Динамика иммуноглобулинов в крови поросят при раннем отъеме и их коррекция

УДК 619:616(68.41.63) А.В. Андреева, О.Н. Николаева

ДИНАМИКА ИММУНОГЛОБУЛИНОВ В КРОВИ ПОРОСЯТ ПРИ РАННЕМ ОТЪЕМЕ И ИХ КОРРЕКЦИЯ

Перевод свиноводства на промышленную основу резко изменил условия среды обитания животных. Технологические приемы, используемые на крупных свиноводческих фермах, часто не обеспечивают биологические потребности свиней. Несбалансированность рационов, нарушение параметров микроклимата, отсутствие активного моциона, нерациональное применение антибиотиков приводят к нарушению обмена веществ, снижению естественной резистентности и иммунологической реактивности организма животных, как следствие - к высокой заболеваемости и низкой продуктивности свиней. Поэтому вопросы, связанные с изысканием новых способов и средств повышения резистентности и продуктивности животных, остаются актуальными. Проведено изучение влияния фитопробиотиков на основе Lactobacteriumplantarum 8P-A3 и лекарственного растительного сырья на динамику иммуноглобулинов А, М, G в сыворотке крови поросят крупной белой породы при раннем отъеме. Определение содержания иммуноглобулинов А M, G в сыворотке крови поросят проведено методом радиальной иммунодиффу-зии по Манчини в модификации О.Н. Грызловой до начала опыта, на 10, 20 и 30-й дни от начала опыта. В результате проведенных исследований установлено, что применение пробиотических композиций способствует коррекции показателей гуморального иммунитета при раннем отъеме поросят. При использовании в рационах поросят фитопробиотиков существенно изменяется насыщение крови иммуноглобулинами. Так, количество иммуноглобулина А превышало показатели контрольной группы на 30-й день исследований в 2,58 раза; иммуноглобулина М - в 1,31 раза; иммуноглобулина G - в 2,2 раза соответственно. Таким образом, применение фитопробиотиков способствует поддержанию уровня гуморального иммунитета на достаточно высоком уровне.

Ключевые слова: поросята, ранний отъем, иммуноглобулины, фитопробиотик, гуморальный иммунитет.

Введение

В отъемный период поросята подвергаются воздействию двух основных стресс -факторов - отлучению от свиноматки и перехода от одного корма к другому [1]. В терапевтической практике все чаще стали обращаться к пробиотическим препаратам, их использование позволяет уменьшить нагрузку на иммунную систему. Включение про-биотиков в технологию выращивания молодняка - наиболее современный способ профилактики послеотъемного стресса и как его следствие - желудочных болезней; основан он на экологически безопасных механизмах поддержания высокого уровня колонизационной резистентности кишечника [2-6]. По данным В.К. Кретинина (2003) [7], микроорганизмы, входящие в состав пробиотиков, активизируют Т и В -системы иммунитета, влияют на выработку иммуноглобулина А, обусловливающего местный иммунитет слизистой оболочки кишечника [8; 9]. Одна из важных функций лактобактерий -иммуностимулирующая, связанная с участием в поддержании «рабочего» состояния специфических и неспецифических, гуморальных и клеточных механизмов иммунитета [10]. Под влиянием лактобактерий изменяется комплекс факторов неспецифической резистентности: повышаются содержание лизоцима, бактерицидная активность сыворотки крови, фагоцитарная активность нейтрофилов и др.; это обусловлено универсальными иммуномодулирующими свойствами пептидогликана и липополисахарида клеточной стенки бактерий [11].

©¡Андреева А.В., Николаева О.Н., 2016

В связи с вышеизложенным целью наших исследований явилось изучение влияния фитопробиотиков на основе Lactobacteriumplantarum 8P-A3 и лекарственного растительного сырья на динамику иммуноглобулинов при раннем отъеме [12].

Объекты и методы

Для достижения поставленной цели были сформированы три группы поросят раннего отъемного возраста (30-дневный отъем) крупной белой породы. Поросят контрольной группы содержали в условиях принятой технологии содержания и кормления: вторая группа получала жидкий пробиотик лактобактерин в два этапа ежедневно по 8 мл в течение 10 дн. с интервалом в 10 дн.; третья группа - фитопробиотик с люцерной посевной и барбарисом обыкновенным по вышеназванной схеме.

До начала опыта, затем на 10, 20, 30-й дни от его начала проводилось взятие крови. Количественное определение иммуноглобулинов А, М и G в сыворотке крови телят проводили методом радиальной иммунодиффузии по Манчини в модификации О.Н. Грызловой. Определяли количественно иммуноглобулины А, М и О в сыворотке крови поросят методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини (1965). Пластинки из 3%-ного агара «Дифко» смешивали с антисывороткой. После застывания геля в нем делали лунки диаметром 2 мм на расстоянии 15 мм друг от друга. При определении содержания: иммуноглобулина G пробы сыворотки крови разводили буфером рН 8,0 в 20 и 30 раз; иммуноглобулина М пробы сыворотки крови разводили в 5 и 10 раз, иммуноглобулина А пробы сыворотки крови использовали неразведенными. Параллельно с опытными пробами на каждом стекле осуществляли контроль - разливали в лунки стандартный препарат определенного иммуноглобулина. После заполнения лунок стекла помещали в эксикатор с водой и выдерживали при комнатной температуре. По окончании сроков инкубации стекла извлекали из эксикатора и измеряли диаметр кольца преципитата вокруг лунок с помощью линейки Беринг -Верке, после окрашивания агаровых пластин. Для расчета содержания иммуноглобулинов в испытываемых пробах строили калибровочную кривую на полулогарифмической бумаге: на оси ординат откладывали концентрацию белка в пробах стандарта, по оси абсцисс - диаметр кольца преципитации. Калибровочную кривую строили отдельно по каждому иммуноглобулину определенного класса. Количество иммуноглобулина в испытуемой пробе устанавливали при сравнении диаметра кольца преципитации вокруг ее лунки с калибровочной кривой.

Результаты исследований

В результате проведенных исследований установлено, что у поросят контрольной группы иммуноглобулины класса А в процессе опыта находились на уровне 0,66 ± 0,02 мг/мл - 0,76 ± 0,02 мг/мл. В крови второй группы уровень иммуноглобулина А на 10-й день опыта превышал контрольные значения в 1,20 раза (на 0,14 мг/мл); на 20-й день - в 1,46 раза (на 0,33 мг/мл); на 30-й день - в 1,60 раза (на 0,46 мг/мл). Содержание иммуноглобулина А в крови поросят третьей группы повысилось по сравнению с контролем на 10-й день опыта в 1,55 раза (на 0,38 мг/мл); на 20-й день -в 2,15 раза (на 0,82 мг/мл); на 30-й день - в 2,58 раза (на 1,20 мг/мл) (рис. 1).

Уровень иммуноглобулинов М в крови поросят контрольной группы за период опытов колебался в пределах от 1,62 до 1,71 мг/мл. В крови поросят второй группы содержание иммуноглобулина М превышало контрольный уровень на 10-й день -в 1,08 раза (на 0,12 мг/мл); на 20 -й день - в 1,21 раза (на 0,35 мг/мл); на 30-й день -в 1,31 раза (на 0,53 мг/мл). Содержание иммуноглобулинов М в крови поросят, получавших фитопробиотик, изменялось в сторону увеличения и превысило контрольные значения на 10-й день опыта в 1,25 раза (на 0,41 мг/мл); на 20 -й день - в 1,55 раза (на 0,92 мг/мл); на 30 -й день - в 1,85 раза (на 1,45 мг/мл) (рис. 2).

1-я контрольная ----- 2-я группа

--♦- 3-я группа

1-я контрольная ----- 2-я группа

--♦-- 3-я группа

Рис. 1. Динамика иммуноглобулинов А

Рис. 2. Динамика иммуноглобулинов М

Фон 10 Дни 20

1-я контрольная

--♦-- 3-я группа

30

2-я группа

Рис. 3. Динамика иммуноглобулинов в

Иммуноглобулин О в крови поросят первой контрольной группы был в пределах от 4,32 до 4,69 мг/мл. В крови поросят второй группы иммуноглобулин О превышал контрольные значения на 10-й день опыта в 1,19 раза (на 0,84 мг/мл); на 20 -й день -в 1,37 раза (на 1,67 мг/мл); на 30 -й день - в 1,54 раза (на 2,53 мг/мл). В крови поросят третьей группы уровень иммуноглобулина О повысился по сравнению с контролем к 10-му дню исследований в 1,50 раза (на 2,20 мг/мл); к 20-му дню - в 1,88 раза (на 3,99 мг/мл); к 30-му дню - в 2,20 раза (на 5,64 мг/мл) (рис. 3).

Заключение

Таким образом, анализируя динамику иммуноглобулинов в крови поросят при раннем отъеме, можно отметить, применение фитопробиотиков способствует поддержанию уровня гуморального иммунитета на достаточно высоком уровне длительное время, свидетельствуя о иммунокоррегирующей способности вышеназванных препаратов.

A. V. Andreeva, O.N. Nikolaeva

Dynamics of immunoglobulins in blood of pigs at early depriving

and their correction

Transfer of pig-breeding to the production basis sharply changed conditions of the habitat of animals. At the same time the processing methods used on large-scale pig-breeding farms often do not provide biological needs of pigs. Imbalance of diets, violation of parameters of a microclimate, lack of the fissile exercise, nonrational application of antibiotics lead to a metabolic disorder, decrease in natural resistance and immunologic reactivity of an organism of animals and, as a result, to high incidence and low efficiency of pigs. There fore questions, the bound to research of new ways and means of increase in resistance and efficiency of animals, remain urgent. Studying of influence of phytoprobioticson the basis of Lactobacteriumplantarum 8P-A3 and medicinal vegetable raw materials on dynamics of immunoglobulins A, M, G in blood serum of pigs of large white breed is carried out at early depriving. Determination of content of A, M, G immunoglobulins in blood serum of pigs was carried out by method of a radial immunodiffusion according to Mancini to O.N. Gryzlova's modifications prior to experience, for the 10th, 20th and 30th days from the beginning of an opta. As a result of the conducted researches it is established that application of probiotic compositions promotes correction of indexes of humoral immunity at early depriving of pigs. When using in diets of pigs of phytoprobiotics blood saturation by immunoglobulins significantly changes. So, the amount of immunoglobulin A exceeded indicators of control group for the 30th day of researches by 2,58 times; immunoglobulin M - by 1,31 times; immunoglobulin G - by 2,2 times respectively. Thus, application of phytoprobiotics promotes maintaining of level of humoral immunity on rather high level.

Keywords: pigs, early depriving, immunoglobulins, phytoprobiotic, humoral immunity.

Список литературы

1. Козьменко В. Адаптация поросят-отъе-мышей / В. Козьменко, Е. Павличенко, Н. Нали-вайская // Животноводство России. - 2007. - № 6. -С. 27.

2. Андреева А.В. Профилактика желудочно-кишечных расстройств у новорожденных телят и поросят отъемного периода фитопробиотиками / А.В. Андреева, О.Н. Николаева // Вестн. Башкир. гос. аграр. ун-та. - 2010. - № 2. - С. 47-52.

3. Коррекция микробиоценоза кишечника поросят при отъемном стрессе / А.В. Андреева [и др.] // Уч. зап. Казан. гос. акад. вет. медицины им. Н.Э. Баумана. - 2012. - Т. 211. - С. 16-21.

4. Николаева О.Н. Синбиотики - новое поколение биологически активных веществ / О.Н. Николаева, А.В. Андреева // Разработка и испытание здоровьесберегающих технологий получения продукции животноводства : материалы Междунар. науч.-практ. конф. - 2008. - С. 95-99.

5. Использование пробиотиков и микробных препаратов направленного действия при выращивании молодняка / А.В. Андреева [и др.] // Состояние, проблемы и перспективы производства и переработки сельскохозяйственной продукции : материалы Междунар. науч.-практ. конф., посвящ. 10-летию факультета пищевых технологий ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет», факультет пищевых технологий, кафедра технологии мяса и молока. - 2011. - С. 4-10.

References

1. Koz'menko V. Adaptacija porosjat-otjo-myshej / V. Koz'menko, E. Pavlichenko, N. Naliva-jskaja // Zhivotnovodstvo Rossii. - 2007. - № 6. -S. 27.

2. Andreeva A.V. Profilaktika zheludochno-kishechnyh rasstrojstv u novorozhdennyh teljat i po-rosjat ot"emnogo perioda fitoprobiotikami / A.V. Andreeva, O.N. Nikolaeva // Vestn. Bashkir. gos. agrar. un-ta. - 2010. - № 2. - S. 47-52.

3. Korrekcija mikrobiocenoza kishechnika po-rosjat pri ot"emnom stresse / A.V. Andreeva [i dr.] // Uch. zap. Kazan. gos. akad. vet. mediciny im. N.Je. Baumana. - 2012. - T. 211. - S. 16-21.

4. Nikolaeva O.N. Sinbiotiki - novoe po-kolenie biologicheski aktivnyh veshhestv / O.N. Nikolaeva, A.V. Andreeva // Razrabotka i ispy-tanie zdorov'esberegajushhih tehnologij polu-chenija produkcii zhivotnovodstva : materialy Mezhdunar. nauch.-prakt. konf. - 2008. - S. 95-99.

5. Ispol 'zovanie probiotikov i mikrobnyh preparatov napravlennogo dejstvija pri vyrashhiva-nii molodnjaka / A.V. Andreeva [i dr.] // Sos-tojanie, problemy i perspektivy proizvodstva i pere-rabotki sel'skohozjajstvennoj produkcii : materialy Mezhdunar. nauch.-prakt. konf., posvjashh. 10-letiju fakul'teta pishhevyh tehnologij FGBOU VPO "Bashkirskij gosudarstvennyj agrarnyj universitet", fakul'tet pishhevyh tehnologij, kafedra tehnologii mjasa i moloka. - 2011. -S. 4-10.

6. Сравнительная оценка терапевтической эффективности ряда препаратов при диарее поросят, вызванной условно-патогенной микрофлорой / В.И. Плешакова [и др.] // Тр. Кубанского гос. аграр. ун-та. - 2009. - № 21. - С. 143-146.

7. Кретинин В.К. Изучение иммунобиологического статуса животных / В.К. Кретинин, Е.А. Михеева // Гигиена содержания и кормления животных - основа сохранения их здоровья и получения экол. чистой продукции : материалы Всерос. науч.-произв. конф. - Орел, 2000. -С. 81-82.

8. Тараканов Б. Производственное испытание лактоамиловорина при скармливании его поросятам / Б. Тараканов, Л. Пузач // Свиноводство. - 2001. - № 3. - С. 2-3.

9. Андреева А.В. Естественная резистентность и микроэкология кишечника новорожденных телят с расстройствами органов пищеварения / А.В. Андреева, О.Н. Николаева // Эффективность адаптивных технологий в растениеводстве и животноводстве : материалы Всерос. науч.-практ. конф., посвящ. 70-летию почетного гражданина УР, председателя СХПК-Племзавод имени Мичурина Вавожского района УР В.Е. Калинина. Ижевск : Ижевская гос. с.-х. академия. - 2008. -С. 220-223.

10. Зорина В.В. Модуляция клеток иммунной системы лактобактериями / В.В. Зорина, Т.Н. Николаева, В.М. Бондаренко // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -2004. - № 6. - С. 57-59.

11. Влияние пробиотика «Ветоспорин» на гематологический статус новорожденных телят / А.В. Андреева [и др.] // Уч. зап. Казанс. гос. акад. вет. медицины им. Н.Э. Баумана. - 2012. -Т. 211. - С. 21-26.

12. Назырова Н.Р. Влияние экстрактов лекарственных растений на биологическую активность штамма Lactobacteriumplantarum 8P-A3: автореф. дис. ... канд. биол. наук / Н.Р. Назырова / Филиал «Иммунопрепарат» ФГУП «НПО «Мик-роген» МЗ РФ. - Уфа, 2007. - 23 с.

Андреева Альфия Васильевна, д-р

биол. наук, проф., Башкирский ГАУ, alfia_andreeva@mail.ru; Николаева Оксана Николаевна, канд. биол. наук, доц., Башкирский ГАУ, oksananik83@mail.ru.

6. Sravnitel'naja ocenka terapevticheskoj jef-fektivnosti jda preparatov pri diaree porosjat, vyzvannoj uslovno-patogennoj mikrofloroj / V.I. Ple-shakova [i dr.] // Tr. Kubanskogo gos. agrar. un-ta. -2009. - № 21. - S. 143-146.

7. Kretinin V.K. Izuchenie immunobiolog-icheskogo statusa zhivotnyh / V.K. Kretinin, E.A. Miheeva // Gigiena soderzhanija i kormle-nija zhivotnyh - osnova sohranenija ih zdorov'ja i poluchenija jekol. chistoj produkcii : materialy Vseros. nauch.-proizv. konf. - Orel, 2000. -S. 81-82.

8. Tarakanov B. Proizvodstvennoe ispytanie laktoamilovorina pri skarmlivanii ego porosjatam / B. Tarakanov, L. Puzach // Svinovodstvo. - 2001. -№ 3. - S. 2-3.

9. Andreeva A.V. Estestvennaja rezistentnost' i mikrojekologija kishechnika novorozhdennyh teljat s rasstrojstvami organov pishhevarenija / A.V. Andreeva, O.N. Nikolaeva // Jeffektivnost' adapti-vnyh tehnologij v rastenievodstve i zhivotno-vodstve : materialy Vseros. nauch.-prakt. konf., posvjashh. 70-letiju pochetnogo grazhdanina UR, predsedatelja SHPK-Plemzavod imeni Michu-rina Vavozhskogo rajona UR V.E. Kalinina. -Izhevsk : Izhevskaja gos. s.-h. akad. - 2008. -S. 220-223.

10. Zorina V.V. Moduljacija kletok immunnoj sistemy laktobakterijami / V.V. Zorina, T.N. Nikolaeva, V.M. Bondarenko // Zhurn. mikrobiologii, jepidemiologii i immunobiologii. - 2004. - № 6. -S. 57-59.

11. Vlijanie probiotika "Vetosporin" na gema-tologicheskij status novorozhdennyh teljat / A.V. Andreeva [i dr.] // Uch. zap. Kazans. gos. akad. vet. mediciny im. N.Je. Baumana. - 2012. - T. 211. -S. 21-26.

12. Nazyrova N.R. Vlijanie jekstraktov le-karstvennyh rastenij na biologicheskuju aktivnost' shtamma Lactobacteriumplantarum 8P-A3: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk / N.R. Nazyrova / Filial "Immunopreparat" FGUP "NPO "Mikrogen" MZ RF]. - Ufa, 2007. - 23 s.

Andreeva Alfia Vasiljevna, Dc. Biol. Sci., Prof., Bashkiria SAU, alfia_andreeva@mail.ru; Nikolaeva Oksana Nikolaevna, Cand. Biol. Sci., Ass. Prof., Bashkiria SAU, oksananik83@mail.ru.