Способ доставки гранзима B в клетку млекопитающего для инициации цитотоксической реакции

1. Способ доставки гранзима B опухолевую клетку млекопитающего с помощью контейнера, отличающийся тем, что гранзим B заключен внутрь наноконтейнера, способного проникать внутрь клетки, после чего молекулы гранзима B покидают контейнер и попадают в цитоплазму.
2. Способ по п. 1, где контейнер проникает в клетку путем эндоцитоза.
3. Способ по п. 1, где контейнер разрушается в лизосоме, высвобождая гранзим В.
4. Способ по п. 1, где молекулы гранзима В покидают контейнер путем диффузии.
5. Способ по п. 1, где гранзим В, проникший в клетку, инициирует реакцию апоптоза.
6. Способ по п. 1, где гранзим В, проникший в клетку, инициирует цитотоксическую реакцию.
7. Способ по п. 1, в котором гранзим B имеет модификации N-концевого домена.
8. Способ по п. 1, в котором гранзим B имеет мутации, снижающие его чувствительность к ингибиторам протеаз.
9. Наноконтейнер для доставки гранзима B в клетку млекопитающего, отличающийся тем, что он проникает в клетку через клеточную мембрану, освобождая гранзим B внутри клетки.
10. Наноконтейнер по п. 9, который способен разрушаться в лизосомах.
11. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 9, способный проникать в клетку посредством эндоцитоза.
12. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 9, способный сливаться с мембраной клетки.
13. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 9, способный самостоятельно проходить через мембрану клетки.
14. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 9 с размерами от 1 до 999 нм, предпочтительно до 600 нм.
15. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 9, имеющий поверхность, на которой могут быть размещены молекулы для таргетной доставки, способные связываться с антигенами, расположенными на поверхности преимущественно опухолевых клеток.
16. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 13, который с помощью молекул для таргетной доставки взаимодействует с антигенами на поверхности клетки, выбранными из списка: CD1, CD2, CD3, CD4, CD5, CD7, CD8, CD10, CD11a, CD11c, CD13, CD14, CD15, CD16, CD18, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD25, CD28, CD30, CD33, CD34, CD36, CD38, CD40, CD41, CD44, CD45, CD51, CD52, CD56, CD62L, CD70, CD79b, CD80, CD95, CD117, CD125, CD137, CD138, CD147, CD242, CD319, гликофорин A, антигены лёгкой и/или тяжёлой цепи иммуноглобулина, T-клеточный рецептор, ACVR2B, VEGF, VEGFR, VEGFR2, PCSK9, HLA-DR, BCMA, BAFF, EGFR, FGFR2, EpCAM, RANKL, GD2, SLAMF7, CCR4, CEA, DPP4, RTN4, PDGFRα, Notch 1, HER2, B7-H3, Nectin-4, ICAM-1, CTLA4, PD-L1, PD-L2, SOST, CSF1R, MUC1, VWF, DLL4, MUC5AC, RANKL, DR5, AXL, HER3, NKG2A, MCP-1, PDCP1, PD-1, MCAM, PTK7, IGHE, TFPI, TfR, GCGR, CCR2, PCSK9, PRAME.
17. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 13, на котором молекулы для таргетной доставки, связывающие антигены на поверхности опухолевой клетки, представлены структурами, выбранными из списка: антитела, антиген-связывающие фрагменты, молекулы, содержащие антиген-распознающие участки, белки, способные связываться с антигенами по принципам лиганд-рецептор.
18. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 9, стенки которого выполнены из как минимум одного вида материала, выбранного из списка: пептидные молекулы, олигонуклеотиды, полиэтиленвинилацетат, разветвленный карбоксилированный поли-β-аминоэфир, сополимеры молочной и гликолевой кислот, циклодекстрины, углерод, золото, оксид железа, липиды.
19. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 16, стенки которого дополнительно содержат антитела, белки, лиганды для мембранных рецепторов, полиэтиленгликоль.
2000
3000
20. Наноконтейнер с гранзимом B по п. 16, в котором стенка контейнера содержит молекулы, выбранные из списка: фосфатидилхолин, холестерин, mPEG-DSPE, pNp-PEG-lipid, белки, пептиды, полиэтиленвинилацетат, молочную кислоту, гликолевую кислоту, циклодекстрины, аллотропные модификации углерода, золото.