СПОСОБ МАССОВОГО ПРОИЗВОДСТВА ОБЛАСТИ Fc ИММУНОГЛОБУЛИНА С УДАЛЕННЫМИ НАЧАЛЬНЫМИ МЕТИОНИНОВЫМИ ОСТАТКАМИ

1. Способ получения области Fc иммуноглобулина, свободной от начального метионинового остатка в массовом масштабе, включающий
получение рекомбинантного экспрессирующего вектора, включающего нуклеотидную последовательность, кодирующую рекомбинантную область Fc иммуноглобулина, составленную из области Fc иммуноглобулина, связанной своим N-концом с шарнирной областью иммуноглобулина посредством пептидной связи;
трансформирование прокариотической клетки рекомбинантным экспрессирующим вектором с получением трансформанта;
культивирование трансформанта для того, чтобы экспрессировать область Fc иммуноглобулина как «тело включения»; и
выделение и очистку области Fc иммуноглобулина.
2. Способ по п.1, в котором область Fc иммуноглобулина выделена в мономерной или димерной форме.
3. Способ по п.1, в котором шарнирная область имеет две или более последовательно расположенные аминокислотные последовательности, полученные из шарнирной области IgG, IgA, IgM, IgE или IgD.
4. Способ по п.3, в котором шарнирная область имеет две или более последовательно расположенные аминокислотные последовательности, каждая из которых включает по меньшей мере один цистеиновый остаток.
5. Способ по п.3, в котором IgG выбран из группы, состоящей из IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4.
6. Способ по п.5, в котором шарнирная область имеет аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 18, 19, 20, 21, 48, 49, 50, 51, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59 или 60.
7. Способ по п.1, в котором область Fc иммуноглобулина выбрана из группы, состоящей из областей Fc из IgG, IgA, IgM, IgE, IgD и из их комбинаций и гибридов.
8. Способ по п.7, в котором область Fc иммуноглобулина является областью Fc IgG, выбранного из группы, состоящей из IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4 и из их комбинаций и гибридов.
н
н
н
н
L
9. Способ по п.1, в котором область Fc иммуноглобулина составлена из от одного до четырех доменов, выбранных из группы, состоящей из доменов С1, С2, С3, С4 и С.
10. Способ по п.1, в котором область Fc иммуноглобулина имеет аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 7, 9, 11, 13, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45 или 47.
11. Способ по п.1, в котором рекомбинантный экспрессирующий вектор представляет собой pmSCPFc, pmPSCFc, pmCPSFc, pmCPFc, pMEPKFc1, pMSCKFc1, pMDKTFc1, pMCPAFc1, pMPKSFc1, pMCPPFc1, pMPPCFc, pMPCPFc, pmPPCG2Fc, pmPCPG2Fc, pmCPG2Fc, pmCCVG2Fc или pmCVE2Fc.
.
12. Способ по п.1, в котором прокариотической клеткой является Ecoli.
13. Способ по п.1, в котором трансформантом является E. coli BL21/pSTIIG1CH1_3 (HM10935), BL21/pSTIIdCG1Fc (HM10927), BL21/pSTIIdCG1SFc (HM10928), BL21/pSTIIdCG1SFFc (HM10929), BL21/pSTIIG1Mo (HM10930), BL21/pSTIIdCG2Fc (HM10936), BL21/pSTIIdCG4Fc (HM10932), BL21/pSTIIG4CH1_3 (HM10931), BL21/pSTIIG4Mo (HM10933) или BL21/pSTIIG4H_K (HM10934).
14. Мономерная или димерная область Fc иммуноглобулина, свободная от начальных метиониновых остатков, полученная способом по п.1.