Результаты проспективного исследования чувствительности штаммов Streptococcus pneumoniae, выделенных из мокроты больных с прогрессирующими респираторными заболеваниями

ОЗЫК МАКАЛА/ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ/ORIGINAL ARTICLE

Материал поступил в редакцию: 25-07-2014 Материал принят к печати: 29-07-2014 УДК 579.862.2.044:615.33

Results of Prospective Analysis of the Antibiotic Susceptibility of Streptococcus Pneumoniae Strains Isolated From Patients with Progressive Respiratory Infections

Bisenova N., Yergalieva A.

National Scientific Medical Research Center, Astana city, Kazakhstan

The aim of this study was to analyses the antibiotic susceptibility of Streptococcus pneumoniae strains isolated from patients with progressive respiratory infections.

Methods. Sputum of hospitalized patients diagnosed with progressive respiratory infection during 20092013 was included to the prospective bacteriological study. Initial seeding material conducted a quantitative method on nutrient medium according to guidelines. The identification of isolates and antibiotic susceptibility testing were performed by microbiological analyzer Microtax, MiniApi, Vitek 2-Compact. The etiological factor was defined at a concentration of 106 and above. The results were subjected to statistical analysis. We determined averages, an averages error (m), Students test, a confidence interval (p). The probability of null hypothesis did not exceed 0.05 (p<0.05).

Results. Streptococcus pneumoniae was the most frequently isolated from sputum with progressive respiratory infection. Antibiotic susceptibility testing showed that Streptococcus pneumoniae had 100% susceptibility to vancomycin. The susceptibility to beta-lactams ranged from 56.6% to penicillin up to 80.1% to cefuroxime. The most activity from quinolones was levofloxacin - 82.6% susceptibility strains of Streptococcus pneumoniae. Macrolides showed susceptibility rate below 50%.

Conclusions. 1) Streptococcus pneumoniae had 100% susceptibility to vancomycin. 2) The susceptibility of Streptococcus pneumoniae was above 80% to levofloxacin, cefuroxime, ceftriaxone.

Key words: progressive respiratory infections, sputum, Streptococcus pneumoniae strains, antibiotic susceptibility testing.

J Clin Med Kaz 2014; 2(32): 33-37

Автор для корреспонденции: Бисенова Неля Михайловна, д.б.н., руководитель микробиологической лаборатории Национального научного медицинского центра, раб.тел. -57-43-72, моб.тел. - 8-701-405-39-96, e-mail: nelyabis@mail.ru

ЖЕДЕЛ ДАМЫП КЕЛЕ ЖАТЦАН РЕСПИРАТОРЛЫ АУРУЛАРГА ШАЛДЫЦЦАН НАУЦАСТАРДЫЦ ЦАЦЫРЫГЫНАН Б0ЛШ1П АЛЫНГАН STREPTOCOCCUS Р^иМОШАЕ СЕЗШТАЛДЫЛЫГЫН АНЫЦТАУ ЦОРЫТЫНДЫСЫ Бисенова Н.М., Ергалиева А.С.

¥лттык гылыми медициналык орталык, Астана, Цазакстан

Зерттеудщ максаты. ЭртYрлі дэрежеде дамып келе жаткан респираторлы ауруларга шалдыккан наукастардан белшш алынган Streptococcus pneumoniae дакылдарынын антибиотиктерге сезімталдылык керсетюшт

Зерттеу эдастерь 2009-2013 жылдар аралыгында терапия белімінде стационарлык емдеуде бакыланган респираторлы ауруларга шалдыккан наукастарга бактериологиялык зерттеу жYргізілді. Б^л зерттеуге наукастардан белшген какырык алынды. Клиникалык материалдын коретж

JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE OF KAZAKHSTAN 2014 VOLUME 2, NUMBER 32

JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE OF KAZAKHSTAN 2014 VOLUME 2, NUMBER 32

орталарга біріншіліктi е^ сандык эдю аркылы нормативтік к^жатка сэйкес юке асты. Микроорганизмдердщ белініп алынган таза дакылдарын «Microtax», «MiniApi» жэне «Vitek2 - Compact» микробиологиялык компьютерлік анализаторларда эрі карай идентификацияланып, антибио-тиктерге сез1мталдылыгы аныкталды.

Этиологиялык факторга микроорганизмдердщ тек кана 1мл какырыкта 106 КОЕ жэне одан жогары белшген тYрлері жаткызылды.

Алынган нэтижелер статистикалык т^ргыда енделдь Ягни, сенімді ара кашыктыктын денгеш (р), Стьюденттщ t - елшемі, орташа кателік (m) жэне орташа аумактыгы аныкталды. Нэтиже тиянакты болып есептелді, егер нел-гипотезасы мYмкіндігі 0,05 тен аспаса (р<0,05).

Нэтижесь ЖYргізілген зерттеулер бойынша жедел респираторлы аурулардын негізгі коздыргышы болып Streptococcus pneumoniae табыл-ды. Осы себептен накты аймакта берілген патологиясы бар наукастардан белінген пневмококктардын антибиотиктерге сезімталдылык динами-касы байсалды тYPДе талкыга тYсті.

ЖYргізілген зерттеулер бойынша Streptococcus pneumoniae дакылынын ванкомицинге абсолютл 100% сезімталдылык керсетті. Пневмококктардын сезімталдылык денгеш бета-лактамды антибиотиктерге онын шшде; пенициллинге 56,6%, цефуроксимге 80,1% аралыгында ауыткыды. Фторхинолондардын онын ішінде левофлоксацин орташа есеппен 82,6% жана белшген Streptococcus pneumoniae дакылына айкын белсендшк керсеттіндегі аныкталды. Ал макролид антибиотиктерше пайыздык керсеткіш бойынша пневмококктардын белсендшп 50% темен екендігі аныкталды.

Цорытынды:

Streptococcus pneumoniae дакылынын ванкомицинге абсолютл 100% сезімталдылык керсетті.

Левофлоксацин, цефуроксим, цефтриаксон зерттелген Streptococcus pneumoniae дакылына 80% тен жогары антибактериалды белсендшк танытты.

Манызды сездер: дамыган респираторлы! аурулар, какырык, коздыргыштар, пневмококктар, антибиотиктерге сезімталдылык.

РЕЗУЛЬТАТЫ ПРОСПЕКТИВНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ШТАММОВ STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ МОКРОТЫ БОЛЬНЫХ С ПРОГРЕССИРУЮЩИМИ РЕСПИРАТОРНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ Бисенова Н.М., Ергалиева А.С.

Национальный научный медицинский центр, Астана, Казахстан

Цель исследования. Анализ чувствительности к антибиотикам штаммов Streptococcus pneumoniae, выделенных у пациентов с прогрессирующими респираторными заболеваниями.

Методы. В течение с 2009 по 2013 годы проведено проспективное бактериологическое исследование больных с прогрессирующими респираторными заболеваниями, находившихся на стационарном лечении в отделениях терапевтического профиля. Бактериологическому исследованию подвергалась мокрота данных больных. Первичный посев клинического материала проводили количественным методом на питательные среды в соответствии с нормативными документами. Идентифицикацию и антибиотикочувствительность выделенных чистых культур микроорганизмов проводили на микробиологических компьютерных анализаторах «Microtax», «MiniAPI» и «Vitek 2 - Compact».

За этиологический фактор принимались только те виды микроорганизмов, которые выделялись из мокроты в количестве 106 КОЕ в 1 мл и выше.

Полученные результаты подвергали статистической обработке. Определяли средние величины, ошибку средней (m), t-критерий Стьюден-та, уровень доверительного интервала (р). Результаты считали достоверными, если вероятность нуль-гипотезы не превышала 0,05 (р<0,05).

Результаты. Проведенных исследований показали, что основным бактериальным возбудителем прогрессирующих респираторных заболеваний являлся Streptococcus pneumoniaе.

В связи с этим представлялось актуальным изучение динамики чувствительности к антибиотикам пневмококков, выделенных у пациентов с данной патологией в конкретном регионе.

Проведенное исследование показало, что абсолютную 100% чувствительность культуры Streptococcus pneumoniae имели к ванкомицину. Уровень чувствительности пневмококков к бета-лактамам колебался от 58,6% процентов к пенициллину до 81,1% к цефуроксиму Из фтор-хинолонов наибольшую активность в отношении свежевыделенных штаммов Streptococcus pneumoniae показал левофлоксацин - в среднем 84,2% чувствительных штаммов. Макролидные антибиотики имели процентный показатель активности в отношении пневмококков ниже 50%.

Выводы:

Абсолютную 100% чувствительность культуры Streptococcus pneumoniae имели к ванкомицину.

Левофлоксацин, цефуроксим, цефтриаксон проявляли антибактериальную активность более чем на 80% изученных штаммов Streptococcus pneumoniae.

Ключевые слова: прогрессирующие респираторные заболевания, мокрота, штаммы, пневмококки, антибиотикочувствительность.

ВВЕДЕНИЕ

Проблема прогрессирующих респираторных заболеваний остается актуальной и в настоящее время, несмотря на прогресс современной пульмонологии.

Антибактериальная терапия прогрессирующих респираторных заболеваний предусматривает выбор препаратов, активных в отношении наиболее вероятных возбудителей с учетом региональных и локальных данных по распространенности устойчивости микробов к различным классам антибиотиков [1-3].

В последнее время увеличивается резистентность штаммов пневмококка к пенициллину. Устойчивость возбудителя к р-лактамам связана с модификацией мишени действия антибиотиков. В тоже время, респираторные хинолоны, такие как левофлоксацин и моксифлоксацин, остаются активными против пени-циллин-резистентных пневмококков. Также указанные препараты сохраняют активность и против макролидус-

тойчивых пневмококков [4-7].

Устойчивость ключевых респираторных возбудителей существенно варьирует от страны к стране и отдельных регионах, поэтому при выборе препаратов наиболее целесообразно руководствоваться локальными данными по резистентности микроорганизмов к антимикробным препаратам.

Например, в России среди штаммов пневмококка, включённых в исследование ПеГАС в 2006 - 2009 годах, резистентность к пенициллину составила 9,1%. Все выделенные штаммы Streptococcus pneumoniae были чувствительны к амоксициллину/клавуланату, левоф-локсацину. Частота резистентности к кларитромицину составила 5,7%, азитромицину 6,4%. Наиболее высокий уровень устойчивости был отмечен к тетрациклину (21,5%) и ко -тримоксазолу (16,6%). Данное исследование свидетельствует о сохранении высокой активности

Р-лактамов и макролидов в отношении пневмококков и диктует необходимость ограничения использования у пациентов с респираторными инфекциями в России тетрациклина и ко-тримоксазола [8].

Из-за особенностей фармакокинетических и фар-макодинамических параметров, а также хорошего профиля безопасности большой популярностью в клинической практике пользуются макролиды. Они являются альтернативой бета-лактамам при лечении нетяжелых пневмококковых инфекций и, в частности, у пациентов с аллергией на выше названные препараты. Но расту-

щий объем потребления макролидов вызвал широкое распространение штаммов с высоким уровнем резистентности к макролидам во всем мире [1,2].

Так, по данным исследования РЯОТБКТ и 8АиСБ-4, резистентность пневмококков к эритромицину в США составила 29,3% в Испании - 81,3% и в Японии - 81,9% [4-6].

Таким образом, эмпирическая антибактериальная должна базироваться на данных о факторах развития резистентности к антибиотикам в различных регионах.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Анализ чувствительности к антибиотикам штам- с прогрессирующими респираторными инфекциями. мов Streptococcus pneumoniae, выделенных у пациентов

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В течение с 2009 по 2013 годы проведено проспективное бактериологическое исследование больных с прогрессирующими респираторными заболеваниями, находившихся на стационарном лечении в отделениях терапевтического профиля. Бактериологическому исследованию подвергалась мокрота данных больных. Первичный посев клинического материала проводили количественным методом на питательные среды в соответствии с нормативными документами [9]. Идентифи-цикацию и антибиотикочувствительность выделенных чистых культур микроорганизмов проводили на микробиологических компьютерных анализаторах «Microtax», «MiniAPI» и «Vitek 2 - Compact».

За этиологический фактор принимались только те виды микроорганизмов, которые выделялись из мокроты в количестве 106 КОЕ в 1 мл и выше.

Полученные результаты подвергали статисти-

ческой обработке. Определяли: средние величины, ошибку средней (m), t-критерий Стьюдента, уровень доверительного интервала (р). Результаты считали достоверными, если вероятность нуль-гипотезы не превышала 0,05 (р<0,05).

Результаты. Исследование этиологической структуры мокроты больных с прогрессирующими респираторными заболеваниями в течение пяти лет (2009-2013 годы) показало, что в нашем регионе основным возбудителем респираторных инфекций является Streptococcus pneumoniae - 40,2+1,6% [10,11].

В связи с этим представлялся интересным мониторинг антибиотикограмм основного бактериального возбудителя данной патологии. Динамика антибиоти-кочувствительности штаммов Streptococcus pneumoniae за наблюдаемый промежуток времени представлена в таблице 1.

Таблица 1 - Антибиотикочувствительность штаммов Б1гер1ососси8 рпеитошае, выделенных из мокроты больных с прогрессирующими респираторными заболеваниями за 2009-2013 годы

Годы

2009 2010 2011 2012 2013 Среднее

Вид антибиотика M±m% M±m% M±m% M±m% M±m% M±m%

Бета-лактамы

Ампициллин 80,2±4,5 72,4±8,3 84,6±7,0 64,0±6,7 50±3,3 81,4±2,8

Б ензилпенициллин 61,8±5,5 50±8,8 63,3±8,7 62,1±5,9 46,1±9,7 58,6±3,2

Цефалексин 73,6±5,0 58,6±9,1 63,6±14,5 52,1±7,3 43,4±10,3 61,6±3,5

Цефотаксим 89,4±3,5 62,5±8,5 80±7,3 90,6±3,6 55,5±9,5 80,7±2,6

Цефтриаксон 78,9±4,6 62,5±8,8 86,6±6,2 87,5±4,7 69,5±9,6 79,1±2,8

Цефтазидим 69,6±8,0 58,0±8,8 55,5±9,5 51,5±6,2 44±9,9 55,5±3,7

Цефуроксим 75,7±7,4 83,8±6,6 80±7,3 85,2±4,5 76±8,5 81,1±2,9

Хинолоны

Ципрофлоксацин 63,6±8,3 75±7,6 76,1±9,3 62,0±6,3 41,6±10 63,6±3,7

Офлоксацин 82,8±4,3 85,7±6,6 94,4±5,4 63,6±7,2 56,5±10,3 76,7±3,0

Левофлоксацин 91,7±3,2 86,2±6,4 92,3±7,3 79,1±8,2 64±9,6 84,7±2,8

Макролиды

Кларитром ицин 77,6±4,7 50±9,1 53,8±9,7 43,4±7,3 34,7±9,9 52,7±3,5

Азитромицин 72±5,1 39,2±9,2 51,8±9,6 35,4±6,0 26,9±8,6 49,5±3,3

Эритромицин 66,2±5,4 31,2±8,1 51,7±9,2 36,0±6,0 26,6±8,0 47,1±3,2

JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE OF KAZAKHSTAN 2014 VOLUME 2, NUMBER 32

JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE OF KAZAKHSTAN 2014 VOLUME 2, NUMBER 32

Продолжение таблицы 1

Вид антибиотика 2009 M±m% Годы 2010 2011 2012 M±m% M±m% M±m% 2013 M±m% Среднее M±m%

Р окситромицин 52,0±5,8 51,8±9,6 65,3±9,3 Линкозамиды 41,6±7,1 34,7±9,9 49,2±3,5

Линкомицин 79,1±4,7 72,4±8,3 65,3±9,3 51,7±6,6 56,6±10,3 68,4±3,2

Клиндомицин 80,2±4,5 71,8±7,9 60,8±10,1 Гликопептиды 56,0±6,4 67,8±8,8 68,8±3,1

Ванкомицин 1 100 100 100 Другие препараты | 100 100 | 100

Рифампицин ]j>1,3±3,3 Г 92,8±4,8^ 100 |^97,2±2,7 95,6±4,2 [j>4,5±1,6

Из таблицы 1 видно, что абсолютную 100% чувствительность культуры Streptococcus pneumoniae имели к ванкомицину, что согласуется с данными российских и зарубежных исследователей.

Уровень чувствительности пневмококков к бета-лактамам колебался от 58,6% процентов к пенициллину до 81,1% к цефуроксиму. Высокую активность в отношении пневмококка демонстрировали цефалоспорины III поколения - цефуроксим - 81,1%, а также цефтри-аксон - 79,1%, чувствительность к которым колебалась в наблюдаемые годы соответственно от 75,7% до 85,2% и 62,5% до 87,5%. Наши данные по чувствительности Streptococcus pneumoniae .

К бензилпенициллину и ампициллину было чув-

ствительно соответственно 58,6% и 81,4% выделенных пневмококков.

Из фторхинолонов наибольшую активность в отношении свежевыделенных штаммов Streptococcus pneumoniae показал левофлоксацин - в среднем 84,7% чувствительных штаммов. Офлоксацин по результатам наших наблюдений оказывал антибактериальную активность на 76,7% изолятов пневмококка.

Макролидные антибиотики по нашим наблюдениям имели процентный показатель активности в отношении пневмококков ниже 50%. Наиболее низкий уровень чувствительности изолятов Streptococcus pneumoniae наблюдался к эритромицину - 47,1% и азитромицину -49,5%.

ОБСУЖДЕНИЕ

Полученные нами данные о 100% чувствительности культуры Streptococcus pneumoniae к ванкомицину согласуются с данными российских и зарубежных исследователей [4,7,8].

По данным российского исследования ПеГАС в 2006 - 2009 годы чувствительные к цефтриаксону штаммы пневмококка составили 99% результаты наших исследований показывают 79,1% уровень чувствительности к цефтриаксону [8].

Наши данные по чувствительности Streptococcus pneumoniae к пенициллину (58,6% чувствительных штаммов) согласуются с данными исследования SOAR в странах Африки и Ближнего Востока, где было выявлено 61,5% пенициллинчувствительных штаммов [4-6]. По данным российского исследования ПеГАС в 2006 -2009 гг. чувствительные к пенициллину штаммы составили 88,8% [8]. Результаты надзора за антимикробной резистентностью в Европе в 2012 году показывают что, частота выделения Streptococcus pneumoniae, резистентных к пенициллину, колеблется от менее 1% в Эстонии; 1-5% в Бельгии, Нидерландах, Ирландии, Великобритании, Чехии; 5-10% в Германии, Австрии, Норвегия, Дании ; 10-25% в Франции, Италии, Венгрии до 10-25% в Испании, Румынии, Болгарии [12].

Из фторхинолонов наибольшую активность в отношении свежевыделенных штаммов Streptococcus

pneumoniae показал левофлоксацин - в среднем 84,7% чувствительных штаммов. По данным исследования ПеГАС в 2006 - 2009 гг. чувствительность пневмококков к левофлоксацину на территории России составила 100% [8]. Офлоксацин по результатам наших наблюдений оказывал антибактериальную активность на 76,7% изолятов пневмококка. По данным надзора за антимикробной резистентностью в Европе в 2012 году, частота выделения Streptococcus pneumoniae, резистентных к фторхинолонам составила 5,2% [12].

Наши данные показали низкий уровень чувствительности изолятов Streptococcus pneumoniae к эритромицину - 47,1% и азитромицину - 49,5%. По результатам российского исследования ПеГАС в 2006 - 2009 гг. чувствительные к эритромицину штаммы составили 95,4% , а к азитромицину - 92,7% [8].

Таким образом, наши динамичные наблюдения за антибиотикочувствительностью Streptococcus pneumoniae, выделенных из мокроты больных с прогрессирующими респираторными заболеваниями в течение пяти лет позволяют сделать следующие выводы:

Абсолютную 100% чувствительность культуры Streptococcus pneumoniae имели к ванкомицину.

Левофлоксацин, цефуроксим, цефтриаксон проявляли антибактериальную активность более чем на 80% изученных штаммов Streptococcus pneumoniae.

ЛИТЕРАТУРА

1. Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики хронической обструктивной болезни легких. // Пер. с англ. под ред. Чучалина А.Г. Атмосфера. Москва.2003. - 96с.

2. Авдеев С.Н. Антибактериальная терапия при обострении хронической обструктивной болезни легких // Пульмонология. - 2010. - №2. - С. 95-10.

3. Зубков М.Н. Современные проблемы резистентности пневмотропных патогенов // Пульмонология. - 2007. -№5. - С.5-13.

4. Данные первого Конгресса стран СНГ по рациональной антибиотикотерапии Inspiration // Антибиотикотерапия. - 2011.-№15-16. -С.268-269.

5. Jenkins S., Brown S., Farrell D. et al. Trends in antimicrobial resistance among Streptococcus pneumoniae isolated in the USA: update from PROTEKT US Years 1-4 // Ann Clin Microbiol Antimicob. - 2008. - N.11. -P.7-11.

6. Inoue M., Kaneko K., et.al. Antimicrobial susceptibility of respiratory tract pathogens in Japan during PROTEKT

years (1999-2004) // Microb Drug Resist. - 2008. -N.14. - P. 109-117.

7. Perez Trallero E., Martin Yerrero J., Mazon A., et al. Antimicrobial resistance among respiratory pathogens in Spain:

latest data and changes over 11 years (1996-1997 to 2006-2007) // Antimicrob Agents Chemother. - 2008. - N. 54. -

P.2953-2959.

8. Козлов Р.С. Динамика антибиотикорезистентности Streptococcus pneumoniae в России (по данным многоцентрового проспективного исследования ПЕГАС 2006-2009гг) // Клин микробиол антимикроб химиотер. - 2010. - №4. - С.329-341.

9. Кречикова О.И., Козлов Р.С., Богданович Т.М., Стецюк О.У, Суворов М.М. Выделение, идентификация и определение чувствительности к антибиотикам Streptococcus pneumoniae. Методические рекомендации для микробиологов. М, 2000.

10. Бисенова Н.М., Ергалиева А.С. Этиологическая структура мокроты больных с обострением ХОБЛ // Сборник трудов XXIII Национального конгресса по болезням органов дыхания. Казань. 2013. - С.198-199.

11. Бисенова Н.М., Ергалиева А.С. .Микробный пейзаж мокроты больных с респираторными инфекциями // Сборник трудов научно-практ. конференции «Микробиология: её роль в медицине, науке, медицинском образовании», посвященной 80 - летию проф. А.Л. Котовой. Алматы. 2012. - С.36-39.

12. Antimicrobial resistance surveillance in Europe. Surveillance report // Annual Report of the European Antimicrobial Resistance Surveillance Network. Stockholm. 2012.- Р.51-59.

JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE OF KAZAKHSTAN 2014 VOLUME 2, NUMBER 32