Морфологическая характеристика летальных случаев после спленэктомии в эксперименте

Таблица 2

Влияние экстракта рапса и леспефлана на некоторые показатели сыворотки крови и почек при сулемовом нефрозе

Показатели мочи Группы животных

интакт- ные n=6 контроль (сулемовый нефроз) n=8 Экстракт рапса 200 мг/кг n=8 Леспефлан 5 мл/кг n=5

Объем мочи за 3 часа, мл/100 г 0,95 ±0,032 0,55±0,030 *-42 0,79±0,031 **+44% *-17% 0,65±0,023 **+18% *-32%

рН 6,1±0,10 5,8±0,19 5,7±0,23 5,9±0,37

Глюкоза, ммоль/л 0 6,6±0,87 0,67±0,061 **-90% 1,3±0,22 **-80%

Белок, г/л 0,038 ±0,0041 0,30±0,024 *+689% 0,041±0,049 **-86% 0,22±0,014 **-36% *+479%

Из данных, приведенных в таблице 2, видно, что введение животным сулемы сопровождается развитием олигурии (снижение диуреза на 42%), гликозурией и протеинури-ей. Введение на этом фоне исследуемого экстракта и леспефлана по сравнению с контролем достоверно увеличивает количество выделившейся мочи, уменьшает интенсивность

гликозурии. Уровень протеинурии наименее выражен при использовании экстракта рапса, применение которого привело к полному восстановлению содержания белка в моче до уровня здоровых животных, в то время как при введении референтного средства этот показатель достоверно превышал норму на 479%.

Выводы

Экстракт рапса обладает защитным действием в условиях острой токсической нефропатии, уменьшает проявление гиперазотемии, снижает интенсивность ПОЛ, нормализует уровень белкового обмена в почках, оказывает положительное влияние на диурез и состав мочи.

По сумме показателей, используемых для оценки выраженности защитного действия объектов, эффективность экстракта рапса выше препарата сравнения леспефлана.

Сведения об авторе статьи:

Терехов Александр Юрьевич - к.фарм.н., старший преподаватель кафедры биологической химии и микробиологии ПГФА.

Адрес: 357532, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11 Тел. (8793)32-44-74. E-mail: tau200@yandex.ru

ЛИТЕРАТУРА

1. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: в 2 т. - Минск: Беларусь. - 2000. - 2 т.

2. Лесиовская, Е.Е. [и др.] Методические подходы к доклинической оценке эффективности нефропротекторов / Е.Е.Лесиовская, К.В.Сивак, В.О.Николаев [и др.]//Ведомости научного центра экспертизы средств медицинского применения.- 2007.- №2.-С.91-102.

3. Методы исследований в профпатологии (биохимические)/ под ред. О.Г. Архиповой. - М.: Медицина, 1988. - 208 с.

4. Uchiyama M. Determination of Malonaldehyde Precursor in Tissues by Thiobarbituric Acid Test / M. Uchiyama, M. Mihara // Anal. Biochem. - 1978. - Vol.94. - № 86. - P. 271 - 278.

5. Ohkawa H. Assay for lipid peroxides in animal tissues by thyobarbituric acid reaction / H. Ohkawa, N. Ochihi, K. Vagi // Anal. Biochem. - 1979. - Vol.95. - № 2. - P. 351-358.

УДК 616.411-089.87-089.168.1-06:616.94]-091.8-092.9

© В.М. Тимербулатов, Р.Р. Фаязов, Б.Ф. Чанышев, Ш.В. Тимербулатов, Ф.А. Каюмов, 2011

В.М. Тимербулатов, Р.Р. Фаязов, Б.Ф. Чанышев, Ш.В. Тимербулатов, Ф.А. Каюмов МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛЕТАЛЬНЫХ СЛУЧАЕВ ПОСЛЕ СПЛЕНЭКТОМИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Уфа

Проведенное экспериментальное исследование показало, что в ранние сроки после спленэктомии летальность белых крыс составила 16,25%. Морфологическое исследование свидетельствует, что у животных определяется постинфекцион-ный гепатит, а также начальная фаза воспаления легочной ткани. Мезентериальные лимфатические узлы как органы гемо -и иммуноцитопоэза оказались в условиях выраженного функционального напряжения в ответ на инфицирование организма.

Ключевые слова: клеточная инфильтрация, лейкоциты, спленэктомия.

V.M. Timerbulatov, R.R. Fayazov, B.F. Chanyshev, Sh.V. Timerbulatov, F.A. Kayumov MORPHOLOGICAL PROFILE OF LETHAL OUTCOMES FOLLOWING SPLENECTOMY UNDER EXPERIMENT

The performed investigation revealed post-splenectomy mortality rate in white rats within a short-term follow-up to be 16.25%. Post-infectious hepatitis and first-stage pulmonary tissue inflammation were found in the animals by means of a morphological investigation. Mesenteric lymphatic nodes, as the organs of hemo- and immunocytopoiesis, appeared to be in the condition of pronounced functional tension in response to ingress of infection.

Key words: cell infiltration, leucocytes, splenectomy.

По мнению большинства исследовате- ный дефицит, что предрасполагает к генера-

лей, после спленэктомии развивается иммун- лизации инфекции и возникновению синдро-

ма отягощенной постспленэктомической инфекции (OPSI-syndrome) [4]. Вероятность развития OPSI-syndrome в настоящее время составляет 5% [3]. Сепсис может развиваться через любой промежуток времени после спленэктомии и характеризуется снижением функции миокарда, респираторным дистресс-синдромом, острой почечно-печеночной недостаточностью, что приводит к полиорган-ной недостаточности [1] и высокой летальности - до 50-80% [2]. В некоторых случаях инфекционные осложнения после спленэктомии могут протекать молниеносно в течение 6-24 ч после операции и с летальными исходами [6], однако наиболее вероятно развитие пост-спленэктомического сепсиса в первые 2 года [5]. Целью исследования явилось выявление возможной причины летальности экспериментальных животных в ранние сроки после спленэктомии.

Материал и методы

Спленэктомия выполнена 80 белым крысах линии Wistar со средней массой 250 г, классифицируемых по возрастной группе как зрелые репродуктивные животные [2]. В ходе экспериментального исследования на 3-7-е сутки после спленэктомии (СЭ) 13 (16,25%) лабораторных животных погибли. Проводили исследования ряда внутренних органов (печень, почка, легкое, сердце, головной мозг, мезентериальные лимфатические узлы). Из кусочков органов размерами 5х5х5 мм после соответствующей гистологической проводки изготовили срезы толщиной 7 мкм, далее их окрашивали гематоксилином и эозином, изучали и фотографировали с помощью микроскопа (Биолам) и цифрового аппарата «Olympus C-50». Всего приготовлено 150 микропрепаратов.

Результаты и обсуждение

У экспериментальных животных,

умерших на 3-7-е сутки после СЭ, определяются значительные гистологические изменения печени. Прежде всего отмечается хронический персистирующий гепатит с диффузной клеточной инфильтрацией междольковой соединительной ткани и периваскулярной зоны (рис. 1). Во всех участках отмечаются изменения микроциркуляторного русла печени, проявляющиеся венозной гиперемией. У лабораторных животных после их смерти отмечается периваскулярный отек и вдоль синусоидных капилляров располагается большее количество разрушающихся нейтрофильных лейкоцитов (кариорексис, кариопикноз и ка-риолизис), а также лимфоцитов и макрофагов. Разрушающиеся нейтрофилы, функционально

активные нейтрофилы, моноциты, лимфоциты и макрофаги встречаются и в междольковой соединительной ткани (рис. 2), а также вокруг триады печени. Фагоцитирующие микробов лейкоциты в значительном количестве выявляются и вокруг центральной вены.

В большинстве случаев фрагменты разрушающихся нейтрофильных лейкоцитов выявляются во внутридольковой зоне и именно в таких очагах отмечается дистрофия и некробиоз гепатоцитов (рис. 3). При этом гепатоци-ты теряют оболочку, цитоплазма клеток сливается, ядра разрушаются, часть из них приобретает очень плотное строение, цитоплазма окрашивается оксифильно. Некротические и дистрофические изменения занимают значительные участки дольки печени. Местами определяется гидропическая и баллонная дистрофия гепатоцитов, часть гепатоцитов в цитоплазме содержит пузырьки с жидким содержимым. Местами синусоидные капилляры расширяются.

У погибших животных в легочной ткани также выявляются определенные изменения гистологических структур. Прежде всего отмечается венозная гиперемия. При этом кровеносные сосуды, расположенные по ходу бронхов, полнокровны (рис. 4).

Лейкоциты концентрируются в слизистой оболочке бронхов, особенно в рыхлой соединительной ткани собственной пластинки и подслизистой основы слизистой оболочки. Лейкоциты располагаются преимущественно диффузно, однако встречаются небольшие скопления лимфоидной ткани (рис. 5).

Лейкоциты встречаются и в периброн-хиальной соединительной ткани, а также в межальвеолярных перегородках. Инфильтрация лейкоцитов и отек интерстициальной соединительной ткани указывают на формирование межлобулярной пневмонии.

Как в корковом, так и в мозговом веществе почки можно было заметить признаки изменения гистоструктуры. Почечные тельца с сетью кровеносных капилляров, а также юк-стагломерулярным аппаратом имеют нормальное гистологическое строение. Кровеносные капилляры, окружающие почечные канальцы полнокровны (рис. 6).

Характерной особенностью лимфатических узлов после гибели экспериментальных животных на 3-7-е сутки после СЭ является выраженная инфильтрация органа лимфоидной тканью. При этом лимфатические узелки достигают больших размеров, корону и герминативный центр определить невозможно. Межузелковая зона полностью исчезает также

за счет инфильтрации лимфоидными клетками (рис. 7). Все синусы (краевые, промежуточные и мозговые) также заполнены лимфоидной тканью. В мозговом веществе лимфа-

Рис. 1. Инфильтрация лейкоцитов по ходу синусоидных капилляров печени крыс, умерших на 3-7-е сутки после СЭ. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 40

Рис. 3. Деструкция и дистрофия гепатоцитов в отдельных участках долек печени крыс, умерших на 3-7-е сутки после СЭ. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 40

Рис. 5. Скопление лимфоидной ткани в интерстициальной соединительной ткани легкого крыс, умерших на 3-7-е сутки после СЭ. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 40

Рис. 7. Инфильтрация лимфоцитов в межузелковой зоне лимфатического узла крыс, умерших на 3-7-е сутки после СЭ. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 40

тических узлов из-за плотного расположения лимфоцитов и макрофагов также невозможно выделить мозговые тяжи, однако клетки располагаются менее плотно (рис. 8).

Рис. 2. Лимфоидная ткань в междольковой соединительной ткани печени крыс, умерших на 3-7-е сутки после СЭ. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 40

Рис. 4. Инфильтрация лимфоидной ткани по ходу бронхов различного калибра легкого крыс, умерших на 3-7-е сутки после СЭ. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 40

Рис. 6. Гиперемия венозных сосудов почки крыс, умерших на 3-7-е сутки после СЭ. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 40

Рис. 8. Уменьшение количества лимфоцитов в мозговом веществе мезентериальных лимфатических узлов крыс, умерших на 37-е сутки после СЭ. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 20

Гистологические препараты других ис- спленэктомии, определяются постинфекцион-

следованных органов, включая головной мозг, ный гепатит, а также начальная фаза воспале-

сердце, брыжейку тонкой кишки, не показы- ния легочной ткани. Мезентериальные лим-

вают каких-либо изменений гистоструктуры. фатические узлы как органы гемо - и иммуноВывод цитопоэза оказались в условиях выраженного

Таким образом, у экспериментальных функционального напряжения в ответ на ин-

животных, умерших в ранние сроки после фицирование организма.

Сведения об авторах статьи

Тимербулатов Виль Мамилович, член-корр. РАМН, д.м.н., профессор, зав. кафедрой хирургии с курсом эндоскопии и подготовки интернов хирургического профиля ИПО БГМУ, адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина 3. Тел. 8 (3472) 55-54-57. Фаязов Радик Радифович, д.м.н., профессор кафедры хирургии с курсом эндоскопии и подготовки интернов хирургического профиля ИПО БГМУ, адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина 3. Тел. 8(3472) 55-54-57; Факс: 8(3472) 55-54-57;

Чанышев Булат Финатович, заочный аспирант кафедры хирургии с курсом эндоскопии и подготовки интернов хирургического профиля ИПО БГМУ, адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина 3. Тел. 8(3472) 55-54-57; 55-65-48; Факс: 8(3472) 55-54-57; Тимербулатов Шамиль Вилевич, к.м.н., доцент кафедры хирургии с курсом эндоскопии и подготовки интернов хирургического профиля ИПО БГМУ, адрес: 450000, ГО г. Уфа, ул. Ленина 3. Тел. 8(3472) 55-54-57Факс: 8(3472) 55-54-57;

Каюмов Фарит Амирьянович, д.м.н., профессор кафедры гистологии БГМУ, адрес: 450000, ГО г. Уфа, ул. Ленина 3.

ЛИТЕРАТУРА

1. A fatal case of overwhelming postsplenectomy infection syndrome developing 10 years after splenectomy / Y. Urata, M. Hasegawa, H. Hasegawa [et al.] // Nihon Rinsho Meneki Gakkai Kaishi. - 1997. - Vol. 20, № 3. - P. 184-190.

2. Benoist, S. Median and long-term complications of splenectomy / S. Benoist // Ann. Chir. - 2000. - Vol. 125, № 4. - P. 317-324.

3. Davidson, R.N. Prevention and management of infections in patients without a spleen / R.N. Davidson, R.A. Wall // Clin. Microbiol. Infect. - 2001. - Vol. 7, № 12. - P. 657-660.

4. Dujmovic, F. Post-traumatic asplenia and splenosis / F. Dujmovic // Med. Pregl. - 1993. - Vol. 46, № 7-8. - P. 264-267.

5. Konigswieser, H. Incidence of serious infections after splenectomy in childhood / H. Konigswieser // Prog. Pediatr. Surg. - 1985. - Vol. 18. - P. 173-181.

6. Lethal pneumococcal infection in an 18-month-old girl with splenic hypoplasia and dysgammaglobulinemia / R. Nanan, K. Peters, L. Schrod, H.W. Kreth // Ann. Hematol. - 2001. - Vol. 80, № 11. - P. 674-676.

УДК 616.411-089.87-089.168.1-06-07:[611.34.018.73:611.428]-092.9 © Р.Р. Фаязов, Б.Ф. Чанышев, Ш.В. Тимербулатов, Ф.А. Каюмов, 2011

Р.Р. Фаязов, Б.Ф. Чанышев, Ш.В. Тимербулатов, Ф.А. Каюмов МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИМФОИДНЫХ ОБРАЗОВАНИЙ КИШЕЧНИКА ПРИ ПОСТСПЛЕНЭКТОМИЧЕСКОМ СИНДРОМЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Уфа

Проведенное экспериментальное исследование на 80 белых крысах свидетельствует, что в отдаленные сроки после спленэктомии в лимфоидной ткани кишечника происходит пролиферация иммунокомпетентных клеток, при этом лимфоидные узелки достигают значительных размеров, и они проявляют повышенную функциональную активность в результате появления центров размножения. В отдаленные сроки после органосберегательных и органозаместительных оперативных пособий выявлено участие в компенсаторном процессе лимфоидной ткани кишечника. Последние оставались не только функционально активными, но в них возрастала пролиферативная активность.

Ключевые слова: Пейеровы бляшки, солитарные фолликулы, лимфоидная ткань кишечника.

R.R. Fayazov, B.F. Chanyshev, Sh.V. Timerbulatov, F.A. Kayumov MORPHOFUNCTIONAL PROFILE OF INTESTINAL LYMPHOID FORMATIONS WITH POSTSPLENECTOMIC SYNDROME UNDER EXPERIMENT

The experimental investigation carried out on 80 post-splenectomy white rats showed immune-competent cells proliferation to occur within a long-term follow-up in the lymphoid tissues of intestines, herewith lymphoid nodules reaching a considerable size and revealing an increased functional activity as a result of reproduction centers appearance. Over a long-term period after organ saving and organ replacement operations, intestinal lymphoid tissue involvement in compensatory process was observed. The lymphoid nodes remained functionally active, demonstrating an increase in proliferative activity.

Key words: Реуer's patches, solitary follicles, lymphoid tissue of intestines.

Селезенка - сложный орган кроветворе- кации от бактериальных эндотоксинов [5].

ния и иммуногенеза человека, принимающий Удаление селезенки, несомненно, приводит к

участие в иммунной регуляции, иммунном выпадению ее функций, которые в дальней-

клиренсе, антигензависимом этапе дифферен- шем возмещаются деятельностью ретикуло-

цировки Т- и В-лимфоцитов (плазмоцитопоэз) эндотелиальной системы, находящейся в дру-

из костно-мозговых предшественников, кон- гих органах. Целью исследования явилось

троле аутоиммунитета [2, 3, 4, 6, 7], детокси- изучение морфофункционального состояния