Изменение уровня дефензинов в сыворотке крови у детей с тяжело протекающими и рецидивирующими острыми паратонзиллитами

ОТОРИНОЛАРИНГОЛОГИЯ

Изменение уровня дефензинов в сыворотке крови у детей с тяжело протекающими и рецидивирующими острыми паратонзиллитами

Р.И.Ланда1, М.Р.Богомильский1, А.П.Китайгородский2, Л.В.Ганковская3, О.А.Ганковская4, Д.Д.Карташов3

1Российский государственный медицинский университет им. Н.И.Пирогова, кафедра оториноларингологии педиатрического факультета, Москва (зав. кафедрой - чл.-кор.РАМН, проф. М.Р.Богомильский);

2Морозовская детская городская клиническая больница, отделение оториноларингологии, Москва (главный врач - В.Л.Фомина);

3Российский государственный медицинский университет им. Н.И.Пирогова, кафедра иммунологии, Москва (зав. кафедрой - проф. Л.В.Ковальчук);

4НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова РАМН, лаборатория диагностики вирусных инфекций, Москва

Целью настоящей работы явилась оценка уровня противомикробных пептидов - дефензинов (HNP1-3) в сыворотке крови у детей с тяжело протекающими и рецидивирующими острыми паратонзиллитами. Были обследованы 140 детей в возрасте от 2 до 17 лет с острыми паратонзиллитами. Все больные были разделены на две группы: 1-я - 110 человек, получавшие стандартную антибактериальную терапию; 2-я - пациенты (30 человек), получавшие пидотимод (синтетический иммунокорректор) со стандартной терапией. Определение концентрации противомикробных пептидов а-дефензинов 1-3 (HNP1-3) в сыворотке крови проводилось методом иммуноферментного анализа (ИФА). Выводы: у больных острым паратонзиллитом выявлено резкое увеличение концентрации HNP1-3 в сыворотке крови в 7-8 раз. В 76% применение пидотимода у больных с паратонзиллитом при тяжелом и рецидивирующем течении позволяет снизить уровень HNP1-3 в сыворотке крови, улучшить показатели врожденного иммунитета. Ключевые слова: паратонзиллит, дети, дефензины, противомикробные пептиды

Change of the level of defensins in blood serum of children with severe and recurrent acute occurring paratonzillitis

R.I.Landa1, M.R.Bogomilskiy1, A.P.Kitaygorodskiy2, L.V.Gankovskaya3, O.A.Gankovskaya4, D.D.Kartashov3

1N.I.Pirogov Russian State Medical University, Department of Otorhinolaryngology of Pediatric Faculty, Moscow (Head of the Department - Corr. Member of RAMS, Prof. M.R.Bogomilskiy); 2Morozovskaya Children Municipal Clinical Hospital, Department of Otorhinolaryngology, Moscow (Chief Doctor - V.L.Fomina);

3N.I.Pirogov Russian State Medical University, Department of Immunology, Moscow (Head of the Department - Prof. L.V.Kovalchuk);

4I.I.Mechnikov Institute of Vaccines and Serums of RAMS, Laboratory of Diagnosis of Viral Infections, Moscow

The purpose of this study was to evaluate the level of antimicrobial peptides - defensins (HNP1-3) in the blood serum of children with severe leaking and recurrent acute paratonzillitis. There were examined 140 children aged from 2 to 17 years with acute paratonzillitis. All patients were divided into 2 groups: the first group - 110 patients who received standard antibiotic therapy, the second - 30 patients receiving standard therapy and pidotimod, a synthetic immunocorrector. Determination of the concentration of antimicrobial peptides а-defensins 1-3 (HNP1-3) in the blood serum was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In patients with acute paratonzillitis there revealed a sharp increase in the concentration of HNP1-3 in serum 7-8 times. In 76% of cases the application of pidotimoda in patients with and recurrent paratonzillitis reduced the level of HNP1-3 in the blood serum and improved the performance of innate immunity. Key words: paratonzillitis, children, defensin, antimicrobial peptides

Для корреспонденции:

Богомильский Михаил Рафаилович, член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой оториноларингологии педиатрического факультета Российского государственного медицинского университета им. Н.И.Пирогова

Адрес: 119049, Москва, 4-й Добрынинский пер., 1 Телефон: (495) 959-8759

Статья поступила 24.11.2010 г., принята к печати 01.03.2011 г.

Острый паратонзиллит - это заболевание, характеризующееся воспалением в паратонзиллярной клетчатке и в окружающих ее тканях (мышцах, сжимающих глотку) при наличии общих патологических изменений в организме в целом [1]. Наиболее распространенным является тонзил-логенный путь проникновения инфекции по контакту, лимфатическим и кровеносным сосудам в замкнутое паратон-

Изменение уровня дефензинов в сыворотке крови у детей с тяжело протекающими и рецидивирующими острыми паратонзиллитами

зиллярное пространство, богатое кровеносными и лимфатическими сосудами, заполненное рыхлой клетчаткой, которое ограничено с одной стороны глоточной фасцией, покрывающей т.сопэ^йог рИагупдеа, и «капсулой», образованной ее отрогами.

В этиологии паратонзиллитов, помимо тонзиллогенной этиологии, нельзя исключить роль травм, что нередко бывает при попадании инородных тел [2]. На сопряженность паратонзиллитов и хронической периодонтальной патологии обратили внимание С.Оеогда!аэ с соавт. [3]. Анализируя на протяжении 3 лет состояние зубочелюстной системы у больных паратонзиллитом, они выявили значимую периодон-тальную патологию у 70%, что достоверно выше, чем в группе больных только с хроническим тонзиллитом, протекающим с рецидивирующими ангинами. У детей в 85-90% случаев встречается передневерхний паратонзиллит, как правило, после перенесенной ангины, он характеризуется тяжелым течением. С первых дней заболевания отмечается резко выраженная интоксикация, гипертермия (нередко до 39-40°С), общая слабость, головная боль, нарастающая сильная боль на стороне пораженной миндалины, появляется иррадиация в область виска и уха, отмечается нарушение сна и снижение или отсутствие аппетита [4].

Ряд авторов наибольшую роль отводят стрептококковой инфекции. А.Ма1эиСа и соавт. проанализировали 724 случая паратонзиллита и выявили превалирование р-гемолити-ческого стрептококка [5].

Одним из наиболее неблагоприятных факторов внешней среды, предрасполагающих к развитию острого пара-тонзиллита, является переохлаждение нижних конечностей человека. Так, по мнению Г.Ф.Назаровой, происходит изменение кровообращения в миндалинах, снижается функция мерцательного эпителия, резко меняется коллоидное состояние клеток [6]. Указанные реакции лежат в основе снижения сопротивляемости организма, вследствие чего происходит активация патогенных возбудителей, создаются предпосылки для развития паратонзилли-та. Условиями для развития хронического тонзиллита, частых ангин следует считать не только патологические изменения в миндалинах, но и иммунодефицитное состояние [7]. Исследование состояния иммунной системы является одним из приоритетных современных направлений в изучении патогенетических механизмов возникновения, течения, развития осложнений, склонности к рецидивиро-ванию острого паратонзиллита. Факторы врожденного иммунитета представляют первую линию защиты от патогена. И.М.Ананич и П.Н.Антохий определили снижение фагоцитарной активности лейкоцитов в сыворотке крови у больных паратонзиллитом [8, 9]. Известно, что нейтро-фильные лейкоциты обладают защитным потенциалом. Одним из таких защитных факторов являются и дефензи-ны, которые быстро высвобождаются при активации ней-трофилов. Действие антимикробных пептидов приводит, главным образом, к нарушению структуры и функций ци-топлазматической мембраны микроорганизмов, что, в свою очередь, ведет к гибели последних. Противомикробные пептиды выступают не только в качестве эндогенных антибиотиков, они также играют важную роль в развитии процессов воспаления, репарации и регуляции адаптивно-

го иммунного ответа. Среди дефензинов выделяют две основные группы - а- и р-дефензины. а-дефензины (HNP 1-4) содержатся в азурофильных гранулах нейтро-филов. Три основных дефензина человека (HNP 1-3) составляют приблизительно 99% всех антимикробных пептидов данного типа. Они синтезируются только нейтрофи-лами, что позволяет считать их специфическими клеточными маркерами этих клеток. Активация нейтрофилов при инфекционных и воспалительных процессах приводит к быстрому высвобождению дефензинов, которые затем обнаруживаются в плазме и других жидкостях организма [10-13]. Несмотря на большое количество работ, посвященных лечению паратонзиллита, единого мнения относительно тактики ведения этих больных нет, а вопрос этот до сих пор дискутируется [14]. В связи с вышеизложенным целью нашей работы явилось исследование а-дефензинов в сыворотке крови как показателя иммунного состояния у детей с тяжело протекающими и рецидивирующими острыми паратонзиллитами.

Пациенты и методы

На кафедре оториноларингологии педиатрического факультета, совместно с кафедрой иммунологии РГМУ на базе Морозовской детской городской клинической больницы, был проведен анализ результатов обследования и лечения больных острым паратонзиллитом, находившихся в стационаре нашей клиники в период с октября 2007 г. по май 2010 г. Под наблюдением находились 140 пациентов с острым паратонзиллитом в возрасте от 0 до 17 лет. Мальчиков было 74 (53%), девочек - 66 (47%); в возрасте до 3 лет - 4 (2,9%), от 4 до 7 лет - 19 (13,5%), от 8 до 17 лет - 117 (83,6%) соответственно. Клинические методы исследования включали в себя: оценку соматического статуса пациента и жалобы, предъявляемые детьми и их родителями при поступлении в стационар. Боль в горле беспокоила всех 140 детей (100%), болезненность при открывании рта - 112 (80%) больных, слюнотечение -у 123 (88%) детей, повышение температуры отмечалось у 129 (92%) человек. Осуществлялся общий ЛОР-осмотр с оценкой выраженности общепринятых фарингоскопических признаков (асимметрия зева за счет смещения небной миндалины к центру на стороне поражения, отек и гиперемия передней небной дужки, смещения uvula в сторону), состояние региональных лимфатических узлов и тризма жевательной мускулатуры. Проводились лабораторно-диагностические методы обследования - клинический анализ крови, анализ мочи, иммунологическое обследование, включающее определение концентрации противомикроб-ных пептидов а-дефензинов 1-3 (HNP1-3) в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа (ИФА); использовались системы фирмы HyCult Biotehnology (Нидерланды). Все пациенты были разделены на две группы в зависимости от получаемой терапии. В 1-ю группу были включены дети (110 человек), получавшие стандартную терапию, включавшую общую антибактериальную, десенсибилизирующую терапию и санацию очага воспаления в ротоглотке. 2-ю группу составили дети (30 человек), получавшие совместно со стандартной терапией иммуномо-

Р.И.Ланда и др. / Вестник РГМУ, 2011, №2, с. 44-46

дулирующее лечение пидотимодом, синтетическим имму-номодулятором, усиливающим активность естественных киллеров, активирующим фагоцитоз, увеличивающим продукцию цитокинов (по 400 мг пидотимода два раза в день внутрь в течение 2 нед). Оценка клинической эффективности проводилась на основании клинических данных (наличие отека, гиперемии передней небной дужки на стороне поражения, гнойного отделяемого из области паратонзил-лярного абсцесса) и данных иммунологического исследования противомикробных пептидов до и после лечения.

Результаты исследования и их обсуждение

По данным нашего исследования, в сыворотке крови у здоровых детей (10 человек) определена концентрация а-дефензинов 1-3, составляющая 52, 6 ± 3,8 нг/мл, что соответствует норме взрослого здорового человека (от 0 до 150 нг/мл). Анализ противомикробных пептидов у больных острым паратонзиллитом выявил у всех пациентов резкое увеличение концентрации HNP1-3 в 7-8 раз, что составляет 808,5 ± 69 нг/мл. Полученные данные об уровне противомикробных пептидов послужили обоснованием для включения в терапию детей с острыми паратонзиллитами пидотимода - синтетического иммуномодулятора, активирующего показатели врожденного иммунитета. У 26 человек (87%) во 2-й группе, получавших стандартную терапию совместно с пидотимодом, отмечалось значительное улучшение самочувствия пациентов с острым паратонзиллитом на 2-3 сут пребывания в стационаре, уменьшение признаков интоксикации, понижение температуры тела до нормальных цифр. Фарингоскопически отмечалось уменьшение отека в области паратонзиллярной клетчатки. В 1-й группе у 102 пациентов (93%), не получавших пидотимод, динамика основных симптомов была замедленной, и аналогичное улучшение наступало на 4-5 сут. У большинства пациентов 2-й группы, у 23 человек (76%), получавших пидотимод, отмечалась тенденция к снижению концентрации противомикробных пептидов HNP1-3 в сыворотке крови на 10-14 день (617 ± 18 нг/мл). У 7 пациентов с рецидивирующим течением паратонзиллита (24%) концентрация а-дефензинов оставалась высокой. Пациенты 1-й группы, не получавшие пидотимод, имели менее выраженную положительную динамику.

Заключение

Традиционное лечение паратонзиллитов, основанное на применении антибиотиков и хирургических методик, не всегда приводит к нормализации показателей иммунной системы, а, следовательно, не позволяет достичь оптимального результата у больных с исходным иммунопатологическим состоянием, что обосновывает необходимость применения у них иммунокорректоров. У больных с острым паратонзиллитом выявлено резкое увеличение концентрации HNP1-3 в сыворотке крови. В 76% применение препарата пидотимод у больных с паратонзиллитом при тяжелом и рецидивирующем течении позволяет снизить уровень HNP1-3 в сыворотке крови, улучшить показатели врожденного иммунитета.

Литература

1. Преображенский Б.С., Попова Г.Н. Ангина, хронический тонзиллит и сопряженные с ними общие заболевания. - М.: Медицина, 1970. - С.145-160.

2. Иванов Г.К. О роли травмы глотки частицами колоса при уборке урожая в происхождении ангин // Вестн.оториноларингол. - 1949. - №3. - С.35-37.

3. Georgalas С., Kanagalingam J. et al. The association between periodontal disease and peritonsillar infection: a prospective study // Otolaryngol. - Head Neck Surg. -2002. - Jan. - V.126 (1). - P.91- 94.

4. Детская оториноларингология. Руководство для врачей. Под ред. М.Р.Бо-гомильского, А.Р.Чистяковой и др. (т. 1). - М.: Медицина, 2005. - С.308-322.

5. Matsuda А., Dаnауа T., Kamata K., Hasegawa M. Peritonsillar abscess a study of 724 cases in Japan // Ear Nose Throat J. - 2002. - Jun. - 81(6). - Р.384-389.

6. Назарова Г.Ф. Флегмонозная ангина (острый флегмонозный тонзиллит) и пери- и паратонзиллит с патогистологической и клинической точек зрения // Вестн. оториноларингол. - 1962. - №4. - С.75-83.

7. Господарь М. А. Токсико-аллергические проявления при хроническом тонзиллите и паратонзиллите (клинико-иммунологические и морфологические исследования). Автореф. дис. ... к.м.н. - М., 2006. - 24 с.

8. Антохий А.Е., Гусева Е.В. Динамика некоторых показателей состояния местного иммунитета у больных паратонзиллитом при различных методах лечения // Ж. ушных, носовых и горловых болезней. - 1980. - №3. - С.11-16.

9. Ананич И.М. Неотложная помощь при лечении больных паратонзиллярными абсцессами по материалам ЛОР клиники за 10 лет. - В кн.: Совместное заседание Пленума Правления Всесоюзного научного медицинского общества оториноларингологов и Научного Совета по оториноларингологии при Президиуме АМН СССР. - М. - 1978. - С.169-171.

10. Schneider J.J. et al. Human defensins // J. Mol Med. - 2005. - Aug. - V.83 (8). -P.587-595.

11. Белки иммунной системы. - Под ред. В.Т.Иванова. - М., Полиграфический участок ИБХ. - РАН. - 1997. С.138 с.

12. Кокряков В. Н. Биология антибиотиков животного происхождения. - СПб.: Наука, 1999. - 162 с.

13. Ганковская Л.В. и соавт. Экспрессия противомикробных пептидов слизистой оболочки носа при гипертрофии аденоидных вегетаций. - Вестн. Уральской медицинской академии наук. - 2010. - №2. - Т.29. - С. 108-109.

14. Бобров В.М., Шишкин С.А. Опыт лечения паратонзиллярных абсцессов. -Казанский мед. ж. - 1990. - №71 (4). - С.301.

Информация об авторах:

Ланда Регина Игоревна, аспирант кафедры оториноларингологии

педиатрического факультета Российского государственного

медицинского университета им. Н.И.Пирогова

Адрес: 119049, Москва, 4-й Добрынинский пер., 1

Телефон: 8(495) 959-8894

E-mail: r.landa@mail.ru

Китайгородский Александр Петрович, кандидат медицинских наук, заведующий отделением оториноларингологии Морозовской детской городской клинической больницы Адрес: 119049, Москва, 4-й Добрынинский пер., 1 Телефон: (495) 959-8809

Ганковская Людмила Викторовна, доктор медицинских наук, профессор кафедры иммунологии Российского государственного медицинского университета им. Н.И.Пирогова Адрес:117997, Москва, ул. Островитянова, 1 Телефон: (495) 434-9000

Ганковская Оксана Анатольевна, кандидат медицинских наук,

ведущий научный сотрудник лаборатории диагностики вирусных инфекций

НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова РАМН

Адрес:105064, Москва, Малый Казенный пер., 5а

Телефон: (495) 674-5501

Карташов Дмитрий Дмитриевич, кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры иммунологии Российского государственного медицинского университета им. Н.И.Пирогова Адрес: 117997, Москва, ул. Островитянова, 1 Телефон: (495) 434-5467