ПОЛИПЕПТИДЫ НА ОСНОВЕ МОДИФИЦИРОВАННОГО ФАКТОРА VII И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Модифицированный полипептид фактора VII (FVII, включающий гетерологичный домен Gla, или его часть, достаточную для связывания с фосфолипидами, и одну или более дополнительных модификаций аминокислоты (аминокислот), которые повышают устойчивость к антитромбину III (AT-III), увеличивают способность связывать и/или аффинность к фосфолипидам, повышают аффинность к тканевому фактору (ТФ), повышают собственную активность, повышают ТФ-зависимую каталитическую или коагулянтную активность, увеличивают коагулянтную активность, изменяют конформацию полипептида для изменения зимогенности, увеличивают каталитическую или коагулянтную активность, сдвигая равновесие между высокоактивной и менее активной конформациями FVIIa в пользу высокоактивной конформации, повышают устойчивость к протеазам, уменьшают гликозилирование, увеличивают гликозилирование, снижают иммуногенность, увеличивают стабильность и/или способствуют связыванию химических групп.
2. Модифицированный полипептид FVII по п.1, в котором гетерологичный домен Gla выбран из Gla домена фактора IX (FIX), фактора X (FX), протромбина, протеина C, протеина S, остеокальцина, Gla белка матрикса, белка Gas6 и белка Z.
3. Модифицированный полипептид FVII по п.1, в котором гетерологичный домен Gla имеет последовательность аминокислот, приведенную в любой из SEQ ID №№: 110-118, 120 и 121, или который обладают его частью, достаточной для связывания с фосфолипидами.
4. Модифицированный полипептид FVII по п.1, в котором непрерывная часть нативного FVII Gla домена, или весь домен удалены и заменены гетерологичным доменом Gla, или его частью, достаточной для связывания с фосфолипидами.
5. Модифицированный полипептид FVII по п.1, включающий модификации, выбранные из Gla замены из FIX, Gla замены из FX, Gla замены из белка C, Gla замены из белка S, Gla ззамены из тромбина.
6. Модифицированный полипептид FVII по п.1, проявляющий увеличенную аффинность или способность связывать фосфолипиды по сравнению с немодифицированным FVII полипептидом.
7. Модифицированный полипептид FVII по п.1, где: модифицированный полипептид FVII содержит дополнительные модификации для проявления повышенной устойчивости к ингибитору пути тканевого фактора (TFPI) по сравнению с немодифицированным FVII полипептидом.
8. Модифицированный полипептид FVII по п.7, в котором дополнительные модификации представляют собой одну или несколько модификаций аминокислоты (аминокислот) в позициях, выбранных из D196, К197, К199, G237, T239, R290 и K341 в полипептиде FVII с последовательностью аминокислот, приведенной в SEQ ID №: 3, или в соответствующих остатках в полипептиде FVII.
9. Модифицированный полипептид FVII по п.8, в котором одна или несколько модификаций аминокислоты (аминокислот) выбраны из D196K, D196R, D196A, D196Y, D196M, D196W, D196L, D196I, K197Y, K197A, K197E, K197D, K197L, K197M, K1 971, K197V, K197F, K197W, K199A, K199D, K199E, G237W, G237T, G237I, G237V, T239A, R290M, R290E, R290D, R290N, R290Q, R290K, K341E, K341R, K341N, K341M, K341D, K341Q, G237T238вставкаA, G237T238вставкаS, G237T238вставкаV, G237T238вставкаAS, G237T238вставкаSA, D196K197вставкаK, D196K197вставкаR, D196K197вставкаY, D196K197вставкаW, D196K197вставкаA, D196K197вставкаM, K197I198вставкаE, K197I198вставкаY, K197I198вставкаA или K197I198вставкаS.
10. Модифицированный полипептид FVII по п.9, в котором одна или несколько модификаций аминокислоты (аминокислот) выбраны из D196R/R290E, D196K/R290E, D196R/R290D, D196R/K197E/K199E, D196K/K197E/K199E, D196R/K197E/K199E/R290E, D196R/K197M/K199E и D196R/K197M/K199E/R290E.
11. Модифицированный полипептид фактора VII (FVII), включающий модификацию в полипептиде FVII, его аллельных и видовых вариантах, или его активных фрагментах, где
эта модификация осуществлена в положениях, соответствующих положениям D 196, K 197 или K 199 в полипептиде FVII, имеющем последовательность аминокислот, приведенную в SEQ ID №: 3, или в соответствующих остатках в полипептиде FVII; и
модификация представляет собой замену на гидрофобные или кислые аминокислоты,
где гидрофобные или кислые аминокислоты выбраны из VaL (V), Leu (L), Ile (I), Phe (F), Trp (W), Met (M), Tyr (Y), Cys (C), Asp (D) и Glu (E), и который обладает увеличенной коагулянтной активностью и/или повышенной устойчивостью к ингибиторам по сравнению с немодифицированным полипептидом FVII.
12. Модифицированный полипептид FVII по п.11, в котором модификация в полипептиде FVII выбрана из D196F, D196W, D196L, D196I, K197E, K197D, K197L, K197M, K197I, K197V, K197F, K197W, K199D и K199E.
13. Модифицированный полипептид FVII по п.11, в котором модификация в полипептиде FVII представляет собой D196Y или K197Y.
14. Модифицированный полипептид FVII по п.11, который дополнительно содержит дополнительную модификацию в другой позиции полипептида FVII.
15. Модифицированный полипептид FVII по п.14, в котором дополнительная модификация представляет собой замену аминокислоты, вставку или делецию.
16. Модифицированный полипептид FVII по п.14, в котором дополнительная модификация представляет собой замену аминокислоты или вставку аминокислоты по позиции, выбранной из D196, K197, K199, G237, T239, R290 и K.341, где первая модификация и вторая модификация затрагивают различные аминокислоты.
17. Модифицированный полипептид FVII по п.14, в котором дополнительные модификации аминокислот выбраны из D196K, D196R, D 196, D196Y, D196F, D196W, D196L, D196I, K197Y, K197A, K197E, K197D, K197L, K197M, K197I, K197V, K197F, K197W, K199A, K199D, K199E, G237W, G237T, G237I, G237V, T239A, R290A, R290E, R290D, R290N, R290Q, R290K, K341E, K341R, K341N, K341M, K341D и K341Q.
18. Модифицированный полипептид FVII по п.16, в котором дополнительная модификация аминокислот представляет собой вставку, выбранную из G237T238вставкаA, G237T238вставкаS, G237T238вставкаV, G237T238вставкаAS, G237T238вставкаSA, D196K197вставкаK, D196K197вставкаR, D196K197вставкаY, D196K197вставкаW, D196K197вставкаA, D196K197вставкаM, K197I198вставкаE, K197I198вставкаY, K197I198вставкаA и K197I198вставкаS.
19. Модифицированный полипептид FVII по п.14, включающий модификации, выбранные из D196R/K197E/K199E, D196K/K197E/K199E, D196R/K197E/K199E/R290E, D196R/K197M/K199E, D196R/K197M/K199E/R290E, D196K/K197L, D196F / K197L, D196L / K197L, D196M/K197L. D196W/K197L, D196F/K197E, D196W/K197E, K196V/K197E, K197E/K341Q, K197L/K341Q, K197E/G237V/K341Q, K197E/К199E, K197E/G237V, K199E/K341Q и K197E/K199E/K341Q.
20. Модифицированный полипептид фактора VII (FVII), включающий модификацию в полипептиде FVII, его аллельных или видовых вариантах, или его активных фрагментах, выбранную из изменений аминокислот D196R, G237W, G237I, G237V, R290M, R290V, K341M, K341D, G237T238вставкаA, G237T238вставкаS, G237T238вставкаV. G237T238вставкаAS, G237T238вставкаSA, D196K197вставкаK, D196K197вставкаR D196K197вставкаY, D196K197вставкаW, D196K197вставкаA, D196K197вставкаM, K197I198вставкаE, K197I198вставкаY, K197I198вставкаA или K197I198вставкаS в полипептиде FVII, имеющем последовательность аминокислот, приведенную в SEQ ID №: 3, или в соответствующих остатках в полипептиде FVII.
21. Модифицированный полипептид FVII по п.20, включающий дополнительную модификацию по другой позиции в полипептиде FVII.
22. Модифицированный полипептид FVII по п.21, в котором дополнительная модификация представляет собой замену аминокислоты, вставку или делецию.
23. Модифицированный полипептид FVII по п.21, в котором дополнительная модификация представляет собой одну или несколько замен аминокислот в позициях, выбранным из D196, K197, K199, G237, T239, R290 и K341, где дополнительная модификация происходит в иной позиции, чем первая модификация.
24. Модифицированный полипептид FVII по п.23, в котором дополнительная модификация аминокислот выбрана из D196K, D196R, D196A, D196Y, D196F, D196M, D196W, D196L, D196I, K197Y, K197A, K197E, K197D, K197L, K197M, K197I, K197V, K197F, K197W, K199A, K199D, K199E, G237W, G237T, G237I, G237V, T239A, R290A, R290E, R290D, R290N, R290Q, R290K, K341E, K341R, K341N, K341M, K341D и K341Q.
25. Модифицированный полипептид FVII по п.24, включающий модификации, выбранные из D196R/R290E, D196R/R290D, D196R/K197E/K199E, D196K/K197E/K199E, D196R/K197E/K199E/R290E, D196R/K197M/K199E, D196R/K197M / K199E/R290E, D196K/K197L, D196F/K197L, D196L/K197L, D196M/K197L, D196W/K197L, D196F/K197E, D196W/K197E, K197L/K341Q, G237V/K341Q, K197E/G237V/K341Q, К197Е/К199Е, K197E/G237V, K199E/K341Q, K197E/K199E/K341Q и K196V/K197E.
26. Модифицированный полипептид фактора VII (FVII), включающий две или более модификации в полипептиде FVII, его аллельных или видовых вариантах, или его активных фрагментах, в котором:
две или более модификации аминокислот выбраны из D196K, D196R, D196A, D196Y, D196F, D196M, D196W, D196L, D196I, K197Y, К197А, К197Е, K197D, K197L, К197М, K197I, K197V, K197F, K197W, К199А, K199D, K199E, G237W, G237T, G237I, G237V, T239A, R290A, R290E, R290D, R290N, R290Q, R290K, K341E, K341R, K341N, K341M, K341D, K341Q, G237T238вставкаA, G237T238вставкаS, G237T238вставкаV, G237T238вставкаAS, G237T238вставкаSA, G196K197вставкаK, G196K197вставкаR, G196K197вставкаY, D196K197вставкаW, D196K197вставкаA, D196K197вставкаM, K197I198вставкаE, K197I198вставкаY, K197I198вставкаA или K197I198вставкаS в полипептиде FVII, имеющем последовательность аминокислот, приведенную в SEQ ID №: 3, или в соответствующих остатках в полипептиде FVII.
27. Модифицированный полипептид FVII по п.26, в котором в FVII полипептиде содержится 2, 3, 4, 5, 6 или 7 модификаций.
28. Модифицированный полипептид FVII по п.26, включающий модификации, выбранные из D196R/R290E, D196K/R290E, D196R/R290D, D196R/K197E/K199E, D196K/K197E/K199E, D196R/K197E/K199E/R290E, D196R/K197M/K199E, D196R/K197M/K199E/R290E, D196K/K197L, D196F/K197L, D196L/K197L, D196M/K197L, D196W/K197L, D196F/K197E, D196W/K197E, D196V/K197E, K197E/K341Q, K197L/K341Q, G237V/K341Q, K197E/G237V/K341Q, K197E/K199E, K197E/G237V, K199E/K341Q, K197E/K199E/K341Q и K197E/G237V/M298Q.
29. Модифицированный полипептид FVII по п.11, который проявляют повышенную устойчивость к ингибитору пути тканевого фактора (TFPI), по сравнению с немодифицированным FVII полипептидом.
30. Модифицированный полипептид FVII по п.11, дополнительно включающий гетерологичный домен Gla, или его часть, достаточную для связывания с фосфолипидами.
31. Модифицированный полипептид FVII по п.11, включающий одну или более дополнительных модификаций аминокислоты (аминокислот), которые повышают устойчивость к антитромбину III (AT-III), увеличивают способность связывать и/или аффинность к фосфолипидам, повышают аффинность к тканевому фактору (ТФ), повышают собственную активность, повышают ТФ-зависимую каталитическую или коагулянтную активность, увеличивают коагулянтную активность, изменяют конформацию полипептида для изменения зимогенности, увеличивают каталитическую или коагулянтную активность, сдвигая равновесие между высокоактивной и менее активной конформациями FVIIa в пользу высокоактивной конформации, повышают устойчивость к протеазам, уменьшают гликозилирование, увеличивают гликозилирование, снижают иммуногенность, увеличивают стабильность и/или способствуют связыванию химических групп.
32. Модифицированный полипептид FVII по п.1, включающий одну или более дополнительных модификаций аминокислоты (аминокислот) в позициях Q176, M298 и E296 в полипептиде FVII с последовательностью аминокислот, приведенной в SEQ ID №: 3, или в соответствующих остатках в полипептиде FVII.
33. Модифицированный полипептид FVII по п.32, в котором модификации аминокислот выбраны из Q176A, M298Q, E296V и E296A.
34. Модифицированный полипептид FVII по п.33, включающий модификации аминокислот, выбранные из V158D/G237V/E296V/M298Q, K197E/G237V/M298Q, K197E/G237V/M298Q/K341Q, K197E/K199E/G237V/M298Q/K341Q, G237V/M298Q, G237V/M298Q/K341Q, M298Q/Gla замена из FIX, K197E/M298Q и M298Q/K341D.
35. Модифицированный полипептид FVII по п.1, включающий одну или несколько дополнительных модификаций аминокислоты (аминокислот), выбранных из S278C/V302C, L279C/N301C, V280C/V301C, S281C/V299C, вставки тирозина в положение 4, F4S, F4T, P1OQ, P1OE, P1OD, P1ON, Q21N, R28F, R28E, I30C, 130D, I30E, K32D, K32Q, K32E, K32G, K32H, K32T, K32C, K32A, K32S, D33C, D33F, D33E, D33K, A34C, A34E, A34D, A34I, A34L, A34M, A34V, A34F, A34W, A34Y, R36D, R36E, T37C, T37D, T37E, K38C, K38E, K38T, K38D, K38L, K38G, K38A, K38S, K38N, K38H, L39E, L39Q, L39H, W41N, W41C, W41E, W41D, I42R, I42N, I42S, I42A, I42Q, I42N, I42S, I42A, I42Q, I42K, S43Q, S43N, Y44K, Y44C, Y44D, Y44E, S45C, S45D, S45E, D46C, A5 IN, S53N, G58N, G59S, G59T, K62E, K62R, K62D, K62N, K62Q, K62T, L65Q, L65S, L65N, F71D, F71Y, F71E, F71Q, F71N, P74S, P74A, А75Е, A75D, Е77А, E82Q, E82N, E82S, E82T T83K, N95S, N95T, G97S, G97T, Y1O1N, D104N, T106N, K109N, E1 16D, G1 17N, G124N, S126N, T128N, L141C, L141D, L141E, E142D, E142C, K143C, K143D, K143E, R144E, R144C, R144D, N145Y, N145G, N145F, N145M, N145S, N1451, N145L, N145T, N145V, N145P, N145K, N145H, N145Q, N145E, N145R, N145W, N145D, N145C, K157V, K157L, K157I, K157M, K157F, K157W, K157P, K157G, K157S, K157T, K157C, K157Y, K157N, K157E, K157R, K157H, K157D, K157Q, V158L, VI 581, V158M, V158F, V158W, V158P, V158G, V158S, V158T, V158C, V158Y, V158N, V158E. V158R, V158K, V158H, V158D, V158Q, A175S, A175T, G179N, I186S, I186T, V188N, R202S, R202T, I205S, I205T, D212N, E220N, I230N, P231N, P236N, G237N, Q250C, V253N, E265N, T267N, E270N, A274M, A274L, A274K, A274R, A274D, A274V, A274I, A274F, A274W, A274P, A274G, A274T, A274C, A274Y, A274N, A274E, A274H, A274S, A274Q, F275H, R277N, F278S, F278A. F278N, F278Q, F278G, L280N, L288K, L288C, L288D, D289C, D289K, L288E, R290C, R290G, R290A, R290S, R290T, R290K, R290D, R290E, G291E, G291D, G291C, G291N, G291K, A292C, A292K, A292D, A292E, T293K, E296V, E296L, E296I, E296M, E296F, E296W, E296P, E296G, E296S, E296T, E296C, E296Y, E296N, E296K, E296R, E296H, E296D, E296Q, M298Q, M298V, M298L, M298I, M298F, M298W, M298P, M298G, M298S, M298T, M298C, M298Y, M298N, M298K, M298R, M298H, M298E, M298D, P303S, P303ST, R304Y, R304F, R304L, R304M, R304G, R304T, R304A, R304S, R304N, L305V, L305Y, L305I, L305F, L305A, L305M, L305W, L305P, L305G, L305S, L305T, L305C, L305N, L305E, L305K, L305R, L305H, L305D, L305Q, M306D, M306N, D309S, D309T, Q312N, Q313K, Q313D, Q313E, S314A, S314V, S3141, S314M, S314F, S314W, S314P, S314G, S314L, S314T, S314C, S314Y, S314N, S314E, S314K, S314R, S314H, S314D, S314Q, R315K, R315G, R315A, R315S, R315T, R315Q, R315C, R315D, R315E, K316D, K316C, K316E, V317C, V317K, V317D, V317E, G318N, N322Y, N322G, N322F, N322M, N322S, N322I, N322L, N322T, N322V, N322P, N322K, N322H, N322Q, N322E, N322R, N322W, N322C, G331N, Y332S, Y332A, Y332N, Y332Q, Y332G, D334G, D334E, D334A, D334V, D334I, D334M, D334F, D334W, D334P, D334L, D334T, D334C, D334Y, D334N, D334K, D334R, D334H, D334S, D334Q, S336G, S336E, S336A, S336V, S336I, S336M, S336F, S336W, S336P, S336L, S336T, S336C, S336Y, S336N, S336K, S336R, S336H, S336D, S336Q, K337L, K337V, K337I, K337M, K337F, K337W, K337P, K337G, K337S, K337T, K337C, K337Y, K337N, K337E, K337R, K337H, K337D, K337Q, K341E, K341Q, K341G, K341T, K341A, K341S, G342N, H348N, R353N, Y357N, I361N, F374P, F374A, F374V, F374I, F374L, F374M, F374W, F374G, F374S, F374T, F374C, F374Y, F374N, F374E, F374K, F374R, F374H, F374D, F374Q, V376N, R379N, L390C, L390K, L390D, L390E, M391D, М391С, М391К, M391N, М391Е, R392C, R392D, R392E, S393D, S393C, S393K, S393E, Е394К, Р395К, Е394С, P395D, Р395С, Р395Е, R396K, R396C, R396D, R396E, P397D, Р397К, Р397С, Р397Е, G398K, G398C, G398D, G398E, V399C, V399D, V399K, V399E, L400K, L401K, L401C, L401D, L401E, R402D, R402C, R402K, R402E, А403К, А403С, A403D, А403Е, Р404Е, P404D, Р404С, Р404К, F405K, Р406С, K32N/A34S, K32N/A34T, F31N/D33S, F31N/D33T, I30N/K32S, I30N/K32T, A34N/R36S, A34N/R36T, K38N/F40S, K38N/F40T, T37N/L39S, T37N/L39T, R36N/K38S, R36N/K38T, L39N/W41S, L39N/W41T, F40N/I42S, F40N/I42T, I42N/ Y44S, I42N/ Y44T, Y44N/ D46S, Y44N/ D46T, D46N/D48S, D46N/D48T, G47N/Q49S, G47N/Q49T, K143N/N145S, K143N/N145T, E142N/R144S, E142N/R144T, L141N/K143S, L141N/K143T, I140N/E142S/, I140N/E142T, R144N/A146S, R144N/A146T, A146N/K148S, A146N/K148T, S147N/P149S/, S147N/P149T, R290N/A292S, R290N/A292T, D289N/G291S, D289N/G291T, L288N/R290S, L288N/R290T, L287N/D289S, L287N/D289, A292N/A294S, A292N/A294T, T293N/L295S, T293N/L295T, R315N/V317S, R315N/V317T, S314N/ K316S, S314N/ К316Т, Q313N/ R315S, Q313N/ R315T, K316N/G318S, K316N/G318T, V317N/D319S, V317N/D319T, K341N/ D343S, K341N/ D343T, S339N/K341S, S339N/K341T, D343N/G345S, D343N/G345T, R392N/E394S, R392N/E394T, L390N/ R392S, L390N/ R392T, K389N/M391S, K389N/M391T, S393N/P395S, S393N/P395T, E394N/R396S, E394N/R396T, P395N/P397S, P395N/P397T, R396N/G398S, R396N/G398T, P397N/V399S, P397N/V399T, G398N/L400S, G398N/L400T, V399N/L401S, V399N/L401T, L400N/R402S, L400N/R402T, L401N/A403S, L401N/A403T, R402N/P404S, R402N/P404T, A403N/F405S, A403N/F405T, P404N/P406S и P404N/P406T.
36. Модифицированный полипептид FVII по п.1, включающий замену позиций 300-322, 305-322, 300-312 или 305-312 соответствующими аминокислотами из трипсина, тромбина или FX, или замену позиций 310-329, 311-322 или 233-329 соответствующими аминокислотами из трипсина.
37. Модифицированный полипептид FVII по п.1, в котором немодифицированный полипептид FVII имеет последовательность аминокислот, приведенную в SEQ ID №: 3.
38. Модифицированный полипептид FVII по п.37, который имеет последовательность аминокислот, приведенную в любой из SEQ ID №№: 18-43 и 125-146 и 206-250.
39. Модифицированный полипептид FVII по п.1, в котором немодифицированный FVII полипептид представляет собой видовой или аллельный вариант полипептида, приведенного в SEQ ID №: 3.
40. Модифицированный полипептид FVII по п.1, который является человеческим полипептидом.
41. Модифицированный полипептид FVII по п.1, который является нечеловеческим полипептидом.
42. Модифицированный полипептид FVII по п.1, который является активным или зрелым полипептидом.
43. Модифицированный полипептид FVII по п.1, в котором изменена только первичная последовательность.
44. Модифицированный полипептид FVII по п.1, дополнительно содержащий химическую модификацию или пост-трансляционную модификацию.
45. Модифицированный полипептид FVII по п.44, где полипептид FVII гликозилирован, карбоксилирован, гидроксилирован, сульфатирован, фосфорилирован, альбумирован, либо соединен с полиэтиленгликольным фрагментом (PEG).
46. Модифицированный полипептид FVII по п.1, который является одноцепочечным полипептидом.
47. Модифицированный полипептид FVII по п.1, который является двухцепочечным полипептидом.
48. Модифицированные полипептиды FVII по п.1, которые являются активными или активированными.
49. Модифицированный полипептид FVII по п.48, в котором активация происходит за счет самоактивации протеолитическим расщеплением, расщепления фактором IX (FIXa), расщепления фактором Х (FXa), расщепления фактором XII (FXIIa), или расщепления тромбином.
50. Модифицированный полипептид FVII по п.1, который сохраняет один или более видов активности немодифицированного FVII полипептида.
51. Модифицированный полипептид FVII по п.1, включающий модификации в 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50 или 60 аминокислотных позициях, пока полипептид сохраняет, по меньшей мере, один вид активности немодифицированного FVII полипептида.
52. Модифицированный полипептид FVII по п.50, где один или более видов активности выбраны из связывания тканевого фактора (ТФ), активации фактора Х (FX), активации фактора IX (FIX), связывания с фосфолипидами и коагулянтной активности.
53. Модифицированный полипептид FVII по п.50, в котором сохраненная активность увеличена по сравнению с немодифицированным FVII полипептидом.
54. Модифицированный полипептид FVII по п.50, в котором сохраненная активность снижена по сравнению с немодифицированным FVII полипептидом.
55. Модифицированный полипептид по п.1, который обладает повышенной коагулянтной активностью.
56. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая последовательность нуклеотидов, кодирующую модифицированный полипептид FVII по любому из пп.1-55.
57. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.56.
58. Вектор по п.57, где вектор представляет собой прокариотический вектор, вирусный вектор или эукариотический вектор.
59. Вектор по п.57, где вектор представляет собой вектор для млекопитающих.
60. Вектор по п.57, где вирусный вектор выбран аденовируса, аденосвязанного вируса, ретровируса, вируса герпеса, лентивируса, поксвируса и цитомегаловируса.
61. Клетка, включающая вектор по п.57.
62. Клетка по п.61, которая является эукариотической клеткой.
63. Клетка по п.62, где эукариотическая клетка является клеткой млекопитающих.
64. Клетка по п.63, где клетка млекопитающих выбрана из клеток почек детенышей хомяков (ВНК-21), или 293 клеток, или клеток СНО.
65. Клетка по п.61, где клетка экспрессирует модифицированный полипептид FVII.
66. Клетка по п.61, которая является дрожжевой клеткой.
67. Клетка по п.66, которая является клеткой Pichia sp.
68. Клетка по п.67, которая является клеткой Pichia pastoris.
69. Модифицированный полипептид FVII, который производится клетками по п.61.
70. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективную концентрацию или количество модифицированного полипептида FVII по любому из пп.1-55 и 69 в фармацевтически приемлемом носителе.
71. Фармацевтическая композиция по п.70, которая составлена для местного, системного или локального введения.
72. Фармацевтическая композиция по п.70, которая составлена для орального, назального, легочного, буккального, трансдермального, подкожного, интрадуоденального, энтерального, парентерального, внутривенного или внутримышечного введения.
73. Фармацевтическая композиция по п.70, которая составлена для управляемого высвобождения.
74. Фармацевтическая композиция по п.70, которая составлена для введения одной дозой.
75. Способ, включающий лечение субъекта введением фармацевтической композиции по п.70, в котором субъект страдает заболеванием или состоянием, поддающимся лечению введением FVII или про-коагулянта.
76. Способ по п.75, в котором лечение заболевания или состояния производится введением зимогенной или активной формы FVII.
77. Способ по п.75, в котором лечение фармацевтической композицией улучшает или облегчает симптомы, связанные с заболеванием или состоянием.
78. Способ по п.75, который дополнительно включает наблюдение субъекта на предмет изменений в симптомах, связанных с заболеванием или состоянием, которое подвергалось лечению введением FVII или другой про-коагулянтной терапии.
79. Способ по п.75, в котором подвергающееся лечению заболевание или состояние выбрано из нарушений свертывания крови, гематологических расстройств, геморрагических расстройств, гемофилий, дефицита фактора VII, нарушений, связанных с кровоточивостью, хирургических кровотечений, или кровотечений, возникших в результате травмы.
80. Способ по п.79, в котором гемофилия представляет собой гемофилию A, гемофилию B или гемофилию C.
81. Способ по п.79, в котором гемофилия является врожденной или приобретенной.
82. Способ по п.75, в котором заболевание или состояние вызвано кровотечением, которое является осложнением после операции или травмы.
83. Способ по п.82, в котором кровотечение проявляется как острый гемартроз, хроническая гемофильная арторопатия, гематомы, гематурия, кровотечения в центральной нервной системе, желудочно-кишечные кровотечения или кровоизлияние в мозг.
84. Способ по п.82, в котором кровотечение происходит из-за удаления зубов.
85. Способ по п.82, в котором хирургия является хирургией на сердце, ангиопластикой, легочной хирургией, абдоминальной хирургией, хирургией позвоночника, сосудистой хирургией, стоматологической хирургией или трансплантацией органов.
86. Способ по п.85, в котором трансплантация выбрана из трансплантации костного мозга, сердца, легких, поджелудочной железы и печени.
87. Способ по п.75, в котором у субъекта вырабатываются аутоантитела к фактору VIII или фактору IX.
88. Способ по п.75, который дополнительно включает введение одного или нескольких дополнительных факторов коагуляции.
89. Способ по п.88, в котором один или несколько дополнительных факторов коагуляции выбраны из очищенных из плазмы или рекомбинантных факторов свертывания, прокоагулянтов, таких как витамин K, производных витамина K и ингибиторов протеина C, плазмы, тромбоцитов, эритроцитов и кортикостероидов.
90. Модифицированный полипептид FVII по любому из пп.1-55 и 69 для использования при лечении заболеваний или состояний, которые поддаются лечению введением FVII или про-коагулянта.
91. Применение фармацевтической композиции по п.70 для приготовления лекарственного средства для лечения заболеваний или состояний, которые поддаются лечению введением FVII или про-коагулянта.
92. Модифицированный полипептид FVII по п.90, где заболевание или состояние поддаются лечению введением зимогенной или активной формы FVII104.
93. Модифицированный полипептид FVII по п.90, где подвергающееся лечению заболевание или состояние выбрано из нарушений свертывания крови, гематологических расстройств, геморрагических расстройств, гемофилии, дефицита фактора VII, нарушений, связанных с кровоточивостью, хирургических кровотечений или кровотечений, возникших в результате травмы.
94. Модифицированный полипептид FVII по п.93, где гемофилия является гемофилией A, гемофилией B или гемофилией C.
95. Модифицированный полипептид FVII по п.94, где гемофилия является врожденной или приобретенной.
96. Модифицированный полипептид FVII по п.93, где заболевание или состояние вызвано кровотечением, которое является осложнением после операции или травмы.
97. Модифицированный полипептид FVII по п.96, где кровотечение проявляется как острый гемартроз, хроническая гемофильная арторопатия, гематомы, гематурия, кровотечения в центральной нервной системе, желудочно-кишечные кровотечения или кровоизлияние в мозг.
98. Модифицированный полипептид FVII по п.96, где хирургия является хирургией на сердце, ангиопластикой, легочной хирургией, абдоминальной хирургией, хирургией позвоночника, хирургией головного мозга, сосудистой хирургией, стоматологической хирургией или трансплантацией органов.
99. Модифицированный полипептид FVII по п.98, где трансплантация выбрана из трансплантации костного мозга, сердца, легких, поджелудочной железы и печени.
100. Модифицированный полипептид FVII по п.90, где у субъекта вырабатываются аутоантитела к фактору VIII или фактору IX.
101. Модифицированный полипептид FVII по п.90 с дополнительным введением одного или нескольких дополнительных факторов коагуляции.
102. Модифицированный полипептид FVII по п.101, где один или несколько дополнительных факторов коагуляции выбраны из очищенных из плазмы или рекомбинантных факторов свертывания, прокоагулянтов, таких как витамин K, производных витамина К и ингибиторов протеина C, плазмы, тромбоцитов, эритроцитов и кортикостероидов.
103. Набор, включающий фармацевтическую композицию по п.70, устройство для введения композиции и необязательно инструкции для введения.
104. Применение по п.91, где заболевание или состояние поддаются лечению введением зимогенной или активной формы FVII.
105. Применение по п.91, где подвергающееся лечению заболевание или состояние выбрано из нарушений свертывания крови, гематологических расстройств, геморрагических расстройств, гемофилий, дефицита фактора VII, нарушений, связанных с кровоточивостью, хирургических кровотечений или кровотечений, возникших в результате травмы.
106. Применение по п.105, где гемофилия является гемофилией A, гемофилией В или гемофилией C.
107. Применение по п.105, где гемофилия является врожденной или приобретенной.
108. Применение по п.104, где заболевание или состояние вызвано кровотечением, которое является осложнением после операции или травмы.
109. Применение по п.108, где кровотечение проявляется как острый гемартроз, хроническая гемофильная арторопатия, гематомы, гематурия, кровотечения в центральной нервной системе, желудочно-кишечные кровотечения или кровоизлияние в мозг.
110. Применение по п.108, где хирургия является хирургией на сердце, ангиопластикой, легочной хирургией, абдоминальной хирургией, хирургией позвоночника, хирургией головного мозга, сосудистой хирургией, стоматологической хирургией или трансплантацией органов.
111. Применение по п.110, где трансплантация выбрана из трансплантации костного мозга, сердца, легких, поджелудочной железы и печени.
112. Применение по п.106, где у субъекта вырабатываются аутоантитела к фактору VIII или фактору IX.
113. Применение по п.106 с дополнительным введением одного или нескольких дополнительных факторов коагуляции.
114. Применение по п.113, где один или несколько дополнительных факторов коагуляции выбраны из очищенных из плазмы или рекомбинантных факторов свертывания, прокоагулянтов, таких как витамин K, производных витамина K и ингибиторов протеина C, плазмы, тромбоцитов, эритроцитов и кортикостероидов.