Изучение фармакокинетики анастрозола на мини свиньях светлогорской популяции

Изучение фармакокинетики анастрозола на мини-свиньях светлогорской популяции

Салар Эйса Задех1, В.Г. Кукес1, Г.Д. Капанадзе2

Московская медицинская академия имени И.М. Сеченова, Москва Научный центр биомедицинских технологий РАМН, Москва

Изучали биоэквивалентность противоопухолевого препарата анастрозола на мини-свиньях светлогорской популяций. Проведенный фармакокинетический анализ показал, что время всасывания, распределения и выведения препарата у мини-свиней светлогорской популяций близки к таковым у человека. Время достижения максимальной концентрации, период полувыведения, площадь под фармакокинетической кривой сравнительно легко экстраполируются на человеческий организм.

Ключевые слова: биоэквивалентность, противоопухолевые препараты, мини-свиньи светлогорской популяции.

Анастрозол — современный лекарственный препарат с противоопухолевой активностью в отношении эстрагензависимых опухолей молочной железы у женщин в постменопаузе [1]. После приема внутрь всасывается 83-85% принятой дозы, время достижения максимальной концентрации — 2 часа, связь с белками плазмы — 40%, равновесная концентрация в плазме достигается после 7 суток приема препарата. Метаболизм осуществляется в процессе ^дезалкилирования, гидроксилирова-ния и конъюгации с глюкуроновой кислотой. Основной метаболит — триазол, определяемый в плазме и моче, не обладает аналогичной фармакологической активностью. Метаболиты выводятся преимущественно почками, менее 10% дозы выводится с мочой в неизмененном виде в течение 72 часов [2]. Известно, что при изучении биоэквивалентности генерических противоопухолевых препаратов с учетом побочных эффектов по этическим соображениям рекомендуется проводить исследование на животных [3, 4].

Целью нашего исследования было изучение фармакокинетических параметров противоопухолевого препарата анастрозо-

ла у мини-свиней после однократного пе-рорального введения.

Материалы и методы

Динамику концентрации анастрозола изучали на 12 мини-свиньях светлогорской популяции MSY (работа с животными проводилась в Научном центре биомедицинских технологий РАМН) после однократного перорального введения препарата ари-мидекс в дозе 2 мг (2 таблетки по 1 мг). Отбор крови осуществляли до и спустя 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 48 и 72 часа после введения препарата. Концентрацию анас-трозола в плазме крови животных определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на хроматографе Gilson с УФ-спектрофотометрическим детектором с переменной длиной волны при длине волны 215 нм. Использовали хроматографическую колонку LC-18-ОВ 4,5x150. Элюирование проводили подвижной фазой состава: ацетонитрил — 0,01 М КН2РО4 в соотношении 27:73. Подвижную фазу перед использованием дегазировали под вакуумом. Скорость элюирования составляла 1,0 мл/мин. Фармакокинетические параметры рассчитывали модельно-незави-

симым методом. Были взяты следующие параметры: Стах — максимальная концентрация; Ттах — время достижения максимальной концентрации; ЛиС0— — площадь под фармакокинетической кривой в пределах длительности наблюдений (рассчитывали методом трапеций); отношение Стах/лис0- по индивидуальным значениям (характеристика скорости всасывания).

Для проведения хроматографического анализа анастрозола в крови животных были подобраны следующие условия экстракции: к 1 мл плазмы добавляли 5 мл дих-лорметана, экстрагировали при энергичном встряхивании 10 минут, затем центрифугировали 10 минут при 4500 об/мин; органический слой переносили в колбы для упаривания и упаривали досуха под вакуумом; к сухому остатку добавляли 250 мкл подвижной фазы, фильтровали и аликвоту использовали для хроматографирования.

Количественное определение проводили методом абсолютной калибровки по высоте пиков. Калибровочная зависимость в диапазоне концентраций 10-200 нг/мл носила линейный характер (у = —2,02708 + + 2,159638 х; r2 = 0,9987).

При статистической обработке экспериментальных данных рассчитывали следующие статистические параметры: среднее арифметическое значение (Mean), среднее геометрическое значение (GMean), стандартное отклонение среднего результата (SD), медиана (Median).

Результаты и обсуждение

Динамика концентрации анастрозола в плазме крови животных после однократного перорального приема 2 мг и результаты расчетов фармакокинетических параметров анастрозола представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Динамика концентрации анастрозола в плазме крови животных, нг/мл

Показатель

Время после приема препарата, час

0,5 1 1,5 2 2,5 3 4 6 8 12 24 30 48

Mean 10,9 32,4 43,0 74,8 68,1 58,0 44,2 35,6 28,2 22,7 16,2 11,4 4,5

GMean 9,4 26,4 38,0 65,1 59,9 50,9 39,5 31,5 24,9 20,6 14,4 10,5 —

SD 6,7 24,8 22,0 43,5 36,9 30,5 22,9 19,3 15,3 11,2 8,8 4,5 3,2

CV 62 77 51 58 54 53 52 54 54 49 54 40 71

Median 9,0 22,6 39,4 63,2 55,3 48,2 34,6 29,5 23,8 18,7 13,3 11,3 4,5

Таблица 2 Фармакокинетические параметры анастрозола

Показатель C , max’ нг/мл T , max час Аисо-^ нгхч/мл Cmax AUC0-t

Mean 77,6 2,1 882,3 0,089

GMean 68,7 2,1 816,7 0,084

SD 42,1 0,2 375,5 0,033

Median 69,6 2,0 729,9 0,087

L-95% 52,0 2,0 653,5 0,069

Up-95% 192,1 2,3 1111,0 0,109

Как видно из представленных данных, пик концентрации анастрозола достигался в среднем через 2 часа после введения препарата и составлял 74,8+43,5 нг/мл. Следует отметить, что через 72 часа после приема препарата концентрация анастро-зола во всех пробах была ниже предела определения.

Полученные результаты были сопоставлены с литературными данными фармакокинетических параметров, полученных у здоровых добровольцев. Проведенный анализ (с учетом доз и веса животных) пока-

зал, что процессы всасывания, распределения и выведения анастрозола у мини-свиней близки к таковым у людей. Сопоставимыми оказались такие параметры, как время достижения максимальной концентрации, период полувыведения, площадь под фармакокинетической кривой. Таким образом, мини-свиньи светлогоской популяций могут быть использованы в исследованиях по биоэквивалентности противоопухолевых препаратов.

Литература

1. The Merck Index, p. 633, 2001.

2. Geiser J., King N., Dowsett M. et al. Influence of anastrozole (Arimidex), a selective, nonsteroidal

aromatase inhibitor, on in vivo aromatisation and plasma oestrogen levels in postmenopausal woman with breast cancer // Br. J. Cancer, 74:1286-91,1996.

3. Geisler J., Bernsten H., Ottestad L. et al.Neoadjuvant treatment with anastrozole (Arimidex) causes profound suppression of intratumor estrogen levels // Proc. ASCO 18: (82a), abstr. 311,1999.

4. Bonneterre J., Buzdar A., Nabholtz J. et al. Anastrozole is superior to tamoxifen as first-line therapy in hormone receptor positive advanced breast carcinoma. Results of two randomized trials designed for combined analyses // Cancer, 9 (92):2247-58, 2001.

STUDY OF ANASTROZOL PHARMACOKINETICS IN SVETLOGORSKAYA

MINIPIGS

Salar Asa Zadekh, V.G. Kukes, G.D. Kapanadze

I.M. Sechenov Moscow Medical Academy, Moscow Research Center for Biomedical Technologies of RAMS, Moscow

Bioequivalence of antitumoral medication of anastrozol was studied on the svetlogorskaya minipigs. The pharmacokinetic analysis showed that for Svetlogorskaya minipigs the time of suction, distribution and elimination of medications is close to that for a human. The time of achieving maximal concentration, elimination half-life and area under a pharmacokinetic curve can be extrapolated on a human organism with relative ease.

Key words: bioequivalence, antitumoral medication, minipigs.