Изучение эмбриотоксических и тератогенных свойств «Геприма для свиней»

Изучение эмбриотоксических и тератогенных свойств Геприма для свиней

П.В. Бурков, к.в.н., Уральская ГАВМ

Одним из наиболее опасных воздействий лекарственных препаратов является эмбрио-токсическое и тератогенное. В связи с этим изучение воздействия лекарственных средств на показатели репродуктивной функции животных представляется актуальной задачей. При применении препаратов возможно непосредственное воздействие их на организм матери, на естественный физиологический барьер — плаценту и прямое — на плод. Эмбрио- и фетотоксич-ность может проявляться в повышении уровня эмбриональной смертности, изменении массы тела, краниокаудального размера плода, задержке оссификации скелета, увеличении перинатальной патологии.

Цель работы — изучение влияния препарата «Геприм для свиней» на репродуктивную функцию крыс [1].

Материал и методы исследований. Изучение эмбриотоксических и тератогенных свойств «Геприма для свиней» проводили согласно методическим указаниям по изучению общетоксического действия фармакологических веществ [2]. Эмбриотоксические и тератогенные свойства изучали на беременных белых крысах массой 150—160 г при введении препарата ежедневно подкожно в дозе 10 мл (максимальная для данного вида животных) на животное на протяжении 20 сут. Крысам контрольной группы вводили аналогичный объём физиологического раствора. Животных разделили на три группы по 8 самок в каждой. Эвтаназию самок проводили дислокацией шейных позвонков. Затем вскрывали брюшную полость, вырезали матку и в чашке Петри с физиологическим раствором, вскрыв рога, подсчитывали количество живых, мёртвых, резорбированных плодов, состояние плаценты и эндометрия, отмечая места имплантации. В яичниках подсчитывали количество жёлтых тел. Плоды подвергали наружному осмотру,

взвешиванию, определяли краниокаудальный размер, пол плода. Часть плодов фиксировали в жидкости Буэна и использовали для изучения внутренних органов по методике Вильсона [3]. Остальные плоды для изучения скелета фиксировали в 96-градусном спирте, окрашивали ализарином (методика Доусона) и использовали для изучения костной системы [4].

Результаты исследования. Значение показателей репродуктивной функции крыс при применении «Геприма для свиней» отражены в таблице 1 и на рисунке.

При определении параметров эмбриотоксичности не установлены нарушения в строении слизистой оболочки матки и плодных оболочек, их кровоснабжении и составе околоплодной жидкости.

По данным таблицы и рисунка видно, что применение «Геприма для свиней» увеличило количество мест имплантации на 1 самку у крыс опытной группы на 19,2% (1—13-е сут.) (р<0,05) и 17,3% (14-20-е сут.) (р<0,01). Препарат позволяет увеличить число плодов на 1 самку на 23,4% (1 —13-е и 14-20-е сут.) (р<0,01). «Геприм для свиней» позволяет снизить общую эмбриональную смертность на 17,25 (1-13-е сут.) и 17,54% (14-20-е сут.) (р< 0,01); предимплантационную гибель — на 12,64 (1—13-е сут.) и 10,52% (14-20-е сут.); постимпланта-ционную гибель - на 3,63 (1—13-е сут.) и 5,11% (14-20-е сут.). При этом установлено, что инъекции «Геприма для свиней» беременным крысам не влияют на среднюю массу плодов и плаценты.

При патологоанатомическом вскрытии эмбрионов (от четырёх самок из каждой группы) не установлено отличий в строении, расположении внутренних органов у эмбрионов опытной и контрольной групп. Носовые щели крысят закрыты, форма их правильная. Твёрдое нёбо целостное, слизистая оболочка гладкая. Язык правильной формы, располагается в ротовой по-

1. Показатели репродуктивной функции крыс

Показатель Контрольная группа Опытная группа по срокам беременности

1-13-е сут. 14-20-е сут.

Число самок Число на 1 самку: жёлтых тел мест имплантации плодов Средняя масса всех плодов, г Средняя масса плаценты, г Плодно-плацентарный коэффициент 8 12,20±0,37 10,40±0,25 9,40±0,25 31,32±0,56 8,25±0,13 0,26 8 13,00±0,32 12,40±0,25* 11,60±0,51** 32,62±0,46 8,34±0,17 0,25 8 13,00±0,31 12,20±0,37** 11,60±0,50** 31,80±0,4. 8,18±0,06 0,26

Примечание: * - р<0,05; ** - р<0,01

и Общая эмбриональная смертность, % - Предимплантационная гибель, % н Постимплантационная гибель, %

Рис. - Эмбриональная смертность у крыс

2. Соотношение самцов и самок в помёте, их краниокаудальный размер

Показатель Контрольная группа Опытная группа

1-13-е сут. 14-20-е сут.

Количество эмбрионов 75 92 92

Количество самцов/самок 38/37 46/46 45/47

Средний краниокаудальный размер, см 3,02±0,03 3,01±0,04 3,04±0,05

лости равномерно. Глазные яблоки развиты, по два у каждого эмбриона, подвижные, все отделы присутствуют, располагаются на одном уровне. Кора больших полушарий головного мозга гладкая, извилины развиты. Отделы головного мозга выражены хорошо, пропорциональны; расположение боковых, третьего и четвёртого мозговых желудочков правильное, с умеренным содержанием мозговой жидкости. Мозжечок и продолговатый мозг правильной формы, анатомическое строение соответствует норме. Гортань эластичная, правильной формы. Пищевод проходим на всём протяжении, без сужений, слизистая оболочка мелкоскладчатая. Трахея эластичная, кольца полукруглой формы, полость выражена хорошо, проходимость сохранена на всём протяжении. Крупные кровеносные сосуды заполнены кровью, анатомических нарушений стенок нет. Слюнные железы развиты хорошо, дольчатый рисунок чётко выражен. Деление на брюшную и грудную полости выражено, диафрагма целостная, гладкая, закреплена по всему краю. Сердце конической формы, деление на предсердия и желудочки чёткое. Все анатомические слои органа сохранены. Лёгкие правильной формы, дольчатые, упругой консистенции. Печень упругой консистенции, края заострены, деление на доли выражено хорошо. Капсула гладкая, без наложений и дефектов. Содержимое желудочно-кишечного тракта слизистое. Слизистая оболочка желудка и кишечника гладкая, блестящая. В толстом кишечнике (прямая

кишка) меконий светло-коричневого цвета, проходимость анального отверстия сохранена. Селезёнка лентовидной формы, эластичная, упругая, строение сохранено. Поджелудочная железа продолговатой формы, дольчатое строение выражено. Деление почек на корковое и мозговое вещество сохранено, лоханка без содержимого. Мочеточники прямые, проходимость сохранена. Мочевой пузырь без содержимого, стенка эластичная. Надпочечники бобовидной формы. Половые органы целостные, анатомическое строение выражено хорошо, топография органов правильная.

Значение соотношения потомства по полу в помёте, а также их краниокаудальный размер представлены в таблице 2.

Согласно данным таблицы установлено, что «Геприм для свиней» не оказал существенного влияния на соотношение потомства по полу, а также линейные промеры эмбрионов крысят — их значения близки к контролю и отличия недостоверны (р>0,05). Дефектов развития кожи, головы, туловища и конечностей не наблюдалось.

Результаты изучения длины участков окостенения отражены в таблице 3.

Данные таблицы свидетельствуют об отсутствии отличий в размерах участков окостенения у плодов опытной и контрольной групп.

Выводы. В ходе исследований установлено, что «Геприм для свиней» не обладает эмбрио-токсическим и тератогенным свойствами. Пре-

3. Длина участков окостенения в закладках костей скелета, мкм

Наименование кости Группа

опытная контрольная

Нижняя челюсть левая правая 7446,0±72,9 7446,0±72,9 7456,0±68,8 7456,0±68,8

Теменная кость левая правая 5501,0±23,0 5501,0±23,0 5496,0±27,7 5496,0±27,7

Ключица левая правая 3450,0±18,4 3450,0±18,4 3454,0±18,6 3454,0±18,6

Лопатка левая правая 3030,0±25,7 3030,0±25,7 3012,0±13,6 3012,0±13,6

Плечевая кость левая правая 3286,0±14,4 3286,0±14,4 3308,0±12,8 3308,0±12,8

Локтевая кость левая правая 22 ОО 00 44 (X ж о о 44 88 2826,0±27,9 2826,0±27,9

Лучевая кость левая правая 3496,0±33,8 3496,0±33,8 3522,0±20,8 3522,0±20,8

Подвздошная кость левая правая 2056,0±23,8 2056,0±23,8 2098,0±19,8 2098,0±19,8

Седалищная кость левая правая 1240,0±14,8 1240,0±14,8 1232,0±8,0 1232,0±8,0

Лонная кость левая правая 1032,0±8,6 1032,0±8,6 1042,0±6,6 1042,0±6,6

Бедренная кость левая правая 2598,0±31,7 2598,0±31,7 2682,0±9,7 2682,0±9,7

Малая берцовая кость левая правая 3004,0±11,2 3004,0±11,2 3000,0±7,1 3000,0±7,1

Большая берцовая кость левая правая 3004,0±10,3 3004,0±10,3 3008,0±8,6 3008,0±8,6

парат не вызывает изменений в линейных промерах и массе плода, количестве плодов в помёте, нарушений анатомического строения, в том числе репродуктивных органов, и окостенении скелета. «Геприм для свиней» в среднем позволяет снизить у опытных животных общую эмбриональную смертность на 17,4, предимплантаци-онную гибель — на 11,58, постимплантационную гибель — на 4,37%.

Литература

1. Патент на изобретение «Средство для профилактики гепатоза у свиней» № 2416430 от 20 апреля 2011 г. / Бурков П.В., Щербаков П.Н., Щербакова Т.Б.

2. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей ред. чл.-корр. РАМН, профессора Р.У. Хабриева. 2-е изд., пере-раб. и доп. М.: ОАО «Изд-во «Медицина», 2005. 832 с.: ил.

3. Wilson, J. Embnological consideration in teratology methods administering agents and detecting malformations in experimental animals. // Technigues. Univ. Chicago Press, 1962. P. 231—262.

4. Dawson, A.B. Note on the staining of the sceletion cleared specimens with alizarin reds. // Stain Tecnol. 1926. №1. P. 123-128.