Сравнительный анализ морфологических изменений плаценты при физиологическом отделении и задержании последа у коров

§ Фф

Ветеринария -И#

оцениваемых быков-производителей; то эти же производители являлись ухудшателями или улучшателями по соответствующим показателям своих дочерей.

Одним из важных селекционно-генетических параметров является коэффициент наследуемости. Под термином наследуемость понимается доля генетической изменчивости в общей фенотипической изменчивости признака. Этот показатель имеет большое практическое значение, т. к. чем больше изменчивость признака зависит от наследственности, тем выше эффект селекции. Если же фенотипическая изменчивость в большей степени обусловлена влиянием условий среды, эффект селекции снижается.

Данные научных исследований, а также практика показывают, что эффективность селекции по основным хозяйственно-полезным признакам на 85-90 % зависит от племенной ценности быков-производителей.

В этой связи нами была определена сила «отца» на продолжительность хозяйственного использования и

пожизненный удой коров, которые оценивали на основе расчета однофакторного дисперсионного комплекса.

На основании проведенных исследований установили, что в АФ «Луговская» доля влияния «отца» на продолжительность хозяйственного использования и пожизненную продуктивность составила соответственно 66,89 % и 67,96 % (Р > 0,999).

Меньше всего на показатели долголетия и продуктивности коров оказывали влияние быки-производители в учхозе ТГСХА, доля влияния по соответствующим признакам составила соответственно 31,90 % и 18,60 % (Р > 0,999).

Выводы. Рекомендации.

Таким образом, наряду с оценкой по молочной продуктивности, селекционерам необходимо учитывать продуктивное долголетие коров-дочерей быков-производителей, используемых для воспроизводства стада, ибо индивидуальные особенности быков-отцов оказывают большое влияние на пожизненную продуктивность своего потомства.

Литература

1. Арзуманян Е. А., Соловьев А. А., Бегучев А. П. [и др.]. Скотоводство. М. : Колос, 1978. 318 с.

2. Толманов А. А., Катмаков П. С., Гавриленко В. П. Продуктивное долголетие коров — важный селекционный признак // Зоотехния. 1998. № 11. С. 2-3.

СРАВНИТЕЛЬНЫМ АНАЛИЗ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИИ ПЛАЦЕНТЫ ПРИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОМ ОТДЕЛЕНИИ И ЗАДЕРЖАНИИ ПОСЛЕДА У КОРОВ

Н. Н. СЕМЕНОВА,

кандидат ветеринарных наук, доцент,

А. В. ТИМКИН,

аспирант,

А. Н. СТУКОВ, аспирант, Уральская ГСХА

620075, г. Екатеринбург, ул. К. Либкнехта, д. 42;

тел.89043837867

Ключевые слова: коровы, морфология, плацента, задержание последа, плацентарная недостаточность. Keywords: cows, morphology, placenta, retention of placenta, placentalinsufficiency.

Задержание последа является наиболее распространенной патологией родового периода у коров. В высокопродуктивных стадах родовой акт у коров может осложняться данным заболеванием в 12-17 % случаев [1].

В основе формирования данной патологии лежат нарушения компенсаторно-приспособительных механизмов плаценты на тканевом и субклеточном уровнях. Морфофункциональные особенности плаценты жвачных обеспечивают лучшую связь ворсин и микроворсин с криптами, при этом соединению отдельных участков плацентом способствует коллаген, разрушение которого считается ключевым фактором в отделении плаценты [2].

Известно, что существуют различия в протеазной активности плацентом при их самопроизвольном отделении и при задержании последа. Эти данные указывают на то, что изменения ферментативной активности играют определенную роль в этиологии данной патологии [3, 4]. Например, коллагеназа котиледона и коллаген 3 типа сохраняется у коров с задержанием последа. Кроме того, при данной патологии выявлена

пониженная активность матриксных металлопротеиназ MMP-9 и недостаток ММР-2 [5]. Эти ферменты относятся к семейству цинк- и кальций-зависимых эндопептидаз, они играют важную роль во многих физиологических процессах, таких как эмбриогенез, морфогенез, репродукция и ремоделирование ткани. Ферменты ММР-2 и ММР-9 являются желатиназами, они расщепляют коллаген 4 типа и денатурированные коллагены и могут быть важны при разрушении связи котиледон-карункул и отделении плодных оболочек [2].

Клеточный ресурс коллагеназы и других протеаз у коров неизвестен, в то же время, можно предположить, что это эпителий котиледонов и карункулов, а также лейкоциты. Нарушение гормонального баланса в маточной среде может ингибировать освобождение протеаз из эпителия, а иммунодепрессия может препятствовать протеазной активности лейкоцитов. Как тот, так и другой вариант может приводить к задержанию последа, вызванному снижением протеазной активности [6].

Ветеринария "И

В связи с этим к ведущим факторам риска в развитии задержания последа у коров можно отнести морфофункциональные изменения в плаценте, возникающие в ответ на различные патогенные воздействия во время беременности.

Цель и методика исследований.

Целью работы был анализ макро- и микроскопических изменений в плаценте при физиологическом отделении и при задержании последа у коров.

Плодные оболочки были взяты от коров уральской черно-пестрой породы с продуктивностью 7000-8000 кг. Для исследования были отобраны плодные оболочки от коров при отделении последа в первые 4 ч. после родов и коров с задержанием последа до 24 ч.

После фиксации времени, отделения последа, проводили морфометрическую оценку по ранее разработанной методике [7, 8].

Для оценки состояния компенсации плаценты необходимо определение массы и измерение хориона с вычислением плацентарно-плодного соотношения. С этой целью самопроизвольно выделившийся послед расправляли на ровной поверхности, осматривали, обращая внимание на расположение котиледонов, наличие чрезмерно разросшихся и патологически измененных плацентом и геморрагий, целостность кровеносных сосудов, присутствие наложений на поверхности плодной части плаценты. Это позволяло выявить макроскопическую патологию плаценты и ее количественное отношение к общей площади хориона.

Затем определяли массу плодных оболочек и подсчитывали количество плацентом. Отдельно учитывали крупные, средние и мелкие котиледоны.

С помощью сетки Автандилова измеряли площадь каждого котиледона с последующим выведением общей площади ворсинчатой части плаценты, учитывали площадь хориона. На основании полученных данных расчетным путем определяли отношение площади ворсинчатой части к площади хориона, что позволяет нам вывести индекс полноценности питания плода.

После морфометрических исследований хорион отделяли от амниона и аллантоиса, определяли его массу. Затем выводили показатели отношения массы всех плодных оболочек и отдельно массы хориона к массе плода, показатели характеризуют жизнеспособность новорожденного.

Одновременно был отобран материал для гистологического и гистохимического исследования. Котиледоны подвергали фиксации в 10 %-м водном растворе нейтрального формалина. Из отобранного материала вырезали кусочки тканей размером 1 х 0,5 х 0,5 см, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации, осуществляли проводку по хлороформу и заливали в парафин. Срезы толщиной 5 и 10 мкм готовили на санном микротоме МС-3.

Препараты окрашивали по общепринятым, стандартным методикам [9]. Обзорную окраску гематоксилином и эозином использовали для общей оценки развития, состояния и взаимодействия исследуемых тканей, а также структурного и функционального состояния соединительнотканных структур. Для оценки структурнофункционального состояния и дифференцировки соединительнотканных волокон препараты окрашивали по методу Ван-Гизона. Изучение морфологической картины проводили на микроскопе Micros MS300, с маркировкой окуляра EW 10х/20, используемые увеличения объектива: 4, 10, 20, 40.

Полученные количественные показатели и цифровые фотографии обработаны на PC Pentium. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием компьютерной программы «Статистика» в Microsoft Excel 2003.

Результаты исследований.

Для сравнения морфометрических показателей нами были исследованы плаценты коров, отделившиеся самопроизвольно и после консервативного лечения. Масса плодов при рождении в сравниваемых группах не представляет значительной разницы.

Осмотр плодных оболочек показал, что у коров с физиологическим течением родов макроскопически выраженная патология не отмечалась. В роге-плодовместилище наблюдался более крупный размер котиледонов по сравнению со свободным рогом. Цвет котиледонов в роге-плодовместилище светлокоричневый, а в свободном роге — более темный: от красного до буро-коричневого.

При задержании последа отмечено значительное снижение площади котиледонов. Так, отношение площади котиледонов к площади хориона составляло 8,8 %, в то время как у здоровых животных данный показатель в среднем был равен 16,22 %, что показывает снижение уровня питания плода. Кроме того, при задержании последа были отмечены более низкие показатели отношения массы плодных оболочек к массе плода (13,72 %) и отношение массы хориона к массе плода (9,43 %). Уменьшение площади котиледонарной зоны является причиной плацентарной недостаточности и приводит к снижению поступающего к плоду кислорода и питательных веществ.

При микроскопии ткани хориона в котиледонарной ткани, взятой от коров с физиологическими сроками отделения последа, выявлен вариант промежуточнозрелых ворсин хориона (относительно незрелая плацента). При этом, наряду с мелкими терминальными ветвями, преобладали более крупные ворсины с хорошо очерченными контурами. В них четко просматривался эпителий и выражена его структура (рис. 1). В некоторых ворсинах обнаруживали разрыхление стромы и незначительный ее отек.

«55

* -

*<=Йк

* - -т.

*»V

V-

~, 'В 'ч £

Рисунок 1 Крупные ворсины хориона с хорошо выраженной эпителиальной структурой. Окраска гематоксилином и эозином. Увелич. 20 х 12,5

§ Фф

Ветеринария +•*

• ;< • Щ%

. • 4 {

, '* Jli '

. I* ' »L '

• 1 тЯПшЧії' Ч .

• i}A'< % к»' •

• ГЛ\\; - $>'*•’Ч

- у.

t v:'

. *

. - -д

>*

1 <* ‘  ' v4-'‘v

•• V« wiCLL ‘1

•»

' Sv»

л-'

’  її і •І л v

(Ä'Л ,о; V& г

лЙ.** • \ te к *<). ..-•*•***»* ' * Ч( і*

'4.

ЯПРМ а 1-

Рисунок 3

Нарушение дифференцировки клеток эпителия ворсин трофобласта. Окраска гематоксилином и эозином.

Увелич. 40 х 12,5

Рисунок 2

Разрыхление и коллагенизация стромы ворсин хориона.

Окраска по Ван-Гизону. Увелич. 20 х 12,5

Рисунок 4

Отслоение и нарушение ориентации ядер эпителиальных клеток. Окраска гематоксилином и эозином.

Увелич. 40 х 12,5

Четко выделялась структура огрубевшей стромы ворсин хориона и синцитиотрофобласта, которая при окраске по методу Ван-Гизона, выглядела более интенсивно окрашенной (рис. 2). Расположенные здесь кровеносные сосуды имели утолщенную стенку, иногда полностью гомогенезированную.

В кровеносных сосудах венозного типа наблюдалось резкое расширение просвета и переполнение их кровью. Периваскулярно находили либо умеренное, либо ярко выраженное разрыхление стромы и ее отек. В межуточной ткани появляются фибриллярные структуры, что свидетельствует о процессах старения плаценты.

Имело место нарушение дифференцировки клеток эпителия ворсин трофобласта: в эпителии находили гигантские клетки, которые характерны для плаценты в первую треть беременности. Некоторые из этих клеток имели четко очерченное ядро, образовавшееся

Рисунок 5

Гиперемия фетальных сосудов и выпадение гемосидерина.

Окраска гематоксилином и эозином. Увелич. 20 х 12,5

путем амитоза (рис. 3). Часто параллельно с участками сохраненного эпителия на ворсинках обнаруживали отслоения клеток или нарушение ориентации ядер эпителиальных клеток. О высокой степени компенсаторно-приспособительных реакций свидетельствует и большое количество субэпителиально расположенных капилляров, которое способствует развитию нормального плода при нарушении строения эпителия ворсин (рис. 4).

Небольшие инволютивно-дистрофические изменения в тканях хориона и масса плода у животных с физиологическими сроками отделения последа указывают на компенсированное функциональное состояние плаценты.

При отделении последа после консервативного лечения, в отдельных участках котиледонарной ткани наблюдалось кровенаполнение фетальных сосудов, выпадение в них гемосидерина, но, как правило, это были незначительные скопления гранул (рис. 5). Вся мелкокапиллярная сеть ворсин была кровенаполнена, что

Ветеринария

Рисунок 6

Гиперхромность ядер клеток ворсин хориона. Окраска гематоксилином и эозином.

Увелич. 40 х 12,5

71. г < V »k., '

. • >< » „

Рисунок 7

Редукция терминальных ворсин при преобладании промежуточных дифференцированных ворсин хориона. Окраска гематоксилином и эозином. Увелич. 20 х 12,5

»•К*

¡X 4 ,

л- V i w h

\

à*

Рисунок 8

Пролиферация стенок сосудов и отложение пигмента липофусцина. Окраска по Ван-Гизону. Увелич. 40 х 12,5

свидетельствует о достаточном кровоснабжении ворсин хориона. То же наблюдалось и в соединительной ткани трофобласта, где отмечалась некоторая фрагментация соединительнотканных структур. В кровеносных сосудах аморфной соединительной ткани ворсин хориона прослеживались процессы пролиферации клеток эндотелия.

Изменения в котиледонарной ткани имеют, скорее всего, вторичный характер, о чем свидетельствует достаточно большое количество хорошо развитых ворсин. Несмотря на изрезанность края и нарушение дифференциации эпителия, ядра его клеток гиперхромные, субэпителиально расположенные капилляры хорошо развиты, что свидетельствует об активизации эпителия и сохранении его растущей и поглотительной способности (рис. 6).

Рисунок 9

Отложение пигмента липофусцина в эпителии ворсин хориона. Окраска по Ван-Гизону. Увелич. 20 х 12,5

В одном случае диагностировали преобладание патологической незрелости плаценты, типа преобладания промежуточных дифференцированных ворсин со слабой их васкуляризацией. Иными словами, речь идет о персистентности промежуточных ветвей при очевидной редукции самых многочисленных, терминальных ворсин, приблизительно в конце 2 триместра беременности (рис. 7). Строма хориона была отечна, в ней прослеживались процессы пролиферации стенки кровеносных сосудов. В эндотелии сосудов и в эпителии ворсин было обнаружено большое количество мелкоточечного пигмента липофусцина, что свидетельствует о ранних процессах изнашивания и нарушении липидного обмена (рис. 8, 9).

Все выявленные патологические изменения свидетельствуют о хроническом характере местной гипоксии, с хорошо развитыми компенсаторно-приспособительными реакциями.

Ветеринария

¡й

Выводы.

Сравнительный анализ макроизменений в плаценте коров показал, что при задержании последа происходит снижение массы хориона, площади котиледонов и плодно-плацентарного соотношения, по сравнению с животными при физиологическом отделении последа. Это является причиной плацентарной недостаточности и может приводить к снижению поступающего к плоду кислорода и питательных веществ.

При гистологическом исследовании у животных с задержанием последа выявлены патологические процессы, при которых условия диффузии газов и питательных веществ нарушаются, развивается местная тканевая гипоксия, вызывающая увеличение числа синцитиальных почек, что свидетельствует о хроническом характере местной гипоксии. Вместе с тем, в плацентах этих коров хорошо развиты компенсаторноприспособительные реакции, позволяющие получить жизнеспособное потомство.

Литература

1. Нежданов А. Г., Мисайлов В. Д., Шахов А. Г. Болезни органов размножения у коров и проблемы их диагностики, терапии и профилактики // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы животных : мат. междунар. науч.-практ. конф. Воронеж, 2005. С. 8-11.

2. Eiler H., Hopkins F. M. Bovine retained placenta: Effects of collagenase and hyaluronidase on detachment of placenta // Biol. Reprod. 1992. V. 46. P. 580-585.

3. Gross T. S., Williams W. F., Manspeaker T. S. et al. In vitro proteolytic activity of the late pregnant and peripartum bovine placenta // J. Anim. Sci. 1985. Vol. 61 (Suppl. 1). P. 391-392.

4. Eiler H., Fecteau K. A. Retained placenta // Youngquist R. S., Threlfall W. R., eds. Current Therapy in Large Animal Theriogenology. 2nd ed. St Louis, MO : WB Saunders, 2007. P. 345-354.

5. Maj J. G., Kankofer M. Activity of 72-kDa and 92-kDa matrixmetalloproteinases in placental tissues of cows with and without Retained fetalmembranes // Placenta, 1997. Vol. 18. P. 683-687.

6. Beagley J. C., Whitman K. J., Baptiste K. E. et al. Physiology and Treatment of Retained Fetal Membranes in Cattle // J. Vet. Intern. Med. 2010. Vol. 24. P. 261-268.

7. Автандилов Г. Г. Основы количественной патологической анатомии : уч. пос. М. : Медицина, 2002. 240 с.

8. Дроздова Л. И., Колчина А. Ф., Семенова Н. Н. Морфофункциональное состояние тканей хориона у коров в хозяйствах с различной степенью йодной недостаточности // Актуальные вопросы ветеринарной медицины : мат. межд. науч.-практ. конф. Екатеринбург, 2007. С. 45-47.

9. Меркулов Г. А. Курс патолого-гистологической техники. Л. : Медицина, 1969. 422 с.

УЛЬТРАСТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЕЧЕНИ И ПОЧЕК ПРИ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ

Н. А. ТАТАРНИКОВА,

доктор ветеринарных наук, профессор,

заведующая кафедрой инфекционных болезней,

А. А. БЕККЕР,

соискатель, Пермская ГСХА

614036, Пермский край, г. Пермь, ул. Мира, д. 86, кв. 1;

тел. 8 906-876-06-78; е-mail: ksenya@aport.ru

Ключевые слова: хламидиоз, печень, почки, митохондрии. Keywords: chlamidiosis, liver, kidneys, mitochondrion.

В последние годы хламидиозы получили необычайно широкое распространение в мире. Их регистрируют в Европе, Азии, Африке, Америке и в Австралии. Ведущим фактором широкого распространения является практически неконтролируемый резервуар инфекции в природе среди диких птиц. Циркулируя в природной среде, возбудитель хламидиоза наиболее интенсивно распространяется по путям миграции диких птиц на территории их зимовья, гнездовий и линьки, формируя природные очаги инфекции [Кирьянов, 1990].

Это создает постоянную угрозу возникновения спорадических случаев или вспышек заболевания, приводящих к гибели сельскохозяйственных животных и птицы, патологии их воспроизводительных органов, абортам, рождению мертвого или нежизнеспособного приплода. Помимо этого, больные животные часто становятся источником инфицирования работников животноводческих хозяйств и птицеферм [Обухов, 1999].

Патологический процесс при хламидийной инфекции может локализоваться в мочеполовой системе, во всех отделах дыхательных путей, в органе зрения, печени, суставах, головном мозге [Кочетова, 2010]. Формирование очага поражения в организме зависит от путей инфицирования, локализации первичного очага инфекции, вида возбудителя [Гранитов, 2000].

В доступной нам литературе встречаются единичные работы, посвященные изучению патологии печени и почек при хламидиозе животных, которые носят фрагментарный характер [Storz, 1971; Suwa, 1990]. По данным научных разработок, обязательным признаком хламиди-оза является иммунная нефропатия [Митрофанов, 2001].

Целью нашей работы явилось изучение особенности электронно-микроскопической структуры печени и почек у лабораторных крыс при экспериментальной хла-мидийной инфекции, вызванной внутрибрюшинным введением Chl. рsittaci.