ДОБАВЛЕНИЕ ЖЕЛЕЗА ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК

1. Способ повышения плотности, жизнеспособности и/или титр клеток в среде для культивирования клеток, включающий этапы:
(a) обеспечения клеток в среде для культивирования клеток для начала процесса культивирования клеток; и
(b) добавления композиции, включающей железо, к вышеупомянутой среде для культивирования клеток в процессе культивирования клеток, таким образом, чтобы концентрация железа в среде для культивирования клеток повышалась на протяжении процесса культивирования клеток.
4
3
3
2
3
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, выбирают из группы, к которой относятся FeSO, Fe-цитрат, Fe-трансферрин, Fe-хлорид, Fe-нитрат, Fe-EDTA, Fe(NO), FeCl, FeCl и их комбинации.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, добавляют после 0-го дня процесса культивирования клеток.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, добавляют в 1-й день или после него в процессе культивирования клеток.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, добавляют на 3-й день или после него в процессе культивирования клеток.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, добавляют на 6-й день или после него в процессе культивирования клеток.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, добавляют в разные моменты времени в процессе культивирования клеток.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что концентрация железа в среде для культивирования клеток после добавления композиции, включающей железо, составляет от 100 мкМ до 5 мМ.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что концентрация железа в среде для культивирования клеток после добавления композиции, включающей железо, составляет от 300 мкМ до 1 мМ.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что концентрация железа в среде для культивирования клеток после добавления композиции, включающей железо, составляет 1 мМ.
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки являются клетками млекопитающих.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что клетки млекопитающих выбирают из линии миеломы мыши BALB/c, ретинобластов человека (PER.C6), клеток почек обезьян, клеток мезонефроса человека (293), клеток почек новорожденного хомяка (ВНК), клеток яичника китайского хомячка (СНО), клеток Сертоли мыши, клеток почек африканской зеленой мартышки (VERO-76), клеток карциномы шейки матки человека (HeLa), клеток почек собаки, клеток печени серой крысы, клеток легких человека, клеток печени человека, клеток опухоли молочной железы мышей, клеток TRI, клеток MRC 5, клеток FS4 или линии гепатомы человека (Hep G2).
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что клетки млекопитающих являются клетками СНО.
14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что процесс культивирования клеток представляет собой процесс культивирования с подпиткой.
15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что процесс культивирования клеток представляет собой процесс культивирования с повторной подпиткой.
16. Способ по п. 1, отличающийся тем, что процесс культивирования клеток представляет собой процесс перфузионного культивирования.
17. Способ по п. 1, отличающийся тем, что процесс культивирования клеток представляет собой процесс крупномасштабного культивирования.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что объем среды для культивирования клеток составляет как минимум приблизительно 500 л.
19. Способ по п. 1, отличающийся тем, что среда для культивирования клеток не содержит гидролизатов.
20. Способ по п. 1, отличающийся тем, что среда для культивирования клеток содержит гидролизаты.
21. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки включают ген, кодирующий рекомбинантный белок.
22. Способ по п. 21, отличающийся тем, что рекомбинантный белок является антителом или его фрагментом.
23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что антитело является антителом против IL-22.
24. Способ по п. 22, отличающийся тем, что антитело является антителом против GDF-8.
25. Способ по п. 22, отличающийся тем, что антитело представляет собой Myo29.
26. Способ по п. 22, отличающийся тем, что антитело является однодоменным антителом.
27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что однодоменное антитело является нанотелом против TNF.
28. Способ по п. 21, отличающийся тем, что рекомбинантный белок представляет собой гликопротеин.
29. Способ по п. 21, отличающийся тем, что рекомбинантный белок является терапевтическим белком.
30. Способ по п.29, отличающийся тем, что терапевтический белок представляет собой фактор роста, коагулирующий фактор, цитокин, слитый белок, лекарственное вещество, вакцину, фермент или Small Modular ImmunoPharmaceutical™ (иммунофармацевтическое средство на основе модульного белка малого размера - SMIP).
31. Способ по любому из пп. 21-30, отличающийся тем, что способ также включает очистку рекомбинантного белка.
32. Рекомбинантный белок, получаемый из клеток, культивируемых согласно способу по любому из пп. 21-31.
33. Способ предотвращения или задержки гибели клеток в культуре клеток, включающий этап добавления композиции, включающей железо, в один или несколько моментов времени после начала процесса культивирования клеток.
34. Способ ингибирования апоптоза в культуре клеток, включающий этап добавления композиции, включающей железо, в один или несколько моментов времени после начала процесса культивирования клеток.
35. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, добавляют после 0-го дня.
36. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, добавляют после 3-го дня.
37. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, добавляют на 6-й день.
38. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что железо добавляют в количестве, подходящем для обеспечения концентрации в среде для культивирования клеток от 100 мкМ до 5 мМ.
39. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что железо добавляют в количестве, подходящем для обеспечения концентрации в среде для культивирования клеток от 300 мкМ до 1 мМ.
40. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что железо добавляют в количестве, подходящем для обеспечения концентрации в среде для культивирования клеток 1 мМ.
41. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что процесс культивирования клеток представляет собой процесс культивирования с подпиткой.
42. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что культивирование клеток представляет собой культивирование с повторной подпиткой.
43. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что культивирование клеток представляет собой перфузионное культивирование.
44. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что культивирование клеток представляет собой процесс крупномасштабного культивирования.
45. Способ по п. 44, отличающийся тем, что объем культуры клеток составляет как минимум приблизительно 500 л.
4
3
3
2
3
46. Способ по п. 33 или 34, отличающийся тем, что композицию, включающую железо, выбирают из группы, к которой относятся FeSO, Fe-цитрат, Fe-трансферрин, Fe-хлорид, Fe-нитрат, Fe-EDTA, Fe(NO), FeCl, FeCl и их комбинации.
47. Комплект для приготовления среды для культивирования клеток, включающий:
(a) один или несколько реагентов для приготовления первичной среды для культивирования клеток; и
(b) отдельную композицию, включающую железо;
(c) инструкцию по добавлению отдельной композиции, включающей железо, к первичной среде для культивирования клеток в один или несколько моментов времени в течение процесса культивирования клеток для повышения плотности, жизнеспособности и/или титра клеток.
48. Комплект по п. 47, отличающийся тем, что отдельная композиция предусмотрена в таком количестве, чтобы концентрация составляла от 100 мкМ до 5 мМ в первичной среде для культивирования клеток.
49. Комплект по п. 47, отличающийся тем, что отдельная композиция предусмотрена в таком количестве, чтобы концентрация составляла от 100 мкМ до 5 мМ в культуре клеток как минимум 500 л.
4
3
3
2
3
50. Комплект по п. 47, отличающийся тем, что отдельную композицию выбирают из группы, к которой относятся FeSO, Fe-цитрат, Fe-трансферрин, Fe-хлорид, Fe-нитрат, Fe-EDTA, Fe(NO), FeCl, FeCl и их комбинации.
51. Комплект по п. 47, отличающийся тем, что комплект также включает дополнительные компоненты для культивирования с подпиткой.
52. Комплект по п. 47, отличающийся тем, что комплект также включает дополнительные компоненты для культивирования с повторной подпиткой.
53. Комплект по п. 47, отличающийся тем, что комплект также включает дополнительные компоненты для перфузионного культивирования.
54. Комплект по любому из пп. 51-53, отличающийся тем, что дополнительные компоненты выбирают из группы, к которой относятся гормоны и/или другие факторы роста, неорганические ионы, буферы, витамины, нуклеозиды или нуклеотиды, микроэлементы, аминокислоты, липиды, глюкоза или другие источники энергии, и их комбинации.