Спектрофотометрическое определение бендазола

как у мужчин размеры ПЧЖ остаются стабильными. У женщин уровень эстрогенов прогрессивно снижается, достигая уровня эстрогенов в периоды детства, тогда как уровень тестостерона, наоборот, повышается и стабилизиуется (рис.1). На фоне недостатка эстрогенов объемная доля паренхимы в ПЧЖ уменьшается в 1,8 раза. Преобладание влияний тестостерона приводит к росту (в 1,5 раза) доли стромальных элементов (прямая связь уровня тестостерона с объемом внутридольковой стромы — г=+0,72), во внедольковой строме нарастает количество жировых клеток, достигающее максимума в старческий период и, по-видимому, частично компенсирующее недостаток эстрогенов. Уровень эстрогенов и тестостерона прямо коррелирует с объемом паренхимы (г=+0,96 и г=+0,73, соответственно) и обратно — с объемом стромы (г=-0,84 и г=-0,79). Таким образом, у женщин в процессе инволюции ПЧЖ уменьшается объем паренхимы и увеличивается объем стромы, а цен-

тральные и локальные механизмы регуляции противостоят этому процессу. У мужчин на этапе инволюции ПЧЖ уровень тестостерона снижается более плавно, поддерживаясь на уровне, превышающем его в периоды детства в 8-10 раз. В ПЧЖ объемная доля паренхимы остается стабильной, объем стромы изменяется волнообразно, сохраняется их взаимоограничивающие отношения. Гормональные влияния направлены, главным образом, на рост паренхимы и накопление жировых клеток (связь тестостерона с объемом паренхимы г=+0,64, с ЖК г=-0,56), что дает возможность поддерживать постоянный объем паренхимы в ПЧЖ [2,17н]. Таким образом, инволютивные процессы в ПЧЖ мужчин проявляются менее выражено, чем у женщин.

Выявленные половые особенности изменчивости структуры ПЧЖ в процессе ее роста и физиологической регенерации в онтогенезе человека необходимо учитывать в клинической практике.

ЛИТЕРАТУРА

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М: Медицина, 1990. — 384 с.

2. Артымук Н.В. Жировая ткань и ее роль в патологии репродуктивной системы у женщин с гипоталамическим синдромом // Проблемы репродукции. — 2003. — № 1. — С. 4043.

3. Гланц С. Медико-биологическая статистика. — М., 1999. — 459 с.

4. Дедов И.И., Мельниченко Г. А., Фадеев В.В. Эндокринология: Учеб. — М.: Медицина, 2000. — 632 с.

5. Калашникова М.Ф., Кахтурия Ю.Б., Мельниченко Г.А. Особенности пери- и постменпаузального периода у женщин с эндокринными заболеваниями (клиническая лекция) // Проблемы репродукции. — 2003. — № 1. — С. 44-52.

6. Манухин И.Б., Геворкян М.А., Чагай Н.Б. Андрогены и инсулино-резистентность // Проблемы репродукции. — 2002. — № 2. — С. 27-31.

7. Мкртумян А.М., Чагай Н.Б. Взаимосвязь между гормо-

нами яичников, массой жировой ткани и инсулинорезистент-ностью. // Проблемы эндокринологии. — 2005. — № 5. — С. 55-59.

8. Серов В.В., Шехтер А.Б. Соединительная ткань. М: Мед., 1981. — 312 с.

9. Cawson R.A., Eveson J.W. The Salivary Glands: Pathology and Surgery — Gleeson, 1997. — 224 p.

10. Jaskoll T., Melnick M. Submandibular gland morphogenesis: stage-specific expression of TGF-L\EGF, IGF, TGF-B, TNF, and IL-6 signal transduction in normal embryonic mice and the phenotypic effects of TGF-B-2, TGF-B-3, and EGF-r null mutations // Anat. Rec. — 1999. — Vol. 256, № 3, р. 1. — P. 252268.

11. Sumimoto S., Okamoto Y., Mizutani A., et al. Immunohistochemical study of fibroblast growth factor receptor (FGF-R) in experimental squamous cell carcinoma of rat submandibular gland // Oral oncol. — 1999. — Vol. 35, № 1. — P. 98-104.

Адрес для переписки: 664003, г.Иркутск, ул. Красного Восстания 1, ИГМУ,

Васильевой Людмиле Сергеевне — заведующей кафедрой гистологии, д.б.н., проф. Тел.(3952)240772

© ИЛЛАРИОНОВА Е.А., СЫРОВАТСКИЙ И.П., ИНОЗЕМЦЕВ П.О. — 2009

СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕНДАЗОЛА

Е.А. Илларионова, И.П. Сыроватский, П.О. Иноземцев

Резюме. Разработана унифицированная методика спектрофотометрического определения бендазола в субстанции, отличающаяся использованием в качестве образцов сравнения бензойной кислоты и фенолфталеина. Обоснованы оптимальные условия определения: растворитель — 0,1М раствор кислоты хлористоводородной, аналитическая длина волны — 270 нм. Определены коэффициенты пересчета. Относительное стандартное отклонение разработанной методики для субстанции составило 0,004.

Ключевые слова: спектрофотометрия, внешний образец сравнения, бендазол, бензойная кислота, фенолфталеин, коэффициент пересчета.

SPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION OF BENDAZOLE

E.A. Illarionova, I.P. Syrovatskii, P.O. Inozemtsev

Summary. A unified procedure was developed for the spectrophotometric determination of bendazole in the medicinal substance and using acid benzoic and phenolphthalein as reference sample. The best conditions for substance determination have been found as follows: 0,1 M HCl as a solvent and an analytical wavelength of 270 nm. The scaling factors have been determined. The relative standard deviations of the results obtained with the proposed ones are less than 0,004 for the substance.

Key words: spectrofotometric determination, external sample of the comparison, factor of the recalculation, bendazol, acid benzoic, phenolphthalein.

Проблема повышения эффективности и точности перед исследователями, работающими в области фар-

анализа, оценка экологической безопасности имею- мацевтического анализа. Спектрофотометрия в види-

щихся и предлагаемых методов анализа всегда стояла мой и УФ области спектра относится к числу методов,

Таблица 1

Результаты определения коэффициентов пересчета для спектрофотометрического определения бендазола по оптическим образцам сравнения

Внешний образец сравнения Метрологические характеристики

S2 S S DХ Е% Sr

Бензойная кислота 0,181 0,000003 0,0019 0,0006 0,0013 0,738 0,010

Фенолфталеин 0,293 0,000004 0,0019 0,0006 0,0014 0,464 0,006

получивших наибольшее распространение в анализе лекарственных средств. Лекарственные средства, выпускающиеся фармацевтической промышленностью и хорошо себя зарекомендовавшие требуют совершенствования методов анализа. Иммуномодулирующей активностью, сопровождающейся индукцией интерферона, обладает производное бензимидазола — бендазол [1]. Рекомендованный нормативной документацией для количественной оценки бендазола субстанции метод неводного титрования требует использования достаточно токсичных веществ (ледяной уксусной кислоты, муравьиной кислоты, уксусного ангидрида, ацетата окисной ртути) [5].

Целью настоящего исследования является разработка методики спектрофотометрического определения бендазола в субстанции с использованием оптических образцов сравнения.

Материалы и методы

В работе использовали: субстанцию бендазола, отвечающую требованиям нормативного документа, бензойная кислота (чда), фенолфталеин (чда), 0,1М раствор натрия гидроксида, приготовленного из фиксанала, 0,1М раствор кислоты хлористоводородной, приготовленного из фиксанала, спирт этиловый 95%.

Электронные спектры регистрировали на спектрофотометре Specord UV VIS. Оптическую плотность растворов измеряли на спектрофотометрах СФ-26 и СФ-46 в кюветах 1 см на фоне растворителя. Величину рН контролировали с помощью универсального ионометра ЭВ — 74.

Результаты исследований обработаны статистически с использованием пакета программ Microsoft Excel для Windows XP. Проверка распределения, которому подчиняются результаты исследования, дала возможность использовать для анализа критерий Стьюдента.

Результаты и обсуждения

Бендазол (2-бензилбензимидазола гидрохлорид) является производным ароматического и гетероциклического рядов и обладает способностью поглощать в ультрафиолетовой области спектра, что обусловлено л^л*-электронными переходами. Поэтому нами были изучены спектральные характеристики изучаемого лекарственного вещества в области от 220 до 400 нм в интервале рН 1,1-12,5.

При растворении в 0,1М растворе хлористоводородной кислоты бендазол протонируется по атому азота в третьем положении кольца имидазола. Спектр поглощения бендазола при рН 1,1 характеризуется двумя максимумами поглощения при длинах волн 270±1нм и 275±1 нм и минимумом поглощения при 245±1 нм. Повышение рН до 12,5 приводит к выделению основания бендазола и соответствующим перераспределением электронной плотности в молекуле, что отражается в батохромном сдвиге максимумов поглощения на 4 нм с одновременным гипсохромным смещением, а также появлению еще одного максимума при длине волны 244±1 нм.

Стабильность приготовленных для количественного определения растворов имеет большое значение в спектрофотометрическом анализе. Поэтому авторами была исследовано зависимость

оптических характеристик бендазола в различных растворителях от времени хранения. Как показали исследования, существенных изменений с растворами не происходит, что находит свое отражение в спектральных характеристиках представленных на графике. Как видно из графика стабильность растворов бендазола в различных растворителях практически одинакова. В качестве растворителя был выбран 0,1М раствор хлористоводородной кислоты т.к. этот же растворитель используется для приготовления растворов внешних образцов сравнения, что позволяет упростить работу химика-аналитика.

Для количественного определения бендазола спектрофотометрическим методом необходимо было выбрать образец сравнения. Исходя из установленной ранее зависимости [2], согласно которой в качестве внешних образцов сравнения могут применяться вещества, для которых интервал между аналитической длиной волны и максимумом (или минимумом) поглощения этого образца сравнения не превышает половины полуширины его полосы поглощения, в качестве внешнего образца сравнения для анализа бендазола выбраны бензойная кислота и фенолфталеин. Аналитическая длина волны бендазола (270 нм) входит в интервал, оптимальный для кислоты бензойной (266-280нм), фенолфталеина (268-282нм). Это дает основание предполагать, что кислота бензойная и фенолфталеин являются оптимальными внешними образцами сравнения для спектрофотометрического определения бендазола при использовании в качестве растворителя 0,1М раствор кислоты хлористоводородной [3].

Бензойная кислота и фенолфталеин выпускаются серийно промышленностью категории (чда), на них имеется ГОСТы регламентирующие их качество. Растворы бензойной кислоты и фенолфталеина в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной устойчивы при хранении длительное время [2].

Для разработки методики спектрофотометрического определения бендазола по бензойной кислоте и фенолфталеину необходимо было определить коэффициенты пересчета, которые находятся по формуле:

, 7Г __ вОС

пер ~ р,

ОС

где Евос — удельный показатель поглощения внешнего образца сравнения, Еос — удельный показатель поглощения определяемого (исследуемого) вещества. Результаты расчета коэффициента пересчета представлены в таблице 1.

Данные удельные показатели поглощения рассчитывают при аналитической длине волны, соответствующей максимуму поглощения определяемого вещества.

Для определения удельного показателя поглощения образца сравнения лекарственного вещества бендазо-ла использовали промышленную серию бендазола, дополнительно очищенную путём перекристаллизации из этилового спирта.

Разработанные оптимальные условия спектрофотометрического определения бендазола были использованы для количественного определения субстанции бендазола.

Методика количественного определения бендазо-ла в субстанции бендазола спектрофотометрическим

Таблица 2

Результаты количественного определения бендазола в субстанции спектрофотометрическим методом с использованием внешних образцов сравнения

Внешний образец сравнения Метрологические характеристики

S2 S S DХ Е% Sr

Бензойная кислота 99,91 0,1459 0,3819 0,1208 0,2729 0,27 0,004

Фенолфталеин 99,90 0,0836 0,2891 0,0914 0,2066 0,21 0,003

Спектр поглощения 0,002% раствора бендатола

методом с использованием внешних образцов сравнения. Точную навеску субстанции бендазола (0,2 г) количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100мл с помощью 20 мл спирта 95%, растворяют и доводят спиртом 95% до метки, перемешивают. Аликвотную часть раствора 1 мл переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки 0,1М раствором кислоты хлористоводородной, перемешивают. Измеряют оптическую плотность приготовленного раствора на спектрофотометре при длине волны 270 нм в кювете с длиной рабочего слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют 0,1М раствор кислоты хлористоводородной. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора внешнего образца сравнения — кислоты бензойной или фенолфталеина.

Методика приготовления раствора внешнего образца сравнения. Точную навеску кислоты бензойной (0,1 г) или фенолфталеина (0,07 г) соответственно количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл с помощью 20 мл спирта 95%, растворяют и доводят спиртом 95% до метки, перемешивают. Аликвотную часть раствора 2 мл переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят до метки 0,1М раствором кислоты хлористоводородной, перемешивают.

Содержание бендазола в субстанции находят по формуле:

1. Вышковский Г.Л. Энциклопедия лекарств. — 2004. — Издание № 11. — 1456 с.

2. Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., Плетенёва Т.В. Модифицированный метод сравнения в спектрофотометрическом анализе лекарственных средств // Вестник РУДН. Сер. Медицина. — 2003. — № 5 (24). — С. 66-70.

3. Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., Артасюк Е.М.

Стабильность растворов бендазола при различных значениях pH

Ах *100*100*от *2*К

__ А вОС Пер

’ Авос * 50 * 50 * ах * 1

где Ах и Авос — оптические плотности определяемого вещества и внешнего образца сравнения соответственно; ах и авос — точные навески определяемого вещества и внешнего образца сравнения соответственно; Кпер — коэффициент пересчета, для бензойной кислоты (0,181), для фенолфталеина (0,293).

Результаты количественного определения бендазола в субстанции приведены в таблице 2.

Относительная ошибка количественного определения не превышает 0,27% для бензойной кислоты и 0,21% для фенолфталеина. Сопоставляя полученные по разработанной методики относительные ошибки с относительной ошибкой химического титриметри-ческого метода (ацидиметрии в неводной среде), которая широко известна [4], можно сделать вывод, что предложенная методика количественного определения с использованием внешних образцов сравнения отличается достаточной точностью. К достоинствам разработанной методики можно отнести ее экологичность, простоту в выполнении и достаточную воспроизводимость.

Оптические характеристики внешних образцов сравнения для спектрофотометрии // Люминесценция и лазерная физика: Труды VII межд. школы-семинара. — Иркутск, 2003. — С. 87-93.

4. Основы аналитической химии / Под ред. Ю. А. Золотова — М.: Высшая школа, 1999. — 351с.

5. Фармакопейная статья 42-0008069101. Дибазол. — ОАО «Фармакон», 2001. — 4 с.

Адрес для переписки:

664003, Иркутск, ул. Красного восстания, 1,

Иркутский государственный медицинский университет,

Сыроватский Игорь Петрович — доцент кафедры фармацевтической и токсикологической химии. Тел. раб. (3952) 24-34-47. E-mail: ips1961@rambler.ru Илларионова Елена Анатольевна — зав. кафедрой, профессор

© КОНДРАТЬЕВ А.И. — 2009

ПРОГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ РИТМА СЕРДЦА У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ КОРОНАРНЫМ СИНДРОМОМ НА ФОНЕ САХАРНОГО ДИАБЕТА

А.И. Кондратьев

Резюме. С целью прогностической оценки заболевания рассматриваются особенности вариабельности ритма сердца у 90 больных при различном течении острого коронарного синдрома (ОКС) на фоне сахарного диабета 2