СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПИДНЫХ НАНОЧАСТИЦ ДЛЯ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

1. Способ получения липидной наночастицы, инкапсулирующей двухнитиевую молекулу РНК, содержащий стадии:
получения липидного раствора, содержащего катионный липид, нейтральный липид, стерол и ПЭГ-липид, растворенные в смешивающемся с водой органическом растворителе;
получения первого водного раствора, содержащего молекулу РНК в концентрации от 0.08 до 0.8 мг/м и водный буфер при pH 4-6;
накачивания липидного раствора через трубку в водный раствор при постоянной скорости в течение 1-100 мин так, что липидный раствор смешивается с водным раствором;
получения смеси, содержащей 25-45% (об.:об.) органического растворителя и липидную наночастицу, имеющую отношение РНК:липид от 0.06 до 0.16 (мас.:мас.) и соотношение зарядов РНК:липид от 2.5:1 до 1:1; и
удаления органического растворителя из смеси посредством диафильтрации относительно второго водного буферизированного раствора при pH 6-8.
2. Способ по п. 1, где второй раствор дополнительно содержит полисахарид.
3. Способ по п. 2, где полисахарид выбирается из группы, состоящей из сахарозы, трегалозы, лактозы, мальтозы и инулина.
4. Способ по п. 1, дополнительно содержащий стадию лиофилизации липидной наночастицы, инкапсулирующей молекулу РНК.
5. Способ по п. 1, где органическим раствором является этанол.
6. Способ по п. 1, где катионный липид составляет от 40 до 60 моль.% от липидов.
7. Способ по п. 1, где катионный липид выбирается из группы, состоящей из HEDC, HEDODC и HE-Et-DODC:
и
8. Способ по п. 1, где катионный липид состоит из ионизируемого или неионизируемого положительного заряда.
9. Способ по п. 1, где липиды дополнительно содержат соединение, содержащее молекулу ретиноида.
10. Способ по п. 1, где первый раствор и второй раствор находятся при 25-55°C.
11. Способ по п. 1, где первый буферизированный раствор содержит цитрат.
12. Способ по п. 5, где этанольный раствор добавляется к водному раствору посредством впрыскивания через многосопловое устройство на границу раздела фаз воздух - вода.
13. Способ по п. 5, где этанольный раствор добавляется к водному раствору посредством погруженного впрыскивания.
14. Фармацевтическая композиция, содержащая липидную наночастицу, инкапсулирующую двухнитиевую молекулу РНК, полученную способом по любому из п.п. 1-13, где катионный липид имеет структурную формулу I
2
4
в которой Ζ представляет собой алкильный линкер, C-C алкил;
1
6
Y - алкильный линкер, C-C алкил;
1
2
12
30
12
30
R и R - каждый независимо C-Cалкил, C-Cалкенил;
3
4
1
6
2
2
R и R - каждый независимо водород, C-Cалкил или -CHCHOH;
n равно 1-6 и
X - противоион.
15. Фармацевтическая композиция по п. 14, где катионный липид составляет от 40 до 60 моль.% от липидов.
16. Фармацевтическая композиция по п. 14, где катионный липид выбирается из группы, состоящей из HEDC, HEDODC и HE-Et-DODC:
и
17. Фармацевтическая композиция по п. 14, где катионный липид состоит из ионизируемого или неионизируемого положительного заряда.
18. Фармацевтическая композиция по п. 14, где липиды дополнительно содержат соединение, содержащее молекулу ретиноида.
19. Фармацевтическая композиция по п. 14, где способ дополнительно содержит лиофилизацию липосома-инкапсулированной молекулы РНК.
20. Фармацевтическая композиция по п. 14, дополнительно содержащая полисахарид.
21. Фармацевтическая композиция по п. 20, где полисахарид выбирается из группы, состоящей из сахарозы, трегалозы, лактозы, мальтозы и инулина.
22. Фармацевтическая композиция по п. 14, где средневзвешанный по объему диаметр липидной наночастицы, инкапсулирующей молекулу РНК, составляет 50-100 нм.
23. Фармацевтическая композиция по любому из п.п. 14-22, где липидная наночастица, инкапсулирующая молекулу РНК, имеет индекс полидисперсности менее 0.02.