6-МЕТИЛ-1-(ТИЕТАНИЛ-3)УРАЦИЛ, СТИМУЛИРУЮЩИЙ ЗАЩИТНУЮ АКТИВНОСТЬ ФАГОЦИТОВ
6-METHYL-1-(THIETANYL-3)URACIL STIMULATING PROTECTIVE ACTIVITY OF PHAGOCYTES

Предлагаемое изобретение относится к органической химии и медицине, а именно к новому соединению - 6-метил-1-(тиетанил-3)урацилу, стимулирующему защитную активность фагоцитов.
В качестве прототипа и препарата сравнения взят метилурацил (бета-форма 2,4-диоксо-6-метил-1,2,3,4-тетрагидропиримидина), применяемый в медицине [Машковский М.Д. Лекарственные средства. // М., ООО «Новая волна», 2004, т.2, с.160-161], известный в качестве средства для активации альвеолярных макрофагов [патент RU 2063226, 1996 г.].
Задачей изобретения является расширение арсенала биологически активных веществ, в том числе обладающих фагоцитарной активностью.
Технический результат - получение биологически активного вещества, стимулирующего защитную активность фагоцитов.
Сущность изобретения: 6-метил-1-(тиетанил-3)урацил формулы (I):
стимулирующий защитную активность фагоцитов.
Указанное соединение и его свойства в литературе не описаны.
Заявляемое соединение синтезируют взаимодействием 6-метилурацила с 2-хлорметилтиираном в присутствии гидроксида калия в водной среде в результате тииран-тиетановой перегруппировки.
Пример 1. Синтез заявляемого соединения
К раствору 4,02 г (72 ммоль) гидроксида калия в 60 мл воды добавляют 7,56 г (60 ммоль) 6-метилурацила и нагревают до 50°С. Затем добавляют 6,9 г (66 ммоль) 2-хлорметилтиирана и перемешивают 2 часа при 50-55°С. Осадок отфильтровывают из горячей реакционной смеси, обрабатывают этилацетатом, горячей водой, сушат при 60°С. Тпл.=231-233°С. Получают 3,03 г (29%) 6-метил-1-(тиетанил-3)урацила, очищают кристаллизацией из смеси этанол-вода (объемное соотношение 1:1). Непрореагированный 6-метилурацил количественно возвращают в синтез.
-1
2
4
2
2
ИК спектр, ν, см: 710 (S(CH)), 1348 (C-N), 1741 (C=O), 1640 (C=O), 1607 (C=C), 2953 (N-H).
1
7
3
2
2
Спектр ЯМР H (DMFA-d), δ, м.д.: 1,66 (3Н, с, 6-СН); 2,20-2,32 (2Н, м, S(CH)); 3,34-3,40 (2Н, м, S(CH)); 4,60 (1Н, с, 5-H); 5,15-5,21 (1Н, м, NCH); 10,30 (1Н, уш. с, 3-NH).
13
5
6
2
4
7
3
2
2
Спектр ЯМР С (DMFA-d), δ, м.д.: 17,99 (6-СН); 32,07 (S(CH)); 47,05 (NCH); 151,95 (С); 152,45 (С); 162,39 (С); 162,59 (С).
отн,
2
2
+
+
+
Масс-спектр (ЭУ, 70 эВ), m/z (I %): 198 [M] (28), 151 [M-SMe] (17), 127 [M-CHS(CH)] (100).
Элементный анализ.
8
10
2
2
Найдено, %: С 48,51; Н 5,15; N 14,58 - CHONS.
Вычислено, %: С 48,55; Н 5,21; N 14,37.
Заявляемое соединение представляет собой белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок, нерастворимый в воде, этаноле, хлороформе, растворимый в диметилформамиде, диметилсульфоксиде, растворах щелочей.
Пример 2. Фагоцитарная активность
Влияние заявляемого соединения и препарата сравнения на процессы свободнорадикального окисления (СРО) в модельных системах in vitro изучали с использованием экспресс-метода, основанного на регистрации хемилюминесценции (ХЛ) - свечения, возникающего при взаимодействии свободных радикалов (Байматов В.Н., Фархутдинов P.P., Багаутдинов A.M. // Хемилюминесцентные методы исследования свободнорадикального окисления в сельском хозяйстве, ветеринарной медицине и животноводстве. - Уфа, изд-во «Здравоохранение Башкортостана», 2009. - 104 с.).
Хемилюминесценцию регистрировали на установке ХЛМ-003 (Россия). ХЛ модельных систем характеризовалась спонтанным свечением, быстрой вспышкой и развивающейся затем медленной вспышкой. Основными наиболее информативными характеристиками ХЛ служили светосумма свечения, определяющаяся по интенсивности излучения, и амплитуда максимального свечения.
Для оценки влияния исследуемых соединений на процессы СРО in vitro исследования были проведены на модельных системах, генерирующих активные формы кислорода (АФК) в клетках крови (модель фагоцитоза).
-5
Характер влияния на процессы генерации свободных радикалов фагоцитами изучали по схеме: гепаринизированную венозную кровь в объеме 0,1 мл инкубировали с исследуемым препаратом в течение 5 мин, затем смешивали с 2,0 мл подогретого до 37°С раствора люминола (5×10 М) и измеряли ХЛ в течение 5 мин.
Препараты добавляли в модельные системы в концентрациях, соответствующих терапевтической дозе назначаемого препарата, - метилурацил. В качестве контроля использовали модельные системы, в которых вместо исследуемых препаратов добавляли 0,9% физиологический раствор в том же объеме.
Изобретение иллюстрируется чертежом, на котором представлено влияние заявляемого соединения и метилурацила на процессы СРО в модельной системе фагоцитоза (венозная кровь), где К - контроль, I - заявляемое соединение, II - препарат сравнения метилурацил.
В крови образование АФК сопровождалось ХЛ, усиливающейся в присутствии люминола. Интенсивность ХЛ коррелирует с потреблением клетками кислорода и степенью завершенности фагоцитоза. Добавление заявляемого соединения вызывало увеличение светосуммы и максимальной светимости люминолзависимой хемилюминесценции по сравнению с уровнем обозначенных параметров интактных клеток крови (см. чертеж). Это свидетельствует о том, что данное соединение стимулирует фагоцитарную активность клеток крови.
Влияние заявляемого соединения на процессы СРО в модельной системе фагоцитоза представлено в таблице.
Заявляемое химическое соединение стимулирует фагоцитарную активность клеток крови, превосходя метилурацил в 2 раза.
Таблица
Влияние заявляемого соединения на процессы СРО в модельной системе фагоцитоза
Соединение
Клетки крови (светосумма, у.е.) 0,01 мг/мл
Контроль
43,6
I
65,8
II
131,0