Информативность изменений биохимических параметров ротовой жидкости и сыворотки крови при сахарном диабете 2 типа

УДК 61:577.1+612.313

ИНФОРМАТИВНОСТЬ ИЗМЕНЕНИЙ БИОХИМИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ И СЫВОРОТКИ КРОВИ ПРИ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ 2 ТИПА

И.А.ФОТИНА*

Внедрение неинвазивных и безопасных способов в лабораторнодиагностический процесс открывает широкие перспективы для са-ливодиагностики. Особенно это актуально для больных сахарным диабетом 2 типа, которые контролируют уровень глюкозы в крови и получают внутривенно лекарственные препараты. В этом плане интересным объектом для изучения является ротовая жидкость. Проведенные биохимические исследования решали задачу по рассмотрению диагностической информативности параметров ротовой жидкости в сравнении с показателями крови.

Ключевые слова: сахарный диабет, ротовая жидкость, неинвазивный метод, окислительный стресс.

Сахарный диабет является острейшей социальной проблемой, относящейся к приоритетам национальных систем здравоохранения практически всех стран мира. Драматизм и актуальность проблемы определяются широкой распространённостью этого эндокринного заболевания, высокой смертностью и ранней инвалидизацией больных. Более 230 миллионов человек в мире страдает диабетом, что составляет 6% взрослого населения мира. В 2025 году количество людей, страдающих этим заболеванием, возрастёт вдвое. Самую большую группу больных в развивающихся странах составят пациенты зрелого, наиболее работоспособного возраста.

Ни одно заболевание не связано с лабораторными исследованиями так тесно, как сахарный диабет. По лабораторным данным устанавливают диагноз этого заболевания, назначают и корректируют лечение, оценивают риск осложнений. Ключевым критерием в диагностике сахарного диабета является уровень гликемии и, в частности, уровень гликемии натощак [8].

Совершенствование лабораторной диагностики является одной из актуальных задач современной практической медицины. Поиск новых эффективных и доступных способов оценки состояния обменных процессов организма  перспективный раздел лабораторной медицины. До недавнего времени аргументированную диагностическую ценность имело исследование крови. Многочисленными исследованиями биохимиков и клиницистов обеспечена многообразная база данных, раскрывающая информативность диагностических критериев различных заболеваний. Однако, в условиях широкого распространения заболеваний, передаваемых с кровью (ВИЧ-инфекция, гепатит и другие) актуален поиск альтернативного биологического материала, который можно получить неинвазивным путём.

Предпочтение отдано секрету ротовой полости - слюне. Практические преимущества исследований слюны по сравнению с анализами крови заключаются в следующем:

1. Возможность ранней диагностики заболеваний, так как биохимические сдвиги в слюне наступают раньше, чем в крови.

2 .Образцы слюны могут быть собраны дома, что исключает лишние визиты в поликлинику или больницу.

3. Имеется неограниченная возможность повторных анализов без негативной реакции пациента.

4. Сбор слюны отличается дешевизной, так как не требует участия врача или медицинской сестры.

5. Исключение стресса при заборе материала исследования

[5].

Все это обращает внимание исследователей на преимущества применения ротовой жидкости при обследовании больных сахарным диабетом 2 типа.

В её состав входит суммарный секрет слюнных желёз, а также слущенный эпителий и продукты жизнедеятельности микрофлоры полости рта. В отличие от других биологических сред она обеспечивает связь организма с внешней средой через поток макро- и микронутриентов, воды и вдыхаемого воздуха. В неё поступают из внутренней среды итермедиаты, биорегуляторы и конечные продукты обмена. Это обеспечивает интегративную функцию ротовой жидкости и определяет её роль в поддержании динамического постоянства внутренней среды организма [3]. В состав также входят белки, ферменты, гормоны, липиды, углеводы и минеральные компоненты из слюнных желёз, сыворотки

* НУЗ «Узловая больница, г.Новороссийск, ст.Новороссийск ОАО «РЖД»] ftinal@rambler.ru, тел.: (8617) 67-83-69

крови и тканей полости рта. Это создает возможность изучения показателей обмена в ротовой жидкости при проведении, прежде всего скрининговых исследований [7].

Естественно, что, создавая в первую очередь среду для органов и тканей полости рта, ротовая жидкость несёт на себе отпечаток их структурно-функционального состояния, изменяясь при стоматологической патологии. Работы, включающие сведения о составе и свойствах ротовой жидкости в норме и соматической патологии малочисленны. Хотя такие исследования актуальны в плане расширения диагностических возможностей, а также для приближения к истинным представлениям о закономерностях функционирования целостного организма в норме и патологии и роли ротовой жидкости в процессе обеспечения динамического постоянства внутренней среды организма [4].

Биохимический состав и свойства ротовой жидкости у больных сахарным диабетом достоверно по всем показателям отличаются от таковых у соматически здоровых лиц. Одним из наиболее ярких примеров является увеличение содержания глюкозы практически на порядок по сравнению со здоровыми лицами. Существует прямая связь содержания глюкозы в ротовой жидкости с ее содержанием в крови. Исследованиями последних лет выявлен параллелизм изменений параметров метаболизма в крови и ротовой жидкости [9].

В полости рта активно протекают процессы свободнорадикального окисления. Гомеостаз в организме зависит от состояния интенсивности перешеного окисления липидов (ПОЛ) в биомембранах и мощности антиоксидантных систем, в норме поддерживающих ПОЛ стационарно на низком уровне. Процессу свободно-радикальных реакций в организме при патологических состояниях противостоят эндогенные механизмы антиоксидант-ной защиты, в которую входят ферментативные и неферментативные антиоксиданты. В здоровом организме клетки от повреждающего действия интермедиатов кислорода предохраняет физиологическая антиоксидантная система [2,3]. Повреждающее действие гипергликемии приводит к увеличению образования активных форм кислорода и развитию окислительного стресса, который сопровождается резкой интенсификацией свободнорадикальных процессов, снижением активности антиоксидантной защиты, развитием эндотоксемии за счет накопления продуктов пероксидации. Прямую опасность представляет избыток (накопление свыше нормы) активных свободных радикалов и продуктов ПОЛ  альдегидов и оснований Шиффа: они нарушают клеточный метаболизм. Одним из соединений является малоновый диальдегид (МДА), его реакция с тиобарбитуровой кислотой широко используется для оценки состояния ПОЛ [10].

Работ, посвященных исследованию свободно-радикального окисления и изменению биохимического состава в сыворотке крови при сахарном диабете 2 типа довольно много [1,6]. Однако данных о развитии окислительного стресса, изменении углеводного и липидного обменов в ротовой жидкости явно недостаточно. Актуальность данного исследования продиктована необходимостью получения базы для клинико-лабораторной диагностики с целью развития превентивной, предиктивной, персонализированной медицины.

Цель исследования  изучение основных биохимических показателей в сыворотке крови и ротовой жидкости в норме и у больных сахарным диабетом 2 типа.

Материалы и методы исследования. В данное исследование было включено 60 пациентов с сахарным диабетом 2 типа (35 женщин и 25 мужчин). Диагноз поставлен врачами терапевтического отделения НУЗ «Узловая больница на ст.НовороссийскП ОАО СРЖДП В первую группу (I) вошли пациенты с наличием сахарного диабета 2 типа  40 человек (66,7%), средний возраст составил 58,3± 10,2. Вторую группу (II) составили  здоровые люди  20 человек (33,3%), средний возраст  50,4 ± 6,7. Анализировались образцы сыворотки венозной крови и ротовой жидкости пациентов с подтвержденным диагнозом.

Кровь для исследования брали утром из локтевой вены, после 12-часового голодания. Образцы крови центрифугировали при 1500об/мин 10 минут. Ротовую жидкость собирали натощак, предварительно прополоскав рот водой, методом сплёвывания в пробирки, в течение 10 минут. Образцы ротовой жидкости подвергали замораживанию, не менее чем на 3 часа. Затем их размораживали, тщательно перемешивали и центрифугировали в течение 5 минут до образования суперна

танта. Для исследования использовали прозрачную надоса-

дочную жидкость.

Показатели глюкозы, общего холестерина (ХС), триглицеридов (ТГ), лактата, гликозилированного гемоглобина (HbAlc) определяли на автоматическом анализаторе для биохимического и иммунотурбидиметрического анализа ÜVitalit 1000», фирмы «Витал» Россия. Использовались реактивы фирмы «Витал диагностике  Результаты представлены в ммоль/л, а гликозилированного гемоглобина в процентах. Липопротеиды высокой плотности (ХС ЛПВП), пирувата, малонового диальдегида выполняли на КФК-3. Исследования пирувата проводили по методу Ум-брайта, а малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты.

Статистический анализ проведен с использованием программ Microsoft Excel, Statistica 6.0. Были использованы статистические характеристики: средняя арифметическая (М), стандартная ошибка от средней арифметической (m), Различия между средними значениями отдельных показателей оценивались с помощью среднего квадратичного отклонения. Достоверными считали результаты при р<0,05.

Результаты и их обсуждение. При сахарном диабете 2 типа показатели состояния углеводного и липидного обмена являются значимыми факторами риска развития сосудистых осложнений диабета.

Исследуемые показатели крови у всех обследованных больных за единичными исключениями были изменены (табл.1). Средний уровень глюкозы был увеличен в 1,52 раза по сравнению с рекомендуемым значением, гликированного гемоглобина -в 1,8 раза. Гликозилированный гемоглобин является более чувствительным маркером повышения гликемии и более полно отражает реальное состояние углеводного обмена. Общего холестерина  в 1,29 раза, триглицеридов  в 1,59 раза, липопротеиды низкой плотности (ХС ЛПНП)  в 1,1 раза. Увеличение этих показателей позволяет оценить степень дислипопротеинемии в наиболее полном объёме у обследуемых. Учитывая достоверное увеличение уровней ТГ, общего ХС, ХС ЛПНП при снижении ХС ЛПВП, можно с уверенностью говорить о наличии у обследованных больных атерогенных дислипидемий и связанных с этим высоким риском развития сердечно-сосудистых осложнений. Повышенный уровень ХС ЛПНП приводит к тому, что они не могут поступать в ткани рецепторным путем, а начинают удаляться фагоцитирующими клетками. С функционированием фагоцитирующих клеток и высоким уровнем липидов, особенно ТГ, связана интенсификация свободно-радикальных реакций и развитие окислительного стресса.

Для подтверждения окислительного стресса у больных с сахарным диабетом 2 типа исследовали состояние антиоксидант-ной системы. Определяли величину малонового диальдегида. Его содержание было повышено в 6,9 раза, что свидетельствует об избытке продуктов перекисного окисления липидов, снижении антиоксидантной активности и увеличивающемся цитотоксиче-ском действии на эндотелиальные клетки сосудов. Таким образом, на основании проведенного биохимического исследования состояния антиоксидантной системы сыворотки крови можно сделать заключение, что для больных сахарным диабетом 2 типа характерным является активация свободно-радикальных процес-

сов при снижении общей антиоксидантной системы защиты.

Уровни лактата и пирувата были увеличены соответственно в 1,1 ив 2,2 раза. Это связано с развитием гипоксии тканей, обусловленной недостаточным поступлением кислорода и глюкозы в клетку, глюкозотоксичностью, конечным гликированием, более прочной связью кислорода с гликированным гемоглобином, т.е. значительными нарушениями в обмене углеводов в условиях недостаточного действия инсулина.

В ротовой жидкости наблюдалось повышение уровней глюкозы в 4,7 раза, общего ХС  в 4,0 раза, ТГ  в 6,2 раза, лактата  в 2,8 раза, МДА  в 3,4 раза. Это достоверно подтверждает изменение биохимических параметров не только в сыворотке, но и в ротовой жидкости (табл. 2).

Выводы:

1. На основании проведенных исследований у больных сахарным диабетом 2 типа биохимические показатели оказались достоверно выше, чем у здоровых людей. Значительно повышены уровни глюкозы, триглицеридов, общего холестерина. В ротовой жидкости сдвиги биохимических показателей оказались более выражены, чем в крови.

2. Слюна в качестве материала для подобного исследования не уступает сыворотке, а соответственно является более предпочтительной для использования.

3. Исследование ротовой жидкости адекватно отражает Таблица 1 биохимический статус и физиологическое состояние здорового и больного человека и подтверждает преимущества применения этого неинвазивного метода в лабораторной диагностике.

Литература

1. Балаболкин, М.И. Диабетология / М.И. Балабол-кин.П М.: Медицина, 2000.П672 с.

2. Бондарь, Т.П. Лабораторно-клиническая диагностика сахарного диабета и его осложнений / Т.П. Бондарь, Г.И.

Козинец.П М.: Медицинское информационное агентство, 2003.П 88 с.

3. Аналитические подходы к изучению показателей метаболизма в ротовой жидкости / Ф.Н. Гильмиярова [и др.]// Под ред. Ф.Н.Гильмияровой.ПМ.: Известия, 2006.П 312 с.

4. Захаренкова, Т.П. Динамичность измерений параметров ротовой жидкости в связи с физиологическими и патологическими состояниями организма: диагностические аспекты: Дисс.  канд. мед. Наук / Т.П. Захаренкова.П Саратов, 2002.

5. Комарова, Л.Г. Саливология (монография) / Л.Г. Комарова,

О.П. Алексеева.ПН. Новгород, изд-во НГМА.П 2006.П180 с.

6. Окислительный стресс. Патологические состояния и заболевания / Е.Б. Меньщикова [и др.].П Новосибирск: АРТА, 2008.П 284 с.

7. Носков, В.Б. Клиническая лабораторная диагностика / В.Б. Носков, 2008.П№ 6.ПС. 14П17.

8. Пономарёва, А.И. Клиническая фармакология инсулинов, пероральных сахароснижающих лекарственных средств / А.И. Пономарёвой., О.Г. Компанией, Т.М. Семенихина.П Краснодар, 2009.

9. Рыскина, Е.А. Аналитические подходы к изучению показателей метаболизма в ротовой жидкости: Дисс.  канд. биол. Наук / Е.А. Рысакина.П М.: РУДН, 2007.

10. E-vans J., Goldfine I, Maddux B, Grodsky G. Are oxidative stress activated signaling pathways mediators of insulin resistance and beta-cell dysfunction? // Diabetes.D 2003.П Vol.52.D A.1.D P. 1-8.

INFORMATION CAPACITY OF CHANGES IN MOUTH LIQUID AND BLOOD SERUM BIOCHEMICAL PARAMETERS OF PATIENTS WITH DIABETES MELLITUS OF THE 2 TYPE

I.A. FOTINA

Non-governmental Healthcare Institution 'JSC ''Russian Railways "Novorossiysk Station Central Hospital"

Implementation of non-invasive and safe methods into the laboratory diagnostic procedures provides considerable possibilities for saliva diagnostics. It is particularly important for patients with diabetes mellitus of II type who have to control glucose blood level and get medicines intravenously. Therefore, mouth liquid is an interesting object for research. Undertaken biochemical research is to solve the problem of considering the information capacity of mouth liquid indices as compared with blood ones.

Биохимические показатели сыворотки крови больных сахарным диабетом 2 типа

Группы обследов Глюкоза ммоль/л ХС ммоль/л ХС ЛПВП ммоль/л ХС ЛПНП ммоль/л ТГ ммоль/л HbA1c % Лактат ммоль/л Пируват ммоль/л МДА мкмоль/лл

больные 9,3±1,65* 6,7±0,91* 1,12±0,135* 3.84±0,369* 2,71±0,85* 7,24±0,76* 2,30±0,25 0,22±0,049 6,94±*0,55

рекомендуемые 6,1 5,2 1,09 3,5 1,7 4-5,5 0,5-2,2 0,1 <1

Примечание: *  статистически значимое различие между биохимическими показателями у больных сахарным диабетом 2 типа и здоровыми лицами, р < 0,05.

Таблица 2

Биохимические показатели слюны больных сахарным диабетом 2 типа

Группы обследованных Г люкоза ммоль/л ХС ммоль/л ТГ ммоль/л Лактат ммоль/л МДА мкмоль/л

Больные 0,250±0,028* 0,133±0,048* 0,136±0,044* 0,142±0,048* 1,29±0,485*

Здоровые 0,068±0,005 0,042±0,003 0,007±0,002 0,06±0,019 0,428±0,013

Примечание: * - достоверность различий по сравнению со здоровыми (р<0,05).

Key words: diabetes mellitus, mouth liquid, non-invasive method, oxidative stress.

УДК 616.65-002

ИНТЕРВАЛЬНАЯ ГИПОКСИЧЕСКАЯ ТРЕНИРОВКА В ВОССТАНОВИТЕЛЬНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПРОСТАТИТОМ

Ш.С. ШУКРУЛЛАЕВ*

В статье представлены результаты разработки, научного обоснования и внедрениия эффективного метода нормобарической интервальной гипоксической тренировки в восстановительное лечение больных хроническим простатитом.

Ключевые слова: хронический простатит, лечение, гипоксическая тренировка.

Простатит  одно из самых распространенных заболеваний в урологической практике, составляющее до 35% всех обращений к врачу по поводу урологических проблем среди мужского населения России трудоспособного возраста. По данным ряда исследователей хроническим простатитом страдают от 27 до 84% мужчин наиболее трудоспособного и активно репродуктивного возраста.

В литературе, к сожалению, мало сведений об особенностях состояния функциональной системы дыхания при хроническом простатите  важнейшей системы организма, основной задачей которой является своевременное и достаточное обеспечение организма, всех его тканей, в том числе и кожи, кислородом. Функциональная система дыхания, включающая органы внешнего дыхания, кровообращения, дыхательную функцию крови, тканевые механизмы, осуществляющие утилизацию кислорода в тканях. Эта система ответственна за обеспечение самым существенным для жизни и нормальной функции тканей элементом  кислородом. Современные научные исследования в области терапии хронического простатита связаны с поиском эффективных, относительно простых и безопасных схем и методов лечения.

Интервальная гипоксическая тренировка (ИГТ) в последние 15 лет стала активно использоваться в качестве эффективного лечебного средства наиболее распространенных заболеваний дыхательных путей и легких, сердечно-сосудистой системы, анемии, хронических гинекологических, эндокринных заболеваний, и других болезней [2]. Известно, что адаптация организма к умеренной гипоксии повышает устойчивость к более выраженной степени кислородной недостаточности. Адаптацию к гипоксии, достигаемую тренировкой, следует рассматривать, как наиболее физиологический способ повышения устойчивости к ней.

Использование интервальной гипоксической тренировки основана на учитывании значения снабжения организма кислородом и, в частности, улучшение микроциркуляции в тканях и улучшению утилизация кислорода из крови. Доставка кислорода зависит от состояния функциональной системы дыхания, включающая газообмен в легких, транспорт респираторных газов кровью, дыхательную функцию крови, тканевое дыхание, то есть все физиологические и биохимические процессы, ответственные за кровоснабжение и обеспечение тканей организма кислородом. Улучшение состояния функциональной системы дыхания у больных с хроническим простатитом с использованием нормобарической интервальной гипоксической тренировки, как метод, улучшает адаптацию к гипоксии  может оказаться одним из новых, не инвазивных, перспективных методов лечения хронического простатита

Цель исследования  разработка, научное обоснование и внедрение эффективного метода нормобарической интервальной гипоксической тренировки в восстановительное лечение больных хроническим простатитом.

Материалы и методы исследований. Под наблюдением находилось 28 больных хроническим простатитом. У всех пациентам обследована функция внешнего дыхания.

С учетом жалоб, всем пациентам определяли состояние функции внешнего дыхания на аппарате СФлоускринЦ Германия. Регистрировались: жизненная емкость легких (VC), форсированная жизненная емкость легких (FVC), объем форсированного выдоха за 1 сек. (FVC), дыхательный объем (VT), частота дыха-

* Клиника «Добромед» Москва, м. «Бульвар Дмитрия Донского»] Бульвар Д. Донского, д.8

ния (BF), максимальная вентиляция легких (MVV).

Лечение пациентов было проведено с использованием гипок-сикаторов фирм "Trade Medical". Проводимая нами интервальная гипоксическая тренировка включала 12 сеансов, в каждом из них 46 серии пятиминутных гипоксических воздействий с пятиминутным интервалом дыхания комнатным воздухом с нормальным содержанием кислорода (20,9%02). Среди методов мануальной терапии применялись мышечно-фасциальные, мышечноэнергетические, тракционные и мобилизационные техники.

Результаты и их обсуждение. При исследовании выявлено, что ИГТ, применяемое пациентам с хроническим простатитом является эффективным терапевтическим методом. Показатели функции внешнего дыхания находятся в зависимости от сопутствующих заболеваний (бронхиальная астма, ИБС, гипертоническая болезнь, заболеваний, сопряженных со сниженным индексом Hg), а так же от тренированности пациента. Чем серьезнее сопутствующее заболевание, тем хуже показатели ФСД.

После использования комплексного воздействия мануальной терапии и ИТГ у всех пациентов улучшилось общее самочувствие, уменьшились все клинические проявления заболевания.

0тмечено улучшение состояния функциональной системы дыхания: увеличились дыхательный объем, альвеолярная вентиляция, ее доля в МОД. Рост дыхательного объема обусловил увеличение диффузионной поверхности легких. У пациентов после курса комплексной терапии улучшились функциональные показатели внешнего дыхания: на 9,5% увеличилась FVC, возрос объем форсированного выдоха за 1 секунду, повысился индекс Тиффно, что свидетельствовало об улучшении бронхиальной проходимости. Достоверно возросли форсированная жизненная емкость легких, увеличилась скорость форсированного выдоха за 1 секунду и мгновенная объемная скорость при выдохе 50% ФЖЕЛ (табл. 1).

Таблица 1

Показатели функции внешнего дыхания у пациентов с дорсопатиями до и после комплексного лечения

Показатели, %N FVC FEV1 FVC/ FEV1 PEF MEF50%

До ИГТ 68,2±2,8 61,1±2,1 57,2±3,1 55,4±2,6 73,3±2,7

После ИГТ 77,7±3,0 78,8±3,8 67,6±3,6 69,2±3,9 86,7±4,3

Таблица 2

Показатели экономичности дыхания и кровообращения у пациентов с дорсопатиями

SaÜ2 Hi) КЕК CaÜ2 QaÜ7

До лечения 94,4 131 170,3 160,8 825

После ИГТ + МТ 96,0 140 182,0 174,7 920

В результате улучшения вентиляционно-перфузионных отношений повысилось насыщение артериальной крови кислородом (8а02). Повышение содержания гемоглобина (НЬ) и насыщение артериальной крови кислородом привело к возрастанию содержания кислорода в артериальной крови (Са02). Эти изменения функциональной системы дыхания способствовали улучшению снабжения кислородом организма  увеличению кислородной емкости крови в артериальной крови (КЕК) и скорости транспорта кислорода артериальной кровью ^а02), что подтверждает увеличение кислорода во всем организме (табл.2).

На основании нашего наблюдения можно с уверенностью отметить, что комплексное лечение больных хроническим простатитом является более эффективным. Применение интервальной гипоксической тренировки в комплексе со стандартной терапией можно рекомендовать больным, страдающим хроническим простатитом.

Литература

1. Гринева, О.В. Нормобарическая гипокситерапия лиц с сердечно-сосудистыми нарушениями в условиях курорта Сочи. В кн.: Прерывистая нормобарическая гипокситерапия / О. В. Гринева, Р.Ю. Поддубная, А. Т. Быков, А.Я. Чижов // Доклады Академии проблем гипоксии РФ, том 3.//Под редакцией Р.Б.Стрелкова, А.Я.Чижова.П М., 2005.П С. 60-67

2. Колчинская, А.З. Нормобарическая интервальная гипоксическая тренировка в медицине и спорте / А.З. Колчинская, Т.Н. Цыганова, Л.А. Остапенко.П М.: Медицина.^ 2003.П 407 С.