Иммуногистохимическая характеристика процессов пролиферации и апоптоза в простой гиперплазии эндометрия и гиперпластических эндометриальных полипах

Вестник РГМУ, 2015, № 2

the formation of the ovary is established by histological examination of a remote capsule. Aim. The aim of the study was to investigate the diagnostic criterion and morphological features of follicular ovarian cysts timely statement of the need for surgical treatment. Materials and methods. We have studied the clinical course of the ovarian tumors in 50 patients admitted to the maternity complex №9 Tashkent. The average age of the women ranged from 25 to 39 years. Ovarian formations identified in the survey in connection with infertility (56%) or routine inspection (44%). Preoperative diagnosis include ultrasound with color Doppler blood vessels of the ovary and the determination of blood tumor marker CA-125. For histological examination of the resected cyst walls prepared histological specimens by the standard technique. Results. Feature of follicular cysts in our patients was the presence of ultrasound thin-walled capsules, no papillae on the inside of the capsule. Brush size does not exceed 5.0-6.0 sm in diameter. At color Doppler mapping were impaired vascularization capsule cysts, vascular capsule cysts detected increase resistance index to 0.8, in the uterine and ovarian blood flow vessels characterized by low speed. Preoperative determination of tumor marker CA-125 in patients with follicular ovarian cysts showed that the average number does not exceed the acceptance rate of 35 units/ml. Only in patients in combination with endometrioid ovarian cysts value of CA-125 is 1.7 times higher than normal. In 2 patients, this figure exceeded the norm by 5.7 and 7.3 times. The results of histological examination confirmed the presence of follicular cysts, but with signs of inflammation. The use of ultrasound in the preoperative period with Doppler study of blood flow through the DRC and combining them with indicators of tumor marker CA-125 allowed to differentiate benign (follicular, luteal, endometrial cysts) from ovarian malignancies and decide on the extent of surgical treatment in favor of surgical laparoscopy and cystectomy. The sensitivity of our comprehensive examination before surgery was 96.0%. Interest is the histological polymorphism in the capsule remote entities. The majority (35 patients - 70%) were tumor formation (follicular and luteal cysts). In 10% of the cases, endometrial cysts in 6% of cases - mature teratoblastomy (dermoid cyst). Benign epithelial serous cystoma small size adopted for follicular cysts was 14.0% (7 patients) cases. Follicular cysts are often presented as a unilateral single- and education walled with a smooth inner wall. Histologically, connective wall was lined with multi-row follicular epithelium, under which the cells are arranged theca interna, in some cases, it was observed hyperplasia and luteinization. Conclusion. To sum up, studies have shown that follicular cysts and other benign ovarian tumors are more common among women of reproductive age - from 20 to 39 years. Studies of tumor marker CA-125, along with ultrasound and Doppler blood flow in the capsule formation allows preoperatively with a high degree of probability to predict the nature of the formation of the ovary and determine surgical tactics.

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРОЦЕССОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ И АПОПТОЗА В ПРОСТОЙ ГИПЕРПЛАЗИИ ЭНДОМЕТРИЯ И ГИПЕРПЛАСТИЧЕСКИХ ЭНДОМЕТРИАЛЬНЫХ ПОЛИПАХ

И.А. Кузьо, А.В. Евсеев, М.М. Баударбекова Научный руководитель — д.м.н., проф. В.А.Туманский Запорожский государственный медицинский университет, Запорожье, Украина

Введение. Простая гиперплазия эндометрия (ПГЭ) - самый распространенный вариант гиперплазии эндометрия (ГЭ), гистологически характеризующаяся увеличением количества железистых и стромальных элементов без структурной перестройки эндометрия. В отечественной литературе эквивалентом простой гиперплазии является железистая и железисто-кистозная ГЭ. Полипы эндометрия также относятся к гиперпластическим процессам, но в отличие от ГЭ, их возникновение не связано с гиперэстрогенией. Одной из форм полипов эндометрия являются гиперпластические эндометриальные полипы (ГЭП), отличающиеся характерной для ГЭ морфологией желез и стромы. В последние годы отмечается рост заболеваемости гиперпластическими процессами и раком эндометрия. Цель исследования. Сравнительный анализ экспрессии маркеров клеточной пролиферации и апоптоза в ПГЭ и ГЭП. Пациенты и методы. Исследование проведено на материале соскобов эндометрия 40 женщин репродуктивного возраста с патоморфологически верифицированным диагнозом ПГЭ (n=20) и ГЭП (n=20). Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование проводили по стандартной методике с использованием первичных антител против Ki-67 Antigen, Clone MIB-1, и p53 Protein, Clone DO-7 (DAKO, США). Оценку уровня экспрессии маркеров проводили полуколичественным методом по Risberg B. et al. (2002) для Ki-67 и по Jian-Liu et. al. (2004) для р53.Результаты. Экспрессия маркера

пролиферации Ki-67 при ПГЭ наблюдалась в ядрах эпителиальных и стромальных клеток в виде большого количества мелких гранул коричневого цвета. Уровень экспрессии достигал 4 баллов (>75% Ki-67+ клеток желез и стромы) у 10% женщин, 3 баллов (>50% Ki-67+ клеток) - у 75%, 2 баллов (>25% Ki-67+ клеток) - у 10% и 1 балла (<25% Ki-67+ клеток) - у 5% женщин. В клетках кистозно трансформированных желез эндометрия при ПГЭ экспрессия маркера Ki-67 не отмечено. Средний индекс клеточной пролиферации при ПГЭ равен 2,90±0,63 баллов. Аналогичный паттерн иммуноокрашивания наблюдался и во фрагментах ГЭП. При этом экспрессия Ki-67 отсутствовала или наблюдалась лишь в небольшом проценте (0-1 балла) клеток в 55%, а высокий индекс пролиферации (3-4 балла) 0 в 15% ГЭП. Средний индекс клеточной пролиферации при ГЭП равен 1,67±0,28 баллов, что достоверно ниже, чем при ПГЭ (р<0,05). Как при ПГЭ, так и при ГЭП отмечался относительно низкий уровень экспрессии маркера апоптоза р53 в эпителии желез, а также в лимфоцитах и одиночных клетках стромы эндометрия. При ИГХ исследовании в эндометрии и полипах экспрессия маркера р53 в ядрах клеток отсутствовала у 90% пациенток, и только у 10% женщин уровень экспрессии этого белка определялся в ядрах единичных клеток, то есть был слабо-позитивным. Достоверных межгрупповых различий отмечено не было. Выводы. 1. Как при простой гиперплазииэндометрия, такипригиперпластическихэндометриальных полипах в клетках желез и стромы отмечается преимущественно низкий и средний уровень экспрессии маркера клеточной пролиферации Ki-67 и негативная экспрессия маркера апоптоза р53. 2. В гиперпластических эндометриальных полипах отмечается достоверно более низкий средний индекс клеточной пролиферации по сравнению с простой гиперплазией эндометрия. 3. Достоверных различий в экспрессии р53 между гиперпластическими эндометриальными полипами и простой гиперплазией эндометрия нами не отмечено.

IMMUNOHISTOCHEMICAL CHARACTERIZATION OF PROLIFERATION AND APOPTOSIS IN SIMPLE ENDOMETRIAL HYPERPLASIA AND ENDOMETRIAL HYPERPLASTIC POLYPS

I.O. Kuzyo, A.V. Evseyev, M.M. Baudarbekova Scientific Adviser - DMedSci, Prof. VA. Tumanskiy Zaporozhye State Medical University, Zaporozhye, Ukraine

Introduction. Simple endometrial hyperplasia (SEH)- the most common variant of endometrial hyperplasia (EH), histologically characterized by increasing the amount of glandular and stromal elements without restructuring of the endometrium. Endometrial polyps are also hyperplastic processes, but unlike EH, 2 points (>25% Ki-67+ cells) - 10% and 1 point (<25% Ki-67+ cells) - 5% of women. In cystic-transformed endometrial glands in SEH expression of marker Ki-67 were not observed. The average index of cell proliferation at SEH is 2.90±0.63 points. A similar pattern of immunostaining was observed in the fragments of HEP. In this case, the expression of Ki-67 was absent or was observed only in a small percentage (0-1 points) cells in 55%, and a high proliferation index (3-4 points) - 15% of GEP. The average index of cell proliferation in GEP is 1.67±0.28 points, which is significantly lower than in SEH (p<0.05). In SHE and HEP were observed low level of expression of p53. In SHE and HEP expression of p53 in the nuclei of cells was absent in 90% of patients, and only in 10% of women the level of expression of this protein was determined in the nuclei of individual cells. No significant intergroup differences were observed. Conclusion. 1. In the glands and stromal cells of simple endometrial hyperplasia and endometrial hyperplastic polyps were observed primarily low and medium level of expression of a cell proliferation marker Ki-67 and negative expression of apoptosis marker p53. 2. Endometrial hyperplastic polyps had significantly lower average index of cell proliferation compared to a simple endometrial hyperplasia. 3. Were admitted no significant differences in p53 expression between hyperplastic endometrial polyps and simple endometrial hyperplasia.their occurrence is not associated with increasing of the estrogen level. One form of endometrial polyps are hyperplastic endometrial polyps (HEP), characterized by typical morphology for EH in glands and stroma. In recent years there has been an increased incidence of hyperplasia and endometrial cancer. Aim. Comparative analysis of the expression of markers of cell proliferation and apoptosis in SEH and HEP. Materials and methods. The research was conducted on the material endometrial scrapings 40 women of reproductive age with pathologically verified diagnosis of SEH (n=20) and GEP (n=20). Paraffin sections were stained with hematoxylin and eosin. Immunohistochemical (IHC) research was performed according to standard procedure using a primary antibody against Ki-67 Antigen, Clone MIB-1, and p53 protein, Clone DO-7 (DAKO, USA). Assessing the level of expression of the markers was performed semiquantitatively - Risberg B. et al. (2002) for Ki-67 and Jian-Liu et. al. (2004) for p53. Results. Expression

Секция «АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ»

of the proliferation marker Ki-67 in SEH was observed in nuclei of epithelial and stromal cells in a great number of small brown pellet. The expression level reached 4 points (>75% Ki-67+ cells of glands and stroma) in 10% of women, 3 points (>50% Ki-67+ cells) - 75%,

ФАКТОРЫ РИСКА ПРЕРЫВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ В I ТРИМЕСТРЕ

Н.Б. Ковалерова

Научный руководитель — к.м.н. Л.Н. Щербакова

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова,

Москва, Россия

Введение. Частота самопроизвольного прерывания беременности составляет около 15% от общего числа всех выявленных беременностей. При этом 40-80% всех самопроизвольных выкидышей происходит в ранние сроки гестации. Цель исследования. Изучить исход I триместра беременности у пациенток с кровяными выделениями из половых путей в ранние сроки. Пациенты и методы. Были обследованы 57 пациенток с кровяным выделениями в I триместре беременности. В зависимости от исхода I триместра, были сформированы группы: пациентки, у которых беременность прогрессировала во II триместре, (1, N=33) и пациентки, у которых в I триместре были выявлены самопроизвольный выкидыш и неразвивающаяся беременность (2, N=24). Критерии исключения -внематочная и многоплодная беременности. Результаты. В группе 1-й количество пациенток старше 35 лет было достоверно меньше, чем в группе 2-й (30% VS 54%). ИМТ<22 кг/м2 определялся у 39% и 54% исследуемых 1-й и 2-й групп соответственно (p<0,05). Эктопия шейки маткибылаванамнезеу 55% женщиниз 1-йгруппыиу 38% из 2-й^<0,05). СПКЯ достоверно чаще встречался у пациенток с репродуктивными потерями (9% VS 21%, p<0,05). Обе группы пациенток представлены, в основном, повторнобеременными, но в группе 2-й пациенток с первой беременностью было больше (12% VS 25%, p<0,05). Выделения на 57 неделе беременности манифестировали у 36% и 70% обследуемых из 1-й и 2-й групп соответственно (p<0,05). Обильные выделения наблюдались только при прерывании беременности (0% VS 13% , p<0,05). Гиперкоагуляция и антифосфолипидные или антинуклеарные антитела выявлялись достоверно чаще во 2-й группе (27% VS 78%, 12% VS 50%). В группе 1-й прегравидарная подготовка проводилась чаще (72% VS 29%, p<0,05). Выводы. Таким образом, нами были определены факторы риска прерывания беременности в I триместре (возраст старше 35, ИМТ<22 кг/м2, первая беременность, СПКЯ, обильные кровяные выделения, выделения в 5-7 недель беременности, гиперкоагуляция, наличие антинуклеарных/ антифосфолипидных антител) и доказано, что прегравидарная подготовка способствует благоприятному исходу I триместра беременности.

RISK FACTORS OF PREGNANCY LOSS IN THE FIRST TRIMESTER

N.B. Kovalerova

Scientific Adviser — CandMedSci L.N. Scherbakova Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia

Introduction. The frequency of spontaneous abortions is about 15% of the total number of all pregnancies. From 40% to 80% of miscarriages occur in the early gestation period. Aim. To investigate the outcome of the first trimester of patients with vaginal bleeding in the early gestation period. Materials and methods. We examined 57 patients with vaginal bleeding in the first trimester. Based on the outcome of the first trimester we formed two groups: patients with pregnancy in the second trimester (1, N=33) and patients with spontaneous abortions or non-developing pregnancy in the first trimester (2, N=24). We excluded ectopic and multiple pregnancies. Results. In the group 1 the number of patients at the age over 35 years was significantly less than in the group 2 (30% VS 54%). BMI<22 kg/m2 was defined in 39% and 54% of patients of the groups 1 and 2 consequently (p<0.05). Cervical ectropion was noted in 55% of case histories in the group

1 and 38% of cases histories in the group 2 (p<0.05). PCOS was associated with pregnancy loss (9% VS 21%, p<0.05). Both groups were mainly formed by patients with pregnancy in the past, but in the group 2 there were more patients with first pregnancy (12% VS 25%, p<0.05). Bleeding manifestation at 5-7 weeks of gestation was defined in 36% and 70% of participants of the group 1 and 2 consequently (p<0.05). Heavy bleedings were presented only in patients with miscarriage (0% VS 13%, p<0.05). Hypercoagulation and antiphospholipid or antinuclear antibodies were detected mainly in the group

2 (27% VS 78%, 12% VS 50%, p<0.05). Pregravidary preparation was more common in the group 1 (72% VS 29%, p<0.05). Conclusion. We detected risk factors of pregnancy loss in the first trimester (age over 35 years , BMI<22

kg/m2 , first pregnancy, PCOS, heavy bleeding, bleeding at 5-7 weeks of gestation, hypercoagulation, antiphospholipid or antinuclear antibodies) and demonstrated that pregravidary preparation correlates with the favorable outcome of the first trimester.

ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС СЫВОРОТКИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ТЕЛА МАТКИ

Т.В. Абакумова, С.О. Генинг, Д.Р. Долгова, А.В. Фомина, А.А. Михеенко Научный руководитель — д.б.н., проф. Т.П. Генинг Ульяновский государственный университет, Ульяновск, Россия

Введение. Установлена роль нарушения баланса цитокинов в развитии злокачественных опухолей различной локализации . Рак тела матки (РТМ) в России составляет, по данным Давыдова М.И., 7,3% от всех злокачественных образований у женщин, и имеет выраженную тенденцию роста заболеваемости. Согласно современным исследованиям, наиболее перспективными в качестве маркеров опухолевого роста и прогностических факторов при злокачественных новообразованиях являются такие цитокины, как IL-1 в, -2, -4, TNF- а. Для ряда онкологических заболеваний показана взаимосвязь между концентрацией цитокинов в сыворотке крови и агрессивностью течения, метастатическим потенциалом и риском развития рецидивов. Поэтому активность цитокинов может быть использована в клинической практике для уточнения стадии РТМ. В связи с этим цель исследования - оценка уровня цитокинов крови при раке тела матки. Материалы и методы. Обследуемая группа состояла из 75 пациенток с РТМ на стадии Ia, Ib, Ic по FIGO и 12 практически здоровых женщин. В сыворотке крови твердофазным иммуноферментным методом определяли уровень спонтанной продукции цитокинов IL-1 в, TNF-a, IFN-y и G-CSF (ЗАО «Вектор-Бест-Волга», г.Н.Новгород). В качестве центральной характеристики применяли медиану, а при сравнении использовали непараметрический критерий Манна-Уитни. Результаты. В результате проведенных исследований установлено резкое, значимое и прогрессирующее (по мере развития неоплазмы) снижение уровня IFN-y - 5,45 пг/мл (0-11,303) на Ia стадии, 2,19 пг/мл (0-13,23) на Ib стадии и 0,63 пг/мл (0-2,54) на Ic стадии против 124,96 пг/мл (1,09422,55) в контроле. IFN-y обладает выраженной противоопухолевой активностью, ингибируя пролиферацию и блокируя опухолевый ангиогенез. Уровень IL-1 в, сниженный на Ia стадии РТМ (4,99 пг/мл (0-11,16) против 7,98 пг/мл (1,69-12,71) в контроле), на последующих стадиях возрастает (9,98 пг/мл (4,13-23,28) на Ib стадии и 6,28 пг/мл (2,86-12,23) на Ic стадии). Способностью продуцировать IL-1 в обладает ряд опухолевых клеток, в связи с чем полагают, что его продукция может способствовать пролиферации неоплазмы. Уровень G-CSF значимо снижался уже на Ia стадии РТМ и оставался ниже уровня контроля на всех изученных стадиях РТМ (79,04 пг/мл (46,64-110,71) - на Ia стадии, 115,72 (0-268,26) пг/мл на Ib стадии и 79,37 пг/мл (4,19-196,55) - на Ic стадии против 157,69 пг/мл (52,39-368,10) в контроле). G-CSF усиливает продукцию кислородных радикалов и антителозависимую цитотоксичность нейтрофилов, стимулирует синтез TNF- а. Уровень TNF- а - провоспалительного цитокина, единственного, обладающего прямым цитотксическим действием в отношении опухолевых клеток, резко и значимо снижался уже на Ia стадии РТМ (3,93 пг/мл (1,77-7,31) против 16,95 пг/мл (5,92-25,59) в контроле), продолжал снижаться на Ib стадии (2,85 пг/мл (1,02-6,38)), и несколько возрастал, не достигая, однако, уровня интактных, на Ic стадии (10,42 пг/мл (1,78-23,33)). Выводы. Полученные данные позволяют предполагать на начальных стадиях РТМ предполагать возникновение цитокинового статуса, благоприятного для прогрессирования неоплазмы. Работа выполнена при поддержке государственного задания МИНОБРНАУКИ РФ.

CYTOKINE STATUS OF BLOOD SERUM IN PATIENTS WITH ENDOMETRIAL CANCER

T. V. Abakumova, S. O. Gening, D.R. Dolgova, A V. Fomina, A.A. Mikheenko Scientific Adviser - DBiolSci, Prof. T.P. Gening Ulyanovsk State University, Ulyanovsk, Russia

Introduction. The role of violation of balance of cytokines in development of malignant tumors of various localization. Endometrial cancer (EC) in Russia is according to Davydov M.I. (2012). 7.3% of all malignancies in women and has a pronounced upward trend in incidence. According to current research, the most promising as markers of tumor growth and prognostic factors in malignant tumors are cytokines, such as IL-1 в, -2, -4, TNF- a. For a number of cancers shows the relationship between the concentration of cytokines in serum and aggressive course, metastatic potential and the risk of relapse. Therefore, the activity of cytokines can be used in clinical