Новые модулирующие регуляцию дыхания соединения и способы их получения и применения
NEW MODULATING BREATHING REGULATION COMPOUNDS AND METHODS FOR THEIR PREPARATION AND USE

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
Согласно данной заявке испрашивается приоритет в соответствии с § 119(е) раздела 35 U.S.C. в отношении предварительной заявки на выдачу патента США №62/186468, поданной 30 июня 2015 г., и предварительной заявки на выдачу патента США №62/328277, поданной 27 апреля 2016 г., все из которых включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Нормальная регуляция дыхания является сложным процессом, который включает, кроме того, определение и ответ тела на химические стимулы, такие как уровни диоксида углерода, рН и кислорода в крови, тканях и головном мозге. На нормальную регуляцию дыхания также влияют другие факторы, такие как бодрствование (т.е. бодрствует пациент или спит), возбуждение, положение тела и издавание звуков. В продолговатом мозге есть центры контроля дыхания, которые интерпретируют различные сигналы прямой связи и обратной связи, которые влияют на дыхание путем подачи команд мышцам, которые выполняют работу по дыханию. Основные группы мышц расположены в брюшной полости, диафрагме, глотке и грудной клетке. Рецепторы центральной и периферической нервной системы затем обеспечивают входящие сигналы в центральные области контроля дыхания в головном мозге, что обеспечивает ответ на изменение метаболических потребностей.
2
2
2
2
Например, газообмен в легких, достаточный для удовлетворения метаболических потребностей организма, поддерживается главным образом быстрым ответом организма на изменения значений уровня диоксида углерода (СО). Повышенные значения уровня СО (гиперкапния) сигнализируют организму повышать частоту и глубину дыхания, что приводит к более высоким значениям уровня кислорода в крови и последующему снижению значений уровня СО в крови. Напротив, низкие значения уровня СО (гипокапния) могут вызывать периоды гипопноэ (снижение интенсивности дыхания) или, в критических случаях, апноэ (отсутствие дыхания), поскольку стимуляция в отношении дыхания ослабевает.
2
Существует множество заболеваний, в которых потеря нормальной регуляции дыхания является первичным или вторичным признаком заболевания. Примеры заболеваний с первичной потерей регуляции дыхания представляют собой апноэ во время сна (центральное, смешанное или обструктивное; при этом дыхание неоднократно прекращается на 10-60 секунд) и синдром врожденной центральной гиповентиляции. Вторичная потеря регуляции дыхания может происходить из-за хронических сердечно-легочных заболеваний (например, из-за сердечной недостаточности, хронического бронхита, эмфиземы и угрожающей жизни дыхательной недостаточности), избыточного веса (например, из-за синдрома гиповентиляции вследствие ожирения), приема некоторых лекарственных средств (например, анестетиков, седативных средств, средств, способствующих сну, анксиолитиков, снотворных средств, алкоголя и наркотических анальгетиков) и/или из-за факторов, которые влияют на нервную систему (например, из-за инсульта, опухоли, травмы, радиационного поражения и ALS). При хронических обструктивных легочных заболеваниях, при которых организм подвергается постоянным высоким значениям уровня диоксида углерода, организм адаптируется к дыхательному ацидозу (более низкому рН) путем опосредованного почками удержания бикарбоната, который имеет эффект частичной нейтрализации стимуляции дыхания, обусловленной СО/рН. Таким образом, пациент не может обеспечить нормальную реакцию легочной вентиляции на изменения в метаболических потребностях.
Нарушение дыхания во время сна является примером, когда нарушения регуляции дыхания приводят к тяжелому и распространенному заболеванию у людей. Апноэ во время сна характеризуется частыми периодами отсутствия дыхания или частичного дыхания. Ключевые факторы, которые участвуют в данных апноэ, включают анатомические факторы (например, ожирение), сниженные гиперкапнические и гипоксические реакции легочной вентиляции (например, сниженная реакция соответственно на высокие значения уровня диоксида углерода и низкие значения уровня кислорода) и потерю "бодрствования" (активности дыхательного центра в отношении мышц-расширителей глотки во время сна). Случаи апноэ приводят к рецидивирующей гипоксии (и связанному окислительному стрессу) и в результате к тяжелым сердечно-сосудистым последствиям (высокому кровяному давлению, инсульту, инфаркту).
Оценки пациентов в США, страдающих от состояний, при которых нарушается контроль дыхания, включают апноэ во время сна (15-20 миллионов); синдром гиповентиляции вследствие ожирения (3-5 миллионов); ишемическую болезнь сердца (5 миллионов); хроническое обструктивное заболевание легких (COPD)/хронический бронхит (10 миллионов); обусловленная действием лекарственного средства гиповентиляция (2-10 миллионов) и снятие искусственной вентиляции легких (0,5 миллиона).
2
В данной области существует необходимость в новых соединениях, пригодных для восстановления всей или части системы нормальной регуляции дыхания организма в ответ на изменения значений уровня СО и/или кислорода с минимальными побочными эффектами. Кроме того, в данной области существует необходимость в новых соединениях, которые пригодны для восстановления всей или части системы нормальной регуляции дыхания организма и обладают подходящими фармакокинетическими свойствами, такими как биодоступность при пероральном введении препарата. Кроме того, в данной области существует необходимость в новых соединениях, которые пригодны для восстановления всей или части системы нормальной регуляции дыхания организма и которые можно вводить перорально и применять в длительном или неотложном режиме. Кроме того, в данной области существует необходимость в новых соединениях, которые пригодны для восстановления всей или части системы нормальной регуляции дыхания организма и которые можно вводить парентерально (например, внутривенно) и применять в неотложном режиме. Настоящее изобретение соответствует и удовлетворяет этим потребностям.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем изобретении предусмотрено соединение формулы (I) или его соль, сольват, энантиомер, диастереоизомер или таутомер: , где в формуле (I):
1
2
1
9
10
1
2
1
5
7
2
6
8
9
10
9
10
11
11
11
1
3
1
3
3
6
1
3
2
2
1
3
один из заместителей, выбранных из группы, состоящей из Y и Y, выбран из группы, состоящей из -N(R)-L-C(R)(R)OH,  и , а другой заместитель представляет собой -N(R)R; R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-Салкила; R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; R и R независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; R и R независимо выбраны из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-С-алкила; или R и R объединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием необязательно замещенной С-Сциклоалкильной группы; каждый вариант R независимо выбран из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-С-алкила; причем -С(R)-C(R)-группа в кольце b необязательно заменена необязательно замещенной 1,2-фениленовой группой, которая конденсирована с кольцом b; каждый вариант независимо необязательно замещенного C-Салкилена; m и n независимо выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3 и 4, таким образом, что 2≤(m+n)≤4; p и q независимо выбраны из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3 и 4, таким образом, что 2≤(p+q)≤4; при условии, что алкильная группа не замещена гидроксигруппой.
1
2
9
10
1
2
1
5
7
2
6
8
9
10
9
10
1
3
1
3
3
6
1
3
В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IIa) или его соль, сольват, энантиомер, диастереоизомер или таутомер: , где в формуле (IIa): один из заместителей, выбранных из группы, состоящей из Y и Y, представляет собой -L-C(R)(R)OH, а другой заместитель представляет собой -N(R)R; R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-Салкила; R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; R и R независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-С-алкила; или R и R объединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием необязательно замещенной С-Сциклоалкильной группы; L представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен; и при условии, что алкильная группа не замещена гидроксигруппой.
1
2
1
2
1
5
7
2
6
8
11
1
3
1
3
1
3
1
3
В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IIb) или его соль, сольват, энантиомер, диастереоизомер или таутомер: , где в формуле (IIb): один из заместителей, выбранных из группы, состоящей из Y и Y, представляет собой , а другой заместитель представляет собой -N(R)R; R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-Салкила; R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; L представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен; и R и R независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; каждый вариант R независимо выбран из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-С-алкила; L представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен; m и n независимо выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3 и 4, таким образом, что 2≤m+n≤4; при условии, что алкильная группа не замещена гидроксигруппой.
В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IIc) или его соль, сольват, энантиомер, диастереоизомер или таутомер:
1
2
1
2
1
5
7
2
6
8
9
10
9
10
11
11
11
1
3
1
3
3
6
1
3
2
2
1
3
, где в формуле (IIc): один из заместителей, выбранных из группы, состоящей из Y и Y, представляет собой , а другой заместитель представляет собой -N(R)R; R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-Салкила; R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; R и R независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; R и R независимо выбраны из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-С-алкила; или R и R объединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием необязательно замещенной С-Сциклоалкильной группы; каждый вариант R независимо выбран из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-С-алкила; причем -C(R)-C(R)-группа в кольце b необязательно заменена необязательно замещенной 1,2-фениленовой группой, которая конденсирована с кольцом b; каждый вариант L независимо представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен; p и q представляют собой S независимо выбраны из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3 и 4, таким образом, что 2≤p+q≤4; при условии, что алкильная группа не замещена гидроксигруппой.
1
6
1
6
1
6
1
6
2
1
6
1
6
1
6
0-2
1
6
1
6
В некоторых вариантах осуществления соединений формул (I), (IIa), (IIb) и (IIc) каждый вариант алкильной группы необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, F, Cl, Br, I и CN; каждый вариант циклоалкильной, алкенильной или алкинильной группы необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, F, Cl, Br, I и CN; каждый вариант фенильной, фенилалкильной, арильной, арилалкильной, гетероарилалкильной или гетероарильной группы необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, C-Салкокси, гидрокси, F, Cl, Br, I, нитро, -NH, -NH(C-Cалкил), -N(C-Салкил)(С-Салкил), -S(=O)(С-Салкил), -С(=O)ОН и -С(=O)ОС-Салкила.
1
5
7
1
5
7
1
5
7
9
10
1
5
7
9
10
1
3
3
В некоторых вариантах осуществления соединений формулы (I) R, R и R представляют собой Н. В некоторых вариантах осуществления соединений формулы (I) R, R и R независимо представляют собой необязательно замещенный C-Салкил. В некоторых вариантах осуществления соединений формулы (I), R, R и R представляют собой Н; и R и R представляют собой Н. В некоторых вариантах осуществления соединений формулы (I) R, R и R представляют собой Н; R представляет собой Н; и R представляет собой СН.
В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (I) выбрано из группы, состоящей из 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (4); 2-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанола (6); 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (8); 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (10); (S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (12); (R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (14); 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ола (16); (S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (18); (R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (20); 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола (22); 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола (24); 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола (26); 2-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (27); 2-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (28); 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метил-пропан-2-ола (31); 1-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метил-пропан-2-ола (32); 1-[2,6-бис-(2,2-дифторэтиламино)-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (33); 2-метил-1-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-пропан-2-ола (34); 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (36); 1-{2,6-бис-метиламино-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ола (38); 1-[8-((R)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (40); 1-[8-((S)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (42); 1-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (44); 1-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (46); 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (47); 2-метил-1-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (48); 2-метил-1-(2,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (49); 2-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (52); 2-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламино-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (54); 2-[8-(2-метоксиэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола(56); 2-(2,6-бис-метиламино-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (58); 2-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-этанола (60); 2-[2,6-бис-метиламино-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (62); 2-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-этанола (64); 3-(8-этиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (67); 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-пирролидин-3-ола(71); 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-циклобутанола (72); 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (73); 3-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-пентан-3-ола (74); 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола (76); (1R,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (77); (1S,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (78); (1S,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (79); (1R,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (80); (2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-1-ола (81); (1R,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (82); (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (83); (1S,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (84); (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (85); (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола (86); (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола (87); 2-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-этанола (90); 2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (91); 2-(6-диметиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-этанола (92); 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола (94); 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (95); 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола (96); 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (97); 1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (99); (R)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (100); (S)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (101); 1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (103); (R)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (104); (S)-1-[6-((8)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (105); 1-[6-(2,2-дифторэтиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (107); 1-{4,8-бис-метиламино-6-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино}-2-метилпропан-2-ола (109); 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола (111); (S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (113); (R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (115); 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (117); 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (119); (1R,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (123); (1S,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (125); (1S,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (127); (1R,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (129); (1R,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (131); (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (133); (1S,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (135); (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (137); (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола (139); (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола (141); (S)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (142); (S)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (143); (R)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (144); (R)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (145); 1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-бутан-2-ола (146); 1-(6-этиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (147); 2-метил-1-(4,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (149); 2-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (154); (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-ил)-пропиламино]-пропан-2-ола (155); (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (156); (R)-1-[6-(2-метил-аллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (158); (S)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (159); 2-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (162); 1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола (163); (S)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (165); (S)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (166); (R)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (168); (R)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (169); (R)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (174); (S)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (175); их солей, сольватов, энантиомеров, диастереоизомеров или таутомеров, а также любых их комбинаций.
В некоторых вариантах осуществления соединений формулы (I) соль предусматривает соль присоединения кислоты, и кислота представляет собой по меньшей мере одну кислоту, выбранную из группы, состоящей из серной, хлористоводородной, бромистоводородной, йодистоводородной, азотной, угольной, фосфорной, муравьиной, уксусной, пропионовой, янтарной, гликолевой, глюконовой, молочной, яблочной, винной, лимонной, аскорбиновой, малеиновой, глюкуроновой, фумаровой, пировиноградной, аспарагиновой, глутаминовой, бензойной, антраниловой, миндальной, памовой, 4-гидроксибензойной, фенилуксусной, метансульфоновой, этансульфоновой, альгиновой, бензолсульфоновой, пантотеновой, сульфаниловой, стеариновой, трифторметансульфоновой, 2-гидроксиэтансульфоновой, п-толуолсульфоновой, циклогексиламиносульфоновой, β-гидроксимасляной, салициловой, галактаровой и галактуроновой кислот, а также любых их комбинаций.
В настоящем изобретении также предусмотрена по меньшей мере одна кристаллическая соль 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31), выбранная из группы, состоящей из:
(i) кристаллической гидрохлоридной соли (31а) со спектром XRPD, как на фиг. 3А; пиками XRPD, как на фиг. 3В; и/или спектром DSC, как на фиг. 3С;
(ii) кристаллической бис-гидрохлоридной соли (31b) со спектром XRPD, как на фиг. 4А; пиками XRPD, как на фиг. 4В; и/или спектром DSC, как на фиг. 4С;
(iii) кристаллической гидромалонатной соли (31с) со спектром XRPD, как на фиг. 5А; пиками XRPD, как на фиг. 5В; и/или спектром DSC, как на фиг. 5С;
(iv) кристаллической гидромалеинатной солевой формы Male-A (31d-1) со спектром XRPD, как на фиг. 6А; пиками XRPD, как на фиг. 6В; и/или спектром DSC, как на фиг. 6С;
(v) кристаллической гидромалеинатной солевой формы Male-B (31d-2) со спектром XRPD, как на фиг. 7А; пиками XRPD, как на фиг. 7В; и/или спектром DSC, как на фиг. 7С;
(vi) кристаллической гидрофумаратной соли (31е) со спектром XRPD, как на фиг. 8А; пиками XRPD, как на фиг. 8В; и/или спектром DSC, как на фиг. 8С;
(vii) кристаллической гидро-L(+)тартратной соли (31f) со спектром XRPD, как на фиг. 9А; пиками XRPD, как на фиг. 9В; спектром DSC, как на фиг. 9С;
(viii) кристаллической D,L-манделатной соли (31g) со спектром XRPD, как на фиг. 10А; пиками XRPD, как на фиг. 10В; и/или спектром DSC, как на фиг. 10С;
(ix) кристаллической тозилатной солевой формы Tos-A (31h-1) со спектром XRPD, как на фиг. 11А; пиками XRPD, как на фиг. 11В; и/или спектром DSC, как на фиг. 11С;
(x) кристаллической тозилатной солевой формы Tos-B (31h-2) со спектром XRPD, как на фиг. 12А; пиками XRPD, как на фиг. 12В; и/или спектром DSC, как на фиг. 12С;
(xi) кристаллической мезилатной соли (31i) со спектром XRPD, как на фиг. 13А; пиками XRPD, как на фиг. 13В; и/или спектром DSC, как на фиг. 13С;
(xii) кристаллической сахаринатной соли (31j) со спектром XRPD, как на фиг. 14А; пиками XRPD, как на фиг. 14В; и/или спектром DSC, как на фиг. 14С;
и любых их смесей.
В настоящем изобретении дополнительно предусмотрена фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно соединение формулы (I) и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно дополнительное средство, выбранное из группы, состоящей из доксапрама, энантиомеров доксапрама, ацетазоламида, алмитрина, теофиллина, кофеина, метилпрогестерона и связанных соединений, седативных средств, которые повышают порог пробуждения у пациентов с нарушениями дыхания во время сна, агонистов бензодиазепинового рецептора, антагонистов орексина, трициклических антидепрессантов, модуляторов серотонинергической системы, модуляторов аденозина и аденозинового рецептора и модуляторов транспортера нуклеозидов, каннабиноидов, орексинов, агонистов мелатонина, ампакинов, оксибата натрия, модафинила и армодафинила. В других вариантах осуществления соединение и дополнительное средство физически смешаны или физически разделены в композиции. В еще одних вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере одно дополнительное средство, которое вызывает изменения в регуляции дыхания. В еще одних вариантах осуществления дополнительное средство представляет собой по меньшей мере одно средство, выбранное из группы, состоящей из опиоидных наркотических средств, бензодиазепинов, седативных средств, средств, способствующих сну, снотворных средств, пропофола и любых их комбинаций.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция обеспечивает модифицированную доставку соединения после перорального введения субъекту. В других вариантах осуществления композиция обеспечивает минимизацию доставки соединения в желудок субъекта и максимальное увеличение доставки соединения в кишечник субъекта.
В некоторых вариантах осуществления композиция предусматривает энтеросолюбильную оболочку. В других вариантах осуществления соединение содержится в фармацевтически пригодной капсуле. В других вариантах осуществления капсула содержит гранулы или порошок соединения или смесь соединения с носителем или вспомогательным веществом. В еще одних вариантах осуществления вспомогательное вещество включает связующее, разрыхлитель, разбавитель, буфер, смазывающее средство, способствующее скольжению средство, антиоксидант, противомикробный консервант, краситель или ароматизатор. В еще одних вариантах осуществления капсула покрыта энтеросолюбильной оболочкой, но гранулы или порошки соединения не покрыты энтеросолюбильной оболочкой. В еще одних вариантах осуществления гранулы или порошки соединения покрываются энтеросолюбильной оболочкой перед помещением в капсулу. В еще одних вариантах осуществления гранулы или порошки соединения покрыты рядом энтеросолюбильных оболочек для обеспечения доставки лекарственного средства в различные участки кишечника субъекта. В еще одних вариантах осуществления по меньшей мере часть гранул или порошков соединения покрыты энтеросолюбильной оболочкой. В еще одних вариантах осуществления капсула покрыта энтеросолюбильной оболочкой, которая отличается от энтеросолюбильной оболочки, которой покрыты гранулы или порошки соединения.
В некоторых вариантах осуществления соединение нанесено на основные частицы с образованием ядра. В других вариантах осуществления основная частица не покрыта энтеросолюбильной оболочкой, и композиция содержится в фармацевтически приемлемой капсуле, которая покрыта энтеросолюбильной оболочкой. В других вариантах осуществления ядро покрыто энтеросолюбильной оболочкой с образованием, таким образом, гранулы, покрытой энтеросолюбильной оболочкой. В еще одних вариантах осуществления гранула, покрытая энтеросолюбильной оболочкой, содержится в фармацевтически приемлемой капсуле. В еще одних вариантах осуществления капсула содержит гранулы, покрытые рядом энтеросолюбильных оболочек, для обеспечения доставки капсулой соединения в различные участки кишечника субъекта. В еще одних вариантах осуществления содержимое капсулы растворено или суспендировано в фармацевтически приемлемой жидкости с обеспечением заполненной жидкостью капсулы. В еще одних вариантах осуществления капсула покрыта энтеросолюбильной оболочкой, но жидкий состав, содержащийся в ней, не содержит энтеросолюбильную оболочку.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ предупреждения или лечения нарушения или заболевания регуляции дыхания у субъекта, нуждающегося в этом, причем способ включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или его соли, сольвата, энантиомера, диастереоизомера или таутомера.
В некоторых вариантах осуществления нарушение или заболевание регуляции дыхания представляет собой по меньшей мере одно нарушение или заболевание, выбранное из группы, состоящей из угнетения дыхания, апноэ во время сна, апноэ у недоношенных детей, синдрома гиповентиляции вследствие ожирения, первичного альвеолярного гиповентиляционного синдрома, диспноэ, высотной болезни, гипоксии, гиперкапнии, хронического обструктивного заболевания легких (COPD), синдрома внезапной детской смерти (SIDS), синдрома врожденной центральной гиповентиляции, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, инсульта, миодистрофии Дюшенна и травматического повреждения головного мозга и спинного мозга. В других вариантах осуществления угнетение дыхания вызвано анестетиком, седативным средством, средством, способствующим сну, анксиолитическим средством, снотворным средством, алкоголем или наркотическим веществом.
В некоторых вариантах осуществления субъекту дополнительно вводят по меньшей мере одно средство, пригодное для лечения нарушения или заболевания дыхания. В других вариантах осуществления средство представляет собой по меньшей мере одно средство, выбранное из группы, состоящей из доксапрама, ацетазоламида, алмитрина, теофиллина, кофеина, метилпрогестерона и связанных соединений, седативных средств, которые повышают порог пробуждения у пациентов с нарушениями дыхания во время сна, агонистов бензодиазепинового рецептора, антагонистов орексина, трициклических антидепрессантов, модуляторов серотонинергической системы, модуляторов аденозина и аденозинового рецептора и модуляторов транспортера нуклеозидов, каннабиноидов, орексинов, агонистов мелатонина, ампакинов, оксибата натрия, модафинила и армодафинила. В других вариантах осуществления соединение и средство вводят субъекту по отдельности. В еще одних вариантах осуществления соединение и средство совместно вводят субъекту, причем, кроме того, соединение и средство физически смешаны или физически разделены при введении субъекту.
В некоторых вариантах осуществления субъекту дополнительно вводят по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство, которое изменяет нормальную регуляцию дыхания у субъекта. В других вариантах осуществления по меньшей мере одно дополнительное средство выбрано из группы, состоящей из опиоидных наркотических средств, бензодиазепинов, седативных средств, средств, способствующих сну, снотворных средств, пропофола и любых их комбинаций.
В некоторых вариантах осуществления соединение вводят совместно с применением устройства для искусственной вентиляции легких или устройства для поддержания положительного давления в дыхательных путях по отношению к субъекту.
В некоторых вариантах осуществления субъектом является млекопитающее или птица. В других вариантах осуществления млекопитающим является человек.
В некоторых вариантах осуществления соединение вводят субъекту с помощью по меньшей мере одного пути, выбранного из группы, состоящей из назального, ингаляционного, местного, перорального, буккального, ректального, плеврального, перитонеального, вагинального, внутримышечного, подкожного, трансдермального, эпидурального, подоболочечного и внутривенного путей.
В настоящем изобретении также предусмотрен способ предупреждения дестабилизации или стабилизации дыхательного ритма у субъекта, нуждающегося в этом, причем способ включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого носителя и по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или его соли, сольвата, энантиомера, диастереоизомера или таутомера.
В некоторых вариантах осуществления дестабилизация связана с нарушением или заболеванием регуляции дыхания, выбранным из группы, состоящей из угнетения дыхания, апноэ во время сна, апноэ у недоношенных детей, синдрома гиповентиляции вследствие ожирения, первичного альвеолярного гиповентиляционного синдрома, диспноэ, высотной болезни, гипоксии, гиперкапнии, хронического обструктивного заболевания легких (COPD), синдрома внезапной детской смерти (SIDS), синдрома врожденной центральной гиповентиляции, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, инсульта, миодистрофии Дюшенна и травматического повреждения головного мозга и спинного мозга. В других вариантах осуществления угнетение дыхания вызвано анестетиком, седативным средством, средством, способствующим сну, анксиолитическим средством, снотворным средством, алкоголем или наркотическим веществом. В еще одних вариантах осуществления субъекту дополнительно вводят по меньшей мере одно средство, пригодное для лечения нарушения или заболевания, связанного с дыханием. В других вариантах осуществления средство выбрано из группы, состоящей из доксапрама, ацетазоламида, алмитрина, теофиллина, кофеина, метилпрогестерона и связанных соединений, седативных средств, которые повышают порог пробуждения у пациентов с нарушениями дыхания во время сна, агонистов бензодиазепинового рецептора, антагонистов орексина, трициклических антидепрессантов, модуляторов серотонинергической системы, модуляторов аденозина и аденозинового рецептора и модуляторов транспортера нуклеозидов, каннабиноидов, орексинов, агонистов мелатонина, ампакинов, оксибата натрия, модафинила и армодафинила. В других вариантах осуществления соединение и средство вводят субъекту по отдельности. В еще одних вариантах осуществления соединение и средство совместно вводят субъекту, причем, кроме того, соединение и средство физически смешаны или физически разделены при введении субъекту.
В некоторых вариантах осуществления субъекту дополнительно вводят по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство, которое изменяет нормальную регуляцию дыхания у субъекта. В других вариантах осуществления по меньшей мере одно дополнительное средство выбрано из группы, состоящей из опиоидных наркотических средств, бензодиазепинов, седативных средств, средств, способствующих сну, снотворных средств, пропофола и любых их комбинаций.
В некоторых вариантах осуществления соединение вводят совместно с применением устройства для искусственной вентиляции легких или устройства для поддержания положительного давления в дыхательных путях по отношению к субъекту.
В некоторых вариантах осуществления субъектом является млекопитающее или птица. В других вариантах осуществления млекопитающим является человек.
В некоторых вариантах осуществления соединение вводят субъекту с помощью по меньшей мере одного пути, выбранного из группы, состоящей из назального, ингаляционного, местного, перорального, буккального, ректального, плеврального, перитонеального, вагинального, внутримышечного, подкожного, трансдермального, эпидурального, подоболочечного и внутривенного путей.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
Для целей иллюстрации настоящего изобретения на фигурах изображены некоторые варианты осуществления настоящего изобретения. Однако настоящее изобретение не ограничено точными условиями и средствами вариантов осуществления, изображенных на фигурах.
Фиг. 1А-1В представляют набор таблиц, в которых приведены результаты выбора солевых форм и растворителей для 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31) (pKa 2,32, 5,79).
На фиг. 2 проиллюстрированы неограничивающие условия получения на уровне граммов выбранных солей 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31), а также данные дифференциальной сканирующей калориметрии и масс-спектроскопии.
На фиг. 3А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31а (гидрохлоридной солевой формы). На фиг. 3В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31а (гидрохлоридной солевой формы). На фиг. 3С представлен иллюстративный спектр DSC для 31а (гидрохлоридной солевой формы).
На фиг. 4А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31b (бис-гидрохлоридной солевой формы). На фиг. 4В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31b (бис-гидрохлоридной солевой формы). На фиг. 4С представлен иллюстративный спектр DSC для 31b (бис-гидрохлоридной солевой формы).
На фиг. 5А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31с (гидромалонатной солевой формы). На фиг. 5В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31с (гидромалонатной солевой формы). На фиг. 5С представлен иллюстративный спектр DSC для 31с (гидромалонатной солевой формы).
На фиг. 6А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31d-1 (гидромалеинатной солевой формы Mal-A). На фиг. 6В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31d-1 (гидромалеинатной формы Mal-А). На фиг. 6С представлен иллюстративный спектр DSC для 31d-1 (гидромалеинатной солевой формы Mal-A).
На фиг. 7А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31d-2 (гидромалеинатной солевой формы Mal-В). На фиг. 7В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31d-2 (гидромалеинатной солевой формы Mal-В). На фиг. 7С представлен иллюстративный спектр DSC для 31d-2 (гидромалеинатной солевой формы Mal-В).
На фиг. 8А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31е (гидрофумаратной солевой формы). На фиг. 8В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31е (гидрофумаратной солевой формы). На фиг. 8С представлен иллюстративный спектр DSC для 31е (гидрофумаратной солевой формы).
На фиг. 9А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31f (гидро-L(+)-тартратной солевой формы). На фиг. 9В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31f (гидро-(+)-тартратной солевой формы). На фиг. 9С представлен иллюстративный спектр DSC для 31f (гидро-(+)-тартратной солевой формы).
На фиг. 10А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31g (D,L-манделатной солевой формы). На фиг. 10В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31g (D,L-манделатной солевой формы). На фиг. 10С представлен иллюстративный спектр DSC для 31g (D,L-манделатной солевой формы).
На фиг. 11А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31h-1 (тозилатной солевой формы Tos-A). На фиг. 11В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31h-1 (тозилатной солевой формы Tos-A). На фиг. 11C представлен иллюстративный спектр DSC для 31h-1 (тозилатной солевой формы Tos-A).
На фиг. 12А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31h-2 (тозилатной солевой формы Tos-B). На фиг. 12В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31h-2 (тозилатной солевой формы Tos-B). На фиг. 12С представлен иллюстративный спектр DSC для 31h-2 (тозилатной солевой формы Tos-B).
На фиг. 13А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31i (мезилатной солевой формы). На фиг. 13В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31i (мезилатной солевой формы). На фиг. 13С представлен иллюстративный спектр DSC для 31i (мезилатной солевой формы).
На фиг. 14А представлен иллюстративный спектр XRPD для 31j (сахаринатной солевой формы). На фиг. 14В представлен перечень иллюстративных пиков XRPD для 31j (сахаринатной солевой формы). На фиг. 14С представлен иллюстративный спектр DSC для 31j (сахаринатной солевой формы).
На фиг. 15 представлен набор графиков, иллюстрирующих, что гидрохлоридная соль 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а) снижает индекс апноэ-гипопноэ у морфинрезистентных крыс (модель CSA) без значительного повышения минутного объема.
На фиг. 16А-16С проиллюстрированы графики % времени, потраченного в каждом состоянии сна-бодрствования (фиг. 16А: бодрствующий, фиг. 16В: REM, фиг. 16С: NREM) на исходном уровне (не получавший медикаментозного лечения) и после ввода пероральным зондом среды-носителя и гидрохлоридной соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а) (10 мг/кг). Значения представляют собой средние значения ± SEM.
2
На фиг. 17А-17В проиллюстрирован набор графиков, иллюстрирующих качество сна NREM и REM, как оценено путем измерения абсолютной удельной мощности (мкВ/0,25 Гц) и относительной удельной мощности (% всей мощности в диапазоне от 0,5 Гц до 30 Гц) на исходном уровне (не получавший медикаментозного лечения), при лечении средой-носителем и гидрохлоридной солью 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d)пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а) (10 мг/кг РО). В первые 2 часа после введения дозы не проводили измерений после введения дозы из-за сильного влияния принудительного кормления через зонд на время, проводимое во сне, который выявляли сразу после введения среды-носителя и тестируемого изделия. Значения представляют собой средние значения ± SEM.
2
На фиг. 18 представлен график, иллюстрирующий снижение десатурации SpO после введения гидрохлоридной соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а).
На фиг. 19 представлен график, иллюстрирующий снижение частоты обструктивного апноэ (ОА) после введения гидрохлоридной соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а).
На фиг. 20 представлен график, иллюстрирующий снижение дефицита содержания кислорода в артериальной крови после введения гидрохлоридной соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а).
На фиг. 21А представлен график, иллюстрирующий увеличение реакций дыхательных путей (подбородочно-язычная мышца или GG) у крыс на вызываемые явления обструкции после введения гидрохлоридной соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а). На фиг. 21В представлен график, иллюстрирующий незначительное увеличение реакций диафрагмы (DIA) у тех же крыс на вызываемые явления обструкции после введения гидрохлоридной соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а). Красная полоса - среда-носитель; светло-синяя полоса - инфузия средней дозы (MD) соединения (31а), предусматривающая введение 0,008 мг/кг/мин в течение 15 минут (фаза загрузки), а затем - 0,002 мг/кг/мин в течение 45 минут (фаза поддержания); темно-синяя полоса - инфузия высокой дозы (HD) соединения (31а), предусматривающая введение 0,024 мг/кг/мин в течение 15 минут (фаза загрузки), а затем - 0,006 мг/кг/мин в течение 45 минут (фаза поддержания).
На фиг. 22 представлен график, иллюстрирующий повышение реакции верхних дыхательных путей (общая амплитуда EMG подбородочно-язычной мышцы) на спонтанное обструктивное апноэ у крыс после введения гидрохлоридной соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а).
На фиг. 23 представлен график, иллюстрирующий, что гидрохлоридная соль 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а), вводимая IV инфузией, дозозависимо повышает реакцию верхних дыхательных путей (активность подбородочно-язычной мышцы) на спонтанное обструктивное апноэ у крыс.
Фиг. 24 представляет таблицу, иллюстрирующую, что гидрохлоридная соль 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а) (10 мг/кг РО) не имеет влияния на струтуру сна у крыс.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к обнаружению того, что соединения по настоящему изобретению являются перорально биодоступными модуляторами регуляции дыхания и пригодны в предупреждении или лечении нарушений или заболеваний регуляции дыхания. Кроме того, соединения по настоящему изобретению являются модуляторами регуляции дыхания, пригодными для предупреждения или лечения нарушений или заболеваний регуляции дыхания. В некоторых вариантах осуществления соединения перорально биодоступны.
2
В одном аспекте посредством соединений по настоящему изобретению предупреждают изменения в системе нормальной регуляции дыхания организма в результате нарушений или заболеваний и в ответ на изменения значений уровня СО и/или уровня кислорода при минимальных побочных эффектах. В другом аспекте соединения по настоящему изобретению снижают частоту и тяжесть нарушений регуляции дыхания, таких как апноэ. В еще одном аспекте соединения по настоящему изобретению снижают частоту случаев апноэ и/или снижают длительность случаев апноэ. В еще одном аспекте соединения по настоящему изобретению имеют хорошую устойчивость к инактивации в процессе метаболизма и пероральную биодоступность. В еще одном аспекте соединения по настоящему изобретению не влияют на эффективность видах терапии, которые могут вызывать изменения регуляции дыхания, таких как аналгезия с помощью опиоидных средств. Такие изменяющие регуляцию дыхания виды терапии обеспечивают пользу посредством введения средств, которые поддерживают или восстанавливают нормальную дыхательную функцию.
В некоторых вариантах осуществления нарушение или заболевание регуляции дыхания выбрано без ограничения из группы, состоящей из угнетения дыхания, апноэ во время сна, апноэ у недоношенных детей, синдрома гиповентиляции вследствие ожирения, первичного альвеолярного гиповентиляционного синдрома, диспноэ, высотной болезни, гипоксии, гиперкапнии, хронического обструктивного заболевания легких (COPD) и синдрома внезапной детской смерти (SIDS). В других вариантах осуществления угнетение дыхания вызвано анестетиком, седативным средством, средством, способствующим сну, анксиолитическим средством, снотворным средством, алкоголем или наркотическим веществом. В еще одних вариантах осуществления угнетение дыхания вызвано генетическими факторами, что выражается без ограничения синдромом врожденной центральной гиповентиляции. В еще одним вариантах осуществления угнетение дыхания вызвано неврологическими состояниями, такими как без ограничения болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, инсульт, миодистрофия Дюшенна и травматическое повреждение головного мозга или спинного мозга.
Определения
При использовании в данном документе каждый из следующих терминов имеет значение, связанное с ним в данном разделе.
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном документе, как правило, имеют такое же значение, которое обычно понимается специалистом в области, к которой относится настоящее изобретение. Как правило, номенклатура, используемая в данном документе, и лабораторные процедуры фармакологии на животных, фармацевтики, разделения и органической химии хорошо известны и обычно используются в данной области.
2
2
2
2
В неограничивающем варианте осуществления следующая терминология, используемая для описания измерений, касающихся газов в крови, хорошо известна специалисту в данной области и может быть определена таким образом: минутный объем вентиляции легких (MV) является мерой объема дыхания в единицу времени и приведен в данном документе в мл/мин; pCO представляет парциальное давление диоксида углерода (газа) в (артериальной) крови, измеренное в мм рт.ст. (миллиметрах ртутного столба); pO представляет парциальное давление кислорода (газа) в (артериальной) крови, измеренное в мм рт.ст. (миллиметрах ртутного столба); SaO представляет собой процентное значение насыщения оксигемоглобином (газообразный кислород, связанный с гемоглобином), которое коррелирует с процентным значением количества сайтов связывания гемоглобина в кровотоке, занятых кислородом; СО в конце спокойного выдоха является измерением выдыхаемого газообразного диоксида углерода, обнаруживаемого с помощью методик калориметрии, капнометрии или капнографии.
При использовании в данном документе единственное число относится к одному или более чем одному (т.е. по меньшей мере к одному) грамматическому объекту изделия. В качестве примера, "элемент" означает один элемент или более одного элемента.
При использовании в данном документе термин "приблизительно" понимается специалистами в данной области и варьируется до некоторой степени в зависимости от контекста, в котором используется. При использовании в данном документе при ссылке на измеряемое значение, такое как количество, временной отрезок и подобное, термин "приблизительно" предназначен для охвата ±20% или ±10%, более предпочтительно ±5%, еще более предпочтительно ±1% и еще более предпочтительно ±0,1% от конкретного значения, при этом такие вариации подходят для выполнения раскрытых способов.
В одном аспекте термины "совместно вводимый" и "совместное введение", относящиеся к субъекту, относятся к введению субъекту соединения по настоящему изобретению или его соли вместе с соединением, которое также может обеспечивать лечение нарушения регуляции дыхания, и/или с соединением, которое пригодно для лечения других медицинских состояний, которые при этом сами по себе могут изменять регуляцию дыхания. В некоторых вариантах осуществления совместно вводимые соединения вводят по отдельности или посредством любого вида комбинации в виде части одного терапевтического подхода. Совместно вводимое соединение может быть составлено в любом виде комбинаций в виде смесей твердых веществ и жидкостей из ряда твердых, гелеобразных и жидких составов, а также в виде раствора.
При использовании в данном документе термин "CYP450", используемый в отношении ферментов, относится к ферментам семейства цитохрома Р450.
При использовании в данном документе термин "заболевание" представляет собой состояние здоровья субъекта, при котором субъект не может поддерживать гомеостаз, и при этом, если состояние при заболевании не улучшается, то здоровье субъекта продолжает ухудшаться.
При использовании в данном документе термин "нарушение" у субъекта представляет собой состояние здоровья, при котором субъект способен поддерживать гомеостаз, но при котором состояние здоровья субъекта хуже, чем оно могло быть в отсутствие нарушения. Если нарушение не лечить, нарушение не обязательно вызывает дальнейшее ухудшение состояния здоровья субъекта.
50
При использовании в данном документе термин "ED" относится к эффективной дозе состава, которая обеспечивает 50% от максимального эффекта у субъектов, которым вводят такой состав.
При использовании в данном документе термины "эффективное количество", "терапевтически эффективное количество" или "фармацевтически эффективное количество" соединения предусматривают такое количество соединения, которого достаточно для обеспечения положительного эффекта для субъекта, которому вводят соединение.
При использовании термина "инструкция" в данном документе данный термин включает публикацию, запись, диаграмму или любое другое средство выражения, которое можно использовать для сообщения о пригодности композиции и/или соединения по настоящему изобретению в наборе. Инструкция к набору может, например, быть прикреплена к контейнеру, который содержит соединение и/или композицию по настоящему изобретению или может поставляться вместе с контейнером, который содержит соединение и/или композицию. В качестве альтернативы, инструкция может поставляться отдельно от контейнера с тем, чтобы получатель совместно использовал инструкцию и соединение. Доставка инструкции может, например, осуществляться с помощью физической доставки публикации или другого средства выражения, сообщающего о пригодности набора, или может, в качестве альтернативы, достигаться электронной передачей, например, с помощью компьютера, например, электронным письмом или загрузкой с веб-сайта.
При использовании в данном документе термин "фармацевтическая композиция" или "композиция" относится к смеси по меньшей мере одного соединения, пригодного в соответствии с настоящим изобретением, с фармацевтически приемлемым носителем. Фармацевтическая композиция облегчает введение соединения субъекту.
При использовании в данном документе термин "фармацевтически приемлемый" относится к материалу, такому как носитель или разбавитель, который не подавляет биологическую активность или свойства соединения, пригодного в соответствии с настоящим изобретением, и является относительно нетоксичным, т.е. материал можно вводить субъекту, не вызывая нежелательных биологических эффектов или вредного взаимодействия с любыми из компонентов композиции, в которой он содержится.
При использовании в данном документе термин "фармацевтически приемлемый носитель" означает фармацевтически приемлемый материал, композицию или носитель, например, жидкий или твердый заполнитель, стабилизатор, диспергирующее средство, суспендирующее средство, разбавитель, вспомогательное вещество, загуститель, растворитель или инкапсулирующий материал, вовлеченные в перенос или транспорт соединения, пригодного в соответствии с настоящим изобретением, в пределах организма субъекта или субъекту, таким образом, что он может выполнять свою предназначенную функцию. Обычно такие структуры переносятся или транспортируются из одного органа или части тела к другому органу или части тела. Каждый носитель должен быть "приемлемым" в смысле быть совместимым с другими ингредиентами состава, включая соединение, пригодное в соответствии с настоящим изобретением, и быть не вредным для субъекта. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают; сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; вспомогательные вещества, такие как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль; полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные средства, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; поверхностно-активные средства; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический раствор; раствор Рингера; этиловый спирт; фосфатно-буферные растворы и другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических составах. При использовании в данном документе "фармацевтически приемлемый носитель" также предусматривает любое или все из покрытий, антибактериальных и противогрибковых средств и средств задерживания поглощения и подобного, которые совместимы с активностью соединения, пригодного в соответствии с настоящим изобретением, и физиологически приемлемы для субъекта. Дополнительные активные соединения можно также включать в композиции. "Фармацевтически приемлемый носитель" может дополнительно включать фармацевтически приемлемую соль соединения, пригодного в соответствии с настоящим изобретением. Другие дополнительные ингредиенты, которые можно включать в фармацевтические композиции, используемые при осуществлении на практике настоящего изобретения, известны в данной области и описаны, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences (Genaro, Ed., Mack Publishing Co., 1985, Easton, PA), который включен в данный документ посредством ссылки.
При использовании в данном документе формулировка "фармацевтически приемлемая соль" относится к соли вводимого соединения, полученной с помощью фармацевтически приемлемых нетоксичных кислот и оснований, включая неорганические кислоты, неорганические основания, органические кислоты, органические основания, их сольваты, гидраты и клатраты.
Термины "предупреждать", "предупреждающий" или "предупреждение" при использовании в данном документе означают избегание или отсрочку начала проявления симптомов, связанных с заболеванием или состоянием субъекта, у которого не проявлялись такие симптомы во время начала введения средства или соединения. Заболевание, состояние и нарушение используют в данном документе взаимозаменяемо.
Под терминами "специфически связанный" или "специфически связывает" при использовании в данном документе понимают, что первая молекула предпочтительно связывается со второй молекулой (например, конкретным рецептором или ферментом), но не обязательно связывается только с такой второй молекулой.
При использовании в данном документе "субъект" может представлять собой человека, или не являющееся человеком млекопитающее, или птицу. Не являющиеся человеком млекопитающие включают, например, домашний скот и домашних животных, таких как овцы, коровы, свиньи, собаки, кошки и мыши. Предпочтительно субъектом является человек.
Термины "лечить", "лечащий" или "лечение" при использовании в данном документе означают снижение частоты или тяжести проявления симптомов заболевания или состояния, которые испытывает субъект, посредством введения средства или соединения субъекту.
1
10
1
6
При использовании в данном документе термин "алкил", сам по себе или как часть другого заместителя, обозначает, если не указано иное, углеводород с прямой или разветвленной цепью, содержащий указанное число атомов углерода (т.е. C-С означает один - десять атомов углерода) и включает группы-заместители с прямой цепью, группы-заместители с разветвленной цепью или циклические группы-заместители. Примеры включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, неопентил, гексил и циклопропилметил. Наиболее предпочтительным является (С-С)алкил, такой как без ограничения этил, метил, изопропил, изобутил, н-пентил, н-гексил и циклопропилметил.
1
10
При использовании в данном документе термин "алкилен", сам по себе или как часть другого заместителя, означает, если не указано иное, углеводородную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую указанное число атомов углерода (т.е. C-С означает один - десять атомов углерода) и включает группы-заместители с прямой цепью, группы-заместители с разветвленной цепью или циклические группы-заместители, причем группа имеет две открытые валентности. Примеры включают метилен, 1,2-этилен, 1,1-этилен, 1,1-пропилен, 1,2-пропилен и 1,3-пропилен.
3
6
3
6
При использовании в данном документе термин "циклоалкил", сам по себе или как часть другого заместителя, означает, если не указано иное, углеводород с циклической цепью, содержащий указанное число атомов углерода (т.е. С-С означает циклическую группу, содержащую кольцевую группу, состоящую из трех-шести атомов углерода) и включает группы-заместители с прямой цепью, группы-заместители с разветвленной цепью или циклические группы-заместители. Примеры включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Наиболее предпочтительным является (С-С)циклоалкил, такой как без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.
2
2
При использовании в данном документе термин "алкенил", используемый отдельно или в комбинации с другими терминами, означает, если не указано иное, стабильную мононенасыщенную или диненасыщенную углеводородную группу с прямой цепью или разветвленной цепью, содержащую указанное число атомов углерода. Примеры включают винил, пропенил (или аллил), кротил, изопентенил, бутадиенил, 1,3-пентадиенил, 1,4-пентадиенил и высшие гомологи и изомеры. Функциональная группа, представляющая собой алкен, представлена -СН-СН=СН.
2
2
2
2
2
2
При использовании в данном документе термин "алкинил", используемый отдельно или в комбинации с другими терминами, означает, если не указано иное, стабильную углеводородную группу с прямой цепью или разветвленной цепью, содержащую тройную углерод-углеродную связь, содержащую указанное число атомов углерода. Неограничивающие примеры включают этинил и пропинил, а также высшие гомологи и изомеры. Термин "пропаргиловый" относится к группе, представленной -СН-С≡СН. Термин "гомопропаргиловый" относится к группе, представленной -СНСН-С≡СН. Термин "замещенный пропаргиловый" относится к группе, представленной -CR-C≡CR, причем каждый вариант R независимо представляет собой Н, алкил, замещенный алкил, алкенил или замещенный алкенил, при условии, что по меньшей мере одна группа R не является водородом. Термин "замещенный гомопропаргиловый" относится к группе, представленной -CRCR-C≡CR, причем каждый вариант R независимо представляет собой Н, алкил, замещенный алкил, алкенил или замещенный алкенил, при условии, что по меньшей мере одна группа R не является водородом.
2
3
2
1
4
2
1
4
1
4
2
2
2
2
2
2
3
2
При использовании в данном документе термины "замещенный алкил", "замещенный циклоалкил", "замещенный алкенил" или "замещенный алкинил" означают алкил, циклоалкил, алкенил или алкинил, определенные выше, замещенные одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, алкокси, тетрагидро-2-Н-пиранила, -NH, -N(СН), (1-метилимидазол-2-ила), пиридин-2-ила, пиридин-3-ила, пиридин-4-ила, -С(=O)ОН, трифторметила, -C≡N, -С(=O)O(С-С)алкила, -C(=O)NH, -С(=O)NH(С-С)алкила, -С(=O)N((С-С)алкила), -SONH, -C(=NH)NH и -NO, предпочтительно содержащие один или два заместителя, выбранные из галогена, -ОН, алкокси, -NH, трифторметила, -N(СН) и -С(=O)ОН, более предпочтительно выбранные из галогена, алкокси и -ОН. Примеры замещенных алкилов включают без ограничения 2,2-дифторпропил, 2-карбоксициклопентил и 3-хлорпропил. В некоторых вариантах осуществления замещенный алкил не замещен гидроксигруппой.
1
3
При использовании в данном документе термин "алкокси", используемый отдельно или в комбинации с другими терминами, означает, если не указано иное, алкильную группу, содержащую указанное число атомов углерода, определенную выше, соединенную с остальной частью молекулы посредством атома кислорода, такую как, например, метокси, этокси, 1-пропокси, 2-пропокси (изопропокси) и высшие гомологи и изомеры. Предпочтительным является (C-С)алкокси, например, без ограничения этокси и метокси.
При использовании в данном документе термин "галогено" или "галоген", отдельно или как часть другого заместителя, означает, если не указано иное, атом фтора, хлора, брома или йода, предпочтительно фтор, хлор или бром, более предпочтительно фтор или хлор.
2
2
3
2
2
2
2
2
3
2
2
3
2
2
3
2
3
2
2
3
При использовании в данном документе термин "гетероалкил", сам по себе или в комбинации с другим термином, означает, если иное не указано, стабильную алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, состоящую из указанного числа атомов углерода и одного или двух гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из О, N и S, и причем атомы азота и серы могут быть необязательно окислены, и гетероатом азота может быть необязательно кватернизован. Гетероатом(гетероатомы) может(могут) размещаться в любом положении гетероалкильной группы, включая положение между остальной частью гетероалкильной группы и фрагментом, к которому он(они) присоединен(присоединены), а также присоединяться к наиболее удаленному атому углерода в гетероалкильной группе. Примеры включают: -O-CH-СН-СН, -CH-CH-CH-OH, -CH-CH-NH-CH, -СН-S-СН-СН и -СНСН-S(=O)-CH. Вплоть до двух гетероатомов могут быть последовательными, как, например, -СН-NH-ОСН или -CH-CH-S-S-CH.
3
2
2
3
3
3
2
2
При использовании в данном документе термин "гетероалкенил", сам по себе или в комбинации с другим термином, означает, если иное не указано, стабильную мононенасыщенную или диненасыщенную углеводородную группу с прямой или разветвленной цепью, состоящую из указанного числа атомов углерода и одного или двух гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из О, N и S, и причем атомы азота и серы могут быть необязательно окислены, и гетероатом азота может быть необязательно кватернизован. Вплоть до двух гетероатомов могут располагаться последовательно. Примеры включают - СН=СН-O-СН, -СН=СН-СН-ОН, -CH-CH=N-ОСН, -СН=СН-N(СН)-СН и -CH-CH=CH-CH-SH.
При использовании в данном документе термин "ароматический" относится к карбоциклу или гетероциклу с одним или более полиненасыщенными кольцами и с ароматической природой, т.е. с (4n+2) делокализованными π(пи)-электронами, где π является целым числом.
При использовании в данном документе термин "арил", используемый отдельно или в комбинации с другими терминами, означает, если иное не указано, карбоциклическую ароматическую систему, содержащую одно или более колец (обычно одно, два или три кольца), причем такие кольца могут соединяться вместе линейным образом, например, бифенил, или могут быть конденсированы, например, нафталин. Примеры включают фенил, антрацил и нафтил. Предпочтительными являются фенил и нафтил, наиболее предпочтительным является фенил.
1
3
2
2
2
2
3
1
3
1
3
2
1
3
2
2
2
1
3
1
3
2
При использовании в данном документе термин "арил-(С-С)алкил" означает функциональную группу, где алкиленовая цепь с одним-тремя атомами углерода присоединена к арильной группе, например, -СНСН-фенил или -СН-фенил (бензил). Предпочтительным является арил-СН- и арил-СН(СН)-. Термин "замещенный арил-(С-С)алкил" означает арил-(С-С)алкильную функциональную группу, в которой арильная группа является замещенной. Предпочтительным является замещенный арил(СН)-. Аналогино термин "гетероарил-(С-С)алкил" означает функциональную группу, в которой алкиленовая цепь с одним-тремя атомами углерода присоединена к гетероарильной группе, например, -СНСН-пиридил. Предпочтительным является гетероарил-(СН)-. Термин "замещенный гетероарил-(С-С)алкил" означает гетероарил-(С-С)алкильную функциональную группу, в которой гетероарильная группа является замещенной. Предпочтительным является замещенный гетероарил-(СН)-.
При использовании в данном документе термин "гетероцикл", или "гетероциклил", или "гетероциклический", сам по себе или как часть другого заместителя, означает, если не указано иное, незамещенную или замещенную, стабильную, моно- или полициклическую гетероциклическую кольцевую систему, которая состоит из атомов углерода и по меньшей мере одного гетероатома, выбранного из группы, состоящей из N, О и S, и причем гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены, и атом азота может быть необязательно кватернизован. Гетероциклическая система может быть присоединена, если не указано иное, к любому гетероатому или атому углерода, который обеспечивает стабильную структуру. Гетероцикл может быть ароматическим или неароматическим по природе. В некоторых вариантах осуществления гетероцикл представляет собой гетероарил.
При использовании в данном документе термин "гетероарил" или "гетероароматический" относится к гетероциклу ароматической природы. Полициклический гетероарил может включать одно или более колец, которые частично насыщены. Примеры включают тетрагидрохинолин и 2,3-дигидробензофурил.
Примеры неароматических гетероциклов включают моноциклические группы, такие как азиридин, оксираы, трииран, азетидин, оксетан, триэтан, пирролидин, пирролин, имидазолин, пиразолидин, диоксолан, сульфолан, 2,3-дигидрофуран, 2,5-дигидрофуран, тетрагидрофуран, тиофан, пиперидин, 1,2,3,6-тетрагидропиридин, 1,4-дигидропиридин, пиперазин, морфолин, тиоморфолин, пиран, 2,3-дигидропиран, тетрагидропиран, 1,4-диоксан, 1,3-диоксан, гомопиперазин, гомопиперидин, 1,3-диоксепан, 4,7-дигидро-1,3-диоксепин и гексаметиленоксид.
Примеры гетероарильных групп включают пиридил, пиразинил, пиримидинил (такой как без ограничения 2- и 4-пиримидинил), пиридазинил, тиенил, фурил, пирролил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, пиразолил, изотиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-триазолил, тетразолил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил и 1,3,4-оксадиазолил.
Примеры полициклических гетероциклов включают индолил (такой как без ограничения 3-, 4-, 5-, 6- и 7-индолил), индолинил, хинолил, тетрагидрохинолил, изохинолил (такой как без ограничения 1- и 5-изохинолил), 1,2,3,4-тетрагидроизохинолил, циннолинил, хиноксалинил (такой как без ограничения 2- и 5-хиноксалинил), хиназолинил, фталазинил, 1,8-нафтиридинил, 1,4-бензодиоксанил, кумарин, дигидрокумарин, 1,5-нафтиридинил, бензофурил (такой как без ограничения 3-, 4-, 5-, 6- и 7-бензофурил), 2,3-дигидробензофурил, 1,2-бензизоксазолил, бензотиенил (такой как без ограничения 3-, 4-, 5-, 6- и 7-бензотиенил), бензоксазолил, бензотиазолил (такой как без ограничения 2-бензотиазолил и 5-бензотиазолил), пуринил, бензимидазолил, бензтриазолил, тиоксантинил, карбазолил, карболинил, акридинил, пирролизидинил и хинолизидинил.
Вышеуказанный перечень гетероциклильных и гетероарильных фрагментов предназначен для иллюстрации, а не ограничения.
При использовании в данном документе термин "замещенный" означает, что атом или группа атомов имеет водород, замененный как заместитель, присоединенный к другой группе.
1
3
1-6
1-6
Для арильных, арил-(С-С)алкильных и гетероциклильных групп термин "замещенный" при использовании в отношении колец данных групп относится к любому уровню замещения, а именно моно-, ди-, три-, тетра- или пента-замещению, где такое замещение допускается. Заместители независимо выбраны, и замещение может происходить в любом химически допустимом положении. В некоторых вариантах осуществления количество заместителей может составлять от одного до четырех. В других вариантах осуществления количество заместителей может составлять от одного до трех. В еще одних вариантах осуществления количество заместителей может составлять от одного до двух. В еще одних вариантах осуществления заместители независимо выбраны из группы, состоящей из Cалкила, -ОН, Cалкокси, галогена, амино, ацетамидо и нитро. При использовании в данном документе, если заместитель представляет собой алкильную или алкоксигруппу, углеродная цепь может быть разветвленной, прямой или циклической, причем прямая - предпочтительна.
13
1
3
3
2
2
6
6
2
2
4
3
3
e
3
2
4
2
e
Следующие сокращения используют в данном документе: ABG: газ в артериальной крови; АсОН: уксусная кислота; ASV: адаптивная сервовентиляция; AUC: площадь под кривой; ВОР: (бензотриазол-1-илокси)трис(диметиламино)фосфония гексафторфосфат; BiPAP: двухуровневое положительное давление в дыхательных путях; nBuOH: н-бутанол; С: атом углерода или элементарный углерод; С-ЯМР: ядерный магнитный резонанс на ядрах углерода-13; CHCl: хлороформ; CDCl: хлороформ-d; CHCl: дихлорметан или метилендихлорид; СРАР: положительное постоянное давление в дыхательных путях; CSA: апноэ сна центрального происхождения; DBU: 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен; DCM: дихлорметан или метилендихлорид; DIA: диафрагма (мышца); DIPEA: N,N-диизопропилэтиламин; DMAc: N,N-диметилацетамид; DMSO: диметилсульфоксид; DMSO-d: диметилсульфоксид-d; DSC: дифференциальная сканирующая калориметрия; ЕРАР: положительное давление в дыхательных путях на выдохе; EtOAc: этилацетат; EtOH: этанол; EtO: (ди)этиловый эфир; f: частота (дыхания); F (%): биодоступность (процент); FID: пламенно-ионизационный детектор; GG: подбородочно-язычная мышца; Н: атом водорода или элементарный водород; Н-ЯМР: протонный ядерный магнитный резонанс или ядерный магнитный резонанс водорода-1; HCl: хлористоводородная кислота или гидрохлоридная соль; HDPE: полиэтилен повышенной плотности; hERG: ген специфических калиевых каналов сердца человека (ионный канал Kv11.1); HSO: серная кислота; HLM: микросомы печени человека; HPLC: жидкостная хроматография высокого давления; ICU: отделение интенсивной терапии; IPA: изопропанол (или 2-пропанол); IPAP: положительное давление в дыхательных путях на вдохе; кПа: килопаскаль; LCMS: жидкостная хроматография-масс-спектрометрия; LOQ: предел количественного определения; m: мультиплет; MAP: среднее артериальное давление крови; мбар: миллибар (0,001 бар); МВР: среднее кровяное давление; МТВЕ: метил-трет-бутиловый эфир; MeCN или CHCN: ацетонитрил; MEK: метилэтилкетон; МеОН или СНОН: метанол; мин: минута; мл (или мл): миллилитр; МР: температура плавления; mpk: мг/кг; MV: минутный объем (синоним v); мс: миллисекунда; MS: масс-спектрометрия; N: атом азота или элементарный азот; NaCl: хлорид натрия; NaHCO: бикарбонат натрия; NaOH: гидроксид натрия; NaSO: сульфат натрия; NAVA: нейро-контролируемая респираторная поддержка; NIPPV: неинвазивная вентиляция с положительным давлением; ЯМР: ядерный магнитный резонанс; О: атом кислорода или элементарный кислород; ОА: обструктивное апноэ; РА: пропаргиламин (пропаргиловый амин); PAV: пропорциональная поддерживающая вентиляция; РЕ или пет. эфир: петролейный эфир; PEG: полиэтиленгликоль; PET: позитронно-эмиссионная томография; ppm: частей на миллион; q: квартет; RLM: микросомы печени крысы; RR: частота дыхания; к. т.: комнатная температура (температура окружающей среды); s: синглет; SpO: степень насыщения артериальной крови кислородом; std: стандарт; t: триплет; THF: тетрагидрофуран; TV: дыхательный объем; UPLC: сверхпроизводительная жидкостная хроматография; v: минутный (выдыхаемый) объем (синоним MV); XRPD: рентгеновская порошковая дифрактометрия (спектр); δ (delta): дельта (ppm); мкл (мкл): микролитр.
Во всем данном раскрытии различные аспекты настоящего изобретения могут быть представлены в формате диапазона. Следует понимать, что описание в формате диапазона представлено только для удобства и краткости и не должно рассматриваться как жесткое ограничение объема настоящего изобретения. Следовательно, описание диапазона следует рассматривать как конкретно раскрывающее все возможные поддиапазоны, а также отдельные числовые значения в данном диапазоне и при необходимости частичные целые числа из численных значений в диапазонах. Например, описание диапазона, такого как от 1 до 6, следует рассматривать как конкретно раскрывающее поддиапазоны, такие как от 1 до 3, от 1 до 4, от 1 до 5, от 2 до 4, от 2 до 6, от 3 до 6 и т.д., а также отдельные числа в таком диапазоне, например, 1, 2, 2,7, 3, 4, 5, 5,3 и 6. Это применимо независимо от ширины диапазона.
Соединения и композиции
Настоящее изобретение включает соединение формулы (I) или его соль, сольват, энантиомер, диастерео изомер или таутомер:
, где в формуле (I):
1
2
1
9
10
1
2
один из заместителей, выбранных из группы, состоящей из Y и Y, выбран из группы, состоящей из -N(R)-L-C(R)(R)OH,  и , а другой заместитель представляет собой -N(R)R;
1
5
7
1
3
R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-Салкила;
2
R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной;
6
8
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила,
причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной;
9
10
9
10
1
3
3
6
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-С-алкила; или R и R объединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием необязательно замещенной С-Сциклоалкильной группы;
11
11
11
1
3
2
2
каждый вариант R независимо выбран из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-С-алкила; причем -C(R)-C(R)-группа в кольце b необязательно заменена необязательно замещенной 1,2-фениленовой группой, которая конденсирована с кольцом b;
1
3
каждый вариант L независимо представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен;
m и n независимо выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3 и 4, таким образом, что 2≤m+n≤4;
р и q независимо выбраны из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3 и 4, таким образом, что 2≤p+q≤4;
при условии, что алкильная группа не замещена гидроксигруппой.
В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IIa) или его соль, сольват, энантиомер, диастереоизомер или таутомер:
, где в формуле (IIa):
1
2
9
10
1
2
один из заместителей, выбранных из группы, состоящей из Y и Y, представляет собой -L-C(R)(R)OH, а другой заместитель представляет собой -N(R)R;
1
5
7
1
3
R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-Салкила;
2
R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной;
6
8
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной;
9
10
9
10
1
3
3
6
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-С-алкила; или R и R объединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием необязательно замещенной С-Сциклоалкильной группы;
1
3
L представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен; и
при условии, что алкильная группа не замещена гидроксигруппой.
В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IIb) или его соль, сольват, энантиомер, диастереоизомер или таутомер:
, где в формуле (IIb):
1
2
один из заместителей, выбранных из группы, состоящей из Y и Y, представляет собой
1
2
, а другой заместитель представляет собой -N(R)R;
1
5
7
1
3
R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-Салкила;
2
1
3
R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной; L представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен; и
6
8
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной;
11
1
3
каждый вариант R независимо выбран из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-С-алкила;
1
3
L представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен;
m и n независимо выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3 и 4, таким образом, что 2≤m+n≤4;
при условии, что алкильная группа не замещена гидроксигруппой.
В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IIc) или его соль, сольват, энантиомер, диастереоизомер или таутомер:
, где в формуле (IIc):
1
2
1
2
один из заместителей, выбранных из группы, состоящей из Y и Y, представляет собой , а другой заместитель представляет собой -N(R)R;
1
5
7
1
3
R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C-Салкила;
2
R выбран из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила, причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной;
6
8
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, фенила, фенилалкила, арила, арилалкила, гетероарилалкила и гетероарила,
причем алкильная, циклоалкильная, алкенильная, алкинильная, фенильная, фенилалкильная, арильная, арилалкильная, гетероарилалкильная или гетероарильная группа независимо является необязательно замещенной;
9
10
9
10
1
3
3
6
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-С-алкила; или R и R объединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием необязательно замещенной С-Сциклоалкильной группы;
11
11
11
1
3
2
2
каждый вариант R независимо выбран из группы, состоящей из Н и необязательно замещенного C-С-алкила; причем -С(R)-C(R)-группа в кольце b необязательно заменена необязательно замещенной 1,2-фениленовой группой, которая конденсирована с кольцом b;
1
3
каждый вариант L независимо представляет собой необязательно замещенный C-Салкилен;
р и q представляют собой S независимо выбраны из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3 и 4, таким образом, что 2≤p+q≤4;
при условии, что алкильная группа не замещена гидроксигруппой.
1
6
В некоторых вариантах осуществления каждый вариант алкильной группы независимо необязательно замещен одним или несколькими, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, F, Cl, Br, I и CN.
1
6
В некоторых вариантах осуществления каждый вариант циклоалкильной, алкенильной или алкинильной группы независимо необязательно замещен одним или несколькими, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, F, Cl, Br, I и СН.
1
6
1
6
2
1
6
1
6
1
6
0-2
1
6
1
6
В некоторых вариантах осуществления каждый вариант фенильной, фенилалкильной, арильной, арилалкильной, гетероарилалкильной или гетероарильной группы независимо необязательно замещен одним или несколькими, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, C-Салкокси, гидрокси, F, Cl, Br, I, нитро, -NH, -NH(С-Салкил), -N(С-Салкил)(С-Салкил), -S(=O)(С-Салкил), -С(=О)ОН и -С(=O)ОС-Салкила.
1
5
7
1
5
7
6
8
1
5
7
6
8
1
5
7
6
8
1
5
7
6
8
1
6
В некоторых вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н. В других вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный C-Салкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный арилалкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкенил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкинил.
1
5
7
1
5
7
6
8
1
5
7
6
8
1
5
7
6
8
1
5
7
6
8
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
В некоторых вариантах осуществления R, R и R независимо представляют собой необязательно замещенный C-С-алкил. В других вариантах осуществления R, R и R независимо представляют собой необязательно замещенный C-С-алкил; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R независимо представляют собой необязательно замещенный C-С-алкил; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный арилалкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R независимо представляют собой необязательно замещенный C-С-алкил; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкенил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R независимо представляют собой необязательно замещенный C-С-алкил; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкинил.
1
5
7
9
10
1
5
7
9
10
6
8
1
5
7
9
10
6
10
1
5
7
9
10
6
8
1
5
7
9
10
6
8
В некоторых вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; и R и R представляют собой Н. В других вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R и R представляют собой Н; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R и R представляют собой Н; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный арилалкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R и R представляют собой Н; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкенил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R и R представляют собой Н; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкинил.
1
5
7
9
10
1
5
7
9
10
6
8
1
5
7
9
10
6
8
1
5
7
9
10
6
8
1
5
7
9
10
6
8
3
3
3
3
3
В некоторых вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; и R и R представляют собой СН. В других вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R и R представляют собой СН; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой H; R и R представляют собой СН; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный арилалкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R и R представляют собой СН; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкенил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R и R представляют собой СН; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкинил.
1
5
7
9
10
1
5
7
9
10
6
8
1
5
7
9
10
6
8
1
5
7
9
10
6
8
1
5
7
9
10
6
8
3
3
3
3
3
В некоторых вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R представляет собой Н; и R представляет собой СН. В других вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R представляет собой Н; R представляет собой СН; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R представляет собой Н; R представляет собой СН; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный арилалкил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R представляет собой Н; Rпредставляет собой СН; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкенил. В еще одних вариантах осуществления R, R и R представляют собой Н; R представляет собой Н; R представляет собой СН; и R и R независимо представляют собой необязательно замещенный алкинил.
1
6
В некоторых вариантах осуществления каждый вариант алкильной группы независимо необязательно замещен одним или несколькими, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, F, Cl, Br, I и CN.
1
6
В некоторых вариантах осуществления каждый вариант циклоалкильной, алкенильной или алкинильной группы независимо необязательно замещен одним или несколькими, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, F, Cl, Br, I и СН.
1
6
1
6
2
1
6
1
6
1
6
0-2
1
6
1
6
В некоторых вариантах осуществления каждый вариант фенильной, фенилалкильной, арильной, арилалкильной, гетероарилалкильной или гетероарильной группы независимо необязательно замещен одним или несколькими, независимо выбранными из группы, состоящей из C-Салкила, C-Салкокси, гидрокси, F, Cl, Br, I, нитро, -NH, -NH-(С-Салкил), -N(С-Салкил)(С-Салкил), -S(=O)(С-Салкил), -C(=O)OH и -С(=O)ОС-Салкила.
1
3
В некоторых вариантах осуществления R выбран из группы, состоящей из Н, СН и пропила.
2
3
2
2
2
3
В некоторых вариантах осуществления, R выбран из группы, состоящей из СН, этила, CHCHF и CHCF.
5
3
В некоторых вариантах осуществления R выбран из группы, состоящей из Н и СН.
6
3
2
2
2
3
2
2
2
2
2
3
2
В некоторых вариантах осуществления R выбран из группы, состоящей из СН, этила, пропила, CHCHF, CHCF, СН(циклопропил), втор-Bu, СН(2-пиримидин), СНСН=СН и СНС(СН)=СН.
7
3
В некоторых вариантах осуществления R выбран из группы, состоящей из Н и СН.
8
3
2
2
2
3
2
2
2
2
3
2
В некоторых вариантах осуществления R выбран из группы, состоящей из СН, этила, пропила, CHCHF, CHCF, СН(циклопропил), втор-Bu, СН(2-пиримидин), бензила, CHCHOCH и СНС≡СН.
9
10
3
3
В некоторых вариантах осуществления R и R независимо выбраны из группы, состоящей из Н, СН, этила и CF.
11
В некоторых вариантах осуществления R выбран из группы, состоящей из Н и конденсированного фениленового кольца.
В некоторых вариантах осуществления L выбран из группы, состоящей из метилена, замещенного метилом метилена, замещенного диметилом метилена и этилена.
В некоторых вариантах осуществления m и n независимо выбраны из группы, состоящей из 1 и 2.
В некоторых вариантах осуществления р и q независимо выбраны из группы, состоящей из 0, 3 и 4.
1
В некоторых вариантах осуществления Y выбран из группы, состоящей из , ,  и .
2
В некоторых вариантах осуществления Y выбран из группы, состоящей из , , ,  и .
В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (I) выбрано из группы, состоящей из 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (4); 2-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанола (6); 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (8); 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (10); (S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (12); (R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (14); 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ола (16); (S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (18); (R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (20); 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола (22); 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола (24); 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола (26); 2-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (27); 2-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (28); 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31); 1-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (32); 1-[2,6-бис-(2,2-дифторэтиламино)-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (33); 2-метил-1-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-пропан-2-ола (34); 1-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (36); 1-{2,6-бис-метиламино-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ола (38); 1-[8-((R)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (40); 1-[8-((S)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (42); 1-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (44); 1-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (46); 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (47); 2-метил-1-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (48); 2-метил-1-(2,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (49); 2-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (52); 2-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (54); 2-[8-(2-метоксиэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (56); 2-(2,6-бис-метиламино-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (58); 2-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-этанола (60); 2-[2,6-бис-метиламино-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (62); 2-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d-пиримидин-4-иламино)-этанола (64); 3-(8-этиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (67); 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-пирролидин-3-ола (71); 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-циклобутанола (72); 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (73); 3-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-пентан-3-ола (74); 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола (76); (1R,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (77); (1S,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (78); (1S,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (79); (1R,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (80); (2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-1-ола (81); (1R,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (82); (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (83); (1S,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (84); (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (85); (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола (86); (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола (87); 2-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-этанола (90); 2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (91); 2-(6-диметиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-этанола (92); 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола (94); 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (95); 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола (96); 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (97); 1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (99); (R)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (100); (S)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола(101); 1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (103); (R)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (104); (S)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (105); 1-[6-(2,2-дифторэтиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (107); 1-{4,8-бис-метиламино-6-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино}-2-метилпропан-2-ола (109); 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола (111); (S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (113); (R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (115); 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (117); 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (119); (1R,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (123); (1S,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (125); (1S,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (127); (1R,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (129); (1R,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (131); (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (133); (1S,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (135); (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (137); (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола (139); (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола (141); (S)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (142); (S)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (143); (R)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (144); (R)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (145); 1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-бутан-2-ола (146); 1-(6-этиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (147); 2-метил-1-(4,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (149); 2-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (154); (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-ил)-пропиламино]-пропан-2-ола (155); (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (156); (R)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (158); (S)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (159); 2-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (162); 1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола (163); (S)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (165); (S)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (166); (R)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (168); (R)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (169); (R)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (174); (S)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (175); их солей, сольватов, энантиомеров, диастереоизомеров или таутомеров, а также любых их комбинаций.
В некоторых вариантах осуществления соль предусматривает кислоту, которая представляет собой по меньшей мере одну кислоту, выбранную из группы, состоящей из серной, хлористоводородной, бромистоводородной, йодистоводородной, азотной, угольной, фосфорной, муравьиной, уксусной, пропионовой, янтарной, гликолевой, глюконовой, молочной, яблочной, винной, лимонной, аскорбиновой, глюкуроновой, малеиновой, миндальной, фумаровой, пировиноградной, аспарагиновой, глютаминовой, бензойной, антраниловой, 4-гидроксибензойной, фенилуксусной, миндальной, памовой, метансульфоновой, этансульфоновой, бензолсульфоновой, пантотеновой, сульфаниловой, стеариновой, альгиновой, трифторметансульфоновой, 2-гидроксиэтансульфоновой, п-толуолсульфоновой, циклогексиламиносульфоновой, β-гидроксимасляной, салициловой, галактаровой, галактуроновой кислот и сахарина, а также любых их комбинаций.
В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению представляет собой компонент фармацевтической композиции, дополнительно содержащей по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
Соединения по настоящему изобретению могут иметь один или несколько стереоцентров, и каждый стереоцентр может независимо находиться либо в (R)-, либо в (S)-конфигурации. В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные в данном документе, присутствуют в оптически активной или рацемической форме. Соединения, описанные в данном документе, охватывают рацемические, оптически активные, региоизомерные и стереоизомерные формы или их комбинации, которые имеют терапевтически пригодные свойства, описанные в данном документе. Получения оптически активных форм достигают любым подходящим способом, включая, в качестве неограничивающего примера, разделение рацемической формы с помощью методик перекристаллизации, синтез из оптически активных исходных материалов, хиральный синтез или хроматографическое разделение с помощью хиральной неподвижной фазы. В некоторых вариантах осуществления смесь одного или нескольких изомеров используют в качестве терапевтического соединения, описанного в данном документе. В других вариантах осуществления соединения, описанные в данном документе, содержат один или несколько хиральных центров. Данные соединения получают любыми способами, включая стереоселективный синтез, энантиоселективный синтез и/или разделение смеси энантиомеров и/или диастереомеров. Разделения соединений и их изомеров достигают любыми средствами, включая, в качестве неограничивающего примера, химические процессы, ферментативные процессы, фракционированную кристаллизацию, дистилляцию и хроматографию.
Способы и составы, описанные в данном документе, включают применение N-оксидов (при необходимости), кристаллических форм (также известных как полиморфы), сольватов, аморфных фаз и/или фармацевтически приемлемых солей соединений со структурой любого соединения по настоящему изобретению, а также метаболитов и активных метаболитов данных соединений с таким же типом активности. Сольваты включают сольваты, образованные водой, простым эфиром (например, тетрагидрофураном, метил-трет-бутиловым эфиром) или спиртом (например, этанолом), ацетаты и подобное. В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные в данном документе, находятся в сольватированных формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода и этанол. В других вариантах осуществления соединения, описанные в данном документе, находятся в несольватированной форме.
В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению существуют в виде таутомеров. Все таутомеры включены в объем соединений, перечисленных в данном документе.
В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные в данном документе, получают в виде пролекарств. "Пролекарство" представляет собой средство, превращающееся в исходное лекарственное средство in vivo. В некоторых вариантах осуществления при введении in vivo пролекарство химически превращается в биологически, фармацевтически или терапевтически активную форму соединения. В других вариантах осуществления пролекарство ферментативно метаболизируется в ходе одной или нескольких стадий или процессов в биологически, фармацевтически или терапевтически активную форму соединения.
В некоторых вариантах осуществления сайты, например, находящиеся на ароматической кольцевой части соединений по настоящему изобретению подвергаются различным метаболическим реакциям. Включение соответствующих заместителей на ароматические кольцевые структуры может снижать, минимизировать или исключать данный метаболический путь. В некоторых вариантах осуществления соответствующий заместитель для снижения или исключения подверженности ароматического кольца метаболическим реакциям, только в качестве примера, представляет собой дейтерий, галоген или алкильную группу.
2
3
11
13
14
36
18
123
125
13
15
15
17
18
32
35
11
18
15
13
Соединения, описанные в данном документе, также включают меченные изотопами соединения, где один или несколько атомов заменены атомом с таким же атомным числом, но с атомной массой или массовым числом, отличающимися от атомной массы или массового числа атомов, обычно встречающихся в природе. Примеры изотопов, подходящих для включения в соединения, описанные в данном документе, включают без ограничения H, H, С, С, С, Cl, F, I, I, 1N, N, О, O, О, P и S. В некоторых вариантах осуществления меченные изотопами соединения пригодны в исследованиях распределения в тканях лекарственного средства и/или субстрата. В других вариантах осуществления замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, обеспечивает большую устойчивость к инактивации в процессе метаболизма (например, повышение срока полураспада in vivo или снижение требуемых дозировок). В еще одних вариантах осуществления замещение позитронно-активными изотопами, такими как С, F, O и N, пригодно для исследований позитронно-эмиссионной томографии (PET) для проверки степени занятости рецептора субстратом. Меченные изотопами соединения получают любым подходящим способом или с помощью процессов, используя соответствующий меченный изотопами реагент вместо немеченного реагента, используемого в иных случаях.
В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные в данном документе, метят другими средствами, включая без ограничения использование хромофоров или флюоресцирующих фрагментов, биолюминесцентных меток или хемилюминесцентных меток.
Синтез
th
th
Соединения, описанные в данном документе, и другие связанные соединения с различными заместителями синтезируют с помощью методик и материалов, описанных в данном документе, и как описано, например, в Fieser & Fieser's Reagents for Organic Synthesis, Vol. 1-17 (John Wiley and Sons, 1991); Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Vol. 1-5 and Supplementals (Elsevier Science Publishers, 1989); Organic Reactions, Vol. 1-40 (John Wiley and Sons, 1991), Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989), March, Advanced Organic Chemistry 4 Ed., (Wiley 1992); Carey & Sundberg, Advanced Organic Chemistry, 4 Ed., Vols. A and В (Plenum 2000, 2001) и Green & Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis 3rd Ed., (Wiley 1999) (все из которых включены посредством ссылки для такого раскрытия). Общие способы получения соединения, описанного в данном документе, модифицируют путем использования соответствующих реагентов и условий для введения различных фрагментов, находящихся в формуле, представленной в данном документе.
Соединения, описанные в данном документе, синтезируют с помощью любых подходящих процедур, начиная с соединений, которые доступны из коммерческих источников или получены с помощью процедур, описанных в данном документе. Смотрите, например, Northen, et al., 2002, J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 108-115; DOI: 10.1039/B102224P.
В неограничивающих примерах соединения формулы (I) можно получать добавлениями первичных алкиламинов к хлорированному пиримидо-пиримидиновому промежуточному соединению (А), в котором один алкиламин содержит боковой спиртовой фрагмент (схемы 1-3). Аминоалканол можно добавлять на различных стадиях; например, вводить в реакцию непосредственно с тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидином (А; схема 2), или, в качестве альтернативы, добавлять к моноалкиламинотрихлорпиримидо[5,4-d]пиримидину (В; схема 1), или, в качестве альтернативы, добавлять к бис-алкиламинодихлорпиримидо[5,4-d]пиримидину (F; схема 3).
Аналоги также получают, следуя общей схеме синтеза, в которой первый амин добавляют к тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидину (i); во-вторых, спирт добавляют к полученному алкиламинотрихлорпиримидо[5,4-d]пиримидину (ii); и, наконец, амин подвергается бис-присоединению при реакции с алкиламинодихлорпиримидо[5,4-d]пиримидинилалканолом (iii) (схема 4).
В некоторых вариантах осуществления реакционноспособные функциональные группы, такие как гидроксильные, амино, имино, тио или карбоксигруппы, защищают, чтобы избежать их нежелательного участия в реакциях. Защитные группы используют для блокирования некоторых или всех реакционноспособных фрагментов и предупреждения участия таких групп в химических реакциях до тех пор, пока защитные группы не удалят. В других вариантах осуществления каждую защитную группу можно удалять различными способами. Защитные группы, которые отщепляются при абсолютно различных условиях реакции, удовлетворяют требованиям дифференцированного удаления.
В некоторых вариантах осуществления защитные группы удаляют с помощью кислоты, основания, восстановительных условий (таких как, например, гидрогенолиз) и/или окислительных условий. Группы, такие как тритил, диметокситритил, ацеталь и трет-бутилдиметилсилил, неустойчивы под воздействием кислот и используются для защиты карбоксильных и гидроксильных реакционноспособных фрагментов в присутствии аминогрупп, защищенных Cbz-группами, которые удаляются гидрогенолизом, и Fmoc-групп, которые неустойчивы под воздействием оснований. Реакционноспособные фрагменты карбоновых кислот и гидроксильные реакционноспособные фрагменты блокируют неустойчивыми под воздействием оснований группами, такими как без ограничения метил, этил и ацетил, в присутствии аминов, которые блокируют неустойчивыми под воздействием кислот группами, такими как трет-бутилкарбамат, или карбаматами, которые являются как устойчивыми под воздействием кислот, так и устойчивыми под воздействием оснований, но удаляются гидролитически.
В некоторых вариантах осуществления реакционноспособные фрагменты карбоновых кислот и гидроксильные реакционноспособные фрагменты блокируют гидролитически удаляемыми защитными группами, такими как бензильная группа, при этом аминные группы, способные образовывать водородные связи с кислотами, блокируют неустойчивыми под воздействием оснований группами, такими как Fmoc. Реакционноспособные фрагменты карбоновых кислот защищают превращением в простые соединения в виде сложных эфиров, представленные в качестве примера в данном документе, которое включает превращение в алкиловые сложные эфиры, или блокируют удаляемыми окислением защитными группами, такими как 2,4-диметоксибензил, при этом сосуществующие аминогруппы блокируют неустойчивыми под воздействием фторидов силилкарбаматами.
Аллильные блокирующие группы пригодны в присутствии кислотных и основных защитных групп, поскольку первые из вышеупомянутых стабильны и затем удаляются металлическими или пи-кислотными катализаторами. Например, с блокированной аллилом карбоновой кислоты снимают защиту с помощью катализируемой палладием реакции в присутствии неустойчивой под воздействием кислот трет-бутилкарбаматной или неустойчивой под воздействием оснований ацетат-аминной защитных групп. Еще одной формой защитных групп является смола, к которой соединение или промежуточное соединение присоединено. Поскольку остаток присоединен к смоле, данная функциональная группа блокируется и не вступает в реакцию. При высвобождении из смолы функциональная группа доступна для реакции.
Обычно блокирующие/защитные группы можно выбирать из следующего:
Другие защитные группы, в дополнение к подробному описанию методик, применяемых для создания защитных групп и их удаления, описаны в Greene & Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley & Sons, New York, NY, 1999 и Kocienski, Protective Groups, Thieme Verlag, New York, NY, 1994, которые включены в данный документ посредством ссылки для данного раскрытия.
Соединения по настоящему изобретению можно получать согласно общему способу, показанному на схемах синтеза, описанных выше. Реагенты и условия, описанные в данном документе, можно модифицировать для обеспечения получения соединений по настоящему изобретению, и такие модификации известны специалистам в данной области. Схемы, включенные в данный документ, предназначены для иллюстрации, но не ограничения химических превращений и способов, которые специалист в данной области может использовать для получения соединений по настоящему изобретению.
Соли
Соединения, описанные в данном документе, могут образовывать соли с кислотами и/или основаниями, и такие соли включены в настоящее изобретение. В некоторых вариантах осуществления соли представляют собой фармацевтически приемлемые соли. Термин "соли" охватывает соли присоединения свободных кислот и/или оснований, которые пригодны в способах по настоящему изобретению. Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, которые имеют профили токсичности в диапазоне, который обеспечивает полезность в фармацевтических применениях. Фармацевтически неприемлемые соли могут, тем не менее, иметь свойства, такие как высокая кристалличность, что имеет полезность при осуществлении на практике настоящего изобретения, такую как, например, полезность в процессе синтеза, очистки или составления соединений, пригодных в способах по настоящему изобретению.
Подходящие фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты можно получать из неорганической кислоты или из органической кислоты. Примеры неорганических кислот включают сульфатную, гидросульфатную, гемисульфатную, хлористоводородную, бромистоводородную, йодистоводородную, азотную, угольную, серную и фосфорную кислоты (включая гидрофосфатную и дигидрофосфатную). Соответствующие органические кислоты можно выбирать из алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых классов органических кислот, примеры которых включают муравьиную, уксусную, пропионовую, янтарную, гликолевую, глюконовую, молочную, яблочную, винную, лимонную, аскорбиновую, глюкуроновую, малеиновую, фумаровую, пировиноградную, аспарагиновую, глутаминовую, бензойную, антраниловую, 4-гидроксибензойную, фенилуксусную, миндальную, эмбоновую (памовую), метансульфоновую, этансульфоновую, бензолсульфоновую, пантотеновую, трифторметансульфоновую, 2-гидроксиэтансульфоновую, п-толуолсульфоновую, сульфаниловую, циклогексиламиносульфоновую, стеариновую, альгиновую, β-гидроксимасляную, салициловую, галактаровую, галактуроновую, глицерофосфоновую кислоты и сахарин (например, сахаринат, сахарат). Соли могут состоять из доли одного, одного или более чем одного молярного эквивалента кислоты или основания в отношении любого соединения по настоящему изобретению.
Подходящие фармацевтически приемлемые соли присоединения основания соединений по настоящему изобретению включают, например, соли металлов, включая соли щелочных металлов, щелочноземельных металлов и переходных металлов, такие как, например, соли кальция, магния, калия, натрия и цинка. Фармацевтически приемлемые соли присоединения основания также включают органические соли, полученные из основных аминов, таких как, например, N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, меглумин (N-метилглюкамин) и прокаин. Все эти соли можно получать из соответствующего соединения путем осуществления реакции, например, соответствующей кислоты или основания с соединением.
Соли присоединения кислоты, как правило, образуются объединением целевого свободного основания с солеобразователем в растворителе с образованием раствора и сбором соли в виде твердого вещества. Молярное соотношение солеобразователя и свободного основания может изменяться (например, 1:1, 2:1, 1:2 и т.д.). Соотношение 1:1 может быть предпочтительным. Растворители могут включать без ограничения метилэтилкетон, метилизобутилкетон, этилацетат, изопропилацетат, воду, гептан, метил-трет-бутиловый эфир, циклогексан, толуол, метанол, этанол, н-пропанол, изопропанол, н-бутанол, 2-бутанол, изоамиловый спирт, тетрагидрофуран и ацетонитрил, а также их смеси. Смеси свободного основания и солеобразователя в растворителе могут образовывать прозрачный раствор при значениях температуры в диапазоне от приблизительно комнатной температуры до температуры образования флегмы растворителя или смеси растворителей, используемой для получения соли. Твердые соли могут быть образованы концентрированном растворенной смеси солеобразователя и свободного основания или путем обеспечения отстаивания или перемешивания смеси в течение периода времени, необязательно включая охлаждение смеси до температуры ниже температуры, при которой раствор свободного основания и солеобразователя изначально готовили. Выделенные твердые соли можно описывать по стехиометрии с помощью титриметрического анализа, элементного анализа и/или 1Н-ЯМР и по степени кристалличности с помощью DSC и XRPD и других способов, известных в данной области техники.
В некоторых вариантах осуществления соли по настоящему изобретению являются кристаллическими. В других вариантах осуществления соли по настоящему изобретению являются некристаллическими или аморфными. В еще одном варианте осуществления кристаллическая соль 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31) представляет собой по меньшей мере одну соль, выбранную из группы, состоящей из:
(i) кристаллической гидрохлоридной соли (31а) со спектром XRPD, как на фиг. 3А; пиками XRPD, как на фиг. 3В, и/или спектром DSC (дифференциальной сканирующей калориметрии) как на фиг. 3С;
(ii) кристаллической бис-гидрохлоридной соли (31b) со спектром XRPD, как на фиг. 4А; пиками XRPD, как на фиг. 4В, и/или спектром DSC как на фиг. 4С;
(iii) кристаллической гидромалонатной соли (31с) со спектром XRPD, как на фиг. 5А; пиками XRPD, как на фиг. 5В, и/или спектром DSC как на фиг. 5С;
(iv) кристаллической гидромалеинатной солевой формы Mal-A (31d-1) со спектром XRPD, как на фиг. 6А; пиками XRPD, как на фиг. 6В, и/или спектром DSC как на фиг. 6С;
(v) кристаллической гидромалеинатной солевой формы Mal-B (31d-2) со спектром XRPD, как на фиг. 7А; пиками XRPD, как на фиг. 7В, и/или спектром DSC как на фиг. 7С;
(vi) кристаллической гидрофумаратной соли (31е) со спектром XRPD, как на фиг. 8А; пиками XRPD, как на фиг. 8В, и/или спектром DSC как на фиг. 8С;
(vii) кристаллической гидро-L(+)-тартратной соли (31f) со спектром XRPD, как на фиг. 9А; пиками XRPD, как на фиг. 9В, и/или спектром DSC как на фиг. 9С;
(viii) кристаллической D,L-манделатной соли (31g) со спектром XRPD, как на фиг. 10А; пиками XRPD, как на фиг. 10В, и/или спектром DSC как на фиг. 10С;
(ix) кристаллической тозилатной солевой формы Tos-A (31h-1) со спектром XRPD, как на фиг. 11А; пиками XRPD, как на фиг. 11В, и/или спектром DSC как на фиг. 11С;
(х) кристаллической тозилатной солевой формы Tos-B (31h-2) со спектром XRPD, как на фиг. 12А; пиками XRPD, как на фиг. 12В, и/или спектром DSC как на фиг. 12С;
(xi) кристаллической мезилатной соли (31i) со спектром XRPD, как на фиг. 13А; пиками XRPD, как на фиг. 13В, и/или спектром DSC как на фиг. 13С;
(xii) кристаллической сахаринатной соли (31j) со спектром XRPD, как на фиг. 14А; пиками XRPD, как на фиг. 14В, и/или спектром DSC как на фиг. 14С; и любых их смесей.
Комбинированный и параллельный виды терапии
В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению пригодны в способах по настоящему изобретению при использовании параллельно по меньшей мере с одним дополнительным соединением, пригодным для предупреждения и/или лечения нарушений регуляции дыхания. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению пригодны в способах по настоящему изобретению в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным соединением, пригодным для предупреждения и/или лечения нарушений регуляции дыхания.
Данные дополнительные соединения могут включать соединения по настоящему изобретению или другие соединения, такие как коммерчески доступные соединения, предусмотренные для лечения, предупреждения или снижения проявления симптомов нарушений дыхания. В некоторых вариантах осуществления комбинация по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или его соли, сольвата, энантиомера, диастереоизомера или таутомера и по меньшей мере одного дополнительного соединения, пригодного для предупреждения и/или лечения нарушений дыхания имеет аддитивные, дополняющие или синергические эффекты при предупреждении и/или лечении нарушений дыхания и при предупреждении и/или лечении нарушений дыхания, связанных со сном.
В неограничивающем примере соединения по настоящему изобретению или их соли можно применять параллельно или в комбинации с одним или несколькими из следующих лекарственных средств: доксапрама, энантиомеров доксапрама, ацетазоламида, алмитрина, теофиллина, кофеина, метилпрогестерона и связанных соединений, седативных средств, которые повышают порог пробуждения у пациентов с нарушениями дыхания во время сна (таких как эсзопиклон и золпидем), агонистов бензодиазепинового рецептора (например, золпидема, залеплена, эстазолама, флуразепама, квазепама, темазепама, триазолама), антагонистов орексина (например, суворексанта), трициклических антидепрессантов (например, доксепина), модуляторов серотонинергической системы, модуляторов аденозина и аденозинового рецептора и модуляторов транспортера нуклеозидов, каннабиноидов (таких как без ограничения дронабинол), орексинов, агонистов мелатонина (таких как рамелтеон), соединений, известных как ампакины, оксибата натрия, модафинила и армодафинила.
В неограничивающем примере соединения по настоящему изобретению или их соли можно применять параллельно или в комбинации с ингалируемыми терапевтическими средствами, такими как кислород и диоксид углерода, для лечения нарушения дыхания во время сна.
Неограничивающие примеры ампакинов представляют собой лекарственные средства, содержащие пирролидиновое производное - рацетам, такие как пирацетам и анирацетам; "СХ-" ряд лекарственных средств, который охватывает диапазон бензоилпиперидиновых и бензоилпирролидиновых структур, таких как СХ-516 (6-(пиперидин-1-илкарбонил)хиноксалин), СХ-546 (2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-7-ил-(1-пиперидил)-метанон), СХ-614 (2Н,3Н,6аН-пирролидино(2,1-3',2')-1,3-оксазино-(6',5'-5,4)бензо(е)1,4-диоксан-10-он), СХ-691 (2,1,3-бензоксадиазол-6-ил-пиперидин-1-ил-метанон), СХ-717, СХ-701, СХ-1739, СХ-1763 и СХ-1837; бензотиазидные производные, такие как циклотиазид и IDRA-21 (7-хлор-3-метил-3,4-дигидро-2Н-1,2,4-бензотиадиазин-1,1-диоксид); биарилпропилсульфонамиды, такие как LY-392098, LY-404187 (N-[2-(4'-цианобифенил-4-ил)пропил]пропан-2-сульфонамид), LY-451646 и LY-503430 (4'-{(1S)-1-фтор-2-[(изопропилсульфонил)амино]-1-метилэтил}-N-метилбифенил-4-карбоксамид).
В одном варианте осуществления настоящее изобретение включает композицию, содержащую соединение по настоящему изобретению и по меньшей мере одно средство, выбранное из группы, состоящей из доксапрама, энантиомеров доксапрама, ацетазоламида, алмитрина, теофиллина, кофеина, метилпрогестерона и связанных соединений, седативных средств, которые повышают порог пробуждения у пациентов с нарушениями дыхания во время сна (таких как эсзопиклон или золпидем), агонистов бензодиазепинового рецептора (таких как золпидем, залеплон, эстазолам, флуразепам, квазепам, темазепам или триазолам), антагонистов орексина (например, суворексанта), трициклических антидепрессантов (таких как доксепин), модуляторов серотонинергической системы, модуляторов аденозина и аденозинового рецептора и модуляторов транспортера нуклеозидов, каннабиноидов (таких как без ограничения дронабинол), орексинов, агонистов мелатонина (таких как рамелтеон), соединений, известных как ампакины, оксибата натрия, модафинила, армодафинила и ингалируемых терапевтических средств, таких как газообразные кислород и диоксид углерода.
В другом неограничивающем примере соединения по настоящему изобретению или их соли, сольваты, энантиомеры, диастереоизомеры или таутомеры можно применять параллельно или в комбинации с одним или несколькими следующими лекарственными средствами и классами лекарственных средств, которые, как известно, вызывают изменения в регуляции дыхания: опиоидные наркотические средства (такие как морфин, фентанил, кодеин, гидроморфон, гидрокодон, оксиморфон, оксикодон, меперидин, буторфанол, карфентанил, бупренорфин, метадон, налбуфин, пропоксифен, пентазоцин, ремифентанил, альфентанил, суфентанил и тапентадол); бензодиазепины (такие как мидазолам) и седативные средства (такие как золипидем и эсзопиклон); оксибат натрия и пропофол. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает композицию, содержащую соединение по настоящему изобретению и по меньшей мере одно средство, которое, как известно, вызывает изменения в регуляции дыхания: В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одно средство выбрано из группы, состоящей из опиоидных наркотических средств, бензодиазепинов, седативных средств, средств, способствующих сну, и пропофола.
В другом неограничивающем примере соединения по настоящему изобретению или их соли, сольваты, энантиомеры, диастереоизомеры или таутомеры можно применять параллельно или в комбинации с одним или несколькими следующими лекарственными средствами и классами лекарственных средств, которые, как известно, либо способствуют засыпанию, сохранению сна и/либо способствуют изменению порогового значения пробуждения: золипидем, залеплон, эсзопиклон, рамельтеон, эстазолам, темазепам, доксепин, оксибат натрия, фенобарбитал и другие барбитураты, дифенгидрамин, доксиламин и связанные соединения, например. Комбинация вызывающего/стабилизирующего сон лекарственного средства и соединений по настоящему изобретению может действовать аддитивно или синергически с улучшением показателей дыхания при нарушениях во время сна. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению стабилизируют способ дыхания (т.е. снижают изменения частоты дыхания и дыхательного объема по дыхательным циклам) и активность дыхательного центра (т.е. снижают колебания нервной регуляции дыхательных мышц), снижая, таким образом, частоту возникновения центрального и обструктивного апноэ, при этом вызывающее/стабилизирующее сон лекарственное средство предупреждает выход пациента из сна, если не прекращается остаточное апноэ. Нарушения содержания газа в крови, связанные с остаточным апноэ, могут вызывать стимуляцию хеморецептора, что, в свою очередь, вызывает генерализованное возбуждение центральной нервной системы. Пациенты с низким порогом выхода из сна просыпаются рано и часто (т.е. испытывают фрагментацию сна), и данные пациенты испытывают избыток вентиляции из-за внезапного пробуждения при повышенном уровне стимулирования хеморецептора. Вызывающие/стабилизирующие сон лекарственные средства задерживают корковую активацию и обеспечивают более соответствующую реакцию легочной вентиляции на индуцированную апноэ стимуляцию хеморецептора. Пациент извлекает пользу из задержки выхода из сна, поскольку фрагментация сна снижается и снижается вызванное гипервентиляцией центральное апноэ.
При использовании в данном документе комбинация двух или более соединений может относиться к композиции, где отдельные соединения физически смешаны, или где отдельные соединения физически разделены. Комбинированная терапия охватывает введение компонентов отдельно для получения желаемых аддитивных, дополняющих или синергических эффектов.
В некоторых вариантах осуществления соединение и средство физически смешаны в композиции. В других вариантах осуществления соединение и средство физически разделены в композиции.
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению совместно вводят с соединением, которое применяют для лечения других нарушений, но при этом вызывает потерю или подавление регуляции дыхания. В этом аспекте соединение по настоящему изобретению блокирует или иным образом снижает подавляющие эффекты на нормальную регуляцию дыхания, вызванные соединением, с которым его совместно вводят. Такое соединение, которое обеспечивает лечение другого нарушения, но подавляет регуляцию дыхания, включает без ограничения анестетики, седативные средства, средства, способствующие сну, анксиолитики, снотворные средства, алкоголь и наркотические анальгетики. Совместно вводимое соединение можно вводить отдельно или в объединенной композиции в виде смеси твердых веществ и/или жидкостей в твердом, гелеобразном или жидком составе или в виде раствора согласно способам, известным специалистам в данной области.
max
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению вводят совместно по меньшей мере с одним дополнительным соединением, пригодным для лечения нарушений регуляции дыхания и по меньшей мере с одним соединением, которое применяют для лечения другого нарушения, но которое при этом вызывает потерю регуляции дыхания. В этом аспекте соединение по настоящему изобретению обеспечивает аддитивный, дополняющий или синергический эффект с вводимым совместно средством регуляции дыхания для блокирования или иного снижения подавляющих эффектов на нормальную регуляцию дыхания, вызванных другими соединениями, с которыми их объединяют. Синергический эффект можно рассчитать, например, с помощью подходящих способов, таких как, например, сигмоидальное уравнение E (Holford & Scheiner, 19981, Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453), уравнение аддитивности по Лоэву (Loewe & Muischnek, 1926, Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326), уравнение медианного эффекта (Chou & Talalay, 1984, Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55), и посредством использования изоболограмм (Tallarida & Raffa, 1996, Life Sci. 58: 23-28). Каждое уравнение, указанное выше, можно применять к экспериментальным данным для создания соответствующего графика для помощи в оценке эффектов комбинирования лекарственных средств. Соответствующие графики, связанные с уравнениями, указанными выше, представляют собой соответственно кривую концентрация-эффект, кривую изоболограммы и кривую показателя аддитивности.
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению может быть упаковано по меньшей мере с одним дополнительным соединением, пригодным для лечения нарушений регуляции дыхания. В других вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению может быть упаковано с терапевтическим средством, которое, как известно, вызывает изменения в регуляции дыхания, таким как без ограничения анестетики, седативные средства, анксиолитики, снотворные средства, алкоголь и наркотические анальгетики. Совместная упаковка может обеспечиваться без ограничения дозирующими устройствами.
Способы
В одном аспекте настоящее изобретение включает способ предупреждения или лечения нарушения или заболевания регуляции дыхания у субъекта, нуждающегося в этом. Способ включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или его соли, сольвата, энантиомера, диастереоизомера или таутомера, которые необязательно являются частью фармацевтического состава, дополнительно содержащего по меньшей мере фармацевтически приемлемый носитель.
В другом аспекте настоящее изобретение включает способ предупреждения дестабилизации или стабилизации дыхательного ритма у субъекта, нуждающегося в этом. Способ включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или его соли, сольвата, энантиомера, диастереоизомера или таутомера, которые необязательно являются частью фармацевтического состава, дополнительно содержащего по меньшей мере фармацевтически приемлемый носитель.
В некоторых вариантах осуществления введение состава по настоящему изобретению обеспечивает стабилизацию дыхательного ритма субъекта. В других вариантах осуществления введение состава по настоящему изобретению обеспечивает повышение минутного объема вентиляции легких у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления дестабилизация связана с нарушением или заболеванием регуляции дыхания.
В некоторых вариантах осуществления нарушение дыхания или заболевание, связанное с дыханием, выбрано из группы, состоящей из вызванного наркотиками угнетения дыхания, вызванного анестетиками угнетения дыхания, вызванного седативными средствами угнетения дыхания, вызванного способствующими сну средствами угнетения дыхания, вызванного анксиолитиками угнетения дыхания, вызванного снотворными средствами угнетения дыхания, вызванного алкоголем угнетения дыхания, вызванного анальгетиками угнетения дыхания, апноэ во время сна (включает без ограничения смешанное центральное, обструктивное, анатомическое апноэ), апноэ у недоношенных детей, синдрома гиповентиляции вследствие ожирения, первичного альвеолярного гиповентиляционного синдрома, диспноэ, высотной болезни, гипоксии, гиперкапнии, хронического обструктивного заболевания легких (COPD), синдрома внезапной детской смерти (SIDS), болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, инсульта, миодистрофии Дюшенна и травматического повреждения головного мозга и спинного мозга. В других вариантах осуществления угнетение дыхания вызвано анестетиком, седативным средством, анксиолитическим средством, снотворным средством, алкоголем или наркотическим веществом. В еще одних вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению или их соли, сольваты, энантиомеры, диастереоизомеры или таутомеры можно применять параллельно или в комбинации с одним или несколькими следующими лекарственными средствами и классами лекарственных средств, которые, как известно, либо способствуют засыпанию, сохранению сна и/либо способствуют изменению порогового значения пробуждения: золипидем, залеплон, эсзопиклон, рамелтеон, эстазолам, темазепам, оксибат натрия, доксепин, фенобарбитал и другие барбитураты, дифенгидрамин, доксиламин и связанные соединения, например.
В некоторых вариантах осуществления субъекту дополнительно вводят по меньшей мере одно дополнительное соединение, пригодное для предупреждения или лечения нарушения дыхания или заболевания, связанного с дыханием. В других вариантах осуществления по меньшей мере одно дополнительное соединение выбрано из группы, состоящей из доксапрама, энантиомеров доксапрама, ацетазоламида, алмитрина, теофиллина, кофеина, метилпрогестерона и связанных соединений, седативных средств, таких как эсзопиклон и золпидем, оксибата натрия, агонистов бензодиазепинового рецептора (например, золпидема, залеплона, эсзопиклона, эстазолама, флуразепама, квазепама, темазепама, триазолама), антагонистов орексина (например, суворексанта), трициклических антидепрессантов (например, доксепина), модуляторов серотонинергической системы, модуляторов аденозина и аденозинового рецептора и модуляторов транспортера нуклеозидов, каннабиноидов (таких как без ограничения дронабинол), орексинов, агонистов мелатонина (таких как рамелтеон) и соединений, известных как ампакины.
В еще одних вариантах осуществления состав вводят субъекту вместе с применением устройства для искусственной вентиляции легких или устройства для поддержания положительного давления в дыхательных путях. В некоторых вариантах осуществления состав вводят субъекту ингаляционным, местным, пероральным, назальным, буккальным, ректальным, плевральным, перитонеальным, вагинальным, внутримышечным, подкожным, трансдермальным, эпидуральным, подоболочечным или внутривенным путем. В других вариантах осуществления субъектом является птица или млекопитающее, включая без ограничения мышь, крысу, хорька, морскую свинку, не являющегося человеком примата (такого как обезьяна), собаку, кошку, лошадь, корову, свинью и других сельскохозяйственных животных. В некоторых вариантах осуществления субъектом является человек.
Фармацевтические композиции и составы
Настоящее изобретение также охватывает применение фармацевтических композиций на основе по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или его соли, сольвата, энантиомера, диастереоизомера или таутомера для осуществления на практике способов по настоящему изобретению. Такая фармацевтическая композиция может состоять по меньшей мере из одного соединения по настоящему изобретению или его соли, сольвата, энантиомера, диастереоизомера или таутомера в виде, подходящем для введения субъекту, или фармацевтическая композиция может содержать по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению или его соль, сольват, энантиомер, диастереоизомер или таутомер и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей, один или несколько дополнительных ингредиентов или некоторую их комбинацию. По меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению может присутствовать в фармацевтической композиции в виде физиологически приемлемой соли, например, в комбинации с физиологически приемлемым катионом или анионом, как хорошо известно в данной области.
В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, пригодные для осуществления на практике способа настоящего изобретения, можно вводить для доставки дозы от 1 нг/кг/сутки до 100 мг/кг/сутки. В других вариантах осуществления фармацевтические композиции, пригодные для осуществления на практике настоящего изобретения, можно вводить для доставки дозы от 1 нг/кг/сутки до 1000 мг/кг/сутки.
Относительные количества активного ингредиента, фармацевтически приемлемого носителя и любых дополнительных ингредиентов в фармацевтической композиции по настоящему изобретению будут изменяться в зависимости от особенностей, веса и состояния субъекта, которого лечат, а также в зависимости от пути, которым композицию вводят. В качестве примера, композиция может содержать от 0,1% до 100% (вес/вес) активного ингредиента.
Фармацевтические композиции, которые пригодны в способах по настоящему изобретению, можно подходящим образом разрабатывать для назального, ингаляционного, перорального, ректального, вагинального, плеврального, перитонеального, парентерального, местного, трансдермального, легочного, интраназального, буккального, глазного, эпидурального, подоболочечного, внутривенного или другого пути введения. Композицию, пригодную в способах по настоящему изобретению, можно непосредственно вводить в головной мозг, ствол головного мозга или любую другую часть центральной нервной системы млекопитающего или птицы. Другие рассматриваемые составы включают спроектированные наночастицы, микросферы, липосомальные препараты, частицы с покрытием, полимерные конъюгаты, повторно закрытые эритроциты, содержащие активный ингредиент, и составы иммунологического характера.
В некоторых вариантах осуществления композиции по настоящему изобретению являются частью фармацевтической матрицы, которая обеспечивает обработку нерастворимых материалов и улучшение их биодоступности, разработку продуктов с регулируемым или замедленным высвобождением и создание гомогенных композиций. В качестве примера, фармацевтическую матрицу можно получать с помощью экструзии горячего расплава, твердых растворов, твердых дисперсий, технологий дробления, молекулярных комплексов (например, циклодекстринов и других), микрочастиц и способов нанесения покрытий на частицы и составы. Аморфные или кристаллические фазы можно использовать в таких процессах.
Путь(пути) введения будет(будут) ясно очевиден(очевидны) специалисту и будет(будут) зависеть от любого числа факторов, включая тип и тяжесть заболевания, которое лечат, типа и возраста пациента, животного или человека, которого лечат, и подобного.
Составы фармацевтических композиций, описанных в данном документе, можно получать любым способом, известным или разрабатываемым в дальнейшем в области фармакологии и фармацевтики. Как правило, такие способы получения включают стадию обеспечения связи активного ингредиента с носителем или одним или несколькими другими вспомогательными ингредиентами, а затем, при необходимости или если желательно, придания формы или упаковывания продукта в необходимую упаковку с однократной дозой или многодозовую упаковку.
При использовании в данном документе "разовая доза" представляет собой дискретное количество фармацевтической композиции, содержащее заранее определенное количество активного ингредиента. Количество активного ингредиента, как правило, равно дозе активного ингредиента, которую будут вводить субъекту, или подходящей части такой дозы, такой как, например, половина или треть такой дозы. Стандартная лекарственная форма может быть предназначена для разовой суточной дозы или одной из множества суточных доз (например, от приблизительно 1 до 4 или более раз в сутки). Когда используют множество суточных доз, стандартная лекарственная форма может быть такой же или отличаться для каждой дозы.
Хотя описания фармацевтических композиций, предусмотренных в данном документе, прежде всего направлены на фармацевтические композиции, которые подходят для введения отпускаемого только по рецепту патентованного средства людям, специалистам в данной области будет понятно, что такие композиции, как правило, подходят для введения животным всех видов. Модификация фармацевтических композиций, подходящих для введения людям, с целью получения композиций, подходящих для введения различным животным, хорошо понятна, и рядовой специалист в ветеринарной фармакологии может разработать и выполнить такую модификацию с помощью проведения только обычного, при наличии такого, эксперимента. Субъекты, по отношению к которым рассматривается введение фармацевтических композиций по настоящему изобретению, включают без ограничения людей и других приматов, млекопитающих, включая коммерчески значимых млекопитающих, таких как крупный рогатый скот, свиньи, лошади, овцы, кошки и собаки.
В некоторых вариантах осуществления композиции по настоящему изобретению составляют с помощью одного или нескольких фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ или носителей. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтически приемлемые носители, которые пригодны, включают без ограничения глицерин, воду, солевой раствор, этанол, рекомбинантный альбумин человека (например, Recombumin), растворимые желатины (например, Gelofusine), а также другие растворы фармацевтически приемлемых солей, таких как фосфаты и соли органических кислот. Их примеры и примеры других фармацевтически приемлемых носителей описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences (1991, Mack Publication Co., New Jersey).
Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и подобное), рекомбинантный альбумин человека, растворимые желатины их подходящие смеси, а также растительные масла. Подходящую текучесть можно поддерживать, например, с помощью покрытия, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и путем использования поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов можно обеспечивать различными антибактериальными и противогрибковыми средствами, например, парабенами, хлорбутанолом, фенолом, аскорбиновой кислотой, тимеросалом и подобным. Во многих случаях предпочтительным будет включение в композицию изотонических средств, например, Сахаров, хлорида натрия или многоатомных спиртов, таких как маннит и сорбит. Пролонгированное всасывание инъецируемых композиций можно обеспечить путем включения в композицию средства, которое задерживает всасывание, например, моностеарат алюминия или желатин.
Составы можно использовать в смесях с обычными вспомогательными веществами, т.е. фармацевтически приемлемыми органическими или неорганическими веществами-носителями, подходящими для перорального, парентерального, назального, ингаляционного, внутривенного, подкожного, трансдермального, энтерального или любого другого подходящего способа введения, известного в данной области. Фармацевтические препараты можно стерилизовать и при необходимости смешивать со вспомогательными средствами, например, смазывающими веществами, консервантами, стабилизаторами, смачивающими средствами, эмульгаторами, солями для влияния на осмотическое давление, буферами, красителями, ароматизаторами и/или придающими запах веществами и подобными. При необходимости их также можно объединять с другими активными средствами, например, другими анальгетиками, анксиолитиками или снотворными средствами. При использовании в данном документе "дополнительные ингредиенты" включают без ограничения один или несколько ингредиентов, которые можно использовать в качестве фармацевтического носителя.
Композиция по настоящему изобретению может содержать консервант в количестве от приблизительно 0,005% до 2,0% от общего веса композиции. Консервант используют для предупреждения порчи в случае воздействия загрязняющих веществ в окружающей среде. Примеры консервантов, пригодных в соответствии с настоящим изобретением, включают без ограничения консерванты, выбранные из группы, состоящей из бензилового спирта, сорбиновой кислоты, парабенов, имидомочевины и их комбинаций. Особенно предпочтительный консервант представляет собой комбинацию от приблизительно 0,5% до 2,0% бензилового спирта и от 0,05% до 0,5% сорбиновой кислоты.
Композиция предпочтительно содержит антиоксидант и хелатирующее средство, которое ингибирует разложение соединения. Предпочтительные антиоксиданты для некоторых соединений представляют собой ВНТ, ВНА, альфа-токоферол и аскорбиновую кислоту в предпочтительном диапазоне от приблизительно 0,01% до 0,3% и более предпочтительно - ВНТ в диапазоне от 0,03% до 0,1% по весу от общего веса композиции. Предпочтительно хелатирующее средство присутствует в количестве от 0,01% до 0,5% по весу от общего веса композиции. Особенно предпочтительные хелатирующие средства включают эдетатные соли (например, эдетат динатрия) и лимонную кислоту в весовом диапазоне от приблизительно 0,01% до 0,20% и более предпочтительно в диапазоне от 0,02% до 0,10% по весу от общего веса композиции. Хелатирующее средство пригодно для хелатирования ионов металлов в композиции, что может отрицательно влиять на срок хранения состава. Хотя ВНТ и эдетат динатрия соответственно являются особенно предпочтительным антиоксидантом и хелатирующим средством, для некоторых соединений их могут заменить другие подходящие и эквивалентные антиоксиданты и хелатирующие средства, как будет понятно специалисту в данной области.
Жидкие суспензии можно получать с помощью обычных способов получения суспензии активного ингредиента в водной или масляной среде-носителе. Водные среды-носителя включают, например, воду и изотонический раствор. Масляные среды-носители включают, например, миндальное масло, маслянистые сложные эфиры, этиловый спирт, растительные масла, такие как арахисовое, оливковое, кунжутное или кокосовое масло, фракционированные растительные масла и минеральные масла, такие как жидкий вазелин. Жидкие суспензии могут дополнительно содержать один или несколько дополнительных ингредиентов, включая без ограничения суспендирующие средства, диспергирующие или смачивающие средства, эмульгаторы, мягчительные средства, консерванты, буферы, соли, ароматизаторы, красители и подсластители. Маслянистые суспензии могут дополнительно содержать загуститель. Известные суспендирующие средства включают без ограничения сорбитный сироп, гидрированные пищевые жиры, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовую камедь, аравийскую камедь и производные целлюлозы, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза. Известные диспергирующие или смачивающие средства включают без ограничения встречающиеся в природе фосфатиды, такие как лецитин, продукты конденсации алкиленоксида с жирной кислотой, с алифатическим спиртом с длинной цепью, с неполным сложным эфиром, полученным из жирной кислоты и гексита, или с неполным сложным эфиром, полученным из жирной кислоты и ангидрида гексита (например, соответственно полиоксиэтиленстеарат, гептадекаэтиленоксицетанол, полиоксиэтиленсорбитмоноолеат и полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат). Известные эмульгаторы включают без ограничения лецитин, аравийскую камедь и ионогенные или неионогеные поверхностно-активные вещества. Известные консерванты включают без ограничения метил-, этил- или н-пропил-пара-гидроксибензоаты, аскорбиновую кислоту и сорбиновую кислоту. Известные подсластители включают, например, глицерин, пропиленгликоль, сорбит, сахарозу и сахарин.
Жидкие растворы активного ингредиента в водных или масляных растворителях можно получать, по сути, таким же образом, что и жидкие суспензии, главное отличие состоит в том, что активный ингредиент растворяют, а не суспендируют в растворителе. При использовании в данном документе термин "мяслянистая" жидкость представляет собой такую жидкость, которая содержит углеродсодержащие молекулы в жидком состоянии и которая характеризуется меньшей полярностью, чем вода. Жидкие растворы фармацевтической композиции по настоящему изобретению могут содержать каждый из компонентов, описанных в отношении жидких суспензий, понятно, что суспендирующие средства не будут обязательно способствовать растворению активного ингредиента в растворителе. Водные растворители включают, например, воду и изотонический раствор. Масляные растворители включают, например, миндальное масло, маслянистые сложные эфиры, этиловый спирт, растительные масла, такие как арахисовое, оливковое, кунжутное или кокосовое масло, фракционированные растительные масла и минеральные масла, такие как жидкий вазелин.
Порошкообразные и гранулированные составы фармацевтического препарата по настоящему изобретению можно получать с помощью известных способов. Такие составы можно вводить непосредственно субъекту с использованием добавления к ним водной или масляной среды-носителя, например, для формирования таблеток, для заполнения капсул или для получения водной или масляной суспензии или раствора. Каждый из данных составов может дополнительно содержать одно или несколько из диспергирующих или смачивающих средств, суспендирующих средств, ионогенных и неионогенных поверхностно-активных веществ и консерванта. Дополнительные вспомогательные вещества, такие как заполнители и подсластители, ароматизаторы или красители, можно также включать в данные составы.
Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно также получать, упаковывать или продавать в виде эмульсии типа масло в воде или эмульсии типа вода в масле. Масляная фаза может представлять собой растительное масло, такое как оливковое или арахисовое масло, минеральное масло, такое как жидкий вазелин, или комбинацию данных средств. Такие композиции могут дополнительно содержать один или несколько эмульгаторов, таких как встречающиеся в природе камеди, такие как аравийская камедь или трагакантовая камедь, встречающиеся в природе фосфатиды, такие как соевый или лецитиновый фосфатид, сложные эфиры или неполные эфиры, полученные из комбинаций жирных кислот и ангидридов гексита, такие как сорбитанмоноолеат, и продукты конденсации таких неполных сложных эфиров с этиленоксидом, такие как полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат. Данные эмульсии могут также содержать дополнительные ингредиенты, включая, например, подсластители или ароматизаторы.
Способы пропитки или нанесения покрытия на материал с помощью химической композиции известны в данной области и включают без ограничения способы осаждения или связывания химической композиции с поверхностью, способы включения химической композиции в структуру материала в ходе синтеза материала (т.е., например, с физиологически разлагаемым материалом), а также способы поглощения водного или масляного раствора или суспензии в поглощающий материал с последующим высушиванием или без последующего высушивания. Способы смешивания компонентов включают физический размол, применение пеллет в твердых и суспензионных составах и смешивание в трансдермальном пластыре, как известно специалистам в данной области.
Введение/введение доз
Режим введения может влиять на то, что составляет эффективное количество. Терапевтические составы можно вводить пациенту либо перед, либо после проявления явления нарушения дыхания. Кроме того, несколько разделенных доз, а также разнесенные во времени дозы, можно вводить ежесуточно или последовательно, или дозу можно непрерывно вводить инфузией, или она может представлять собой болюсную инъекцию. Кроме того, дозировки терапевтических составов можно пропорционально увеличивать или уменьшать, на что указывают потребности терапевтической или профилактической ситуации.
Введение композиций по настоящему изобретению пациенту, предпочтительно млекопитающему, более предпочтительно человеку, можно осуществлять с помощью известных процедур, в дозах и в течение периодов времени, эффективных для лечения нарушения регуляции дыхания у пациента. Эффективное количество терапевтического соединения, необходимое для достижения терапевтического эффекта, может изменяться в зависимости от факторов, таких как активность конкретного используемого соединения; время введения; скорость выведения соединения; длительность лечения; другие лекарственные средства, соединения или материалы, используемые в комбинации с соединением; течение заболевания или нарушения, возраст, пол, вес, состояние, общее состояние здоровья и сведения о перенесенных ранее пациентом заболеваниях, которого лечат, и подобные факторы, хорошо известные в области медицины. Схемы приема лекарственного средства можно регулировать для обеспечения оптимального терапевтического ответа. Например, несколько разделенных доз можно вводить ежесуточно или дозу можно пропорционально снижать, как указано потребностями терапевтической ситуации. Неограничивающий пример диапазона эффективной дозы для терапевтического соединения по настоящему изобретению составляет от приблизительно 0,01 мг/кг до 100 мг/кг массы тела/сутки. Специалист в данной области сможет изучить соответствующие факторы и осуществить определение касательно эффективного количества терапевтического соединения без лишнего проведения экспериментов.
Соединение можно вводить животному с частотой несколько раз в сутки или его можно вводить менее часто, например, один раз в сутки, один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в месяц или еще менее часто, например, один раз в несколько месяцев или даже один раз в год или реже. Понятно, что количество вводимой дозы соединения в сутки можно вводить в неограничивающих примерах, каждые сутки, через сутки, каждые 2 суток, каждые 3 суток, каждые 4 суток или каждые 5 суток. Например, при введении через сутки дозу, составляющую 5 мг в сутки, можно начинать вводить в понедельник с первой следующей дозой, составляющей 5 мг в сутки, вводимой в среду, второй следующей дозой, составляющей 5 мг в сутки, вводимой в пятницу, и т.д. Частота введения доз будет явно очевидна специалисту в данной области и будет зависеть от некоторого ряда факторов, таких как без ограничения тип и тяжесть заболевания, которое лечат, тип и возраст животного и т.д.
Фактические значения уровня дозировки активных ингредиентов в фармацевтических композициях по настоящему изобретению могут изменяться таким образом, чтобы получить количество активного ингредиента, которое эффективно для достижения желаемого терапевтического ответа для конкретного пациента, композиции и режима введения, без токсичности для пациента.
Врач, например, терапевт или ветеринар, специалист в данной области может легко определить и назначить эффективное количество требуемой фармацевтической композиции. Например, терапевт или ветеринар может начинать введение доз используемого соединения по настоящему изобретению в фармацевтической композиции при значениях уровней ниже, чем значения, которые требуются для достижения желаемого терапевтического эффекта, и постепенно повышать дозировку, пока желаемый эффект не будет достигнут.
В конкретных вариантах осуществления особенно предпочтительно составлять соединение в стандартной лекарственной форме для простоты введения и равномерности дозировки. Стандартная лекарственная форма при использовании в данном документе относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для пациентов, подлежащих лечению; каждая единица содержит заранее определенное количество терапевтического соединения, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта вместе с требуемой фармацевтической средой-носителем. Стандартные лекарственные формы по настоящему изобретению определены и непосредственно зависят от (а) уникальных характеристик терапевтического соединения и конкретного терапевтического эффекта, которого следует достичь, и (b) ограничений в данной области, присущих смешиванию/составлению такого терапевтического соединения для лечения нарушений дыхания у пациента.
В некоторых вариантах осуществления композиции по настоящему изобретению вводят пациенту в дозировках, которые находятся в диапазоне от одного до пяти раз в сутки или больше. В других вариантах осуществления композиции по настоящему изобретению вводят пациенту в диапазоне дозировок, который включает без ограничения один раз в сутки, один раз в два дня, период от одного раза в три дня до одного раза в неделю, а также один раз в две недели. Специалисту в данной области будет явно очевидно, что частота введения различных смешанных композиций по настоящему изобретению будет отличаться в зависимости от субъекта, в зависимости от многих факторов, включая без ограничения возраст, заболевание или нарушение, которое лечат, пол, общее состояние здоровья и другие факторы. Таким образом, настоящее изобретение не следует рассматривать как ограничивающееся какой-либо конкретной схемой приема лекарственного средства, и точная дозировка и композиция, подлежащая введению любому пациенту, будут определяться лечащим врачом, принимая во внимание все остальные факторы касательно пациента.
Соединения по настоящему изобретению, предназначенные для введении, могут находиться в диапазоне от приблизительно 1 мкг до приблизительно 7500 мг, от приблизительно 20 мкг до приблизительно 7000 мг, от приблизительно 40 мкг до приблизительно 6500 мг, от приблизительно 80 мкг до приблизительно 6000 мг, от приблизительно 100 мкг до приблизительно 5500 мг, от приблизительно 200 мкг до приблизительно 5000 мг, от приблизительно 400 мкг до приблизительно 4000 мг, от приблизительно 800 мкг до приблизительно 3000 мг, от приблизительно 1 мг до приблизительно 2500 мг, от приблизительно 2 мг до приблизительно 2000 мг, от приблизительно 5 мг до приблизительно 1000 мг, от приблизительно 10 мг до приблизительно 750 мг, от приблизительно 20 мг до приблизительно 600 мг, от приблизительно 30 мг до приблизительно 500 мг, от приблизительно 40 мг до приблизительно 400 мг, от приблизительно 50 мг до приблизительно 300 мг, от приблизительно 60 мг до приблизительно 250 мг, от приблизительно 70 мг до приблизительно 200 мг, от приблизительно 80 мг до приблизительно 150 мг, а также каждое или все целые или частные приращения между ними.
В некоторых вариантах осуществления доза соединения по настоящему изобретению составляет от приблизительно 0,5 мкг до приблизительно 5000 мг. В некоторых вариантах осуществления доза соединения по настоящему изобретению, применяемая в композициях, описанных в данном документе, составляет менее приблизительно 5000 мг, или менее приблизительно 4000 мг, или менее приблизительно 3000 мг, или менее приблизительно 2000 мг, или менее приблизительно 1000 мг, или менее приблизительно 800 мг, или менее приблизительно 600 мг, или менее приблизительно 500 мг, или менее приблизительно 200 мг, или менее приблизительно 50 мг. Аналогично в некоторых вариантах осуществления доза второго соединения, как описано в данном документе, составляет менее приблизительно 1000 мг, или менее приблизительно 800 мг, или менее приблизительно 600 мг, или менее приблизительно 500 мг, или менее приблизительно 400 мг, или менее приблизительно 300 мг, или менее приблизительно 200 мг, или менее приблизительно 100 мг, или менее приблизительно 50 мг, или менее приблизительно 40 мг, или менее приблизительно 30 мг, или менее приблизительно 25 мг, или менее приблизительно 20 мг, или менее приблизительно 15 мг, или менее приблизительно 10 мг, или менее приблизительно 5 мг, или менее приблизительно 2 мг, или менее приблизительно 1 мг, или менее приблизительно 0,5 мг, а также каждое или все целые или частные приращения данных значений.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение направлено на упакованную фармацевтическую композицию, содержащую контейнер, содержащий терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению, отдельно или в комбинации со вторым фармацевтическим средством, а также инструкции по применению соединения для лечения, предупреждения или снижения проявления одного или нескольких симптомов нарушения дыхания у пациента.
Термин "контейнер" включает любую емкость для хранения фармацевтической композиции или для регулирования стабильности или поглощения воды. Например, в некоторых вариантах осуществления контейнер представляет собой упаковку, которая содержит фармацевтическую композицию, такую как жидкость (раствор и суспензия), полутвердое вещество, лиофилизированное твердое вещество, раствор и порошок или лиофилизированный состав, находящийся в двойных камерах. В других вариантах осуществления контейнер не является упаковкой, которая содержит фармацевтическую композицию, т.е. контейнер представляет собой емкость, такую как коробка или сосуд, который содержит упакованную фармацевтическую композицию или неупакованную фармацевтическую композицию и инструкции по применению фармацевтической композиции. Более того, методики упаковывания хорошо известны в данной области. Следует понимать, что инструкции по применению фармацевтической композиции могут содержаться на упаковке, содержащей фармацевтическую композицию, и, по сути, инструкции образуют повышенную функциональную связь с упакованным продуктом. Тем не менее, следует понимать, что инструкции могут содержать информацию, касающуюся способности соединения выполнять его предназначенную функцию, например, лечения, предупреждения или снижения степени нарушения дыхания у пациента.
Введение
Пути введения любой из композиций по настоящему изобретению включают ингаляционное, пероральное, назальное, ректальное, парентеральное, подъязычное, трансдермальное, чресслизистое (например, подъязычное, лингвальное, (транс)буккальное, (транс)уретральное, вагинальное (например, транс- и околовлагалищное), (интра)назальное и (транс)ректальное), внутрипузырное, внутрилегочное, интрадуоденальное, внутрижелудочное, подоболочечное, эпидуральное, внутриплевральное, внутрибрюшинное, подкожное, внутримышечное, внутрикожное, внутриартериальное, внутривенное, внутрибронхиальное введение, ингаляцию и местное введение.
Подходящие композиции и лекарственные формы включают, например, таблетки, капсулы, каплеты, пилюли, желатиновые капсулы, пастилки, эмульсии, дисперсии, суспензии, растворы, сиропы, гранулы, гранулы, трансдермальные пластыри, гели, порошки, пеллеты, взвеси, таблетки для рассасывания, кремы, пасты, пластыри, лосьоны, диски, суппозитории, жидкие спреи для назального или перорального введения, сухой порошок или аэрозольные составы для ингаляции, композиции и составы для внутрипузырного введения и подобное. Следует понимать, что составы и композиции, которые будут пригодны в настоящем изобретении, не ограничены конкретными составами и композициями, которые описаны в данном документе.
Пероральное введение
В одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению можно составлять для получения фармацевтической композиции для перорального введения. В дополнительных вариантах осуществления композиция для перорального введения может предназначаться для обеспечения модифицированного высвобождения лекарственного средства, таким образом, происходит модулирование места, степени и скорости воздействия соединения при проглатывании. Факторы, которые влияют на целевую зону для воздействия лекарственного средства, могут представлять собой рН или устойчивость лекарственного средства к воздействию ферментов, химическую активность в отношении других лекарственных средств (например, некоторых антибиотиков), растворимость в виде соли или свободного основания, характер ионизации и фармакодинамические и фармакокинетические характеристики в конкретных средах. Некоторые лекарственные средства лучше поглощаются в двенадцатиперстной кишке или других отделах кишечника.
Отсроченное высвобождение является особенно пригодным режимом модифицированного высвобождения, которое обеспечивает доставку лекарственного средства в его наиболее концентрированной форме в двенадцатиперстную кишку или другие отделы кишечника. В предпочтительном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению составляют для обеспечения доставки в двенадцатиперстную кишку и необязательно другие отделы кишечника. Отсроченного высвобождения можно достигать с помощью композиций, которые предусматривают энтеросолюбильные оболочки. Энтеросолюбильные оболочки нерастворимы в сильнокислых средах, причем многокислотная оболочка остается неионизированной и неповрежденной при рН желудка. Однако при среднекислых (> рН 5,5), нейтральных или среднещелочных условиях (рН 6,5-7,6) двенадцатиперстной кишки или других участков кишечника оболочка ионизируется, набухает и разрушается, высвобождая покрытое содержимое в окружающую среду. Существуют варианты оболочек для обеспечения ионизации при значении или около значения конкретного рН (например, Eudragit L-110, порог ионизации рН 6,0; Eudragit S-100, порог ионизации рН 7,0).
В дополнительном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению можно составлять с энтеросолюбильной оболочкой, которая была модифицирована добавлением пластификаторов в полимер перед нанесением оболочки. Пластификаторы можно добавлять для регулирования стойкости к дроблению или растрескиванию оболочки, при этом снижение температуры стеклования оболочки также обеспечивает гладкую и равномерную растекаемость оболочки при ее нанесении. Подходящие пластификаторы включают полиэтиленгликоль 8000 (PEG 8000), триэтилцитрат (ТЕС) и триацетин, которые можно включать в полимерное средство для энтеросолюбильных оболочек.
Соединения по настоящему изобретению можно составлять для применения в кишечнике в различных лекарственных формах, включая (без ограничения) капсулы, гранулы активного лекарственного средства самого по себе, гранулы и таблетки. В одном варианте осуществления композиция может содержать лекарственное средство, инкапсулированное в капсуле, которая покрыта энтеросолюбильной оболочкой для высвобождения лекарственного средства в двенадцатиперстной кишке или другой области кишечника. В одном аспекте настоящего изобретения фармацевтически приемлемые капсулы включают твердые капсулы, которые могут состоять из полисахаридов, крахмалов и целлюлозы растительного происхождения или желатина. В другом варианте осуществления фармацевтически приемлемые капсулы включают мягкие желатиновые капсулы. Желатиновая капсула может состоять из коллагена животного происхождения или из гипромеллозы, модифицированной формы целлюлозы и изготавливаться с помощью необязательных смесей из желатина, воды и пластификаторов, таких как сорбит или глицерин.
В одном варианте осуществления молекулы по настоящему изобретению могут быть инкапсулированы в виде чистых гранул или порошка без носителей, вспомогательных веществ или других фармацевтически приемлемых добавок. В других вариантах осуществления молекулы настоящего изобретения можно инкапсулировать вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, вспомогательными веществами, антиоксидантами (например, матабисульфитом натрия, бутилированным гидрокситолуолом [ВНТ]), фунгицидами (например, бензойной и аскорбиновой кислотами и их солями, и фенольными соединениями, такими как метил-, этил-, пропил- и бутил-п-гидроксибензоат (парабены)), противомикробными консервантами (например, бензоатом натрия, сорбиновой кислотой), красителями и ароматизаторами. Вспомогательные вещества могут способствовать характеру заполнения капсул, стабильности и в распределении лекарственного средства, когда капсула расщепляется в организме. В другом варианте осуществления гранулы и/или порошки соединений по настоящему изобретению могут быть покрыты энтеросолюбильной оболочкой перед помещением в капсулу. Гранулы и/или порошки, покрытые энтеросолюбильной оболочкой, помещенные в капсулу, могут иметь один или несколько типов энтеросолюбильной оболочки для обеспечения доставки лекарственного средства в различные участки кишечника. Капсула может не иметь энтеросолюбильной оболочки или может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой, соответствующей или отличающейся полностью от оболочки, нанесенной на любой из материалов, покрытых энтеросолюбильной оболочкой, внутри капсулы.
В дополнительном варианте осуществления молекулы по настоящему изобретению могут быть инкапсулированы в жидкости в виде раствора или суспензии в воде или различных фармацевтически приемлемых маслах или другой дисперсионной среде (например, минеральном масле, кунжутном масле, сафлоровом масле, кокосовых маслах), необязательно с такими вспомогательными веществами, как сорастворители (например, пропиленгликоль, глицерин), повышающие растворимость вещества (например, сорбит, декстроза), смачивающие средства (например, полисорбаты [Tween], сложные эфиры сорбитана [Span], гидрофобные коллоиды [производные целлюлозы], загустители (например, метилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза), буферы (например, гидрофосфат динатрия), антиоксиданты (например, бутилированный гидрокситолуол [ВНТ], лимонная кислота, сорбат калия), фунгициды (например, бензойная и аскорбиновая кислоты и их соли, а также фенольные соединения, такие как метил-, этил-, пропил- и бутил-п-гидроксибензоат (парабены)), противомикробные консерванты (например, бензоат натрия, сорбиновая кислота), красители и ароматизаторы. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению можно составлять для заполненных жидкостью капсул в виде чистого лекарственного средства в виде гранул и/или порошков в жидкости. В связанном варианте осуществления капсула, содержащая лекарственное средство в жидкости, может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой. В другом варианте осуществления на гранулы и/или порошки соединений по настоящему изобретению можно наносить энтеросолюбильную оболочку перед помещением в жидкость и помещением данной комбинации в капсулу. Гранулы и/или порошок, покрытые энтеросолюбильной оболочкой, могут иметь один или несколько типов энтеросолюбильной оболочки для обеспечения доставки лекарственного средства в различные участки кишечника. Капсула может не иметь энтеросолюбильной оболочки или может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой, соответствующей или отличающейся полностью от оболочки, нанесенной на любой из материалов, покрытых энтеросолюбильной оболочкой, внутри капсулы.
В другом варианте осуществления молекулы по настоящему изобретению могут быть инкапсулированы в капсуле, состоящей из материала, который обеспечивает доставку лекарственного средства, прошедшего желудок, без необходимости в отдельном нанесении энтеросолюбильной оболочки (например, энтеросолюбильные мягкие желатиновые капсулы Entericare). Молекулы могут быть инкапсулированы в таких капсулах в виде гранул или порошков со вспомогательными веществами или без вспомогательных веществ, а также в виде растворов или суспензий, как описано выше.
В некоторых вариантах осуществления твердые частицы соединений по настоящему изобретению, характеризующиеся рядом размеров частиц и распределений частиц по размерам, можно смешивать со вспомогательными веществами, такими как микрокристаллическая целлюлоза или лактоза, и формировать в виде гранулы, которая содержит содержащее лекарственное средство ядро, на которое наносят энтеросолюбильную оболочку. В некоторых вариантах осуществления молекулы по настоящему изобретению можно формировать в виде суспензии или раствора, включающих необязательно буферы (например, водн. 1 н. HCl с трис-гидроксиметиламинометаном [TRIS]) и связующие (например, порошок для создания прозрачного слоя Opadry), и наносить на основную частицу, например, сахарные гранулы (например, сахарная крупка, NF-частицы) с получением гранулы. В другом варианте осуществления гранулы могут быть покрыты энтеросолюбильной оболочкой. В еще одном варианте осуществления молекулы по настоящему изобретению могут быть составлены в виде покрытых энтеросолюбильной оболочкой гранул, как описано выше, и гранулы дополнительно составляют инкапсуляцией. В дополнительном варианте осуществления комбинацию гранул с различными типами энтеросолюбильной оболочки можно инкапсулировать таким образом, что при высвобождении из капсулы соединения по настоящему изобретению становятся доступными контролируемым образом в различных участках от двенадцатиперстной кишки до других частей кишечника. Капсула может не иметь энтеросолюбильной оболочки или может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой, соответствующей или отличающейся полностью от оболочки, нанесенной на любой из материалов, покрытых энтеросолюбильной оболочкой, внутри капсулы.
В дополнительном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению можно составлять в виде таблеток или каплет, которые отдельно или в комбинации с другими компонентами состава обеспечивают доставку лекарственного средства в двенадцатиперстную кишку или другой участок кишечника. В одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению составлены в виде таблеток или каплет, которые покрыты энтеросолюбильной оболочкой и которые составляют вводимую лекарственную форму. В другом варианте осуществления таблетки или каплеты подходящего размера и формы можно помещать внутрь капсулы. В одном таком варианте осуществления капсула может быть покрытой энтеросолюбильной оболочкой и содержать не покрытые энтеросолюбильной оболочкой таблетки или каплеты, которые высвобождаются из капсулы в двенадцатиперстной кишке или другом участке кишечника. В еще одном таком варианте осуществления капсула может быть предназначена для расщепления в желудке и высвобождения покрытых энтеросолюбильной оболочкой таблеток или каплет для последующей доставки в двенадцатиперстную кишку или другие участки кишечника. В еще одном таком варианте осуществления капсула и таблетки или каплеты, содержащиеся в ней, могут быть покрыты энтеросолюбильной оболочкой для обеспечения дополнительного контроля высвобождения таблеток или каплет из капсулы и последующего высвобождения лекарственного средства из таблетки или каплеты. В дополнительном связанном варианте осуществления таблетки или каплеты, имеющие ряд энтеросолюбильных оболочек, можно объединять и помещать в капсулу, которая сама по себе также необязательно может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой. Материалы, которые пригодны для энтеросолюбильных оболочек, предназначенных для таблеток и каплет, включают без ограничения материалы, описанные выше, предназначенные для нанесения на капсулы.
Энтеросолюбильные оболочки могут допускать преждевременное высвобождение лекарственного средства в кислой среде. В еще одном дополнительном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению можно составлять таким образом, что внутреннее покрытие наносят перед нанесением энтеросолюбильной оболочки. Нанесение внутреннего покрытия может включать нанесение на энтеросолюбильный субстрат растворимого средства внутреннего покрытия, примеры которого представляют собой гидроксипропилметилцеллюлозу, повидон, гидроксипропилцеллюлозу, полиэтиленгликоль 3350, 4500, 8000, метилцеллюлозу, псевдоэтилцеллюлозу и амилопектин. Тонкий слой внутреннего покрытия на энтеросолюбильном субстрате препятствует проникновению воды через энтеросолюбильную оболочку, находящуюся на оболочке капсулы, или в ядро, где находится активный ингредиент, предупреждая преждевременное высвобождение лекарственного средства. Внутреннее покрытие может также обеспечивать высвобождение лекарственного средства в основной среде путем смягчения кислотной микросреды на границе раздела между ядром и энтеросолюбильной оболочкой. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению составлены с внутренним покрытием, содержащим органические кислоты, предназначенные для обеспечения более быстрого растворения полимера капсулы, поскольку покрытие разлагается в средах с рН 5-6, обеспечивая быстрое высвобождение лекарственного средства в основной среде.
Для перорального применения особенно подходящими являются таблетки, драже, жидкости, капли, капсулы, каплеты и желатиновые капсулы. Другие составы, подходящие для перорального введения, включают без ограничения порошкообразный или гранулированный состав, водную или масляную суспензию, водный или масляный раствор, пасту, гель, зубную пасту, жидкость для полоскания рта, покрытие, ополаскиватель для полости рта или эмульсию. Композиции, предназначенные для перорального применения, можно получать согласно любому способу, известному в данной области, и такие композиции могут содержать одно или несколько средств, выбранных из группы, состоящей из инертных, нетоксичных, как правило, признаваемых безопасными (GRAS) фармацевтических вспомогательных веществ, которые подходят для изготовления таблеток. Такие вспомогательные вещества включают, например, инертный разбавитель, такой как лактоза; гранулирующие средства и средства, для улучшения распадаемости, такие как кукурузный крахмал; связующие средства, такие как крахмал, а также смазывающие средства, такие как стеарат магния.
Таблетки могут не иметь покрытия, или они могут быть покрыты с помощью известных способов для достижения отсроченного расщепления в желудочно-кишечном тракте субъекта, обеспечивая, таким образом, замедленное высвобождение и всасывание активного ингредиента. В качестве примера, материал, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, можно использовать для нанесения покрытия на таблетки. Дополнительно, в качестве примера, таблетки можно покрывать с помощью способов, описанных в патентах США №№4256108, 4160452 и 4265874, для получения таблеток с осмотически регулируемым высвобождением. Таблетки могут дополнительно содержать подсластитель, ароматизатор, краситель, консервант или некоторую их комбинацию для обеспечения фармацевтически приятного на вид и вкусного препарата. Твердые капсулы, содержащие активный ингредиент, можно получать с помощью физиологически разлагаемой композиции, такой как желатин. Капсулы содержат активный ингредиент и могут дополнительно содержать дополнительные ингредиенты, включая, например, инертный твердый разбавитель, такой как карбонат кальция, фосфат кальция или каолин.
Твердые капсулы, содержащие активный ингредиент, можно получать с помощью физиологически разлагаемой композиции, такой как желатин. Такие твердые капсулы содержат активный ингредиент и могут дополнительно содержать дополнительные ингредиенты, включая, например, инертный твердый разбавитель, такой как карбонат кальция, фосфат кальция или каолин.
Мягкие желатиновые капсулы, содержащие активный ингредиент, могут быть получены с помощью физиологически разлагаемой композиции, такой как желатин, из коллагена животного происхождения или из гипромеллозы, модифицированной формы целлюлозы и изготавливаться с помощью необязательных смесей из желатина, воды и пластификаторов, таких как сорбит или глицерин. Такие мягкие капсулы содержат активный ингредиент, который можно смешивать с водной или масляной средой, такой как арахисовое масло, жидкий вазелин или оливковое масло.
Для перорального введения соединения по настоящему изобретению могут находиться в форме таблеток или капсул, полученных обычными средствами с помощью фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, таких как связующие; заполнители; смазывающие вещества; разрыхлители или смачивающие средства. При необходимости на таблетки можно наносить покрытие с помощью подходящих способов и материалов для покрытия, таких как системы пленочных покрытий OPADRY™, доступные от Colorcon, Уэст-Пойнт, Пенсильвания, (например, OPADRY™ типа OY, типа OYC, органические энтеросолюбильные типа OY-P, водные энтеросолюбильные типа OY-A, типа OY-PM и белое OPADRY™, 32K18400). Понятно, что можно использовать аналогичный тип пленочного покрытия или полимерные продукты от других компаний.
Таблетка, содержащая активный ингредиент, может, например, быть получена прессованием или формованием активного ингредиента, необязательно с одним или несколькими дополнительными ингредиентами. Прессованные таблетки можно получать прессованием в подходящем устройстве активного ингредиента в свободнотекучей форме, такой как порошок или гранулированный препарат, необязательно смешанный с одним или несколькими из связующего, смазывающего средства, вспомогательного вещества, поверхностно-активного средства и диспергирующего средства. Формованные таблетки можно получать формованием в подходящем устройстве смеси активного ингредиента, фармацевтически приемлемого носителя и по меньшей мере достаточного количества жидкости для увлажнения смеси. Фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, используемые при изготовлении таблеток, включают без ограничения инертные разбавители, гранулирующие средства и средства, для улучшения распадаемости, связующие средства и смазывающие средства. Известные диспергирующие средства включают без ограничения картофельный крахмал и натрия крахмалгликолят. Известные поверхностно-активные средства включают без ограничения лаурилсульфат натрия. Известные разбавители включают без ограничения карбонат кальция, карбонат натрия, лактозу, микрокристаллическую целлюлозу, фосфат кальция, гидрофосфат кальция и фосфат натрия. Известные гранулирующие средства и средства, для улучшения распадаемости, включают без ограничения кукурузный крахмал и альгиновую кислоту. Известные связующие средства включают без ограничения желатин, аравийскую камедь, прежелатинизированный кукурузный крахмал, поливинилпирролидон и гидроксипропилметилцеллюлозу. Известные смазывающие средства включают без ограничения стеарат магния, стеариновую кислоту, диоксид кремния и тальк.
Методики гранулирования хорошо известны в фармацевтике для модификации исходных порошков или других материалов в виде частиц активного ингредиента. Порошки обычно смешивают со связующим материалом в большие постоянно свободнотекучие агломераты или гранулы, что называется "гранулирование." Например, способы "влажного" гранулирования, в которых используют растворитель, как правило, характеризуются тем, что порошки объединяют со связующим материалом и увлажняют водой или органическим растворителем при условиях, приводящих к образованию влажной гранулированной массы, из которой затем следует выпарить растворитель.
Гранулирование из расплава, как правило, состоит в использовании материалов, которые являются твердыми или полутвердыми при комнатной температуре (т.е. с относительно низким диапазоном значений температуры размягчения или плавления) для обеспечения гранулирования из порошкообразных или других материалов, главным образом в отсутствие добавленной воды или других жидких растворителей. Твердые вещества с низкой температурой плавления при нагревании до температуры в диапазоне температур плавления превращаются в жидкость с выполнением функции связующего или гранулирующей среды. Превращенное в жидкость твердое вещество распределяется по поверхности порошкообразных материалов, с которыми его приводят в контакт, и при охлаждении образует твердую гранулированную массу, в которой исходные материалы связаны вместе. Полученный гранулированный из расплава материал можно затем подавать в таблетировочный пресс или инкапсулировать для получения лекарственной формы для перорального применения. Гранулирование из расплава улучшает скорость растворения и биодоступность активного средства (т.е. лекарственного средства) благодаря образованию твердой дисперсии или твердого раствора.
В патенте США №5169645 раскрыты непосредственно прессуемые содержащие воск гранулы, имеющие улучшенные свойства текучести. Гранулы получают при примешивании воска в расплав с некоторыми улучшающими текучесть добавками с последующим охлаждением и гранулированием смеси. В некоторых вариантах осуществления только сам воск плавится в комбинации расплава воска(восков) и добавки(добавок), а в других случаях будет(будут) плавиться как воск(воски), так и добавка(добавки).
Настоящее изобретение также включает многослойную таблетку, содержащую слой, обеспечивающий отсроченное высвобождение одного или нескольких соединений, пригодных в способах по настоящему изобретению, и дополнительный слой, обеспечивающий немедленное высвобождение одного или нескольких соединений, пригодных в способах по настоящему изобретению. Используя смесь воска/чувствительного к рН полимера, можно получать нерастворимую в желудке композицию, в которой захвачен активный ингредиент, обеспечивая его отсроченное высвобождение.
Жидкий препарат для перорального введения может находиться в виде растворов, сиропов или суспензий. Жидкие препараты можно получать обычными способами с фармацевтически приемлемыми добавками, такими как суспендирующие средства (например, сорбитный сироп, метилцеллюлоза или гидрированные пищевые жиры); эмульгаторы (например, лецитин или аравийская камедь); неводные среды - носители (например, миндальное масло, маслянистые сложные эфиры или этиловый спирт), а также консерванты (например, метил- или пропил-пара-гидроксибензоаты или сорбиновая кислота). Жидкие составы фармацевтической композиции по настоящему изобретению, которые подходят для перорального введения, можно получать, упаковывать и продавать либо в жидком виде, либо в виде сухого продукта, предназначенного для растворения водой или другой подходящей средой-носителем перед применением.
Парентеральное введение
При использовании в данном документе термин "парентеральное введение" фармацевтической композиции включает любой путь введения, характеризующийся физическим прорывом через ткань субъекта, и введение фармацевтической композиции через прорыв в ткани. Парентеральное введение, таким образом, включает без ограничения введение фармацевтической композиции путем инъекции композиции, путем применения композиции через хирургический разрез, путем применения композиции через проникающую через ткань нехирургическую рану и подобное. В частности, парентеральное введение рассматривают как включающее без ограничения методики подкожной, внутривенной, внутрибрюшинной, внутримышечной, внутригрудинной инъекции и почечного диализа.
Составы фармацевтической композиции, подходящие для парентерального введения, содержат активный ингредиент вместе с фармацевтически приемлемым носителем, таким как стерильная вода или стерильный изотонический раствор. Такие составы можно получать, упаковывать или продавать в виде, подходящем для болюсного введения или для непрерывного введения. Инъекционные составы можно получать, упаковывать или продавать в стандартной лекарственной форме, такой как ампулы или контейнеры с множеством доз, содержащие консервант. Инъекционные составы можно также получать, упаковывать или продавать в устройствах, таких как устройства для управляемой пациентом аналгезии (РСА).
Составы для парентерального введения включают без ограничения суспензии, растворы, эмульсии в масляной или водной средах-носителях, пасты и имплантируемые с замедленным высвобождением или биоразлагаемые составы. Такие составы могут дополнительно содержать один или несколько дополнительных ингредиентов, включая без ограничения суспендирующие, стабилизирующие или диспергирующие средства. В одном варианте осуществления состава для парентерального введения активный ингредиент обеспечивается в сухой (т.е. порошкообразной или гранулированной) форме для растворения с помощью подходящей среды-носителя (например, стерильной апирогенной воды) перед парентеральным введением растворенной композиции.
Фармацевтические композиции можно получать, упаковывать или продавать в виде стерильной инъекционной водной или масляной суспензии или раствора. Данная суспензия или раствор могут быть составлены согласно известным техникам и могут содержать, помимо активного ингредиента, дополнительные ингредиенты, такие как диспергирующие средства, смачивающие средства или суспендирующие средства, описанные в данном документе. Такие стерильные инъекционные составы можно получать с помощью нетоксичного парентерально приемлемого разбавителя или растворителя, такого как, например, вода или 1,3-бутандиол. Другие приемлемые разбавители и растворители включают без ограничения раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия и жирные масла, такие как синтетические моно- или диглицериды. Другие парентерально вводимые составы, которые пригодны, включат составы, которые содержат активный ингредиент в микрокристаллической форме в рекомбинантном альбумине человека, псевдоожиженном желатине, в липосомальном препарате или в виде компонента биоразлагаемой полимерной системы. Композиции для замедленного высвобождения или имплантации могут содержать фармацевтически приемлемые полимерные или гидрофобные материалы, такие как эмульсия, ионообменная смола, умеренно растворимый полимер или умеренно растворимая соль.
Местное введение
Препятствием для местного введения фармацевтических веществ является роговой слой эпидермиса. Роговой слой является высокопрочным слоем, состоящим из белка, холестерина, сфинголипидов, свободных жирных кислот и различных других липидов, и содержит ороговевшие и живые клетки. Одним из факторов, которые ограничивают значение скорости проникновения (потока) соединения через роговой слой, является количество активного вещества, которое можно загрузить или нанести на поверхность кожи. Чем больше количество активного вещества, которое наносят на единицу площади поверхности кожи, тем больше градиент концентрации между поверхностью кожи и нижними слоями кожи и, в свою очередь, больше сила диффузии активного вещества через кожу. Таким образом, состав, характеризующийся большей концентрацией активного вещества, вероятнее обеспечит проникновение активного вещества через кожу и, более того, при более подходящей скорости, чем состав с меньшей концентрацией, если все остальные факторы одинаковы.
Составы, подходящие для местного введения, включают без ограничения жидкие или полужидкие препараты, такие как жидкие мази, лосьоны, эмульсии типа масло в воде или вода в масле, такие как кремы, мази или пасты, а также растворы или суспензии. Вводимые местно составы могут содержать, например, от приблизительно 1% до приблизительно 10% (вес/вес) активного ингредиента, хотя концентрация активного ингредиента достигать предела растворимости активного ингредиента в растворителе. Составы для местного введения могут дополнительно содержать один или несколько дополнительных ингредиентов, описанных в данном документе.
Можно использовать усилители проникания. Данные материалы повышают скорость проникновения лекарственных средств через кожу. Обычные усилители из уровня техники включают этанол, монолаурат глицерина, PGML (монолаурат полиэтиленгликоля), диметилсульфоксид и подобное. Другие усилители включают олеиновую кислоту, олеиловый спирт, этоксидигликоль, лаурокапрам, алканкарбоновые кислоты, диметилсульфоксид, полярные липиды или N-метил-2-пирролидон.
Одна приемлемая среда-носитель для местной доставки некоторых из композиций по настоящему изобретению может содержать липосомы.
В альтернативных вариантах осуществления местная активная фармацевтическая композиция может быть необязательно объединена с другими ингредиентами, такими как вспомогательные средства, антиоксиданты, хелатирующие средства, поверхностно-активные вещества, вспенивающие средства, смачивающие средства, эмульгаторы, добавки для увеличения вязкости, буферные средства, консерванты и подобное. В других вариантах осуществления усилитель проникания или проникновения включен в композицию и эффективен для улучшения чрескожного проникновения активного ингредиента в роговой слой и через роговой слой относительно композиции без усилителя проникания. Различные усилители проникания, включая олеиновую кислоту, олеиловый спирт, этоксидигликоль, лаурокапрам, алканкарбоновые кислоты, диметилсульфоксид, полярные липиды или N-метил-2-пирролидон, известны специалистам в данной области. В другом аспекте композиция может дополнительно содержать гидротропное средство, которое действует, повышая нарушение в структуре рогового слоя, и, таким образом, обеспечивает повышенный транспорт через роговой слой. Различные гидротропные средства, такие как изопропиловый спирт, пропиленгликоль или натрия ксилолсульфонат, известны специалисту в данной области.
Активную местно фармацевтическую композицию следует наносить в количестве, эффективном для обеспечения необходимых изменений. При использовании в данном документе термин "эффективное количество" будет означать количество, достаточное для покрытия участка поверхности кожи, где необходимо изменение. Активное соединение должно присутствовать в количестве от приблизительно 0,0001% до приблизительно 15% вес/объем композиции. Более предпочтительно оно должно присутствовать в количестве от приблизительно 0,0005% до приблизительно 5% композиции; наиболее предпочтительно оно должно присутствовать в количестве от приблизительно 0,001% до приблизительно 1% композиции. Такие соединения могут быть получены синтетическим способом или из природных источников.
Буккальное введение
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть получена, упакована или продаваться в составе, подходящем для буккального введения. Такие составы могут находиться, например, в виде таблеток или пастилок, полученных с помощью обычных способов, и могут содержать, например, от 0,1 до 20% (вес/вес) активного ингредиента, остальное - перорально растворимая или разлагаемая композиция и необязательно один или несколько дополнительных ингредиентов, описанных в данном документе. В качестве альтернативы, составы, подходящие для буккального введения, могут содержать порошок или аэрозольные или атомизированные раствор или суспензию, содержащие активный ингредиент. Такие порошкообразные, аэрозольные или аэрозольные составы при диспергировании предпочтительно имеют средний размер частиц или капель в диапазоне от приблизительно 0,1 до приблизительно 200 нанометров и могут дополнительно содержать один или несколько дополнительных ингредиентов, описанных в данном документе. Примеры составов, описанных в данном документе, не являются исключительными, и следует понимать, что настоящее изобретение включает дополнительные модификации данных и других составов, не описанных в данном документе, но которые известны специалистам в данной области.
Ректальное введение
Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть получена, упакована или продаваться в составе, подходящем для ректального введения. Такая композиция может находиться в виде, например, суппозитория, препарата для удерживающей клизмы и раствора для промывания прямой кишки или толстой кишки.
Составы в виде суппозиториев могут быть получены объединением активного ингредиента с нераздражающим фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, которое является твердым при обычной комнатной температуре (т.е. приблизительно 20°С) и которое является жидким при температуре в прямой кишке субъекта (т.е. приблизительно 37°С у здорового человека). Подходящие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества включают без ограничения масло какао, полиэтиленгликоли и различные глицериды. Составы в виде суппозиториев могут дополнительно содержать различные дополнительные ингредиенты, включая без ограничения антиоксиданты и консерванты.
Препараты для удерживающей клизмы или растворы для промывания прямой кишки или толстой кишки могут быть получены объединением активного ингредиента с фармацевтически приемлемым жидким носителем. Как хорошо известно из уровня техники, препараты для клизм можно вводить с помощью устройства для доставки, и они могут быть упакованы в устройство для доставки, приспособленное к анатомии прямой кишки субъекта. Препараты для клизм могут дополнительно содержать различные дополнительные ингредиенты, включая без ограничения антиоксиданты и консерванты.
Дополнительные формы введения
Дополнительные лекарственные формы по настоящему изобретению включают лекарственные формы, описанные в патентах США №№6340475, 6488962, 6451808, 5972389, 5582837 и 5007790. Дополнительные лекарственные формы по настоящему изобретению также включают лекарственные формы, описанные в заявках на патенты США №№20030147952, 20030104062, 20030104053, 20030044466, 20030039688 и 20020051820. Дополнительные лекарственные формы по настоящему изобретению включают лекарственные формы, описанные в PCT-заявках №№ WO 03/35041, WO 03/35040, WO 03/35029, WO 03/35177, WO 03/35039, WO 02/96404, WO 02/32416, WO 01/97783, WO 01/56544, WO 01/32217, WO 98/55107, WO 98/11879, WO 97/47285, WO 93/18755 и WO 90/11757.
Составы с контролируемым высвобождением и системы доставки лекарственных средств
В некоторых вариантах осуществления композиция предназначена для обеспечения контролируемого высвобождения лекарственного средства, таким образом, происходит модулирование места, степени и скорости воздействия соединения при введении. Факторы, которые влияют на целевую зону для воздействия перорально вводимого лекарственного средства, могут представлять собой рН и устойчивость лекарственного средства к воздействию ферментов, химическую активность в отношении других лекарственных средств (например, некоторых антибиотиков), растворимость в виде соли или свободного основания, характер ионизации и фармакодинамические и фармакокинетические характеристики в конкретных средах.
Составы с контролируемым или замедленным высвобождением фармацевтической композиции по настоящему изобретению можно получать с помощью обычного способа. В некоторых случаях лекарственные формы, подлежащие применению, можно обеспечивать в виде медленного или контролируемого высвобождения одного или нескольких активных ингредиентов, находящихся в них, используя, например, гидропропилметилцеллюлозу, другие полимерные матрицы, гели, проницаемые мембраны, осмотические системы, многослойные покрытия, микрочастицы, липосомы или микросферы или их комбинацию, для обеспечения необходимого профиля высвобождения в различных пропорциях. Подходящие составы с контролируемым высвобождением, известные специалистам в данной области, включая составы, которые описаны в данном документе, можно легко выбирать для применения с фармацевтическими композициями по настоящему изобретению. Таким образом, единичные стандартные лекарственные формы, подходящие для перорального введения, такие как таблетки, капсулы, желатиновые капсулы и каплеты, которые приспособлены для контролируемого высвобождения, охватываются настоящим изобретением.
Большинство фармацевтических продуктов с контролируемым высвобождением имеют общую цель улучшения терапии лекарственным средством относительно терапии, достигаемой их аналогами без контролируемого высвобождения. В идеальном случае применение оптимально разработанного препарата с контролируемым высвобождением при терапевтическом лечении характеризуется использованием минимального количества вещества лекарственного средства для лечения или регулирования состояния за минимальный промежуток времени. Преимущества составов с контролируемым высвобождением включают нацеленную доставку в желудочно-кишечном тракте при пероральном введении, длительную активность лекарственного средства, снижение кратности приема и повышение степени соблюдения больным режима и схемы лечения. Кроме того, составы с контролируемым высвобождением можно использовать для влияния на время начала действия или другие характеристики, такие как уровень лекарственного средства в крови, и, таким образом, можно влиять на появление побочных эффектов.
Большинство составов с контролируемым высвобождением предназначено для изначального высвобождения количества лекарственного средства, которое быстро обеспечивает необходимый терапевтический эффект, и постепенного и непрерывного высвобождения других количеств лекарственного средства для поддержания данного уровня терапевтического эффекта в течение длительного периода времени. Для поддержания данного постоянного уровня лекарственного средства в организме лекарственное средство должно высвобождаться из лекарственной формы со скоростью, которая будет заменять количество лекарственного средства, метаболизированного и выведенного из организма.
Контролируемое высвобождение активного ингредиента можно быть простимулировано различными стимуляторами, например, водой, значением рН, температурой, ферментами, бактериями или другими физиологическими условиями или соединениями. Термин "компонент с контролируемым высвобождением" в контексте настоящего изобретения определен в данном документе как соединение или соединения, включая без ограничения полимеры, полимерные матрицы, гели, проницаемые мембраны, липосомы или микросферы или их комбинацию, которые облегчают контролируемое высвобождение активного ингредиента.
В некоторых вариантах осуществления составы по настоящему изобретению могут представлять собой без ограничения составы кратковременного действия, быстрого окончания действия, а также контролируемого высвобождения, например, замедленного высвобождения, отсроченного высвобождения и пульсирующего высвобождения. Активное вещество лекарственного средства также может быть нанесено на имплантируемое медицинское устройство с целью вымывания или высвобождения с помощью дистанционно активируемой системы.
Термин отсроченное высвобождение используют в его обычном смысле для ссылки на состав лекарственного средства, который обеспечивает постепенное высвобождение лекарственного средства в течение длительного периода времени, и который может, хотя и не обязательно, обеспечивать значительные постоянные уровни лекарственного средства в крови в течение длительного периода времени. Период времени может составлять до месяца или больше и должен представлять собой высвобождение, которое длительнее, чем для такого же количества средства, вводимого в болюсной форме.
Для замедленного высвобождения соединения могут быть составлены с подходящим полимером или гидрофобным материалом, который обеспечивает соединениям свойства замедленного высвобождения. Таким образом, соединения для применении способа по настоящему изобретению можно вводить в виде микрочастиц, например, путем инъекции или в виде капсул-имплантатов или дисков путем имплантации (лекарственное средство, внедренное в полимерные матрицы).
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения соединения по настоящему изобретению вводят пациенту, отдельно или в комбинации с другим фармацевтическим средством, с помощью состава с замедленным высвобождением.
Термин отсроченное высвобождение используют в данном документе в его обычном смысле для ссылки на состав лекарственного средства, который обеспечивает начальное высвобождение лекарственного средства после некоторой задержки после введения лекарственного средства, и который может, хотя и не обязательно, включать задержку от приблизительно 10 минут до приблизительно 24 часов.
Термин пульсирующее высвобождение используют в данном документе в его обычном смысле для ссылки на состав лекарственного средства, который обеспечивает высвобождение лекарственного средства таким образом, чтобы получить «пульсирующие» профили лекарственного средства в плазме после введения лекарственного средства.
Термин немедленное высвобождение используют в его обычном смысле для ссылки на состав лекарственного средства, который обеспечивает высвобождение лекарственного средства сразу после введения лекарственного средства.
При использовании в данном документе краткосрочный относится к любому периоду времени, составляющему вплоть до и включая приблизительно 24 часа, приблизительно 12 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 7 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 5 часов, приблизительно 4 часа, приблизительно 3 часа, приблизительно 2 часа, приблизительно 1 час, приблизительно 40 минут, приблизительно 20 минут или приблизительно 10 минут, а также к каждому или всем целым или частным приращениям его длительности после введения лекарственного средства после введения лекарственного средства.
При использовании в данном документе быстрое окончание действия относится к любому периоду времени, составляющему вплоть до и включая приблизительно 24 часа, приблизительно 12 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 7 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 5 часов, приблизительно 4 часа, приблизительно 3 часа, приблизительно 2 часа, приблизительно 1 час, приблизительно 40 минут, приблизительно 20 минут или приблизительно 10 минут, а также к каждому или всем целым или частным приращениям его длительности после введения лекарственного средства.
Лекарственное средство может лучше всасываться в двенадцатиперстной кишке или других отделах кишечника. Особенно пригодным режимом контролируемого высвобождения является режим, который обеспечивает минимизацию высвобождения лекарственного средства в желудке, при этом обеспечивает доставку лекарственного средства в своей наиболее концентрированной форме в двенадцатиперстную кишку или другие отделы кишечника. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению составляют для обеспечения доставки в двенадцатиперстную кишку и необязательно другие отделы кишечника. Контролируемого высвобождения, которое обеспечивает доставку лекарственного средства в двенадцатиперстную кишку или другие участки кишечника, можно достигать с помощью композиций, которые предусматривают энтеросолюбильные оболочки. Энтеросолюбильные оболочки нерастворимы в сильнокислых средах, зачастую содержат многокислотную оболочку, которая остается неионизированной и неповрежденной при рН желудка. Однако при среднекислых (>рН 5,5), или нейтральных, или среднещелочных условиях (рН 6,5-7,6) двенадцатиперстной кишки или других участков кишечника оболочка ионизируется, набухает и разрушается, высвобождая покрытое содержимое в окружающую среду. Существуют варианты оболочек для обеспечения ионизации при значении или около значения конкретного рН (например, Eudragit L-110, порог ионизации рН 6,0; Eudragit S-100, порог ионизации рН 7,0). Понятно, что можно использовать аналогичный тип или категорию пленочного покрытия или полимерные продукты от других компаний.
В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению составляют с энтеросолюбильной оболочкой, которая была модифицирована добавлением пластификаторов в полимер перед нанесением оболочки. Пластификаторы можно добавлять для регулирования стойкости к дроблению или растрескиванию оболочки, при этом снижение температуры стеклования оболочки также обеспечивает гладкость и равномерную растекаемость оболочки при ее нанесении. Подходящие пластификаторы включают полиэтиленгликоль 8000 (PEG 8000), триэтилцитрат (ТЕС) и триацетин, которые можно включать в полимерное средство для энтеросолюбильных оболочек.
Соединения по настоящему изобретению можно составлять для применения в кишечнике в различных лекарственных формах, включая (без ограничения) капсулы, гранулы активного лекарственного средства самого по себе, гранулы, микросферы и таблетки. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит лекарственное средство, инкапсулированное в капсуле, покрытой энтеросолюбильной оболочкой для высвобождения лекарственного средства в двенадцатиперстной кишке или другой области кишечника. В других вариантах осуществления фармацевтически приемлемые капсулы включают твердые капсулы. В еще одних вариантах осуществления фармацевтически приемлемые капсулы включают мягкие желатиновые капсулы.
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению инкапсулировано в виде чистых гранул или порошка без носителей, вспомогательных веществ или других фармацевтически приемлемых добавок. В других вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению инкапсулировано вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, вспомогательными веществами, антиоксидантами, фунгицидами, (например, бензойной и аскорбиновой кислотами и их солями, и фенольными соединениями, такими как метил-, этил-, пропил- и бутил-п-гидроксибензоат (парабены)), противомикробными консервантами, красителями и ароматизаторами. Вспомогательные вещества могут способствовать характеру заполнения капсул, стабильности и в распределении лекарственного средства, когда капсула расщепляется в организме. В других вариантах осуществления гранулы и/или порошки соединения по настоящему изобретению покрываются энтеросолюбильной оболочкой перед помещением в капсулу. Гранулы и/или порошки, покрытые энтеросолюбильной оболочкой, помещенные в капсулу, могут иметь один или несколько типов энтеросолюбильной оболочки для обеспечения доставки лекарственного средства в различные участки кишечника. Капсула может не иметь энтеросолюбильной оболочки или может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой, которая является такой же или отличается от оболочки, нанесенной на любой из материалов, покрытых энтеросолюбильной оболочкой, внутри капсулы.
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению инкапсулировано в жидкости в виде раствора или суспензии в воде или различных фармацевтически приемлемых маслах или другой дисперсионной среде, необязательно с такими вспомогательными веществами, как сорастворители (например, PEG 300, PEG 400, пропиленгликоль, глицерин, Tween 80, этанол), повышающими растворимость средствами (например, сорбитом, декстрозой), смачивающими средствами (например, загустителями), буферами (например, гидрофосфатом динатрия), антиоксидантами, фунгицидами, консервантами, красителями и ароматизаторами. В некоторых вариантах осуществления соединение настоящего изобретения составляют для заполненных жидкостью капсул в виде чистого лекарственного средства в виде гранул и/или порошков в жидкости. В других вариантах осуществления капсула, содержащая соединение в жидкости, покрыта энтеросолюбильной оболочкой. В еще одних вариантах осуществления на гранулы и/или порошки соединения по настоящему изобретению наносят энтеросолюбильную оболочку перед помещением в жидкость и помещением данной комбинации в капсулу. Гранулы и/или порошок, покрытые энтеросолюбильной оболочкой, могут иметь один или несколько типов энтеросолюбильной оболочки для обеспечения доставки лекарственного средства в различные участки кишечника. Капсула может не иметь энтеросолюбильной оболочки или может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой, которая является такой же или отличается от оболочки, нанесенной на любой из материалов, покрытых энтеросолюбильной оболочкой, внутри капсулы.
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению инкапсулировано в капсуле, состоящей из материала, который обеспечивает доставку лекарственного средства, прошедшего желудок, без необходимости в отдельном нанесении энтеросолюбильной оболочки (например, энтеросолюбильные мягкие желатиновые капсулы Entericare). Соединение может быть инкапсулировано в таких капсулах в виде гранул или порошков со вспомогательными веществами или без вспомогательных веществ, а также в виде растворов или суспензий, как описано выше.
В некоторых вариантах осуществления твердые частицы соединения по настоящему изобретению, характеризующиеся рядом размеров частиц и распределений частиц по размерам, смешаны со вспомогательными веществами, такими как микрокристаллическая целлюлоза или лактоза, и сформированы в виде гранулы, которая содержит содержащее лекарственное средство ядро, на которое наносят энтеросолюбильную оболочку. В других вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению сформировано в виде суспензии или раствора, включающих необязательно буферы (например, водн. 1 н. HCl с трис(гидроксиметил)аминометаном "TRIS") и связующие (например, порошок для создания прозрачного слоя Opadry), и наносят на основную частицу, например, сахарные гранулы (например, сахарная крупка, NF-частицы) с получением гранулы. В еще одних вариантах осуществления гранулы покрыты энтеросолюбильной оболочкой. В еще одних вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению составлено в виде покрытых энтеросолюбильной оболочкой гранул, как описано выше, и гранулы дополнительно составляют инкапсуляцией. В еще одних вариантах осуществления комбинация гранул с различными типами энтеросолюбильной оболочки инкапсулирована таким образом, что при высвобождении из капсулы соединение по настоящему изобретению становится доступным контролируемым образом в различных участках от двенадцатиперстной кишки до других частей кишечника. Капсула может не иметь энтеросолюбильной оболочки или может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой, которая является такой же или отличается от оболочки, нанесенной на любой из материалов, покрытых энтеросолюбильной оболочкой, внутри капсулы.
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению составлено в виде таблеток или каплет, которые отдельно или в комбинации с другими компонентами состава обеспечивают доставку лекарственного средства в двенадцатиперстную кишку или другой участок кишечника. В других вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению составлено в виде таблеток или каплет, которые покрыты энтеросолюбильной оболочкой и которые составляют вводимую лекарственную форму. В еще одних вариантах осуществления таблетки или каплеты подходящего размера и формы помещены внутрь капсулы. В еще одних вариантах осуществления капсула покрыта энтеросолюбильной оболочкой и содержит не покрытые энтеросолюбильной оболочкой таблетки или каплеты, которые высвобождаются из капсулы в двенадцатиперстной кишке или другом участке кишечника. В еще одних вариантах осуществления капсула предназначена для расщепления в желудке и высвобождения покрытых энтеросолюбильной оболочкой таблеток или каплет для последующей доставки в двенадцатиперстную кишку или другие участки кишечника. В еще одних вариантах осуществления как капсула, так и таблетки или каплеты, содержащиеся в ней, покрыты энтеросолюбильной оболочкой для обеспечения дополнительного контроля высвобождения таблеток или каплет из капсулы и последующего высвобождения лекарственного средства из таблетки или каплеты. В еще одних вариантах осуществления таблетки или каплеты, имеющие ряд энтеросолюбильных оболочек, объединены и помещены в капсулу, которая сама по себе также необязательно может быть покрыта энтеросолюбильной оболочкой. Материалы, пригодные для энтеросолюбильных оболочек, предназначенных для таблеток и каплет, включают без ограничения материалы, описанные выше, предназначенные для нанесения на капсулы.
Энтеросолюбильные оболочки могут допускать преждевременное высвобождение лекарственного средства в кислой среде. В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению составлено таким образом, что внутреннее покрытие нанесено перед нанесением энтеросолюбильной оболочки. Нанесение внутреннего покрытия может включать нанесение на энтеросолюбильный субстрат растворимого средства внутреннего покрытия, примеры которого представляют собой гидроксипропилметилцеллюлозу, повидон, гидроксипропилцеллюлозу, полиэтиленгликоль 3350, 4500, 8000, метилцеллюлозу, псевдоэтилцеллюлозу и амилопектин. Понятно, что можно использовать аналогичный тип синтетических и полусинтетических полимерных продуктов от других компаний. Тонкий слой внутреннего покрытия на энтеросолюбильном субстрате препятствует проникновению воды через энтеросолюбильную оболочку, находящуюся на оболочке капсулы, или в ядро, где находится активный ингредиент, предупреждая преждевременное высвобождение лекарственного средства. Внутреннее покрытие может также обеспечивать высвобождение лекарственного средства в основной среде путем смягчения кислотной микросреды на границе раздела между ядром и энтеросолюбильной оболочкой. В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению составлено с внутренним покрытием, содержащим органические кислоты, предназначенные для обеспечения более быстрого растворения полимера капсулы, поскольку покрытие разлагается в средах с рН 5-6, обеспечивая быстрое высвобождение лекарственного средства в основной среде.
Механические устройства
В одном аспекте настоящего изобретения способ лечения пациента, у которого отсутствует нормальное дыхание и нормальная регуляция дыхания, включает введение композиции, пригодной по настоящему изобретению, как описано в данном документе, и дополнительное лечение пациента с помощью устройства для поддержания дыхания. Такие устройства включают без ограничения устройства искусственного дыхания, устройства СРАР и BiPAP.
Искусственная вентиляция легких является способом механической помощи или замены самостоятельного дыхания. Искусственную вентиляцию легких обычно используют после инвазивной интубации, процедуры, при которой эндотрахеальную или трахеостомическую трубку вставляют в дыхательные пути. Ее обычно используют при неотложных ситуациях, таких как в ICU, в течение короткого периода времени при тяжелых болезнях. Ее также можно использовать дома или в лечебном или реабилитационном учреждении, если пациенты имеют хронические болезни, которые требуют длительной помощи для поддержания дыхания. Основной вид искусственной вентиляции легких представляет собой вентиляцию с положительным давлением, которая работает посредством повышения давления в дыхательных путях пациента и, таким образом, нагнетает воздух в легкие. Менее распространенными в настоящее время являются устройства для вентиляции с отрицательным давлением (например, аппарат "железные легкие"), которые создают среду отрицательного давления вокруг грудной клетки пациента, таким образом всасывая воздух в легкие. Искусственная вентиляция легких зачастую является воздействием для спасения жизни, но несет множество возможных осложнений, включая пневмоторакс, повреждение дыхательных путей, повреждение альвеол и связанную с вентиляцией пневмонию. По этой причине давление и объем используемого газа жестко регулируются, и процедуру прекращают насколько возможно быстро. Типы искусственной вентиляции легких следующие: обычная вентиляция с положительным давлением, высокочастотная искусственная вентиляция легких, неинвазивная вентиляция (неинвазивная вентиляция с положительным давлением или NIPPV), пропорциональная поддерживающая вентиляция (PAV), адаптивная сервовентиляция (ASV) и неврально регулируемая вентиляционная поддержка (NAVA).
Неинвазивная вентиляция относится ко всем методикам, которые способствуют вентиляции без использования эндотрахеальной трубки. Неинвазивная вентиляция главным образом направлена на минимизацию дискомфорта пациента и осложнений, связанных с инвазивной вентиляцией, и зачастую используется при сердечном заболевании, обострениях хронического заболевания легких, апноэ во время сна и нервно-мышечных заболеваниях. Неинвазивная вентиляция относится только к области взаимодействия с пациентом, а не к применяемому режиму вентиляции; при этом режимы могут включать самостоятельный или регулируемый режим и могут представлять собой либо режимы с периодическим изменением давления, либо режимы с периодическим изменением объема. Некоторые часто используемые режимы NIPPV включают следующее.
(a) Положительное постоянное давление в дыхательных путях (CPAP). Этот вид аппарата использовали главным образом для пациентов для лечения апноэ во время сна дома, но сейчас он широко используется в отделениях интенсивной терапии в качестве формы вспомогательной искусственной вентиляции легких. Аппарат СРАР прекращает обструкцию верхних дыхательных путей путем подачи потока сжатого воздуха через шланг в подушку для носа, маску для носа или полнолицевую маску, оставляя открытым дыхательный путь (поддерживая его открытым под давлением воздуха), таким образом, становится возможным незатрудненное дыхание, снижается частота появления и/или предупреждаются явлений апноэ и гипопноэ. Когда включают аппарат, но перед помещением маски на голову, поток воздуха проходит через маску. После помещения маски на голову, ее герметизируют на лице, и воздух перестает течь. В этот момент только давление воздуха обеспечивает необходимый результат. Данное имеет дополнительное преимущество снижения или устранения сильно громкого храпения, которое иногда сопровождает апноэ во время сна.
(b) Двухфазная вентиляция с положительным давлением в дыхательных путях (BIPAP). Давление изменяется между положительным давлением в дыхательных путях на вдохе (IPAP) и более низким положительным давлением в дыхательных путях на выдохе (ЕРАР), вызванным усилием пациента. На многих таких устройствах значения степени содействия можно устанавливать, что обеспечивает значения давления IPAP, даже если пациенты не могут сделать вдох.
(с) Перемежающаяся вентиляция с положительным давлением (IPPV) через загубник или маску.
Специалисты в данной области узнают или смогут установить, проводя не более, чем обычные эксперименты, многочисленные эквиваленты конкретных процедур, вариантов осуществления, пунктов формулы и примеров, описанных в данном документе. Такие эквиваленты считаются входящими в объем настоящего изобретения и охватываются прилагаемой к данному документу формулой изобретения. Например, следует понимать, что модификации условий реакции, включая без ограничения значения времени реакции, формат/объем реакции и реагенты для эксперимента, такие как растворители, катализаторы, значения давления, атмосферные условия, например, атмосфера азота, а также восстанавливающие/окисляющие средства с принятыми в данной области альтернативами и проведение не более, чем обычного эксперимента, находятся в объеме настоящей заявки.
Следует понимать, что везде, где в данном документе указаны значения и диапазоны, описание в формате диапазона представлено только для удобства и краткости и не должно рассматриваться как жесткое ограничение объема настоящего изобретения. Следовательно, все значения и диапазоны, охваченные данными значениями и диапазонами, рассматриваются как находящиеся в объеме настоящего изобретения. Более того, все значения, которые попадают в данные диапазоны, а также верхние или нижние пределы диапазона значений, также предусматриваются настоящей заявкой. Описание диапазона следует рассматривать как конкретно раскрывающее все возможные поддиапазоны, а также отдельные числовые значения в данном диапазоне и при необходимости частичные целые числа из численных значений в диапазонах. Например, описание диапазона, такого как от 1 до 6, следует рассматривать как конкретно раскрывающее поддиапазоны, такие как от 1 до 3, от 1 до 4, от 1 до 5, от 2 до 4, от 2 до 6, от 3 до 6 и т.д., а также отдельные числа в таком диапазоне, например, 1, 2, 2,7, 3, 4, 5, 5,3 и 6. Это применимо независимо от ширины диапазона.
Следующие примеры дополнительно иллюстрируют аспекты настоящего изобретения. Однако они никоим образом не ограничивают идеи или раскрытие настоящего изобретения, указанного в данном документе.
ПРИМЕРЫ
Настоящее изобретение далее будет описано со ссылкой на следующие примеры. Данные примеры представлены только с целью иллюстрации, и настоящее изобретение не ограничено данными примерами, но напротив охватывает все вариации, которые очевидны как результат идей, представленных в данном документе.
Материалы
Если иное не указано, все остальные исходные материалы получали от коммерческих поставщиков и использовали без очистки. Готовые продукты обычно выделяют в виде солей, если не указано иное.
Пример 1: 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (4) и соответствующая гидрохлоридная соль (4а)
(а) Пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амин (2)
4
3
1
+
К суспензии 2,4,6,8-тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидина (1) (3,00 г, 11,15 ммоль) в THF (40 мл) при -78°С посредством шприцевого насоса добавляли (в течение ~20 мин) пропиламин (880 мкл, 10,71 ммоль) в THF (7 мл), а затем DIPEA (2,12 мл, 12,27 ммоль) в THF (7 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительных 30 мин, а затем обеспечивали достижение комнатной температуры. Добавляли воду (200 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×200 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (250 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (99:1) до PE/EtOAc (5:1) с получением пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амина (2) (2,91 г, 93% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,22 (1Н, br s) 3,69-3,60 (2H, m) 1,78 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,05 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 292, 294, 296, 298 [M+H].
(b) 2-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (3)
3
4
3
1
+
2-Аминоэтанол (2,90 мл, 47,85 ммоль) (в 10 мл дихлорметана) добавляли порциями к раствору пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амина (2) (5,60 г, 19,14 ммоль) в дихлорметане (180 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли насыщенный NaHCO (100 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью хлороформа (3×100 мл). После фильтрования объединенные органические экстракты промывали водой и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (5:1) до РЕ/EtOAc (1:2) с получением 2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (3) (5,53 г, 91% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,30 (1Н, t, J=5,7 Гц) 6,91 (1H, t, J=5,7 Гц) 3,96-3,88 (2H, m) 3,83-3,74 (2H, m) 3,61-3,51 (2H, m) 2,62 (1H, T, J=4,9 Гц) 1,80-1,66 (2H, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 317, 319, 321 [M+H].
(c) 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (4)
3
4
3
1
+
Смесь 2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (3) (5,53 г, 17,43 ммоль) и метиламина (40% водный раствор) (15,00 мл) в н-бутаноле (50 мл) нагревали при 115°С в течение 72 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (100 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (300 мл), затем солевым раствором (300 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (5:1) до РЕ/EtOAc (1:3) с получением 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (4) (3,39 г, 63% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,03-6,83 (1Н, m) 6,61-6,41 (1H, m) 4,84-4,48 (3H, m) 3,89-3,83 (2H, m) 3,72-3,64 (2H, m) 3,51-3,41 (2H, m) 2,96 (3H, d, J=4,9 Гц) 2,95 (3H, d, J=4,9 Гц) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [M+H].
(d) 2-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорид (4а)
1
+
2
Раствор 2 М HCl /диэтиловый эфир (4,64 мл, 9,27 ммоль) добавляли к раствору 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (4) (2,84 г, 9,27 ммоль) в диэтиловом эфире (50 мл) и метаноле (25 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре и полученный осадок фильтровали, промывали диэтиловым эфиром (20 мл) и высушивали с получением 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорида (4а) (3,13 г, 98% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 3,85 (2Н, t, J=5,4 Гц) 3,68 (2Н, t, J=5,4 Гц) 3,44 (2Н, t, J=7,3 Гц) 2,95 (3Н, s) 2,94 (3Н, s) 1,68 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 0,97 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [М+Н]; MP: 201-203°С.
Пример 2: 2-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метил-амино]-этанол (6) и соответствующая гидрохлоридная соль (6а)
(а) 2-[(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метил-амино]-этанол (5)
3
4
3
1
+
2-метиламино-этанол (740 мкл, 3,00 ммоль) добавляли к раствору пропил-(2,6,8-трихлор-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амина (2) (350 мг, 1,20 ммоль) в дихлорметане (15 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. По прошествии этого времени добавляли насыщенный NaHCO (30 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью дихлорметана (3×10 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9:1) до РЕ/EtOAc (1:1) с получением 2-[(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанола (5) (230 мг, 58% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,08 (1Н, br s) 4,39-4,13 (2H, m) 4,05-3,98 (2H, m) 3,85 (1H, br s) 3,59-3,50 (2H, m) 3,38 (3H, s) 1,72 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 331, 333, 335 [M+H].
(b) 2-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанол (6)
3
4
3
1
+
Смесь 2-[(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанола (5) (210 г мг, 0,63 ммоль) и метиламина (40% водный раствор) (330 мкл, 4,25 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) нагревали при 100°С в течение 40 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл), затем солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9:1) до РЕ/EtOAc (1:4) с получением 2-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо [5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанола (6) (80 мг, 40% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,86-6,73 (1Н, m) 6,5-6,2 (1H, m) 4,72-4,51 (2H, m) 4,18 (2H, t, J=4,9 Гц) 3,95 (2H, t, J=4,9 Гц) 3,49-3,41 (2H, m) 3,27 (3H, m) 2,96 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,96 (3H, d, J=5,1 Гц) 1,74-1,64 (2H, m) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(c) 2-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанола гидрохлорид (6а)
1
+
3
Раствор 2 М HCl /диэтиловый эфир (115 мкл, 0,23 ммоль) добавляли к раствору 2-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанола (6) (74 мг, 0,23 ммоль) в диэтиловом эфире (5 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре, а затем осадок фильтровали, промывали диэтиловым эфиром (3 мл) и высушивали с получением 2-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-этанола гидрохлорида (6а) (81 мг, 99% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 14,2-13,7 (1Н, m) 8,4-7,7 (2H, m) 6,7-6,3 (1H, m) 4,28-3,77 (4H, m) 3,64-3,49 (2H, m) 3,28 (3H, s) 3,03-2,97 (6H, m) 1,83-1,72 (2H, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H]; MP: 165-167°C.
Пример 3: 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (8) и соответствующая гидрохлоридная соль (8а)
(a) 3-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (7)
1
+
3
3-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (7) получали из пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амина (2) (300 мг, 1,03 ммоль) и 3-аминопропан-1-ола в дихлорметане с помощью процедуры, описанной для соединения (5), с получением 3-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (7) (260 мг, 77% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,17 (1Н, t, J=6,3 Гц) 6,90 (1H, t, J=5,8 Гц) 3,79-3,73 (2H, m) 3,69 (2H, t, J=5,6 Гц) 3,59-3,53 (2H, m) 3,02 (1H, br s) 1,92-1,84 (2H, m) 1,72 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 331, 333, 335 [M+H].
(b) 3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (8)
2
2
2
2
3
1
+
3-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (7) (250 мг, 0,75 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) в н-бутаноле вводили в реакцию с помощью процедуры, описанной для соединения (6). Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/MeOH (95:5) с получением 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (8) (200 мг, 83% выход). 400 МГц H-ЯМР (CDCl, ppm): 6,73 (1Н, s) 6,52 (1H, s) 4,88 (1H, s) 4,63 (1H, s) 4,57 (1H, s) 3,73-3,65 (2H, m) 3,59 (2H, t, J=5,5) 3,50-3,43 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,95 (3H, d, J=5,2 Гц) 1,83-1,75 (2H, m) 1,75-1,64 (2H, m) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(c) 3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола гидрохлорид (8a)
1
+
3
3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (8) (190 мг, 0,59 ммоль) и 2 M HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире вводили в реакцию с помощью процедуры, описанной для соединения (6а), с получением необходимого продукта (208 мг, 98% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,74-3,66 (4Н, m) 3,56 (2Н, t, J=7,2 Гц) 3,00 (6Н, d, J=5,2 Гц) 1,97-1,88 (2Н, m) 1,79-1,68 (2Н, m) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [М+Н]; MP: 178-180°С.
Пример 4: 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (10) и соответствующая гидрохлоридная соль (10а)
(а) 1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (9)
3
4
3
1
+
Смесь пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амина (2) (350 мг, 1,20 ммоль), 1-аминопропан-2-ола (100 мкл, 1,25 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина (230 мкл, 1,31 ммоль) в дихлорметане (7 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем добавляли насыщенный раствор NaHCO (30 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью дихлорметана (3×10 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования летучие вещества удаляли и остаток растворяли в дихлорметане (5 мл) и фильтровали через подушку из силикагеля. Растворитель выпаривали с получением 1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (9) (380 мг, 96% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,31 (1Н, t, J=5,7 Гц) 6,90 (1H, t, J=5,5 Гц) 4,19-4,08 (1H, m) 3,78 (1H, ddd, J=14,0, 6,6, 3,1 Гц) 3,60-3,51 (2H, m) 3,48 (1H, ddd, J=14,0, 7,8, 5,5 Гц) 2,67 (1H, s) 1,72 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,30 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 331, 333, 335 [M+H].
(b) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (10)
1
+
3
1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (9) (370 мг, 1,12 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 4, с получением 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (10) (230 мг, 64% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,96-6,81 (1Н, m) 6,59-6,42 (1H, m) 4,90 (1H, s) 4,69-4,51 (2H, m) 4,11-4,01 (1H, m) 3,64-3,56 (1H, m) 3,50 (1H, dd, J=7,l, 6,0 Гц) 3,47-3,42 (2H, m) 2,96 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,95 (3H, d, J=5,1 Гц) 1,74-1,63 (2H, m) 1,23 (3H, d, J=6,4 Гц) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(c) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (10a)
1
+
2
1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (10) (190 мг, 0,59 ммоль) и 2 М HCl /диэтиловый эфир в диэтиловом эфире вводили в реакцию с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (10а) (200 мг, 75% выход). 400 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 4,18-4,08 (1Н, m) 3,63 (1H, dd, J=13,9, 4,1 Гц) 3,52 (1H, dd, J=13,9, 7,6 Гц) 3,47 (2H, t, J=7,2 Гц) 2,97 (3H, s) 2,95 (3H, s) 1,74-1,63 (2H, m) 1,25 (3H, d, J=6,4 Гц) 0,97 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H]; MP: 216-219°C.
Пример 5: (S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (12) и соответствующая гидрохлоридная соль (12а)
(a) (S)-1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (11)
1
+
3
Пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амин (2) (300 мг, 1,03 ммоль) и (S)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в дихлорметане (7 мл) с помощью процедуры, описанной для соединения 9, с получением (S)-1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (11) (333 мг, 98% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,32 (1Н, t, J=5,8 Гц) 6,90 (1H, t, J=5,5 Гц) 4,19-4,08 (1H, m) 3,78 (1H, ddd, J=14,0, 6,6, 3,1 Гц) 3,60-3,42 (3H, m) 2,74 (1H, s) 1,72 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,30 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 331, 333, 335 [M+H].
(b) (S)-1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (12)
3
3
3
1
+
(S)-1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (11) (340 мг, 1,03 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 4. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/МеОН (9:1) с получением (S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (12) (160 мг, 48% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,97-6,84 (1H, m) 6,58-6,44 (1Н, m) 4,92 (1Н, s) 4,74-4,53 (2Н, m) 4,13-3,99 (1Н, m) 3,60 (1H, ddd, J=14,3, 6,4, 2,4 Гц) 3,53-3,39 (3Н, m) 2,96 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,94 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,68 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,4 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [М+Н].
(c) (S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (12а)
1
+
3
2 М HCl/диэтиловый эфир (220 мкл, 0,44 ммоль) добавляли к раствору (S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (12) (140 мг, 0,44 ммоль) в диэтиловом эфире (5 мл) и дихлорметане (6 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре, а затем летучие вещества удаляли под вакуумом. Остаток обрабатывали диэтиловым эфиром (5 мл) и полученный осадок фильтровали, промывали диэтиловым эфиром (3 мл) и высушивали с получением (S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-олагидрохлорида (12а) (150 мг, 96% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,14-3,99 (1Н, m) 3,69 (1Н, dd, J=13,6, 4,0 Гц) 3,57 (2Н, t, J=7,2 Гц) 3,48 (1H, dd, J=13,6, 7,6 Гц) 3,00 (3Н, s) 2,99 (3Н, s) 1,74 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,24 (3Н, d, J=6,3 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [М+Н]; MP: 206-208°С.
Пример 6: (R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (14) и соответствующая гидрохлоридная соль (14а)
(a) (R)-1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (13)
1
+
3
Пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амин (2) (300 мг, 1,03 ммоль) и (R)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в дихлорметане с помощью процедуры, описанной для соединения 9, с получением (R)-1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (13) (333 мг, 98% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,32 (1Н, t, J=5,8 Гц) 6,90 (1H, t, J=5,5 Гц) 4,19-4,08 (1H, m) 3,78 (1H, ddd, J=14,0, 6,6, 3,1 Гц) 3,60-3,42 (3Н, m) 2,74 (1H, s) 1,72 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,30 (3Н, d, J=6,3 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 331, 333, 335 [M+H].
(b) (R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (14)
1
+
3
(R)-1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (13) (311 мг, 0,94 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 4, с получением (R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (14) (190 мг, 63% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,95-6,82 (1Н, m) 6,57-6,41 (1H, m) 4,92 (1H, br s) 4,70-4,53 (2H, m) 4,13-4,01 (1H, m) 3,61 (1H, ddd, J=14,3, 6,3, 2,3) 3,54-3,41 (3H, m) 2,96 (3H, d, J=5,0 Гц) 2,95 (3Н, d, J=5,0 Гц) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,23 (3Н, d, J=6,4 Гц) 1,0 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(c) (R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (14а)
1
+
3
(R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (14) (180 мг, 0,56 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в дихлорметане с помощью процедуры, описанной для соединения (12а), с получением (R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (14а) (170 мг, 85% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 14,25-13,60 (1H, m) 8,11-7,88 (1H, m) 7,67-7,46 (1H, m) 6,63-6,24 (1H, m) 4,88 (1H, br s) 4,23-4,10 (1H, m) 3,79-3,34 (4H, m) 3,09-2,86 (6H, m) 1,76 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,28 (3Н, d, J=5,6 Гц) 1,03 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H]; MP: 218-220°C.
Пример 7: 2-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метил-пропан-1-ол (16) и соответствующая гидрохлоридная соль (16а)
(a) 2-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ол (15)
1
+
3
Пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амин (2) (350 мг, 1,20 ммоль) и 2-амино-2-метилпропан-1-ол вводили в реакцию в дихлорметане с помощью процедуры, описанной для соединения 5, с получением 2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ола (15) (250 мг, 60% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,97 (1H, s) 6,89 (1Н, t, J=5,5 Гц) 4,59 (1H, t, J=6,5 Гц) 3,77 (2H, d, J=6,5 Гц) 3,60-3,50 (2H, m) 1,72 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,48 (6H, s) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 345, 347, 349 [M+H].
(b) 2-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ол (16)
1
+
3
2-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ол (15) (250 мг, 0,72 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 4, с получением 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ола (16) (120 мг, 50% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,96 (1H, s) 6,72 (1H, s) 6,48 (1H, t, J=5,7 Гц) 4,62 (1H, q, J=5,0 Гц) 4,54 (1H, q, J=5,0 Гц) 3,70 (2H, s) 3,51-3,40 (2H, m) 2,96 (3H, d, J=5,0 Гц) 2,95 (3H, d, J=5,0 Гц) 1,76-1,62 (2H, m) 1,44 (6H, s) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(c) 2-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ола гидрохлорид (16a)
1
+
3
2-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ол (16) (115 мг, 0,34 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедуры, описанной для соединения (12а), с получением 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-1-ола гидрохлорида (16а) (125 мг, 99% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,82 (2Н, s) 3,56 (2Н, t, J=7,1 Гц) 3,00 (3Н, s) 2,98 (3Н, s) 1,79-1,68 (2Н, m) 1,53 (6Н, s) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
Пример 8: (S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (18) и соответствующая гидрохлоридная соль (18а)
(a) (S)-2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d] пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (17)
1
+
3
(S)-2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (17) получали из пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амина (2) (350 мг, 1,20 ммоль) и (S)-2-аминопропан-1-ола в дихлорметане с помощью процедуры, описанной для соединения 5, с получением необходимого продукта (280 мг, 70% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,00 (1Н, d, J=7,5 Гц) 6,90 (1H, t, J=5,4 Гц) 4,52-4,38 (1H, m) 3,90-3,79 (1H, m) 3,77-3,67 (1H, m) 3,60-3,51 (2H, m) 2,48 (1H, s) 1,79-1,66 (2H, m) 1,35 (3H, d, J=6,8 Гц) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 331, 333, 335 [M+H].
(b) (S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (18)
1
+
3
(S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (18) получали из (S)-2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (17) (280 мг, 0,85 ммоль) и метиламина (40% водный раствор) в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 4, с получением необходимого продукта (160 мг, 59% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,61-6,39 (2Н, m) 4,86 (1Н, br s) 4,69-4,49 (2H, m) 4,30-4,15 (1H, m) 3,79 (1H, dd, J=11,0, 2,8 Гц) 3,67 (1H, dd, J=11,0, 7,4 Гц) 3,51-3,41 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,94 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,76-1,61 (2H, m) 1,33 (3H, d, J=6,9 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(с) (S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола гидрохлорид (18a)
1
+
3
(S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола гидрохлорид (18а) получали из (S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (18) (150 мг, 0,47 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением необходимого продукта (135 мг, 80% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,51-4,40 (1H, m) 3,72 (1H, dd, J=11,1, 4,8 Гц) 3,67 (1H, dd, J=11,1, 5,5 Гц) 3,60 (2H, t, J=7,3 Гц) 3,03 (3Н, s) 3,00 (3Н, s) 1,81-1,70 (2H, m) 1,33 (3H, d, J=6,8 Гц) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
Пример 9: (R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (20) и соответствующая гидрохлоридная соль (20а)
(а) (R)-2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (19)
1
+
3
Пропил-(2,6,8-трихлор-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амин (2) (270 мг, 0,93 ммоль) и (R)-2-аминопропан-1-ол вводили в реакцию в дихлорметане с помощью процедуры, описанной для соединения 9, с получением (R)-2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил-амино)-пропан-1-ола (19) (275 мг, 90% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,98 (1Н, d, J=7,7 Гц) 6,89 (1H, t, J=5,3 Гц) 4,52-4,38 (1H, m) 3,84 (1H, dd, J=11,2, 3,9 Гц) 3,72 (1H, dd, J=11,2, 5,9 Гц) 3,60-3,51 (2H, m) 2,39 (1H, s) 1,79-1,66 (2H, m) 1,36 (3H, d, J=6,8 Гц) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 331, 333, 335 [M+H].
(b) (R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (20)
1
+
3
(R)-2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (19) (269 мг, 0,81 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 4, с получением (R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (20) (180 мг, 69% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,67-6,43 (2Н, m) 5,0-4,5 (3Н, m) 4,30-4,13 (1Н, m) 3,79 (1H, dd, J=11,0, 2,8 Гц) 3,68 (1H, dd, J=11,0, 7,4 Гц) 3,51-3,41 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,95 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,77-1,62 (2H, m) 1,34 (3H, d, J=6,9 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(c) (R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола гидрохлорид (20a)
1
+
3
(R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (20) (143 мг, 0,45 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола гидрохлорида (20а) (150 мг, 93% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,50-4,38 (1Н, m) 3,72 (1Н, dd, J=11,1, 4,9 Гц) 3,67 (1Н, dd, J=11,1, 5,4 Гц) 3,58 (2Н, t, J=7,2 Гц) 3,02 (3Н, s) 2,99 (3Н, s) 1,81-1,70 (2Н, m) 1,33 (3Н, d, J=6,8 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [М+Н]; MP: 197-199°С.
Пример 10: 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (22) и соответствующая гидрохлоридная соль (22а)
(a) 3-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (21)
3
2
4
+
Смесь пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амина (2) (250 мг, 0,85 ммоль) и 3-амино-1,1,1-трифторпропан-2-ола (221 мг, 1,71 ммоль) в THF (7 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавляли насыщенный раствор NaHCO (30 мл), полученную суспензию экстрагировали с помощью дихлорметана (3×10 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (3:1) до РЕ/EtOAc (1:9) с получением 3-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола (21) (277 мг, 84% выход). ESI-MS (масса/заряд): 385, 387, 389 [М+Н].
(b) 3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1 -трифторпропан-2-ол (22)
1
+
3
3-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (21) (277 мг, 0,72 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле при 125°C с помощью процедуры, описанной для соединения 4, с получением 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола (22) (250 мг, 93% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,69-6,87 (2Н, m) 6,55-6,46 (1H, m) 4,73-4,58 (2Н, m) 4,26-4,14 (1Н, m) 3,90-3,74 (2Н, m) 3,51-3,40 (2Н, m) 2,96 (3Н, d, J=5,0 Гц) 2,95 (3Н, d, J=5,0 Гц) 1,69 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,0 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 375 [М+Н].
(c) 3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1 -трифторпропан-2-ола гидрохлорид (22а)
1
+
3
3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (22) (220 мг, 0,59 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедуры, описанной для соединения 12а, с получением 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола гидрохлорида (22а) (185 мг, 76% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 13,89-13,57 (1Н, m) 8,29-8,09 (1H, m) 7,60-7,45 (1H, m) 6,35-6,15 (1Н, m) 5,35-5,18 (1Н, m) 4,99-4,86 (1Н, m) 4,42-4,27 (1Н, m) 3,91-3,69 (2Н, m) 3,68-3,57 (2Н, m) 3,10-3,02 (3Н, m) 2,96 (3Н, d, J=4,8 Гц) 1,76 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,04 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 375 [M+H]; MP: 230-232°С.
Пример 11: 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (24) и соответствующая гидрохлоридная соль (24а)
(a) 1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (23)
2
2
2
2
3
1
+
Пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амин (2) (350 мг, 1,20 ммоль) и 1-аминобутан-2-ол вводили в реакцию в бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 9. Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (4:1) в качестве элюента с получением с получением 1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола (23) (350 мг, 84% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,29 (1Н, t, J=5,7 Гц) 6,90 (1H, t, J=5,7 Гц) 3,89-3,74 (2Н, m) 3,60-3,45 (3H, m) 2,63 (1Н, d, J=3,8 Гц) 1,72 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,67-1,51 (2Н, m) 1,03 (3H, t, J=7,4 Гц) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 345, 347, 349 [М+Н].
(b) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (24)
2
2
2
2
3
1
+
1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (23) (350 мг, 1,01 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 4. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9:1) до CHCl/EtOAc (1:4) в качестве элюента с получением 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола (24) (275 мг, 81% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,96-6,80 (1H, m) 6,57-6,43 (1Н, m) 4,92 (1Н, s) 4,72-4,50 (2Н, m) 3,84-3,69 (1Н, m) 3,63 (1Н, ddd, J=14,3, 6,3, 2,1 Гц) 3,56-3,38 (3H, m) 2,96 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,94 (3H, d, J=5,2 Гц) 1,68 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,60-1,45 (2Н, m) 0,99 (6Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(с) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорид (24а)
1
+
3
1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (24) (270 мг, 0,81 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире вводили в реакцию с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорида (24а) (240 мг, 80% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm) 3,85-3,72 (2Н, m) 3,58 (2Н, t, J=7,1 Гц) 3,49 (1Н, dd, J=14,3, 8,3 Гц) 3,00 (6Н, s) 1,75 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,66-1,42 (2Н, m) 1,02 (6Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
Пример 12: 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (26) и соответствующая гидрохлоридная соль (26а)
(a) 3-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (25)
1
+
3
Пропил-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-амин (2) (360 мг, 1,23 ммоль) и 3-аминобутан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 21. Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (95:5) до РЕ/EtOAc (5:95) с получением 3-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола (25) (330 мг, 78% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,14 (1Н, d, J=8,6 Гц) 6,91 (1Н, t, J=5,6 Гц) 4,38-4,24 (1H, m) 4,01-3,89 (1Н, m) 3,61-3,49 (2Н, m) 2,53 (1Н, d, J=3,5 Гц) 1,79-1,65 (2Н, m) 1,34 (3H, d, J=6,7 Гц) 1,26 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 345, 347, 349 [М+Н].
(b) 3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (26)
1
+
3
3-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (25) (330 мг, 0,95 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле при 120°C с помощью процедуры, описанной для соединения 4, с получением 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола (26) (208 мг, 66% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,60 (1Н, d, J=6,3 Гц) 6,54-6,48 (1H, m) 4,68-4,54 (2H, m) 4,35 (1H, br s) 4,0 (1H, секстет, J=6,8 Гц) 3,82 (1H, пентет, J=6,2 Гц) 3,49-3,43 (2H, m) 2,96 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,94 (3H, d, J=5,2 Гц) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,32 (3H, d, J=6,8 Гц) 1,23 (3H, d, J=6,2 Гц) 0,99 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(с) 3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорид (26а)
1
+
3
3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ол (26) (208 мг, 0,62 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорида (26а) (170 мг, 74% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,43-4,35 (1Н, m) 3,96-3,89 (1H, m) 3,59 (2Н, t, J=7,2 Гц) 3,02 (3H, s) 3,01 (3H, s) 1,76 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,32 (3H, d, J=6,7 Гц) 1,21 (3H, d, J=6,4 Гц) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
Пример 13: 2-(2,6-бис-эталамино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (27) и соответствующая гидрохлоридная соль (27а)
(а) 2-(2,6-Бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (27)
2
4
2
2
2
2
3
1
+
Смесь 2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (3) (250 мг, 0,79 ммоль) и этиламина (70% водный раствор) (1,20 мл) в н-бутаноле (2 мл) нагревали при 120°С в течение 48 ч в закрытом сосуде. После охлаждения насыщенный раствор NaCl (20 мл) добавляли и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99:1) до CHCl/EtOAc (9:1) с получением 2-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (27) (220 мг, 83% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,90 (1Н, s) 6,49 (1H, s) 4,62 (2H, br s) 4,52 (1H, s) 3,88-3,84 (2H, m) 3,71-3,64 (2H, m) 3,50-3,34 (6H, m) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,23 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,22 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(b) 2-(2,6-Бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорид (27a)
1
+
3
2-(2,6-Бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (27) (190 мг, 0,62 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/этанол (2/1) с помощью процедуры, описанной для соединения 12а, с получением 2-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорида (27а) (185 мг, 88% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,82-3,77 (2Н, m) 3,76-3,65 (2Н, m) 3,56 (2Н, t, J=7,0 Гц) 3,53-3,41 (4Н, m) 1,79-1,68 (2Н, m) 1,30-1,19 (6Н, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н]; MP: 192-194°С.
Пример 14: 2-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифтор-этиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (28) и соответствующая гидрохлоридная соль (28а)
(а) 2-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифтор-этиламино)-пиримидо[5,4-d] пиримидин-4-иламино]-этанол (28)
1
+
6
Смесь 2-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (3) (240 мг, 0,76 ммоль) и 2,2,2-трифторэтиламина (726 мкл, 9,12 ммоль) в н-бутаноле (2 мл) нагревали при 120°С в течение 72 ч в закрытом сосуде. Реакционную смесь охлаждали и осадок фильтровали, промывали этанолом (2×5 мл) и высушивали с получением 2-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (28) (310 мг, 92% выход). 400 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 8,3-7,6 (1Н, br s) 7,41 (1H, br s) 4,36-4,18 (4H, m) 3,72-3,37 (6H, m, перекрывается водой) 1,63 (2H, секстет, J=7,3 Гц) 0,92 (3H, t, J=7,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 443 [М+Н].
(b) 2-[8-Пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d] пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорид (28а)
2
2
3
1
+
2-[8-Пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (28) (250 мг, 0,57 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в CHCl с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 2-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]этанола гидрохлорида (28а) (250 мг, 92% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,28 (2Н, q, J=9,1 Гц) 4,27 (2Н, q, J=9,1 Гц) 3,83-3,78 (2Н, m) 3,77-3,72 (2Н, m) 3,60 (2Н, t, J=7,1 Гц) 1,80-1,70 (2Н, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 443 [М+Н]; MP: 254-255°С.
Пример 15: 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метил-пропан-2-ол (31) и соответствующая гидрохлоридная соль (31а)
(а) 2-Метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (29)
4
3
1
+
К суспензии 2,4,6,8-тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидина (1) (3,50 г, 13,01 ммоль) в THF (200 мл) при -78°С посредством шприцевого насоса добавляли 1-амино-2-метилпропан-2-ол (1,17 мл, 12,36 ммоль) в THF (20 мл)(в течение приблизительно 30 мин), а затем DIPEA (2,93 мл, 16,91 ммоль) в THF (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительных 30 мин, а затем обеспечивали достижение комнатной температуры. Добавляли воду (250 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (150 мл), затем солевым раствором (150 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (10:4) до РЕ/EtOAc (1:1) с получением 2-метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (29) (3,67 г, 92% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,70-7,58 (1Н, m) 3,70 (2H, d, J=6,1 Гц) 1,80 (1H, s) 1,36 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 322, 324, 326, 328 [M+H].
(b) 1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (30)
3
4
3
1
+
Пропиламин (1,03 мл, 12,50 ммоль) и DIPEA (2,56 мл, 14,79 ммоль) добавляли к раствору 2-метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (29) (3,67 г, 11,38 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. По прошествии этого времени добавляли насыщенный NaHCO (100 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью дихлорметана (3×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (100 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (5:1) до РЕ/EtOAc (2:1) с получением 1-(2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (30) (3,10 г, 79% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,28 (1Н, t, J=6,2 Гц) 6,94-6,84 (1H, m) 3,62 (2H, d, J=6,2 Гц) 3,60-3,51 (2H, m) 2,36 (1H, s) 1,72 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,32 (6H, s) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 345, 347, 349 [M+H].
(c) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (31)
3
4
2
2
2
2
3
1
+
1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (30) (3,10 г, 8,98 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) (7,7 мл) вводили в реакцию в н-бутаноле (20 мл), нагретом при 115°С в течение 72 ч. После охлаждения насыщенный раствор NaHCO (100 мл) добавляли и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×75 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (100 мл), затем солевым раствором (100 мл) и, наконец, высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/МеОН (99:1) до CHCl/МеОН (95:5) с получением 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31) (2,30 г, 77% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,98-6,83 (1H, m) 6,55-6,45 (1H, m) 5,24-5,06 (1H, m) 4,70-4,53 (2H, m) 3,52 (2H, d, J=6,3 Гц) 3,50-3,41 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,94 (3H, d, J=5,1 Гц) 1,76-1,61 (2H, m) 1,27 (6H, s) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(d) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (31a)
1
+
3
15
27
8
Раствор 2 M HCl/диэтиловый эфир (3,42 мл, 6,84 ммоль) добавляли к раствору 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31) (2,30 г, 6,88 ммоль) в диэтиловом эфире (60 мл) и этаноле (3 мл). Смесь перемешивали в течение 0,5 ч при комнатной температуре и полученный осадок фильтровали и промывали диэтиловым эфиром (60 мл) с получением 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (31а) (2,36 г, 92% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,64 (2Н, s) 3,57 (2Н, t, J=7,2 Н) 3,00 (6Н, s) 1,82-1,67 (2Н, m) 1,27 (6Н, s) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н]; MP: 205-208°C. Анал. рассч. для CHClNO: С, 48,58; Н, 7,34; N, 30,21. Обнаружено: С, 48,33; Н, 7,34; N, 30,00.
Пример 16: 1-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (32) и соответствующая гидрохлоридная соль (32а)
(а) 1-(2,6-Бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (32)
1
+
3
1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (30) (300 мг, 0,87 ммоль) вводили в реакцию с этиламином (70% водный раствор) в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (27), с получением 1-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (32) (220 мг, 70% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,86 (1Н, t, J=6,3 Гц) 6,46 (1Н, t, J=5,8 Гц) 5,21 (1Н, s) 4,58 (1H, t, J=5,5 Гц) 4,51 (1Н, t, J=5,5 Гц) 3,51 (2Н, d, J=6,3 Гц) 3,49-3,33 (6Н, m) 1,75-1,61 (2Н, m) 1,27 (6Н, s) 1,23 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,21 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 363 [M+H].
(b) 1-(2,6-Бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (32а)
1
+
3
1-(2,6-Бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-(3]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (32) (175 мг, 0,48 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/метанол (1/1) с помощью процедуры, описанной для соединения 12а, с получением 1-(2,6-бис-этиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (32а) (170 мг, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,64 (2Н, s) 3,56 (2Н, t, J=7,1 Гц) 3,48 (4Н, q, J=7,1 Гц) 1,83-1,65 (2Н, m) 1,36-1,14 (12Н, m) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 363 [M+H]; MP: 199-201°C.
Пример 17: 1-[2,6-бис-(2,2-дифторэтиламино)-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (33) и соответствующая гидрохлоридная соль(33а)
(а) 1-[2,6-Бис-(2,2-дифторэтиламино)-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (33)
1
+
3
1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (30) (300 мг, 0,87 ммоль) и 2,2-дифторэтиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (5:1) до РЕ/EtOAc (1:1) с получением 1-[2,6-бис-(2,2-дифторэтиламино)-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (33) (200 мг, 53% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,85 (1Н, t, J=6,0 Гц) 6,47 (1H, t, J=6,0 Гц) 5,97 (1H, tt, J=56,5, 4,3 Гц) 5,94 (1H, tt, J=56,5, 4,3 Гц) 4,94-4,80 (2H, m) 3,88-3,68 (5H, m) 3,53 (2H, d, J=6,4 Гц) 3,51-3,42 (2H, m) 1,76-1,62 (2H, m) 1,29 (6H, s) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 435 [M+H].
(b) 1-[2,6-Бис-(2,2-дифторэтиламино)-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (33а)
1
+
3
1-[2,6-Бис-(2,2-дифторэтиламино)-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метил-пропан-2-ол (33) (170 мг, 0,39 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 M HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 1-[2,6-бис-(2,2-дифторэтиламино)-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (33а) (170 мг, 92% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 6,04 (2Н, t, J=56,5 Гц) 3,98-3,73 (4Н, m) 3,64 (2Н, s) 3,62-3,51 (2Н, m) 1,81-1,66 (2Н, m) 1,28 (6Н, s) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 435 [М+Н]; MP: 245-247°C.
Пример 18: 2-метил-1-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-пропан-2-ол (34) и соответствующая гидрохлоридная соль (34а)
(a) 2-Метил-1-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-пропан-2-ол (34)
1
+
3
1-(2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (30) (300 мг, 0,87 ммоль) и 2,2,2-трифторэтиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, используемых ранее, с получением 2-метил-1-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-пропан-2-ола (34) (390 мг, 95% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,34-4,14 (4Н, m) 3,66 (2Н, s) 3,60 (2Н, t, J=6,8 Гц) 1,82-1,66 (2Н, m) 1,28 (6Н, s) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 471 [М+Н].
(b) 2-Метил-1-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (34а)
1
+
6
2-Метил-1-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-пропан-2-ол (34) (344 мг, 0,73 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в метаноле с помощью процедуры, описанной для соединения 12а, с получением 2-метил-1-[8-пропиламино-2,6-бис-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (34а) (255 мг, 69% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 9,6-7,8 (3Н, m) 7,68 (1Н, s) 7,53 (1H, s) 4,4-3,9 (4H, m, перекрывается водой) 3,58-3,38 (4H, m) 1,72-1,55 (2H, m) 1,17 (6H, s) 0,93 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 471 [M+H]; MP: 257-259°C.
Пример 19: 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (36) и соответствующая гидрохлоридная соль (36а)
(a) 1-[2,6-дихлор-8-(2,2-дифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (35)
+
2-Метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (29) (550 мг, 1,71 ммоль) и 2,2-дифторэтиламин в THF вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-[2,6-дихлор-8-(2,2-дифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (35) (609 мг, 97% выход). ESI-MS (масса/заряд): 367, 369, 371 [М+Н].
(b) 1-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (36)
1
+
3
1-[2,6-Дихлор-8-(2,2-дифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (35) (300 мг, 0,82 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле при 125°C с помощью процедуры, описанной для соединения (4), с получением 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (36) (172 мг, 59% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,89 (1Н, t, J=5,0 Гц) 6,63 (1H, t, J=5,0 Гц) 6,0 (1H, tt, J=56,4, 4,4 Гц) 4,84 (1H, s) 4,69-4,56 (2H, m) 3,96-3,84 (2H, m) 3,54 (2H, d, J=6,4 Гц) 2,97 (3Н, d, J=5,2 Гц) 2,94 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,28 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 357 [М+Н].
(с) 1-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (36а)
2
2
3
1
+
1-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (36) (150 мг, 0,42 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в CHCl (7 мл) с помощью процедуры, описанной для соединения (12а), с получением 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (36а) (335 мг, 82% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 8,18-7,85 (2Н, m) 7,66 (1Н, br s) 6,67-6,38 (1H, m) 6,05 (1H, tt, J=56,0, 4,2 Гц) 4,94 (1H, br s) 4,15-3,85 (2H, m) 3,70-3,52 (2H, m) 3,10-2,89 (6H, m) 1,34 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 357 [M+H]; MP: 223-225°C.
Пример 20: 1-{2,6-бис-метиламино-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ол (38) и соответствующая гидрохлоридная соль (38а)
(a) 1-{2,6-дихлор-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ол (37)
1
+
3
Смесь 2-метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (29) (250 мг, 0,78 ммоль), пиримидин-2-илметанамина (114 мг, 0,78 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (272 мкл, 1,56 ммоль) в н-бутаноле (4 мл) нагревали при 70°C в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, осадок фильтровали, промывали н-бутанолом (3 мл), затем этанолом (3 мл) и высушивали с получением 1-{2,6-дихлор-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ола (37) (300 мг, 97% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 8,78 (2Н, d, J=4,9 Гц) 8,09 (1Н, t, J=5,0 Гц) 7,33-7,23 (1H, m) 7,27 (1H, t, J=4,9 Гц) 5,02 (2H, d, J=5,0 Гц) 3,64 (2H, d, J=6,3 Гц) 2,28 (1H, s) 1,33 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 395, 397, 399 [M+H].
(b) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ол (38)
3
4
2
2
2
2
3
1
+
1-{2,6-Дихлор-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ол (37) (300 мг, 0,76 ммоль) и метиламин (1 мл, 40% водный раствор) нагревали в DMSO (2 мл) при 115°C в течение 72 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NAHCO (100 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (10 мл), затем солевым раствором (10 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOH (4:1) с получением чистого 1-{2,6-бис-метиламино-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ола (38) (120 мг, 41% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 8,76 (2Н, d, J=4,9 Гц) 7,67-7,57 (1Н, m) 7,22 (1Н, t, J=4,9 Гц) 6,96-6,84 (1H, m) 5,27 (1H, br s) 4,95 (2Н, d, J=5,1 Гц) 4,71-4,57 (2Н, m) 3,54 (2Н, d, J=6,3 Гц) 2,99 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,96 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,28 (6Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 385 [М+Н].
(с) 1-{2,6-Бис-метиламино-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (38а)
1
+
3
1-{2,6-Бис-метиламино-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ол (38) (110 мг, 0,29 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/EtOH (5/1) с помощью процедуры, описанной для соединения (6а), с получением 1-{2,6-бис-метиламино-8-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино}-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (38а) (110 мг, 90% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 8,78 (2Н, d, J=5,0 Гц) 7,42 (1Н, t, J=5,0 Гц) 4,99 (2Н, s) 3,66 (2Н, s) 3,03 (3Н, s) 2,86 (3Н, s) 1,28 (6Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 385 [М+Н]; MP: 169-170°C.
Пример 21: 1-[8-((R)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (40) и соответствующий гидрохлорид (40а)
(a) (R)-1-(8-втор-бутиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (39)
2
2
4
3
1
+
Смесь 2-метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (29) (250 мг, 0,78 ммоль) и (R)-бутан-2-амина (93 мкл, 0,93 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (202 мкл, 1,17 ммоль) в CHCl (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли воду (10 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью метиленхлорида (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и продукт фильтровали через подушку из силикагеля с помощью РЕ/EtOAc в качестве элюента с получением после ротационного выпаривания (R)-1-(8-втор-бутиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (39) (255 мг, 91% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,29 (1Н, t, J=6,2 Гц) 6,69 (1Н, d, J=8,7 Гц) 4,36-4,20 (1Н, m) 3,62 (2Н, d, J=6,2 Гц) 2,36 (1Н, s) 1,71-1,58 (2Н, m) 1,32 (6Н, s) 1,28 (3Н, d, J=6,6 Гц) 0,97 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 359, 361, 363 [М+Н].
(b) 1-[8-((R)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (40)
4
3
1
+
(R)-1-(8-втор-бутиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (39) (250 мг, 0,70 ммоль) и метиламин (40% водный раствор, 700 мкл) вводили в реакцию в н-бутаноле (3 мл) при 125°C в течение 96 ч. Добавляли насыщенный раствор бикарбоната натрия (10 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетона (10:1) до РЕ/ацетона (4:1) с получением 1-[8-((R)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (40) (176 мг, 73% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,95-6,82 (1Н, m) 6,29 (1Н, d, J=8,3 Гц) 5,28 (1Н, br s) 4,70-4,49 (2H, m) 4,22-4,02 (1H, m) 3,52 (2H, d, J=6,3 Гц) 2,98-2,91 (6H, m) 1,72-1,50 (2H, m) 1,27 (6H, s) 1,26 (3H, t, J=6,7 Гц) 0,96 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H].
(c) 1-[8-((R)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (40a)
1
+
3
1-[8-((R)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (40) (176 мг, 0,51 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/EtOH (5/1) с помощью процедуры, описанной для соединения (6а), с получением 1-[8-((R)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (40а) (170 мг, 87% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,40-4,20 (1Н, m) 3,65 (2Н, s) 3,11-2,86 (6Н, m) 1,80-1,58 (2Н, m) 1,35-1,22 (3Н, m) 1,27 (6Н, s) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н]; MP: 173-175°C.
Пример 22: 1-[8-((S)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (42) и соответствующая гидрохлоридная соль(42а)
(а) (S)-1-(8-втор-бутиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (41)
2
2
3
1
+
2-Метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (29) (250 мг, 0,78 ммоль) и (S)-бутан-2-амин в CHCl вводили в реакцию с помощью процедуры, описанной для соединения (39), с получением (S)-1-(8-втор-бутиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (41) (253 мг, 90% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,31-7,24 (1Н, m) 6,68 (1Н, d, J=8,7 Гц) 4,36-4,20 (1Н, m) 3,62 (2Н, d, J=6,2 Гц) 2,36 (1Н, s) 1,71-1,58 (2Н, m) 1,32 (6Н, s) 1,28 (3Н, d, J=6,6 Гц) 0,97 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 359, 361, 363 [М+Н].
(b) 1-[8-((S)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (42)
1
+
3
(S)-1-(8-втор-бутиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (41) (250 мг, 0,70 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле при 125°C с помощью процедуры, описанной для соединения (4), с получением 1-[8-((S)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (42) (180 мг, 74% выход). 300 МГц H-ЯМР (CDCl, ppm): 6,95-6,82 (1Н, m) 6,29 (1H, d, J=8,3 Гц) 5,19 (1H, br s) 4,66-4,51 (2H, m) 4,22-4,02 (1H, m) 3,53 (2H, d, J=6,3 Гц) 2,98-2,91 (6H, m) 1,72-1,50 (2H, m) 1,27 (6H, s) 1,26 (3H, t, J=6,7 Гц) 0,96 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H].
(c) 1-[8-((S)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (42a)
1
+
3
1-[8-((S)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (42) (150 мг, 0,43 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/EtOH (5/1) с помощью процедуры, описанной для соединения (6а), с получением 1-[8-((S)-втор-бутиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (42а) (155 мг, 94% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,40-4,20 (1Н, m) 3,65 (2Н, s) 3,00 (3Н, s) 2,98 (3Н, s) 1,80-1,58 (2Н, m) 1,35-1,22 (3Н, m) 1,27 (6Н, s) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н]; MP: 170-172°C.
Пример 23: 1-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (44) и соответствующая гидрохлоридная соль (44а)
(а) 1-(8-бензиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (43)
2
4
2
2
2
2
3
1
+
2-Метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (29) (250 мг, 0,78 ммоль), бензиламин (102 мкл, 0,93 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (202 мкл, 1,17 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли воду (10 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (9:1) с получением 1-(8-бензиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (43) (290 мг, 95% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,40-7,28 (6Н, m) 7,14 (1Н, t, J=5,9 Гц) 4,78 (2Н, d, J=5,9 Гц) 3,63 (2Н, d, J=6,3 Гц) 2,19 (1Н, br s) 1,32 (6Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 393, 395, 397 [М+Н].
(b) 1-(8-Бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (44)
3
2
4
2
2
2
2
3
1
+
1-(8-Бензиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (43) (280 мг, 0,71 ммоль) и метиламин (40% водный раствор, 1,1 мл) вводили в реакцию в н-бутаноле (6 мл) при 120°C в течение 72 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (10 мл), полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9:1) до CHCl/EtOAc (1:4) в качестве элюента с получением чистого 1-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (44) (212 мг, 78% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,38-7,24 (5Н, m) 6,98-6,89 (1H, m) 6,87-6,79 (1Н, m) 5,10 (1Н, s) 4,73 (2Н, d, J=6,1 Гц) 4,68 (1Н, br s) 4,63-4,55 (1H, m) 3,52 (2Н, d, J=6,3 Гц) 2,97 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,90 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,27 (6Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 383 [М+Н].
(c) 1-(8-Бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (44а)
1
+
3
1-(8-Бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ол (44) (175 мг, 0,46 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире/МеОН (5/1) с помощью процедуры, описанной для соединения (6а), с получением 1-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (44а) (155 мг, 80% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,44-7,40 (2Н, m) 7,38-7,32 (2Н, m) 7,31-7,26 (1Н, m) 4,79 (2H, s) 3,65 (2H, s) 3,00 (3Н, s) 2,98 (3Н, s) 1,28 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 383 [M+H]; MP: 227-228°C.
Пример 24: 1-[8-(Циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-метилпропан-2-ол (46) и соответствующая гидрохлоридная соль (46а)
(a) 1-[2,6-дихлор-8-(циклопропилметиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (45)
2
4
2
2
2
2
+
2-Метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (29) (250 мг, 0,78 ммоль) и циклопропилметанамин (80 мкл, 0,93 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (202 мкл, 1,17 ммоль) перемешивали в н-бутаноле (5 мл) при температуре окружающей среды в течение 3 ч. Добавляли воду (10 мл), полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99:1) до CHCl/EtOAc (9:1) в качестве элюента с получением 1-[2,6-дихлор-8-(циклопропилметиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (45) (200 мг, 72% выход). ESI-MS (масса/заряд): 357, 359, 361 [М+Н].
(b) 1-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (46)
3
2
4
2
2
2
2
3
1
+
1-[2,6-Дихлор-8-(циклопропилметиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (45) (200 мг, 0,56 ммоль) и метиламин (40% водный раствор, 870 мкл) нагревали в н-бутаноле (6 мл) при 120°C в течение 72 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (10 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования и удаления растворителей продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9:1) до CHCl/EtOAc (1:4) в качестве элюента с получением 1-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (46) (180 мг, 93% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,91 (1Н, br s) 6,58 (1H, br s) 5,13 (1Н, br s) 4,60 (2Н, s) 3,53 (2Н, d, J=6,3 Гц) 3,40-3,32 (2Н, m) 2,99-2,93 (6Н, m) 1,28 (6Н, s) 1,18-1,07 (1Н, m) 0,59-0,52 (2H, m) 0,33-0,28 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H].
(с) 1-[8-(Циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (46а)
1
+
3
1-[8-(Циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (46) (180 мг, 0,52 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедур, описанных ранее, с получением 1-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (46а) (145 мг, 73% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,66 (2Н, s) 3,47 (2Н, d, J=7,2 Гц) 3,02 (3Н, s) 3,00 (3Н, s) 1,28 (s, 6Н), 1,26-1,14 (1Н, m) 0,63-0,56 (2Н, m) 0,39-0,33 (2Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 347 [М+Н]; MP: 215-216°C.
Пример 25: 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (47) и соответствующая гидрохлоридная соль(47а)
(а) 1-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (47)
1
+
3
1-[2,6-Дихлор-8-(2,2-дифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (35) (300 мг, 0,82 ммоль) и этиламин (70% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (32), с получением 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола (47) (262 мг, 83% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,92-6,81 (1Н, m) 6,66-6,53 (1H, m) 6,0 (1H, tt, J=56,4, 4,4 Гц) 4,89 (1H, s) 4,63 (1H, t, J=5,0 Гц) 4,59-4,52 (1H, m) 3,95-3,83 (2H, m) 3,52 (2H, d, J=6,3 Гц) 3,46-3,35 (4H, m) 1,28 (6H, s) 1,23 (3H, t, J=7,4 Гц) 1,21 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 385 [M+H].
(b) 1-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (47a)
2
2
3
1
+
1-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ол (47) (200 мг, 0,52 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в CHCl с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (47а) (170 мг, 78% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 8,24-7,97 (1Н, m) 7,89 (1H, br s) 7,61 (1Н, br s) 6,71-6,45 (1Н, m) 6,20-5,88 (1Н, m) 4,95-4,85 (1Н, m) 4,12-3,85 (2Н, m) 3,69-3,35 (6Н, m) 1,34 (6Н, s) 1,30-1,20 (6Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 385 [М+Н]; MP: 233-235°C.
Пример 26: 2-метил-1-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (48) и соответствующая гидрохлоридная соль (48а)
(а) 2-Метил-1-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (48)
3
2
4
3
1
+
Смесь 2-метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (29) (400 мг, 1,24 ммоль) и метиламина (40% водный раствор) (1,00 мл, 12,87 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, а затем нагревали при 120°C в течение 96 ч в закрытом сосуде. По прошествии этого времени добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл), затем солевым раствором (30 мл) и, наконец, высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетона (5:1) до РЕ/ацетона (1:1) с получением 2-метил-1-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (48) (345 мг, 91% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,21 (1Н, s) 6,28 (1H, s) 6,36-5,94 (1H, br s) 4,87 (1H, s) 3,52 (2H, d, J=6,0 Гц) 3,10 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,99 (3Н, d, J=5,0 Гц) 2,93 (3Н, d, J=5,0 Гц) 1,28 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 307 [M+H].
(b) 2-Метил-1-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (48a)
1
+
3
2-Метил-1-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (62) (310 мг, 1,01 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (1/1) с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-метил-1-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (48а) (290 мг, 84% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,65 (2Н, s) 3,13 (3Н, s) 3,09 (3Н, s) 2,99 (3Н, s) 1,28 (6Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 307 [М+Н]; MP: 213-215°C.
Пример 27: 2-Метил-1-(2,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (49) и соответствующая гидрохлоридная соль (49а)
(а) 2-Метил-1-(2,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (49)
1
+
3
2-Метил-1-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (29) (300 мг, 0,93 ммоль) и этиламин (70% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле (5 мл) с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (5:1) до РЕ/EtOAc (1:2) с получением 2-метил-1-(2,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола (49) (210 мг, 65% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,92-6,80 (1Н, m) 6,45-6,34 (1H, m) 5,24-5,14 (1H, m) 4,64-4,55 (1H, m) 4,55-4,46 (1H, m) 3,58-3,48 (4H, m) 3,48-3,33 (4H, m) 1,32-1,17 (9H, m) 1,27 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H].
(b) 2-Метил-1-(2,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (49a)
1
+
3
2-Метил-1-(2,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ол (49) (190 мг, 0,55 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/EtOH (1/1) с помощью процедур, описанных ранее, с получением 2-метил-1-(2,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (49а) (205 мг, 97% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,69-3,55 (4Н, m) 3,55-3,38 (4Н, m) 1,27 (6Н, s) 1,34-1,19 (9Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н]; MP: 192-194°C.
Пример 28: 2-(2,6,8-Трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (52) и соответствующая гидрохлоридная соль (52а)
(а) 2-(2,6,8-Трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (50)
4
3
1
+
К суспензии 2,4,6,8-тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидина (1) (1,00 г, 3,70 ммоль) в THF (50 мл) при -78°C по каплям добавляли 2-аминоэтанол (200 мкл, 3,32 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (900 мкл, 5,18 ммоль) в THF (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч, а затем обеспечивали достижение комнатной температуры. Добавляли воду (50 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (50 мл), затем солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью РЕ/EtOAc (1:1) в качестве элюента с получением 2-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (50) (860 мг, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,61 (1Н, s) 3,99-3,93 (2Н, m) 3,91-3,83 (2Н, m) 1,99 (1Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 294, 296, 298, 300 [M+H].
(b) 2-(2,6-Дихлор-8-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (51)
3
2
4
6
1
+
Метиламин (2 M в THF, 2,04 мл, 2,04 ммоль) добавляли к раствору 2-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (50) (300 мг, 1,02 ммоль) в THF (5 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. По прошествии этого времени насыщенный раствор NaHCO (20 мл) добавляли и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (50 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (5:1) до РЕ/EtOAc (1:1) с получением 2-(2,6-дихлор-8-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (51) (180 мг, 61% выход). 400 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 8,68 (1H, q, J=4,2 Гц) 8,44 (1Н, s) 4,84 (1H, t, J=5,5 Гц) 3,61-3,55 (2H, m) 3,54-3,48 (2H, m) 2,93 (3Н, d, J=4,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 289, 291, 293 [M+H].
(c) 2-(2,6,8-Трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (52)
1
+
3
2-(2,6-Дихлор-8-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (51) (171 мг, 0,59 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле при 125°C с помощью процедуры, описанной для соединения (4), с получением 2-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (52) (112 мг, 68% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,99-6,87 (1Н, m) 6,54-6,41 (1H, m) 4,73-4,65 (1H, m) 4,63-4,54 (1H, m) 3,89-3,84 (2H, m) 3,72-3,65 (2H, m) 3,07 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,97 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,96 (3Н, d, J=5,1 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 279 [M+H].
(d) 2-(2,6,8-Трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорид (52a)
2
2
2
1
+
Для 2-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (52) (112 мг, 0,40 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир в CHCl применяли процедуры, описанные в другом месте в данном документе, с получением 2-(2,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорида (52а) (110 мг, 87% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 3,83 (2Н, t, J=5,4 Гц) 3,66 (2Н, t, J=5,4 Гц) 3,03 (3Н, s) 2,95 (3Н, s) 2,90 (3Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 279 [М+Н]; MP: 252-254°C.
Пример 29: 2-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (54) и соответствующая гидрохлоридная соль (54а)
(a) 2-[2,6-Дихлор-8-(циклопропилметиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (53)
1
+
6
2-(2,6,8-Трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (50) (300 мг, 1,02 ммоль) и циклопропилметанамин вводили в реакцию в THF с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-[2,6-дихлор-8-(циклопропилметиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (53) (244 мг, 73% выход). 400 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 8,77 (1Н, t, J=6,0 Гц) 8,45 (1H, t, J=5,7 Гц) 4,84 (1H, t, J=5,5 Гц) 3,61-3,55 (2H, m) 3,55-3,48 (2H, m) 3,32-3,27 (2H, m) 1,20-1,09 (1H, m) 0,48-0,40 (2H, m) 0,33-0,26 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 329, 331, 333 [M+H].
(b) 2-[8-(Циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (54)
1
+
3
2-[2,6-Дихлор-8-(циклопропилметиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (53) (244 мг, 0,74 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в 1,4-диоксане при 125°C с помощью процедуры, описанной для соединения (4). Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от EtOAc до EtOAc/EtOH (9:1) в качестве элюента с получением 2-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (54) (80 мг, 34% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,98-6,87 (1Н, m) 6,62-6,52 (1Н, m) 4,76-4,54 (3Н, m) 3,89-3,84 (2Н, m) 3,73-3,66 (2Н, m) 3,35 (2Н, dd, J=7,7, 5,6 Гц) 2,97 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,96 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,18-1,07 (1Н, m) 0,60-0,52 (2Н, m) 0,33-0,27 (2Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 319 [М+Н].
(c) 2-[8-(Циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорид (54а)
2
2
2
1
+
2-[8-(Циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (54) (80 мг, 0,25 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в CHCl с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-[8-(циклопропилметиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорида (54а) (75 мг, 84% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 3,83 (2Н, t, J=5,4 Гц) 3,67 (2Н, t, J=5,4) 3,31 (2Н, d, J=7,1 Гц) 2,93 (3Н, s) 2,91(3Н, s) 1,20-1,06 (1Н, m) 0,62-0,53 (2H, m) 0,34-0,27 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 319 [M+H]; MP: 206-208°C.
Пример 30: 2-[8-(2-Метоксиэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (56)и соответствующая гидрохлоридная соль (56а)
(a) 2-[2,6-Дихлор-8-(2-метоксиэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (55)
1
+
6
2-(2,6,8-Трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (50) (300 мг, 1,02 ммоль) и 2-метоксиэтиламин вводили в реакцию в THF с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-[2,6-дихлор-8-(2-метоксиэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (55) (246 мг, 72% выход). 400 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 8,54 (1Н, t, J=5,9 Гц) 8,47 (1H, t, J=5,7 Гц) 4,84 (1H, t, J=5,5 Гц) 3,64-3,56 (4H, m) 3,56-3,48 (4H, m) 3,27 (3H, s). ESI-MS (масса/заряд): 333, 335, 337 [M+H].
(b) 2-[8-(2-Метоксиэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (56)
1
+
3
2-[2,6-Дихлор-8-(2-метоксиэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (55) (240 мг, 0,72 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле при 125°C с помощью процедуры, описанной для соединения (4). Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от EtOAc до EtOAc/EtOH (9:1) в качестве элюента с получением чистого 2-[8-(2-метоксиэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (56) (111 мг, 48% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,95-6,87 (1Н, m) 6,79-6,71 (1Н, m) 4,70-4,53 (3Н, m) 3,89-3,84 (2Н, m) 3,74-3,65 (4Н, m) 3,64-3,58 (2Н, m) 3,40 (3Н, s) 2,98-2,93 (6Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 323 [M+H].
(с) 2-[8-(2-Метоксиэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорид (56а)
2
2
2
1
+
2-[8-(2-Метоксиэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (56) (111 мг, 0,34 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в CHCl с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-[8-(2-метоксиэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорида (56а) (115 мг, 93% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 3,82 (2Н, t, J=5,3 Гц) 3,75-3,60 (6Н, m) 3,41 (3Н, s) 2,93-2,85 (6Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 323 [М+Н]; MP: 160-162°C.
Пример 31: 2-(2,6-бис-метиламино-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (58) и соответствующая гидрохлоридная соль (58а)
(a) 2-(2,6-Дихлор-8-проп-2-иниламино-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (57)
1
+
6
2-(2,6,8-Трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (50) (300 мг, 1,02 ммоль) и проп-2-ин-1-амин вводили в реакцию в THF с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-(2,6-дихлор-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (57) (100 мг, 31% выход). 400 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 9,05 (1H, s) 8,55 1Н, t, J=5,7 Гц) 4,84 (1H, t, J=5,5 Гц) 4,18 (2H, s) 3,62-3,55 (2H, m) 3,55-3,49 (2H, m) 3,13 (1H, t, J=2,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 313, 315, 317 [M+H].
(b) 2-(2,6-Бис-метиламино-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (58)
3
4
3
1
+
Смесь 2-(2,6-дихлор-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (57) (100 мг, 0,32 ммоль) и метиламина (40% водный раствор) (330 мкл, 4,25 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) нагревали при 105°C в течение 18 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл), затем солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от EtOAc до EtOAc/EtOH (9:1) с получением 2-(2,6-бис-метиламино-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (58) (37 мг, 38% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,91 (1H, br s) 6,56 (1H, br s) 4,70 (1H, br s) 4,61 (1H, br s) 4,34-4,29 (2H, m) 3,90-3,84 (2H, m) 3,72-3,66 (2H, m) 2,99-2,94 (6H, m) 2,27-2,24 (1H, m). ESI-MS (масса/заряд): 303 [M+H].
(с) 2-(2,6-Бис-метиламино-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорид (58a)
2
2
2
1
+
2-(2,6-Бис-метиламино-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (58) (37 мг, 0,12 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в CHCl с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-(2,6-бис-метиламино-8-проп-2-иниламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорида (58а) (40 мг, 96% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 4,35-4,27 (2Н, m) 3,90-3,82 (2Н, m) 3,78-3,71 (2Н, m) 2,98 (3Н, s) 2,97 (3Н, s) 2,76-2,72 (1Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 303 [M+H]; MP: 240-242°C.
Пример 32: 2-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-этанол (60) и соответствующая гидрохлоридная соль (60а)
(а) 2-[2,6-Дихлор-8-(2,2-дифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (59)
1
+
3
2-(2,6,8-Трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (50) (240 мг, 0,81 ммоль) и 2,2-дифторэтиламин вводили в реакцию в THF с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-[2,6-дихлор-8-(2,2-дифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (59) (190 мг, 69% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,31 (1Н, s) 7,05 (1H, t, J=6,3 Гц) 6,04 (1H, tt, J=55,5, 4,1 Гц) 4,01 (2H, tdd, J=14,4, 6,5, 4,1 Гц) 3,97-3,89 (2H, m) 3,84-3,76 (2H, m) 2,30 (1H, J=5,1 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 339, 341, 343 [M+H].
(b) 2-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-этанол (60)
2
2
2
2
6
1
+
2-[2,6-Дихлор-8-(2,2-дифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (59) (240 мг, 0,61 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (4). Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/МеОН (95:5) с получением 2-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-этанола (60) (125 мг, 68% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 7,32 (1H, t, J=6,1 Гц) 7,05 (1Н, t, J=5,6 Гц) 6,28 (1H, q, J=4,6 Гц) 6,24 (1H, tt, J=56,5, 4,3 Гц) 6,16 (1H, q, J=4,6 Гц) 4,84 (1H, t, J=5,1 Гц) 3,93-3,73 (2H, m) 3,63-3,54 (2H, m) 3,53-3,44 (2H, m) 2,81 (3H, d, J=4,6 Гц) 2,79 (3Н, d, J=4,6 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 329 [M+H].
(c) 2-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорид (60a)
1
+
3
2-[8-(2,2-Дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-этанол (60) (125 мг, 0,38 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения (6а), с получением 2-[8-(2,2-дифторэтиламино)-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорида (60а) (125 мг, 90% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 6,14 (1Н, tt, J=56,2, 4,0 Гц) 3,98 (2H, td, J=14,9, 4,0 Гц) 3,84-3,69 (4H, m) 3,03 (3Н, s) 2,98 (3Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 329 [M+H]; MP: 213-215°C.
Пример 33: 2-[2,6-Бис-метиламино-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (62) и соответствующая гидрохлоридная соль (62а)
(a) 2-[2,6-Дихлор-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (61)
3
2
4
2
2
2
2
3
1
+
Смесь 2-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (50) (295 мг, 1,00 ммоль) и 2,2,2-трифторэтиламина (159 мкл, 2,00 ммоль) в н-бутаноле (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли насыщенный раствор NaHCO (10 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/MeOH (95:5) с получением чистого 2-[2,6-дихлор-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (61) (300 мг, 84% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,38-7,30 (1Н, m) 7,05 (1Н, t, J=6,4 Гц) 4,31 (2Н, qd, J=8,8, 6,8 Гц) 3,96-3,89 (2Н, m) 3,85-3,77 (2Н, m) 2,26 (1Н, t, J=5,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 357, 359, 361 [М+Н].
(b) 2-[2,6-Бис-метиламино-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (62)
2
2
2
2
3
1
+
2-[2,6-Дихлор-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (61) (290 мг, 0,81 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/МеОН (98:25) с получением 2-[2,6-бис-метиламино-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола (62) (242 мг, 86% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,99-6,86 (1H, m) 6,65 (1Н, t, J=5,8 Гц) 4,75-4,58 (2Н, m) 4,37 (1Н, s) 4,22 (2Н, qd, J=9,1, 6,8 Гц) 3,89-3,84 (2Н, m) 3,73-3,67 (2Н, m) 2,97 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,96 (3Н, d, J=5,1 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [М+Н].
(c) 2-[2,6-Бис-метиламино-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорид (62а)
1
+
3
2-[2,6-Бис-метиламино-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанол (62) (125 мг, 0,38 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (1/2) с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-[2,6-бис-метиламино-8-(2,2,2-трифторэтиламино)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино]-этанола гидрохлорида (62а) (210 мг, 95% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,38 (2Н, q, J=9,3 Гц) 3,85-3,69 (4H, m) 3,04 (3Н, s) 2,97 (3Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H]; MP: 253-254°C.
Пример 34: 2-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-этанол (64) и соответствующая гидрохлоридная соль (64а)
(a) 2-(8-бензиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (63)
1
+
3
2-(2,6,8-Трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (50) (400 мг, 1,36 ммоль) и бензиламин вводили в реакцию в дихлорметане с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-(8-бензиламино-2,6-дихлор-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанола (63) (380 мг, 77% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,41-7,27 (6Н, m) 7,15 (1Н, t, J=5,7 Гц) 4,77 (2H, d, J=5,9 Гц) 3,95-3,88 (2H, m) 3,82-3,74 (2H, m) 2,49 (1H, s). ESI-MS (масса/заряд): 365, 367, 369 [M+H].
(b) 2-(8-Бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-этанол (64)
1
+
3
2-(8-Бензиламино-2,6-дихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-этанол (63) (370 мг, 1,01 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (4), с получением 2-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-этанола (64) (235 мг, 66% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,42-7,27 (5Н, m) 6,95 (1H, t, J=6,1 Гц) 6,80 (1Н, t, J=6,1 Гц) 4,73 (2H, d, J=6,1 Гц) 4,68 (1H, q, J=5,1 Гц) 4,58 (1H, q, J=5,1 Гц) 3,90-3,83 (2H, m) 3,73-3,65 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,92 (3Н, d, J=5,1 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 355 [M+H].
(c) 2-(8-Бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорид (64a)
1
+
3
2-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-этанол (64) (180 мг, 0,51 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (5/1) с помощью процедуры, описанной для соединения (6а), с получением 2-(8-бензиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-этанола гидрохлорида (64а) (198 мг, 99% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,44-7,38 (2Н, m) 7,38-7,23 (3Н, m) 4,77 (2Н, s) 3,83-3,76 (2Н, m) 3,77-3,66 (2Н, m) 2,98 (6Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 355 [М+Н]; MP: 181-183°C.
Пример 35: 3-(8-этиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (67) и соответствующая гидрохлоридная соль (67а)
(a) 3-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (65)
4
3
1
+
К суспензии 2,4,6,8-тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидина (1) (600 мг, 2,23 ммоль) в THF (10 мл) при -78°C посредством шприцевого насоса (в течение приблизительно 20 мин) добавляли 3-аминопропан-1-ол (158 мг, 2,11 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (500 мкл, 2,90 ммоль) в THF (5 мл). Смесь перемешивали при -78°C в течение дополнительных 30 мин, а затем обеспечивали достижение комнатной температуры. Добавляли воду (40 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью РЕ/EtOAc (1:1) в качестве элюента с получением 3-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (65) (630 мг, 97% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,77 (1H, s) 3,89-3,78 (4Н, m) 2,35 (1Н, s) 2,02-1,91 (2Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 308, 310, 312, 314 [М+Н].
(b) 3-(2,6-Дихлор-8-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (66)
3
4
2
2
2
2
3
1
+
Этиламин (2 M в THF, 1,5 мл, 3 ммоль) порциями добавляли к раствору 3-(2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (65) (300 мг, 0,97 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) и хлороформе (3 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. По прошествии этого времени добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью хлороформа (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/МеОН (97:3) с получением 3-(2,6-дихлор-8-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (66) (275 мг, 89% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,17 (1Н, t, J=5,9 Гц) 6,87 (1Н, t, J=5,3 Гц) 3,80-3,72 (2Н, m) 3,72-3,66 (2Н, m) 3,64 (2Н, qd, J=7,3, 5,9 Гц) 3,00 (1H, s) 1,93-1,83 (2Н, m) 1,33 (3Н, t, J-7,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 317, 319, 321 [М+Н].
(с) 3-(8-Этиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (67)
1
+
3
3-(2,6-Дихлор-8-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (66) (270 мг, 0,85 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (4), с получением 3-(8-этиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола (67) (165 мг, 63% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,74 (1Н, t, J=6,3 Гц) 6,46 (1Н, t, J=5,8 Гц) 5,2-4,4 (1H, br s) 4,75-4,64 (1Н, m) 4,63-4,52 (1H, m) 3,74-3,66 (2H, m) 3,62-3,55 (2H, m) 3,54 (2H, qd, J=7,2, 5,8 Гц) 2,97 (3Н, d, J=4,9 Гц) 2,95 (3Н, d, J=4,9 Гц) 1,84-1,74 (2H, m) 1,29 (3H, t, J=7,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [M+H].
(b) 3-(8-Этиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола гидрохлорид (67a)
1
+
3
3-(8-Этиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ол (67) (170 мг, 0,55 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/EtOH (4/1) с помощью процедуры, описанной для соединения (14а), с получением 3-(8-этиламино-2,6-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-пропан-1-ола гидрохлорида (67а) (185 мг, 98% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,80-3,49 (4Н, m) 3,69 (2Н, t, J=6,1 Гц) 3,11-2,87 (6Н, m) 1,98-1,86 (2Н, m) 1,31 (3Н, t, J=7,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [М+Н]; MP: 179-181°C.
Пример 36: 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-пирролидин-3-ол (71) и соответствующая гидрохлоридная соль (71а)
(a) 2,6,8-Трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (68)
2
5
Смесь 2,4,6,8-тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидина (1) (10,00 г, 37,05 ммоль), воды (60 мл) и THF (120 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Летучие вещества удаляли in vacuo. Добавляли воду (200 мл) и полученную суспензию фильтровали. Собранное твердое вещество промывали водой (2×50 мл) и высушивали над РО in vacuo при 60°C в течение 48 ч с получением 2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ола (68) (8,47 г, 91% выход).
(b) 2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (69)
2
5
3
1
+
К суспензии 2,6,8-трихлорпиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ола (68) (8,47 г, 33,68 ммоль) в THF (120 мл) при 0°C по каплям добавляли пропиламин (7,20 мл, 101,05 ммоль) в THF (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего in vacuo удаляли летучие вещества и добавляли воду (200 мл). Полученный осадок фильтровали, промывали водой (3×50 мл) и высушивали над РО in vacuo при 60°C в течение 16 ч с получением 2,6-дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ола (69) (9,00 г, 97% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl+TFA, ppm): 7,79 (1Н, t, J=6,0 Гц) 3,79-3,69 (2Н, m) 1,81 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,06 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 274, 276, 278 [М+Н].
(c) 2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70)
3
3
4
3
3
6
1
+
2,6-Дихлор-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (69) (9,00 г, 32,83 ммоль) и метиламин (40% водный раствор) (23,00 мл) вводили в реакцию в н-бутаноле (50 мл), нагревали при 105°C в течение 96 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (100 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью CHCl (3×150 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (300 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/МеОН (98:2) до CHCl/МеОН (1:1) с получением 2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ола (70) (6,18 г, 71% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 7,18 (1H, s) 6,23 (1H, q, J=4,7 Гц) 6,10 (1H, q, J=4,7 Гц) 3,48-3,26 (2H, m, перекрывается водой) 3,16 (1H, s) 2,83 (3Н, d, J=4,7 Гц) 2,75 (3Н, d, J=4,7 Гц) 1,66-1,52 (2H, m) (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 264 [M+H].
(d) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-пирролидин-3-ол (71)
2
4
3
1
+
Смесь 2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ола (70) (250 мг, 0,95 ммоль), (бензотриазол-1-илокси)трис(диметиламино)фосфония гексафторфосфата (ВОР) (548 мг, 1,24 ммоль) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена (DBU) (214 мкл, 1,43 ммоль) в DMF (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли смесь пирролидин-3-ола гидрохлорида (352 мг, 2,85 ммоль) и DBU (426 мкл, 2,85 ммоль) в DMF (2 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавляли воду (50 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (99:1) до РЕ/EtOAc (1:99) с получением 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-пирролидин-3-ола (71) (161 мг, 51% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,62-6,53 (1Н, m) 4,65-4,44 (3Н, m) 4,36-3,98 (5H, m) 3,47-3,39 (2H, m) 2,95-2,89 (6H, m) 2,07-1,98 (2H, m) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 333 [М+Н].
(с) 1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-пирролидин-3-ола гидрохлорид (71а)
2
2
3
1
+
1-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-пирролидин-3-ол (71) (144 мг, 0,43 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в CHCl с помощью процедуры, описанной для соединения (14а), с получением 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-пирролидин-3-ола гидрохлорида (71а) (125 мг, 78% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,59-4,52 (1Н, m) 4,39-4,04 (4Н, m) 3,54 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,02 (3Н, s) 2,97 (3Н, s) 2,16-2,0 (2Н, m) 1,75 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,03 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 333 [М+Н]; MP: 202-204°C.
Пример 37: 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-циклобутанол (72) и соответствующая гидрохлоридная соль (72а)
(a) 1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-циклобутанол (72)
2
4
3
1
+
Смесь 2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ола (70) (250 мг, 0,95 ммоль), реагента ВОР (548 мг, 1,24 ммоль и DBU (214 мкл, 1,43 ммоль) в DMF (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли 1-аминометилциклобутанол (288 мг, 2,85 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавляли воду (50 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (99:1) до PE/EtOAc (1:99) с получением 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-циклобутанола (72) (147 мг, 45% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,03-6,92 (1Н, m) 6,53-6,44 (1H, m) 6,14-5,95 (1H, m) 4,67-4,60 (1H, m) 4,60-4,52 (1H, m) 3,68 (2H, d, J=6,2 Гц) 3,49-3,41 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,93 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,18-2,02 (4H, m) 1,80-1,60 (3H, m) 1,58-1,41 (1H, m) 0,99 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H].
(b) 1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-циклобутанола гидрохлорид (72a)
2
2
3
1
+
1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-циклобутанол (72) (113 мг, 0,33 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в CHCl с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-циклобутанола гидрохлорида (72а) (95 мг, 76% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,85 (2Н, s) 3,61 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,04 (3Н, s) 3,03 (3Н, s) 2,22-2,04 (4Н, m) 1,86-1,60 (2Н, m) 1,77 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,03 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [М+Н]; MP: 248-250°C.
Пример 38: 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (73) и соответствующая гидрохлоридная соль (73а)
(a) 1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (73)
1
+
3
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (250 мг, 0,95 ммоль) и 1-метиламино-пропан-2-ол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (73) (170 мг, 54% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,0-6,4 (1Н, br s) 6,79 (1H, t, J=5,7 Гц) 4,70 (1H, dd, J=14,5, 9,5 Гц) 4,61 (1H, q, J=5,1 Гц) 4,56 (1H, q, J=5,1 Гц) 4,24-4,10 (1H, m) 3,50-3,39 (2H, m) 3,30 (1H, dd, J=14,5, 2,5 Гц) 3,30 (3Н, s) 2,97 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,95 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,76-1,61 (2H, m) 1,28 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(b) 1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-ил)-метиламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (73a)
1
+
3
1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (73) (165 мг, 0,49 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-ил)-метиламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (73а) (160 мг, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,36-4,24 (1Н, m) 3,85-3,67 (1H, m) 3,60 (2H, t, J=7,2 Гц) 3,28-3,11 (1H, m) 3,18 (3H, s) 3,03 (3H, s) 2,98 (3H, s) 1,83-1,67 (2H, m) 1,31 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
Пример 39: 3-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-пентан-3-ол (74) и соответствующая гидрохлоридная соль (74а)
(a) 3-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-пентан-3-ол (74)
1
+
3
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (300 мг, 1,14 ммоль) и 3-аминометилпентан-3-ол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 3-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-пентан-3-ола (74) (134 мг, 32% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,81 (1Н, t, J=6,3 Гц) 6,50 (1H, t, J=5,7 Гц) 5,09-4,73 (1H, br s) 4,69-4,53 (2H, m) 3,53 (2H, d, J=6,3 Гц) 3,49-3,42 (2H, m) 2,96 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,94 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,58-1,51 (4H, m) 1,0 (3Н, t, J=7,4 Гц) 0,92 (6H, t, J=7,6 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 363 [M+H].
(b) 3-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-пентан-3-ола гидрохлорид (74а)
1
+
3
3-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-пентан-3-ол (74) (134 мг, 0,37 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 3-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-метил]-пентан-3-ола гидрохлорида (74а) (137 мг, 93% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,69 (2Н, s) 3,59 (2Н, t, J=7,3 Гц) 3,02 (3Н, s) 3,02 (3Н, s) 1,76 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,61-1,53 (4Н, m) 1,03 (3Н, t, J=7,4 Гц) 0,94 (6Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 363 [М+Н]; MP: 219-221°C.
Сравнительный пример 40: 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1,2-диол (75) и соответствующая гидрохлоридная соль(75а)
(a) 3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1,2-диол (75)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (263 мг, 1,00 ммоль) и 3-аминопропан-1,2-диол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (4:1) в качестве элюента с получением чистого 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1,2-диола (75) (175 мг, 52% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,86 (1H, br s) 6,52 (1Н, br s) 4,66 (1H, br s) 4,63-4,53 (1H, m) 3,98-3,81 (3H, m) 3,72-3,65 (2H, m) 3,61 (1H, dd, J=11,7, 4,0 Гц) 3,56 (1H, dd, J=11,7, 4,5 Гц) 3,51-3,42 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,95 (3Н, J=5,1 Гц) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 337 [М+Н].
(b) 3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1,2-диола гидрохлорид (75а)
1
+
3
3-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1,2-диол (75) (165 мг, 0,49 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (6/1) с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 3-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-пропан-1,2-диола гидрохлорида (75а) (135 мг, 74% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,97-3,89 (1Н, m) 3,83 (1H, dd, J=13,8, 4,1 Гц) 3,59 (2Н, d, J=5,4 Гц) 3,63-3,51 (3Н, m) 3,00 (6Н, s) 1,74 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,01 (3Н, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 337 [М+Н]; MP: 166-167°C.
Пример 41: 1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метил-амино]-2-метилпропан-2-ол (76) и соответствующая гидрохлоридная соль (76а)
(a) 1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ол (76)
1
+
3
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (300 мг, 1,14 ммоль) и 2-метил-1-метиламинопропан-2-ол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных ранее, с получением 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола (76) (235 мг, 59% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,79 (1Н, t, J=5,0 Гц) 4,62-4,49 (2H, m) 4,06 (2H, s) 3,49-3,39 (2H, m) 3,41 (3Н, s) 2,98-2,92 (6H, m) 1,68 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,30 (6Н, s) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н].
(b) 1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (76а)
1
+
3
1-[(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ол (76) (233 мг, 0,67 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 1-[(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (76а) (160 мг, 62% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,71-3,63 (2Н, br s) 3,60 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,29-3,22 (3Н, br s) 3,02 (3Н, s) 2,97 (3Н, s) 1,74 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,41 (6Н, s) 1,0 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н]; MP: 161-163°C.
Пример 42: (1R,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (77) и соответствующая гидрохлоридная соль (77а)
(а) (1R,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (77)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (250 мг, 0,95 ммоль) и (1R,2S)-1-аминоиндан-2-ол вводили в реакцию с помощью процедуры, описанной для соединения (71). Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/МеОН (98:2) до CHCl/МеОН (96:4) в качестве элюента с получением (1R,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (77) (180 мг, 48% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,38-7,33 (1H, m) 7,33-7,27 (2H, m) 7,25-7,19 (1H, m) 7,04 (1H, br s) 6,61 (1H, br s) 5,60 (1H, dd, J=7,4, 5,1 Гц) 4,87-4,54 (2H, m) 4,80 (1H, td, J=5,1 2,8 Гц) 3,53-3,43 (2H, m) 3,23 (1H, dd, J=16,4, 5,3 Гц) 3,09 (1H, dd, J=16,4, 2,8 Гц) 2,97 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,92 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,78-1,63 (2H, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
(b) (1R,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола гидрохлорид (77a)
1
+
3
(1R,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (77) (145 мг, 0,37 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (6/1) с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (1R,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола гидрохлорида (77а) (155 мг, 98% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,37-7,17 (4Н, m) 5,83 (1Н, d, J=5,1 Гц) 4,76 (1H, td, J=5,1, 1,8 Гц) 3,61 (2H, t, J=7,2 Гц) 3,24 (1H, dd, J=16,6, 5,1 Гц) 3,06-2,91 (1H, m) 3,01 (3H, s) 2,99 (3H, s) 1,84-1,68 (2H, m) 1,03 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H]; MP: 281-283°С.
С помощью процедур, описанных в данном документе, и вариаций, легко доступных и известных специалистам в данной области, получали следующие пиримидо[5,4-d]-пиримидиниламиноциклоалканолы.
Пример 43: (1S,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (78) и соответствующая гидрохлоридная соль (78а)
(a) (1S,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (78)
3
3
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (250 мг, 0,95 ммоль) и (1S,2S)-1-аминоиндан-2-ол вводили в реакцию с помощью процедуры, описанной для соединения (71). Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/МеОН (99:1) в качестве элюента с получением (1S,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (78) (140 мг, 37% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm) 7,42-7,35 (1Н, m) 7,35-7,27 (3Н, m) 7,12 (1H, s) 6,55 (1H, s) 6,27 (1H, br s) 5,30 (1H, t, J=5,9 Гц) 4,66 (2H, s) 4,58-4,47 (1H, m) 3,53-3,44 (2H, m) 3,37 (1H, dd, J=15,6, 7,9 Гц) 3,05-2,92 (1H, m) 2,98 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,95 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,78-1,63 (2H, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
(b) (1S,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола гидрохлорид (78a)
1
+
3
(1S,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (78) (140 мг, 0,35 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (6/1) с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1S,2S)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола гидрохлорида (78а) (120 мг, 80% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,32-7,25 (3Н, m) 7,25-7,19 (1Н, m) 5,67 (1H, d, J=5,5 Гц) 4,63-4,54 (1H, m) 3,62 (2H, t, J=7,1 Гц) 3,36 (1H, dd, J=15,9, 7,0 Гц) 3,01 (3Н, s) 3,00 (3Н, s) 2,91 (1H, dd, J=15,9, 6,3 Гц) 1,85-1,69 (2H, m) 1,03 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H]; MP: 290-292°C.
Пример 44: (1S,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (79) и соответствующая гидрохлоридная соль (79а)
(a) (1S,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (79)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (300 мг, 1,14 ммоль) и (1S,2R)-1-амино-индан-2-ол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных выше. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (4:1) в качестве элюента с получением (1S,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (79) (380 мг, 84% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,36-7,32 (1Н, m) 7,32-7,20 (3Н, m) 7,01 (1Н, d, J=7,1 Гц) 6,58-6,51 (1Н, m) 5,59 (1Н, dd, J=7,3, 5,3 Гц) 4,80 (1Н, td, J=5,2, 2,6 Гц) 4,75-4,56 (2Н, m) 3,54-3,40 (2Н, m) 3,22 (1Н, dd, J=16,4, 5,3 Гц) 3,06 (1H, dd, J=16,4, 2,5 Гц) 2,96 (3Н, d, J=5,0 Гц) 2,91 (3Н, d, J=5,0 Гц) 1,70 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [М+Н].
(b) (1S,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола гидрохлорид (79а)
1
+
3
(1S,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (79) (310 мг, 0,35 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (1/1) с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1S,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола гидрохлорида (79а) (300 мг, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,40-7,15 (4Н, m) 5,87-5,75 (1Н, m) 4,78-4,70 (1Н, m) 3,68-3,50 (2Н, m) 3,33-3,16 (1Н, m) 3,10-2,85 (7Н, m) 1,76 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,03 (3Н, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [М+Н]; MP: 286°C (с разлож.).
Пример 45: (1R,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (80) и соответствующая гидрохлоридная соль (80а)
(a) (1R,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (80)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (250 мг, 0,95 ммоль) и (1R,2R)-1-аминоиндан-2-ол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOH (99:1) до CHCl/EtOH (9:1) с получением (1R,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола (80) (144 мг, 38% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,42-7,35 (1Н, m) 7,35-7,26 (3Н, m) 7,08 (1H, d, J=4,6 Гц) 6,57-6,45 (1H, m) 6,28 (1H, s) 5,33-5,24 (1H, m) 4,71-4,58 (2H, m) 4,58-4,47 (1H, m) 3,53-3,43 (2H, m) 3,37 (1H, dd, J=15,7, 7,9 Гц) 3,05-2,95 (1H, m) 2,98 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,95 (3Н, d, J=5,1) 1,78-1,61 (2H, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
(b) (1R,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола гидрохлорид (80a)
1
+
3
(1R,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ол (80) (130 мг, 0,33 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1R,2R)-1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-2-ола гидрохлорида (80а) (120 мг, 84% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,32-7,24 (3Н, m) 7,24-7,16 (1Н, m) 5,65 (1H, d, J=5,5 Гц) 4,62-4,50 (1H, m) 3,61 (2H, t, J=7,0 Гц) 3,35 (1H, dd, J=16,0, 7,0 Гц) 2,99 (3Н, s) 2,98 (3Н, s) 2,90 (1H, dd, J=16,0, 6,4 Гц) 1,84-1,68 (2H, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
Пример 46: rac-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-1-ол (81) и соответствующая гидрохлоридная соль (81а)
(a) 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-1-ол (81)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (220 мг, 0,84 ммоль) и 2-аминоиндан-1-ол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOH (99:1) до CHCl/EtOH (9:1) с получением (2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-1-ола (81) (200 мг, 61% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,48-7,39 (1Н, m) 7,34-7,20 (3Н, m) 7,00-6,90 (1H, m) 6,85 (1H, br s) 6,53 (1H, t, J=5,5 Гц) 5,19 (1H, d, J=6,7 Гц) 4,72-4,55 (2H, m) 4,49-4,35 (1H, m) 3,56-3,40 (3H, m) 3,06 (1H, dd, J=15,5, 10,2 Гц) 2,98 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,97 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,78-1,63 (2H, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
(b) 2-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-1-ола гидрохлорид (81a)
1
+
3
2-(2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-1-ол (81) (200 мг, 0,51 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной в другом месте в данном документе, с получением 2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-4-иламино)-индан-1-ола гидрохлорида (81а) (200 мг, 91% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,44-7,37 (1Н, m) 7,33-7,22 (3Н, m) 5,26 (1H, d, J=5,8 Гц) 4,80-4,68 (1Н, m) 3,60 (2Н, t, J=7,2 Гц) 3,54 (1Н, dd, J=15,8, 7,9 Гц) 3,02 (3Н, s) 2,98 (3Н, s) 2,92 (1Н, dd, J=15,8, 7,2 Гц) 1,83-1,67 (2Н, m) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [М+Н]; MP: 181-183°C.
Пример 47: (1R,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (82) и соответствующая гидрохлоридная соль (82а)
(a) (1R,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (82)
1
+
3
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (250 мг, 0,95 ммоль) и (1R,2S)-2-аминоциклогексанола гидрохлорид вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (1R,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (82) (190 мг, 56% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,76 (1Н, d, J=6,7 Гц) 6,50 (1H, t, J=5,2 Гц) 4,76-4,63 (1H, m) 4,58 (1H, q, J=5,2 Гц) 4,25-4,16 (1H, m) 4,05-3,99 (1H, m) 3,50-3,41 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,94 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,95-1,35 (10Н, m) 0,99 (3Н, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H].
(b) (1R,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола гидрохлорид (82а)
1
+
3
(1R,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексан(82) (190 мг, 0,53 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1R,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола гидрохлорида (82а) (165 мг, 79% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,28-4,21 (1Н, m) 4,13-4,08 (1H, m) 3,58 (2H, t, J=7,4 Гц) 3,01 (3Н, s) 2,99 (3Н, s) 1,93-1,58 (8H, m) 1,53-1,37 (2H, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H]; MP: 249-251°C.
Пример 48: (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-(83) и соответствующая гидрохлоридная соль циклогексанола (83а)
(a) (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (83)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (300 мг, 1,14 ммоль) и (1S,2S)-2-аминоциклогексанол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (4:1) в качестве элюента с получением (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (83) (269 мг, 65% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,6-6,3 (2Н, br s) 5,42 (1Н, s) 4,7-4,4 (2H, br s) 3,84-3,66 (1H, m) 3,58-3,38 (3H, m) 3,06-2,85 (6H, m) 2,18-2,02 (2H, m) 1,84-1,62 (2H, m) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,51-1,17 (4H, m) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H].
(b) (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола гидрохлорид (83a)
1
+
3
(1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (83) (230 мг, 0,64 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола гидрохлорида (83а) (215 мг, 85% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,15-4,00 (1Н, m) 3,69-3,51 (1H, m) 3,59 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,02 (3Н, s) 2,99 (3Н, s) 2,20-2,03 (2Н, m) 1,86-1,68 (2Н, m) 1,75 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,49-1,29 (4Н, m) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н]; MP: 236-238°C.
Пример 49: (1S,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (84) и соответствующая гидрохлоридная соль (84а)
(a) (1S,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (84)
1
+
3
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (250 мг, 0,95 ммоль) и (1S,2R)-2-аминоциклогексанола гидрохлорид вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (1S,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (84) (190 мг, 63% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,75 (1H, d, J=7,0 Гц) 6,50 (1H, t, J=5,2 Гц) 4,72-4,62 (1H, m) 4,58 (1H, q, J=5,2 Гц) 4,25 (1H, m) 4,06-3,98 (1H, m) 3,50-3,41 (2H, m) 2,96 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,94 (3Н, d, J=5,2) 1,94-1,58 (8H, m) 1,57-1,36 (2H, m) 0,99 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H].
(b) (1S,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола гидрохлорид (84a)
1
+
3
(1S,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (84) (215 мг, 0,60 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1S,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола гидрохлорида (84а) (180 мг, 76% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,30-4,19 (1Н, m) 4,13-4,06 (1H, m) 3,58 (2H, t, J=7,4 Гц) 3,0 (3Н, s) 2,99 (3Н, s) 1,95-1,55 (8H, m) 1,54-1,34 (2H, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H]; MP: 242-244°C.
Пример 50: (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (85) и соответствующая гидрохлоридная соль (85а)
(a) (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (85)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (300 мг, 1,14 ммоль) и (1R,2R)-2-аминоциклогексанол вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (4:1) в качестве элюента с получением (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола (85) (205 мг, 55% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,59-6,40 (2Н, m) 4,70-4,53 (2Н, m) 3,82-3,71 (1Н, m) 3,57-3,41 (3Н, m) 2,98-2,91 (6Н, m) 2,16-2,05 (2Н, m) 1,82-1,72 (2Н, m) 1,69 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,51-1,24 (4Н, m) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н].
(b) (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола гидрохлорид (85а)
1
+
3
(1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанол (85) (195 мг, 0,54 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклогексанола гидрохлорида (85а) (200 мг, 93% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,12-4,01 (1Н, m) 3,67-3,54 (1H, m) 3,58 (2H, t, J=7,4 Гц) 3,02 (3Н, s) 2,99 (3Н, s) 2,19-2,06 (2H, m) 1,84-1,70 (2H, m) 1,74 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,46-1,32 (4H, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H]; MP: 212-213°C.
Пример 51: (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанол (86) и соответствующая гидрохлоридная соль (86а)
(a) (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанол (86)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (300 мг, 1,14 ммоль) и (1S,2S)-2-аминоциклопентанола гидрохлорид вводили в реакцию с помощью процедур, описанных ранее. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (4:1) в качестве элюента с получением (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола (86) (275 мг, 73% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,68-6,59 (1Н, m) 6,57-6,44 (1H, m) 6,2-6,0 (1H, br s) 4,75-4,47 (2H, m) 4,13-3,91 (2H, m) 3,53-3,40 (2H, m) 2,97 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,95 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,36-2,22 (1H, m) 2,20-2,04 (1H, m) 1,94-1,51 (4H, m) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H].
(b) (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола гидрохлорид (86a)
1
+
3
(1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанол (86) (235 мг, 0,68 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (15/1) с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1S,2S)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола гидрохлорида (86а) (230 мг, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,38-4,26 (1H, m) 4,24-4,13 (1H, m) 3,60 (2H, t, J=7,4 Гц) 3,03 (3H, s) 3,01 (3H, s) 2,37-2,22 (1H, m) 2,11-1,97 (1H, m) 1,92-1,58 (4H, m) 1,75 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H]; MP: 257-259°C.
Пример 52: (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанол (87) и соответствующая гидрохлоридная соль (87а)
(a) (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанол (87)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-ол (70) (300 мг, 1,14 ммоль) и (1R,2R)-2-аминоциклопентанола гидрохлорид вводили в реакцию с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (4:1) в качестве элюента с получением (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола (87) (210 мг, 55% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,68-6,57 (1H, m) 6,55-6,43 (1Н, m) 6,2-6,1 (1Н, br s) 4,67-4,49 (2Н, m) 4,12-3,91 (2Н, m) 3,51-3,42 (2Н, m) 2,96 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,95 (3Н, d, J=5,0 Гц) 2,36-2,22 (1H, m) 2,20-2,04 (1Н, m) 1,94-1,51 (4Н, m) 1,69 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [М+Н].
(b) (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола гидрохлорид (87а)
1
+
3
(1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанол (87) (235 мг, 0,68 ммоль) и 2 М HCl/диэтиловый эфир вводили в реакцию в смеси диэтиловый эфир/МеОН (15/1) с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (1R,2R)-2-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-циклопентанола гидрохлорида (87а) (160 мг, 80% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,38-4,26 (1Н, m) 4,24-4,13 (1Н, m) 3,60 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,03 (3Н, s) 3,00 (3Н, s) 2,38-2,22 (1H, m) 2,11-1,97 (1Н, m) 1,92-1,56 (4Н, m) 1,75 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,02 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [М+Н]; MP: 255-257°С.
Пример 53: 2-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-этанол (90) и соответствующая гидрохлоридная соль (90а)
(a) 2,6-дихлор-N,N'-диметил-пиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88)
2
5
3
1
+
2 М метиламин/THF (42 мл, 84,00 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2,4,6,8-тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидина (1) (5,00 г, 18,52 ммоль) в THF (300 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, а затем удаляли летучие вещества. Остаток суспендировали в воде (50 мл) и осадок фильтровали, промывали водой (2×30 мл) и высушивали над твердым безводным РО с получением 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (4,61 г, 96% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,90 (2Н, br s) 3,16 (6Н, d, J=5,0 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 259, 261, 263 [М+Н].
(b) 2-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (89)
3
2
4
3
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (600 мг, 2,32 ммоль) и 2-аминоэтанола (700 мкл, 11,60 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) нагревали при 100°С в течение 18 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования летучие вещества выпаривали и остаток кристаллизовали из смеси EtOAc/петролейный эфир (1/1) с получением 2-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (89) (500 мг, 76% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,68-6,54 (2Н, m) 5,36 (1Н, t, J=5,7 Гц) 3,87-3,82 (2Н, m) 3,62 (2Н, dt, J=5,7, 4,6 Гц) 3,46 (1Н, br s) 3,13 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 284, 286 [М+Н].
(c) 2-[6-(Циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-этанол (90)
3
Смесь 2-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (89) (250 мг, 0,81 ммоль) и циклопропилметанамина (176 мкл, 3,53 ммоль) в н-бутаноле (4,0 мл) нагревали при 125°С в течение 72 ч в закрытом сосуде. Реакционную смесь охлаждали и добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл).
2
4
3
1
+
Полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от PE/i-PrOH (2/1) до PE/i-PrOH (1/1) с получением 2-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-этанола (90) (159 мг, 57% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,62-6,54 (1Н, m) 6,27-6,19 (1H, m) 5,10 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,84 (1H, t, J=5,0 Гц) 4,56 (1H, s) 3,85-3,81 (2H, m) 3,60-3,55 (2H, m) 3,24 (2H, dd, J=7,0, 5,2 Гц) 3,06 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3H, d, J=5,2 Гц) 1,14-1,03 (1H, m) 0,55-0,49 (2H, m) 0,26-0,22 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 319 [M+H].
(d) 2-[6-(Циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-этанола гидрохлорид (90a)
1
+
2
2-[6-(Циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-этанол (90) (159 мг, 0,50 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-этанола гидрохлорида (90а) (177 мг, 87% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 3,78 (2Н, t, J=5,5 Гц) 3,55 (2Н, t, J=5,5 Гц) 3,26 (2Н, d, J=7,0 Гц) 3,05 (3Н, s) 3,01 (3Н, s) 1,19-1,08 (1H, m) 0,62-0,53 (2H, m) 0,34-0,26 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 319 [M+H]; MP: 214-216°C.
Пример 54: 2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (91) и соответствующий гидрохлорид (91а)
(а) 2-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (91)
1
+
3
2-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (89) (250 мг, 0,81 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (90), с получением 2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (91) (129 мг, 48% выход). 400 МГц H-ЯМР (CDCl, ppm): 6,64-6,54 (1H, m) 6,26-6,18 (1H, m) 5,09 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,75-4,65 (1H, m) 4,64-4,48 (1Н, br s) 3,85-3,81 (2H, m) 3,60-3,55 (2H, m) 3,38-3,32 (2H, m) 3,06 (3H, d, J=6,5 Гц) 3,05 (3Н, d, J=6,5 Гц) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [M+H].
(b) 2-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола гидрохлорид (91а)
1
+
2
2-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (91) (125 мг, 0,41 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола гидрохлорида (91а) (128 мг, 92% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 3,78 (2Н, t, J=5,5 Гц) 3,55 (2Н, t, J=5,5 Гц) 3,35 (2Н, t, J=7,0 Гц) 3,05 (3Н, s) 3,01 (3Н, s) 1,64 (2Н, секстет, J=7,3 Гц) 0,96 (3Н, t, J=7,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [М+Н]; MP: 224-226°С.
Пример 55: 2-(6-диметиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-этанол (92) и соответствующая гидрохлоридная соль (92а)
(а) 2-(6-Диметиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-этанол (92)
2
5
3
1
+
Смесь 2-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (89) (300 мг, 1,06 ммоль) и диметиламина (40% водный раствор) (1,00 мл) в н-бутаноле (3,0 мл) нагревали при 110°С в течение 18 ч в закрытом сосуде. Реакционную смесь охлаждали, осадок фильтровали, промывали водой (2×10 мл) и высушивали над твердым безводным РО с получением 2-(6-диметиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-этанола (92) (200 мг, 65% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl-d6, ppm): 6,68-6,51 (1Н, m) 6,22-6,04 (1H, m) 5,06 (1H, t, J=6,1 Гц) 4,75 (1H, s) 3,88-3,78 (2H, m) 3,62-3,51 (2H, m) 3,16 (6H, s) 3,08 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,1 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 293 [M+H].
(b) 2-(6-Диметиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-этанола гидрохлорид (92а)
1
+
3
2-(6-Диметиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-этанол (92) (140 мг, 0,48 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (4/1) с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 2-(6-диметиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-этанола гидрохлорида (92а) (145 мг, 92% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,81-3,70 (2Н, m) 3,68-3,55 (2Н, m) 3,19 (6Н, s) 3,15 (3Н, s) 3,07 (3Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 293 [М+Н]; MP: 264-266°С.
Пример 56: 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ол (94) и соответствующая гидрохлоридная соль (94а)
4
8
2
(a) 6-Хлор-N,N-диметил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (93)
3
2
4
3
4
8
2
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (4,00 г, 15,44 ммоль) и пропиламина (5,1 мл, 61,75 ммоль) в н-бутаноле (40 мл) нагревали при 90°С в течение 20 ч. После охлаждения насыщенный раствор NaHCO (200 мл) добавляли и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (200 мл), затем солевым раствором (200 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли с получением 6-хлор-N,N-диметил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (93) (4,32 г, 99% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,72 (1Н, br s) 6,49 (1H, br s) 4,97 (1H, t, J=5,4 Гц) 3,42-3,35 (2H, m) 3,14 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,69-1,59 (2H, m) 0,99 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 282, 284 [M+H].
(b) 1-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метил-пропан-2-ол (94)
4
8
2
1
+
3
2
4
3
Смесь 6-хлор-N,N-диметил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (93) (253 мг, 0,90 ммоль) и 1-амино-2-метилпропан-2-ола (340 мкл, 3,60 ммоль) в н-бутаноле (4,0 мл) нагревали при 125°С в течение 48 ч в закрытом сосуде. Добавляли вторую порцию 1-амино-2-метилпропан-2-ола (340 мкл, 3,60 ммоль) и смесь нагревали в течение 100 ч. Реакционную смесь охлаждали и добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл). Полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (1/1) до РЕ/EtOAc (1/99) с получением 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола (94) (263 мг, 87% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,65-6,53 (1Н, m) 6,19-6,11 (1H, m) 5,33 (1H, br s) 5,09 (1H, t, J=5,1 Гц) 4,69 (1H, t, J=5,1 Гц) 3,43-3,31 (2H, m) 3,39 (2H, d, J=6,4 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,62 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,27-1,24 (6H, m) 0,98 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(с) 1-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (94а)
1
+
3
1-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ол (94) (207 мг, 0,62 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедур, описанных ранее, с получением 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламино-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (94а) (200 мг, 87% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,52 (2Н, s) 3,46 (2Н, t, J=7,1 Гц) 3,15 (3Н, s) 3,13 (3Н, s) 1,69 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,27 (6Н, s) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н]; MP: 191-193°С.
Пример 57: 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (95) и соответствующая гидрохлоридная соль (95а)
(a) 1-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (95)
4
8
2
1
+
3
6-Хлор-N,N-диметил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (93) (200 мг, 0,71 ммоль) и 1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (94), с получением 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (95) (110 мг, 48% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,57 (1Н, s) 6,18 (1H, s) 5,10-4,90 (2H, m) 4,75-4,61 (1H, m) 4,08-3,99 (1H, m) 3,50 (1H, ddd, J=14,4, 6,3, 2,3 Гц) 3,41-3,30 (3Н, m) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,68-1,56 (2H, m) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(b) 1-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (95a)
1
+
3
1-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (95) (105 мг, 0,33 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (95а) (110 мг, 94% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,03-3,93 (1H, m) 3,53 (1H, dd, J=13,7, 4,6 Гц) 3,48-3,37 (3Н, m) 3,13 (3Н, s) 3,11 (3Н, s) 1,74-1,63 (2H, m) 1,23 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H]; MP: 217-219°C.
Пример 58: 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метил-амино]-2-метилпропан-2-ол (96) и соответствующая гидрохлоридная соль (96а)
(а) 1-[(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ол (96)
4
8
2
1
+
3
2
4
3
Смесь 6-хлор-N,N-диметил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (93) (285 мг, 1,01 ммоль) и 2-метил-1-метиламинопропан-2-ола (238 мкл, 2,02 ммоль) в н-бутаноле (4,0 мл) нагревали при 125°С в течение 120 ч в закрытом сосуде. Реакционную смесь охлаждали и добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл). Полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл), а затем высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/99) с получением 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола (96) (250 мг, 71% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,8-6,5 (1Н, br s) 6,55 (1H, s) 6,27 (1H, s) 4,70-4,63 (1H, m) 3,56 (2H, s) 3,38-3,31 (2H, m) 3,22 (3H, s) 3,07 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,27 (6H, s) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H].
(b) 1-[(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (96а)
1
+
3
1-[(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ол (96) (182 мг, 0,52 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (96а) (191 мг, 95% выход). 400 МГц Н-ЯМР: (CDOD, ppm) 3,74 (2Н, s) 3,46 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,30 (3Н, s) 3,15 (3Н, s) 3,09 (3Н, s) 1,70 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,25 (6Н, s) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н]; MP: 213-215°С.
Пример 59: 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (97) и соответствующая гидрохлоридная соль (97а)
(а) 1-[(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (97)
4
8
2
1
+
+
3
6-Хлор-N,N-диметал-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (93) (280 мг, 0,99 ммоль) и 1-метиламино-пропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (94), с получением 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (97) (215 мг, 64% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,54 (1Н, br s) 6,29 (1Н, br s) 5,65 (1H, br s) 4,66 (1H, s) 4,18-4,07 (1H, m) 3,74 (1H, dd, J=14,7, 7,4 Гц) 3,47 (1H, d, J=14,7 Гц) 3,41-3,30 (2H, m) 3,21 (3H, s) 3,11-3,01 (6H, m) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,23 (3Н, d, J=6,l Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H]. ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(b) 1-[(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (97a)
1
+
3
15
27
8
1-[(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (97) (175 мг, 0,52 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 1-[(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (97а) (159 мг, 82% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,17-4,07 (1Н, m) 3,64 (2Н, s) 3,46 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,25 (3Н, s) 3,16 (3Н, s) 3,07 (3Н, s) 1,70 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,20 (3Н, d, J=6,1 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н]; MP: 236-237°С. Анал. рассч. для CHClNO: С, 48,58; Н, 7,34; N, 30,21. Обнаружено: С, 48,47; Н, 7,33; N, 30,22.
Пример 60: 1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (99) и соответствующая гидрохлоридная соль (99а)
2
4
8
(а) (R)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (98)
3
4
3
2
4
8
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (350 мг, 1,35 ммоль), (R)-(-)-втор-бутиламина (216 мкл, 2,16 ммоль) и N-диизопропилэтиламина (234 мкл, 1,35 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) нагревали при 80°С в течение 72 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл), затем солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (2/1) с получением (R)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (98) (330 мг, 83% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm) 6,77-6,63 (1Н, m) 6,54-6,41 (1H, m) 4,79 (1H, d, J=8,2 Гц) 4,09-3,94 (1H, m) 3,14 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,63-1,49 (2H, m) 1,21 (3H, d, J=6,6 Гц) 0,96 (3Н, t, J=7,5 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 296, 298 [M+H].
(b) 1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (99)
2
4
8
1
+
3
(R)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (98) (330 мг, 1,12 ммоль) и 1-амино-2-метилпропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедуры, описанной для соединения (94), с получением 1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (99) (160 мг, 41% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,62-6,49 (1Н, m) 6,20-6,06 (1H, m) 5,6-5,2 (1Н, br s) 5,07 (1Н, t, J=6,3 Гц) 4,52 (1Н, d, J=8,3 Гц) 4,04-3,89 (1Н, m) 3,39 (2Н, d, J=6,3 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,66-1,43 (2Н, m) 1,26 (6Н, s) 1,19 (3Н, d, J=6,5 Гц) 0,96 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н].
(c) 1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (99а)
1
+
3
1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (99) (140 мг, 0,40 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (99а) (145 мг, 94% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,19-4,06 (1Н, m) 3,51 (2Н, s) 3,13 (3Н, s) 3,12 (3Н, s) 1,70-1,55 (2Н, m) 1,26 (6Н, s) 1,25 (3Н, d, J=6,4 Гц) 0,98 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н]; MP: 174-176°С.
Пример 61: (R)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (100) и соответствующая гидрохлоридная соль (100а)
(a) (R)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (100)
2
4
8
1
+
3
(R)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (98) (168 мг, 0,57 ммоль) и (R)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (R)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (100) (109 мг, 67% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,61-6,51 (1Н, m) 6,24-6,14 (1Н, m) 5,07 (1Н, t, J=5,8 Гц) 4,54 (1Н, d, J=8,3 Гц) 4,09-3,90 (2Н, m) 3,49 (1Н, ddd, J=14,4, 6,3, 2,5 Гц) 3,35 (1Н, ddd, J=14,4, 6,9, 6,2 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,69-1,46 (2Н, m) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 1,19 (3Н, d, J=6,5 Гц) 0,95 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
(b) (R)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (100а)
1
+
3
(R)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (100) (109 мг, 0,33 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (R)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (100а) (95 мг, 78% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,17-4,06 (1H, m) 4,02-3,93 (1Н, m) 3,51 (1Н, dd, J=13,7, 4,5 Гц) 3,40 (1H, dd, J=13,7, 6,9 Гц) 3,12 (3Н, s) 3,10 (3Н, s) 1,62 (2Н, пентет, J=7,4 Гц) 1,25 (3Н, d, J=6,6 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 0,98 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н]; MP: 186-188°С.
Пример 62: (S)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (101) и соответствующая гидрохлоридная соль (101а)
(a) (S)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (101)
2
4
8
1
+
3
(S)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (98) (168 мг, 0,57 ммоль) и (S)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (S)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (101) (100 мг, 52% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,61-6,51 (1Н, m) 6,24-6,14 (1Н, m) 5,07 (1Н, t, J=5,8 Гц) 4,54 (1Н, d, J=8,3 Гц) 4,09-3,90 (2Н, m) 3,49 (1Н, ddd, J=14,4, 6,3, 2,5 Гц) 3,35 (1Н, ddd, J=14,4, 6,9, 6,2 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,69-1,46 (2Н, m) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 1,19 (3Н, d, J=6,5 Гц) 0,95 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
(b) (S)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (101а)
1
+
3
(S)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (101) (90 мг, 0,27 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (S)-1-[6-((R)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (101а) (85 мг, 85% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,16-4,06 (1Н, m) 4,02-3,93 (1Н, m) 3,51 (1H, dd, J=13,7, 4,6 Гц) 3,40 (1Н, dd, J=13,7, 6,9 Гц) 3,12 (3Н, s) 3,10 (3Н, s) 1,62 (2Н, пентет, J=7,4 Гц) 1,25 (3Н, d, J=6,6 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 0,98 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н]; MP: 167-169°С.
Пример 63: 1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (103) и соответствующая гидрохлоридная соль (103а)
2
4
8
(a) (S)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (102)
2
4
8
1
+
3
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (350 мг, 1,35 ммоль) и (S)-(+)-втор-бутиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (S)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (102) (250 мг, 63% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,77-6,63 (1Н, m) 6,54-6,41 (1H, m) 4,79 (1H, d, J=8,2 Гц) 4,09-3,94 (1H, m) 3,14 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,65-1,49 (2H, m) 1,21 (3H, d, J=6,5 Гц) 0,96 (3Н, t, J=7,5 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 296, 298 [M+H].
(b) 1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (103)
2
4
8
1
+
3
(S)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (102) (250 мг, 0,85 ммоль) и 1-амино-2-метилпропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (103) (180 мг, 61% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,62-6,49 (1Н, m) 6,20-6,06 (1H, m) 5,41 (1H, s) 5,06 (1H, t, J=6,3 Гц) 4,51 (1H, d, J=8,3 Гц) 4,04-3,89 (1H, m) 3,39 (2H, d, J=6,3 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,66-1,43 (2H, m) 1,26 (6H, s) 1,19 (3H, d, J=6,5 Гц) 0,96 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H].
(c) 1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (103a)
1
+
3
1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (103) (140 мг, 0,40 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением 1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (103а) (140 мг, 91% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,19-4,06 (1Н, m) 3,50 (2Н, s) 3,12 (3Н, s) 3,11 (3Н, s) 1,70-1,55 (2Н, m) 1,26 (6Н, s) 1,25 (3Н, d, J=6,5 Гц) 0,98 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н]; MP: 182-184°С.
Пример 64: (R)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (104) и соответствующая гидрохлоридная соль (104а)
(a) (R)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (104)
2
4
8
1
+
3
(S)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (102) (185 мг, 0,63 ммоль) и (R)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (R)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (104) (95 мг, 45% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,56 (1Н, s) 6,18 (1Н, s) 5,20-4,85 (2Н, m) 4,63-4,42 (1Н, m) 4,10-3,90 (2Н, m) 3,50 (1Н, ddd, J=14,4, 6,3, 2,5 Гц) 3,35 (1Н, ddd, J=14,4, 6,9, 6,2 Гц) 3,09-3,02 (6Н, m) 1,67-1,48 (2Н, m) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 1,20 (3Н, d, J=6,5 Гц) 0,96 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
(b) (R)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (104а)
1
+
3
(R)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (104) (95 мг, 0,28 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (R)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (104а) (70 мг, 66% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,20-4,06 (1H, m) 4,05-3,92 (1Н, m) 3,53 (1Н, dd, J=13,7, 4,6 Гц) 3,41 (1Н, dd, J=13,7, 6,9 Гц) 3,13 (3Н, s) 3,12 (3Н, s) 1,69-1,56 (2Н, m) 1,26 (3Н, d, J=6,6 Гц) 1,23 (3Н, d, J=6,3 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
Пример 65: (S)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (105) и соответствующая гидрохлоридная соль (105а)
(a) (S)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (105)
2
4
8
1
+
3
(S)-N-втор-бутил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (102) (185 мг, 0,63 ммоль) и (S)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (S)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (105) (110 мг, 52% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,56 (1Н, s) 6,18 (1H, s) 5,16-4,90 (2H, m) 4,60-4,45 (1H, m) 4,10-3,90 (2H, m) 3,50 (1H, ddd, J=14,4, 6,3, 2,5 Гц) 3,35 (1H, ddd, J=14,4, 6,9, 6,2 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,66-1,45 (2H, m) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,19 (3Н, d, J=6,5 Гц) 0,96 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(b) (S)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (105a)
1
+
3
(S)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (105) (110 мг, 0,33 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с помощью процедуры, описанной для соединения 6а, с получением (S)-1-[6-((S)-втор-бутиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (105а) (85 мг, 69% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,20-4,08 (1Н, m) 4,05-3,91 (1H, m) 3,54 (1H, dd, J=13,7, 4,6 Гц) 3,41 (1H, dd, J=13,7, 6,9 Гц) 3,14 (3Н, s) 3,12 (3Н, s) 1,69-1,56 (2H, m) 1,26 (3H, d, J=6,6 Гц) 1,23 (3Н, d, J=6,3 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H]; MP: 178-180°C.
Пример 66: 1-[6-(2,2-дифторэтиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (107) и соответствующая гидрохлоридная соль (107а)
2
4
8
(a) 6-хлор-N-(2,2-дифторэтил)-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (106)
3
2
4
2
4
8
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (250 мг, 0,96 ммоль) и 2,2-дифторэтиламина (157 мг, 1,93 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) нагревали при 100°С в течение 18 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования летучие вещества выпаривали и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/2) с получением 6-хлор-N-(2,2-дифторэтил)-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (106) (105 мг, 36% выход). ESI-MS (масса/заряд): 304, 306 [М+Н].
(b) 1-[6-(2,2-Дифторэтиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (107)
2
4
8
1
+
3
2
4
3
Смесь 6-хлор-N-(2,2-дифторэтил)-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (106) (105 мг, 0,35 ммоль) и 1-амино-2-метилпропан-2-ола (340 мкл, 3,60 ммоль) в н-бутаноле (4,0 мл) нагревали при 125°С в течение 48 ч в закрытом сосуде. Реакционную смесь охлаждали и добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл). Полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до PE/EtOAc (1/99) с получением 1-[6-(2,2-дифторэтиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола (107) (95 мг, 76% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,54-6,43 (1Н, m) 6,30-6,20 (1H, m) 5,97 (1H, tt, J=57,0, 4,5 Гц) 5,12 (1H, t, J=6,4 Гц) 4,88 (1H, t, J=6,4 Гц) 3,86-3,71 (2H, m) 3,41 (2H, d, J=6,4 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,27 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 357 [M+H].
(c) 1-[6-(2,2-Дифторэтиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (107a)
1
+
3
1-[6-(2,2-Дифторэтиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ол (107) (95 мг, 0,27 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-[6-(2,2-дифторэтиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (107а) (90 мг, 85% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 6,02 (1Н, tt, J=57,0, 4,2 Гц) 3,84 (2Н, dd, J=14,7, 4,2 Гц) 3,52 (2Н, s) 3,16 (3Н, s) 3,09 (3Н, s) 1,28 (6Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 357 [М+Н]; MP: 223-225°С.
Пример 67: 1-{4,8-бис-метиламино-6-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино}-2-метилпропан-2-ол (109) и соответствующая гидрохлоридная соль (109а)
4
8
2
(а) 6-хлор-N,N-диметил-N-пиримидин-2-илметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (109)
2
5
6
4
8
2
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (259 мг, 1,00 ммоль), пиримидин-2-илметанамина гидрохлорида (218 мг, 1,50 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (435 мкл, 2,50 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) нагревали при 90°С в течение 72 ч. Реакционную смесь охлаждали, осадок фильтровали, промывали водой (2×10 мл) и высушивали над РО с получением 6-хлор-N,N-диметил-N-пиримидин-2-илметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (108) (260 мг, 79% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DMSO-d+TFA, ppm): 8,76 (2Н, d, J=4,8 Гц) 7,92 (1Н, q, J=4,9 Гц) 7,77 (1H, q, J=4,9 Гц) 7,38 (1H, t, J=4,8 Гц) 7,02 (1H, br s) 4,83 (2H, s) 2,91 (3H, d, J=4,9 Гц) 2,90-2,80 (3Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 332, 334 [М+Н].
(b) 1-{4,8-Бис-метиламино-6-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино}-2-метилпропан-2-ол (109)
4
8
2
1
+
2
2
2
4
2
2
2
2
3
Смесь 6-хлор-N,N-диметил-N-ииримидин-2-илметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (108) (125 мг, 0,38 ммоль) и 1-амино-2-метилпропан-2-ола (180 мкл, 1,90 ммоль) в DMSO (1,5 мл) нагревали при 115°С в течение 48 ч. После охлаждения реакционную смесь охлаждали и добавляли воду (20 мл). Полученную суспензию экстрагировали с помощью CHCl (3×15 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (20 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOAc (4/1) с получением 1-{4,8-бис-метиламино-6-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино}-2-метилпропан-2-ола (109) (70 мг, 48% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 8,72 (2Н, d, J=4,9 Гц) 7,18 (1Н, t, J=4,9 Гц) 6,60 (1Н, br s) 6,17 (1Н, br s) 5,95-5,77 (1H, m) 5,34 (1H, br s) 5,09 (1H, br s) 4,87 (2H, d, J=5,2 Гц) 3,39 (2H, d, J=6,2 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,26 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 385 [M+H].
(c) 1-{4,8-Бис-метиламино-6-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино}-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (109a)
1
+
3
1-{4,8-Бис-метиламино-6-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино}-2-метилпропан-2-ол (109) (65 мг, 0,17 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (2/1) с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением 1-{4,8-бис-метиламино-6-[(пиримидин-2-илметил)-амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино}-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (109а) (63 мг, 88% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 8,80 (2Н, d, J=5,0 Гц) 7,44 (1Н, t, J=5,0 Гц) 4,87 (2Н, s) 3,50 (2Н, s) 3,13 (3Н, s) 3,00 (3Н, s) 1,27 (6Н, s). ESI-MS (масса/заряд): 385 [М+Н]; MP: 159-160°С.
Пример 68: 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (111) и соответствующая гидрохлоридная соль (111а)
(a) 3-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (110)
3
2
4
3
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (250 мг, 0,96 ммоль), 3-амино-1,1,1-трифторпропан-2-ола (249 мг, 1,93 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (166 мкл, 0,96 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) нагревали при 90°С в течение 18 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/4) с получением 3-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола (110) (151 мг, 45% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,75 (1Н, q, J=5,2 Гц) 6,45 (1Н, s) 5,90 (1Н, br s) 5,39-5,29 (1Н, m) 4,25-4,17 (1Н, m) 3,83 (1Н, ddd, J=15,0, 6,8, 2,6 Гц) 3,72 (1H, ddd, J=15,0, 7,4, 6,0 Гц) 3,15 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 352, 354 [M+H].
(b) 3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (111)
3
2
4
3
1
+
3-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (110) (151 мг, 0,43 ммоль) и пропиламин (212 мкл, 2,58 ммоль) в н-бутаноле (4,0 мл) нагревали при 120°С в течение 100 ч в закрытом сосуде. После охлаждения реакционную смесь охлаждали и добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл). Полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/9) с получением 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола (111) (150 мг, 93% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,73-6,63 (1H, m) 6,09-5,99 (1Н, m) 5,04 (1H, t, J=5,3 Гц) 4,73 (1H, t, J=5,3 Гц) 4,22-4,11 (1H, m) 3,75-3,69 (2H, m) 3,40-3,31 (2H, m) 3,08 (3H, d, J=5,3 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,3 Гц) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 375 [M+H].
(с) 3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола гидрохлорид (111)
1
+
3
3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ол (111) (150 мг, 0,40 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-1,1,1-трифторпропан-2-ола гидрохлорида (111а) (110 мг, 67% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,28-4,19 (1Н, m) 3,88 (1Н, dd, J=4,2, 14,3 Гц) 3,56-3,49 (1Н, m) 3,46 (2Н, t, J=7,10 Гц) 3,14 (3Н, s) 3,09 (3Н, s) 1,70 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 375 [М+Н]; MP: 236-240°С.
Пример 69: (S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (113) и соответствующая гидрохлоридная соль (113а)
(а) (S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ол (112)
3
2
4
3
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (1,50, 5,79 ммоль) и (S)-1-аминопропан-2-ола (869 мг, 11,78 ммоль) в н-бутаноле (20 мл) нагревали при 100°С в течение 18 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования летучие вещества выпаривали и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетон (5/1) до РЕ/ацетон (1/1) с получением (S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ола (112) (1,33 г, 77% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,69-6,49 (2Н, m) 5,35 (1Н, t, J=6,0 Гц) 4,05 (1H, dqd, J=7,2, 6,3, 2,8 Гц) 3,77 (1H, br s) 3,56 (1H, ddd, J=14,2, 6,5, 2,8 Гц) 3,38 (1H, ddd, J=14,2, 7,2, 6,0 Гц) 3,13 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,24 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 298, 300 [M+H].
(b) (S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (113)
1
+
3
(S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ол (112) (213 мг, 0,72 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле, как описано выше, с получением (S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (113) (108 мг, 47% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,63-6,52 (1H, m) 6,23-6,12 (1H, m) 5,04 (1H, br s) 5,04 (1H, t, J=5,3 Гц) 4,69 (1H, t, J=5,3 Гц) 4,09-3,96 (1H, m) 3,50 (1H, ddd, J=14,4, 6,3, 2,5 Гц) 3,41-3,30 (3Н, m) 3,07 (3Н, d, J=5,3 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,3 Гц) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(c) (S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (113а)
1
+
3
(S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (113) (108 мг, 0,34 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (113а) (90 мг, 75% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,03-3,89 (1Н, m) 3,59-3,34 (4H, m) 3,21-2,93 (6H, m) 1,75-1,58 (2H, m) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 1,0 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H]; MP: 218-220°C.
Пример 70: (R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (115) и соответствующая гидрохлоридная соль (115а)
(а) (R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ол (114)
1
+
3
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (250 мг, 0,96 ммоль) и (R)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в 1,4-диоксане с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от PE/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/2) с получением желаемого (R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ола (114) (224 мг, 78% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,69-6,49 (2Н, m) 5,37-5,28 (1H, m) 4,11-4,00 (1Н, m) 3,77 (1H, br s) 3,56 (1H, ddd, J=14,2, 6,5, 2,8 Гц) 3,38 (1H, ddd, J=14,2, 7,2, 6,0 Гц) 3,13 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,25 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 298, 300 [M+H].
(b) (R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (115)
1
+
3
(R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ол (114) (224 мг, 0,75 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (115) (88 мг, 37% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,57 (1Н, br s) 6,18 (1H, br s) 5,04 (1H, br s) 4,96 (1H, br s) 4,68 (1H, br s) 4,08-4,0 (1H, m) 3,50 (1H, ddd, J=14,3, 6,2, 2,4 Гц) 3,40-3,32 (3Н, m) 3,07 (3Н, d, J=5,3 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,3 Гц) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,23 (3Н, d, J=6,2 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(c) (R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (115а)
1
+
3
(R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (115) (69 мг, 0,22 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в дихлорметане с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (115а) (75 мг, 97% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,02-3,93 (1Н, m) 3,51 (1H, dd, J=13,7, 4,6 Гц) 3,47-3,40 (2H, m) 3,41 (1H, dd, J=13,7, 6,9 Гц) 3,13 (3Н, s) 3,10 (3Н, s) 1,68 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H]; MP: 215-217°C.
Пример 71: 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (117) и соответствующая гидрохлоридная соль (117а)
(a) 1-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (116)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (1,40, 5,40 ммоль) и 1-аминобутан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле, как описано в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9/1) до CHCl/EtOAc (1/2) с получением 1-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (116) (1,48 г, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,67-6,50 (2Н, m) 5,37-5,27 (1Н, m) 3,81-3,71 (1H, m) 3,69 (1Н, br s) 3,62 (1Н, ddd, J=14,3, 6,5, 2,4 Гц) 3,44-3,33 (1H, m) 3,13 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,63-1,50 (2H, m) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 312, 314 [M+H].
(b) 1-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (117)
2
2
2
2
3
1
+
1-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (116) (325 мг, 1,04 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле, как описано в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9/1) до CHCl/EtOAc (1/2) с получением 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (117) (230 мг, 66% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,56 (1Н, s) 6,18 (1Н, s) 5,08-4,94 (1Н, m) 4,94-4,81 (1Н, m) 4,74-4,58 (1H, m) 3,79-3,68 (1Н, m) 3,62-3,51 (1Н, m) 3,43-3,30 (3Н, m) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,74-1,43 (4Н, m) 0,99 (6Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
(c) 1-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорид (117а)
1
+
3
1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (117) (220 мг, 0,66 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (10/1) с получением 1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорида (117а) (190 мг, 78% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,75-3,66 (1Н, m) 3,59 (1H, dd, J=13,8, 4,0 Гц) 3,48-3,40 (2H, m) 3,40 (1H, dd, J=13,8, 7,2 Гц) 3,13 (3Н, s) 3,11 (3Н, s) 1,68 (2H, секстет, J=7,2 Гц) 1,64-1,54 (1H, m) 1,54-1,43 (1H, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H]; MP: 189-190°C.
Пример 72: 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (119) и соответствующая гидрохлоридная соль (119а)
(a) 3-(6-Хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)бутан-2-ол (118)
4
8
1
+
3
2
4
3
Смесь 2,6-дихлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (300 мг, 1,16 ммоль) и 3-аминобутан-2-ола (206 мг, 2,32 ммоль) в н-бутаноле (4 мл) нагревали при 100°С в течение 120 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования летучие вещества выпаривали и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/2) с получением 3-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)бутан-2-ола (118) (251 мг, 69% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,67-6,53 (2Н, m) 5,03 (1Н, d, J=8,3 Гц) 4,06-3,96 (1H, m) 3,80 (1H, пентет, J=6,2 Гц) 3,4-3,1 (1H, br s) 3,13 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,25 (3Н, d, J=6,2 Гц) 1,24 (3Н, d, J=6,6 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 312, 314 [M+H].
(b) 3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (119)
1
+
3
3-(6-Хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)бутан-2-ол (118) (251 мг, 0,81 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле, как описано в другом месте в данном документе, с получением 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (119) (80 мг, 30% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,54 (1Н, q, J=5,2 Гц) 6,24 (1H, q, J=5,2 Гц) 4,75-4,60 (2H, m) 4,42 (1H, br s) 3,88 (1H, секстет, J=7,1 Гц) 3,73 (1H, пентет, J=6,4 Гц) 3,40-3,31 (2H, m) 3,06 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,62 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,25-1,20 (6H, m) 0,98 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(с) 3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорид (119а)
1
+
3
3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо [5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (119) (80 мг, 0,24 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/EtOH (2/1) с получением 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорида (119а) (85 мг, 96% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,21-4,13 (1Н, m) 3,88-3,82 (1H, m) 3,49-3,44 (2H, m) 3,15 (3H, s) 3,14 (3H, s) 1,69 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,26 (3Н, d, J=6,8 Гц) 1,20 (3Н, d, J=6,4 Гц) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H]; MP: 179-181°C.
Сравнительный пример 73: 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диол (121) и соответствующая гидрохлоридная соль (121а)
(а) 3-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диол (120)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (300 мг, 1,16 ммоль) и 3-аминопропан-1,2-диол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9/1) до CHCl/EtOAc (1/2) с получением 3-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диола (120) (260 мг, 71% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,67 (1Н, br s) 6,50 (1H, br s) 5,34-5,25 (1H, m) 3,95-3,88 (1H, m) 3,66 (2H, d, J=5,0 Гц) 3,65-3,60 (2H, m) 3,15 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 314, 316 [M+H].
(b) 3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диол (121)
2
2
2
2
3
1
+
3-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диол (120) (260 мг, 0,83 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле, как описано в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9/1) до CHCl/EtOAc (1/2) с получением 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диола (121) (119 мг, 43% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,65 (1Н, br s) 6,13 (1H, br s) 5,02 (1H, t, J=6,4 Гц) 4,78-4,67 (1H, m) 3,89-3,83 (1H, m) 3,66 (1H, dd, J=11,3, 4,9 Гц) 3,61 (1H, dd, J=11,3, 5,0 Гц) 3,61-3,56 (2H, m) 3,39-3,31 (2H, m) 3,07 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 337 [M+H].
(c) 3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диола гидрохлорид (121а)
1
+
3
3-(4,8-Бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диол (121) (115 мг, 0,34 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением 3-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-1,2-диола гидрохлорида (121а) (120 мг, 94% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,89-3,81 (1H, m) 3,66 (1H, dd, J=14,0, 4,5 Гц) 3,60-3,57 (2H, m) 3,47 (1H, dd, J=14,0, 6,8 Гц) 3,47-3,41 (2H, m) 3,12 (3H, s) 3,10 (3H, s) 1,68 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,01 (3Н, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 337 [M+H]; MP: 232-234°C.
Пример 74: (1R,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (123) и соответствующая гидрохлоридная соль (123а)
(a) (1R,2S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (122)
4
8
1
+
2
5
3
Смесь 2,6-дихлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (250 мг, 0,96 ммоль), (1R,2S)-аминоиндан-2-ола (215 мг, 1,44 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (166 мкл, 0,96 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) нагревали при 100°С в течение 72 ч. Реакционную смесь охлаждали, осадок фильтровали, промывали водой (2×10 мл) и высушивали над твердым PO с получением (1R,2S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (122) (260 мг, 73% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,38-7,32 (1H, m) 7,32-7,18 (3Н, m) 6,72-6,56 (2Н, m) 5,58-5,45 (2Н, m) 4,81-4,73 (1Н, m) 3,23 (1Н, dd, J=16,5, 5,3 Гц) 3,14 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,04 (1Н, dd, J=16,5, 2,5 Гц) 2,56 (1H, br s). ESI-MS (масса/заряд): 372, 374 [М+Н].
(b) (1R,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (123)
1
+
3
(1R,2S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (122) (250 мг, 0,67 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле, как описано в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетон (5/1) до РЕ/ацетон (1/1) с получением (1R,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (123) (140 мг, 53% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,38-7,32 (1H, m) 7,30-7,25 (2Н, m) 7,25-7,17 (1Н, m) 6,58 (1Н, br s) 6,36 (1Н, br s) 5,46 (1H, ddd, J=7,0, 5,1, 0,8 Гц) 5,14 (1H, br s) 4,84-4,63 (2H, m) 3,43-3,33 (2H, m) 3,19 (1H, dd, J=16,5, 5,4 Гц) 3,08-3,01 (1H, m) 3,07 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,72-1,56 (2H, m) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
(c) (1R,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола гидрохлорид (123a)
1
+
3
(1R,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (123) (130 мг, 0,33 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (1R,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола гидрохлорида (123а) (110 мг, 77% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,33-7,26 (2Н, m) 7,26-7,16 (2Н, m) 5,68 (1Н, d, J=4,9 Гц) 4,70 (1H, td, J=5,0, 1,5 Гц) 3,48 (2H, t, J=7,1 Гц) 3,22 (1H, dd, J=16,5, 4,9 Гц) 3,14 (3Н, s) 3,13 (3Н, s) 2,98 (1H, d, J=16,5 Гц) 1,78-1,63 (2H, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
С помощью процедур, описанных в данном документе, и вариаций, легко доступных и известных специалистам в данной области, получали следующие пиримидо[5,4-d]-пиримидиниламиноциклоалканолы.
Пример 75: (1S,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (125) и соответствующая гидрохлоридная соль (125а)
(а) (1S,2S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2,3-дигидро-1Н-индан-2-ол (124)
1
+
3
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (250 мг, 0,96 ммоль) и (1S,2S)-1-аминоиндан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (3/1) до РЕ/EtOAc (1/1) с получением (1S,2S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2индан-2-ола (124) (230 мг, 64% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,35-7,23 (4Н, m) 6,74 (1Н, s) 6,51 (1H, br s) 5,7-5,1 (1H, br s) 5,46 (1H, d, J=6,0 Гц) 5,39-5,31 (1H, m) 4,55-4,45 (1H, m) 3,34 (1H, dd, J=15,5, 7,7 Гц) 3,15 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,09 (3Н, d, J=5,2 Гц) 2,96 (1H, dd, J=15,5, 8,7 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 372, 374 [М+Н].
(b) (1S,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (125)
1
+
3
(1S,2S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (124) (225 мг, 0,61 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетон (5/1) до РЕ/ацетон (2/1) с получением (1S,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (125) (125 мг, 52% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,38-7,31 (1Н, m) 7,31-7,22 (3Н, m) 6,78-6,60 (1H, m) 6,49-6,04 (2H, m) 5,31-5,19 (2H, m) 4,73 (1H, t, J=5,7 Гц) 4,53-4,42 (1H, m) 4,42-3,27 (3H, m) 3,10 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 2,95 (1H, dd, J=15,3, 8,9 Гц) 1,72-1,56 (2H, m) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
(c) (1S,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола гидрохлорид (125a)
1
+
3
(1S,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (125) (125 мг, 0,32 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир с получением (1S,2S)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола гидрохлорида (125а) (115 мг, 84% выход). 300 МГц H-ЯМР (CDOD, ppm): 7,28-7,14 (4Н, m) 5,47 (1Н, d, J=5,9 Гц) 4,51-4,38 (1H, m) 3,47 (2H, t, J=7,0 Гц) 3,35-3,23 (1H, m, перекрывается метанолом) 3,14 (3Н, s) 3,06 (3Н, s) 2,86 (1H, dd, J=15,6, 6,7 Гц) 1,79-1,61 (2H, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
Пример 76: (1S,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (127) и соответствующая гидрохлоридная соль (127а)
(a) (1S,2R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (126)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (300 мг, 1,16 ммоль) и (1S,2R)-1-аминоиндан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1S,2R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (126) (300 мг, 70% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,37-7,31 (1Н, m) 7,31-7,19 (3Н, m) 6,73-6,55 (2H, m) 5,58-5,49 (2H, m) 4,83-4,73 (1H, s) 3,23 (1H, dd, J=16,4, 5,3 Гц) 3,13 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,04 (1H, dd, J=16,4, 2,2 Гц) 2,66 (1H, br s). ESI-MS (масса/заряд): 372, 374 [M+H].
(b) (1S,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (127)
2
2
2
2
3
1
+
(1S,2R)-1-(6-Хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (126) (300 мг, 0,81 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1S,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (127) (170 мг, 53% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,38-7,33 (1Н, m) 7,30-7,18 (3Н, m) 6,61-6,47 (1H, m) 6,39-6,27 (1H, m) 5,49-5,42 (1H, m) 5,10 (1H, d, J=6,4 Гц) 4,80-4,65 (1H, m) 4,77 (1H, td, J=5,2, 3,3 Гц) 3,42-3,32 (2H, m) 3,19 (1H, dd, J=16,4, 5,4 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,0 Гц) 3,05 (1H, dd, J=16,4, 3,3 Гц) 1,64 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
(c) (1S,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола гидрохлорид (127а)
1
+
3
(1S,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо [5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (146) (167 мг, 0,42 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (10/1) с получением (1S,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола гидрохлорида (127а) (130 мг, 71% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,35-7,15 (4Н, m) 5,69 (1H, d, J=4,2 Гц) 4,73-4,67 (1Н, m) 3,47 (2Н, t, J=7,0 Гц) 3,22 (1H, dd, J=16,5, 4,7 Гц) 3,14 (3Н, s) 3,12 (3Н, s) 2,98 (1H, d, J=16,5 Гц) 1,71 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,03 (3Н, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [М+Н]; МР: 210-211°С.
Пример 77: (1R,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (129) и соответствующая гидрохлоридная соль (129а)
(a) (1R,2R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (128)
1
+
3
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (250 мг, 0,96 ммоль) и (1R,2R)-1-аминоиндан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (1R,2R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (128) (230 мг, 64% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,35-7,23 (4Н, m) 6,74 (1H, s) 6,50 (1H, br s) 5,6-5,1 (1H, br s) 5,46 (1H, d, J=6,1 Гц) 5,39-5,31 (1H, m) 4,55-4,45 (1H, m) 3,34 (1H, dd, J=15,6, 7,7 Гц) 3,15 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,09 (3Н, d, J=5,2 Гц) 2,96 (1H, dd, J=15,6, 8,7 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 372, 374 [M+H].
(b) (1R,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (129)
1
+
3
(1R,2R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (128) (230 мг, 0,62 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетон (5/1) до РЕ/ацетон (2/1) с получением (1R,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола (129) (120 мг, 49% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 7,40-7,32 (1Н, m) 7,32-7,22 (3Н, m) 6,74-6,59 (1H, m) 6,24 (1H, br s) 6,18-6,06 (1H, m) 5,31-5,25 (1H, m) 5,22 (1H, d, J=5,9 Гц) 4,72 (1H, t, J=5,5 Гц) 4,47 (1H, ddd, J=9,0, 7,7, 6,8 Гц) 3,41-3,33 (2H, m) 3,33 (1H, dd, J=15,5, 7,7 Гц) 3,10 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,95 (1H, dd, J=15,5, 9,0 Гц) 1,72-1,57 (2H, m) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
(c) (1R,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола гидрохлорид (129a)
1
+
3
(1R,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ол (129) (115 мг, 0,29 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиле с получением (1R,2R)-1-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-индан-2-ола гидрохлорида (129а) (110 мг, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 7,30-7,14 (4Н, m) 5,47 (1Н, d, J=6,1 Гц) 4,50-4,37 (1H, m) 3,47 (2H, t, J=7,1 Гц) 3,35-3,24 (1H, m, перекрывается метанолом) 3,14 (3H, s) 3,07 (3Н, s) 2,86 (1H, dd, J=15,6, 6,7 Гц) 1,79-1,62 (2H, m) 1,02 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 395 [M+H].
Пример 78: (1R,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (131) и соответствующая гидрохлоридная соль (131а)
(а) (1R,2S)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанол (130)
3
2
4
3
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (250 мг, 0,96 ммоль), (1R,2S)-2-аминоциклогексанола гидрохлорида (146 мг, 0,96 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (319 мкл, 1,92 ммоль) в н-бутаноле (4 мл) нагревали при 110°С в течение 100 ч. Смесь охлаждали и добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл). Полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/99) с получением (1R,2S)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанола (130) (140 мг, 43% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,63-6,52 (2Н, m) 5,20 (1Н, d, J=7,1 Гц) 4,19-4,08 (1H, m) 4,06-3,98 (1H, m) 3,3-3,0 (1H, br s) 3,14 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,84-1,57 (6H, m) 1,57-1,36 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 338, 340 [M+H].
(b) (1R,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (131)
1
+
3
(1R,2S)-2-(6-Хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанол (130) (140 мг, 0,41 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе, с получением (1R,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (131) (121 мг, 81% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,60-6,50 (1H, m) 6,36-6,21 (1H, m) 4,90 (1Н, d, J=5,6 Гц) 4,76 (1Н, t, J=5,2 Гц) 4,17-4,09 (1Н, m) 3,99-3,92 (1Н, m) 3,39-3,30 (2Н, m) 3,06 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,86-1,34 (10Н, m) 0,98 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н].
(c) (1R,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола гидрохлорид (131а)
1
+
3
(1R,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (130) (121 мг, 0,34 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (1R,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола гидрохлорида (131а) (85 мг, 64% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,15-4,06 (1Н, m) 4,03-3,97 (1Н, m) 3,43 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,11 (3Н, s) 3,11 (3Н, s) 1,90-1,57 (8Н, m) 1,53-1,36 (2Н, m) 1,0 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н].
Пример 79: (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (133) и соответствующая гидрохлоридная соль (133а)
(a) (1S,2S)-2-(6-Хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанол (132)
4
8
1
+
2
2
2
2
3
2,6-Дихлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (300 мг, 1,16 ммоль) и (1S,2S)-2-аминоциклогексанол вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1S,2S)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанола (132) (290 мг, 74% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,69-6,59 (1H, m) 6,57-6,47 (1H, m) 4,93 (1H, d, J=6,7 Гц) 4,76 (1H, s) 3,79-3,65 (1H, m) 3,52-3,41 (1H, m) 3,14 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,16-1,99 (2H, m) 1,82-1,70 (2H, m) 1,48-1,18 (4H, m). ESI-MS (масса/заряд): 338, 340 [M+H].
(b) (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (133)
2
2
2
2
3
1
+
(1S,2S)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанол (132) (290 мг, 0,86 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (133) (180 мг, 58% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,66-6,49 (1H, m) 6,23-6,06 (1Н, m) 5,89-5,69 (1Н, m) 4,75-4,57 (2Н, m) 3,69-3,55 (1H, m) 3,50-3,40 (1Н, m) 3,39-3,30 (2Н, m) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 2,16-1,95 (2Н, m) 1,81-1,68 (2Н, m) 1,63 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,43-1,19 (4Н, m) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H].
(с) (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола гидрохлорид (133а)
1
+
3
(1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (133) (142 мг, 0,39 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола гидрохлорида (133а) (135 мг, 86% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,89-3,75 (1Н, m) 3,56-3,39 (1H, m) 3,44 (2H, t, J=7,4 Гц) 3,13 (3Н, s) 3,12 (3Н, s) 2,12-1,98 (2H, m) 1,84-1,72 (2H, m) 1,67 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,52-1,25 (4H, m) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H]; MP: 163-165°C.
Пример 80: (1S,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (135) и соответствующая гидрохлоридная соль (135а)
(a) (1S,2R)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанол (134)
1
+
3
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (250 мг, 0,96 ммоль) и (1S,2R)-2-аминоциклогексанола гидрохлорид вводили в реакцию в н-бутаноле с получением (1S,2R)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанола (134) (221 мг, 68% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,64-6,50 (2Н, m) 5,20 (1Н, d, J=7,3 Гц) 4,19-4,09 (1H, m) 4,05-3,98 (1H, m) 3,3-3,0 (1H, br s) 3,14 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,84-1,36 (8H, m). ESI-MS (масса/заряд): 338, 340 [M+H].
(b) (1S,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (135)
1
+
3
(1S,2R)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанол (134) (221 мг, 0,65 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с получением (1S,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (135) (155 мг, 66% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,60-6,49 (1Н, m) 6,28-6,16 (1Н, m) 4,83 (1H, d, J=6,0 Гц) 4,68 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,18-4,10 (1Н, m) 3,99-3,93 (1Н, m) 3,39-3,30 (2Н, m) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,87-1,32 (8Н, m) 1,63 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н].
(с) (1S,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола гидрохлорид (134а)
1
+
3
(1S,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (135) (131 мг, 0,36 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (1S,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола гидрохлорида (135а) (110 мг, 76% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm) 4,19-4,09 (1Н, m) 4,03-3,96 (1Н, m) 3,47 (2Н, t, J=7,1 Гц) 3,15 (6Н, s) 1,88-1,59 (8Н, m) 1,53-1,37 (2Н, m) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н].
Пример 81: (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (137) и соответствующая гидрохлоридная соль (137а)
(а) (1R,2R)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанол (136)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (300 мг, 1,16 ммоль) и (1R,2R)-2-аминоциклогексанол вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1R,2R)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанола (136) (225 мг, 58% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,65 (1Н, s) 6,53 (1H, s) 5,1-4,6 (1H, br s) 5,00-4,88 (1H, m) 3,80-3,62 (1H, m) 3,53-3,38 (1H, m) 3,14 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,17-1,98 (2H, m) 1,83-1,70 (2H, m) 1,45-1,18 (4H, m). ESI-MS (масса/заряд): 338, 340 [M+H].
(b) (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (137)
2
2
2
2
3
1
+
(1R,2R)-2-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)циклогексанол (136) (220 мг, 0,65 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола (137) (165 мг, 70% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,59 (1H, br s) 6,15 (1Н, br s) 5,79 (1H, br s) 4,74-4,60 (2H, m) 3,69-3,55 (1H, m) 3,50-3,40 (1H, m) 3,39-3,30 (2H, m) 3,07 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 2,16-1,95 (2H, m) 1,81-1,68 (2H, m) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,47-1,19 (4H, m) 0,99 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H].
(c) (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола гидрохлорид (137a)
1
+
3
(1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанол (137) (160 мг, 0,44 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (20/1) с получением (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклогексанола гидрохлорида (137а) (140 мг, 79% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,87-3,75 (1Н, m) 3,53-3,37 (1H, m) 3,43 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,11 (3Н, s) 3,10 (3Н, s) 2,11-1,98 (2Н, m) 1,84-1,72 (2Н, m) 1,67 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,50-1,25 (4Н, m) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н]; MP: 170-171°С.
Пример 82: (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанол (139) и соответствующая гидрохлоридная соль (139а)
(a) (1S,2S)-2-((6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-циклопентанол (138)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (300 мг, 1,16 ммоль) и (1S,2S)-2-аминоциклопеитанола гидрохлорид вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1S,2S)-2-((6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-циклопентанола (138) (310 мг, 83% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6-75-6,61 (1Н, m) 6,47 (1H, br s) 5,30 (1H, br s) 5,14 (1H, d, J=3,8 Гц) 4,14-3,95 (2H, m) 3,12 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 2,28-2,02 (2H, m) 1,94-1,61 (3H, m) 1,61-1,43 (1H, m). ESI-MS (масса/заряд): 324, 326 [М+Н].
(b) (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанол (139)
2
2
2
2
3
1
+
(1S,2S)-2-((6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-циклопентанол (138) (310 мг, 0,96 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола (139) (135 мг, 41% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,69-6,55 (1H, m) 6,4-6,2 (1H, br s) 6,13-5,98 (1H, m) 4,86 (1H, d, J=3,6 Гц) 4,69 (1H, t, J=5,4 Гц) 4,08-3,86 (2H, m) 3,41-3,29 (2H, m) 3,07 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,24-2,03 (2H, m) 1,90-1,44 (6H, m) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H].
(с) (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола гидрохлорид (139а)
1
+
3
(1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанол (139) (134 мг, 0,39 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (6/1) с получением (1S,2S)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола гидрохлорида (139а) (85 мг, 57% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm) 4,21-4,04 (2Н, m) 3,46 (2H, t, J=7,4 Гц) 3,16 (3H, s) 3,13 (3H, s) 2,31-2,14 (1H, m) 2,07-1,92 (1H, m) 1,92-1,74 (2H, m) 1,74-1,52 (4H, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H]; МР: 215-217°С.
Пример 83: (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанол (141) и соответствующая гидрохлоридная соль (141а)
(a) (1R,2R)-2-((6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-циклопентанол (140)
2
2
2
2
3
1
+
2,6-Дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (88) (300 мг, 1,16 ммоль) и (1R,2R)-2-аминоциклопентанола гидрохлорид вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1R,2R)-2-((6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-циклопентанола (140) (270 мг, 72% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6-76-6,62 (1H, m) 6,45 (1H, br s) 5,31 (1H, br s) 5,17-5,08 (1H, m) 4,12-3,95 (2H, m) 3,13 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,06 (3H, d, J=5,2 Гц) 2,28-2,02 (2H, m) 1,94-1,62 (3H, m) 1,62-1,45 (1H, m). ESI-MS (масса/заряд): 324, 326 [M+H].
(b) (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанол (141)
2
2
2
2
3
1
+
(1R,2R)-2-((6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)-циклопентанол (140) (270 мг, 0,83 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (99/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола (141) (160 мг, 55% выход). 300 МГц H-ЯМР (CDCl, ppm): 6,69-6,55 (1Н, m) 6,31 (1Н, s) 6,14-5,98 (1Н, m) 4,87 (1Н, d, J=3,6 Гц) 4,69 (1H, t, J=5,4 Гц) 4,08-3,98 (1Н, m) 3,98-3,86 (1Н, m) 3,41-3,30 (2Н, m) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 2,24-2,04 (2Н, m) 1,92-1,44 (6Н, m) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H].
(с) (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола гидрохлорид (141а)
1
+
3
(1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанол (141) (160 мг, 0,46 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (6/1) с получением (1R,2R)-2-(4,8-бис-метиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-циклопентанола гидрохлорида (141а) (115 мг, 65% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,22-4,03 (2Н, m) 3,43 (2Н, t, J=7,4 Гц) 3,15 (3Н, s) 3,12 (3Н, s) 2,30-2,14 (1Н, m) 2,07-1,91 (1Н, m) 1,91-1,74 (2Н, m) 1,74-1,52 (4H, m) 1,01 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 347 [М+Н]; МР: 209-210°С.
Пример 84: (S)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (142) и соответствующая гидрохлоридная соль (142а)
(а) (S)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (142)
1
+
3
(S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ол (112) (220 мг, 0,74 ммоль) и циклопропилметанамин вводили в реакцию в н-бутаноле с получением (S)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламииопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (142) (130 мг, 53% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,63-6,51 (1Н, m) 6,25-6,14 (1Н, m) 5,08-4,99 (1Н, m) 4,86-4,76 (1Н, m) 4,07-4,0 (1Н, m) 3,55-3,44 (1Н, m) 3,41-3,30 (1Н, m) 3,28-3,21 (2H, m) 3,09-3,06 (6H, m) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,15-1,01 (1Н, m) 0,56-0,48 (2H, m) 0,29-0,19 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 333 [М+Н].
(b) (S)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (142а)
1
+
3
(S)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (142) (126 мг, 0,38 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/EtOH (2/1) с получением (S)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (142а) (90 мг, 64% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,06-3,92 (1Н, m) 3,56-3,49 (1Н, m) 3,46-3,37 (1Н, m) 3,31 (2H, d, J=7,1 Гц) 3,14 (3H, s) 3,12 (3H, s) 1,23 (3H, d, J=6,4 Гц) 1,22-1,10 (1Н, m) 0,60-0,51 (2H, m) 0,36-0,27 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 333 [М+Н]; МР: 211-213°С.
Пример 85: (S)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (143) и соответствующая гидрохлоридная соль (143а)
(а) (S)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (143)
3
4
3
1
+
(S)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ол (112) (1,33 г, 4,47 ммоль) и аллиламин (2,0 мл, 26,80 ммоль) нагревали в н-бутаноле при 105°С в течение 8 дней. Смесь охлаждали и добавляли насыщенный раствор NaHCO (40 мл). Полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (1/1) до РЕ/EtOAc (99/1) с получением (S)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (143) (820 мг, 58% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,62-6,48 (1Н, m) 6,26-6,14 (1Н, m) 5,99 (1Н, ddt, J=17,2, 10,2, 5,5 Гц) 5,25 (1Н, ddt, J=17,2, 1,6, 1,6 Гц) 5,12 (1Н, ddt, J=10,2, 1,6, 1,6 Гц) 5,04 (1Н, t, J=6,3 Гц) 4,90 (1H, br s) 4,74 (1Н, t, J=5,9 Гц) 4,09-3,98 (3H, m) 3,50 (1Н, ddd, J=14,4, 6,3, 2,4 Гц) 3,36 (1Н, ddd, J=14,4, 7,0, 6,3 Гц) 3,06 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,05 (3H, d, J=5,1 Гц) 1,23 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 319 [М+Н].
(b) (S)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (143а)
1
+
3
(S)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (143) (820 мг, 2,58 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (2/1) с получением (S)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (143а) (870 мг, 95% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 5,97 (1Н, ddd, J=17,2, 10,3, 5,4 Гц) 5,29 (1Н, ddt, J=17,2, 1,6, 1,6 Гц) 5,16 (1Н, ddt, J=10,3, 1,6, 1,6 Гц) 4,13 (2Н, dt, J=5,4, 1,6 Гц) 4,00 (1Н, dqd, J=7,0, 6,3, 4,3 Гц) 3,56 (1Н, dd, J=13,8, 4,3 Гц) 3,42 (1Н, dd, J=13,8, 7,0 Гц) 3,14 (3H, s) 3,13 (3H, s) 1,23 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 319 [M+H]; МР: 192-193°С.
Пример 86: (R)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламино-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (144) и соответствующая гидрохлоридная соль (144а)
(а) (R)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (144)
1
+
3
(R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ол (114) (210 мг, 0,71 ммоль) и циклопропилметанамин вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетон (10/1) до РЕ/ацетон (1/1) с получением (R)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (144) (110 мг, 47% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,63-6,49 (1Н, m) 6,24-6,12 (1Н, m) 5,04 (1Н, t, J=6,0 Гц) 4,93 (1H, s) 4,82 (1H, t, J=5,6 Гц) 4,09-3,98 (1H, m) 3,56-3,44 (1H, m) 3,42-3,29 (1H, m) 3,28-3,21 (2H, m) 3,07 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,06 (3H, d, J=5,2 Гц) 1,23 (3H, d, J=6,3 Гц) 1,16-1,02 (1H, m) 0,56-0,46 (2H, m) 0,28-0,20 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 333 [M+H].
(b) (R)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (144а)
1
+
3
(R)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (144) (110 мг, 0,33 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (2/1) с получением (R)-1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (144а) (120 мг, 98% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,05-3,91 (1H, m) 3,58-3,45 (1H, m) 3,45-3,34 (1H, m) 3,34-3,27 (2H, m, перекрывается метанолом) 3,11 (3H, s) 3,09 (3H, s) 1,22 (3H, d, J=6,2 Гц) 1,19-1,07 (1H, m) 0,61-0,49 (2H, m) 0,35-0,24 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 333 [M+H]; МР: 224-226°С.
Пример 87: (R)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (145) и соответствующая гидрохлоридная соль (145а)
(а) (R)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (145)
1
+
3
(R)-1-(6-хлор-4,8-бис(метиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)пропан-2-ол (114) (210 мг, 0,71 ммоль) и аллиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с получением (R)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (145) (125 мг, 55% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,63-6,48 (1H, m) 6,27-6,13 (1H, m) 5,99 (1H, ddt, J=17,2, 10,2, 5,6 Гц) 5,25 (1H, ddt, J=17,2, 1,6, 1,6 Гц) 5,11 (1H, ddt, J=10,2, 1,6, 1,4 Гц) 5,05 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,90 (1H, s) 4,74 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,10-3,98 (3H, m) 3,50 (1H, ddd, J=14,4, 6,3, 2,4 Гц) 3,42-3,29 (1H, m) 3,06 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,05 (3H, d, J=5,1 Гц) 1,23 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 319 [М+H].
(b) (R)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (145а)
1
+
3
(R)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (145) (120 мг, 0,38 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (2/1) с получением (R)-1-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (145а) (120 мг, 90% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 5,97 (1Н, ddt, J=17,2, 10,3, 5,4 Гц) 5,28 (1Н, ddt, J=17,2, 1,6, 1,6 Гц) 5,15 (1Н, ddt, J=10,3, 1,6, 1,5 Гц) 4,12 (2Н, dt, J=5,4, 1,6 Гц) 4,04-3,95 (1Н, m) 3,54 (1Н, dd, J=13,7, 4,4 Гц) 3,42 (1Н, dd, J=13,7, 7,0 Гц) 3,13 (3Н, s) 3,12 (3H, s) 1,23 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 319 [М+Н]; МР: 205-207°С.
Пример 88: 1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-бутан-2-ол (146) и соответствующая гидрохлоридная соль (146а)
(а) 1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-бутан-2-ол (146)
2
2
2
2
3
1
+
1-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (116) (350 мг, 1,12 ммоль) и циклопропилметанамин вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением 1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-бутан-2-ола (146) (210 мг, 54% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,66-6,50 (1Н, m) 6,28-6,15 (1Н, m) 5,04 (1Н, t, J=6,0 Гц) 4,90 (1Н, s) 4,87-4,77 (1Н, m) 3,77-3,69 (1Н, m) 3,57 (1Н, ddd, J=14,4, 6,3, 2,4 Гц) 3,41-3,32 (1Н, m) 3,24 (2Н, dd, J=7,0, 5,5 Гц) 3,06 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,05 (3H, d, J=5,1 Гц) 1,64-1,47 (2Н, m) 1,15-1,03 (1Н, m) 0,99 (3H, t, J=7,4 Гц) 0,54-0,48 (2Н, m) 0,27-0,21 (2Н, m). ESI-MS (масса/заряд): 347 [М+Н].
(b) 1-[6-(Циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-бутан-2-ола гидрохлорид (146а)
1
+
3
1-[6-(Циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-бутан-2-ол (146) (150 мг, 0,43 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (4/1) с получением 1-[6-(циклопропилметиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино]-бутан-2-ола гидрохлорида (146а) (145 мг, 87% выход). 400 МГц H-ЯМР (CDOD, ppm): 3,75-3,66 (1Н, m) 3,60 (1H, dd, J=13,8, 3,9 Гц) 3,40 (1H, dd, J=13,8, 7,2 Гц) 3,35 (2H, d, J=7,0 Гц) 3,13 (3Н, s) 3,11 (3H, s) 1,67-1,54 (1H, m) 1,54-1,42 (1H, m) 1,21-1,09 (1H, m) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц) 0,59-0,52 (2H, m) 0,34-0,28 (2H, m). ESI-MS (масса/заряд): 347 [M+H]; MP: 208-209°C.
Пример 89: 1-(6-этиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (147) и соответствующая гидрохлоридная соль (147а)
(а) 1-(6-Этиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (147)
2
2
2
2
3
1
+
1-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (116) (325 мг, 1,04 ммоль) и этиламин (70% водный раствор) (0,8 мл) вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением 1-(6-этиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола (147) (150 мг, 45% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,62 (1H, s) 6,25 (1H, s) 5,14-4,98 (1H, m) 4,97-4,53 (1H, m) 4,68 (1H, s) 3,77-3,70 (1H, m) 3,57 (1H, ddd, J=14,5, 6,3, 2,4 Гц) 3,43 (2H, qd, J=7,2, 5,7 Гц) 3,41-3,33 (1H, m) 3,07 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,64-1,47 (2H, m) 1,23 (3Н, t, J=7,2 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,5 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H].
(b) 1-(6-Этиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорид (147а)
1
+
3
1-(6-Этиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ол (147) (140 мг, 0,44 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (3/1) с получением 1-(6-этиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-бутан-2-ола гидрохлорида (147а) (120 мг, 77% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,76-3,64 (1Н, m) 3,64-3,34 (4H, m) 3,11 (3H, s) 3,09 (3H, s) 1,67-1,54 (1H, m) 1,54-1,42 (1H, m) 1,26 (3H, t, J=6,5 Гц) 1,01 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 321 [M+H]; MP: 190-191°С.
Пример 90: 2-метил-1-(4,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (148) и соответствующая гидрохлоридная соль (148а)
(a) 1-(6-Хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ол (148)
2
4
2
2
2
2
3
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (1,50 г, 5,79 ммоль) и 1-амино-2-метилпропан-2-ола (1,65 мл, 17,37 ммоль) в н-бутаноле (10 мл) нагревали при 90°С в течение 40 ч в закрытом сосуде. Добавляли воду (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением 1-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола (148) (1,47 г, 81% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,69-6,58 (1H, m) 6,58-6,46 (1H, m) 5,36 (1H, t, J=6,4 Гц) 4,02 (1H, s) 3,45 (2H, d, J=6,4 Гц) 3,13 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3H, d, J=5,1 Гц) 1,28 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 312, 314 [M+H].
(b) 2-Метил-1-(4,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (149)
2
4
2
2
2
2
3
1
+
Смесь 1-(6-хлор-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола (148) (312 мг, 1,00 ммоль) и метиламина (40% водный раствор) (2,30 мл) в н-бутаноле (7 мл) нагревали при 120°С в течение 48 ч в закрытом сосуде. Добавляли воду (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл), солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOAc (9/1) до CHCl/EtOAc (1/4) с получением 2-метил-1-(4,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (149) (230 мг, 75% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,71-6,55 (1Н, m) 6,24-6,09 (1H, m) 5,37 (1H, s) 5,09 (1H, t, J=6,3 Гц) 4,72-4,61 (1H, m) 3,40 (2H, d, J=6,3 Гц) 3,07 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3H, d, J=5,1 Гц) 2,96 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,26 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 307 [М+Н].
(с) 2-Метил-1-(4,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (149а)
1
+
3
2-Метил-1-(4,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (149) (180 мг, 0,59 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (10/1) с получением 2-метил-1-(4,6,8-трис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (149а) (145 мг, 72% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,51 (2H, s) 3,14 (3Н, s) 3,13 (3Н, s) 3,04 (3Н, s) 1,26 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 307 [M+H]; МР: 214-215°С.
Сравнительный пример 91: (R)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (151) и соответствующая гидрохлоридная соль (151а)
4
8
(а) 6-Хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (150)
2
5
3
4
8
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (800 мг, 3,09 ммоль) и нашатырного спирта (25% раствор) (1,00 мл) в н-бутаноле (10 мл) нагревали при 100°С в течение 48 ч в закрытом сосуде. Добавляли дополнительную порцию нашатырного спирта (25% раствор) (1,00 мл) и нагревание продолжали в течение еще 48 ч. Реакционную смесь охлаждали и осадок фильтровали, промывали водой (2×30 мл) и высушивали над твердым PO с получением 6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (150) (590 мг, 80% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,69 (1Н, s) 6,59 (1Н, s) 4,83 (2H, s) 3,13 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,06 (3H, d, J=5,1 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 240, 242 [M+H].
(b) (R)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (151)
4
8
1
+
3
3
3
6-Хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (150) (280 мг, 1,17 ммоль) и (R)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOH (98/2) до CHCl/EtOH (96/4) с получением (R)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (151) (170 мг, 52% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,61-6,46 (1Н, m) 6,39-6,21 (1Н, m) 5,31 (1Н, t, J=5,9 Гц) 4,9-4,4 (1Н, br s) 4,60 (2H, s) 4,04 (1Н, dqd, J=7,1, 6,3, 2,5 Гц) 3,51 (1Н, ddd, J=14,3, 6,3, 2,5 Гц) 3,36 (1Н, ddd, J=14,3, 7,1, 6,1 Гц) 3,06 (3H, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3H, d, J=5,1 Гц) 1,23 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 279 [M+H].
(c) (R)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (151а)
1
+
3
(R)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (151) (170 мг, 0,61 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (10/1) с получением (R)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (151а) (150 мг, 78% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,03-3,90 (1Н, m) 3,51 (1Н, dd, J=13,7, 4,7 Гц) 3,40 (1Н, dd, J=13,7, 6,9 Гц) 3,14 (3H, s) 3,09 (3H, s) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 279 [М+Н]; МР: 229-231°С.
Сравнительный пример 92: (S)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (152) и соответствующая гидрохлоридная соль (152а)
(a) (S)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (152)
4
8
1
+
2
2
2
2
3
6-Хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (150) (280 мг, 1,17 ммоль) и (S)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOH (99/1) до CHCl/EtOH (9/1) с получением (S)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (152) (165 мг, 51% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,59-6,48 (1Н, m) 6,38-6,25 (1Н, m) 5,16-5,04 (1Н, m) 4,72 (1Н, br s) 4,58 (2H, s) 4,09-3,98 (1Н, m) 3,51 (1Н, ddd, J=14,4, 6,3, 2,5 Гц) 3,36 (1Н, ddd, J=14,4, 7,1, 6,1 Гц) 3,06 (3Н, d, J=5,1 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,23 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 279 [М+Н].
(b) (S)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (152а)
1
+
3
(S)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (152) (165 мг, 0,59 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (10/1) с получением (S)-1-(6-амино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (152а) (150 мг, 80% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,00 (1Н, dqd, J=7,0, 6,3, 4,3 Гц) 3,58 (1Н, dd, J=13,7, 4,3 Гц) 3,44 (1Н, dd, J=13,7, 7,0 Гц) 3,17 (3Н, s) 3,16 (3Н, s) 1,24 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 279 [М+Н]; МР: 227-230°С.
Пример 93: 2-(6-Аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (154) и соответствующая гидрохлоридная соль (154а)
2
4
8
(a) N-аллил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (153)
3
2
4
3
2
4
8
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (750 мг, 2,89 ммоль) и аллиламина (433 мкл, 5,78 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) нагревали при 100°С в течение 18 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования летучие вещества выпаривали и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/2) с получением N-аллил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (153) (760 мг, 94% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,79-6,65 (1Н, m) 6,58-6,45 (1Н, m) 5,97 (1Н, ddt, J=17,2, 10,3, 5,4 Гц) 5,26 (1Н, ddt, J=17,2, 1,6, 1,6 Гц) 5,14 (1Н, ddt, J=10,3, 1,4, 1,4 Гц) 5,04 (1Н, t, J=5,4 Гц) 4,11-4,04 (2Н, m) 3,14 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,04 (3Н, d, J=5,1 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 280, 282 [М+Н].
(b) 2-(6-Аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (154)
2
4
8
1
+
3
N-аллил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (153) (250 мг, 0,89 ммоль) и 2-аминоэтанол вводили в реакцию в н-бутаноле с получением 2-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (154) (120 мг, 44% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,62-6,51 (1Н, m) 6,31-6,17 (1Н, m) 5,99 (1Н, ddt, J=17,1, 10,3, 5,7 Гц) 5,25 (1Н, ddt, J=17,1, 1,7, 1,7 Гц) 5,15-5,05 (2Н, m) 4,76 (1Н, t, J=5,7 Гц) 4,08-4,02 (2Н, m) 3,86-3,80 (2Н, m) 3,62-3,54 (2Н, m) 3,06 (3Н, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 305 [M+H].
(c) 2-(6-Аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола гидрохлорид (154а)
1
+
3
2-(6-Аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (154) (120 мг, 0,39 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (1/1) с получением 2-(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола гидрохлорида (154а) (110 мг, 83% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 5,98 (1Н, ddt, J=17,1, 10,3, 5,7 Гц) 5,31-5,21 (1Н, m) 5,17-5,10 (1Н, m) 4,15-4,04 (2Н, m) 3,77-3,71 (2Н, m) 3,63-3,55 (2Н, m) 3,09 (6H, s). ESI-MS (масса/заряд): 305 [M+H].
Пример 94: (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-ил)-пропиламино]-пропан-2-ол (155) и соответствующая гидрохлоридная соль (155а)
(a) (S)-1-(пропиламино)пропан-2-ол
4
2
4
3
1
+
Пропиональдегид (274 мкл, 3,76 ммоль) добавляли к раствору (S)-1-аминопропан-2-ола в EtOH (5,0 мл) при 0°С и смесь перемешивали при 0°С в течение 45 мин. По прошествии этого времени при 0°С порциями добавляли NaBH (259 мг, 6,84 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Добавляли воду (4 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли с получением (S)-1-(пропиламино)пропан-2-ола (336 мг, 84% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 3,79-3,70 (1Н, m) 3,21 (1H, br s) 2,70 (1H, dd, J=12,1, 3,2 Гц) 2,65-2,62 (1H, dt, J=11,6, 7,1 Гц) 2,55 (1H, dt, J=11,6, 7,1 Гц) 2,38 (1H, dd, J=12,1, 9,5 Гц) 1,49 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,14 (3Н, d, J=6,3 Гц) 0,92 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 118 [M+H].
(b) (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-ил)-пропиламино]-пропан-2-ол (155)
2
4
8
1
+
3
4
3
Смесь N-аллил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (153) (250 мг, 0,89 ммоль), (S)-1-(пропиламино)пропан-2-ола (313 мг, 2,67 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (295 мкл, 1,78 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) нагревали при 125°С в течение 100 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл), затем солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (2/1) с получением (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-ил)-пропиламино]-пропан-2-ола (155) (135 мг, 42% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,49 (1H, br s) 6,21 (1H, br s) 6,06-5,90 (2Н, m) 5,30-5,20 (1H, m) 5,15-5,07 (1Н, m) 4,76-4,66 (1H, m) 4,17-3,99 (3H, m) 3,78 (1H, dd, J=14,8, 7,9 Гц) 3,73-3,59 (1H, m) 3,54-3,42 (1H, m) 3,37 (1H, dd, J=14,8, 1,2 Гц) 3,07 (6Н, d, J=5,1 Гц) 1,75-1,60 (2Н, m) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц) 0,93 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H].
(с) (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-ил)-пропил-амино]-пропан-2-ола гидрохлорид (155а)
1
+
3
(S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-ил)-пропиламино]-пропан-2-ол (155) (125 мг, 0,35 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-ил)-пропиламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (155а) (120 мг, 86% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 5,98 (1H, ddt, J=17,2, 10,4, 5,1 Гц) 5,29 (1H, ddt, J=17,2, 1,5, 1,5 Гц) 5,18 (1H, ddt, J=10,4, 1,5, 1,5 Гц) 4,22-4,08 (3H, m) 3,76-3,50 (4H, m) 3,15 (3H, s) 3,09 (3H, s) 1,78-1,61 (2Н, m) 1,22 (3H, d, J=6,4 Гц) 0,95 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н]; МР: 198-200°С.
Пример 95: (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (156) и соответствующая гидрохлоридная соль (156а)
(а) (S)-этил-2-((2-гидроксипропил)амино)ацетат
2
4
3
1
+
К раствору (S)-1-аминопропан-2-ола (414 мкл, 5,26 ммоль) в 1,4-диоксане (5,0 мл) добавляли 5 M NaOH (1,18 мл, 5,92 ммоль) и этилхлорформиат (564 мкл, 5,92 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли воду (15 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли с получением (S)-этил-2-((2-гидроксипропил)амино)ацетата (734 мг, 95% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 5,12 (1H, br s) 4,16-4,06 (2Н, m) 3,96-3,83 (1H, m) 3,31 (1H, ddd, J=14,0, 6,5, 3,1 Гц) 3,03 (1H, ddd, J=14,0, 7,5, 5,5 Гц) 2,7-2,2 (1H, br s) 1,28-1,20 (6Н, m) 1,17 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 148 [М+Н].
(b) (S)-1-(метиламино)пропан-2-ол
4
2
2
3
1
+
LiAlH (379 мг, 9,97 ммоль) добавляли к раствору (S)-этил-2-((2-гидроксипропил)-амино)ацетата (734 мг, 4,99 ммоль) в THF (10 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч и после охлаждения добавляли 15% водный раствор NaOH (1,2 мл). Полученный осадок фильтровали и промывали последовательно с помощью THF, CHCl и диэтилового эфира (каждого по 10 мл). Фильтрат выпаривали с получением (S)-1-(метиламино)пропан-2-ола (289 мг, 65% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 3,86-3,74 (1Н, m) 2,64 (1Н, dd, J=12,0, 3,1 Гц) 2,44 (3Н, s) 2,4 (1Н, dd, J=12,0, 9,4 Гц) 1,16 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 90 [M+H].
(c) (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (156)
2
4
8
1
+
3
N-аллил-6-хлор-N,N-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (153) (253 мг, 0,90 ммоль) (S)-1-(метиламино)пропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с получением (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола (156) (130 мг, 43% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,68-6,46 (1Н, br s) 6,43-6,27 (1Н, br s) 5,98 (1Н, ddt, J=17,4, 10,3, 5,6 Гц) 5,26 (1H, ddt, J=17,4, 1,7, 1,7 Гц) 5,12 (1Н, ddt, J=10,3, 1,5, 1,5 Гц) 4,93-4,65 (1Н, br s) 4,17-4,09 (1Н, m) 4,08-4,03 (2H, m) 3,75 (1Н, dd, J=14,7, 7,4 Гц) 3,47 (1Н, dd, J=14,7, 2,2 Гц) 3,21 (3Н, s) 3,07 (6Н, d, J=5,1 Гц) 1,23 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 333 [M+H].
(d) (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (156а)
1
+
3
(S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ол (156) (130 мг, 0,39 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/этанол (5/2) с получением (S)-1-[(6-аллиламино-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)-метиламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (156а) (110 мг, 76% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 5,98 (1Н, ddt, J=17,2, 10,3, 5,4 Гц) 5,29 (1Н, ddt, J=17,2, 1,7, 1,7 Гц) 5,18 (1Н, ddt, J=10,3, 1,5, 1,5 Гц) 4,17-4,10 (3Н, m) 3,71-3,61 (2H, m) 3,28 (3Н, s) 3,15 (3Н, s) 3,09 (3Н, s) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 333 [М+H]; МР: 218-220°С.
Пример 96: (R)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (158) и соответствующая гидрохлоридная соль (158а)
4
8
2
(a) 6-Хлор-N,N-диметил-N-(2-метилаллил)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (157)
4
3
4
8
2
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диметилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (88) (700 мг, 2,70 ммоль), 2-метилаллиламина (294 мкл, 3,24 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (560 мкл, 3,24 ммоль) в н-бутаноле (8 мл) нагревали при 90°С в течение 48 ч. Добавляли дополнительную порцию 2-метилаллиламина (100 мкл, 1,10 ммоль) и смесь нагревали при 90°С в течение 24 ч. После охлаждения добавляли воду (30 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток фильтровали через силикагель с помощью РЕ/EtOAc (1/1) с получением 6-хлор-N,N-диметил-N-(2-метилаллил)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (157) (650 мг, 82% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,77-6,63 (1Н, m) 6,58-6,45 (1H, m) 5,06 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,96-4,91 (1H, m) 4,87-4,83 (1H, m) 4,03-3,98 (2H, m) 3,14 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,1 Гц) 1,81-1,78 (3H, m). ESI-MS (масса/заряд): 294, 296 [М+Н].
(b) (R)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (158)
4
8
2
1
+
3
3
3
6-Хлор-N,N-диметил-N-(2-метилаллил)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (157) (325 мг, 1,11 ммоль) и (R)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/МеОН (99/1) до CHCl/EtOH (97/3) с получением (R)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (158) (185 мг, 50% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,63-6,48 (1H, m) 6,29-6,12 (1H, m) 5,11-5,01 (1H, m) 4,96-4,91 (1H, m) 4,86-4,81 (1H, m) 4,81-4,73 (1H, m) 4,09-3,95 (1H, m) 3,98 (2H, d, J=6,0 Гц) 3,50 (1H, ddd, J=14,4, 6,3, 2,5 Гц) 3,41-3,30 (1Н, m) 3,06 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,80 (3H, s) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 333 [M+H].
(с) (R)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (158а)
1
+
2
(R)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (158) (180 мг, 0,54 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/метанол (2/1) с получением (R)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (158а) (175 мг, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 4,97-4,90 (2Н, m) 4,14-4,04 (1Н, m) 4,04-3,99 (2H, m) 3,52 (1Н, dd, J=14,0, 4,5 Гц) 3,44 (1Н, dd, J=14,0, 7,0 Гц) 3,08 (3Н, s) 3,07 (3Н, s) 1,81 (3Н, s) 1,25 (3H, d, J=6,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 333 [M+H].
Пример 97: (S)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (159) и соответствующая гидрохлоридная соль (159а)
(а) (S)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (159)
4
8
2
1
+
3
3
3
6-Хлор-N,N-диметил-N-(2-метилаллил)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (157) (325 мг, 1,11 ммоль) и (S)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/МеОН (99/1) до CHCl/EtOH (97/3) с получением (S)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (159) (185 мг, 50% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,62-6,47 (1Н, m) 6,26-6,13 (1Н, m) 5,05 (1Н, t, J=6,1 Гц) 4,96-4,91 (1Н, m) 4,85-4,81 (1Н, m) 4,78 (1Н, t, J=5,9 Гц) 4,09-3,95 (1Н, m) 3,98 (2H, d, J=6,1 Гц) 3,50 (1Н, ddd, J=14,3, 6,3, 2,5 Гц) 3,41-3,30 (1Н, m) 3,06 (3H, d, J=5,2 Гц) 3,05 (3Н, d, J=5,2 Гц) 1,81-1,78 (3H, m) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 333 [M+H].
(b) (S)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (159а)
1
+
2
(S)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (159) (180 мг, 0,54 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/метанол (2/1) с получением (S)-1-[6-(2-метилаллиламино)-4,8-бис-метиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (159а) (185 мг, 93% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DO, ppm): 4,97-4,90 (2Н, s) 4,13-4,03 (1H, m) 4,03-3,95 (2H, m) 3,55-3,35 (2H, m) 3,05 (6H, s) 1,81 (3Н, s) 1,25 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 333 [М+Н]; МР: 201-203°C.
Пример 98: 2-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (162) и соответствующая гидрохлоридная соль (162а)
(a) 2,6-Дихлор-N,N'-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамин (160)
2
5
6
1
+
2 M этиламин/THF (27 мл, 54,00 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2,4,6,8-тетрахлорпиримидо[5,4-d]пиримидина (1) (3,00 г, 11,15 ммоль) в THF (150 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Летучие вещества удаляли и остаток суспендировали в воде (50 мл). Полученный осадок фильтровали, промывали водой (2×30 мл) и высушивали над твердым PO с получением 2,6-дихлор-N,N'-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (160) (2,93 г, 92% выход). 300 МГц Н-ЯМР (DMSO-d, ppm): 8,68 (2H, t, J=5,9 Гц) 3,52-3,40 (4Н, m) 1,16 (6H, t, J=7,1 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 287, 289, 291 [М+Н].
4
8
2
(b) 6-Хлор-N,N-диэтил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (161)
3
2
4
3
4
8
2
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (160) (420 мг, 1,46 ммоль) и пропиламина (720 мкл, 8,76 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) нагревали при 90°С в течение 24 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (15 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл), затем солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли с получением 6-хлор-N,N-диэтил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (161) (450 мг, 99% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,66 (1Н, t, J=5,9 Гц) 6,46 (1H, t, J=5,9 Гц) 4,93 (1H, t, J=6,0 Гц) 3,61 (2H, qd, J=7,3, 5,9 Гц) 3,52 (2H, qd, J=7,3, 5,9 Гц) 3,38 (2H, td, J=7,1, 6,0 Гц) 1,71-1,55 (2H, m) 1,32 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,28 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,5 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 310, 312 [М+Н].
(c) 2-(4,8-Бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (162)
4
8
2
1
+
3
2
4
2
2
2
2
3
Смесь 6-хлор-N,N-диэтил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (161) (225 мг, 0,73 ммоль) и 2-аминоэтанола (176 мкл, 2,92 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) нагревали при 120°С в течение 24 ч в закрытом сосуде. Добавляли дополнительную порцию 2-аминоэтанола (176 мкл, 2,92 ммоль) и нагревание продолжали еще 24 ч. После охлаждения добавляли воду (10 мл) и насыщенный раствор NaHCO (10 мл). Полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOH (99/1) до CHCl/EtOH (97/3) с получением 2-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола (162) (165 мг, 68% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,53 (1H, br s) 6,18 (1H, br s) 5,04 (1H, t, J=5,0 Гц) 4.76-4,46 (2H, m) 3,86-3,80 (2H, m) 3,61-3,46 (6H, m) 3,36 (2H, td, J=7,0, 6,1 Гц) 1,70-1,55 (2H, m) 1,30 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,28 (3Н, t, J=7,2 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(d) 2-(4,8-Бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола гидрохлорид (162а)
1
+
3
2-(4,8-Бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанол (162) (155 мг, 0,46 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/этанол (2/1) с получением 2-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-этанола гидрохлорида (162а) (165 мг, 97% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,73 (2H, t, J=5,6 Гц) 3,69-3,56 (6H, m) 3,44 (2H, t, J=7,1 Гц) 1,68 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,32 (6H, t, J=7,2 Гц) 1,00 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H]; МР: 183-184°С.
Пример 99: 1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метил-пропан-2-ол (163) и соответствующая гидрохлоридная соль (163а)
(a) 1-(4,8-Бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ол (163)
4
8
2
1
+
3
2
4
2
2
2
2
3
Смесь 6-хлор-N,N-диэтил-N-пропилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (161) (200 мг, 0,65 ммоль) и 1-амино-2-метилпропан-2-ола (232 мг, 2,60 ммоль) в н-бутаноле (4 мл) нагревали при 120°С в течение 48 ч в закрытом сосуде. Добавляли дополнительную порцию 1-амино-2-метилпропан-2-ола (232 мг, 2,60 ммоль) и нагревание продолжали еще 48 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl до CHCl/EtOH (98/2) с получением 1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола (163) (180 мг, 76% выход). 300 МГц H-ЯМР (CDCl, ppm): 6,53 (1Н, s) 6,15 (1H, s) 5,24 (1H, br s) 5,09-4,97 (1H, m) 4,70-4,60 (1H, m) 3,58-3,46 (4H, m) 3,39 (2H, d, J=6,4 Гц) 3,39-3,31 (2H, m) 1,63 (2H, секстет, J=7,4 Гц) 1,34-1,23 (6Н, m) 1,26 (6H, s) 0,99 (6H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 363 [M+H].
(b) 1-(4,8-Бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорид (163а)
1
+
3
1-(4,8-Бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ол (163) (170 мг, 0,47 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/МеОН (20/1) с получением 1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-2-метилпропан-2-ола гидрохлорида (163а) (145 мг, 77% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 3,70-3,53 (4H, m) 3,48 (2H, s) 3,42 (2H, t, J=7,2 Гц) 1,75-1,60 (2H, m) 1,35-1,27 (6H, m) 1,25 (6H, s) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 363 [M+H]; МР: 182-183°С.
Пример 100: (S)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (165) и соответствующая гидрохлоридная соль (165а)
(a) (S)-1-((6-хлор-4,8-бис(этиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)пропан-2-ол (164)
3
4
3
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (160) (500 мг, 1,74 ммоль), (S)-1-аминопропан-2-ола (207 мг, 2,76 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (301 мкл, 1,74 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) нагревали при 75°С в течение 48 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетон (9/1) до РЕ/ацетон (3/1) с получением (S)-1-((6-хлор-4,8-бис(этиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)пропан-2-ола (164) (330 мг, 58% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,63-6,47 (2Н, m) 5,30 (1H, t, J=6,1 Гц) 4,11-3,99 (1H, m) 3,70 (1H, br s) 3,60 (2Н, qd, J=7,3, 5,9 Гц) 3,59-3,52 (1H, m) 3,52 (2Н, qd, J=7,3, 5,8 Гц) 3,36 (1H, ddd, J=14,2, 7,2, 6,1 Гц) 1,31 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,29 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,25 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 326, 328 [M+H].
(b) (S)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (165)
3
2
4
3
1
+
Смесь (S)-1-((6-хлор-4,8-бис(этиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)пропан-2-ола (164) (160 мг, 0,49 ммоль) и этиламина (70% водный раствор) (0,8 мл) в н-бутаноле (3 мл) нагревали при 120°С в течение 48 ч в закрытом сосуде. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (10 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетон (9/1) до РЕ/ацетон (1/1) с получением (S)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (165) (95 мг, 58% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,61-6,43 (1Н, m) 6,25-6,10 (1H, m) 5,10-4,87 (2H, m) 4,67-4,53 (1H, m) 4,08-3,97 (1H, m) 3,59-3,27 (8H, m) 1,30 (3H, t, J=7,0 Гц) 1,27 (3Н, t, J=7,0 Гц) 1,23 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H].
(с) (S)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (165а)
1
+
3
(S)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (165) (95 мг, 0,28 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/EtOH (1/1) с получением (S)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (165а) (105 мг, ~100% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,04-3,91 (1H, m) 3,65 (2H, q, J=7,3 Гц), 3,63 (2H, q, J=7,3 Гц) 3,5,7-3,46 (3H, m) 3,40 (1H, dd, J=13,7, 7,0 Гц) 1,33 (6Н, t, J=7,3 Гц) 1,27 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,24 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H]; MP: 193-195°C.
Пример 101: (S)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (166) и соответствующая гидрохлоридная соль(166а)
(а) (S)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (166)
3
2
4
3
1
+
Смесь (S)-1-((6-хлор-4,8-бис(этиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)пропан-2-ола (164) (160 мг, 0,49 ммоль) и пропиламина (403 мкл, 4,90 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) нагревали при 120°С в течение 24 ч в закрытом сосуде. Добавляли дополнительную порцию пропиламина (200 мкл, 2,45 ммоль) и нагревание продолжали еще 24 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (10 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/ацетон (9/1) до РЕ/ацетон (1/1) с получением (S)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (166) (110 мг, 64% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,60-6,46 (1Н, m) 6,24-6,12 (1H, m) 5,10-4,90 (2H, m) 4,72-4,60 (1H, m) 4,10-3,96 (1H, m) 3,58-3,45 (5H, m) 3,40-3,25 (3H, m) 1,71-1,55 (2H, m) 1,30 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,27 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц) 0,99 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H].
(b) (S)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (166а)
1
+
3
(S)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (166) (100 мг, 0,29 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в смеси диэтиловый эфир/EtOH (1/1) с получением (S)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (166а) (100 мг, 90% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,04-3,90 (1H, m) 3,69-3,55 (4H, m) 3,55-3,34 (4H, m) 1,76-1,59 (2H, m) 1,31 (6H, t, J=7,3 Гц) 1,22 (3H, d, J=6,4 Гц) 1,00 (3H, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H].
Пример 102: (R)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (168) и соответствующая гидрохлоридная соль (168а)
(a) (R)-1-((6-хлор-4,8-бис(этиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)пропан-2-ол (167)
3
2
4
3
1
+
Смесь 2,6-дихлор-N,N'-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (160) (300 мг, 1,04 ммоль), (R)-1-аминопропан-2-ола (157 мг, 2,09 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) нагревали при 100°С в течение 18 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным NaSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/4) с получением (R)-1-((6-хлор-4,8-бис(этиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)пропан-2-ола (167) (222 мг, 66% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,59 (1Н, t, J=5,8 Гц) 6,54 (1H, t, J=5,8 Гц) 5,32 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,05 (1H, dqd, J=7,2, 6,4, 2,8 Гц) 3,76 (1H, br s) 3,60 (2H, qd, J=7,3, 5,8 Гц) 3,59-3,53 (1H, m) 3,51 (2H, qd, J=7,3, 5,8 Гц) 3,36 (1H, ddd, J=14,2, 7,2, 6,0 Гц) 1,30 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,28 (3H, J=7,3 Гц) 1,24 (3Н, d, J=6,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 326, 328 [M+H].
(b) (R)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (168)
1
+
3
(R)-1-((6-хлор-4,8-бис(этиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)пропан-2-ол (167) (222 мг, 0,68 ммоль) и этиламин (70% водный раствор) вводили в реакцию в н-бутаноле. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (1/4) с получением (R)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (168) (128 мг, 56% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm) 6,57-6,49 (1H, m) 6,23-6,14 (1H, m) 5,01 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,90 (1H, br s) 4,60 (1H, t, J=5,0 Гц) 4,10-3,96 (1H, m) 3,58-3,27 (8H, m) 1,33-1,19 (12H, m). ESI-MS (масса/заряд): 335 [М+Н].
(c) (R)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (168а)
2
2
3
1
+
(R)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (168) (110 мг, 0,33 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в CHCl с получением (R)-1-(4,6,8-трис-этиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (168а) (122 мг, ~100% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,02-3,94 (1H, m) 3,65 (2H, q, J=7,3 Гц) 3,62 (2H, q, J=7,3 Гц) 3,55-3,48 (3Н, m) 3,40 (1H, dd, J=13,7, 7,0 Гц) 1,32 (6Н, t, J=7,3 Гц) 1,26 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 335 [M+H]; MP: 194-196°C.
Пример 103: (R)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (169) и соответствующая гидрохлоридная соль (169а)
(a) (R)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (169)
1
+
3
(R)-1-((6-хлор-4,8-бис(этиламино)пиримидо[5,4-d]пиримидин-2-ил)амино)пропан-2-ол (167) (160 мг, 0,49 ммоль) и пропиламин вводили в реакцию в н-бутаноле с помощью процедур, описанных в другом месте в данном документе. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до PE/EtOAc (1/4) с получением (R)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (169) (123 мг, 72% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,53 (1Н, br s) 6,18 (1Н, br s) 5,04-4,97 (1Н, m) 4,91 (1Н, br s) 4,69-4,60 (1Н, br s) 4,07-3,99 (1Н, m) 3,56-3,47 (5Н, m) 3,39-3,29 (3Н, m) 1,63 (2Н, секстет, J=7,4 Гц) 1,30 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,28 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 0,99 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [М+Н].
(b) (R)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (169а)
2
2
3
1
+
(R)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (169) (100 мг, 0,29 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в CHCl с получением (R)-1-(4,8-бис-этиламино-6-пропиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (169а) (105 мг, 95% выход). 400 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,02-3,93 (1Н, m) 3,67-3,57 (4Н, m) 3,50 (1Н, dd, J=13,7, 4,6 Гц) 3,46-3,39 (2Н, m) 3,40 (1Н, dd, J=13,7, 6,9) 1,68 (2Н, секстет, J=7,4) 1,31 (6H, t, J=7,3 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц) 1,0 (3Н, t, J=7,4 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 349 [M+H].
Сравнительный пример 104: (R)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (171) и соответствующая гидрохлоридная соль (171а)
4
8
(a) 6-Хлор-N,N-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (170)
4
8
4
8
1
+
3
3
3
3
4
3
3
3
Смесь 2,6-дихлор-N,N-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (160) (800 мг, 2,79 ммоль) и гидроксида аммония (NH, 25% водный раствор, 1,00 мл) в н-бутаноле (5 мл) нагревали при 95°С в течение 72 ч. Добавляли дополнительную порцию гидроксида аммония (NH, 25% водный раствор, 1,00 мл) и нагревание продолжали в течение 96 ч. После охлаждения насыщенный раствор NaHCO (20 мл) добавляли и полученную суспензию экстрагировали с помощью CHCl (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/МеОН (99/1) до CHCl/МеОН (95/5) с получением 6-хлор-N,N-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (170) (380 мг, 51% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,70-6,60 (1Н, m) 6,60-6,50 (1Н, m) 4,80 (2Н, s) 3,59 (2Н, qd, J=7,2, 5,8 Гц) 3,53 (2Н, qd, J=7,2, 5,8 Гц) 1,31 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,28 (3Н, t, J=7,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 268, 270 [M+H].
(b) (R)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (171)
4
8
1
+
3
4
2
2
2
2
3
Смесь 6-хлор-N,N-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (170) (150 мг, 0,56 ммоль) и (R)-1-аминопропан-2-ола (170 мг, 2,24 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) нагревали при 110°С в течение 120 ч. После охлаждения добавляли насыщенный раствор NaHCO (20 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от CHCl/EtOH (99/1) до CHCl/EtOH (9/1) с получением (R)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (171) (115 мг, 67% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,55-6,41 (1Н, m) 6,32-6,19 (1Н, m) 5,05 (1Н, t, J=5,8 Гц) 4,70 (1Н, br s) 4,54 (2Н, s) 4,09-3,98 (1Н, m) 3,59-3,45 (5Н, m) 3,34 (1H, ddd, J=14,2, 6,7, 6,2 Гц) 1,29 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,28 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,23 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [M+H].
(с) (R)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (171а)
1
+
3
(R)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (171) (105 мг, 0,34 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (R)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (171а) (105 мг, 90% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm) 4,02-3,89 (1H, m) 3,64 (2H, q, J=7,2 Гц) 3,58 (2H, q, J=7,2 Гц) 3,52-3,34 (2H, m) 1,31 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,30 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,21 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [M+H]; МР: 178-180°С.
Сравнительный пример 105: (S)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (172) и соответствующая гидрохлоридная соль (172а)
(a) (S)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (193)
4
8
1
+
3
6-Хлор-N,N-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (170) (150 мг, 0,56 ммоль) и (S)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле с получением (S)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола (172) (115 мг, 67% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,48 (1H, s) 6,27 (1H, s) 5,05 (1H, t, J=5,8 Гц) 4,9-4,3 (1H, br s) 4,54 (2H, s) 4,09-3,98 (1H, m) 3,59-3,45 (5Н, m) 3,41-3,25 (1H, m) 1,29 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,28 (3Н, t, J=7,3 Гц) 1,23 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 307 [M+H].
(b) (S)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорид (172а)
1
+
3
(S)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ол (172) (105 мг, 0,34 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (S)-1-(6-амино-4,8-бис-этиламинопиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино)-пропан-2-ола гидрохлорида (172a) (100 мг, 86% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,02-3,89 (1Н, m) 3,64 (2H, q, J=7,2 Гц) 3,58 (2H, q, J=7,2 Гц) 3,48 (1Н, dd, J=13,6, 4,6 Гц) 3,38 (1Н, dd, J=13,6, 6,7 Гц) 1,31 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,30 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,21 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд); 307 [М+Н]; МР: 180-182°С.
Пример 106: (R)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (174) и соответствующая гидрохлоридная соль (174а)
4
8
2
(a) 6-Хлор-N,N-диэтил-N-(2-метилаллил)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (173)
4
8
4
8
2
1
+
3
4
3
Смесь 2,6-дихлор-N,N-диэтилпиримидо[5,4-d]пиримидин-4,8-диамина (160) (700 мг, 2,44 ммоль), 2-метилаллиламина (270 мкл, 2,93 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (334 мкл, 2,93 ммоль) в н-бутаноле (8 мл) нагревали при 80°С в течение 24 ч. Добавляли дополнительную порцию 2-метилаллиламина (130 мкл, 1,43 ммоль) и смесь нагревали при 90°С в течение 24 ч. После охлаждения добавляли воду (30 мл) и полученную суспензию экстрагировали с помощью CHCl (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (30 мл) и высушивали над твердым безводным MgSO. После фильтрования растворитель удаляли; остаток очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (9/1) до РЕ/EtOAc (5/1) с получением 6-Хлор-N,N-диэтил-N-(2-метилаллил)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамина (173) (570 мг, 73% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,64 (1Н, t, J=5,9 Гц) 6,49 (1Н, t, J=5,9 Гц) 5,03 (1Н, t, J=6,1 Гц) 4,96-4,91 (1Н, m) 4,88-4,83 (1Н, m) 4,01 (2H, d, J=6,1 Гц) 3,60 (2H, qd, J=7,2, 5,9 Гц) 3,53 (2H, qd, J=7,2, 5,9 Гц) 1,80 (3Н, s) 1,31 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,28 (3Н, t, J=7,2 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 322, 324 [М+Н].
(b) (R)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (174)
4
8
2
1
+
3
6-Хлор-N,N-диэтил-N-(2-метилаллил)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (173) (285 мг, 0,89 ммоль) и (R)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле и неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (5/1) до PE/EtOAc (1/1) с получением (R)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (174) (150 мг, 47% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,50 (1Н, t, J=5,6 Гц) 6,20 (1H, t, J=5,6 Гц) 5,01 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,95-4,92 (1H, m) 4,90 (1H, br s) 4,85-4,81 (1H, m) 4,75 (1H, t, J=6,1 Гц) 4,07-3,94 (3H, m) 3,57-3,45 (5H, m) 3,33 (1H, ddd, J=14,4, 6,9, 6,1) 1,80 (3H, s) 1,29 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,27 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н].
(с) (R)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (174а)
1
+
3
(R)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (174) (150 мг, 0,42 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (R)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (174а) (145 мг, 88% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,92 (1H, s) 4,85 (1H, s, перекрывается водой) 4,04 (2Н, s) 4,02-3,92 (1H, m) 3,62 (2H, q, J=7,2 Гц) 3,61 (2Н, q, J=7,2 Гц) 3,52 (1H, dd, J=13,7, 4,5 Гц) 3,39 (1H, dd, J=13,7, 6,9 Гц) 1,79 (3H, s) 1,31 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,30 (3H, t, J=7,2 Гц) 1,22 (3H, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [М+Н]; МР: 148-150°С.
Пример 107: (S)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (175) и соответствующая гидрохлоридная соль (175а)
(а) (S)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (175)
4
8
2
1
+
3
6-Хлор-N,N-диэтил-N-(2-метилаллил)-пиримидо[5,4-d]пиримидин-2,4,8-триамин (173) (285 мг, 0,89 ммоль) и (S)-1-аминопропан-2-ол вводили в реакцию в н-бутаноле. Неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с помощью градиентного элюирования от РЕ/EtOAc (5/1) до PE/EtOAc (1/1) с получением (S)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола (175) (160 мг, 50% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDCl, ppm): 6,50 (1H, t, J=5,6 Гц) 6,20 (1Н, t, J=5,6 Гц) 5,01 (1H, t, J=6,0 Гц) 4,95-4,92 (1H, m) 4,90 (1Н, br s) 4,85-4,81 (1Н, m) 4,75 (1Н, t, J=6,1 Гц) 4,07-3,94 (3Н, m) 3,57-3,45 (5Н, m) 3,33 (1H, ddd, J=14,4, 6,9, 6,1) 1,80 (3Н, s) 1,29 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,27 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H].
(b) (S)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорид (175а)
1
+
3
(S)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ол (175) (160 мг, 0,44 ммоль) обрабатывали с помощью смеси 2 М HCl/диэтиловый эфир в диэтиловом эфире с получением (S)-1-[4,8-бис-этиламино-6-(2-метилаллиламино)-пиримидо[5,4-d]-пиримидин-2-иламино]-пропан-2-ола гидрохлорида (175а) (150 мг, 85% выход). 300 МГц Н-ЯМР (CDOD, ppm): 4,92 (1H, s) 4,85 (1H, s, перекрывается водой) 4,04 (2Н, s) 4,02-3,92 (1H, m) 3,62 (2H, q, J=7,2 Гц) 3,61 (2Н, q, J=7,2 Гц) 3,52 (1H, dd, J=13,7, 4,5 Гц) 3,39 (1H, dd, J=13,7, 6,9 Гц) 1,79 (3Н, s) 1,31 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,30 (3Н, t, J=7,2 Гц) 1,22 (3Н, d, J=6,3 Гц). ESI-MS (масса/заряд): 361 [M+H]; МР: 151-153°С.
Пример 108: выбор соли
Солеобразователи (т.е. кислоты) и растворители, оцениваемые при выборе соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31), проиллюстрированы на фиг. 1. Свободное основание 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31) объединяли с 1 или 2 молярными эквивалентами солеобразователя в ряде растворителей при комнатной температуре и при необходимости нагревали для получения прозрачного раствора. Раствор концентрировали до сухого состояния и полученное твердое вещество оценивали на растворимость при комнатной температуре и при нагревании с обратным холодильником при 50 мг/мл в растворителях, перечисленных на фиг. 1. Обеспечивали охлаждение любых растворов, которые образовывались, до 0°С чтобы вызвать кристаллизацию. Отмечали смеси, из которых образовывались твердые вещества. Только выбранные соли получали в больших количествах (т.е. соли, в которых образовывались твердые вещества); однако отсутствие образования твердого вещества из любого данного эксперимента не означает, что соль не образовывалась.
Пример 109: общая процедура получения граммовых количеств выбранных солей соединения 31 (фиг. 2)
2
1
1
Указанное количество свободного основания 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31) смешивали с указанным растворителем и добавляли соответствующие молярные эквиваленты солеобразователя; при необходимости смесь нагревали с образованием раствора, охлаждали до комнатной температуры в случаях применения нагревания для образования раствора, затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Кристаллизованный продукт собирали фильтрацией, промывали диэтиловым эфиром (для солей, образованных из EtOH/EtO) или, в ином случае - таким же растворителем или смесью растворителей, которые использовали для образования соли. Промытый продукт быстро высушивали на фильтре, затем на воздухе при 65°C. Соли описывали температурой плавления (SRS OptiMelt) или DSC-эндотермической характеристикой, LC/MS, H-ЯМР, элементным анализом и XRPD. Элементный анализ и H-ЯМР подтверждали стехиометрию для всех изначально полученных солей, полученных объединением свободного основания и солеобразователя в столбце C, в котором приводится растворитель или смесь растворителей.
Для спектра XRPD, перечня пиков XRPD и спектра DSC для:
гидрохлоридных солей 31a соединения 31 смотрите фиг. 3A-3C; бис-гидрохлоридных солей 31b соединения 31 смотрите фиг. 4A-4C; гидромалонатных солей 31c соединения 31 смотрите фиг. 5A-5C; гидромалеинатных солей Male-A 31d-1 соединения 31 смотрите фиг. 6A-6C; гидромалеинатных солей Male-B 31d-2 соединения 31 смотрите фиг. 7A-7C; гидрофумаратных солей 31e соединения 31 смотрите фиг. 8A-8C; гидро-L(+)тартратных солей 31f соединения 31 смотрите фиг. 9A-9C; D,L-манделатных солей 31g соединения 31 смотрите фиг. 10A-10C; тозилатных солей 31h-1 и 31h-2 соединения 31 смотрите фиг. 11A-11C и 12A-12C; мезилатных солей 31i соединения 31 смотрите фиг. 13A-13C; сахаринатных солей 31j соединения 31 смотрите фиг. 14A-14C.
Пример 110: полиморфное преобразование под воздействием влажности
Примерно 10 мг твердого вещества в виде его изначально полученной полиморфной формы помещали в 4-мл открытый сосуд. В 20-мл сосуд добавляли приблизительно 5 мл дистиллированной воды и нагревали до приблизительно 50°С, затем сосуд закрывали и содержимое охлаждали в течение приблизительно 30 минут при температуре окружающей среды. Затем 20-мл сосуд открывали, меньший сосуд помещали внутрь большего сосуда, больший сосуд повторно закрывали и на образец в меньшем сосуде воздействовали и состаривали в среде при приблизительно 80-95% относительной влажности при температуре окружающей среды в течение 3 дней. Полиморфное преобразование подтверждали с помощью XRPD и DSC относительно такого для изначально полученной полиморфной формы.
Малеинатную соль 31d изначально получали в виде формы Mal-A (31d-1) и превращали в форму Mal-B (31d-2) после воздействия >80% влажности в течение трех дней при температуре окружающей среды, как описано выше.
Тозилатную соль 31h изначально получали в виде формы Tos-A (31h-1) и превращали в форму Tos-B (31h-2) после воздействия >80% влажности в течение трех дней при температуре окружающей среды.
Смотрите фиг. 2, на которой изображены итоги получения выбранных солей 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31) в граммовом масштабе.
Смотрите фиг. 3А-14С, на которых изображены спектры XRPD, перечни пиков XRPD и спектры DSC солей 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31).
Описание аналитических характеристик
Порошковые рентгенограммы получали с помощью рентгеновского дифрактометра Bruker D8 Advance, оснащенного источником излучения Cu Kα (λ=1,54060°А) в закрытом/связанном режиме. Использовали 9-позиционный сменник проб и высокоскоростной детектор LYNXEYE. Образцы помещали на нулевую отметку в силиконовые планшетодержатели. Шаг составлял 0,05°. Время счета составляло 1,3 секунды на шаг.
Данные DSC собирали с помощью ТА Instruments Q1000 DSC, оснащенного автодозатором. Обычно образцы (~2-5 мг) помещали в герметичные кюветы для образцов из алюминия с алодиновым покрытием и сканировали от 30 до 300°С со скоростью 10°С/мин при продувке азотом 50 мл/мин. Затем кювету охлаждали до 25°С со скоростью 20°С/мин.
T
Пример 111: влияние на частоту дыхания (RR), дыхательный объем (V) и производное - минутный объем (MV) с помощью скринингового исследования спирометрии крыс под анестезией
Крысы под анестезией обеспечивали быстрый способ оценки соединений в отношении респираторной и сердечно-сосудистой деятельности.
Схема способа
T
Крыс изначально анестезировали 3% изофлурана (вдыхали) и в бедренную артерию и вену хирургическим путем вставляли канюли. После канюлирования крыс переводили на уретановую анестезию (1,5 г/кг; i.v.) и проводили трахеальный надрез. После размещения трахеальной канюли ее соединяли с пневмотахометром для записи дыхательного потока, из которого получали частоту дыхания (RR), дыхательный объем (V) и их производное - минутный объем (MV, также называемый ). После завершения хирургических приготовлений обеспечивали стабилизацию животных в течение 30 минут, в то же время частоту дыхания, дыхательный объем, минутный объем, кровяное давление и частоту сердечных сокращений непрерывно фиксировали. Газы в артериальной крови (ABG) получали из артериальной крови, собранной из бедренной артерии. Измерения ABG проводили перед и через 6 минут после введения среды-носителя и каждой дозы соединения. Выбранные соединения вводили болюсными инъекциями через венную канюлю с последующей промывкой солевым раствором (общее время введения приблизительно 30 секунд), и животных наблюдали в течение по меньшей мере 6 минут на изменения сердечно-сосудистой деятельности. Соединения готовили в виде составов, определенных для обеспечения оптимальной растворимости. Таким образом, контроли в виде среды-носителя соответствовали составу каждого тестируемого соединения. Дозирование выбранных соединений проводили при 0,1 и/или 0,3 мг/кг и/или 3 мг/кг. Следующую дозу не вводили, пока все сердечно-сосудистые и респираторные показатели не возвращались на исходные уровни. Используемые соединения положительного контроля представляли собой N-[4,6-ди-(н-пропиламино)-[1,3,5]триазин-2-ил]-N,O-диметилгидроксиламин или N-[2,6-ди-(н-пропиламино)-[1,3]пиримидин-4-ил]-N,О-диметилгидроксиламин (оба вводили в конце каждого отсеивающего эксперимента (0,3 мг/кг доза) для подтверждения эксперимента и также служили в качестве меры, с которой выбранные соединения можно сравнивать.
Анализ данных
Данные анализировали путем сбора данных сердечно-сосудистой и респираторной систем за 30-секундные усредненные интервалы (BIN). Данные показаны за 2 минуты до стимула и затем через 6 минут после стимула.
* Отношение сравнивали с гидросульфатом N-(2,6-бис-пропиламино-пиримидин-4-ил)-О,N-диметилгидроксиламина
Пример 112: влияние на индекс апноэ-гипопноэ и вентиляцию во время сна на крысах, получающих морфин постоянно
Апноэ сна центрального происхождения (CSA) и гипопноэ особенно преобладают у людей с постоянным лечением опиоидными средствами. Следовательно, была разработана новая модель на грызунах вызванных постоянным приемом опиоидных средств нарушений дыхания во сне, которая имитирует многие признаки состояния у людей.
Морфин вводили постоянно крысам в их питьевую воду с дозой и длительностью, которые вызывают переносимость морфина. Сульфат морфина добавляли в питьевую воду отдельно живущих крыс, начиная с 0,1 мг/мл морфина и повышая концентрацию с приращением, чтобы конечная концентрация 0,6 мг/мл была достигнута в течение 2 недель от начала введения морфина. В течение трех первых недель после начала введения морфина крысы акклиматизировались в камерах плетизмографии всего тела.
Частоту дыхания (ƒR), дыхательный объем (VT), минутный объем (), и CSA, и частоту и длительность гипопноэ (т.е. длительность каждого апноэ) измеряли непрерывно, тогда как животные находились в условиях свободного поведения в плетизмографических камерах всего тела. Животные вдыхали комнатный воздух в течение исследования, за исключением тех, которые были отмечены для исследования подтверждения гипероксии. Поток воздуха камеры смещения по меньшей мере 2 л/мин создавали подключением камер к источнику вакуума постоянной величины. Период по меньшей мере 1 час давали животным для акклиматизации в камере перед началом сбора данных. В общем, большинство крыс входили в нормальный цикл сна-бодрствования в течение этого времени. Иногда большее время требовалось до того, пока крыса успокаивалась.
Форму волны дыхания получали от расширения и сжатия воздуха, которым обменивались животные и камера. Циклическое изменение объема воздуха при цикле дыхания вызывало колеблющийся поток воздуха в калиброванном пневмотахометре на стенке плетизмографической камеры. Каждый пневмотахометр калибровали (объем 5,0 мл подавали трижды) в каждый день исследования перед помещением животных в камеры. Сигнал потока воздуха усиливали и непрерывно фиксировали с помощью PowerLab и LabChart 7.0.
Способ дыхания (дыхательный объем, частота дыхания), и минутный объем (произведение дыхательного объема и частоты дыхания), и число и длительность апноэ сна центрального происхождения и число гипопноэ измеряли с помощью плетизмографии всего тела перед введением или среды-носителя, или тестового соединения (10 мг/кг РО) в перекрестной схеме и после него. Коэффициент изменения для респираторного периода, индекс дыхательной нестабильности, также рассчитывали. Интервалы времени, характеризующееся как "сон" или "бодрствование" на основе присутствия или отсутствия артефакта движения в форме волны потока воздуха, фиксировали из пневмотахометра, прикрепленного к стенке плетизмографической камеры. Общее число CSA и гипопноэ суммировали за час для получения индекса апноэ-гипопноэ (AHI).
Способы
Все хирургические и плетизмографические испытания разрешены комитетом IACUC компании Galleon Pharmaceuticals. В исследовании использовали крыс, которым имплантировали двойные биопотенциальные электроды, которые обеспечивали непрерывные и одновременные телеметрические записи форм волн электроэнцефалограммы (EEG) и электромиограммы (EMG). Три условия лечения оценивали в отношении их влияния на количество, архитектуру и качество сна; исходный уровень (не получавшие медикаментозного лечения), (31а) (10 мг/кг РО) и среда-носитель (равный объем РО). Дни исследования на исходном уровне и с лечением (31а) были случайными. Однако среду-носитель в отдельности оценивали после того, как для каждой крысы завершали оценки без медикаментозного лечения и с использованием соединения (31а).
EEG, EMG и операции по имплантации датчика температуры
Стандартную асептическую методику применяли для всех хирургических процедур. Взрослые самцы крыс линии Спраг Доули предварительно получали дексмедетомидин (0,1 мг/кг подкожно) для успокоения и аналгезии, карпрофен (5 мг/кг подкожно) для аналгезии и цефтриаксон (33 мг/кг подкожно или внутривенно) в качестве профилактического антибиотика. Анестезию индуцировали и поддерживали с помощью изофлурана в кислороде. Тело телеметрического импланта вшивали в париетальную брюшину посредством лапаротомии средней линии. 4 вывода электрода (каждая пара использовалась как биопотенциальная) выходили из живота через срединный разрез и подкожно проходили в спинную часть шеи. Для помещения вывода EEG электроды прикрепляли к двум зажимам, которые проходили на толщину черепа (координаты первого электрода: ~5 мм сзади брегмы и ~5 мм левее срединной линии; второй электрод: ~5 мм сзади брегмы и ~2 мм вправо от срединной линии), и закрепляли зубным цементом. Для помещения вывода EMG электроды прикрепляли к шейным мышцам нейлоновой нитью. Хирургические раны зашивали посредством обычных методик. Бупренорфин (0,05 мг/кг подкожно или внутривенно) вводили в конце операции и перед выходом из анестезии. Атипамезол (0,4 мг/кг подкожно или внутривенно) вводили в конце операции для возврата действия дексмедетомидина. Антибиотики и анальгетики продолжали давать в течение 3 дней после операции, при необходимости. После операции животных оставляли по меньшей мере на 1 неделю (7-10 дней) перед использованием в дальнейших исследованиях.
Сбор данных EEG, EMG и температуры при телеметрии
Крысам с имплантированными телеметрами позволяли находиться в их клетках в течение сбора данных. Сигналы от телеметров беспроводно передавались на приемники, которые размещали непосредственного под клетками. Формы волн EEG и EMG фиксировали с 8 часов утра до 3 часов дня в каждый день исследования. Только данные, собранные между 10:00 часами утра и 3:00 часами дня, использовали в конечном анализе. Для каждой крысы три телеметрических сигнала (EEG, EMG и температура) направляли из приемника на PowerLab и фиксировали с помощью LabChart. Преобразование сигнала EEG/EMG описано в разделе Анализ данных.
Анализ данных и статистические способы
Оценка сна
Сигналы EEG, EMG и температуры калибровали в программном обеспечении LabChart согласно рекомендациям производителя телеметра. Частота отбора образцов для каждого сигнала составляла 1 K/c. Сигнал EEG фильтровали в цифровом виде через полосу пропускания от 0,3 до 30 Гц. Сигнал EMG фильтровали с помощью высокочастотного фильтра 25 Гц, выпрямляли и получали скользящее среднее значение (100 мс). Весь анализ оценки сна проводили с помощью Sleep Sign (Kissei Comtec). Это программное обеспечение было разработано и утверждено, и его способность определять состояния сна у крыс основано на предыдущих исследованиях (www dot sleepsign dot com/bibliography dot html).
Принципиальные аспекты этих анализов были для оценки величины сигнала EMG (т.е. уровня активности животного) и относительных плотностей дельта-волн EEG (0,5-4 Гц; преобладающие в сне NREM) и тета-волн EEG (6-10 Гц; преобладающие в сне REM) в течение каждого 4-секундного интервала. Относительные плотности волн позволяли определить каждое состояние сна/бодрствования (NREM, REM и AWAKE) в программном обеспечении Sleep Sign, такое как AWAKE (относительно высокая частота и низкая амплитуда EEG, с высокой активностью EMG), NREM (низкая частота и высокая амплитуда EEG, с низкой активностью EMG) и REM (высокая частота и низкая амплитуда EEG, как правило с более низкой активностью EMG, чем сон NREM). После установки программное обеспечение автоматически оценивало состояние сна/бодрствования для каждого 4-секундного интервала на основании минимального процента времени интервала, проведенного в каждом состоянии. После завершения автоматического анализа каждый 4-секундный интервал для каждого файла, использованного в конечном анализе данных, визуально оценивался исследователем для подтверждения точности оценки интервала. Любой интервал, который был некорректно оценен с помощью Sleep Sign, вручную правил тот же исследователь. Гипнограммы затем переносили в Excel для обеспечения анализа относительного времени в NREM/REM/AWAKE за час, индекса пробуждения, числа периодов бодрствования/часов сна, числа пробуждений/часов сна, числа периодов NREM/REM/ч, числа интервалов NREM/REM/ч, длины периода NREM/REM и длины интервала NREM/REM.
Статистический анализ
Период сна определяли как 3 или более непрерывных интервала (4-с периоды) сна NREM или REM. Периоды бодрствования определяли как 4 или более интервала бодрствования с предшествующим одним или несколькими периодами сна. Пробуждение определяли как 3 или менее интервала бодрствования с предшествующими по меньшей мере 3 интервалами сна. Для каждого животного количество, архитектуру и качество сна усредняли между периодами 10:00 утра и 3:00 дня и сравнивали между группами контрольного и тестового соединения с помощью двухфакторного дисперсионного анализа и последующих тестов Даннета (сравнение с состоянием без медикаментозного лечения).
Архитектуру сна оценивали вычислением: процента времени бодрствования, сна NREM и сна REM, числа периодов бодрствования на час сна, числа пробуждений за час сна, индекса пробуждения (сумма периодов бодрствования и число пробуждений за час), числа периодов NREM за час, числа интервалов NREM за час, длительности периодов NREM, длительности интервалов NREM, числа периодов REM за час, числа интервалов REM за час, длительности периодов REM и длительности интервалов REM.
2
Качество сна оценивали измерением спектральной плотности мощности EEG (мкВ/0,25 Гц) и относительной плотности мощности (в спектре 0,5-30 Гц) в течение сна NREM и REM. См. фиг. 24.
Результаты
Влияние среды-носителя и (31а) (10 мг/кг РО) на индексы архитектуры сна. Для каждого животного эти параметры усредняли между периодами 10:00 утра - 3:00 дня и сравнивали между группами среды-носителя и лечения (31а) с помощью ретроспективных анализов с использованием критерия Стьюдента-Ньюмена-Кейлса. Никакой значительной разницы в архитектуре сна не обнаруживали при сравнении групп исходного уровня и (31а) (фиг. 24).
Пероральное введение гидрохлоридной соли 1-(2,6-бис-метиламино-8-пропиламинопиримидо[5,4-d]пиримидин-4-иламино)-2-метилпропан-2-ола (31а) при 10 мг/кг РО не связано с какими-либо статистически значимыми эффектами на количество, архитектуру или качество сна. Влияние среды-носителя на архитектуру сна REM, вероятно, зависит от нерандомизированных дней исследования и последующего ожидания перорального зонда в качестве неблагоприятного стимула.
Пример 113: влияние на обструктивное апноэ во время сна
В двух моделях на грызунах обструктивного апноэ использовали: одну, которая моделировала спонтанную обструкцию (модель спонтанного обструктивного апноэ), которая усугублялась со временем, и другую (модель индуцированного обструктивного апноэ), в которой исследователь сохранял контроль над переменными, которые определяли тяжесть OSA, такими как частота апноэ (ƒ OA) и длительность апноэ (OA t).
-1
-1
2
Основную часть испытаний проводили с помощью модели спонтанного обструктивного апноэ, в которой крыс помещали в дорсальное положение (лежа на спине) и обеспечивали им возможность самостоятельного дыхания комнатным воздухом. Поток воздуха измеряли непрерывно с помощью плетизмографии всего тела. Большинство анестезированных и лежащих на спине крыс проявляли нормальную модель дыхания, и для того, чтобы добиться спонтанных повторных затруднений, шею каждой крысы вентрофиксировали и поддерживали при 25°-30° над горизонтальной плоскостью. OA определяли как периоды без потока воздуха в течение более чем 2 циклов дыхания с дыхательными усилиями (например, повышенное трансторакальное пищеводное давление на вдохе). После фиксации шеи нормальное дыхание становилось сильно затрудненным кластерами затруднений в верхних дыхательных путях (ƒ OA 30±3 ч (среднее ± SEM), диапазон: 13-94 ч; OA t 11±3 с, диапазон: 6-15 с). Тяжесть OA дополнительно вычисляли по изменению пика в насыщенности кислородом гемоглобина при затруднении (ΔSpO: -20±1%, диапазон: -11 - -31%). Кластерные OA часто разделены длительными периодами нормального дыхания, что, возможно, возвращается, когда активация соответствующего афферентного/эффекторного рефлекса (например, хемоцептор, обеспечивающий усиленное движение подбородочно-язычной мышцы) достигает порогового значения, необходимого для восстановления открытых верхних дыхательных путей.
Способы
Все эксперименты на животных проводили согласно протоколам, утвержденным Комитетом по биоэтике (IACUC) в Galleon Pharmaceuticals, Inc. Все экспериментальные процедуры проводили под общей анестезией. Все эксперименты представляли собой процедуры без возможности выживания, и животных умерщвляли по результатам эксперимента до выхода животного из анестезии. Использовали две модели на грызунах обструктивного апноэ, одну, которая моделировала спонтанную обструкцию, которая усугублялась со временем (модель спонтанного обструктивного апноэ), и другую, в которой исследователь сохранял контроль над параметрами, которые определяют тяжесть OSA, такими как ƒ OA и OA t, и путем их контроля также регулировали величину ненасыщенности оксигемоглобина (модель индуцированного обструктивного апноэ).
Анестезия, общая для всех моделей спонтанного обструктивного апноэ
2
Крысам изначально давали анестезию в камере получения анестезии для крыс с помощью 3% (настройка по шкале) изофлурана в 97% кислороде (О) для манипуляций с хирургическим инструментарием. Когда крысы ложились, их вынимали из камеры и помещали в дорсальное положение (лежа на спине) на электрическую грелку. Анестезию поддерживали с помощью 2% изофлурана в 98% кислорода и крысам обеспечивали возможность самостоятельного дыхания комнатным воздухом. После манипуляций с инструментарием подачу изофлурана медленно прекращали и уретан (1,5-1,8 г/кг, внутривенно) вводили для непрерывного поддержания анестезии. В это время прекращали подавать дополнительный кислород.
Инструментарий, общий для всех моделей
Бедренную артерию канюлировали для обеспечения постоянных записей артериального давления и периодического отбора проб крови для анализов рН и газов в крови, а также однократного определения концентраций тестируемого соединения в крови. Бедренную вену канюлировали для обеспечения введение тестируемого соединения и жидкой среды. Артериальную канюлю соединяли с заполненным гепаринизированным солевым раствором датчиком давления. Формы волн артериального давления отбирали при 2K/секунду и фильтровали через полосу пропускания 0-1000 Гц. Функцию циклического измерения в LabChart использовали для расчета частоты сердечных сокращений и средневзвешенное отношение 1/3 макс. + 2/3 мин. использовали для расчета среднего артериального кровяного давления (MAP).
Модель спонтанного обструктивного апноэ
GG
После канюлирования бедренного сосуда крыс помещали на спину в плетизмографической камере головой наружу для обеспечения непрерывной записи форм волн потока воздуха. Артериальные и венозные сосуды выводили путем продевания каждого сосуда через порт в камере. Шейный сегмент пищевода открывали хирургическим надрезом и аккуратно отделяли от окружающей ткани. Небольшие в пищеводе делали надрезы для обеспечения вставки заполненной солевым раствором трубки РЕ-205 и прикрепления к заполненному солевым раствором датчику давления. Трубку вставляли в грудной сегмент пищевода на уровень, который детектирует максимальные изменения давления при вдохе без воздействия на способ дыхания. Биполярные электроды EMG вставляли в подбородочно-язычную мышцу сразу краниально к подъязычной кости и заземляющий провод прикрепляли к коже рядом. Активность EMG оцифровывали и отбирали при 4 K/с, усиливали, фильтровали (полоса пропускания: высокочастотная граница пропускания: 2500 Гц, низкочастотная граница пропускания 120 Гц) и выпрямляли и усредняли время перемещения (60 мс). Внутривенную инфузию 50% гидроксиэтилкрахмала/50% солевого раствора вводили со скоростью 5 мл/кг/мин в качестве жидкой среды.
Один час проходил для обеспечения физиологической стабилизации перед началом периода записи данных исходного уровня. Большинство анестезированных и лежащих на спине крыс проявляли нормальную модель дыхания, и для того, чтобы добиться спонтанных повторных OA, шею каждой крысы вентрофиксировали и поддерживали при 25°-30° над горизонтальной плоскостью в начале периода стабилизации. OA определяли как периоды без потока воздуха в течение более 2 циклов дыхания, сопровождающихся признаками попыток дыхания, возникающими при апноэ (например, повышенное чреспищеводное давление на вдохе (РТР) и амплитуду вспышки EMGGG на вдохе).
Параметры исследований для оценки тяжести OA
-1
2
Тяжесть OA оценивали с помощью числа OA за час (ƒ OA ч), средней длительности каждого апноэ (OA t, секунды) и среднего снижения насыщенности кислородом гемоглобина (ΔSpO, %), связанного с апноэ. Ответ на затруднение оценивали измерением пикового изменения в усредненное время (100 мс) амплитуду вспышки EMGGG при апноэ (мкВ.с).
Параметры исследований для оценки физиологического состояния
2
2
2
2
Параметры исследований, которые измеряли для оценки физиологического состояния в периоды апноэ и между ними, но не количественная тяжесть OA, представляли артериальное кровяное давление (мм рт.ст.), дыхательный объем воздуха (л/с), РТР (мм рт.ст.), чрескожную насыщенность кислородом гемоглобина (пульсовая оксиметрия, SpO, %). Эти параметры фиксировали непрерывно как формы волн в каждом эксперименте. Переменные исследований, которые получали из этих форм волн, а также рассматривали "непрерывно измеряемыми", были MAP, ƒН, ƒ1R, VT,  и ΔРТР при каждом вдохе. Периодически измеряемыми параметрами исследований были ректальная температура (°С) и артериальный рН, PaCO (мм рт.ст.), PaO (мм рт.ст.), SpO (%), полученные из анализа газов в артериальной крови.
Проверка на модели с положительным постоянным давлением в дыхательных путях (СРАР)
2
2
2
Положительное постоянное давление в дыхательных путях (СРАР) является первым лечением для пациентов с OSA и вводилось для субпопуляции крыс в качестве положительного контроля. Крысам надевали сделанные изготовленные на заказ маски, расположенные для закрытия носа без покрытия рта. Таким образом, контур потока положительного давления создавали продувочным воздухом, входящим в верхние дыхательные пути через ноздри и выходящим через рот. Постоянное положительное давление применяли во всем цикле дыхания, давая постоянно поддерживаемый устойчивый поток, из которого каждая крыса дышала с помощью нормальных давлений при вдохе. Целями первого эксперимента были оценка модели как средства с достаточной чувствительностью для детектирования пошагового снижения ƒ OA, в то же время пошагового повышения уровня поддержки СРАР. Уровень СРАР регулировали с помощью изготовленного на заказ клапана с разрешением ±0,1 см HO. Давление СРАР медленно повышали (0, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 и 4,0 см HO). Крысам позволяли оставаться при каждом давлении на 30 минут, пока фиксировали параметры исследования. Во втором исследовании целью было определение, было ли положительное влияние СРАР на тяжесть OA действительно временным, как описано для людей. Параметры исследований фиксировали при условиях исходного уровня, 30 минут поддержки СРАР при 4 см HO, затем наконец 30 минут без поддержки СРАР (фиг. 18-25).
Раскрытия всех без исключения патентов, патентных заявок и публикаций, цитируемых в данном документе, таким образом, включены в данный документ ссылкой во всей их полноте. Хотя данное изобретение было раскрыто со ссылкой на конкретные варианты осуществления, очевидно, что другие варианты осуществления и вариации данного изобретения могут разрабатываться специалистами в данной области без отклонения от сущности и объема настоящего изобретения. Приложенная формула изобретения должна рассматриваться как включающая все такие варианты осуществления и эквивалентные вариации.