СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ИЗ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА И МЕЗЕНХИМАЛЬНЫЕ СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ, ПОЛУЧЕННЫЕ ЭТИМ СПОСОБОМ

1. Способ получения мезенхимальных стволовых клеток из плюрипотентных стволовых клеток человека, включающий:
а) получение эмбриоидных телец из плюрипотентных стволовых клеток человека;
b) прикрепление эмбриоидных телец к чашке Петри для индукции спонтанной дифференцировки эмбриоидных телец в мезенхимальные стволовые клетки; и
c) культивирование с пролиферацией мезенхимальных стволовых клеток при сохранении идентичности мезенхимальных стволовых клеток.
2. Способ по п.1, где плюрипотентные стволовые клетки человека стадии a) культивируют в течение 14 суток с получением эмбриоидных телец.
3. Способ по п.1, где эмбриоидные тельца стадии b) культивируют в основных компонентах модифицированной по Дульбекко среды Игла (DMEM), содержащей эмбриональную телячью сыворотку (FBS), тем самым индуцируя их дифференцировку.
4. Способ по п.1, где индукция спонтанной дифференцировки стадии b) происходит посредством формирования петель аутологичного цитокина без дополнительного внесения цитокина.
5. Способ по п.4, где аутологичный цитокин представляет собой морфогенетический белок кости (ВМР).
6. Способ по п.1, где мезенхимальные стволовые клетки стадии с) культивируют с применением среды, содержащей эпидермальный фактор роста человека (hEGF), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), основной фактор роста фибробластов человека (hFGF-B), инсулиноподобный фактор роста (IGF-1), гидрокортизон и аскорбиновую кислоту.
7. Мезенхимальные стволовые клетки, полученные способом по любому из пп.1-6.
8. Средства клеточной терапии, содержащие мезенхимальные стволовые клетки по п.7.
9. Средство клеточной терапии по п.8, образующее клетки, выбранные из группы, состоящей из адипоцитов, остеоцитов, хондроцитов, миоцитов, нейроцитов и кардиомиоцитов.
10. Способ применения мезенхимальных стволовых клеток, полученных способом по любому из пп.1-6, в качестве фидерных клеток для культивирования клеток.
11. Способ по п.10, где клетки представляют собой плюрипотентные стволовые клетки человека.
12. Способ по п.11, где плюрипотентные стволовые клетки человека проходят 30 пассажей.
13. Фидерные клетки для культивирования клеток, представляющие собой мезенхимальные стволовые клетки, полученные способом по любому из пп.1-6.
14. Фидерные клетки по п.13, где клетки представляют собой плюрипотентные стволовые клетки человека.
15. Набор для получения мезенхимальных стволовых клеток человека, где набор содержит:
а) среду для эмбриональных стволовых клеток, лишенную основного фактора роста фибробластов (bFGF);
b) модифицированную по Дульбекко среду Игла (DMEM), содержащую 10% (об./об.) эмбриональную телячью сыворотку (FBS); и
c) среду, содержащую эпидермальный фактор роста человека (hEGF), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), основной фактор роста фибробластов человека (hFGF-В), инсулиноподобный фактор роста (IGF-1), гидрокортизон и аскорбиновую кислоту.
16. Система культивирования для получения мезенхимальных стволовых клеток из плюрипотентных стволовых клеток человека, где система культивирования включает:
а) культивирование плюрипотентных стволовых клеток человека и отбор эмбриоидных телец на 14 сутки культивирования;
b) прикрепление эмбриоидных телец к чашке Петри и культивирование эмбриоидных телец с применением модифицированной по Дульбекко среды Игла (DMEM), содержащей эмбриональную телячью сыворотку (FBS), с индукцией дифференцировки эмбриоидных телец в мезенхимальные стволовые клетки; и
c) поддержание и культивирование с пролиферацией мезенхимальных стволовых клеток с применением среды, содержащей эпидермальный фактор роста человека (hEGF), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), основной фактор роста фибробластов человека (hFGF-B), инсулиноподобный фактор роста (IGF-1), гидрокортизон и аскорбиновую кислоту.