БИОДОСТУПНОСТЬ ПЕРОРАЛЬНОГО α-ФЕТОПРОТЕИНСОДЕРЖАЩЕГО НЕКОВАЛЕНТНОГО КОМПЛЕКСА АИМПИЛА НА МОДЕЛИ «ВЫВЕРНУТЫХ МЕШОЧКОВ» ИЗОЛИРОВАННОГО ОТРЕЗКА ТОНКОЙ КИШКИ КРЫС

6 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

соответственно по отношению к контролю. Данный пока- кологических заболеваний. Перспективным является из-затель для группы фотооблучения с фотолоном составил учение условий получения наиболее активных химических 55 % по отношению к контролю. Показатель цитостатиче- соединений этого ряда, в том числе подбор порфиринов ского эффекта ЭК50 составил 0,17 ± 0,03 мкг/мл для ЦП, с наибольшим выходом долгоживущих перекисей, параме-0,05 ± 0,01 мкг/мл — для ЦП с фотооблучением. Отмечено тров и длин волн излучения в спектре их поглощения, оп-сокращение количества опухолевых клеток HeLa с 59,33 ределения времени их существования в различных средах ± 4,86 х 104 (ЦП 0,05 мкг/мл) до 44,0 ± 2,39 х 104 для ЦП и биологических объектах, а также накопления в патоло-0,05 мкг/мл с фотооблучением (p = 0,022); с 46,0 ± 2,26 х гически измененных тканях. 104 (ЦП 0,1 мкг/мл) до 38,5 ± 2,26 х 104 для ЦП 0,1 мкг/мл с фотооблучением (p = 0,044); с 43,88 ± 4,13 х 104 (ЦП Н.Н. Андронова1, С.А. Цурка2. Ж.Р. Черкасова2, 0,2 мкг/мл) до 33,25 ± 2,14 х 104 для ЦП 0,2 мкг/мл с фото- Г.Б. Смирнова1, Ю.А. Борисова1, Е.М. Трещалина1 облучением (p = 0,048). БИОДОСТУПНОСТЬ ПЕРОРАЛЬНОГО Заключение. Полученные результаты в эксперименте а-ФЕТОПРОТЕИНСОДЕРЖАЩЕГО на культуре клеток карциномы шейки матки человека HeLa НЕКОВАЛЕНТНОГО КОМПЛЕКСА АИМПИЛА свидетельствуют о синергетическом действии комбинации НА МОДЕЛИ «ВЫВЕРНУТЫХ МЕШОЧКОВ» фотодинамической терапии с фотолоном и ЦП. ИЗОЛИРОВАННОГО ОТРЕЗКА ТОНКОЙ КИШКИ КРЫС Ю.В. Алексеев1, Е.В. Давыдов2, Г.В. Пономарев3, 1ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; В.Ю. Шленский2, А. В. Иванов4 2ООО «ФармАксесс», Москва ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ ПРОДУКТОВ Введение. Для пероральных белковых нековалентных ФОТОЛИЗА 2,4-ДИ(1-МЕТОКСИЭТИЛ) — комплексов, в том числе комплекса а-фетопротеина и из-ДЕЙТЕРОПОРФИРИНА-IX (ДИМЕГИНА) вестного индуктора апоптоза (Аимпила), всасывание проВ КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ исходит, как правило, в нижних отделах тонкой кишки, 1ФГБУ ГНЦЛМФМБА России, Москва; а попадание во внутреннюю среду организма — различны-2Ветеринарная клиника «Велес-Текстильщики», Москва; ми вариантами пиноцитоза. Прохождение агента через 3ФГБНУ«НИИбиомедицинской химии стенку кишки (интернализация) контролируют с помощью им. В.Н. Ореховича», Москва; люминисцентной метки в транспортной части комплекса. ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Доказательство интернализации комплекса Аимпила при Москва пероральном введении является необходимым этапом для Введение. Известно, что продукты фотолиза фотосен- проведения доклинического изучения на животных. сибилизаторов порфиринового ряда, в том числе их долго- Цель исследования — оценка биодоступности перо-живущие перекиси, обладают биологической активностью, рального комплекса Аимпила на модели перфузии изоли-сохраняя при этом тропность, присущую порфиринам рованного отрезка тонкой кишки крыс. к пролиферирующим клеткам и микроорганизмам. При- Задачи исследования. 1. Модификация методики получе-менение растворов облученных порфиринов может найти ния изолированного отрезка тонкой кишки крысы для Аим-широкое применение в различных областях медицины. пила. 2. Изучение всасывания комплекса Аимпила в тонкой Цель исследования — изучить воздействие продуктов кишке крыс по динамике концентрации акридиновой метки. фотолиза димегина на ряд микроорганизмов in vitro. Материалы и методы. Исследование выполнено на кры-Материалы и методы. В работе были использованы: сах-самках с массой тела 150—200 г. Метод «вывернутых лазерный аппарат «АСТ» (ООО «Панков-медикал») мощ- мешочков» изолированных отрезков тонкой кишки моди-ностью 0,8 Вт, X = 405 нм; музейные штаммы Escherichia фицирован заменой перевязки отрезка кишки фиксацией coli, Salmonella enteritidis, Enterococcus faecalis, Staphylococcus их клипсами с двух сторон без перфузии. Использованы aureus; питательная среда для выращивания хемооргано- комплекс Аимпила в пероральной лекарственной форме трофных бактерий мясопептонный агар; растворы диме- (ООО «ФармАксесс», РФ) и акридин NHS-эфир (Toronto гина с различной концентрацией. К 0,5 мл бактериальных Pharmaceuticals, Канада) для люминисцентного окраши-культур добавляли 0,5 мл облученного раствора димегина вания препаратов. Комплекс Аимпила — акридин в кон-с последующим посевом на специальные среды. Облучение центрации 1,0 мкг/мл добавляли в инкубационную среду проводилось в стеклянной кювете 1,0 мл диаметром 1 см2 (раствор Рингера—Локка, t = 37 °C). Прохождение мече-с расстояния 5 см в течение 5 мин (240 Дж/см2). Контролем ного соединения через стенку кишки фиксировали через являлось добавление к бактериальным культурам соответ- 30 мин после введения в инкубационную среду (время жиз-ствующих концентраций необлученного димегина. неспособности отрезка) и трехкратной отмывки отрезков Результаты. В опытной группе наблюдалось подавле- под контролем люминесцентной метки. Интенсивность ние роста всех бактерий при концентрации димегина люминесценции измеряли в относительных световых еди-0,0001 и 0,00001 мг в 0,5 мл, более выраженное для S. aureus ницах (RLU, relative light units), 1 RLU = 1,0 фемтомоль и S. enteritidis. В контрольной группе подавления роста (10-15 моль) аденозинтрифосфата. не наблюдалось. Результаты. Показано, что исходное значение люми-Заключение. Результаты исследований подтверждают несценции комплекса Аимпила — акридин в инкубацион-возможность использования продуктов фотолиза порфи- ной среде составляло 1073714 RLU. Уровень люминесцен-ринов в практических целях и, вероятно, при терапии он- ции меченого препарата в просвете отмытых «вывернутых

№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 7

мешочков», определенных в 4 изолированных отрезках Для линии mel Kor уровень каспазы-8 составил 45,2 (8 ч), тонкой кишки, составлял 425—829 RLU, максимальный 73,2 (24 ч), 84,9 % (48 ч), каспазы-9 — 37,9 (8 ч), 93,7 (24 ч), уровень 0,08 % от исходного значения. Неспецифическая 98,5 % (48 ч). Для линии mel Ibr уровень каспазы-8 соста-люминесценция среды и следовая люминесценция отрез- вил 9,8 (8 ч), 25,6 (24 ч), 64,5 % (48 ч), каспазы-9 — 6,4 (8 ч), ков кишки после трехкратной отмывки, величины которых 23,4 (24 ч), 65,3 % (48 ч). были предельно малы и колебались от 30 RLU и 50 RLU Заключение. Инкубация клеток с обеими лекарствен-соответственно, не учитывались. ными формами аранозы сопровождалась повышением Заключение. Полученные данные позволяют считать, уровней обеих каспаз, что указывает на активирование что меченый акридином пероральный комплекс Аимпила и внешнего, и митохондриального путей апоптоза. На кле-после однократного введения в инкубационную среду ин- точных линиях mel Z, mel Mtp и mel Mtp clone X, на кото-тернализуется через стенку тонкой кишки крысы в коли- рых отсутствовали рецепторы внешнего пути индукции честве до 0,08 % от введенной концентрации. Незначи- апоптоза, обе лекарственные формы аранозы повышали тельная концентрации препарата, поступающая в организм активность инициаторных каспаз в меньшей степени, при однократном введении, позволяет считать оправдан- чем на СБ95+-линиях клеток mel Ibr и mel Kor. Таким обра-ным эмпирически найденный на животных многократный зом, индукция апоптоза аранозой более выражена при на-терапевтический режим применения комплекса Аимпила. личии рецепторов внешнего пути апоптоза. Д.А. Афанасьева. М.А. Барышникова. О.С. Бурова, Б.Б. Ахмедов, А.К. Аллахвердиев, А.П. Полозкова, Т.Н. Заботина,\А.Ю. Барышников М.М. Давыдов, Б.Е. Полоцкий АКТИВАЦИЯ ИНИЦИАТОРНЫХ КАСПАЗ-8 И -9 ОПЫТ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ЛЕГОЧНЫХ ПОД ВЛИЯНИЕМ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ АРАНОЗЫ МЕТАСТАЗОВ КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва Введение. Ранее нами было показано, что некоторые Введение. При колоректальном раке (КРР) метастазы клеточные линии меланомы человека устойчивы к аранозе выявляются у 20—25 % больных при установлении диагно-в традиционной лекарственной форме, но чувствительны за, еще у 20—25 % после удаления первичной опухоли. к липосомальной. Подобное поведение клеток может объ- Для большинства пациентов, имеющих метастазы в легких, ясняться существованием различных путей индукции кле- хирургическое их удаление может быть единственной ре-точной гибели. альной надеждой на значительное увеличение продолжи- Цель исследования — определение пути индукции тельности жизни, а иногда и выздоровление. апоптотической гибели клеток после воздействия двух ле- Цель исследования — определить роль хирургического карственных форм аранозы — лиофилизата для приготов- метода в комплексном лечении больных с метастатически-ления раствора для инъекций и липосомальной — по ак- ми опухолями легких. тивации каспаз-8 и -9 в клеточных линиях меланомы Материалы и методы. В торакальном отделении с 2000 человека. по 2014 г. выполнено 146 оперативных вмешательств по по- Материалы и методы. Исследования проводили на двух воду метастазов КРР. СВ95+-клеточных линиях меланомы человека: mel Kor, mel Результаты. Торакотомным доступом оперированы 120 Ibr и на трех линиях, на которых отсутствовала экспрессия (82 %) пациентов, видеоторакоскопически — 26 (18 %). мРНК рецепторов внешнего пути апоптоза: mel Z, mel Mtp Наиболее часто выполнялись атипичные резекции — у 78 и mel Mtp clone X. Клеточные линии сажали на 6-луночные (53 %), лобэктомии — у 59 (40 %), пневмонэктомий выпол-планшеты, через сутки в лунки добавляли лекарственные нено 6 (4 %), сегментэктомий — 3 (2 %). После открытых формы аранозы — лиофилизат для приготовления раство- оперативных вмешательств осложнения составили 6,8 % ра для инъекций (араноза-лио) и липосомальную в кон- (при летальности 1,3 %), после торакоскопических вмеша-центрации 1 ИК50. Контролем служили клетки, которые тельств — 2,3 %. Общая 1-, 3- и 5-летняя выживаемость инкубировали в тех же условиях, но без препарата. Через 146 больных составила 96,7; 73,3 и 61,2 %. При сравне-8, 24 и 48 ч проводили определение активных каспаз с помощью нии результатов хирургического лечения больных КРР Caspase 8 и Caspase 9 (active) FITC Staining Kit (Abcam) с метастазами в легкие анализ показал статистически на проточном цитофлуориметре. достоверное преимущество выживаемости у пациентов Результаты. Под действием аранозы-лио с увеличени- с длительностью безрецидивного периода < 24 мес и раем времени инкубации уровень каспазы-8 и -9 постепенно дикальным удалением всех определяемых метастатиче-повышался до 15 % на клеточных линиях mel Z, mel Mtp ских узлов. Пол, возраст, объем хирургического лечения и mel Mtp clone X. Для линии mel Kor уровень каспазы-8 (атипичная или типичная операция), характер пораже-составил 19,5 (8 ч), 63,7 (24 ч), 64,2 % (48 ч), каспазы-9 — ния (солитарный, единичный) и размер метастазов до-9,4 (8 ч), 93,6 (24 ч), 98,5 % (48 ч). Для линии mel Ibr уро- стоверно не влияли на прогноз. Радикальность хирурги-вень каспазы-8 составил 8,5 (8 ч), 35,3 (24 ч), 72,3 % (48 ч), ческого вмешательства, длительность безрецидивного а уровень каспазы-9 составил 7,7 (8 ч), 25,4 (24 ч), 59,5 % периода < 24 мес и нормальный уровень раково-эмбри-(48 ч). Под действием липосомальной аранозы с увеличе- онального антигена в крови достоверно коррелировали нием времени инкубации уровень каспазы-8 и -9 посте- с более благоприятным прогнозом. Следует отметить, пенно повышался до 15 % на клеточных линиях mel Z что первичные и повторные торакальные вмешательства и mel Mtp, а на mel Mtp clone X — до 21 и 25 соответственно. по поводу метастазов КРР в легкие характеризуются низ-

No 1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ