СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ РАСТВОРОМ ГОМЕОПАТИЧЕСКИХ РАЗВЕДЕНИЙ АНТИТЕЛ К ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ СИНТАЗЕ ОКСИДА АЗОТА ЧЕЛОВЕКА В КОМПЛЕКСЕ С РАСТВОРОМ ГОМЕОПАТИЧЕСКИХ РАЗВЕДЕНИЙ АНТИТЕЛ К С-КОНЦЕВОМУ ФРАГМЕНТУ РЕЦЕПТОРА АНГИОТЕНЗИНА II
METHOD FOR ENDOTHELIAL DYSFUNCTION CORRECTION BY SOLUTION OF HOMOEOPATHIC DILUTIONS OF HUMAN ENDOTHELIAL NITROGEN OXIDE SYNTHASE ANTIBODIES IN COMPLEX WITH SOLUTION OF HOMOEOPATHIC DILUTIONS OF ANGIOTENSIN II RECEPTOR C-TERMINAL FRAGMENT ANTIBODIES

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции L-Name-индуцированной эндотелиальной дисфункции.
Из уровня техники известен способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200, описанный в патенте РФ №2306953 C1 (А61K 39/395, 27.09.2007 г.).
Недостатком данного способа является то, что основным механизмом действия смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 является увеличение количества eNOS, что ограничивает его эффективность.
Задачей изобретения является повышение эффективности коррекции эндотелиальной дисфункции смесью как за счет повышения количества eNOS, так и за счет устранения эффектов ангиотензина II.
Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что на фоне моделирования L-name-индуцированной эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным введением лабораторному животному в течение 28 суток блокатора синтеза NO L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 12,5 мг/кг/сут., проводится ее коррекция введением смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200 (внутрижелудочно, 2 раза в сутки по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут.)) в комбинации с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II -С12, С30, С200, внутрижелудочно, 2 раза в сутки по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут.).
Использование в заявленном способе смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 в комбинации с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 приводит не только к увеличению количества eNOS но и к блокаде ангиотензиновых рецепторов-1 типа и устраняют такие эффекты ангиотензина II, как: превращение оксида азота в пероксинитрат, стимуляция синтеза эндотелина, стимуляция выработки цитокинов и инициация тем самым воспаления в сосудистой стенке, гиперактивация ренин-ангиотензин альдостероновой системы (РААС), ведущая к формированию эндотелиальной дисфункции.
Заявленный способ может быть осуществлен следующим образом.
Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 12,5 мг/кг/сут. На 29 день от начала эксперимента под наркозом (тиопентал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика TSD104A и аппаратно-программного комплекса МР100, производства Biopac System, Inc., США. Функциональные пробы: эндотелий зависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.
Степень развития эндотелиальной дисфункции оценивается с помощью коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления артериального давления (АД) в ответ на введение нитропруссида (НП), при этом точками меньшего катета являются точка максимального падения АД и точка выхода уровня АД на плато при введении функциональной пробы с введением НП, к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение ацетилхолина (АХ), причем за меньший из катетов принимают разность между точкой окончания кардиального компонента и точкой восстановления АД при введении функциональной пробы с введением АХ, а большими катетами в этих треугольниках являются показатели времени восстановления сосудистой реакции на введение АХ и НП, выражаемое в секундах; площадь исчисляемых треугольников выражается в условных единицах (см., например, известную методику, описанную в патенте RU 2301015).
При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.
Обработка полученных экспериментальных данных при проведении функциональных проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин 40 мкг/кг в/в) и эндотелийнезависимое (нитропруссид 30 мг/кг в/в) расслабление сосудов у экспериментальных животных, позволили установить, что внутрибрюшинное введение L-Name в дозе 12,5 мг/кг в течение 28 дней вызывает повышение коэффициента эндотелиальной дисфункции до 3,5±0,5 усл. ед. (Таблица 1), тогда как в контрольной группе животных (внутрижелудочное введение дистиллированной воды, в дозе 9 мл/кг/сут) он составил 1,2±0,1 усл. ед.
В группе животных, где на фоне введения L-NAME в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней внутрижелудочно вводилась смесь растворов гомеопатических разведении поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе окасида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200 КЭД составил - 1,8±0,1 усл. ед.
Таблица 1
Динамика показателей АД и коэффициента эндотелиальной дисфункции при моделировании L-Name-индуцированной эндотелиальной дисфункции и ее коррекции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200 в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 в дозе 9 мл/кг/сут
Группы животных
Функциональная проба
САД, мм рт.ст.
ДАД, мм рт.ст.
S сосудистой реакции при проведении ЭЗВД с АХ и ЭНВД с НП, усл.ед.
КЭД, усл. ед.
Контрольная (ежедневное, внутрижелудочное введение дистиллированной воды 9 мл/кг/сут)
Исходные
159,2±5,4
124,2±4,7
1,2±0,1
АХ
96,9±6,7
52,0±3,0
3071,2±501,1
НП
113,8±6,1
55±2,4
3617,2±560,1
Получавшие L-NAME (12,5 мг/кг)
Исходные
204,8±10*
164,2±5,9*
3,5±0,5*
АХ
111,3±7,4
64,7±4,3*
3700,2±536,9
НП
118,2±9,9
61,4+4,4
11922,8±1838,9*
L-NAME (12,5 мг/кг)+смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - С12, С30, С200 (9 мл/кг/сут)
Исходные
230,1±8,8*
175,1±6,4*
1,8±0,2**
АХ
116,4±4,0*
73,5±3,5*
5826,0±801,2**
НП
108,1±4,6
60±3,6
9628,5±970,1*
L-NAME (12,5 мг/кг)+смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - С12, С30, С200 (9 мл/кг/сут)+смесью растворов гомеопатических разведений антител к с-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II -С12, С30, С200 (9 мл/кг/сут)
Исходные
213,6±4,6*
166,8±2,7*
1,4±0,1**
АХ
116,9±5,5*
73,3±3,4*
3295,3±201,4
НП
122,3±4,6
70,5±4,5*
4546,2±299,4**
Примечание: * - р<0,05 в сравнении с контрольной группой; ** -  р<0,05 в сравнении с группой L-NAME. САД - систолическое артериальное давление, ДАД - диастолическое артериальное давление, S - площадь над кривой восстановления артериального давления при проведении фармакологических проб, КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции.
В группе животных, где на фоне введения L-Name в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней внутрижелудочно вводилась смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200 в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 КЭД составил - 1,4±0,1, что достоверно ниже, чем в группе с моделированием патологии и в группе с моно коррекцией смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200.
Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию L-Name-индуцированной эндотелиальной на фоне введения L-Name в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, С30, С200 в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200, при внутрижелудочном введении в дозе 9 мл/кг каждой из них, снижая КЭД до уровня такового в контрольной группе животных - 1,2±0,1 усл.ед.