Особенности цитокинового статуса у недоношенных новорожденных с заболеваниями легких инфекционного и неинфекционного генеза

ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Особенности цитокинового статуса у недоношенных новорожденных с заболеваниями легких инфекционного и неинфекционного генеза

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России

ФГБУ «Центр стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровью» Минздрава России, Москва

Никитина И.В.1, Жукова А.С.1, Ванько Л.В.1, Вторушина В.В.1, Матвеева Н.К.1, Кречетова Л.В.1, Крючко Д.С.1, 3, Ионов О.В.1, 2, Зубков В.В.1, 2, Дегтярев Д.НЛ 2

i

2

3

Цель исследования - сравнение уровня ростовых факторов, хемокинов, провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в первые сутки после рождения в крови недоношенных новорожденных с дыхательными нарушениями инфекционного и неинфекционного генеза.

Материал и методы. Мультиплексным методом исследовали концентрацию 17 цитокинов в плазме периферической крови 63 недоношенных новорожденных первых суток жизни с дыхательными нарушениями инфекционного и неинфекционного генеза.

Результаты. У детей гестационного возраста менее 32 нед с врожденной пневмонией концентрация хемокинов К-8 и МСР-1 выше по сравнению с детьми с респираторным дистресс-синдромом; у детей с ранним неонатальным сепсисом по сравнению с новорожденными с респираторным дистресс-синдромом значимо выше концентрация К-13, ^N7, К-12, К-17, К-1р, Т^-а, К-8, МСР-1. Концентрация Т^-а достоверно выше в плазме крови глубоконедоношенных новорожденных с ранним неонатальным сепсисом по сравнению с детьми с течением врожденной пневмонии. У новорожденных гестационного возраста 32-36 нед с респираторным дистресс-синдромом концентрация К-13 повышена по сравнению с детьми с транзиторным тахипноэ; у новорожденных с врожденной пневмонией по сравнению с новорожденными, имеющими дыхательные нарушения неинфекционного генеза, статистически значимо повышены уровни К-6 и G-CSF.

Ключевые слова:

цитокины, недоношенный новорожденный, врожденная пневмония, ранний неонатальный сепсис

Неонатология: новости, мнения, обучение. 2018. Т. 6. № 4. С. 16-23.

сЫ: 10.24411/2308-2402-2018-14002. Статья поступила в редакцию: 03.10.2018. Принята в печать: 15.10.2018.

Cytokine status of preterm newborns with infectious and noninfectious diseases

Nikitina I.V.1, Zhukova A.S.1, 1 V.I. KuLakov Obstetrics, Gynecology and Perinatology National Van'ko L.V.1, Vtorushina V.V.1, Medical Research Center of Ministry of Healthcare of the Russian Matveeva N.K.1, Krechetova L.V.1, Federation, Moscow

Kryuchko D.S.1,3,IonovO.V.1,2, 2 I.M. Sechenov First Moscow State Medical University Zubkov V. V.12, Degtyarev D.N.1 2

Aim. To compare levels of growth factors, chemokines, proinflammatory and anti-inflammatory cytokines in blood in the first day of life of premature newborns with infectious and non-infectious respiratory diseases.

Material and methods. Concentrations of 17 cytokines were examined by multiplex assay in the plasma of peripheral blood of 63 premature newborns in the first day of life.

Results. In the group of newborns with the gestational age (GA) of 32 weeks the concentration of chemokines IL-8 and MSR-1 were higher in subgroup of congenital pneumonia vs. respiratory distress syndrome (RDS). The level of IL-13, IFNy, IL-12, IL-17, IL-ip, TNF-a, IL-8 and MSR-1 were statistically significant in newborns with early onset sepsis (EOS) versus in subgroup with RDS. Concentration of TNF-a was higher in plasma of infants with EOS in comparison with the newborns in with congenital pneumonia. The level of IL-13 for newborns with GA 32-36 weeks with RDS was higher than in transient tachypnea subgroup. IL-6 and G-CSF's levels were statistically significantly higher in newborns with congenital pneumonia in comparison with the newborns with noninfectious respiratory diseases.

Conclusions. The laboratorial evaluation of blood cytokines can be useful tool for the differential diagnostics of infectious and non-infectious diseases in the early neonatal period

Keywords:

cytokines, premature newborn, congenital pneumonia, early onset sepsis

Neonatology: News, Opinions, Training. 2018; 7 (4): 16-23.

doi: 10.24411/2308-2402-2018-14002. Received: 03.10.2018. Accepted: 15.10.2018.

Список сокращений

ВЖК - внутрижелудочковое кровоизлияние ВПК - высокопоточные канюли

ВЧОВЛ - высокочастотная осцилляторная вентиляция легких

ГВ - гестационный возраст

ДВС-синдром - синдром диссеминированного

внутрисосудистого свертывания

ИВЛ - искусственная вентиляция легких

ОРИТН - отделение реанимации и интенсивной терапии

новорожденных

РДС - респираторный дистресс-синдром

РНС - ранний неонатальный сепсис

СРБ - С-реактивный белок

ТТН - транзиторное тахипноэ новорожденных

Biphasic - неинвазивная искусственная вентиляция

легких

СРАР - спонтанное дыхание с постоянным положительным давлением в конце выдоха IL - интерлейкин

Проблема преждевременных родов по-прежнему является актуальной как для акушерства, так и для неона-тологии. В настоящее время частота рождения недоношенных детей варьирует в широких пределах и составляет около 5% в развитых странах Европы, 9,62% в США и достигает 18% в некоторых странах Африки [1, 2]. Морфофунк-циональная незрелость органов и систем у данной группы новорожденных обусловливает развитие у них заболеваний, зачастую несовместимых с жизнью. Инфекционные заболевания, в том числе врожденная пневмония и сепсис, являются основными причинами детской смертности [3, 4]. Наибо-

лее частыми проявлениями различного рода патологических процессов в раннем неонатальном периоде у недоношенных детей являются дыхательные нарушения, наличие которых может свидетельствовать как о манифестации раннего не-онатального сепсиса (РНС), так и о развитии врожденной пневмонии или тяжелого респираторного дистресс-синдрома (РДС). Неспецифический характер клинических симптомов, характерных для данных патологических состояний, создает значительные трудности в их дифференциальной диагностике, в особенности у глубоконедоношенных детей. Оперативное взаимодействие иммунной, нервной, эндо-

кринной, кроветворной систем на уровне организма осуществляют цитокины - группа регуляторных пептидов, для которых характерны плейотропизм и взаимозаменяемость биологического действия, индуцибельный характер синтеза, отсутствие антигенной специфичности, саморегуляция продукции, формирование сети. В процессе родов и сразу после рождения ребенка происходит тесный контакт стерильного организма новорожденного с антигенами микроорганизмов родовых путей и окружающей среды. Взаимодействие микроорганизмов со слизистыми оболочками приводит к активации эпителиальных, иммунных и других клеток, повышению миграционной активности лейкоцитов, что связано с заселением ими барьерных тканей. Данные процессы сопровождаются усилением синтеза и секреции цитокинов и хемокинов [5]. Баланс провоспалительных и противовоспалительных цитокинов играет важную роль для поддержания гомеостаза в организме новорожденного. Кроме того, концентрация и баланс цитокинов в плазме крови во многом определяют направление, тяжесть и исход патологического процесса у новорожденных, в том числе у недоношенных детей [6].

Цель исследования - сравнение уровня ростовых факторов, хемокинов, провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в первые сутки после рождения в плазме периферической крови недоношенных новорожденных с дыхательными нарушениями различного генеза.

Материал и методы

В исследование были включены 63 недоношенных новорожденных, проходивших лечение в ОРИТН с ноября 2014 г. по апрель 2017 г. Исходя из гестационного возраста (ГВ), дети были разделены на 2 группы, в каждой из которых на основании клинического диагноза были выделены по 3 подгруппы (см. рисунок). В качестве групп сравнения использовали: для новорожденных ГВ 32-36 нед - группу детей с ТТН, для новорожденных, чей ГВ составил 25-31 нед, -группу детей с РДС.

Для исследования уровня цитокинов в плазме крови использовали периферическую венозную кровь недоношенных новорожденных, полученную в течение первых суток после рождения. Сбор крови осуществлялся в пробирки

с антикоагулянтом (ЭДТА) одновременно с проведением обязательного клинико-лабораторного обследования при поступлении новорожденных в ОРИТН до начала специфической терапии. Родителями новорожденных было подписано добровольное информированное согласие на участие детей в исследовании. Данное исследование было одобрено этическим комитетом ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и пери-натологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России. Содержание цитокинов определяли мультиплексным методом на анализаторе BiopLex 200 (Bio-Rad, США) с использованием коммерческого набора Bio-PLex Pro Human Cytokine 17-pLex Assay (Bio-Rad, США). Оценивали содержание провоспалительных (IFNy, TNF-a, IL-1ß, IL-2, IL-6, IL-12, IL-17) и противовоспалительных (IL-4, IL-5, IL-10, IL-13) цитокинов, хемокинов (IL-8, MCP-1, MIP-1ß) и ростовых факторов (IL-7, G-CSF, GM-CSF).

Статистическую обработку проводили методами вариационной статистики с использованием пакета программ MedCaLc 2018 (Бельгия). Проверку нормальности распределения оценивали с помощью критерия Шапиро-Уилка. Для выявления статистической значимости различий использовали непараметрический ü-критерий Манна-Уитни. Результаты представлены как медиана (25-75-й процентиль). Различия считали достоверными при уровне значимости p<0,05. Для оценки корреляционных взаимосвязей принимали во внимание коэффициент корреляции Спирмана.

Результаты и обсуждение

При изучении анамнеза матерей включенных в исследование новорожденных не было обнаружено статистически значимых различий в особенностях течения настоящей беременности. Мы отдельно проанализировали клинико-лабораторные характеристики новорожденных, чей гестаци-онный возраст составил 32-36 и 25-31 нед.

Гестационный возраст новорожденных с ТТН находился в интервале 33-36 нед, в группе детей с РДС - 32-35 нед, новорожденных с пневмонией - 32-36 нед. Масса и длина тела при рождении детей с ТТН: 2006-2615 г и 42-48 см, 1208-2410 г и 38-46 см у новорожденных с РДС, 1175-2650 г и 38-46 см в группе детей с пневмонией. Оценка по шкале

Схема деления новорожденных на группы

Апгар на 1-й минуте составила 7-8 баллов в группе детей с ТТН и 6-8 баллов у новорожденных с РДС и пневмонией. Один ребенок с врожденной пневмонией родился в тяжелой асфиксии (оценка по шкале Апгар на 1-й минуте составила 1 балл).

По результатам клинико-лабораторного обследования в первые сутки жизни нейтропения была отмечена у половины детей с врожденной пневмонией (5 пациентов) и у 3 пациентов с РДС. Тромбоцитопения была выявлена у 1 недоношенного ребенка с врожденной пневмонией и у 1 ребенка с течением РДС. Повышение показателей СРБ и нейтрофильного индекса >0,2 было отмечено у 1 новорожденного с врожденной пневмонией. Показатели гемограммы у новорожденных с ТТН оставались в пределах нормативных значений.

Проявления ДВС-синдрома не регистрировались у новорожденных с РДС и ТТН, в то время как у 1 пациента в группе детей с врожденной пневмонией было отмечено желудочное кровотечение, у 1 пациента - ВЖК I степени, ВЖК II степени также у 1 ребенка. Трансфузия крови и ее компонентов проводилась 2 детям с врожденной пневмонией для коррекции факторов свертывания крови и с целью купирования геморрагического синдрома. Антибактериальную терапию двумя препаратами (пенициллин + аминоглико-зид) с первых суток жизни получали все дети с врожденной пневмонией, а также 6 детей из группы РДС и 2 ребенка из группы ТТН по подозрению на течение врожденной пневмонии. При повторном клинико-лабораторном обследовании на 3-и сутки жизни данных за течение инфекционного процесса у этих пациентов не получено. Антибактериальная терапия была завершена.

Проведение респираторной терапии было необходимо всем пациентам с течением РДС и врожденной пневмонии и 7 пациентам с ТТН. Всем детям с ТТН проводилась дыхательная терапия неинвазивными методами: через ВПК 1 пациенту, СРАР и В1рИаз1с - по 3 пациента соответственно. Интубация трахеи и проведение традиционной ИВЛ были необходимы 1 пациенту среди детей с РДС. 3 пациентам с врожденной пневмонией проводилась традиционная ИВЛ и 2 пациентам - ВЧОВЛ.

Все 35 детей ГВ 25-31 нед родились путем операции кесарева сечения. Гестационный возраст новорожденных с РДС находился в интервале 27-31 нед, детей с пневмонией - 26-31 нед, новорожденных с РНС - 25-31 нед. Масса и длина тела при рождении составили 900-1973 г и 34-45 см в группе детей с РДС, 740-1444 г и 27-40 см у новорожденных с пневмонией, 490-1380 г и 26-38 см - у детей с РНС. Оценка по Апгар на 1-й минуте у детей из исследуемых групп составила соответственно 5-7, 1-7, 3-6 баллов. 1 ребенок с врожденной пневмонией и 2 ребенка с РНС родились в тяжелой асфиксии.

По результатам клинико-лабораторного обследования в первые сутки жизни нейтропения в клиническом анализе крови была отмечена у 1 новорожденного с РДС, у 3 детей с врожденной пневмонией и у половины детей (6 пациентов) с РНС. Лейкопения была выявлена у 3 пациентов с РНС и у 1 пациента с врожденной пневмонией. Тромбоцитопения определялась у 3 пациентов с РНС и у 5 пациентов с врож-

денной пневмонией. Повышение значения прокальцитонина и нейтрофильный индекс >0,2 были отмечены у 1 пациента с течением РНС. Повышения уровня С-реактивного белка (СРБ) в группе новорожденных с РДС не отмечалось, в группах детей с врожденной пневмонией и РНС - регистрировалось у 2 и 3 пациентов соответственно. Положительная гемо-культура (E. coli) была выявлена у 2 пациентов с РНС.

В группе детей с РДС лишь у 1 пациента по результатам ультразвукового обследования было выявлено ВЖК I степени, ВЖК более тяжелой степени не отмечалось. У 9 из 12 новорожденных с течением врожденной пневмонии и РНС развились ВЖК II и III степени соответственно. Проявления ДВС-синдрома в виде желудочного кровотечения были отмечены у 3 детей с врожденной пневмонией, у половины детей с РНС (6 пациентов) и не отмечались у новорожденных с РДС. Трансфузия крови и ее компонентов проводилась 1 пациенту с РДС, 11 детям с врожденной пневмонией и всем детям с РНС для коррекции факторов свертывания крови и геморрагического синдрома. Антибактериальная терапия двумя препаратами (пенициллин + аминогликозид) с первых суток жизни проводилась всем недоношенным с врожденной пневмонией и РНС, а также 8 детям с РДС до момента уточнения окончательного диагноза по результатам расширенного клинико-лабораторного обследования на 3-и сутки жизни.

Проведение респираторной терапии в первые сутки жизни было необходимо всем пациентам исследуемых групп. При этом проведение ВЧОВЛ потребовалось 2 детям с врожденной пневмонией и 7 новорожденным с РНС. Среди детей с РДС на СРАР в первые сутки жизни находились 3 пациента, на неинвазивной ИВЛ методом Biphasic - 6 пациентов и 2 пациента - на традиционной ИВЛ.

При анализе результатов исследования содержания цитокинов в крови обследованных новорожденных мы принимали во внимание ранее полученные нами данные о том, что у недоношенных детей (ГВ 27-36 нед) с врожденной пневмонией уровень цитокинов (IFNy, IL-1b, IL-6, TNF-a, IL-12, IL-8, МСР, IL-4, IL-10, IL-13) в плазме пуповинной крови значимо выше, чем у детей сходного гестационного возраста, имеющих дыхательные нарушения неинфекционного генеза [7]. Согласно другой нашей работе [8], уровень цитокинов TNF-a, IL-1b, IL-7, IL-8, IL-10, IL-4, GM-CSF в периферической крови здоровых доношенных новорожденных первых суток жизни значимо выше по сравнению с соответствующими показателями в их пуповинной крови. В табл. 1 приведено содержание цитокинов в периферической крови недоношенных детей, включенных в настоящее исследование.

Отмечено, что у детей с РДС по сравнению с новорожденными с ТТН повышена концентрация IL-13 (р=0,004). Данный цитокин является противовоспалительным, подавляет дифференцировку ThO-клеток в Т1п1-лимфоциты, высокое содержание данного цитокина подавляет продукцию сур-фактанта альвеолярными клетками [9]. Следует отметить, что соотношение TNF-a/IL-4 значимо ниже в группе детей с РДС по сравнению с ТТН: 9,2 (6,86-13,57) против 17,5 (11,95-25,95), р=0,026, что также свидетельствует о противовоспалительной направленности иммунного ответа в группе детей с РДС.

У детей с врожденной пневмонией по сравнению с детьми с РДС статистически значимо повышен уровень IL-6, являющегося важным провоспалительным цитокином, и G-CSF, необходимого для созревания нейтрофильных гра-нулоцитов, что согласуется с имеющимися данными [10]. Как известно, именно IL-6 является цитокином, запускающим продукцию клетками печени С-реактивного белка, -одного из главных маркеров системного воспалительного ответа. Отношение TNF-a к IL-4 в данной группе составило 15,2 (13,57-21,76), что статистически значимо выше, чем у новорожденных с РДС (р=0,014). По сравнению с новорожденными с ТТН у детей с врожденной пневмонией выше содержание IL-6 и МСР-1. Белок, усиливающий миграцию моноцитов (МСР-1, monocyte chemoattractant protein), относится к СС-классу хемокинов и определяет направление и интенсивность движения мононуклеарных клеток, преимущественно моноцитов и макрофагов, а также способствует формированию провоспалительного микроокружения в очаге инфекции. Согласно результатам, полученным Y. Osaki и соавт., уровень G-CSF и МСР-1 в сыворотке у пациентов с РДС значимо выше, чем у пациентов из группы сравнения, в то время как содержание IL-6 - достоверно ниже [11]. В работе N. AmbaLavanan и соавт. [12] показано, что концентрация IL-6 и МСР-1 в плазме крови повышена у детей с бронхолегочной дисплазией, что напрямую связано с тяжестью течения заболевания.

Поскольку онтогенез иммунной системы коррелирует с гестационным возрастом плода, иммунная система глубоконедоношенных детей характеризуется количественным и качественным дефицитом факторов врожденного и адаптивного иммунитета по сравнению с детьми, родившимися в срок. Следствием этого является более частая генерализация инфекционного процесса у недоношенных новорожденных по сравнению с детьми более старшего ГВ [13]. Мы сравнили концентрацию цитокинов в плазме крови детей с учетом их клинического диагноза. Результаты представлены в табл. 2.

По сравнению с новорожденными с РДС у детей с пневмонией выше концентрация хемокинов: К-8 и МСР-1; у детей с сепсисом по сравнению с детьми с РДС отмечаются выраженные различия в уровне многих цитокинов: противовоспалительного К-13 и провоспалительных ^N7, К-12, К-17, К-1р, TNF-a, а также хемокинов (К-8, МСР-1), что свидетельствует об активации иммунных клеток. При первичном контакте организма с инфекционным агентом в ответ на его токсины и продукты жизнедеятельности в крови начинают одновременно продуцироваться как провоспалительные, так и противовоспалительные цитокины. Если в организме этот контакт прекращается, провоспалительные и противовоспалительные цитокины начинают подавлять активность друг друга, в результате чего отмечается более благоприятное течение воспалительного процесса, и очаг воспаления ограничивается [14]. По мнению многих авторов [15-17], высокой диагностической значимостью для выявления раннего неонатального сепсиса обладает К-6. Согласно результатам нашего исследования, уровень К-6 в плазме крови детей с РНС превышает соответствующий показатель в группе недоношенных с пневмонией более чем в 4 раза, но полученные различия недостоверны (р=0,21). Вероятно, это связано с неоднородностью показателей в исследуемых группах и большим разбросом в группах детей с инфекционной патологией. В группе детей с РНС содержание TNF-a достоверно выше, чем у новорожденных с врожденной пневмонией. Данный цитокин наряду с К-1р, К-6, К-8 синтезируется в первую фазу иммунного ответа при сепсисе, распространяется далеко за пределы первичного очага воспаления и обусловливает развитие системной воспалительной реакции. Наиболее выраженное повышение уровня медиаторов воспаления наблюдается при септическом шоке [18]. В работе Е. Segurа-Cervаntes [19] показано, что значимое повышение содержания провоспалительных цитокинов ^N7, TNF-a, К-6 в сыворотке крови при выраженных клинических проявлениях сепсиса отмечается только у недоношенных

Таблица 1. Концентрация

Группа Дети сТТН, Дети с РДС, Детисврож [денной Р1-2 Р1-3 Р2-3

Показатель .................................. n=8 n=10 пневмоние й, n=10 НИ И ШИЛ

Провоспали- F V 4,5 (3,82-13,90) 24,8 (4,04-30,98) 15,1 (4,04- 26,87) 0,15 0,23 0,47

тельные цито- TNF-a 6,3 (4,22-8,39) 13,1 (6,31-16,66) 13,1 (8,39- -18,73) 0,16 0,06 0,45

кины IL-1P 0,5 (0,31-0,62) 0,9 (0,31-1,45) 0,7 (0,48- -0,88) 0,28 0,17 0,94

IL-2 0,5 (0,44-0,52) 0,5 (0,44-0,55) 0,5 (0,44- 0,55) 0,48 0,89 0,68

IL-6 5,7 (2,78-13,76) 9,6 (1,25-22,30) 35,2 (9,37- -39,74) 0,86 0,03 0,02

IL-12 0,9 (0,87-1,02) 1,0 (0,90-2,15) 0,9 (0,90- -0,98) 0,42 0,75 0,45

IL-17 5,2 (0,74-22,4) 18,7 (13,68-21,72) 26,3 (9,55- 32,15) 0,14 0,09 0,29

Противовос- IL-4 0,3 (0,22-1,06) 1,2 (0,92-1,51) 0,6 (0,58- -1,38) 0,06 0,14 0,15

палительные IL-5 0,3 (0,31-2,02) 4,3 (0,31-6,71) 1,3 (0,31- 3,70) 0,25 0,86 0,15

цитокины IL-10 0,9 (0,82-0,91) 1,0 (0,91-6,24) 1,1 (0,98- 4,12) 0,05 0,05 0,55

IL-13 0,6 (0,24-0,82) 1,5 (1,09-2,54) 1,1 (0,55- 1,09) 0,004 0,07 0,10

Хемокины IL-8 10,3 (7,69-13,30) 9,8 (8,94-13,91) 17,8 (9,94- -47,61) 0,86 0,21 0,23

МСР-1 49,6 (19,35-87,34) 71,2 (49,85-196,58) 163,5 (62,93 -489,40) 0,06 0,01 0,27

MIP-1P 10,5 (8,45-16,34) 16,0 (12,37-19,49) 15,3 (11,51 -20,65) 0,11 0,21 1,0

Ростовые IL-7 1,6 (0,91-3,14) 4,4 (1,25-4,97) 1,6 (0,57- -4,37) 0,27 0,93 0,32

факторы Г-КСФ 2,7 (2,40-24,43) 2,5 (1,66-22,14) 16,6 (4,44- 107,00) 0,33 0,08 0,04

ГМ-КСФ 1,5 (0,20-7,45) 2,7 (0,23-14,14) 5,5 (0,20- 18,1) 0,45 0,69 0,91

Здесь и в табл. 2: расшифровка аббревиатур дана в тексте.

Таблица 2. Концентрация

Группа Дети с РДС, Дети с врожденной Дети с РНС, Р1-2 Р1-3 Р2-3

Показатель ................................... п=11 пневмонией, п=12 п=10 НИ

Провоспали- : V 14,0 (5,72-25,82) 20,5 (13,99-37,02) 39,0 (18,40-54,51) 0,31 0,032 0,21

тельные цито- ТИР-а 12,5 (6,31-19,76) 16,7 (11,50-23,87) 27,5 (20,79-35,15) 0,28 0,01 0,044

кины !ЫР 0,7 (0,50-1,23) 1,0 (0,51-1,57) 1,3 (0,99-2,15) 0,32 0,011 0,10

11_-2 0,5 (0,51-0,55) 0,6 (0,52-0,65) 0,6 (0,53-0,64) 0,16 0,061 0,77

!1_-6 27,6 (13,34-55,24) 23,6 (10,50-71,41) 101,6 (12,76-187,86) 0,98 0,26 0,21

!_-12 1,0 (0,90-1,05) 1,6 (0,98-2,15) 2,2 (1,05-5,35) 0,18 0,018 0,29

!_-17 16,4 (5,61-21,06) 21,1 (6,69-30,50) 37,6 (17,73-46,80) 0,41 0,029 0,12

Противовос- !_-4 1,2 (0,72-1,81) 1,3 (0,83-1,64) 1,7 (0,99-2,07) 0,98 0,27 0,15

палительные !_-5 2,3 (0,30-6,01) 2,6 (0,33-6,12) 5,6 (0,31-10,32) 0,46 0,36 0,51

цитокины !_-10 1,1 (0,97-8,49) 8,8 (1,40-14,66) 5,3 (1,40-10,53) 0,20 0,085 0,95

!_-13 0,6 (0,33-1,65) 2,1 (0,55-3,67) 1,8 (1,59-3,00) Ц 0,063 0,037 0,84

Хемокины !_-8 13,4 (9,13-23,24) 42,3 (24,15-63,26) 57,6 (35,21-258,24) 0,0009 0,0009 0,43

МСР-1 211,2 (116,31-290,28) 382,2 (262,69-851,47) 624,0 (330,56-1933,04) 0,031 0,02 0,36

М!Р-1в 13,7 (10,62-15,31) 16,3 (11,67-22,79) 20,7 (11,52-31,26) 0,58 0,18 0,43

Ростовые !_-7 2,5 (1,25-3,91) 4,1 (0,75-5,86) 5,0 (3,15-7,32) 0,64 0,09 0,34

факторы Г-КСФ 19,2 (2,01-32,14) 6,7 (2,57-39,93) 33,6 (2,15-242,10) 0,93 0,25 0,55

ГМ-КСФ 8,8 (7,45-15,47) 26,2 (9,96-33,88) 10,8 (2,69-29,96) 0,05 0,70 0,25

новорожденных более старшего гестационного возраста (32-36 нед гестации). Напротив, при сепсисе у глубоконедоношенных детей (25-31-я неделя гестации) изменение продукции ^N7, Т^-а и К-6 незначительно.

Ранее нами было показано, что функциональная активность клеток врожденного иммунитета у детей с пневмонией существенно зависит от их ГВ [20]. В связи с этим мы сравнили содержание исследуемых факторов в плазме крови новорожденных с РДС и пневмонией с учетом их гестационного возраста. Установлено, что содержание К-13 в крови у детей с РДС выше в группе новорожденных более старшего ГВ, чем у глубоконедоношенных детей: 1,5 (1,09-2,54) и 0,6 (0,33-1,65) пг/мл соответственно (р=0,04). Напротив, концентрация К-6 существенно выше в плазме крови детей гестационного возраста (25-31-я неделя): 27,6 (13,34-55,24) против 9,6 (1,25-22,30) пг/мл в группе детей более старшего ГВ (р=0,021). Статистически значимых различий в группах детей с пневмонией не выявлено (р>0,05). Корреляционные зависимости между концентрацией исследуемых цитокинов в плазме крови у детей с инфекционной патологией (врожденная пневмония и РНС) и их ГВ, массой и длиной тела при рождении также отсутствовали (р>0,05).

Заключение

В ходе проведенного исследования нами было отмечено, что у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом по сравнению с недоношенными детьми с врожденной пневмонией наблюдается преимущественная противовоспалительная направленность иммунного ответа. Максимально

выраженные различия в уровне продукции цитокинов были установлены у детей с ранним неонатальным сепсисом по сравнению с детьми с респираторным дистресс-синдромом, что свидетельствует об активации иммунных клеток в ответ на манифестацию инфекционного процесса. Было продемонстрировано достоверное повышение содержания TNF-а в группе детей с ранним неонатальным сепсисом по сравнению с новорожденными с течением врожденной пневмонии.

В группах детей с инфекционной патологией нами было выявлено отсутствие корреляции между массой тела и длиной новорожденных, их гестационным возрастом и концентрацией исследуемых цитокинов в плазме крови. Полученные в ходе настоящего исследования данные об особенностях цитокинового профиля недоношенных новорожденных различного гестационного возраста с дыхательными нарушениями инфекционного и неинфекционного генеза могут быть использованы как в целях быстрой диагностики РНС и врожденной пневмонии, так и при проведении дифференциальной диагностики патологических состояний раннего неонатального периода.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Работа выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России на 2018-2020 гг.

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ

Никитина Ирина Владимировна - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных отдела неонатологии и педиатрии, доцент кафедры неонатологии ФГБУ «Национальный медицин-

ский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва Е-шаН: i_nikitina@oparina4.ru

Жукова Анастасия Сергеевна - научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва

Е-шаН: a_beLyaeva@oparina4.ru

Ванько Людмила Викторовна - доктор медицинских наук, профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва E-maiL: L_vanko@oparina4.ru

Вторушина Валентина Валентиновна - кандидат медицинских наук, врач лаборатории клинической иммунологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва E-maiL: v_vtorushina@oparina4.ru

Матвеева Наталия Константиновна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва E-maiL: n_matveeva@maiL.ru

Кречетова Любовь Валентиновна - кандидат медицинских наук, заведующая лабораторией клинической иммунологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва E-maiL: L_krechetova@oparina4.ru

Крючко Дарья Сергеевна - доктор медицинских наук, начальник отдела координации и анализа научных разработок в области перинатологии и педиатрии ФГБУ «Центр стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровью» Минздрава России, профессор кафедры неонатологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва Е-maiL: krdarya@gmaiL.com

Ионов Олег Вадимович - кандидат медицинских наук, заведующий отделением реанимации и интенсивной терапии новорожденных отдела неонатологии и педиатрии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, доцент кафедры неонатологии ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский университет) Е-maiL: o_ionov@oparina4.ru

Зубков Виктор Васильевич - доктор медицинских наук, заведующий отделом неонатологии и педиатрии, заведующий кафедрой неонатологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, профессор кафедры неонатологии ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский университет) E-maiL: victor.zubkov@maiL.ru

Дегтярев Дмитрий Николаевич - доктор медицинских наук, профессор, заместитель директора по научной работе ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, заведующий кафедрой неонатологии ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Минздрава России» (Сеченовский университет) E-maiL: d_degtiarev@oparina4.ru

ЛИТЕРАТУРА

1. Blencowe H., Cousens S., Oestergaard M.Z., Chou D. et al. National, regional, and worldwide estimates of preterm birth rates in the year 2010 with time trends since 1990 for selected countries: a systematic analysis and implications // Lancet. 2012. Vol. 379, N 9832. P. 21622172.

5. Володин Н.Н., Дегтярева М.В., Симбирцев А.С., Котов А.Ю. и др. Роль про- и противовоспалительных цитокинов в иммунной адаптации новорожденных детей // Int. J. Immunorehabil. 2000. Т. 2, № 1. С. 175-185.

4. Shah B.A., Padbury J.F. Neonatal sepsis // Virulence. 2014. Vol. 5, N 1. P. 170-178.

2. Vogel J.P., Chawanpaiboon S., Moller A.B., Watananirun K. et aL The global epidemiology of preterm birth // Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. 2018. URL: https://doi.org/10.1016/j.bpobgyn.2018.04.003.

6. Eric Z., Konjevic S. Proinflammatory cytokines in a newborn: a literature review // Signa Vitae. 2017. Vol. 13, N 4. P. 10-13.

3. Щеголев А.И., Туманова У.Н., Шувалова М.П., Фролова О.Г. Врожденная пневмония как причина перинатальной смертности в Российской Федерации // Неонатология: новости, мнения, обучение. 2016. № 2. С. 61-66.

7. Жукова А.С., Ванько Л.В., Никитина И.В., Балашова Е.Н. и др. Содержание цитокинов в плазме крови недоношенных новорожденных детей в раннем неонатальном периоде // Иммунология. 2017. Т. 38,

№ 3. С. 143-147.

8. Жукова А.С., Ванько Л.В., Тимофеева Л.А. Фенотип и функциональная активность иммунных клеток в пуповинной и венозной крови новорожденных первых суток жизни // Мед. иммунол. 2017. Т. 19, № S. С. 243.

9. Ito Y., Mason R.J. The effect of interleukin-13 (IL-13) and interferon-y (IFN-y) on expression of surfactant proteins in adult human alveolar type II cells in vitro // Respir. Res. 2010. Vol. 11. Р. 157.

10. Якорнова Г.В., Ремизова И.И., Чистякова Г.Н., Устьянцева Л.С. Динамика провоспалительных цитокинов у детей, родившихся у женщин с осложненной беременностью, в зависимости от течения раннего периода адаптации // Рос. вестн. перинатол. и педиатр. 2015. № 4. С. 50-56.

11. Osaki Y., Maehara Y., Sato M., Hoshino A. et al. Analysis of cyto-kine/chemokine levels in bronchoalveolar lavage fluids from patients with acute respiratory distress syndrome // J. Jpn. Soc. Intensive Care Med. 2010. Vol. 17. P. 179-184.

12. Ambalavanan N., Carlo W.A., D'Angio C.T., McDonald S.A. et al. Cytokines associated with bronchopulmonary dysplasia or death in extremely low birth weight infants // Pediatrics. 2009. Vol. 123, N 4. P. 1132-1141.

13. Melville J.M., Moss T.J.M. The immune consequences of preterm birth // Front. Neurosci. 2013. Vol. 7. Article ID 79.

14. Тусупкалиев Б.Т., Жумалина А.К., Жекеева Б.А., Быйжа-нова Р.М. Особенности иммунного ответа у новорожденных с малой

REFERENCES

1. Blencowe H., Cousens S., Oestergaard M.Z., Chou D., et al. National, regional, and worldwide estimates of preterm birth rates in the year 2010 with time trends since 1990 for selected countries: a systematic analysis and implications. Lancet. 2012; 379 (9832): 2162-72.

2. Vogel J.P., Chawanpaiboon S., Moller A.B., Watananirun K., et al. The global epidemiology of preterm birth. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 2018. https://doi.org/10.1016Zj.bpobgyn.2018.04.003.

3. Shchegolev A.I., Tumanova U.N., Shuvalova M.P., Frolova O.G. Congenital pneumonia as a cause of perinatal mortality in the Russian Federation. Neonatologiya: novosti, mneniya, obuchenie [Neonatology: News, Opinions, Training]. 2016;

4. Shah B.A., Padbury J.F. Neonatal sepsis. Virulence. 2014. Vol. 5, N 1. P. 170-8.

5. Volodin N.N., Degtyareva M.V., Simbirtsev A.S., Kotov A.Yu., et al. The role of pro- and anti-inflammatory cytokines in the immune adaptation of newborns. Int J Immunorehabil. 2000; 2

6. Eric Z., Konjevic S. Proinflammatory cytokines in a newborn: a literature review. Signa Vitae. 2017; 13 (4): 10-3.

7. Zhukova A.S., Vanko L.V., Nikitina I.V., Balashova E.N., , et al. Plasma cytokine levels in preterm newborns in the early neonatal period. Immu-nologiya [Immunology]. 2017; 38

8. Zhukova A.S., Vanko L.V., Timofeeva L.A. Phenotype and functional activity of immune cells in the umbilical and venous blood of newborns in the first day of life. Meditsinskaya Immunologiya [Medical Immunology]. 2017; 9

9. Ito Y., Mason R.J. The effect of interleukin-13 (IL-13) and interferon-y (IFN-y) on expression of surfactant proteins in adult human alveolar type II cells in vitro. Respir Res. 2010; 11: 157.

10. Yakornova G.V., Remizova I.I., Chistyakova G.N., Ustyantseva L.S. Time course of changes in proinflammatory cytokines in infants born to women with complicated pregnancy in relation to the course of an early adaptation period. Rossiyskiy vestnik perinatologii i pediatrii [Russian Bulletin of Perinatology and Pediatrics]. 2015;

массой тела при внутриутробном инфицировании // Наука и здравоохранение. 2015. № 5. С. 52-60.

15. Mirzarahimi M., Barak M., Eslami A., Enteshari-Moghaddam A. The role of interleukin-6 in the early diagnosis of sepsis in premature infants // Pediatr. Rep. 2017. Vol. 9, N 3. Article ID 7305.

16. Prashant A., Vishwanath P., Kulkarni P., Narayana P.S. et al. Comparative assessment of cytokines and other inflammatory markers for the early diagnosis of neonatal sepsis - a case control study // PLoS One. 2013. Vol. 8, N 7. Article ID e68426.

17. Ye Q., Du L., Shao W.-X., Shang Sh. Utility of cytokines to predict neonatal sepsis // Pediatr. Res. 2017. Vol. 81. P. 616-621.

18. Хаертынов Х.С., Анохин В.А., Бойчук С.В. Патофизиология неона-тального сепсиса // Вестн. соврем. клин. мед. 2014. Т. 7, № 6. С. 97-104.

19. Segura-Cervantes E., Mancilla-Ramirez J., Gonzalez-Canudas J., Alba E. et al. Inflammatory response in preterm and very preterm newborns with sepsis // Mediators Inflamm. 2016. Article ID 6740827.

20. Жукова А.С., Никитина И.В., Ванько Л.В., Матвеева Н.К. и др. Особенности продукции активных форм кислорода фагоцитами периферической крови у недоношенных новорожденный в раннем неона-тальном периоде // Неонатология: новости, мнения, обучение. 2016. № 2. С. 89-96.

11. Osaki Y., Maehara Y., Sato M., Hoshino A., et al. Analysis of cyto-kine/chemokine levels in bronchoalveolar lavage fluids from patients with acute respiratory distress syndrome. J Jpn Soc Intensive Care Med. 2010; 17: 179-84.

12. Ambalavanan N., Carlo W.A., D'Angio C.T., McDonald S.A., et al. Cytokines associated with bronchopulmonary dysplasia or death in extremely low birth weight infants. Pediatrics. 2009; 123 (4): 1132-41.

13. Melville J.M., Moss T.J.M. The immune consequences of preterm birth. Front Neurosci. 2013; 7: 79.

14. Tussupkaliev B.T., Zhumalina A.K., Zhekeyeva B.A., Baizhanova R.M. Features of immune response in newborn children with low body weight in intrauterine infection. Nauka i zdravookhranenie [Science and Healthcare]. 2015;

15. Mirzarahimi M., Barak M., Eslami A., Enteshari-Moghaddam A. The role of interleukin-6 in the early diagnosis of sepsis in premature infants. Pediatr Rep. 2017; 9 (3): 7305.

16. Prashant A., Vishwanath P., Kulkarni P., Narayana P.S., Gowdara V., et al. Comparative assessment of cytokines and other inflammatory markers for the early diagnosis of neonatal sepsis - a case control study. PLoS One. 2013; 8 (7): e68426.

17. Ye Q., Du L., Shao W.-X., Shang Sh. Utility of cytokines to predict neonatal sepsis. Pediatr Res. 2017; 81: 616-21.

18. Khaertynov Kh.S., Anokhin V.A., Boichuk S.V. Pathophsyology of neonatal sepsis. Vestnik sovremennoy klinicheskoy meditsiny [Bulletin of Modern Clinical Medicine]. 2014; 7

19. Segura-Cervantes E., Mancilla-Ramirez J., Gonzalez-Canudas J., Alba E., et al. Inflammatory response in preterm and very preterm newborns with sepsis. Mediators Inflamm. 2016: 6740827.

20. Zhukova A.S., Nikitina I.V., Vanko L.V., Matveeva N.K., et al. Production of reactive oxygen species by peripheral blood phagocytes in preterm infants in the early neonatal period. Neonatologiya: novosti, mneniya, obuchenie [Neonatology: News, Opinions, Training]. 2016;