МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ДЕНДРИТНЫЕ КЛЕТКИ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ЛЕЧЕНИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ

1. Вектор, для регулируемой экспрессии обладающего функцией интерлейкина-12 (IL-12) белка, который содержит полинуклеотид, который кодирует переключатель гена, содержащий (1) по меньшей мере одну последовательность транскрипционного фактора, причем указанная, по меньшей мере одна последовательность транскрипционного фактора кодирует лигандзависимый транскрипционный фактор, функционально связанный с промотором, и (2) полинуклеотид, кодирующий обладающий функцией интерлейкина-12 белок и связанный с промотором, который активируется указанным лигандзависимым транскрипционным фактором.
2. Вектор по п.1, который представляет собой аденовирусный вектор.
3. Вектор по п.2, который представляет собой вектор rAD.RheoIL12.
4. Вектор по пп.1-3, в котором указанный переключатель гена представляет собой переключатель гена на основе рецептора экдизона (EcR).
5. Вектор по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует переключатель гена, который содержит первую последовательность транскрипционного фактора и вторую последовательность транскрипционного фактора под контролем промотора, причем белки, кодируемые указанной первой последовательностью транскрипционного фактора и указанной второй последовательностью транскрипционного фактора, взаимодействуют с образованием белкового комплекса, функционирующего в качестве лигандзависимого транскрипционного фактора.
6. Вектор по п.5, отличающийся тем, что указанный первый транскрипционный фактор и указанный второй транскрипционный фактор соединены посредством участка внутреннего сайта посадки рибосомы (IRES).
7. Вектор по п.1, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид, кодирующий переключатель гена, содержит первую последовательность транскрипционного фактора под контролем первого промотора и вторую последовательность транскрипционного фактора под контролем второго промотора, причем белки, кодируемые указанной первой последовательностью транскрипционного фактора и указанной второй последовательностью транскрипционного фактора, взаимодействуют с образованием белкового комплекса, который функционирует как лигандзависимый транскрипционный фактор.
8. Вектор по любому из пп.1-3, 6 и 7, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид, кодирующий обладающий функцией интерлейкина-12 белок, кодирует интерлейкин-12 человека.
9. Способ получения популяции дендритных клеток, регулируемо экспрессирующих обладающий функцией интерлейкина-12 белок, включающий в себя модификацию по меньшей мере части дендритных клеток путем введения в указанные дендритные клетки вектора по любому из пп.1-8.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанные дендритные клетки представляют собой дендритные клетки человека.
11. Модифицированные in vitro дендритные клетки, содержащие вектор по любому из пп.1-8.
12. Фармацевтическая композиция, содержащая популяцию модифицированных in vitro дендритных клеток по п.11.
13. Фармацевтическая композиция по п.12, отличающаяся тем, что указанная фармацевтическая композиция предназначена для внутриопухолевого, внутрибрюшинного или подкожного введения.
14. Применение популяции модифицированных in vitro дендритных клеток по п.11 в получении медикамента для лечения опухоли млекопитающего.
15. Применение по п.14, отличающееся тем, что указанная опухоль представляет собой меланому.
16. Применение по п.14, отличающееся тем, что указанному млекопитающему дополнительно вводят эффективное количество лиганда, который активирует лигандзависимый транскрипционный фактор.
17. Применение по п.16, отличающееся тем, что указанный лиганд вводят внутриопухолево, орально, внутрибрюшинно или подкожно.
18. Способ определения эффективности терапевтического режима с применением модифицированных in vitro дендритных клеток у пациента, включающий:
(a) измерение уровня экспрессии и/или уровня активности интерферона-гамма (IFN-γ) в первом биологическом образце, полученном от указанного пациента, нуждающегося в терапии, до введения модифицированных in vitro дендритных клеток с получением контрольного уровня;
(b) введение пациенту, нуждающемуся в терапии, модифицированных in vitro дендритных клеток по п.11;
(c) введение указанному пациенту, нуждающемуся в терапии, эффективного количества активирующего лиганда;
(d) измерение уровня экспрессии и/или уровня активности интерферона-гамма (IFN-γ) во втором биологическом образце, полученном от указанного пациента, нуждающегося в терапии, после введения модифицированных in vitro дендритных клеток и активирующего лиганда с получением тестового уровня; и
(e) сравнение контрольного и тестового уровней интерферона-гамма, причем повышение уровня тестового уровня экспрессии и/или активности IFN-γ по сравнению с контрольным уровнем свидетельствует об эффективности терапевтического режима для данного пациента, нуждающегося в терапии.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный пациент является онкологическим пациентом.
20. Способ по п.19, отличающийся тем, что указанный онкологический пациент болеет меланомой.
21. Набор, содержащий модифицированные in vitro дендритные клетки по п.11.
22. Применение популяции модифицированных in vitro дендритных клеток по п.11 при производстве медикамента для индуцирования регулируемой экспрессии белка, обладающего функцией интерлейкина-12 в дендритных клетках.
23. Применение по п.22, отличающееся тем, что указанные модифицированные in vitro дендритные клетки вводят млекопитающему, которое имеет опухоль.
24. Применение по п.23, отличающееся тем, что указанные модифицированные in vitro дендритные клетки вводят внутриопухолево, внутрибрюшинно или подкожно.
25. Применение по п.23, отличающееся тем, что указанная опухоль представляет собой меланому.