Иммунобиологическая реактивность организма свиней при метастронгилёзе

Иммунобиологическая реактивность организма свиней при метастронгилёзе

Н.Н. Гугушвили, д.б.н., профессор, А.А. Лысенко, д.в.н., профессор, В.М. Гугушвили, аспирант, Т.А. Инюкина, к.т.н., Е.А. Горпинченко, к.в.н, ФГБОУ ВПО Кубанский ГАУ

Развитие патологических процессов в организме сельскохозяйственных животных часто обусловлено воздействием на него гельминтов. Большое значение имеет изучение иммунитета организма животных для своевременного выявления иммунодефицитного состояния с целью предупреждения возникновения патологий, вызванных гельминтами Metastrongylus elongates [1–6].

Материалы и методы исследования. Целью данного исследования было изучение иммунобиологической реактивности организма свиней при метастронгилёзе.

Кровь для исследования брали у клинически здоровых животных и инвазированных со слабой и сильной степенью инвазии.

Результаты исследования. Общеклинический анализ крови показал, что количество эритроцитов и концентрация гемоглобина достоверно снижались у инвазированных животных по сравнению с клинически здоровыми. С увеличением степени инвазии происходит подавление выработки эритроцитов, что непосредственно приводит к гипоксии органов и тканей. В то же время, напротив, количество лейкоцитов увеличивалось в зависимости от степени инвазии животных. В крови слабоинвазированных животных количество эритроцитов снижалось на 8%, концентрация гемоглобина – на 6%; а с увеличением степени инвазии – на 25 и 12% соответственно и, напротив, отмечалось увеличение количества лейкоцитов на 18%, у сильноинвази-рованных – на 35% по сравнению с клинически здоровыми животными. С увеличением степени инвазии количество эритроцитов было снижено на 10%, концентрация гемоглобина – на 8%, вместе с тем наблюдалось повышение количества лейкоцитов на 30% по сравнению с животными со слабой степенью инвазии.

Нами установлено, что у слабоинвазированных свиней Metastrongylus elongates происходило в 3 раза достоверное повышение количества эозинофилов,

палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов и в то же время снижение лимфоцитов в 1,3 раза и сегментоядерных нейтрофилов – в 2 раза по сравнению с клинически здоровыми животными. С увеличением степени инвазии повышалось количество палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов в 3 раза, эозинофилов – в 4 раза, и, напротив, наблюдалось подавление лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов в 2 раза по сравнению с клинически здоровыми животными.

Необходимо отметить, что у слабоинвазиро-ванных свиней наблюдалась динамика повышения количества эозинофилов, способных подавлять жизнедеятельность паразитов ферментными и неферментными интралейкоцитарными системами. Кроме того, при сильной степени инвазии увеличивалось количество моноцитов и палочкоядерных нейтрофилов, которые способны активировать иммунный ответ организма на внедрение чужеродного агента, в частности гельминта. Динамика гематологических показателей при слабой степени инвазии свидетельствует о поддержании гомеостаза и компенсаторных механизмах, обеспечивающих жизнедеятельность организма.

Проведёнными исследованиями установлены колебания активности фагоцитоза в зависимости от степени инвазии. Так, при слабой степени инвазии наблюдалась высокая активность бактериального фагоцитоза (на 16%) и поглотительная способность нейтрофилов (на 30%) и в то же время подавление переваривающей способности – на 10%, а коэффициент мобилизации нейтрофильных гранулоцитов был выше в 2 раза относительно клинически здоровых животных. Однако при сильной степени инвазии у свиней происходило подавление не только активности бактериального фагоцитоза (на 25%), но и поглотительной (на 37%) и переваривающей способности нейтрофилов (на 23%), коэффициент мобилизации нейтрофилов снижался в 4 раза по сравнению с клинически здоровыми животными и в 7 раз относительно слабоинвазированных.

Нами установлено, что у клинически здоровых животных происходило завершение процесса фа-

гоцитоза, а у слабоинвазированных — активизация и, напротив, при увеличении степени инвазии — снижение.

Анализ протекающих процессов во внутри-лейкоцитарной системе позволил установить изменения активности ферментных — кислой и щелочной фосфатаз, миелопероксидазы, а также неферментных — уровня лизосомально-катионных белков в виде снижения активности ферментных систем с повышением степени инвазии. У слабоинвазированных животных происходила активация фермента миелопероксидазы (на 18%) и уровня лизосомально-катионных белков (на 15%) и, напротив, снижалась активность щелочной (на 10%) и кислой фосфатаз (на 12%) по сравнению с клинически здоровыми свиньями.

Однако с увеличением инвазии отмечалось снижение ферментных и неферментных систем нейтрофильных гранулоцитов в 2 раза по сравнению с клинически здоровыми животными и в 3 раза относительно слабоинвазированных.

Нами установлено, что при слабой степени инвазии происходила активизация кислородзависимых систем, а с увеличением степени инвазии наблюдалась обратная динамика, что свидетельствовало о снижении иммунного статуса как на клеточном, так и на субклеточном уровне.

Анализ изменения кислородзависимых (ферментных) и кислороднезависимых (неферментных) систем свидетельствует о положительной динамике процесса фагоцитоза. Установлено, что при слабой степени инвазии у животных наблюдалось двукратное возрастание миелопероксидазы, которое оказывало положительное влияние на реактивность организма, тогда как с увеличением инвазии происходило её подавление. Кислая фосфатаза принимает непосредственное участие в процессах внутриклеточного лизиса, что обусловливает функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов.

Установлено, что усиление степени инвазии приводило к снижению активности кислой и щелочной фосфатаз на фоне активации миело-пероксидазы и уровня лизосомально-катионных белков, что является проявлением компенсаторноприспособительных реакций организма животных. Миелопероксидаза, как ферментная система, так и неферментная система — лизосомально-катионные белки обладают не только антимикробным действием, но и антгельминтным, в связи с чем физиологически оправдан их высокий уровень при развитии механизмов защиты у свиней при гельминтозах.

В результате проведённых исследований было выявлено, что при слабой степени инвазии количество натуральных киллеров было выше в 2 раза по сравнению с клинически здоровыми животными, тогда как количество Т-лимфоцитов снижалось, а

В-лимфоцитов находилось практически на одном уровне с клинически здоровыми животными.

С повышением степени инвазии происходило достоверное снижение В-лимфоцитов на 12%, Т-лимфоцитов — на 16% и, напротив, увеличение количества NK-лимфоцитов в 2,5 раза по сравнению с клинически здоровыми животными. Кроме того, происходило угнетение клеточного иммунитета относительно слабоинвазированных животных (В- и NK-лимфоциты снижались на 10%, Т-лимфоциты, напротив, повышались на 13%).

При изучении гуморального иммунитета нами установлено, что при слабой степени инвазии бактерицидная активность сыворотки крови повышалась на 7%, а лизоцимная активность находилась практически на одном уровне с клинически здоровыми животными. С повышением степени инвазии отмечалось снижение лизоцим-ной (на 13%) и бактерицидной активности (на 22%) по сравнению с клинически здоровыми животными. При сильной степени инвазии лизо-цимная и бактерицидная активности снижались на 15 и 25% относительно слабоинвазированных животных.

Выводы. Нами выявлено, что у свиней при слабой степени инвазии Metastrongylus elongates происходила активизация иммунобиологической реактивности, что связано с эффекторными свойствами нейтрофилов и макрофагов, обладающих фагоцитирующей активностью и способностью подавлять процессы жизнедеятельности гельминтов с использованием ферментных и неферментных механизмов защиты макроорганизма. Однако с увеличением степени инвазии происходило подавление иммунобиологической реактивности организма животных.

Литература

1. Гугушвили Н.Н. Иммунологические методы исследования в ветеринарии (методические разработки) / Утверждены МСХРФ, Департаментом ветеринарии. №13-7-2/2128. Краснодар: КубГАУ, 2001. 95 с.

2. Гугушвили Н.Н. Способ определения активности щелочной фосфатазы в мазках крови крупного рогатого скота и птиц // Пат. 2212843 Российская Федерация, МПК 7 А 61 В 5/145, G 01 N 33/49/ заявитель и патентообладатель Кубанский государственный аграрный университет. №2000109913/13; заявл. 17.04.2000, опубл. 27.09.2003. Бюл. № 27. С. 393.

3. Способ определения дифференцировки Т-, В- ,NK-лимфоцитов в мазках крови животных и птиц / Н.Н. Гу-гушвили, Н.П. Радуль, О.В. Супрунов, Б.С. Сенченко, А.Л. Кулакова // Пат. 2192638 Российская Федерация, МПК 7 G 01 N 33/48/ заявитель и патентообладатель Кубанский государственный аграрный университет. № 2000100536/13; заявл. 10.01.2000, опубл. 10.11.2002 Бюл. № 31. С. 506.

4. Гугушвили Н.Н., Радуль Н.П. Способ цитохимического определения активности миелопероксидазы в мазках крови животных // Пат. 2196509 Российская Федерация, МПК 7 А 61 В 5/145, С 12 Q 1/28, G 01 N 33/49/ заявитель и патентообладатель Кубанский государственный аграрный университет. № 2000109984/13; заявл. 18.04.2000, опубл. 20.01.2003. Бюл. № 2. С. 344.

5. Забашта С.Н. Метастронгилёз свиней: монография. Краснодар: КубГАУ, 2003. 259 с.

6. Шакиров Ш., Кузнецов А., Малышев И. и др. Биохимические показатели крови растущих свиней в зависимости от уровня фосфора в их рационах // Свиноводство. 2005. № 3. С. 29—31.