СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ

1. Клетка-хозяин, трансфицированная белком NHEJ или его функциональным фрагментом, или полинуклеотидом, кодирующим его, где указанная полинуклеотидная последовательность находится под контролем подходящего промотора и клетка-хозяин также трансфицирована экспрессионной кассетой, содержащей полинуклеотидную последовательность (ДНК или РНК), кодирующую по меньшей мере один белок, представляющий интерес.
2. Клетка-хозяин, трансфицированная полинуклеотидной последовательностью, кодирующей белок NHEJ или его функциональный фрагмент, где указанная полинуклеотидная последовательность находится под контролем подходящего промотора и клетка-хозяин также трансфицирована экспрессионной кассетой, содержащей полинуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере один белок, представляющий интерес.
3. Клетка-хозяин по п. 1 или 2, где белок NHEJ представляет собой Ku70 или Ku80, или их функциональный фрагмент.
4. Клетка-хозяин по п. 1 или 2, трансфицированная двумя или более белками NHEJ или их функциональными фрагментами, или полинуклеотидом, или полинуклеотидами, кодирующими их.
5. Клетка-хозяин по п. 4, трансфицированная Ku70 и Ku80 или их функциональными фрагментами, или полинуклеотидом, или полинуклеотидами, кодирующими их.
6. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2 и 5, представляющая собой прокариотическую клетку, эукариотическую клетку или клетку дрожжей.
7. Клетка-хозяин по п. 6, представляющая собой клетку СНО.
8. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где белок, представляющий интерес, представляет собой антитело или его связывающий фрагмент.
9. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где белок, представляющий интерес, представляет собой белок, вызывающий сайт-специфический мутагенез, такой как нуклеаза с «цинковыми пальцами», мегануклеаза или их функциональные фрагменты.
10. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где полинуклеотид представляет собой ДНК.
11. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где полинуклеотид представляет собой РНК.
12. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где полинуклеотидная последовательность, кодирующая белок NHEJ, находится в форме плазмиды.
13. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где полинуклеотидная последовательность, кодирующая белок, представляющий интерес, находится в форме плазмиды.
14. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где полинуклеотидная последовательность, кодирующая белок, представляющий интерес, находится в форме линейной ДНК или РНК.
15. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где последовательность ДНК, кодирующая белок, представляющий интерес, предоставлена в форме плазмиды и при этом плазмида дополнительно содержит последовательность ДНК, кодирующую Ku70, Ku80, сочетание Ku70 и Ku80 или их функциональный фрагмент.
16. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где промотор представляет собой сильный вирусный промотор.
17. Клетка-хозяин по п. 16, где промотор представляет собой CMV промотор.
18. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5, 7 и 17, где белок NHEJ или его функциональный фрагмент происходит из последовательности человека, хомяка, мыши, дрожжей или другого вида.
19. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5 и 7, где полинуклеотидная последовательность, кодирующая белок NHEJ или его функциональный фрагмент, и/или экспрессионная кассета, содержащая последовательность ДНК, кодирующую белок, представляющий интерес, дополнительно содержит селективный маркер.
20. Клетка-хозяин по п. 19, где селективный маркер представляет собой маркер глутаминсинтетазу.
21. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5, 7 и 20, где экспрессионная кассета, содержащая последовательность ДНК, кодирующую белок, представляющий интерес, стабильно интегрирована в геном клетки.
22. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5, 7 и 20, где полинуклеотидная последовательность, кодирующая белок NHEJ или его функциональный фрагмент, временно трансфицирована в клетку.
23. Клетка-хозяин по любому из пп. 1, 2, 5, 7 и 20, где полинуклеотидная последовательность, кодирующая белок NHEJ или его функциональный фрагмент, стабильно трансфицирована в клетку.
24. Плазмидная ДНК, содержащая последовательность, кодирующую Ku70, Ku80, их сочетание или их функциональный фрагмент, при этом указанная последовательность ДНК находится под контролем подходящего промотора.
25. Плазмидная ДНК по п. 24, дополнительно содержащая ДНК, кодирующую белок, представляющий интерес, например, в случае, когда белок, представляющий интерес, представляет собой антитело или его связывающий фрагмент.
26. Плазмидная ДНК по п. 24 или 25, где ДНК является кольцевой.
27. Плазмидная ДНК по п. 24 или 25, где ДНК является линейной.
28. Способ получения клетки-хозяина, способной экспрессировать белок, представляющий интерес, кодируемый полинуклеотидной последовательностью, включающий стадию трансфицирования клетки:
a. Ku70, Ku80, их сочетанием или их функциональным фрагментом, или полинуклеотидной последовательностью или последовательностями, кодирующими их, где указанная полинуклеотидная последовательность находится под контролем подходящего промотора, и
b. экспрессионной кассетой, содержащей полинуклеотидную последовательность (ДНК или РНК), кодирующую белок, представляющий интерес.
29. Способ по п. 28, где трансфекция компонентов на стадиях a) и b) представляет собой совместную трансфекцию (сопутствующую трансфекцию).
30. Способ по п. 28, где трансфекция компонентов стадии a) происходит раньше, чем компонентов стадии b).
31. Способ по п. 28, где трансфекция компонентов стадии b) происходит раньше, чем компонентов стадии а).
32. Способ по любому из пп. 28-31, где полинуклеотидная последовательность стадии а) представляет собой последовательность ДНК, кодирующую Ku70, Ku80, их сочетание или их функциональный фрагмент.
33. Способ по любому из пп. 28-31, где полинуклеотидные последовательности стадии a) представляют собой последовательность ДНК, кодирующую Ku70, и последовательность ДНК, кодирующую Ku80.
34. Способ по п. 32, где полинуклеотидная последовательность предоставлена в форме плазмиды.
35. Способ по п. 33, где полинуклеотидная последовательность предоставлена в форме плазмиды.
36. Способ по любому из пп. 28-31, где экспрессионная кассета, содержащая последовательность ДНК, кодирующую белок, представляющий интерес, предоставлена на плазмиде.
37. Способ по любому из пп. 28-31, где полинуклеотидная последовательность, кодирующая Ku70, Ku80, их сочетание или их функциональный фрагмент, временно трансфицирована в клетку.
38. Способ по любому из пп. 28-31, где последовательность ДНК, кодирующая белок, представляющий интерес, стабильно интегрирована в геном клетки.