ПРОИЗВОДНЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИХ КАРБОНОВЫХ КИСЛОТ, СОДЕРЖАЩИЕ 2,5,7-ЗАМЕЩЕННОЕ ОКСАЗОЛОПИРИМИДИНОВОЕ КОЛЬЦО
DERIVATIVE OF HETEROCYCLIC CARBON ACIDS, WHICH CONTAIN 2,5,7-SUBSTITUTED OXAZOLOPYRIMIDINE RING

Настоящее изобретение относится к производным гетероциклической карбоновой кислоты, содержащим 2,5,7-замещенное оксазолопиримидиновое кольцо, и к их физиологически приемлемым солям.
Структурно сходные соединения, которые можно использовать для лечения рассеянного склероза, уже были раскрыты в известном уровне техники (см. WO 2009/154775). Схема действия указанных соединений состоит в использовании десенсибилизации EDG 1 сигнального пути за счет активации EDG 1 рецептора (так называемый суперагонизм), что затем эквивалентно функциональному антагонизму EDG 1 сигнального пути. Системно это означает, что особенно для лимфоцитов, EDG 1 сигнальный путь постоянно подавляется, в результате чего указанные клетки не могут больше хемотаксически следовать за S1P градиентом между кровью и лимфой. Это означает, что подвергнутые воздействию лимфоциты уже не могут покидать вторичную лимфатическую ткань (повышенный хоуминг) и количество свободно циркулирующих лимфоцитов в плазме существенно снижается. Такой дефицит лимфоцитов в плазме (лимфопения) приводит к иммуносупрессии, которая обязательно требуется для механизма действия модуляторов рецептора EDG 1, раскрытых в WO 2009/154775.
Цель настоящего изобретения состоит в создании соединений, которые можно использовать конкретно для заживления ран и особенно для лечения осложнений при лечении ран у пациентов больных диабетом. В дополнение было желательно получить соединения, которые можно использовать для лечения синдрома диабетической стопы (DFS).
Кроме того, было желательно достичь воспроизводимой активации сигнального пути EDG 1 рецептора, что, тем самым, обеспечило бы, в фармакологических терминах, устойчивую активацию сигнального пути EDG 1.
Настоящее изобретение относится к оксазолопиримидиновым соединениям формулы I.
1
2
3
4
где A, R, R, R, R, X и Y имеют указанные далее значения. Механизм действия соединений формулы I, таким образом, не основан на десенсибилизации сигнального пути EDG 1, и поэтому диаметрально противоположен механизму действия, раскрытому в WO 2009/154775. Кроме того, настоящее изобретение относится к способам получения соединений формулы I, к их использованию, особенно в качестве активных ингредиентов в фармацевтических препаратах, и в содержащих их фармацевтических композициях.
По сравнению со здоровыми людьми, у пациентов больных диабетом заживление ран происходит более длительно и наблюдается повышенная степень инфицирования, особенно в случае длительной гипергликемии, вызываемой, например, неудовлетворительной регуляцией уровня сахара в крови. Причины включают нарушения циркуляции, особенно в области мелких сосудов, что ведет к нарушению поступления кислорода и питательных веществ в ткани. Более того, снижается скорость деления клеток и миграции клеток кератиноцитов, фибробластов и кожных эндотелиальных клеток. Дополнительно ограничивается активность различных защитных клеток (гранулоцитов), сопровождающаяся ослаблением фагоцитоза (захвата и уничтожения бактерий). Действие антител (иммуноглобулинов) против бактерий при высоких уровнях сахара в крови также ограничено. Соответственно раны и инфекции у пациентов, больных диабетом, следует лечить особенным способом.
Рецептор Edg 1 является членом семейства рецепторов гена эндотелиальной дифференциации (Edg) из восьми идентифицированных в настоящее время класса A GPCR (рецепторы, связанные с G-белком). Указанное семейство можно разделить на подсемейства сфингозин-1-фосфата (S1-реактивированные рецепторы (пять членов) и рецепторы, активированные лизофосфатидной кислотой (LPA; три члена). Эндогенный лиганд S1P представляет собой плюрипотентный лизофосфолипид, воздействующий на различные типы клеток путем активирования GPCR из семейства рецепторов Edg, а именно, Edg 1 (=S1P1), Edg 3 (=S1P3), Edg 5 (=S1P2), Edg 6 (=S1P4) и Edg 8 (S1P5). Хотя S1P также описывается как внутриклеточный мессенджер, многочисленные клеточные реакции S1P опосредованы через активацию рецепторов Edg. S1P вырабатываются семейством ферментов сфингозинкиназ (SPHK) и разлагаются различными фосфатазами или лиазами.
В настоящем изобретении предложены соединения оксазолопиримидина формулы I в любой из их стереоизомерных форм, или в смеси стереоизомерных форм в любом отношении, или их физиологически приемлемые соли, или физиологически приемлемые сольваты таких соединений или таких солей,
где
A выбирают из группы, состоящей из NH, O и S;
1
6
2
8
2
6
3
7
1
6
1
6
2
X выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкандиила, (C-C)-алкендиила, (С-С)-алкиндиила, (C-C)-циклоалкандиила и (C-C)-алкандиилокси, причем все они, необязательно замещены одним или более из одинаковых или различных заместителей, выбранных из группы, состоящей из фтора и гидроксила, где атом кислорода (C-C)-алкандиилоксигруппы присоединен к группе R;
1
4
1
4
Y представляет собой 4-7-членный насыщенный или частично ненасыщенный моноциклический или бициклический гетероцикл, который, в дополнение к атому азота кольца, представленному в формуле I, содержит 0, 1, 2 или 3 одинаковые или различные гетероатомы в кольце, выбранные из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из дополнительных атомов азота кольца может быть замещен атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, и один из атомов серы кольца может быть замещен одной или двумя оксогруппами, и где гетероцикл, необязательно замещен по одному или более из атомов азота кольца одинаковыми или различными (С-С)-алкильными заместителями;
1
1
6
2
6
2
6
3
7
t
2t
t
2t
R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила, (С-С)-алкенила, (С-С)-алкинила, (C-C)-циклоалкил-CH и Het-CH, где t выбирают из группы, состоящей из 0, 1, 2 и 3;
2
21
22
R выбирают из группы, состоящей из фенилена и двухвалентного радикала, состоящего из ароматического 5-членного или 6-членного моноциклического гетероцикла, который содержит 1, 2 или 3 одинаковые или различные гетероатома в кольце, выбранные из группы, состоящей из N, O и S, где один из атомов азота кольца может быть замещен атомом водорода или заместителем R, и где фенилен и двухвалентный радикал, состоящий из ароматического гетероцикла, необязательно замещены по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R;
3
3
31
3
1
6
2
6
2
6
3
7
u
2u
v
2v
1
4
1
6
R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила, (C-C)-алкенила, (C-C)-алкинила, (C-C)-циклоалкил-CH- и Het-CH-, где u и v выбирают из группы, состоящей из 1 и 2, или R представляет собой радикал, состоящий из насыщенного или ненасыщенного 3-10-членного моноциклического или бициклического кольца, которое содержит 0, 1, 2, 3 или 4 одинаковых или различных гетероатомов в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем и один или два из атомов серы кольца могут быть замещены одной или двумя оксогруппами и где радикал кольца, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R, при условии, что R не может представлять (C-C)-алкил, если A представляет собой S;
4
1
4
3
7
z
2z
R выбирают из группы, состоящей из водорода, (C-C)-алкила и (С-С)-циклоалкил-CH-1 где z выбирают из группы, состоящей из 0, 1 и 2;
21
1
4
3
7
w
2w
R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила и (С-С)-циклоалкил-CH», - и окси, где w выбирают из группы, состоящей из 0, 1 и 2;
22
1
4
1
4
1
4
m
1
4
R выбирают из группы, состоящей из галогена, гидроксила, (C-C)-алкила, (C-C)-алкилокси, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, нитро, циано, гидроксикарбонила, (С-С)-алкилоксикарбонила, аминокарбонила и аминосульфонила;
31
1
4
3
7
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
R выбирают из группы, состоящей из галогена, (С-С)-алкила, (С-С)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, оксо, (C-C)-алкил-S(О)-, амино, (C-C)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, (C-C)-алкилкарбониламино, (С-С)-алкилсульфониламино, нитро, циано, (С-С)-алкилкарбонила, аминосульфонила, (C-C)-алкиламиносульфонила и ди((С-С)-алкил)аминосульфонила;
1
4
Het представляет собой радикал, состоящий из насыщенного 4-7-членного моноциклического гетероцикла, который содержит 1 или 2 одинаковых или различных гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, О и S, и который присоединен через атом углерода кольца, где радикал, представляющий собой гетероцикл, необязательно замещен одним или более из одинаковых или различных заместителей, выбранных из группы, состоящей из фтора и (C-C)-алкила;
m выбирают из группы, состоящей из 0, 1 и 2, где все числа m не зависят друг от друга;
1
4
где все циклоалкильные и циклоалкандиильные группы независимо друг от друга и независимо от других заместителей, необязательно замещены одним или более из одинаковых или различных заместителей, выбранных из группы, состоящей из фтора и (С-С)-алкила;
t
2t
u
2u
V
2V
2w
z
2z
где все алкильные, алкандиильные, CH, CH, CH, CwH, CH, алкенильные, алкендиильные, алкинильные и алкиндиильные группы, независимо друг от друга и, независимо от других заместителей, необязательно замещены одним или более из фторзаместителей.
22
31
Структурные элементы, такие как группы, заместители, гетероциклические члены, числа или другие характеристики, например, алкильные группы, группы, такие как R или R, числа, такие как m, u и v, которые могут встречаться несколько раз в соединениях формулы I, могут все, независимо друг от друга, принимать любые из указанных значений, и в каждом случае могут быть идентичными или могут отличаться друг от друга. Например, алкильные группы в диалкиламиногруппе могут быть идентичными или могут отличаться друг от друга.
Алкильные, алкенильные и алкинильные группы могут быть линейными, т.е. с неразветвленной цепью, или могут быть разветвленными. Это также применимо, если они являются частью других групп, например, алкилоксигрупп (= алкоксигруппы, алкил O группы), алкилоксикарбонильных групп или алкилзамещенных аминогрупп, или если они замещены. В зависимости от соответствующего определения, число атомов углерода в алкильной группе может быть 1, 2, 3, 4, 5 или 6, или 1, 2, 3 или 4, или 1, 2 или 3. Примерами алкилов являются метил, этил, пропил, включая н-пропил и изопропил, бутил, включая н-бутил, втор-бутил, изобутил и трет-бутил, пентил, включая н-пентил, 1-метилбутил, изопентил, неопентил и трет-пентил, и гексил включая н-гексил, 3,3-диметилбутил и изогексил. Двойные связи и тройные связи в алкенильных группах и алкинильных группах могут присутствовать в любом из положений. В одном варианте настоящего изобретения, алкенильные группы содержат одну двойную связь и алкинильные группы содержат одну тройную связь.
В одном варианте настоящего изобретения, алкенильная группа или алкинильная группа содержит по меньшей мере три атома углерода и связана с остальной частью молекулы через атом углерода, который не является частью двойной связи или тройной связи. Примерами алкенила и алкинила служат этинил, проп-1-енил, проп-2-енил (= аллил), бут-2-енил, 2-метилпроп-2-енил, 3-метилбут-2-енил, гекс-3-енил, гекс-4-енил, проп-2-инил (= пропаргил), бут-2-инил, бут-3-инил, гекс-4-инил или гекс-5-инил. Замещенные алкильные группы, алкенильные группы и алкинильные группы могут быть замещены в любом из положений, при условии, что соответствующее соединение является достаточно стабильным и пригодно для желательной цели, такой как использование в качестве лекарственного вещества. Предварительное условие о том, что конкретная группа и соединение формулы I являются достаточно стабильными и пригодны для желательной цели, такой как использование в качестве лекарственного вещества, применимо вообще в отношении определений всех групп в соединениях формулы I.
t
2t
u
2u
v
2v
w
2w
z
2z
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
3
2
3
2
2
3
3
2
2
2
3
2
,
2
2
2
2
2
2
3
3
2
2
3
2
3
2
2
2
2
2
t
2t
t
2t
В той мере, в какой это применимо, вышеприведенные разъяснения относительно алкильных, алкенильных и алкинильных групп относятся к двухвалентным алкильным группам, таким как группы алкандиила, CH, CH. CH, CH и CH и к двухвалентным алкенильным группам и алкинильным группам, таким как группы алкендиила и алкиндиила, которые также аналогично могут быть неразветвленными или разветвленными. Двойные связи и тройные связи в алкендиильных и алкиндиильных группах могут быть расположены в любом из положений. В одном варианте настоящего изобретения, алкендиильные группы содержат одну двойную связь и алкиндиильные группы содержат одну тройную связь. Примерами двухвалентных алкильных группы являются -CH-(= метилен), -CH-CH-, -CH-CH-CH-, -CH-CH-CH-CH-, -CH(CH)-, -C(CH)-, -CH(CH)-CH-, -CH-CH(CH)-, -C(CH)-CH-, -CH-C(CH)- примерами двухвалентных алкенильных групп являются -CH=CH-, -CH-CH=CH-, -CH=CH-CH-, -CH-CH=CH-CH-, -CH-CH-CH=CH-, -C(CH)=C(CH)- и примерами двухвалентных алкинильных групп являются -C≡C-, -CH-C≡C-, -C≡C-CH-, -C(CH)-C≡C-, -C≡C-C(CH)-, -CH-C≡C-CH-, -CH-CH-C≡C-. Если число в двухвалентной группе, такое как число t в группе CH, например, равно 0 (= зеро), две группы, которые присоединены к рассматриваемой группе, такой как CH, непосредственно связаны друг с другом простой связью.
Число атомов углерода кольца в циклоалкильной группе может быть 3, 4, 5, 6 или 7. В одном варианте настоящего изобретения, число атомов углерода кольца в циклоалкильной группе, независимо от числа атомов углерода кольца в любой другой циклоалкильной группе, равно 3, 4, 5 или 6, в другом варианте 3, 4 или 5, в другом варианте 3 или 4, в другом варианте 3, в другом варианте 5, 6 или 7, в другом варианте 5 или 6, в другом варианте 6 или 7, в другом варианте 6. Это применимо соответственно к двухвалентным циклоалкильным группам, т.е. циклоалкандиильным группам, которые могут быть связаны с соседними группами через один или два атомов углерода кольца. Примерами циклоалкильных групп являются циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Примерами двухвалентных циклоалкильных групп являются циклопропан-1,1-диил, циклопропан-1,2-диил, циклобутан-1,3-диил, циклопентан-1,1-диил, циклопентан-1,2-диил, циклопентан-1,3-диил, циклогексан-1,1-диил, циклогексан-1,2-диил, циклогексан-1,3-диил, циклогексан-1,4-диил, циклогептан-1,4-диил.
1
4
1
4
3
7
t
2t
Независимо друг от друга и независимо от любых других заместителей, циклоалкильные и циклоалкандиильные группы, необязательно замещены одним или более из одинаковых или различных (С-С)-алкильных заместителей, которые могут быть расположены в любом из положений, т.е., циклоалкильные группы могут быть незамещены алкильными заместителями или замещены алкильными заместителями, например, 1, 2, 3 или 4, или 1 или 2, (С-С)-алкильными заместителями, например, метильными группами. Примерами алкилзамещенных циклоалкильных и циклоалкандиильных групп являются 4-метилциклогексил, 4-трет-бутилциклогексил или 2,3-диметилциклопентил, 2,2-диметилциклопропан-1,1-диил, 2,2-диметилциклопропан-1,2-диил, 2,2-диметилциклопентан-1,3-диил, 6,6-диметилциклогептан-1,4-диил. Примерами циклоалкилалкильных групп, которые могут представлять группы, такие как (C-C)- циклоалкил-CH-, например, являются циклопропилметил, циклобутилметил, циклопентилметил, циклогексилметил, циклогептилметил, 1-циклопропилэтил, 2-циклопропилэтил, 1-циклобутилэтил, 2-циклобутилэтил, 2-циклопентилэтил, 2-циклогексилэтил, 2-циклогептилэтил.
2
2
2
2
2
2
2
3
3
2
1
4
Независимо друг от друга и независимо от любых других заместителей, алкильные группы, двухвалентные алкильные группы, алкенильные группы, двухвалентные алкенильные группы, алкинильные группы, двухвалентные алкинильные группы, циклоалкильные группы и двухвалентные циклоалкильные группы, необязательно замещены одним или более фторзаместителями, которые могут быть расположены в любом из положений, т.е., указанные группы могут быть незамещены фторзаместителями или могут быть замещены фторзаместителями, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или 13, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или 9, или 1, 2, 3 4, 5,6 или 7, или 1, 2, 3, 4 или 5, или 1, 2 или 3, или 1 или 2, фторзаместителями. Примерами таких фторзамещенных групп являются трифторметил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, пентафторэтил, 3,3,3-трифторпропил, 2,2,3,3,3-пентафторпропил, 4,4,4-трифторбутил, гептафторизопропил, -CHF-, -CF-, -CF-CH-, -CH-CF-, -CF-CF-, -CF(CH)-, -C(CF)-, 1-фторциклопропил, 2,2-дифторциклопропил, 3,3-дифторциклобутил, 1-фторциклогексил, 4,4-дифторциклогексил, 3,3,4,4,5,5-гексафторциклогексил, 2,2-дифторциклопропан-1,2-диил. Примерами алкилоксигрупп, в которых алкильным фрагментом является фторзамещенное соединение, служат трифторметокси, 2,2,2-трифторэтокси, пентафторэтокси и 3,3,3-трифторпропокси. В одном варианте настоящего изобретения, полное число фторзаместителей и (С-С)-алкильных заместителей, которые независимо от любых других заместителей, необязательно присутствуют в циклоалкильных и циклоалкандиильных группах в соединениях формулы I, составляет 1, 2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или 11, в другом варианте 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или 9, в другом варианте 1, 2, 3, 4 или 5, в другом варианте 1, 2, 3 или 4.
1
4
1
4
1
4
2
-
2
Группы, подобные фенилу, нафтилу (= нафталенилу) и остаткам ароматических гетероциклов, которые необязательно замещены одним или более заместителями, могут быть незамещенными или замещенными, например, 1, 2, 3, 4 или 5, или 1, 2, 3 или 4, или 1, 2 или 3, или 1 или 2, или 1, одинаковыми или различными заместителями, которые могут быть расположены в любом из положений. В одном варианте настоящего изобретения полное число нитрозаместителей в соединении формулы I не больше, чем два. Ароматические азотсодержащие гетероциклы, которые в исходной кольцевой системе замещены атомом водорода у атома азота кольца в 5-членном кольце, таком, например, как пиррольное, имидазольное, индольное или бензимидазольное кольцо, могут быть замещены по атомам углерода и/или по таким атомам азота кольца. В одном варианте настоящего изобретения, заместители у таких атомов азота кольца выбирают из (С-С)-алкильных групп, т.е. такие атомы азота кольца в ароматических гетероциклах замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем. Если указано в отношении атомов азота кольца в ароматических гетероциклах и любых других гетероциклах, что они могут быть замещены атомом водорода или заместителем, такие атомы азота кольца или замещены атомом водорода или заместителем, или они не замещены атомом водорода или заместителем. Атомы азота кольца, которые замещены атомом водорода или заместителем, встречаются в азотсодержащем ароматическом 5-членном кольце, как это происходит в пирроле, имидазоле, индоле или бензимидазоле, например, и в неароматическом кольце, включая насыщенные кольца. Атомы азота кольца, которые не замещены атомом водорода или заместителем, если только они не присутствуют в положительно заряженной форме, включая любые дальнейшие атомы азота кольца в дополнение к атомам азота кольца, которые замещены атомом водорода или заместителем, находятся в ароматическом кольце, как это происходит в тиазоле, имидазоле, пиридине или бензимидазоле, например, и в неароматическом кольце, где они представляют собой мостиковые атомы, или являются частью двойной связи, и они встречаются как атомы азота кольца, через которые кольцо связано. Подходящие атомы азота кольца в ароматических гетероциклах в соединениях формулы I, такие как атомы азота кольца в пиридиновом кольце, особенно атомы азота кольца в ароматическом гетероцикле, представляющем собой R, могут также быть замещены оксозаместителем O и быть представлены как N-оксид, и такие атомы азота кольца могут также присутствовать как четвертичные соли, например, как N-(С-С)-алкильная соль, такая как N-метильная соль, где в одном варианте настоящего изобретения противоионом в такой четвертичной соли является физиологически приемлемый анион, который получен из кислоты, которая образует физиологически приемлемую соль. В монозамещенных фенильных группах указанный заместитель может быть расположен в 2-положении, 3-положении или 4-положении. В дизамещенных фенильных группах заместители могут быть расположены в 2,3-положении, 2,4-положении, 2,5-положении, 2,6-положении, 3,4-положении или 3,5-положении. В тризамещенных фенильных группах заместители могут быть расположены в 2,3,4-положении, 2,3,5-положении, 2,3,6-положении, 2,4,5-положении, 2,4,6-положении или 3,4,5-положении. Нафтил может быть 1-нафтилом (= нафталин-1-илом) или 2-нафтилом (= нафталин-2-илом). В монозамещенных 1-нафтильных группах заместитель может быть расположен в 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-положении. В монозамещенных 2-нафтильных группах заместитель может быть расположен в 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-положении. В дизамещенных нафтильных группах заместители могут аналогично быть расположены в любом из положений и кольца, через которое нафтильная группа связана, и/или в другом кольце. Такое утверждение, касающееся одновалентных остатков, применимо соответственно к соответствующим двухвалентным остаткам, таким как фениленовые группы, представляющие собой R, например, которые также могут аналогично быть незамещенными или замещенными, например, 1, 2, 3 или 4, или 1, 2 или 3, или 1 или 2, или 1, одинаковыми или различными заместителями, которые могут быть расположены в любом из положений.
2
3
3
3
В радикалах ароматических гетероциклов, представляющих собой R или R, которые могут обозначаться как гетероарильные и гетероариленовые группы, также как во всех других гетероциклических кольцах в соединениях формулы I, включая группы Het и неароматические гетероциклические группы, представляющие собой R, указанные гетероатомы в кольце обычно выбирают из группы, состоящей из N, O и S, где N включает атомы азота кольца, которые замещены атомом водорода или заместителем, также как атомы азота кольца, которые не замещены атомом водорода или заместителем. Гетероатомы в кольце могут быть расположены в любом из положений, при условии, что указанная гетероциклическая система известна специалистам и является стабильной и пригодна в качестве подгруппы для нужной цели соединения формулы I, такой как использование в качестве лекарственного вещества. В одном варианте настоящего изобретения, два атома кислорода кольца не могут существовать в соседних положениях кольца любого из гетероциклов, в другом варианте атомы кислорода не могут представлять собой два гетероатома в кольце, выбранные из группы, состоящей из кислорода и серы, не могут существовать в соседних положениях кольца любого из гетероциклов. Насыщенные кольца не содержат двойной связи кольца. Ненасыщенные кольцевые системы могут быть ароматическими или частично ненасыщенными, включая частично ароматические, когда в последнем случае одно кольцо в бициклической кольцевой системе является ароматическим и кольцевая система связана через атом в неароматическом кольце. В зависимости от соответствующей группы ненасыщенные кольца могут содержать одну, две, три, четыре или пять двойных связей кольца. Ароматические группы содержат циклическую систему из шести или десяти делокализованных πи-электронов кольца. В зависимости от соответствующей группы, насыщенные и неароматические ненасыщенные гетероциклические кольца, включая Het и неароматические группы, представляющие собой R, могут быть 3-членными, 4-членными, 5-членными, 6-членными, 7-членными, 8-членными, 9-членными или 10-членными. В одном варианте настоящего изобретения, ароматические гетероциклические кольца представляют собой 5-членные или 6-членные моноциклические кольца или 8-членные, 9-членные или 10-членные бициклические кольца, в другом варианте 5-членные или 6-членные моноциклические кольца или 9-членные или 10-членные бициклические кольца, в другом варианте 5-членные или 6-членные моноциклические кольца, где указанные 8-членные, 9-членные или 10-членные бициклические кольца состоят из двух конденсированных 5-членных колец, 5-членного кольца и 6-членного кольца, которые конденсированы друг с другом, и двух конденсированных 6-членных колец, соответственно. В бициклических ароматических гетероциклических группах, одно или оба кольца могут содержать гетерокольцевые члены, и одно или оба кольца могут быть ароматическими. Обычно бициклическое кольцевые системы, содержащие ароматическое кольцо и неароматическое кольцо, считают ароматическими, если они связаны через атом углерода в ароматическом кольце, и считают неароматическими, если они связаны через атом углерода в неароматическом кольце. Если не указано иначе, гетероциклические группы, включая ароматические гетероциклические группы, могут быть связаны через любой подходящий атом углерода кольца, и, в случае азотсодержащих гетероциклов, через любой подходящий атом азота кольца. В одном варианте настоящего изобретения, ароматическая гетероциклическая группа в соединении формулы I, независимо от любых других ароматических гетероциклических групп, связана через атом углерода кольца, в другом варианте через атом азота кольца. В зависимости от определения, соответствующего гетероциклической группе, в одном варианте настоящего изобретения количество гетероатомов в кольце, которые могут присутствовать в гетероциклической группе, независимо от количества гетероатомов в кольце в любой другой гетероциклической группе, составляет 1, 2, 3 или 4, в другом варианте 1, 2 или 3, в другом варианте 1 или 2, в другом варианте 1, где указанные гетероатомы в кольце могут быть одинаковыми или различными. Гетероциклические группы, которые необязательно замещены, могут независимо от любых других гетероциклических групп быть незамещенными или могут быть замещены одним или более из одинаковых или различных заместителей, например, 1, 2, 3, 4 или 5, или 1, 2, 3 или 4, или 1, 2 или 3, или 1 или 2, или 1 заместителями, которые указаны в определении защитной группы. Заместители у гетероциклических групп могут быть расположены в любом из положений. Например, в пиридин-2-ильной группе заместители могут быть расположены в 3-положении и/или 4-положении и/или 5-положении и/или 6-положении, в пиридин-3-ильной группе заместители могут быть расположены в 2-положении и/или 4-положении и/или 5-положении и/или 6-положении, в пиридин-4-ильной группе заместители могут быть расположены в 2-положении и/или 3-положении и/или 5-положении и/или 6-положении.
Примерами исходных гетероциклов, из которых можно получить гетероциклические группы, включая ароматические гетероциклические группы, насыщенные гетероциклические группы и неароматические ненасыщенные гетероциклические группы, являются азет, оксет, пиррол, фуран, тиофен, имидазол, пиразол, [1,3]диоксол, оксазол (= [1,3]оксазол), изоксазол (= [1,2]оксазол), тиазол (= [1,3]тиазол), изотиазол (= [1,2]тиазол), [1,2,3]триазол, [1,2,4]триазол, [1,2,4]оксадиазол, [1,3,4]оксадиазол, [1,2,4]тиадиазол, [1,3,4]тиадиазол, тетразол, пиридин, пиран, тиопиран, пиридазин, пиримидин, пиразин, [1,3]оксазин, [1,4]оксазин, [1,3]тиазин, [1,4]тиазин, [1,2,3]триазин, [1,3]дитиин, [1,4]дитиин, [1,2,4]триазин, [1,3,5]триазин, [1,2,4,5]тетразин, азепин, [1,3]диазепин, [1,4]диазепин, [1,3]оксазепин, [1,4]оксазепин, [1,3]тиазепин, [1,4]тиазепин, азоцин, азецин, циклопента[b]пиррол, 2-азабицикло[3.1.0]гексан, 3-азабицикло[3.1.0]гексан, 2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан, индол, изоиндол, бензотиофен, бензофуран, [1,3]бензодиоксол (= 1,2-метилендиоксибензол), [1,3]бензоксазол, [1,3]бензотиазол, бензоимидазол, тиено[3,2-c]пиридин, хромен, изохромен, [1,4]бензодиоксин, [1,4]бензоксазин, [1,4]бензотиазин, хинолин, изохинолин, циннолин, хиназолин, хиноксалин, фталазин, тиенотиофен, [1,8]нафтиридин и другие нафтиридины, птеридин, и соответствующие насыщенные и частично насыщенные гетероциклы, в которых одна или более из, например, одной, двух, трех, четырех или всех двойных связей кольцевой системы, включая двойные связи в ароматическом кольце, заменены простыми связями, такими как, например, азетидин, оксэтан, пирролидин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, имидазолидин, оксазолидин, тиазолидин, дигидропиридин, пиперидин, тетрагидропиран, пиперазин, морфолин, тиоморфолин, азепан, хроман, изохроман, [1,4]бензодиоксан (=1,2-этилендиоксибензол), 2,3-дигидробензофуран, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.
,
Примерами остатков ароматических гетероциклов, которые могут существовать в соединениях формулы I, являются тиофенил (=тиенил), включая тиофен-2-ил и тиофен-3-ил, пиридинил (=пиридил), включая пиридин-2-ил (=2-пиридил), пиридин-3-ил (=3-пиридил) и пиридин-4-ил (=4-пиридил), имидазолил, включая, например, 1H-имидазол-1-ил, 1H-имидазол-2-ил, 1H-имидазол-4-ил и 1H-имидазол-5-ил, [1,2,4]триазолил, включая 1H-[1,2,4]-триазол-1-ил и 4H-[1,2,4-триазол-3-ил, тетразолил, включая 1H-тетразол-1-ил и 1H-тетразол-5-ил, хинолинил (= хинолил), включая хинолин-2-ил, хинолин-3-ил, хинолин-4-ил, хинолин-5-ил, хинолин-6-ил, хинолин-7-ил и хинолин-8-ил, причем все они, необязательно замещены, как указано в определении защитных групп. Примерами остатков насыщенных и частично ненасыщенных гетероциклов, которые могут существовать в соединениях формулы I, являются азетидинил, пирролидинил, включая пирролидин-1-ил, пирролидин-2-ил и пирролидин-3-ил, 2,5-дигидро-1H-пирролил, пиперидинил, включая пиперидин-1-ил, пиперидин-2-ил, пиперидин-3-ил и пиперидин-4-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиридинил, 1,2,5,6-тетрагидропиридинил, 1,2-дигидропиридинил, азепанил, азоканил, азеканил, октагидроциклопента[b]пирролил, 2,3-дигидробензофуранил, включая 2,3-дигидробензофуран-7-ил, 2,3-дигидро-1H-индолил, октагидро-1H-индолил, 2,3-дигидро-1H-изоиндолил, октагидро-1H-изоиндолил, 1,2-дигидрохинолинил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолинил, декагидрохинолинил, 1,2-дигидроизохинолинил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинил, декагидроизохинолинил, декагидроизохинолинил, 45,6,7-тетрагидротиено[3,2-c]пиридинил, пиразолидинил, имидазолидинил, гексагидропиримидинил, 1,2-дигидропиримидинил, пиперазинил, [1,3]диазепанил, [1,4]диазепанил, оксазолидинил, [1,3]оксазинанил, [1,3]оксазепанил, морфолинил, включая морфолин-2-ил, морфолин-3-ил и морфолин-4-ил, [1,4]оксазепанил, тиазолидинил, [1,3]тиазинанил, тиоморфолинил, включая тиоморфолин-2-ил, тиоморфолин-3-ил и тиоморфолин-4-ил, 3,4-дигидро-2H-[1,4]тиазинил, [1,3]тиазепанил, [1,4]тиазепанил, [1,4]тиазепанил, оксэтанил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиенил, изоксазолидинил, изотиазолидинил, оксазолидинил, [1,2,4]-оксадиазолидинил, [1,2,4]-тиадиазолидинил, [1,2,4]триазолидинил, [1,3,4]оксадиазолидинил, [1,3,4]тиадиазолидинил, [1,3,4]триазолидинил, 2,3-дигидрофуранил, 2,5-дигидрофуранил, 2,3-дигидротиенил, 2,5-дигидротиенил, 2,3-дигидропирролил, 2,3-дигидроизоксазолил, 4,5-дигидроизоксазолил, 2,5-дигидроизоксазолил, 2,3-дигидроизотиазолил, 4,5-дигидроизотиазолил, 2,5-дигидроизотиазолил, 2,3-дигидропиразолил, 4,5-дигидропиразолил, 2,5-дигидропиразолил, 2,3-дигидрооксазолил, 4,5-дигидрооксазолил, 2,5-дигидрооксазолил, 2,3-дигидротиазолил, 4,5-дигидротиазолил, 2,5-дигидротиазолил, 2,3-дигидроимидазолил, 4,5-дигидроимидазолил, 2,5-дигидроимидазолил, тетрагидропиридазинил, тетрагидропиримидинил, тетрагидропиразинил, тетрагидро[1,3,5]триазинил, [1,3]дитианил, тетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил, [1,3]диоксоланил, 3,4,5,6-тетрагидропиридинил, 4H-[1,3]тиазинил, 1,1-диоксо-2,3,4,5-тетрагидротиенил, 2-азабицикло[3.1.0]гексил, включая 2-азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил, 3-азабицикло[3.1.0]гексил, включая 3-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил, 2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептил, включая 2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гепт-5-ил, причем все они связаны через любой подходящий атом углерода кольца или атом азота кольца, и необязательно замещены, как указано в определении защитных групп.
Галоген представляет собой фтор, хлор, бром или иод. В одном варианте настоящего изобретения, любой галоген в соединении формулы I, независимо от любого другого галогена, выбирают из группы, состоящей из фтора, хлора и брома, в другом варианте выбирают из фтора и хлора.
2
2
Если оксогруппа связана с атомом углерода, она заменяет два атома водорода у атома углерода исходной системы. Таким образом, если CH группа в цепи или кольца замещена оксо, т.е. атомом кислорода с двойной связью, она превращается в C(O) (= C(=О)) группу. Очевидно, что оксогруппа не может существовать в качестве заместителя у атома углерода в ароматическом кольце, например, в фенильной группе. Если атом серы кольца в гетероциклической группе может быть замещен одной или двумя оксогруппами, он представляет собой неокисленный атом серы S в случае, если он не замещен ни одной оксогруппой, или он представляет собой S(O) группу (= сульфоксидная группа, S оксидная группа) в случае, если он замещен одной оксогруппой, или он представляет собой S(О) группу (= группа сульфона, S,S диоксидная группа) в случае, если он замещен двумя оксогруппами.
Настоящее изобретение включает все стереоизомерные формы соединений формулы I и их солей и сольватов. Что касается каждого хирального центра, то независимо от любого другого хирального центра, соединения формулы I могут присутствовать в S конфигурации или практически в S конфигурации, или в R конфигурации или практически в R конфигурации, или в виде смеси S изомеров и R изомеров в любом отношении. Настоящее изобретение включает все возможные энантиомеры и диастереоизомеры и смеси двух или более стереоизомеров, например, смеси энантиомеров и/или диастереоизомеров, во всех отношениях. Так, соединения в соответствии с настоящим изобретением, которые могут существовать в виде энантиомеров, могут присутствовать в энантиомерно чистой форме, как левовращающие, так и правовращающие антиподы, и в форме смеси двух энантиомеров во всех отношениях, включая рацематы. В случае E/Z изомеризма, или цис/транс изомеризма, например, у двойных связей или колец, таких как циклоалкильные кольца, настоящее изобретение включает обе формы (E форму и Z форму), или цис-форму и транс-форму, также как смеси указанных форм во всех отношениях. В одном варианте настоящего изобретения, соединения, которые могут существовать в двух или более стереоизомерных формах являются чистыми, или практически чистыми, индивидуальными стереоизомерами. Получение индивидуальных стереоизомеров можно осуществить, например, разделяя смесь изомеров обычными способами, например, с помощью хроматографии или кристаллизации, за счет использования в синтезе стереохимически однородных исходных материалов, или используя стереоселективный синтез. Необязательно, получение производных можно осуществить до разделения стереоизомеров. Разделение смеси стереоизомеров можно осуществить на стадии соединений формулы I или на стадии исходных материалов или промежуточных соединений в процессе синтеза. Настоящее изобретение также включает все таутомерные формы соединений формулы I и их солей и сольватов.
В том случае, если соединения формулы I содержат одну или более из кислотных и/или основных групп, т.е. сольобразующих групп, настоящее изобретение также включает их соответствующие физиологически или токсикологически приемлемые соли, т.е. нетоксичные соли, особенно их фармацевтически приемлемые соли. Так, соединения формулы I, которые содержат кислотную группу, такую как гидроксикарбонильная группа (= карбоксильная группа = C(O)-OH группа), можно использовать в соответствии с настоящим изобретением, например, как соли щелочных металлов, соли щелочноземельных металлов или соли аммония. Более конкретные примеры таких солей включают соли натрия, соли калия, соли кальция, соли магния, четвертичные аммониевые соли, такие как соли тетраалкиламмония или соли присоединения кислоты к аммонию или к органическим аминам, таким как, например, этиламин, этаноламин, триэтаноламин или аминокислоты. Соединения формулы I, которые содержат основную группу, т.е. группу, которая может быть протонирована, такую как аминогруппа или азотсодержащий гетероцикл, могут быть использованы в соответствии с настоящим изобретением в форме их солей присоединения с неорганическими и органическими кислотами. Примеры подходящих кислот включают хлористый водород, бромистый водород, фосфорную кислоту, серную кислоту, метансульфоновую кислоту, щавелевую кислоту, уксусную кислоту, трифторуксусную кислоту, винную кислоту, молочную кислоту, бензойную кислоту, малоновую кислоту, фумаровую кислоту, малеиновую кислоту, лимонную кислоту и другие кислоты, хорошо известные специалистам в данной области. Если соединение формулы I одновременно содержит кислотную группу и основную группу в молекуле, в дополнение к уже указанным формам солей, указанное соединение также включает внутренние соли (= бетаины, цвиттерионы). Соли соединений формулы I можно получить обычными способами, которые хорошо известны специалистам в данной области, например, осуществляя контактирование соединения формулы I с органической или неорганической кислотой или основанием в растворителе или разбавителе, или в результате анионного обмена или катионного обмена с другой солью. Настоящее изобретение также включает все соли соединений формулы I, которые из-за низкой физиологической совместимости солеобразующей кислоты или основания непосредственно не пригодны для использования в фармацевтических препаратах, но, которые можно использовать, например, в качестве промежуточных соединений в химических реакциях или для получения физиологически приемлемых солей.
1
4
Настоящее изобретение включает все сольваты соединений формулы I, например, гидраты или аддукты со спиртами, такими как (C-C)-алканолы, активные метаболиты соединений формулы I, и также пролекарста и производные соединений формулы I, которые in vitro могут необязательно проявлять фармакологическую активность, но которые in vivo превращаются в фармакологически активные соединения, например, сложные эфиры или амиды группы карбоновых кислот.
В одном варианте настоящего изобретения, A выбирают из группы, состоящей из NH и O, в другом варианте изобретения, A выбирают из группы, состоящей из NH и S, в другом варианте изобретения, A выбирают из группы, состоящей из O и S, в другом варианте изобретения, A представляет собой NH, в другом варианте изобретения, A представляет собой O, в другом варианте изобретения, A представляет собой S.
2
2
2
2
1
6
2
6
3
7
1
6
1
6
2
6
1
6
1
6
3
7
1
6
1
6
1
6
1
6
2
6
2
6
3
7
1
6
2
6
3
7
1
6
2
6
1
6
2
6
3
7
1
6
1
6
1
4
1
3
1
2
2
6
2
6
2
4
2
4
2
3
2
3
3
7
3
6
3
4
3
2
2
3
2
2
2
2
2
3
3
2
1
6
2
2
3
3
2
6
2
2
2
6
3
7
2
2
2
3
3
2
2
2
2
2
2
2
2
1
6
2
2
2
3
3
3
2
2
2
3
2
3
2
2
6
1
6
1
6
2
6
Алкандиильные, алкендиильные и алкиндиильные группы, находящиеся в группе X, могут быть линейными или разветвленными, как уже было указано в отношении таких групп вообще, и указанные группы также как циклоалкандиильные группы, представляющие собой X, могут быть связаны с соседними группами, т.е. с гетероциклом Y и с группой R или, в случае группы алкандиилокси, с атомом кислорода алкандиилоксигруппы, в любом положении. Соседние группы могут быть связаны с тем же самым атомом углерода или с другими атомами углерода в группе X. В одном варианте цепочка атомов углерода в алкандиильной, алкендиильной и алкиндиильной группе, находящейся в группе X, которая непосредственно соединяет гетероцикл Y с группой R или, в случае группы алкандиилокси, с атомом кислорода алкандиилокси группы, состоит из 1, 2, 3 или 4 атомов углерода, в другом варианте из 1, 2 или 3 атомов углерода, в другом варианте из 1 или 2 атомов углерода, в другом варианте из 1 атома углерода. В случае циклоалкандиильной группы, представляющей собой X, в одном варианте гетероцикл Y и группа R связаны с двумя атомами углерода кольца, которые находятся в 1,2-положении, 1,3-положении или 1,4-положении по отношению друг к другу, в другом варианте в 1,2-положении или 1,3-положении по отношению друг к другу, в другом варианте в 1,2-положении по отношению друг к другу, в другом варианте в 1,4-положении по отношению друг к другу. В одном варианте X выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкандиила, (C-C)-алкендиила, (C-C)-циклоалкандиила и (C-C)-алкандиилокси, в другом варианте из (C-C)-алкандиила, (C-C)-алкендиила и (C-C)-алкандиилокси, в другом варианте из (C-C)-алкандиила, (C-C)-циклоалкандиила и (C-C)-алкандиилокси, в другом варианте из (C-C)-алкандиила и (C-C)-алкандиилокси, в другом варианте из (C-C)-алкандиила, (C-C)-алкендиила, (С-С)-алкиндиила и (C-C)-циклоалкандиила, в другом варианте из (C-C)-алкандиила, (C-C)-алкендиила и (C-C)-циклоалкандиила, в другом варианте из (C-C)-алкандиила и (С-С)-алкендиила, в другом варианте X представляет собой (C-C)-алкандиил, в другом варианте X представляет собой (С-С)-алкендиил, в другом варианте X представляет собой (C-C)-циклоалкандиил и в другом варианте X представляет собой (C-C)-алкандиилокси, причем все они, необязательно замещены как указано. В одном варианте (C-C)-алкандиильная группа, присутствующая в X, представляет собой (С-С)-алкандиильную группу, в другом варианте (С-С)-алкандиильную группу, в другом варианте (С-С)-алкандиильную группу. В одном варианте (С-С)-алкендиильная и (С-С)-алкиндиильная группы, представляющие собой X, представляют собой (C-C)-алкендиильную и (C-C)-алкиндиильную группы, в другом варианте (C-C)-алкендиильную и (C-C)-алкиндиильную группы. В одном варианте (C-C)-циклоалкандиильная группа представляющая собой X, представляет собой (C-C)-циклоалкандиильную группу, в другом варианте (C-C)-циклоалкандиильную группу, в другом варианте циклопропандиильную группу, в другом варианте циклогександиильную группу. Примеры групп X, из которых соответствующую группу, представляющую собой X, можно выбрать в вышеуказанных вариантах или из которых X выбирают в другом варианте настоящего изобретения, представляют собой метилен, -CH(CH)-(этан-1,1-диил), -CH-CH-(этан-1,2-диил, 1,2-этилен), -C(CH)-(1-метилэтан-1,1-диил), -CH-CH-CH-(пропан-1,3-диил, 1,3-пропилен), -CH-CH(CH)- и -CH(CH)-CH-(пропан-1,2-диил, 1,2-пропилен), который является примером группы (C-C)-алкандиила, -CH=CH-(этен-1,2-диил), -CH=CH-CH- и -CH-CH=CH-(проп-1-ен-1,3-диил и проп-2-ен-1,3-диил) и -CH=C(CH)- и -C(CH)=CH-(проп-1-ен-1,2-диил), который является примером группы (C-C)-алкендиила, -C≡C-(этиндиил) и -CH-C≡C- и -C≡C-CH-(проп-1-ин-1,3-диил и проп-2-ин-1,3-диил), который является примером группы (C-C)-алкиндиила, циклопропан-1,1-диил, циклопропан-1,2-диил и циклогексан-1,4-диил, который является примером группы (C-C)-циклоалкандиила, -CH-O-(метиленокси), -CH-CH-O-(этан-1,2-диилокси), -CH(CH)-О-(этан-1,1-диилокси), -C(CH)-О-(1-метилэтан-1,1-диилокси), -CH-CH-CH-O-(пропан-1,3-диилокси) и -CH-CH-CH-CH-O-(бутан-1,4-диилокси), который является примером группы (C-C)-алкандиилокси, причем все они, необязательно замещены, как указано в описании. Так, в одном варианте X выбирают из группы, состоящей из -CH-O-, -CH-CH-O-, -CH(CH)-О- и -C(CH)-О-, в другом варианте из -CH-О-, -CH-CH-О- и -CH(CH)-О-, в другом варианте из -CH-О- и -CH(CH)-О-, и в другом варианте X представляет собой -CH-O-, причем все указанные группы необязательно замещены, как указано в описании, и где атом кислорода связан с группой R. В одном варианте количество заместителей, которые необязательно присутствуют в X, составляет 1, 2, 3 или 4, в другом варианте 1, 2 или 3, в другом варианте 1 или 2, в другом варианте 1, и в другом варианте группа X не замещена заместителями, выбранными из группы, состоящей из фтора и гидроксила. В одном варианте число гидроксизаместителей в X не больше, чем 2, в другом варианте не больше, чем 1. В одном варианте не больше одного гидроксизаместителя присутствует у индивидуального атома углерода в X. В одном варианте гидроксизаместители не присутствуют у атомов углерода, которые являются частью двойной связи в группе (C-C)-алкендиила. В одном варианте гидроксизаместители не присутствуют у атома углерода в группе (C-C)-алкандиилокси, которая связана с атомом кислорода, в другом варианте никакие заместители не присутствуют у атома углерода в группе (C-C)-алкандиилокси, которая связана с атомом кислорода, т.е. в указанном последнем варианте все атомы углерода, которые не связаны с указанным атомом кислорода, необязательно замещены одним или более из одинаковых или различных заместителей, выбранных из группы, состоящей из фтора и гидроксила. Двойная связь в группе (С-С)-алкендиила может иметь E конфигурацию или Z конфигурацию. В одном варианте она имеет E конфигурацию, в другом варианте она имеет Z конфигурацию.
1
4
1
4
4-7-членный насыщенный или частично насыщенный, моноциклический или бициклический гетероцикл Y включает атом азота кольца, изображенный в формуле I, который замещен карбонильной группой, связанной с группой X, как гетероатом в кольце, и в дополнение включает 0, 1, 2 или 3, в одном варианте настоящего изобретения 0, 1 или 2, в другом варианте 0 или 1, в другом варианте 1 или 2, в другом варианте 1, в другом варианте 0, идентичных или различных других гетероатомов в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из дополнительных атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, и один из атомов серы кольца может быть замещен одной или двумя оксогруппами, и где указанный гетероцикл, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца, одинаковыми или различными (С-C)-алкильными заместителями. В одном варианте дополнительные гетероатомы, которые могут присутствовать в Y, выбирают из группы, состоящей из N и O, в другом варианте из группы, состоящей из N и S, в другом варианте из группы, состоящей из O и S, в другом варианте они представляют собой N атомы, в другом варианте они представляют собой O атомы, и в другом варианте они представляют собой S атомы. Как применимо к соединениям формулы I вообще, гетероатомы в кольце в Y могут быть расположены любом из положений, при условии, что гетероциклическая система хорошо известна специалистам в данной области и является стабильной и пригодна в качестве подгруппы для нужных целей соединений формулы I, таких как использование в качестве лекарственных веществ. В одном варианте настоящего изобретения, два атома углерода кольца в Y не могут находиться в соседних положениях кольца, в другом варианте два гетероатома в кольце в Y, выбранные из группы, состоящей из кислорода и серы, не могут находиться в соседних положениях кольца, и в другом варианте два гетероатома в кольце в Y, включая атом азота кольца, который изображен в формуле I, не могут находиться в соседних положениях кольца. В том случае, если Y является насыщенным, указанный гетероцикл Y не содержат двойные связи кольца. В том случае, если Y является частично ненасыщенным, т.е. указанный гетероцикл Y содержит одну или более из двойных связей кольца, но является неароматическим, в одном варианте гетероцикл содержит одну или две, в другом варианте одну, двойные связи кольца, которые могут находиться в любом из подходящих положений. В одном варианте Y является насыщенным, в другом варианте Y является частично ненасыщенным.
1
4
1
4
В одном варианте Y представляет собой 4-6-членный, в другом варианте 4-5-членный, в другом варианте 5-6-членный, в другом варианте 4-членный, в другом варианте 5-членный, в другом варианте 6-членный гетероцикл, который является насыщенным или частично ненасыщенным и моноциклическим или бициклическим, и который иначе определен как указано в отношении Y вообще, до тех пор, пока это применимо. В одном варианте число кольцевых членов в моноциклическом гетероцикле, представляющем собой Y, имеет значения, как указано в описании в общем определении Y или в вышеуказанных вариантах, и бициклический гетероцикл, представляющий собой Y, является 6-7-членным, в другом варианте 6-членным, в другом варианте 7-членным. В бициклических гетероциклах, представляющих собой Y, атомы в голове мостика могут быть атомами азота, который является любым из атомов азота кольца, которые могут присутствовать в дополнение к атому азота кольца, изображенному в формуле I, и/или атомам углерода кольца. В одном варианте один из атомов в голове мостика в бициклическом гетероцикле, представляющем собой Y, является атомом углерода и другой является атомом углерода или атомом азота, в другом варианте оба атома в голове мостика являются атомами углерода. Примерами бициклических кольцевых систем, из которых выбирают бициклические гетероциклы, представляющие собой Y, в одном варианте являются бицикло[3.1.0], бицикло[3.2.0], бицикло[4.1.0], бицикло[2.2.1] и бицикло[2.1.1] кольцевыми системами, которые включают атом азота кольца, изображенный в формуле, и дополнительные гетероатомы в кольце, которые необязательно присутствуют в Y, и которые являются насыщенными или частично ненасыщенными и иначе определены как указано в отношении Y вообще, до тех пор, пока это применимо. В одном варианте бициклический гетероцикл представляющий собой Y, является насыщенным. В одном варианте Y представляет собой моноциклический гетероцикл, в другом варианте Y представляет собой бициклический гетероцикл. В одном варианте число (С-С)-алкильных заместителей, которые необязательно присутствуют у атомов углерода кольца в Y, составляет один, два, три или четыре, в другом варианте один или два, и в другом варианте Y не замещен у атомов углерода кольца (С-С)-алкильными заместителями.
1
4
1
4
1
4
1
4
В одном варианте Y представляет собой 4-7-членный насыщенный моноциклический или бициклический гетероцикл, который в дополнение к атому азота кольца, представленному в формуле I, содержит 0 или 1 из гетероатомов в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где дополнительный атом азота кольца может быть замещен атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, и атом серы кольца может быть замещен одной или двумя оксогруппами, и где гетероцикл, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца идентичными или различными (С-С)-алкильными заместителями. В другом варианте Y представляет собой 4-6-членный, насыщенный, моноциклический гетероцикл, который не содержит другие гетероатомы в кольце в дополнение к атому азота кольца, изображенному в формуле I, где указанное кольцо необязательно замещено по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными (С-С)-алкильными заместителями. В другом варианте Y выбирают из одного или более гетероциклов азетидина, пирролидина и пиперидина, атом азота кольца которого представляет собой атом азота кольца в Y, изображенный в формуле I, который содержит карбонильную группу, связанную с группой X, где указанные гетероциклы, необязательно замещены у атомов углерода кольца одним или более из одинаковых или различных (С-С)-алкильных заместителей, и в другом варианте указанные гетероциклы не имеют алкильных заместителей.
4
4
4
4
4
4
4
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
Группа R-О-C(О)- может быть связана с гетероциклом Y в любом подходящем положении. В одном варианте группа R-О-C(О)- связана с атомом углерода кольца в Y в любом положении, в другом варианте она связана с атомом углерода кольца в Y, который расположен в положении кольца, соседним с атомом азота кольца в Y, изображенном в формуле I, в другом варианте указанная группа связана с атомом углерода кольца в Y, который является соседним, с указанным атомом азота кольца или отделен от указанного атома азота кольца одним или двумя членами кольца, в другом варианте она связана с атомом углерода кольца, который является соседним с указанным атомом азота кольца или отделен от указанного атома азота кольца по меньшей мере одним членом кольца, в другом варианте она связана с атомом углерода кольца в Y, который отделен от указанного атома азота кольца одним или двумя членами кольца, и в другом варианте она связана с атомом углерода кольца, который отделен от указанного атома азота кольца по меньшей мере одним членом кольца. Например, в случае гетероцикла, Y, который не содержит других гетероатомов в кольце в дополнение к атому азота, изображенному в формуле I, и где указанный атом азота кольца, таким образом, находится в положении гетероцикла, в одном варианте группа R-О-C(О)- связана с атомом углерода кольца в любом положении, в другом варианте она связана в положении 2, в другом варианте в положении 3, в другом варианте в положении 4, в другом варианте в положении 2 или 3, в другом варианте в положении 3 или 4, в другом варианте в положении 2, 3 или 4. В одном варианте в частично ненасыщенном гетероцикле Y группа R-О-C(О)- связана с атомом кольца, который не является частью двойной связи. В одном варианте в случае бициклического гетероцикла Y группа R-О-C(О)-связана с атомом кольца, который не является атомом в голове мостика. Группа Y может присутствовать у гетероцикла Y в любом стереохимическом положении, например, в эндо-положении или в экзо-положении в случае или бициклического кольца Y, или в цис-положении или в транс-положении по отношению к заместителю в Y, или у атома углерода, имеющего S конфигурацию, или у атома углерода имеющего R конфигурацию. Например, в случае кольца Y, которое выбирают из группы, состоящей из азетидина, пирролидина, пиперидина и пергидроазепина, атом азота кольца которого представляет собой атом азота кольца в Y, изображенный в формуле I, и который содержит группу R-О-C(О)- в положении 2, в одном варианте атом углерода, замещенный группой R-О-C(О)- присутствует в S конфигурации. Примеры группировок R-О-C(О)-Y-, из которых выбирают указанную группировку в соединениях формулы I, в одном варианте являются 2-гидроксикарбонилазетидин-1-илом, 2-((С-С)-алкилоксикарбонил)азетидин-1-илом, (S)-2-гидроксикарбонилазетидин-1-илом, (S)-2-((С-С)-алкилоксикарбонил)азетидин-1-илом, 3-гидроксикарбонилазетидин-1-илом, 3-((С-С)-алкилоксикарбонил)азетидин-1-илом, 2-гидроксикарбонилпирролидин-1-илом, 2-((С-С)-алкилоксикарбонил)пирролидин-1-илом, (S)-2-гидроксикарбонилпирролидин-1-илом, (S)-2-((С-С)-алкилоксикарбонил)пирролидин-1-илом, 3-гидроксикарбонилпирролидин-1-илом, 3-((С-С)-алкилоксикарбонил)пирролидин-1-илом, 2-гидроксикарбонилпиперидин-1-илом, 2-((С-С)-алкилоксикарбонил)пиперидин-1-илом, (S)-2-гидроксикарбонилпиперидин-1-илом, (S)-2-((C-C)-алкилоксикарбонил)пиперидин-1-илом, 3-гидроксикарбонилпиперидин-1-илом, 3-((С-С)-алкилоксикарбонил)пиперидин-1-илом, 4-гидроксикарбонилпиперидин-1-илом, 4-((С-С)-алкилоксикарбонил)пиперидин-1-илом, 2-гидроксикарбонилпергидроазепин-1-илом, 2-((С-С)-алкилоксикарбонил)пергидроазепин-1-илом, (S)-2-гидроксикарбонилпергидроазепин-1-илом, (S)-2-((С-С)-алкилоксикарбонил)пергидроазепин-1-илом, 3-гидроксикарбонилпергидроазепин-1-илом, 3-((С-С)-алкилоксикарбонил)пергидроазепин-1-илом, 4-гидроксикарбонилпергидроазепин-l-илом, 4-((С-С)-алкилоксикарбонил)пергидроазепин-1-илом, 2-гидроксикарбонилморфолинил-4-илом, 2-((С-С)-алкилоксикарбонил)морфолин-4-илом, 3-гидроксикарбонилморфолин-4-илом, 3-((С-С)-алкилоксикарбонил)морфолин-4-илом, 2-гидроксикарбонилтиоморфолин-4-илом, 2-((С-С)-алкилоксикарбонил)тиоморфолин-4-илом, 3-гидроксикарбонилтиоморфолин-4-илом, 3-((С-С)-алкилоксикарбонил)тиоморфолин-4-илом, 2-гидроксикарбонил-1,1-диоксотиоморфолин-4-илом, 2-((С-С)-алкилоксикарбонил)-1,1-диоксотиоморфолин-4-илом, 3-гидроксикарбонил-1,1-диоксотиоморфолин-4-илом, 3-((С-С)-алкилоксикарбонил)-1,1-диоксотиоморфолин-4-илом, 2-гидроксикарбонил-4-метилпиперазин-1-илом, 2-((С-С)-алкилоксикарбонил)-4-метилпиперазин-1-илом, 3-гидроксикарбонил-4-метилпиперазин-1-илом, 3-((С-С)-алкилоксикарбонил)-1-метилпиперазин-1-илом.
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
6
3
7
t
2t
t
2t
1
6
3
7
t
2t
1
6
3
7
t
2t
t
2t
3
7
t
2t
3-
7
t
2t
3
7
2
3
7
t
2t
t
2t
2
1
6
2
6
2
5
3
5
2
6
2
6
3
6
3
5
3
4
3
4
3
7
3
6
3
5
3
4
1
4
В одном варианте настоящего изобретения, число t выбирают из группы, состоящей из 0, 1 или 2, в другом варианте из 0 или 1, в другом варианте из 1, 2 или 3, в другом варианте из 1 или 2, в другом варианте t равно 0, в другом варианте t равно 1. В одном варианте R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила, (C-C)-циклоалкил-CH- и Het-CH-, в другом варианте из (C-C)-алкила и (C-C)-циклоалкил-CH-, в другом варианте R представляет собой (C-C)-алкил, в другом варианте R представляет собой (C-C)-циклоалкил-CH-, и в другом варианте R представляет собой Het-CH-. В одном варианте R представляет собой (C-C)-циклоалкил-CH-, где t выбирают из группы, состоящей из 0, 1 и 2, в другом варианте R представляет собой (CC)-циклоалкил-CH- где t выбирают из группы, состоящей из 0 и 1, в другом варианте R представляет собой (C-C)-циклоалкил-CH-, в другом варианте R представляет собой (C-C)-циклоалкил, в другом варианте R представляет собой Het-CH- где t выбирают из группы, состоящей из 0, 1 и 2, в другом варианте R представляет собой Het-CH- где t выбирают из группы, состоящей из 0 и 1, в другом варианте R представляет собой Het-CH-, в другом варианте R представляет собой Het. В одном варианте (C-C)-алкильная группа, которая представляет собой R, является (C-C)-алкилом, в другом варианте (C-C)-алкилом, в другом варианте (C-C)-алкилом. В одном варианте (C-C)-алкенильная группа и (C-C)-алкинильная группа, представляющие собой R являются (C-C)-алкенилом и (C-C)-алкинилом, соответственно, в другом варианте (C-C)-алкенилом и (C-C)-алкинилом, соответственно. В одном варианте (C-C)-циклоалкильная группа, которая представляет собой R, является (C-C)-циклоалкилом, в другом варианте (C-C)-циклоалкилом, в другом варианте (C-C)-циклоалкилом, в другом варианте циклопропилом. В одном варианте группа Het, которая представляет собой R представляет собой 4-6-членный, в другом варианте 4-членный или 5-членный, в другом варианте 4-членный, насыщенный моноциклический гетероцикл, который присоединен через атом углерода кольца, и который содержит 1 или 2 идентичных или различных гетероатома в кольце, в другом варианте 1 гетероатом в кольце, который выбирают из группы, состоящей из N, O и S, в другом варианте из O и S, и который в другом варианте представляет собой O атом. В одном варианте группа Het, которая представляет собой R, представляет собой оксетанильную группу, например, оксэтан-3-ильную группу. В одном варианте число заместителей, необязательно присутствующих у группы Het, представляющей собой R, составляет один, два или три, в другом варианте один или два, в другом варианте один, и в другом варианте такая группа Het является незамещенной. В одном варианте (C-C)-алкильный заместитель, присутствующий у группы Het, представляющей собой R, является метильной группой.
2
2
21
22
2
22
2
21
22
2
21
22
2
2
В одном варианте настоящего изобретения, количество гетероатомов в кольце в ароматическом гетероцикле, представляющем собой R, составляет 1 или 2, в другом варианте оно равно 1. В одном варианте настоящего изобретения, R выбирают из группы, состоящей из фенилена и двухвалентного остатка ароматического, 6-членного моноциклического гетероцикла, который включает 1, 2 или 3 атома азота кольца, в другом варианте 1 или 2 атома азота кольца, в другом варианте 1 атом азота кольца, где один из атомов азота кольца может иметь заместитель R, который представляет собой окси, т.е. где один из атомов азота кольца мождет быть окислен до N-оксида, и где фенилен и двухвалентный остаток ароматического гетероцикла необязательно замещены по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R. В другом варианте R представляет собой фенилен, где указанный фенилен, необязательно замещен по одному или более из атомов кольца одинаковыми или различными заместителями R, и в другом варианте R представляет собой пиридиндиил, где указанный атом азота кольца может быть замещен R, который представляет собой окси, т.е. где указанный атом азота кольца мождет быть окислен до N-оксида, и где пиридиндиил, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R. В другом варианте R представляет собой двухвалентный остаток ароматического 5-членного гетероцикла, который включает 1, 2 или 3 идентичных или различных гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один из атомов азота кольца может быть замещен атомом водорода или заместителем R, и где двухвалентный остаток ароматического гетероцикла, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R. В одном варианте остаток ароматической гетероциклической группы, представляющей собой R, выбран из группы, состоящей из фурандиила, тиофендиила, оксазолдиила, тиазолдиила, пиридиндиила, пиридазиндиила, пиримидиндиила и пиразиндиила, в другом варианте из фурандиила, тиофендиила, тиазолдиила, пиридиндиил, пиридазиндиила, пиримидиндиила и пиразиндиила, в другом варианте из фурандиила, тиофендиила, пиридиндиил, пиридазиндиила, пиримидиндиила и пиразиндиила, в другом варианте из фурандиила, тиофендиила, пиридиндиила и пиримидиндиила, в другом варианте из фурандиила, тиофендиила и пиридиндиил, причем все они, необязательно замещены, как указано в отношении R.
2
2
2
2
2
2
22
2
2
22
Атомы углерода кольца, через которые фениленовая группа и двухвалентный остаток ароматического гетероцикла, представляющего собой R, связаны с оксазолопиримидиновым кольцом и с группой X, могут быть в любом из положений. Фениленовая группа, представляющая собой R, может быть 1,2-фениленом, т.е. оксазолопиримидиновое кольцо и группа X могут быть связаны в 1,2-положении, или в ортоположении по отношению друг к другу, она может быть 1,3-фениленом, т.е. оксазолопиримидиновое кольцо и группа X могут быть связаны в 1,3-положении, или в мета-положении, по отношению друг к другу, и она может быть 1,4-фениленом, т.е. оксазолопиримидиновое кольцо и группа X могут быть связаны в 1,4-положении, или в пара-положении по отношению друг к другу. В одном варианте фениленовую группу, представляющую собой R, выбирают из группы, состоящей из 1,3-фенилена и 1,4-фенилена, в другом варианте она представляет собой 1,3-фенилен, и в другом варианте она представляет собой 1,4-фенилен, причем все указанные группы, необязательно замещены, как указано в отношении R. В одном варианте R выбирают из одного или более из группы фенилена, фуран-2,5-диила, тиофен-2,4-диила, тиофен-2,5-диила, пиридин-2,4-диила, пиридин-2,5-диила, пиридин-3,5-диила, пиридин-2,6-диила и пиримидин-2,5-диила, в другом варианте из группы фуран-2,5-диила, тиофен-2,4-диила, тиофен-2,5-диила, пиридин-2,4-диила, пиридин-2,5-диила, пиридин-3,5-диила, пиридин-2,6-диила и пиримидин-2,5-диила, в другом варианте из пиридин-2,4-диила, пиридин-2,5-диила, пиридин-3,5-диила и пиридин-2,6-диила, в другом варианте из фенилена, пиридин-2,4-диила, пиридин-2,5-диила, пиридин-3,5-диила и пиридин-2,6-диила, причем все из них, необязательно замещены, как указано в отношении R. В одном варианте количество заместителей R, которые, необязательно присутствуют у атомов углерода кольца в R, составляет 1, 2, 3, 4 или 5, в другом варианте 1, 2, 3 или 4, в другом варианте 1, 2 или 3, в другом варианте 1 или 2, в другом варианте 1. Атомы азота кольца в R, у которых нет заместителя R, замещены атомом водорода.
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
1
6
2
6
2
6
1
6
2
5
1
4
3
7
u
2U
v
2v
3
7
u
2U
v
2v
3
7
u
2U
u
2u
u
2u
u
2u
v
2v
,
v
2v
u
2u
u
2u
u
2u
В одном варианте настоящего изобретения, R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила, (C-C)-алкенила и (С-С)-алкинила, в другом варианте R представляет собой (C-C)-алкил, в другом варианте R представляет собой (C-C)-алкил, и в другом варианте R представляет собой (C-C)-алкил, при условии, что R не может быть алкильной группой, если A представляет собой S. В другом варианте R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-циклоалкил-CH- и Het-CH-. В другом варианте R представляет собой (C-C)-циклоалкил-CH-, и в другом варианте R представляет собой Het-CH-, где в указанном варианте u и v независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из 1 и 2. В одном варианте u равно 1, в другом варианте u равно 2. В одном варианте v равно 1, в другом варианте v равно 2. В одном варианте группу (C-C)-циклоалкил-CH-,которая представляет собой R, выбирают из группы, состоящей из циклопропил-CH-, циклобутил-CH- и циклопентил-CH-, и группа Het-CH-, которая представляет собой R  представляет собой тетрагидрофуранил-CH-. В одном варианте R выбирают из группы, состоящей из циклопропил-CH-, циклобутил-CH- и циклопентил-CH-.
3
3
31
3
31
3
3
3
3
3
3
3
3
3
31
3
3
7
u
2u
v
2v
1
4
1
4
,
1
4
1
4
,
,
1
4
,
В одном варианте R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-циклоалкил-CH- и Het-CH-, или R представляет собой радикал, состоящий из насыщенного или ненасыщенного, 3-10-членного, моноциклического или бициклического кольца, которое содержит 0, 1, 2, 3 или 4 одинаковых или различных гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)алкильным заместителем, и один или два из атомов серы кольца могут быть замещены одной или двумя оксогруппами, и где радикал кольца, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R, и в другом варианте R представляет собой радикал, состоящий из насыщенного или ненасыщенного, 3-10-членного, моноциклического или бициклического кольца, которое содержит 0, 1, 2, 3 или 4 одинаковых или различных гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, и один или два из атомов серы кольца могут быть замещены одной или двумя оксогруппами, и где остаток кольца, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца идентичными или различными заместителями R. В одном варианте количество гетероатомов в кольце, представляющем собой R  составляет 0, 1, 2 или 3, в другом варианте 0, 1 или 2, в другом варианте 0 или 1, в другом варианте 0, в другом варианте оно составляет 1, 2, 3 или 4, в другом варианте 1, 2 или 3, в другом варианте 1 или 2, в другом варианте 1. Так, указанный радикал кольца, который представляет собой R, может быть карбоциклическим или гетероциклическим. В одном варианте указанные гетероатомы в кольце в R выбирают из группы, состоящей из N и O, в другом варианте из N и S, в другом варианте из O и S, в другом варианте они представляют собой N, где атомы азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, как это существует в насыщенных или частично ненасыщенных гетероциклах или в 5-членных ароматических кольцах в гетероциклах, таких как, например, пиррол или бензимидазол, или они могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, как это существует в ароматических гетероциклах, таких как, например, имидазол или пиридин. В радикале гетероцикла, представляющего собой R, который содержит один или более из атомов серы кольца, в одном варианте один из атомов серы кольца является неокисленным или замещен одной или двумя оксогруппами, и все остальные атомы серы кольца являются неокисленными. Радикал моноциклического или бициклического кольца, представляющий собой Rможет быть связан с группой A через любой подходящий атом углерода кольца или атом азота кольца. В одном варианте он связан через атом углерода кольца, в другом варианте он связан через атом углерода кольца или, в случае, если А представляет собой NH, через атом азота кольца, и в другом варианте он связан через атом азота кольца. Радикал моноциклического или бициклического кольца, представляющий собой R может быть ненасыщенным, и в этом случае может содержать 1, 2, 3, 4 или 5, или 1, 2, 3 или 4, или 1, 2 или 3, или 1 или 2, или 1, двойные связи кольца, и может быть ароматическим или неароматическим в любом из двух колец, или он может быть ненасыщенным, и в этом, последнем случае он не содержит двойные связи кольца. В одном варианте указанный радикал кольца, представляющий собой R  является насыщенным или ароматическим, в другом варианте он является насыщенным, и в другом варианте он является ароматическим. В одном варианте указанный радикал, состоящий из 3-членного или 4-членного кольца, представляющий собой R  является насыщенным. Если R включает атомы азота кольца, которые могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, тогда может присутствовать один из таких атомов азота кольца или могут присутствовать два из таких атомов азота кольца. В одном варианте число необязательных заместителей Rу атомов углерода кольца, представляющем собой R  составляет 1, 2, 3, 4, 5 или 6, в другом варианте 1, 2, 3, 4 или 5, в другом варианте 1, 2, 3 или 4, в другом варианте 1, 2 или 3, в другом варианте 1 или 2, в другом варианте 1.
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
31
3
3
31
,
,
,
5
7
1
4
1
4
Кольцо, которое может представлять собой R  может быть 3-членным, 4-членным, 5-членным, 6-членным, 7-членным, 8-членным, 9-членным или 10-членным. В одном варианте R представляет собой 4-10-членное, в другом варианте 4-9-членное, в другом варианте 4-8-членное, в другом варианте 4-7-членное, в другом варианте 5-7-членное, в другом варианте 5-6-членное, в другом варианте 6-членное, в другом варианте 8-10-членное, в другом варианте 9-10-членное. В одном варианте 3-членное кольцо, представляющее собой R, не содержит никаких гетероатомов в кольце. В одном варианте R является моноциклическим, в другом варианте бициклическим. В одном варианте бициклическая группа, представляющая собой R, является по меньшей мере 7-членной. Среди других указанный радикал кольца, представляющего собой R  может быть циклоалкильной группой, фенильной группой, нафтильной группой, радикалом, состоящим из ненасыщенной, ароматической или неароматической гетероциклической группы или радикалом, состоящим из насыщенной гетероциклической группы, причем все они, необязательно замещены у атомов углерода кольца и атомов азота кольца, как определено в отношении R. До тех пор, пока это возможно, все приведенные выше объяснения в отношении такой группы применимы соответственно к R. Другими примерами групп, которые могут представлять собой R  являются циклоалкенильные группы, такие как (C-C)-циклоалкенильные группы, которые могут быть связаны через любой атом углерода кольца и, необязательно замещены, как определено в отношении R. В одном варианте необязательные заместители R у циклоалкенильной группы, представляющей собой R, выбирают из группы, состоящей из фтора и (С-С)-алкила. В одном варианте циклоалкенильные группы содержат одну двойную связь кольца, причем указанная двойная связь может присутствовать в любом положении. Примерами циклоалкенилов являются циклопентенил, включая циклопент-1-енил, циклопент-2-енил и циклопент-3-енил, циклогексенил, включая циклогекс-1-енил, циклогекс-2-енил и циклогекс-3-енил, и циклогептенил, включая циклогепт-1-енил, циклогепт-2-енил, циклопент-3-енил и циклогепт-4-енил. Примеры радикалов колец, из которых выбирают R, в одном варианте настоящего изобретения представляют собой циклобутил, циклопентил, циклогексил, фенил, оксэтанил, включая оксэтан-3-ил, тетрагидрофуранил, включая тетрагидрофуран-3-ил, тетрагидротиофенил, включая тетрагидротиофен-3-ил, тетрагидропиранил, включая тетрагидропиран-4-ил, азетидинил, включая азетидин-1-ил, пирролидинил, пиперидинил, имидазолидинил, пиперазинил, морфолинил, включая морфолинил-1-ил, тиоморфолинил, фуранил, включая фуран-3-ил, тиофенил, включая тиофен-3-ил, пиразолил, включая пиразол-3-ил, имидазолил, тиазолил, включая тиазол-2-ил, пиридинил, включая пиридин-2-ил, пиридин-3-ил и пиридин-4-ил, пиридазинил, включая пиридазин-3-ил, где во всех указанных циклоалкенилах, если это применимо, один или два из атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкилом, и где все они, необязательно замещены по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R, и где во всех них, если это применимо, атом серы кольца может быть неокисленным, т.е. присутствовать как атом серы, или быть замещен одной или двумя оксогруппами, т.е. присутствовать в форме сульфоксида или сульфона.
3
31
3
31
1
4
В одном варианте R выбирают из группы, состоящей из фенила и радикала, состоящего из насыщенного или ненасыщенного 3-7-членного, моноциклического кольца, в другом варианте из фенила и радикала, состоящего из насыщенного или ненасыщенного 5-7-членного, моноциклического кольца, в другом варианте из фенила, пиридинила и радикала, состоящего из насыщенного 3-7-членного моноциклического кольца, в другом варианте из фенила, пиридинила и радикала, состоящего из насыщенного 5-7-членного, моноциклического кольца, в другом варианте из фенила и пиридинила, в другом варианте из фенила и радикала, состоящего из насыщенного 3-7-членного, моноциклического кольца, в другом варианте из фенила и радикала, состоящего из насыщенного 5-7-членного, моноциклического кольца, в другом варианте из одного или более из группы, состоящей из фенила, циклобутила, циклопентила, циклогексила и пиридинила, в другом варианте из одного или более из группы, состоящей из фенила, циклопентила и циклогексила, в другом варианте из одного или обоих из группы фенила и циклогексила, где во всех указанных вариантах моноциклическое кольцо содержит 1 или 2 одинаковых или различных гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, и один или два из атомов серы кольца может быть замещен одной или двумя оксогруппами, и где указанные фенил, пиридинил, радикал кольца, циклобутил, циклопентил и циклогексил, необязательно замещены по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R, и где пиридинил включает пиридин-2-ил, пиридин-3-ил и пиридин-4-ил. В другом варианте R представляет собой фенил, который, необязательно замещен одним или более из одинаковых или различных заместителей R.
4
4
4
4
4
4
4
1
4
1
4
3
7
3
6
В одном варианте настоящего изобретения, число z выбирают из группы, состоящей из 0 и 1, в другом варианте z=0, в другом варианте z=1. В одном варианте изобретения, группу R выбирают из группы, состоящей из водорода и (С-С)-алкила, в другом варианте R выбирают из группы, состоящей из водорода, метила, этила, н-пропила, н-бутила и изопропила, в другом варианте из водорода, метила и этила, в другом варианте R представляет собой водород, в другом варианте R представляет собой (С-С)-алкил, в другом варианте R представляет собой метил и в другом варианте R представляет собой этил. В одном варианте (C-C)-циклоалкильная группа, присутствующая в R, представляет собой (C-C)-циклоалкил, в другом варианте она представляет собой циклопропил.
3
7
3
6
3
5
1
4
1
4
1
3
21
21
21
В одном варианте настоящего изобретения, число w выбирают из группы, состоящей из 0 и 1, в другом варианте w=0, в другом варианте w=1. В одном варианте (C-C)-циклоалкильная группа, которая присутствует в R, представляет собой (C-C}-циклоалкил, в другом варианте (C-C)-циклоалкил, в другом варианте циклопропил. В одном варианте R выбирают из группы, состоящей из (С-С)-алкила и окси, в другом варианте R представляет собой (С-С)-алкил, в другом варианте он представляет собой (C-C)-алкил, в другом варианте он представляет собой метил и в другом варианте он представляет собой окси.
22
2
1
4
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
В одном варианте настоящего изобретения заместители R, необязательно присутствующие у группы R, выбирают из группы, состоящей из галогена, гидроксила, (С-С)-алкила-, (С-С)-алкилокси-, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, нитро и циано, в другом варианте из галогена, гидроксила, (С-С)-алкила-, (С-С)-алкилокси-, амино и циано, в другом варианте из галогена, гидроксила, (С-С)-алкила- и (С-С)-алкилокси-, в другом варианте из фтора, хлора, гидроксила, (С-С)-алкила- и (С-С)- алкилокси-, в другом варианте из фтора, хлора и (С-С)-алкила-, и в другом варианте они представляют собой (С-С)-алкильные заместители.
22
22
22
2
22
22
2
22
22
22
22
2
22
22
22
22
2
22
22
22
2
2
22
2
22
22
22
1
4
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
В одном варианте 1, 2 или 3 из заместителей R, в другом варианте 1 или 2 из заместителей R, и в другом варианте 1 из заместителей R, которые необязательно присутствуют у группы R, определены, как представлено в общем определении R, и, таким образом, их выбирают из группы, состоящей из галогена, гидроксила, (С-С)-алкила-, (С-С)-алкилокси-, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, нитро, циано, гидроксикарбонила, (С-С)-алкилоксикарбонила, аминокарбонила и аминосульфонила, и любые другие заместители R, которые необязательно присутствуют у группы R, например, 1, 2 или 3 других заместителя R, или 1 или 2 других заместителя R, или 1 другой заместитель R, выбирают из группы, состоящей из галогена, гидроксила, (С-С)-алкила-, (С-С)-алкилокси-, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, нитро и циано, где все алкильные группы независимо друг от друга, необязательно замещены одним или более из фторзаместителей, как это обычно применимо к алкильным группам. В одном варианте заместители R, которые необязательно присутствуют у группы R, и которые в вышеуказанном варианте определены как указано в общем определении R, например, 1 или 2 таких заместителя R, или 1 такой заместитель R, выбирают из группы, состоящей из галогена, гидроксила, (C-C)-алкила-, (С-С)-алкилокси-, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, нитро и циано. В одном варианте заместители R, которые необязательно присутствуют у группы R и которые в вышеуказанном варианте определены как указано в общем определении R, например, 1 или 2 такие заместителя R, или 1 такой заместитель R, не расположены у атомов углерода кольца внутри группы R, которая расположена рядом с атомом, через который группа R присоединена к оксазолопиримидиновому кольцу, представленному в формуле I. В одном варианте другие заместители R, которые необязательно присутствуют у группы R, например, 1, 2 или 3 других заместителя R, или 1 или 2 других заместителя R, или 1 другой заместитель R, выбирают из группы, состоящей из галогена, гидроксила, (С-С)-алкила-, (С-С)-алкилокси-, амино, циано, в другом варианте из галогена, гидрокси, (С-С)-алкила- и (С-С)-алкилокси-, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила- и (С-С)-алкилокси-, в другом варианте из галогена и (С-С)-алкила-, где во всех указанных вариантах все алкильные группы независимо друг от друга, необязательно замещены одним или более из фторзаместителей.
31
1
4
3
7
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
В одном варианте настоящего изобретения, R выбирают из группы, состоящей из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, оксо, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, (С-С)-алкилкарбониламино, (С-С)-алкилсульфониламино, циано, (С-С)-алкилкарбонила, аминосульфонила, (С-С)-алкиламиносульфонила и ди((С-С)-алкил)аминосульфонила, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, оксо, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, циано, аминосульфонила, (С-С)-алкиламиносульфонила и ди((С-С)-алкил)аминосульфонила, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, оксо, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, циано и аминосульфонила, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, оксо, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, циано и аминосульфонила, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, оксо, амино, (С-С)-алкиламино и ди((С-С)-алкил)амино, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, (С-С)-алкилокси и ди((С-С)-алкил)амино, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила и (С-С)-алкилокси, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила и (С-С)-алкилокси, в другом варианте из фтора, хлора, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила и (С-С)-алкилокси, где во всех указанных вариантах все алкильные группы независимо друг от друга, необязательно замещены одним или более из фторзаместителей.
31
3
1
4
3
7
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
m
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
В одном варианте необязательные заместители R у указанного радикала, состоящего из насыщенного или неароматического ненасыщенного кольца, представляющего собой R, выбирают из группы, состоящей из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, (С-С)-алкилкарбониламино, (С-С)-алкилсульфониламино, циано, (С-С)-алкилкарбонила, аминосульфонила, (С-С)-алкиламиносульфонила и ди((С-С)-алкил)аминосульфонила, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)- алкилокси, (С-С)-алкил-S(О)m-, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, циано, аминосульфонила, (С-С)-алкиламиносульфонила и ди((С-С)-алкил)аминосульфонила, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, (С-С)-алкил-S(О)-, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, циано и аминосульфонила, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, циано и аминосульфонила, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, амино, (С-С)-алкиламино и ди((С-С)-алкил)амино, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, (С-С)-алкилокси и ди((С-С)-алкил)амино, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила и (С-С)-алкилокси, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила и (С-С)-алкилокси, в другом варианте из фтора, хлора, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила и (С-С)-алкилокси, где во всех указанных вариантах все алкильные группы независимо друг от друга, необязательно замещены одним или более из фторзаместителей.
31
3
3
31
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
3
7
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
1
4
В одном варианте необязательные заместители R у указанного радикала, состоящего из насыщенного или неароматического ненасыщенного кольца, представляющего собой R, выбирают из группы, состоящей из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, оксо, (С-С)-алкил-S(О)m-, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино, (С-С)-алкилкарбониламино, (С-С)-алкилсульфониламино и циано, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси, оксо, амино, (С-С)-алкиламино, ди((С-С)-алкил)амино и циано, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси и оксо, в другом варианте из галогена, (С-С)-алкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси и оксо, в другом варианте из фтора, хлора, (С-С)-алкила, гидроксила, (С-С)-алкилокси и оксо, в другом варианте из (С-С)-алкила, гидроксила и оксо, в другом варианте из алкила и гидроксила, и в другом варианте они представляют собой (С-С)-алкил, причем во всех указанных вариантах все алкильные группы независимо друг от друга, необязательно замещены одним или более из фторзаместителей. Если указанный радикал кольца, представляющий собой R, содержит любые оксогруппы в качестве заместителей R, в одном варианте присутствуют не более двух таких оксозаместителей, и в другом варианте присутствует не более чем один такой оксозаместитель.
1
4
1
4
В одном варианте настоящего изобретения указанные гетероатомы в кольце в Het выбирают из группы, состоящей из N и O, в другом варианте из O и S, в другом варианте они представляют собой O атомы. В другом варианте количество гетероатомов в кольце в Het составляет 1. В одном варианте два атома кислорода кольца в Het не находятся в соседних положениях кольца, в другом варианте два гетероатома в кольце, выбранные из группы, состоящей из O и S не находятся в соседних положениях кольца, в другом варианте два гетероатома в кольце не находятся в соседних положениях кольца. Атомы азота кольца в Het замещены атомом водорода или заместителем, как указано в описании. В одном варианте необязательные заместители у атомов азота кольца в Het представляют собой (С-С)-алкильные заместители. В одном варианте необязательные заместители у атомов азота кольца и атомов углерода кольца в Het представляют собой (С-С)-алкильные заместители. В одном варианте число необязательных заместителей у Het составляет 1, 2, 3, 4 или 5, в другом варианте 1, 2, 3 или 4, в другом варианте 1, 2 или 3, в другом варианте 1 или 2, в другом варианте 1. Het может быть присоединен через любой подходящий атом углерода кольца. В одном варианте Het присоединен через атом углерода кольца, который не является соседним с гетероатомом в кольце. Het может быть 4-членным, 5-членным, 6-членным или 7-членным. В одном варианте Het является 4-членным или 5-членным, в другом варианте 5-7-членным, в другом варианте 5-членным или 6-членным, в другом варианте 4-членным. Примерами Het, где его выбирают из одного варианта, являются оксэтанил, включая оксэтан-2-ил и оксэтан-3-ил, тетрагидрофуранил, включая тетрагидрофуран-2-ил и тетрагидрофуран-3-ил, тетрагидропиранил, включая тетрагидропиран-2-ил, тетрагидропиран-3-ил и тетрагидропиран-4-ил, оксепанил, включая оксепан-2-ил; оксепан-3-ил и оксепан-4-ил, [1,3]диоксоланил, включая [1,3]диоксолан-2-ил и [1,3]диоксолан-4-ил, [1,4]диоксанил, включая [1,4]диоксан-2-ил, тиэтанил, включая тиэтан-2-ил и тиэтан-3-ил, тетрагидротиофенил, включая тетрагидротиофен-2-ил и тетрагидротиофен-3-ил, тетрагидротиопиранил, включая тетрагидротиопиран-2-ил, тетрагидротиопиран-3-ил и тетрагидротиопиран-4-ил, [1,4]дитианил, включая [1,4]дитиан-2-ил, азетидинил, включая азетидин-2-ил и азетидин-3-ил, пирролидинил, включая пирролидинил-2-ил и пирролидинил-3-ил, пиперидинил, включая пиперидинил-2-ил, пиперидинил-3-ил и пиперидинил-4-ил, азепанил, включая азепан-2-ил, азепан-3-ил и азепан-4-ил, оксазолидинил, включая оксазолидин-2-ил, оксазолидин-4-ил и оксазолидин-5-ил, тиазолидинил, включая тиазолидин-2-ил, тиазолидин-4-ил и тиазолидин-5-ил, морфолинил, включая морфолин-2-ил и морфолин-3-ил, тиоморфолинил, включая тиоморфолин-2-ил и тиоморфолин-3-ил, причем все они необязательно замещены, как указано в отношении Het.
В настоящем изобретении предложены все соединения формулы I, в которых один или более из структурных элементов, таких как группы, заместители и числа, определены как в любом из конкретных вариантов или определений элементов или имеет одно или более из конкретных значений, которые здесь указаны как примеры элементов, где все комбинации одного или более из конкретных вариантов и/или определений и/или конкретных значений элементов составляют предмет настоящего изобретения. Также в отношении всех таких соединений формулы I, все их стереоизомерные формы и смеси стереоизомерных форм в любом отношении, и их физиологически приемлемые соли, и физиологически приемлемые сольваты составляют предмет настоящего изобретения.
3
3
31
3
1
6
3
7
u
2u
v
2v
1
4
1
6
Примерами соединений в соответствии с настоящим изобретением, которые определены в отношении любых структурных элементов, как в указанных вариантах настоящего изобретения, определениях таких элементов, и которые являются частью предмета настоящего изобретения, являются соединения формулы I в любой из их стереоизомерных форм или в смеси стереоизомерных форм в любом отношении, и их физиологически приемлемые соли, и физиологически приемлемые сольваты таких соединений и таких солей, где R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила, (C-C)-циклоалкил-CH- и Het-CH-, где u и v выбирают из группы, состоящей из 1 и 2, или R представляет собой радикал, состоящий из насыщенного или ненасыщенного 3-10-членного моноциклического или бициклического кольца, которое содержит 0, 1 или 2 идентичных или различных гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, и один из атомов серы кольца может быть замещен одной или двумя оксогруппами, и где радикал кольца, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца идентичными или различными заместителями R, при условии, что R не может представлять (C-C)-алкил, если A представляет собой S;
1
4
Het представляет собой радикал, состоящий из насыщенного 4-6-членного моноциклического гетероцикла, который содержит 1 гетероатом в кольце, выбранный из группы, состоящей из N, O и S, и который присоединен через атом углерода кольца, где радикал гетероцикла, необязательно замещен одним или более из одинаковых или различных заместителей, выбранных из группы, состоящей из фтора и (С-С)-алкила;
и все остальные группы и числа определены также как в общем определении соединений формулы I или в одном из указанных вариантов настоящего изобретения или в определениях структурных элементов.
Другим таким примером являются соединения формулы I в любой из их стереоизомерных форм или в смеси стереоизомерных форм в любом отношении, и их физиологически приемлемые соли, и физиологически приемлемые сольваты таких соединений или таких солей, в которых
A выбирают из группы, состоящей из O и S;
1
6
2
6
1
6
X выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкандиила, (C-C)-алкендиила и (C-C)-алкандиилокси;
1
4
1
4
Y представляет собой 4-7-членный насыщенный моноциклический или бициклический гетероцикл, который, в дополнение к атому азота кольца, представленному в формуле I, содержит 0 или 1 гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где дополнительный атом азота кольца может быть замещен атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем, и атом серы кольца может быть замещен одной или двумя оксогруппами, и где гетероцикл, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными (С-С)-алкильными заместителями;
1
1
6
3
7
t
2t
t
2t
R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила, (C-C)-циклоалкил-CH- и Het-CH-, где t выбирают из группы, состоящей из 0, 1 и 2;
2
22
R выбирают из группы, состоящей из фенилена и пиридинила, где фенилен и пиридиндиил, необязательно замещены по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R;
3
1
6
3
7
u
2u
v
2v
R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила, (C-C)- циклоалкил-CH- и Het-CH-, где u и v выбирают из группы, состоящей из 1 и 2, или
3
31
3
1
4
1
6
R представляет собой радикал, состоящий из насыщенного или ненасыщенного 3-10-членного моноциклического или бициклического кольца, которое содержит 0, 1 или 2 одинаковых или различных гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем и один из атомов азота кольца может быть замещен одной или двумя оксогруппами и где радикал кольца, необязательно замещен по одному или более из атомов азота кольца одинаковыми или различными заместителями R, при условии, что R не может представлять собой (C-C)-алкил, если A представляет собой S;
1
4
Het представляет собой радикал, состоящий из насыщенного 4-6-членного моноциклического гетероцикла, который содержит 1 гетероатом в кольце, выбранный из группы, состоящей из N, O и S, и который присоединен через атом углерода кольца, где радикал, представляющий собой гетероцикл, необязательно замещен одним или более из одинаковых или различных заместителей, выбранных из группы, состоящей из фтора и С-С)-алкила;
и все остальные группы и числа определены также как в общем определении соединений формулы I, или в одном из указанных вариантов изобретения или в определениях структурных элементов.
Другим таким примером служат соединения формулы I в любой из их стереоизомерных форм или в смеси стереоизомерных форм в любом отношении, и их физиологически приемлемые соли и физиологически приемлемые сольваты таких соединений или таких солей, где A представляет собой O;
1
6
1
6
X выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкандиила и (C-C)-алкандиилокси;
1
4
Y представляет собой 4-6-членный насыщенный моноциклический гетероцикл, который, в дополнение к атому азота кольца, представленному в формуле I, не содержит других гетероатомов в кольце, где кольцо, необязательно замещено по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными (С-С)-алкильными заместителями;
1
1
6
3
7
t
2t
R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-алкила и (C-C)-циклоалкил-CH-, где t выбирают из группы, состоящей из 0 и 1;
2
22
R представляет собой фенилен, который необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R;
3
3
31
3
3
7
u
2u
V
2V
1
4
1
6
R выбирают из группы, состоящей из (C-C)-циклоалкил-CH- и Het-CH-, где u и v выбирают из группы, состоящей из 1 и 2, или R представляет собой радикал, состоящий из насыщенного или ненасыщенного 3-7-членного моноциклического или бициклического кольца, которое содержит 0, 1 или 2 одинаковых или различных гетероатома в кольце, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, где один или два из атомов азота кольца могут быть замещены атомом водорода или (С-С)-алкильным заместителем и один из атомов серы кольца может быть замещен одной или двумя оксогруппами, и где радикал кольца, необязательно замещен по одному или более из атомов углерода кольца одинаковыми или различными заместителями R, при условии, что R не может представлять собой (C-C)-алкил, если A представляет собой S;
4
1
4
R выбирают из группы, состоящей из водорода и (С-С)-алкила;
22
1
4
1
4
R выбирают из группы, состоящей из галогена, гидроксила, (С-С)-алкила и (С-С)-алкилокси;
31
1
4
3
7
1
4
R выбирают из группы, состоящей из галогена, (С-С)-алкила, (C-C)-циклоалкила, гидроксила и (С-С)-алкилокси;
1
4
Het представляет собой радикал, состоящий из насыщенного 4-6-членного моноциклического гетероцикла, который содержит 1 гетероатом в кольце, выбранный из группы, состоящей из O и S, и который присоединен через атом углерода кольца, где радикал гетероцикла, необязательно замещен одним или более из одинаковых или различных заместителей, выбранных из группы, состоящей из фтора и (С-С)-алкила;
1
4
где все циклоалкильные группы независимо друг от друга и независимо от других заместителей, необязательно замещены одним или более из одинаковых или различных заместителей, которые выбирают из группы, состоящей из фтора и (С-С)-алкила;
t
2t
u
2U
v
2v
где все алкильные, алкандиильные, CH, CH и CH группы независимо друг от друга и, независимо от других заместителей, необязательно замещены одним или более из фторзаместителей.
Аналогично, также в отношении всех раскрытых здесь конкретных соединений, таких как соединения примеров, которые представляют собой варианты воплощения настоящего изобретения, в которых различные группы и числа в общем определении соединений формулы I имеют конкретные значения, представленные в соответствующих конкретных соединениях, предполагают, что они являются предметом настоящего изобретения в любой из их стереоизомерных форм и/или в смеси стереоизомерных форм в любом отношении, и в форме их физиологически приемлемых солей, и в форме физиологически приемлемых сольватов таких соединений или таких солей. Независимо от того, является ли раскрытое здесь конкретное соединение соединением в свободной форме и/или соединением в виде конкретной соли, в настоящем изобретении предложены соединения, как в форме свободных соединений, так и в форме всех их физиологически приемлемых солей, и если раскрыта конкретная соль, дополнительно в форме указанной конкретной соли, и в форме физиологически приемлемых сольватов такого соединения или такой соли. Таким образом, в настоящем изобретении также предложено соединение формулы I, которое выбирают из одного или более раскрытых в изобретении конкретных соединений формулы I, включая представленные далее соединения примеров, и их физиологически приемлемые соли, и физиологически приемлемые сольваты такого соединения или таких солей, где в настоящем изобретении предложено соединение формулы I в любой из его стереоизомерных форм или в смеси стереоизомерных форм в любом отношении, если это применимо. Примерами, которые можно указать, являются соединения формулы I, или их физиологически приемлемые соли или физиологически приемлемые сольваты таких соединений или таких солей, выбранные из группы, состоящей из
(S)-1-(2-{4-[5-(2,5-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты
(S)-1-(2-{4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты
(S)-1-(2-{4-[5-{2-фторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты
(S)-1-(2-{4-[5-(5-фтор-2-метилфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты
(S)-1-(2-{4-[5-(3-фтор-4-метилфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты
(S)-1-(2-{2,6-диметил-4-[7-пропокси-5-(пиридин-3-илокси)оксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]фенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты
(S)-1-(2-{4-[5-(2,4-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты
(S)-1-{2-[2,6-диметил-4-(5-фенокси-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)фенокси]ацетил}пирролидин-2-карбоновой кислоты и
(S)-1-(2-{4-[5-(3-хлорфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты,
где транс-2-фторциклогексилокси группировка в соединении (S)-1-(2-{4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновой кислоты может присутствовать в S,S-конфигурации или в R,R-конфигурации или в смеси указанных двух форм группировки в любом отношении.
Другим предметом настоящего изобретения являются способы получения соединений формулы I и их солей и сольватов, которыми указанные соединения можно получить, и которые представлены далее. В одном способе, соединение формулы II подвергают взаимодействию с соединением формулы III, получая соединение формулы I,
1
2
3
4
1
2
1
4
где группы A, X, Y, R, R, R и R в соединениях формул II и III определены как в соединениях формулы I, и дополнительно функциональные группы могут присутствовать в защищенной форме или в форме группы предшественника, которую позднее превращают в конечную группу. Группа L в соединениях формулы II представляет собой уходящую группу, которую можно заменить, используя реакцию нуклеофильного ароматического замещения, такую как атом галогена, например, атом хлора или брома, или сульфоксидную группу или сульфонную группу, например, группу формулы -S(О)-Alk или -S(О)-Alk, где Alk представляет собой (С-С)-алкильную группу, например, метил или этил.
Реакция соединений формул II и III представляет собой реакцию нуклеофильного ароматического замещения у атома углерода в положении 5 оксазоло[5,4-d]пиримидинового кольца, т.е. в пиримидиновой группировке, и ее можно осуществить в условиях, стандартных для таких реакций, которые хорошо известны специалистам в данной области. Обычно реакцию, в зависимости от конкретных условий рассматриваемого варианта, ведут в инертном растворителе, например, в углеводороде или в хлорированном углеводороде, таком как бензол, толуол, ксилол, хлорбензол, дихлорметан, хлороформ или дихлорэтан, в эфире, таком как тетрагидрофуран (ТГФ), диоксан, дибутиловый эфир, диизобутиловый эфир или 1,2-диметоксиэтан (DME), в кетоне, таком как ацетон или бутан-2-он, в сложном эфире, таком как этилацетат или бутилацетат, в нитриле, таком как ацетонитрил, в амине, таком как N,N-диметилформамид (ДМФ) или N-метилпирролидин-2-он (NMP), или в смеси растворителей, при температурах от около 20°C до около 160°C, например, при температурах от около 40°C до около 100°C. Вообще, желательно добавлять основание для повышения нуклеофильности соединения формулы III, например, третичный амин, такой как триэтиламин, этилдиизопропиламин или N-метилморфолин, или неорганическое основание, такое как гидрид, гидроксид, карбонат или бикарбонат щелочного металла, такой как гидрид натрия, гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия или бикарбонат натрия или алкоксид или амид, такой как метоксид натрия, этоксид натрия, метоксид калия, трет-бутоксид калия, амид натрия или литийдиизопропиламид. До реакции с соединением формулы II, соединение формулы III можно также отдельно обработать основанием и превратить в соль.
1
4
2
Исходные материалы формул II и III можно получить, используя способы, раскрытые в литературе, или аналогичные способам, раскрытым в литературе, и во многих случаях они коммерчески доступны. Соединения формулы IIa, т.е. соединения формулы II, где L представляет собой, например, сульфоксидную группу формулы Alk-S(O)- или сульфонную группу формулы Alk-S(О)-, можно получить, подвергая взимодействию аминомалоновый сложный эфир формулы IV с активированным производным карбоновой кислоты формулы V, получая соединение формулы VI, подвергая взаимодействию последнее соединение с тиомочевиной формулы VII, получая соединение формулы VIII, алкилируя тиол алкилирующим реагентом формулы IX, получая тиоэфир формулы X, осуществляя циклизацию последнего соединения с образованием системы оксазоло[5,4-d]пиримидинового кольца, получая соединение формулы XI, алкилируя последнее соединение по атому кислорода кетогруппы или таутомерной гидроксильной группы, используя алкилирующий реагент формулы XII, вводя группировку R"О-C(О)-X- в соединение формулы XIII, используя реакцию с соединением формулы XIV, удаляя защитные группы полученного соединения формулы XV, получая карбоновую кислоту формулы XVI, вводя группировку RO-C(О)-Y-, используя реакцию с соединением формулы XVII и окисляя тиоэфирную группировку в полученном соединении формулы XVIII, получая соответствующий сульфоксид или сульфон формулы IIa.
1
3
4
2
Порядок введения структурных элементов во время синтеза соединения формулы I может также быть различным; например, в соединении формулы XV тиоэфирную группировку можно сначала окислить, получая соответствующий сульфоксид или сульфон формулы XIX, где L представляет собой -S(О)-Alk или -S(О)-Alk, и группировку -A-R можно ввести, используя реакцию с соединением формулы III, и у полученного соединения формулы XX можно удалить защитные группы, получая карбоновую кислоту формулы XXI, и группировку RO-C(О)-Y- можно ввести, используя реакцию с соединением формулы XVII, получая соединение формулы I.
1
2
3
4
a
a
1
2
a
2
s
2
1
Группы A, X, Y, R, R, R и R в соединениях формул IIa, V, VI, VIII, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI, XVII, XVIII, XIX, XX и XXI определены как для соединения формулы I, и дополнительно функциональные группы могут присутствовать в защищенной форме или в форме группы предшественника, которую позднее превращают в конечную группу. Группа X в соединениях формулы XIV имеет такие же значения, что и группа X в соединениях формулы I, или включает часть группы X в нужном соединении формулы II, таким образом, что после реакции соединений формул XIII и XIV группа X и любые части групп FG и FG,остающиеся в соединении формулы XV, вместе образуют нужную группу X. Так, например, если группа X представляет собой алкандиилоксигруппу, группа X в соединении формулы XIV может быть нужной алкандиилокси группой и группа FG может быть атомом водорода, присоединенным к атому кислорода, или группа X может быть алкандиильным фрагментом, группа FG представляет собой уходящую группу и группа FG в соединении формулы XIII представляет собой гидроксильную группу, атом кислорода, которой вместе с алкандиильным фрагментом затем, после алкилирования соединения формулы XIII соединением формулы XIV, образует нужную алкандиилокси группу.
1
2
a
1
2
a
2
1
1
2
a
2
2
1
2
a
a
2
1
a
2
2
1
1
2
1
1
.
Группы FG и FG в соединениях формул V, VI, VIII, X, XI, XIII и XIV представляют собой функциональные группы, которые можно использовать для указанного типа реакции сочетания, использованной для образования нужной группы X из группы X и любой части групп FG и FG, оставшихся в соединении формулы XV. Если, например, группу X присоединяют в результате реакции нуклеофильного замещения к группе R или к атому в группе FG, такому как атом кислорода в гидроксильной группе, представляющий собой FG, как указано выше, FG может быть уходящей группой, такой как атом галогена, такой как хлор, бром или иод, или сульфонилоксигруппой, такой как метансульфонилокси, трифторметансульфонилокси или толуолсульфонилокси. Если группа X присоединена к группе Rв результате реакции, катализируемой переходным металлом, FG может быть уходящей группой, такой как группа бороновой кислоты, боронового эфира, диалкилборана или станнана, и в этом случае FG может быть галогеном. FG может также быть атомом водорода или атомом углерода, который является частью двойной связи в алкендиильной группе, представляющей собой X, если используют реакцию Хека для связывания X с R, и в этом случае FG может быть галогеном. Если используют реакцию Виттига или реакцию Виттига-Хорнера для связывания X с R, FG может быть фосфиногруппой, такой как трифенилфосфино или фосфонильной группой, такой как диэтилфосфонил, и соединение формулы XIV может быть солью или эфиром фосфоновой кислоты, и в этом случае FG может быть альдегидной группой -C(О)-H или кетонной группой -C(О)-алкил, и наоборотВообще, группа FG расположена у атома углерода в фениленовой группе или в гетероциклической группе, которая представляет собой R, который, в соединениях формул XV, IIa и I, замещен группой X. Группа FG в соединениях формул V, VI, VIII, X и XI может также присутствовать в защищенной форме или в форме группы предшественника, который позднее превращают в группу, которая в соединении формулы XIII реагирует с соединением формулы XIV. Так, например, гидроксильная группа, которая представляет собой FG в соединении формулы XIII, может присутствовать в защищенной форме в соединениях формул V, VI, VIII, X и XI, например, в форме этерифицированной гидроксильной группы, такой как бензиловый эфир или алкиловый эфир, такой как метиловый эфир. Такие эфиры можно отщеплять, используя способы, которые хорошо известны специалистам в данной области. Обзор способов удаления защитных групп можно найти в литературе, например, в P.J. Kocienski, Protecting Groups (Thieme Veriag, 1994), или T.W. Greene и P.G.M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis (John Wiley & Sons, 1999).
1
2
2
2
3
4
1
3
1
4
Группа L в соединениях формул IIa и XIX имеет указанные выше значения. Группа L в соединениях формулы V представляет собой нуклеофильно замещаемую уходящую группу, и может быть в частности, атомом галогена, таким как хлор или бром, и соединение формулы V может также быть карбонилгалогенидом. L может также быть группой формулы R-C(О)-О, и соединение формулы V может таким образом быть, например, ангидридом карбоновой кислоты. Группы L и L представляют собой уходящие группы, которые можно заменить, используя реакцию нуклеофильного замещения, и могут быть в частности атомами галогенов, таких как хлор, бром или иод, или сульфонилоксигруппой, такой как метансульфонилокси, трифторметансульфонилокси или толуолсульфонилокси, т.е. соединения формул IX и XII могут быть, например, органическими галогенидами или сульфонатами. Группа R' в соединениях формул IV и VI может быть алкилом, таким как, например, (С-С)-алкил, такой как метил или этил. Группа R" в соединениях формул XIV, XV, XIX и XX представляет собой группу, которую можно использовать для защиты функции карбоновой кислоты как эфир, например, (С-С)-алкильную группу, такую как метил, этил или трет-бутил, или бензильную группу. Как было указано, соединения формулы XI могут также присутствовать в другой таутомерной форме, например, в форме соответствующих производных 7-гидроксиоксазоло[5,4-d]пиримидина, где подвижный атом водорода, который в формуле XI присоединен к атому азота кольца в 6-положении системы оксазолопиримидинового кольца, присоединен к атому кислорода, связанному с атомом углерода кольца в положении 7. Если это применимо, это относится ко всем соединениям, принимающим участие в получении соединений формулы I, которые могут присутствовать в таутомерной форме, отличающейся от той, которая представлена в их формулах. В реакциях процесса получения соединений формулы II, как и во всех других реакциях, осуществляемых при получении соединений формулы I, исходные материалы также можно использовать в форме солей, и/или продукты можно получить в форме солей. Так, например, соединения формулы IV можно использовать в форме соли присоединения кислоты, такой как гидрохлорид.
Реакцию соединений формул IV и V можно осуществить в стандартных условиях ацилирования амина активированным производным карбоновой кислоты, таким как галоидангидрид или ангидрид. Обычно реакцию ведут в инертном растворителе, например, в углеводороде или в хлорированном углеводороде, таком как бензол, толуол, ксилол, хлорбензол, дихлорметан, хлороформ или дихлорэтан, в эфире, таком как ТГФ, диоксан, дибутиловый эфир, диизобутиловый эфир или DME, в кетоне, таком как ацетон или бутан-2-он, в сложном эфире, таком как этилацетат или бутилацетат, или в воде, или в смеси растворителей, при температурах от около -10°C до около 40°C, например, при температурах от около 0°C до около 30°C. Обычно реакцию ведут, добавляя основание, например, третичный амин, такой как триэтиламин, этилдиизопропиламин или N-метилморфолин или неорганическое основание, такое как гидроксид, карбонат или бикарбонат щелочного металла, такой как гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат натрия, карбонат калия или бикарбонат натрия. Реакцию соединений формул VI и VII обычно ведут в инертном растворителе, например, в спирте, таком как метанол, этанол или изопропанол, или в эфире, таком как ТГФ, диоксан или DME, или в смеси растворителей, при температурах от около 20°C до около 80°C, например, при температурах от около 40°C до около 80°C, в присутствии основания, например, алкоксида, такого как метоксид натрия, этоксид натрия, метоксид калия или трет-бутоксид калия.
3
Реакция соединений формул VIII и IX представляет собой реакцию нуклеофильного замещения у атома углерода в группе Alk, которая содержит группу L, и реакцию можно осуществить в условиях стандартных для таких реакций, которые хорошо известны специалистам в данной области. Обычно реакцию, в зависимости от конкретных условий рассматриваемого варианта, ведут в инертном растворителе, например, в углеводороде или в хлорированном углеводороде, таком как бензол, толуол, ксилол, хлорбензол, дихлорметан, хлороформ или дихлорэтан, в эфире, таком как ТГФ, диоксан, дибутиловый эфир, диизопропиловый эфир или DME, в спирте, таком как метанол, этанол или изопропанол, в кетоне, таком как ацетон или бутан-2-он, в сложном эфире, таком как этилацетат или бутилацетат, в нитриле, таком как ацетонитрнил, в амиде, таком как ДМФ или NMP, или в смеси растворителей, включая двухфазные смеси с водными растворами, при температурах от около -20°C до около 100°C, например, при температурах от около -10°C до около 30°C. Вообще, желательно добавлять основание для повышения нуклеофильности соединений формулы VII и/или для связывания кислоты, выделяющейся в ходе реакции, например, третичный амин, такой как триэтиламин, этилдиизопропиламин или N-метилморфолин, или неорганическое основание, такое как гидрид, гидроксид, карбонат или бикарбонат щелочного металла, такой как гидрид натрия, гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия или бикарбонат натрия, или алкоксид или амид, такой как метоксид натрия, этоксид натрия, метоксид калия, трет-бутоксид калия, амид натрия или литийдиизопропиламид. До реакции с соединением формулы IX, соединение формулы VIII можно также отдельно обработать основанием, превратив его в соль.
Циклизацию соединений формулы X до соединений формулы XI благоприятно вести в присутствии галоидного соединения фосфора, такого как пентахлорид фосфора или хлорокись фосфора или их смесей, в инертном растворителе, например, в углеводороде или в хлорированном углеводороде, таком как бензол, толуол, ксилол, хлорбензол, дихлорметан, хлороформ или дихлорэтан, при температурах от около 20°C до около 100°C, например, при температурах от около 50°C до около 80°C.
1
4
1
1
Реакция соединений формул XI и XII представляет собой другую реакцию нуклеофильного замещения у атома углерода в группе R, которая содержит группу L, и такую реакцию можно осуществить в условиях, стандартных для таких реакций, которые хорошо известны специалистам в данной области. Обычно реакцию, в зависимости от конкретных условий рассматриваемого варианта, ведут в инертном растворителе, например, в углеводороде или в хлорированном углеводороде, таком как бензол, толуол, ксилол, хлорбензол, дихлорметан, хлороформ или дихлорэтан, в эфире, таком как ТГФ, диоксан, дибутиловый эфир, диизопропиловый эфир или DME, в спирте, таком как метанол, этанол или изопропанол, в кетоне, таком как ацетон или бутан-2-он, в сложном эфире, таком как этилацетат или бутилацетат, в нитриле, таком как ацетонитрил, в амиде, таком как ДМФ или NMP, или в смеси растворителей, при температурах от около 20°C до около 100°C, например, при температурах от около 40°C до около 80°C. Вообще, желательно добавлять основание для повышения нуклеофильности соединения формулы XI и/или для связывания кислоты, выделяющейся в ходе реакции, например, третичный амин, такой как триэтиламин, этилдиизопропиламин или N-метилморфолин, или неорганическое основание, такое как гидрид, гидроксид, карбонат или бикарбонат щелочного металла, такой как гидрид натрия, гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия или бикарбонат натрия, или алкоксид или амид, такой как метоксид натрия, этоксид натрия, метоксид калия, трет-бутоксид калия, амид натрия или литийдиизопропиламид. До реакции с соединением формулы XII, соединение формулы XI можно также отдельно обработать основанием, превратив его в соль. Соединение формулы XI можно получить не только, используя реакцию с соединением формулы XII, но можно также осуществить превращение, используя реакцию с соответствующим спиртом формулы R-OH, где R имеет значения, определенные для соединений формулы I, и функциональные группы могут дополнительно присутствовать в защищенной форме или в форме группы предшественника, в условиях реакции Митсунобу в присутствии азодикарбоксилата, такого как диэтилазодикарбоксилат или диизопропилазодикарбоксилат, и фосфина, такого как трифенилфосфин или трибутилфосфин в инертном апротонном растворителе, например, в эфире, таком как ТГФ или диоксан, в соединении формулы XIII (см. O. Mitsunobu, Synthesis (1981), 1-28).
2
1
2
2
1
1
2
1
Реакцию сочетания соединения формулы XIII с соединениями формулы XIV можно осуществить, используя реакции различных типов, как уже было указано выше, например, используя реакцию алкилирования. Так, группу R можно, например, если она содержит гидроксильную группу, которая представляет собой FG, алкилировать, используя соединение формулы XIV, где FG представляет собой уходящую группу, которую можно использовать в реакции нуклеофильного замещения, такую как атом галогена, такой как хлор, бром или иод, или сульфонилоксигруппу, такую как метансульфонилокси или толуолсульфонилокси. Реакцию нуклеофильного замещения у атома углерода группы XIV, которая содержит группу FG, можно осуществить в условиях, стандартных для таких реакций, которые хорошо известны специалистам в данной области. Обычно указанную реакцию, в зависимости от конкретных условий рассматриваемого варианта, ведут в инертном растворителе, например, в углеводороде или в хлорированном углеводороде, таком как бензол, толуол, ксилол, хлорбензол, дихлорметан, хлороформ или дихлорэтан, в эфире, таком как ТГФ, диоксан, дибутиловый эфир, диизобутиловый эфир или DME, в спирте, таком как метанол, этанол или изопропанол, в кетоне, таком как ацетон или бутан-2-он, в сложном эфире, таком как этилацетат или бутилацетат, в нитриле, таком как ацетонитрил, в амиде, таком как N,N-диметилформамид или N-метилпирролидин-2-он, или в смеси растворителей, при температурах от около 20°C до около 100°C, например, при температурах от около 40°C до около 80°C. Вообще, желательно добавлять основание для повышения нуклеофильности соединения формулы XIII и/или для связывания кислоты, выделяющейся в ходе реакции, например, третичный амин, такой как триэтиламин, этилдиизопропиламин или N-метилморфолин, или неорганическое основание, такое как гидрид, гидроксид, карбонат или бикарбонат щелочного металла, такой как гидрид натрия, гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия или бикарбонат натрия, или алкоксид или амид, такой как метоксид натрия, этоксид натрия, метоксид калия, трет-бутоксид калия, амид натрия или литийдиизопропиламид. До реакции с соединением формулы XIV, соединение формулы XIII, где FG представляет собой гидроксил, можно также отдельно обработать основанием и превратить его в соль. Соединение формулы XIV, где FG представляет собой гидроксил, можно превратить в соединение формулы XV, не только используя реакцию с соединением формулы XIV, где FG представляет собой уходящую группу, как указано в описании, но также, используя реакцию с соответствующим спиртом, т.е. с соединением формулы XIV, где FG представляет собой гидроксил, в условиях указанной выше реакции Митсунобу. Реакцию сочетания соединения формулы XIII с соединениями формулы XIV, используя реакцию, катализируемую переходным металлом, можно также вести в условиях реакций перекрестного сочетания, катализируемых палладием, таких как реакции сочетания Хека, Стилле или Сузуки (см. A. de Meijere and F. Diederich (Ed.), Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions (Wiley-VCH, 2004)).
Удаление защитных групп у R"-защищенной группы карбоновой кислоты в соединениях формулы XV до получения соединений формулы XVI можно осуществить стандартными способами, которые хорошо известны специалистам в данной области и суммированы в вышеуказанных книгах P.J. Kocienski и T.W. Greene и P.G.M. Wuts, например, в основных условиях путем обработки гидроксидом щелочного металла, таким как гидроксид натрия или гидроксид лития, в случае соединений, в которых R" представляет собой алкильную группу, такую как метил или этил, путем обработки трифторуксусной кислотой, в случае соединений, в которых R" представляет собой трет-бутильную группу, или путем гидрирования в присутствии катализатора - переходного металла, такого как палладий-на-угле, в случае соединений, в которых R" представляет собой бензильную группу.
4
Для введения фрагмента RO-C(О)-Y-, группу карбоновой кислоты HO-C(O)- в соединениях формулы XVI обычно активируют in situ, используя обычный амидный связывающий реагент, или превращая в реакционноспособное производное карбоновой кислоты, которое можно получить in situ или выделить. Например, соединение формулы XVI можно превратить в галогенангидрид путем обработки тионилхлоридом, пятихлористым фосфором, трехбромистым фосфором или оксалилхлоридом, или обработать алкилхлорформиатом, таким как этилхлороформиат или изобутилхлороформиат до получения смешанного ангидрида. Обычными связывающими реагентами, которые можно использовать, являются: пропанфосфоновый ангидрид, N,N'-карбонилдиазолы, такие как N,N'-карбонилдиимидазол (CDI), карбодиимиды, такие как 1,3-диизопропилкарбодиимид (DIC), 1,3-дициклогексилкарбодиимид (DCC) или 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид (EDC), карбодиимиды вместе с добавками, такими как 1-гидроксибензотриазол (HOBT) или 1-гидрокси-7-азабензотриазол (HOAT), связывающие реагенты на основе урония, такие как О-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуронийгексафторфосфат (HATU), О-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N\N'-тетраметилуронийгексафторфосфат (HBTU) или О-(циано(этоксикарбонил)метиленамино)-N,N,N',N'-тетраметилуронийтетрафторборат (TOTU), и связывающие агенты на основе фосфония, такие как (бензотриазол-1-илокси)трис(диметиламино)фосфонийгексафторфосфат (BOP), (бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфонийгексафторфосфат (PyBOP) или бромтрипирролидинофосфонийгексафторфосфат (PyBroP).
Условия реакций для получения соединений формулы XVIII из соединений формул XVI и XVII зависят от конкретных условий рассматриваемого варианта, например, используемого реагента, и они хорошо известны специалистам в данной области. Так, например, в случае активации соединения формулы XVI с помощью хлорангидрида или бромангидрида, реакцию сочетания с циклическим амином формулы XVII обычно ведут в инертном растворителе, например, в углеводороде или в хлорированном углеводороде или в эфире, аналогичном перечисленным выше, в сложном эфире, таком как этилацетат или бутилацетат, в нитриле, таком как ацетонитрил, или в воде, или в смеси растворителей, включая смесь воды и смешиваемого или несмешиваемого с водой органического растворителя, при температурах от около -10°C до около 100°C, особенно при температурах от около 0°C до около 80°C, например, при комнатной температуре. Целесообразно реакцию ацилгалогенида, полученного из карбоновой кислоты формулы XVI, с соединением формулы XVII вести в присутствии основания, такого как третичный амин, такого как триэтиламин, этилдиизопропиламин, N-метилморфолин или пиридин, или неорганического основания, такого как гидроксид, карбонат или бикарбонат щелочного металла, например, гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат натрия или бикарбонат натрия. В случае активации группы карбоновой кислоты в соединениях формулы XVI с помощью амидного связывающего агента, такого как, например, карбодиимид или TOTU, реакцию обычно ведут в безводных условиях в инертном апротонном растворителе, например, в эфире, таком как ТГФ, диоксан или DME, или в амиде, таком как ДМФ или NMP, при температурах от около -10°C до около 80°C, особенно при температурах от около 0°C до около 60°C в присутствии основания, такого как третичный амин, такой как триэтиламин, этилдиизопропиламин или N-метилморфолин. Если соединение формулы XVII используют в форме соли присоединения кислоты, для реакции с соединением формулы XVI, обычно добавляют количество основания, достаточное для выделения соединения формулы XVII в свободной форме.
Окисление Alk-S группы в соединениях формулы XVIII до группы сульфоксида или сульфона в соединениях формулы IIa можно осуществить с помощью перекиси водорода или перкислоты, такой как 3-хлорпербензойная кислота или монопероксифталевая кислота, в инертном растворителе, например, в хлорированном углеводороде, таком как дихлорметан или хлороформ, или в сложном эфире, таком как этилацетат или бутилацетат, при температурах от около 0°C до около 40°C, например, при температуре около 20°C.
Приведенные выше объяснения окисления соединений формулы XVIII до соединений формулы IIa применимы, соответственно, к окислению соединений формулы XV до соединений формулы XIX, и аналогично, объяснения, приведенные для реакции соединений формул II и III, для удаления защитных групп у группы карбоновой кислоты в соединениях формулы XV и для реакции соединений формул XVI и XVII, применимы соответственно к реакции соединений формул XIX и III, к удалению защитных групп у групп карбоновой кислоты в соединениях формулы XX и к реакции соединений формул XXI и XVII.
Другие стадии получения соединений формулы X также можно изменить, и аминомалоновый сложный эфир формулы IV, такой как диэтиловый сложный эфир, можно вначале подвергнуть взаимодействию в присутствии алкоксида щелочного металла, такого как этоксид натрия, с тиомочевиной, причем атом серы можно затем алкилировать, например, метилировать иодометаном, и полученный продукт можно ацилировать соединением формулы V (см. M.H. Holschbach et al., Eur. J. Med. Chem. 41 (2006), 7-15).
2
a
Другие соединения формулы I можно получить из соответствующих соединений, полученных в соответствии с раскрытыми выше процессами путем функционализации или модификации любых присутствующих функциональных групп, в соответствии со стандартными процедурами, например, путем превращения в сложный эфир, путем амидирования, гидролиза, этерификации, алкилирования, ацилирования, сульфонилирования, восстановления, окисления, превращения в соли, и другими способами. Например, гидроксильную группу, которая может высвободиться из эфирной группы при отщеплении эфира, например, с использованием трехбромистого бора, или из защищенной гидроксильной группы за счет удаления защитной группы, можно превратить в сложный эфир, получая эфир карбоновой кислоты или эфир сульфоновой кислоты, или этерифицировать. Этерификацию гидроксильной группы с успехом можно осуществить путем алкилирования соответствующим галогеновым соединением, например, бромидом или иодидом, в присутствии основания, например, карбоната щелочного металла, такого как карбонат калия или карбонат цезия, в инертном растворителе, например, в амиде, таком как ДМФ или NMP или в кетоне, таком как ацетон или бутан-2-он, или соответствующим спиртом в условиях реакции Митсунобу, упомянутой выше. Гидроксильную группу можно превратить в галогенид путем обработки галогенирующим агентом. Атом галогена можно заменить различными группами в реакции замещения, которая может быть также реакцией, катализируемой переходным металлом. Нитрогруппу можно восстановить до аминогруппы, например, используя каталитическое гидрирование. Аминогруппу можно модифицировать в стандартных условиях алкилирования, например, используя реакцию с соединением галогена, или используя восстановительное аминирование карбонильного соединения, или для ацилирования или сульфонилирования, например, используя реакцию с реакционноспособным производным карбоновой кислоты, таким как хлорангидрид или ангидрид кислоты или хлорид сульфоновой кислоты, или с активированной карбоновой кислотой, которую можно получить из карбоновой кислоты в результате обработки связующим агентом, таким как CDI, карбодиимидом, например, таким как DCC или EDC, HATU, TOTU, TBTU. Эфирную группу карбоновой кислоты можно гидролизовать в кислотных или щелочных условиях, получая карбоновую кислоту. Группу карбоновой кислоты можно активировать или превратить в реакционноспособное производное, как указано выше, и осуществить реакцию со спиртом или амином или аммиаком до получения сложного эфира или амида. Первичный амид можно дегидратировать до получения нитрила. Атом серы, например, в алкил-S группе или в гетероциклическом кольце, может быть окислен перекисью, такой как перекись водорода, или перкислотой до получения сульфоксидного фрагмента S(O) или сульфонового фрагмента S(О). Группу карбоновой кислоты, группу эфира карбоновой кислоты и группу кетона можно восстановить до спирта, например, используя комплексный гидрид, такой как литийалюминийгидрид, литийборгидрид или натрийборгидрид. Соединение формулы I или промежуточное соединение, такое как соединение формулы II, которое содержит двойную связь или тройную связь в группе X, которое можно легко получить, используя реакцию сочетания, катализируемую переходным металлом, из соединения формулы XIV, содержащего двойную или тройную связь в группе X, и соединения формулы XIII в соответствии с приведенным выше описанием можно превратить путем гидрирования в присутствии катализатора гидрирования, такого как палладиевый катализатор, в соединение, где X представляет собой насыщенную группу.
Все реакции, использованные в вышеописанных способах синтеза соединений формулы I, сами по себе, хорошо известны специалистам, и их можно осуществить в стандартных условиях в соответствии с процедурами, описанными в литературе, или в аналогичных им условиях, например, см. Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie (Mewthods of Organic Chemistry), Thieme-Veriag, Stuttgart, или Organic Reactions, John Wiley & Sons, New York. При желании полученные соединения формулы I, также как любые промежуточные соединения, можно очистить, используя обычные способы очистки, например, путем перекристаллизации или используя хроматографию. Как уже было указано, все исходные соединения и промежуточные соединения, используемые в описанных выше способах синтеза, которые содержат кислотные или основные группы, можно также использовать в форме солей, и все промежуточные соединения и конечные целевые соединения также можно получить в форме солей. Аналогично, как указано выше, в зависимости от условий конкретного варианта, чтобы избежать нежелательного хода реакции или побочных реакций во время синтеза соединения, обычно необходимо или выгодно временно блокировать функциональные группы, вводя защитные группы и удаляя их на более поздних стадиях синтеза, или вводя функциональные группы в форме групп предшественников, которые позднее превращают в нужные функциональные группы. В качестве примеров защитных групп можно указать аминозащитные группы, которыми могут быть ацильные группы или алкилоксикарбонильные группы, например, трет-бутилоксикарбонильная группа (= Boc), которую можно удалить обработкой трифторуксусной кислотой (= TFA), бензилоксикарбонильная группа, которую можно удалить, используя каталитическое гидрирование, флуорен-9-ил-метоксикарбонильная группа, которую можно удалить путем обработки пиперидином, и защитные группы групп карбоновой кислоты, которые можно защитить как сложноэфирные группы, такие, как трет-бутиловые эфиры, и такие защитные группы можно удалить путем обработки трифторуксусной кислотой, или как бензиловые эфиры, и такие защитные группы можно удалить, используя каталитическое гидрирование. В качестве примера группы предшественника можно указать нитрогруппу, которую можно превратить в аминогруппу путем восстановления, например, используя каталитическое гидрирование. Такие стратегии синтеза и защитные группы и группы предшественников, которые можно использовать в конкретном случае, хорошо известны специалистам в данной области.
a
1
2
3
4
1
2
1
2
4
Другим предметом настоящего изобретения являются новые исходные соединения и промежуточные соединения, которые встречаются в ходе синтеза соединений формулы I, включая соединения формул II, IIa, III, IV, V, VI, VIII, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI, XVII, XVIII, XIX, XX и XXI, где A, X, X, Y, R, R, R, R, R', Alk, FG, FG, L, L и L имеют определенные выше значения, в любой из их стереоизомерных форм или в смеси стереоизомерных форм в любом отношении, и их соли и сольваты таких соединений или таких солей, и их используют в качестве промежуточных соединений. Настоящее изобретение также включает все таутомерные формы указанных промежуточных соединений и исходных соединений. Все представленные выше объяснения и указанные выше варианты в отношении соединений формулы I также применимы соответственно к указанным промежуточным соединениям и исходным материалам. Предметом настоящего изобретения особенно являются раскрытые в описании новые конкретные исходные соединения и промежуточные соединения. Независимо от того, раскрыты ли они как свободные соединения, или как конкретные соли, они являются предметом настоящего изобретения, как в форме свободных соединений, так и в форме их солей, и если раскрыта конкретная соль, дополнительно к форме такой конкретной соли, и в форме сольватов таких соединений или таких солей.
Соединения формулы I, необязательно в комбинации с другими фармакологически активными соединениями, можно вводить животным, особенно млекопитающим, включая людей, как сами фармацевтические
средства, в смеси друг с другом, или в форме фармацевтических композиций. Такое введение можно осуществлять перорально, например, в форме таблеток, покрытых пленкой таблеток, таблеток в сахарной оболочке, гранул, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, включая водные, спиртовые и масляные растворы, соков, капель, сиропов, эмульсий или суспензий, ректально, например, в форме суппозиториев, или парентерально, например, в форме растворов для подкожных, внутримышечных или внутривенных инъекций или вливаний, особенно водных растворов. Соединения формулы I можно дополнительно использовать для местной доставки лекарственных средств, например, в стентах с нанесенным покрытием для предотвращения или снижения рестеноза внутри стента, или вводя их локально с помощью катетера. Подходящие формы введения зависят, наряду с другими, от подлежащего лечению заболевания и от его тяжести.
Конкретное количество соединения формулы I и/или его физиологически приемлемых солей и/или сольватов, присутствующих в фармацевтических композициях, обычно находится в интервалах от около 0,2 до около 800 мг, например, от около 0,5 до около 500 мг, например, от около 1 до около 200 мг, в единичной дозе, но в зависимости от типа фармацевтической композиции, оно может также быть выше. Фармацевтические композиции обычно включают от около 0,5 до около 90% вес. соединения формулы I и/или его физиологически приемлемых солей и/или сольватов. Получение фармацевтических композиций можно осуществить способами, известными сами по себе. Для такой цели одно или более из соединений формулы I и/или его физиологически приемлемых солей и/или сольватов вместе с одним или более из твердых или жидких фармацевтических веществ носителей или средств доставки, и/или добавок или вспомогательных веществ, и если необходима комбинация лекарственных средств, других фармакологически активных соединений, обладающих терапевтическим или профилактическим действием, приготавливают в подходящей для введения форме и в дозах, которые можно использовать в медицине или ветеринарии. В качестве веществ носителей и добавок можно использовать подходящие органические и неорганические вещества, которые не реагируют нежелательным образом с соединениями формулы I или их физиологически приемлемыми солями или сольватами. В качестве примеров типов добавок, которые могут содержаться в фармацевтических композициях и лекарственных средствах, можно указать лубриканты, консерванты, загустители, стабилизаторы, дезинтегранты, смачивающие агенты, агенты для достижения эффекта депо, эмульгаторы, соли, например, для изменения осмотического давления, буферные вещества, красители, вкусовые агенты и ароматизаторы. Примерами веществ носителей и добавок являются вода, физиологический раствор хлорида натрия, растительные масла, воски, спирты, такие как этанол, изопропанол, 1,2-пропандиол, бензиловый спирт или глицерин, полиоли, маннит, полиэтиленгликоли, полипропиленгликоли, глицеринтриацетат, поливинилпирролидон, желатин, целлюлоза, углеводы, такие как лактоза, глюкоза, сахароза, или крахмал, такой как кукурузный крахмал, стеариновая кислота и ее соли, такие как стеарат магния, тальк, ланолин, вазелин или их смеси, например, смеси воды с одним или более из органических растворителей, такие как смеси воды со спиртами. Соединения формулы I и их физиологически приемлемые соли и сольваты можно также лиофилизировать и полученные лиофилизаты использовать для получения, например, композиций для инъекций.
Дозы соединений формулы I и/или их физиологически приемлемых солей и/или сольватов зависят от конкретного случая, и обычно их адаптирует врач в соответствии с общепринятыми правилами и процедурами для конкретных обстоятельств, для достижения оптимального эффекта. Дозы зависят, например, от природы и тяжести подлежащего лечению заболевания, от пола, возраста, массы и индивидуальной восприимчивости пациента - человека или животного, от эффективности и длительности действия используемого соединения, от того, является ли лечение лечением острого или хронического заболевания, или оно является профилактическим, или от того, введены ли другие активные ингредиенты в дополнение к соединению формулы I. Обычно дневная доза составляет от около 0,01 мг/кг до около 100 мг/кг, или от около 0,1 мг/кг до около 10 мг/кг, или от около 0,3 мг/кг до около 5 мг/кг (в каждом случае на кг массы тела), например, она соответствует дозе для введения взрослому массой около 75 кг для достижения необходимых результатов. Дневную дозу можно вводить в виде одной дозы, или, особенно если вводят большие количества, разделенной на несколько доз, например, на две, три или четыре отдельные дозы.
Введение можно также осуществлять непрерывно, например, путем непрерывных вливаний или инъекций. В зависимости от индивидуального поведения в конкретном случае, может оказаться необходимым увеличить или уменьшить указанные дозировки.
Далее приводятся примеры, которые иллюстрируют изобретение.
Если иллюстративные соединения, содержащие основную группу, очищают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на колонке с обращенной фазой (RP) и, как обычно, осуществляют градиентное элюирование смесью воды и ацетонитрила, содержащей трифторуксусную кислоту (TFA), причем часть их получают в форме их соли присоединения трифторуксусной кислоты, в зависимости от деталей обработки, таких как условия выпаривания или лиофилизации. В названиях соединениях примеров и в их структурных формулах никакая полученная таким образом, трифторуксусная кислота не указывается.
t
Полученные соединения обычно характеризуют спектральными данными и хроматографическими данными, особенно данными масс-спектров (МС) и ВЭЖХ временами удерживания (Rв минутах), которые получают, комбинируя аналитические ВЭЖХ/МС характеристики (ЖХ/МС), и/или используя спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР). Характеристики спектров ЯМР содержат данные о химических сдвигах δ (в м.д.), числе атомов водорода и мультиплентности (s = с = синглет, d = д = дублет, dd = дд = дублет дублетов, t = т = триплет, dt =дт = дублет триплетов, q = кв = квартет, m = м = мультиплет; br = шир = уширенный) сигналов. На основании спектра МС обычно приводят массовое число (m/z) пика молекулярного иона M, например, M+, или исходного иона, такого как ион M+1, например, [M+1]+, т.е. протонированного молекулярного иона [M+H]+, который образуется в зависимости от используемого способа ионизации. Обычно используют способ ионизации электроспреем (ESI). Используют следующие условия ЖХ/МС.
Метод ЖХ1
+
Колонка: UPLC BEH C18, 50×2,1 мм, 1,7 мкм; скорость потока: 0,9 мл/мин; элюент A: ацетонитрил + 0,08% муравьиной кислоты; элюент B: вода + 0,1% муравьиной кислоты; градиент от 5% A + 95% B до 95% A + 5% B в 1,1 мин, затем от 95% B до 95% A + 5% B в течение 0,6 мин; МС способ ионизации: ESI
Метод ЖХ2
+
Колонка: UPLC BEH C18, 50×2,1 мм, 1,7 мкм; скорость потока: 0,9 мл/мин; элюент A: ацетонитрил + 0,035% муравьиной кислоты; элюент B: вода + 0,05 % муравьиной кислоты; градиент: от 5% A + 95% B до 95% A + 5% B в 1,1 мин, затем 95% A + 5% B в течение 0,6 мин; МС способ ионизации: ESI
Метод ЖХ3
Колонка: Phenomenex Mercury MS Luna 3 мкм C18(2) 100 ангстрем, 10×2,0 мм; скорость потока 1,1 мл/мин; элюент A: ацетонитрил; элюент B: вода + 0,05% TFA; градиент: от 20% A + 80% B до 95% A + 5% B в 0,8 мин, затем 95% A + 5% B в течение 0,6 мин; затем 20% A + 80% B в 0,05 мин; МС способ ионизации: ESI+
Пример 1
(S)-1-(2-{4-[5-(2,5-Дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5
4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
.
(a) Диэтил 2-(4-метокси-3,5-диметилбензоиламино)малонат
116,8 г диэтиламиномалонатгидрохлорида растворяют в 700 мл дихлорметана, и 231 мл триэтиламина добавляют при охлаждении на бане со льдом. Затем медленно добавляют по каплям раствор 109,6 г 4-метокси-3,5-диметилбензоилхлорида в 400 мл дихлорметана. После 2 час при 0°C, медленно добавляют 200 мл воды. После разделения фаз водную фазу дважды экстрагируют, используя 200 мл дихлорметана. Объединенные органические фазы промывают 2M хлористоводородной кислотой и затем водой, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и выпаривают. Полученный остаток обрабатывают метилтретбутиловым эфиром, после чего образовавшийся осадок отфильтровывают, получая в результате 178,7 г указанного в заголовке соединения.
(b) Натрий 4,6-дигидрокси-5-(4-метокси-3,5-диметилбензоиламино)пиримидин-2-тиолат
1,5 эквивалента метоксида натрия (раствор 30% крепости в метаноле) добавляют к 20,6 г тиомочевины в 900 мл абсолютного этанола. После добавления 91 г диэтил 2-(4-метокси-3,5-диметилбензоиламино)малоната небольшими порциями, полученную смесь перемешивают при 60°C в течение 3 часов. Полученную смесь затем охлаждают до комнатной температуры, и осадок отфильтровывают с подсосом, промывают 100 мл этанола и 100 мл диэтилового эфира и сушат при пониженном давлении. Получают 78,2 г сырого указанного в заголовке соединения.
(c) N-(4,6-Дигидрокси-2-метилсульфанилпиримидин-5-ил)-4-метокси-3,5-диметилбензамид
19,1 г натрий 4,6-дигидрокси-5-(4-метокси-3,5-диметилбензоиламино)пиримидин-2-тиолата в 190 мл воды и 80 мл N-метилпирролидин-2-она охлаждают до 0°C. При охлаждении добавляют 5,9 г гидроксида натрия, после чего полученную смесь перемешивают при 0°C в течение 30 мин. Затем добавляют раствор 3,7 мл иодометана в 4,3 мл N-метилпирролидин-2-она. После окончания реакции (2 часа), полученную смесь подкисляют концентрированной хлористоводородной кислотой. Образовавшийся осадок отфильтровывают с подсосом, промывают водой и сушат при пониженном давлении. Получают 10,1 г указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,03 мин; m/z=336,1 [M+H]
(d) 2-(4-Метокси-3,5-диметилфенил)-5-метилсульфанилоксазоло[5,4-d]пиримидин-7-ол
10,1 г N-(4,6-дигидрокси-2-метилсульфанилпиримидин-5-ил)-4-метокси-3,5-диметилбензамида в 55 мл оксихлорида фосфора нагревают при 60°C в течение 3 час. После охлаждения полученную твердую часть отфильтровывают с подсосом и промывают метил-трет-бутиловым эфиром. Затем твердое вещество растворяют в смеси дихлорметана и тетрагидрофурана, промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, сушат и концентрируют при пониженном давлении. Получают 5,9 г указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,24 мин; m/z=318,08 [M+H]
(e) 2-(4-Метокси-3,5-диметилфенил)-5-метилсульфанил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин
,
t
+
5,9 г 2-(4-метокси-35-диметилфенил)-5-метилсульфанилоксазоло[5,4-d]пиримидин-7-ола растворяют в 150 мл N,N-диметилформамида, и добавляют 7,7 г карбоната калия и затем 2,7 г 1-бромпропана. Полученный раствор перемешивают при 60°C в течение 5 часов, и затем, после охлаждения, выливают в 150 мл воды. Полученный осадок отфильтровывают с подсосом. Полученную смесь стереоизомеров очищают, используя хроматографическую обработку на колонке с силикагелем (картридж Isolute с 50 г диоксида кремния, гептан/этилацетат 9/1). В дополнение к 1,4 г 2-(4-метокси-3,5-диметилфенил)-5-метилсульфанил-6-пропил-6H-оксазоло[5,4-d]пиримидин-7-она (ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,43 мин; m/z=360,13 [M+H]), получают 2,5 г указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,51 мин; m/z=360,13 [M+H]
(f) 2,6-Диметил-4-(5-метилсульфанил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)фенол
При -20°C 0,70 мл трехбромистого бора медленно добавляют к раствору 2,5 г 2-(4-метокси-3,5-диметилфенил)-5-метилсульфанил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидина в 50 мл дихлорметана. После 1 часа при -20°C и 2 часов при комнатной температуре, полученную смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, при этом температуру поддерживают ниже 5°C. После разделения фаз водную фазу дважды экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат и концентрируют при пониженном давлении. Получают 2,0 г указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,41 мин; m/z=346,11 [M+H]
)
(gТрет-бутил [2,6-диметил-4-(5-метилсульфанил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)фенокси]ацетат
3,20 г карбоната калия и затем 0,93 мл трет-бутилбромацетата добавляют к раствору 2,00 г 2,6-диметил-4-(5-метилсульфанил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)фенола в 20 мл N,N-диметилформамида. Полученную смесь оставляют реагировать при 60°C в течение 1 часа, и затем оставляют охлаждаться и выливают в воду.
Образовавшийся осадок отфильтровывают с подсосом и сушат при пониженном давлении. Получают 2,45 г указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,52 мин; m/z=460,18 [M+H]
(h) Трет-бутил [4-(5-метансульфонил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)-2,6-диметилфенокси]ацетат
t
+
250 мг трет-бутил [2,6-диметил-4-(5-метилсульфанил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)фенокси]ацетата растворяют в 5 мл дихлорметана. Затем при 0°C добавляют 268 мг 3-хлорпербензойной кислоты, после чего полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 часов. Полученную смесь обрабатывают 1M водным раствором гидроксида натрия, слои разделяют, и органический слой последовательно дважды экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические фазы промывают водным раствором бисульфита натрия 10% крепости, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и выпаривают при пониженном давлении. Получают 268 мг указанного в заголовке соединения. ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,38 мин; m/z=492,17 [M+H]
(i) Трет-бутил {4-[5-(2,5-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетат
62 мг карбоната калия и 32 мг 2,5-дифторфенола добавляют к раствору 100 мг трет-бутил [4-(5-метансульфонил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)-2,6-диметилфенокси]ацетата в 1,5 мл N,N-диметилформамида. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 час. Полученную смесь затем выливают в воду, нейтрализуют, добавляя водный раствор бисульфата натрия 10% крепости, и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои сушат и концентрируют при пониженном давлении. После фильтрования растворитель отгоняют при пониженном давлении, и полученный остаток очищают, используя препаративную ВЭЖХ, получая 69 мг указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,47 мин; m/z=542,20 [M+H]
,
(j) {4-[5-(25-Дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси]уксусная кислота
69 мг трет-бутил {4-[5-(2,5-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетата растворяют в 1,6 мл дихлорметана, и добавляют 0,8 мл трифторуксусной кислоты. Через 16 часов полученную смесь концентрируют и сушат вымораживанием. Получают 71 мг указанного в заголовке соединения.
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): Rt=1,35 мин; m/z=486,33 [M+H]
(k) Трет-бутил (S)-1-(2-{4-[5-(2,5-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоксилат
60 мг {4-[5-(2,5-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}уксусной кислоты растворяют в 1 мл N,N-диметилформамида, и добавляют 35 мг 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорида, 7 мг 1-гидрокси-7-азабензотриазола и 139 мкл N,N-диизопропилэтиламина, и через 5 минут добавляют 17 мг трет-бутил L-пролината. После 16 часов при комнатной температуре добавляют 10 мл воды, после чего pH полученной смеси доводят до 3, добавляя 2M водный раствор хлористоводородной кислоты, и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия и раствором хлорида натрия, сушат и концентрируют при пониженном давлении. Получают 61 мг указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,46 мин; m/z=639,26 [M+H]
(i)(S)-1-(2-{4-[5-(2,5-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
59 мг трет-бутил (S)-1-(2-{4-[5-(2,5-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоксилата растворяют в 1,2 мл дихлорметана, и добавляют 0,5 мл трифторуксусной кислоты. После 16 часов при комнатной температуре, полученную смесь концентрируют при пониженном давлении и сушат вымораживанием. Получают 53 мг указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,36 мин; m/z=583,19 [M+H]
Пример 2
(S)-1-(2-{4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
(a) Трет-бутил {4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетат
В атмосфере аргона и при 0°C, 26 мг транс-2-фторциклогексанола добавляют к суспензии 10 мг гидрида натрия (60% в минеральном масле) в 2 мл N,N-диметилформамида. Через 15 минут медленно добавляют раствор 100 мг трет-бутил [4-(5-метансульфонил-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)-2,6-диметилфенокси]ацетата в 1 мл N,N-диметилформамида. После 12 часов при комнатной температуре полученную смесь гасят, добавляя воду, и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои сушат и концентрируют при пониженном давлении. Получают 101 мг указанного в заголовке соединения.
t
+
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,49 мин; m/z=530,26 [M+H] и 552,26 [M+Na]
(b) {4-[5-(Транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}уксусная кислота
t
+
98 мг трет-бутил {4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетата растворяют в 3,5 мл дихлорметана, и обрабатывают 1,5 мл трифторуксусной кислоты. Через 16 часов полученную смесь концентрируют и сушат вымораживанием. Получают 96 мг указанного в заголовке соединения. ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,35 мин; m/z=474,20 [M+H]
(c) Трет-бутил (S)-1-(2-{4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоксилат
82 мг {4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}уксусной кислоты добавляют к 1,5 мл N,N-диметилформамида, и 48 мг 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорида, и добавляют 10 мг 1-гидрокси-7-азабензотриазола и 195 мкл N,N-диизопропилэтиламина, и через 5 минут добавляют 24 мг трет-бутил L-пролината. После 16 часов при комнатной температуре добавляют 10 мл воды, после чего pH полученной смеси доводят до 3, добавляя 2M водный раствор хлористоводородной кислоты, и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия и раствором хлорида натрия, сушат и концентрируют при пониженном давлении. Получают 79 мг указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,44 мин; m/z=627,31 [M+H]
(d) (S)-1-(2-{4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
76 мг трет-бутил (S)-1-(2-{4-[5-(транс-2-фторциклогексилокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоксилата растворяют в 1,6 мл дихлорметана и 0,8 мл трифторуксусной кислоты. После 16 часов при комнатной температуре, полученную смесь концентрируют при пониженном давлении и сушат вымораживанием. Получают 83 мг указанного в заголовке соединения.
t
+
ЖХ/МС (Метод ЖХ1): R=1,33 мин; m/z=571,25 [M+H]
Примерные соединения формулы I, перечисленные в Таблице 1, получают способом, аналогичным способу получения примерных соединений, описанному выше. Некоторые из них получают в форме их трифторацетатных солей.
Таблица 1
Примерные соединения формулы I
Пример
Название
ЖХ/МС
m/z [M+H]<sup>+</sup>
R<sub>t</sub> [мин]
3
(S)-1-(2-{4-[5-(2-фторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC1
565,38
1,32
4
(S)-1-(2-{4-[5-(5-фтор-2-метилфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC1
579,40
1,36
5
(S)-1-(2-{4-[5-(3-фтор-4-метилфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC1
579,42
1,36
6
(S)-1-(2-{2<sub>,</sub>6-диметил-4-[7-пропокси-5-(пиридин-3-илокси)оксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]фенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC1
546,56
1,24
7
(S)-1-(2-{4-[5-(2,4-дифторфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC1
583,38
1,36
8
(S)-1-{2-[2,6-диметил-4-(5-фенокси-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)фенокси]ацетил}пирролидин-2-карбоновая кислота
LC1
547,40
1,36
9
(S)-1-(2-{4-[5-(3-хлорфенокси)-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC1
581,12
1,40
10
(S)-1-(2-{4-[5-(3-хлорфенокси)-7-этоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC2
567,15
1,37
11
(S)-1-(2-{4-[7-этокси-5-(3-фторфенокси)оксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC2
551,15
1,33
12
(S)-1-(2-{4-[7-этокси-5-(2-фторфенокси)оксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC2
551,16
1,32
13
(S)-1-(2-{4-[5-(2,5-дифторфенокси)-7-этоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC2
569,16
1,33
14
(S)-1-(2-{4-[7-этокси-5-(5-фтор-2-метилфенокси)оксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил]-2,6-диметилфенокси}ацетил)пирролидин-2-карбоновая кислота
LC1
565,26
1,23
15
(S)-1-[2-(2,6-диметил-4-{5-[метил-(3,3,3-трифторпропил)амино]-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил}фенокси)ацетил]пирролидин-2-карбоновая кислота
LC3
580,25
0,80
16
(S)-1-{2-[4-(5-циклобутилметокси-7-пропоксиоксазоло[5,4-d]пиримидин-2-ил)-2,6-диметилфенокси]ацетил}пирролидин-2-карбоновая кислота
LC3
539,25
0,81
Определение фармакологической активности
A) GTP-γ-S анализ с использованием человеческих Edg 1 рецепторов
Для определения Edg 1 рецепторной активации соединениями настоящего изобретения используют GTP-γ-S ((GTP-γ-S = гуанозин 5'-[тио]трифосфат) анализ связывания для сопряженного с G-белком рецептора на основе принципа сцинтилляционного анализа сближения, используя препарат клеточных мембран из клеточной линии CHO FIp-In, которая конститутивно сверхэкспрессирует человеческий Edg 1 рецептор.
(a) Создание клеточной линии
FIp-In™ экспрессионная система (Invitrogen, cat. no. K6010-01) позволяет создавать стабильные клеточные линии млекопитающих, в которые представляющий интерес ген интегрирован в результате гомологической рекомбинации в специфическое положение генома, называемое мишеневым сайтом FIp рекомбинации (FRT) с помощью FIp рекомбиназы, кодируемой экспрессионной плазмидой pOG44. Интеграция экспрессионной конструкции pcDNA5/FRT в геном клеточной линии хозяина FIp-In приводит к транскрипции представляющего интерес гена. Стабильно трансфицированные клетки становятся устойчивыми к гигромицину.
2
За один день до трансфекции, 200 000 FIp-In-CHO клеток высевают в Ham F-12 среду (Invitrogen, cat. no. 31765), дополненную 10% фетальной телячьей сывороткой (FCS; Perbio Science, cat. no. SH30068.03) в 6-луночных планшетах и инкубируют в условиях 37°C/5% CO в течение ночи. Используя FuGENE 6 реагент трансфекции (Roche, cat. no. 11988387001), клетки совместно трансфицируют с экспрессионной плазмидой FIp рекомбиназы pOG44 и модифицированную плазмиду, дополнительно содержащую edg 1 ген (регистрационный номер no. NM_001400), называемую pcDNA5-FRT-TO_nFLAG_DEST-EDG 1, в отношении 9:1. Для получения модифицированной pcDNA5-FRT-TO_nFLAG_DEST плазмиды Invitrogen плазмиду pcDNA5/FRT/TO (Invitrogen, cat. no. V6520-20) адаптируют для Gateway (Invitrogen) системы клонирования, встраивая Gateway кассету, содержащую attR рекомбинационные сайты, фланкирующие ccdB ген, и ген устойчивости к хлорамфениколу (Gateway conversion system, Invitrogen, cat. no. 11828-029). Кроме того, FLAG tag эпитоп добавляют перед 5' att рекомбинационным сайтом, чтобы обеспечить рекомбинантную экспрессию FLAG-меченных по N-концу белков.
Для трансфекции одной лунки 1,08 мкг pOG44 и 0,12 мкг pcDNA5-FRT-TO__nFLAG_DEST-EDG 1 смешивают со 100 мкл не содержащей сыворотки Ham F-12 среды, содержащей 6 мкл реагента трансфекции FuGENE 6. После 20 минут инкубирования комплекс реагент трансфекции/ДНК по каплям распределяют на лунки. Планшеты инкубируют в течение 24 часов при 37°C. Затем клетки из трех лунок переносят в T75 колбу (Greiner Cellstar, cat. no. 658175), содержащую Ham F-12 среду, дополненную 10% FCS, но без антибиотика, и инкубируют дополнительно 24 часа. Через 48 часов после трансфекции, среду заменяют селекционной средой (Ham F-12, дополненная 10% FCS и 300 мкг/мл гигромицина B (Invitrogen, cat. no. 10687-010)). Среду заменяют каждые 2-3 дня до тех пор, пока вырастает устойчивая популяция клеток. Клетки несколько раз расщепляют и высевают в новую колбу так, чтобы указанные клетки не достигали более 25% конфлюентности. После 2 недель селекции клетки переносят в T175 колбы (Greiner Cellstar, cat. no. 660175) и культивируют для получения партии. Клетки собирают из культуральных колб, используя короткую обработку (2-5 минут) аккутазой (PAA, cat. no. L11-007), снова суспендируют в селекционной среде (см. выше) и центрифугируют при 200×g в течение 5 минут. Клетки снова суспендируют в смеси 90% FCS и 10% диметилсульфоксида и хранят замороженными в жидком азоте.
(b) Подготовка мембран
Мембранные препараты получают стандартными способами из вышеописанной СНО FIp-In клеточной линии, конститутивно сверхэкспрессирующей человеческий Edg 1 рецептор. Короче, криоконсервированные клетки помещают в культуру, и выращивают до конфлюэнтности в T175 флаконах для клеточных культур (Becton Dickinson, cat. no. 35 5001). Культуру клеток останавливают, промывая не содержащим кальция буферированным фосфатом солевым раствором (PBS; Gibco, cat. no. 14190), и клетки собирают резиновым скребком в охлажденную до 4°С и не содержащую кальция PBS, дополненную коктейлем ингибитора протеазы (полный ингибитор протеазы; Roche, cat. no. 1697498; 1 таблетка на 50 мл) и затем центрифугируют при 4°C в течение 15 минут при 1100×g (Heraeus Minifuge T). Для клеточного лизиса осадок снова суспендируют в охлажденном до 4°C гипотоническом буфере, состоящем из 5 мМ HEPES (Sigma-Aldrich, cat. no. H-0981), 1 мМ EDTA (динатриевая соль; Merck, cat. No. 8418), дополненном коктейлем ингибитора протеазы (см. выше), причем клетки хранят на льду еще 15 минут. После лизиса клетки центрифугируют при 4°C в течение 10 минут при 400×g (Heraeus Minifuge T). Осадок разрушают в гомогенизаторе Dounce, разбавляют надосадочной жидкостью из предыдущего центрифугирования и затем центрифугируют при 4°C в течение 10 минут при 500×g (Heraeus Minifuge T), чтобы отделить ядра и все еще интактные клетки от мембран, которые в основном присутствуют в надосадочной жидкости. Затем надосадочную жидкость разбавляют гипотоническим буфером и центрифугируют (Beckmann, Avanti J251) примерно при 18600×g в течение 2 часов при 4°C. После центрифугирования мембранный осадок снова суспендируют в буфере для хранения, состоящем из 20 мМ HEPES; 150 мМ NaCl (Merck, cat. no. 6400), 1 мМ EDTA (см. выше), дополненном коктейлем ингибитора протеазы (см. выше). Отбирают аликвоты мембранного препарата и хранят при -80°C. Концентрацию белка в мембранном препарате определяют в образце, используя коммерческий анализ белка (Bio-Rad, DC Protein Assay, cat. nos. 500-0113, 500-0114, 500-0115).
(c) GTP-γ-S анализ
35
Edg 1 мембранный препарат, полученный в (b) используют в коммерчески доступном наборе для сцинтилляционного анализа сближения (SPA) для связывания сопряженного с G-белком рецептора от Amersham Biosciences/GE Healthcare (код RPNQ0210), где индуцируемое лигандом связывание S-радиомеченного GTP-γ-S с рецептор-содержащими мембранами, которые связаны со сцинтилляционными шариками, стимулирует эмиссию света, и позволяет количественно определить активность агонистического к Edg 1 соединения. Анализ осуществляют, используя 96-луночный планшет практически в соответствии с инструкциями изготовителя. Перед началом экспериментов, сцинтилляционные шарики суспендируют в восстанавливающем буфере, состоящем из Tris-HCl (pH 7,4) дополненном 0,1% (масс/объем) азидом натрия, и затем разбавляют на льду аналитическим буфером (состоящим из 20 мМ HEPES, 100 мМ NaCI, 1 мМ EDTA (см. выше), 1 мМ дитиотреитола (DTT), и при рН доведенном до 7,4) до конечной концентрации шариков 30 мг/мл.
35
35
В лунки помещают 10 мкл специфического аналитического буфера, 10 мкл 100 мкМ раствора гуанозиндифосфата (GDP), и 10 мкл раствора тестируемого соединения в аналитическом буфере/диметилсульфоксиде, получая конечную концентрацию тестируемого соединения 10 мкМ. Для контроля высоких концентраций, 10 мкл раствора сфингозин-1-фосфата (S1P; Sigma, cat. no. S-9666), полученного в конечной S1P концентрации 10 мкМ, и для контроля низких концентраций 10 мкл аналитического буфера добавляют в соответствующие лунки вместо полученного раствора тестируемого соединения. Все лунки содержат одинаковые количества диметилсульфоксида. Затем 10 мкл раствора [S]GTP-γ-S (4 нМ) и Edg 1 мембранный препарат, полученный в (b), (15 мкг мембранного белка в 100 мкл аналитического буфера) добавляют в каждую лунку. После инкубирования планшетов при комнатной температуре в течение 5 минут добавляют 50 мкл специфической суспензии сцинтилляционных шариков (30 мг/мл). После дополнительного периода инкубирования 45 минут при комнатной температуре, планшеты центрифугируют в течение 10 минут при 500×g. Количественное значение [S]GTP-γ-S связывания, и таким образом активации рецепторов, измеряют, используя счетчик бета-частиц (MicroBeta, Wallac) в течение 1 минуты. Значения корректируют на фон, вычитая соответствующие значения для контроля низкой концентрации. Все измерения осуществляют троекратно. Активацию рецепторов тестируемым соединением выражают в процентах соответствующей высокой концентрации (10 мкМ S1P; принимают за 100% активации). В таблице 2 перечислены наблюдаемые активации для примерного соединения при 10 мкМ.
Таблица 2
Активация рецептора Edg 1 соединениями примеров при концентрации 10 мкМ в процентах от активации с использованием 10 мкМ S1P
Пример
% активации
1
101
2
97
3
96
4
110
5
79
6
112
7
90
8
108
9
128
10
69
11
100
12
70
13
95
14
99
15
42
16
85
Из приведенных результатов видно, что соединения с успехом можно использовать для лечения ран, и особенно для лечения нарушений заживления ран у пациентов, больных диабетом.