Эндотелиопротективные эффекты препаратов фосфоглив при экспериментальном моделировании дефицита оксида азота

ПРОБЛЕМЫ КЛИНИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ

Е. Б. АРТЮШКОВА

ЭНДОТЕЛИОПРОТЕКТИВНЫЕ ЭФФЕКТЫ ПРЕПАРАТОВ ФОСФОГЛИВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ МОДЕЛИРОВАНИИ

ДЕФИЦИТА ОКСИДА АЗОТА

Кафедра фармакологии НИИ экологической медицины Курского государственного медицинского университета

Введение

Нарушение функции эндотелия является одним из универсальных механизмов патогенеза многих заболеваний, в том числе таких распространенных, как атеросклероз, гипертоническая болезнь, сахарный диабет, и др. [10].

Сегодня доказаны эндотелиопротективные эффекты основных групп антигипертензивных препаратов (ингибиторов АПФ, блокаторов ангиотензиновых рецепторов, ингибиторов ГМГ-Ко-редуктазы, антагонистов кальция, бета-адреноблокаторов), антиоксидантов (токоферола, аскорбиновой кислоты, ретинола), а также препаратов, влияющих на метаболические процессы (убихинона, предуктала, мексидола) [5].

В настоящее время, несмотря на многочисленные исследования, посвященные фармакологическим свойствам фосфолипидов и глицирризиновой кислоты, мало что известно об эндотелио- и кардиопротектив-ных эффектах лекарственных композиций на их основе. Для понимания механизма защитного действия фосфолипидов следует иметь в виду, что все клеточные мембраны имеют достаточно типичное строение и примерно на 75% (мембраны митохондрий на 92%) состоят из фосфолипидов, основу которых составляет фосфатидилхолин. Помимо структурной функции фосфолипиды участвуют в процессах молекулярного транспорта, делении и дифференцировке клеток, стимулируют активность различных ферментных систем. Их основные функции заключаются в поддержании нормальной текучести и репарации клеточных мембран, антиоксидантном действии, защите митохондри-альных и микросомальных ферментов от повреждения, замедлении синтеза коллагена и повышении активности коллагеназы [1, 7].

Известна высокая эффективность в лечении ряда заболеваний глицирризиновой кислоты, которая является основным активным компонентом корня солодки. Глицирризин представляет собой кальциевую или калиевую соль трехосновной глицирризиновой кислоты. К настоящему времени описаны противовоспалительное, антиаллергическое, антивирусное и иммуномоду-лирующее свойства этого соединения [12, 9].

В связи с данными последних лет о важной физиологической роли N0 и образующих его ферментов ЫО-синтаз, о влиянии 18-Р-глицирретовой кислоты на активацию экспрессии индуцибельной ЫО-синтазы и увеличении продукции мРНК ЫО-синтазы, стабилизирующем действии смеси фосфатидилхолина и глицир-ризиновой кислоты на культуру эндотелиальных клеток

при воздействии токсических агентов представляется актуальным изучение эндотелио- и кардиопротектив-ных свойств препаратов на основе растительных фосфолипидов и глицирризиновой кислоты [11, 13, 18, 17].

Целью настоящего исследования явилось сравнительное исследование эндотелио- и кардиопротек-тивных свойств препаратов фосфоглив (капсулы) и фосфоглив (лиофилизат для приготовления раствора для внутривенного введения, далее лиофилизат) на модели L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота в эксперименте.

Методика исследования

Опыты проводились на белых крысах-самцах линии Wistar массой 200—250 г. N-нитро^-аргининме-тиловый эфир (L-NAME) вводился внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут (n=10) в течение 7 дней. На 8-й день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводили катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей, болюсное введение фармакологических агентов осуществляли в правую бедренную вену. Показатели кардиогемодинамики — систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД), частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряли посредством датчика P23ID «Gould» (США) и компьютерной программы «Bioshell» в исходе, а также на фоне функциональных проб:

1. Проба на эндотелийзависимое расслабление сосудов (внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг) [10].

2. Проба на эндотелийнезависимое расслабление сосудов (внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг) [2].

Для оценки степени развития эндотелиальной дисфункции у экспериментальных животных и ее коррекции исследуемыми препаратами нами производился расчет коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), являющийся отношением площади треугольника над кривой восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над кривой восстановления АД в ответ на введение АХ [8].

Для оценки функциональных возможностей миокарда у животных проводили нагрузочные пробы на нагрузку сопротивлением и 3-минутной гипоксией.

Исследуемые препараты вводились внутриже-лудочно на фоне введения (L-NAME) в следующих дозах:

фосфоглив (капсулы) 2,2 г/кг (содержание фосфа-тидилхолина 231,4 мг/кг), далее фосфоглив (капсулы) 2,2 г/кг;

фосфоглив (лиофилизат) 5,0 мл/кг (содержание фосфатидилхолина 231,4 мг/кг), далее фосфоглив (лиофилизат) 5,0 мл/кг;

фосфоглив (лиофилизат) 0,5 мл/кг (содержание фосфатидилхолина 23,14 мг/кг), далее фосфоглив (лиофилизат) 0,5 мл/кг.

Результаты исследования

Моделирование L-NAME-зависимой эндотелиаль-ной дисфункции вызвало стойкое повышение артериального давления в контрольной группе животных, связанное с блокадой синтеза оксида азота (NO). Так, в группе животных, не получавших лечения, гемоди-намические показатели составляли: систолическое артериальное давление (САД) — 190,3±6,7 мм рт. ст., диастолическое артериальное давление (ДАД) — 145,0±3,9 мм рт. ст. при частоте сердечных сокращений (ЧСС) 428±11 уд./мин. В группе интактных животных данные показатели распределились следующим образом: САД — 137,7±3,7 мм рт. ст., ДАД — 101,9±4,3 мм рт. ст. и ЧСС — 420±9 уд./мин. Как мы и предполагали, применение препаратов фосфоглив (капсулы), фосфоглив (лиофилизат) не оказывало существенного влияния на базальный уровень артериального давления (АД). Во всех экспериментальных группах наблюдалось повышение САД и ДАД в той же степени, что и в контрольной группе животных (табл. 1).

При изучении влияния на эндотелий исследуемых препаратов на основании времени и выраженности реакций на эндотелийзависимое расслабление сосудов

(внутривенное введение ацетилхолина) и эндотелий-независимое расслабление — внутривенное введение нитропруссида натрия, мы рассчитывали коэффициент эндотелиальной дисфункции — КЭД, отражающий соотношения этих реакций сосудистого русла. Данный показатель был рассчитан для каждого животного ин-тактной группы и животных после моделирования блокады NO-синтазы, при этом получили достоверную разницу КЭД в 5 раз, соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME (табл. 2). У животных, получавших на фоне введения L-NAME фосфоглив (капсулы) в дозе 2,2 г/кг, КЭД соответствовал значению 2,2±0,3, а при использовании препарата фосфоглив (лиофилизат) в дозах 5,0 мл/кг и 0,5 мл/кг коэффициент эндотелиальной дисфункции был равен соответственно 3,1±0,4 и 2,9±0,5. Обращает на себя внимание тот факт, что время сосудистой реакции и площадь сосудистой реакции над трендом реакции восстановления в ответ на введение НП в группе, получавшей L-NAME, были достоверно больше по сравнению с интактной группой животных. В то время как на фоне введения исследуемых препаратов данные показатели демонстрировали более высокие значения в ответ на введение АХ по сравнению с группой нелеченных животных. При этом время сосудистой реакции у животных, получавших фосфоглив (лиофилизат), было не только более продолжительным, но и достоверно не отличалось от группы интактных животных (табл. 2).

Полученные данные могут свидетельствовать о выраженном эндотелиопротективном эффекте препаратов фосфоглив как в капсульной, так и в инъекционной форме, что выражалось в снижении коэффициентов эндотелиальной дисфункции при экспериментальном моделировании дефицита оксида азота.

Для исследования кардиопротективных свойств препаратов нами была использована нагрузка сопро-

Таблица 1

Группы животных Функциональные пробы САД, мм рт. ст. ДАД, мм рт. ст. ЧСС, уд. в мин.

Интактные Исходные 137,7 ±3,7 у 101,9 ± 4,3 у 420 ± 9

ЭЗВ с АХ 84,3 ± 4,5 у 38,7 ±2,8 у 416 ±14

ЭНЗВ с НП 83,0 ± 3,7 42,1 ± 4,4 415 ± 10

Получавшие L-NAME Исходные 190,3 ± 6,7* 145,0 ± 3,9* 428 ± 11

ЭЗВ с АХ 110,6 ± 5,2* 82,8 ± 6,6* 426 ± 14

ЭНЗВ с НП 88,7 ± 4,7 50,8± 4,2 426 ± 13

L-NAME + фосфоглив (капсулы) (2,2 г/кг) Исходные 197,8±6,8 142,7±4,0 364 ± 14*у

ЭЗВ с АХ 91,6 ± 3,4 50,4 ± 3,0 348 ± 14*у

ЭНЗВ с НП 104,3 ± 4,5 55,5 ± 5,1 377 ± 17у

L-NAME + фосфоглив (лиофилизат) (5,0 мл/кг) Исходные 181,0±10,5* 138,3±7,8* 365 ± 10*у

ЭЗВ с АХ 95,0±3,2 58,9±4,0* у 360 ± 9*у

ЭНЗВ с НП 94,6±4,9 47,8±4,0 375 ± 10у

L-NAME + фосфоглив (лиофилизат) (0,5 мл/кг) Исходные 203,2±11,3* 157,4±8,4* 391 ± 5 у

ЭЗВ с АХ 108,0±5,1 65,1±3,8* 378 ± 4 у

ЭНЗВ с НП 120,7±4,2*у 67,8±7,8 393 ± 8

Динамика показателей АД и ЧСС при моделировании дефицита оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции препаратами фосфоглив

и фосфоглив

68

Примечание: * — р<0,05 в сравнении с интактными, у — р<0,05 в сравнении с группой L-NAME.

Таблица 2

Показатели, отражающие коррекцию эндотелиальной дисфункции на фоне введения L-NAME препаратами фосфоглив

Группы животных Функциональные пробы Прирост падения сосудистой реакции по СрАД (мм рт. ст.) Время сосудистой реакции (сек.) Площадь сосудистой реакции (усл. ед.) Отношение площадей сосудистой реакции НП к АХ

Интактные АХ 59,9±2,9 42,2±0,8 1268,0±74,8 1,1±0,1

НП 61,0±3,0 45,1±1,0 1375,3±93,7

1_-ЫАМЕ АХ 68,0±4,1 20,0±1,4* 695,3±87,6* 5,4±0,6*

НП 98,0±2,0* 67,4±1,4* 3322,7±116,7*

1_-ЫАМЕ + фосфоглив (капсулы) АХ 96,9±4,3*у 52,4±2,4*у 2554,2±177,6*у 2,2±0,3 у

НП 92,0±4,0* 108,5±11,0*у 4954,9±497,3*у

1_-ЫАМЕ + фосфоглив (лиофилизат) (5,0 мл/кг) АХ 81,6±6,1* 42,0±4,1у 1710,8±231,7 у 3,1±0,4* у

НП 97,0±7,0* 101,8±6,8* у 4975,5±578,8* у

1_-ЫАМЕ + фосфоглив (лиофилизат) (0,5 мл/кг) АХ 93,3±7,2* у 49,0±5.7 у 2347,0±352,7* у 2,9±0,5* у

НП 86,0±6,0* 136,6±12,3* у 5783,7±560,0* у

Примечание: * — р<0,05 в сравнении с группой интактных, у — р<0,05 в сравнении с группой 1_-ЫАМЕ.

тивлением (пережатие дуги восходящей аорты в течение 30 секунд). Экспериментальное моделирование дефицита оксида азота привело к достоверному снижению приростов ЛЖД как на 5-й, так и на 25-й секунде пережатия аорты (рис. 1). На фоне введения исследуемых препаратов имело место выраженное кардио-протективное действие, которое проявилось в значительном увеличении приростов ЛЖД по сравнению с группой животных, получавших 1_-ЫАМЕ. При этом значения приростов ЛЖД на 5-й и 25-й секундах на фоне введения препарата фосфоглив (лиофилизат) в дозе 0,5 мл/кг не уступали таковым при введении препарата в дозе, в 10 раз большей. Данный факт может свидетельствовать о большей биологической доступности препарата фосфоглив (лиофилизат) за счет входящих в его состав фосфолипидных наночастиц, обеспечивающих высокую эффективность транспортной системы и способность восстанавливать структуру и нарушенные свойства мембран кардиомиоцитов, возникшие при моделировании 1_-ЫАМЕ патологии.

При проведении пробы на нагрузку сопротивлением в качестве критерия эффективности использовалась способность миокарда поддерживать максимально высокое ЛЖД на всем протяжении пробы. На 5-й секунде пережатия аорты измерялся прирост ЛЖД и принимался за 100% (миокардиальный резерв сократимости), затем прирост ЛЖД относительно исходного давления измерялся на 25-й секунде и выражался в виде % от величины миокардиального резерва (рис. 2). Очевидно, что введение 1_-ЫАМЕ экспериментальным животным вызывало серьезные нарушения в способности

миокарда переносить максимальные нагрузки в течение длительного периода времени.

Применение препаратов фосфоглив (капсулы), фосфоглив (лиофилизат) приводило к тому, что исчерпание миокардиального резерва было достоверно меньше по сравнению с группой нелеченных животных. Причем значения исчерпания миокардиального резерва препарата фосфоглив (лиофилизат) приближались к группе интактных животных как в дозе 5,0 мл/кг, так и в дозе, в 10 раз меньшей, и были сопоставимы с эффектом препарата фосфоглив (капсулы). На основании этих данных можно предположить, что кардиопротек-тивный эффект препаратов обусловлен суммированием эффектов глициррата и фосфолипидов, связанных с предупреждением нарушения свойств мембран кардиомиоцитов, возникшего при моделировании 1_-ЫАМЕ патологии, а отсутствие дозозависимого эффекта вызвано повышением биодоступности препарата на основе лиофилизата для приготовления раствора для внутривенного введения.

В заключительной части эксперимента мы проводили гипоксическую пробу с целью выявления действия препаратов на изменения в работе миокарда после реоксигенации (рис. 3).

При данной пробе положительные сдвиги наблюдались во всех группах, принимавших препарат, приросты давления были достоверно выше по сравнению с контрольной группой, не получавшей лечения.

Эти данные говорят о модулирующем действии проводимой терапии в отношении сосудистого русла в отличие от группы контроля, где наблюдались

заклеивающий дефекты поврежденных биологических мембран независимо от их происхождения. Вторым компонентом фосфоглива является глицирризиновая кислота — соединение с антивирусной активностью, широко известное в Японии, Китае и других странах Юго-Восточной Азии. В основе механизма его действия лежат интерферонпродуцирующая активность, противовоспалительное, иммуномодулирующее, ан-тиоксидантное действие. Кроме того, наличие в молекуле ГК гидрофильного и гидрофобного фрагментов придает ей поверхностно-активные и гелеобразую-щие свойства, которые объясняют широкий диапазон ее использования [3].

Оригинальная технология получения инъекционной формы препарата фосфоглив позволила создать уникальную фосфолипидную наносистему эмульгированных мицелл и липосом, представляющую собой устойчивые частицы со средним диаметром 30—50 нм. Можно предположить, что, как и любые другие наночастицы, они могут обладать совершенно иными физико-химическими свойствами по сравнению с микро- и макросистемами того же состава, и изучение этих свойства представляется актуальным для комплексного экспериментального исследования [14, 3].

В ходе проведенных нами исследований с помощью комплекса физиологических методов были получены результаты, указывающие на отчетливое эндотелиопротективное действие препаратов фос-фоглив (капсулы) и фосфоглив (лиофилизат) на модели L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота, выражавшееся в преобладании эндотелийза-висимого расслабления сосудов и снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции. Результаты нагрузочных проб выявили способность препарата фосфоглив предотвращать исчерпание миокарди-ального резерва, а также изменять реактивность миокарда в ответ на 3-минутную гипоксию с последующей реоксигенацией. Полученные данные об эндотелио- и кардиопротективных эффектах свидетельствуют о высокой биологической доступности препарата фосфоглив, полученного на основе нано-технологий, которая способствует восстановлению структуры и нарушенных свойств мембран кардио- и эндотелиоцитов, возникших при моделировании L-NAME-патологии.

Накопленные к настоящему времени данные о роли биомембран в жизнедеятельности клетки и об универсальном характере повреждений мембран при широком спектре патологических состояний позволяют предполагать, что репарация поврежденных мембран независимо от повреждающего фактора будет неспецифично приводить к нормализации клеточных функций. Вероятно, такую неспецифичную «мембранную терапию» целесообразно включать в схему лечения многих заболеваний в комбинации с соответствующей специфической терапией, направленной на прекращение данного патологического воздействия.

Поступила 23.04.2008

ЛИТЕРАТУРА

1. Арчаков А. И., Сельцовский А. П., Лисов В. И., Цыганов Д. И., Княжев В. А., Ипатова О. М., Торховская Т. И. Фосфоглив: механизм действия и эффективность применения в клинике // Вопр. мед. химии. 2002. Т. 48. C. 139—151.

2. Галаган М. Е. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо- и эндогенных источников // Вопр. мед. химии. 1991. Т. 37, № 1. С. 67—70.

3. Ипатова О. М. Фосфоглив: механизм действия и применение в клинике / Под редакцией академика РАМН А. И. Арчако-ва. Москва: изд-во ГУ НИИ биомедицинской химии РАМН, 2005. 318 с.

4. Маколкин В. И. Микроциркуляция в кардиологии / В. И. Ма-колкин, В. И. Подзолков, В. В. Бранько и др. Москва, 2004. 136 с.

5. Малая Л. Т., Корж А. Н., Балковая Л. Б. Эндотелиальная дисфункция при патологии сердечно-сосудистой системы. Харьков: изд-во «ТОРСИНГ», 2000. 354 с.

6. Марков Х. М. Оксидантный стресс и дисфункция эндотелия // Патол. физиология и эксперим. терапия. 2005. № 4. С. 5—9.

7. Никитин И. Г. Гепатопротекторы: мифы и реальные возможности // Фарматека. 2007. Т. 147, № 13. С. 14—18.

8. Покровский М. В., Кочкаров В. И., Покровская Т. Г. и др. Методические подходы для количественной оценки развития эн-дотелиальной дисфункции при L-NAME-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте // Кубанский научный медицинский вестник. Краснодар, 2006. Т. 12.

9. Сторожаков Г. И., Байкова И. Е. Глицирризин в лечении хронических вирусных гепатитов // Клин. фармакология и терапия.

2000. № 9. С. 39—41.

10. Bautista L. E. Inflammation, endothelial dysfunction, and the risk of high blood pressure: epidemiologic and biological evidence // J. Hum. Hypertens. 2003. V. 17 (4). P. 223—230.

11. Jeong H. G., Kim J. Y. Induction of inducible nitric oxide synthase expression by 18-beta-glycyrrhetinic acid in macrophages. FEBS Lett. 2002, № 513. Р. 208—212.

12. Kusano G., Shibano M., Watanabe H., Ozaki K. Pharmaceutical botanical studies on some glycyrrhiza species. Yakugaku Zasshi. 2003, № 123. Р. 619—631.

13. Li Y., Cai H. Effect of glycyrrhizin on plasma endothelin and serum nitric oxide in myocardial ischemia reperfusion rabbits. Hunan Yi Ke Da Xue Xue Bao. 1999, № 24. Р. 377—378.

14. Moghimi S. M., Yunter A. C., Murray J. C. Long-circulating and target-specific nanoparticles: theory to practice. Pharmacol Reviews.

2001, № 53. Р. 283—318.

15. Soloviev A. I., Stefanov A. V., Bazilyuk O. V., Sagach V. F. Phospholipid vesicles (liposomes) restore endothelium-dependent cholinergic relaxation in thoracic aorta from spontaneously hypertensive rats. Journal Hypertens. 1993, № 11 (6). Р. 623—627.

16. Soloviev A. I., Stefanov A. V., Tishkin S. M., Khromov A. S., Parshikov A. V., Ivanova I. V., Gurney A. M. Saline containing phosphatidylcholine liposomes possess the ability to restore endothelial function damaged resulting from g-irradiation. Journal of physiology and pharmacology. 2002, № 53 (4). Р. 701—712.

17. Stuart-Smith K. Demystified nitric oxide. J Clin Patol: Mol Pathol. 2002, № 55. Р. 360—366.

18. Torkhovskaya T., Khalilov E., Medvedeva N., Morozkin A., Misharin A., Ipatova O., Antonov A., Kabayeva N., Archakov A. Antiatherogenic action of micelles with glycyrrhizin on plasma lipoproteins and endothelial culture cells. XIII Lipid Meeting Leipzig, Germany. 2002. Р. 82—83.

E. B. ARTYUSHKOVA

ENDOTHELIOPROTECTIVE EFFECTS

OF FOSFOGLIV PREPARATIONS DURING EXPERIMENTAL MODELLING OF DEFICIENCY OF NITROGEN OXYDE

Experimental research of endothelio- and cardioprotective effects of fosfogliv preparation (capsule) and fosfogliv preparation (liofilizat) at the

L-NAME-induced deficiency of nitrogen oxyde have been carried out.

With the help of complex of physiological methods were achieved results specifying on distinct endothelio-and cardioprotective action of fosfogliv preparation

(capsule) and fosfogliv preparation (liofilizat) received on the nanotechnologies basis.

The present research allows to recommend these preparations to wide clinical studying.

Е. Б. АРТЮШКОВА, М. В. ПОКРОВСКИЙ, Е. В. АРТЮШКОВА, М. В. КОРОКИН, К. Е. БОБРАКОВ

МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ И АНТИОКСИДАНТНАЯ ТЕРАПИЯ L-NAME-ИНДУЦИРОВАННОЙ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ

ДИСФУНКЦИИ

Кафедра фармакологии НИИ экологической медицины Курского государственного медицинского университета

Введение

В России распространенность АГ среди взрослого населения превышает 30%; наша страна занимает одно из первых мест в Европе по смертности от инсультов и ИБС [2, 3, 18, 11]. Одной из основных причин АГ является эндотелиальная дисфункция (ЭД), в первую очередь нарушение релаксационных свойств эндотелия [1, 4, 13, 20, 22].

Главным механизмом, лежащим в основе эндотели-альной дисфункции, является изменение метаболизма оксида азота (N0) [19].

В коррекции эндотелиальной дисфункции перспективными считаются препараты, обладающие антиок-сидантной активностью (мексикор), так как главным механизмом, лежащим в основе эндотелиальной дисфункции, являются снижение продукции и биодоступность N0 при одновременном повышении уровня супероксид-аниона вследствие увеличения окислительной активности НАДФ [11]. Кроме того, известно, что ингибиторы окисления свободных жирных кислот (триметазидин, милдронат), увеличивая количество гамма-бутиробетаина, способны осуществлять индукцию биосинтеза N0.

В этой связи стратегия на понижение уровня и про-грессирования эндотелиальной дисфункции, вызванной снижением продукции и биодоступности оксида азота, заключается в использовании средств метаболической терапии и антиоксидантов с целью сохранения N0^^ дуцированных сигнальных путей в сосудах [7].

Целью настоящего исследования явилось изучение эндотелио- и кардиотропных эффектов препаратов кардионат (ОАО «Фармстандарт-Лексредства») и мексикор (ООО «ЭкоФармИнвест») в условиях моделирования Ь^АМЕ-индуцированной эндотелиальной дисфункции.

Методика исследования

Эксперименты выполнены на 40 половозрелых самцах крыс линии массой 180—220 г.

С целью моделирования эндотелиальной дисфункции ^нитро-Ь-аргининметиловый эфир (Ь^АМЕ-не-

селективный блокатор N0-синтазы) вводился внутри-брюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. в течение 7 дней.

Кардионат в дозе 80 мг/кг вводили в течение 7 дней внутрижелудочно, за 30 минут до внутрибрюшинного введения Ь^АМЕ в дозе 25 мг/кг.

Мексикор в дозе 30 мг/кг вводили в течение 7 дней внутрижелудочно, за 30 минут до внутрибрюшинного введения Ь^АМЕ в дозе 25 мг/кг.

На 7-й день от начала эксперимента под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) в левую сонную артерию вводили катетер для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляли в бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастоли-ческое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) — измеряли непрерывно посредством датчика и компьютерной программы «ВювМеИ».

Помимо измерения артериального давления (АД) проводили ряд функциональных тестов с последующей оценкой изменения параметров гемодинамики (САД, ДАД, ЧСС): эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВД) в ответ на внутривенное введение раствора ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг из расчета 0,1 мл на 100 г массы тела животного [23], а также эндотелий-независимая вазодилатация (ЭНВД) в ответ на внутривенное введение раствора нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг из расчета 0,1 мл на 100 г массы тела животного [5, 8].

Степень эндотелиальной дисфункции у экспериментальных животных, а также степень ее коррекции исследуемыми препаратами оценивали по расчетному коэффициенту эндотелиальной дисфункции (КЭД), представляющему собой отношение площади треугольника над кривой восстановления АД в ответ на введение НП (ЭНВД) к площади треугольника над кривой восстановления АД в ответ на введение АХ (ЭЗВД) [14].

Для оценки функциональных возможностей миокарда у животных, находящихся на управляемом дыхании, катетеризировали полость левого желудочка