СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ КЛЕТОЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ

1. Способ получения мультипотентных, плюрипотентных, самовосстанавливающихся, дифференцирующихся или устойчивых к заболеванию клеток, включающий:
приведение содержащей ядро клетки в контакт с полипептидом или вектором, кодирующим полипептид, на первой стадии приведения в контакт, где указанная первая стадия приведения в контакт включает приведение указанной клетки в контакт с одним первым полипептидом, или с одной или более нуклеиновыми кислотами, кодирующими один первый полипептид, где указанный один первый полипептид представляет собой Oct3/4, Sox2, LIN28 или Nanog, и возможно дополнительно приведение указанной клетки в контакт с одним или более вторыми полипептидами, или с нуклеиновой кислотой, кодирующей один или более вторых полипептидов, где указанный один или более вторых полипептидов выбраны из Numb, Notch, FGF4, НОХВ4, LIF, LIFR, CNTF, кардиотрофина, OSM, OSM-R, IL6, IL6R, гипер-IL6, IL-11, gp130, stat3, c-myc и полипептида с активностью LIF; и
выращивание указанной клетки в ростовой среде, содержащей один или более цитокинов, выбранных из bFGF, steel-фактора, LIF, кардиотрофина, OSM, IL6, гипер-IL6, цитокина с активностью LIF и других усиливающих рост цитокинов, эффективных для обеспечения роста выбранных клеток с первой скоростью роста.
2. Способ п.1, дополнительно включающий генетическую модификацию указанной клетки.
3. Способ по п.1 или 2, дополнительно включающий приведение в контакт указанной клетки на второй стадии приведения в контакт, включающей приведение указанной клетки в контакт с третьим полипептидом, или с нуклеиновой кислотой, кодирующей третий полипептид, где указанный третий полипептид стимулирует желаемую дифференцировку; и
дополнительную инкубацию указанной клетки в среде для дифференцировки, содержащей по меньшей мере один агент дифференцировки, способный стимулировать дифференцировку указанной клетки в желаемую дифференцирующуюся клетку, эффективной для обеспечения роста выбранных клеток с второй скоростью роста в указанной среде для дифференцировки, где указанная вторая скорость роста представляет собой уменьшенную скорость роста по сравнению с указанной первой скоростью роста.
4. Способ по п.1, где указанная первая стадия приведения в контакт включает приведение указанной клетки в контакт с вектором, кодирующим указанный второй полипептид, где указанный вектор не интегрируется в геном указанной клетки, причем указанный вектор содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую только один второй полипептид, где указанный только один второй полипептид выбран из Numb, Notch, HoxB4, FGF4, LIN28, LIF, кардиотрофина, OSM, OSM-R, IL6, гипер-IL6, gp130 и stat3, c-myc и полипептида с активностью LIF.
5. Способ по п.2, где клетка генетически модифицирована посредством экспозиции с вектором, содержащим ложную синтетическую олигонуклеотидную последовательность и синтетические олигонуклеотиды, направленные против корецептора ВИЧ, где указанный вектор способен замедлять ВИЧ-1 и/или ВИЧ-2 инфекцию.
6. Способ по п.5, где вектор включает ложную последовательность RRE ВИЧ-2 и ложную последовательность TAR ВИЧ-2, где указанный вектор способен замедлять ВИЧ-1 и/или ВИЧ-инфекцию.
7. Способ по п.5, где указанные синтетические олигонуклеотиды выбраны из siPHK, miPHK и shPHK.
8. Способ по п.6, где указанный вектор представляет собой вирусный вектор, и где синтетические олигонуклеотиды содержат последовательности miPHK, направленные против CXCR4 и направленные против CCR5.
9. Способ по п.1, где содержащая ядро клетка выбрана из группы стволовых клеток/клеток-предшественников и типов соматических клеток, состоящих из аутологичных клеток, гистосовместимых клеток, репрограммированных клеток, клеток, происходящих из костного мозга, периферической крови, плацентарной крови, амниотической жидкости, пуповинной крови, кожи, жировой ткани и нечеловеческих эмбрионов, гемопоэтических клеток, сперматогониев, первичных половых клеток, эпителиальных клеток, клеток слизистой оболочки щеки и генетически модифицированных клеток.
10. Способ по п.1, где указанная первая стадия приведения в контакт не включает контакт со вторым полипептидом.
11. Способ по п.1, где указанная первая стадия приведения в контакт включает приведение указанной клетки в контакт только с одним вторым полипептидом, или с нуклеиновой кислотой, кодирующей только один второй полипептид, где указанный только один второй полипептид выбран из Numb, Notch, FGF4, НОХВ4, LIF, LIFR, CNTF, кардиотрофина, OSM, OSM-R, IL6, IL6R, гипер-IL6, IL-11, gp130 и stat3, c-myc и полипептида с активностью LIF.
12. Способ по п.3, дополнительно включающий третью стадию приведения в контакт, где указанная третья стадия приведения в контакт включает приведение указанной клетки в контакт с четвертым полипептидом, или приведение указанной клетки в контакт с вектором, содержащим последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую четвертый полипептид или антисмысловую РНК, где указанный четвертый полипептид стимулирует дифференцировку, и где четвертый полипептид выбран из короткой изоформы Numb, Numblike, MyoD, миогенина, миокардина, Myf 5, Myf 6, Mef2A, Gata 4, Gata 5, Gata 6, Sox9, CREB-связывающего полипептида, Runx2, HNF-1, HNF-3, HNF-4, HNF-6, Nurr1, REN, Нейрогенина 1, Нейрогенина 2, Нейрогенина 3, Mash1, Phox2a, Phox2b, dHand, Gata3, Shh, FGF8, Lmx1b, Nkx2.2, Pet1, Lbx1, Rnx, PITX2, Dlx2, Dlx5, REN, Ngn2, Ptx-3, Gata2, REST4, Foxa2, Sox17, HLXB9, Runx1/AML, Pdx1, OLIG1, OLIG2, NOV (CCN3) и Zfp488, или указанный вектор содержит антисмысловую РНК Hes1.
13. Способ по п.1, где указанная стадия приведения в контакт включает приведение указанной клетки в контакт с вектором, где указанный вектор не интегрируется в геном указанной клетки.
14. Способ по п.1, где указанная первая стадия приведения в контакт включает приведение клетки в контакт с нуклеиновой кислотой, которая не интегрируется в геном клетки и которая кодирует первый полипептид, или приведение клетки в контакт с первым полипептидом, где указанный первый полипептид выбран из НохВ4, Numb, Notch, c-myc и полипептидов с LIF активностью; и дополнительно приведение указанной клетки в контакт с Nanog, Oct3/4 или Sox2; где клетка генетически модифицирована с использованием вектора, содержащего ложную синтетическую олигонуклеотидную последовательность ВИЧ и синтетический олигонуклеотид, направленный против корецептора ВИЧ; и дополнительно приведение клетки в контакт с нуклеиновой кислотой, кодирующей NOV(CCNS) или Runx1/AML1, или с полипептидом, который представляет собой NOV(CCN3) или Runx1/AML1.
15. Способ по п.12, включающий приведение раковой или диспластической клетки в контакт с полипептидом, содержащим numblike или короткую изоформу Numb, или с вектором, содержащим последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид, где указанный полипептид представляет собой numblike.
16. Способ по п.1, где указанный первый полипептид представляет собой Oct3/4, и при котором дополнительно приводят указанную клетку в контакт с другим полипептидом, или с последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей другой полипептид, где указанный другой полипептид представляет собой Sox2.
17. Способ по п.1, дополнительно включающий выделение выбранных клеток, где выбранные клетки выделяют из ростовой среды или среды для дифференцировки после достижения желаемого количества клеток и желаемого состояния дифференцировки.
18. Клетка, обработанная способом по п.1.
19. Вектор для применения в способе по п.1, способный замедлять ВИЧ-1 и/или ВИЧ-2 инфекцию, который включает ложную(ые) синтетическую(ие) олигонуклеотидную(ые) последовательность(и) и синтетические олигонуклеотиды, направленные против корецептора(ов) ВИЧ, где синтетические олигонуклеотиды включают олигонуклеотиды, выбранные из группы siPHK, miPHK и shRNA.
20. Способ по п.3, где указанные клетки, выращенные при уменьшенной скорости роста, выращивают в окружающей среде, выбранной из децеллюляризованной трупной ткани, двухмерного каркаса, сконструированного для воспроизведения тканевой структуры или органа, и трехмерного каркаса, сконструированного для воспроизведения тканевой структуры или органа, и картриджа струйного типа для последующего размещения указанной клетки в желаемом положении с использованием технологии струйного принтера.