ПОЛИНУКЛЕОТИДЫ, КОДИРУЮЩИЕ ИНТЕРЛЕЙКИН-12 (IL12), И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Способ уменьшения размера опухоли или ингибирования роста опухоли у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества композиции, включающей один или более полинуклеотидов, кодирующих полипептид IL-12, где полинуклеотид, включает открытую рамку считывания ("ORF"), кодирующую полипептид субъединицы p40 интерлейкина 12 ("IL12B") и полипептид субъединицы p35 интерлейкина 12 ("IL12A").
2. Способ по п.1, дополнительно включающий введение субъекту эффективного количества композиции, включающей полинуклеотид, включающий ORF, кодирующую полипептид ингибитора контрольной точки, или эффективного количества композиции, включающей полипептид ингибитора контрольной точки.
3. Способ по п.2, где полипептид ингибитора контрольной точки ингибирует PD-1, PD-L1, CTLA-4 или их комбинацию.
4. Способ по п.2 или 3, где полипептид ингибитора контрольной точки включает антитело.
5. Способ по п.4, где антитело является антителом против CTLA-4 или его антигенсвязывающим фрагментом, которые специфично связывают CTLA-4, антителом против PD1 или его антигенсвязывающим фрагментом, которые специфично связывают PD-1, антителом против PD-L1 или его антигенсвязывающим фрагментом, которые специфично связывают PD-L1, и их комбинацией.
6. Способ по п.5, где антителом против PD-L1 является атезолизумаб, авелумаб или дурвалумаб.
7. Способ по п.5, где антителом против CTLA-4 является тремелимумаб или ипилимумаб.
8. Способ по п.5, где антителом против PD-1 является ниволумаб или пембролизумаб.
9. Способ по любому из пп.1-8, где введение композиции активирует T-клетки у субъекта.
10. Способ активации T-клеток у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества композиции, включающей один или более полинуклеотидов, кодирующих полипептид IL-12, где полинуклеотид включает ORF, кодирующую полипептид IL12B и полипептид IL12A.
11. Способ по п.9 или 10, где активация T-клеток включает индукцию пролиферации T-клеток.
12. Способ по любому из пп.9-11, где активация T-клеток включает индукцию инфильтрации T-клеток в опухоль или увеличение количества инфильтрирующих опухоль T-клеток.
13. Способ по любому из пп.9-12, где активация T-клеток включает индукцию ответа T-клеток памяти.
+
+
14. Способ по любому из пп.9-13, где активированные T-клетки включают CD4 T-клетки, CD8 T-клетки или и те, и другие.
15. Способ по любому из пп.1-14, где введение композиции отдельно или в комбинации с композицией, включающей полинуклеотид, включающий ORF, кодирующую полипептид ингибитора контрольной точки, или композицией, включающей полипептид ингибитора контрольной точки, увеличивает отношения эффекторных к супрессорным T-клеткам в опухоли.
16. Способ увеличения отношения эффекторных к супрессорным T-клеткам в опухоли у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества композиции, включающей один или более полинуклеотидов, кодирующих полипептид IL-12, где полинуклеотид включает ORF, кодирующую полипептид IL12B и полипептид IL12A.
+
17. Способ по п.15 или 16, где отношение эффекторных к супрессорным T-клеткам является отношением CD8 T-клеток:регуляторных T-клеток (Tрег).
18. Способ по п.17, где отношение CD8+:Tрег составляет по меньшей мере 10, по меньшей мере 20, по меньшей мере 30, по меньшей мере 40, по меньшей мере 50, по меньшей мере 60, по меньшей мере 70, по меньшей мере 80, по меньшей мере 90, по меньшей мере 100, по меньшей мере 110, по меньшей мере 120, по меньшей мере 130, по меньшей мере 140 или по меньшей мере 150.
19. Способ по любому из пп.1-18, где введение композиции дополнительно увеличивает количество активированных NK-клеток у субъекта.
20. Способ увеличения количества активированных естественных киллерных (NK) клеток у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества композиции, включающей один или более полинуклеотидов, кодирующих полипептид IL-12, где полинуклеотид включает ORF, кодирующую полипептид IL12B и полипептид IL12A.
21. Способ по п.19 или 20, где количество активированных NK-клеток увеличено по меньшей мере приблизительно в два раза, по меньшей мере приблизительно в три раза, по меньшей мере приблизительно в четыре раза, по меньшей мере приблизительно в пять раз, по меньшей мере приблизительно в шесть раз, по меньшей мере приблизительно в семь раз, по меньшей мере приблизительно в восемь раз, по меньшей мере приблизительно в девять раз или по меньшей мере приблизительно в десять раз.
22. Способ по любому из пп.19-21, где повышенные активированные NK-клетки сохраняются в течение по меньшей мере приблизительно одного дня, по меньшей мере приблизительно двух дней, по меньшей мере приблизительно трех дней, по меньшей мере приблизительно четырех дней, по меньшей мере приблизительно пяти дней, по меньшей мере приблизительно шести дней, по меньшей мере приблизительно семи дней, по меньшей мере приблизительно восьми дней, по меньшей мере приблизительно девяти дней, по меньшей мере приблизительно десяти дней, по меньшей мере приблизительно 11 дней, по меньшей мере приблизительно 12 дней, по меньшей мере приблизительно 13 дней или по меньшей мере приблизительно 14 дней.
23. Способ по любому из пп.1-22, где введение композиции повышает перекрестно-презентирующие дендритные клетки в опухоли субъекта.
24. Способ повышения перекрестно-презентирующих дендритных клеток в опухоли у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества композиции, включающей один или более полинуклеотидов, кодирующих полипептид IL-12, где полинуклеотид включает ORF, кодирующую полипептид IL12B и полипептид IL12A.
+
25. Способ по п.23 или 24, где перекрестно-презентирующие дендритные клетки являются CD103 клетками.
26. Способ по любому из пп.1-25, где введение композиции уменьшает размер дистальной опухоли или ингибирует рост дистальной опухоли у субъекта.
27. Способ по любому из пп.1 или 26, где полипептид IL12B и полипептид IL12A слиты напрямую или с помощью нуклеиновой кислоты, кодирующей линкер.
28. Способ по п.27, где полипептид IL12B расположен на 5'-конце полипептида IL12A или линкера.
29. Способ по п.27, где полипептид IL12A расположен на 5'-конце полипептида IL12B или линкера.
30. Способ по любому из пп.27-29, где полипептид IL12B включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 98% идентична аминокислотам 23-328 из SEQ ID NO: 48, где аминокислотная последовательность обладает активностью IL12B.
31. Способ по любому из пп.27-30, где полипептид IL12A включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 98% идентична аминокислотам 336-532 из SEQ ID NO: 48, где аминокислотная последовательность обладает активностью IL12A.
32. Способ по любому из пп.27-31, где полинуклеотид включает нуклеотидную последовательность, кодирующую сигнальный пептид.
33. Способ по п.32, где сигнальный пептид является сигнальным пептидом IL12B.
34. Способ по п.32 или 33, где сигнальный пептид включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 98% идентична аминокислотам 1-22 из SEQ ID NO: 48.
35. Способ по любому из пп.27-34, где композиция включает полинуклеотид, включающий ORF, кодирующую полипептид IL12B, функционально связанный через линкер с полипептидом IL12A.
36. Способ по любому из пп.27-35, где композиция включает полинуклеотид, включающий ORF, кодирующую сигнальный пептид IL12B, полипептид IL12B, линкер и полипептид IL12A.
37. Способ по любому из пп.27-36, где линкер включает Gly/Ser линкер.
n
m
38. Способ по п.37, где Gly/Ser линкер включает (GS), где n является 1, 2 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 или 20, и m является 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 или 20.
n
m
39. Способ по п.38, где Gly/Ser линкер включает (GS), и где n является 6, и m является 1.
40. Способ по любому из пп.1-39, где полипептид IL12 включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 98% идентична SEQ ID NO: 48.
41. Способ по любому из пп.1-40, где полинуклеотид включает нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична нуклеотидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5-44, 236 и 237.
42. Способ по любому из пп.1-41, где полинуклеотид включает нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична SEQ ID NO: 236 или 237.
43. Способ по любому из пп.1-42, где полинуклеотид включает ORF, включающую по меньшей мере один химически модифицированный нуклеозид.
44. Способ по п.43, где по меньшей мере один химически модифицированный нуклеозид выбран из группы, состоящей из любого из нуклеозидов, перечисленных в Разделе XI, и их комбинации.
45. Способ по п.43 или 44, где по меньшей мере один химически модифицированный нуклеозид выбран из группы, состоящей из псевдоуридина, N1-метилпсевдоуридина, 5-метилцитозина, 5-метоксиуридина и их комбинации.
46. Способ по любому из пп.43-45, где нуклеозиды в ORF химически модифицированы по меньшей мере на приблизительно 10%, по меньшей мере на приблизительно 20%, по меньшей мере на приблизительно 30%, по меньшей мере на приблизительно 40%, по меньшей мере на приблизительно 50%, по меньшей мере на приблизительно 60%, по меньшей мере на приблизительно 70%, по меньшей мере на приблизительно 80%, по меньшей мере на приблизительно 90%, по меньшей мере на приблизительно 95%, по меньшей мере на приблизительно 99% или на приблизительно 100%.
47. Способ по любому из пп.43-46, где химически модифицированные нуклеозиды в ORF выбраны из группы, состоящей из уридина, аденина, цитозина, гуанина и любой их комбинации.
48. Способ по любому из пп.1-47, где уридиновые нуклеозиды в ORF химически модифицированы по меньшей мере на приблизительно 10%, по меньшей мере на приблизительно 20%, по меньшей мере на приблизительно 30%, по меньшей мере на приблизительно 40%, по меньшей мере на приблизительно 50%, по меньшей мере на приблизительно 60%, по меньшей мере на приблизительно 70%, по меньшей мере на приблизительно 80%, по меньшей мере на приблизительно 90%, по меньшей мере на приблизительно 95%, по меньшей мере на приблизительно 99% или на приблизительно 100%.
49. Способ по любому из пп.1-48, где аденозиновые нуклеозиды в ORF химически модифицированы по меньшей мере на приблизительно 10%, по меньшей мере на приблизительно 20%, по меньшей мере на приблизительно 30%, по меньшей мере на приблизительно 40%, по меньшей мере на приблизительно 50%, по меньшей мере на приблизительно 60%, по меньшей мере на приблизительно 70%, по меньшей мере на приблизительно 80%, по меньшей мере на приблизительно 90%, по меньшей мере на приблизительно 95%, по меньшей мере на приблизительно 99% или на приблизительно 100%.
50. Способ по любому из пп.1-49, где цитидиновые нуклеозиды в ORF химически модифицированы по меньшей мере на приблизительно 10%, по меньшей мере на приблизительно 20%, по меньшей мере на приблизительно 30%, по меньшей мере на приблизительно 40%, по меньшей мере на приблизительно 50%, по меньшей мере на приблизительно 60%, по меньшей мере на приблизительно 70%, по меньшей мере на приблизительно 80%, по меньшей мере на приблизительно 90%, по меньшей мере на приблизительно 95%, по меньшей мере на приблизительно 99% или на приблизительно 100%.
51. Способ по любому из пп.1-50, где гуанозиновые нуклеозиды в ORF химически модифицированы по меньшей мере на приблизительно 10%, по меньшей мере на приблизительно 20%, по меньшей мере на приблизительно 30%, по меньшей мере на приблизительно 40%, по меньшей мере на приблизительно 50%, по меньшей мере на приблизительно 60%, по меньшей мере на приблизительно 70%, по меньшей мере на приблизительно 80%, по меньшей мере на приблизительно 90%, по меньшей мере на приблизительно 95%, по меньшей мере на приблизительно 99% или на приблизительно 100%.
52. Способ по любому из пп.1-51, где полинуклеотид включает участок связывания мкРНК.
53. Способ по п.52, где участок связывания мкРНК является участком связывания miR-122.
54. Способ по п.52 или 53, где участок связывания мкРНК является участком связывания miR-122-3p или miR-122-5p.
55. Способ по п.53, где участок связывания мкРНК включает нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 80%, по меньшей мере на приблизительно 85%, по меньшей мере на приблизительно 90%, по меньшей мере на приблизительно 95% или на приблизительно 100% идентична aacgccauua ucacacuaaa ua (SEQ ID NO: 51), где участок связывания мкРНК связывается с miR-122.
56. Способ по п.53, где участок связывания мкРНК включает нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 80%, по меньшей мере на приблизительно 85%, по меньшей мере на приблизительно 90%, по меньшей мере на приблизительно 95% или на приблизительно 100% идентична uggaguguga caaugguguu ug (SEQ ID NO: 53), где участок связывания мкРНК связывается с miR-122.
57. Способ по п.53, где участок связывания мкРНК включает нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на приблизительно 80%, по меньшей мере на приблизительно 85%, по меньшей мере на приблизительно 90%, по меньшей мере на приблизительно 95% или на приблизительно 100% идентична caaacaccau ugucacacuc ca (SEQ ID NO: 54), где участок связывания мкРНК связывается с miR-122.
58. Способ по любому из пп.43-57, где полинуклеотид включает 5'-нетранслируемую область (UTR).
59. Способ по п.57, где 5'-UTR включает последовательность нуклеиновой кислоты, которая по меньшей мере на приблизительно 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична последовательности, перечисленной в Таблице 3.
60. Способ по любому из пп.43-59, где полинуклеотид включает 3'-нетранслируемую область (UTR).
61. Способ по п.60, где 3'-UTR включает последовательность нуклеиновой кислоты, которая по меньшей мере 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична последовательности, перечисленной в Таблице 4A или 4B.
62. Способ по п.60 или 61, где полинуклеотид включает участок связывания мкРНК в 3'-UTR.
63. Способ по п.62, где полинуклеотид включает нуклеотидную спейсерную последовательность, слитую с участком связывани мкРНК.
64. Способ по п.63, где нуклеотидная спейсерная последовательность включает по меньшей мере приблизительно 10 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 20 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 30 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 40 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 50 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 60 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 70 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 80 нуклеотидов, по меньшей мере приблизительно 90 нуклеотидов или по меньшей мере приблизительно 100 нуклеотидов.
65. Способ по любому из пп.43-64, где полинуклеотид включает 5'-концевую кэп-структуру.
66. Способ по п.65, где 5'-концевой кэп-структурой является Cap0, Cap1, ARCA, инозин, N1-метил-гуанозин, 2′фтор-гуанозин, 7-деаза-гуанозин, 8-оксо-гуанозин, 2-амино-гуанозин, LNA-гуанозин, 2-азидогуанозин, Cap2, Cap4, 5'-метилG кэп или их аналог.
67. Способ по любому из пп.1-66, где полинуклеотид включает 3'-полиA-хвост.
68. Способ по любому из пп.1-66, где полинуклеотид включает по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять, по меньшей мере шесть, по меньшей мере семь, по меньшей мере восемь, по меньшей мере девять или по меньшей мере десять участков связывания мкРНК.
69. Способ по любому из пп.1-68, где полинуклеотид включает кодон-оптимизированную ORF.
70. Способ по любому из пп.1-69, где полинуклеотид является in vitro транскрибируемым (IVT) полинуклеотидом.
71. Способ по любому из пп.1-70, где полинуклеотид является кольцевым.
72. Способ по любому из пп.1-71, где полинуклеотид включен в лекарственную форму со средством доставки.
73. Способ по п.72, где средство доставки включает липидоид, липосому, липоплекс, липидную наночастицу, полимерное соединение, пептид, белок, клетку, миметик наночастицы, нанотрубку или конъюгат.
74. Способ по п.73, где средство доставки является липидной наночастицей.
75. Способ по п.74, где липидная наночастица включает липид, выбранный из группы, состоящей из DLin-DMA, DLin-K-DMA, 98N12-5, C12-200, DLin-MC3-DMA, DLin-KC2-DMA, DODMA, ПМГК, ПЭГ, ПЭГ-DMG, ПЭГилированных липидов, аминоспиртовых липидов, KL22 и их комбинаций.
76. Способ по любому из пп.70-74, где средство доставки включает соединение, имеющее формулу (I)
(I),
или его соль или стереоизомер, где
1
5-20
5-20
R выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила, -R*YR'', -YR'' и -R''M'R';
2
3
1-14
2-14
2
3
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, C алкила, C алкенила, -R*YR'', -YR'' и R*OR'', или R и R, вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют гетероцикл или карбоцикл;
4
3-6
2
n
2
n
2
1-6
2
n
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
R выбран из группы, состоящей из C карбоцикла, -(CH)Q, -(CH)CHQR, -CHQR, -CQ(R) и незамещенного C алкила, где Q выбран из карбоцикла, гетероцикла, -OR, -O(CH)N(R), -C(O)OR, -OC(O)R, -CX, -CXH, -CXH, -CN, -N(R), -C(O)N(R), -N(R)C(O)R, -N(R)S(O)R, -N(R)C(O)N(R), -N(R)C(S)N(R) и -C(R)N(R)C(O)OR, и каждое n независимо выбрано из 1, 2, 3, 4 и 5;
5
1-3
2-3
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила и H;
6
1-3
2-3
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила и H;
2
M и M' независимо выбраны из -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)-, арильной группы и гетероарильной группы;
7
1-3
2-3
R выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила и H;
1-3
2-3
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила и H;
1-18
2-18
каждый R' независимо выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила, -R*YR'', -YR'' и H;
3-14
3-14
каждый R'' независимо выбран из группы, состоящей из C алкила и C алкенила;
1-12
2-12
каждый R* независимо выбран из группы, состоящей из C алкила и C алкенила;
3-6
каждый Y независимо является C карбоциклом;
каждый X независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br и I; и
m выбрано из 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 и 13; и
4
2
n
2
n
2
2
при условии, что в том случае, когда R является -(CH)Q, -(CH)CHQR, -CHQR или -CQ(R), то тогда: (i) Q не является -N(R), когда n является 1, 2, 3, 4 или 5, или (ii) Q не является 5, 6 или 7-членным гетероциклоалкилом, когда n является 1 или 2.
77. Способ по п.76, где соединение имеет Формулу (IA)
(IA),
или его соль или стереоизомер, где
l выбрано из 1, 2, 3, 4 и 5;
m выбрано из 5, 6, 7, 8 и 9;
1
M является связью или M';
4
1-3
2
n
2
2
R является незамещенным C алкилом или -(CH)Q, в котором n является 1, 2, 3, 4 или 5, и Q является OH, -NHC(S)N(R) или -NHC(O)N(R);
M и M' независимо выбраны из -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -P(O)(OR')O-, арильной группы и гетероарильной группы; и
2
3
1-14
2-14
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, C алкила и C алкенила.
78. Способ по любому из пп.75-77, где m является 5, 7 или 9.
79. Способ по п.76, где соединение имеет Формулу (II):
(II),
или его соль или стереоизомер, где
l выбрано из 1, 2, 3, 4 и 5;
1
M является связью или M';
4
1-3
2
n
2
2
R является незамещенным C алкилом или -(CH)Q, в котором n является 2, 3 или 4, и Q является OH, -NHC(S)N(R) или -NHC(O)N(R);
M и M' независимо выбраны из -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -P(O)(OR')O-, арильной группы и гетероарильной группы; и
2
3
1-14
2-14
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, C алкила и C алкенила.
80. Способ по любому из пп.75-79, где соединение выбрано из Соединения 1, Соединения 147 и их солей и стереоизомеров.
81. Способ по п.76, где соединение имеет Формулу (IIa),  (IIa), или его соль или стереоизомер.
82. Способ по п.76, где соединение имеет Формулу (IIb)  (IIb), или его соль или стереоизомер.
83. Способ по п.76, где соединение имеет Формулу (IIc) или (IIe)
(IIc),
(IIe),
или их соль или стереоизомер.
4
2
n
2
n
84. Способ по п.76, где R выбран из -(CH)Q и -(CH)CHQR, где Q, R и n являются такими, как определено выше в п.75 или 76.
85. Способ по п.76, где соединение имеет Формулу (IId)
(IId),
или его соль или стереоизомер,
2
3
5-14
5-14
5
6
где R и R независимо выбраны из группы, состоящей из C алкила и C алкенила, n выбрано из 2, 3 и 4, и R', R'', R, R и m являются такими, как определено в п.75 или 76.
2
8
86. Способ по п.85, где R является C алкилом.
3
5
6
7
8
9
87. Способ по п.85 или 86, где R является C алкилом, C алкилом, C алкилом, C алкилом или C алкилом.
88. Способ по любому из пп.85-87, где m является 5, 7 или 9.
5
89. Способ по любому из пп.85-88, где каждый R является H.
6
90. Способ по п.89, где каждый R является H.
91. Способ по любому из пп.72-74, где средство доставки включает соединение, имеющее формулу (I)
(I),
или его соль или стереоизомер, где
1
5-30
5-20
R выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила, -R*YR'', -YR'' и -R''M'R';
2
3
1-14
2-14
2
3
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, C алкила, C алкенила, -R*YR'', -YR'' и -R*OR'', или R и R, вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют гетероцикл или карбоцикл;
4
3-6
2
n
2
n
2
1-6
2
n
2
3
2
2
2
2
2
2
2
8
2
n
9
2
9
2
2
2
2
2
9
2
9
2
9
2
9
2
R выбран из группы, состоящей из C карбоцикла, -(CH)Q, -(CH)CHQR, -CHQR, -CQ(R) и незамещенного C алкила, где Q выбран из карбоцикла, гетероцикла, OR, O(CH)N(R), C(O)OR, OC(O)R, CX, CXH, CXH, CN, N(R), C(O)N(R), N(R)C(O)R, N(R)S(O)R, N(R)C(O)N(R), -N(R)C(S)N(R), -N(R)R, -O(CH)OR, -N(R)C(=NR)N(R), -N(R)C(=CHR)N(R), -OC(O)N(R), -N(R)C(O)OR, -N(OR)C(O)R, -N(OR)S(O)R, -N(OR)C(O)OR, -N(OR)C(O)N(R), -N(OR)C(S)N(R), -N(OR)C(=NR)N(R), -N(OR)C(=CHR)N(R), -C(=NR)N(R), -C(=NR)R, -C(O)N(R)OR и -C(R)N(R)C(O)OR, и каждое n независимо выбрано из 1, 2, 3, 4 и 5;
5
1-3
2-3
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила и H;
6
1-3
2-3
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила и H;
2
M и M' независимо выбраны из -C(O)O-,-OC(O)-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -(O)-, -C(S)-, -(S)S-, -(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)-, -S-S-, арильной группы и гетероарильной группы;
7
1-3
2-3
R выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила и H;
8
3-6
R выбран из группы, состоящей из C карбоцикла и гетероцикла;
9
2
1-6
2
2
2
2-6
3-6
R выбран из группы, состоящей из H, CN, NO, C алкила, -OR, -S(O)R, -S(O)Н(R), C алкенила, C карбоцикла и гетероцикла;
1-3
2-3
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила и H;
1-18
2-18
каждый R' независимо выбран из группы, состоящей из C алкила, C алкенила, -R*YR'', -" и H;
3-14
3-14
каждый R'' независимо выбран из группы, состоящей из C алкила и C алкенила;
1-12
2-12
каждый R* независимо выбран из группы, состоящей из C алкила и C алкенила;
3-6
каждый Y независимо является C карбоциклом;
каждый X независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br и I; и m выбрано из 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 и 13; и
4
2
n
2
n
2
2
при условии, что в том случае, когда R является -(CH)Q, -(CH)CHQR, -CHQR или -CQ(R), то тогда (i) Q не является -N(R), когда n является 1, 2, 3, 4 или 5, или (ii) Q не является 5, 6 или 7-членным гетероциклоалкилом, когда n является 1 или 2.
92. Способ по п.91, где средство доставки включает соединение Формулы (IA)
(IA),
или его соль или стереоизомер, где
l выбрано из 1, 2, 3, 4 и 5;
m выбрано из 5, 6, 7, 8 и 9;
1
M является связью или M';
4
1-3
2
n
2
2
2
2
8
9
2
9
2
2
R является незамещенным C алкилом или (CH)Q, в котором Q является OH, NHC(S)N(R) или -NHC(O)N(R), -NHC(O)N(R), -N(R)C(O)R, -N(R)S(O)R, -N(R)R, -NHC(=NR)N(R), -NHC(=CHR)N(R), -OC(O)N(R), -N(R)C(O)OR, гетероарилом или гетероциклоалкилом;
M и M' независимо выбраны из -(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -P(O)(OR')O-, -S-S-, арильной группы и гетероарильной группы; и
2
3
1-14
2-14
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, C алкила и C алкенила.
93. Способ по п.91 или 92, где m является 5, 7 или 9.
94. Способ по п.92 или 93, где соединение имеет Формулу (II)
(II)
или его соль или стереоизомер, где
l выбрано из 1, 2, 3, 4 и 5;
1
M является связью или M';
4
1-3
2
n
2
2
2
8
9
2
9
2
2
R является незамещенным C алкилом или (CH)Q, в котором n является 2, 3 или 4, и Q является OH, -NHC(S)N(R) или NHC(O)N(R), -N(R)C(O)R, -N(R)S(O)R, -N(R)R, -NHC(=NR)N(R), -NHC(=CHR)N(R), -OC(O)N(R), -N(R)C(O)OR, гетероарилом или гетероциклоалкилом;
M и M' независимо выбраны из -(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -P(O)(OR')O-, -S-S-, арильной группы и гетероарильной группы; и
2
3
1-14
2-14
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, C алкила и C алкенила.
1
95. Способ по любому из пп.92-94, где M является M'.
96. Способ по п.95, где M и M' независимо являются -C(O)O- или -OC(O)-.
97. Способ по любому из пп.92-96, где l является 1, 3 или 5.
98. Способ по п.91, где соединение выбрано из группы, состоящей из Соединения 1, Соединения 232, их солей и стереоизомеров и их любой комбинации.
99. Способ по любому из пп.72-98, где средство доставки дополнительно включает фосфолипид.
100. Способ по п.99, где фосфолипид выбран из группы, состоящей из:
1,2-дилинолеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (DLPC),
1,2-димиристоил-sn-глицерофосфохолина (DMPC),
1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (DOPC),
1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (DPPC),
1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфохолина (DSPC),
1,2-диундеканоил-sn-глицерофосфохолина (DUPC),
1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (POPC),
1,2-ди-O-октадецинил-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:0 PC диэфира),
1-олеоил-2-холестерилгемисукциноил-sn-глицеро-3-фосфохолина (OChemsPC),
1-гексадецил-sn-глицеро-3-фосфохолина (C16 Lyso PC),
1,2-дилиноленоил-sn-глицеро-3-фосфохолина,
1,2-диарахидоноил-sn-глицеро-3-фосфохолина,
1,2-дидокозагексаеноил-sn-глицеро-3-фосфохолина,
1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (DOPE),
1,2-дифитаноил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (ME 16:0 PE),
1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина,
1,2-дилинолеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина,
1,2-дилиноленоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина,
1,2-диарахидоноил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина,
1,2-дидокозагексаеноил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина,
1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфо-рац-(1-глицерина) натриевой соли (DOPG),
сфингомиелина и их смесей.
101. Способ по п.99, где фосфолипид выбран из группы, состоящей из:
1-миристоил-2-пальмитоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (14:0-16:0 PC, MPPC),
1-миристоил-2-стеароил-sn-глицеро-3-фосфохолина (14:0-18:0 PC, MSPC),
1-пальмитоил-2-ацетила-sn-глицеро-3-фосфохолина (16:0-02:0 PC),
1-пальмитоил-2-миристоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (16:0-14:0 PC, PMPC),
1-пальмитоил-2-стеароил-sn-глицеро-3-фосфохолина (16:0-18:0 PC, PSPC),
1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (16:0-18:1 PC, POPC),
1-пальмитоил-2-линолеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (16:0-18:2 PC, PLPC),
1-пальмитоил-2-арахидоноил-sn-глицеро-3-фосфохолина (16:0-20:4 PC),
1-пальмитоил-2-докозагексаеноил-sn-глицеро-3-фосфохолина (14:0-22:6 PC),
1-стеароил-2-миристоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:0-14:0 PC, SMPC),
1-стеароил-2-пальмитоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:0-16:0 PC, SPPC),
1-стеароил-2-олеоил-sn-глицеро-3- фосфохолина (18:0-18:1 PC, SOPC),
1-стеароил-2-линолеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:0-18:2 PC),
1-стеароил-2-арахидоноил-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:0-20:4 PC),
1-стеароил-2-докозагексаеноил-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:0-22:6 PC),
1-олеоил-2-миристоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:1-14:0 PC, OMPC),
1-пальмитоил-олеоил-2-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:1-16:0 PC, OPPC),
1-олеоил-2-стеароил-sn-глицеро-3-фосфохолина (18:1-18:0 PC, OSPC),
1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (16:0-18:1 PE, POPE),
1-пальмитоил-2-линолеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (16:0-18:2 PE),
1-пальмитоил-2-арахидоноил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (16:0-20:4 PE),
1-пальмитоил-2-докозагексаеноил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (16:0-22:6 PE),
1-стеароил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (18:0-18:1 PE),
1-стеароил-2-линолеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (18:0-18:2 PE),
1-стеароил-2-арахидоноил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (18:0-20:4 PE),
1-стеароил-2-докозагексаеноил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (18:0-22:6 PE),
1-олеоил-2-холестерилгемисукциноил-sn-глицеро-3-фосфохолина (OChemsPC) и их любой комбинации.
102. Способ по любому из пп.72-101, где средство доставки дополнительно включает структурный липид.
103. Способ по п.102, где структурный липид выбран из группы, состоящей из холестерина, фекостерина, ситостерина, эргостерина, кампестерина, стигмастерина, брассикастерина, томатидина, урсоловой кислоты, альфа-токоферола и их смесей.
104. Способ по любому из пп.72-103, где средство доставки дополнительно включает ПЭГ-липид.
105. Способ по п.104, где ПЭГ-липид выбран из группы, состоящей из модифицированного ПЭГ-фосфатидилэтаноламина, модифицированной ПЭГ-фосфатидной кислоты, модифицированного ПЭГ-церамида, модифицированного ПЭГ-диалкиламина, модифицированного ПЭГ-диацилглицерина, модифицированного ПЭГ-диалкилглицерина и их смесей.
106. Способ по любому из пп.72-105, где средство доставки дополнительно включает ионизируемый липид, выбранный из группы, состоящей из:
3-(дидодециламино)-N1,N1,4-тридодецил-1-пиперазинэтанамина (KL10),
N1-[2-(дидодециламино)этил]-N1,N4,N4-тридодецил-1,4-пиперазиндиэтанамина (KL22),
14,25-дитридецил-15,18,21,24-тетрааза-октатриаконтана (KL25),
1,2-дилинолеилокси-N,N-диметиламинопропана (DLin-DMA),
2,2-дилинолеил-4-диметиламинометил-[1,3]-диоксолана (DLin-K-DMA),
гептатриаконта-6,9,28,31-тетраен-19-ил-4-(диметиламино)-бутаноата (DLin-MC3-DMA),
2,2-дилинолеил-4-(2-диметиламиноэтил)-[1,3]-диоксолана (DLin-KC2-DMA),
1,2-диолеилокси-N,N-диметиламинопропана (DODMA),
2-({8-[(3β)-холест-5-ен-3-илокси]октил}окси)-N,N-диметил-3-[(9Z,12Z)-октадека-9,12-диен-1-илокси]пропан-1-амина (Октил-CLinDMA),
(2R)-2-({8-[(3β)-холест-5-ен-3-илокси]октил}окси)-N,N-диметил-3-[(9Z,12Z)-октадека-9,12-диен-1-илокси]пропан-1-амина (Октил-CLinDMA (2R)) и
(2S)-2-({8-[(3β)-холест-5-ен-3-илокси]октил}окси)-N,N-диметил-3-[(9Z,12Z)-октадека-9,12-диен-1-илокси]пропан-1-амина (Октил-CLinDMA (2S)).
107. Способ по любому из пп.72-106, где средство доставки дополнительно включает соединение четвертичного аммония.
108. Способ по п.107, где соединение четвертичного аммония выбрано из группы, состоящей из:
1,2-диолеоил-3-триметиламмоний-пропана (DOTAP),
N-[1-(2,3-диолеоилокси)пропил]-N,N,N-триметиламмонийхлорида (DOTMA),
1-[2-(олеоилокси)этил]-2-олеил-3-(2-гидроксиэтил)-имидазолинийхлорида (DOTIM),
2,3-диолеилокси-N-[2(сперминкарбоксамидо)этил]-N,N-диметил-1-пропанаминийтрифторацетата (DOSPA),
N,N-дистеарил-N,N-диметиламмонийбромида (DDAB),
N-(1,2-димиристилоксипроп-3-ил)-N,N-диметил-N-гидроксиэтил-аммонийбромида (DMRIE),
N-(1,2-диолеоилоксипроп-3-ил)-N,N-диметил-N-гидроксиэтил-аммонийбромида (DORIE),
N,N-диолеил-N,N-диметиламмонийхлорида (DODAC),
1,2-дилауроил-sn-глицеро-3-этилфосфохолин (DLePC),
1,2-дистеароил-3-триметиламмоний-пропана (DSTAP),
1,2-дипальмитоил-3-триметиламмоний-пропана (DPTAP),
1,2-дилинолеоил-3-триметиламмоний-пропана (DLTAP),
1,2-димиристоил-3-триметиламмоний-пропана (DMTAP),
1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (DSePC),
1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (DPePC),
1,2-димиристоил-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (DMePC),
1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (DOePC),
1,2-ди-(9Z-тетрадеценоил)-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (14:1 EPC),
1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (16:0-18:1 EPC),
и их любой комбинации.
109. Способ по любому из пп.1-108, где композиция изготовлена в форме для доставки in vivo.
110. Способ по п.109, где композиция изготовлена в форме для внутримышечной, подкожной, внутриопухолевой или внутрикожной доставки.
111. Способ по любому из пп.1-108, где композицию вводят подкожно, внутривенно, внутримышечно, внутрисуставно, внутрисиновиально, внутригрудинно, интратекально, внутрипеченочно, внутриочагово, интракраниально, интравентрикулярно, перорально, в спрее для ингаляции, наружно, ректально, назально, буккально, вагинально или с помощью имплантируемого резервуара
112. Способ по любому из пп.1-108, где введение лечит рак.
113. Способ по п.112, где рак выбран из группы, состоящей из рака коры надпочечников, распространенного рака, рака анального канала, апластической анемии, рака желчных протоков, рака мочевого пузыря, рака костей, костного метастаза, опухолей головного мозга, рака головного мозга, рака молочной железы, детского рака, рака неизвестного первичного происхождения, болезни Кастлемана, рака шейки матки, рака толстой/прямой кишки, рака эндометрия, рака пищевода, опухолей семейства саркомы Юинга, глазного рака, рака желчного пузыря, желудочно-кишечных карциноидных опухолей, желудочно-кишечных стромальных опухолей, гестационной трофобластической болезни, болезни Ходжкина, саркомы Капоши, почечно-клеточного рака, рака гортани и гипофарингеального рака, острого лимфоцитарного лейкоза, острого миелоидного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, хронического миеломоноцитарного лейкоза, рака печени, гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК), немелкоклеточного рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, карциноидной опухоли легкого, лимфомы кожи, злокачественной мезотелиомы, множественной миеломы, миелодиспластического синдрома, рака носовой полости и околоносовых пазух, рака носоглотки, нейробластомы, неходжкинской лимфомы, рака полости рта и ротоглотки, остеосаркомы, рака яичника, рака поджелудочной железы, рака полового члена, опухолей гипофиза, рака предстательной железы, ретинобластомы, рабдомиосаркомы, рака слюнной железы, саркомы мягких тканей у взрослых, базальноклеточного и плоскоклеточного рака кожи, меланомы, рака тонкой кишки, рака желудка, рака яичка, рака горла, рака тимуса, рака щитовидной железы, саркомы матки, рака влагалища, рака вульвы, макроглобулинемии Вальденстрема, опухоли Вильмса, вторичных раковых опухолей, вызванных лечением рака, и их любой комбинации.
114. Способ по любому из пп.1-108, где композицию вводят с помощью устройства, включающего насос, пластырь, резервуар лекарственного средства, короткоигольное устройство, одноигольное устройство, многоигольное устройство, микроигольное устройство, устройство безыгольного впрыскивания, баллистическое устройство доставки порошка/частиц, катетер, трубку, криозонд, канюлю, микроканюлю или устройства, использующие тепло, радиочастотную энергию, электрический ток, или их любую комбинацию.
115. Способ по любому из пп.1-108, где эффективное количество составляет от приблизительно 0,10 мг/кг до приблизительно 1000 мг/кг.
116. Способ по любому из пп.1-108, где субъект является человеком.
117. Липидная наночастица, включающая полинуклеотид, кодирующий человеческий полипептид IL12, где полинуклеотид включает ORF, кодирующую человеческий полипептид IL12B, функционально связанный с человеческим полипептидом IL12A.
118. Липидная наночастица по п.117, где полипептид IL12B функционально связан с полипептидом IL12A пептидным линкером.
119. Липидная наночастица по п.117 или 118, где полипептид IL12B расположен на 5'-конце полипептида IL12A или пептидного линкера.
120. Липидная наночастица по п.117 или 118, где полипептид IL12A расположен на 5'-конце полипептида IL12B или пептидного линкера.
121. Липидная наночастица по любому из пп.117-120, где пептидный линкер включает Gly/Ser линкер.
n
m
122. Липидная наночастица по п.121, где Gly/Ser линкер включает (GS), где n является 1, 2 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 или 20, и m является 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 или 20.
n
m
123. Липидная наночастица по п.122, где Gly/Ser линкер включает (GS), и где n является 6, и m является 1.
124. Липидная наночастица по любому из пп.117-123, где ORF кодирует сигнальный пептид.
125. Липидная наночастица по п.124, где сигнальный пептид является человеческим сигнальным пептидом IL12B.
126. Липидная наночастица по любому из пп.117-125, где человеческий полипептид IL12B включает аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 23-328 из SEQ ID NO: 48.
127. Липидная наночастица по любому из пп.117-126, где человеческий полипептид IL12A включает аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 336-532 из SEQ ID NO: 48.
128. Липидная наночастица по любому из пп.117-127, где человеческий сигнальный пептид IL12B включает аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 1-22 из SEQ ID NO: 48.
129. Липидная наночастица по любому из пп.117-128, где человеческий полипептид IL12 включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 48.
130. Липидная наночастица по любому из пп.117-129, где полинуклеотид включает участок связывания мкРНК.
131. Липидная наночастица по п.130, где участок связывания мкРНК является участком связывания miR-122.
132. Липидная наночастица по п.131, где участок связывания мкРНК является участком связывания miR-122-3p или miR-122-5p.
133. Липидная наночастица по п.132, где участок связывания мкРНК является участком связывания miR-122-5p, включающим последовательность, представленную в SEQ ID NO: 54.
134. Липидная наночастица по любому из пп.117-133, где полинуклеотид включает 3'-UTR.
135. Липидная наночастица по п.134, где 3'-UTR включают последовательность, представленную в SEQ ID NO: 240.
136. Липидная наночастица по п.134 или 135, где участок связывания мкРНК расположен в 3'-UTR.
137. Липидная наночастица по п.136, где полинуклеотид включает 5'-UTR.
138. Липидная наночастица по п.137, где 5'-UTR включают последовательность, представленную в SEQ ID NO: 39.
139. Липидная наночастица по любому из пп.117-138, где полинуклеотид включает 5'-концевую кэп-структуру.
140. Липидная наночастица по п.139, где 5'-концевой кэп-структурой является Cap0, Cap1, ARCA, инозин, N1-метил-гуанозин, 2′фтор-гуанозин, 7-деаза-гуанозин, 8-оксо-гуанозин, 2-амино-гуанозин, LNA-гуанозин, 2-азидогуанозин, Cap2, Cap4, 5'-метилG-кэп или их аналог.
141. Липидная наночастица по любому из пп.117-140, где полинуклеотид включает 3'-полиA-хвост.
142. Липидная наночастица по п.117, где полинуклеотид включает последовательность, представленную в SEQ ID NO:6.
143. Липидная наночастица по п.117, где полинуклеотид включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 236 или 237.
144. Липидная наночастица по любому из пп.117-143, где полинуклеотид включает ORF, включающую по меньшей мере один модифицированный нуклеозид.
145. Липидная наночастица по п.144, где по меньшей мере один химически модифицированный нуклеозид выбран из группы, состоящей из псевдоуридина, N1-метилпсевдоуридина, 5-метилцитозина, 5-метоксиуридина и их комбинации.
146. Липидная наночастица по п.145, где по меньшей мере один химически модифицированный нуклеозид является N1-метилпсевдоуридином.
147. Липидная наночастица по любому из пп.117-146, где липидная наночастица включает молярное отношение приблизительно 20-60% ионизируемого аминолипида: 5-25% фосфолипида: 25-55% стерина; и 0,5-15% ПЭГ-модифицированного липида.
148. Липидная наночастица по любому из пп.117-147, где липидная наночастица включает молярное отношение приблизительно 50% ионизируемого аминолипида: 10% фосфолипида: 38,5% холестерина; и 1,5% ПЭГ-модифицированного липида.
149. Липидная наночастица по п.148, где ионизируемый аминолипид является Соединением 18.
150. Применение липидной наночастицы по любому из пп.117-149 в производстве лекарственного средства для лечения или задержки прогрессирования рака у индивида, где лекарственное средство включает липидную наночастицу и необязательный фармацевтически приемлемый носитель, и где лечение включает введение лекарственного средства в комбинации с композицией, включающей полипептид ингибитора контрольной точки и необязательный фармацевтически приемлемый носитель.
151. Набор, включающий лекарственное средство, включающее липидную наночастицу по любому из пп.117-149 и необязательный фармацевтически приемлемый носитель, и вкладыш в упаковку, включающий инструкции по применению лекарственного средства отдельно или в комбинации с композицией, включающей полипептид ингибитора контрольной точки и необязательный фармацевтически приемлемый носитель, для лечения или задержки прогрессирования рака у индивида.
152. Набор по п.151, где набор дополнительно включает вкладыш в упаковку, включающий инструкции по применению первого лекарственного средства и второго лекарственного средства для лечения или задержки прогрессирования рака у индивида.
153. Композиция, включающая липидную наночастицу по любому из пп.117-149 и необязательный фармацевтически приемлемый носитель, для применения в лечении или задержке прогрессирования рака у индивида, где лечение включает введение указанной липидной наночастицы в комбинации со второй композицией, где вторая композиция включает полипептид ингибитора контрольной точки и необязательный фармацевтически приемлемый носитель.
154. Фармацевтическая композиция, включающая липидную наночастицу по любому из пп.117-149 и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.
155. Фармацевтическая композиция по п.154, где липидная наночастица изготовлена в форме для внутриопухолевого введения.
156. Набор, включающий контейнер, включающий фармацевтическую композицию по п.154 или 155, и вкладыш в упаковку, включающий инструкции по применению фармацевтической композиции для лечения или задержки прогрессирования рака у индивида.
157. Набор по п.156, где вкладыш в упаковку дополнительно включает инструкции по применению фармацевтической композиции в комбинации с композицией, включающей полипептид ингибитора контрольной точки и необязательный фармацевтически приемлемый носитель, для лечения или задержки прогрессирования рака у индивида.