Опыт применения вирусных вакцин в терапии экспериментальных злокачественных опухолей

БИОТЕРАПИЯ

9

ИММУНОФАРМАКОЛОГИЯ ПРЕПАРАТОВ «КАСКАРУТОЛ» И «СОЛОДКА»

А.В. Сергеев, Г.И. Кабацкая, Л.И. Карасёва, Е.В. Лабурдова, С.И. Павлова, И.Р. Просалкова, М.Я. Шашкина. ГУ РОНЦим. Н.Н. Блохина РАМН, Москва

Препарат «Каскарутол» (КАС) представляет собой оригинальный комплекс бета-каротина (БК), аскорбиновой кислоты, токоферилацетата, рутина и обладает широким спектром физиологической активности, в том числе антитоксической, антимутагенной, антиканцерогенной и т. д. Препарат «Солодка» (СОЛ) разработан на основе лиофилизированного экстракта из корня солодки голой и, по данным литературы, обладает антитоксическими, антиэстрогенными, противовоспалительными и другими свойствами.

Цель работы. Изучение иммунотропной активности и иммунофармакологаи препаратов КАС и СОЛ.

Материалы и методы. Работа проводилась на мышах-самцах линий BALB/c и СЗН. Иммунотропная активность препаратов изучалась на модели реакции пролиферации спленоцитов мышей BALB/c, трансформированных in vitro митогеном Кон А или аллоантигенами в смешанной культуре лимфоцитов (СКЛ) селезёнки аллогенных мышей. Иммунофармакология препаратов изучалась также в реакциях образования ци-толитических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) в СКЛ и на моделях определения цитотоксической активности натуральных киллеров селезёнки и перитонеальных макрофагов. КАС вводили животным ежедневно в течение 6-8 нед в дозах, эквивалентных 10-25 мг/кг БК.

Препарат СОЛ животные получали ежедневно из расчёта 1 и 10 мг лиофилизированного экстракта на 1 кг веса мыши.

Результаты. Препарат КАС в дозах 10 и 25 мг/кг через 6-8 нед после введения его животным вызывал 2-3-кратное увеличение пролиферативной активности спленоцитов в ответ на Кон А или аллоантигены. Препарат СОЛ вдозе 10 мг/кг приводил к 1,5-2-кратному повышению пролиферативной активности спленоцитов. Препараты КАС и СОЛ через 4—6 нед после введения вызывали 2-3-кратное увеличение образования ЦГЛ в СКЛ. СОЛ ни в одной из использованных концентраций не влиял на активность натуральных киллеров селезёнки, тогда как КАС повышал их активность на 70-90 %. КАС и СОЛ в оптимальных концентрациях усиливали цитотоксическую активность перитонеальных макрофагов в 1,5-2,5 раза. Одновременное введение мышам ВАЬВ/с препаратов арано-зы, КАС или СОЛ частично или полностью снимали иммунодепрессию, вызванную цитостатиком.

Выводы. Препараты КАС и СОЛ обладают широким спектром иммуномодулирующей активности и могут быть использованы для коррекции вторичных иммунодифицитов, вызванных противоопухолевыми препаратами.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ВИРУСНЫХ ВАКЦИН В ТЕРАПИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ

Перед исследователями, занимающимися отбором и изучением новых противоопухолевых препаратов, стоит сложная задача по изысканию принципиально новых методов лечения. Наиболее перспективно в этом плане использование терапевтических воздействий, позволяющих не только повреждать опухолевые клетки, но и активировать антибластомные потенции организма. Достаточно перспективными считаются такие методы биологической терапии рака, как противоопухолевая вакцинация и генотерапия, использование некоторых вакцинных штаммов экзогенных вирусов, сочетающих как антибластомные, так и иммуномодулирующие свойства. Использование для этой цели стандартных вирусных вакцин, многократно апробированных на практике, привлекает возможностью в случае положительного противоопухолевого эффекта иметь

Л.Н. Уразова, Т. И. Кузнецова, И. Г. Видяева НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, Томск

готовый официнальный препарат для клинического применения.

Задачи исследования. Изучение эффективности и механизмов реализации противоопухолевого действия вакцинных штаммов вирусов при экспериментальном онкогенезе.

Материалы и методы. Эксперименты проведены на инбредных мышах линий ВАЬВ/с, С57В1/6 и ОБА/ 2 массой 18-20 г. Использовали штаммы меланомы В-16, асцитного и солидного вариантов аденокарциномы Эрлиха, карциномы легких Льюис. При оценке противоопухолевой и антиметастатической активности исследуемых вирусных вакцин (венесуэльского энцефаломиелита, паротита и осповакцины) определяли процент торможения опухолевого роста, частоту и степень метастазирования опухолей. Цитоморфологичес-

№2/томЗ/2004

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

10

БИОТЕРАПИЯ

кие нарушения в опухолевых клетках определяли по общепринятой методике. Оценивали функциональную (цитостатическую, цитотоксическую и естественную киллерную) активность иммунокомпетентных клеток, а также иммуногенность онколизата в реакции бласт-трансформации спленоцитов.

Результаты и выводы. Вакцинные штаммы изученных вирусов обладают высокой тропностью к клеткам изученных экспериментальных опухолей как in vivo (уровень их вирулентности в клетках опухолей составил 6,5-7,0 lg ТЦД50/мл), так и in vitro (жизнеспособность опухолевых клеток меланомы В-16 и карциномы Льюис снижалась в течение 48 ч до 8,0 % и 1,6 %). Исследованные штаммы вирусов проявляют противоопухолевые и антиметастатические свойства: наблюдается статистически значимое снижение роста экспериментальных опухолей (вирусом ВЭЛ - до 80 %, паротита-до 45 %, осповакцины-до 37 %). При этом индекс ингибирования метастазирования составил до 92 %; 68 % и 62 % соответственно. Вакцинные штаммы вирусов ВЭЛ, паротита и оспы индуцируют в опухолевых клетках такие цитоморфологические нарушения, как появление многоядерных, с микроядрами и вакуолизированной цитоплазмой клеток. Кроме того,

вирусы ВЭЛ и паротита значительно подавляют митотическую активность опухолевых клеток in vivo (0,2 % и 0,4 % соответственно, при митотической активности интактных клеток - 2,4 %). Терапия вакцинными штаммами вирусов на фоне удаления первичных опухолей приводила к статистически значимому угнетению послеоперационного метастазирования и рециди-вирования опухолей (78,0-82,1 %; 60,0-100 % соответственно), которое ассоциировалось с усилением цито-статической активности перитонеальных макрофагов и спленоцитов. Перитонеальные макрофаги живот-ных-опухоленосителей, инфицированных вирусными вакцинами, проявляли выраженное цитостатическое действие, которое превышало аналогичный показатель опухолеассоциированных макрофагов (59,3-96,01 %; 29,5-38,4 % соответственно).

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что изученные вакцинные штаммы вирусов, проявляя высокую тропность к клеткам экспериментальных опухолей, способны индуцировать их лизис и влиять на процессы метастазирования, изменяя антигенные и иммуногенные характеристики этих клеток, а также модулируя эффекторные неспецифические реакции организма-опухоленосителя.

ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ НА ОСНОВЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ

В Российском онкологическом научном центре получен целый ряд моноклональных антител (МКА) и на их основе созданы несколько препаратов для лечения онкологических и других заболеваний.

Так, совместно с сотрудниками МНИОИ им. П. А. Герцена разработана лекарственная форма MICA ICO-25, направленная против муциноподобного антигена MUC1. Препарат, названный Имутераном, не имеет зарубежных аналогов и в настоящее время проходит II фазу клинических испытаний для лечения опухолей эпителиального генеза. Предварительные результаты свидетельствуют о безопасности Имуте-рана в рекомендованных дозах и возможности замедления развития опухолевого процесса у некоторых больных. Окончательные результаты исследования ожидаются в 2005 г.

На основе МКА ICO-90, направленных против СБЗ-антигена Т-клеток человека, создан препарат АТЭМА, аналог препарата Ортоклон ОКТЗ фирмы Орто Фармасьютикалс, США. Он предназначен для лечения реакции острого отторжения трансплантата (РООТ) после пересадки органов и тканей и в настоящее время проходит I/II фазу клинических испытаний по этому показанию. Полученные данные свидетельствуют об эффективности и безопасности АТЭМА, и при успешном завершении клинических

Е.Ф. Чмутин, П.К. Иванов, А.Ю. Барышников ГУРОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва

испытаний он сможет заменить Ортоклон ОКТЗ, который из-за высокой стоимости недоступен большинству российских больных. Имеются некоторые сведения о применении МКА против СОЗ-антигена для лечения реакции “трансплантат против хозяина” (РТПХ) после аллогенной трансплантации костного мозга (ТКМ) онкологическим больным, а также для иммуномагнитной сепарации СОЗ+-Т-клеток с целью предотвращения РТПХ при аллогенной ТКМ и с целью очистки костного мозга больных Т-кле-точной лимфомой от опухолевых клеток перед аутологичной ТКМ.

Потенциально терапевтическое применение могут получить также имеющиеся у нас МКА ICO-180 против антигена CD20 В-лимфоцитов (аналог противоопухолевого препарата Мабтера), МКА ICO-84 (аналог противоопухолевого препарата Герцептин), МКА ICO-105 к рецептору интерлейкина-2 (ИЛ-2Р) (аналог препаратов Зенапакс и Симулект, предназначенных для лечения РООТ) и МКА ICO-80, направленные против антигена CD5 Т- и В-лимфоцитов. Препараты на основе этих МКА пока находятся в стадии предклини-ческих исследований, но можно надеяться, что они заменят дорогостоящие импортные аналоги, а также будут использоваться для создания противоопухолевых иммунотоксинов и радиоиммуноконъюгатов.

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧБСКИЙ ЖУРНАЛ

№2/томЗ/2004