ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ КАЛИБРОВОЧНЫЙ СЛАЙД

1. Калибровочный слайд (10) для флуоресцентного микроскопа, содержащий:
подложку (12); и
структуру (14) пикселей, содержащую множество разнесенных металлических наноструктур (16), расположенных на поверхности (18) подложки, и по меньшей мере одну дополнительную структуру, расположенную на поверхности калибровочного слайда, которая выбирается из группы, содержащей монослой окрашенных микробусинок, мишень для проверки разрешающей способности и искажения, слой неорганических люминофоров;
в котором металлические наноструктуры расположены для создания плазмонных резонансов, которые делают возможным поглощение света (20) на длине волны возбуждения, чтобы создавалось фотолюминесцентное и/или флуоресцентное излучение (22) для формирования флуоресцентного изображения; и
в котором флуоресцентное изображение содержит множество значений интенсивности пикселей, которые предоставляются для калибровки флуоресцентного микроскопа.
2. Калибровочный слайд по п. 1, в котором подложка является оптически прозрачной.
3. Калибровочный слайд по п. 1 или 2, в котором металлические наноструктуры расположены с возможностью связи друг с другом.
4. Калибровочный слайд по одному из предшествующих пунктов, в котором структура пикселей содержит по меньшей мере две подструктуры (36) пикселей, при этом по меньшей мере две подструктуры пикселей выполнены с возможностью образования различных цветов при освещении ярким светом.
5. Калибровочный слайд по одному из предшествующих пунктов, в котором металлические наноструктуры содержат металл, выбираемый из группы, содержащей золото, серебро, медь и алюминий, при этом предпочтительно, чтобы металлом был алюминий или сплав алюминия.
6. Калибровочный слайд по одному из предшествующих пунктов, в котором каждая металлическая наноструктура имеет размер (28) в поперечном сечении в пределах от 30 нм до 700 нм, предпочтительно от 60 нм до 450 нм; в котором каждая металлическая наноструктура имеет толщину (30) в пределах от 10 нм до 1 мкм, предпочтительно от 25 нм до 150 нм; и/или в котором расстояние (32) между соседними металлическими наноструктурами является сравнимым с длиной волны видимого света, и оно находится в пределах от 100 нм до 1 мкм, предпочтительно от 180 нм до 650 нм.
7. Система (100) калибровки, содержащая:
флуоресцентный микроскоп (42) и калибровочный слайд по одному из предшествующих пунктов;
в которой флуоресцентный микроскоп содержит источник (44) света, детектор (48) света; при этом источник света и детектор света расположены на оптическом пути;
в котором при калибровке источник света настроен на подачу света с длиной волны возбуждения, поглощаемого металлическими наноструктурами калибровочного слайда, расположенного на оптическом пути, для создания фотолюминесцентного и/или флуоресцентного излучения; и
в которой детектор света выполнен с возможностью обнаружения создаваемого фотолюминесцентного и/или флуоресцентного излучения для регистрации данных флуоресцентного изображения в качестве данных для проверки калибровки в целях калибровки.
8. Система по п. 7, где система калибровки также снабжена калибровочным устройством (58), содержащим блок (60) памяти и блок (62) обработки; в которой блок памяти выполнен с возможностью сохранения заданных стандартных калибровочных данных из по меньшей мере одного канала флуоресценции; в которой блок обработки выполнен с возможностью сравнения регистрируемых данных для проверки калибровки с сохраняемыми заданными стандартными калибровочными данными для формирования профиля коррекции интенсивности по меньшей мере одного канала флуоресценции; и в которой профиль коррекции интенсивности предоставляется для коррекции данных флуоресцентного изображения флуоресцентного патологического образца, получаемого флуоресцентным микроскопом для по меньшей мере одного канала флюоресценции.
9. Система по п. 7 или 8, в которой в дополнение к структуре пикселей по меньшей мере одна структура предусмотрена на поверхности калибровочного слайда, которая выбирается из группы, содержащей монослой окрашенных микробусинок и мишень для проверки разрешающей способности и искажения; в которой детектор света выполнен с возможностью регистрации данных изображения по меньшей мере одной структуры в качестве дополнительных данных для проверки калибровки; в которой блок памяти выполнен с возможностью сохранения дополнительных заданных стандартных калибровочных данных по меньшей мере одной структуры; в которой блок обработки выполнен с возможностью сравнения регистрируемых дополнительных данных для проверки калибровки и сохраняемых дополнительных заданных стандартных калибровочных данных для калибровки параметра флуоресцентного микроскопа; и в которой параметр выбирается из группы, содержащей качество фокусировки флуоресцентного микроскопа и артефакты разрешающей способности и сшивки изображений.
10. Система по любому одному из пп. 7-9, в которой флуоресцентный микроскоп представляет собой эпифлуоресцентный микроскоп.
11. Система по любому одному из пп. 7-10, в которой калибровочный слайд постоянно установлен во флуоресцентном микроскопе.
12. Способ (200) калибровки флуоресцентного микроскопа, содержащего источник света и детектор света, которые расположены на оптическом пути, при этом способ содержит этапы, на которых:
а) освещают (210) калибровочный слайд, расположенный на оптическом пути, светом от источника света по направлению к детектору света; при этом калибровочный слайд содержит подложку и структуру пикселей, содержащую множество разнесенных металлических наноструктур, расположенных на поверхности подложки, при этом металлические наноструктуры расположены для создания плазмонного резонанса; и при этом свет, освещающий калибровочный слайд, создает плазмонные резонансы, которые обеспечивают поглощение света на длине волны возбуждения, чтобы создавалось фотолюминесцентное и/или флуоресцентное излучение для формирования флуоресцентного изображения, содержащего множество значений интенсивности пикселей, которые предоставляются для калибровки флуоресцентного микроскопа;
b) регистрируют (220) данные флуоресцентного изображения в качестве данных для проверки калибровки; и
с) используют (230) данные для проверки калибровки в целях калибровки флуоресцентного микроскопа.
13. Способ по п. 12, в котором этап с) способа также содержит следующие подэтапы, на которых:
с1) подготавливают (232) заданные стандартные калибровочные данные;
с2) сравнивают (234) регистрируемые данные для проверки калибровки с заданными стандартными калибровочными данными, чтобы образовать профиль коррекции интенсивности; и
с3) используют профиль коррекции интенсивности для калибровки данных флуоресцентного изображения флуоресцентного патологического образца, получаемого с помощью флуоресцентного микроскопа.
14. Способ по п. 12 или 13, в котором в дополнение к структуре пикселей по меньшей мере одну структуру предусматривают на поверхности калибровочного слайда, которую выбирают из группы, содержащей монослой окрашенных микробусинок и мишень для проверки разрешающей способности и искажения; и где способ также содержит следующие этапы, на которых:
d) регистрируют (240) данные изображения по меньшей мере одной структуры в качестве дополнительных данных для проверки калибровки;
е) подготавливают (250) дополнительные заданные стандартные калибровочные данные по меньшей мере одной структуры; и
f) сравнивают (260) регистрируемые дополнительные данные для проверки калибровки и сохраняемые дополнительные заданные стандартные калибровочные данные для калибровки параметра флуоресцентного микроскопа; при этом параметр выбирают из группы, содержащей качество фокусировки флуоресцентного микроскопа и артефакты разрешающей способности и сшивки изображений.
15. Способ (300) изготовления флуоресцентного калибровочного слайда с множеством структур, содержащего структуру пикселей с множеством разнесенных металлических наноструктур, расположенных на поверхности подложки, монослой окрашенных микробусинок и мишень для проверки разрешающей способности и искажения, при этом способ содержит следующие этапы, на которых:
аа) осаждают (302) монослой окрашенных микробусинок на подложку, образуя предметное стекло микроскопа;
bb) осаждают (304) структуру пикселей и мишень для проверки разрешающей способности и искажения на две другие подложки, образуя два покровных стекла; и
сс) устанавливают (306) два покровных стекла на предметное стекло микроскопа для образования калибровочного слайда.