СПОСОБЫ УЛУЧШЕНИЯ ФАРМАКОКИНЕТИКИ
METHODS FOR IMPROVING PHARMACOKINETICS

Настоящее изобретение относится к усовершенствованному способу введения соединения согласно формуле I для лечения гепатита С путем совместного введения с ритонавиром. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение формулы I и ритонавир.
Вирус гепатита С (ВСГ, англ. Hepatitis С virus, HCV) является ведущей причиной хронических заболеваний печени во всем мире (Воуег, N. et al., J. Hepatol. 2000 32:98-112). По оценкам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), более 170 миллионов человек во всем мире (или около 3% населения земного шара) инфицированы одноцепочечной рибонуклеиновой кислотой (РНК) ВГС (G.M.Lauer and B.D. Walker, N. Engl. J. Med. 2001 345:41-52). Приблизительно у одной пятой части хронически инфицированных пациентов с ВГС в конечном счете развивается цирроз печени, при этом для таких пациентов характерна значительная частота развития осложнений и смертности, в том числе печеночная недостаточность и гепатоцеллюлярная карцинома (T.J. Liang et al. Ann. Intern. Med. 2000 132:296-305; M.W. Fried et al. N. Engl. J. Med. 2002 347:975-982). Инфицирование ВГС является основным показанием к трансплантации печени в США (Совместное заключение НИЗ в отношении гепатита С, 10-12 июня 2002 19 (3): 146; http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14768714).
ВГС классифицируют как представителя семейства вирусов Flaviviridae, включающего роды Flavivirus, Pestivirus и Hepacivirus, который в свою очередь включает вирус гепатита С (Rice, С.ML, Flaviviridae: The viruses and their replication. In: Fields Virology, Editors: B.N. Fields, D.M. Knipe and P.M. Howley, Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia, Pa., Chapter 30, 931-959, 1996). ВГС представляет собой оболочечный вирус, геном которого представлен однонитевой положительно-полярной РНК размером около 9,4 тысяч оснований. Вирусный геном состоит из высоко консервативной 5′-нетранслируемой области (untranslated region, UTR), протяженной открытой рамки считывания, кодирующей полипротеиновый предшественник около 3011 аминокислот, и короткую 3' нетранслируемую область (3' UTR).
В результате генетического анализа вируса ВГС было выделено шесть основных генотипов, различающихся более чем на 30% по последовательности ДНК. Различают более 30 подтипов. В США около 70% больных гепатитом инфицированы вирусом типа 1а и 1b. Тип 1b является наиболее распространенным подтипом в Азии. (X.Forns and J.Bukh, Clinics in Liver Disease 1999 3:693-716; J. Bukh etal., Semin. Liv. Dis. 1995 15:41-63). К сожалению, инфекция 1-го типа более устойчива к терапии, чем инфекция вирусом с генотипом 2-го или 3-го типа (N. N. Zein, Clin. Microbiol. Rev., 2000 13:223-235).
Геном ВГС кодирует полипротеин, включающий 3010-3033 аминокислот (Q.L.Choo, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991 88:2451-2455; N.Kato et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1990 87:9524-9528; A.Takamizawa et al., J. Virol. 1991 65:1105-1113). Вирусные структурные белки включают коровый белок нуклеокапсида (С) и два гликопротеина оболочки, Е1 и Е2. ВГС также кодирует две протеазы: цинк-зависимую металлопротеиназу, кодируемую областью NS2-NS3 и сериновую протеазу, кодируемую областью NS3. Протеаза NS3 вируса гепатита С представляет собой сериновую протеазу, которая обеспечивает процессинг большинства вирусных ферментов и, таким образом, считается необходимой для вирусной репликации и инфекционности. Такие протеазы необходимы для гидролитического отщепления конкретных участков полипротеинового предшественника с образованием зрелых пептидов. С-концевой участок неструктурного белка 5, NS5B, включает РНК-зависимую РНК-полимеразу.
В настоящее время доступно ограниченное число одобренных способов терапии для лечения инфекции ВГС. Новые и существующие терапевтические подходы для лечения инфекции ВСГ и ингибирования активности полимеразы NS5B вируса ВГС рассмотрены в работах: R. G. Gish, Sem. Liver. Dis., 1999 19:5; Di Besceglie, A. M. and Bacon, B. R., Scientific American, October: 1999 80-85; G.Lake-Bakaar, Curr. Drug Targ. Infect. Dis. 2003 3(3):247-253; P.Hoffmann et al, Exp. Opin. Ther. Patents 2003 13(11): 1707-1723; M.P.Walker et al., Exp. Opin. Investing. Drugs 2003 12(8): 1269-1280; S.-L.Tan et al., Nature Rev. Drug Discov. 2002 1:867-881; J. Z. Wu and Z. Hong, Curr. Drug Targ-lnfect. Dis. 2003 3(3):207-219.

Рибавирин (амид 1-((2R,3R,4R,5R)-3,4-дигидрокси-5-гидроксиметил-тетрагидрофуран-2-ил)-1H-[1,2,4]триазол-3-карбоновой кислоты; Виразол) представляет собой синтетический противовирусный нуклеозидный аналог широкого спектра действия, не индуцирующий интерферон. Рибавирин обладает активностью in vitro, направленной против нескольких ДНК- и РНК-содержащих вирусов, включая Flaviviridae (L.Davis. Gastroenterology 2000 118:S104-S114). Хотя при монотерапии рибавирин снижает уровень сывороточной аминотрансферазы до нормального состояния у 40% пациентов, он не снижает содержание РНК ВГС в сыворотке крови. Рибавирин также демонстрирует значительную токсичность и, как известно, вызывает анемию. Вирамидин представляет собой пролекарство рибавирина, которое превращается в рибавирин в гепатоцитах с участием аденозиндезаминазы (J.Z.Wu, Antivir. Chem. Chemother. 2006 17(1):33-9).
Интерфероны (ИФН) применяют для лечения хронического гепатита на протяжении почти десятилетия. ИФН представляют собой гликопротеины, продуцируемые иммунными клетками в ответ на вирусную инфекцию. Известны два различных типа интерферонов: 1-й тип включает несколько альфа-интерферонов и один бета-интерферон, 2-й тип включает гамма-интерферон. Интерфероны 1-го типа производятся главным образом инфицированными клетками и защищают соседние клетки от инфицирования de novo. ИФН подавляет репликацию многих вирусов, в том числе ВГС, и при использовании в монотерапии для лечения инфекции гепатита С интерферон подавляет уровень РНК ВГС до уровня, не детектируемого при анализе. Кроме того, ИФН нормализует уровень сывороточной аминотрансферазы. К сожалению, эффекты ИФН носят временный характер. Прекращение терапии приводит к 70%-ной частоте рецидива, и только в 10-15% случаев наблюдается устойчивый вирусологический ответ с нормальным уровнем сывороточной аланинтрансферазы (Davis, Luke-Bakaar, см. выше).
Комбинированная терапия гепатита C с помощью рибавирина и интерферона-α в настоящее время представляет собой стандартное лечение пациентов, инфицированных ВГС. Сочетание рибавирина и ПЭГ-интерферона (см. ниже) приводит к устойчивому вирусологическому ответу (УВО), который определяют как отсутствие детектируемой рибонуклеиновой кислоты вируса гепатита С (РНК ВГС) через 24 недели после завершения терапии (M.W.Fried et al. см. выше) у 54-56% пациентов, инфицированных ВГС 1-го типа. УВО приближается к 80% для ВГС 2-го и 3-го типа. (Walker, см. выше) Кроме того, ПЭГ-ИФН вводят путем инъекции, а гематологическая и системная токсичность ПЭГ-интерферона и рибавирина трудно переносится многими пациентами при необходимости длительного (до 48 недель) лечения. В настоящее время отсутствует стандарт лечения (Standards of Care, SOC) пациентов, у которых наблюдается рецидив, или пациентов, не демонстрирующих ответ (резистентных) на терапию с помощью ПЭГ-интерферона/рибавирина. С учетом высокой распространенности хронического гепатита C во всем мире, высокого процента неудач лечения при текущем стандарте лечения (SOC), и проблемой переносимости при текущем стандарте лечения, существует значительная неудовлетворенная медицинская потребность в улучшении и расширении возможностей для лечения таких пациентов. Эффективному протеканию защитных реакций организма препятствует способность вируса гепатита нарушать, избегать и противодействовать иммунному ответу, не только за счет непрерывной вирусной инфекции, но также довольно часто за счет устойчивости к противовирусному действию терапии с помощью ИФН (M.Gale, Jr. and Е.М.Foy, Nature 2005. 436:939-945). Таким образом, стратегия, мишенью которой является сам вирус, может улучшить результаты лечения, по сравнению с существующими средствами терапии.
К настоящему времени выявлен ряд новых молекулярных мишеней для разработки лекарств в виде терапевтических средств, направленных против ВГС, включающих, но не ограниченных перечисленными, аутопротеазу NS2-NS3, протеазу NS3, геликазу NS3 и полимеразу NS5B. РНК-зависимая РНК-полимераза является абсолютно необходимой для репликации одноцепочечной, положительно-полярной РНК генома. Этот фермент вызвал значительный интерес в области медицинской химии.
Ингибиторы полимеразы ВГС представляют собой еще одну мишень для разработки лекарственных препаратов, и соединения, применяемые в таких разработках, включают R-1626, R-7128, IDX184/IDX102, PF-868554 (Pfizer), VCH-759 (ViroChem), GS-9190 (Gilead), A-837093 and A-848837 (Abbot), MK-3281 (Merck), GSK949614 и GSK625433 (Glaxo), ANA598 (Anadys), VBY 708 (ViroBay).
Также было обнаружено, что ингибиторы протеазы NS3 ВГС также потенциально применимы для лечения ВГС.Ингибиторы протеаз, применяемые в клинических испытаниях, включают VX-950 (Telaprevir, Vertex), SCH503034 (Broceprevir, Schering), TMC435350 (Tibotec/Medivir) и ITMN-191 (Intermune). Другие ингибиторы протеаз, находящиеся на более ранних стадиях разработок, включают МК7009 (Merck), BMS-790052 (Bristol Myers Squibb), VBY-376 (Virobay), IDXSCA/IDXSCB (Idenix), BI12202 (Boehringer), VX-500 (Vertex) и PHX1766 (Phenomix).
В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ повышения биодоступности и/или повышения уровня в крови ингибитора протеазы NS3 вируса гепатита C, имеющего формулу I, у пациента, включающий совместное введение пациенту соединения формулы I и ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы I и ингибитор цитохрома Р450-монооксигеназы.
При упоминании в настоящей заявке объекта/понятия в единственном числе подразумевается один или более объект/понятие, например, «соединение» охватывает одно или более соединение или по меньшей мере одно соединение. Таким образом, упоминание объекта/понятия в единственном числе, использование терминов «один или более» и «по меньшей мере один» могут быть взаимозаменяемыми в настоящем описании.
При использовании в настоящем описании, как в переходной фразе, так и в тексте формулы настоящего изобретения термины «включать (включает)» и «включающий» имеют не ограничивающее значение. Иными словами, данные термины следует понимать как синонимы выражения «имеющий по меньшей мере» или «включающий по меньшей мере». При использовании в контексте процесса/способа, термин «включающий» означает, что процесс/способ включает по меньшей мере указанные стадии, но может включать дополнительные стадии. При использовании в контексте соединения или композиции термин «включающий» означает, что соединение или композиция включает по меньшей мере указанные характеристики или компоненты, но также может включать дополнительные характеристики или компоненты.
Термин «возможный/ факультативный» или «возможно/факультативно» при использовании в настоящей заявке означает, что следующее за термином описываемое событие или обстоятельство может, но не обязательно, происходить, и что описание включает случаи, когда событие или обстоятельство происходит, и случаи, когда это не так.
При использовании в настоящей заявке числовых значений для обозначения переменных величин подразумевается, что изобретение может быть осуществлено с использованием значения переменной величины, равного любому из значений в указанном диапазоне. Таким образом, в случае переменной величины, которая по своей сути является дискретной, конкретная переменная величина может быть равной любому целому значению из числового диапазона, включая конечные точки диапазона. Аналогично, в случае переменной величины, которая по сути является непрерывной, конкретная переменная величина может быть равной любому реальному значению числового диапазона, включая конечные точки диапазона. Например, переменная, которая, как описывается, имеет значение от 0 до 2, может представлять собой 0, 1 или 2 в случае переменных, которые по сути являются дискретными, и может быть равной 0,0, 0,1, 0,01, 0,001, или любому другому реальному значению в случае переменных, которые по сути являются непрерывными.
Существует необходимость в композиции и терапевтической комбинации для лечения ВГС. Комбинированная химиотерапия доказала свою эффективность при лечении ВГС, однако, исполнительность пациента улучшается по мере уменьшения количества доз и частоты введения. Для терапии ВГС было бы целесообразно усовершенствование соединений и режима дозирования. Настоящее изобретение обеспечивает способ введения соединения формулы I (R7227) и ингибитора CYP 3A4, повышающего биодоступность R7227 и уменьшающего количество R7227, необходимого для введения.
50
50

Соединение I (R7227) представляет собой высокоэффективный и селективный макроциклический пептидомиметический ингибитор активности протеазы NS3/4A, выбранный для разработки как агент для перорального введения для лечения инфекции ВГС благодаря его способности ингибировать протеазу NS3/4A. R7227 демонстрирует значительную активность в печени животных, которая является главным или единственным местом репликации ВГС в организме человека, и имеет приемлемый токсикологический профиль. R7227 является очень мощным ингибитором протеолиза NS3/4A, характеризующийся 50% ингибирующей концентрацией (IC)≤0,225 нм и высокой степенью специфичности по отношению к мишени. В анализе эффективности в клеточных системах с использованием репликона генотипа 1 ВГС R7227 имеет IC, равную 1,77 нМ. Кроме того, в этом же анализе R7227 демонстрирует синергетический противовирусный эффект с интерфероном альфа-2а, конъюгированным с полиэтиленгликолем ("ПЭГ-илированным") (PEG-IFN-α2a, Pegasys, Roche), что позволяет предположить, что R7227 будет полезен в терапии ВГС.
Было показано, что цитохромы, в частности изоформа CYP3A4,
метаболизируют R7227, в результате чего возникает потребность в более частом введении и в более высоких дозах для поддержания терапевтически эффективного уровня R7227 в крови.
В начале доклинических исследований фенотипирование цитохрома Р450 с использованием химических ингибиторов позволило предположить, что в метаболизме R7227 участвуют несколько изоферментов CYP, в том числе ЗА4, 2С19, 1А2, 2D6 и 2С9. Дальнейшие эксперименты с рекомбинантными CYP показали, что только CYP3A4 метаболизирует R7227 до такой степени, что он может оказать влияние на фармакокинетику. Таким образом, ингибитор цитохрома Р450-монооксигеназы в количестве, эффективном для ингибирования метаболизма протеазного ингибитора может повышать биодоступность R7227, по сравнению с введением без указанного ингибитора CYP.
Некоторые лекарственные вещества метаболизируются ферментами цитохромами системы Р450. Такие ферменты обычно окисляют лекарственные вещества, что приводит к неблагоприятным фармакокинетическим показателям (например, к снижению уровня в крови, к уменьшению периода полувыведения). В этих случаях ингибирование метаболизма лекарственного вещества может привести к улучшению фармакокинетического профиля лекарственного вещества (см., например, патент США №6037157; D.Е.Kempf et al. Antimicrob. Agents Chemother., 1997 41:654-660; W.J.Curatolo and G.Foulds, публикацию патента США 2004/0091527 и M.G.Cordingley, публикацию патента США US 004/0152625). Для установления того, будет ли комбинированная терапия с применением антагониста цитохрома Р450 улучшать фармакокинетические характеристики лекарственного вещества, необходимо выяснение метаболических путей, в которые вовлечено данное лекарственное вещество.
Цитохромы Р450 (CYP Р450) представляют собой обширное и разнообразное суперсемейство гемопротеинов. В качестве субстратов для изоформ цитохрома Р450 могут служить как экзогенные, так и эндогенные соединения. Цитохром Р450 3A4 (CYP3A4; EC 1.14.13.97) является одним из важнейших ферментов, участвующих в метаболизме ксенобиотиков в организме. CYP3A4 участвует в окислении большого спектра субстратов всех CYP. Хотя CYP3A4, в основном, обнаруживается в печени, он также присутствует в других органах и тканях организма.
Любой ингибитор CYP, улучшающий фармакокинетику соответствующих протеаз NS3, можно применять в способе настоящего изобретения. Такие ингибиторы CYP включают, но не ограничены перечисленными, ритонавир (WO 94/14436), кетоконазол, тролеандомицин, 4-метил пиразол, циклоспорин, клометиазол, циметидин, итраконазол, флуконазол, миконазол, флувоксамин, флуоксетин, нефазодон, сертралин, индинавир нелфинавир, ампренавира, фосампренавир, саквинавир, лопинавир, делавирдин и эритромицин. Предпочтительным ингибитором CYP является ритонавир.
Ритонавир представляет собой мощный ингибитор активности CYP3A4, и в настоящее время его применяют в низких нетерапевтических дозах (например, 100 мг дважды в день) для повышения или усиления эффекта ингибиторов протеинкиназ или других ингибиторов протеаз ВИЧ (ИП). Учитывая высокую распространенность совместной инфекции ВИЧ/ВГС, R7227 можно применять для лечения гепатита С у пациентов с совместной инфекцией ВИЧ/ВГС, получающих усиленные ритонавиром ингибиторы протеаз ВИЧ, что может приводить к взаимодействию усиленных ритонавиром ингибиторов протеаз и R7227.
Однако в дополнение к ингибирующему воздействию на 3A4, ритонавир, по-видимому, индуцирует активность других ферментов, в том числе цитохромов 1А2, 2С9, и 2С19. Хотя при однократном введении ингибирующий эффект ритонавира будет преобладающим, приводя к повышению уровня R7227, постоянное введение, которое может осуществляться при терапии ВГС, может индуцировать другие изоформы, которые могут окислять R7227, противодействуя желаемому ингибирующему эффекту.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложен способ увеличения биодоступности ингибитора протеазы NS3/4A вируса гепатита C R7227 у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение R7227 и ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы, при этом количество ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы достаточно для повышения содержания R7227 в крови, по сравнению с содержанием R7227 в крови в отсутствие ингибитора цитохрома Р4500-монооксигеназы.

В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ увеличения биодоступности R7227 у пациента, включающий введение R7227 и ритонавира. Ритонавир реализуется на рынке компанией Abbott Laboratories под названием NORVIR как ингибитор протеазы ВИЧ (номер по Химической реферативной службе (Chemical Abstract) 1555213-67-5).
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ увеличения биодоступности R7227 у пациентов, включающий совместное введение R7227 и ритонавира, при котором R7227 и ритонавир представлены в отдельных лекарственных формах. Доза каждого из них может быть введена одновременно, или дозы могут быть введены через различные временные интервалы.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ увеличения биодоступности R7227 у пациентов, включающий совместное введение R7227 и ритонавира, при котором R7227 и ритонавир вводят одновременно. R7227 и ритонавир могут присутствовать в одной лекарственной форме для большего удобства пациента.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ увеличения биодоступности R7227 у пациентов, включающий совместное введение R7227 и ритонавира, при котором ритонавир и R7227 вводят в одной лекарственной форме.
В еще одном варианте реализации настоящего изобретения предложен способ увеличения биодоступности R7227 у пациентов, включающий совместное введение дозы от 25 до 600 мг/день, в частности, от 25 до 500 мг/день R7227, и от 50 до 400 мг/день ритонавира.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ увеличения биодоступности R7227 у пациентов, включающий совместное введение дозы от 50 до 300 мг/день R7227 и от 100 до 200 мг/день ритонавира.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ лечения ВГС, включающий введение пациенту, нуждающегося в этом, соединения формулы I, или его свободного основания или другой фармацевтически приемлемой соли, и ингибитора цитохрома Р450 монооксигеназы.
В другом варианте настоящего изобретения предложен способ лечения ВГС, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы I, или его свободного основания или другой фармацевтически приемлемой соли, и ритонавира.
Комбинированная терапия оказалась ценной составляющей противовирусной терапии и, таким образом, лечение ВГС с помощью R7227 и ритонавира может включать в себя введение другого компонента, включающего дополнительный агент, выбранный из иммуномодулирующего агента; противовирусного агента, другого ингибитора протеазы ВГС, ингибитора другой мишени в жизненном цикле ВГС, такого как ингибитор полимеразы ВГС, или их комбинацию.
В еще одном варианте настоящего изобретения предложен способ лечения ВГС, включающий совместное введение вместе с соединением формулы I и ритонавиром по меньшей мере одного дополнительного агента, выбранного из иммуномодулирующего агента и/или противовирусного агента и/или другого ингибитора протеазы NS3/4A ВГС и/или ингибитора полимеразы NS5B и/или вирусного ингибитора широкого спектра и/или другого ингибитора цитохрома Р-450.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ лечения ВГС, включающего совместное введение соединения формулы II (R7128) вместе с R7227 и ритонавиром.
В еще одном варианте реализации настоящего изобретения предложен способ лечения ВГС, который включает совместное введение α-, β- и γ-интерферона и/или тимозина и/или рибавирина и/или R7128 вместе с R7227 и ритонавиром.
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение R7227 и ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы, при котором количество ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы достаточно для увеличение содержания R7227 в крови, по сравнению с содержанием R7227 в крови в отсутствие ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы, для повышения биодоступности ингибитора протеазы NS3/4A вируса гепатита С R7227 или для производства лекарственного средства для увеличения биодоступности ингибитора протеазы NS3/4A вируса гепатита С R7227.
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение R7227 и ритонавира для повышения биодоступности R7227 или для производства лекарственного средства для увеличения биодоступности R7227. Ритонавир реализуется на рынке компанией Abbott Laboratories под названием NORVIR как ингибитор протеазы ВИЧ (номер по Химической реферативной службе (Chemical Abstract) 1555213-67-5).
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение R7227 и ритонавира для получения лекарственного средства для повышения биодоступности R7227, при котором R7227 и ритонавир представлены в отдельных лекарственных формах. Доза каждого из них может быть введена одновременно, или дозы могут быть введены через различные временные интервалы.
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение R7227 и ритонавира для получения лекарственного средства для повышения биодоступности R7227, при котором R7227 и ритонавир вводят одновременно. R7227 и ритонавир могут присутствовать в одной лекарственной форме для большего удобства пациента.
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение R7227 в комбинации с ритонавиром для повышения биодоступности R7227, при котором R7227 и ритонавир вводят в одной лекарственной форме, или для получения лекарственного средства для повышения биодоступности R7227, при котором R7227 и ритонавир вводят в одной лекарственной форме.
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение R7227 и ритонавира для производства лекарственного средства, включающее совместное введение дозы от 25 до 600 мг/день, в частности, от 25 до 500 мг/день R7227, и от 50 до 400 мг/день ритонавира.
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение R7227 и ритонавира для производства лекарственного средства для увеличения биодоступности при совместном введении дозы от 50 до 300 мг/день R7227 и от 100 до 200 мг/день ритонавира.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I, его свободного основания или другой фармацевтически приемлемой соли, и ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы для лечения ВГС, или для производства лекарственного средства для лечения ВГС.
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение соединения формулы 1, его свободного основания или другой фармацевтически приемлемой соли, и ритонавира для лечения ВГС, или для производства лекарственного средства для лечения ВГС.
Комбинированная терапия оказалась ценной составляющей противовирусной терапии и, таким образом, лечение ВГС с помощью R7227 и ритонавира может включать в себя введение другого компонента, включающего дополнительный агент, выбранный из иммуномодулирующего агента; противовирусного агента, другого ингибитора протеазы ВГС, ингибитора другой мишени в жизненном цикле вируса гепатита C, такого как ингибитор полимеразы ВГС, или их комбинацию.
В другом варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение соединения формулы I и ритонавира в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным агентом, выбранным из иммуномодулирующего агента и/или противовирусного агента и/или другого ингибитора протеазы NS3/4A ВГС и/или ингибитора полимеразы NS5B и/или вирусного ингибитора широкого спектра и/или другого ингибитора цитохрома Р-450, для лечения ВГС или для приготовления лекарственного средства для лечения ВГС.
В другом варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает применение соединения формулы II (R7128)
вместе с R7227 и ритонавиром для лечения ВГС или для приготовления лекарственного средства для лечения ВГС.
В еще одном варианте реализации настоящего изобретения обеспечено применение α-, β- и γ-интерферона и/или тимозина и/или рибавирина и/или R7128 вместе с R7227 и ритонавиром для лечения ВГС или для производства лекарственного средства для лечения ВГС.
В другом варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую R7227 или его фармацевтически приемлемую соль, ингибитор цитохрома Р450-монооксигеназы или его фармацевтически приемлемую соль, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, разбавитель или носитель.
В другом варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую R7227, или его свободное основание или другую фармацевтически приемлемую соль, ингибитор цитохрома Р450-монооксигеназы, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, разбавитель или носитель.
В еще одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую R7227, или его свободное основание или другую фармацевтически приемлемую соль, ингибитор цитохрома Р450-монооксигеназы, ингибитор полимеразы ВГС R7128 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, разбавитель или носитель.
В другом варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую R7227 или его свободное основание или другую фармацевтически приемлемую соль, ритонавир, или его фармацевтически приемлемую соль, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, разбавитель или носитель.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен набор, включающий ингибитор протеазы NS3 вируса гепатита C согласно формуле I и ритонавир.
В одном варианте реализации настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую упаковку, которая содержит соединение согласно формуле I, ритонавир, и также может содержать информационный вкладыш с указаниями по применению ингибиторов.

Как было показано, в низкой дозе ритонавир усиливает содержание мидазолама, наиболее чувствительного маркерного субстрата CYP3A, примерно в 7 раз (A.A.Mathias et al., Clin. Pharmacol. Ther. 2009 85(1)64-70). Моделирование SimCYP (SymCYP Limited, Blades Enterprise Centre, John Street, Sheffield S2 4SU, UK) предсказало, что ритонавир может увеличивать воздействие R7227 примерно в 2 - 4 раза, принимая вклад CYP3A в общую элиминацию R7227 равным 50% и 100%, соответственно. При совместном введении с ритонавиром в настоящем исследовании предсказанное 4-кратное увеличение R7227 воздействия является, однако, значительно более низким, чем наблюдаемое при наиболее высокой безопасной и допустимой дозе, равной 1600 мг, при исследованиях однократно нарастающих доз (Single Ascending Dose studies, SAD) у здоровых добровольцев.
Многократные дозы ритонавира 100 мг каждые 12 часов значительно увеличивали AUC0→∞ (Area under the curve, площадь под кривой), Концмакс и Конц12 ч R7227 примерно в 5,5 раза, в 3,25 раза, и в 27-42 раз, соответственно. Эффект многократных доз ритонавира на Конц12 ч R7227 меньше, чем эффект однократной большой дозы ритонавира, возможно благодаря индукции ферментов CYP ритонавиром при многократном дозировании, которая противодействует ингибирующему эффекту ритонавира на CYP 3A4. Таким образом, фармакокинетика R7227 была существенно улучшена при совместном введении ритонавира.
Соединения настоящего изобретения могут входить в состав препаратов в виде разнообразных лекарственных форм для перорального введения и носителей. Лекарственные формы для перорального введения могут быть представлены в виде таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий, сиропов или суспензий. Соединения настоящего изобретения являются эффективным при введении посредством других способов, включая непрерывное (внутривенное капельное введение), локальное, парентеральное, внутримышечное, внутривенное, подкожное введение и введение посредством суппозиториев, наряду с другими способами введения. Предпочтительный способ введения в целом представляет собой пероральное введение с подходящим ежедневным режимом дозирования, который может быть скорректирован в зависимости от тяжести заболевания и ответа пациента на действующее вещество.
Соединение или соединения настоящего изобретения, а также их фармацевтически применимые соли вместе с одним или более стандартным эксципиентом, носителем или разбавителем могут быть представленыв виде фармацевтических композиций и единичных лекарственных форм. Фармацевтические композиции и единичные лекарственные формы могут включать стандартные компоненты в стандартных пропорциях с или без дополнительных активных соединений или активных веществ, при этом единичные лекарственные формы могут содержать любое подходящее эффективное количество действующего вещества, соизмеримое с диапазоном предназначенной для применения дневной дозы. Фармацевтические композиции можно применять в виде твердых лекарственных форм, таких как таблетки или заполненные капсулы, полутвердых форм, порошков, препаратов с замедленным высвобождением, или жидких форм, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры, или в виде заполненных капсул для перорального приема, либо в форме суппозиториев для ректального или вагинального введения, или в виде стерильных растворов для инъекций для парентерального применения. Типичный препарат содержит примерно от 5% до примерно 95% действующего вещества или соединения (в/в). Термин «препарат» или «лекарственная форма» охватывает как твердые, так и жидкие лекарственные формы Действующего соединения, при этом, как очевидно специалисту в данной области, действующее вещество может быть представлено в виде различных препаратов в зависимости от органа-мишени или ткани-мишени и от желаемой дозы и фармакокинетических параметров.
Термин «эксципиент» при использовании в настоящей заявке относится к соединению, применимому при приготовлении фармацевтической композиции, которое в целом безопасно, нетоксично и не является биологически или в ином смысле нежелательным, и включает в себя вспомогательные вещества, которые подходят для применения как в ветеринарии, так и для фармацевтических целей для лечения людей. Соединения настоящего изобретения могут быть введены в отдельности, но, как правило, их вводят в смеси с одним или более подходящим фармацевтически приемлемым эксципиентом, разбавителем или носителем, выбранным с учетом предполагаемого пути введения и стандартной фармацевтической практики.
«Фармацевтически приемлемый» означает, что вещество можно применять для приготовления фармацевтической композиции, оно в целом является безопасным, нетоксичным и не является биологически или в ином смысле нежелательным; термин «фармацевтически приемлемый» охватывает вещества, приемлемые для применения в фармацевтических целях для человека.
Форма «фармацевтически приемлемой соли» действующего вещества может также изначально придавать желаемые фармакокинетические свойства действующему веществу, отсутствующие у несолевой формы, и даже может положительно повлиять на фармакодинамику действующего вещества в отношении его терапевтической активности в организме. Выражение «фармацевтически приемлемая соль» соединения означает, что соль является фармацевтически приемлемой и что она обладает желаемой фармакологической активностью исходного соединения. Такие соли включают: (1) кислотно-аддитивные соли, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., или образованные с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил) бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфокислота, этансульфокислота, 1,2-этан-дисульфокислота, 2-гидроксиэтансульфокислота, бензолсульфокислота, 4-хлорбензолсульфокислота, 2-нафталинсульфокислота, 4-толуолсульфокислота, камфорсульфокислота, 4-метилбицикло [2.2 0,2]-окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, трет-бутилуксусная кислота, лаурилсульфокислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п.; или (2) соли, образованные в случае, когда кислотообразующий протон, присутствующий в исходном соединении, либо замещен ионом металла, например, ионом щелочного металла, ионом щелочно-земельного металла или ионом алюминия, или образует координационную связь с органическим основанием, таким как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглюкамин и т.п.
Твердые формы препаратов включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердый носитель может представлять собой одно или более вещество, которое может также выступать в качестве разбавителя, отдушки, солюбилизатора, смазочного вещества, суспендирующего агента, связующего вещества, консерванта, вещества для улучшения распадаемости таблеток или вещества для инкапсулирования. В порошках носитель, как правило, представляет собой мелкодисперсное твердое вещество, находящееся в смеси с мелкодисперсным действующим веществом. В таблетках действующее вещество обычно смешано с носителем, имеющим необходимую связывающую способность в подходящих пропорциях, и прессовано с получением желаемой формы и размера. Подходящие носители включают, но не ограничены перечисленными, карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактоза, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу, легкоплавкий воск, масло какао и т.п. Твердые формы препаратов могут содержать в дополнение к действующему веществу красители, ароматизаторы, стабилизаторы, буферы, искусственные и натуральные подсластители, диспергирующие агенты, загустители, солюбилизирующие агенты и т.п.
Жидкие препараты также пригодны для перорального введения и включают жидкие препараты, включающие эмульсии, сиропы, эликсиры, водные растворы, водные суспензии. К ним относятся твердые формы препаратов, предназначенные для преобразования в препараты в жидкой форме непосредственно перед применением. Эмульсии могут быть получены в растворах, например, в водном растворе пропиленгликоля, или могут содержать эмульгаторы, такие как лецитин, сорбитанмоноолеат или камеди. Водные растворы могут быть получены путем растворения активного компонента в воде и добавления соответствующих красителей, ароматизаторов, стабилизаторов и загустителей. Водные суспензии могут быть получены путем диспергирования мелкодисперсного действующего вещества в воде с веществом, придающим вязкость, например, натуральными или синтетическими камедями, смолами, метилцеллюлозой, натрий-карбоксиметилцеллюлозой и другими известными суспендирующими агентами.
Соединения настоящего изобретения могут входить в состав препаратов для парентерального введения (например, путем инъекции, например болюсной инъекции или непрерывной инфузии) и могут быть представлены в единичной лекарственной форме в ампулах, предварительно заполненных шприцах, в форме для инфузии небольшого объема или в виде многодозовых контейнеров с добавлением консерванта. Композиции могут быть представлены в таких формах, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных растворителях, например, растворы в водном полиэтиленгликоле. Примеры масляных или неводных носителей, разбавителей, растворителей или наполнителей включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла (например, оливковое масло), а также инъекционные органические сложные эфиры (например, этилолеат), и может содержать такие агенты для составления препаратов, как консерваторы, увлажняющие агенты, эмульгаторы или суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Кроме того, действующее вещество может быть представлено в виде порошка, полученного путем асептического выделения стерильного твердого вещества или лиофилизации раствора, для восстановления перед применением с помощью подходящего носителя, например, стерильной апирогенной воды.
Соединения настоящего изобретения могут входить в состав препаратов для введения в виде суппозиториев. Сначала плавят легкоплавкий воск, например, смесь глицеридов жирных кислот или масло какао, и однородно диспергируют действующее вещество, например, путем перемешивания. Затем расплавленную однородную смесь заливают в формы удобного размера, дают ей остыть и затвердеть.
Соединения настоящего изобретения могут входить в состав препаратов для вагинального введения. Походящие для применения вагинальные суппозитории, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или аэрозоли, содержащие в дополнение к действующему веществу такие носители, известны в данной области.
При желании препараты могут быть приготовлены с энтеросолюбильным покрытием, приспособленным для введения с замедленным и контролируемым высвобождением действующего вещества. Например, соединения настоящего изобретения могут входить в состав препаратов в устройствах для трансдермальной или подкожной доставки лекарственного средства. Такие системы доставки предпочтительны в случаях, когда необходимо замедленное высвобождение соединения и когда крайне важно соблюдение пациентом режима лечения. Соединения в трансдермальных системах доставки часто совмещают с твердой подложкой, которая может быть приклеена к коже. Соединение, представляющее интерес, может также быть комбинировано с веществом, усиливающим проникновение, например, таким как Азон (1-додецилаза-циклогаптан-2-он). Системы доставки с замедленным высвобождением вводят подкожно в подкожный слой посредством операции или инъекции. Подкожные имплантаты содержат в себе соединения в жирорастворимых мембранах, например, в силиконовом каучуке, или в биоразлагаемом полимере, например, полимере молочной кислоты.
Подходящие препараты наряду с фармацевтическими носителями, разбавителями и эксципиентами описаны в руководстве Ремингтона «Наука и практика фармации» (Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, edited by E.W.Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania). Исследователь-специалист по составлению препаратов может модифицировать состав препаратов в соответствии с настоящим описанием с получением множества различных препаратов, предназначенных для конкретного способа введения, без нарушения стабильности соединения настоящего изобретения или его терапевтической активности.
Модификация соединений настоящего изобретения с целью увеличения их растворимости в воде или другом растворители, например, может быть легко осуществлена путем незначительных изменений (образование соли, этерификация и т.д.), известных специалистам в данной области. Кроме того, специалист в данной области способен модифицировать способ введения и режим дозирования конкретного соединения для регулирования фармакокинетики соединения настоящего изобретения для максимально положительного эффекта у пациентов.
Способы, описанные в настоящей заявке, включают введение комбинации ингибитора протеазы NS3/4A вируса гепатита C и ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы. Такое введение в настоящей заявке упоминается как совместное введение. Совместное введение включает введение каждого из ингибиторов в одной и той же лекарственной форме или в разных лекарственных формах. При приеме внутрь в разных лекарственных формах ингибиторы можно вводить одновременно или в разное время и в любом порядке. Соответственно, данное изобретение обеспечивает способы, в которых ингибитор CYP вводят совместно с ингибитором протеазы NS3/4A вируса гепатита C в одной и той же лекарственной форме или в виде отдельных лекарственных форм.
При введении ингибитора CYP и ингибитора протеазы в отдельных лекарственных формах каждый из ингибиторов можно вводить примерно одновременно. Кроме того, ингибитор CYP можно вводить в любой период времени относительно введения ингибитора протеазы. То есть, ингибитор CYP можно вводить перед, совместно или после введения ингибитора протеазы NS3/4A. Временной период введения должен быть таким, чтобы ингибитор CYP оказывал влияние на метаболизм ингибитора протеазы. Например, если ингибитор протеазы вводят первым, ингибитор CYP следует вводить до того, как ингибитор протеазы будет метаболизирован и/или выведен из организма.
Термин «терапевтически эффективное количество», используемый в настоящей заявке, обозначает количество, необходимое для ослабления симптомов заболевания у человека. Уровень терапевтической эффективности в терапии ВГС, как правило, определяют путем измерения уровня вирусной РНК. Доза может быть скорректирована с учетом индивидуальных потребностей в каждом конкретном случае. Доза может варьировать в широких пределах в зависимости от целого ряда факторов, таких как тяжесть заболевания, подлежащего лечению, возраст и общее состояние здоровья пациента, другие лекарственные средства, используемые для лечения пациента, способ и форма введения, а также предпочтения и опытом лечащего врача.
Для профилактики и лечения заболеваний, опосредованных вирусом гепатита С, применяют величину дозы примерно от 100 до 800 мг в день, предпочтительно примерно от 200 и до 600 мг в день ингибитора протеазы NS3. Для ингибитора CYP доза составляет, как правило, примерно от 50 до 400 мг в день, были бы типичны. Обычно доза составляет примерно от 100 до 200 мг в день. Как правило, фармацевтические композиции настоящего изобретения и согласно настоящему изобретению вводят от 1 до 2 раз в день. Количество действующего вещества, которое может быть объединено с веществом носителя для производства одной лекарственной формы, варьирует в зависимости от конкретного пациента и способа введения. Как правило, лечение начинают с более низких доз, которые ниже оптимальной дозы для конкретного соединения. После этого дозу увеличивают с небольшим приращением до достижения оптимального эффекта у конкретного пациента. Любой специалист в лечении заболеваний, описанных в настоящей заявке, сможет без лишних экспериментов и, полагаясь на личные знания, опыт и описание настоящей заявки, определить терапевтически эффективное количество соединения настоящего изобретения для конкретного заболевания и пациента.
Предпочтительные лекарственные формы для ритонавира описаны Л.А.Аль-Раззак и соавторами (L.A.Al-Razzak et al.) в патенте США №5484801 опубликованном 16 января 1996 г., в патенте США №5948436, опубликованном 7 сентября 1999 г., международной публикации WO 95/07696, опубликованной 23 марта 1995 г.и WO 95/09614, опубликованной 13 апреля 1995 г.
Способы, описанные в настоящей заявке, включают введение комбинации ингибитора протеазы NS3/4A вируса гепатита C и ингибитора цитохрома Р450-монооксигеназы. Такое введение в настоящей заявке упоминается как совместное введение. Совместное введение включает введение каждого из ингибиторов в одной и той же лекарственной форме или в разных лекарственных формах. При введении в разных лекарственных формах ингибиторы можно вводить одновременно или в разное время и в любом порядке. Соответственно, данное изобретение обеспечивает способы, в которых ингибитор CYP вводят совместно с ингибитором протеазы NS3/4A вируса гепатита C в одной и той же лекарственной форме или в виде отдельных лекарственных форм.
При введении ингибитора CYP и ингибитора протеазы в отдельных лекарственных формах каждый из ингибиторов можно вводить примерно одновременно. Кроме того, ингибитор CYP можно вводить в любой период времени относительно введения ингибитора протеазы. То есть, ингибитор CYP можно вводить перед, совместно или после введения ингибитора протеазы NS3/4A. Временной период введения должен быть таким, чтобы ингибитор CYP оказывал влияние на метаболизм ингибитора протеазы. Например, если ингибитор протеазы вводят первым, ингибитор CYP следует вводить до того, как ингибитор протеазы будет метаболизирован и/или выведен из организма.
Комбинированная терапия оказалась ценной составляющей противовирусной терапии и, таким образом, лечение ВГС с помощью R7227 и ритонавира может включать в себя введение другого компонента, включающего дополнительный агент, выбранный из иммуномодулирующего агента; противовирусного агента, другого ингибитора протеазы ВГС или другой мишени в жизненном цикле вируса гепатита С, или их комбинацию.
Фармацевтические композиции могут также быть назначены пациенту в виде «упаковки для пациента», содержащей весь курс лечения в одном пакете, как правило, блистерной упаковке. Форма «упаковки для пациента» имеет преимущество перед традиционными формами лекарственных средств, выдаваемых по рецептам, при которых фармацевты выделяют поставляемый пациенту фармацевтический препарат из большой партии. Указанное преимущество заключается в том, что пациент всегда имеет доступ к листку-вкладышу, имеющемуся в упаковке для пациента, который, как правило, отсутствует в традиционных партиях лекарственного средства, выдаваемых по рецептам. Вложение такого листка-вкладыша, как было показано, обеспечивает большую согласованность пациента с указаниями врача.
Применение фармацевтической комбинации настоящего изобретения с применением единой упаковки для пациента или упаковок для пациента с каждым из препаратов, содержащих в листок-вкладыш, информирующий пациента о правильном применении настоящего изобретения, является желательной дополнительной характеристикой настоящего изобретения, которая позволяет улучшить соблюдение пациентом режима лечения.
В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение обеспечивает упаковку, содержащую по меньшей мере ингибитор протеазы NS3 и ингибитор CYP 3A4 настоящего изобретения и вкладыш, содержащий указания по применению комбинации настоящего изобретения. В альтернативном варианте настоящего изобретения фармацевтическая упаковка дополнительно содержит один или более дополнительный агент, как описано в настоящей заявке. Дополнительный агент или агенты могут быть предоставлены в одной и той же упаковке или в отдельных упаковках.
Другой аспект настоящего изобретения включает набор в упаковке для пациента для применения в лечении или профилактики инфекции вируса гепатита С, включающий в себя: одним или более лекарственный препарат каждого фармацевтического компонента; контейнер, включающий лекарственный препарат (препараты) в процессе хранения и перед введением, а также инструкции по применению препарата для эффективного лечения и профилактики инфекции ВГС.
Соответственно, данное изобретение обеспечивает наборы для одновременного или последовательного введения ингибитора протеазы NS3/4A и ингибитора CYP (и, возможно, дополнительного агента) или их производных, подготовленный стандартным способом. Как правило, такие комплекты включают, например, композицию каждого ингибитора и при необходимости дополнительного агента (агентов) в фармацевтически приемлемом носителе (и в одном или в нескольких фармацевтических препаратов), а также письменные инструкции для одновременного или последовательного введения.
В другом варианте изобретение обеспечивает набор в упаковке, содержащий одну или более лекарственную форму для самостоятельного введения; контейнер, предпочительно герметичный, содержащий лекарственную форму во время хранения и перед применением, и инструкции для пациента по введению препарата. Инструкции, как правило, представляют собой письменные инструкции на вкладыше, этикетке и/или других компонентах набора, и лекарственная форма или формы, является такой, как описано в настоящей заявке. Каждая лекарственная форма может быть индивидуально упаковано, например в листе слоистого пластика с металлической фольгой, в котором каждая лекарственная форма изолирована от других в отдельных ячейках или пузырьках, или лекарственные формы могут быть размещены в одном контейнере, например, в пластиковой бутылке. Такие наборы обычно включают средства для упаковки отдельных компонентов комплекта, то есть лекарственных форм, контейнер, а также письменные инструкции по применению. Такая упаковка может быть в виде картонной или бумажной коробки, мешочка из пластика или фольги и т.д.
Для более полного понимания настоящего изобретения изложены примеры по приготовлению и анализу. Данные примеры представлены исключительно с целью иллюстрации и никоим образом не ограничивают объем настоящего изобретения.
ПРИМЕР
Улучшение фармакокинетических характеристик R7227 у здоровых взрослых
Объекты были обследованы для участия в данном исследовании за 21 день до начала приема препарата. В исследование были вовлечены 14 здоровых добровольцев (n=14 в группе). Режим дозирования показан ниже:
ТАБЛИЦА I
Процедура
День исследования
1
2
3
4 to 11
12
Введение R7227<sup>1</sup>
×
×
×
Введение ритонавира<sup>2</sup>
×
×
×
Сбор образцов для анализа ФК
24-ч ФК
48-ч ФК
48-ч ФК
<sup>1</sup> R7227 100 мг в виде единичной дозы перорально
<sup>2</sup> Ритонавир 100 мг перорально каждые 12 ч.
Препарат R7227-R7227 входит в состав препарата в виде 10 овальных мягких желатиновых капсул определенного размера для перорального применения в концентрации 100 мг в капсуле (эквивалент безводной свободной кислоты). Раствор содержимого капсулы включает R7227-001, полиэтиленгликоль PEG400 (макрогол 400), и бутилированный гидрокситолуол (БГТ). Все эксципиенты фармакопейного качества (согласно Национальному формуляру (NP) или Европейской фармакопее (ЕР). Для оболочки капсулы в качестве основной гелевой массы использовали желатин типа 195 (NF, ЕР) с использованием небольшого количества жидкого сорбитола 85/70/00 (NF, ЕР) и воды (фармакопея США) в качестве пластификаторов.
Все лекарственные препараты в исследовании вводили вместе с едой. В дни, в которые вводили R7227 (в отдельности или в комбинации с ритонавиром), исследуемые лекарственные препараты вводили после завершения стандартного завтрака с высоким содержанием жиров, при этом завтраки в указанные дни были идентичными. R7227 вводили перорально в виде однократной дозы 100 мг в мягких желатиновых капсулах в 1, 3 и 12 день. В дни 3 и 12 R7227 вводили с утренней дозы ритонавира. Ритонавир 100 мг вводили перорально два раза в сутки (каждые 12 часов) с 3 до 12-й день.
Образцы крови (5 мл) собирали для определения концентрации R7227 в плазме (и метаболитов, при доступности анализа) в соответствии со следующим графиком:
День 1, образцы для ФК (5 мл) собирали до введения дозы R7227 (перед дозой) и через 0,5, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3.5, 4, 6, 8, 12 и 24 часов после введения R7227;
Дни 3 и 12, образцы для ФК (5 мл) собирали до введения дозы R7227 (перед дозой) и через 0,5, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3.5, 4, 6, 8, 12, 24, 36 и 48 часов после введения R7227.
макс
макс
последн.
1/2
12 ч
24 ч
Первичные параметры ФК для R7227, определяемые в анализе, представляют собой Конц и AUC0→∞. Вторичные оцениваемые параметры ФК для R7227 включают Т и AUC0→, CL/F, t, Конц и Конц.
Лог-преобразованные первичные фармакокинетические параметры подвергали дисперсионному анализу (ANOVA). Для следующих сравнений были получены двусторонние 90% доверительные интервалы для отношения средних геометрических первичных параметров (AUC0→∞ и максимальной концентрации R7227): (R7227+ритонавир) день 3, по сравнению с R7227 день 1, и (R7227+ритонавир) день 12, по сравнению с R7227 день 1 Дисперсионный анализ (ANOVA) использовали для анализа всех основных параметров исследования с использованием следующей модели:
Yij= µ+τi+sj+εij
0
макс
где Yij обозначает параметр ФК, который необходимо проанализировать, и обозначает общее среднее преобразованных переменных, τi, фиксированный эффект лечения; sj - случайный эффект объекта; sij (ошибка). Случайные отклонения εij считали независимы и нормально распределенными с нулевым средним и общей дисперсией σ2. Групповые сравнения τR7227+ритонавир-τR7227, остаточную дисперсию σ2, и 90% доверительные интервалы для групповых сравнений оценивали с помощью ANOVA. Для лог-преобразованных переменных (AUC→∞ и Конц), отношение истинных групповых средних и границ доверительного интервала для соответствующее отношений средних непреобразованных переменных рассчитывают путем возведения в степень различий пределов средних и границ доверительных интервалов для преобразованных значений, соответственно.
ТАБЛИЦА II
R7227 ФК (значения)
N
геометрическое среднее по методу наименьших квадратов (Geometric Least Square Mean, GLSM)
Отношение GLSM (90% ДИ)
День 1 (вотдельности)
День 3 (с однократной дозой ритонавира)
День 12 (с многократной дозой ритонавира)
День 3 относительно дня 1
День 12 относительно Дня 1
AUC<sub>0-→∞</sub>нг*ч/мл
12
14,4
82,
79,4
5,70 (4,07, 7,99)
5,50 (4,05, 7,48)
C<sub>max</sub> (нг/мл)
12
8,40
26,4
27,3
3,14(1,87, 5,25)
3,25 (2,12, 4,96)
C<sub>12h</sub> (нг/мл)
8<sup>a</sup>
0,02
1,00
0,53
50,6 (25,6, 100)
26,9(17,7, 41,0)
C<sub>12h</sub> (нг/мл)
12<sup>b</sup>
0,01
0,55
0,36
65,2 (34,8, 122)
42,4 (25,7, 70,0)
<sup>a</sup> Данные (непропущенные и выше нижнего предела количественного определения (BLQ, Below Limit of Quantitation) (0,010 нг/мл) для всех трех дней лечения.
<sup>b</sup> Включает экстраполированные значения Конц<sub>12 ч</sub> У 4 объектов со значениями BLQ в день 1
Вышеизложенное изобретение было описано подробно с целью иллюстрации и примера для ясности и понимания. Специалисту в данной области очевидно, что в рамках формулы изобретения могут быть осуществлены изменения и модификации. Поэтому следует понимать, что приведенное выше описание предназначено лишь для иллюстрации и не носит ограничительный характер. Объем изобретения, таким образом, определен не вышеизложенным описанием, а следующей ниже формулой изобретения, а также полным спектром эквивалентов, которые по праву охватывает формула изобретения.
Все патенты, заявки на патенты и публикации, цитируемые в данной заявке, приведены в настоящем описании посредством ссылки в полном объеме для всех целей в такой же степени, как если бы каждый отдельный патент, заявка на патент или публикация были указаны в отдельности.