АНТИТЕЛА ПРОТИВ А2 ТЕНАСЦИНА С И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Антитело, специфически связывающее А2 домен тенасцина А2 (TNC A2), отличающееся тем, что указанное антитело подвергли гликоинженерии для повышения эффекторной функции.
2. Антитело, специфически связывающее А2 домен тенасцина С (TNC A2), отличающееся тем, что указанное антитело содержит по меньшей мере один определяющий комплементарность участок тяжелой или легкой цепи (CDR), выбранный из группы SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:31, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:45 и SEQ ID NO:47 или их комбинацию.
3. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий
(a) CDR1 тяжелой цепи, выбранный из группы SEQ ID NO; 3, SEQ ID NO:5 и SEQ ID NO:7;
(б) CDR2 тяжелой цепи, выбранный из группы SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:23, и SEQ ID NO:25; и
(в) CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:27.
4. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело содержит вариабельный участок легкой цепи, содержащий
(а) CDR1 легкой цепи, выбранный из группы SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:31 и SEQ ID NO:33;
(б) CDR2 легкой цепи, выбранный из группы SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:43 и SEQ ID NO:45; и
(в) CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:47.
5. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело не содержит комбинацию CDR1 тяжелой цепи, выбранного из группы SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:7, CDR2 тяжелой цепи, выбранного из группы SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:15, и SEQ ID NO:21, CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO:27, CDR1 легкой цепи SEQ ID NO:29, CDR2 легкой цепи SEQ ID NO:35 и CDR3 легкой цепи SEQ ID NO:47.
6. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы: SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:67 и SEQ ID NO:63.
7. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы: SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:85, и SEQ ID NO:89.
8. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело не содержит комбинацию вариабельного участка тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:59 и вариабельного участка легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:55 или SEQ ID NO:57.
9. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело содержит Fc фрагмент или участок, эквивалентный Fc фрагменту иммуноглобулина.
10. Антитело по п.9, отличающееся тем, что указанный Fc фрагмент представляет собой Fc фрагмент IgG.
11. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой полноразмерное антитело класса IgG.
12. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело содержит человеческий константный участок.
13. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой человеческое антитело.
14. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело содержит Fc фрагмент, модифицированный с использованием гликоинженерии.
15. Антитело по п.14, отличающееся тем, что указанное антитело имеет повышенное содержание нефукозилированных олигосахаридов в указанном Fc фрагменте по сравнению с антителом, не модифицированным с использованием гликоинженерии.
16. Антитело по п.14, отличающееся тем, что по меньшей мере приблизительно от 20% до приблизительно 100% N-связанных олигосахаридов в указанном Fc фрагменте являются нефукозилированными.
17. Антитело по п.14, отличающееся тем, что указанное антитело имеет повышенное содержание разветвленных олигосахаридов в указанном Fc фрагменте по сравнению с антителом, не модифицированным с использованием гликоинженерии.
18. Антитело по п.14, отличающееся тем, что по меньшей мере приблизительно от 20% до приблизительно 100% N-связанных олигосахаридов в указанном Fc фрагменте являются разветвленными.
19. Антитело по п.14, отличающееся тем, что по меньшей мере приблизительно от 20% до приблизительно 50% N-связанных олигосахаридов в указанном Fc фрагменте являются разветвленными и нефукозилированными.
20. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело имеет повышенную эффекторную функцию и/или повышенную аффинность связывания Fc рецепторов.
21. Антитело по п.20, отличающееся тем, что указанная повышенная эффекторная функция представляет собой повышенную ADCC.
22. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой антитело, подвергнутое аффинному созреванию.
D
23. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело связывает TNC A2 человека с K менее приблизительно 1 мкМ.
24. Антитело по п.1 или 2, отличающееся тем, что указанное антитело связывает TNC A2 в тканях человека.
25. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, формирующий часть антитела по любому из пп.1-24.
26. Выделенный полипептид, кодируемый полинуклеотидом по п.25.
27. Композиция, содержащая первый выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий последовательность, выбранную из группы SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:67 и SEQ ID NO:63, и второй выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий последовательность, выбранную из группы SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:81, SEQ ID NO:85 и SEQ ID NO:89.
28. Вектор, содержащий полинуклеотид по п.25.
29. Клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид по п.25, композицию по п.27 или вектор по п.28.
30. Клетка-хозяин по п.29, отличающаяся тем, что указанная клетка-хозяин модифицирована с целью экспрессировать повышенные уровни одного или нескольких полипептидов, обладающих активностью GnTIII.
31. Клетка-хозяин по п.30, отличающаяся тем, что указанный полипептид, имеющий активность GnTIII, представляет собой гибридный полипептид, содержащий каталитический домен GnTIII и отвечающий за локализацию в комплексе Гольджи домен ManII.
32. Клетка-хозяин по п.30 или 31, отличающаяся тем, что указанная клетка-хозяин также модифицирована с целью экспрессировать повышенный уровни одного или нескольких полипептидов, обладающих активностью ManII.
33. Способ получения антитела, специфично связывающего А2 домен тенасцина А2, отличающийся тем, что указанный способ включает
а) культивирование клетки-хозяина по п.29 в среде при условиях, обеспечивающих экспрессию антитела и
б) выделение антитела.
34. Способ получения антитела, специфично связывающего А2 домен тенасцина А2, отличающийся тем, что указанный способ включает
а) культивирование клетки-хозяина по любому из пп.29-32 в среде при условиях, обеспечивающих экспрессию антитела и модификацию олигосахаридов, содержащихся в Fc фрагменте указанного антитела с использованием указанного полипептида, обладающего активностью GnTIII и
б) выделение антитела.
35. Антитело, специфично связывающее А2 домен тенасцина А2, отличающееся тем, что указанное антитело получают способом по п.33 или 34.
36. Конъюгат антитела, содержащий антитело по любому из пп.1-24 и цитотоксический агент.
37. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из пп.1-24 и фармацевтически приемлемый носитель.
38. Фармацевтическая композиция по п.37, также содержащая дополнительный терапевтический агент.
39. Антитело по п.1 или 2 для применения в качестве лекарственного средства.
40. Антитело по п.1 или 2 для лечения заболевания, характеризующегося экспрессией TNC А2.
41. Антитело по п.40, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой рак.
42. Антитело по п.1 или 2 для применения при индукции цитолиза опухолевой клетки или стромальной опухолевой клетки.
43. Применение антитела по любому из пп.1-24 для изготовления лекарственного средства.
44. Применение антитела по любому из пп.1-24 для производства лекарственного средства для лечения заболевания, характеризующегося экспрессией TNC A2.
45. Применение по п.44, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой рак.
46. Применение антитела по любому из пп.1-24 для производства лекарственного средства для индукции цитолиза опухолевой клетки или стромальной опухолевой клетки.
47. Способ лечения индивида, имеющего заболевание, характеризующееся экспрессией TNC A2, включающий введение индивиду эффективного количества антитела по любому из пп.1-24 или фармацевтической композиции по п.37 или п.38.
48. Способ по п.47, также включающий введение индивиду дополнительного терапевтического агента.
49. Способ по п.47 или 48, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой рак.
50. Способ индукции цитолиза опухолевой клетки или стромальной опухолевой клетки, отличающийся тем, что указанный способ включает приведение в контакт указанной опухолевой клетки или стромальной клетки с антителом по любому из пп.1-24.
51. Способ по п.50, отличающийся тем, указанный цитолиз вызван антитело-зависимой цитотоксичностью антитела.
52. Способ диагностики у индивида заболевания, включающий введение индивиду эффективного количества диагностического агента, отличающийся тем, что указанный диагностический агент содержит антитело по любому из пп.1-24 и метку, позволяющую детектировать комплекс указанного диагностического агента и TNC A2.