Роль генов системы детоксикации (GSTM1 и GSTT1) в развитии неходжкинских злокачественных лимфом

234

Вопросы онкогематологии

О. В. Березина*, Т. И. Поспелова*, М. Л. Филипенко*,

Т. Н. Бабаева*, В. С. Овчинников*

Роль генов системы детоксикации (GSTM1 и GSTT1) в развитии неходжкинских злокачественных лимфом

* ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет»

Минздрава России

** ФГБУН Институт химической биологии и фундаментальной медицины

СО РАН, г. Новосибирск

Глутатион-опосредованная детоксикация играет ключевую р оль в обеспечении резистентности клеток к перекисному окислению липидов свободными радикалами, алкилированию белков и способствует предотвращению поломок ДНК. Глута-тион-Б-трансферазы (GST) также модулируют индукцию других ферментов и белков, важных для клеточных функций, таких как репарация ДНК [Атнюкова О. Е. и др., 2009]. Генетически обусловленные различия в ферментативной активности GST опосредуют неодинаковую предрасположенность к заболеваниям, развитие которых тесно связано с факторами внешней среды. Наибольший вклад в формирование соматической и онкологической патологии вносят глутатион-Б-трансферазы M1 и Т1, что связано с наличием делеции в кодирующих их генах, которая приводит к практически полному отсутствию синтеза белкового продукта [Landi S., 2000]. В связи с этим, исследование генов глутатион-Б-трансфераз M1 и Т1 информативно для проведения лабораторного скрининга неоплазий и формирования групп онкологического риска и ранней диагностики заболевания.

Принимая во внимание значительные вариации в распространенности делеционных (нулевых) аллелей GSTM1 и GSTT1 в разных популяционных группах, целью настоящего исследования явилась оценка ассоциации полиморфных локусов GSTM1 и GSTT1 с риском развития неходжкинских злокачественных лимфом (НХЗЛ) у жителей г. Новосибирска.

Роль генов системы детоксикации (GSTM1 и GSTT1) в развитии ...

235

Материал и методы. Группу обследованных составили 146 пациентов с впервые установленным диагнозом неходжкин-ской злокачественной лимфомы. Средний возраст больных -52,4 ± 14,97 года (18-72 лет). По полу больные распределились поровну: мужчины и женщины по 73 человека. В соответствии с классификацией ВОЗ 2008 года, больные НХЗЛ были разделены на группы в зависимости от иммунологической принадлежности: с B-клеточными лимфомами - 135 человек (92,5%), с T-клеточными - 11 пациентов (7,5%). Агрессивные лимфомы были диагностированы у 89 пациентов (61%), а индолентные -у 57 человек (39%). ДНК выделяли из венозной крови с использованием стандартной процедуры, включающей выделение и лизис клеток крови, гидролиз белков протеиназой К, очистку ДНК экстракцией примесей фенол-хлороформом и осаждение ДНК этанолом; а также из буккального эпителия с использованием стандартной методики выделения ДНК на силике. Амплификацию специфических участков исследуемых генов проводили методом амплификации с флуоресцентной детекцией результатов в режиме реального времени. Частоты встречаемости генотипов исследуемых полиморфных локусов в выборке больных НХЗЛ сравнивали с таковыми в контрольной группе. Значимость различий оценивали с помощью критерия х2. В случае, если абсолютные частоты более 20% признаков в группе не превышали 5, использовали точный критерий Фишера. Статистически значимыми считали различия при р < 0,05. Соответствие контрольной выборки равновесию Харди-Вайнберга проверяли с помощью критерия х2. Для оценки величины относительного риска использовали отношение шансов (OR) с его доверительным интервалом (C.I.) при уровне доверия 95%.

Результаты и их обсуждение. Определены частоты встречаемости генотипов GSTM1 и GSTT1 и их сочетаний у пациентов с НХЗЛ и у лиц контрольной группы. Распределение частот встречаемости генотипов соответствовало закону Харди - Вайнберга в группе контроля.

Выявлена большая частота делеционного генотипа GSTM1 в группе пациентов с индолентными лимфомами по сравнению с контролем и агрессивными НХЗЛ: 32/57 (56%), 70/177 (40%) (p < 0,02) и 31/89 (34%) (p < 0,01) соответственно. Разница в распределении генотипов для локуса GSTM1 позволила оценить риск развития индолентных НХЗЛ в популяции. Делеционный генотип GSTM1 ассоциируется с повышением риска развития данной группы лимфом почти в 2 раза (OR = 1,96; C.I. [1,07-3,58], p < 0,02), соответственно дикий генотип GSTM1 обладает протек-

236

Вопросы онкогематологии

тивным эффектом. Известно, что делеция в гене GSTM1 приводит к резкому снижению активности фермента, который участвует в метаболизме большого количества ксенобиотиков. Принимая во внимание полученные нами данные о неоднородности пациентов с агрессивными и индолентными вариантами НХЗЛ, были проанализированы отличия частот аллелей и генотипов изучаемых полиморфных локусов при разных морфологических вариантах заболевания. Различий в подгруппах как агрессивных, так и индолентных лимфом между собой и по сравнению с контрольной группой по полиморфному локусу GSTT1 не выявлено. У пациентов с фолликулярными лимфомами 1 и 2 цитологического типов частота делеционного генотипа GSTM1 составила 10/15 (67%), что почти в 2 раза чаще, чем у больных агрессивными вариантами заболевания (р < 0,017) и в контроле (р < 0,039). Нулевой генотип GSTM1 обусловливает повышение риска развития фолликулярной лимфомы в 3 раза (OR = 3,06, C.I. [1,01— 9,32], p < 0,039), тогда как нормальный генотип GSTM1 обладает протективным эффектом.

Подобные результаты получены Hohaus S. еt al., которые показали, что делеционный генотип GSTM1, помимо увеличения риска развития фолликулярных лимфом, может модифицировать факторы, входящие в прогностический индекс FLIPI, приводя к более плохим результатам лечения у пациентов именно низкой группы риска. Для ряда опухолей было выявлено увеличение частоты мутаций в гене проапоптотического белка p53 у носителей делеции в генах глутатион^-трансфераз [Agodi A. et al., 2010; Zhang Z. et al., 2010]. Нарушения процессов апоптоза являются ключевыми в патогенезе развития индолентных лимфом в целом и фолликулярной лимфомы в частности [Волкова М.А., 2007]. Было показано, что частота мутаций в гене p53 у пациентов с лимфомами меньше, чем у больных с содидными неоплазиями, но в то же время при фолликулярных лимфомах -несколько больше по сравнению с другими вариантами НХЗЛ, в частности, диффузной В-крупноклеточной лимфомой и составляет до 16%. Вышесказанное может объяснять большую частоту делеционного генотипа GSTM1 именно у пациентов с фолликулярной лимфомой.

Заключение. Выявлена ассоциация делеционного генотипа GSTM1 с увеличением риска развития индолентных НХЗЛ. Влияния полиморфного локуса GSTT1 на возникновение неходж-кинских злокачественных лимфом не обнаружено. Исследование локуса GSTM1 может использоваться как дополнительный маркер для формирования групп риска по развитию НХЗЛ и ранней

Роль генов системы детоксикации (GSTM1 и GSTT1) в развитии ...

237

диагностики данной группы неоплазий, наряду с полиморфными локусами генов фолатного цикла, системы репарации ДНК, программированной клеточной смерти, хемокиновых рецепторов, роль которых в развитии НХЗЛ у жителей г. Новосибирска была показана ранее [Поспелова Т. И. и др., 2010; Березина О. В. и др., 2011; Воропаева Е. Н. и др., 2011].