Выделенный альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора и включающий его химерный антигенный рецептор

1. Выделенный альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR), где один или два иммунорецепторных тирозин-основных активационных мотива (ITAM), выбранных из ITAM1, ITAM2 и ITAM3, заменены на фрагмент аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3).
2. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.1, где один иммунорецепторный тирозин-основный активационный мотив (ITAM), выбранный из ITAM1, ITAM2 и ITAM3, заменен на фрагмент аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3).
3. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.2, где ITAM1 заменен на ITGB3.
4. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.2, где ITAM2 заменен на ITGB3.
5. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.2, где ITAM3 заменен на ITGB3.
6. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.1, где два иммунорецепторных тирозин-основных активационных мотива (ITAM), выбранных из ITAM1, ITAM2 и ITAM3, заменены на фрагмент аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3).
7. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.6, где ITAM2 и ITAM3 заменены на два ITGB3.
8. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.6, где ITAM1 и ITAM3 заменены на два ITGB3.
9. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.6, где ITAM1 и ITAM2 заменены на два ITGB3.
10. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.1, где ITAM1 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:1.
11. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.1, где ITAM2 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:2.
12. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.1, где ITAM3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:3.
13. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.1, где ITGB3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:4 или аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:4 с любой 1 или 2 консервативными заменами.
14. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.13, где ITGB3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO: 4 с любой 1 консервативной заменой.
15. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.13, где ITGB3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO: 4 с любыми 2 консервативными заменами.
16. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.13, где ITGB3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO: 4.
17. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.2, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:5 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 5 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
18. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.2, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:6 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 6 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
19. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.2, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:7 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 7 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 7 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
20. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.6, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:8 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 8 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 8 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
21.  Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.6, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:9 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 9 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
22.  Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.6, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:10 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 10 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 10 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
23. Выделенный альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR), который включает один или два иммунорецепторных тирозин-основных активационных мотива (ITAM) , выбранных из ITAM1, ITAM2 и ITAM3,  и один или два фрагмента аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3), при этом общее количество ITAM и ITGB3 равно трем.
24. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.23, который включает два иммунорецепторных тирозин-основных активационных мотива (ITAM) , выбранных из ITAM1, ITAM2 и ITAM3,  и один фрагмент аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3).
25. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.24, который включает ITAM2 , ITAM3 и ITGB3.
26. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.24, который включает ITAM1, ITAM3 и ITGB3.
27. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.24, который включает ITAM1, ITAM2 и ITGB3.
28. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.23, который включает один иммунорецепторный тирозин-основный активационный мотив (ITAM) , выбранных из ITAM1, ITAM2 и ITAM3,  и два фрагмента аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3).
29. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.28, который включает ITAM1 и два фрагмента аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3).
30. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.28, который включает ITAM2 и два фрагмента аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3).
31. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.28, который включает ITAM3 и два фрагмента аминокислотной последовательности интегрина бета 3 (ITGB3).
32. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.23, где ITAM1 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:1.
33. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.23, где ITAM2 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:2.
34. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.23, где ITAM3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:3.
35. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п. 23, где ITGB3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:4 или аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:4 с любой 1 или 2 консервативными заменами.
36. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п. 23, где ITGB3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:4 с любой 1 консервативной заменой.
37. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п. 23, где ITGB3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:4 с любыми 2 консервативными заменами.
38. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п. 23, где ITGB3 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:4.
39. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.24, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:5 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 5 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
40. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.24, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:6 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 6 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
41. Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.24, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:7 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 7 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 7 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
42.  Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п. 28, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:8 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 8 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 8 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
43.  Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.28, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:9 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 9 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
44.  Альтернативный внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR) по п.28, который имеет  аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:10 или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 10 и имеет отличия по сравнению с SEQ ID NO: 10 только в неконсервативных аминокислотных остатках.
45. Выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует альтернативный внутриклеточный сигнальный домен по пп. 1-44.
46. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR), содержащий альтернативный внутриклеточный сигнальный домен по пп. 1-44.
47. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по 46, содержащий:
а) антигенсвязывающий домен, который специфичен к опухолевому антигену;
б) трансмембранный домен;
в) ко-стимуляторный домен;
г) альтернативный внутриклеточный сигнальный домен по пп. 1-44.
48. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 47, где антигенсвязывающий домен, который специфичен к опухолевому антигену,  представляет собой Fab или scFv.
49. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 48, где антигенсвязывающий домен, который специфичен к опухолевому антигену,  представляет собой scFv.
50. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 47, где антигенсвязывающий домен специфичен к опухолевому антигену, который выбран из группы: CD19, CD20, CD123 или BCMA.
51. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 50, где антигенсвязывающий домен специфичен к опухолевому антигену CD19.
52. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 51, где антигенсвязывающий домен, который специфичен к опухолевому антигену CD19, имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO: 11.
53. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 48, где трансмембранный домен представляет собой трансмембранный домен белка, выбранного из группы, состоящей из альфа, бета или дзета-цепи T-клеточного рецептора, CD28, CD3-эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137 и CD154.
54. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 53, где трансмембранный домен представляет собой CD8.
55. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 54, где трансмембранный домен CD8 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO: 12.
56. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 47, где ко-стимуляторный домен представляет собой функциональный сигнальный домен белка, выбранного из группы, состоящей из OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278) и 4-1BB (CD137).
57. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 56, где ко-стимуляторный домен представляет собой CD28 или 4- 1BB.
58. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 57, где ко-стимуляторный домен представляет собой CD28.
59. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 58, где ко-стимуляторный домен CD28 имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO:13.
60. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 56, где ко-стимуляторный домен представляет собой 4- 1BB.
61. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 60, где ко-стимуляторный домен 4- 1BB имеет аминокислотную последовательность представленную SEQ ID NO: 14.
62. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 46, дополнительно содержащий лидерную последовательность.
63. Выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по п. 46, который имеет  аминокислотную последовательность представленную аминокислотной последовательностью, которую выбирают из группы: SEQ ID NO:15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или 26, или имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности, которую выбирают из группы: SEQ ID NO:15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или 26, и имеет отличия по сравнению с аминокислотной последовательностью, которую выбирают из группы: SEQ ID NO:15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или 26, только в неконсервативных аминокислотных остатках.
64. Выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует выделенный химерный антигенный рецептор (CAR) по пп. 46-63.
65. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из п. 64.
66. Вектор доставки, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из п. 64.
67. Вектор по пп. 65-66, выбранный из группы, состоящей из ДНК, РНК, плазмиды, лентивирусного вектора, аденоассоциированного вирусного вектора, аденовирусного вектора или ретровирусного вектора.
68. Вектор по пп. 65-66, дополнительно содержащий промотор.
69. Вектор по пп. 65-66, представляющий собой in vitro транскрибируемый вектор.
70. Вектор по пп. 65-66, в котором последовательность нуклеиновой кислоты дополнительно содержит поли(A)-последовательность.
71. Вектор по пп. 65-66, в котором последовательность нуклеиновой кислоты дополнительно содержит 3'UTR.
72. Способ получения генетически модифицированной клетки, которая содержит химерный антигенный рецептор (CAR) по пп. 46-63, включающий трансформирование клетки вектором по пп. 65-71.
73. Генетически модифицированная клетка, которая содержит химерный антигенный рецептор (CAR) по пп. 46-63, которую получают способом по п. 72.
74. Клетка по п. 73, где клетка представляет собой Т-лимфоцит.
75. Клетка по п. 73, где клетка представляющая собой CD8+ T-клетку.
76. Клетка по п. 73, где клетка представляет собой NK-клетку.
77. Клетка по п. 73, которую используют в качестве лекарственного средства.
78. Клетка по п. 77, которую используют в качестве лекарственного средства при опухолевых заболеваниях.
79. Клетка по п. 78, которую используют в качестве лекарственного средства при заболеваниях, где опухоль представляет собой рак.