КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ СВЯЗЫВАНИЯ СФИНГОЗИН-1-ФОСФАТА

1. Выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, специфично реактивное к S1P и содержащее по меньшей мере одну тяжелую цепь и по меньшей мере одну легкую цепь, в котором:
A. каждая тяжелая цепь содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий:
(i) последовательность аминокислотных остатков, имеющую аминокислотную последовательность
(ii) последовательность аминокислотных остатков, имеющую по меньшей мере приблизительно 80%-ную идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью A(i), выше; и
B. каждая легкая цепь содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий:
(i) последовательность аминокислотных остатков, имеющую аминокислотную последовательность
(ii) последовательность аминокислотных остатков, имеющую по меньшей мере приблизительно 80%-ную идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью B(i), выше,
необязательно, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент имеет две тяжелые цепи и две легкие цепи.
2. Выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, в котором:
A. каждая тяжелая цепь содержит по меньшей мере одну из следующих:
(i) первую последовательность аминокислотных остатков последовательности DHTIH [SEQ ID NO:13];
(ii) вторую последовательность аминокислотных остатков AISPRHDITKYNEMFRG [SEQ ID NO:18] или
(iii) третью последовательность аминокислотных остатков последовательности GGFYGSTIWFDF [SEQ ID NO:15]; и
B. каждая легкая цепь содержит по меньшей мере одну из следующих:
(i) первую последовательность аминокислотных остатков последовательности ITTTDIDDDMN [SEQ ID NO:10];
(ii) вторую последовательность аминокислотных остатков последовательности EGNILRP [SEQ ID NO:11] или
(iii) третью последовательность аминокислотных остатков последовательности LQSDNLPFT [SEQ ID NO:12].
3. Выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, в котором:
A. каждая тяжелая цепь содержит:
(i) первую последовательность аминокислотных остатков последовательности DHTIH [SEQ ID NO:13];
(ii) вторую последовательность аминокислотных остатков AISPRHDITKYNEMFRG [SEQ ID NO:18] и
(iii) третью последовательность аминокислотных остатков последовательности GGFYGSTIWFDF [SEQ ID NO:15]; и
B. каждая легкая цепь содержит:
(i) первую последовательность аминокислотных остатков последовательности ITTTDIDDDMN [SEQ ID NO:10];
(ii) вторую последовательность аминокислотных остатков последовательности EGNILRP [SEQ ID NO:11] и
(iii) третью последовательность аминокислотных остатков последовательности LQSDNLPFT [SEQ ID NO:12].
4. Выделенное гуманизированное антитело по п.1. в котором:
A. каждая тяжелая цепь содержит последовательность аминокислотных остатков, имеющую аминокислотную последовательность:
(i)
(ii) последовательность аминокислотных остатков, имеющую по меньшей мере приблизительно 80%-ную идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью A(i), выше; и
B. каждая легкая цепь содержит последовательность аминокислотных остатков, имеющую аминокислотную последовательность:
(i)
(ii) последовательность аминокислотных остатков, имеющую по меньшей мере приблизительно 80%-ную идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью B(i), выше.
5. Выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.4, в котором:
A. каждая тяжелая цепь содержит по меньшей мере одну из следующих:
(i) первую последовательность аминокислотных остатков последовательности DHTIH [SEQ ID NO:13];
(ii) вторую последовательность аминокислотных остатков AISPRHDITKYNEMFRG [SEQ ID NO:18] или
(iii) третью последовательность аминокислотных остатков последовательности GGFYGSTIWFDF [SEQ ID NO:15]; и
B. каждая легкая цепь содержит по меньшей мере одну из следующих:
(i) первую последовательность аминокислотных остатков последовательности ITTTDIDDDMN [SEQ ID NO:10];
(ii) вторую последовательность аминокислотных остатков последовательности EGNILRP [SEQ ID NO:11] или
(iii) третью последовательность аминокислотных остатков последовательности LQSDNLPFT [SEQ ID NO:12].
6. Выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.4, в котором:
A. каждая последовательность тяжелой цепи содержит:
(i) первую последовательность аминокислотных остатков последовательности DHTIH [SEQ ID NO:13];
(ii) вторую последовательность аминокислотных остатков AISPRHDITKYNEMFRG [SEQ ID NO:18] и
(iii) третью последовательность аминокислотных остатков последовательности GGFYGSTIWFDF [SEQ ID NO:15]; и
B. каждая последовательность легкой цепи содержит:
(i) первую последовательность аминокислотных остатков последовательности ITTTDIDDDMN [SEQ ID NO:10];
(ii) вторую последовательность аминокислотных остатков последовательности EGNILRP [SEQ ID NO:11] и
(iii) третью последовательность аминокислотных остатков последовательности LQSDNLPFT [SEQ ID NO:12].
7. Выделенное гуманизированное антитело по п.1, в котором:
A. каждая тяжелая цепь содержит последовательность аминокислотных остатков, имеющую аминокислотную последовательность:
B. каждая легкая цепь содержит последовательность аминокислотных остатков, имеющую аминокислотную последовательность:
8. Выделенное гуманизированное антитело по п.4, в котором каждая тяжелая цепь содержит последовательность аминокислотных остатков, имеющую аминокислотную последовательность
9. Выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, в котором:
A. каждая тяжелая цепь содержит такую же аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи, что и вариабельный домен тяжелой цепи, кодируемый геном тяжелой цепи в векторе pATH1009 из ATCC с регистрационным № PTA-8421; и
B. каждая легкая цепь содержит такую же аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи, что и вариабельный домен легкой цепи, кодируемый геном легкой цепи в векторе pATH1009 из ATCC с регистрационным № PTA-8421.
10. Выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, в котором по меньшей мере один аминокислотный остаток антитела является гликозилированным.
11. Фармацевтическая композиция, содержащая выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.
12. Композиция выделенной нуклеиновой кислоты, которая кодирует гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1 для экспрессии, где композиция содержит:
A. первую экспрессирующую кассету, которая содержит промотор и ген, который кодирует полипептид(ы) тяжелой цепи гуманизированного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента; и
B. вторую экспрессирующую кассету, которая содержит промотор и ген, который кодирует полипептид(ы) легкой цепи гуманизированного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента.
13. Композиция выделенной нуклеиновой кислоты по п.12, где композиция содержит плазмиду, содержащую первую и вторую экспрессирующие кассеты.
14. Клетка-хозяин, трансфицированная композицией выделенной нуклеиновой кислоты по п.12, необязательно клетка-хозяин, депонированная под регистрационным номером ATCC PTA-8421.
15. Способ лечения заболевания или нарушения у индивида, включающий введение индивиду, нуждающемуся в таком лечении, выделенного гуманизированного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по п.1, где указанное заболевание или нарушение коррелирует с аномальным уровнем S1P.
16. Выделенное гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, в котором:
A. каждая тяжелая цепь содержит такую же тяжелую цепь, что и тяжелая цепь антитела, экспрессируемого клеточной линией CHO LH1 275, депонированной под регистрационным номером ATCC PTA-8422; и
B. каждая легкая цепь содержит такую же легкую цепь, что и легкая цепь антитела, экспрессируемого клеточной линией CHO LH1 275, депонированной под регистрационным номером ATCC PTA-8422.
17. Выделенное гуманизированное антитело, специфично реактивное к S1P, которое содержит гуманизированный вариабельный домен легкой цепи, включающий гипервариабельные определяющие комплементарность области (CDR), характеризуемые как CDRL1 (SEQ ID NO:10), CDRL2 (SEQ ID NO:11) и CDRL3 (SEQ ID NO:12), и гуманизированный вариабельный домен тяжелой цепи, включающий гипервариабельные CDR, характеризуемые как CDRH1 (SEQ ID NO:13), CDRH2 (SEQ ID NO:18) и CDRH3 (SEQ ID NO:15).
18. Композиция выделенной нуклеиновой кислоты, которая кодирует гуманизированное антитело, специфично реактивное к S1P, где композиция содержит первый ген, который кодирует ген легкой цепи, который кодирует пептиды CDR SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11 и SEQ ID NO:12, и второй ген, который кодирует ген тяжелой цепи, который кодирует SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:18 и SEQ ID NO:15.
19. Плазмида, содержащая композицию выделенной нуклеиновой кислоты по п.18, где указанная плазмида необязательно кодирует гуманизированное антитело, которое специфично реактивно к S1P и которое содержит ген тяжелой цепи, включающий последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:33, и ген легкой цепи, включающий последовательность нуклеиновой кислоты легкой цепи SEQ ID NO:34.
20. Рекомбинантная клетка-хозяин, трансфицированная плазмидой по п.19 и способная экспрессировать указанное антитело, где указанная клетка-хозяин необязательно представляет собой клетку CHOK1SV, необязательно клеточную линию, имеющую обозначение LH1 275, и депонированную под регистрационным номером ATCC PTA-8422.