СПОСОБ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ УГНЕТЕНИЯ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
METHOD OF ESTIMATING DEGREE OF NERVOUS SYSTEM DEPRESSION IN CASE OF ALCOHOLIC INTOXICATION IN EXPERIMENT

Изобретение относится к области медицины, в частности токсикологии и фармакологии, и предназначено для диагностики степени угнетения нервной системы при алкогольной интоксикации и оценки эффективности экспериментальной терапии.
Известен способ оценки состояния нервной системы при моделировании химической патологии, вызванной этанолом в эксперименте, разработанный Рейнюком В.Л. (Рейнюк В.Л. Кинетика эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия; роль ее нарушений в формировании летального исхода: автореф. дис. … д-ра мед наук / В.Л.Рейнюк. - СПб, 2008. - 41 с.).
Недостатками этого способа являются невысокая точность и объективность диагностики состояния. Кроме того, невозможность дифференцировать состояния, формирующиеся при тяжелых отравлениях этанолом, по степени выраженности угнетения функций нервной системы на оглушение, сопор и кому; а также отсутствие градации признаков по степени выраженности и значимости угнетения неврологических функций не позволяет изучать динамику изменения состояния, как в процессе развития интоксикации, так и в ходе экспериментальной терапии.
Цель изобретения - повысить точность диагностики степени угнетения неврологических функций у лабораторных животных при острых отравлениях этанолом.
Цель достигается тем, что предлагается способ оценки клинических данных о функционировании нервной системы животных по следующей формуле:
ИТНН=5*ПЖ+4*ГР+3*БР+2*РС+2*ЗР+КР,
где:
ИТНН - индекс тяжести угнетения нервной системы, балл;
ПЖ - поведение животных: активная деятельность (грумминг, принятие пищи и др), сон, при взятии на руки активные целенаправленные реакции - 4 балла; лежит, при взятии на руки движения замедленные, но сохраняется их целенаправленность к избеганию, поворот головы - 3 балла, лежит на животе или боковое положение, при взятии на руки движения нецеленаправленные - 2 балла, лежит на животе или боковое положение, при взятии на руки двигательная активность отсутствует - 1 балл;
ГР - глоточный рефлекс: выраженный - 3 балла; ослаблен - 2 балла; отсутствует - 1 балл;
БР - тактильно-болевая чувствительность: реагирует на локальное одиночное воздействие агрессией или избеганием - 4 балла, реакция избегания на воздействие вялая, проявляется отползанием или поворотом тела и головы - 3 балла; нелокализованный ответ, в том числе и сокращением мышц брюшной стенки - 2 балла; реакция отсутствует - 1 балл;
PC - рефлекс сгибания задних конечностей: быстрое поджатие лапы в ответ на механическое болевое раздражение стопы, которое ненадолго сохраняется - 4 балла; замедленная реакция на раздражение, длительное сохранение сгибания - 3 балла; отсутствие реакции на одиночный стимул или нелокализованный ответ сокращением брюшной стенки - 2 балла, отсутствие ответа после многократного воздействия - 1 балл;
ЗР - зрачковый рефлекс: быстрое сокращение зрачков при освещении - 3 балла; замедленная фотореакция - 2 балла, отсутствие реакции - 1 балл;
КР - корнеальный рефлекс: выраженный - 3 балла; ослаблен - 2 балла; отсутствует - 1 балл.
При интерпретации значений, рассчитанных по формуле индекса тяжести угнетения нервной системы, используются следующие критерии: ИТНН более 55 баллов - состояние функционирования нервной системы в пределах физиологической нормы; от 46 до 55 баллов - оглушение; от 36 до 45 баллов - сопор; от 26 до 35 баллов - кома умеренная; от 18 до 25 баллов - кома глубокая, 17 баллов и ниже - кома запредельная.
Способ реализуется следующим образом. Крысам, которые являются животными выбора при моделировании алкогольной патологии, внутрижелудочно или внутрибрюшинно вводится этиловый спирт в широком диапазоне доз. У животных в баллах оценивают комплекс неврологических показателей функционирования нервной системы: поведение, глоточный рефлекс, тактильно-болевую чувствительность, рефлекс сгибания задней конечности, зрачковый и корнеальный рефлексы.
За поведением животного наблюдают при нахождении его в клетке и при взятии на руки. Тактильно-болевая чувствительность исследуется при надавливании корнцангом на основание хвоста. Рефлекс сгибания задних конечностей вызывают путем надавливания корнцангом на стопу задней лапы. Оценку глоточного рефлекса выполняют с использованием зонда для внутрижелудочного введения. Зрачковый и корнеальный рефлексы оценивают по общепринятой методике.
Полученные данные, выраженные в баллах, используют для вычисления по формуле индекса тяжести угнетения нервной системы и оценки степени угнетения неврологических функций у лабораторных животных при острых отравлениях этанолом.
Нами впервые предложен способ комплексной оценки состояния нервной системы у экспериментальных животных при интоксикациях этиловым спиртом. Отличием предлагаемого способа от других является простота и высокая надежность (надежность данного способа оценки составляет 75%), возможность одновременно анализировать клиническую картину и выносить экспертное заключение о степени угнетения нервной системы и прогнозе исхода интоксикации. Предлагаемый способ позволяет быстро и точно оценить неврологический статус в динамике интоксикации, а также осуществлять мониторинг состояния животного в процессе экспериментальной терапии при скрининговых доклинических исследованиях.
Приводим примеры практической реализации способа оценки степени угнетения нервной системы при алкогольной интоксикации в эксперименте.
Пример 1. Животному внутрибрюшинно введен 30% раствор этанола в дозе 5,5 г/кг, что соответствует среднесмертельной дозе. В динамике оценивалось изменения степени угнетения неврологического статуса.
Так, через 1 час наблюдения получены следующие данные: поведение животных (ПЖ) - 1 балл, тактильно-болевая чувствительность (БР) - 2 балла, рефлекс сгибания задних конечностей (PC) - 2 балла, зрачковый рефлекс (ЗР) - 1, корнеальный рефлекс (КР) - 2, глоточный рефлекс (ГР) - 2 балла.
Подставляем полученные данные в формулу и проводим вычисления:
ИТНН=5*ПЖ+4*ГР+3*БР+2*РС+2*ЗР+КР=5*1+4*2+3*2+2*2+2*1+2=27.
Таким образом, рассчитанный ИТНН составил 27 баллов, что соответствует «умеренной коме».
Через 3 часа наблюдения: поведение животных (ПЖ) - 1 балл, тактильно-болевая чувствительность (БР) - 1 балл, рефлекс сгибания задних конечностей (PC) - 1 балл, зрачковый рефлекс (ЗР) - 2 балла, корнеальный рефлекс (КР) - 2 балла, глоточный рефлекс (ГР) - 1 балл.
ИТНН=19 баллов. Глубокая кома.
Животное погибло, через 3 ч 44 мин после введения этанола.
Пример 2. Животному внутрибрюшинно введен 30% раствор этанола в дозе 5,5 г/кг, что соответствует среднесмертельной дозе. В динамике оценивалось изменения степени угнетения неврологического статуса.
Динамика изменения состояния животного №2 представлена в таблице.
Время после введения этанола, ч
Показатели неврологического статуса, баллы
ИТНН, баллы
Состояние
ПЖ
БР
PC
3P
KP
ГР
0,5
1
3
4
3
1
2
37
Сопор
1
1
1
1
2
1
3
27
Умеренная кома
3
1
1
1
2
1
2
23
Глубокая кома
6
1
1
3
3
2
1
26
Умеренная кома
8
1
3
3
3
2
3
37
Сопор
24
4
4
4
3
3
3
61
Норма
Пример 3. Трем животным четырехкратно внутрижелудочно в течение 3 ч вводили 9% раствор этанола дозе 8 г/кг, что соответствует среднесмертельной дозе. Через 1 час после последнего введения оценивали состояние животных Данные о динамике изменения состояния животных представлены в таблице.
Номер животного
Показатели неврологического статуса, баллы
ИТНН, баллы
Состояние
Исход через 1 сут
ПЖ
БР
PC
3P
KP
ГР
1
1
1
1
2
1
1
19
Глубокая кома
Погибло
2
1
1
2
2
1
3
29
Умеренная кома
Выжило
3
1
2
4
2
2
3
37
Сопор
Выжило
Пример 4. Исследование выполнено на 92 белых беспородных крысах-самцах, которым вводили 30% раствор этанола внутрибрюшинно в диапазоне от 0,5 до 1,2 среднесмертельных доз. У животных в динамике оценивали показатели неврологического статуса, производили расчет суммы баллов по предлагаемому нами способу. Одновременно анализировалась клиническая картина, выносилось экспертное заключение о степени угнетения нервной системы.
Распределение данных, полученных расчетным методом и данных экспертной оценки, представлено на чертежах.
Фиг.1, 2, 3 и 4 отображают соотношение данных экспертной оценки состояния экспериментальных животных с данными, полученными при использовании предлагаемого способа оценки степени угнетения функций нервной системы, через 1, 3, 6 и 8 часов после введения этанола соответственно.
Из представленных данных видно, что совпадение прогноза с использованием разработанного нами способа и экспертной оценкой встречается в среднем в 75% наблюдений. Наиболее полное совпадение отмечается через 1 час после введения токсиканта, оно составляет 78%.