Дигидрокверцетин и его эффективность при длительной экспериментальной гипергликемии

30 % больных), по-видимому, связано со стимуляцией озоном пентозо-фосфатного шунта и аэробного гликолиза, вызывающих снижение уровня глюкозы крови за счет более активного поступления ее в ткани [2].

Применение корреляционного анализа для оценки эффективности озонотерапии позволило выявить тенденцию к снижению силы сопряженности элементов системы после лечения в сравнении с результатами до лечения. Коэффициент, индексирующий уровень напряженности метаболических параметров до лечения, составил 0,33. После проведенного курса лечения показатели сопряженности связей метаболических параметров уменьшились на 10 %, что свидетельствует о позитивной динамике изменений.

Озонотерапия способствует нормализации метаболических процессов у большинства больных как липидного, так и углеводного обменов, снижая риск развития атерогенных изменений в организме. Медицинский озон является эффективным терапевтическим средством, опосредующим свое результативное воздействие на этиопатогенетические механизмы АГ, оказывая благоприятное влияние на реологические свойства крови, обладая саногенным эффектом при сосудистых реакциях, которые лежат в основе формирования ГБ, осуществляет коррекцию нарушений доставки кислорода и потребления его тканями, снижая выраженность астеновегетатив-ного синдрома, улучшая качество жизни больных.

Выявленный у части пациентов эффект резистентности к данному методу лечения требует дальнейшего изучения для дифференцированного подхода к назначению озонотерапии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Влияние озонотерапии на показатели микроциркуляции по данным допплеровской флоуметрии / А.Г. Куликов, В.А. Максимов, С.Н. Зеленцов, С.Д. Каратаев // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: тез. докл. III Всеросс. науч.-практ. конф.

Н.-Новгород, 1998. С. 107.

2. Змызгова А.В. Клинические аспекты озо-нотерапии / А.В. Змызгова, В.А. Максимов, М., 2003.287с.

3. Кобалава Ж.Д. Артериальная гипертония. Ключи к диагностике и лечению. / Ж.Д. Кобалава, Ю.В. Котовская, В С. Моисеев. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. 863 с.

4. Косова Л.А. Изменение показателей липидного обмена у больных с артериальной гипертензией под влиянием различных дозировок озонотерапии / Л.А. Косова, А.Н. Серова, А.Ф. Бахтиярова // Казанский мед. журн. 2007. Т 88, № 4. Приложение. С. 164.

5. Лебедев К.А. Физиология хронических воспалительных процессов и их лечение / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина, Н.В. Козаченко // Физиология человека. 2005. Т. 31, № 1. С. 100-113.

6. Скворцов В.В. Внутривенная озонотерапия (ВОТ) и ее влияние на показатели гемореологии при хронических диффузных заболеваниях печени / В.В. Скворцов, О.В. Разваляева, М.Н. Устинова. // Физиотерапевт. 2009. № 8. С. 38-41.

7. Новиков Д.К. Оценка иммунного статуса / Д.К. Новиков, В.И. Новикова. М.; Витебск: Медицина, 1996. 281с.

E.V. Khmeleva, M.V. Antoniuk, A.D. Novgorodtsev, E.V. Loginova

metabolic effects of ozone therapy in medical rehabilitation of patients with hypertension

Vladivostok Affiliation of Far Eastern Research Centre for Physiology and Respiratory Pathology of SB RAMS -Institute of Medical Climatology and Rehabilitative Treatment, Vladivostok

Studied the effect of ozone therapy on the metabolic status of patients with arterial hypertension. Been positive changes in indicato rs of metabolism in patients with arterial hypertension after a course of treatment of medical ozone. Ozone therapy helps to normalize the metabolic processes in most patients, lipid and carbohydrate metabolism, redu ces the risk of atherogenic changes in the body.

Key words: hypertension, ozone therapy, rehabilitation treatment.

Адрес для переписки: e-mail: eniya75@mail.ru

© Коллектив авторов, 2011.

УДК 616-008 [616.153.455.01-678.048] :611.37:611-0181:577.125:616.12-001.06

С.С. Целуйко, Н.П. Красавина, Л.С. Корнеева

дигидрокверцетин и его эффективность при длительной экспериментальной гипергликемии

Амурская государственная медицинская академия, г. Благовещенск.

Введение антиоксиданта биофлавоноида дигидрокверцетина при длительной экспериментальной гипергликемии снижает уровень глюкозы крови, содержание продуктов ПОЛ и дистрофические изменения в Р-инсулоцитах. На этом фоне увеличивается число клеток в островках и количество специфических Р-гранул в них. Снижается уровень патологических изменений и интенсивность реакции на ШИК-позитивные вещества в соединительной ткани и в кровеносных сосудах островков поджелудочной железы.

Ключевые слова: экспериментальная гипергликемия, метаболический синдром, дигидрокверцетин, островки поджелудочной железы, Р-инсулоциты, перекисное окисление липидов, кровеносные сосуды.

В настоящее время повышенное внимание привлекает проблема метаболического синдрома, для которого характерно нарушение углеводного и липидного обменов. В основе данной патологии лежит снижение чувствительности тканей к инсулину, а именно инсулинорезистентность, которая обычно развивается при сахарном диабете II типа [2,8]. Сахарный диабет (СД) занимает одно из ведущих мест в структуре заболеваемости и сопровождается большим числом осложнений [7]. Считают, что основную роль при СД играет гипергликемия, на фоне которой активируется уровень реакций перекисного окисления липидов (ПОЛ) и как результат развиваются осложнения в виде ангиопатий.

Достигнуты значительные успехи в области лечения СД, но решение столь сложной задачи возможно только путем дополнительного воздействия на разные звенья патологического процесса путем снижения тканевой гипоксии и уровня реакций ПОЛ [5]. Особое значение приобретают препараты флавоноидной природы растительного происхождения, в частности дигидрокверцетин. Он проявляет антиокислительную активность, устойчив к автоокислению и малотоксичен, а также снижает сосудистую проницаемость и положительно влияет на систему гемостаза [1,4,6].

Целью работы было изучение морфофункционального состояния островков поджелудочной железы при экспериментальной гипергликемии и оценка эффективности в этих условиях дигидрокверцетина.

Работа выполнена на беспородных белых крысах. Возраст животных-самцов, включённых в исследование, составил 6-8 месяцев, масса 220-320 граммов. Животные были разбиты на 5 групп: 1-я - интактные; 2-я и 3-я - экспериментальные с гипергликемией в течение 8 и 16 недель (контроль). Ежедневно животным перорально и парентерально вводили глюкозу в дозе 600 мг на 100 грамм веса животного. В 4-й и 5-й группах на фоне гипергликемии в течение 8 и 16 недель (созданной аналогично 2-й и 3-й группам) ежедневно вводили дигидрокверцетин в дозе 2,5 мг / 100 г веса.

Контроль за содержанием глюкозы крови проводили еженедельно натощак. Морфологическая обработка материала начиналась с фиксации объектов в 10 % нейтральном формалине и спирт-формоловой смеси, получении парафиновых срезов поджелудочной железы с последующей окраской: гематоксилином и эозином, альдегид-фуксином по Gabe, альциновым синим 8 GХ по Стидмэну, ШИК-реакцией по Мак-Манусу.

Материал поджелудочной железы подвергали морфологическому исследованию на полутонких, а затем ультратонких срезах методом трансмиссионной микроскопии. Полутонкие и ультратонкие срезы получали на ультратоме “ЛКБ - NOWA”. Исследование и фотографирование ультратонких срезов проводили на электронных микроскопах “Technai G2 Spirit Twin”, “Jeol 1230”. Морфометрические исследования Р-клеток поджелудочной железы проводили на площади 10 мкм2. Был проведён подсчёт общего числа гранул, при этом отдельно регистрировались гранулы с высокой и средней плотностью осмио-фильного содержимого, средняя площадь секреторного материала 1 гранулы, а также подсчитывали число клеток в одном островке.

Содержание глюкозы определяли в периферической крови с помощью глюкозооксидазного метода прибором One Touch Basic™ Plus (LifeScan, USA 2000). Уровень реакции ПОЛ оценивали по содержанию в крови диеновых конъюгатов, гидроперекисей липидов, малонового диальдегида, а также определяли количество витамина Е.

Гипергликемия - это результат нарушения углеводного обмена, при котором уровень глюкозы, поступающей с пищей, превышает ее потребление органами и тканями. При этом глюкоза длительно и неконтролируемо воздействует на различные структуры клеток, что приводит к развитию глюкозоток-сичности [3,8].

В эксперименте достоверные результаты были получены на 4-й неделе, когда показатели глюкозы крови возросли до 5,9±0,58 ммоль/л (у интактных 3,1±0,24 ммоль/л). По мере удлинения срока эксперимента до 16 недель наблюдалась четкая тенденция к росту уровня глюкозы крови до 7,1±0,63 ммоль/л, что свидетельствует о развитии гипергликемического синдрома у экспериментальных животных. Гипергликемия в течение 8 недель приводит к значительному увеличению в периферической крови уровня диеновых конъюгатов до 81,6±4,04 нмоль/мл (у интакт-ных 18,6±0,31 нмоль/мл), малонового диальдегида до 5,6±0,37 нмоль/мл (у интактных 3,1±0,17 нмоль/ мл) на фоне снижения показателя витамина Е. При удлинении гипергликемии до 16 недель в периферической крови сохраняется вышеописанная закономерность. Гипергликемия в течение 8 и 16 недель приводит к уменьшению числа Р-клеток во всех островках (табл. 1).

Таблица

Число клеток в составе различных островков поджелудочной железы у интактных и экспериментальных животных

Объект Размер островков

Экспериментальная группа Большие Средние Малые

Интактные 110,3 ± 3,1 75,2 ± 2,5 12,3 ± 1,4

Гипергликемия 8 недель (контроль) 95,1 ± 4,8* 50,2 ± 5,6* 7,8 ± 2,1

Гипергликемия 8 недель на фоне введения дигидрокверцетина 150,3 ± 5,4** 45 ± 3,7 15,2 ± 1,8**

Гипергликемия 16 недель (контроль) 85,4 ±5,1* 35,2 ± 4,9 7,4 ± 2,6

Гипергликемия 16 недель на фоне введения дигидрокверцетина 185,3 ± 7,5** 72,3 ± 3,7** 18,7 ± 2,2**

Примечание: * - р < 0,05 по сравнению с интактными животными; ** - р < 0,05 по сравнению с контрольной группой.

Вместе с тем, появляются достаточно многочисленные малые островки, в которых присутствуют в основном Р-клетки. В большей части инсулоцитов крупных островков наблюдаются дистрофические изменения в цитоплазме, многочисленные вакуоли, очаговое расширение межклеточных пространств. Появляется значительная вариабельность Р-клеток, причем, наиболее выраженные изменения отмечаются в гранулах. В большинстве случаев, число гранул в Р-клетках резко снижается, возрастает электронная плотность секреторного материала и изменяется площадь занятая им. В крупных и средних островках возрастают прослойки соединительной ткани, в которых увеличивается число ШИК-позитивных гранул, наблюдаются зоны муко-идного набухания. По мере удлинения эксперимента в соединительной ткани островков увеличивается число коллагеновых волокон, усиливается реакция на гликоза-миногликаны, возрастает количество ШИК-позитивных веществ. Если вначале кровеносные сосуды и капилляры в островках обычно расширены, в них часто выявляются большие скопления эритроцитов, наблюдаются выраженные периваскулярные и перикапиллярные отеки, то в дальнейшем, при удлинении гипергликемии, наблюдается сужение кровеносных капилляров, их просвет заполнен форменными элементами крови, склеенными в конгломераты, выявляется диффузное расширение периэндотелиального пространства. Отмечается утолщение, а иногда и расщепление базальной мембраны капилляров. Все эти признаки свидетельствуют о поражении, как крупных сосудов, так и сосудов микро-циркуляторного русла. И как следствие, замедляется транспорт интерстициальной жидкости через стенку сосудов, нарушаются оксибиотические процессы, возникает периваскулярный и перикапиллярный отеки. Повышается проницаемость сосудов, что обусловлено дисфунк—цией эндотелиальных клеток и экстрацел-люлярного матрикса. А поскольку клетки сосудистого эндотелия являются независимым от инсулина потребителем глюкозы, то при гипергликемии резко возрастает и внутриклеточное содержание этого моносахарида, по—этому эндотелиоциты становятся преобладающими мишенями глюкозотоксичности [3, 7].

Применение в течение 8 недель на фоне гипергликемии дигидрокверцетина приводит к увеличению числа инсулоцитов в различных островках поджелудочной железы (табл.). Известно, что увеличение числа эндокринных клеток осуществляется не только за счет размножения инсулоцитов островка, но и при участии быстроделящихся клеток протоков. Решающую роль в процессе дифференцировки Р-клеток играет высокое содержание кислорода, характерное для естественного микроокружения островков. Повышенное содержание кислорода является сигналом к массовому созреванию стволовых клеток [9]. Изменения в кровеносных капиллярах на фоне введения дигидрокверцетина выражены значительно меньше, чем в контроле, а именно: капилляры умеренно расширены, в просвете не наблюдаются застойные явления, сохраняется незначительное расширение перикапиллярных пространств и небольшая очаговая реакция на ШИК-положительные вещества, т.е. налицо проявляется ангиопротекторное действие препарата.

При удлинении эксперимента до 16 недель сохраняется тенденция к росту числа клеток в островках (табл.). По сравнению с предыдущим сроком эксперимента мы отметили незначительные структурные изменения со стороны сосудов различного звена, т.е. ангиопротекторное действие препарата оказалось довольно эффективным, несмотря на столь продолжительный срок гипергликемии (16 недель). Об этом свидетельствуют снижение уровня реакции на ШИК-положительные вещества в стенке сосудов, небольшие очаги периваскулярного отека и отсутствие застойных явлений в сосудах. Вероятно, действие дигидрокверцетина более многогранно, т.к. он является не только антиоксидантом, но и обладает капилляропротекторным действием, уменьшает агрегацию форменных элементов крови, препятствует тромбообразованию. Это улучшает кровоснабжение, понижает уровень гипоксии и возможно уменьшает явления интоксикации. Таким образом повышается устойчивость клеток и тканей к повреждающему действию высокого содержания глюкозы крови [1, 6].

Биохимические исследования показали, что применение дигидрокверцетина позволило несколько снизить уровень глюкозы, но показатели оставались повышенными и эта тенденция сохранялась во все сроки эксперимента. Кроме этого, отмечается достоверное снижение уровня диеновых конъюгатов, малонового диальдегида и рост показателя витамина Е в периферической крови.

Таким образом, применение на фоне 8-недельной гипергликемии дигидрокверцетина приводит к увеличению количества островков и числа клеток, уменьшению дистрофических изменений в большинстве Р-инсулоцитов, увеличению в них числа специфических гранул. Снижается уровень структурных изменений в соединительной ткани и стенке кровеносных сосудов. Удлинение эксперимента до 16 недель позволило сохранить вышеописанную тенденцию. На фоне развившейся гипергликемии во все сроки эксперимента применение дигидрокверцетина приводит к уменьшению содержания как первичных, так и вторичных продуктов ПОЛ в сыворотке крови на фоне снижения показателя глюкозы крови.

ЛИТЕРАТУРА

1. Антиоксидантные свойства дигидрокверцетина. / Теселкин Ю.О., Жамбалова Б.А., Бабенко-

S.S. Tseluyko, N. P. Krasavina, L.S. Korneeva DIGIDROQERTSETIN AND ITS EFFEcTIVENESS WITH PROLONGED EXPERIMENTAL HYPERGLYCEMIA

Amur state medical academy, Blagoveshchensk.

The introduction of antioxidant, bioflavonoid of digidroqertsetin with prolonged experimental hyperglycemia decreases the level of glucose of the blood, the content of products Paul and dystrophic changes in p-cells. The number of cells in the islets and a quantity of specific P-granules in them against this background increases. The level of pathologic changes and the intensity of reaction to the Stylishness- positive substances in the connective tissue and in the blood vessels of the islets of the pancreas is reduced.

Key words: experimental hyperglycemia, metabolic syndrome, digidroqertsetin, the islets of the pancreas, P-cells: the peroxide oxidation of lipids, blood vessels.

Адрес для переписки: e-mail: agma@nm.ru

© Коллектив авторов, 2011.

УДК 616-008.9-092.19:612.215.4

А.А. Чуров1, Х.М. Меджидова1, О.В. Перервенко2, И.Г Яцук3, Ж.А. Курбанова3 НАРУШЕНИЕ МИКРОЭКОЛОгИИ ВЕРХНИХ ДЬІХАТЕЛЬНЬІХ ПУТЕЙ ПРИ МЕТАБОЛИЧЕСКОМ СИНДРОМЕ

1Военный госпиталь (Филиал №2 ФБУ в/ч 26826);

2Камчатский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД и ИЗ;

3Микробиологический центр Камчатского края, г. Петропавловск-Камчатский.

Изложены результаты обследования микробиоценоза верхних дыхательных путей у лиц с метаболическим синдромом (МС). Обследованы 67 человек от 45 до 65 лет с различными проявлениями МС. Проведено сравнительное изучение цитоморфологии слизистых оболочек верхних дыхательных путей, а также показателей работы иммунной системы. Среди пациентов с МС выявлен высокий уровень носительства

ва И.В., Клебанова Г.И. // Биофизика . 1996. Т. 41, Вып. 3. С. 621-623.

2. Балаболкин М.И. Сахарный диабет / М.И. Бала-болкин. М.: Медицина, 1994. 384 с.

3. Баранов В.Г. Экспериментальный сахарный диабет / В.Г. Баранов. Л.: Наука, 1983. 238 с.

4. Волчегорский И.А. Антиоксиданты при экспериментальном сахарном диабете / И.А. Волчегорский, Л.М. Рассохина, И.Ю. Мирошниченко // Проблемы эндокринологии. 2008. № 5, С. 43-49.

5. Смолянский Б.Л. Лечение сахарного диабета / Б.Л. Смолянский, В.Г. Лифлянский. СПб.: Издательский дом «Нева», 2004. 384 с.

6. Уминский А.А. Биохимия флавоноидов и их значение в медицине / А.А. Уминский, Б.Х. Хавстеен, В.Ф. Баканева. Пущино: ООО «Фотон - век», 2007. 264 с.

7. Уильямз Г. Руководство по диабету / Г.Уильямз. Дж.К. Пикам. М.: Мед. пресс-информ, 2003. 248 с.

8. Beta-cell deficit and increased beta-cell apoptosis in humans with type 2 diabetes / A.E. Butler, J. Janson, S. Bonner-Weir et al. // Diabetes. 2003. Vol. 52, № 1. P. 102-110.

9. Enhanced oxygenation promotes beta cell differentiation in vitro / C.A. Fraker, S. Alvarez, P. Papadopoulos et al. // Stem cells express. 2007. Doi.10.1634. P. 1-20.