ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ СЛИТЫЕ БЕЛКИ НАПРАВЛЕННОГО ДЕЙСТВИЯ НА ОСНОВЕ ЛИЗОСОМНЫХ ФЕРМЕНТОВ, СООТВЕТСТВУЮЩИЕ СОСТАВЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Состав, содержащий
(a) слитый белок, включающий лизосомный фермент или его функциональный фрагмент, пептидную метку, обладающую по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 2, и спейсерный пептид, расположенный между лизосомным ферментом или его функциональным фрагментом и пептидной меткой, где спейсерный пептид обладает по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 4; и
(b) один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из буферного вещества, изотонического вещества, электролитного вещества и антиадсорбирующего вещества.
2. Состав по п.1, который является водным.
3. Состав по п.1, где лизосомный фермент или его функциональный фрагмент включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1.
4. Состав по п.1, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.
5. Состав по п.1, где слитый белок состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5.
6. Состав по п.1, включающий буферное вещество, изотоническое вещество и электролитное вещество, и где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.
7. Состав по п.6, включающий двухосновного натрия фосфата гептагидрат, одноосновного натрия фосфата моногидрат, натрия хлорид и трегалозу, и где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.
8. Состав по п.7, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 в концентрации от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 35 мг/мл, двухосновного натрия фосфата гептагидрат присутствует в концентрации от приблизительно 0,15 мг/мл до приблизительно 0,25 мг/мл, одноосновного натрия фосфата моногидрат присутствует в концентрации от приблизительно 0,03 мг/мл до приблизительно 0,05 мг/мл, натрия хлорид присутствует в концентрации от приблизительно 0,8 мг/мл до приблизительно 1,0 мг/мл, и трегалоза присутствует в концентрации от приблизительно 7% (в/об) до приблизительно 9% (в/об), где состав имеет pH в пределах от приблизительно 6,5 до приблизительно 7,5.
9. Состав по п.7, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 в концентрации приблизительно 30 мг/мл, двухосновного натрия фосфата гептагидрат присутствует в концентрации приблизительно 0,19 мг/мл, одноосновного натрия фосфата моногидрат присутствует в концентрации приблизительно 0,04 мг/мл, натрия хлорид присутствует в концентрации приблизительно 0,88 мг/мл, и трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 8% (в/об), где состав имеет pH приблизительно 7,0.
10. Состав по п.6, дополнительно включающий антиадсорбирующее вещество.
11. Состав по п.10, включающий двухосновного натрия фосфата гептагидрат, одноосновного натрия фосфата моногидрат, натрия хлорид, трегалозу и полисорбат 20, и где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.
12. Состав по п.11, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 в концентрации от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 35 мг/мл, двухосновного натрия фосфата гептагидрат присутствует в концентрации от приблизительно 0,15 мг/мл до приблизительно 0,25 мг/мл, одноосновного натрия фосфата моногидрат присутствует в концентрации от приблизительно 0,03 мг/мл до приблизительно 0,05 мг/мл, натрия хлорид присутствует в концентрации от приблизительно 4,5 мг/мл до приблизительно 5,5 мг/мл, трегалоза присутствует в концентрации от приблизительно 3% (в/об) до приблизительно 5% (в/об), и полисорбат 20 присутствует в концентрации от 0,0025% (в/об) до приблизительно 0,0075% (в/об), где состав имеет pH в пределах от приблизительно 6,5 до приблизительно 7,5.
13. Состав по п.11, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 в концентрации приблизительно 30 мг/мл, двухосновного натрия фосфата гептагидрат присутствует в концентрации приблизительно 0,19 мг/мл, одноосновного натрия фосфата моногидрат присутствует в концентрации приблизительно 0,04 мг/мл, натрия хлорид присутствует в концентрации приблизительно 5 мг/мл, трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 4% (в/об), и полисорбат 20 присутствует в концентрации приблизительно 0,005% (в/об), где состав имеет pH приблизительно 7,0.
14. Состав по п.6, включающий двухосновного натрия фосфата гептагидрат, одноосновного натрия фосфата моногидрат, натрия хлорид, калия хлорид, магния хлорида гексагидрат и кальция хлорида дегидрат, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.
15. Состав по п.14, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 в концентрации от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 35 мг/мл, двухосновного натрия фосфата гептагидрат присутствует в концентрации от приблизительно 0,15 мг/мл до приблизительно 0,25 мг/мл, одноосновного натрия фосфата моногидрат присутствует в концентрации от приблизительно 0,03 мг/мл до приблизительно 0,05 мг/мл, натрия хлорид присутствует в концентрации от приблизительно 8 мг/мл до приблизительно 9 мг/мл, калия хлорид присутствует в концентрации от приблизительно 0,15 мг/мл до приблизительно 0,3 мг/мл, магния хлорида гексагидрат присутствует в концентрации от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 0,2 мг/мл, и кальция хлорида дигидрат присутствует в концентрации от приблизительно 0,15 мг/мл до приблизительно 0,3 мг/мл, где состав имеет pH в пределах от приблизительно 6,5 до приблизительно 7,5.
16. Состав по п.14, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 в концентрации приблизительно 30 мг/мл, двухосновного натрия фосфата гептагидрат присутствует в концентрации приблизительно 0,19 мг/мл, одноосновного натрия фосфата моногидрат присутствует в концентрации приблизительно 0,04 мг/мл, натрия хлорид присутствует в концентрации приблизительно 8,66 мг/мл, калия хлорид присутствует в концентрации приблизительно 0,22 мг/мл, магния хлорида гексагидрат присутствует в концентрации приблизительно 0,16 мг/мл, и кальция хлорида дигидрат присутствует в концентрации приблизительно 0,21 мг/мл, где состав имеет pH приблизительно 7,0.
17. Состав по п.1, который является лиофилизированным сухим порошком.
18. Состав по п.1, который подходит для интратекального введения человеку.
19. Контейнер, включающий состав по п.1.
20. Контейнер по п.19, который является стеклянным флаконом.
21. Способ лечения заболевания МПС IIIB у субъекта, страдающего таким заболеванием, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества состава по любому из пп.1-18.
22. Способ по п.21, включающий введение субъекту состава по п.9.
23. Способ по п.21, включающий введение субъекту состава по п.13.
24. Способ по п.21, включающий введение субъекту состава по п.16.
25. Способ любого из заявлений 21-24, где состав вводят интратекально.
26. Способ по любому из пп.21-24, где состав вводят интрацеребровентрикулярно.
27. Способ по п.26, где интрацеребровентрикулярное введение является изоволюметрическим.
28. Способ по п.26, где интрацеребровентрикулярное введение производят в течение периода времени продолжительностью от приблизительно 5 минут до приблизительно 240 минут.
29. Способ по п.26, где интрацеребровентрикулярное введение производят в течение периода времени продолжительностью от приблизительно 5 минут до приблизительно 10 минут.
30. Способ по любому из пп.21-29, где состав вводят еженедельно.
31. Способ по п.30, где состав вводят еженедельно в течение по меньшей мере 24 недель.
32. Способ по п.30, где состав вводят еженедельно в течение по меньшей мере 48 недель.
33. Способ по любому из пп.21-32, включающий введение по меньшей мере приблизительно 30 мг/мл слитого белка, включающего лизосомный фермент или его функциональный фрагмент.
34. Способ по п.33, где слитый белок включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.
35. Способ замедления уровня ухудшения по меньшей мере одного симптома заболевания МПС IIIB у субъекта, страдающего таким заболеванием, включающий введение субъекту состава по любому из пп.1-18.
36. Способ по п.35, включающий введение субъекту состава по п.9.
37. Способ по п.35, включающий введение субъекту состава по п.13.
38. Способ по п.35, включающий введение субъекту состава по п.16.
39. Способ по любому из пп.35-38, где состав вводят интрацеребровентрикулярно.
40. Способ по п.39, где интрацеребровентрикулярное введение является изоволюметрическим.
41. Способ по п.39, где интрацеребровентрикулярное введение производят в течение периода времени продолжительностью от приблизительно 5 минут до приблизительно 240 минут.
42. Способ по п.39, где интрацеребровентрикулярное введение производят в течение периода времени продолжительностью от приблизительно 5 минут до приблизительно 10 минут.
43. Способ по любому из пп.35-42, где состав вводят еженедельно.
44. Способ по п.43, где состав вводят еженедельно в течение по меньшей мере 24 недель.
45. Способ по п.43, где состав вводят еженедельно в течение по меньшей мере 48 недель.
46. Способ по любому из пп.35-45, который приводит к улучшению по меньшей мере одного симптома заболевания МПС IIIB у субъекта.
47. Способ по любому из пп.35-46, где по меньшей мере один симптом выбран из группы, состоящей из ухудшения когнитивной функции, ухудшения языковой функции, ухудшения двигательной функции, ухудшения социально-эмоциональной функции, ухудшения адаптивной функции, ухудшения концептуального мышления, ухудшения распознавания лиц, ухудшения способности к завершению рассказа, ухудшения функции/ловкости рук, потери слуха, гиперактивности, агрессивности и нарушений сна.
48. Способ по любому из пп.35-47, где уменьшение уровня ухудшения по меньшей мере одного симптома определяют путем:
(a) определения уровня ухудшения симптома до введения, и
(b) определения уровня ухудшения симптома после введения;
где более низкий уровень снижения симптома после введения по сравнению с уровнем до введения указывает на уменьшение уровня ухудшения.
49. Способ по любому из пп.35-48, дополнительно включающий определение индекса развития (DQ) у субъекта до введения и определение DQ у субъекта после введения, где более высокий DQ у субъекта после введения по сравнению с DQ до введения указывает на уменьшение уровня ухудшения.
50. Способ по п.49, где индексы развития определяют при использовании шкалы развития младенцев Бейли, 3-й редакции (BSID-III), или батареи тестов Кауфманов для детей, 2-й редакции (KABC-II).
51. Способ уменьшения уровня ухудшения когнитивной функции у субъекта, страдающего заболеванием МПС IIIB, включающий введение субъекту сстава по любому из пп.1-18.
52. Способ по п.51, включающий введение субъекту состава по п.9.
53. Способ по п.51, включающий введение субъекту состава по п.13.
54. Способ по п.51, включающий введение субъекту состава по п.16.
55. Способ по любому из пп.51-54, где состав вводят интрацеребровентрикулярно.
56. Способ по п.55, где интрацеребровентрикулярное введение изоволюметрическое.
57. Способ по п.55, где интрацеребровентрикулярное введение производят в течение периода времени продолжительностью от приблизительно 5 минут до приблизительно 240 минут.
58. Способ по п.55, где интрацеребровентрикулярное введение производят в течение периода времени продолжительностью от приблизительно 5 минут до приблизительно 10 минут.
59. Способ по любому из пп.51-57, где состав вводят еженедельно.
60. Способ по п.59, где состав вводят еженедельно в течение по меньшей мере 24 недель.
61. Способ по п.59, где состав вводят еженедельно в течение по меньшей мере 48 недель.
62. Способ по любому из пп.51-61, который приводит к улучшению когнитивной функции у субъекта.
63. Способ по любому из пп.51-61, где уменьшение уровня ухудшения когнитивной функции у субъекта определяют путем:
(a) определения уровня ухудшения когнитивной функции до введения и
(b) определения уровня ухудшения когнитивной функции после введения;
где более низкий уровень ухудшения когнитивной функции после введения по сравнению с уровнем до введения указывает на уменьшение уровня ухудшения.
64. Способ по любому из пп.51-63, дополнительно включающий определение индекса развития (DQ) у субъекта до введения и определение DQ у субъекта после введения, где более высокий DQ у субъекта после введения по сравнению с DQ до введения указывает на уменьшение уровня ухудшения.
65. Способ уменьшения или предотвращения накопления гликозаминогликана (ГАГ) в одной или более тканях ЦНС субъекта, страдающего лизосомным нарушением накопления, включающий введение терапевтически эффективного количества состава по любому из пп.1-18.
66. Способ по п.65, где ГАГ является гепарансульфатом, и лизосомным нарушением накопления является МПС IIIB.
67. Способ по п.66, включающий введение субъекту состава по п.9.
68. Способ по п.66, включающий введение субъекту состава по п.13.
69. Способ по п.66, включающий введение субъекту состава по п.16.
70. Способ по любому из пп.65-69, где состав вводят интрацеребровентрикулярно.
71. Способ по п.70, где интрацеребровентрикулярное введение является изоволюметрическим.
72. Способ по п.70, где интрацеребровентрикулярное введение производят в течение периода времени продолжительностью от приблизительно 5 минут до приблизительно 240 минут.
73. Способ по п.70, где интрацеребровентрикулярное введение производят в течение периода времени продолжительностью от приблизительно 5 минут до приблизительно 10 минут.
74. Способ по любому из пп.65-73, где состав вводят еженедельно.
75. Способ по п.74, где состав вводят еженедельно в течение по меньшей мере 24 недель.
76. Способ по п.74, где состав вводят еженедельно в течение по меньшей мере 48 недель.
77. Способ по любому из пп.65-76, который приводит к улучшению по меньшей мере одного симптома заболевания МПС IIIB у субъекта.
78. Способ по любому из пп.65-77, где накопление GAG уменьшается в лизосомах клеток одной или более тканей ЦНС, выбранных из группы, состоящей из серого вещества, белого вещества, перивентрикулярной области, оболочек мозга, паутинной оболочки и мягкой оболочки, глубоких тканей в коре головного мозга, новой коры, мозжечка, области хвостатого ядра/скорлупы полосатого тела, молекулярного слоя, глубоких областей моста или продолговатого мозга, среднего мозга и нейронов спинного мозга.
79. Применение состава по любому из пп.1-18 в производстве лекарственного средства, применяемого для лечения МПС IIIB у страдающего им субъекта.
80. Применение состава по любому из пп.1-18 в производстве лекарственного средства, применяемого для уменьшения уровня ухудшения по меньшей мере одного симптома заболевания МПС IIIB у страдающего им субъекта.
81. Применение состава по любому из пп.1-18 в производстве лекарственного средства, применяемого для уменьшения уровня ухудшения когнитивной функции у субъекта, страдающего заболеванием МПС IIIB.
82. Применение состава по любому из пп.1-18 в производстве лекарственного средства, применяемого для уменьшения или предотвращения накопления ГАГ в одной или более тканях ЦНС субъекта, страдающего лизосомным нарушением накопления.