Функциональная активность нейтрофилов крови больных почечноклеточным раком в нагрузочных тестах in vitro

из наиболее эффективных схем адъювантной терапии. Апробация таксансодержащих схем химиотерапии при РМЖ III стадии может явиться одним из актуальных направлений.

Цель исследования. Сравнительная оценка непосредственных результатов НАХТ по схемам FAC с TAC у больных с местнораспространенным РМЖ.

Материал и методы. Проанализированы непосредственные результаты неоадъювантной полихимиотерапии у 180 пациенток с местнораспространенным РМЖ в возрасте 28-65 лет, получивших лечение в ООД ЮКО за период 2003-2007 гг. У 140 (77,7 %) больных была 111а стадия заболевания (T2-3N1-2M0), у 40 (32,3 %) -111б стадия (T4N1-2M0). Все больные получили по 4 курса неоадъювантной химиотерапии. В сравнительном аспекте изучены результаты 2 и 4 курсов неоадъювантной химиотерапии. 100 (55,5 %) больных получили лечение по схеме FAC (5-фторурацил - 600 мг/м2, Доксорубицин

- 50 мг/м2, Циклофосфан - 600 мг/м2) и 80 (44,5 %) по схеме ТАС (Таксотер - 75 мг/м2, Доксо-рубицин -50 мг/м2, Циклофосфан - 600 мг/м2). При развитии гематологической токсичности применяли Нейпоген 30 млн МЕ подкожно, 1-3 инъекции.

Результаты. При контрольном осмотре в группе больных, получавших лечение по схеме FAC, после 2 курсов химиотерапии у 60 (60 %) больных отмечена частичная регрессия процесса, у 40 (40 %) - стабилизация процесса. После 4 курсов химиотерапии частичная регрессия

отмечена у 65

- частичная регрессия, у 35 (43,7 %) - стабилизация процесса. После 4 курсов химиотерапии полная регрессия отмечена у 16 (20 %) больных, частичная регрессия - у 48 (60 %), стабилизация процесса - у 8 (10 %) больных, у 6 (7,5 %) больных наблюдалось прогрессирование опухолевого процесса. При анализе регрессии метастазов в регионарных лимфоузлах установлено, что в группе больных, получавших химиотерапию по схеме ТАС, после 4 курсов резорбция очагов в регионарных лимфоузлах была на 15 % выше, чем у больных, получавших НАХТ по схеме FAC. Кроме того, в группе с ТАС в 20 % случаев отмечена полная регрессия опухоли и на 3,5 % меньше частота прогрессирования опухоли по сравнению с группой с FAC (р<0,05).

Выводы. Проведенное исследование показало, что комбинация ТАС имеет преимущество перед стандартной схемой FAC по частоте объективных эффектов, что может отразиться на отдаленных результатах лечения и продолжительности жизни больных. Рандомизированные исследования подтверждают эти результаты, комбинации с включением таксанов могут быть рекомендованы в качестве первой линии химиотерапии больных РМЖ, особенно у женщин молодого возраста.

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ КРОВИ БОЛЬНЫХ ПОЧЕЧНОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ В НАГРУЗОЧНЫХ ТЕСТАХ IN VITRO

Л.В. ФИЛОН, Е.А. шкапова, Р.А. ЗУКОВ

СФУ ИЕиГН, Кафедра биохимии и физиологии человека и животных, г. Красноярск Красноярский краевой онкологический диспансер

Актуальность. Иммунная система играет важную роль в задержке роста и регрессии опухолевых новообразований. Нейтрофильные гранулоциты участвуют в генерации активных форм кислорода (АФК), оказывающих токсичное

воздействие на клеточные структуры, и являются важнейшими клеточными факторами системы неспецифической резистентности организма.

Цель исследования. Изучение фагоцитарной и хемилюминесцентной (ХЛ) активности

нейтрофильных гранулоцитов крови у больных почечноклеточным раком (ПКР).

Материал и методы. На базе Краевого онкологического диспансера проведены наблюдения за больными с местно-распространенным ПКР до и через 14 дней после хирургического лечения (п=60 и п=26 соответственно) в возрасте от 50-65 лет. В качестве контрольной группы были обследованы здоровые доноры (п=56). Кислородный метаболизм нейтрофилов исследовали с помощью люминолзависимой ХЛ в течение 45 мин. Затем измеряли стимулированную ХЛ, в качестве индукторов «респираторного взрыва» использовали опсонизированный зимозан и взвесь St.epidermidis. ХЛ активность оценивали по параметрам: время выхода на максимум интенсивности, максимальное значение интенсивности и площадь ХЛ кривой. Индекс активации определяли по соотношению площади спонтанной к площади индуцированной ХЛ. Для оценки фагоцитоза определяли фагоцитарный индекс и фагоцитарное число. По результатам исследования была сформирована база данных, на основе которой с помощью пакета прикладных программ Statistica 6.0 производился статистический анализ. Описание выборки проводили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Проверку гипотезы о статистической достоверности выборок проводили с помощью критерия Манна-Уитни.

Результаты. В ходе проведенных исследований выявлено, что уровень фагоцитарной активности нейтрофилов крови больных ПКР до хирургического вмешательства соответствует таковому у здоровых доноров, статистически значимых различий не выявлено. Изучение ХЛ ответа нейтрофилов крови у больных ПКР после операции показало увеличение времени выхода на максимум спонтанного свечения клеток по сравнению с контрольной группой (р<0,001).

У больных ПКР после хирургического лечения выявлена тенденция к снижению количества нейтрофилов, вступающих в реакцию фагоцитоза с культурой St.epidermidis, по сравнению с соответствующими параметрами групп здоровых доноров и больных ПКР до операции (0,05<р<0,1). Кроме того, что у больных ПКР после хирургического лечения обнаружена тенден-

ция к снижению поглотительной способности нейтрофилов в тесте с культурой St.epidermidis относительно показателя группы больных ПКР до операции (0,05<р<0,01). Выявлена тенденция к снижению активности нейтрофильных грану-лоцитов крови в тесте с латексом у пациентов ПКР после лечения, относительно соответствующего показателя крови у больных ПКР до операции (0,05<р<0,1). Среднее количество поглощенных нейтрофилами частиц латекса у обследованных пациентов с ПКР соответствует контрольному диапазону. У больных ПКР после хирургического лечения остается увеличенным время выхода на максимум спонтанного свечения нейтрофилов по сравнению с контрольной группой (р<0,001). После индукции ХЛ ответа клеток опсонизированым зимозаном у больных ПКР после хирургического вмешательства зарегистрировано увеличение времени выхода на максимум интенсивности ХЛ по сравнению с величинами контрольной группы (р<0,01). При стимуляции нейтрофилов взвесью St ерь dermidis наблюдается тенденция к снижению площади ХЛ ответа относительно показателей у больных ПКР до операции (0,05<р<0,1). При исследовании уровня фагоцитарной активности в зависимости от вида объекта фагоцитоза установлено, что у больных ПКР как до, так и после хирургического лечения количество активно фагоцитирующих St. epidermidis нейтрофильных гранулоцитов периферической крови превышает количество фагоцитирующих нейтрофилов в тесте с латексом (р<0,001). Кроме того, обнаружено, что изменение кислородзависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов больных ПКР в ответ на стимуляцию как до, так и после хирургического лечения одной направленности: уровень продукции АФК в ответ на индукцию опсонизированным зимозаном выше, чем при активации клеток St.epidermidis (р<0,05).

Выводы. У больных ПКР до хирургического лечения не выявлено выраженных функционально-метаболических изменений в нейтрофильных гранулоцитах. Через 14 дней после операции у больных ПКР снижаются показатели фагоцитарной активности клеток, что может отражать количественные и функциональные нарушения рецепторного аппарата нейтрофилов. Кроме того, в нейтрофильных

гранулоцитах периферической крови проопе- без нарушения компенсаторных возможностей

рированных пациентов снижена скорость и данной клеточной популяции.

стимулированный уровень продукции АФК,

УРОВЕНЬ ЦИРКУЛИРУЮЩЕЙ ДНК И АКТИВНОСТЬ ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕАЗ В ПЛАЗМЕ КРОВИ ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ И БОЛЬНЫХ РАКОМ ЖЕЛУДКА

А.В. ЧЕРЕПАНОВА1, С.Н. ТАМКОВИЧ12, Е.В. КОЛЕСНИКОВА1, В.И. ПЕРМЯКОВА3, П.И. шелестюк4, С.А. ТУЗИКОВ5, В.В. ВЛАСОВ1, П.П. ЛАКТИОНОВ1

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, г. Новосибирск1 Новосибирский государственный университет2 Центральная клиническая больница СО РАН, г. Новосибирск3 Областной онкологический диспансер, г. Новосибирск4 ГУ «НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН»5

Актуальность. Известно, что при развитии патологии происходит увеличение концентрации внеклеточных ДНК в плазме крови. Причиной этого может быть изменение ДНКазной активности крови в результате развития патофизиологических процессов.

Цель исследования. Мы исследовали влияние ДНКаз крови на концентрацию внеклеточных ДНК (внДНК) в крови больных раком желудка.

Материал и методы. Кровь здоровых доноров была предоставлена Центральной клинической больницей Советского района г. Новосибирска, образцы крови впервые поступивших больных раком желудка были собраны в Новосибирском областном онкологическом диспансере. Концентрацию выделенной внДНК крови определяли при помощи флуоресценции интеркалирующего красителя Hoechst 33258. Для оценки уровня ДНКазной активности крови нами был использован иммуноферментный анализ, основанный на гидролизе ПЦР фрагмента ДНК.

Результаты. Концентрация внДНК в плазме крови здоровых доноров (п=60) не превышает 13 ± 12,9 нг/мл крови, ДНКазная активность составляет 0,14 ± 0,13 ед. акт/мл крови (р<0,05). У больных раком желудка (п=17) концентрация внДНК в плазме достоверно выше, чем у здоровых доноров (критерий Манна-Уитни, р<0,001),

и составляет в среднем 70 (0-254) нг/мл крови. Так же как и в более ранних исследованиях, не выявлено зависимости концентрации внеклеточных нуклеиновых кислот плазмы от стадии онкологического заболевания. В 30 % исследованных образцов плазмы больных раком желудка дезоксирибонуклеазная активность была ниже уровня детекции и в среднем составляла 0,10 (0-0,37) ед. акт. ДНКазы 1/мл крови. Сравнение дезоксирибонуклеазной активности плазмы крови здоровых доноров и больных раком желудка показало, что при развитии патологии происходит понижение ДНКазной активности (критерий Манна-Уитни, р<0,01), однако корреляции между активностью дезоксирибонуклеаз и стадией заболевания не обнаружено.

Выводы. Данные о концентрации внДНК и ДНКазной активности крови в норме и при онкопатологии свидетельствуют о достоверной (р<0,001) обратной зависимости этих параметров с коэффициентом корреляции Спирмена

- 0,37. Таким образом, одним из факторов, определяющих повышение концентрации внДНК у больных раком желудка, является снижение активности дезоксирибонуклеаз крови.

Работа поддержана Российским фондом фундаментальных исследований (№ 06-04-49732а), грантами Президента РФ