СПОСОБ БИОРЕМЕДИАЦИИ НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ МЕРЗЛОТНЫХ ПОЧВ
OIL-CONTAMINATED CRYOGENIC SOILS BIOREMEDIATION METHOD

Изобретение относится к области экологии, в частности к способам очистки почв от нефтяных загрязнений.
Аналоги изобретения. Известны способы восстановления плодородия нефтезагрязненных почв микробным препаратом «Байкал ЭМ1» (Безуглова О., Модвинова Д.Ж. Главный агроном, 2009. - №3. - С.16-17), бактериями рода Rhodococcus и микробными поверхностно-активными веществами (Карпенко Е.В. и другие. Ж. Прикладная биохимия и микробиология, 2006. - Том 42. - №2. - С.175-179), препаратом Альбит (Злотников К.М. и другие. Ж. Вестник Россельхозакадемии, 2007. - №1. - С.65-67).
Известен штамм бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП, используемый для обеззараживания птичьего помета и навоза от патогенных микроорганизмов (патент Российской Федерации на изобретение №2105810, опубл. 27.02.98, бюл. №6). Однако данный штамм не применяется для обеззараживания почв, загрязненных нефтепродуктами.
Известен способ очистки мерзлотных почв от нефти спорообразующими бактериями Bacillus subtilis (патент на изобретение №2446900, опубл. 10.04.2012, бюл. №10). Однако способ предусматривает использование только штамма бактерий Bacillus subtilis «Колыма-7/2к».
В основу изобретения положена задача разработки способа биоремедиации мерзлотных почв от нефти путем внесения в почву помета, после применения птицам пробиотика из штаммов бактерий «Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП» и «Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП».
Технический результат изобретения - очистка почвы от нефтяного загрязнения путем внесения помета с микробным препаратом. Используют помет птиц после применения штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 и Bacillus subtilis ТНП-5, которые обладают способностью разлагать нефтепродукты.
Технический результат изобретения достигается следующим образом.
4
Используют помет птиц после применения пробиотика из штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП с питьевой водой курам-несушкам. Добавляют в воду суспензию в равных соотношениях штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП на 1% растворе глюкозы из расчета 0,001 мл на 1 голову, содержащую 50 млн КОЕ (пробиотик «Норд-Бакт»). Назначение микробного препарата нормализует кишечный микробиоценоз, обеспечивает микробиологическую безопасность яиц, повышает содержание в них жизненно важных макро- и микроэлементов, витаминов и яйценоскость. В фекалии (помете) птиц присутствуют спорообразующие микроорганизмы рода Bacillus subtilis, в концентрации до 26,2×10 КОЕ/г и представители нормобиоза (бифидо- и лактобактерии).
Используют штаммы бактерий «Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП» и «Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП», депонированные в коллекции микроорганизмов Всероссийского Государственного института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ). Справки о депонировании выданы 6 февраля 2001 г. за №180/15 и №181/15.
Штаммы бактерий могут быть получены в лаборатории по разработке микробных препаратов ГНУ Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии и ВГНКИ.
Штаммы бактерий «Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП» и «Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП» выращивают в мясопептонном агаре pH 7,0-7,2 в течение 5 суток при 37°C, затем суспензируют в равных соотношениях в 1%-ном растворе глюкозы в концентрации 5 млрд КОЕ/г.
2
Для искусственного загрязнения берут 4 квадрата с площадью 0,5 м, в три из них вносят равномерно нефть из расчета 600 мл на один квадрат.
В первый квадрат вносят 375 г помета, второй квадрат - 375 г помета, после назначения птицам пробиотика, третий квадрат - контроль с нефтью, четвертый квадрат - контроль без нефти.
Пробы почвы берут до и после загрязнения нефтью, а затем через 3 месяца для микробиологических и химический исследований.
Установлено, что применение помета птиц после применения пробиотика снижает концентрацию нефти до - 1,97%, то есть уровень нефти от 135143 мг/кг снижается до 2667 мг/кг в течение 3 месяцев летнего периода. В контроле содержание нефти существенно не изменяется и составляет в контроле с нефтью - 135143 мг/кг, в контроле без нефти - 1506 мг/кг. Внесение чистого помета уровень нефтезагрязнения снижает только до 84368 мг/кг или до 62,4%.
Таким образом, применение помета птиц после применения штаммов бактерий «Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП» и «Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП» очищает почву, загрязненную нефтью, и может быть использовано в восстановлении нефтезагрязненных земель в условиях Крайнего Севера.