УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОЧИСТКИ БЕЛКА И СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ УКАЗАННОГО УСТРОЙСТВА

1. Устройство для очистки белка из образца, содержащего подлежащий очистке белок, которое включает:
а. улавливающую хроматографическую смолу;
b. фильтр глубокой очистки, расположенный по отношению к улавливающей хроматографической смоле так, что образец проходит через улавливающую хроматографическую смолу и фильтр глубокой очистки; и
с. хроматографическую смолу смешанного типа, расположенную по отношению к фильтру глубокой очистки так, что образец проходит через фильтр глубокой очистки и хроматографическую смолу смешанного типа.
2. Устройство по п.1, в котором улавливающую хроматографическую смолу выбирают из группы, состоящей из смолы для аффинной хроматографии, смолы для ионообменной хроматографии и смолы для гидрофобной хроматографии.
3. Устройство по п.1, в котором улавливающую хроматографическую смолу выбирают из группы, состоящей из смолы с белком А, смолы с белком G, смолы с белками А/G и смолы с белком L.
4. Устройство по п.1, в котором улавливающая хроматографическая смола и/или хроматографическая смола смешанного типа находится в хроматографической колонке.
5. Устройство по п.1, дополнительно включающее одно или более осветляющих устройств, предназначенных для осветления белка, в которые образец поступает до пропускания через улавливающую хроматографическую смолу.
6. Устройство по п.5, в котором осветляющее устройство выбирают из одного или более устройств из группы, состоящей из центрифуги, микрофильтра, ультрафильтра и фильтра глубокой очистки.
7. Устройство по п.1, дополнительно включающее второй фильтр глубокой очистки, в который образец поступает после первого фильтра глубокой очистки и до пропускания образца через хроматографическую смолу смешанного типа.
8. Устройство по п.1, дополнительно включающее стерилизующий фильтр, в который образец поступает после фильтра глубокой очистки и до пропускания образца через хроматографическую смолу смешанного типа.
9. Устройство по п.1, в котором хроматографическая смола смешанного типа включает хроматографическую смолу, функционирующую в соответствии с одним или более хроматографическими механизмами, выбираемыми из группы, состоящей из анионного обмена, катионного обмена, гидрофобного взаимодействия, гидрофильного взаимодействия, образования водородных связей, pi-pi-связывания и сродства к металлу.
10. Устройство по п.1, в котором хроматографическая смола смешанного типа включает хроматографическую смолу, функционирующую в соответствии с комбинацией механизмов анионообменной и гидрофобной хроматографии.
11. Устройство для очистки белка из образца, содержащего подлежащий очистке белок, которое включает:
а. улавливающую хроматографическую смолу;
b. фильтр глубокой очистки, расположенный по отношению к улавливающей хроматографической смоле так, что образец проходит через улавливающую хроматографическую смолу и фильтр глубокой очистки; и
с. мембранный адсорбер, расположенный по отношению к фильтру глубокой очистки так, что образец проходит через фильтр глубокой очистки и мембранный адсорбер.
12. Устройство по п.11, в котором улавливающую хроматографическую смолу выбирают из группы, состоящей из смолы с белком А, смолы с белком G, смолы с белками А/G и смолы с белком L.
13. Устройство по п.11, дополнительно включающее одно или более осветляющих устройств, предназначенных для осветления белка, в которые образец поступает до пропускания через улавливающую хроматографическую смолу.
14. Устройство по п.13, в котором осветляющее устройство выбирают из одного или более устройств в группе, состоящей из центрифуги, микрофильтра, ультрафильтра и фильтра глубокой очистки.
15. Устройство по п.11, дополнительно включающее второй фильтр глубокой очистки, в который образец поступает после первого фильтра глубокой очистки и до пропускания образца через мембранный адсорбер.
16. Устройство по п.11, дополнительно включающее стерилизующий фильтр, в который образец поступает после фильтра глубокой очистки и до пропускания образца через мембранный адсорбер.
17. Устройство по п.11, в котором мембранный адсорбер выбирают из группы, состоящей из мембранного ионообменника, мембраны, содержащей лиганд смешанного типа, и гидрофобной мембраны.
18. Устройство по п.11, дополнительно включающее фильтр, предшествующий разливу, который расположен по отношению к мембранному адсорберу так, что образец проходит через мембранный адсорбер и указанный фильтр.
19. Устройство по п.18, в котором фильтр, предшествующий разливу, выбирают из группы, состоящей из вирусного фильтра, нанофильтра, ультрафильтра и диафильтра.
20. Устройство для очистки белка из образца, содержащего подлежащий очистке белок, которое включает:
а. улавливающую хроматографическую смолу;
b. фильтр глубокой очистки, расположенный по отношению к улавливающей хроматографической смоле так, что образец проходит через улавливающую хроматографическую смолу и фильтр глубокой очистки; и
с. монолит, расположенный по отношению к фильтру глубокой очистки так, что образец проходит через фильтр глубокой очистки и монолит.
21. Способ очистки белка, который включает:
а. получение образца, содержащего белок;
b. пропускание образца через улавливающую хроматографическую смолу с получением первого элюата, включающего белок;
с. пропускание первого элюата, полученного после пропускания образца через улавливающую хроматографическую смолу, пропусканием через фильтр глубокой очистки с получением фильтрованного элюата, включающего белок; и
d. пропускание фильтрованного элюата, полученного после пропускания первого элюата через фильтр глубокой очистки, через хроматографическую смолу смешанного типа с получением второго элюата, включающего белок.
22. Способ по п.21, в котором улавливающую хроматографическую смолу выбирают из группы, состоящей из смолы для аффинной хроматографии, смолы для ионообменной хроматографии и смолы для гидрофобной хроматографии.
23. Способ по п.21, в котором улавливающую хроматографическую смолу выбирают из группы, состоящей из смолы с белком А, смолы с белком G, смолы с белками A/G и смолы с белком L.
24. Способ по п.21, в котором белок выбирают из группы, состоящей из фрагмента белка, антитела, моноклонального антитела, иммуноглобулина и гибридного белка.
25. Способ по п.21, в котором образец представляет собой культуру клеток.
26. Способ по п.21, в котором образец осветляют до пропускания через улавливающую хроматографическую смолу.
27. Способ по п.26, в котором образец осветляют способом осветления, выбираемым из группы, состоящей из центрифугирования, микрофильтрации, ультрафильтрации, глубокой фильтрации, стерилизующей фильтрации и обработки детергентом.
28. Способ по п.21, в котором первый элюат подвергают инактивации вирусов после пропускания через улавливающую хроматографическую смолу, но до пропускания через фильтр глубокой очистки.
29. Способ по п.28, в котором инактивацию вирусов выполняют способом, выбираемым из группы, состоящей из обработки кислотой, детергентом, химическими веществами, агентами, перекрестно сшивающими нуклеиновые кислоты, ультрафиолетовым светом, гамма-излучением и теплом.
30. Способ по п.28, в котором инактивация вирусов включает понижение рН первого элюата до рН от около 3 до около 4.
31. Способ по п.30, в котором первый элюат инкубируют в течение периода времени от около 30 до около 90 мин во время инактивации вирусов.
32. Способ по п.21, в котором фильтрованный элюат вторично пропускают через фильтр глубокой очистки.
33. Способ по п.32, в котором фильтрованный элюат дважды пропускают через один и тот же фильтр глубокой очистки.
34. Способ по п.32, в котором фильтрованный элюат пропускают через два отдельных фильтра глубокой очистки.
35. Способ по п.21, в котором хроматографическая смола смешанного типа включает хроматографическую смолу, функционирующую в соответствии с одним или более хроматографическими методами, выбираемыми из группы, состоящей из анионного обмена, катионного обмена, гидрофобного взаимодействия, гидрофильного взаимодействия, образования водородных связей, pi-pi-связывания и сродства к металлу.
36. Способ по п.21, в котором хроматографическая смола смешанного типа включает хроматографическую смолу, функционирующую в соответствии с комбинацией методов анионообменной и гидрофобной хроматографии.
37. Способ по п.21, в котором второй элюат, полученный после пропускания через хроматографическую смолу смешанного типа, подвергают дальнейшей фильтрации.
38. Способ по п.37, в котором дальнейшую фильтрацию выполняют одним или более способами, выбираемыми из группы, состоящей из вирусной фильтрации, нанофильтрации, ультрафильтрации и диафильтрации.
39. Способ по п.21, в котором фильтрованный элюат пропускают через хроматографическую смолу смешанного типа в проточном режиме.
40. Способ по п.21, в котором фильтрованный элюат пропускают через хроматографическую смолу смешанного типа в режиме связывания элюата.
41. Способ очистки белка, который включает:
а. получение образца, содержащего белок;
b. пропускание образца через улавливающую хроматографическую смолу с получением первого элюата, включающего белок;
с. пропускание первого элюата, полученного после пропускания образца через улавливающую хроматографическую смолу, через фильтр глубокой очистки с получением фильтрованного элюата, включающего белок; и
d. пропускание фильтрованного элюата, полученного после пропускания первого элюата через фильтр глубокой очистки, через мембранный адсорбер с получением второго элюата, включающего белок.
42. Способ по п.41, в котором улавливающую хроматографическую смолу выбирают из группы, состоящей из смолы для аффинной хроматографии, смолы для ионообменной хроматографии и смолы для гидрофобной хроматографии.
43. Способ по п.41, в котором улавливающую хроматографическую смолу выбирают из группы, состоящей из смолы с белком А, смолы с белком G, смолы с белками A/G и смолы с белком L.
44. Способ по п.41, в котором белок выбирают из группы, состоящей из фрагмента белка, антитела, моноклонального антитела, иммуноглобулина и гибридного белка.
45. Способ по п.41, в котором образец представляет собой культуру клеток.
46. Способ по п.41, в котором образец осветляют до пропускания через улавливающую хроматографическую смолу.
47. Способ по п.46, в котором образец осветляют способом осветления, выбираемым из группы, состоящей из центрифугирования, микрофильтрации, ультрафильтрации, глубокой фильтрации, стерилизующей фильтрации и обработки детергентом.
48. Способ по п.41, в котором первый элюат подвергают инактивации вирусов до пропускания через фильтр глубокой очистки.
49. Способ по п.48, в котором инактивацию вирусов выполняют способом, выбираемым из группы, состоящей из обработки кислотой, детергентом, химическими веществами, агентами, перекрестно сшивающими нуклеиновые кислоты, ультрафиолетовым светом, гамма-излучением и теплом.
50. Способ по п.48, в котором инактивация вирусов включает понижение рН первого элюата до рН от около 3 до около 4.
51. Способ по п.49, в котором первый элюат инкубируют в течение периода времени от около 30 до около 90 мин во время инактивации вирусов.
52. Способ по п.41, в котором фильтрованный элюат вторично пропускают через фильтр глубокой очистки.
53. Способ по п.41, в котором фильтрованный элюат дважды пропускают через один и тот же фильтр глубокой очистки.
54. Способ по п.41, в котором фильтрованный элюат пропускают через два отдельных фильтра глубокой очистки.
55. Способ по п.41, в котором мембранный адсорбер выбирают из группы, состоящей из мембранного ионообменника, мембраны, содержащей лиганд смешанного типа, и гидрофобной мембраны.
56. Способ по п.41, в котором второй элюат вторично пропускают через мембранный адсорбер.
57. Способ по п.41, в котором второй элюат, полученный после пропускания через мембранный адсорбер, подвергают дальнейшей фильтрации.
58. Способ по п.57, в котором дальнейшую фильтрацию выполняют одним или более способами, выбираемыми из группы, состоящей из вирусной фильтрации, нанофильтрации, ультрафильтрации и диафильтрации.
59. Способ по п.41, который включает:
а. пропускание первого элюата через фильтр глубокой очистки после пропускания образца через улавливающую хроматографическую смолу; и
b. пропускание фильтрованного элюата через мембранный адсорбер после пропускания первого элюата через фильтр глубокой очистки.
60. Способ очистки белка, который включает:
а. получение образца, содержащего белок;
b. пропускание образца через улавливающую хроматографическую смолу с получением первого элюата, включающего белок;
с. пропускание первого элюата, полученного после пропускания образца через улавливающую хроматографическую смолу, через фильтр глубокой очистки с получением фильтрованного элюата, включающего белок; и
d. пропускание фильтрованного элюата, полученного после пропускания первого элюата через фильтр глубокой очистки, через монолит с получением второго элюата, включающего белок.