ОТЛИЧНЫЕ ОТ ЧЕЛОВЕКА ЖИВОТНЫЕ С ГУМАНИЗИРОВАННЫМ ГЕНОМ СИГНАЛЬНОГО РЕГУЛЯТОРНОГО БЕЛКА

1. Мышь, геном которой содержит замещение экзонов 2, 3 и 4 гена SIRPα мыши в эндогенном локусе SIRPα мыши на экзоны 2, 3 и 4 гена SIRPα человека с образованием гуманизированного гена SIRPα, причем указанный гуманизированный ген SIRPα функционально связан с мышиным промотором SIRPα в указанном эндогенном локусе SIRPα мыши и экспрессирует у указанной мыши гуманизированный белок SIRPα, содержащий внеклеточную часть человеческого белка SIRPα, кодируемого указанным геном SIRPα человека, и внутриклеточную часть мышиного белка SIRPα, кодируемого указанным геном SIRPα мыши.
2. Мышь по п. 1, у которой гуманизированный ген SIRPα содержит экзоны 1, 5, 6, 7 и 8 указанного гена SIRPα мыши.
3. Мышь по п. 1 или 2, у которой указанный белок SIRPα человека содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4.
4. Мышь по п. 3, у которой указанный гуманизированный белок SIRPα содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5.
5. Мышь по п. 1 или 2, причем мышь не экспрессирует мышиный белок SIRPα.
+
6. Мышь по п. 1 или 2, у которой указанный гуманизированный белок SIRPα экспрессируется на клеточной поверхности у указанной мыши и поддерживает приживление человеческих гемопоэтических стволовых CD34-клеток.
7. Выделенная клетка или ткань мыши, геном которой содержит замещение экзонов 2, 3 и 4 гена SIRPα мыши в эндогенном локусе SIRPα мыши на экзоны 2, 3 и 4 гена SIRPα человека с образованием гуманизированного гена SIRPα, причем указанный гуманизированный ген SIRPα функционально связан с мышиным промотором SIRPα в указанном эндогенном локусе SIRPα мыши и кодирует гуманизированный белок SIRPα, содержащий внеклеточную часть человеческого белка SIRPα, кодируемого
указанным геном SIRPα человека, и внутриклеточную часть мышиного белка SIRPα, кодируемого указанным геном SIRPα мыши.
8. Выделенная клетка или ткань по п. 7, в которой гуманизированный ген SIRPα содержит экзоны 1, 5, 6, 7 и 8 указанного гена SIRPα мыши.
9. Выделенная клетка или ткань по п. 7 или 8, в которой клетка или ткань не экспрессирует мышиный белок SIRPα.
10. Способ получения мыши, предусматривающий:
(a) замещение экзонов 2, 3 и 4 гена SIRPα мыши в эндогенном локусе SIRPα мыши в мышиной ЭС клетке на экзоны 2, 3 и 4 гена SIRPα человека с образованием гуманизированного гена SIRPα, причем указанный гуманизированный ген SIRPα функционально связан с мышиным промотором SIRPα в указанном эндогенном локусе SIRPα мыши и кодирует гуманизированный белок SIRPα, содержащий внеклеточную часть человеческого белка SIRPα, кодируемого указанным геном SIRPα человека, и внутриклеточную часть мышиного белка SIRPα, кодируемого указанным геном SIRPα мыши, получая таким образом модифицированную ЭС клетку мыши, содержащую указанный гуманизированный ген SIRPα; и
(b) получение мыши с использованием модифицированной ЭС клетки, полученной на стадии (а).
11. Способ трансплантации человеческих клеток мыши, предусматривающий стадии:
(a) получение мыши по любому из пп. 1-6; и
(b) трансплантации одной или нескольких человеческих клеток мыши.
12. Способ по п. 11, при котором человеческие клетки представляют собой человеческие гемопоэтические стволовые клетки.
13. Способ, предусматривающий:
(а) получение одной или нескольких клеток мыши, геном которой содержит замещение экзонов 2, 3 и 4 гена SIRPα мыши в эндогенном локусе SIRPα мыши на
экзоны 2, 3 и 4 гена SIRPα человека с образованием гуманизированного гена SIRPα, причем указанный гуманизированный ген SIRPα функционально связан с мышиным промотором SIRPα в указанном эндогенном локусе SIRPα мыши и кодирует гуманизированный белок SIRPα, содержащий внеклеточную часть человеческого белка SIRPα, кодируемого указанным геном SIRPα человека, и внутриклеточную часть мышиного белка SIRPα, кодируемого указанным геном SIRPα мыши;
(b) инкубацию одной или нескольких клеток, полученных на стадии (а), с меченым субстратом; и
(c) измерение фагоцитоза меченого субстрата с помощью одной или нескольких клеток стадии (b).
14. Способ, предусматривающий
(a) получение мыши в соответствии с любым из пп. 1-6;
(b) воздействие на мышь антигеном, и
(c) измерение фагоцитоза антигена с помощью одной или нескольких клеток мыши.
15. Способ оценки терапевтической эффективности лекарственного средства, направленно воздействующего на клетки человека, предусматривающий:
(a) получение мыши в соответствии с любым из пп. 1-6;
(b) трансплантацию одной или нескольких человеческих клеток мыши;
(c) введение потенциального лекарственного средства указанной мыши, и
(d) мониторинг человеческих клеток у мышу для определения терапевтической эффективности потенциального лекарственного средства.