Исследование иммунного статуса с целью оценки безопасности адъювантной монотерапии рака молочной железы

1ММУНН0Г0 СТАТУСА 1КИ БЕЗОПАСНОСТИ 1ОИ МОНОТЕРАПИИ ЮЧНОИ ЖЕЛЕЗЫ

Е.М. Дьяконова, аспирант кафедры общей и клинической фармакологии1;

А.Б. Петров, главный врач филиала №12

'Нижегородская государственная медицинская академия, Н. Новгород;

Нижегородский областной онкологический диспансер

Цель исследования — изучение иммунного статуса при применении антиэстрогена тамоксифена и ингибитора синтеза эстрогенов летрозола в качестве адъювантной монотерапии рака молочной железы.

Материалы и методы. В исследование включено 26 больных раком молочной железы Т1-3Н1-2М0 стадии, которым после проведения радикальной мастэктомии назначалась адъювантная монотерапия препаратами тамоксифен, или летрозол. До начала гормонотерапии, а также через 4 мес лечения проводилась комплексная оценка иммунного статуса. Субпопуляции лимфоцитов определяли с помощью моноклональных антител, иммуноглобулины А, М, G — методом радиальной иммунодиффузии.

Результаты. Тамоксифен увеличивает не только общее количество Т-лимфоцитов, но и относительное количество Т-лимфоцитов-хелперов, а также Т-лимфоцитов-супрессоров, Т-лимфоцитов с рецепторами к интерлейкину-2 и фактору некроза опухоли, снижая при этом число 1\1К-лимфоцитов. На фоне тамоксифена регистрируется также увеличение концентрации ^ в сыворотке крови и снижение концентрации 1дА и 1дМ.

Летрозол обусловливает снижение общего количества Т-лимфоцитов, относительного количества Т-лимфоцитов-супрессоров, \1К-лимфоцитов, Т-лимфоцитов с рецепторами к фактору некроза опухоли и Т-лимфоцитов-хелперов, не изменяя при этом число Т-лимфоцитов с рецепторами к интерлейкину-2. При применении летрозола отмечается также увеличение концентрации 1дМ и снижение содержания 1дА и 1дй.

Заключение. Для каждого из исследованных препаратов характерна определенная направленность выявленных изменений, что свидетельствует о необходимости динамического контроля иммунологических показателей и проведения соответствующей корригирующей терапии.

Ключевые слова: адъювантная монотерапия рака молочной железы, тамоксифен, летрозол, иммунный статус.

English

Investigation of immune status for assessment of a mammary gland cancer adjuvant monotherapy safety

E.M. Diyakonova, post-graduate of a general and clinical pharmacology chair1;

A.B. Petrov, head physician of a branch №12

1 Nizhny Novgorod state medical academy, N. Novgorod;

2 Nizhny Novgorod regional oncologic dispensary

Для контактов: Дьяконова Елена Михайловна, тел. раб. 8(831)436-54-01, тел. моб. +7 953-415-23-45; e-mail: farmnnov@mail.ru.

40 СТМ J 2010 - 3 Е.М. Дьяконова, А.Б. Петров

Aim of investigation is a study of immune status at the tamoyfen antiestrogen and letrosol estrogen synthesis inhibitor use as an adjuvant monotherapy of a mammary gland cancer.

Materials and methods. 26 patients with a mammary gland cancer of a stage T1-3H1-2M0, undergoing the adjuvant monotherapy with the tamoxyfen or letrosol preparations after a radical mastectomy, are included into investigation. A complex assessment of immune status was made prior to beginning of a hormonotherapy and in 4 months of treatment. The lymphocyte subpopulations were detected with a use of monoclonal antibodies, the immunoglobulins A, M, G — with a method of radial immunodiffusion.

Aresults. A tamoxyfen increases not only a general quantity of the T-lymphocytes, but a relative quantity of the T-lymphocytes-helpers, and also the T-lymphocytes-supressors, T-lymphocytes with receptors to interleukin-2 and a tumor necrosis factor, decreasing at the same time a number of NK-lymphocytes. An increase of the IgG concentration in a blood serum, and a decrease of the IgA and IgM concentration are registered at the background of tamoxyfen.

A letrosol stipulates a decrease of the T-lymphocyte general quantity, a relative quantity of the T-lymphocytes-supressors, NK-lymphocytes, T-lymphocytes with receptors to a tumor necrosis factor and T-lymphocytes-helpers, not altering a number of T-lymphocytes with receptors to interleukin-2. An increase of the IgM concentration and a decrease of the IgA and IgG content are also observed at a letrosol use.

Conclusion. A certain direction of revealed alterations is characteristic of each of investigated preparations, which testifies to necessity of the immunologic value dynamic control and a corresponding corrugated therapy.

Key words: adjuvant monotherapy of a mammary gland cancer, tamoxyfen, letrosol, immune status.

Ежегодно в мире регистрируется более 600 000 случаев рака молочной железы (РМЖ). В Европе на долю РМЖ приходится 13% всех злокачественных новообразований. При этом в структуре заболеваемости женщин РМЖ занимает первое место [1, 2]. В России заболеваемость РМЖ характеризуется тенденцией к постоянному увеличению. Так, если в 1983 г. количество вновь выявленных случаев составляло около 25,8 тыс., то в 2003 г. — уже 46,3 тыс. [3, 4]. В структуре смертности от онкологических заболеваний среди женщин РМЖ также занимает первое место.

В то же время данные литературы свидетельствуют о тенденции к снижению смертности от РМЖ за последнее десятилетие в странах Европейского Союза, что в определенной степени связано с внедрением современных методов лечения данного заболевания [1, 2]. Эти достижения связаны, прежде всего, с совершенствованием фармакотерапевтических методов лечения РМЖ и применением новых групп лекарственных средств, в том числе влияющих на гормональный статус больных, в частности ингибиторов синтеза эстрогенов (ароматазы) III поколения [5, 6].

В настоящее время препараты указанной группы, а также антиэстрогены (блокаторы эстрогеновых рецепторов) являются препаратами 1-й линии в терапии гор-мончувствительных, а также медленно прогрессирующих форм РМЖ. Доказано, что гормональная терапия является более эффективной и лучше переносимой, чем классические схемы лечения цитостатиками [7]. Кроме того, одним из побочных эффектов, характерных практически для всех цитостатиков, является иммуносупрессия [8]. Однако влияние антиэстрогенов и ингибиторов синтеза эстрогенов на показатели иммунитета у пациентов с РМЖ практически не исследовалось. При этом известно, что состояние гормонального дисбаланса само по себе может приводить к качественным нарушениям клеточного звена иммунитета, а эстрогеновые рецепторы находятся на иммунокомпе-тентных клетках, влияют на продукцию ряда цитокинов и фагоцитоз [9].

Цель исследования — изучение иммунного статуса

при применении антиэстрогена тамоксифена и ингибитора синтеза эстрогенов летрозола в качестве адъювантной монотерапии рака молочной железы.

Материалы и методы. В исследование были включены 26 больных раком молочной железы Т1.3Н1.2М0 стадии, проходивших лечение на базе филиала №1 Нижегородского областного онкологического диспансера. Всем женщинам была проведена радикальная мастэк-томия, после чего они с помощью метода случайных чисел были разделены на две группы: 1-я группа (сравнения) — пациенты, получавшие адъювантный курс гормонотерапии антиэстрогеном (тамоксифен) в дозе 20 мг в сутки (14 человек); 2-я группа — получавшие ингибитор синтеза эстрогенов (летрозол) в дозе 2,5 мг в сутки (12 человек).

До начала гормонотерапии, а также через 4 мес от начала лечения была проведена оценка иммунного статуса у всех пациентов, которая включала определение субпопуляций Т-лимфоцитов по маркерам CD3, CD4, CD8, CD16, CD25, CD95 и уровня иммуноглобулинов А, M, G.

Определение маркеров Т-лимфоцитов осуществлялось с помощью моноклональных антител производства Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. академика И.Н. Блохиной Роспотребнадзора на люминесцентном микроскопе Leitz (Германия).

Количественное определение иммуноглобулинов А, M, G осуществлялось методом радиальной иммунодиффузии по Манчини с использованием моноспецифичес-ких сывороток против IgA, IgM, IgG производства Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием лицензионного статистического пакета Stadia 7.0/prof на персональном компьютере IBM PC. Результаты представлялись в виде М±1Г1, где М — среднее арифметическое, m — стандартная ошибка средней величины. Уровень значимости различий выборочных средних для выборок, имеющих распределение, не отличающееся от нормального, определяли с помощью критериев Стьюдента и Фишера, а для выборок, имеющих распределение, отличное от

Исследование иммунного статуса с целью оценки безопасности адъювантной монотерапии ... СТМ | 2010 - 3 41

нормального, — с помощью критериев Вилкоксона и Ван-дер-Вардена. Статистическая значимость различий между относительными величинами определялась с помощью критерия Фишера. Методы статистической обработки применялись в соответствии с рекомендациями по статистической обработке результатов исследований [10].

результаты и обсуждение. На фоне применения антиэстрогена тамоксифена отмечалось увеличение относительного количества CD3, CD4, CD8, CD25 и CD95 лимфоцитов соответственно на 32,66; 16,67; 28,57; 100 и 14,12% по сравнению с исходным уровнем. При этом регистрировалось снижение количества CD16 лимфоцитов на 6,90% (табл. 1). Выявленные тенденции свидетельствуют, что тамоксифен увеличивает не только общее количество Т-лимфоцитов, но и количество Т-лимфоцитов-хелперов, а также Т-лим-фоцитов-супрессоров, Т-лимфоцитов с рецепторами к интерлейкину-2 и фактору некроза опухоли, снижая при этом число NK-лимфоцитов. Вместе с тем все зарегистрированные изменения относительного количества субпопуляций Т-лимфоцитов находятся в пределах референтных значений.

Кроме того, на фоне тамоксифена регистрировались увеличение концентрации ^ в сыворотке крови относительно результатов I обследования (в 3,86 раза; p<0,01), а также снижение концентрации ^А и ^М (соответственно на 0,72 и 5,41%) (см. табл. 1), следовательно, активирующее влияние тамоксифена на показатели гуморального иммунитета проявляется на уровне иммуноглобулинов, находящихся в сосудистом русле, экстраваскулярном пространстве и активирующих систему комплемента.

При применении ингибитора синтеза эстрогенов лет-розола выявлено снижение относительного количества практически всех исследованных субпопуляций Т-лим-фоцитов по сравнению с исходными значениями, в частности CD3 лимфоцитов

Таблица 1

Динамика иммунологических показателей

при применении антиэстрогена тамоксифена

Показатели Этапы исследования

I обследование II обследование

CD3, % 49,60±6,06 65,80±3,41

CD4, % 40,80±2,52 47,60±7,79

CD8, % 28,00±3,15 36,00±7,27

CD16, % 23,20±2,48 21,60±1,81

CD25, % 0 0,40±0,04

CD95, % 34,00±3,91 38,80±3,65

1дА, г/л 1,39±0,27 1,38±0,25

1дМ, г/л 1,48±0,63 1,40±0,23

^, г/л 4,05±1,08 15,62±1,94

Примечание: уровень статистической значимости различий результатов после I и II обследований, p<0,01.

Таблица 2

Динамика иммунологических показателей при применении ингибитора синтеза эстрогенов летрозола

Показатели Этапы исследования

I обследование II обследование

С03, % 64,20±1,91 59,00±2,47

С04, % 48,80±0,49 32,00±2,81 р,<0,01; р1-2<0,05

сое, % 35,20±2,76 24,20±3,11

С016, % 25,00±1,58 18,00±2,81 р,<0,05

С025, % 0 0

С095, % 29,80±0,80 26,00±1,67

1дА, г/л 3,68±0,58 2,98±0,23

1дМ, г/л 0,88±0,08 2,18±0,40 р,<0,05; р1-2<0,05

1дв, г/л 8,54±0,77 8,30±0,22 р1-2<0,05

Примечание: p1 — уровень статистической значимости различий по сравнению с результатами I обследования; p1—2 — различий между изменениями показателя в 1-й и 2-й группах пациентов.

(табл. 2). При этом снижение числа CD4 лимфоцитов на фоне применения летрозола отличалось статистически значимо от увеличения аналогичного показателя в группе с использованием тамоксифена ^<0,05) и было несколько ниже референтных значений (36—55%). Количество CD25 лимфоцитов на фоне летрозола не изменилось по сравнению с исходным уровнем.

Полученные данные свидетельствуют, что в отличие от тамоксифена летрозол обусловливает уменьшение общего количества Т-лимфоцитов, а также относительного количества Т-лимфоцитов-супрессоров, NK-лимфоцитов и Т-лимфоцитов с рецепторами к фактору некроза опухоли — в пределах референтных значений, количества Т-лимфоцитов-хелперов — несколько ниже референтных значений, не изменяя при этом число Т-лимфоцитов с рецепторами к интерлейкину-2.

Через 4 мес терапии летрозолом отмечалось также увеличение концентрации ^ (в 2,48 раза; p<0,05) и снижение содержания ^ и ^ (соответственно на 19,02 и 2,81%) относительно исходных значений (см. табл. 2). При этом динамика концентраций ^М и ^ на фоне применения летрозола отличалась статистически значимо от таковой в группе тамоксифена ^<0,05 и p<0,01 соответственно). Таким образом, летрозол оказывает влияние на гуморальный иммунитет уже на I этапе иммунного ответа в сосудистом русле.

Заключение. Применение препаратов тамоксифен и летрозол в качестве адъювантной монотерапии рака молочной железы сопровождается различными изменениями иммунного статуса пациентов. При этом для каждого из исследованных препаратов характерна определенная направленность выявленных изменений,

42 СТМ | 2010 - 3 Е.М. Дьяконова, А.Б. Петров

что свидетельствует о необходимости динамического контроля иммунологических показателей и проведения соответствующей корригирующей терапии.

Литература

1. Bosetti C, Bertuccio P., Levi F. et al. Cancer mortality in the European Union, 1970—2003, with a joinpoint analysis. Ann Oncol 2008; 19(4): 631—640.

2. Levi F., Lucchini F., Negri E., La Vecchia C. Continuing declines in cancer mortality in the European Union. Ann Oncol 2007; 18(3): 593—595.

3. Аксель Е.М. Злокачественные новообразования молочной железы: состояние онкологической помощи, заболеваемость и смертность. Маммология 2006; 1: 9—13.

4. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2004 г. Вестник Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина РАМН. Под ред. М.И. Давыдова, Е.М. Аксель. 2006; 17(3): 1—132.

5. Johnston S.R. Enhancing the efficacy of hormonal agents with selected targeted agents. Clin Breast Cancer 2009; 9(1): 28—36.

6. Keating G.M. Letrozole: a review of its use in the treatment of postmenopausal women with hormone-responsive early breast cancer. Drugs 2009; 69(12): 1681—1705.

7. Rodriguez Lajusticia L., Martin Jimenez M., Lopez-Tarruel-la Cobo S. Endocrine therapy of metastatic breast cancer. Clin Transl Oncol 2008; 10(8): 462—467.

8. Петров А.Б., Безрукова Е.В., Кузин В.Б. Комплексная оценка иммунного статуса пациентов, получающих курс адъювантной полихимиотерапии по поводу рака молочной железы. Нижегородский медицинский журнал 2008; 4: 164—168.

9. Angele M.K., Chaudry I.H. Surgical trauma and immunosuppression: pathophysiology and potential immunomodulatory approaches. Langenbecks Arch Surg 2005; 390(4): 333—341.

10. Кулаичев А.П. Методы и средства комплексного анализа данных. М: ФОРУМ; ИНФРА-М; 2006; 512 с.