ИНГИБИТОРЫ РЕГУЛИРУЮЩЕЙ АПОПТОТИЧЕСКИЕ СИГНАЛЫ КИНАЗЫ 1 И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ
INHIBITORS OF APOPTOTIC SIGNAL-REGULATING KINASE 1, AND THEIR PRODUCTION METHODS

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
Данная заявка испрашивает приоритет по предварительным заявкам США №62/505,202, поданной 12 мая 2017 г, №62/523,472, поданной 22 июня 2017 г, и №62/550,960, поданной 28 августа 2017 г. Описания выше указанных заявок целиком включены в данный документ посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Данное изобретение в целом относится к соединениям и фармацевтическим композициям, полезным в качестве ингибиторов ASK-1. Конкретнее, данное изобретение относится к соединениям, полезным в качестве ингибиторов ASK-1, и способам их получения и применения.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Регулирующая апоптотические сигналы киназа 1 (ASK-1) является членом семейства митоген-активированных протеинкиназ (MAPKKK, MAP3K), которые при активировании фосфорилируют нижестоящие МАР-киназы (MAPKK, MAP2K), что, в свою очередь, активирует МАР-киназы (MAPK). МАР-киназы вызывают ответ путем фосфорилирования клеточных субстратов, таким образом регулируя активность транскрипционных факторов, которые в конечном итоге контролируют экспрессию генов. Конкретнее, ASK-1 также известная как MAPKKK5, фосфорилирует MAPKK4/MAPKK7 или MAPKK3/MAPKK6, что, следовательно, фосфорилирует и активирует c-Jun N-терминальную протеинкиназу (JNK) и р38 МАР-киназы, соответственно (Н. Ichijo, et al., Cell Comm. Signal 2009, 7, 1-10; K. Takeda, et al., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2008, 48, 199-225; H. Nagai, et al., J. Biochem. Mol. Biol. 2007, 40, 1-6). Активирование путей JNK и p38 запускает последующий стрессовый ответ, а именно апоптоз, воспаление или дифференциацию (Н. Ichijo, et al., Science1997, 275, 90-94; K. Takeda, et al., J. Biol. Chem.2000, 275, 9805-9813; K. Tobiume, et al., EMBO Rep. 2001, 2, 222-228; K. Sayama et al., J. Biol. Chem.2001, 276, 999-1004).
Активность ASK-1 регулируется тиоредоксином (Trx), который связывается с N-терминальным концом ASK-1 (М. Saitoh, et al., EMBO J. 1998, 17, 2596-2606). ASK-1 активируется после аутофосфорилирования у Thr838 в ответ на раздражители окружающей среды, включая окислительный стресс, липополисахариды (ЛПС), активные формы кислорода (АФК), стресс эндоплазматического ретикулума (ЭР), повышение концентрации клеточных ионов кальция, лиганд Fas и различные цитокины, а именно фактор некроза опухоли (ФНО) (Н. Nishitoh, et al., Genes Dev. 2002, 16, 1345-1355; K. Takeda, et al., EMBO Rep. 2004, 5, 161-166; A. Matsuzawa, et al., Nat. lmmunol. 2005, 6, 587-592).
ASK-1 связывали с аутоиммунными расстройствами, нейродегенеративными расстройствами, воспалительными заболеваниями, хроническим заболеванием почек, сердечно-сосудистым заболеванием, метаболитическими расстройствами и острыми и хроническими заболеваниями печени (R. Hayakawa, et al., Proc. Jpn. Acad., Ser. В 2012, 88, 434-453).
Конкретнее, ASK-1 связывали с жировым гепатозом, включая неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП) и неалкогольный стеатогепатит (НАСГ). В мышиной модели диеты с высоким содержанием жира вызывали стеатоз печени, в конечном итоге приводящий к накоплению жира и окислению жирных кислот. Это приводило к образованию АФК, что вызывало дисфункцию гепатоцитов и смерть (S.K. Mantena, et al., Free Radio. Biol. Med. 2008, 44, 1259-1272; S.K. Mantena, et al., Biochem. J. 2009, 417, 183-193). Более того, было показано, что ФНО является критическим для апоптоза гепатоцитов посредством пути ASK-1-JNK, а у мышей с дефицитом ФНО наблюдался сниженный стеатоз печени и фиброз (W. Zhang et al., Biochem. Biophys. Res. Commun.2010, 391, 1731-1736).
Соединения, имеющие небольшие молекулы, которые действуют как ингибиторы ASK-1, были раскрыты в следующих публикациях: WO 2008/016131, WO 2009/027283, WO 2009/0318425, WO 2009/123986, US 2009/0318425, WO 2011/041293, WO 2011/097079, US 2011/0009410, G.P. Volynets, et al., J. Med. Chem.2011, 54, 2680-2686, WO 2012/003387, WO 2012/011548, WO 2012/080735, Y. Terao, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett.2012, 22, 7326-7329, WO 2013/112741, G.P. Volynets, et al., Eur. J. Med. Chem.2013, 16, 104-115, US 2014/0018370, WO 2014/100541, WO 2015/095059, WO 2016/049069, WO 2016/049070.
Существует необходимость в разработке ингибиторов ASK-1 для лечения и профилактики заболевания. В данном изобретении приведены соединения, которые ингибируют ASK-1, а также способы применения этих соединений для лечения заболевания.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Данное изобретение относится к соединениям и фармацевтическим композициям, полезным в качестве ингибиторов ASK-1. Конкретнее, данное изобретение относится к соединениям, полезным в качестве ингибиторов ASK-1, и способам их получения и применения. Дополнительно, в данном изобретении предложен способ получения указанных соединений.
В основном аспекте данного изобретения предложено соединение Формулы (I), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
где:
выбирают из
1
2
3
5
каждый X, X и X независимо выбирают из N и C(R);
3
4
5
каждый R, R и R независимо выбирают из группы, состоящей из:
1) Водорода;
2) Галогена;
2
3) -NO;
4) Циано;
1
8
5) Необязательно замещенного -С-С-алкила;
3
8
6) Необязательно замещенного -С-С-циклоалкила;
7) Необязательно замещенного от 3- до 8-членного гетероциклоалкила; и
1
8
8) Необязательно замещенного -C-C-алкокси;
R выбирают из
групп:
где каждое триазольное или имидазольное кольцо необязательно дополнительно замещено;
1
R выбирают из группы, состоящей из:
1) Водорода;
1
8
2) Необязательно замещенного -C-С-алкила;
2
8
3) Необязательно замещенного - С-С-алкенила;
2
8
4) Необязательно замещенного - С-С-алкинила;
3
8
5) Необязательно замещенного - С-C-циклоалкила;
6) Необязательно замещенного арила;
7) Необязательно замещенного арилалкила;
8) Необязательно замещенного от 3-до 8-членного гетероциклоалкила;
9) Необязательно замещенного гетероарила;
10) Необязательно замещенного гетероарилалкила; и
6
7
6
7
7
8
1
15
1
8
3
11) -N(R)(R), где R и R независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, C-С-алкила, предпочтительно C-C-алкила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила и гетероарила, причем каждый алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, алкила, алкиламино, диалкиламино, алкил-С(O)NH-, арил-С(O)NH-, гетероарил-С(О)-NH, -CN, алкокси, -CF, арила и гетероарила; в альтернативном варианте, R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклический фрагмент молекулы;
1
6
7
при условии, что если R представляет собой  R не представляет собой -N(R)(R);
1
R выбирают из группы, состоящей из:
1) Водорода;
2) Галогена;
2
3) -NO;
4) Циано;
1
8
5) Необязательно замещенного -C-C-алкила;
2
8
6) Необязательно замещенного -С-C-алкенила;
2
8
7) Необязательно замещенного -С-С-алкинила;
3
8
8) Необязательно замещенного -С-С-циклоалкила;
9) Необязательно замещенного арила;
10) Необязательно замещенного арилалкила;
11) Необязательно замещенного от 3- до 8-членного гетероциклоалкила;
12) Необязательно замещенного гетероарила;
13) Необязательно замещенного гетероарилалкила;
6
7
14) -N(R)(R);
2
6
7
15) -S(O)N(R)(R);
6
7
16 )-N(R)C(O)(R); и
6
7
2
17) -N(R)S(O)(R);
6
7
где R и R ранее описаны.
В другом варианте реализации данного изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения или комбинации соединений по данному изобретению, или фармацевтически приемлемую соль, стереоизомер, сольват, гидрат или их комбинацию, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или вспомогательным веществом.
В другом варианте реализации данного изобретения предложен способ профилактики или лечения заболевания или состояния, опосредованного ASK-1. Способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения Формулы (I). В данном изобретении также предложено применение соединения Формулы (I) для получения лекарственного средства для профилактики или лечения заболевания или состояния, опосредованного ASK-1. Такие заболевания включают аутоиммунные расстройства, нейродегенеративные расстройства, воспалительные заболевания, хроническое заболевание почек, сердечно-сосудистое заболевание, метаболитическое расстройство и острое и хроническое заболевание печени.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Первый вариант реализации изобретения представляет собой соединение, представленное Формулой (I), описанное выше, или его фармацевтически приемлемую соль или сложный эфир.
В определенных вариантах реализации данное изобретение относится к соединениям Формулы (I) и фармацевтически приемлемым солям, сложным эфирам, стереоизомерам, таутомерам, сольватам, гидратам или их комбинации, причем  выбирают из групп, приведенных ниже:
5
4
причем каждая из этих групп по возможности необязательно замещена, и каждый R и R являются такими, как описано ранее.
1
В определенных вариантах реализации данное изобретение относится к соединениям Формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям и сложным эфирам, причем X представляет собой -N-, -C(F) или -С(ОМе)-.
1
В определенных вариантах реализации данное изобретение относится к соединениям Формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям и сложным эфирам, причем R выбирают из групп, приведенных ниже:
причем каждая из этих групп необязательно замещена.
2
В определенных вариантах реализации данное изобретение относится к соединениям Формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям и сложным эфирам, причем R выбирают из групп, приведенных ниже:
причем каждая из этих групп необязательно замещена.
3
В определенных вариантах реализации данное изобретение относится к соединениям Формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям и сложным эфирам, причем R выбирают из групп, приведенных ниже:
причем каждая из этих групп необязательно замещена.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное Формулой (Ia), (Ib), (Ic) или (Id), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
3
1
где , R, R, R и X имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное Формулой (IIa) или (IIb), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
3
1
где, R, R, R и X ранее описаны.  выбирают из групп, приведенных ниже,
1
где валентность, обозначенная  присоединена к пиридиновому или триазольному кольцу; валентность, обозначенная  присоединена к R, и каждое триазольное или имидазольное кольцо дополнительно необязательно замещено. Предпочтительно,  дополнительно не замещено.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное одной из Формул (IIa-1)~(IIa-4) и (IIb-1)~(IIb-4), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
3
1
где, R, R, R и X имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное Формулой (IIIa) или (IIIb), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
1
где, , R, R и X имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное одной из Формул (IIIa-1)~(IIIa-4) и (IIIb-1)~(IIIb-4), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
1
где, R, R и X имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное Формулой (IVa) или (IVb), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
где, , R и R имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное одной из Формул (IVa-1)~(IVa-4) и (IVb-1)~(IVb-4), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
где, R и R имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное Формулой (Va) или (Vb), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
где, , R и R имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное одной из Формул (Va-1)~(Va-4) и (Vb-1)~(Vb-4), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
где, R и R имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное Формулой (VIa) или (VIb), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
где, , R и R имеют значения, определенные ранее.
В одном варианте реализации изобретения предложено соединение, представленное одной из Формул (VIa-1)~(VIa-4) и (VIb-1)~(VIb-4), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
1
2
где, R и R имеют значения, определенные ранее.
1
2
Типичные соединения по изобретению включают, но не ограничиваются ими, следующие соединения (от Строки 1 до Строки 100 в Таблице 1) Формулы (IVa), где R и R для каждого соединения приведены в Таблице 1, и  имеет значение, определенное ранее и дополнительно не замещен.
1
2
Типичные соединения по изобретению включают, но не ограничиваются ими, следующие соединения (от Строки 101 до Строки 200 в Таблице 2) Формулы (IVb), где R и R для каждого соединения приведены в Таблице 2, и  имеет значение, определенное ране и дополнительно не замещен.
1
2
Типичные соединения по изобретению включают, но не ограничиваются ими, следующие соединения (от Строки 201 до Строки 300 в Таблице 3) Формулы (Va), где R и R для каждого соединения приведены в Таблице 3, и  имеет значение, определенное ранее и дополнительно не замещен.
1-
2
Типичные соединения по изобретению включают, но не ограничиваются ими, следующие соединения (от Строки 301 до Строки 400 в Таблице 4) Формулы (Vb), где Rи R для каждого соединения приведены в Таблице 4, и  имеет значение, определенное ранее и дополнительно не замещен.
1
2
Типичные соединения по изобретению включают, но не ограничиваются ими, следующие соединения (от Строки 401 до Строки 500 в Таблице 5) Формулы (VIa), где R и R для каждого соединения приведены в Таблице 5 и  имеет значение, определенное ранее.
1
2
Типичные соединения по изобретению включают, но не ограничиваются ими, следующие соединения (от Строки 501 до Строки 600 в Таблице 6) Формулы (VIb), где R и R для каждого соединения приведены в Таблице 6, и  имеет значение, определенное ранее и дополнительно не замещен.
В определенных вариантах реализации данного изобретения предложен способ профилактики или лечения заболевания или состояния, опосредованного ASK-1. Способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения Формулы (I). В данном изобретении также предложено применение соединения Формулы (I) для получения лекарственного средства для лечения заболевания или состояния, опосредованного ASK-1.
В определенных вариантах реализации изобретения заболевание или состояние, опосредованное ASK-1, представляет собой аутоиммунное расстройство, нейродегенеративное расстройство, воспалительное заболевание, хроническое заболевание почек, почечную недостаточность, сердечно-сосудистое заболевание, метаболитическое заболевание или острое или хроническое заболевание печени.
В некоторых вариантах реализации изобретения хроническое заболевание печени представляет собой первичный билиарный цирроз (ПБЦ), церебротендиновый ксантоматоз (ЦТК), первичный склерозирующий холангит (ПСХ), холестаз, вызванный лекарственным средством, внутрипеченочный холестаз беременности, холестаз, связанный с парентеральным питанием (ХПП), чрезмерное развитие микрофлоры или сепсис, связанный с холестазом, аутоиммунный гепатит, хронический вирусный гепатит, алкогольную болезнь печени, неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП), неалкогольный стеатогепатит (НАСГ), болезнь «трансплантат против хозяина», связанную с трансплантацией печени, регенерацию печени, пересаженной от живого донора, врожденный фиброз печени, холедохолитиаз, гранулематозное поражение печени, внутри- или внепеченочную злокачественность, синдром Шегрена, саркоидоз, болезнь Вильсона, болезнь Гоше, гемохроматоз или дефицит альфа-1-антитрипсина. В определенных вариантах реализации изобретения желудочно-кишечное заболевание представляет собой воспалительное заболевание кишечника (ВЗК) (включая болезнь Крона и язвенный колит), синдром раздраженного кишечника (СРК), избыточное развитие микрофлоры, синдром мальабсорбции, пострадиационный колит или микроскопический колит.
В определенных вариантах реализации изобретения почечная недостаточность представляет собой диабетическую нефропатию, очаговый сегментарный гломерулосклероз (ОСГС), гипертонический нефросклероз, хронический гломерулонефрит, хроническую посттрансплантационную гломерулопатию, хронический интерстициальный нефрит или поликистоз почек.
В определенных вариантах реализации изобретения сердечно-сосудистое заболевание представляет собой атеросклероз, артериосклероз, реперфузию/ишемию при инсульте, гипертрофию сердца, респираторные заболевания, инфаркт миокарда, ишемию миокарда.
В определенных вариантах реализации изобретения метаболитическое заболевание представляет собой инсулино-резистентность, диабет I и II типов или ожирение.
В определенных вариантах реализации изобретения хроническое заболевание почек представляет собой поликистоз почек, пиелонефрит, фиброз почек и гломерулонефрит.
Дополнительный аспект данного изобретения представляет собой способ получение любого из соединений, приведенных в данном документе, с помощью любого средства синтеза, приведенного в данном документе.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Ниже перечислены определения различных терминов, использованных для описания данного изобретения. Эти определения применяются к терминам в таком виде, как они используются по всему описанию и формуле изобретения, если иное не ограничено в определенных примерах, либо отдельно, либо как часть большей группы.
1
3
1
6
1
10
2
4
3
6
1
8
Применяемый в данном документе термин «алкил» относится к насыщенным, линейным или разветвленным углеводородным радикалам. «C-С-алкил», «C-С-алкил», «C-С-алкил», «С-С-алкил» или «С-С-алкил» относится к алкильным группам, содержащим от одного до трех, от одного до шести, от одного до десяти атомов углерода, от 2 до 4 и от 3 до 6 атомов углерода, соответственно. Примеры C-C-алкильных радикалов включают, но не ограничиваются ими, метальный, этильный, пропильный, изопропильный, н-бутильный, трет-бутильный, неопентильный, н-гексильный, гептильный и октильный радикалы.
2
10
2
8
2
4
3
6
Применяемый в данном документе термин «алкенил» относится к линейным или разветвленным углеводородным радикалам, содержащим по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь посредством удаления одного атома водорода. «С-С-алкенил», «С-С-алкенил», «С-С-алкенил» или «С-С-алкенил» относится к алкенильным группам, содержащим от двух до десяти, от двух до восьми, от двух до четырех или от трех до шести атомов углерода, соответственно. Алкенильные группы включают, но не ограничиваются ими, например, этенил, пропенил, бутенил, 1-метил-2-бутен-1-ил, гептенил, октенил и тому подобное.
2
10
2
8
2
4
3
6
Применяемый в данном документе термин «алкинил» относится к линейным или разветвленным углеводородным радикалам, содержащим по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь посредством удаления одного атома водорода. «С-С-алкинил», «С-С-алкинил», «С-С-алкинил» или «С-С-алкинил» относится к алкинильным группам, содержащим от двух до десяти, от двух до восьми, от двух до четырех или от трех до шести атомов углерода, соответственно. Типичные алкинильные группы включают, но не ограничиваются ими, например, этинил, 1-пропинил, 1-бутинил, гептинил, октинил и тому подобное.
3
12
3
6
3
8
4
7
3
12
Применяемый в данном документе термин «циклоалкил» относится к моноциклическому или полициклическому насыщенному карбоциклическому кольцу или би- или трициклической группе конденсированной, мостиковой или спиро-системы, а атомы углероды необязательно оксо-замещены или необязательно замещены экзоциклической олефиновой, иминовой или оксимовой двойной связью. Предпочтительные циклоалкильные группы включают С-С-циклоалкил, С-С-циклоалкил, С-С-циклоалкил и С-С-циклоалкил. Примеры С-С-циклоалкила включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, 4-метиленциклогексил, бицикло[2.2.1]гептил, бицикло[3.1.0]гексил, спиро[2.5]октил, 3-метиленбицикло[3.2.1]октил, спиро[4.4]нонанил и тому подобное.
3
12
3
8
5
7
3
12
Применяемый в данном документе термин «циклоалкенил» относится к моноциклическому или полициклическому карбоциклическому кольцу или би- или трициклической группе конденсированной, мостиковой или спиро-системы, содержащей по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, а атомы углероды необязательно оксо-замещены или необязательно замещены экзоциклической олефиновой, иминовой или оксимовой двойной связью. Предпочтительные циклоалкенильные группы включают С-С-циклоалкенильные, С-С-циклоалкенильные или С-С-циклоалкенильные группы. Примеры С-С-циклоалкенилов включают, но не ограничиваются ими, циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил, циклооктенил, бицикло[2.2.1]гепт-2-енил, бицикло[3.1.0]гекс-2-енил, спиро[2.5]окт-4-енил, спиро[4.4]нон-1-енил, бицикло[4.2.1]нон-3-ен-9-ил и тому подобное.
Применяемый в данном документе термин «арил» относится к моно- или полициклической карбоциклической кольцевой системе, содержащей по меньшей мере одно ароматическое кольцо, включая, но не ограничиваясь ими, фенил, нафтил, тетрагидронафтил, инданил и инденил. Полициклический арил представляет собой полициклическую кольцевую систему, содержащую по меньшей мере одно ароматическое кольцо. Полициклические арилы содержат конденсированные кольца, ковалентно соединенные кольца или их комбинацию.
Применяемый в данном документе термин «гетероарил» относится к моно- или полициклическому ароматическому радикалу, содержащему один или более циклообразующих атомов, выбранных из S, О и N; а остальные циклообразующие атомы представляют собой углерод, причем любой N или S, содержащийся в кольце, необязательно окислен. Гетероарил включает, но не ограничивается ими, пиридинил, пиразинил, пиримидинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, изоксазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, тиофенил, фуранил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензоксазолил, хиноксалинил. Полициклические гетероарилы содержат конденсированные кольца, ковалентно соединенные кольца или их комбинацию.
В соответствии с изобретением, ароматические группы являются замещенными или незамещенными. Термин «бициклический арил» или «бициклический гетероарил» относится к кольцевой системе, состоящей из двух колец, причем по меньшей мере одно кольцо является ароматическим; и два кольца являются конденсированными или ковалентно связанными.
2
2
Применяемый в данном документе термин «арилалкил» означает функциональную группу, в которой алкиленовая цепь присоединена к арильной группе, например, -СНСН-фенил. Термин «замещенный арилалкил» означает арилалкильную функциональную группу, в которой арильная группа является замещенной. Аналогично, термин «гетероарилалкил» означает функциональную группу, причем алкиленовая цепь присоединена к гетероарильной группе. Термин «замещенный гетероарилалкил» означает гетероарилалкильную функциональную группу, в которой гетероарильная группа является замещенной.
2
2
2
2
2
2
3
2
Применяемый в данном документе термин «алкилен» относится к двухвалентному радикалу разветвленной или неразветвленной насыщенной углеводородной цепи, как правило, содержащей от 1 до 20 атомов углерода (например, от 1 до 10 атомов углерода, или 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода). Этот термин представлен такими группами, как метилен (-СН-), этилен (-СНСН-), изомеры пропилена (например, СНСНСН и -СН(СН)СН-), и тому подобное.
2
2
3
1
6
2
12
2
12
1
12
2
12
2
12
3
12
1
12
2
12
2
12
3
12
1
12
2
12
2
12
3
12
1
12
2
12
2
12
3
12
2
1
12
2
12
2
12
3
12
2
1
12
2
2
12
2
2
12
2
3
12
2
2
2
2
1
12
2
12
2
12
3
12
1
12
2
12
2
12
3
12
2
1
12
2
2
12
2
2
12
2
3
12
2
2
2
2
1
12
2
12
2
12
3
12
2
1
12
2
12
2
12
3
12
2
1
12
2
12
2
12
3
12
1
12
2
12
2
12
3
12
1
12
2
12
2
12
3
12
2
2
2
1
12
2
2
12
2
2
12
2
3
12
2
2
2
2
1
12
2
2
12
2
2
12
2
3
12
2
2
2
2
2
2
2
3
3
12
1
12
2
12
2
12
3
12
1
6
2
6
2
6
3
12
3
12
1
6
2
2
Применяемый в данном документе термин «замещенный» относится к независимой замене одного, двух или трех, или более атомов водорода заместителями, включая, но не ограничиваясь ими, дейтерий, -F, -Cl, -Br, -I, -ОН, защищенную гидрокси-группу, -NO, -CN, -NH, N, замещенную амино-группу, алкокси, тиоалкокси, оксо, C-C-алкил, С-С-алкенил, С-С-алкинил, -галоген-С-С-алкил, -галоген-С-С-алкенил, -галоген-С-С-алкинил, -галоген-С-С-циклоалкил, -NH-C-C-алкил, -NH-С-С-алкенил, -NH-С-С-алкинил, -NH-С-С-циклоалкил, -NH-арил, -NH-гетероарил, -NH-гетероциклоалкил, -диалкиламино, -диариламино, -дигетероариламино, -O-С-С-алкил, -О-С-С-алкенил, -О-С-С-алкинил, -О-С-С-циклоалкил, -О-арил, -О-гетероарил, -О-гетероциклоалкил, -С(O)-С-С-алкил, -С(О)-С-С-алкенил, -С(О)-С-С-алкинил, -С(O)-С-С-циклоалкил, -С(O)-арил, -С(O)-гетероарил, -С(О)-гетероциклоалкил, -CONH, -CONH-C-С-алкил, -CONH-С-С-алкенил, -CONH-С-С-алкинил, -CONH-С-С-циклоалкил, -CONH-арил, -CONH-гетероарил, -CONH-гетероциклоалкил, -ОСО-С-С-алкил, -OCO-С-C-алкенил, -OCO-С-С-алкинил, -ОСО-С-С-циклоалкил, -OCO-арил, -OCO-гетероарил, -OCO-гетероциклоалкил, -OCONH, -OCONH-С-С-алкил, -OCONH-С-С-алкенил, -OCONH-С-С-алкинил, -OCONH-С-С-циклоалкил, -OCONH-арил, -OCONH-гетероарил, -OCONH-гетероциклоалкил, -NHC(O)-С-С-алкил, -NHC(O)-С-С-алкенил, -NHC(O)-C-C-алкинил, -NHC(O)-С-С-циклоалкил, -NHC(O)-арил, -NHC(O)-гетероарил, -NHC(O)-гетероциклоалкил, -NHCO-C-С-алкил, -NHCO-С-С-алкенил, -NHCO-C-C-алкинил, -NHCO-С-С-циклоалкил, -NHCO-арил, -NHCO-гетероарил, -NHCO-гетероциклоалкил, -NHC(O)NH, -NHC(O)NH-C-C-алкил, -NHC(O)NH-С-С-алкенил, -NHC(O)NH-С-С-алкинил, -NHC(O)NH-С-С-циклоалкил, -NHC(O)NH-арил, NHC(O)NH-гетероарил, -NHC(O)NH-гетероциклоалкил, NHC(S)NH, -NHC(S)NH-C-C-алкил, -NHC(S)NH-С-С-алкенил, -NHC(S)NH-C-C-алкинил, -NHC(S)NH-C-C-циклоалкил, -NHC(S)NH-арил, -NHC(S)NH-гетероарил, -NHC(S)NH-гетероциклоалкил, -NHC(NH)NH, -NHC(NH)NH-C-C-алкил, -NHC(NH)-C-C-алкенил, -NHC(NH)-C-C-алкинил, -NHC(NH)-С-С-циклоалкил, -NHC(NH)-арил, -NHC(NH)-гетероарил, NHC(NH)-гетероциклоалкил, -C(NH)NH-C-C-алкил, -С(NH)NH-С-С-алкенил, C(NH)NH-C-C-алкинил, -С(NH)NH-С-С-циклоалкил, -C(NH)NH-алкил, -C(NH)NH-гетероарил, -С(NH)NH-гетероциклоалкил, -S(O)-С-С-алкил, -S(O)-С-С-алкенил, -S(O)-С-С-алкинил, -S(O)-С-С-циклоалкил, -S(O)-арил, -S(O)-гетероарил, -S(O)-гетероциклоалкил-SONH, -SONH-C-С-алкил, -SONH-С-С-алкенил, -SONH-C-С-алкинил, -SONH-С-С-циклоалкил, -SONH-арил, -SONH-гетероарил, -SONH-гетероциклоалкил, -NHSO-С-С-алкил, -NHSO-С-С-алкенил, -NHSO-C-C-алкинил, -NHSO-С-С-циклоалкил, -NHSO-арил, -NHSO-гетероарил, -NHSO-гетероциклоалкил, -CHNH, -CHSOCH, -арил, -арилалкил, -гетероарилалкил, -гетероциклоалкил, -С-С-циклоалкил, полиалкоксиалкил, полиалкокси, метоксиметокси, -метоксиэтокси, -SH, -S-С-С-алкил, -S-С-С-алкенил, -S-C-C-алкинил, -S-С-С-циклоалкил, -S-арил, -S-гетероарил, -S-гетероциклоалкил, метилтиометил или -L'-R', причем L' представляет собой C-C-алкилен, С-С-алкенилен или С-С-алкинилен и R' представляет собой арил, гетероарил, гетероциклический фрагмент, С-С-циклоалкил или С-С, циклоалкенил. Понятно, что арилы, гетероарилы, алкилы и тому подобное дополнительно замещены. В некоторых случаях каждый заместитель в замещенном фрагменте молекулы является дополнительно необязательно замещенным одной или более группами, причем каждую группу выбирают независимо из C-C-алкил, -F, -Cl, -Br, -I, -ОН, -NO, -CN или -NH.
В соответствии с изобретением любой из арилов, замещенных арилов, гетероарилов или замещенных гетероарилов, описанных в данном документе, представляет собой любую ароматическу группу. Ароматические группы являются замещенными или незамещенными.
Понятно, что любой алкильный, алкенильный, алкинильный, циклоалкильный и циклоалкенильный фрагмент молекулы, описанный в данном документе, также представляет собой алифатическую группу, алициклическую группу или гетероциклическую группу. «Алифатическая группа» представляет собой неароматический фрагмент молекулы, который содержит любую комбинацию атомов углерода, атомов водорода, атомов галогена, кислорода, азота и других атомов, и необязательно содержит одну или более областей ненасыщенности, например, двойные и/или тройные связи. Алифатическая группа является линейной, разветвленной или циклической и предпочтительно содержит от около 1 до около 24 атомов углерода, конкретнее от около 1 до около 12 атомов углерода. Дополнительно к алифатическим углеводородным группам алифатические группы включают, например, полиалкоксиалкилы, а именно полиалкиленгликоли, полиамины и полиимины. Такие алифатические группы дополнительно замещены. Понятно, что алифатические группы применяются вместо алкильных, алкенильных, алкинильных, алкиленовых, алкениленовых и алкиниленовых групп, описанных в данном документе.
Применяемый в данном документе термин «алициклический» означает одновалентную группу, полученную из моноциклического или полициклического насыщенного карбоциклического кольцевого соединения посредством удаления одного атома водорода. Примеры включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, бицикло[2.2.1]гептил и бицикло[2.2.2]октил. Такие алициклические группы дополнительно замещены.
1
3
Применяемый в данном документе термин «алкокси» отдельно или в комбинации с другими терминами означает, если иное не указано, алкильную группу, содержащую заданное количество атомов углерода, соединенных с остальной молекулой с помощью атома кислорода, а именно, например, метокси, этокси, 1-пропокси, 2-пропокси (изопропокси) и высшие гомологи и изомеры. Предпочтительные алкокси представляют собой (С-С)-алкокси.
Термин «арилокси» относится к группе арил-О-, причем арильная группа описана выше и содержит необязательно замещенную арильну группу, что также описано выше. Термин «арилтио» относится к группе R-S, причем R описан для арила.
Термины «гетероциклический» или «гетероциклоалкил» используются как синонимы и относятся к неароматическому кольцу или би- или трициклической группе конденсированной, мостиковой или спиро-системы, причем (1) каждая кольцевая система содержит по меньшей мере один гетероатом, независимо выбранный из кислорода, серы и азота; (2) каждая кольцевая система является насыщенной или ненасыщенной; (3) атомы азота и серы необязательно окислены; (4) гетероатом азота необязательно является четвертичным; (5) любое из выше описанных колец сконденсировано с ароматическим кольцом; и (6) оставшиеся циклообразующие атомы представляют собой атомы углерода, которые являются необязательно оксо-замещенными или необязательно замещенными экзоциклической олефиновой, иминовой или оксимовой двойной связью. Типичные гетероциклоалкильные группы включают, но не ограничиваются ими, 1,3-диоксолан, пирролидинил, пиразолинил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, хиноксалинил, пиридазинонил, 2-азабицикло[2.2.1]гептил, 8-азабицикло[3.2.1]октил, 5-азаспиро[2.5]октил, 1-окса-7-азаспиро[4.4]нонанил, 7-оксоксепан-4-ил и тетрагидрофурил. Такие гетероциклические группы дополнительно замещены. Гетероарильные или гетероциклические группы присоединены к С или N (где это возможно).
Понятно, что любой алкильный, алкенильный, алкинильный, цикло алкильный, гетероциклический и циклоалкенильный фрагмент молекулы, описанный в данном документе, также представляет собой алифатическую группу или алициклическую группу.
Очевидно, что в различных вариантах реализации изобретения подразумевается, что замещенный или незамещенный алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, циклоалкинил, ариалкил, гетероарилалкил и гетероциклоалкил являются одновалентными или двухвалентными. Следовательно, алкиленовые, алкениленовые и алкиниленовые, циклоалкиленовые, циклоалкениленовые, циклоалкиниленовые, арилалкиленовые, гетероарилалкиленовые и гетероциклоалкиленовые группы предназначены быть включенными в выше приведенные описания, и применяются для обозначения Формул в данном документе надлежащей валентностью.
Применяемый в данном документе термин «галоген» относится к атому, выбранному из фтора, хлора, брома и йода.
Применяемый в данном документе термин «необязательно замещенный» означает, что указанные группы являются замещенными или незамещенными. В одном варианте реализации изобретения указанная группа необязательно замещена нулем заместителей, т.е., указанная группа незамещена. В другом варианте реализации изобретения указанная группа необязательно замещена одной или более дополнительной(ыми) группой(ами), отдельно и независимо выбранной из групп, описанных в данном документе.
Термин «водород» включает водород и дейтерий. Дополнительно, список атомов включает другие изотопы этого атома при условии, что полученное соединение является фармацевтически приемлемым.
В определенных вариантах реализации изобретения указано, что соединения каждой формулы в данном документе включают изотопно-меченные соединения. «Изотопно-меченное соединение» представляет собой соединение, в котором по меньшей мере одна позиция атома обогащена определенным изотопом заданного элемента до уровня, значительно большего, чем распространенность этого изотопа в природе. Например, одна или более позиций атома водорода в соединении обогащена дейтерием до уровня, значительно большего, чем распространенность дейтерия в природе, например, обогащена до уровня по меньшей мере 1%, предпочтительно по меньшей мере 20% или по меньшей мере 50%. Такое дейтерированное соединение, например, метаболизируется более медленно, чем его недейтерированный аналог, и, следовательно, проявляет более долгий период полувыведения при введении субъекту. Такие соединения синтезируют с помощью способов, известных в уровне техники, например, с помощью дейтерированных исходных материалов. Если не указано иное, изотопно-меченные соединения являются фармацевтически приемлемыми.
Соединения, описанные в данном документе, содержат один или более ассиметричных центров и, следовательно, образуют энантиомеры, диастереомеры и другие стереоизомерные формы, которые описывают терминами абсолютной стереохимии, а именно как (R)- или (S)-, или как (D)- или (L)- для аминокислот. Подразумевается, что данное изобретение включает все такие возможные изомеры, а также рацемические и оптически чистые формы. Оптические изомеры получают из их соответствующих оптически чистых прекурсоров с помощью методик, описанных выше, или с помощью разделения рацемических смесей. Разделение проводят в присутствии средства для разделения с помощью хроматографии или повторной кристаллизации, или некоторой комбинации этих методик, известных специалистам в данной области техники. Дополнительные подробности касательно разделения можно найти в Jacques, et al., Enantiomers, Racemates, and Resolutions (John Wiley & Sons, 1981). Если соединения, описанные в данном документе, содержат олефиновые двойные связи, другие области ненасыщенности или другие центры геометрической асимметрии, и если не указано иное, предполагается, что соединения включают и Е и Z-геометрические изомеры, или и цис- и транс-изомеры. Аналогично, также предполагается, что включены все таутомерные формы. Таутомеры являются циклическими или ациклическими. Расположение любой углерод-углеродной двойной связи, появляющейся в данном документе, выбрано только для наглядности и не предназначено для обозначения определенного расположение, если не указано иное; следовательно, углерод-углеродная двойная связь или углерод-гетероатомная двойная связь, произвольно изображенная в данном документе как транс, представляют собой цис, транс или смесь двух в любой пропорции.
Применяемый в данном документе термин «субъект» относится к млекопитающему. Следовательно, субъект относится, например, к собакам, котам, лошадям, коровам, свиньям, морским свинкам и тому подобное. Предпочтительно, субъект представляет собой человека. Если субъектом является человек, то субъект в данном документе именуется пациентом.
Применяемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к тем солям соединений, которые образованы с помощью способа по данному изобретению, и которые, в пределах тщательной медицинской оценки, подходят для применения в контакте с тканями человека и низших животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и тому подобного, и которые соизмеримы с рациональным соотношением преимуществ и рисков. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в области техники.
Berge, et at. подробно описывает фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977). Соли получают in situ при конечном выделении и очистке соединений по изобретению, или отдельно при реакции свободной основной функциональной группы с подходящей органической кислотой. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают, но не ограничиваются ими, нетоксичные кислотно-аддитивные соли, например, соли, образованные из амино-группы с неорганическими кислотами, а именно хлористоводородной кислотой, бромистоводородной кислотой, фосфорной кислотой, серной кислотой и перхлорной кислотой, или с органическими кислотами, а именно уксусной кислотой, малеиновой кислотой, винной кислотой, лимонной кислотой, янтарной кислотой или малоновой кислотой, или с помощью других способов, известных в данной области техники, а именно ионного обмена. Другие фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются ими, адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфоросульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоционат, р-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и тому подобное. Типичные соли щелочных и щелочно-земельных металлов включают натрий, литий, калий, кальций, магний и тому подобное. Дополнительные фармацевтически приемлемые соли включают, при необходимости, нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония и амина, образованные с помощью противоионов, а именно галогенида, гидроксида, карбоксилата, сульфата, фосфата, нитрата, алкила, содержащего от 1 до 6 атомов углерода, сульфоната и арилсульфоната.
1
6
Применяемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемый сложный эфир» относится к сложным эфирам, которые гидролизуют in vivo и включают те, которые легко распадаются в человеческом организме с образованием исходного соединения или его соли. Подходящие сложноэфирные группы включают, например, те, которые получены из фармацевтически приемлемых алифатических карбоновых кислот, в частности, алкановых, алкеновых, циклоалкановых и алкендионовых кислот, в которых алкиловый или алкениловый фрагмент молекулы содержит преимущественно не более чем 6 атомов углерода. Примеры конкретных сложных эфиров включают, но не ограничиваются ими, сложные эфиры C-С-алкановых кислот, а именно эфиры ацетата, пропионата, бутирата и пивалата.
Применяемый в данном документе термин «группа, активирующая гидроксильную группу» относится к подвижному фрагменту химической молекулы, который известен в данной области техники как активирующий гидроксильную группу, так, что она удаляется во время процессов синтеза, а именно реакций замещения или отщепления. Примеры групп, которые активируют гидроксильную группу, включают, но не ограничиваются ими, мезилат, тозилат, трифлат, р-нитробензоат, фосфанат и тому подобное.
Применяемый в данном документе термин «активированная гидроксильная группа» относится к гидроксильной группе, активированной группой, которая активирует гидроксильную группу, как описано выше, включая, например, мезилатные, тозилатные, трифлатные, р-нитробензоатные, фосфанатные группы.
Применяемый в данном документе термин «группа, защищающая гидроксильную группу» относится к подвижному фрагменту химической молекулы, который известен в данной области техники как защищающий гидроксильную группу от нежелательных реакций во время процессов синтеза. После указанных процессов синтеза описанная выше группа, защищающая гидроксильную группу, избирательно удаляется. Группы, защищающие гидроксильную группу, известные в данной области техники, в общем описаны в Т.Н. Greene and P.G.М. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999). Примеры групп, защищающих гидроксильную группу, включают бензилоксикарбонил, 4-метоксибензилоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, изопропоксикарбонил, дифенилметоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, аллилоксикарбонил, ацетил, формил, хлорацетил, трифторацетил, метоксиацетил, феноксиацетил, бензоил, метил, трет-бутил, 2,2,2-трихлорэтил, 2-триметилсилилэтил, аллил, бензил, трифенилметил (тритил), метоксиметил, метилтиометил, бензилоксиметил, 2-(триметилсилил)этоксиметил, метансульфонил, триметилсилил, триизопропилсилил и тому подобное.
Применяемый в данном документе термин «защищенная гидроксильная группа» относится к гидроксильной группе, защищенной группой, которая защищает гидроксильную группу, как описано выше, включая, например, бензоильные, ацетильные, триметилсилильные, триэтилсилильные, метоксиметильные группы.
Применяемый в данном документе термин «неактивная гидроксильная группа» относится к неактивной химической группе, которая известна в данной области техники как временно изменяющая физико-химические и, следовательно, биологические свойства исходного лекарственного средства путем покрытия или максировки гидроксильной группы. После указанных процессов синтеза описанная в данном документе неактивная гидроксильная группа должна быть способна превращаться обратно в гидроксильную группу in vivo. Неактивные гидроксильные группы, известные в данной области техники, в общем описаны в Kenneth В. Sloan, Prodrugs, Topical and Ocular Drug Delivery, (Drugs and the Pharmaceutical Sciences; Volume 53), Marcel Dekker, Inc., New York (1992) и в "Prodrugs of Alcohols and Phenols" by S.S. Dhareshwar and V.J. Stella, in Prodrugs Challenges and Rewards Part-2, (Biotechnology: Pharmaceutical Aspects), изданной V.J. Stella, et al, Springer and AAPSPress, 2007, pp 31-99.
2
Применяемый в данном документе термин «амино» относится к группе -NH.
Применяемый в данном документе термин «замещенная амино-группа» относится к группе -NRR причем каждый R независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, алкила, циклоалкила, арила, гетероарила и гетероциклоалкила, при условии, что обе группы R представляют собой не водород; или к группе -Y-Z, в которой Y необязательно замещен алкиленом и Z представляет собой алкенил, циклоалкенил или алкинил.
Применяемый в данном документе термин «группа, защищающая амино-группу» относится к подвижному фрагменту химической молекулы, который известен в данной области техники как защищающий амино-группу от нежелательных реакций во время процессов синтеза. После указанных процессов синтеза описанная выше группа, защищающая амино-группу, избирательно удаляется. Группы, защищающие аминогруппу, известные в данной области техники, в общем описаны в Т.Н. Greene and P.G.М. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999). Примеры групп, защищающих амино-группу, включают, но не ограничиваются ими, трет-бутоксикарбонил, 9-флуоренилметоксикарбонил, бензилоксикарбонил и тому подобное.
Термин «замещаемая группа» означает функциональную группу или атом, которые заменяют другой функциональной группой или атомом в реакции замещения, а именно реакции нуклеофильного замещения. В качестве примера, типичные замещаемые группы включают хлор, бром и йод; группы сульфонового эфира, а именно мезилат, тозилат, брозилат, нозилат и тому подобное; и ацилокси-группы, а именно ацетокси, трифторацетокси и тому подобное.
Применяемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемый сложный эфир» относится к сложным эфирам соединений, образованных с помощью способов по данному изобретению, которые гидролизуют in vivo и включают те, которые легко распадаются в человеческом организме с образованием исходного соединения или его соли. Подходящие сложноэфирные группы включают, например, те, которые получены из фармацевтически приемлемых алифатических карбоновых кислот, в частности, алкановых, алкеновых, циклоалкановых и алкендионовых кислот, в которых алкиловый или алкениловый фрагмент молекулы содержит преимущественно не более чем 6 атомов углерода. Примеры конкретных сложных эфиров включают, но не ограничиваются ими, формиаты, ацетаты, пропионаты, бутираты, акрилаты и этилсукцинаты.
Применяемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемое пролекарство» относится к тем пролекарствам из соединений, которые образованы с помощью способа по данному изобретению, и которые, в пределах тщательной медицинской оценки, подходят для применения в контакте с тканями человека и низших животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и тому подобного, и которые соизмеримы с рациональным соотношением преимуществ и рисков, и эффективны в их целевом применении; а также, по возможности, к цвиттерионным формам соединений по данному изобретению. Применяемый в данном документе термин «пролекарство» относится к соединению, которое способно превращаться in vivo с помощью метаболитических процессов (например, гидролиза) для получения любого соединения, обозначенного Формулами данного изобретения. В данной области техники известны различные формы пролекарств, которые обсуждаются в Bundgaard, (ed.), Design of Prodrugs, Elsevier (1985); Widder, et al. (ed.), Methods in Enzymology, Vol. 4, Academic Press (1985); Krogsgaard-Larsen, et al., (ed). "Design and Application of Prodrugs, Textbook of Drug Design and Development, Chapter 5, 113-191 (1991); Bundgaard, et al., Journal of Drug Deliver Reviews, 8:1-38(1992); Bundgaard, J. of Pharmaceutical Sciences, 77:285 et seq. (1988); Higuchi and Stella (eds.) Prodrugs as Novel Drug Delivery Systems, American Chemical Society (1975); и Bernard Testa & Joachim Mayer, "Hydrolysis In Drug And Prodrug Metabolism: Chemistry, Biochemistry And Enzymology," John Wiley and Sons, Ltd. (2002).
Применяемый в данном документе термин «лечение» означает облегчение, уменьшение, снижение, устранение, модулирование или улучшение, то есть, регресс заболевания или расстройства. Лечение также включает ингибирование, т.е., остановку развития, существующего заболевания или расстройства, и облегчение или улучшение, т.е., вызывая регрессию существующего заболевания или расстройства, например, если заболевание или расстройство уже существует.
Применяемый в данном документе термин «профилактика» означает полную или практически полную остановку возникновения заболевания или расстройства у пациента или субъекта, особенно если пациент или субъект предрасположен к заболеванию или риску развития заболевания или расстройства.
Дополнительно, соединения по данному изобретению, например, соли соединений, существуют либо в водной, либо в безводной (ангидриды) форме, либо в виде сольватов с молекулами других растворителей. Неограничивающие примеры гидратов включают моногидраты, дигидраты и т.д. Неограничивающие примеры сольватов включают сольваты этанола, сольваты ацетона и т.д.
2
«Сольваты» означают сольватно-аддитивные формы, которые содержат либо стехеометрическое, либо нестехеометрическое количество растворителя. Некоторые соединения имеют тенденцию завключать фиксированное молярное отношение молекул растворителя в кристаллическом твердом состоянии, следовательно, образуя сольват. Если растворитель представляет собой воду, то образованный сольват представляет собой гидрат, если растворитель представляет собой спирт, то образованный сольват представляет собой алкоголят. Гидраты образуются из комбинации одной или более молекул воды с одним из веществ, в котором вода сохраняет свое молекулярное состояние, а именно НО; такая комбинация способна образовывать один или более гидратов.
Применяемый в данном документе термин «аналог» относится к химическому соединению, структурно похожему на другое, но немного отличающемуся по составу (как при замене одного атома атомом другого элемента, или в присутствии определенной функциональной группы, или при замене одной функциональной группы другой функциональной группой). Следовательно, аналог представляет собой соединение, похожее или сравнимое по функциональным группам и виду с указанным соединением.
Применяемый в данном документе термин «апротонный растворитель» относится к растворителю, который является относительно инертным к протонной активности, т.е., не действует как донор протонов. Примеры включают, но не ограничиваются ими, углеводороды, а именно гексан и толуол, например, галогенированные углеводороды, а именно, например, метиленхлорид, этиленхлорид, хлороформ и тому подобное, гетероциклические соединения, а именно, например, тетрагидрофуран и N-метилпирролидинон, и простые эфиры, а именно диэтиловый эфир, бис-метоксиметиловый эфир. Такие растворители известны специалистам в данной области техники, и отдельные растворители или их смеси могут быть предпочтительными для определенных соединений и условий реакций в зависимости от таких факторов, как, например, растворимость реагентов, реакционная способность реагентов и предпочтительные температурные диапазоны. Дополнительные обсуждения апротонных растворителей можно найти в пособиях по органической химии или в специализированных монографиях, например: Organic Solvents Physical Properties and Methods of Purification, 4th ed., edited by John A. Riddick et al., Vol. II, в Techniques of Chemistry Series, John Wiley & Sons, NY, 1986.
Применяемые в данном документе термины «протоногенный органический растворитель» или «протонный растворитель» относятся к растворителям, которые имеют тенденцию отдавать протон, а именно к спиртам, например, метанолу, этанолу, пропанолу, изопропанолу, бутанолу, трет-бутанолу и тому подобное. Такие растворители известны специалистам в данной области техники, и отдельные растворители или их смеси могут быть предпочтительными для определенных соединений и условий реакций, в зависимости от таких факторов, как, например, растворимость реагентов, реакционная способность реагентов и предпочтительные температурные диапазоны. Дополнительные обсуждения протогенных растворителей можно найти в пособиях по органической химии или в специализированных монографиях, например: Organic Solvents Physical Properties and Methods of Purification, 4th ed., edited by John A. Riddick et al., Vol. II, в Techniques of Chemistry Series, John Wiley & Sons, NY, 1986.
В данном изобретении предусмотрены только те комбинации заместителей и переменных, которые образуют стабильные соединения. Применяемый в данном документе термин «стабильный» относится к соединениям, которые обладают достаточной стабильностью для производства, и которые сохраняют целосность соединения в течение достаточного периода времени (например, при терапевтическом или профилактическом введении субъекту).
Синтезированные соединения отделяют от реакционной смеси и дополнительно очищают такими способами, как колоночная хроматография, жидкостная хроматография высокого давления или повторная кристаллизация. Дополнительно, различные этапы синтеза выполняют в альтернативной последовательности или порядке для получения целевых соединений. Дополнительно, растворители, температуры, длительность реакции и тому подобное, описанные в данном документе, приведены только для целей иллюстрации, и варьирование условий реакции дает целевые изоксазольные соединения по данному изобретению. Химические превращения при синтезе и методология защитных групп (защита и снятие защиты), подходящие для синтеза соединений, описанных в данном документе, включают, например, описанные в R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995).
Соединения по данному изобретению модифицируют путем присоединения различных функциональных групп с помощью средств синтеза, описанных в данном документе, для улучшения селективных биологических свойств. Такие модификации включают те, которые увеличивают биологическое проникновение в заданную биологическую систему (например, кровь, лимфатическую систему, центральную нервную систему), увеличивают оральную доступность, увеличивают растворимость для введения с помощью инъекции, изменять метаболизм или изменять скорость выведения.
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ
Фармацевтическая композиция по данному изобретению содержит терапевтически эффективное количество соединения по данному изобретению, и составлена с одним или более фармацевтически приемлемых носителей. Применяемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемый носитель» означает нетоксичный, инертный, твердый, полутвердый или жидкий наполнитель, разбавитель, инкапсулирующий материал или рецептурное вспомогательное вещество любого типа. Некоторые примеры материалов, которые могут служить фармацевтически приемлемыми носителями, представляют собой сахара, а именно лактозу, глюкозу и сахарозу; крахмалы, а именно кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, а именно карбоксиметилцеллюлозу натрия, этилцеллюлозу и ацетат целлюлозы; порошковый трагакант; солод; желатин; тальк; вспомогательные вещества, а именно масло какао и суппозиторные воски; масла, а именно арахисовое масло, хлопковое масло, подсолнечное масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; буферные средства, а именно гидроксид магния и гидроксид алюминия, альгиновую кислоту, апирогенную воду, изотоноческий раствор, раствор Рингера, этиловый спирт и фосфатный буфер; а также другие нетоксичные совместимые смазывающие средства, а именно лаурилсульфат натрия и стеарат магния; покрывающие средства; подсластители; ароматизаторы и отдушки; консерванты и антиоксиданты также находятся в композиции согласно оценке разработчика рецептуры. Фармацевтические композиции по данному изобретению вводят людям или другим животным орально, ректально, парентерально, интрацистернально, внутривагинально, внутрибрюшинно, наружно (с помощью порошков, мазей и капель), буккально, или в виде орального или назального спрея.
Фармацевтические композиции по данному изобретению вводят орально, парентерально, с помощью ингаляционного спрея, наружно, ректально, назально, буккально, вагинально или с помощью имплантированной емкости; предпочтительно с помощью орального введения или введения с помощью инъекции. Фармацевтические композиции по данному изобретению содержат любые традиционные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные вещества и наполнители. В некоторых случаях рН состава доводят с помощью фармацевтически приемлемых кислот, оснований или буферов для улучшения стабильности соединения в составе или его формы для доставки. Применяемый в данном документе термин «парентеральный» включает методики подкожной, внутрикожной, внутривенной, внутримышечной, внутрисуставной, внутриартериальной, интрасиновинальной, внутригрудинной, интратекальной, внутриочаговой или внутричерепной инъекции или инфузии.
Жидкие лекарственные формы для орального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и настойки. Дополнительно к активным соединениям, жидкие лекарственные формы содержат инертные разбавители, широко используемые в данной области техники, а именно, например, воду и другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, а именно этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, ростков, оливковое, касторовое и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофураниловый спирт, полиэтиленгликоли и эфиры сорбитана и жирных кислот, и их смеси. Кроме разбавителей композиции для орального применения также содержат вспомогательные вещества, а именно смачивающие средства, эмульгирующие и диспергирующие средства, подсластители, ароматизаторы и отдушки.
Инъекционные препараты, например, стерильные инъекционные водные или масляные суспензии составляют согласно данной области техники с помощью подходящих диспергирующих или смачивающих средств. Стерильный инъекционный препарат также представляет собой стерильный инъекционный раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, раствор в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых наполнителей и растворителей, которые могут применяться, находятся вода, раствор Рингера по фармакопеи США и изотонический раствор хлорида натрия. Дополнительно, в качестве среды для растворения или диспергирования традиционно применяются стерильные жирные масла. Для этой цели применяются любые смешанные жирные масла, включая синтетические моно- или диглицериды. Дополнительно, в инъекционных препаратах применяются жирные кислоты, а именно олеиновая кислота.
Инъекционные составы стерилизуют, например, фильтрацией сквозь фильтр, задерживающий бактерии, или с помощью введения стерилизующих средств в виде стерильных твердых композиций, которые растворяются или диспергируются в стерильной воде или другой стреильной инъекционной среде, перед применением.
Для продления эффекта лекарственного средства, часто необходимо замедлить абсорбцию лекарственного средства из подкожной или внутримышечной инъекции. Этого достигают с помощью использования жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала с плохой растворимостью в воде. Тогда скорость абсорбции лекарственного средства зависит от скорости растворения, что, в свою очередь, зависит от размера кристаллов и кристаллической формы. В альтернативном варианте, замедленная абсорбция паретерально введенного лекарственного средства достигается с помощью растворения или диспергирования лекарственного средства в масляном наполнителе. Инъекционные депо-формы изготовляют путем образования микроинкапсулирующих матриц лекарственного средства в биоразлагаемых полимерах, а именно полиактиде-полигликолиде. Скорость высвобождения лекарственного средства контролируют отношением лекарственного средства к полимеру и природой конкретного используемого полимера. Примеры биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Инъекционные депо-составы также получают путем заключения лекарственного средства в липосомы или микроэмульсии, совместимые с тканями организма.
Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно представляют собой свечи, которые получают смешиванием соединений по данному изобретению с подходящими, не вызывающими раздражения, вспомогательными веществами или носителями, а именно маслом какао, полиэтиленгликолем или суппозиторным воском, которые являются твердыми при температуре окружающей среды, но жидкими при температуре тела, и, следовательно, плавятся в ректальной или вагинальной полости и высвобождают активное соединение.
Твердые лекарственные формы для орального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активное соединение смешано с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом или носителем, а именно цитратом натрия или дикальция фосфатом и/или: а) наполнителями или разбавителями, а именно крахмалами, лактозой, сахарозой, глюкозой, маннитолом и кремниевой кислотой; б) связующими веществами, а именно, например, карбоксиметилцеллюлозой, альгинатами, желатином, поливинилпирролидиноном, сахарозой и акацией; в) увлажняющим средством, а именно глицерином; г) средством для улучшения распадаемости таблеток, а именно агар-агаром, карбонатом кальция, картофельным крахмалом или крахмалом тапиоки, альгиновой кислотой, определенными силикатами и карбонатом натрия; д) средствами для замедления растворения, а именно парафином; е) ускорителями абсорбции, а именно соединениями четвертичного аммония; ж) смачивающими агентами, а именно, например, цетиловым спиртом и моностеаратом глицерина; з) абсорбентами, а именно каолином и бентонтовой глиной; и и) смазывающими средствами, а именно тальком, стеаратом кальция, стеаратом магния, твердыми полиэтиленгликолями, лаурилсульфатом натрия; и их смесями. В случае капсул, таблеток и пилюль, лекарственные формы также содержат буферные средства.
Твердые композиции аналогичного типа также применяются как наполнители в мягких и твердых желатиновых капсулах с применением таких вспомогательных веществ, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и тому подобное.
Активные соединения также представляют собой микроинкапсулированные формы с одним или более вспомогательными веществами, указанными выше. Твердые лекарственные формы таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул изготавливают с покрытием или оболочкой, а именно кишечнорастворимыми покрытиями, покрытиями, контролирующими высвобождение, и другими покрытиями, хорошо известными в области техники составления рецептур. В таких твердых лекарственных формах активное соединение смешивают с по меньшей мере одним инертным разбавителем, а именно сахарозой, лактозой или крахмалом. Такие лекарственные формы также содержат, что является нормальной практикой, дополнительные вещества, отличные от инертных разбавителей, например, смазывающие вещества для таблеток и другие вспомогательные средства для таблетирования, а именно стеарат магния и микрокристаллическую целлюлозу. В случае капсул, таблеток и пилюль, лекарственные формы также содержат буферные средства. Они необязательно содержат средства, придающие непрозрачность, и имеют такой состав, что они высвобождают активный(ые) ингредиент(ы) только, или предпочтительно, в определенной части кишечного тракта, необязательно, замедленным образом. Примеры капсулирующих композиций, которые могут использоваться, включают полимерные вещества и воски.
Лекарственные формы для наружного или трансдермального введения соединения по данному изобретению включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляции или пластыри. Активный компонент смешивают, при необходимости, в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферами. Также предполагается, что объем данного изобретения охватывает офтальмологические составы, глазные капли, глазные мази, порошки и растворы.
Мази, пасты, крема и гели в дополнение к активному соединению по данному изобретению содержат вспомогательные вещества, а именно животные и растительные жиры, масла воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремниевую кислоту, тальк и оксид цинка, или их смеси.
Порошки и спреи в дополнение к соединениям по данному изобретению содержат вспомогательные вещества, а именно лактозу, тальк, кремниевую кислоту, гидроксид алюминия, силикаты кальция и порошковый полиамид, или смеси этих веществ. Спреи дополнительно содержат традиционные распылительные средства, а именно хлорфторуглеводороды.
Трансдермальные пластыри обладают дополнительным преимуществом по обеспечению контролируемой доставки соединения в тело. Такие лекарственные формы получают растворением или диспергированием соединения в подходящей среде. Также применяются усилители абсорбции для увеличения потока соединения через кожу. Скорость контролируют либо мембраной, контролирующей скорость высвобождения, либо диспергированием соединения в полимерной матрице или геле.
Если не указано иное, все технические и научные термины, применяемые в данном документе, соответствуют значению, широко известному специалисту в данной области техники. Все публикации, патенты, опубликованные патентные заявки и другие ссылки, упомянутые в данном документе, целиком включены в данный документ посредством ссылки.
СОКРАЩЕНИЯ
Сокращения, которые применяются в описании к схемам и примерам, следующие:
ВОР-Cl для бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфонинхлорида;
КДИ для карбонилдиимидазола;
ДБУ для 1,8-диазабициклоундек-7-ена;
ДЦК для N,N-дициклогексилкарбодиимида;
ДХМ для дихлорметана;
ДИПЭА для N,N-диизопропилэтиламина;
ДМАП для N,N-диметиламинопиридина;
ДМЭ для 1,2-диметоксиэтана;
ДМФ для N,N-диметилформамида;
DMPU для 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1Н)-пиримидинона;
ЭДХ для гидрохлорида 1-(3-диэтиламинопропил)-3-этилкарбодиимида
3
EtN для триэтиламина;
EtOAc для этилацетата;
HATU для гексафторфосфата 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазол[4,5-b]пиримидиний-3-оксида;
HCl для хлористоводородной кислоты;
mХПБК для мета-хлорпероксибензойной кислоты;
NMO для N-метилморфолин-N-оксида;
PhMe для толуола;
РуАОР для гексафторфосфата 7-азабензотриазол-1-илоксипирролидинофосфония;
РуВОР для гексафторфосфата бензотриазол-1-илоксипирролидинофосфония;
ТГФ для тетрагидрофурана.
СПОСОБЫ СИНТЕЗА
Соединения и способы по данному изобретению станут понятными лучше в рамках следующих схем синтеза, которые иллюстрируют способы, по которым получают соединения по данному изобретению, которые предусмотрены только для иллюстрации и не ограничивают объем изобретения. Для специалистов в данной области техники будут очевидны различные изменения и модификации для раскрытых вариантов реализации изобретения, и такие изменения и модификации, включая без ограничений те, которые относятся к химическому строению, заместителям, производным и/или способам по изобретению, могут быть сделаны без отклонения от сущности изобретения и объема прилагаемой формулы.
2
3
1
3
Как изображено на Схеме 1, соединение Формулы (I) получают сопряжением карбоновой кислоты (1) и амина (2) при подходящих условиях сопряжения амида, причем R, R, R, X, и  имеют значения, определенные ранее. С получением карбоновой кислоты (1) можно ознакомиться в US 2016/0244430. Следовательно, смесь карбоновой кислоты (1) и амина (2) в апротонном растворителе обрабатывают подходящим сшивающим агентом в присутствии органического основания для образования амида Формулы (I). Подходящий сшивающий агент представляет собой, но не ограничивается ими, ВОР-Cl, КДИ, ДЦК, ЭДХ, HATU, РуАОР или РуВОР, а органические основания представляют собой, но не ограничиваются ими, EtN, ДИПЭА, пиридин или N-метилморфолин. Апротонный растворитель представляет собой, но не ограничивается ими, ТГФ, ДХМ и ДМФ. Температура реакции находится в диапазоне от -20°С до 80°С.
Схема 1
В альтернативном варианте, соединение Формулы (I) получают сначала превращением карбоновой кислоты (1) в хлорид кислоты (3), а затем реакцией хлорида кислоты (3) с амином (2) в присутствии органического основания (как изображено на Схеме 2).
Схема 2
Следовательно, карбоновую кислоту (1) обрабатывают тионилхлоридом или оксалилхлоридом или другим агентом для образования хлорида кислоты в апротонном растворителе, а именно, но не ограничиваясь ими, ДХМ или ДМФ, для получения хлорида кислоты (3). Затем хлорид кислоты (3) реагирует с амином (2) в апротонном растворителе, а именно, но не ограничиваясь ими, ДХМ или ДМФ, в присутствии органического соединения, а именно, но не ограничиваясь ими, ТЭА, ДИПЕА, ДМАП или пиридином для получения соединения Формулы (I).
В другом альтернативном варианте, соединение Формулы (I) получают сначала превращением карбоновой кислоты (1) в смешанный ангидрид (4), а затем реакцией смешанного ангидрида (4) с амином (2) в присутствии органического основания (как изображено на Схеме 3).
Схема 3
Следовательно, карбоновую кислоту (1) обрабатывают хлорформиатом а именно, но не ограничиваясь ими, изобутилхлорформиатом, в апротонном растворителе, а именно, но не ограничиваясь ими, ДХМ, в присутствии основания, а именно, но не ограничиваясь ими, ТЭА или ДИПЭА. для получения смешанного ангидрида (4). Затем смешанный ангидрид (4) реагирует с амином (2) в апротонном растворителе, а именно, но не ограничиваясь ими, ДХМ или ДМФ, в присутствии органического соединения, а именно, но не ограничиваясь ими, ТЭА, ДИПЕА, ДМАП для получения соединения Формулы (I).
Схема 4-Схема 6 иллюстрируют синтез тетразола (2а). Схема 7 иллюстрирует синтез тетразола (2b). Более подробное обсуждение синтеза тетразола описано в литературе, например, в Cheng-Xi Wei, Ming Bian and Guo-Hua Gong, Molecules, 2015, 20, 5528-5553.
3
3
3
1
1
Как изображено на Схеме 4 тетразол (6а) получают [3+2] циклоприсоединением азотистоводородной кислоты к нитрилу (5а). Следовательно, соединение (5а) обрабатывают NaN или TMCN в растворителе, а именно, но не ограничиваясь ими, ДМФ, в присутствии кислоты Люиса при высокой температуре для получения соединения (6а). Указанная кислота Люиса представляет собой, но не ограничивается ими, хлорид аммония, BuSnO. Температура реакции находится в диапазоне от 50°С до 150°С. Соединение (6а) дополнительно алкилируют RX, где R ранее описан, предпочтительно, необязательно замещенным алкилом, а X представляет собой галоген, предпочтительно, хлор, бром или йод, в присутствии основания для получения соединения (2а).
Схема 4
В альтернативном варианте, методика получения соединения (2а) изображена на Схеме (5). Тетразол (9а) синтезируют с помощью реакции амина (8а) с триэтилортоформиатом и азидом натрия в уксусной кислоте. Соединение (9а) дополнительно сопрягают с соединением (10а), причем X представляет собой галоген, предпочтительно, хлор, бром или йод, для получения соединения (2а). Растворитель в реакции сопряжения представляет собой, но не ограничивается ими, 1,4-диоксан. Катализатор, применяемый в этой реакции представляет собой, но не ограничивается им, хлорид бис(трифенилфосфин)палладия (II). Основание, применяемое в этой реакции, представляет собой, но не ограничивается им, карбонат цезия. Температура реакции находится в диапазоне от 0°С до 50°С.
Схема 5
3
В другом альтернативном варианте, методика получения соединения (2а) изображена на Схеме (6). Соединение (12а) получают сопряжением карбоновой кислоты (11а) с амином (8а). Следовательно, смесь карбоновой кислоты (11а) и амина (8а) в апротонном растворителе обрабатывают подходящим сшивающим агентом в присутствии органического основания для образования амида (12а). Подходящий сшивающий агент представляет собой, но не ограничивается ими, ВОР-Cl, КДИ, ДЦК, ЭДХ, HATU, РуАОР или РуВОР, а органические основания представляют собой, но не ограничиваются ими, EtN, ДИПЭА, пиридин или N-метилморфолин. Апротонный растворитель представляет собой, но не ограничивается ими, ТГФ, ДХМ и ДМФ. Температура реакции находится в диапазоне от -20°С до 80°С. Затем амид (12а) дополнительно превращают в тетразол (13а) обработкой азидом натрия и трифторметансульфоновым ангидридом в апротонном растворителе. Такой апротонный растворитель представляет собой, но не ограничивается им, ацетонитрил. Температура реакции находится в диапазоне от -20°С до 50°С.
Схема 6
rd
rd
3
Как изображено на Схеме 7, диамин (5а) защищен Р-группой для получения соединения (6b). Р-группа представляет собой любую группу, защищающую аминогруппу, а именно, но не ограничиваясь ими, КБЗ, трет-бутоксикарбонил и пМБ. Более подробное обсуждение методик, реагентов и условий защиты амино-группы описано в литературе, например, в T.W. Greene and P.G.M. Wuts in "Protective Groups in Organic Synthesis" 3 ed., John Wiley & Son, Inc., 1999. Соединение (8b) получают сопряжением полученного амина (6b) с карбоновой кислотой (7b). Следовательно, смесь карбоновой кислоты (7b) и амина (6b) в апротонном растворителе обрабатывают подходящим сшивающим агентом в присутствии органического основания для образования амида (8b). Подходящий сшивающий агент представляет собой, но не ограничивается ими, ВОР-Cl, КДИ, ДЦК, ЭДХ, HATU, РуАОР или РуВОР, а органические основания представляют собой, но не ограничиваются ими, EtN, ДИПЭА, пиридин или N-метилморфолин. Апротонный растворитель представляет собой, но не ограничивается ими, ТГФ, ДХМ и ДМФ. Температура реакции находится в диапазоне от -20°С до 80°С. Затем амид (8b) дополнительно превращают в тетразол (9b) обработкой пентахлоридом фосфора и триметилсилилазидом в апротонном растворителе. Такой апротонный растворитель представляет собой, но не ограничивается им, ацетонитрил и дихлорэтан. Температура реакции находится в диапазоне от -20°С до 60°С. Снятие защиты с Р-группы дает тетразол (2b). Более подробное обсуждение методик, реагентов и условий снятия группы, защищающей амино-группу, описано в литературе, например, в T.W. Greene and P.G.M. Wuts in "Protective Groups in Organic Synthesis" 3 ed., John Wiley & Son, Inc., 1999.
Схема 7
Примеры
Соединения и способы по данному изобретению станут понятными лучше в рамках следующих примеров, которые предусмотрены только для иллюстрации и не ограничивают объем изобретения. Для специалистов в данной области техники будут очевидны различные изменения и модификации для раскрытых вариантов реализации изобретения, и такие изменения и модификации, включая без ограничений те, которые относятся к химическому строению, заместителям, производным и/или способам по изобретению, могут быть сделаны без отклонения от сущности изобретения и объема прилагаемой формулы.
Синтез 6-(1-изопропил-1H-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина (Соединение 3а):
Способ 1:
Этап 1. Синтез 1-изопропил-1H-тетразола (Соединение 1а):
3
2
4
1
Раствор пропан-2-амина (3,44 мл, 40 ммоль), азида натрия (3,64 г, 56 ммоль) и триэтилортоформиата (9,31 мл, 56,0 ммоль) в уксусной кислоте (20 мл) нагревают до 90°С и перемешивают в течение 1 д под противоударным экраном. Затем реакционную смесь охлаждают до кт и разбавляют EtOAc. Смесь промывают 1 Н HCl, насыщенным NaHCO (×3) и рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют в вакууме для получения целевого продукта в виде маслянистой жидкости светло-желтого цвета (1,52 г, 34%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,62 (s, 1Н),4,90 (р, J=6,7 Гц, 1H), 1,68 (d, J=6,7 Гц, 6Н).
Этап 2. Синтез 6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина (Соединение 3а):
2
4
+
1
Смесь 1-изопропил-1H-тетразол (560 мг, 4,99 ммоль), 6-хлорпиридин-2-амина (2а) (642 мг, 4,99 ммоль), йодида меди (I) (47,6 мг, 0,250 ммоль), хлорида бис(трифенилфосфин)палладия (II) (351 мг, 0,499 ммоль) и карбоната цезия (3254 мг, 9,99 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) дегазируют, нагревают до 100°С и перемешивают в течение 24 ч под противоударным экраном. Реакционную смесь охлаждают до кт и затем разбавляют EtOAc и водой. Водный слой экстрагируют EtOAc, а объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с помощью гексана/ацетона (от 100/0 до 50/50, 15 мин) для получения соединения 3а в виде твердого вещества светло-желтого цвета (330 мг, 32%), MC (m/z): 205,10 [М+Н]. H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,75-7,60 (m, 2Н), 6,66 (dd, J=7,3, 1,8 Гц, 1Н), 5,87 (dq, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 4,62 (s, 2Н), 1,68 (d, J=6,7 Гц, 6Н).
Способ 2:
Этап 1. Синтез N-изопропил-6-нитропиколинамида (Соединение 5а):
2
4
2
1
В раствор 6-нитропиколиновой кислоты (10 г, 59,5 ммоль) и основания Хюнига (31,1 мл, 178 ммоль, 3 экв.) в сухом ДМФ (200 мл) при 0°С добавляют изопропиламин (6,64 мл, 77 ммоль, 1,3 экв.), затем добавляют HATU (29,4 г, 77 ммоль, 1,3 экв.). Полученную смесь оставляют нагреваться до кт и перемешивают в течение нескольких часов, после чего гасят с помощью добавления воды (500 мл). Смесь экстрагируют EtOAc (3×200 мл), а объединенные органические слои промывают водой (2×200 мл), рассолом (200 мл), сушат (NaSO) и концентрируют. Остаток очищают колоночной хроматографией на SiO (80 г колонна, от 100% гексанов до 40% EtOAc/гексанов) для получения соединения N-изопропил-6-нитропиколинамида (10,81 г, выход 87%) в виде твердого вещества желтого цвета. H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,58 (dd, J=7,7, 1,0 Гц, 1Н), 8,36 (dd, J=8,0, 1,0 Гц, 1H), 8,21 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7,70 (s, 1H), 4,31 (гепт, J=6,6 Гц, 1Н), 1,32 (d, J=6,6 Гц, 6Н).
Этап 2. Синтез 2-(1-изопропил-1H-тетразол-5-ил)-6-нитропиридина (соединение 6а).
2
3
3
2
1
В смесь N-изопропил-6-нитропиколинамида (350 мг, 1,673 ммоль) и азида натрия (120 мг, 1,840 ммоль) в безводном ацетонитриле (5,58 мл) в атмосфере N при 0°С под противоударным экраном по каплям добавляют трифторметансульфоновый ангидрид (1 М раствор в ДХМ, 1,84 мл, 1,840 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч, и затем при кт в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждают до 0°С и гасят насыщенным NaHCO (50 мл). Смесь экстрагируют EtOAc 2x. Объединенные органические слои промывают насыщенным NaHCO и рассолом, и концентрируют. Остаточное твердое вещество темно-красного цвета очищают колоночной хроматографией на SiO (12 г колонна, от 100% гексанов до 35% EtOAc/гексанов) для получения соединения 6а (170 г, выход 43%) в виде бесцветного твердого вещества. Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,74 (dd, J=7,7, 0,9 Гц, 1Н), 8,41 (dd, J=8,1, 0,9 Гц, 1Н), 8,32 (t, J=7,9 Гц, 1H), 5,95 (гепт, J=6,7 Гц, 1Н), 1,72 (d, J=6,7 Гц, 6Н).
Этап 3. Синтез 6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина (соединение 3а):
2
+
1
Смесь 2-(1-изопропил)-1H-тетразол-5-ил)-6-нитропиридина (100 мг, 0,427 ммоль) и Pd/C (10% Pd на сухом основании, содержащем 50% воды, 23 мг, 0,025 экв.) в МеОН (1 мл)/EtOAc (1 мл) перемешивают при кт с баллоном с Н в течение ночи. Затем катализатор отфильтровывают, и фильтрат концентрируют для получения соединения 3а (85 мг, выход 97%), которое сразу применяют на следующем этапе без дополнительного очищения. МС (m/z): 163,05 [М+Н]. H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,72-7,54 (m, 2Н), 6,63 (dd, J=7,4, 1,7 Гц, 1Н), 5,85 (гепт, J=6,7 Гц, 1H), 4,57 (s, 2Н), 1,65 (d, J=6,7 Гц, 6Н).
Способ 3:
1
13
+
1
6
Реакционную смесь 6-аминопиколинонитрила (542 мг, 4,55 ммоль), оксида дибутилолова (566 мг, 2,275 ммоль), толуола (10 мл) и азидотриметилсилана (1,812 мл, 13,65 ммоль) перемешивают при 200°С под микроволновым излучением в течение 5 мин. ТСХ указывает на завершение реакции. Суспензию желтого цвета фильтруют, промывают толуолом, сушат в вакууме для получения порошка желтого цвета 6-(1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина (1,2 г, количественный выход). H и С-ЯМР указывает на присутствие продукта, содержащего оксид дибутилолова, что не повлияет на реакцию на следующем этапе. МС (m/z): 205,10 [М+Н]. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 7,67 (t, J=7,9 Гц, 1Н), 7,36 (d, J=7,2 Гц, 1Н), 6,71 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,57 (s, 2Н).
2
+
В 50 мл-ую 2-горловую круглодонную колбу загружают 6-(1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амин (300 мг, 1,850 ммоль), ДМФ (9,250 мл), и раствор охлаждают до 0°С, а затем добавляют гидрид натрия (133 мг, 3,33 ммоль). Наблюдается выделение пузырьков. После перемешивания при 0°С в течение 20 мин добавляют 2-йодпропан (0,333 мл, 3,33 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при от 0°С до кт в течение 9 ч. Реакционную смесь охлаждают до 0°С, гасят водой (~30 мл). Экстрагируют ДХМ (~70 мл), промывают рассолом. Сушат, фильтруют, концентрируют, очищают с помощью CombiFlash (24 г SiO, MeOH/DCM=0~100%) для получения 6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина в виде твердого вещества белого цвета (24 мг, выход 6,35%). МС (m/z): 205,10 [М+Н].
Синтез 6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина (соединение 7а):
1
6
Соединение 7а получают с помощью аналогичной методики, описанной для соединения 3а, по способу 2. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 7,61 (dd, J=8,4, 7,3 Гц, 1H), 7,29 (dd, J=7,3, 0,8 Гц, 1H), 6,65 (dd, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 6,38 (s, 2Н), 4,79 (m, 1H), 1,33-1,12 (m, 4Н).
Синтез 6-(1-(1-метилциклопропил)-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина (соединение 8а):
1
6
Соединение 8а получают с помощью аналогичной методики, описанной для соединения 3а, по способу 2. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 7,59 (dd, J=8,4, 7,3 Гц, 1Н), 7,18 (dd, J=7,3, 0,8 Гц, 1Н), 6,64 (dd, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 6,29 (s, 2Н), 1,72 (m, 1H), 1,12 (m, 4Н).
Пример 1а: 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамид
2
4
6
1
В суспензию 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (382 мг, 1,469 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляют 1-хлор-N,N,2-триметилпроп-1-ен-1-амин (реагент Гозеса, 0,324 мл, 2,448 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при кт в течение 40 мин для получения прозрачного раствора, и затем концентрируют в вакууме. Остаток (соединение 8а) растворяют в ДХМ (40,0 мл), охлаждают до 0°С, и добавляют раствор 6-(1-изопропил-1H-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина (3а) (250 мг, 1,224 ммоль) и пиридина (0,594 мл, 7,34 ммоль) в ДХМ (20 мл). Реакционную смесь оставляют нагреваться до кт и перемешивают в течение 4 часов. Реакционную смесь концентрируют, и затем разбавляют EtOAc и рассолом. Водный слой экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над NaSO и концентриурют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с помощью гексана/ацетона/МеОН (от 100/0/0 до 50/40/10, 15 мин) для получения соединения по Примеру 1а в виде пены белого цвета (440 мг, 81%), ЖХ-МС (m/z): М-1=445,18, рассчитано 445,20, М+1=447,20, рассчитано 447,20. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 11,08 (s, 1H), 8,34-8,26 (m, 1H), 8,14 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 8,05-7,97 (m, 1H), 7,73-7,63 (m, 2Н), 7,51 (d, J=10,7 Гц, 1Н), 7,19 (d, J=1,5 Гц, 1Н), 6,00 (р, J=6,7 Гц, 1Н), 2,26 (s, 3H), 1,84 (m, 1Н), 1,56 (d, J=6,6 Гц, 6Н), 0,86-0,76 (m, 2Н), 0,70-0,68 (m, 2Н).
Пример 2а: 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(1-циклопропил-1H-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамид.
1
6
Пример 2а получают из соединения 7а с помощью методики, описанной для соединения по Примеру 1а. ЖХ-МС (m/z): М-1=443,17, рассчитано 443,18. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 11,09 (s, 1Н), 8,35 (dd, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 8,15 (dd, J=8,4, 7,6 Гц, 1H), 7,98 (dd, J=7,6, 0,9 Гц, 1H), 7,72-7,62 (m, 2Н), 7,50 (d, J=10,8 Гц, 1Н), 7,18 (d, J=1,4 Гц, 1Н), 4,86 (m, 1H), 2,25 (s, 3H), 1,85 (m, 1Н), 1,32-1,12 (m, 4Н), 0,85-0,74 (m, 2Н), 0,74-0,66 (m, 2Н).
Пример 3а: 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(1-(1-метилциклопропил)-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамид.
1
6
Пример 3а получают из соединения 8а с помощью методики, описанной для соединения по Примеру 1а. ЖХ-МС (m/z): М-1=457,19, рассчитано 457,20. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 10,75 (s, 1Н), 8,36 (dd, J=8,4, 0,9 Гц, 1H), 8,14 (dd, J=8,4, 7,6 Гц, 1H), 7,86 (dd, J=7,6, 0,9 Гц, 1H), 7,73-7,65 (m, 2Н), 7,49 (d, J=11,1 Гц, 1H), 7,19 (d, J=1,3 Гц, 1H), 2,25 (s, 3H), 1,85 (m, 1H), 1,74 (s, 3H), 1,15 (q, J=2,6 Гц, 4Н), 0,87-0,77 (m, 2Н), 0,73-0,67 (m, 2Н).
Пример 4а: (S)-2-(5-(6-(5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензамидо)пиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропилацетат.
Этап 1: Синтез (S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропилацетата
2
1
В (S)-2-аминопропан-1-ол (2,1 г, 28,0 ммоль) в ДХМ (60 мл) при 0°С добавляют ВОСО (9,74 мл, 41,9 ммоль). Смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин, затем оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. Смесь концентрируют для получения трет-бутил-(S)-(1-гидроксипропан-2-ил)карбамата в виде бесцветной маслянистой жидкости. H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 4,64 (s, 1Н), 3,77 (s, 1H), 3,64 (dd, J=11,0, 3,8 Гц, 1H), 3,51 (dd, J=11,0, 6,2 Гц, 1H), 1,45 (s, 9Н), 1,27 (s, 1Н), 1,15 (d, J=6,8 Гц, 3H).
3
1
В неочищенный трет-бутил-(S)-(1-гидроксипропан-2-ил)карбамат добавляют ДХМ (60 мл), карбонат натрия (5,93 г, 55,9 ммоль), а затем ацетилхлорид (3,18 мл, 44,7 ммоль), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь фильтруют сквозь целит, и фильтрат концентрируют. Смесь разбавляют этилацетатом, промывают раствором NaHCO, раствором NaOH, водой и рассолом. Органический слой сушат, фильтруют и концентрируют для получения (S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропилацетата (5,61 г, 92%) в виде бесцветной маслянистой жидкости. H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 4,57 (s, 1H), 4,06-3,86 (m, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,45 (s, 9Н), 1,16 (d, J=6,7 Гц, 3H).
Этап 2: Синтез (S)-2-(6-нитропиколинамидо)пропилацетата
В суспензию 6-нитропиколиновой кислоты (200 мг, 1,190 ммоль) в ДХМ (3 мл) и одной капле ДМФ по каплям добавляют оксалилхлорид (0,714 мл, 1,428 мммоль, 2 M в ДХМ). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч для получения прозрачного раствора. Раствор концентрируют в вакууме и доводят ДХМ для получения 6-нитропиколиноилхлорида в виде твердого вещества желтого цвета. В отдельную пробирку, наполненную (S)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропилацетатом (388 мг, 1,785 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляют ТФУ (2 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрируют и доводят ДХМ для получения соли ТФУ и (S)-2-аминопропан-1-ола.
1
В свежеприготовленный 6-нитропиколиноилхлорид по каплям при 0°С добавляют ДХМ (0,5 мл), а затем соль ТФУ и (S)-2-аминопропан-1-ола в ДХМ (2 мл) и триэтиламин (0,497 мл, 3,57 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры в течение 16 ч. Смесь концентрируют, и остаток очищают CombiFlash с элюированием от гексана до 70% этилацетата в гексане для получения (S)-2-(6-нитропиколинамидо)пропилацетата (175 мг, 55%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,58 (dd, J=7,6, 1,0 Гц, 1H), 8,39 (dd, J=8,1, 1,0 Гц, 1H), 8,23 (dd, J=8,8, 6,9 Гц, 1H), 7,93 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,59-4,39 (m, 1H), 4,21 (qd, J=11,3, 5,0 Гц, 2Н), 2,11 (d, J=3,4 Гц, 3H), 1,36 (d, J=6,9 Гц, 3H).
Этап 3: Синтез (S)-2-(5-(6-нитропиридин-2-ил)-1Н-тетразол-1-ил)пропилацетата
3
1
В смесь (S)-2-(6-нитропиколинамидо)пропилацетата (175 мг, 0,655 ммоль) и азида натрия (68,1 мг, 1,048 ммоль) в ацетонитриле (3 мл) при 0°С по каплям добавляют трифлатный ангидрид (0,982 мл, 0,982 ммоль, 1 M в ДХМ). Полученную смесь перемешивают в течение 30 мин, затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и гасят раствором NaHCO. Органический слой отделяют, промывают рассолом, сушат, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают CombiFlash с элюированием от гексана до 60% этилацетата в гексане для получения (S)-2-(5-(6-нитропиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропилацетата (148 мг, 0,506 ммоль, выход 77%) в виде маслянистой жидкости желтого цвета. H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,79 (dd, J=7,7, 0,9 Гц, 1H), 8,43 (dd, J=8,1, 1,0 Гц, 1Н), 8,33 (t, J=7,9 Гц, 1H), 6,17 (td, J=7,1, 4,6 Гц, 1Н), 4,62 (qd, J=11,8, 6,1 Гц, 2Н), 1,89 (s, 3H), 1,82 (d, J=6,9 Гц, 3H).
Этап 4: Синтез (S)-2-(5-(6-аминопиридин-2-ил)-1Н-тетразол-1-ил)пропилацетата
1
В (S)-2-(5-(6-нитропиридин-2-ил)-1Н-тетразол-1-ил)пропилацетат (40 мг, 0,137 ммоль) в этаноле (0,8 мл) и уксусной кислоте (0,8 мл) добавляют железо (76 мг, 1,369 ммоль), и полученную смесь перемешивают при 90°С в течение 2 ч. Смесь фильтруют сквозь целит, фильтрат концентрируют и доводят ДХМ. Остаток очищают CombiFlash с элюированием от гексана до 70% этилацетата в гексане для получения (S)-2-(5-(6-аминопиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропилацетата (28 мг, 0,107 ммоль, выход 78%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,85-7,48 (m, 2Н), 6,62 (dd, J=8,0, 1,1 Гц, 1H), 6,30 (m, 1H), 4,96-4,58 (m, 3H), 4,32 (dd, J=11,4, 9,5 Гц, 1Н), 1,85 (s, 3H), 1,68 (d, J=7,0 Гц, 3H).
Этап 5: Синтез (S)-2-(5-(6-(5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензамидо)пиридин-2-ил)-1Н-тетразол-1-ил)пропилацетата (Пример 4а)
1
В 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензойную кислоту (33,3 мг, 0,128 ммоль) в ДХМ (1,5 мл) добавляют одну каплю ДМФ и оксалилхлорид (0,080 мл, 0,160 мммоль, 2 M в ДХМ). Суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 45 мин, и она превращается в прозрачный раствор. Смесь концентрируют и доводят ДХМ. В этот остаток добавляют (S)-2-(5-(6-аминопиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропилацетат (28 мг, 0,107 ммоль) в ДХМ (1,5 мл) и пиридин (0,043 мл, 0,534 ммоль). Смесь перемешивают при КТ в течение 16 ч и концентрируют. Остаток разбавляют этил ацетатом, промывают водой и рассолом, сушат, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают CombiFlash с элюированием от гексана до 10% MeOH в этилацетате для получения (S)-2-(5-(6-(5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензамидо)пиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропилацетата (36 мг, 0,071 ммоль, выход 66,8%). ЖХ/МС показывает [М+Н], 505,20; H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9,18 (d, J=9,9 Гц, 1Н), 8,41 (dd, J=8,4, 0,9 Гц, 1Н), 8,02 (dd, J=7,6, 0,9 Гц, 1H), 7,95-7,73 (m, 2Н), 7,36 (d, J=1,4 Гц, 1Н), 7,11 (d, J=11,6 Гц, 1Н), 6,69 (d, J=1,4 Гц, 1Н), 6,07 (dqd, J=9,2, 6,9, 4,7 Гц, 1Н), 4,55 (dd, J=11,4, 4,8 Гц, 1H), 4,29 (dd, J=11,4, 9,2 Гц, 1H), 2,18 (s, 3H), 1,80 (tt, J=8,3, 5,1 Гц, 1Н), 1,69 (s, 3H), 1,61 (d, J=6,9 Гц, 3H), 0,83-0,69 (m, 4Н).
Пример 5а: (S)-5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(1-(1-гидроксипропан-2-ил)-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамид.
1
В (S)-2-(5-(6-(5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензамидо)пиридин-2-ил)-1Н-тетрахол-1-ил)пропилацетат (26 мг, 0,052 ммоль) в МеОН (1 мл) добавляют LiOH (0,077 мл, 0,077 ммоль, 1 Н в воде), и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь концентрируют, и остаток очищают CombiFlash с элюированием от гексана до 10% МеОН в этилацетате для получения (S)-5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(1-(1-гидроксипропан-2-ил)-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамида (19,5 мг, 0,042 ммоль, выход 82%). ЖХ/МС показывает [М+Н], 463,19; H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9,14 (d, J=15,7 Гц, 1Н), 8,45 (dd, J=8,3, 0,9 Гц, 1Н), 8,18-7,91 (m, 3H), 7,45 (d, J=1,5 Гц, 1Н), 7,25-7,16 (m, 1Н), 6,80 (d, J=1,5 Гц, 1H), 5,71 (dddd, J=11,0, 7,8, 6,9, 4,1 Гц, 1H), 4,14-4,06 (m, 2Н), 2,30 (s, 3H), 1,91 (tt, J=8,3, 5,1 Гц, 1Н), 1,70 (d, J=6,8 Гц, 3H), 1,00-0,73 (m, 4Н).
Пример 6а: (R)-2-(5-(6-(5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензамидо)пиридин-2-ил)-1Н-тетразол-1-ил)пропилацетат
1
Пример 6а с помощью аналогичной методики, описанной для соединения по Примеру 4а. ЖХ/МС показывает [М+Н], 505,20; H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9,62-9,38 (m, 2Н), 8,38 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 8,07 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 8.02-7.98 (m, 1Н), 7,92 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 7,21 (d, J=10,0 Гц, 1Н), 6,85 (s, 1Н), 6,21 (d, J=10,3 Гц, 1H), 4,57 (dd, J=11,6, 4,2 Гц, 1H), 4,33 (dd, J=11,4, 8,8 Гц, 1Н), 2,30 (s, 3H), 1,97 (s, 1H), 1,73 (s, 3H), 1,65 (d, J=6,7 Гц, 3H), 1,10-0,87 (m, 4Н).
Пример 7а: (R)-5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(1-(1-гидроксипропан-2-ил)-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамид.
1
Пример 7а с помощью аналогичной методики, описанной для соединения по Примеру 5а. ЖХ/МС показывает [М+Н], 463,19; Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9,13 (d, J=14,8 Гц, 1Н), 8,34 (dd, J=8,4, 0,9 Гц, 1Н), 8,08-7,95 (m, 2Н), 7,90 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,46 (d, J=1,4 Гц, 1Н), 7,12 (d, J=12,2 Гц, 1Н), 6,71 (d, J=1,4 Гц, 1Н), 5,82-5,52 (m, 1Н), 4,15-3,88 (m, 2Н), 2,21 (s, 3H), 1,82 (tt, J=8,3, 5,1 Гц, 1Н), 1,59 (d, J=6,8 Гц, 3H), 0,87-0,69 (m, 4Н).
Пример 19а
2
2
3
2
4
В раствор (R)-5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(1-(1-гидроксипропан-2-ил)-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамида (681 мг, 1,47 ммоль) в ДХМ (7,3 мл) при 0°С добавляют периодинан Десса-Мартина (750 мг, 1,77 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при 0°С в течение 1 часа, гасят насыщенным водным раствором NaSCO и экстрагируют ДХМ (Х3). Объединенные слои в ДХМ промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Полученное твердое вещество белого цвета сразу применяют при следующем превращении без какой-либо очистки.
2
4
2
2
2
4
6
1
В суспензию предыдущего неочищенного продукта (36 мг, 0,075 ммоль), 2-метидбут-2-ена (2,0 М в ТГФ, 0,10 мл) и NaHPO (13,5 мг, 0,113 ммоль) в tBuOH/НО (0,8 мл, 4/1) добавляют NaClO (34 мг, 0,3 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при кт в течение 3 часов, гасят 20%-ным водным раствором лимонной кислоты и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные слои в EtOAc промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->10% МеОН в ДХМ) для получения Примера 19а в виде твердого вещества белого цвета (12,8 мг, выход 36%). ЖХ/МС показывает [М+1]: 477,17. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 11,08 (s, 1Н), 8,26 (d, J=8,3 Гц, 1H), 8,08 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,92 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 7,72 (d, J=1,4 Гц, 1H), 7,67 (d, J=6,4 Гц, 1Н), 7,48 (d, J=10,7 Гц, 1Н), 7,21 (s, 1Н), 6,02 (s, br, 1H), 2,26 (s, 3H), 1,89-1,83 (m, 1H), 1,78 (d, J=7,2 Гц, 3H), 0,80 (dt, J=8,4, 3,1 Гц, 2H), 0,73-0,68 (m, 2H).
Пример 29a
2
3
4
2
4
Смесь 4-трет-бутил-1H-имидазола (130 мг, 1,05 ммоль), 5-бром-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (200 мг, 0,86 ммоль), CuO (7 мг, 0,04 ммоль), 8-гидроксихинолина (25 мг, 0,17 ммоль) и KPO (912 мг, 4,3 ммоль) в ДМСО (10 мл) перемешивают при 100°С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждают до кт, гасят 60 мл воды, доводят до рН 5 с помощью 8 М HCl и экстрагируют EtOAc (50 мл×2). Органический слой сушат над насыщенным NaSO и выпаривают. Очистка остатка препаративной ВЭЖХ с 0-100% MeCN/H2O дает 100 мг (42,2%) 5-(4-трет-бутил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты в виде твердого вещества белого цвета.
2
Смесь 5-(4-трет-бутил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (60 мг, 0,22 ммоль) и (1-хлор-2-метилпроп-1-ен-1-ил)диметиламина (36 мг, 0,27 ммоль) в ДХМ (2 мл) перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. В выше указанную смесь добавляют пиридин (52 мг, 0,66 ммоль) и 6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амин (68 мг, 0,33 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение дополнительного 1 ч. Растворитель удаляют в вакууме, и остаток очищают хроматографией с обращенной фазой с 0-60% MeCN/НО для получения Примера 29а (8,4 мг) в виде твердого вещества белого цвета.
Пример 30а
2
2
3
2
Смесь 5-(4-трет-бутил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (60 мг, 0,22 ммоль) и (1-хлор-2-метилпроп-1-ен-1-ил)диметиламина (36 мг, 0,27 ммоль) в ДХМ (2 мл) перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. В выше указанную смесь добавляют пиридин (52 мг, 0,66 ммоль) и (R)-2-(5-(6-аминопиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропилацетат (87 мг, 0,33 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение дополнительного 1 ч. Растворитель удаляют в вакууме, и остаток очищают хроматографией с обращенной фазой с 0-60% MeCN/НО для получения (R)-2-(5-(6-(5-(4-трет-бутил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензамидо)пиридин-2-ил)-1Н-тетразол-1-ил)пропилацетата (50 мг, 44%) в виде твердого вещества белого цвета. KCO (73 мг, 0,53 ммоль) добавляют в раствор (R)-2-(5-(6-(5-(4-трет-бутил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензамидо)пиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропилацетата (50 мг, 0,096 ммоль) в МеОН (5 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрируют, и неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ с 0-100% MeCN/НО для получения 16,3 мг Примера 30 в виде твердого вещества белого цвета.
Пример 27а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 29а.
Пример 28а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 30а.
Пример 31а
Этап 1: синтез метил-5-бром-2-фтор-4-метилбензоата
3
2
4
1
В суспензию 5-бром-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (5 г, 21,46 ммоль) в МеОН (7 мл) по каплям добавляют концентрированную серную кислоту (0,114 мл, 2,15 ммоль). Полученный раствор оставляют перемешиваться с обратным холодильником до завершения реакции. Затем реакционную смесь охлаждают до кт и концентрируют. Неочищенный продукт растворяют в EtOAc и подщелачивают водным NaHCO. Водный слой экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные слои в EtOAc промывают рассолом и сушат над NaSO. Фильтрование и концентрирование дает 5-бром-2-фтор-4-метилбензоат в виде белого твердого вещества (4,06 г, выход 77%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,09 (d, J=6,9 Гц, 1Н), 7,04 (d, J=11,0 Гц, 1H), 3,92 (s, 3H), 2,43 (s, 3H).
Этап 2: синтез метил-5-бром-4-(дибромметил)-2-фторбензоата
4
1
В раствор метил-5-бром-2-фтор-4-метилбензоата (3,13 г, 12,67 ммоль) в CCl (40 мл) добавляют NБС (6,76 г, 38 ммоль) и бензоилпероксид (0,307 г, 1,27 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при 90°С в течение ночи. Неочищенный продукт охлаждают, отфильтровывают сквозь небольшой пакет целита и дважды промывают МТБЭ. Затем фильтрат концентрируют и очищают хроматографией на силикагеле (0->10% EtOAc в гексанах) для получения метил-5-бром-4-(дибромметил)-2-фторбензоата в виде бесцветной маслянистой жидкости (4,86 г, выход 95%). Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,10 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7,82 (d, J=10,9 Гц, 1Н), 6,94 (d, J=1,2 Гц, 1H), 3,95 (s, 3H).
Этап 3: синтез метил-5-бром-2-фтор-4-формилбензоата
3
2
4
1
В суспензию метил-5-бром-4-(дибромметил)-2-фторбензоата (4,86 г, 12,0 ммоль) в ТГФ/воде (3/1, 60 мл) добавляют AgNO (6,12 г, 368 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при 80°С 2 часов. Неочищенную реакционную смесь гасят водой и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные слои в EtOAc промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->20% EtOAc в гексанах) для получения метил-5-бром-2-фтор-4-формилбензоата в виде твердого вещества белого цвета (2,76 г, выход 88%). Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10,32 (d, J=2,7 Гц, 1H), 8,23 (d, J=6,1 Гц, 1H), 7,68 (d, J=10,0 Гц, 1H), 3,98 (s, 3H).
Этап 4: синтез метил-5-бром-4-(дифторметил)-2-фторбензоата
3
2
4
1
В раствор метил-5-бром-2-фтор-4-формилбензоата (2,03 мг, 7,79 ммоль) в ДХМ (20 мл) при 0°С добавляют деоксофтор (9,23 мл, 24,9 ммоль). Затем реакционную смесь оставляют перемешиваться при кт в течение ночи. Реакционную смесь гасят водным NaHCO при 0°С и экстрагируют ДХМ (Х3). Объединенные слои в ДХМ промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->10% МТБЭ в гексанах) для получения метил-5-бром-4-(дифторметил)-2-фторбензоата в виде маслянистой жидкости светло-желтого цвета (1,55 г, выход 70%). Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,18 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,46 (d, J=10,3 Гц, 1Н), 6,85 (td, J=54,3, 0,9 Гц, 1Н), 3,96 (s, 3H).
Этап 5: синтез (5-бром-4-(дифторметил)-2-фторфенил)метанола
2
4
1
В раствор метил-5-бром-4-(дифторметил)-2-фторбензоата (310 мг, 1,1 ммоль) в ТГФ (5,5 мл) при 0°С добавляют гидрид диизобутилалюминия (1,0 М раствор в толуоле, 3,3 мл, 3,3 ммоль). Реакционную смесь оставляют охлаждаться при той же температуре в течение 3 часов, после чего осторожно гасят 10%-ным водным раствором сегнетовой соли. Неочищенный продукт оставляют перемешиваться при кт в течение 1 часа и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные слои в EtOAc промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->30% EtOAc в гексанах) для получения (5-бром-4-(дифторметил)-2-фторфенил)метанола в виде бесцветной маслянистой жидкости (252,3 мг, выход 90%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,75 (d, J=6,5 Гц, 1H), 7,35 (d, J=9,8 Гц, 1H), 6,85 (td, J=54,7, 1,2 Гц, 1Н), 4,80 (s, 2Н).
Этап 6: синтез ((5-бром-4-(дифторметил)-2-фторбензил)окси)(трет-бутил)диметилсилана
1
В раствор (5-бром-4-(дифторметил)-2-фторфенил)метанола (252,3 мг, 0,99 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляют ТВСХ (164 мг, 1,09 ммоль) и имидазол (168 мг, 2,47 ммоль). Суспензию оставляют перемешиваться при кт в течение 3 дней. Реакционную смесь фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->20% МТБЭ в гексанах) для получения ((5-бром-4-(дифторметил)-2-фторфенил)окси)(трет-бутил)диметилсилана в виде бесцветной маслянистой жидкости (327 мг, выход 90%). Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,73 (dt, J=6,5, 1,2 Гц, 1H), 7,31 (d, J=9,9 Гц, 1Н), 6,85 (td, J=54,8, 1,2 Гц, 1H), 4,79 (s, 2Н), 0,96 (s, 9Н), 0,13 (s, 6Н).
Этап 7: синтез 1-(5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(дифторметил)-4-фторфенил)-4-циклопропил-1Н-имидазола
4
3
4
2
В реакционную ампулу загружают трис(дибензиледенацетон)дипалладий (0) (32,4 мг, 0,035 ммоль) и MetButylXphos (42,6 мг, 0,089 ммоль) в толуоле/1,4-диоксане (1,0 мл, 4/1) и нагревают до 120°С в течение 3 мин для предварительного комплексообразования. Полученный раствор темного цвета охлаждают до кт и переносят в отдельную ампулу, наполненную ((5-бром-4-(дифторметил)-2-фторбензил)окси)(трет-бутил)диметилсиланом (327 мг, 0,885 ммоль), 4-циклопропил-1H-имидазолом (192 мг, 1,771 ммоль) и KPO (376 мг, 1,771 ммоль) в толуоле/1,4-диоксане (3,4 мл, 4/1). Реакционную смесь интенсивно дегазируют с помощью N и оставляют перемешиваться при 120°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают до кт, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->30% EtOAc в гексанах) для получения 1-(5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(дифторметил)-4-фторфенил)-4-циклопропил-1Н-имидазола в виде маслянистой жидкости светло-коричневого цвета (130 мг, выход 37%).
Этап 8: синтез (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фторфенил)метанола
2
4
1
В раствор 1-(5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-(дифторметил)-4-фторфенил)-4-циклопропил-1Н-имидазола (130 мг, 0,328 ммоль) в ТГФ (1,6 мл) добавляют ТБАФ (1,0 М в ТГФ, 0,66 мл, 0,66 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при кт в течение 1 часа, гасят водой и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные слои в EtOAc промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->100% EtOAc в гексанах) для получения (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фторфенил)метанола в виде твердого вещества белого цвета (58 мг, выход 63%). Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,60 (s, 1Н), 7,55 (d, J=6,3 Гц, 1H), 7,45 (d, J=9,5 Гц, 1H), 6,86 (s, 1Н), 6,39 (t, J=54,2 Гц, 1H), 4,87 (s, 2Н), 1,97-1,79 (m, 1H), 0,98-0,90 (m, 2Н), 0,86-0,76 (m, 2Н).
Этап 9: синтез (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фторбензальдегида
2
2
3
2
4
1
В раствор (5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фторфенил)метанола (52 мг, 0,184 ммоль) в ДХМ (0,92 мл) при 0°С добавляют периодинан Десса-Мартина (156 мг, 0,368 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при 0°С в течение 1 часа, гасят насыщенным водным раствором NaSO и экстрагируют ДХМ (Х3). Объединенные слои в ДХМ промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->50% ацетон в гексанах) для получения (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фторбензальдегида в виде бесцветной маслянистой жидкости (50 мг, выход 97%). Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) 10,40 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,88 (d, J=5,8 Гц, 1Н), 7,67 (d, J=9,6 Гц, 1H), 6,88 (s, 1H), 6,53 (t, J=54,0 Гц, 1H), 2,00-1,93 (m, 1H), 1,04-0,96 (m, 2Н), 0,94-0,85 (m, 2Н).
Этап 10: синтез 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фторбензойной кислоты
2
4
2
2
4
2
4
6
1
В суспензию 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензальдегида (50 мг, 0,178 ммоль), 2-метилбут-2-ена (2,0 М в ТГФ, 2,2 мл) и КНРО (170 мг, 1,25 ммоль) в tBuOH/НО (0,9 мл, 4/1) добавляют NaClO (182 мг, 1,61 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при кт в течение ночи, гасят насыщенным водным раствором NHCl и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные слои в EtOAc промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->100% МеОН в ЛХМ) для получения (5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фторбензойной кислоты в виде твердого вещества белого цвета (25 мг, выход 47%). H-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d) δ 7,65 (s, 1H), 7,58 (s, br, 2Н), 7,16 (s, 1H), 6,84 (t, J=54,0 Гц, 1H), 1,89-1,82 (m, 1H), 0,85-0,74 (m, 2H), 0,74-0,58 (m, 2H).
Этап 11: синтез 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фтор-N-(6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)бензамида
1
5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-4-(дифторметил)-2-фтор-N-(6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)бензамид получают с помощью аналогичной методики, описанной для соединения по Примеру 31а. ЖХ/МС показывает [М+1]: 483,18. H-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 11,30 (s, 1H), 8,31 (d, J=8,3 Гц, 1H), 8,20-8,12 (m, 1H), 8,05-7,99 (m, 1H), 7,88 (dd, J=17,9, 7,8 Гц, 2Н), 7,72 (d, J=1,4 Гц, 1H), 7,23 (d, J=1,4 Гц, 1H), 6,99 (t, J=53,8 Гц, 1H), 5,98 (р, J=6,6 Гц, 1H), 1,87 (ddd, J=13,3, 8,4, 5,0 Гц, 1H), 1,55 (d, J=6,6 Гц, 6Н), 0,84-0,78 (m, 2Н), 0,72 (dt, J=5,1, 2,9 Гц, 2Н).
Пример 32а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 31а.
Пример 33а
Этап 1: синтез метил-5-бром-2-фтор-4-(гидроксиметил)бензоата
4
2
4
В раствор метил-5-бром-2-фтор-4-формилбензоата (3,5 г, 13,4 ммоль) в ТГФ (27 мл) при кт добавляют NaBH (0,534 г, 14,1 ммоль). Полученную суспензию оставляют охлаждаться до 0°С, и затем добавляют МеОН (0,57 мл, 1,41 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при кт в течение ночи, после чего осторожно гасят водой при 0°С. Неочищенный продукт экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные слои в EtOAc промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют для получения твердого вещества белого цвета. Полученный неочищенный материал сразу применяют при следующем превращении без какой-либо очистки.
Этап 2: синтез метил-5-бром-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)бензоата
3
2
4
1
В раствор метил-5-бром-2-фтор-4-(гидроксиметил)бензоата (0,891 мг, 3,39 ммоль) и ДИПЭА (1,18 мл, 6,77 ммоль) в ДХМ (11 мл) при 0°С добавляют МЭМХ (0,65 мл, 5,42 ммоль). Полученный раствор оставляют перемешиваться при 0°С в течение 1 часа, и затем нагревают до кт в течение ночи. Реакционную смесь гасят насыщенным водным раствором NaHCO и экстрагируют ДХМ (Х3). Объединенные слои в ДХМ промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->30% EtOAc в гексанах) для получения метил-5-бром-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)бензоата в виде бесцветной маслянистой жидкости (923,8 мг, выход 78%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) 8,10 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7,35 (d, J=11,4 Гц, 1H), 4,89 (s, 2Н), 4,66 (s, 2Н), 3,93 (s, 3H), 3,79-3,74 (m, 2Н), 3,60-3,53 (m, 2Н), 3,40 (s, 3H).
Этап 3: синтез (5-бром-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)фенил)метанола
2
4
1
В раствор метил-5-бром-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)бензоата (3,03 мг, 8,63 ммоль) в ТГФ (28,8 мл) при 0°С добавляют гидрид диизобутилалюминия (1,0 М раствор в толуоле, 25,9 мл, 25,9 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при той же температуре в течение 3 часов, после чего осторожно гасят 10%-ным водным раствором сегнетовой соли. Неочищенный продукт оставляют перемешиваться при кт в течение 1 часов и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные слои в EtOAc промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->70% EtOAc в гексанах) для получения (5-бром-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)фенил)метанола в виде бесцветной маслянистой жидкости (2,14 г, выход 77%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) 7,62 (d, J=6,8 Гц, 1Н), 7,23 (d, J=10,6 Гц, 1H), 4,87 (s, 2Н), 4,74 (s, 2Н), 4,64 (s, 2Н), 3,79-3,75 (m, 2Н), 3,62-3,55 (m, 2Н), 3,40 (s, 3H).
Этап 4: синтез (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)фенил)метанола
2
3
4
2
4
6
1
Микроволновая реакционная емкость, заполненная (5-бром-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)фенил)метанолом (640 мг, 1,98 ммоль), 4-циклопропил-1H-имидазолом (428 мг, 3,96 ммоль), CuO (28,3 мг, 0,198 ммоль), 8-гидроксихинолином (57,5 мг, 0,396 ммоль) и KPO (841 мг, 3,96 ммоль) в ДМСО (6,6 мл). Реакционную смесь продувают (Х3) и облучают при 160°С в течение 1 часа. Реакционную смесь гасят водой и экстрагируют ДХМ (Х3). Объединенные слои в ДХМ промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->10% МеОН в ДХМ) для получения (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)фенил)метанола в виде маслянистого вещества темного цвета (534,3 мг, выход 77%). H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 7,61 (d, J=1,4 Гц, 1H), 7,38 (d, J=6,8 Гц, 1H), 7,35 (d, J=10,5 Гц, 1H), 7,11 (d, J=1,4 Гц, 1H), 5,40 (t, J=5,7 Гц, 1H), 4,66 (s, 2Н), 4,58 (d, J=5,7 Гц, 2Н), 4,37 (s, 2Н), 3,57-3,52 (m, 2Н), 3,44-3,39 (m, 2Н), 3,22 (s, 3H), 1,89-1,77 (m, 1H), 0,82-0,77 (m, 2Н), 0,71-0,66 (m, 2Н).
Этап 5: синтез (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)бензальдегида
2
2
3
2
4
6
1
В раствор (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)фенил)метанола (534 мг, 1,52 ммоль) в ДХМ (7,6 мл) при 0°С добавляют периодинан Десса-Мартина (776 мг, 1,83 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при 0°С в течение 1 часа, гасят насыщенным водным раствором NaSO и экстрагируют ДХМ (Х3). Объединенные слои в ДХМ промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->5% МеОН в ДХМ) для получения (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)бензальдегида в виде твердого вещества светло-желтого цвета (171 мг, выход 32%). H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 10,20 (s, 1H), 7,77 (d, J=6,3 Гц, 1H), 7,70 (d, J=1,4 Гц, 1H), 7,61 (d, J=11,1 Гц, 1H), 7,20 (d, J=1,4 Гц, 1H), 4,71 (s, 2Н), 4,49 (s, 2Н), 3,61-3,55 (m, 2Н), 3,47-3,39 (m, 2Н), 3.21 (s, 3Н), 1,90-1,79 (m, 1H), 0,86-0,80 (m, 2Н), 0,73-0,64 (m, 2Н).
Этап 6: синтез (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)бензойной кислоты
2
4
2
2
2
3
2
4
В суспензию 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(((2-метоксиэтокси)метокси)метил)бензальдегида (170 мг, 0,488 ммоль), 2-метилбут-2-ена (2,0 М в ТГФ, 1,13 мл) и NaHPO (82 мг, 0,683 ммоль) в tBuOH/HO (4,9 мл, 4/1) добавляют NaClO (123 мг, 0,98 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при кт в течение ночи, гасят насыщенным водным раствором NaSO и экстрагируют ДХМ (Х3). Объединенные слои в ДХМ промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют для получения 80 мг неочищенного материала в виде твердого вещества светло-желтого цвета, которое сразу применяют при следующем превращении без какой-либо очистки.
Этап 7: синтез (R)-5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(гидроксиметил)-N-(6-(1-(1-гидроксипропан-2-ил)-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)бензамида
1
6
(R)-5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(гидроксиметил)-N-(6-(1-(1-гидроксипропан-2-ил)-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-ил)бензамид получают с помощью аналогичной методики, описанной для соединения по Примеру 33а. ЖХ/МС показывает [М+1]: 479,20. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 11,13 (s, 1Н), 8,31 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 8,14 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,97 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,70 (d, J=6,3 Гц, 1H), 7,55 (d, J=10,7 Гц, 1H), 7,22 (s, 1H), 5,92-5,82 (m, 1H), 5,62 (t, J=5,4 Гц, 1H), 4,91 (t, J=5,6 Гц, 1H), 4,42 (d, J=5,5 Гц, 2Н), 3,79-3,68 (m, 2Н), 1,85 (td, J=8,4, 4,2 Гц, 1H), 1,55 (d, J=6,8 Гц, 3Н), 0,81 (dt, J=8,5, 3,0 Гц, 2Н), 0,73-0,67 (m, 2Н).
Пример 37а
1
Сульфид диметилборана (0,36 мл, 3,8 ммоль) по каплям при 0°С добавляют в раствор 5-бром-2-фтор-4-(трифторметил)бензойной кислоты (344 мг, 1,2 ммоль) в ТГФ (3,4 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, и постепенно нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и осторожно гасят МеОН. Полученную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученную бесцветную маслянистую жидкость очищают колоночной хроматографией с элюированием гексанами/EtOAc (0% EtOAc → 20% EtOAc) для получения (5-бром-2-фтор-4-(трифторметил)фенил)метанола (295 мг, 1,1 ммоль, выход 90%) в виде бесцветного твердого вещества: H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,86 (d, J=6,6, 0,9 Гц, 1H), 7,39 (d, J=9,9 Гц, 1Н), 4,82 (s, 2Н), 1,87 (br s, 1Н).
2
3
4
1
ТБСХ (280 мг, 1,86 ммоль) добавляют в раствор (5-бром-2-фтор-4-(трифторметил)фенил)метанол а (362 мг, 1,33 ммоль) и имидазола (253 мг, 3,71 ммоль) в ДМФ (2,7 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение 6 часов при температуре окружающей среды. Реакционную смесь гасят НО и разбавляют МТБЭ. Слои разделяют, и водный слой экстрагируют МТБЭ (1×10 мл). Объединенные органические слои промывают 10%-ной лимонной кислотой, водой, насыщенным NaHCO и рассолом. Органический слой сушат (MgSO), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученную бесцветную маслянистую жидкость очищают колоночной хроматографией с элюированием гексанами/EtOAc (0% EtOAc → 4% EtOAc) для получения ((5-бром-2-фтор-4-(трифторметил)бензил)окси)(трет-бутил)диметилсилана (423 мг, 1,09 ммоль, выход 82%) в виде бесцветного маслянистой жидкости: H-ЯМР (500 МГц, Хлороформ-d) δ 7,84 (d, J=6,7 Гц, 1Н), 7,34 (d, J=9,9 Гц, 1Н), 4,80 (s, 2Н), 0,96 (s, 9Н), 0,14 (s, 6Н).
2
3
4
2
3
4
2
1
Смесь Pd(dba) (9,5 мг, 10,3 мкмоль) и Met-ButylXphos (12,4 мг, 0,03 ммоль) в 0,5 мл в 4:1 PhMe: 1,4-диоксана барботируют N в течение 5 минут. Реакционную смесь нагревают при 120°С в течение 5 минут для предварительного образования активного вещества Pd Реакционную смесь охлаждают до кт. В отдельной ампуле смесь ((5-бром-2-фтор-4-(трифторметил)бензил)окси)(трет-бутил)диметилсилана (100 мг, 0,26 ммоль), 4-циклопропил-1H-имидазола (55,8 мг, 0,52 ммоль) и KPO (110 мг, 0,52 ммоль) в 0,7 мл в 4:1 PhMe: 1,4-диоксане барботируют N в течение 5 мин. Раствор катализатора добавляют в оставшуюся реакционную смесь, и реакционную смесь нагревают при 120°С в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют сквозь целит, опрыскивают ДХМ и концентрируют при пониженном давлении. Полученную маслянистую жидкость коричневого цвета очищают колоночной хроматографией с элюированием гексанами/EtOAc (0% EtOAc → 20% EtOAc) для получения 1-(5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-4-фтор-2-(трифторметил)фенил)-4-циклопропил-1H-имидазола (23,3 мг, 0,06 ммоль, выход 22%) в виде маслянистой жидкости светло-желтого цвета: ЖХМС (m/z) 415,17 [М+1]; H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,70 (s, 1Н), 7,55 (d, J=6,2 Гц, 1H), 7,47 (d, J=9,4 Гц, 1H), 6,34 (s, 1H), 4,85 (s, 2Н), 1,98 (ddd, J=13,3, 8,4, 5,1 Гц, 1H), 0,98 (dt, J=8,0, 2,7 Гц, 2Н), 0,94-0,91 (comp, 11Н), 0,14 (s, 6Н).
1
ТБАФ (0,11 мл 1,0 М раствора в ТГФ, 0,11 ммоль) по каплям добавляют в раствор 1-(5-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-4-фтор-2-(трифторметил)фенил)-4-циклопропил-1H-имидазола (23 мг, 0,06 ммоль) в ТГФ (0,79 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч. Реакционную смесь очищают колоночной хроматографией с элюированием гексанами/EtOAc (0% EtOAc → 80% EtOAc) для получения (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(трифторметил)фенил)метанола (12,8 мг, 0,04 ммоль, выход 77%) в виде твердого вещества желтого цвета: ЖХМС (m/z) 301,07 [М+1]; H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) 8,02 (s, 1Н), 7,69 (d, J=6,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=9,3 Гц, 1H), 6,81 (s, 1Н), 4,82 (s, 2Н), 1,90 (tt, J=8,3, 5,1 Гц, 1H), 0,98-0,89 (m, 2Н), 0,89-0,79 (m, 2Н).
2
2
3
4
1
Периодинан Десса-Мартина (62,7 мг, 0,15 ммоль) при 0°С добавляют в раствор (5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(трифторметил)фенил)метанола (22,2 мг, 0,07 ммоль) в ДХМ (0,37 мл), и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1,5 часов. Реакционную смесь гасят насыщенным NaSO и экстрагируют ДХМ (3×2 мл). Объединенные органические слои сушат (MgSO), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток светло-желтого цвета очищают колоночной хроматографией с элюированием гексанами/EtOAc (0% EtOAc → 55% EtOAc) для получения 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(трифторметил)бензальдегида (21 мг, 0,07 ммоль, выход 95%) в виде бесцветного резиноподобного вещества: ЖХМС (m/z) 299,06 [М+1]; H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) 10,40 (s, 1Н), 7,87 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,67 (d, J=9,6 Гц, 1Н), 7,49 (s, 1H), 6,81 (s, 2Н), 1,89 (tt, J=8,3, 5,1 Гц, 1Н), 0,93-0,85 (m, 2Н), 0,89-0,78 (m, 2Н).
4
4
2
2
1
Хлорит натрия (71,6 мг, 0,63 ммоль) добавляют в раствор 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(трифторметил)бензальдегида (21 мг, 0,07 ммоль), 2-метилбут-2-ена (0,88 мл 2,0 М раствора в ТГФ, 1,76 ммоль) и дигидрофосфата натрия (67,1 мг, 0,49 ммоль) в ТГФ (0,75 мл)/H2O (0,25 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным NHCl (5 мл) и разбавляют EtOAc (5 мл). Слои разделяют, и водный слой экстрагируют EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические слои сушат (MgSO), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученное твердое вещество белого цвета очищают колоночной хроматографией с элюированием CHCl/МеОН (0% MeOH → 25% MeOH) для получения 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(трифторметил)бензойной кислоты (10,7 мг, 0,03 ммоль, выход 48%) в виде твердого вещества белого цвета: ЖХМС (m/z) 315,05 [М+1]; H-ЯМР (400 МГц, Метанол-d) 8,19 (s, 1H), 7,97 (d, J=6,1 Гц, 1H), 7,80 (d, J=9,8 Гц, 1H), 7,23 (s, 1Н), 1,94 (ddd, J=8,5, 5,1, 3,4 Гц, 1Н), 1,01-0,93 (m, 2H), 0,82-0,75 (m, 2H).
Оксалилхлорид (7 мкл, 0,08 ммоль) добавляют в смесь 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(трифторметил)бензойной кислоты (6 мг, 0,02 ммоль) и ДМФ (1 капля) в ДХМ (55 мкл), и реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и сушат в вакууме. Полученный остаток желтого цвета сразу применяют на следующем этапе без очистки.
2
2
6-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)пиридин-2-амин (5,9 мг, 0,03 ммоль) добавляют в раствор 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-(трифторметил)бензоилхлорида (6,4 мг, 0,02 ммоль) в ДХМ (27 мкл)/пиридине (27 мкл), и реакционную смесь перемешивают в течение часа. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученное твердое вещество оранжевого цвета очищают колоночной хроматографией с элюированием CHCl/МеОН (0% MeOH → 5% МеОН) для получения Примера 37а (4,2 мг, 8,4 мкмоль, выход 44%) в виде прозрачного резиноподобного вещества:
Пример 40а
2
2
3
2
4
Этап 1: Смесь 4-циклопропил-1H-имидазола (1,95 мг, 18,1 ммоль), 2-хлор-5-фтор-4-йодпиридина (3,1 г, 12,0 ммоль), CuO (105 мг, 0,6 ммоль), 8-гидроксихинолина (353 мг, 2,4 ммоль) и CsCO (11,7 г, 36 ммоль) в бутиронитриле (100 мл) перемешивают при 65°С в течение 16 ч. После охлаждения по комнатной температуры добавляют 100 мл воды, и полученную смесь экстрагируют EtOAc (100 мл × 2). Органический слой сушат над NaSO, фильтруют и выпаривают. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле с ПЭ/EtOAc (3:1) для получения 1,7 г (57%) 2-хлор-4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-фторпиридина в виде твердого вещества белого цвета.
2
3
Этап 2: В 50 мл-ом автоклаве смесь 2-хлор-4-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-5-фторпиридина (1,7 г, 7,1 ммоль), Pd(dppf)Cl (539 мг, 0,7 ммоль) и EtN (2,13 г, 21 ммоль) в BuOH (30 мл) перемешивают при 10 атм СО при 70°С в течение 16 часов. Полученную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле с ПЭ/EtOAc (3:1) для получения бутил-4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-фторпиколината (1,6 г, 73,7%) в виде маслянистого вещества желтого цвета.
Этап 3: В раствор 6утил-4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-фторпиколината (800 мг, 2,64 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) добавляют 1 М HCl (5 мл). Полученную смесь перемешивают при 100°С в атмосфере азота в течение ночи. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией с обращенной фазой с 0-30% MeCN/воды для получения 4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-фторпиридин-2-карбоновой кислоты (320 мг, 49,0%) в виде твердого вещества белого цвета.
3
2
Этап 4: Смесь 4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-фторпиридин-2-карбоновой кислоты (300 мг, 1,21 ммоль), 6-[1-(пропан-2-ил)-1Н-1,2,3,4-тетразол-5-ил]пиридин-2-амина (371,7 мг, 1,82 ммоль), HATU (922,8 мг, 2,43 ммоль) и NMM (368,1 мг, 3,64 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают хроматографией с обращенной фазой с 0-60% CHCN/HO для получения Примера 39а (100 мг, 19,01%) в виде твердого вещества белого цвета.
3
2
Этап 5: Пример 39а (20 мг, 50 ммоль) растворяют в пиперидине (1 мл) и перемешивают при 70°С в течение 1 ч. Полученную смесь концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают хроматографией с обращенной фазой с 0-75% CHCN/HO для получения Примера 40а (7 мг, 30,4%) в виде твердого вещества светло-коричневого цвета.
Пример 41а
3
2
Этап 1: Смесь 4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-фторпиридин-2-карбоновой кислоты (200 мг, 0,8 ммоль), 2-(1-изопропил-1Н-тетразол-5-ил)тиазол-4-амина (245,3 мг, 1,2 ммоль), HATU (615,2 мг, 1,6 ммоль) и NMM (254,4 мг, 2,4 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Полученную смесь концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают хроматографией с обращенной фазой с 0-60% CHCN/HO для получения Примера 38а (160 мг, 45,5%) в виде твердого вещества белого цвета.
3
2
Этап 2: Раствор Примера 38 (30 мг, 0,068 ммоль) в пиперидине (1 мл) перемешивают при 70°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают хроматографией с обращенной фазой с 0-75% CHCN/HO для получения Примера 41  (12 мг, 34,8%) в виде твердого вещества светло-коричневого цвета.
Примеры 42а, 44а и 45а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 41а.
Примеры 43а, 46а и 47а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 40а.
Пример 52а
2
3
2
4
Этап 1: 4-бром-2-хлор-5-метилпиридин (600 мг, 2,9 ммоль) добавляют в смесь 4-(трет-бутил)-1Н-имидазола (431 мг, 3,48 ммоль) и CsCO (2,83 г, 8,7 ммоль) в ДМФ (2 мл). Полученный раствор перемешивают при 100°С в течение ночи. Смесь охлаждают до кт, разбавляют EtOAc (100 мл) и промывают водой (30 мл × 2) и рассолом (30 мл). Органический слой сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют в вакууме. Очистка остатка колоночной хроматографией на силикагеле с 30% EtOAc/ПЭ дает 400 мг (55%) 4-(4-(трет-бутил)-1Н-имидазол-1-ил)-2-хлор-5-метилпиридина в виде твердого вещества желтого цвета.
2
3
Этап 2: В 50 мл-ом автоклаве смесь 2-хлор-5-метил-4-(4-(трифторметил)-1Н-имидазол-1-ил)пиридина (400 мг, 1,6 ммоль), Pd(dppf)Cl (195 мг, 0,24 ммоль) и EtN (485 мг, 4,8 ммоль) в BuOH (20 мл) перемешивают при 10 атм СО при 70°С в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле с ПЭ/EtOAc (3:1) для получения бутил-4-(4-(трет-бутил)-1Н-имидазол-1-ил)-5-метилпиколината (380 мг, 75%) в виде твердого вещества белого цвета.
2
3
2
Этап 3: Бутил-4-(4-(трет-бутил)-1Н-имидазол-1-ил)-5-метилпиколинат (50 мг, 0,15 ммоль) добавляют в смесь 6-[1-(пропан-2-ил)-1Н-1,2,3,4-тетразол-5-ил]пиридин-2-амина (43 мг, 0,18 ммоль) и CsCO (146 мг, 0,45 ммоль) в ДМФ (2 мл). Полученную смесь перемешивают при 100°С в течение 2 ч, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Фильтрат очищают препаративной флэш-ВЭЖХ с 0-100% MeCN/НО для получения 12,4 мг Примера 52 в виде твердого вещества белого цвета.
Примеры 48а и 50а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 52а.
Пример 53а
3
2
4
2
MeAl (1 мл, 2 M в толуоле) при 0°С добавляют в раствор (R)-2-(5-(6-аминопиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропан-1-ола (43 мг, 0,18 ммоль) в ДХМ, и полученную смесь перемешивают при этой температуре в течение 1 часа. Добавляют раствор бутил-4-(4-(трет-бутил)-1Н-имидазол-1-ил)-5-метилпиколината (50 мг, 0,15 ммоль) в ДХМ (2 мл). Полученный раствор перемешивают при 35°С в течение ночи. Реакционную смесь гасят сегнетовой солью и экстрагируют EtOAc. Органический слой сушат над безводным NaSO, фильтруют и концентрируют в вакуум. Неочищенный продукт очищают препаративной флэш-ВЭЖХ с 0-100% MeCN/НО для получения 9,4 мг Примера 53а в виде твердого вещества белого цвета.
Примеры 49а и 51а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 53а.
Пример 55а
4
2
2
4
Этап 1: В герметичную пробирку вводят метил-4-хлор-5-метилпиридин-2-карбоксилат (3 г, 16,16 ммоль), БСИ (14,4 г, 80,81 ммоль), АИБН (1,3 г, 8,08 ммоль) и CCl (60 мл). Полученную смесь перемешивают при 90°С в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают до кт, разбавляют ДХМ и промывают НО и рассолом Органический слой сушат над безводным NaSO, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле с ЭА в ПЭ (0~10%) для получения метил-4-хлор-5-(дибромметил)пиридин-2-карбоксилата (4,4 г, 79,3%) в виде твердого вещества серого цвета.
3
2
Этап 2: Смесь 4-хлор-5-(дибромметил)пиридин-2-карбоксилата (4,4 мг, 12,81 ммоль), AgNO (6,5 г, 38,44 ммоль) в EtOH (90 мл) и НО (9 мл) перемешивают при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют сквозь диатомит, и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Очистка остатка колоночной хроматографией на силикагеле с EtOAc в ПЭ (0-50%) дает метил-4-хлор-5-формилпиридин-2-карбоксилат (1,4 г, 54,7%) в виде твердого вещества желтого цвета.
Этап 3: Смесь 4-хлор-5-формилпиридин-2-кар6оксилата (1,4 мг, 7,01 ммоль) и ДАСТ (2,8 г, 17,54 ммоль) в ДХМ (15 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученную смесь концентрируют в вакууме, и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле с EtOAc в ПЭ (0-10%) для получения метил-4-хлор-5-(цифторметил)пиридин-2-кар6оксилата (0,9 г, 54,7%) в виде твердого вещества желтого цвета.
2
3
2
Этап 4: Смесь метил-4-хлор-5-(дифторметил)пиридин-2-кар6оксилата (700 мг, 3,16 ммоль), 4-циклопропил-1H-имидазола (409,9 мг, 3,79 ммоль) и CsCO (2058,5 мг, 6,32 ммоль) в ДМФ (10 мл) перемешивают при 100°С в течение 2 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры и подкисляют до рН 3~4 HCl (водной). Растворитель удаляют в вакууме, и неочищенный продукт очищают хроматографией с обращенной фазой с 0-20% MeCN/HO для получения 4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-(дифторметил)пиридин-2-карбоновой кислоты (550 мг, 62,4%) в виде твердого вещества желтого цвета.
3
3
Этап 5: Смесь 4-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-5-(дифторметил)пиридин-2-карбоновой кислоты (100 мг, 0,36 ммоль), МеОН (22,9 мг, 0,72 ммоль), PPh (187,8 мг, 0,72 ммоль) и ДИАД (144,8 мг, 0,72 ммоль) в ТГФ (2 мл) перемешивают при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 2 ч. Растворитель удаляют в вакууме, и остаток очищают хроматографией с обращенной фазой с 20-30% CHCN/воды для получения 4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-(дифторметил)пиридин-2-карбоксилата (80 мг, 76,2%) в виде бесцветной маслянистой жидкости.
3
2
4
2
Этап 6: В перемешанный раствор (2R)-2-[5-(6-аминопиридин-2-ил)-1Н-1,2,3,4-тетразол-1-ил]пропан-1-ола (180,2 мг, 0,82 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°С в атмосфере азота по каплям добавляют 2 М раствор MeAl (2 мл, 4,1 ммоль) в толуоле. Смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и добавляют 4-(4-циклопропил)-1Н-имидазол-1-ил)-5-(дифторметил)пиридин-2-карбоксилат (240 мг, 0,818 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 35°С в течение дополнительного 1 ч. Реакционную смесь гасят сегнетовой солью и экстрагируют ДХМ Органический слой сушат над безводным NaSO и концентрируют при пониженном давлении. Очистка остатка хроматографией с обращенной фазой с 0-35% MeCN/HO дает Примера 55а (115,1 мг, 29,21%) в виде твердого вещества белого цвета.
Примеры 54а и 56а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 55а.
Пример 57а
2
3
Этап 1: В 50 мл-вую круглодонную колбу, продутую азотом, помещают раствор 2,4-дихор-5-(трифторметил)пиридина (800 мг, 3,7 ммоль) в ДМФ (2 мл), 4-циклопропил-1H-имидазола (482 мг, 4,4 ммоль) и KCO (1,53 г, 11,1 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 70°С в течение ночи. Растворитель удаляют в вакууме. Очистка неочищенного продукта колоночной хроматографией на силикагеле с 30% EtOAc/ПЭ дает 360 мг (38%) 2-хлор-4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиридин в виде твердого вещества желтого цвета.
2
3
Этап 2: В 50 мл-ом автоклаве смесь 2-хлор-4-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиридина (360 мг, 1,25 ммоль), Pd(dppf)Cl (152 мг, 0,187 ммоль) и EtN (387 мг, 3,75 ммоль) в BuOH (20 мл) перемешивают при 10 атм СО при 70°С в течение 16 часов. Полученную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле с ПЭ/EtOAc (3:1) для получения бутил-4-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиколината (270 мг, 61%) в виде маслянистой жидкости желтого цвета.
2
3
2
Этап 3: Бутил-4-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиколинат (60 мг, 0,17 ммоль) добавляют в смесь 6-[1-(пропан-2-ил)-1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил]пиридин-2-амина (49 мг, 0,2 ммоль) и КСО (70 мг, 0,5 ммоль) в дихлорметане (2 мл). Полученную смесь перемешивают при 100°С в течение 2 ч. Растворитель удаляют в вакууме, и неочищенный продукт очищают препаративной флэш-ВЭЖХ с 0-100% MeCN/HO для получения 25,3 мг (31%) Примера 57а в виде твердого вещества белого цвета.
Пример 58а
2
2
Этап 1: Смесь бутил-4-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиколината (50 мг, 0,14 ммоль) и NaOH (56 мг, 1,4 ммоль) в МеОН (2 мл) и НО (2 мл) перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Растворитель удаляют в вакууме, и неочищенный продукт очищают препаративной флэш-ВЭЖХ с 0-100% MeCN/НО для получения 25 мг (59%) 4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиколиновой кислоты в виде твердого вещества белого цвета.
2
Этап 2: Смесь 4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиколиновой кислоты (25 мг, 0,08 ммоль), (R)-2-(5-(6-аминопиридин-2-ил)-1Н-тетразол-1-ил)пропилацетата (27 мг, 0,1 ммоль), HATU (61 мг, 0,16 ммоль) и ДИЭА (31 мг, 0,24 ммоль) в дихлорметане (2 мл) перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Растворитель удаляют в вакууме, и неочищенный продукт очищают препаративной флэш-ВЭЖХ с 0-100% MeCN/HO для получения 20 мг (44%) (R)-2-(5-(6-(4-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиколинамидо)пиридин-2-ил)-1H-тетразол-1-ил)пропилацетата в виде твердого вещества белого цвета.
2
3
2
Этап 3: KCO (15 мг, 0,11 ммоль) добавляют в раствор (R)-2-(5-(6-(5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)пиколинамидо)пиридин-2-ил)-1Н-тетразол-1ил)пропилацетата (20 мг, 0,037 ммоль) в МеОН (5 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляют в вакууме, и неочищенный продукт очищают препаративной флэш-ВЭЖХ с 0-100% MeCN/НО для получения 9,7 мг (51%) Примера 58 в виде твердого вещества белого цвета.
Пример 59а получают по аналогичному протоколу, что и Пример 57а.
Примеры 8а-18а, 20а-26а, 34а-36а, 60а и 61а получают по аналогичным способам, что и Пример 1а.
Пример 1б:
Этап 1: Синтез 6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-амина (соединение 1б):
Способ 1 для Этапа 1:
Этап 1-1а. Синтез бензил-(6-аминопиридин-2-ил)кар6амата (соединение 3)
4
2
4
1
В раствор пиридин-2,6-диамина (1,017 г, 9,32 ммоль) в ТГФ (23 мл) при -78°С медленно добавляют раствор 1,0 М nBuLi в гексане (6,41 мл, 10,25 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при той же температуре в течение одного часа, после чего добавляют CbzCl (1,38 мл, 9,32 ммоль). Затем реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение дополнительных двух часов. Реакционную смесь гасят водным раствором NHCl. Водный слой экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над NaSO и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с помощью 0->100% EtOAc в гексане для получения 0,93 г маслянистой жидкости соединения 3 (выход 41%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,53-7,26 (m, 8Н), 6,19 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 5,20 (s, 2Н), 4,38 (br, 3Н).
Этап 1-2а. Синтез бензил-(6-изобутирамидопиридин-2-ил)карбамата (соединение 4)
В раствор бензил-(6-аминопиридин-2-ил)карбамата (0,93 г, 3,82 ммоль) в пиридине (13 мл) при комнатной температуре по каплям добавляют изобутирилхлорид (0,48 мл, 4,59 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться в течение двух часов. Концентрируют и очищают 40 г колонной с 0->100% EtOAc в гексане для получения 0,984 мг твердого вещества белого цвета соединения 5 (выход 82%). ЖХ-МС (m/z): М+1 = 314,13, рассчитано 314,14.
Этап 1-3а и 1-4а. Синтез бензил-(6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-ил)карбамата (соединение 6)
5
В раствор бензил-(6-изобутирамидопиридин-2-ил)карбамата (666 мг, 2,13 ммоль) в ДХЭ (11 мл) добавляют PCl (531 мг, 2,55 ммоль). Полученный прозрачный раствор оставляют перемешиваться при 60°С в течение ночи для получения мутного раствора светло-желтого цвета. Концентрируют для получения твердого вещества светло-желтого цвета соединения 5. Неочищенный материал сразу применяют на этапе 4 без какой-либо очистки.
3
3
2
4
1
В раствор полученного соединения 5 (554 мг, 1,67 ммоль) в ДХЭ (8 мл) добавляют TMCN (0,43 мл, 3,34 ммоль). Полученный мутный раствор оставляют перемешиваться при 60°С в течение ночи. Неочищенный продукт гасят водным раствором NaHCO. Водный слой экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над NaSO и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с помощью 0->30% EtOAc в гексанах для получения 369,3 мг твердого вещества белого цвета соединения 6 (выход 65%). ЖХ-МС (m/z): М+1 = 339,14, рассчитано 339,15. Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,14 (d, J=8,3 Гц, 1H), 7,96 (t, J=8,1 Гц, 1H), 7,60 (dd, J=7,8, 0,8 Гц, 1H), 7,46-7,35 (m, 5Н), 7,31 (br, 1H), 5,26 (s, 2Н), 3,85 (p, J=6,9 Гц, 1H), 1,43 (d, J=6,9 Гц, 6Н).
Этап 1-5а. Синтез 6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-амина (соединение 1б):
2
2
1
В раствор бензил-(6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-ил)карбамата (421 мг, 1,24 ммоль) в EtOH (6,2 мл) добавляют Pd/C (21 мг). Реакционную смесь продувают H три раза и перемешивают при комнатной температуре при 1 атм Н в течение ночи. Фильтруют сквозь пакет целита и концентрируют. Затем остаток очищают хроматографией на силикагеле с помощью 0->5% МеОН в ДХМ для получения 218,6 мг твердого вещества белого цвета соединения 1б (выход 86%). ЖХ-МС (m/z): М+1 = 205,10, рассчитано 205,11. H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,71-7,61 (m, 1Н), 7,18 (dd, J=7,7, 0,7 Гц, 1H), 6,59 (dd, J=8,2, 0,7 Гц, 1Н), 4,62 (s, 2Н), 3,89 (p, J=6,9 Гц, 1H), 1,44 (d, J=7,0 Гц, 6Н).
Способ 2 для Этапа 1:
Этап 1-1б: синтез N-(6-хлорпиридин-2-ил)изобутирамида
4
2
4
1
В раствор 6-хлорпиридин-2-амина (1,04 г, 8,09 ммоль) в пиридине/ДХМ (16,4 мл, 1/4) при 0°С по каплям добавляют изобутирилхлорид (0,91 мл, 8,49 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при 0°С в течение 30 мин, а затем при кт в течение 1 ч. Неочищенную реакционную смесь разбавляют ДХМ и промывают водным NHCl и рассолом Затем органический слой сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Неочищенный остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->20% ацетона в гексанах) для получения N-(6-хлорпиридин-2-ил)изобутирамида в виде твердого вещества белого цвета (1,523 г, 95%). H-ЯМР (500 МГц, Хлороформ-d) 8,19 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 7,85 (s, br, 1H), 7,68 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 7,08 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 2,62-2,48 (m, 1Н), 1,29 (d, J=6,9 Гц, 6Н).
Этап 1-2б: синтез (Z)-Н-(6-хлорпиридин-2-ил)изобутиримидоилхлорида
5
В раствор N-(6-хлорпиридин-2-ил)изобутирамида (1,523 г, 7,67 ммоль) в ДХМ (38 мл) добавляют PCl (1,764 г, 8,05 ммоль). Полученную прозрачную суспензию оставляют перемешиваться при кт в течение 1 часа. Неочищенный материал концентрируют и сразу применяют на этапе 3 без какой-либо очистки.
Этап 1-3б: синтез 2-хлор-6-(5-изопропил-1H-тетразол-1-ил)пиридина
3
3
2
4
1
В раствор (Z)-N-(6-хлорпиридин-2-ил)изобутиримидоилхлорида (0,887 г, 4,09 ммоль) в MeCN (10,2 мл) добавляют TMCN (1,09 мл, 8,17 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при 60°С в течение 2 дней. Неочищенный продукт охлаждают до кт, гасят водным NaHCO и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Неочищенный остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->30% EtOAc в гексанах) для получения 2-хлор-6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридина в виде твердого вещества белого цвета (396 мг, выход 43%). H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,00-7,93 (m, 8Н), 7,56-7,43 (m, 1H), 4,06-3,94 (m, 1H), 1,51 (d, J=6,9 Гц, 6Н).
Этап 1-4б: синтез N-(6-(5-изопропил-1H-тетразол-1-ил)пиридин-2-ил)-1,1-дифенилметанамина
3
2
4
В раствор 2-хлор-6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридина (102 мг, 0,456 ммоль) в толуоле (2,3 мл) добавляют дифенилметанамин (0,115 мл, 0,685 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) (20,9 мг, 0,023 ммоль), BINAP (28,4 мг, 0,046 ммоль) и трет-бутоксид натрия (65,8 мг, 0,685 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при 60°С в течение ночи. Реакционную смесь гасят водным NaHCO и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Неочищенный остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->20% EtOAc в гексанах) для получения N-(6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-ил)-1,1-дифенилметанамина в виде твердого вещества беловатого цвета (112,4 мг, выход 67%). ЖХ-МС [М+Н] = 369,16.
Этап 1-5б: синтез 6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-амина
3
2
4
В раствор N-(6-(5-изопропил-1H-тетразол-1-ил)пиридин-2-ил)-1,1-дифенилметанамина (112,4 мг, 0,305 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) добавляют водный раствор HCl (6 Н, 0,763 мл) и затем реакционную смесь оставляют перемешиваться при кт в течение 1 часа. Реакционную смесь гасят водным NaHCO и экстрагируют EtOAc (Х3). Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над NaSO, фильтруют и концентрируют. Неочищенный остаток очищают хроматографией на силикагеле (0->60% EtOAc в гексанах) для получения 6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-амина в виде твердого вещества белого цвета (47 мг, выход 75%).
Этап 2: Синтез 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамида (Пример 1б)
В суспензию 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (89 мг, 0,343 ммоль) в ДХМ (0,6 мл) добавляют 1-хлор-N,N,2-триметилпроп-1-ен-1-амин (реагент Гозеса, 0,14 мл, 1,02 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при кт в течение одного часа для получения прозрачного раствора, и затем концентрируют в вакууме.
2
4
1
Остаток (соединение 8б) растворяют в пиридине (0,6 мл), охлаждают до 0°С, и добавляют раствор 6-(5-изопропил-1Н-тетразол-1-ил)пиридин-2-амина (1) (50 мг, 0,245 ммоль) в ДХМ (0,6 мл). Реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 4 часов. Реакционную смесь концентрируют, и затем разбавляют EtOAc и рассолом. Водный слой экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над NaSO и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле 0->5% МеОН в ДХМ для получения соединения по примеру 10 в виде твердого вещества белого цвета (94 мг, выход 86%). ЖХ-МС (m/z) М+1 = 447,19, рассчитано 447,20. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 11,18 (s, 1H), 8,34 (d, J=7,7 Гц, 1H), 8,23 (t, J=8,1 Гц, 1H), 7,72 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,70 (d, J=1,4 Гц, 1H), 7,65 (d, J=6,6 Гц, 1H), 7,48 (d, J=10,9 Гц, 1H), 7,18 (d, J=1,4 Гц, 1H), 3,91 (p, J=6,8 Гц, 1Н), 2,25 (s, 3Н), 1,89-1,82 (m, 1Н), 1,31 (s, 3Н), 1,30 (s, 3Н), 0,83-0,77 (m, 2Н), 0,72-0,67 (m, 2Н).
Примеры 2б-6б получают по аналогичным способам, что и Пример 1б.
Пример 1в:
Этап 1: Синтез 6-(3-изопропил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)пиридин-2-амина (соединение 4в):
3
6
1
В суспензию 1-гадразинил-3-метил6утан-2-она (673 мг, 5,5 ммоль) в ацетонитриле (4 мл) добавляют 1,1-диметокси-N,N-диметилметанамин (0,731 мл, 5,50 ммоль), и полученную смесь (прозрачный раствор) нагревают до 50°С и перемешивают в течение 30 мин. Затем добавляют пиридин-2,6-диамин (612 мг, 5,5 ммоль) в уксусной кислоте (5 мл)/ацетонитриле (1 мл), и смесь нагревают до 120°С в течение 23 ч, охлаждают до кт и концентрируют. Остаток разбавляют EtOAc, промывают насыщенным NaHCO и снова концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на силикагеле с ДХМ/МеОН (от 100/0 до 90/10, 10 мин) для получения целевого продукта 4. ЖХ-МС [М+Н] = 204,09, рассчитано 204,12, H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 8,66 (s, 1Н), 7,59 (t, J=7,5 Гц, 1H), 6,65 (d, J=7,5 Гц, 1H), 6,53 (d, J=8,3 Гц, 1H), 6,43 (s, 2H), 3,49-3,41 (m, 1H), 1,21 (d, J=6,9 Гц, 6H).
Этап 2: Синтез 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(3-изопропил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамида.
1
6
В суспензию 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (5) (30,5 мг, 0,117 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляют 1-хлор-N,N,2-триметилпроп-1-ен-1-амин (реагент Гозеса, 0,033 мл, 0,251 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при кт в течение 40 мин (прозрачный раствор), и затем концентрируют в вакууме. Остаток (соединение 6) растворяют в ДХМ (1 мл), охлаждают до 0°С, и добавляют раствор 6-(3-изопропил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)пиридин-2-амина (4в) (17 мг, 0,084 ммоль) и пиридина (0,041 мл, 0,502 ммоль) в ДХМ (1 мл). Реакционную смесь оставляют нагреваться до кт и перемешивают в течение ночи, и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с ДХМ/МеОН (от 100/0 до 70/30, 15 мин) для получения целевого продукта (Пример 1в) в виде твердого вещества белого цвета ЖХ-МС [М-Н] = 444,20, рассчитано 444,20. Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 11,24 (s, 1Н), 9,33 (d, J=1,7 Гц, 1Н), 8,92 (s, 1Н), 8,27 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 8,17 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 7,94 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7,77 (d, J=1,6 Гц, 1Н), 7,59 (d, J=10,7 Гц, 1Н), 7,52 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 3,61-3,41 (m, 1Н), 2,29 (s, 3Н), 2,10-2,01 (m, 1Н), 1,21 (d, J=6,9 Гц, 6Н), 1,05 (dt, J=8,6, 3,3 Гц, 2Н), 0,92-0,83 (m, 2Н).
Пример 2в: N-(6-(4H-1,2,4-триазол-4-ил)пиридин-2-ил)-5-(4-циклопропил-1H-имидазод-1-ил)-2-фтор-метилбензамид.
1
6
Пример 2в получают с помощью аналогичной методики, описанной для соединения по Примеру 1в. ЖХ-МС [М-Н] = 444,20, рассчитано 444,20. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 11,22 (s, 1H), 9,32 (d, J=1,6 Гц, 1H), 9,23 (s, 2Н), 8,22-8,10 (m, 2Н), 7,93 (d, J=6,4 Нц, 1Н), 7,79 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,67 (dd, J=7,2, 1,3 Гц, 1H), 7,60 (d, J=10,8 Гц, 1Н), 2,30 (s, 3Н), 2,08-2,02 (m, 1H), 1,11-0,99 (m, 2Н), 0,92-0,83 (m, 2Н).
Пример 3в:
Этап 1: Синтез 6-(2-изопропил-1H-имидазол-1-ил)пиридин-2-амина (соединение 7в):
2
6
1
Смесь 6-фторпиридин-2-амина (448 мг, 4,00 ммоль), 2-изопропил-1H-имидазола (880 мг, 7,99 ммоль) и карбоната цезия (3906 мг, 11,99 ммоль) в ДМА (4 мл) нагревают до 120°С в атмосфере N и перемешивают в течение ночи, охлаждают до кт, разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с помощью гексана/ацетона (от 100/0 до 50/50, 10 мин) для получения целевого продукта (7в) в виде твердого вещества беловатого цвета, которое промывают EtOAc для удаления некоторого количества оставшегося исходного материала. H-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d) δ 7,54 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7,25 (d, J=1,3 Гц, 1H), 6,85 (d, J=1,3 Гц, 1H), 6,53 (d, J=7,4 Гц, 1H), 6,46 (d, J=8,2 Гц, 1H), 6,28 (s, 2Н), 3,44 (h, J=6,8 Гц, 1H), 1,16 (d, J=6,8 Гц, 6Н).
Этап 2: Синтез 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(2-изопропил-1H-тетразол-1-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамида (Пример 3в)
3
6
1
В суспензию 5-(4-циклопропил-1H-имидазол-1-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (5) (64,9 мг, 0,249 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляют 1-хлор-N,N,2-триметилпроп-1-ен-1-амин (0,071 мл, 0,534 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при кт в течение 40 мин (прозрачный раствор), затем охлаждают до 0°С, и добавляют раствор 6-(2-изопропил-1Н-имидазол-1-ил)пиридин-2-амина (36 мг, 0,178 ммоль) и пиридина (0,086 мл, 1,068 ммоль) в ДХМ (2 мл). Реакционную смесь оставляют нагреваться до кт и перемешивают в течение ночи, и затем разбавляют EtOAc, промывают насыщенным NaHCO и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с гексаном/ацетоном (от 100/0 до 20/80, 15 мин) для получения Примера 3 в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ-МС [М+Н] = 445,20, рассчитано 445,21. H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 11,03 (s, 1Н), 8,21 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 8,08 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,72-7,60 (m, 2Н), 7,49-7,39 (m, 2Н), 7,37-7,30 (m, 2Н), 7,18 (d, J=1,4 Гц, 1Н), 6,92 (d, J=1,5 Гц, 1H), 3,52 (p, J=6,8 Гц, 1H), 2,24 (s, 3Н), 1,84 (td, J=8,5, 4,3 Гц, 1Н), 1,15 (d, J=6,8 Гц, 6Н), 0,85-0,74 (m, 2Н), 0,74-0,65 (m, 2Н).
Пример 4в:
Этап 1: Синтез 6-(1-изопропил-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пиридин-2-амина (соединение 12в)
2
4
2
3
1
В емкость, содержащую 1Н-1,2,3-триазол (3,06 г, 44,3 ммоль) и i-PrOH (3,7 мл, 48,7 ммоль), при 0°С по каплям добавляют 96%-ную HSO (16,11 мл) и перемешивают при 0°С в течение 5 ч и при кт в течение 43 ч. Реакционную смесь выливают на лед (100 г). Смесь экстрагируют ДХМ (3×50 мл). В водный слой добавляют NaCO (32 г) медленно (экзотермический эффект, выделение пузырьков) и при перемешивании. Полученную смесь молочного цвета экстрагируют ДХМ (50 мл × 3). Объединенные слои в ДХМ промывают водой (50 мл), затем рассолом (50 мл). Сушат, фильтруют и концентрируют для получения соединения 9 (2,8 г) в виде бесцветной маслянистой жидкости. H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,67 (d, J=0,8 Гц, 1Н), 7,53 (d, J=0,8 Гц, 1H), 4,85 (m, J=6,8 Гц, 1Н), 1,57 (d, J=6,8 Гц, 6Н).
2
2
4
1
При -78°С н-бутиллитий в гексанах (1,6 М) (315 мкл, 0,504 ммоль) добавляют в раствор выше указанного 1-изопропил-1Н-1,2,3-триазола (56 мг, 0,504 ммоль) в ТГФ (0,97 мл). После перемешивания при -78°С в течение 30 мин по каплям добавляют раствор 2-бром-6-нитропиридина (123 мг, 0,605 ммоль) в ТГФ (0,97 мл). Смесь перемешивают при температуре от -78°С до кт в течение ночи, затем разбавляют HO и затем экстрагируют этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные органические слои промывают рассолом и сушат NaSO. Выпаривание и очистка колоночной хроматографией дает целевой продукт соединения 10 (13 мг). ЖХМС: 267,0 (М+1); 269,0 (М+1); Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,95 (s, 1H), 7,64 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,54 (dd, J=8,0, 0,8 Гц, 1H), 7,48 (dd, J=8,0, 0,8 Гц, 1H), 5,54 (m, J=6,8 Гц, 1H), 1,65 (d, J=6,8 Гц, 6H).
2
3
2
2
1
В раствор выше указанного 2-бром-6-(1-изопропил-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пиридина (12 мг, 0,045 ммоль), Pd(dba) (2,057 мг, 2,246 мкмоль), BINAP (4,20 мг, 6,74 мкмоль) и трет-бутоксида натрия (8,63 мг, 0,090 ммоль) в толуоле (0,45 мл) при кт в атмосфере N добавляют бензофенонимин (9,8 мг, 0,054 ммоль). Смесь перемешивают при 100°С в течение 15 ч в атмосфере N. Реакционную смесь гасят 0,1 Н раствором NaOH и экстрагируют EtOAc три раза. Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют для получения остатка желтого цвета (27 мг). Остаток растворяют в ТГФ (2 мл). Добавляют 6 Н раствор HCl (0,25 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляют раствор 0,1 Н HCl (1 мл) и воды (2 мл). Смесь экстрагируют EtOAc два раза. Отбирают водный слой, доводят до рН>9 1 Н раствором NaOH и экстрагируют ДХМ три раза. Органические слои объединяют, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют для получения неочищенного остатка (11 мг). Неочищенный остаток очищают колоночной хроматографией для получения соединения 12в (6 мг) в виде белого твердого вещества. ЖХМС: 204,09 (М+1); H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,87 (s, 1H), 7,55 (t, J=8,0 Гц, 1H), 6,88 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,58 (d, J=8,0 Гц, 1H), 5,49-5,39 (m, 1H), 4,99 (s, 2Н), 1,62 (d, J=6,8 Гц, 6Н).
Этап 2: Синтез 5-(4-циклопропил-1Н-имидазол-1-ил)-2-фтор-N-(6-(1-изопропил-1Н-1,2,3-триазол-5-ил)пиридин-2-ил)-4-метилбензамида (Пример 4в)
1
Пример 4в получают с помощью аналогичной методики, описанной для соединения по Примеру 1в. ЖХМС: 446,20 (М+1); Н-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9,09 (d, J=15,2 Гц, 1Н), 8,35 (dd, J=8,0, 0,8 Гц, 1H), 8,06 (d, J=7,2 Гц, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,87 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,37 (dd, J=8,0, 0,8 Гц, 1H), 7,20 (d, J=12,0 Гц, 1H), 6,78 (d, J=1,2 Гц, 1H), 5,44 (m, J=6,8 Гц, 1H), 2,28 (s, 3H), 1,96-1,79 (m, 1H), 1,67 (d, J=6,8 Гц, 6H), 0,95-0,87 (m, 2H), 0,87-0,79 (m, 2H).
АНАЛИЗЫ
50
Способность (IC) соединений ингибировать активность киназы ASK1 определяют с помощью системы анализа HTRF KinEASE™.
50
2
50
3+
ASK1 приобретают в Thermofisher (Catalogue # PV4011), АТФ приобретают в Sigma (Catalogue # А7699), систему анализа HTRF KinEASE™ приобретают в Cisbio (Bedford, Mass). Планшет с половинным объемом лунок приобретают в Perkin Elmer (Catalogue # #6005560). HTRF KinEASE™-STK представляет собой универсальный способ измерения активностей серин/треонин киназ с помощью метода иммунологического анализа с применением флуорисцентного индуктивно-резонансного переноса энергии с временным разрешением (ВР-ФИРПЭ). Величины IC для каждого соединения определяют в присутствии соединения (различные концентрации от 0 до 10 мкМ) и фиксированного количества АТФ и пептидных субстратов. Исследуемое соединение, 1 мкМ пептидного субстрата STK3 и 5 нМ киназы ASK1 в течение 30 минут инкубируют с буфером для реакции с киназой, содержащим 50 мМ ГЭПЭС рН 7,5, 0,01% BRIJ-35, 10 мМ MgCl и 1 мМ ЭГТК. Добавляют 100 мкМ АТФ, чтобы инициировать реакцию с киназой, и инкубируют в течение 3 часов. Антитело STK3, меченное Eu - криптатом, и 125 нМ стрептавидина XL665 смешивают в одной порции со стоп-реагентами, полученными из набора Cisbio, которые применяются для остановки реакции с киназой. Флуорисценцию считывают с помощью ридера Envision Multilabeled 2014 от PerkinElmer. Флуорисценцию измеряют при 615 нм (криптат) и 655 нм (XL665), и для каждой лунки рассчитывают отношение 655 нм/615 нм. Полученный ВР-ФИРПЭ пропорционален уровню фосфорилирования. Стауроспорин применяется в качестве положительного контроля. IC определяют с помощью XLfit 5.3.
50
С помощью выше указанного способа исследуют ингибирование ASK1 для соединения Формулы (I). Диапазоны IC следующие: А < 1 нм; 1 нм < В < 10 нм; 10 нм < С < 100 нм; 100 нм < D < 1 мкМ; Е > 1 мкМ.
Хотя изобретение конкретно изображено и описано со ссылками на его предпочтительные варианты реализации, специалисту в данной области техники понятно, что различные изменения в форме и деталях могут быть сделаны без отклонения от объема изобретения, который охватывается прилагаемой формулой изобретения.