АНАЛИЗЫ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ НЕЙТРАЛИЗУЮЩИХ АУТОАНТИТЕЛ ДЛЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ TNFα

1. Способ измерения уровня или процента нейтрализующих форм аутоантител к анти-TNFα лекарствам в образце, включающий:
(a) контактирование контакта образца с меченым анти-TNFα лекарством и меченым TNFα для образования:
(i) первого меченого комплекса из меченого анти-TNFα лекарства и аутоантитела; и/или
(ii) второго меченого комплекса из меченого анти-TNFα лекарства, меченого TNFα, и аутоантитела;
(b) обработку первого меченого комплекса и/или второго меченого комплекса исключающей (эксклюзионной) хроматографией для отделения их от свободных меченых TNFα, свободных анти- TNFα лекарств, и/или комплексов меченых анти- TNFα лекарств и меченых TNFα;
(c) измерение уровня свободных меченых TNFα после исключающей хроматографии; и
(d) сравнение уровня свободных меченых TNFα, измеренных на этапе (с), с нормализованным уровнем или процентом свободного меченого TNFα в контрольном образце, в котором нормализованный уровень или процент свободного меченого TNFα в контрольном образце соответствует уровню или проценту нейтрализованной формы аутоантитела.
2. Способ по п. 1, в котором анти-TNFα лекарство выбирают из группы, состоящей из REMICADE™ (инфликсимаб), ENBREL™ (этанерцепт), HUMIRA™ (адалимумаб), CIMZIA (цертолизумаб пегол), SIMPONI (голимумаб; CNTO 148), и их комбинации.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором аутоантитела к анти-TNFα лекарству выбирают из группы, состоящей из человеческих анти-химерных антител (НАСА), человеческих анти- гуманизированных антител (НАНА), человеческих анти-мышиных антител (НАМА), и их комбинации.
4. Способ по п. 1, в котором этап (с) включает измерение площади пика свободных меченых TNFα после исключающей хроматографии.
5. Способ по п. 1, в котором контрольным образцом является эталонный образец, содержащий только свободный меченый TNFα.
6. Способ по п. 1, в котором уровень или процент свободного меченого TNFα в контрольном образце нормализован вычитанием измеренной площади пика третьего меченого комплекса, сформированного между меченым анти-TNFα лекарством и меченым TNFα из измеренной площади пика свободного меченого TNFα.
7. Способ по п. 1, в котором разница между нормализованным уровнем или процентом свободного меченого TNFα в контрольном образце и уровнем свободного меченого TNFα, измеренного на этапе (с) соответствует уровню или проценту ненейтрализующих форм аутоантител.
8. Способ по п. 1, в котором образец является положительным на нейтрализующие формы аутоантител, когда образец имеет более чем, или равное около 3,00% нейтрализующих форм аутоантител.
9. Способ по п. 1, в котором образцом является сыворотка.
10. Способ по п. 1, в котором образец получен от человека, получающего терапию анти-TNFα лекарством.
11. Способ по п. 1, в котором меченое анти-TNFα лекарство и меченый TNFα содержат различные флюорофоры или флюоресцентные метки.
12. Способ обнаружения присутствия нейтрализующих и/или не-нейтрализующих форм аутоантител к анти-TNFα лекарству в образце, включающий:
(a) контактирование образца с меченым анти-TNFα лекарством и меченым TNFα для образования:
(i) первого меченого комплекса меченого анти-TNFα лекарства и аутоантитела; и/или
(ii) второго меченого комплекса меченого анти-TNFα лекарства, меченого TNFα, и аутоантитела;
(b) обработку первого меченого комплекса и/или второго меченого комплекса исключающей хроматографией для отделения их от свободных меченых TNFα, свободных анти-TNFα лекарств, и/или комплексов меченых анти-TNFα лекарств и меченых TNFα;
(c) измерение уровня свободных меченых TNFα после исключающей хроматографии; и
(d) сравнение уровня свободных меченых TNFα, измеренного на этапе (с), с уровнем свободных меченых TNFα в контрольном образце, для обнаружения присутствия нейтрализующих и/или не-нейтрализующих форм аутоантител.
13. Способ по п. 12, в котором анти-TNFα лекарство выбирают из группы, состоящей из REMICADE™ (инфликсимаб), ENBREL™ (этанерцепт), HUMIRA™ (адалимумаб), CIMZIA (цертолизумаб пегол), SIMPONI (голимумаб; CNTO 148), и комбинации таковых.
14. Способ по п. 12 или 13, в котором аутоантитела к анти-TNFα лекарству выбирают из группы, состоящей из человеческих анти-химерных антител (НАСА), человеческих анти-гуманизированных антител (НАНА), человеческих анти-мышиных антител (НАМА), и их комбинации.
15. Способ по п. 12, в котором этап (с) включает измерение площади пика свободных TNFα после исключающей хроматографии.
16. Способ по п. 12, в котором контрольным образцом является эталонный образец, содержащий только свободный меченый TNFα.
17. Способ по п. 12, в котором нейтрализующие формы аутоантител обнаруживают, если уровень свободных меченых TNFα, измеренный на этапе (с), был одинаковым или по существу таким же, как уровень свободного меченого TNFα в контрольном образце.
18. Способ по п. 12, в котором не-нейтрализующие формы аутоантител обнаруживают, если уровень свободных меченых TNFα, измеренный на этапе (с), снижен или отсутствовал по сравнению с уровнем свободного меченого TNFα в контрольном образце.
19. Способ по п. 12, в котором образцом является сыворотка.
20. Способ по п. 12, в котором образец получен от человека, получающего терапию анти-TNFα лекарством.
21. Способ по п. 12, в котором меченое анти-TNFα лекарство и меченый TNFα содержат различные флюорофоры или флюоресцентные метки.
22. Способ определения, будет ли нейтрализующая форма антитела к первому анти-TNFα лекарству перекрестно взаимодействовать со вторым анти-TNFα лекарством, включающий:
(a) обнаружение или измерение присутствия, уровня или процента нейтрализующей формы аутоантитела в образце в соответствии с любым способом из пп. 1-21, для определения является ли анализ положительным или отрицательным на нейтрализующую форму аутоантитела; и
если образец положителен на нейтрализующие формы аутоантител, затем:
(b) контактирование образца с меченым вторым анти-TNFα лекарством для формирования меченого комплекса меченого второго анти-TNFα лекарства и нейтрализующей формы аутоантитела;
(c) обработку меченого комплекса исключающей хроматографией для отделения меченых комплексов; и
(d) детектирование меченых комплексов для определения, является ли нейтрализующая форма аутоантитела к первому анти-TNFα лекарству перекрестно взаимодействующей со вторым анти-TNFα лекарством.
23. Способ по п. 22, в котором первое и второе анти-TNFα лекарства независимо выбирали из группы, состоящей из REMICADE™ (инфликсимаб), ENBREL™ (этанерцепт), HUMIRA™ (адалимумаб), CIMZIA (цертолизумаб пегол), SIMPONI (голимумаб; CNTO 148), и их комбинации.
24. Способ по п. 22 или 23, в котором аутоантитела к первому анти-TNFα лекарству выбирают из группы, состоящей из человеческих анти-химерных антител (НАСА), человеческих анти-гуманизированных антител (НАЛА), человеческих антимышиных антител (НАМА), и их комбинации.
25. Способ по п. 22, в котором присутствие меченых комплексов является показателем того, что нейтрализующие аутоантитела против первого анти-TNFα лекарства являются перекрестно взаимодействующими со вторым анти-TNFα лекарством.
26. Способ по п. 22, в котором отсутствие меченых комплексов является показателем того, что нейтрализующие аутоантитела против первого анти-TNFα лекарства не являются перекрестно взаимодействующими со вторым анти-TNFα лекарством.
27. Способ по п. 22, в котором образцом является сыворотка.
28. Способ по п. 22, в котором образец получен от человека, получающего терапию анти-TNFα лекарством.
29. Способ по п. 22, в котором меченое анти-TNFα лекарство и меченый TNFα содержат различные флюорофоры или флюоресцентные метки.
30. Способ мониторинга и/или оптимизации терапии анти-TNFα лекарством у пациента, проходящего курс терапии анти-TNFα лекарствами, включающий:
(a) обнаружение или измерение наличия, уровня или процентов нейтрализующей формы аутоантител к анти-TNFα лекарствам, в соответствии со способами по любому из пп. 1-21, во множестве временных точек в течение курса терапии;
(b) обнаружение изменения в наличии, уровне или проценте нейтрализующей формы аутоантител в течение времени; и
(c) определение последующей дозы курса терапии для человека, или какой из различных курсов терапии должен быть назначен пациенту на основе изменений наличия, уровня или процентов нейтрализующей формы аутоантител в течение времени.
31. Способ по п. 30, в котором анти-TNFα лекарство выбирали из группы, состоящей из REMICADE™ (инфликсимаба), ENBREL™ (этанерцепта), HUMIRA™ (адалимумаба), CIMZIA (цертолизумаба пегола), SIMPONI (голимумаба; CNTO 148), и их комбинации.
32. Способ по п. 30 или 31, в котором аутоантитела к анти-TNFα лекарству выбирают из группы, состоящей из человеческих анти-химерных антител (НАСА), человеческих анти-гуманизированных антител (НАНА), человеческих анти-мышиных антител (НАМА) и их комбинации.
33. Способ по п. 30, в котором последующую дозу курса терапии повышали, понижали, или оставляли, на основании изменений в наличии, уровне или проценте нейтрализующих форм аутоантител в течение времени.
34. Способ по п. 30, в котором другой курс терапии включает другое анти-TNFα лекарство, в течение текущего курса терапии вместе с иммуносупрессивным агентом, или смену на курс терапии, который не содержит анти-TNFα лекарства.
35. Способ по п. 34, в котором другой курс терапии назначают, когда уровень или процент нейтрализующих форм аутоантител повышался с течением времени.
36. Способ оптимизации терапии и/или снижения токсичности у человека, получающего курс терапии с первым анти-TNFα лекарством, включающий:
(a) определение, является ли нейтрализующая форма аутоантител к первому анти-TNFα лекарству перекрестие взаимодействующей со вторым анти-TNFα лекарством, обнаружением или измерением наличия, уровня, или процента нейтрализующих форм аутоантител в образце от человека в соответствии со способами по любому из пп. 1-21; и
(b) определение, какой из различных курсов терапии должен быть назначен пациенту, если нейтрализующая форма аутоантител является перекрестно взаимодействующей со вторым анти-TNFα лекарством.
37. Способ по п. 35, в котором первое и второе анти-TNFα лекарства независимо выбирали из группы, состоящей из REMICADE™ (инфликсимаба), ENBREL™ (этанерцепта), HUMIRA™ (адалимумаба), CIMZIA (цертолизумаба пегола), SIMPONI (голимумаба; CNTO 148), и их комбинации.
38. Способ по п. 36 или 37, в котором аутоантитела к первому анти-TNFα лекарству выбирают из группы, состоящей из человеческих анти-химерных антител (НАСА), человеческих анти-гуманизированных антител (НАНА), человеческих антимышиных антител (НАМА) и их комбинации.
39. Способ по п. 36, в котором другой курс терапии включает смену на курс терапии, которая не содержит анти-TNFα лекарства.
40. Способ по п. 39, в котором не-анти-TNFα лекарство выбирают из группы, состоящей из моноклональных антител, ингибирующих IL-6 рецептор, анти-интегриновых молекул, JAK-2 ингибиторов, ингибиторов тирозинкиназы, терапии питанием, и их комбинации.
41. Способ по п. 36, который дополнительно включает определение, какую последующую дозу текущего курса терапии надо повышать или понижать, или надо ли назначить другой курс терапии, если нейтрализующие формы аутоантител не являются перекрестно взаимодействующими со вторым анти-TNFα лекарством.