СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТАБИЛЬНОСТИ ОРГАНИЧЕСКИХ МЕТИЛЕНАМИНОВ В ПРИСУТСТВИИ СЕМИКАРБАЗИД-ЧУВСТВИТЕЛЬНОЙ АМИНОКСИДАЗЫ

1. Способ идентификации метаболической стабильности испытуемого вещества, определяемой метаболизмом, который катализирует семикарбазид-чувствительная аминоксидаза (САО), и такой способ включает
a) культивирование клеток, экспрессирующих САО;
b) добавление испытуемого вещества к клеткам;
c) инкубирование испытуемого вещества с клетками в течение заранее определенного периода времени;
d) измерение количества испытуемого вещества, остающегося в присутствии клеток, содержащих экспрессированную САО, в течение заранее определенного периода времени; и
e) сопоставление количества испытуемого вещества за заранее определенный период времени с количеством испытуемого вещества в контрольной пробе с тем, чтобы установить значение,
которое отражает метаболическую стабильность испытуемого вещества в присутствии клеток, содержащих экспрессированную САО.
2. Способ идентификации метаболической стабильности меченного радиоизотопом испытуемого вещества, определяемой метаболизмом, который катализирует семикарбазид-чувствительная аминоксидаза (САО), и такой способ включает
a) культивирование клеток, экспрессирующих САО;
b) добавление меченного радиоизотопом испытуемого вещества к клеткам;
c) инкубирование меченного радиоизотопом испытуемого вещества с клетками в течение заранее определенного периода времени; и
d) измерение количества меченного радиоизотопом испытуемого вещества, остающегося в присутствии клеток, содержащих экспрессированную САО, в течение заранее определенного периода времени,
причем процент меченного радиоизотопом испытуемого вещества, не подвергшегося метаболизму, определяет метаболическую стабильность меченного радиоизотопом испытуемого вещества в присутствии клеток, содержащих экспрессированную САО.
3. Способ по п.1 или 2, при котором клетки, экспрессирующие САО, производят промежуточной или стабильной трансфекцией клеток ДНК, кодирующей САО.
4. Способ по п.1 или 2, в котором клетки, экспрессирующие САО, являются прокариотическими клетками.
5. Способ по п.1 или 2, в котором клетки, экспрессирующие САО, являются эукариотическими клетками.
6. Способ идентификации метаболической стабильности испытуемого вещества, определяемой метаболизмом, который катализируется САО в биологической пробе, и такой способ включает
a) получение биологической пробы, содержащей экспрессированную САО;
b) добавление испытуемого вещества к биологической пробе;
c) инкубирование испытуемого вещества с биологической пробой в течение заранее определенного периода времени;
d) измерение количества испытуемого вещества в течение заранее определенного периода времени; и
e) сопоставление количества испытуемого вещества за заранее определенный период времени с количеством испытуемого вещества в контрольной пробе с тем, чтобы установить значение,
которое отражает метаболическую стабильность испытуемого вещества в присутствии биологической пробы, содержащей экспрессированную САО.
7. Способ идентификации метаболической стабильности меченного радиоизотопом испытуемого вещества, определяемой метаболизмом, который катализируется САО в биологической пробе, и такой способ включает
a) получение биологической пробы, содержащей экспрессированную САО;
b) добавление меченного радиоизотопом испытуемого вещества к биологической пробе;
c) инкубирование меченного радиоизотопом испытуемого вещества с биологической пробой в течение заранее определенного периода времени; и
d) измерение количества меченного радиоизотопом испытуемого вещества в течение заранее определенного периода времени,
причем процент меченного радиоизотопом испытуемого вещества, не подвергшегося метаболизму, определяет метаболическую стабильность испытуемого вещества в присутствии биологической пробы, содержащей экспрессированную САО.
8. Способ по п.6 или 7, в котором биологическая проба является пробой, отобранной из группы, включающей кровь, плазму, сыворотку, артерию, пуповину, печень, подвздошную кишку и легкое.
9. Способ по п.8, в котором биологическая проба получена от человека.
10. Способ по п.8, в котором биологическая проба получена от животного.
11. Способ по п.9 или 10, в котором человека или животное подвергают воздействию до получения биологической пробы.
12. Способ по п.11, при котором методы воздействия на человека или животных выбирали из группы, включающей лечение одним или несколькими лекарствами, индукцию одного или нескольких аспектов болезненного состояния, хирургические процедуры и генетические изменения.
13. Способ по п.1 или 6, в котором количество испытуемого вещества определяют методом, выбираемым из группы, к которой относится масс-спектрометрия, высокоэффективная жидкостная хроматография, жидкостная хроматография/масс-спектрометрия, жидкостная хроматография/масс-спектрометрия/масс-спектрометрия и жидкостная хроматография/сцинтилляционное детектирование.
14. Способ по п.1 или 6, в котором одну или более стадий выполняют роботизированные устройства.
15. Способ по п.1 или 6, в котором метаболическую стабильность испытуемого вещества определяют путем измерения одного или нескольких метаболитов испытуемого вещества в дополнение к измерению количества испытуемого вещества или вместо него.
16. Способ определения профиля метаболической стабильности испытуемого вещества, и такой способ предполагает
a) получение значения метаболической стабильности испытуемого вещества, инкубированного в присутствии клетки, содержащей экспрессированную САО, в соответствии со способом по п.1;
b) получение биологической пробы, содержащей экспрессированную САО;
c) добавление испытуемого вещества к биологической пробе;
d) инкубирование испытуемого вещества с биологической пробой в течение заранее определенного периода времени;
e) измерение количества испытуемого вещества в течение заранее определенного периода времени; и
f) сопоставление количества испытуемого вещества за заранее определенный период времени с количеством испытуемого вещества в контрольной пробе с тем чтобы установить значение, определяющее метаболическую стабильность испытуемого вещества в присутствии биологической пробы, содержащей экспрессированную САО,
причем значение метаболической стабильности испытуемого вещества в присутствии клетки, содержащей экспрессированную САО, сопоставляют со значением метаболической стабильности испытуемого вещества в присутствии биологической пробы, содержащей экспрессированную САО, что позволяет получить профиль метаболической стабильности испытуемого вещества.
17. Способ определения профиля метаболической стабильности меченного радиоизотопом испытуемого вещества, и такой способ предполагает
a) получение значения метаболической стабильности меченного радиоизотопом испытуемого вещества, инкубированного в присутствии клеточного лизата, содержащего экспрессированную САО, в соответствии со способом по п.2;
b) получение биологической пробы, содержащей экспрессированную САО;
c) добавление меченного радиоизотопом испытуемого вещества к биологической пробе;
d) инкубирование меченного радиоизотопом испытуемого вещества с биологической пробой в течение заранее определенного периода времени;
e) измерение количества меченного радиоизотопом испытуемого вещества в течение заранее определенного периода времени; и
f) определение метаболической стабильности меченного радиоизотопом испытуемого вещества на основании процентной доли меченного радиоизотопом испытуемого вещества, не подвергшегося метаболизму в заданный период времени,
причем значение метаболической стабильности меченного радиоизотопом испытуемого вещества в присутствии клеточного лизата, содержащего экспрессированную САО, сопоставляют со значением метаболической стабильности меченного радиоизотопом испытуемого вещества в присутствии биологической пробы, содержащей экспрессированную САО, что позволяет получить профиль метаболической стабильности испытуемого вещества.