КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ, СВЯЗАННЫЕ СО СКОНСТРУИРОВАННЫМИ КОНСТРУКЦИЯМИ НА ОСНОВЕ Fc-АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩЕГО ДОМЕНА

1. Композиция, содержащая конструкцию на основе Fc-антигенсвязывающего домена, где конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена содержит антигенсвязывающий домен и первый Fc-домен, присоединенный ко второму Fc-домену посредством линкера, где по меньшей мере 5% гликанов в композиции не содержат остаток фукозы.
2. Композиция, содержащая полипептид, содержащий антигенсвязывающий домен; линкер; первый мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен; второй линкер; второй мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен; необязательный третий линкер и необязательный третий мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен, где по меньшей мере один мономер Fc-домена содержит мутации, обеспечивающие образование сконструированного выступа, и где по меньшей мере 5% гликанов в композиции не содержат остаток фукозы.
3. Полипептид, содержащий антигенсвязывающий домен; линкер; первый мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен; второй линкер; второй мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен; необязательный третий линкер и необязательный третий мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен,
где по меньшей мере один мономер Fc-домена содержит одну, две или три мутации, предусматривающие аминокислотную замену, обеспечивающие изменение заряда на противоположный.
4. Полипептид, содержащий первый мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен; второй линкер; второй мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен; необязательный третий линкер и необязательный третий мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен,
где по меньшей мере один мономер Fc-домена содержит мутации, обеспечивающие образование сконструированного выступа.
5. Полипептид, содержащий первый мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен; второй линкер; второй мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен; необязательный третий линкер и необязательный третий мономер Fc-домена IgG1, содержащий шарнирный домен, CH2-домен и CH3-домен,
где по меньшей мере один мономер Fc-домена содержит одну, две или три мутации, предусматривающие аминокислотную замену, обеспечивающие изменение заряда на противоположный.
6. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена; и
d) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду или третьему полипептиду;
при этом первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена.
7. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена; и
d) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду или третьему полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена предусматривает биологическую активность, которую не демонстрирует конструкция, содержащая один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
8. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) спейсер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена; и
d) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду или третьему полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена.
9. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена; и
d) первый антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду; и
e) второй антигенсвязывающий домен, присоединенный ко второму полипептиду и/или третьему полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, при этом первый и второй антигенсвязывающие домены связывают разные антигены, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена обладает усиленной эффекторной функцией в анализе антителозависимой цитотоксичности (ADCC), анализе антителозависимого клеточного фагоцитоза (ADCP) и/или комплементзависимой цитотоксичности (CDC) по сравнению с конструкцией, содержащей один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
10. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена;
d) первый антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду; и
e) второй антигенсвязывающий домен, присоединенный ко второму полипептиду и/или третьему полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, и при этом первый и второй антигенсвязывающие домены связывают разные антигены, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена предусматривает биологическую активность, которую не демонстрирует конструкция, содержащая один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
11. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) спейсер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена; и
d) первый антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду; и
e) второй антигенсвязывающий домен, присоединенный ко второму полипептиду и/или третьему полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, и при этом первый и второй антигенсвязывающие домены связывают разные антигены.
12. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена;
d) первый антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду;
e) второй антигенсвязывающий домен, присоединенный ко второму полипептиду; и
f) третий антигенсвязывающий домен, присоединенный к третьему полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, и при этом первый, второй и третий антигенсвязывающие домены связывают разные антигены, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена обладает усиленной эффекторной функцией в анализе антителозависимой цитотоксичности (ADCC), анализе антителозависимого клеточного фагоцитоза (ADCP) и/или комплементзависимой цитотоксичности (CDC) по сравнению с конструкцией, содержащей один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
13. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена;
d) первый антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду;
e) второй антигенсвязывающий домен, присоединенный ко второму полипептиду; и
f) третий антигенсвязывающий домен, присоединенный к третьему полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, и при этом первый, второй и третий антигенсвязывающие домены связывают разные антигены, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена предусматривает биологическую активность, которую не демонстрирует конструкция, содержащая один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
14. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) спейсер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий третий мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий четвертый мономер Fc-домена;
d) первый антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду;
e) второй антигенсвязывающий домен, присоединенный ко второму полипептиду; и
f) третий антигенсвязывающий домен, присоединенный к третьему полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, и при этом первый, второй и третий антигенсвязывающие домены связывают разные антигены.
15. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) первый линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
b) второй полипептид, содержащий
iv) третий мономер Fc-домена,
v) четвертый мономер Fc-домена и
vi) второй линкер, соединяющий третий мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена; и
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена; и
e) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду или четвертому полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, четвертый мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена обладает усиленной эффекторной функцией в анализе антителозависимой цитотоксичности (ADCC), анализе антителозависимого клеточного фагоцитоза (ADCP) и/или комплементзависимой цитотоксичности (CDC) по сравнению с конструкцией, содержащей один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
16. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) первый линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
b) второй полипептид, содержащий
iv) третий мономер Fc-домена,
v) четвертый мономер Fc-домена и
vi) второй линкер, соединяющий третий мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена; и
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена; и
e) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду или четвертому полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, четвертый мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена предусматривает биологическую активность, которую не демонстрирует конструкция, содержащая один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
17. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) первый спейсер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
b) второй полипептид, содержащий
iv) третий мономер Fc-домена,
v) четвертый мономер Fc-домена и
vi) второй спейсер, соединяющий третий мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена; и
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена; и
e) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду или четвертому полипептиду;
где первый мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и второй мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, четвертый мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена.
18. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) первый линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
b) второй полипептид, содержащий
iv) третий мономер Fc-домена,
v) четвертый мономер Fc-домена и
vi) второй линкер, соединяющий третий мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена; и
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена; и
e) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду или четвертому полипептиду;
где второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и первый мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, при этом третий мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена обладает усиленной эффекторной функцией в анализе антителозависимой цитотоксичности (ADCC), анализе антителозависимого клеточного фагоцитоза (ADCP) и/или комплементзависимой цитотоксичности (CDC) по сравнению с конструкцией, содержащей один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
19. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) первый линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
b) второй полипептид, содержащий
iv) третий мономер Fc-домена,
v) четвертый мономер Fc-домена и
vi) второй линкер, соединяющий третий мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена; и
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена; и
e) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду или четвертому полипептиду;
где второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и первый мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, при этом третий мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена предусматривает биологическую активность, которую не демонстрирует конструкция, содержащая один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
20. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена и
iii) первый спейсер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
b) второй полипептид, содержащий
iv) третий мономер Fc-домена,
v) четвертый мономер Fc-домена и
vi) второй спейсер, соединяющий третий мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена; и
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена; и
e) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду или четвертому полипептиду;
где второй мономер Fc-домена и четвертый мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и первый мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, при этом третий мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена.
21. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) третий мономер Fc-домена,
iv) первый линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
v) второй линкер, соединяющий второй мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
vii) четвертый мономер Fc-домена,
vii) пятый мономер Fc-домена,
viii) шестой мономер Fc-домена,
ix) третий линкер, соединяющий четвертый мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена; и
x) четвертый линкер, соединяющий пятый мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий седьмой мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий восьмой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий девятый мономер Fc-домена;
f) шестой полипептид, содержащий десятый мономер Fc-домена; и
g) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду, четвертому полипептиду, пятому полипептиду или шестому полипептиду;
где второй мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и первый мономер Fc-домена и седьмой мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, четвертый мономер Fc-домена и восьмой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена, третий мономер Fc-домена и девятый мономер Fc-домена объединены с образованием четвертого Fc-домена, и шестой мономер Fc-домена и десятый мономер Fc-домена объединены с образованием пятого Fc-домена, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена обладает усиленной эффекторной функцией в анализе антителозависимой цитотоксичности (ADCC), анализе антителозависимого клеточного фагоцитоза (ADCP) и/или комплементзависимой цитотоксичности (CDC) по сравнению с конструкцией, содержащей один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
22. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) третий мономер Fc-домена,
iv) первый линкер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
v) второй линкер, соединяющий второй мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
vi) четвертый мономер Fc-домена,
vii) пятый мономер Fc-домена,
viii) шестой мономер Fc-домена,
ix) третий линкер, соединяющий четвертый мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена; и
x) четвертый линкер, соединяющий пятый мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий седьмой мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий восьмой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий девятый мономер Fc-домена;
f) шестой полипептид, содержащий десятый мономер Fc-домена; и
g) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду, четвертому полипептиду, пятому полипептиду или шестому полипептиду;
где второй мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и первый мономер Fc-домена и седьмой мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, четвертый мономер Fc-домена и восьмой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена, третий мономер Fc-домена и девятый мономер Fc-домена объединены с образованием четвертого Fc-домена, и шестой мономер Fc-домена и десятый мономер Fc-домена объединены с образованием пятого Fc-домена, и при этом конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена предусматривает биологическую активность, которую не демонстрирует конструкция, содержащая один Fc-домен и антигенсвязывающий домен.
23. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) третий мономер Fc-домена,
iv) первый спейсер, соединяющий первый мономер Fc-домена и второй мономер Fc-домена; и
v) второй спейсер, соединяющий второй мономер Fc-домена и третий мономер Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
vi) четвертый мономер Fc-домена,
vii) пятый мономер Fc-домена,
viii) шестой мономер Fc-домена,
ix) третий спейсер, соединяющий четвертый мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена; и
x) четвертый спейсер, соединяющий пятый мономер Fc-домена и шестой мономер Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий седьмой мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий восьмой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий девятый мономер Fc-домена;
f) шестой полипептид, содержащий десятый мономер Fc-домена; и
g) антигенсвязывающий домен, присоединенный к первому полипептиду, второму полипептиду, третьему полипептиду, четвертому полипептиду, пятому полипептиду или шестому полипептиду;
где второй мономер Fc-домена и пятый мономер Fc-домена объединены с образованием первого Fc-домена, и первый мономер Fc-домена и седьмой мономер Fc-домена объединены с образованием второго Fc-домена, четвертый мономер Fc-домена и восьмой мономер Fc-домена объединены с образованием третьего Fc-домена, третий мономер Fc-домена и девятый мономер Fc-домена объединены с образованием четвертого Fc-домена, и шестой мономер Fc-домена и десятый мономер Fc-домена объединены с образованием пятого Fc-домена.
24. Композиция, содержащая конструкцию по любому из предыдущих пунктов, где по меньшей мере 5%, 10%, 15%, 20%, 30% или 40% гликанов в композиции не содержат остаток фукозы.
25. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) первый связывающий домен тяжелой цепи и
iv) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
i) третий мономер Fc-домена,
ii) четвертый мономер Fc-домена,
iii) второй связывающий домен тяжелой цепи и
iv) линкер, соединяющий третий и четвертый мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий первый связывающий домен легкой цепи; и
f) шестой полипептид, содержащий второй связывающий домен легкой цепи;
где первый и третий мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, второй и пятый мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, четвертый и шестой Fc-мономеры совместно образуют третий Fc-домен, первый связывающий домен тяжелой цепи и первый связывающий домен легкой цепи совместно образуют первый Fab; и второй связывающий домен тяжелой цепи и второй связывающий домен легкой цепи совместно образуют второй Fab.
26. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) первый связывающий домен тяжелой цепи и
iv) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
i) третий мономер Fc-домена,
ii) четвертый мономер Fc-домена,
iii) второй связывающий домен тяжелой цепи и
iv) линкер, соединяющий третий и четвертый мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена и первый связывающий домен легкой цепи; и
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена и второй связывающий домен легкой цепи;
где первый и третий мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, второй и пятый мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, четвертый и шестой Fc-мономеры совместно образуют третий Fc-домен, первый связывающий домен тяжелой цепи и первый связывающий домен легкой цепи совместно образуют первый Fab; и второй связывающий домен тяжелой цепи и второй связывающий домен легкой цепи совместно образуют второй Fab.
27. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) первый связывающий домен тяжелой цепи и
iv) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
i) третий мономер Fc-домена,
ii) четвертый мономер Fc-домена,
iii) второй связывающий домен тяжелой цепи и
iv) линкер, соединяющий третий и четвертый мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий первый связывающий домен легкой цепи; и
f) шестой полипептид, содержащий второй связывающий домен легкой цепи;
где первый и пятый мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, третий и шестой мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, второй и четвертый Fc-мономеры совместно образуют третий Fc-домен, первый связывающий домен тяжелой цепи и первый связывающий домен легкой цепи совместно образуют первый Fab; и второй связывающий домен тяжелой цепи и второй связывающий домен легкой цепи совместно образуют второй Fab.
28. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) третий мономер Fc-домена,
iv) первый связывающий домен тяжелой цепи,
v) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена; и
vi) линкер, соединяющий второй и третий мономеры Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
i) четвертый мономер Fc-домена,
ii) пятый мономер Fc-домена,
iii) шестой мономер Fc-домена,
iv) второй связывающий домен тяжелой цепи,
v) линкер, соединяющий четвертый и пятый мономеры Fc-домена, и
vi) линкер, соединяющий пятый и шестой мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий седьмой мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий восьмой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий девятый мономер Fc-домена;
f) шестой полипептид, содержащий десятый мономер Fc-домена;
g) седьмой полипептид, содержащий первый связывающий домен легкой цепи; и
h) восьмой полипептид, содержащий второй связывающий домен легкой цепи;
где первый и седьмой мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, четвертый и восьмой мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, второй и пятый мономеры Fc-домена совместно образуют третий Fc-домен, третий и девятый мономеры Fc-домена совместно образуют четвертый Fc-домен, шестой и десятый Fc-мономеры совместно образуют пятый Fc-домен, первый связывающий домен тяжелой цепи и первый связывающий домен легкой цепи совместно образуют первый Fab; и второй связывающий домен тяжелой цепи и второй связывающий домен легкой цепи совместно образуют второй Fab.
29. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) третий мономер Fc-домена,
iv) первый связывающий домен тяжелой цепи,
v) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена; и
vi) линкер, соединяющий второй и третий мономеры Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
i) четвертый мономер Fc-домена,
ii) пятый мономер Fc-домена,
iii) шестой мономер Fc-домена,
iv) второй связывающий домен тяжелой цепи,
v) линкер, соединяющий четвертый и пятый мономеры Fc-домена, и
vi) линкер, соединяющий пятый и шестой мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий седьмой мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий восьмой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий девятый мономер Fc-домена и первый связывающий домен легкой цепи; и
f) шестой полипептид, содержащий десятый мономер Fc-домена и второй связывающий домен легкой цепи,
где первый и седьмой мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, четвертый и восьмой мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, второй и пятый мономеры Fc-домена совместно образуют третий Fc-домен, третий и девятый мономеры Fc-домена совместно образуют четвертый Fc-домен, шестой и десятый Fc-мономеры совместно образуют пятый Fc-домен, первый связывающий домен тяжелой цепи и первый связывающий домен легкой цепи совместно образуют первый Fab; и второй связывающий домен тяжелой цепи и второй связывающий домен легкой цепи совместно образуют второй Fab.
30. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) третий мономер Fc-домена,
iv) первый связывающий домен тяжелой цепи,
v) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена; и
vi) линкер, соединяющий второй и третий мономеры Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
i) четвертый мономер Fc-домена,
ii) пятый мономер Fc-домена,
iii) шестой мономер Fc-домена,
iv) второй связывающий домен тяжелой цепи,
v) линкер, соединяющий четвертый и пятый мономеры Fc-домена, и
vi) линкер, соединяющий пятый и шестой мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий седьмой мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий восьмой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий девятый мономер Fc-домена;
f) шестой полипептид, содержащий десятый мономер Fc-домена;
g) седьмой полипептид, содержащий первый связывающий домен легкой цепи; и
h) восьмой полипептид, содержащий второй связывающий домен легкой цепи;
где первый и четвертый мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, второй и седьмой мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, пятый и восьмой Fc-мономеры совместно образуют третий Fc-домен, третий и девятый мономеры Fc-домена совместно образуют четвертый Fc-домен, шестой и десятый Fc-мономеры совместно образуют пятый Fc-домен, первый связывающий домен тяжелой цепи и первый связывающий домен легкой цепи совместно образуют первый Fab; и второй связывающий домен тяжелой цепи и второй связывающий домен легкой цепи совместно образуют второй Fab.
31. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) третий мономер Fc-домена,
iv) первый связывающий домен тяжелой цепи,
v) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена; и
vi) линкер, соединяющий второй и третий мономеры Fc-домена;
b) второй полипептид, содержащий
i) четвертый мономер Fc-домена,
ii) пятый мономер Fc-домена,
iii) шестой мономер Fc-домена,
iv) второй связывающий домен тяжелой цепи,
v) линкер, соединяющий четвертый и пятый мономеры Fc-домена, и
vi) линкер, соединяющий пятый и шестой мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий седьмой мономер Fc-домена;
d) четвертый полипептид, содержащий восьмой мономер Fc-домена;
e) пятый полипептид, содержащий девятый мономер Fc-домена и первый связывающий домен легкой цепи;
f) шестой полипептид, содержащий десятый мономер Fc-домена и второй связывающий домен легкой цепи;
где первый и четвертый мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, второй и седьмой мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, пятый и восьмой Fc-мономеры совместно образуют третий Fc-домен, третий и девятый мономеры Fc-домена совместно образуют четвертый Fc-домен, шестой и десятый Fc-мономеры совместно образуют пятый Fc-домен, первый связывающий домен тяжелой цепи и первый связывающий домен легкой цепи совместно образуют первый Fab; и второй связывающий домен тяжелой цепи и второй связывающий домен легкой цепи совместно образуют второй Fab.
32. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена; и
b) второй полипептид, содержащий
i) третий мономер Fc-домена,
ii) четвертый мономер Fc-домена,
iii) линкер, соединяющий третий и четвертый мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена и первый связывающий домен тяжелой цепи и
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена и второй связывающий домен тяжелой цепи;
e) пятый полипептид, содержащий первый связывающий домен легкой цепи; и
f) шестой полипептид, содержащий второй связывающий домен легкой цепи;
где первый и пятый мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, третий и шестой мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, второй и четвертый мономеры Fc-домена совместно образуют третий Fc-домен, первый связывающий домен тяжелой цепи и первый связывающий домен легкой цепи совместно образуют первый Fab; и второй связывающий домен тяжелой цепи и второй связывающий домен легкой цепи совместно образуют второй Fab.
33. Конструкция на основе Fc-антигенсвязывающего домена, содержащая
a) первый полипептид, содержащий
i) первый мономер Fc-домена,
ii) второй мономер Fc-домена,
iii) первый связывающий домен тяжелой цепи и
iv) линкер, соединяющий первый и второй мономеры Fc-домена,
b) второй полипептид, содержащий
i) третий мономер Fc-домена,
ii) четвертый мономер Fc-домена,
iii) второй связывающий домен тяжелой цепи и
iv) линкер, соединяющий третий и четвертый мономеры Fc-домена;
c) третий полипептид, содержащий пятый мономер Fc-домена и третий связывающий домен тяжелой цепи;
d) четвертый полипептид, содержащий шестой мономер Fc-домена и четвертый связывающий домен легкой цепи;
e) пятый полипептид, содержащий первый связывающий домен легкой цепи;
f) шестой полипептид, содержащий второй связывающий домен легкой цепи;
g) седьмой полипептид, содержащий третий связывающий домен легкой цепи; и
h) восьмой полипептид, содержащий четвертый связывающий домен легкой цепи;
где первый и пятый мономеры Fc-домена совместно образуют первый Fc-домен, третий и шестой мономеры Fc-домена совместно образуют второй Fc-домен, второй и четвертый мономеры Fc-домена совместно образуют третий Fc-домен, первый связывающий домен легкой цепи и третий связывающий домен тяжелой цепи совместно образуют первый Fab, второй связывающий домен легкой цепи и четвертый связывающий домен тяжелой цепи совместно образуют второй Fab, третий связывающий домен легкой цепи и первый связывающий домен тяжелой цепи совместно образуют третий Fab; и четвертый связывающий домен легкой цепи и второй связывающий домен тяжелой цепи совместно образуют второй Fab.