КОНСТРУКЦИИ СЛИТОГО БЕЛКА ДЛЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ, СВЯЗАННОГО С КОМПЛЕМЕНТОМ

1. Конструкция мономерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция мономерного слитого белка содержит:
a) первый полипептид, содержащий: домен A и домен B, расположенные от N-конца к C-концу в ориентации A-B,
b) второй полипептид, содержащий: домен E и домен F, расположенные от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
при этом по меньшей мере один из домена A, домена B, домена E или домена F конъюгирован с доменом R, и при этом:
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(iv) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(v) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
2. Конструкция мономерного слитого белка по п. 1, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации R-A-B, и при этом домен R и домен A конъюгированы.
3. Конструкция мономерного слитого белка по п. 1, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-R, и при этом область B и область R конъюгированы.
4. Конструкция мономерного слитого белка по п. 1, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации R-E-F, и при этом домен E и домен R конъюгированы.
5. Конструкция мономерного слитого белка по п. 1, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F-R, и при этом домен F и домен R конъюгированы.
6. Конструкция мономерного слитого белка по пп. 2, 3, 4 или 5, дополнительно содержащая второй полипептид модулятора комплемента, при этом второй полипептид модулятора комплемента и домен R являются одинаковыми или разными.
7. Конструкция слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция слитого белка содержит: первый полипептид и второй полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит домен A, домен B, домен R, шарнирную область, домен C и домен D,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D, при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(iv) домен D включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH3, и
(v) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
и при этом (1) домен A и домен R конъюгированы, или (2) домен D и домен R конъюгированы;
b) второй полипептид содержит домен E и домен F, при этом домены E и F второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом
(i) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(ii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), и
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
8. Конструкция слитого белка по п. 7, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен D и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из первых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
9. Конструкция слитого белка по п. 7, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен A и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из первых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
10. Конструкция слитого белка по п. 8 или 9, дополнительно содержащая домен R1, в которой домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
11. Конструкция слитого белка по п. 10, в которой домен A и домен R конъюгированы, и домен D и домен R1 конъюгированы.
12. Конструкция слитого белка по п. 10, в которой домен D и домен R конъюгированы, и домен A и домен R1 конъюгированы.
13. Конструкция слитого белка по п. 7, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гетеродимерного слитого белка, дополнительно содержащую
c) третий полипептид, который содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D; и
d) четвертый полипептид, который содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
при этом домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей, и где первый и третий полипептиды связаны вместе через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
14. Конструкция слитого белка по п. 13, в которой домен D и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
15. Конструкция слитого белка по п. 13, в которой домен A и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
16. Конструкция слитого белка по п. 14 или 15, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
17. Конструкция слитого белка по п. 16, в которой домен R1 конъюгирован с первым полипептидом.
18. Конструкция слитого белка по п. 16, в которой домен R1 конъюгирован со вторым полипептидом.
19. Конструкция слитого белка по п. 16, в которой домен R1 конъюгирован с третьим полипептидом.
20. Конструкция слитого белка по п. 16, в которой домен R1 конъюгирован с четвертым полипептидом.
21. Конструкция слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция слитого белка содержит: первый полипептид и второй полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, домен R, шарнирную область и домен C,
где домены A, B, шарнирная область и C первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C, при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2, и
(iv) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
и при этом (1) домен A и домен R конъюгированы, или (2) домен C и домен R конъюгированы;
b) второй полипептид содержит домен E и домен F,
при этом домены E и F расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом
(i) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(ii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), и
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
22. Конструкция слитого белка по п. 21, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен C и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из первых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
23. Конструкция слитого белка по п. 21, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен A и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из первых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
24. Конструкция слитого белка по п. 21, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и где домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
25. Конструкция слитого белка по п. 24, в которой домен A и домен R конъюгированы, и домен C и домен R1 конъюгированы.
26. Конструкция слитого белка по п. 24, в которой домен C и домен R конъюгированы, и домен A и домен R1 конъюгированы.
27. Конструкция слитого белка по п. 21, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гетеродимерного слитого белка, дополнительно содержащую
c) третий полипептид, который содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D; и
d) четвертый полипептид, который содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны одной или более дисульфидными связями, и
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
28. Конструкция слитого белка по п. 27, в которой домен C и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
29. Конструкция слитого белка по п. 27, в которой домен A и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
30. Конструкция слитого белка по п. 28 или 29, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
31. Конструкция слитого белка по п. 30, в которой домен R1 конъюгирован с первым полипептидом.
32. Конструкция слитого белка по п. 30, в которой домен R1 конъюгирован со вторым полипептидом.
33. Конструкция слитого белка по п. 30, в которой домен R1 конъюгирован с третьим полипептидом.
34. Конструкция слитого белка по п. 30, в которой домен R1 конъюгирован с четвертым полипептидом.
35. Конструкция слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем слитый белок содержит: первый полипептид и второй полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, домен R и шарнирную область,
при этом домены A, B и шарнирная область первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область, при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен R включает полипептид модулятора комплемента, и
при этом (1) домен A и домен R конъюгированы, или (2) шарнирная область и домен R конъюгированы;
b) второй полипептид содержит домен E и домен F,
при этом домены E и F расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом
(i) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(ii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), и
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
36. Конструкция слитого белка по п. 35, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен A и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из первых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
37. Конструкция слитого белка по п. 35, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом шарнирная область и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из первых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
38. Конструкция слитого белка по п. 36 или 37, дополнительно содержащая домен R1, в которой домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
39. Конструкция слитого белка по п. 38, в которой домен A и домен R конъюгированы, и шарнирный домен и домен R1 конъюгированы.
40. Конструкция слитого белка по п. 38, в которой шарнирный домен и домен R конъюгированы, а домен A и домен R1 конъюгированы.
41. Конструкция слитого белка по п. 35, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гетеродимерного слитого белка, дополнительно содержащую
c) третий полипептид, который содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D; и
d) четвертый полипептид, который содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны одной или более дисульфидными связями, и
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
42. Конструкция слитого белка по п. 41, в которой шарнирный домен и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
43. Конструкция слитого белка по п. 41, в которой домен A и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
44. Конструкция слитого белка по п. 42 или 43, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
45. Конструкция слитого белка по п. 44, в которой домен R1 конъюгирован с первым полипептидом.
46. Конструкция слитого белка по п. 44, в которой домен R1 конъюгирован со вторым полипептидом.
47. Конструкция слитого белка по п. 44, в которой домен R1 конъюгирован с третьим полипептидом.
48. Конструкция слитого белка по п. 44, в котором домен R1 конъюгирован с четвертым полипептидом.
49. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка содержит: первый полипептид, второй полипептид, третий полипептид и четвертый полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, шарнирную область, домен C, домен D и домен R,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D, и
при этом (1) домен A и домен R конъюгированы, или (2) домен D и домен R конъюгированы;
b) второй полипептид содержит домен E и домен F,
при этом домены E и F второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
c) третий полипептид содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D;
d) четвертый полипептид содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей, и где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей,
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в указанной шарнирной области, и при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(iv) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(v) домен D включает аминокислотную последовательность константной области СН3 тяжелой цепи
(vi) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(vii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1).
50. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 49, в которой домен A и домен R первого полипептида конъюгированы.
51. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 49, в которой домен D и домен R первого полипептида конъюгированы.
52. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка содержит: первый полипептид, второй полипептид, третий полипептид и четвертый полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен R,
при этом домены A, B, шарнирная область и C первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C, и
при этом (1) домен A и домен R конъюгированы, или (2) домен C и домен R конъюгированы;
b) второй полипептид содержит домен E и домен F,
при этом домены E и F второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
c) третий полипептид содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D;
d) четвертый полипептид содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей, и где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей,
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в указанной шарнирной области, и при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(iv) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(v) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(vi) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1).
53. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 52, в которой домен A и домен R первого полипептида конъюгированы.
54. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 52, в которой домен C и домен R первого полипептида конъюгированы.
55. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка содержит первый полипептид, второй полипептид, третий полипептид и четвертый полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, шарнирную область и домен R,
при этом домены A, B и шарнирная область первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область, и при этом (1) домен A и домен R конъюгированы, или (2) шарнирная область и домен R конъюгированы;
b) второй полипептид содержит домен E и домен F,
при этом домены E и F второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
c) третий полипептид содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D;
d) четвертый полипептид содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей, и где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей,
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в указанной шарнирной области, и при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(iv) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(v) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1).
56. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 55, в которой домен A и домен R первого полипептида конъюгированы.
57. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 55, в которой шарнирной области и домен R первого полипептида конъюгированы.
58. Конструкция слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция слитого белка содержит: первый полипептид и второй полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D, при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(iv) домен D включает аминокислотную последовательность константной области СН3 тяжелой цепи;
a) второй полипептид содержит: домен E, домен F и домен R,
при этом домены E и F расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом (1) домен E и домен R конъюгированы, или (2) домен F и домен R конъюгированы, и при этом
(i) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(ii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), и
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
59. Конструкция слитого белка по п. 58, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен E и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из вторых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
60. Конструкция слитого белка по п. 58, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен F и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из вторых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
61. Конструкция слитого белка по п. 58 или 59, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
62. Конструкция слитого белка по п. 61, в которой домен E и домен R конъюгированы, и домен F и домен R1 конъюгированы.
63. Конструкция слитого белка по п. 61, в которой домен F и домен R конъюгированы, и домен E и домен R1 конъюгированы.
64. Конструкция слитого белка по п. 58, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гетеродимерного слитого белка, дополнительно содержащую
c) третий полипептид, который содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D; и
d) четвертый полипептид, который содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны одной или более дисульфидными связями, и
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
65. Конструкция слитого белка по п. 64, в которой домен E и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
66. Конструкция слитого белка по п. 64, в которой домен F и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
67. Конструкция слитого белка по п. 65 или 66, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
68. Конструкция слитого белка по п. 67, в которой домен R1 конъюгирован с первым полипептидом.
69. Конструкция слитого белка по п. 67, в которой домен R1 конъюгирован со вторым полипептидом.
70. Конструкция слитого белка по п. 67, в которой домен R1 конъюгирован с третьим полипептидом.
71. Конструкция слитого белка по п. 67, в котором домен R1 конъюгирован с четвертым полипептидом.
72. Конструкция слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция слитого белка содержит: первый полипептид и второй полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, шарнирную область и домен C,
при этом домены A, B, шарнирная область, и C расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C, при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2;
b) второй полипептид содержит: домен E, домен F и домен R,
при этом домены E и F расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом (1) домен E и домен R конъюгированы, или (2) домен F и домен R конъюгированы, и при этом
(i) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(ii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), и
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
73. Конструкция слитого белка по п. 72, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен E и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из вторых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
74. Конструкция слитого белка по п. 72, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен F и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из вторых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
75. Конструкция слитого белка по п. 73 или 74, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
76. Конструкция слитого белка по п. 75, в которой домен E и домен R конъюгированы, и домен F и домен R1 конъюгированы.
77. Конструкция слитого белка по п. 75, в которой домен F и домен R конъюгированы, и домен E и домен R1 конъюгированы.
78. Конструкция слитого белка по п. 72, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гетеродимерного слитого белка, дополнительно содержащую
с) третий полипептид, который содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D; и
d) четвертый полипептид, который содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны одной или более дисульфидными связями, и
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
79. Конструкция слитого белка по п. 78, в которой домен E и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
80. Конструкция слитого белка по п. 78, в которой домен F и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
81. Конструкция слитого белка по п. 79 или 80, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
82. Конструкция слитого белка по п. 81, в которой домен R1 конъюгирован с первым полипептидом.
83. Конструкция слитого белка по п. 81, в которой домен R1 конъюгирован со вторым полипептидом.
84. Конструкция слитого белка по п. 81, в которой домен R1 конъюгирован с третьим полипептидом.
85. Конструкция слитого белка по п. 81, в котором домен R1 конъюгирован с четвертым полипептидом.
86. Конструкция слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция слитого белка содержит: первый полипептид и второй полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B и шарнирная область расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область, где
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2;
b) второй полипептид содержит: домен E, домен F и домен R,
при этом домены E и F расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом (1) домен E и домен R конъюгированы, или (2) домен F и домен R конъюгированы, и при этом
(i) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(ii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), и
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
87. Конструкция слитого белка по п. 86, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен E и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из вторых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
88. Конструкция слитого белка по п. 86, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гомодимерного слитого белка, содержащую два первых полипептида и два вторых полипептида, при этом домен F и домен R конъюгированы по меньшей мере с одним из вторых полипептидов, и причем два первых полипептида связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
89. Конструкция слитого белка по п. 87 или 88, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
90. Конструкция слитого белка по п. 89, в которой домен E и домен R конъюгированы, и домен F и домен R1 конъюгированы.
91. Конструкция слитого белка по п. 89, в котором домен F и домен R конъюгированы, и домен E и домен R1 конъюгированы.
92. Конструкция слитого белка по п. 86, которая представляет собой конструкцию четырехвалентного гетеродимерного слитого белка, дополнительно содержащую
c) третий полипептид, который содержит: (i) домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, (ii) домен A, домен B, шарнирную область и домен C, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D; и
d) четвертый полипептид, который содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны одной или более дисульфидными связями, и
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в шарнирной области.
93. Конструкция слитого белка по п. 92, в которой домен E и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
94. Конструкция слитого белка по п. 92, в которой домен F и домен R конъюгированы в первом полипептиде.
95. Конструкция слитого белка по п. 93 или 94, дополнительно содержащая домен R1, где домен R1 включает второй полипептид модулятора комплемента, и при этом домен R1 и домен R являются одинаковыми или разными.
96. Конструкция слитого белка по п. 95, в которой домен R1 конъюгирован с первым полипептидом.
97. Конструкция слитого белка по п. 95, в которой домен R1 конъюгирован со вторым полипептидом.
98. Конструкция слитого белка по п. 95, в которой домен R1 конъюгирован с третьим полипептидом.
99. Конструкция слитого белка по п. 95, в которой домен R1 конъюгирован с четвертым полипептидом.
100. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка содержит: первый полипептид, второй полипептид, третий полипептид и четвертый полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, шарнирную область, домен C, и домен D,
при этом домены A, B, шарнирная область, C, и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D;
b) второй полипептид содержит: домен E, домен F и домен R,
при этом домены E и F расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом (1) домен E и домен R конъюгированы, или (2) домен F и домен R конъюгированы;
c) третий полипептид содержит: (i) домен A, домен B, домен C, домен D и шарнирную область, (ii) домен A, домен B, домен C и шарнирную область, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C, и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D;
d) четвертый полипептид содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей, и где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей,
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в указанной шарнирной области, и при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(iv) домен D включает аминокислотную последовательность константной области СН3 тяжелой цепи,
(v) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(vi) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(vii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1).
101. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 100, в которой домен E и домен R второго полипептида конъюгированы.
102. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 100, в которой домен F и домен R второго полипептида конъюгированы.
103. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка содержит: первый полипептид, второй полипептид, третий полипептид и четвертый полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B, шарнирную область и домен C,
при этом домены A, B, шарнирная область и C первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C;
b) второй полипептид содержит: домен E, домен F и домен R,
при этом домены E и F расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом (1) домен E и домен R конъюгированы, или (2) домен F и домен R конъюгированы;
c) третий полипептид содержит: (i) домен A, домен B, домен C, домен D и шарнирную область, (ii) домен A, домен B, домен C и шарнирную область, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D;
d) четвертый полипептид содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей, и где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей,
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в указанной шарнирной области, и при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(iv) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(v) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(vi) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1).
104. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 103, в которой домен E и домен R второго полипептида конъюгированы.
105. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 103, в которой домен F и домен R второго полипептида конъюгированы.
106. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка содержит: первый полипептид, второй полипептид, третий полипептид и четвертый полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит: домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B и шарнирная область первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область;
b) второй полипептид содержит: домен E, домен F и домен R,
при этом домены E и F расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом (1) домен E и домен R конъюгированы, или (2) домен F и домен R конъюгированы;
c) третий полипептид содержит: (i) домен A, домен B, домен C, домен D и шарнирную область, (ii) домен A, домен B, домен C и шарнирную область, или (iii) домен A, домен B и шарнирную область,
при этом домены A, B, шарнирная область, C и D третьего полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнирная область-C-D;
a) четвертый полипептид содержит: домен E и домен F,
при этом домены E и F четвертого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F;
при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей, и где домен B третьего полипептида и домен F четвертого полипептида связаны через одну или более дисульфидных связей,
где первый и третий полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в указанной шарнирной области, и при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(iv) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(v) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1).
107. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 106, в которой домен E и домен R второго полипептида конъюгированы.
108. Конструкция трехвалентного гетеродимерного слитого белка по п. 106, в которой домен F и домен R второго полипептида конъюгированы.
109. Конструкция слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, при этом конструкция слитого белка содержит: первый полипептид, второй полипептид и третий полипептид, причем
a) первый полипептид содержит домен R, шарнирную область, домен C и домен D, при этом домены R, шарнирная область, C и D расположены от N-конца к C-концу в ориентации R-шарнир-C-D, и при этом
(i) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(ii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(iii) домен D включает аминокислотную последовательность константной области СН3 тяжелой цепи;
при этом домен R и шарнирная область конъюгированы,
a) второй полипептид содержит домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, где домены A, B, шарнирная область, C и D расположены от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнир-C-D, и при этом
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1;
a) третий полипептид содержит домен E и домен F, при этом домены расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F, и при этом
(i) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1);
при этом домен B второго полипептида и домен F третьего полипептида связаны одной или более дисульфидными связями; и при этом первый и второй полипептиды связаны друг с другом через одну или более дисульфидных связей в указанной шарнирной области.
110. Конструкция мономерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция мономерного слитого белка содержит:
a) первый полипептид, содержащий: домен A, домен B и шарнирную область, расположенную от N-конца до C-концу в ориентации A-B-шарнир;
b) второй полипептид, содержащий: домен E и домен F, расположенные от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
при этом по меньшей мере один из домена A, шарнирного домена, домена E или домена F конъюгирован с доменом R, и при этом:
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(iv) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(v) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
111. Конструкция мономерного слитого белка по п. 110, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B, шарнирный домен и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к C-концу, в ориентации R-A-B-шарнир, и при этом домен R и домен A конъюгированы.
112. Конструкция мономерного слитого белка по п. 110, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B, шарнирный домен и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к C-концу, в ориентации A-B-шарнир-R, и при этом шарнирный домен и домен R конъюгированы.
113. Конструкция мономерного слитого белка по п. 110, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации R-E-F, и при этом домен E и домен R конъюгированы.
114. Конструкция мономерного слитого белка по п. 110, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F-R, и при этом домен F и домен R конъюгированы.
115. Конструкция мономерного слитого белка по пп. 111, 112, 113 или 114, дополнительно содержащая второй полипептид модулятора комплемента, при этом второй полипептид модулятора комплемента и домен R являются одинаковыми или разными.
116. Конструкция мономерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция мономерного слитого белка содержит:
a) первый полипептид, содержащий: домен A, домен B, шарнирную область и домен C, расположенный от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнир-C-область;
b) второй полипептид, содержащий: домен E и домен F, расположенный от N-конца к C-концу в ориентации E-F, при этом по меньшей мере один из домена A, домена C, домена E или домена F конъюгирован с доменом R,
при этом:
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(iv) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(v) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(vi) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
117. Конструкция мономерного слитого белка по п. 116, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B, шарнирный домен, домен C и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к С-концу в ориентации R-A-B-шарнир-С, и при этом домен R и домен А конъюгированы.
118. Конструкция мономерного слитого белка по п. 116, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B, шарнирный домен, домен C и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к С-концу в ориентации A-B-шарнир-C-R, и при этом домен C и домен R конъюгированы.
119. Конструкция мономерного слитого белка по п. 116, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации R-E-F, и при этом домен E и домен R конъюгированы.
120. Конструкция мономерного слитого белка по п. 116, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F-R, и при этом домен F и домен R конъюгированы.
121. Конструкция мономерного слитого белка по пп. 117, 118, 119 или 120, дополнительно содержащая второй полипептид модулятора комплемента, при этом второй полипептид модулятора комплемента и домен R являются одинаковыми или разными.
122. Конструкция мономерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция мономерного слитого белка содержит:
a) первый полипептид, содержащий: домен A, домен B, шарнирную область, домен C и домен D, расположенные от N-конца к C-концу в ориентации A-B-шарнир-C-D-область;
b) второй полипептид, содержащий: домен E и домен F, расположенные от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
при этом по меньшей мере один из домена A, домена D, домена E или домена F конъюгирован с доменом R, и при этом:
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен C включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH2,
(iv) домен D включает аминокислотную последовательность константной области СН3 тяжелой цепи,
(v) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(vi) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(vii) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1), при этом домен B первого полипептида и домен F второго полипептида связаны одной или более дисульфидными связями.
123. Конструкция мономерного слитого белка по п. 116, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B, шарнирный домен, домен C, домен D и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к С-концу в ориентации R-A-B-шарнир-С-D, и при этом домен R и домен А конъюгированы.
124. Конструкция мономерного слитого белка по п. 116, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B, шарнирный домен, домен C, домен D, и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к С-концу в ориентации A-B-шарнир-C-D-R, и при этом домен C и домен R конъюгированы.
125. Конструкция мономерного слитого белка по п. 116, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации R-E-F, и при этом домен E и домен R конъюгированы.
126. Конструкция мономерного слитого белка по п. 116, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации E-F-R, и при этом домен F и домен R конъюгированы.
127. Конструкция мономерного слитого белка по пп. 117, 118, 119 или 120, дополнительно содержащая второй полипептид модулятора комплемента, при этом второй полипептид модулятора комплемента и домен R являются одинаковыми или разными.
128. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-120, в которой конъюгация включает связывание двух доменов с пептидным линкером, связывание без линкера, ферментативную конъюгацию, химическую конъюгацию или любую их комбинацию.
129. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-128, в которой ассоциированный с комплементом антиген представляет собой C3d, iC3b, C3dg или их фрагменты, или их варианты.
130. Конструкция слитого белка по п. 129, которая связывает C3 и C3b с более низкой аффинностью связывания, чем афинность связывания по отношению к C3d.
D
-3
131. Конструкция слитого белка по п. 130, которая связывает C3 и C3b с аффинностью K около 10 M или выше.
D
-8
132. Конструкция слитого белка по п. 130, которая связывает iC3b, C3dg или оба с аффинностью в K 10 M или менее
133. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-132, которая модулирует активность альтернативного пути комплемента у субъекта при введении указанной конструкции слитого белка или фармацевтической композиции, содержащей указанную конструкцию слитого белка, указанному субъекту.
134. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-132, которая модулирует активность классического пути комплемента у субъекта при введении указанной конструкции слитого белка или фармацевтической композиции, содержащей указанную конструкцию слитого белка, указанному субъекту.
135. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-132, которая модулирует активность лектинового пути комплемента у субъекта при введении указанной конструкции слитого белка или фармацевтической композиции, содержащей указанную конструкцию слитого белка, указанному субъекту.
136. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-135, в которой указанная конструкция слитого белка связывает домен белка аннексина млекопитающего.
D
-8
137. Конструкция слитого белка по п. 136, в которой указанная конструкция слитого белка связывает домен белка аннексина млекопитающих с аффинностью K 10M или менее.
138. Конструкция слитого белка по п. 136, в которой указанный домен представляет собой центральный домен аннексина.
139. Конструкция слитого белка по п. 138, в которой указанный центральный домен аннексина включает альфа-спиральный домен.
140. Конструкция слитого белка по п. 139, в которой указанный центральный домен аннексина содержит сайт связывания кальция и сайт связывания с мембраной.
141. Конструкция слитого белка по п. 139 или 140, в которой указанный центральный домен аннексина содержит по меньшей мере один повтор аннексина.
142. Конструкция слитого белка по п. 141, в которой указанная конструкция слитого белка связывает последовательность повтора аннексина в указанном домене.
143. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-135, в которой указанная конструкция слитого белка связывает фосфолипид.
D
-8
144. Конструкция слитого белка по п. 143, в котором указанная конструкция слитого белка связывает фосфолипид с аффинностью K 10M или менее.
145. Конструкция слитого белка по п. 143, в которой указанный фосфолипид выбран из группы, состоящей из фосфатидилэтаноламина (ФЭ), кардиолипина (КЛ), фосфатидилхолина (ФХ), фосфатидилинозитола, фосфатидилглицерина, фосфатидилсерина и фосфатидной кислоты, и малонового диальдегида (МДА).
146. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный пептид модулятора комплемента содержит домен А белка рецептора комплемента 1 (CR1 - англ.: complement receptor 1) или его фрагмент, который сохраняет по меньшей мере три коротких консенсусных повтора (SCR - англ.: short consensus repeat) домена А.
147. Конструкция слитого белка по п. 146, дополнительно содержащая домен B белка CR1 или его фрагмент, который сохраняет по меньшей мере три SCR домена B.
148. Конструкция слитого белка по п. 146 или 147, дополнительно содержащая домен C белка CR1 или его фрагмент, который сохраняет по меньшей мере три SCR домена C.
149. Конструкция слитого белка по пп. 146, 147 или 148, дополнительно содержащая домен D CR1 или его фрагмент, который сохраняет по меньшей мере три SCR домена D.
150. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный полипептид модулятора комплемента содержит первые три SCR домена A, первые три SCR домена B и первые три SCR домена C белка CR1.
151. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный полипептид модулятора комплемента представляет собой CR1-10.
152. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный полипептид модулятора комплемента представляет собой CR1-17.
153. Конструкция слитого белка по п. 151, в которой указанный пептид модулятора комплемента содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41 или SEQ ID NO: 91, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
154. Конструкция слитого белка по п. 152, в которой указанный полипептид модулятора комплемента содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42 или SEQ ID NO: 92, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
155. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой фактор ускорения распада (DAF - англ.: decay-accelerating factor) или его биологически активный фрагмент.
156. Конструкция слитого белка по п. 153, в которой указанный DAF представляет собой DAF человека.
157. Конструкция слитого белка по п. 155 или 156, в которой указанный биологически активный фрагмент DAF человека содержит по меньшей мере один из домена короткого консенсусного повтора (SCR) и богатого O-гликозилированным серином/треонином домена полноразмерного DAF человека.
158. Конструкция слитого белка по п. 155 или 156, в которой указанный биологически активный фрагмент DAF содержит SCR 1-4 или SCR 2-4 полноразмерного DAF человека.
159. Конструкция слитого белка по п. 155, в которой указанный биологически активный фрагмент DAF содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 184 или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
160. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой фактор H или его биологически активный фрагмент.
161. Конструкция слитого белка по п. 160, в которой указанный фактор H представляет собой фактор H человека.
162. Конструкция слитого белка по п. 161, в которой биологически активный фрагмент фактора H человека содержит одну или более групп коротких консенсусных повторов (SCR), включающих SCR 1-20, SCR 1-2, SCR 2-3, SCR 3-4, SCR 4-5, SCR 5-6, SCR 6-7, SCR 7-8, SCR 8-9, SCR 9-10, SCR 10-11, SCR 11-12, SCR 12-13, SCR 13-14, SCR 14-15, SCR 15-16, SCR 16-17, SCR 17-18, SCR 19-20 полноразмерного фактора H человека или любую комбинацию SCR 1-20.
163. Конструкция слитого белка по п. 161, в которой указанный биологически активный фрагмент фактора H человека содержит SCR 1-4 или SCR 1-5 полноразмерного фактора H человека.
164. Конструкция слитого белка по п. 161, в которой указанный биологически активный фрагмент фактора H человека содержит участок аминокислот, выбранный из группы, состоящей из: аминокислот 21-266, аминокислот 21-320, аминокислот 21-509 или аминокислот 19-1106 из SEQ ID NO: 9, или его вариант с аминокислотной последовательностью, по меньшей мере на 85% идентичной указанному участку аминокислот.
165. Конструкция слитого белка по п. 160, в которой указанный фактор H или его биологически активный фрагмент содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 108, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
166. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой МСР или его биологически активный фрагмент.
167. Конструкция слитого белка по п. 166, в которой указанный МСР представляет собой МСР человека.
168. Конструкция слитого белка по п. 167, в которой указанный биологически активный фрагмент MCP человека содержит по меньшей мере один из домена короткого консенсусного повтора (SCR) полноразмерного MCP человека.
169. Конструкция слитого белка по п. 168, в которой указанный биологически активный фрагмент MCP человека содержит SCR 3-4 полноразмерного MCP человека.
170. Конструкция слитого белка по п. 166, в которой указанный МСР содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 187 или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
171. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой Map44 или его биологически активный фрагмент.
172. Конструкция слитого белка по п. 171, в которой указанная Map44 представляет собой Map44 человека.
173. Конструкция слитого белка по п. 171, в которой указанный Map44 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 186 или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
174. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-145, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой CD59 или его биологически активный фрагмент.
175. Конструкция слитого белка по п. 174, в которой указанная CD59 представляет собой CD59 человека.
176. Конструкция слитого белка по п. 174, в которой указанный CD59 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 185 или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
177. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-176, в которой указанная конструкция слитого белка содержит человеческое антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
178. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-177, в которой указанная конструкция слитого белка содержит гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
179. Конструкция трехвалентного слитого белка по любому из пп. 49-57 или 100-108, в которой каждый из первого и третьего полипептидов содержит по меньшей мере одну ортогональную модификацию, которая способствует образованию гетеродимера, а не гомодимера.
180. Конструкция трехвалентного слитого белка по п. 179, в которой первый полипептид содержит модификацию типа «выступ», а третий полипептид содержит модификацию типа «впадина»; или при этом третий полипептид содержит модификацию типа «выступ», а первый полипептид содержит модификацию типа «впадина».
181. Конструкция трехвалентного слитого белка по п. 180, в которой первый и третий полипептиды содержат модификации, приводящие к зарядовой или поверхностной комплементарности.
182. Конструкция слитого белка по любому из пп. 179-181, в которой
a) первый полипептид содержит (i) три определяющие комплементарность области тяжелой цепи (CDR), имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:11, 12 и 13; 17, 18 и 19; 23, 24 и 25; 29, 30 и 31; 35, 36 и 37; 147, 148, и 149; 188, 189, и 190; 196, 197, и 198; 204 или 343, 205, и 206; 212, 213, и 214; 220, 221, и 222; 228, 229, и 230; 29, 259 и 31; или 29, 260 и 31; или (ii) три CDR тяжелой цепи, имеющие аминокислотные последовательности, которые отличаются одной консервативной аминокислотной заменой в пределах одной из SEQ ID NO: 11, 12 и 13; 17, 18 и 19; 23, 24 и 25; 29, 30 и 31; 35, 36 и 37; 147, 148, и 149; 188, 189, и 190; 196, 197, и 198; 204 или 343, 205, и 206; 212, 213, и 214; 220, 221, и 222; 228, 229, и 230; 29, 259 и 31; или 29, 260 и 31; и
(b) второй полипептид содержит (i) три определяющие комплементарность области легкой цепи (CDR), имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 14, 15 и 16; 20, 21 и 22; 26, 27 и 28; 32, 33 и 34; 38, 39 и 40; 150, 151 и 152; 191, 192 и 193; 199, 200 и 201; 207, 208 и 209; 215, 216 и 217; 223, 224 и 225; или 231, 232 и 233, или (ii) три CDR легкой цепи, имеющие аминокислотные последовательности, которые отличаются одной консервативной аминокислотной заменой в одной из SEQ ID NO 14, 15 и 16; 20, 21 и 22; 26, 27 и 28; 32, 33 и 34; 38, 39 и 40; 150, 151 и 152; 191, 192 и 193; 199, 200 и 201; 207, 208 и 209; 215, 216 и 217; 223, 224 и 225; или 231, 232 и 233.
183. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-182, дополнительно содержащая по меньшей мере один аминокислотный линкер, при этом указанный по меньшей мере один линкер содержит аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 241, или SEQ ID NO: 242.
184. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-183, в которой указанная конструкция слитого белка содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 75, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO: 77, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 87, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 114, SEQ ID NO: 115, SEQ ID NO: 116, SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118, SEQ ID NO: 119, SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 123, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 143, и SEQ ID NO: 144.
185. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-181, в которой первый полипептид содержит последовательность SEQ ID NO: 282 (домен A, домен B, домен C и домен D), конъюгированную с полипептидом модулятора комплемента, содержащим выбранную последовательность из группы, состоящей из SEQ ID NO: 41, 42 и 72 (домен R); и при этом второй полипептид содержит последовательность SEQ ID NO: 279 (домен E и домен F).
186. Конструкция слитого белка по любому из пп. 1-181, в которой первый полипептид содержит последовательность SEQ ID NO: 282 (домен A, домен B, домен C и домен D); и при этом второй полипептид содержит последовательность SEQ ID NO: 279 (домен E и домен F), конъюгированную с полипептидом модулятора комплемента, содержащим последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 72 (домен R).
187. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию слитого белка по любому из пп. 1-186.
188. Полинуклеотид, кодирующий слитый белок по любому из пп. 1-186.
189. Способ лечения, включающий обеспечение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 186.
190. Способ по п. 189, в которой указанный субъект имеет комплемент-опосредованное заболевание или комплемент-опосредованное воспаление.
D
-8
191. Способ по п. 189 или 190, в котором конструкция слитого белка специфически связывается с C3d с аффинностью в K 10 M или менее, и субъект имеет комплемент-опосредованное заболевание, при этом комплемент-опосредованное заболевание характеризуется повышенным отложением C3d.
D
-8
192. Способ по п. 189 или 190, в котором конструкция слитого белка специфически связывается с реакционноспособным с антителом к C2 фосфолипидом с аффинностью K 10 M или менее, и субъект имеет комплемент-опосредованное заболевание, при этом комплемент-опосредованное заболевание характеризуется повышенным отложением реакционноспособного с антителом к C2 фосфолипида.
193. Способ по п. 190, в котором субъект имеет указанное комплемент-опосредованное воспаление, при этом указанное комплемент-опосредованное воспаление включает воспалительное фиброзное заболевание, и при этом указанное воспалительное фиброзное заболевание включает фокально-сегментарный гломерулосклероз, первичный склерозирующий холангит или мембранопролиферативный гломерулонефрит.
194. Способ по п. 190, в котором субъект имеет комплемент-опосредованное аутоиммунное заболевание, включающее ревматоидный артрит, системную красную волчанку, волчаночный нефрит или обыкновенную пузырчатку.
195. Способ по п. 190, в котором субъект имеет комплемент-опосредованное заболевание почек, включающее мембранопролиферативный гломерулонефрит или комплемент 3 - гломерулопатию.
196. Способ по п. 190, в котором субъект имеет комплемент-опосредованное сердечно-сосудистое заболевание.
197. Способ по п. 196, в котором сердечно-сосудистое заболевание включает атеросклероз или тромбоз.
198. Способ по п. 190, в котором субъект имеет комплемент-опосредованное дерматологическое заболевание.
199. Способ по п. 198, в котором дерматологическое заболевание включает псориаз, инверсное акне, красную волчанку, кожный васкулит мелких сосудов, крапивницу, уртикарный васкулит, буллезный пемфигоид,
200. Способ по п. 190 в котором указанный субъект имеет комплемент-опосредованное воспаление, и при этом комплемент-опосредованное воспаление связано с патологическим состоянием или заболеванием, выбранным из группы, состоящей из следующего: ишемически-реперфузионное повреждение, ожоговое поражение, эндотоксемия и септический шок, респираторный дистресс-синдром взрослых, искусственное кровообращение, гемодиализ, анафилактический шок, астма, ангионевротический отек, болезнь Крона, серповидноклеточная анемия, гломерулонефрит, мембранозный нефрит, панкреатит, отторжение трансплантата, сверхострое отторжение ксенотрансплантата, повторная угроза выкидыша, преэклампсия, лекарственная аллергия, индуцированный ИЛ-2 синдром транссудации, аллергия на рентгеноконтрастное вещество, миастения, болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, инсулинозависимый сахарный диабет, острый диссеминированный энцефаломиелит, болезнь Аддисона, синдром антифосфолипидных антител, аутоиммунный гепатит, синдром Гудпасчера, болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, болезнь Хашимото, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, пузырчатка, синдром Шегрена, синдром Такаясу, инфаркт миокарда, инсульт, острый респираторный дистресс-синдром, сепсис, плазмаферез, тромбоцитферез, лейкоферез, экстракорпоральная мембранная оксигенация, гепарин-индуцированная экстракорпоральная преципитация ЛПНП, воспаление кишечника, крапивница, и васкулит, и волчаночный нефрит.
201. Способ по п. 189, в котором субъект имеет патологическое состояние или заболевание, выбранное из группы, состоящей из следующего: ишемически-реперфузионное повреждение, ревматоидный артрит (РА), волчаночный нефрит, ишемически-реперфузионное повреждение, атипичный гемолитико-уремический синдром (аГУС), типичный или инфекционный гемолитико-уремический синдром (тГУС), болезнь плотного осадка (БПО), пароксизмальная ночная гемоглобинурия (ПНГ), рассеянный склероз (РС), макулярная дегенерация, синдром гемолиза, повышения печеночных ферментов и низких тромбоцитов (HELLP - англ.: hemolysis, elevated liver enzymes, and low platelets), сепсис, дерматомиозит, диабетическая ретинопатия, тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (ТТП), спонтанная угроза выкидыша, pauci - иммунный васкулит, буллезный эпидермолиз, повторная угроза выкидыша, рассеянный склероз (РС), черепно-мозговая травма, сердечно-сосудистое заболевание, миокардит, нарушение мозгового кровообращения, нарушение со стороны периферических сосудов, реноваскулярное заболевание, нарушение сосудистого генеза брыжейки/ кишечника, реваскуляризация трансплантатов и/или приживленных органов, васкулит, нефрит при пурпуре Шенлейна-Геноха, васкулит, связанный с системной красной волчанкой, васкулит, связанный с ревматоидным артритом, геморрагический васкулит, болезнь Такаясу, синдром капиллярной утечки, дилатационная кардиомиопатия, диабетическая ангиопатия, аневризм торако-абдоминальной аорты, синдром Кавасаки (артериит), венозная газовая эмболия (ВГЭ), и рестеноз после установки стента, ротационной атерэктомии, чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластики (ЧТКА), миастения гравис, болезнь холодовых агглютининов (БХА), пароксизмальная холодовая гемоглобинурия (ПХГ), дерматомиозит, склеродермия, сердечная аутоиммунная гемолитическая анемия, болезнь Грейвса, тиреоидит Хашимото, сахарный диабет I типа, псориаз, пузырчатка, аутоиммунная гемолитическая анемия (АИГА), идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ИТП), синдром Гудпасчера, антифосфолипидный синдром (АФС), синдром Дегоса и катастрофический антифосфолипидный синдром (КАФС).
202. Способ по п. 189, в котором субъект имеет патологическое состояние или заболевание, выбранное из группы, состоящей из следующего: возрастная макулярная дегенерация (ВМД), мембранопролиферативный гломерулонефрит II типа (МПГН II), гемолитико-уремический синдром (ГУС), астма, амилоидоз и тромботическая тромбоцитопеническая пурпура.
203. Способ по п. 202, в котором гемолитико-уремический синдром (ГУС) представляет собой атипичный гемолитико-уремический синдром (аГУС).
204. Способ по п. 189, в котором субъект имеет ассоциированное с друзами заболевание или связанное с друзами заболевание.
205. Способ по п. 204, в котором ассоциированное с друзами заболевание представляет собой амилоидоз, эластоз, болезнь плотного осадка, гломерулонефрит, атеросклероз или ассоциированное с друзами глаз заболевание.
206. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию четырехвалентного слитого белка для модуляции активности комплемента, причем указанная конструкция четырехвалентного слитого белка содержит:
a) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который связывает ассоциированный с комплементом антиген; и
b) первый пептид модулятора комплемента и второй пептид модулятора комплемента, при этом первый и второй полипептиды модулятора комплемента являются одинаковыми или разными.
207. Фармацевтическая композиция по п. 206, в которой по меньшей мере один из указанных первого и второго пептидов модулятора комплемента конъюгирован с указанным антителом или антигенсвязывающим фрагментом с помощью линкера.
208. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию трехвалентного слитого белка для модуляции активности комплемента, причем указанная конструкция четырехвалентного слитого белка содержит:
a) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который связывает ассоциированный с комплементом антиген; и
b) один пептид модулятора комплемента.
209. Фармацевтическая композиция по п. 208, в которой указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент и указанный пептид модулятора комплемента конъюгированы посредством линкера.
210. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию трехвалентного слитого белка для модуляции активности комплемента, причем указанная конструкция трехвалентного слитого белка содержит:
a) Fab, который связывает ассоциированный комплемент антиген;
b) домен Fc антитела; и
c) пептид модулятора комплемента, конъюгированный с указанным Fab или указанным доменом Fc.
211. Фармацевтическая композиция по п. 210, в которой указанный Fab или указанный домен Fc и указанный пептид модулятора комплемента конъюгированы посредством линкера.
212. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию трехвалентного слитого белка, содержащую:
a) первый полипептидный мономер, содержащий домен CH2 или CH3 антитела, причем указанный домен имеет по меньшей мере одну ортогональную модификацию, которая способствует образованию гетеродимера, а не гомодимера;
b) второй полипептидный мономер, содержащий домен CH2 или CH3 антитела, причем указанный домен имеет по меньшей мере одну ортогональную модификацию, которая способствует образованию гетеродимера с указанным первым полипептидным мономером, а не гомодимера; и
при этом один из указанных первого и второго полипептидов дополнительно содержит пептид модулятора комплемента, и при этом указанная конструкция трехвалентного слитого белка связывает ассоциированный с комплементом антиген.
213. Фармацевтическая композиция по п. 212, в которой указанный первый полипептид содержит модификацию типа «выступ», а указанный второй полипептид содержит модификацию типа «впадина».
214. Фармацевтическая композиция по п. 212, в которой указанные первый и второй полипептиды содержат модификации, приводящие к зарядовой или поверхностной комплементарности.
215. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 212-214, в которой указанный пептид модулятора комплемента соединен с одним из указанных первого и второго полипептидов посредством аминокислотного линкера.
216. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию слитого белка, которая содержит:
антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее
a) три определяющие комплементарность области тяжелой цепи (CDR), имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 11, 12 и 13; 17, 18 и 19; 23, 24 и 25; 29, 30 и 31; 35, 36 и 37; 147, 148 и 149; 188, 189 и 190; 196, 197 и 198; 204 или 343, 205 и 206; 212, 213 и 214; 220, 221 и 222; 228, 229 и 230; 29, 259 и 31; или 29, 260 и 31; или
b) три CDR тяжелой цепи, имеющие аминокислотные последовательности, которые отличаются одной консервативной аминокислотной заменой в пределах одной из SEQ ID NO: 11, 12 и 13; 17, 18 и 19; 23, 24 и 25; 29, 30 и 31; 35, 36 и 37; 147, 148 и 149; 188, 189 и 190; 196, 197 и 198; 204 или 343, 205 и 206; 212, 213 и 214; 220, 221 и 222; 228, 229 и 230; 29, 259 и 31; или 29, 260 и 31; и
c) три определяющие комплементарность области легкой цепи (CDR), имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 14, 15 и 16; 20, 21 и 22; 26, 27 и 28; 32, 33 и 34; 38, 39 и 40; 150, 151 и 152; 191, 192 и 193; 199, 200 и 201; 207, 208 и 209; 215, 216 и 217; 223, 224 и 225; или 231, 232 и 233, или
d) три CDR легкой цепи, имеющие аминокислотные последовательности, которые отличаются одной консервативной аминокислотной заменой в пределах одной из SEQ ID NO: 14, 15 и 16; 20, 21 и 22; 26, 27 и 28; 32, 33 и 34; 38, 39 и 40; 150, 151 и 152; 191, 192 и 193; 199, 200 и 201; 207, 208 и 209; 215, 216 и 217; 223, 224 и 225; или 231, 232 и 233; и пептид модулятора комплемента.
217. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию слитого белка, которая содержит: антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее
a) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность по меньшей мере в одной из SEQ ID NO:54, 58, 67, 73, 74, 81, 88, 89, 98, 99, 112, 145, 153, 194, 202, 210, 218, 226, 234, 238, 243, 244, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 261, 262, 263, 264, 265, 270, 271, 272, 273, 274, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 288, 290, и 342; и
b) легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность по меньшей мере в одной из SEQ ID NO: 45, 59, 68, 195, 203, 211, 219, 227, 235, 256, 257, 258, 266, 267, 268, 269, 275, 276, 277, 278, 279, 287, и 289,
или
a) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается одной или более консервативными аминокислотными заменами по меньшей мере в одной из SEQ ID NO: 54, 58, 67, 73, 74, 81, 88, 89, 98, 99, 112, 145, 153, 194, 202, 210, 218, 226, 234, 238, 243, 244, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 261, 262, 263, 264, 265, 270, 271, 272, 273, 274, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 288, 290, и 342; и
b) легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается одной или более консервативными аминокислотными заменами по меньшей мере в одной из SEQ ID NO: 45, 59, 68, 195, 203, 211, 219, 227, 235, 256, 257, 258, 266, 267, 268, 269, 275, 276, 277, 278, 279, 287, и 289.
218. Фармацевтическая композиция, содержащая
конструкцию слитого белка, которая содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из: SEQ ID NO: 45, 51, 54, 58, 59, 62, 64, 67, 68, 73, 74, 79, 81, 88, 89, 98, 99, 112, 194, 195, 202, 203, 210, 211, 218, 219, 226, 227, 234, 235, 238, 239, 240, 243, 244, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, и 342; и
пептид модулятора комплемента.
219. Фармацевтическая композиция по п. 216 или 217, в которой указанный пептид модулятора комплемента соединен с указанным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом посредством аминокислотного линкера.
220. Фармацевтическая композиция по пп. 207, 209, 211, 215 или 218, в которой указанный аминокислотный линкер содержит аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 241, или SEQ ID NO: 242.
2
221. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-212 или 214-219, содержащая указанный антигенсвязывающий фрагмент, при этом указанный антигенсвязывающий фрагмент включает фрагмент Fv, Fab, Fab', F(ab'), или scFv.
222. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-220, в которой указанная конструкция слитого белка модулирует активность альтернативного пути комплемента у субъекта при введении указанной фармацевтической композиции указанному субъекту.
223. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-222, в которой указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент или указанный Fab связывает домен белка аннексина млекопитающих.
D
-8
224. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-223, в которой указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, или указанный Fab связывает домен белка аннексина млекопитающих с аффинностью K 10M или менее.
225. Фармацевтическая композиция по п. 223 или 224, в которой указанный домен представляет собой центральный домен аннексина.
226. Фармацевтическая композиция по п. 225, в которой указанный центральный домен аннексина включает альфа-спиральный домен.
227. Фармацевтическая композиция по п. 224 или 225, в которой указанный центральный домен аннексина содержит сайт связывания кальция и сайт связывания с мембраной.
228. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 223-227, в которой указанный центральный домен аннексина содержит по меньшей мере одну последовательность повтора аннексина.
229. Фармацевтическая композиция по п. 228, в которой указанное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, или указанный Fab связывает указанную по меньшей мере одну последовательность повтора аннексина.
230. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-221, в которой указанный ассоциированный с комплементом антиген включает фосфолипид, и при этом указанное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, или указанный Fab связывает указанный фосфолипид.
D
-8
231. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-222 или 230, в которой указанное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, или указанный Fab связывает фосфолипид с аффинностью в K 10M или менее.
232. Фармацевтическая композиция по п. 231, в которой указанный фосфолипид выбран из группы, состоящей из фосфатидилэтаноламина (ФЭ), кардиолипина (КЛ), фосфатидилхолина (ФХ) и малонового диальдегида (МДА).
233. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-222, в которой указанный ассоциированный с комплементом антиген включает белок комплемента C3 или его фрагмент, и при этом указанное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, или указанный Fab связывает указанный белок комплемента C3 или его фрагмент.
D
-8
234. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-222 или 233, в которой указанное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, или указанный Fab связывает указанный белок комплемента С3 или его фрагмент с аффинностью K 10M или менее.
235. Фармацевтическая композиция по п. 234, в которой указанный фрагмент белка комплемента C3 представляет собой C3d.
236. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-235, в которой указанный пептид модулятора комплемента содержит белок рецептора комплемента 1 (CR1).
237. Фармацевтическая композиция по п. 236, в которой указанный пептид модулятора комплемента содержит домен А белка CR1 или его фрагмент, который сохраняет по меньшей мере три коротких консенсусных повтора (SCR) домена А.
238. Фармацевтическая композиция по п. 236 или 237, в которой указанный пептид модулятора комплемента содержит домен B белка CR1 или его фрагмент, который сохраняет по меньшей мере три SCR домена B.
239. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 236-238, в которой указанный пептид модулятора комплемента содержит домен С белка CR1 или его фрагмент, который сохраняет по меньшей мере три SCR домена С.
240. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 236-239, дополнительно содержащая домен D белка CR1 или его фрагмент, который сохраняет по меньшей мере три SCR домена D.
241. Фармацевтическая композиция по п. 240, в которой указанный пептид модулятора комплемента содержит первые три SCR домена A, первые три SCR домена B и первые три SCR домена C белка CR1.
242. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 236-241, в которой белок CR1 представляет собой белок CR1 человека.
243. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-242, в которой указанный полипептид модулятора комплемента представляет собой CR1 (1-10).
244. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-242, в которой указанный полипептид модулятора комплемента представляет собой CR1 (1-17).
245. Фармацевтическая композиция по п. 244, в которой указанный CR1 (1-10) содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, или SEQ ID NO: 91, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
246. Фармацевтическая композиция по п. 244, в которой указанный CR1 (1-17) содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42, или SEQ ID NO: 92, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
247. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-242, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой фактор ускорения распада (DAF) или его биологически активный фрагмент.
248. Фармацевтическая композиция по п. 247, в которой указанный DAF представляет собой DAF человека.
249. Фармацевтическая композиция по п. 247 или 248, в которой указанный биологически активный фрагмент DAF человека содержит по меньшей мере один из домена короткого консенсусного повтора (SCR) и богатого O-гликозилированным серином/треонином домена полноразмерного DAF человека.
250. Фармацевтическая композиция по п. 248 или 249, в которой указанный биологически активный фрагмент DAF человека содержит SCR 1-4 или SCR 2-4 полноразмерного DAF человека.
251. Конструкция фармацевтической композиции по любому из пп. 247-250, в которой указанный биологически активный фрагмент DAF человека содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 184 или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
252. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-242, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой фактор H или его биологически активный фрагмент.
253. Фармацевтическая композиция по п. 252, в которой указанный фактор H представляет собой фактор H человека.
254. Фармацевтическая композиция по п. 253, в которой указанный биологически активный фрагмент фактора H человека содержит участок аминокислот, выбранный из группы, состоящей из: аминокислот 21-266, аминокислот 21-320, аминокислот 21-509 или аминокислот 19-1106 из SEQ ID NO: 9, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85% указанному участку аминокислот.
255. Фармацевтическая композиция по п. 253, в которой биологически активный фрагмент фактора H человека содержит одну или более групп коротких консенсусных повторов (SCR), включающих SCR 1-20, SCR 1-2, SCR 2-3, SCR 3-4, SCR 4-5, SCR 5-6, SCR 6-7, SCR 7-8, SCR 8-9, SCR 9-10, SCR 10-11, SCR 11-12, SCR 12-13, SCR 13-14, SCR 14-15, SCR 15-16, SCR 16-17, SCR 17-18, SCR 19-20 полноразмерного фактора H человека или любую комбинацию SCR 1-20.
256. Фармацевтическая композиция по п. 253, в которой указанный биологически активный фрагмент фактора H человека содержит SCR 1-4 полноразмерного фактора H человека.
257. Фармацевтическая композиция по п. 253, в которой указанный биологически активный фрагмент фактора H человека содержит SCR 1-5 полноразмерного фактора H человека.
258. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 252-257, в которой указанный биологически активный фрагмент фактора H человека содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72, или SEQ ID NO: 108, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
259. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-242, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой MCP или его биологически активный фрагмент.
260. Фармацевтическая композиция по п. 259, в которой указанный MCP представляет собой MCP человека.
261. Фармацевтическая композиция по п. 260, в которой указанный биологически активный фрагмент MCP человека содержит по меньшей мере один из домена короткого консенсусного повтора (SCR) полноразмерного MCP человека.
262. Фармацевтическая композиция по п. 261, в которой указанный биологически активный фрагмент MCP человека содержит SCR 3-4 полноразмерного MCP человека.
263. Фармацевтическая композиция по п. 261 или 262, в которой указанный биологически активный фрагмент MCP человека содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 187 или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
264. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-242, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой Map44 или его биологически активный фрагмент.
265. Фармацевтическая композиция по п. 264, в которой указанный Map44 представляет собой Map44 человека.
266. Фармацевтическая композиция по п. 265, в которой указанный Map44 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 186 или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
267. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-242, в которой указанный пептид модулятора комплемента представляет собой CD59 или его биологически активный фрагмент.
268. Фармацевтическая композиция по п. 267, в которой указанный CD59 представляет собой CD59 человека.
269. Фармацевтическая композиция по п. 267 или 268, в которой указанный CD59 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 185 или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
270. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-269, в которой указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой антитело человека или его антигенсвязывающий фрагмент.
271. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 206-269, в которой указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
272. Полинуклеотид, кодирующий слитый белок, как описано в любом из пп. 206-271.
273. Способ лечения, включающий обеспечение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп. 206-271.
274. Способ по п. 269, в котором указанный субъект имеет комплемент-опосредованное воспаление.
275. Способ по п. 274, в котором комплемент-опосредованное воспаление включает воспалительное фиброзное заболевание, и при этом указанное воспалительное фиброзное заболевание включает фокально-сегментарный гломерулосклероз, первичный склерозирующий холангит или мембранопролиферативный гломерулонефрит.
276. Способ по п. 275, в котором указанный субъект имеет комплемент-опосредованное аутоиммунное заболевание, включающее ревматоидный артрит, системную красную волчанку, волчаночный нефрит или обыкновенную пузырчатку.
277. Способ по п. 275, в котором указанный субъект имеет комплемент-опосредованное заболевание почек, включающее мембранопролиферативный гломерулонефрит или комплемент 3 - гломерулопатию.
278. Способ по п. 275, в котором указанный субъект имеет комплемент-опосредованное сердечно-сосудистое заболевание.
279. Способ по п. 278, в котором сердечно-сосудистое заболевание включает атеросклероз или тромбоз.
280. Способ по п. 275, в котором субъект имеет комплемент-опосредованное дерматологическое заболевание.
281. Способ по п. 280, в котором дерматологическое заболевание включает псориаз, инверсное акне, красную волчанку, кожный васкулит мелких сосудов, крапивницу, уртикарный васкулит, буллезный пемфигоид,
282. Способ по п. 274, в котором комплемент-опосредованное воспаление связано с патологическим состоянием или заболеванием, выбранным из группы, состоящей из следующего: ишемически-реперфузионное повреждение, ожоговое поражение, эндотоксемия и септический шок, респираторный дистресс-синдром взрослых, искусственное кровообращение, гемодиализ, анафилактический шок, астма, ангионевротический отек, болезнь Крона, серповидноклеточная анемия, гломерулонефрит, мембранозный нефрит, панкреатит, отторжение трансплантата, сверхострое отторжение ксенотрансплантата, повторная угроза выкидыша, преэклампсия, лекарственная аллергия, индуцированный ИЛ-2 синдром транссудации, аллергия на рентгеноконтрастное вещество, миастения, болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, инсулинозависимый сахарный диабет, острый диссеминированный энцефаломиелит, болезнь Аддисона, синдром антифосфолипидных антител, аутоиммунный гепатит, синдром Гудпасчера, болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, болезнь Хашимото, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, пузырчатка, синдром Шегрена, синдром Такаясу, инфаркт миокарда, инсульт, острый респираторный дистресс-синдром, сепсис, плазмаферез, тромбоцитферез, лейкоферез, экстракорпоральная мембранная оксигенация, гепарин-индуцированная экстракорпоральная преципитация ЛПНП, воспаление кишечника, крапивница, и васкулит и волчаночный нефрит.
283. Способ по п. 273, в котором субъект имеет патологическое состояние или заболевание, выбранное из группы, состоящей из следующего: ишемически-реперфузионное повреждение, ревматоидный артрит (РА), волчаночный нефрит, ишемически-реперфузионное повреждение, атипичный гемолитико-уремический синдром (аГУС), типичный или инфекционный гемолитико-уремический синдром (тГУС), болезнь плотного осадка (БПО), пароксизмальная ночная гемоглобинурия (ПНГ), рассеянный склероз (РС), макулярная дегенерация, синдром гемолиза, повышения печеночных ферментов и низких тромбоцитов (HELLP), сепсис, дерматомиозит, диабетическая ретинопатия, тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (ТТП), спонтанная угроза выкидыша, pauci - иммунный васкулит, буллезный эпидермолиз, повторная угроза выкидыша, рассеянный склероз (РС), черепно-мозговая травма, сердечно-сосудистое заболевание, миокардит, нарушение мозгового кровообращения, нарушение со стороны периферических сосудов, реноваскулярное заболевание, нарушение сосудистого генеза брыжейки/ кишечника, реваскуляризация трансплантатов и/или приживленных органов, васкулит, нефрит при пурпуре Шенлейна-Геноха, васкулит, связанный с системной красной волчанкой, васкулит, связанный с ревматоидным артритом, геморрагический васкулит, болезнь Такаясу, синдром капиллярной утечки, дилатационная кардиомиопатия, диабетическая ангиопатия, аневризм торако-абдоминальной аорты, синдром Кавасаки (артериит), венозная газовая эмболия (ВГЭ), и рестеноз после установки стента, ротационной атерэктомии, чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластики (ЧТКА), миастения гравис, болезнь холодовых агглютининов (БХА), пароксизмальная холодовая гемоглобинурия (ПХГ), дерматомиозит, склеродермия, сердечная аутоиммунная гемолитическая анемия, болезнь Грейвса, тиреоидит Хашимото, сахарный диабет I типа, псориаз, пузырчатка, аутоиммунная гемолитическая анемия (АИГА), идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ИТП), синдром Гудпасчера, антифосфолипидный синдром (АФС), синдром Дегоса и катастрофический антифосфолипидный синдром (КАФС).
284. Способ по п. 273, в котором указанный субъект имеет патологическое состояние или заболевание, выбранное из группы, состоящей из следующего: возрастная макулярная дегенерация (ВМД), мембранопролиферативный гломерулонефрит II типа (МПГН II), гемолитико-уремический синдром (ГУС), астма, амилоидоз и тромботическая тромбоцитопеническая пурпура.
285. Способ по п. 284, в котором указанный гемолитико-уремический синдром (ГУС) представляет собой атипичный гемолитико-уремический синдром (аГУС).
286. Способ по п. 283, в котором указанный субъект имеет ассоциированное с друзами заболевание или связанное с друзами заболевание.
287. Способ по п. 286, в котором указанное ассоциированное с друзами заболевание представляет собой амилоидоз, эластоз, болезнь плотного осадка, гломерулонефрит, атеросклероз или ассоциированное с друзами глаз заболевание.
288. Конструкция мономерного слитого белка, которая связывает ассоциированный с комплементом антиген, причем конструкция мономерного слитого белка содержит:
a) первый полипептид, содержащий: домен A и домен B, расположенные от N-конца к C-концу в ориентации A-B,
b) второй полипептид, содержащий: домен E и домен F, расположенные от N-конца к C-концу в ориентации E-F,
при этом по меньшей мере один из домена A и домена E конъюгирован с доменом R, и при этом:
(i) домен A включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) или его антигенсвязывающий фрагмент,
(ii) домен B включает аминокислотную последовательность константной области тяжелой цепи CH1,
(iii) домен R включает полипептид модулятора комплемента,
(iv) домен E включает аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) или его антигенсвязывающий фрагмент, и
(v) домен F включает аминокислотную последовательность константной области легкой цепи (CL1).
289. Конструкция мономерного слитого белка по п. 288, в которой первый полипептид содержит домен A, домен B и домен R, при этом домены первого полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации R-A-B, и при этом домен R и домен A конъюгированы.
290. Конструкция мономерного слитого белка по п. 288, в которой второй полипептид содержит домен E, домен F и домен R, причем домены второго полипептида расположены от N-конца к C-концу в ориентации R-E-F, и при этом домен E и домен R конъюгированы.
291. Конструкция слитого белка, содержащая:
а) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфически связываются с белком комплемента 3d (c3d), и
b) две молекулы полипептида модулятора комплемента, причем каждая молекула полипептида модулятора комплемента содержит биологически активный фрагмент белка комплемента, выбранный из группы, состоящей из CR1, DAF, MCP, Crry, MAp44, MAp19, CD59, и фактора H,
причем конструкция слитого белка имеет более низкую концентрацию полумаксимального ингибирования в анализе комплемента по сравнению с таковой у конструкции белка для сравнения, которая не содержит антитело, но в остальном идентична.
292. Конструкция слитого белка по п. 291, в которой каждая молекула полипептида модулятора комплемента конъюгирована с тяжелой цепью антитела или его антигенсвязывающим фрагментом.
293. Конструкция слитого белка по п. 292, в которой каждая молекула полипептида модулятора комплемента конъюгирована с С-концом тяжелой цепи.
294. Конструкция слитого белка по п. 291, в которой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит первый полипептид и второй полипептид, при этом
a) первый полипептид содержит последовательность тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность по меньшей мере одной из: SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 75, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 80, EQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 87, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 282, SEQ ID NO: 284, SEQ ID NO: 285, и SEQ ID NO: 286; и
b) второй полипептид содержит последовательность легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность по меньшей мере одной из: SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 77, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 135, и SEQ ID NO: 279.
295. Конструкция слитого белка по п. 294, в которой первый полипептид содержит по меньшей мере две аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 75, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 80, EQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 87, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 282, SEQ ID NO: 284, SEQ ID NO: 285, и SEQ ID NO: 286; и при этом второй полипептид содержит по меньшей мере две аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 77, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 135, и SEQ ID NO: 279.
296. Конструкция слитого белка по п. 295, в которой по меньшей мере две аминокислотные последовательности первого полипептида являются одной и той же аминокислотной последовательностью, и при этом по меньшей мере две аминокислотные последовательности второго полипептида представляют собой одну и ту же аминокислотную последовательность.
297. Конструкция слитого белка по п. 296, в которой по меньшей мере две аминокислотные последовательности первого полипептида представляют собой SEQ ID NO: 282 или SEQ ID NO: 285, и при этом по меньшей мере две аминокислотные последовательности второго полипептида представляют собой SEQ ID NO: 279.
298. Конструкция слитого белка по п. 291, в которой слитый белок дополнительно содержит линкер.
299. Конструкция слитого белка по п. 298, в которой линкер содержит аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 164, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 166, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 168, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 170, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 172, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 174, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 176, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 178, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 241, или SEQ ID NO: 242.
300. Конструкция слитого белка по п. 291, в которой белок комплемента представляет собой фактор H или его биологически активный фрагмент.
301. Конструкция слитого белка по п. 300, в которой фактор H или его биологически активный фрагмент содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72, или SEQ ID NO: 108, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
302. Конструкция слитого белка по п. 291, в которой белок комплемента представляет собой CR1 или его фрагмент.
303. Конструкция слитого белка по п. 302, в которой белок комплемента содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 91 или SEQ ID NO: 92, или его вариант с аминокислотной последовательностью, идентичной по меньшей мере на 85%.
304. Конструкция слитого белка по п. 291, в которой конструкция слитого белка содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 60, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 75, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO: 77, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 87, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 114, SEQ ID NO: 115, SEQ ID NO: 116, SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118, SEQ ID NO: 119, SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 123, SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 279, SEQ ID NO: 282, и SEQ ID NO: 285.
305. Конструкция слитого белка, содержащая:
а) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфически связывается с ассоциированным с комплементом антигеном, при этом антитело содержит первый полипептид и второй полипептид, при этом каждый из первого полипептида и второго полипептида содержит тяжелую цепь и легкую цепь; и
b) первую молекулу и вторую молекулу полипептида модулятора комплемента, при этом первая молекула и вторая молекула содержат биологически активный фрагмент белка комплемента, выбранный из группы, состоящей из CR1, DAF, MCP, Crry, MAp44, MAp19, CD59, и фактора H,
причем при введении конструкции слитого белка субъекту, имеющему заболевание, отношение альбумина к креатинину в образце мочи от субъекта, имеющего заболевание, ниже, чем отношение альбумина к креатинину в образце мочи от субъекта, которому вводят сопоставимую конструкцию слитого белка, при этом сопоставимая конструкция слитого белка не содержит антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, но в остальном идентична.
306. Конструкция слитого белка по п. 305, в которой заболевание представляет собой комплемент-опосредованное заболевание почек.
307. Конструкция слитого белка по п. 306, в которой комплемент-опосредованное заболевание почек представляет собой мембранопролиферативный гломерулонефрит или комплемент 3 - гломерулопатию.
308. Конструкция слитого белка по п. 305, в которой отношение альбумина к креатинину в образце мочи пациента, имеющего заболевание, на по меньшей мере около 1%, 2%, 3%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85% ниже.
309. Конструкция слитого белка, которая содержит: антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее
a) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 54, 58, 60, 61, 64, 65, 67, 69, 70, 71, 73, 74, 75, 76, 78, 80, 81, 82, 85, 87, 88, 89, 98, 99, 112, 132, 133, 134, 145, 153, 194, 202, 210, 218, 226, 234, 238, 243, 244, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 261, 262, 263, 264, 265, 270, 271, 272, 273, 274, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 288, 290, и 342; и
b) легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность по меньшей мере одной из SEQ ID NO: 45, 59, 68, 77, 79, 84, 86, 135, 195, 203, 211, 219, 227, 235, 256, 257, 258, 266, 267, 268, 269, 275, 276, 277, 278, 279, 287, и 289;
или
c) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается одной или более консервативными аминокислотными заменами по меньшей мере в одной из SEQ ID NO: 54, 58, 60, 61, 64, 65, 67, 69, 70, 71, 73, 74, 75, 76, 78, 80, 81, 82, 85, 87, 88, 89, 98, 99, 112, 132, 133, 134, 145, 153, 194, 202, 210, 218, 226, 234, 238, 243, 244, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 261, 262, 263, 264, 265, 270, 271, 272, 273, 274, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 288, 290, и 342; и
d) легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается одной или более консервативными аминокислотными заменами по меньшей мере в одной из SEQ ID NO: 45, 59, 68, 77, 79, 84, 86, 135, 195, 203, 211, 219, 227, 235, 256, 257, 258, 266, 267, 268, 269, 275, 276, 277, 278, 279, 287, и 289.
310. Конструкция слитого белка по п. 309, в которой конструкция слитого белка дополнительно содержит полипептид модулятора комплемента, при этом полипептид модулятора комплемента содержит по меньшей мере один из белка рецептора комплемента 1 (CR1), DAF, MCP, Crry, MAp44, MAp19, CD59, фактора H и их биологически активных фрагментов.