Пренатальное формирование синусов лимфатического узла

A. И. Краюшкин, М. Ю. Капитонова, А. И. Перепелкин, Л. И. Александрова,

B. Л. Загребин, Н. Г. Краюшкина

Волгоградский государственный медицинский университет,

кафедра анатомии человека, кафедра гистологии, эмбриологии, цитологии

ПРЕНАТАЛЬНОЕ ФОРМИРОВАНИЕ СИНУСОВ ЛИМФАТИЧЕСКОГО УЗЛА

УДК 611. 428-612. 428

Общим в становлении синусов лимфатических узлов независимо от локализации органов является последовательное преобразование их зачатков. Наиболее вероятным представляется сочетание одновременного формирования сообщений краевого синуса с областью ворот через щелевидные зачатки промежуточных синусов.

Ключевые слова: синус, лимфатический узел, формирование.

A. I. Krayushkin, M. Yu. Kapitonova, A. I. Perepelkin, L. I. Alexandrova, V. L. Zagrebin, N. G. Krayushkina

PRENATAL FORMATION OF LYMPH NODE SINUSES

A progressive transformation of primordia is a common stage in the formation of lymph node sinuses regardless of their localization. A simultaneous formation of the regional reports from the sinus area of the gate through the slit-like rudiments of the intermediate sinuses seems to be the most probable combination.

Key words: lymph nodes, formation, sinus.

Еще в 1965 году А. Поликар указывал, что многие заболевания лечатся так, как будто лимфатической системы вообще не существует [6]. Французский ученый объективно констатировал клинические и фундаментальные факты того времени в области лимфологии: «Несмотря на ценность и многочисленность новейших исследований, посвященных структуре и функциям лимфоидной системы, она все еще продолжает оставаться одной из наиболее загадочных составных частей организма» [6, с. 199]. При этом Анри Поликар с оптимизмом рассматривал темпы развития теоретической и прикладной лимфологии: «Можно надеяться, что в ближайшие годы лимфоидная система станет одним из наиболее изучаемых объектов как в патофизиологическом так и в общебиологическом плане» [6, с. 200]. Однако, несмотря на многочисленные публикации по функциональной и клинической анатомии лимфатической системы и важнейшего ее звена — органов иммуногенеза[1, 7, 11, 12], современные методологические подходы и совершенные методические приемы изучения этой функциональной системы организма [2, 3], на сегодняшний день научные работы в области лимфологии, адресованные врачам-практикам, которые удовлетворяли бы потребностям клинической медицины, единичны [1, 4]. Это объяснимо недостаточной разработкой теоретических основ лечебной лимфологии [4, 9], неоднозначными представлениями о фундаментальных фактах функциональной анатомии лимфатической системы, в том числе об источниках и механизмах становления ее структур на этапах онтогенеза, который является

одним из наименее разработанных вопросов эмбриологии [9]. Противоречивы представления о путях формирования важнейшего элемента лимфатического узла (ЛУ) — его дренажной системы [5,8].

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Получить морфологические факты для интерпретации закономерностей формирования синусов ЛУ в пренатальном онтогенезе.

Задачи. 1. Изучить морфологические особенности синусов висцеральных и соматических ЛУ на этапах формирования органов в пренатальном онтогенезе; 2. Выявить общие характеристики и особенности развития синусов ЛУ различной локализации.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалом для работы послужили висцеральные (брыжеечные) и соматические (подколенные) ЛУ 24 кроликов породы шиншилла двух этапов онтогенеза: 17-е сутки внутриутробного развития (предплод-ный период — 11 животных) и 23-и сутки пренаталь-ного формирования (плодный период — 13 животных). Для фиксации материала использовали 10-й % водный раствор формалина. При изучении зачатков ЛУ изготавливали серийные тотальные срезы, проведенные через туловище животных перпендикулярно продольной оси и тазовую конечность, перпендикулярно оси разогнутой в коленном суставе конечности в области подколенной ямки. Давали характеристику топографии зачатков ЛУ, качественное описание формирующихся синусов и их морфометрическую оценку с использованием микроскопической техники и

фотографических матриц препаратов. Всего изготовлено и проанализировано более 35 тысяч срезов и более 1 тысячи подвергнуто морфометрической обработке с использованием имидж-анализа [2].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Зачаток брьжеечного ЛУ кролика на 17-е сутки пренатального развития (рис. 1) представляет собой компактное скопление мезенхимньх и лимфоидных клеток, которое расположено в корне общей брьжейки кишки на вентральной стенке брюшной аорты на уровне тела первого поясничного позвонка, с размерами (362,76 ± 5,75) мкм на (145,65 ± 7,47) мкм и с площадью на срезе (0,068182 ± 0,005227) мм2 . В боковых отделах закладки виден формирующийся краевой синус (рис. 1), который представлен в виде 2—3 щелевидных полостей.

Рис. 1. Зачаток брыжеечного ЛУ кролика.

17-е сутки пренатального развития: 1 — зачаток краевого синуса; 2—зачаток лимфоидной ткани;

3 — корень общей брыжейки кишки.

Окраска гематоксилин-эозином. Об. 10, ок. 10.

В промежутках между ними окружающая соединительная ткань связана с закладкой ЛУ Ширина просвета закладки краевого синуса составляет (28,82 ± 3,84) мкм, относительная площадь составляет 21,86 ± 0,08 %. Другие структуры, которые выделяются в сформированных ЛУ на рассматриваемом этапе отсутствуют. Зачаток подколенного ЛУ кролика 17 суток пренатального периода (рис. 2) представлен в виде клеточного скопления овоидной формы размерами (317,00 ± 2,49) мкм на (237,27 ± 1,59) мкм и площадью в плоскости среза (0,062972 ± 0,001201) мм2 . Непосредственно к зачатку ЛУ прилежит мезенхима подколенной ямки в окружении мышц бедра и голени. По периферии тканевой закладки ЛУ находится формирующийся краевой синус шириной (10,65 ± 1,88) мкм и относительной площадью 19,09 ± 0,83 %о. Между участками закладки краевого синуса соединительная ткань, окружающая зачаток ЛУ в 5—7 местах, связана с тканевой закладкой узла. Закладка капсулы, которая представляет собой наружную стенку формирующегося краевого синуса не отграничена от вокругузелковой ткани и контрасти-руется в виде структуры толщиной (3,03 ± 0,37) мкм, состоящей из цепочки плоских клеток с вытянутой

цитоплазмой и удлиненным ядром. Ширина закладки краевого синуса брыжеечного ЛУ (28,82 ± 3,84) мкм, его абсолютная площадь (0,020702 ± 0,000073) мм2 и относительная (21,86 ± 0,08 %) достоверно больше, чем в зачатке подколенного узла (ширина—10, 65 ± 1,88 мкм, абсолютная площадь — (0,016734 ± 0,000726) мм2 , относительная — 19,09 ± 0,08 %), во всех трех случаях Р < 0,001.

Рис. 2. Зачаток подколенного ЛУ кролика.

17-е сутки пренатального развития: 1 — зачаток краевого синуса; 2 — зачаток лимфоидной ткани.

Окраска гематоксилин-эозином. Об. 10, ок. 10

Брыжеечный ЛУ к 23-м суткам пренатального периода (рис. 3) по сравнению с 17-и сутками (рис. 1), претерпевает значительные качественные преобразования.

Рис. 3. Брыжеечный ЛУ плода кролика. 23 сутки пренатального развития: 1 — капсула; 2 — краевой синус; 3 — вокругузелковый синус; 4 — мозговой лимфатический синус; 5 — корковое вещество; 6 — мозговые тяжи. Окраска гематоксилин-эозином. Об. 10, ок. 10

Наиболее существенным является деление тканевой закладки ЛУ на корковое и мозговое вещество. Капсула образована преимущественно двумя — тремя слоями веретенообразно вытянутых клеток. Плотно расположенные соединительнотканные элементы капсулы почти по всему протяжению четко отграничиваются от вокругузловой ткани.

В области ворот ЛУ заметны формирующиеся тра-бекулы. Краевой синус имеет более равномерный просвет по сравнению с ЛУ 17 суток. В нем отсутствуют выраженные расширения, характерные для 17 суток, свидетельствующие о происхождении синуса из лимфатических сосудов. Вокругузловоя ткань связана с внутриузловой только в области ворот, хотя еще сохранены участки со стороны противоположной воротам, где капсула не отграничена полностью от окружающей узел ткани. Последняя переходит через краевой синус в ткань ЛУ Краевой синус в единичных местах через узкие щелевидные пространства развивающихся межузелковых синусов связан с мозговыми лимфатическими синусами. Развивающиеся межузелковые синусы представляются в виде пространств разреженной лимфоидной паренхимы мозгового вещества, не разделенных трабекулами. В просветах всех синусов видны единичные ретикулярные клетки. Корковое вещество однородно. Мозговые тяжи, межузелковые и мозговые синусы имеют тенденцию к ориентировке в направление ворот К 23-м суткам в формировании капсулы принимает участие уплотняющаяся вокругузловая соединительная ткань. У плодов 23 суток в брыжеечном ЛУ хорошо выражены мозговые лимфатические синусы, которые по ширине просвета (11,02 ± 0,85 мкм) превосходят краевой синус (6,46 ± 0,79 мкм, Р < 0,001). Однако эти структуры еще малочисленны, поэтому их абсолютная площадь в плоскости среза (0,095880 ± 0,011558 мм2) и относительная площадь (10,38 ± 1,25 %) не имеют достоверных отличий от таких же параметров краевого синуса. Вокругузелковые синусы развиты слабо (3,01 ± 0,52 % площади среза).

В подколенном ЛУ плодов (рис. 4) качественно новым по сравнению с предплодным периодом оказывается появление щелевидных пространств в паренхиме ЛУ Эти пространства являются формирующимися промежуточными (вокругузелковыми и мозговыми) синусами.

Рис. 4. Подколенный ЛУ плода кролика. 23-и сутки пренатального развития: 1 — капсула; 2 — краевой синус; 3 — промежуточные синусы; 4 — лимфоидная ткань. Окраска гематоксилин-эозином. Об. 10, ок. 10

Расположены они преимущественно в средней части узла, имея, различные направления. Вместе с тем, хорошо заметна тенденция ориентировки их в направлении ворот Единичные щелевидные пространства связаны с краевым синусом, большинство из них такой связи не имеет Промежуточные синусы представляются более широкими, чем краевые, причем в средних отделах узла промежуточные синусы шире, чем ближе к периферии. Однако они не позволяют еще отдифференцировать корковое вещество от мозгового, которое рассматривается как часть узла, соответствующая расположению мя-котных тяжей и промежуточных мозговых синусов. Поэтому трудно отнести эти пространства к промежуточным корковым или промежуточным мозговым синусам, а также точно квалифицировать участки паренхимы, являющиеся мякотными тяжами. Менее ошибочной будет оценка взаимоотношений формирующихся промежуточных синусов с окружающей лимфоидной тканью на данном этапе развития узла как «разрежение паренхимы органа» в целом, без дифференцировки промежуточных синусов на корковые и мозговые и без выделения мякотных тяжей. Ширина краевого синуса на 23-и сутки (7,10 ± 0,89 мкм) имеет тенденцию к уменьшению по сравнению с предплодным периодом (10,65 ± 1,83 мкм), хотя различие это недостоверно (Р > 0,05). Последнее обстоятельство можно трактовать как признак стабилизации в преобразованиях лимфатических сосудов, из которых закладывается краевой синус. Ширина формирующихся промежуточных синусов в плоскости среза подколенного узла (11,03 ± 0,99 мкм) больше, чем краевого (7,10 ± 0,89 мкм, Р < 0,01).

В литературе существует мнение, что первыми из внутриузловых путей лимфы закладываются промежуточные синусы, как щелевидные пространства между мезенхимными элементами. Позднее эти щели сообщаются с лимфатическими путями [6].

На основе анализа морфологии зачатков ЛУ предплодов кролика (17-е сутки), более вероятным нам представляется другой механизм образования и формирования дренажной системы ЛУ Изучение ранней закладки ЛУ позволяет говорить о трех ее компонентах: тканевой

закладке, закладке краевого синуса и капсулы. Кроме формирующегося краевого синуса других щелей, которые отличались бы от обычных межклеточных пространств, не встречается. Во внутриузловом транспорте лимфы, т.о., первым возникает «прямой, быстрый» путь, как его называет А. Поликар [6] циркуляции, которым является краевой синус. Это согласуется с литературными сведениями, приводимыми М. Р Сапиным с соавт. [8]. Дальнейшую последовательность становления элементов транспортной системы ЛУ можно представить в виде одного из следующих предположительных вариантов: 1) появление щелей со стороны краевого синуса, которые в этом случае можно было бы считать зак-

ладкой межузелковых синусов; 2) внедрение пространств в тканевой зачаток со стороны ворот, то есть, развитие мозговых лимфатических синусов; 3) одновременный встречный рост закладок межузелковых и мозговых лимфатических синусов; 4) появление щелевидных пространств в толще тканевой закладки (об этом указывает А. Поликар, 1965, с. 88), которые вторично соединяются с краевым и воротным синусами; 5) «одномоментное» формирование сообщений краевого и воротного синусов с закладкой щелей в толще зачатка узла.

По нашим данным в самом начале формирования промежуточных синусов не встречалось изолированных выпячиваний в области краевого синуса или в области ворот. Это позволяет исключить первые два предположения. На серийных срезах зачатков не обнаруживалось также щелевидных пространств в толще закладки без появления щелей в области краевого синуса и ворот, что не согласуется со следующими двумя предположениями. Даже при наличии единичных щелей (до 10) в плоскости среза всегда встречались сочетания в виде ответвления пространств от краевого синуса и от области ворот с полостями в средних отделах зачатка. Отмеченные факты свидетельствуют в пользу последнего предположения об «одномоментном» формировании сообщений краевого синуса с областью ворот через щели в толще зачатка ЛУ.

В силу гетерохронности развития ЛУ к 23-м суткам в брыжеечном ЛУ выделяются вокру-гузелковые и мозговые лимфатические синусы, в то время как в подколенном ЛУ об этих синусах можно говорить только как о промежуточных без диффе-ренцировки их на корковые и мозговые.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

1) Эмбриогенез синусов ЛУ различной локализации характеризуется асинхронностью развития. Формирование дренажной системы висцеральных ЛУ происходит интенсивнее, чем соматических.

2) Общим в становлении синусов ЛУ независимо от локализации органов является последовательное преобразование их зачатков. Наиболее вероятным представляется сочетание одновременного формирования сообщений краевого синуса с об-

ластью ворот через щелевидные зачатки промежуточных синусов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Буланов Д. В., Смирнов А. В., Загребин В. Л. Иммуно-гистохимические и молекулярно-биологические характеристики опухолей семейства саркомы Юинга // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. — 2011. — № 1 (37) — С. 76—80.

2. Ибатуллин И. А. Гомеостаз и артериальная гипер-тензия. Сегментарное строение лимфатической системы и его клиническое значение: Руководство для врачей. 3-е изд., перераб. и доп. / И. А. Ибатулин // Казань: Магариф, 2003. — 479 с.

3. Капитонова М. Ю. Методы лимфологии и иммуно-морфологии / М. Ю. Капитонова, А. И. Краюшкин, Ю. В. Дегтярь, В. Л. Загребин // Волгоград: Изд-во ВолГМУ. — 2009. — 100 с.

4. Краюшкин А. И. Функциональная анатомия лимфатического узла с аспектами медицины, основанной на доказательствах / А. И. Краюшкин, М. Ю. Капитонова, Л. И. Александрова // Вестник ВолГМУ. — 2010. — № 3 (35). — С. 3—7.

5. Левин Ю. М. Основы лечебной лимфологии / Ю. М. Левин // М.: Медицина. — 1986. — 288 с.

6. Петренко В. М. Основы эмбриологии. Вопросы развития в анатомии человека / СПб: СПбГМА, Изд-во ДЕАН, 2003. — 400 с.

7. Поликар А. Физиология и патология лимфоидной системы / А. Поликар // Изд-во «Медицина». — 1965. — 210 с.

8. Сапин М. Р. Лимфатический узел (структура и функции) / М. Р. Сапин, Н. А. Юрина, Л. Е. Этинген // М.: «Медицина». — 1978. — 272 с.

9. Сапин М. Р. Внеорганные пути транспорта лимфы / М. Р. Сапин, Э. И. Борзек // Медицина. — 1982. — 264 с.

10. Сапин М. Р. Состояние и перспективы развития исследований в области анатомии человека / М. Р. Сапин // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. — 1990. -Т. 98. — В. 2. — С. 5—11.

11. Сапин М. Р. Иммунная система, стресс и иммунодефицит — / М. Р. Сапин, Д. Б. Никиток // М.: АПП «Джангар», 2000 — 184 с.

12. Снигур Г. Л., Смирнов А. В. К вопросу стандартизации патогистологической диагностики сахарного диабета // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. — 2010. — № 3 (35) — С. 112—115.

13. Balogh P., Horvath G., Skazal A. K. Immunoarchitecture of distinct reticular fibroblastic domains in the white pulp of mouse spleen // J. Histochem. Cytochem. — 2004. — Vol. 52. — № 10. — P. 1287—1298.

14. Okazaki S. I., Yamakawa M, Maeda K, Ohta N, Aoyagi M. Expression of glucocorticoid receptors in non — neoplastic follicles and B cells type malignant lymphomas // J. Clin. Pathol. — 2006. — Vol. 59. — № 4. — P. 410—416.