Влияние IL-4 на активность транскрипционного фактора stat6 в лимфоцитах периферической крови больных бронхиальной астмой

Медицинская Иммунология 2009, Т. 11, № 2-3, стр. 177-184 © 2009, СПб РО РААКИ

Оригинальные статьи

ВЛИЯНИЕ IL-4 НА АКТИВНОСТЬ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА STAT6 В ЛИМФОЦИТАХ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

Минеев В.Н., Сорокина Л.Н., Нёма М.А.

Кафедра госпитальной терапии им. акад. М.В.Черноруцкого Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова

Резюме. Цель исследования — изучить уровни STAT6 и pSTAT6 в условиях влияния IL-4 у больных бронхиальной астмой (БА). Обследовано 10 практически здоровых лиц и 33 больных аллергической и неаллергической БА различной степени тяжести. Для активации применяли IL-4 (Sigma Aldrich, США) в концентрации 10 нг/мл в течение 1 ч. Применяли методику Western blotting в соответствии со стандартным протоколом (Amersham) с использованием соответствующих антител: анти-STAT6, анти-pSTAT6 (Cell Signaling). Уровень белка стандартизировали по в-актину (Cell Signaling, USA). В условиях активации IL-4 выявлено нарастание уровня активированного pSTAT6 (фосфорилированной формы) в лимфоцитах периферической крови у больных БА во всех группах, более выраженное при аллергической, нежели при неаллергической БА. Уровни экспрессии STAT6 в лимфоцитах периферической крови у больных с тяжелым течением БА были достоверно выше, чем при среднетяжелой БА. Выявлено активирующее влияние IL-4 на уровень транскрипционного фактора рSTAT6, наиболее выраженное при аллергической форме БА. Уровень транскрипционного фактора STAT6 может служить показателем тяжести заболевания. Работа в 2008 году поддержана грантом по итогам конкурса научных работ молодых ученых СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова на «Стипендию года» за 2007 год.

Ключевые слова: бронхиальная астма, JAK-STAT-система, IL-4, STAT6, pSTAT6, лимфоциты.

Mineev V.N., Sorokina L.N., Nyoma M.A.

EFFECTS OF IL-4 UPON THE ACTIVITY OF STAT6 TRANSCRIPTION FACTOR IN PERIPHERAL BLOOD LYMPHOCYTES IN BRONCHIAL ASTHMA

Abstract. The aim of the study is to specify the levels of STAT6, and phospho-STAT6 under the influence of IL-4 in patients with bronchial asthma (BA). The samples from ten healthy controls and thirty-three BA patients with allergic and non-allergic clinical forms of different severity were under investigation. Peripheral blood lymphocytes were treated with 10 ng/ml of IL-4 (Sigma Aldrich, USA) for 1 h. Then the proteins (STAT6 and phospho-STAT6) expressed in peripheral lymphocytes were analyzed by Western blot of cell lysates. Preparation of the cell lysates and Western blotting were carried out using standard procedures. Antibodies against phospho-STAT6 and STAT6 (10 ng/ml) were used (Cell Signaling, USA). Levels of thespecific proteins were standardized according to в-actin (Cell Signaling, USA). Treatment with IL-4 caused an increase of phospho-STAT6 levels in lymphocytes of all BA patients, as compared with control group. In allergic BA, the phospho-STAT6 levels were significantly higher than in non-allergic clinical forms. Expression of STAT6 in lymphocytes of patients with severe BA was significantly higher, as compared to BA of moderate severity.

An IL-4-induced activation of the STAT6 transcription

Адрес для переписки: factor was revealed in an in vitro system, being mostly

Минеев Валерий Николаевич, expressed in allergic BA. The level of STAT6 may serve

198516, Санкт-Петербург, г. Петродворец, as a BA severity index. This study was supported by a

Санкт-Петербургский пр, д. 56, кв.15. «Scholarship of the Теш» grant from the St. Petersburg

Тел  (812) 450-7^63 State Medical I. Pavlov University (2007). (Med.

E-mail: minvn@spmu.rssi.ru ImmmoL, vol U, N2-3,pp Ш-Ш)

177

Минеев В.Н., Сорокина Л.Н., Нёма М.А.

Медицинская Иммунология

Введение

Прошло уже более десяти лет с тех пор, как Darnell J.E. с соавторами [11] выделили первый представитель семейства STAT белков JAK-STAT-системы (Janus Kinases — Signal Transducer and Activator of Transcription), однако до настоящего времени остается еще много вопросов в понимании роли этой системы в формировании бронхиальной астмы (БА) и функционировании цитокиновой сигнализации.

Известно, что активация JAK-STAT сигнального пути при формировании ^2-иммунного ответа запускается с помощью IL-4 (рис. 1) [22, 25]. В результате связывания IL-4 и/или IL-13 с трансмембранным рецептором, состоящим из лиганд-специфичной IL^Ra-цепи и у-цепи (уС), происходит его олигомеризация и последу-

ющая активация с внутренней стороны мембраны Янус-киназ JAK1 и JAK3, которые фосфорили-руют STAT6-мономер (неактивный белок), превращая его в pSTAT6-димер (активный белок), который затем транслоцируется в ядро, участвуя в транскрипции.

При этом активация STAT6 оказывается, по нашему мнению [5] и мнению ряда авторов [8, 14, 15, 19, 21, 23], ключевым звеном в данном сигнальном каскаде. Так, нами ранее [5] было выявлено повышение экспрессии STAT6, а также повышенный уровень активной (фосфорилиро-ванной) формы его (pSTAT6) в лимфоцитах периферической крови больных аллергической БА.

Цель данного исследования — изучение регуляторного влияния IL-4 на выраженность экспрессии STAT6 в лимфоцитах периферической крови больных БА.

Рисунок 1. Дифференцировка Т-лимфоцитов в сторону Th2 под действием IL-4

178

2009, Т. 11, № 2-3

Влияние IL-4 на STAT6 при бронхиальной астме

Материалы и методы

Работу проводили на базе лаборатории «Внутриклеточной сигнализации и транспорта» (руководитель — академик РАН, профессор Н.Н. Никольский) Научно-исследовательского института цитологии РАН.

Обследовали 10 практически здоровых лиц и 33 больных БА с различной тяжестью течения. Все обследованные больные БА находились на лечении в клинике госпитальной терапии им. акад. М.В. Черноруцкого Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова.

Всем больным проводили комплексное клинико-лабораторное и инструментальное обследование, включавшее общеклинические методы, цитологический и бактериологический анализ мокроты или промывных вод бронхов, а также, по показаниям, бронхоскопическое, аллергологическое и микологическое, гормональные исследования. В каждой обследованной группе проводили исследование функции внешнего дыхания.

Диагноз БА устанавливали в соответствии с классификацией и критериями международного консенсуса по вопросам диагностики и лечения БА (Global Initiative of Asthma — GINA, 2006). Комплекс лечебных мероприятий у больных БА полностью соответствовал варианту заболевания. Больные получали медикаментозную терапию в соответствии со стандартами лечения (GINA, 2006).

Методика подробно описана ранее [1, 5]. Активацию лимфоцитов проводили добавлением 10 нг/мл IL-4 (Sigma Aldrich, США) в СО2-инку-баторе в течение 60 мин. После окончания инкубации лимфоциты помещали на лед и все дальнейшие процедуры проводили при +4 °С.

Статистическую обработку результатов исследований проводили с помощью программы «Excel 7» и статистического пакета «Statistica 6» с использованием методов и критериев непараметрической статистики при малом значении n (числа наблюдений): критерия Вилкоксона— Манна-Уитни, коэффициента корреляции Спирмана и т.д. Заключение о статистической значимости давалось при уровне вероятности ошибочного заключения не менее 0,05.

Для обработки и анализа полученных данных (с регистрацией интегрированной плотности по стандартной методике) использовали программы Adobe Photoshop CS2 и Scion Image.

Результаты

Уровни экспрессии STAT6 в лимфоцитах периферической крови больных БА существенно выше по сравнению с уровнем у практически здоровых лиц (табл. 1-3). В условиях инкубации с IL-4 отмечалась тенденция к снижению как в контрольной группе, так и при аллергической БА (табл. 1) уровня экспрессии STAT6.

Активация сигнального пути при действии IL-4 приводила к существенному нарастанию фосфорилированной формы (активной) pSTAT6, которое было наиболее выражено при аллергической БА (табл. 1) в сравнении с неаллергической (табл. 2).

При анализе изменений исследуемого транскрипционного фактора в динамике обострения (табл. 3) было выявлено существенное нарастание как уровня экспрессии STAT6, так и его активной формы pSTAT6 к окончанию обострения. В то же время в условиях активации IL-4 статистически значимого нарастания pSTAT6 не выявлено.

С целью интегральной характеристики нами проведена сравнительная оценка уровней

ТАБЛИЦА 1. УРОВНИ STAT6 И pSTAT6 У ПРАКТИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ И У БОЛЬНЫХ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ БА

(интегрированная плотность по отношению к р-актину, процентили: 25-й, 75-й) в обследованных группах

Транскрипционный фактор Контрольная группа

Среднее значение Процентили Среднее значение Процентили

25-й 75-й 25-й 75-й

STAT6 0,007 0,0008 0,018 0,85* 0,298 1,33

STAT6 в условиях активации IL-4 0,003 0,001 0,004 0,78 0,17 1,21

pSTAT6 0,004 0,001 0,007 1,47 0,66 2,45

pSTAT6 в условиях активации IL-4 0,082** 0,01 0,2 5,87*; ** 4,8 6,91

Примечание. * - значимость (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни для несвязанных совокупностей) (р < 0,05) - сравнение с контрольной группой; ** - значимость (критерий Вилкоксона для связанных совокупностей) - сравнение с исходным уровнем (в отсутствие IL-4).

179

Минеев В.Н., Сорокина Л.Н., Нёма М.А.

Медицинская Иммунология

ТАБЛИЦА 2. УРОВНИ STAT6 И pSTAT6 У БОЛЬНЫХ С НЕАЛЛЕРГИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

(интегрированная плотность по отношению к р-актину, процентили: 25-й, 75-й) в зависимости от тяжести течения

Транскрипционный фактор Течение средней тяжести

Среднее значение Процентили Среднее значение Процентили

25-й 75-й 25-й 75-й

STAT6 0,13* 0,014 0,29 0 77*: ** 0,62 1,1

STAT6 в условиях активации IL-4 0,14 0,004 0,3 0,4 0,007 0,63

pSTAT6 0,13 0,025 0,11 0,31 0,03 0,68

pSTAT6 в условиях активации IL-4 0,52*** 0,21 0,73 0 9**; *** 0,7 1,22

Примечание. * - значимость (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни для несвязанных совокупностей) (р < 0,05) - сравнение с контрольной группой; ** - значимость (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни для несвязанных совокупностей) (p < 0,05) -сравнение со средней тяжестью; *** - значимость (критерий Вилкоксона для связанных совокупностей) - сравнение с исходным уровнем (в отсутствие IL-4).

таблица 3. динамика изменений STAT6 И pSTAT6 в ходе обострения у больных с НЕАЛЛЕРГИЧЕскОЙ бронхиальной астмой (интегрированная плотность по отношению к р-АкТИНУ, пРОЦЕНТИЛИ: 25-Й, 75-Й) в обследованных ГРУппАх

Транскрипционный фактор Начало обострения Окончание обострения

Среднее значение Процентили Среднее значение Процентили

25-й 75-й 25-й 75-й

STAT6 0,22 0,005 0,31 0,79* 0,65 0,88

STAT6 в условиях активации IL-4 0,38 0,002 0,61 0,6** 0,55 0,65

pSTAT6 0,004 0,001 0,0054 0,24* 0,03 0,44

pSTAT6 в условиях активации IL-4 0,49** 0,17 0,67 0,86** * р = 0,07 0,7 0,92

Примечание. * - значимость (критерий Вилкоксона для связанных совокупностей) (р < 0,05) - сравнение с началом обострения, ** - значимость (критерий Вилкоксона для связанных совокупностей) - сравнение с исходным уровнем (в отсутствие IL-4).

активной (фосфорилированной) pSTAT6 и экспрессии неактивной STAT6 форм изучаемого транскрипционного фактора (рис. 4).

Как видно из рисунка 4, исходные значения данного индекса pSTAT6/STAT6 уменьшаются при нарастании тяжести заболевания, в то время как индуцированные IL-4, наоборот, нарастают по мере утяжеления заболевания.

С целью оценки влияния системных глюкокортикоидов на активность STAT6 был проведен корреляционный анализ между уровнями активной формы транскрипционного фактора STAT6 (pSTAT6) и дозами вводимых парентеральных глюкокортикоидов: выявлена отрицательная

корреляционная связь r = -0,55; p = 0,003; n = 27. При этом следует отметить, что данная корреляционная связь при действии IL-4 сохранялась, но заметно ослабевала: r = -0,46; p = 0,017; n = 27.

Еще одна существенная отрицательная корреляционная связь (г = -0,39; p = 0,048; n = 27) выявлена при сравнении ОФВ1 и уровня экспрессии STAT6 в лимфоцитах периферической крови. После бронхолитического теста данная корреляционная связь становится более выраженной: r = -0,44; p = 0,023; n = 27.

Вполне закономерно наличие еще одной корреляционной связи, характеризующей тяжесть течения БА: нами выявлена отрицательная корреляционная связь (г = -0,55; p = 0,004; n = 27) между ОФВ1 и дозой вводимых парентеральных глюкокортикоидов, что свидетельствует о нарастании потребности в системных глюкокортикоидах при утяжелении заболевания и нарастании бронхиальной обструкции. При этом после бронхолитического теста данная корреляционная связь становится менее выраженной: r = -0,44; p = 0,026; n = 27.

180

2009, Т. 11, № 2-3

Влияние IL-4 на STAT6 при бронхиальной астме

Обсуждение

Полученные нами данные являются существенными, на наш взгляд, в обсуждении двух важных вопросов: выяснение механизмов утяжеления течения БА и роли транскрипционных факторов в формировании патологического процесса.

Ранее нами [5] было показано повышение экспрессии транскрипционного фактора STAT6 в лимфоцитах периферической крови больных аллергической БА, что согласуется с полученными данными в настоящем исследовании, свидетельствующими о повышении экспрессии STAT6 во всех обследованных группах больных БА, наиболее выраженном при аллергической БА, и с данными литературы о повышенной активности IL-4 сигнализации при аллергической патологии, и, в частности, указанного выше транскрипционного фактора [9, 17, 24].

В частности, при иммуногистохимическом исследовании ткани бронхов больных БА [9] определялось более высокое содержание клеток, экспрессирующих STAT6 у больных с аллергической БА в сравнении с неаллергической астмой.

Примечательно, что лимфоциты периферической крови больных с тяжелой БА характеризовались более выраженной исходной экспрессией STAT6, чем больных БА с течением средней тяжести, что, по-видимому, может играть важную роль для оценки механизмов утяжеления БА. Ранее [18] в исследовании бронхиального эпителия больных БА был выявлен более высокий уровень экспрессии STAT6 у больных с тяжелой БА, которые получали ингаляционные и пероральные глюкокортикостероиды, однако подобных исследований на лимфоцитах периферической крови не проводилось.

В этой связи представляют интерес выявленные нами отрицательные корреляционные связи между уровнем экспрессии STAT6 в лимфоцитах периферической крови и ОФВ1 [16]; уровнем рSTAT6 и дозой системных глюкокортикостероидов; ОФВ1 и дозой системных глюкокортикостероидов. Таким образом, исходная экспрессия транскрипционного фактора STAT6 в лимфоцитах периферической крови больных БА может являться важным конститутивным показателем в патогенезе и определении степени тяжести заболевания.

STAT6

pSTAT6

U U M K IL-4 IL-12 K IL-4 IL-12 K IL-4 IL-12

Рисунок 2. Western blotting анализ с использованием антител к STAT6 и pSTAT6 в группе больных бронхиальной астмой

Начало

обострения

STAT6

pSTAT6

U M K IL-4 IL-12 K IL-4 IL-12 K IL-4 IL-12 IL-4 IL-12 M U

Окончание

обострения

Больной К. Больной Я.

Рисунок 3. Western blotting анализ с использованием антител к STAT6 и pSTAT6 в группе больных бронхиальной астмой при обострении

181

Минеев В.Н., Сорокина Л.Н., Нёма М.А.

Медицинская Иммунология

Тем более, на наш взгляд, важным является исследование данного транскрипционного фактора в условиях его активации IL-4 как ключевого цитокина в развитии аллергического иммунного ответа. Так, IL-4, как хорошо известно, имеет уникальное свойство определять дифференцировку TM-лимфоцитов, имеющих рецепторы к данному цитокину, в ^2-лимфоциты, которые характеризуются способностью к продукции соответствующих цитокинов IL-4, IL-5, IL-9 и IL-13. При инкубации Т-лимфоцитов человека in vitro c IL-4 образуется ^2-подобный клон лимфоцитов. Дальнейшее развитие аллергического воспаления [6], характеризующегося индукцией В-лимфоцитов к синтезу IgE, регуляцией рецепторов к IgE (низкоафинные на В-лимфоцитах, макрофагах и высокоафинные на тучных клетках и базофилах), также усиливается воздействием IL-4. В результате происходит IgE-зависимая активация тучных клеток. Кроме того, IL-4 индуцирует экспрессию муцина, приводя к гиперсекреции слизи и повышению обструкции бронхов; повышает экспрессию эотаксина и других провоспалительных цитокинов в фибробластах, что оказывается решающим в ремоделировании бронхов при длительном течении БА. Индуцируя молекулы адгезии к эндотелию (VCAM-1), IL-4 обеспечивает миграцию Т-лимфоцитов, моноцитов, базофилов и эозинофилов в очаг воспаления. И, наконец, показано, что, воздействуя на активированные Т-лимфоциты, В-лимфоциты, эозинофилы, IL-4 способен ингибировать процесс апоптоза, что обеспечивает длительную пер-систенцию клеток воспаления, удлиняя существование патологического процесса [10, 26].

Итак, нами показано, что эффект IL-4 был статистически значимым во всех обследованных группах и проявлялся в существенном нарастании

50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0

Рисунок 4. Изменение значений индекса pSTAT6/STAT6 в зависимости от тяжести БА

т

Контроль Легкая БА Средней Тяжелая БА тяжести БА

Исходно П IL-4

активной фосфорилированной формы рSTAT6 в лимфоцитах периферической крови больных БА. Следует отметить также, что максимальной активация данного сигнального пути была в лимфоцитах больных аллергической БА, что согласуется с данными литературы [12, 18, 27].

Примечательно, что в условиях активации IL-4 введенный нами [5] интегральный индекс pSTAT6/STAT6 приобретает практическую значимость в рамках оценки тяжести течения заболевания, поскольку (рис. 4) его значения нарастают с утяжелением течения БА.

Еще один важный аспект, на котором следует остановиться подробнее, это анализ индукции IL-4 в условиях обострения БА. Следует отметить (табл. 3), что в динамике обострения (к концу обострения) бронхиальной астмы отмечалось не уменьшение, а нарастание экспрессии STAT6. Данный факт может быть объяснен эффектом больших доз системных глюкокортикоидов, применявшихся у обследованных больных в связи с началом обострения. Как известно, в T-лимфоцитах крови [Armelle Biola] между глюкокортикоидами (GC) и IL-4 сигнализацией существует взаимодействие и взаимовлияние [7, 20]. Так, в эксперименте было показано [7], что дексаметазон может ингибировать пролиферацию Т-лимфоцитов и, наоборот, воздействие IL-4 приводит к торможению индуцированного глюкокортикоидами апоптоза.

В этой связи является объяснимым факт уменьшения выраженности обнаруженной нами существенной обратной корреляционной связи между дозой парентеральных глюкокортикостероидов и уровнем рSTAT6 в лимфоцитах периферической крови в присутствии IL-4.

Проведенные нами исследования позволяют сделать следующие выводы:

1) выявлено активирующее влияние IL-4 на уровень транскрипционного фактора рSTAT6, наиболее выраженное при аллергической БА;

2) уровень транскрипционного фактора STAT6 может служить показателем тяжести заболевания;

3) аллергическая БА характеризуется максимальной степенью активации рSTAT6.

Таким образом, нами выявленные особенности влияния IL-4 на активность транскрипционного фактора STAT6, связанные с клинико-патогенетическими особенностями БА. В дальнейшем планируется сопоставить полученные данные по фактору STAT6 с рядом других транскрипционных факторов, таких как GATA3-связывающихся белков, T-bet.

Работа в 2008 году поддержана грантом по итогам конкурса научных работ молодых ученых СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова на «Стипендию года» за 2007 год.

182

2009, Т. 11, № 2-3

Влияние IL-4 на STAT6 при бронхиальной астме

Список литературы

1. Лимфоциты: методы: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Клауса. — М.: Мир, 1990. — 395 с.

2. Минеев В.Н., Нестерович И.И., Лалае-ва Т.М., Иванова В.В., Яблонская В.Н., Булатова Н.Ю., Лукашевская Н.Н., Сорокина Л.Н., Ра-бик Ю.Д., Супранович И.Ю., Волченкова О.С., Болотина Н.В. Сигнальные системы при бронхиальной астме // Ученые записки СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова. — 2001. — Т. 8, № 1. — С. 17-21.

3. Минеев В.Н., Сорокина Л.Н. Современные представления о JAK-STAT системе как новой сигнальной системе и ее нарушениях при иммунной патологии (Часть I) // Аллергология. —

2005. - № 4. - С. 38-44.

4. Минеев В.Н., Сорокина Л.Н. Современные представления о JAK-STAT системе как новой сигнальной системе и ее нарушениях при иммунной патологии: механизмы негативной регуляции (Часть II) // Аллергология. — 2006. — № 1. — С. 49-55.

5. Минеев В.Н., Сорокина Л.Н. Экспрессия STAT6 в лимфоцитах периферической крови больных аллергической бронхиальной астмой // Медицинская иммунология. — 2007. — Т. 9, № 4-5. — С. 405-410.

6. Фрейдлин И.С., Тотолян А.А. Иммунологические механизмы аллергических реакций. // Общая аллергология. — Т 1. — СПб., 2001. — С.169-381.

7. Biola A., Andreau K., David M., Sturm M., Haake M., Bertoglio J., Pallardy M. The glucocorticoid receptor and STAT6 physically and functionally interact in T-lymphocytes // FEBS Letters — 2000. — Vol. 487. — P. 229-233.

8. Caramori G., Lim S., Ito K., Tomita K., Oates T., Jazrawi E., Chung K.F., Barnes PJ., Adcock I.M. Expression of GATA family of transcription factors in T-cells, monocytes and bronchial biopsies // Eur. Respir. J. — 2001. — Vol. 18. — P. 466-473.

9. Christodoulopoulos P., Cameron L.,

Nakamura Y., Lemiere C., Muro S., Dugas M., Boulet L-P., Laviolette M., Olivenstein R., Hamid Q. Th2 cytokine-associated transcription factors in atopic and nonatopic asthma: evidence for differential signal transducer and activator of transcription 6 expression // J. Allergy Clin. Immunol. — 2001. — Vol. 107, N 4. — P. 586—591.

10. Chung K. F., Barnes P. J. Cytokines in asthma // Thorax. — 1999. — Vol. 54. — P. 825-857.

11. Darnell J.E., Kerr I.M., Stark G.R. JAK-STAT pathways and transcriptional activation in response to IFNs and other extracellular signaling proteins // Science. — 1994. — Vol. 64. — Р. 1415-1421.

12. Diel F., Borck H., Horr B. Distinct responses to histamine of STAT1 and STAT6 phosphoregulation

in human T helper lymphocytes // Inflamm. Res. —

2004. — Vol. 53., N 1. — P. 19-20.

13. Herrick Ch.A., Bottomly K. To respond or not to respond: T cells in allergic asthma // Nature Reviews / Immunology. — 2003. — ЛЫ. 3. — P. 1-8.

14. Kaplan M.H., Schindler U., Smiley S.T., Grusby M.J. Stat6 is required for mediating responses to IL-4 and for development of Th2 cells // Immunity. — 1996. — Vol. 4. — P. 313-319.

15. Kharmate G., Liu Z., Patterson E., Khan M.M. Histamine affects STAT6 phosphorylation via its effects on IL-4 secretion: role of H1 receptors in the regulation of IL-4 production // Int. Immunophrmacol. — 2007. — Vol.7, N 3. — P. 277—286.

16. Kuperman D., Schofield B., Wills-Karp M., Grusby M.J. Signal transducer and activator of transcription factor 6 (Stat6)-deficient mice are protected from antigen-induced airway hyperresponsiveness and mucus production // J. Exp. Med. — 1998. — Vol.187. — P. 939-948.

17. Leonard C., Tormey V., Burke C., Poulter L.W Allergen-induced cytokine production in atopic disease and its relationship to disease severity // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. — 1997. — Vol. 17. — P. 368-375.

18. Mullings, R.E., Wilson S.J., Puddicombe S.M.,

Lordan J.L., Bucchieri F., Djukanovi R.,

Howarth P.H., Harper S., Holgate S.T., Davies D.E. Signal transducer and activator of transcription 6 (STAT-6) expression and function in asthmatic bronchial epithelium // J. Allergy Clin. Immunol. — 2001. — Vol. 108, N 5. — P. 832-838.

19. Murray PJ. The JAK-STAT signaling pathway: input and output integration // J. Immunol. — 2007. — Vol. 178. — P. 2623-2629.

20. Nelson G., Wilde G.J.C., Spiller D.G., Kennedy S.M., Ray DW, Sullivan E., Unitt J.F., White R.H. NF-kB signalling is inhibited by glucocorticoid receptor and STAT6 via distinct mechanisms // Journal of Cell Science — 2003. — Vol.116. — P. 2495-2503.

21. O’Shea J. J., Park H., Pesu M., Borie D., Changelian P. New strategies for immunosuppression: interfering with cytokines by targeting the JAK-STAT pathway // Curr. Opin. Rheumatol. — 2005. — Vol. 17, N 3. — P. 305-311.

22. Pernis A.B., Rothman P.B. JAK-STAT signaling in asthma // J. Clin. Invest. — 2002. — Vol. 109, N 10. — P. 1279-1283.

23. Rawlings J.S., Rosler K.M., Harrison D.A. The JAK-STAT signaling pathway // J. Cell Science. — 2004. — Vol. 117. — P. 1281-1283.

24. Shi H.Z., Deng J.M., Xu H., Nong Z.X., Xiao C.Q., Liu Z.M., Qin S.M., Jiang H.X., Liu G.N., Chen Y.Q. Effect of inhaled interleukin-4 on airway

183

Минеев В.Н., Сорокина Л.Н., Нёма М.А.

Медицинская Иммунология

hyperreactivity in asthmatics // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 1998. - Vol. 157. - P 1818-1821.

25. Shuai K., Liu B. Regulation of JAK-STAT signalling in the immune system // Nature. — 2003. — Vol. 3. - P. 900-911.

26. Steinke J.W., Borish L. Th2 cytokines and asthma. Interleukin-4: its role in the pathogenesis of asthma, and targeting it for asthma treatment with interleukin-4 receptor antagonists. // J. Respir. Res. -2001. - Vol. 2. - P. 66-70.

27.Walker C., Bauer W, Braun R.K., Menz G., Braun P, Schwarz F., Hansel T.T, Villiger B. Activated T cells and cytokines in bronchoalveolar lavages from patients with various lung diseases associated with Eosinophilia // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1994. - Vol. 150. - P 1038-1048.

поступила в редакцию 09.12.2008 принята к печати 02.03.2009

184