МАЗЬ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОЖОГОВ
OINTMENT FOR TREATING BURNS

Изобретение относится к области медицины, в частности к мазям для лечения ожогов I-III А степени с противовоспалительным, регенерирующим, противоожоговым, антимикробным и биостимулирующим действием и может быть использовано в хирургии, травматологии, дерматологии, пластической хирургии и косметологии.
Известна мазь для лечения ожогов (Патент РФ №2523551, опубл. 20.07.2014), содержащая биологически активные вещества - пчелиный подмор в количестве 21-23 мас. %, зверобойное масло в количестве 12-14 мас. %, прополис в количестве 10-12 мас. % и воск пчелиный в количестве 7-9 мас. %, а так же вазелин и ланолин в качестве мазевой основы.
Недостатком данной мази является наличие в рецептуре большого количества продуктов пчеловодства, что зачастую у пациентов вызывает аллергические реакции.
Известна противоожоговая мазь (Патент РФ №2163800, опубл. 09.06.1996), содержащая козий жир в количестве 26,5-29,5 мас. %, говяжий жир в количестве 26,5-29,5 мас. %, воск пчелиный - 3,5-4,5 мас. %, яичное масло - 5,5-8,5 мас. %, ладан - 0,3-0,7 мас. % и подсолнечное масло - остальное.
Недостатками мази являются недостаточный спектр терапевтической активности, необходимость для достижения антибактериального действия включения в состав мази дополнительных синтетических антимикробных агентов.
Известна мазь (Патент РФ №2058776, опубл. 27.04.1996) для лечения ожогов, гнойных и инфицированных ран различной этиологии, содержащая пихтовое масло, прополис, хвойные смолы, спермацет и жир пингвина при массовом соотношении компонентов 3-7:0,5-1,5:0,5-1,5:1,5-2,5:7-15 соответственно.
Недостатками данной мази являются наличие в рецептуре спермацета и жира пингвина, доступность и сырьевая база которых ограничены, а также неширокий спектр лечебного действия на организм.
Известна мазь для лечения ожогов (патент РФ №2252018, опубл. 20.05.2005), состоящая из 45-67% подсолнечного масла, 15-37% оливкового масла, 1-2% экстракта растения Calendulae officinalis, 0,8-1,8% ладана, 2,5-8% канифоли, 6,5-11,5% белого пчелиного воска, 0,7-1,8%) основного галловокислого висмута и 0,7-1,8% камфоры, причем состав представлен в весовых процентах.
Недостатки мази следующие: особые требования к качеству подсолнечного и оливкового масел, их трудоемкая предварительная подготовка, что значительно затрудняет технологический процесс приготовления мази, также наличие в составе данных масел ограничивает срок хранения мази.
Известна мазь «Эвар» для лечения ожогов, гнойных и инфицированных ран различной этиологии Патент РФ №2139708, опубл. 20.10.1999), которая содержит компоненты в масс. %: живица сосны 7,0-8,0; воск пчелиный 6,7-7,3; масло сливочное 6,5-7,5; масло растительное 6,5-7,5; жир нутряной (свиной) 19,0-22,0; прополис 0,5-1,0; лук репчатый - остальное.
Известный состав не позволяет сохранить высокое качество мази длительное время, что является существенным недостатком.
В качестве прототипа выбрана мазь (патент РФ №2706333, опубл. 18.11.2019), включающая измельченную травяную смесь зверобоя продырявленного, вероники лекарственной, листьев лопуха, Черноголовки, листьев и стеблей белой лилии, чернокорня при массовом соотношении ингредиентов 1:1:1:1:1:0,5 соответственно, воск пчелиный, свиной жир, яичное масло, масло виноградных косточек при следующем соотношении компонентов, мас. %: измельченная травяная смесь - 20-30; желтый пчелиный воск - 10-15; яичное масло - 3-5; масло виноградных косточек - 2-3; нутряное свиное сало - остальное (патент РФ №2706333, опубл. 18.11.2019).
Недостатком данной мази является условно недостаточный ранозаживляющий эффект и отсутствие облегченной гелеобразной структуры мази.
Проведенный патентно-информационный поиск показал, что отдельно взятые компоненты мази или их комбинации встречаются в известных лечебных мазях подобного назначения, однако лекарственные средства в форме мази для лечения ран в предложенной совокупности ингредиентов и их соотношении в составе заявляемой мази не были выявлены.
Исходя из вышеприведенного уровня техники, при создании мазей для лечения ожогов, проблемой является достижение многопланового действия: антисептического, некролитического, противовоспалительного, регенерирующего и противоожогового, а также выраженного пролонгированного действия, что обеспечит максимальную терапевтическую эффективность с минимальными побочными реакциями.
Разработка нового состава мази для лечения ожогов противовоспалительного, обезболивающего и противоожогового действия на основе природных компонентов подходящих для лечения ожогов вне зависимости от фазы ожогового процесса, позволяет решить вышеуказанную проблему.
Технический результат заключается в создании мази с расширенным спектром лечебного воздействия, с повышенным ранозаживляющим эффектом, с длительным сроком хранения и удобством в применении.
Дополнительным результатом является расширение ассортимента отечественных лечебных мазей, не имеющих выраженного раздражающего побочного эффекта. Все использованные в составе мази компоненты не дефицитны, доступны и возможно предложение для промышленного производства.
Заявляемое сочетание компонентов мази в экспериментально подобранном, оптимальном количестве, обеспечивает получение заявляемого терапевтического эффекта. Иные соотношения взятых компонентов не позволяют достичь в короткие сроки необходимого терапевтического эффекта.
Предлагается, как и в прототипе, использовать в составе мази измельченную травяную смесь зверобоя продырявленного, вероники лекарственной, листьев лопуха, Черноголовки, листьев и стеблей белой лилии, чернокорня при массовом соотношении ингредиентов 1:1:1:1:1:0,5 соответственно, воск пчелиный, свиной жир, яичное масло, масло виноградных косточек при следующем соотношении компонентов, мас. %: измельченная травяная смесь - 20-30; желтый пчелиный воск - 10-15; яичное масло - 3-5; масло виноградных косточек - 2-3; нутряное свиное сало - остальное
Мазь для лечения ожогов в заявляемом составе разработана впервые.
Сущность заявляемого изобретения заключается в том, что мазь для лечения ран, включающая измельченную травяную смесь зверобоя продырявленного, вероники лекарственной, листьев лопуха, Черноголовки, листьев и стеблей белой лилии, чернокорня при массовом соотношении ингредиентов 1:1:1:1:1:0,5 соответственно, воск пчелиный, свиной жир, яичное масло, масло виноградных косточек при следующем соотношении компонентов, мас. %: измельченная травяная смесь - 20-30, желтый пчелиный воск - 10-15, яичное масло - 3-5, масло виноградных косточек - 2-3, нутряное свиное сало - остальное, согласно изобретению, дополнительно мазь содержит микробную трансглютаминазу в количестве 0,03 мас. %.
Причинно-следственная связь между совокупностью существенных признаков и обеспечиваемым изобретением техническим результатом, состоит в следующем: дополнительное введение в состав мази микробной трансглютаминазы в количестве 0,03 мас. % в качестве биокатализатора процесса, позволяет за счет ферментации и перевода состава мази в гелеобразную форму использовать ее в процессе лечения термических ожогов I-III А степени, способствует повышению ранозаживляющего, регенерирующего и противовоспалительного эффектов мази, а использование в составе мази действующей фазы на основе травяной смеси зверобоя продырявленного, вероники лекарственной, Черноголовки, листьев лопуха, листьев и стеблей белой лилии, чернокорня, обладающих противовоспалительным, противоожоговым, антимикробным и ранозаживляющим действием, способствует усилению действия трав друг другом, в комбинация травяной смеси с жировой фазой мази, включающей яичное масло, масло виноградных косточек, нутряное свиное сало и пчелиный воск, позволяет обеспечить высокий терапевтический эффект за счет сокращения сроков заживления ожогов различной этиологии без побочных явлений; а также расширить ассортимент отечественных лекарственных средств в виде мазей противовоспалительного, противоожогового, ранозаживляющего и антимикробного действия без использования химических или специальных синтетических добавок с доступным стабильным составом из продуктов природного происхождения.
Приведенные количественные интервалы соотношения компонентов, входящих в состав мази, были определены экспериментально, являются оптимальными и обеспечивают максимальную эффективность действия мази, отклонение от предложенного соотношения компонентов нецелесообразно, так как снижается терапевтический эффект.
В состав заявляемой мази для лечения ожогов входят одиннадцать компонентов.
Действующая фаза мази представляет собой измельченную травяную смесь шести трав, подобранных экспериментальным путем таким образом, чтобы усиливать действие друг друга.
В состав травяной смеси входят зверобой продырявленный (Hypericum perforatum L.), вероника лекарственная (Veronica officinalis L.), листья лопуха (Arctium lappa L.), Черноголовка (Prunella vulgaris L.), листья и стебли белой лилии (Lilium candidum L.), чернокорень (Cynoglossum officinale L.).
Жировая фаза мази содержит желтый пчелиный воск, яичное масло, масло виноградных косточек и нутряное свиное сало.
Измельченную травяную смесь вводят в расплавленную жировую фазу путем тщательного размешивания до однородности, экстрагирования с последующей фильтрацией.
Мазь имеет цвет от светлого-прозрачного до светло-желтого. Мазь получают гелеобразной консистенции, однородную и без запаха. Мазь отличается хорошей вязкостью, плотностью и липкостью. Хорошо фиксируется на поверхности кожи и слизистых, гигиенична.
Показания для использования мази: ожоги, поверхностные и глубокие раны, трофические язвы. Применяется наружно, без ограничений в период беременности и лактации. Противопоказание - повышенная индивидуальная чувствительность к отдельным компонентам препарата.
В составе заявляемой мази для лечения ожогов чернокорень из-за токсичности взят в меньшем в два раза количестве по сравнению с другими пятью травами. Дозировка установлена экспериментальным путем, является оптимальной для достижения необходимого терапевтического эффекта, безвредна.
Травы в заявляемом составе мази подобраны таким образом, чтобы все обладали противовоспалительным, анальгезирующим, ранозаживляющим, антимикробным, противоожоговым, регенерирующим, противотоксическим, тонизирующим действием и регулировали систему клеточного иммунитета.
Зверобой продырявленный (Hypericum perforatum L.) содержит токоферолы, флаваноиды, эфирное масло гиперицин, дубильные вещества, витамин Р и РР, витамины С, каротин, макро- и микроэлементы, никотиновую кислоту, азулен, провитамин А, инвертный сахар. Активные вещества: кверцетин, гиперозид, кверцитрин, изокверцитрин, рутин, гиперицинол, дубильные вещества, псевдогиперицин, каротин, смолы, эфирное масло, никотиновая и аскорбиновая кислоты, фитонциды. Токоферолы необходимы для защиты от свободных радикалов, флавоновые соединения позволяют применять зверобой как антибактериальное, антисептическое, болеутоляющее, ранозаживляющее и регенерирующее средство. Каротин способствует обновлению клеток кожи и защищает от вирусов и бактерий, дубильные вещества способствуют очищению ран от инфекции, снижают воспаление, ускоряют заживление, витамин С способствует восстановлению и обновлению тканей, поддерживает тургор кожи, препятствует перерождению клеток в атипичные. Гиперозид и рутин укрепляют стенки сосудов, фитонциды - растительные антибиотики с мощным противомикробным действием, способны подавлять золотистый стафилококк при гнойных заболеваниях кожи, абсцессах, флегмонах, ожогах.
Вероника лекарственная (Veronica officinalis L.) в своем составе имеет аскорбиновую кислоту, горечи, каротин, дубильные вещества и гликозиды и является одним из лучших ранозаживляющих и дезинфицирующих средств, останавливает кровь, эффективно борется с воспалением, устраняет боль. В составе много микроэлементов, присутствуют алкалоиды, лимонная, яблочная, молочная кислоты.
Используют веронику лекарственную для лечения язв, гнойников, фурункулов, ожогов, остановки кровотечения. Имеет противовоспалительное, анальгезирующее и антитоксическое действие. Каротин, дубильные вещества, аскорбиновая кислота, горечи, гликозиды, уничтожают микробы и вместе с яблочной, молочной, лимонной кислотами и микроэлементами оказывают противозудное действие, что очень важно в процессе заживления раны. В химическом составе вероники много углеводов, являющихся энергетическим потенциалом для клеток кожи, множество органических и фенолкарбоновых кислот, присутствуют стерины, сапонины, холин, кумарины, жирные масла, биофлавоноиды. Аукубин идентичный тому, который содержится в подорожнике, с антисептическим, антимикробным и противовоспалительным действием.
26
54
В составе лопуха (Arctium lappa L.) содержится протеинов более 12%, эфирных масел до 0,17%, жироподобных веществ 0,82%, дубильные и горькие вещества, полисахариды, инулин до 45%, аскорбиновая кислота. Благодаря чему поддаются лечению ожоги, обморожения, замедляется рост опухолей. Присутствуют в химическом составе лопуха фитонциды, флавоноиды, пальмитиновая, стеариновая кислоты, углевод СН, ситостерин и стигмастерин, жирное масло до 20%, состоящее из глицеридов линолиевой 58,5% и олеиновой 19,1% кислот, слизь 0,03%. Растение имеет антитоксическое, ранозаживляющее, обезболивающее, кровоостанавливающее, противовоспалительное, антибактериальное и задерживающее рост опухолей действие.
В составе Черноголовки (Prunella vulgaris L.) содержатся дубильные вещества 15,3%, смолы, эфирное масло, сапонины тритерпенового ряда, витамин С, флавоноиды - 0,3%, кверцитрин - 0,5%, обуславливающие противовоспалительное, антимикробное, кровоостанавливающее действие. Присутствуют также в составе Черноголовки тритерпеновые сапонины в виде урсоловой и оленоловой кислот, жирное масло в количестве 3-16%, витамин К, гиперозид, бетуриновая кислота, дельфинидин. Черноголовка имеет широкий спектр антимикробного действия в отношении shigella, включая штаммы E.coli. Имеет также противогрибковый эффект, противовоспалительное и тонизирующее действие, мощное угнетающее влияние на свободно радикальное окисление, обладает противовирусной активностью. Используют траву для ранозаживления, обезболивания, лечения ожогов.
Белая лилия (Lilium candidum L.) широко используется в косметологии, так как защищает и смягчает кожу, осветляет, стабилизирует пигментацию, тонизирует и успокаивает кожу, обладает мощным противоотечным действием на фоне противовоспалительного, антимикробного, ранозаживляющего кровоостанавливающего, болеутоляющего, противоожогового, дезинфицирующего действия. Сапонины снимают воспаление, приводят к норме обменные процессы, регулируют и усиливают деятельность гормонов, способствуют синтезу кортикостероидов. Флавоноиды уменьшают хрупкость капилляров, укрепляют кровеносные сосуды, устраняют воспалительный процесс и ускоряют ранозаживление, лечат ожоги. Алкалоиды повышают свертываемость крови, уменьшают боль. Белки в составе белой лилии, регулируют и нормализуют гормональный фон, способствуют образованию клеток мышечной массы. Витамин С участвует в регуляционно-восстанавливающем процессе, обеспечивая рост и развитие ткани, повышает проницаемость капилляров, выводит свободные радикалы и токсины. Железо способствует синтезу гормонов, нейтрализует болезнетворные бактерии. Микроэлемент бор нормализует и регулирует репродукцию кожи, стабилизирует гормональный фон, дубильные вещества эффективно устраняют очаги воспаления кожи и слизистых.
Чернокорень (Cynoglossum officinale L.) содержит алкалоиды циноглоссеин, консолидин, дубильные вещества, кумарины, коричную и фумаровую кислоты, горькое вещество циноглоссоидин, холин, инулин. Фармакологические свойства чернокорня определяются его химическим составом. Чернокорень лекарственный обладает обезболивающими, противовоспалительными, кровоостанавливающими свойствами.
Жировая фаза заявляемой мази включает четыре компонента.
Нутряное свиное сало содержит линоленовую и линолевую кислоты, в которых много ненасыщенных жирных кислот с температурой плавления всего 25-30°С. Нутряное сало обладает выраженным смягчающим и заживляющим свойствами, основой его являются жирные насыщенные кислоты, их более 60%. Химический состав определяет улучшение питание тканей кожи.
Желтый пчелиный воск в составе мази повышает ее вязкость и впитываемость. Пчелиный воск питает, укрепляет кожу. По своему химическому составу близок к жирам. В составе свободные спирты и различные жирные кислоты. Имеющийся в составе витамин А и каротин полезны для кожных заболеваний, задерживают рост ряда болезнетворных микроорганизмов.
В составе мази воск облегчает образование эмульсии и повышает ее стабильность, а благодаря своей природе улучшает впитываемость.
Благодаря биологически активным веществам, экстрагированным из воска пчелиного, жировой основы, мазь обладает многоплановым воздействием. Пчелиный воск выполняет также структурообразующую функцию.
Пчелиный воск в сочетании с растительным маслом способствует выделению в заживающую рану кислорода. Масло же обеспечивает бактерицидный эффект и антимикробную активность, усиливает проникновение в биоткань.
Яичное масло зарекомендовало себя при ранозаживлении от ожогов, рубцов, шрамов. Липиды, содержащиеся в яичном масле по строению сходны с липидами кожи человека, довольно просто связываются друг с другом и соответственно восстанавливают природный барьер. При попадании на поверхность кожи образует двухслойную структуру. В ней нижний слой гидрофобный, а верхний гидрофильный, что помогает влаге извне лучше поступать к роговому слою кожи и не позволяет влаге испаряться изнутри, что особенно важно при ожогах. Поэтому очень важно эту теплую и влажную среду, благоприятную для размножения микроорганизмов, нейтрализовать сильной по своим свойствам травяной смесью и другими составляющими заявляемой мази.
Яичное масло стимулирует развитие молодых слоев эпидермиса, а так как в коже дополнительно задерживается влага, не образуется грубая рубцовая ткань. Этому также способствует достаточное количество жирорастворимых витаминов А, Д, Е. Это синергический природный антиоксидантный комплекс, который защищает молодые клетки и поддерживает их биологические функции, регулирует водно-солевой и электролитный обмены в клетках, способствует усвоению клетками кальция и фосфора, укрепляет стенки капилляров, за счет повышенной концентрации витаминов. Яичное масло размягчает кожу, быстро всасывается в ткани, ликвидирует кровоточащие трещины, одновременно и подсушивает рану, создавая благоприятные условия для заживления. Большое количество фосфолипидов - основной строительный материал клеточных мембран у живых организмов, основа матрикса рогового слоя, они фиксируют биологически активные вещества, обеспечивая их постепенное высвобождение и глубокое проникновение в кожу.
Масло виноградных косточек, используемое в составе заявляемой мази, получено путем холодного прессования, поэтому сохраняет важные биологически активные вещества, определяет целебные регенирирующие, антиоксидантные, цитопротекторные свойства. Масло имеет жидкую и очень легкую консистенцию, отличается большим количеством витамина Е. В нем содержится самый мощный естественный антиоксидант - процианид, регулирующий работу мембран клеток, что помогает выходу агрессивных окисленных радикалов. Ценность данного растительного масла в высоком содержании полиненасыщенных жирных кислот. Масло виноградных косточек не забивает поры, легко впитывается в кожу, придавая ей естественный здоровый вид, обладает выраженным увлажняющим действием. Стимулирует синтез коллагена, обеспечивая упругость кожи, нормализует деятельность сальных желез. Обладает масло виноградных косточек противовоспалительным, бактерицидным, вяжущим, ранозаживляющим, сильным регенерирующим на клетки кожи действием. Повышает эластичность и тургор кожи, стимулирует ток крови и лимфы в верхних слоях кожи, препятствует возникновению пигментации, полностью впитывается.
Микробная трансглютаминаза является биокатализатором, продуцируется бактериями и имитирует тканевую трансглютаминазу. Это протеин - глютамин - гамма - глютаминтрансфераза (КФ 2.3.2.13) -распространенный в живой природе фермент, участвующий в жизненно важных биологических функциях. Микробная трансглютаминаза -семейство ферментов катализирующих образование ковалентных связей между свободными аминогруппами (либо из боковых цепей лизина) и гамма - карбоксамидными группами глютамина. Ковалентные связи, образованные трансглютаминазами устойчивы к протеолизу. Микробная трансглютаминаза катализирует реакции ацильного переноса между гамма-карбоксиамидной группой пептид-связанных остатков глутамина (ацильный донор) и различными первичными аминами, в том числе ε-аминогруппой остатков лизина (ацил-акцептор), что приводит к формированию «сшивок» в молекулах белка. Это сшивание может быть как внутри, так и межмолекулярным, что в последнем случае приводит к упрочению белков каркаса. Размер частиц этого биокатализатора отвечает стандартным требованиям и оптимальный размер частиц достаточно мал, чтобы скорость диффузии не лимитировала скорость всего процесса, и в то же время достаточно велик, чтобы свести к минимуму перепад давления. Удается обеспечить необходимое качество конечного продукта несмотря на постепенную инактивацию биокатализатора.
Изобретение иллюстрируется следующим примером конкретного выполнения.
Травяную смесь готовят из наземной части зверобоя продырявленного, вероники лекарственной, Черноголовки, листьев лопуха, листьев и стеблей белой лилии и чернокорня, при массовом соотношении ингредиентов 1:1:1:1:1:0,5 соответственно, измельчают и перемешивают.
Нутряное свиное сало в огнеупорной стеклянной посуде на водяной бане доводят до кипения и проваривают на малом огне в течение 7 минут, постоянно помешивая деревянной ложкой.
Далее полученную измельченную травяную смесь вводят в расплавленное нутряное свиное сало и тщательно перемешивают, томят на очень слабом огне под крышкой, помешивая в течении 60 минут.
Затем слегка охлаждают, тщательно процеживают и отжимают.
Желтый пчелиный воск расплавляют на водяной бане, смешивают с яичным маслом, тщательно перемешивая деревянной ложкой.
В расплавленную массу добавляют готовую профильтрованную травяную смесь.
Затем томят на медленном огне на водяной бане в течение 20 минут, тщательно перемешивая. В остывшую смесь добавляют масло виноградных косточек и интенсивно перемешивают.
После чего добавляется главный компонент предлагаемой нами мази - микробную трансглютаминазу в количестве 0,03 мас. %. Капсулированная форма фермента позволяет строго соблюсти дозировку. Однако перед добавлением в состав мы перепроверяем вес на электронных весах. А затем тщательно перемешиваем смесь.
Далее полученную мазь расфасовывают.
Хранить мазь необходимо в холодильнике при температуре 25°С.
Заявляемую мазь готовят со следующим содержанием компонентов, мас. %: измельченная травяная смесь - 20-30%, желтый пчелиный воск - 10-15%, яичное масло - 3-5%, масло виноградных косточек - 2-3%, нутряное свиное сало - остальное, микробная трансглютаминаза 0,03% за счет остального.
Допустимое соотношение в травяной смеси частей 1:1:1:1:1:0,5.
Допустимое соотношение масла виноградных косточек до 50% от количества яичного масла.
Допустимое соотношение яичного масла к пчелиному воску до 30%.
Допустимое соотношение нутряного свиного сала к измельченной травяной смеси 3:1.
Допустимое соотношение микробной трансглютаминазы к 100 граммам полученной мази 0,03:100.
Данные количественные интервалы, соотношение компонентов определены экспериментально и являются оптимальными для обеспечения лечебного эффекта.
При использовании других соотношений компонентов трав и масел в составе мази снижается их биологическая активность, значительно уменьшается терапевтический эффект и соответственно не выполняется поставленная задача многопланового действия с широким спектром биологической активности.
Испытания заявляемого состава проводилось на простейших и двух видах лабораторных животных. С экспериментальным моделированием термических ожогов III А степени. Исследовательская работа велась с 2016 года, выявляя повторяемость и стабильность положительных результатов.
При проведении экспериментальных исследований соблюдали принципы и положения Руководства по уходу и использованию лабораторных животных (US NIH, №85-23), международных правил «Guide for the Care and Use of Laboratory Animals» (2009 г.) с учетом Конвенции Совета Европы о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (Страсбург, 1986 г.).
Широкий спектр действия определяется компонентами, входящими в состав мази и их свойствами.
Длительный срок хранения и удобство применения. В пользу длительного срока хранения и удобства в применении говорит термо и коллоидная стабильность мази. Определяли термостабильность устойчивость к изменению температуры и коллоидную стабильность - устойчивость к расслоению по принятой методике ГОСТ 28.
В качестве препарата сравнения использовали прототип. В таблице 1 приведены результаты термо- и коллоидной стабильности мази.
Определение осмотической активности - прогнозирует уменьшение воспаления и отека при лечении.
В таблице 2 приведены показатели осмотической активности заявляемой мази и прототипа.
Определение острой и хронической токсичности микробной трансглютаминазы позволяет установить, при какой концентрации микробная трансглютаминаза становится токсичной для тест-объекта.
Проведенный биотест показал, что анализируемый фермент не является токсичным для Paramecium caudatum, которые размножаются при всех концентрациях.
Показатель воспаления, очищения и регенерации при ожоге - иммуногистохимический метод (ИГХ).
Для постановки реакции антиген-антитело в ткани методом ИГХ использовали следующие антитела.
Ki-67 ядерный маркер, показатель уровня пролиферации эпителиоцитов,
CD 68- маркер активности макрофагов, ответственных за элиминацию поврежденных тканей и участвующих в ее ремоделировании при созревании;
CD 138 синдекан-1, маркер плазмоцитов - является маркером активности воспалительных процессов. CD138+ клеток с выраженной экспрессией свидетельствует о пролонгации воспаления и тенденции к заживлению вторичным натяжением.
В таблице 3 приведено количество CD68+ в 1-е сутки эксперимента
*Контроль - во всех приводимых примерах группа лабораторных животных без лечения.
В таблице 4 приведено количество ИГХ маркеров на 3 сутки эксперимента.
Позитивная динамика репарации зафиксирована в группе - заявляемая мазь, что подтверждается и данными ИГХ исследования.
В таблице 5 приведено количество ИГХ маркеров на 5-7 сутки эксперимента.
В таблице 6 приведено количество ИГХ маркеров на 10 сутки эксперимента.
Данные таблиц свидетельствуют в том числе о превентивном антибактериальном воздействии, что способствует интенсификации заживления ожогов.
Визуальные наблюдения показали, что заживление термических ожогов во всех группах с применением заявляемой мази имело благоприятный характер течения.
2
В таблице 7 приведена динамика площади раневой поверхности в эксперименте (см).
Проанализировав результаты макро- и микроскопического анализа заживления ожогов наиболее эффективным препаратом является заявляемая противоожоговая мазь.
Оценку противоожогового действия проводили по визуальным признакам развития поражения, течению ожогового процесса и выживаемости животных.
Данные, приведенные в таблице 7, свидетельствуют о биостимулирующем эффекте мази и сокращении сроков заживления ожогов.
Мазь длительное время сохраняет высокое качество, а также удобна в применении благодаря хорошей фиксации и равномерному распределению на кожной поверхности. За счет химической реакции фермента с жировой основой мази значительно облегчается текстура мази, она приобретает гелеобразную форму.
Заявляемую мазь можно использовать при термических ожогах I-III А степени. Применяется мазь наружно, без ограничений в период беременности и лактации. Лечение заявляемой мазью ускоряет сроки заживления ожогов без осложнений и побочных явлений.