Полиморфизм гена метилентетрагидрофолатредуктазы как фактор риска возникновения синдрома Ретта у детей

Полиморфизм гена метилентетрагидрофолатредуктазы как фактор риска возникновения синдрома Ретта у детей

В.Ю. Воинова, П.В. Новиков

Московский НИИ педиатрии и детской хирургии

Polymorphism of the methylenetetrahydrofolate reductase gene as a risk factor for Rett syndrome in children

V.Yu. Voinova, P.V. Novikov

Moscow Research Institute of Pediatrics and Pediatric Surgery

Проведено исследование полиморфного варианта гена MTHFR — 677Т как возможного фактора риска возникновения мутаций de novo. Объектом исследования являлись 48 матерей и 31 отец больных с синдромом Ретта. В группе матерей наблюдалась повышенная частота генотипа T/T. Частоты генотипов C/C, C/T и T/T среди матерей составили 39,5, 42 и 18,5% соответственно, что статистически достоверно отличалось от частот генотипов в контрольной группе женщин (х2=7,975; /К0,05). У отцов больных с синдромом Ретта достоверных различий частот генотипов по сравнению с контрольной группой мужчин не отмечено. Определено достоверное снижение уровня фолиевой кислоты у родителей с генотипами С/Т (5,6±1,5 нг/мл) и Т/Т (3,6±1,2 нг/мл) по сравнению с контролем (11,3±3,9 нг/мл). Полученные данные позволяют предполагать, что полиморфный аллель 677Т у матерей больных с синдромом Ретта может быть возможным фактором риска возникновения de novo мутаций в их половых клетках и возникновения случаев Х-сцепленной патологии.

Ключевые слова: дети, синдром Ретта, метилентетрагидрофолатредуктаза, гена MTHFR, полиморфные аллели, 677Т.

The polymorphic MTHFR gene 677T variant as a possible risk factor for de novo mutations was studied. The study covered 48 mothers and 31 fathers of patients with Rett syndrome. A group of mothers was observed to have a higher frequency of the T/T genotype. The frequencies of the C/C, C/T, and T/T genotypes among the mothers were 39,5, 42, and 18,5%, respectively, which statistically significantly differed from the frequency of the genotypes in the control group (x2=7,975; ^<0,05). There were no significant differences in the frequencies of the genotypes in the fathers of patients with Rett syndrome as compared with the control group of men. A significant reduction in folic acid levels was determined in the parents with the C/T (5,6±1,5 ng/ml) and T/T (3,6±1,2 ng/ml) genotypes as compared with the controls (11,3±3,9 ng/ml). The findings may suggest that the polymorphic 677T allele in the mothers of patients with Rett syndrome may be a possible risk factor for de novo mutations in their sex cells and for cases of X-linked pathology.

Key words: children, Rett syndrome, methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR gene, polymorphic alleles, 677T.

Актуальность исследований генетически обусловленных форм нарушений психического развития для педиатрии обусловлена их высокой частотой в популяции, достигающей 2—3%, а также тем, что данная патология ведет к глубокой инвалидности вследствие тяжелого поражения мозга. Синдром Ретта (ОМ1М 312750) служит одной из ведущих причин умственной отсталости у девочек, поскольку встречается среди них с довольно высокой частотой — 1:10 000. Синдром Ретта — прогрессирующее неврологическое заболевание, сцепленное с хромосомой Х, которое проявляется преимущественно у гетерозиготных девочек, а для гемизи-готных мальчиков является летальным. В большинстве случаев заболевания обнаруживают мутации в гене

© В.Ю. Воинова, П.В. Новиков, 2012 Ros Vestn Perinatol Pediat 2012; 5:66-71

Адрес для корреспонденции: Воинова Виктория Юрьевна — к.м.н., в.н.с.

отделения психоневрологии и наследственных заболеваний с нарушением психики Московского НИИ педиатрии и детской хирургии Новиков Петр Васильевич — д.м.н., проф., рук. того же отдела 125412 Москва, ул. Талдомская, д. 2

MECP2, расположенном на длинном плече хромосомы X, в участке Xq28 и кодирующем метил-CpG-связыва-ющий белок 2 (methyl-CpG-binding protein 2, МеСР2), который необходим для развития нейронов [1].

Особенностью синдрома Ретта является то, что практически каждый случай заболевания представляет собой результат новой мутации [2]. Поэтому профилактика данной патологии с помощью прена-тальной диагностики в семьях не имеет оснований. Возникает необходимость исследования у родителей больных детей факторов предрасположенности к возникновению de novo мутаций и поиска путей устранения возможных факторов риска, одним из которых может быть полиморфный вариант 677T гена мети-лентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR).

Исследование ключевого гена в обмене фолатов — MTHFR особенно важно, поскольку в настоящее время все более широкое применение находит прекон-цепционная профилактика различных врожденных аномалий и пороков развития с помощью адекватного обеспечения организма будущих родителей рядом

витаминов, прежде всего фолатами, для обеспечения оптимальных условий созревания половых клеток [3]. Особое значение имеет достаточное количество пищевых фолатов для тех индивидуумов, у которых снижена активность метилентетрагидрофолатредуктазы. Полиморфный аллель 677Т гена MTHFR является одним из распространенных в популяции. Под генетическим полиморфизмом понимают такое явление, когда в популяции представлены две и более формы аллелей одного гена, причем частота наиболее редкого аллеля составляет не менее 1—2% [4].

Фермент метилентетрагидрофолатредуктаза катализирует образование 5-метилтетрагидрофолата. Данный фермент представляет собой флавопротеин, коферментом которого является флавинадениндинук-леотид (ФАД), ингибитором — S-аденозилметионин, субстратом служит 5,10-метилентетрагидрофолат, продуктом — 5-метилтетрагидрофолат. Метилтетра-гидрофолат используется в организме как источник (донор) метильных групп для цикла метилирования нуклеиновых кислот, белков, жиров и других соединений и вместе со своим предшественником 5,10-ме-тилентетрагидрофолатом играет значительную роль в синтезе пуринов и пиримидинов, входящих в состав нуклеиновых кислот [5].

Ген MTHFR, кодирующий данный фермент, локализован на хромосоме 1 в участке 1р36.3, содержит 11 экзонов. В настоящее время описано несколько десятков редких мутаций данного гена, которые ведут к глубокому нарушению функции одноименного фермента, гипергомоцистинемии и гомоцистинурии — редкой форме наследственной болезни обмена. Кроме того, в гене MTHFR описаны несколько десятков полиморфных участков, большинство из которых не имеет какого-либо влияния на активность фермента. Однако нуклеотидная замена С677Т (замена цитозина на тимин и, как следствие, замена в самом белке в положении 222 аминокислоты аланина на ва-лин) ведет к частичному снижению активности ме-тилентетрагидрофолатредуктазы [6]. При гомозигот-ности индивидуума по полиморфному варианту 677Т происходит снижение активности фермента вследствие образования его термолабильной формы. Частота полиморфного варианта 677Т в популяции очень высока — около 30%. Частота гомозигот по данному аллелю (генотип Т/Т) в европейской и азиатской популяциях составляет около 12%. Гомозиготы с генотипом Т/Т имеют пониженную активность фермента метилентетрагидрофолатредуктазы, составляющую 45% от нормы [7].

Снижение активности фермента приводит к накоплению в плазме крови гомоцистеина, который токсичен для эндотелия сосудов, а также вызывает агрегацию клеток крови [8]. Повышение уровня го-моцистеина в плазме индивидуумов, гомозиготных по полиморфному аллелю 677Т, умеренное и возни-

кает только в условиях дефицита фолатов [9]. В ряде исследований был показан протективный эффект фолатов у лиц с гипергомоцистеинемией вследствие нуклеотидной замены С677Т [10].

Установлено, что полиморфный аллель 677Т является важнейшим фактором риска ряда патологических состояний: цереброваскулярных и кардиова-скулярных болезней, венозных тромбозов, различных видов рака (в частности, колоноректального и лейкемии), сахарного диабета 2-го типа [11, 12]. Кроме того, выявлена ассоциация между генотипом Т/Т и рядом психических нарушений — шизофреноподобными и депрессивными расстройствами [13]. Возникновение дефектов нервной трубки и врожденных пороков сердца также связывают с гомозиготностью матери по полиморфному аллелю 677Т [14, 15]. В ряде работ установлена взаимосвязь нерасхождения хромосом у женщин — матерей детей с синдромом Дауна и наличием у них генотипа Т/Т [16—18]. Показана связь гомозиготности по данному полиморфному аллелю со спонтанными абортами [19].

Предполагается, что увеличение риска вышеперечисленных заболеваний у лиц с полиморфным алле-лем 677Т гена MTHFR связано: 1) с прямым токсическим действием повышенного уровня гомоцистеина плазмы крови на эндотелий сосудов при васкулярных заболеваниях и на процесс развития эмбриона при дефектах нервной трубки [20]; 2) с нарушением процессов метилирования ДНК, РНК, белков вследствие либо нарушения синтеза метионина и S-аденозилме-тионина, либо превращения избытка гомоцистеина в S-аденозилгомоцистеин, который является ингибитором некоторых метилтрансфераз [6]; 3) с нарушением соотношения метаболитов фолиевой кислоты, что ведет к превышению содержания неметильных форм, дефекту синтеза пуринов и пиримидинов с последующим нарушением синтеза ДНК. Перераспределение фолатов было продемонстрировано в лимфоцитах индивидуумов с генотипом Т/Т [21].

Несмотря на большое количество работ по изучению дефицита метилентетрагидрофолатредуктазы при мультифакторных заболеваниях, в литературе отсутствуют данные о связи между полиморфным ал-лелем 677T гена MTHFR и риском возникновения моногенных заболеваний, особенно обусловленных мутациями de novo в половых клетках родителей. Однако можно предположить существование у некоторых индивидуумов предрасположенности (в том числе генетической) к возникновению мутаций в половых клетках, одним из таких неблагоприятных факторов может быть полиморфный аллель 677T гена MTHFR.

Цель исследования: оценить взаимосвязь распространенного полиморфного варианта 677T гена MTHFR у родителей больных детей с предрасположенностью к возникновению у них мутаций de novo, ведущих к синдрому Ретта.

характеристика обследуемых и методы исследования

Нами проведены исследования полиморфного аллеля 677Т гена MTHFR и содержания фолие-вой кислоты в плазме крови у 79 родителей девочек с синдромом Ретта (48 матерей и 31 отец). Контрольную группу составили 100 здоровых доноров крови (50 женщин и 50 мужчин).

Использовали клинико-генеалогический и моле-кулярно-генетический методы исследования. Родословные семей составлялись на основании перекрестного опроса родителей и родственников пробанда, изучения медицинской документации с последующим анализом полученных данных. Дополнительные сведения о состоянии здоровья членов семьи были получены в результате осмотра родителей, сибсов и других родственников больных детей.

Исследование полиморфизма гена MTHFR осуществлялось методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим электрофорезом продуктов ПЦР в агарозном геле. ПЦР проводили в объеме 25 мкл в растворе состава: по 6 пмоль каждого прай-мера, четыре дезоксинуклеозидтрифосфата (каждый в концентрации 0,2 мМ), 1 мкл геномной ДНК, ПЦР смесь фирмы «Amplisense», содержащая Tаq-полиме-разу, буфер для Tаq-полимеразы и MgCl2. Для амплификации исследуемого участка гена MTHFR использовали следующие праймеры:

5' — TGA AGG AGA AGG TGT CTG CGG GA — 3' sense

5' — AGG ACG GTG CGG TGA GAG TG — 3' antisense

ПЦР проводили при следующих условиях:

94°С — 5 мин 60 с

90 с у 38 циклов

60 с 5 мин.

Размер ПЦР продукта 198 п.н. (пар нуклеотидов). Для анализа полиморфизма гена MTHFR продукты ПЦР подвергали обработке рестриктазой. На реакцию рестрикции брали 9 мкл ампликона, 0,5 мкл ре-стриктазы Hinf I (3—4 ЕД) и 1 мкл 10хбуфера для ре-стриктазы. Продукты рестрикции/амплификации анализировали посредством электрофореза в 2% ага-розном геле, содержащем 1 мкг/мл бромистого эти-

94°С 62°С 72°С -72°С

}

дия. Размер фрагментов определяли с помощью стандарта массы 500 п.н. — Ladder фирмы «Fermentas». Генотипу С/С соответствовал продукт рестрикции размером 198 п.н., генотипу С/T — продукты 198, 175, 23 п.н. и генотипу T/T — продукты175, 23 п.н.

Фолиевая кислота определялась в образцах сыворотки крови больных иммунохемилюминисцентным методом в лаборатории Гемотест.

Для статистической обработки результатов использовалась программа SPSS (Statistical Package for Social Sciences), включающая стандартные методы для медико-биологических исследований. При сравнении исследуемых групп с контрольной применялись критерии Стьюдента, х2, различия считались статистически значимыми при уровне достоверности /><0,05.

результаты

Результаты исследования генотипов больных (частоты аллелей С677, 677Т и генотипов С/С, С/Т и Т/Т) в исследуемых группах представлены в табл. 1. Частоты аллелей 677Т и С677 в контрольной группе соответствовали равновесию Харди — Вайнберга, что свидетельствует о репрезентативности выборки. При сравнении частот аллелей С677 и 677Т у матерей девочек с синдромом Ретта и в контрольной группе наблюдались достоверные различия. В группе матерей отмечалась более высокая, чем в контроле, частота аллеля 677Т (х2=5,224; p<0,05). В группе отцов не было различий по частоте аллеля 677Т по сравнению с контрольной группой мужчин (х2=0,075; p>0,05).

Выявлено достоверное изменение соотношения генотипов С/ C, С/ Т и Т/Т (см. рисунок) в группе матерей детей с синдромом Ретта (х2=7,975; p<0,05) по сравнению с контрольной группой женщин. При этом у матерей это соотношение было смещено в сторону повышения частоты генотипа Т/ Т. В группе отцов не наблюдалось отличий частот генотипов от контрольной группы мужчин (х2=0,103; p>0,05). Полученные данные позволяют предположить возможную связь между гомо-зиготностью по полиморфному аллелю 677T гена MTHFR у матерей детей с синдромом Ретта и риском возникновения в их половых клетках мутаций Х-сцепленного гена MECP2.

Таблица 1. Частоты аллелей гена MTHFR и различных генотипов в исследуемых группах

Группа Частоты генотипов Частоты аллелей

С/С С/Т Т/Т С677 677Т

Матери детей с синдромом Ретта (п=48) 0,395 0,42 0,185 0,58 0,38

Контрольная группа женщин (п=50) 0,50 0,42 0,08 0,71 0,29

Отцы детей с синдромом Ретта (п=31) 0,55 0,355 0,095 0,73 0,27

Контрольная группа мужчин (п=50) 0,52 0,38 0,10 0,71 0,29

Рисунок. Частоты генотипов С/С, С/Т и Т/Т в группах матерей (а) и отцов (б) детей с синдромом Ретта в сравнении с контролем.

Проявлением предрасположенности к возникновению мутаций может быть накопление случаев онкологических заболеваний в родословных. Это дало основание провести анализ генеалогических данных, который показал, что в родословных детей с синдромом Ретта повышена частота онкологических заболеваний, которая составила 134 на 10 000 населения, в то время как среднеевропейская частота онкологической патологии, согласно данным ВОЗ, составляет

45 на 10 000 населения [22]. Полученные генеалогические данные свидетельствуют, что в семьях у 9 из 12 родителей с генотипом T/T среди ближайших родственников были выявлены случаи онкологической патологии, трое родителей составили исключение, поскольку в их родословных онкологических заболеваний не отмечено. Наблюдались также две семьи, в которых регистрировались различные неоплазии у родственников, но полиморфного аллеля 677Т у родителей не было.

Поскольку фермент метилентетрагидрофола-тредуктаза является ключевым в обмене фолатов, проведен анализ содержания фолиевой кислоты в плазме крови родителей больных с синдромом Ретта. У матерей уровень фолиевой кислоты составил 6,0±2,5 нг/мл, что не отличалось от её содержания у отцов (7,3±2,3 нг/ мл; p>0,05). Концентрация фолиевой кислоты у матерей и отцов детей с синдромом Ретта была ниже, чем в контрольной группе (11,3±3,9 нг/мл), однако различия не были статистически достоверными (p>0,05).

Известно, что в случае полиморфного аллеля 677Т гена MTHFR функционирование метилентетрагидро-фолатредуктазы нарушается при условии снижения уровня фолиевой кислоты. Поэтому было проанализировано содержание фолиевой кислоты у родителей с различными генотипами: С/С, С/Т и Т/Т (табл. 2). Было определено достоверное снижение уровня фолиевой кислоты у родителей с генотипами С/Т (5,6±1,5 нг/мл) и Т/Т (3,6±1,2 нг/мл) по сравнению с контролем (11,3±3,9 нг/мл), а также более низкие значения концентрации фолиевой кислоты у гомозигот по полиморфному аллелю 677Т, чем у гетерозигот. Эти результаты согласуются с работами авторов, наблюдавших пониженный уровень фолатов у индивидуумов с полиморфным аллелем 677Т [23].

обсуждение и заключение

Установлено, что при синдроме Ретта почти каждый случай заболевания является результатом мутации de novo в гене MECP2 [24, 25]. Можно предполагать существование у некоторых индивидуумов факторов предрасположенности (в том числе генетических) к возникновению новых мутаций Х-сцепленных генов в половых клетках и, следовательно, рождению детей с наследственными заболеваниями [26, 27].

Генотипы родителей больных с синдромом Рет-

Таблица 2. Содержание фолиевой кислоты в сыворотке крови родителей с различными генотипами по полиморфным аллелям гена MTHFR

Генотип родителей n Содержание фолиевой кислоты в сыворотке крови, нг/мл

С/С 36 8,7±1,6

С/Т 31 5,6±1,5*

Т/Т 12 3,6±1,2*

та по полиморфным вариантам гена MTHFR ранее не исследовались. Различными авторами была найдена высокая частота гомозигот по полиморфному ал-лелю 677Т среди родителей детей с врождённой и генетической патологией, например синдромом Дауна, дефектами нервной трубки, а также больных с некоторыми онкологическими заболеваниями [28]. В настоящей работе на основании результатов обследования родителей детей с синдромом Ретта выдвинуто предположение, что в половых клетках у части из них мутации Х-сцепленного гена MECP2 могли возникнуть de novo вследствие генетически обусловленного дефицита активности фермента метилентетрагидро-фолатредуктазы.

Получен ряд данных, которые согласуются с предложенной гипотезой: увеличение частоты гомозигот по полиморфному аллелю 677Т среди матерей девочек с синдромом Ретта, низкий уровень фолиевой кислоты у индивидуумов с генотипом Т/Т. Как было показано ранее, низкая активность метилентетрагидрофолатредуктазы при дефиците фолатов ведет к повышению уровня гомоцистеина плазмы крови и его прямому токсическому воздействию на клетки, нарушению процессов метилирования и синтеза пуринов и пиримидинов в организме [29]. Любое из этих биохимических нарушений теоретически может привести к возникновению мута-

ций de novo. Генеалогические данные о повышенной частоте онкологической патологии в семьях девочек с синдромом Ретта также могут указывать на повышенную предрасположенность к возникновению мутаций в соматических клетках у индивидуумов из семей больных с синдромом Ретта. Не исключена связь возникновения этих мутаций с нарушением обмена фолатов вследствие наличия полиморфного варианта 677Т гена MTHFR. Результаты работы поддерживают отдельные звенья изложенной гипотезы, доказательство которой может привести к разработке показаний для назначения носителям полиморфного варианта гена MTHFR (в том числе матерям больных детей с синдромом Ретта) преконцепцион-ной профилактики de novo мутаций с помощью препаратов фолиевой кислоты. Данные о повышенной частоте гомозигот по полиморфному аллелю 677Т среди матерей детей с синдромом Ретта согласуются с работами тех авторов, которые показали возможность материнского происхождения мутации гена MECP2 у девочек с синдромом Ретта [30].

Полученные в работе результаты могут положить начало исследованиям генетических факторов предрасположенности к возникновению de novo мутаций Х-сцепленных генов у родителей больных детей с генетическими формами умственной отсталости и поиску путей профилактики патологии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ворсанова С.Г., Улас В.Ю, Юров Ю.Б. и др. Клинико-генетические корреляции при синдроме Ретта: изучение российской когорты больных. Журн неврол и психиат 2002; 102: 10: 23—29.

2. Юров И.Ю., Ворсанова С.Г., Улас В.Ю. и др. Клинико-генетическая и эпигенетическая характеристика синдрома Ретта у монозиготных близнецов. Рос вестн перинатол и педиат 2004; 4: 14—17.

3. Новиков П.В. Периконцепционная профилактика врожденных и наследственных заболеваний у детей. Ребеноки лекарство. Том II. Фармакотерапия в педиатрии: Пособие для врачей под ред. А.Д. Царегородцева. М: Оверлей 2010; 25—41.

4. Спицын В.А. Экологическая генетика человека. М: Наука 2008; 503.

5. Fodinger M., Horl W.H., Sunder-Plassmann G. Molecular biology of 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase. J Nephrol 2000; 13: 1: 20—33.

6. Friso S., Choi S.W., Girelli D. et al. A common mutation in the 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase gene affects genomic DNA methylation through an interaction with folate status. Proc Natl Acad Sci USA 2002; 99: 8: 5606—5611.

7. Gueant-Rodriguez R.M., Gueant J.L., Debard R. et al. Prevalence of methylenetetrahydrofolate reductase 677T and 1298C

alleles and folate status: a comparative study in Mexican, West African, and European populations. Am J Clin Nutr 2006; 83: 3: 701—707.

8. Guinotte C.L., Burns M.G., Axume J.A. et al. Methylenetetrahydrofolate reductase 677C-->T variant modulates folate status response to controlled folate intakes in young women. J Nutr 2003; 133: 1272—1280.

9. Gemmati D., Previati M., Serino M.L. et al. Low folate levels and thermolabile methylenetetrahydrofolate reductase as primary determinant of mild hyperhomocystinemia in normal and thromboembolic subjects. Arterioscler Thromb Vasc Biol 1999; 19: 7: 1761—1767.

10. Murphy H.R., Roland J.M., Skinner T.C. et al. Effectiveness of a regional prepregnancy care program in women with type 1 and type 2 diabetes: benefits beyond glycemic control. Diabetes Care 2010; 33: 12: 2514—2520.

11. Salomon O., Steinberg D.M., Zivelin A. et al. Single and combined prothrombotic factors in patients with idiopathic venous thromboembolism: prevalence and risk assessment. Arterio-scler Thromb Vasc Biol 1999; 19: 3: 511—518.

12. Singh S.M., Murphy B., O'Reilly R.L. Involvement of gene-diet/drug interaction in DNA methylation and its contribution to complex diseases: from cancer to schizophrenia. Clin Genet 2003; 64: 6: 451—460.

13. Zintzaras E. C677T and A1298C methylenetetrahydrofolate reductase gene polymorphisms in schizophrenia, bipolar disorder and depression: a meta-analysis of genetic association studies. Psychiat Genet 2006; 16: 3: 105—115.

14. Storti S., Vittorini S., Lascone M.R. et al. Association between 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase C677T and A1298C polymorphisms and conotruncal heart defects. Clin Chem Lab Med 2003; 41: 3: 276—280.

15. Harisha P.N., Devi B.I., Christopher R. et al. Impact of 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase gene polymorphism on neural tube defects. J Neurosurg Pediatr 2010; 6: 4: 364—367.

16. James S.J., Pogribna M, Pogribny I.P. et al. Abnormal folate metabolism and mutation in the methylenetetrahydrofolate reductase gene may be maternal risk factors for Down syndrome. Am J Clin Nutr 1999; 70: 495—501.

17. Hassold T, Hunt P. To err (meiotically) is human: the genesis of human aneuploidy. Nat Rev Genet 2001; 2: 4: 280—291.

18. Barkai G, Arbuzova S, Berkenstadt M. et al. Frequency of neural tube defects and Down syndrome in the same sib-ship: analysis of the Spanish ongoing case-control study. Lancet 2003; 361: 9366: 1331—1335.

19. Bailey L.B., Berry R.J. Folic acid supplementation and the occurrence of congenital heart defects, orofacial clefts, multiple births, and miscarriages. Am J Clin Nutr 2005; 81: Suppl: 1213S—1217S.

20. Carter T.C, Pangilinan F, Troendle J.F. et al. Evaluation of 64 candidate single nucleotide polymorphisms as risk factors for neural tube defects in a large Irish study population. Am J Med Genet 2011; 155: 1: 14—21.

21. Axume J., Smith S.S., Pogribny I.P. et al. The MTHFR 677TT

genotype and folate intake interact to lower global leukocyte DNA methylation in young Mexican American women. Nutr Res 2007; 27: 1: 1365—1317.

22. http: www.euro.who.int

23. Poirier L.A. The effects of diet, genetics and chemicals on toxicity and aberrant DNA methylation: an introduction. J Nutr 2002; 132: Suppl 8: 2336S—2339S.

24. Girard M., Couvert P., Camé A. et al. Parental origin of de novo MECP2 mutations in Rett syndrome. Eur J Hum Genet 2001; 9: 3: 231—236.

25. Trappe R., Laccone F, Cobilanschi J. et al. MECP2 mutations in sporadic cases of Rett syndrome are almost exclusively of paternal origin. Am J Hum Genet 2001; 68: 5: 1093—1101.

26. Вельтищев Ю.Е., Царегородцев А.Д., Казанцева Л.З. Прогресс генетики и его значение для педиатрии. Рос вестн перинатол и педиатр 2001; 5: 6—13.

27. Вельтищев Ю.Е, Царегородцев А.Д., Новиков П.В., Ворсанова С.Г. Современные диагностические и превентивные технологии при наследственных и врожденных нарушениях интеллектуального развития детей. Вестн РАМН 2006; 9: 10: 11—18.

28. Rozen R. Folate and genetics. J Food Sc 2004; 69: SNQ65—7.

29. García-Fragoso L, García-García I., Leavitt G. et al. MTHFR polymorphisms in Puerto Rican children with isolated congenital heart disease and their mothers. Int J Genet Mol Biol 2010; 2: 3: 43—47.

30. Юров И.Ю., Ворсанова С.Г, Воинова-Улас В.Ю. и др. Эпигенетические исследования синдрома Ретта как адекватной модели аутистических расстройств. Журн неврол и психиат 2005: 105: 4—11.

Поступила 25.06.12