СПОСОБ СОЗДАНИЯ КЛЕТОЧНО-ИНЖЕНЕРНОЙ КОНСТРУКЦИИ И ТКАНЕИНЖЕНЕРНОЙ КОНСТРУКЦИИ НА ЕЁ ОСНОВЕ

1. Способ создания клеточно-инженерной конструкции, характеризующийся тем, что
на заранее подготовленную стерильную сетку-матрикс, предназначенную для имплантации в реконструктивной хирургии, или, по меньшей мере, на один ее фрагмент наносят и выращивают живые соматические и/или стволовые клетки, полученные из тканей, жидкостей, систем и/или органов организма животных, человека, в том числе, с возможным изначальным наличием в составе указанных клеток, включением в их состав при культивировании и/или выделением из их состава: мезенхимальных, нейрональных или эпителиальных клеток, формируя таким образом клеточно-инженерную конструкцию,
при этом волокна/нити указанной сетки могут быть выполнены, по меньшей мере, из одного не деградируемого материала, из синтетического или биополимерного биодеградируемого материала или в виде композиции, по меньшей мере, из двух указанных материалов и/или покрыты, по меньшей мере, одним из указанных материалов или композицией, по меньшей мере, из двух указанных материалов,
при этом в процессе культивирования клеток на матриксе проводят оценку жизнеспособности культуры клеток, с этапом определения количества или долевого числа живых и/или мертвых клеток от общего числа клеток в культуре на поверхности и/или в объеме указанной сетки,
и/или проводят оценку степени заполнения поверхности/объема указанной сетки культурой живых клеток с использованием средств оптической микроскопии, с возможным аппаратным анализом изображений и расчетом указанного параметра,
с возможностью определения момента завершения процесса формирования клеточно-инженерной конструкции при заданном диапазоне значений степени заполнения поверхности/объема матрикса, предназначенного для имплантации, живыми клетками и/или при заданном диапазоне значений доли живых клеток относительно общего числа клеток в культуре.
2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве матрикса используют сетку, материал которой выполнен из композиции тонких не деградируемых волокон изотактического кристаллического стереоизомера полипропилена и синтетического линейного полиолефина (С3Н6)n, толщиной около 0,5 мм или менее.
3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве матрикса используют не деградируемый сетчатый материал типа PROLENE MESH РММ3 (ETHICON) или GYNECARE GYNEMESH PS (ETHICON).
4. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве матрикса используют сетку, материал которой выполнен из викрила, синтетического деградируемого материала, или волокна сетки покрыты викрилом.
5. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве животных для отбора клеток используют лабораторных крыс, самцов или самок.
6. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что на сетку наносят и выращивают культуру мезенхимальных стволовых клеток (МСК), премимущественно, 1-5 пассажа, полученных из костного мозга (КМ) лабораторных животных.
7. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что на сетку наносят и выращивают культуру дермальных фибробластов человека (кожи здорового донора), премимущественно, 1-5 пассажа.
8. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что нанесенные на сетку биологические клетки культивируют/выращивают в соответствии с методикой [10] (раскрыта в заявке, см. аналог).
9. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что указанную клеточно-инженерную конструкцию в стерильных условиях разрезают на два или более фрагментов: сетку - заранее и/или конструкцию - на этапе ее формирования или по завершении этого процесса.
10. Способ по п. 1 или 9, характеризующийся тем, что количество и геометрию фрагментов, на которые разрезают клеточно-инженерную конструкцию, определяют заранее по количеству вариантов клеточно-инженерной конструкции и по месту имплантации указанных фрагментов клеточно-инженерной конструкции группе животных того же вида, что и тех, у которых отбирают клетки для культивирования в указанной конструкции.
11. Способ по п. 1 или 9, характеризующийся тем, что клеточно-инженерную конструкцию разрезают на фрагменты квадратной формы с размерами: 10×10 мм или 20×20 мм.
12. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что момент завершения процесса формирования клеточно-инженерной конструкции определяют при достижении долевого числа живых клеток в 50% или более от общего числа клеток в культуре.
13. Способ формирования тканеинженерной конструкции in situ на основе клеточно-инженерной конструкции (по п. 1 формулы), характеризующийся тем, что
по меньшей мере, одному животному из группы животных, возможно преимущественно, того же вида, что и тех, у которых отбирали клетки для культивирования в клеточно-инженерной конструкции, имплантируют, по меньшей мере, один фрагмент указанной клеточно-инженерной конструкции из аутологичных или не аутологичных клеток в «карман» подапоневротического пространства, образованный в процессе указанной операции имплантации на брюшной стенке животного,
в послеоперационный период обеспечивают условия протекания и контролируют процессы: заживления раны/швов, формирования тканевых структур в месте имплантации животному клеточно-инженерной конструкции и формирования тканеинженерной конструкции в целом.
14. Способ по п. 13, характеризующийся тем, что в качестве животных для имплантации клеточно-инженерной конструкции используют лабораторных крыс, преимущественно - самок.
15. Способ по п. 13, характеризующийся тем, что имплантируемую клеточно-инженерную конструкцию разрезают на фрагменты квадратной формы, преимущественно, с размерами: 10×10 мм или 20×20 мм.
16. Способ по п. 13 или 15, характеризующийся тем, что имплантируют фрагмент клеточно-инженерной конструкции и формируют тканеинженерную конструкцию в центральной, нижней части брюшной стенки лабораторного животного или сбоку, симметрично с контрольной сеткой той же формы, что и клеточно-инженерная конструкция, относительно белой линии живота животного, преимущественно, самки лабораторной крысы.