АНТИГИПЕРТЕНЗИВНАЯ ОРГАНИЧЕСКАЯ СОЛЬ
ANTI-HYPERTENSION ORGANIC SALT

Область техники
Изобретение относится к антигипертензивной органической соли на основе аниона кислого ингибитора ангиотензинпревращающего фермента (далее иАПФ) и катиона щелочного блокатора кальциевых каналов (далее БКК).
Уровень техники
Препараты типа иАПФ и типа БКК давно и хорошо известны в кардиотерапии как классические средства лечения и профилактики повышенного артериального давления (Шагако С.В. Сравнительная характеристика фармакодинамической и клинической эффективности каптоприла и празозина у больных с хронической недостаточностью кровообращения: Автореф. дис. канд. мед. наук. М.: 1988; 23 с.).
Так, первый представитель этой группы препаратов - каптоприл - известен в этом качестве еще с 1978 года (John Hakim, Тех Heart Inst J. 2001; 28(1): 47-52).
Другие антигипертензивные препараты этой группы синтезированы и используются с середины 80-х гг. XX века. Эффективность препаратов зависит от степени связывания и блокирования активного центра фермента, называемого ангиотензинпревращающим (или кининазой II), и, таким образом, от их способности уменьшать образование естественных сосудосужающих (например, ангиотензина II, вазопрессина, эндотелина, адреналина и пр.) и увеличивать накопление сосудорасширяющих (ангиотензин I, простагландины группы Е) биологических веществ.
Среди ингибиторов АПФ есть препараты, образующие с активным центром этого фермента как относительно слабую (каптоприл), так и прочную (рамиприл, периндоприл, лизиноприл) связь (Джанашия П.Х., Назаренко В.А., Николенко С.А. Фармакотерапия сердечно-сосудистых заболеваний. - М.: РГМУ, 1998. - с.38-47). Так, константа ингибирования АПФ у рамиприла в 47 раз больше, чем у каптоприла, и в 7 раз больше, чем у эналаприла. Это позволяет разделить ингибиторы АПФ на более и менее мощные (в расчете миллиграмм на миллиграмм).
Однако только четыре иАПФ (каптоприл, либензаприл, лизиноприл и ценонаприл) непосредственно обладают биологической активностью. Прочие известные иАПФ неактивны сами по себе и становятся эффективными антигипертензивными средствами только после определенных метаболических превращений в организме. Поэтому их называют пролекарствами (от англ. prodrugs).
Эти пролекарства лишь после всасывания в ЖКТ в результате ферментативного гидролиза в слизистой оболочке этого тракта и/или в печени превращаются в активные диацидные метаболиты (для обозначения которых используют окончание -прилат). Например, эналаприл превращается в эналаприлат, периндоприл - в периндоприлат, фозиноприл - в фозиноприлат и т.д. Соответственно, при заболеваниях ЖКТ и печени препараты, нуждающиеся в трансформации для приобретения активности, действуют слабее (Преображенский Д.В., Сидоренко Б.А., Романова Н.Е., Шатунова И.М. Клиническая фармакология основных классов антигипертензивных препаратов. Consilium Medicum 2000; №2, р.3).
Кроме того, активность (и, отчасти, продолжительность действия) иАПФ зависит от степени всасывания в ЖКТ (см. там же).
Фармакокинетика активных иАПФ не одинакова. Например, липофильный каптоприл частично метаболизируется в печени с образованием метаболитов, часть из которых обладает биологической активностью, тогда как гидрофильные иАПФ типа лизиноприла, либензаприла и церонаприла не метаболизируются и выводятся с мочой в неизмененном виде. Системная биодоступность липофильных иАПФ, обычно выше, чем у их гидрофильных аналогов.
Фармакокинетика пролекарственных форм иАПФ также различна. Как пролекарства, так и активные диацидные метаболиты иАПФ различаются по растворимости в жирах. От липофильности пролекарственных форм иАПФ в значительной мере зависит их всасываемость в ЖКТ. Наряду со всасываемостью пролекарств системная биодоступность неактивных иАПФ определяется скоростью и степенью выраженности их деэстерификации в результате гидролиза.
Общеизвестно, что биотрансформация неактивных иАПФ в активные диацидные метаболиты происходит главным образом в печени, в частности, от 40 до 60% эналаприла именно в ней превращается в эналаприлат. Кроме печени, определенную роль в метаболической трансформации пролекарственных форм ингибиторов АПФ играют гидролазы слизистой оболочки ЖКТ, крови и внесосудистых тканей. Например, в отличие от эналаприла, фозиноприл и периндоприл быстро и практически полностью превращаются в фозиноприлат и периндоприлат, причем их биотрансформация происходит не только в печени, но и в слизистой оболочке ЖКТ и в крови. Иными словами, неактивные иАПФ существенно различаются тем, насколько легко и полностью они деэстерифицируются путем гидролиза, превращаясь в активные диацидные метаболиты.
Тем не менее, большинство иАПФ (кроме вышеперечисленных четырех препаратов) не применяют в виде активных, то есть гидролизованных, форм, содержащих свободную кислотную группу, потому что их всасываемость не превышает 10-20% (CD Mosby, 2003), а остаточные дозы не могут проявлять системное действие по снижению артериального давления. Поэтому для достижения терапевтического эффекта их следовало бы применять в больших дозах (иногда 10-20-кратно превышающих дозы пролекарств).
Однако, ныне общеизвестно, что даже в сравнительно небольших дозах иАПФ могут оказывать такие выраженные побочные эффекты, как артериальная гипотония, нарушение функции почек, гиперкалиемия, сухой кашель и ангионевротический отек.
Так, сухой кашель, заставляющий отказаться пациентов от лечения, по данным литературы, встречается при лечении иАПФ с частотой от 1 до 48%. Мало того, частота такого кашля существенно зависит от пола и расы больных. Так, у женщин он наблюдается значительно чаще, чем у мужчин (соотношение примерно 7:3), а у негров и монголоидов чаще, чем у белых.
По некоторым наблюдениям, добавление БКК ослабляет такой кашель.
Ангионевротический отек (отек Квинке) также является характерным побочным эффектом иАПФ. Он встречается гораздо реже, чем сухой кашель (в 0,1-0,5% случаев), однако в отличие от кашля может представлять непосредственную угрозу жизни больных.
Кроме того, все иАПФ могут вызывать нарушение вкусовых ощущений, лейкопению (нейропению), кожные высыпания, диспептические расстройства, а также единичные случаи повреждения почек и печени и развития анемии.
Естественно, что не прекращается поиск более совершенных антигипертензивных препаратов, которые должны комплексно соответствовать таким условиям:
(1) обеспечивать быстрый и стойкий во времени терапевтический эффект при использовании как можно меньших разовых доз и
(2) давать как можно меньше заметных побочных эффектов.
Часть этих требований можно выполнить, применяя активные вещества взамен пролекарств. Однако, как уже упоминалось, они плохо всасываются из ЖКТ и требуют больших доз. Возможно, в будущем появятся более эффективные простые антигипертензивные препараты. Однако врачи и фармакологи хорошо знают, что комбинирование по меньшей мере двух порознь известных препаратов нередко способно усилить полезные и/или ослабить побочные эффекты их раздельного применения.
Если механизм действия отдельных препаратов хорошо изучен, то их комбинирование иногда может быть целенаправленным и давать вполне ожидаемые результаты. Например, как уже упоминалось, комбинирование БКК с иАПФ может ослаблять кашель. Более того, в ходе мегаисследования EUROPA-2005 установлено, что последовательное введение иАПФ (периндоприла) и БКК (амлодипина) более эффективно для лечения артериальной гипертонии и профилактики осложнений, поскольку удалось документировать значительное уменьшение смертности пациентов.
Следовательно, создание на основе иАПФ комбинированных антигипертензивных препаратов, снижающих вероятность развития (или, по меньшей мере, выраженности) побочных эффектов, остается актуальной задачей.
Одним из таких препаратов, который по технической сущности наиболее близок к предлагаемой далее антигипертензивной соли, является механическая смесь лизиноприла и амлодипина, известная под торговой маркой «Экватор».
Ее применяют для лечения и профилактики повышенного артериального давления, сердечной недостаточности и осложнений сахарного диабета.
Однако комбинация лизиноприла с амлодипином не лишена побочного действия и менее эффективна у пациентов с заболеваниями печени и ЖКТ по причинам, описанным выше. Эти побочные эффекты особенно заметны у пожилых пациентов (то есть именно у тех людей, которые чаще всего страдают сердечными заболеваниями).
Сущность изобретения
В основу изобретения положена задача путем комбинирования аниона по меньшей мере одного иАПФ и катиона по меньшей мере одного БКК создать такой антигипертензивный препарат, который способен легко всасываться из ЖКТ и обеспечить снижение терапевтических доз и побочных эффектов.
1
3
2
1
-
+
Поставленная задача решена тем, что согласно изобретению предложена антигипертензивная органическая соль общей формулы [(R-COO)·(HN-R)], где R - ингибитор ангиотензинпревращающего фермента, выбранный из группы, состоящей из:
периндоприлата, то есть 1-[N-[1-карбоксибутил]аланил]гексагидро-2-индолинкарбоновой кислоты,
рамиприлата, то есть [1-карбокси-3-фенилпропил]аланил]октагидроцилопента[b]-пирроло-2-карбоновой кислоты,
спираприлата, то есть (8S)-7-[(S)-N-[(S)-1-карбокси-3-фенилпропил]аланин]-1,4-дитиа-7-азаспиро[4,4]нонан-8-карбоновой кислоты,
беназеприлата, то есть [S-(R*,R*)]-3-[[1-(карбонил)-3-фенилпропил]амино]-2,3,4,5-тетрагидро-2-оксо-1Н-1-бензазепин-1-уксусной кислоты,
моэксиприлата, то есть (3S-[2[R*(R*)],3R*]]-2-[2-[[1-(карбонил)-3-фенилпропил]аминол]-1-оксопропил]-1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси-3-изохинолинкарбоксиловой кислоты),
трандалаприлата, то есть 1-карбокси-3-фенилпропил]аланил]-гексагидро-2-индолинкарбоновой кислоты,
фозиноприлата, то есть [1-[S*(R*)]-2альфа,4бета]-4-циклогексил-1-[[[2-метил-1-(1-оксопропокси)пропокси]-(4-фенилбутил)фосфинил]ацетил]-L-пролина,
эналаприлата, то есть S-1-[N-[1-карбонил-3-фенилпропил]-L-аланил]-L-пролина,
зофеноприлата, то есть (2S,4S)-[(2S)-3-(сульфанил)-2-метилпропаноил]-4-фенилпироллидин-2-карбоновой кислоты,
2
лизиноприла, то есть (N-[N-[(15)-1-карбокси-3-фенилпропил]-L-лизил]-L-пролина, а R - блокатор кальциевых каналов, выбранный из группы, состоящей из:
амлодипина, то есть 3-этил-5-метилового эфира (±)-2-[(аминометокси)-метил]-4-(o-хлорфенил)-1,4-дигидро-6-метил-3,5-пиридиндикарбоновой кислоты,
лацидипина, то есть 4-трет-бутил диэтилового эфира 4-[орто-[2-карбоксивинил]фенил]1,4-дигидро-2,6-диметил-3,5-пиридинкарбоновой кислоты,
фелодипина, то есть (+)-этил метил, 4-(2,3-дихлорфенил)-1,4-дигидро-2,6-диметил-3,5-пиридиндикарбоксилата и
исрадипина, то есть изопропилметилового эфира 4-(4-бензофуразанил)-1,4-дигидро-2,6-диметил-3,5-пиридиндикарбоновой кислоты.
Краткое описание иллюстраций
Для иллюстрации принципиальной возможности синтеза антигипертензивной органической соли на основе аниона кислого иАПФ и катиона щелочного БКК к описанию приложены иллюстрации, где изображены на:
фиг.1 - ЯМР-спектр, характеризующий периндоприлат как таковой;
фиг.2 - ЯМР-спектр, характеризующий амлодипин как таковой;
фиг.3 - ЯМР-спектр, характеризующий периндоприлат амлодипина.
Наилучшие примеры осуществления изобретения
Далее сущность изобретения поясняется:
описанием лабораторных методов получения соли периндоприлата с амлодипином и
описанием лечения гипертонии с применением этой соли на лабораторных моделях и полученных результатов в сравнении с общепринятыми гипотензивными препаратами.
Сырьем для синтеза во всех случаях служили субстанции, доступные на фармацевтическом рынке как фармакопейные препараты или химические реактивы, качеством не ниже «хч».
Соль иАПФ (в частности, периндоприлата) с амлодипином получали несколькими конкурентными методами.
Метод 1. Получение соли периндоприлата с амлодипином из периндоприла эрбумина и амлодипина путем гидролиза без рацемизации.
Первоначально в реактор загружают эквимолярные количества периндоприла эрбумина и амлодипина, затем добавляют в водный раствор карбонат калия, который предварительно растворен в смеси воды, метанола и диэтилового эфира. Через 2 суток реакционную массу упаривают в вакууме при комнатной температуре до сухого остатка постоянной массы, после чего к остатку добавляют маленькими порциями охлажденную до 5°С дистиллированную воду и присыпают лимонную кислоту до достижения рН - 6,5.
Выход периндоприлата амлодипина составляет около 90%.
Полученный продукт представляет собой соль амлодипина и периндоприлата, что подтверждается спектрометрически.
Метод 2. Получение соли периндоприлата с амлодипином из периндоприла эрбумина и амлодипина путем гидролиза без рацемизации.
Первоначально в реактор загружают эквимолярные количества периндоприла эрбумина и амлодипина, затем добавляют в водный раствор гидрокарбоната натрия, который предварительно растворен в смеси воды, метанола и диэтилового эфира. Через 2 суток реакционную массу упаривают в вакууме при комнатной температуре до сухого остатка постоянной массы, после чего к остатку добавляют маленькими порциями охлажденную до 5°С дистиллированную воду и присыпают лимонную кислоту до достижения рН - 6,5.
Выход периндоприлата амлодипина составляет около 80-82%.
Полученный продукт представляет собой соль амлодипина и периндоприлата, что подтверждается спектрометрически.
Метод 3. Получение соли периндоприлата с амлодипином из периндоприла эрбумина и амлодипина путем гидролиза без рацемизации.
Первоначально в реактор загружают эквимолярные количества периндоприла эрбумина и амлодипина, затем добавляют избыток гидрокарбоната натрия, который предварительно растворен в метиловом спирте. Через 3 суток реакционную массу упаривают в вакууме при комнатной температуре до сухого остатка постоянного веса, после чего добавляют маленькими порциями охлажденную до 5°С дистиллированную воду и присыпают лимонную кислоту остатка до достижения рН - 6,5.
Выход периндоприлата амлодипина составляет около 92%.
Полученный продукт представляет собой соль амлодипина и периндоприлата, что подтверждается ЯМР-спектрами (см. фиг.1-3).
Метод 4. Получение соли периндоприлата с амлодипином из смеси периндоприлата и амлодипина.
Первоначально периндоприл как этиловый моноэфир дикислоты получают из эрбуминовой соли периндоприла ее разложением в водном растворе гидроксида натрия в присутствии тозилата с последующей экстракцией эфиром.
Выход периндоприла составил 100% от расчетного.
Далее периндоприл растворяют в метаноле, содержащем избыток гидроксида натрия, после чего упаривают досуха и нейтрализуют избыток щелочи лимонной кислотой. Полученный осадок - периндоприлат - фильтруют и высушивают.
При выбранном температурном режиме гидролиза выход периндоприлата составляет более 90%.
Соль периндоприлата с амлодипином получают смешиванием их эквимолярных количеств в абсолютном этаноле с последующим упариванием до получения твердого остатка постоянной массы. Выход составляет около 100%.
Полученный продукт является солью амлодипина и периндоприлата, что подтверждается спектрометрически.
Четвертый метод получения довольно прост и обеспечивает наиболее высокий выход соли периндоприлата с амлодипином. Поэтому именно этот метод может послужить основой для промышленного технологического регламента.
Специалистам понятно, что соли иных вышеуказанных иАПФ и БКК могут быть получены сходными методами.
Исследования эффективности полученной антигипертензивной органической соли проводили на породе генетически гипертензионных крыс (SRH). Гипертоническая болезнь у этих крыс официально признана адекватной экспериментальной моделью гипертонической болезни у людей (Методические рекомендации. К.: Фарм. Комитет МЗ Украины, 1995, 62 с.).
Все манипуляции с лабораторными животными, взятыми в одинаковых группах по 6 особей, выполняли под этаминал-натриевым (40 мг/кг) наркозом. Экспериментальный препарат и препараты сравнения и механическую смесь препаратов вводили в эквивалентных дозах через зонд непосредственно в желудок, растворяя их в крахмальной слизи.
Артериальное давление (АД) регистрировали в хвостовой артерии на протяжении 24 часов и оценивали через 1, 2, 3, 6, 12 и 24 часа. Полученные данные обрабатывали статистически. Значки (*) после чисел указывают, что статистические различия p<0,05 по сравнению с контролем. По результатам экспериментов комплексно оценивали активность препаратов.
Таблица 1
Сравнительные данные об антигипертензивной эффективности препаратов у спонтанно гипертензивных крыс
Использованные препараты и дозы
АД, мм рт.ст.
Исходное
1 ч
2 ч
3 ч
6 ч
12 ч
24 ч
Контроль (крахмальная слизь)
152/88
152/90
154/92
152/88
152/90
152/90
154/92
Периндоприл, 0,05 мг/кг
152/88
148/84
140*/80
138*/82
142/88
144/88
150/90
Периндоприлат, 0,05 мг/кг
154/88
152/90
145/86
140*/80
148/86
150/80
150/90
Амлодипин, 0,05 мг/кг
152/88
150/80
145/80
145/80
142/78
150/80
142/78
Смесь периндоприла 0,05 мг/кг и амлодипина 0,05 мг/кг
152/88
150/80
144/80
140*/76
150/84
142/80
144/80
Смесь периндоприлата 0,05 мг/кг и амлодипина 0,05 мг/кг
152/88
150/80
142*/86
145/84
150/80
148/80
142/78
Соль периндоприлата с амлодипином (амлоприлат) 0,05 мг/кг
152/88
150/80
140*/78
135*/70*
134*/70*
136*/72*
132*/70*
Из табл.1 следует, что:
все использованные препараты снижали АД, наиболее быстро действовал периндоприл,
механические смеси периндоприла или периндоприлата с амлодипином по быстроте, силе и продолжительности действия существенно не отличались от периндоприла, однако
наиболее сильное и стабильное действие проявила именно соль периндоприлата с амлодипином (сокращенно названная «амлоприлат»).
Для выяснения проницаемости через стенку ЖКТ использовали методику для изучения транспорта веществ через клетки культуры Сасо-2, которые имеют морфологические и функциональные свойства, аналогичные кишечным абсорбирующим энтероцитам.
Клетки Сасо-2 при культивировании образуют плотные монослои, экспрессируют основные ферменты ворсистого слоя тонкого кишечника и имеют соответствующие транспортные системы, включая транспорт аминокислот, дипептидов, витаминов и цитостатиков.
Необычно высокая степень дифференцирования в сочетании со способностью спонтанно дифференцироваться при нормальных условиях культивирования превратили клетки Сасо-2 в основную клеточную модель для изучения эпителиальной проницаемости и транспорта веществ.
Время измерения концентрации препаратов в акцепторной камере после прохождения через монослой Сасо-2 оценивали через 30, 60, 90, 120 и 180 мин. После каждого измерения вычисляли коэффициент проницаемости Р по формуле:
a
d
a
Р=[V/A·C]·dC/dt, где
a
V - объем акцепторной части,
2
А - площадь мембраны инсерта (в данном случае 0,6 см),
d
C - концентрация препарата в донорной части,
а
С - концентрация препаратов в акцепторной части,
t - время экспозиции.
Полученные данные усреднили и свели в табл.2.
Таблица 2
Средние значения коэффициента проницаемости Р
Препарат (в разовой удельной дозе 0,05 мг/кг)
Среднее значение коэффициента проницаемости, см/с
Периндоприл
18,1±3,2·10<sup>-6</sup>
Периндоприлат
9,1±2,8·10<sup>-6</sup>
Амлодипин
23,1±3,0·10<sup>-6</sup>
Соль периндоприлата с амлодипином (амлоприлат)
18,1±3,0·10<sup>-6</sup>
Как следует из табл.2, соль периндоприлата с амлодипином проникает через монослой клеток Сасо-2 значительно интенсивнее, чем периндоприлат, и примерно так же, как периндоприл. Таким образом, предложенная соль может хорошо всасываться из ЖКТ.
Ниже приведены характерные примеры лечебной и профилактической гипотензивной активности препаратов согласно изобретению.
Пример 1. Крысе породы SHR массой 200 г с исходным АД 157/84 мм рт.ст. внутрь через зонд ввели субстанцию периндоприла в дозе 0,05 мг/кг. Через 3 часа АД составило 148/80 мм рт.ст. Через 24 часа АД вернулось к исходным значениям.
Пример 2. Крысе породы SHR массой 180 г с исходным АД 155/84 мм рт.ст. внутрь через зонд ввели субстанцию периндоприлата в дозе 0,05 мг/кг. Через 3 часа АД составило 144/80 мм рт.ст. Через 24 часа АД проявило тенденцию к возвращению к исходным значениям и составило 150/80 мм рт.ст.
Пример 3. Крысе породы SHR массой 200 г с исходным АД 156/88 мм рт.ст. внутрь через зонд ввели субстанцию соли периндоприлата с амлодипином в дозе 0,05 мг/кг. Через 3 часа АД составило 140/80 мм рт.ст. Через 24 часа АД оставалось сниженным по отношению к исходным значениям и составило 138/78 мм рт.ст.
Это свидетельствует о выраженном и длительном действии предложенной соли.
Промышленная применимость
Предложенная соль может быть легко изготовлена из доступных на фармацевтическом рынке субстанций и использована как лекарственный препарат:
для понижения артериального давления при купировании приступов и профилактике гипертонической болезни,
для лечения и профилактики сердечной недостаточности на фоне ИБС,
для лечения и профилактики легочной гипертензии и
для профилактики почечной недостаточности и/или сосудистых осложнений на фоне сахарного диабета.
Кроме того, препараты на основе предложенной соли в сочетании с β-блокаторами адренергических рецепторов, гиполипидемическими и антитромботическими препаратами могут быть применены для предупреждения осложнений при лечении постинфарктных больных.