ОЦЕНКА СПЕЦИФИЧЕСКОГО Т-КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ COVID-19

COVID-19

конъюгаты не антительные системы защиты организма против SARS-CoV-2 и в связи с COVID-19 // Эпидемиологическое благополучие : сб. тез. Между-нар. конф. / под ред. д-ра мед. наук, проф. А.Ю. Поповой. М., 2021. C. 128-129. ISBN 978-5-00140-765-2.

8. Лахтин М.В., Лахтин В.М., Комбарова С.Ю., Алешкин В.А. Новые стратегии не антительного иммунитета в связи с Ковидом // Боткинские чтения : сб. тез. Всерос. терапевтического конгр. с меж-дунар. участием / под ред. академика РАН В.И. Мазурова, доцента Е.А. Трофимова. СПб. : Человек и его здоровье, 2021. С. 162. ISBN 978-5-6040648-4-9.

9. Lakhtin V.M., Lakhtin M.V., Afanasiev S.S., Davydkin V.Yu., Aleshkin V.A. Communications between proteins and glycoconjugates in organism infected with COVID-19. World Journal of Pharmaceutical Research. 2021; 10 (1): 37-54. DOI: 10.20959/wjpr20211-19459.

glikokon"yugaty ne antitel'nye sistemy zashchity or-ganizma protiv SARS-CoV-2 i v svyazi s COVID-19 // Epidemiologicheskoe blagopoluchie : sb. tezisov Mezhdunar. konf. / pod red. d-ra med. nauk, prof. A.Yu. Popovoj. M., 2021. C. 128-129. ISBN 978-5-00140-765-2.

8. Lahtin M.V., Lahtin V.M., Kombarova S.YU., Aleshkin V.A. Novye strategii ne antitel'nogo immuniteta v svyazi s Kovidom // Botkinskie chteniya : sb. tez. Vse-ros. terapevticheskogo kongr. s mezhdunar. uchastiem / pod red. akademika RAN V.I. Mazurova, docenta E.A. Trofimova. SPb. : CHelovek i ego zdorov'e, 2021. S. 162. ISBN 978-5-6040648-4-9.

9. Lakhtin V.M., Lakhtin M.V., Afanasiev S.S., Davydkin V.Yu., Aleshkin V.A. Communications between proteins and glycoconjugates in organism infected with COVID-19. World Journal of Pharmaceutical Research. 2021; 10 (1): 37-54. DOI: 10.20959/wjpr20211-19459.

Лахтин Владимир Михайлович - доктор биологических наук, главный научный сотрудник лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов; Лахтин Михаил Владимирович - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов; Комбарова Светлана Юрьевна - доктор биологических наук, директор; ФБУН Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора.

УДК 615.371:616.24-002

Платонова Т.А.1, Скляр М.С.1, Голубкова А.А.2, Карбовничая Е.А.1, ЧернышевМ.А.1, Воробьев А.В.1, Смирнова С.С.3'4

1ООО «Европейский медицинский центр «УГМК-Здоровье», Екатеринбург, Россия 2ФБУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва, Россия

3ЕНИИВИ ФБУНГНЦВБ «Вектор» Роспотребнадзора, Екатеринбург, Россия 4ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, Екатеринбург, Россия

ОЦЕНКА СПЕЦИФИЧЕСКОГО Т-КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ COVID-19

Проведена оценка особенностей формирования специфического Т-клеточного иммунного ответа к SARS-CoV-2 у вакцинированных препаратом «Гам-Ковид-Вак». У 95,8 % участников исследования был выявлен клеточный иммунитет после вакцинации, в том числе у лиц без серопротекции по IgG. Полученные данные дают более широкое представление об иммунном ответе у вакцинированных против коронавирусной инфекции и могут быть использованы в перспективе при планировании профилактических и противоэпидемических мероприятий.

Ключевые слова: SARS-CoV-2, COVID-19, вакцинация, Т-клеточный иммунный ответ.

© Платонова Т.А., Скляр М.С., Голубкова А.А., Карбовничая Е.А., Чернышев М.А., Воробьев А.В., Смирнова С.С., 2021

Platonova T.A.1, Sklyar M.S.1, Golubkova A.A.2, Karbovnichaya E.A.1,Chernyshev M.A.1, Vorobyov A. V.1, Smirnova S.S.3,4

1European medical center «UMMC-Health» 2Central research Institute of epidemiology of Rospotrebnadzor 3ERIVI, FBRISRC VB «Vector» of Rospotrebnadzor 4Ural state medical University

ASSESSMENT OF SPECIFIC T-CELL IMMUNITY IN VACCINATED AGAINST COVID-19

The evaluation of the features of the formation of specific T-cell immunity to SARS-CoV-2 in vaccinated with the drug "Gam-Covid-Vac" was carried out. 95.8% of the study participants showed cellular immunity after immunization, including those without IgG seroprotection. The obtained data provide a broader understanding of the immune response in those vaccinated against coronavirus infection and can be used in the future when planning preventive and anti-epidemic measures.

Keywords: SARS-CoV-2, COVID-19, vaccination, T-cell immune response.

Введение. Новая коронавирусная инфекция (COVID-19) буквально за несколько месяцев мобилизовала здравоохранение всех стран мира, поставив задачи быстрой диагностики, оказания квалифицированной медицинской помощи заболевшим и разработки эффективных средств профилактики. Активное изучение клинических, иммунологических и эпидемиологических особенностей заболевания проводилось во всех государствах.

В настоящее время в научной литературе можно встретить достаточно много работ, посвященных оценке гуморального иммунного ответа при COVID-19, особенностей его формирования и продолжительности сохранения [1—5]. Однако довольно редко в открытой печати можно найти исследования по изучению специфического клеточного иммунитета при коронавирусной инфекции, что может быть обусловлено трудоемкостью лабораторных исследований, необходимостью специализированного оборудования и оснащения, а также значительными финансовыми затратами.

Цель исследования - оценить особенности формирования специфического Т-клеточного иммунитета у вакцинированных против новой коронавирусной инфекции.

Материалы и методы. Исследование выполнено на базе клинико-диагностической лаборатории ООО «Европейский медицинский центр «УГМК-Здоровье». Оценку специфического Т-клеточного иммунитета проводили с использованием технологии БЫБРОТ. Исследование предполагало опре-

деление Т-лимфоцитов, способных специфически реагировать и вырабатывать гамма-интерферон при встрече с пептидами SARS-CoV-2.

Для исследования применяли стрипо-ванные 96-луночные планшеты с мембранным дном ImmunoSpot System T-cell single-color enzymatic HU INF-g, покрытые моноклональ-ными антителами к человеческому гамма-интерферону (производитель CTL, США). Стимуляцию проводили с использованием пептиваторов трех классов PepTivator SARS-CoV-2 Prot_M, Prot_N, Prot_S (производитель Miltenyi Biotec, Германия). Для подсчета спо-тов использовали анализатор активации клеток иммунной системы ImmunoSpot Servis 6 TATC Alfa ELISPOT Analyzer (производитель CTL, США). Учитывали образцы, где в лунке с отрицательным контролем было не более 5 спо-тов, а в лунке с положительным контролем не менее 500 спотов. Результат для каждого антигена считался как среднее количество спотов (из двух лунок) за вычетом количества спотов в отрицательном контроле. Положительным считали выявление 7 и более спотов в ответ на стимуляцию любым из используемых антигенов SARS-CoV-2 (М, N, S).

В процессе исследования был проведен анализ клеточного иммунитета у 24 интактных по COVID-19 пациентов до вакцинации (24 образца) и после прививки препаратом «Гам-Ковид-Вак» (24 образца).

Помимо этого, каждый участник исследования параллельно с оценкой Т-клеточного

COVID-19

иммунитета проходил обследование для определения специфических антител класса G (IgG) к SARS-CoV-2. Антитела исследовали методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием тест-систем SARS-CoV-2-IgG-ИФА-БЕСТ (производитель АО «ВЕКТОР-БЕСТ»). Наличие иммуноглобулинов определяли посредством расчета коэффициента позитивности (КП). Результат анализа считали положительным при КП>1,1, отрицательным при КП < 0,8, сомнительным или пограничным, если 0,8<КП<1,1.

В исследовании применяли эпидемиологический, иммунологический и статистический методы исследования. Характер распределения данных определяли с помощью критерия Шапиро-Уилка, а также показателей асимметрии и эксцесса. При анализе полученных данных использовали общепринятые статистические приемы с расчетом медианы, минимальных и максимальных значений, межквартального размаха. Для оценки связи уровня Т-клеточного иммунного ответа и коэффициента позитивности антител IgG использовали коэффициент корреляции Спирмена. Тесноту связи интерпретировали по шкале Чеддо-ка. Различия считали достоверными при р <0 ,05. Статистическую обработку материалов проводили с использованием пакета прикладных программ Microsoft Office 2016 и IBM SPSS Statistics (26-я версия).

Результаты и обсуждение. Установлено, что ни у одного из участников исследования до вакцинации не было IgG-антител к корона-вирусной инфекции. При оценке Т-клеточного иммунитета были получены другие результаты: у 23 из 24 интактных по COVID-19 лиц Т-клеточного иммунитета к коронавирусной инфекции не было, однако у одного пациента установлен ответ на 3 белка - M, N, S, что свидетельствует о том, что он ранее уже встречался с вирусом SARS-CoV-2 или, возможно, другими коронавирусами. Далее участники исследования были вакцинированы против корона-вирусной инфекции и через 2-3 мес. после введения второго компонента «Гам-Ковид-Вак» было проведено повторное исследование Т-клеточного иммунитета и IgG к SARS-CoV-2.

После вакцинации у одного пациента не выявлен Т-клеточный иммунитет (коэффициент позитивности IgG - 0,623; отрицательный

результат), у 23 - констатировано его наличие. Медиана Т-клеток в ответ на стимуляцию М-пептидом составила 0 (шт-шах: 0-15, 01-03: 0-2), К-пептидом - 0 (тт-шах: 0-10, 01-03:

0-1,5), Б-пептидом - 30 (шт-шах: 0-172,

01-03: 18,5-55,5). У 22 участников исследования выявлен Т-клеточный ответ на стимуляцию только Б-белком, что соответствует составу используемой вакцины, а у пациента с ранее выявленным иммунным ответом на 3 белка коронавируса после прививки сохранился ответ на М-, К-белки практически на том же уровне, что и до вакцинации, а клеточный ответ на Б-пептид увеличился вдвое (с 22 до 46 спотов). При оценке корреляции между уровнем Т-клеточного ответа и уровнем коэффициента позитивности 1§0 значимой связи не установлено (М-пептид: р Спирмена = -0,288, р = 0,183, К-пептид: р Спирмена = -0,339, р = 0,113, Б-пептид: р Спирмена = -0,101, р = 0,646). Необходимо отметить, что у двух пациентов был отрицательный результат при исследовании их 1§0-антител (КП - 0,781 и 0,232, соответственно), при этом специфический Т-клеточный ответ у них был выявлен (14 и 16 спотов на Б-белок, соответственно).

Следует указать, что в течение периода наблюдения в рамках данного исследования (3-4 мес.), который частично совпал с так называемой «третьей волны» пандемии в Российской Федерации, случаев инфицирования 8ЛЯ8-СоУ-2 среди участников исследования зарегистрировано не было, что может давать предположение о значительной роли Т-клеточного иммунитета к коронавирусной инфекции в защите от заражения.

Заключение. Таким образом, по итогам проведенного исследования получены важные материалы по особенностям формирования специфического Т-клеточного иммунного ответа у привитых против новой коронави-русной инфекции вакциной «Гам-Ковид-Вак». У 95,8 % участников исследования был выявлен клеточный иммунитет после вакцинации, в том числе у лиц без серопротекции по 1§0. Полученные данные дают более широкое представление об иммунном ответе у вакцинированных против коронавирусной инфекции и могут быть использованы в перспективе при планировании профилактических и противоэпидемических мероприятий.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Chowdhury M.A., Hossain N., Kashem M.A. et al. Immune response in COVID-19: A review // J Infect Public Health. 2020. Vol. 13. N. 11. P. 1619-1629.

2. Kadkhoda K. COVID-19: an Immunopatholog-ical View // mSphere. 2020.Vol. 5. N 2. P. 00344-20.

3. Ma H., Zeng W., He H. [et al.]. Serum IgA, IgM, and IgG responses in COVID-19 // Cell Mol Immunol. 2020. Vol. 17. N. 7. P. 773-775.

4. Ni L., Ye F., Cheng M.L. [et al.]. Detection of SARS-CoV-2-Specific Humoral and Cellular Immunity in COVID-19 Convalescent Individuals // Immunity. 2020. Vol. 52. N. 6. P. 971-977.

5. Paces J., Strizova Z., Smrz D. [et al.]. COVID-19 and the immune system // Physiol Res. 2020. Vol. 69. N. 3. P. 379-388.

REFERENCES

1. Chowdhury M.A., Hossain N., Kashem M.A. et al. Immune response in COVID-19: A review // J Infect Public Health. 2020. Vol. 13. N. 11. P. 1619-1629.

2. Kadkhoda K. COVID-19: an Immunopatholog-ical View // mSphere. 2020.Vol. 5. N 2. P. 00344-20.

3. Ma H., Zeng W., He H. [et al.]. Serum IgA, IgM, and IgG responses in COVID-19 // Cell Mol Immunol. 2020. Vol. 17. N. 7. P. 773-775.

4. Ni L., Ye F., Cheng M.L. [et al.]. Detection of SARS-CoV-2-Specific Humoral and Cellular Immunity in COVID-19 Convalescent Individuals // Immunity. 2020. Vol. 52. N. 6. P. 971-977.

5. Paces J., Strizova Z., Smrz D. [et al.]. COVID-19 and the immune system // Physiol Res. 2020. Vol. 69. N. 3. P. 379-388.

Платонова Татьяна Александровна - кандидат медицинских наук, заведующий эпидемиологическим отделом — врач-эпидемиолог; Скляр Михаил Семенович - доктор медицинских наук, генеральный директор; ООО «Европейский медицинский центр «УГМК-Здоровье».

Голубкова Алла Александровна - доктор медицинских наук, профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора.

Карбовничая Елена Александровна - заведующий клинико-диагностической лабораторией; Чернышев Михаил Анатольевич - врач клинической лабораторной диагностики лаборатории; Воробьев Артур Владимирович - кандидат медицинских наук, директор по стратегическому развитию; ООО «Европейский медицинский центр «УГМК-Здоровье».

Смирнова Светлана Сергеевна - кандидат медицинских наук, руководитель Урало-Сибирского научно-методического центра по профилактике инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, ЕНИИВИ ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора, доцент кафедры эпидемиологии, социальной гигиены и организации госсанэпидслужбы, ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет Минздрава России.

УДК 615.371:616.24-002

Платонова Т.А.1, СклярМ.С.1, Голубкова А.А.2, Карбовничая Е.А.1, Смирнова С.С.3'4

1ООО «Европейский медицинский центр «УГМК-Здоровье», Екатеринбург, Россия 2ФБУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва, Россия

3ЕНИИВИ ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора, Екатеринбург, Россия 4 ФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, Екатеринбург, Россия

ОЦЕНКА ПРОГНОСТИЧЕСКИХ КРИТЕРИЕВ РАЗВИТИЯ ТЯЖЕЛЫХ ФОРМ С УЧЕТОМ КЛИНИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЙ COVID-19 В ПРОФЕССИОНАЛЬНЫХ ГРУППАХ РИСКА

© Платонова Т.А., Скляр М.С., Голубкова А.А., Карбовничая Е.А., Чернышев М.А., Воробьев А.В., Смирнова С.С., 2021