ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ КОНЪЮГАТЫ

1. Флуоресцентный конъюгат, содержащий флуорохромный фрагмент F, соединенный с нацеливающим фрагментом Т, где фрагмент F имеет формулу (I):
,
3
3
3
где Y независимо для каждого случая выбран из SOH, SO- и SOM, где
М представляет собой одновалентный катион;
х, z и y независимо выбраны из целого числа от 1 до 8;
и фрагмент Т обладает аффинностью в отношении опухолевого маркера.
3
3
2. Конъюгат по п. 1, характеризующийся тем, что Y выбран из SO- и SONa.
3. Конъюгат по п. 1 или 2, характеризующийся тем, что фрагмент F имеет формулу (II):
4. Конъюгат по любому из пп. 1-3, характеризующийся тем, что опухолевый маркер представляет собой опухолевый антиген.
5. Конъюгат по п. 4, характеризующийся тем, что опухолевый антиген представляет собой раково-эмбриональный антиген (РЭА).
6. Конъюгат по любому из предшествующих пунктов, характеризующийся тем, что фрагмент Т выбран из антитела, фрагмента антитела и гибридного белка, содержащего по меньшей мере одну вариабельную область антитела; причем указанное антитело, необязательно, представляет собой химерное моноклональное антитело (mAb).
7. Конъюгат по любому из предшествующих пунктов, характеризующийся тем, что фрагмент Т представляет собой химерное моноклональное антитело, которое связывается с одним или более эпитопами антигена РЭА.
8. Конъюгат по п. 7, характеризующийся тем, что фрагмент F имеет формулу (II), и при этом химерное моноклональное антитело, направленное против эпитопа GOLD-2 РЭА, содержит тяжелые цепи аллотипа Glm3 и легкие цепи аллотипа km3, где каждая тяжелая цепь и каждая легкая цепь содержит по меньшей мере один вариабельный домен IgG1 мыши и по меньшей мере один константный домен иммуноглобулина человека.
9. Конъюгат по п. 8, характеризующийся тем, что химерное моноклональное антитело содержит вариабельную область легкой цепи последовательности SEQ ID NO: 4, и вариабельную область тяжелой цепи последовательности SEQ ID NO: 3.
10. Конъюгат по любому из пп. 1-5, характеризующийся тем, что фрагмент Т представляет собой непептидный лиганд.
11. Конъюгат по любому из предшествующих пунктов, характеризующийся тем, что n фрагментов F присоединено к одному фрагменту Т, где n представляет собой целое число, выбранное из 1-4.
12. Композиция, содержащая конъюгат по любому из предшествующих пунктов, причем указанная композиция, необязательно, (a) является стерильной и содержит водный буфер и L-аргинин и/или (b) содержит соединение, содержащее фрагмент Т, который не соединен с фрагментом F.
13. Композиция по п. 12, отличающаяся тем, что средняя степень конъюгирования для конъюгата в композиции составляет примерно от 0,5 до 3.
14. Способ получения флуоресцентного конъюгата, включающий этапы (a) обеспечения флуорохрома, имеющего формулу (III)
,
3
3
3
-
где Y независимо для каждого случая выбран из SOH, SO и SOM,
где М представляет собой одновалентный катион;
х, z и y независимо выбраны из целого числа от 1 до 8 и
Z выбран из противоиона, водорода, сукцинимидила, сульфосукцинимидила и нитрофенила,
(b) обеспечения нацеливающего агента, обладающего аффинностью в отношении опухолевого маркера; и
(c) соединения флуорохрома с нацеливающим агентом.
3
3
-
15. Способ по п. 14, характеризующийся тем, что Y выбран из SO и SONa.
16. Способ по п. 14 или 15, характеризующийся тем, что нацеливающий агент представляет собой химерное моноклональное антитело, обладающее аффинностью в отношении РЭА, и/или флуорохром представляет собой соединение формулы (IV):
.
17. Применение конъюгата по пп. 1-11 или композиции по пп. 12, 13 in vitro для детекции опухолевой клетки в образце или для диагностики и/или мониторинга опухоли.
18. Применение конъюгата по пп. 1-11 или композиции по пп. 12, 13 для медицинского лечения или диагностики.
19. Применение конъюгата по пп. 1-11 или композиции по пп. 12, 13 для (a) детекции у пациента опухолевых очагов, которые экспрессируют опухолевый маркер, или для определения положения опухоли, экспрессирующей опухолевый маркер, и/или (b) детекции опухолевых клеток или опухолевой ткани по краю резекции у пациента, подвергающегося или подвергавшегося резекционному хирургическому лечению опухоли, экспрессирующей опухолевый маркер.
20. Применение по п. 18 или 19, где применение включает этапы
(a) введения указанного конъюгата или композиции пациенту с опухолью;
(b) инициации резекционного хирургического лечения опухоли у указанного пациента;
(c) освещения ткани в области резекции у пациента, проходящего резекционное хирургическое лечение светом имеющим длину волны от примерно 660 до 700 нм,
где этап (b) осуществляют в пределах не более чем примерно 96 часов после этапа (а).
21. Применение по любому из пп. 18-20, где опухоль представляет собой колоректальный рак, рак желудка, рак желчных протоков, рак поджелудочной железы, рак пищевода, рак яичников, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак печени или рак легких.
22. Применение по п. 21, где опухоль представляет собой злокачественную опухоль желудочно-кишечного тракта, и конъюгат представляет собой конъюгат по п. 8 или 9.
23. Применение по любому из пп. 18-22, где конъюгат или композицию вводят местно, путем ингаляции или путем внутривенной, внутрибрюшинной, подкожной или внутримышечной инъекции или перфузии.