УЛЬТРАЗВУКОВЫЕ КОНТРАСТНЫЕ ВЕЩЕСТВА И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

1. Способ получени  лиофилизованной матрицы, котора  после контакта с водной жидкостью-носителем и газом может быть восстановлена в суспензию наполненных газом микропузырьков, стабилизированную преимущественно фосфолипидом, причем указанный способ включает стадии
a) приготовление водно-органической эмульсии, содержащей i) водную среду, включающую воду, ii) органический растворитель, по существу, не смешиваемый с водой; iii) эмульгирующий состав амфифильных материалов, содержащий более 50 вес.% фосфолипида и iv) лиопротективный агент;
b) лиофилизацию указанной эмульгированной смеси с получением лиофилизованной матрицы, содержащей указанный фосфолипид.
2. Способ по п.1, в котором стади  a) приготовлени  эмульсии включает следующие стадии:
a1) приготовление суспензии путем диспергировани  эмульгирующего состава и лиопротективного агента в водной среде;
a2) смешение полученной суспензии с органическим растворителем;
a3) регулируемое перемешивание смеси с получением эмульсии.
3. Способ по п.1, в котором растворимость органического растворител  в воде составл ет менее 10 г/л.
4. Способ по п.3, в котором растворимость органического растворител  в воде составл ет 0,001 г/л или меньше.
5. Способ по п.1, в котором органический растворитель выбран из разветвленных или пр мых алканов, алкенов, циклоалканов, ароматических углеводородов, простых алкиловых эфиров, кетонов, галогенированных углеводородов, перфторированных углеводородов и их смесей.
6. Способ по п.5, в котором растворитель выбран из пентана, гексана, гептана, октана, нонана, декана, 1-пентена, 2-пентена, 1-октена, циклопентана, циклогексана, циклооктана, 1-метилциклогексана, бензола, толуола, этилбензола, 1,2-диметилбензола, 1,3-диметилбензола, дибутилового эфира и диизопропилкетона, хлороформа, четыреххлористого углерода, 2-хлор-1-(дифторметокси)-1,1,2-трифторэтана (энфлюрана), 2-хлор-2-(дифторметокси)-1,1,1-трифторэтана (изофлюрана), тетрахлор-1,1-дифторэтана, перфторпентана, перфторгексана, перфторгептана, перфторнонана, перфторбензола, перфтордекалина, метилперфторбутилового эфира, метилперфторизобутилового эфира, этилперфторбутилового эфира, этилперфторизобутилового эфира и их смесей.
7. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором количество органического растворител  составл ет от примерно 1 до примерно 50 об.% от количества воды.
8. Способ по п.1, в котором лиопротективный агент выбран из углеводородов, сахарных спиртов, полигликолей и их смесей.
9. Способ по п.8, в котором лиопротективный агент выбран из глюкозы, галактозы, фруктозы, сахарозы, трегалозы, мальтозы, лактозы, амилозы, амилопектина, циклодекстрина, декстрана, инулина, растворимого крахмала, гидроксиэтилкрахмала (HES), эритрита, маннита, сорбита, полиэтиленгликолей и их смесей.
10. Способ по п.1, в котором количество лиопротективного агента составл ет от примерно 1 до примерно 25 вес.% от веса воды.
11. Способ по п.1, в котором фосфолипид выбран из дилауроилфосфатидилхолина (DLPC), димиристоилфосфатидилхолина (DMPC), дипальмитоилфосфатидилхолина (DPPC), диарахидоилфосфатидилхолина (DAPC), дистеароилфосфатидилхолина (DSPC), диолеоилфосфатидилхолина (DOPC), 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (Этил-DSPC), дипентадеканоилфосфатидилхолина (DPDPC), 1-миристоил-2-пальмитоилфосфатидилхолина (MPPC), 1-пальмитоил-2-миристоилфосфатидилхолина (PMPC), 1-пальмитоил-2-стеароилфосфатидилхолина (PSPC), 1-стеароил-2-пальмитоилфосфатидилхолина (SPPC), 1-пальмитоил-2-олеилфосфатидилхолина (POPC), 1-олеил-2-пальмитоилфосфатидилхолина (OPPC), дилауроилфосфатидилглицерина (DLPG) и его солей с щелочными металлами, диарахидоилфосфатидилглицерина (DAPG) и его солей с щелочными металлами, димиристоилфосфатидилглицерина (DMPG) и его солей с щелочными металлами, дипальмитоилфосфатидилглицерина (DPPG) и его солей с щелочными металлами, дистеароилфосфатидилглицерина (DSPG) и его солей с щелочными металлами, диолеоилфосфатидилглицерина (DOPG) и его солей с щелочными металлами, димиристоилфосфатидной кислоты (DMPA) и ее солей с щелочными металлами, дипальмитоилфосфатидной кислоты (DPPA) и ее солей с щелочными металлами, дистеароилфосфатидной кислоты (DSPA), диарахидоилфосфатидной кислоты (DAPA) и ее солей с щелочными металлами, димиристоилфосфатидилэтаноламина (DMPE), дипальмитоилфосфатидилэтаноламина (DPPE), дистеароилфосфатидилэтаноламина (DSPE), диолеилфосфатидилэтаноламина (DOPE), диарахидоилфосфатидилэтаноламина (DAPE), дилинолеилфосфатидилэтаноламина (DLPE), модифицированного полиэтиленгликолем димиристоилфосфатидилэтаноламина (DMPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем дипальмитоилфосфатидилэтаноламина (DPPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем дистеароилфосфатидилэтаноламина (DSPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем диолеилфосфатидилэтаноламина (DOPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем диарахидоилфосфатидилэтаноламина (DAPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем дилинолеилфосфатидилэтаноламина (DLPE-ПЭГ), димиристоилфосфатидилсерина (DMPS), диарахидоилфосфатидилсерина (DAPS), дипальмитоилфосфатидилсерина (DPPS), дистеароилфосфатидилсерина (DSPS), диолеоилфосфатидилсерина (DOPS), дипальмитоилсфингомиелина (DPSP), дистеароилсфингомиелина (DSSP) и их смесей.
12. Способ по п.1, в котором эмульгирующий состав амфифильных материалов содержит фосфолипид или амфифильный материал, несущий суммарный ненулевой зар д.
13. Способ по п.1, в котором количество фосфолипида составл ет от примерно 0,005 до примерно 1,0 вес.% от полного веса эмульгированной смеси.
14. Способ по п.13, в котором количество фосфолипида составл ет от 0,01 до 1,0 вес.% от полного веса эмульгированной смеси.
15. Способ по п.1, в котором фосфолипид включает нацеливающий лиганд или защитную реакционноспособную группу, способную взаимодействовать с нацеливающим лигандом.
12
24
12
24
10
20
10
20
3
6
16. Способ по п.1, в котором эмульси  дополнительно содержит амфифильный материал, выбранный из лизолипидов, жирных кислот и их соответствующих солей с щелочью или щелочными металлами, полимеров, несущих липиды; сульфированных моно-, ди-, олиго- или полисахаридов, несущих липиды; липидов, св занных с жирными кислотами простой или сложноэфирной св зью; полимеризованных липидов; диацетилфосфата; дицетилфосфата; стеариламина; церамидов; полиоксиэтилированных сложных эфиров жирных кислот; полиоксиэтилированных жирных спиртов; полиоксиэтилированных простых эфиров жирных спиртов; полиоксиэтилированных сложных эфиров сорбита и жирных кислот; модифицированного полиэтиленгликолем глицеринрицинолеата; этоксилированных стеринов соевых бобов; этоксилированного касторового масла; блок-сополимеров этиленоксида (ЭО) и пропиленоксида (ПО); стериновых сложных эфиров сахарных кислот; сложных эфиров сахаров с алифатическими кислотами; сложных эфиров глицерина с (C-C) дикарбоновыми жирными кислотами и их соответствующими сол ми с щелочами или сол ми щелочных металлов; сапонинов; длинноцепочечных (C-C)-спиртов; 6-(5-холестен-3-илокси)-1-тио--D-галактопиранозида; дигалактозилдиглицерида; 6-(5-холестен-3-илокси)гексил-6-амино-6-деокси-1-тио--D-галактопиранозида; 6-(5-холестен-3-илокси)гексил-6-амино-6-деоксил-1-тио--D-маннопиранозида; 12-(((7'-диэтиламинокумарин-3-ил)карбонил)метиламино)-октадекановой кислоты; N-[12-(((7'-диэтиламинокумарин-3-ил)карбонил)метиламино)октадеканоил]-2-аминопальмитиновой кислоты; N-сукцинилдиолеилфосфатидилэтаноламина; 1-гексадецил-2-пальмитоилглицерофосфоэтаноламина; пальмитоилгомоцистеина; алкиламмониевых солей, содержащих по меньшей мере одну (C-C) алкильную цепь; солей третичного или четвертичного аммони , содержащих по меньшей мере одну (C-C)-ацильную цепь, соединенную с атомом N через (C-C)-алкиленовый мостик, и их смесей или комбинаций.
17. Способ по п.1, в котором водно-органическую эмульсию со стадии a) подвергают стадии промывки перед стадией лиофилизации b).
18. Способ по п.1, в котором водно-органическую эмульсию со стадии a) подвергают стадии микрофильтрации перед стадией лиофилизации b).
19. Способ по п.1, который включает дополнительно добавление водной суспензии, содержащей дополнительное амфифильное соединение, в водно-органическую эмульсию, полученную согласно стадии a), перед стадией лиофилизации b), с получением, таким образом, второй водёно-органической эмульсии, содержащую указанное дополнительное амфифильное соединение.
20. Способ по п.19, который включает дополнительно нагрев смеси указанной водной суспензии и указанной водно-органической эмульсии.
21. Способ по п.19, в котором указанную смесь нагревают при температуре от примерно 40 до примерно 80°C.
22. Способ по п.19, в котором указанное амфифильное соединение  вл етс  ПЭГ-модифицированным фосфолипидом, причем ПЭГ-модифицированный фосфолипид имеет реакционноспособный компонент, или ПЭГ-модифицированный фосфолипид имеет нацеливающий лиганд.
23. Способ по п.1, который включает дополнительно до стадии лиофилизации b), регулируемый нагрев водно-органической эмульсии.
24. Способ по п.19, который дополнительно включает, до стадии лиофилизации b), регулируемый нагрев водно-органической эмульсии.
25. Способ по п.23 или 24, в котором указанный регулируемый нагрев осуществл ют при температуре от примерно 60 до 125°C.
26. Способ по п.25, в котором указанную эмульсию помещают в запа нный флакон.
27. Способ получени  пригодного дл  инъекций контрастного вещества, содержащего жидкую водную суспензию наполненных газом микропузырьков, стабилизированную преимущественно фосфолипидом, который включает стадии получени  лиофилизованной матрицы в соответствии со способом по одному из пп.1-24; контактирование указанной лиофилизованной матрицы с биосовместимым газом; и восстановление указанной лиофилизованной матрицы путем растворени  ее в физиологически приемлемой водной жидкости-носителе, с получением суспензии наполненных газом микропузырьков, стабилизированной преимущественно указанным фосфолипидом.
1
7
4
7
2
7
2
7
1
7
28. Способ по п.27, в котором биосовместимый газ выбран из воздуха, азота, кислорода, двуокиси углерода, водорода, закиси азота, инертных газов, низкомолекул рного углеводорода, в том числе (C-C)-алкана, (C-C)-циклоалкана, (C-C)-алкена и (C-C)-алкина, простого эфира, кетона, сложного эфира, галогенированного (C-C)-углеводорода, кетона или простого эфира, или смесей любых из вышеупом нутых веществ.
29. Способ по п.28, в котором галогенированный углеводородный газ  вл етс  перфторированным углеводородом или гексафторидом серы.
30. Способ по п.29, в котором перфторированный углеводородный газ  вл етс  перфторметаном, перфторэтаном, перфторпропаном, перфторбутаном, перфторпентаном, перфторгексаном, перфторгептаном; перфторпропеном, перфторбутеном, перфторбутадиеном, перфторбут-2-ином, перфторциклобутаном, перфторметилциклобутаном, перфтордиметилциклобутаном, перфтортриметилциклобутаном, перфторциклопентаном, перфторметилциклопентаном, перфтордиметилциклопентаном, перфторциклогексаном, перфторметилциклогексаном, перфторметилциклогексаном и их смес ми.
N
V50
V50
N
31. Пригодна  дл  инъекций водна  суспензи  микропузырьков, наполненных биосовместимым газом и содержащих стабилизирующий слой, преимущественно содержащий фосфолипид, причем указанные микропузырьки имеют среднечисленный диаметр (D) менее 1,70 мкм и медианный диаметр объемного распределени  (D) такой, что отношение D/D составл ет примерно 2,00 или меньше.
N
32. Водна  суспензи  по п.31, в которой указанные микропузырьки имеют значение D 1,60 мкм или меньше, предпочтительно 1,50 мкм или меньше, более предпочтительно 1,30 мкм или меньше.
V50
N
33. Водна  суспензи  по п.31, в которой указанные микропузырьки имеют отношение D/D примерно 1,80 или меньше, предпочтительно примерно 1,60 или меньше, более предпочтительно примерно 1,50 или меньше.
34. Контрастное вещество дл  применени  в диагностической интроскопии, содержащее водную суспензию по любому из пп. 31-33.
35. Способ диагностической интроскопии, включающий введение пациенту улучшающего контрастность количества водной суспензии по любому из пп. 31-33 и получение изображени  по меньшей мере части указанного пациента.
36. Способ по п.35, который включает обработку ультразвуком указанного пациента с помощью ультразвукового прибора, генерирующего ультразвуковые волны с заранее установленной выходной частотой, определ ющей соответствующий резонансный размер микропузырьков, и введение контрастного вещества, содержащего наполненные газом микропузырьки с узким распределением по размерам и средним размером, близким к половине резонансного размера.