Способ получения частиц на основе гематита для доставки генетических конструкций в клетку

1. Способ получения трансфецирующей частицы на основе гематита, включающий в себя, по крайней мере:
i) смешение частиц ферригидрита с раствором по крайней мере одной кислоты и инкубацию полученной смеси при температуре не выше +4 градусов Цельсия с целью формирования частиц гематита, причем концентрация упомянутой кислоты после смешения с упомянутыми частицами ферригидрита составляет не менее 50% от концентрации концентрированной кислоты,
ii) перевод упомянутых частиц гематита в водный раствор с рН более 2,
iii) добавление к суспензии упомянутых частиц гематита раствора положительно-заряженного полимера,
iv) добавление к суспензии упомянутых частиц гематита раствора нуклеиновой кислоты.
2. Способ по п. 1, в котором концентрация упомянутой кислоты после смешения с упомянутыми частицами ферригидрита составляет не менее 70% от концентрации концентрированной кислоты.
3. Способ по п. 1, в котором концентрация упомянутой кислоты после смешения с упомянутыми частицами ферригидрита составляет не менее 90% от концентрации концентрированной кислоты.
4. Способ по п. 1, в котором упомянутую инкубацию осуществляют не более 10 минут.
5. Способ по п. 1, в котором упомянутую инкубацию осуществляют не более 1 часа.
6. Способ по п. 1, в котором упомянутую инкубацию осуществляют не более 24 часов.
7. Способ по п. 1, в котором упомянутая кислота является сильной минеральной кислотой.
8. Способ по п. 1, в котором упомянутая кислота является сильной минеральной кислотой из группы: серная, азотная, соляная.
9. Способ по п. 1, в котором упомянутая кислота является органической кислотой.
10. Способ по п. 1, в котором упомянутая кислота является органической кислотой из группы: муравьиная, уксусная.
11. Способ по п. 1, в котором упомянутую инкубацию проводят при температуре от 0.5 до 1 градуса Цельсия.
12. Способ по п. 1, в котором упомянутую инкубацию проводят при температуре 1.5-2.5 градуса Цельсия.
13. Способ по п. 1, который, кроме того, включает шаг синтеза упомянутого ферригидрита, который, в свою очередь, включает в себя, по крайней мере:
14. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита имеют средний размер менее 100 нм.
15. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита имеют средний размер менее 200 нм.
16. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита имеют средний размер менее 1000 нм.
17. Способ по п. 1, в котором на упомянутые частицы гематита дополнительно сорбируют полимер.
18. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита коллоидно стабильны.
19. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита имеют индекс полидисперсности менее 0.05.
20. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита имеют индекс полидисперсности менее 0.1.
21. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита имеют индекс полидисперсности менее 0.2.
22. Способ по п. 1, в котором на упомянутые частицы гематита дополнительно сорбируют полимер из группы: декстран, карбоксиметилдекстран, карбоксиметилцелюлюза, разветвленный полиэтиленимин, линейный полиэтиленимин, поливинилпирролидон, поливинилацетат, хитозан, полилизин, полиаспарагиновая кислота, полиакриловая кислота, полиоктадецен-альт-малеиновая кислота, полистиролсульфоновая кислота.
23. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита дополнительно конъюгируют с меткой из группы: флуоресцентную, магнитную, МРТ-контрастирующую, рентгентоконтрастирующую, люминесцентную, радиоактивную.
24. Способ по п. 1, в котором упомянутые частицы гематита дополнительно включают в себя цитостатические, цитотоксические или терапевтические соединения.
25. Способ по п. 1, в котором упомянутая нуклеиновая кислота сорбируется на поверхность частиц.
26. Способ по п. 1, в котором упомянутая нуклеиновая кислота сорбируется на поверхность частиц за счет электростатического взаимодействия с упомянутым полимером.
27. Способ по п. 1, в котором упомянутый полимер принадлежит группе полиэтиленимин, полилизин.
28. Способ по п. 1, который содержит дополнительный шаг добавления к упомянутым частицам дополнительного полимера, причем упомянутый дополнительный полимер принадлежит группе декстран, карбоксиметилдекстран, полиэтиленимин, полилизин, полиаспарагиновая кислота, полиакриловая кислота.
29. Способ по п. 1, который содержит дополнительный шаг добавления к упомянутым частицам дополнительного полимера, причем упомянутый дополнительный полимер принадлежит группе декстран, карбоксиметилдекстран, полиэтиленимин, полилизин, полиаспарагиновая кислота, полиакриловая кислота, причем упомянутый дополнительный шаг выполняют между упомянутыми шагами ii и iii.
30. Способ по п. 1, который содержит дополнительный шаг добавления к упомянутым частицам дополнительного полимера, причем упомянутый дополнительный полимер принадлежит группе декстран, карбоксиметилдекстран, полиэтиленимин, полилизин, полиаспарагиновая кислота, полиакриловая кислота, причем упомянутый дополнительный шаг выполняют между упомянутыми шагами iii и iv.
31. Способ по п. 1, в котором упомянутый раствор положительно-заряженного полимера содержит дополнительный полимер принадлежит группе декстран, карбоксиметилдекстран, полиэтиленимин, полилизин, полиаспарагиновая кислота, полиакриловая кислота, причем упомянутый дополнительный шаг выполняют между упомянутыми шагами ii и iii.
32. Способ по п. 1, в котором упомянутая нуклеиновая кислота является плазмидной ДНК.
33. Способ по п. 1, в котором упомянутая нуклеиновая кислота является плазмидной ДНК, кодирующей терапевтический ген.
34. Способ по п. 1, в котором упомянутая нуклеиновая кислота является малой РНК.
35. Способ по п. 1, в котором упомянутая нуклеиновая кислота является малой интерферирующей РНК.
36. Способ по п. 1, в котором упомянутая нуклеиновая кислота является антисенс олигонуклеотидом.
37. Способ по п. 1, в котором белок, кодируемый упомянутой нуклеиновой кислотой, содержит нуклеазу редактирования генов.
38. Способ по п. 1, в котором белок, кодируемый упомянутой нуклеиновой кислотой, содержит нуклеазу редактирования генов.
39. Способ по п. 1, в котором упомянутую трансфецирующую частицу используют для повышения экспрессии белка в клетки-мишени.
40. Способ по п. 1, в котором упомянутую трансфецирующую частицу используют для понижения экспрессии белка в клетки-мишени.
41. Способ доставки нуклеиновой кислоты в клетку, заключающийся в приведении в контакт с упомянутой клеткой трансфецирующей частицы по пп. 1-40.