Влияние озонированного физиологического раствора на биохимические показатели печени животных-опухоленосителей

ВЛИЯНИЕ ОЗОНИРОВАННОГО ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО РАСТВОРА НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПЕЧЕНИ ЖИВОТНЫХ-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ

19 9

К.Н. Конторщикова , , Т.А. Веселова

1ФГБОУ ВО "ПИМУ" Минздрава России, Нижний Новгород

2

Нижегородский государственный университет им. Н.И.Лобачевского, Нижний Новгород

Abstract

The aim of the work is to study the effect of ozonated saline solution (OPP) on the biochemical parameters of the liver of tumor-bearing animals. It was found that the use of ozonated saline solution can improve the efficiency of the processes of anti-cancer adaptation of the body with the tumor, reduce the toxic effect of the products of tumor tissue metabolism on the body.

Key words: ozonized saline, sarcoma, ozone therapy

Цель работы - исследование влияния озонированного физиологического раствора (ОФР) на биохимические параметры печени животных -опухоленосителей. Установлено, что использование озонированного физиологического раствора может способствовать повышению эффективности процессов адаптации организма с опухолью к воздействию злокачественного новообразования, снижению токсического влияния продуктов обмена опухолевой ткани на организм.

Ключевые слова: озонированный физиологический раствор, саркома, озонотерапия

Гомеостаз печени во многом определяет течение опухолевого процесса, состояние всего организма, переносимость противоопухолевых препаратов. Для коррекции функциональных изменений в клетках печени необходимо стимулировать эндогенные противоопухолевые возможности организма с целью снижения токсического и системного воздействия опухоли на организм. В связи с хорошо известным корригирующим эффектом озона на аэробные процессы, про-и антиоксидантный баланс, его токсическое воздействие на опухолевые клетки интересным представляется исследование влияния озонированного физиологического раствора (ОФР) на биохимические параметры печени животных - опухоленосителей.

Материал и методы

В экспериментальных условиях проанализированы метаболические показатели печени крыс-опухоленосителей на 20 и 30 дней после перевивки опухоли Саркома 45 (n=30). Всем животным внутрибрюшинно и непосредственно в опухоль вводили озонированный физиологический раствор - 5

введений через день по 1,5 мл. Концентрация озона для приготовления раствора составляла в газовой фазе для внутрибрюшинного введения 1200 мкг/л, для введения в опухоль 3000 мкг/л, скорость подачи газа 1л/мин. Концентрация озона в физиологическом растворе, измеренная методом йодометрического титрования равнялась, соответственно 120-140 мкг/л и 500-550мкг/л. Группу сравнения представляли интактные крысы (п=32). В конце эксперимента декапитацию животных проводили с использование нембуталового наркоза (30 мг/кг).

Определение интенсивности свободнорадикального окисления осуществляли методом индуцированной железом и перекисью водорода хемилюминесценции на приборе БХЛ - 07 (Нижний Новгород, Россия) с оценкой параметров, включающих показатели Imax, S (Кузьмина Е.И. с соавт., 1983). Уровни молекулярных продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) -диеновые конъюгаты (ДК), триеновые конъюгаты (ТК), основания Шиффа -оценивали по методу И.А. Волчегорского с соавт. (1989). Антиоксидантную систему ткани печени оценивали по активности ферментов суперокисиддисмутазы, каталазы, глюкозо-6 фосфат- дегидрогеназы. Для оценки энергетического потенциала клеток печени измеряли уровни АМФ, АДФ, АТФ, ГДФ и ГТФ методом ионообменной хроматографии. Определение уровней продуктов углеводного обмена - пирувата и лактата - проводили энзиматическим методом с использованием лактатдегидрогеназы.

Содержание циклических нуклеотидов цАМФ и цГМФ определяли радиоизотопным методом с использованием наборов фирмы Amersham.

Результаты

Важную роль в развитии многих патологических процессов играет чрезмерная активация ПОЛ. Баланс про- и антиоксидантных систем является показателем устойчивости организма к развитию злокачественной опухоли, а также характеризует состояние и эффективность лечения. В наших экспериментах в печени крыс-опухоленосителей на ранних стадиях роста и развития саркомы 45 усиливается активация ПОЛ, что сопровождается накоплением продуктов пероксидации. Через 30 дней превышение уровней интактных животных составляет уже двойную величину. Увеличение содержание уровней ОШ свидетельствует о том, что первичные продукты пероксидации липидов -ДК и ТК- не обезвреживаются системами антиоксидантной защиты и процесс ПОЛ выходит за рамки физиологической нормы. Это можно объяснить токсическим воздействием опухоли на печень. Нарушение работы микросомальной системы переноса электронов в печени - один из источников образования активных форм кислорода. Второй важнейшей причиной является снижение антиоксидантной защиты. При этом активность фермента СОД была повышена на всех сроках развития опухоли, что свидетельствует о происходящих адаптационных реакциях в гепатоцитах. В то же время активность каталазы, которая работает в паре с СОД и убирает образующиеся при действии СОД активные формы кислорода, оказалось сниженной по сравнению с интактными животными. Об изменении антиоксидантной защиты свидетельствует снижение активности фермента глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы, участвующего в

восстановлении системы глутатиона в гепатоцитах, а отсюда, в поддержании активности фермента глутатиопероксидазы.

У животных с саркомой 45 в клетках печени отмечается увеличение содержания цАМФ, что является показателем физиологической активности гепатоцитов, что, однако, не компенсирует функциональные изменения в клетках печени животных-опухоленосителей. О нарушении энергетических процессов в гепатоцитах крыс-опухоленосителей свидетельствуют изменения в показателях макроэргических соединений. Через 20 дней роста опухоли саркомы 45 в ткани печени крыс-опухоленосителей содержание АТФ уменьшилось на 21% по сравнению с интактными животными, через 30 дней - на 36% (p< 0,05) Различия в содержании ГТФ составили, соответственно, через 20 дней 28% и через 30 дней 46% Одной из причин снижения уровней макроэргических соединений является нарушение в углеводном обмене в гепатоцитах животных- опухоленосителей., что характеризуется накоплением лактата в 2,5 раза через 20 дней и на 57% -через 30 дней, уровня пирувата, соответственно, в 2 и 4 раза. Полученные результаты указывают на преобладание анаэробных реакций гликолиза. Введение озонированного физиологического раствора оказывает корригирующий эффект на нарушенные показатели метаболизма, связанные с наличием опухоли в организме. В печени крыс - опухоленосителей нормализуется активность ферментов антиоксидантной системы защиты, снижается интенсивность реакций ПОЛ. Дальнейшее увеличение содержания цАМФ в печени крыс после курса введения ОФР свидетельствует об усилении адаптивных процессов, что подтверждается повышением в клетках печени уровней АТФ и ГТФ и снижением до нормы уровней лактата и пирувата.

Таким образом, использование озонированного физиологического раствора может способствовать повышению эффективности процессов адаптации организма с опухолью к воздействию злокачественного новообразования, снижению токсического влияния продуктов обмена опухолевой ткани на организм.

Список литература

1. Кузьмина Е.И., Нелюбин А.С., Щенникова М.К. Применение индуцированной хемилюминесценции для оценок свободнорадикальных реакций в биологических субстратах // Межвузовский сборник «Биохимия и биофизика микроорганизмов». Горький, 1983. С. 41-43.

2. Волчегорский И.А., Налимов А.Г., Ярвинский Б.Г. Сопоставление различных подходов к определению продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропанольных экстрактах крови // Вопр. мед. химии. 1989. №1. С.127-131.