Эволюционно новые гены, специфически экспрессирующиеся в опухолях: новый класс мишеней?

42

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

в таблетках для перорального применения. Для улучшения биодоступности препарата и его адресной доставки к клеткам-мишеням разработана лиофилизированная липосо-мальная лекарственная форма (ЛЛЛФ) цифетрилина для парентерального применения.

Цель исследования — определить оптимальный путь введения, при котором достигается наибольшая эффективность ЛЛЛФ цифетрилина в сравнении с исходным соединением.

Материалы и методы. В опытах использованы иммуно-компетентные самки мышей — гибридов Fl (C57B1/6 DBA/2) массой 20—22 г с перевиваемой подкожно адено-карциномой молочной железы Са-755. Сравнительное изучение противоопухолевой активности цифетрилина проводилось в дозах 5, 10 и 20 мг/кг при ежедневном 5-кратном внутривенном (в/в), подкожном (п/к) и перо-ральном способах введения исследуемых лекарственных форм в концентрации 1 мг/мл. Противоопухолевый эффект оценивали по показателю торможения роста опухоли (ТРО, %) и увеличению продолжительности жизни (УПЖ, %) подопытных мышей по сравнению с контрольными животными.

Результаты. При сравнительной оценке эффективности ЛЛЛФ при в/в введении и исходного соединения при пероральном введении мышам в дозе 20 мг/кг выявлен схожий противоопухолевый эффект в течение 7 дней после окончания лечения: ТРО = 70-57 % и ТРО = 59-53 % соответственно. При п/к введении ЛЛЛФ цифетрилина в дозах 10 и 20 мг/кг длительность противоопухолевого эффекта наблюдалась в течение 1418 дней и составляла ТРО = 87-65 % и ТРО = 87-62 % соответственно. В то время как пероральное введение аналогичных доз исходного соединения тормозило рост Са-755 с показателями ТРО = 79-50 % и ТРО = 59-53 % соответственно и сохранением противоопухолевого эффекта в течение 7 дней после окончания лечения. Кроме того, только при п/к введении ЛЛЛФ цифетрилина в дозе 10 и 20 мг/кг наблюдалось УПЖ мышей с Са-755 на 28 и 45 % соответственно.

Заключение. Сравнительное изучение противоопухолевой активности ЛЛЛФ цифетрилина в зависимости от способа введения показало преимущество его подкожного применения на Са-755 мышей.

М.В. Князев, В.А. Дуванский

АУТОФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ ЭНДОСКОПИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПОВЕРХНОСТНЫХ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ ЖЕЛУДКА

ФГБУ«ГНЦЛМФМБА России», РУДН, Москва, Россия

Цель исследования. Определить зависимость аутофлу-оресцентного (АФ) окрашивания поверхностных эпителиальных новообразований желудка от гистоморфологиче-ского строения.

Материалы и методы. Обследованы 3688 пациентов, выявлены эпителиальные образования у 123 (3,3 %) пациентов. Использовали эндоскопическую видеосистему Olympus Lucera GV-260 с режимом аутофлуоресценции AFI. Фиксировали АФ окрашивание образования в пурпурный или зеленый цвет. Все образования разделили на 4 группы: 1-я группа включала все виды гистоморфологиче-ски подтвержденных инвазивных и неинвазивных карци-

ном; 2-я — аденоматозные образования с диспластически-ми изменениями I—III степенью; 3-я — образования с неопределенной дисплазией, смешанным аденоматозно-гиперпластическим гистологическим строением; 4-я контрольная — образования негативные по диспласти-ческим изменениям, воспалительного характера.

Результаты. Диагностические возможности АФ эндоскопии: чувствительность — 0,69; специфичность — 0,71; прогностическая ценность положительного результата — 0,92; прогностическая ценность отрицательного результата — 0,31; отношение правдоподобия — +LR- 2,4 и -LR-0,43. Выявлено, что пурпурное АФ окрашивание эпителиальных образований в 2,4 раза вероятнее, чем в контрольной группе.

Заключение. АФ окрашивание поверхностных эпителиальных новообразований желудка зависит от гистологического строения — карциноматозные и аденоматозные структурные изменения имеют пурпурный цвет, что позволяет получить дополнительную информацию о гистологическом строении образования и применить адекватный метод лечения.

А.П. Козлов, Л.Л. Круковская, Н.А. Самусик, А.А. Макашов, Е.А. Матюнина, Ю.К. Карнаухова, Т.В. Курбатова, А.В. Емельянов

ЭВОЛЮЦИОННО НОВЫЕ ГЕНЫ, СПЕЦИФИЧЕСКИ ЭКСПРЕССИРУЮЩИЕСЯ В ОПУХОЛЯХ: НОВЫЙ КЛАСС МИШЕНЕЙ?

Биомедицинский центр и Санкт-Петербургский университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Ранее мы описали несколько единичных генов с двойной специфичностью — эволюционно новых, экспрессирующихся опухолеспецифически или преимущественно в опухолях (OTP, ESRG, PVT1, ELFN1-AS1, HHLA1, DCD, SPRR1A, CLLU1, PBOV1 и др.).

Мы предложили назвать такие гены эволюционно новыми генами, специфически экспрессирующимися в опухолях [Tumor Specifically Expressed, Evolutionarily Novel (TSEEN) genes]. Мы также показали эволюционную новизну целых классов генов, экспрессирующихся преимущественно в опухолях, а именно CT-X генов и генов некодиру-ющих опухолеспецифических РНК, описанных в нашей лаборатории.

Цель исследования — изучить эволюционную новизну и опухолеспецифичность экспрессии как отдельных генов, так и целых классов генов человека и полосатого данио.

Материалы и методы. Анализ эволюционной новизны функциональных классов опухолеассоциированных генов человека проводили с помощью программы ProteinHistorian и HMMER. Ортологи изучаемых генов искали в 26 полногеномных последовательностях эу- и прокариот. Для изучения генов полосатого данио, экспрессирующихся опухоле-специфически, использовали модель трансгенной индуцируемой гепатомы. Секвенирование транскриптома осуществляли по методике RNA-Seq. Дальнейший in silico анализ проводили с помощью программ TopHat, Cufflinks, BLASTX, PSIBLAST и web-ресурса Ensembl.

Результаты. Мы изучили филогенетическое распределение ортологов генов, экспрессирующихся в опухолях,

Спецвыпуск / том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

43

и показали, что разные функциональные классы генов имеют разную эволюционную новизну. Некоторые из них обогащены эволюционно новыми генами. Мы показали, что филогенетическое распределение кривых онкогенов, генов — супрессоров опухолевого роста и дифференциро-вочных генов происходит параллельно, что подтверждает участие опухолей в происхождении новых клеточных типов. Используя модель трансгенных индуцируемых опухолей у полосатого данио, мы обнаружили, что некоторые гены человека, определяющие прогрессивные признаки, возникают у рыб и впервые экспрессируются в опухолях рыб. Наши данные и данные, обнаруженные в литературе, свидетельствуют о том, что гены, произошедшие: путем генной дупликации; из эндогенных ретровирусов; посредством перестановки экзонов или возникшие de novo экс-прессируются в опухолях, причем некоторые из них — с очень высокой специфичностью.

Заключение. Экспрессия эволюционно новых генов в опухолях может быть новым биологическим феноменом, имеющим важную эволюционную роль. Эволюционно новые гены, специфически экспрессирующиеся в опухолях, могут являться мишенями для терапии и профилактики опухолей.

О.И. Койфман1, Г.В. Пономарёв2, Т.В. Сергеева3,

А.В. Иванов4 5, Е.Б. Цитрин6

НОВАЯ КОМПОЗИЦИЯ

ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ

«ИНТРАХЛОРИН»

1ИГХТУ, Иваново, Россия;

2ИБМХРАН, Москва, Россия;

3ООО «НХТ», Москва, Россия;

4ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России,

Москва, Россия;

5ФГБУ«ГНЦ лазерной медицины ФМБА России», Москва, Россия;

6ИБР РАН, Москва, Россия

Введение. Фотодинамическая терапия является высокоэффективным способом лечения онкологических заболеваний, но не может выйти на лидирующие позиции из-за отсутствия фотосенсибилизатора с характеристиками, удовлетворяющими идеальным критериям. Оптимальные характеристики обнаружены у природных бактериохлори-нов, попадающих в окно биологической прозрачности инфракрасного диапазона.

Материалы и методы. В Ивановском ГХТУ удалось синтезировать композиционный препарат, в котором основным действующим веществом является бактериохлорин (масс. % 88), возбуждаемый длиной волны 762 нм, с добавлением хлорина для одномоментной флуоресцентной диагностики (масс. % 12). Химическое соединение защищено патентом, и композиция получила название «Интрахлорин». Особенность данной композиции — возможность ее эффективного использования как для лечения, так и для одномоментной флуоресцентной диагностики различных морфологических вариантов злокачественных новообразований. Высокоизбирательное попадание бактериохлорина в злокачественные клетки и «включение» апоптоза через ряд ферментативных реакций относит «Интрахлорин» к группе препаратов моле-кулярно-таргетной терапии.

Результаты. Прекрасная водорастворимость позволяет быстро и равномерно насыщать композицией любой объем опухоли, что обусловливает возможность ее интратумораль-ного или комбинированного (с внутривенным введением) применения. Это повышает концентрацию композиции в опухолевой ткани и снижает общую нагрузку на организм. Изучена внутриклеточная фармакодинамика. При конфокальной микроскопии проводилась флуоресцентная визуализация митохондрий, лизосом и композиции в живых клетках. Показана колокализация бактериохлорина с лизо-сомами, но не с митохондриями (для выявления лизосом клетки перед экспериментом загружали LysoTracker Green DND-26 или LysoTracker Red DND-99). Для выявления митохондрий использовался MitoTracker Red CMXRos. Композиция в течение 20 мин активно заполняет органеллы клеток, что определяет время экспозиции при интратумо-ральном введении. Пропускание биотканями световой энергии в диапазоне 762 нм позволяет на протяжении 10—15 мин эффективно возбуждать бактериохлорин непосредственно в опухолевом объеме.

Заключение. Полученная композиция обладает всеми критериями «идеального» фотосенсибилизатора, что определяется ее высокой туморотропностью, гидрофильно-стью, низкой темновой и световой токсичностью, химической устойчивостью и высоким квантовым выходом синглетного кислорода (~ 0,45 ± 5). Предпосылками для промышленного производства «Интрахлорина» являются низкая себестоимость и легкая воспроизводимость синтеза.

Л.А. Кокоев

ИЗУЧЕНИЕ ХИМИОПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПОЛИСАХАРИДОВ АИРА БОЛОТНОГО НА МОДЕЛИ КАНЦЕРОГЕНЕЗА ПЕЧЕНИ И ПИЩЕВОДА

ФГБОУ ВО СОГМА Минздрава России, Владикавказ, Россия

Введение. Злокачественные новообразования — одна из основных причин смертности населения. Возможности лечения онкологических пациентов ограничены. Большие надежды связывают с совершенствованием методов профилактики рака. Перспективным направлением является химиопрофилактика — использование биологически активных соединений на разных этапах канцерогенеза. Актуально использовать соединения природного происхождения в силу их низкой токсичности и высокой эффективности, что важно при длительном применении. Таким соединением признаны полисахариды аира болотного. В связи с чем целесообразно изучение химиопрофи-лактической активности полисахаридов аира болотного и их возможных механизмов.

Цель исследования — изучить влияние полисахаридов аира болотного на возникновение опухолей печени и пищевода, индуцированных у крыс N-нитрозодиэтиламином (N-НДЭА).

Материалы и методы. Эксперимент проведен на 30 крысах линии Вистар. Животные разделены на 2 группы: 1-я — животные, получавшие N-НДЭА с питьевой водой (100 мг/л — 4 мес) и 2-я — получавшие N-НДЭА с питьевой водой (100 мг/л — 4 мес) и с кормом полисахариды

Спецвыпуск/ том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ