ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНЕЙ ВИРУСНОЙ ЭТИОЛОГИИ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА И СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭТИХ БОЛЕЗНЕЙ
DRUG PREPARATION FOR PREVENTION AND TREATMENT DISEASES OF VIRAL ETIOLOGY IN CATTLE AND METHOD OF SUCH DISEASES PREVENTION AND TREATMENT

Изобретение относится к сельскому хозяйству, точнее, к ветеринарной медицине и производству биогенных и антимикробных лекарственных препаратов и средств для профилактики и лечения различных вирусных заболеваний сельскохозяйственных животных и может быть использовано как на крупных животноводческих комплексах и фермах, так и на фермерских и личных хозяйствах, в комплексной терапии животных, в частности при инфекционном ринотрахеите, инфекционном пустулезном вульвовагините крупного рогатого скота и острых респираторно-вирусных инфекций у телят.
Инфекционный ринотрахеит, вирусная диарея - болезнь слизистых и парагрипп-3 крупного рогатого скота - широко распространены в России и занимают одно из ведущих мест в патологии респираторных органов. Профилактические мероприятия при острых респираторных вирусных заболеваниях должны начаться с создания колострального иммунитета у новорожденных телят, в частности, путем введения телятам специальных сывороток или иммуномодулирующих лекарственных средств.
3
3
3
3
3
Известно применение полиспецифической гипериммунной сыворотки против рота-, корона-, герпесвирусов и E.Coli (K99, А20) новорожденных телят, производства ФГНУ «ВНИВИ» г.Казань. С профилактической целью сыворотку вводят новорожденным телятам перорально в дозе 60-80 см до первой порции молозива. С лечебной целью сыворотку применяют при слабой интоксикации организма животного - внутривенно 40-60 см, при выраженной интоксикации двухкратно: первый раз - внутривенно в дозе 60-80 см в смеси с 40%-ным раствором глюкозы в равных объемах с добавлением 2-3 смраствора кофеина - натрия бензоата. Повторно - через 12 часов подкожно в дозе 50 см (см. Романов Е.А. Биологические ветеринарные препараты в России: вакцины, сыворотки, диагностикумы. Справочник, Казань, Руген, 2005 г., с.356).
При хороших результатах использования этой полиспецефической сыворотки к некоторым ее недостаткам относятся непродолжительность формируемого пассивного иммунитета (25-30 дней) и довольно сложный двухкратный курс применения для лечения, включающий приготовление смеси с раствором глюкозы и кофеина-натрия, что требует дополнительных затрат времени, особенно при массовой обработке животных.
3
3
Известно также и применение поливалентной сыворотки против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи и аденоинфекции крупного рогатого скота производства ФГУП Покровский завод биопрепаратов - BIOSAF. Сыворотка способствует формированию у привитых телят пассивного иммунитета к вирусам ИРТ, ПГ-3, вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. С профилактической целью сыворотку вводят телятам внутримышечно из расчета 0,5-1,0 см на 1 кг живой массы в течение первых 3-х суток после поступления животных в комплекс. С лечебной целью сыворотку вводят внутримышечно из расчета 1,0-1,5 см на 1 кг живой массы в сочетании с антибиотиками (см. Романов Е.А. Биологические ветеринарные препараты в России: вакцины, сыворотки, диагностикумы. Справочник, Казань, Руген, 2005 г., с.357).
При положительных результатах применения поливалентной сыворотки к некоторым ее недостаткам следует отнести необходимость ее использования в сочетании с антибиотиками и недостаточную иммуностимулирующую активность при довольно высоких дозах введения.
Известно также применение растительного иммуномодулятора виватон-С в ветеринарии. Виватон-С рекомендуют применять в качестве иммуномодулирующего средства при лечении и профилактики респираторных болезней телят. Препарат вводят внутримышечно с профилактической целью на 2-3 сутки после рождения по 1,0-1,5 мл один раз в день в течение трех суток с целью лечения по 1,0-2,0 мл один раз в сутки ежеднено до выздоровления (около семи суток). Виватон-С является стерильной безаммиачной формой виватона, полученного из сбора трав (см. Наставление по применению виватона-С в ветеринарии (Утверждено Департаментом ветеринарии 26.06.1998 г. №13-5-2/1288)).
Задачей изобретения являются разработка и создание эффективного и удобного для применения в ветеринарии, в производственных условиях, готового к применению лекарственного средства для профилактики и лечения болезни вирусной этиологии у крупного рогатого скота широкого спектра действия и способа его применения без использования антибиотиков, позволяющего использовать средство в виде инъекций с максимальной эффективностью и минимальными затратами при массовой иммунизации животных, не требующего для применения дополнительного обучения персонала и с приемлемым для ветеринарной медицины сроком годности, при приготовлении которого использовались бы только отечественные серийно выпускаемые общедоступные составляющие, а при изготовлении использовали бы существующее оборудование, аппараты и средства контроля.
Задача решается тем, что в качестве основного лечебного компонента лекарственного средства используют поливалентную сыворотку, дополненную препаратом иммунномодулятором Виватон ТУ 112-84-803-3615-001-13 при соотношении компонентов в готовой форме предлагаемого лекарственного средства, мас.%:
поливалентная сыворотка против инфекционного
ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи и
аденоинфекций крупного рогатого скота
80-85
виватон
- остальное
При этом телятам вводят лекарственное средство подкожно: с профилактической целью - двукратно с интервалом 10-14 дней в дозе 0,5 мл/кг живой массы, причем первую обработку у телят лекарственным средством проводят в течение 24 часов после рождения или поступления в хозяйство, а с лечебной целью сыворотку вводят в дозе 1 мл/кг живой массы - двукратно с интервалом 48 часов, а взрослым животным сыворотку вводят подкожно по 20,0 мл двукратно с интервалом 7-14 дней.
Приготовление предложенного лекарственного средства проводят путем механического смешивания компонентов, при этом виватон перед введением выдерживают (выветривают) под вытяжкой открытым способом в течение 36-48 часов в открытой посуде до исчезновения запаха аммиака или используют безаммиачную форму виватона - виватон-С.
После стерилизации, контроля и расфасовки лекарственное средство готово для проведения профилактики и лечения болезней вирусной этиологии у сельскохозяйственных животных. Лекарственное средство перед использованием не требует разведения или смешивания с другими препаратами, стерильно, эффективно и может быть использовано для внутривенного и инъекционного применения как самостоятельно, так и в комплексном лечении с другими препаратами и средствами.
После проведения многочисленных лабораторных опытов и исследований на животных разработаны и утверждены: временный регламент и наставления на проведение производственных испытаний лекарственного средства для профилактики и лечения болезней вирусной этиологии у крупного рогатого скота.
Соотношения основных действующих компонентов лекарственного средства: поливалентной сыворотки и виватона подобраны практически опытным путем на основе аналитического обзора и производственного опыта авторов как способствующие получению стабильного нерасслаивающегося состава, удобного для инъекционного введения, с достаточным сроком использования и практически доказанным высоким лечебным эффектом.
Неочевидным эффектом предложенной для ветеринарии нового лекарственного средства стало то, что, являясь комплексным универсальным препаратом-иммуномодулятором, готовым к применению, лекарственное средство не только сохраняет эффективность двух основных составляющих: поливалентной сыворотки и виватона, но и проявляет новые свойства (может быть введена инъекционно одноразово), показывает высокую эффективность лечения по предложенной схеме выше раздельного применения составляющих при снижении затрат труда и времени на лечение.
Разносторонние производственные испытания предложенного лекарственного средства при различных вирусных заболеваниях животных проведены на сельскохозяйственных предприятиях Свердловской области и Башкирии.
В производственных испытаниях использовали лекарственное средство, изготовленное ООО «ТРАВНИК». Контроль качества препарата проводили в лабораториях НИВС и УрНИВИ г.Екатеринбург в соответствии с утвержденной временной технической документацией.
По органолептическим и физико-химическим показателям лекарственное средство должно соответствовать основным требованиям и нормам, указанным в таблице 1.
Таблица 1
Характеристика сыворотки
Наименование
Характеристика
Внешний вид
Жидкий
Цвет
Темно-соломенный
% содержания поливалентной сыворотки
80-85
% содержания виватона
20-15
Стерильность на МПА
Для проведения производственных испытаний лекарственное средство выпускают опытными партиями. Препарат расфасовывают в стеклянные флаконы вместимостью 0,1-0,2 л с резиновыми пробками и закатанными алюминиевыми колпачками. Каждая единица фасовки снабжена этикеткой с указанием на ней наименования, даты изготовления, срока годности, номера серии. Каждая серия сыворотки проверяется на стерильность на МПА с указанием в журнале. Результаты некоторых характерных производственных испытаний представлены ниже.
Для изучения влияния иммуностимулирующего лекарственного средства на напряженность иммунитета к указанным вирусам и биохимические показатели телят в хозяйстве СПК «Ярославский» (республика Башкортостан) сформированы 2 группы телят по 5 голов (опытная и контрольная) средней живой массой 40 кг, от которых была взята кровь из яремной вены для вирусологических и биохимических исследований (таблицы 2, 3).
Телятам опытной группы с профилактической целью было подкожно введено предложенное лекарственное средство двукратно с интервалом 10-14 дней в дозе до 20 мл из расчета 0,5 мл на 1 кг живой массы.
Таблица 2
Биохимические показатели крови у телят (опытная группа)
Показатели
До введения
Через 10-14 дней
Через 30 дней
Общий белок
11,15±0,25
9,41±0,20
8,99±0,52
Альбумины
39,71±3,42
46,59±3,32
46,38±3,31
α-глобулины
11,05±1,85
9,58±1,27
9,76±1,38
β-глобулины
13,21±0,14
11,15±0,25
8,60±1,12
γ-глобулины
31,64±3,42
29,11±3,21
31,73±3,67
АСаТ
0,42±0,01
0,35±0,01
0,41±0,04
АЛаТ
0,35±0,05
0,31±0,07
0,25±0,06
Мочевина
4,82±0,15
3,63±0,11
1,23±0,25
Глюкоза
2,47±0,12
3,52±0,38
3,02±0,72
Билирубин
4,20±1,11
4,21±1,02
4,15±1,12
Общие липиды
2,45±0,44
2,67±0,30
2,11±0,31
Каротин
1,03±0,13
1,02±0,11
1,07±0,14
Кальций
3,59±0,13
3,58±0,7
3,71±0,45
Фосфор
2,07±2,21
2,11±2,04
2,28±0,28
Щелочной резерв
27,03±1,12
24,02±0,19
28,01±1,15
Лекарственное средство для профилактики и лечения болезни вирусной этиологии у крупного рогатого скота разработано на кафедре инфекционных и инвазионных болезней животных Уральской государственной сельскохозяйственной академии и ООО «Травник». Лекарственное средство - это комплексный препарат, сочетающий в себе все положительные свойства специфической гипериммунной сыворотки и растительного иммуномодулятора - виватон. Лекарственное средство позволяет создать пассивную защиту от возбудителей наиболее распространенных инфекций за счет содержащихся в ней антител, а также повысить реактивность иммунокомпетентных клеток организма благодаря присутствию цитокиновых белков.
Таблица 3
Биохимические показатели крови у телят (контрольная группа)
Показатели
В начале опыта
Через 10-14 дней
Через 30 дней
Общий белок
11,04±0,28
16,72±8,81
9,38±2,73
Альбумины
33,24±6,32
45,24±8,57
34,85±10,1
α-глобулины
21,83±7,17
19,84±7,45
16,12±9,61
β-глобулины
17,65±5,03
12,51±1,15
10,89±1,56
γ-глобулины
25,37±4,22
22,52±3,33
28,36±4,21
АСаТ
0,35±0,71
0,38±0,72
0,44±0,7
АЛаТ
0,32±0,04
0,36±0,05
0,22±0,08
Мочевина
9,13±3,57
3,61±0,12
2,21±0,11
Глюкоза
2,36±0,13
3,62±0,38
1,22±0,19
Билирубин
2,85±1,22
2,71±1,21
2,81±1,73
Общие липиды
2,04±0,11
2,63±0,52
2,02±0,41
Каротин
1,06±0,33
1,09±0,15
1,09±0,35
Кальций
2,34±0,54
2,66±0,46
0,78±0,32
Фосфор
2,15±0,45
2,18±0,33
2,17±0,45
Щелочной резерв
20,49±6,44
20,13±7,31
26,02±7,1
Из данных таблиц 2 и 3 видно, что профилактическое введение предложенного лекарственного средства по указанной схеме благоприятно влияет на биохимические показатели сыворотки крови телят. В опытной группе по сравнению с контрольной в течение всего периода опыта происходило существенное уменьшение содержания общего белка, что можно объяснить нормализацией белкового обмена в организме теленка. За период опыта в крови телят экспериментальной группы произошло повышение содержания уровня альбуминов при неизменяющемся уровне гамма-глобулина и снижении уровня аланинаминотрансферазы, что свидетельствует о нормализации функции печени и восстановлении гепатоцитов. Количество глюкозы в крови опытных животных к концу опыта существенно увеличилось. Этим объясняется повышение усвоения ее из корма и всасывания, а также нормализацией функции печени.
Таблица 4
Средние титры вируснейтрализующих антител и антигемагглютининов в пробах сыворотки крови к вирусам ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 у телят до введения предложенного лекарственного средства
Животные
Количество животных
Титр вируснейтрализующих антител и антигемагглютининов (M+m), lg<sub>2</sub>
ИРТ
ВД
ПГ-3
Телята 10-28 дней
5
3,1±0,19
2,8±0,18
1,8±0,3
Таблица 5
Средние титры вируснейтрализующих антител и антигемагглютининов в пробах сыворотки крови к вирусам ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 у телят после введения предложенного лекарственного средства
Животные
Количество животных
Титр вируснейтрализующих антител и антигемагглютининов (M+m), lg<sub>2</sub>
ИРТ
ВД
ПГ-3
Телята 10-28 дней
5
3,38±0,27
3,03±0,24
4,68±0,14
Как видно из таблиц 4, 5 до введения предложенного средства телятам выявлены титры антител к вирусам ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 - 3,1±0,19 lg2; 2,8±0,18 lg2; 1,8±0,3 lg2 соответственно.
После введения указанного средства отмечали сероконверсию к вирусам ИРТ, ВД-БС, ПГ-3. Среднестатистический титр антител составил 3,38±0,27 lg2; 3,03±0,24 lg2; 4,68±0,14 lg2 (таблица №5), что выше на 3,45±0,28 lg2 в сравнении до введения средства, соответственно (разница достоверна при Р<0,05).
Для профилактики острых респираторных вирусных инфекций у взрослого поголовья крупного рогатого скота в количестве 25 голов вводили предложенное лекарственное средство в дозе 20,0 мл подкожно двукратно с интервалом 7-14 дней. До введения средства в крови коров выявляли антитела к вирусу ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 (таблица 6).
Таблица 6
Средние титры вируснейтрализующих антител в пробах сыворотки крови коров к вирусам ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 до введения предложенного лекарственного средства
Животные
Количество животных
Титр вируснейтрализующих антител и антигемагглютининов (M+m), lg<sub>2</sub>
ИРТ
ВД-БС
ПГ-3
Коровы
25
2,1±0,17
2,18±0,14
2,8±0,2
Как видно из таблицы 6, до введения лекарственного средства коровы имели низкие титры антител к указанным вирусам, что говорит об их возможной инфицированности вирусом ИРТ КРС. Отрицательную реакцию на введение лекарственного средства у животных не наблюдали. Ко всем компонентам у обработанных лекарственным средством коров отмечали сероконверсию к вирусам ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 через 14-21 день после введения (разница достоверна при Р<0,05). Среднестатистические титры антител к вирусам ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 составил 3,1±0,19 lg2; 2,8±0,18 lg2; 4,8±0,3 lg2 соответственно (таблица 7).
На основании полученных результатов было сделано предположение, что введение предложенного лекарственного средства против ОРВИ КРС обеспечивает формирование напряженного и однородного иммунитета у крупного рогатого скота с учетом их возраста.
Таблица 7
Средние титры вируснейтрализующих антител в пробах сыворотки крови коров к вирусам ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 через 14-21 день после введения лекарственного средства
Животные
Количество животных
Титр вируснейтрализующих антител и антигемагглютининов (M+m), lg<sub>2</sub>
ИРТ
ВД
ПГ-3
Коровы
25
3,1±0,19
2,8±0,18
4,8±0,3
Предложенное лекарственное средство при введении его телятам и коровам вызывает нормализацию их гомеостаза, что будет благотворно влиять на выработку иммунитета, формирует однородный и напряженный противовирусный иммунитет против острых респираторных вирусных инфекций крупного рогатого скота и особенно у телят.
Новизной предложенного средства является то, что лекарственное средство вводят телятам не в сочетании с антибиотиками (как рекомендовано инструкцией), а сразу в комплексе с препаратом иммуномодулятором - виватон, причем доза введения снижена в двое при высокой эффективности применения.
Способ применения нового иммуностимулирующего лекарственного средства прост, не трудоемок, не приводит к ограничениям в использовании продукции животноводства.
Разносторонние успешные производственные испытания в условиях промышленного животноводства, сопровождаемые исследованиями, позволяют утверждать, что использование предложенного лекарственного средства не вызывает аллергических реакций, побочных эффектов и осложнений. Средство не обладает нефро-гепатотоксическим действием при данном предложенном режиме дозирования.
Лекарственное средство при предложенном способе использования расширяет ассортимент эффективных средств для профилактики и лечения сельскохозяйственных животных, не оказывает общего и местного неблагоприятного воздействия на организм животных и продукцию животноводства и может быть рекомендовано к широкому применению в ветеринарии.