КОРМОВАЯ ДОБАВКА ДЛЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ И ПТИЦЫ
FEED ADDITIVES FOR LIVESTOCK AND POULTRY

Изобретение относится к кормопроизводству и может быть использовано для кормовых добавок, стимулирующих все системы организма сельскохозяйственной птицы и животных.
Согласно статистическим данным, более 30% случаев гибели и выбраковки животных и птицы происходит по причине болезни органов пищеварения (атония, диарея, гепатит) и нарушения обмена веществ. Основной причиной служат недоброкачественные корма, поражение различными токсикантами, в том числе широко распространившимися в последнее время микотоксинами.
Любой корм содержит токсические вещества, в том числе радионуклиды, тяжелые металлы и микотоксины, поэтому одним из важных компонентов биологических добавок должно быть присутствие сорбента в составе добавки, которые выводят токсины из корма.
Известна кормовая добавка «Биовитос», содержащая биосорбент природного происхождения и антибиотик (Патент РФ №2131677, A23K 1/16, 1/17).
Недостатком является использование антибиотика, который убивает полезную микрофлору организма животных, ухудшая процесс пищеварения и усиливая нагрузку на почки и печень.
Известен способ получения кормовой добавки, в которой в качестве пробиотиков использованы живые культуры бифидобактерий B.bifidum в форме биопрепарата «Бифидумбактерин» и сухая порошкообразная листостебельная масса из стевии в соотношении 9:1 (Патент РФ №2342851, C1, A23K 1/00).
Недостатком данного способа является то, что кормовая добавка предназначена только для кормления поросят подсосного периода и она неполноценна по растительному составу - в ней учавствует только один стевиозный комплекс, что явно недостаточно для создания сбалансированной кормовой добавки.
Известна кормовая смесь для сельскохозяйственных животных и птиц, включающая белковую и минеральную добавку, компоненты растительного происхождения и кормовые дрожжи, в качестве белковой добавки содержит белковый препарат, полученный из биомассы дождевого червя и компонентов растительного происхождения (Патент РФ 2295253 С2 A23K 1/00).
Недостатком способа является труднодоступность технологического сырья (использование биомассы из красного калифорнийского червя) и сложная технология ее обработки. Кроме того, в кормовой добавке отсутствует сорбент, что снижает ее биологическую активность.
Известна кормовая добавка для сельскохозяйственной птицы и животных, содержащая сорбент и растительный стимулятор. В качестве растительного стимулятора организма при стрессовых состояниях она содержит душицу, зверобой, мать-и-мачеху, подорожник, чистотел, донник, полынь горькую, тысячелистник, ромашку аптечную, крапиву двудомную (Патент РФ №2344187 C1 A23K 1/14, 1/16). В качестве сорбента в кормовой добавке использованы опоки - природные минералы опалкристоболитовой породы.
Недостатком кормовой добавки является использование значительного количества (11 видов) ценных лекарственных трав, которые только в таком сложном сочетании обеспечивают успокаивающее, обезболивающее, дезодорирующее, антимикробное, возбуждающее аппетит, антидепрессивное, антисептическое, ранозаживляющее, противовоспалительное, антиоксидантное, иммуностимулирующее, иммуномодулирующее, десенсибилизирующее действие, благодаря наличию в составе фенолов, флавоноидов, спиртов, витаминов, органических кислот, полисахаридов, фитонцидов. Перечисленные лекарственные травы, согласно изобретению, только в указанном сочетании, количестве и соотношениях обеспечивают такой широкий спектр биологического действия.
Известна также натуральная биологически активная кормовая добавка, содержащая прополис, пергу, обножку, пчелиный подмор и травяную муку, трутневый расплод в разных стадиях развития, кровяную муку, хвойную муку и бентонит при следующем содержании компонентов, мас. %: прополис - 2,5-3,0; перга - 17,0-19,0; обножка - 26,0-28,0; пчелиный подмор - 17,0-18,0; трутневый расплод в разных стадиях развития - 6,5-7,0; кровяная мука - 2,5-2,7; хвойная мука - 2,6-2,8; бентонит - 2,5-3,0; травяная мука - остальное (пат. РФ №25223339, МПК A23K 1/16; A23K 1/00, опуб. 10.07.2014 г.)
В этой натуральной биологически активной добавке, наиболее близкой к предлагаемой, содержится комплекс ценных биологических веществ, благотворно влияющих на организм животных, однако данная кормовая добавка не выводит микотоксины, кроме того, она имеет сложный состав, включающий значительные количества ценных лекарственных веществ, таких как прополис, перга, обножка в самом составе кормовой добавки, что приводит к ее удорожанию.
Технический результат, на достижение которого направлено изобретение, состоит в повышении и расширении спектра сорбционных свойств препарата при попадании в организм животного радионуклидов, тяжелых металлов и микотоксинов, упрощении состава кормовой добавки, снижении себестоимости с сохранением преимуществ препарата «Вита-Форце М».
Для достижения технического результата кормовая добавка для сельскохозяйственных животных и птицы, содержащая пчелиный подмор, бентонит и травяную муку, дополнительно содержит биомассу и культуральную жидкость чайного гриба M. Gisevii Lindau, бифидумбактерин, антидиарин - экстракт коры сосны и осины и сорбент - опоку при следующем содержании компонентов, мас. %:
Пчелиный подмор
10,0-12,0
Биомасса и культуральная жидкость, полученная при культивировании чайногогриба М. Gisevii Lindau
18,0-20,0
Бифидумбактерин
0,35-0,40
Экстракт коры сосны и осины
4,5-5,0
Опока
3,0-3,5
Бентонит
3,0-3,5
Травяная мука
Остальное
Отличительными признаками предложенной кормовой добавки является дополнительное введение биомассы и/или культуральной жидкости чайного гриба М. Gisevii Lindau, пробиотика B.bifidum, антидиарина - экстракта коры хвойных и лиственных пород и сорбента - опоки (опалкристоболитовой породы), взятых в определенных соотношениях компонентов, что позволило повысить адаптогенные, антибактериальные, иммуностимулирующие, антиинфекционные, метаболитические, токсинвыводящие, ранозаживляющие свойства, при сохранении высокой эффективности кормления, уровня привеса и сохранности поголовья молодняка, профилактики желудочно-кишечных расстройств, а также болезней респираторной системы.
1
Биомасса чайного гриба Medusomyces Gisevii Lindau содержит белок, углеводы, полисахариды, липиды, нуклеиновые кислоты, минеральные вещества, витамины группы С, В, РР, аминокислоты, микроэлементы (калий, натрий, магний, железо, медь, цинк, марганец, хром). Культуральная жидкость М. Gisevii Lindau содержит органические кислоты (уксусную, глюконовую, лимонную, молочную, щавелевую, яблочную, пировиноградную, коевую, фосфорную), спирт этиловый, витамины группы С, В, РР, сахара, ферменты, пигменты, антибиотик-медузин, хитин, кофеин, пуриновые и пиримидиновые основания. Чайный гриб обладает антибактериальной активностью с широким спектром действия, стимулирующим физиологические и обменные процессы, повышает тонус и иммунологический статус организма, обеспечивает устойчивость организма к неблагоприятным факторам, в том числе к различным инфекциям, используется при иммунодефиците, общей слабости, гастритах, колитах, ожогах, кишечных и раневых инфекциях различной этиологии (Даниелян Л.Т. Чайный гриб и его биологические свойства. - М: Изд-во медицинской литературы. - 2010. - 83 с.)
Биопрепарат «Бифидумбактерин» ФСП 42.0092-2847-02, содержащий бифидобактерии B.bifidum (Патент РФ №2343851, опубл. 10.01.2009), обладает бифидогенной активностью, включающий антимикробную, токсиннейтрализующую, ингибирующую метаболизм и жизнедеятельность патогенных бактерий, улучшая пищеварение, обладает иммуномодулирующей и иммуностимулирующей активностью, синтезирует уксусную, молочную, муравьиную кислоту, этиловый спирт (Зинченко Е.В., Панин А.Н., иммунопробиотики в ветеринарной практике. - Пущино, 2000. - 162 с).
Антидиарин - продукт водной экстракции коры деревьев хвойных и лиственных пород, содержащий пектин (до 90% от сухого веса препарата) и легниновый комплекс, представленный целлюлозой, гемицеллюлозой и моносахаридами (10-60% от сухого веса препарата (Патент RU №2141317 С1, 1999).
1
Опока - опалкристоболитовая порода - это минеральный сорбент на основе высоко дисперсного кремнезема, связывающий в кормах микотоксины (афлатоксин B, Т-2 токсин, зеараленон, охратоксин А), соли тяжелых металлов, химические токсины, радионуклиды, газы и другие продукты обмена благодаря огромной сорбционной поверхности. Так на 1 г опоки создается сорбционная поверхность не менее 150 м за счет микропор, имеющихся в минерале, что легко доступно для сорбции молекул с минимальным размером 2-90 нм. Кремний обеспечивает рост и упрочнение тканей в период развития и формирования скелета и участвует в минерализации костей даже при дефиците кальция, фосфора, хлора, фтора, натрия, серы и других химических элементов (Патент RU №2355187 C1, опубл. 20.05.2009).
Кормовую добавку готовят следующим образом.
Для получения порошка из подмора, собирают свежепогибшие, сухие, без признаков разложения, пчелы. Сырье просеивают через сито с крупными ячейками, чтобы отделить его от мелкого мусора. После этого подмор просушивают в духовке, печи при температуре +40-45°С или над батареей центрального отопления. Сухой материал подвергают гомогенизации на шаровой мельнице или электрокофемолке. Степень дисперсности контролируют микроскопически, которая должна составлять в пределах 60-90 мкм. Полученный порошок упаковывают в бумажные пакеты по 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50 г и подвергают радиостерилизации в дозе 3000 Гр. В процессе радиационного воздействия происходит не только гибель микробов-контаминантов, но и радиохимическая активация хитина путем радиолиза, в процессе которого происходит разрыв дисульфидных связей с образованием тиоловых групп (естественные радиопротекторы) с одновременной депротеинизацией и деминерализацией, т.е. активация хитина без традиционного гидролиза с использованием технологически опасных реагентов - концентрированных щелочей и кислот. Использование облученного хитинсодержащего материала в качестве биостимулятора для роста бифидобактерий и чайного гриба существенно влияет на выход биомассы бифидобактерий и чайного гриба, а при применении порошка из облученного подмора пчел существенно повышает биологическую эффективность продуктов пчеловодства.
Для получения биомассы чайного гриба и культуральной жидкости, штамм чайного гриба Medusomyces Gisevii Lindau культивируют в условиях аэрации при 23-25°С в хитинсодержащей среде в течение 5 суток. В качестве источника питания используют простерилизованный гамма-лучами гомогенат (порошок) подмора пчел, который вносят в культуральную среду из расчета 10 г на 1 л культуральной жидкости. По истечении указанной экспозиции проводят разделение культуральной среды на биомассу и культуральную жидкость, подвергают сушке любым известным способом (лиофилизация, распылительная сушка). Полученные порошки биомассы гриба и культуральной жидкости смешивают, фасуют и упаковывают, предварительно определяя содержание хитозана в биомассе с использованием ЭПР (электронно-парамагнитный резонанс) или ИКС (инфракрасный спектральный анализ) в соответствии с методическими рекомендациями Л. Беллами (Инфракрасные спектры сложных молекул. - М.: Изд-во иностр. лит-ры. 1963).
Антидиарин - продукт (порошок) водной экстракции коры деревьев хвойных и лиственных пород получают путем сбора коры сосны и осины, подвергают сушке, гомогенизации и водной экстракции материала в соответствии с известной технологией (Патент RU №2141317, C1, 1999). Полученный экстракт сушат любым известным способом, порошок фасуют, упаковывают и используют в качестве одного из компонентов кормовой добавки.
6
8
Пробиотик «Бифидумбактерин» ФСП 42.0092-2847-02, содержащий бифидобактерий B.bifidum, добавляют к порошку смеси биомассы и культуральной жидкости в количестве 10-10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 г порошка смеси биомассы и культуральной жидкости указанного гриба.
3
2
2
3
2
3
2
Минеральный сорбент на основе высокодисперсного кремнезема - опоки - опалкристоболитовой породы любого происхождения (Самарского, Саратовского, Волгоградского, Пензенского, Московского, Калужского, Брянского, Ленинградского, Уральского, Камчатского, Сахалинского) имеет тонкозернистую структуру с размерами частиц 0,001-0,01 мм, состоит из мельчайших зерен опала, частично остатков скелетов водорослей - продукт растворения и переотложения кремнистого вещества скелетов диатомей. В составе опал-кристоболитовой породы содержатся до 77,18 мас.% SiO, 36,1 - SiO, 6,36 - AlO, 3,34 - FeO, 2,0 - СаО, 1,31 - MgO, 2,04 - CO (Патент РФ №2084178 от 20.07.1997).
Для использования опоки в качестве сорбента, природный минерал измельчают на дробилке до размеров 0,001-0,005 мм, контролируя степень дисперсности путем микроскопирования, полученный порошок фасуют, упаковывают и используют в качестве одного из сорбционных компонентов кормовой добавки. Сорбент является высокоактивным по отношению к митотоксинам.
+
+
+
+
+
Бентониты - это бикарбонатные разновидности тонкодисперсных глин, состоящих в основном из минералов высокой емкости обменных оснований, резко выраженными сорбционными свойствами и высокой связывающей особенностью благодаря специфическому строению минералов в виде разбухающей кристаллической решетки. Наличие необменных катионов в кристаллической разбухающей решетке бентонитов (Na, K, Rb, Cs, Ra и др.) обеспечивает высокую сорбционную способность монтмориллонитовой фракции бентонитов с образованием комплексов многих радиоизотопов и тяжелых металлов (см. кн. «Сельскохозяйственная радиоэкология». / Под ред. P.M. Алексахина, И.А. Корнеева. - М.: Экология, 1991).
Для повышения адсорбционных свойств глины проводят активацию бентонита путем специальной обработки соляной кислотой, удаления солей и кварца и селективного фракционирования микрочастиц монтморрилонита (основной сорбционный компонент глины) величиной 0,0006-0,0009 мм (6-9 мкм) (Авторское свидетельство СССР №952260 A61K 39/00 от 23.08.1982 г.).
Кормовую добавку для сельскохозяйственных животных и птиц изготавливают в виде порошка следующим образом.
1. Для получения 100 кг порошка берут 10 кг помолотого пчелиного подмора, 18 кг биомассы и культуральной жидкости, полученной при культивировании штамма чайного гриба Medusomyces Gisevii Lindau, 0,35 кг «Бифидумбактерина», 4,5 кг антидиарина (порошка экстракта коры сосны и осины 1:1), 3,0 кг опоки и 3,0 кг бентонита и смешивают 61,15 кг травяной муки по ГОСТ 18691-83. Полученную смесь перемешивают до получения однородной массы, расфасовывают в целлофановые мешки по 30 кг и хранят в темном прохладном помещении при температуре 15-16°С в течение 24 мес.
2. Для получения 100 кг порошка берут 12 кг помолотого пчелиного подмора, 20 кг биомассы и культуральной жидкости, полученной при культивировании чайного гриба Medusomyces Gisevii Lindau, 0,40 кг «Бифидумбактерина», 5,0 кг антидиарина (порошка экстракта коры сосны и осины 1:1), 3,5 кг опоки, 3,5 кг бентонита и смешивают с 55,6 кг травяной муки, полученную смесь перемешивают, фасуют и хранят согласно п. 1.
3. Для получения 100 кг порошка берут 10 кг помолотого, облученного в дозе 3000 Гр пчелиного подмора, 19,0 кг биомассы и культуральной жидкости, полученной при культивировании штамма чайного гриба Medusomyces Gisevii Lindau на среде, содержащей в качестве питательного субстрата порошок из облученного подмора пчел из расчета 10 г/л культуральной среды, 0,35 кг «Бифидумбактерина», 4,5 кг антидиарина (порошка экстракта коры сосны и осины 1:1), 3,0 кг опоки, 3,0 кг бентонита и смешивают с 60,15 кг травяной муки, полученную смесь перемешивают, фасуют и хранят согласно п. 1.
6
8
4. Для получения 100 кг порошка берут 11 кг помолотого, облученного в дозе 3000 Гр пчелиного подмора, 18,35 кг биомассы и культуральной жидкости, полученной при культивировании штамма чайного гриба Meidusomyces Gisevii Lindau на среде с облученным подмором пчел, путем внесения подмора из расчета 10 г/л совместно с пробиотиком «Бифидумбактерин» в количестве 10-10 колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 мл (1 г) культуральной жидкости и биомассы гриба, 4,5 кг антидиарина (порошка экстракта коры сосны и осины 1:1), 3,0 кг опоки, 3,0 кг бентонита и смешивают с 60,15 кг травяной муки, полученную смесь перемешивают, фасуют и хранят согласно п. 1.
Испытания показали, что изменение вышеперечисленных соотношений компонентов в сторону уменьшения приведет к ослаблению биологической активности (общеукрепляющей, детоксицирующей, антиоксидантной, адаптогенной, десорбционно-декорпорирующей, антиинфекционной, антидиарейной), а увеличение компонентов - к их перерасходу, и только использование в этом диапазоне компонентов обеспечивает получение наилучших результатов (см. ниже).
Разработанная кормовая добавка может быть рекомендована в качестве общеукрепляющего, детоксицирующего, антиоксидантного, иммуностимулирующего, иммуномодулирующего, метаболизмстимулирующего, стимулятора роста и развития молодняка, а также в качестве адаптогенного в условиях воздействия на организм экологических факторов (перегруппировка, транспортировка, охлаждение, перегрев, облучение, инкорпорация радиоизотопов, экотоксикантов, тяжелых металлов, пестицидов, контаминации кормов микотоксинами, патогенной и условно-патогенной микрофлорой и т.д.).
Пример 1. Стимулирующее влияние кормовой добавки в разных вариантах (полученных согласно пп. 1-4 технологии изготовления) на энергию роста и сохранность молодняка кур проводили в научно-производственном опыте на цыплятах - бройлерах в возрасте 4 сут. Отобранный методом аналогов для опыта молодняк распределяли на 5 групп - опытные и контрольную. Все цыплята содержались в аналогичных условиях, оптимальных по температуре, освещенности, вентиляции и получали комбикорм ВНИТИП (2000 г). В опытных группах цыплятам с основным рационом скармливали кормовую добавку, изготовленную согласно п. 1 (1-я группа), п. 2 (2-я группа), п. 3 (3-я группа), п. 4 (4-я группа) в дозе 0,4% к основному рациону двумя 10-дневными курсами с интервалом между ними в 10 дней. Для оценки состояния поголовья в опытных и контрольных группах учитывали следующие показатели: весовая - взвешивание молодняка с выведением средней живой массы; ежедневный контроль сохранности, клинического состояния и иммунобиологические показатели крови цыплят в возрасте 49 дней.
Результаты приведены в таблице 1.
Результаты динамических наблюдений за сохранностью и привесами (таблица 1) показали, что назначение заявленной кормовой добавки способствовало увеличению сохранности к концу опыта до 98,7% по сравнению 91,6% и повышению среднесуточного привеса на 11,64% по сравнению с контролем, что свидетельствует о положительном влиянии заявленной кормовой добавки, с одной стороны, на состояние естественной резистентности и уровень развития иммунной системы, как основной составляющей резистентности организма к инфекционным заболеваниям и устойчивости к факторам внешней среды, интегральным критерием которого является показатель сохранности поголовья, и продуктивность, показателями которого являются привесы, с другой.
Пример 2. Оценку эффективности применения различных вариантов заявленной кормовой добавки для роста, развития и сохранности молодняка проводили на поросятах 50-60-дневного возраста, которых разделили на 5 групп по 12 голов в каждой. Поросята 1-й группы получали обычный рацион с добавлением кормовой добавки варианта I по 30 г в сутки в течение 30 дней, поросята 2-й группы получали кормовую добавку вариант II в тех же дозах, 3-й группы - варианта III, 4-й группы - варианта IV в тех же дозах. Поросята 5-й группы получали обычный рацион без кормовых добавок (контрольная).
Установлено, что в 1-й группе прирост живой массы за 30 дней кормления составил 1,05 кг, во 2-й - 1,08, в 3-й - 1,12, в 4-й - 1,26, а в 5-й - 0,68 кг, что ниже по сравнению с 1-й группой в 1,54 раза, 2-й группой - в 1,59 раза, 3 группой - 1,65 раза и по сравнению с четвертой группой - в 1,85 раза. Количество заболеваний в 1-й и 2-й группах составило 3 (30%), 3-й - 2 (20%), в 4-й - 1 (10%) и в 5-й (контрольная) - 5 (50%). Выживаемость поросят в 1-й и 2-й группах составила 91,7%, 3-й и 4-й -100%, в 5-й - 58,3%. Следовательно, включение в основной кормовой рацион поросят заявленной кормовой добавки в количестве 30 г/день в течение 30 дней обеспечивало 91,7-100%-ную сохранность молодняка, снижало заболеваемость желудочно-кишечными и респираторными болезнями в 2,5 раза по сравнению с контрольной группой.
3
Пример 3. Проверка антистрессовой активности кормовой добавки. В качестве стрессирующей модели в опытах использовали транспортный стресс поросят, подлежащих перегруппировке на другие технологические позиции (перевод в группу откорма, находящуюся на расстоянии 10 км от места содержания поросят). В опытах использовали 60 поросят 2-месячного возраста, которых по принципу аналогов разделили на шесть групп. Поросятам 1-й группы в течение 10 дней задавали I вариант заявляемой добавки в дозе 30 г/день, 2-й группы в тех же условиях - II вариант кормовой добавки, 3-й группы - III вариант, 4-й группы - IV вариант, 5-й группы - регламентированный адаптоген - «Дилудин», в той же дозе и кратности применения, а поросята 6-й группы в идентичных условиях получали обычный рацион без кормовых добавок. Эффективность испытуемых препаратов оценивали по изменению клинико-гематологических, иммунологических показателей и состоянию здоровья поросят. Транспортировку животных осуществляли на автомобиле с тентовым полуприцепом в летний период при температуре воздуха внутри кузова 25°С, относительная влажность составляла 86%, концентрация аммиака - 21,5 мг/м.
Наблюдение за животными в пути показало, что транспортировка животных сопровождалась беспокойством, нервным напряжением, частыми актами мочеиспускания и дефекации.
После прибытия животные были взвешены, проведены клинико-гематологические исследования. У поросят отмечали симптомокомплекс общей утомленности, нарушение координации движений, мышечную дрожь, усиление перестальтики желудочно-кишечного тракта (диарея), снижение живой массы у поросят 6-й группы на 7,01%. Следует отметить, что диарея была выражена у всех поросят контрольных групп, в то время как у поросят опытных групп она наблюдалась только у некоторых поросят 1-й и 2-й групп. Восстановление нормального состояния здоровья и клинико-гематологических показателей у поросят 1-й группы наступало через 15-17 часов, 2-й 14-16 часов, 3-й - 13-15 часов, 4-й - 12-14 часов, 5-й через 9-10 часов, у 6-й - через 21 час.
Результаты изучения иммунного статуса по содержанию иммуноцитов (Т- и В-лимфоцитов), фагоцитарной активности нейтрофилов, бласттрансформационной активности лимфоцитов и иммунорегулирующему индексу показали, что все варианты заявленной кормовой добавки обладали иммуностимулирующими и иммуномодулирующими свойствами, которые были более выражены у поросят 4-й группы, получавших IV вариант препарата. Иммуностимулирующий эффект препарата проявлялся в увеличении числа антителосинтезирующих В-лимфоцитов на 7,8% (1-я), 8,0% (2-я), 8,05% (3-я) и 8,6% (4-я) при отсутствии иммуностимуляции у 5-й (получавшие регламентированный адаптоген - «Дилудин») и 6-й групп (контроль). Увеличение числа антителосинтезирующих В-лимфоцитов в 1-4 группах поросят сопровождались усилением бласттрансформирующей активности лимфоцитов на 17% (1-я), 18% (2-я), 19% - (3-я) и 20% (4-я группа), что обусловливало увеличение синтеза иммуноглобулинов на 12,5% у поросят 1-й группы, на 12,9% - у второй, 13,3% - 3-й и 14,7% у 4 группы, по сравнению с таковыми поросят контрольной группы. Иммуномодулирующий эффект испытуемых препаратов характеризовался сохранением значения важнейшего показателя нормального функционирования иммунной системы - иммунорегуляторного индекса - соотношения Т-хелперов и Т-супрессоров (Th/Ts). Так, на фоне применения всех вариантов заявляемой кормовой добавки это значение составляло в пределах 2,19-2,22 (Th/Ts=2,19 (1-я), 2,20 (2-я),2,21 (3-я) и 2,22 (4-я), то у контрольных (5-я получавшая «Дилудин» и 6-я, не получавшая никакие препараты) составляло 2,43 (5-я) и 2,96 (6-я) соответственно. Следовательно, состояние иммунитета у поросят 5-й и 6-й групп соответствовало стресс-реакции, которая сопровождалась снижением числа Т-лимфоцитов на 3,9% (5-я) и 4,6% (6-я), В-лимфоцитов - на 3,7% (5-я) и 4,3% (6-я), что свидетельствует о функциональной недостаточности Т-системы иммунитета. Фагоцитарный индекс у поросят 1-й группы составлял 5,9, у 2-й - 6,07, 3-й - 6,11 и у 4-й - 6,3 против 5,1 и 5,3 у 5 и 6 групп соответственно. Число нейтрофилов, положительно реагирующих на НСТ-тест, у поросят контрольных групп снизилось на 3,9 и 4,2% по сравнению с опытными группами поросят, что свидетельствует об угнетении кислородного метаболизма в нейтрофиллах под воздействием стрессирующего агента.
Пример 4. Проверка радиопротекторной активности испытуемого препарата.
В связи с тем, что все испытуемые варианты заявляемой кормовой добавки обладали адаптогенной активностью, для ограничения количества испытуемых животных при проверке радиопротекторной активности использовали IV вариант препарата, который обладал более выраженными адаптогенными свойствами.
Опыты по проверке радиозащитной активности заявляемой кормовой добавки проводили на 50 подсвинках 5-месячного возраста, которые разделили на 5 групп по 10 голов в каждой. Подсвинки 1-й групы в течении 30 дней до облучения получали кормовой рацион, содержащий 3% к сухому корму заявляемой кормовой добавки (профилактический вариант), 2-й группы в тех же условиях и дозах получали испытуемую кормовую добавку после облучения (лечебный вариант), 3-й группы - в тех же дозах и условиях известную кормовую добавку «Вита-Форце М» до облучения, 4-й группы -в аналогичных условиях и дозах известную кормовую добавку после облучения. Облученные подсвинки 5-й группы никаких препаратов не получали и они служили контролем облучения.
За 30 дней до (профилактический вариант) и через 30 дней (лечебный вариант) после облучения животные всех групп были подвергнуты внешнему гамма-облучению в дозе 4,5 Гр, вызывающую тяжелую степень острой лучевой болезни.
Установлено, что выживаемость в 1-й группе составила 80%, во второй - 70%, в 3-й 60% и в 4-й - 50% при радиационной гибели всех подсвинков в 5-й группе (облученный контроль).
Как видно из сопоставительного анализа прототипа и заявляемого, для достижения 80%-ной защиты при использовании препарата «Вита-Форце М» необходимо было использовать дозу препарата в количестве 5% от кормового рациона, что в 1,66 раза больше расхода заявленной добавки.
Пример 5. Проверка сорбционной активности заявляемой кормовой добавки по отношению к радиоизотопу цезия.
Для оценки сорбционной (радионуклидсвязывающей и выводящей из организма) активности препарата, опыты проводили на 36 белых крысах, разделенных на 6 групп по 6 животных в каждой. Животным всех групп трехкратно внутрижелудочно вводили водный раствор цезия-137 с суммарной активностью 1000 Бк/кг. После завершения затравки в течение 20 дней животным 1-й группы рацион с добавлением кормовой добавки «Вита-Форце М», 2-й - заявляемую кормовую добавку (вариант IV), 3-й - бентонит, 4-й - опоку, 5-й - смесь бентонита и опоки 1:1. Затравленные животные 6-й группы получали обычный рацион без добавок.
Результаты радиометрии органов и тканей убитых через 20 дней после начала кормления животных показал, что остаточная радиоактивность в критическом органе - мышечной ткани животных 1-й группы (Вита-Форце М) составила 396,3 Бк/кг, 2-й (заявленная добавка) - 293,5 Бк/кг, 3-й - 301,5 Бк/кг, 4-й - 572,3 Бк/кг, в 5-й - 387,5 Бк/кг и в 6-й (контроль затравки) - 799,3 Бк/кг.
Таким образом, по радиоцезийсвязывающей активности заявляемый препарат превосходит известный препарат в 1,35 раза и регламентированный сорбент (бентонит) в 1,02 раза. Хотя по цезийсвязывающей активности сорбент опока уступает традиционному сорбенту в 1,85 раза, однако при сочетании ее с бентонитом происходит существенное повышение коэффициента сорбции - в 1,48 по сравнению с изолированным применением сорбента опоки. Предлагаемый препарат, в отличие от минеральных сорбентов (бентонит и опока) наряду с сорбционными свойствами обладает лечебно-профилактическими свойствами, повышая радиопротективность как при профилактическом (за 30 дней до облучения), так и лечебном(в течение 30 дней после облучения) применении заявленного препарата.
Пример 6. Проверка сорбционной активности заявленной кормовой добавки по отношению к микотоксинам.
50
50
В качестве модели микотоксикоза использовали поступление с кормом основных микотоксинов: Т-2 токсина и зеараленона. Исследования проводили на 50 белых крысах, разделенных на 5 групп по 10 животных в каждой. Животные 1-й группы получали с рационом Т-2 токсин в дозе 0,13 мг/кг (1/10 ЛД), 2-я зеараленон в дозе 0,14 мг/кг (1/10 ЛД), 3-я Т-2 токсин + заявленную кормовую добавку, 4-я зеараленон + кормовую добавку, 5-я Т-2 токсин + бентонит, 6-я зеараленон + опоку, 7-я зеараленон + Т2 токсин + кормовую добавку. Количество кормовой добавки и бентонита составляло 1%, а опоки - 0,5% соответственно.
Через 20 дней после начала кормления микотоксинсодержащими кормами животные всех групп были убиты, из органов и тканей были взяты пробы на исследование содержания микотоксинов в организме.
Результаты индикации Т-2 токсина и зеараленона методом масспектрометрии экстракта органов и тканей подопытных и контрольных крыс на фоне применения минеральных сорбентов показали, что содержание Т-2 токсина у получавших заявляемую кормовую добавку составляло 5,5% (3-я группа), заераленона 4,9% (4-я группа) от вводимого количества микотоксина, у получавших Т2 токсин и бентонит - 10,7% (5-я группа), получавших заераленон и опоку -6,7% (6-я группа), у получавших кормовую добавку на фоне сочетанного поступления в организм Т2 токсина и заераленона (7-я группа) составляет 5,2% от вводимого количества.
Таким образом, кормовая добавка, содержащая опоку, значительно (почти в 2 раза) повышает сорбционную активность регламентированного сорбента - бентонита как при изолированном, так и при сочетанном поступлении в организм основных микотоксинов: Т2 токсина и заераленона.
Пример 7: Проверка антибактериальной активности препарата.
8
Для проверки антибактериальной активности препарата, готовили водные экстракты с последующим разведением его 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, 1:128, 1:256, 1:512. Параллельно готовили водные экстракты препарата «Вита-Форце М» в качестве контроля. Препараты в указанных концентрациях вносили по 1 мг в пробирки, содержащего микробные клетки внутреннего штамма возбудителя эшерихиоза E.coli «КВ-1» с концентрацией 5·10 м.к./мл и термостатировали смесь в течение 24 ч, проводя контрольные высевы проб из каждой пробирки с соответствующим разведением экстракта и тестируемого микроорганизма через 1, 2, 4, 8, 16, 20, 24 ч. Посевы просматривали ежедневно в течение 10 сут, регистрируя рост колоний и сравнивая с контрольными пробами.
Установлено, что гибель тест-культуры при применении экстракта заявляемого препарата наступало за 60 мин при ее контакте с разведением экстракта 1:32. В отличие от заявляемого, в контрольных пробах с использованием экстракта известного препарата «Вита-Форце М» гибель тест-культуры наступала за 4 часа при разведении препарата 1:8, что уступает заявляемому по изучаемому показателю в 4 раза. Повышение антибактериальной активности предлагаемого препарата обусловлено суммацией микробиоцидных эффектов агентов аписогенного (подмор пчел), бактериального (бифидумбактерин), микогенного (чайный гриб) и сорбционно-детоксикационного(опока, бентонит) происхождения.
Таким образом, предлагаемая кормовая добавка для сельскохозяйственных животных и птицы позволяет повысить биологическую активность препарата с одновременным снижением его себестоимости.
Включение в состав кормовой добавки активированных бентонита, хитина и антидиарина позволяет расширить возможности применения препарата при различных формах патологии животных, вызванных агентами физической, химической и биологической природы.
Экономический эффект от внедрения препарата в животноводство и ветеринарную медицину складывается из повышения эффективности кормления, увеличения привесов, сохранности поголовья молодняка, профилактики болезней инфекционной и неинфекционной природы, протекающих по типу желудочно-кишечных расстройств, поражения респираторной системы, а также в условиях изменения экологической ситуации в отдельных регионах страны.
Были проведены испытания предлагаемой кормовой добавки в животноводческих хозяйствах Тукаевского района РТ, которые показали увеличение привеса на 21,3% и сохранности молодняка на 31,5%. Намечено внедрение предлагаемой добавки в животноводческих хозяйствах Республики Татарстан в 2014 г.