ЭТИЛОВЫЙ ЭФИР 2-АМИНО-4-ОКСО-5-[2-(НАФТАЛЕН-1-ИЛ)-2-ОКСОЭТИЛ]-5-ФЕНИЛТИО-1Н-4,5-ДИГИДРОФУРАН-3-КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРОТИВОМИКРОБНУЮ АКТИВНОСТЬ
2-AMINO-4-OXO-5-[2-(NAPHTHALEN-1-YL)-2-OXOETHYL]-5-PHENYLTIO-1H-4,5-DIHYDROFURAN-3-CARBOXIC ACID ETHYL ETHER WITH ANTIMICROBIAL ACTIVITY

Заявляемое соединение относится к области органической химии, к производным 2-аминофурана, а именно к новым биологически активным веществам - этиловому эфиру 2-амино-4-оксо-5-[2-(нафтален-1-ил)-2-оксоэтил]-5-фенилтио-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты формулы
который может найти применение в качестве лекарственного против о микробного препарата.
Соединение I получают взаимодействием этилового эфира 2-амино-5-[2-(нафтален-2-ил)-2-оксоэтилиден]-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбонов ой кислоты II с тиофенолом в среде ацетоннтрила. Это соединение представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в диметилформамиде, диметилсульфоксиде, при нагревании - в этаноле, устойчивое при хранении. Известны структурные аналоги заявляемого соединения, получаемые взаимодействием 5-арилфуран-2,3-дионов с циануксусным эфиром [Иванов Д.В., Игидов Н.М., Рубцов А.Е. Синтез производных 2-амнно-5-(2-арил-2-оксоэтилиден)-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновых кислот рециклизацией 5-арилфуран-2,3-дионов под действием производных цианоуксусной кислоты // Журн. орган. химии -2016. - Т. 52, вып. 5. - С. 691-695].
В качестве эталона сравнения нами был взят противомикробный препарат - диоксидин [Tanaka, Т., Murayama, S., Tuda, N., et al. Microbial Degradation of Disinfectants. A New Chiorhexidine Degradation Intermediate (CHDI), CHDI-C, Produced by Pseudomonas sp. Strain No. A-3 // J. Health Sci. - 2005. - Vol. 51. - N. 3. - P. 357-361]. Задачей предлагаемого изобретения является получение нового, неописанного ранее этилового эфира 2-амино-4-оксо-5-[2-(нафтален-1-ил)-2-оксоэтил]-5-фенилтио-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты, обладающего противомикробным действием.
Заявляемое вещество I получали взаимодействием 2-амино-5-[2-(нафтален-2-ил)-2-оксоэтилиден]-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты с тиофенолом в среде ацетонитрила [Bykov E.V., Igidov N.M., Ivanov D.V., Tsechoev А.Т., Novikova V.V. Synthesis and antimicrobial activity of derivatives 2-amino-5-arylthio-4-oxo-5-(2-arylethyl-2-oxo)-4,5-dilrydrofuran-3-carboxilic acid // Topical issues of new drugs development: Abstracts of XXV International Scientific And Practical Conference Of Young Scientists And Student (Kharkiv, April 18-20, 2018). - Kharkiv: NUPh, 2018. - PP. 8-9] по схеме:
10 ммоль этилового эфира 2-амино-5-[2-(нафтален-2-ил)-2-оксоэтилиден]-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты кипятили в 30 мл ацетонитрила с добавлением 10 ммоль тиофенола около одного часа, контролируя протекание реакции методом ТСХ. Затем смесь охлаждали, отфильтровывали выпавший осадок и перекристаллизовывали из этанола.
25
21
5
6
2
аром
аром
6
-1
1
13
Получали 3,9 г бесцветного кристаллического вещества I (87%) с температурой плавления 212-213°С. CHNOS. ИК спектр, ν, см: 3340, 3148 (NH), 1714 (COOEt), 1670, 1630 (С=O, С=С). Спектр ЯМР Н (ДМСО-d) δ, м.д.: 1,15 т (3Н, Me, J 7,0 Гц), 4,04 м (2Н, 2СН), 7,36-7,71 м (7Н.), 7,87-8,12 м (5Н.) 8,66 с (1H, NH), 9,17 с (1H, NH). Спектр ЯМР С (ДМСО-d) δ, м.д.: 14,3, 42,5, 58,3, 86,8, 94,5, 123,1, 126,9, 127,0, 127,6, 128,3, 128,8, 128,9, 129,6, 130,0, 130,5, 132,0, 133,3, 135,1, 136,3, 162,9, 177,4, 185,9, 193,9.
Заявляемое соединение представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в диметилформамиде, диметилсульфоксиде, при нагревании - в этаноле, устойчивое при хранении.
Исследование биологической активности
4
3
5
Противомикробную активность заявляемого соединения I определяли пробирочным методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под ред. А.Н. Миронова, Н.Д. Бунятян, А.Н. Васильева, О.Л. Верстаковой, М.В. Журавлевой, В.К. Лепахина, Н.В. Коробова, В.А. Меркулова, С.Н. Орехова, И.В. Сакаевой, Д.Б. Утешева, А.Н. Яворского. М.: Гриф и К, 2012. Ч. 1. 944 с.]. Скрининг противомикробной активности осуществляли в отношении штаммов: S. epidermidis АТСС 14990, S. aureus АТСС 10832, Е. faecalis АТСС 29212, В. cereus АТСС 10702. Исследуемое соединение массой 0,05 г растворяли в 5 мл ДМСО, получая основной раствор вещества в концентрации 10 мкг/мл. Данный раствор служил основой для рабочего раствора, имеющего концентрацию 2×10 мкг/мл, который последовательно разводили двукратно в жидкой питательной среде в ряду из 10 пробирок. Концентрация исследуемого соединения в первой пробирке ряда разведений в питательной среде составляла 1000,0 мкг/мл. Для определения противомикробной активности использовали питательный бульон. Для приготовления взвеси бактериальных культур применяли суточные культуры, выращенные на питательном агаре. Концентрация микробных клеток в опыте составила 2-5×10 КОЕ/мл. В качестве положительного контроля использовали питательную среду с внесенной исследуемой культурой. В качестве отрицательного контроля использовали интактную питательную среду. Посевы инкубировали в термостате при температуре 35±2°С. Оценку противомикробной активности осуществляли визуально на 18-20 ч инкубирования. Исследования проводили в двух повторах. В качестве значения МПК (минимальной подавляющей концентрации) принимали концентрацию соединения в последней прозрачной пробирке серии разведения.
Противомикробный эффект заявляемого соединения I сравнивали с экспериментальными данными диоксидина. Результаты испытаний представлены в таблице 1.
Как видно из таблицы 1 заявляемое соединение I по противомикробной активности превосходит эффект эталона сравнения диоксидина в отношении неспорообразующих грамположительных микроорганизмов в 8 и более раз, в отношении изученного представителя спорообразующих бактерий - в 4 раза. Наиболее выраженный антибактериальный эффект зафиксирован в отношении изученного штамма S. epidermidis.
Таким образом, заявляемое соединение I проявляет более высокую противомикробную активность по сравнению с эталоном сравнения диоксидином. Это делает возможным его использование для создания нового лекарственного средства, обладающего противомикробной активностью.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Иванов Д.В., Игидов Н.М., Рубцов А.Е. Синтез производных 2-амино-5-(2-арил-2-оксоэтилиден)-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновых кислот рециклизацией 5-арилфуран-2,3-дионов под действием производных цианоуксусной кислоты // Журн. орган, химии - 2016. - Т. 52, вып. 5. - С. 691-695.
2. Tanaka, Т., Murayama, S., Tuda, N., et al. Microbial Degradation of Disinfectants. A New Chlorhexidine Degradation Intermediate (CHDI), CHDI-C, Produced by Pseudomonas sp. Strain No. A-3 // J. Health Sci. - 2005. - Vol. 51 - N. 3. - P. 357-361.
3. Bykov E.V., Igidov N.M., Ivanov D.V., Tsechoev А.Т., Novikova V.V Synthesis and antimicrobial activity of derivatives 2-amino-5-arylthio-4-oxo-5-(2-arylethyl-2-oxo)-4,5-dihydrofuran-3-carboxilic acid // Topical issues of new drugs development: Abstracts of XXV International Scientific And Practical Conference Of Young Scientists And Student (Kharkiv, April 18-20, 2018). - Kharkiv: NUPh, 2018. - PP. 8-9.
4. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. - Ч. 1. - М.: Гриф и К, 2012. - С. 576-578.