Цитокинотерапия

Медицинская Иммунология 2003, Т.5, №3-4 ©2003, СПб POP А АКИ

ЦИТОКИНОТЕРАПИЯ

ПРИМЕНЕНИЕ БЕГАЛ ЕЙКИНА В ЛЕЧЕНИИ ВИРУСНЫХ КЕРАТОКОНЪЮНКТИВИТОВ

Бекмуратова З.Т., Янгиева Н.Р., Урманова Ф.М., Аббасханова Н.Х.

Первый ташкентский государственный медицинский институт, Ташкент, Узбекистан

В последнее время в научной медицинской литературе появились сообщения об успешном применении препарата Беталейкин при различных воспалительных заболеваниях в качестве иммуностимулятора. Учитывая тот факт, что лечение воспалительных заболеваний глаз, особенно вирусной этиологии, является актуальной проблемой офтальмологии, нами проведено исследование клинической эффективности Беталейкина в лечении герпетических и аденовирусных заболеваний переднего отрезка глаза.

Материал и методы исследования. В исследование было включено 38 больных в возрасте от 20 до 60 лет, из них 18 больных герпетическим кератитом (ГК) и 20 больных аденовирусным кератоконъюнктивитом (АВКК). Диагноз устанавливался клинически и подтверждался лабораторно (методом ИФА, ИФМ). Из 18 больных ГК Беталейкином было пролечено 10 человек, 8 больных было пролечено по общепринятой методике. В свою очередь больные АВКК также были разделены на две группы: основную группу, в которой применялся Беталейкин, составило 12 больных, у 8 больных контрольной группы Беталейкин в комплексном лечении не применялся.

Беталейкин применяли в виде форсированных инстилляций в конъюнктивальный мешок в дозе 2,5 нг (0,5 мл раствора) ежедневно в течение 5-7 дней. Для получения необходимого раствора содержимое ампулы (1000 нг) растворяли в 1 мл стерильного изотонического 0,9% раствора натрия хлорида и доводили общий объем раствора до 200 мл изотоническим 0,9% раствором натрия хлорида. Затем раствор набирался в 1,0 г одноразовые шприцы по 0,5 мл и хранился в замороженном состоянии.

Результаты и обсуждение. У всех больных ГК, получавших Беталейкин, был получен положительный эффект, выражавшийся в купировании воспалительного процесса в среднем на 11,2±0,8 день. При этом улучшение процесса, которое отмечалось в виде начала резорбции инфильтратов, уменьшении отека роговицы и уменьшении субъективных симптомов, у больных этой группы отмечалось уже на 2-3 день от начала лечения. Срок лечения в контрольной группе больных ГК составил в среднем 15±1,3 дней.

Аналогичные результаты были получены и при применении Беталейкина у больных АВКК. Средняя продолжительность лечения больных основной группы составила 10,4± 1,0 дней, в то время как лечение больных в контрольной группе длилось 14±1,2 дней. Кроме того, объективное и субъективное улучшение воспалительного процесса в глазах больные АВВК, получавшие инстилляции Беталейкина, отмечали уже на 1-2 сутки от начала лечения, в то время, как у больных контрольной группы аналогичный эффект отмечался лишь на 4-5 сутки.

Надо отметить, что применение Беталейкина не вызывало побочных действий и хорошо переносилось больными.

Выводы. Полученные данные свидетельствуют о высокой эффективности, хорошей переносимости препарата Беталейкин и обосновывают целесообразность его применения в комплексном лечении больных с вирусными поражениями переднего отрезка глаз.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ И КЛИНИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ИНТЕРЛЕЙКИНА-10 В КАЧЕСТВЕ МЕСТНОГО ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩЕГО И РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО СРЕДСТВА

Варюшина Е.А.. Конусова В.Г.. Котов А.Ю., Анциферова М.А., Александров Г.В., Синева С.А., Демьянов А.В., Саламатов А.В., Баринов О.В., Москаленко В.В., Петропавловская О.Ю.,

Тимчук Л.Э., Симбирцев А.С., Кетлинский С.А.

Государственный научный центр НИИ особо чистых биопрепаратов, Санкт-Петербург, Россия

Как известно, интерлейкин-1 (IL-1) является одним из важнейших медиаторов иммунного ответа, воспаления и острофазового ответа. В очаге воспаления IL-ip продуцируется в ответ на проникновение инфекции или повреждение ткани, и обладает активностью в отношении большинства клеток организма. Практически все воспалительные процессы протекают на фоне изменения продукции данного цитокина, IL-1P контролирует все этапы развития местного воспалительного процесса. Кроме иммуностимулирующего действия, IL-ip может обладать также ранозаживляющим действием. В связи с этим, в настоящее время одним из главных вопросов в изучении биологии IL-ip является перспектива использования данного медиатора в качестве иммунотерапевтического и ранозаживляющего средства. Клинические испытания IL-ip продемонстрировали его высокую эффективность при системном применении. В последние годы получило развитие местное применение IL-ip, которое позволяет достичь значительных клинических эффектов при отсутствии системной токсичности. Однако исследования роли IL-ip в местной воспалительной реакции in vivo на животных и клинические работы пока носят единичный характер. Целью данной работы является клинико-экспериментальное обоснование применения IL-ip как местного иммунотерапевтического и ранозаживляющего средства. Экспериментальная часть выполнена на мышиной модели осложненного заживления кожных ран. Исследовали влияние мази, содержащей IL-ip в дозе 50 нг/мл, на основные параметры заживления в динамике. Показано, что при применении IL-ip происходит ускорение заживления ран в эксперименте. Не отмечено изменений в хемилюминесценции крови в группе животных с применением IL-ip. Клиническая часть работы отражает изучение местных факторов защиты при осложненном течении местных воспалительных процессов и влияния IL-1P на данные параметры. Исследовали функциональную активность лейкоци-

тов, продукцию цитокинов, проводили цитологическое исследование содержимого очага воспаления у больных с хроническими воспалительными заболеваниями дыхательной системы и при плохо заживающих ранах в динамике лечения препаратом 1Ь-1 (3. Также изучали ряд показателей системного иммунитета. Полученные данные свидетельствуют об активации местных факторов защиты при применении 1Ь-1р. Не было отмечено влияния 1Ь-1Р на исследованные показатели иммунитета в крови этих пациентов. Полученные данные служат обоснованием новых подходов к использованию рекомбинантного 1Ь-1(3 в качестве местного иммуностимулирующего средства при вялотекущих и осложненных воспалительных процессах у человека с учетом механизмов действия препарата, а также для выбора оптимальных доз, схем и длительности лечения.

ИЗМЕНЕНИЕ УРОВНЯ ЦИТОКИНОВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ПРОТИВОВИРУСНОГО ПРЕПАРАТАФОСПРЕНИЛ ПРИ ГРИППОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ У МЫШЕЙ

Григорьева Е.А., Пронин А.В., Деева А.В., Ожерелков С.В., Санин А.В.,

Наровлянский А.Н.

НИИЭМим. Н.Ф. Гамалеи, г Москва

Фоспренил - новейший противовирусный препарат, применяемый для лечения многих вирусных инфекций домашних животных. Ранее показано и его защитное действие при гриппозной инфекции у мышей.

Цель данной работы: выявить возможные механизмы влияния препарата на течение гриппозной инфекции у мышей С В А.

Материалы и методы. Заражение производилось вирусом гриппа (ВГ), штамм А/АюЫ/2/68 интраназально, под легким эфирным наркозом в дозе 5ЬБ50 Исследованы 4 группы мышей: 1. Контрольная; 2. Мыши, которым был интраназально введен Фоспренил (5 мкл/мышь); 3. Мыши, инфицированные ВГ; 4. Мыши, которым ВГ вводили вместе с Фоспренилом. Через сутки после заражения исследовали активность ЫК-клеток, уровень сывороточного ТОТ, а также способность спленоцитов вырабатывать факторы с активностью 1Ь-1, 1Ь-2 и 1РН - спонтанно и под действием Кон А.

Влияние Фоспренила на активность ЫК-клеток и уровень сывороточного ТОТ, исследовали на клетках Ь-929. В качестве цитотоксических клеток использовали спле-ноциты.

Исследование факторов с активностью 1Ь-1, 1Ь-2 и 1РН проводили в супернатантах спленоцитов, культивированных с добавлением Кон А и без него. Продукцию 1Ь-1 тестировали на тимоцитах с добавлением ФГА и последующим внесением за 16 часов до окончания тестирования 3Н - тимидина.

Результаты. Было показано достоверное повышение активности ЫК-клеток в группе 4, по сравнению с группой

3 (ИЦ 51,8 и 45% соответственно), тогда как ИЦ в контроле составлял 32,8%, а в группе 2 - 34,5%.

Наибольшая выработка ТОТ наблюдалась в группе 3, а в группе 4 уровень ТОТ снижался до контрольных значений. Уровень ТОТ у мышей группы 2 был незначительным.

Спонтанная продукция 1Ь-1 была наиболее высокой в группе 4, что в два раза выше, чем в группах 2 и 3. После стимуляции клеток Кон А наибольшая активность 1Ь-1

зарегистрирована в группе 2, а группы 3 и 4 показали в 2,5 раз более низкую активность.

Тестирование супернатантов на наличие IL-2 проводили на КонА-бластах. Наивысшая спонтанная выработка фактора с активностью IL-2 наблюдалась в группах 3 и 4, что примерно в 2 раза выше, чем в группе 2. После культивирования спленоцитов с Кон А в супернатантах выявлена высокая активность IL-2 в группе 2. В группах 3 и 4 активность была значительно ниже.

В группе 3 не регистрируется фактор с активностью IFN, тогда как в группе 4 IFN был обнаружен. После стимуляции спленоцитов Кон А в группе 3 IFN регистрировался на том же уровне, что и в группе 4.

Заключение. Таким образом, можно сделать вывод, что Фоспренил является активным иммуномодулирующим препаратом, который значительно изменяет ответ организма на вирусную инфекцию, что проявляется в изменении способности иммунных клеток продуцировать цитокины.

ДИНАМИКА УРОВНЯ TNFaY ДЕТЕЙ С АТОПИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ НА ФОНЕ ИММУНОКОРРЕКЦИИ

Гущина Я.С- Маркелова Е.В.,

СуровенкоТ.Н.

ВГМУ, Владивосток

В настоящее время применению иммунокорригирующей терапии при атопической бронхиальной астме (БА) уделяется большое внимание. Целью ее проведения является восстановление факторов естественной защиты дыхательных путей, коррекция иммунных нарушений.

Нами было обследовано 12 детей в возрасте от 4 до 16 лет с атопической БА разной степени тяжести, в анамнезе которых перенесенные пневмонии, бронхиты. У данной группы пациентов, в периоде нестойкой ремиссии, в комплексное лечение был включен иммунокорригирующий препарат Ронколейкин (rIL-2) в дозе 125 тыс.ед. подкожно трехкратно с интервалом 72 часа и однократно ингаляци-онно в той же дозе через небулайзер (приоритетная справка 2002115541 от 10,06.02., получено положительное решение на выдачу патента). Трем пациентам, в ремиссию, дополнительно введена вакцина Пневмо-23. Уровень содержания TNFa, одного из наиболее активных провоспали-тельных цитокинов, в сыворотке крови пациентов определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа с применением реактивов фирмы « R & D diagnostics Inc.» (США).

В результате исследований клинически было отмечено значительное снижение тяжести обострений БА, удлинение периода ремиссии, уменьшение дозы и спектра базисной терапии. Зафиксировано снижение содержания TNFa в сыворотке крови после применения Ронколейки-нас 16,41±0,21 pg/ml до 10,25±0,34 pg/ml. (р<0,05). У двоих детей с дополнительной вакцинацией Пневмо-23 уровень этого цитокина стал еще ниже (с 12,62 pg/ml. до 1,98 pg/ ml и с 7,93 pg/ml до 3,84 pg/ml). У одного ребенка после вакцинации содержание TNFa существенно не изменилось.

Таким образом, применение Ронколейкина снижает уровень провоспалительного цитокина - TNFa, а дополнительная вакцинация Пневмо23 у детей-астмати-ков, с перенесенной пневмонией, возможно, усиливает этот эффект.

ВЛИЯНИЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗЫ (СОД), РЕЦЕПТОРНОГО АНТАГОНИСТА ИНТЕРЛЕЙКИНА 1 (АРИЛ) И ЕГО МОДИФИЦИРОВАННОЙ ФОРМЫ (М-АРИЛ) НА ПРОЯВЛЕНИЕ ОСТРОГО ВОСПАЛЕНИЯ

ДобрииаВ.П.. Чурилова И.В., Мартюшин С.В., Ищенко А.М.

Государственный научный центр - Гос НИИ особо чистых биопрепаратов, Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время в семейство 1Ь-1 объединены три белка - 1Ь-1а, 1Ь-1 (3, и рецепторный антагонист интерлейкина 1,1Ь-Ша (препарат Арил), которые имеют вместе с активными радикалами кислорода ведущее значение в инициировании и развитии острого или хронического инфекционного или иммунного воспаления. Рекомбинантный препарат Арил интенсивно изучается в эксперименте и клинике при лечении ревматоидного артрита (РА) и сепсиса, а новая модификация М-Арил пока не имеет достаточных экспериментальных исследований. Рекомбинантный СОД представляется особенно интересным в изучении терапевтического и профилактического воздействия на различные виды воспаления.

Целью исследований являлась отработка различных доз, схем и курсов назначения препаратов Арил, М-Арил и СОД в монотерапии, а также определение оптимальных возможностей их сочетанного применения для лечения и профилактики острого каррагенанового воспаления в эксперименте.

Работа проведена на 150 линейных мышах-самцах, гибридах БВА/С57 В1аск. Каждой мыши внутрибрюшин-но вводили различные дозы монопрепаратов в чистом виде или в сочетании различных доз при изучении терапевтического действия - спустя 30-40 минут после интраплан-тарного введения 1% раствора каррагенана, а при исследовании возможного профилактического действия рекомбинантных лекарственных средств - за 30-40 минут до аналогичного введения каррагенана в аналогичных объемах

0,1 и 0,05 мл физиологического раствора. Количественные изменения выраженности степени отека конечностей в динамике наблюдений производили прямым измерением (в мм) и по объему вытеснения жидкости в мерной пробирке на 1,3 и 5 часов после инъекции каррагенана, а также в баллах по описанной методике А1опг1 Т. е.а., 1998.

Установлено, что профилактическим антиэкссудатив-ным действием обладал только препарат СОД, но не Арил и его модифицированная форма.

При исследовании терапевтической активности препаратов наибольшее количество достоверных различий между группами были получены на первом сроке наблюдений после инъекции (1 час). Минимальная антиэкс-судативная активность была зафиксирована для групп животных, которым вводили Арил в чистом виде (дозы

4 - 40 мкг на мышь). Значения, полученные для Арила, достоверно отличались практически от всех опытных групп. Минимальную воспалительную и экссудативную реакции отмечали для группы, которой вводили М-Арил в дозе 4 мкг. Интересно, что среднее значение, полученное для этой группы, достоверно отличалось от средних значений в группах, получавших другие дозы Арила и М-Арила в чистом виде или в сочетании с СОД 1,2 мкг. В группах животных, получивших комбинированные сочетания этих же веществ (в том числе и с СОД) достоверные различия с группой М-Арил 4 мкг не зафиксированы.

На третий час после инъекции количество достоверно отличающихся групп резко снижалось. Минимальные значения (M-AR.IL 4мкг + СОД) достоверно не отличались ни от одной из опытных групп. Любопытно, что для группы М-АШЬ 4 мкг на этом сроке были получены максимальные значения, которые достоверно отличались от групп с разными дозами Арила в сочетании с СОД. На пятом часу результаты динамично выравнивались и достоверность различий сглаживались. Аналогичная картина наблюдалась и при изучении динамики антиэкссуда-тивной активности при введении 1% каррагенана в объеме 0,05 мл.

В заключение можно констатировать, что рекомбинантный СОД эффективно профилактировал и оказывал выраженное супрессивное воздействие на экссудацию и развитие воспаления в монотерапии и в сочетании с 1Ь-Ша.

Препараты Арил и М-Арил в монотерапии оказывали только терапевтическое (но не профилактическое) анти-экссудативное воздействие на развитие острого каррагенанового воспаления с более выраженной активностью у М-Арила.

Сочетанное применение рекомбинантных препаратов СОД, Арила и М-Арила потенцировало их фармакологическое воздействие и открывает перспективы повышения эффективности терапии и профилактики воспаления.

ВЛИЯНИЕ ЦИТОКИНОВОЙ ТЕРАПИИ НА ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ ВНЕБОЛЬНИЧНЫХ ПНЕВМОНИЯХ

Козлов В.А., Гресь С.Н.. Розентул А.Ш., Смолянинов А.Б.

Институт клинической иммунологии СО РАМН, г.Новосибирск. Военно-медицинская академия, г.Санкт-Петербург, Россия

Внебольничная пневмония (ВП) - одно из наиболее распространенных заболеваний органов дыхания. Заболеваемость составляет 8-15 случаев на 1000 человек населения. У больных ВП с тяжелым течением, в связи с выраженной интоксикацией отмечены изменения ряда психофизиологических показателей на фоне проявлений иммунодефицита.

Обследовано 28 больных ВП с тяжелым течением. В острой фазе болезни у 10,7% больных наблюдался делири-озный синдром в форме галлюцинаторных наплывов, а у 17,9% пациентов различного рода вестибулопатии (кружение, перемещение тела в пространстве) в сочетании с сенестопатиями. В ряде случаев (7,9%) у лиц с преморбид-ной агрессивной дезадаптированностью, галлюцинации сопровождаются психомоторным возбуждением и агрессией. В клинической картине ВП наблюдался астенический феномен с различными синдромальными оттенками (60,7%), которые зависят от преморбидных индивидуально-психологических особенностей больных. При этом преобладали депрессивный (14,3%), тревожно-фобический (28,6%), ипохондрический компоненты (25,0%) либо их сочетания. В то же время у части больных ВП (особенно с выраженными преморбидными тенденциями спонтанности и лабильности) к концу лихорадочной фазы может наблюдаться в 35,7% случаев эйфорическая недооценка тяжести заболевания (анозогнозия и расторможенность). У 67,9% больных ВП депрессивный компонент осложняется реакцией на лечение, усиливается тревожность в свя-

зи с необходимостью длительного нахождения в стационаре и соблюдения определенного режима. У лиц с истеро-идной акцентуацией (39,3%) на фоне астенического состояния может наблюдаться феномен психогенного индуцирования, с появлением симптоматики, индуцированной окружающими больными.

21 пациенту ВП после оценки иммунологического статуса с целью иммунокорригирования на фоне антибиоти-котерапии применяли интерлейкин-2 ронколейкин («Био-тех») в дозе 500,000 МЕ, через 2-3 дня, № 3-4. При этом отмечено, что на фоне облегчения клинического течения ВП проявления астенического синдрома (тревожность, депрессия) не достигали дезадаптирующих значений и к моменту выписки из стационара определялись лишь в форме заостренностей по соответствующим шкалам. При среднетяжелых формах ВП с невыраженной или кратковременно выраженной общей интоксикацией и лихорадкой определялись их нормальные значения. Применение ци-токиновой терапии с помощью ронколейкина приводит к нормализации психофизиологического статуса у лиц, страдающих ВП с тяжелым течением.

ОСОБЕННОСТИ ИЗМЕНЕНИЙ ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА БОЛЬНЫХ ИНФАРКТОМ МИОКАРДА ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ЦИТОКИНОВОЙ ТЕРАПИИ

Козлов В. А.. Розентул А.Ш.. Смолянинов А.Б.

Институт клинической иммунологии СО РАМН, г.Новосибирск. Военно-медицинская академия, городская больница № 20. г.Санкт-Петербург, Россия

Инфаркт миокарда (ИМ) является одной из главных причин смертности населения цивилизованных стран. С учетом того, что одной из важных составляющих объек-

тивного состояния больных данного профиля являются показатели, характеризующие их психофизиологический статус, представляется актуальным изучение их динамики, в частности, в процессе проведения терапии с использованием новых лечебных методик. Под наблюдением находилось 8 больных ИМ, получавших в составе комплексной терапии аутологичные стволовые клетки «С034+С038-», выброс которых в периферическую кровь был стимулирован гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (Г-КСФ) - граноцит «АуепЫв» и интерлейкином-2 (1Ь-2) - ронколейкин («Биотех»). При поступлении больных особенности эмоционально-поведенческих доминант устанавливались методом контент-анализа, в последующий период пребывания в стационаре психодиагностическое обследование проводилось с использованием многофакторного личностного опросника «Адаптивность». Контрольную группу составили 8 больных ИМ, которым проводилось базовое лечение без применения клеточных технологий. Эмоционально-поведенческая составляющая указанных пациентов ИМ, по данным проведенного нами контент-анализа, характеризовалась повышенной раздражительностью, нетерпеливостью, агрессивностью, враждебностью, высокой тревожностью и страхом смерти. При этом две последние характеристики значительно преобладали над остальными (табл.).

В группе больных, получавших в составе комплексной терапии ИМ аутологичные стволовые клетки «СВ34+С038-», выброс которых стимулирован Г-КСФ - граноцит и 1Ь-2 - ронколейкин, наблюдалось достаточно быстрая (в течение 8 дней) положительная динамика личностного адаптационного потенциала по критериям поведенческой регуляции, астенических реакций и суицидального риска. В контрольной группе этот процесс протекал значительно медленнее, и отдельные проявления астенических реакций сохранялись к моменту выписки из стационара. Динамика основных социально-психологи-

ЭМОЦИОНАЛЬНО-ПОВВДЕНЧЕСКИЕ ДОМИНАНТЫ У БОЛЬНЫХ ИНФАРКТОМ МИОКАРДА

Показатели Всего

Абс. %

Тревожность 15 93.7

Страх смерти 14 87,5

Раздражительность, нетерпеливость 6 37,5

Агрессивность, враждебность 3 18,8

в II111

ПР АсР ПсР СР

При поступлении  При выписке

При поступлении НПри выписке

Рис.1. Динамика устойчивости по критериям показателей личностного адаптационного потенциала больных ИМ в процессе лечения аутологичными стволовыми клетками «С034+С038-» (ПР - поведенческая регуляция,

АсР - астенические реакции, ПсР - психотические реакции, СР - суицидальный риск): А - с использованием Г-КСФ, Б - на фоне стандартной терапии.

ческих и клинико-психологических составляющих обследованных нами больных ИМ представлена на рисунке 1.

Таким образом, полученные нами первые результаты изучения психологических особенностей больных ИМ при лечении аутологичными стволовыми клетками «CD34+CD38-» представляют несомненный клинический интерес и требуют продолжения дальнейших исследований.

ЭХОКАРДИОГРАФИЧЕСКИЙ И ТЕЛЕМЕТРИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ В ДИАГНОСТИКЕ БОЛЬНЫХ ИНФАРКТОМ МИОКАРДА ПРИ ЛЕЧЕНИИ ГРАНУЛОЦИТАРНЫМ-КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩИМ ФАКТОРОМ И ИНТЕРЛЕЙКИНОМ-2

Козлов В.А., Смолянинов А.Б.. Годунова И.В.. Порхал Е.Н., Козлов В.В.

Институт клинической иммунологии СО РАМН, г.Новосибирск, Военно-медицинская академия, городская больница № 20, г.Санкт-Петербург, Россия

Целью нашей работы было определение влияния аутологичных стволовых клеток, выброс которых стимулирован гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (Г-КСФ) и интерлейкином-2 (IL-2) на течение инфаркта миокарда (ИМ), при помощи эхокардиографии и телеметрического мониторинга «Динамика-100». Нами исследованы 8 больных ИМ (в возрасте от 50 до 69 лет). Лечение ИМ у этих больных проводили при помощи базовой терапии и терапии аутологичными стволовыми клетками «CD34+CD38-», выброс которых в периферическую кровь был стимулирован Г-КСФ - граноцит «Aventis» и IL-2 -ронколейкин («Биотех»), что способствовало более быстрому течению восстановительного периода. Группа сравнения составила 24 пациента ИМ, которые получали только базовую терапию.

Раннее выявление дисфункции миокарда при ИМ исследовали при помощи эхокардиографии. Формирование сердечной недостаточности происходит на фоне диастолической дисфункции миокарда, которая является процессом отражения ремоделирования левого желудочка. О наличии систолической дисфункции судили по снижению фракции выброса. Эффективность лечения оценивали по функциональному классу стенокардии (NYHA), сердечной недостаточности (АСС/АНА, 2001), левожелудочковой дисфункции, изменению пороговой мощности выполненной нагрузки, наличию осложнений (постинфарктная стенокардия, аневризма сердца, нарушения ритма), а также развитию реинфарктов и смертельных исходов.

У пациентов ИМ, которым вводили аутологичные стволовые клетки отмечалось улучшение глобальной сократимости левого желудочка, фракция укорочения до лечения составляла 26,1+0,56%, а после лечения 32,2+0,95% (р<0,05). Фракция выброса изменилась у группы исследования больных ИМ с 52,1±1,3% в начале лечения до 59,4±1,1% (р<0,001) в конце лечения. В группе контроля таких изменений не наблюдалось. Г-КСФ (граноцит) и IL-2 (ронколейкин) уменьшает зону ИМ на 48,4±4,3%, степень дилатации левого желудочка на 29,8±2,6%, увеличивает глобальную фракцию выброса левого желудочка, значительно улучшает гемодинамику.

В группе больных, получавших в составе комплексной терапии ИМ аутологичные стволовые клетки «CD34+CD38-», выброс которых стимулирован Г-КСФ и

IL-2, наблюдалось достаточно быстрая положительная динамика при телеметрическом мониторинге. До лечения у больных наблюдался срыв адаптации (1,2±0,1%) при норме от 50%, истощение энергетических ресурсов и резервов центральной и вегетативной регуляции, энергетический дисбаланс, нервный стресс и признаки депрессии, нарушение вегетативного гомеостаза в сторону резкого преобладания тонуса симпатического отдела вегетативной нервной системы. После проведенного лечения ИМ аутологичными стволовыми клетками улучшилось функциональное состояние организма - общая адаптация увеличилась до 29,9± 1,3%, увеличились энергетические ресурсы и резервы центральной и вегетативной регуляции.

КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ИНФАРКТА МИОКАРДА ПРИ ЛЕЧЕНИИ ГРАНУЛОЦИТАРНЫМ-КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩИМ ФАКТОРОМ И ИНТЕРЛЕЙКИНОМ-2

Козлов В.А., Смолянинов А.Б.. Козлов В.В.

Институт клинической иммунологии СО РАМН, г.Новосибирск. Военно-медицинская академия, городская больница № 20, г.Санкт-Петербург, Россия

Инфаркт миокарда (ИМ) наиболее частое проявление ишемической болезни сердца и одна из наиболее частых причин смерти в развитых странах. В США ежегодно ИМ развивается у 1000000 человек, умирает около 300000 больных, причем около 1500000 смертей приходится на первый час от начала заболевания (АНА, 1999). В России распространенность ИМ составляет 500 на 100000 среди мужчин и 100 на 100000 среди женщин. Целью нашей работы было изучение влияния мобилизированных аутологичных стволовых клеток, выброс которых стимулирован гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (Г-КСФ) граноцит («Aventis») и интерлейкином-2 (IL-2) ронколейкин («Биотех) на клиническое течение ИМ.

Под нашим наблюдением находилось 32 пациента ИМ. Средний возраст больных составил 55,8±11,4 года. 8 больным ИМ (группа исследования) лечение проводили при помощи базовой терапии и терапии мобилизированными аутологичными стволовыми клетками. 24 пациентам ИМ (группа контроля) проводилось традиционное лечение. Динамику изменения количества стволовых клеток крови оценивали по данным проточной цитометрии. Ее выполняли на проточном цитометре FACScan фирмы «Becton Dickinson» с использованием тройной комбинации прямых моноклональных антител CD34FITC/CD38 РЕ/ CD45 РегСР для определения CD34 CD38- клеток, LeucoGATE (CD45/CD14) для выделения лимфоцитарного гейта и изоптического контроля IgG, FITC/IgG2 РЕ/ CD45. У 5 пациентов группы исследования отмечался Q-инфаркт миокарда, а у 3 He-Q-иифаркт миокарда.

Мобилизация аутологичных стволовых клеток у больных группы исследования приводит к более благоприятному течению ИМ. Больные ИМ (группа исследования) находились на лечении в стационаре 16,5+2,1 суток,агруп-пы контроля 21,8±1,9 дня, дальнейшая реабилитация больных ИМ осуществлялась в кардиологическом санатории. В группе исследования отмечалось снижение смертности, летальный исход был только у 1 (12,5%) пациента. В то же время в группе контроля смерть в процессе лечения наступила у 29,2% больных. В группе исследования через 45 дней отмечалось уменьшение зоны ИМ на 48,4±4,3%, бо-

левой синдром в процессе лечения отмечался только у 2 (25%) пациентов. У 37,8% больных ИМ (группа исследования) на электрокардиограмме отмечены желудочковые экстрасистолы.

Таким образом, мобилизация аутологичных стволовых клеток Г-КСФ граноцит и 1Ь-2 ронколейкин у больных ИМ приводит к быстрому выздоровлению. Цитокиновая терапия ИМ приводит к более благоприятному течению и отсутствию осложнений.

ПРИМЕНЕНИЕ МОБИЛИЗИРОВАННЫХ ГРАНУЛОЦИТАРНЫМ-КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩИМ ФАКТОРОМ И ИНТЕРЛЕЙКИНОМ-2 АУТОЛОГИЧНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ЦИТОКИНОВОЙ ТЕРАПИИ ИНФАРКТА МИОКАРДА

Козлов В.А., Смолянинов А.Б.. Никитин В.Ю.

Институт клинической иммунологии СО РАМН, г.Новосибирск. Военно-медицинская академия, городская больница № 20, г.Санкт-Петербург, Россия

Инфаркт миокарда (ИМ) - одна из крупных проблем современной медицины. Постоянно идет поиск новых путей предупреждения развития и лечения ИМ. Предпринимались попытки восстановления инфарцированных участков миокарда путем трансплантации миобластов скелетной мускулатуры, фетальных клеток (О.ОгНс е1 а1., 2001). Положительный эффект отсутствовал из-за неспособности трансплантированных клеток трансформироваться, структурно и функционально интегрироваться в нормальную ткань миокарда. Была обнаружена способность стволовых клеток костного мозга к росту и превращению (дифференциации) во «взрослые» кардиомиоциты.

Мы изучали влияние мобилизированных аутологичных стволовых клеток, выброс которых стимулировали гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (Г-КСФ) граноцит («Ауеп^») и интерлейкином-2 (1Ь-2) ронколейкин («Биотех») при лечении ИМ. Нами получена приоритетная справка на изобретение: Способ лечения инфаркта миокарда, № 2003100172 от 04.01.03.

Г-КСФ и 1Ь-2, являются цитокинами, которые регулируют дифференцировку и пролиферацию стволовых клеток СБ34 СБ38, мобилизируя их из костного мозга в кровь. У больных ИМ происходит вживление клеток СВ34 СВ38 в зону повреждения и некроза, что способствует восстановлению кардиомиоцитов, формированию вместо рубца полноценного миокарда. Граноцит и ронколейкин останавливают процессы ремоделирования сердца при инфаркте миокарда, восстанавливают систолическую дисфункцию сердца, увеличивая количество нормально функционирующих кардиомиоцитов, предотвращая процессы формирования рубцовой ткани на месте некроза, за счет мобилизации клеток СЭ34 С 038. Мобилизи-рованные клетки устремляются в поврежденную ткань, где они не только превращаются в кардиомиоциты, но и успешно интегрируются в окружающую жизнеспособную интактную ткань. Стволовые клетки, попадая в периин-фарктную зону, превращаются во взрослые кардиомиоциты, оплетаемые капиллярной сетью, то есть образуют полноценный миокард, структурно и функционально интегрированный в исходную ткань.

Под нашим наблюдением находилось 32 пациента ИМ. Средний возраст больных составил 55,8±11,4 года. 8 больным ИМ лечение проводили при помощи базовой терапии

и терапии мобилизированными аутологичными стволовыми клетками. 24 пациентам ИМ (группа контроля) проводилось традиционное лечение.

Таким образом, мобилизация стволовых клеток костного мозга может стать новой неинвазивной стратегией лечения сердечно-сосудистых заболеваний, направленной на регенерацию миокардиальной ткани, утраченной в результате ИМ. Бурное развитие фундаментальных научных исследований в области клеточной биологии привело к созданию отдельной научной дисциплины, известной как клеточная кардиомиопластика. Целью этого научного направления является разработка методов трансплантации клеток для лечения различных сердечно-сосудистых заболеваний. Предложенная нами новая клеточная технология доставки стволовых клеток к месту репарации - с помощью мобилизации стволовых клеток посредством инъекций цитокинов Г-КСФ и IL-2, может стать наиболее перспективным клиническим направлением в клеточной кардиомиопластике.

ОЦЕНКА ДИНАМИКИ КОЛИЧЕСТВА АУТОЛОГИЧНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПРИ ЦИТОКИНОВОЙ ТЕРАПИИ ИНФАРКТА МИОКАРДА

Козлов В.А.ЛТыганВ.Н.. Смолянинов А.Б., Никитин В.Ю.

Институт клинической иммунологии СО РАМН, г.Новосибирск;

Военно-медицинская академия, городская больница № 20, г.Санкт-Петербург, Россия

Мобилизированные стволовые клетки костного мозга способствуют репарации миокарда в зоне инфаркта, улучшая тем самым функцию сердца и прогноз заболевания. Целью работы было изучение динамики изменения уровня мобилизированных аутологичных стволовых клеток, выброс которых стимулирован гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (Г-КСФ) граноцит («Aventis») и интерлейкином-2 (IL-2) ронколейкин («Биотех») при цитокиновой терапии инфаркта миокарда (ИМ).

Под нашим наблюдением находилось 32 пациента ИМ.

8 больным ИМ (группа исследования) лечение проводили при помощи базовой терапии и терапии мобилизированными аутологичными стволовыми клетками. 24 пациентам ИМ (группа контроля) проводилось традиционное лечение. Динамику изменения количества стволовых клеток крови оценивали по данным проточной цитометрии. Ее выполняли на проточном цитометре FACScan фирмы «Becton Dickinson» с использованием тройной комбинации прямых моноклональных антител CD34FITC/CD38 PE/CD45 РегСР для определения CD34 CD38- клеток, LeucoGATE (CD45/CD14) для выделения лимфоцитарного гейта и изоптического контроля IgG, FITC/IgG2 РЕ/ CD45. У 5 пациентов группы исследования отмечался Q-инфаркт миокарда, а у 3 He-Q-иифаркт миокарда.

У больных ИМ исследовали уровень стволовых клеток периферической крови до лечения. Он составил по клеткам CD34 CD38 0,07±0,02%, CD34 CD38-0% при Q-инфаркте миокарда. При не-Ц-инфаркте миокарда CD34 CD38+ 0,15±0,02%, CD34+CD38- 0,02±0,001%. После стимуляции Г-КСФ граноцит уровень стволовых клеток составил CD34 CD38 0,71 ±0,04%, CD34 CD38-

0,58+0,05% (р<0,0,001)при Q-инфаркте миокарда. Прине-Q-инфаркте миокарда после стимуляции граноцитом уро-

вень клеток составил СБ34 СОЭ8 0,99±0,03%, С034+СБ38- 0,75+0,02% (р<0,05).

Таким образом, у больных ИМ в периферической крови отмечено отсутствие стволовых клеток при С)-инфарк-те миокарда и весьма незначительное количество при не-(^-инфаркте миокарда. Мобилизированные аутологичные стволовые клетки, выброс которых стимулирован Г-КСФ граноцит и 1Ь-2 ронколейкин был выражен в обоих случаях ИМ, но больше при не^-инфаркте миокарда.

РОНКОЛЕЙКИН В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ДЕКОМПЕНСИРОВАННЫМ БРУЦЕЛЛЕЗОМ

Курманова Г.М.. Жанкин А.А. *, КурмановаК.Б.**, Дуйсенова А.К.**

Научный центр гигиены и эпидемиологии М3 РК;

* * Казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова;

* * Алматинский государственный институт усовершенствования врачей, Алматы, Казахстан

Бруцеллез - особо опасное инфекционное заболевание из группы антропозоонозов, характеризующееся склонностью к хроническому течению с длительной персистенци-ей патогена, с высоким риском инвалидизации, что и обуславливает социальную значимость этой инфекции. Бруцеллёз занимает особое положение среди других инфекционных болезней из-за своеобразия возбудителя, а именно: высокая контагиозность или инфицирующая способность бруцелл; устойчивость их к неспецифическим факторам защиты; устойчивость микроба к действию ферментов ли-зосомального аппарата лейкоцитов, что даёт возможность размножаться внутриклеточно; ничтожно малая инактивирующая роль противобруцеллёзных антител. Несмотря на достигнутые успехи, современные методы лечения не всегда обеспечивают полную санацию организма от бруцелл. Решающее значение для исходов бруцеллёзного процесса в остром периоде болезни имеет своевременное использование комплексной терапии, включающей эффективные этиотропные средства в сочетании с иммуномодуляторами, направленными на повышение клеточного иммунитета и микробоцидной активности фагоцитов. При хроническом течении процесса благоприятный исход напрямую зависит от своевременной рациональной иммунокорригирующей терапии. Поскольку при бруцеллёзе формируется вторичное имунодефицитное состояние, которое характеризуется снижением абсолютного количества им-мунокомпетентных клеток и их функциональной несостоятельностью, то применение 1Ь-2 в комплексной терапии больных, особенно в хронический стадии болезни является патогенетически обоснованным. Препарат рекомбинантного П.-2 уже нашел широкое применение при инфекци-

онной патологии и является одним из наиболее перспективных препаратов класса цитокинов.

Эффективность рекомбинантного интерлейкина-2 при хроническом декомпенсированном бруцеллезе была оценена у 32 больных со следующими ведущими очаговыми проявлениями: полиартрит (7), полиартрит с бурситами и/или тендовагинитами (5), васкулит сосудов головного мозга (5), остеомиелит (трубчатых костей - 2; позвонков -3), спондиллит/спондилодисцит - 2, орхоэпидидимит -2, сальпингоофорит - 3, нейробруцеллез (полиомиелит - 2, лейкоэнцефалит - 1). У всех больных на момент начала лечения наблюдались умеренная лихорадка или субфебрилитет, полиартронейромиалгии, слабость, потливость, головные боли, утомляемость. У трети больных была лим-фоаденопатия, гепатоспленомегалия.

Рекомбинантный человеческий интерлейкин-2 (Ронколейкин, «Биотех», Санкт-Петербург) применяли на фоне этиотропной терапии (спустя 5-7 дней после начала приема ципрофлоксацина по 1000 мг/сут) по 0,5 млн. п/к с интервалом 72 часа от 3 до 10 инъекций. Число инъекций зависело от тяжести и выраженности очаговых проявлений, а также их динамики в ответ на лечение. Длительность антибактериальной терапии составила 21 день, у больных остеомиелитом и нейробруцеллезом и у 1 больного с тяжелым полиартритом - 30 дней. Дополнительно больные получали противовоспалительные препараты.

У больных при применении Ронколейкина на первые

1-2-3 инъекции наблюдалось усиление воспалительных проявлений, у части больных отмечалось повышение температуры тела в первые часы после введения препарата. Далее наблюдалось быстрое купирование основных клинических симптомов, по сравнению с контрольной группой быстрее исчезали симптомы интоксикации, полиарт-ронейромиалгия, потливость, уменьшались размеры периферических лимфоузлов, нормализовывались размеры печени и селезенки, исчезали воспалительные изменения суставов, восстанавливалась работоспособность. У больных остеомиелитом в довольно короткие сроки (1-2 недели) исчезало отделяемое из натечников, сами натечники уменьшались в размерах или полностью ликвидировались. В течение 4-6 недель исчезали рентгенологические признаки остеомиелита.

В динамике лечения у больных возросло исходно сниженное содержание CD3 , CD4 , CD8 лимфоцитов. Количество CD16 клеток, нормальное до начала лечения, к концу лечения выросло в 2 раза. Из нашего опыта мы знаем, что подобная динамика CD16 лимфоцитов коррелирует с отсутствием рецидивов в отдаленные сроки наблюдения. Содержание В-лимфоцитов изменилось недостоверно. Значительно возросло число клеток, несущих рецептор к IL-2 (CD25 ). В динамике возросли показатели стимулированного (ЛПС E.coli) НСТ-тестас 21,5±4,25% до 36,3±2,22% (Р<0,01).

ОСНОВНЫЕ СУБ/ПОПУЛЯЦИИ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИУБОЛЬНЫХХРОНИЧЕСКИМ БРУЦЕЛЛЕЗОМ В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ РОНКОЛЕЙКИНОМ

Лимфоциты до лечения Ронколейкином X 106/л через 1 месяц х 106/л Р

CD3+ 520,7±127,51 920,1190,62 0,001

CD4+ 467,3±85,88 745,1165,49 0,05

CD8+ 254,5175,46 523,7169,94 0,05

CD16+ 256,8122,50 506,4181,30 0,01

CD20+ 194,3192,57 381,2181,30 0,01

CD25+ 66,9114,89 302,4+70,39 -

В катамнезе (от 4 до 10 месяцев) рецидив наблюдался у 2 больных: больной с тяжелым полиартритом (были поражены все крупные и мелкие суставы конечностей, позвоночника, реберно-грудинные сочленения) - при рецидиве наблюдался артрозоартрит плечевого и голеностопного суставов; больная с лейкоэнцефалитом - рецидив протекал со значительно менее выраженной неврологической симптоматикой. Этим больным был проведен повторный курс Ронколейкина + флероксацин по 800 мг/сут 20 дней.

Таким образом, рекомбинантный интерлейкин-2 является эффективным и перспективным препаратом для иммунокорригирующей терапии хронического декомпенсиро-ванного бруцеллеза. Необходимо дальнейшее изучение возможностей его применения при бруцеллезной инфекции при различных клинических вариантах ее течения, в том числе при остром и подостром процессе.

МЕСТНЫЕ ЭФФЕКТЫ РОНКОЛЕЙКИНА ПРИ СИСТЕМНОМ ВВЕДЕНИИ У ПАЦИЕНТОВ С УВЕАЛЬНОЙ МЕЛАНОМОЙ

Лихванцева В.Г.*. Зиангирова Г.Г.**., Слепова О.С*., Сутулов А.Ю. *, Верещагина М.В.*

*Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца,

**Научно-исследовательский институт глазных болезней РАМН, Москва, Россия

Увеальная меланома (УМ) - наиболее часто встречающаяся внутриглазная опухоль, представляющая угрозу зрению и жизни. Частота метастазирования УМ достигает 50 % при 5-летних сроках наблюдения. Системное назначение ронколейкина (р1Ь-2) существенно удлиняет продолжительность жизни пациентов с диссеминированной УМ, замедляя скорость прогрессирования. Местные эффекты р1Ь-2 на первичный узел УМ при системном введении препарата, при этом совершенно не изучены, что и послужило целью работы.

Материал и методы. Ронколейкин вводили по 1 млн. МЕ внутривенно капельно через день с суммарной дозой 5 млн. МЕ 5 пациентам с УМ в стадии Т3-4Ы0МЬс до энуклеации. После гистологической верификации Ум на парафиновых срезах опухоли, толщиной 3-5 микрон, проводили исследования в 3 этапа: с помощью световой микроскопии, иммуногистохимического Типе1-метода и электронной микроскопии. Просмотр препаратов осуществляли под микроскопом “Ор^оп” с телевизионной приставкой (440, 4125, 41250, 41800) и на электронном микроскопе ЕМ100 (Ор^оп, Германия, х 5000-20000). Контроль - не леченые УМ.

Результаты. Биомодифицированные опухоли разительно отличались от контроля изобилием тумор-инфильтри-рующих лимфоцитов (ТИЛ), макрофагов и плазмацитов в основании и в строме опухоли (1). В местах их депонирования концентрировались апоптирующие клетки, выявляемые в виде так называемых «клеток-теней», что свидетельствовало об иммунных клеточно-опосредованных реакциях. Инфильтрация ТИЛ сопровождалась расширением зоны апоптоза (2). Апоптоз в биомодифицированных опухолях протекал по физиологическому типу и завершался формированием апоптозных телец с последующим их мак-рофагированием (3). Апоптоз в контроле происходил с нарушениями на всех этапах. Так, на первом этапе имела место фрагментация ядра по незавершенному типу, причем, наиболее крупные его фрагменты, вместе с прилежащим

участком цитоплазмы и небольшим количеством органелл, оказывались жизнеспособными и давали начало новой популяции мелких, дедифференцированных клеток. Несмотря на то, что из-за потери части хромосом, эта популяция имела дефектное ядро с неполноценным геномом, она обладала высокой пролиферативной активностью, способностью к диссоциации и миграции, легко проникала в сосудистое русло. На конечном этапе из-за дефицита макрофагов и ТИЛ в УМ происходил аутолиз апоптозных телец, сгруппировавшихся вокруг зоны апоптоза наряду с популяциями дедифференцированных клеток. Известно, что аутолиз апоптозных телец приводит к освобождению митогенных и мутагенных факторов, а, следовательно, к стимуляции пролиферации низкодифференцированных опухолевых клеток, обладающих ограниченным спектром белковых синтезов и отсутствием чувствительности к традиционным программам запуска апоптоза, то есть к формированию феномена полирезистентности к терапии (4). Биомодифицированные УМ отличались также отсутствием зоны пролиферации опухолевых клеток, как правило, окружающих зону апоптоза в контроле (5).

Выводы.

1. Ронколейкин (р1Ь-2) индуцирует запуск иммунных клеточно-опосредованных реакций, усиливая инфильтрацию УМ ТИЛ, макрофагами и плазмоцитами, по-видимо-му, через экспрессию опухоль-ассоциированных антигенов.

2. Препарат устраняет нарушения апоптоза, приводящие к формированию клона дедифференцированных опухолевых клеток, нечувствительных к стандартным программам запуска апоптоза, а, следовательно, препятствует формированию лекарственной резистентности.

3. Переводя апоптоз в физиологическое русло, он снижает пролиферативную активность опухоли.

БЕТАЛЕЙКИН В ПРОФИЛАКТИКЕ ГРИППА И ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ В ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПЕРИОД

Москалев А.В.. Сбойчаков В.Б., Ботиева В.И., Осипова О.Н., Ерёмина М.В.

Воєнно-медицинская академия,

Северо-Западный окружной медицинский центр, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Несмотря на проводимую профилактику, ежегодно возникают эпидемии гриппа и острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ), сопровождающиеся значительными трудопотерями и осложнениями. Мы исходили из того, что цитокины являются одними из основных патогенетических факторов развития и исхода воспалительного процесса и, видимо, у людей, часто и длительно болеющих гриппом и ОРВИ, имеет место дисбаланс провоспалительных цитокинов. Беталейкин, который является иммуномодулятором широкого спектра действия, можно использовать для коррекции данного дисбаланса.

Цель исследования. Изучить динамику основных провоспалительных цитокинов (ІЬ-ір, ТОТа, П-Ыу) у людей, болеющих гриппом и ОРВИ не менее 2-3 раз в году. Оценить профилактическое воздействие беталейкина на снижение заболеваемости этими инфекциями в эпидемический период.

Материалы и методы. Нами были отобраны 19 человек (9 мужчин и 10 женщин), средний возраст кото-

рых составил 47,6±2,5 года. Беталейкин вводили подкожно в в/3 наружной поверхности плеча, предварительно разведя в 1 мл 0,5% раствора новокаина в количестве

5 нг на 1 кг массы тела.

Динамику цитокиновых профилей (IL-lp, TNFa, IFNy) осуществляли с помощью диагностических тест-систем ООО «Протеиновый контур» методом ИФА и оценивали по отношению к данным группы редко болеющих людей (12 чел., средний возраст 42,4±3,2 года). Заболеваемость гриппом и ОРВИ сопоставляли с аналогичной группой из 15 чел., не получавших беталейкин.

Результаты. Уровни цитокинов в опытной группе

I1-1P составили 16,2±3,1 пг/мл; TNFa - 21,1±2,4 пг/ мл; IFNy - 60,5±5,8 пг/мл, что достоверно (р<0,05) ниже показателей контрольной группы. В результате проведения иммуномодулирующей терапии беталейкином уровни цитокинов возросли в 1,8-2,7 раза, по сравнению с исходными данными. Уровни цитокинов в группе не получавших Беталейкин, но так же длительно и часто болеющих гриппом и ОРВИ достоверно не отличались от показателей основной опытной группы. Заболеваемость в основной опытной группе в эпидемический период составила - 6 чел. (31,6%), а в группе не получавших беталейкин - 9 чел. (75%), что в 2, 4 раза выше.

Заключение. Таким образом, часто и длительно болеющие гриппом и ОРВИ, - это люди, которых необходимо отнести к пациентам с вторичными иммунодефи-цитными состояниями. У них выявлена недостаточная активность иммунокомпетентных клеток, проявляющаяся сниженным синтезом провоспалительных цитокинов (IL-ip, TNFa) и IFNy. Экзогенное введение рекомбинантного IL-ip позволяет не только повысить эндогенный синтез провоспалительных цитокинов, IFNy, но и снизить заболеваемость гриппом и ОРВИ у таких пациентов.

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПЯТИЛЕТНЕГО ПРИМЕНЕНИЯ БЕТАЛЕЙКИНА

Осипова Q.H.. Москалев А.В.. Сбойчаков В.Б., Ботиева В.И., Ерёмина М.В..

Северо-Западный окружной медицинский центр, Военно-медицинская академия;

Санкт-Петербург, военный госпиталь,

Моздок, Россия

Введение. На сегодняшний день установлено, что оппортунистическая микрофлора (как бактериальной, так и вирусной природы) является одной из этиологических причин вторичных иммунодефицитных состояний (ВИД). У таких больных, как правило, выявляются недостаточность активации иммунокомпетентных клеток (ИКК), процессов хемотаксиса, регуляции функциональной активности микрофагов в очаге воспаления, механизмов фагоцитоза и др. Исходя из этого, мы в комплексной терапии больных с ВИД применяли беталейкин, являющийся иммуномодулятором широкого спектра действия

Материалы и методы. Беталейкин применяли в комплексном лечении 47 больных с рецидивирующим течением хронических эрозий желудка (РТХЭЖ) и с инфекционной патологией - 29 больных с герпетической (ВПГ

тип 1, 2) и цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекциями, 24 человека с хронической хламидийной урогенитальной инфекцией и 38 больных с папилломавирусной инфекцией (ПВИ).

Динамику цитокиновых профилей (IL-lp, TNFa, IL-8, IL-lra) осуществляли с помощью диагностических тест-систем ООО «Протеиновый контур» методом ИФА.

Результаты. Применение беталейкина у больных с РТХЭЖ вызывало более выраженную положительную динамику иммунологических показателей в периоде обострения заболевания по сравнении с больными, получавшими только комплексную терапию. Наряду с этим мы отмечали сокращенные сроки эпителизации эрозивных дефектов на 4,5 дня в опытной группе, а в периоде динамического наблюдения (4 года) снижение количества рецидивов в 3,4 раза у больных, получавших беталейкин. Соответственно 2 чел. (4,7%) и 26 чел. (16,3%), р<0,0,1, увеличение периода ремиссии..

Использование беталейкина в комплексной терапии больных с ЦМВ и ВПГ тип 1, 2-инфекциями, вирусами с выраженными иммуносупрессивными свойствами, способствовало усилению активизации всех этапов фагоцитоза, особенно его завершающей стадии. Это компенсировало изначальную недостаточность механизмов фагоцитоза у таких больных и значительно (в 1,8 раза) сокращало количество рецидивов в периоде динамического наблюдения. Особенно эффективным было применение беталейкина у больных с папилломавирусной инфекцией (ПВИ), которая трудно поддаётся известным методам терапии. Применение беталейкина в комплексной терапии больных с ПВИ значительно ускоряло эпителизацию мест деструкции на 5,5+0,6 сут. в сравнении с больными, получавшими только комплексную терапию. Уровни провоспалительных цитокинов в данной группе восстанавливались также быстрее и достоверно не отличались от показателей контрольной группы. Уровни IgG были практически такими же, как в контрольной группе, a IgA оставались достоверно сниженными у больных, получавших только комплексную терапию. При наблюдении в течение 1 года рецидив заболевания у больных, в комплексном лечении которых применялся беталейкин, был выявлен у двух человек (10%), а в группе больных, находящихся только на комплексном лечении, у 7 человек (38,9%). Эффективность применения беталейкина у больных с ПВИ - р<0,01.

У больных с хламидийной урогенитальной инфекцией также выявлены нарушения кинетики воспаления и иммунного ответа внутриклеточно паразитирующими С. trachomatis. В результате страдает кинетика провоспалительных цитокинов, характеризующаяся снижением уровней IL-ip, IL-8, TNFa и увеличением уровней IL-lra, который конкурирует за связывание с рецепторами иммунокомпетентных клеток. Введение экзогенного рекомбинантного IL-ip (беталейкина) восстанавливало нормальную иммунокинетику и значительно улучшало результаты этиотропной терапии.

Заключение. Таким образом, в комплексной терапии больных с ВИД, проявляющихся как соматической патологией, так и инфекционным синдромом, необходимо применять беталейкин как в периоде обострения, так и в периоде динамического наблюдения, что позволит снизить количество рецидивов заболевания и увеличить период ремиссии.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМБИНИРОВАННОГО ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ И АДЕНОВИРУСНОЙ ГЛАЗНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ РЕКОМБИНАНТНЫМ ИНТЕРФЕРОНОМ АЛЬФА

Половинкина Г.В.. Добрица Е.В.

Городской глазной диагностический центр, Санкт-Петербург, Россия

В структуре глазной патологии герпетическая и аденовирусная инфекции имеют все возрастающее значение, особенно в мегаполисах при повышенных контактах инфицированных со здоровым населением (до 50 ООО больных ежегодно по обращаемости в г.Санкт-Петербурге), а существующие тактика и стратегия лечения и профилактики рецидивов нуждаются как в разработке высокоэффективных новых препаратов, так и в оптимизации принципов комбинирования местной и системной терапии противовирусных препаратов с пробиотиками.

Целью проведенной работы явилось изучение возможности оптимизации эффективности терапии таких больных с острой и хронической формами заболеваний в период обострения рекомбинантным препаратом Интераль (полученным по высоким генно-инженерным технологиям в ГосНИИ ОЧБ) в монотерапии, а также в сочетании с пробиотической терапией препаратом Витафлор.

Комплексное клинико-лабораторное изучение лечебно-профилактической эффективности препаратов проводили в установленном порядке согласно протоколу исследований в течение 6 месяцев у 20 больных герпетическим и аденовирусным конъюнктивитом, аденовирусным кератоконъюнктивитом и герпетическим древовидным кератитом .Возраст больных варьировал от 20 до 70 лет.

Контрольные группы больных набирали с аналогичной патологией и соответствующими возрастными категориями.

Среди пациентов были больные острой первичной формой заболевания, а также уже леченные в поликлиниках города антибиотиками и сульфаниламидными препаратами с развившейся картиной токсико-аллергической реакции на медикаментозное лечение препаратом Реаферон.

Всем больным проведены динамичные клинические и лабораторные исследования до и после проведенных курсов лечения с изучением в ПЦР соскобов с конъюнктивы на аденовирус и герпес.

С целью восстановления нормального микробиоцено-

за, для нормализации иммунного статуса и использования конкурентных антагонистических взаимоотношений между вирусами и бактериями-латобациллами данной группе больных был назначен per os препарат Витафлор в соответствии с действующей инструкцией о системном его применении один раз в день курсом от 10 до 30 дней.

Использованные дозы, курсы .схемы и продолжительность лечения цитокиновой терапии - местно на конъюнктиву ежедневно капельно Интераль из флакона с 1 млн ME, растворенным в 5 мл изотонического физиологического раствора по 2 капли 8-9 раз в день, по мере улучшения состояния и самочувствия- 4-6 раз в день.

Средняя продолжительность полноценного лечения при вирусных конъюнктивитах составляла 10-14 дней, при аденовирусных кератоконъюнктивитах и герпетических древовидных кератитах от14 до 30 дней (удлинение сроков лечения было вызвано отягощающей сопутствующей патологией - сахарным диабетом, лимфогранулематозом или

из-за ослабления общей резистентности организма полостными операциями на органах желудочно-кишечного тракта и мочеполовой системы).

Практически у всех больных после комбинированной терапии Интералем и Витафлором отмечали ускоренное и более полное выздоровление без последующих рецидивов в течение 6 месяцев (срок наблюдения), что сочеталось с улучшением функций желудочно-кишечного тракта, нормализацией стула у пожилых и ослабленных больных, устранением метеоризма и общим улучшением психо-эмо-ционального статуса у всех больных.

Препараты не проявляли нежелательных побочных или сопутствующих эффектов, присущих цитокинам (например, угнетение функций центральной нервной системы и аллергических реакций на наполнители готовых лекарственных форм) и могут быть рекомендованы в клиническую практику для оптимизации лечения больных с герпетическими и аденовирусными заболеваниями глаз.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КОМПЛЕКСА НЕСПЕЦИФИЧЕСКИХ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ В РЕАБИЛИТАЦИИ БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Селихова Ю.Б.. Старостина Н.М., Козлов В.А., Кузнецова Н.П.

ГУ Научно-исследовательский институт клинической иммунологии СО РАМН,

Новосибирск, Россия

У пациентов с онокологическими заболеваниями после проведения хирургического лечения и стандартной ци-тостатической терапии наблюдаются выраженные нарушения функции иммунной системы. В данном случае можно выделить несколько составляющих иммунодепрессии. Во-первых, онкопатология возникает, когда дефект функции иммунного надзора дает возможность малигнизиро-ванным клеткам беспрепятственно размножаться; таким образом, уже на момент первичной диагностики онкологического заболевания можно говорить о наличии у пациента иммунодефицитного состояния. Во-вторых, сами опухолевые клетки оказывают локальное и системное имму-носупрессивное влияние за счет выработки различных субстанций. В-третьих, современное комплексное лечение онкологических заболеваний (хирургическое лечение, лучевая и химиотерапия) оказывается мощным фактором, индуцирующим генерализованную иммуносупрессию. Иммунодефицит, ассоциированный с процессом малиг-низации, и иммуносупрессивные составляющие лечения объясняют глубокую иммунодепрессию, характерную для онкопатологии. В этих условиях резко возрастает риск развития вторичных инфекций, аутоиммунных заболеваний, лимфопролиферативных и других вторичных онкозаболеваний.

Вышесказанное объясняет включение в комплекс лечения онкологических больных средств иммунотерапии. Для успешной иммунореабилитации пациентов необходимо соблюдение некоторых условий: 1) предварительное максимальное удаление опухолевой ткани для снижения опухолезависимой иммуносупрессии и уменьшения риска иммуностимуляции опухоли; 2) ее проведение только после окончания химио- и лучевой терапии, так как стимуляция роста и дифференцировки может повышать чувствительность иммунокомпетентных клеток к цитотокси-ческим воздействиям и усугублять иммуносупрессию, истощая костный мозг.

У больных раком молочной железы II-III стадий после проведения радиального хирургического лечения и 4-6 курсов химиотерапии по схеме CAF нами наблюдалось развитие лейкопении и иммунодефицита с преимущественным снижением количественных и функциональных показателей клеточного иммунитета. С учетом структуры выявленного иммунодефицита разработана комбинация иммуномодуляторов (ронколейкин, лейкинферон, такти-вин) для использования в виде ’’иммунологического коктейля” в реабилитации больных раком молочной железы. Парентеральное введение препаратов осуществляется по определенной схеме в течение первого месяца после окончания химиотерапии. Одновременное использование нескольких препаратов позволяет более эффективно решать следующие задачи: профилактика инфекционных осложнений, уменьшение частоты метастазирования, улучшение качества жизни.

IFN ПИПА: НОВЫЕ ПОДКЛАССЫ И НОВЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ ИММУНОРЕГУЛЯТОРНЫХ ВОЗМОЖНОСТЯХ

Серебряная Н.Б.

Медицинская академия последипломного образования, Санкт-Петербург

У человека к IFN I типа давно отнесены IFN-a (13 генов), IFN-Р и IFN-co (по одному гену), обладающие выраженной противовирусной и антипролиферативной активностью [Biron С., Sen G., 2001]. Первоначально предполагалось, что гены IFN-a и IFN-co экспрессируются преимущественно лейкоцитами, а IFN-P - фибробластами. Однако оказалось, что при соответствующей индукции большинство типов клеток человека могут продуцировать IFN-a и Р [Маеуег Е., Maeyer-Guignard J., 1998]. В последние годы определены новые подклассы: IFN-к [LaFler F., 2001] и IFN-A, [Vilcek J., 2003]. IFN-к экспрессируется в неактивированных кератиноцитах и клетках, относимых к системе врожденного иммунитета (моноциты и дендритные клетки) [Yaar М., 1986]. IFN-к характеризуется примерно 30% гомологией по отношению к другим интерферо-нам I типа. Роль IFN-k в неактивированных кератиноцитах может быть связана с защитными функциями кожи, являющейся барьерным органом [Nardelli В., 2002].

Несмотря на различия в их строении, IFN-a, Р и к используют общий рецептор (IFNAR). В течение многих лет не было удовлетворительного объяснения, для чего существует такое разнообразие IFN 1 типа, если все они действуют через один и тот же рецептор. Однако теперь определено, что Р2 субъединица рецептора имеет длинную (PL) и короткую (Ps) формы. Для проявления своих противовирусных свойств разные IFN используют различные внутрицитоплазматические регионы Р, -иепи и, вероятно, активируют различные сигналинговые молекулы, не являющиеся членами STAT-пути [Domanski P. et al. 1998].

Связывание IFN I класса с IFNAR вызывает подключение факторов Jak-STAT пути и МАРК. В клетках некоторых типов , кроме STAT1 и STAT2, активируется и STAT3 [Velichko S., 2002]. STAT3 известен как онкоген, и данные о его активации интересны в связи с тем, что IFN используются как средства для терапии рака [Bromberg J., 2000]. Ключевыми регуляторами экспрессии генов IFNявляются белки IFN - регулирующие факторы (IRF). Показано, что в клетке, неинфицированной вирусом, при взаимодействии IFNAR с лигандом активируется только IRF3

(р48), а в инфицированных вирусом клетках индуцируется дополнительно IRF7, способный активировать значительно больше генов, принадлежащих к семейству IFN-a [Levy D„ 2003].

IFN-Л представляют собой субкласс IFN I и одновременно новое семейство цитокинов Три члена нового семейства цитокинов были названы одной группой исследователей IFN-A.1, IFN-A2 и IFN- АЗ [Kotenko. S., 2002], а другой группой - IL-28A, IL-28B и IL-29 [Sheppard R., 2003]. Белки IFN-А структурно схожи с IFN 1 типа, а их геномная структура имеет большее сходство с генами семейства IL-10. Рецептор IFN-Х состоит из специфичной субъединицы (IFN-AR1) и второй цепи, известной как Р2-цепь IL-10R. События, происходящие при передаче сигналов от рецептора IFN-А, неотличимы от сигналинга через IFNAR [VilcekJ., 2003].

Продукция и противовирусная функция IFN-cc/p позитивно и негативно регулируется различными цитокина-ми. IL-8, хемокин, который обычно индуцируется различными вирусами, ингибирует противовирусную функцию IFN-a/p [Khabar К., 1997]. Позитивная регуляция IFN-a/ Р может осуществляться самими IFN 1 типа, которые усиливают экспрессию друг друга. IFN a/р влияют на экспрессию и функцию ряда других цитокинов (IL-12, IL-15, IFN-у) [Biron А.,2001].

Иммунорегуляторные возможности IFN-a/P в реакциях противоинфекционного иммунитета связаны со способностью вирусов и внутриклеточных микроорганизмов быть сильными или слабыми индукторами IFN-a/p. При инфицировании слабыми индукторами, IFN-a/P (синергично с IL-12) увеличивают продукции IFNy CD4+ и CD8* Т-лимфоцитами. При инфицировании сильными индукторами экспрессируется более широкий диапазон генов IFN-a/P, что приводит к угнетению продукции IL-12 и IFN-y и стимуляции ответов CD8’ Т-лимфоцитов и NK-клеток, особенно эффективных при защите от вирусов [Bogdan С., 2000]. Т.о., IFN-a/P, взаимодействуя с некоторыми другими цитокинами и их рецепторами, способны осуществлять связь естественного и адаптивного иммунитета, что может быть использовано для регуляции противоинфекционного и противоопухолевого иммунных ответов.

ЦИТОКИНЫ СЕМЕЙСТВА ИНТЕРЛЕЙКИ НА-1 -НОВЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ МЕСТНОЙ И СИСТЕМНОЙ ИММУНОТЕРАПИИ

Симбирцев А.С.

ГНЦ НИИ особо чистых биопрепаратов, Санкт-Петербург, Россия

Семейство интерлейкина-1 (IL-1) представлено несколькими белками с высокой степенью гомологии в структуре.

Одними из важнейших цитокинов, регулирующих развитие защитных реакций, являются агонисты среди членов данного семейства - IL-1 альфа и IL-1 р. Оба цитокина взаимодействуют со специфическими клеточными рецепторами, причем, внутриклеточный путь передачи сигнала сходен с передачей активационного сигнала от Толл белков, служащих первичными рецепторами для распознавания патогенов. Обладая плейотроп-ным характером биологической активности, семейство белков IL-1 регулирует все стороны воспалительной реакции и иммунного ответа. Уникальные свойства этих

цитокинов в настоящее время используются для лечения заболеваний человека. Клиническое применение цитокинов семейства 1Ь-1 стало возможным благодаря клонированию генов 1Ь-1, очистке, всестороннему исследованию биологической активности рекомбинантных белков и созданию на их основе медицинских препаратов.

Препараты агонистов семейства 1Ь-1 используются в клинической практике по двум основным назначениям: 1) для восстановления костномозгового кроветворения у больных раком после интенсивных курсов химио-и радиотерапии, 2) в качестве иммуностимуляторов при вторичных иммунодефицитных состояниях и инфекционных заболеваниях.

Особенно перспективным в настоящее время представляется местное применение 1Ь-1. Местное применение препаратов 1Ь-1 имеет целый ряд преимуществ, так как оно позволяет достигать высокой локальной концентрации действующего начала, целенаправленно воздействовать на инфекционный очаг и избежать системных нежелательных проявлений. Местное применение П.-1 уже нашло клиническое применение при лечении гнойных абсцессов легких, флегмон, трофических язв у больных сахарным диабетом, отитов и риносинуситов. Существует две принципиально разные возможности применения белков семейства 1Ь-1 в клинической практике.

Первая связана с использованием 1Ь-1 для стимуляции защитных реакций организма, сниженных в результате травм, инфекционных заболеваний и воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды, в том числе, радиации. Вторая, напротив, направлена на снижение концентрации 1Ь-1 в организме, чтобы избежать чрезмерных проявлений воспалительной реакции и острофазового ответа, вызванных гиперпродукцией эндогенного 1Ь-1. В этом случае может быть использован другой член семейства 1Ь-1 - рецепторный антагонист 1Ь-1 (РАИЛ), как лучший специфический блокатор биологического действия 1Ь-1, в частности, при ревматоидном артрите, острых и хронических воспалительных процессах.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ УЛЬТРАЗВУКОВОЙ КАВИТАЦИИ В СОЧЕТАНИИ С ЛОКАЛЬНОЙ ИММУНОКОРРЕКЦИЕЙ ПРИ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

СнимщиковаИ.А., Юдина С.М.*, Медведев А.И., Ререкин И. А.,

Шманева И. А.

Медицинский институт Орловского государственного университета, Орел; Курский государственный медицинский университет, Курск, Россия

Гнойно-воспалительные заболевания мягких тканей до настоящего времени остаются одной из актуальных проблем современной медицины, что обусловлено их распространенностью, тенденцией к хроническому и рецидивирующему течению, недостаточной эффективностью тра-дици-онных методов лечения.

Исследованиями последних лет показано, что нарушение сложной сети медиаторных взаимодействий, сопровождающихся накоплением в крови провоспали-тельных цитокинов (И.-1, ТОТ-а, 1Ь-6 и др.), является

ключевым фактором патогенеза воспалительных и регенераторных процессов в тканях. Дефекты синтеза и восприятия цитокинов, необходимых для роста, активации, пролиферации и дифференцировки клеток иммунной системы, приводят к развитию иммунодефицита

Применение эндогенных иммуномодуляторов (цитокинов, миелопептидов и др.), в т.ч. их локальное введение в очаг воспаления, является новым перспективным направлением терапии инфекционных, онкологических заболеваний, вторичных иммунодефицитов.

В связи с этим, целью работы явилась разработка способов локального применения препаратов эндогенных иммуномодуляторов и сравнительное изучение их клинической эффективности у больных с гнойно-воспалительны-ми заболеваниями мягких тканей (фурункул, карбункул, абсцесс, флегмона и др.).

Исследована клиническая эффективность локальной иммунокоррекции (ЛИ) препаратами суперлимф (композит гетерологичных цитокинов, не обладающих видовой специфичностью, с активностью 1Ь-1, 1Ь-2, 1Ь-6, ЗТФР-Р) и миелопида (комплекс свиных миелопептидов).

Препараты (суперлимф в концентрации 2 мкг/мл; миелопид - 60 мкг/мл) применяли местно путем ультразвуковой кавитации на аппарате УРСК 7Н 18 с модифицированным волноводом ежедневно до полной санации очага инфекции у 30 больных. Локальной иммунокоррекции (ЛИ), состоящей из 3-5 сеансов, предшествовало промывание очага воспаления растворами антисептиков.

Эффективность терапии оценивали в 4-х балльной системе по разработанным нами критериям. При этом учитывали следующие симптомы: интоксикация, количество и характер раневого отделяемого, длительность стояния дренажа, срок полного заживления раны, результаты бактериологического посева. Контрольную группу составили 20 больных, которым проводилась традиционная терапия, включавшая дренирование и санацию гнойных полостей, антибактериальную, дезин-токсикационную терапию, физиолечение. Для исследования локального иммунитета использовали смывы из очага воспаления, которые собирали путем активной аспирации предварительно введенного в него физиологического раствора.

Оценка клинической эффективности лечения показала, что если купирование патологического процесса в очаге инфекции при использовании эндогенных иммуномодуляторов происходило к 3-4 дню, то на традиционной терапии только 6-7 дню, соответственно. Выявленная положительная динамика клинических симптомов у больных на фоне ЛИ сочеталась с быстрой нормализацией исходно нарушенных показателей локального иммунитета: уменьшением числа нейтрофилов в полостных смывах, восстановлением их фагоцитарной и метаболической активности, сни-жением уровня провоспалительных цитокинов (1Ь-1,1Ь-6, тара).

Таким образом, проведенные исследования показали высокую клиническую эффективность ультразвуковой кавитации в сочетании с локальной иммунокоррекцией препаратами эндогенных иммуномодуляторов, по сравнению с традиционной терапией, и обосновали возможность их использования для быстрого купирования гнойно-вос-палительного процесса в мягких тканях, обеспечивающего сокращение сроков лечения.

БАЛАНС ЦИТОКИНОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ И НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ БРОНХИТОМ И РЕЦИДИВИРУЮЩЕЙ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИЕЙ. ВЛИЯНИЕ ИММУНОАКТИВНОЙ ТЕРАПИИ

Соловьева Н.Ю., Сенникова Ю.А.. Гришина Л.В., Сенников С.В., Ширинский B.C., Козлов В.А.

ГУ НИИ Клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирск, Россия

В патогенезе хронических инфекционно-воспали-тельных заболеваний как бактериальной, так и вирусной природы большое значение придают нарушениям функции иммунной системы, обозначаемым синдромом вторичного иммунодефицита. Целью настоящего исследования явилось изучение содержания в сыворотке крови некоторых цитокинов и стандартных показателей иммунного статуса у больных хроническим бронхитом и герпетической инфекцией, оценка влияния иммуноак-тивной терапии.

Обследовано 20 больных хроническим бронхитом (ХБ) в период обострения, получавших полиоксидоний (1 группа), 22 человека с рецидивирующей герпетической инфекцией (РГИ) в фазе обострения, получавших виферон (2 группа), и 30 здоровых доноров (3 группа). До и после лечения у больных, а также у доноров, определялись стандартные показатели иммунного статуса (ИС), пролиферативная активность МНК ПК и содержание в сыворотке крови основных цитокинов (IL-1P, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNFa, IFNy). Изменения, выявленные у больных, соответствовали клинико-лабораторным критериям ВИД. У больных ХБ обнаружен ряд статистически значимых различий по сравнению с группой здоровых. Так, у больных ХБ наблюдалось угнетение функциональных свойств моноцитов и гранулоци-тов, в сыворотке крови было значительно повышено содержание провоспалительных (TNFa, IL-1, IL-6) и Thl-продуцируемых (IL-2, IFNy) цитокинов. У больных РГИ на фоне угнетения функциональных свойств моноцитов, гранулоцитов и Т-эффекторов ГЗТ, отмечалось увеличение относительного числа CD4* клеток, спонтанная пролиферативная активность МНК ПК была снижена, но повышен индекс стимуляции пролиферативной активности в сравнении со здоровыми. Также в сыворотке крови было существенно повышено содержание провоспалительных (TNFa, IL-1), Thl-продуцируемых (IL-2, IFNy) цитокинов, а также, IL-10 (при нормальном уровне IL-4). Больные из 1 и 2 групп различались по следующим параметрам: у больных ХБ было ниже относительное содержание CD4+, но больше CD8+ клеток; выше уровень экспрессии HLA-DR на моноцитах, но сильнее угнетена активность нейтрофилов; выше сывороточный уровень провоспалительных и Thl- цитокинов, но ниже IL-10, чем в группе больных РГИ. В динамике лечения больных ХБ полиоксидонием произошла частичная нормализация показателей ИС, снизилось содержание IL-4, IFNy и возрос уровень IL-10. У больных РГИ, получавших виферон, помимо тенденции к нормализации индивидуальных нарушений ИС, отмечалось увеличение числа CD20 лимфоцитов, нормализация показателей пролиферативной активности МНК ПК, баланс цитокинов сместился в сторону преобладания Thl профиля при снижении уровней провоспалительных цитокинов и IL-4.

Таким образом, больные с хронической бактериальной и вирусной инфекционной патологией отличаются по спектру содержащихся в сыворотке крови иммунорегулятор-ных цитокинов с преобладанием ТЫ профиля, в первом случае, и дисбалансом цитокинов ТЬ2 профиля во втором. Включение в терапию данных категорий больных иммуномодулирующих препаратов способствует коррекции выявленных в уровне сывороточных цитокинов нарушений.

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ РОНКОЛЕЙКИНАПРИ СИСТЕМНОМ ВВЕДЕНИИ ПРЕПАРАТАУ ПАЦИЕНТОВ СУВЕАЛЬНОИ МЕЛАНОМОЙ

СутуловА.Ю. *, Лихванцева В.Г. **, Степанова Е.В.** *, Астахова С.Е. *, Верещагина М.В. * *

Рязанский медицинский университет им. И.П. Павлова*,

Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца **,

Российский онкологический центр им. Н.Н. Блохина РАМН** *, Москва, Россия.

Увеальная меланома (УМ) - наиболее часто встречающаяся внутриглазная опухоль, представляющая угрозу зрению и жизни. Частота метастазирования УМ достигает 50 % при 5-летних сроках наблюдения. Системное назначение ронколейкина (р1Ь-2) существенно удлиняет продолжительность жизни пациентов с диссеминированной УМ, замедляя скорость прогрессирования. Однако молекулярные механизмы действия р1Ь-2 в опухолевых клетках УМ при системном его введении совершенно не изучены, что и послужило целью работы.

Материал и методы. Ронколейкин вводили по 1 млн. МЕ внутривенно капельно через день с суммарной дозой 5 млн. МЕ 5 пациентам с УМ в стадии Т3-^0МЬе до энуклеации. После гистологической верификации Ум на парафиновых срезах опухоли, толщиной 3-5 микрон, проводили иммуногистохимические исследования с помощью антител Вах, Вс1-2 р53 (маркеры апоптоза). Контроль - не леченые УМ (п=11, метастазы в печени определены на момент оперативного вмешательства). Группа сопоставления - УМ в стадиях Т,-^0М0(п=87). Было оценено комбинированное влияние экспрессии маркеров (р53 и Вс1-2; р53 и Вах; Вс1-2 и Вах) на безрецидивную и общую выживаемость пациентов всех трех групп. Результаты подверглись пошаговому регрессионному анализу и корреляционному анализу с фактом лечения.

Результаты. Клинически системное введение ронколейкина сопровождалось удлинением продолжительности жизни больнех с генерализованной УМ в среднем с 13,0±2,3 месяца в группе, не получавшей лечения до 36,3±9,8 месяцев, в трех случаях имела место регрессия одиночных метастазов с продолжительностью ремиссии до 3-х лет при сроках наблюдения - 5 лет.

Анализ результатов показал, что определяет прогрессирование УМ соэкспрессия Вс1-2-/Вах. 4 различные комбинации экспрессии Вс1-2 и Вах показали статистически значимые различия в безрецидивной и общей выживаемости больных (р=0,043). Группа Вс1-2-/Вах+ опухолей (7 человек) имела самую низкую безрецидивную и общую выживаемость, а больные Вс1-2-/Вах- (10 больных) самую высокую. Именно соотношение уровня экспрессии

Вс1-2:Вах определяет готовность клеток к апоптозу. Экспрессия Вс1-2 и Вах слабо коррелировала с присутствием р53 в опухоли. Опухоли, экспрессирующие р53, имели низкий уровень экспрессии Вс1-2, высокий уровень экспрессии Вах и, что наиболее важно, соотношение Вс1-2:Вах < 1 (прогностически неблагоприятное). Мутантный р53 слабо коррелировал с прогнозом УМ (р=0,09).

У 11 больных группы контроля. Все больные были положительными по р53 и не содержали Вс1-2. Четверо больных имели экспрессию Вах. У всех больных соотношение Вс1-2:Вах было <1.

Леченные ронколейкином УМ отличались отсутствием р53 (негативного прогностического фактора, р=0,048), а ср. индекс экспрессии Вс1-2:Вах был достоверно выше, чем в контроле (р=0,034).

Вывод.

1. Системная терапия ронколейкином позволяет увеличить продолжительность жизни пациентов с диссеминированной УМ (в среднем с - 13,0±2,3 месяца до

36,3+9,8 месяцев) за счет полной или частичной регрессии развившихся метастазов и замедления появления новых.

2. Механизм лечебного эффекта 1Ь-2 при УМ обусловлен восстановлением баланса анти- и проапоптических пептидов в опухолевых клетках (1), снятием феномена апоптозорезистентности за счет подавления экспрессии р53(2).

КЛИНИЧЕСКИЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ПРИМЕНЕНИЯ БЕТАЛЕЙКИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГНОЙНЫМ РИНОСИНУСИТОМ

ТимчукЛ.Э.

НИИ уха, горла, носа и речи, Санкт-Петербург, Россия

Лечение хронических гнойных риносинуситов является одним из перспективных направлений использования препарата Беталейкин (рекомбинантного П.-1 (3). Цель исследования заключалась в разработке схем, доз и методики введения Беталейкина при хроническом гнойном ри-носинусите. Нами наблюдалось 15 больных хроническим гнойным риносинуситом в возрасте от 23 до 60 лет, из них

9 женщин и 6 мужчин. Давность заболевания - от 3-х до 10-ти лет. Всем пациентам проводилась пункция верхнечелюстных пазух на 1-й, 2-й, 5-й и 8-й (контрольный) день лечения, аспирация гнойного содержимого с последующим посевом на чувствительные среды, промывание пазух и введение Беталейкина в концентрации 10 нг/мл в объёме 2 мл физиологического раствора. На 3-й и 4-й день проводилось промывание пазух Беталейкином в объёме физиологического раствора 100 мл, процедурой «перемещения» по методу Проетца. Исследуемыми материалами являлись периферическая кровь больного до и после лечения, смывы из пазух до введения Беталейкина. Согласно полученным результатам схема введения Беталейкина в дозе 10 нг/мл местно даёт «положительный» эффект на 2-е сутки в 73% случаев. У 20% больных на 5-е сутки отмечалось слизистое содержимое при промывании пазух в виде сгустка. Клиническими критериями оценки выздоровления являлись: уменьшение отёка слизистой полости носа и околоносовых пазух, что подтверждалось рентгенологическими и эндоскопическими методами, восстановление функций естественных соустий и нормализация состояния аэродинамического сопротивления носа, прекращение

продукции патологического секрета слизистой оболочкой носа и околоносовых пазух. Лишь в 7% случаев отмечалась неэффективность применения Беталейкина, обусловленная локальным блоком соустья полипозным процессом. Клинический контроль через месяц после лечения показал отсутствие признаков воспаления в придаточных пазухах носа. Анализ полученных результатов исследования позволяет сделать вывод, что у 73% больных уже на вторые сутки после начала лечения достигается положительный клинический эффект. Для 20% пациентов необходимо было продолжать введение препарата для достижения клинического выздоровления. Полученные результаты исследования ставят перед нами задачу поиска критерия индивидуальной подборки доз и схем введения Беталейкина при лечении больных хроническим гнойным риносинуситом.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЦИТОКИНОВОЙ ТЕРАПИИ

Хайруллина P.M., Коценко Т.М., Кальметьева Л.Р.

Республиканская детская клиническая больница, Уфа, Россия

Гнойно-септические процессы и хронические рецидивирующие заболевания хирургического профиля сопровождаются формированием синдрома «иммунологической недостаточности», в значительной степени обусловленной персистенцией возбудителя, реинфекцией. Установлено, что главную роль в локализации и последующей полной элиминации возбудителя играют иммунологические реакции.

Цель настоящего исследования - оценка эффективности применения цитокиовыых препаратов ронколей-кин и беталейкин в общем базисном комплексе этиопато-генетической терапии

Под нашим наблюдением находилось 40 пациентов хирургических отделений с гнойно-септическими процессами различной локализации: дети из соматических и реанимационных отделений, из низ 3 детей с диагнозом “первичное иммунодефицитное состояние” (ПИД). Проводилось общеклиническое и иммунологическое обследование до и после применения препарата. Мониторингу подвергался комплекс тестов, включающий лейкоцитограмму, иммунофенотипирование лимфоцитов (CD3+, CD4\ CD8\ CD 16+, CD20+, CD25+, HLA-DR), определение уровня ци-токинов (IL-1, IL-8), методом ИФА, иммуноглобулинов IgA, IgM, IgG, компонентов комплемента, оценку фагоцитарной и микробоцидной функции микрофагов, хеми-люминесценции цельной крови и клеток бронхиального лаважа. Пациентам, входившим в группу сравнения, проводилось аналогичное обследование с последующей базисной терапией без рекомбинантных цитокиновых препаратов.

Ронколейкин вводили внутривенно капельно, из расчета 0,2-0,5 млн.МЕ на 1 кв.м, поверхности тела, в суточной дозе от 0,5 до 2 млн.МЕ, в течение 4-6 часов. Повторные инфузии осуществлялись, при необходимости, с перерывом в 2-3 дня. Кроме того, проводилось подкожное введение Ронколейкина 8 пациентам при контактном дерматите, обусловленном воздействием серной мази; врожденной ихтиозоформной эритродермии Брока; герпетифор-мном дерматозе Дюринга, обострениях атопического дерматита, сопровождавшихся присоединением стрептоста-филодермии. Наблюдаемые нами дерматозы протекали на

фоне сепсиса или угрозы его развития вследствие обширности поражения кожного покрова, а терапия ронколейки-ном проводилась в комплексе с адекватной антибактериальной терапией.

Весьма важным моментом при назначении того или иного иммуномодулятора является «отвечаемость» больного. В случае с Ронколейкином проведение хемилюми-несцентных методов исследования в динамике позволило нам сделать заключение о возможности использования данных хемилюминесценции в качестве критериев для оценки эффективности. Выявлен клинико-иммунологи-ческий параллелизм: отсутствие динамики на хемилюми-нограммах через сутки после введения Ронколейкина сопровождалось отсутствием клинического улучшения.

Применение Ронколейкина в комплексной терапии ур-гентных состояний имело свои особенности. Дети поступали, как правило, в крайне тяжелом состоянии: с явлениями септического шока, наличием моно- или полиорган-ной недостаточности (РДС, энцефалопатия, острая печеночная дисфункция). Показания к применению Ронколейкина в этих случаях были следующими: 1) разлитой характер персистирующего перитонита, с выраженным токсическим компонентом; 2) ограниченный характер перитонита при неблагоприятном соматическом фоне (в частности при ОГО). Иммунологические критерии назначения Ронколейкина при перитонитах, равно как и при других ургентных состояниях, сводились к следующим: снижение абсолютного и относительного содержания лимфоцитов; инверсная реакция иммунного ответа в целом. Условием его назначения было купирование полиорганной недостаточности (К < 3,0 по Бонне). Рекомбинантный 1Ь-1 (Беталейкин) применялся в комплексной терапии гнойно-септических состояний (15 больных). Кроме того, контингент больных, получавших коррекцию Беталейкином, включал пациентов, перенесших нейрохирургическую операцию по поводу удаления опухоли мозга (преимущественно медуллобластомы, эпендимомы). Беталейкин вводили подкожно, внутривенно капельно и интрабронхиально, после бронхоскопии и санации ВДП для купирования затяжных и хронических воспалительных процессов (больным с рецидивирующим фурункулезом (РФ), хроничес-

кими абсцедирующими инфильтратами (ХРИ), хроническим деформирующим бронхитом с гнойными бронхоэкта-зами (ХДБГБ), рецидивирующим гнойным гидроаденитом (РГГ), затяжным течением бронхопневмонии (БПЗТ) и др.). Суточная доза для внутривенного и подкожного введения составляла 2,5 нг/кг, № 3-5, через день. На фоне терапии отмечалось улучшение общего состояния, настроения, аппетита. Пирогенный эффект имел место практически у всех больных, но лишь в одном случае гипертермия достигла фебрильных значений и возникла необходимость введения антиперетиков.

В процессе иммунологического мониторинга отмечена тенденция к формированию адекватного, однонаправленного иммунного ответа. Повышался абсолютный и относительный уровень СБЗ+, СБ4* клеток, нивелировалась дисиммуноглобулинемия, формировался нор-мергическихтип хемилюмиграмм. Содержание цитоки-нов до и после проведенной терапии в большинстве случаев характеризовалось тенденцией к снижению 1Ь-1. Интересной находкой было полное отсутствие динамики изменений 1Ь-1,1Ь-8 у детей с ПИД. Причем, наряду с отсутствием динамики по показателям цитокинового статуса, отмечалось выраженное клиническое улучшение, стабилизация общегематологических и иммунологических параметров (концентрация иммуноглобулинов, ЦИК, хемилюминесценция). Период ремиссии длился более 1,5 лет, тогда как при традиционной заместительной терапии иммуноглобулинами ремиссия была кратковременной.

В целом анализ клинико-иммунологических показателей в процессе лечения, по-видимому, характеризует модулирующий и заместительный эффект ронколейкина, проявляющийся формированием баланса между гуморальным, неспецифическим и клеточным компонентами иммунного ответа. Клиническая динамика наблюдалась уже в первые сутки после инфузии: улучшалось общее состояние, снижалась температурная реакция до субфебрильных значений, уменьшались проявления интоксикации. Эффективность терапии беталейкином, по-нашему мнению, обусловлена активацией фагоцитирующих клеток, ответственных за элиминацию патогена.