Конструирование тест-системы с наночастицами коллоидного серебра для обнаружения возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза в дот-иммуноанализе

4. Кирьякова JI.С. Эпидемиологические и экологические особенности 7 пандемии холеры в Украине. Дисс. канд. мед. наук. Киев, 2007.

5. Стеценко И.И. Изучение процесса формирования эндемического очага холеры в Мариуполе. Профилактическая медицина. 2009,2 (6): 37-42.

6. Хайтович О.Б., Шварсалон М.К., O.JI. Павленко OJL, Зинич JI.C., Ильичев Ю.О., Денисенко B.I., Гусаков Г.М., Антонова Л.П. Вспышка холеры в Мариуполе в 2011 году. Инфекционные болезни. 2011,1:10-14.

7. Morita М., Ohnishi М., Arakava Е. et al. Development and validation of a mismatch amplification mutation PCA assay to monitor tht dissemination of an emerging variant ofVibrio cholerae 01 biotype El Tor. Microbiol. Immunol. 2008, 52: 314-317.

8. Nusrin S., Khan G.Y., Bhuiyan N .A. Diverse CTX phages among toxigenic Vibrio cholerae 01 and 0139 strains isolated between 1994 and 2002 in an area where cholera is endemic in Bangladesh. J. Clin. Microbiol. 2004,42 (12): 5854-5856.

9. Safa A., Bhuiyan N.A., Nursin S. et al. Genetic characteristics of Matlab variants ofVibrio cholerae 01 that are hybrids between classical and El Tor diotypes. J. Med. Microbiol. 2006, 55:1563-1569.

10. Safa A., Nair G.B., Kong R.Y. Evolution of new variants ofVibrio cholerae 01. Trends Microbiol. 2010,18:46-54.

11.TanejaN., MishraA., SangarG. etal. Outbreaks caused by new variant ofVibrio cholerae 01 eltor, India. Emerg. Infect. Dis. 2009,15 (2): 352-354.

12. Waldor M.K., Rubin E.J., Gregori D.N. Regulation, replication, and integration functions of the СТХф are incoded by regions RS2. Mol. Microbiol. 1997, 24:917-926.

Поступила 25.08.16

Контактная информация: Савельева Ирина Вилориевна,

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13-15, р.т (8652)26-48-19

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017

Т.Ю.Загоскина, М.В.Чеснокова, В.Т.Климов, Ю.О.Попова, Е.Ю.Марков, ОЛСтарикова

КОНСТРУИРОВАНИЕ ТЕСТ-СИСТЕМЫ С НАНОЧАСТИЦАМИ КОЛЛОИДНОГО СЕРЕБРА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗА И КИШЕЧНОГО ИЕРСИНИОЗА В ДОТ-ИММУНОАНАЛИЗЕ

Иркутский научно-исследовательский противочумный институт

Цель. Конструирование иммунологической тест-системы для обнаружения возбудителей энтеропатогенных иерсиний (Yersinia pseudotuberculosis и Y. enterocolitica) методом дот-иммуноанализа. Материалы и методы. В качестве маркера специфических антител использовали наночастицы коллоидного серебра размером 5 — 9 нм. IgG фракцию выделяли из коммерческих антисывороток к псевдотуберкулезным (0:1) и кишечноиерси-ниозным (0:3 и 0:9) микроорганизмам. Испытание полученной тест-системы проведено на 20 штаммах Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica (по десять каждого вида). Результаты. Дот-анализ имел специфический характер и обнаруживал энтеропатогенные иерсинии в концентрации 5-Ю5 — 8-Ю6 м.к./мл (100 — 1000 м.к. в пробе). При этом не наблюдалось перекрестного реагирования с гетерологичными исследованными микроорганизмами — Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Yersinia pestis EV. Показана возможность одновременного обнаружения и серотипирования Y. enterocolitica, что является обязательным для подтверждения их эпидемической значимости. Заключение. Разработанные тест-системы позволяют исследовать микрообъемы испытуемых проб (1 мкл), экспрессны (1,5 — 2 ч), высокочувствительны и специфичны, технически просты и не требуют использования дорогостоящего оборудования, специальной подготовки персонала, могут с успехом применяться в практическом здравоохранении в лабораториях разного уровня оснащенности.

Журн. микробиол., 2017, № 1, С. 55—61

Ключевые слова: коллоидное серебро, агглютинирующие специфические сыворотки, дот-иммуноанализ, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica

T.Yu.Zagoskina, M.V.Chesnokova, V.T.Klimov, Yu.O.Popova, E.Yu.Markov, O.A.Starikova

CONSTRUCTION OF A TEST-SYSTEM WITH NANOPARTICLES OF COLLOID SILVER FOR DETECTION OF PSEUDOTUBERCULOSIS AND INTESTINAL YERSINIOSIS FOR CAUSATIVE AGENTS IN DOT-IMMUNOASSAY

Irkutsk Research Institute for Plague Control, Russia

Aim. Construction of an immunologic test-system for detection of causative agents of entero-pathogenicyersinia (Yersinia pseudotuberculosis and Y. enterocolitica) by dot-immunoassay. Materials and methods. Nanoparticles of colloid silver sized 5 — 9 nm were used as a marker of specific antibodies. IgG fraction was isolated from commercial antisera to Y. pseudotuberculosis (0:1) and Y. enterocolitica (0:3 and 0:9). Testing of the obtained test-system was carried out on 20 strains of Y. pseudotuberculosis and Y. enterocolitica (10 of each species). Results. Dot-analysis had a specific character and detected enteropathogenic yersinia at a level of 5-105 — 8-106 CFU/ml (100 — 1000 CFU in sample). Wherein cross-reaction with heterologic studied microorganisms — Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Yersiniapestis EV — was not observed. A possibility of simultaneous detection and serotyping of Y. enterocolitica is shown, that is necessary for confirmation of their epidemic significance. Conclusion. The developed test-systems allow to study micro volumes of the samples under study (1 ц1), are express (1.5 — 2 h), highly sensitive and specific, technically simple and do not require the use of high-cost equipment, special training of the staff, may be successfully used in practical healthcare in laboratories with varying equipment levels.

Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2017, No. 1, P. 55-61

Keywords: colloid silver, agglutinating specific sera, dot-immunoassay, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica

ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время около 70% всех регистрируемых болезней человека имеют инфекционную этиологию. Контроль за распространением инфекций в мире актуален в условиях современных темпов и масштабов миграции населения. Псевдотуберкулез и кишечный иерсиниоз относятся к эмерджент-ным (emergency) пищевым зоонозам, эпидемические проявления которых возникают внезапно, без видимых предвестников. По социально-экономической значимости, частоте распространения энтеропатогенные иерсинии в Европейском союзе занимают третье место после возбудителей сальмонел-леза и кампилобактериоза. В Российской Федерации псевдотуберкулез и кишечный иерсиниоз регистрируются практически повсеместно в виде спорадической и вспышечной заболеваемости, при этом наиболее высокие показатели характерны для сибирского, дальневосточного и северо-западного федеральных округов [7]. Возникновение массовых эпидемических осложнений этих инфекционных болезней возможно и при стихийных бедствиях и катастрофах в местах размещения пострадавшего населения, ввиду увеличения численности грызунов и появления среди них эпизоотий, что приводит к контаминации возбудителем воды и пищевых продуктов. Важнейшей предпосылкой эффективности мероприятий, проводимых при возникновении эпидемических очагов, является своевременное обнаружение патогенных биологических агентов, что требует быстрой и достоверной диагностики. В этом плане методы, направленные на детекцию специфических антигенов

возбудителя как при исследовании клинического материала от больных, так и проб из объектов окружающей среды (пищевые продукты, вода, смывы и др.) являются наиболее перспективными.

В 80 — 90-е годы в Российской Федерации проводились широкие научные исследования по разработке и апробации ряда диагностических тест-систем: гемагглютинационных (РНГА, РТНГА), агглютинационных (реакции коаг-глютинации и латекс-агглютинации), твердофазных иммунохимических (ИФА) [1, 8, 10 — 13]. Несмотря на эффективные диагностические возможности разработанные ранее в экспериментальных условиях иммунологические методы в практике лабораторной службы не получили широкого распространения ввиду сложности постановки большинства реакций, нестабильности выпускаемых серий препаратов, отсутствия сертифицированных тест-систем. Кроме этого, не все учреждения здравоохранения имеют техническую базу для выполнения сложных анализов, большинство из них нуждается в оснащении надежными, простыми, недорогими диагностическими тестами, не требующими использования сложной аппаратуры для постановки анализа и учета результатов, специальной подготовки персонала. Одним из широко распространенных экспресс-методов обнаружения патогенных микроорганизмов и диагностики вызываемых ими заболеваний является дот-иммуноанализ (ДИА). Достаточно высокие специфичность и чувствительность, простота постановки, миниатюризация, экспрессность, отсутствие потребности в ридерах и других дорогостоящих приборах делают ДИА перспективным при индикации возбудителей опасных инфекционных болезней [2], особенно в режиме чрезвычайных ситуаций. Наиболее привлекательным представляется использование в ДИА в качестве маркеров иммунных реагентов золей тяжелых металлов, в частности, серебра, которые способны при накоплении на поверхности матрицы создавать визуально различимую окраску.

Цель исследования — конструирование тест-систем для дот-иммуноанализа с использованием наночастиц коллоидного серебра в качестве маркера специфических антител для обнаружения корпускулярных антигенов Yesinia pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, пригодных как для скрининга исследуемого материала в период эпидемиологического неблагополучия, так и выполнения индивидуальных анализов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

При конструировании соответствующих диагностических тест-систем для дот-иммуноанализа использованы специфические антитела, источником которых служили коммерческие агглютинирующие псевдотуберкулезные и кишечноиерсиниозные 0:3 и 0:9 серовариантов не адсорбированные сыворотки производства Санкт-Петербургского НИИ вакцин и сывороток с титром антител 1:3200 — 1:6400, полученные против липополисахаридного антигена возбудителей и традиционно применяемые в реакциях агглютинации. Выделение IgG фракций из указанных сывороток осуществляли комбинированным методом с использованием каприловой кислоты и сульфата аммония [14]. Золь серебра готовили восстановлением из раствора азотнокислого серебра боргидридом натрия. Для этого к 0,05% водного раствора боргидрида натрия одномоментно приливали равный объем 0,02% водного раствора азотнокислого серебра. Все манипуляции приводили при постоянном встряхивании [4]. Формирующийся золь коллоидного серебра первоначально имел соломенно-желтый цвет, который в процессе созревания менялся на светло-коричневый. Размер частиц золя составлял 5 — 9 нм. После коррекции рН

золь серебра насыщали растворами соответствующих IgG, предварительно осветленных центрифугированием при 12 ООО g в течение 5 мин для осаждения присутствующих в препаратах агрегатов и денатурированных молекул иммуноглобулинов, имеющих большое количество гидрофобных участков на поверхности и способных негативно влиять на качество получаемых диагности-кумов [2,4]. Стабилизатором биозондов являлся раствор, содержащий бычий сывороточный альбумин, полиэтиленгликоль, хлорид и азид натрия [5].

Постановку дот-иммуноанализа осуществляли традиционным способом, предполагающим адсорбцию исследуемого материала, содержащего корпускулярные антигены Yersinia pseudotuberculosis (штаммы 45, 47, 57, 59, 61, 65, 71, 74, 66, 44) и Y. enterocolitica серовариантов 0:3 и 0:9 (штаммы 1731, 1188, 1190, 157 - 162, 1189,91,8, 1659, 378,880) из рабочей коллекции отдела эпидемиологии Иркутского научно-исследовательского противочумного института, на нитроцеллюлозной мембране, блокирование свободных сайтов связывания раствором 1 % казеината натрия. Детекцию адсорбированных на твердой фазе антигенов осуществляли с помощью соответствующих IgG, меченных наночастицами коллоидного металла. Визуализацию результатов реакции проводили погружением мембран в раствор проявителя, состоящего из метола, лимонной кислоты и азотнокислого серебра, с последующим промыванием ее проточной водой. Общее время проведения анализа ~2 ч. Пробы, содержащие искомые антигены, выявлялись в виде темно-серых пятен. В отрицательных контролях окрашивания не развивалось [2 — 6, 9].

Для проверки специфичности разработанных тест-систем использовали штаммы Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Yersinia pes-tis EV в концентрациях 107, 108 м.к./мл, инактивированные кипячением на водяной бане в течение 20 мин.

Обнаружение энтеропатогенных иерсиний проводили с использованием 10 различных штаммов Y. pseudotuberculosis (\5, 47, 57, 59, 61, 65, 71, 74, 66, 44) и 10 штаммов Y. enterocolitica серовариантов 0:3и0:9(1731,1188,1190,157- 162,1189, 91, 8, 1659, 378, 880), инактивированных кипячением на водяной бане в течение 20 мин.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В результате проведенных экспериментов установлено, что все взятые в работу штаммы Y. pseudotuberculosis уверенно обнаруживались в дот-иммуноанализе с применением специфических антител, меченных наночастицами коллоидного серебра, но в разных концентрациях (рис. 1). Поскольку используемые для конструирования тест-системы коммерческие псевдотуберкулезные сыворотки были получены против поверхностных структур бактериальной клетки определенных штаммов возбудителя, это, вероятно, сказалось на различиях в минимальной определяемой концентрации пато-

Y. pseudotuberculosis

Рис. 1. Дот-анализ для определения Y. pseudotuberculosis.

По горизонтали — штаммы Y. pseudotuberculosis: 1 — 45, 2 — 47, 3 — 57, 4 - 59, 5 - 61, 6 - 65, 7 - 71, 8 - 74, 9 —66, 10 — 44. По вертикали — разведения антигена: 108, 5-107, 2,5-107, 1,6-107, 8-Ю6, 4-106, 2-106, 106, 5-105, 2,5-105, 1,25-105 м.к./мл.

Y. enterocolitica 0:3

Y. enterocolitica 0:9

Рис. 2. Дот- анализ для определения и серотипирования Y. enterocolitica 0:3 и Y. entero-

colitica 0:9.

По горизонтали — штаммы Y. enterocolitica (слева — обнаружение Y. enterocolitica 0:3,

справа - обнаружение Y. enterocolitica 0:9): 1 - 1731; 2 - 1188; 3 -1190; 4 - 157/162;

5 - 1189; 6 — 91; 7 - 8; 8 - 1659; 9 — 378; 10 — 880. По вертикали — разведения антигена: 108, 5-Ю7, 2,5107, 1,6 О7, 8 106, 4-Ю6, 2-106, 106, 5 105, 2, 105, 1,25 Ю5 м.к./мл.

гена каждого исследуемого штамма и указывало на различный количественный и/или качественный состав отдельных структурных макромолекул поверхностных антигенов исследуемых штаммов возбудителя (преимущественно, ЛПС). Так, в дот-иммуноанализе обнаруживались штаммы Y. pseudotuberculosis в следующих концентрациях: 45 — 106 м.к./мл, 47 — 8-106, 57 — 5-105, 59-8-Ю6, 61 - 1,6 107, 65 - 8-Ю6, 71 - 4-Ю6, 74-2-Ю6, 66- 106, 44- 8-Ю6. При этом не наблюдалось перекрестного реагирования с гетерологичными исследованными микроорганизмами — Е. coli, S. typhimurium, S. flexneri, Y. pestis EV.

В разработанных тест-системах для дот-иммуноанализа с использованием специфических кишечноиерсиниозных 0:3 и 0:9 иммуноглобулинов, меченных наночастицами коллоидного серебра, исследовано 10 штаммов Y. enterocolitica обоих серовариантов (рис. 2). В дот-иммуноанализе с использованием IgG из кишечноиерсиниозных сывороток серовара 0:3 положительные результаты получены только со штаммами Y. enterocolitica 0:3 сероварианта: 1731 -отр.; 1188-отр.; 1190 —отр.; 157/162 - 8-106 м.к./мл; 1189 —отр.;91 -2-Ю6 м.к./мл; 8 — отр.; 1659 — отр.; 378 — 106м.к./мл; 880 — 8-106 м.к./мл. Штаммы серовариантов 0:9 в данной тест-системе не обнаруживались, что указывает на возможность серотипирования штаммов Y. enterocolitica в предлагаемом варианте дот-иммуноанализа.

При использовании IgG из кишечноиерсиниозных сывороток серовара 0:9 указанные корпускулярные антигены обнаруживались только в штаммах Y. enterocolitica 0:9 сероварианта: 1731 - 2-106 м.к./мл; 1188 -2-106; 1190 -2-Ю6; 157/162 - 5-Ю7 (слабо положительный); 1 189 - 2-106м.к./мл; 91 - отр.;

8 - 2,5-107м.к./мл; 1659 - 106; 378 - 5-107 (слабо положительный); 880 - 2,5-107 м.к./мл (слабо положительный).

Полученные результаты указывают на высокую чувствительность и специфичность разработанных тест-систем для дот-иммуноанализа энтеропато-генных иерсиний, на возможность в сравнительном аспекте определения количественных и/или качественных различий по поверхностным антиген-

ным структурам у штаммов возбудителя псевдотуберкулеза, что делает актуальным продолжение исследований в этом направлении, а также на возможность обнаружения с одновременным серотипированием штаммов Y. enterocolitica, что является обязательным этапом идентификации иерсиний для подтверждения их этиологической значимости.

В процессе работы нами установлено, что сконструированные тест-системы для дот-иммуноанализа позволяют быстро (в течение 2 часов) с высокой чувствительностью и специфичностью обнаруживать возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза, тест-системы просты в исполнении, с минимальным расходом исследуемых образцов (1 мкл), экономичны (не используются дорогостоящие реактивы и оборудование), их применение позволит оперативно осуществлять микробиологический мониторинг и проводить быструю оценку ситуации при возникновении биологической угрозы.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бургасова О.А., Куляшова Л.Б., Ценева Г.Я. Сравнительная оценка различных иммунологических реакций в динамике псевдотуберкулеза. Журн. микробиол. 1996, 2: 4851.

2. Загоскина Т.Ю., Балахонов С.В., Марков Е.Ю., Николаев В.Б., Субычева Е.Н., Чапор-гина Е.А., Михайлов Е.П., Бодрых О.Б., Попова Ю.О. Апробация диагностических тест-систем с использованием наночастиц серебра в качестве маркеров специфических антител для скрининга исследуемого материала на наличие антигенов возбудителей чумы, бруцеллеза, туляремии и ботулотоксина в дот-иммуноанализе. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2014,4:61-64.

3. ЗагоскинаТ.Ю., БалахоновС.В.,ЧапоргинаЕ.А., МарковЕ.Ю., ГавриловаО.В., Бодрых О.Б., Долгова Т.М., ТайковаТ.С., Иванова Т.А., Попова Ю.О., Корнева А.В. Сравнительная оценка методов детекции ботулотоксина в клиническом материале от больных людей. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2014,4:65-68.

4. Загоскина Т.Ю., Калиновский А.И., Марков Е.Ю., Докорина А.А., Голубинский Е.П. Использование специфических антител, меченных частицами коллоидного серебра, для выявления антигенов бруцелл методом дот-иммуноанализа. Клин. лаб. диагностика. 2002,6: 38-39.

5. Загоскина Т.Ю., Марков Ю.Е., Калиновский А.И., Голубинский Е.П. Обнаружение антигенов бруцелл с помощью частиц коллоидных металов в качестве маркеров специфических антител. Журн. микробиол. 2001, 3:65-69.

6. Загоскина Т. Ю., Чапоргина Е. А., Марков Е. Ю., Попова Ю. О., Соловьев С. Ю., Андреевская Н. М., Балахонов С. В. Совершенствование тест-системы для скрининга материала на ботулотоксин в дот-иммуноанализе. Бюлл. ВСНЦ СО РАМН. 2015, 1 (101): 60-62.

7. Иерсинии и иерсиниозы. Г.Я. Ценева (ред.). СПб, Медмассмедиа, 2006.

8. Куляшова Л.Б., Ценева Г.Я., Буйневич Ю.Б. Роль антигенов наружной мембраны Yesinia pseudotuberculosis в патогенезе и диагностике псевдотуберкулеза. Журн. микробиол. 1997, 1: 14-18.

9. Носкова О .А., Загоскина Т.Ю., Субычева Е.Н., Марков Е.Ю., Попова Ю.О., Гриднева Л.Г., Михайлов Е.П. Применение дот-иммуноанализа для выявления антигенов чумного микроба в полевом материале. Проблемы ООИ. 2014, 3:69-71.

10. Смирнова Е.Ю. Совершенствование лабораторного обеспечения системы эпидемиологического надзора за иерсиниозами: Автореф. дис. канд. мед. наук. СПб, 2003.

П.Сомов Г.П., Покровский В.И., Беседнова Н.Н., Антоненко Ф.Ф. Псевдотуберкулез. М.: Медицина, 2001.

12. Ценева Г.Я., Куляшова Л.Б., Белая Ю.А., Быстрова С.М. Применение псевдотуберкулезного коаглютинирующего антительного диагностикума в лабораторной практике. Лаб. дело. 1995,2:111-113.

13. Шпилюк Г.Ф., Головешкина Т.Н., Володина И.К. и др. Иммуноглобулиновые латекс-ные препараты для экспресс диагностики иерсиниозов. Журн. микробиол. 1993, 6: 92-93.

14. McKinney М. М., Parkinson A. A simple, non-chromatographic procedure to purify immunoglobulins from serum and ascites fluid. J. Immunol. Meth. 1987, 96 (2): 271-278.

Поступила 15.06.16

Контактная информация: Загоскина Татьяна Юрьевна, д.м.н., 664047, Иркутск, ул. Трилиссера, 78, р.т. (3952)22-01-39

О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017

Ф.Н.Шубин1, А.В.Раков1, Н.А.Кузнецова1, Т.В.Якубич2, И.П.Снеткова3

ФОРМИРОВАНИЕ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ НАСЕЛЕНИЯ САЛЬМОНЕЛЛЕЗОМ, ВЫЗВАННЫМ SALMONELLA ENTERITIDIS, В РАЙОНАХ С НЕПОЛНЫМ ОБЕСПЕЧЕНИЕМ НАСЕЛЕНИЯ МЕСТНОЙ ПРОДУКЦИЕЙ ПТИЦЕВОДСТВА

'НИИ эпидемиологии и микробиологии, Владивосток; 2Центр гигиены и эпидемиологии в Сахалинской области, Южно-Сахалинск; 3Центр гигиены и эпидемиологии в Еврейской АО, Биробиджан

Цель. Изучение плазмидных характеристик штаммов S. enteritidis у больных и особенностей эпидемиологии инфекции в областях с неполным обеспечением населения местной продукцией птицеводства. Материалы и методы. Выполнен плазмидный анализ штаммов микроба, выделенных от 382 больных и из 8 проб продуктов, и оценена значимость плазмидных типов в заболеваемости населения. Идентификацию сальмонелл проводили общепринятыми методами, определение спектра плазмид — по методу Kado C.I. и Liu S.T. (1981). Результаты. 98,4% штаммов содержали плазмиду вирулентности р38, а 80,1% штаммов вместе с ней имели мелкие плазмиды. Сахалинские штаммы разделены на 16 плазмидных типов (D=0,794), а штаммы из Еврейской АО — на 10 (D=0,834). Выявлена однотипность штаммов у больных при вспышках инфекции и в факторах передачи. Заключение. Особенности сальмонеллеза в изучаемых субъектах РФ определяются повышенным риском завоза продуктов, содержащих сальмонеллы. Мониторинг на основе плазмидного анализа является эффективной базой эпидемиологического надзора.

Журн. микробиол., 2017, № 1, С. 61—67

Ключевые слова: сальмонеллез, Salmonella enteritidis, плазмидные типы, местная и завозная заболеваемость

F.N.Shubin1, A.V.Rakov1, N.A.Kuznetsova1, T.V.Yakubich2,1.P.Snetkova3

FORMATION OF POPULATION MORBIDITY WITH SALMONELLOSIS CAUSED BY SALMONELLA ENTERITIDIS IN REGIONS WITH INCOMPLETE SUPPLY OF LOCAL POULTRY PRODUCTS

'Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Vladivostok; 2Centre of Hygiene and Epidemiology in Sakhalin Region, Yuzhno-Sakhalinsk; 3Centre of Hygiene and Epidemiology, in Jewish AR, Birobidzhan, Russia

Aim. Study plasmid characteristics of S. enteritidis strains in patients and features of epidemiology of the infection in regions with incomplete supply of population with local poultry production. Materials and methods. Plasmid analysis of microbe strains isolated from 382 patients and 8 samples of products was carried out, and significance of plasmid types in population morbidity was evaluated. Identification of salmonella was carried out by conventional methods, plasmid