Цитоархитектоника лимфатических узлов переднего отдела желудочно-кишечного тракта нутрий в онтогенезе

Цитоархитектоника лимфатических узлов переднего отдела желудочно-кишечного тракта нутрий в онтогенезе

ЮА. Киселева, аспирантка, А.Б. Панфилов, д.б.н., профессор, Вятская ГСХА

Изучение качественного состава лимфоидной ткани у нутрий является довольно актуальным и представляет определенный научный интерес для морфологов, физиологов и микробиологов.

В анализируемой общедоступной литературе нам не встретились сведения о клеточном составе лимфатических узлов переднего отдела желудочно-кишечного тракта, что и привело нас к изучению данной проблемы.

Цель работы — изучить цитоархитектонику лимфатических узлов головы, пищевода и желудка у нутрий.

Материалы, методы исследования. Исследовались самки нутрий 1, 8 и 32 месяцев. Всего исследовано 21 животное. Кусочки лимфатических узлов переднего отдела желудочно-кишечного тракта фиксировали в нейтральном формалине. Материал по общепринятой методике заливали в парафин. На микротоме изготовляли срезы толщиной 5 микрометров. Полученные срезы окрашивали гематоксилином Гарриса с д окраской эозином, метиловым зеленым-пиронином по Унна.

Для электронно-микроскопического исследования кусочки лимфатических узлов фиксировали в 2-4%-ном растворе глутарового альдегида. Через 4 часа кусочки промывали трижды по 30 минут в фосфатном буфере с тоничностью 400 Мосм и дофиксировали 1%-ным раствором четырехокиси осмия в течение 3 часов. Затем кусочки погружали в галловую кислоту на 30 минут. После дегидратации в спиртах и абсолютном ацетоне материал заливали в аралдит. На ультра-

микротоме типа LKB-5 (Швеция и NOVA) получали полутонкие и ультратонкие срезы. Полутон-кие срезы (1 мкм) окрашивали 1%-ным раствором толуидинового синего. Ультратонкие срезы (46—60 нм) контрастировали 5 минут в уксуснокислом ураниле и 5—15 секунд — в цитрате свинца по Рейнольдсу и просматривали на электронном микроскопе JEM. Подсчет клеточного состава по морфофункциональным зонам в лимфатических узлах производили под микроскопом МБИ-6 (объектив 90 окуляр 7) специализированной, усовершенствованной сеткой С.Б. Стефанова [1]. Идентификацию учтенных в работе клеток проводили по Г.С. Катинас [2].

Полученные в работе цифровые данные обработаны методами вариационной статистики. Для каждой величины определяли среднее Х1 арифметическое значение и доверительный интервал средних арифметических величин — I с уровнем достоверности 95%.

Результаты исследования и их обсуждение. Гистологически в лимфатических узлах переднего отдела желудочно-кишечного тракта нутрий одномесячного возраста все морфофункциональные зоны сформированы. От капсулы отходят трабекулы. В корковом веществе обнаруживаются вторичные лимфоидные узелки, а в мозговом видны и первичные. Основными клетками лимфатических узлов являются лимфоциты. Они составляют 78%. В корковом веществе узлов процент лимфоцитов и ретикулярных клеток варьирует. Рассматривая функциональные зоны лимфатических узлов, видим, что лимфоциты преобладают в герминативном центре лимфоидных узелков (70—76%), в паракортикальной зоне — 80%. Иммунобласты встречаются в гермина-

1. Цитоархитектоника лимфатических узлов у нутрии в возрасте 1 месяца

Клетки Зона лимфоидного узелка

корковое вещество герминативный центр паракортикальная зона мозговое вещество

Подчелюстной лимфатический узел

Лимфоциты 54,0±1,23 93,0±1,78 84,0±2,88 81,0±4,32

Иммунобласты - 2,0±0,22 4,0±1,44 3,14±1,42

Плазмобласты 0,57±0,14 1,0±0,12 5,14±0,43 4,0±0,12

Незрелые плазматические 1,43±0,12 0,67±0,12 0,34±0,12 1,0±0,24

Зрелые плазматические - - 0,56±0,12 0,76±0,31

Макрофаги - - - 2,42±0,12

Ретикулярные 38,0±2,17 3,33±0,12 4,0±0,72 6,0±0,44

Митозы - - 2,1±0,12 -

Тучные клетки 3,0±0,12 - - 1,68±0,31

Глубокий шейный лимфатический узел

Лимфоциты 58,34±3,46 96,0±1,44 80,0±1,34 72,1±1,42

Иммунобласты - - 2,3±0,14 1,17±0,22

Плазмобласты - 0,9±0,12 8,51±0,33 7,43±1,13

Незрелые плазматические 3,67±1,2 - 4,22±0,67 3,33±0,12

Зрелые плазматические - - - 2,3±0,14

Макрофаги 1,33±0,16 - 0,33±0,12 1,45±0,22

Ретикулярные 35,43±1,33 3,1±0,48 4,58±0,67 10,3±1,5

Митозы - - - 0,72±0,22

Тучные клетки 1,23±0,46 - - 1,3±0,24

Желудочно-поджелудочный лимфатический узел

Лимфоциты 66,61±3,77 94,0±1,44 78,45±2,23 75,0±4,32

Иммунобласты - 0,43±0,24 2,45±1,41 4,13±0,48

Плазмобласты 2,3±0,13 0,68±0,44 11,33±1,51 4,48±1,14

Незрелые плазматические 1,45±0,22 - 1,34±0,12 0,75±0,12

Зрелые плазматические 0,67±0,31 - 0,36±0,14 -

Макрофаги 2,85±0,12 - - 2,1±0,14

Ретикулярные 24,33±2,17 5,0±0,24 5,0±0,76 13,2±1,15

Митозы 0,65±0,13 - 0,41±0,12 0,34±0,12

Тучные клетки 1,14±0,16 - 0,66±0,14 -

2. Цитоархитектоника лимфатических узлов у нутрии в возрасте 8 месяцев

Зона лимфоидного узелка

Клетки корковое герминативный паракортикальная мозговое

вещество центр зона вещество

1 2 3 4 5

Подчелюстной лимфатический узел

Лимфоциты 88,7±1,67 95,34±0,48 73,68±2,16 88,0±1,92

Иммунобласты 2,0±0,72 - 3,34±0,22 1,34±0,48

Плазмобласты 3,67±0,68 3,0±0,48 13,54±0,12 5,16±0,22

Незрелые плазматические 0,29±0,12 0,33±0,12 - 0,34±0,22

Зрелые плазматические - - 0,34±0,24 0,24±0,12

Макрофаги - - - -

Ретикулярные 5,0±1,67 4,33±0,72 8,44±0,22 4,93±0,68

Митозы 0,34±0,12 - - -

Тучные клетки - - 0,66±0,22 -

Глубокий шейный лимфатический узел

Лимфоциты 78,08±1,67 94,67±0,48 81,33±1,48 83,66±1,48

Иммунобласты 1,0±0,12 1,0±0,12 3,34±0,12 2,0±0,24

Плазмобласты 3,14±1,42 2,0±0,72 11,0±1,2 7,0±0,44

Незрелые плазматические - 0,33±0,12 0,33±0,12 -

Зрелые плазматические 1,0±0,31 - - -

Макрофаги - - 2,0±0,48 0,34±0,22

Ретикулярные 16,78±1,34 2,0±0,72 11,0±1,2 7,0±0,48

Митозы - - 1,0±0,12 -

Тучные клетки - - 0,66±0,12 -

продолжение таблицы 2

1 2 3 4 5

Желудочно-поджелудочный лимфатический узел

Лимфоциты 83,73±2,4 94,0±0,48 79,0±1,4 84,0±0,72

Иммунобласты 1,0±0,12 0,66±0,14 6,0±0,14 2,0±0,22

Плазмобласты 4,0±0,33 1,66±0,22 7,0±1,1 2,0±0,22

Незрелые плазматические - 0,33±0,14 2,0±0,48 -

Зрелые плазматические 1,0±0,31 - - -

Макрофаги 0,33±0,12 - 0,66±0,12 -

Ретикулярные 9,3±0,48 2,0±0,07 5,0±1,51 12,0 ±0,12

Митозы - 0,34±0,24 - -

Тучные клетки 0,64±0,12 - 0,34±0,14 -

3. Цитоархитектоника лимфатических узлов у нутрии в возрасте 32 месяцев

Зона лимфоидного узелка

Клетки корковое герминативный паракортикальная мозговое

вещество центр зона вещество

Подчелюстной лимфатический узел

Лимфоциты 73,33±3,5 81,0±5,6 78,7±8,51 80,54±1,78

Иммунобласты - 3,1±0,48 - 1,13 ±0,41

Плазмобласты - 0,72±0,31 3,45±0,24 -

Незрелые плазматические - - - -

Зрелые плазматические - 3,12±0,64 6,34±0,43 -

Макрофаги - 3,75±0,48 3,86±1,03 5,7±1,2

Ретикулярные 26,0±5,2 8,31±1,12 8,13± 1,41 12,0±1,62

Митозы - - - 0,63±0,31

Тучные клетки - - - -

Глубокий шейный лимфатический узел

Лимфоциты 68,0±8,5 91,0±4,8 84,0±2,1 82,52±4,8

Иммунобласты - 0,51±0,14 0,82±0,32 0,61±0,16

Плазмобласты 1,0±0,6 3,1±0,24 2,12±1,1 -

Незрелые плазматические - 0,33±0,14 - -

Зрелые плазматические 1,34±0,38 3,06±1,8 4,8±0,44 5,1±1,2

Макрофаги - 1,0±0,63 0,36±0,22 0,81±0,32

Ретикулярные 29,64±1,4 - 7,9±1,4 11,0±1,6

Митозы - 1,0±0,53 - -

Тучные клетки - - - -

Желудочно-поджелудочный лимфатический узел

Лимфоциты 66,0±1,2 88,0±2,4 79,0±5,6 84,0±8,4

Иммунобласты - 1,0±0,6 - 0,34±0,12

Плазмобласты - 0,66±0,22 3,0±0,31 1,33±0,22

Незрелые плазматические 1,33±0,14 1,0±0,66 - -

Зрелые плазматические 4,5±1,2 1,0±0,66 - 0,33±0,06

Макрофаги 0,36±,022 0,34±0,04 - 14,0±0,93

Ретикулярные 27,81±3,4 7,0±1,4 18,0±1,16 -

Митозы - - - -

Тучные клетки - 1,0±0,24 - -

тивном центре и в паракортикальной зоне лимфатических узлов — от 2 до 4%, и в мозговом веществе — до 5% (табл. 1).

Доля малодифференцированных, дифференцирующихся и дифференцированных клеток составляет 1—2%. Около 8% плазмобластов встречаются в паракортикальной зоне. Герминативные центры вторичных лимфоидных узелков содержат плазмо- и иммунобласты, незрелые и зрелые плазматические клетки, митотически делящиеся, макрофаги и тучные клетки. Митотически делящиеся клетки встречаются до 2%, преобладают в

паракортикальной зоне. Тучные клетки встречаются до 3% во всех зонах лимфатических узлов. Число макрофагов неустойчиво и составляет 1-3%.

Доля малодифференцированных, дифференцирующихся и дифференцированных клеток составляет 1-2%. Около 8% плазмобластов встречаются в паракортикальной зоне. Герминативные центры вторичных лимфоидных узелков содержат плазмо- и иммунобласты, незрелые и зрелые плазматические клетки, митотически делящиеся, макрофаги и тучные клетки. Митоти-

Рис. 1 - Электронная микрофотография венулы лимфоузла. Ув. 5000

чески делящиеся клетки встречаются до 2%, преобладают в паракортикальной зоне. Тучные клетки встречаются до 3% во всех зонах лимфатических узлов. Число макрофагов неустойчиво и составляет 1—3%. К 8-месячному возрасту в лимфатических узлах больше обнаруживается ретикулярных клеток, а также тучных (табл. 2).

К 32 месяцам основными клетками лимфатического узла являются лимфоциты — до 80%. Ретикулярные клетки составляют 26%, в глубоком шейном лимфатическом узле — до 29,6% (табл. 3).

Большая высота эндотелиальных клеток (рис. 1); последние почти закрывают весь просвет сосуда; способность лимфоцитов (рис. 2) проникать через стенку венулы.

По данным исследований можно сделать следующие выводы.

В лимфатических узлах переднего отдела пищеварительного тракта дифференцируются все морфофункциональные зоны. У одномесячных животных в корковых плато встречаются первичные лимфоидные узелки.

Второе место по количеству занимают ретикулярные клетки — до 30%. Число ретикулярных клеток возрастает при инволютивных процессах.

Рис. 2 - Первичный лимфоидный узелок в кортикальной зоне лимфатического узла. Ув. 100

Дифференцировка клеток, способных к выработке антител (иммунобласты, зрелые и незрелые плазмоциты), происходит преимущественно в герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков коры и в мякотных волокнах.

Количество макрофагов увеличивается с возрастом.

Во всех лимфатических узлах присутствуют тучные клетки.

C 32-месячного возраста у нутрий отмечаются инволютивные процессы лимфатических узлов: сглаживание зон, появление реактивных лимфатических узелков, сужение коры, уменьшение количества лимфоцитов, снижается интенсивность лимфоцитопоэза.

Литература

1. Ускоренный способ количественного сравнения морфологических признаков / под ред. C^. ^ефанова, H.C. Кухаренко. Благовещенск: РИО Амурполиграфиздат,

1988. 27 с.

2. Катинас, T.C. Динамика количества клеток лимфоидного ряда в паракортикальной зоне лимфатических узлов у мышей C/S7// Временная и пространственная организация тканей» / T.C. Катинас, О.Г. Лешко, И.А. Баженова. Л.: Изд-во 1-го Ленинградского медицинского института, 1981. C. 47-S4.

3. Cапин, М.Р. Иммунная система человека / М.Р. Cапин,

Л.Е. Этинген. М.: Медицина, 1996. 302.