Поиск противоопухолевых средств среди новых углеводных производных мочевин

поиск противоопухолевых средств среди новых углеводных производных мочевин

Б.к. Эрназарова1, А.З. джуманазарова2, А.Е. Бармашов3, Г.н. Апрышко3

1Жалал-Абадский государственный университет; Кыргызская Республика, 715600Жалал-Абад, ул. Ленина, 57; 2Институт химии и фитотехнологий НАНКР; Кыргызская Республика, 720071 Бишкек, проспект Чуй, 267; 3ФГБУ«Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России;

Россия, 115478 Москва, Каширское ш., 24

Введение. В последние годы создание и использование препаратов для таргетной противоопухолевой терапии, улучшивших качество жизни и выживаемость онкологических пациентов, стало переломным событием в развитии онкологии. Известно, что производные мочевины входят в класс препаратов, обладающих антиангиогенными свойствами. Присоединение же углеводного остатка к производным мочевины способствует улучшению растворимости, адресной доставки лекарств в организме (таргетности), устранению побочных эффектов. С целью поиска новых соединений с антиангиогенными свойствами нами синтезирован ряд соединений, часть из которых — ранее неизвестные производные мочевины. Цель исследования — синтез производных мочевины на основе переамидирования нитрозокарбамидов сахаров, а также оценка методами in silico и in vitro возможности создания новых противоопухолевых лекарств на основе новых гликозидных производных мочевин.

Материалы и методы. Доэкспериментальное прогнозирование биологической активности проводили с помощью компьютерной системы PASS. Цитотоксическую активность определяли методом МТТ. Для постановки MTT-теста клетки раскапывали в 198 мкл полной среды RPMI-1640 в 96-луночные планшеты. Через сутки в каждую лунку добавляли исследуемые соединения в концентрации 100мкМ. Через 72 ч в каждую лунку вносили по 20мкл раствора МТТ. Интенсивность окрашивания среды измеряли на фотометрическом анализаторе иммуноферментных реакций Multiskan EX при X = 540 нм. Результаты. Для 5 виртуальных соединений из ряда исследованных предсказаны высокая вероятность противоопухолевой активности и низкая вероятность цитотоксической активности in silico. Синтезированы соединения: N-(P-D-галакто-пиранозилкарбомоил-1)-2-изоникотин-семикарбазид, 1-[(N-в-D-галактопиранозил)карбомоил]-3,5-диметилпиразол, N-(в-D-галактопиранозилкарбомоил)-п-бромфенилмочевина, N-(в-D-галактопиранозил)-п-хлорфенилмочевина, N-ф-D-глю-копиранозил)-п-хлорфенилмочевина. Соединения не проявляли цитотоксическую активность in vitro.

Выводы. Для исследованных соединений виртуально спрогнозированы низкая вероятность проявления цитостатической активности (что подтверждено экспериментально) и высокая вероятность проявления противоопухолевой активности.

Ключевые слова: противоопухолевое соединение, цитотоксический тест, производное мочевин

DOI: 10.17650/1726-9784-2019-18-3-31-38

SEARCH FoR NEw ANTICANCER DRuGS AMoNG NEw CARBoHYDRATE DERIVATIVES uREA

B.K. Ernazarova1, A.Z. Dzhumanazarova2, A.E. Barmashov3, G.N. Apryshko3

1Jalal-Abad State University; 57Lenin St., Jalal-Abad 715600, Kyrgyz Republic;

2Institute of Chemistry and Phytotechnology of the NAS KR; 267 Chui Prospekt, Bishkek 720071, Kyrgyz Republic;

3N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of Russia; 24 Kashyrskoe Sh., Moscow 115478, Russia

Introduction. In recent years, the creation and use of drugs for antitumor therapy, which have improved the quality of life and survival of cancer patients, has become a crucial event in the development of oncology. It is known that urea derivatives are included in the class of drugs with anti-angiogenic properties. The addition of a carbohydrate residue to urea derivatives helps to improve the solubility, targeted drug delivery in the body (targeting), and the elimination of side effects. In order to search for new compounds with anti-angiogenic properties, we have synthesized a number of compounds, some of which are previously unknown urea derivatives. Purpose of the study — synthesis of urea derivatives based on sugary nitrosocarbamidetransamidation. To evaluate using in silico and in vitro methods, there is the ability to create new anticancer drugs based on new glycosidic urea derivatives. Materials and methods. Pre-experimental prediction of biological activity was performed using a computer system PASS. Cytotoxic activity was determined by the MTT method. For the MTT assay, cells were dropped into 198 ^l of RPMI-1640 complete medium in 96-well plates. After one day, the test compounds were added to each well in concentration 100 ^mol. After 72 hours, 20 ^l of MTT solution was added to each well. The intensity of the medium staining was measured on a Multiskan EX photometric immunoassay analyzer at X = 540 nm.

Контакты: Бактыгуль Кочкорбаевна Эрназарова nauca_07@mail.ru

Results. From the number of virtual compounds studied, for 5 compounds a high probability of antineoplastic activity and a low probability of cytotoxic activity in silico are predicted. Compounds were synthesized: N-(f!-D-galactopyranosylcarbamoyl-1)-2-isonico-tin-semicarbazide, 1-[(N-^-D-galactopyranosyl)-carbamoyl]-3,5-dimethylpyrazole, N-(P-D-galactopyranosylcarbamoyl)-p-bromo-phenylurea, N-(P-D-galactopyranosyl)-p-chlorophenylurea, N-(fi-D-glucopyranosyl)-p-chlorophenylurea. The compounds did not show cytotoxic activity in vitro.

Conclusion. For the studied compounds, a low probability of cytostatic activity manifestation (as confirmed experimentally) and a high probability of antitumor activity manifestation are virtually predicted.

Key words: anticancer drug, cytotoxic assay, derivatives urea

Введение

В последние годы создание и использование препаратов для таргетной противоопухолевой терапии, улучшивших качество жизни и выживаемость онкологических пациентов, стало переломным событием в развитии онкологии.

Рост всех солидных опухолей зависит от ангио-генеза. В опухолевых тканях, особенно в тканях злокачественных опухолей, ангиогенез протекает постоянно и очень интенсивно [1, 2]. Это является одной из причин быстрого роста злокачественных опухолей, поскольку они активно снабжаются кровью и получают значительное количество питательных веществ. Кроме того, усиленный ангиогенез в опухоли является одним из механизмов ее быстрого метастазиро-вания, так как опухолевые клетки имеют свойство располагаться вдоль стенок кровеносных сосудов или разносятся по всему организму с током крови. Антиангиогенная терапия по определению не направлена на излечение, так как не обладает способностью воздействовать на опухолевые клетки. Однако подавление опухолевого ангиогенеза и регрессия уже образованных опухолевых сосудов потенциально могут перевести опухоль в «спящее» состояние, при котором не происходит дальнейшего увеличения ее размеров (все вновь образованные клетки гибнут от гипоксии), и даже привести к уменьшению опухоли и ее метастазов до минимального размера. Подавление ангиогенеза может приводить и к «нормализации» внутриопухолевой сосудистой сети. В связи с этим создание антиангиогенных препаратов является одним из наиболее активно развиваемых и перспективных направлений в области лечения злокачественных новообразований.

Известно, что производные мочевины входят в класс препаратов, обладающих антиангиогенными свойствами [3]. Присоединение же углеводного остатка к производным мочевины способствует улучшению растворимости, адресной доставки лекарств в организме, устранению побочных эффектов [4, 5]. С целью поиска новых соединений с антиангиогенными свойствами нами синтезирован ряд новых соединений.

Для 5 синтезированных соединений предсказаны высокая вероятность противоопухолевой (апйпео-

plastic) активности и низкая вероятность цитотокси-ческой активности in silico. Соединения N-(P-D-ra-лактопиранозилкарбомоил)-п-бромфенилмочевина (III), N-( в ^-галактопиранозил)-п-хлорфенилмоче-вина (II), ^(Р^-глюкопиранозил)-п-хлорфенил-мочевина описаны в ряде работ, тогда как соединения N-( в -^-галактопиранозилкарбомоил-1)-2-изонико-тин-семикарбазид (IV), l-^N-p-D-галактопирано-зил)-карбомоил]-3,5-диметилпиразол (VI) ранее были неизвестны [6, 7].

Цель исследования — синтез производных мочевины на основе переамидирования нитрозокарбамидов сахаров. Оценить методами in silico и in vitro возможность создания новых противоопухолевых лекарств на основе новых гликозидных производных мочевин.

Материалы и методы

Гликозил-нитрозометилмочевина была избрана ключевым соединением для разработки методов получения новых углеводных аналогов медицинских препаратов. Этот класс соединений обладает высокой реакционной способностью, и на его основе нами были синтезированы углеводные производные мочевины. Установлено, что при непродолжительном нагревании эквимолекулярных количеств реагентов в водно-спиртовых средах гликозил-нитрозометил-мочевины гладко вступают в реакцию конденсации с аминами (см. рисунок).

Результаты экспериментальных исследований показывают, что в ходе реакции образования промежуточных интермедиатов за счет присоединения амина и разрыва одной из связей группы, по-видимому, не происходит. Вероятнее всего, реакция протекает по синхронному механизму с одновременным разрывом старой и образованием новой связи C—N. Реакция нуклеофильного замещения для протекания процесса образования конечных продуктов не требует в большинстве случаев добавок катализирующих агентов. Это свидетельствует о том, что введение ни-трозогруппы само по себе оказывает достаточно сильное активирующее действие, которое сводится главным образом к разрыхлению связи C—N (N0).

С целью облегчения поиска среди синтезированных нами соединений веществ с нужным эффектом

Оригинальные стать33

CH2OH Л—\ CH2OH H —, °H J_C CH3 H2^ y-a (Br) °h| O HN—C—H—\ v—CI (Br) <OH ^ O N=° -^ Ks^^ O Ли (1) -Г (N)(IN) OH (I) H OH ^---Cn ch2oh H H U^ ^^^^ ohJ OHN-C—C—fi^l H2N nh^H2O ai и и KOH Й1 0 0 N w -Г (IV) N V OH CH2OH H H3C-C-CH2—C-CH3 CH2°H yN— CH3 OHJ-0 HN_C—H—NH2 3 О 2 O O -- 0 t ¿H (V) OH (VI) Реакция получения углеводных производных мочевины Synthesis of carbohydrate derivatives of urea проведено доэкспериментальное прогнозирование получены значения вероятности проявления проти-биологической активности, для чего их структурные воопухолевой активности pa >0,5. формулы сгенерированы с помощью компьютерной Цитотоксическую активность определяли метасистемы PASS, разработанной и постоянно совершен- дом МТТ. ствуемой сотрудниками Института биомедицинской Для постановки MTT-теста клетки раскапывали химии им. В.Н. Ореховича [8—11]. Использованная в 198 мкл полной среды RPMI-1640 в 96-луночные версия PASS 12.06.22 прогнозирует биологическую плоскодонные планшеты (Costar, USA). активность 6400 видов химических веществ на осно - Чернз сутки в каждую лунку добавляли исследуемые ве сравнения структурных формул исследуемых со- соединения в концентрации 100 мкМ и инкубировали единений со структурными формулами соединений с клетками в течение 72 ч в 5 % СО2 при 37 °C. Каждое из массива данных, содержащего формулы и сведения соединение ставили в триплете. Соединения растворя-по биологической активности 313 345 химических ли в диметилсульфоксиде так, чтобы концентрация соединений. диметилсульфоксида в лунке не превышала 1 %. В ка-Структурные формулы исследуемых соединений честве контроля использовали лунки с клетками с 1 % вводятся в систему в виде файлов формата MOL диметилсульфоксидом в полной ростовой среде. или SDF. Средняя ошибка прогноза составляет 4,9 %. Через 72 ч в каждую лунку вносили по 20 мкл Результаты прогнозирования рассчитывают в виде раствора МТТ [3-(4,5-диметилтиазолин-2)-2,5-ди-вероятности проявления определенной биологиче- фенилтетразолий бромид](маточный раствор 5 мг/мл, ской активности (pa) соединением и вероятности конечная концентрация 1 мг/мл) и инкубировали 4 ч не проявлять эту активность (p.). Обычно для новых при 37 °С в 5 % CO2. химических соединений порогом отбора перспектив- После образования формазана надосадочную ных соединений считают значениеpa >0,5. жидкость удаляли, осадок растворяли в 150 мкл ди-После контроля корректности сгенерированные метилсульфоксида. Далее планшеты помещали структурные формулы исследуемых соединений вво- на 5—7 мин в термостат при температуре 37 °С, затем дили в базу данных формата ISISBASE, из которой встряхивали на шейкере для равномерного растворе-экспортировали в файлы формата SDF для ввода в си- ния кристаллов формазана, после чего интенсивность стему PASS. В качестве перспективных для экспери- окрашивания среды измеряли на фотометрическом ментального изучения потенциальных противоопухо- анализаторе иммуноферментных реакций Multiskan EX левых веществ были квалифицированы соединения, при X = 540 нм. Величина поглощения прямо продля которых при компьютерном прогнозировании порциональна числу живых клеток.

3'2019 ТОМ 18 1 vol. 18 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ | RUSSIAN JOURNAL OF BiOTHERAPY

Определяли процент ингибирования роста клеток (И, %) по формуле:

И = (1 - (Оо/Ок)) х 100 %,

где Ок — оптическая плотность в контрольных лунках, Оо — оптическая плотность в опытных лунках.

Соединение считали цитостатически активным, если оно вызывало подавление роста клеток >50 %.

Результаты

Для 5 из 57 исследованных виртуальных соединений (нумерация и названия которых приведены в табл. 1) предсказаны высокая вероятность проти-

воопухолевой (antineoplastic) активности и низкая вероятность цитотоксической активности. В табл. 1 для этих соединений представлены также результаты прогнозирования 9 видов биологической активности (противоопухолевой, цитотоксической, общей токсичности, антиметастатической активности и ряда механизмов действия противораковых лекарств) в виде значений вероятности наличия (p) или отсутствия (p) у соединения противоопухолевой активности.

Объект исследования — соединения, содержащие углеводные фрагменты (II—VI), формулы которых представлены на рисунке.

Реакция протекает гладко в спиртовой среде. Выход продуктов составляет «55 %. Идентификацию

таблица 1. Результаты прогнозирования биологической активности гликозидов мочевины Table 1. Prediction results of the biological activity of urea glycosides

№ соединения Compound н азвание соединений Химическая структура Прогноз активности Predicted activity Активность Activity

Compound name p p

0 779 0 014 Противоопухолевая Antineoplastic

0613 0010 Ингибитор ангиогенеза Angiogenesis inhibitor

N-(ß-D-ra- O лакто-пиранозил- ,--OH карбомоил-1)- \—O N N k 2-изоникотин- HO / \/\/\/\ 1 семикарбазид V У M N /-\ N-(ß-D-galacto- \ OH / // pyranosylcarbomoyl-1)- V_/ o \ / 2-isonicotine- ' O \ / semicarbazide OH N- 0 384 0 051 Антиметастатическая Antimetastatic

0 297 0 128 Агонисты апоптоза Apoptosis agonist

n nnn Антилейкемическая 0,162 0,099 Antileukemic

0,173 0,156 Щтосж™^ Cytostatic

0 084 0 199 Цитостатическая Cytotoxic

0,078 0,384 Тоюическм loxic

0,020 0,598 Антимитотическая Antimitotic

0 622 0 040 Противоопухолевая Antineoplastic

CH3 1-[(N-ß-D-ra- лактопиранозил) i-OH N /s карбомоил-3,5-ди- \ // 2 метилпиразол piij-O N N— 2 1-[(N-ß-D- O/ \/\/ \ 0 539 0 016 Ингибитор ангиогенеза Angiogenesis inhibitor

0 502 0 019 Антиметастатическая Antimetastatic

0,254 0,167 Токсическая loxic

„л.г n ico Агонисты апоптоза 0,245 0,168 Apoptosis agonist

galactopyranosyl) carbomoyl- \OH / || CH3 3,5-dimethylpyrazole \| / O OH 0,182 0,148 Цитостатическая Cytostatic

0 148 0 130 Цитотоксическая Cytotoxic

0 041 0 314 Антилейкемическая Antileukemic

п Антимитотическая 0,034 0,463 Antimitotic

Окончание табл. 1 The end of the table 1

№ соединения

название

соединений impound Compound name

Химическая структура Chemical structure

N-(ß-D-

галактопирано-

зилкарбомоил)-

п-бром-

фенилмочевина

N-(ß-D-

galactopyranosyl-

carbomoyl)-p-

bromophenylurea

-oh

HO ^—O N N OH

Br

-OH

^ф^-галактопи-

ранозил)-п-хлор-

фенилмочевина

N-(ß-D-galacto-

pyranosyl)-p-chloro-

phenylurea

OH

Cl

^ф^-глюкопи-

ранозил)-п-хлор-

фенилмочевина

N-(ß-D-gluco-

pyranosyl)-p-chloro-

phenylurea

Cl

0,784 0,750 0,422 0,344 0,241 0,198 0,149 0,208 0,027 0,733 0,689 0,459 0,313 0,233 0,197 0,243 0,113 0,017 0,733 0,689 0,459 0,313 0,233 0,197 0,243 0,113 0,017

0,014 0,005 0,040 0,101 0,100 0,096 0,108 0,198 0,524 0,021 0,006 0,030 0,119 0,105 0,097 0,174 0,141 0,657 0,021 0,006 0,030 0,119 0,105 0,097 0,174 0,141 0,657

Противоопухолевая Antineoplastic Ингибиторы ангиогенеза Angiogenesis inhibitor

Антиметастатическая Antimetastatic

Агонисты апоптоза Apoptosis agonist Цитостатическая Cytostatic

Цитотоксическая Cytotoxic

Антилейкемическая Antileukemic Токсическая Toxic

Антимитотическая Antimitotic

Противоопухолевая Antineoplastic Ингибиторы ангиогенеза Angiogenesis inhibitor

Антиметастатическая Antimetastatic

Агонисты апоптоза Apoptosis agonist

Цитостатическая Cytostatic

Цитостатическая Cytotoxic

Токсическая Toxic

Антилейкемическая Antileukemic

Антимитотическая Antimitotic

Антинеопластическая Antineoplastic

Ингибиторы ангиогенеза Angiogenesis inhibitor

Антиметастатическая Antimetastatic

Агонисты апоптоза Apoptosis agonist

Цитостатическая Cytostatic

Цитотоксическая Cytotoxic Токсическая Toxic

Антилейкемическая Antileukemic

Антимитотическая Antimitotic

3

4

5

36 Оригинальные статьи

синтезируемых соединений осуществляли с помощью 1-[ДО-Ь^-галактопиранозил)карбамоил]-методов тонкослойной хроматографии на пластинках 3,5-диметилпиразол (VI) Silufol, спектроскопии ядерного магнитного резонан- К 2,07 г (0,01 моль) галактопиранозилсемикарба-са (ЯМР), ИК-, 13С-, 'Н-спектроскопии и элемент- зида (V) прибавили 1 мл (0,01 моль) ацетилацетона ного анализа. и 15 мл метанола. Реакционную смесь нагревали Спектры 13С ЯМР были сняты на приборе Bru- на кипящей водяной бане до полной гомогенизации. ker AM-300, SF = 75,47 MHz с рабочей частотой 126 МГ Выпавший осадок отфильтровали, промыли холод-при температуре 295 °К, где в качестве внутреннего ным спиртом, перекристаллизовали из водного спир-стандарта использовался ТМС. Спектры сняты в дей- та. Сушили на воздухе. терированных растворителях - ДМСО-d^ W-ЯМР- Выход: 1,8 г (60 %), т. пл. 180 °С, Rf = 0,5 ТСХ спектры были сняты на приборе Bruker AM-300, (хлороформ : метанол — 3 : 1), [a]20D = +24,8° (c 1, H2O). SF = 300,13 MHz с рабочей частотой 500 МГц при Инфракрасный спектр (КВг, n, см-1): 900, 950, температуре 293 °К, где в качестве внутреннего стан- 1030, 1080, 1110 n (колебания углеводного кольца), дарта использовали ТМС. Спектры сняты в дейтери- 1130, 1168, 1220 n (колебания пиразольного кольца), рованных растворителях ДМСО-d^ 1300—1360 n (-N) 1545 n (амид I, N—H), 1710 n (амид II, Инфракрасные спектры исследуемых соединений С = О), 1260—1290 n (-C—N =), 1350 n (-CH-). были получены на спектрофотометрах Specord M-80 ЯМР !H (d, м. д., Ру-d^: 2,04 (уш. с., 3Н, CH3), с программой Soft Spectra в области 500—4000 см-1 2,4 (уш. с., 3Н, CH3), 3,85—4,75 (м., 6Н, СН-углевод-(прессование с KBr). ные протоны), 5,45—5,9 (м., 1Н, СН), 6,0—7,6 (м., 4Н, Температуру плавления синтезируемых соединений ОН), 9,13 (д., 1Н, CONH). измеряли на микронагревательном столике Boetuis. C12H19N3O6 301,28 Скорость подъема температуры на столике составляла Вычислено, %: С — 47,83; Н — 6,36; N — 13,95. 4 °С в минуту. Элементный состав полученных соеди- Найдено, %: С — 47,95; Н — 6,10; N — 13,80. нений определен кулонометрическим методом и методами Дюма—Прегля и Шёнигера на приборах ВМ-20. Экспериментальное изучение цитотоксической активности Синтез №(Ь^-галактопиранозил-1)-2-изоникотиноил- Дальнейшее экспериментальное исследование семикарбазида (IV) цитостатической активности этих 5 соединений В колбу, снабженную магнитной мешалкой, поме- (N- (Р^-галактопиранозилкарбомоил)-п-бромфе-щают 3,568 г гидразида изоникотиновой кислоты, рас- нилмочевины, ^(Р^-алактопиранозилкарбомо-творяют в 30 мл этилового спирта и охлаждают смесь ил-1)-2-изоникотинсемикарбазида, 1-[(N-p-D-ra-до —2 °С, затем в течение 30 мин при перемешивании лактопиранозил)карбомоил]-3,5-диметилпиразола, добавляют 7,136 г ^метил-К-(Ь^-галактопиранозил)- ^(Р^-галактопиранозил)-п-хлорфенилмочевины, N-нитрозомочевины (I). Помешивая, смесь нагревают ^(Р^-глюкопиранозил)-п-хлорфенилмочевины) на водяной бане при 55—60 °С в течение 1 ч, при этой проводили на базе лаборатории экспериментальной температуре выпадают кристаллы. Выпавшие кристал- диагностики и биотерапии опухолей НИИ экспери-лы перекристаллизовывают из водного спирта, от- ментальной диагностики и терапии опухолей Нацио-фильтровывают и высушивают на воздухе. нального медицинского исследовательского центра Выход: 5,377 г (58,38 %), Тпл = 212—213 °С, *Rf = 0,3, онкологии им. Н.Н. Блохина. Цитотоксическую ак-**Rf = 0,5 (*хлороформ : этанол (1 : 1)), (**этанол : тивность исследовали на 5 клеточных линиях опухолей хлороформ : ацетон (2 : 1 : 1)). человека: аденокарциномы предстательной железы Инфракрасный спектр (КВг, n, см—1): 892, 906, РС-3, карциномы толстой кишки HCT-116, Т-клеточ-1051, 1091, 1134 n (колебания углеводного кольца), ного лимфобластного лейкоза Jurkat, аденокарциномы 3000—3500 n (ОН-группы углеводного кольца), 1548 n молочной железы MCF-7, карциномы легкого А549. (амид I, N—H), 1601 n (амид II, С = О), 473, 545, 583, Клеточные линии культивировали в среде RPMI-626, 675, 705 n (валентные колебания изониазида). 1640, содержащей 10 % телячьей эмбриональной сы-ЯМР !H (d, м. д.,): 4,7 (уш. с., 8Н, C—H), 3,55—4 воротки, 10 мМ HEPES (Sigma, США), 2м М L-глута-(м., 4ОН), 5,4 (с., 1Н, N—H), 4,8 (д., 1Н, NH—С—О), мина (Sigma, США), 40 нг/мл гентамицина (ICN, США), 7,5—8,8 (м., 4Н, С—Н аром.) аминокислоты и витамины (ПанЭко, Россия) при 37 °С ЯМР 13С (d, м. д.,): 81,34 (С1); 69,43 (С2); 73,39 в атмосфере 5 % СО2. Клетки поддерживали в лога-(С3); 68,67 (С4); 76,43 (С5); 60,97 (С6) 159,15 (С = О); рифмической фазе роста постоянным пересевом 1522,1 (С7); 127,9 (С8); 136,4 (С9); 124,28 (С10); 147,5 (С11). культуры через 3—4 дня. Для открепления с пластика С13Н18^О7 342,30 адгезионных культур использовали раствор Версена. Вычислено, %: С — 45,61; H — 5,30; N — 16,36. Провели цитотоксическое исследование данных Найдено, %: С — 45,90; H — 5,59; N — 16,65. соединений методом МТТ. Ни одно из исследуемых

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ | RUSSiAN JOURNAL OF BiOTHERAPY 3'2019 том 181 vol. 18

Таблица 2. Цитотоксическая активность исследуемых соединений в концентрации 100мкМ

№ Концентрация,100 мкМ Ornceirtratíoii, 100 дм А549 PC3 Jurkat HCT-116 MCF-7

1 ^(Р^-галактопиранозилкарбомоил-1)-2-изоникотинсемикарбазид N-(p-D-galactopyranosylcarbomoyl-1)-2-isonicotinsemicarbazide 26 0 6 0 0

2 1-[(^р^-галактопиранозил)карбомоил]-3,5-диметилпиразола 1-[(N-p-D-galactopyranosyl)carbomoyl]-3,5-dimethylpyrazole 0 17 16 0 0

3 ^(Р^-галактопиранозилкарбомоил)-п-бромфенилмочевина N-(p-D-galactopyranosylcarbomoyl)-p-bromophenylurea 31 0 10 0 0

4 ^(Р^-галактопиранозил)-п-хлорфенилмочевина N-(p-D-galactopyranosyl)-p-chlorophenylurea 0 2 20 0 0

5 ^(Р^-глюкопиранозил)-п-хлорфенилмочевина N-(p-D-glucopyranosyl)-p-chlorophenylurea 0 19 2 0 0

МТТ-тестом соединений не проявило цитотоксиче-скую активность. Результаты представлены в табл. 2.

Заключение

Для большинства исследованных виртуальных соединений получены низкая вероятность проявления цитостатической активности и высокая вероятность проявления противоопухолевой активности,

обусловленная согласно прогнозу, предположительно, антиангиогенными свойствами. Целесообразны их исследования на экспериментальных опухолях in vivo даже при отрицательных результатах анализа цитотоксичности на культурах клеток, а также дальнейший поиск потенциальных противоопухолевых соединений из класса гликозидных производных мочевин.

ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES

1. Folkman J. Tumor angiogenesis: therapeutic implications. N Engl J Med 1971;285(21):1182—6.

DOI: 10.1056/NEJM197111182852108.

2. Dvorak H.F. Tumors: wounds that do not heal. Similarities between tumor stroma generation and wound healing.

N Engl J Med 1986;315(26):1650-9. DOI: 10.1056/NEJM198612253152606.

3. Производные мочевины и их применение в качестве ингибиторов белка, связывающего жирные кислоты. Доступно по: http://www.findpatent.ru/ patent/264/2642454.html. [Derivatives of urea and their use as inhibitors

of a protein that binds fatty acids. Available by: http://www.findpatent.ru/patent/ 264/2642454.html. (In Russ.)].

4. Лурье С.И., Шемякин М.М. Глюко-зиды сульфамидов. Журнал общей химии 1944;10(8):935-9. [Lurie S.I., Shemyakin M.M. Glucosides of sulfamides. Zhurnal obshchey khimii = Russian Journal of General Chemistry 1944;10(8):935-9. (In Russ.)].

5. Прогресс химии углеводов. М.: Наука, 1985. С.: 230. [Progress in the chem-

istry of carbohydrates. Moscow: Nauka, 1985. P.: 230. (In Russ.)].

6. Бакирова А.А., Эрназарова Б.К. Синтез N-арилзамещенных гликозилмо-чевин. Известия НАН КР 2012;1:41-5. [Bakirova A.A., Ernazarova B.K. Synthesis of N-aryl substituted glycosyl urea. Izves-tya NAN KR = News NAN KR 2012;1:41-5. (In Russ.)].

7. Эрназарова Б.К., Дермугин В.С., Джаманбаев Ж.А. Синтез сахаросо-держащих производных пиразола. Сб. научных трудов. Проблемы и перспективы развития химии и химической технологий в Кыргызской Республике 2002. С. 271-5. [Ernazarova B.K., Dermugin V.S., Dzhamanbaev J.A. Synthesis of sugar-containing derivatives of pyrazole. Sb. nauchnykh trudov. Problems and prospects of development of chemistry and chemical technologies in the Kyr-gyz Republic 2002. P.: 271-5. (In Russ.)].

8. Аширматов M.A., Джаманбаев Ж.А., Садыбакасов Б.К., Афанасьев В.А. Расчет структуры и оценка реакционной способности N-метил-№-(р^-ксилопиранозил)-нитрозо-

мочевины в условиях кислотно-основного катализа. Теоретическая и экспериментальная химия 1985;5:596-9. [Ashirmatov М.А., Dzhamanbaev J.A., Sadybakasov B.K., Afanasyev V.A. Calculation of the structure and evaluation of the reactivity of N-methyl-N1 -(p-D-xylopyranosyl)-nitrosourea under acid-base catalysis. Teoreticheskaya i experimentalnaya himia = Theoretical and Experimental Chemistry 1985;5:596-9 (In Russ.)].

9. Filimonov D.A., Poroikov V.V.

Prediction of biological activity spectra for organic compounds. Chem Heterocycl 2006;50(2):66-75.

10. Filimonov D.A., Poroikov V.V. In.: Chemoinformatics Approaches to Virtual Screening. Eds.: A. Varnek, A.Tropsha. Probabilistic approach in activity prediction 2008. С.: 182-216.

11. Filimonov D.A., Lagunin A.A., Gloriozova T.A. et al. Prediction of the biological activity spectra

of organic compounds using the PASS online web resource. Chem Heterocycl 2014;50(3):444-57.

Вклад авторов

Б.К. Эрназарова: постановка и проведение исследований по синтезу, получение данных для анализа, анализ полученных данных, написание текста рукописи;

А.З. Джуманазарова: обзор публикаций по теме статьи, анализ полученных данных, редактирование текста рукописи;

A.Е. Бармашов, Г.Н. Апрышко: постановка и проведение цитотоксической активности, получение данных и их анализ, интерпретация результатов.

Authors' contributions

B.K. Ernazarova: formulation and conduct of synthesis studies, obtaining data for analysis, article writing;

A.Z. Dzhumanazarova: reviewing of publications of the article's theme, analysis of the obtained data, manuscript text editing; A.E. Barmashov, G.N. Apryshko: statement and carrying out cytotoxic activity, data acquisition and analysis, interpretation of results.

ORCID авторов/ORCID of authors

А.З Джуманазарова/А^. Dzhumanazarova: https://orcid.org/0000-0001-6966-4188 Б.К. Эрназарова/B.K. Ernazarova: https://orcid.org/0000-0001-8154-0911 А. Бармашов/А. Barmashov: https://orcid.org/0000-0002-7440-6404

Конфликт интересов. Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.

Финансирование. Исследование проведено без спонсорской поддержки. Financing. The study was performed wishout external funding.

Статья поступила: 26.02.2019. Принята в печать: 05.08.2019. Article received: 26.02.2019. Accepted for publication: 05.08.2019.