Липоевая кислота как потенциальный прооксидант

9. Лопаткин Н.А., Шевцов И.П. Оперативная урология. - Л.: Медицина, 1986. - 480 с.

10. Негашева М.А. Морфологическая типология лица у мужчин и женщин в связи с конституциональной принадлежностью: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. - М., 1996. - 18 с.

11. Николаев В.Г., Николаева Н.Н., Синдеева Л.В. Антропологическое обследование в клинической практике. - Красноярск, 2007. - 171 с.

12. Петров С.Б. Хирургия предстательной железы. -СПб., 2004. - 270 с.

13. Пушкарь Д.Ю. Гиперактивный мочевой пузырь у женщин. - М.: ГЭОТАР Медицина, 2003. - 86 с.

14. Пушкарь Д.Ю. Диагностика и лечение сложных и комбинированных форм недержания мочи у женщин: Автореф. дис. ... докт. мед. наук. - М., 1997. - 324 с.

15. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая

статистика в клинических исследованиях. - М.:

ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 304 с.

16.Хрисанфова Е.Н., Перевозчиков И.В. Антропология.

- М.: Изд-во МГУ, 1991. - 318 с.

17. Чтецов В.П. Морфология человека. - М., 1990. -С.90-110.

18. Carroll P.R., Dixon C.M. Surgical anatomy of the male and female urethra // Urol. Clin. North Am. - 1992. - Vol.

19. № 2. - P.339-346.

19. De Souza N.M., Daniels O.J., Williams A.D. Female urinary genuine stress incontinence: anatomic considerations at MR imaging of the paravaginal fascia and urethra initial observations // Radiology. - 2002. - Vol. 225. № 2. - P.433-439.

20. Hendren W.H. Construction of a female urethra using the vaginal wall and a buttock flap: experience with 40 cases // J. Pediatr. Surg. - 1998. - Vol. 33. № 2. - P.180-187.

21. Malone-Lee J., Shaffu B., Anand C. Tolterodine: superior tolerability than and comparable efficacy to oxybutynin in individuals 50 years old or older with overactive bladder: randomized controlled trial // J. Urol. -2001. - № 7. - P.1452-1456.

22. Nakeua-Janeuska N. Dependence of the body height and body mass on the aqe in young population 7 to 20 years from Macedonian nationality // Int. Anat. - 1989. - Vol. 35. № 1. - P.16-22.

23. Rechberger T., Miturski R. Immunohistochemical localization of estrogen receptors in vesicovaginal fascia among female patients with stress incontinence - preliminary report // Ginecol. Pol. - 1995. - № 3. - P.231-236.

24. Reszapour M., Ulmsten U. Tension- free vaginal tape (TVT) in women with mixed urinary incontinence - a longterm follow-up // Int. Urogynecol. J. - 2001. - № 12. - P.615-618.

Информация об авторах: 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1, КрасГМУ им проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, кафедра оперативной хирургии с топографической анатомией. Тел. 8-950-428-47-48.

E-mail: chegevara-84@mail.ru, Русских Андрей Николаевич - ассистент; Самотёсов Павел Афанасьевич - первый проректор КрасГМУ им проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого, заслуженный работник высшей школы РФ, заведующий кафедрой, д.м.н., профессор; Горбунов Николай Станиславович - декан лечебного факультета, д.м.н., профессор;

Андрейчиков Александр Владимирович - д.м.н., профессор.

в ЛАЛЕТИН B.C., КОЛЕСНИЧЕНКО Л.С. - 2010

ЛИПОЕВАЯ КИСЛОТА КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЙ ПРООКСИДАНТ

В.С. Лалетин, Л.С. Колесниченко (Иркутский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра биоорганической и бионеорганической химии, зав. - д.м.н., проф. Л.С. Колесниченко, кафедра биохимии,

зав. - д.м.н., проф. В.И. Кулинский)

Резюме. Исследовано влияние однократного введения альфа-липоевой кислоты на систему глутатиона печени здоровых мышей. Альфа-липоевая кислота оказывает разнонаправленное воздействие на систему глутатиона, проявляя в определенных условиях прооксидантные свойства. Предлагается механизм, объясняющий реализацию прооксидантных эффектов альфа-липоевой кислоты.

Ключевые слова: альфа-липоевая кислота, система глутатиона.

LIPOIC ACID AS A POTENTIAL PROOXIDANT

V.S. Laletin, L.S. Kolesnichenko

Summary. The influence of single administration of alpha-lipoic acid on healthy mice liver glutathione system has been investigated. Alpha-lipoic acid renders the multidirectional influence on glutathione system, showing prooxidative features in certain conditions. The mechanism explaining alpha-lipoic acid prooxidative effects is suggested.

Key words: alpha-lipoic acid, glutathione system.

В условиях естественной прогрессии опухоли параллельно нарастают интоксикация и оксидативный стресс. Эти процессы происходят как в тканях опухоли, так и в интактных тканях. Применение схем терапии усугубляет и интоксикацию, и оксидативный стресс, ограничивая возможность проведения адекватного курса химиотерапии. Развитие побочных эффектов связано с высокой токсичностью и низкой избирательностью действия химиопрепаратов.

Актуальным вопросом является изучение свойств известных химиопротекторов и поиск новых препара-

тов. Механизм действия многих химиопротекторов направлен на подавление оксидативного стресса. Такие химиопротекторы как Ы-ацетилцистеин непосредственно влияют на поддержание концентрации глутатиона (С8Н). Обоснованным является поддержание не только концентрации С8Н, но и всей системы глутатиона, одной из главных антиоксидантных систем организма в предотвращении развития интоксикации и оксидативного стресса. С этой точки зрения большой практический интерес представляет изучение влияния альфа-липоевой кислоты (ЛК) на систему глутатиона. В большинстве

публикаций описаны антиоксидантные свойства ЛК. В ряде работ описаны противоопухолевые эффекты ЛК [9,11,12,15]. Появляются отдельные публикации, свидетельствующие о прооксидантном [3,5,7,8,10,14] и гепа-тотоксическом действии ЛК [10]. Механизм реализации этих эффектов остается малоизученным.

Ранее нами были описаны такие эффекты однократного введения ЛК в дозе 100 мг/кг на фоне введения цитостатиков различных групп, как нормализация активности всех ферментов метаболизма глутатиона и предотвращение атрофии печени и селезенки [6].

Целью этапа исследования, описываемого в данной статье, было изучение влияния однократного интрапе-ритонеального введения ЛК в дозе 10 и 100 мг/кг на систему глутатиона печени здоровых мышей.

Материалы и методы

Эксперименты проведены на 82 мышах обоего пола. Мыши были разделены на 5 групп: 1 - контрольная (n = 51), 2 - ЛК 10 мг/кг 24 ч, 3 - ЛК 100 мг/кг 24 ч, 4 - ЛК 10 мг/кг 72 ч, 5 - ЛК 100 мг/кг 72 ч (n = 6-10).

Концентрацию GSH и активность главных ферментов его метаболизма: глутатионтрансферазы (ГТ), глу-татионредуктазы (ГР) и глутатионпероксидазы (ГПО) в печени мышей измеряли стандартными спектрофотометрическими методами [2]. Концентрацию производных тиобарбитуровой кислоты (TBARS) как маркера пере-кисного окисления липидов (ПОЛ) в печени мышей измеряли по методу J. Stocks и соавт. [13] в модификации И.А. Волчегорского [1]. Результаты статистически обработаны с использованием критериев F, t-Стьюдента и t-Велча. Описаны только значимые изменения (р < 0,05).

Результаты и обсуждение

ЛК в малой дозе 10 мг/кг через 24 ч после введения увеличивала концентрацию GSH (на 14%), активность ГР (на 39%), но снижала активность ГТ (на 15%) и ГПО (на 33%) и активировала ПОЛ (подъем TBARS на 106%). Через 72 ч показатели системы глутатиона нормализо-вывались, но уровень TBARS оставался повышенным

ло активность ГПО на 39% и повышало концентрацию TBARS на 139%. Через 72 часа ЛК повышала активность

1GD

ЇІШ

гор

I5D

JJL

W1

ф -

А

1 я

iGLri h ГТ

ич і

іргп/vu

mi:

Рис. 1. Влияние однократного введения ЛК через 24 часа на систему глутатиона и ПОЛ печени здоровых мышей.

(на 135%). Малая доза ЛК вызывает значительные сдвиги в системе глутатиона и, вероятно, снижение активности ГПО и ГТ является одним из решающих факторов активации ПОЛ, сохраняющегося на высоком уровне и после нормализации системы глутатиона. Вероятно, малая доза ЛК при однократном введении недостаточна для предотвращения ПОЛ в мембране, но достаточна для инициации ПОЛ.

Введение ЛК в дозе 100 мг/кг через 24 часа снижа-

1й Мт/кг Я чМа ПК КМ ч-'/иг Н -о:л

Примечания: на рисунках 1 и 2 приняты следующие обозначения: * - р < 0,05, ** - р < 0,01, *** - р < 0,001; за 0% приняты значения контрольной группы.

Рис. 2. Влияние однократного введения ЛК через 72 часа на систему глутатиона и ПОЛ печени здоровых мышей.

ГТ (на 40%) и ГР (на 272%), тогда как активность ГПО оставалась сниженной (на 41%), уровень TBARS норма-лизовывался. Последнее, вероятно, связано с подъемом активности ГТ.

Увеличение концентрации маркеров перекисного окисления свидетельствует о развитии оксидативного стресса в тканях печени. Вероятно, возникновение этого эффекта при введении ЛК обусловлено двумя факторами: 1) окислительно-восстановительными преобразованиями; 2) дестабилизацией ферментов метаболизма глутатиона, и в первую очередь снижением активности ГПО. ЛК восстанавливается в цитоплазме клетки ГР до ДГЛК с использованием ЫАБРН. ДГЛК по градиенту концентрации выделяется во внеклеточную среду, где быстро окисляется и снова поступает в клетку, повторяя цикл [4]. Клетка вынуждена затрачивать ЫАБРН для поддержания окислительно-восстановительного статуса, не только внутри-, но и внеклеточной среды; данный эффект преобладает до достижения равновесной концентрации ДГЛК. Таким образом, формируется шунт, истощающий ЫАБРН клетки [4]. Уменьшение ЫАБРН лимитирует работу системы ГР/ГПО. Вероятно, данный механизм, реализуемый при взаимодействии экзогенной ЛК с системой глутатиона, обусловливает развитие оксидативного стресса в клетке.

Увеличение активности ГР с одной стороны является благоприятной защитной реакцией и, вероятно, связан с его индукцией, вызванной развитием оксидативного стресса. Но рост активности ГР при снижении активности ГПО малоэффективен, так как снижается элиминация АФК, нарастает ПОЛ. При возрастании активности ГР увеличивается восстановление не только GSH, но и ЛК, что увеличивает расход ЫАБРН на восстановление внеклеточной среды. При истощении ЫАБРН становится невозможным эффективное восстановление GSSG глутатионредуктазой (несмотря на увеличение активности ГР). Активность ГПО уменьшалась в большинстве групп.

Выявленные в ходе эксперимента сдвиги в системе глутатиона позволяют заключить, что ЛК проявляет как прооксидантные (умеренно снижает активность ГПО и повышает концентрацию TBARS), так и антиоксидант-ные свойства (подъем активности ГР и умеренное или высокое увеличение - ГТ). Рассматривая ЛК в качестве химиопротектора, следует учитывать двойственность её действия.

ЛИТЕРАТУРА

1. Волчегорский И.А., Долгушин И.И., Колесников О.Л., Цейликман В.Э. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма. - Челябинск, 2000. - 16 с.

2. Колесниченко Л.С., Кулинский В.И., Сотникова Г.В., Ковтун В.Ю. Влияние направленного изменения концентрации глутатиона на температуру тела и толерантность к ишемии головного мозга // Биохимия. - 2003.

- Т.68. №5. - С.656-663.

3. Cakatay U., Kayali R., Sivas A., et al. Prooxidant activities of alpha-lipoic acid on oxidative protein damage in the aging rat heart muscle // Arch. Gerontol. Geriatr. - 2005.

- Vol.40. №3. - P231-240.

4. Han D., Hamilton R.T., Lam P.Y., PackerL. Lipoic acid: energy production, antioxidant activity and health effects / Ed. M.S. Patel, L. Packer. - N.Y.: CRC Press, 2008. - P293-315.

5. Kayali R., Cakatay U., Akgay T., et al. Effect of alpha-lipoic acid supplementation on markers of protein oxidation in post-mitotic tissues of ageing rat // Cell Biochem. Funct.

- 2006. - Vol.24. №1. - P.79-85.

6. Kolesnichenko L.S., Laletin V.S., Kulinsky V.I. The influence of anticancer drugs on glutathione system of the liver and the a-lipoic acid effects // The 7th Mongo lian-Russian International Medical Symposium. - 2006. - P.75-77.

7. Moini, H., Packer, L., Saris, N.E. Antioxidant and prooxidant activities of alpha-lipoic acid and dihydrolipoic acid // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 2002. - Vol.182. №1. -P.84-90.

8. Morkunaite-Haimi S., Kruglov A.G., Teplova, et al. Reactive oxygen species are involved in the stimulation of the mitochondrial permeability transition by dihydrolipoate // Biochem. Pharmacol. - 2003. - Vol.65. №1. - P43-49.

9. Moungjaroen J., Nimmannit U., Callery P. S., et al. Reactive oxygen species mediate caspase activation and

apoptosis induced by lipoic acid in human lung epithelial cancer cells through Bcl-2 down-regulation // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2006. - Vol.319. №3. - P.1062-1069.

10. Perra A., Pibiri M., Sulas, et al. Alpha-lipoic acid promotes the growth of rat hepatic pre-neoplastic lesions in the choline-deficient model // Carcinogenesis. - 2008. -Vol.29. №1. - P.161-168.

11. Selvakumar E., Hsieh T.C. Regulation of cell cycle transition and induction of apoptosis in HL-60 leukemia cells by lipoic acid: role in cancer prevention and therapy // J. Hematol. Oncol. - 2008. - Vol. 1. - P4.

12. Simbula G., Columbano A., Ledda-Columbano, et al. Increased ROS generation and p53 activation in alpha-lipoic acid-induced apoptosis of hepatoma cells // Apoptosis. -2007. - Vol. 12. №1. - P113-123.

13. Stocks J., Gutteridge J.M., Sharp R.J., et al. Assay using brain homogenate for measuring the antioxidant activity of biological fluids // Clin. Sci. Mol. Med. - 1974. - Vol.47. №3.

- P215-222.

14. Wenzel U., Nickel A., Daniel H. Alpha-Lipoic acid induces apoptosis in human colon cancer cells by increasing mitochondrial respiration with a concomitant O2-*-generation // Apoptosis. - 2005. - Vol.10. №2. - P.359-368.

15. Yamasaki M., Kawabe A., Nishimoto, et al. Dihydro-alpha-lipoic acid has more potent cytotoxicity than alpha-lipoic acid // In Vitro Cell. Dev. Biol. Anim. - 2009. - Vol.45. №5-6. - P.275-280.

Информация об авторах: 664003 г. Иркутск, ул. Kрасного Восстания 1, кафедра биохимии ИГМУ

Лалетин Всеволод Сергеевич, аспирант ка( Колесниченко Лариса Станиславовна - зав. кас

зедры биохимии, тел. 83952243825, E-mail: greensleeves@list.ru; )едрой биоорганической и бионеорганической химии, профессор.

© ЦАЛИХИН А.Д., БУЕВИЧ Е.И. - 2010

К ПРОБЛЕМЕ АНЕМИИ БЕРЕМЕННЫХ

А.Д. Цалихин, Е.И. Буевич

Резюме. В статье представлены вопросы диагностики и дифференциальной диагностики гемоглобинопениче-ских состояний у беременных (по материалам собственных исследований).

Ключевые слова: анемия, беременность, гемоглобинопеническое состояние.

ON THE PROBLEM OF ANEMIA IN PREGNANCY

A.D. Tsalikhin, E.I. Buevich

Summary. The original data on diagnosis and differential diagnosis of hemoglobinopenia in pregnancy is presented. Key words: anemia, pregnancy, hemoglobinopenia.

Вопросы диагностики и дифференциальной диагностики гемоглобинопенических состояний у беременных давно привлекают внимание клиницистов различных специальностей - акушеров-гинекологов, терапевтов, гематологов. Однако до сих пор вопрос о наличии у беременных истинной железодефицитной анемии и снижения гемоглобина другого генеза остается открытым [1-3]. Во многом это обусловлено отсутствием конкретных критериев для верификации дефицита железа в организме, а также четких нормативных показателей состояния красной крови для различных сроков беременности. Неясным остается и вопрос о влиянии мно-говодия, гестозов и сопутствующей соматической патологии на метаболизм железа в организме и показатели красной крови [4,5].

Цель работы: актуализировать критерии дифференциальной диагностики гемоглобинопенических состояний у беременных.

Материалы и методы

В исследование были включены 82 женщины со

сроком беременности от 22 до 40 недель. Контрольную группу составили 40 женщин в аналогичных сроках беременности. У всех женщин определяли уровень гемоглобина, эритроцитов и гематокрита в периферической крови (определялись на гематологическом анализаторе СеП-Буп 3700), сывороточный ферритин (ИФА). Статистическая обработка данных включала: расчет среднего значения, стандартного отклонения, стандартной ошибки среднего значения. Значимость различий в группах определялась по критерию Стьюдента (1), уровень значимости был принят за 5%.

Результаты и обсуждение

Нами обследованы 82 женщины со сроком беременности от 22 до 40 недель и уровнем гемоглобина в крови ниже 110 г/л (анемическое состояние согласно критериям ВОЗ). Распределение обследованных женщин по срокам беременности представлено в таблице 1.

Группу сравнения составили 40 женщин с аналогичными сроками беременности с гемоглобином крови бо-