Морфометрический анализ яиц Fasciola hepatica до и после воздействия антигельминтиков

Заключение. Проведенные нами исследования показали, что у больных стронгилятозами лошадей изменение иммунного статуса выражается угнетением клеточных факторов иммунитета: снижением общего количества лимфоцитов в 2 раза, Т-лимфоцитов - в 2,8 раза, в том числе Т-хелперов - в 2,3, В-лимфоцитов - в 2,6, повышением количества Т-супрессоров - в 2,9 раза по сравнению со здоровыми животными хозяйства. Индекс регуляции иммунитета не превышал 1,12-1,14. Всё это свидетельствует о глубоких изменениях в иммунобиологическом статусе больных животных, несомненно, требующем коррекции.

Литература: 1.Величкин П.А. Гельминтозы лошадей. М.:

Россельхозиздат, 1967. - 84с. 2. Орлов Ф.М. Инфекционные и инвазионные болезни лошадей. М.,Колос, 1976. - С.326-355. 3. Архипов И.А., Горохов В.В., Еременко Н.А., Яковлев С.С. //Сб.мат.научн.конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями».- М., 2004. - вып.5. - С.35-39. 4. Латко М.Д. // Там же. М., 2006. - вып.7. - С.211-214. 5. Бякова О.В., Белозеров С.Н., Скорнякова О.О. //Там же. М.,2007. - вып.8. - С.52-53. 6. Дахно И.С., Дахно Г.Ф., Лазоренко Л.М., Дахно Ю.И., Бухыкало В.М. //Там же. М., 2008. - вып.9. - C.170-173. 7. Presson B.L., Hamm D., Yazwinski T.A., Pote L.M. //«Amer. J. Vet. Res.», 1984. - V.-45.- №6. - P.1203-1204. 8. Seibert B.P.,Newcomb K.M., Michael B.E., Seibert B.P. //Amer. J. Vet. R., - 1986.-V. - 47. - №6. - P.1347-1350. 9. Couto M.C.M., Quinelatos F., Santos C.N., Souza L.S., Sampaio I.B.M., Rodrigues M.L.A. //Veter. med. - 2008. - Vol. 53. - №5. - P.243-249. 10. Michalski

M. M. // Med. Veter. - 2007. - V.63 - №6. - P.643-647.

Status of T-cell chain of immunity at helminthoses of horses. Bespalova

N. S. Voronezh K.D. Glinka State Agrarian University.

Summary. The changes of immune status found in horses infected by Strongylata manifested in inhibition of immunity cell factors namely reduction of total number of lymphocytes by 2 times, T-lymphocytes by 2,8 times including T-helpers by 2,3 times, B-lymphocytes by 2,6 times as well as increase of number of T-supressors by 2,9 times compared with healthy animals. Immunity regulation index didn’t exceed 1,12-1,14. All changes evidenced about sharp events in immunobiological status of infected animals.

МОРФОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЯИЦ FASCIOLA HEPATICA ДО И ПОСЛЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ АНТИГЕЛЬМИНТИКОВ

Бибик О.И., Штернис Т.А.

ГОУ ВПО Кемеровская государственная медицинская академия

Введение. Фасциолез, вызываемый трематодами Fasciola hepatica и F.gigantica, среди гельминтозов сельскохозяйственных животных является одним из экономически значимых [2, 6]. В РФ ежегодный ущерб от фасциолеза составляет 1500-2500 тонн мясной продукции и 2-4 миллиона тонн

73

молока. Официальная статистика Минздрава России за последние 10 лет показывает, что заболеваемость людей фасциолезом возросла более чем в 10 раз [9]. Наиболее действенным методом борьбы с паразитарными болезнями животных и человека в настоящее время является химиотерапия с использованием высокоэффективных антигельминтиков широкого спектра воздействия, максимально безопасных для организма и относительно безвредных для окружающей среды [3]. Лечение фасциолеза человека эффективно проводилось триклабендазолом [8] и тегалидом [7].

Цель исследования. Провести анализ эффективности антигельминтиков триклабендазола и тегалида на яйцепродукцию Fasciola hepatica in vivo спонтанно инвазированных овец с использованием метода морфометрического анализа яиц паразита.

Материалы и методы. Объектом исследования служили трематоды вида Fasciola hepatica, взятые из печени спонтанно инвазированных овец после воздействия триклабендазола в дозе 10 мг/кг и тегалида в дозе 30 мг/кг на организм хозяина. Животные контрольной группы антигельминтика не получали. Паразитов фиксировали в растворе метилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3:1, а затем в 70% спирте.

Материал обрабатывали по общепринятой гистологической методике и заливали в парафин. Срезы готовили из половозрелых трематод F.hepatica толщиной 5-7 мкм, окрашивали гематоксилин-эозином. Измерения яиц трематод проводили на гистологических препаратах в световом микроскопе «Микмед-6» используя окуляр-микрометр ШИО-8 . Для оценки эффективности воздействия антигельминтиков использовался морфометрический анализ яиц трематод [5]. Метод морфометрии со статистическим анализом включал следующие этапы: 1. На гистологических препаратах из фасциолы печеночной, окрашенных гематоксилин-эозином, измерялись в миллиметрах с помощью окуляр-микрометра в световом микроскопе общие размеры 50 яиц трематод и размеры их содержимого по большому (D) и малому (d) диаметрам в норме и после воздействия препарата, находящихся в дистальном отделе матки - зрелые яйца с несформированными мирацидиями. 2. Рассчитывались объемы яиц (Уя) и их содержимого (Ус) с применением формулы объема эллипсоида [1]. Статистический анализ данных выполнен с использованием пакета прикладных программ STATISTICA 6.1 и Microsoft office Excel 2007. В тексте приводятся статистически значимые результаты. Описание количественных признаков проводилось с использованием средних величин (М) и среднеквадратических (стандартных) ошибок среднего (m). Для сопоставления двух зависимых выборок по количественным признакам (параметрам морфометрии), которые не являются нормально распределенными использовался непараметрический критерий Вилкоксона (Т) для парных сравнений. Критическое значение уровня статистической значимости, при проверке Но, принималось равным 0,05. В случае превышения достигнутого уровня значимости статистического критерия гипотеза (Но) об отсутствии различий групп по изучаемому

74

признаку принималась; при достижении уровня значимости статистического критерия менее 0,05 принималась альтернативная гипотеза (Н1) о существовании различий групп по изучаемому признаку. Достигнутые в исследовании значения уровня статистической значимости для критерия Т=0,0000000-302,0 составили 0,000000-0,002164.

Результаты исследований. Любое отклонение от устоявшихся морфофункциональных канонов формирования яиц (размеры, форма, композиция содержимого и соотношение между общими размерами яиц трематод и внутренним их содержимым), представляет патологию, блокирующую развития яиц трематод, что особенно наглядно обнаруживается после воздействия антигельминтика при применении морфометрических методов исследования [5].

Данные статистического анализа показывают объективные изменения яиц фасциол после воздействия препаратов из химической группы бензимидазолов - триклабендазола и салициланилидов - тегалида После воздействия тегалида большой диаметр яиц трематод по отношению к норме (8,58±0,035)-10-3 мм изменился (8,71±0,012)-10-3 мм; (Т=78,0; р=0,000002). Изменения большого диаметра яиц фасциол после воздействия

-5

триклабендазола оказались статистически незначимыми (8,62±0,024)-10- мм (Т=451; р=0,123). Изменился малый диаметр яиц при сравнении с контролем

-5 -5

(4,32±0,092)-10- мм, после применения как триклабендазола (4,51±0,012)-10-мм (Т=24; р=0,000318), так и тегалида (3,64±0,016)-10-3 мм (Т=0,00; р=0,0000; рис. 1).

При применении антигельминтных препаратов статистически значимо изменялись большой и малый диаметры содержимого яиц фасциол как после воздействия триклабендазола, так и тегалида. В норме большой диаметр

-5

содержимого яиц трематод имеет размеры (7,44±0,039)-10- мм, а размеры

-5

малого диаметра содержимого яиц составляют (3,77±0,102)-10- мм, когда

-5

после триклабендазола размеры диаметров достигали

соответственно. Тегалид вызывал изменение большого и малого диаметров содержимого яиц фасциол: (7,58±0,011)-10-3мм (Т=302; р=0,0020) и

(2,93±0,024)40-3 мм (Т=0,0; р=0,0000) соответственно.

Выявлены объективные изменения объёмов как яиц фасциол, так и их содержимого. После воздействия препарата триклабендазола обнаруживаются изменения в сторону увеличения общих объемов яиц (Уя) трематод (9,15±0,06)-10-8 мм3 (Т=289; р=0,002) и объемов их содержимого (Ус) (б,98±0,04)-10-8 мм3 (Т=2; р=0,0000) по отношению к норме: (8,11±0,171)-10-8 и

О -5

(5,3±0,124)40- мм соответственно (рис. 2). Изменение объёмов яиц после антигельминтика свидетельствует о проницаемости скорлуповой оболочки и набухании содержимого яиц фасциол.

Статистический анализ показал что, после воздействия препарата тегалида изменения происходят в сторону уменьшения общих объёмов яиц

75

(3,40±0,06) -10"8 мм3 (Т=1; р=0,0000) по отношению к норме: (8,11±0,171)-10"8 и (5,3±0,124)-10" мм соответственно. Статистически значимые изменения объёмов яиц фасциол и их содержимого в сторону их уменьшения свидетельствует о проницаемости скорлуповой оболочки яиц, возрастании в них некротических процессов и торможении их развития.

10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0

Большой Малый Большой малый

диаметр яйца диаметр яйца диаметр диаметр

содержимого содержимого яйца яйца

контроль

триклабендазол

тегалид

Рис. 1. Размеры яиц фасциол и их содержимого до и после воздействия антигельминтиков

10

8

6

4

2

0

объём яиц

объём содержимого

Рис. 2. Объёмы яиц фасциол и их содержимого до и после воздействия антигельминтиков

Заключение. Проведенные исследования показывают, что препараты триклабендазол и тегалид вызывают микроморфофункциональные изменения яиц трематод и их содержимого в организме паразита (р=0,0000). Сравнительный анализ морфометрических исследований яиц фасциол, находящихся в конечных отделах матки в норме и после химиотерпии триклабендазолом в дозе 10 мг/кг и тегалида в дозе 30 мг/ действующего вещества на организм хозяина подтверждает трематодоцидные возможности препаратов, которые следует расценивать как эффективные антигельминтики против яицепродукции фасциол.

Литература: 1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М., 1990. -384 с. 2. Алексеева Н. // Ветеринария. - 2008.- № 6.- С. 15-18. 3. Архипов И.А.

76

Антигельминтики: фармакология и применение. - М., 2009. - 405 с. 4. Бибик

О.И., Начева Л.В. // Медицина в Кузбассе. - Кемерово, 2007. - № 3. - С. 19-22. 5. Бибик О.И., Начева Л.В // Российский паразитологический журнал.- 2009. -№ 1. - С. 102-106. 6. Ендоренко П. // Ветеринария.- 2008.- № 6.- С. 18-22. Лебедева М.Н., Михайлицын Ф.С., Цизин Ю.С. и др. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. - 1990. - № 4.- С. 30-33. 7. Молчанов И.А., Сорокина Н.П., Фабиан А. и др. // Ветеринарная патология. - 2004. - № 4 (11).- С. 97-102. 8. Рыжакина Т.П. Эпизоотологический анализ фасциолезной инвазии в условиях Европейского севера России. // Автореф. дисс. ... канд. ветер. наук. - Санкт-Петербург, 2007.- 17 с.

Morphometric analysis of Fasciola hepatica eggs before and following treatment by anthelmintics. Bibic O.I., Shtemis T.A. Kemerovo State Medical Academy.

Summary. Triclabendazole and tegalid caused micromorphofunctinal alterations of trematode eggs and their contents. The obtained data on morphometric analysis of F. hepatica eggs confirmed the trematodocide properties of both agents.

АНТГЕЛЬМИНТНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ АЛЬБЕНА ФОРТЕ ПРИ ПАРАМФИСТОМАТОЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Бирюков С.А.

ФГОУ ВПО «Вологодская государственная молочнохозяйственная

академия им. Н.В. Верещагина

Введение. Среди гельминтозов, наносящих экономический ущерб животноводству, значительное место занимает парамфистоматоз крупного рогатого скота.

Инвазирование телят парамфистомами происходит на первом году жизни в результате выпаса их на заболоченных пастбищах, которые являются биотопами промежуточных хозяев парамфистом - пресноводных моллюсков из семейства Planorbidae.

Среди моллюсков из семейства Planorbidae в Вологодской области наиболее распространенным видом является Planorbis planorbis (окаймленная

л

катушка), плотность расселения которых на 1 м площади биотопа в июне составляет 72-132 экз. (перезимовавшие моллюски и их молодые формы первой генерации текущего года), а в сентябре - 143-765 экз. (молодые моллюски первой и второй генерации текущего года).

Для обеспечения благополучия хозяйств по трематодозам крупного рогатого скота необходим целый ряд организационно - хозяйственных, общих и специальных профилактических мероприятий. Одно из основных средств борьбы с гельминтозами животных - применение антгельминтиков с лечебной или профилактической целью.

77