ПРОПЕНОАТНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ БЕТУЛИНА
PROPENOATE BETULIN DERIVATIVES

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ПАТЕНТЫ И ПАТЕНТНЫЕ ЗАЯВКИ
Данный документ представляет собой заявку, поданную в соответствии с Договором о патентной кооперации, и заявляет приоритет по заявке, поданной в соответствии с Договором о патентной кооперации в патентное ведомство Китая 14 декабря 2011 г., № PCT/CN 2011/002105 и по заявке, поданной в соответствии с Договором о патентной кооперации в патентное ведомство Китая 21 декабря 2011 г., № PCT/CN 2011/002159, которые тем самым включены посредством ссылки во всей своей полноте.
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к соединениям, являющимся пропеноатными производными, фармацевтическим композициям и способам их применения для (1) ингибирования репликации ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) у субъекта, инфицированного ВИЧ, или (2) лечения субъекта, инфицированного ВИЧ, путем введения таких соединений.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
В настоящее время длительное подавление вирусной репликации антиретровирусными лекарственными средствами представляет собой единственную возможность для лечения ВИЧ-1-инфекции. На сегодняшний день для ряда одобренных к применению лекарственных средств было продемонстрировано значительное повышение выживаемости пациентов. Однако применение схем лечения, известных как высокоактивная антиретровирусная терапия (HAART), зачастую осложняется тем, что для того, чтобы избежать быстрого возникновения лекарственно-устойчивых вариантов ВИЧ-1, пациенту должна быть введена комбинация разных лекарственных средств. Несмотря на положительное влияние HAART на выживаемость пациентов, все еще может иметь место лекарственная устойчивость.
Появление изолятов ВИЧ-1 с множественной лекарственной устойчивостью (MDR) имеет серьезные клинические последствия и должно быть подавлено благодаря применению новой схемы лекарственного лечения, известной как терапия спасения. Современные руководства рекомендуют включать в терапию спасения по меньшей мере два и предпочтительно три в полной мере активных лекарственных средства. Обычно, терапии первой линии объединяют три-четыре лекарственных средства, направленных на вирусные ферменты RT (обратная транскриптаза) и протеазу (PR). Одна из возможностей терапии спасения заключается во введении различных комбинаций лекарственных средств, принадлежащих одному классу по механизму действия, которые остаются активными против резистентных изолятов. Однако возможности такого подхода часто имеют ограничения, поскольку вызывающие резистентность мутации зачастую обуславливают широкую перекрестную устойчивость к разным лекарственным средствам одного и того же класса. Альтернативные терапевтические стратегии стали доступны в последнее время благодаря разработке ингибиторов слияния, проникновения и интегразы (IN). Однако уже сейчас имеются сообщения относительно устойчивости ко всем трем новым классам лекарственных средств как in vitro, так и in vivo. Поэтому для длительного успешного лечения ВИЧ-1-инфицированных пациентов антиретровирусными лекарственными средствами требуется дальнейшая разработка новых и улучшенных лекарственных средств с новыми мишенями и механизмами действия.
Полипротеин-предшественник Gag (Pr55Gag) ВИЧ, который состоит из четырех белковых доменов - матриксного (МА), капсидного (СА), нуклеокапсидного (NC) и р6, и двух спейсерных пептидов, SP1 и SP2, представляет собой новую терапевтическую мишень. Несмотря на то, что расщепление полипротеина Gag играет центральную роль в процессе продуцирования инфекционных вирусных частиц, на сегодняшний день ни одно из антиретровирусных лекарственных средств, воздействующих на этот механизм, не одобрено к применению.
В клетках большинства типов сборка осуществляется на плазматической мембране, и связывание с мембраной опосредуется МА-доменом Gag. Сборка завершается отпочковыванием незрелой частицы от клетки. Одновременно с высвобождением частицы кодируемая вирусом PR расщепляет Gag на четыре зрелых белковых домена, MA, CA, NC и р6, и два спейсерных пептида, SP1 и SP2. Gag-Pol также расщепляется под действием PR с высвобождением вирусных ферментов PR, RT и IN. Протеолитический процессинг Gag индуцирует морфологическую перегруппировку внутри частицы, известную как созревание. В процессе созревания незрелая частица тороидальной формы превращается в зрелый вирион, который содержит сконденсированное коническое ядро, состоящее из CA оболочки, окружающей геномную РНК вируса, в комплексе с NC и вирусными ферментами RT и IN. Созревание готовит вирус для инфицирования новой клетки и является абсолютно необходимым для инфекционности частицы.
10
Бевиримат (РА-457) представляет собой ингибитор созревания, который ингибирует конечную стадию в процессинге Gag, превращение капсид-SP1 (р25) в капсид, необходимое для образования инфекционных вирусных частиц. Бевиримат активен против резистентного к ART (антиретровирусная терапия) ВИЧ и ВИЧ дикого типа и демонстрирует синергизм с антиретровирусными средствами всех классов. Бевиримат снижал вирусную нагрузку ВИЧ в среднем на 1,3 log/мл у тех пациентов, у которых минимальные уровни достигали не менее 20 мкг/мл, и которые не имели никаких ключевых исходных полиморфизмов Gag в положениях Q369, V370 или Т371. Однако принимавшие бевиримат пациенты с полиморфизмами Gag в положениях Q369, V370 или Т371 демонстрировали существенно более низкое снижение нагрузки, чем пациенты без полиморфизмов Gag в этих сайтах.
Поэтому было бы достижением в данной области техники обнаружить альтернативные соединения, эффективные с точки зрения предупреждения и/или лечения ВИЧ-инфекций.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Согласно одному из воплощений настоящего изобретения предложено соединение формулы I:
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
2
W выбран из -CH- или -C(=O)-;
1
6
2
6
2
6
2
n
1
6
2
1
6
1
6
1
6
6
3
3
3
X выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)алкенила, (C-C)алкинила, NH, -CN, -C(O)R, -(Q)R, -(C-C)aлкил-N(R), -(C-C)алкил-OR-(C-C)алкокси и группы амино-(C-C)алкил;
1
2
5
Y выбран из -NRR или -OR;
Z представляет собой ;
1
3
3
1
12
2
12
2
12
1
6
2
1
6
R выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)алкенила, (C-C)алкинила, -(C-C)aлкил-N(R), -(C-C)алкил-OR;
2
3
1
12
2
12
2
12
n
R выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)алкенила, (C-C)алкинила и -(Q)R;
1
2
5
10
2
R и R могут возможно вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образовывать 4-12-членное гетероциклильное или гетероарильное кольцо, каждое из которых независимо содержит от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, и где указанное гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть также возможно и независимо замещено 1-3 группами R;
3
4
4
4
1
6
2
R независимо выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, -R, -C(O)R, -COR, ,  и , где:
5
14
A представляет собой (C-C)арил,
2
9
2
9
B выбран из (C-C)гетероцикла или (C-C)гетероарила, каждый из которых имеет от одного до трех гетероатомов, выбранных из S, N или O, и
3
8
C представляет собой (C-C)циклоалкил;
4
5
1
6
1
6
3
8
3
3
2
2
r
2
2
R независимо выбран из группы, состоящей из галогена, оксо, (C-C)алкила, (C-C)алкокси, (C-C)циклоалкила, -CF, -OCF, -N(R), -(CH)-гетероцикла, -C(O)OH, -C(O)NH и -NO;
5
1
6
3
8
R выбран из группы, состоящей из Н, (C-C)алкила и (C-C)циклоалкила;
6
7
8
7
8
6
10
1
6
3
8
1
6
3
2
r
2
R независимо представляет собой H, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, (C-C)алкокси, галогеналкил, -OCF, -NRR, гетероцикл, -(CH)NRR, -C(O)OH, -C(O)NH, где две группы R могут возможно быть взяты вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного циклоалкильного кольца, где указанное циклоалкильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
7
8
4
14
15
7
8
5
10
1
6
3
8
n
3
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, -Q-арил-(R), -NRR, -C(O)CH, где R и R могут возможно быть взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-8-членного гетероциклильного или гетероарильного кольца, содержащего от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, где указанное гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
9
10
11
3
6
3
6
14
15
3
7
1
3
2
9
10
11
5
4
1
6
q
q
2
1
6
2
R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из оксо, галогена, (C-C)алкокси, -R(R), -OR(R), нитро, -NRR, -SOR, (C-C)алкила, -C(O)R, -RYR и -CO(O)R, где любые две группы из R, R или R могут возможно соединяться с образованием 3-8-членного циклоалкильного, арильного, гетероциклильного или гетероарильного кольца, где указанное гетероциклильное или гетероарильное кольцо может содержать от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, и где указанное циклоалкильное, арильное, гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
12
13
6
6
7
1
2
2
12
13
5
10
1
6
3
8
1
6
2
r
2
r
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)алкокси, -[C(R)]-, -O[C(R)]-, оксо, галогена, -C(O)R, -NRR и -CO(O)R, где R и R могут возможно быть взяты вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного циклоалкильного кольца или 4-8-членного гетероциклильного кольца, содержащего от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO-, где указанное циклоалкильное или гетероциклильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
14
15
3
6
3
6
14
15
5
10
1
6
3
8
1
6
q
q
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)алкокси, -R(R) и -OR(R), где R или R могут быть взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-8-членного гетероциклильного или гетероарильного кольца, возможно содержащего один или три гетероатома, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, где указанное гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
6
2
r
Q представляет собой -[C(R)]-;
m и n независимо представляют собой 0, 1, 2, 3 или 4;
p независимо представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4; и
r и q независимо представляют собой 0, 1, 2, 3 или 4.
Во втором аспекте настоящее изобретение относится к композиции, содержащей а) соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и б) фармацевтически приемлемый эксципиент.
В третьем аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения ВИЧ-инфекции, включающему введение страдающему от нее пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
Соединения по настоящему изобретению полезны для лечения пациентов с ВИЧ-инфекцией.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ РЕПРЕЗЕНТАТИВНЫХ ВОПЛОЩЕНИЙ
По всему тексту данной заявки приведены ссылки на различные воплощения, относящиеся к соединениям, композициям и способам. Различные описанные воплощения предназначены для представления ряда иллюстративных примеров, и их не следует истолковывать как описания альтернативных разновидностей изобретения. Скорее следует отметить, что описания различных воплощений, предложенных в данном изобретении, могут перекрываться. Воплощения, рассмотренные в данном описании, являются главным образом иллюстративными и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.
Следует понимать, что использованная в данном описании терминология применена только для описания конкретных воплощений и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения. В этом описании и в следующей далее формуле изобретения будет сделана ссылка на ряд терминов, которые будут определены как имеющие приведенные ниже значения.
x
y
3
3
2
3
2
2
3
2
3
2
2
2
3
2
2
3
3
2
3
3
3
2
2
2
2
3
3
2
При использовании в данном описании, если не указано иное, ʺалкилʺ относится к моновалентной насыщенной алифатической гидрокарбильной группе, имеющей от 1 до 14 атомов углерода и, в некоторых воплощениях, от 1 до 6 атомов углерода. ʺ(C-C)алкилʺ относится к алкильным группам, имеющим от x до y атомов углерода. Термин ʺалкилʺ включает, в качестве примера, линейные и разветвленные гидрокарбильные группы, такие как метил (CH-), этил (CHCH-), н-пропил (CHCHCH-), изопропил ((CH)CH-), н-бутил (CHCHCHCH-), изобутил ((CH)CHCH-), втор-бутил ((CH)(CHCH)CH-), трет-бутил ((CH)C-), н-пентил (CHCHCHCHCH-) и неопентил ((CH)CCH-).
u
v
1
6
1
6
ʺАлкиленʺ или ʺалкенилʺ относится к двухвалентным насыщенным алифатическим гидрокарбильным группам, имеющим от 1 до 10 атомов углерода и, в некоторых воплощениях, от 1 до 6 атомов углерода. ʺ(C-C)алкиленʺ относится к алкиленовым группам, имеющим от u до v атомов углерода. Алкиленовые группы включают гидрокарбильные группы с разветвленной и прямой цепью. Например, подразумевается, что ʺ(C-C)алкиленʺ включает в себя метилен, этилен, пропилен, 2-метилпропилен, диметилэтилен, пентилен и так далее. Собственно, примером термина ʺпропиленʺ могла бы быть следующая структура: . Аналогичным образом, примером термина ʺдиметилбутиленʺ могла бы быть любая из следующих трех или более структур: , p или . Кроме того, подразумевается, что термин ʺ(C-C)алкиленʺ включает в себя такие гидрокарбильные группы с разветвленной цепью, как циклопропилметилен, примером чего могла бы быть следующая структура: .
x
y
ʺАлкенилʺ относится к линейной или разветвленной гидрокарбильной группе, имеющей от 2 до 10 атомов углерода и, в некоторых воплощениях, от 2 до 6 атомов углерода или от 2 до 4 атомов углерода и имеющей по меньшей мере 1 сайт винил-ненасыщения (>C=C<). Например, ʺ(C-C)алкенилʺ относится к алкенильным группам, имеющим от x до y атомов углерода, и подразумевается, что он включает, например, этенил, пропенил, изопропилен, 1,3-бутадиенил и им подобные.
2
6
ʺАлкинилʺ относится к линейному моновалентному углеводородному радикалу или разветвленному моновалентному углеводородному радикалу, содержащему по меньшей мере одну тройную связь. Также подразумевается, что термин ʺалкинилʺ включает такие гидрокарбильные группы, имеющие одну тройную связь и одну двойную связь. Например, подразумевается, что (C-C)алкинил включает этинил, пропинил и им подобные.
ʺАлкоксиʺ относится к группе -O-алкил, где алкил определен в данном описании. Алкокси включает, в качестве примера, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, трет-бутокси, втор-бутокси и н-пентокси.
3
ʺАцилʺ относится к группам H-C(O)-, алкил-C(O)-, алкенил-C(O)-, алкинил-C(O)-, циклоалкил-C(O)-, арил-C(O)-, гетероарил-C(O)- и гетероциклил-C(O)-. Ацил включает ʺацетильнуюʺ группу CHC(O)-.
20
20
20
20
20
20
20
20
ʺАциламиноʺ относится к группам -NRC(O)алкил, -NRC(O)циклоалкил, -NRC(O)алкенил, -NRC(O)алкинил, -NRC(O)арил, -NRC(O)гетероарил и -NRC(O)гeтepoциклил, где R представляет собой водород или алкил.
ʺАцилоксиʺ относится к группам алкил-C(O)O-, алкенил-C(O)O-, алкинил-C(O)O-, арил-C(O)O-, циклоалкил-C(O)O-, гетероарил-C(O)O- и гетероциклил-C(O)O-.
21
22
21
22
21
22
21
22
21
22
21
22
21
22
2
2
2
2
2
2
ʺАминоʺ относится к группе -NRR, где R и R независимо выбраны из водорода, алкила, алкенила, алкинила, арила, циклоалкила, гетероарила, гетероциклила, групп -SO-алкил, -SO-алкенил, -SO-циклоалкил, -SO-арил, -SO-гетероарил и -SO-гетероциклил, и где R и R возможно соединены вместе с атомом азота, связанным с ними, с образованием гетероциклической группы. Когда R представляет собой водород, и R представляет собой алкил, аминогруппу иногда обозначают в данном описании как алкиламино. Когда R и R представляют собой алкил, аминогруппу иногда обозначают в данном описании как диалкиламино. Когда приводится ссылка на монозамещенный амино, то понимают, что или R, или R представляет собой водород, но не оба. Когда приводится ссылка на дизамещенный амино, то понимают, что ни R, ни R не представляют собой водород.
ʺГидроксиаминоʺ относится к группе -NHOH.
ʺАлкоксиаминоʺ относится к группе -NHO-алкил, где алкил определен в данном описании.
26
27
26
27
26
27
ʺАминокарбонилʺ относится к группе -C(O)NRR, где R и R независимо выбраны из водорода, алкила, алкенила, алкинила, арила, циклоалкила, гетероарила, гетероциклила, гидрокси, алкокси, амино и ациламино, и где R и R возможно соединены вместе с атомом азота, связанным с ними, с образованием гетероциклической группы.
ʺАрилʺ относится к ароматической группе из 6-14 атомов углерода, не имеющей никаких гетероатомов в кольце и имеющей единственное кольцо (например, фенил) или несколько конденсированных (слитых) колец (например, нафтил или антрил). Для систем, состоящих из нескольких колец, включая конденсированные, соединенные мостиковой связью и спиро-кольцевые системы, имеющие ароматические и неароматические кольца, в которых нет никаких кольцевых гетероатомов, термин ʺарилʺ или ʺArʺ применяют, когда место присоединения находится на ароматическом атоме углерода (например, 5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ил представляет собой арильную группу, поскольку место ее присоединения находится в положении 2 ароматического фенильного кольца).
ʺЦианоʺ или ʺнитрилʺ относится к группе -CN.
ʺЦиклоалкилʺ относится к насыщенной или частично насыщенной циклической группе из 3-14 атомов углерода, не имеющей никаких гетероатомов в кольце и имеющей единственное кольцо или несколько колец, включая конденсированные, соединенные мостиковой связью и спиро-кольцевые системы. Для систем, состоящих из нескольких колец, имеющих ароматические и неароматические кольца, в которых нет никаких кольцевых гетероатомов, термин ʺциклоалкилʺ применяют, когда место присоединения находится на неароматическом атоме углерода (например, 5,6,7,8-тетрагидронафталин-5-ил). Термин ʺциклоалкилʺ включает в себя циклоалкенильные группы, такие как циклогексенил. Примеры циклоалкильных групп включают, например, адамантил, циклопропил, циклобутил, циклогексил, циклопентил, циклооктил, циклопентенил и циклогексенил. Примерами циклоалкильных групп, которые включают множественные бициклоалкильные кольцевые системы, являются бициклогексил, бициклопентил, бициклооктил и им подобные. Ниже приведены в качестве примера вместе со своим названием две такие бициклоалкильные множественные кольцевые структуры:  бициклогексил и  бициклогексил.
u
v
ʺ(C-C)циклоалкилʺ относится к циклоалкильным группам, имеющим от u до v атомов углерода.
ʺСпиро-циклоалкилʺ относится к 3-10 членному циклическому заместителю, образованному путем замены двух атомов водорода при одном атоме углерода в циклической кольцевой структуре или в алкиленовой группе, имеющей 2-9 атомов углерода, и примером является приведенная ниже структура, где показанная там группа, присоединенная к связям, отмеченным волнистыми линиями, замещена спиро-циклоалкильной группой:
.
ʺКонденсированный циклоалкилʺ относится к 3-10 членному циклическому заместителю, образованному путем замены двух атомов водорода при разных атомах углерода в циклоалкильной кольцевой структуре, и примером является приведенная ниже структура, где показанная там циклоалкильная группа содержит связи, отмеченные волнистыми линиями, присоединенные к атомам углерода, которые замещены конденсированной циклоалкильной группой:
.
2
ʺКарбоксиʺ или ʺкарбоксилʺ взаимозаменяемо обозначает группы , , -C(O)O или -CO.
ʺГалогеноʺ или ʺгалогенʺ относится к атому фтора, хлора, брома и иода.
ʺГалогеналкоксиʺ относится к замещению алкоксигрупп 1-5 (например, когда алкоксигруппа имеет по меньшей мере 2 атома углерода) или в некоторых воплощениях 1-3 группами галогено (например, трифторметокси).
ʺГидроксиʺ или ʺгидроксилʺ относится к группе -OH.
ʺГетероарилʺ относится к ароматической группе из 1-14 атомов углерода и 1-6 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, и включает в себя системы, состоящие из одного кольца (например, имидазолил) и нескольких колец (например, бензимидазол-2-ил и бензимидазол-6-ил). Для систем, состоящих из нескольких колец, включая конденсированные, соединенные мостиковой связью и спиро-кольцевые системы, имеющие ароматические и неароматические кольца, термин ʺгетероарилʺ применяют, если имеется по меньшей мере один кольцевой гетероатом, и местом присоединения является атом ароматического кольца (например, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-ил и 5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3-ил). В некоторых воплощениях кольцевой(ые) атом(ы) азота и/или серы в гетероарильной группе возможно окислен(ы) с получением группировок N-оксида (N→O), сульфинила или сульфонила. Более конкретно термин ʺгетероарилʺ включает в себя, но не ограничивается этим, пиридил, фуранил, тиенил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, имидазолил, имидазолинил, изоксазолил, пирролил, пиразолил, пиридазинил, пиримидинил, пуринил, фталазинил, нафтилпиридил, бензофуранил, тетрагидробензофуранил, изобензофуранил, бензотиазолил, бензоизотиазолил, бензотриазолил, индолил, изоиндолил, индолизинил, дигидроиндолил, индазолил, индолинил, бензоксазолил, хинолил, изохинолил, хинолизинил, хиназолинил, хиноксалинил, тетрагидрохинолинил, изохинолил, хиназолинонил, бензимидазолил, бензизоксазолил, бензотиенил, бензопиридазинил, птеридинил, карбазолил, карболинил, фенантридинил, акридинил, фенантролинил, феназинил, феноксазинил, фенотиазинил и фталимидил.
3
10
Термин ʺгетероциклическийʺ, или ʺгетероциклʺ, или ʺгетероциклоалкилʺ, или ʺгетероциклилʺ относится к насыщенной или частично насыщенной циклической группе, имеющей от 1 до 14 атомов углерода и от 1 до 6 гетероатомов, выбранных из азота, серы, фосфора или кислорода, и включает в себя кольцевые системы, состоящие из одного кольца или нескольких колец, в том числе конденсированные, соединенные мостиковой связью и спиро-кольцевые системы. Для систем, состоящих из нескольких колец, имеющих ароматические и/или неароматические кольца, термины ʺгетероциклическийʺ, ʺгетероциклʺ, ʺгетероциклоалкилʺ или ʺгетероциклилʺ применяют, когда имеется по меньшей мере один кольцевой гетероатом, и местом присоединения является атом неароматического кольца (например, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-3-ил, 5,6,7,8-тетрагидрохинолин-6-ил и декагидрохинолин-6-ил). В одном из воплощений атом(ы) азота, фосфора и/или серы в гетероциклической группе возможно окислены с получением группировок N-оксида, фосфинан оксида, сульфинила, сульфонила. Более конкретно гетероциклил включает, но не ограничивается этим, тетрагидропиранил, пиперидинил, пиперазинил, 3-пирролидинил, 2-пирролидон-1-ил, морфолинил и пирролидинил. Префикс, указывающий количество атомов углерода (например, C-C), относится к общему числу атомов углерода в части гетероциклильной группы без учета числа гетероатомов.
Примеры гетероциклильных и гетероарильных групп включают, но не ограничиваются этим, группы азетидина, пиррола, имидазола, пиразола, пиридина, пиразина, пиримидина, пиридазина, пиридона, индолизина, изоиндола, индола, дигидроиндола, индазола, пурина, хинолизина, изохинолина, хинолина, фталазина, нафтилпиридина, хиноксалина, хиназолина, циннолина, птеридина, карбазола, карболина, фенантридина, акридина, батофенантролина, изотиазола, феназина, изоксазола, феноксазина, фенотиазина, имидазолидина, имидазолина, пиперидина, пиперазина, индолина, фталимида, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолина, 4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофена, тиазола, тиазолидина, тиофена, бензо[b]тиофена, морфолина, тиоморфолина (также обозначаемого как тиаморфолин), пиперидина, пирролидина и тетрагидрофуранила.
ʺКонденсированный гетероциклилʺ относится к 3-10-членному циклическому заместителю, образованному путем замены двух атомов водорода у разных атомов углерода в циклоалкильной кольцевой структуре, и примером является приведенная ниже структура, где показанная там циклоалкильная группа содержит связи, отмеченные волнистыми линиями, присоединенные к атомам углерода, которые замещены конденсированной гетероциклической группой:
.
Термины ʺсоединениеʺ, ʺсоединенияʺ, ʺхимическое соединениеʺ и ʺхимические соединенияʺ, использованные в данном описании, относятся к соединению, охваченному общими формулами, приведенными в данном описании, любой подгруппой этих общих формул, и к любым формам соединений в пределах таких общих формул и их подгрупп, включая рацематы, стереоизомеры и таутомеры соединения или соединений.
+
-
2
Термин ʺгетероатомʺ означает атом азота, кислорода или серы и включает в себя любую окисленную форму азота, такую как N(O) {N-O}, и серы, такую как S(O) и S(O), и кватернизованную форму любого основного азота.
ʺОксазолидинонʺ относится к 5-членному гетероциклическому кольцу, содержащему один атом азота и один атом кислорода в качестве гетероатомов, и он также содержит два атома углерода и замещен по одному из этих двух атомов углерода карбонильной группой, и примером является любая из следующих структур, при этом показанные здесь оксазолидиноновые группы присоединены к родительской молекуле, что указывается волнистой линией, изображенной на связи с родительской молекулой:
или .
Термин ʺрацематыʺ относится к смеси энантиомеров. В одном из воплощений изобретения соединения формулы 1 или их фармацевтически приемлемые соли являются энантиомерно обогащенными по одному энантиомеру, у которого все хиральные атомы углерода находятся в одной конфигурации. В общем случае понимается, что ссылка на энантиомерно обогащенное соединение или соль указывает на то, что конкретный энантиомер будет составлять более 50% по массе от общей массы всех энантиомеров данного соединения или соли.
ʺСольватʺ или ʺсольватыʺ соединения относятся к таким определенным выше соединениям, которые находятся в связанном состоянии с растворителем в стехиометрическом или нестехиометрическом количестве. Сольваты соединения включает сольваты всех форм соединения. В некоторых воплощениях растворители являются летучими, нетоксичными и/или приемлемыми для введения людям в следовых количествах. Подходящие сольваты включают воду.
Термин ʺстереоизомерʺ или ʺстереоизомерыʺ относится к соединениям, которые отличаются по хиральности одного или более стереоцентров. Стереоизомеры включают энантиомеры и диастереомеры.
ʺТаутомерʺ относится к альтернативным формам соединения, которые отличаются по положению протона, таким как таутомеры, характеризующиеся кето-енольной и имин-енаминной таутомерией, или таутомерные формы гетероарильных групп, содержащих кольцевой атом, присоединенный как к группировке -NH- кольца, так и к группировке =N- кольца, такие как пиразолы, имидазолы, бензимидазолы, триазолы и тетразолы.
x
Термин ʺатропоизомерʺ относится к стереоизомеру, возникающему вследствие наличия оси асимметрии. Это может быть результатом ограничения вращения вокруг одинарной связи, когда барьер вращения достаточно высок для того, чтобы иметь возможность разделения изомерных видов, вплоть до полного выделения стабильных не взаимопревращающихся диастереомерных или энантиомерных разновидностей [ссылка на Eliel]. Специалисту в данной области техники известно, что после введения несимметричного R в коровую часть молекулы возможно образование атропоизомеров. Кроме того, как только в заданную молекулу, содержащую атропоизомер, вводится второй хиральный центр, эти два хиральных элемента, взятые вместе, могут создавать диастереомерные и энантиомерные стереохимические разновидности. В зависимости от замещения вокруг оси Cx, между атропоизомерами возможно может происходить или не происходить взаимопревращение, и оно может зависеть от температуры. В некоторых случаях взаимопревращение атропоизомеров может происходить быстро при комнатной температуре, и их разделение в условиях окружающей среды невозможно. Имеются другие ситуации, которые могут способствовать разделению и выделению, но взаимопревращение может осуществляться в течение периода времени от нескольких секунд до нескольких часов или даже суток либо месяцев, таким образом оптическая чистота заметно ухудшается в зависимости от времени. При этом у других разновидностей может полностью отсутствовать взаимопревращение при температуре окружающей среды и/или повышенной температуре, вследствие чего процесс разделения и выделения становится возможным и приводит к получению стабильных разновидностей. Тогда, когда это было известно, разделенным атропоизомерам давали названия с использованием номенклатуры спиралей. Для такого обозначения самыми важными считаются только два лиганда впереди и позади оси. В том случае, когда приоритетным является поворот от ʺпереднегоʺ лиганда (front ligand) 1 к ʺзаднемуʺ лиганду (rear ligand) 1 осуществляется по часовой стрелке, конфигурация называется P-конфигурацией (от англ. plus), если против часовой стрелки, то M-конфигурацией (от англ. minus).
Термин ʺфармацевтически приемлемая сольʺ относится к фармацевтически приемлемые солям, происходящим из ряда органических и неорганических противоионов, хорошо известных в данной области техники, и включающим только в качестве примера соли натрия, калия, кальция, магния, аммония и тетраалкиламмония, и, когда молекула содержит основные функциональные группы, соли органических или неорганических кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, тартрат, мезилат, ацетат, малеат и оксалат. Подходящие соли включают соли, описанные в Р. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (Eds.), Handbook of Pharmaceutical Salts Properties, Selection, and Use, 2002.
Термин ʺпациентʺ относится к млекопитающим и включает в себя людей и млекопитающих, не являющихся людьми.
ʺПодвергание лечениюʺ или ʺлечениеʺ заболевания у пациента относится к 1) предупреждению возникновения заболевания у пациента, предрасположенного к данному заболеванию или еще не проявляющего симптомы данного заболевания; 2) подавлению заболевания или прекращению его развития; или 3) облегчению или вызыванию регрессии заболевания.
Настоящее изобретение включает соединения, а также их фармацевтически приемлемые соли. Соответственно, подразумевается, что слово ʺилиʺ в контексте ʺсоединения или его фармацевтически приемлемой солиʺ относится либо к: 1) самому соединению или его фармацевтически приемлемой соли (как альтернативы), либо к 2) соединению и его фармацевтически приемлемой соли (в комбинации).
x
x
x
x
y
y
2
Если не указано иное, обозначение заместителей, которые в явном виде не определены в данном описании, дается путем перечисления их названий, начиная от концевой функциональной группы, затем ближайшей к ней функциональной группы в направлении к месту присоединения. Например, заместитель ʺарилалкилоксикарбонилʺ относится к группе (арил)-(алкил)-O-C(O)-. Для такого выражения, как ʺ-C(R)ʺ, следует понимать, что две группы R могут быть одинаковыми или могут быть разными, если в определении R приводится более одного возможного значения. Кроме того, изображение некоторых заместителей приводится в виде -RR, где ʺ-ʺ указывает на связь, примыкающую к исходной молекуле, а R представляет собой концевую часть функциональной группы. Также очевидно, что упомянутые выше определения не предполагают включения недопустимых типов замещения (например, метила, замещенного 5 группами фтора). Такие недопустимые типы замещения хорошо известны специалисту в данной области.
Согласно одному из воплощений настоящего изобретения предложено соединение формулы I:
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
2
W выбран из -CH- или -C(=O)-;
1
6
2
6
2
6
2
n
1
6
2
1
6
1
6
1
6
6
3
3
3
X выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)алкенила, (C-C)алкинила, NH, -CN, -C(O)R, -(Q)R, -(C-C)aлкил-N(R), -(C-C)алкил-OR-(C-C)алкокси и группы амино-(C-C)алкил;
1
2
5
Y выбран из -NRR или -OR;
Z представляет собой ;
1
3
3
1
12
2
12
2
12
1
6
2
1
6
R выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)алкенила, (C-C)алкинила, -(C-C)aлкил-N(R), -(C-C)алкил-OR;
2
3
1
12
2
12
2
12
n
R выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)алкенила, (C-C)алкинила и -(Q)R;
1
2
5
10
2
R и R могут возможно, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образовывать 4-12-членное гетероциклильное или гетероарильное кольцо, каждое из которых независимо содержит от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, и где указанное гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть также возможно и независимо замещено 1-3 группами R;
3
4
4
4
1
6
2
R независимо выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, -R, -C(O)R, -COR, ,  и , где:
5
14
A представляет собой (C-C)арил,
2
9
2
9
B выбран из (C-C)гетероциклила или (C-C)гетероарила, каждый из которых имеет от одного до трех гетероатомов, выбранных из S, N или O, и
3
8
C представляет собой (C-C)циклоалкил;
4
5
1
6
1
6
3
8
3
3
2
2
r
2
2
R независимо выбран из группы, состоящей из галогена, оксо, (C-C)алкила, (C-C)алкокси, (C-C)циклоалкила, -CF, -OCF, -N(R), -(CH)-гетероцикла, -C(O)OH, -C(O)NH и -NO;
5
1
6
3
8
R выбран из группы, состоящей из H, (C-C)алкила и (C-C)циклоалкила;
6
7
8
7
8
6
10
1
6
3
8
1
6
3
2
r
2
R независимо представляет собой H, (C-C)алкил, (C-C)циклоалкил, (C-C)алкокси, галогеналкил, -OCF, -NRR, гетероцикл, -(CH)NRR, -C(O)OH, -C(O)NH, где две группы R могут возможно быть взяты вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного циклоалкильного кольца, где указанное циклоалкильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
7
8
4
14
15
7
8
5
10
1
6
3
8
n
3
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, -Q-арил-(R), -NRR, -C(O)CH, где R и R могут возможно быть взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-8-членного гетероциклильного или гетероарильного кольца, содержащего от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, где указанное гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
9
10
11
3
6
3
6
14
15
3
7
1
3
2
9
10
11
5
4
1
6
q
q
2
1
6
2
R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из оксо, галогена, (C-C)алкокси, -R(R), -OR(R), нитро, -NRR, -SOR, (C-C)алкила, -C(O)R, -RYR и -CO(O)R, где любые две группы из R, R или R могут возможно соединяться с образованием 3-8-членного циклоалкильного, арильного, гетероциклильного или гетероарильного кольца, где указанное гетероциклильное или гетероарильное кольцо может содержать от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, и где указанное циклоалкильное, арильное, гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
12
13
6
6
7
1
2
2
12
13
5
10
1
6
3
8
1
6
2
r
2
r
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)алкокси, -[C(R)]-, -O[C(R)]-, оксо, галогена, -C(O)R, -NRR и -CO(O)R, где R и R могут возможно быть взяты вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного циклоалкильного кольца или 4-8-членного гетероциклильного кольца, содержащего от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO-, где указанное циклоалкильное или гетероциклильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
14
15
3
6
3
6
14
15
5
10
1
6
3
8
1
6
q
q
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)алкокси, -R(R) и -OR(R), где R или R могут быть взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-8-членного гетероциклильного или гетероарильного кольца, возможно содержащего один или три гетероатома, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, где гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
6
2
r
Q представляет собой -[C(R)]-;
m и n независимо представляют собой 0, 1, 2, 3 или 4;
p независимо представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4; и
r и q независимо представляют собой 0, 1, 2, 3 или 4.
Согласно другому воплощению настоящего изобретения предложено соединение формулы I:
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
2
W выбран из -CH- или -C(=O)-;
1
6
X выбран из H или C-C-алкила;
1
2
5
Y выбран из -NRR или -OR;
Z представляет собой ;
1
2
3
3
1
6
n
каждый из R и R независимо выбран из группы, состоящей из H, -(C-C)алкил-OR и группы -(Q)R;
3
R выбран из группы, состоящей из ,  и , где:
5
14
A представляет собой (C-C)арил,
2
9
2
9
B выбран из (C-C)гетероцикла или (C-C)гетероарила, каждый из которых имеет от одного до трех гетероатомов, выбранных из S, N или O, и
3
7
C представляет собой (C-C)циклоалкил;
5
R представляет собой H;
6
6
10
1
6
R независимо выбран из Н или (C-C)алкила, причем две алкильные группы R могут возможно быть взяты вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного циклоалкильного кольца, где указанное циклоалкильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
9
10
11
3
6
3
6
14
15
3
7
1
3
2
1
6
q
q
2
1
6
R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из оксо, галогена, (C-C)алкокси, -R(R), -OR(R), нитро, -NRR, -SOR, (C-C)алкила, -C(O)R, -RYR и -CO(O)R;
12
13
6
6
7
1
2
2
12
13
5
10
1
6
3
8
1
6
2
r
2
r
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)алкокси, -[C(R)]-, -O[C(R)]-, оксо, галогена, -C(O)R, -NRR и -CO(O)R, где R и R могут возможно быть взяты вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного циклоалкильного кольца или 4-8-членного гетероциклильного кольца, содержащего от одного до трех гетероатомов, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO-, где указанное циклоалкильное или гетероциклильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
14
15
3
6
3
6
14
15
5
10
1
6
3
8
1
6
q
q
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из H, (C-C)алкила, (C-C)циклоалкила, (C-C)алкокси, -R(R) и -OR(R), где R или R могут быть взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-8-членного гетероциклильного или гетероарильного кольца, возможно содержащего один или три гетероатома, выбранных из -NR-, -O-, -S-, -S(O)- или -SO-, где гетероциклильное или гетероарильное кольцо может быть возможно замещено 1-3 группами R;
6
2
r
Q представляет собой -[C(R)]-;
m и n независимо представляют собой 0, 1, 2, 3 или 4;
p независимо представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4; и
r и q независимо представляют собой 0, 1, 2, 3 или 4.
В следующем воплощении настоящего изобретения предложена композиция, содержащая а) соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль; и б) фармацевтически приемлемый эксципиент.
В следующем воплощении настоящего изобретения предложен способ лечения ВИЧ-инфекции, включающий введение пациенту, страдающему от нее, эффективного количества соединения формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли.
Такие соединения по изобретению могут существовать в конкретных геометрических или стереоизомерных формах. Изобретение охватывает все такие соединения, включая цис- и транс-изомеры, (-)- и (+)-энантиомеры, (R)- и (S)-энантиомеры, диастереомеры, (D)-изомеры, (L)-изомеры, их рацемические смеси и другие их смеси, такие как энантиомерно или диастереомерно обогащенные смеси, как попадающие в пределы объема изобретения. В таком заместителе, как алкильная группа, могут присутствовать дополнительные асимметрические атомы углерода. Подразумевается, что все такие изомеры, а также их смеси, включены в данное изобретение.
Оптически активные (R)- и (S)-изомеры и d- и l-изомеры могут быть получены с использованием хиральных синтонов или хиральных реагентов или разделены традиционными методами. Если, например, желателен конкретный энантиомер соединения по настоящему изобретению, его можно получить посредством асимметрического синтеза или путем образования производных с использованием хирального вспомогательного вещества, при этом полученную диастереомерную смесь разделяют и отщепляют вспомогательную группу с получением чистых желаемых энантиомеров. Альтернативно, в том случае, когда молекула содержит основную функциональную группу, такую как аминогруппа, или кислотную функциональную группу, такую как карбоксильная группа, можно образовать диастереомерные соли с соответствующими оптически активными кислотой или основанием, затем разделить образованные таким образом диастереомеры фракционной кристаллизацией или хроматографическими методами, известными в данной области техники, и после этого извлечь чистые энантиомеры. Кроме того, разделение энантиомеров и диастереомеров зачастую выполняют, используя хроматографию с применением хиральных неподвижных фаз, возможно в комбинации с получением производных путем химических превращений (например, с образованием карбаматов из аминов).
В другом воплощении изобретения предложено соединение формулы I, где соединение или соль соединения используют в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении вирусной инфекции у человека.
В другом воплощении изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый разбавитель и терапевтически эффективное количество соединения, которое определено формулой I.
В одном из воплощений фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его соль представляет собой композицию, адаптированную для парентерального введения. В другом воплощении композиция представляет собой парентеральную композицию длительного действия. В следующем воплощении композиция представляет собой композицию на основе наночастиц.
Соединения по настоящему изобретению и их соли, сольваты или другие их фармацевтически приемлемые производные можно применять по отдельности или в комбинации с другими терапевтическими агентами. Соединения по настоящему изобретению и любой(ые) другой(ие) фармацевтически активный(ые) агент(ы) могут быть введены вместе или по отдельности, и в случае раздельного введения оно может осуществляться одновременно или последовательно в любом порядке. Количества соединений по настоящему изобретению и другого(их) фармацевтически активного(ых) агента(ов) и относительные временные интервалы введения будут выбраны с целью достижения желаемого комбинированного терапевтического эффекта. Введение соединения по настоящему изобретению и его солей, сольватов или других фармацевтически приемлемых производных в сочетании с другими терапевтическими агентами может осуществляться в комбинации путем совместного введения в: (1) единой фармацевтической композиции, включающей в себя оба соединения; или (2) отдельных фармацевтических композициях, каждая из которых включает в себя одно из соединений. Альтернативно, данная комбинация может быть введена по отдельности последовательно друг за другом, причем один терапевтический агент вводят первым, а другой вторым, или наоборот. Такое последовательное введение может осуществляться близко во времени или отдаленно во времени. Количества соединения(ий) формулы I или их солей и другого(их) фармацевтически активного(ых) агента(ов) и относительные временные интервалы введения будут выбраны с целью достижения желаемого комбинированного терапевтического эффекта.
По сути, соединения по настоящему изобретению могут быть использованы в комбинации с одним или более агентами, полезными в предупреждении или лечении ВИЧ-инфекций.
Примеры таких агентов включают:
нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы, такие как зидовудин, диданозин, ламивудин, залцитабин, абакавир, ставудин, адефовир, адефовира дипивоксил, фозивудин, тодоксил, эмтрицитабин, аловудин, амдоксовир, элвуцитабин и подобные агенты;
ненуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы (в том числе агент, имеющий антиоксидантную активность, такой как иммунокал, олтипраз и т.д.), такие как невирапин, делавирдин, эфавиренз, ловирид, иммунокал, олтипраз, каправирин, лерсивирин, GSK2248761, ТМС-278, ТМС-125, этравирин и подобные агенты;
ингибиторы протеаз, такие как саквинавир, ритонавир, индинавир, нелфинавир, ампренавир, фосампренавир, бреканавир, дарунавир, атазанавир, типранавир, палинавир, ласинавир и подобные агенты;
ингибиторы проникновения, присоединения и слияния, такие как энфувиртид (Т-20), Т-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, BMS-663068 и BMS-626529, 5-Helix и подобные агенты;
ингибиторы интегразы, такие как ралтегравир, элвитегравир, GSK1349572, GSK1265744 и подобные агенты;
ингибиторы созревания, такие как РА-344 и РА-457 и подобные агенты; и
ингибиторы CXCR4 (хемокиновый рецептор семейства СХС) и/или CCR5 (хемокиновый рецептор семейства СС), такие как викривирок (Sch-C), Sch-D, TAK779, маравирок (UK 427857), TAK449, а также описанные в WO 02/74769, PCT/US 03/39644, PCT/US 03/39975, PCT/US 03/39619, PCT/US 03/39618, PCT/US 03/39740 и PCT/US 03/39732 и подобные агенты.
Комбинации соединений по данному изобретению с агентами против ВИЧ не ограничиваются таковыми, упомянутыми выше, а включают в принципе любую комбинацию с любой фармацевтической композицией, полезной для лечения ВИЧ-инфекции. Как уже отмечалось, в таких комбинациях соединения по настоящему изобретению и другие агенты против ВИЧ можно вводить по отдельности или совместно. К тому же, один агент может быть введен до, одновременно или после введения другого(их) агента(ов).
Настоящее изобретение может быть применено в комбинации с одним или более агентами, полезными в качестве фармакологических усилителей, а также с добавлением или без добавления дополнительных соединений для предупреждения или лечения ВИЧ-инфекции. Примеры таких фармакологических усилителей (или фармакокинетических бустеров) включают, но не ограничиваются этим, ритонавир, GS-9350 и SPI-452.
Ритонавир представляет собой 5-тиазолилметиловый эфир 10-гидрокси-2-метил-5-(1-метилэтил)-1-1[2-(1-метилэтил)-4-тиазолил]-3,6-диоксо-8,11-бис(фенилметил)-2,4,7,12-тетраазатридекан-13-овой кислоты [5S-(5S*,8R*,10R*,11R*)], и поставляется Abbott Laboratories из Abbott Park, Illinois, под наименованием «норвир». Ритонавир представляет собой ингибитор протеазы ВИЧ, показанный к применению вместе с другими антиретровирусными агентами для лечения ВИЧ-инфекции. Кроме того, ритонавир ингибирует Р450-опосредованный метаболизм лекарственных средств, а также систему клеточного транспорта с участием P-гликопротеина (Pgp), что приводит к увеличению концентрации активного вещества внутри организма.
GS-9350 представляет собой соединение, разрабатываемое Gilead Sciences из Foster City, California, в качестве фармакологического усилителя.
SPI-452 представляет собой соединение, разрабатываемое Sequoia Pharmaceuticals из Gaithersburg, Maryland, в качестве фармакологического усилителя.
В одном из воплощений настоящего изобретения соединение формулы I используют в комбинации с ритонавиром. В одном из воплощений комбинация представляет собой фиксированную комбинацию для перорального введения. В другом воплощении, на основе соединения формулы I изготавливают препарат в виде парентеральной инъекции длительного действия, а на основе, ритонавира изготавливают препарат в виде пероральной композиции. В одном из воплощений предложен набор, содержащий препарат, изготовленный на основе соединения формулы I, в виде парентеральной инъекции длительного действия и препарат, изготовленный на основе ритонавира, в виде пероральной композиции. В другом воплощении, на основе соединения формулы I изготавливают препарат в виде парентеральной инъекции длительного действия, а на основе ритонавира изготавливают препарат в виде инъекционной композиции. В одном из воплощений предложен набор, содержащий препарат, изготовленный на основе соединения формулы I, в виде парентеральной инъекции длительного действия и препарат, изготовленный на основе ритонавира, в виде инъекционной композиции.
В другом воплощении настоящего изобретения соединение формулы I используют в комбинации с GS-9350. В одном из воплощений комбинация представляет собой фиксированную комбинацию для перорального введения. В другом воплощении, на основе соединения формулы I изготавливают препарат в виде парентеральной инъекции длительного действия, а на основе GS-9350 изготавливают препарат в виде пероральной композиции. В одном из воплощений предложен набор, содержащий препарат, изготовленный на основе соединения формулы I, в виде парентеральной инъекции длительного действия и препарат, изготовленный на основе GS-9350, в виде пероральной композиции. В другом воплощении, на основе соединения формулы I изготавливают препарат в виде парентеральной инъекции длительного действия, а на основе GS-9350 изготавливают препарат в виде инъекционной композиции. В одном из воплощений предложен набор, содержащий препарат, изготовленный на основе соединения формулы I, в виде парентеральной инъекции длительного действия и препарат, изготовленный на основе GS-9350, в виде инъекционной композиции.
В одном из воплощений настоящего изобретения соединение формулы I используют в комбинации с SPI-452. В одном из воплощений комбинация представляет собой фиксированную комбинацию для перорального введения. В другом воплощении, на основе соединения формулы I изготавливают препарат в виде парентеральной инъекции длительного действия, а на основе SPI-452 изготавливают препарат в виде пероральной композиции. В одном из воплощений предложен набор, содержащий препарат, изготовленный на основе соединения формулы I, в виде парентеральной инъекции длительного действия и препарат, изготовленный на основе SPI-452, в виде пероральной композиции. В другом воплощении, на основе соединения формулы I изготавливают препарат в виде парентеральной инъекции длительного действия, а на основе SPI-452 изготавливают препарат в виде инъекционной композиции. В одном из воплощений предложен набор, содержащий препарат, изготовленный на основе соединения формулы I, в виде парентеральной инъекции длительного действия и препарат, изготовленный на основе SPI-452, в виде инъекционной композиции.
Другие вышеупомянутые терапевтические агенты, когда их применяют в комбинации с химическими соединениями, изложенными в данном описании, могут быть использованы, например, в количествах, указанных в настольном справочнике врача (Physicians' Desk Reference, PDR) или иным образом определенных средним специалистом в данной области.
В другом воплощении изобретения предложен способ лечения вирусной инфекции у млекопитающего, опосредованной по меньшей мере частично вирусом из ретровирусного семейства вирусов, включающий введение млекопитающему, которому был поставлен диагноз указанной вирусной инфекции или у которого есть риск развития указанной вирусной инфекции, соединения формулы I.
В другом воплощении изобретения предложен способ лечения вирусной инфекции у млекопитающего, опосредованной по меньшей мере частично вирусом из ретровирусного семейства вирусов, включающий введение млекопитающему, которому был поставлен диагноз указанной вирусной инфекции или у которого есть риск развития указанной вирусной инфекции, соединения формулы I, где указанный вирус представляет собой вирус ВИЧ.
В другом воплощении изобретения предложен способ лечения вирусной инфекции у млекопитающего, опосредованной по меньшей мере частично вирусом из ретровирусного семейства вирусов, включающий введение млекопитающему, которому был поставлен диагноз указанной вирусной инфекции или у которого есть риск развития указанной вирусной инфекции, соединения формулы I, дополнительно включающий введение терапевтически эффективного количества одного или более агентов, активных против вируса ВИЧ.
В другом воплощении изобретения предложен способ лечения вирусной инфекции у млекопитающего, опосредованной по меньшей мере частично вирусом из ретровирусного семейства вирусов, включающий введение млекопитающему, которому был поставлен диагноз указанной вирусной инфекции или у которого есть риск развития указанной вирусной инфекции, соединения формулы I, дополнительно включающий введение терапевтически эффективного количества одного или более агентов, активных против вируса ВИЧ, выбранных из нуклеотидных ингибиторов обратной транскриптазы; ненуклеотидных ингибиторов обратной транскриптазы; ингибиторов протеаз; ингибиторов проникновения, присоединения и слияния; ингибиторов интегразы; ингибиторов созревания; ингибиторов CXCR4 и ингибиторов CCR5.
В следующих воплощениях соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль выбраны из соединений, приведенных в Таблице 1.
Приведенные с Таблице 1 соединения синтезировали в соответствии со способами синтеза, общими схемами и примерами, описанными ниже.
В некоторых воплощениях соединение(я) по настоящему изобретению или его(их) фармацевтически приемлемая соль, выбрано(ы) из соединений, приведенных в Таблице 1.
Способы синтеза
В способах синтеза для предложенных химических соединений применяют легко доступные исходные вещества, используя приведенные ниже общие методы и методики. Очевидно, что там, где приведены типичные или предпочтительные условия осуществления способов (т.е. температуры и продолжительности реакций, мольные соотношения реагентов, растворители, величины давления и т.д.), также можно использовать другие условия осуществления способов, если не указано иное. Оптимальные реакционные условия могут варьировать в зависимости от конкретных используемых реагентов или растворителя, однако такие условия могут быть определены специалистом в данной области техники с помощью обычных процедур оптимизации.
Кроме того, в способах по данному изобретению могут быть использованы защитные группы, которые предотвращают вступление некоторых функциональных групп в нежелательные реакции. Подходящие защитные группы для различных функциональных групп, а также подходящие условия введения защиты и удаления защиты с конкретных функциональных групп хорошо известны в данной области техники. Например, многочисленные защитные группы описаны в Т.W. Greene and G.M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York, 1999 и приведенных там ссылках.
Кроме того, предложенные химические соединения могут содержать один или более хиральных центров, и такие соединения могут быть получены или выделены в виде чистых стереоизомеров, т.е. в виде индивидуальных энантиомеров или диастереомеров, либо в виде обогащенных по стереоизомеру смесей. Все такие стереоизомеры (и обогащенные смеси) включены в объем этого описания, если не указано иное. Чистые стереоизомеры (или обогащенные смеси) можно получить, используя, например, оптически активные исходные вещества или стереоселективные реагенты, хорошо известные в данной области техники. Альтернативно, рацемические смеси таких соединений можно разделить, используя, например, хиральную колоночную хроматографию, хиральные разрешающие агенты и им подобное.
Исходные вещества для приведенных ниже реакций обычно представляют собой известные соединения или могут быть получены с использованием известных методик или их очевидных модификаций. Например, большинство исходных веществ поставляются коммерческими поставщиками, такими как Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wisconsin, USA), Bachem (Torrance, California, USA), Ernka-Chemce или Sigma (St. Louis, Missouri, USA). Другие могут быть получены с использованием методик или их очевидных модификаций, описанных в стандартных справочниках, таких как Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-15 (John Wiley and Sons, 1991), Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Volumes 1-5 and Supplementals (Elsevier Science Publishers, 1989), Organic Reactions, Volumes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991), March's Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons, 4th Edition) и Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989).
Если не указано иное, реакции, изложенные в данном описании, проводят при атмосферном давлении, обычно в температурном диапазоне от -78°C до 200°C. Кроме того, за исключением некоторых случаев, реализованных в примерах или конкретизированных каким-либо иным образом, подразумевается, что продолжительности и условия реакций являются приблизительными, например, протекают при примерно атмосферном давлении в температурном диапазоне от примерно -78°C до примерно 110°C в течение периода времени от примерно 1 до примерно 24 часов; для реакций, оставленных на ночь, средний период времени составляет примерно 16 часов.
Каждый из терминов ʺрастворительʺ, ʺорганический растворительʺ и ʺинертный растворительʺ означает растворитель, являющийся инертным в условиях описываемой с его использованием реакции, включая, например, бензол, толуол, ацетонитрил, тетрагидрофуран (ʺTHFʺ), диметилформамид (ʺDMFʺ), хлороформ, метиленхлорид (или дихлорметан), диэтиловый эфир, метанол, N-метилпирролидон (ʺNMPʺ), пиридин и им подобное.
Выделение и очистку химических соединений и промежуточных соединений, описанных в данном изобретении, при желании можно осуществить любым подходящим методом разделения или очистки, таким как, например, фильтрация, экстракция, кристаллизация, колоночная хроматография, тонкослойная хроматография или толстослойная хроматография или комбинация этих методов. Конкретные иллюстрации подходящих методов разделения и выделения можно увидеть в примерах, изложенных в данном описании ниже. Однако, также можно использовать другие эквивалентные методы разделения или выделения.
При желании (R)- и (S)-изомеры могут быть разделены методами, известными специалистам в данной области техники, например, посредством образования диастереоизомерных солей или комплексов, которые могут быть разделены, например, кристаллизацией; посредством образования диастереоизомерных производных, которые могут быть разделены, например, кристаллизацией, газо-жидкостной или жидкостной хроматографией; посредством избирательного взаимодействия одного энантиомера со специфичным к энантиомеру реагентом, например с использованием ферментативного окисления или восстановления с последующим разделением модифицированных и немодифицированных энантиомеров; или посредством газо-жидкостной или жидкостной хроматографии в хиральной среде, например на хиральной подложке, такой как диоксид кремния со связанным хиральным лигандом, или в присутствии хирального растворителя. Альтернативно, можно синтезировать конкретный энантиомер путем асимметрического синтеза с использованием оптически активных реагентов, субстратов, катализаторов или растворителей или путем превращения одного энантиомера в другой в результате асимметрического преобразования.
ПРИМЕРЫ
Следующие далее примеры служат для более полного описания способа реализации и применения описанного выше изобретения. Очевидно, что эти примеры никоим образом не служат для ограничения истинного объема изобретения, а скорее приведены в целях иллюстрации. Следующие далее сокращения в приведенных ниже примерах и в приведенных выше схемах синтеза имеют указанные ниже значения. Если сокращение не определено, то оно имеет свое общепринятое значение:
водн.
водный,
мкл
микролитры,
мкМ
микромолярный,
ЯМР
ядерный магнитный резонанс,
boc
трет-бутоксикарбонил,
br
уширенный,
Cbz
бензилоксикарбонил,
d
дублет,
δ
химический сдвиг,
°C
градусы по Цельсию,
DCM
дихлорметан,
dd
дублет дублетов,
DMEM
модифицированная Дульбекко среда Игла,
DMF
N,N-диметилформамид,
DMSO
диметилсульфоксид,
EtOAc
этилацетат,
г
грамм,
ч или час
часы,
HCV
вирус гепатита C,
ВЭЖХ
высокоэффективная жидкостная хроматография,
Гц
Герц,
IU
международные единицы,
ИК<sub>50</sub>
концентрация ингибитора при 50%-ном ингибировании,
J
константа спин-спинового взаимодействия (приведена в Гц, если не указано иное),
m
мультиплет,
M
молярный,
M+H<sup>+</sup>
исходная масса, соответствующая пику в спектре, плюс H<sup>+</sup>,
мг
миллиграмм,
мин
минута(ы),
мл
миллилитр,
мМ
миллимолярный,
ммоль
миллимоль,
MS
масс-спектр,
нМ
наномолярный,
млн<sup>-1</sup>
число частей на миллион,
q.s.
достаточное количество,
s
синглет,
КТ
комнатная температура,
насыщ.
насыщенный,
t
триплет,
TFA
трифторуксусная кислота.
Описание оборудования
1
-1
H ЯМР спектры регистрировали на спектрометр Avance-III 400 от Bruker. Химические сдвиги выражали в частях на миллион (млн, единицы δ). Константы спин-спинового взаимодействия выражены в герцах (Гц). Картины расщепления описаны видимыми мультиплетностями и обозначены как s (синглет), d (дублет), t (триплет), q (квартет), quint (квинтет), m (мультиплет), br (уширенный).
Аналитические масс-спектры (MS) низкого разрешения регистрировали на Agilent 1200 ВЭЖХ/6110 или Agilent 1200 ВЭЖХ/6130, используя колонку SunFire C18, 4,6×50 мм, 3,5 мкм, с применение метода градиентного элюирования:
растворитель A: 0,01%-ная трифторуксусная кислота (TFA) в воде;
растворитель B: 0,01%-ная TFA в ацетонитриле;
непрерывно A в течение 1,2 мин, затем 5%-95% или 20%-95% B в течение 4 мин.
Схемы и экспериментальные методики
50
Следующие далее схемы и методики иллюстрируют то, как можно получить соединения по настоящему изобретению. Конкретные указанные растворители и реакционные условия также приведены для иллюстрации и не предполагают ограничения. Не описанные соединения либо приобретены, либо могут быть легко получены специалистом в данной области техники с использованием доступных исходных веществ. Примеры, изложенные в данном описании, приведены только в целях иллюстрации и не подразумевают ограничения объема данного изобретения. Соединения из всех примеров демонстрировали величины LHIV ИK от 1 мкМ до 1 нМ при использовании анализа, изложенного в данном описании.
Стадия А
Промежуточное соединение 2
((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икозагидро-1Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)метилацетат
3
2
2
2
3
1
-1
+
К раствору промежуточного соединения 1 (20 г; 45,2 ммоль), 4-диметиламинопиридина (DMAP; 1,66 г; 13,6 ммоль) и EtN (63 мл; 136 ммоль) в CHCl (DCM; 100 мл) при комнатной температуре добавляли уксусный ангидрид (AcO; 17,1 мл; 113 ммоль). Затем его нагревали при температуре дефлегмации в течение ночи и охлаждали до комнатной температуры, реакцию гасили водой (50 мл). Затем органическую фазу промывали водой (50 мл ×2) и сушили над сульфатом натрия. После удаления большей части органического растворителя при пониженном давлении добавляли безводный этанол (50 мл) и полученные осадки собирали фильтрованием в виде белого твердого вещества (промежуточное соединение 2; 20 г; 84%). H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ млн 4.69 (1Н, m), 4.59 (1Н, m), 4.51-4.43 (1Н, m), 4.25 (1Н, d, J=11,2 Гц), 3.85 (1Н, d, J=10,8 Гц), 2.49-2.40 (1Н, m), 2.07 (3Н, s), 2.04 (3Н, s), 1.98-0.77 (42H, m). ЖХ/МС: m/z рассчитано 526,4; обнаружено 527,7 (М+1).
Стадия В
Промежуточное соединение 3
((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-ацетокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)метилацетат
2
3
1
-1
+
HBr в уксусной кислоте (40 мл; 33%) добавляли к суспензии промежуточного соединения 2 (20 г; 38 ммоль) в толуоле (40 мл), AcO (40 мл) и уксусной кислоте (AcOH; 40 мл), предварительно нагретой при 105°C. Реакционную смесь перемешивали и нагревали при этой температуре в течение 1,5 ч. После охлаждения добавляли ацетат натрия (24 г) и полученную реакционную смесь упаривали досуха. Бледно-коричневый остаток переносили в DCM (200 мл), органическую фазу промывали водой (100 мл ×3), сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха при пониженном давлении, получая остаток, который затем перекристаллизовывали из этанола (EtOH; 95%-ный) и DCM, получая промежуточное соединение 3 (13,8 г; 69%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ млн 4.50-4.46 (1Н, m), 4.02 (1Н, d, J=10,8 Гц), 3.98 (1Н, d, J=10,8 Гц), 3.18-3.10 (1Н, m), 2.43-2.40 (1Н, m), 2.26-2.22 (2H, m), 2.04 (3Н, s), 2.05 (3Н, s), 2.00-1.95 (1Н, m), 1.90-1.85 (1Н, m), 1.77-0.83 (39H, m). ЖХ/МС: m/z рассчитано 526,4; обнаружено 549,2 (M+Na).
Стадия С
Промежуточное соединение 4
((3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-ацетокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)метилацетат
2
3
1
-1
+
Смесь промежуточного соединения 3 (7 г; 13,29 ммоль), ацетата натрия (NaOAc; 6,21 г; 76 ммоль) и дигидрата дихромата натрия (4,75 г; 15,95 ммоль) в безводном толуоле (90 мл), AcOH (119 мл) и AcO (29 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. После охлаждения реакционную смесь распределяли между водой (150 мл) и этилацетатом (EtOAc; 250 мл). Органическую фазу последовательно промывали водой (100 мл), насыщенным раствором карбоната натрия (100 мл ×2) и рассолом (100 мл ×2), затем сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая вязкое масло. Это вязкое масло растирали с MeOH (250 мл) и собирали осадки, получая промежуточное соединение 4 (6 г; 11,1 ммоль; 83%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ млн 4.52-4.46 (1Н, m), 4.33 (1Н, d, J=10,8 Гц), 4.06 (1Н, d, J=11,2 Гц), 3.21-3.16 (1Н, m), 2.86 (1Н, dd, J=12,8; 3,2 Гц), 2.42-2.36 (1Н, m), 2.05 (3Н, s), 2.00 (3H, s), 1.94-0.84 (40H, m). ЖХ/МС: m/z рассчитано 540,4; обнаружено 563,3 (M+Na).
Стадия D
Промежуточное соединение 5
(3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-(гидроксиметил)-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-илацетат
+
Смесь промежуточного соединения 4 (7 г; 12,94 ммоль) и гидроксида калия (KOH; 0,872 г; 15,5 ммоль) в EtOH (200 мл) и толуоле (200 мл) энергично перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь нейтрализовали водным HCl (1 н.) до pH 7 и упаривали досуха. Полученный остаток переносили в воду и небольшое количество ацетона. Осадки собирали, затем промывали водой и сушили в вакууме, получая промежуточное соединение 5 (6,0 г; 93%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: m/z рассчитано 498,4; обнаружено 499,3 (М+1).
Стадия Е
Промежуточное соединение 6
(3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-формил-1-изопропил-6а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-илацетат
+
К раствору промежуточного соединения 5 (5,1 г; 10,23 ммоль) в DCM (300 мл) при комнатной температуре добавляли хлорхромат пиридиния (РСС; 6,61 г; 30,7 ммоль) и силикагель (6,6 г). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем реакцию гасили водой, органическую фазу промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (100 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле (EtOAc: РЕ (петролейный эфир) от 1:10 до 1:5), получая промежуточное соединение 6 (4,2 г; 83%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: m/z рассчитано 496,4; обнаружено 497,2 (М+1).
Пример 1
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
Стадия А
Промежуточное соединение 7
(Е)-этил-3-((3аS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-ацетокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акрилат
3
К суспензии этил-2-(диэтоксифосфорил)ацетата (1,173 г; 5,23 ммоль) в N,N-диметилформамиде (DMF) (10 мл), перемешиваемой в атмосфере азота при 0°C, по каплям в течение 5 мин добавляли NaH (0,242 г; 8,05 ммоль) и перемешивали в течение 10 мин. Этот раствор нагревали до кг и перемешивали в течение 30 мин, после чего к указанной выше смеси добавляли раствор (3b)-21,28-диоксолуп-18-ен-3-илацетата (2 г; 4,03 ммоль) (в тетрагидрофуране) (THF) (5 мл), контролируя ход реакции по ЖХМС (жидкостная хроматография в сочетании с масс-спектрометрией). Через 4 ч реакционную смесь гасили насыщенным NaHCO и экстрагировали DCM. Объединенную органическую фазу сушили над сульфатом натрия, упаривали в вакууме и перекристаллизовывали из диэтилового эфира, получая (Е)-этил-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11аR,11bR,13аS)-9-ацетокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акрилат (1,8 г; 3,13 ммоль; 78%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия В
Промежуточное соединение 8
(E)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриловая кислота
4
2
4
К раствору (Е)-этил-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11аR,11bR,13аS)-9-ацетокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акрилата (1,6 г; 2,82 ммоль) в тетрагидрофуране (THF) (15 мл), метаноле (10 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид натрия (4,52 г; 113 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 4 ч. Реакционную смесь упаривали досуха и pH подводили до 5 насыщенным NHCl. Твердое вещество растворяли в DCM (50 мл), промывали водой, сушили над NaSO и концентрировали, получая (Е)-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11аR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриловую кислоту (1,2 г; 2,012 ммоль; 71,3%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия С
Промежуточное соединение 10
(Е)-N-(1-(4-хлорфенил)циклопропил)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриламид
К раствору (E)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриловой кислоты (500 мг; 1,007 ммоль), гидрохлорида 1-(4-хлорфенил)циклопропанамина (226 мг; 1,107 ммоль) и HATU (гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония) (765 мг; 2,013 ммоль) в N,N-диметилформамиде (DMF) (2 мл), перемешиваемому при 0°C, добавляли DIPEA (диизопропилэтиламин) (0,703 мл; 4,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 1 ч. Значение pH реакционной смеси подводили приблизительно до 3-4, используя 2 М HCl, фильтровали, твердое вещество промывали водой (50 мл), растворяли в DCM, сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме, получая неочищенный продукт. Неочищенный продукт промывали смесью петролейный эфир/EtOAc/DCM (10/1/1), получая целевой продукт (E)-N-(1-(4-хлорфенил)циклопропил)-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриламид (685 мг; 1,007 ммоль; 100%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия D
Промежуточное соединение 12
1-трет-бутил-4-((3аS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцинат
3
2
4
К раствору DMAP (647 мг; 5,30 ммоль), EDC (N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимид) (1016 мг; 5,30 ммоль) и 4-трет-бутокси-3,3-диметил-4-оксобутановой кислоты (663 мг; 3,18 ммоль) (11) в дихлорметане (10 мл), перемешиваемому при 20°C в течение 30 мин, добавляли (E)-N-(1-(4-хлорфенил)циклопропил)-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриламид (685 мг; 1,060 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 2 ч. Смесь промывали насыщенным хлоридом аммония, водой, насыщенным NaHCO, водой и рассолом. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали, получая неочищенный продукт, который очищали на колонке с силикагелем с элюированием смесью петролейный эфир/этилацетат (5:1), получая продукт 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцинат (480 мг; 0,542 ммоль; 51,2%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия Е
Соединение 13
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5a,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
3
1
-1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (460 мг; 0,554 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,554 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза: А: 0,05% TFA/HO, В: MeCN), получая продукт 4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановую кислоту (130 мг; 0,162 ммоль; 29,2%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ млн 9.00 (m, 1Н), 7.31 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 7.15 (d, J=15,6 Гц, 1Н), 7.06 (d, J=8,8 Гц, 2H), 5.99 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4.56 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.89-0.80 (m, 54H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 773,4; обнаружено 774,3 (М+1).
Использованное выше промежуточное соединение 11 получали в соответствии со следующей методикой.
Стадия А
Промежуточное соединение 15
4-Этокси-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
-1
-
3
Раствор 3,3-диметил-дигидрофуран-2,5-диона 14 (25 г; 195 ммоль) в безводном EtOH (150 мл) перемешивали при 50°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли при пониженном давлении с использованием роторного испарителя и остаток растирали с гексаном при -50°C, получая промежуточное соединение 15 (25 г; 133 ммоль; 67,9%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ млн 4.13-4.18 (2H, q, J=7,2 Гц), 2.62 (2H, s), 1.28 (6H, s), 1.32-1.25 (3H, t, J=7.6 Гц). ЖХ/МС: m/z рассчитано 174,1; обнаружено 173,1 (М-1).
Стадия В
Промежуточное соединение 16
1-трет-Бутил-4-этил 2,2-диметилсукцинат
1
-1
+
3
К смеси промежуточного соединения 15 (20 г; 109 ммоль), сульфата магния (52,5 г; 436 ммоль) и трет-бутанола (60 мл) в DCM (480 мл) добавляли серную кислоту (8,72 мл; 164 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь выливали в насыщенный раствор бикарбоната натрия (300 мл) и воду (300 мл). Для экстрагирования желаемого продукта добавляли DCM, органическую фазу промывали рассолом, сушили и концентрировали, получая промежуточное соединение 16 (19 г; 83 ммоль; 80%) в виде бесцветного масла. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ млн 4.02-4.08 (2H, q, J=7,2 Гц), 2.46 (2H, s), 1.07 (9H, s), 1.14-1.20 (9H, m). ЖХ/МС: m/z рассчитано 230,2; обнаружено 253,1 (М+Na).
Стадия С
Промежуточное соединение 11
4-(трет-Бутокси)-3,3-диметил-4-оксобутановая кислота
1
-1
-
3
К раствору промежуточного соединения 15 (10 г; 41,3 ммоль) в EtOH (200 мл) добавляли гидроксид калия (12,86 г; 206 ммоль) в воде (100 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Значение pH реакционной смеси подводили до 3-4, используя 1 н. HCl. Полученный раствор экстрагировали эфиром (300 мл), эфирную фазу сушили и концентрировали с получением неочищенного продукта, который перекристаллизовывали из гексана при -10°C, получая промежуточное соединение 11 (4 г; 19,78 ммоль; 47,9%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ млн 2.58 (2Н, s), 1.43 (9Н, s), 1.25 (6Н, s). ЖХ/МС: m/z рассчитано 202,1; обнаружено 201,1 (М-1).
Пример 2
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((4-хлорфенил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
3
1
-1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((4-хлорфенил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (230 мг; 0,291 ммоль) в дихлорметане (DCM) (4 мл) добавляли TFA (2 мл; 0,291 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза: А: 0,05% TFA/HO, В: MeCN), получая продукт 4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((4-хлорфенил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановую кислоту (100 мг; 0,136 ммоль; 46,8%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ млн 7.60-7.53 (m, 3Н), 7.28 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7.12 (d, J=15,6 Гц, 1Н), 5.84 (d, J=15,6 Гц, 1Н), 4.50 (dd, J=11,2; 5,2 Гц, 1Н), 3.22 (m, 1Н), 2.77 (d, J=11,6 Гц, 1Н), 2.68 (d, J=16,0 Гц, 1Н), 2.57 (d, J=15,6 Гц, 1Н), 2.32 (d, J=18,8 Гц, 1Н), 2.20 (d, J=19,2 Гц, 1Н), 2.11 (d, J=12,0 Гц, 1Н), 1.93-0.77 (m, 44H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 733,4; обнаружено 734,3 (М+1).
Пример 3
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-(((S)-1-(5-хлорпиридин-2-ил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
Раствор 1-трет-бутил-4-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(5-хлорпиридин-2-ил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (240 мг; 0,293 ммоль) и 2,2,2-трифторуксусной кислоты (1 мл; 12,98 ммоль) в дихлорметане (4 мл) перемешивали при кг. Реакционную смесь перемешивали при кг в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривали и затем очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза А: вода (с 0,05% TFA), В: ACN (ацетонитрил); градиент 85-85% В за 0-12 мин, окончание через 12 мин; скорость потока (мл/мин) 30,00), получая продукт соль трифторуксусной кислоты 4-(((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11аR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-(((S)-1-(5-хлорпиридин-2-ил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановую кислоты (80 мг; 0,091 ммоль; 31,0%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 8.56 (br. s., 1H), 8.13-7.82 (m, 3Н), 7.65 (d, J=7,3 Гц, 1H), 7.45 (d, J=8,5 Гц, 1H), 6.87 (d, J=15,8 Гц, 1H), 5.80 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.28 (m, 1H), 4.51 (dd, J=4,8; 11,0 Гц, 1H), 3.20 (m, 1H), 2.78-2.56 (m, 3Н), 2.36-2.05 (m, 3Н), 2.02-0.64 (m, 48H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 762,4; обнаружено 763,3 (М+1).
Пример 4
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((R)-1-(4-Хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((R)-1-(4-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (2,5 г; 3,05 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли TFA (13 мл; 3,05 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме, получая неочищенный продукт, который разбавляли DCM, промывали водой, насыщенным NаНСО (дважды), водой, 2 M HCl, водой, и органический слой концентрировали, разбавляли смесью MeOH/HO (1:5; 36 мл) и подвергали сублимационной сушке под высоким вакуумом, получая продукт 4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((R)-1-(4-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановую кислоту (1,7 г; 2,217 ммоль; 72,6%) в виде желтого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.34-12.04 (m, 1H), 8.43 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7.53-7.18 (m, 4H), 6.63 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.92 (d, J=15,8 Гц, 1H), 4.94 (квин., J=7,0 Гц, 1H), 4.39 (dd, J=4,6; 10,9 Гц, 1H), 3.18 (dt, J=6,7; 13,7 Гц, 1H), 2.70 (dd, J=4,3; 10,5 Гц, 2Н), 2.58-2.52 (m, 1H), 2.34-1.99 (m, 3H), 1.99-0.56 (m, 48H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 761,4; обнаружено 762,3 (М+1).
Пример 5
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-(((R)-1-(5-хлорпиридин-2-ил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
Раствор 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((R)-1-(5-хлорпиридин-2-ил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (150 мг; 0,183 ммоль) и 2,2,2-трифторуксусной кислоты (1 мл; 12,98 ммоль) в дихлорметане (4 мл) перемешивали при кт. Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривали и затем очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза А: вода (с 0,05% TFA), В: ACN; градиент 85-85% В за 0-12 мин, окончание через 12 мин; скорость потока (мл/мин) 30,00), получая продукт соль трифторуксусной кислоты 4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((R)-1-(5-хлорпиридин-2-ил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановую кислоты (80 мг; 0,091 ммоль; 49,8%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 8.58 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7.84 (dd, J=1,8; 8,0 Гц, 1H), 7.58-7.40 (m, 2Н), 6.89 (d, J=15,8 Гц, 1H), 5.79 (d, J=15,8 Гц, 1H), 5.26 (m, 1H), 4.52 (dd, J=5,3; 11,0 Гц, 1H), 3.31-3.13 (m, 1H), 2.84-2.47 (m, 3H), 2.38-2.02 (m, 3Н), 2.04-0.63 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 762,4; обнаружено 763,3 (М+1).
Пример 6
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(4-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-(((S)-1-(4-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (420 мг; 0,513 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,513 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза: А: 0,05% TFA/HO, В: MeCN), получая продукт 4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(4-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановую кислоту (60 мг; 0,079 ммоль; 15,34%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.44-7.18 (m, 4Н), 6.97 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.80-5.58 (m, 2H), 5.25-5.09 (m, 1Н), 4.50 (dd, J=5,3; 10,8 Гц, 1Н), 3.27-3.13 (m, 1Н), 2.79-2.52 (m, 2H), 2.36-2.01 (m, 3Н), 2.00-0.65 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 761,4; обнаружено 762,3 (М+1).
Пример 7
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((1-(5-хлорпиридин-2-ил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((1-(5-хлорпиридин-2-ил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (300 мг; 0,361 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,361 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза: А: 0,05% TFA/HO, В: MeCN), получая продукт соль трифторуксусной кислоты 4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(5-хлорпиридин-2-ил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановую кислоты (120 мг; 0,135 ммоль; 37,4%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ равны 8.62 (m, 1H), 8.43 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7.75 (dd, J=2,0; 8,4 Гц, 1H), 7.27 (d, J=8,5 Гц, 1H), 6.73 (d, J=15,8 Гц, 1H), 5.96 (d, J=16,0 Гц, 1H), 4.43 (dd, J=5,9; 10,0 Гц, 1H), 3.20 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 2.52 (m, 1H), 2.27-0.72 (m, 52H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 774,4; обнаружено 775,3 (М+1).
Пример 8
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((S)-1-(пиримидин-4-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((S)-1-(пиримидин-4-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (100 мг; 0,127 ммоль) в дихлорметане (8 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (4 мл; 28,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 1 ч. Продукт экстрагировали DCM (15 мл ×3), остаток очищали препаративной ВЭЖХ, получая соль TFA указанного в заголовке соединения (70 мг; 98%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 9.24 (s, 1Н), 8.80 (br. s., 1H), 7.45 (d, J=4,5 Гц, 1Н), 7.08-6.86 (m, 2Н), 5.82 (d, J=15,6 Гц, 1Н), 5.26 (m, 1Н), 4.53 (dd, J=5,0; 11,0 Гц, 1Н), 3.23 (m, 1Н), 2.85-2.52 (m, 3Н), 2.42-2.05 (m, 3H), 2.06-0.70 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 729,5; обнаружено 730,4 (М+1).
Пример 9
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((R)-1-(пиримидин-4-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((R)-1-(пиримидин-4-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (100 мг; 0,127 ммоль) в дихлорметане (8 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (4 мл; 28,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 1 ч. Продукт экстрагировали DCM (15 мл ×3), остаток очищали препаративной ВЭЖХ, получая соль ТFА указанного в заголовке соединения (70 мг; 98%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 9.24 (s, 1Н), 8.78 (br. s., 1H), 7.43 (d, J=4,3 Гц, 1Н), 7.08-6.82 (m, 2H), 5.81 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.26 (m, 1Н), 4.52 (dd, J=5,0; 11,0 Гц, 1Н), 3.36-3.16 (m, 1Н), 2.83-2.51 (m, 3H), 2.41-2.06 (m, 3H), 2.05-0.71 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 729,5; обнаружено 730,4 (М+1).
Пример 10
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((R)-1-(пиримидин-2-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((R)-1-(пиримидин-2-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (130 мг; 0,127 ммоль) в дихлорметане (8 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (4 мл; 51,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 3 ч. Продукт экстрагировали DCM (15 мл ×2), объединенную органическую фазу промывали рассолом (15 мл), сушили, удаляли растворители и остаток очищали препаративной ВЭЖХ, получая соль TFA указанного в заголовке соединения (78 мг; 72%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 8.78 (d, J=4,8 Гц, 2H), 7.34-7.28 (m, 1Н), 7.13-7.05 (m, 1Н), 6.96 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.82 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.44-5.28 (m, 1Н), 4.51 (dd, J=5,0; 11,0 Гц, 1Н), 3.30-3.13 (m, 1Н), 2.83-2.50 (m, 3H), 2.40-2.05 (m, 3H), 2.03-0.68 (m, 46H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 729,5; обнаружено 730,4 (М+1).
Пример 11
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((S)-1-(пиримидин-2-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((S)-1-(пиримидин-2-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (120 мг; 0,128 ммоль) в дихлорметане (8 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (4 мл; 51,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Продукт экстрагировали DCM (15 мл ×3), объединенную органическую фазу промывали рассолом (20 мл), сушили, удаляли растворитель и остаток очищали препаративной ВЭЖХ, получая соль TFA указанного в заголовке соединения (70 мг; 65%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 8.79 (d, J=4,5 Гц, 2Н), 7.37-7.28 (m, 1H), 7.11 (br. s., 1H), 6.95 (d, J=15,6 Гц, 1Н), 5.84 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.43-5.25 (m, 1H), 4.50 (dd, J=5,0; 10,5 Гц, 1H), 3.31-3.09 (m, 1H), 2.82-2.50 (m, 3H), 2.39-2.05 (m, 3H), 2.01-0.70 (m, 46H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 729,5; обнаружено 730,4 (М+1).
Пример 12
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-((1-(пиридин-2-ил)циклопропил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-((1-(пиридин-2-ил)циклопропил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (460 мг; 0,577 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,577 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза: А: 0,05% TFA/HO, В: MeCN), получая соль трифторуксусной кислоты указанного в заголовке соединения (30 мг; 0,033 ммоль; 5,78%) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.16 (br. s., 1H), 8.80 (s, 1Н), 8.42 (d, J=4,0 Гц, 1Н), 7.66 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7.29-7.06 (m, 2H), 6.69 (d, J=15,8 Гц, 1H), 5.97 (d, J=15,8 Гц, 1H), 4.40 (dd, J=4,6; 10,9 Гц, 1H), 3.27-3.13 (m, 1H), 3.02-2.87 (m, 1H), 2.80 (d, J=11,5 Гц, 1H), 2.59-2.52 (m, 1H), 2.30-0.73 (m, 51Н); ЖХ/МС: m/z рассчитано 740,5; обнаружено 741,3 (М+1).
Пример 13
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-((1-(пиримидин-2-ил)циклопропил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-((1-(пиримидин-2-ил)циклопропил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (460 мг; 0,576 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,576 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза: А: 0,05% TFA/HO, В: MeCN), получая соль трифторуксусной кислоты указанного в заголовке соединения (100 мг; 0,116 ммоль; 20,19%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.18 (br. s., 1H), 8.78-8.57 (m, 3H), 7.39-7.15 (m, 1H), 6.68 (d, J=16,1 Гц, 1H), 5.94 (d, J=16,1 Гц, 1H), 4.40 (dd, J=4,6; 11,2 Гц, 1H), 3.30-3.11 (m, 1H), 2.90-2.67 (m, 1H), 2.59-2.52 (m, 1H), 2.28-2.01 (m, 3H), 2.01-0.75 (m, 49H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 741,5; обнаружено 742,4 (М+1).
Пример 14
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((R)-1-(пиридин-2-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((R)-1-(пиридин-2-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (470 мг; 0,599 ммоль) в дихлорметане (10 мл), перемешиваемому при кт, добавляли TFA (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч. Затем ее упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта. Это вещество очищали препаративной ВЭЖХ, получая соль трифторуксусной кислоты указанного в заголовке соединения (225 мг; 0,267 ммоль; 44,6%) в виде светло-желтого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 9.23 (d, J=6,8 Гц, 1Н), 8.75 (d, J=3,5 Гц, 1Н), 8.32 (t, J=7,7 Гц, 1Н), 7.92 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.84-7.69 (m, 1H), 6.77 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.89 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.49-5.21 (m, 1Н), 4.50 (dd, J=5,4; 10,7 Гц, 1Н), 3.32-3.05 (m, 1Н), 2.78-2.49 (m, 3Н), 2.33-2.01 (m, 3Н), 2.03-0.63 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 728,5; обнаружено 729,4 (М+1).
Пример 15
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((S)-1-(пиридин-2-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(((S)-1-(пиридин-2-ил)этил)амино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (480 мг; 0,611 ммоль) в дихлорметане (10 мл), перемешиваемому при кт, добавляли TFA (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч. Затем ее упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта. Это вещество очищали препаративной ВЭЖХ, получая соль трифторуксусной кислоты указанного в заголовке соединения (220 мг; 0,261 ммоль; 42,7%) в виде светло-желтого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 9.43 (d, J=7,0 Гц, 1Н), 8.75 (d, J=4,5 Гц, 1Н), 8.33 (t, J=7,7 Гц, 1Н), 7.94 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.77 (t, J=6,4 Гц, 1H), 6.77 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.89 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.50-5.27 (m, 1Н), 4.50 (dd, J=5,3; 10,8 Гц, 1Н), 3.29-3.05 (m, 1Н), 2.76-2.44 (m, 3H), 2.31-2.00 (m, 3Н), 2.03-0.51 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 728,5; обнаружено 729,3 (М+1).
Пример 16
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-2-карбоксивинил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
Стадия А
Промежуточное соединение 31
(E)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-9-((4-(трет-бутокси)-3,3-диметил-4-оксобутаноил)окси)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриловая кислота
К раствору 4-(трет-бутокси)-3,3-диметил-4-оксобутановой кислоты (122 мг; 0,604 ммоль), DMAP (123 мг; 1,007 ммоль) и EDC (193 мг; 1,007 ммоль) в дихлорметане (12 мл), перемешиваемому при комнатной температуре в течение 30 мин, добавляли (E)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриловую кислоту (100 мг; 0,201 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч. Продукт экстрагировали DCM (15 мл ×3), объединенную органическую фазу промывали рассолом (20 мл), сушили и растворитель удаляли при пониженном давлении, получая 110 мг остатка в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия В
Соединение 32
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-2-карбоксивинил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
К раствору (E)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-((4-(трет-бутокси)-3,3-диметил-4-оксобутаноил)окси)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриловой кислоты (200 мг; 0,294 ммоль) в дихлорметане (6 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли трифторуксусную кислоту (TFA) (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 1 ч. Продукт экстрагировали DCM (15 мл ×3) и остаток очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (85 мг; 39%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.05 (d, J=16,1 Гц, 1Н), 5.75 (d, J=16,3 Гц, 1Н), 4.52 (dd, J=4,8; 11,3 Гц, 1Н), 3.32-3.11 (m, 1Н), 2.78-2.61 (m, 3Н), 2.34-2.12 (m, 3H), 2.06-0.61 (m, 44H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 624,4; обнаружено 625,3 (М+1).
Пример 17
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((4-фторфенил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5a,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
2
4
1
+
Раствор 1-трет-бутил-4-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((4-фторфенил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (250 мг; 0,323 ммоль) и TFA (1 мл; 12,98 ммоль) в дихлорметане (4 мл) перемешивали при кт. Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч, промывали насыщенным раствором NaHCO в воде (300 мл ×8), затем 2 M HCl (300 мл), водой и далее рассолом. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали, получая неочищенный продукт, который растворяли в DCM (80 мл) и добавляли гексан (120 мл). Суспензию фильтровали и промывали гексаном с получением неочищенного продукта и затем очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (160 мг; 68%) в виде беловатого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.56 (br. s., 3Н), 7.23-6.93 (m, 3H), 5.96-5.75 (m, 1H), 4.52 (dd, J=5,1; 10,9 Гц, 1Н), 3.33-3.13 (m, 1H), 2.88-2.51 (m, 3Н), 2.45-0.72 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 717,4; обнаружено 718,3 (М+1).
Пример 18
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((5-хлорпиридин-2-ил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((5-хлорпиридин-2-ил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (100 мг; 0,126 ммоль) в дихлорметане (4 мл), перемешиваемому при кт, добавляли TFA (2 мл; 26,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 1 ч. Смесь упаривали, получая неочищенный продукт, который очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение в виде соли TFA (60 мг; 55,9%). H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 11.06 (br. s., 1H), 8.54 (d, J=9,0 Гц, 1H), 8.13 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7.83 (dd, J=2,3; 9,0 Гц, 1H), 7.10 (d, J=15,8 Гц, 1H), 6.09 (d, J=15,8 Гц, 1H), 4.52 (dd, J=4,3; 11,5 Гц, 1H), 3.30-3.12 (m, 1H), 2.82-2.52 (m, 3Н), 2.38-2.08 (m, 3Н), 2.04-1.75 (m, 3Н), 1.75-0.60 (m, 41 H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 734,4; обнаружено 735,3 (М+1).
Пример 19
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((5-хлорпиридин-2-ил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(пиридин-2-иламино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (300 мг; 0,396 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,396 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза: А: 0,05% TFA/HO, В: МеСN), получая соль трифторуксусной кислоты указанного в заголовке соединения (100 мг; 0,119 ммоль; 30,0%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 10.72 (br. s., 1Н), 8.33 (br. s., 1H), 8.14 (br. s., 1H), 7.83 (br. s., 1H), 7.33-6.97 (m, 1H), 6.97-6.75 (m, 1H), 6.41-6.13 (m, 1H), 4.52-4.25 (m, 1H), 3.35-3.06 (m, 1H), 2.98-2.65 (m, 2H), 2.35-0.53 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 700,5; обнаружено 701,3 (М+1).
Пример 20
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(2-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((1-(2-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (300 мг; 0,361 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,361 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза: А: 0,05% TFA/HO, В: MeCN), получая указанное в заголовке соединение (110 мг; 0,142 ммоль; 39,3%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.23 (br. s., 1Н), 8.67 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 7.67 (br. s., 1H), 7.52-7.13 (m, 3H), 6.69-6.41 (m, 1Н), 6.00-5.76 (m, 1Н), 4.49-4.20 (m, 1Н), 3.29-3.02 (m, 1Н), 2.78-2.60 (m, 1Н), 2.30-0.57 (m, 53H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 773,4; обнаружено 774,4 (М+1).
Пример 21
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(п-толиламино)проп-1-ен-1-ил)-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
6
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3а-((Е)-3-оксо-3-(п-толиламино)проп-1-ен-1-ил)-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (250 мг; 0,325 ммоль) в дихлорметане (5 мл), перемешиваемому при кт, добавляли TFA (0,025 мл; 0,325 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 1 ч. После завершения реакции, обработки и очистки получали соль трифторуксусной кислоты указанного в заголовке соединения (150 мг; 0,181 ммоль; 55,8%) в виде беловатого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ равны 9.70 (s, 1Н), 7.51 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7.11 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 6.83 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 6.08 (d, J=15,7 Гц, 1Н), 4.53-4.32 (m, 1Н), 3.30-3.11 (m, 1Н), 2.90-2.73 (m, 1Н), 2.55-2.51 (m, 1Н), 2.35-0.75 (m, 51 Н); ЖХ/МС: m/z рассчитано 713,5; обнаружено 714,3 (М+1).
Пример 22
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((R)-1-(2-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
4
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-(((R)-1-(2-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (200 мг; 0,101 ммоль) в дихлорметане (6 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (3 мл; 38,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Продукт экстрагировали DCM (20 мл ×2), объединенную органическую фазу промывали HO (20 мл ×2) и рассолом (30 мл), сушили. Затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (70 мг; 0,092 ммоль; 91%), которое собирали в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d) δ равны 8.69 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 7.50-7.17 (m, 4H), 6.83 (d, J=16,1 Гц, 1Н), 6.03 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.52-5.35 (m, 1Н), 4.50 (dd, J=5,1; 11,2 Гц, 1Н), 3.32-3.26 (m, 1Н), 3.00-2.80 (m, 1Н), 2.73-2.49 (m, 2H), 2.35-0.77 (m, 50H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 761,4; обнаружено 762,3 (М+1).
Пример 23
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(3-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
2
1
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-(((S)-1-(3-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (12 г; 14,66 ммоль) в дихлорметане (130 мл) добавляли TFA (80 мл; 14,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч, разбавляли DCM, дважды промывали водой и органический слой концентрировали, разбавляли смесью MeCN/HO (1:5; 36 мл) и подвергали сублимационной сушке под высоким вакуумом, получая указанное в заголовке соединение (9,9 г; 12,89 ммоль; 88%). Это вещество объединяли с несколькими партиями, полученными в аналогичных условиях, и совместно подвергали сублимационной сушке для исследования, получая 31 г (41 ммоль) в виде светло-желтого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.38-7.13 (m, 4H), 6.97 (d, J=15,6 Гц, 1Н), 5.82-5.59 (m, 2Н), 5.26-5.06 (m, 1H), 4.50 (dd, J=5,3; 11,0 Гц, 1Н), 3.29-3.09 (m, 1H), 2.81-2.48 (m, 3Н), 2.37-2.00 (m, 3H), 2.00-0.68 (m, 47H).
Пример 24
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(3-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
-
6
К раствору 1-трет-бутил-4-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((1-(3-хлорфенил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (200 мг; 0,241 ммоль) в дихлорметане (5 мл), перемешиваемому при кт, добавляли TFA (3 мл; 38,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 1 ч. Смесь упаривали с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ, получая продукт (100 мг; 53%) в виде беловатого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.18 (br. s., 1H), 8.78 (s, 1H), 7.38-7.18 (m, 2H), 7.13 (d, J=5,3 Гц, 1H), 7.08-6.96 (m, 1H), 6.65 (d, J=15,8 Гц, 1H), 5.92 (d, J=16,1 Гц, 1H), 4.39 (dd, J=4,8; 11,0 Гц, 1H), 3.31-3.08 (m, 1H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.63-0.58 (m, 53H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 773,4; обнаружено 772,3 (М-1).
Пример 25
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(2-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
4
Раствор 1-трет-бутил-4-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(2-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (150 мг; 0,183 ммоль) и трифторуксусной кислоты (1 мл; 12,98 ммоль) в дихлорметане (4 мл) перемешивали при кт. Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривали и затем очищали препаративной ВЭЖХ (подвижная фаза А: вода (с 0,05% TFA), В: ACN; градиент 89-89% В за 0-7,5 мин, окончание через 12 мин; скорость потока (мл/мин) 30,00; время удерживания (мин) 7,0), получая указанное в заголовке соединение (70 мг; 0,092 ммоль; 50,1%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d) δ равны 7.43-7.32 (m, 2H), 7.32-7.18 (m, 2H), 6.81 (d, J=15,8 Гц, 1H), 6.01 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.41 (q, J=6,9 Гц, 1Н), 4.48 (dd, J=5,1; 11,2 Гц, 1Н), 3.30-3.24 (m, 1Н), 2.94-2.81 (m, 1Н), 2.72-2.49 (m, 2H), 2.30-0.75 (m, 50H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 761,4; обнаружено 762,3 (М+1).
Пример 26
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((1-(5-хлорпиримидин-2-ил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
1
+
6
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((1-(5-хлорпиримидин-2-ил)циклопропил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (300 мг; 0,360 ммоль) в дихлорметане (5 мл), перемешиваемому при кт, добавляли TFA (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч. Ее упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (90 мг; 28%) в виде светло-желтого твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ равны 8.72 (s, 2H), 8.54 (br. s., 1Н), 6.70 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.94 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 4.55-4.29 (m, 1Н), 3.31-3.07 (m, 1Н), 2.94-2.64 (m, 1Н), 2.59-0.60 (m, 52H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 775,4, обнаружено 776,3 (М+1).
Пример 27
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
Стадия А
Промежуточное соединение 44
(Е)-этил-3-((3аS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-ацетокси-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакрилат
3
2
4
К суспензии этил-2-(диэтоксифосфорил)пропаноата (3,12 г; 13,09 ммоль) в DMF (35 мл), перемешиваемой в атмосфере азота при 0°C, в течение 5 мин добавляли NaH (0,60 г; 80% масс.; 20 ммоль) и перемешивали в течение 10 мин. Раствор нагревали до кт и перемешивали в течение 30 мин, после чего к указанной выше смеси добавляли (3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-формил-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-илацетат (5,0 г; 10 ммоль). По прошествии ночи реакционную смесь гасили водой и промывали насыщенным NaHCO и водой. Твердое вещество растворяли в EtOAc, сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали для удаления большей части растворителя. Остаток перекристаллизовывали из смеси петролейный эфир/EtOAc (8:1), проводили фильтрацию и фильтрат концентрировали, получая остаток, который очищали на силикагеле с элюированием смесью петролейный эфир/EtOAc (от приблизительно 15:1 до 10:1), получая продукт (Е)-этил-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11аR,11bR,13аS)-9-ацетокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакрилат (1,0 г; 1,291 ммоль; 12,82%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия В
Промежуточное соединение 45
(E)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакриловая кислота
4
2
4
К раствору (Е)-этил-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11аR,11bR,13аS)-9-ацетокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакрилата (2,0 г; 3,44 ммоль) в THF (12 мл), MeOH (8 мл) и воде (4 мл) добавляли гидроксид натрия (5,51 г; 138 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривали досуха и pH подводили до 5 насыщенным NHCl. Твердое вещество растворяли в DCM (50 мл), промывали водой, сушили над NaSO и концентрировали, получая (E)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакриловую кислоту (1,3 г; 54,8%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия С
Промежуточное соединение 46
(Е)-N-(1-(4-хлорфенил)циклопропил)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакриламид
К раствору (E)-3-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакриловой кислоты (350 мг; 0,685 ммоль), гидрохлорида 1-(4-хлорфенил)циклопропанамина (154 мг; 0,754 ммоль) и HATU (521 мг; 1,371 ммоль) в DMF (2 мл), перемешиваемому при 0°C, добавляли DIPEA (0,479 мл; 2,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 1 ч. Значение pH реакционной смеси подводили приблизительно до 3-4, используя 2 М HCl, и проводили фильтрацию. Твердое вещество промывали водой (50 мл), растворяли в DCM, сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме, получая неочищенный (Е)-N-(1-(4-хлорфенил)циклопропил)-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11аR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакриламид (650 мг; 0,680 ммоль; 99%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия D
Промежуточное соединение 47
1-трет-бутил-4-((3аS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцинат
3
2
4
1
К раствору DMAP (415 мг; 3,40 ммоль), EDC (652 мг; 3,40 ммоль) и 4-трет-бутокси-3,3-диметил-4-оксобутановой кислоты (425 мг; 2,039 ммоль) в DCM (10 мл), перемешиваемому при 20°C в течение 30 мин, добавляли (E)-N-(1-(4-хлорфенил)циклопропил)-3-((3аS,5аR,5bR,7аR,9S,11aR,11bR,13aS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)-2-метилакриламид (650 мг; 0,680 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 2 ч. Смесь промывали насыщенным хлоридом аммония, водой и насыщенным NaHCO, водой и рассолом. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали на колонке с силикагелем с элюированием смесью петролейный эфир/этилацетат (3:1), получая 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцинат (300 мг; 52%) в виде светло-желтого твердого вещества. Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.30-7.22 (m, 2Н), 7.22-7.14 (m, 2H), 6.59 (s, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.51 (dd, J=5,4; 10,9 Гц, 1Н), 3.28-3.10 (m, 1H), 2.72 (d, J=10,3 Гц, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.41-2.21 (m, 2H), 2.12-0.71 (m,61H).
Стадия Е
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
4
2
4
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((1-(4-хлорфенил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (300 мг; 0,355 ммоль) в DCM (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,355 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме, получая неочищенный продукт, который разбавляли DCM (30 мл) и промывали водой, насыщенным NаНСО, водой, насыщенным NHCl и водой. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который растворяли в смеси MeCN/HO (1:2; 9 мл) и подвергали сублимационной сушке, получая указанное в заголовке соединение (150 мг; 0,190 ммоль; 53,6%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.81-11.61 (m, 1H), 8.73-8.51 (m, 1H), 7.28 (d, J=8,3 Гц, 2H), 7.22-7.04 (m, 2H), 6.54 (s, 1H), 4.39 (dd, J=4,9; 11,2 Гц, 1H), 3.23-3.10 (m, 1H), 2.79-0.44 (m, 57H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 787,5, обнаружено 788,3 (М+1).
Пример 28
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((1-(5-хлорпиримидин-2-ил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
4
2
4
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3аS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((1-(5-хлорпиримидин-2-ил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (250 мг; 0,295 ммоль) в DCM (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,295 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме, получая неочищенный продукт. Это вещество разбавляли DCM (30 мл) и промывали водой, насыщенным NaHCO, водой, насыщенным NHCl и водой. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который растворяли в смеси MeCN/HO (1:2; 9 мл) и подвергали сублимационной сушке, получая указанное в заголовке соединение (120 мг; 0,149 ммоль; 50,4%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.22 (br. s., 1H), 8.75 (s, 2H), 8.60 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.39 (dd, J=4,8; 11,3 Гц, 1H), 3.24-3.10 (m, 1H), 2.82-0.59 (m, 57H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 789,5, обнаружено 790,3 (М+1).
Пример 29
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((1-(3-хлорфенил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
4
2
4
2
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((1-(3-хлорфенил)циклопропил)амино)-2-метил-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (280 мг; 0,332 ммоль) в DCM (6 мл) добавляли TFA (3 мл; 0,332 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч и упаривали в вакууме, получая неочищенный продукт. Его разбавляли DCM (30 мл) и промывали водой, насыщенным NaHCO, водой, насыщенным NHCl и затем водой. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который растворяли в смеси MeCN-HO (1:2; 9 мл) и подвергали сублимационной сушке, получая указанное в заголовке соединение (130 мг; 48%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.16 (br. s., 1H), 8.62 (s, 1H), 7.34-7.17 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 7.05 (d, J=7,5 Гц, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.40 (dd, J=4,4; 10,9 Гц, 1H), 3.23-3.08 (m, 1H), 2.83-0.62 (m, 57H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 787,5; обнаружено 788,2 (М+1).
Пример 30
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-(циклогексиламино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-(циклогексиламино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (400 мг; 0,525 ммоль) в DCM (10 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (5 мл; 64,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение 2 ч. Смесь упаривали досуха, затем разбавляли 200 мл DCM. Органическую фазу промывали насыщенным раствором NaHCO, водой и насыщенным рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Это вещество далее очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (120 мг; 32%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 6.92 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.62 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.37 (d, J=8,3 Гц, 1H), 4.50 (dd, J=5,3; 11,0 Гц, 1Н), 3.94-3.73 (m, 1Н), 3.27-3.14 (m, 2H), 2.80-2.51 (m, 3H), 2.37-2.03 (m, 3H), 2.03-0.69 (m, 54H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 705,5; обнаружено 706,3 (M+1).
Пример 31
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((R)-1-(3-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-(((R)-1-(3-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (400 мг; 0,489 ммоль) в DCM (10 мл), который перемешивали при комнатной температуре, затем добавляли TFA (5 мл; 64,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение 2 ч. Смесь упаривали досуха, затем разбавляли 200 мл DCM. Органическую фазу промывали насыщенным NаНСО, водой и рассолом. Органические фазы сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (100 мг; 27%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.38-7.14 (m, 4H), 6.96 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 6.25 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 5.73 (d, J=15,6 Гц, 1Н), 5.23-5.08 (m, 1Н), 4.50 (dd, J=5,4; 10,7 Гц, 1Н), 3.27-3.11 (m, 1Н), 2.82-2.49 (m, 3Н), 2.33-2.19 (m, 1Н), 2.19-2.00 (m, 2H), 2.00-0.71 (m, 47H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 761,4; обнаружено 762,2 (М+1).
Пример 32
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-((Е)-3-((2-гидроксиэтил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
4
1
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((2-гидроксиэтил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (60 мг; 0,083 ммоль) в DCM (5 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (2,5 мл; 32,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривали досуха, затем разбавляли 200 мл DCM. Органическую фазу промывали насыщенным раствором NaHCO (200 мл ×3), водой и рассолом. Органические фазы сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который далее очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (35 мг; 63%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d) δ равны 6.85 (d, J=16,1 Гц, 1Н), 5.96 (d, J=16,1 Гц, 1Н), 4.49 (dd, J=5,5; 10,5 Гц, 1Н), 3.64 (t, J=5,6 Гц, 2H), 3.39 (t, J=5,6 Гц, 2H), 3.37-3.21 (m, 1Н), 2.91 (dd, J=4,1; 11,7 Гц, ОН), 2.68-2.50 (m, 2H), 2.33-2.10 (m, 3Н), 2.09-0.75 (m, 44H).
Пример 33
4-(((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-((циклогексилметил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
6
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-((циклогексилметил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-2-оксо-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (200 мг; 0,258 ммоль) в DCM (10 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (5 мл; 64,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение 2 ч. Продукт упаривали досуха и затем разбавляли 200 мл DCM. Органическую фазу промывали насыщенным NaHCO, водой и рассолом. Органические фазы сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (55 мг; 29%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ равны 12.18 (br. s., 1H), 7.93 (t, J=5,8 Гц, 1H), 6.60 (d, J=15,8 Гц, 1H), 5.89 (d, J=15,8 Гц, 1H), 4.39 (dd, J=4,6; 11,2 Гц, 1H), 3.27-3.12 (m, 1H), 3.03-2.87 (m, 2H), 2.73 (dd, J=3,5; 11,8 Гц, 1H), 2.24-1.99 (m, 3H), 1.96-0.70 (m, 57H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 719,5; обнаружено 720,5 (М+1).
Пример 34
4-(((3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(3-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-3,3а,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
Стадия А
Промежуточное соединение 55
(3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-(гидроксиметил)-1-изопропил-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-3,3а,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-илацетат
1
-1
3
К раствору промежуточного соединения 3 (5 г; 7,59 ммоль) в ЕtOН (100 мл) и толуоле (100 мл) добавляли KOH (0,51 г; 9,11 ммоль). Затем после перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч реакционную смесь распределяли между водой (500 мл) и ЕtOAс (500 мл). Органическую фазу промывали водой (200 мл ×3), рассолом (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. После удаления растворителя получали остаток, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гекс.: ЕtOAс от 6:1 до 4:1), получая промежуточное соединение 55 (2,5 г; 67,9%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 Гц, CDCl) δ млн 4.50-4.67 (1Н, m), 3.68 (1Н, d, J=10,4 Гц), 3.32 (1Н, d, J=10,4 Гц), 3.23-3.15 (1Н, m), 2.42-2.28 (3Н, m), 2.05 (3Н, s), 2.02-1.89 (2Н, m), 1.77-0.83 (40Н, m).
Стадия В
Промежуточное соединение 56
(3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-3а-формил-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-илацетат
1
-1
3
К раствору промежуточного соединения 55 (3 г; 6,19 ммоль) в DCM (75 мл) при комнатной температуре добавляли РСС (4 г; 18,57 ммоль) и силикагель (3,0 г). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч реакцию гасили водой (100 мл). Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным бикарбонатом натрия (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме с получением остатка, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гекс.: EtOAc, 10:1), получая промежуточное соединение 56 (3 г; 100%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 Гц, CDCl) δ млн 9.43 (1Н, s), 4.50-4.46 (1Н, m), 3.25-3.21 (1Н, m), 2.43-2.02 (5H, m), 2.04 (3Н, m), 2.00-1.93 (1Н, m), 1.75-0.81 (38H, m).
Стадия С
Промежуточное соединение 57
(Е)-этил-3-((3аR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акрилат
3
1
К суспензии этил-2-(диэтоксифосфорил)ацетата (7,80 г; 34,8 ммоль) в безводном N,N-диметилформамиде (DMF) (20 мл) и тетрагидрофуране (THF) (10 мл), перемешиваемой в атмосфере азота при 0°C, по каплям в течение 5 мин добавляли NaH (1,288 г; 32,2 ммоль) и перемешивали в течение 10 мин. Раствор нагревали до кт и перемешивали в течение 30 мин, после чего к указанной выше смеси добавляли (3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-формил-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-илацетат (4,2 г; 8,70 ммоль). После перемешивания в течение ночи реакционную смесь гасили водой и промывали насыщенным NaHCO, водой и рассолом. Органическую фракцию сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением остатка, который очищали на колонке с силикагелем (петролейный эфир/EtOAc, 10:1), получая чистый продукт (E)-этил-3-((3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акрилат (3,1 г; 69%) в виде белой пены. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.01-6.84 (m, 2H), 5.64 (d, J=16,1 Гц, 1Н), 4.20 (q, J=7,3 Гц, 2H), 3.26-3.07 (m, 3Н), 2.40-2.11 (m, 5H), 2.08-1.91 (m, 2H), 1.89-0.61 (m, 43H).
Стадия D
Промежуточное соединение 58
(E)-3-((3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-3,3а,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриловая кислота
4
1
К раствору (E)-этил-3-((3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акрилата (2 г; 3,92 ммоль) в THF (15 мл), метаноле (10 мл) и воде (5 мл) добавляли гидроксид натрия (3,13 г; 78 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 4 ч. Далее добавляли насыщенный NHCl. Суспендированный осадок отфильтровывали и сушили, получая промежуточное соединение 58 (1,72 г; 69%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.05 (d, J=15,8 Гц, 1Н), 5.66 (d, J=16,1 Гц, 1Н), 3.30-3.07 (m, 2H), 2.28 (br. s., 3Н), 2.08-1.93 (m, 1Н), 1.91-0.59 (m, 40H).
Стадия Е
Промежуточное соединение 59
(E)-N-((S)-1-(3-хлорфенил)этил)-3-((3аR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриламид
1
К раствору (E)-3-((3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриловой кислоты (1 г; 2,072 ммоль), гидрохлорида (S)-1-(3-хлорфенил)этанамина (0,477 г; 2,486 ммоль) и HATU (1,575 г; 4,14 ммоль) в DMF (5 мл), перемешиваемому при кт, добавляли DIPEA (1,447 мл; 8,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 3 ч. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc, фильтровали через короткую колонку с силикагелем, получая промежуточное соединение 59 (1,2 г; 1,569 ммоль; выход 76%). H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.40-7.13 (m, 4Н), 6.99-6.77 (m, 1Н), 5.70-5.50 (m, 2H), 5.27-5.12 (m, 1H), 3.27-3.08 (m, 2H), 2.41-2.14 (m, 3H), 2.07-1.93 (m, 1H), 1.88-0.58 (m, 43H).
Стадия F
Промежуточное соединение 60
1-трет-бутил-4-((3аR,5аR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(3-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11a,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцинат
К раствору 4-трет-бутокси-3,3-диметил-4-оксобутановой кислоты (1,174 г; 5,80 ммоль) и DMAP (0,709 г; 5,80 ммоль) в DCM (20 мл), перемешиваемому при кт, добавляли EDCl (гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида) (1,854 г; 9,67 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли (E)-N-((S)-1-(3-хлорфенил)этил)-3-((3аR,5аR,5bR,7аR,9S,11аR,11bR,13аS)-9-гидрокси-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-3а-ил)акриламид (1,2 г; 1,934 ммоль). Полученную смесь перемешивали при кт в течение ночи. Добавляли воду и смесь распределяли и промывали дополнительным количеством воды. Органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали через короткую колонку с силикагелем и упаривали в вакууме, получая неочищенный продукт в виде желтой пены. Это вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия G
Соединение 54
4-(((3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((E)-3-(((S)-1-(3-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13a-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота
3
1
+
К раствору 1-трет-бутил-4-((3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aS)-3a-((Е)-3-(((S)-1-(3-хлорфенил)этил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3,3а,4,5,5а,5b,6,7,7а,8,9,10,11,11а,11b,12,13,13а-октадекагидро-2Н-циклопента[а]хрисен-9-ил)-2,2-диметилсукцината (1556 мг; 1,934 ммоль) в DCM (12 мл), перемешиваемому при комнатной температуре, добавляли TFA (4 мл; 51,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 2 ч. Смесь упаривали досуха, затем разбавляли 200 мл DCM. Органическую фазу промывали насыщенным раствором NaHCO (200 мл ×3), водой и рассолом. Органические фазы сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение (550 мг; 38%) в виде белого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ равны 7.40-7.17 (m, 4Н), 6.85 (d, J=15,3 Гц, 1Н), 5.72-5.49 (m, 2H), 5.18 (t, J=7,2 Гц, 1H), 4.50 (dd, J=5,6; 10,7 Гц, 1Н), 3.28-3.10 (m, 1Н), 2.74-2.62 (m, 1Н), 2.62-2.50 (m, 1Н), 2.24 (br. s., 3H), 2.08-1.92 (m, 2H), 1.89-0.70 (m, 49H); ЖХ/МС: m/z рассчитано 747,5; обнаружено 748,2 (М+1).
Пример 35
Анализ антивирусной активности на МТ4-клетках
Экспериментальная методика
50
2
3
50
Антивирусную активность в отношении ВИЧ и индуцированную соединениями цитотоксичность измеряли одновременно с помощью методики, основанной на применении иодида пропидия, в линии клеток МТ4, трансфицированных Т-клеточным лимфотропным вирусом человека. Выполняли серийные разведения аликвот тестируемых соединений в DMSO в 96-луночных планшетах. Клетки МТ4 собирали в экспоненциальной фазе роста и центрифугировали. Клеточные осадки после центрифугирования ресуспендировали в свежей порции среды (RPMI 1640, 10% FCS (фетальная телячья сыворотка) и гентамицин). Аликвоты клеток инфицировали, добавляя ВИЧ-1 (штамм IIIB), разведенный для получения множественности вирусной инфекции 300×TCID (доза, инфицирующая 50% клеток культуры ткани; от англ. tissue culture infectious dose 50)/миллион клеток. Аналогичную аликвоту клеток разбавляли средой для получения имитирующего заражение контроля. Заражение клеток проводили в течение 1 ч при 37°C в инкубаторе для тканевых культур в увлажненной атмосфере 5% CO. Через 1 ч инкубации, суспензии вируса с клетками разбавляли в свежей порцией среды и добавляли в каждую лунку планшета, содержащую предварительно разведенное соединение. Затем планшеты помещали в инкубатор для тканевых культур в увлажненную атмосферу 5% CO на 5 суток. По окончании периода инкубации количество клеток и, следовательно, ВИЧ-индуцированный цитопатический эффект оценивали посредством добавления Cell Titer-Glo (Promega). Планшеты анализировали на автоматическом планшетном ридере для люминесцентного анализа. В качестве контроля и стандарта использовали эфавиренз, который тестировали в диапазоне концентраций 0,001-1 мкМ в каждом анализе. Ожидаемый диапазон величин ИК для эфавиренза составляет 0,1-1 нМ.
Анализ
50
50
Антивирусный эффект тестируемого соединения выражают в виде ИК, т.е. ингибирующей концентрации, которая будет приводить к 50%-ному уменьшению ВИЧ-индуцированного цитопатического эффекта. Этот эффект измеряют по количеству тестируемого соединения, необходимого для восстановления 50% клеточного роста ВИЧ-инфицированных МТ4-клеток в сравнении с неинфицированными контрольными МТ4-клетками. ИК рассчитывали, используя автоматизированную программу аппроксимации кривых по точкам RoboSage.
Для каждого используемого в анализе планшета проводили усреднение результатов для лунок, содержащих не инфицированные клетки или инфицированные клетки и не содержащих никакого соединения, соответственно. При измерениях индуцированной соединением цитотоксичности результаты для лунок, содержащих соединение в различных концентрациях и неинфицированные клетки, сравнивали со средними показателями для неинфицированных клеток, не обработанных соединением. Процент оставшихся клеток определяют по следующей формуле:
процент оставшихся клеток=(обработанные соединением неинфицированные клетки/необработанные неинфицированные клетки)×100.
50
Процентная доля клеток, оставшихся на уровне 79% или меньше, указывает на значительный уровень цитотоксичности, индуцированной непосредственно соединением, для соединения в такой концентрации. При выполнении этого условия результаты для обработанных соединением инфицированных лунок в этой концентрации не включаются в расчет ИК.
При измерениях антивирусной активности соединений результаты для лунок, содержащих соединение в различных концентрациях и инфицированные клетки, сравнивают со средними показателями для неинфицированных и инфицированных клеток, не обработанных соединением. Процент ингибирования вируса определяют по следующей формуле:
процент ингибирования вируса=(1-((средн. для необработанных неинфицированных клеток - средн. для обработанных инфицированных клеток)/(средн. для необработанных неинфицированных клеток - средн. для необработанных инфицированных клеток)))×100.
Литература
1. Averett, D.R., Anti-HIV compound assessment by two novel high capacity assays, J. Virol. Methods, 23: 263-276, 1989.
2. Schwartz, O., et al. A rapid and simple colorimetric test for the study of anti-HIV agents, AIDS Res. and Human Retroviruses, 4 (6): 441-447, 1988.
3. Daluge, S.M., et al., 5-chloro-2'3'-deoxy-3'fluorouridine (935U83), a selective anti-human immunodeficiency virus agent with an improved metabolic and toxicological profile. Antimicro. Agents and Chemother., 38 (7): 1590-1603, 1994.
4. Dornsife, R.E., et al., Anti-human immunodeficiency virus synergism by zidovudine (3'-azidothymidine) and didanosine (dideoxyinosine) contrasts with the additive inhibition of normal human marrow progenitor cells, Antimicro. Agents and Chemother. 35 (2): 322-328, 1991.
5. Promega Technical Bulletin №ТВ245. CellTiter 96 AQ One Solution Cell Proliferation Assay.
Результаты
Введение и технология изготовления фармацевтических композиций
В другом воплощении предложена фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый разбавитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.
Соединения по настоящему изобретению могут поставляться в форме фармацевтически приемлемой соли. Термин ʺфармацевтически приемлемая сольʺ относится к солям, полученным из фармацевтически приемлемых неорганических и органических кислот и оснований. Соответственно, подразумевается, что слово ʺилиʺ в контексте ʺсоединения или его фармацевтически приемлемой солиʺ относится либо к соединению или его фармацевтически приемлемой соли (как альтернативы), либо к соединению и его фармацевтически приемлемой соли (в комбинации).
Использованный в данном описании термин ʺфармацевтически приемлемыйʺ относится к тем соединениям, материалам, композициям и лекарственным формам, которые с медицинской точки зрения подходят для применения в контакте с тканями людей и животных без чрезмерных токсичности, раздражения или других проблем или осложнений. Специалисту в данной области будет очевидно, что можно получить фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I. Такие фармацевтически приемлемые соли могут быть получены in situ в процессе конечного выделения и очистки соединения или в результате взаимодействия по отдельности очищенного соединения в форме своей свободной кислоты или своего свободного основания с подходящими основанием или кислотой, соответственно.
Иллюстративные фармацевтически приемлемые получаемые присоединением кислоты соли соединений по настоящему изобретению могут быть получены из следующих кислот, включая, без ограничения, муравьиную, уксусную, пропионовую, бензойную, янтарную, гликолевую, глюконовую, молочную, малеиновую, яблочную, винную, лимонную, азотную, аскорбиновую, глюкуроновую, малеиновую, фумаровую, пировиноградную, аспарагиновую, глутаминовую, бензойную, соляную, бромистоводородную, йодистоводородную, изолимонную, трифторуксусную, памовую, пропионовую, антраниловую, мезиловую, щавелевоуксусную, олеиновую, стеариновую, салициловую, п-гидроксибензойную, никотиновую, фенилуксусную, миндальную, эмбоновую (памовую), метансульфоновую, фосфорную, фосфоновую, этансульфоновую, бензолсульфоновую, пантотеновую, толуолсульфоновую, 2-гидроксиэтансульфоновую, сульфаниловую, серную, салициловую, циклогексиламиносульфоновую, альгеновую, β-гидроксимасляную, галактуровую и галактуроновую кислоты. Предпочтительные фармацевтически приемлемые соли включают соли соляной кислоты и трифторуксусной кислоты.
2
3
2
3
Иллюстративные фармацевтически приемлемые, получаемые присоединением неорганических оснований соли соединений по настоящему изобретению включают ионы металлов. Более предпочтительные соли ионов металлов включают, но не ограничиваются этим, соответствующие соли щелочных металлов, соли щелочноземельных металлов и других физиологические приемлемых ионов металлов. Соли, происходящие из неорганических оснований, включают соли алюминия, аммония, кальция, меди, трехвалентного железа, двухвалентного железа, лития, магния, трехвалентного марганца, двухвалентного марганца, калия, натрия, цинка и тому подобного и в их обычных валентностях. Типичные основные соли включают соли алюминия, кальция, лития, магния, калия, натрия и цинка. Другие типичные основные соли включают соли аммония, кальция, магния, калия и натрия. Следующие типичные основные соли включают, например, соли на основе гидроксидов, карбонатов, гидридов и алкоголятов, включая NaOH, KOH, NaCO, KCO, NaH и трет-бутилат калия.
Соли, происходящие из фармацевтически приемлемых органических нетоксичных оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, включающие в том числе соли триметиламина, диэтиламина, N,N'-дибензилэтилендиамина, хлорпрокаина, холина, диэтаноламина, этилендиамиана, меглумина (N-метилглюкамина) и прокаина; замещенных аминов, в том числе природных замещенных аминов; циклических аминов; четвертичных катионов аммония; и основных ионообменных смол, такие как соли аргинина, бетаина, кофеина, холина, N,N-дибензилэтилендиамина, диэтиламина, 2-диэтиламиноэтанола, 2-диметиламиноэтанола, этаноламина, этилендиамина, N-этилморфолина, N-этилпиперидина, глюкамина, глюкозамина, гистидина, гидрабамина, изопропиламина, лизина, метилглюкамина, морфолина, пиперазина, пиперидина, полиаминных смол, прокаина, пуринов, теобромина, триэтиламина, триметиламина, трипропиламина, трометамина и им подобные.
Все вышеупомянутые соли могут быть получены специалистами в данной области техники традиционными способами из соответствующего соединения по настоящему изобретению. Например, фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению могут быть синтезированы традиционными химическими методами из исходного соединения, содержащего основную или кислотную группировку. В общем случае такие соли могут быть получены в результате взаимодействия этих соединений в формах свободной кислоты или свободного основания со стехиометрическим количеством соответствующего(ей) основания или кислоты в воде либо в органическом растворителе или в смеси их обоих; как правило, предпочтительными являются неводные среды типа простого эфира, этилацетата, этанола, изопропанола или ацетонитрила. Соль можно осаждать из раствора и собирать фильтрованием или можно извлекать путем выпаривания растворителя. Степень диссоциации соли может варьировать от полностью диссоциированной до практически недиссоциированной формы. Перечни подходящих солей находятся в работе Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p.1418, описание которой тем самым включено посредством ссылки только в отношении перечней подходящих солей.
2
6
6
Соединения по изобретению могут существовать как в несольватированный, так и в сольватированной формах. Термин ʺсольватʺ используется в данном описании для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение по изобретению и одну или большее число молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например, этанола. Термин ʺгидратʺ применяют в случае, когда указанным растворителем является вода. Фармацевтически приемлемые сольваты включают гидраты и другие сольваты, причем растворителем для кристаллизации может быть изотопно замещенный растворитель, например DO, d-ацетон, d-DMSO.
Соединения формулы I или формулы II, содержащие один или более асимметрических атомов углерода, могут существовать в виде двух или более стереоизомеров. Если соединение формулы I или формулы II содержит алкенильную или алкениленовую группу или циклоалкильную группу, то возможны геометрические цис/транс- (или Z/E) изомеры. Если соединение содержит, например, группу кето или оксима либо ароматическую группировку, может иметь место таутомерная изомерия (ʺтаутомерияʺ). Из этого следует, что индивидуальное соединение может иметь более одного типа изомерии.
В пределы объема заявленных соединений по настоящему изобретению включены все стереоизомеры, геометрические изомеры и таутомерные формы соединений формулы I или формулы II, в том числе соединения, демонстрирующие более одного типа изомерии, и смеси одного или более из них. Также включены соли присоединения кислоты или соли с основаниями, где противоион является оптически активным, например, как в солях D-лактата или L-лизина, или рацемическим, например, как в солях DL-тартрата или DL-аргинина.
цис/транс-Изомеры могут быть разделены традиционными методами, хорошо известными специалистам в данной области техники, например, хроматографией и фракционной кристаллизацией.
Традиционные методы получения/выделения индивидуальных энантиомеров включают хиральный синтез из подходящего оптически чистого предшественника или разделение рацемата (или рацемата соли или производного) с использованием, например, хиральной жидкостной хроматографии высокого давления (ВЭЖХ).
Альтернативно, рацемат (или рацемический предшественник) может быть приведен во взаимодействие с подходящим оптически активным соединением, например, спиртом, или, в том случае, когда соединение формулы I или формулы II содержит кислотную или основную группировку, с кислотой или основанием, такими как винная кислота или 1-фенилэтиламин. Полученную диастереомерную смесь можно разделить хроматографией и/или фракционной кристаллизацией и один или оба из диастереоизомеров можно превратить в соответствующий(ие) чистый(ые) энантиомер(ы) способами, хорошо известными специалисту.
Хиральные соединения по изобретению (и их хиральные предшественники) можно получить в энантиомерно обогащенной форме, используя хроматографию, обычно ВЭЖХ, на смоле с асимметрической неподвижной фазой и с подвижной фазой, состоящей из углеводорода, обычно гептана или гексана, содержащего 0-50% изопропанола, обычно 2-20%, и 0-5% алкиламина, обычно 0,1% диэтиламина. После концентрирования элюата получают обогащенную смесь.
Смеси стереоизомеров могут быть разделены традиционными методами, известными специалистам в данной области техники. (См., например, E.L. Eliel, ʺStereochemistry of Organic Compoundsʺ (Wiley, New York, 1994).)
Настоящее изобретение включает все фармацевтически приемлемые меченные изотопом соединения формулы I или формулы II, в которых один или более атомов заменены атомами, имеющими один и тот же атомный номер, но атомную массу или массовое число, отличающиеся от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе.
2
3
11
13
14
36
18
123
125
13
15
15
17
18
32
35
Примеры изотопов, подходящих для включения в соединения по изобретению, включают изотопы водорода, такие как H и H, углерода, такие как C, C и C, хлора, такие как Cl, фтора, такие как F, йода, такие как I и I, азота, такие как N и N, кислорода, такие как О, O и O, фосфора, такие как P, и серы, такие как S.
3
14
Некоторые меченные изотопом соединения формулы I или формулы II, например те, в которые включен радиоактивный изотоп, полезны в исследованиях распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Радиоактивные изотопы трития, т.е. H, и углерода-14, т.е. C, особенно полезны для этой цели ввиду простоты их включения и доступных средств обнаружения.
2
Замена на более тяжелые изотопы, такие как дейтерий, т.е. H, может давать некоторые терапевтические преимущества, обусловленные большей метаболической стабильностью, например, увеличенный in vivo период полувыведения или снижение дозировки, и поэтому может быть предпочтительной в некоторых обстоятельствах.
В общем случае, меченные изотопом соединения формулы I или формулы II могут быть получены традиционными методами, известными специалистам в данной области техники, или способами, аналогичными описанным в сопроводительных примерах и подготовительных примерах, в которых вместо ранее используемого немеченого реагента применяют соответствующие меченные изотопом реагенты.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить в виде пролекарств. Так, некоторые производные соединений формулы I или формулы II, которые сами по себе могут обладать незначительной или не обладать никакой фармакологической активностью, при введении в организм или нанесении на тело будут превращаться в соединения формулы I или формулы II, как это делают ʺпролекарстваʺ.
Введение химических соединений, описанных в данном изобретении, может быть осуществлено любым из способов введения, принятых для средств, используемых при аналогичных состояниях, в том числе, но не ограничиваясь этим, перорально, сублингвально, подкожно, внутривенно, интраназально, местно, трансдермально, внутрибрюшинно, внутримышечно, внутрилегочно, внутривлагалищно, ректально или интраокулярно. В некоторых воплощениях используют пероральное или парентеральное введение.
Фармацевтические композиции или препараты включают твердые, полутвердые, жидкие и аэрозольные лекарственные формы, такие как, например, таблетки, капсулы, порошки, жидкости, суспензии, суппозитории, аэрозоли или им подобные. Химические соединения также можно вводить в лекарственных формах с длительным или контролируемым высвобождением, включая инъекционные депо-препараты, осмотические насосы, пилюли, трансдермальные (включая электротранспортные) пластыри и им подобное, для пролонгированного и/или рассчитанного по времени, импульсного введения с заданной скоростью. В некоторых воплощениях предложены композиции в стандартных лекарственных формах, подходящих для однократного введения точной дозы.
Химические соединения, описанные в данном изобретении, можно вводить или отдельно, или, что более типично, в комбинации с традиционным фармацевтическим носителем, эксципиентом или им подобным (например, маннитом, лактозой, крахмалом, стеаратом магния, сахарином натрия, тальком, целлюлозой, кроскармелозой натрия, глюкозой, желатином, сахарозой, карбонатом магния и им подобным). При желании, фармацевтическая композиция также может содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как увлажняющие агенты, эмульгирующие агенты, солюбилизирующие агенты, pH буферные агенты и им подобные (например, ацетат натрия, цитрат натрия, производные циклодекстрина, монолаурат сорбитана, ацетат триэтаноламина, олеат триэтаноламина и им подобное). Как правило, в зависимости от предполагаемого способа введения фармацевтическая композиция будет содержать примерно от 0,005% до 95%, в некоторых воплощениях примерно от 0,5% до 50% по массе химического соединения. Существующие способы изготовления таких лекарственных форм известны или будут очевидны специалистам в данной области; например, см. Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania.
В некоторых воплощениях композиции будут иметь форму пилюли или таблетки, и такая композиция будет содержать вместе с активным ингредиентом разбавитель, такой как лактоза, сахароза, дикальция фосфат или им подобное, смазывающее вещество, такое как стеарат магния или тому подобное, и связующее вещество, такое как крахмал, аравийская камедь, поливинилпирролидин, желатин, целлюлоза, производные целлюлозы или им подобное. В другой твердой лекарственной форме порошок, сферические частицы, раствор или суспензия (например, в пропиленкарбонате, растительных маслах или триглицеридах) инкапсулированы в желатиновую капсулу.
Вводимые в виде жидкостей фармацевтические композиции, например, могут быть изготовлены путем растворения, диспергирования и т.д. по меньшей мере одного химического соединения и возможных фармацевтических адъювантов в носителе (например, воде, физиологическом растворе, водной декстрозе, глицерине, гликолях, этаноле или им подобном) с образованием раствора или суспензии. Инъекционные композиции могут быть изготовлены в традиционных формах, либо в виде жидких растворов или в виде суспензий, представляющих собой эмульсии, либо в твердых формах, подходящих для растворения или суспендирования в жидкости перед инъекцией. Процентное содержание химических соединений в таких парентеральных композициях сильно зависит от их конкретной природы, а также активности химических соединений и потребностей субъекта. Тем не менее, реально используют процентные содержания активного ингредиента от 0,01% до 10% в растворе, и они будут выше, если композиция находится в твердой форме, которая впоследствии будет разбавлена до указанных выше процентных содержаний. В некоторых воплощениях композиция будет содержать от примерно 0,2 до 2% активного агента в растворе.
Фармацевтические композиции на основе химических соединений, описанных в данном изобретении, также можно вводить в дыхательные пути в виде аэрозоля или раствора для небулайзера или в виде микроизмельченного порошка для инсуффляции, по отдельности или в комбинации с инертным носителем, таким как лактоз. В таком случае частицы фармацевтической композиции имеют диаметры менее 50 микрон, в некоторых воплощениях менее 10 микрон.
В общем случае предложенные химические соединения будут введены в терапевтически эффективном количестве любым из способов введения, приемлемых для средств, используемых при аналогичных состояниях. Реальное количество химического соединения, т.е. активного ингредиента, будет зависеть от многочисленных факторов, таких как тяжесть подлежащего лечению заболевания, возраст и относительное состояние здоровья субъекта, эффективность используемого химического соединения, способ и форма введения и другие факторы. Данное лекарственное средство можно вводить более одного раза в сутки, например, один раз или два раза в сутки.
Терапевтически эффективные количества химических соединений, описанных в данном изобретении, могут находиться в диапазоне от приблизительно 0,01 до 200 мг на килограмм массы тела реципиента в сутки; как например, приблизительно 0,01-100 мг/кг/сутки, например, от приблизительно 0,1 до 50 мг/кг/сутки. Так, для введения субъекту массой 70 кг диапазон дозировок может составлять приблизительно 7-3500 мг в сутки.
В общем случае химические соединения будут введены в виде фармацевтических композиций любым из следующих способов: путем перорального, системного (например, трансдермального, интраназального или посредством суппозиториев) или парентерального (например, внутримышечного, внутривенного или подкожного) введения. В некоторых воплощениях может быть использовано пероральное введение с удобным режимом ежесуточного дозирования, которое может быть откорректировано в соответствии со степенью заболевания. Композиции могут иметь форму таблеток, пилюль, капсул, полутвердых веществ, порошков, композиций с непрерывным высвобождением, растворов, суспензий, эликсиров, аэрозолей или любых других соответствующих композиций. Другим способом введения предложенных химических соединений является ингаляция.
Выбор технологии изготовления зависит от различных факторов, таких как способ лекарственного введения и биодоступность лекарственного вещества. Для доставки ингаляцией химическое соединение может быть изготовлено в виде жидкого раствора, суспензий, аэрозольных пропеллентов или сухого порошка и загружено в диспенсер, подходящий для введения. Существует несколько типов фармацевтических ингаляторных устройств - небулайзеры, дозированные ингаляторы (MDI) и ингаляторы сухого порошка (DPI). Небулайзеры обеспечивают получение струи воздуха высокой скорости, и это приводит к тому, что терапевтические агенты (изготовленные в жидкой форме) распыляются в виде аэрозоля в дыхательные пути пациента. В MDI обычно используют композицию, упакованную со сжатым газом. После приведения устройства в действие происходит выброс отмеренного количества терапевтического агента под действием сжатого газа, обеспечивающий тем самым надежный способ введения установленного количества агента. DPI распыляет терапевтические агенты в форме свободнотекучего порошка, который посредством использования данного устройства может быть диспергирован в струю вдыхаемого пациентом воздуха в процессе дыхания. Чтобы добиться состояния свободнотекучего порошка, терапевтический агент комбинируют вместе с таким эксципиентом, как лактоза. Отмеренное количество терапевтического агента хранят в капсулярной форме и распыляют во время каждого акта приведения в действие.
Недавно, для лекарственных средств с плохой биодоступностью были разработаны фармацевтические композиции, в основе которых лежит принцип возможного повышения биодоступности путем увеличения площади поверхности, т.е. уменьшения размера частиц. Например, в патенте США №4107288 описана фармацевтическая композиция с частицами в диапазоне размеров от 10 до 1000 нм, в которых активное вещество закреплено на перекрестно-сшитой матрице из макромолекул. В патенте США №5145684 описано изготовление фармацевтической композиции, при котором лекарственное вещество измельчают до наночастиц (средний размер частиц 400 нм) в присутствии модификатора поверхности и затем диспергируют в жидкой среде с получением фармацевтической композиции, демонстрирующей замечательно высокую биодоступность.
В общем случае композиции состоят по меньшей мере из одного химического соединения, описанного в данном изобретении, в комбинации по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым эксципиентом. Приемлемые эксципиенты являются нетоксичными, помогают введению и не оказывают неблагоприятного действия на терапевтический эффект по меньшей мере одного химического соединения, описанного в данном изобретении. Таким эксципиентом может быть любой твердый, жидкий, полутвердый или, в случае аэрозольной композиции, газообразный эксципиент, который как правило является доступным специалисту в данной области техники.
Твердые фармацевтические эксципиенты включают крахмал, целлюлозу, тальк, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат магния, стеарат натрия, моностеарат глицерина, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко и им подобные. Жидкие и полутвердые эксципиенты могут быть выбраны из глицерина, пропиленгликоля, воды, этанола и различных масел, включая масла, получаемые из нефти, масла животного, растительного или синтетического происхождения, например, арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и т.д. Жидкие носители для инъекционных растворов включают воду, физиологический раствор, водный раствор декстрозы и гликоли.
Для диспергирования описанного в данном изобретении химического соединения в аэрозольной форме можно использовать сжатые газы. Инертными газами, подходящими для этой цели, являются азот, углекислый газ и т.д. Другие подходящие фармацевтические эксципиенты и их составы описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences под редакцией Е.W. Martin (Mack Publishing Company, 18-e изд., 1990).
Количество химического соединения в композиции может варьировать в пределах всего диапазона, используемого специалистами в данной области. Обычно, композиция будет содержать, на основании процента по массе (масс.%), примерно 0,01-99,99% по массе по меньшей мере одного химического соединения, описанного в данном изобретении, из расчета на общую композицию, при этом остальную часть будут составлять один или более подходящих фармацевтических эксципиентов. В некоторых воплощениях по меньшей мере одно химическое соединение, описанное в данном изобретении, присутствует на уровне примерно 1-80% по массе.