Состояние иммунитета и лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии при раке гортани

Медицинская Иммунология 2007, Т. 9, № 6, стр. 653-659 © 2007, СПб РО РААКИ

Краткие сообщения

СОСТОЯНИЕ ИММУНИТЕТА И ЛИМФОЦИТАРНО-ТРОМБОЦИТАРНОЙ АДГЕЗИИ ПРИ РАКЕ ГОРТАНИ

Витковский Ю.А., Ильиных Л.В., Кузник Б.И., Солпов А.В.

ГОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия», г. Чита

Резюме. Установлено, что у больных раком гортани увеличивается общее количество лейкоцитов, тогда как число лимфоцитов и их основных субпопуляций (CD4+, CD8+, CD16+, CD22), а также им-мунорегуляторный индекс значительно снижаются. Одновременно у больных отмечалось увеличение уровня IgA и падение концентрации IgM. Кроме того, при раке гортани уменьшается относительное и абсолютное количество лимфоцитов, несущих маркеры CD4+ и CD16+ и способных присоединять тромбоциты. В то же время у больных раком гортани увеличена экспрессия рецепторов к IL-2. В работе приводится детальное обсуждение полученных данных.

Ключевые слова: рак гортани, иммунитет, лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия (ЛТА).

Vitkovsky Yu.A., Il’inykh L.V., Kuznik B.I., Solpov A.V.

immune parameters and lymphocyte-platelet adherence in laryngeal carcinoma

Abstract. It was established that in patients with laryngeal carcinoma the leukocytes total count increased, but lymphocytes number and their main subpopulations

Рак гортани является одной из самых распространенных форм злокачественных новообразований верхних дыхательных путей. Не последнюю роль в патогенезе этого патологического процесса играют нарушения клеточного и гуморального иммунитета.

Известно, что важнейшими эффекторными звеньями противоопухолевого иммунитета являются натуральные киллеры, цитотоксические лимфоциты, макрофаги и цитокины [15, 16, 20,

21, 23, 24].

Адрес для переписки:

672000, Чита, Горького 39а, Медицинская академия, кафедра нормальной физиологии,

Кузнику Борису Ильичу.

Тел. : (3022) 35-31-33 (дом.),

(3022) 32-16-23 (служ.).

Факс: (3022) 32-30-58.

E-mail: bi_kuznik@mail.ru

В настоящее время досконально изучен функциональный ответ и фенотипическая характеристика периферических Т-лимфоцитов и их корреляция с клинической стадией у больных раком гортани. Установлено, что у таких больных снижается число периферических Т-лимфоцитов (СD2+, CD3+). У больных с Т4-стадией также уменьшается субпопуляция клеток с фенотипом CD4+. Подобный эффект наблюдался и со стороны бластогенной функции. Считается, что изменения в Т-популяции лимфоцитов зависят от стадии опухоли и нарушения бластогенной функции и продукции ^-2 [26].

Более того, иммунный статус больных раком гортани характеризуется угнетением функциональной активности лимфоцитов и уменьшением показателей в крови дифференцированных Ти В-клеток с увеличением числа 0-клеток и ЦИК. Эти изменения слабо выражены в начальных стадиях процесса и усиливаются с ростом опухоли.

Увеличение размеров новообразования сопровождается уменьшением в крови количества Ти В-клеток [12, 14, 24, 26].

Вместе с тем, исследованиями, проведенными Ю.А. Витковским и др. (3, 6, 38), установлено, что Т-лимфоциты, являющиеся непосредственными участниками клеточного иммунитета, способны образовывать агрегаты с кровяными пластинками. Этот тест, получивший наименование лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия (ЛТА), является объективным показателем, отражающим состояние иммунологической реактивности организма [6, 13, 19]. Однако в литературе отсутствуют сведения, как изменяется характер лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии у больных раком гортани. В то же время выяснение данного вопроса позволило бы дополнительно объективно оценить состояние иммунологической реактивности при раке гортани различной степени тяжести.

Материалы и методы

Нами обследовано 68 больных раком гортани обоего пола в возрасте от 35 до 75 лет. Исследования проводились у пациентов со стадиями опухолевого процесса Т2, Т3 и Т4, поскольку больные со стадией Т: в условиях стационара практически не встречаются. Полученные данные сравнивались с результатами исследований, проведенных на 120 здоровых донорах в возрасте от 18 до 40 лет.

В работе использовалась классификация Международного противоракового союза по системе TNM последней редакции от 1978 г., а также клиническая классификация рака гортани, утвержденная МЗ СССР в 1984 г. По этой классификации Т2 стадия рака гортани была диагностирована

у 3 больных, Т3 — у 38, Т4 — у 27 пациентов. У всех больных диагноз злокачественной опухоли был подтвержден гистологическими исследованиями биопсийного и операционного материала. Плоскоклеточный ороговевающий рак диагностирован у 45 пациентов, неороговевающий — у 23, в 3 случаях — низкодифференцированный рак.

Лимфоциты выделяли из цельной гепари-низированной крови на градиенте плотности урографин-фикол (плотность 1,077). Субпопуляции лимфоцитов определяли методом непрямой поверхностной иммунофлуоресценции. Исследование показателя лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА) проводили по методу Ю.А. Витковского и др. [3]. Исследование уровня иммуноглобулинов определяли методом иммуноферментного анализа.

Полученные данные обработаны методом вариационной статистики для связанных и не связанных между собой наблюдений, а также вычислен показатель достоверности различий (Р) при помощи электронной программы (Microsoft Office 2003 for Windows XP Professional).

Результаты и обсуждение

Установлено, что у больных раком гортани увеличивалось число лейкоцитов. Общее и относительное количество лимфоцитов снижалось в зависимости от стадии патологического процесса (табл. 1).

Одновременно у больных на фоне резкого снижения общего числа клеток уменьшалась численность основных субпопуляций лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD16+, CD22). Аналогичное снижение отмечается среди Т-хелперов, цитотоксических (киллерных) лимфоцитов

таблица 1. состав популяций лимфоцитов у здоровых людей и вольных раком гортани

Показатели Здоровые люди n = 30 Больные раком гортани

Т2 стадия n = 3 Т3 стадия n = 38 Т4 стадия n = 27

Число лейкоцитов X 109/л 5,8±0,9 11,3±1,3* 13,8±1,6* 14,2±2,3*

Число лимфоцитов, % 34,2±3,2 13,6±2,6 * 9,4±2,4* 8,4±1,5*

абс./мкл 1970±183 1540±296 1120±287 1200±214

CD3+, % 64,3±2,5 51,9±3,4 57,3±4,6 46,4±3,8*

абс./мкл 1260±42 800±52* 640±52* 660±54*

CD4+, % 37,8±3,2 39,5±4,1 28,5±3,2* 26,1±1,7

абс./мкл 744±70 610±64* 320±36* 370±24*

CD8+, % 27,9±2,5 29,8±4,1 26,7±3,7 23,9±2,1

абс./мкл 549±51 461±63* 302±42* 342±30*

CD16+, % 14,4±1,2 10,1±3,0 8,9±1,3* 8,4±1,1*

абс./мкл 284±20 161±47* 101±15* 122±16*

CD4+/CD8+ 1,45±0,1 1,31±0,1 1,12±0,1 1,14±0,1

CD22+, % 31,2±2,5 27,2±2,1 16,2±1,4 18,7±1,9

абс./мкл 614±5 420±32 230±20* 211±21*

Примечание: * - достоверность различий по сравнению со здоровыми людьми (р < 0,05).

таблица 2. содержание иммуноглобулинов в крови у вольных раком гортани

Здоровые люди Больные раком гортани

Иммуноглобулины Т2 Тз Т4

n = 20 n = 3 n = 38 n = 27

IgA, г/л 1,8±0,2 2,9±0,2 p < 0,05 3,2±0,3 p < 0,01 2,4±0,3 p > 0,05

IgG, г/л 12,4±1,1 8,2±1,3 p > 0,05 9,8±1,7 p > 0,05 11,4±1,1 p > 0,05

IgM, г/л 0,9±0,1 0,7±0,1 p > 0,05 0,5±0,1 p < 0,05 0,5±0,1 p < 0,05

Примечание: р - достоверность различий по сравнению со здоровыми людьми.

и естественных киллеров ^К-лимфоцитов) — основных эффекторов противоопухолевой защиты. Кроме того, у больных также снижался иммунорегуляторный индекс (соотношение CD4+/СD8+), что в основном связано с низким содержанием Т-хелперов и указывает на развитие клеточного иммунодефицита, степень выраженности которого пропорциональна стадии опухолевого процесса.

На фоне снижения числа клеток, составляющих Т-популяцию, уменьшается число В-лимфоцитов (CD22+). Чем тяжелее протекает заболевание, тем резче падает содержание В-клеток (табл. 1).

Резюмируя вышеизложенное, можно сделать вывод, что при раке гортани происходит угнетение Т-клеточного звена иммунитета, степень выраженности которого находится в прямой зависимости от стадии развития опухолевого процесса, а также снижается число В-лимфоцитов.

В следующей серии экспериментов нами были изучены основные показатели гуморального иммунитета (табл. 2).

Оказалось, что уровень иммуноглобулинов класса А у больных раком гортани был выше, чем у здоровых людей. Максимальный подъем концентрации IgA выявлялся при стадии опухолевого процесса Т3 (p < 0,05), а при стадии Т4 его концентрация падала. Выявленная динамика IgA, на наш взгляд, биологически целесообразна, так как направлена на защиту организма не только от опухолевых антигенов, которые могут находиться в слизистых оболочках, но и от сопутствующей инфекции. Уровень IgM проявлял тенденцию к снижению пропорционально степени тяжести заболевания, что может свидетельствовать о развитии гуморального иммунодефицита, подтверждаемого также снижением содержания В-лимфоцитов. Концентрация IgG у больных раком гортани не имела существенных отличий от здоровых людей.

В отдельной серии экспериментов нами изучена функция лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (табл. 3).

Оказалось, что у больных раком гортани резко тормозится способность лимфоцитов к взаимо-

ТАБЛИЦА 3. СОСТОЯНИЕ ЛИМФОЦИТАРНО-ТРОМБОЦИТАРНОЙ АДГЕЗИИ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ГОРТАНИ

Показатели Здоровые люди n = 30 Больные раком гортани

Т2 стадия n = 3 Тз стадия n = 38 Т4 стадия n = 27

Общий % ЛТА 14,4±1,1 7,4±0,8 3,4±0,5 3,2±0,5

P1 < 0,001 < 0,001 < 0,001

p2 < 0,001 < 0,001

Абсолютное число ЛТА/ мкл 283,7±21,6 114,0±9,2 38,1±6,8 38,4±6,4

P1 < 0,001 < 0,001 < 0,001

p2 < 0,001 < 0,001

% ЛТА по отношению к CD4+ 38,0±3,3 18,7±1,9 11,9±1,4 10,4±0,8

P1 < 0,001 < 0,001 < 0,001

p2 < 0,001 < 0,001

Абсолютное число ТЬ^М мкл 1028±93,4 771±54,3 421±24,8 442±44,7

P1 < 0,01 < 0,001 < 0,001

p2 < 0,001 < 0,001

% ЛТА по отношению к Тh+NK 27,6±2,9 14,8±1,6 9,0±1,3 8,6±0,7

P1 < 0,001 < 0,001 < 0,001

p2 < 0,001 < 0,001 < 0,001

Примечание: р1 - достоверность различий между здоровыми и больными, р2 - между больными Т2 и Т3 или Т4.

действию с тромбоцитами. Чем тяжелее протекает заболевание, тем меньшее число лимфоцитов способно присоединять к себе кровяные пластинки.

Таким образом, при раке гортани существенно снижаются адгезивные свойства лимфоцитов, что существенно затрудняет проявление механизмов противоопухолевой защиты. Этот функциональный показатель может быть результатом развития как Т-клеточного иммунодефицита, так и феномена лейкоцитарной депрессии, который часто сопровождает тяжелое течение заболевания [2, 13].

Вместе с тем, исследованиями, проведенными в нашей лаборатории, установлено, что способностью присоединять к себе тромбоциты обладают лишь клетки, несущие маркеры CD4+ (Т-хелперы — Т^), а также CD16+ ^К-лимфоциты), в случае активации их ^-2 [4, 5, 18, 32, 35, 36, 37].

Нами установлено, что у больных раком гортани значительно снижено относительное и абсолютное число Т^ а также ТЪ совместно с NK-клетками, способными присоединять к себе тромбоциты. Эти нарушения более выражены при раке гортани Т3 и Т4.

В связи с тем, что способность лимфоцитов образовывать агрегаты с кровяными пластинками возрастает под воздействием ^-2, мы решили проследить степень экспрессии рецептора данного цитокина (табл. 4).

Как следует из полученных данных, при раке гортани на лимфоцитах значительно усиливается экспрессия рецепторов к ^-2 (СD25+).

Как же могут быть расценены наши наблюдения?

Не вызывает сомнений, что тромбоциты играют чрезвычайно важную роль не только в метаста-зировании злокачественных опухолей, но и в «вы боре» места, наиболее благоприятного для жизни

таблица 4. содержание лимфоцитов, экспрессирующих рецептор к 1Ь2 ДО25+) у здоровых людей и вольных раком гортани

Наблюдаемые группы n Количество лимфоцитов с маркером CD25+, %

Здоровые люди 10 18,5±3,2

Рак гортани

Т2 3 29,6±3,4

p < 0,05

Тэ 6 38,8±4,2

p < 0,01

Т4 6 32,4±2,9

p < 0,05

Примечание: р - достоверность различий по сравнению со здоровыми людьми.

опухолевых клеток [1, 9, 11, 31]. Gasic et al. еще в 1968 году в эксперименте показали, что присутствие тромбоцитов необходимо для метастази-рования опухолевых клеток. Оказалось, что при инъекции опухолевых клеток в хвостовую вену можно обнаружить метастазы в легких. Если же у крыс предварительно вызывалась выраженная тромбоцитопения, то инъекции опухолевых клеток не приводили к появлению метастазов в легких. Введение таким животным тромбоцитов человека и последующая инъекция опухолевых клеток всегда сопровождались возникновением метастазов [27].

G. Lugassy et al. [31] указывают на следующие механизмы, приводящие к развитию данного феномена.

При опухолевом процессе активируются как тромбоциты, так и раковые клетки. Ведущим индуктором при этом выступает тромбин. Активированные кровяные пластинки генерируют тромбин на своей поверхности, что может стимулировать тромбоцитарно-опухолевую адгезию, а также адгезию тромбоцитов и опухолевых клеток к эндотелию. Все это в конечном итоге сопровождается ростом опухоли и метастазами. Опухолевые клетки сами способны вызывать генерацию тромбина, вследствие продукции опухоль-зависимого тканевого фактора (так называемого ракового прокоагулянта — РП), который в условиях нормы не экспрессируется эпителиальными клетками [1, 11, 17]. Тромбин-активированные тромбоциты повышают экспрессию GP IIb/IIIa, vWF, Р-селектина и других адгезивных молекул, таких как фибронектин. Тромбин-активированные опухолевые клетки увеличивают свою адгезию к эндотелиальным клеткам. Активация PAR-1 тромбин-PAR-1-активирующим пептидом

(TRAP) усиливает процесс метастазирования в эксперименте, независимо от способности раковых клеток прилипать к тромбоцитам. В то же время, тромбоциты, соединенные с поверхностью опухолевых клеток, способствуют их выживаемости в циркуляторном русле. При этом тромбоцитарно-опухолевые эмболы индуцируют ишемическое повреждение эндотелия, ведущее к повышению адгезивных свойств эндотелиальных клеток. Активированные тромбоциты в близком контакте с опухолевыми клетками се-кретируют соединения, способные повышать проницаемость сосудистой стенки, и тем самым облегчают опухолевую инвазию. Считают также, что кровяные пластинки могут поддерживать рост метастатических очагов, так как являются источниками ростковых факторов, в частности, усиливающих ангиогенез, ведущий к новому ме-тастазированию опухоли [29, 30].

Вместе с тем, существует и иной аспект указанной проблемы.

В настоящее время не вызывает сомнений, что злокачественные новообразования являются иммунозависимой патологией, при которой развивается целый каскад защитных клеточногуморальных реакций и в которых принимают участие кровяные пластинки. Мы считаем, что их роль в противоопухолевой защите может быть следующей. Во-первых, активированные тромбоциты принимают участие в гемостазе [1, 9, 10, 22, 34]. Гиперкоагуляция, развивающаяся при опухолевом росте, ведет к тромбированию сосудов, питающих раковые клетки. Индукторами тромбооб-разования являются активированные тромбоциты и тканевой фактор, экспрессируемый эндотелиальными клетками, моноцитами и макрофагами в ответ на действие ^-1 и TNFa [2, 28], а также РП, продуцируемый опухолевыми клетками [1, 9,

11, 17, 31]. Полагают, что последний способствует маскировке злокачественных клеток и тем самым препятствует их выживанию, поскольку усиливает адгезию к ним тромбоцитов.

Однако эти реакции могут усиливаться следующим образом. Известно, что тромбоциты, являясь вспомогательным звеном, принимают непосредственное участие в реакциях клеточного иммунитета [10]. Наряду с высокой адгезивной способностью к опухолевым клеткам, они стимулируют экспрессию HLA I класса и тем самым усиливают механизмы клеточного иммунитета, осуществляемого Т-лимфоцитами хелперами, ЦТЛ и макрофагами [22]. Амплификация клеточных реакций сопровождается высокой продукцией ^-2. Одновременно под воздействием ^-2 увеличивается лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия [4, 5,

18, 36, 37], направленная на миграцию Т-клеток в опухолевый очаг. Увеличение экспрессии рецептора ^-2 у больных раком гортани, установленное в наших исследованиях, подтверждает высказанные представления.

Известно, что одним из механизмов инвазии и метастазирования является разрушение базальной мембраны, которая окружает опухоль, и внеклеточного матрикса, ассоциированного с опухолью протеазами. Последние также способствуют неоангиогенезу, усиливая тем самым питание опухоли. Одно из центральных мест в протео-литических реакциях, протекающих в опухолевых тканях, занимают активаторы плазминогена и плазмин [7, 8]. Плазмин разрушает компоненты опухолевой стромы, а также активирует ме-таллопротеиназы, в частности, коллагеназу IV, расщепляющую коллаген и другие компоненты базальной мембраны, что и способствует мета-стазированию и инвазии опухолей.

В активации плазминогена принимают участие как урокиназный (и-РА), так и тканевой 0>РА) активаторы плазминогена. Но если и-РА, способствуя образованию плазмина, усиливает процессы метастазирования, то ^РА приводит не только к образованию плазмина, но и к разрушению опухолевых клеток, а также к защите окружающих тканей от разрастания опухоли [7, 8].

Кровяные пластинки в своем составе содержат более 700 различных белков, из которых более 400 пока еще не идентифицированы [22]. Среди этих соединений имеются и-РА, ^РА и ингибиторы активатора плазминогена 1 и 2 (РА1-1 и РА1-2) типов, а также а2-антиплазмин, а2-макроглобулин и а1-антитрипсин, препятствующие образованию плазмина. Кроме того, в тромбоцитах содержится целый отряд протеолитических ферментов, способных разрушать мембрану раковых клеток. Если в процессе высвобождения тромбоцитов будет преобладать выделение ^РА и комплекса ингибиторов, связывающих плазмин, то это может препятствовать развитию онкологического процесса.

Вместе с тем, известно, что основная роль в удалении из организма чужеродных эндогенных клеток принадлежит триаде: макрофаги — NK-клетки — антигенспецифические цитотокси-ческие Т-лимфоциты. Эти компоненты работают в теснейшей взаимосвязи между собой и выполняют функции контроля над постоянством внутренней среды организма [20, 21, 23].

Но клетки рака гортани являются иммуногенетически зависимыми опухолями, при которых опухоль-инфильтрирующие лимфоциты состоят в значительной степени из клеток с поверхностными маркерами CD4+ (среди которых ТЫ и ТЬ2), CD8+ и в меньшей степени из макрофагов, В-лимфоцитов и др. [39].

Но как же проникают иммунокомпетентные клетки в ткани, пораженные опухолевым процессом? Известно, что лимфоциты не содержат в своем составе актинмиозинового комплекса и не способны к самостоятельному передвижению в тканях.

Мы считаем, что эту функцию берут на себя тромбоциты. Доставляя лимфоциты, в том числе ТЫ и ТЪ2, а также NK-клетки (а возможно, и ЦТЛ) к месту патологического процесса, кровяные пластинки должны способствовать уничтожению опухоли.

И вместе с тем, до сих пор остается загадкой, является «бедой» или «благом» уменьшение числа ЛТА в кровотоке при злокачественном росте. Ведь основное назначение этих клеток заключается в том, чтобы на месте патологического процесса проявлять свои защитные функции. Не исключено, что уменьшение ЛТА в кровотоке

связано с тем, что большинство таких конгломератов, попадая в лимфу, переносится к опухолевой ткани и выполняет там свои специфические функции. На вопрос: «беда или благо — уменьшение числа ЛТА в циркулирующей крови при опухолевом процессе» — мы постараемся ответить в последующих наших сообщениях.

Список литературы

1. Балуда В.П., Балуда М.В., Тлепушков И.К., Цыб А.Ф. Рак и тромбоз. — Москва-Обнинск, 2001. - 154 с.

2. Витковский Ю.А. Цитокины в регуляции системы гемостаза: Автореф. дисс. ... д-ра мед. наук. — Чита, 1997. — 40 с.

3. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарного розет-кообразования // Иммунология. — 1999. — №4. — С. 35-37.

4. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Влияние цитокинов на лимфоцитарно-тромбо-цитарную адгезию // Медицинская иммунология. — 2002. — Т. 4, № 2. — С. 135-136.

5. Витковский Ю.А., Солпов А.В. Влияние интерлейкина-2 на бластную трансформацию лимфоцитов in vitro // Актуальные вопросы акушерства, гинекологии и перинатологии. Сборник научно-практических трудов. Выпуск 2. — Чита, 1998. — С. 134-135.

6. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Патогенетическое значение лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии // Мед. иммунология. — 2006. — № 5-6. — С. 745-752.

7. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Активаторы плазминогена урокиназного и тканевого типов и их ингибитор PAI-1 в опухолях человека // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. — 2001. — № 1. — С. 81-87.

8. Герштейн Е.С., Талаева Ш.Ж., Сандыбаев М.Н., Кушлинский Н.Е. Клиническая роль системы активации плазминогена в опухолях человека. // Молекуляр. медицина. — 2007. — № 1. — С. 4-8.

9. Зубаиров Д.А. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования. — Казань, 2000. — 368 с.

10. Кузник Б.И., Васильев В.Н., Цыбиков Н.Н. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма. — М.: Медицина, 1989. — 320 с.

11. Кузник Б.И., Михайлов В.Д., Альфонсов В.В. Тромбогеморрагический синдром в онкогинекологии. — Томск: Изд-во Томского университета,

1983. — 168 с.

12. Кузник Б.И., Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., Витковский Ю.А., Пинелис И.С., Абдулаев Р.А., Сулим Н.И. Пептидные биорегуляторы. Приме-

нение в хирургии, травматологии, стоматологии и онкологии. — М.: Вузовская книга, 2004. — 400 с.

13. Кузник Б.И., Цыбиков Н.Н., Витковский Ю.А. Единая клеточно-гуморальная система защиты организма // Тромбоз, гемостаз и реология. — 2005. — № 2. — С. 3-16.

14. Новиков В.И., Карандашов В.И., Сидорович И.Г. Иммунотерапия при злокачественных новообразованиях. — М.: Медицина, 1999. — 136 с.

15. Симбирцев А.С. Роль цитокинов в регуляции физиологических функций иммунной системы // Физиология и патология иммунной системы. — 2004. — № 10. — С. 3-9.

16. Симбирцев А.С. Цитокины — новая система защитных реакций организма // Цитокины и воспаление. — 2002. — № 3. — С. 9-17.

17.Скипетров В.П., Власов А.П., Голышен-ков С.П. Коагуляционно-литическая система тканей и тромбогеморрагический синдром в хирургии. — Саранск, 1999. — 230 с.

18. Солпов А.В. Влияние цитокинов на лимфо-цитарно-тромбоцитарную адгезию // Тромбоз, гемостаз, реология. — 2002. — № 1. — С. 34-36.

19. Солпов А.В. Механизмы лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. — Чита, 2005. — 24 с.

20.Хаитов Р.М. Физиология иммунной системы. — М.: ВИНИТИ РАН, 2001. — 223 с.

21.Хаитов Р.М., Минько В.М., Ярилин А.А. Внутриклеточные сигнальные пути, активирующие или ингибирующие клетки иммунной системы // Успехи соврем. биол. — 2005. — № 4. — С. 348-359.

22. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. —

С.-Петербург, 2000. — 224 с.

23.Ярилин А.А. Основы иммунологии. — М.: Медицина, 1999. — 720 с.

24. An W. Comparative study on cytotoxicity of lymphocytes from different tissues in laryngeal cancer // Zhonghua Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi (China). — 1993. — Vol. 28(5). — P. 292-294, 314-315.

25. Gasic G.J., Gasic TB., Galanti N., Tweardy D.J. Platelet tumor cell interaction in mice // Int. J. Cancer. — 2003. — Vol. 11. — P. 704-718.

26. Gonzalez F.M., Vargas J.A., Gea-Banacloche J.C. Functional and phenotypic analysis of T-lymphocytes in laryngeal carcinoma // Acta Otolaryngol. — 1994. — Vol. 114, N 6. — P. 663-668.

27. Karpatkin S., Ambrogo C., Pearlstein E. Lack of effect of prostaglandin I2 on the development of pulmonary metastases in mice folloving intravenous injection of CT26 colon carcinoma // Cancer Res. —

1984. — Vol. 84. — P. 3880-3083.

28. Kuznik B.I., Tsibikov N.N. Cytokines, immunoglobulins and hemostasis // Hematol. Rev. — 1996. — Vol. 7, Part 2. — P. 43-70.

29. Li J.J., Huang Y.Q., Basch R., Karpatkin S. Thrombin induces the release of angiopoetin-1 from platelets // J. Thromb. Haemost. — 2001. — Vol. 85. — P. 204-206.

30. Liekens S., De Clerco E., Neyts E. Angiogenesis: regulators and clinical applications // Biochem. Pharmacol. - 2001. - Vol. 61. - P. 253-270.

31. Lugassy G., Falanga A., Kakkar A.K., Rickles F.A. Thrombosis and cancer. — London and New-York.: MD Martin Dunitz, 2004. — 230 p.

32. Solpov A., Kuznik B., Vitkovsky Yu., Yedelev

D. Influence of interleukin 4 and 10 on haemostasis // J. Thromb. Haemost. (Suppl.), Abstr. XVII Congress of the ISTH. Washington D.C. — August 14-21, 1999. — P. 110.

33. Solpov A., Shenkman B., Vitkovsky Yu., Kuznik B. Platelets enhance CD4+ lymphocyte adhesion to extracellular matrix: role of CD40 ligand and P-selectin glycoprotein ligand // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2004. - № 4. - С. 25-27.

34.Weyrich A.S., Zimmerman G.A. Platelets: signaling cells in the immune continuum // Trends Immunol. - 2004. - Vol. 25, N 9. - P. 489-495.

35. Vitkovsky Yu., Ilynykh L., Solpov A., Kuznik B. Lymphocyte-platelet adhesion in IL-2 therapy of

patient with laryngeal carcinoma // J. Leukoc. Biol. (Suppl.) - 2001. - P. 66.

36.Vitkovsky Yu., Kuznik B., Solpov A. Role of interleukin-2 in lymphocytes rosette formation with platelet // Platelets 2000 Symposium. — 18-22 May 2000, Ma’ale Hachamisha, Israel. — P. 32.

37.Vitkovsky Yu., Solpov A., Kuznik B. Interleukin 2 influence on platelet-lymphocyte adhesion // J. Thromb. Haemost. (Suppl.), Abstr. XVII Congress of the ISTH. Washington D.C. — August 14-21, 1999. — P. 141-142.

38. Vitkovsky Yu., Ilyinykh L. Lymphocyte-platelet adhesion in patients with laryngeal carcinoma // J. Thromb. Haemost. (Suppl.) — 2001. — P. 3460.

39.Vitolo D., Gallo A., Ciocci L., Cicerone E., Baroni C.D. Interleukin-12 related cytokine gene expression at a tissue level in carcinomas of the larynx // Eur. Arch. Otorhinolaryngol. — 2000. — Vol. 257, N 5. — P. 290-294.

поступила в редакцию 04.05.2007 отправлена на доработку 20.08.2007 принята к печати 22.08.2007