ПРИМЕНЕНИЕ ИНСУЛИН-СЕНСИБИЛИЗИРУЮЩИХ АГЕНТОВ, ВВОДИМЫХ ИНТРАВАГИНАЛЬНО
USING INTRAVAGINAL INSULIN SENSITISERS

Область техники
Настоящее изобретение относится к применению вагинальных инсулин-сенсибилизирующих агентов для профилактики и/или лечения яичниковой гиперандрогении и/или синдрома поликистозных яичников, и/или связанных расстройств.
Предшествующий уровень техники
В общих чертах, гиперандрогения представляет собой любое клиническое или лабораторное проявление избытка андрогенов у женщин. Наиболее частым клиническими проявлением гиперандрогении у женщин репродуктивного возраста является гирсутизм или акне с симптомами ановуляции или без них, такими как аменорея или дисфункциональное маточное кровотечение.
Гиперандрогения у женщин репродуктивного возраста может иметь пять разных причин:
- синдром поликистозных яичников;
- идиопатический гирсутизм;
- недостаточность ферментов в синтезе стероидных гормонов;
- андроген-секретирующие опухоли;
- другие эндокринные нарушения, такие как синдром Кушинга и т.д.
Тем не менее, большинство женщин с симптомами гиперандрогении страдают от синдрома поликистозных яичников (80%).
Синдром поликистозных яичников (или СПКЯ, также называемый синдромом Штейна-Левенталя) представляет собой репродуктивную и гормональную проблему, которая наиболее часто поражает женщин репродуктивного возраста. Согласно оценкам, приблизительно 5% женщин
страдают от данного расстройства.
Согласно Американскому обществу репродуктивной медицины, СПКЯ определяют по наличию любых двух следующих характеристик:
- отсутствие овуляции в течение длительного периода времени;
- высокие уровни андрогенов;
- большое количество мелких кист в яичниках.
Признаки и симптомы СПКЯ связаны с гиперандрогенией и могут включать:
- гирсутизм, акне и выпадение волос;
- избыточный вес или ожирение, особенно в области талии и живота;
- нерегулярные, спорадические менструации или их отсутствие;
- крупные и/или поликистозные яичники;
- бесплодие.
Кроме того, женщины с СПКЯ подвержены более высокому риску развития определенных проблем со здоровьем, включая:
- метаболический синдром: расстройство с несколькими компонентами, среди которых сахарный диабет типа 2 или резистентность к инсулину, высокие уровни холестерина, высокое кровяное давление (особенно вокруг талии и живота), высокие уровни С-реактивного белка и высокие уровни факторов свертывания крови;
- чрезмерное утолщение выстилки эндометрия, обильное или нерегулярное кровотечение и рак эндометрия.
Таким образом, СПКЯ оказывает важное влияние на систему здравоохранения и вызывает беспокойство у женщин, страдающих от него.
Фармакологическое лечение гиперандрогении направлено на устранение связанных с ней симптомов путем уменьшения уровней в сыворотке крови и/или периферического действия андрогенов. Оно должно поддерживаться в течение длительного времени, и удовлетворительные клинические эффекты обычно появляются в течение нескольких месяцев.
Оказалось, что некоторые лекарственные средства, разрешенные для лечения сахарного диабета типа 2, известные как инсулин-сенсибилизирующие агенты, обладают полезным эффектом у пациентов с СПКЯ.
Метформин (N,N-диметилимидодикарбоимиддиамид, Глюкофаж (Glucophage)), инсулин-сенсибилизирующий агент бигуанидового типа, доступен для лечения СПКЯ.
Метформин уменьшает клинические признаки гиперандрогении и корректирует нарушения менструального цикла. Если метформин в одиночку не восстанавливает овуляцию, он может улучшать реакцию женщины на фармацевтические продукты при лечении бесплодия. Обычная пероральная доза составляет от 500 до 2500 мг/сутки.
Розиглитазон (Авандия (Avandia)) и Пиоглитазон (Актос (Actos)), относящиеся к группе тиазолидиндионовых инсулин-сенсибилизирующих агентов, также доступны в Соединенных Штатах для лечения женщин с СПКЯ. Тиазолидиндионы продемонстрировали уменьшение гиперандрогении и восстановление овуляции у некоторых пациентов. Рекомендуемая пероральная доза составляет от 4 до 8 мг/сутки для розиглитазона и от 15 до 30 мг/сутки для пиоглитазона.
Краткое описание изобретения
Однако инсулин-сенсибилизирующие агенты могут вызывать некоторые побочные эффекты при введении перорально, некоторые из которых являются очень серьезными.
В случае метформина наиболее распространенным побочным эффектом, который может приводить к прекращению лечения, является раздражение желудочно-кишечного тракта, что происходит в 5-20% случаев. Диарея представляет собой самый распространенный симптом, сопровождающийся рвотой, болью в животе и неприятным привкусом во рту. Лактацидоз представляет собой редкий, но серьезный побочный эффект, вызываемый данным лекарственным средством.
В случае тиазолидиндионов гепатотоксичность представляет собой редкий эффект, вызывающий сильное беспокойство. При применении данных фармацевтических препаратов необходимо регулярно проводить функциональные пробы печени. Их применение не рекомендуется у пациентов с признаками заболевания печени.
В ходе лечения данными фармацевтическими препаратами может происходить задержка жидкости, которая может усугублять или вызывать застойную сердечную недостаточность. При наблюдении ухудшения сердечной функции необходимо прекратить лечение.
С другой стороны, применение розиглитазона было связано с более высоким риском явлений миокардиальной ишемии. Его применение не рекомендуется у пациентов с ишемической кардиопатией и/или заболеванием периферических артерий.
Также сообщали о случаях возникновения или ухудшения диабетического отека желтого пятна со снижением остроты зрения в ходе лечения данными фармацевтическими препаратами.
У женщин также должен быть учтен риск длительных переломов, связанных с лечением тиазолидиндионами.
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что вагинальное введение инсулин-сенсибилизирующих агентов неожиданным образом позволяет достигать достаточных уровней лекарственного средства в яичниках и оказывать терапевтические эффекты при значительном уменьшении системного воздействия, а следовательно, их неблагоприятных эффектов.
Неожиданно оказалось, что данные агенты оказывают антиандрогенное действие без необходимости опосредованного системного действия - за счет повышения чувствительности к инсулину, - но путем прямого действия на клетки яичников.
В частности, авторы настоящего изобретения установили, что вагинальное введение метформина значительно снижает уровни тестостерона (андрогенного гормона) в плазме крови. Подобным образом, авторы настоящего изобретения наблюдали уменьшение атретических (атрофированных) фолликулов в поликистозных яичниках.
Следовательно, вагинальное введение инсулин-сенсибилизирующих агентов может быть полезным при профилактике и/или лечении СПКЯ как у пациентов с высокими уровнями андрогенов (вследствие их влияния на концентрацию тестостерона в плазме крови), так и у пациентов с нормальными уровнями андрогенов (вследствие их прямого действия на ткань яичников).
Оно также может быть подходящим при профилактике и/или лечении других гиперандрогенных состояний, которые возникают при высоких уровнях андрогенов в плазме крови, а также связанных расстройств, таких как гирсутизм, акне и/или выпадение волос.
Следовательно, первый аспект настоящего изобретения относится к вагинальному применению инсулин-сенсибилизирующих агентов для профилактики и/или лечения синдрома поликистозных яичников, и/или гиперандрогенных состояний яичникового происхождения, и/или связанных расстройств.
Второй аспект относится к фармацевтическим составам для вагинального введения, содержащим по меньшей мере один инсулин-сенсибилизирующий агент, для профилактики и/или лечения синдрома поликистозных яичников, и/или гиперандрогенных состояний яичникового происхождения, и/или связанных расстройств.
Третий аспект настоящего изобретения относится к способу предупреждения и/или лечения синдрома поликистозных яичников, и/или гиперандрогенных состояний яичникового происхождения, и/или связанных расстройств, включающему вагинальное введение фармацевтического состава, содержащего по меньшей мере один инсулин-сенсибилизирующий агент.
Краткое описание графических материалов
Фиг. 1: Концентрация тестостерона в плазме крови.
Фиг. 2: Средняя гистологическая оценка обоих яичников (количество атретических фолликулов).
Подробное описание изобретения
Согласно одному воплощению, настоящее изобретение относится к применению метформина или тиазолидиндиона для профилактики и/или лечения синдрома поликистозных яичников.
Согласно другому конкретному воплощению, настоящее изобретение относится к применению метформина или тиазолидиндиона для профилактики и/или лечения других гиперандрогенных состояний яичникового происхождения с высокими уровнями андрогенов в плазме крови.
Настоящее изобретение относится к применению указанных фармацевтических препаратов для профилактики и/или лечения расстройств, связанных с гиперандрогенными состояниями яичникового происхождения, таких как гирсутизм, акне и/или выпадение волос.
Составы инсулин-сенсибилизирующего агента согласно настоящему изобретению могут быть представлены в любой лекарственной форме, подходящей для вагинального введения, например, такой как твердое вещество, полужидкое вещество или жидкость.
Данные составы будут содержать терапевтически эффективное и нетоксичное количество по меньшей мере одного инсулин-сенсибилизирующего агента или одной из его фармацевтически приемлемых солей или пролекарств совместно с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым наполнителем. Наполнители могут быть выбраны из любых наполнителей, известных специалисту в данной области техники, и должны быть подходящими для лекарственной формы, которую требуется изготовить.
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению могут содержаться в любом устройстве, подходящем для вагинального введения, например кольце или пессарии. Материалы для применения в изготовлении указанного устройства могут быть выбраны из любых материалов, известных специалисту в данной области техники, которые являются фармацевтически приемлемыми.
Количество инсулин-сенсибилизирующего агента, которое следует вводить при вагинальном применении для безопасного и эффективного лечения яичниковой гиперандрогении, и/или СПКЯ, и/или родственных расстройств, зависит от многих факторов, включая возраст и состояние пациента, тяжесть заболевания или расстройства, частоту введения состава и т.д.
Согласно конкретному воплощению настоящего изобретения, доза метформина, которую следует вводить при вагинальном применении, будет составлять от 0,01 мг/сутки до 1000 мг/сутки; предпочтительно от 0,1 мг/сутки до 100 мг/сутки; более предпочтительно от 0,5 до 50 мг/сутки, от 1 до 10 мг/сутки.
ПРИМЕР
Следующий тест иллюстрирует настоящее изобретение и не ограничивает объем настоящей заявки.
Цель исследования заключалась в оценке влияния метформина в модели синдрома поликистозных яичников (СПКЯ), индуцированного дегидроэпиандростероном (ДГЭА), у крыс.
Экспериментальный метод
Тестируемые составы представляли собой:
- Гели с Метформином в концентрации, составляющей 2 мг/мл (FT-147), 20 мг/мл (FT-148) и 200 мг/мл (FT-149).
- Гель без Метформина (Плацебо; FT-150).
Указанные гели получали в соответствии со следующими формулами:
гель 2 мг/мл
гель 20 мг/мл
гель 200 мг/мл
(FT-147)
(FT-148)
(FT-149)
Метформин
0,1 г
1 г
10 г
Метилпарабен натрия
34,3 мг
34,3 мг
34,3 мг
Лимонная кислота
1 г
1 г
1 г
40% Гидроксид натрия
дост. кол-во, приблизит.pH=5,5
дост. кол-во, приблизит.pH=5,5
дост. кол-во, приблизит.pH=5,5
Натросол (Natrosol)
0,85 г
0,85 г
0,85 г
Вода
дост. кол-во 50 г
дост. кол-во 50 г
дост. кол-во 50 г
Использовали 2-3-недельных самок крыс линии Sprague-Dawley.
Животные оставались на карантине в течение 7 дней в тех же условиях, в которых проводили исследование. Определяли их массу после их поступления в лабораторию и каждый день после этого до введения исследуемых веществ и ДГЭА.
Животных держали в клетках из поликарбоната 255×405×197 мм с подстилкой из опилок.
Животных делили на группы по 5 животных в каждой клетке, выбранных случайным образом, и содержали в условиях с контролем температуры (22±2°C), светового периода (12/12 ч свет/темнота), давления воздуха, числа возобновлений и относительной влажности (30-70%).
Животным давали стандартную пищу для грызунов и обеспечивали неограниченный доступ к питьевой воде.
В указанном исследовании использовали четыре экспериментальные группы по 8 животных в каждой:
Группа А: Контроль=Плацебо+ДГЭА
Группа В: Доза 1 исследуемого вещества (0,016 мг/животное)+ДГЭА
Группа С: Доза 2 исследуемого вещества (0,16 мг/животное)+ДГЭА
Группа D: Доза 3 исследуемого вещества (1,6 мг/животное)+ДГЭА
Каждую дозу для животного рассчитывали исходя из концентрации каждого состава и вводимого объема.
Доза 1: состав 2 мг/мл с введением 8 мкл/животное=0,016 мг/животное Доза 2: состав 20 мг/мл с введением 8 мкл/животное=0,16 мг/животное Доза 3: состав 200 мг/мл с введением 8 мкл/животное=1,6 мг/животное.
Исследуемое вещество (дозы, составляющие 0,016, 0,16 и 1,6 мг/животное) и контрольное вещество вводили интравагинально в виде водного геля в объеме, равном 8 мкл/животное.
Перед введением получали раствор ДГЭА в масле семян кунжута и вводили его путем подкожной инъекции в кожную складку в задней грудной области (дорсальная) в объеме, составляющем 0,2 мл.
Введение исследуемого или контрольного вещества начинали в день 0 в дозе, указанной в пункте 7.1.
Также в день 0 сразу после введения исследуемого или контрольного вещества каждому животному вводили путем подкожной инъекции ДГЭА (6 мг/100 г массы тела /0,2 мл кунжутного масла).
Данный режим повторяли с дня 0 по день 14 (всего в течение 15 дней лечения).
У каждого животного забирали образцы крови в день 15 (через 24 часа после последнего лечения) путем пункции брюшной полой вены (с антикоагулянтом гепарином натрия) под анестезией (пентобарбитал натрия).
Из каждого образца крови путем центрифугирования при 5000 g в течение 5 минут получали плазму, которую замораживали для дальнейшей оценки (количественные определения) уровней тестостерона с помощью коммерческих наборов для иммуноанализа (ИФА) для крыс.
После забора крови каждое животное умерщвляли путем смещения шейных позвонков и извлекали оба яичника. Определяли их массу и фиксировали в забуференном формалине для последующей гистологической оценки (путем окрашивания гематоксилином и эозином).
Исследовали три гистологических среза из каждого яичника, взятые из трех репрезентативных областей каждого яичника (начало, центр и конец), определяя количество атретических (атрофических) фолликулов. Фолликул считается атретическим, если наблюдается один из следующих признаков: пикноз тучных клеток, тучные клетки присутствуют в фолликулярной жидкости, гипертрофия текальных клеток.
Результаты
А. Концентрация тестостерона в плазме крови.
Концентрации тестостерона в образцах плазмы крови всех животных определяли в конце исследования (15 День). Результаты представлены в Таблице 1:
Таблица 1
Концентрация тестостерона в плазме крови
Исследование FCI/07/05FT - УРОВНИ ТЕСТОСТЕРОНА В ПЛАЗМЕ КРОВИ
ГРУППА A
ГРУППА B
ГРУППА C
ГРУППА D
животное
тестостерон (пг/мл)
животное
тестостерон (пг/мл)
животное
тестостерон (пг/мл)
животное
тестостерон (пг/мл)
A1
3128
B1
2300
C1
6072
D1
2576
A2
6164
B2
5474
C2
3450
D2
2622
A3
4876
B3
6578
C3
4462
D3
2990
A4
3956
B4
2714
C4
3818
D4
736
A5
5244
B5
6486
C5
7406
D5
598
A6
6670
B6
5336
C6
4554
D6
1518
A7
5474
B7
4048
C7
5428
D7
3404
A8
4692
B8
3036
C8
6578
D8
828
СРЕД. ЗНАЧЕ НИЕ
5025,5
СРЕД. ЗНАЧЕ НИЕ
4496,5
СРЕД. ЗНАЧЕ НИЕ
5221
СРЕД. ЗНАЧ ЕНИЕ
1909,000
В. Гистологическая оценка
Исследовали три гистологических среза из каждого яичника, взятые из 3 репрезентативных областей (начало, центр и конец), определяя количество атретических фолликулов. Полученные результаты суммированы в Таблицах 2-5:
Таблица 2
Гистологическая оценка яичников животных в группе A
ИССЛЕДОВАНИЕ FCI/07/05FT - ГИСТОЛОГИЯ
ГРУППА А
КОЛИЧЕСТВО АТРЕТИЧЕСКИХ ФОЛЛИКУЛОВ, левый яичник
КОЛИЧЕСТВО АТРЕТИЧЕСКИХ ФОЛЛИКУЛОВ, правый яичник
Среднее значение Атретические фолликулы. Оба яичника
ЖИВОТНОЕ
Срез 1
Срез 2
Срез 3
ЖИВОТНОЕ
Срез 1
Срез 2
Срез 3
А1
2
3
5
A1
1
2
3
2,67
А2
2
4
5
A2
3
6
7
4,50
A3
1
7
3
A3
3
5
5
4,00
А4
2
2
3
A4
2
3
3
2,50
А5
6
2
2
A5
6
5
4
4,17
А6
3
3
2
A6
3
6
5
3,67
А7
1
5
8
A7
1
4
6
4,17
А8
2
3
5
A8
2
4
6
3,67
Среднее количество атретических фолликулов, оба яичника
3,67
Таблица 3
Гистологическая оценка яичников животных в группе В
ИССЛЕДОВАНИЕ FCI/07/05FT-ГИСТОЛОГИЯ
ГРУППА В
Количество атретических фолликулов левый яичник
Количество атретических фолликулов, правый яичник
Среднее значение Атретические фолликулы. Оба яичника
ЖИВОТНОЕ
Срез 1
Срез 2
Срез 3
ЖИВОТНОЕ
Срез 1
Срез 2
Срез 3
В1
5
4
4
В1
2
4
6
4,17
В2
3
6
6
В2
2
4
2
3,83
В3
4
5
3
В3
5
5
5
4,50
В4
5
4
0
В4
2
3
4
3,00
В5
3
4
5
В5
3
3
2
3,33
В6
3
3
4
В6
1
2
4
2,83
в7
1
3
1
В7
2
6
4
2,83
В8
1
1
4
В8
3
3
4
2,67
Среднее количество атретических фолликулов, оба яичника
3,40
Таблица 4
Гистологическая оценка яичников животных в группе В
ИССЛЕДОВАНИЕ FCI/07/05FT - ГИСТОЛОГИЯ
ГРУППА С
Количество атретических фолликулов, левый яичник
Количество атретических фолликулов, правый яичник
среднее значение Атретические фолликулы. Оба яичника
ЖИВОТНОЕ
Срез 1
Срез 2
Срез 3
ЖИВОТНОЕ
Срез 1
Срез 2
Срез 3
C1
2
2
2
C1
4
4
3
2,83
C2
2
4
5
C2
3
2
2
3,00
C3
2
2
2
C3
2
4
4
2,67
C4
3
3
3
C4
2
4
1
2,67
C5
2
2
4
C5
1
5
4
3,00
C6
2
2
5
C6
2
3
2
2,67
C7
3
3
2
C7
1
2
2
2,17
C8
2
5
3
C8
3
3
4
3,33
Среднее количество атретических фолликулов оба яичника
2,79
Таблица 5
Гистологическая оценка яичников животных в группе D
ИССЛЕДОВАНИЕ FCI/07/05FT - ГИСТОЛОГИЯ
ГРУППА D
Количество атретических фолликулов, левый яичник
Количество атретических фолликулов, правый яичник
Среднее значение Атретические фолликулы. Оба яичника
ЖИВОТНОЕ
Срез 1
Срез 2
Срез 3
ЖИВОТНОЕ
Срез 1
Срез 2
Срез 3
D1
2
2
3
D1
2
5
5
3,17
D2
2
2
3
D2
4
5
4
3,33
D3
4
4
4
D3
3
3
4
3,67
D4
2
3
3
D4
4
5
3
3,33
D5
2
2
4
D5
2
1
4
2,50
D6
2
4
3
D6
1
2
3
2,50
D7
3
3
4
D7
2
3
3
3,00
D8
2
3
3
D8
1
4
5
3,00
Среднее количество атретических фолликулов, оба яичника
3,06
Выводы
Данные результаты демонстрируют очень значительное снижение уровней тестостерона в плазме крови у животных, которых лечили исследуемым веществом (метформином) в высокой дозе, по сравнению с группой, которую лечили контрольным веществом.
Также наблюдали значительное уменьшение количества атретических фолликулов у животных, которых лечили исследуемым веществом (метформином) в промежуточной дозе, по сравнению с группой, которую лечили контрольным веществом.