ЦЕЛЬНОКЛЕТОЧНЫЙ БИОКАТАЛИЗАТОР

1. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая следующие компоненты:
(1) сегмент, кодирующий сигнальный пептид,
(2) сегмент, кодирующий гетерологичный полипептид, регенерирующий редокс-фактор,
(3) необязательно сегмент, кодирующий сайт распознавания для протеазы,
(4) сегмент, кодирующий трансмембранный линкер, и
(5) сегмент, кодирующий транспортный домен аутотранспортера или его вариант,
+
+
2
где полипептид, регенерирующий редокс-фактор, представляет собой полипептид, подходящий для регенерации редокс-факторов, выбранных из группы, включающей NADH, NAD, NADPH, NADP, FADH и FAD.
2. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где полипептид, регенерирующий редокс-фактор, содержит один или несколько флавиновых кофакторов.
3. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где полипептид, регенерирующий редокс-фактор, выбран из группы, включающей NADH-оксидазу, формиатдегидрогеназу, глюкозодегидрогеназу.
4. Молекула нуклеиновой кислоты по п.3, где полипептид, регенерирующий редокс-фактор, выбран из группы, включающей NADH-оксидазы из Lactobacillus brevis, Thermus thermophilus, Thermus aquaticus, Brevibacterium sp. KU139 и Streptococcus faecalis, предпочтительно NADH-оксидазу из Lactobacillus brevis, и их варианты.
5. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где транспортный домен аутотранспортера выбран из группы, включающей Ssp, Ssp-h1, Ssp-h2, PspA, PspB, Ssa1, SphB1, AspA/NalP, VacA, AIDA-I, IcsA, MisL, TibA, Ag43, ShdA, AutA, Tsh, SepA, EspC, EspP, Pet, Pic, SigA, Sat, Vat, EpeA, EatA, EspI, EaaA, EaaC, пертактин, BrkA, Tef, Vag8, PmpD, Pmp20, Pmp21, протеазу AgA1, App, Hap, rOmpA, rOmpB, ApeE, EstA, Lip-1, McaP, BabA, SabA, AlpA, Aae, NanB и их варианты.
6. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где полипептид, регенерирующий редокс-фактор, чувствителен к кислороду.
7. Полипептид, кодируемый молекулой нуклеиновой кислоты по любому из пп.1-6.
8. Клетка, которая экспрессирует полипептид по п.7 на своей поверхности или которая была трансформирована с помощью молекулы нуклеиновой кислоты по любому из пп.1-6.
9. Мембранная фракция, получаемая из клетки по п.8.
10. Способ регенерации редокс-фактора, включающий следующие этапы:
(a) обеспечения полипептида по п.7, мембранного препарата по п.9 или клетки по п.8,
(b) приведения в контакт полипептида по п.7, мембранного препарата по п.9 или клетки по п.8 с одним или несколькими субстратами полипептида, регенерирующего редокс-фактор,
где один субстрат или несколько субстратов включает или включают редокс-фактор.
11. Применение клетки по п.8 или мембранного препарата по п.9, или полипептида по п.7 для регенерации редокс-фактора.
12. Применение клетки по п.8, мембранного препарата по п.9 и полипептида по п.7 для регуляции редокс-среды водного раствора, предпочтительно при помощи раскисления водного раствора.
13. Способ получения клетки, которая проявляет на своей поверхности полипептид, регенерирующий редокс-фактор, включающий следующие этапы:
(a) введения нуклеиновой кислоты по любому из пп.1-6 в клетку,
(b) необязательно приведения в контакт клетки с одной или несколькими редокс-реакционноспособными простетическими группами.
14. Способ получения продукта фермента, зависимого от редокс-фактора, включающий следующие этапы:
(a) обеспечения фермента, зависимого от редокс-фактора,
(b) обеспечения клетки по п.8, мембранного препарата по п.9 или полипептида по п.7 и
(c) приведения в контакт фермента, зависимого от редокс-фактора, с одним или несколькими его субстратами в присутствии клетки по п.8,
мембранного препарата по п.9 или полипептида по п.7,
где клетка по п.8, мембранный препарат по п.9 или полипептид по п.7 содержит полипептид, который регенерирует редокс-фактор, от которого зависит полипептид, зависимый от редокс-фактора.