Полиморфизм гена жирномолочности крупного рогатого скота

4. Галиуллин А.К., Шакиров М.С., Юсупов Р.Х. К вопросу обеспечения ветеринарного благополучия регионов РФ по сибирской язве. Ученые записки КГАВМ. Казань.-2008.-Т.191.-С.53-55.

5. Бакулов И.А. Сибирская язва (Антракс); новые страницы в изучении «старой» болезни/Гаврилов В.А., Селиверстов В.В. - Владимир: «Посад». -2001.-287с.

6. Колонин Г.В. Эволюция сибирской язвы/Г.В.Колонин// ЖМЭИ. -1971.-№1. -С. 118-121.

МОНИТОРИНГ СИБИРСКОЙ Я

7. Погребняк Л.С.. Заболеваемость сибирской язвой в УССР/ Л.С.Погребняк// Ветеринарния.-1976.-.№5.-С.63.

8. Смирнов А.М. Сибирская язва животных в современных условиях/ А.М.Смирнов, М.П.Бутко// Ветеринарная газета.-М.2002.-№7.-С.2-6.

9. Вернер, О.М. К вопросу о географическом распространении очагов сибирской язвы / О.М. Вернер, В.П. Волкова, Л.В. Третьякова // Методологические основы медицинской географии.-1983.-С. 49-52.

В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ

Галиуллин А.К., Хисамиев И.М. Резюме

Своевременный контроль над сибиреязвенной инфекцией позволит своевременно отреагировать на возникновение болезни среди животных и ограничить спорадические случаи среди населения. Эти усилия должны быть скоординированы действиями административных учреждений, ветеринарных, и медицинских служб. В этой связи становится очевидной и необходимой создание всеобъемлющей системы для точной оценки масштабности заболевания и разработки общей программы эпизоотологического мониторинга.

MONITORING OF ANTHRAX IN MODERN CONDITIONS

Galiullin A.K., Khisamiev I.M.

Summary

Timely control of anthrax infection will allow time to react to the emergence of the disease among the animals and to limit sporadic cases among the population. These efforts should be coordinated by the actions of administrative agencies, veterinary and medical services. In this context, it becomes obvious and necessary to create a comprehensive system to accurately assess the extent of disease and the development of the overall programs of epizootological monitoring.

УДК 636.082.12; 577.21 ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ЖИРНОМОЛОЧНОСТИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Ганиев А.С. - аспирант; Шайдуллин Р.Р. - к.с.-х.н., доцент Казанский государственный аграрный университет e-mail: info@kazgau.ru

Ключевые слова: полиморфизм, ген, жирномолочность, аллель, генотип, DGAT.

Key words: рolymorphism, gene, fat content, allele, genotype.

Для получения высоких результатов в связи с возрастающими требованиями

молочном скотоводстве необходимо вести рынка к качеству молочной продукции, в

селекцию коров как по белковомолочности, частности, к содержанию жира, количеству

так и по жирномолочности, так как это во и составу молочного белка, а также

многом определяет пищевую ценность использования жира и белка молока при

молока и его технологические свойства. В выработке молочных продуктов,

существует необходимость в выявлении и использовании в селекции генетических маркеров, связанных с качественными признаками молочной продуктивности.

Одним из таких маркеров считается тестирование животных по локусу гена диацетил глицерин О-ацетил трансферазы (DGAT).

Ген диацетил глицерин О-ацетил трансферазы локализован на 14 хромосоме генома Bos taurus и определен как генетический маркер, влияющий на качество молока. Данный ген фермент DGAT используется в биосинтезе липидов и связан с жирномолочностью коров (10).

Известно, что неконсервативная замена К232А (лизина на аланин) в последовательности этого гена снижает содержание жира в молоке коров. При этом аллель, содержащий лизин в 232 положении является наиболее предпочтительным, поскольку коровы, имеющие этот аллель гена DGAT (генотипы КК и КА), лактируют более жирное молоко, чем гомозиготные коровы с генотипом АА, содержащим аллель, где в 232 положении располагается аланин (11).

Таким образом, целью данной работы явилось проведение исследований по изучению полиморфизма и определению частоты встречаемости аллельных вариантов по гену диацетилглицерин О-ацетил трансферазы (DGAT) у разных возрастных групп крупного рогатого скота.

Материалы и методы. Исследования проводились на стаде крупного рогатого скота черно-пестрой породы ООО «Дусым» Атнинского района Республики Татарстан и для оценки по гену диацетилглицерин О-ацетил трансферазы было отобрано 122 телок, 142 коров-первотелок, 208 высокопродуктивных коров, от которых были взяты пробы крови.

Материалом для исследования служила кровь. От каждой пробы крови животных была выделена ДНК с помощью набора для выделения ДНК. После с каждой пробой ДНК была выполнена полимеразная цепная реакция, которую осуществляли на детектирующем амплификаторе ДТ-96 (ДНК-технология,

Россия).

С полученными ампликонами (продукты ПЦР) проведен рестрикционный анализ с использованием различных эндонуклеаз рестрикции (EaeI, Hinfl, HaeIII, Tail).

Детекцию результатов осуществляли с помощью горизонтального электрофореза в 2-% агарозном геле.

Частоту встречаемости генотипов определяли по формуле:

n

р=N, где

р - частота определения генотипа, n - количество особей, имеющих определенный генотип, N - число особей.

Частоту отдельных аллелей определяли по формуле Е.К. Меркурьевой (1977):

Ра = (2nAA+nAK) : 2N qb = (2nKK+nAK) : 2N, где PA - частота аллеля А, qb - частота аллеля К, N - общее число аллелей. По закону Харди-Вайнберга (Петухов В.Л., 1985) рассчитывали ожидаемые результаты частот генотипов в исследуемой популяции.

Результаты исследований. В результате исследований проб ДНК у телок по локусу гена диацетил глицерин О-ацетил трансферазы (DGAT) выявлено, что из 122 голов молодняка 55 голов (45,1 %) имели генотип АА, 58 голов (47,5 %) - АК и 9 голов или 7,4 % генотип КК. Частота аллеля А достигла 0,69, а аллеля К - 0,31 (табл. 1, рис. 1).

Формулы Харди-Вайнберга и метода X применяются для выявления отклонений эмпирического распределения частот генотипов от теоретического. Расчет по формулам Харди-Вайнберга и метода X в стаде телок ООО «Дусым» Атнинского района показал, что нет достоверной разницы между наблюдаемой и ожидаемой величинами частот генотипов АА, АК, КК (%2= 0,85), что указывает на генное равновесие у животных.

Таблица 1 - Полиморфизм гена жирномолочности (DGAT) у телок

n Распре- Частота генотипов Частота аллелей 2 X

деление АА АК КК А К

n % n % n %

122 Н 55 45,1 58 47,5 9 7,4 0,69 0,31 0,85

О 58 47,5 52 42,7 12 9,8

Н - наблюдаемое распределение генотипов, О - ожидаемое распределение генотипов

Рис. 1 - Частота встречаемости генотипов гена жирномолочности у телок

Из 142 первотелок обнаружено коров с генотипом АА 50 голов, АК - 85 и КК - 7 голов. Частота генотипов DGAT составила

соответственно 35,2 %, 59,9 % и 4,9 %. При этом частота аллеля А была 0,65, а алелля К - 0,35 (табл. 2, рис. 2).

Таблица 2 - Полиморфизм гена жирномолочности (DGAT) у коров-первотелок

n Распре- Частота генотипов Частота аллелей 2 X

деление АА АК КК А К

n % n % n %

142 Н 50 35,2 85 59,9 7 4,9 0,65 0,35 7,82**

О 60 42,2 65 45,8 17 12,0

Н - наблюдаемое распределение генотипов, О - ожидаемое распределение генотипов ** - Р<0,01

У коров-первотелок имеется достоверная разница между наблюдаемой и ожидаемой величинами частот генотипов в сторону преобладания генотипа АК (%2 = 7,82, Р<0,01).

При исследовании

высокопродуктивных коров по локусу гена жирномолочности (DGAT) получены

следующие результаты: из 208 коров генотип АА имелся у 89 (42,8 %) животных, гетерозиготный генотип АК у 105 (50,5 %) голов, а гомозиготный генотип КК у 14 (6,7 %) голов. При этом частота аллеля А составила 0,68 и алелля К - 0,32 (табл. 3, рис. 3).

Рис 2 -. Частота встречаемости генотипов гена жирномолочности у коров-первотелок Таблица 3 - Полиморфизм гена жирномолочности (DGAT) у высокопродуктивных коров

п Распределение Частота генотипов Частота аллелей 2 X

АА АК КК А К

п % п % п %

208 Н 89 42,8 105 50,5 14 6,7 0,68 0,32 2,66

О 96 46,1 91 43,8 21 10,1

Н - наблюдаемое распределение генотипов, О - ожидаемое распределение генотипов

Рис. 3 Частота встречаемости генотипов гена жирномолочности у высокопродуктивных коров

У высокопродуктивного молочного стада не выявлено достоверной разницы между наблюдаемыми и ожидаемыми

генотипами АА, АК, КК (% = 2,66), что указывает на отсутствие сдвига генетического равновесия.

Данные анализа показывают, что частота генотипа АА и КК выше у телок, чем коров на 2,3-9,9 % и 0,7-2,5 % соответственно. Частота генотипа АК больше у первотелок на 9,4-12,4 %. Частота аллелей в стаде животных была примерно одинаковой: по аллелю А в пределах 0,650,69, алелю К - 0,31-0,35.

Наблюдаемая частота встречаемости гетерозиготных генотипов АК больше ожидаемой частоты генотипов у телок на 4,8 %, у первотелок на - 11,1%, у высокопродуктивных коров на - 6,7 %. В то время как ожидаемая частота гомозиготных генотипов АА и КК преобладает у исследуемых групп животных на 2,4 и 2,4 %, 7,0 и 7,1 %, 3,3 и 3,4 % соответственно.

В целом по стаду животных ООО «Дусым» выявлена наибольшая доля частоты встречаемости у генотипа АК (47,5-59,9 %). Аналогичные данные были получены по первотелкам холмогорской породы татарстанского типа СХПК им. Ленина Атнинского района РТ [2]. Однако имеются публикации с противоположными результатами по гену DGAT, так, в популяции крупного рогатого скота СХПК им. Вахитова Кукморского района РТ большая часть первотелок (75,4 %) и коров (85,8 %) имели гомозиготный генотип АА, остальная часть животных (24,6 и 14,2 %) относилась к генотипу АК, а желательный генотип КК в данной популяции крупного рогатого скота отсутствовал [3].

Выводы. Таким образом,

проведенные расчеты по формулам Харди-Вайнберга и метода % показали, что в стаде нет смещения генетического равновесия ни по одному из трех генотипов локуса гена DGAT, за исключением коров-первотелок, у которых идет достоверный сдвиг в сторону генотипа АК. Следовательно, в стаде ООО «Дусым» Атнинского района не проводится искусственный отбор по локусу гена диацетил глицерин О-ацетил трансферазы.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Ахметов Т.М. Использование методов маркер-вспомогательной селекции в молочном скотоводстве Республике Татарстан: Автореф. дис. ... докт. биол. наук. - Казань, 2009. - 50 с.

2. Зиннатова, Ф.Ф. Генотипирование первотёлок по локусу гена жирномолочности (DGAT) и их молочная

продуктивность / Ф.Ф. Зиннатова, Ш.К. Шакиров, А.М. Алимов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана. -2010. - Т. 200. - С. 45-50.

3. Зиннатова, Ф.Ф. Роль генов липидного обмена (DGAT1, TG5) в улучшении хозяйственно-полезных признаков крупного рогатого скота / Ф.Ф. Зиннатова, Ф.Ф. Зиннатов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана. - 2014. - Т. 219. - С. 164-168.

4. Зиновьева, Н.А. Применение ДНК-диагностики для анализа генов-кандидатов локусов количественных признаков сельскохозяйственных животных / Н.А. Зиновьева, Е.А. Гладырь [и др.] // Научные труды ВИЖ. - Дубровицы, 2001. - Вып. 61.

- С. 218-224.

5. Зиновьева, Н.А. ДНК-диагностика полиморфизма генов - белков молока крупного рогатого скота / Н.А. Зиновьева, Е.А. Гладырь, О.В. Костюнина // Методы исследований в биотехнологии сельскохозяйственных животных. - М., 2004. - С. 7-22.

6. Калашникова, Л.А. Возможности использования ДНК маркеров продуктивных качеств животных в практической селекционной работе / Л. А. Калашникова // Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных. -Дубровицы. - 2003. - С. 33-39.

7. Меркурьва, Е.К. Биометрия в животноводстве. - М.: Колос, 1977. - 311 с.

8. Петухов, В.Л. Ветеринарная генетика с основами вариационной статистики / В.Л. Петухов, А.И. Жигачев, Г.А. Назарова. - М.: Агропромиздаи, 1985.

- 368 с.

9. Фаизов, Т.Х. Методические рекомендации по типиророванию гена фермента DGAT, отвечающего за жирномолочность крупного рогатого скота / Т.Х. Фаизов, Р.Р. Шайдуллин, КВ. Усольцев [и др.] - Казань: Изд-во Казанского ГАУ, 2014. - 16 с.

10. Locarte G.A., Machado M.A., Martinez M L. et. All DGAT1 K 232A polymorphism in Brazilian cattle breeds // Genetics and Molecular Research.- 5(3)-2006.- P. 475-482.

11. Thalle, G., W. Kramer, A. Winter.

B. Kaupe, G. Erhardt, and R. Fries. 2003. traits in German cattle breeds. J. Dairy Sci

Effects of DGAT1 variants on milk production 81:1911-1918.

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ЖИРНОМОЛОЧНОСТИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Ганиев А.С., Шайдуллин Р. Р.

Резюме

Ген DGAT используется в биосинтезе липидов и связан с жирномолочностью коров.

В стаде животных выявлена наибольшая доля частоты встречаемости у генотипа АК. У телок и высокопродуктивных коров не выявлено достоверной разницы между наблюдаемыми и ожидаемыми генотипами АА, АК, КК (х2 = 0,85 и 2,66), что показывает на отсутствие сдвига генетического равновесия. В то время как у коров-первотелок идет достоверное смещение в сторону генотипа АК (х2 = 7,82, Р<0,01).

GENE POLYMORPHISM BUTTERFAT CATTLE

Ganiev A.S., Shaydullin R.R.

Summary

DGAT gene used in the biosynthesis of lipids and associated with butterfat cows.

In a herd of animals found the largest proportion in the genotype frequency of АК. Heifers and high yielding cows was no significant difference between the observed and expected genotype AA, АК, КК (х2 = 0,85 and 2,66), that indicates no shift genetic equilibrium. While in fresh cows is a significant shift towards the genotype АК (х2 = 7,82, Р<0,01).

УДК: 543. 53. 001.5: 614.3

ЭКОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ ОБЪЕКТОВ ВЕТЕРИНАРНОГО НАДЗОРА УРМАРСКОГО РАЙОНА РЕСПУБЛИКИ ЧУВАШИЯ

Гилемханов М.И. - к.б.н., доцент; Лутфуллин М.Х. - д.в.н., профессор, зав кафедрой;

*Матюшко Д.Б. - к.б.н.; Юсупова Г.Р. - д.б.н., доцент Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана

*Испытательный центр ФГБУ «Татарская межрегиональная ветеринарная лаборатория»

тел.: (843) 273-96-56

Ключевые слова: удельная радиоактивность, продукты питания, молоко, мясо, радиационный фон, кадмий, мышьяк, свинец, ртуть.

Key words: specific radioactivity, food, milk, meat, background radiation, cadmium, arsenic, lead, mercury.

В настоящее время широкое применение атомной энергетики не может исключить загрязнения радиоактивными веществами окружающей среды в результате аварий и катастроф на предприятиях ядерной промышленности и испытания ядерного оружия. Загрязнение сельскохозяйственных угодий

радионуклидами приводят к

радиоактивному загрязнению продукции животноводства и растениеводства [1,5].

Защита сельскохозяйственных

животных от вредного действия радиации является главной задачей, решение которой во многом будет зависеть от организации и проведения экологических исследований, осуществляемых специалистами разных ведомств, в том числе межрегиональными ветеринарными лабораториями и научно-исследовательскими институтами.

Экологический мониторинг в сфере сельскохозяйственного производства,

прежде всего, объектов ветеринарного надзора, необходим для планомерного