Фармакотерапевтическое влияние "гепатофита" при экспериментальном гепатите

2. Ботоева Е.А., Баханова Е.М. Антимикробная активность экстракта ортилии однобокой // Сб. статей молодых учёных и специалистов. - Томск, СГМУ, 2002. - С.204-205.

3. Кулеш Н И., Красовская Н.П., Горовой П.Г., Максимов О.Б. Особенности химического состава двух видов Р. Руго1а Ь. на северных границах ареалов // Растительные ресурсы. - 1988. - Т.ХХ1У, Вып.З. -С.420-424.

4. Максютина Н.П., Литвиненко В.И. Методы выделения и иследования флавоноидных соединений // Фенольные соединения и их биологические функции. - М.: Наука, 1968. - С.7-26.

5. Пензина Т.Н. Фармакологическая активность некоторых растений семейства грушанковых: Автореферат дисс. ... канд. биол. наук/Т.Н. Пензина. -Барнаул, 1999.-24 с.

6. Телятьев В В. Полезные растения Центральной Сибири / ВВ. Телятьев. - Иркутск: Вост. Сиб. кн. изд-во, 1987. - С. 188-191.

7. Тахтаджян А.П. Систематика и филогения цветковых растений. - М.-Л.: Наука, 1966. - С.221-223.

8. Федосеева Г.М., Куклина Л.Б., Изатулин В.Г., Красникова И.М. Фармакологическое и химическое исследование ортилии однобокой // Тез. докл. науч. практ. конф. - Улан-Удэ, 1997. - С.57-58.

9. Федосеева Г.М., Куклина Л.Б., Четверякова Т.Д. и др. Терапия инфекционного и асептического воспалительного процесса в эксперименте // Жур. ин-фек. патологии. - Иркутск, 1998. - Т.5, №1. - С.24-25.

10. Федосеева Г.М., Мирович В.М., Федосеев А.П., Дроздова Н.В. Фитохимическое и биологическое исследование грушанки круглолистной // Сб. науч. тр. НИМФ. - М., 2000. - Т.ХХХ1Х, 4.2. - С.285-

288.

11. Федосеева Г.М., Дроздова Н.В., Федосеев А.П. и др. Сравнительное биолого-фитохимическое исследование растении семейства грушанковых как перспективных источников новых лекарственных средств растительного происхождения // Матер, межд. науч. конф. - Томск, 2000. - С.64-65.

12. Химический анализ лекарственных растений / Под редакцией Н.И. Гринкевич и Л.Н. Сафронич. - М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.

13. Шретер А.И. Лекарственная флора Советского Дальнего Востока. - М.: Медицина, 1975. - С.212-213.

14. Шретер А.И. Поиск и изучение новых лекарственных растений. - М.: Знание, 1980. - С.67.

© НИКОЛАЕВ С.М., САМБУЕВА З.Г., ЦЫРЕНЖАПОВ А.В., ЧЕХИРОВА Г.В. -УДК 616.36-002.1:615.32

ФАРМАКОТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ВЛИЯНИЕ "ГЕПАТОФИТА" ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ

С.М. Николаев. З.Г. С'амбуева, Л.В. Цыренжапов. Г.В. Чехирова.

Резюме. В экспериментах на белых крысах-самцах линии \Vistar при ССЦ - гепатите установлена выраженная фармакотерапевтическая эффективность сухого экстракта, полученного из фитосбора "7 драгоценных" ("нор-бу-дун-тан"), применяемого в практике тибетской медицины при заболеваниях печени, и условно названного "гепатофитом". Курсовое лечебно-профилактическое введение "гепатофита" в экспериментально-терапевтической дозе 0,1 г/кг массы при экспериментальном гепатите сопровождается ингибированием процессов ПОЛ, уменьшением явлений цитолиза и холестаза, а также стимуляцией дезинтоксикационной и желчевыделительной функции печени.

Ключевые слова: экспериментальный гепатит, (токсический гепатит, ССЦ), ПОЛ, цитолиз, хо-лестаз, желчь, "гепатофит".

По данным письменных источников традиционной медицины [7,12,13] многокомпонентный фитосбор "7 драгоценных" ("нор-бу-дун-тан"), состоящий из девясила высокого, софоры желтоватой, имбиря лекарственного, бузины сибирской, кровохлебки лекарственной, боярышника кроваво-красного и яблони ягодной, применяется при заболеваниях печени. Учитывая популярность и выраженную эффективность данного средства при заболеваниях печени, из указанного сбора с использованием экстракционной технологии получен сухой экстракт [11], условно названный "гепатофитом". Последние три вида из сбора являются заменителями тибетского растительного сырья - миробалана хебула, миробалана беллерического и эмблики лекарственной соответственно. Обоснование правомерности замены тибетских лекарственных растений видами местной флоры проводилось экспериментально, для чего ис-

пользовали правило подобия, а именно: подобия химического состава и фармакологической активности извлечений или препаратов из указанных растений.

Материалы и методы Эксперименты проведены на белых крысах линии \Vistar обоего пола с массой 180-210 г, которые были разделены на 4 группы. Токсическое повреждение печени у крыс трех групп вызывали подкожным введением 50% (\'/у) масляного раствора четыреххлористого углерода (СС14)в объеме 0,4 мл на 100 г массы крыс 1 раз в сутки в течение 4 дней. С лечебно-профилактической целью крысам первой группы интрагастрально вводили "гепатофит" в дозе

0,1 г/кг массы (экспериментально-терапевтическая доза) в виде водного раствора 1 раз в сутки в течение 10 дней, начиная со 2-го дня опыта. В аналогичном режиме крысам 2-ой группы вводили холосас

Таблица 1.

Влияние "гепатофита " на биохимические показатели и содержание продуктов ПОЛ в сыворотке крови у белых крыс с острым СС14-гепатитом. 1-е сутки

№ п/п Показатели Интактные животные (п=5) 1,25±0,13 7 сутки

С С Ь 4 + Ь Ш

1 АсАТ, мкМ/мл-час 1,78+0,14 1,60+0,13 1,08+0,11*

2 АлАТ, мкМ/мл-час 1,54±0,13 2,22+0,20 2,26+0,08 1,24+0,06*

3 Общий билирубин, мкМ/л 3,40±0,25 4,40+0,21 3,54+0,27* 3,23+0,24*

4 Общий белок, г/л 74,0±1,75 56,25+1,63 64,7+1,87* 62,25+2,71*

5 Холестерин, мкМ/л 1,66+0,09 2,08+0,20 1,97+0,08 1,92+0,13

6 [3-липопротеиды, ед. опт. пл. 0,53±0,05 0,60+0,05 0,43+0,03* 0,37+0,04*

7 МДА, мкМ/мл-мин 1,27±0,05 1,67+0,06 1,34+0,06* 1,41+0,04*

8 ДК, отн. ед. 6,04+0,27 9,41+0,62 7,58+0,32* 6,01+0,46*

Примечание: * - означает, что здесь и далее разница достоверна по сравнению с контролем при Р<0,05; п чество животных в группе

в объеме 1 мл/кг массы (экспериментально-терапевтическая доза). Животным 3-ей (контрольной) и 4-ой (интактной) групп вводили дистиллированную воду в эквиобъемном количестве в аналогичном режиме.

Функциональное состояние печени крыс оценивали на 7, 14 и 21-е сутки опыта по биохимическим показателям сыворотки крови: активности аспарта-таминотрансферазы (АсАТ), аланинаминотрансфе-разы (АлАТ), содержанию общего билирубина, общего белка, холестерина и р-липопротеидов [6]; содержанию продуктов перекисного окисления липидов: малонового диальдегида (МДА) и диеновых конъюгатов (ДК) в сыворотке крови [1,10]; интенсивности желчевыделения и химическому составу желчи, а также оценивали антитоксическую функцию печени по тесту гексеналового сна [2]. Крыс наркотизировали внутрибрюшинно 1% раствором барбамила (8 мл/кг массы). Интенсивность желчевыделения оценивали по скорости секреции, общему объему выделенной желчи и по содержанию в ней основных ингредиентов: желчных кислот [4], холестерина [3] и билирубина [9]. Для оценки достоверности различий между средними значениями выборки использовали ^критерий Стыодента Результаты и обсуждение

Результаты исследования по оценке фармакоте-рапевтического влияния "гепатофита" на течение

экспериментального гепатита представлены в таблицах 1-4, из которых следует, что повреждение печени СС14 вызывает значительные нарушения ее функционального состояния. В настоящее время известно, что ведущим звеном в нарушении функций печени при экзогенных отравлениях является активация ПОЛ. Введение "гепатофита" в указанной дозе белым крысам на фоне СС14 позволило ограничить в значительной степени развитие повреждений гепатопитов. В частности, его назначение способствовало предотвращению нарастания уровня продуктов ПОЛ - МДА и ДК, что свидетельствовало об ингибирующем влиянии данного средства на процессы ПОЛ. Уже на 7-е сутки опыта их содержание в сыворотке крови снижалось на 20% по сравнению с контролем, а на 14-е сутки достигало уровня таковых у интактных животных. Снижение активности маркеров цитолиза - АлАТ и АсАТ было более выражено на 14-е сутки опыта и составило соответственно 25% и 30%. Введение "гепатофита" ограничивало и развитие синдрома холестаза, о чем свидетельствовало снижение содержания холестерина на 14-е сутки наблюдения и [3-липопротеидов с 7-х суток на 28%, а также билирубина в сыворотке крови. Кроме того, указанное средство способствовало стимуляции синтеза белка, концентрация которого в сыворотке крови на 7-е сутки наблюдения превышала контроль на 20% (табл. 1-2).

Таблица 2.

Влияние "гепатофита" на биохимические показатели и содержание продуктов ПОЛ в сыворотке крови у белых крыс с острым ССЬ4 -гепатитом, 14-е сутки

№ п/п Показатели Интактные животные (н=5) 14 сутки

ссц+ььо

1 АсАТ, мкМ/мл-час 1,25+0,13 1,87+0,18 1,41+0,08* 1,64+017

2 АлАТ, мкМ/мл-час 1.54+0,13 2,13+0,20 1,50+0,10* 1,94+0,24

3 Общий билирубин, мкМ/л 3,40+0,25 4,08+0,24 3,32+0,21* 3,42+0,19

4 Общий белок, г/л 74,0+1,75 61,4+1,70 71,0+2,0* 71,2+0,90*

5 Холестерин. мкМ/л 1,66+0,09 1,93+0,17 1,39+0,08* 1,81+0,15

6 Р-липопротеиды, ед. опт. пл. 0,53+0,05 0,72+0,007 0,58+0,05* 0,56+0,04*

7 МДА, мкМ/мл-мин 1,27+0,05 1,36+0,03 0,83+0,05* 0,85+0,03*

8 ДК, отн. ед. 6,04+0,27 13,35+1,42 5,09+0,52* 3,45+0,25*

Влияние "гепатофита" на скорость секреции и биохимический состав желчи у белых крыс с острым ССЬ4 - гепатитом, 1-е сутки

Таблица 2.

Условия опыта Скорость секреции желчи в течение 4-х часов (мг/мин на 100 г) Общее кол-во желчи за 1 -4 ч Желчные кислоты Билиру- бин Холесте- рин

1ч. 2ч. Зч. 4ч. мг/100 г. Мг % мг/100 г

1. Интактные (п=5) 6,2+0,3 6,3+0,4 6,3+0,4 6,1+0,4 1494+81 1972 7,35 31 0,115 27.5 0,102

7 сутки

2. ССЦ+ЬЬО (контроль) (и=6) 5,6±0,3 5,3+0,2 5,3+0,2 4,9+0,3 1266+23 1665 5,24 29 0,085 25 0,082

3. ССЦ+холосас (п=6) 6,2+0,2 5,9+0,3 5,8+0,3 5,6+0,4 1410+112 2026 7,16 31 0,108 29 0,103

4. ССІ4+"гепатофит" (п=6) 6,5+0,2* 6,6+0,3* 6,5+0,5* 5,9+0,4 1530+93* 2416 9,10 33 0,122 27 0,100

Введение "гепатофита" при экспериментальном повреждении печени у лабораторных животных также ограничивает нарушения желчеобразовательной и желчевыделителыюй функции печени крыс. Из таблицы 3 следует, что уже на 7-е сутки эксперимента скорость секреции желчи по сравнению с контролем возрастает на 25%. Кроме того, концентрация желчных кислот в желчи превышала контроль на 45%, что способствовало повышению на 34% холато-холестеринового коэффициента, которое. в свою очередь, свидетельствовует об улучшении солюбилизирующих свойств желчи.

Благоприятное влияние экстракта на желчевыделительную функцию печени сохранялось и на 14-е сутки опыта: скорость секреции желчи достоверно возрастала в среднем на 25%; концентрация холатов и билирубина в желчи превышала контроль в 1,5 раза, а холато-холестериновый коэффициент повышался на 32%, тогда как у крыс, получавших холосас - на 15%. Положительная динамика изменений в скорости секреции и биохимического состава желчи у крыс, получавших "гепатофит", сохранялась и на 21-е сутки опыта.

Таблица 4.

Влияние "гепатофита " на продолжительность гексеншювого сна у крыс с токсическим гепатитом

Лечебно-профилактическое введение крысам "гепатофита" оказывало благоприятное влияние и на антитоксическую функцию печени. Из данных,

представленных в таблице 4, следует, что ССЦ резко угнетает скорость элиминации гексенала из организма. У крыс, получавших испытуемый экстракт, продолжительность сна сокращалась на 7 и 14-е сутки опыта соответственно на 29% и 27%, что свидетельствовало о стимулирующем влиянии данного средства на антитоксическую функцию печени.

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о выраженной фармако-терапевтической эффективности "гепатофита" при остром токсическом повреждении печени крыс, вызванном ССЦ. Курсовое введение данного экстракта в указанной дозе способствует ингибированию процессов ПОЛ, вызванных ССЦ, и стабилизации мембран гепатоцитов. Одним из важнейших молекулярно-клеточных механизмов в действии исследуемого экстракта является его антиоксидантная активность, что обусловливает его мембраностабилизирующее действие, установленное в условиях in vitro [8]. "Гепатофит", снижая проницаемость мембран гепатоцитов, препятствует развитию цитолиза, а также хо-лестаза, так как изменение электрохимического потенциала мембраны при интоксикации ССЦ, вызывающее нарушение транспорта желчных кислот, приводит к развитию опосредованного цитолизом холестаза [5]. Указанное средство, вероятно, повышая функциональную активность микросомальной ферментной системы (МФС), способствует нормализации метаболизма холестерина и желчных кислот и предотвращает развитие вторичных некрозов гепатоцитов. О повышении функциональной активности МФС под влиянием "гепатофита" свидетельствует ускорение элиминации из организма гексенала. Холатостимулирующее влияние экстракта, вероятно, связано не только с улучшением синтетической функции печени, но и влиянием на энтерогепа-тическую циркуляцию желчных кислот. Фармакоте-рапевтическая эффективность данного лекарственного средства при экспериментальном гепатите обусловлена наличием и синергизмом в действии содержащихся в нем биологически активных веществ, которые представлены флавоноидами, антоцианами, дубильными веществами, фенолкарбоновыми ки-

Условия опыта Продолжительность сна, в секундах

7 сутки 14 сутки

1. Интактные (п=5) 838+75 1103+78

2. ССЦ+ЬЬО (контроль) (п=6) 1470+118 1294+55

3. ССЦ+холосас (п=6) 1368+212 1321+102

4. СС14+"гепатофит" (п=6) 1038+73* 943+70*

слотами, сесквитерпеновыми лактонами, кумарина- благодаря широкому спектру его фармакологиче-

ми, витамином С, аминокислотами, алкалоидами, ской активности, оказывая не только специфическое

свободными сахарами и полисахаридами [11]. холеретическое действие, но и регулирующее влияВ целом, многокомпонентый состав исследуемо- пие на функциональные системы адаптации орга-

го экстракта обеспечивает выраженное фармакоте- низма в целом,

рапевтическое влияние при повреждении печени,

PH ARM АС О THERAPEUTICAL EFFECT OF "HEPATOPHYT" TN EXPERIMENTAL HEPATTTTS

S.M. Nikolayev, Z.G. Sambuyeva, A.V. Tsyrenzhapov, G.V. Chekhirova

A marked pharmacotherapeutical efficiency of the dry extract derived from the nor-bu-dun-than ("Seven jewels") plant collection, which is used in Tibetan medicine in liver diseases, and conditionally named as "hepatophyt" has been established in experiments on white Wistar-line male rats with CC 14-hepatitis. The course oftherapeutic-and-prophylactic administration of the "hepatophyt" in an experimental-and-therapeutic dose 0,1 g/kg of mass in experimental hepatitis is followed by inhibition of lipid peroxidation processes, decrease ofcytolysis and cholestasis signs, as well as stimulation of the liver desintoxicative and choleretic functions.

Литература

1.Гаврилов Б.В., Мишкорудная М.И. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови // Лабораторное дело. - 1983. - №3. - С.33-35.

2. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. - М., 1976. - 144 с.

3. Дроговоз С.М. Нарушение интенсивности желчеотделения и химического состава желчи при дистрофии печени, вызванной четыреххлористым углеродом // Вопросы медицинской химии. - 1971. -Вып.4. - С.397-400.

4. Карбач ЯМ. Количественное определение желчных кислот в желчи и крови с применением хроматографического метода // Биохимия. - 1961. - Т.26, №2. - С.305-309.

5. Катикова О.Ю., Костин Я.В., Тишкин B.C. Гепато-протекторное действие препаратов растительного происхождения // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2002. - Т.65, №1. - С.41-43.

6. Колб В.Г., Камышников B.C. Справочник по клинической химии. - Минск, 1982. - 366 с.

7. Лекарствоведение в тибетской медицине / Т.А. Асеева, Д.Б. Дашиев, А.Н. Кудрин и др. - Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1989. - 192 с.

8. Николаев С.М., Самбуева З.Г., Цыренжапов А.В., Чехирова Г.В. Мембраностабилизирующая активность комплексного фитосредства "нор-бу-дун-тан" // IX Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл. - М. - 2002. - С.615.

9. Скакун Н.П. Нейрогуморальный механизм желчегонного действия инсулина // Проблемы эндокринологии и гормонотерапии. - 1956. - №6. - С.75-78.

10. Темирбулатов Р.А., Селезнев Е.И. Метод повышения интенсивности свободнорадикального окисления липидсодержащих компонентов крови и его диагностическое значение // Лабораторное дело. -1981. - №4. - С.209-211.

11. Чехирова Г.В., Самбуева З.Г., Ербаева Л.В., Асеева Т.А., Николаев С.М., Петров Е.В., Дашинамжи-лов Ж.Б. Способ получения средства, обладающего желчегонной и противовоспалительной активностью. Патент РФ № 21591237 от 20.11.2000.

12. "Чжуд-ши": Канон тибетской медицины. Перевод с тибетского, предисл., примеч., указатели Д.Б. Да-шиева. - М.: Издат. фирма "Восточная литература" РАН, 2001.-766 с.

13. Дандаржав Д., Байгалмаа Р., Монгол ардын эмнэл-гийн эмийн жор. - Ондорхаан. - 1992. - 250 с.