АНАЛИЗЫ Т-КЛЕТОК

1. Способ измерения ответа хелперных Т-клеток на тестируемое вещество, включающий следующие стадии:
(а) выделение антиген-представляющих клеток (АПК) и Т-клеток из образца, полученного из организма;
(б) истощение регуляторных Т-клеток из этих выделенных клеток;
(в) инкубирование указанных АПК и полученных на стадии (б) клеток, истощенных по регуляторным Т-клеткам, с тестируемым веществом; и
(г) анализ Т-клеточных ответов на тестируемое вещество.
2. Способ по п.1, дополнительно включающий:
(а1) отделение антиген-представляющих клеток (АПК) от других клеток; и где стадия (в) включает инкубирование тестируемого вещества с отделенными АПК перед последующим добавлением клеток, истощенных по регуляторным Т-клеткам.
3. Способ по п.2, где АПК обрабатывают цитокинами перед добавлением тестируемого вещества.
4. Способ по п.1, где АПК и Т-клетки получают из мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК).
5. Способ по п.1, где АПК и Т-клетки являются человеческими.
+
6. Способ по п.1, где регуляторные Т-клетки истощены по CD25hiТ-клеткам.
7. Способ по п.1, где Т-клетки истощены по CD8+ Т-клеткам.
8. Способ по п.1, где Т-клеточные ответы анализируют путем измерения любого одного или более из следующего: пролиферации Т-клеток, высвобождений цитокинов, изменений транскрипции в Т-клетках, и/или других маркеров, ассоциированных с активацией Т-клеток.
9. Способ по п.8, где пролиферацию Т-клеток измеряют по поглощению меченного тритием тимидина.
10. Способ по п.8, где высвобождение цитокина измеряют по высвобождению IL-2 и/или IFNγ.
11. Способ по п.1, где Т-клеточные ответы анализируют более чем в одной временной точке во время инкубации.
12. Способ по п.2, где АПК инкубируют с тестируемым веществом в течение более чем одного промежутка времени перед добавлением указанных клеток, истощенных по Т-клеткам.
13. Способ по п.1, где тестируемое вещество анализируют в более чем одной концентрации.
14. Способ по п.1, где для определения оптимального(ых) времени(ен) и/или оптимальной(ых) концентрации(й) для анализа тестируемого вещества анализируют оптимизирующее вещество.
15. Способ по п.1, где тестируемое вещество представляет собой белок.
16. Способ по п.1, где тестируемое вещество представляет собой пептид.
17. Способ по п.1, где тестируемое вещество не является белком.
18. Способ по п.17, где тестируемое вещество представляет собой органическую молекулу, липид, углевод или молекулу, состоящую из двух или более группировок, включая конъюгаты, смеси и препараты.
19. Способ по любому из пп.1-16, где тестируемое вещество является иммуномодуляторным или токсичным для Т-клеток и/или АПК.
20. Способ по любому из пп.4-13, где используют МКПК доноров, экспрессирующие аллотипы HLA, представляющие более 80% экспрессии в мировой или исследуемой популяции.
21. Способ по любому из пп.4-13, где используют МКПК доноров для представления специфических аллотипов HLA, связанных с исследуемым заболеванием.
22. Способ по любому из пп.1-15, где перекрывающиеся пептиды из последовательности белка тестируют для идентификации Т-клеточных эпитопов в последовательности белка.
23. Способ по любому из пп.15-18, где ряд молекул тестируют индивидуально для оценки относительной иммуногенности.
24. Способ по п.23, где относительные Т-клеточные ответы используют в качестве основы для отбора лидирующих фармацевтических препаратов для дальнейшей разработки.
25. Способ по любому из пп.15-18, где тестируемое вещество анализируют для оценки потенциальной иммуногенности.
26. Способ по любому из пп.15-18, где различные изготовленные композиции тестируемого вещества анализируют для оценки относительной иммуногенности.
27. Способ по любому из пп.15-18, где различные изготовленные партии тестируемого вещества анализируют для оценки потенциальной иммуногенности.
28. Способ по любому из пп.15-18, где тестируемое вещество анализируют, используя кровь пациента в качестве источника Т-клеток для оценки иммуногенности тестируемого вещества.
29. Применение способа по любому из пп.1-15 для идентификации Т-клеточных эпитопов в последовательности белка.
30. Применение способа по любому из пп.1-18 для оценки иммуногенности тестируемого вещества.