Амидазный домен эндолизина стафилококкового фага 2638А, вызывающий лизис Staphylococcus aureus

1. Рекомбинатная ДНК, кодирующая антимикробную молекулу фермента пептидогликангидролазы, обладающую специфичностью и экзолитической активностью в отношении пептидогликана клеточных стенок интактных клеток S. aureus, при этом заявленная ДНК кодирует полноразмерный или укороченный вариант эндолизина 2638А.
2. ДНК по п. 1, где ДНК указанного полноразмерного эндолизина 2638А включает мутацию в кодоне, который начинается с позиции 180 последовательности эндолизина 2638А.
3. ДНК по п. 2, где указанный эндолизин 2638А является эндолизином 2638А (1-180 Mut-486).
4. ДНК по п. 3, имеющая последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1.
5. ДНК по п. 1, где указанный укороченный эндолизин 2638А имеет амидазный домен и SH3b связывающий домен.
6. ДНК по п. 5, где указанный укороченный эндолизин 2638А является эндолизином 2638А (139-486) и эндолизином 2638А (180-486), которые включают полноразмерный амидазный домен и полноразмерный SH3b домен.
7. ДНК по п. 6 включающая последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3 соответственно.
8. ДНК по п. 1, где указанный укороченный эндолизин 2638А несет CHAP домен.
9. Конструкт, включающий ДНК по п. 1, где указанная ДНК включает промотор, который обеспечивает экспрессию эндолизина в клетках хозяина.
10. Конструкт, включающий ДНК по п. 6, где указанная ДНК включает промотор, который обеспечивает экспрессию эндолизина в клетках хозяина.
11. Клонирующий вектор, включающий конструкт по п. 9 или по 10.
12. Вектор экспрессии, включающий конструкт по п. 9 или по 10.
13. Хозяйские клетки, трансформированные ДНК согласно п. 1.
14. Хозяйские клетки, трансформированные конструктами по п. 9 или 10.
15. Хозяйские клетки по п. 13 или 14, где указанные хозяйские клетки являются одноклеточным или многоклеточным организмом, в который конструкт согласно изобретению может быть введен так, чтобы продуцировать антимикробный фермент эндолизин.
16. Метод создания рекомбинантного белка эндолизина, указанный метод включает шаги: а) введение в хозяйские клетки ДНК, кодирующую белок эндолизина; b) культивирование указанных клеток в условиях, подходящих для экспрессии указанного белка; с) очистка указанного белка после продукции в клетках хозяина.
17. Белок эндолизина, обладающий специфичностью и экзолитической активностью в отношении пептидогликана клеточных стенок интактных клеток S. aureus и коагулазо-негативных стафилококков (CNS), указанные CNS включают S. chronogenes, S. epidermis, S. hyicus, S. simulans, S. warneri, и S. xylocus, где указанный белок является эндолизином 2638А.
18. Белок по п. 17, где указанный белок является рекомбинантным очищенным эндолизином 2638А.
19. Белок по п. 17, где указанный белок является эндолизином 2638А, имеющим мутацию в кодоне, который начинается с позиции 180 последовательности эндолизина 2638А.
20. Белок по п. 19, где указанный эндолизин 2638А является эндолизином 2638А (1-180 Mut-486).
21. Белок по п. 20, имеющий последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4.
22. Укороченный вариант белка эндолизина 2638А, где указанный укороченный вариант белка является эндолизином 2638А (139-486) или эндолизином 2638А (180-486), включающих полноразмерный амидазный домен и полноразмерный SH3b домен.
23. Белки по п. 22, имеющие последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6, соответственно.
24. Композиция пригодная для лечения заболеваний, вызванных мульти-резистентными стафилококками, где указанная композиция включает полноразмерный эндолизин 2638А и соответствующий фармацевтический носитель.
25. Композиция пригодная для лечения заболеваний, вызванных мультирезистентными стафилококками, где указанная композиция включает белок по п. 19 и соответствующий фармацевтический носитель.
26. Композиция пригодная для лечения заболеваний, вызванных мультирезистентными стафилококками, где указанная композиция включает белок по п. 20 и соответствующий фармацевтический носитель.
27. Композиция пригодная для лечения заболеваний, вызванных мультирезистентными стафилококками, где указанная композиция включает белок по п. 21 и соответствующий фармацевтический носитель.
28. Композиция пригодная для лечения заболеваний, вызванных мультирезистентными стафилококками, где указанная композиция включает белок по п. 22 и соответствующий фармацевтический носитель.
29. Композиция пригодная для лечения заболеваний, вызванных мультирезистентными стафилококками, где указанная композиция включает белок по п. 23 и соответствующий фармацевтический носитель.
30. Метод лечения инфекции отдельного организма, вызванной мультирезистентным стафилококком, включает: введение указанному отдельному организму эффективной дозы композиции, соответствующей одному из пп. 24-29, где указанная композиция включает очищенный белок эндолизина, обладающий специфичностью и экзолитической активностью в отношении пептидогликана клеточных стенок интактных стафилококков и где указанное введение композиции является эффективным для лечения инфекций, вызванных указанными мультирезистентными стафилококками.
31. Метод лечения маститов у животных включает: введение указанному животному организму эффективной дозы композиции, соответствующей одному из пп. 24-29, где указанная композиция включает очищенный белок эндолизина, обладающий специфичностью и экзолитической активностью в отношении пептидогликана клеточных стенок мастит-вызывающих бактерий, где указанные мастит-вызывающие бактерии являются интактными Staphylococcus aureus и коагулазо-негативными стафилококками (CNS), где указанные CNS включают S. chromogenes, S. epidermidis, и S. simulans и где указанное введение композиции является эффективным для уменьшения осложнений от указанных маститов.