ПРИМАНКА ДЛЯ ОРАЛЬНОЙ ИММУНИЗАЦИИ ДИКИХ ПЛОТОЯДНЫХ ЖИВОТНЫХ ПРОТИВ БЕШЕНСТВА
BAIT FOR ORAL IMMUNIZATION OF WILD CARNIVORES AGAINST RABIES

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии, может быть использовано при разработке средств специфической профилактики, и в частности для получения приманки для оральной иммунизации диких плотоядных животных против бешенства.
Известен способ получения вирусвакцины против бешенства для пероральной иммунизации плотоядных, при котором выращенную в перевиваемой культуре клеток почки сайги суспензию вируса бешенства, штамм ТС-80, смешанную со стабилизирующей средой и пектином в соотношении 1:1:(1-2), подвергают сублимационному высушиванию в течение 48-72 часов, размалывают в шаровой мельнице и заполняют полученной массой полые брикеты-приманки (Патент РФ №2157700, МПК А61К 39/205, 10.20.2000).
Известен способ изготовления вирусвакцины против бешенства для оральной иммуннизации диких плотоядных животных, при котором вирус бешенства, штамм ТС-80 смешивают со стабилизирующей средой, полученный полуфабрикат наносят на приманку из муки, замораживают и высушивают сублимацией в течение 24-30 час (Патент РФ №2250781, МПК А61К 39/12, А61К 39/205, 27.04.2005).
Недостатками этих способов являются многостадийность (7-10 этапов), продолжительность получения готовых форм и высокая себестоимость, при этом получают брикеты-приманки, не обеспечивающие гарантированную сохранность, поедаемость и стабильность вакцины.
Наиболее близким аналогом является антирабическая вакцина для оральной иммунизации диких плотоядных животных, включающая иммунизирующий антиген бешенства и аттрактант, причем в качестве пищевых и формообразующих компонентов содержит рыбную муку, говяжий жир, парафин или пищевой полимер и неочищенное зерно хлебных злаков, дополнительно содержит маркер-тетрациклин. Использование неочищенного зерна хлебных злаков позволяет нарушать целостность слизистой ротовой полости животных, что увеличивает эффект их вакцинирования (Патент РФ №2440139, МКИ А61К 39/205, А61Р 31/12,03.11.2010).
Также известна приманка для оральной иммунизации диких плотоядных животных против бешенства и способ ее получения, включающей формообразующий компонент, тетрациклин и аттрактант, а также приготовление посевного материала из штамма вируса бешенства, инфицирование посевным материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса бешенства, сбор вируссодержащей жидкости с последующим получением иммунизирующего антигена бешенства и добавлением к нему аттрактанта и формообразующего компонента. Вируссодержащую жидкость замораживают при минус 20-40°С, затем готовят приманку в течение 25-30 минут при температуре 55-60°С, снижают температуру до 40-45°С, вносят в приманку вирус и готовую форму препарата замораживают при минус 20-40°С. (Патент РФ №2440139, МКИ А61К 39/205, А61Р 31/12,03.11.2010).
Недостатком ближайшего аналога является многокомпонентность и жесткие условия хранения готового препарата (минус 20-40°С), неудобство в применении при различных погодных условиях, а также многостадийность и сложность процесса получения целевого продукта (частая смена температурных режимов).
Технический результат от использования изобретения заключается в повышении эффективности целевого продукта.
Технический результат достигается в приманке для диких плотоядных животных, включающей формообразующий компонент, тетрациклин и аттрактант тем, что в качестве в качестве формообразующего компонента содержит водный раствор клея столярного, при массовом соотношении клея к воде 0,4-0,5:1, и дополнительно неочищенное зерно хлебных злаков, при следующем содержании компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 3,0-5,0,
тетрациклин
- 0,001-0,003
неочищенное зерно хлебных злаков
- 5,0-15,0,
аттрактант
- остальное.
Также технический результат достигается в приманке для диких плотоядных животных по п. 1 тем, что в качестве клея столярного используют мездровый, или костный, или рыбий.
Также технический результат достигается в приманке для диких плотоядных животных по п. 1 тем, что в качестве аттрактанта используют муку кормовую из рыбы или мясокостную муку.
Также технический результат достигается в приманке для диких плотоядных животных по п. 1 тем, что в качестве неочищенного зерна хлебных злаков используют зерно пшеницы, ржи, ячменя, овса.
Также технический результат достигается в способе получения приманки для диких плотоядных животных по п. 1, включающем добавление к формообразующему компоненту тетрациклина и аттрактанта тем, что к формообразующему компоненту клею столярному добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,4-0,5:1, выдерживают при комнатной температуре 10-12 часов, затем нагревают до 50-60°С в течение 1-3 часов, добавляют неочищенное зерно хлебных злаков, аттрактант и тетрациклин, а целевой продукт получают путем экструзии или капиллярно-химического обезвоживания полученной массы, разложенной в пластиковые формы при комнатной температуре.
Известен клей столярный мездровый (ГОСТ 3252-80), или костный (ГОСТ 2067-93), или рыбий (Быков В.П. Технология рыбных продуктов. М. Пищевая промышленность, 1980, - 320 с.).
Известна мясокостная мука (ГОСТ 17536-82), предназначенная для применения в производстве комбикормов и при кормлении скота и птиц.
Известна мука кормовая из рыбы (ГОСТ 2116-2000), предназначенная для выработки комбикормов и для кормления сельскохозяйственных животных.
В патентной и научно-технической литературе не известны технические решения, содержащие признаки, аналогичные заявляемым, т.е. предложение соответствует критерию «новизна».
Предложение осуществимо в лабораторных и промышленных условиях, направлено на решение реальной технической задачи, т.е. предложение «промышленно применимо».
Нами впервые показано, что приманки для оральной иммунизации диких плотоядных животных против бешенства, изготовленные по предлагаемому способу, обладали высокой вкусовой привлекательностью и поедаемостью для плотоядных животных, что обеспечило более высокую иммунизацию животного чем в прототипе, т.е. предложение соответствует критерию «изобретательский уровень».
Способ иллюстрируется на следующих примерах.
Пример 1.
К клею столярному (мездровый) добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,4:1, выдерживают при комнатной температуре 10 часов, затем нагревают до 50°С в течение 1 часа, к 3 кг водного раствора клея столярного добавляют 5 кг неочищенного зерна хлебных злаков (зерно пшеницы), 0,001 кг тетрациклина и до 100 кг аттрактанта (мука кормовая из рыбы), получая состав 1 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 3,0,
тетрациклин
- 0,001
неочищенное зерно хлебных злаков
- 5,0,
аттрактант
- остальное.
В каждую ячейку формы помещают контейнер (например, полиэтиленовый пакетик) с замороженным при минус 20°С вируссодержащим материалом (полученным как и в прототипе известным способом) массой 4 г и шпателем разравнивают поверхность формы таким образом, чтобы все пакетики были покрыты пищевой массой. Во время розлива готовой массы поддерживают ее температуру в пределах 40,0°С в течение всего времени розлива.
Пример 2.
К клею столярному (мездровый) добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,5:1, выдерживают при комнатной температуре 12 часов, затем нагревают до 60°С в течение 3 часов, к 5 кг водного раствора клея столярного добавляют 15 кг неочищенного зерна хлебных злаков (зерно пшеницы), 0,003 кг тетрациклина и до 100 кг аттрактанта (мука кормовая из рыбы), получая состав 2 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 5,0,
тетрациклин
- 0,003
неочищенное зерно хлебных злаков
- 15,0,
аттрактант
- остальное.
В каждую ячейку формы помещают контейнер (например, полиэтиленовый пакетик) с замороженным при минус 40°С вируссодержащим материалом (полученным как и в прототипе известным способом) массой 1 г и шпателем разравнивают поверхность формы таким образом, чтобы все пакетики были покрыты пищевой массой. Во время розлива готовой массы поддерживают ее температуру в пределах 45,0°С в течение всего времени розлива.
Далее получают целевой продукт получают путем экструзии или капиллярно-химического обезвоживания полученной массы, разложенной в пластиковые формы при комнатной температуре.
Пример 3.
К клею столярному (костный) добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,4:1, выдерживают при комнатной температуре 10 часов, затем нагревают до 50°С в течение 1 часа, к 3 кг водного раствора клея столярного добавляют 5 кг неочищенного зерна хлебных злаков (зерно ржи), 0,001 кг тетрациклина и до 100 кг аттрактанта (мясокостная мука), получая состав 3 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 3,0,
тетрациклин
- 0,001
неочищенное зерно хлебных злаков
- 5,0,
аттрактант
- остальное.
В каждую ячейку формы помещают контейнер (например, полиэтиленовый пакетик) с замороженным при минус 20°С вируссодержащим материалом (полученным как и в прототипе известным способом) массой 4 г и шпателем разравнивают поверхность формы таким образом, чтобы все пакетики были покрыты пищевой массой. Во время розлива готовой массы поддерживают ее температуру в пределах 40,0°С в течение всего времени розлива.
Пример 4.
К клею столярному (костный) добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,5:1, выдерживают при комнатной температуре 12 часов, затем нагревают до 60°С в течение 3 часов, к 5 кг водного раствора клея столярного добавляют 15 кг неочищенного зерна хлебных злаков (зерно ржи), 0,003 кг тетрациклина и до 100 кг аттрактанта (мясокостная мука), получая состав 4 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 5,0,
тетрациклин
- 0,003
неочищенное зерно хлебных злаков
- 15,0,
аттрактант
- остальное.
В каждую ячейку формы помещают контейнер (например, полиэтиленовый пакетик) с замороженным при минус 40°С вируссодержащим материалом (полученным как и в прототипе известным способом) массой 1 г и шпателем разравнивают поверхность формы таким образом, чтобы все пакетики были покрыты пищевой массой. Во время розлива готовой массы поддерживают ее температуру в пределах 45,0°С в течение всего времени розлива.
Далее получают целевой продукт получают путем экструзии или капиллярно-химического обезвоживания полученной массы, разложенной в пластиковые формы при комнатной температуре.
Пример 5.
К клею столярному (рыбий) добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,4:1, выдерживают при комнатной температуре 10 часов, затем нагревают до 50°С в течение 1 часа, к 3 кг водного раствора клея столярного добавляют 5 кг неочищенного зерна хлебных злаков (зерно ячменя), 0,001 кг тетрациклина и до 100 кг аттрактанта (мука кормовая из рыбы), получая состав 5 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 3,0,
тетрациклин
- 0,001
неочищенное зерно хлебных злаков
- 5,0,
аттрактант
- остальное.
В каждую ячейку формы помещают контейнер (например, полиэтиленовый пакетик) с замороженным при минус 20°С вируссодержащим материалом (полученным как и в прототипе известным способом) массой 4 г и шпателем разравнивают поверхность формы таким образом, чтобы все пакетики были покрыты пищевой массой. Во время розлива готовой массы поддерживают ее температуру в пределах 40,0°С в течение всего времени розлива.
Пример 6.
К клею столярному (рыбий) добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,5:1, выдерживают при комнатной температуре 12 часов, затем нагревают до 60°С в течение 3 часов, к 5 кг водного раствора клея столярного добавляют 15 кг неочищенного зерна хлебных злаков (зерно ячменя), 0,003 кг тетрациклина и до 100 кг аттрактанта (мука кормовая из рыбы), получая состав 6 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 5,0,
тетрациклин
- 0,003
неочищенное зерно хлебных злаков
- 15,0,
аттрактант
- остальное.
В каждую ячейку формы помещают контейнер (например, полиэтиленовый пакетик) с замороженным при минус 40°С вируссодержащим материалом (полученным как и в прототипе известным способом) массой 1 г и шпателем разравнивают поверхность формы таким образом, чтобы все пакетики были покрыты пищевой массой. Во время розлива готовой массы поддерживают ее температуру в пределах 45,0°С в течение всего времени розлива.
Далее получают целевой продукт получают путем экструзии или капиллярно-химического обезвоживания полученной массы, разложенной в пластиковые формы при комнатной температуре.
Пример 7.
К клею столярному (костный) добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,4:1, выдерживают при комнатной температуре 10 часов, затем нагревают до 50°С в течение 1 часа, к 3 кг водного раствора клея столярного добавляют 5 кг неочищенного зерна хлебных злаков (зерно овса), 0,001 кг тетрациклина и до 100 кг аттрактанта (мясокостная мука), получая состав 7 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 3,0,
тетрациклин
- 0,001
неочищенное зерно хлебных злаков
- 5,0,
аттрактант
- остальное.
В каждую ячейку формы помещают контейнер (например, полиэтиленовый пакетик) с замороженным при минус 20°С вируссодержащим материалом (полученным как и в прототипе известным способом) массой 4 г и шпателем разравнивают поверхность формы таким образом, чтобы все пакетики были покрыты пищевой массой. Во время розлива готовой массы поддерживают ее температуру в пределах 40,0°С в течение всего времени розлива.
Пример 8.
К клею столярному (костный) добавляют воду взятых в массовом соотношении 0,5:1, выдерживают при комнатной температуре 12 часов, затем нагревают до 60°С в течение 3 часов, к 5 кг водного раствора клея столярного добавляют 15 кг неочищенного зерна хлебных злаков (зерно овса), 0,003 кг тетрациклина и до 100 кг аттрактанта (мясокостная мука), получая состав 8 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
водный раствор клея столярного
- 5,0,
тетрациклин
- 0,003
неочищенное зерно хлебных злаков
- 15,0,
аттрактант
- остальное.
В каждую ячейку формы помещают контейнер (например, полиэтиленовый пакетик) с замороженным при минус 40°С вируссодержащим материалом (полученным как и в прототипе известным способом) массой 1 г и шпателем разравнивают поверхность формы таким образом, чтобы все пакетики были покрыты пищевой массой. Во время розлива готовой массы поддерживают ее температуру в пределах 45,0°С в течение всего времени розлива.
Далее получают целевой продукт получают путем экструзии или капиллярно-химического обезвоживания полученной массы, разложенной в пластиковые формы при комнатной температуре.
Для испытания готовых приманок, полученных согласно примерам 1-8, использовали беспородных щенков 3-5 месячного возраста, проверенных на отсутствие антител к вирусу бешенства. В каждом опыте использовали по 2-3 щенка, содержащихся в отдельных клетках. Для определения вкусовой привлекательности щенкам предлагали на выбор приманку по предлагаемому техническому решению и контрольную композицию по прототипу. Исходя из потребления и/или предпочтения определяли степень привлекательности. За состоянием животных вели наблюдение в течение 30 суток. Активность вируснейтрализующих антител определяли в реакции нейтрализации с использованием референс-сыворотки.
Готовые вакцины, полученные по примерам 1-8, испытывали на прочность (при сбрасывании с 150 м не ломались и не рассыпались - сохраняли первоначальную форму), термостабильность (выдерживание от минус 20 до плюс 40°С не влияет на физические показатели и биологические свойства), влагоустойчивость (при экспозиции в течение суток при комнатной температуре сохраняли первоначальную форму - не происходило размокания приманок при 90% влажности), вкусовую привлекательность, безвредность (100% поедаемость по сравнению с прототипом, где поедаемость в аналогичных условиях составила 80%), при введении перорарольно собакам не вызывала аллергических реакций, активность вируснейтрализующих антител в сыворотке крови животных, вакцинированных однократно при использовании заявляемой приманки определялась на уровне выше 2,3-2,4 МЕ/см, что превышало аналогичный показатель при использовании прототипа на 8,7-40%.
Вирус-вакцина для орального применения в виде приманок-таблеток сохраняла свои иммунобиологические характеристики в течение 12 месяцев при 6-8°С, причем добавление вакцины против бешенства в приманку в виде блистера можно производить как непосредственно при производстве приманки, так и после ее высушивания в форме, укладывая вакцину во внутрь приманки склеивая приманку с вакциной, например столярным клеем, что упрощает технологию борьбы с бешенством диких плотоядных животных, поскольку основу приманки можно хранить при плюс 20 до минус 40°С более 10 лет, в то время как блистер с вакциной сохраняет свою активность в ограниченном временном интервале.
Как показали результаты экспериментальных исследований, предлагаемая приманка для оральной иммунизации диких плотоядных животных против бешенства обеспечила более высокую иммунизацию животных чем в прототипе.