МОДУЛИРОВАНИЕ ПОСТПРАНДИАЛЬНОГО ПОГЛОЩЕНИЯ ЖИРОВ
POSTPRANDIAL LIPID ABSORPTION MODULATION

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к области молочной смеси для детского питания и детского порошкового молока. В частности оно относится к питательным композициям, которые приготавливают таким образом, что они оказывают существенное влияние на метаболическую реакцию на жиры.
Уровень техники
Грудное вскармливание является предпочтительным способом вскармливания младенцев. Однако имеются обстоятельства, которые делают грудное вскармливание невозможным или менее желательным. В этих случаях, молочные смеси для детского питания представляют собой хорошую альтернативу. Композиция современных молочных смесей для детского питания адаптируется таким образом, что она удовлетворяет многим конкретным потребностям в питании быстро растущего и развивающегося младенца.
По-прежнему очевидно, что можно осуществить улучшения относительно составов молочных смесей для детского питания. Например, известно, что, по сравнению со смесями для вскармливания младенцев, младенцы вскармливаемые грудью, имеют меньшую вероятность ожирения в более поздней жизни. Также, позже в жизни, профили липидов в крови являются более здоровыми у субъектов, которых вскармливали грудью в младенчестве. Также, грудное вскармливание в начале жизни связывают с более высокой плотностью костей и содержанием минералов в костях в более поздней жизни, в детстве, и более ранним наступлением пубертатного возраста по сравнению с теми, кого вскармливали искусственно.
Осуществляют усилия в попытках установить, что именно вызывает такие различия, и что более важно, рассматриваются меры, которые должны предприниматься для уменьшения этих различий.
Например, WO 2009/154448 относится к молочной смеси для детского питания, которая осуществляет воспроизведение той ситуации, что при грудном вскармливании, младенцы получают женское молоко, где концентрация жира постепенно увеличивается в течение процесса вскармливания. Более позднее молоко обычно имеет более высокую концентрацию жиров по сравнению с более ранним молоком. Обычные молочные смеси для детского питания не дают градиента жиров при введении, то есть концентрация жиров в обычной молочной смеси для детского питания является в основном постоянной. В WO 2009/154448 градиент жиров устанавливают в молочной смеси для детского питания посредством создания смеси, содержащей капли жиров с размерами, большими, чем у тех, которые находятся в обычной молочной смеси для детского питания.
Michalski et al., Eur J Nutr (2005), 44:436-444 и Eur J Nutr (2006) 45:215-224 исследуют прямое влияние дисперсного состояния и супрамолекулярной структуры молочного жира в различных препаратах молочных продуктов на метаболизм триглицеридов у крыс. В этих исследованиях измеряют прямое влияние различных композиций жиров и наблюдают самый высокий пик триглицеридов (триацилглицерола) в плазме для неэмульсифицированного препарата жиров, при этом обнаруживают медленнее изменяющийся профиль для малых капель, покрытых казеином. Также наблюдают более низкие фоновые уровни триацилглицерола для малых капель, покрытых казеином, по сравнению с неэмульсифицированным препаратом.
Сущность изобретения
Теперь неожиданно обнаружено, что способ переработки жиров может модулироваться или программироваться с помощью диеты, содержащей липидные глобулы конкретной архитектуры. Обнаружено, что экспонирование для смеси, содержащей липидные глобулы, которые покрыты слоем, содержащим полярные липиды, в течение продолжительного периода времени благотворно ослабляет доступность жиров в плазме по сравнению с потреблением стандартных жиров (без капель с покрытием). Как правило, постпрандиальное поглощение жиров, как измеряют с помощью уровня триглицеридов в плазме, показывает пик через относительно короткое время после потребления пищи. Теперь обнаружено, что постпрандиальное поглощение жиров может быть растянуто на продолжительный период времени. Пикового увеличения триглицеридов в плазме вскоре после потребления пищи нет, но увеличение уровня триглицеридов в плазме сдвигается на более позднее время, и поддерживается в течение более продолжительного периода времени. Таким образом, достигается более растянутое по времени поступление или потребление жиров в организме. Это воздействие получается после экспонирования системы пищеварения для диеты, которая содержит липидные глобулы, покрытые фосфолипидами. Такое воздействие не наблюдают, когда фосфолипиды добавляют отдельно от липидных глобул.
Таким образом, как правило, настоящее изобретение предусматривает улучшенную и продолжительную постпрандиальную переработку жиров. В частности, улучшается биологическая доступность жиров в питательных композициях, более конкретно, в молочной смеси для детского питания. Постепенное высвобождение жиров в циркуляцию имеет то последствие, что больше жиров доступно для роста. Также обнаружено, что после периода экспонирования для диеты, которая содержит липидные глобулы, покрытые фосфолипидами, периода программирования, фоновый уровень триглицеридов в плазме после кормления становится ниже по сравнению с уровнем, обнаруживаемым после потребления стандартной молочной смеси для детского питания. После полного переваривания стандартного питания, уровни триглицеридов в плазме возвращаются к этому низкому фоновому значению. Также, благодаря этому более низкому фоновому уровню триглицеридов в плазме, который ближе к фоновым уровням, наблюдаемым после периода грудного вскармливания от матери, менее вероятно появление избытка триглицеридов в плазме, и по этой причине, происходит меньшее накапливание избытков жиров в адипозной ткани. Таким образом, преимущественно, настоящее изобретение предусматривает оптимальное использование или улучшенную биологическую доступность питательных жиров. Эту улучшенную биологическую доступность конкретно доказывает изменение и улучшение профиля жирных кислот клеточных мембран, в частности, клеточных мембран клеток, не принадлежащих к центральной нервной системе, предпочтительно, клеточных мембран клеток крови, более предпочтительно, эритроцитов. Эритроциты считают особенно репрезентативными для всех клеток организма, за исключением клеток центральной нервной системы, включая клетки спинного мозга и клетки головного мозга, из-за мозгового барьера кровяного давления. По сравнению с композициями без липидных глобул, покрытых фосфолипидами, обнаруживают пониженное отношение n6/n3 жирных кислот и увеличенное количество n3 жирных кислот, в частности, n3-LC-PUFA, несмотря на сравнимую композицию жиров в диетах. Дополнительное усиление воздействия на уменьшение отношения n6/n3 жирных кислот наблюдают, когда используют липидные глобулы, которые имеют увеличенные размеры. Это является важным, поскольку показано положительное воздействие n3 PUFA и отношения n6/n3 на кровяное давление, воспалительную реакцию тучных клеток, инсулинорезистивность, риск инсульта и воспалительный статус.
Стандартная молочная смесь для детского питания содержит растительные жиры в качестве липидного компонента. Жиры гомогенизируют для получения стабильной эмульсии, и липидные глобулы являются малыми, с усредненным по объему диаметром в пределах примерно 0,3-0,6 мкм. Как правило, полярные липиды специально не добавляют, но малые их количества могут присутствовать в готовой молочной смеси для детского питания по причинам, связанным со стабильностью. Обнаружено, что липидные стандартные глобулы, то есть, приготовленные из порошков смесей для детского питания покрыты молочными белками и неполярными липидами. Предполагается, что эти белки представляют собой, в частности, казеин.
Липидные глобулы, покрытые фосфолипидами, используемые в настоящем изобретении, могут быть получены при гомогенизации компонента жиров, содержащего растительные липиды, в присутствии фосфолипидов.
Подробное описание
Настоящее изобретение, таким образом, относится к способу программирования постпрандиальной переработки жиров у младенца, указанный способ включает введение композиции питательной смеси в течение, по меньшей мере, одной недели, предпочтительно, по меньшей мере, двух недель, при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу, указанная композиция питательной смеси содержит белки и перевариваемые углеводы и содержит жиры в форме липидных глобул, покрытых фосфолипидами.
В контексте настоящего изобретения, композиция питательной смеси, содержащая белки и перевариваемые углеводы и содержащая жиры в форме липидных глобул, покрытых фосфолипидами, также упоминается как программирующая композиция.
Настоящее изобретение может также быть описано как использование белков, перевариваемого углевода и липидов для получения композиции питательной смеси с целью программирования постпрандиальной переработки жиров у младенца посредством введения указанной композиции питательной смеси в течение, по меньшей мере, одной недели, предпочтительно, по меньшей мере, двух недель, при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу, указанная композиция питательной смеси содержит 10-50% масс. растительных липидов по отношению к сухой массе композиции и 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, и указанная композиция содержит липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды.
Настоящее изобретение может также быть описано как композиция питательной смеси, содержащая белки, перевариваемые углеводы и содержащая 10-50% масс. растительных липидов по отношению к сухой массе композиции и 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, указанная композиция содержит липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды, для использования при программировании постпрандиальной переработки жиров у младенца, посредством введения указанной композиции питательной смеси в течение, по меньшей мере, одной недели, предпочтительно, по меньшей мере, двух недель, при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу.
В одном из вариантов осуществления, настоящий способ устанавливает постепенное, пролонгированное поступление жира в циркуляцию младенца.
Более конкретно, настоящее изобретение относится к способу
- более равномерного распределения пика постпрандиального поглощения жиров и/или уровней триглицеридов в плазме
- пролонгирования постпрандиального поглощения жиров и/или уровней триглицеридов в плазме
- расширения по времени постпрандиальной биологической доступности жиров
- улучшения использования питательных жиров
у младенца, указанный способ включает введение композиции питательной смеси в течение, по меньшей мере, одной недели, предпочтительно, по меньшей мере, двух недель, при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу, указанная композиция питательной смеси содержит белки и перевариваемые углеводы и содержит 10-50% масс. растительных липидов по отношению к сухой массе композиции и 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, и указанная композиция содержит липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды.
Более конкретно, композиция питательной смеси, которую вводят, содержит белки, усваиваемые углеводы и липиды, где компонент липидов обеспечивает 10-50% масс. растительных липидов по отношению к сухой массе композиции питательной смеси и содержит 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, и в ней компонент липидов содержит липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды.
Настоящее изобретение может также быть описано как использование белков, перевариваемых углеводов и липидов для получения композиции питательной смеси для
- более равномерного распределения пика постпрандиального поглощения жиров и/или уровней триглицеридов в плазме
- пролонгирования постпрандиального поглощения жиров и/или уровней триглицеридов в плазме
- расширения по времени постпрандиальной биологической доступности жиров
- улучшения использования питательных жиров
у младенца, посредством введения указанной композиции питательной смеси в течение, по меньшей мере, одной недели, предпочтительно, по меньшей мере, двух недель, при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу, указанная композиция питательной смеси содержит 10-50% масс. растительных липидов по отношению к сухой массе композиции и 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, и указанная композиция содержит липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды.
Настоящее изобретение может также быть описано как композиция питательной смеси, содержащая белки, перевариваемые углеводы, и содержащая 10-50% масс. растительных липидов по отношению к сухой массе композиции и 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, указанная композиция содержит липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды, для использования для
- более равномерного распределения пика постпрандиального поглощения жиров и/или уровней триглицеридов в плазме
- пролонгирования постпрандиального поглощения жиров и/или уровней триглицеридов в плазме
- расширения по времени постпрандиальной биологической доступности жиров
- улучшения использования питательных жиров
у младенца посредством введения указанной композиции питательной смеси в течение, по меньшей мере, одной недели, предпочтительно, по меньшей мере, двух недель, при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу.
Воздействия, которые достигают в соответствии с настоящим изобретением, соотносятся с воздействием, получаемым с помощью 'стандартной' молочной смеси для детского питания, то есть молочной смеси для детского питания, содержащей липидные глобулы малых размеров, получаемые после гомогенизации жиров с менее чем 1,0% масс. фосфолипидов по отношению к присутствующим липидам в целом.
Воздействия, получаемые в соответствии с настоящим способом, наблюдаются после потребления питательной смеси, содержащей жиры в обычной или регулярной форме, то есть питательной смеси, где не предпринимают специальных мер для получения липидных глобул, покрытых фосфолипидами.
Таким образом, в одном из вариантов осуществления в соответствии с настоящим способом, воздействие, в частности, более равномерное распределение пика постпрандиального поглощения жиров и/или уровней триглицеридов в плазме, пролонгирование постпрандиального поглощения жиров и/или уровней триглицеридов в плазме, расширение по времени постпрандиальной биологической доступности жира и/или улучшение использования питательных жиров, происходит, при введении питательной смеси, содержащей жиры, не содержащей указанных липидных глобул с сердцевиной, содержащей растительные липиды, и с покрытием, содержащим фосфолипиды.
Предпочтительно, воздействия в соответствии с настоящим способом получают после некоторого периода программирования с использованием липидных глобул, покрытых фосфолипидами. Таким образом, предпочтительно питательную смесь, содержащую жиры в обычной или регулярной форме, вводят после этого периода программирования.
Следовательно, в предпочтительном варианте осуществления, питательную смесь, не содержащую указанные липидные глобулы с сердцевиной, содержащей растительные липиды, и с покрытием, содержащим фосфолипиды, вводят после, по меньшей мере, одной недели, предпочтительно, по меньшей мере, двух недель введения, когда вводят указанную композицию питательной смеси, содержащую липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды.
Считается, что метаболическое воздействие на переработку жиров является более продолжительным, если период программирования с использованием липидных глобул, покрытых фосфолипидами, дольше, таким образом, при более продолжительном экспонировании младенца для липидных глобул с сердцевиной, содержащей растительные липиды, и с покрытием, содержащим фосфолипиды. Таким образом, в одном из вариантов осуществления, настоящее изобретение включает введение композиции питательной смеси, содержащей липидные глобулы, покрытые фосфолипидами, в течение, по меньшей мере, 4 недель, предпочтительно, по меньшей мере, 8 недель, более предпочтительно, по меньшей мере, 12 недель или еще более предпочтительно, по меньшей мере, 16 недель.
Как рассмотрено выше, воздействия в соответствии с настоящим способом получают после некоторого периода программирования с использованием липидных глобул, покрытых фосфолипидами, и в частности, воздействие программирования на постпрандиальную переработку жиров, происходит, когда принимают питательную смесь, которая содержит стандартную композицию жиров, то есть композицию жиров, не содержащую липидные глобулы, покрытые фосфолипидами. На модели мышей наблюдают, что воздействие диетического импринтинга или программирования может поддерживаться, по меньшей мере, в раннем взрослом возрасте. Таким образом, в одном из вариантов осуществления настоящего изобретения, воздействие, в частности, более равномерное распределение пика постпрандиальных уровней триглицеридов в плазме, пролонгирование постпрандиального поглощения жиров, расширение по времени постпрандиальной биологической доступности жира и/или улучшение использования питательных жиров, происходит в последующей жизни младенца, предпочтительно через 36 месяцев, предпочтительно, через 5 лет, предпочтительно, через 10 лет, предпочтительно, через 13 лет или даже предпочтительно, через 18 лет жизни младенца. Другие предпочтительные варианты осуществления заключаются в том, что воздействия получают в течение периодов интенсивного роста, то есть, когда младенец находится в возрасте в пределах между 3 и 10 годами, предпочтительно, в пределах между 3 и 5 годами, и, как следствие, в течение пубертатного периода, предпочтительно, когда ребенок находится в возрасте в пределах между 10 и 18 годами.
В одном из вариантов осуществления, ежедневная доза программирующей композиции, которая должна вводиться в соответствии с настоящим изобретением, следует обычным питательным потребностям младенца, которые возрастают с увеличением возраста младенца. Это является особенно предпочтительным, поскольку программирующая композиция, как предполагается, представляет собой питательно полноценную молочную смесь для детского питания. С учетом этого, ежедневная доза программирующей композиции, которая должна вводиться в соответствии с настоящим изобретением, может также составлять, по меньшей мере, 150 мл или, по меньшей мере, 200 мл, или, по меньшей мере, 300 мл, или, по меньшей мере, 450 мл, или, по меньшей мере, 500 мл. Также увеличение ежедневной дозы до того уровня, который является обычным для возраста младенца, может быть преимущественным для установления программирования.
Для ясности, отметим, что липидные глобулы, содержащие покрытие, формируются из растительных липидов и фосфолипидов. Таким образом, в одном из вариантов осуществления, липиды в питательных композициях в способе или применении в соответствии с настоящим изобретением, присутствуют в форме липидных глобул с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды. Предпочтительно, по существу все липиды в питательной композиции в способе или применении в соответствии с настоящим изобретением, присутствуют в форме липидных глобул с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды.
Как указано выше, введение программирующей композиции приводит к понижению фонового уровня триглицеридов в плазме и к улучшению профиля жирных кислот клеточных мембран, в частности, к увеличению количества n3 жирных кислот, предпочтительно, n3 LC-PUFA, и к уменьшению отношения n6/n3 в клеточных мембранах, предпочтительно в эритроцитах.
Таким образом, в одном из вариантов осуществления, настоящий способ или настоящая композиция также предназначается для использования при
- понижении уровня триглицеридов в плазме натощак
- улучшении профиля жирных кислот клеточных мембран.
Эти воздействия определяют после двухнедельного введения программирующей композиции. Считается, однако, что эти воздействия могут также быть получены непосредственно при заглатывании программирующей композиции.
Таким образом, в одном из аспектов, настоящее изобретение относится к способу i) понижения уровня триглицеридов в плазме натощак ii) улучшения профиля жирных кислот клеточных мембран, у младенца, указанный способ включает введение композиции питательной смеси при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу, указанная композиция питательной смеси содержит белки и перевариваемые углеводы и содержит жиры в форме липидных глобул, покрытых фосфолипидами.
Настоящее изобретение может быть также описано как использование белков, перевариваемых углеводов и липидов для получения композиции питательной смеси для
- понижения уровня триглицеридов в плазме натощак
- улучшения профиля жирных кислот клеточных мембран
у младенца, посредством введения указанной композиции питательной смеси при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу, указанная композиция питательной смеси содержит 10-50% масс. растительных липидов по отношению к сухой массе композиции и 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, и указанная композиция содержит липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды.
Настоящее изобретение может также быть описано как композиция питательной смеси, содержащая белки, перевариваемые углеводы, и содержащая 10-50% масс. растительных липидов по отношению к сухой массе композиции и 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, указанная композиция содержит липидные глобулы с сердцевиной, содержащей указанные растительные липиды, и с покрытием, содержащим указанные фосфолипиды, для использования при i) понижении уровня триглицеридов в плазме натощак, ii) улучшении профиля жирных кислот клеточных мембран у младенца посредством введения указанной композиции питательной смеси при ежедневной дозе, по меньшей мере, 80 мл указанному младенцу.
Предпочтительно, 'понижение' и 'улучшение' соотносятся со значениями, полученными для композиции питательной смеси, не содержащей липидных глобул, покрытых фосфолипидами. Предпочтительно, 'понижение' и 'улучшение' относятся к значениям, полученным для младенцев, принимающих материнское молоко, в частности, для младенцев, вскармливаемых грудью.
Предпочтительно, улучшение профиля жирных кислот означает увеличение количества n3 жирных кислот, предпочтительно, n3 LC-PUFA, и/или уменьшение отношения n6/n3.
Липидный компонент
Настоящее изобретение использует липиды. Липиды предпочтительно составляют 30-60% от общей калорийности композиции. Более предпочтительно, настоящая композиция содержит липиды, составляющие 35-55% от общей калорийности, еще более предпочтительно, настоящая композиция содержит липиды, составляющие 40-50% от общей калорийности. Когда она находится в жидкой форме, например, как жидкость, готовая для вскармливания, композиция предпочтительно содержит 2,1-6,5 г липидов на 100 мл, более предпочтительно, 3,0-4,0 г на 100 мл. По отношению к сухой массе, настоящая композиция предпочтительно содержит 10-50% масс., более предпочтительно, 12,5-40% масс. липидов, еще более предпочтительно, 19-30% масс. липидов.
Липиды включают полярные липиды (такие как фосфолипиды, гликолипиды, сфингомиелин и холестерин), моноглицериды, диглицериды, триглицериды и свободные жирные кислоты. Предпочтительно, композиция содержит, по меньшей мере, 75% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, 85% масс. триглицеридов по отношению к липидам в целом.
Липиды по настоящему изобретению содержат растительные липиды. Присутствие растительных липидов преимущественно делает возможным получение оптимального профиля жирных кислот, с высоким содержанием полиненасыщенных жирных кислот, и/или профиля, сильнее напоминающего жиры материнского молока. Использование одних лишь липидов из коровьего молока или молока других домашних животных не обеспечивает оптимального профиля жирных кислот. Этот не вполне оптимальный профиль жирных кислот, например, с большим количеством насыщенных жирных кислот, как известно, приводит к повышению тучности. Предпочтительно, настоящая композиция содержит, по меньшей мере, один, предпочтительно, по меньшей мере, два источника липидов, выбранных из группы, состоящей из льняного масла (масла семян льна), рапсового масла (такого как сурепноемасло, рапсовое масло с низким содержанием эруковой кислоты и масло канолы), масла далматского шалфея, периллового масла, пуртулакового масла, брусничного масла, облепихового масла, конопляного масла, подсолнечного масла, подсолнечного масла с высоким содержанием олеиновой кислоты, сафлорового масла, сафлорового масла с высоким содержанием олеиновой кислоты, оливкового масла, черносмородинового масла, масла эхиума, кокосового масла, пальмового масла и косточкового пальмового масла. Предпочтительно, настоящая композиция содержит, по меньшей мере, один, предпочтительно, по меньшей мере, два источника липидов, выбранных из группы, состоящей из льняного масла, масла канолы, кокосового масла, подсолнечного масла и подсолнечного масла с высоким содержанием олеиновой кислоты. Коммерчески доступные растительные липиды, как правило, предлагаются в форме сплошной масляной фазы. Когда она находится в жидкой форме, например, как жидкость, готовая для вскармливания, композиция предпочтительно содержит 2,1-6,5 г растительных липидов на 100 мл, более предпочтительно, 3,0-4,0 г на 100 мл. По отношению к сухой массе, настоящая композиция предпочтительно содержит 10-50% масс., более предпочтительно, 12,5-40% масс. растительных липидов, еще более предпочтительно, 19-30% масс. Предпочтительно, композиция содержит 50-100% масс. растительных липидов по отношению к липидам в целом, более предпочтительно, 70-100% масс., еще более предпочтительно, 75-97% масс. Следовательно, отметим, что настоящая композиция также может содержать нерастительные липиды. Пригодные для использования и предпочтительные нерастительные липиды дополнительно указаны ниже.
Фосфолипиды
Настоящее изобретение использует фосфолипиды. Фосфолипиды принадлежат к группе полярных липидов. Полярные липиды являются амфипатическими по природе, и включают глицерофосфолипиды, гликосфинголипиды, сфингомиелин и/или холестерин. Композиция содержит фосфолипиды (сумму глицерофосфолипидов и сфингомиелина). Полярные липиды в настоящем изобретении относится к сумме глицерофосфолипидов, гликосфинголипидов, сфингомиелина и холестерина. В соответствии с настоящим изобретением, фосфолипиды и, необязательно, другие полярные липиды присутствуют в виде покрытия липидных глобул. Под 'покрытием' подразумевается, что наружный поверхностный слой липидной глобулы содержит фосфолипиды и, необязательно, другие полярные липиды, в то время как эти полярные липиды по существу отсутствуют в сердцевине липидной глобулы. Присутствие фосфолипидов и, необязательно, других полярных липидов в виде покрытия или наружного слоя липидной глобулы в диете, получаемой на ранней стадии жизни, как обнаружено, оказывает программирующее воздействие на переработку жиров у младенца.
Настоящая композиция предпочтительно содержит глицерофосфолипиды. Глицерофосфолипиды представляют собой класс липидов, полученных из жирных кислот, этерифицированных на гидроксильных группах на атоме углерода-1 и атоме углерода-2 основной цепи глицеролового остатка и на отрицательно заряженной фосфатной группе, присоединенной к атому углерода-3 глицерола с помощью сложноэфирной связи, и, необязательно, на холиновой группе (в случае фосфатидилхолина, PC), на сериновой группе (в случае фосфатидилсерина, PS), на этаноламиновой группе (в случае фосфатидилэтаноламина, PE), на инозитольной группе (в случае фосфатидилинозитола, PI) или на глицерольной группе (в случае фосфатидилглицерола, PG), присоединенной к фосфатной группе. Лизофосфолипиды представляют собой класс фосфолипидов с одной ацильной цепью жирной кислоты. Предпочтительно, настоящая композиция содержит PC, PS, PI и/или PE, более предпочтительно, по меньшей мере, PC.
Настоящая композиция предпочтительно содержит фосфоспинголипиды, более предпочтительно, сфингомиелин. Сфингомиелины имеют молекулу фосфорилхолина или фосфорилэтаноламина, этерифицированную с помощью 1-гидрокси группы керамида, и представляют собой главный фосфосфинголипид в жирах молока. Они классифицируются как фосфолипиды, а также как сфинголипиды, но не классифицируются как глицерофосфолипиды или как гликосфинголипиды.
Настоящая композиция предпочтительно содержит гликосфинголипиды. Термин гликосфинголипиды, как он используется в настоящем изобретении, относится, в частности, к гликолипидам со сфингозином аминоспирта. Основная цепь сфингозина является O-связанной с заряженной головной группой, такой как основная цепь этаноламина, серина или холина. Основная цепь также связана через амидную связь с ацильной группой жирной кислоты. Гликосфинголипиды представляют собой керамиды с одним или несколькими остатками сахаров, соединенными в виде β-гликозидной связи в 1-гидроксильном положении. Предпочтительно, настоящая композиция содержит ганглиозиды, более предпочтительно, по меньшей мере, один ганглиозид, выбранный из группы, состоящей из GM3 и GD3.
Сфинголипиды в настоящем изобретении определяются как сумма фосфосфинголипидов и гликосфинголипидов. Фосфолипиды в настоящем изобретении определяются как сумма сфингомиелина и глицерофосфолипидов. Предпочтительно, фосфолипиды получают из липидов молока. Предпочтительно, массовое отношение фосфолипиды : гликосфинголипиды составляет от 2:1 до 10:1, более предпочтительно, от 2:1 до 5:1.
Настоящая композиция содержит фосфолипиды. Предпочтительно, настоящая композиция содержит 1,0-20% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, более предпочтительно, 1,0-10% масс., еще более предпочтительно, 2-10% масс., еще более предпочтительно, 3-8% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом. Предпочтительно, настоящая композиция содержит 0,1-10% масс. гликосфинголипидов по отношению к липидам в целом, более предпочтительно, 0,5-5% масс., еще более предпочтительно, 2-4% масс. Предпочтительно, настоящая композиция содержит 1,1-10% масс. (гликосфинголипиды плюс фосфолипиды) по отношению к липидам в целом.
Настоящая композиция предпочтительно содержит холестерин. Настоящая композиция предпочтительно содержит, по меньшей мере, 0,005% масс. холестерина по отношению к липидам в целом, более предпочтительно, по меньшей мере, 0,02% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, 0,05% масс., еще более предпочтительно, по меньшей мере, 0,1% масс. Предпочтительно, количество холестерина не превышает 10% масс. по отношению к липидам в целом, более предпочтительно, не превышает 5% масс., еще более предпочтительно, не превышает 1% масс., по отношению к липидам в целом.
Предпочтительно, настоящая композиция содержит 1,0-25% масс. полярных липидов по отношению к липидам в целом, где полярные липиды представляют собой сумму фосфолипидов, гликосфинголипидов и холестерина, более предпочтительно, 1,5-12% масс., более предпочтительно, 1,0-10% масс., еще более предпочтительно, 2-10% масс., еще более предпочтительно, 3,0-10% масс. полярных липидов по отношению к липидам в целом, где полярные липиды представляют собой сумму фосфолипидов, гликосфинголипидов и холестерина.
Предпочтительные источники получения фосфолипидов, гликосфинголипидов и/или холестерина представляют собой яичные липиды, молочный жир, жир из пахты и жир плазмы масла (такой как, бета жир плазмы масла). Предпочтительный источник фосфолипидов, в частности, PC, представляет собой лецитин сои и/или лецитин подсолнечника. Настоящая композиция предпочтительно содержит фосфолипиды, полученные из молока. Предпочтительно, настоящая композиция содержит фосфолипиды и гликосфинголипиды, полученные из молока. Предпочтительно, холестерин также получают из молока. Предпочтительно, полярные липиды получают из молока. Полярные липиды, полученные из молока, включают полярные липиды, выделенные из липидов молока, липидов сливок, липидов плазмы масла (бета липидов плазмы масла), липидов молочной сыворотки, липидов сыра и/или липидов пахты. Липид пахты, как правило, получают при получении пахты. Липиды плазмы масла или бета липиды плазмы масла, как правило, получают при производстве сухого молочного жира из сливочного масла. Предпочтительно, фосфолипиды, гликосфинголипиды и/или холестерин получают из сливок. Композиция предпочтительно содержит фосфолипиды, гликосфинголипиды и/или холестерин из молока коров, кобыл, овец, коз, буйволов, лошадей и верблюдов. Предпочтительнее всего использовать экстракт липидов, выделенных из коровьего молока. Использование полярных липидов из молочного жира преимущественно включает полярные липиды из мембран глобул молочного жира, что сильнее напоминает ситуацию с материнским молоком. Полярные липиды, полученные из жирного молока, преимущественно уменьшают массу жира до большей степени, чем полярные липиды из других источников. Полярные липиды находятся на поверхности липидной глобулы, то есть как слой покрытия или наружный слой. Способ пригодный для определения того, находятся ли полярные липиды на поверхности липидных глобул, представляет собой конфокальную лазерную сканирующую микроскопию с использованием флуоресцентных зондов Annexin V Alexa Fluor 488 (молекулярные зонды In Vitrogen) для мечения фосфолипидов, и нильского красного (Sigma-Aldrich) для мечения триглицеридов. После мечения, к образцам молока удобно добавить закрепляющую среду Vectrahield (Vector laboratories Inc., Burliname USA) для уменьшения подвижности частиц и фотоотбеливания. Наблюдения можно осуществлять с использованием лазерного сканирующего микроскопа Zeiss с длинами волн возбуждения 488/543/633 нм и с фильтрами испускания, установленными на полосе пропускания 505-530 и на полосе пропускания 560-615. Одновременное использование полярных липидов, полученных из молока домашних животных, и триглицеридов, полученных из растительных липидов, следовательно, дает возможность получения покрытых липидных глобул с покрытием более сходным с материнским молоком, получая в то же время, оптимальный набор жирных кислот, полученных из растительных масел. Пригодные для использования коммерчески доступные источники полярных липидов молока представляют собой BAEF, порошок SM2, SM3 и SM4 Corman, Salibra of Glanbia, и LacProdan MFGM-10 или PL20 от Aria. Предпочтительно, источник полярных липидов молока содержит, по меньшей мере, 4% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом, более предпочтительно, 7-75% масс., наиболее предпочтительно, 20-70% масс. фосфолипидов по отношению к липидам в целом. Предпочтительно, массовое отношение фосфолипидов к белкам выше 0,10, более предпочтительно, выше 0,20, еще более предпочтительно, выше 0,3. Предпочтительно, по меньшей мере, 25% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, 40% масс., наиболее предпочтительно, по меньшей мере, 75% масс. полярных липидов получают из полярных липидов молока.
Композиция жирных кислот
LA относится к линолевой кислоте и/или ацильной цепи (18:2 n6); ALA относится к α-линоленовой кислоте и/или ацильной цепи (18:3 n3); LC-PUFA относится к длинноцепным полиненасыщенным жирным кислотам и/или к ацильным цепям, содержащим, по меньшей мере, 20 атомов углерода в ацильной цепи жирной кислоты и имеющим 2 или более ненасыщенных связи; DHA относится к докозагексаеновой кислоте и/или ацильной цепи (22:6, n3); EPA относится к эйкозапентаеновой кислоте и/или ацильной цепи (20:5 n3); ARA относится к арахидоновой кислоте и/или ацильной цепи (20:4 n6); DPA относится к докозапентаеновой кислоте и/или ацильной цепи (22:5 n3). Жирные кислоты со средней цепью (MCFA) относятся к жирным кислотам и/или ацильным цепям с длиной цепи 6, 8 или 10 атомов углерода.
LA предпочтительно присутствует в количестве, достаточном для того, чтобы способствовать здоровому росту и развитию. Следовательно, композиция предпочтительно содержит меньше чем 15% масс. LA по отношению к жирным кислотам в целом, предпочтительно, в пределах между 5 и 14,5% масс., более предпочтительно, в пределах между 6 и 10% масс. Предпочтительно, композиция содержит более 5% масс. LA по отношению к жирным кислотам. Предпочтительно, ALA присутствует в количестве, достаточном для того, чтобы способствовать здоровому росту и развитию младенца. Следовательно, настоящая композиция предпочтительно содержит, по меньшей мере, 1,0% масс. ALA по отношению к жирным кислотам в целом. Предпочтительно, композиция содержит, по меньшей мере, 1,5% масс. ALA по отношению к жирным кислотам в целом, более предпочтительно, по меньшей мере, 2,0% масс. Предпочтительно, композиция содержит меньше чем 10% масс. ALA, более предпочтительно, меньше чем 5,0% масс. по отношению к жирным кислотам в целом. Массовое отношение LA/ALA должно быть хорошо сбалансированным для предотвращения возникновения тучности, обеспечивая в то же время нормальный рост и развитие. По этой причине, настоящая композиция предпочтительно содержит массовое отношение LA/ALA в пределах между 2 и 15, более предпочтительно, в пределах между 2 и 7, более предпочтительно, в пределах между 4 и 7, более предпочтительно, между 3 и 6, еще более предпочтительно, в пределах между 4 и 5,5, еще более предпочтительно, в пределах между 4 и 5.
Предпочтительно, настоящая композиция содержит n-3 LC-PUFA. Более предпочтительно, настоящая композиция содержит EPA, DPA и/или DHA, еще более предпочтительно, DHA. Поскольку низкая концентрация DHA, DPA и/или EPA уже является эффективной, а нормальный рост и развитие являются важными, содержание n-3 LC-PUFA в настоящей композиции, предпочтительно, не превышает 15% масс. от общего содержания жирных кислот, предпочтительно, не превышает 10% масс., еще более предпочтительно, не превышает 5% масс. Предпочтительно, настоящая композиция содержит, по меньшей мере, 0,2% масс., предпочтительно, по меньшей мере, 0,5% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, 0,75% масс, n-3 LC-PUFA от общего содержания жирных кислот. В молочные смеси для детского питания предпочтительно добавляют n-3 LC-PUFA, поскольку биологическое преобразование ALA в n-3 LC-PUFA у младенцев является менее эффективным.
Поскольку группа n-6 жирных кислот, в особенности арахидоновая кислота (AA) и LA, в качестве ее предшественника, находятся в равновесии с группой n-3 жирных кислот, в особенности, DHA и EPA и ALA, в качестве их предшественников, настоящая композиция содержит относительно низкие количества AA. Содержание n-6 LC-PUFA предпочтительно не превышает 5% масс., более предпочтительно, не превышает 2,0% масс., более предпочтительно, не превышает 0,75% масс., еще более предпочтительно, не превышает 0,5% масс., по отношению к жирным кислотам в целом. Поскольку AA является важной для младенцев, для оптимального функционирования мембран, в особенности, мембран неврологических тканей, количество n-6 LC-PUFA предпочтительно составляет, по меньшей мере, 0,02% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, 0,05% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, 0,1% масс. по отношению к жирным кислотам в целом, более предпочтительно, по меньшей мере, 0,2% масс. Присутствие AA является преимущественным в композиции с низким содержанием LA, поскольку она компенсирует дефицит LA. Присутствие низких количеств AA, предпочтительно, является полезным в питании, которое должно вводиться младенцам возрастом менее 6 месяцев, поскольку для таких младенцев молочные смеси для детского питания, как правило, являются единственным источником питания.
Предпочтительно, в дополнение к растительным липидам, присутствует липид, выбранный из рыбьего жира (предпочтительно, рыбьего жира тунца) и масла одноклеточных (такое как масло из водорослей, микробов и грибков). Эти источники масла являются пригодными в качестве источников LC-PUFA. Предпочтительно, в качестве источника n-3 LC-PUFA используют масло одноклеточных, включая масло из водорослей и микробное масло, поскольку эти источники масла имеют низкое отношение EPA/DHA. Более предпочтительно, в качестве источника n-3 LC-PUFA используют рыбий жир (еще более предпочтительно, рыбий жир тунца), поскольку они имеют более высокую концентрацию EPA, что является преимущественным, поскольку EPA является предшественником эйкозаноидов. Таким образом, в одном из своих вариантов осуществления, настоящая композиция дополнительно содержит, по меньшей мере, один липид, выбранный из группы, состоящей из рыбьего жира, жира морских млекопитающих, масла водорослей, масла грибков и микробного масла.
Способ получения липидных глобул, покрытых фосфолипидами
Настоящее изобретение использует липидные глобулы. Размером липидных глобул можно манипулировать посредством регулировки стадий способа, с помощью которого получают настоящую композицию. Удобный и предпочтительный путь для получения липидных глобул, покрытых фосфолипидами, заключается в увеличении количества фосфолипидов по сравнению с количествами, как правило, присутствующими в молочной смеси для детского питания, и в обеспечении присутствия этих фосфолипидов в течение способа гомогенизации, когда гомогенизируют смесь водной фазы и масляной фазы. Типичные количества фосфолипидов/полярных липидов в молочной смеси для детского питания составляют примерно 0,15% масс./0,2% масс. по отношению к жирам в целом. Количество фосфолипидов увеличивают, по меньшей мере, до 0,5% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, до 1,0% масс. по отношению к жирам в целом или количество фосфолипидов увеличивают, по меньшей мере, до 0,6% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, до 1,0% масс. по отношению к жирам в целом. В стандартной молочной смеси для детского питания фракция липидов (обычно содержащая растительный жир, малое количество фосфолипидов и жирорастворимых витаминов) подмешивают в водную фракцию (обычно содержащую воду, снятое молоко, сыворотку, перевариваемые углеводы, такие как лактоза, водорастворимые витамины и минералы и необязательные неперевариваемые углеводы) посредством гомогенизации. Если гомогенизация не имеет места, липидная часть должна отстаиваться очень быстро, то есть, отделяться от водной части и собираться поверх нее. Гомогенизация представляет собой процесс разрушения жировой фазы на частицы меньших размеров так, что она больше не отделяется быстро от водной фазы, но поддерживается в стабильной эмульсии. Это осуществляют посредством принудительного прохождения молока при высоком давлении через малые отверстия.
Способ включает следующие стадии:
1. Смешивание ингредиентов
Ингредиенты композиции смешивают, например, предпочтительно, перемешивают. В основном, липидную фазу, содержащую растительные липиды, и водную фазу добавляют друг к другу. Ингредиенты дополнительно содержат полярные липиды, более предпочтительно, фосфолипиды. Ингредиенты водной фазы могут содержать воду, снятое молоко (порошок), сыворотку (порошок), обезжиренное молоко, лактозу, водорастворимые витамины и минералы. Предпочтительно, водная фаза содержит неперевариваемые олигосахариды. Предпочтительно, водную фазу доводят до pH в пределах между 6,0 и 8,0, более предпочтительно, до pH от 6,5 до 7,5. Предпочтительно, полярные липиды, в частности, фосфолипиды, получают из молока. Преимущественно, присутствие полярных липидов в водной смеси до гомогенизации приводит к эффективному нанесению на липидные глобулы, состоящие в основном из триглицеридов, покрытия из фосфолипидов.
Предпочтительно, липидная фаза содержит 50-100% масс. растительных липидов по отношению к общей массе липидной фазы. Вместо водной фазы, фосфолипиды, более предпочтительно, фосфолипиды, могут также присутствовать в липидной фазе или в обеих фазах. Альтернативно, фосфолипиды могут добавляться отдельно к водной и липидной фазам. Массовое отношение фосфолипидов к липидам в целом составляет от 1,0 до 20% масс., более предпочтительно, от 1,0 до 10% масс., еще более предпочтительно, от 3 до 8% масс. Предпочтительно, массовое отношение полярных липидов к липидам в целом составляет от 1,0 до 25% масс., более предпочтительно, от 1,2 до 12% масс.
Водную и липидную фазу предпочтительно нагревают перед добавлением друг к другу, предпочтительно, при температуре от 40°C до 80°C, более предпочтительно, от 55°C до 70°C, еще более предпочтительно, от 55°C до 60°C. Смесь также поддерживают при этой температуре, и смешивают. Удобный способ смешивания заключается в использовании Ultra-Turrax T50 в течение примерно 30-60 сек при 5000-10000 об./мин. Впоследствии к этой смеси могут добавлять деминерализованную воду, для получения желаемого % сухого материала. Желаемый процент сухого материала составляет, например, 15%. Альтернативно, липидную фазу инжектируют в водную фазу непосредственно перед гомогенизацией.
Минералы, витамины и стабилизирующие смолы можно добавлять в различных точках способа в зависимости от их чувствительности к теплу. Смешивание, например, можно осуществлять в высокосдвиговом миксере. В способе по настоящему изобретению, снятое молоко (казеин) предпочтительно не присутствует на этой стадии, и его добавляют в композицию после гомогенизации фракции жиров в водной фракции (содержащей такие соединения как сыворотка, белок сыворотки, лактоза).
2. Пастеризация
Затем смесь предпочтительно пастеризуют. Пастеризация включает стадию быстрого нагревания при контролируемых условиях, которую микроорганизмы пережить не могут. Температура от 60 до 80°C, более предпочтительно, от 65 до 75°C, поддерживаемая в течение, по меньшей мере, 15 сек, обычно адекватно уменьшает количество вегетативно размножающихся клеток микроорганизмов. Известно и коммерчески доступно несколько способов пастеризации. Альтернативно эту стадию также можно осуществлять перед смешиванием, как на стадии 1, и/или ее заменить стадией нагревания до 60°C на стадии 1.
3. Гомогенизация
Впоследствии, необязательно, пастеризованную смесь, содержащую растительные липиды, фосфолипиды и водную фазу, гомогенизируют. Гомогенизация представляет собой способ, который увеличивает однородность и стабильность эмульсии, посредством уменьшения размера липидных глобул в молочной смеси для детского питания. Эту стадию способа можно осуществлять с помощью разнообразного смесительного оборудования, которое прикладывает высокие сдвиговые усилия к продукту. Этот тип смешивания разбивает липидные глобулы на глобулы меньших размеров. Полученную смесь предпочтительно гомогенизируют в две стадии, например, при 250 и 50 бар, соответственно, так что в целом прикладывают давление в 300 бар для получения малых, стабильных липидных глобул.
В случае, когда является предпочтительным, чтобы размер липидных глобул был больше, стадии гомогенизации осуществляют при гораздо более низких давлениях. Например, при 60°C, 5-100, предпочтительно, 30-100 бар и 5-50 бар, соответственно, при общем давлении 35-150 бар. Альтернативно, полученную смесь предпочтительно гомогенизируют в две стадии при более низкой температуре, в пределах между 15 и 40°C, предпочтительно, примерно при 20°C, 5-50 и 5-50 бар, соответственно, при общем давлении 5-100 бар. Это значительно ниже, чем стандартные давления, которые, как правило, составляют 250-50 бар, соответственно, так что общее давление составляет 300 бар. От конкретного используемого гомогенизатора будет зависеть, какое именно давление прикладывать. Удобный путь представляет собой использование давления 100 бар на первой стадии и 50 бар на второй стадии в гомогенизаторе Niro Suavi NS 2006 H при температуре 60°C. Удобный путь представляет собой использование давления 5 бар на первой стадии и 20 бар на второй стадии в гомогенизаторе Niro Suavi NS 2006 H при температуре 20°C.
Впоследствии можно добавлять необязательно другие ингредиенты, не являющиеся липидами.
4. Стерилизация
Впоследствии, эмульсию, полученную на стадии 3, предпочтительно стерилизуют. Предпочтительно, стерилизация имеет место in-line при сверхвысокой температуре (UHT) и/или в соответствующих контейнерах с получением молочной смеси для детского питания в форме стерильной жидкости. Удобный путь для обработки UHT представляет собой обработка при 120-130°C в течение, по меньшей мере, 20 сек. Альтернативно, эту стадию 4 стерилизации осуществляют до стадии 3 гомогенизации.
Предпочтительно, композицию, полученную с помощью описанного выше способа, сушат после этого распылением.
Альтернативно, эмульсию, полученную на стадии 3, концентрируют посредством выпаривания, впоследствии стерилизуют при сверхвысокой температуре, а впоследствии сушат распылением с получением порошка, высушенного распылением, который заполняют в соответствующие контейнеры.
Различия в покрытиях липидных глобул могут дополнительно быть получены из зета потенциала. Зета потенциал (ζ потенциал) измеряет разницу в милливольтах (мВ) для электрокинетического потенциала между плотным неподвижным слоем вокруг поверхности частицы и отдаленной зоной электронейтральности и является мерой величины отталкивания или притяжения между частицами в дисперсии. Его значение также связано со стабильностью коллоидных дисперсий. Высокий абсолютный зета потенциал будет придавать стабильность, то есть раствор или дисперсия будут иметь стойкость против агрегации.
Размер липидной глобулы
В соответствии с настоящим изобретением, липиды присутствуют в композиции в форме липидных глобул, эмульсифицированных в водной фазе. Липидные глобулы содержат сердцевину и покрытие. Сердцевина содержит растительные жиры, а предпочтительно, она содержит, по меньшей мере, 90% масс. триглицеридов, а более предпочтительно, в основном состоит из триглицеридов. Покрытие содержит фосфолипиды и, необязательно, другие полярные липиды. Не все фосфолипиды и/или полярные липиды, которые присутствуют в композиции, должны обязательно содержаться в покрытии, но предпочтительно, они должны составлять их главную часть. Предпочтительно, более чем 50% масс., более предпочтительно, более чем 70% масс., еще более предпочтительно, более чем 85% масс., наиболее предпочтительно, более чем 95% масс. фосфолипидов и/или полярных липидов, которые присутствуют в композиции, содержатся в покрытии липидных глобул. Не все растительные липиды, которые присутствуют в композиции, должны обязательно содержаться в сердцевине липидных глобул, но предпочтительно, они составляют их главную часть, предпочтительно, более чем 50% масс., более предпочтительно, более чем 70% масс., еще более предпочтительно, более чем 85% масс., еще более предпочтительно, более чем 95% масс., наиболее предпочтительно, более чем 98% масс. растительных липидов, которые присутствуют в композиции, содержатся в сердцевине липидных глобул.
В одном из вариантов осуществления, липидные глобулы по настоящему изобретению предпочтительно имеют
1. усредненный по объему диаметр ниже 1,0 мкм, а предпочтительно, в пределах от 0,2 до 0,7 мкм, более предпочтительно, в пределах от 0,3 до 0,6 мкм, и
2. распределение по размерам, устроенное таким образом, что меньше чем 45% объема, имеют диаметр в пределах между 2 и 12 мкм, предпочтительно, распределение размеров, где более чем 55% объема липидных глобул имеет диаметр меньше чем 2 мкм, более предпочтительно, распределение размеров, устроенное таким образом, что меньше чем 35% объема имеют диаметр в пределах между 2 и 12 мкм, еще более предпочтительно, распределение размеров, где более чем 65% объема липидных глобул имеют диаметр меньше чем 2 мкм.
В одном из вариантов осуществления могут преимущественно быть использованы липидные глобулы, которые больше по размеру. Таким образом, в другом варианте осуществления, липидные глобулы по настоящему изобретению предпочтительно имеют
1. усредненный по объему диаметр выше 1,0 мкм, предпочтительно, выше 3,0 мкм, более предпочтительно, 4,0 мкм или выше, предпочтительно, в пределах между 1,0 и 10 мкм, более предпочтительно, в пределах между 2,0 и 8,0 мкм, еще более предпочтительно, в пределах между 3,0 и 8,0 мкм, наиболее предпочтительно, в пределах между 4,0 мкм и 8,0 мкм и/или
2. распределение по размерам, устроенное таким образом, что, по меньшей мере, 45% объема, предпочтительно, по меньшей мере, 55% объема, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 65% объема, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 75% объема имеют диаметр в пределах между 2 и 12 мкм. Более предпочтительно, по меньшей мере, 45% объема, предпочтительно, по меньшей мере, 55% объема, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 65% объема, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 75% объема имеют диаметр между 2 и 10 мкм. Еще более предпочтительно, по меньшей мере, 45% объема, предпочтительно, по меньшей мере, 55% объема, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 65% объема, еще более предпочтительно, по меньшей мере, 75% объема имеют диаметр в пределах между 4 и 10 мкм.
Процент липидных глобул относится к объему липидов в целом. Диаметр относится к диаметру, который представлен больше всего по отношению к объему липидов в целом, или к пиковому значению при графическом представлении, имеющем ось X как диаметр и ось Y как объем (%).
Объем липидной глобулы и распределение ее размеров могут быть определены соответствующим образом с использованием анализатора размеров частиц, такого как Mastersizer (Malvern Instruments, Malvern, UK), например, с помощью способа, описанного в Michalski et al, 2001, Lait 81 : 787-796.
Компонент перевариваемых углеводов
Настоящее изобретение использует перевариваемые углеводы. Перевариваемые углеводы предпочтительно обеспечивают от 30 до 80% от общей калорийности композиций. Предпочтительно, перевариваемые углеводы обеспечивают от 40 до 60% от общей калорийности. Когда она находится в жидкой форме, например, в виде жидкости,готовой для вскармливания, композиция предпочтительно содержит 3,0-30 г перевариваемых углеводов на 100 мл, более предпочтительно, 6,0-20, еще более предпочтительно, 7,0-10,0 г на 100 мл. По отношению к сухой массе настоящая композиция предпочтительно содержит 20-80% масс., более предпочтительно 40-65% масс. перевариваемых углеводов.
Предпочтительные источники перевариваемых углеводов представляют собой лактозу, глюкозу, сахарозу, фруктозу, галактозу, мальтозу, крахмал и мальтодекстрин. Лактоза представляет собой главный перевариваемый углевод, присутствующий в материнском молоке. Настоящая композиция предпочтительно содержит лактозу. Настоящая композиция предпочтительно содержит перевариваемые углеводы, где, по меньшей мере, 35% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, 50% масс., более предпочтительно, по меньшей мере, 75% масс., еще более предпочтительно, по меньшей мере, 90% масс., наиболее предпочтительно, по меньшей мере, 95% масс. перевариваемого углевода представляют собой лактозу. По отношению к сухой массе, настоящая композиция предпочтительно содержит, по меньшей мере, 25% масс. лактозы, предпочтительно, по меньшей мере, 40% масс.
Неперевариваемыеолигосахариды
Предпочтительно, в соответствии с настоящим изобретением, композиция питательной смеси содержит неперевариваемые олигосахариды со степенью полимеризации (DP) в пределах между 2 и 250, более предпочтительно, между 3 и 60.
Неперевариваемый олигосахарид предпочтительно выбирают из группы, состоящей из фрукто-олигосахаридов (таких как инулин), галакто-олигосахаридов (таких как трансгалакто-олигосахариды или бета-галакто-олигосахариды), глюко-олигосахаридов (таких как гентио-, нигеро- и циклодекстрин-олигосахариды), арабино-олигосахаридов, маннан-олигосахаридов, ксило-олигосахаридов, фуко-олигосахаридов, арабиногалакто-олигосахаридов, глюкоманно-олигосахаридов, галактоманно-олигосахаридов, олигосахаридов, содержащих сиаловую кислоту и олигосахаридов уроновой кислоты. Предпочтительно, композиция содержит смолу акации в сочетании с неперевариваемым олигосахаридом.
n
Предпочтительно, настоящая композиция содержит фрукто-олигосахариды, галакто-олигосахариды и/или олигосахариды галактуроновой кислоты, более предпочтительно, галакто-олигосахариды, наиболее предпочтительно, трансгалакто-олигосахариды. В предпочтительном варианте осуществления, композиция содержит смесь трансгалакто-олигосахаридов и фрукто-олигосахаридов. Предпочтительно, настоящая композиция содержит галакто-олигосахариды с DP 2-10 и/или фрукто-олигосахариды с DP 2-60. Галакто-олигосахарид предпочтительно выбирают из группы, состоящей из трансгалакто-олигосахаридов, лакто-N-тетраозы (LNT), лакто-N-неотетраозы (neo-LNT), фукозил-лактозы, фукозилированной LNT и фукозилированной нео-LNT. В особенно предпочтительном варианте осуществления, настоящий способ включает введение трансгалакто-олигосахаридов ([галактоза]-глюкозы; где n представляет собой целое число в пределах между 1 и 60, то есть оно равно 2, 3, 4, 5, 6, …, 59, 60; предпочтительно, n выбирают из 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10). Трансгалакто-олигосахариды (TOS) продают, например, под торговым наименованием Vivinal™ (Borculo Domo Ingredients, Netherlands). Предпочтительно, сахариды трансгалакто-олигосахаридов являются β-связанными.
Фрукто-олигосахарид представляет собой неперевариваемый олигосахарид, содержащий цепь из β-связанных единиц фруктозы с DP или средним DP от 2 до 250, более предпочтительно, от 10 до 100. Фрукто-олигосахарид включает инулин, леван и/или смешанный тип полифруктана. Особенно предпочтительный фрукто-олигосахарид представляет собой инулин. Фрукто-олигосахарид, пригодный для использования в композициях, также уже является коммерчески доступным, например, RaftilineHP (Orafti).
Олигосахариды уроновой кислоты предпочтительно получают при деградации пектина. Олигосахариды уроновой кислоты предпочтительно являются олигосахаридами галактуроновой кислоты. Следовательно, настоящая композиция предпочтительно содержит продукт деградации пектина с DP в пределах между 2 и 100. Предпочтительно, продукт деградации пектина приготавливают из яблочного пектина, свекольного пектина и/или пектина цитрусовых. Предпочтительно, композиция содержит трансгалакто-олигосахарид, фрукто-олигосахарид и продукт деградации пектина. Массовое отношение трансгалакто-олигосахарид:фрукто-олигосахарид:продукт деградации пектина составляет предпочтительно (20-2):1:(1-3), более предпочтительно, (12-7):1:(1-2).
Предпочтительно, композиция содержит от 80 мг до 2 г неперевариваемых олигосахаридов на 100 мл, более предпочтительно, 150 мг - 1,50 г, еще более предпочтительно, 300 мг - 1 г на 100 мл. По отношению к сухой массе, композиция предпочтительно содержит 0,25% масс. - 20% масс., более предпочтительно, 0,5% масс. - 10% масс., еще более предпочтительно, 1,5% масс. - 7,5% масс.). Более низкое количество неперевариваемых олигосахаридов будет менее эффективным при воздействии на BMC и/или BMD, в то время как слишком высокое количество будет приводить к побочным воздействиям вздутия живота и дискомфорта в желудке.
Белковый компонент
Настоящее изобретение использует белки. Белковый компонент предпочтительно обеспечивает 5-15% от общей калорийности. Предпочтительно, настоящая композиция содержит белковый компонент, который обеспечивает 6-12% от общей калорийности. Более предпочтительно, белок присутствует в композиции при менее чем 9% по отношению к калорийности, более предпочтительно, композиция содержит в пределах между 7,2 и 8,0% белка по отношению к общей калорийности, еще более предпочтительно, в пределах между 7,3 и 7,7% по отношению к общей калорийности. Низкая концентрация белка преимущественно обеспечивает более низкую инсулиновую реакцию, предотвращая тем самым пролиферацию адипоцитов у младенцев. Материнское молоко содержит более низкое количество белка по отношению к общей калорийности, чем коровье молоко. Концентрацию белка в композиции питательной смеси определяют по сумме белков, пептидов и свободных аминокислот. По отношению к сухой массе, композиция предпочтительно содержит меньше чем 12% масс. белков, более предпочтительно, в пределах между 9,6-12% масс., еще более предпочтительно, от 10 до 11% масс. По отношению к готовому для питья жидкому продукту, композиция предпочтительно содержит меньше чем 1,5 г белков на 100 мл, более предпочтительно, в пределах между 1,2 и 1,5 г, еще более предпочтительно, в пределах между 1,25 и 1,35 г.
Источник белка должен выбираться таким образом, чтобы удовлетворялись минимальные потребности в содержании основных аминокислот, и обеспечивался удовлетворительный рост. Следовательно, предпочтительными являются источники белков на основе белков коровьего молока, таких как белок сыворотки, казеин и их смеси, и белки на основе сои, картофеля или гороха. В случае, когда используют белки сыворотки, источник белков предпочтительно основывается на кислой сыворотке или сладкой сыворотке, на изоляте белков сыворотки или на их смесях, и они могут включать α-лактальбумин и β-лактоглобулин. Более предпочтительно, источник белка основывается на кислой сыворотке или сладкой сыворотке, из которой удаляют казеин-глико-макропептид (CGMP). Удаление CGMP из белка сладкой сыворотки преимущественно уменьшает содержание треонина, белка сладкой сыворотки. Пониженное содержание треонина также преимущественно достигают посредством использования кислой сыворотки. Необязательно, источник белка может дополняться свободными аминокислотами, такими как метионин, гистидин, тирозин, аргинин и/или триптофан, для улучшения профиля аминокислот. Предпочтительно, используют белки сыворотки, обогащенные α-лактальбумином, для оптимизации профиля аминокислот. Использование источников белков с оптимизированным профилем аминокислот, близким к профилю материнского молока, позволяет обеспечить все основные аминокислоты при пониженной концентрации белка, ниже 9% по отношению к калорийности, предпочтительно, в пределах между 7,2 и 8,0% по отношению к калорийности, и при этом обеспечить удовлетворительный рост. Если в качестве источника белков используют сладкую сыворотку, из которой удаляют CGMP, ее предпочтительно дополняют свободным аргинином в количестве от 0,1 до 3% масс. и/или свободным гистидином в количестве от 0,1 до 1,5% масс. по отношению к белку в целом.
Казеин присутствует преимущественно. Предпочтительно, композиция содержит, по меньшей мере, 3% масс. казеина по отношению к сухой массе. Предпочтительно, казеин является интактным и/или негидролизованным.
Композиция питательной смеси
Настоящая композиция предпочтительно является особенно пригодной для обеспечения ежедневной потребности в питании у человека в возрасте меньше 36 месяцев, в частности, у младенца в возрасте меньше 24 месяцев, еще более предпочтительно, у младенца в возрасте меньше 18 месяцев, наиболее предпочтительно, в возрасте меньше 12 месяцев. Следовательно, композиция питательной смеси предназначена для вскармливания или используется для вскармливания субъекта человека, в частности, младенца. Настоящая композиция содержит липиды и белки, и компонент перевариваемых углеводов, где компонент липидов предпочтительно обеспечивает 30-60% от общей калорийности, компонент белков предпочтительно обеспечивает 5-20%, более предпочтительно, 5-15% масс. от общей калорийности, и компонент перевариваемых углеводов предпочтительно обеспечивает 25-75% от общей калорийности. Предпочтительно, настоящая композиция содержит компонент липидов, обеспечивающий 35-50% от общей калорийности, компонент белков обеспечивает 6-12% от общей калорийности, и компонент перевариваемых углеводов обеспечивает 40-60% от общей калорийности. Величину общей калорийности определяют по сумме калорий, полученных от белков, липидов и перевариваемых углеводов.
Настоящая композиция не представляет собой материнское молоко. Настоящая композиция содержит растительные липиды. Композиции по настоящему изобретению предпочтительно содержат другие фракции, такие как витамины, минералы, в соответствии с международными директивами для молочных смесей для детского питания.
Для удовлетворения потребности младенцев в калорийности, композиция предпочтительно содержит 50-200 ккал/100 мл жидкости, более предпочтительно, 60-90 ккал/100 мл жидкости, еще более предпочтительно, 60-75 ккал/100 мл жидкости. Эта удельная калорийность обеспечивает оптимальное отношение между потреблением воды и калорий. Осмолярность настоящей композиции предпочтительно находится в пределах между 150 и 420 мОсмоль/л, более предпочтительно, составляет от 260 до 320 мОсмоль/л.
-1
Предпочтительно, композиция находится в жидкой форме, с вязкостью ниже 35 мПа.сек, более предпочтительно, ниже 6 мПа.сек, как измерено в помощью вискозиметра Brookfield при 20°C, при скорости сдвига 100 сек. Предпочтительный объем, вводимый ежедневно, находится в пределах от примерно 80 до 2500 мл, предпочтительно, примерно от 150 до 2500 мл, предпочтительно, примерно от 200 до 2000 мл, предпочтительно, примерно от 300 до 2000 мл, предпочтительно, примерно от 450 до 1000 мл, предпочтительно, примерно от 500 примерно до 1000 мл в день.
Младенец
Настоящий способ преимущественно применяют к детям в возрасте 0-36 месяцев, более предпочтительно, к детям в возрасте 0-18 месяцев, более предпочтительно, к детям в возрасте 0-12 месяцев, еще более предпочтительно, к детям в возрасте 0-6 месяцев. Чем младше младенец, тем больше воздействие "программирования".
Предпочтительно, способ должен использоваться для младенцев, которые имеют несбалансированную переработку жиров, таких как младенцы, которые родились преждевременно или, которые являются недоношенными, но также и для младенцев, которых переносили, поскольку эти младенцы имеют повышенный риск развития тучности и/или накопления слишком большой массы жира в последующей жизни. Предпочтительно, способ должен использоваться для младенцев, которые родились от матерей, которые страдали от тучности и/или диабета. Такие младенцы имеют повышенный риск развития тучности и/или накопления слишком большой массы жира в последующей жизни.
В настоящем документе и в его формуле изобретения, глаголы "содержать" и "включать" используют в их неограничивающем смысле, чтобы обозначить, что объекты, следующие после этого слова, включаются, но объекты, не рассмотренные конкретно, не исключаются. В дополнение к этому, упоминание элемента в единственном числе не исключает возможности того, что присутствуют несколько элементов, если только контекст ясно не требует, что должен существовать один и только один элемент. Таким образом, упоминание единственного числа обычно означает "по меньшей мере, один".
Примеры
Пример 1:
Приготовление экспериментальной молочной смеси для детского питания
Водную фазу приготавливают посредством растворения деминерализованного порошка сыворотки, лактозы, концентрата белков сыворотки, порошкового снятого молока, галакто-олигосахаридов, минералов и витаминного премикса в деминерализованной воде до содержания сухой массы 22,5 г/100 г и нагревания водной фазы при 65°C. Для молочной смеси для детского питания (IMF) 3 также добавляют к водной фазе жирное порошковое молоко, обогащенное фосфолипидами, полученными из молока SM2 (Corman, Belgium).
Масляную смесь приготавливают с использованием более 98% масс растительных масел, жирорастворимых витаминов и антиоксидантов. Как водную фазу, так и масляную смесь нагревают до 65°C перед смешиванием. Масляную смесь добавляют в водную фазу, и перемешивают ее с помощью Ultra-Turrax T50, в течение примерно 30-60 сек, при 5000-1000 об/мин. Сухая масса этой смеси составляет примерно 26%. Продукт обрабатывают UHT в течение 30 сек, при 125°C, а впоследствии охлаждают до 20°C.
Для IMF 1 осуществляют 2-стадийную гомогенизацию при давлении 200 и 50 бар, соответственно, в гомогенизаторе Niro Suavi NS 2006 H. Для IMF 2 и 3 давление гомогенизации составляет 50 и 0 бар, соответственно. Все продукты высушивают до получения порошка с помощью сушки распылением. Длинноцепный инулин подмешивают в сухом виде в порошок для всех продуктов. Для IMF 2 SM2 подмешивают в сухом виде в порошок до такой же конечной концентрации как в IMF 3.
В IMF 1 добавленные фосфолипиды не присутствуют. Количество растительных (полученных из сои) глицерофосфолипидов для IMF 1 составляет 0,12% масс. по отношению к жирам в целом, IMF 2 и 3 содержат 5,7% масс. фосфолипидов по отношению к жирам в целом, из которых примерно 98%, получают из порошкового жирного молока, а примерно 2% уже присутствуют в стандартной IMF, полученной из растительных масел. Порошок SM2 содержит примерно 76% глицерофосфолипидов по отношению к фосфолипидам в целом и дополнительно содержит примерно 24% масс. сфингомиелина по отношению к фосфолипидам в целом.
В IMF 2 порошок SM2, содержащий фосфолипиды, подмешивают в сухом виде после стадии гомогенизации, стерилизации и сушки распылением для предотвращения покрывания липидных глобул фосфолипидами. В IMF 1 и IMF 2 липидные глобулы покрываются в основном белками (в частности казеином). Для IMF 3 порошок SM2 присутствует в водной фазе в течение стадии гомогенизации, в результате чего получают покрытие липидных глобул из фосфолипидов.
Размер липидных глобул измеряют с помощью Mastersizer 20000 (Malvern Instruments, Malvern UK), и он показан в Таблице 3.
Полученные IMF являются очень похожими по композиции макропитательных веществ (смотри Таблицу 1) и по профилю жирных кислот (смотри Таблицу 2), но различаются по архитектуре липидных глобул, то есть по размеру и покрытию (смотри Таблицу 3).
<b>Таблица 1</b>Композиция IMF на 100 г порошка
IMF 1, контрольная IMF
IMF 2 и 3
кДж
2008
2023
Липиды (г)Фосфолипиды (% масс. липидов)
25,1
25,3
0,12
5,7
Перевариваемые углеводы (г)
53,4
53,8
Волокна (г)
5,7
5,7
Белки (г)
10,3
10,3
<b>Таблица 2</b>Композиция жирных кислот экспериментальной IMF, проценты по отношению к жирным кислотам в целом
IMF 1, контрольная IMF
IMF 2 и 3
C12:0
10,9
10,3
C14:0
4,9
5,0
C16:0
18,2
18,7
C18:0
3,3
3,9
C18:1 n-9
39,5
39,0
C18:2 n-6 (LA)
15,2
14,7
C18:3 n-3 (ALA)
2,8
2,7
Другие
5,2
5,7
n-6
15,2
14,8
n-3
2,84
2,7
n-6/n-3
5,4
5,5
LA/ALA
5,
5,5
SFA
41,6
42,5
MFA
40,4
40,0
PUFA
18,0
17,5
<b>Таблица 3</b>Характеристики липидных глобул различных молочных смесей (разбавленные, из порошка)
IMF
Покрытие из фосфолипидов
Усредненный по объему диаметр, мкм
% Объемный глобул с диаметром в пределах между 2 и 12 мкм
1. Стандартная IMF
-
0,96
2,5
2. Экспериментальная IMF (свободные фосфолипиды)
-
0,83
2,2
3. Экспериментальная IMF по настоящему изобретению (липидные глобулы, покрытые фосфолипидами)
+
1,55
21,2
Пример 2:
Воздействие программирования от покрытия липидных глобул на постпрандиальные уровни липидов в плазме и на композицию жирных кислот в мембранах эритроцитов
Потомство выводков C57/BL6 сортируют по 4 детеныша мужского пола и 2 детеныша женского пола. В день 15 одну группу из 42 детенышей отделяют от маток, и держат голодными в течение 2 часов. Одну группу фоновых детенышей (n=7) умерщвляют, и получают образцы крови и печени: группа t=0. После 2 часов голодания, при t=0 детеныши мужского пола (n=35) получают через зонд теплое соевое масло (0,25 мл/детеныш). Детенышей умерщвляют через t=1, 2, 3, 5 и 8 час после кормления через зонд (n=7 в каждый момент времени). Для каждого детеныша получают массу тела и образец крови, образцы печени и свежие (влажные) фекальные выделения.
Оставшихся детенышей распределяют по 3 различным экспериментальным диетам до дня 28. Детенышей оставляют в выводках с их матками до дня 21, когда матку удаляют.
Экспериментальные диеты, которые используют для отнятия от груди, представляют собой:
1) контрольную диету на основе IMF. Эта диета содержит 282 г стандартной IMF на кг, IMF 1 из примера 1, то есть малые липидные глобулы без покрытия из фосфолипидов. Диету дополняют до AIN-93G посредством добавления белков, углеводов, волокон и витаминов/минералов. Все липиды, присутствующие в диетах (7% масс.), получают из порошка IMF.
2) контрольную диету с полярными липидами на основе IMF. Эта диета отличается от диеты 1 тем, что она содержит 282 г IMF 2 из примера 1, то есть содержит фосфолипиды, дополнительно добавленные к сухой смеси, и малые липидные глобулы без покрытия из фосфолипидов. Все липиды, присутствующие в диете (7% масс.), получают из порошка IM.
3) диету на основе IMF по настоящему изобретению. Эта диета отличается от диеты 1 и 2 тем, что она содержит 282 г IMF 3 из примера 1, то есть с липидными глобулами, покрытыми фосфолипидами. Все липиды, присутствующие в диете (7% масс.), получают из порошка IMF.
В день 28 всех детенышей держат голодными в течение 2 часов. Одну группу фоновых детенышей (n=7) умерщвляют, и получают образцы крови и печени: группа t=0.
При t=0 другие детеныши (n=35) получают через зонд теплое соевое масло (0,25 мл/детеныш): жировой стимул. Детенышей умерщвляют через t=1, 2, 3, 5 и 8 час после кормления через зонд (n=7 в каждый момент времени). Для каждого детеныша получают массу тела и образец крови, образцы печени и свежие (влажные) фекальные выделения.
Из образцов крови, полученных в день 15 и 28, колориметрически определяют уровни триглицеридов (набор Sigma). Из мембран эритроцитов определяют композицию жирных кислот.
Результаты:
Хороший рост мышей наблюдают для всех 3 диет.
Уровни триглицеридов в плазме описаны в таблице 4. Из уровней при t=0, в день 28, можно сделать вывод, что уровни триглицеридов в плазме, отобранной натощак, выгодно отличаются в меньшую сторону у детенышей, экспонируемых для экспериментальной диеты с IMF 3 в предыдущие 2 недели. Также, более низкие уровни триглицеридов в плазме, к которым возвращаются значения через 8 часов после жировой стимуляции, являются показателями более низких фоновых уровней триглицеридов в плазме при диете 3. Эти значения сравнимы со значениями, наблюдаемыми у детенышей, вскармливаемых жирами материнского молока (день 15, t=0) и t=8.
Что интересно, постпрандиальное изменение триглицеридов в плазме со временем после потребления стандартной жировой нагрузки (жирового стимула) отличается у мышей, экспонируемых для диеты с IMF 3, по сравнению с мышами, экспонируемыми для диет с IMF 1 и IMF 2. Это разница может быть объяснена в основном различиями в положении фосфолипидов (то есть, в виде покрытия вокруг липидной глобулы), но не композицией жирных кислот или композицией или присутствием фосфолипидов, как таковых. Постпрандиальные уровни триглицеридов в плазме у мышей, экспонируемых для диеты с IMF 3, ниже по максимальной концентрации, максимальная концентрация достигается в более позднее время, и уровни триглицеридов в плазме являются повышенными в течение более продолжительного времени. Относительная реакция, считая значение при t=0 за 0%, однако выше для IMF 3, что является показателем различий в используемых триглицеридах, поскольку суммарный профиль в плазме представляет собой сумму появления и исчезновения. Эти данные являются показателями для уровней, не имеющих пика, но для более медленного поступления жиров в организм: это является выгодным, поскольку нет необходимости в накоплении избыточных триглицеридов в плазме, в адипозной ткани, но триглицериды могут использоваться немедленно для получения тепла и энергии (β-окисление). Предположительно, распределенный по времени и более стабильный уровень триглицеридов в плазме мышей, экспонируемых для IMF 3, будет переноситься в различные сигналы в организме, например, относительно энергетического статуса и адипозного метаболизма.
<b>Таблица 4</b>Постпрандиальный уровень триглицеридов (n=4-7): среднее значение (среднеквадратичное отклонение). n.d.=не определено
Время (час)
День 15
Диета с IMF 1, День 28
Диета с IMF 2, День 28
Диета с IMF 3, День 28
0
0,36 (0,08)
0,61 (0,06)
0,54 (0,12)
0,35 (0,06)
1
0,18(0,04)
1,07 (0,20)
1,09 (0,13)
0,82 (0,18)
2
0,42 (0,14)
0,84 (0,09)
0,54 (0,09)
0,97 (0,15)
3
0,24 (0,06)
0,44 (0,12)
0,58 (0,08)
0,95 (0,21)
5
n.d.
0,29 (0,08)
0,40 (0,11)
0,69 (0,16)
8
0,20 (0,04)
0,30 (0,06)
0,36 (0,13)
0,13(0,01)
Реакция после экспонирования для диеты с IMF 3 также является показателем более высокой биологической доступности жирных кислот в течение более продолжительного периода времени, например, для включения в мембраны. Интересно, что через 2 недели экспонирования для диеты, содержащей IMF 1, 2 или 3, отличаются также и композиции жирных кислот эритроцитов, смотри таблицу 5. Для диеты с IMF 3, количество n3 жирных кислот увеличивается, а количество n6 жирных кислот уменьшается, в результате чего уменьшается отношение n6/n3. Потребление диеты с IMF 2 дает опосредованное воздействие. Также увеличивается количество n3 длинноцепного FA для диеты с IMF 3 и 2 по сравнению с IMF 1.
Уменьшение отношения n6/n3 жирных кислот и увеличение количества n3 жирных кислоты, в особенности, длинноцепных n3 жирных кислот, является выгодным, поскольку показано положительное воздействие n3 PUFA и отношение n6/n3 на кровяное давление, воспалительную реакцию тучных клеток, инсулинорезистивность, риск инсульта и воспалительный статус.
Изменения профиля FA в мембранах эритроцитов являются показателями измененной, улучшенной биологической доступности n3 жирных кислот, зависимой от архитектуры липидов для липидов в диете (покрытых фосфолипидами), независимо от композиции жирных кислот липидов в диете и независимо от присутствия фосфолипидов как таковых. Эти различия, как считается, являются результатом различий в постпрандиальной реакции на жиры в диете (в частности, на более широко распределенный по времени и стабильный уровень триглицеридов в плазме), связанных с различиями в архитектуре липидных глобул.
<b>Таблица 5</b>Профиль жирных кислот мембран эритроцитов у детенышей мышей через две недели экспонирования для диет, отличающихся по архитектуре липидов; (n=4-7) среднее значение (среднеквадратичное отклонение)
Тип FA
День 28
Диета с IMF 1
Диета с IMF 2
Диета с IMF 3
n6
28,00 (0,35)<sup>a</sup>
26,36 (0,13)<sup>b</sup>
25,45 (0,20)<sup>c</sup>
n3
6,98 (0,17)<sup>a</sup>
7,45 (0,08)<sup>b</sup>
7,63 (0,09)<sup>b</sup>
n6/n3
4,02 (0,08)<sup>a</sup>
3,54 (0,04)<sup>b</sup>
3,34 (0,01)<sup>c</sup>
n6 LC
17,75 (0,42)
16,95 (0,54)
17,64 (0,23)
n3LC
6,69 (0,17)<sup>a</sup>
7,10 (0,09)<sup>b</sup>
7,33 (0,09)<sup>b</sup>
n6/n3 LC
2,65 (0,03)<sup>a</sup>
2,38 (0,06)<sup>b</sup>
2,41 (0,01)<sup>b</sup>
SFA
42,04 (0,54)
41,54 (0,69)
43,06 (0,23)
MUFA
19,56 (0,29)
21,45(0,93)
20,07(0,17)
PUFA
35,17 (0,48)<sup>a</sup>
33,98 (0,15)<sup>b</sup>
33,25 (0,29)<sup>b</sup>
a,b,c: Различные верхние индексы обозначают статистически значимые различные значения.
Пример 3:
Воздействие размера липидных глобул, покрытых фосфолипидами, на композицию жирных кислот мембран эритроцитов
Потомство выводков C57/BL6 сортируют по 4 детеныша мужского пола и 2 детеныша женского пола. В день 15 детенышей распределяют по 3 различным экспериментальным диетам до дня 42. Детеныши остаются в выводках с их матками до дня 21, когда матку удаляют.
Экспериментальные диеты, которые используют для отнятия от груди, представляют собой:
1) диету на основе IMF по настоящему изобретению. Липидные глобулы имеют покрытие, и имеют диаметр моды 0,28 мкм (усредненный по объему). (2% в пределах 2-12 мкм)
2) диету на основе IMF по настоящему изобретению. Липидные глобулы имеют покрытие, и имеют диаметр моды 6,77 мкм (усредненный по объему). (60% в пределах 2-12 мкм)
Различие в размерах липидных глобул получают с помощью различных давлений гомогенизации, как описано в примере 1. Источник фосфолипидов представляет собой порошок SM2 от Corman, который используют при конечной концентрации примерно 1,4% по отношению к липидам в целом. В остальном, все диеты являются сходными, как в примере 1 и 2.
В день 42 от каждого детеныша получают образец крови. Из образцов крови, полученных в день 42 из мембран эритроцитов, определяют композицию жирных кислот.
Результаты:
В день 42 композиция жирных кислот эритроцитов отличается, смотри таблицу 6. Это является показателем более высокой биологической доступности жирных кислот в течение более продолжительного периода времени, например, для включения в мембраны. Для диеты 2, количество n3 жирных кислот дополнительно увеличивается, количество n6 жирных кислот дополнительно уменьшается, что приводит к дополнительному уменьшению отношения n6/n3 по сравнению с диетой 1. Сходные воздействия наблюдают для длинноцепных n3 и n6 жирных кислот. Это является показателем дополнительного улучшенного воздействия больших липидных глобул с покрытием по сравнению с меньшими липидными глобулами с покрытием.