ПРИМЕНЕНИЕ ЭКСТРАКТА ALBIZZIA CHINENSIS ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЯЗВЫ ЖЕЛУДКА
APPLICATION OF ALBIZZIA CHINENSIS EXTRACT IN PREPARATION OF MEDICINE FOR TREATMENT OF GASTRIC ULCER

Область техники
Изобретение относится к области медицины. В частности, настоящее изобретение относится к экстракту Albizzia chinensis (Osbeck) Merr. и способу его получения, а также к применению экстракта Albizzia chinensis для получения ингибитора протонного насоса и лекарственного средства для лечения язвы желудка и кислотозависимых заболеваний.
Уровень техники
Язва желудка представляет собой распространенное заболевание пищеварительной системы, и оно легко может возникать повторно. В условиях стресса, характерного для современной жизни, люди страдают от нервно-психического напряжения и давления на работе, которые приводят к возрастанию частоты возникновения язв желудка, и данное заболевание подвергает опасности здоровье людей. В настоящее время в клиниках пациенту часто назначают некоторые противоязвенные лекарственные средства, такие как ранитидин, омепразол и т.д. Несмотря на то, что кратковременная эффективность химических лекарственных средств очевидна, после применения данных лекарственных средств возникают некоторые побочные эффекты. Вследствие этого люди начинают исследовать и развивать новый тип противоязвенных лекарственных средств, обладающих высокой эффективностью и низким уровнем токсичности. На основе многолетней истории клинической практики было доказано, что традиционная китайская медицина имеет естественное преимущество, при этом с точки зрения клинического применения большую ценность для нас имеет обнаружение и извлечение природных активных ингредиентов или фракций из растительных лекарственных средств традиционной китайской медицины для лечения язвы желудка.
Albizzia chinensis (Osbeck) Merr. принадлежит к роду Alhizzia, семейству Бобовые, и ее лекарственной частью является, главным образом, кора дерева. Как правило, кора содержит танины, способные облегчать диарею за счет содержащихся в них вяжущих веществ и стимулировать грануляцию и заживление ран. Ее можно применять для лечения энтерита, диареи и дизентерии. (Сборник о китайской медицине, относящейся к травам, составленный редакционной группой Chinese Herbal Medicine editorial group, второе издание, 1986, volume 2, р .768). Также сообщалось, что тритерпеновые сапонины (окситоцин Albizzia julibrissin) из коры Albizzia chinensis играют роль в сократительной деятельности матки (Словарь китайской традиционной медицины, составленный в Jiangsu New Medical College, 1998, volume 1, p. 937). Недавно авторами настоящего изобретения была опубликована серия работ, посвященных сложным тритерпеновым сапонинам с цитотоксичной активностью, выделенным из коры Albizzia chinensis (J. Nat. Prod. 2009, 72, 632-639; Carbohydr. Res. 2010, 345, 1877-1881). Более того, авторы настоящего изобретения также обнаружили, что экстракты Albizzia chinensis обладают седативной и снотворной активностью (патентная публикация Китая № CN 101766676 A). На сегодняшний день не было сообщений о фармакологической активности, направленной против язвы желудка или хронического гастрита, и ингибирующей активности экстракта коры Albizzia chinensis в отношении протонного насоса.
Подробное описание изобретения
Техническая проблема, решаемая настоящим изобретением, заключается в обеспечении нового класса лекарственного средства, экстракта Albizzia chinensis (Osbeck) Merr., для лечения язвы желудка и кислотозависимых заболеваний. Экстракт Albizzia chinensis (Osbeck) Merr. согласно настоящему изобретению можно применять в качестве ингибитора протонного насоса с получением лекарственного средства для лечения язвы желудка и кислотозависимых заболеваний.
Второй технической проблемой, решаемой настоящим изобретением, является обеспечение способа получения экстракта Albizzia chinensis (Osbeck) Merr. и экстракта, полученного данным способом.
Третьей технической проблемой, решаемой настоящим изобретением, является обеспечение фармацевтической композиции, которая содержит экстракт Albizzia chinensis (Osbeck) Merr., действующий в качестве активного компонента, и фармацевтически приемлемый носитель.
Четвертой технической проблемой, решаемой настоящим изобретением, является обеспечение применения экстракта Albizzia chinensis для получения лекарственного средства для лечения язвы желудка и кислотозависимых заболеваний.
Для решения вышеупомянутых технических проблем согласно настоящему изобретению предложены следующие технические решения.
Настоящее изобретение относится к экстракту Albizzia chinensis, применяемому для получения лекарственного средства, действующего в качестве ингибитора протонного насоса, для лечения язвы желудка и кислотозависнмых заболевании, и следующий способ получения экстракта Albizzia chinensis:
(1) сырьевой материал Albizzia chinensis размалывают и экстрагируют растворителем, экстракт растворителя концентрируют с получением неочищенного экстракта Albizzia chinensis.
Предпочтительный сырьевой материал Albizzia chinensis представляет собой кору ствола Albizzia chinensis. Сырьевой материал Albizzia chinensis сушат и соответствующим образом раздавливают для увеличения площадей контакта с растворителями и для улучшения эффективности экстракции.
Растворители содержат спирт или смесь воды и спирта.
Предпочтительные спирты включают метанол, этанол, изопропанол, бутанол и т.д.; наиболее предпочтительным растворителем является этанол.
2
Концентрация этанола составляет 50-100% при объемном отношении этанола к HO, предпочтительная концентрация составляет 80~95%.
Объемное/массовое (л/кг) отношение экстрагирующего растворителя к сырьевому материалу составляет от 3:1 до 10:1, предпочтительное объемное/массовое (л/кг) отношение экстрагирующего растворителя к сырьевому материалу составляет от 3:1 до 5:1.
Экстракцию можно проводить в статических и динамических условиях, предпочтительно в динамических условиях, например в условиях перемешивания. Для улучшения эффективности экстракции можно применять способ ультразвуковой экстракции.
Экстракцию проводят в интервале температур от комнатной температуры (например, 20°C) до температуры флегмы растворителя, предпочтительно при температуре температуры флегмы.
Процесс экстракции может быть непрерывным и прерывающимся, когда прерывающийся процесс можно повторять 1-5 раз, предпочтительно повторять 2-4 раза.
Время экстракции находится в интервале от 1 часа до 5 часов, предпочтительно от 2 часов до 3 часов.
Экстракты растворителя собирали и концентрировали нагреванием при атмосферном или пониженном давлении с получением экстракта, предпочтительно концентрировали при пониженном давлении.
2
Предпочтительный способ получения экстракта Albizzia chinensis выглядит следующим образом: один килограмм измельченной коры Albizzia chinensis экстрагируют 3-5 литрами 80-90% EtOH в HO в условиях нагревания с обратным холодильником в течение 2-4 раз (каждый раз при нагревании в течение 2-3 часов); и экстракты растворителя собирают, затем растворитель удаляли при пониженном давлении с получением экстракта Albizzia chinensis.
(2) Экстракт Albizzia chinensis можно дополнительно очищать с помощью колоночной хроматографии с полиамидом, используя градиент спиртового растворителя для элюирования экстракта, и экстракт Albizzia chinensis получали посредством переработки и очистки.
2
2
Полученный экстракт Albizzia chinensis растворяли в 10-30% в EtOH в HO, предпочтительно в 20% EtOH в HO.
Объемное/массовое (л/кг) отношение порошка полиамидного адсорбента к экстракту Albizzia chinensis составляет от 20:1 до 40:1, предпочтительное отношение полиамидного порошка к экстракту Albizzia chinensis составляет от 25:1 до 30:1.
Элюирующие растворители включают спирт или смесь воды и спирта, предпочтительно спирты включают метанол и этанол, и наиболее предпочтительным растворителем является этанол.
Отношение (об./об.) элюирующего растворителя к полиамидному порошку составляет от 3:1 до 10:1, предпочтительное отношение составляет от 4:1 до 5:1.
2
2
Условия градиентного элюирования представляют собой следующие: EtOH 10-30% в HO, затем EtOH 40-80% в HO. Раствор, элюированный EtOH 40-80%, концентрируют с получением экстракта Albizzia chinensis.
2
2
Предпочтительные стадии очистки включают следующее: экстракт Albizzia chinensis растворяют в 10-30% EtOH в HO и затем подвергают колоночной хроматографии с использованием полиамидной колонки с 30-90 меш (количество отверстий на 1 линейный дюйм) (объемное/массовое отношение (л/кг) порошка полиамидного адсорбента к экстракту Albizzia chinensis составляет от 25:1 до 30:1), последовательно элюируя EtOH 10-30% и 40-80% в HO соответственно, и количество элюирующих растворов в 3-5 раз больше количества полиамидного порошка. Раствор, элюированный EtOH 40-80%, концентрируют с получением экстракта Albizzia chinensis.
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, которая содержит экстракт Albizzia chinensis (Osbeck) Merr., полученный способом, описанным настоящим изобретением, и фармацевтически приемлемый носитель.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей экстракт согласно настоящему изобретению в качестве активного компонента и обычно применяемые вспомогательные вещества для лекарственного средства и/или добавки. Как правило, фармацевтическая композиция содержит от 0,1 до 95% по массе экстракта согласно настоящему изобретению.
Согласно настоящему изобретению также предложена фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически эффективное количество экстракта Albizzia chinensis (Osbeck) Merr. согласно настоящему изобретению в качестве активного ингредиента и фармацевтически приемлемый носитель.
Фармацевтическую композицию, содержащую экстракт Albizzia chinensis (Osbeck) Merr. согласно настоящему изобретению, можно получать согласно способу, известному в данной области техники. С этой целью, в случае необходимости, любой экстракт согласно изобретению можно смешивать с одним или большим числом обычно применяемых вспомогательных веществ для лекарственных средств и/или добавок в форме твердого вещества или жидкости. Композиция может быть приготовлена в форме для лечения человека или в виде лекарственного средства для ветеринарии.
Экстракт согласно настоящему изобретению или его фармацевтическая композиция могут быть приготовлены в единичной лекарственной форме. Экстракт можно вводить энтеральным и/или парентеральным способами, например пероральным, внутривенным, внутримышечным, подкожным, интраперитонеальным, интраназальным путем, через слизистую оболочку ротовой полости, глаза, легкие, дыхательный путь, кожу, влагалище и/или ректальным путем. Предпочтительным является пероральное введение.
Лекарственная форма может быть приготовлена в виде жидкой формы, твердой формы или полутвердой формы. Жидкая форма может представлять собой растворы (включая истинные растворы и коллоидные растворы), эмульсии (включая эмульсии типа 'масло в воде', типа 'вода в масле' и сложные эмульсии), суспензии, инъекции (включая водные инъекции, порошок и вливание), глазные капли, капли для носа, лосьоны и/или жидкие мази для растирания. Твердые формы могут представлять собой таблетки (включая обычные таблетки, таблетки с энтеросолюбильным покрытием, защечные таблетки, диспергируемые таблетки, жевательные таблетки, шипучие таблетки, перорально распадающиеся таблетки), капсулы (включая твердые капсулы, мягкие капсулы, капсулы с энтеросолюбильным покрытием), гранулы, порошки, пилюли, микропилюли, суппозитории, пленки, пластыри, газовые (порошковые) аэрозоли, спреи и т.д. Полутвердая доза может быть представлена в форме мази, форме геля, форме пасты и т.д.
Экстракт согласно изобретению можно приготовить в виде обычного препарата, препарата с замедленным высвобождением, препарата с контролируемым высвобождением, препарата-мишени или различных систем на основе микрочастиц.
Для получения твердых композиций, таких как таблетки, можно применять разные вспомогательные вещества, хорошо известные в данной области техники. Вспомогательные вещества включают разбавители, связующие вещества, увлажняющие агенты, разрыхлители, смазывающие вещества, скользящие вещества. Разбавитель может представлять собой крахмал, декстрин, сахарозу, глюкозу, галактозу, маннит, сорбит, ксилит, микрокристаллическую целлюлозу, сульфат кальция, гидрофосфат кальция, карбонат кальция и т.д.; увлажняющие агенты могут представлять собой воду, этанол, изопропанол и тому подобное; связующие вещества могут представлять собой крахмальную суспензию, декстрин, патоку, мед, раствор глюкозы, микрокристаллическую глюкозу, аравийскую камедь, желатин, натрий карбоксиметилцеллюлозу, метил целлюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, этилцеллюлозу, акриловую смолу, карбомер, поливинилпирролидон пиррол, полиэтиленгликоль и изопропанол, и т.д.; разрыхлитель может представлять собой сухой крахмал, микрокристаллическую целлюлозу, гидроксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения, поливинилпирролидон с поперечными межмолекулярными связями, натрий-карбоксиметилцеллюлозу с поперечными межмолекулярными связями, натрий-карбоксиметилкрахмал, бикарбонат натрия и лимонную кислоту, карбонат кальция, полиоксиэтиленсорбитановые сложные эфиры жирной кислоты, додекансульфонат; смазывающие вещества и скользящие вещества могут представлять собой порошок талька, диоксид кремния, стеариновую кислоту, винную кислоту, жидкий парафин, полиэтиленгликоль и т.д.
На таблетки согласно настоящему изобретению может быть нанесено покрытие, такое как сахарное покрытие, пленочное покрытие, энтеросолюбильное покрытие или они могут быть покрыты двумя слоями или многими слоями.
Для получения пилюль, можно применять разные носители, хорошо известные в данной области техники. Примерами таких носителей являются разбавители и абсорбенты, такие как глюкоза, лактоза, крахмал, какао-масло, гидрогенизированное растительное масло, поливинилпирролидон, каолин, тальк; связующие вещества, такие как аравийская камедь, трагакантовая камедь, желатин, этанол, мед, жидкий сахар, рисовая паста или мучной клейстер; разрыхлитель, такой как агарозный порошок, сухой крахмал, альгинаты, додецилсульфат натрия, метилцеллюлоза, этилцеллюлоза и т.д.
Для получения суппозитория можно применять разные носители, хорошо известные в данной области техники, такие как полиэтиленгликоль, лецитин, какао-масло, высшие спирты, сложные эфиры высших спиртов, желатин, полусинтетический глицерид и т.д.
Для получения капсул экстракт согласно настоящему изобретению смешивают с разными носителями, упомянутыми выше, и полученную смесь заключают в твердую или мягкую желатиновую капсулу. Также экстракт согласно настоящему изобретению может быть получен в микрокапсуле, суспендирован в водной среде в виде суспензии, заключен в жесткие капсулы или приготовлен в виде инъекций.
Например экстракт согласно настоящему изобретению можно получить в виде инъецируемых композиций, таких как раствор, суспензия, эмульсия и лиофилизированный порошок. Такая композиция может быть водной или неводной и может содержать один и/или большее число фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей, связующих веществ, смазывающих веществ, консервантов, поверхностно-активных веществ или диспергирующих веществ. Разбавитель может быть выбран из воды, этанола, полиэтиленгликоля, 1,3-пропанола, этоксилированного стеарилового спирта, полиокисленного изостеарилового спирта, полиэтиленсорбитанового сложного эфира жирной кислоты и т.д. Помимо этого, для получения изотонических инъекций в инъецируемые композиции можно добавлять соответствующее количество NaCl, глюкозы или глицерина. Также в композиции можно добавлять общепринятый совместный растворитель, буфер, pH-регулирующий агент и тому подобное. Данные добавки обычно применяют в данной области.
Кроме того, в случае необходимости, в фармацевтические композиции можно добавлять красители, консерванты, ароматизирующие вещества, вкусовые агенты, подсластители или другие вещества.
Для достижения цели, заключающейся в усилении эффективности действия лечения, экстракт согласно настоящему изобретению фармацевтической композиции можно вводить любым известным в данной области техники способом.
Специалисту в данной области техники очевидно, что терапевтически эффективная доза для активных экстрактов согласно изобретению или их фармацевтической композиции будет зависеть от разных факторов, таких как характер и тяжесть заболеваний, подлежащих лечению, пола, возраста, массы, характерного и индивидуального ответа пациентов или животных, способа и количества введения и цели лечения. Вследствие этого, терапевтическая доза согласно изобретению может сильно варьировать. В целом, дозы, подлежащие введению, могут быть легко определены специалистами в данной области. Терапевтически эффективная доза для применения непосредственного экстракта согласно изобретению содержит диапазон доз от примерно 0,001 до примерно 150 мг/кг массы/сутки, предпочтительно от 0,1 до примерно 100 мг/кг массы/сутки, в частности от примерно 1 до примерно 60 мг/кг массы/сутки, более предпочтительно от примерно 2 до примерно 50 мг/кг массы/сутки активных экстрактов. Общую суточную дозу можно вводить один раз или дважды, три или четыре раза в сутки. Станет понятно, однако, что фактически вводимое количество экстрактов будет определять врач-терапевт согласно своему клиническому опыту и другой параллельно используемой схеме лечения. Каждую схему можно вводить один или несколько раз. Экстракт, его фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению можно применять независимо или в комбинации с другими терапевтическими лекарственными средствами с правильной дозой.
+
+
+
+
Исследования эффекта экстракта Albizzia chinensis согласно настоящему изобретению на активность H/K-АТФ-азы желудка свиньи и вызванную дотированием язву привратника желудка у крыс доказало, что экстракт Albizzia chinensis оказывает значительное действие, направленное против язвы желудка, с помощью механизма ингибирования H/K-АТФ-азной активности.
Ценные технические результаты
Согласно настоящему изобретению предложено новое лекарственное средство для лечения язвы желудка и хронического гастрита. Способ получения экстракта Albizzia chinensis является простым и, таким образом, подходит для промышленного получения.
Описание графических материалов
Фигура 1. Блок-схема получения экстракта Albizzia chinensis в Примере 1. Фигура 2. Защитное действие экстракта Albizzia chinensis на хроническую язву желудка, вызванную введением уксусной кислоты, у крыс.
Варианты реализации
Следующие примеры использованы для иллюстрации настоящего изобретения и не предназначены для ограничения объема изобретения, который может понять специалист в данной области.
Пример получения
Пример 1. Получение экстракта Albizzia chinensis
2
2
2
Высушенную на воздухе и измельченную кору Alhizzia chinensis (1 кг) экстрагировали 3,5 литрами 95% EtOH в условиях нагревания с обратным холодильником три раза (каждый раз нагревание в течение трех часов) и собирали растворы жидкого экстракта, затем растворитель удаляли при пониженном давлении с получением экстракта (130 г). Экстракт растворяли в 20% EtOH в HO и затем подвергали колоночной хроматографии с полиамидом 30-60 меш (порошок, 3200 мл), последовательно элюируя 12 литрами 20% EtOH в HO и 12 литрами 60% EtOH в HO. Раствор, элюированный 60% EtOH, концентрировали с получением экстракта Albizzia chinensis (8,0 г).
Фармакологические эксперименты
Пример 1
+
+
Экстракт Albizzia chinensis ингибирует активность H/К-ATФ-aзы желудка
+
+
+
+
Способы: Измерение H/К-АТФ-азной активности: частично очищенную слизистую оболочку желудка свиньи инкубировали с экстрактом Albizzia chinensis в буферном растворе в течение 20 мин при 37°C. Затем добавляли АТФ (20 мг/кг), и пробирки держали при 37°C в течение 30 мин. Реакцию останавливали добавлением 10% трихлоруксусной кислоты и центрифугировали при 6000 об/мин в течение 10 мин. Концентрацию неорганического фосфата супернатанта определяли, используя набор реагентов для определения неорганического фосфора. Поглощение при 660 нм считывали со спектрофотометра. Рассчитывали активность H/К-АТФ-азы.
+
+
+
+
Результаты: Результат приведен в табл.1. Активность H/К-АТФ-азы снижалась под действием экстракта Albizzia chinensis (1 и 10 мг/л) на 28% и 73% соответственно. Экстракт демонстрировал сильное ингибирующее действие на H/К-АТФ-азную активность желудка свиньи.
Пример 2
Экстракт Albizzia chinensis обладает гастропротекторным действием на язву желудка, вызванную лигированием привравратника желудка, у крыс
Способы: Самцов крыс использовали после 48 ч воздержания от приема пищи и случайным образом разделяли на три группы. Физиологический раствор и экстракт Albizzia chinensis (100 и 500 мг/кг) вводили интрадуоденально, непосредственно после лигирования привратника желудка. Лигирование привратника желудка проводили под легким наркозом с помощью диэтилового эфира. Животных умерщвляли спустя 20 ч после лигирования. Желудки удаляли и вскрывали для определения повреждения. Результаты анализировали с использованием однофакторного дисперсионного анализа ANOVA для оценки достоверности.
Результаты: Результат приведен в табл. 2. Было обнаружено, что ингибирование язвы желудка составляет 43% и 86% (p<0,05) при дозах 100 и 500 мг/кг соответственно. Это, соответственно, позволяет предположить, что экстракт Albizzia chinensis значительно снижал заболеваемость язвой желудка.
Пример 3
Экстракт Albizzia chinensis обладает гастропротекторным действием на вызванную введением уксусной кислоты хроническую язву желудка у крыс
2
Способы: Крыс использовали после 48 ч воздержания от приема пищи. После наркоза с пентобарбиталом натрия, 30% (об./об.) уксусную кислоту (20 мкл) вводили путем инъекции в субсерозный слой в железистой части привратника желудка. Животных случайным образом делили на три группы и обрабатывали экстрактом Albizzia chinensis (30 и 100 мг/кг, в/ж) один раз в сутки в течение 10 дней после индукции язвы желудка. Животных умерщвляли; желудки удаляли и вскрывали, расправляли на стеклянной пластинке. Фотографии делали с помощью цифровой камеры, и площадь поверхности (мм) образования язвы определяли, используя Spot Advanced software.
Результаты: Результат приведен в табл.3. Было обнаружено, что ингибирование язвы желудка составляло 57% и 50% (p<0,01) при дозах 30 и 100 мг/кг соответственно. Результат показал, что экстракт Albizzia chinensis значительно уменьшал хроническую язву желудка у крыс, вызванную введением уксусной кислоты.