СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОМБИНАЦИИ АНТИТЕЛА К PD-1 И ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО АГЕНТА
METHOD FOR TREATMENT OF MALIGNANT NEOPLASM, USING COMBINATION OF ANTIBODY TO PD-1 AND CHEMOTHERAPEUTIC AGENT

Область техники
[001] Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно к способам лечения злокачественного новообразования, включающим введение антитела к PD-1, в частности пролголимаба, в комбинации с химиотерапевтическим агентом.
Уровень техники
[002] Белок программируемой смерти 1 (PD-1) является ингибиторным членом семейства рецепторов CD28, которое включает в себя также CD28, CTLА-4, ICOS и BTLA. PD-1 экспрессируется активированными В-клетками, Т-клетками и миелоидными клетками (Agata et al., supra; Okazaki et al. (2002) Curr. Opin. Immunol. 14: 391779-82; Bennet et al. (2003) J Immunol 170:711-8). Первоначальные члены данного семейства, CD28 и ICOS, были обнаружены по функциональным действиям на увеличение пролиферации Т-клеток после добавления моноклональных антител (Hutloff et al. (1999) Nature 397:263-266; Hansen et al. (1980) Immunogenics 10:247-260). PD-1 был обнаружен скринингом на дифференциальную экспрессию в апоптотических клетках (Ishida et al. (1992) EMBO J 11:3887-95). Другие члены данного семейства, CTLA-4 и BTLA, были обнаружены скринингом на дифференциальную экспрессию в цитотоксических Т-лимфоцитах и TH1-клетках, соответственно. CD28, ICOS и CTLA-4, все, имеют неспаренный остаток цистеина, дающий возможность гомодимеризации. В противоположность этому, предполагается, что PD-1 существует в виде мономера, не имея неспаренного остатка цистеина, характерного для других членов семейства CD28.
[003] PD-1 является трансмембранным белком типа I 55 кДа, который является частью суперсемейства генов Ig (Agata et al. (1996) Int Immunol 8:765-72). PD-1 содержит мембранопроксимальный иммунорецепторный ингибирующий мотив на основе тирозина (ITIM) и мембранодистальный мотив переключения на основе тирозина (ITSM) (Thomas, M.L. (1995) J Exp Med 181:1953-6; Vivier, E и Daeron, M (1997) Immunol Today 18:286-91). PD-1, хотя и является структурно сходным с CTLA-4, лишен мотива MYPPPY, который является критическим для связывания B7-1 и B7-2. Были идентифицированы два лиганда для PD-1, PD-L1 и PD-L2, которые, как было показано, отрицательно регулируют активацию Т-клеток после связывания с PD-1 (Freeman et al. (2000) J Exp Med 192:1027-34; Latchman et al. (2001) Nat Immunol 2:261-8; Carter et al. (2002) Eur J Immunol 32:634-43). Как PD-L1, так и PD-L2 являются гомологами B7, которые связываются с PD-1, но не связываются с другими членами семейства CD28.
[004] Один лиганд для PD-1, PD-L1, является изобилующим в различных типах рака человека (Dong et al. (2002) Nat. Med. 8:787-9). Взаимодействие между PD-1 и PD-L1 приводит к снижению количества инфильтрирующих опухоль лимфоцитов, уменьшению опосредованной рецептором Т-клеток пролиферации и ускользанию от иммунологического надзора раковых клеток (Dong et al. (2003) J. Mol. Med. 81:281-7; Blank et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307-314; Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100). Иммуносупрессия может быть обращена ингибированием локального взаимодействия PD-1 с PD-L1, и это действие является аддитивным при блокировании взаимодействия PD-1 с PD-L2 (Iwai et al. (2002) Proc. Nat’l. Acad. Sci. USA 99:12293-7; Brown et al. (2003) J. Immunol. 170:1257-66).
[005] PD-1 является ингибирующим членом семейства CD28, экспрессируемым на активированных B-клетках, T-клетках и миелоидных клетках (Agata et al., supra; Okazaki et al. (2002) Curr Opin Immunol 14: 391779-82; Bennett et al. (2003) J Immunol 170:711-8). PD-1-недостаточные животные развивают различные аутоиммунные фенотипы, включая аутоиммунную кардиопатию и подобный волчанке синдром с артритом и нефритом (Nishimura et al. (1999) Immunity 11:141-51; Nishimura et al. (2001) Science 291:319-22). Кроме того, было обнаружено, что PD-1 играет роль в аутоиммунном энцефаломиелите, системной красной волчанке, болезни трансплантат против хозяина (GVHD), диабете типа I и ревматоидном артрите (Salama et al. (2003) J Exp Med 198:71-78; Prokunina and Alarcon-Riquelme (2004) Hum Mol Genet 13:R143; Nielsen et al. (2004) Lupus 13:510). Было показано, что в линии мышиных опухолевых В-клеток ITSM PD-1 является необходимым для блокирования BCR-опосредованного вхождения Ca2+ и фосфорилирования тирозина, находящихся ниже по ходу процесса эффекторных молекул (Okazaki et al. (2001) PNAS 98:13866-71).
[006] В настоящее время известен ряд антител против PD-1, например, nivolumab (BMS), pembrolizumab (Merck), которые представляют собой монокональное антитело человека изотипа IgG4.
[007] Также известно новое антитело к PD-1 пролголимаб (также известное как BCD-100) представляет собой моноклональное антитело человека изотипа IgG1 c безэффекторными мутациями L234A, L235A. Пролголимаб показал повышенную аффинность к PD-1, повышенную агрегационную стабильность в сравнении с антителами изотипа IgG4. Кроме того, пролголимаб в настоящее время проходит клинические исследования для различных типов злокачественных новообразований, включая меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого; рак шейки матки, в том числе метастатический рак шейки матки, рецидивирующий рак шейки матки, прогрессирующий рак шейки матки, персистирующий рак шейки матки, ранние стадии рака шейки матки до и после радикального лечения.
[008] Терапия злокачественных новообразований может сочетать в себе иммунотерапию и химиотерапию. Такая терапия может оказаться эффективнее, чем иммунотерапия или химиотерапия по отдельности.
[009] Таким образом, в настоящее время является актуальной разработка новых способов лечения злокачественных новообразований, включающих введение антитела к PD-1, в частности пролголимаба, в комбинации с химиотерапевтическими агентами (химиотерапией).
Описание изобретения
Определения
[0010] Термины, используемые в настоящем описании, как правило, имеют их обычные для данной области значения в пределах контекста изобретения и в конкретном контексте, где используют каждый термин. Ниже, или в другом месте описания, определены некоторые термины, которые используют для описания изобретения, для предоставления практику дополнительного руководства в отношении описания изобретения. Приведены синонимы некоторых терминов. Изложение одного или нескольких синонимов не исключает использование других синонимов. Использование примеров в любом месте настоящего описания, включая примеры любых терминов, описываемых в настоящем документе, является исключительно иллюстративным и никоим образом не ограничивает объем и значение изобретения или любого иллюстрируемого объекта. Изобретение не ограничено различными вариантами осуществления, приведенными в настоящем описании.
[0011] Кроме того, если по контексту не требуется иное, термины в единственном числе включают в себя термины во множественном числе, и термины во множественном числе включают в себя термины в единственном числе.
[0012] В настоящем описании и в последующей формуле изобретения, если контекстом не предусмотрено иное, слова «иметь», «включать» и «содержать» или их вариации, такие как «имеет», «имеющий», «включает», «включающий», «содержит» или «содержащий», следует понимать, как включение указанного целого или группы целых, но не исключение любого другого целого или группы целых.
[0013] Термин «фармацевтическая композиция» относится к композиции и/или составу, содержащему антитело согласно изобретению в терапевтически эффективном количестве и эксцепиенты или вспомогательные вещества (носители, разбавители, наполнители, растворители и другие эксцепиенты).
[0014] Термин «водная композиция» при использовании в данном документе относится к композиции на основе воды, в качестве воды могут быть использованы: вода, вода для инъекций, физиологический раствор (0,9-1,0%-ный водный раствор хлористого натрия).
[0015] Термин «парентеральное введение» означает режимы введения, обычно с помощью инъекции, и включает, в частности, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, внутритрахеальную, внутрикапсулярную, внутриорбитальную, внутрикардиальную, внутрикожную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, внутрисуставную, субкапсулярную, субарахноидальную, внутриспинальную, эпидуральную и надчревную инъекцию или инфузию.
[0016] Термин «применение» относится к возможности применения антитела согласно изобретению или фармацевтической композиции, его содержащей, для лечения, облегчения течения заболеваний, для ускорения ремиссии, снижения частоты рецидивов вследствие заболеваний или нарушений, опосредуемых рецепторами, с которыми может связываться антитело согласно изобретению. Примерами заболеваний являются, но не ограничиваются ими, злокачественные новообразования, включая меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения, рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого, неплоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, в том числе неоперабельный или метастатический мелкоклеточный рак легкого, рак легкого ранних стадий до и после радикального лечения, рак шейки матки, в том числе метастатический рак шейки матки, рецидивирующий рак шейки матки, прогрессирующий рак шейки матки, персистирующий рак шейки матки, ранние стадии рака шейки матки до и после радикального лечения, опухоли головы и шеи, в том числе плоскоклеточный рак головы и шеи, лимфома Ходжкина, опухоль желудка и кишечника, метастатический плоскоклеточный рак пищевода, рак мочевого пузыря, в том числе метастатическая уротелиальная карцинома, рак почки, рак эндометрия, в том числе метастатический рак эндометрия, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения, рак молочной железы, в том числе метастатический рак молочной железы, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения, рак печени, в том числе метастатический или неоперабельный рак печени, ранние стадии рака печени до и после радикального лечения, неоперабельная или метастатическая солидная опухоль, в том числе неоперабельная или метастатическая солидная опухоль с признаками микросателлитной нестабильности.
[0017] Термин «способ лечения» относится к возможности применения антитела согласно изобретению или фармацевтической композиции, его содержащей, для лечения, облегчения течения заболеваний, для ускорения ремиссии, снижения частоты рецидивов вследствие заболеваний или нарушений, связанных с активностью PD1. «Лечить» или «лечение» заболевания, нарушения или состояния может включать предотвращение или замедление появления клинических симптомов заболевания, нарушения или состояния, развивающегося у человека, ингибирования заболевания, нарушения или состояния, то есть остановки, уменьшения или замедления развития заболевания или его рецидива (в случае поддерживающей терапии) или по меньшей мере его одного клинического или субклинического симптома, или облегчение или ослабление заболевания, то есть вызывание регресса заболевания, нарушения или состояния. Примерами заболеваний являются, но не ограничиваются ими, злокачественные новообразования, включая меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального оперативного лечения; рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого.
[0018] «Химиотерапевтическим агентом» является химическое соединение, применимое для лечения злокачественного новообразования. Примеры химиотерапевтических агентов включают алкилирующие агенты, такие как тиотепа и циклофосфамид (CYTOXAN); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбохинон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метилмеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилмеламин; ацетогенины (например, буллатацин и буллатацинон); дельта-9-тетрагидроканнабинол (дронабинол, MARINOL); бета-лапахон; лапахол; колхицины; бетулиновую кислоту; камптотецин (включая синтетический аналог топотекан (HYCAMTIN), CPT-11 (иринотекан, CAMPTOSAR), ацетилкамптотецин, скополектин и 9-аминокамптотецин); бриостатин; каллистатин; CC-1065 (включая его синтетические аналоги адозелезин, карзелезин и бизелезин); подофиллотоксин; подофиллиновую кислоту; тенипозид; криптофицины (например, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги KW-2189 и CB1-TM1); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, гидрохлорид оксида мехлорэтамина, мелфалан, новембихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урамустин; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимнустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин,например, калихеамицин гамма II и калихеамицин омега II (см., например, Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)); динемицин, включая динемицин A; эсперамицин; а также хромофор неокарциностатина и родственные хромофоры хромопротеинов - энедииновые антибиотики, аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, карминомицин, карзинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, доксорубицин (включая ADRIAMICIN, морфолинодоксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин, доксорубициноНСl в инъецируемых липосомах (DOXOL), липосомный доксорубицин TLC D-99 (MYOCET), пегилированный липосомный доксорубицин (CAELYX) и дезоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин C, микофеноловую кислоту, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат, гемцитабин (GEMZAR), тегафур (UFTORAL), капецитабин (XELODA), эпотилон и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; средства, подавляющие функции надпочечников, такие как аминоглютетимид, митотан, трилостан; компенсатор фолиевой кислоты, такой как фолиновая кислота; ацеглатон; гликозид альдофосфамида; аминолевулиновую кислоту; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазихон; элфорнитин; ацетат эллиптиния; этоглуцид; нитрат галлия; гидроксимочевину; лентинан; лонидаинин; майтанзиноиды, такие как майтанзин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; 2-этилгидразид; прокарбазин; полисахаридный комплекс PSK (JHS Natural Products, Eugene, OR); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2»-трихлортриэтиламин; трихотецены (например, токсин T-2, верракурин A, роридин A и ангуидин); уретан; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид («ara-C»); тиотепа; таксоид, например паклитаксел (TAXOL), препарат паклитаксела на основе сконструированных связанных с альбумином наночастиц (ABRAXANETM) и доцетаксел (TAXOTERE); хлорамбуцил; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; средства на основе платины, такие как цисплатин, оксалиплатин и карбоплатин; алкалоиды барвинка, которые предотвращают полимеризацию тубулина из образующихся микротрубочек, включая винбластин (VELBAN), винкристин (ONCOVIN), виндезин (ELDISINE, FILDESIN) и винорелбин (NAVELBINE); этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; лейковорин; новантрон; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; ибандронат; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота, включая бексаротен (TARGRETIN); бифосфонаты, такие как клодронат (например, BONEFOS или OSTAC), этидронат (DIDROCAL), NE-58095, золедроновую кислоту/золедронат (ZOMETA), алендронат (FOSAMAX), памидронат (AREDIA), тилудронат (SKELID) или ризендронат (ACTONEL); троксацитабин (1,3-диоксолановый нуклеозидный аналог цитозина); антисмысловые олигонуклеотиды,например олигонуклеотиды, которые ингибируют экспрессию генов в путях передачи сигналов, вовлеченных в пролиферацию аберрантных клеток, таких как, например, PKC-альфа, Raf, H-Ras и рецептора эпидермального фактора роста (EGF-R); вакцины, такие как вакцина THERATOPE и вакцины для генной терапии, например вакцина ALLOVECTIN, вакцина LEUVECTIN и вакцина VAXID; ингибитор топоизомеразы 1 (например, LURTOTECAN); rmRH (например, ABARELIX); BAY439006 (сорафениб; Bayer); SU-11248 (Pfizer); перифосин, ингибитор ЦОГ-2 (например, целекоксиб или эторикоксиб), ингибитор протеосом (например, PS341); бортезомиб (VELCADE); CCI-779; типифарниб (811577); орафениб, ABT510; ингибитор Bcl-2, такой как облимерсен натрия (GENASENSE); пиксантрон; ингибиторы EGFR (см. определение ниже); ингибиторы тирозинкиназ (см. определение ниже); и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше средств; а также сочетания двух или более указанных выше средств, такие как CHOP, сокращенное название комбинированной терапии циклофосфамидом, доксорубицином, винкристином и преднизолоном, и FOLFOX, сокращенное название схемы лечения оксалиплатином (ELOXATINTM) в сочетании с 5-FU и лейковорином.
[0019] Также в указанное определение включены противогормональные средства, которые действуют, регулируя или ингибируя действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены со смешанным профилем агонист/антагонист, включая тамоксифен (NOLVADEX), 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, торемифен (FARESTON); идоксифен, дролоксифен, ралоксифен (EVISTA), триоксифен, кеоксифен и избирательные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM), такие как SERM3; чистые антиэстрогены без агонистических свойств, такие как фулвестрант (FASLODEX) и EM800 (такие средства могут блокировать димеризацию рецепторов эстрогена (ER), ингибировать связывание ДНК, усиливать метаболизм ER и/или снижать уровни ER); ингибиторы ароматазы, включая стероидные ингибиторы ароматазы, такие как форместан и эксеместан (AROMASIN), и нестероидные ингибиторы ароматазы, такие как анастразол (ARIMIDEX), летрозол (FEMARA) и аминоглутетимид и другие ингибиторы ароматазы, включая ворозол (RIVISOR), ацетат мегестрола (MEGASE), фадрозол, имидазол; агонисты рилизинг-гормона лютеинизирующего гормона, включая лейпролид (LUPRON и ELIGARD), гозерелин, бузерелин и триптерелин; половые стероиды, включая прогестины, такие как ацетат мегестрола и ацетат медроксипрогестерона, эстрогены, такие как диэтилстилбестрол и премарин и андрогены/ретиноиды, такие как флуоксиместерон, полностью трансретиноевая кислота и фенретинид; онапристон; антипрогестероны; понижающие регуляторы рецепторов эстрогенов (ERD); антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид и бикалутамид; тестолактон; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше средств; а также сочетания двух или более указанных выше средств.
[0020] Субъект лечения или пациент является млекопитающим, предпочтительно человеческим субъектом. Вышеупомянутый субъект может быть мужского или женского пола любого возраста.
Сокращения
AUC – Площадь под фармакокинетической кривой «концентрация-время» (от англ. «area under the curve»)
AUMC AUMC - суммарная площадь под кривой произведения времени на концентрацию препарата в организме
Cl - Общий клиренс
Cmax - Максимальная концентрация
CTCAE - Критерии тяжести нежелательных явлений Национального онкологического института США (от англ. Common Toxicity Criteria for Adverse Events)
ECOG - Исследовательская группа Eastern Cooperative Oncology Group
GCP - Надлежащая клиническая практика (от англ. Good Clinical Practice)
HBV - Вирус гепатита В (от англ. hepatitis B virus)
HCV - Вирус гепатита С (от англ. hepatitis C virus)
ICH  - Международная конференция по гармонизации (International Conference on Harmonization)
irRC - Иммуноопосредованные Критерии оценки опухолевого ответа, (immune-related Response Criteria)
T1/2 - Период полувыведения
Tmax - Время до достижения максимальной концентрации
TNM - Система стадирования злокачественных опухолей (от англ. tumor, node, metastasis)
SPD - Сумма произведения перпендикулярных диаметров для множественных очагов
LDi - Самый длинный поперечный диаметр очага
SDi - Короткая ось перпендикулярна к LDi
Q2W - 1 раз в 2 недели
Q3W - 1 раз в 3 недели
PPD - Произведение LDi и перпендикулярного диаметра
TPS (Tumor Proportion Score) - Доля экспрессирующих PD-L1 жизнеспособных опухолевых клеток (с полным или частичным мембранным окрашиванием любой интенсивности) среди общего количества опухолевых клеток
CPS (Combined Positive Score) - Количество окрашенных PD-L1 клеток (опухолевых и лимфоидных) по отношению к общему количеству жизнеспособных опухолевых клеток, умноженное на 100
АЛТ - Аланинаминотрансфераза
АСТ - Аспартатаминотрансфераза
АЧН - Абсолютное число нейтрофилов
ВИЧ - Вирус иммунодефицита человека
Г-КСФ - Гранулоцитарный колониестимулирующий фактор
ГОСТ - Государственный стандарт
ЗАО - Закрытое акционерное общество
ИГХ - Иммуногистохимическое исследование
ИРК - Индивидуальная регистрационная карта
ИФА - Иммуноферментный анализ
ИЦ - Исследовательский центр
кДа - Килодальтон
КТ - Компьютерная томография
МНН - Международное непатентованное название
НМРЛ - Немелкоклеточный рак легкого
НКМД - Независимый комитет по мониторингу данных
НЯ - Нежелательное явление
ПКР - Почечно-клеточный рак
РФ - Российская Федерация
РШМ - Рак шейки матки
СНЯ - Серьезное нежелательное явление
ФН - Фебрильная нейтропения
ХТ - химиотерапия
ЩФ - Щелочная фосфатаза
ЭКГ - Электрокардиография
Эхо-КГ - Эхокардиография
Сущность изобретения
[0021] В настоящем изобретении раскрыты способы лечения злокачественного новообразования у нуждающегося в этом субъекта, включающие введение терапевтически эффективного количества антитела к PD-1, в частности пролголимаба, в комбинации с по меньшей мере одним химиотерапевтическим агентом, в частности паклитакселом, карбоплатином или цисплатином. В настоящем изобретении также раскрыты способы лечения злокачественного новообразования у нуждающегося в этом субъекта, включающие введение терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 пролголимаба в комбинации с антителом к VEGF, в частности бевацизумабом, и как минимум одним химиотерапевтическим агентом, в частности паклитакселом, карбоплатином или цисплатином.
[0022] Как описано в международной заявке на изобретение WO/2018/013017, включенной в настоящий документ посредством ссылки, было показано, что антитело к PD-1 пролголимаб, которое представляет собой моноклональное антитело человека изотипа IgG1 c безэффекторными мутациями L234A, L235A, (именуемое в настоящем документе «антитело по изобретению»), обладает улучшенной агрегационной стабильностью, повышенной аффинностью и улучшенными фармакинетическими параметрами, такими как t1/2β (час) или Cmax (мкг/мл), по сравнению с известными антителами к PD-1, которые базируются на человеческом антителе изотипа IgG4, такими как ниволумаб. Пролголимаб имеет средневесовую молекулярную массу около 146 кДа и является специфическим по отношению к PD-1 человека. Пролголимаб имеет тяжелую цепь, которая насчитывает 459 аминокислот (SEQ ID NO: 1), и имеет легкую человека, насчитывающую 214 аминокислот (SEQ ID NO: 2), константная часть (Fc) пролголимаба содержит мутации L234A, L235A.
[0023] В одном из аспектов настоящее изобретение относится к применению антитела к PD-1 в комбинации с по меньшей мере одним химиотерапевтическим агентом для лечения злокачественного новообразования у нуждающегося в этом субъекта.
[0024] В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу лечения злокачественного новообразования у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 в комбинации с по меньшей мере одним химиотерапевтическим агентом.
[0025] Терапевтически эффективное количество антитела к PD-1 по настоящему изобретению зависит от состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, предшествующей терапии и истории болезни пациента, и ответу на терапевтическое средство. Подходящую дозу можно регулировать по решению лечащего врача так, что ее можно вводить пациенту один раз или посредством нескольких введений.
[0026] В некоторых вариантах осуществления изобретения терапевтически эффективное количество антитела к PD-1 на дозу для пациента составляет приблизительно от 0.01 до 10 мг/кг массы тела, или приблизительно от 1 до 10 мг/кг массы тела, или приблизительно 0.05 мг/кг массы тела, или приблизительно 0.25 мг/кг массы тела, или приблизительно 0.5 мг/кг веса тела, или приблизительно 1 мг/кг массы тела, или приблизительно 2 мг/кг массы тела, или приблизительно 3 мг/кг массы тела, или приблизительно 4 мг/кг массы тела, или приблизительно 5 мг/кг массы тела, или приблизительно 6 мг/кг массы тела, или приблизительно 7 мг/кг массы тела, или приблизительно 8 мг/кг массы тела, или приблизительно 9 мг/кг массы тела, или приблизительно 10 мг/кг массы тела.
[0027] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 вводят в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг массы тела.
[0028] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 вводят в виде фиксированной дозы (в мг). Приемлемая доза антитела к PD-1 может содержать 5-450 мг/дозу, или может содержать 40 мг, или 50 мг, или 60 мг на одну дозу; или может содержать 70 мг, или 80 мг, или 90 мг, или 100 мг на одну дозу; или может содержать 110 мг, или 120 мг, или 130 мг, или 140 мг на одну дозу; или может содержать 150 мг, или 160 мг, или 170 мг, или 180 мг на одну дозу; или может содержать 190 мг, или 200 мг, или 210 мг, или 220 мг на одну дозу; или может содержать 230 мг, или 240 мг, или 250 мг, или 260 мг на одну дозу; или может содержать 270 мг, или 280 мг, или 290 мг на одну дозу, или может содержать 300 мг, или 310 мг, или 320 мг, или 330 мг, или 340 мг, или 350 мг на одну дозу; или может содержать 360 мг, или 370 мг, или 380 мг, или 390 мг, или 400 мг, или 410 мг , или 420 мг, или 430 мг, или 440 мг, или 450 мг на одну дозу.
[0029] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 вводят в дозе 100-400 мг.
[0030] Частота введения доз обычно может быть примерно один раз в неделю, или примерно один раз каждые 2 недели, или примерно один раз каждые 3 недели, или примерно один раз каждые 4 недели.
[0031] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 вводят каждые 2 недели, или каждые 3 недели, или каждые 4 недели.
[0032] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 вводят в дозе 1 мг/кг массы тела каждые 2 недели или каждые 3 недели.
[0033] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 вводят в дозе 3 мг/кг массы тела каждые 2 недели или каждые 3 недели.
[0034] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 представляет собой пролголимаб.
[0035] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб вводится парентерально.
[0036] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанное парентеральное введение может представлять собой внутривенное, подкожное или внутримышечное введение.
[0037] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб вводиться внутривенно в виде инфузии.
[0038] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб может быть введен внутривенно в виде инфузии длительностью 60 минут, при хорошей переносимости длительность инфузии может быть сокращена до 30 минут.
[0039] В некоторых вариантах осуществления изобретения химиотерапевтический агент выбран из группы, включающей таксан, препарат платины.
[0040] В некоторых вариантах осуществления изобретения химиотерапевтический агент вводят каждые 2 недели, или каждые 3 недели, или каждые 4 недели.
[0041] В некоторых вариантах осуществления изобретения таксан выбран из паклитаксела, доцетаксела.
2
[0042] В некоторых вариантах осуществления изобретения паклитаксел вводят в дозе 135-175 мг/м.
2
[0043] В некоторых вариантах осуществления изобретения паклитаксел вводят в дозе 135 или 175 мг/м.
2
[0044] В некоторых вариантах осуществления изобретения паклитаксел вводят в дозе 175 мг/м в виде 3-часовой внутривенной (в/в) инфузии.
2
[0045] В некоторых вариантах осуществления изобретения паклитаксел вводят в дозе 135 мг/м в виде 24-часовой в/в инфузии.
[0046] В некоторых вариантах осуществления изобретения препарат платины выбран из карбоплатина, цисплатина.
2
[0047] В некоторых вариантах осуществления изобретения цисплатин вводят в дозе 50-100 мг/м.
2
2
[0048] В некоторых вариантах осуществления изобретения цисплатин вводят в дозе 50 мг/м, 100 мг/м.
[0049] В некоторых вариантах осуществления изобретения цисплатин вводится в дозе 50-100 мг/м2 в виде в/в инфузии каждые 3 или каждые 4 недели.
[0050] В некоторых вариантах осуществления изобретения карбоплатин вводят в дозе AUC 5-7.
[0051] В некоторых вариантах осуществления изобретения карбоплатин вводят в дозе AUC 5, AUC 6, AUC 7.
[0052] Для расчета дозы карбоплатина используют формулу Калверта (AUC 5-7). AUC (area under the curve) статистический показатель, площадь, ограниченная некоторой кривой концентрации лекарства в плазме крови и осью абсцисс (время).
2
[0053] В некоторых вариантах осуществления изобретения паклитаксел вводят в дозе 175 мг/м в виде 3-часовой внутривенной (в/в) инфузии с последующим введением цисплатина каждые 3 недели.
2
[0054] В некоторых вариантах осуществления изобретения паклитаксел вводят в дозе 135 мг/м в виде 24-часовой в/в инфузии с последующим введением цисплатина каждые 3 недели.
[0055] При этом в процессе лечения субъекта возможна редукция дозы любого химиотерапевтического агента, в частности, паклитаксела, карбоплатина, цисплатина. Редукция дозы может составлять, например, 50% или 25%.
[0056] В некоторых вариантах осуществления изобретения дополнительно вводится антитело к VEGF.
[0057] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к VEGF вводят каждые 2 недели, или каждые 3 недели, или каждые 4 недели.
[0058] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к VEGF представляет собой бевацизумаб.
[0059] В некоторых вариантах осуществления изобретения бевацизумаб вводят в дозе 15 мг/кг массы тела.
[0060] В одном из аспектов настоящее изобретение относится к применению антитела к PD-1 в комбинации с паклитакселом и карбоплатином или цисплатином для лечения злокачественного новообразования у субъекта, нуждающегося в этом.
[0061] В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу лечения злокачественного новообразования у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 в комбинации с паклитакселом и карбоплатином или цисплатином.
[0062] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 вводят в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг массы тела.
[0063] В некоторых вариантах осуществления изобретения паклитаксел вводится в дозе 175 мг/м2.
[0064] В некоторых вариантах осуществления изобретения карбоплатин вводится в дозе AUC 5 или цисплатин вводится в дозе 50 мг/м2.
[0065] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в комбинации с паклитакселом и карбоплатином или цисплатином вводятся каждые 2 недели или каждые 3 недели.
[0066] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг массы тела вводится в комбинации с паклитакселом в дозе 175 мг/м2 и карбоплатином в дозе AUC 5 или цисплатином в дозе 50 мг/м2 каждые 2 недели или каждые 3 недели.
[0067] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 1 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и карбоплатин в дозе AUC 5 вводят каждые 3 недели.
[0068] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 1 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели или каждые 3 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и карбоплатин в дозе AUC 5 вводят каждые 3 недели.
[0069] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 3 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели или каждые 3 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и карбоплатин в дозе AUC 5 вводят каждые 3 недели.
[0070] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 1 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели или каждые 3 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и цисплатин в дозе 50 мг/м2 вводят каждые 3 недели.
[0071] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 3 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели или каждые 3 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и цисплатин в дозе 50 мг/м2 вводят каждые 3 недели.
[0072] В некоторых вариантах осуществления изобретения терапия может включать один или несколько циклов введения доз. Например, терапия может включать не более 6 циклов введения доз, или ровно 6 циклов введения доз. Под циклом в рамках настоящего изобретения подразумевается повторение ранее введенных доз активных веществ через определенный период времени (каждые 2 недели, 3 недели, 4 недели и т. п.).
[0073] В некоторых вариантах осуществления изобретения дополнительно осуществляется поддерживающая терапия после описанной выше основной терапии (антитело к PD-1 в комбинации с по меньшей мере одним химиотерапевтическим агентом). Поддерживающая терапия заключается во введении антитела к PD-1 в дозе 1 мг/мл или 3 мг/мл каждые 2 или каждые 3 недели. Поддерживающую терапию осуществляют до прогрессирования.
[0074] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят не более 6 циклов введения антитела к PD-1 в комбинации с паклитакселом и карбоплатином каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 каждые 2 или каждые 3 недели до прогрессирования.
[0075] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят не более 6 циклов введения антитела к PD-1 в комбинации с бевацизумабом, паклитакселом и цисплатином каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 каждые 2 или каждые 3 недели до прогрессирования.
[0076] Дозы антитела к PD-1, паклитаксела, карбоплатина и цисплатина могут быть такими, как указано выше.
2
[0077] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят 6 циклов введения антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг в комбинации с бевацизумабом в дозе 15 мг/кг, паклитакселом в дозе 175 мг/м и карбоплатином в дозе AUC 5 каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг каждые 2 или каждые 3 недели до прогрессирования.
2
2
[0078] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят 6 циклов введения антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг в комбинации с бевацизумабом в дозе 15 мг/кг, паклитакселом в дозе 175 мг/м и цисплатином в дозе 50 мг/м каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг каждые 2 или каждые 3 недели до прогрессирования.
[0079] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 представляет собой пролголимаб.
[0080] В одном из аспектов настоящее изобретение относится к применению антитела к PD-1 в комбинации с бевацизумабом, паклитакселом, карбоплатином или цисплатином для лечения злокачественного новообразования у субъекта, нуждающегося в этом.
[0081] В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу лечения злокачественного новообразования у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества антитела к PD-1 в комбинации с бевацизумабом, паклитакселом, карбоплатином или цисплатином.
[0082] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 вводится в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг массы тела.
[0083]  В некоторых вариантах осуществления изобретения бевацизумаб вводится в дозе 15 мг/кг массы тела.
[0084] В некоторых вариантах осуществления изобретения паклитаксел вводится в дозе 175 мг/м2.
[0085] В некоторых вариантах осуществления изобретения карбоплатин вводится в дозе AUC 5 или цисплатин вводится в дозе 50 мг/м2.
[0086] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в комбинации с бевацизумабом, паклитакселом, карбоплатином или цисплатином каждые 2 недели или каждые 3 недели.
[0087] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг массы тела вводится в комбинации с бевацизумабом в дозе 15 мг/кг массы тела, паклитакселом в дозе 175 мг/м2 и карбоплатином в дозе AUC 5 или цисплатином в дозе 50 мг/м2 каждые 2 недели или каждые 3 недели.
[0088] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 1 мг/кг массы тела и бевацизумаб в дозе 15 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели или каждые 3 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и карбоплатин в дозе AUC 5 вводят каждые 3 недели.
[0089] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 3 мг/кг массы тела и бевацизумаб в дозе 15 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели или каждые 3 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и карбоплатин в дозе AUC 5 вводят каждые 3 недели.
[0090] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 1 мг/кг массы тела и бевацизумаб в дозе 15 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели или каждые 3 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и цисплатин в дозе 50 мг/м2 вводят каждые 3 недели.
[0091] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 в дозе 3 мг/кг массы тела вводят и бевацизумаб в дозе 15 мг/кг массы тела вводят каждые 2 недели или каждые 3 недели, паклитаксел в дозе 175 мг/м2 и цисплатин в дозе 50 мг/м2 вводят каждые 3 недели
[0092] В некоторых вариантах осуществления изобретения антитело к PD-1 представляет собой пролголимаб.
[0093] В некоторых вариантах осуществления изобретения терапия может включать один или несколько циклов введения доз до прогрессирования. Например, терапия может включать не более 6 циклов введения доз, или ровно 6 циклов введения доз. Под циклом в рамках настоящего изобретения подразумевается повторение ранее введенных доз активных веществ через определенный период времени (каждые 2 недели, 3 недели, 4 недели и т. п.).
[0094] В некоторых вариантах осуществления изобретения дополнительно осуществляется поддерживающая терапия после описанной выше основной терапии (антитело к PD-1 в комбинации с по меньшей мере одним химиотерапевтическим агентом). Поддерживающая терапия заключается во введении антитела к PD-1 в дозе 1 мг/мл или 3 мг/мл каждые 2 или каждые 3 недели. Поддерживающую терапию осуществляют до прогрессирования.
[0095] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят не более 6 циклов введения антитела к PD-1 в комбинации с бевацизумабом, паклитакселом и карбоплатином каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 каждые 2 или каждые 3 недели до прогрессирования.
[0096] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят не более 6 циклов введения антитела к PD-1 в комбинации с бевацизумабом, паклитакселом и карбоплатином каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 и бевацизумаба каждые 3 недели до прогрессирования.
[0097] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят не более 6 циклов введения антитела к PD-1 в комбинации с бевацизумабом, паклитакселом и цисплатином каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 каждые 2 или каждые 3 недели до прогрессирования.
[0098] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят не более 6 циклов введения антитела к PD-1 в комбинации с бевацизумабом, паклитакселом и цисплатином каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 и бевацизумаба каждые 3 недели до прогрессирования.
[0099] Дозы антитела к PD-1, бевацизумаба, паклитаксела, карбоплатина и цисплатина могут быть такими, как указано выше.
2
[00100] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят 6 циклов введения антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг в комбинации с бевацизумабом в дозе 15 мг/кг, паклитакселом в дозе 175 мг/м и карбоплатином в дозе AUC 5 каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг каждые 2 или каждые 3 недели до прогрессирования.
2
[00101] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят 6 циклов введения антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг в комбинации с бевацизумабом в дозе 15 мг/кг, паклитакселом в дозе 175 мг/м и карбоплатином в дозе AUC 5 каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг и бевацизумаба в дозе 15 мг/кг каждые 3 недели до прогрессирования.
2
2
[00102] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят 6 циклов введения антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг в комбинации с бевацизумабом в дозе 15 мг/кг, паклитакселом в дозе 175 мг/м и цисплатином в дозе 50 мг/м каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг каждые 2 или каждые 3 недели до прогрессирования.
2
2
[00103] В некоторых вариантах осуществления изобретения проводят 6 циклов введения антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг в комбинации с бевацизумабом в дозе 15 мг/кг, паклитакселом в дозе 175 мг/м и цисплатином в дозе 50 мг/м каждые 3 недели, а затем последующее введение антитела к PD-1 в дозе 1 мг/кг или 3 мг/кг и бевацизумаба в дозе 15 мг/кг каждые 3 недели до прогрессирования.
[00104] В некоторых вариантах осуществления изобретения антителом к PD-1 является пролголимаб.
[00105] В некоторых вариантах осуществления изобретения злокачественное новообразование выбрано из группы, включающей меланому, в том числе неоперабельную или метастатическую меланому, ранние стадии меланомы до и после радикального лечения, рак легкого, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), в том числе неоперабельный или метастатический немелкоклеточный рак легкого, неплоскоклеточный немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, в том числе неоперабельный или метастатический мелкоклеточный рак легкого, рак легкого ранних стадий до и после радикального лечения, рак шейки матки, в том числе метастатический рак шейки матки, рецидивирующий рак шейки матки, прогрессирующий рак шейки матки, персистирующий рак шейки матки, ранние стадии рака шейки матки до и после радикального лечения, опухоли головы и шеи, в том числе плоскоклеточный рак головы и шеи, лимфома Ходжкина, опухоль желудка и кишечника, метастатический плоскоклеточный рак пищевода, рак мочевого пузыря, в том числе метастатическая уротелиальная карцинома, рак почки, рак эндометрия, в том числе метастатический рак эндометрия, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения, рак молочной железы, в том числе метастатический рак молочной железы, ранние стадии рака эндометрия до и после радикального лечения, рак печени, в том числе метастатический или неоперабельный рак печени, ранние стадии рака печени до и после радикального лечения, неоперабельная или метастатическая солидная опухоль, в том числе неоперабельная или метастатическая солидная опухоль с признаками микросателлитной нестабильности.
[00106] В некоторых вариантах осуществления изобретения злокачественное новообразование является раком шейки матки, в том числе метастатическим раком шейки матки, рецидивирующим раком шейки матки, прогрессирующим раком шейки матки, персистирующий рак шейки матки, ранние стадии рака шейки матки до и после радикального лечения.
[00107] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб может быть введен в виде водной фармацевтической композиции, содержащей:
(а)пролголимаб в концентрации от 15 мг/мл до 40 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 80 мг/мл до 110 мг/мл;
(с) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0.2 мг/мл до 2.5 мг/мл; и
(d) уксусную кислоту до pH от 4.5 до 5.5.
[00108] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 мг/мл до 25 мг/мл.
[00109] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 20 мг/мл.
[00110] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 95 мг/мл до 105 мг/мл.
[00111] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 100 мг/мл.
[00112] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1.6 мг/мл до 1.9 мг/мл.
[00113] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1.7 мг/мл до 1.8 мг/мл.
[00114] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации 1.742 мг/мл.
[00115] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может быть добавлена до pH 5.0.
[00116] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0.04 до 0.77 мг/мл.
[00117] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0.40 мг/мл до 0.50 мг/мл.
[00118] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации 0.43 мг/мл.
[00119] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб может быть введен в виде водной фармацевтической композиции, содержащей:
(а) пролголимаб в концентрации от 90 мг/мл до 150 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 50 мг/мл до 110 мг/мл;
(с) натрия ацетат тригидрат в концентрации от 0.2 мг/мл до 2.5 мг/мл; и
(d) уксусную кислоту до pH от 4.5 до 5.5.
[00120] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 90 мг/мл до 110 мг/мл.
[00121] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 100 мг/мл.
[00122] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 75 мг/мл до 85 мг/мл.
[00123] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 80 мг/мл.
[00124] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1.6 мг/мл 1.9 до мг/мл.
[00125] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации от 1.7 мг/мл до 1.8 мг/мл.
[00126] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный натрия ацетат тригидрат может находиться в концентрации 1.742 мг/мл.
[00127] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может быть добавлена до pH от 5.0 до 5.5.
[00128] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может быть добавлена до pH 5.0.
[00129] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации 0.045 мг/мл до 0.77 мг/мл.
[00130] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0.40 мг/мл до 0.50 мг/мл.
[00131] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная уксусная кислота может находиться в концентрации от 0.43 мг/мл.
[00132] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб может быть введен в виде водной фармацевтической композиции, содержащей:
(а) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(с) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1.742 мг/мл; и
(d) уксусную кислоту до pH 5.0
[00133] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб может быть введен в виде водной фармацевтической композиции, содержащей:
(а) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(с) натрия ацетат тригидрат в концентрации 1.742 мг/мл; и
(d) уксусную кислоту до pH от 5.0 до 5.5.
[00134] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб может быть введен в виде водной фармацевтической композиции, содержащей:
(а) пролголимаб в концентрации от 5 мг/мл до 150 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации от 70 мг/мл до 110 мг/мл;
(с) L-гистидин в концентрации от 0,2 до 2,5 мг/мл; и
(d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации от 0,2 до 3,5 мг/мл.
[00135] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 мг/мл до 40 мг/мл.
[00136] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 15 мг/мл до 25 мг/мл.
[00137] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 20 мг/мл.
[00138] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 95 мг/мл до 105 мг/мл.
[00139] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 100 мг/мл.
[00140] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидин может находиться в концентрации от 0,7 до 1,0 мг/мл.
[00141] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидин может находиться в концентрации 0,92 мг/мл.
[00142] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации от 2,8 до 3,3 мг/мл.
[00143] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации 2,96 мг/мл.
[00144] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь pH от 5.5 до 6.5.
[00145] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь pH 5.5.
[00146] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации от 90 мг/мл до 110 мг/мл.
[00147] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный пролголимаб может находиться в концентрации 100 мг/мл.
[00148] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации от 75 мг/мл до 85 мг/мл.
[00149] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный трегалозы дигидрат может находиться в концентрации 80 мг/мл.
[00150] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидин может находиться в концентрации от 0,7 до 1,0 мг/мл.
[00151] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидин может находиться в концентрации 0,92 мг/мл.
[00152] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации от 2,8 до 3,3 мг/мл.
[00153] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный L-гистидина гидрохлорид может находиться в концентрации 2,96 мг/мл.
[00154] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь pH от 5.5 до 6.5.
[00155] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь pH от 5.5 до 6.0.
[00156] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная композиция может иметь pH 5.5.
[00157] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб может быть введен в виде водной фармацевтической композиции, содержащей:
(а) пролголимаб в концентрации 20 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 100 мг/мл;
(с) L-гистидин в концентрации 0.92 мг/мл; и
(d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2.96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет pH 5.5.
[00158] В некоторых вариантах осуществления изобретения пролголимаб может быть введен в виде водной фармацевтической композиции, содержащей:
(а) пролголимаб в концентрации 100 мг/мл в качестве антитела;
(b) трегалозы дигидрат в концентрации 80 мг/мл;
(с) L-гистидин в концентрации 0.92 мг/мл; и
(d) L-гистидина гидрохлорид в концентрации 2.96 мг/мл;
(e) где указанная композиция имеет pH от 5.5 до 6.0.
[00159] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанная водная фармацевтическая композиция дополнительно может содержать подходящий солюбилизатор.
[00160]  В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный солюбилизатор может представлять собой полоксамер 188.
[00161] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
[00162] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанный полоксамер 188 может находиться в количестве 0 мг/мл, 0.1 мг/мл, 0.2 мг/мл, 0.3 мг/мл, 04 мг/мл, 0.5 мг/мл, 0.6 мг/мл, 0.7 мг/мл, 0.8 мг/мл, 0.9 мг/мл, 1.0 мг/мл.
[00163] В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции пролголимаба может включать введение данной композиции парентерально.
[00164] В некоторых вариантах осуществления изобретения указанное парентеральное введение может представлять собой внутривенное, подкожное или внутримышечное введение.
[00165] В некоторых вариантах осуществления изобретения применение указанной водной фармацевтической композиции антитела к PD-1 пролголимаба может включать введение данной композиции внутривенно в виде инфузии.
[00166] В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция антитела к PD-1 пролголимаба по настоящему изобретению может быть введена внутривенно в виде инфузии длительностью 60 минут, при хорошей переносимости длительность инфузии может быть сокращена до 30 минут.
Примеры
[00167] Применение пролголимаба (BCD-100) для терапии пациентов в комбинации с платиносодержащей химиотерапией и бевацизумабом в терапии первой линии у пациенток с рецидивирующим/персистирующим либо метастатическим раком шейки матки, исследование II фазы, BCD-100-4/CAESURA.
Дизайн исследования
[00168] Исследование № BCD-100-4/CAESURA (CAESURA, NCT03912402) по своему дизайну представляет собой открытое несравнительное исследование эффективности, безопасности препарата BCD-100 (ЗАО «БИОКАД», Россия) в комбинации с платиносодержащей химиотерапией (ХТ) и бевацизумабом (БЕВ) в первой линии терапии у пациенток с рецидивирующим/персистирующим либо метастатическим раком шейки матки (РШМ). Исследование проводится в 2 этапа. На первом этапе пациентки получали терапию BCD-100 + ХТ + БЕВ до 6-ти циклов, либо до развития явлений непереносимой токсичности, либо до прогрессирования заболевания. Пациентки, продемонстрировавшие положительный противоопухолевый эффект (стабилизация заболевания, частичный или полный ответ) и не имеющие признаков непереносимой токсичности переводились на второй этап исследования – этап поддерживающей терапии.
[00169] Были получены и проанализированы данные 1 этапа исследования.
[00170] В рамках данного исследования режим комбинированной терапии, включающей препараты платины, таксаны, бевацизумаб и пролголимаб, исследуется впервые. В настоящее время отсутствуют литературные данные об эффективности и безопасности добавления иммунотерапии к стандартной терапии 1 линии в популяции пациенток с рецидивирующим/персистирующим либо метастатическим раком шейки матки.
Лечение
Первый этап
[00171] Пациентки получали комбинированную терапию, включающую:
• BCD-100 3 мг/кг в качестве 1-часовой инфузии 1 раз в 3 недели (Q3W);
• Бевацизумаб 15 мг/кг в качестве 1-часовой инфузии Q3W;
• Паклитаксел 175 мг/м2 в качестве 3-часовой инфузии Q3W;
• Цисплатин 50 мг/м2 в качестве 1-часовой инфузии Q3W или Карбоплатин AUC 5  мг/мл/мин в качестве 1-часовой инфузии Q3W (выбор Карбоплатин или Цисплатин оставался на усмотрение Врача-Исследователя исходя из соотношения риск/польза для конкретной пациентки).
[00172] Модификация терапевтического режима в рамках первого этапа не предусматривалась, за исключением случаев непереносимой токсичности, описанной в Протоколе данного исследования. После применения указанной комбинированной терапии в течение 18 недель (6 циклов BCD-100 + ХТ + БЕВ), в случае достижения положительного противоопухолевого эффекта (стабилизация заболевания, частичный или полный ответ) и при условии отсутствия непереносимой токсичности, в интересах пациентки, терапия могла быть продолжена в рамках второго этапа исследования. В случае, если пациентка получала менее 6 циклов терапии в рамках первого этапа по причине непереносимой токсичности, в интересах пациентки, терапия могла быть продолжена по схеме, предусмотренной в рамках второго этапа исследования.
Второй этап
[00173] Данный этап исследования представлен поддерживающей терапией, которая проводится у пациенток, достигших положительного противоопухолевого эффекта. Режим поддерживающей терапии:
• BCD-100 3 мг/кг в качестве 1-часовой инфузии Q3W;
• Бевацизумаб 15 мг/кг в качестве 1-часовой инфузии Q3W
[00174] Терапия в рамках второго этапа исследования проводится до прогрессирования заболевания или до развития явлений непереносимой токсичности, но не более 12 циклов включительно. Терапия пациенток может быть продолжена в рамках исследования № BCD-100-EXT при достижении стабилизации или ответа на терапию и при условии отсутствия явлений непереносимой токсичности.
Исследование эффективности
[00175] Оценка противоопухолевого действия комбинированной терапии с BCD-100 производилась на основании результатов компьютерной томографии (КТ) через 9 и 18 недель после начала терапии согласно критериям RECIST 1.1 и iRECIST (стандартные критерии оценки динамики опухолевого процесса по КТ). В случае достижения положительного противоопухолевого эффекта (стабилизация заболевания, частичный или полный ответ) на фоне 6 циклов введения препарата BCD-100 в комбинации с платиносодержащей химиотерапией и бевацизумабом, по решению Врача-Исследователя пациентка могла быть переведена на второй этап исследования. На втором этапе пациентка могла получить дополнительно до 12 циклов (включительно) препарата BCD-100 в комбинации с бевацизумабом (дальнейшая терапия могла продолжаться в рамках другого исследования BCD-100-EXT). Оценка эффективности на втором этапе исследования носила дополнительный характер. Пациенткам проводилось исследование КТ каждые 12 недель, также предполагалось проведение внепланового исследования при подозрении на прогрессирование заболевания.
Исследование безопасности и иммуногенности
[00176] Безопасность оценивалась на основании данных о регистрации нежелательных явлений (НЯ) и серьезных нежелательных явлений (СНЯ), а также данных общего осмотра и определения физиологических показателей, результатов общего и биохимического анализов крови и других анализов.
[00177] Исследование иммуногенности входило в обязательные процедуры мониторинга безопасности лекарственного средства и проводилось до первого введения препарата и далее через каждые 42 дня терапии препаратом до завершения первого этапа исследования. Пациенткам, перешедшим во второй этап исследования, для обязательного мониторинга безопасности, предусмотрен отбор образцов для оценки иммуногенности BCD-100.
Результаты исследования
Сводная информация о характеристиках популяции пациентов
[00178] В исследование было включено 59 пациенток в возрасте от 18 лет. Популяция была представлена пациентками женского пола, с гистологически верифицированным (все гистологические типы) первичным метастатическим раком шейки матки, либо рецидивирующиим/персистирующим раком шейки матки, с наличием измеримых контрольных опухолевых очагов (как минимум 1 очаг), согласно критериям RECIST 1.1 (подтвержденных центральным пересмотром), с общим состоянием, соответствующим баллу 0-1 по шкале ECOG (Таблица 1).
[00179] Данная популяция включала пациенток, которые заняли место тех, кто выбыл до первого введения BCD-100 либо вследствие серьезных отклонений от Протокола. Образованная в итоге модифицированная ITT-популяция, состоящая из пациенток, получивших хотя бы одну дозу BCD-100, насчитывала 58 пациенток.
[00180] В популяцию по Протоколу (Per Protocol, РР) вошли 42 пациентки, получившие все 6 циклов терапии на первом этапе. В качестве цикла терапии учитывалось введение хотя бы одного из четырех препаратов комбинированной терапии (т. е. пролголимаба, бевацизумаба, паклитаксела, цисплатина/карбоплатина).
Таблица 1 – Основные характеристики заболевания, в популяции mITT
Сводная информация о клинической эффективности, полученная в ходе исследования № BCD-100-4/CAESURA.
[00181] Оценка ответа опухоли на терапию производилась в двух популяциях пациенток (mITT и РР) как по критериям RECISТ 1.1, так и по критериям iRECISТ. Анализ данных был проведен по данным независимого центрального пересмотра КТ и по данным локальной оценки. Основным являлся анализ параметров эффективности по данным независимого центрального пересмотра по критериям RECIST 1.1 в популяции mITT.
[00182] В популяции mITT общая частота ответа на фоне комбинированной терапии с пролголимабом составила 50,00% в соответствии с критериями оценки RECIST 1.1 и 65,52% - в соответствии с критериями оценки iRECIST. Подробные данные по частоте ответа в популяции mITT по критериям RECISТ 1.1 и iRECISТ на основании данных центрального пересмотра приведены в таблице ниже.
Таблица 2 – Частота ответа в популяции mITT по критериям RECISТ 1.1 и iRECISТ на основании данных центрального пересмотра
[00183] За анализируемый период ответ на терапию был достигнут у 29 пациенток, что превышает предустановленное критическое значение (r = 24), определяющее количество положительных ответов в группе терапии, необходимое для подтверждения достоверного противоопухолевого эффекта исследуемой терапии (относительно литературных данных об эффективности стандартной терапии). Исследование достигло своей первичной конечной точки, что позволяет сделать вывод о достаточной эффективности исследуемого режима терапии.
[00184] По оценке центрального пересмотра в популяции РР общая частота ответа на фоне комбинированной терапии с пролголимабом составила 59,52% в соответствии с критериями оценки RECIST 1.1 и 80,95% - в соответствии с критериями оценки iRECIST. Частота достижения контроля над заболеванием составила 88,10% в соответствии с критериями оценки RECIST 1.1 и 95,24% - в соответствии с критериями оценки iRECIST. Стоит отметить, что показатели эффективности терапии в популяции пациенток, получивших все 6 циклов терапии выше показателей в популяции mITT, что свидетельствует о более благоприятном прогнозе у данной подгруппы пациенток.
[00185] Медиана времени достижения ответа на терапию по всем проведенным оценкам составляла около 2,2 мес., что соответствует сроку проведения первого контрольного исследования КТ. Медиана длительности ответа на терапию не была достигнута ни по одной из проведенных оценок.
[00186] Полученные данные позволяют сделать предположение о достаточной эффективности комбинированной терапии с пролголимабом со стандартной терапией первой линии у пациенток с рецидивирующим/персистирующим либо метастатическим раком шейки матки.
Сводная информация о клинической безопасности, полученная в ходе исследования № BCD-100-4/CAESURA
[00187] В анализ безопасности включены все больные, включенные в исследование и получившие хотя бы 1 введение исследуемого препарата (mITT).
[00188] За анализируемый период экспозиция по препарату пролголимаб составила 126 дней и более у 68,97% (40 из 58) пациентов. Медиана (н. квартиль; в. квартиль) количества инфузий составляла 6 (5; 6) инфузий. Большинство пациенток получили 6 введений пролголимаба, согласно схеме терапии, запланированной в протоколе (с учетом срока среза данных). Экспозиция по полной комбинации исследуемой терапии (все препараты химиотерапии, включая бевацизумаб и пролголимаб) составила 126 дней и более у 74,14% (43 из 58) пациентов. Большинство пациенток получили полный курс терапии всеми препаратами исследуемой комбинации.
[00189] В течение анализируемого периода у большинства пациенток (98,28%) было зарегистрировано как минимум одно нежелательное явление. При этом наличие причинно-следственной связи развития данных НЯ с терапией пролголимабом, по мнению исследователей, было установлено у 35 пациенток из 58 (60,34%).
[00190] Нежелательные явления 3-4 степени тяжести по CTCAE 5.0 наблюдались у 30 (51,72%) пациенток. У 10 пациенток (17,24%) зарегистрированные нежелательные явления 3-4 степени тяжести, по мнению исследователей, имели причинно-следственную связь с терапией пролголимабом.
[00191] Нежелательные явления, отвечающие критериям серьезности, были зарегистрированы у 20 пациенток (34,48%) из 58. По мнению исследователей, только 2 из зарегистрированных СНЯ, имели непосредственную связь с терапией пролголимабом.
[00192] Нежелательные явления 5 ст. тяжести были зарегистрированы у 7 (12,07%) пациенток. По мнению исследователя только 1 случай нежелательного явления 5 ст. был связан с терапией пролголимабом.
[00193] За анализируемый период терапии иоНЯ были отмечены у 17 из 58 пациенток (29,31%). В подавляющем большинстве случаев, данные иоНЯ соответствовали 1 и 2 степеням тяжести по CTCAE 5.0. ИоНЯ 3-4 степени тяжести были зафиксированы у 5 пациентов (8,62%).
[00194] Досрочно прекратили терапию по причине развития нежелательного явления (непереносимая токсичность) 10 (17,24%) пациенток, а 3 (5,17%) пациентки прекратили терапию в связи с летальным исходом.
[00195] Данные по первичным основным параметрам безопасности приведены в таблице 3.
Таблица 3 - Основные параметры безопасности в популяции mITT
[00196] С учетом, что исследуемый режим терапии подразумевает добавление пролголимаба к стандарту лечения РШМ, важно отметить, что согласно литературным данным (Avastin Extension of indication variation assessment report 26 February 2015 EMA/CHMP/205694/2015) сам режим платиносодержащей химиотерапии в комбинации с бевацизумабом характеризуется параметрами безопасности, схожими с полученными в рамках текущего исследования. Так, стандартный режим терапии в схожей популяции пациенток характеризовался развитием НЯ с частотой 100%, развитием СНЯ у 45,9% пациенток, развитием НЯ 3/4/5 ст. у 78,0% пациенток, прекращением терапии в связи с развитием НЯ у 33,0% пациенток. Таким образом, можно заключить, что добавление к стандартной терапии пролголимаба было ассоциировано с развитием специфических для иммунотерапии нежелательных явлений – иммуноопосредованных НЯ, которые не регистрировались на фоне стандартной терапии, но не привело к существенному ухудшению профиля безопасности комбинированного режима терапии по сравнению со стандартом лечения.
[00197] По совокупности анализа параметров безопасности можно отметить, что профиль безопасности комбинированной терапии с добавлением пролголимаба соответствует литературным данным о безопасности стандартного режима платиносодержащей химиотерапии в комбинации с бевацизумабом. При этом, добавление к стандартной терапии пролголимаба было ассоциировано с развитием специфических для иммунотерапии нежелательных явлений – иммуноопосредованных НЯ, которые не регистрировались (по литературным данным) на фоне стандартной терапии, но не привело к существенному ухудшению профиля безопасности комбинированного режима терапии по сравнению со стандартом лечения.
Иммуногенность
[00198] В анализ иммуногенности были включены данные 55 пациенток, получивших как минимум одно введение пролголимаба, у которых при этом не было пропущено/утеряно/испорчено образца сыворотки, взятого в день 1 недели 0, а также как минимум одного из образцов, взятых на одном из следующих визитов. Исследование иммуногенности не выявило образования связывающих антител к пролголимабу ни у одной из пациенток.
Вывод
[00199] В рамках данного исследования режим комбинированной терапии, включающей препараты платины, таксаны, бевацизумаб и пролголимаб, исследуется впервые. В настоящее время отсутствуют литературные данные об эффективности и безопасности добавления иммунотерапии к стандартной терапии 1 линии в популяции пациенток с рецидивирующим/персистирующим либо метастатическим раком шейки матки.
[00200] Исследование проведено на репрезентативной, сбалансированной по основным демографическим параметрам и характеристикам заболевания популяции, приближенной к целевой популяции больных рецидивирующим/персистирующим либо метастатическим раком шейки матки.
[00201] Полученные данные об эффективности, безопасности являются достаточными для обоснования применения препарата в комбинации с платиносодержащей химиотерапией и бевацизумабом.
[00202] В рамках многоцентрового открытого исследования II фазы № BCD-100-4/CAESURA в популяции пациенток с первичным метастатическим раком шейки матки, либо рецидивирующиим/персистирующим раком шейки матки был продемонстрирован значимый терапевтический эффект применения пролголимаба в комбинации с платиносодержащей химиотерапией и бевацизумабом. С учетом полученных в рамках исследования показателей эффективности при удовлетворительном профиле безопасности, применение препарата пролголимаб в комбинации с платиносодержащей химиотерапией и бевацизумабом отвечает балансу риска и пользы в данной популяции пациентов.
--->
Перечень последовательностей
<110> ЗАКРЫТОЕ АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО "БИОКАД"
<120> СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ
КОМБИНАЦИИ АНТИТЕЛА К PD-1 И ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО АГЕНТА
<160> 2
<170> BiSSAP 1.3.6
<210> 1
<211> 459
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20                  25                  30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35                  40                  45
Ser Ala Ile Asp Thr Gly Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Val Asn Ala Lys Asn Thr Met Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Ala Arg Asp Glu Gly Gly Gly Thr Gly Trp Gly Val Leu Lys Asp Trp
100                 105                 110
Pro Tyr Gly Leu Asp Ala Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115                 120                 125
Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser
130                 135                 140
Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp
145                 150                 155                 160
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr
165                 170                 175
Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr
180                 185                 190
Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln
195                 200                 205
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
210                 215                 220
Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
225                 230                 235                 240
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
245                 250                 255
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
260                 265                 270
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
275                 280                 285
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
290                 295                 300
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
305                 310                 315                 320
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
325                 330                 335
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Tyr Thr
340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
355                 360                 365
Gln Val Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
370                 375                 380
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
385                 390                 395                 400
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
405                 410                 415
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
420                 425                 430
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
435                 440                 445
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
450                 455
<210> 2
<211> 214
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Leu Ser Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1               5                   10                  15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Asn Val
20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35                  40                  45
Arg Asp Ser Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50                  55                  60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Ala Gln Ala Gly
65                  70                  75                  80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Thr Ala Val
85                  90                  95
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gln Arg Thr Val Ala Ala
100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<---