Вакцины "Гриппол", "Ваксигрип" и "Инфлювак" - индукторы генов факторов врожденного и адаптивного иммунитета в клетках крови человека

13. Eneslätt K., Rietz C., Ryden P. et al. Persistence of cell-mediated immunity three decades after vaccination with the live vaccine strain of Francisella tularensis. Eur. J. Immunol. 2011, 41 (4): 974-980.

14. Isherwood K.E., Titball R.W., Davies D.H. et al. Vaccination strategies for Francisella tularensis. Adv. Drug. Deliv. Rev. 2005, 57 (9): 1403-1414.

15. Kirimanjeswara G.S., Olmos S., Bakshi C.S. et al. Humoral and cell-mediated immunity to the intracellular pathogen Francisella tularensis. Immunol. Rev. 2008, 225: 244-255.

16. Pechous R. D., McCarthy T. R., Zahrt T. C. Working toward the future: insights into Francisella tularensis pathogenesis and vaccine development. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2009, 73 (4): 684-711.

17. Pike R. M. Laboratory-associated infections: summary and analysis of3921 cases. Health Lab. Sci. 1976, 13: 105-114.

18. Tärnvik A., Ericsson M., Golovliov I. et al. Orchestration of the protective immune response to intracellular bacteria: Francisella tularensis as a model organism. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1996, 13: 221-225.

19. Shapiro D. S., Schwartz D. R. Exposure of laboratory workers to Francisella tularensis despite a bioterrorism procedure. J. Clin. Microbiol. 2002, 40 (6): 2278-2281.

Поступила 27.02.14

Контактная информация: Аронова Надежда Валентиновна,

344002, Ростов-на-Дону, ул. М. Горького, 117/40, р.т. (863)240-27-03

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014

Т.М.Соколова2, А.Н.Шувалов1, В.В.Полосков1, И.М.Шаповал1, М.П.Костинов3

ВАКЦИНЫ «ГРИППОЛ», «ВАКСИГРИП» И «ИНФЛЮВАК» - ИНДУКТОРЫ ГЕНОВ ФАКТОРОВ ВРОЖДЕННОГО И АДАПТИВНОГО ИММУНИТЕТА В КЛЕТКАХ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

1НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, 2НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского, 3НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, Москва

Цель. Изучение действия инактивированных гриппозных вакцин на активность генов врожденного и адаптивного иммунитета (TLR3, TLR4 и В2М) и Dicer1 гена РНК-интерференции и продукцию цитокинов (антивирусных ИФН типа I и II, регуляторных ИЛ10, ИЛ17) и провоспалительных факторов ИЛ1-бета, ФНО-альфа. Материалы и методы. В клетках крови человека, обработанных различными дозами вакцин, генная экспрессии определена методом ОТ-ПЦР в реальном времени с авторскими праймерами. В культуральной жидкости измерена концентрация цитокинов иммуноферментным методом с использованием наборов «Вектор-бест». Результаты. Исследованные вакцины имеют характерные эффекты на генном уровне. Вакцина «Гриппол» преимущественно стимулирует ген TLR4, активирует гены TLR3, В2М и Dicer1. Вакцина «Инфлювак» в большей степени индуцирует TLR3 ген и в меньшей степени TLR4 ген, не влияет на экспрессию гена В2М и ингибирует Dicer1 ген. Сплит-вакцина «Ваксигрип» — самый сильный стимулятор генной активности в низких дозах. Ее основными мишенями являются гены TLR3 и B2M. Все инактивированные вакцины — индукторы высокого уровня гамма-ИФН, низкого уровня ФНО-альфа и не индуцируют ИЛ17. Дополнительно «Гриппол» стимулирует секрецию ИЛ1-бета, а «Ваксигрип» — ИФН-альфа. Субъединичные вакцины «Гриппол» и «Инфлювак», содержащие очищенные гемагглютинины вируса гриппа, индуцируют в клетках крови синтез ИЛ10. Заключение. Получены иммуногенетические характеристики применяемых сегодня инактивированных гриппозных вакцин.

Журн. микробиол., 2014, № 5, С. 37—43

Ключевые слова: гриппозные вакцины, клетки крови человека, экспрессия генов иммунитета, продукция интерферонов и цитокинов

T.M.Sokolova2, A.N.Shuvalov1, V.V.Poloskov1, I.M.Shapoval1, M.P.Kostinov3

GRIPPOL, VAXIGRIP AND INFLUVAC VACCINES - INDUCTORS OF INNATE AND ADAPTIVE IMMUNITY FACTOR GENES IN HUMAN BLOOD CELLS

1Gamaleya Research Institute of Epidemiology and Microbiology, 2Ivanovsky Research Institute of Virology, 3Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow, Russia

Aim. Study the effect of inactivated influenza vaccines on the activity of innate and adaptive immunity genes (TLR3, TLR4 and B2M), RNA-interference Dicerl-gene, production ofcytokines (antiviral IFN type I and II, regulatory IL10, IL17) and pro-inflammatory factors IL1-0, TNFa. Materials and methods. Gene expression was determined by rRT-PCR with authors' primers in human blood cells treated with various doses of the vaccines. Concentration ofcytokines by enzyme immunoassay was measured in cultural fluid using «Vector-best» kits. Results. The studied vaccines have characteristic effects on genetic level. Grippol vaccine predominately stimulates TLR4 gene, activates TLR3, B2M and Dicerl genes. Influvac vaccine mostly induces TLR3 gene and to a lesser extent TLR4 gene, does not influence the expression of B2M gene and inhibits Dicerl gene. Vaxigrip split vaccine — the most potent stimulator of gene activity at low doses. Its main targets are TLR3 and B2M genes. All the inactivated vaccines — inductors of high level of IFNy, low level of TNFa and do not induce IL17. Grippol additionally stimulates secretion of IL1-0, and Vaxigrip — IFNa. Subunit vaccines Grippol and Influvac that contain purified influenza virus hemagglutinins induce IL10 synthesis in blood cells. Conclusion. Immunogenetic characteristics of the inactivated influenza vaccines administered nowadays are obtained.

Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2014, No. 5, P. 37—43

Key words: influenza vaccines, human blood cells, immunity gene expression, interferon and cytokine production

ВВЕДЕНИЕ

Вакцины «Гриппол», «Ваксигрип» и «Инфлювак» находятся в арсенале основных медицинских препаратов, применяемых в настоящее время в России для защиты населения от заболеваемости гриппом [1, 2, 4, 5]. Они приготовлены из актуальных штаммов вируса гриппа, рекомендуемых ВОЗ на основании анализа эпидемической ситуации 2012 — 2013 гг. Исследованные инактивированные вакцины эффективно защищают людей от заболевания. Информация о развитии ими протективного иммунного ответа получена, главным образом, в серологических исследованиях специфического гуморального ответа. В меньшей степени изучались вызываемые ими реакции клеточного иммунитета. Сравнительный анализ действия вакцин «Гриппол», «Ваксигрип» и «Инфлювак» на генном уровне ранее не проводился. Вместе с тем, сегодня появилась возможность оценивать вакцинные препараты, применяя методы количественного анализа экспрессии генов и секретируемых клетками цитокинов [8]. Субъединичные вакцины представляют удобную модель для выяснения роли очищенных поверхностных гликопротеинов (гемагглютининов и нейраминидаза) вирусов гриппа в вызываемых ими реакциях клеточного иммунитета. В своей работе мы сравнили действие субъединичных вакцин со сплит-вакциной, приготовленной из разрушенных вирионов. Такой анализ имеет важное значение, т.к. высокопатогенный инфекционный вирус гриппа А вызывает в организме сильный воспалительный ответ, осложняющий течение заболевания.

Важными составляющими врожденного и адаптивного иммунитета являются системы интерферона (ИФН) и РНК-интерференции [6]. Многофакторный иммунный ответ организма осуществляется с участием большой группы рецепторов врожденного иммунитета [11]. Регуляция их активности осуществляется сетью взаимодействий на транскрипционном и постранскрипционных уровне [15].

В нашей работе с гриппозными вакцинами изучена активность генов рецепторов

врожденного и адаптивного иммунитета TLR3 и TLR4 и корецептора Т-лимфоцитов — В2М (бета2-микроглобулина). Именно эти виды TLR узнают структуры вирусных РНК и гликолипротеидов. Через них происходит внутриклеточная передача сигналов на гены интерферонов и интерлейкинов — регуляторов Т- и В-клеточного иммунитета [14]. Активированные иммунокомпетентные клетки крови продуцируют антивирусные, иммунорегуляторные и провоспалительные цитокины, направляющие дифференцировку субпопуляций Т-лимфоцитов на распознавание ими вирусных антигенов. Активность корецептора В2М комплекса гистосоместимости 2 типа характеризует состояние адаптивного иммунитета и влияет на специфический гуморальный ответ антител. Имеются данные, что активность Dicerl — ключевого фермента РНК-интерференции — также влияет на этот процесс [13].

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

«Гриппол» (Микроген, Россия) — гриппозная тривалентная полимер-субъ-единичная вакцина, жидкая [5]. Представляет собой высокоочищенный белковый препарат, содержащий только поверхностные антигены вирусов гриппа (гемагглюти-нин и нейраминидаза) типов A и В, связанные водорастворимым высокомолекулярным N-оксидированным производным поли-1,4-этиленпиперазина (иммуномодуля-тор полиоксидоний). В одной дозе вакцины содержится по 5 мкг гемагглютининов (ГА) 2 вирусов типа А (подтипы H1N1 и H2N2) и 11 мкг ГА вируса гриппа типа В, 500 мкг полиоксидония и консервант мертиолят.

«Инфлювак» (Эбботт, Нидерланды) — тривалентная субъединичная вакцина, содержащая очищенные поверхностные протективные антигены гемагглютининов вирусов гриппа А/Калифорния/7/2009/NYMC X-181, А/Виктория/361/201П^-165 и В/Хубей-Вуджиаганг/156/2009 NYMCBX-39, прошла регистрационные испытания в России [1]. В одной прививочной дозе (0,5 мл) вакцины содержится по 15 мкг ге-магглютининов каждого вируса и вспомогательные вещества солей.

«Ваксигрип» (Франция) — инактивированная высокоочищенная расщепленная (сплит) вакцина, применяется в России с 1992 г. [2]. Активный компонент — вирусы гриппа, выращенные в куриных эмбрионах, расщепленные и инактивированные. В одной дозе (0,5 мл) тривалентной вакцины содержится по 15 мкг ГА вирусов гриппа А/Калифорния/7/2009 NYMC Х-179А (H1N1), А/Виктория/361/2011 IVR-165 (H3N2) и В/Хубей-Вуджиаганг/156/2009 NYMCBX-39, не более 0,05 мкг овальбумина и добавочные соли.

Свежевзятую венозную кровь доноров разводили в отношении 1:3 в питательной среде RPMI-1640 с глютамином, содержащей 10% эмбриональной сыворотки телят и антибиотик гентамицин. Разведенную кровь разливали по 1 мл в культуральные стерильные пробирки с герметичными пробками. К ней добавляли препараты вакцин по 10 мкл из 1 дозы и по 10 мкл из разведений в 10 раз и 100 раз. В результате концентрация вакцин в 1 мл разведенной крови составила 1/100, 1/1000 и 1/10000 выпускаемой дозы. Расчет применяемых доз является приблизительным и сделан, исходя из объема крови в организме взрослого человека (в среднем 5 л). Инкубацию клеток крови с вакцинами проводили 24 ч при 37°С в термостате, затем клетки осаждали при 1000 об/мин на центрифуге и надосадочную культуральную жидкость собирали для тестирования цитокинов в ИФА. Осадки клеток лизировали в 0,5 мл буфера Тризол (Invitrogen, США) согласно инструкции и использовали для выделения и количественного анализа мРНК методом ОТ-ПЦР в реальном времени.

Подробное описание процедуры выделения РНК и обработки препарата ДНКзой, получения кДНК и проведения количественного ПЦР-анализа на приборе CFX-96 фирмы «Био-Рад» (США) приведены в [7]. Структура рассчитанных нами олигону-клеотидных праймеров приведена в табл. 1. Все праймеры были синтезированы фирмой «Синтол» (Россия). Полученный ПЦР-продукт соответствовал расчетному по f-плавления и подвижности в агарозном геле. Относительная оценка экспрессии

Ген/мРНК Последовательность 5'-------------------3' ПЦР-продукт. Размер и t° плавления

TLR3 П — AGT GCC GTC TAT TTG CCA CA 149 н.п.

О — GCA TCC CAA AGG GCA AAA GG 80,5°С

TLR4 П — GTC AGA CGG TGA TAG CGA GC 177 н.п.

О — TTA GGA ACC ACC TCC ACG CA 86,5°С

B2M П — ACT GAA TTC ACC CCC ACT GA 114 н.п.

О — CCT CCA TGA TGC TGC TTA CA 80,5°С

DICER1 П — CAG TTC AGA CAA GAG CAA CAC 300 н.п.

О — GTC TTC CCT GAG CCA GTG TTT 81°С

генов (дельта Cq) сделана в Таблица 1. Структура олигонуклеотидных ПЦР-праймеров программе CFX Manager «Gene expression analysis» в автоматическом режиме.

Иммуноферментный анализ цитокинов ИФН-альфа, ИФН-гамма, ИЛ1-бета, ИЛ10, ИЛ17 и ФНО-альфа в культу-ральной жидкости выполнен с помощью ИФА-наборов фирмы «Вектор-бест» согласно прилагаемой инструкции. Количественное измерение оптической плотности и расчет концентрации в пг/мл выполнен на микропланшетном фотометре модели «Anthos 2010» в программе ADAP+.

РЕЗУЛ ЬТАТЫ

Изучена экспрессия генов рецепторов врожденного и адаптивного иммунитета TLR3 , TLR4 и B2M, играющих ведущую роль в антивирусной и антибактериальной защите. Особый интерес представляло выяснение участия систем ИФН и РНК-интерференции (РНК-и) в реализации протективных свойств вакцин. Обе системы работают в клетках одновременно и осуществляют неспецифическую и специфическую защиту от патогенов [6, 13]. Исследования проведены методом количественной ОТ-ПЦР и ИФА.

Сопоставлен конститутивный уровень 4 исследованных генов в клетках крови здоровых доноров. Для этого был использован суммарный образец кДНК контрольных клеток и проведены 3 повторных ПЦР-определения в реальном времени. Значения пороговых циклов начала логарифмической фазы амплификации (Cq) значительно отличались и составили для мРНК TLR3=34,1±0,9; мРНК TLR4=26,3±0,2; мРНК B2M=20,8±0,8 и мРНК Dicer1=35,1±1,1. Наиболее низкие показатели Cq и, следовательно, самый высокий уровень транскрипции в клетках крови имеет ген В2М, который часто используется в качестве референс-гена. Однако этот ген является ИФН-зависимым и поэтому в исследованиях с ИФН и их ИФН-индукторами не пригоден как нормализатор [7]. Представленность мРНК 2 TLR-рецепторов отличается в 64 раза, вероятно, отражая большую представленность и значимость мембранного TLR4 перед эндо-сомальным рецептором TLR3 в клетках крови. Уровень экспрессии фермента Dicerl сравним с TLR3 и характеризирует участие обоих генов в сохранении клеточного гомеостаза.

Эффект препаратов вакцин «Гриппол», «Инфлювак» и «Ваксигрип» на транскрипцию генов представлен на рис. Каждая вакцина имеет характерные особенности действия на

Стимуляция гриппозными вакцинами экспрессии генов врожденного и адаптивного иммунитета в клетках крови.

По оси ординат — кратность стимуляции активности генов. По оси абсцисс — ТЬЯ3 (1), ТЬЯ4 (2), В2М (3), Бюег1 (4), контроль клеток = 1. Приведены результаты действия 3 доз вакцин в разведениях (см. Материалы и методы).

генном уровне. Так, стимулирующие эффекты вакцины «Гриппол» на гены TLR3, TLR4, В2М и Dicer1 проявляются при максимальной дозе и затем исчезают, за исключением гена TLR4. Он оказался наиболее восприимчив к действию вакцины «Гриппол» (рис., а). Следует отметить выраженную активацию отечественной вакциной гена Dicer1.

Вакцина «Инфлювак» в 3 дозах преимущественно активирует только ген рецептора TLR3 и в разведении 1/10 — ген TLR4. При этом вакцина подавляет экспрессию генов Dicer1, существенно не влияя активность гена В2М (рис., б).

Наиболее сильным стимулятором генной транскрипции показала себя вакцина «Ваксигрип». Ее выраженные эффекты на исследованные гены проявляются при сниженных дозах в разведениях 1/10 и 1/100. В минимальной дозе вакцина в 8 раз активирует эндосомальный рецептор TLR3 и в 7 раз корецептор Т-лимфоцитов — В2М, имеющий значение для формирования адаптивного иммунного ответа (рис., в). Ген Dicer1 негативно регулируется сплит-вакциной в разведениях.

На основании полученных данных мы можем заключить, что наличие в составе сплит-вакцины «Ваксигрип» вирионных РНК и внутренних белков существенно повышает ее иммуногенную активность. Преимущественными мишенями сплит-вакцины «Ваксигрип» являются гены TLR3 и В2М и в меньшей степени — Dicer1. Вместе с тем, ингибирующее действие на транскрипцию высоких доз может быть вызвано вирусными компонентами (белки полимеразы и М2).

В культуральной жидкости клеток крови определены спонтанные и индуцированные вакцинами цитокины, имеющие сигнальное значение (ИЛ1-бета), антивирусное действие — ИФН-альфа и ИФН-гамма, связанный с воспалением, цитотоксический ФНО-альфа и иммуносупрессорный ИЛ 10, необходимый для дифференцировки Т-хелперов типа 2 и переключения на гуморальный ответ ответ В-лимфоцитов.

Иммунный ответ Т- и В-лимфоцитов характеризуется образованием разных видов цитокинов. Активированные Т-хелперы типа 1 секретируют гамма-ИФН и ИЛ2, а Т-хелперы типа 2 — ИЛ4 и ИЛ10 [8]. Дифференцировка Т-клеток в Т-хелперы типа 17 сопровождается продукцией ИЛ17. Индукция цитокинов 3 исследованными дозами гриппозных вакцин суммирована в табл. 2.

В процессе культивирования клеток крови здорового донора в среду спонтанно освобождались ИЛ 1-бета в количестве до 24 пг/мл и ФНО-альфа — до 6 пг/мл. Содержание ИФН-альфа и ИФН-гамма в среде культивирования клеток крови было

низким, на пределе чувствительности Таблица 2. Продукция цигокитш клеткат крмш в используемых ИФА-тест систем.

ответ на вакцинные препараты ' тх-тг,

Секретируемое количество ИЛ10

было не выявляемым без индукции. Содержание в среде ИЛ17 до и после добавления гриппозных вакцин оставалось на нулевом уровне.

Индуцированный уровень цитокинов во многом характеризует формирование клеточного иммунитета. Прежде всего, это относится к продукции и секреции ИФН-альфа и ИФН-гамма [3, 14]. Выраженная ИФН-альфа индуцирующая активность присуща только сплит-вакцине «Ваксигрип» в максимальной дозе. Субъединичные вакцины «Гриппол» и «Инфлювак» не являются индукторами ИФН-альфа.

Все 3 вида исследованных вакцин

Препараты вакцин Разведения вакцин Цитокины

альфа-ИФН гамма-ИФН ФНО- альфа ИЛ1-бета ИЛ10

«Гриппол»

«Инфлювак»

«Ваксигрип»

Контроль*

1,0 1,1 1,3 1,5 1,3 2,0

1

1/10 1/100 1

1/10 1/100 1

1/10 1/100 1

1/10 1/100

Примечание.* Спонтанная продукция цитокинов клетками крови без добавления вакцин. Выделенные числовые значения в опытах достоверно отличаются от контроля (Р<0,05).

10,5

0,9 1,9 0,25 1,1 1,2

83.4 39,1

4,2 226,6 66,7

13.5 300,4 78,4

3.4 2,2

2.5 0,9

21,3

6,7 5,9 15,6 11,6 4,4

36.1

13.2 3,9 4,6 6,2 3,6

25,8 123,8

24.3

25.6 11,1 9,9 9,2

23.4 7,4

23.7

14.5 9,4

7,6 0 0

6,9 0 0 0 0 0 0 0 0

индуцируют значительное количество ИФН-гамма. Ответ является зависимым от дозы. Максимально высокое количество гамма-ИФН дает сплит-вакцина «Ваксигрип», немного ниже — вакцина «Инфлювак». Действие вакцины «Гриппол» на синтез гамма-ИФН слабее. Полученные результаты убедительно демонстрируют участие Т-хелперов типа 1 в реализации антивирусного действия вакцин. Это согласуются с данными, полученными при испытаниях гриппозной вакцины к пандемическому вирусу НШ1/09 на свиньях [12].

Наблюдается позитивная корреляция в действии вакцин на гамма-ИФН и ФНО-альфа. Следует отметить, что этот воспалительный фактор, по сравнению с гамма-ИФН, индуцируется вакцинами в 10-кратно более низком количестве, несмотря на его спонтанную секрецию.

«Гриппол», в отличие от «Ваксигрип» и «Инфлювак», стимулирует секрецию сигнального ИЛ1-бета. Вероятно, это обусловлено наличием в составе вакцины имму-номодулятора полиоксидония.

При добавлении к клеткам крови максимальных доз субъединичных вакцин «Гриппол» и «Инфлювак» происходит индукция ИЛ10, который активирует Т-хелперы типа 2. Возможно, это ответная иммуносупрессорная реакция на синтез избыточного количества гамма-ИФН. Есть данные, что образование ИФН-гамма и продукция ИЛ10 находятся в антагонистических отношениях [10].

ОБСУЖДЕНИЕ

В настоящее время наши знания о влиянии применяемых отечественных и зарубежных вакцинных препаратов на активность генов клеточного иммунитета и ИФН-гены крайне ограничены. При создании гриппозных вакцин не учитывалось их действие на экспрессию ТЬЯ-генов сигнальных рецепторов, ассоциированных с синтезом ИФН, гена В2М-корецептора и гена Бюег1 — фермента РНК-интерференции. Все они имеют важное значение для формирования неспецифического и специфического иммунного ответа. В нашей работе с вакцинами «Гриппол», «Инфлювак» и «Ваксигрип» [4] получены новые результаты в отношении этих генов и группы цитокинов, секретируемых Т-хелперами 1 и 2 типов. Наряду с общими для 3 вакцин реакциями клеток крови человека выявлены и особенности как в уровне, так и в спектре индуцируемых генов и цитокинов. Наиболее ярко это проявляется при сравнении сплит-вакцины «Ваксигрип», содержащей структурные компоненты разрушенного вируса (фрагменты РНК и белки) с субъединичными вакцинами, в состав которых входят преимущественно очищенные ГА. Отечественная субъединичная вакцина «Гриппол», по сравнению с импортной субъединичной вакциной «Инфлювак», содержит в 3 раза сниженные дозы ГА гриппа А, но дополнительно включает иммуномодулятор полиоксидоний [5]. Наличие в составе вакцины «Гриппол» иммуномодулятора, по нашим данным, усиливает индуцирующие эффекты очищенных ГА на гены Бюег1 и В2М. Кроме того, вакцина «Гриппол» с полиок-сидонием выделяется выраженной секрецией ИЛ1-бета клетками крови. Следует отметить способность сплит-вакцины, в отличие от субъединичных, проявлять обратный дозовый эффект на генном уровне. Вероятно, это обусловлено наличием в составе неразведенного препарата полного набора инактивированных формалином структур вирусов гриппа, которые в высоких дозах могут оказывать цитотоксический эффект.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бектимиров Т.А., Ельшина Г.А., Горбунов М.А. и др. Результаты изучения эффективности гриппозной инактивированной субъединичной вакцины Инфлювак. Межд. журн. медиц. практики. 2000, 9: 47-51.

2. Гендон Ю.З. Инактивированная расщепленная гриппозная вакцина «Ваксигрип». Вакцинация. 2000, 11: 3-11.

3. Киселев О.И., Ершов Ф.И., Деева Э.Г. Интерферон-гамма: новый цитокин в клинической практике. М., Димитрейд График групп, 2007.

4. Костинов М.П., Гурвич Э.Б. Вакцины нового поколения в профилактике инфекционных заболеваний. М., Медицина для всех, 2002.

5. Петров Р.В., Хаитов Р.М. Новая отечественная тривалентная полимерсубъединичная вакцина Гриппол. Вакцинология. 1999, 5: 6-7.

6. Соколова Т.М., Ершов Ф.И. РНК-интерференция и система интерферона. Цитокины и воспаление. 2011, 10 (4): 11-20.

7. Соколова Т.М., Шувалов А.Н., Телков М.В., Колодяжная Л.В., Ершов Ф.И. Препарат «Ридостин» индуцирует транскрипцию широкого спектра генов системы интерферона в клетках человека. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2013, 156 (8): 179-181.

8. Buonaguro L., Pulendran B. Immunogenomics and systems biology ofvaccines. Immunol. Rev. 2011, 239 (1): 197-208.

9. Cheng X., Xu Q., Song E. et al. The hemagglutinin protein of influenza A/Vietnam/1203/2004 (H5N1) control to hyperinduction of proinflamatory cytokines in human epithelial cells. Virology. 2010, 406: 28-36.

10. Hu X., Paik P.K., Chen J et al. IFNgamma suppresses IL10 production and synergizes with TLR2 by regulating GSK3 and CREB/AP-1 proteins. Immunity. 2006, 24: 563-574.

11. Kawai T., Akira S. Toll-like receptor and RIG1-like receptor signaling. Ann. NY Acad. Sci. 2008, 1143: 1-20.

12. Lefevre E.A., Carr B.V., Inman C.F. et al. Immune responses in pigs vaccinated with adjuvan-ted and non-adjuvanted A(H1N1)pdm/09 influenza vaccines used in human immunization programmes. Plos one. 2012, 7 (3): e32400: 1-9.

13. Tang K.F. Dicer regulates the expression of major histocompatibility complex (MHC) class I chain-related genes A and B. In Histocompatibility. In.Tech Rijeka, Croatia, 2012: 73-92.

14. Saha B., Prasanna S.J., Chandrasekar B., Nandi D. Gene modulation and immunoregula-tory roles of interferon gamma. Cytokine. 2010, 50: 1-14.

15. Zhu W., Higgs B.W., Morehouse C. et al. A whole genome transcriptional analysis of the early immune response induced by live attenuated and inactivated influenza vaccines in young children. Vaccine. 2010, 28: 2865-2876.

Поступила 13.10.13 С переработки 20.04.14

Контактная информация: Костинов Михаил Петрович, д.м.н, проф.,

105064, Москва, М.Казенный пер., 5а, р.т. (495)917-41-49

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014

С.Л.Мукомолов1,2, Д.Д.Болсун1, В.К.Красняков3, И.А.Левакова1, А.Ю.Грибанов1, Е.А.Синявская4, М.В.Алексеева1, В.И.Лихачева3

ЧАСТОТА АНТИТЕЛ К ПОВЕРХНОСТНОМУ И ЯДЕРНОМУ АНТИГЕНАМ ВИРУСА ГЕПАТИТА В У НАСЕЛЕНИЯ САНКТ-ПЕТЕРБУРГА В 2013 Г.

1НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, Санкт-Петербург; 2Санкт-Петербургский государственный университет; 3Санкт-Петербургская городская станция переливания крови; 4Санкт-Петербургская детская городская больница Святой Ольги

Цель. Определить частоту антител к поверхностному (анти-HBs) и сердцевинному (анти-НВс) антигенам гепатита В у населения Санкт-Петербурга различного возраста для оценки протективного коллективного иммунитета к вирусу гепатита В (ГВ). Материалы и методы. Сыворотки крови 970 человек (491 мужчин, 479 женщин) 10 возрастных групп от 0 до 50 лет и старше исследованы на наличие anti-HBs и ап^-НВс IgG методом имму-ноферментного анализа с использованием коммерческих диагностических тест систем. Результаты. В целом анти-HBs в концентрации 5 мМЕ/мл и более выявлены у 603 обследованных (62,2%). Анти-HBs в концентрации 10 мМЕ/мл и более выявлены у 53,9%.