СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ СПЕЦИФИЧНЫХ ФРАГМЕНТОВ РНК С ПОМОЩЬЮ ТРАНСКРИПЦИОННОЙ АМПЛИФИКАЦИИ С УВЕЛИЧИВАЮЩИМСЯ КОЭФФИЦИЕНТОМ РАЗМНОЖЕНИЯ ДНК-АМПЛИКОНОВ

1. Способ детекции специфичных фрагментов РНК с помощью транскрипционной амплификации, отличающийся тем, что в режиме реального времени контролируется рост флуоресценции, который свидетельствует об увеличении числа ДНК-ампликонов, которые появляются благодаря стадии обратной транскрипции и представлены в виде двуцепочечных молекул ДНК, несущих в своем составе прямой и обратный праймеры с соответствующими красителями, которые формируют пару донор-акцептор, оказывающимися в ДНК-ампликонах, расположенными на расстоянии, достаточном для переноса флуоресцентной резонансной энергии, причем за счет дублетного состояния второго праймера происходит постоянный (через каждый условный цикл) рост числа мест отжига для такого праймера и появление благодаря цепь-смещающей активности обратной транскриптазы M-MuLV все большего числа одноцепочечных ДНК-ампликонов, служащих местами для отжига первого праймера с Т7 промотором; при этом появление временных РНК-ампликонов, которые служат матрицами при обратной транскриптазной реакции, не учитывается.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что вместо пары красителей донор-акцептор может использоваться пара краситель-гаситель и в этом случае регистрируется снижение базовой флуоресценции реакционного раствора.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что вместо обратной транскриптазы M-MuLV и Т7 РНК полимеразы вкупе с ее промотором могут использоваться другие ферментные системы со сходными характеристиками.