МУЛЬТИЗИМЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ПОЛУЧЕНИИ ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ

20/22
20/22
1. Мультизим, включающий отдельный полипептид, обладающий, по меньшей мере, двумя независимыми и раздельными ферментативными активностями, где указанные ферментативные активности представляют собой дельта-4-десатуразу и C-элонгазу, и где указанные дельта-4-десатураза и C-элонгаза связаны связью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:198, SEQ ID NO:200, SEQ ID NO:235, SEQ ID NO:438, SEQ ID NO:472, SEQ ID NO:445 и SEQ ID NO:504.
2. Выделенный полинуклеотид, кодирующий мультизим по п. 1, где указанный полинуклеотид включает:
(a) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, которая, по меньшей мере, на 80% идентична SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96 или SEQ ID NO:97;
(b) нуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93 или SEQ ID NO:410; или
(c) нуклеотидную последовательность, которая гибридизуется в жестких условиях с нуклеотидной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93 или SEQ ID NO:410.
3. Выделенный полинуклеотид по п. 2, где указанный полинуклеотид включает нуклеотидную последовательность, кодирующую SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96 или SEQ ID NO:97.
4. Выделенный полинуклеотид по п. 3, где указанный
полинуклеотид включает нуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93 или SEQ ID NO:410.
5. Рекомбинантная конструкция, включающая любой из выделенных полинуклеотидов по пп. 2-4, функционально связанный, по меньшей мере, с одной регуляторной последовательностью.
6. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантную конструкцию по п. 5.
7. Клетка-хозяин по п. 6, где указанная клетка хозяин представляет собой клетку растения.
8. Клетка-хозяин по п. 7, где указанная клетка растения представляет собой клетку масличного растения.
9. Клетка-хозяин по п. 6, где указанная клетка-хозяин представляет собой клетку дрожжей.
10. Клетка-хозяин по п. 9, где указанная клетка-хозяин представляет собой клетку жировых дрожжей.
11. Клетка-хозяин по п. 10, где указанная клетка дрожжей представляет собой клетку Yarrowia.
12. Способ трансформирования клетки, включающий трансформирование клетки рекомбинантной конструкцией по п. 5 и отбор клеток, трансформированных указанной рекомбинантной конструкцией.
13. Способ получения трансформированного растения, включающий трансформирование клетки растения рекомбинантной конструкцией по п. 5 и регенерирование растения из указанной трансформированной клетки растения.
14. Растение, содержащее рекомбинантную конструкцию по п. 5.
15. Растение по п. 14, где указанное растение представляет собой масличное растение.
16. Растение по п. 15, где указанное растение представляет собой растение сои или растение подсолнечника.
17. Семя, полученное из растения по п. 14, где указанное семя содержит указанную рекомбинантную конструкцию.
18. Способ превращения эйкозапентаеновой кислоты в докозагексаеновую кислоту, включающий:
a) обеспечение рекомбинантной микробной клетки-хозяина, содержащей рекомбинантную конструкцию по п. 5 и источник эйкозапентаеновой кислоты; и
b) выращивание указанной клетки-хозяина из (a) в условиях, в которых образуется докозагексаеновая кислота.