Гидрозольные препараты на основе гексоцианоферрата железа - универсальные экспресс-диагностикумы для детекции различных нозологий

следуемых интермедиатов у лиц 2-ой группы. После работы на биостенде увеличился уровень ОЛ и ТАГ в обеих группах, на фоне снижения ХС за счет обеих его фракций. После велоэргометрии ИА уменьшился в обеих группах (на 38,6 % и 43,5%) соответственно. Полученные данные свидетельствуют о благоприятном влиянии умеренной мышечной деятельности на обмен липидов и могут быть использованы для биохимического контроля лиц, занимающихся лечебной физкультурой.

ВЛИЯНИЕ ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ ОБСТАНОВКИ В МЕСТЕ ПРОИЗРАСТАНИЯ И СРОКА ХРАНЕНИЯ НА СОДЕРЖАНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ПЛОДАХ РЯБИНЫ Князева Е.Н.

Кировская государственная медицинская академия, Вятское НОУ «Вектор», кафедра биохимии Научный руководитель - к.м.н. А.В. Еликов Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок

Плоды рябины обыкновенной широко применяются в медицине и пищевой промышленности, как в составе сборов, так и в виде основного компонента. В зависимости от технологии, ягоды применяются как в свежесобранном, так и в сушеном виде, после более или менее длительного срока хранения. Аскорбиновая кислота является важным водорастворимым витамином, обуславливающим лечебные свойства ягод рябины, поэтому ее количество в плодах служит одним из критериев для оценки качества продукта. Целью нашей работы было оценить характер влияния экологической обстановки в месте сбора плодов рябины, а также длительности сроков хранения на содержание в них витамина С. Сбор плодов проводили в лесном массиве за пределами городской черты (экологически чистая местность), в городском парке, непосредственно вблизи дороги с интенсивным транспортным потоком и предприятия с промышленными выбросами. Определение содержания аскорбиновой кислоты проводили в свежесобранных ягодах, а также в процессе хранения спустя 3 - 6 месяцев. Установлено достоверное снижение содержания аскорбиновой кислоты в плодах рябины в местности с неблагоприятной экологической обстановкой. В процессе хранения содержание витамина С снижалось равномерно во всех исследуемых образцах. Таким образом, можно сделать вывод о том, что вещества входящие в состав промышленных выбросов в первую очередь нарушают процесс синтеза аскорбиновой кислоты в растениях. Полученные данные можно использовать, как для контроля за экологической обстановкой, так и при оценке качества продукции.

ФОТОЭЛЕКТРОКОЛ ОРИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПИРОГЕННОСТИ ИНЪЕКЦИОННОЙ ВОДЫ

Кузиева З., Убайдуллаев К.А.

Ташкентский фармацевтический институт, кафедра фармацевтической химии

Зав. кафедрой - проф. А.А. Тулаганов

Цель: Разработка физического метода определения пиро-генности инъекционной воды. Задачи: На основе восстановительных свойств эндотоксинов выделяемых микроорганизмами определение пирогенности инъекционной воды фотоэлектроколориметрическим методом анализа. Материалы и методы: Согласно фармакопейной статьи каждая серия инъекционной воды должна подвергаться на испытание пирогенности. Существуют два фармакопейных метода определения пирогенности на кроликах и с томощью так называемого ЛАЛ-теста. Для определения пирогенности на кроликах испытуемый раствор проверяют на 3 кроликах. Если у 1 или 2 кроликов температура повысилась более чем на 0,6°С, испытание повторяют дополнительно на 5 кроликах. В основе ЛАЛ - тест метода лежат процессе физико-химического взаимодействия эндотоксинов с лизатом клеток крови мечехвостов, в результате которого происходит образование геля различной плотности. Методика определения: 10 мл испытуемой воды для инъекции нагревают до кипения (для улетучивания летучих восстановителей), прибавляют 0,1 мл 0,01 м раствора перманганата ка-

лия и 0,2 мл разбавленного раствора серной кислоты и кипятят еще 10 минут. Смесь закрывают пробкой, охлаждают определяют оптическую плотность раствора на фотоэлек-троколориметра на кювете толщиной 10 мл при синее - зеленном светофильтре. В качестве раствора сравнения используют инъекционную воду - D. Параллельно определяют оптическую плотность, инъекционной апирогенной воды при тех же условиях -D0. Выводы: 1. Предлагается фото-электроколориметрический метод определения пирогенности инъекционной воды. 2. Метод основан на окисления бактериальных эндотоксинов раствором перманганата калия в кислой среде.

МОДЕЛИРОВАНИЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ 1 -(2'ГИДРОКСИЭТИЛ) -2-МЕТИЛ-5 НИТРОИМИДАЗОЛА НА КИНЕТИКУ ФОЛДИНГА ФЕРМЕНТОВ И НА СОСТОЯНИЕ СЕТКИ ВОДОРОДНЫХ СВЯЗЕЙ ВОДЫ

Мавлюдова А.Ш., Попыхова Э.Б.

Саратовский Государственный Университет, кафедра биохимии и биофизики

Научный руководитель - проф. П.Е. Кузнецов Зав. кафедрой - доц. Г.В. Мельников

1-(2'гидроксиэтил)-2-метил-5нитроимидазол (МЗ) - это синтетический противобактериальный препарат, широко используемый современной медициной. Также, известно о способности МЗ оказывать протекторное действие на клетки теплокровных. Вероятно, это связано со способностью МЗ изменять состояние сетки Н-связей воды вблизи клеточных мембран и макромолекул. Снижение подвижности приповерхностной воды с помощью МЗ может использоваться в регуляции фолдинга белков. Цель и задачи работы. Экспериментально изучить влияние МЗ в концентрационном интервале 10"1-10"1 % на скорость фолдинга ферментов (каталаза дрожжей, лизоцим куриного яйца), а также с помощью молекулярно-динамических расчетов определить влияние МЗ на собственное водное микроокружение. Материалы и методы. В эксперименте использовали каталазу дрожжей (Serva), лизоцим куриного яйца (Serva), мочевину ХЧ (Экрос), МЗ экстрагировали из таблетированной лекарственной формы "Трихопол", молекулярно-динамические расчеты проводили с помощью программы "HyperChem". Результаты и обсуждение. Изучение влияния МЗ на кинетику фолдинга ферментов осуществлялось флуоресцентным методом. Видно, что МЗ в концентрационном интервале 10" 5-10-7% значительно снижает скорость фолдинга. Вероятно, это связано с влиянием МЗ на состояние сетки Н-связей воды. Прямое влияние МЗ на белки можно исключить, т.к. его концентрация во много раз меньше концентрации белков. Молекулярно-динамические расчеты показывают, что распределение молекул воды по кластерам в растворах МЗ, глюкозы, гидрозоле ультрадисперсных алмазов и в чистой воде не изменяется. Видно, что МЗ, в отличие от других веществ, существенно изменяет состояние сетки Н-связей воды. Выводы. Показано, что МЗ снижает скорость фолдинга лизоцима и каталазы. Вероятным молекулярным механизмом подобного действия МЗ является перестройка сетки Н-связей воды, что подтверждается молекулярно-динамическими расчетами. Таким образом, МЗ можно использовать для регулирования скорости фолдинга ферментов.

ГИДРОЗОЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ НА ОСНОВЕ ГЕКСОЦИАНОФЕРРАТА ЖЕЛЕЗА - УНИВЕРСАЛЬНЫЕ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКУМЫ ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ РАЗЛИЧНЫХ НОЗОЛОГИЙ Мальщукова А.А.

Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей химии

Научный руководитель - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин Зав. кафедрой - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин

Целью настоящей работы явилось изучение реакции гидрозольной агглютинации с различными объектами. Материалы: гексоцианоферрат железа Fe4 [Fe(CN)6b - ультрадисперсные частицы неорганической природы, на поверхности

Вятский медицинский вестник, №1, 2005

которых адсорбированы по определенной технологии биоспецифические лиганды - комплексный туберкулезный (ППД) антиген, либо парвовирусный антиген. Использовали также сыворотку «минус» - донорскую и сыворотку «плюс» от больного с верифицированным диагнозом «туберкулез», а также сыворотки птиц с верифицированным диагнозом. Раститровку сывороток проводили в растворах различных солей. Методы: разведение сывороток в ряде лунок поли-стирольного стрипа, в последнюю (контрольную) лунку сыворотку не вносят. На предметное стекло наносили 1:1 соответствующую сыворотку и гидрозоль. Отмечали результат. Для регистрации которого использовали фильтровальную бумагу и нетканый материал. Также для дополнительной проверки работы гидрозоля использовали панель сывороток: серия плюс и минус сывороток от больных с верифицированным диагнозом. Результаты: были получены типичные результаты «плюс» и «минус», т. е. гидрозоль четко дифференцировал сыворотку (+) и (-). В случае положительного результата реакции-наблюдали хлопья и зерна агглютинанта в каплях; в случае отрицательного результа-та-отсутствие агглютинации. Время реакции - от 30 секунд, до 2 минут, что, по-видимому, определялось используемым раствором для разведения. Результаты реакции на нетканом материале и на фильтровальной бумаге: при положительной реакции - плотный, компактный комплекс с четкой границей, диаметром 2-4 мм; отрицательная реакция -распределение частиц реагирующих веществ без четкой границы. Опытным путем выявлен оптимальный раствор для разведения сывороток - 0,25% KCL. Выводы: Т. о. препарат гексоцианоферрата железа дифференцирует сыворотки (+) и (-). Чувствительность метода составляет 90%, специфичность - 90%. Данный метод - бесприборное тестирование биологического материала, позволяет проводить диагностику за короткий промежуток времени и без использования дорогостоящих и дефицитных материалов. Способ фиксации результатов на фильтровальной бумаге и на нетканом материале позволяет хранить результаты реакции длительное время и использовать при необходимости сравнить какие - либо результаты и для демонстрации. В ближайшее время предполагается проведение работ по адсорбции специфических антител на поверхности гидрозолей с тестируемым гидрозолем в объектах внешней среды.

ИССЛЕДОВАНИЕ ОБЪЕКТИВИЗАЦИИ СТЕПЕНИ СТРУКТУРИРОВАНИЯ ВОДЫ Навалихин А.А., Пленкина Л., Смагина Е. Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей и биоорганической химии Научный руководитель - асс. О. В. Журавлева Зав. кафедрой - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин

В настоящее время большой научный и практический интерес представляет изучение степени структурной упорядоченности либо неупорядоченности воды как базового объекта изопатических и гомеопатических препаратов. Целью настоящей работы явилось исследование возможностей объективизации степени структурирования воды. Материалы и методы. Использовали дистиллированную воду и различные добавки-электролиты: NaCl, KCl, MnCl2, CuSO4 и неэлектролит - глюкозу. Осуществляли потенцирование воды вышеупомянутыми добавками с использованием классических методов гомеопатии в аспекте получения биологически активных препаратов в децизмальных разведениях. Далее в полученных препаратах растворяли сульфат меди; каплю раствора помещали на предметное стекло и высушивали в условиях естественной конвективной сушки. После высушивания препараты микроскопировали в световом микроскопе и оценивали форму, размер и иные параметры кристаллов. В результате показано изменение форм, размеров и типа кристаллизации в зависимости от вида предшествующего потенцирования воды электролитами, либо не электролитами.

О ВОЗМОЖНОСТИ ЭКСПРЕССНОЙ СЕРОДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА ПРИ ПОМОЩИ РЕАКЦИИ ГИДРОЗОЛЬНОЙ ГЛЮТИНАЦИИ Окатьева Н.В.

Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей и биоорганической химии. Научный руководитель - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин Зав. кафедрой - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин

В последние годы, заболевания передающиеся половым путем (зппп), в частности сифилис представляет одну из наиболее серьезных проблем для здоровья миллионов людей. По данным ВОЗ, в течении года в мире выявляется около 330 мл. новых случаев наиболее распространенных зппп, из них на долю сифилиса приходится 12 мл. В этих условиях особую актуальность приобретает эффективная экспресс диагностика данного заболевания. На фоне широкого разнообразия методов лабораторной диагностики справедливо повышаются требования к чувствительности, высокоспецифичности и простоты выполнения метода. Особая роль при этом должна отводится массовому профилактическому скринингу населения, в особенности групп риска (мед. персонал), с целью выявления инфекции на ранних стадиях. Целью настоящей работы явилось создание диагностикума, отвечающим на вышеперечисленные требования и проведение сравнительного анализа для определения его диагностической ценности. Материалы и методы. В исследовании были использованы: набор для определения ассоцеированных с сифилисом реагиновых антител «Люис-тест», включающий кардиолипиновый антиген (КЛ), положительный контрольный образец - сыворотка крови человека, содержащая специфические антитела, антиген генноинженер-ный, полученный от дрожжевых грибов, на основе внедрения в геном фрагмента ДНК Trepanema pallidym, производство молекулярной биологии РАМН, образцы берлинской лазури синтезированные на базе кафедре общей и биоорганической химии КГМА. Проводили ковалентное связывание антигенов ассо-цеированных с Trepanema pallidym на поверхности берлинской лазури. Для определения специфических антител применяли реакцию гидрозольной агглютинации на стекле с сыворотками различных титров. Буфером служили растворы NaCl и KCl различных концентраций. Результаты анализа считали положительными если на поверхности стекла с используемым образцом визуализировались агрегаты частиц различной величины, с четкими просветлениями жидкости между ними в течение 1 минуты. При отрицательном результате на поверхности стекла с образцов видна мутная жидкость с равномерно распределенными частицами.

ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ТВЕРДЫХ ФАЗ В КАЧЕСТВЕ ИСХОДНЫХ МАТЕРИАЛОВ ПРИ СИНТЕЗЕ ГИДРОЗОЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ Орлова О.Ю, Попов Д.В.

Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей и биоорганической химии Научный руководитель - д. т. н., проф. А.Г. Мешандин Зав. кафедрой - д. т. н., проф. А.Г. Мешандин

Проблема создания экспрессных безприборных диагностических препаратов постоянно сталкивается с задачей выбора вида материала для твердой фазы коллоидного раствора, либо достаточно устойчивой суспензии. Целью представляемой работы являлось изучение различных видов твердых фаз, используемых в последующем синтезе иммунохимических диагностических препаратов. Материалы и методы. Используем образцы оксида железа(Ре203), оксида меди (CuO) и гексациа-ноферрата железа^е^Ре^^бЬ). В качестве биолигандов применяли модельный антиген - человеческии противокорье-вой иммуноглобулин, а также реальные антигены - туберкулезные и дифтерийные антигены. Синтезировали гидрозоли с вышеуказанными объектами и осуществляли полный комплекс исследований их иммунно-химической активности. В результате комплексной оценки, что наиболее оптимальными материалами для твердой фазы гидрозоля является гексацианофер-рат железа в виде коллоидного раствора. Этот препарат рекомендуется для последующего широкого изучения и внедрения в практическое здравоохранение.