ПЛАЗМИДНЫЙ ВЕКТОР pE-Lc-LTP, ШТАММ БАКТЕРИИ Escherichia coli ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ЛИПИД-ТРАНСПОРТИРУЮЩИХ БЕЛКОВ ЧЕЧЕВИЦЫ Lens culinaris И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ УКАЗАННЫХ БЕЛКОВ

1. Плазмидный вектор рЕ-Lc-LTP для экспрессии в клетках Escherichia coli липид-транспортирующих белков чечевицы Lens culinaris, содержащий ген гибридного полипептида Trx-Lc-LTP, включающего аминокислотную последовательность белка тиоредоксина, аффинную метку, сайт расщепления и последовательность липид-транспортирующего белка Lc-LTP, выбранную из группы последовательностей SEQ ID Nos.1-8, где
аффинная метка - аминокислотная последовательность, позволяющая проводить аффинную очистку гибридного полипептида на сорбентах с иммобилизованными ионами металлов,
сайт расщепления - участок аминокислотной последовательности, расположенный между последовательностями липид-транспортирующего белка Lc-LTP и тиоредоксина, позволяющий проводить частичное расщепление гибридного полипептида химическим или ферментативным способом.
2. Плазмидный вектор по п.1, содержащий в составе гена гибридного полипептида промотор Т5.
3. Плазмидный вектор по п.1, содержащий в составе гена гибридного полипептида промотор Т7.
4. Плазмидный вектор по п.1, где последовательность белка тиоредоксина представляет собой последовательность тиоредоксина A Escherichia coli с заменой внутреннего остатка Met на Leu, а сайт расщепления представляет собой остаток Met.
5. Плазмидный вектор по п.1, с нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы последовательностей SEQ ID Nos.9-11.
6. Штамм бактерии Escherichia coli - продуцент гибридного полипептида Trx-Lc-LTP, полученный путем трансформации клеток родительского штамма BL21 (DE3) или XL1-Blue плазмидным вектором pE-Lc-LTP.
7. Способ получения липид-транспортирующих белков чечевицы Lens culinaris, включающий экспрессию целевого белка в составе гибридного полипептида Trx-Lc-LTP в штамме-продуценте, полученном путем трансформации клеток родительского штамма бактерии Escherichia coli плазмидным вектором pE-Lc-LTP, лизис клеток, аффинную очистку гибридного белка на металлохелатном носителе, расщепление гибридного белка по сайту, расположенному между последовательностями Lc-LTP и тиоредоксина, и очистку целевого липид-транспортирующего белка методом обращенно-фазовой ВЭЖХ.
8. Способ по п.7, где гибридный белок расщепляют бромцианом в кислой среде по остатку Met.
9. Способ по п.7, где гибридный белок расщепляют кислотным гидролизом по связи Asp-Pro.