Модуляция дипироксимом реакции гиперчувствительности замедленного типа при острой интоксикации дихлорэтаном

Статья

различия в структуре фаций диагностикума «ЛИТОС-системы» и др. биожидкостей локализованы чаще в краевой зоне, надо определить гидродинамические явления, которые там происходят.

Выводы. В каплях воды и водных растворах, содержащих различные соли и белки, при высыхании происходят гидродинамические процессы, характеризующиеся образованием конвекционных потоков тороидальной формы. Циркуляционное течение типа тороидального вихря, возникающее в каплях воды и водных растворов, помещенных на горизонтальную подложку и испаряющихся при комнатной температуре, имеет конвективную природу и связано с термодинамическими явлениями, причем за его возникновение могут быть ответственны различные механизмы. В периферийной части капли образуется зона застоя. Возникновение конвективной циркуляции характерно для очень широкого класса ситуаций и наблюдается в каплях разнообразных биожидкостей, расположенных на горизонтальных поверхностях и высыхающих при комнатной температуре.

Литература

1. Волынский М.С. Необыкновенная жизнь обыкновенной капли.- М.: Знание .-1986.- 144 с.

2. ГегузинЯ.Е. Капля.- 2-ое изд., М.: Наука.- 1977.- С.152.

3. Гетлинг А.В. Конвекция Релея - Бенара. Структуры и динамика.- М.: Эдиториал УРСС, 1999.- 248с.

4. Залеский М.Г. // Сб. науч. тр. 2-й Всерос. научно-практ. конф. Морфология биологических жидкостей в диагностике и контроле эффективности лечения.- М., 2001.- С. 53-56.

5. Залеский М.Г. и др. //Клин. лаб. диагностика.- 2004.-№8.- С.20-24.

6. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. // 1-й съезд российских геронтологов и гериатров.- Самара.- 1999.- С. 502-506

7. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. // Вестник РАМН.-2000.- №3.- С. 45-49.

8. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей.- М., 2001.- С.303.

9. Шатохина С.Н. Диагностическое значение кристаллических структур биологических жидкостей в клинике внутренних болезней: Дис... докт. Мед. наук.- М., 1995.- 225 с.

10. Шатохина С.Н., Шабалин В.Н.// Клин. лаб. диагностика.- 1999.- №9.- С.38.

11 Deegan R.D.ÍÍ Phys. Rev. E.- 2000.- Vol. 61.- Р. 475^85.

12. Deegan R.D. et al. // Phys. Rev. E.- 2000.- Vol. 62.-Р. 756-765.

13. Sole A. // Kolloid-Zeitschrift.- 1955.- Bd. 143.- S. 73-83.

14. Solé A. // Kolloid-Zeitschrift.- 1957.- Bd. 151.- S. 55-62.

CONVECTIVE FLOWS IN DROPS OF WATER AND BIOLOGICAL LIQUIDS (LITOS-SYSTEM) ON A HORIZONTAL SOLID SUPPORT

A.V. GETLING, M.G. ZALESKIY Summary

In drops of water solutions on a horizontal support a toroidal-vortex flow, when vaporizing at room temperature. Has convective nature and is due to thermodynamic phenomena.

Key words: toroidal-vortex flow

УДК 612.017

МОДУЛЯЦИЯ ДИПИРОКСИМОМ РЕАКЦИИ ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА ПРИ ОСТРОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ДИХЛОРЭТАНОМ

П. Ф. ЗАБРОДСКИЙ, В. Г. ЛИМ, Н. М. ТРОШКИН*

Введение. В настоящее время широкое применение находят ядовитые технические жидкости, в частности дихлорэтан (ДХЭ), который обладает токсичностью и способен вызывать как острые, так и хронические отравления. При этом последствия острых

* Военный институт радиационной, химической и биологической защиты МО РФ, 410037, Саратов, ул. 50 лет Октября, дом 5

отравлений ДХЭ (интоксикация парами яда, использование в качестве суррогата алкоголя) приводят к смертельным исходам в 32-96% случаев [1]. Основные иммунотоксические эффекты ДХЭ надо рассматривать как следствие ингибирования неспецифических эстераз иммуноцитов [2]. Но механизм развития нарушений системы иммунитета после интоксикации ДХЭ остаются невыясненными. Мало изучены вопросы фармакологической коррекции нарушений иммунного гомеостаза при острых отравлениях ДХЭ.

Цель исследования - изучение механизма действия дипи-роксима на клеточный иммунитет, оцениваемый по формированию реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) в различных моделях при острой интоксикации ДХЭ.

Материал и методы исследования. Эксперименты проводили на белых мышах линии СВА массой 18-24 г. ДХЭ вводили внутрижелудочно в растворе оливкового масла в дозе 0,75 ЛД50 (ЛД50 составляла 683±35 мг/кг). Дипироксим - внутримышечно в дозе 20 мг/кг через 30 мин, 2 и 24 ч после интоксикации ДХЭ в модели реакции ГЗТ без переноса клеток. В других моделях реакции ГЗТ дипироксим вводили животным донорам так же. При изучении влияния ДХЭ на формирование реакции ГЗТ использовали модели: реакция ГЗТ без переноса иммуноцитов, локальная адаптивная реакция ГЗТ [3-4], оценка реакции ГЗТ после переноса спленоцитов иммунизированных сингенных мышей, исследование эффекта переноса супрессорных клеток [57]. Реакцию ГЗТ оценивали по приросту массы стопы задней лапы мышей по сравнению с контрольной. Реакцию ГЗТ без переноса иммуноцитов исследовали после иммунизации внутривенным введением эритроцитов барана (ЭБ). Разрешающую дозу ЭБ (5.108) вводили под апоневроз задней лапы через 4 сут. после иммунизации. Оценку реакции осуществляли через 24 ч. Локальную адаптивную реакцию ГЗТ изучали у мышей-реципиентов после введения им под апоневроз стопы смеси ЭБ (5.108) и спле-ноцитов (4108) от сингенных интактных мышей (отрицательный контроль), животных, иммунизированных 108 ЭБ (положительный контроль) и мышей, получивших внутривенно то же количество ЭБ одновременно с введением ДХЭ (опытная серия). Селезенку для получения клеток извлекали у животных доноров через 4 сут. после иммунизации. Суспензию спленоцитов готовили на среде 199. При исследовании формирования реакции ГЗТ после переноса спленоцитов мышам-реципиентам, иммунизированным ЭБ 108 сингенных доноров, мышей-реципиентов через 1 ч сенсибилизировали внутривенным введением 107 ЭБ. Через 4 сут. под апоневроз стопы реципиентов вводили разрешающую дозу ЭБ (5.108) с оценкой реакции через 24 ч. Спленоциты получали через 5 сут. после иммунизации доноров. В контрольной и опытной сериях донорам одновременно с иммунизацией вводили внутрь

0,1 мл на 10 г массы животного физиологического раствора и то же количество раствора ДХЭ. В опыте формирование ГЗТ отражало влияние острой интоксикации на вторичный иммунный ответ в системе адаптивного переноса иммунных спленоцитов. Исследование супрессии реакции ГЗТ у мышей проводили аналогично описанному опыту. Формирование спленоцитов-

супрессоров под влиянием ДХЭ проводили одновременно с введением ЭБ донорам. Супрессорную активность клеток селезенки оценивали по проценту супрессии реакции ГЗТ [8]. Активность а-нафтил-А8-ацетатэстеразы спленоцитов и подколенных лимфоузлов (источник клеток для формирования реакции ГЗТ) в реакции ГЗТ без переноса иммуноцитов и у мышей-доноров в других моделях реакции ГЗТ исследовали через сутки после введения ДХЭ, у мышей-реципиентов в реакциях ГЗТ, связанных с переносом клеток, - одновременно с оценкой данных реакций определяли гистохимическим методом [7]. Статобработку результатов вели с применением 1-критерия Стьюдента.

Результаты. Установлено (табл. 1), что под влиянием ДХЭ идет снижение формирования реакции ГЗТ в 2,3 раза (р<0,05). Применение дипироксима восстанавливает данную реакцию.

ДХЭ в реакции локальной адаптивной ГЗТ вызывает такие же сдвиги, как в «отрицательном» контроле и приводит к статистически значимому снижению реакции ГЗТ по сравнению с «положительным» контролем. Этот факт говорит о снижении способности спленоцитов доноров вызывать адаптивную реакцию ГЗТ. Это обусловлено супрессией функции этих клеток из-за уменьшения в них а-нафтил-А8-ацетатэстеразы. При этом дипи-роксим практически полностью восстанавливает реакцию ГЗТ и активность а-нафтил-А8-ацетатэстеразы спленоцитов (табл. 2). При переносе спленоцитов иммунизированных доноров-

Статья

реципиентам с последующим введением ЭБ и оценкой реакции ГЗТ установлено снижение прироста массы лапы под влиянием острого отравления ДХЭ. В этом случае формирование реакции ГЗТ зависит от иммунных свойств спленоцитов доноров.

Таблица 1

Влияние дипироксима на различные модели реакции ГЗТ у мышей при отравлении ДХЭ в дозе 0,75 ЛД50

Модель Условия эксперимента Прирост массы лапы, мг

ДХЭ ДХЭ+ дипироксим

Реакция ГЗТ Контроль Опыт 40,3±4,3 17,1±3,3* 38,9±4,4 33,2±4,9

Локальная адаптивная реакция ГЗТ Отрицат. контроль Положит. контроль Опыт 18,9±2,4 31,2±3,1* 22,4±2,З** 23,3±2,2 3б,1±3,0* 37,1±3,3**

Эффект переноса спленоцитов после иммунизации Контроль Опыт 72,4±б,1 30,1±3,3* 7б,1±3,2 73,0±4,9

Эффект переноса супрессорных клеток Контроль Опыт 30,2±2,3 19,3±3,3* 32,3±2,9 23,1±2,б*

Примечание: * - различия достоверны при сравнении с контролем

Снижение реакции ГЗТ у реципиентов под влиянием ДХЭ, по нашему мнению, можно объяснить уменьшением способности спленоцитов доноров к реализации вторичного иммунного ответа вследствие снижения активности а-нафтил-А8-ацетатэстеразы клеток селезенки. Также показано, что кроме снижения исследованного энзима в селезенке, отмечается его редукция в подколенных лимфоузлах. Это вполне закономерно, т.к. формирование реакции ГЗТ в этой модели прямо связано, в отличие от локальной адаптивной реакции ГЗТ, с функцией клеток периферических лимфоузлов, из которых для реализации реакции ГЗТ мигрируют ТЬ1-лимфоциты, моноциты и макрофаги, определяющие проявление реакции. Опытные данные по оценке возможности применения реактиваторов холинэстеразы при острой интоксикации ДХЭ говорят о том, что дипироксим полностью восстанавливает реакцию ГЗТ и активность а-нафтил-А8-ацетатэстеразы сплено-цитов и клеток лимфоузлов.

Таблица 2

Оценка влияния дипироксима на активность а-нафтил-А8-ацетатэстеразы спленоцитов мышей по относительному содержанию эстеразопозитивных клеток селезенки доноров и лимфоузлов реципиентов в различных моделях реакции ГЗТ при остром отравлении ДХЭ

в дозе 0,75 ЛД50

Модель реакции ГЗТ Селезенка Подколенный лимфоузел

1 2 3 1 2 3

Реакция ГЗТ без переноса клеток 47±3 23±3* 4б±4 З2±4 20±4* 47±З

Локальная адаптивная реакция ГЗТ 33±4 23±3* 30±3 ЗЗ±4 47±4 49±4

Эффект переноса спленоцитов после иммунизации 43 ±3 22±2* 48±З З7±З 30±3* 33±4

Эффект переноса супрессорных клеток 47±З 31±3* 29±4* З4±4 40±3* 43±3*

Примечание: 1 - контроль, 2 - ДХЭ, 3 - ДХЭ+дипироксим, * - различия достоверны

При изучении влияния ДХЭ на формирование супрессоров в селезенке установлено снижение супрессорной активности спленоцитов доноров через 5 сут. после действия яда. Активность эстеразы в клетках селезенки падала по сравнению с контролем. Это обусловлено тем, что а-нафтил-А8-ацетатэстераза локализована чаще в Т-хелперах [7], и при относительном увеличении

доли Т-супрессоров в селезенке относительное число эстеразопо-зитивных клеток уменьшается. Данным механизмом можно объяснить и снижение активности а-нафтил-А8-ацетатэстеразы в подколенных лимфоузлах у животных-реципиентов. В этом случае применение дипироксима не восстанавливает реакцию ГЗТ и активность эстераз спленоцитов доноров и клеток подколенных лимфоузлов. Это объясняется относительным ростом числа супрессорных клеток со слабой эстеразной активностью.

Выводы. Острое отравление ДХЭ в дозе 0,75 ЛД50 снижает клеточный иммунитет, оцениваемый по формированию реакции гиперчувствительности замедленного типа, вследствие снижения активности а-нафтил-А8-ацетатэстеразы в спленоцитах и клетках подколенных лимфоузлов. ДХЭ уменьшает эффект переноса супрессорных клеток в реакции гиперчувствительности замедленного типа, которая сопровождается снижением а-нафтил-А8-ацетатэстеразы в спленоцитах доноров и подколенных лимфоузлах реципиентов. Применение реактиватора холинэстеразы дипироксима восстанавливает формирование реакции гиперчувствительности замедленного типа при острой интоксикации ДХЭ.

Литература

1. Курашов О.В., Троцевич В.А // Врач. дело, Киев.- 1992.— №10.- С. 109—111.

2. Забродский П.Ф. и др.. // Токсикол. вестн.— 1996.— №1.— С. 13—15.

3. Аксалонов А.А. и др.// Иммунология.— 1985.— №2.— С.56—

59.

4. Гюллинг Э.В., Самбур М.Б. // Физиол. журн.— 1981.— Т. 27, № 2.— С. 237—240.

5. Писарев В.М., Певницкий ЛА. // Бюл. экспер. биол.— 1985.— №5.— С. 571—573.

6. ФроловБА. и др. // Иммунология.— 1985.— №2.— С. 39—41.

7. Хейхоу Д.Г.Дж., Кваглино Д. Гематологическая цитохимия.— М.: Медицина, 1983.— 154—173 с.

8. Черноусов А.Д., Юрин Б.Л. // Иммунология.— 1982.— №1.— С. 13—16.

УДК 612.017

ВЛИЯНИЕ ИМУНОФАНА НА ПОКАЗАТЕЛИ СИСТЕМЫ ИММУНИТЕТА И ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ ПРИ

ОСТРОМ ТОКСИЧЕСКОМ ДЕЙСТВИИ ХЛОРИРОВАННЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ

П. Ф. ЗАБРОДСКИЙ, В. Г. ЛИМ, Н. М. ТРОШКИН*

Введение. Исследование токсического действия хлорированных углеводородов дихлорэтана (ДХЭ), тетрахлорметана (ТХМ) и трихлорэтилена (ТХЭ) на иммунную систему для снижения частоты постинтоксикационных инфекционных осложнений и заболеваний путем прим применения иммуностимуляторов [1, 6] является актуальной задачей токсикологии и фармакологии в связи с ростом частоты отравлений этими веществами [4]. Влияние имунофана (ИФ), имеющего иммуностимулирующий, антиоксидантный и гепатотропный эффекты, на показатели восстановления системы иммунитета и снижения интенсивности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) при острых отравлениях хлорированными углеводородами мало изучено [2].

Цель работы — оценка возможности восстановления сниженных острым действием хлорированных углеводородов показателей системы иммунитета и ПОЛ применением иммуностимулятора и антиоксиданта ИФ.

Материал и методы исследования. Эксперименты велись на беспородных белых крысах массой 180—240 г. Хлорированные углеводороды вводили перорально в растворе оливкового масла в

*

Военный институт радиационной, химической и биологической защиты МО РФ, 410037, Саратов, ул. 50 лет Октября, дом 5