Исследование уровня некоторых адгезивных молекул при диабетических микроангиопатиях

ИССЛЕДОВАНИЕ УРОВНЯ НЕКОТОРЫХ АДГЕЗИВНЫХ МОЛЕКУЛ ПРИ ДИАБЕТИЧЕСКИХ МИКРОАНГИОПАТИЯХ

И.К. Закляков

Отделение ультразвуковой диагностики ГУЗ АМ ОКБ

ул. Татищева, 2, Астрахань, Россия, 114056

М.А. Киселева

Кафедра внутренних болезней с курсом эндокринологии Факультет постдипломного образования ГОУ ВПО АГМА Росздрава Бакинская, 111, Астрахань, Россия, 414000

В работе изучалась возможность использования адгезивных молекул для диагностики микрососудистых осложнений у больных сахарным диабетом типа 1 (СД1). Определялся уровень растворимых форм молекулы межклеточной адгезии-1 (sICAM-1) сосудистой молекулы адгезии-1 (sVCAM-1) и Е-селектина в сыворотке крови 70 больных СД1 и 20 здоровых лиц. Выявлено повышение уровней молекул sICAM-1 и sVCAM-1 у больных СД1, коррелирующее с наличием и степенью тяжести поражения микрососудистого русла. Достоверных изменений уровня растворимой формы Е-селектина в сыворотках крови больных СД1 по сравнению с группой контроля не выявлено.

Одним из направлений современной диабетологии является поиск новых способов максимально ранней, доклинической диагностики микрососудистых осложнений сахарного диабета типа 1 (СД1) — диабетических ретино- и нефропатии (ДР и ДН) как наиболее специфичных и значимых микроангиопатий. Данная позиция обусловлена тем, что только начальные стадии диабетических микроангио-патий при достижении компенсации углеводного обмена и своевременно начатой адекватной терапии способны регрессировать.

За последние десятилетия в диабетологии произошли существенные изменения во взглядах на патогенез как самого сахарного диабета, так и его микрососудистых осложнений. Большой интерес вызвало открытие в восьмидесятых годах нескольких семейств адгезивных молекул. Опосредуя процессы межклеточных взаимодействий, молекулы адгезии участвуют в патогенезе целого ряда заболеваний [1].

В единичных исследованиях проводилось изучение адгезивных молекул и у больных СД, при этом наибольшее внимание уделялось молекулам суперсемейства иммуноглобулинов и селектинам ^-селектину и E-селектину) [3, 4]. Изначально данным молекулам, по мнению исследователей, отводилась защитная функция. Однако при дальнейшем изучении адгезивных молекул было выяснено, что их функция заключается не в ингибировании активированных лейкоцитов, а в опосредовании их триггирования и прилипания при пассаже из циркуляции

Закляков И.К., Киселева М.А. Исследование уровня некоторых адгезивных молекул.

в различные ткани. Обнаруженная при морфологических исследованиях инфильтрация лейкоцитов в стенках микрососудов у больных СД1 указала на возможное участие молекул адгезии в развитии диабетических микроангиопатий [1].

Каждая из молекул адгезии участвует в определенном этапе каскадных процессов взаимодействия эндотелия и лейкоцитов. Так, например, фаза роллинга обеспечивается только L-селектинами, приводящая в дальнейшем к более тесной адгезии лейкоцитов к эндотелию, опосредованной взаимодействием Е-селектинов с компонентами мембраны лейкоцитов. Фаза сильной адгезии клеток обусловлена интегринзависимым связыванием лейкоцитов с молекулами межклеточной адгезии (ICAM-1, ICAM-2) и сосудистой адгезии (VCAM-1) эндотелиальных клеток. Фаза миграции лейкоцитов в ткани происходит под влиянием цитокинов, обладающих хемотаксическими свойствами.

Указанные молекулы могут существовать в мембраносвязанной и растворимой формах (sICAM-1, sVCAM-1, растворимая форма Е-селектина). Последние появляются в сыворотке крови в результате протеолиза и слущивания молекул с мембраны продуцирующих их клеток [2].

Отсутствие фундаментальных исследований, посвященных изучению роли молекул межклеточной адгезии в развитии диабетических микроангиопатий, предполагает дальнейшее изучение этого вопроса, как в теоретическом, так и в клиническом аспектах. В связи с вышесказанным, на нашей кафедре проведено комплексное исследование, посвященное изучению роли молекул адгезии в развитии микрососудистых осложнений СД1 с проведением сравнительной оценки уровня растворимых форм ICAM-1 или VCAM-1 и Е-селектина на разных стадиях ДР и ДН.

Цель данного исследования направлена не только на продолжение изучения патогенеза диабетических микроангиопатий, но и на поиск новых диагностических методик прогнозирования появления и течения микрососудистых осложнений СД.

Материалы и методы. Было обследовано 70 пациентов с СД типа 1 (39 мужчин и 31 женщина) и 20 лиц контрольной группы (10 мужчин и 10 женщин). Средний возраст в обеих группах составил 26,5 лет.

В исследование не были включены пациенты с другими аутоиммунными заболеваниями, воспалительными очагами любой локализации, атеросклерозом, болезнями печени, неопластическими заболеваниями и заболеваниями системы крови (патологические состояния, при которых у больных, по данным литературы, отмечается повышение уровня растворимых форм данных адгезивных молекул в сыворотке крови).

Все больные СД типа 1 были разделены на три подгруппы:

1-я подгруппа (п = 23) — с отсутствием микрососудистых осложнений;

2-я подгруппа (п = 23) — с начальными стадиями поражения микрососудистого русла (непролиферативной ретинопатией и (или) нефропатией на стадии микроальбуминурии);

3-я подгруппа (п = 24) — с выраженными сосудистыми осложнениями (пре-пролиферативной или пролифератвной ретинопатией и (или) нефропатией на стадии протеинурии). У больных с неодинаковой степенью развития микроангиопа-тий в разных сосудистых бассейнах критерием включения во вторую и третью

группы являлась большая стадия поражения глаз или почек. Все пациенты были сопоставимы по полу, возрасту, степени компенсации СД.

Уровень sICAM-1, sVCAM-1 и растворимой формы Е-селектина в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом (реактивы фирмы Bender MedSystems, Австрия).

Полученные результаты. В ходе исследования нами обнаружено достоверное (p < 0,05) повышение уровня sICAM-1 и sVCAM-1 во всех подгруппах больных СД1 по сравнению с контрольной группой. Достоверных различий уровня растворимой формы Е-селектина между группами контроля и больными СД1 нами не выявлено (табл. 1).

Как видно из табл. 1, значения растворимых форм обеих молекул возрастают в группах больных с различными стадиями микроангиопатий по сравнению с больными, не имеющими признаков поражения микрососудистого русла. Причем, степень тяжести поражения микрососудистого русла прямо коррелировала с уровнями sICAM-1 и sVCAM-1.

Особо важным является тот факт, что в группе больных без признаков микрососудистых осложнений наблюдалось достоверное повышение уровня sICAM-1 и sVCAM-1 по сравнению с группой контроля p < 0,05), что подтверждает чувствительность этого теста на ранней, доклинической стадии микроангиопатий.

Таблица 1

Средние уровни sICAM-1 и sVCAM-1 у больных СД типа 1 в зависимости от степени поражения микрососудистого русла

Показатель Контрольная группа (n = 20) Больные СД 1 типа

1-я группа

Уровень вЮАМ-1 в сыворотке крови

Уровень вУСАМ-1 в сыворотке крови

Уровень растворимой формы Е-селектина в сыворотке крови

Примечания. р1 — достоверность различия показателей уровня молекул у больных СД1 по сравнению с контрольной группой. р2 — достоверность различия показателей уровня молекул у больных СД1 по сравнению с данными 1-й группы. р3 — достоверность различия показателей уровня молекул у больных СД1 по сравнению с данными 2-й группы.

Выводы. Повышение уровней sICAM-1 и sVCAM-1 у больных СД типа 1, коррелирующее со стадией ДР и ДН, указывает на важную роль деструкции эн-

Закляков И.К., Киселева М.А. Исследование уровня некоторых адгезивных молекул..

дотелия в процессе развития диабетических микроангиопатий и возможность использования данных тестов для определения наличия и степени тяжести поражения микрососудистого русла.

ЛИТЕРАТУРА

[1] Дедов И.И., Шестакова М.В., Миленькая Т.М. Сахарный диабет: ретинопатия, нефро-патия. — М.: Медицина, 2001. — 176 с.

[2] Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия. — М.: Медицина, 1995. — 224 с.

[3] Fasching P., Veitl M., Rohac M. et al. Elevated concentrations of circulating adhesion molecules and their association with microvascular complications in insulin-dependent diaetes mellitus // J. Clin. Endocrinol. Metab. — 1996. — V. 81(12). — P. 4313—4317.

[4] Mceleod D.S., Lefer D.J., Merges C., Luttly G.A. Enhanced expression of intracellular adhesion molecule-1 and P-selectin in the diabetic human retina and choroid // Am. J. Pathol. — 1995. — V. 147. — № 3. — P. 642—653.

THE INVESTIGATION OF THE SOME ADHESIVE MOLECULES (S ICAM-1, SVCAM-1) IN DIABETIC MICROANGIOPATHY

I.K. Zaklyakov

Division of Sonarography Aleksandro-Mariinskaya Clinical Hospital

Tatisheva str., 2, Astrakhan, Russia, 414056

M.A. Kiseleva

Department of Internal Diseases with the Course of Endocrinology Faculty of the Postgraduate Education Astrakhan State Medical Academy Bakinskaja str., 121, Astrakhan, Russia, 414000

The possibility of diagnostic value of adhesive molecules in vascular complications in patients with diabetes mellitus was investigated. The study analyzed the levels of adhesive molecules (s ICAM 1 and sVCAM-1) in serum from 90 samples. 70 samples were from patients with diabetes mellitus and 20 samples were from non-diabetes patients. The increasing levels of adhesive molecules were detected in patients with diabetes mellitus. Thus, our findins were proved what increasing levels of adhesive molecules are correlated with presence and degree of damages of micro vessels. We did not find the reliable difference of levels of E-selectine in patients with diabetes mellitus and in non-diabetes mellitus group.

Key words: diabetes mellitus, microangiopathy, adhesive molecules.