УЛУЧШЕННЫЕ СПОСОБЫ ДОСТАВКИ ГЕНОВ

1. Улучшенный способ генетического модифицирования CD34+ гемопоэтических стволовых или прогениторных клеток (HSPC), причем способ предусматривает
(a) совместное культивирование CD34+ HSPC-клеток с E4ORF1+ эндотелиальными клетками и
(b) приведение HSPC в контакт с одной или несколькими экзогенными молекулами нуклеиновой кислоты,
где стадию совместного культивирования начинают либо: до приведения HSPC в контакт с одной или несколькими экзогенными молекулами нуклеиновой кислоты, одновременно с ним или после него,
в результате чего обеспечивается генетическое модифицирование CD34+ HSPC.
2. Способ по п. 1, в котором стадию совместного культивирования осуществляют в гипоксических условиях.
3. Способ по п. 1, в котором стадию совместного культивирования осуществляют в сильно гипоксических условиях.
4. Способ по п. 1, в котором стадию совместного культивирования осуществляют при уровнях кислорода, находящихся в диапазоне от 0,1% до 18%.
5. Способ по п. 1, в котором HSPC происходят из костного мозга, периферической крови или пуповинной крови.
6. Способ по п. 1, в котором эндотелиальные клетки представляют собой эндотелиальные клетки человека.
7. Способ по п. 1, в котором эндотелиальные клетки представляют собой эндотелиальные клетки пупочной вены.
8. Способ по п. 1, в котором эндотелиальные клетки представляют собой эндотелиальные клетки пупочной вены человека.
9. Способ по п. 1, в котором эндотелиальные клетки являются митотически инактивированными.
10. Способ по п. 1, в котором стадию приведения целевых клеток в контакт с одной или несколькими экзогенными молекулами нуклеиновой кислоты осуществляют с помощью трансфекции.
11. Способ по п. 10, в котором трансфекция предусматривает опосредованную липосомами трансфекцию, опосредованную полибреном трансфекцию, опосредованную DEAE-декстраном трансфекцию, электропорацию, осаждение фосфатом кальция, микроинъекцию или бомбардировку микрочастицами.
12. Способ по п. 1, в котором стадию приведения целевых клеток в контакт с одной или несколькими экзогенными молекулами нуклеиновой кислоты осуществляют с помощью трансдукции.
13. Способ по п. 12, в котором трансдукцию осуществляют с применением опосредованной лентивирусом трансдукции, опосредованной аденовирусом трансдукции, опосредованной ретровирусом трансдукции, опосредованной аденоассоциированным вирусом трансдукции или опосредованной вирусом герпеса трансдукции.
14. Способ по п. 1, в котором молекула нуклеиновой кислоты присутствует в плазмидном векторе.
15. Способ по п. 1, в котором молекула нуклеиновой кислоты присутствует в вирусном векторе.