СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НЕВИДИМЫХ МЕХАНИЧЕСКИХ ВКЛЮЧЕНИЙ В ОКРАШЕННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВАХ
METHOD FOR DETERMINATION OF INVISIBLE IMPURITIES IN COLOURED MEDICINAL AGENTS

Изобретение относится к способам определения размеров частиц, в частности к способам определения невидимых механических включений в окрашенных лекарственных препаратах для парентерального применения. Изобретение может быть использовано для контроля качества лекарственных препаратов.
Известен способ определения невидимых механических включений в парентеральных лекарственных препаратах, состоящий в визуальном определении невидимых частиц за счет увеличения изображения не менее 100 раз и подсчета с помощью окуляр-микрометра микроскопа с минимальной ценой деления 2,5 мкм [1]. Способ включает:
- пробоподготовку образца,
- помещение образца на предметный столик микроскопа,
- просмотр и подсчет с помощью окуляр-микрометра,
- регистрацию количества и размеров невидимых механических включений.
Общим с заявляемым изобретением является стадия пробоподготовки образца.
К недостаткам этого известного способа следует отнести субъективность, длительность, неточность. Это обусловлено тем, что определение невидимых механических включений данным способом возможно в неокрашенных или слабоокрашенных растворах.
Ближайшим аналогом заявленного изобретения является применение метода светоблокировки (затемнение светового потока) для определения невидимых механических включений в парентеральных лекарственных препаратах [2].
Способ включает следующие стадии:
- подготовка пробы препарата и помещение пробы в прибор,
- измерение и подсчет количества невидимых механических включений,
- обработка результатов.
Общим с заявляемым изобретением является стадия пробоподготовки образца.
К недостаткам данного способа следует отнести то, что для окрашенных лекарственных препаратов он не может быть использован из-за интенсивности окраски препарата и его непрозрачности для проходящего света, что является препятствием для определения невидимых механических включений в неразбавленных окрашенных препаратах.
Задачей изобретения является расширение арсенала способов для определения невидимых механических включений в окрашенных лекарственных средствах, повышение точности, сокращение времени анализа.
Поставленная задача решается благодаря тому, что при использовании способа электрочувствительных зон для определения точного количества и размеров невидимых механических включений в лекарственных средствах для парентерального применения их окраска (цвет, интенсивность окраски), коэффициент преломления образца; размер, форма и коэффициент преломления невидимых механических включений не влияют на точность измерения.
Предложенный способ определения количеств и размеров невидимых механических включений в окрашенных лекарственных препаратах обеспечивает точность, объективность, высокую скорость и возможность выполнения статистической обработки данных.
Способ определения невидимых механических включений в окрашенных лекарственных средствах характеризуется тем, что подготавливают пробы окрашенного препарата для определения невидимых механических включений, проводят измерения и обрабатывают полученные результаты, при этом отбор пробы производят в боксе с ламинарным потоком воздуха в условиях, ограничивающих попадание механических включений, а в ходе проведения измерений регистрируют электрические импульсы, возникающие при прохождении пробы препарата через электрочувствительную зону.
Продолжительность единичного измерения - не более 30 секунд.
Количество невидимых механических включений в широком диапазоне их размеров воспроизводится в виде графика и цифровых данных.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1. Дифференциальный график содержания невидимых механических включений в препарате гидроксиалюминия трисульфофталоцианина.
Фиг. 2. Дифференциальный график содержания невидимых механических включений в препарате железа.
Средства и методы
При определении невидимых механических включений в окрашенных препаратах для парентерального применения использовали счетчик частиц Coulter Counter Multisizer-3 производства Beckman Coulter, США. Счетчик частиц представляет собой установку, содержащую апертурную трубку, систему анализа жидкостей, включающую насос и измерительный прибор, и элементы для управления апертурным током. Диапазон размеров частиц от 0,4 мкм до 1200 мкм.
Принцип действия прибора основан на регистрации электрических импульсов, возникающих при прохождении частицы через апертуру (электрочувствительная зона). Величина импульса пропорциональна размеру частицы.
Предварительно была произведена настройка прибора: установлена трубка с апертурой диаметром отверстия 100 мкм (диапазон размеров от 2 до 60 мкм), число каналов 256; сила тока в апертурной трубке 1600 мА.
Реактивы: раствор Coulter Isoton II.
Калибровка прибора: прибор калибровали с помощью латексных стандартов (Coulter СС Size Standard) производства Beckman Coulter, Inc. США, размером 5 мкм.
Для проведения анализа заполняли систему прибора раствором Coulter Isoton II.
Перед началом работы проводили проверку пригодности условий испытания, измеряя фоновый уровень - количество механических включений размером более 5 мкм и более 25 мкм в трех общих пробах раствора Coulter Isoton II. Количество включений не должно превышать 60. Результаты проверки пригодности условий показали отсутствие механических включений размером более 5 мкм и более 25 мкм.
Пример 1. Определение размера и количества невидимых механических включений свыше 10 мкм и более 25 мкм в окрашенном концентрате гидроксиалюминия трисульфофталоцианина, 2 мг/мл, для приготовления раствора для инфузий.
Пробоподготовка
Отбор пробы производили в боксе с ламинарным потоком воздуха в условиях, ограничивающих попадание механических включений. Для определения невидимых механических включений в окрашенном препарате для инфузий было отобрано 25 мл препарата из 10 флаконов с препаратом в химический стакан.
Химический стакан с исследуемым препаратом помещали в прибор и проводили измерение.
Результат
Количество невидимых механических включений размером более 10 мкм составляет 20 частиц в одном флаконе исследуемого окрашенного концентрата для приготовления раствора для инфузий.
Невидимые механические включения размером более 25 мкм в исследуемом окрашенном концентрате для приготовления раствора для инфузий не обнаружены. Распределение частиц по размерам приведено на фиг. 1.
Пример 2. Определение размера и количества невидимых механических включений свыше 10 мкм и более 25 мкм в лиофилизированном окрашенном препарате для внутривенного применения индоцианина зеленого, лиофилизат для внутривенного применения 5 мг/мл.
Пробоподготовка
Отбор пробы производили в боксе с ламинарным потоком воздуха в условиях, ограничивающих попадание механических включений. Для определения невидимых механических включений в лиофилизированном окрашенном препарате для внутривенного введения отбирали 10 флаконов с препаратом, содержимое каждого флакона с препаратом растворяли в 5 мл раствора Coulter Isoton II и полученные образцы раствора окрашенного препарата объединяли. Далее в химический стакан отобрали 25 мл объединенной пробы препарата.
Химический стакан с исследуемой объединенной пробой помещали в прибор и проводили измерение.
Результат
Количество невидимых механических включений размером более 10 мкм составляет 28 частиц в одном флаконе исследуемого лиофилизированного окрашенного препарата для внутривенного введения 5 мг/мл.
Невидимые механические включения размером более 25 мкм в исследуемом лиофилизированном окрашенном препарате для внутривенного введения 5 мг/мл не обнаружены.
Пример 3. Определение размера и количества невидимых механических включений свыше 10 мкм и более 25 мкм в окрашенном препарате для парентерального применения железа (III) гидроксид полимальтозат, раствор для внутримышечного введения 50 мг/мл.
Пробоподготовка
Отбор пробы производили в боксе с ламинарным потоком воздуха в условиях, ограничивающих попадание механических включений. Для определения невидимых механических включений в окрашенном препарате для внутримышечного введения было отобрано 10 ампул по 5 мл препарата, содержимое которых объединяли в единую пробу. Из объединенной пробы в химический стакан перенесли 25 мл.
Химический стакан с исследуемым пробой помещали в прибор и проводили измерение.
Результат
Количество невидимых механических включений размером более 10 мкм в исследуемом окрашенном препарате железа (III) гидроксид полимальтозат для внутримышечного применения 50 мг/мл составляет 3 частицы на одну ампулу.
Невидимые механические включения размером более 25 мкм в исследуемом окрашенном препарате железа (III) гидроксид полимальтозат для внутримышечного применения 50 мг/мл не обнаружены. Распределение частиц по размерам приведено на фиг. 2.
Пример 4. Определение размера и количества невидимых механических включений свыше 10 мкм и более 25 мкм в окрашенном препарате для внутривенного введения железа (III) гидроксид сахарозный комплекс, 20 мг/мл.
Пробоподготовка
Отбор пробы производили в боксе с ламинарным потоком воздуха в условиях, ограничивающих попадание механических включений. Для определения невидимых механических включений в окрашенном препарате для внутримышечного введения было отобрано 10 ампул по 5 мл препарата, содержимое которых объединяли в единую пробу. Из объединенной пробы в химический стакан перенесли 25 мл.
Химический стакан с исследуемой пробой помещали в прибор и проводили измерение.
Результат
Количество невидимых механических включений размером более 10 мкм в исследуемом окрашенном препарате для внутривенного введения железа (III) гидроксид сахарозный комплекс 20 мг/мл составляет 7 частиц на одну ампулу.
Невидимые механические включения размером более 25 мкм в исследуемом окрашенном препарате для внутривенного введения железа (III) гидроксид сахарозный комплекс 20 мг/мл не обнаружены.
Результаты проведенных испытаний окрашенных лекарственных средств на примере препарата железа (III) гидроксид полимальтозат показали эффективность способа определения невидимых механических включений в окрашенных лекарственных средствах и продемонстрировали точность получаемых результатов. Результаты испытаний приведены в представленной ниже таблице.
Из данных, представленных в таблице, следует, что при помощи способа электрочувствительных зон получены более низкие значения метрологических характеристик, чем способом микроскопии, и мера отклонения опытных данных от выборочного среднего значения (CV%) у способа электрочувствительных зон меньше, чем у способа микроскопии, что подтверждает более высокую точность способа электрочувствительных зон.
Кроме этого, при применении способа электрочувствительных зон для определения невидимых механических включений в окрашенных лекарственных средствах время, требуемое для выполнения испытания данным способом составило всего 30 сек, в то время как на испытание способом микроскопии было затрачено 30 минут, что очевидным образом говорит о преимуществах заявленного изобретения перед известными аналогами.
Список литературы
1. Механические включения в инъекционных лекарственных препаратах / Фармакопея США: USA 29; Национальный формуляр: NF24: в 2 т.: [пер. с англ.] // - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - Т. 2. - С. 2583-2586.
2. Механические включения в инъекционных лекарственных препаратах / Фармакопея США: USA 29; Национальный формуляр: NF24: в 2 т.: [пер. с англ.] // - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - Т. 2. - С. 2579-2583.