СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕРБИЦИДА ИЗ ПРОДУКТОВ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ FUSARIUM OXYSPORUM, STREPTOMYCES HYGROSCOPICUS И МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ
METHOD FOR OBTAINING HERBICIDE FROM THE PRODUCTS OF FUSARIUM OXYSPORUM, STREPTOMYCES HYGROSCOPICUS AND LACTIC ACID BACTERIA

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Оно может быть использовано в области защиты растений, в частности, в борьбе с нежелательной растительностью.
Уровень техники
Использование биологических средств защиты растений широко известно в настоящее время. Биогербициды для своего получения предполагают использование микроорганизмов. Основными их преимуществами является биоразлагаемость, отсутствие загрязнения окружающей среды, высокая специфичность. Использование препаратов на основе живых организмов затрудняет выработку резистентности у объекта воздействия. Существует две группы биогербицидов: на основе живых организмов и на основе их метаболитов.
Авторы патента RU2577970 предлагают использовать в качестве гербицида непатогенные для животных бактерии рода Burkholderia. Указанный в патенте штамм NRRL № В-50319 продуцирует соединения белковой природы и низкомолекулярные соединения, действующие на однодольные злаковые, осоковые или двудольные сорняки.
Решение по патенту RU 2515899 предусматривает использование штамма гриба Stagonospacirsii Davis против распространенного сорняка - бодяка полевого. Биогербицид представляет собой конидиальную суспензию, которой обрабатывают сорняки. Применение живого патогена обусловлено его специфичностью к бодяку полевому и безопасностью для определенных зерновых культур.
Недостатком такого подхода является сложность подбора безопасного штамма. Использование метаболитов живых организмов открывает большие возможности в разработке препаратов по широте охвата поражаемых объектов и гербицидной активности.
Гербицид, полученный из культурального бульона Streptomyces griseolus, описан в патенте CN101243792. Основой для биоцидной композиции является сконцентрированный бутанольный экстракт, который разводят органическими растворителями с добавлением ПАВ.
В изобретении CN1857079 описано приготовление гербицида для защиты посадок риса с использованием продуктов жизнедеятельности грибов рода Bipolaris. Выделение группы действующих веществ осуществляется путем экстракции культуральной жидкости этилацетатом и последующим его упариванием.
Экстракция органическими растворителями культуральной жидкости грибов Paecilomyces lilacinus CN111592987 также позволяет выделить вещества, обладающие гербицидными свойствами. Они подавляют рост как надземных, так и подземных частей растений и замедляют прорастание семян.Также известен гербицид Биалофос (Биланафос), выделенный из фильтратов культур Streptomyces hygroscopicus (японская патентная заявка JP № 23282/1984), являющийся биологическим гербицидом сплошного действия.
Наиболее близким аналогом является решение по патенту CN101736032, в котором предлагается использовать в качестве гербицидов токсины, выделенные из культурального бульона Fusarium oxysporum. Процесс получения гербицида проводят в несколько стадий: подготовка среды для роста, инокуляция штамма Fusarium oxysporum, культивирование, экстракция токсина раствором натрия гидроксида и центрифугированием, сушка экстракта с получением твердого или порошкообразного токсина. Далее для применения в качестве гербицида сплошного действия твердый порошок токсина разводят водой и опрыскивают поля 10-15 дней до посева или пересадки сельскохозяйственных культур.
Существенными недостатками указанного решения являются:
- сложность извлечения токсина, связанная с необходимостью применения щелочи и центрифугирования, а также упаривания большого количества воды при получении твердого продукта;
- возможность применения токсина только в качестве гербицида сплошного действия.
Раскрытие предлагаемого технического решения
Перед разработчиками стояла задача создания биологического гербицида, лишенного описанных выше недостатков, с минимальными трудозатратами, и, соответственно, с минимальной себестоимостью. Также задачей было получение именно эффективного повсходового гербицида, дающего возможность защиты культурных растений на начальных стадиях их роста.
Было протестировано множество вариантов продуктов жизнедеятельности микроорганизмов, выделяющих экзотоксины, и неожиданно для исследователей наилучшие результаты показало использование продуктов культивирования Fusarium oxysporum и Streptomyces hygroscopicus вместе с продуктами культивирования молочнокислых бактерий. Самостоятельно применение продуктов культивирования Fusarium oxysporum и Streptomyces hygroscopicus также позволяло получить приемлемые результаты, но с несколько меньшей эффективностью.
Итак, настоящее изобретение предлагает получение гербицида на основе отфильтрованной культуральной жидкости Fusarium oxysporum, Streptomyces hygroscopicus и молочнокислых бактерий или отфильтрованной культуральной жидкости Fusarium oxysporum и Streptomyces hygroscopicus, способ его получения, а также применения в качестве повсходового гербицида.
Технический результат изобретения заключается в эффективном подавлении всходов сорняков при обработке всходов целевых растений.
Осуществление изобретения
Препарат получали следующим способом:
8
В ферментере 100 л выращивалась культура гриба Fusarium oxysporum на среде следующего состава: дрожжевой экстракт 10 г/л, меласса 10 г/л, фосфат калия двузамещенный 1 г/л, температура культивирования 24°С, аэрация 1 л воздуха на 1 литр среды. Культивирование проводили в течение 48 часов до концентрации 10 КОЕ/мл. По окончании культивирования культуральную жидкость подавали на систему фильтрации (центрифуга и последующий микрофильтр (Millipore с порами размером 0,2 мкм)), где биомассу Fusarium oxysporum полностью отфильтровывали, а оставшуюся жидкость без клеток и спор использовали в качестве первого компонента гербицида.
Безопасность полученного продукта может быть также обеспечена проведением дополнительной стадии инактивации Fusarium oxysporum как патогена путем автолиза, ферментолиза, гидролиза, дефрострации, разрушения с помощью УЗИ воздействия, термического и механического разрушения. Однако двухстадийная фильтрация выбрана как наиболее технологичная и обеспечивающая гарантированный результат по получению композиции согласно изобретению, используемой в качестве гербицида.
8
Далее в ферментере 100 литров выращивалась культура Streptomyces hygroscopicus на среде следующего состава: пептон 15 г/л, дрожжевой экстракт 5 г/л, глюкоза 15 г/л, цитрат аммония 2 г/л, фосфат калия двузамещенный 1 г/л. Культивирование ведут при температуре 28°С в течении 48 часов с аэрацией 0,5 л/л среды до концентрации 10 КОЕ/мл. По окончании процесса культуру отфильтровывали от мицелия и спор Streptomyces hygroscopicus в две стадии, как указано выше применительно к Fusarium oxysporum, а продукты метаболизма  использовали для приготовления гербицида.
9
Далее в ферментере 100 л. выращивали культуру бактерий Lactococcus и Lactobacillus (использовались Lactococcuslactis, Lactobacilluscasei, Lactobacillus acidophilus, показавшие сходные результаты) на среде следующего состава: дрожжевой экстракт 10 г/л, меласса 30 г/л, фосфат калия двузамещенный 1 г/л, температура культивирования 37°С. Культивирование вели в течении 36 часов до концентрации 10 КОЕ/мл, после чего культуральную жидкость молочнокислых бактерий (без их удаления) смешивали с профильтрованными метаболитами Fusarium oxysporum и Streptomyces hygroscopicus, полученными вышеуказанным образом, в соотношении 1:1:1. Данный состав использовали в качестве повсходового гербицида (рабочее название Дейтромицин).
Пример 1
Работа по яровому ячменю сорта Виконт 2021 год (КФХ Комков Алексей Иванович, Краснодарский край, хутор Крупский).
Опытное поле 1:1 га ярового ячменя в фазе кущения, одно- и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев. Опытное поле 2:1 га ярового ячменя в фазе кущения, одно- и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев.
На 1 кв. м опытного поля 1 перед обработкой произрастало суммарно68 сорняков, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, подмаренник цепкий и т.д.) не отмечено. На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 65 сорняков, относящихся к тем же видам.
2 л. препарата Дейтромицин разводили в 100 л. рабочей жидкости (воды), после чего опытное поле 1 с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 было обработано препаратом с расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработку проводили 15 апреля 2021 г.
На 7 день после обработки 64 сорняка на 1 кв.м были заметно угнетены. На 14 день хорошо заметно их увядание, те же 64 сорняка на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 6 сорняков на 1 кв.м, но они уже не  конкурировали с культурными растениями, а 4 выживших сорняка - не принесли посевам ячменя существенного ущерба.
Опытное поле 2 было обработано профильтрованными метаболитами Fusarium oxysporum с дозировкой 1 л/га и расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработку проводили с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 также 15 апреля 2021 года.
На 7 день после обработки 52 сорняка на 1 кв.м были заметно угнетены. На 14 день хорошо заметно их увядание, те же 52 сорняка на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 8 сорняков на 1 кв.м, но они уже не  конкурировали с культурными растениями, а 13 выживших сорняков - не приносили посевам ячменя такого ущерба, как первоначальные 65. Эффективность следует считать более низкой по сравнению с вариантом с комплексным препаратом с добавлением молочнокислых бактерий, но также промышленно значимой.
Пример 2
Работа по подсолнечнику сорта Арис 2021 год (КФХ Комков Алексей Иванович, Краснодарский край, хутор Крупский).
Опытное поле 1 по состоянию на 29 апреля 2021 г.: 1 га подсолнечника в фазе 2-3 пар настоящих листьев, одно и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев. Опытное поле 2: 1 га подсолнечника в фазе 2-3 пар настоящих листьев, одно и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев.
На 1 кв. м опытного поля 1 перед обработкой произрастало суммарно 74 сорняка, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, и т.д.) не отмечено. На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 72 сорняка, относящихся к тем же видам.
2 литра препарата Дейтромицин разводились в 100 литрах рабочей жидкости (воды), после чего опытное поле 1 с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 было обработано препаратом с расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработку проводили 29 апреля 2021 г.
На 7 день после обработки 69 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены. На 14 день 68 сорняков на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 9 сорняков на 1 кв.м, но они уже не конкурировали с высокорослым подсолнечником, а 5 выживших сорняков не приносили посевам подсолнечника существенного ущерба.
Опытное поле 2 было обработано профильтрованными метаболитами Fusarium oxysporum с дозировкой 1 л/га и расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка производилась с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 также 29 апреля 2021 г.
На 7 день после обработки 56 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены. На 14 день 56 сорняков на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 8 сорняков на 1 кв.м. В целом эффективность просто профильтрованных метаболитов Fusarium oxysporum следует считать более низкой по сравнению с вариантом с комплексным препаратом с добавлением молочнокислых бактерий, но также промышленно значимой.
Пример 3
Работа по озимой пшенице сорта Юка 2021 год (ИП Глава КФХ Акулов Олег Валерьевич, Краснодарский край, Тихорецкое район, Фастовецкое сельское поселение).
Опытное поле 1: 1 га озимой пшеницы в фазе кущения, одно и двудольные  однолетние сорняки, находящиеся в фазе  семядолей - 2-х настоящих листьев. Опытное поле 2: 1 га озимой пшеницы в фазе кущения, одно и двудольные  однолетние сорняки, находящиеся в фазе  семядолей - 2-х настоящих листьев.
На 1 кв. м опытного поля 1 перед обработкой произрастало суммарно 72 сорняка, относящихся к следующим видам: горчица полевая, марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник зелёный, овсюг, яснотка пурпурная, вероника. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, подмаренник цепкий и т.д. не отмечено). На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 69 сорняков, относящихся к тем же видам.
2 литра препарата Дейтромицин разводились в 100 литрах рабочей жидкости (воды), после чего опытное поле 1 с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 было обработано препаратом с расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка проводилась 10 апреля 2021 года.
На 7 день после обработки 72 сорняка на 1 кв.м были заметно угнетены, но взошли ещё: 2 щирицы запрокинутые, 1 щирица жминдолистная, 4 амброзии трёхраздельные.  На 14 день хорошо заметно увядание 67 обработанных сорняков, но взошло ещё: 1 щирица запрокинутая, 1 щирица жминдолистная, 2 амброзии трёхраздельной. На 21 день - те же 72 сорняка на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом, взошедшие 11 сорняков разных видов на 1 кв.м, уже не будут конкурировать с культурными растениями, а 5 выживших сорняка - не принесут посевам ячменя существенного ущерба.
hygroscopicus
Опытное поле 2 было обработано профильтрованными метаболитами Streptomyces  с дозировкой 2 л/га и расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка производилась с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 также 10 апреля 2021 года.
На 7 день после обработки 58 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день хорошо заметно их увядание, те же 58 сорняка на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 12 сорняков на 1 кв.м, но они уже не будут конкурировать с культурными растениями, а 11 выживших сорняков - не принесут посевам ячменя такого ущерба как первоначальные 69. Эффективность следует считать более низкой по сравнению с вариантом с комплексным препаратом с добавлением молочнокислых бактерий, но также промышленно значимой.
Пример 4
Работа по кукурузе гибрид ЗП 434, 2021 год (ИП Глава КФХ Акулов Олег Валерьевич, Краснодарский край, Тихорецкое район, Фастовецкое сельское поселение).
Опытное поле 1 по состоянию на 12 мая 2021 года: 1 га кукурузы в фазе 3-4 настоящих листьев, одно и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев. Опытное поле 2: 1 га кукурузы в фазе 3-4 настоящих листьев, одно и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев.
На 1 кв. м опытного поля 1 перед обработкой произрастало суммарно 78 сорняков, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная, овсюг, горчица полевая. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, вьюнок полевой и т.д. не отмечено). На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 74 сорняка, относящихся к тем же видам.
2 литра препарата Дейтромицин разводились в 100 литрах рабочей жидкости (воды), после чего опытное поле 1 с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 было обработано препаратом с расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка проводилась 12 мая 2021 года.
На 7 день после обработки 70 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день 70 сорняков на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 8 сорняков на 1 кв.м, но они уже не смогут конкурировать с высокорослым подсолнечником, а 8 выживших сорняков не принесут посевам кукурузы существенного ущерба.
На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 68 сорняков, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная, овсюг, горчица полевая. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, вьюнок полевой и т.д. не отмечено).
Опытное поле 2 было обработано профильтрованными метаболитами Streptomyces spp. с дозировкой 2 л/га и расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка производилась с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 также 12 мая 2021 года.
На 7 день после обработки 55 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день 55 сорняков на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 12 сорняков на 1 кв.м. В целом эффективность просто профильтрованных метаболитов Streptomyces hygroscopicus следует считать более низкой по сравнению с вариантом с комплексным препаратом с добавлением молочнокислых бактерий, но также промышленно значимой.
Пример 5
Работа по озимой пшенице сорта Юка 2021 год (ИП Глава КФХ Подкопаев Александр Никитович, Краснодарский край, Тихорецкое район, Крутое сельское поселение).
Опытное поле 1: 1 га озимой пшеницы в фазе кущения, одно и двудольные  однолетние сорняки, находящиеся в фазе  семядолей - 2-х настоящих листьев. Опытное поле 2: 1 га озимой пшеницы в фазе кущения, одно и двудольные  однолетние сорняки, находящиеся в фазе  семядолей - 2-х настоящих листьев.
На 1 кв. м опытного поля 1 перед обработкой произрастало суммарно 72 сорняков, относящихся к следующим видам: горчица полевая, марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник зелёный, овсюг, яснотка пурпурная, вероника. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, подмаренник цепкий и т.д. не отмечено). На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 69 сорняков, относящихся к тем же видам.
2 литра препарата Дейтромицин разводились в 100 литрах рабочей жидкости (воды), после чего опытное поле 1 с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 было обработано препаратом с расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка проводилась 10 апреля 2021 года.
На 7 день после обработки 72 сорняка на 1 кв.м были заметно угнетены, но взошли ещё 2 щирицы запрокинутой, 1 щирица жминдолистная, 4 амброзии трёхраздельной.  На 14 день хорошо заметно увядание 67 обработанных сорняков взошло ещё: 1 щирица запрокинутая, 1 щирица жминдолистная, 2 амброзии трёхраздельной. На 21 день - те же 72 сорняка на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом, взошедшие 11 сорняков разных видов на 1 кв.м, уже не будут конкурировать с культурными растениями, а 5 выживших сорняка - не принесут посевам ячменя существенного ущерба.
Опытное поле 2 было обработано профильтрованными метаболитами Fusarium oxysporum с дозировкой 1 л/га и расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка производилась с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 также 10 апреля 2021 года.
На 7 день после обработки 58 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день хорошо заметно их увядание, те же 58 сорняка на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 12 сорняков на 1 кв.м, но они уже не будут конкурировать с культурными растениями, а 11 выживших сорняков - не принесут посевам ячменя такого ущерба как первоначальные 69. Эффективность следует считать более низкой по сравнению с вариантом с комплексным препаратом с добавлением молочнокислых бактерий, но также промышленно значимой.
Пример 6
Работа по кукурузе гибрид ЗП 434, 2021 год (ИП Глава КФХ Акулов Олег Валерьевич, Краснодарский край, Тихорецкое район, Фастовецкое сельское поселение).
Опытное поле 1 по состоянию на 12 мая 2021 года: 1 га кукурузы в фазе 3-4 настоящих листьев, одно и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев. Опытное поле 2: 1га кукурузы в фазе 3-4 настоящих листьев, одно и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев.
На 1 кв. м опытного поля 1 перед обработкой произрастало суммарно 78 сорняков, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная, овсюг, горчица полевая. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, вьюнок полевой и т.д. не отмечено). 2 литра препарата Дейтромицин разводились в 100 литрах рабочей жидкости (воды), после чего опытное поле 1 с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 было обработано препаратом с расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка проводилась 12 мая 2021 года.
На 7 день после обработки 70 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день 70 сорняков на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 8 сорняков на 1 кв.м, но они уже не смогут конкурировать с высокорослой кукурузы, а 8 выживших сорняков не принесут посевам кукурузы существенного ущерба.
На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 68 сорняков, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная, овсюг, горчица полевая. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, вьюнок полевой и т.д. не отмечено).
Опытное поле 2 было обработано профильтрованными метаболитами Fusarium oxysporum с дозировкой 1 л/га и расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка производилась с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 также 12 мая 2021 года.
На 7 день после обработки 55 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день 55 сорняков на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 12 сорняков на 1 кв.м. а 13 выживших сорняков не принесут посевам кукурузы существенного ущерба. В целом эффективность просто профильтрованных метаболитов Fusarium oxysporum следует считать более низкой по сравнению с вариантом с комплексным препаратом с добавлением молочнокислых бактерий, но также промышленно значимой.
Пример 7
Работа по озимому ячменю сорта Добрыня 2021 год (ИП Глава КФХ Акулов Олег Валерьевич, Краснодарский край, Тихорецкое район, Фастовецкое сельское поселение).
Опытное поле 1: 1 га озимого ячменя в фазе кущения, одно и двудольные  однолетние сорняки, находящиеся в фазе  семядолей - 2-х настоящих листьев .Опытное поле 2: 1 га озимого ячменя в фазе кущения, одно и двудольные  однолетние сорняки, находящиеся в фазе  семядолей - 2-х настоящих листьев.
На 1 кв. м опытного поля 1 перед обработкой произрастало суммарно 69 сорняков, относящихся к следующим видам: горчица полевая, марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник зелёный, овсюг, яснотка пурпурная, вероника. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, подмаренник цепкий и т.д.) не отмечено. На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 66 сорняков, относящихся к тем же видам.
2 литра препарата Дейтромицин разводились в 100 литрах рабочей жидкости (воды), после чего опытное поле 1 с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 было обработано препаратом с расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка проводилась 8 апреля 2021 года.
На 7 день после обработки 64 сорняка на 1 кв.м были заметно угнетены, но взошли ещё 6 сорняков.  На 14 день хорошо заметно увядание 64 обработанных сорняков взошло ещё: 3 сорняка. На 21 день - те же 64 сорняка на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом, взошедшие 9 сорняков разных видов на 1 кв.м, уже не будут конкурировать с культурными растениями, а 5 выживших сорняков - не принесут посевам ячменя существенного ущерба.
Опытное поле 2 было обработано профильтрованными метаболитами Fusarium oxysporum с дозировкой 1 л/га и расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка производилась с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 также 8 апреля 2021 года.
На 7 день после обработки 55 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день хорошо заметно их увядание, те же 55 сорняков на 21 день на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 10 сорняков на 1 кв.м, но они уже не будут конкурировать с культурными растениями, а 11 выживших сорняков - не принесут посевам ячменя такого ущерба как первоначальные 66. Эффективность следует считать более низкой по сравнению с вариантом с комплексным препаратом с добавлением молочнокислых бактерий, но также промышленно значимой.
Пример 8
Работа по гороху сорта ЗП 434,  2021 год (ИП Глава КФХ Подкопаев Александр Никитович, Краснодарский край, Тихорецкое район, Крутое сельское поселение).
Опытное поле 1 по состоянию на 2 мая 2021 года: 1 га гороха в фазе 3-5 настоящих листьев, одно и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев. Опытное поле 2: 1га гороха в фазе 3-5 настоящих листьев, одно и двудольные однолетние сорняки, находящиеся в фазе семядолей - 2-х настоящих листьев.
На 1 кв. м опытного поля 1 перед обработкой произрастало суммарно 63 сорняков, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная, овсюг, горчица полевая. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, вьюнок полевой и т.д.) не отмечено. 2 литра препарата Дейтромицин разводились в 100 литрах рабочей жидкости (воды), после чего опытное поле 1 с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 было обработано препаратом с расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка проводилась 12 мая 2021 года.
На 7 день после обработки 57 сорняков на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день 57 сорняков на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 7 сорняков на 1 кв.м, но они уже не смогут конкурировать с высокорослой кукурузы, а 6 выживших сорняков не принесут посевам гороха существенного ущерба.
На 1 кв. м опытного поля 2 перед обработкой произрастало суммарно 65 сорняков, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щирица жминдолистная, амброзия трёхраздельная, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная, овсюг, горчица полевая. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, вьюнок полевой и т.д.) не отмечено.
hygroscopicus
Опытное поле 2 было обработано профильтрованными метаболитами Streptomyces  с дозировкой 2 л/га и расходом рабочей жидкости 100 л/га. Обработка производилась с помощью прицепного опрыскивателя ОП-2000 также 12 мая 2021 года.
hygroscopicus
На 7 день после обработки 51 сорняк на 1 кв.м были заметно угнетены.  На 14 день 51 сорняков на 1 кв.м имели признаки увядания. При этом взошли ещё 10 сорняков на 1 кв.м. а 14 выживших сорняков не принесут посевам гороха существенного ущерба. В целом эффективность просто профильтрованных метаболитов Streptomyces  следует считать более низкой по сравнению с вариантом с комплексным препаратом с добавлением молочнокислых бактерий, но также промышленно значимой.
Пример 9
Сахарная свекла. Гибрид Неро, дата посева 21 марта 2021года, дата появления всходов: 5 апреля 2021 г. Место опыта: Краснодарский край, г.Абинск, производственный участок ООО Биота (ул. Линейная, вл.20), делянка 1 сотка.
На 1 кв. м опытной делянки перед обработкой произрастало суммарно 43 сорняка, относящихся к следующим видам: марь белая, щирица запрокинутая, щетинник сизый, щетинник зелёный, просо куриное, яснотка пурпурная, овсюг. Зимующих и многолетних сорняков (пырей, бодяк, вьюнок полевой и т.д.) не отмечено).
Обработка смесью Fusarium oxysporum и Streptomyces hygroscopicus из расчета 2 л/га 2 апреля 2021г. 10 апреля сорняки были заметно угнетены, частично пожелтели, ростки сах.свелы без заметного угнетения.
Следует отметить, что существенного угнетения культурных растений ни на одном опытном поле не отмечено, что, по мнению исследователей, объясняется более поздней фазой роста культурных растений по сравнению с сорняками. Подобранная концентрация действующего вещества оказалась фатальной для большинства сорняков, находящихся в ранних стадиях роста, но недостаточной для нанесения значимого вреда культурным посевам. Механизм усиления действия продуктов метаболизма Fusarium oxysporum и Streptomyces spp. в сочетании с молочнокислыми бактериями не полностью ясен исследователям и, по-видимому, связан с кислой средой, создаваемой данными микроорганизмами.
Положительные моменты предлагаемого способа получения гербицида и обработки им растений:
1) способ получения препарата максимально прост и технологичен, не содержит сложные и высокозатратные способы извлечения действующих веществ, что позволяет снизить его себестоимость и повысить конкурентоспособность препарата;
2) препарат подходит под стандарты органического земледелия, т.е. позволяет дополнить разрабатываемые схемы защиты для экосельхозпродукции органическим гербицидом, в котором существует острая необходимость;
3) за счет подобранной дозировки и периода внесения позволяет использовать препарат в качестве повсходового гербицида фактически избирательного действия (кроме случаев засорения многолетними сорняками).