Влияние трансплантации перисинусоидальных клеток печени на регенерацию печени крыс после повреждения четыреххлористым углеродом и 2-ацетиламинофлуореном

Оригинальные исследования

53

ВЛИЯНИЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ПЕРИСИНУСОИДАЛЬНЫХ КЛЕТОК ПЕЧЕНИ НА РЕГЕНЕРАЦИЮ ПЕЧЕНИ КРЫС ПОСЛЕ ПОВРЕЖДЕНИЯ

четыреххлористым углеродом и 2-ацетиламинофлуореном

Г.Р. Бурганова 1, А.А. Титова 1, Э.И. Шарипова 12, Г.О. Певнев 12, М.О. Мавликеев 1,

И.М. Газизов 12, А.Р. Галявиева 2, А.К. Шафигуллина 1, М.С. Калигин 1, М.А. Титова 1,

А.А. Гумерова 1, А.П. Киясов 1

1 Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань, Россия 2Казанский государственный медицинский университет, Казань, Россия

Influence of liver perisinusoidal cell transplantation on liver regeneration after damage induced by CCL4 and 2-acetylaminofluorene

G.R. Burganova 1, A.A. Titova 1, E.I. Sharipova 12, G.O. Pevnev12, M.O. Mavlikeev1, I.M. Gazizov12,

A.R. Galyavieva 2, A.K. Shafigullina 1, M.S. Kaligin 1, M.A. Titova 1, A.A. Gumerova 1, A.P. Kiassov1 1 Kazan (Volga region) Federal University, Kazan, Russia 2Kazan State Medical University, Kazan, Russia

Исследования последнего десятилетия позволяют рассматривать перисинусоидальные клетки печени в качестве возможных региональных стволовых клеток печени. Несмотря на это, работы, посвящённые изучению влияния их трансплантации на регенерацию печени, практически отсутствуют. Целью данного исследования было изучение регенерации печени после трансплантации перисинусо-идальных клеток крысам с повреждением четырёххлористым углеродом и четырёххлористым углеродом в сочетании с 2-ацетиламинофлуореном. Установлено, что в обоих случаях токсического повреждения трансплантированные перисинусоидальные клетки обнаруживаются в печени реципиента, дифференцируются в гепатоциты. При этом не выявлено трансдифференцировки введённых клеток в миофибробласты, что указывает на сомнительность риска развития фиброза печени при использовании данного типа клеток для целей клеточной терапии.

Ключевые слова: печень, стволовые клетки, периси-нусоидальные клетки печени, трансплантация, четырёххлористый углерод, регенерация, дифференцировка.

Печень является органом с высоким регенераторным потенциалом. Исследования последних десятилетий позволили изучить особенности регенерации печени на различных моделях её повреждения. Классической моделью токсического поражения печени является воздействие четырёххлористым углеродом (ЧХУ). ЧХУ метаболизиру-ется в 3-й зоне печёночного ацинуса комплексом цитохрома Р-450, в результате чего образуется высокореактивный радикал трихлорметила, который вызывает перекисное окисление липидов эндоплазматической сети, разрушение плазматической мембраны, повышение уровня внутриклеточного кальция и гибель гепатоцитов [1]. В ответ на данные процессы происходит активация клеток Купфера, которая ведёт к дальнейшему повреждению печени за счет вырабатываемых цитокинов, радикалов активного кислорода и активации нейтрофилов. В результате через 36—48 ч в печени наблюдается картина чётко очерченного перицентрального некроза. Вслед за этим следует пролиферация близлежащих гепатоцитов, которые восстанавливают область повреждения в течение 1—2 нед. [2]. Обнаруживаемое при этом повышение уровня альфа-фетопротеина (АФП) в плазме крови может быть результатом его секреции гепатобластами, образующимися в результате пролиферации гепатоцитов, прилежащих к зоне некроза [3]. В данной модели изучения регенера-

е-mail: guzel.burganova@gmail.com

Research in the past decade allows us to consider liver perisinusoidal cells as a possible regional stem cells of the liver. Despite of this, there is no work dedicated to study their influence to liver regeneration. The aim of this work was to study liver regeneration after liver perisinusoidal cell transplantation in rats with CCL4 and combination of CCL4 and 2-acetylaminofluorene damage. Our results showed that in both models of toxic damage transplanted perisinusoidal cells are found in the recipient's liver and exhibit the properties of stem cells by differentiation into hepatocytes. Transdifferentiation of injected cells into myofibroblasts was not detected which indicates the absence of liver fibrosis risk after use of this cell type for cell therapy.

Key words: liver, stem cells, liver perisinusoidal cell, transplantation, carbon tetrachloride, regeneration, differentiation.

ции основную роль в восстановлении печени играют гепатоциты.

При поражении печени ЧХУ на фоне действия

2-ацетиламинофлуорена (ААФ) происходит блокирование пролиферации гепатоцитов, и регенерация осуществляется за счёт активации клеток регионального стволового компартмента. При этом источником образования выстилки большинства новых желчных протоков служат холангиоциты предсуществующих желчных протоков. Новообразованные желчные протоки интенсивно ветвятся и мигрируют в паренхиму печёночной дольки, вырабатывая АФП [4].

В последние годы активно проводится поиск доступных клеточных источников для индукции регенерации печени. В качестве трансплантируемого материала были применены клетки пупочного канатика [5], фетальные [6], мезенхимальные [7—12], гемопоэтические стволовые клетки [13, 14]. Единственная работа, в которой описана трансплантация перисинусоидальных клеток печени (ПКП) мышам после частичной гепатэктомии, опубликована в 2014 г. научной группой P.B. Patil [6].

Целью настоящего исследования стало изучение регенерации печени крыс после трансплантации крысам после повреждения печени ЧХУ и блокирования пролиферации гепатоцитов ААФ перисинусо-идальных клеток печени, трансфицированных геном зелёного флуоресцентного белка (Enhanced Green Fluorescent Protein, EGFP).

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

54

Оригинальные исследования

Материал и методы

Исследование было проведено на белых беспородных крысах-самцах массой 250—300 г, находящихся на стандартном рационе вивария и имеющих свободный доступ к воде. Животные были разделены на 4 группы: I (контрольная группа) — крысы с повреждением печени ЧХУ без трансплантации ПКП, II группа — крысы с повреждением печени ЧХУ с трансплантацией ПКП, III группа — крысы с повреждением печени ЧХУ и ААФ без трансплантации ПКП (контрольная группа), IV группа — крысы с повреждением печени ЧХУ и ААФ с трансплантацией ПКП. ААФ животным групп III и IV вводили внутрибрюшинно ежедневно за 5 сут. до операции, в день операции введение не проводили, затем вводили ежедневно до выведения животных из эксперимента.

Выделение ПКП было проведено методом кол-лагеназно-проназной перфузии печени с последующим разделением клеток в градиенте плотности гистоденза [15]. Количество выделенных клеток и их жизнеспособность определяли путём подсчёта клеток в камере Горяева при разведении клеточной суспензии в трипановом синем в соотношении 1:10. ПКП трансфицировали вирусом, несущим ген EGFP, культивировали в инкубаторе в течение 1 ч при температуре 37°C и 5% содержании СО2 во влажной атмосфере в питательной среде DMEM (Sigma, США), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS, Sigma, США), 146 мг/мл L-глутамина, 100 Ед/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma, США). За сутки до операции животным вводили 20% раствор ЧХУ на оливковом масле в дозе 2 мл/кг. Трансплантацию ПКП проводили интраоперационно путём введения суспензии клеток в воротную вену в дозе 3х10в клеток/животное. Животным групп I и III в воротную вену вводили физиологический раствор.

Из эксперимента животных выводили через 1, 2, 3, 5, 7, 14 сут. после введения клеток, кусочки печени помещали в 10% нейтральный формалин на 0,2 М фосфатном буфере (рН = 7,4) на 24 ч для фиксации и заливали в парафин по стандартной методике. Ставили иммуногистохимические реакции с коммерческими антителами к EGFP (клон GSN-24, Sigma, 1:200), С-kit (рецептор к фактору стволовых клеток, клон T595, Novocastra, 1:75), маркёру миофибробластов альфа-гладкомышечному актину (АГМА, клон 1A4, DAKO, 1:50), маркёру гепатобла-стов и холангиоцитов цитокератину 19 (ЦК19, клон ВА-17, Santa Crus, 1:200), маркёру гепатобластов альфа-фетопротеину (Abcam, 1:200). Иммуногистохимическое окрашивание было проведено с использованием визуализационных систем Novolink фирмы Novocastra (Великобритания), CSA и Envision фирмы Dako (Дания). Контроль специфичности иммуногистохимической реакции проводили путём замены первичных антител неиммунной сывороткой мыши или кролика, а также путём исключения из реакции первичных антител.

Результаты и обсуждение

В I и III группах ни на одном из экспериментальных сроков не было выявлено клеток, экспрессирующих EGFP. При изучении экспрессии EGFP в срезах печени крыс II группы выявлены лишь единичные мелкие округлые EGFP + клетки в синусоидах и единичные гепатоциты через сутки после трансплантации (рис. 1A). К третьим суткам количество EGFP+

гепатоцитов увеличивалось и достигало максимума (рис. 1 Б), а затем снижалось. Данный факт может указывать на возможность дифференцировки ПКП в гепатоциты, которая может быть либо прямой, либо осуществляться за счёт слияния трансплантированных клеток с гепатоцитами реципиента. При изучении экспрессии EGFP в срезах печени крыс IV группы мы выявили некоторое повышение числа EGFP-позитивных гепатоцитов по сравнению с группой II как в паренхиме печени, так и в перипор-тальных областях печеночных долек с 3 по 7 сут. эксперимента; в IV группе также были выявлены EGFP-позитивные синусоидные клетки. Результаты данного эксперимента подтверждают возможность дифференцировки ПКП в гепатоцитарном направлении, а также предположение о том, что уровень приживления трансплантированных стволовых клеток и репопуляции гепатоцитов с участием этих клеток коррелирует с тяжестью повреждения печени.

Чтобы оценить выраженность активации клеток стволового компартмента и процессы дифференци-ровки этих клеток, были изучены экспрессия маркёра стволовых и прогениторных клеток C-kit [16] и экспрессия маркёров гепатобластов — ЦК19 и АФП.

Рис. 1. Срезы печени крысы II группы (ведение ЧХУ и трансплантация EGFP+ ПКП]: EGFP+-renaTO^Tbi. Иммуногистохимическая реакция с антителами к EGFP, продукт иммуногистохимической реакции красного цвета, докраска гематоксилином. А — 1 сут.;

Б — 3 сут. Ув. х400

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

Оригинальные исследования

55

Исследование экспрессии С-kit в срезах печени животных I группы выявило наличие множества клеток, экспрессирующих данный маркёр, начиная с 1 сут. эксперимента. Вплоть до 14 сут. можно было обнаружить С-kit^ мелкие округлые клетки в пределах портальных трактов и в паренхиме; они располагались как группами, так и по отдельности (рис. 2А).

А*

*

#,л- *

* 0* ш и .  . -

**> л* * Jc. • t 11

• I

>

. #« '•#"

Рис. 2. Срезы печени крысы I группы (введение ЧХУ и трансплантация EGFP+ ПКП]:

А — группа С-kit+ клеток, 1 сут.;

Б — C-kit+ гепатоциты и синусоидные клетки, 2 сут.; В — ЦК19+ эпителий желчных протоков и клетки в портальной зоне, 5 сут.

Иммуногистохимическая реакция, продукт реакции красного цвета, докраска гематоксилином. Ув. х400

Первые С-kit^ гепатоциты появлялись через двое суток (рис. 2Б); после 5 сут. их число постепенно снижалось. Клетки желчных протоков и единичные мелкие округлые клетки экспрессировали ЦК19, клетки были расположены в основном перипорталь-но и иногда в паренхиме (рис. 2В). На всех сроках эксперимента в этой группе в печени определялись единичные ЦК19+ синусоидные клетки. Клеток, экспрессирующих АФП, в данной группе не выявлено.

Во II группе С-kit с первых суток эксперимента экспрессировали мелкие округлые клетки, расположенные в пределах крупных портальных трактов, единичные синусоидные клетки и гепатоциты (рис. 3А, Б). Далее, вплоть до 5 сут. число С-kit^ округлых клеток и гепатоцитов увеличивалось, а после 7 сут. экспрессия С-kit снижалась, но единичные окрашенные клетки можно было выявить в пери-портальной зоне и через 14 сут. В целом интенсивность экспрессии C-kit была меньше, чем в I группе. С 1 по 3 сут. можно было выявить ЦК19+ эпите-лиоциты желчных протоков и единичные округлые клетки перипортально и в паренхиме печени; через 5 сут. ЦК19+ клетки формировали группы, и обнаруживались единичные позитивные клетки в синусоидах (рис. 3В); через 7 сут. — число ЦК19+ синусоидных клеток и сгруппированных округлых клеток увеличивалось (рис. 3Г), происходило ветвление протоков, а через 14 сут. выявлены единичные ЦК19+ гепатоциты (рис. 3Д).

АФП с первого дня эксперимента экспрессировали мелкие округлые клетки в портальных трактах, отдельные клетки в синусоидах и довольно многочисленные гепатоциты (рис. 3Е). На второй неделе число АФП-позитивных клеток уменьшалось. Появление в паренхиме печени после повреждения ЧХУ и трансплантации ПКП мелких округлых клеток, экспрессирующих маркёры гепатобластов ЦК19 и АФП, может свидетельствовать об активации региональных стволовых клеток и дифференцировке их потомков в гепатоцитарном направлении, что косвенно подтверждается появлением в печени позитивных по этим маркёрам клеток, имеющих форму и размеры гепатоцитов. Локализация же части позитивных клеток в синусоидах может свидетельствовать о локализации клеток стволового компартмента в синусоидах печени. Очевидно, что данный процесс стимулируется именно введением ПКП, поскольку в контрольной группе I количество ЦК19+ клеток было существенно ниже, а экспрессии АФП не наблюдалось вовсе. Нельзя также исключить, что во II группе появление ЦК19+/АФП + клеток в синусоидах может быть связано с гепатоцитарной дифференцировкой трансплантированных клеток.

В печени животных III группы (введение ЧХУ и ААФ) пролиферативная активность гепатоцитов была минимальной (единичные клетки в препарате), что обусловлено подавлением пролиферации гепатоцитов ААФ. Экспрессия С-kit обнаруживалась в единичных мелких округлых клетках в пределах небольших портальных трактов, и их число увеличивалось до 5—6 клеток в крупных портальных трактах к 3 сут. эксперимента, в это же время появлялись единичные С-kit^ синусоидные клетки, а также округлые клетки в паренхиме печени. ЦК19 экспрессировали только клетки внутрипечёночных желчных протоков. Лишь к 7 сут. эксперимента отмечены незначительные признаки ветвления протоков и единичные ЦК19+ клетки в перипортальной зоне. На этих же

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

56

Оригинальные исследования

сроках в образцах печени данной группы отмечено появление АФП в единичных синусоидных клетках, расположенных перипортально и в паренхиме, что может свидетельствовать о появлении незрелых ЦК19+/АФП + гепатобластов в ходе регенерации печени после токсического повреждения.

В IV группе экспрессия C-kit отмечена в единичных синусоидных клетках и мелких округлых клетках в перипортальных областях, причём в пределах крупных портальных трактов таких клеток было больше.

К 7 сут. их число постепенно уменьшалось (рис. 4А). Помимо этого на 3 сут. определялись единичные C-kit+ гепатоциты (рис. 4Б). Следует отметить, что интенсивность экспрессии и количество позитивных по C-kit клеток в группах II и IV были несколько ниже, чем в группах I и III. Данный факт можно объяснить тем, что после трансплантации ПКП происходит уменьшение активации эндогенного стволового ком-партмента, видимо, из-за введения большого объёма клеточного материала в регенерирующую печень.

0

А Л f  «

. *

7» г, ' ^ ~ *> *

Т Ч-; t '

Ъ' : * * *

4 9 UU

Ч.‘ * 9 , * г С* '% * * v’

А л v, $ Л ' Clj ма лл.

1 ‘ - ~ \ -- - V * ч

. J ^ « * <&

V - ,3 •

и

0 4

£ • *V *V ’ в*Гч\ . &

** * - Т Г % % фф '4 * V <!>*'• ' ' ' в

9* Л ' - * * t ' . '** • ь *

I . *5 0' . е* * * 'г *: *

J4. . *

- * * •*«

* © «

Э «!•

V ^ *

* ,\r.v * -

-Л»

ь • ь *

‘ э s

V •

‘"Ч • •v.; *.  Л

«__• А  ;f 3 S _Г Т^Гч

Д<.# i* ;/vT V

,v% > • I -V* -.?*•••;*•• •,

>v\* • **V;^% .и*

• • • * л ' ,•*•** • л

» .• «i

?. .'Л,- ' * . •/.

* * • • . Чж « !у • • Я •' \м,

• #•„« . t> J V * S' 1 *4 Ф

•**; • % I* v< • \

'Л J* «Г. «*»

Рис. 3. Срезы печени крысы II группы (введение ЧХУ и трансплантация EGFP+ ПКП):

А, Б — C-kit+ гепатоциты и синусоидные клетки, 1 сут.; В — группа ЦК19+ клеток, 5 сут.; Г — реакция на ЦК19, дуктулярная реакция, 7 сут.; Д — ЦК19+ гепатоцит, 14 сут.; Е — АФП+ гепатоциты и синусоидные клетки, 1 сут. Иммуногистохимическая реакция, продукт реакции красного цвета, докраска гематоксилином. Ув. х400

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

Оригинальные исследования

57

. ' . »•

Б-**' /*• .• •' > ч,'

/г* <

’ • **,.»« * * *’V *

• •• . ••• -V#* • / . • •

* a w т ' а

* * »*•»** •• •  , •, *

>* • 1 il •, _ ^ **г

Рис. 4. Срезы печени крысы IV группы (введение ЧХУ и ААФ и трансплантации EGFP+ ПКП):

А — С-kit+ клетка в портальном тракте, 7 сут.; Б — C-kit+ гепатоцит, 3 сут.; В — реакция на ЦК19, дуктулярная реакция, 5 сут.; Г — АГМА+ сосуды, миофибробласты в синусоидах печени отсутствуют, 14 сут. Иммуногистохимическая реакция, продукт реакции красного цвета, докраска гематоксилином. Ув. х400

Подобный феномен мы наблюдали ранее после трансплантации мононуклеаров пуповинной крови крысам, перенесшим частичную гепатэктомию [17]. Первые два дня ЦК19 экспрессировали только холангиоциты, однако уже через 3 сут. появлялись единичные округлые ЦК19 + клетки в перипортальной зоне, а с 5 сут. можно было наблюдать сгруппированные ЦК19 + клетки, а также позитивные синусоидные клетки, расположенные перипортально и в паренхиме, признаки дуктулярной реакции и максимальное увеличение числа ЦК19 + клеток в портальной зоне (рис. 4В). На поздних сроках экспрессия ЦК19 сохранялась в клетках желчных протоков и синусоидных клетках. Экспрессия АФП в данной группе практически не отличалась от группы III: она выявлена лишь в синусоидных клетках, расположенных перипортально и в паренхиме, однако в одном образце через 5 сут. выявлены единичные позитивные гепатоциты. Таким образом, трансплантация ПКП и в этом случае обладает некоторым стимулирующим влиянием на регенераторный процесс, несмотря на сочетанное повреждение печени ЧХУ и ААФ: дифференцирующиеся клетки появляются на 2 сут. раньше (5 сут. против 7 в контроле), и уже к пятым суткам можно видеть дифференцирующиеся АФП + клетки, имеющие форму и размеры гепатоцитов.

Ни на одном из экспериментальных сроков ни в одной из групп в паренхиме печени не выявлено

АГМА-позитивных миофибробластов. Экспрессия АГМА отмечена только в гладкомышечных клетках внутрипечёночных сосудов (внутренний положительный контроль) (рис. 4Г). Следовательно, трансплантация ПКП не сопровождается трансдиффе-ренцировкой вводимых клеток в миофибробласты и является, таким образом, безопасным методом с точки зрения риска развития фиброза печени. Ранее похожие результаты мы получили при изучении трансплантации этих клеток крысам после частичной гепатэктомии [18].

Следовательно, ПКП после трансплантации в воротную вену мигрируют в печень с портальным кровотоком и способны дифференцироваться в ге-патоцитарном направлении. Кроме того, трансплантация ПКП стимулирует регенерацию печени после повреждения ЧХУ и ЧХУ в сочетании с ААФ. В последнем случае стимулирующее влияние ПКП менее значимо. Трансплантация ПКП не сопровождается очевидным риском развития фиброза печени в обеих экспериментальных моделях.

Благодарности

Работа выполнена в рамках государственной программы повышения конкурентоспособности Казанского (Приволжского) федерального университета среди ведущих мировых научно-обра-

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

58

Оригинальные исследования

зовательных центров» и субсидии, выделенной Казанскому федеральному университету для выполнения государственного задания в сфере научной деятельности.

Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ 12-04-97088-р_поволжье_а «Изучение фундаментальных механизмов пластичности и

ЛИТЕРАТУРА:

1. Farber J.L. The biochemical pathology of liver cell necrosis. Am. J. Physiol. 1975; 81: 237-50.

2. Stenger R.J. Ultrastructural alterations within hepatic parenchymal cells after carbon tetrachloride poisoning. In: Bajusz E, Jasmin G, eds. Methods in Achievement in Experimental Pathology. 1. Basel, Switzerland: Karger, 1966: 677-700.

3. Panduro А., Shalaby F., Weiner F.R. et al. Transcriptional switch from albumin to a-fetoprotein and changes in transcription of other genes during carbon tetrachloride induced liver regeneration. Biochemistry. 1986; 25: 1414-20.

4. Petersen B.E. Hepatic oval cell activation in response to injury following chemically induced periportal or pericentral damage in rats. Hepatology. 1998; 27: 1030-8.

5. Cui L., Shi Y., Zhou X. et al. A set of microRNAs mediate direct conversion of human umbilical cord lining-derived mesenchymal stem cells into hepatocytes. Cell Death Dis. 2013; 14; 4: e918.

6. Patil P.B., Joshi M., Kuna V.K. et al. CD271 identifies functional human hepatic stellate cells, which localize in peri-sinusoidal and portal areas in liver after partial hepatectomy. Cytotherapy. 2014; 16(7): 990-9.

7. Kaibori M., Adachi Y., Shimo T. et al. Stimulation of liver regeneration after hepatectomy in mice by injection of bone marrow mesenchymal stem cells via the portal vein. Transplant. Proc. 2012; 44(4): 1107-9.

8. Khuu D.N., Nyabi O., Maerckx C. et al. Adult human liver mesenchymal stem/progenitor cells participate in mouse liver regeneration after hepatectomy. Cell Transplant. 2013; 22(8):1369-80.

9. Seki T., Yokoyama Y., Nagasaki H. et al. Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell transplantation promotes hepatic regeneration after hepatic ischemia-reperfusion and subsequent hepatectomy in rats. J. Surg. Res. 2012; 178(1): 63-70.

10. Devine S.M., Cobbs C., Jennings M. et al. Mesenchymal stem cells distribute to a wide range of tissues following

направленной дифференцировки звёздчатых клеток печени для разработки клеточной биомедицинской технологии восстановления гепатоцитов». Работа частично выполнена на оборудовании Междисциплинарного центра коллективного пользования и Научнообразовательного центра фармацевтики Казанского (Приволжского) федерального университета.

systemic infusion into nonhuman primates. Blood 2003; 101(8): 2999-3001.

11. Campard D., Lysy P.A., Najimi M. et al. Native umbilical cord matrix stem cells express hepatic markers and differentiate into hepatocyte-like cells. Gastroenterology 2008; 134(3): 833-48.

12. Popp F.C., Slowik P., Eggenhofer E. et al. No contribution of multipotent mesenchymal stromal cells to liver regeneration in a rat model of prolonged hepatic injury. Stem Cells 2007; 25(3): 639-45.

13. Petersen B.E., Bowen W.C., Patrene K.D. et al. Bone marrow as a potential source of hepatic oval cells. Science 1999; 284(5417): 1168-70.

14. Andreeva D., Gazizov I., Yilmaz T. et al. Differentiation of transfected human umbilical cord blood stem cells in the regenerating liver of rats. Abstracts of 45th annual meeting of the European association for the study of the liver. J. of Hepatol. 2010; 52, S.1: S353-4.

15. Шафигуллина А.К., Трондин А.А., Бурганова Г.Р. и др. Сравнение различных методов выделения, мечения и трансплантации звёздчатых клеток печени крыс. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2013; VMK3): 147-51.

16. Газизов И.М. Гумерова А.А., Калигин М.С. и др. Экспрессия рецептора фактора стволовых клеток C-kit в регенерирующей печени после частичной гепатэктомии. Морфологические ведомости 2008; 1-2: 23-7.

17. Андреева Д.И., Газизов И.М., Йылмаз Т.С. и др. Возможные направления дифференцировки мононуклеаров пуповинной крови человека в регенерирующей печени крыс. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2013; VMI(3): 95-100.

18. Шафигуллина А.К., Гумерова А.А., Трондин А.А. и др. Трансплантированные звёздчатые клетки печени участвуют в регенерации органа после частичной гепатэктомии без риска развития фиброза печени. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2012; VII(3): 169-72.

Поступила: 01.09.2014

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014