МЫШИ, У КОТОРЫХ ВЫРАБАТЫВАЮТСЯ СВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ, СОДЕРЖАЩИЕ VL-ДОМЕНЫ

1. Мышь, содержащая в своих зародышевых клетках нереаранжированный V-сегмент легкой цепи и нереаранжированный J-сегмент, функционально связанные с нуклеотидной последовательностью, кодирующей константную область тяжелой цепи.
2. Мышь по п.1, где нереаранжированный V-сегмент легкой цепи выбирают из κ-сегмента человека, λ-сегмента человека и их комбинации.
H
H
H
3. Мышь по п.1, где нуклеотидную последовательность, кодирующую константную область тяжелой цепи, выбирают из группы, состоящей из последовательности C1, последовательности шарнирной области, последовательности C2, последовательности C3 и их комбинации.
4. Мышь по п.1, где нереаранжированный V сегмент легкой цепи и нереаранжированный J-сегмент заменяют эндогенный мышиный V-сегмент тяжелой цепи и эндогенный мышиный J-сегмент тяжелой цепи в эндогенном мышином локусе, кодирующем тяжелые цепи.
5. Мышь по п.4, где нереаранжированный V-сегмент легкой цепи заменяет все или по существу все функциональные мышиные V-сегменты тяжелой цепи в эндогенном мышином локусе, кодирующем тяжелые цепи.
6. Мышь по п.4, где нереаранжированный J-сегмент включает J-сегмент легкой цепи, и J-сегмент легкой цепи заменяет все или по существу все функциональные мышиные J-сегменты тяжелой цепи эндогенного мышиного локуса, кодирующего тяжелые цепи.
7. Мышь по п.6, где нереаранжированный V-сегмент легкой цепи и нереаранжированный J-сегмент легкой цепи функционально связаны, и у мыши отсутствуют функциональный D-сегмент между нереаранжированным V-сегментом легкой цепи и нереаранжированным J-сегментом легкой цепи.
8. Мышь по п.7, где нереаранжированным V-сегментом легкой цепи является κ-сегмент человека, а нереаранжированным J-сегментом легкой цепи является κ-сегмент человека.
9. Мышь по п.1, содержащая В-клетку, которая содержит в своем геноме реаранжированный иммуноглобулиновый ген, который включает последовательность вариабельность области κ человека, функционально связанный с мышиным геном константной области.
10. Мышь по п.1, где реаранжированный иммуноглобулиновый ген находится в эндогенном мышином локусе, кодирующем тяжелые цепи иммуноглобулинов.
11. Мышь по п.1, дополнительно содержащая в своих зародышевых клетках V-сегмент легкой цепи человека и J-сегмент легкой цепи человека, функционально связанные с геном константной области легкой цепи.
12. Мышь по п.11, где геном константной области легкой цепи является мышиный ген константной области легкой цепи.
13. Мышь по п.12, где V-сегментом легкой человека является Vκ-сегмент человека.
14. Мышь по п.13, где мышиным геном константной области легкой цепи является мышиный ген константной области легкой цепи κ.
15. Мышь, которая экспрессирует исходя из своих зародышевых клеток иммуноглобулин, включающий первый полипептид, включающий последовательность первой вариабельной области легкой цепи человека, слитую с константной областью тяжелой цепи иммуноглобулина, и второй полипептид, включающий последовательность второй вариабельной области легкой цепи человека, слитую с константной областью легкой цепи иммуноглобулина.
16. Мышь по п.15, где последовательность первой вариабельной области легкой цепи человека включает последовательность вариабельной области легкой цепи κ человека, а вторую вариабельную область легкой цепи человека выбирают из вариабельной области легкой цепи κ человека и вариабельной области легкой цепи λ человека.
17. Мышь по п.16, где константную область тяжелой цепи иммуноглобулина выбирают из константной области тяжелой цепи человека и константной области тяжелой цепи мыши.
18. Мышь по п.16, где константную область легкой цепи иммуноглобулина выбирают из константной области легкой цепи человека и константной области легкой цепи мыши.
19. Мышь по п.16, где первый полипептид экспрессируется с модифицированного эндогенного мышиного локуса тяжелой цепи иммуноглобулина, в котором отсутствует функциональный эндогенный сегмент V гена тяжелой цепи.
20. Мышь по п.19, где второй полипептид экспрессируется с модифицированного эндогенного мышиного локуса легкой цепи иммуноглобулина, в котором отсутствует функциональный эндогенный сегмент V гена легкой цепи.
+
+
+
+
21. Мышь, содержащая замену в зародышевых клетках мыши в эндогенном мышином локусе, кодирующем тяжелую цепь иммуноглобулина, всех или по существу всех функциональных эндогенных мышиных генных сегментов вариабельной области тяжелой цепи по меньшей мере шестью или более нереаранжированными генными сегментами V легкой цепи и одним или более нереаранжированными генными сегментами J, где нереаранжированные генные сегменты V легкой цепи и нереаранжированные генные сегменты J являются функционально связанными, где мышь не способна экспрессировать тяжелую цепь иммуноглобулина, происходящую от генного сегмента V тяжелой цепи, и где мышь содержит популяцию В-клеток селезенки (B220/IgM), размер которой составляет по меньшей мере 75% от размера популяцию В-клеток селезенки (B220/IgM) у мыши дикого типа.
22. Применение мыши по любому из пп.1-21 для продуцирования связывающего белка, который содержит вариабельный домен легкой цепи человека.
23. Применение мыши по любому из пп.1-21 для продуцирования антитела.
24. Применение по п.23, где антителом является антитело человека.
25. Применение мыши по любому из пп.1-21 для продуцирования биспецифического антитела.
26. Клетка или ткань, полученная от мыши по любому из пп.1-21.
27. Клетка по п.26, которую выбирают их эмбриональной стволовой клетки, В-клетки и гибридомы.