Muc16: структура, функции и роль в онкогенезе

Раздел - обзоры

MUC16: структура, функции и роль в онкогенезе

Киселева Я.Ю. к.м.н., Джикия Е.Л. к.б.н., Кулинич Т.М. к.м.н., Шишкин А.М. к.м.н., Иванов А.В. к.м.н., Боженко В.К. профессор, д.м.н.

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский научный центр рентгенорадиологии" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГБУ "РНЦРР" Минздравсоцразвития России) 117997, Москва, ул. Профсоюзная, д. 86

Резюме

MUC16 является высокомолекулярным трансмембранным гликопротеином, который экспрессируется в норме на поверхности некоторых типов эпителиальных клеток, и участвует в их защите от неблагоприятного механического воздействия и проникновения в организм различных патогенов. Антигенная детерминанта муцина 16, известная как CA125, используется в клинической диагностике для мониторинга прогрессирования заболевания и ответа на терапию пациентов с раком яичников. В статье рассмотрены структура MUC16 и его эпитопа CA125, экспрессия MUC16 и его функции в норме, значение антигена CA125 как онкомаркера и его применение в клинике, биологическая роль MUC16 в онкогенезе и метастазировании, а также его участие в механизмах ингибирования противоопухолевого иммунного ответа.

Ключевые слова: MUC16, CA125, онкомаркер, онкогенез, метастазирование

MUC16: Structure, function and role in oncogenesis.

Ya.Yu. Kiseleva - Candidate of Medical Science, E.L. Djikia - Candidate of Biological Sciences, T.M. Kulinich - Candidate of Medical Science, A.M. Shishkin - Candidate of Medical Science, A.V. Ivanov - Candidate of Medical Science, V.K. Bozhenko - Professor, Doctor of Medicine.

Federal state budgetary institution "Russian Scientific Center of Roentgenoradiology" of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation

86 Profsoyuznaya str., Moscow, Russia, 117997.

Summary: MUC16 is a high-molecular transmembrane glycoprotein that is expressed on the surface of normal epithelial cells of some types and is involved in protecting them from the adverse mechanical effects and penetration into the body of various pathogens. Antigenic determinant mucin 16 is known as CA125 and is used in clinical diagnostics for monitoring disease progression and response to treatment of patients with ovarian cancer. The article describes the structure of MUC16 and its epitope CA125, MUC16 expression and functions are normal, the CA125 antigen value as a tumor marker and its application in the clinic, the biological role of MUC16 in oncogenesis and metastasis, and also its participation in the mechanisms of inhibition of anti-tumor immune response.

Keywords: MUC16, CA125, tumor marker, oncogenesis, metastasis.

Введение

Структура MUC16 Функции MUC 16 в норме

Клиническое значение антигена CA125 как онкомаркера и его применение в диагностике

Роль MUC16 в онкогенезе и метастазировании

Заключение

Киселева Яна Юрьевна - кандидат медицинских наук, научный сотрудник лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточных технологий в онкологии. Джикия Екатерина Левановна - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточных технологий в онкологии. Кулинич Татьяна

Михайловна - кандидат медицинских наук, заведующий лабораторией иммунологии, онкоцитологии и клеточных технологий в онкологии. Шишкин Александр Михайлович - кандидат медицинских наук, заведующий лабораторией иммунологии, онкоцитологии и клеточных технологий в онкологии. Иванов Андрей Валерьевич - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории иммунологии, онкоцитологии и клеточных технологий в онкологии. Боженко Владимир Константинович - профессор, доктор медицинских наук, заведующий научно-исследовательским отделом молекулярной биологии и экспериментальной терапии опухолей.

Введение

Онкологические заболевания сегодня являются второй по значимости причиной смертности, что делает их своевременную диагностику и эффективное лечение крайне актуальной проблемой. Среди белков, которые вызывают особый интерес одновременно как диагностические биомаркеры онкозаболеваний и как терапевтические мишени, муцин 16 (MUC16) занимает особое место (Das, Batra, 2015; Felder et al., 2014; Marcos-Silva et al.,

2014). MUC16 представляет собой высокомолекулярный трансмембранный гликопротеин, экспрессированный в норме на поверхности некоторых типов эпителиальных клеток (Haridas et al., 2014). Являясь членом семейства муцинов, он входит в состав слизи, покрывающей дыхательные, пищеварительные и мочеполовые пути, а также роговицу и конъюнктиву. Совместно с другими муцинами, MUC16 защищает их от различных физических и химических повреждений, инфекций и обезвоживания (Bottoni, Scatena,

2015). Трансформация эпителиальных клеток в злокачественные сопровождается экспрессией на их поверхности значительного количества MUC16 (Haridas et al., 2014).

Впервые MUC16 был детектирован Робертом Бастом с коллегами (Bast et al., 1981). Используя моноклональное антитело ОС125, ранее полученное к сыворотке больных

раком яичника, они обнаружили при иммуногистохимическом анализе образцов опухоли, что это антитело связывает опухоль-ассоциированный антиген, экспрессирующийся в 80% случаев эпителиального рака яичников

В обзоре рассмотрены структура MUC16 и его эпитопа CA125, экспрессия MUC16 и его функции в норме, клиническое значение антигена CA125 как онкомаркера и его применение в диагностике, биологическая роль MUC16 в онкогенезе и метастазировании, а также его участие в механизмах ингибирования противоопухолевого иммунного ответа. Структура MUC16

MUC16 является самым большим муцином, известным на сегодняшний день (O'Brien et al., 2001; O'Brien et al., 2002). Ген MUC16 расположен на коротком плече хромосомы 19 (локус 19p13.2), имеет длину ~179 Кб (килобаз) геномной ДНК,

кодирующей белок размером 22152 а.о. (аминокислотных остатка), молекулярная масса которого в среднем составляет 2,5-5 миллионов Да, при этом масса гликозилированного MUC16 оценивается в 20 миллионов Да (O'Brien et al., 2002).

MUC16 является гликопротеином I типа и состоит из трех основных доменов: внеклеточного N-концевого домена, тандемного повторяющегося домена (tándem repeat domain) и С-концевого домена (Рис.1). N-концевой домен состоит из 12068 а.о. и высоко О-гликозилирован. Главными сайтами O-гликозилирования являются регионы с высоким содержанием пролина, треонина и серина (PTS-богатые регионы) (Hattrup and Gendler, 2008). Тандемный повторяющийся домен состоит из более чем 60 повторов, каждый из которых длиной около 156 а.о. Недавно с помощью BLAST-анализа было показано, что основной частью каждого повтора (с 1 по 128 а.о.) является так называемый 'SEA домен', который содержит домены известные как sea urchin sperm, enterokinase и argin (Bork, Patthy, 1995; Felder et al., 2014; Maeda et al., 2004; O'Brien et al., 2002). В каждом 'SEA домене' присутствуют два консервативных цистеина в позициях 59 и 79, которые, как полагают, имеют структурное значение, формируя внутри- и межмолекулярные дисульфидные связи (O'Brien et al., 2001). SEA-домен имеет низкую плотность PTS-регионов и три потенциальных сайта N-гликозилирования (Marcos-Silva et al., 2014). SEA-домен фланкирован С-концевым линкером - областью длиной ~30 а.о. с высокой плотностью PTS-регионов. SEA-домен и С-концевой линкер вместе составляют один трандемный повтор (Marcos-Silva et al., 2014). Предполагают, что потенциально этот регион может взаимодействовать с другими гликозилированными белками и активировать различные сигнальные пути (Haridas et al., 2014).

Рис.1 Схематическое изображение структуры доменов MUC16 человека

С-концевой домен MUC16 имеет 284 а.о. и может быть подразделен на 3 основных региона: экстраклеточная часть, трансмембранный домен и цитоплазматический домен. Экстраклеточный участок содержит консервативный SEA домен, а также сайт (или сайты) для протеолитического расщепления MUC16 (Das et al., 2015a). Цитоплазматический домен MUC16 короткий (примерно 31-34 а.о.), содержит серин, треонин, тирозин, которые могут служить потенциальными сайтами для фосфорилирования. Недавно показано, что внутриклеточный, расположенный рядом с мембраной, положительно заряженный мотив RRRKK может взаимодействовать с белками, содержащими домен ERM (ezrin/radixin/moesin), а через них влиять на актиновый цитоскелет (Blalock et al., 2007).

До недавнего времени оставалась неясна локализация эпитопа СА125 на поверхности молекулы MUC16, и, следовательно, не была известна мишень антител OC125 и M11, применяемых для тестирования антигена CA125 у больных. В работе Bressam с соавторами выявлено, что данный эпитоп является прерывистым и зависит от

вторичной структуры участка тандемного повтора с 1 по 128 а.о. (Bressan et al., 2013).

6

Marcos-Silva с коллегами показали, что эпитоп CA125 локализован в SEA-доменах двух последовательных тандемных повторов (Marcos-Silva et al., 2015) и имеет очень стабильную конформацию, не денатурируя под воздействием SDS и мочевины, а также, что он преимущественно не гликозилирован, поскольку N- и О-гликозилирование существенно не влияет на связывание антител OC125 и M11 (Marcos-Silva et al., 2014). Выявлено, что О-гликозилирование MUC16, высоко экспрессированого на клетках эпителиального рака яичников, нарушено вследствие присоединения незрелых О-гликанов (Ricardo et al., 2014). Функции MUC16 в норме

MUC16 входит в состав гликопротеинов слизи - муцинов, покрывающих дыхательный, пищеварительный, урогенитальный тракты человека и слизистую оболочку глаза (Bottoni, Scatena, 2015). Муцины образуют непрерывный вязкий слой, толщина которого сильно варьирует даже в пределах одного органа. Муциновый слой обеспечивает гидрофильную среду и выполняет функцию смазки и селективного барьера, защищающего лежащие под ним эпителиальные клетки от неблагоприятных механических воздействий, препятствует проникновению в организм бактерий, вирусов и других патогенов (Железная, 1997). MUC16 относится к мембранно-ассоциированным муцинам, которые интегрированы в мембрану, представлены мономерами и могут участвовать в передаче сигналов (Jonckheere et al., 2013; Золотова, 2014).

MUC16 участвует в организации эпителиальной выстилки ряда органов и проводящих путей. В норме муцин 16 экспрессирован (Таб.1) на поверхности эпителиальных клеток, выстилающих конъюнктиву и роговицу глаза (Argueso et al., 2003), верхние дыхательные пути и плевру (Davies et al., 2007); брюшную полость (Zeimet et al., 1998) и перикард (Kabawat et al., 1983), на поверхности женских половых органов и проводящих путей (Kabawat et al., 1983). MUC16 был обнаружен в цервикальной слизи, в менструальной крови, околоплодных водах и женском молоке (Gipson, 2005; O'Brien et al.,

1986), в эпителии среднего уха (Kerschner, 2007). Dharma Rao с соавторами не обнаружили экспрессию MUC16 в здоровой ткани толстой кишки, прямой кишки, шейки матки, тонкого кишечника, печени, поджелудочной железы, селезенки, почек, кожи и яичников (Dharma Rao et al., 2010).

Основные функции MUC16 - обеспечение увлажнения и смазки эпителиальной выстилки (Blalock et al., 2007), защита клеточной поверхности от прикрепления и проникновения патогенов, участие в формировании плотных контактов между клетками (Gipson et al., 2014; Menon et al., 2016). Выявлено, что муцин 16 взаимодействует с галектинами Gal-1 и Gal-3 - Р-галактозид-связывающими секреторными протеинами. В норме на поверхности клеток эпителия слизистой оболочки глаза MUC16 и Gal-3 формируют физиологический барьер, регулирующий перемещение внеклеточных компонентов внутрь эпителиальных клеток, а также защищающий от проникновения вирусов и бактерий (Argueso et al., 2009). Предложенная модель предполагает, что растворимый Gal-3 формирует поливалентные комплексы, которые взаимодействуют с О-гликозилированными участками MUC16 и помогают стабилизации такого крупного муцина на поверхности клеток эпителия роговицы и конъюнктивы (Argueso et al., 2009). На примере Staphylococcus aureus продемонстрировано, что при подавлении экспрессии MUC16 на поверхности клеточной линии человеческого корнеально-лимбального эпителия (HCLE) повышается адгезия и проникновение данного патогена в клетки (Blalock et al., 2007). В то же время показано, что другие патогены, например Streptococcus pneumonae и аденовирус HAdV-37, способны отщеплять эктодомен MUC-16 перед инфицированием клеток эпителия роговицы (Govindarajan et al., 2012; Menon et al., 2016). Таблица 1.Экспрессия MUC16 в нормальных тканях

Эпителий/локализация Экспрессия в Увеличение экспрессии Ссылки

норме при заболевании

Роговица и конъюнктива глаза слезные железы + Атопический кератоконъюнктивит, глазной рубцовый пемфигоид, синдром Шегрена

Эпителий женского репродуктивного тракта: мюллеровы протоки, фаллопиевые трубы, эндометрий и эндоцервикс + Эндометриоз, миома матки, доброкачественные кисты яичников воспалительные заболевания малого таза

Пищеварительный тракт + Язва желудка; язвенный колит, перитонит

Печень Острые и хронические заболевания печени

Сердце, перикард + Сердечная недостаточность

Эпителий дыхательных путей + Воспаление дыхательных путей

Легкие, плевра + Туберкулез легких

Яичники — Рак яичников

Толстая кишка — Рак толстой кишки

Прямая кишка Колоректальная карцинома

Тонкий кишечник —

Поджелудочная железа Рак поджелудочной железы

Почки —

Селезенка —

Кожа —

Клиническое значение антигена СА125 как онкомаркера и его применение в диагностике

CA125 - наиболее хорошо изученный и широко используемый опухолевый маркер рака яичников. Он поступает в циркуляцию в результате протеолитического расщепления и слущивания с поверхности опухолевых клеток яичников N-концевого домена MUC16 (sMUC16). В сыворотке антигенный эпитоп CA125 выявляется с помощью иммуноферментного анализа. CA125 считается лучшим биомаркером эпителиального рака яичников серозного типа, демонстрируя повышенный уровень у 80% пациентов.

Однако применение его в качестве инструмента для скрининга в настоящее время ограничено в связи с низкой чувствительностью и специфичностью. Так, повышенный уровень CA125 (>35 ед/мл) в сыворотке наблюдается у 50% пациентов с ранней стадией рака яичников, что говорит о его низкой чувствительности при выявлении данной патологии до появления симптомов. При второй стадии заболевания повышение CA125 обнаруживается у 90% пациентов, при III и IV стадии более чем у 90% пациентов. В то же время у оставшейся части больных уровень CA125 не возрастает. Повышение уровня CA125 выявляется примерно у 1-2% здоровых индивидуумов (Bast et al., 1983), у 5% женщин, во время фолликулярной фазы менструального цикла (Masahashi et al., 1988), а также у лиц с циррозом, гепатитом (Devarbhavi et al., 2002), эндометриозом (Patton et al., 1986; Pittaway, Fayez, 1987), в первом триместре беременности (Haga et al., 1986a; Halila et al., 1986), при кистозе яичников (Pittaway, Fayez, 1987), при воспалительных заболеваниях малого таза (Halila et al., 1986; Niloff et al., 1984b). У онкологических пациентов отмечается повышение уровня СА125 в сыворотке при раке поджелудочной железы (63%), печени (40%), желчевыводящих путей (46%) (Haga et al., 1986b), толстой кишки (25%) (Omar et al., 1989), шейки матки (Borras et al., 1995) фаллопиевых труб и эндометрия (Duk et al., 1986; Niloff et al., 1984a) и у 89% пациентов с плевральными метастазами при раке груди (Kramer et al., 1997).

Использование CA125 одобрено для мониторинга прогрессирования заболевания и ответа на терапию пациентов с раком яичников (Bottoni, Scatena, 2015). Повышение

уровня СА125 в сыворотке крови онкологических больных говорит о прогрессировании рака яичника приблизительно в 90% случаев. Нарастание концентрации СА125 в плазме у прооперированных пациентов в среднем на 3 месяца опережает появление рецидива основного заболевания (Jacobs, Bast, 1989). Наоборот, в случае падения концентрации СА125 можно предположить положительный эффект проводимой терапии и регресс заболевания (Rustin et al., 1996). Особо важное прогностическое значение приобретает оценка уровня концентрации СА125 у женщин в постменопаузе. Длительный мониторинг СА125 показал, что оценка уровня данного антигена позволяет выявить рак яичника с чувствительностью 91% и специфичностью 94,5% (Felder et al., 2014). Роль MUC16 в "ускользании" от противоопухолевого иммунного ответа

Клетки опухоли используют адгезивные и анти-адгезивные свойства MUC16 для того, чтобы избежать распознавания и уничтожения со стороны иммунной системы. Показана способность MUC16 с помощью разных механизмов ингибировать цитолитическое действие натуральных киллеров человека (Gubbels et al., 2010; Patankar et al., 2005). Инкубация NK-клеток здоровых доноров с sMUC16 приводит к 40-70% понижению экспрессии рецептора антитело-зависимой цитотоксичности CD 16 и, таким образом, снижает способность натуральных киллеров к лизированию опухолевых клеток мишеней. Также показано, что экспрессия такого крупного и высокогликозилированного муцина как MUC16 на поверхности опухолевых клеток создает стерическое препятствие, не давая NK-клетке подойти на достаточное расстояние, чтобы связаться с поверхностными рецепторами, сформировать иммунный синапс и получить сигнал для атаки (Gubbels et al., 2010). Полученнные данные показывают, что NK-клетки в качестве мишени выбирают раковые клетки яичника с низкой плотностью экспрессии MUC16 на мембране. Поэтому in vivo возможно идет селекция в направлении раковых клеток с высокой плотностью экспрессии MUC16. Тогда выжившие опухолевые клетки будут

иметь преимущество не только при ускользании от иммунного надзора, но и при адгезии к мезотелиальным клеткам брюшной полости (Gubbels et al., 2010).

Еще одним важным свойством является способность MUC16 взаимодействовать с поверхностью иммунных клеток посредством лектина I-типа Siglec-9. Анализ иммунных клеток периферической крови и перитонеальной жидкости пациентов с раком яичника выявил, что свободный и мембраносвязанный MUC16 связывается с NK-клетками, В-клетками и моноцитами. Оказалось, что Siglec-9 присутствует на поверхности 30-40% CD 16pos/CD56dim NK-клеток, 20-30% В-клеток и >95% моноцитов. Siglec-9 является ингибирующим рецептором, который индуцирует иммунную супрессию, ослабляя активность NK-клеток (Avril et al., 2004), и запуская в моноцитах секрецию иммуносупрессивного цитокина IL-10 (Ando et al., 2008). Таким образом, согласно представленным данным, MUC16 действует как супрессор противоопухолего иммунного ответа.

Роль MUC16 в онкогенезе и метастазировании

Механизмы, с помощью которых MUC16 усиливает развитие опухоли и появление метастазов, сейчас активно исследуются не только при раке яичников, но и при таких онкологических заболеваниях, как рак груди и поджелудочной железы. Вызывает интерес факт, что при анализе 11 различных типов опухоли выявлено, что MUC16 является одним из трех наиболее часто мутирующих генов (Kim et al., 2013).

К настоящему времени в нескольких исследованиях продемонстрировано, что С-концевой домен MUC16 усиливает пролиферацию, миграцию, инвазию клеточных линий рака яичников, молочной и поджелудочной железы. Первое исследование, касающееся усиления онкогенных свойств муцином MUC16, опубликовано в 2011 году (Theriault et al., 2011). Нокдаун гена MUC 16 в клеточной линии рака яичника OVCAR3 снижает онкогенность, что выражается в снижении числа колоний, формирующихся в мягком агаре, а также в снижении роста опухоли in vivo. Кроме того, в данной работе показано,

что принудительная экспрессия С-концевого домена в клетках аденокарциномы яичников БКОУ-3 усиливает формирование колоний в мягком агаре и рост опухоли у бестимусных мышей. Внутрибрюшинное введение опухолевых клеток, экспрессирующих С-концевой домен, значительно снижает выживаемость бестимусных мышей по сравнению с контролем (ТЬепаик Й а1., 2011). Более поздние исследования, используя механизм РНК-интерференции для подавления экспрессии МИС16, также продемонстрировали подобные результаты - снижение пролиферации клеточных линий рака молочной железы и роста опухоли т у1уо (ЬаквЬшапап е! а1., 2012), а также (ЯетаГ^ е! а1., 2012) снижение способности к миграции и инвазии клеточных линий рака молочной железы и рака яичника.

В двух недавних исследованиях (йаппакоигоБ е! а1., 2015Ь; Яао е! а1., 2015) подтверждены трансформирующие свойства С-концевого домена МИС16. Стабильная экспрессия лентивирусных векторов, содержащих С-концевые домены МИС16 различной длины (284 а.о. (йаппакоигоБ е! а1., 2015Ь), а также 114 и 344 а.о. (Яао е! а1., 2015)), в линии клеток мышиных фибробластов №Н3Т3 значительно усиливает образование колоний в мягком агаре, а также формирование опухолевых узлов в подкожной клетчатке бестимусных мышей. В то же время данные эффекты отсутствуют, при использовании конструкции вектора, не содержащего цитоплазматический домен (йаппакоигоБ е! а1., 2015Ь). В совокупности данные указывают на то, что экспрессия С-концевого домена МиС16 является ключевым звеном для усиления онкогенных свойств опухоли.

Изучение молекулярных механизмов влияния МИС16 на онкогенный потенциал опухоли выявило, что домены МИС16 вовлечены в различные взаимодействия с поверхностными молекулами, а также в процессы сигнальной трансдукции (БаБ е! а1., 2015Ь; ОиЬЬе^ е! а1., 2010; ЬаквЬшапап е! а1., 2012; Майе е! а1., 2014; Мепоп е! а1., 2015; БЬиЫа е! а1., 2015). Важным механизмом метастазирования раковых клеток, экспрессирующих МИС16, является его способность взаимодействовать с мезотелином

(Rump et al., 2004), Связывание двух гликопротеинов - MUC16 и мезотелина - является высокоаффинным и осуществляется через N-гликозилированные участки MUC16 (Gubbels et al., 2006). В свою очередь для мезотелина показано, что его участок N-концевого домена внеклеточного региона с 296 по 359 а.о. является достаточным для связывания MUC16 (Kaneko et al., 2009). Важно отметить, что мезотелин также как MUC16 высоко экспрессирован на раковых клетках яичника, поэтому взаимодействие этих молекул способствует формированию агрегатов раковых клеток (Gubbels et al., 2006). Кроме того, мезотелин выстилает брюшную полость, и тем самым способствует метастазированию агрегатов раковых клеток яичника (Shield et al., 2009).

Chen с соавторами (Chen et al., 2013) исследовали молекулярный механизм, который при взаимодействии MUC16 и мезотелина приводит к метастазированию. На модели раковых клеток поджелудочной железы выявлено, что взаимодействие человеческого рекомбенантного мезотелина и мембранно-связанного MUC16 приводит к селективной индукции в раковых клетках матриксной металлопротеиназы ММР-7. Повышение экспрессии мРНК и белка ММР-7 происходит через фосфорилирование митоген-активированной протеинкиназы p68 и приводит к увеличению подвижности клеток карциномы поджелудочной железы и усилению их инвазивных свойств. Эти данные имеют клиническое подтверждение: Einama с соавторами проводили оценку уровня MUC16 и мезотелина в гистологических срезах парафиновых блоков опухолевой ткани у пациентов с аденокарциномой протоков поджелудочной железы. У пациентов с ко-экспрессией MUC16 и мезотелина существенно чаще выявляли случаи метастазов в печени, период безрецидивной выживаемости составлял 10 месяцев, а у пациентов без ко-экспрессии - 16 месяцев (Einama et al., 2011). Che^ коллегами в другой своей работе (Chen et al., 2012) показали также, что MUC16 эффективно связывается с Е- и L-селектинами, экспрессированными на поверхности эндотелиальных клеток и на поверхности лимфоцитов, соответственно. Связывание происходит через

сиалофукозилированные структуры N- и О-гликанов MUC16 и опосредует усиление метастатических свойств клеток, экспрессирующих MUC16.

Lakshmanan с соавторами выявлено, что потенциальный механизм индукции пролиферации клеток опухоли молочной железы осуществляется через сигнальный белок и активатор транскрипции STAT3 (Lakshmanan et al., 2012). MUC16 взаимодействует с нерецепторной тирозинкиназой JAK2 (Janus kinase) через ее домен ERM, фосфорилирует STAT3, в результате чего STAT3 димеризуется, транслоцируется в ядро, взаимодействует с транскрипционным фактором c-Jun и индуцирует транскрипцию циклина D1. Кроме того, MUC16 ингибирует апоптоз в клетках опухоли молочной железы через рецептор-зависимый (внешний) сигнальный путь. MUC16 снижает экспрессию лиганда рецептора смерти - TRIAL (TNF-related apoptosis-inducing ligand) через регуляторный фактор интерферонов-1 (Lakshmanan et al., 2012).

Matte с соавторами обнаружили способность муцина MUC16 подавлять апоптоз, индуцированный воздействием TRIAL в клетках эпителиального рака яичников (Matte et al., 2014). TRIAL является перспективным кандидатом для противоопухолевой терапии, поскольку способен к селективной индукции апоптоза в раковых клетках. Показано, что MUC16 снижает экспрессию рецептора TRIAL R2 (Death receptor 5) и формирование апоптосом (так называемого - DISC - death-inducing signaling complex — «сигнальный комплекс, индуцирующий смерть»). При этом MUC16 повышает экспрессию внутриклеточного ингибитора каспазы-8 - cFLIP как на уровне мРНК, так и на уровне белка (Matte et al., 2014). Оказалось, что экспрессии короткого С-концевого домена MUC16 в клетках линии SCOV3 достаточно для ослабления апоптоза и сигналов, индуцированных TRIAL (Matte et al., 2014).

Исследуя метаболические изменения, индуцированные MUC16 в раковых клетках поджелудочной железы, Shukla с коллегами (Shukla et al., 2015) обнаружили, что при подавлении экспрессии MUC16 снижается поглощение глюкозы и секреция лактата

раковыми клетками, снижается уровень мРНК и белка переносчика глюкозы GLUT1, а также экспрессия ключевого фермента гликолиза - гексокиназы II, уровень которого повышен при разных типах опухоли, а его системная делеция приводит к снижению роста опухоли (Patra et al., 2013). Также авторы оценили возможное влияние MUC16 на координирующий сигнальный путь PI3K/AKT/mTOR, который регулирует клеточный метаболизм, включая гликолиз и различные биосинтетические процессы в клетке, а также играет важную роль в прогрессировании различных типов опухоли (Duvel et al., 2010; Shimobayashi, Hall, 2014). Оказалось, что в клетках при подавлении экспрессии MUC16 снижается фосфорилирование Akt и активность киназы mTOR. Кроме того, для протоонкогена c-MIC показано снижение уровня мРНК и белка, а для Cyclin D1, экспрессия которого координирована с c-MIC при инициации и прогрессировании опухоли (Liao et al., 2007), выявлено снижение экспрессии белка (Shukla et al., 2015).

В течение 2015 года группа американских исследователей под руководством Barta S.K. опубликовала две оригинальные работы (Das et al., 2015a; Das et al., 2015b), посвященные изучению роли С-концевого домена MUC16 в онкогенезе. Согласно их данным, важная роль в усилении формирования клеточных агрегатов принадлежит проксимальному участку С-концевого домена MUC16, так называемому, MUC-Cter (17 кДа). Впервые экспериментально показано (Das et al., 2015a), что MUC-Cter появляется в результате расщепления экстраклеточной части С-концевого домена на расстоянии 12 а.о. (PLTGNSDLPFWA) от мембраны, причем этот участок отличается от предсказанных ранее (Macao et al., 2006; O'Brien et al., 2001). Выявлено также, что расщепление происходит независимо от действия внеклеточных протеаз (нейтрофильной эластазы и MMP-7) и внутриклеточных стимулов (например, фосфорилорования). В то же время продемонстрировано, что расщепление MUC16 является pH-зависимым и происходит в кислой среде аппарата Гольджи и транс-сети аппарата Гольджи при продвижении MUC16 по секреторному пути в направлении плазматической мембраны (Das et al., 2015a).

Авторы считают, что существует четыре возможных результата такого расщепления: если расщепляется не весь MUC16, то полноразмерный муцин экспонируется на мембране; если два фрагмента остаются связаны друг с другом, то формируется гетеродимер MUC16, если два фрагмента не связаны между собой, то С-концевой домен MUC-Cter остается на поверхности клетки, а N-концевой домен секретируется (sMUC16). Во второй работе авторы продемонстрировали, что экспрессия С-концевого домена MUC16 (последние 114 С-концевых аминокислот) в линиях клеток поджелудочной железы MiaPaCa-2 и T3M4 усиливает их пролиферацию и миграцию, в то время как подавление экспрессии MUC16 ингибирует эти процессы (Das et al., 2015b). При этом не только для клеток поджелудочной железы MiaPaCa-2 и T3M4, но и для линии клеток HeLa, при использовании субклеточного фракционирования контрольных и трансфецированных клеток, в ответ на экспрессию MUC-Cter наблюдалось увеличение уровня белка JAK2 в ядре (Das et al., 2015b). Авторам удалось показать колокализацию MUC16-Cter и JAK2 в ядре. Предполагают, что взаимодействие между ними происходит через цитоплазматический полиосновной мотив MUC16 (RRRKK) и ERM-домен JAK2 (Lakshmanan et al., 2012). Также выявлено, что повышение уровня JAK2 в ядре сопровождается повышением фосфорилирования гистона H3 и уровня белков LMO2 и NANOG. Как показано ранее на эмбриональных (Dawson et al., 2009) и гемопоэтических (Griffiths et al., 2011) стволовых клетках, JAK2 фосфорилирует тирозин в положении 41 гистона 3, что приводит к интерференции связывания белка гетерохроматина 1а с промоторами генов LMO2 и NANOG и повышению их экспрессии. Белки LMO2 и NANOG в течение онкогенеза способны индуцировать у клеток свойства, подобные стволовым клеткам (Dawson et al., 2009; Griffiths et al., 2011).

В работе Giannakouros с соавторами (Giannakouros et al., 2015a) показано, что подавление экспрессии MUC16 в клетках ингибирует формирование клеточных агрегатов и индуцирует перемещение Р-катенина из цитоплазматической мембраны в цитоплазму.

При этом экспрессия гена Р-катенина снижается. В то же время, экспрессия С-концевого домена MUC16 в клетках SKOV3 приводит к усилению агрегации клеток и сопровождается изменением локализации и экспрессии Е-кадгерина и Р-катенина. Обнаружено, что С-концевой домен MUC16 ингибирует фосфорилирование и деградацию Р-катенина, в результате чего уровень его в клетках повышается. Эти данные указывают, что MUC16 усиливает агрегацию клеток за счет ингибирования деградации Р-катенина.

Подобный подход для выявления функций и механизма действия MUC16 использован в недавней публикации Liu с коллегами (Liu et al., 2016). Авторы отмечают, что MUC16 в С-концевом домене имеет ту же структурную особенность, что и MUC1, а именно мотив SXXXXXSSX (Yamamoto et al., 1997), который является ключевым для связывания MUC1 с Р-катенином, последующей транслокации Р-катенина в ядро и активации молекулярных процессов эпителиально-мезенхимального перехода (Li et al., 2001; Wen et al., 2003; Yamamoto et al., 1997). Для подтверждения своей гипотезы о взаимодействии MUC16 и Р-катенина авторы использовали С-концевой фрагмент MUC16 длиной 200 а.о. (MUC16Q, который включает в себя данный мотив. В результате показано, что ЫиОбС способен взаимодействовать с активатором транскрипционных факторов - Р-катенином через С-концевой транс-активационный домен последнего. Выявлено, что в клетках линии аденокарциномы яичника человека SKOV-3, трансфецированных MUC16С, усиливается накопление в ядре Р-катенина. Это приводит к запуску взаимодействия Р-катенина с семейством транскриационных факторов TCF/LEF (T-cell factor/lymphoid enhancing factor), активации транскрипции генов сигнального пути Wnt - Cyclin D1, Axin2, c-Myc, Snail, Survivin и усилению клеточной пролиферации. Также показано, что в клетках линии SKOV-3, трансфецированных MUC16Q уровень экспрессии мРНК и белков нескольких маркеров эпителиально-мезенхимального перехода, таких как N-кадгерин, виментин, фибронектин возрастает, а Е-кадгерина, участвующего в образовании плотных контактов между эпителиоцитами, снижается.

Уровень матриксных металлопротеиназ - ММР-2 и ММР-9, значимых маркеров клеточной миграции и метастазирования, также повышается. Анализ способности клеток к миграции и инвазии выявил усиление этих свойств. При этом нокдаун гена MUC16 в SKBR-3 - линии клеток опухоли молочной железы с изначально высоким уровнем эндогенного MUC16, приводит к изменениям прямо противоположным, описанным выше для клеток SCOV-3: уровень экспрессии мРНК и белков Cyclin D1, Axin2, c-Myc, Snail, Survivin, N-кадгерина, виментина и фибронектина снижается, в то время как уровень Е-кадгерина повышается (Liu et al., 2016). Авторы также продемонстрировали, что повышенная экспрессия MUC16 усиливает способность клеток линии SKOV-3 к метастазированию in vivo. Таким образом, сегодня становится очевидно, что муцин 16 вовлечен в механизмы, определяющие рост опухоли и ее метастазирование, посредством взаимодействия с молекулами, экспрессированными на поверхности других клеток, а также влияя на процессы сигнальной трансдукции. Заключение

Муцин 16 и антигенная детерминанта CA125 являются объектами интенсивных исследований уже более 30 лет. Если ранее интерес к муцину 16 определялся тем, что он содержит антиген CA125, который является прогностическим онкомаркером, то в настоящее время стало ясно, что MUC16 играет важную роль в онкогенезе. Понимание его роли в молекулярных механизмах роста и метастазирования опухоли и ее ускользания от иммунного ответа позволит реализовать потенциал MUC16 как возможного диагностического маркера и терапевтической мишени.

Список литературы

1. Железная Л.А. Муцины - новый подкласс гликопротеинов. Успехи биол. химии. 1997. T. 37. С. 115-146.

2. Золотова Н.А. Структурная и функциональная характеристика муцинов. Клиническая и экспериментальная морфология. 2014. №. 1. С. 66-72.

3. Ando M., Tu W., Nishijima K., Lijima S. Siglec-9 enhances IL-10 production in macrophages via tyrosine-based motifs. Biochem Biophys Res Commun. 2008. V. 369. N. 3. P. 878-883.

4. Argueso P., Guzman-Aranguez A., Mantelli F., et al. Association of cell surface mucins with galectin-3 contributes to the ocular surface epithelial barrier. J Biol Chem. 2009. V. 284. N. 34. P. 23037-23045.

5. Argueso P., Spurr-Michaud S., Russo C.L., et al. MUC16 mucin is expressed by the human ocular surface epithelia and carries the H185 carbohydrate epitope. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2003. V. 44. N. 6. P. 2487-2495.

6. Avril T., Floyd H., Lopez F., et al. The membrane-proximal immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif is critical for the inhibitory signaling mediated by Siglecs-7 and -9, CD33-related Siglecs expressed on human monocytes and NK cells. J Immunol. 2004. V. 173. N. 11. P. 6841-6849.

7. Bast R.C., Feeney M., Lazarus H., et al. Reactivity of a monoclonal antibody with human ovarian carcinoma. J Clin Invest. 1981. V. 68. N. 5. P. 1331-1337.

8. Bast R.C., Klug T.L., St John E., et al. A radioimmunoassay using a monoclonal antibody to monitor the course of epithelial ovarian cancer. N Engl J Med. 1983. V. 309. N. 15. P. 883887.

9. Bast R.C., Spriggs D.R. More than a biomarker: CA125 may contribute to ovarian cancer pathogenesis. Gynecol Oncol. 2011. V. 121. N. 3. P. 429-430.

10. Blalock T.D., Spurr-Michaud S.J., Tisdale A.S., et al. Functions of MUC16 in corneal epithelial cells. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2007. V. 48. N. 10. P. 4509-4518.

11. Bork P., Patthy L. The SEA module: a new extracellular domain associated with O-glycosylation. Protein Sci. 1995. V. 4. N. 7. P. 1421-1425.

12. Borras G., Molina R., Xercavins J., et al. Tumor antigens CA 19.9, CA 125, and CEA in carcinoma of the uterine cervix. Gynecol Oncol. 1995. V. 57. N. 2. P. 205-211.

13. Bottoni P., Scatena R The Role of CA 125 as Tumor Marker: Biochemical and Clinical Aspects. Adv Exp Med Biol. 2015. V. 867. N. P. 229-244.

14. Bressan A., Bozzo F., Maggi C.A., et al. OC125, M11 and OV197 epitopes are not uniformly distributed in the tandem-repeat region of CA125 and require the entire SEA domain. Dis Markers. 2013. V. 34. N. 4. P. 257-267.

15. Caffery B., Joyce E., Heynen M.L., et al. MUC16 expression in Sjogren's syndrome, KCS, and control subjects. Mol Vis. 2008. V. 14. N. P. 2547-2555.

16. Chen S.H., Dallas M.R., Balzer E.M., et al. Mucin 16 is a functional selectin ligand on pancreatic cancer cells. Faseb J. 2012. V. 26. N. 3. P. 1349-1359.

17. Chen S.H., Hung W.C., Wang P., et al. Mesothelin binding to CA125/MUC16 promotes pancreatic cancer cell motility and invasion via MMP-7 activation. Sci Rep. 2013. V. 3. N. Article ID: 1870.

18. Comamala M., Pinard M., Theriault C., et al. Downregulation of cell surface CA125/MUC16 induces epithelial-to-mesenchymal transition and restores EGFR signalling in NIH: OVCAR3 ovarian carcinoma cells. Br J Cancer. 2011. V. 104. N. 6. P. 989-999.

19. Das S., Batra S.K.. Understanding the Unique Attributes of MUC16 (CA125): Potential Implications in Targeted Therapy. Cancer Res. 2015. V. 75. N. 22. P. 4669-4674.

20. Das S., Majhi P.D., Al-Mugotir M.H., et al. Membrane proximal ectodomain cleavage of MUC16 occurs in the acidifying Golgi/post-Golgi compartments. Sci Rep. 2015a. V. 5. N. Article ID: 9759.

21. Das S., Rachagani S., Torres-Gonzalez M.P., et al. Carboxyl-terminal domain of MUC16 imparts tumorigenic and metastatic functions through nuclear translocation of JAK2 to pancreatic cancer cells. Oncotarget. 2015b. V. 6. N. 8. P. 5772-5787.

22. Davies J.R., Kirkham S., Svitacheva N., et al. MUC16 is produced in tracheal surface epithelium and submucosal glands and is present in secretions from normal human airway and cultured bronchial epithelial cells. Int J Biochem Cell Biol. 2007. V. 39. N. 10. P. 1943-1954.

23. Dawson M.A., Bannister A.J., Gottgens B., et al. JAK2 phosphorylates histone H3Y41 and excludes HP1alpha from chromatin. Nature. 2009. V. 461. N. 7265. P. 819-822.

24. Devarbhavi H., Kaese D., Williams A.W., et al. Cancer antigen 125 in patients with chronic liver disease. Mayo Clin Proc. 2002. V. 77. N. 6. P. 538-541.

25. Dharma Rao T., Park K.J., Smith-Jones P., et al. Novel monoclonal antibodies against the proximal (carboxy-terminal) portions of MUC16. Appl Immunohistochem Mol Morphol.

2010. V. 18. N. 5. P. 462-472.

26. Dogru M., Matsumoto Y., Okada N., et al. Alterations of the ocular surface epithelial MUC16 and goblet cell MUC5AC in patients with atopic keratoconjunctivitis. Allergy. 2008. V. 63. N. 10. P. 1324-1334.

27. Duk J.M., Aalders J.G., Fleuren G.J., et al. CA 125: a useful marker in endometrial carcinoma. Am J Obstet Gynecol. 1986. V. 155. N. 5. P. 1097-1102.

28. Duvel K., Yecies J.L., Menon S., et al. Activation of a metabolic gene regulatory network downstream of mTOR complex 1. Mol Cell. 2010. V. 39. N. 2. P. 171-183.

29. Einama T., Kamachi H., Nishihara H., et al. Co-expression of mesothelin and CA125 correlates with unfavorable patient outcome in pancreatic ductal adenocarcinoma. Pancreas.

2011. V. 40. N. 8. P. 1276-1282.

30. Felder M., Kapur A., Gonzalez-Bosquet J., et al. MUC16 (CA125): tumor biomarker to cancer therapy, a work in progress. Mol Cancer. 2014. V. 13. N. P. 129.

31. Giannakouros P., Comamala M., Matte I., et al. MUC16 mucin (CA125) regulates the formation of multicellular aggregates by altering beta-catenin signaling. Am J Cancer Res. 2015a. V. 5. N. 1. P. 219-230.

32. Giannakouros P., Matte I., Rancourt C., et al. Transformation of NIH3T3 mouse fibroblast cells by MUC16 mucin (CA125) is driven by its cytoplasmic tail. Int J Oncol. 2015b. V. 46. N. 1. P. 91-98.

33. Gipson I.K. Human endocervical mucins. Ernst Schering Res Found Workshop. 2005. V. N. 52. P. 219-244.

34. Gipson I.K., Spurr-Michaud S., Tisdale A., et al. Comparison of the transmembrane mucins MUC1 and MUC16 in epithelial barrier function. PLoS One. 2014. V. 9. N. 6. P. e100393.

35. Govindarajan B., Menon B.B., Spurr-Michaud S., et al. A metalloproteinase secreted by Streptococcus pneumoniae removes membrane mucin MUC16 from the epithelial glycocalyx barrier. PLoS One. 2012. V. 7. N. 3. P. e32418.

36. Griffiths D.S., Li J., Dawson M.A., et al. LIF-independent JAK signalling to chromatin in embryonic stem cells uncovered from an adult stem cell disease. Nat Cell Biol. 2011. V. 13. N. 1.P. 13-21.

37. Gronowitz E., Pitkanen S., Kjellmer I., et al. Association between serum oncofetal antigens CA 19-9 and CA 125 and clinical status in patients with cystic fibrosis. Acta Paediatr. 2003. V. 92. N. 11. P. 1267-1271.

38. Gubbels J.A., Belisle J., OndaM., et al. Mesothelin-MUC16 binding is a high affinity, N-glycan dependent interaction that facilitates peritoneal metastasis of ovarian tumors. Mol Cancer. 2006. V. 5. N. 1. P. 50.

39. Gubbels J.A., Felder M., Horibata S., et al. MUC16 provides immune protection by inhibiting synapse formation between NK and ovarian tumor cells. Mol Cancer. 2010. V. 9. N. P. 11.

40. Haga Y., Sakamoto K., Egami H., et al. Evaluation of serum CA125 values in healthy individuals and pregnant women. Am J Med Sci. 1986a. V. 292. N. 1. P. 25-29.

41. Haga Y., Sakamoto K., Egami H., et al. Clinical significance of serum CA125 values in patients with cancers of the digestive system. Am J Med Sci. 1986b. V. 292. N. 1. P. 30-34.

42. Halila H., Stenman U.H., Seppala M. Ovarian cancer antigen CA 125 levels in pelvic inflammatory disease and pregnancy. Cancer. 1986. V. 57. N. 7. P. 1327-1329.

43. Haridas D., Ponnusamy M.P., Chugh S., et al. MUC16: molecular analysis and its functional implications in benign and malignant conditions. Faseb J. 2014. V. 28. N. 10. P. 4183-4199.

44. Hattrup C.L., Gendler S.J. Structure and function of the cell surface (tethered) mucins. Annu Rev Physiol. 2008. V. 70. N. P. 431-457.

45. He C.Z., Zhang K.H., Li Q, et al. Combined use of AFP, CEA, CA125 and CAl9-9 improves the sensitivity for the diagnosis of gastric cancer. BMC Gastroenterol. 2013. V. 13. N. P. 87.

46. Jacobs I., Bast R.C. The CA 125 tumour-associated antigen: a review of the literature. Hum Reprod. 1989. V. 4. N. 1. P. 1-12.

47. Jager K., Wu G., Sel S., et al. MUC16 in the lacrimal apparatus. Histochem Cell Biol. 2007. V. 127. N. 4. P. 433-438.

48. Jonckheere N., Skrypek N., Frenois F., et al. Membrane-bound mucin modular domains: from structure to function. Biochimie. 2013. V. 95. N. 6. P. 1077-1086.

49. Kabawat S.E., Bast R.C., Bhan A.K., et al. Tissue distribution of a coelomic-epithelium-related antigen recognized by the monoclonal antibody OC125. Int J Gynecol Pathol. 1983. V. 2. N. 3. P. 275-285.

50. Kaneko O., Gong L., Zhang J., et al. A binding domain on mesothelin for CA125/MUC16. J Biol Chem. 2009. V. 284. N. 6. P. 3739-3749.

51. Kerschner J.E. Mucin gene expression in human middle ear epithelium. Laryngoscope. 2007. V. 117. N. 9. P. 1666-1676.

52. Kim N., Hong Y., Kwon D., et al. Somatic mutaome profile in human cancer tissues. Genomics Inform. 2013. V. 11. N. 4. P. 239-244.

53. Kramer S., Jager W., Lang N. CA 125 is an indicator for pleural metastases in breast cancer. Anticancer Res. 1997. V. 17. N. 4B. P. 2967-2970.

54. Lakshmanan I., Ponnusamy M.P., Das S., et al. MUC16 induced rapid G2/M transition via interactions with JAK2 for increased proliferation and anti-apoptosis in breast cancer cells. Oncogene. 2012. V. 31. N. 7. P. 805-817.

55. Li Y., Ren J., Yu W., et al. The epidermal growth factor receptor regulates interaction of the human DF3/MUC1 carcinoma antigen with c-Src and beta-catenin. J Biol Chem. 2001. V. 276. N. 38. P. 35239-35242.

56. Liao D.J., Thakur A., Wu J., et al. Perspectives on c-Myc, Cyclin D1, and their interaction in cancer formation, progression, and response to chemotherapy. Crit Rev Oncog. 2007. V. 13. N. 2. P. 93-158.

57. Liu Q., Cheng Z., Luo L., et al. C-terminus of MUC16 activates Wnt signaling pathway through its interaction with beta-catenin to promote tumorigenesis and metastasis. Oncotarget. 2016. V. N. P.

58. Macao B., Johansson D.G., Hansson G.C., et al. Autoproteolysis coupled to protein folding in the SEA domain of the membrane-bound MUC1 mucin. Nat Struct Mol Biol. 2006. V. 13. N. 1. P. 71-76.

59. Maeda T., Inoue M., Koshiba S., et al. Solution structure of the SEA domain from the murine homologue of ovarian cancer antigen CA125 (MUC16). J Biol Chem. 2004. V. 279. N. 13. P.13174-13182.

60. Mai P.L., Wentzensen N., Greene M.H. Challenges related to developing serum-based biomarkers for early ovarian cancer detection. Cancer Prev Res (Phila). 2011. V. 4. N. 3. P. 303306.

61. Mantelli F., Argueso P. Functions of ocular surface mucins in health and disease. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2008. V. 8. N. 5. P. 477-483.

62. Marcos-Silva L., Narimatsu Y., Halim A., et al. Characterization of binding epitopes of CA125 monoclonal antibodies. J Proteome Res. 2014. V. 13. N. 7. P. 3349-3359.

63. Marcos-Silva L., Ricardo S., Chen K., et al. A novel monoclonal antibody to a defined peptide epitope in MUC16. Glycobiology. 2015. V. 25. N. 11. P. 1172-1182.

64. Masahashi T., Matsuzawa K., Ohsawa M., et al. Serum CA 125 levels in patients with endometriosis: changes in CA 125 levels during menstruation. Obstet Gynecol. 1988. V. 72. N. 3 Pt 1. P. 328-331.

65. Matte I., Lane D., Boivin M., et al. MUC16 mucin (CA125) attenuates TRAIL-induced apoptosis by decreasing TRAIL receptor R2 expression and increasing c-FLIP expression. BMC Cancer. 2014. V. 14. N. P. 234.

66. Menon B.B., Kaiser-Marko C., Spurr-Michaud S., et al. Suppression of Toll-like receptor-mediated innate immune responses at the ocular surface by the membrane-associated mucins MUC1 and MUC16. Mucosal Immunol. 2015. V. 8. N. 5. P. 1000-1008.

67. Menon B.B., Zhou X., Spurr-Michaud S., et al. Epidemic Keratoconjunctivitis-Causing Adenoviruses Induce MUC16 Ectodomain Release To Infect Ocular Surface Epithelial Cells. mSphere. 2016. V. 1. N. 1. P.

68. Miralles C., Orea M., Espana P., et al. Cancer antigen 125 associated with multiple benign and malignant pathologies. Ann Surg Oncol. 2003. V. 10. N. 2. P. 150-154.

69. Molina R., Filella X., Bruix J., et al. Cancer antigen 125 in serum and ascitic fluid of patients with liver diseases. Clin Chem. 1991. V. 37. N. 8. P. 1379-1383.

70. Niloff J.M., Klug T.L., Schaetzl E., et al. Elevation of serum CA125 in carcinomas of the fallopian tube, endometrium, and endocervix. Am J Obstet Gynecol. 1984a. V. 148. N. 8. P. 1057-1058.

71. Niloff J.M., Knapp R.C., Schaetzl E., et al. CA125 antigen levels in obstetric and gynecologic patients. Obstet Gynecol. 1984b. V. 64. N. 5. P. 703-707.

72. O'Brien T.J., Beard J.B., Underwood L.J., et al. The CA 125 gene: an extracellular superstructure dominated by repeat sequences. Tumour Biol. 2001. V. 22. N. 6. P. 348-366.

73. O'Brien T.J., Beard J.B., Underwood L.J., et al. The CA 125 gene: a newly discovered extension of the glycosylated N-terminal domain doubles the size of this extracellular superstructure. Tumour Biol. 2002. V. 23. N. 3. P. 154-169.

74. O'Brien T.J., Hardin J.W., Bannon G.A., et al. CA 125 antigen in human amniotic fluid and fetal membranes. Am J Obstet Gynecol. 1986. V. 155. N. 1. P. 50-55.

75. Omar Y.T., al-Naqeeb N., el Nas S.A., et al. Serum levels of CA 125 in patients with gastrointestinal cancers. Tumour Biol. 1989. V. 10. N. 6. P. 316-323.

76. Patankar M.S., Jing Y., Morrison J.C., et al. Potent suppression of natural killer cell response mediated by the ovarian tumor marker CA125. Gynecol Oncol. 2005. V. 99. N. 3. P. 704-713.

77. Patra K.C., Wang Q., Bhaskar P.T., et al. Hexokinase 2 is required for tumor initiation and maintenance and its systemic deletion is therapeutic in mouse models of cancer. Cancer Cell. 2013. V. 24. N. 2. P. 213-228.

78. Patton P.E., Field C.S., Harms R.W., et al. CA-125 levels in endometriosis. Fertil Steril. 1986. V. 45. N. 6. P. 770-773.

79. Pittaway D.E., Fayez J.A. Serum CA-125 antigen levels increase during menses. Am J Obstet Gynecol. 1987. V. 156. N. 1. P. 75-76.

80. Rao T.D., Tian H., Ma X., et al. Expression of the Carboxy-Terminal Portion of MUC16/CA125 Induces Transformation and Tumor Invasion. PLoS One. 2015. V. 10. N. 5. P. e0126633.

81. Reinartz S., Failer S., Schuell T., et al. CA125 (MUC16) gene silencing suppresses growth properties of ovarian and breast cancer cells. Eur J Cancer. 2012. V. 48. N. 10. P. 15581569.

82. Ricardo S., Marcos-Silva L., Pereira D., et al. Detection of glyco-mucin profiles improves specificity of MUC16 and MUC1 biomarkers in ovarian serous tumours. Mol Oncol. 2014. V. 9. N. 2. P. 503-512.

83. Rump A., Morikawa Y., Tanaka M., et al. Binding of ovarian cancer antigen CA125/MUC16 to mesothelin mediates cell adhesion. J Biol Chem. 2004. V. 279. N. 10. P. 9190-9198.

84. Rustin G.J., Nelstrop A.E., McClean P., et al. Defining response of ovarian carcinoma to initial chemotherapy according to serum CA 125. J Clin Oncol. 1996. V. 14. N. 5. P. 1545-1551.

85. Shield K., Ackland M.L., Ahmed N., et al. Multicellular spheroids in ovarian cancer metastases: Biology and pathology. Gynecol Oncol. 2009. V. 113. N. 1. P. 143-148.

86. Shimizu A., Hirono S., Tani M., et al. Coexpression of MUC16 and mesothelin is related to the invasion process in pancreatic ductal adenocarcinoma. Cancer Sci. 2012. V. 103. N. 4. P. 739-746.

87. Shimobayashi M., Hall M.N. Making new contacts: the mTOR network in metabolism and signalling crosstalk. Nat Rev Mol Cell Biol. 2014. V. 15. N. 3. P. 155-162.

88. Shukla S.K., Gunda V., Abrego J., et al. MUC16-mediated activation of mTOR and c-Myc reprograms pancreatic cancer metabolism. Oncotarget. 2015. V. 6. N. 22. P. 19118-19131.

89. Sikaris K.A. CA125--a test with a change of heart. Heart Lung Circ. 2011. V. 20. N. 10. P. 634-640.

90. StreppelM.M., Vincent A., Mukherjee R., et al. Mucin 16 (cancer antigen 125) expression in human tissues and cell lines and correlation with clinical outcome in adenocarcinomas of the pancreas, esophagus, stomach, and colon. Hum Pathol. 2012. V. 43. N. 10. P. 1755-1763.

91. Theriault C., Pinard M., Comamala M., et al. MUC16 (CA125) regulates epithelial ovarian cancer cell growth, tumorigenesis and metastasis. Gynecol Oncol. 2011. V. 121. N. 3. P. 434-443.

92. Wen Y., Caffrey T.C., WheelockM.J., et al. Nuclear association of the cytoplasmic tail of MUC1 and beta-catenin. J Biol Chem. 2003. V. 278. N. 39. P. 38029-38039.

93. Woo H.J., Bae C.H., Song S.Y., et al. Expression of membrane-bound mucins in human nasal mucosa: different patterns for MUC4 and MUC16. Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 2010. V. 136. N. 6. P. 603-609.

94. Yamamoto M., Bharti A., Li Y., Kufe D. Interaction of the DF3/MUC1 breast carcinoma-associated antigen and beta-catenin in cell adhesion. J Biol Chem. 1997. V. 272. N. 19. P. 12492-12494.

95. Yin B.W., Lloyd K.O. Molecular cloning of the CA125 ovarian cancer antigen: identification as a new mucin, MUC16. J Biol Chem. 2001. V. 276. N. 29. P. 27371-27375.

96. Zeimet A.G., Offner F.A., Muller-Holzner E., et al. Peritoneum and tissues of the female reproductive tract as physiological sources of CA-125. Tumour Biol. 1998. V. 19. N. 4. P. 275282.