ПРОИЗВОДНЫЕ ЦИКЛИЧЕСКИХ 5-НИТРОПИРИДИН-2-ИЛ-ТИОАЛКЕНИЛ-4-ДИТИОКАРБАМАТОВ, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВОГРИБКОВОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
CYCLIC 5-NITROPYRIDIN-2-YL-THIOALKENYL-4-DITHIOCARBAMATE DERIVATIVES HAVING ANTIFUNGAL ACTIVITY AND USE THEREOF

Изобретение относится к новым производным циклических 5-нитропиридин-2-ил-тиоалкенил-4-дитиокарбаматов общей формулы (I), их фармацевтически приемлемым солям и/или сольватам, проявляющим активность в отношении штаммов дрожжей и патогенных грибов, способу их получения, фармкомпозициям и лекарственным средствам, содержащих эти соединения, и их применению в качестве противогрибковых, в частности антимикотических лекарственных средств.
Проблема поиска новых противогрибковых средств обусловлена значительным распространением грибковых инфекций (микозов) у людей и животных. Это связано с понижением иммунной защиты у человеческой популяции, а также с широким развитием резистентности у возбудителей микозов к имеющимся на рынке лекарственным препаратам. Проблема быстрого развития резистентности обусловлена тем, что многие противогрибковые препараты представляют собой производные одного класса соединений (в первую очередь полиены и азолы), а также их недостаточной эффективностью и токсичностью. Трудность в лечении грибковых инфекций во многом обусловлена тем, что грибы являются эукариотными микроорганизмами. Данное обстоятельство значительно ограничивает потенциальный выбор мишеней, воздействие на которые позволяет эффективно подавлять рост возбудителей микозов без побочных воздействий на организм человека и животных. Большинство имеющихся в распоряжении медицины противогрибковых препаратов - полиены, азолы и аллиламины, влияющие на главный компонент мембраны грибов - эргостерол, не обеспечивают должной избирательности и эффективности действия. Они весьма токсичны, к тому же многие штаммы возбудителей микозов приобрели резистентность к препаратам группы азолов.
Известны различные производные дитиокарбаматов, которые могут быть использованы в основном в сельском хозяйстве в качестве фунгицидов, гербицидов (см. патенты JP 5606580, SU 579844).
Антимикробная активность некоторых дитиокарбаматов также описана в статьях:
- V.Makarov, O.Riabova, A.Yuschenko, N.Urlyapova, A.Daudova, P.F.Zipfel, U.Mollmann, Synthesis and Antileprosy Activity of Some Dialkyldithiocarbamates, J. Antimicrobial Chemother., Apr 2006, 57, 1134-1138;
- Mohamed GG, Ibrahim NA, Attia HA. Synthesis and antifungicidal activity of some transition metal complexes with benzimidazole dithiocarbamate ligand. Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. 2009 Apr; 72(3): 610-5;
- Nogueira LJ, de Resende MA, Oliveira SR, de Araujo MH, Magalhaes TF, de Oliveira MB, Martins CV, Lopes MT, Araujo e Silva AC, Donnici CL. In vitro susceptibility of Aspergillus spp. to dithiocarbamate organoruthenium compounds. Mycoses. 2011 Sep; 54(5): e323-9.
Известны различные фунгицидные смеси, например смеси амидов и производных пиридинов с известными дитиокарбаматами (см. патент US 6407126). Известны также соединения, содержащие производные тиазолина и пиридиновый фрагменты. Так, например, патент ЕР 2107058 А1 описывает соединения, содержащие тиазолиновый и пиридиновый фрагменты в качестве средства для борьбы с вредителями, такими как тля myzus persicae. В патенте US 2009/0270630 описывается получение производного розиглитазона-соединения, содержащего тиазолидиновый и пиридиновый фрагменты, которое используется при лечении гипогликемических заболеваний.
Задача настоящего изобретения состоит в изыскании новых фармакологически активных соединений (производных гетероциклических соединений) в отношении грибковых инфекций (микозов), в том числе к штаммам, резистентным к существующим в настоящее время лекарственным препаратам (N.Berila, J.Subík., Epidemiol Mikrobiol Imunol. 2010, 59(2), 67-79; R. Di Santo, Nat. Prod. Rep., 2010, 27(7), 1084-98; R. Musiol, M.Serda, S.Hensel-Bielowka, J.Polanski. Curr. Med. Chem. 2010, 17(18), 1960-73), имеющих низкую токсичность и не вызывающих побочных эффектов в отношении теплокровных живых организмов.
Данная задача была решена путем синтеза новых производных циклических 5-нитропиридин-2-ил-тиоалкенил-4-дитиокарбаматов, которые имеют в своем составе дитиокарбамоильный фрагмент, где атом азота карбаматной группы является частью гетероциклического кольца. Таким фрагментом в соединениях настоящего изобретения является -1,3-тиазолидинилкарбодитиоат, -1,4-тиоморфолинкарбодитиоат или -пергидро-1,5-тиазепинкарбодитиоат.
Производные циклических 5-нитропиридин-2-ил тиоалкенил-4-дитиокарбаматов настоящего изобретения соответствуют общей формуле (I)
1
6
где R означает нитро, циано, галоидзамещенную С-Салкильную группу, предпочтительно трифторметильную группу, n=1, 2 или 3.
Изобретение также относится к фармацевтически приемлемым кислотно- или основно-аддитивным солям указанных соединений. Соединения могут быть получены и использованы в кристаллическом виде.
Синтезированные соединения общей формулы (I) и их фармацевтически приемлемые кислотно- или основно-аддитивные соли исследованы в отношении штаммов, вызывающих различные грибковые инфекции (микозы), и могут быть использованы для получения лекарственных средств на их основе.
Термин «фармацевтически приемлемые соли соединения формулы (I)» означает любые соли неорганической или органической кислоты или основания, которые обладают необходимой фармакологической активностью исходного соединения. Эти соли могут быть получены in situ в процессе синтеза, выделения или очистки соединения формулы (I) или приготовлены специально.
Предлагаемые соединения могут быть также в виде стереохимических изомерных форм, таутомеров или кристаллических модификаций.
Фармацевтически аддитивные соли с кислотами характеризуются тем, что содержат терапевтически активные нетоксичные аддитивные солевые формы с кислотами, которые способны образовывать соединения формулы (I). Указанные аддитивные соли с кислотами могут быть получены обработкой соединения в виде оснований, представленных общей формулой (I), подходящими кислотами, в том числе неорганическими кислотами, например: галогенводородной кислотой, хлористоводородной кислотой, бромистоводородной кислотой, серной кислотой, азотной или фосфорной кислотой; органическими кислотами, например: уксусной кислотой, гидроксиуксусной кислотой, пропионовой кислотой, молочной кислотой, пировиноградной кислотой, щавелевой кислотой, малоновой кислотой, малеиновой или фумаровой кислотой, яблочной, винной, лимонной кислотой или другими кислотами.
Используемый в рамках данного изобретения термин «аддитивная соль» включает также различные сольваты, которые способны образовывать соединения общей формулы (I), а также физиологически приемлемые соли и сольваты или смеси этих соединений.
Изобретение также относится к способу получения соединений общей формулы (I). Способ заключается во взаимодействии соответствующего 5-нитро-2-галогенпиридина формулы II, где Hal означает фтор, хлор, бром или йод с солью соответствующего дитиокарбамата общей формулы III в подходящем растворителе согласно следующей схеме (1):
где R и n имеют указанные в формуле (I) значения, с выделением получаемого продукта в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой кислотно- или основно-аддитивной соли.
Способ осуществляют следующим образом.
Промежуточное соединение формулы II (где Hal - это фтор, хлор, бром или йод) по реакции нуклеофильного замещения, где в качестве нуклеофила выступает ион дитиокарбаминовой кислоты, который может быть введен в реакцию в виде его натриевой или калиевой соли (схема (1)). Реакция проходит в подходящем растворителе, например в низших спиртах, ацетоне, этилметилкетоне, диметилформамиде. Все радикалы имеют значения, указанные выше. Реакция может быть проведена при температуре в интервале от +10 до +100°С. Перемешивание может увеличить скорость реакции.
Исходные и промежуточные соединения формулы II и III являются известными соединениями и могут быть получены широко известными методами.
Результаты синтеза, тестирования фармакологической активности соединений формулы (I), приведенные ниже в примерах, иллюстрируют, но не ограничивают рамки настоящего изобретения.
Пример 1.
3,5-динитропиридин-2-ил тиоморфолино-4-карбодитиоат (соединение №1).
Синтез натриевой соли тиоморфолинодитиокарбаминовой кислоты.
К раствору 5,04 г тиоморфолина в 50 мл этилового спирта прибавляют при интенсивном перемешивании раствор 1,95 г гидроксида натрия в 15 мл воды. Реакционную массу охлаждают до 10°С и к ней медленно прикапывают 2,95 мл сероуглерода. Полученный раствор выдерживают при комнатной температуре в течение 2 часов и упаривают под вакуумом. Полученный белый твердый кристаллический осадок перекристаллизовывают из этилового спирта и получают 8,9 г натриевой соли тиоморфолинодитиокарбаминовой кислоты дигидрата.
К суспензии 0,2 г 3,5-динитро-2-хлорпиридина в 10 мл этанола при интенсивном перемешивании присыпают 0,28 г натриевой соли тиоморфолинодитиокарбаминовой кислоты дигидрата. Реакционная масса приобретает оранжевый оттенок и через 20 минут ее разбавляют 70 мл холодной воды. Сформировавшийся желтый осадок отфильтровывают, сушат на воздухе в течении суток и перекристаллизовывают из этилацетата. Получают 0,17 г 3,5-динитропиридин-2-ил тиоморфолино-4-карбодитиоата.
Выход: 50%.
Т пл.: 132-135°C (этилацетат)
+
MS (m/z): 346 (M)
1
6
2
2
2
2
H NMR (DMSO-d): 9.56 (1Н, s, Н), 9.28 (1H, s, H), 3.46(4H, m, N(СН)), 2.65 (4H, m, S(CH)) ppm
10
10
4
4
3
Элементный анализ CHNOS:
Calc.: C, 34.67; H, 2.91; N, 16.17
Found: C, 34.63; H, 2.90; N, 16.22
Пример 2.
3,5-динитропиридин-2-ил 1,3-тиазолидин-3-карбодитиоат (соединение №2)
Соединение №2 было синтезировано аналогично соединению №1, но с использованием в качестве нуклеофильного агента натриевой соли 1,3-тиазолидиндитиокарбаминовой кислоты, полученной по методу, описанному в примере 1.
Выход: 58%.
Т пл.: 126-129°C (EtOH)
+
MS (m/z): 332 (M)
1
6
2
2
2
H NMR (DMSO-d): 9.51 (1Н, s, Н), 9.29 (1H, s, H), 4.66(4H, m, N(СН)), 2.28 (2H, m, SCH) ppm
9
8
4
4
3
Элементный анализ CHNOS:
Calc.: C, 32.52; H, 2.43; N, 16.86
Found: C, 32.43; H, 2.47; N, 16.92
Пример 3.
5-нитро-3-цианопиридин-2-ил тиоморфолино-4-карбодитиоат (соединение №3)
Соединение №3 было синтезировано по методу, описанному для соединения №1, но с использованием в качестве исходного 5-нитро-3-циано-2-хлорпиридина, синтезированного по методике Winn M., Zydowsky T.M., Altenbach R.J. 2-(Alkylamino)nicotinic acid and analogs. Potent angiotensin II antagonists // J. Med. Chem. - 1993. - Vol.36. - P.2676-2688.
Выход: 81%.
Т пл.: 136-137°C (этилацетат)
+
MS (m/z): 326 (M)
1
6
2
2
2
2
H NMR (DMSO-d): 9.69 (1Н, s, Н), 8.61 (1H, s, H), 3.42(4H, b m, N(СН)), 2.54 (4H, m, S(CH)) ppm
11
10
4
2
3
Элементный анализ CHNOS:
Calc.: C, 40.47; H, 3.09; N, 17.16
Found: C, 40.43; H, 3.18; N, 17.11
Пример 4.
5-нитро-3-цианопиридин-2-ил 1,3-тиазолидин-4-карбодитиоат (соединение №4)
Соединение №4 было синтезировано по методу, описанному для соединения №2, но с использованием в качестве исходного 5-нитро-3-циано-2-хлорпиридина, синтезированного по методике Winn M., Zydowsky T.M., Altenbach R.J. 2-(Alkylamino)nicotinic acid and analogs. Potent angiotensin II antagonists // J. Med. Chem. - 1993. - Vol.36. - P.2676-2688.
Выход: 52%.
o
Т пл.: 107-109C (Этилацетат)
+
MS (m/z): 312 (M)
1
6
2
2
2
H NMR (DMSO-d): 9.77 (1Н, s, Н), 8.74 (1H, s, H), 4.60 (4H, m, N(СН)), 2.23 (2H, m, SCH) ppm
10
8
4
2
3
Элементный анализ CHNOS:
Calc.: C, 38.45; H, 2.58; N, 17.93
Found: C, 38.38; H, 2.64; N, 17.91
Пример 5.
5-нитро-3-трифторметилпиридин-2-ил-тиоморфолино-4-карбодитиоат (соединение №5)
Соединение №5 было синтезировано по методу, описанному для соединения №1, но с использованием в качестве исходного 5-нитро-3-трифторметил-2-хлорпиридина, синтезированного по методике, описанной в патентах US 20100298321 и ЕР 1632477.
Выход: 36%.
Т пл.: 150-151°C (этанол)
+
MS (m/z): 293 (M)
1
6
2
2
2
2
H NMR (DMSO-d): 9.50 (1Н, s, Н), 8.83 (1H, s, H), 3.41(4H, m, N(СН)), 2.72 (4H, m, S(CH)) ppm
11
10
3
3
2
3
Элементный анализ CHFNOS:
Calc.: C, 35.76; H, 2.73; N, 11.37
Found: C, 35.71; H, 2.66; N, 11.49
Пример 6.
5-нитро-3-трифторметилпиридин-2-ил 1,3-тиазолидин-4-карбодитиоат (соединение №6)
Соединение №6 было синтезировано по методу, описанному для соединения №2, но с использованием в качестве исходного 5-нитро-3-трифторметил-2-хлорпиридина, синтезированного по методике, описанной в патентах US 20100298321 и ЕР 1632477.
Выход: 18%.
Т пл.: 123-125°C (метанол)
+
MS (m/z): 355 (M)
1
6
2
2
2
H NMR (DMSO-d): 9.51 (1Н, s, Н), 8.79 (1H, s, H), 4.57 (4H, m, N(СН)), 2.32 (2H, m, SCH) ppm
10
8
3
3
2
3
Элементный анализ CHFNOS:
Calc.: C, 33.80; H, 2.27; N, 11.82
Found: C, 33.84; H, 2.22; N, 11.93
Объектом изобретения также является фармацевтическая композиция, обладающая противогрибковыми свойствами, включающая соединение, или его фармацевтически приемлемые кислотно- или основно-аддитивные соли, или их смеси в фармакологически эффективном количестве, а также фармацевтически приемлемый носитель и вспомогательные добавки. Предпочтительно, чтобы активный ингредиент входил в состав фармацевтической композиции настоящего изобретения в виде единичных доз.
Термин "в виде единичных доз" означает любое эффективное количество активного ингредиента, которое в сочетании с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами содержится в лекарственной форме фармацевтической композиции, используемой для разового применения пациентом.
Термин «эффективное количество» означает количество активного ингредиента, которое при введении пациентам обеспечивает предупреждение, ослабление или устранение симптомов заболеваний, подлежащих профилактике или лечению.
Фармацевтической композиция согласно настоящему изобретению в виде таблеток, капсул, инъекций, мазей, свечей и других готовых форм (см. ниже), как и сами соединения или их фармацевтически приемлемые соли, могут быть использованы для лечения и предупреждения заболеваний или расстройств у людей и животных, вызванных штаммами возбудителей грибковых инфекций (микозов), в том числе резистентных к существующим в настоящее время лекарственным препаратам.
Соединения формулы (I), фармацевтически приемлемые соли, сольваты, фармацевтическая композиция или лекарственное средство на их основе могут применяться для лечения людей или животных обычными методами, в том числе:
- энтеральной формой введения, например, в форме таблеток, гранул, драже, шариков, порошков, капсул, суспензий, сиропов, эмульсий, ректальных свечей, включая трансбукальные и сублингвальные формы введения и др.;
- парентеральной формой введения, в виде инъекционной формы введения, например, в форме растворов, эмульсий, суспензий, порошков и таблеток для получения растворов и имплантаций, лиофилизированных препаратов, вводимых в организм парентерально (подкожно, внутримышечно, внутривенно, внутриартериально, в различные полости) и др.; в виде неинъекционных форм введения, например в форме суппозиториев для вагинального введения, аэрозоля, спрея, кремов, мазей, гелей, суспензий, эмульсий, линиментов, растворов, капель, пластырей, присыпок, порошков, пудр, примочек и др.
Изобретение также относится к применению соединений общей формулы (I) и их фармацевтически приемлемых кислотно- или основно-аддитивных солей возможно в кристаллическом виде или фармацевтической композиции на их основе для приготовления лекарственных средств для лечения и предупреждения грибковых инфекций у людей и животных. При этом предлагаемые соединения проявляют противогрибковую активность в случае глубоких, подкожных или поверхностных микозов у людей и животных, вызванных штаммами (в том числе устойчивыми к имеющимся препаратам) возбудителей микозов.
В качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ в составе фармацевтической композиции согласно изобретению могут быть использованы любые фармацевтически приемлемые компоненты, которые совместимы с активным ингредиентом и не наносят вреда пациентам, традиционно используемые для приготовления лекарственных форм, например наполнители, связующие агенты, гранулирующие агенты, солюбилизирующие агенты, средства для скольжения, стабилизаторы, разбавители, адъюванты, консерванты, компоненты буферных систем, растворители, диспергирующие агенты, консерванты, смазывающие агенты, вкусовые добавки, загустители, пищевые красители, эмульгаторы, регуляторы пролонгированной доставки и др.
Фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами являются, например, лактоза, инозит, глюкоза, маннит, декстран, циклодекстрин, сорбит, крахмал и его модификации, сахароза, алюмосиликат магния, синтетический алюмосиликат, кристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия, гидроксипропилированный крахмал, карбоксиметилцеллюлоза кальция, ионообменные смолы, метилцеллюлоза, желатин, гуммиарабик, гидроксипропилцеллюлоза,гидроксипропилметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, альгиновая кислота, альгинат натрия, безводная кремниевая кислота, стеарат магния, тальк, карбоксивиниловый полимер, оксид титана, эфир жирной кислоты и сорбита, натрия лаурилсульфат, глицерин, глицериновый эфир жирной кислоты, ланолин, глицерожелатин, полисорбат, макроголь, растительное масло, воск, парафины, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, вода, этанол, полиспирты, полиоксиэтиленгидрированное касторовое масло, хлорид натрия, гидроксид натрия, соляная кислота, двухосновный фосфат натрия, моноосновный фосфат натрия, лимонная кислота, глутаминовая кислота, бензиловый спирт, метил п-оксибензоат, этил п-оксибензоат и др.
Фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами при получении фармацевтической композиции в форме мазей, кремов и суппозиториев являются, например, природные или отвержденные масла, например масло какао, воска, жиры, эфир глицерина и насыщенной жирной кислоты, глицерожелатин, макрогол, полужидкие или жидкие полиолы, триглицериды и др. Основа мазей, кремов, суппозиториев может включать также поверхностно-активное вещество или стабилизатор.
Композиция по изобретению может содержать также такие компоненты, которые обеспечат быстрое продолжительное или замедленное высвобождение активного ингредиента после применения пациентами. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного начала, например моностеарат алюминия и желатин.
Как указано выше, предпочтительно, чтобы активный ингредиент входил в состав фармацевтической композиции настоящего изобретения в виде единичных доз.
Фармацевтическая композиция настоящего изобретения в одной единичной дозе может содержать активный ингредиент в количестве в диапазоне от 2 до 0,5 г в 100 г композиции, в суточной терапевтической дозе от 1,8 до 7,2 мг активного ингредиента на 1 кг веса. Эффективное количество активного ингредиента в некоторых композициях может выходить за вышеуказанные границы.
Фармацевтические композиции могут быть приготовлены любым известным способом в данной области, например смешением компонентов с использованием одного или нескольких фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.
Объектом изобретения является также способ лечения или предупреждения заболеваний у людей или животных, вызванных штаммами возбудителей грибковых инфекций, в том числе резистентных к существующим в настоящее время препаратам, с использованием соединений общей формулы (I), а также их фармацевтически приемлемых кислотно- или основно-аддитивных солей, или их смесей, или фармацевтических композиций на их основе в эффективном количестве.
Описание противогрибковой активности соединений по изобретению.
Фармакологическая активность соединений настоящего изобретения была изучена в соответствии с методическими указаниями по изучению фармакологических веществ (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под редакцией проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд.. перераб. и доп., М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005).
1. Активность соединений общей формулы I в отношении лабораторных и клинических штаммов грибов.
Полученные соединения общей формулы I показали высокую активность в отношении лабораторных и клинических штаммов грибов, в том числе резистентных к противогрибковым препаратам.
Определение противогрибковой активности в отношении эталонных штаммов: Candida albicans ATCC 14053, Candida albicans ATCC 24433, Candida parapsilosis ATCC 22019, Cryptococcus humiculus ATCC 9949 и Aspergilla niger ATCC 16404, а также клинических штаммов грибов проводили методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде RPMI 1640 микрометодом.
Для приготовления инокулята использовали суспензию клеток дрожжей и суспензию спор грибов в стерильном физиологическом растворе (0,85% NaCl). Плотность суспензий контролировали спектрофотометрически.
3
4
Для получения инокулята исходные суспензии дрожжей и спор грибов разводили стандартной средой (RPMI 1640). Конечная концентрация клеток в опыте составляла 1-5×10 клеток/мл для дрожжей и 0,4-5×10 клеток/мл для грибов.
Количество клеток в инокуляте проверяли путем высева на агар Сабуро и подсчета выросших колоний. Все растворы тестируемых соединений готовили непосредственно перед использованием.
Навески тестируемого соединения в количестве 4,8 мг растворяли в 3 мл ДМСО, получая исходную концентрацию 1,6 мг/мл (1600 мкг/мл). Далее, в том же растворителе готовили серии двукратных разведений от 1600 до 3,13 мкг/мл. Для постановки эксперимента полученные растворы разводили в 50 раз в стандартной используемой для опыта среде RPMI 1640.
Эксперименты проводили в стерильных 96-луночных плоскодонных планшетах в среде RPMI 1640, в лунках, содержащих 200 мкл питательной среды. Конечная концентрация соединений в опыте после внесения инокулятов составляла от 16 до 0,03 мкг/мл при концентрации растворителя (ДМСО) 1%.
Каждый препарат в эксперименте присутствовал не менее чем в трех повторах. В панель эксперимента в качестве контроля были включены лунки, не содержащие тестируемых препаратов.
Планшеты инкубировали при температуре 35°С без встряхивания. Минимальную подавляющую концентрацию (МПК) тестируемых соединений считывали при 24 часах культивирования для Candida albicans и при 48 часах культивирования - для Aspergillus niger. МПК определяли как минимальную концентрацию соединения, полностью предотвращающую видимый рост тест-организма.
Результаты определения противогрибковой активности представлены в таблице 1.
Таблица 1
Противогрибковая активность указанных в примерах соединений по изобретению общей формулы (I) в отношении лабораторных штаммов грибов. Минимальная подавляющая концентрация в мкг/мл.
Номер примера (Номер соединения)
Candida albicans ATCC 14053
Aspergilus niger ATCC 16404
1
8
2
2
4
1
3
0,5
0,5
4
1
1
5
32
2
6
32
1
Соединение №3 выбрано для дальнейшего исследования как наиболее активное по результатам проведенных опытов.
Изучена активность in vitro соединения №3 в отношении лабораторных и клинических штаммов грибов, указанных в таблице 2
Таблица 2
Спектр противогрибковой активности соединения №3 in vitro
Микроорганизмы
Активность мкг/мл
Candida albicans ATCC 14053
0,5
Candida albicans ATCC 24433
0,5
Candida albicans 608M
0,5
Candida albicans 2-04
1,0
Candida glabrata 75-05
1,0
Candida glabrata 3-05
1,0
Candida tropicalis 100M
4,0
Candida tropicalis 56-05
2,0
Candida tropicalis 42-05
2,0
Candida parapsilosis ATCC 22019
1,0
Candida parapsilosis 7-04
4,0
Candida parapsilosis 37-05
0,5
Candida kruzei 432M
1,0
Candida kruzei 80-05
1,0
Cryptococcus humiculus ATCC 9949
0,5
Aspergillus niger ATCC 16404
0,5
Fusarium oxysporum VKM F-140
1,0
Candida kruzei 432M
1,0
Candida kruzei 80-05
1,0
Microsporum canis клин.
4,0
Trychophyton rubrum клин.
2,0
Trychophyton mentagrophytes клин.
2,0
50
Проведено определение острой токсичности при однократном внутрижелудочном введении соединения №3 мышам линии BALB. Показатель LD составил более 5000 мг/кг, что соответствует 4 группе умеренно токсичных соединений по классификации Hodge и Sterner.
Ниже приводятся примеры получения фармацевтических композиций в виде различных форм, пригодных для использования в качестве лекарственного средства.
Пример А. Приготовление таблеток, содержащих 50-500 мг активного ингредиента. Активный ингредиент смешивают с 1600 мг крахмала, 1600 мг измельченной лактозы, 400 мг талька и спрессовывают в брусок. Полученный брусок измельчают в гранулы и просеивают через сита, собирая гранулы размером 14-16 меш. Полученные гранулы таблетируют в подходящую форму таблетки весом 560 мг каждая.
Пример Б. Капсулы, содержащие 50-500 мг активного ингридиента, согласно изобретению получают тщательным смешиванием активного соединения с порошком лактозы в соотношении 2:1. Полученную порошкоообразную смесь упаковывают по 300 мг в желатиновые капсулы подходящего размера.
Пример С. Инъекционные композиции для внутримышечных, внутрибрюшинных или подкожных инъекций могут быть приготовлены смешиванием 50-500 мг активного соединения с 300 мг хлорбутанола, 2 мл пропиленгликоля и 100 мл инъекционной воды. Полученный раствор фильтруют и помещают по 1 мл в ампулы, которые запаивают и стерилизуют в автоклаве.
Пример D. Мазь, крем или свечи могут быть изготовлены следующим образом: активное вещество расплавляют в небольшом количестве мазевой, кремовой или свечной основы. Получившийся расплав тщательно перемешивают с необходимым количеством основы, разогретой до (35-80)°C. Полученную смесь гомогенизируют. Готовую смесь в растопленном состоянии разливают в тубы или используют для изготовления свечей.