Искусственно вызванная патология гепатопанкреаса речных раков

Искусственно вызванная патология гепатопанкреаса речных раков

Н.Ю. Корягина1, Г.И. Пронина2, А.О. Ревякин2, О.И. Степанова2,

О.В. Баранова2, Г.Д. Капанадзе2, И.Ю. Меньшиков1

1 - Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт ирригационного рыбоводства РАСХН

2 - ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий ФМБА России», Московская область

Инъекция аллоксана в дозе 100 мг/кг в вентральный синус речных раков приводит к нарушению структуры R-клеток гепатопанкреаса. Отмечается увеличение содержания глюкозы в гемолимфе.

Ключевые слова: моделирование патологии, речные раки, гепатопанкреас, аллоксан (С4Н^204).

Типичные представители беспозвоночных десятиногих - речные раки являются перспективными объектами биомоделирования, обладая сопоставимостью физиологической реакции с высшими животными, а также специфическими свойствами, позволяющими расширить представления о спектре действия тестируемого фактора на биосистему. Они удовлетворяют современным этическим представлениям и нормам, ограничивающим область применения высших животных в экспериментальных исследованиях.

Задачей данного исследования являлось моделирование патологии гепато-панкреаса речных раков как подготовка для трансплантации стволовых клеток с целью их получения путем пассажа через организм рака.

Гепатопанкреас десятиногих ракообразных представляет собой двухлопастной орган, состоящий из множества мелких разветвленных слепых трубочек. Они окружены рыхлой соединительной тканью и содержат железистые клетки. Эпителий гепатопанкреатической тру-

бочки содержит 4 типа клеток (гепато-панкреацитов). Трубочки собираются в пару общих протоков, впадающих в среднюю кишку. Слепой конец каждой трубочки составлен недифференцированными эмбриональными клетками (Е-клетки), которые являются предшественниками всех остальных типов клеток гепатопанкреатической трубочки. Проксимально Е-клеткам располагаются накопительные Я-клетки, вакуоли-зированные В-клетки и фибриллярные F-клетки [7, 8]. При патологии гепатопанкреаса краба-стригуна Chionoecetes орПю, вызванной разного рода естественными инфекциями и инвазиями (хитино-литическими бактериями, простейшими Hematodinium, паразическим грибком Trichomaris invadens), происходит вакуолизация цитоплазмы Я-клеток, уменьшение количества В-клеток, инфильтрация гемоцитами интертубулярной соединительной ткани [4, 5].

У ракообразных (крабов, раков и креветок) гепатопанкреас является органом, совмещающим функции печени и под-

желудочной железы. Из-за особенностей питания отряда Decapoda гепатопанкреас секретирует большое количество пищеварительных ферментов, гидролизующих все классы природных полимеров и обладающих широкой специфичностью и необычно высокой активностью [1]. В частности, в организме ракообразных, как и у высших животных и человека, расщепление гликогена в тканях происходит, в основном, под действием ферментов, специфически гидролизующих 1,4- и 1,6-глико-зидные связи: альфа-глюканфосфорилаза и альфа-амилаза; амило-1,6-глюкозидаза соответственно [2, 3].

Объектами настоящего исследования являлись длиннопалые речные раки Pontastacus leptodactylus L. Патологию вызывали двумя способами:

1. Введением аллоксана путем диффузии в вентральный синус в дозе 50 и 100 мг/кг.

2. Кормлением кормами с содержанием жира выше 17% (комбикорм для форели и сига «craft soft light»).

Кроме того, раков кормили личинками хиронамид по нормам, установленным при проведении трофологических исследований [6].

Продолжительность опыта составляла 1,5 мес. Были взяты клинически здоровые раки. В процессе эксперимента произошло их поражение ржавопятнистым заболеванием (РПЗ), вызванным грибком Saprolegnia parasitica. Вероятно, на фоне развивающейся патологии их организм оказался более подверженным внедрению возбудителей.

Результаты исследований показали, что через 3 дня после введения аллоксана содержание глюкозы в гемолимфе речных раков было невелико, что характерно для здоровых особей (рис. 1). Затем, к 7-му дню, наступает повышение уровня

глюкозы в гемолимфе и не меняется до конца эксперимента.

Г пикша в гемолимфе, ммоль/л

"i;ui “дії I "дм З^діі I'vui —Р Icpt Iks ийлсиївд фепдел IP Iejrt Діг-J и lnhnHfl 5ПМГ-ІГ*

Рис. 1. Динамика изменений уровня глюкозы под действием аллоксана (50 мг/кг) и кормления кормами с повышенным для речного рака содержанием жира.

Наблюдалась гибель речных раков на 3-й и на 23-й день после введения 100 мг/кг аллоксана.

Патологоанатомические изменения гепатопанкреаса: увеличение органа,

дряблая консистенция, серо-зеленоватый цвет (рис. 2). У здорового речного рака гепатопанкреас имеет плотную консистенцию и красновато-коричневый цвет.

Рис. 2. Вскрытие погибшего речного рака Pontastacus leptodactylus L.

Гистологические исследования показали, что в ткани гепатопанкреаса происходит вакуолизация цитоплазмы R-клеток после введения аллоксана в дозе 100 мг/кг (рис. 3).

Таким образом, при введении аллоксана в дозе 100 мг/кг отмечается патология гепатопанкреаса длиннопалых речных ра-

A Б

Рис. 3. Гистологическая картина гепатопанкреаса длиннопалого речного рака Pontastacus leptodactylus L. Окраска гематоксилин-эозином. Вакуолизация цитоплазмы R-клеток.

А — увеличение 10x10; Б — увеличение 10x40.

ков. Это обнаружено по динамике уровня глюкозы в крови, а также по результатам гистологических исследований.

Список литературы

1. Артюков АА, Мензорова НИ, Козловская Э.П, Кофанова Н.Н., Козловский А.А., Рассказов ВА.

Ферментный препарат из гепатопанкреаса промышленных видов крабов и способ его получения. Патент № 2280076, заявка № 2004135771 от 20.07.2006 г.

2. Джунковская А.В., Захарова Н.В. Панкреатическая эластаза - новая сериновая протеаза, выделенная из гепетопанкреаса камчатского краба // Всесоюз. совещ. «Биологически активные вещества гидробионтов - новые лекарственные, лечебнопрофилактические и технические препараты»: Тез. Докладов. - Владивосток: ТИНРО. 1991. 8 с.

3. Калчугина Е.П, Леваньков С.В, Купина Н.М. Динамика изменения содержания гликогена в гепатопан-креасе камчатского краба в результате автолитических процессов // Известия ТИНРО (Тихоокеанского научно-исследовательского рыбохо-

зяйственного центра). Владивосток. 2001. Т. 129: Биохимия и биотехнология гидробионтов. С. 203-214.

4. Пономарев А.К. Гистологический и гистохимический анализ гаметоге-неза и состояния гепатопанкреаса у Procambarus Clarkii при различных вариантах кормления // Дисс. канд. биол. наук. - М., 2003. 120 с.

5. Рязанова Т.В. Патологические изменения органов и тканей у краба-стригуна опилио (Chionoecetes opilio) на западно-камчатском шельфе Охотского моря // Исследования водных биологических ресурсов Камчатки и Северо-западной части Тихого океана - 2006. Вып. 8. С. 207-216.

6. Тамкявичене Е.А. Некоторые количественные закономерности питания широкопалого рака. Литв.: Сб. научн. тр. // Ин-т зоол. и паразитол. АН Лит. ССР. - 1979. - С. 67-76.

7. Harrison F.W, Humes A.G. Microscopic anatomy of invertebrates. Decapoda Crustacea. - New York: Willey-Liss Inc., 1992. Vol.10. 459 p.

8. Johnson P.T. Histology of the blue crab, Callinectes sapidus: a model for the Decapoda. - New York: Praeger. 1980. 440 p.

Artificially caused hepatopankreas's pathology of river crayfish

N.Yu. Koryagina, G.I. Pronina, A.O. Revyakin, O.I. Stepanova, O.V. Baranova, G.D. Kapanadze, I.Yu. Menshikov

The injection of alloxan in a dose of 100 mg/kg in a ventral sine of river crayfish leads to violation of structure of R-cages of hepatopancreas. The increase of glucose content in a hemolymph is noted.

Key words: pathology modeling, river crayfish, hepatopancreas, alloxan (C4H2N2O4).

Влияние мелаксена на функциональную активность тромбоцитов в условиях экспериментальной гипо- и гиперагрегации

Е.Н. Лазарева, Х.М. Галимзянов, М.А. Самотруева

ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразви-тия России

Контактная информация: Лазарева Елена Николаевна, elniklazareva@yandex.ru

В работе представлены данные, полученные при экспериментальном изучении регулирующего действия синтетического аналога мелатонина — мелаксена — на процессы функционирования тромбоцитов в условиях их гипо- и гиперагрегации. Гипоагрегационную модель нарушений функции тромбоцитов индуцировали введением ацетилсалициловой кислоты (per os в дозе 20 мг/кг). Гиперагрегация была вызвана внутрибрюшинным введением 0,1мл 10% раствора кальция хлорида. Изучали активность мелаксена при применении в дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг. Установлено, что мелаксен в дозе 1 мг/кг обладает корригирующей способностью, уменьшая формирующиеся в условиях экспериментальной гипо- и гиперагрегации нарушения функциональной активности тромбоцитов.

Ключевые слова: мелаксен, тромбоциты, нарушения гемостаза, ацетилсалициловая кислота, кальция хлорид.

Введение

Одним из ключевых механизмов гемостаза является сбалансированное функционирование тромбоцитов, где повышение их агрегационной способности может спровоцировать усиление тромбообразования, а снижение — развитие геморрагического синдрома [4].

Многочисленными экспериментальными и клиническими данными показано, что гиперагрегация тромбоцитов имеет причинно-следственную связь с развитием таких тяжелых патологических состояний как инфаркт миокарда, нарушения мозгового кровообращения, сахарный диабет, гипертоническая болезнь и др.,