Способ эвисцерации органокомплекса репродуктивной системы у плодов женского пола крыс
METHOD FOR EVISCERATION OF REPRODUCTIVE SYSTEM ORGAN COMPLEX IN FEMALE RATS

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной гинекологии, патоморфологии, патофизиологии и эмбриологии, и может применяться в исследованиях антенатального влияния патогенных факторов на дифференцировку и развитие женской репродуктивной системы.
Известен способ патологоанатомического вскрытия трупов по А.И. Абрикосову, заключающийся в извлечении и исследовании внутренних органов в пять приемов, пятью отдельными топографическими комплексами [Сундуков, В.А. Секционная техника в практике судебно-медицинской экспертизы трупа: учебно-методическое пособие / В.А. Сундуков, Г.П. Джуваляков. - Астрахань: Астраханская государственная медицинская академия, 1996. - 79 с].
Недостатками этого способа являются как нецелесообразность выделения всех комплексов органов, так и выделение репродуктивной системы единым блоком с органами мочевой системы. Более того, данный способ предполагает разъединение клетчаточных пространств малого таза и отсечение дистального отдела влагалища со стороны брюшной полости, что практически неосуществимо при работе с фетальным материалом и имеет высокий риск травматизации.
Ближайшим к заявляемому является способ секционного исследования женских половых органов по поводу аборта, основывающийся на выпиливании участка лонных костей и удалением их путем отделения мягких тканей [Хижнякова, К.И. Модификация техники секционного исследования женских половых органов по поводу аборта / К.И. Хижнякова // Судебно-медицинская экспертиза. - М., 1959 - №2. - С. 53-56]
Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является использование срединно-лапаротомического разреза, что создает высокий риск травматизации при экстраполяции на работу с плодами, а также большие трудности в топографо-анатомической идентификации репродуктивной системы плода и делает невозможным осмотреть ее на месте.
Другим недостатком прототипа является то, что извлечение общим комплексом внутренних и наружных половых органов, прямой кишки и мочевого пузыря нецелесообразно и требует большего количества времени.
Задачей настоящего изобретения является создание возможности проведения исследований женской репродуктивной системы на экспериментальных крысах в позднем
антенатальном периоде при снижении травматичности процедуры и улучшении условий работы специалиста.
Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе эвисцерации органокомплекса репродуктивной системы у плодов женского пола крыс с помощью хирургического инструментария выполняют физическую эвтаназию и экстирпацию матки беременной самки экспериментального животного, забор фетального материала и препарирование плода, которое осуществляют с помощью микрохирургических инструментов, а процедуру осуществляют под операционным микроскопом.
Использование в способе физических методов эвтаназии предотвращает воздействие лекарственных препаратов на ультра-, микроструктуру организации систем плода, что позволяет повысить точность получаемых результатов при исследовании репродуктивной системы в антенатальный период.
При взятии фетального материала из полости матки доступ к плодам производится послойным вскрытием, что позволяет минимизировать риск физического повреждения плода.
Применение микрохирургических инструментов позволяет снизить травматичность процедуры экстирпации матки при препарировании плодов женского пола крыс.
Использование операционного микроскопа обеспечивает удобство выполнения процедуры эвисцерации органокомплекса репродуктивной системы у плодов женского пола крыс в эксперименте.
Способ осуществляется следующим образом. На первом этапе производится гистерэктомия у беременной самки крысы. Сначала проводят физическую эвтаназию -цервикальную дислокацию или декапитацию. После эвтаназии самку располагают на препаровальном столике, в горизонтальном положении на спине и фиксируют иглами за передние и задние конечности. Выполнив срединную лапаротомию, выделяют рога матки. Далее выполняют экстирпацию матки: в области дистальных отделов рогов, накладывают по одному зажиму на правые и левые яичниковые сосудистые пучки, третий зажим располагается в проекции шейки матки, одновременно блокируя кровоток по маточным артериям и венам. Структуры, расположенные дистальнее зажимов, пересекают.
На втором этапе производится забор фетального материала. Для этого матку с плодами располагают на отдельном препаровальном столике и фиксируют иглами за мезометрий. С помощью вертикально изогнутых сосудистых ножниц по латеральному краю рогов матки выполняют продольный разрез, не повреждая амнион, после чего выделяют плоды.
На третьем этапе осуществляется собственно эвисцерация репродуктивной системы плода. Все манипуляции производят под операционным микроскопом. Плод располагают в горизонтальном положение на спине. Передние конечности закрепляют иглами в отведенном на 90 градусов положении, задние конечности разводятся и ротируются кнаружи, после чего фиксируются к препаровальному столику. Далее выполняют следующие разрезы кожи при помощи микрохирургических прямых остроконечных ножниц. Спереди проводят горизонтальный разрез на уровне верхнего края тела грудины от правого до левого локтевого сустава. От середины данного разреза проводят вертикальный разрез вниз, идущий по средней линии до верхнего края пупочного кольца. Зачем, обойдя область пупка с обеих сторон, проводят разрезы по направлению к правому и левому коленным суставам. Очерченные таким образом четырехугольные правые и левые кожные лоскуты отпрепаровывают и отводят в стороны с помощью микрохирургических ножниц и пинцета. Нижний лоскут треугольной формы аккуратно низводя т в каудальном направлении, не повреждая культю пуповины, и далее отсекают на уровне основания полового соска по горизонтальной линии.
После отведения кожных лоскутов обнажается передняя брюшная стенка, состоящая из фасций, мышц и брюшины. Для доступа в брюшную полость проводится рассечение этих слоев по следующим линиям с помощью микрохирургических ножниц. Первые два разреза, ограниченные средними подмышечными линиями, проводят по нижним краям реберных дуг. Третий разрез ведется парамедиально от нижнего края левой реберной дуги до верхнего края лобковой кости. От этого места начинается дугообразный, изогнутый кверху, идущий в косом направлении четвертый разрез, который проводится до средней подмышечной линии. Сформированный таким образом левый лоскут отводится полным пластом в соответствующую сторону. Правый лоскут низводится щадяще за верхний медиальный угол, для сохранения урахуса, и фиксируется к препаровальному столику. На внутренней поверхности брюшной стенки определяется урахус, который перевязывается с помощью микрохирургического пинцета и иглодержателя шовным материалом размером USP 10/0 и отводится за нить в каудальном направлении. При этом мочевой пузырь перекидывается за лобковый симфиз, и задняя стенка брюшной полости с тановится доступной для обзора, где определяются матка и ее рога.
В проекции латеральных краев низведенного мочевого пузыря производятся разрезы таза с помощью микрохирургических ножниц. Далее отпрепаровываются передние стенки матки и влагалища.
В завершение яичник освобождается от поддерживающих связок, рога и тело матки от мезометрия. а ткани, расположенные вокруг наружных половых органов, рассекаются, и выполняется эвисцерация органокомплекса.
Использование предлагаемого изобретения иллюстрируется следующим примером: самке крысы линии Wistar, весом 350 грамм, со сроком беременности 18 суток проведена физическая эвтаназия. В соответствии с первым этапом формулы данного изобретения, с помощью хирургического скальпеля с лезвием №10 произведена срединная лапаротомия беременной самки крысы, и выделены рога матки. Далее накладывали зажимы Холстеда на правые и левые яичниковые сосудистые пучки в области дистальных отделов рогов матки и в проекции шейки матки. Структуры, расположенные дистальнее зажимов, отсекали, и производили эвисцерацию матки с плодами. В соответствии со вторым этапом формулы данного изобретения матку с фетальным материалом располагали на препаровальном столике и фиксировали иглами за мезометрий. С помощью вертикально изогнутых сосудистых ножниц по латеральному краю рогов выполняли продольный разрез, после чего выделяли плоды и производили половую идентификацию. В соответствии с третьим этапом формулы данного изобретения плод женского пола фиксировали на препаровальном столике под микроскопом Carl ZEISS OPMI Pico и при увеличении х25 при помощи микрохирургических прямых остроконечных ножниц производили разрезы кожи. Далее при помощи микрохирургических ножниц производили вскрытие передней брюшной стенки плода, в соответствии с формулой, послойно выделяют органокомплекс репродуктивной системы.
Заявляемый способ создает возможность проведения исследований женской репродуктивной системы на экспериментальных животных в позднем антенатальном периоде. Это позволяет значительно расширить исследовательские возможности в области эмбриологии, патоморфологии, патофизиологии и экспериментальной гинекологии, повысить качество получаемых результатов и углубить познания в вопросах влияния патогенных факторов на репродуктивную систему в антенатальном периоде.
Способ минимизирует риск повреждения репродуктивной системы плода самки экспериментального животного, дает специалисту возможность осуществлять четкую идентификацию и дальнейшее выделение половой системы плода.