ПРЕПАРАТ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ДИАРЕЙ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ
PREPARATION FOR PREVENTION OF DIARRHOEA IN NEWBORN CALVES

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способу профилактики ранних диарей у телят.
Известно, что основной причиной развития диарей у телят являются условно патогенные бактерии, которые чрезмерно размножаются в кишечнике при недостаточно сформированной «колонизационной» резистентности (Эколого-адаптационная стратегия защиты здоровья и продуктивности животных в современных условиях / Отв. ред. А.Г. Шахов - Воронеж: Воронежский госуниверситет, 2001. - 207 с.). Для профилактики расстройств пищеварения предлагается использовать различные препараты, в частности пробиотики, антибиотики, сорбенты, иммуномодуляторы, препараты крови (Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях / Материалы конф. - Воронеж: Воронежский госуниверситет, 2002. - 731 с.). Однако выше обозначенные средства не всегда достаточно эффективны, так как имеют ряд недостатков.
Недостатком современных пробиотиков состоящих из живых бактерий-симбионтов остается их слабая приживляемость в кишечном тракте животных. Состав внедряемой с помощью пробиотиков микрофлоры не воспроизводит все видовое и индивидуальное многообразие нормальной микрофлоры кишечника.
Недостатком антибиотиков является непродолжительный срок действия; они вызывают гибель не только патогенных микроорганизмов, но и симбионтов; обуславливают развитие антибиотикоустойчивых расе болезнетворных бактерий; токсичны для самих животных.
Недостатком сорбентов является отсутствие у них селективности, вместе с токсическими продуктами и патогенными бактериями они удаляют из кишечника и пищевые нутриенты (витамины, микроэлементы, аминокислоты), что ослабляет животных.
Использование иммунномодуляторов на сегодняшний день для большинства хозяйств экономически не доступно, и, кроме того, требует определенных предварительных иммунологических анализов, что также мало осуществимо в общественном секторе сельскохозяйственного производства.
Препараты крови достаточно эффективны и недороги. Например, широко известен препарат гидролизин, который представляет собой раствор, полученный при кислотном гидролизе белков крови крупного рогатого скота и содержит все незаменимые аминокислоты и 2% глюкозы (Червяков Д.К., Евдокимов П.Д, Вишкер А.С. Лекарственные средства в ветеринарии. М., Колос, 1977. - С.271). Однако, из-за нейтральной реакции препараты крови (в т.ч. и гидролизин) применяются только парентерально, поскольку при употреблении во внутрь служат отличной питательной средой для условно патогенных бактерий, которые, чрезмерно размножившись в кишечнике, могут вызвать понос.
Данный недостаток можно нивелировать с помощью пищевых консервантов - молочной и бензойной кислоты (пат. РФ №2186497 от 10.08.2002 г.), а повысить профилактический эффект за счет дополнительного ввода янтарной кислоты (пат. РФ №2292874 от 10.02.2007 г., прототип, содержит масс.%: молочная кислота 0,3-0,4, бензойная кислота 0,04-0,05, янтарная кислота 0,1-0,2, кислотный гидролизат крови - остальное.).
Однако у этих решений так же имеется недостаток, который заключается в том, что введенные в состав препаратов органические кислоты в обозначенном количестве были ориентированы в основном на сохранность целевого продукта и повышение обменных процессов в организме телят. Между тем, устойчивость новорожденных телят к острым кишечным заболеваниям, сопровождающимся диарейным синдромом, во многом определяется уровнем формирования (состояния) их колонизационной резистентности, т.е. качественным и количественным составом симбионтной микрофлоры в пищеварительном тракте. Поэтому создание наиболее благоприятных условий для собственной симбионтной микрофлоры животных может обеспечить полноценное функционирование колонизационной резистентности и противостоять размножению в кишечном тракте патогенных и условно патогенных микроорганизмов.
Поставленная задача достигается тем, что предложен препарат для профилактики диарей у новорожденных телят, включающий кислотный гидролизат крови животных, молочную, бензойную, янтарную кислоты, отличающийся тем, что дополнительно содержит уксусную кислоту при следующем соотношении компонентов, масс.%:
Уксусная кислота…
0,4-0,5
Молочная кислота…
0,05-0,06
Бензойная кислота…
0,04-0,05
Янтарная кислота…
0,02-0,03
Кислотный гидролизат крови…
остальное.
Препарат дают новорожденным телятам после первой выпойки молозива вместе с 1,5-2 л молока в количестве 50-60 мл 2 раза в сутки в течение 10 дней подряд.
Обоснованием ввода в состав препарата уксусной кислоты явилось то обстоятельство, что в кишечном химусе животных в составе летучих жирных кислот, являющихся продуктом метаболизма кишечных бактерий, до 70-80% приходится на уксусную кислоту (Eje Collinder Intestinal functions in animals/ Stockholm, Sweden, 2001. - P.35). По всей видимости, данная кислота участвует в большей степени в регуляции качественного и количественного состава бактериального сообщества пищеварительного тракта.
Проведя предварительные исследования в условиях in vitro, было установлено, что добавление в среду культивирования уксусной кислоты в объеме 0,02-0,03% стимулирует размножение лактобактерий, повышая их численность в 10-20 раз по сравнению со средой без кислоты.
Еще в большей степени стимулирующий эффект был отмечен при использовании уксусной, молочной и янтарной кислот при их соотношении как 1:0,125:0,1. полученные результаты послужили основанием для разработки препарата предназначенного для профилактики диарей у новорожденных телят.
Примеры, доказывающие эффективность наличия уксусной кислоты в заявляемом препарате.
Пример 1. Было сформировано 2 группы новорожденных телят -опытную и контрольную по 5 животных в каждой. Подопытные телята после первой выпойки молозива получали препарат состоящий масс.%: уксусная кислота 0,2; молочная кислота 0,03; бензойная кислота 0,04; янтарная кислота 0,01; кислотный гидролизат крови - остальное. Телятам из контрольной группы давали прототип. Препараты давали с молоком 2 раза в сутки в течение 10 дней в дозе 50 мл. За период наблюдения (10 дней) в опытной группе диарея была у 4 телят, в контрольной группе - у 3 телят.
Пример 2. Было сформировано 2 группы новорожденных телят - опытную и контрольную по 5 животных в каждой. Подопытные телята после первой выпойки молозива получали препарат состоящий масс.%: уксусная кислота 0,3; молочная кислота 0,04; бензойная кислота 0,05; янтарная кислота 0,02; кислотный гидролизат крови - остальное. Телятам из контрольной группы давали прототип. Препараты давали с молоком 2 раза в сутки в течение 10 дней в дозе 60 мл. За период наблюдения (10 дней) в опытной группе диарея была у 2 телят, в контрольной группе - у 2 телят.
Пример 3. Было сформировано 2 группы новорожденных телят - опытную и контрольную по 5 животных в каждой. Подопытные телята после первой выпойки молозива получали препарат состоящий масс.%: уксусная кислота 0,4; молочная кислота 0,05; бензойная кислота 0,05; янтарная кислота 0,03; кислотный гидролизат крови - остальное. Телятам из контрольной группы давали прототип. Препараты давали с молоком 2 раза в сутки в течение 10 дней в дозе 60 мл. За период наблюдения (10 дней) в опытной группе ни один теленок не заболел, в контрольной группе - у 2 телят регистрировали диарею.
Пример 4. Было сформировано 2 группы новорожденных телят - опытную и контрольную по 5 животных в каждой. Подопытные телята после первой выпойки молозива получали препарат состоящий масс.%: уксусная кислота 0,5; молочная кислота 0,06; бензойная кислота 0,04; янтарная кислота 0,02; кислотный гидролизат крови - остальное. Телятам из контрольной группы давали прототип. Препараты давали с молоком 2 раза в день в дозе 50 мл. За период наблюдения (10 дней) в опытной группе все телята оставались здоровыми, тогда как в контрольной группе заболело 3 теленка.
Пример 5. Было сформировано 2 группы новорожденных телят -опытную и контрольную по 5 животных в каждой. Подопытные телята после первой выпойки молозива получали препарат состоящий масс.%: уксусная кислота 0,6; молочная кислота 0,07; бензойная кислота 0,04; янтарная кислота 0,03; кислотный гидролизат крови - остальное. Телятам из контрольной группы давали прототип. Препараты давали с молоком 2 раза в день в дозе 50 мл. За период наблюдения (10 дней) в опытной группе все телята оставались здоровыми, тогда как в контрольной группе заболело 2 теленка.
Пример 6. Было сформировано 2 группы новорожденных телят - опытную и контрольную по 5 животных в каждой. Подопытные телята после первой выпойки молозива получали препарат состоящий масс.%: уксусная кислота 0,7; молочная кислота 0,08; бензойная кислота 0,04; янтарная кислота 0,02; кислотный гидролизат крови - остальное. Телятам из контрольной группы давали прототип. Препараты давали с молоком 2 раза в день в дозе 60 мл. За период наблюдения (10 дней) в опытной группе все телята оставались здоровыми, тогда как в контрольной группе заболело 2 теленка. Следует отметить, что препарат при данном составе имеет выраженный уксусный запах и повышенную кислотность, что негативно сказывается на вкусовых свойствах молока при добавлении препарата и нежеланием его пить телятами.
Следовательно, наиболее оптимальный состав препарата для профилактики диарей у новорожденных телят, обеспечивающий выраженный эффект при сохранении вкусовых качеств молока и минимальные производственные затраты является, масс%: уксусная кислота 0,4-0,5; молочная кислота 0,05-0,06; бензойная кислота 0,04-0,05; янтарная кислота 0,02-0,03; кислотный гидролизат крови - остальное.
Такое количество кислот взято с тем расчетом, что при добавлении препарата в молоко их концентрация изменяется до такого значения, которое обеспечивает стимуляцию размножения молочнокислых бактерий.
Пример конкретного использования препарата для профилактики диареи у новорожденных телят.
На молочном комплексе ЗАО «Путиловец-Юг» Краснодарского края было сформировано 3 группы новорожденных телят по 20 животных в каждой. Телята первой группы получали молоко без препаратов, второй группы - с прототипом, третьей - с предлагаемым способом. Препараты давали в течение 10 дней 2 раза в сутки в количестве 50-60 мл. Через 10 дней у телят исследовали фекальную микрофлору и кровь, учитывали заболеваемость диареями и сохранность животных в группах.
Опыт показал (табл.1), что в 1 группе из 20 телят заболели все животные, причем 12 из них тяжелой формой, при которой использовалась интенсивная терапия с применением антибиотиков, инфузионных средств и витаминов. Из этих 12 телят пало 4. Таким образом, сохранность телят в этой группе составила 80%. Во второй группе заболело 12 телят, у 5 из них заболевание протекало в тяжелой форме и сопровождалось сильным обезвоживанием. Данные телята лечились с использованием антибиотиков, инфузионных средств и витаминов. В этой группе пало 2 теленка. Сохранность составила 90%. В 3 группе заболело 8 телят, у которых заболевание протекало только в средней (3 теленка) и легкой форме (5 телят). Лечение, которых заключалось в назначении диеты и выпойке регидратационных растворов и вяжущих средств в течение 1-2 дней. В этой группе не пал ни один теленок, сохранность составила 100%.
Таблица 1 - Эффективность применения препаратов для профилактики диарей у новорожденных телят
Показатель
Группа
1 (контрольная)
2 (опытная, получала прототип)
3 (опытная, получала предлагаемый препарат)
Количество телят
20
20
20
Заболело диареями, гол.
20
12
8
В том числе: в легкой форме
4
5
в средней форме
8
3
3
в тяжелой форме
12
5
-
Пало, гол.
4
2
-
Заболеваемость, %
100
60
40
Сохранность, %
80
90
100
При исследовании крови телят было установлено (табл.2), что количественный состав лейкоцитов и эритроцитов у животных всех групп находится на одном уровне и соответствует показателям здоровых животных. Между тем, насыщенность крови гемоглобином наиболее высокая у телят из 2 группы (103,7 г/л), а наименьшая из 1 группы (93,0 г/л). В качественном составе лейкоцитов так же отмечена разница. У телят из 1 группы в составе лейкоцитов превалирующее место приходится на гранулоциты (70,3%), что может свидетельствовать о наличии у них хронического воспалительного процесса. У телят из 2 и 3 групп соотношение гранулоцитов и лимфоцитов наиболее благоприятное и составляет 1,0 и 1,3 соответственно. Кроме того, у телят из 3 группы в составе лейкоцитов 6% приходилось на моноциты, которые являются предшественниками макрофагов, осуществляющих фагоцитоз и презентацию антигенов лимфоцитам. По показателям бактерицидной активности (БАСК) и лизоцимной активности (ЛАСК) сыворотки крови следует констатировать, что уровень неспецифической резистентности наиболее выражен у телят из 3 группы у которых БАСК находилась на уровне 48,9%, а ЛАСК - 4,53 мкг/мл. У телят из первой группы данные показатели были соответственно 37,1% и 0,40 мкг/мл, т.е. у данных животных естественная защита от инфекций наиболее низкая.
Таблица 2 - Показатели крови телят после применения препаратов
Показатель
Группа (n=5)
1 (контрольная)
2 (опытная, получала прототип)
3 (опытная, получала предлагаемый препарат)
Лейкоциты, 10<sup>9</sup>/л
9,1±0,85
10,5±0,93
9,4±0,75
Эритроциты, 10<sup>12</sup>/л
9,7±0,81
9,7±0,64
9,5±0,91
Гемоглобин, г/л
93,0±9,4
103,7±9,9
98,3±9,6
Состав лейкоцитов, %: гранулоциты
70,3±6,7
48,7±2,4
53,7±4,7
лимфоциты
26,7±3,1
48,3±5,6
40,3±4,0
моноциты
3,0±0,15
3,0±0,15
6,0±0,2
БАСК, %
37,1±5,6
48,9±4,2
48,9±3,9
ЛАСК, мкг/мл
0,40±0,03
2,45±0,19
4,53±0,30
При исследовании состояния кишечного микробиоценоза было установлено (табл.3), что у телят 1 группы превалирующее положение в составе кишечной микрофлоры принадлежит эшерихиям, количество которых составляло 9,7 lg КОЕ/г. Достаточно много у этих животных было и стафилококков - 5,0 lg КОЕ/г. В тоже время количество лактобактерий было всего 2,7 lg КОЕ/г. Такое соотношение кишечных бактерий можно охарактеризовать как дисбиотическое, свидетельствующее о ярко выраженном дисбактериозе и предрасположенности к развитию диарей. У телят 2 группы количество эшерихий и стафилококков было на 2 порядка меньшим, а количество лактобактерий на 4 порядка большим, чем у телят из контрольной группы. Между тем, у этих животных количество эшерихий превалировало над количеством лактобактерий, что свидетельствовало также о наличии дисбактериоза. У телят из 3 группы количество эшерихий и стафилококков было на 3 порядка меньшим, а количество лактобактерий на 6 порядков большим, чем у телят из 1 группы. Соотношение в фекалиях лактобактерий и эшерихий у животных из 3 группы было физиологичным и свидетельствовало о нормобиозе.
Таблица 3 - Количественный состав фекальной микрофлоры у телят после применения препаратов (lg КОЕ/г)
Показатель
Группа (n=5)
1 (контрольная)
2 (опытная, получала прототип)
3 (опытная, получала предлагаемый препарат)
Эшерихии
9,7±0,9
8,0±0,7
6,0±0,5
Стафилококки
5,0±0,5
3,0±0,3
2,0±0,1
Энтерококки
3,2±0,3
3,3±0,3
1,0±0,1
Лактобактерии
2,7±0,1
6,3±0,6
8,3±0,6
Плесневые грибы
3,3±0,3
3,0±0,3
2,0±0,2
Таким образом, предложенный препарат для профилактики диарей у новорожденных телят состоящий из кислотного гидролизата крови с включением уксусной, молочной, бензойной и янтарной кислот положительно влияет на организм животных, позволяет осуществлять коррекцию кишечного микробиоценоза повысить естественную резистентность новорожденных телят, устойчивость к заболеванию диареями, и, как следствие, их сохранность.