СЛИТЫЕ БЕЛКИ С АЛЬБУМИН-СВЯЗЫВАЮЩИМИ ДОМЕНАМИ

1. Композиция, содержащая альбумин-связывающий домен (ABD), при этом указанный ABD содержит:
а) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3 любой из вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2; а также
b) вариабельную область легкой цепи, содержащую vlCDR1, vlCDR2 и vlCDR3 любой из вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
2. Композиция, содержащая альбумин-связывающий домен по п. 2, отличающаяся тем, что указанная vhCDR1 содержит последовательность vhCDR1, указанная vhCDR2 содержит последовательность vhCDR2 и указанная vhCDR3 содержит последовательность vhCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
3. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность любой из вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
4. Композиция по любому из предыдущих пунктов, отличающаяся тем, что указанная vlCDR1 содержит последовательность vlCDR1, указанная vlCDR2 содержит последовательность vlCDR2 и указанная vlCDR3 содержит последовательность vlCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vlCDR1, vlCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
5. Композиция по п. 4, отличающаяся тем, что указанная вариабельная область легкой цепи содержит последовательность любой из вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
6. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что указанный альбумин-связывающий домен содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи A10m3 (фиг. 2D).
7. Композиция, содержащая вариант IL-15, содержащий одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из K86A, K86R, N112A, N112S, N112Q, K86A/N112A, K86R/N112A, K86A/N112S, K86R/N112S, K86A/N112Q, K86R/N112Q, K86A/N112A/N79A, K86R/N112A/N79A, K86A/N112A/N79D, K86R/N112A/N79D, K86A/N112A/N79Q, K86R/N112A/N79Q, K86A/N112A/N71D, K86R/N112A/N71D, K86A/N112A/N71Q, K86R/N112A/N71Q, K86A/N112A/N71D/N79A, K86A/N112A/N71D/N79D, K86A/N112A/N71Q/N79A, K86A/N112A/N71Q/N79D, K86R/N112A/N71D/N79A, K86R/N112A/N71D/N79D, K86R/N112A/N71D/N79Q, K86R/N112A/N71Q/N79A, K86R/N112A/N71Q/N79D и K86R/N112A/N71Q/N79Q, по сравнению с исходным IL-15.
8. Композиция, содержащая вариант IL-15 по п. 7, отличающаяся тем, что указанный вариант IL-15 содержит аминокислотную последовательность любого из вариантов IL-15, продемонстрированных на фиг. 3.
9. Композиция, содержащая вариант IL-15 по п. 7 или 8, дополнительно содержащая рецептор альфа IL-15 (IL-15Rα), присоединенный к указанному IL-15.
10. Слитый белок с альбумин-связывающим доменом (ABD), содержащий ABD, присоединенный к партнеру по слиянию, при этом указанный ABD содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3 любой из вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и вариабельную область легкой цепи, содержащую vlCDR1, vlCDR2 и vlCDR3 любой из вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
11. Слитый белок с ABD по п. 10, отличающийся тем, что указанная vhCDR1 содержит последовательность vhCDR1, указанная vhCDR2 содержит последовательность vhCDR2 и указанная vhCDR3 содержит последовательность vhCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
12. Слитый белок с ABD по п. 11, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательности любой из последовательностей вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
13. Слитый белок с ABD по любому из пп. 10-12, отличающийся тем, что vlCDR1 содержит последовательность vlCDR1, указанная vlCDR2 содержит последовательность vlCDR2 и указанная vlCDR3 содержит последовательность vlCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vlCDR1, vlCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
14. Слитый белок с ABD по п. 13, отличающийся тем, что указанная вариабельная область легкой цепи содержит последовательность любой из последовательностей вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
15. Слитый белок с ABD по п. 10, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи и указанная вариабельная область легкой цепи содержат вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи A10m3 соответственно (фиг. 2D).
16. Слитый белок с ABD по п. 10, отличающийся тем, что указанный партнер по слиянию представляет собой цитокин.
17. Слитый белок с ABD по п. 16, отличающийся тем, что указанный цитокин выбирают из группы, состоящей из IL-2, IL-7, IL-12, IL-15, IL-18, IL-21, GM-CSF и IFN-α.
18. Слитый белок с ABD по п. 10, отличающийся тем, что указанный партнер по слиянию представляет собой связывающий фрагмент.
19. Слитый белок с ABD по п. 18, отличающийся тем, что указанный связывающий фрагмент представляет собой scFv, содержащий вариабельную область тяжелой цепи scFv и вариабельную область легкой цепи scFv.
20. Слитый белок с ABD по п. 19, отличающийся тем, что указанный scFv выбирают из группы, состоящей из анти-scFv TGFβ, анти-scFv PD-L1, анти-scFv TNF, анти-scFv IL-1, анти-scFv IL-6, анти-scFv IL-8, анти-scFv IL-17 (AF) и анти-scFv IL-23.
21. Слитый белок с ABD по любому из пп. 10-20, отличающийся тем, что указанный ABD присоединен к указанному партнеру по слиянию с помощью линкера.
x
22. Слитый белок с ABD по п. 21, отличающийся тем, что указанный линкер представляет собой (GGGGS), где x представляет собой целое число от 1 до 10.
23. Слитый белок IL15-альбумин-связывающий домен (ABD) в соответствии с формулой (IL-15)-L-(ABD),
при этом указанный ABD содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3 любой из вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и вариабельную область легкой цепи, содержащую vlCDR1, vlCDR2 и vlCDR3 любой из вариабельный областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и
при этом указанный L представляет собой линкер.
24. Слитый белок IL15-ABD по п. 23, отличающийся тем, что указанная vhCDR1 содержит последовательность vhCDR1, указанная vhCDR2 содержит последовательность vhCDR2 и указанная vhCDR3 содержит последовательность vhCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
25. Слитый белок IL15-ABD по п. 24, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательности любой из последовательностей вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
26. Слитый белок IL15-ABD по любому из пп. 23-25, отличающийся тем, что указанная vlCDR1 содержит последовательность vlCDR1, указанная vlCDR2 содержит последовательность vlCDR2 и указанная vlCDR3 содержит последовательность vlCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vlCDR1, vlCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
27. Слитый белок IL15-ABD по п. 26, отличающийся тем, что указанная вариабельная область легкой цепи содержит последовательность любой из последовательностей вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
28. Слитый белок IL15-ABD по п. 23, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи и указанная вариабельная область легкой цепи содержат вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи A10m3 соответственно (фиг. 2D).
29. Слитый белок IL15-ABD по любому из пп. 23-28, отличающийся тем, что IL-15 представляет собой вариантный IL-15, содержащий одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из K86A, K86R, N112A, N112S, N112Q, K86A/N112A, K86R/N112A, K86A/N112S, K86R/N112S, K86A/N112Q, K86R/N112Q, K86A/N112A/N79A, K86R/N112A/N79A, K86A/N112A/N79D, K86R/N112A/N79D, K86A/N112A/N79Q, K86R/N112A/N79Q, K86A/N112A/N71D, K86R/N112A/N71D, K86A/N112A/N71Q, K86R/N112A/N71Q, K86A/N112A/N71D/N79A, K86A/N112A/N71D/N79D, K86A/N112A/N71Q/N79A, K86A/N112A/N71Q/N79D, K86R/N112A/N71D/N79A, K86R/N112A/N71D/N79D, K86R/N112A/N71D/N79Q, K86R/N112A/N71Q/N79A, K86R/N112A/N71Q/N79D и K86R/N112A/N71Q/N79Q, по сравнению с исходным IL-15.
30. Слитый белок IL15-ABD по п. 29, отличающийся тем, что указанный вариант IL-15 содержит аминокислотную последовательность любого из вариантов IL-15, продемонстрированных на фиг. 3.
31. Слитый белок IL15-ABD по п. 30, отличающийся тем, что указанный вариант IL-15 содержит аминокислотную последовательность IL15 K86R/N112A.
32. Слитый белок IL15-ABD по любому из пп. 23-28, отличающийся тем, что указанный IL-15 представляет собой IL-15 дикого типа.
33. Слитый белок IL15-ABD по пп. 23-28, отличающийся тем, что указанный IL-15 содержит IL-15 дикого типа, присоединенный к альфа-рецептору IL-15 (IL-15Rα).
34. Слитый белок IL15-ABD по любому из пп. 23-33, отличающийся тем, что указанный линкер выбирают из любого из линкеров, продемонстрированных на фиг. 48.
x
35. Слитый белок IL15-ABD по п. 34, отличающийся тем, что указанный линкер представляет собой (GGGGS), где x представляет собой целое число от 1 до 10.
36. Слитый белок IL15-ABD по п. 23, отличающийся тем, что указанный слитый белок на основе IL15-ABD имеет аминокислотную последовательность в соответствии с любой из аминокислотных последовательностей, продемонстрированных на фиг. 4.
37. Слитый белок IL12-альбумин-связывающий домен (ABD) в соответствии с формулой (IL-12)-L-(ABD),
при этом указанный ABD содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3 любой из вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и вариабельную область легкой цепи, содержащую vlCDR1, vlCDR2 и vlCDR3 любой из вариабельный областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и
при этом указанный L представляет собой линкер.
38. Слитый белок IL12-ABD по п. 37, отличающийся тем, что указанная vhCDR1 содержит последовательность vhCDR1, указанная vhCDR2 содержит последовательность vhCDR2 и указанная vhCDR3 содержит последовательность vhCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
39. Слитый белок IL12-ABD по п. 38, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательности любой из последовательностей вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
40. Слитый белок IL12-ABD по любому из пп. 37-39, отличающийся тем, что указанная vlCDR1 содержит последовательность vlCDR1, указанная vlCDR2 содержит последовательность vlCDR2 и указанная vlCDR3 содержит последовательность vlCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vlCDR1, vlCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
41. Слитый белок IL12-ABD по п. 40, отличающийся тем, что указанная вариабельная область легкой цепи содержит последовательность любой из последовательностей вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
42. Слитый белок IL12-ABD по п. 37, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи и указанная вариабельная область легкой цепи содержат вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи A10m3 соответственно (фиг. 2D).
43. Слитый белок IL12-ABD по любому из пп. 37-42, отличающийся тем, что указанный IL-12 представляет собой одноцепочечный IL-12, содержащий субъединицу p35, субъединицу p40 и линкер IL-12, и отличающийся тем, что указанный линкер IL-12 ковалентно присоединяет указанную субъединицу p35 к указанной субъединице p40.
44. Слитый белок IL12-ABD по любому из пп. 37-41, отличающийся тем, что указанный линкер выбирают из любого из линкеров, продемонстрированных на фиг. 48.
x
45. Слитый белок IL12-ABD по п. 44, отличающийся тем, что указанный линкер представляет собой (GGGGS), где x представляет собой целое число от 1 до 10.
46. Слитый белок IL12-ABD по п. 37, отличающийся тем, что указанный слитый белок на основе IL12-ABD содержит аминокислотную последовательность в соответствии с любой из аминокислотных последовательностей фиг. 20.
47. Слитый белок с альбумин-связывающим доменом (ABD), имеющий формулу от N-конца к C-концу, выбранную из группы, состоящую из
a) (IL-12)-L1-(ABD)-L2-(IL-15); и
b) (IL-15)-L1-(ABD)-L2-(IL-12),
при этом ABD представляет собой альбумин-связывающий домен, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, содержащую vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3 любой из вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и вариабельную область легкой цепи, содержащую vlCDR1, vlCDR2 и vlCDR3 любой из вариабельный областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и
при этом L1 и L2 представляют собой первый и второй линкер соответственно.
48. Слитый белок с ABD по п. 47, отличающийся тем, что указанная vhCDR1 содержит последовательность vhCDR1, указанная vhCDR2 содержит последовательность vhCDR2 и указанная vhCDR3 содержит последовательность vhCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
49. Слитый белок с ABD по п. 48, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательности любой из последовательностей вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
50. Слитый белок с ABD по любому из пп. 47-49, отличающийся тем, что указанная vlCDR1 содержит последовательность vlCDR1, указанная vlCDR2 содержит последовательность vlCDR2 и указанная vlCDR3 содержит последовательность vlCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vlCDR1, vlCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
51. Слитый белок с ABD по п. 50, отличающийся тем, что указанная вариабельная область легкой цепи содержит последовательность любой из последовательностей вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
52. Слитый белок с ABD по п. 47, отличающийся тем, что указанный слитый белок с ABD соответствует указанной формуле от N-конца к C-концу (IL-12)-L1-(ABD)-L2-(IL-15).
53. Слитый белок с ABD по п. 47, отличающийся тем, что указанный слитый белок с ABD соответствует указанной формуле от N-конца к C-концу (IL-15)-L1-(ABD)-L2-(IL-12).
54. Слитый белок с ABD по п. 47, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи и вариабельная область легкой цепи содержат вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи A10m3 (фиг. 2D) соответственно.
55. Слитый белок с ABD по любому из пп. 47-54, отличающийся тем, что указанный IL-15 содержит полипептид IL-15 дикого типа.
56. Слитый белок с ABD по любому из пп. 47-54, отличающийся тем, что указанный IL-15 содержит IL-15 дикого типа, присоединенный к альфа-рецептору IL-15 (IL-15Rα).
57. Слитый белок с ABD по любому из пп. 47-54, отличающийся тем, что IL-15 представляет собой вариантный IL-15, содержащий одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из K86A, K86R, N112A, N112S, N112Q, K86A/N112A, K86R/N112A, K86A/N112S, K86R/N112S, K86A/N112Q, K86R/N112Q, K86A/N112A/N79A, K86R/N112A/N79A, K86A/N112A/N79D, K86R/N112A/N79D, K86A/N112A/N79Q, K86R/N112A/N79Q, K86A/N112A/N71D, K86R/N112A/N71D, K86A/N112A/N71Q, K86R/N112A/N71Q, K86A/N112A/N71D/N79A, K86A/N112A/N71D/N79D, K86A/N112A/N71Q/N79A, K86A/N112A/N71Q/N79D, K86R/N112A/N71D/N79A, K86R/N112A/N71D/N79D, K86R/N112A/N71D/N79Q, K86R/N112A/N71Q/N79A, K86R/N112A/N71Q/N79D и K86R/N112A/N71Q/N79Q, по сравнению с исходным IL-15.
58. Слитый белок с ABD по любому из пп. 47-54, отличающийся тем, что указанный IL-15 содержит аминокислотную последовательность в соответствии с любой из аминокислотных последовательностей, продемонстрированных на фиг. 3.
59. Слитый белок с ABD по любому из пп. 47-58, отличающийся тем, что указанный IL-12 представляет собой одноцепочечный IL-12, содержащий субъединицу p35, субъединицу p40 и линкер IL-12, и отличающийся тем, что указанный линкер IL-12 присоединяет указанную субъединицу p35 к указанной субъединице p40.
60. Слитый белок с ABD по любому из пп. 47-59, отличающийся тем, что каждый из указанного первого линкера и второго линкера независимо выбирают из любого из линкеров, продемонстрированных на фиг. 48.
x
61. Слитый белок с ABD по п. 60, отличающийся тем, что указанный линкер представляет собой (GGGGS), где x представляет собой целое число от 1 до 10.
62. Слитый белок с ABD, содержащий альбумин-связывающий домен (ABD), цитокин и линкер (L) в соответствии с формулой (цитокин)-L-(ABD),
при этом указанный ABD содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3 любой из вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и вариабельную область легкой цепи, содержащую vlCDR1, vlCDR2 и vlCDR3 любой из вариабельный областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2, и
при этом указанный цитокин выбирают из группы, состоящей из IL-2, IL-7, IL-12, IL-15, IL-18, IL-21, GM-CSF и IFN-α.
63. Слитый белок с ABD по п. 62, отличающийся тем, что указанная vhCDR1 содержит последовательность vhCDR1, указанная vhCDR2 содержит последовательность vhCDR2 и указанная vhCDR3 содержит последовательность vhCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
64. Слитый белок с ABD по п. 63, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательности любой из последовательностей вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
65. Слитый белок с ABD по любому из пп. 62-64, отличающийся тем, что указанная vlCDR1 содержит последовательность vlCDR1, указанная vlCDR2 содержит последовательность vlCDR2 и указанная vlCDR3 содержит последовательность vlCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vlCDR1, vlCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
66. Слитый белок с ABD по п. 65, отличающийся тем, что указанная вариабельная область легкой цепи содержит последовательность любой из последовательностей вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
67. Слитый белок с ABD по любому из пп. 62-66, отличающийся тем, что указанный линкер выбирают из любого из линкеров, продемонстрированных на фиг. 48.
x
68. Слитый белок с ABD по п. 67, отличающийся тем, что указанный линкер представляет собой (GGGGS), где x представляет собой целое число от 1 до 10.
69. Слитый белок с ABD в соответствии с формулой (FP1)-L1-(ABD)-L2-(FP2),
при этом ABD представляет собой альбумин-связывающий домен, содержащий вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи;
при этом FP1 и FP2 представляют собой первый слитый белок и второй слитый белок соответственно;
при этом L1 и L2 представляют собой первый и второй линкер соответственно;
при этом указанная вариабельная область тяжелой цепи указанного ABD содержит vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3 любой из вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2; и
при этом указанная вариабельная область легкой цепи указанного ABD содержит vlCDR1, vlCDR2 и vlCDR3 любой из вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
70. Слитый белок с ABD по п. 69, отличающийся тем, что указанная vhCDR1 содержит последовательность vhCDR1, указанная vhCDR2 содержит последовательность vhCDR2 и указанная vhCDR3 содержит последовательность vhCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vhCDR1, vhCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
71. Слитый белок с ABD по п. 70, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательности любой из последовательностей вариабельных областей тяжелых цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
72. Слитый белок с ABD по любому из пп. 69-71, отличающийся тем, что указанная vlCDR1 содержит последовательность vlCDR1, указанная vlCDR2 содержит последовательность vlCDR2 и указанная vlCDR3 содержит последовательность vlCDR3 в соответствии с любой из последовательностей vlCDR1, vlCDR2 и vhCDR3, продемонстрированных на фиг. 2.
73. Слитый белок с ABD по п. 72, отличающийся тем, что указанная вариабельная область легкой цепи содержит последовательность любой из последовательностей вариабельных областей легких цепей, продемонстрированных на фиг. 2.
74. Слитый белок с ABD по п. 69, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи и указанная вариабельная область легкой цепи содержат вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи A10m3 (фиг. 2D) соответственно.
75. Слитый белок с ABD по п. 69, отличающийся тем, что FP1 и FP2 представляют собой первый цитокин и второй цитокин соответственно.
76. Слитый белок с ABD по п. 69, отличающийся тем, что указанный первый цитокин и указанный второй цитокин выбирают из группы, состоящей из
IL-2 и IL-12; IL-7 и IL-15; IL-15 и IL-12; IL-18 и GM-CSF; IL-21 и IL-15; GM-CSF и IL-12; GM-CSF и IL-21; и IFN-α и IL-15.
77. Слитый белок с ABD по п. 69, отличающийся тем, что FP1 и FP2 представляют собой первый связывающий фрагмент и второй связывающий фрагмент соответственно.
78. Слитый белок с ABD по п. 77, отличающийся тем, что каждый из указанного первого связывающего фрагмента и указанного второго связывающего фрагмента представляют собой scFv.
79. Слитый белок с ABD по п. 77, отличающийся тем, что указанный первый связывающий фрагмент и указанный второй связывающий фрагмент выбирают из группы, состоящей из scFv TNF и scFv IL-1; scFv TNF и scFv IL-6; scFv TNF и scFv IL-8; scFv TNF и scFv IL-17 (изоформы AF); scFv TNF и scFv IL-23; первого TNF scFv и второго TNF scFv; анти-scFv PD-L1 и IL-12; анти-scFv PD-L1 и IL-15; анти-scFv PD-L1 и анти-scFv TGF; первого анти-scFv PD-L1 и второго scFv PD-L1; анти-scFv TGFβ и IL-12; анти-scFv TGFβ и IL-15; анти-scFv TGFβ и scFv PD-L1; и первого анти-scFv TGFβ и второго анти-scFv TGFβ.
80. Слитый белок с ABD по любому из пп. 69-79, отличающийся тем, что каждый из указанного первого линкера и второго линкера независимо выбирают из любого из линкеров, продемонстрированных на фиг. 48.
x
81. Слитый белок с ABD по п. 80, отличающийся тем, что каждый из указанного первого линкера и второго линкера независимо друг от друга представляет собой (GGGGS), где x представляет собой целое число от 1 до 10.
82. Слитый белок с альбумин-связывающим доменом (ABD), содержащий TGFβ-связывающий домен и альбумин-связывающий домен,
при этом указанный альбумин-связывающий домен содержит вариабельную область тяжелой цепи ABD и вариабельную область легкой цепи ABD, имеющие аминокислотные последовательности любой из вариабельных областей тяжелых цепей и вариабельных областей легких цепей на фиг. 2.
83. Слитый белок с ABD по п. 82, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи ABD и указанная вариабельная область легкой цепи ABD содержат аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи A10m3 (фиг. 2D) соответственно.
84. Слитый белок с ABD по п. 82, отличающийся тем, что указанный TGF-связывающий домен представляет собой scFv, содержащий вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи 4D9 (фиг. 40В).
85. Слитый белок с ABD по любому из пп. 82-84, отличающийся тем, что указанный ABD дополнительно содержит IL-12-, IL-15- или PD-L1-связывающий домен или второй TGFβ-связывающий домен.
86. Слитый белок с альбумин-связывающим доменом (ABD), содержащий PD-L1-связывающий домен и альбумин-связывающий домен,
при этом указанный альбумин-связывающий домен содержит вариабельную область тяжелой цепи ABD и вариабельную область легкой цепи ABD, имеющие аминокислотные последовательности любой из вариабельных областей тяжелых цепей и вариабельных областей легких цепей на фиг. 2.
87. Слитый белок с ABD по п. 86, отличающийся тем, что указанная вариабельная область тяжелой цепи ABD и указанная вариабельная область легкой цепи ABD содержат аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи A10m3 соответственно (фиг. 2D).
88. Слитый белок с ABD по п. 86, отличающийся тем, что указанный PD-L1-связывающий домен представляет собой scFv, содержащий вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи 10D12 (фиг. 50).
89. Слитый белок с ABD по любому из пп. 86-88, отличающийся тем, что указанный ABD дополнительно содержит IL-12-, IL-15- или TGFβ-связывающий домен или второй PD-L1-связывающий домен.
90. Нуклеиновая кислота, кодирующая альбумин-связывающий домен по любому из пп. 1-6.
91. Нуклеиновая кислота, кодирующая вариант IL-15 по любому из пп. 6-9.
92. Нуклеиновая кислота, кодирующая белок с ABD по любому из пп. 10-89.
93. Клетка-хозяин, содержащая указанную нуклеиновую кислоту по п. 90.
94. Способ получения альбумин-связывающего домена по любому из пп. 1-6, включающий культивирование указанной клетки-хозяина по п. 93 в условиях, в которых указанный альбумин-связывающий домен продуцируется, и извлечение указанного альбумин-связывающего домена.
95. Клетка-хозяин, содержащая указанную нуклеиновую кислоту по п. 91.
96. Способ получения варианта IL-15 по любому из пп. 6-9, включающий культивирование указанной клетки-хозяина по п. 94 в условиях, в которых указанный вариант IL-15 образуется, и извлечение указанного варианта IL-15.
97. Клетка-хозяин, содержащая указанную нуклеиновую кислоту по п. 92.
98. Способ получения слитого белка с ABD по любому из пп. 10-89, включающий культивирование указанной клетки-хозяина по п. 97 в условиях, в которых слитый белок с ABD продуцируется, и извлечение указанного слитого белка на основе ABD.
99. Способ ингибирования или уменьшения опухоли у субъекта, нуждающегося в этом, при этом указанный способ включает введение указанному субъекту слитого белка на основе ABD по любому из пп. 10-89.