Влияние «Гепатофита» на холеретическую реакцию при экспериментальном холелитиазе

ческих функций у больных, перенесших анестезию с применением дипривана и кетамина // Общая реаниматология. — 2005. — Т.1, №2. — С.48-52.

4. Захаров В.В. Когнитивные нарушения в неврологической клинике // Фармация. — 2006. — № 7 (122). — С. 37-43.

5. Майборода А.А., Калягин А.Н., Зобнин Ю.В., Щербатых А.В. Современные подходы к подготовке оригинальной статьи в журнал медико-биологической направленности в свете концепции «доказательной медицины». // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). — 2008. — Т. 76. №1. — С. 5-8.

6. Николаев С.М., Дымшеева Л. Д., Николаева И.Г., Николаева Г.Г. Лекарственное средство, обладающее ноотропной активностью. Патент на изобретение № 2331432 С1 от 20.08.2007.

7. Николаева И. Г., Дымшеева Л.Д., Николаев С.М., Николаева Г.Г Антиоксидантная активность нового ноотроп-ного средства «Полиноофит» и изучение его флавоноидного состава // Химико-фармацевтический журнал. — Т. 40, №10. — 2007. — С. 41-45

8. РазуваеваЯ.Г., ДымшееваЛ.Д., ДамдиноваГ.Х., Николаева И.Г Морфофункциональная оценка нейропротекторного действия комплексного растительного средства «Полиноофит» при гипобарической гипоксии // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). — 2006. — Т. 62, № 4. — С. 63-65.

9. Сергиенко В.И., Бондаренко И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. — М., 2006. — 256 с.

10. Шнайдер Н.А. Послеоперационная когнитивная дисфункция // Неврологический журнал. — 2005. — Т. 10, № 4. — С. 37-43.

11. Шнайдер Н.А. Когнитивные нарушения у пациентов молодого возраста после операций в условиях общей анестезии // Міжнародний неврологічний журнал. — 2006. — № 2 (6). — С. 125-129.

12. Шнайдер Н.А., Салмина А.Б. Биохимические и молекулярные механизмы патогенеза послеоперационной когнитивной дисфункции // Неврологический журнал. — 2007. — № 2. — С. 41-47.

13. Conet J., Raeder J., Rasmussen L.S., et al. Cognitive dysfunction after minor surgery in the elderly //Acta Anesth. Scand. — 2003. — Vol.47, №10. — Р.1204 — 1210.

14. Johnson T., Monk T., Rasmussen L.S., et al. Postoperative cognitive dysfunction in middle-aged patients // Anesthesiology. — 2002. — Vol. 96, №6. — P. 1351-1357.

15. Kitamure R., Hirakate H., Ocuda H., et al. Tiopental ehances human platelet aggregation by increasing arachidonic acid release //Can. J. Physiol. and Pharmacol. — 2003. — Vol. 79, № 10. — Р.854-860.

Адрес для переписки: 670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, ИОЭБ СО РАН.

Тел.: 8(3012)433713, e-mail: tatur75@mail.ru Разуваева Янина Геннадьевна — к.б.н., научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН;

Итыгилов Михаил Юрьевич — аспирант кафедры клинической фармакологии и традиционной медицины БГУ; Чукаев Сергей Александрович — к.м.н., заведующий кафедрой клинической фармакологии и традиционной медицины БГУ, доцент;

Торопова Анюта Алексеевна — к.б.н., научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН;

Николаева Ирина Геннадьевна — к.ф.н., старший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований ИОЭБ СО РАН

©НИКОЛАЕВ С.М., САМБУЕВА З.Г., ЗАНДАНОВ А.О., МАРХАЕВА Л.Э., ЧЕХИРОВА Г.В. — 2009

ВЛИЯНИЕ «ГЕПАТОФИТА» НА ХОЛЕРЕТИЧЕСКУЮ РЕАКЦИЮ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ХОЛЕЛИТИАЗЕ

С.М.Николаев1-2, З.Г. Самбуева1, А.О. Занданов2, Л.Э. Мархаева2, Г.В. Чехирова1 ^Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л. Л. Убугунов; 2Бурятский государственный университет, г. Улан-Удэ, ректор — д.п.н., чл.-корр. РАО, проф. С.В. Калмыков)

Резюме. Курсовое введение комплексного растительного средства «гепатофит» на фоне экспериментального хо-лелитиаза оказывает выраженное антилитогенное действие.

Ключевые слова: «гепатофит», экспериментальный холелитиаз, желчь.

INFLUENCE OF COMPLEX PHYTOREMEDY «HEPATOPHYTH» ON CHOLERETIC REACTION IN EXPERIMENTAL CHOLELITHIASIS

S.M. Nikolaev1'2, Z.G. Sambueva1, A.O. Zandanov2, L.E. Markhaeva2, G.V. Chekhirova1

Summary. Complex phytoremedy «Hepatophyth» on a background of experimental cholelithiasis in course treatment shows expressed antilythogenic action.

Key words: complex plant remedy Hepatophyth, experimental cholelithiasis, bale.

Заболевания желчевыводящих путей являются весьма распространенными, одним из них является холелитиаз в различных формах. При рациональной фармакотерапии холелитиаза особое внимание уделяется изучению внутриклеточных транспортных систем гепатоци-тов, как секреторных, так и экскреторных процессов в печени, в частности, ее желчевыделительной функции. Нарушение любого из синтетических или секреторных звеньев механизма жёлчевыделения приводит к нарушению равновесия биохимического состава жёлчи, что ведет к образованию в желчи осадка разнообразной формы в виде взвеси микролитов, сладжа и конкреме-тов в просвете желчного пузыря [1, 2, 3]. Для профилактики и лечения холелитиаза наряду с другими методами широко применяются препараты, изготовленные из растительного сырья, которые являются практически

нетоксичными при длительном применении и обладают широким спектром фармакологических свойств. По данным трактатов тибетской медицины многие растительные средства применяются при заболеваниях органов гепатобилиарной системы, в частности, многокомпонентные фитосредства, одним из которых является «гепатофит» (условное название) [11]. «Гепатофит» получен из корневищ с корнями девясила высокого, корней софоры желтоватой, корневищ имбиря лекарственного, древесины бузины сибирской, корневищ с корнями кровохлебки лекарственной, плодов боярышника красного и яблони ягодной в соотношении 2 : 2 : 1 : 4 : 2 : 2 : 2 [5] экстракцией 40% спиртом этиловым.

Целью настоящей работы явилось определение влияния «Гепатофита» на холеретическую реакцию у собак при экспериментальном холелитиазе.

Таблица 1

Динамика осаждения конкрементов на шарики фистул у собак при экспериментальном холелитиазе

Группы животных Масса осажденных конкрементов на шариках, мг

7-е сутки 14-е сутки 21-е сутки 30-е сутки

Контроль (Н2О), п=4 93,3±6,4 342,3±11,2 379,0±25,1 290,5±21,0

«Гепатофит», п=4 40,0±3,50 154,6±9,3* 186,3±8,7* 154,0±14,6*

Антилитогенный сбор, п=4 77,2±5,1* 296,3±13,4* 332,5±20,7 305,6±23,4

Примечание: здесь и далее: * — различия значимы по сравнению с данными у животных контрольной группы при р<0,05.

Материалы и методы

Эксперименты по воспроизведению холелитиаза проведены внутрижелудочным ежедневным введением в течение 30 дней тетрациклина гидрохлорида (40 мг/ кг) [8] собакам с массой 8-12 кг Предварительно собакам были установлены фистулы с тремя поли-стерольными цариками с неровной поверхностью, прикрепленных титановой проволокой к фистульной пробке [10]. Начиная со второго дня опыта «гепатофит» вводили животным внутрижелудочно в дозе 0,1 г/кг массы в форме водного раствора 1 раз в день в течение 30 дней.

Как препарат сравнения другой группе животных вводили антилитогенный сбор, состоящий из коры крушины, листьев мяты и трав зверобоя и чистотела [9] в виде настоя (1:10) в объеме 10 мл/кг по аналогичной схеме. Собакам контрольной группы вводили очищенную воду в эквиобъёмном количестве. Интервалы между введениями гепатофита, антилитогенного сбора, воды и тетрациклина гидрохлорида составляли 5-6 часов. Холеретическую рекцию у собак оценивали по количеству выделенной желчи за 4 часа наблюдения, содержанию в желчи билирубина (3), холестерина, желчных кислот (1), а также продукта пе-рекисного окисления липидов — малонового диальдегида (МДА) в желчи (4). Исследования по определению влияния указанного средства проводили на 14, 21, и 30 сутки опыта по разности массы шариков, вставленных в фистулы, количеству выделенной желчи, а также по биохимическим показателям желчи.

Статистическая обработка проводилась с использованием критерия Мана-Уитни в программе 81аИз11са у.8.0.

Результаты и обсуждение

В результате проведенных исследований установлено, что курсовое применение «гепатофита» в экспериментально — терапевтической дозе оказывает благоприятное влияние на желчевыделительную функцию печени животных. В частности, у собак, которым вводили «Гепатофит», масса шариков в фистулах была на 55, 51 и 47% меньше таковой у собак контрольной группы соответственно на 14,

21 и 28-е сутки опыта, в то время как у животных, получавших антилитогенный сбор, масса шариков в фистулах была в среднем на 24% меньше (табл. 1).

При исследовании желчи установлено, что объем желчи у собак, получавших испытуемое средство, на 7-е сутки опыта превышал объем желчи у животных контрольной группы на 81%, а в последующие сроки опыта — на 35-43% (табл. 2).

Курсовое применение «Гепатофита» способствовало снижению литогенности желчи, о чем свидетельствовала положительная динамика ее биохимических показателей (табл. 3). В частности, в первые два срока наблюдения суммарная концентрация желчных кислот у животных, получавщих испытуемый экстракт, превышала на 20% таковую у животных контрольной группы, у которых она продолжала снижаться в течение всего опыта. Содержание билирубина в желчи значительно снижалось начиная с 21-х суток опыта, а уменьшение

экскреции холестерина с — 14-х суток, суммарная концентрация которого было ниже контроля на 37% и в последующие сроки — на 40%. Наиболее объективным показателем литогенности желчи является холато-холестериновый коэффициент (ХХК), характеризующий коллоидную стабилизацию желчи [1]. Данный показатель у животных, получавших «Гепатофит», на 7-е сутки опыта превышал таковой у контрольных животных на 25 %, а в последующие сроки — в 2 раза.

При холестазе компоненты желчи оказывают токсическое действие на гепатоциты, блокируя окисление жирных кислот, результатом чего является дальнейшее нарушение функции гепатоцитов и стимуляция процессов перекисного окисления липидов. Содержание в желчи малонового диальдегида у собак, получавших испытуемое средство, было на 55, 64, 41 и 43% ниже, чем у животных контрольной группы соответственно на 7-30-е сутки опыта.

Таблица 2

Таким образом, явления холестаза приводят к нарушению функций желчевыделительных путей, что требует применения антихолестатических средств, которые не только способствовали бы восстановлению пассажа желчи, но также благотворно влияли бы на функциональное состояние гепатоцитов. Курсовое лечебно-профилактическое применение «Гепатофита» ингибирует развитие холелитиаза, предотвращая нарушение секреторных звньев механизма желчевыделения, а также устраняет билиарную недостаточность, стимулируя экскрецию билирубина и холестерина с желчью. Установленное фармакотерапевтическое влияние «ге-патофита» при холелитиазе связано с его угнетающим действием на свободнорадикальное окисление биомакромолекул, стимуляцией секреции желчных кислот, благодаря содержанию в нем биологически активных веществ: флавоноидов, органических кислот, витаминов, полисахаридов и других природных соединений [5]. Этим можно объяснить его литогенное влияние.

Таблица 3

Влияние «гепатофита» на биохимический состав желчи у собак при экспериментальном холелитиазе

Группы животных Били- рубин, мг% Желчные кислоты, мг% Холе- стерин, мг% ХХК МДА, усл. ед

Интактная 30 855,0 36 24 150

7-е сутки

Контроль (Н2О), (п=4) 28 570,0 45,2 12,6 400

«Гепатофит», (п=4) 26 684,0 43,2 15,8 180

Антилитоген-ный сбор, (п=4) 24 541,5 42,4 12,8 200

14-е сутки

Контроль (Н2О), (п=4) 20 524,4 48,0 10,9 330

«Гепатофит», (п=4) 18 630,1 30,0 21,0 120

Антилитогенный сбор, (п=4) 22 570,0 31,2 18,3 240

21-е сутки

Контроль (Н2О), (п=4) 20 461,7 43,2 10,7 320

«Гепатофит», (п=4) 12 664,3 26,0 25,5 190

Антилитогенный сбор, (п=4) 14 547,2 35,6 15,4 200

30-е сутки

Контроль (Н2О), (п=4) 19 484,6 46,4 10,4 260

«Гепатофит», (п=4) 15 755,0 30,8 24,5 150

Антилитогенный сбор, (п=4) 15 558,6 31,6 17,6 150

Влияние «гепатофита» на количество желчи у собак при экспериментальном холелитиазе

Группы животных Количество желчи в желчном пузыре

7-е сутки 14-е сутки 21-е сутки 30-е сутки

Контроль (Н2О), (п=4) 0,37±0,04 0,37±0,05 0,50±0,03 0,47±0,02

«Гепатофит», (п=4) 0,67±0,06* 0,50±0,03* 0,62±0,05 0,62±0,03*

Антилитогенный сбор, (п=4) 0,37±0,05 0,30±0,05 0,47±0,03 0,51±0,03

ЛИТЕРАТУРА

го действия инсулина// Проблемы эндокринологии. — 1956. — №6. — С. 75-78.

7. Скакун Н.П., Высоцкий Н.Ю. Применение метода с тио-барбитуровой кислотой для определения продуктов липопе-роксидации в желчи// Новое в лабораторной диагностике хронических болезней внутренних органов: тез. докл. 3-го съезда респ. науч. общ-ва врачей лаборантов. — Ужгород,1983. — С. 386-387.

8. Скуя Н.А. Xронические заболевания желчных путей (патогенез и лабораторная диагностика). — Л.: «Медицина». — 1972. — 229 с.

9. Соколов С.Я. Фитотерапия и фито фармакология: Руководство для врачей. М.: Медицина, 2000. — 976 с.

10. Шантанова Л.Н., Николаев С.М. К патогенезу желчнокаменной болезни// Моделирование и фармакотерапия заболеваний органов пищеварения. — Улан-Удэ: БНЦ СО РАН СССР, 1990. — С. 109-119.

11. Дандаржав Д., Байгалмаа Р. Монгол ардын эмнэлгийн эмийн жор. — Ондорхаан. — 1992. — 250 с.

Адрес для переписки: тел.: 8(3012)433713 E-MAIL: smnikolaev@mail.ru Николаев Сергей Матвеевич — д.м.н., профессор, заведующий Отделом биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН;

Самбуева Зинаида Гомбожаповна — к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН;

Занданов Александр Октябревич — к.м.н., зав. кафедрой пропедевтики Медицинского факультета БГУ; Мархаева Лариса Эдуардовна — старший преподаватель кафедры пропедевтики Медицинского факультета БГУ; Чехирова Галина Владимировна — к.фарм.н., старший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований ИОЭБ СО РАН.

© ПОТРЯСАЙ К.А., КОПНИН А.А., ДАРГАЕВА Т.Д., МАРКАРЯН А.А., СОКОЛЬСКАЯ Т.А. — 2009

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АРБУТИНА В СЫРЬЕ РОДОДЕНДРОНА ЗОЛОТИСТОГО (RHODODENDRON AUREUM GEORGI) МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОЙ ХРОМАТОРАФИИ

К.А. Потрясай1, А.А. Копнин2, Т.Д. Даргаева2, А.А Маркарян1, Т.А. Сокольская2 ^Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, ректор — д.м.н., проф., акад. РАН и РАМН М.А. Пальцев, кафедра фармхимии с курсом социальной фармации, зав. — д.ф.н., проф. А.А. Маркарян; ^Всероссийский НИИ лекарственных и ароматических растений

Резюме. Целью нашей работы являлось обнаружение арбутина в извлечениях из свежего и высушенного сырья рододендрона золотистого, а также разработка методики количественного определения методом ВЭЖХ. В результате исследований нами предложены хроматографические условия разделения арбутина и условия пробоподготов-ки сухого и свежего сырья рододендрона золотистого. Согласно проведенным исследованиям содержание арбутина должно быть не менее 1,0 %. Воспроизводимость методики количественного определения арбутина была установлена на примере одного образца сырья в 5 независимых повторностях. Относительная ошибка методики определения содержания арбутина с 95%вероятностью составляет ±0,904%для свежего сырья и ±1,03%для высушенного сырья. Для проверки отсутствия систематической ошибки методики были проведены эксперименты с добавками арбутина к навеске высушенного сырья перед началом экстракции.

Ключевые слова: рододендрон золотистый, арбутин, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ).

QUANTATIVE DEFINITION OF ARBUTIN IN THE RAW MATERIALS OF RHODODENDRON AUREUM GEORGI BY THE METHOD OF HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY

K.A. Potrjasaj, A.A. Kopnin, T.D. Dargaeva, A.A. Markarjan, T.A. Sokolskaya (All-Russian Scientific-Research Institute of Medicinal and Aromatic Plants,

Moscow Medical Academy named after I.M. Sechenov)

Summary. The purpose of our work was detection of arbutin in extraction from the fresh and dried up raw material of a rhododendron golden (Rhododendron aureum Georgi), and also development of the methods of quantitative definition by method of high-performance liquid chromatography (HPLC). As a result of the researches there have been picked up chromatography conditions of division of arbutin and conditions of preparation of test dry and fresh raw material of a rhododendron golden. According to the researches the content of arbutin should be not less than 1,0 %. Reproducibility of the methods of quantitative definition of arbutin was established on an example of one sample of raw material in 5 independent repetitionc. The relative mistake of the methods of definition of the content of arbutin with 95 %probability a mounts to ± 0,904 %for fresh raw material and ± 1,03 %for the dried up raw material. For check of absence of a regular mistake of the methods , the experiments with additives of arbutin to the dried up raw material before the beginning extraction have been conducted.

Kew words: rhododendron aureum Georgi, arbutin, high-performance liquid chromatography (HPLC).

Рододендрон золотистый (Rhododendron aureum кустарником, образующим заросли по каменистым

Georgi) — представитель рода Rhododendron L. семейства склонам и скалам, преимущественно в высокогорном

вересковые (Ericaceae), являющийся, главным образом поясе Восточной Сибири и Дальнего Востока, включая

1. Галкин В.А. Профилактика холелитиаза в практике терапевта поликлиники// Терапевтический архив. — 2007. — №1. — С. 23-28.

2. Лазебник Л.В., Ильченко А.А. Желчнокаменная болезнь. Пути решения проблемы// Терапевтический архив. — 2005. — № 2. — С. 5-10.3.

3. Лузина В.Е. Влияние некоторых гормонов на развитие желчнокаменной болезни// Забайкал. Мед. Вест. — 2002. — № 3. — С. 31-34.

4. Мирошниченко В.П., Громашевская Л.Л., Касаткина М.Г и др. Определение содержания желчных кислот и холестерина в желчи //Лаб. дело. — 1978. — №3. — С.149-153.

5. Патент РФ № 215591237 А61Р1/16. Опубл. 20. 11. 2000. Бюлл. 32. «Способ получения средства, обладающего желчегонной и противовоспалительной активностью».

6. Скакун Н.П. Нейрогуморальный механизм желчегонно-