Влияние препарата «Мексибел» на репарацию тканей в эксперименте

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2011

ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА «МЕКСИБЕЛ» НА РЕПАРАЦИЮ ТКАНЕЙ

В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

КАБАНОВА А.А.*, ГОЛУБЦОВ В.В.**, САМСОНОВА И.В.**, БОГДАН Н.Ю.

У О «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет», кафедра стоматологии детского возраста и челюстно-лицевой хирургии, * кафедра патологической анатомии**

Резюме. Цель исследования - экспериментальное изучение влияния антиоксиданта «Мексибел» на репарацию тканей при лечении гнойно-воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области. Эксперимент выполнен на 32 кроликах, которым была создана модель подчелюстного абсцесса. Животных разделили на 2 серии: контрольная (п=8), опытная (п=24) - в лечении которых использовался «Мексибел». Исследования осуществляли в динамике на

1, 2, 4, 7 и 11 сутки лечения. Результаты показали, что положительное влияние препарата «Мексибел» проявилось в более раннем (на 7 сутки лечения в опытной серии, по сравнению с 11 сутками контроля) купировании воспалительного процесса и заживлении раны.

Ключевые слова: антиоксидант, гнойно-воспалительный процесс, репарация тканей.

Abstract. The aim of this investigation was to study experimentally the influence of «Mexibel» antioxidant on the tissue reparation in the treatment of pyo-inflammatory diseases of the maxillofacial region. The experiment was performed on 32 rabbits which were subject to submaxillary abscess. The animals were divided into two series: the control one (n=8) and the experimental one (n=24) treated with «Mexibel». The experiment was carried out in dynamics on the 1 st, 2nd, 4th, 7th and 11th days of treatment. The results demonstrated that the positive influence of «Mexibel» preparation on the inflammatory process arresting and the wound healing was observed in earlier terms (on the 7th day of treatment in the experimental series comparing with the 11th day in the control one).

Одонтогенные воспалительные заболевания челюстно-лицевой области, из которых значительный удельный вес занимают абсцессы и флегмоны, характеризуются широким распространением и наносят весомый социально-экономический ущерб. По данным литературы, число пациентов с ост-

Адрес для корреспонденции: 210009 г. Витебск, ул.Терешковой, д.28, кв. 57. Тел.моб.: +375 (29) 295-3354, е-mail: arinakabanova@mail.ru - Кабанова А.А.

рыми гнойно-воспалительными процессами лица и шеи составляет 3-4% от общего числа больных с гнойной инфекцией и 50-70% от количества пациентов, проходивших лечение в отделениях челюстно-лицевой хирургии [1].

Возникновение и развитие острых одон-тогенных воспалительных заболеваний в значительной мере зависят от функциональной полноценности антиоксидантной системы организма. Поэтому применение антиоксидантов в качестве как средств лечения, так и

препаратов профилактики данной патологии может иметь высокую эффективность. Долгое время роль антиоксидантов в лечебной и профилактической медицине недооценивалась. Это было связано со сложностью их синтеза и первыми отрицательными результатами практического применения. Однако проведение фундаментальных научных исследований дало возможность изучить тончайшие механизмы изменений клеточных структур, происходящих в организме во время оксидативного стресса [3]. В последнее десятилетия проблеме антиоксидантной терапии уделено достаточное внимание учеными всего мира. Антиоксиданты приобретают все большую значимость в повседневной практике врачей как самостоятельные средства, так и в комплексе с другими лекарственными средствами [5].

По определению В.И. Стручкова и соавт. (1975), раны, образовавшиеся после операции по поводу острых гнойных процессов (абсцессов, флегмон), относятся к первичным гнойным ранам и заживление их протекает по законам вторичного натяжения [4]. Раневой процесс является одним из распространенных видов патологии, характеризующийся изменением активности свободнорадикального окисления [2]. Доказано, что в физиологических условиях продукты свободнорадикального окисления участвуют в регуляции скорости пролиферации клеток [9]. Недостаток продукции свободных радикалов в области пораженного участка кожи приводит к микробной инвазии. Избыток усиливает воспалительный процесс, усугубляет метаболические расстройства, приводит к дальнейшему нарушению функций биологических мембран, задержке репаративных процессов, определяемой морфологически [8]. Наблюдается увеличение сроков заживления

[6]. Для эффективной коррекции окислительно-восстановительного статуса необходимо постоянно расширять спектр фармакологических средств, изменяющих интенсивность процессов свободнорадикального окисления при репарации тканей. Использование при комплексном лечении ран и ожогов антиоксидантов (супероксиддисмутаза, каталаза, глутатион-пероксидаза, витамин Е, аскорбат, ингибитор ксантиоксидазы) способствовало ускорению

заживления ран. По данным M. Tissot (1990), применение лекарственного препарата «Тет-рахлордекакислород» существенно ингибирует миграцию палочкоядерных лейкоцитов и уменьшает их количество в раневом экссудате

[7]. Убедительные данные о целесообразности использования антиоксидантов при лечении ран получены при изучении ранозаживляющих свойств супероксиддисмутаза и аллопуринола. При использовании данных препаратов создаются оптимальные условия для заживления травматических повреждений мягких тканей. В опытах на животных G.S. Weinstein (1989) установил, что при введении антиоксиданта «Десферал» заживление ран у морских свинок проходит в два раза эффективнее по отношению к контролю [10]. У пациентов с одонто-генными флегмонами челюстно-лицевой области, в комплексную терапию которых был включен антиоксидант «Рексод», регенераторные способности тканей гнойной раны были выше по сравнению с больными, получающими стандартный комплекс лечения, а именно, появление грануляций и краевой эпителизации раны наблюдалось в 1,5 раза быстрее [2]. Однако в литературе не выявлено результатов исследования процессов репарации тканей при использовании в комплексном лечении гнойно-воспалительных процессов челюстно-лицевой области препарата «Мексибел», обладающего антиоксидантным, антигипоксическим, липидрегулирующим и мембранопротекторным действием.

Цель исследования - экспериментальное изучение влияния антиоксиданта «Мексибел» на репарацию тканей при лечении гнойновоспалительных заболеваний челюстно-лицевой области.

Методы

В эксперимент были включены 32 кролика породы Шиншилла массой 3000-3500 г, обоего пола. Все животные находились на стандартном рационе питания в виварии УО «Витебский государственный медицинский университет». Перед началом проведения эксперимента животные выдерживались в выделенном боксе в течение одной недели для

адаптации к новым условиям. Перед проведением эксперимента все животные взвешивались, тщательно осматривались на наличие видимой патологии и признаков болезней. Особи с выявленной патологией выбраковывались и не включались в эксперимент.

Все животные были разделены на 2 серии: контрольная серия с подчелюстным абсцессом (п=8), опытная серия кроликов с подчелюстным абсцессом, в лечении которых был использован препарат «Мексибел» (п=24). Препарат «Мексибел» вводился внутримышечно. В качестве модели гнойно-воспалительного заболевания использовался подчелюстной абсцесс кролика, получение которого было отработано на 10 животных. Моделирование гнойной раны, последующее лечение её, содержание животных, выведение их из эксперимента и забор материала проходили в выделенном отдельном боксе с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Подчелюстной абсцесс у кроликов формировался через неделю и имел классические признаки воспаления. В подчелюстной области определялся ограниченный инфильтрат, в центре которого имелась флюктуация. Кроме того, выявлялась местная гипертермия очага воспаления, животные остро реагировали на пальпацию подчелюстной области, отказывались от приема пищи, имели учащенное дыхание. У всех животных определялись одинаковые по форме, площади и расположению подчелюстные абсцессы, что являлось важным для дальнейшего их сравнения и последующего анализа. Использованная нами модель по клиническому течению приближалась к одонтогенному абсцессу.

Всем животным на 7 сутки после заражения проводилась первичная хирургическая обработка (ПХО) гнойного очага под инфильтрационной анестезией 1 мл 0,25% раствора новокаина. Ежедневно до исчезновения признаков местного воспаления проводили перевязки с обработкой раны антисептиками и сменой резиновых дренажей. Животных с подчелюстным абсцессом по завершении срока наблюдения выводили из эксперимента введением летальной дозы нем-бутала.

Исследования проводили в динамике. На 1, 2, 4, 7 и 11 сутки лечения определяли длину гнойной раны, наличие гнойного раневого экссудата и эпителизацию краёв раны. Забор материала для гистологического исследования осуществляли с края раны с подлежащими мягкими тканями на 7 и 11 сутки лечения. Препараты изготавливали стандартным способом и окрашивали гематоксилином и эозином, изучали под микроскопом при увеличении х200 и х400. При морфологическом исследовании учитывали характер воспалительного инфильтрата, степень инфильтрации, наличие или отсутствие эпителизации в области раневого дефекта.

Полученные результаты обрабатывались с помощью компьютерных программ «Statistica 6.0» и «Excel». Перед применением методов описательной статистики определяли тип распределения количественных признаков с использованием критерия Шапиро-Уилка и равенство дисперсий с помощью критерия Левена. Для признаков с нормальным распределением рассчитывали среднюю арифметическую (М) и стандартное отклонение (8). При распределении признака, отличном от нормального, вычисляли медиану (Ме), нижний 25-й (LQ) и верхний 75-й квартили (UQ). Оценку статистической значимости различий проводили с учетом распределения признака при помощи Т-критерия Стьюдента (t) и критерия Манна-Уитни (U). Критический уровень значимости определяли как 0,05.

Результаты и обсуждение

Характеристики гнойной раны у животных опытной и контрольной серий в начале лечения не отличались друг от друга. Динамика исследуемых клинических показателей у сравниваемых серий была различной.

Длина раны в контрольной и опытной сериях после проведения ПХО гнойного очага составила 2 см. На 2-е сутки лечения длина раны у экспериментальных животных обеих исследуемых серий равнялась 1,8 (1,8; 1,8) см. На 4-е сутки лечения в серии животных, получающих «Мек-сибел», длина гнойной раны составила 1,5 (1,4; 1,5) см и была достоверно меньше, чем в кон-

трольной серии животных - 1,55 (1,5; 1,6) см, р=0,008, р<0,01. На 7-е сутки лечения длина раны в опытной серии животных была также меньше, чем в серии контроля, соответственно 0,9 (0,8;1) см и 1,3 (1,1;1,3) см, р=0,0001, р<0,01. Аналогичная картина наблюдалась и на 11-е сутки: 0 (0;0,1) см в опытной серии и 0,4 (0,3;0,5) см в контрольной, р=0,000009, р<0,001 (табл. 1 ).

На 1-е и 2-е сутки лечения в обеих сериях животных эпителизация раны клинически не определялась. На 4-е сутки лечения в опытной серии у 33% (8) кроликов отмечались первые признаки эпителизации, в то же время в серии животных, не получающих «Мексибел», подобных изменений выявлено не было. На 7-е сутки лечения у 12,5% (1) кроликов контрольной серии и у

Таблица 1

Линейные размеры гнойной раны у кроликов в динамике лечения

Сутки Длина раны, см р

Опыт Контроль

1 2 (2;2) 2 (2;2) >0,05

2 1,8 (1,8;1,8) 1,8 (1,8;1,8) >0,05

4 1,5 (1,4;1,5) 1,55 (1,5; 1,6) 0,01, <0,05

7 0,9 (0,8;1) 1,3 (1,1;1,3) 0,0002, <0,001

11 0 (0;0,15) 0,4 (0,3;0,5) 0,0001, <0,001

Таким образом, сокращение размеров гнойной раны в течение лечения у кроликов, получающих антиоксидант «Мексибел», происходило быстрее, чем у животных, не получающих препарат.

Выделение гнойного экссудата из раны в 1-е и 2-е сутки наблюдался у всех животных опытной и контрольной серий, то есть в 100% наблюдений. На 4-е сутки лечения в опытной серии у 15 особей (62,5%) имело место гнойное отделяемое из раны, в то же время в контрольной серии гнойный экссудат выделялся у 7 животных (87,5%). Через неделю у 10 особей (41%) опытной серии и 6 (75%) серии контроля наблюдалось гнойное раневое отделяемое. В конце лечения на 11-е сутки только у 2 животных (9%), получающих «Мексибел», и у 4 особей (57%) контрольной серии наблюдалось выделение гнойного экссудата. Следовательно, очищение раны в подчелюстной области кроликов от гнойно-некротических масс наступало раньше у животных опытной серии по сравнению с серии контроля. Уже на 4-е сутки лечения у кроликов, в лечении которых использовался «Мексибел», количество гнойного раневого отделяемого было ниже, чем у животных, не получающих данный препарат.

62,5% (15) кроликов опытной серии имелись признаки эпителизации краев раны. На 11-е сутки лечения в опытной серии эпителизация была отмечена в 85% (18) наблюдений, тогда как в контроле данный показатель составил 28% (2).

При морфологическом исследовании на седьмые сутки лечения в контрольной серии животных отмечались изъязвления кожи, ярко выраженная воспалительная инфильтрация с преобладанием сегментоядерных нейтрофилов, участки гнойного расплавления, очаговое образование грануляционной ткани. Все это определяло отсутствие тенденции к заживлению.

В то же время в серии кроликов, получающих «Мексибел», на 7-е сутки лечения констатировалась умеренно выраженная воспалительная инфильтрация с преобладанием сегментоядерных нейтрофилов, встречались единичные мелкие участки гнойного расплавления мягких тканей, в коже сохранялись участки изъязвления. В глубине тканей определялись очаги склерозирования.

На 11-е сутки наблюдения в гистологических препаратах контрольной серии животных сохранялась выраженная воспалительная инфильтрация с наличием участков гнойного расплавления мягких тканей. Вместе с тем грануляционная ткань была развита в большей

степени, в глубине мягких тканей появлялись очаги склероза. В составе воспалительного инфильтрата, помимо нейтрофилов, определялись лимфоциты и гистиоциты, что указывало на хронизацию воспалительного процесса. В коже сохранялись зоны изъязвления.

При использовании препарата «Мексибел» в гистологических препаратах опытной серии на 11-е сутки в мягких тканях наблюдалась скудная мелкоочаговая преимущественно лимфогистиоцитарная воспалительная инфильтрация с примесью светлых «пенистых» макрофагов. Изъязвления кожи отсутствовали, в дерме определялся сетчатый склероз. Все это свидетельствовало о заживлении раны.

Таким образом, выполненное исследование показало, что при использовании антиоксиданта «Мексибел» у экспериментальных животных уже на 4 день лечения гнойная рана значительно уменьшалась в размерах, появлялись первые признаки краевой эпителизации и очищения раны от гнойного экссудата. При последующих сроках наблюдения различия в клинических характеристиках гнойных ран двух сравниваемых серий кроликов становились еще более выраженными и достигали максимальных характеристик к концу лечения. При завершении эксперимента в опытной серии животных рана заживала, только в единичных наблюдениях определялось гнойное раневое отделяемое. В то же время в контрольной серии у большинства животных отсутствовала эпителиза-ция краев раны и имело место выделение гнойного экссудата.

Клинические данные коррелировали с результатами морфологического исследования, которые указывали на начало купирования воспалительного процесса уже на 7-е сутки лечения препаратом «Мексибел». Морфологическая картина раны на 11-е сутки лечения контрольной серии была близка картине 7-ых суток лечения опытной серии животных, что свидетельствовало об ускорении очищения раны и обеспечения антиоксидантом «Мекси-бел» наиболее благоприятных и оптимальных условий для регенераторных процессов в тканях. На 11-е сутки лечения при использовании «Мексибел» морфологические показатели воспалительного процесса были гораздо

менее выражены, чем в серии животных, где исследуемый препарат не применялся.

Заключение

В результате проведенного экспериментального исследования можно заключить, что использование препарата «Мексибел» способствует более быстрому очищению гнойной раны, сокращению ее размеров и более раннему появлению признаков эпителизации.

Литература

1. Бажанов, Н.Н. Состояние и перспективы профилактики и лечения гнойных воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области / Н.Н. Бажанов, В.А. Козлов, Т.Г. Робустова // Стоматология. -1997. - № 2. - С. 15-19.

2. Воробьева, Т.Л. Клиническая оценка эффективности применения рексода при лечении больных одон-тогенными флегмонами челюстно-лицевой области / Т.Л. Воробьева, Т.В. Гайворонская // Кубан. науч. мед. вестн. - 2008. - № 5 (104). - С. 49-53.

3. Зенков, Н.К. Окислительный стресс. Биохимические и патофизиологические аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Ланкин, Е.Б. Меньшикова. - М.: Наука, 2001. - 345 с.

4. Стручков, В.И. Гнойная рана / В.И. Стручков, А.В. Григорян, В.К. Гостищев. - М.: Медицина, 1975. - 311 с.

5. Терехина, Н.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная система / Н.А. Терехина, Ю.А. Петрович. - Пермь, 2005. - 69 с.

6. Хамитова, З.А. Применение перевязочного материала «Полидерм» в комплексном лечении гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей : ав-тореф. дис. ... канд. мед. наук: 14.00.27, 14.00.25 / З.А. Хамитова. - Уфа, 2007. - 22 с.

7. Anti-inflammatory properties of a novel wound healing and immunomodulating agent, tetrachlorodecaoxygen complex (TCDO) / M. Tissot [et al.] // Agent and Action. - 1990. - Vol. 31. - № 3-4. - P. 368-374.

8. Effect of the hydroxyl radical on fibroblast-mediated collagen remodelling in vitro / S. Arisawa [et al.] // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. - 1996. - Vol. 23, № 3. -P. 222-228.

9. Owens, M.W. Cyto Kines increase proliferation of human

intestinal smooth muscle cells: possible role in inflamation inolucel stricture formation / M.W. Owens, M.B.Grisham // Inflammation. - 1993. - № 17 (4). - P. 481-487.

10. Weinstein, G.S. Deferoxamine decreases necrosis in dorsally based pig skin flaps / G.S. Weinstein, M.D. Moves, M.Y. McCormack // Otolaryngol Head Neck Surg. - 1989. - Vol. 101, №5. - P. 559-561.

Поступила 21.11.2011 г.

Принята в печать 02.12.2011 г.