ПРОДУКЦИЯ РНК У ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ

1. Пластида сосудистого растения, содержащая:
- конструкцию нуклеиновой кислоты, включающую:
- кодирующую область для кодирования молекулы двунитевой РНК (днРНК);
- промотор, функционирующий в пластиде для обеспечения возможности продуцирования молекулы днРНК;
- где днРНК имеет последовательность, обеспечивающую возможность получения из нее ми-РНК.
2. Пластида по п.1, дополнительно содержащая днРНК, имеющую последовательность, обеспечивающую возможность образования из нее ми-РНК, при этом указанная днРНК кодируется кодирующей областью.
3. Пластида по п.1 или 2, в которой кодирующая область имеет нуклеотидную последовательность, которая не встречается в геноме растения.
4. Пластида по п.3, в которой кодирующая область имеет нуклеотидную последовательность вредителя или патогена растения.
5. Пластида по п.1, в которой молекулы ми-РНК не образуются внутри пластиды.
6. Пластида по п.1, в которой днРНК содержит по существу всю нуклеотидную последовательность, кодируемую кодирующей областью.
7. Пластида по п.6, в которой днРНК подвергается редактированию, сплайсингу или кэпированию в пластиде.
8. Пластида по любому из предшествующих пунктов, дополнительно содержащая по меньшей мере одну дополнительную кодирующую область для кодирования по меньшей мере одного инсектицидного средства.
9. Пластида по п.8, в которой инсектицидным средством является инсектицидный полипептид.
10. Конструкция нуклеиновой кислоты для трансформации сосудистого растения, содержащая:
- кодирующую область для кодирования молекулы двунитевой РНК (днРНК);
- промотор, функционирующий в пластиде, для обеспечения возможности продуцирования молекулы днРНК;
- один или несколько сайтов интеграции, избирательных в отношении интеграции конструкции в пластидный геном сосудистого растения;
- где днРНК имеет последовательность, обеспечивающую возможность получения из нее ми-РНК.
11. Конструкция по п.10, в которой кодирующая область имеет нуклеотидную последовательность, которая не встречается в геноме растения.
12. Конструкция по п.10, в которой кодирующая область имеет нуклеотидную последовательность вредителя или патогена растения.
13. Конструкция по любому из пп.10-12, в которой конструкция включает по меньшей мере одну дополнительную кодирующую область для кодирования по меньшей мере одного инсектицидного средства.
14. Конструкция по п.13, в которой инсектицидным средством является инсектицидный полипептид.
15. Растение, содержащее пластиду или конструкцию по любому из предшествующих пунктов.
16. Растение по п.15, отличающееся тем, что растение является по существу гомоплазматическим в отношении пластиды по п.1.
17. Растение по п.15 или 16, отличающееся тем, что растение дополнительно содержит:
- по меньшей мере, одну дополнительную конструкцию нуклеиновой кислоты для кодирования инсектицидного полипептида; и/или
- по меньшей мере, одну дополнительную конструкцию нуклеиновой кислоты для кодирования инсектицидной РНК.
18. Растение по п. 17, в котором по меньшей мере одна дополнительная конструкция нуклеиновой кислоты расположена в ядре клетки растения.
19. Материал для размножения, полученный из растения по п. 18.
20. Способ накопления днРНК в клетке сосудистого растения, включающий:
- трансформацию пластиды сосудистого растения конструкцией нуклеиновой кислоты по любому из предшествующих пунктов;
- обеспечение условий для клетки для продуцирования днРНК в пластиде с конструкции нуклеиновой кислоты.
21. Способ по п. 20, в котором молекула днРНК стабильно интегрирована в геном хлоропласта растительной клетки.
22. Способ по п. 20, в котором конструкция нуклеиновой кислоты включает селектируемый маркер.
23. Способ по п. 20, дополнительно включающий применение селектируемого маркера конструкции нуклеиновой кислоты для отбора растительной клетки или растения, являющегося по существу гомоплазматическим в отношении конструкции нуклеиновой кислоты, кодирующей молекулу днРНК.
24. Способ борьбы с насекомыми-вредителями, включающий предоставление указанным вредителям или в окружающую среду указанных вредителей растения, содержащего пластиду или конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из предшествующих пунктов.
25. Способ по п. 24, в котором окружающей средой, в которой требуется борьба с насекомыми-вредителями, является культура или поле с растениями.
26. Культура или поле, содержащие:
- растения, содержащие пластиду или конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из предшествующих пунктов; или
- растения, содержащие пластиду или конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из предшествующих пунктов и растения, не несущие хлоропластных трансформантов, в форме растений, которые не содержат пластиду или конструкцию нуклеиновой кислоты по любому из предшествующих пунктов.