Физиологические особенности тромбоцитарно-коагуляционного гемостаза у сухостойных коров айрширской породы

2017, том 19 [3]

УДК 636.2:591.11.001.8

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ТРОМБО-ЦИТАРНО-КОАГУЛЯЦИОННОГО ГЕМОСТАЗА У СУХОСТОЙНЫХ КОРОВ АЙРШИРСКОЙ ПОРОДЫ

Ошуркова1 Ю.Л., Медведев2 И.Н.

1Вологодская государственная молочнохозяйственная академия имени Н. В. Верещагина, г. Вологда, Российская Федерация

2Всероссийский НИИ физиологии, биохимии и питания животных, г. Курск, Российская Федерация

Аннотация: Цель работы: изучить особенности тромбоцитарно-коагуляционного гемостаза у здоровых сухостойных коров айрширской породы. Проведено обследование 47 сухостойных коров айрширской породы с использованием гематологических методов исследования. Наиболее активная агрегация тромбоцитов отмечена на АДФ и ристомицин, оказавшаяся минимальной к концу сухостоя. Коллагеновая агрегация была ниже, что косвенно указывало на низкую экспрессию коллагеновых рецепторов на поверхности тромбоцитов. Дезагрегацион-ные возможности тромбоцитов в ответ на любые индукторы у коров в течение сухостоя прогрессивно возрастали. В ходе сухостоя у коров айрширской породы отмечено снижение активности гемокоагуляции. К его концу у коров этой породы развивалась понижение концентрации фибриногена в крови.

Ключевые слова: тромбоциты, коагуляционный гемостаз, фибриновый сгусток, коровы, айрширская порода, сухостой.

Реализация онтогенеза неразрывно сопряжена с физиологической динамикой систем, регулирующих и интегрирующих живые организмы, в число которых входит кровь [5,6]. Весьма важной ее подсистемой, обеспечивающей сохранение жидкого ее состояния и купирование кровотечений, является гемостаз [3].

Гемостаз включает в себя ряд различных компонентов, весьма значимыми из которых являются тромбоциты [8] и гемокоагуляция [2]. От функционального их совершенства в значительной степени зависят эффективность кровоснабжения тканей, предупреждение и купирование ге-моррагий, тромбозов, ишемий и инфарктов органов, защита от диссеминации бактерий и токсинов из очагов поражения по всему организму и т.д. [9,10].

Большую практическую значимость для биологии имеет оценка показателей крови и особенно элементов гемостаза у продуктивных жи-

вотных, как показано тесно связанных с их соматическими характеристиками [6] и функционированием всего организма [5], позволяющая выработать возрастные нормы учитываемых показателей и выявить начало наступления гемостазиопа-тии при отдельных состояниях. Большое значение эти исследования имеют у коров во время стельности [4], особенно высокопродуктивных пород. Ввиду высокой продуктивности коров айршир-ской породы и большой значимости для их соматического статуса и продуктивности, тромбоци-тарной активности и свертывания крови представлялось актуальным исследовать их в течение сухостоя.

Цель работы: изучить особенности тромбо-цитарно-коагуляционного гемостаза у здоровых сухостойных коров айрширской породы.

Материалы и методы: Исследования проводили на 47 коровах айрширской породы в СХПК «Племзавод Майский» Вологодского рай-

—-Ече^с-—

~ 20 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций

Since 1999 e-ISSN 2226-7417

On line scientific @ educational Bulletin "Health and Education Millennium", 2017. Vol. 19. No 1

—---

она Вологодской области. Животные были обследованы троекратно: в начале сухостоя (1-2 сут. сухостоя), в его середине (2-31 сут. сухостоя) и в конце сухостоя (58-60 ст. сухостоя). Под наблюдение были взяты только здоровые животные, у которых стельность протекала без осложнений.

У всех коров для изучения гемостаза в утренние часы брали кровь из яремной вены. Взятие осуществлялось в пластиковую пробирку, содержащую 3,8%-й раствор натрия лимоннокислого 3-х замещенного (цитрата натрия), в соотношении объемов крови и цитрата натрия - 9:1.

Количество тромбоцитов, их средний объем и тромбокрит (показатель, характеризующий процент тромбоцитарной массы в объеме крови) определяли электронно-автоматическим методом на гематологическом анализаторе ВС-3000 PLUS.

Определение агрегационной активности тромбоцитов осуществляли количественным методом с применением фотоэлектроколориметра

Общие тромбоцитарные характеристики кров

КФК-2 с применением в качестве индукторов агрегации АДФ, коллагена и ристомицина в стандартных концентрациях. Агрегацию тромбоцитов оценивали путем вычисления показателей суммирующего индекса агрегации тромбоцитов (СИАТ), скорости агрегации (СА) и индекса дезагрегации тромбоцитов (ИДТ).

Для определения параметров плазменно-коагуляционного гемостаза использовали однока-нальный коагулометр Trombostat (Behnk Elektronik, Германия). У всех животных определяли также активированное частичное тромбопласти-новое время, протромбиновое время, тромбино-вое время и концентрацию фибриногена в плазме [1].

Результаты обработаны t-критерием Стью-

дента.

Результаты исследования. Общие тром-боцитарные показатели у обследованных животных находились в пределах нормы, не менялись в течение наблюдения (табл. 1).

Таблица 1.

коров айрширской породы в течение сухостоя

Общие тромбоцитарные показатели Периоды сухостоя, n=33, M±m

начальный период

Количество тромбоцитов, тыс/мкл 335,4±12,8 341,2±10,62 330,4±7,94

Средний объем тромбоцитов, фл 7,3±0,63 7,2±0,42 7,3±0,38

Тромбокрит, % 0,27±0,05 0,27±0,04 0,27±0,04

Примечание: р-достоверной динамики показателей не получено.

В результате исследования агрегационной активности тромбоцитов у коров айрширской породы между отдельными периодами лактации выявлены достоверные различия (табл. 2).

Таблица 2

Агрегационная активность тромбоцитов у коров айрширской породы в течение сухостоя

Показатели тромбоцитарной Периоды сухостоя, n=47, M±m

агрегации начальный средний завершающий

период период период

(1-2 сут. (29-31 сут. (58-60 сут.

сухостоя) сухостоя) сухостоя)

индуктор агрегации АДФ

СИАТ, % 30,02±3,42 28,05±2,26 27,22±2,36

СА, мин 0,042±0,009 0,044±0,004 0,047±0,003

ИДТ, % 12,62±1,46 13,2±1,82 14,22±1,28

индуктор агрегации коллаген

СИАТ, % 13,65±1,37 12,10±0,85 10,16±1,37

СА, мин 0,0077±0,004 0,0082±0,0005 0,0095±0,0028

ИДТ, % 2,23±1,34 2,53±1,26 3,00±1,49

~ 21 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций

Since 1999 e-ISSN 2226-7417

On line scientific & educational Bulletin "Health and Education Millennium", 2017. Vol. 19. No 3

—--—

индуктор агрегации ристомицин

СИАТ, % 15,83±1,23 14,22±1,46 12,00±2,61

СА, мин 0,0078±0,0062 0,0085±0,0046 0,0095±0,0034

ИДТ, % 3,11±0,56 3,22±0,44 3,40±0,32

Примечание: достоверной динамики показателей

У коров айрширской породы в течение сухостоя выяснена тенденция к ослаблению агрегации тромбоцитов. Наибольший ответ тромбоцитов отмечен на АДФ и коллаген. При этом СИАТ с АДФ к середине сухостоя уменьшился до 28,05±2,26%, снижаясь к ее концу до 27,22±2,36%. В ответ на коллаген СИАТ у животных в течение сухостоя постепенно понижался до 10,16±1,37%. Это указывало на снижение чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации на протяжении сухостоя у коров айрширской породы при невыраженном секреторном процессе из тромбоцитов во время активации пластинок. Активность агрегации тромбоцитов под действием ристомицина у коров айрширской породы за сухостой постепенно снижалась - СИАТ в его начале составил 15,83±1,23%, достигая к его концу 12,00±2,61%.

Скорость образования агрегатов у коров айрширской породы в ответ на коллаген снижалась за сухостой с 0,0077±0,004 мин до 0,0095 ±

Общие показатели коагуляционного гемостаза

не получено.

0,0028 мин. Сходную динамику испытала СА под действием АДФ и ристомицина, составившая у коров к концу сухостоя 0,047±0,003 мин и 0,0095±0,0034 мин, соответственно.

Индекс дезагрегации тромбоцитов, показывающей устойчивость возникающих агрегантов, позволил выяснить, что наиболее стабильными являлись агрегаты, формирующиеся в ответ на коллаген - величина ИДТ с ним к концу сухостоя достигла 3,00±1,49%. Агрегаты, образованные под действием АДФ и ристомицина на протяжении сухостоя, были менее устойчивыми: ИДТ в отношении обоих нарастали с ристомицином до 3,40±0,32%, с АДФ до 14,22±1,28% к концу наблюдения.

У коров айрширской породы в течение сухостоя было проведено определение показателей, характеризующих отдельные механизмы коагуляции (табл. 3).

Таблица 3

у коров айрширской породы в течение сухостоя

Общие коагуляционные показатели Периоды сухостоя, n=47, M±m

начальный период

Фибриноген, г/л 3,12±0,24 3,02±0,27 2,90±0,25

Протромбиновое время, с 17,05±0,26 17,82±0,44 18,10±0,27

Активированное частичное тромбо-пластиновое время, с 47,62±0,94 50,14±1,11 52,00±0,98

Тромбиновое время, с 15,90±1,14 16,20±1,12 16,70±1,26

Примечание: достоверной динамики не получено.

Показатель активированного частичного тромбопластинового времени, характеризующий первую фазу гемокоагуляции, у коров айршир-ской породы несколько замедлялся в ходе сухостоя (52,00±0,98с). Активность внешнего пути коагуляции у наблюдаемых коров оценивалась по динамике протромбинового времени, которое слегка удлинялось в ходе сухостоя до 18,10±0,27с.

Состояние третьей фазы гемокоагуляции у сухостойных коров айрширской породы характеризовали двумя показателями: тромбиновым временем и концентрацией фибриногена в плазме. Тромбиновое время у животных несколько возрастало (16,70±1,26с). При этом концентрация фибриногена в крови животных в течение наблюдения постепенно снижалась, достигая 2,90±0,25 г/л.

—-Ече^с-—

~ 22 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций

Since 1999 e-ISSN 2226-7417

On line scientific @ educational Bulletin "Health and Education Millennium", 2017. Vol. 19. No 1

—---

Обсуждение: Исследования последних лет значительно расширили представления о факторах, влияющих на агрегацию тромбоцитов и систему свертывания, а также сохранение крови в жидком состоянии. Большое число аспектов тромбоцитарного и коагуляционного компонента гемостаза у крупного рогатого скота в ходе онтогенеза остаются исследованы слабо. Остаются не выяснены их породные особенности, в частности у айрширской породы, в т.ч. в течение сухостоя.

Наиболее активно тромбоциты сухостойных коров реагировали на действие АДФ и ристо-мицина. С увеличением срока сухостоя СИАТ с этими индукторами понижался. В то же время в ответ на коллаген СИАТ был меньше. Это говорило о низкой доступности коллагена субэндотелия для тромбоцитов. У наблюдаемых животных во время сухостоя скорость агрегации в ответ на все индукторы снижалась, что указывало на снижение числа рецепторов на тромбоцитарных мембранах [7].

Дезагрегационные возможности тромбоцитов в течение сухостоя росли. Это также можно объяснить рецепторными перестройками мембран тромбоцитов и динамикой в тромбоцитах механизмов их активации (синтез тромбоксана, фосфатидной кислоты и фактора активации тромбоцитов) [4].

Осуществленная у коров айрширской породы в течение сухостоя оценка показателей, характеризующих отдельные механизмы гемокоа-гуляции, позволила выявить их ослабление при неуклонном снижении плазменного уровня фибриногена. Это следует расценивать, как важный в первую очередь породный механизм функционирования свертывающей системы крови у этих коров, способствующий подготовке к отелу.

Заключение. Ослабление гемокоагуляции и понижение активности тромбоцитов обеспечивает оптимальные условия для кровоснабжения плаценты и плода. Также это во многом способствует завершению подготовки матки к отелу.

ЛИТЕРАТУРА

1. Баркаган З.С., Момот А.П. Дианостика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. Издание 3-е. М.: Ньюдиамед, 2008. 292с.

2. Завалишина С.Ю. Коагуляционная активность плазмы крови у телят при растительном кормлении. Ветеринария. 2011; 4: 48-49.

3. Завалишина С.Ю., Белова Т.А., Медведев И.Н., Кутафина Н.В. Физиология крови и кровообращения. Санкт-Петербург: «Лань», 2015; 176.

4. Завалишина, С.Ю. Сосудисто-тромбоцитарные взаимодействия у стельных коров. Фундаментальные исследования. 2015; 2(часть 2): 267-271.

5. Глаголева Т.И. Онтогенетическая динамика основных гематологических показателей у крупного рогатого скота. Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2016; 5: 66-69.

6. Корепанова Л.В., Старостина О.С., Батанов С.Д. Кровь как показатель интерьерной особенности помесных животных. Зоотехния. 2015; 10: 26-28.

7. Лазарева Е.Н., Мамотруева М.А., Ломакин Н.Н. Современный взгляд на морфофункциональные особенности тромбоцитов. Естественные науки. 2005; 3: 36-42.

8. Шитикова А.С. Тромбоцитопатии врожденные и приобретенные. Санкт-Петербург, 2008: 384.

9. Wagner M.C., Eckman J.R., Wick T.M. Histamine increases sickle erythrocyte adherence to endothelium. Brit. J. Haematol. 2006; 4 : 512-522.

10. White G.C., Rompietti R. Platelet secretion: indiscriminately spewed forth or highly orchestrated, J. Thromb. Haemost. 2007; 5: 2009-2016.

PHYSIOLOGICAL FEATURES OF PLATELET-COAGULATION HEMOSTASIS IN DRY COWS OF AYRSHIRE BREED

Oshurkova1 Y.L., Medvedev2 I.N.

'Vologda State Dairy Farming Academy by N. V. Vereshchagin", Vilogda, Russian Federation

2All-Russian Research Institute of Physiology, Biochemistry and Nutrition of Animals, Kursk, Russian Federation

Annotation: Objective: to study the features of platelet-coagulation hemostasis in healthy dry cows of Ayrshire breed. 47 dry cows of Ayrshire breed were examined with the use of hematological methods of investigation. The most active

aggregation of platelets was observed in ADP and ristomycin, which was minimal by the end of the deadness. Collagen

—--—

~ 23 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций

Since 1999 e-ISSN 2226-7417

On line scientific & educational Bulletin "Health and Education Millennium", 2017. Vol. 19. No 3

—--—

aggregation was lower, which indirectly indicated a low expression of collagen receptors on the surface of platelets. Disaggregation capacity of platelets in response to any inducers in cows during the deadly progressively increased. In the course of the dead, the cows of the Ayrshire breed showed a decrease in hemocoagulation activity. To its end, the cows of this breed developed a decrease in the concentration of fibrinogen in the blood. Keywords: platelets, coagulation hemostasis, fibrin clot, cows, Ayrshire breed, deadwood.

REFERENCES

1. Barkagan Z.S., Momot A.P. Diagnosis and therapy controlled hemostasis disorders. Izdanie 3-e. Moskva: N'judiamed, 2008, 292. (in Russian).

2. Zavalishina S.Yu. Coagulation activity of blood plasma in calves fed with vegetable. Veterinarija, 2011, no. 4, pp.48-49. (in Russian).

3. Zavalishina S.Yu., Belova T.A., Medvedev I.N., Kutafina N.V. Physiology of blood and blood circulation. Sankt-Peterburg: «Lan'», 2015, 176. (in Russian).

4. Zavalishina, S.Yu. Vascular-platelet interaction in pregnant cows. Fundamental'nye issledovanija, 2015, no.2(chast' 2), pp.267-271. (in Russian).

5. Glagoleva T.I. Ontogenetic dynamics of the main hematological parameters in cattle. Veterinarija, zootehnija i biotehnologija, 2016, no.5, pp.66-69 (in Russian).

6. Korepanova L.V., Starostina O.S., Batanov S.D. The blood as an indicator of interior features of hybrid animals. Zootehnija, 2015, no.10, pp.26-28. (in Russian).

7. Lazareva E.N., Mamotrueva M.A., Lomakin N.N. The modern view of the morphological and functional features of platelets. Estestvennye nauki, 2005, no. 3, pp. 3642.

8. Shitikova A.S. Thrombocytopathy congenital and acquired. Sankt-Peterburg, 2008, 384p.

9. Wagner M.C., Eckman J.R., Wick T.M. Histamine increases sickle erythrocyte adherence to endothelium. Brit. J. Haematol, 2006, no. 4, pp.512-522.

10. White G.C., Rompietti R. Platelet secretion: indiscriminately spewed forth or highly orchestrated, J. Thromb. Haemost, 2007, no.5, pp.2009-2016.

—--—

- 24 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций