ИММУНОГЛОБУЛИН С ДВУМЯ ВАРИАБЕЛЬНЫМИ ДОМЕНАМИ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ

1. Связывающийся белок, включающий полипептидную цепь, где указанная полипептидная цепь содержит VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен тяжелой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует, и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует;
где указанное первое родительское антитело и второе родительское антитело могут быть одинаковыми или различными,
где указанный связывающийся белок может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI.
2. Связывающийся белок по п.1, где каждый из VD1 и VD2 содержит аминокислотную последовательность, по отдельности выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47 и 49.
3. Связывающийся белок, включающий полипептидную цепь, где указанная полипептидная цепь содержит VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, полученный от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, полученный от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен легкой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует, и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует;
где указанное первое родительское антитело и второе родительское антитело могут быть одинаковыми или различными,
где указанный связывающийся белок может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI.
4. Связывающийся белок по п.3, где каждый из VD1 и VD2 содержит аминокислотную последовательность, по отдельности выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48 и 50.
n
5. Связывающийся белок по п. 1 или 3, где (X2) отсутствует.
6. Связывающийся белок, включающий первую и вторую полипептидные цепи, где указанная первая полипептидная цепь содержит первый VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен тяжелой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует; и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует; и
где указанная вторая полипептидная цепь содержит второй VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, полученный от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, полученный от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен легкой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует; и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует;
где указанное первое родительское антитело и второе родительское антитело могут быть одинаковыми или различными;
где указанный связывающийся белок может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI.
7. Связывающийся белок по п.6, где каждый из вариабельных доменов VD1 и VD2 тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, по отдельности выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47 и 49, и где каждый из вариабельных доменов VD1 и VD2 легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, по отдельности выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48 и 50.
n
8. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где (X2)представляет собой аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-28.
9. Связывающийся белок по п.6, где указанный связывающийся белок содержит две первых полипептидных цепи и две вторых полипептидных цепи.
10. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где Fc-область выбрана из группы, состоящей из Fc-области с нативной последовательностью и Fc-области с модифицированной последовательностью.
11. Связывающийся белок по п.10, где указанная Fc-область выбрана из группы, состоящей из Fc-области, происходящей от IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgE и IgD.
12. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанный VD1 первой полипептидной цепи и указанный VD1 второй полипептидной цепи были получены от одного и того же родительского антитела или их антигенсвязывающей части.
13. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанный VD1 первой полипептидной цепи и указанный VD1 второй полипептидной цепи были получены от различных родительских антител или их антигенсвязывающей части.
14. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанный VD2 первой полипептидной цепи и указанный VD2 второй полипептидной цепи были получены от одного и того же родительского антитела или их антигенсвязывающей части.
15. Связывающийся белок по п.1, 3 или 6, где указанный VD2 первой полипептидной цепи и указанный VD2 второй полипептидной цепи были получены от различных родительских антител или их антигенсвязывающей части.
16. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанное первое и указанное второе родительские антитела связываются с различными эпитопами на указанном антигене.
17. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанные первое родительское антитело или его антигенсвязывающая часть связываются с указанным первым антигеном с активностью, отличающейся от активности связывания указанных второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части с указанным вторым антигеном.
18. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанные первое родительское антитело или его антигенсвязывающая часть связываются с указанным первым антигеном с аффинностью, отличающейся от аффинности связывания указанных второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части с указанным вторым антигеном.
19. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанные первое родительское антитело или его антигенсвязывающая часть и где указанные второе родительское антитело или его антигенсвязывающая часть выбраны из группы, состоящей из человеческого антитела, CDR-привитого антитела и гуманизованного антитела.
2
20. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанные первое родительское антитело или его антигенсвязывающая часть и указанные второе родительское антитело или его антигенсвязывающая часть выбраны из группы, состоящей из Fab-фрагмента; F(ab')-фрагмента; двухвалентного фрагмента, содержащего два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; Fd-фрагмента, состоящего из доменов VH и CH1; Fv-фрагмента, состоящего из доменов VL и VH одной ветви антитела; dAb-фрагмента; выделенной гипервариабельной области (комплементарность-определяющей области, CDR); одноцепочечного антитела; и диантитела.
21. Связывающийся белок по пп.1, 3 или 6, где указанный связывающийся белок обладает по меньшей мере одним нужным свойством, которым обладает указанное первое родительское антитело или его антигенсвязывающая часть, или указанное второе родительское антитело или его антигенсвязывающая часть.
22. Связывающийся белок по п.21, где указанное нужное свойство выбрано из одного или нескольких параметров антитела.
23. Связывающийся белок по п.21, где указанные параметры антитела выбраны из группы, состоящей из специфичности к антигену, аффинности к антигену, активности, биологической функции, способности к распознаванию эпитопа, стабильности, растворимости, эффективности продуцирования, иммуногенности, фармакокинетических свойств, биологической доступности, способности перекрестно реагировать с тканью и способности к связыванию с ортологичным антигеном.
24. DVD-Ig, который может связываться с двумя антигенами и включает четыре полипептидные цепи, где указанные первая и третья полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен тяжелой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует; и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует; и
где указанные вторая и четвертая полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, полученный от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, полученный от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен легкой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует, и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует;
где указанное первое родительское антитело и второе родительское антитело могут быть одинаковыми или различными;
где каждый из вариабельных доменов VD1 и VD2 тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, по отдельности выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47 и 49, и где каждый из вариабельных доменов VD1 и VD2 легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, по отдельности выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48 и 50.
25. DVD-Ig, который может связываться с двумя антигенами и включает четыре полипептидные цепи, где первая и третья полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен тяжелой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует, и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует; и
где вторая и четвертая полипептидные цепи содержат VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, полученный от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, полученный от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен легкой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует, и
n
n
(X2) не содержит Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует;
где указанное первое родительское антитело и второе родительское антитело могут быть одинаковыми или различными; и
где указанный DVD-Ig связывается по меньшей мере с одним антигеном, выбранным из группы, состоящей из NGAL, ВИЧ, IL-18, BNP и TnI.
26. Способ получения иммуноглобулина с двумя вариабельными доменами, который может связываться с двумя антигенами, где указанный способ включает стадии
(a) получения первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которые могут связываться с первым антигеном;
(b) получения второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которые могут связываться со вторым антигеном;
(c) конструирования первой и третьей полипептидных цепей, включающих VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где:
VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от указанного первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от указанного второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен тяжелой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует, и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует;
(d) конструирования второй и четвертой полипептидных цепей, включающих VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, полученный от указанного первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, полученный от указанного второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен легкой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер, при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует, и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует; и
(е) экспрессии указанной первой, второй, третьей и четвертой полипептидных цепей;
с получением иммуноглобулина с двумя вариабельными доменами, который может связываться с указанным первым и указанныи вторым антигеном,
где указанное первое родительское антитело и второе родительское антитело могут быть одинаковыми или различными; и
где указанный иммуноглобулин с двумя вариабельными доменами может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI.
27. Способ по п.26, где каждый из вариабельных доменов VD1 и VD2 тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, по отдельности выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47 и 49, и где каждый из вариабельных доменов VD1 и VD2 легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, по отдельности выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48 и 50.
28. Способ по п.26, где каждое из указанных первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части и каждое из указанных второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части по отдельности выбраны из группы, состоящей из человеческого антитела, CDR-привитого антитела и гуманизованного антитела.
2
29. Способ по п.26, где каждое из указанных первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части и указанных второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части по отдельности выбраны из группы, состоящей из Fab-фрагмента, F(ab')-фрагмента, двухвалентного фрагмента, содержащего два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; Fd-фрагмента, состоящего из доменов VH и CH1; Fv-фрагмента, состоящего из доменов VL и VH одной ветви антитела, dAb-фрагмента, выделенной гипервариабельной области (CDR), одноцепочечного антитела и диантител.
30. Способ по п.26, где указанные первое родительское антитело или его антигенсвязывающая часть обладают по меньшей мере одним нужным свойством, которым обладает иммуноглобулин с двумя вариабельными доменами.
31. Способ по п.26, где указанные второе родительское антитело или его антигенсвязывающая часть обладают по меньшей мере одним нужным свойством, которым обладает иммуноглобулин с двумя вариабельными доменами.
32. Способ по п.26, где Fc-область выбрана из группы, состоящей из Fc-области с нативной последовательностью и Fc-области с модифицированной последовательностью.
33. Способ по п.26, где указанная Fc-область выбрана из группы, состоящей из Fc-области, происходящей от IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgE и IgD.
34. Способ по п.30, где указанное нужное свойство выбрано из одного или нескольких параметров антитела.
35. Способ по п.31, где указанное нужное свойство выбрано из одного или нескольких параметров антитела.
36. Способ по п.34, где указанные параметры антитела выбраны из группы, состоящей из специфичности к антигену, аффинности к антигену, активности, биологической функции, способности к распознаванию эпитопа, стабильности, растворимости, эффективности продуцирования, иммуногенности, фармакокинетических свойств, биологической доступности, способности перекрестно реагировать с тканью и способности к связыванию с ортологичным антигеном.
37. Способ по п.35, где указанные параметры антитела выбраны из группы, состоящей из специфичности к антигену, аффинности к антигену, активности, биологической функции, способности к распознаванию эпитопа, стабильности, растворимости, эффективности продуцирования, иммуногенности, фармакокинетических свойств, биологической доступности, способности перекрестно реагировать с тканью и способности к связыванию с ортологичным антигеном.
38. Способ по п.26, где указанные первое родительское антитело или его антигенсвязывающая часть связываются с указанным первым антигеном с аффинностью, отличающейся от аффинности связывания указанных второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части со вторым указанным антигеном.
39. Способ по п.26, где указанные первое родительское антитело или его антигенсвязывающая часть связываются с указанным первым антигеном с активностью, отличающейся от активности связывания указанных второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части со вторым указанным антигеном.
40. Способ получения иммуноглобулина с двумя вариабельными доменами, который может связываться с двумя антигенами и который обладает нужными свойствами, где указанный способ включает стадии
(a) получения первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которые могут связываться с первым антигеном и обладают по меньшей мере одним нужным свойством, присущим свойству иммуноглобулина с двумя вариабельными доменами;
(b) получения второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которые могут связываться со вторым антигеном и обладают по меньшей мере одним нужным свойством, присущим свойству иммуноглобулина с двумя вариабельными доменами;
(c) конструирования первой и третьей полипептидных цепей, включающих VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от указанного первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, полученный от указанного второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен тяжелой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует; и
n
n
(X2) представляет собой Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует;
(d) конструирования второй и четвертой полипептидных цепей, включающих VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где
VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, полученный от указанного первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, полученный от указанного второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части;
C представляет собой константный домен легкой цепи;
n
n
(X1) представляет собой линкер при условии, что он не является СН1, где указанный (X1) присутствует или отсутствует, и
n
n
(X2) не содержит Fc-область, где указанный (X2) присутствует или отсутствует; и
(е) экспрессии указанной первой, второй, третьей и четвертой полипептидной цепи;
где указанное первое родительское антитело и второе родительское антитело могут быть одинаковыми или различными;
с получением иммуноглобулина с двумя вариабельными доменами, которые могут связываться с указанным первым и указанным вторым антигеном и обладают нужными свойствами;
где указанный иммуноглобулин с двумя вариабельными доменами может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI.
41. Способ определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце;
где указанный антиген или его фрагмент выбран из группы, состоящей из ВИЧ, BNP, TnI и NGAL, взятых отдельно или в комбинации с IL-18;
где указанный способ включает иммуноанализ тест-образца на антиген или его фрагмент;
где указанный иммуноанализ включает (i) использование по меньшей мере одного связывающегося белка и по меньшей мере одной детектируемой метки и (ii) сравнение сигнала, генерируемого детектируемой меткой, которая служит прямым или непрямым показателем присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце, с сигналом, генерируемым как прямой или непрямой показатель присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в контроле или калибраторе;
где указанным калибратором является, но необязательно, часть серии калибраторов, где каждый калибратор отличается от другого калибратора данной серии концентрацией антигена или его фрагмента; и
где по меньшей мере один из связывающихся белков (i') содержит полипептидную цепь, включающую VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, происходящей от первого родительского антитела (или его антигенсвязывающей части), VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, происходящей от второго родительского антитела (или его антигенсвязывающей части), которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен тяжелой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, а белок (ii') может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI;
вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце.
42. Способ по п. 41, где указанный способ включает следующие стадии:
(i) приведение в контакт тест-образца по меньшей мере с одним агентом для захвата, который связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент,
(ii) приведение в контакт указанного комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент по меньшей мере с одним детектирующим агентом, который содержит детектируемую метку и связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте, не связывающимся с агентом для захвата, с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент/детектирующий агент, и
(iii) определение присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце исходя из сигнала, генерируемого детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/антиген или его фрагмент/детектирующий агент, образованном в стадии (ii), вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце,
где по меньшей мере один агент для захвата и/или по меньшей мере один детектирующий агент представляют собой по меньшей мере один связывающийся белок.
43. Способ по п.41, где указанный способ включает следующие стадии:
(i) приведение в контакт тест-образца по меньшей мере с одним агентом для захвата, который связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент, и одновременного или последовательного приведения в контакт в любом порядке указанного тест-образца с детектируемо меченным антигеном или его фрагментом, который может конкурировать с любым антигеном или его фрагментом в тест-образце за связывание по меньшей мере с одним агентом для захвата, где любой антиген (или его фрагмент), присутствующий в тест-образце, и детектируемо меченный антиген конкурируют друг с другом с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент и комплекса агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент соответственно, и
(ii) определение присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце, исходя из сигнала, генерируемого детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, образованном в стадии (ii),
где по меньшей мере один агент для захвата представляет собой по меньшей мере один связывающийся белок,
где сигнал, генерируемый детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, обратно пропорционален количеству или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце,
вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце.
44. Способ по п.41, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
45. Способ по п.42, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
46. Способ по п.43, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
47. Способ по п.41, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
48. Способ по п.42, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
49. Способ по п.43, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
50. Способ определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце;
где указанный антиген или его фрагмент выбран из группы, состоящей из ВИЧ, BNP, TnI и NGAL, взятых отдельно или в комбинации с IL-18;
где указанный способ включает иммуноанализ тест-образца на антиген или его фрагмент;
где указанный иммуноанализ включает (i) использование по меньшей мере одного связывающегося белка и по меньшей мере одной детектируемой метки и (ii) сравнение сигнала, генерируемого детектируемой меткой, которая служит прямым или непрямым показателем присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце, с сигналом, генерируемым как прямой или непрямой показатель присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в контроле или калибраторе;
где указанным калибратором является, но необязательно, часть серии калибраторов, где каждый калибратор отличается от другого калибратора данной серии концентрацией антигена или его фрагмента; и
где по меньшей мере один из связывающихся белков (i') содержит полипептидную цепь, включающую VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, происходящей от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, происходящей от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен легкой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, а белок (ii') может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI;
вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце.
51. Способ по п. 50, где указанный способ включает следующие стадии:
(i) приведения в контакт тест-образца по меньшей мере с одним агентом для захвата, который связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент,
(ii) приведения в контакт указанного комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент по меньшей мере с одним детектирующим агентом, который содержит детектируемую метку и связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте, не связывающимся с агентом для захвата, с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент/детектирующий агент, и
(iii) определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце, исходя из сигнала, генерируемого детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/антиген или его фрагмент/детектирующий агент, образованном в стадии (ii),
вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце,
где по меньшей мере один агент для захвата и/или по меньшей мере один детектирующий агент представляют собой по меньшей мере один связывающийся белок.
52. Способ по п.50, где указанный способ включает следующие стадии:
(i) приведения в контакт тест-образца по меньшей мере с одним агентом для захвата, который связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент, и одновременного или последовательного приведения в контакт в любом порядке указанного тест-образца с детектируемо меченным антигеном или его фрагментом, который может конкурировать с любым антигеном или его фрагментом в тест-образце за связывание по меньшей мере с одним агентом для захвата, где любой антиген или его фрагмент, присутствующий в тест-образце, и детектируемо меченный антиген конкурируют друг с другом с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент и комплекса агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, соответственно, и
(ii) определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце исходя из сигнала, генерируемого детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, образованном в стадии (ii),
где по меньшей мере один агент для захвата представляет собой по меньшей мере один связывающийся белок,
где сигнал, генерируемый детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, обратно пропорционален количеству или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце,
вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце.
53. Способ по п.50, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
54. Способ по п.51, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
55. Способ по п.52, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
56. Способ по п.50, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
57. Способ по п.51, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
58. Способ по п.52, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
59. Способ определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце;
где указанный антиген или его фрагмент выбран из группы, состоящей из ВИЧ, BNP, TnI и NGAL, взятых отдельно или в комбинации с IL-18;
где указанный способ включает иммуноанализ тест-образца на антиген или его фрагмент;
где указанный иммуноанализ включает (i) использование по меньшей мере одного связывающегося белка и по меньшей мере одной детектируемой метки и (ii) сравнение сигнала, генерируемого детектируемой меткой, которая служит прямым или непрямым показателем присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце, с сигналом, генерируемым как прямой или непрямой показатель присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в контроле или калибраторе;
где указанным калибратором является, но необязательно, часть серии калибраторов, где каждый калибратор отличается от другого калибратора данной серии концентрацией антигена или его фрагмента; и
где по меньшей мере один из связывающихся белков (i') содержит первую полипептидную цепь и вторую полипептидную цепь, где указанная первая полипептидная цепь содержит первый VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, происходящей от первого родительского антитела (или его антигенсвязывающей части), VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, происходящей от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен тяжелой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, и где указанная вторая полипептидная цепь содержит второй VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, происходящей от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, происходящей от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен легкой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, а белок (ii') может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI;
вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце.
60. Способ по п.59, где указанный способ включает стадии
(i) приведения в контакт тест-образца по меньшей мере с одним агентом для захвата, который связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент,
(ii) приведения в контакт указанного комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент по меньшей мере с одним детектирующим агентом, который содержит детектируемую метку и связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте, не связывающимся с агентом для захвата, с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент/детектирующий агент, и
(iii) определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце исходя из сигнала, генерируемого детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/антиген или его фрагмент/детектирующий агент, образованном в стадии (ii), вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце,
где по меньшей мере один агент для захвата и/или по меньшей мере один детектирующий агент представляют собой по меньшей мере один связывающийся белок.
61. Способ по п.59, где указанный способ включает стадии
(i) приведения в контакт тест-образца по меньшей мере с одним агентом для захвата, который связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент, и одновременного или последовательного приведения в контакт в любом порядке указанного тест-образца с детектируемо меченным антигеном или его фрагментом, который может конкурировать с любым антигеном или его фрагментом в тест-образце за связывание по меньшей мере с одним агентом для захвата, где любой антиген или его фрагмент, присутствующий в тест-образце, и детектируемо меченный антиген конкурируют друг с другом с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент и комплекса агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, соответственно, и
(ii) определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце исходя из сигнала, генерируемого детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, образованном в стадии (ii),
где по меньшей мере один агент для захвата представляет собой по меньшей мере один связывающийся белок,
где сигнал, генерируемый детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, обратно пропорционален количеству или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце;
вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце.
62. Способ по п.59, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
63. Способ по п.60, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
64. Способ по п.61, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
65. Способ по п.59, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
66. Способ по п.60, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
67. Способ по п.61, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
68. Способ определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце;
где указанный антиген или его фрагмент выбран из группы, состоящей из ВИЧ, BNP, TnI, NGAL и IL-18,
где указанный способ включает иммуноанализ тест-образца на антиген или его фрагмент;
где указанный иммуноанализ включает (i) использование по меньшей мере одного DVD-Ig, который может связываться с двумя антигенами и по меньшей мере одной детектируемой метки и (ii) сравнение сигнала, генерируемого детектируемой меткой, которая служит прямым или непрямым показателем присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце, с сигналом, генерируемым как прямой или непрямой показатель присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в контроле или калибраторе;
где указанным калибратором является, но необязательно, часть серии калибраторов, где каждый калибратор отличается от другого калибратора данной серии концентрацией антигена или его фрагмента, и
где по меньшей мере один из DVD-Ig (i') содержит четыре полипептидных цепи, где первая и третья полипептидные цепи содержат первый VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, происходящий от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, происходящий от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен тяжелой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, и где вторая и четвертая полипептидные цепи содержат второй VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, происходящей от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, происходящей от второго родительского антитела (или его антигенсвязывающей части), которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен легкой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, а белок (ii') может связываться с двумя антигенами или их фрагментами, выбранными из группы, состоящей из ВИЧ, BNP, TnI, NGAL и IL-18.
69. Способ по п.68, где указанный способ включает стадии
(i) приведения в контакт тест-образца по меньшей мере с одним агентом для захвата, который связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент,
(ii) приведения в контакт указанного комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент по меньшей мере с одним детектирующим агентом, который содержит детектируемую метку и связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте, не связывающимся с агентом для захвата, с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент/детектирующий агент, и
(iii) определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента) в тест-образце исходя из сигнала, генерируемого детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/антиген или его фрагмент/детектирующий агент, образованном в стадии (ii), вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце,
где по меньшей мере один агент для захвата и/или по меньшей мере один детектирующий агент представляют собой по меньшей мере один DVD-Ig.
70. Способ по п.68, где указанный способ включает стадии
(i) приведения в контакт тест-образца по меньшей мере с одним агентом для захвата, который связывается с эпитопом на антигене или его фрагменте с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент, и одновременного или последовательного приведения в контакт в любом порядке указанного тест-образца с детектируемо меченным антигеном или его фрагментом, который может конкурировать с любым антигеном или его фрагментом в тест-образце за связывание по меньшей мере с одним агентом для захвата, где любой антиген или его фрагмент, присутствующий в тест-образце, и детектируемо меченный антиген конкурируют друг с другом с образованием комплекса агент для захвата/антиген или его фрагмент и комплекса агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, соответственно, и
(ii) определения присутствия, количества или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце исходя из сигнала, генерируемого детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, образованном в стадии (ii),
где по меньшей мере один агент для захвата представляет собой по меньшей мере один DVD-Ig,
где сигнал, генерируемый детектируемой меткой в комплексе агент для захвата/детектируемо меченный антиген или его фрагмент, обратно пропорционален количеству или концентрации антигена или его фрагмента в тест-образце,
вследствие чего определяют присутствие, количество или концентрацию антигена или его фрагмента в тест-образце.
71. Способ по п.68, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
72. Способ по п.69, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
73. Способ по п.70, где указанный тест-образец берут у пациента, и где указанный способ также включает диагностику, прогностический анализ или оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, а если указанный способ также включает оценку эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента, то такой способ также включает, но необязательно, модификацию терапевтического/профилактического лечения данного пациента, если это необходимо для повышения эффективности такого лечения.
74. Способ по п.68, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
75. Способ по п.69, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
76. Способ по п.70, где указанный способ адаптирован для его применения в автоматизированной или полуавтоматизированной системе.
77. Набор для анализа тест-образца на антиген или его фрагмент, где указанный набор включает по меньшей мере один компонент для анализа тест-образца на антиген или его фрагмент и инструкции по проведению анализа тест-образца на антиген или его фрагмент, где по меньшей мере один компонент включает по меньшей мере одну композицию, содержащую связывающийся белок, который (i') содержит полипептидную цепь, включающую VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, происходящей от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, происходящей от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен тяжелой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, а белок (ii') может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI, где указанный связывающийся белок является, но необязательно, детектируемо меченным.
78. Набор для анализа тест-образца на антиген или его фрагмент, где указанный набор включает по меньшей мере один компонент для анализа тест-образца на антиген или его фрагмент и инструкции по проведению анализа тест-образца на антиген или его фрагмент, где по меньшей мере один компонент включает по меньшей мере одну композицию, содержащую связывающийся белок, который (i') содержит полипептидную цепь, включающую VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, происходящей от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, происходящей от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен легкой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, а белок (ii') может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI, где указанный связывающийся белок является, но необязательно, детектируемо меченным.
79. Набор для анализа тест-образца на антиген или его фрагмент, где указанный набор включает по меньшей мере один компонент для анализа тест-образца на антиген или его фрагмент и инструкции по проведению анализа тест-образца на антиген или его фрагмент, где по меньшей мере один компонент включает по меньшей мере одну композицию, содержащую связывающийся белок, который (i') содержит первую полипептидную цепь и вторую полипептидную цепь, где указанная первая полипептидная цепь содержит первый VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, происходящей от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, происходящей от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен тяжелой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, и где указанная вторая полипептидная цепь содержит второй VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, происходящей от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, происходящей от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен легкой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, а белок (ii') может связываться с парой антигенов, выбранных из группы, состоящей из NGAL и NGAL; ВИЧ и ВИЧ; NGAL и IL-18; BNP и BNP; и TnI и TnI, где указанный связывающийся белок является, но необязательно, детектируемо меченным.
80. Набор для анализа тест-образца на антиген или его фрагмент, где указанный набор включает по меньшей мере один компонент для анализа тест-образца на антиген или его фрагмент и инструкции по проведению анализа тест-образца на антиген или его фрагмент, где по меньшей мере один компонент включает по меньшей мере одну композицию, содержащую DVD-Ig, который (i') содержит четыре полипептидных цепи, где первая и третья полипептидные цепи содержат первый VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи, происходящий от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи, происходящий от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен тяжелой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, и где вторая и четвертая полипептидные цепи содержат второй VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи, происходящей от первого родительского антитела или его антигенсвязывающей части, VD2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи, происходящей от второго родительского антитела или его антигенсвязывающей части, которое может быть идентичным первому родительскому антителу или отличаться от него, C представляет собой константный домен легкой цепи, (X1)n представляет собой линкер, который необязательно должен присутствовать, а если он присутствует, то отличается от CH1, и (X2)n представляет собой Fc-область, присутствие которой необязательно, а белок (ii') может связываться с двумя антигенами или их фрагментами, выбранными из группы, состоящей из ВИЧ, BNP, TnI, NGAL и IL-18, где указанный DVD-Ig является, но необязательно, детектируемо меченным.