N,Nʹ-диметил-1,2-этандиамин (18,10 мг, 0,205 ммоль), и смесь дегазировали в течение 5 минут барботированием N. Добавляли комплекс трифторметансульфоната меди(I) и бензола (63,6 мг, 0,126 ммоль), и пробирку герметично закрывали. Смесь грели при 165°C в течение ночи при перемешивании. Смесь охлаждали, фильтровали и очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ (Gemini 5u C18(2) 100A, AXIA; 30×100 мм 5 микрон; 30 мл/минут, 30% ACN/HO, 0,1% муравьиная кислота - 60% ACN/HO, 0,1% муравьиная кислота), получая заявленное в заголовке соединение (118 мг, 25%) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) м.д. 1,47 (д, J=8,00 Гц, 6H), 2,30-2,41 (м, 3H), 4,94 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,88 (д, J=1,77 Гц, 1H), 8,24 (д, J=1,52 Гц, 1H), 13,17 (шир.с, 1H). MS: (M+H)+=296,3.
Промежуточное соединение 31
1-Изопропил-6-(метилсульфонил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
6
1
В 10-мл СВЧ пробирку добавляли метил 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (160 мг, 0,540 ммоль), метансульфинат натрия (80 мг, 0,702 ммоль), DMSO (2 мл) и N,Nʹ-диметил-1,2-этандиамин (6,19 мг, 0,070 ммоль), и смесь дегазировали в течение 5 минут барботированием N. Добавляли комплекс трифторметансульфоната меди(I) и бензола (25,6 мг, 0,043 ммоль), и смесь грели при 165°C в течение 2 часов при перемешивании. Смесь фильтровали, и DMSO раствор очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ, получая 14 мг продукта в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) м.д. 1,51 (д, J=4,00 Гц, 6H), 4,90-5,11 (м, 1H), 7,13 (д, J=3,03 Гц, 1H), 7,98-8,08 (м, 1H), 8,15-8,23 (м, 1H), 8,32-8,46 (м, 1H), 13,19 (шир.с, 1H). MS: (M+H)+=281,9.
Промежуточное соединение 32
6-(Циклопропилсульфонил)-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,03 (дд, J=7,71, 2,40 Гц, 2H), 1,17 (дд, J=7,20, 3,41 Гц, 2H), 1,50 (д, 6H), 2,83-2,97 (м, 1H), 5,02 (дт, J=13,14, 6,57 Гц, 1H), 7,17 (д, J=2,27 Гц, 1H), 7,99 (д, J=3,03 Гц, 1H), 8,13 (с, 1H), 8,28 (с, 1H). MS: (M+H)+=308,3.
Промежуточное соединение 33
Метиловый эфир 6-гидрокси-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты
2
4
6
1
Свежеприготовленный метоксид натрия (500 мг в 5 мл метанола) добавляли к перемешиваемой суспензии метилового эфира 6-бром-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (500 мг, 1,68 ммоль) и CuI (480 мг, 2,53 ммоль) в NMP (8 мл), и затем грели при 120°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (5 мл) и подкисляли 1н HCl. Реакционную смесь фильтровали через целит и промывали EtOAc (5 мл). Отделяли EtOAc слой от фильтрата, сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную 1-изопропил-6-метокси-1H-индол-4-карбоновую кислоту (700 мг), которую применяли в следующей стадии без дополнительной очистки. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 1,44 (д, J=6,4 Гц, 6H), 3,84 (с, 3H), 4,80-4,76 (м, 1H), 6,87 (д, 1H), 7,33 (т, J=3,2 Гц, 2H), 7,49 (д, J=3,2 Гц, 1H), 12,65 (шир.с, 1H). LCMS (ES+): m/z= 234,11 [M+H].
2
4
3
2
4
2
6
1
К перемешиваемой суспензии 1-изопропил-6-метокси-1H-индол-4-карбоновой кислоты (700 мг, 3,00 ммоль) в MeOH добавляли HSO (440 мг, 4,50 ммоль), и затем грели при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. Метанол отгоняли полностью при пониженном давлении, и остаток подщелачивали насыщенным водным NaHCO раствором и экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (SiO, 100-200), элюируя 5% этилацетата в петролейном эфире, получая метиловый эфир 1-изопропил-6-метокси-1H-индол-4-карбоновой кислоты (240 мг, 32,4%) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 1,45 (д, J=6,8 Гц, 6H), 3,84 (с, 3H), 3,88 (с, 3H), 4,81-4,78 (м, 1H), 6,86 (д, J=3,2 Гц, 1H), 7,34 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,39 (д, J=2 Гц, 1H), 7,54 (д, J=3,6 Гц, 1H). LCMS (ES+): m/z= 248,16 [M+H].
Промежуточное соединение 34
1-Изопропил-6-метокси-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
2
4
6
1
К перемешиваемому раствору метилового эфира 1-изопропил-6-метокси-1H-индол-4-карбоновой кислоты (320 мг, 1,29 ммоль) в THF (2 мл) добавляли LiOH·HO (160 мг, 3,88 ммоль) в воде (2 мл) при комнатной температуре и грели при кипячении с обратным холодильником в течение 2 часов. THF удаляли при пониженном давлении, и полученный в результате водный слой подкисляли 1н HCl (pH ~6) и экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным NaSO и концентрировали, получая 1-изопропил-6-метокси-1H-индол-4-карбоновую кислоту (210 мг). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 1,42 (д, 6H), 3,88 (с, 3H), 4,85 (м, 1H), 6,81 (д, J=2,8 Гц, 1H), 7,26 (с, 2H), 7,45 (с, 1H), 12,68 (с, 1H).
Промежуточное соединение 35
Метиловый эфир 6-гидрокси-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты
2
4
6
1
К перемешиваемому раствору метилового эфира 1-изопропил-6-метокси-1H-индол-4-карбоновой кислоты (1,9 г, 7,69 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли безводный хлорид алюминия (5,11 г, 38,4 ммоль) при комнатной температуре, и затем грели при кипячении с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенный органический слой сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя 3-15% этилацетата в петролейном эфире, получая заявленное в заголовке соединение, метиловый эфир 6-гидрокси-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновой кислоты (1,5 г, 83%) в виде желтой смолы. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 1,43 (д, J=6,8 Гц, 6H), 3,86 (с, 3H), 4,65-4,61 (м, 1H), 6,81 (д, J=2,8 Гц, 1H), 7,11 (с, 1H), 7,29 (с, 1H), 7,44 (д, J=2,8 Гц, 1H), 9,32 (шир.с, 1H). LCMS (ES+): m/z= 234,09 [M+H].
Промежуточное соединение 36
3-Метил-1-(1-метилэтил)-6-(метилокси)-1H-индол-4-карбоновая кислота
4
+
К метил 6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилату (1,3 г, 4,19 ммоль) и йодиду меди (I) (1,0 г, 5,25 ммоль) добавляли NMP (8 мл). К смеси добавляли при перемешивании по каплям раствор метоксида натрия 25 % по весу в метаноле (4,0 мл, 17,49 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 1,5 часа. Реакционную смесь охлаждали, и когда температура достигала 80°C, добавляли воду (200 мкл). Реакционную смесь продолжали охлаждать до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь подкисляли 1н HCl (17 мл) и разбавляли водой и EtOAc. Смесь фильтровали через целит и промывали EtOAc. Фильтрат выливали в делительную воронку, и органическую фазу отделяли, промывали соляным раствором, сушили (MgSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 20-50% EtOAc в гексане) давала после концентрирования, растирания с гептаном, фильтрования и сушки в вакууме 3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(метилокси)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (825 мг, 3,34 ммоль, 80% выход) в виде светло-желтого твердого остатка. MS(ES)+ m/e 248,3 [M+H].
Промежуточное соединение 37
6-Йод-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
4
+
К перемешиваемому раствору метил 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилата (1,1 г, 3,71 ммоль) в диоксане (50 мл) добавляли йодид натрия (1,2 г, 8,01 ммоль), N,Nʹ-диметилэтилендиамин (200 мкл, 1,858 ммоль) и йодид меди (I) (150 мг, 0,788 ммоль). Реакционную смесь продували N, затем кипятили с обратным холодильником (110°C масляная баня) в течение ночи. LCMS показала, что реакция завершилась на 90% с 6% оставшегося исходного соединения. Добавляли еще 0,75 г йодида натрия и 75 мг йодида меди(I), и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение следующих 24 часов. (LCMS показала менее чем 4% бромидного исходного соединения). Реакционную смесь концентрировали в вакууме, растворяли в EtOAc, промывали водой, соляным раствором, сушили (MgSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix, SF25-60 г, 0-10% EtOAc в гексане) давала эфирный продукт в виде светло-желтого масла. (1,27 г, 100%). MS(ES)+ m/e 344,0 [M+H].
1
+
6
Полученный выше эфир растворяли в 40 мл (3:1) MeOH, THF и обрабатывали 1н NaOH (15 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Нейтрализация 1н HCl (15 мл) давала белую суспензию, которую фильтровали, промывали холодной водой и сушили в вакууме, получая продукт, 6-йод-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (1,12 г, 3,40 ммоль, 92% выход) в виде светло-желтого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 12,94 (шир.с, 1H), 8,20 (с, 1H), 7,94 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,66 (д, J=3,3 Гц, 1H), 6,97 (д, 1H), 4,86 (квин., J=6,6 Гц, 1H), 1,44 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 330,0 [M+H].
Промежуточное соединение 38
6-Циано-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновая кислота
a) Метил 6-циано-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат
2
2
3
6
1
В 10 мл микроволновую пробирку добавляли метил 6-бром-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (500 мг, 1,612 ммоль), дицианоцинк (150 мг, 1,277 ммоль) и DMF (5 мл). Смесь дегазировали и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N в течение 15 минут. К смеси добавляли тетракиспалладий (118 мг, 0,102 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 95°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали и выливали в насыщенный водный NaCO (50 мл) и EtOAc (50 мл) и перемешивали в течение 20 минут. Смесь экстрагировали эфиром (100 мл) и EtOAc (100 мл) (1:1), с последующим фильтрованием и упариванием, получая остаток. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Analogix IF280, 0-8% EtOAc/гексан, SF25-40 г, 30 минут), получая метил 6-циано-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (130 мг, 0,497 ммоль, 38,9% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 8,38 (д, J=1,52 Гц, 1H), 7,82 (с, 1H), 7,71 (д, J=1,52 Гц, 1H), 4,85-4,97 (м, 1H), 3,90 (с, 3H), 2,29 (с, 3H), 1,45 (д, J=6,57 Гц, 6H). MS(ES)[M+H]+257,4.
b) 6-Циано-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоновая кислота
1
+
6
В 50 мл круглодонную колбу добавляли метил 6-циано-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (230 мг, 0,897 ммоль), с последующим добавлением метанола (1 мл) и THF (1 мл). К раствору добавляли 3 M NaOH (0,449 мл, 2,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов. Реакционную смесь упаривали и обрабатывали кислой водой до pH 5. Выпадал коричневый остаток, и его собирали фильтрованием. Твердый остаток был с примесями. pH жидкости доводили до 3, и жидкость упаривали, получая остаток. Растирание остатка с водой, с последующим фильтрованием, давало 6-циано-3-метил-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (155 мг, 0,576 ммоль, 64,2% выход) в виде желтого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 13,16 (шир.с, 1H), 8,33 (с, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 4,81-4,98 (м, 1H), 2,33 (с, 4H), 1,45 (д, J=6,57 Гц, 6H). MS(ES) [M+H] 243,3.
Промежуточное соединение 39
1-Изопропил-3-метил-6-(1H-тетразол-5-ил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
a) Метил 1-изопропил-3-метил-6-(1H-тетразол-5-ил)-1H-индол-4-карбоксилат
2
4
2
2
6
1
+
К перемешиваемой суспензии метил 6-циано-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилата (0,50 г, 1,951 ммоль) в азидотриметилсилане (1,0 мл, 7,53 ммоль) в небольшой пробирке добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (300 мг, 0,951 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 85°C и перемешивали в течение 18 часов (присоединяли небольшой обратный холодильник) (реакционная смесь становилась полутвердой массой). Реакционную смесь растворяли в EtOAc (75 мл), промывали 1н HCl (75 мл) (перемешивали до растворения). Органическую фазу удаляли, сушили (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Analogix, SF40-80 г, 0-3% MeOH/CHCl с 0,1% HOAc) давала продукт, метил 1-изопропил-3-метил-6-(1H-тетразол-5-ил)-1H-индол-4-карбоксилат (0,28 г, 0,935 ммоль, 48,0% выход) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8,40 (д, J=1,3 Гц, 1H), 8,15 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,69 (с, 1H), 4,86 (квин., J=6,6 Гц, 1H), 3,94 (с, 3H), 2,33 (с, 3H), 1,50 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 300,3 [M+H].
b) 1-Изопропил-3-метил-6-(1H-тетразол-5-ил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
1
+
6
К перемешиваемому раствору метил 1-изопропил-3-метил-6-(1H-тетразол-5-ил)-1H-индол-4-карбоксилата (0,27 г, 0,902 ммоль) в MeOH (15 мл) и тетрагидрофуране (5 мл) добавляли 1н NaOH (5 мл, 5,00 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение 48 часов. LCMS показала, что реакция завершилась. Реакционную смесь концентрировали практически досуха в вакууме, подкисляли 1н HCl (5 мл), растирали, фильтровали и промывали небольшим объемом воды и сушили в вакууме, получая продукт, 1-изопропил-3-метил-6-(1H-тетразол-5-ил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (0,26 г, 0,911 ммоль, 101% выход) в виде светло-желтого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 13,04 (шир.с, 1H), 8,36 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,13 (д, J=1,3 Гц, 1H), 7,65 (с, 1H), 4,85 (квин., J=6,6 Гц, 1H), 2,36 (с, 3H), 1,50 (д, J=6,6 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 286,1 [M+H].
Промежуточное соединение 40
6-Бром-3-хлор-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновая кислота
3
2
4
6
1
+
В 100 мл круглодонную колбу добавляли метил 6-бром-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилат (1,100 г, 3,71 ммоль) в виде раствора в THF и магнитный мешальник. В ту же колбу добавляли 1-хлор-2,5-пирролидиндион (0,546 г, 4,09 ммоль), и систему перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и остаток растворяли в EtOAc (60 мл) и промывали насыщенным NaHCO (20 мл) и соляным раствором (8 мл). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Очистка остатка колоночной хроматографией давала метил 6-бром-3-хлор-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат (в виде густого золотистого масла), который применяли в следующей стадии. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8,15 (д, J=1,52 Гц, 1H), 7,93 (с, 1H), 7,50 (д, J=1,77 Гц, 1H), 4,90 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 3,89 (с, 3H), 1,43 (д, J=6,57 Гц, 6H). MS(ES) [M+H] 332,2.
1
+
6
К раствору метил 6-бром-3-хлор-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоксилата (1,2 г, 3,63 ммоль) в THF (2,368 мл) и MeOH (14,21 мл) добавляли 3н NaOH (1,573 мл, 4,72 ммоль). Полученную в результате смесь грели при 55°C в течение 4 часов. Реакционную смесь прекращали нагревать, и растворитель удаляли в вакууме. Оставшийся остаток растворяли в воде (12 мл), и подкисляли добавлением по каплям 1н HCl. Выпадал продукт, и суспензия становилась слишком густой для перемешивания, и ее разбавляли водой (10 мл). После того как выпадение осадка прекращалось, кислоту не добавляли. Твердый остаток собирали вакуумным фильтрованием, промывали водой и сушили в вакууме в течение ночи, получая 6-бром-3-хлор-1-(1-метилэтил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (650 мг, 2,033 ммоль, 56,0% выход на 2 стадии) в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 13,22 (с, 1H), 8,09 (д, J=1,77 Гц, 1H), 7,89 (с, 1H), 7,45 (д, J=1,77 Гц, 1H), 4,88 (квин., J=6,63 Гц, 1H), 1,43 (д, J=6,57 Гц, 6H). MS(ES) [M+H] 316,0.
Промежуточное соединение 41
Метил 2-бром-6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат
2
2
6
1
+
К перемешиваемому раствору метил 6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилата (2,5 г, 9,41 ммоль) в DMF (25 мл) добавляли NBS (1,7 г, 9,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 часов, затем упаривали досуха в вакууме. Реакционную смесь очищали хроматографией на силикагеле (Analogix, SF40-80 г, 0-5% EtOAc в гексане), затем (Analogix, SF25-60 г, 25% CHCl в гексане), получая продукт, метил 2-бром-6-хлор-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат (1,79 г, 5,19 ммоль, 55,2% выход) в виде прозрачного масла. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 7,98 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,41 (д, J=1,8 Гц, 1H), 5,05 (дт, J=6,7, 13,4 Гц, 1H), 3,89 (с, 3H), 2,22 (с, 3H), 1,57 (д, J=7,1 Гц, 6H). MS(ES)+ m/e 344,0 [M+H].
Промежуточное соединение 42
1-Изопропил-3-метил-6-(пиридазин-4-ил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
a) Метил 1-изопропил-3-метил-6-(пиридазин-4-ил)-1H-индол-4-карбоксилат
2
2
2
4
1
+
В 50 мл круглодонную колбу добавляли метил 6-бром-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксилат (150 мг, 0,484 ммоль), PdCl(dppf)-CHCl аддукт (39,5 мг, 0,048 ммоль) и 1,4-диоксан (4836 мкл), с последующим добавлением 4-(трибутилстаннил)пиридазина (179 мг, 0,484 ммоль) и магнитного мешальника. Колбу снабжали обратным холодильником и выпускным барботером и нагревали до 105°C. Реакционный раствор становился темно-коричневым через 30 минут. LCMS (105C-3h) показала, что реакция завершилась. Реакционный растворитель удаляли в вакууме, и оставшийся остаток растворяли в DMSO. (1,5 мл). DMSO раствор очищали обращено-фазовой ВЭЖХ, применяя Phenomenex Gemini 100×30 мм колонку, нейтральный ацетонитрил и 0,1% муравьиную кислоту в воде, 40-70%, 10 минутный градиент. Требуемые фракции сушили в Genovac EZ-2 испарителе, и объединяли твердый остаток. Продукт, метил 1-изопропил-3-метил-6-(пиридазин-4-ил)-1H-индол-4-карбоксилат, получали в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-δ) δ 9,68 (δ, J=1,26 Гц, 1H), 9,19 (д, J=5,56 Гц, 1H), 8,20 (д, J=1,52 Гц, 1H), 8,13 (дд, J=2,53, 5,56 Гц, 1H), 7,98 (д, J=1,52 Гц, 1H), 7,48 (с, 1H), 4,96 (дт, J=6,60, 13,33 Гц, 1H), 4,00 (с, 3H), 2,39 (с, 3H), 1,56 (д, 6H). MS(ES) [M+H] 310,2.
b) 1-Изопропил-3-метил-6-(пиридазин-4-ил)-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
2
6
1
+
В 100 мл круглодонную колбу добавляли метил 1-изопропил-3-метил-6-(пиридазин-4-ил)-1H-индол-4-карбоксилат (74,0 мг, 0,239 ммоль), метанол (1595 мкл), тетрагидрофуран (THF) (3189 мкл) и магнитный мешальник. В ту же колбу добавляли гидроксид лития, HO (30,1 мг, 0,718 ммоль), и смесь перемешивали при 55°C. Протекание реакции контролировали LCMS. LCMS (после выходных) показала 50% превращение. К реакционной смеси добавляли гидроксид лития, HO (20,08 мг, 0,478 ммоль). Реакционную смесь продолжали перемешивать и нагревать до 55°C. После полного превращения реакционный растворитель удаляли, и оставшийся остаток растворяли в воде (1,5 мл). Водный раствор подкисляли добавлением по каплям 1н HCl до завершения выпадения осадка. Твердый остаток собирали вакуумным фильтрованием и промывали водой (5 мл). Твердый остаток сушили в вакууме на открытом воздухе в течение ночи. Продукт, 1-изопропил-3-метил-6-(пиридазин-4-ил)-1H-индол-4-карбоновую кислоту (68 мг, 0,228 ммоль, 95% выход) получали в виде коричневого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-δ) δ 9,71-9,83 (м, 1H), 9,23 (дд, J=1,26, 5,56 Гц, 1H), 8,32 (с, 1H), 8,11 (дд, J=2,65, 5,43 Гц, 1H), 7,86 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 4,90-5,09 (м, 1H), 2,34 (с, 3H), 1,47 (д, J=6,82 Гц, 6H). MS(ES) [M+H] 296,2.
Промежуточное соединение 43
6-Бром-3-фтор-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновая кислота
a) Метил 6-бром-3-фтор-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат
1
+
4
В 20 мл пробирку добавляли метил 6-бром-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат (50,0 мг, 0,169 ммоль), (селектфлуор) дитетрафторборат 1-(хлорметил)-4-фтор-1,4-диазонийбицикло[2.2.2]октана (78 мг, 0,219 ммоль), с последующим добавлением магнитного мешальника и нитроэтана (2 мл). Пробирку закрывали крышкой, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Протекание реакции контролировали LCMS. После завершения реакции реакционный растворитель удаляли в вакууме. Остаток растворяли в DCM (1,4 мл). DCM раствор наносили на analogix Si35 SF10-8 граммовую колонку. Соединение элюировали EtOAc/гексан, 5-15%, 20 минут. Требуемый продукт и побочный MW629 элюировались совместно. Смесь растворяли в DMSO (1 мл) и очищали обращено-фазовой ВЭЖХ, применяя Gemini 5 мк 30×100 мм колонку, нейтральный ацетонитрил/0,1% муравьиная кислота в воде, 50-80%, 7 минутный градиент. Требуемый продукт элюировался через 6,8 минут, и побочный продукт MW 629 через 9,5 минут. Требуемые фракции концентрировали до остатка. LCMS и ЯМР подтвердили требуемую структуру и аналитическая ВЭЖХ показала 100% чистоту. Продукт, метил 6-бром-3-фтор-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат (11 мг, 0,035 ммоль, 20,53% выход), получали в виде белого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d) δ 7,95 (т, J=1,77 Гц, 1H), 7,78 (д, J=1,77 Гц, 1H), 7,47 (д, J=2,53 Гц, 1H), 4,76-4,84 (м, J=1,64, 6,65, 6,65, 13,36 Гц, 1H), 3,96 (с, 3H), 1,50 (д, 6H). MS(ES)[M+H] 315,1.
b) 6-Бром-3-фтор-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновая кислота
2
6
1
+
В 100 мл круглодонную колбу добавляли метил 6-бром-3-фтор-1-изопропил-1H-индол-4-карбоксилат (33,0 мг, 0,105 ммоль), метанол (700 мкл), тетрагидрофуран (THF) (1401 мкл) и магнитный мешальник. В ту же колбу добавляли гидроксид лития, HO (13,22 мг, 0,315 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре. Протекание реакции контролировали LCMS. LCMS (18 часов) показала 60% превращение. Реакционную смесь нагревали до 50°C в алюминиевом нагревательном блоке при перемешивании. После полного превращения растворитель удаляли в вакууме, и оставшийся остаток растворяли в воде (1 мл) и добавляли по каплям (9 капель) 1н HCl до прекращения выпадения осадка. Мелкодисперсный бледно-желтый твердый остаток собирали вакуумным фильтрованием. LCMS и ВЭЖХ показали 100% чистоту, и ЯМР подтвердил требуемую структуру. Продукт, 6-бром-3-фтор-1-изопропил-1H-индол-4-карбоновую кислоту (24 мг, 0,080 ммоль, 76% выход) получали в виде желтого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 13,07 (шир.с, 1H), 8,12 (т, J=1,89 Гц, 1H), 7,77 (д, J=2,27 Гц, 1H), 7,66 (д, J=1,77 Гц, 1H), 4,88 (кв.д, J=5,31, 6,65 Гц, 1H), 1,40 (д, 6H). MS(ES)[M+H] 300,1.
Промежуточное соединение 44
N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индол-4-карбоксамид
2
2
2
Пробное испытание: смесь 6-бром-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамида (1,0 г, 2,32 ммоль, 1 экв.), бис(пинаколато)дибора (0,71 г, 2,79 ммоль, 1,2 экв.), KOAc (0,47 г, 4,76 ммоль, 2 экв.) и PdCl(dppf)-CHCl аддукта (104 мг, 00,13 ммоль, 0,1 экв.) в 10 мл диоксана в 20 мл микроволновой пробирке барботировали азотом в течение 10 минут, с последующим закрыванием крышкой и нагреванием на масляной бане при 80°C в течение 3 часов. LCMS показала полное превращение. Обнаруживали только 4% дебромидного побочного продукта.
2
2
2
3
Препаративный опыт: смесь 6-бром-N-((4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-3-метил-1H-индол-4-карбоксамида (22,0 г, 51,1 ммоль, 1 экв.), бис(пинаколато)дибора (15,58 г, 61,3 ммоль, 1,2 экв.), KOAc (10,29 г, 105 ммоль, 2 экв.) и PdCl (dppf)-CHCl аддукта (2,30 г, 2,81 ммоль, 0,1 экв.) в 190 мл диоксана дегазировали и продували азотом (повторяли ×4). Смесь грели на масляной бане при 90°C в течение 2 часов. Темно-коричневую смесь объединяли с неочищенной смесью пробного испытания выше и фильтровали через целит (промывая EtOAc). Фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в CHCl и распределяли на 9 одинаковых порций. Одну порцию наносили на картридж для сухой загрузки с целитом. Очистку осуществляли на SF40-80 г силикагельном картридже, применяя градиентное элюирование 25% EtOAc в гексане - 100% EtOAc (градиент: 0-5 минут, 25% EtOAc, 5-20 минут, линейный градиент 25-100% EtOAc, 25-65 минут, 100% EtOAc). Требуемый продукт элюировался 100% EtOAc (с длинным хвостом). DASI часть в процессе забивалась и требовалось ее удаление для продолжения хроматографии, что вызывало потерю продукта. Таким образом, применение FCC отбрасывали и переключались на гравитационную колонку.
3
Оставшиеся 8 порций объединяли и растворяли в CHCl, с последующим нанесением на силикагельную колонку (500 г крупнозернистого силикагеля, наносили в 25% EtOAc в гексане), и затем элюированием 1 л 25% EtOAc в гексане, 1 л 50% EtOAc, 1 л 75% EtOAc в гексане, 2 л 100% EtOAc, 1 л EtOAc с 25 мл добавлением MeOH. Требуемый продукт элюировался 100% EtOAc, 25 мл-100 мл MeOH в EtOAc фракциях.
1
6
EtOAc фракции объединяли с FCC очищенным соединением. Смесь концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в MTBE (5 мл) и гексане (100 мл), получая суспензию, которую фильтровали. Остаток на фильтре промывали гексаном (30 мл) и сушили в вакууме при комнатной температуре в течение 4 часов, получая N-[(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индол-4-карбоксамид (14,01 г) в виде светло-бежевого твердого остатка. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 1,31 (с, 12H), 1,41 (д, J=6,8 Гц, 6H), 2,11 (с, 3H), 2,16 (с, 3H), 2,22 (с, 3H), 4,33 (д, J=8 Гц, 2H), 4,79 (квин., J=6,6 Гц, 1H), 5,87 (с, 1H), 7,23 (с, 1H), 7,40 (д, J=1,0 Гц, 1H), 7,75 (с, 1H), 8,04 (т, J=5,1 Гц, 1H), 11,46 (с, 1H).
Протокол анализа
Соединения, относящиеся к настоящему изобретению, оценивали на их способность ингибировать метилтрансферазную активность EZH2 в PRC2 комплексе. Человеческий PRC2 комплекс получали совместной экспрессией каждого из 5 мембранных белков (FLAG-EZH2, EED, SUZ12, RbAp48, AEBP2) в Sf9 клетках с последующей совместной очисткой. Ферментативную активность измеряли в сцинтилляционном анализе сближения (SPA), где тритилированную метильную группу переносят с 3H-SAM на лизиновый остаток гистона H3 мононуклеосомы, очищенной из HeLa клеток. Мононуклеосомы захватывали на шариках, и полученный в результате сигнал считывали на ViewLux планшет-ридере.
Часть A. Получение соединений
1. Получали 10 мМ исходный раствор соединения из твердых веществ в 100% DMSO.
2. Осуществляли 11-точечное серийное разбавление (1:3 разбавление, максимальная концентрация 10 мМ) в 100% DMSO для каждого испытуемого соединения в 384 луночном планшете, оставляя колонки 6 и 18 для DMSO контролей.
3. Распределяли 100 нл соединения из планшета для разбавления на реакционные планшеты (Grenier Bio-он, 384-луночные, Cat# 784075).
Часть B. Получение реагентов
Получали следующие растворы:
1. 50 мм Tris-HCl, pH 8: на 1 л основного буфера, смешивали 1 M Tris-HCI, pH 8 (50 мл) и дистиллированную воду (950 мл).
2
2
2. 1x Буфер для анализа: на 10 мл 1x буфера для анализа, смешивали 50 мм Tris-HCl, pH 8 (9958 мкл), 1 M MgCl (20 мкл), 2 M DTT (20 мкл) и 10% Tween-20 (2 мкл), получая конечную концентрацию 50 мМ Tris-HCl, pH 8, 2 мМ MgCl, 4 мМ DTT, 0,002% Tween-20.
3. 2x Раствор фермента: на 10 мл 2x раствора фермента, смешивали 1x буфер для анализа и PRC2 комплекс, получая конечную концентрацию фермента 10 нМ.
2
4. Суспензия SPA шариков: на 1 мл суспензии SPA шариков, смешивали PS-PEI покрытые LEADSeeker шарики (40 мг) и ddHO (1 мл), получая конечную концентрацию 40 мг/мл.
5. 2x Раствор субстрата: на 10 мл 2x раствора субстрата, смешивали 1x буфер для анализа (9728,55 мкл), 800 мкг/мл мононуклеосом (125 мкл), 1 мМ охлажденного SAM (4 мкл) и 7,02 мкМ 3H-SAM (142,45 мкл; 0,55 мКи/мл), получая конечную концентрацию 5 мкг/мл нуклеосом, 0,2 мкМ охлажденную SAM и 0,05 мкМ 3H-SAM.
2
6. 2,67x смесь тушителя реакции/шариков: на 10 мл 2,67x смеси тушителя реакции/шариков, смешивали ddHO (9358 мкл), 10 мм холодной SAM (267 мкл), 40 мг/мл суспензии шариков (375 мкл), получая конечную концентрацию 100 мкМ охлажденной SAM и 0,5 мг/мл SPA шариков.
Часть C. Аналитическая реакция в 384-луночных Grenier Bio-One планшетах
Добавление соединения
1. Распределяли 100 нл/лунка 100x соединения в лунки для испытаний (как отмечалось выше).
2. Распределяли 100 нл/лунка 100% DMSO в лунки 6 и 18 для максимального и минимального контроля, соответственно.
Анализ
1. Распределяли 5 мкл/лунка 1 x буфера для анализа в колонку 18 (реакции минимального контроля).
2. Распределяли 5 мкл/лунка 2x раствора фермента в лунки 1-17, 19-24.
3. Вращали планшеты для анализа в течение ~1 минуты при 500 об/мин.
4. Ставили друг на друга планшеты для анализа, накрывая верхний планшет.
5. Выдерживали соединение/DMSO с ферментом в течение 30 минут при комнатной температуре.
6. Распределяли 5 мкл/лунка 2x раствора субстрата в колонки 1-24.
7. Вращали планшеты для анализа в течение ~1 минуты при 500 об/мин.
8. Ставили друг на друга планшеты для анализа, накрывая верхний планшет.
9. Выдерживали планшеты для анализа при комнатной температуре в течение 1 часа.
Добавление тушителя реакции/шариков
1. Распределяли 5 мкл/лунка 3x смеси тушителя реакции/шариков в колонки 1-24.
2. Герметично закрывали верхнюю часть каждого планшета для анализа клеящимся TopSeal.
3. Вращали планшеты для анализа в течение ~1 минуты при 500 об/мин.
4. Приводили в равновесие планшеты в течение >20 минут.
Считывание планшетов
1. Считывали планшеты для анализа на Viewlux планшетном ридере, применяя 613 нМ эмиссионный фильтр с 300 секундным временем считывания.
Добавление реагентов можно осуществлять вручную или автоматическим устройством для подачи жидкостей.
* Конечная DMSO концентрация в данном анализе составляла 1%.
* Положительный контроль находился в колонке 6; отрицательный контроль находился в колонке 18.
* Конечная исходная концентрация соединений составляла 100 мкМ.
Часть D. анализ данных
50
Ингибирование в процентах рассчитывали относительно DMSO контроля для каждой концентрации соединения, и полученные в результате величины аппроксимировали, применяя стандартные IC подгоняемые параметры в ABASE пакете программ для аппроксимации данных.
50
50
50
50
Примерные соединения настоящего изобретения обычно испытывали согласно приведенному выше или аналогичному анализу и было обнаружено, что они являются ингибиторами EZH2. IC величины были в диапазоне от приблизительно 1 нМ до приблизительно 10 мкМ; IC Величины самых активных соединений находились в диапазоне от приблизительно 1 нМ до приблизительно 500 нМ; самые активные соединения имели концентрацию ниже 50 нМ. Как испытывали в предшествующем анализе или аналогичном анализе, соединения различных примеров давали pIC данные в таблице соединений выше или IC данные в параграфе ниже. Повторение анализа может приводить к несколько иным результатам.
Пр. 78, 1800; Пр. 174, 18; Пр. 211, 14; Пр. 212, 9; Пр. 234, 1000; Пр. 244, 29; Пр. 264, 13; Пр. 265, 13; Пр. 266, 25; Пр. 267, 20; Пр. 268, 40; Пр. 269, 4; Пр. 270, 4; Пр. 271, 8; Пр. 272, 13; Пр. 273, 10; Пр. 274, 32; Пр. 275, 3; Пр. 339, 13.
Получение конкретных соединений (соединение A, B и C), которые испытывали в исследованиях пролиферации T-клеток и продуцирования цитокинов:
N-((4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-6-(4-(2-(диметиламино)этокси)фенил)-1-изопропил-1H-индазолe-4-карбоксамид
2
2
2
4
3
6
1
+.
6-Бром-N-(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-1-изопропил-1H-индазолe-4-карбоксамид (80 мг, 0,19 ммоль), N,N-диметил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-l,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенокси)этанамин (84 мг, 0,29 ммоль) и PdCl(dppf)-CHCl аддукт (7,8 мг, 0,009 ммоль) в диоксане/воде (3 мл:1 мл) перемешивали в течение 10 минут в атмосфере азота. Добавляли бикарбонат натрия (48,3 мг, 0,58 ммоль), и нерастворимую смесь облучали в СВЧ-печи при 100°C в течение 20 минут. Реакционную смесь упаривали, растворяли в DCM/MeOH (1:1), наносили на силикагель и очищали, применяя хроматографию на силикагеле (элюент: DCM/MeOH/NHOH; градиент 0 - 80:20:2 в DCM). Выделенный продукт растворяли в горячей смеси DMSO/MeOH и очищали, применяя обращено-фазовую ВЭЖХ (25-80% градиент MeCN в воде с 0,1% TFA). Большую часть растворителя из объединенных фракций с продуктом упаривали и добавляли насыщенный водный NaHCO, твердый остаток, который образовывался, фильтровали, сушили на воздухе в течение 15 минут, и сушили в вакуумном шкафу в течение ночи. Продукт собирали в виде белого твердого остатка (56 мг, 56%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d)™ м.д. 11,54 (шир.с, 1H), 8,64 (т, J=4,80 Гц, 1H), 8,35 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,81-7,84 (м, 2H). LC-MS (ES) m/z = 528,1 [M+H]
Соединение A можно получить согласно способу, аналогичному примеру выше:
Соединение A: 1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индазол-4-карбоксамид
1
+.
6
Заявленное в заголовке соединение получали аналогичным способом, как описано для пример выше из 6-бром-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-4-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-индазолe-4-карбоксамида (90 мг, 0,202 ммоль) и 1-метил [5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридинил]пиперазина (92 мг, 0,303 ммоль). Конечный продукт собирали в виде светло-коричневого твердого остатка (54 мг, 49%). H ЯМР (400 МГц, DMSO-d)™ м.д. 11,54 (шир.с, 1H), 8,65 (д, J=2,27 Гц, 1H), 8,61 (т, J=4,80 Гц, 1H), 8,36 (с, 1H), 8,04-8,08 (м, 2H), 7,83 (с, 1H), 6,96 (д, J=9,09 Гц, 1H), 5,92 (с, 1H), 5,14 (квин., J=6,57 Гц, 1H), 4,42 (д, J=4,80 Гц, 2H), 3,53-3,59 (м, 4H), 2,53-2,61 (м, 2H), 2,40-2,45 (м, 4H), 2,23 (с, 3H), 2,14 (с, 3H), 1,51-1,58 (м, 2H), 1,50 (с, 3H), 1,49 (с, 3H), 0,88 (т, J=7,33 Гц, 3H). LC-MS (ES) m/z = 542,2 [M+H]
Соединение B: N-[(4,6-Диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-3-метил-1-(1-метилэтил)-6-[6-(4-метил-1-пиперазинил)-3-пиридинил]-1H-индол-4-карбоксамид
Соединение B можно получить согласно общему способу, описанному в экспериментальной части выше.
6-Циклопропил-1-(1-метилэтил)-N-[(4-метил-2-оксо-6-пропил-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-пиразолo[3,4-b]пиридин-4-карбоксамид
2
6
1
6-Циклопропил-1-(1-метилэтил)-1H-пиразолo[3,4-b]пиридин-4-карбоновую кислоту (167 мг, 0,680 ммоль), трифторацетат 3-(аминометил)-4-метил-6-пропил-2(1H)-пиридинона (200 мг, 0,680 ммоль), HOAT (139 мг, 1,019 ммоль), EDC (195 мг, 1,019 ммоль) и N-метилморфолин (0,299 мл, 2,72 ммоль) растворяли в DMF (6 мл) и перемешивали при 40°C в течение 24 часов. Реакционную смесь выливали в воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали до оранжевого масла. Остаток растворяли в DMSO и очищали обращено-фазовой ВЭЖХ (подвижная фаза: 40-60% ACN в HO, 0,1% TFA). Выделенный продукт сушили в вакуумной печи в течение ночи и получали TFA соль заявленного в заголовке соединения в виде белого твердого остатка, 0,113 г (32%). LCMS E-S (M+H) = 408,1. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ м.д. 0,80-0,98 (м, 3H), 1,06 (д, J=7,07 Гц, 4H), 1,46 (д, J=6,82 Гц, 6H), 1,52-1,67 (м, 2H), 2,17-2,31 (м, 4H), 2,37 (т, J=7,58 Гц, 2H), 4,36 (д, J=4,80 Гц, 2H), 5,02-5,27 (м, 1H), 5,91 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 8,21 (с, 1H), 8,62-8,87 (м, 1H), 11,54 (шир.с, 1H).
Соединение C можно получить согласно способу, аналогичному примеру выше:
6-Циклопропил-1-(1-метилэтил)-N-[(6-метил-2-оксо-1,2-дигидро-3-пиридинил)метил]-1H-пиразолo[3,4-b]пиридин-4-карбоксамид
Примеры
Исследование пролиферации:
EZH1/EZH2 ингибиторы, соединение A и соединение B, нарушали зависящим от концентрации способом пролиферацию, вызываемую T-клеточными рецепторами, CD4+ T-клеток с pIC50 5,30 ± 0,06 и 4,93 ± 0,05, соответственно (n=4; фигура 1). Напротив, соединение C не оказывало влияния на пролиферацию, вызванную T-клеточными рецепторами, CD4+ T-клеток (n=4).
Исследование продуцирования цитокинов:
EZH1/EZH2 ингибиторы, соединение A и соединение B, нарушали зависящим от концентрации способом продуцирование, вызываемое T-клеточными рецепторами, IL-10, IL-13, IL-17, IFN и TNF в CD4+ T-клетках с pIC50 величинами в диапазоне 5,65 ± 0,06 - 5,23 ± 0,03 и 5,21 ± 0,09 - 4,94 ± 0,03, соответственно (n=4; фигура 2 и таблица 1). Напротив, соединение C не оказывало влияния на продуцирование, вызванное T-клеточными рецепторами, IL-17 или IFN в CD4+ T-клетках (n=4). Высокие концентрации соединения C (т.е. >15 мкМ) ослабляли IL-10, IL-13 и TNF продуцирование (n=4).
EZH1/EZH2 ингибиторы, соединение A и соединение B, нарушали зависящим от концентрации способом продуцирование, вызываемое T-клеточными рецепторами, IL-2 в CD4+ T-клетках с pIC50 величинами 6,24 ± 0,24 и 5,76 ± 0,25, соответственно (n=4; фигура 3). соединение C также нарушало продуцирование, вызываемое T-клеточными рецепторами, IL-2 в CD4+ T-клетках, хотя pIC50 нельзя было рассчитать (n=4; фигура 3).
Способы:
Выделение CD4 T-клеток из человеческой крови:
15 мл фиколла добавляли к 8×50 мл пробиркам фирмы accuspin для одного донора и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 1 минуты. Образцы цельной крови (200 мл + 1 % гепарин) собирали у доноров, являющихся людьми. Приблизительно 25 мл крови добавляли к каждой предварительно заполненной фиколлом 50 мл пробирке фирмы falcon с фильтром и центрифугировали при 1500 об/мин в течение 20 минут с торможение для того, чтобы избежать нарушения разделения клеток. 45 мл с PBS добавляли к PBMC фракции каждой пробирки и центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 минут с торможением. Кондиционированную среду выбрасывали, и клеточную массу повторно суспендировали в 2 мл PBS. Клеточные суспензии для каждого донора объединяли в одной пробирке фирмы falcon, доводя до 45 мл PBS и центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 минут. CD4+ T-клетки выделяли отрицательным извлечением, применяя набор для выделения CD4 T-клеток Miltenyi Biotech согласно протоколу производителя.
Исследования пролиферации:
6
2
96-луночные плоскодонные планшеты покрывали 10 мкг/мл анти-CD3 + 2 мкг/мл анти-CD28 при 4°C в течение ночи. На следующий день, планшеты промывали PBS. Для исследований пролиферации, клетки прокрашивали CFSE (Invitrogen) согласно протоколу производителя. Затем, клетки добавляли к предварительно покрытым анти-CD3 + анти-CD28 96-луночным планшетам при 0,2×10 клеток/лунка в присутствии EZH1/EZH2 ингибиторов (соединение A и соединение B), неактивного контрольного соединения (соединение C) или среды (0,1 % DMSO) и выдерживали в течение 6 дней при 37°C/ 5% CO. Затем, клетки переносили в 96-луночные круглодонные планшеты, промывали, и затем анализировали проточной цитометрией.
Исследования продуцирования цитокинов:
6
2
96-луночные плоскодонные планшеты покрывали 10 мкг/мл анти-CD3 + 2 мкг/мл анти-CD28 при 4°C в течение ночи. На следующий день, планшеты промывали PBS. Для исследования продуцирования цитокинов, клетки добавляли к предварительно покрытым анти-CD3 + анти-CD28 96-луночным планшетам при 0,4×10 клеток/лунка в присутствии EZH1/EZH2 ингибиторов или среды и выдерживали при 37°C/ 5 % CO. Кондиционированную среду выдерживали в течение 18 часов (IL-2) или 72 часов (IL-10, IL-13, IL-17, IFN, TNF) для определения продуцирования цитокинов многократным ELISA Mesoscale discovery согласно протоколу производителя.
Лекарственные средства и материалы
2+
2+
Анти-CD3 (HU CDS MALE MAB UCHT1; Cat # 555329) и анти-CD28 (HU CD28 MALE MAB CD28.2; Cat #: 555725) получали у BD Pharmingen и растворяли в физиологическом растворе, забуференном фосфатом Дульбекко (с Ca/Mg; Gibco). Виколл-пак (Cat # 17-1440-03) получали у GE Healthcare. Набор для выделения CD4+ T-клеток (Cat # 130-091-155) получали у Miltenyi Biotec. Клетки выращивали в RPMI 1640, содержащей 10% PCS + 1% пенициллин/стрептомицин + 1% L-глютамин. CellTrace CFSE набор для клеточной пролиферации (Cat # C34554) получали у Invitrogen.
Все из соединения A, соединения B и соединения C получали на месте и растворяли в 100% DMSO.
Анализ данных
Исследования пролиферации:
Flowjo программное обеспечение применяли для расчета коэффициента деления, применяя интенсивность флуоресценции. Данные приводили в виде среднего ± среднеквадратичная ошибка среднего; n величины представляли собой количество применяемых человеческих доноров. pIC50 величины получали, применяя GraphPad Prism программное обеспечение и нелинейный подбор сигмоидальной кривой дозы.
Исследования продуцирования цитокинов:
Данные анализировали, применяя Excel, и приводили в виде среднего ± среднеквадратичная ошибка среднего; n величины представляли собой количество применяемых человеческих доноров. pIC50 величины получали, применяя GraphPad Prism программное обеспечение и нелинейный подбор сигмоидальной кривой дозы.