ВНЕКЛЕТОЧНЫЕ ВЕЗИКУЛЫ, ПРОИСХОДЯЩИЕ ИЗ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

1. Композиция, содержащая внеклеточные везикулы (EV), полученные посредством:
(1) культивирования мезенхимальных стволовых клеток, полученных из биологической ткани или жидкости, в первой культуральной среде, не содержащей факторов роста, таким образом, чтобы создать популяцию культивированных недифференцированных мезенхимальных стволовых клеток,
высокая
+
+
(2) приведения в контакт указанной популяции культивированных недифференцированных мезенхимальных стволовых клеток со второй культуральной средой, содержащей по меньшей мере два провоспалительных фактора роста, в результате чего образуются СD106СD151нестин мезенхимальные стволовые клетки,
(3) культивирования указанных MSC в не содержащей внеклеточные везикулы культуральной среде в условиях, допускающих их размножение;
и
(4) очистки внеклеточных везикул от клеток, полученных на стадии (3).
2. Композиция по п. 1, где указанная вторая культуральная среда, использованная на стадии (2), содержит по меньшей мере два провоспалительных фактора роста, выбранных среди фактора некроза опухоли альфа (TNF-α), интерлейкина (IL)) IL-1, IL4, IL12, IL18 и интерферона гамма (IFNγ)), предпочтительно выбранных из IL1, IL4, IL12 и IL18.
3. Композиция по п. 1, где указанная не содержащая внеклеточных везикул культуральная среда дополнена смесью IL1 и IL4, предпочтительно IL1β и IL4.
4. Композиция по любому из пп. 1-3, где указанные внеклеточные везикулы получены из недифференцированных MSC, происходящих из биологической ткани, выбранной из плаценты, пуповины или оболочек плаценты (хориона, амниона) или их компонентов, либо из биологической жидкости, такой как пуповинная кровь, плацентарная кровь или амниотическая жидкость.
5. Композиция по любому из пп. 1-4, где указанные внеклеточные везикулы получены из недифференцированных MSC, происходящих из пуповины, предпочтительно посредством выделения клеток из эксплантата фрагмента пуповины.
6. Композиция по любому из пп. 1-4, где указанные внеклеточные везикулы получены из недифференцированных MSC, происходящих из плаценты, предпочтительно посредством выделения клеток из фрагмента плацентарной ткани.
7. Композиция по любому из пп. 1-6 для применения при лечении субъектов, страдающих ишемической болезнью, расстройством системы кровообращения, иммунопаталогией, повреждением или расстройством органов или недостаточностью функционирования органов.
8. Композиция для применения по п. 7, где указанное заболевание или расстройство выбрано из группы, состоящей из: сахарного диабета 1 типа, диабета II типа, болезни "трансплантат против хозяина" (GVHD), апластической анемии, рассеянного склероза, мышечной дистрофии Дюшенна, ревматоидного артрита, мозгового инсульта, идиопатического легочного фиброза, дилатационной кардиомиопатии, остеоартрита, цирроза, печеночной недостаточности, почечной недостаточности, окклюзионного заболевания периферических артерий, критической ишемии конечностей, заболевания периферических сосудов, сердечной недостаточности, диабетической язвы, фиброзных поражений, синехии и патологий эндометрия.
9. Композиция для применения по п. 7, где указанное заболевание или расстройство представляет собой заболевание или расстройство кожи либо слизистой оболочки, предпочтительно диабетическую язву, язву, травму, ожог, ожог паром или жидкостью, рану или проблему с заживлением ран, пролежень, бородавку, синехию, патологию эндометрия или фиброзное поражение желудочно-кишечного тракта, такое как свищ прямой кишки.
10. Фармацевтическая, ветеринарная, диагностическая или косметическая композиция, содержащая внеклеточные везикулы, которые определены в любом из пп. 1-6.
11. Фармацевтическая или ветеринарная композиция по п. 10, дополнительно содержащая гидрогель или другой биосовместимый материал.
12. Состав для наружного применения, содержащий внеклеточные везикулы, которые определены в любом из пп. 1-6.
13. Фармацевтическая композиция по п. 10 или 11 либо состав для наружного применения по п. 12 для применения при лечении субъектов, страдающих ишемической болезнью, расстройством системы кровообращения, иммунопаталогией, фиброзным поражением, повреждением органов или недостаточностью функционирования органов.
14. Фармацевтическая композиция по п. 10 или 11 либо состав для наружного применения по п. 12 для применения при лечении субъектов, страдающих заболеванием или расстройством, выбранным из группы, состоящей из: сахарного диабета 1 типа, диабета II типа, GVHD, апластической анемии, рассеянного склероза, мышечной дистрофии Дюшенна, ревматоидного артрита, мозгового инсульта, идиопатического легочного фиброза, дилатационной кардиомиопатии, остеоартрита, цирроза, печеночной недостаточности, почечной недостаточности, окклюзионного заболевания периферических артерий, критической ишемии конечностей, заболевания периферических сосудов, сердечной недостаточности, диабетической язвы, фиброзных поражений, синехии и патологий эндометрия.
15. Дерматологическая или косметическая композиция, содержащая внеклеточные везикулы, которые определены в любом из пп. 1-6.
16. Применение дерматологической или косметической композиции по п. 15 для регенерации клеток кожи или слизистой оболочки, улучшения внешнего вида кожи или слизистой оболочки либо для исправления дефекта кожи или слизистой оболочки, такого как пигментные пятна, пятна, акне, морщины, сухость.
17. Применение дерматологической или косметической композиции по п. 15 для заживления кожного повреждения или расстройства, такого как ожог, рубец, ангиома, невус или бородавка.
18. Медицинское устройство, содержащее внеклеточные везикулы, которые определены в любом из пп. 1-6.
19. Медицинское устройство по п. 18, где указанное устройство представляет собой перевязочный материал, пластырь, стент, эндоскоп или шприц.
20. Система доставки, содержащая внеклеточные везикулы, которые определены в любом из пп. 1-6.
21. Система доставки по п. 20, где она представляет собой микро- или нановезикулы из биополимеров, липиды или наночастицы.
22. Способ получения внеклеточных везикул, при этом указанный способ включает стадии, на которых:
(1) культивируют мезенхимальные стволовые клетки, полученные из биологической ткани или жидкости, в первой культуральной среде, не содержащей факторов роста, таким образом, чтобы создать популяцию культивированных недифференцированных мезенхимальных стволовых клеток,
высокая
+
+
(2) приводят в контакт указанную популяцию культивированных недифференцированных мезенхимальных стволовых клеток со второй культуральной средой, содержащей по меньшей мере два провоспалительных фактора роста, в результате чего образуются СD106СD151нестин мезенхимальные стволовые клетки,
(3) культивируют указанные MSC в не содержащей внеклеточные везикулы культуральной среде в условиях, допускающих их размножение;
и
(4) очищают внеклеточные везикулы от клеток, полученных на стадии (3).
23. Способ по п. 22, где указанные провоспалительные факторы роста выбраны среди TNF-α, IL1, IL4, IL12, IL18 и I FNγ, предпочтительно выбраны из IL1, IL4, IL12 и IL18.
24. Способ по п. 22 или 23, где указанный провоспалительный фактор роста представляет собой смесь IL1 и IL4, предпочтительно IL1β и IL4.
25. Способ по любому из пп. 22-24, где указанные недифференцированные MSC происходят из биологической ткани, выбранной из плаценты, пуповины или оболочек плаценты (хориона, амниона) или их компонентов, либо из биологической жидкости, такой как пуповинная кровь, плацентарная кровь или амниотическая жидкость.
26. Способ по любому из пп. 22-25, где указанные недифференцированные MSC получают посредством выделения клеток из тканей эксплантата.
27. Способ по любому из пп. 22-26, где указанные недифференцированные MSC происходят из пуповины, предпочтительно посредством выделения клеток из эксплантата фрагмента пуповины.
28. Способ по любому из пп. 22-26, где указанные недифференцированные MSC происходят из плаценты, предпочтительно посредством выделения клеток из фрагмента плацентарной ткани.
29. Способ по любому из пп. 22-28, где указанная вторая культуральная среда содержит интерлейкин 1 в диапазоне от 1 до 100нг/мл, предпочтительно интерлейкин 1β.
30. Способ по любому из пп. 22-29, где указанная вторая культуральная среда содержит интерлейкин 4 в диапазоне от 1 до 100 нг/мл.
31. Способ по любому из пп. 22-30, где указанная не содержащая внеклеточные везикулы культуральная среда дополнена смесью IL1 и IL4, предпочтительно IL1β и IL4.
32. Способ по любому из пп. 22-31, где внеклеточные везикулы очищают ультрафильтрацией.