СПОСОБ И АППАРАТ ДЛЯ ПРОЦЕССА ВОССТАНОВЛЕНИЯ АНТИГЕНА

1. Способ восстановления антигена в образце ткани, фиксированной формальдегидом, включающий стадии:
инкубирования образца ткани, фиксированной формальдегидом, в первом растворе для восстановления антигена при температуре выше 90°С;
переноса образца ткани, фиксированной формальдегидом, во второй раствор для восстановления антигена;
и инкубирования образца ткани, фиксированной формальдегидом, во втором растворе для восстановления антигена при температуре выше 90°С.
2. Способ по п.1, где
первый раствор для восстановления антигена содержит буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 5 до приблизительно 7, и второй раствор для восстановления антигена содержит буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 7,5 до приблизительно 11; или
первый раствор для восстановления антигена содержит буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 7,5 до приблизительно 11, и второй раствор для восстановления антигена содержит буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 5 до приблизительно 7.
3. Способ по п.2, где буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 5 до приблизительно 7, содержит лимонную кислоту, дигидрофосфат калия, борную кислоту, диэтилбарбитуровую кислоту, пиперазин-N,N'-бис(2-этансульфоновую кислоту), диметиларсиновую кислоту, 2-(N-морфолино)этансульфоновую кислоту или их комбинацию.
4. Способ по п.3, где буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 5 до приблизительно 7, содержит лимонную кислоту.
5. Способ по п.2, где буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 7,5 до приблизительно 11, содержит трис(гидроксиметил)метиламин (TRIS), 2-(N-морфолино)этансульфоновую кислоту (TAPS), N,N-бис(2-гидроксиэтил)глицин (Бицин), N-трис(гидроксиметил)метилглицин (Трицин), 4-2-гидроксиэтил-1-пиперазинэтансульфоновую кислоту (HEPES), 2-{[трис(гидроксиметил)метил]амино}этансульфоновую кислоту (TES) или их комбинацию.
6. Способ по п.5, где буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 7,5 до приблизительно 11, содержит TRIS.
7. Способ по п.1, где образец ткани, фиксированной формальдегидом, погружен в парафин.
8. Способ по п.1, где образец ткани, фиксированной формальдегидом, представляет собой фрагмент среза органа или ткани, жидкость организма, ткань или микроматрицу.
9. Способ по п.1, где стадии инкубирования с первым раствором для восстановления антигена и вторым раствором для восстановления антигена включают инкубирование в нагревательном устройстве в течение более десяти минут.
10. Способ по п.9, где нагревательное устройство представляет собой скороварку, автоклав, водяную баню, плитку, микроволновую печь, паровой нагреватель или их комбинацию.
11. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию иммуноокрашивания антигенов.
12. Способ по п.11, где иммуноокрашивание включает последовательное введение иммунопероксидазной метки и ее удаление.
13. Способ по любому из пп.1-12, где образец ткани, фиксированной формальдегидом, подвергают анализу FISH (флуоресцентная гибридизация in situ) или CISH (хромогенная гибридизация in situ).
14. Набор для восстановления антигенов в образце ткани, фиксированной формальдегидом, содержащий:
первый раствор для восстановления антигена, который восстанавливает по меньшей мере часть невосстановленных антигенов в образце; и
второй раствор для восстановления антигена, который восстанавливает по меньшей мере некоторые из другой части невосстановленных антигенов в образце.
15. Набор по п.14, где первый раствор для восстановления антигена представляет собой буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 5 до приблизительно 7, и второй раствор для восстановления антигена представляет собой буферный раствор, имеющий рН в диапазоне от приблизительно 7,5 до приблизительно 11.
16. Набор по п.14, где первый раствор для восстановления антигена содержит лимонную кислоту, дигидрофосфат калия, борную кислоту, диэтилбарбитуровую кислоту, пиперазин-N,N'-бис(2-этансульфоновую кислоту), диметиларсиновую кислоту, 2-(N-морфолино)этансульфоновую кислоту или их комбинацию.
17. Набор по п.15, где первый раствор для восстановления антигена содержит лимонную кислоту.
18. Набор по п.14, где второй раствор для восстановления антигена содержит трис(гидроксиметил)метиламин (TRIS), 2-(N-морфолино)этансульфоновую кислоту (TAPS), N,N-бис(2-гидроксиэтил)глицин (Бицин), N-TPIS(гидроксиметил)метилглицин (Трицин), 4-2-гидроксиэтил-1-пиперазинэтансульфоновую кислоту (HEPES), 2-{[трис(гидроксиметил)метил]амино}этансульфоновую кислоту (TES) или их комбинацию.
19. Набор по п.18, где второй раствор для восстановления антигена содержит TRIS.
20. Набор по любому из пп.14-19, дополнительно содержащий один или более чем один иммуноокрашивающий реагент.
21. Устройство для обработки образца для осуществления способа по п.11, содержащее подсистему для обработки образца и подсистему для распределения реагента.
22. Устройство по п.21, где подсистема для распределения реагента способна приводить образец в контакт по меньшей мере с одним первым раствором для восстановления антигена, вторым раствором для восстановления антигена и иммуноокрашивающим реагентом.
23. Устройство по п.21, где подсистема для распределения реагента способна приводить образец в контакт с реагентом для удаления иммуноокрашивающего реагента.
24. Устройство по п.21, где устройство для обработки образца способно осуществлять более чем один цикл распределения реагента.
25. Устройство по любому из пп. пп.21-24, дополнительно содержащее подсистему для обнаружения сигнала.
26. Устройство по п.25, где одна или более чем одна подсистема обработки образца, подсистема для распределения реагента или подсистема для обнаружения сигнала автоматизирована.