Влияние лантана ацетата на коагуляционное звено и фибринолиз при остром ДВС-синдроме

Необходимо подчеркнуть, что применение методов биотестирования в токсикологии не может полностью заменить традиционные методы определения параметров токсичности химических веществ с использованием теплокровных животных, а также аналитический физико-химический контроль, установленный действующими нормативными документами [4]. Методы биотестирования являются одними из методов определения токсичности. Использование биологических тест-объектов может существенно дополнить результаты оценки комплексного воздействия содержащихся в исследуемом объекте токсикантов, повысить оперативность обнаружения опасных уровней загрязнения объектов окружающей среды. Для получения более точных результатов возможно комплексное использование

различных биотестов, взаимно дополняющих друг друга по чувствительности к различным группам токсикантов.

Таким образом, по чувствительности к действию метанола, этанола, бутанола и изопропанола исследованные нами тест-объекты могут быть расположены в следующей последовательности: люминесцентные бактерии инфузории > Те1таЫтепа ругИогтв > сперматозоиды крупного рогатого скота.

Установлено, что токсичность спиртов зависит от химической структуры: с увеличением длины и развет-вленности углеводородной цепи и увеличением молекулярной массы токсичность спиртов возрастает по отношению к люминесцентным бактериям и тетрахиме-нам, но снижается по отношению к сперматозоидам.

COMPARATIVE ASSESSMENT OF TOXIC EFFECT OF SPIRITS FOR BIOLOGICAL TEST - OBJECTS

V.V. Shilov, A.S. Bogachyova, E.V. Polozova

The comparative assessment of sensitivity to biological test - objects is investigated: luminescent bacteria, infusorians and spermatozoon of large horned livestock to action of spirits (buthanol, ethanol, methanol and izopropanol). It is established, that spirits possess toxic effect to researched biological objects. The greatest sensitivity was shown with luminescent bacteria, on the second place took infusorians, and the least sensitivity has been revealed in spermatozoon.

ЛИТЕРАТУРА

1. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. — Л.: Мелгиз, 1963. — 220 с.

2. Двоскин Я.Г., Меньшикова Т.А., Федосеева Т.А. и др. Оценка токсичности товаров бытовой химии. Экспресс-метол оценки токсичности моющих срелств с использованием в качестве тест-объекта спермы крупного рогатого скота // Гигиена, токсикология, санитария. Метолические рекомендации. — М. Минзлрав России, 2002. — 21 с.

3. Ирлина И.С., Меркулова Н.А. Определение токсичности с использованием в качестве тест-объекта Tetrahymena pyriformis // Цитология. — 1975. — Т. 17, № 10. — С. 1208-1215.

4. Красовский Г.Н., Егорова Н.А. Проблема биотестирования в токсиколого-гигиенических исследованиях // Токсикологический вестник. — 2005. — № 3. — С.29-34.

5. Серегина О.Б., Леонидов Н.Б. Простейшие как альтернативный биологический тест-объект в фармации // Фармация. — 2003. — № 4. — С.34-35.

6. Суслов А.Н., Данилов В.С. Определение токсичности воды и водных экстрактов из объектов окружающей среды по интенсивности биолюминесценции бактерий. — М., 1996.

7. Leblond J.D., Applegate В.М., Menn F.-M., et al. Structure-toxicity assessment of metabolites of the aerobic bacterial transformation of substituted naphthalene's // Environmental Toxicology and Chemistry. — 2000. — № 19. — P. 12351246.

© ДОРЖИЕВ Ж.П., УБАШЕЕВ И.О., КОЖЕВНИКОВА Н.М., БУРАЕВА Л.Б., ШОЙНХОРОВАМ.В. -2007

ВЛИЯНИЕ ЛАНТАНА АЦЕТАТА НА КОАГУЛЯЦИОННОЕ ЗВЕНО И ФИБРИНОЛИЗ ПРИ ОСТРОМ ДВС-СИНДРОМЕ

Ж.П. Доржиев, И.О. Убашеев, Н.М. Кожевникова, Л.Б. Бураева, М.В. Шойнхорова

Резюме. Лантана ацетат (ЛА) влияет на свертывающую систему крови, стадию гиперкоагуляции при экспериментальной модели ДВС-синдрома. Повышает активность образования тромбопластина и тромбина, снижает степень гиперкоагуляции и повышает степень фибринолиза. ЛА препятствует развитию ДВС-синдрома — снижается степень тромбоцитопении и дефицита плазменных факторов, восстанавливается сопряженность свертывающей и фиб-ринолитических систем.

Ключевые слова: ДВС-синдром, лантана ацетат, фибринолиз

Проблемы расстройств гемостаза имеют общемедицинское значение. Эти процессы значительно ухудшают течение чрезвычайно большого числа болезней — инфекционно-септических [14], иммунных [5,21], сердечно-сосудистых, неопластических [1,9], значительной части акушерской патологии [11,25], болезней новорожденных и т.д. Они сопутствуют травмам [10], осложняют хирургические вмешательства [16,27,29,31], лекарственную [18,24] и трансфузионную терапию [13,28,30], лимитируют использование инвазивных методов и применение аппаратов экстракорпорального

кровообращения и гемодиализа [10], осложняют хирургические вмешательства [13,27,29,31], лекарственную [18,24] и трансфузионную терапию [13,28,30].

Серьезнейшая проблема, с которой могут столкнуться врачи всех специальностей — синдром диссемини-рованного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС-синдром), являющийся наиболее тяжелой формой декомпенсации системы гемостаза. Это опасное осложнение целого ряда патологических состояний, которое может привести к смерти больного [2,3,6,8,15]. Он неспецифичен и в определенной степени универ-

сален, так как возникает при самых разнообразных патологических процессах. При одних процессах он закономерен, при других развивается часто, но не всегда, при третьих — это редкое осложнение [4,7,23,26].

Несмотря на многочисленные клинико-экспери-ментальные исследования системы гемостаза при различных заболеваниях, проблема далека от решения, а это сдерживает разработку патогенетически обоснованных методов коррекции гемостатических нарушений [12,17]. Поэтому, поиск веществ и создание на их основе новых препаратов для лечения и профилактики ДВС-синдрома остается одной из важных задач клинической и экспериментальной фармакологии.

ДВС — это приобретенное расстройство гемостаза, которое является следствием ряда разных по происхождению болезней и патологических состояний. Тяжесть, распространенность и темп развития ДВС варьируют в очень больших пределах: от молниеносных смертельных форм до латентных и затяжных, от всеобщего свертывания крови в циркуляции до региональных и органных тромбогеморрагий [2].

Перспективными для фармакологической коррекции нарушений системы гемостаза и сопутствующих дисфункций систем и органов являются препараты природного происхождения, отличающиеся, как правило, широтой терапевтического действия, малой токсичностью и связанной с этим возможностью длительного применения без риска возникновения побочных реакций (Макаров, 1989) [22]. В этом плане, большой интерес представляют лантаноиды (редкоземельные элементы — РЗЭ). Исследованиями многих авторов показано, что соединения редкоземельных элементов (РЗЭ) способны вызывать гипокоагуляцию как in vitro, так in vivo [20].

При внутривенном введении эти соединения снижают свертываемость крови, сочетая быстроту влияния антикоагулянтов непрямого действия. Эта особенность фармакодинамического эффекта объясняется механизмом действия соединений РЗЭ. Способность лантана к антимор-фному замещению кальция и железа в биомолекулярных системах определяют широкий спектр фармакологических эффектов испытуемого средства.

Целью наших исследований явилась оценка влияния лантана ацетата на тромбоцитарное звено гемостаза при экспериментально вызванной модели острого ДВС-синдрома у белых крыс.

менты проведены на крысах линии Вистар с исходной массой 170-180 гг. ЛА вводили перорально в дозе Змг/кг массы животного однократно и в течение 7 дней. Животные были разделены на две группы: 1 — контрольная, животные получали физиологический раствор; 2 — опытная, животные получали ЛА за 1 час до инъекции тромбина. Кровь забирали из вены через 60 мин. после введения тромбина. Для оценки состояния коагуляционного гемостаза определяли активированное частичное тромбопластино-вое время (АЧТВ), тромбиновое время (ТВ), а так же показатели аутокоагулограммы (АКТ), свидетельствующие о присутствии продуктов деградации фибрина и нарушении фибринолиза, р-нафтоловый тест. Результаты представлены в таблицах 1-З.

Результаты исследований обрабатывали статистически общепринятыми методами для малой выборки с определением средней величины (М) и средней квадратной ошибки (т). Достоверность различий между экспериментальными группами по изученным параметрам оценивали с помощью непараметрического критерия Вилкоксона, Манна-Уитни. Значимыми считали различия при р<0,05. Результаты и обсуждение Анализ базисных показателей коагуляционного звена гемостаза (табл. 1) свидетельствует, что ЛА в дозе Змг/ кг через 30 мин у крыс повышает активность механизма свертывания крови по «внутреннему» пути (АЧТВ — укорачивается на 24%), удлиняется ТВ — на 54%, содержание фибриногена снижается на 22% (табл. 3). После введения ЛА сохранялась высокая свертывающая активность крови, и не наблюдалось активации фибринолиза.

Данные, представленные в таблице 2, показывают, что у животных контрольной группы на фоне выраженной гипокоагуляции активируется фибринолиз. Так, у животных контрольной группы активность образования тромбопластина и тромбина (А) снижается в 4,5 раза, МА — в 2,4 раза, удлиняется время достижения максимальной свертывающей активности (Т2) в 2,5 раза,

Таблица 1

Влияние Лантана ацетата на коагуляционное звено и фибринолиз при остром ДВС-синдроме

Условия Показатели

опыта ПВ, с АЧТВ, с ТВ, с ß -нафтоловый тест

Интактные 9,4+0,50 20,5+0,63 12,5+0,69 отриц.

Контроль

р-р)

ЛА 0,3 мг/100 г 8,7+0,37 7,6+0,58 26,3+1,09 полож.

Фармакологическую активность ЛА изучали на модели острого ДВС-синдро-ма, вызванного введением в яремную вену тромбина в дозе 20 ед/кг и окси-тоцина 0,6 ед/кг массы животных в равных объемах. Экспери-

Материалы и методы

Примечание:* - значения статистически значимы (р<0,05) по сравнению с контролем.

что свидетельствует о развитии гипокоагуляции, возрастает инактивация тромбопластина и тромбина, а активность фибринолиза (ИИТ увеличивается в 4,7 раза). Нарушение сопряженности реакций свертывающей и фибринолитических систем свидетельствуют об исто-

Таблица 2

Влияние Лантана ацетата на показатели АКТ при остром ДВС-синдроме

Условия Показатели

опыта А, % МА, % Тр мин Т2, мин Ф, мин ИИТ, у.е.

Интактные 32,0+2,4 58,0+3,1 2,0+0,13 4,0+0,28 36,0+2,7 2,3+0,13

Контроль (физ. 7,2+0,54 20,2+1,52 2,0+0,80 10,6+0,71 32,6+2,94 10,7+1,19

р-р)

ЛА 0,3 мг/100г 28,8+2,90 43,4+3,36 1,6+0,21 6,0+0,23* 20,0+1,42 1,8+0,13*

щении плазменных факторов свертывания крови, что указывает на развитие стадии гипокоагуляции ДВС-синдрома. Обнаружение фибрина В также указывает на активацию неферментативного фибринолиза, что характеризует наличие в плазме продуктов деградации фибрина, обладающих антикоагуляционной активностью.

При введении ЛА в дозе 3 мг/100 г массы животного отмечали, повышение активности свертывающей сис-

активности образования тромбопластина и тромбина (А), удлинение ПВ, АЧТВ, ТВ, тромбоцитопения, положительный р-нафтоловый тест, характеризующие стадию гипокоагуляции ДВС-синдрома.

У животных, получавших в течение 7 дней ЛА в дозе 3 мг/кг массы животного, степень выраженности ДВС-синдрома меньше, чем у животных контрольной группы, вследствие повышения активности образования

Таблица 3

Влияние Лантана ацетата при длительном введении на коагуляционное звено гемостаза при ДВС-синдроме

Условия Показатели АКТ-теста Показатели коагуляции

опыта А, МА, Т, 11' Т, Ф, ИИТ, ПВ, АЧТВ, ТВ, ß-нафтоло-

% % мин мин мин у.е. с с с вый тест

Интактные 32,9+ 58,0+ 2,0+ 4,0+ 36,2+ 2,3+ 13,0+ 30,0+ 12,5+ отриц.

Контроль 4,4+ 12,0+ 2,0+ 10,2+ 30,0+ 11,6+ 26,0+ 120,0+ 180,0+ резко

(физ. р-р) 0,42 1,53 0,18 1,2 3,24 1,2 0,38 9,84 5,74* полож.

ЛА 52,4+ 52,4+ 1,2+ 2,0+ 25,0+ 4,6+ 25,6+ 78,0+ 98,0+ полож.

3 мг/100 г

темы и механизмов противосвертывающей системы (укорочение Ф до 20,0 мин против 30 мин в контроле), снижение фибринолиза (ИИТ=2,04 против 10,6 в контроле), т.е. наблюдалась тенденция к нормализации ге-мостатического потенциала.

Через 7 дней после введения тромбина у животных контрольной группы наблюдали признаки снижения

тромбопластина и тромбина (А), снижается степень ги-покоагуляции и фибринолиза.

Результаты исследования показали, что ЛА препятствует развитию ДВС-синдрома, достоверно снижается степень тромбоцитопении и дефицита плазменных факторов, восстанавливается сопряженность свертывающей и фибринолитических систем.

THE EFFECT OF LANTANA ACETATE ON COAGULATIVE UNIT AND FIBRINOLYSIS IN ACUTE DISSEMINATED INTRAVASCULAR COAGULATION SYNDROME

Zh.P. Dorzhiev, I.O. Ubasheyev, N.M. Kozhevnikova, L.B. Byraeva, M.V. Shoinchorova

LA influences on the coagulatious system of blood, stage of hypercoagulation in experimental model of disseminated intravascular coagulation syndrome. It increases the activity of thromboplastin and thrombin's formation, reduces the degree of hypercoagulation and accelerates fibrinolytic activity. LA prevents the development of disseminated intravascular coagulation syndrome reducing the level of thrombocytopenia and deficiency of plasmatic factors; the interaction of coagulative ana fibrinolytic systems is restored.

ЛИТЕРАТУРА

1.

Александрова Л.М. Состояние поверхностных эритроцитов в динамике опухолевого роста // Вопросы онкологии. - 1986. - № 3. - С.32.

Баркаган 3. С. Геморрагические заболевания и синдромы. - М.: Медицина, 1988. - 336 с. Бышевский А.Ш., Леонова О.П. Пептидные ингибиторы коагуляционного превращения фибриногена // Укр. биохим. журн. - 1991. - Т63, № 1. - С.26-33. Воробьев H.A., Борисов Д.Б., Фомкина И.А. и др. Роль плазмафереза в динамике тромбинемии при остром ДВС-синдроме // Вестн. интенсивной терапии. - 2004. - № 3. - С.51-52.

Влияние основных полипептидов на гемостаз при гнойно-септической патологии // Сб. тезисов Всероссийской науч. конф. - Чита, 1991. - Ч. 2. - С.221. Волков A.B., Кожура В.Л. // Патол. физиология и экс-пер. терапия. - 1968. - № 6. - С.22-26. Воробьев П.А. Интенсивная терапия при нарушениях гемостаза. - М.: Ньюдиамед, 1998. - С.97.7 Гаврилов О.К. Проблемы и гипотезы в учении о свертывании крови. - М., 1981.

Ганцев К.Ш. Гемореология у больных раком толстой кишки // Вестник Службы крови России. - 2004. - № 4. - С.8-12.

10. Гончаров С.Ф., Жиляев Е.Г. Методика подготовки и проведения научных исследований в районах чрезвычайных ситуаций // Воен. -мед. журн. - 1993. - № 9. - С.17-19.

11. Зильбер A.n., Шифман Е.М. Этюды критической медицины. Т 3. - Петрозаводск: Изд-во ПГУ; 1997. - С.23-25.

12. Золотокрылина Е.С. Значение нарушений перфузии

4.

5.

тканей и диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови в патогенезе постреанимационной болезни у больных с массивной кровопотерей и тяжелой сочетанной травмой // Анестезиология и реаниматология. - 1995. - № 4. - С.24-29.

13. Интенсивная терапия: пер. с англ. / Под ред. А.И. Мартынова. - М: гэотар Медицина, 1999. - 640 с.

14. Козинец Г.И., Высоцкий В.В., Погорелое В.М. и др. Кровь и инфекция. - М.: Триада-фарм, 2001. - С.428-434.

15. Кровотечения при беременности, в родах и раннем послеродовом периоде: учеб. пособие / H.A. Егорова, А.Ф. Добротина, О.И. Гусева и др. - H. Новгород: Изд-во Нижегор. гос. мед. акад., 2004. - 82 с.

16. Применение активированного протеина С при тяжелом сепсисе и септическом шоке: опыт Российских клиник (предварительные результаты) / В.А. Руднов, Б.Р. Гельфанд, А.В. Алферов и др. // Consilim Medicum.

- 2004. - № 6. - С.424-427.

17. Практическая трансфузиология / Г.И. Козинец, Л.С. Бирюкова, H.A. Горбунова и др. - М.: Триада-Х, 1997.

18. Фибринолиз. Современные фундоментальные и клинические концепции: пер. с англ. / Под ред. П.Дж. Гаф-фни, С. Балкув - Улютина. - М.: Медицина, 1982. -С.46-55.

19. Фомина И.Г. Неотложная терапия в кардиологии: справ.

- 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2002. - 256 с.

20. ЧазоеЕ.й. Антитромботическая терапия при остром коронарном синдроме:^обзор // Терапевт. архив. - 2000.

21. Шееякоеа В.П. Фармакокоррекция иммунитета и гемостаза при гнойно-септической патологии тималином,

тимогеном и Т-активином: Автореф. ... канд. мед. наук.

- Улан-Удэ, 2002. - 19 с.

22. Шпак И.И. Влияние сухих экстрактов горечавника бородатого и зубчатки обыкновенной на систему гемостаза при цитостатической болезни: Автореф. ... канд. мед. наук. — Улан-Удэ, 2001. — 20 с.

23. Ashar F.S., Ratima R. В. Thyroid storm treatment with blood exchange and plasmapheresis // J. Amer. Med. Ass. — 1970

— Vol. 214, № 7. — P. 1275-1279.

24. Collen D. // Eur. J. Biochem. — 1976. — Vol. 69. — P.209-216.

25. Increased intravascular coagulation associated with pregnancy / F.R. Gebrasi, S. Bottoms, A. Farag A., et al. // Obstet. Gynecol. — 1990. — Vol. 75. — P.385-389._

26. Hirsh J. Guide to anticoagulant therapy. Part 1 // Heparin. Circulation. - 1994. - Vol. 89. - P. 1449-1468.

27. Latter P.-F., Heiselman D. // Am. J. Surg. - 2002. - Vol. 1.

- P.39-46.

28. Lee V.S., Tarasenko L.L., Bellhous B.J. Platelet transfusion therapy; Platelet concentrate preparation and storage // J. Lab. Clin. Med. - 1988. - Vol. 111. - P.371-383.

29. Mammen E.F. // J. Antimicrob. Chemother. - 1998. - Vol. 41, Suppl. A. - P.413-418.

30. Platelet Transfusion Therapy. Consensus Conference on Platelet Transfusion Therapy // JAMA. - 1987. - Vol. 257.

- P. 1777-1780.

31. Schein R.M.H., Kinasevitz G.T. // Am. J. Surg. - 2002. -Vol. 184. - P.25-38.

© ДАУТОВА 3.A., ИМАЕВА A.K., ГАРИФУЛЛИНА X.P., АБДУЛЛИН P.P. - 2007

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ МИКРОДРЕНАЖА НА ОСНОВЕ УГЛЕРОДА В ХИРУРГИИ

ГЛАУКОМЫ

З.А. Даутова, А.К. Имаева, Х.Р. Гарифуллина, P.P. Абдуллин

(Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней, директор — д.м.н., проф. М.М. Бикбов; Башкирский государственный медицинский университет, ректор — член-корр. РАМН, д.м.н., проф. В.М. Тимербулатов, кафедра патологической анатомии; Альметьевская центральная районная больница, гл. врач —

Ф.Ф. Агзамов)

Резюме. Предложен материал для микродренажа на основе химически чистого углерода для хирургии глаукомы. Экспериментально изучена реакция 16 глаз 8 кроликов на применение имплантанта при синусотрабекулоэктомии. В контрольной группе проводили традиционную синустрабекулоэктомию без дренирования.

На основании клинико-гистологического исследования можно отметить, что углеродный имплантат предполагает изменения в тканях глаза, которые определяются сроком его пребывания. Однако его использование не вызывает каких-либо процессов избыточного рубцевания при антиглаукоматозной операции.

Несмотря на различия морфологической картины при СТЭКУИ и СТЭК, прослеживается однотипность процессов. Ключевые слова:

Хирургическое лечение занимает ведущее место в лечении некомпенсированной открытоугольной глаукомы [2,5,8]. Снижение гипотензивного эффекта многие исследователи связывают с избыточным рубцеванием в зоне оперативного доступа [6,7]. В последние годы для достижения стойкого снижения внутриглазного давления разработано множество дренажей [3,10,11,12]. Однако, недостаточная биосовместимость к тканям глаза некоторых из них также приводит к патологическому рубцеванию и образованию плотной, многослойной соединительнотканной капсулы.

Наше внимание привлек не применявшийся ранее в офтальмологии материал для микродренажа на основе чистого углерода, который имеет хорошую эластичность, ареактивен к тканям глаза, не обладает раздражающим, местнотоксическим действием на организм, инертен и соответствует требованиям, предъявляемым к материалам медицинского назначения (патент RU 2030173, 1995 г.). Имеется разрешение Министерства здравоохранения и социального развития РФ к применению изделия в медицинской практике (ТУ 9393-001 -10992110-96, государственный регистрационный номер 42/99-1804-0498 от 30.12.1999 г.). Материал представляет собой гигроскопичный тканный микроволокнистый химически чистый углерод. Основу его составляют углеродные нити черного цвета диаметром 500 мкм, которые при помещении в стерильный физиологический раствор размягчаются, что позволяет формировать имплантат необходимого размера и формы (Решение о выдаче патента РФ по заявке 2006142429/14 от 11.07.2007 г.).

Целью настоящего исследования явилось экспериментальное изучение реакции тканей глаза на применение углеродного микродренажа при синустрабекулоэктомии.

Материалы и методы

Экспериментальные исследования проведены на 16 кроликах (32 глаза). На 16 глазах (8 кроликов) моделировали синустрабекулоэктомию с микродренированием углеродным имплантатом (СТЭКУИ). В контрольной группе (8 кроликов, 16 глаз) проводили традиционную синуст-рабекулоэктомию (СТЭК) без дренирования (табл. 1).

Таблица 1

Клинические группы и сроки наблюдения за экспериментальными животными

Сроки наблю- Группы кроликов (глаз) Всего

дения, сутки основная контрольная

3 2

7 2

21 2

30 2

Всего 8

Методика синустрабекулоэктомии с микродренированием углеродным имплантатом

После обработки операционного поля и традиционного обезболивания накладывали векорасширитель и фиксирующий шов на верхнюю прямую мышцу.

Отступив от лимба на 6,0-7,0 мм, рассекали конъюнктиву с теноновой капсулой. Затем отсепаровывали конъ-юнктивальный лоскут до лимбальной области. По необходимости производили минимальную коагуляцию поверхностных сосудов склеры. Особенностью выполнения данного этапа операции была минимальная травматизация теноновой капсулы и практически отсутствие термокоагуляции сосудов склеры.

После обнажения операционного поля на склере при помощи алмазного скальпеля выкраивали поверхностный склеральный лоскут основанием к лимбу с вовлечением стромы роговицы. Ориентировочная толщина лоскута в большинстве случаев составляла 300-350 мкм, что соответствует 1/3 толщины склеры.

Переключали микроскоп на большее увеличение. Затем выкраивали склеральный лоскут треугольной формы