Исследование микробиоты воздуха в многопрофильном стационаре Санкт-Петербурга

strategiya razvitiya, innovatsionnye podkhody i perspektivy: materialy Vserossiyskoy nauchno-prakticheskoy konferentsii s mezhdunarodnym uchastiem. Ekaterinburg; 2009: 120-3.

2. Budarina O.V., Pinigin M.A., Ul'yanova A.V. Modern criteria of hygienic rationing of a smell in atmospheric air of the occupied places. In: Prioritety profilakticheskogo zdravookhraneniya v ustoychivom razvitii obshchestva: sostoyanie i puti resheniya problem: materialy plenuma nauchnogo soveta po ekologii cheloveka i gigiene okruzhayushchey sredy Rossiyskoy Federatsii 12-15 December 2013. Moscow; 2013: 47-9.

3. Chekmareva O.V. Complex assessment of the atmosphere of streets of the industrial city. In: Tsytsura A.A. et al. Transportno-dorozhnyy kompleks i ego vliyanie na ekologicheskuyu obstanovku Orenburga. Orenburg: Izd-vo OGU; 2002: 40-87.

4. Kopytnikova O.I., Levanchuk A.V, Mingulova I.O., Tursunov Z.Sh. Justification of the directions of development of social and hygienic monitoring. In: Prioritety profilakticheskogo

zdravookhraneniya v ustoychivom razvitii obshchestva: sostoyanie i puti resheniya problem: materialy plenuma nauchnogo soveta po ekologii cheloveka i gigiene okruzhayushchey sredy Rossiyskoy Federatsii 12-13 December 2013. Moscow; 2013: 184-7.

5. Bityukova V.R. Social and ecological problems of development of the cities of Russia [Sotsial'no-ekologicheskie problemy razvitiya gorodov Rossii]. 2-nd ed. Moscow: Librokom; 2009.

6. Levanchuk A.V., Kopytnikova O.I., Bashketova N.S. Quantitative characteristic of level of environmental pollution by an automobile and road complex. In: Prioritety profilakticheskogo zdra-vookhraneniya v ustoychivom razvitii obshchestva: sostoyanie i puti resheniya problem: materialy plenuma nauchnogo soveta po ekologii cheloveka i gigiene okruzhayushchey sredy Rossiyskoy Federatsii 12-13 December 2013. Moscow; 2013: 209-11.

Поступила 14.02.14 Received 14.02.14

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 613.5:614.72-078

Пунченко О.Е., Косякова К.Г., Васильева Н.В.

исследование микробиоты воздуха в многопрофильном стационаре санкт-петербурга

ГБОУ ВПО Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова Минздрава РФ, кафедра медицинской микробиологии, 191015, Санкт-Петербург

Микробиологическое исследование воздуха лечебно-профилактических организаций является важным компонентом в системе мероприятий по профилактике инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи. Цель исследования - оценить качество воздушной среды в отделениях многопрофильного стационара по микробиологическим показателям. Проанализированы результаты микробиологических исследований воздуха различных отделений крупного многопрофильного стационара за период с 1993 по 2011 г. с помощью ретроспективного и оперативного анализа. Количество проб, не соответствующих нормативам, составило 0,2-4,2% от числа ежегодных исследований. Наибольший процент высеваемости микроорганизмов отмечали в период действия СанПиН 2.1.3.1375-03. Уменьшение процента высеваемости регистрировали при введении СанПиН 2.1.3.2630-10, в котором не нормируется количество плесневых и дрожжевых грибов. Частота обследования больничной среды не влияла на число проб, не удовлетворяющих нормативам. Обсуждение. Микромицеты - возбудители инвазивных микозов и могут являться фактором риска в развитии внутрибольничных инфекций. Согласно МУК 4.2.2942-11 по исследованию воздуха в стационаре, ограничены возможности обнаружения микроскопических грибов из-за отсутствия соответствующих условий культивирования микромицетов.

Вывод. Несмотря на то, что качество воздушной среды в обследованном стационаре по нормируемым микробиологическим показателям оценивается как удовлетворительное, следует оптимизировать методологию микробиологических исследований и перечень нормируемых показателей.

Ключевые слова: микробная обсемененность воздуха; общее микробное число; Staphylococcus aureus; микромицеты.

Punchenko O.E., Kosyakova K.G., Vasilyeva N.V. - INVESTIGATION OF THE AIR MICROBIOTA IN THE MULTIDISCIPLINARY HOSPITAL OF SAINT PETERSBURG

North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov, 191015, Saint-Petersburg, Russian Federation

Microbiological tests of air in hospitals are the very important constituent element in prophylaxis of health care-associated infections.

The aim of the study is to assess air in hospitals accordingly to the microbiological standards. The results were analyzed for 1993-2011. There were 0,2 - 4,2% of the samples that did not meet the standard. The maximum amount of microorganisms was found while SanPiN 2.1.3.1375-03 was effective within validity period. SanPiN 2.1.3.2630-10 didn't normalize fungus, resulting in the minimal amount ofmold. The frequency of sampling did not affect the result.

Discussion Moulds are the causative agents of invasive fungal infections. Fungi can cause nosocomial infections. There is description of method to isolate fungi in the guidelines for control MUK 4.2.2942-11. Conclusion It is necessary to use a new procedure when assessing the air in hospitals.

Key words: bacterization of air; total microbial number; Staphylococcus aureus; moulds.

Для корреспонденции: Пунченко Ольга Евгеньевна; Olga.Punchenko@mail.ru For correspondence: Punchenko Olga; Olga.Punchenko@mail.ru

гиена и санитария 5/2014

Профилактика инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП), является актуальной проблемой современного здравоохранения. Согласно официальным данным, в 12% случаев внутрибольничных инфекций регистрируется воздушно-капельный путь передачи [1]. В России для профилактики ИСМП и мониторинга окружающей среды в организациях, занимающихся лечебной деятельностью, необходимо контролировать воздух по микробиологическим показателям 1 раз в 6 мес согласно СанПиН 2.1.3.2630-10 (приложение № 20) в помещениях, в зависимости от их функционального назначения. В настоящее время в воздухе нормируют общее микробное число (ОМЧ) и Staphylococcus aureus в 1 м3, при этом количество микромицетов не регламентируется [2].

Цель исследования - оценить микробиоту воздуха по нормируемым микробиологическим показателям в хирургических и реанимационных отделениях многопрофильного стационара в соответствии с действующими нормативными документами.

Материалы и методы

В период с 1993 по 2011 г. выполнено 17 533 исследования проб воздуха, отобранных в операционных блоках, отделениях реанимации и интенсивной терапии методом естественной седиментации [3]. ОМЧ определяли в 1 м3 воздуха путем посева на среду мясо-пептонного агара с инкубацией посевов при температуре 37°С в течение 24 ч и дополнительно при температуре 22°С в течение 24 ч и S. aureus - путем посева на среду ЖСА с инкубацией при 37°С в течение 48 ч. Для выделения микромицетов использовали среду Сабуро с инкубацией посевов при температуре 28°С в течение 72-96 ч [4].

Результаты и обсуждение

В период с 1993 по 2011 г. микро-биоту воздуха в стационаре оценивали по количественным критериям - ОМЧ и качественным - Staphylococcus au-reus и микромицеты. Для комплексной оценки в расчет принимали либо два показателя - ОМЧ и Staphylococcus aureus, либо три - ОМЧ, Staphylococ-cus aureus и микромицеты (рис. 1).

На протяжении анализируемого периода отмечали тенденцию к увеличению количества проб, не соответствующих нормативам. Следует заметить, что наиболее высокий процент высеваемости микроорганизмов из воздуха стационара отмечали в период действия СанПиН 2.1.3.1375-03, когда микромицеты нормировались в воздухе больниц. С помощью коэффициента корреляции установлено, что частота обследования больничной среды не влияла на количество не соответствующих нормативу проб воздуха (p < 0,05). Высеваемость микроорганизмов из воздуха стационара по нормируемым критериям изменялась на протяжении 19 лет (рис. 2).

Превышение показателя ОМЧ относительно норматива было наибольшим в 2003-2005 гг. и 2011 г. (1,9-2,1%), по-

1400 и

1200-

1000-

казателя S. aureus - в 1993-1994 гг. и 2002 г. (1,9-2,7%), показателя микроскопических грибов - в 2006 и 2009 гг. (2,1-2,5%). Наибольший уровень высеваемости микроорганизмов наблюдали при оценке одновременно трех показателей.

Обсуждение. Общие требования к уровню микро-биоты воздуха лечебно-профилактических организаций в России в настоящее время регламентированы ГОСТ Р 52539-2006 и СанПиН 2.1.3.2630-10, ранее - СанПиН 2.1.3.1375-03 и Приказом МЗ СССР № 720 [2, 5-7]. Требования ГОСТ Р 52539-2006 распространяются на новые и реконструируемые действующие лечебные учреждения, а также могут использоваться для более строгого нормирования в существующих помещениях. Документ подразделяет все помещения лечебно-профилактических организаций (ЛПО) на пять групп и устанавливает для каждой из них максимально допустимые число механических частиц в 1 м3 воздуха (частиц с размерами > 0,5 мкм) и число КОЕ микроорганизмов в 1 м3 воздуха. В СанПиН 2.1.3.2630-10 нормируется предельное общее количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха (КОЕ/ м3) до начала работы и во время работы в наиболее «критических» помещениях лечебных организаций классов чистоты А и Б. Следует отметить, что в этих документах существуют расхождения не только по количеству классов помещений и их обозначению, но и по ОМЧ в 1 м3 воздуха.

Требования к микробиологическим показателям качества воздушной среды ЛПО в настоящее время ограничиваются только двумя показателями: ОМЧ и S. aureus. Как следует из нашей работы, необходимо учитывать и микроорганизмы других групп, в частности микроми-

i-4,5

to о о.

с

ш

Б

03 X

5

^

2

800-

600-

400-

200-

Количество проб —»— % высеваемости по 3 показателям % высеваемости по 2 показателям

- Линейная

-----Линейная

Рис. 1. Микробиота воздуха хирургических и реанимационных отделений в период 19932011 гг.

Микробное число

гр ср ср су cjy су су

^ Staphylococcus aureus

rp cfr Микромицеты

Рис. 2. Структура не соответствующих нормативам по микробному числу, Staphylococcus aureus и микромицетам проб воздуха больничной среды за 1993-2011 гг.

цеты. Эти данные согласуются с результатами других исследований, в которых сообщается о высоком уровне контаминации воздушной среды микроскопическими грибами, с преобладанием Penicillum spp. и Aspergillus spp. - 37,6 и 29% соответственно [8, 9]. Рост некоторых микромицетов рода Aspergillus spp. при температуре 37°C свидетельствует о высокой вероятности внутрибольнич-ного аспергиллеза [10]. Показано, что показатель ОМЧ не коррелирует с количеством других микроорганизмов на абиотических объектах больничной среды [11], в том числе с микроскопическими грибами.

Перечень питательных сред для взятия проб воздуха и условия культивирования в настоящее время регламентируются методическими указаниями МУК 4.2.2942-11, согласно которым отбор проб на ОМЧ и микроскопические грибы следует производить на простые питательные среды, такие как МПА и его аналоги [12]. Однако ни перечисленные в документе питательные среды, ни рекомендуемая температура инкубации посевов не способствуют росту грибов. В связи с этим находки микроскопических грибов стали редкостью при исследовании воздуха в стационарах. Кроме того, в случае выделения микромицетов остается неясным вопрос об интерпретации полученных результатов, так как в СанПиН 2.1.3.2630-10 приводится нормирование воздуха только по ОМЧ, исключая микроскопические грибы.

Согласно действующему нормативному документу [12], идентификация колоний, подозрительных на S. aureus, проводится по ограниченному набору тестов: лецитовителлазная активность и свободная плазмокоа-гулаза (пробирочный тест). При отрицательном или слабоположительном тесте на свободную плазмокоагулазу другие признаки, используемые для идентификации, не позволяют дифференцировать S. aureus от Staphylococcus pseudintermedius. В мире описано несколько случаев ИСМП, вызванных S. pseudintermedius, при этом изученные штаммы обладали мультиустойчивостью к антибактериальным препаратам [13, 14]. В связи с этим в ряде случаев точная видовая идентификация становится востребованной не только в рамках эпидемиологического расследования, но и как плановый элемент программы инфекционного контроля. Применение солевого агара с маннитом в качестве питательной среды для отбора проб воздуха позволит уже в первичном посеве провести более точную дифференцировку стафилококков. Более

перспективной представляется идентификация микроорганизмов, выделенных из воздуха с помощью современных методов, таких как MALDI TOFF масс-спектрометрия.

Среди проблемных вопросов -перечень пробоотборников воздуха, в настоящее время регламентируемый документами. Чаще всего в нормативных документах рекомендуют пробоотборники импакторного типа, исключив использование седимента-ционного способа для отбора проб воздуха. Существующие методы подсчета микроорганизмов в воздухе позволяют обнаружить лишь жизнеспособные клетки, а сублетально поврежденные микроорганизмы, среди которых могут оказаться и характерные для данного стационара госпитальные штаммы, как правило, не выявляются. Таким образом, данные наших исследований диктуют необходимость разработки новой стратегии мониторинга воздушной среды стационаров для профилактики ИСМП с учетом качественного и количественного состава микромицетов.

Литер атур а

1. Постановление Роспотребнадзора № 146. О профилактике внутрибольничных инфекций. 29 ноября 2012 года. Available at: http//34.rospotrebnadzor.ra/documents/ros/80337/ (дата обращения 05.02.2014).

2. СанПиН 2.1.3.2630-10. Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность. Утв. постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 18.05.2010 № 58. М.; 2010.

3. Методы бактериологического исследования условно-патогенных микроорганизмов в клинической микробиологии: Методические рекомендации. Утв. Минздравом РСФСР 19.12.1991. М.; 1991.

4. МУК 4.2.1089-02. Использование установки обеззараживания воздуха УОВ «Поток 150-М-01» и контроль микробной обсемененности воздуха при ее работе, утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 04.01.2002. М.; 2002.

5. СанПиН 2.1.3.1375-03. Гигиенические требования к размещению, устройству, оборудованию и эксплуатации больниц, родильных домов и других лечебных стационаров. Утв. постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 06.06.2003 № 124 (ред. от 04.03.2010). М.; 2003.

6. ГОСТ Р 52539-2006. Чистота воздуха в лечебных учреждениях. Общие требования. Утв. приказом Ростехрегулирова-ния от 21.04.2006 № 73-ст. М.; 2006.

7. Приказ МЗ СССР № 720. Об улучшении медицинской помощи больным с гнойными хирургическими заболеваниями и усилении мероприятий по борьбе с внутрибольнич-ной инфекцией. Утв. Министром здравоохранения СССР 31.07.1978. М.; 1978.

8. Sukhanova Yu., Vasil'eva N., Bogomolova T. Prevalence of Aspergillus spp. in hospital air. In: Abstract Book of 16-th Congress of the International Society for Human and Animal Mycology. Paris, France. 25-29 June, 2006: 0566.

9. Суханова Ю.А. Меры профилактики и организации микологического мониторинга в помещениях ЛПУ В кн.: Проблемы медицинской микологии. Материалы научно-практической конференции по медицинской микологии (XII Кашкинские чтения). СПб.; 2009; т. 11 (ч. 2): 116.

[гиена и санитария 5/2014

10. Суханова Ю.А. Микромицеты - контаминанты больничных помещений: Дисс. ... канд. мед. наук. СПб.; 2009.

11. Пунченко О.Е., Косякова К.Г. Оценка микробной контаминации сотовых телефонов студентов медицинского вуза. В кн.: Материалы III Международного конгресса по профилактике инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2013; 6 (73): 109-10.

12. МУК 4.2.2942-11. Методы санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в лечебных организациях. Утв. Главным государственным санитарным врачом РФ15.07.2011. М.; 2011.

13. Savini V., Barbarini D., Polakowska K., Gherardi G., Biaiecka A. et al. Methicillin-resistant Staphylococcus pseud-intermedius infection in a bone marrow transplant recipient. J. Clin. Microbiol. 2013; 51 (5): 1636-8.

14. Stegmann R., Burnens A., Maranta C.A., Perreten V. Human infection associated with methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius ST71. J. Antimicrob. Chemother. 2010; 65 (9): 2047-8.

References

1. Resolution of Rospotrebnadzor № 146. On the prevention of nosocomial infections. 29 November, 2012. Available at: http://34.rospotrebnadzor.ru/documents/ros/80337/

2. SanPiN 2.1.3.2630-10. Sanitary requirements for organizations engaged in medical activities, approved by Resolution of Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation N 58. 18 May, 2010. Moscow; 2010.

3. Methods of bacteriological examination of opportunistic pathogens in clinical microbiology. Guidelines. Approved by Ministry of Health of the RSFSR. 19 December, 1991. Moscow; 1991.

4. Methodical instructions 4.2.1089-02. Use of the device of air disinfection UOV "Potok 150-M-01" and the control of microbial contamination of air during its operation, approved by Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation. 04 January, 2002. Moscow; 2002.

5. SanPiN 2.1.3.1375-03. Hygienic requirements for placement, structure, equipment and operation of hospitals, maternity hospi-

tals and other medical organizations, approved by Resolution of Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation N 124. 06 June 2003

6. State Standard R 52539-2006. The air cleanliness in hospitals. General requirements. Moscow: Standartinform Publ.; 2006.

7. The Order N 720 of USSR Ministry of Health. On the improvement of medical care for patients with purulent surgical diseases and strengthening measures to combat nosocomial infection. Approved by Minister of Health of USSR. 31 July, 1978. Moscow; 1978.

8. Sukhanova Yu., Vasil'eva N., Bogomolova T. Prevalence of Aspergillus spp. in hospital air. In: Abstract Book of 16-th Congress of the International Society for Human and Animal Mycology. Paris, France. 25-29 June, 2006: 0566.

9. Sukhanova Yu.A. Measures of prophylaxis and organization of mycological monitoring of hospital environments. In: Proceeding of the scientific-practical conference in medical mycology

10. Sukhanova Yu.A. Micromycetes - contaminants of hospital environments: Dis. St.-Petersburg; 2009.

11. Punchenko O.E., Kosyakova K.G. Evaluation of microbial contamination of medical students' mobile phones. In: Proceeding of the III International Congress on the prevention of health-care associated infections. Epidemiologiya i vaktsinoprofilaktika. 2013; 6

12. Methodical instructions 4.2.2942-11. Methods of sanitary-bacteriological studies of the environment, air and sterility control in medical organizations. Approved by Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation. 15 July, 2011. Moscow; 2011.

13. Savini V, Barbarini D., Polakowska K., Gherardi G., Biaiecka A. et al. Methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius infection in a bone marrow transplant recipient. J. Clin. Microbiol. 2013; 51 (5): 1636-8.

14. Stegmann R., Burnens A., Maranta C.A., Perreten V. Human infection associated with methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius ST71. J. Antimicrob. Chemother. 2010; 65 (9): 2047-8.

Поступила 28.02.14 Received 28.02.14

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УдК 613.31:615.916.076.9

Хрипач Л.В., Рахманин Ю.А., Михайлова Р.И., Князева Т.Д., Коганова З.И., Железняк Е.В., Савостикова О.Н., Алексеева А.В., Каменецкая Д.Б., Рыжова И.Н., Круглова Е.В., Ревазова Т.Л.

влияние углеродных нанотрубок и активированного угля на биохимические показатели состояния организма при хроническом введении препаратов крысам с питьевой водой

ФГБУ «НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина» Минздрава России, 119121, Москва, РФ

В хроническом 6-месячном эксперименте на крысах изучено влияние введения с питьевой водой многослойных углеродных нанотрубок (УНТ; наружный диаметр 15-40 нм, длина > 2 мкм) и активированного угля (АУ; диаметр 10-100 мкм) на биохимические показатели состояния организма в пробах крови животных. Оба препарата через 2 нед после начала опыта вызывали окислительный стресс, на более поздние сроки - изменения содержания в крови кортизола, общего белка и сывороточных маркеров повреждения тканей печени и почек. Таким образом, в отличие от литературных данных, свидетельствующих о значительно более высокой (асбестоподобной) токсичности УНТ по сравнению с микрочастицами угля и фуллеренами при ингаляционном пути введения, мы не нашли существенных различий между влиянием УНТ и АУ на биохимические маркеры при введении с питьевой водой.

Ключевые слова: многослойные углеродные нанотрубки; активированный уголь; хронический эксперимент; крысы; пробы крови; биохимические маркеры токсичности.

для корреспонденции: Хрипач Людмила Васильевна; lkhripach@mail.ru For correspondence: Khripach Ludmila; lkhripach@mail.ru