ВАРИАНТЫ FC С ПОВЫШЕННЫМ СВЯЗЫВАНИЕМ С FCRN И ПРОЛОНГИРОВАННЫМ ПЕРИОДОМ ПОЛУВЫВЕДЕНИЯ

1. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий
аспарагиновую кислоту (D) или глутаминовую кислоту (E) в положении аминокислоты 256 и/или триптофан (W) или глутамин (Q) в положении аминокислоты 307, где положение аминокислоты 254 не является треонином (T), и дополнительно содержащий:
фенилаланин (F) или тирозин (Y) в положении аминокислоты 434; или
тирозин (Y) в положении аминокислоты 252,
где положения аминокислот соответствуют нумерации ЕС.
2. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий комбинацию аминокислотных остатков, выбранных из группы, состоящей из
а) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252 и аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256;
b) аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256 и фенилаланина (F) в положении аминокислоты 434;
c) аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256 и тирозина (Y) в положении аминокислоты 434;
d) триптофана (W) в положении аминокислоты 307 и фенилаланина (F) в положении аминокислоты 434;
е) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252 и триптофана (W) в положении аминокислоты 307, где тирозин (Y) не находится в положении аминокислоты 434;
f) аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256 и триптофана (W) в положении аминокислоты 307, где тирозин (Y) не находится в положении аминокислоты 434;
g) аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256 и глутамина (Q) в положении аминокислоты 307, где тирозин (Y) не находится в положении аминокислоты 434;
h) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256 и глутамина (Q) в положении аминокислоты 307, где тирозин (Y) не находится в положении аминокислоты 434; и
i) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252, глутаминовой кислоты (E) в положении аминокислоты 256 и глутамина (Q) в положении аминокислоты 307, где треонин (T) не находится в положении аминокислоты 254, гистидин (H) не находится в положении аминокислоты 311, а тирозин (Y) не находится в положении аминокислоты 434;
где аминокислотные замены соответствуют нумерации ЕС.
3. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий
a) двойную аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из M252Y/T256D, M252Y/T256E, M252Y/T307Q, M252Y/T307W, T256D/T307Q, T256D/T307W, T256E/T307Q и T256E/T307W, где треонин (T) не находится в положении аминокислоты 254, гистидин (H) не находится в положении аминокислоты 311, а тирозин (Y) не находится в положении аминокислоты 434; или
b) тройную аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из M252Y/T256D/T307Q, M252Y/T256D/T307W, M252Y/T256E/T307Q и M252Y/T256E/T307W, где треонин (T) не находится в положении аминокислоты 254, гистидин (H) не находится в положении аминокислоты 311, а тирозин (Y) не находится в положении аминокислоты 434;
где аминокислотные замены соответствуют нумерации ЕС.
4. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, где измененный Fc-домен содержит аспарагиновую кислоту (D) в положении аминокислоты 256 и глутамин (Q) в положении аминокислоты 307, согласно нумерации ЕС.
5. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, где измененный Fc-домен содержит аспарагиновую кислоту (D) в положении аминокислоты 256 и триптофан (W) в положении аминокислоты 307, согласно нумерации ЕС.
6. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, где измененный Fc-домен содержит тирозин (Y) в положении аминокислоты 252 и аспарагиновую кислоту (D) в положении аминокислоты 256, согласно нумерации ЕС.
7. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-6, где выделенный связывающий полипептид имеет более длинный период полувыведения из сыворотки крови по сравнению со связывающим полипептидом, содержащим Fc-домен дикого типа.
8. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-7, где выделенный связывающий полипептид имеет повышенную способность связывания с FcRn по сравнению со связывающим полипептидом, содержащим Fc-домен дикого типа, где необязательно FcRn представляет собой FcRn человека.
9. Выделенный связывающий полипептид по п. 8, где выделенный связывающий полипептид имеет повышенную способность связывания с FcRn при кислотном значении pH по сравнению со связывающим полипептидом, содержащим Fc-домен дикого типа, где необязательно кислотное значение pH составляет примерно 6,0.
10. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-9, где выделенный связывающий полипептид имеет более высокую способность связывания с FcRn при кислотном значении pH по сравнению со способностью связывания с FcRn связывающего полипептида при некислотном значении pH, где необязательно кислотное значение pH составляет примерно 6,0, и где необязательно некислотное значение pH составляет примерно 7,4.
11. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-10, где выделенный связывающий полипептид имеет измененную способность связывания с FcγRIIIa по сравнению со связывающим полипептидом, содержащим Fc-домен дикого типа, где необязательно FcγRIIIa представляет собой FcγRIIIa человека.
12. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, где измененный Fc-домен содержит
тирозин (Y) в положении аминокислоты 252,
аспарагиновую кислоту (D) или глутаминовую кислоту (E) в положении аминокислоты 256,
триптофан (W) или глутамин (Q) в положении аминокислоты 307, и
фенилаланин (F) или тирозин (Y) в положении аминокислоты 434,
где положения аминокислот соответствуют нумерации ЕС.
13. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий комбинацию аминокислотных остатков, выбранных из группы, состоящей из
a) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256, глутамина (Q) в положении аминокислоты 307 и тирозина (Y) в положении аминокислоты 434;
b) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252, глутаминовой кислоты (E) в положении аминокислоты 256, триптофана (W) в положении аминокислоты 307 и тирозина (Y) в положении аминокислоты 434;
с) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252, глутаминовой кислоты (E) в положении аминокислоты 256, глутамина (Q) в положении аминокислоты 307 и тирозина (Y) в положении аминокислоты 434;
d) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256, глутамина (Q) в положении аминокислоты 307 и фенилаланина (F) в положении аминокислоты 434;
е) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256, триптофана (W) в положении аминокислоты 307 и тирозина (Y) в положении аминокислоты 434; и
f) тирозина (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновой кислоты (D) в положении аминокислоты 256, триптофана (W) в положении аминокислоты 307 и фенилаланина (F) в положении аминокислоты 434,
где аминокислотные замены соответствуют нумерации ЕС.
14. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий
четверную аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из
M252Y/T256D/T307Q/N434Y, M252Y/T256E/T307W/N434Y, M252Y/T256E/ T307Q/N434Y, M252Y/T256D/ T307Q/N434F, M252Y/T256D/ T307W/N434Y и M252Y/T256D/ T307W/N434F,
где аминокислотные замены соответствуют нумерации ЕС.
15. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий тирозин (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновую кислоту (D) в положении аминокислоты 256, глутамин (Q) в положении аминокислоты 307 и тирозин (Y) в положении аминокислоты 434, согласно нумерации ЕС.
16. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий тирозин (Y) в положении аминокислоты 252, глутаминовую кислоту (Е) в положении аминокислоты 256, триптофан (W) в положении аминокислоты 307 и тирозин (Y) в положении аминокислоты 434, согласно нумерации ЕС.
17. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий тирозин (Y) в положении аминокислоты 252, глутаминовую кислоту (Е) в положении аминокислоты 256, глутамин (Q) в положении аминокислоты 307 и тирозин (Y) в положении аминокислоты 434, согласно нумерации ЕС.
18. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий тирозин (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновую кислоту (D) в положении аминокислоты 256, глутамин (Q) в положении аминокислоты 307 и фенилаланин (F) в положении аминокислоты 434, согласно нумерации ЕС.
19. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий тирозин (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновую кислоту (D) в положении аминокислоты 256, триптофан (W) в положении аминокислоты 307 и тирозин (Y) в положении аминокислоты 434, согласно нумерации ЕС.
20. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий
a) тирозин (Y) в положении аминокислоты 252 и тирозин (Y) в положении аминокислоты 434,
b) тирозин (Y) в положении аминокислоты 252, триптофан (W) в положении аминокислоты 307 и тирозин (Y) в положении аминокислоты 434,
c) тирозин (Y) в положении аминокислоты 252, аспарагиновую кислоту (D) в положении аминокислоты 256 и тирозин (Y) в положении аминокислоты 434, или
d) аспарагиновую кислоту (D) в положении аминокислоты 256, триптофан (W) в положении аминокислоты 307 и тирозин (Y) в положении аминокислоты 434,
где положения аминокислот соответствуют нумерации ЕС.
21. Выделенный связывающий полипептид, содержащий измененный Fc-домен, содержащий комбинацию аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из
M252Y/N434Y,
M252Y/T307W/N434Y,
M252Y/T256D/N434Y и
T256D/307W/N434Y,
где аминокислотные замены соответствуют нумерации ЕС.
22. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 12-21, где измененный Fc-домен имеет повышенную способность связывания с FcRn при кислотном значении pH и повышенную способность связывания с FcRn при некислотном значении pH по сравнению с Fc-доменом дикого типа, где необязательно кислотное значение pH составляет примерно 6,0, и где необязательно некислотное значение pH составляет примерно 7,4, где дополнительно необязательно FcRn представляет собой FcRn человека.
23. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 12-22, где измененный Fc-домен имеет повышенную способность связывания с FcRn при кислотном значении pH и повышенную способность связывания с FcRn при некислотном значении pH по сравнению с Fc-доменом, содержащим пять аминокислотных замен M252Y/S254T/T256E/H433K/N434F, где необязательно кислотное значение pH составляет примерно 6,0, и где необязательно некислотное значение pH составляет примерно 7,4, где дополнительно необязательно FcRn представляет собой FcRn человека.
24. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 12-23, где измененный Fc-домен имеет пониженную способность связывания с FcγRIIIa по сравнению со связывающим полипептидом, содержащим Fc-домен дикого типа, где дополнительно необязательно FcγRIIIa представляет собой FcγRIIIa человека.
25. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 12-24, где измененный Fc-домен имеет пониженную способность связывания с FcγRIIIa по сравнению с Fc-доменом, содержащим пять аминокислотных замен M252Y/S254T/T256E/H433K/N434F, где дополнительно необязательно FcγRIIIa представляет собой FcγRIIIa человека.
26. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-25, где измененный Fc-домен представляет собой измененный Fc-домен IgG человека.
27. Выделенный связывающий полипептид по п. 26, где измененный Fc-домен представляет собой измененный Fc-домен IgG1 человека.
28. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-27, где связывающий полипептид обладает способностью связывания с FcRn человека, и, необязательно, способностью связывания с FcRn крысы.
29. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-28, где выделенный связывающий полипептид специфически связывает одну или несколько мишеней у человека.
30. Выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-29, где выделенный связывающий полипептид представляет собой моноклональное антитело.
31. Выделенный связывающий полипептид по п. 30, где антитело представляет собой химерное, гуманизированное или человеческое антитело.
32. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-31.
33. Вектор экспрессии, содержащий выделенную молекулу нуклеиновой кислоты по п. 32.
34. Клетка-хозяин, содержащая вектор экспрессии по п. 33.
35. Клетка-хозяин по п. 34, где клетка-хозяин представляет собой клетку млекопитающего.
36. Способ получения выделенного связывающего полипептида, включающий культивирование клетки-хозяина по п. 35 в условиях, которые обеспечивают экспрессию связывающего полипептида, и выделение связывающего полипептида из культуры.
37. Фармацевтический состав, содержащий выделенный связывающий полипептид по любому из пп. 1-31 и фармацевтически приемлемый носитель.
38. Применение выделенного связывающего полипептида по любому из пп. 1-31 для изготовления лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения у субъекта, нуждающегося в этом.
39. Применение выделенного связывающего полипептида по любому из пп. 1-11 и 26-31 для изготовления лекарственного препарата для лечения рака у субъекта, нуждающегося в этом.
40. Применение выделенного связывающего полипептида по любому из пп. 12-31 для изготовления лекарственного препарата для лечения аутоиммунного нарушения у субъекта, нуждающегося в этом.