КОНСТРУКЦИИ, ИМЕЮЩИЕ SIRP-α ДОМЕН ИЛИ ЕГО ВАРИАНТ

1. Полипептид, содержащий вариант D1 сигнального регуляторного белка α (SIRP-α), содержащий домен D1 SIRP-α или его фрагмент, имеющий аминокислотную мутацию в остатке 80 по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа; и по меньшей мере одну дополнительную аминокислотную мутацию по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа в остатке, выбранном из группы, состоящей из: остатка 6, остатка 27, остатка 31, остатка 47, остатка 53, остатка 54, остатка 56, остатка 66 и остатка 92.
2. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что домен D1 SIRP-α дикого типа имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 1-10.
3. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что домен D1 SIRP-α содержит от одной до девяти дополнительных аминокислотных мутаций по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа в остатке, выбранном из группы, состоящей из: остатка 6, остатка 27, остатка 31, остатка 47, остатка 53, остатка 54 остатка 56, остатка 66 и остатка 92.
4. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α содержит аминокислотную последовательность
EEELQX
IQPDKSVLVAAGETATLRCTX
TSLX
PVGPIQWFRGAGPGRX
LIYNQ X
X
GX
FPRVTTVSDX
TKRNNMDFSIRIGX
ITPADAGTYYCX
KFRKGSPDD VEFKSGAGTELSVRAKPS (SEQ ID NO: 49), где X
представляет собой V, L или I; X
представляет собой A, I, V или L; X
представляет собой I, F, S или T; X
представляет собой E, V или L; X
представляет собой K или R; X
представляет собой E или Q; X
представляет собой H, P или R; X
представляет собой L, T, S или G; X
представляет собой A, а X
представляет собой V или I; и при этом вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере две аминокислотные замены по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
5. Полипептид по п.4, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет аминокислотную последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85.
6. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α содержит аминокислотную последовательность
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
6) EEELQXIQPDKSVLVAAGETATLRCTXTSLXPVGPIQWFRGAGPGRXLIYNQ XXGXFPRVTTVSDXTKRNNMDFSIRIGXXXXADAGTYYCXKFRKGSPDD VEFKSGAGTELSVRAKPS (SEQ ID NO: 218), где X представляет собой V, L или I; X представляет собой A, V, L или I; X представляет собой I, S, T или F; X представляет собой E, L или V; X представляет собой K или R; X представляет собой E или Q; X представляет собой H, R или P; X представляет собой S,G, L или T; X представляет собой любую аминокислоту; X представляет собой любую аминокислоту; X представляет собой любую аминокислоту; X представляет собой любую аминокислоту, а X представляет собой V или I; и при этом вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере две аминокислотные замены по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
9
7. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой A.
9
8. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой N.
10
9. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой I.
9
10
10. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой N, а X представляет собой P.
9
11
11. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой N, а X представляет собой любую аминокислоту, отличную от S, T или C.
11
12. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой T.
11
13. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой аминокислоту, отличную от T.
12
14. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой P.
9
12
15. Полипептид по п.6, отличающийся тем, что X представляет собой N, а X представляет собой любую аминокислоту, отличную от P.
16. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α содержит аминокислотную последовательность
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
7) EEELQXIQPDKSVLVAAGETATLRCTXTSLXPVGPIQWFRGAGPGRXLIYNQ XXGXFPRVTTVSDXTKRNNMDFSIRIGXITXADAGTYYCXKFRKGSPDD VEFKSGAGTELSVRAKPS (SEQ ID NO: 219), где X представляет собой V, L или I; X представляет собой A, V, L или I; X представляет собой I, S, T или F; X представляет собой E, L или V; X представляет собой K или R; X представляет собой E или Q; X представляет собой H, R или P; X представляет собой S, G, L или T; X представляет собой N; X представляет собой любую аминокислоту, отличную от P, а X представляет собой V или I; и при этом вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере две аминокислотные замены по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
17. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α содержит аминокислотную последовательность
1
2
3
4
5
6
7
1
2
3
4
5
6
7
EEELQXIQPDKSVLVAAGETATLRCTXTSLXPVGPIQWFRGAGPGRELIYNQ XEGXFPRVTTVSDXTKRNNMDFSIRIGXITPADAGTYYCVKFRKGSPDD VEFKSGAGTELSVRAKPS (SEQ ID NO: 52), где X представляет собой V, L или I; X представляет собой A, I или L; X представляет собой I, T, S или F; X представляет собой K или R; X представляет собой H, P или R; X представляет собой L, T или G, а X представляет собой A; и при этом вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере две аминокислотные замены по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
1
2
3
4
5
6
7
18. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что X представляет собой V или I, X представляет собой A или I, X представляет собой I или F, X представляет собой K или R, X представляет собой H или P, X представляет собой L или T, а X представляет собой A.
19. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере три аминокислотных замены по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
20. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере четыре аминокислотных замены по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
21. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере пять аминокислотных замен по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
22. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере шесть аминокислотных замен по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
23. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере семь аминокислотных замен по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно SEQ ID NO: 1.
1
24. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что X представляет собой I.
2
25. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что X представляет собой I.
3
26. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что X представляет собой F.
4
27. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что X представляет собой R.
5
28. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что X представляет собой P.
6
29. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что X представляет собой T.
1
2
3
4
5
6
30. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что каждый из X, X, X, X, X и X не является аминокислотой дикого типа.
31. Полипептид по п.17, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет аминокислотную последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 81-85.
1
2
3
4
5
6
7
1
2
3
4
5
6
7
32. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α содержит аминокислотную последовательность EEELQXIQPDKSVSVAAGESAILHCTXTSLXPVGPIQWFRGAGPARELIYNQ XEGXFPRVTTVSEXTKRENMDFSISISXITPADAGTYYCVKFRKGSPD TEFKSGAGTELSVRAKPS (SEQ ID NO: 212), где X представляет собой V, L или I; X представляет собой V, I или L; X представляет собой I, T, S или F; X представляет собой K или R; X представляет собой H, P или R; X представляет собой S, T или G, а X представляет собой A; и при этом вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере две аминокислотные замены по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность SEQ ID NO: 2.
D
-9
33. Полипептид по п.1, отличающийся тем, что полипептид связывается с CD47 человека с K менее чем около 5×10  M.
34. Полипептид по п.1, дополнительно содержащий мономер домена Fc, связанный с N-концом или С-концом полипептида, причем мономер домена Fc представляет собой область Fc IgG1, IgG2 или IgG4 человека.
35. Полипептид по п.34, отличающийся тем, что мономер домена Fc содержит по меньшей мере одну мутацию по сравнению с областью Fc дикого типа IgG1, IgG2 или IgG4 человека.
36. Полипептид по п.35, отличающийся тем, что имеет любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 136 или SEQ ID NO: 137.
37. Полипептид по п.35, отличающийся тем, что мономер домена Fc содержит (а) одну из следующих аминокислотных замен по сравнению с IgG1 человека дикого типа: T366W, T366S, L368A, Y407V, T366Y, T394W, F405W, Y349T, Y349E, Y349V, L351T, L351H, L351N, L351K, P353S, S354D, D356K, D356R, D356S, E357K, E357R, E357Q, S364A, T366E, L368T, L368Y, L368E, K370E, K370D, K370Q, K392E, K392D, T394N, P395N, P396T, V397T, V397Q, L398T, D399K, D399R, D399N, F405T, F405H, F405R, Y407T, Y407H, Y407I, K409E, K409D, K409T или K409I; или
8) (b) (i) мутацию N297A по сравнению с областью Fc IgG1 человека; (ii) мутацию L234A, L235A и G237A по сравнению с областью Fc IgG1 человека; (iii) мутацию L234A, L235A, G237A и N297A по сравнению с областью Fc IgG1 человека; (iv) мутацию N297A по сравнению с областью Fc IgG2 человека; (v) мутацию A330S и P331S по сравнению с областью Fc IgG2 человека; (vi) мутацию A330S, P331S и N297A по сравнению с областью Fc IgG2 человека; (vii) мутацию S228P, E233P, F234V, L235A и delG236 по сравнению с областью Fc IgG4 человека, или (viii) мутацию S228P, E233P, F234V, L235A, delG236 и N297A по сравнению с областью Fc IgG4 человека.
38. Полипептид по п.35, отличающийся тем, что демонстрирует снижение фагоцитоза в анализе фагоцитоза по сравнению с полипептидом с областью Fc дикого типа IgG человека.
39. Полипептид по п.35, отличающийся тем, что мономер домена Fc связан со вторым полипептидом, содержащим второй мономер домена Fc, с образованием димера домена Fc.
40. Полипептид по п.39, отличающийся тем, что второй мономер домена Fc связан с дополнительным полипептидом.
41. Полипептид по п.40, отличающийся тем, что дополнительный полипептид содержит вариабельный домен антитела.
42. Полипептид по п.41, отличающийся тем, что вариабельный домен антитела нацелен на антиген, экспрессируемый на клетке.
43. Полипептид по п.42, отличающийся тем, что клетка является раковой клеткой.
44. Полипептид по п.43, отличающийся тем, что вариабельный домен антитела нацелен на поверхностный белок клетки, вовлеченный в регуляцию иммунных клеток.
45. Полипептид по п.40, отличающийся тем, что дополнительный полипептид содержит терапевтический белок.
46. Полипептид по п.45, отличающийся тем, что терапевтический белок представляет собой цитокин, интерлейкин, антиген, стероид, противовоспалительный агент или иммуномодулирующий агент.
47. Полипептид по п.45, отличающийся тем, что дополнительный полипептид содержит вариант D1 SIRP-α.
48. Полипептид по п.1 дополнительно содержащий сывороточный альбумин человека (ЧСА) (SEQ ID NO: 12).
49. Полипептид по п.48, отличающийся тем, что ЧСА содержит аминокислотную замену C34S или K573P по сравнению с SEQ ID NO: 12.
50. Полипептид по п.48, отличающийся тем, что полипептид имеет аминокислотную последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 152-159.
51. Полипептид по п.1, дополнительно содержащий альбуминсвязывающий пептид.
52. Полипептид по п.51, отличающийся тем, что альбуминсвязывающий пептид содержит аминокислотную последовательность DICLPRWGCLW (SEQ ID NO: 160).
53. Полипептид по п.1, дополнительно содержащий полимер полиэтиленгликоль (ПЭГ).
54. Полипептид по п.53, отличающийся тем, что полимер ПЭГ соединен с цистеиновой заменой в полипептиде.
55. Полипептид, содержащий
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
9) (a) вариант D1 сигнального регуляторного белка α (SIRP-α), причем вариант D1 SIRP-α содержит аминокислотную последовательность EEXXQXIQPDKXVXVAAGEXXXLXCTXTSLXPVGPIQWFRGAGPXRXLIYNQ XXGXFPRVTTVSXXTXRXNMDFXIXIXXITXADAGTYYCXKX RKGSPDXXEXKSGAGTELSVRXKPS (SEQ ID NO: 47), где X представляет собой E или G; X представляет собой L, I или V; X представляет собой V, L или I; X представляет собой S или F; X представляет собой L или S; X представляет собой S или T; X представляет собой A или V; X представляет собой I или T; X представляет собой H, R или L; X представляет собой A, V, I или L; X представляет собой I, T, S или F; X представляет собой A или G; X представляет собой E, V или L; X представляет собой K или R; X представляет собой E или Q; X представляет собой H, P или R; X представляет собой D или E; X представляет собой S, L, T или G; X представляет собой K или R; X представляет собой E или N; X представляет собой S или P; X представляет собой S или R; X представляет собой S или G; X представляет собой любую аминокислоту; X представляет собой любую аминокислоту; X представляет собой V или I; X представляет собой F, L или V; X представляет собой D или отсутствует; X представляет собой T или V; X представляет собой F или V, а X представляет собой A или G; и при этом вариант D1 SIRP-α имеет по меньшей мере две аминокислотных заменены по сравнению с доменом D1 SIRP-α дикого типа, имеющим последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 1-10; и
10) (b) вариант Fc, содержащий димер домена Fc, имеющий два мономера домена Fc, причем каждый мономер домена Fc независимо представляет собой (i) область Fc IgG1 человека, содержащую мутацию N297A; (ii) область Fc IgG1 человека, содержащую мутации L234A, L235A и G237A; (iii) область Fc IgG1 человека, содержащую мутации L234A, L235A, G237A и N297A; (iv) область Fc IgG2 человека, содержащую мутацию N297A; (v) область Fc IgG2 человека, содержащую мутации A330S и P331S; (vi) область Fc IgG2 человека, содержащую мутации A330S, P331S и N297A; (vii) область Fc IgG4 человека, содержащую мутации S228P, E233P, F234V, L235A и delG236 или (viii) область Fc IgG4 человека, содержащую мутации S228P, E233P, F234V, L235A, delG236 и N297A.
56. Полипептид по п.55, отличающийся тем, что один из мономеров домена Fc в димере домена Fc содержит область Fc IgG1 человека, содержащую мутации L234A, L235A, G237A и N297A.
57. Полипептид по п.55, отличающийся тем, что полипептид содержит аминокислотную последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 98-104, 107-113, 116-122 или 135-137.
58. Полипептид по п.55, отличающийся тем, что вариант Fc демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с рецептором Fcγ по сравнению с версией дикого типа области Fc IgG человека.
59. Полипептид по п.55, отличающийся тем, что вариант Fc IgG1 или IgG2 демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с рецепторами Fcγ CD16a, CD32a, CD32b, CD32c и CD64 по сравнению с версией дикого типа области Fc IgG1 или IgG2 человека.
60. Полипептид по п.55, отличающийся тем, что вариант Fc IgG4 демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с рецепторами Fcγ CD16a и CD32b по сравнению с версией дикого типа области Fc IgG4 человека.
61. Полипептид по п.55, отличающийся тем, что вариант Fc IgG1 или IgG2 демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с C1q по сравнению с версией дикого типа слитого Fc и IgG1 или IgG2 человека.
D
-6
62. Полипептид по п.55, отличающийся тем, что вариант Fc связывается с рецептором Fcγ с K более чем около 5×10 M.
63. Полипептид, содержащий вариант Fc, причем вариант Fc содержит димер домена Fc, имеющий два мономера домена Fc, при этом каждый мономер домена Fc независимо выбирают из (i) области Fc IgG1 человека, включающей в свой состав мутации L234A, L235A, G237A и N297A; (ii) области Fc IgG2 человека, включающей в свой состав мутации A330S, P331S и N297A или (iii) области Fc IgG4 человека, содержащей мутации S228P, E233P, F234V, L235A, delG236 и N297A.
64. Полипептид по п.63, отличающийся тем, что два мономера домена Fc являются идентичными.
65. Полипептид по п.63, отличающийся тем, что по меньшей мере один из мономеров домена Fc представляет собой область Fc IgG1 человека, состоящую из мутаций L234A, L235A, G237A и N297A.
66. Полипептид по п.63, отличающийся тем, что по меньшей мере один из мономеров домена Fc представляет собой область Fc IgG2 человека, состоящую из мутаций A330S, P331S и N297A.
67. Полипептид по п.63, отличающийся тем, что вариант Fc демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с рецептором Fcγ по сравнению с версией области Fc дикого типа IgG человека.
68. Полипептид по п.67, отличающийся тем, что вариант Fc демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с рецепторами Fcγ CD16a, CD32a, CD32b, CD32c и CD64 по сравнению с версией области Fc дикого типа IgG человека.
69. Полипептид по п.63, отличающийся тем, что вариант Fc демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с C1q по сравнению с версией дикого типа слитого Fc IgG человека.
70. Полипептид по п.63, отличающийся тем, что по меньшей мере один из мономеров домена Fc представляет собой область Fc IgG4 человека, содержащую мутации S228P, E233P, F234V, L235A, delG236 и N297A.
71. Полипептид по п.70, отличающийся тем, что вариант Fc демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с рецептором Fcγ по сравнению с областью Fc дикого типа IgG4 человека.
72. Полипептид по п.71, отличающийся тем, что вариант Fc демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с рецепторами Fcγ CD16a и CD32b по сравнению с версией дикого типа его области Fc IgG4 человека.
D
-6
73. Полипептид по п.63, отличающийся тем, что вариант Fc связывается с рецептором Fcγ с K более чем около 5×10 M.
74. Полипептид по п.63, дополнительно содержащий CD47-связывающий полипептид.
75. Полипептид по п.74, отличающийся тем, что вариант Fc демонстрирует аблированное или уменьшенное связывание с рецептором Fcγ по сравнению с версией дикого типа области Fc IgG человека.
76. Полипептид по п.74, отличающийся тем, что CD47-связывающий полипептид не вызывает острой анемии у грызунов и приматов, отличных от человека.
77. Полипептид по п.74, отличающийся тем, что CD47-связывающий полипептид не вызывает острой анемии у людей.
78. Полипептид по п.74, отличающийся тем, что CD47-связывающий полипептид представляет собой полипептид сигнального регуляторного белка α (SIRP-α) или его фрагмент.
79. Полипептид по п.78, отличающийся тем, что полипептид SIRP-α содержит вариант D1 SIRP-α, содержащий аминокислотную последовательность
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1
2
3
4
5
6
7
8
9
11) EEELQXIQPDKSVLVAAGETATLRCTXTSLXPVGPIQWFRGAGPGRXLIYNQ XEGXFPRVTTVSDXTKRNNMDFSIRIGXITPADAGTYYCXKFRKGSPDD VEFKSGAGTELSVRAKPS (SEQ ID NO: 51), где X представляет собой V или I; X представляет собой A или I; X представляет собой I или F; X представляет собой E или V; X представляет собой K или R; X представляет собой H или P; X представляет собой L или T; X представляет собой аминокислоту, отличную от N, а X представляет собой V или I.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
80. Полипептид по п.79, отличающийся тем, что полипептид SIRP-α содержит вариант D1 SIRP-α, где X представляет собой V или I; X представляет собой A или I; X представляет собой I или F; X представляет собой E; X представляет собой K или R; X представляет собой H или P; X представляет собой L или T; X представляет собой не N, а X представляет собой V.
81. Полипептид, содержащий вариант D1 сигнального регуляторного белка α (SIRP-α), причем вариант D1 SIRP-α представляет собой неприродный высокоаффинный домен D1 SIRP-α, при этом вариант D1 SIRP-α связывается с CD47 человека с аффинностью, которая по меньшей мере в 10 раз больше, чем аффинность природного домена D1 SIRP-α, связывающегося с CD47 человека; и мономер домена Fc, причем мономер домена Fc связан со вторым полипептидом, содержащим второй мономер домена Fc, с образованием домена Fc, при этом домен Fc имеет аблированную или уменьшенную эффекторную функцию и аблированное и уменьшенное связывание с C1q.
82. Полипептид по п.81, отличающийся тем, что неприродный высокоаффинный домен D1 SIRP-α содержит аминокислотную мутацию в остатке 80.
D
D
D
D
83. Полипептид, содержащий вариант D1 сигнального регуляторного белка α (SIRP-α), причем вариант D1 SIRP-α связывает CD47 первого вида с K менее 250 нМ; и при этом вариант D1 SIRP-α связывает CD47 второго вида с K менее 250 нМ; и K для CD47 первого вида и K для CD47 второго вида отличаются в 100 раз друг от друга; причем первый вид и второй вид выбраны из группы, состоящей из человека, грызуна и приматов, отличных от человека.
84. Полипептид по п.83, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP- α связывает CD47 по меньшей мере 3 различных видов.
85. Полипептид по п.83, отличающийся тем, что примат, не являющийся человеком, представляет собой яванского макака.
D
86. Полипептид, содержащий (a) домен D1 сигнального регуляторного белка α (SIRP- α), который связывает CD47 человека с K менее 250 нМ; и (b) мономер домена Fc, связанный с N-концом или С-концом домена D1 SIRP-α, причем полипептид не вызывает острой анемии у грызунов и приматов, отличных от человека.
87. Полипептид по п.86, отличающийся тем, что представляет собой неприродный вариант домена D1 SIRP-α человека.
in vivo
88. Полипептид по п.86, отличающийся тем, что введение полипептида приводит к снижению гемоглобина менее чем на 50% в течение первой недели после введения.
89. Полипептид по п.86, отличающийся тем, что введение полипептида человеку приводит к снижению гемоглобина менее чем на 50% в течение первой недели после введения.
90. Полипептид по п.83, дополнительно содержащий по меньшей мере один вариант Fc, причем вариант Fc выбирают из (i) области Fc IgG1 человека, включающей в свой состав мутации L234A, L235A, G237A и N297A; (ii) области Fc IgG2 человека, включающей в свой состав мутации A330S, P331S и N297A; или (iii) области Fc IgG4 человека, содержащей мутации S228P, E233P, F234V, L235A, delG236 и N297A.
91. Полипептид по п.90, отличающийся тем, что вариант Fc представляет собой область Fc IgG1 человека, включающей в свой состав мутации L234A, L235A, G237A и N297A.
92. Полипептид по п.90, отличающийся тем, что вариант Fc представляет собой область Fc IgG2 человека, включающей в свой состав мутации A330S, P331S и N297A.
93. Полипептид по п.90, отличающийся тем, что вариант Fc представляет собой область Fc IgG4 человека, содержащую мутации S228P, E233P, F234V, L235A, delG236 и N297A.
94. Способ лечения индивидуума, имеющего заболевание или расстройство, включающий введение индивидууму полипептида по любому из пп. 1-93.
95. Способ по п.94, отличающийся тем, что заболевание или расстройство представляет собой рак, аутоиммунное заболевание или воспалительное заболевание.
96. Способ по п.94, отличающийся тем, что заболевание или расстройство представляет собой рак, а рак выбирают из рака с солидной опухолью, гематологического рака, острого миелоидного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, неходжкинской лимфомы, лимфомы Ходжкина, множественной миеломы, рака мочевого пузыря, рака поджелудочной железы, рака шейки матки, рака эндометрия, рака легкого, рака бронхов, рака печени, рака яичника, рака толстой кишки и прямой кишки, рака желудка, рака желудочно-кишечного тракта, рака желчного пузыря, желудочно-кишечной стромальной опухоли, рака щитовидной железы, рака головы и шеи, рака ротоглотки, рака пищевода, меланомы, немеланомного рака кожи, карциномы из клеток Меркеля, вирус-индуцированного рака, нейробластомы, рака молочной железы, рака предстательной железы, рака почки, почечно-клеточного рака, рака почечной лоханки, лейкоза, лимфомы, саркомы, глиомы, опухоли головного мозга и карциномы.
97. Способ по п.94, отличающийся тем, что заболевание или расстройство представляет собой аутоиммунное заболевание или воспалительное заболевание, а аутоиммунное заболевание или воспалительное заболевание выбирают из рассеянного склероза, ревматоидного артрита, спондилоартропатии, системной красной волчанки, опосредованного антителом воспалительного или аутоиммунного заболевания, заболевания «трансплантат против хозяина», сепсиса, диабета, псориаза, атеросклероза, синдрома Шегрена, прогрессирующего системного склероза, склеродермии, острого коронарного синдрома, ишемической реперфузии, болезни Крона, эндометриоза, гломерулонефрита, миастении гравис, идиопатического легочного фиброза, астмы, острого респираторного дистресс-синдрома (ARDS), васкулита и воспалительного аутоиммунного миозита.
98. Способ по п.94, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
99. Способ по п.98, дополнительно включающий введение по меньшей мере одного дополнительного агента.
100. Способ по п.99, отличающийся тем, что по меньшей мере один дополнительный агент представляет собой антитело, опухолеассоциированный антиген или терапевтическое средство, отличное от антитела.
101. Способ по п.100, отличающийся тем, что вводят по меньшей мере два дополнительных агента.
102. Способ по п.101, отличающийся тем, что по меньшей мере два дополнительных агента включают два антитела.
103. Способ по п.101, отличающийся тем, что по меньшей мере два дополнительных агента включают антитело и опухолеассоциированный антиген.
104. Способ по п.100, отличающийся тем, что по меньшей мере один дополнительный агент представляет собой антитело.
105. Способ по п.104, отличающийся тем, что антитело представляет собой антитело изотипа IgG1 человека.
106. Способ по п.104, отличающийся тем, что антитело представляет собой антитело изотипа IgG2 человека.
107. Способ по п.104, отличающийся тем, что антитело представляет собой антитело изотипа IgG4 человека.
108. Способ по п.104, отличающийся тем, что антитело выбирают из антитела против HER2, антитела против CD20, антитела против CD19, антитела против CS1, антитела против CD38, антитела против EGFR, антитела против PD1, антитела против OX40, антитела против PD-1, антитела против PD-L1, антитела против RANKL, антитела против CD274, антитела против CTLA-4, антитела против CD137, антитела против 4-1BB, антитела против B7-H3, антитела против FZD7, антитела против CD27, антитела против CCR4, антитела против CD38, антитела против CSF1R, антитела против CSF, антитела против CD30, антитела против BAFF, антитела против VEGF или антитела против VEGFR2.
109. Способ по п.108, отличающийся тем, что антитело выбирают из антитела против HER2, антитела против CD20, антитела против CD19, антитела против CS1, антитела против CD38, антитела против PD-1, антитела против RANKL или антитела против PD-L1.
110. Способ по п.104, отличающийся тем, что по меньшей мере один дополнительный агент представляет собой по меньшей мере одно антитело, а антитело выбирают из цетуксимаба, нецитумумаба, пембролизумаба, ниволумаба, пидилизумаба, MEDI0680, MED16469, атезолизумаба, авелумаба, дурвалумаба, MEDI6383, RG7888, ипилимумаба, тремелимумаба, урелумаба, PF-05082566, эноблитузумаба, вантиктумаба, варлилумаба, могамалимузумаба, SAR650984, даратумумаба, трастузумаба, трастузумаб емтансина, пертузумаба, элотузумаба, ритуксимаба, офатумумаба, обинутузумаба, RG7155, FPA008, панитумумаба, брентуксимаб ведотина, MSB0010718C, белимумаба, бевацизумаба, деносумаба, панитумумаба, рамуцирумаба, нецитумумаба, ниволумаба, пембролизумаба, авелумаба, атезолизумаба, дувалумаба, MEDI0680, пидилизумаба или BMS-93659.
111. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой трастузумаб.
112. Способ по п.111, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
113. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой ритуксимаб.
114. Способ по п.113, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
115. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой цетуксимаб.
116. Способ по п.115, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
117. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой даратумумаб.
118. Способ по п.117, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
119. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой белимумаб.
120. Способ по п.119, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
121. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой бевацизумаб.
122. Способ по п.121, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
123. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой деносумаб.
124. Способ по п.123, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
125. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой панитимумаб.
126. Способ по п.125, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
127. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой рамуцирумаб.
128. Способ по п.127, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
129. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой нецитумумаб.
130. Способ по п.129, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
131. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой ниволумаб.
132. Способ по п.131, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
133. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой пембролизумаб.
134. Способ по п.133, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
135. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой авелумаб.
136. Способ по п.135, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
137. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой атезолизумаб.
138. Способ по п.137, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
139. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой дурвалумаб.
140. Способ по п.139, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
141. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой MEDI0680.
142. Способ по п.141, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
143. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой пидилизумаб.
144. Способ по п.143, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
145. Способ по п.110, отличающийся тем, что антитело представляет собой BMS-93659.
146. Способ по п.145, отличающийся тем, что вариант D1 SIRP-α имеет последовательность согласно любой из SEQ ID NO: 78-85, 98-104, 107-113, 116-122, 135-137 или 152-159.
147. Способ по п.110, отличающийся тем, что меньшей мере один дополнительный агент представляет собой опухолеассоциированный антиген, и указанный опухолеассоциированный антиген вызывает иммунный ответ.
148. Способ по п.110, отличающийся тем, что по меньшей мере один дополнительный агент представляет собой антитело, и указанное антитело нацелено на комплекс HLA/пептид или MHC/пептид.
149. Способ по п.148, отличающийся тем, что антитело нацелено на комплекс HLA/пептид или MHC/пептид, содержащий NY-ESO-1/LAGE1, SSX-2, семейство MAGE (MAGE-A3), gp100/pmel17, Melan-A/MART-1, gp75/TRP1, тирозиназу, TRP2, CEA, PSA, TAG-72, незрелый рецептор ламинина, MOK/RAGE-1, WT-1, Her2/neu, EphA3, SAP-1, BING-4, Ep-CAM, MUC1, PRAME, сурвивин, Mesothelin, BRCA1/2 (мутированный), CDK4, CML66, MART-2, p53 (мутированный), Ras (мутированный), β-катенин (мутированный), TGF-βRII (мутированный), HPV E6 или E7.
150. Способ по п.149, отличающийся тем, что антитело представляет собой ESK1, RL1B, Pr20 или 3.2G1.
151. Полипептид по п.1 для применения в лечении рака.
152. Полипептид по п.1 для применения в лечении аутоиммунного заболевания.
153. Полипептид по п.1 для применения в лечении воспалительного заболевания.
154. Применение полипептида по п.1 для получения лекарственного средства для лечения рака.
155. Применение полипептида по п.1 для получения лекарственного средства для лечения аутоиммунного заболевания.
156. Применение полипептида по п.1 для получения лекарственного средства для лечения воспалительного заболевания.