ПИРАЗИЛПИРИМИДИНОНЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИМПОТЕНЦИИ
PIRAZILE PYRIMIDINONES FOR IMPOTENCY TREATMENT

Изобретение касается использования ряда пиразол[4,3-d]пиримидин-7-онов для лечения импотенции.
Импотенция может быть определена буквально как недостаток у мужчины силы для полового акта и может повлечь за собой неспособность достигнуть эрекции пениса или эякуляции, или обеих сразу. Более покретно, импотенция или дисфункция эрекции может быть определена как неспособность получить или поддержать эрекцию, адекватную для полового сношения.
От этого страдают от 2 до 7% мужского населения, процент увеличивается с возрастом, до 50 лет, и составляет от 18 до 75% в возрасте между 55 и 80 годами. Только в США, например, имеются до 10 миллионов мужчин-импонентов, в большинстве страдающих скорее от проблем органического, чем психогенного происхождения.
Сообщения о хорошо контролируемых клинических испытаниях на человеке немногочисленны, и эффективность орально принимаемых лекарств является низкой. Хотя большое количество различных лекарств, как показано, стимулирует эрекцию пениса, они эффективны только после прямого введения в пенис, например, интрауретрально или интракавернозно (и.к.), не показаны для дисфункции эрекции.
В настоящее время лечение основано на и.к. введении вазоактивных веществ, и хорошие результаты были заявлены с феноксибензамином, фентоламином, папаверином и простагландином El как по одному, так и в комбинации; однако с и.к. введением некоторых из этих агентов связаны боль, приапизм и фиброз пениса. Калиевые активаторы каналов (КАК) и вазоактивный кишечный полипептид (ВКП) так же, как показано, являются активными и.к., но стоимость и стабильность выпуска могла бы ограничивать развитие последнего.
Альтернативой и.к. употреблению является использование глицерин тринитратных (ГТН) пластырей, прикладываемых к пенису, которые, как показано, являются действенным, но производят побочные явления как у пациента, так и у партнерши (партнера).
Как общая альтернатива к фармакологическому вмешательству используются разнообразные протезы для пениса, чтобы помочь достижению эрекции. Первоначальные результаты удовлетворительны, но проблемы с инфекцией и с ишимией, особенно у страдающих диабетом мужчин, делают этот тип лечения скорее заключительным выбором, чем первоначальной терапией.
Соединения согласно изобретению являются мощными ингибиторами циклических гуанозин 3',5'-монофосфат фосфодиэстераз (цГМФ ФДЭ) в отличие от их ингибирования циклических аденозин 3',5'- монофосфат фосфодиэстераз (цАМФ ФДЭ). Это селективное игибирование ферментов ведет к повышенным уровням цГМФ, которые, в свою очередь, обеспечивают основу для возможностей, уже описанных для упомянутых соединений, в ЕР-А-0463756 и ЕР-А-0525004, а именно при лечении устойчивой, непостоянной и вариантной (Prinzmetal) стенокардии, гипертонии, легочной гипертонии, сердечной недостаточности, связанной с застойными явлениями, атеросклероза, состояний с пониженной расширяемостью кровеносных сосудов, например после ангиопластики подкожных кровеносных сосудов с круговыми швами (пост - ПКСКША), болезней периферийных кровеносных сосудов, инсульта, бронхитов, аллергической астмы, хронической астмы, аллергического насморка, глаукомы и болезней, характеризуемых расстройствами кишечной подвижности, например воспалительного кишечного синдрома (ВКС).
Обнаружено, что эти описанные соединения являются полезными при лечении дисфункции эрекции. Кроме того, соединения могут назначаться орально, таким образом, устраняя недостатки, связанные с н.к. введением. Таким образом, представленное изобретение касается применения соединения формулы (I):
,
1
1
3
3
5
где R представляет собой Н; C-С перфторалкил; или С-С циклоалкил;
2
1
6
3
6
1
3
3
6
R представляет собой Н; C-С алкил, необязательно замещенный С-С циклоалкилом; C-С перфторалкил; или С-С циклоалкил;
3
1
6
3
6
1
6
3
5
3
6
3
6
R представляет собой C-С алкил, необязательно замещенный С-С циклоалкилом; C-С перфторалкил; С-С циклоалкил; С-С алкенил; или С-С алкинил;
4
5
6
5
6
7
5
6
7
5
6
5
6
5
6
5
6
7
5
6
5
6
1
4
2
2
4
2
2
4
2
4
2
3
1
3
2
2
R представляет собой C-C алкил, необязательно замещенный ОН, NRR, CN, CONRR или COR; С-С алкенил, необязательно замещенный CN, CONRR или COR; С-С алканоил, необязательно замещенный NRR; (гидрокси) С-С алкил, необязательно замещенный NRR; (С-С алкокси) C-С алкил, необязательно замещенный ОН или NRR; CONRR; COR; галоген; NRR; NHSONRR;
2
2
8
9
10
NHSOR; SONRR; или фенил, пиридил, пиримидинил, имидазолил, оксазолил, тиазолил, тиенил или триазолил, любой из которых необязательно замещен метилом;
5
6
11
1
4
R и R представляют собой каждый независимо Н или C-C алкил, или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пирролидинильную, пиперидиновую, морфолиновую, 4-N(R)-пиперазинильную или имидазолильную группу, где упомянутая группа необязательно замещена метилом или ОН;
7
1
4
R представляет собой Н или C-C алкил;
8
5
6
1
3
R представляет собой C-С алкил, необязательно замещенный NRR;
9
10
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пирролидинильную, пиперидиновую, морфолиновую или
12
13
14
13
14
1
4
1
3
4-N(R)-пипepaзинильнyю группу, где указанная группа необязательно замещена C-C алкилом, C-С алкокси, NRR или CONRR;
11
1
3
2
3
1
4
R представляет собой Н; C-С алкил, необязательно замещенный фенилом; (гидрокси) С-С алкил; или C-C алканоил;
12
13
14
13
14
13
14
13
14
13
14
1
6
1
3
2
6
2
6
2
6
1
6
R представляет собой Н; C-С алкил; (C-С алкокси) С-С алкил; (гидрокси) С-С алкил; (RRN) С-С алкил; (RRNOC) C-С алкил; CONRR; CSNRR; или C(NH)NRR; и
13
14
1
4
R и R представляют собой каждый независимо Н; C-C алкил;
1
3
2
4
2
4
(C-С алкокси) С-С алкил; или (гидрокси) С-С алкил;
или их фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей любое вещество для получения лекарства для лечения или профилактического лечения дисфункции эрекции у животного самца, включая человека.
В вышеупомянутом определении, если не обозначено иначе, алкильные группы, имеющие три или большее количество атомов углерода, алкенильные и алкинильные группы, имеющие четыре или большее количество атомов углерода, алкокси группы, имеющие три атома углерода, и алканоильные группы, имеющие четыре атома углерода, могут иметь прямую цепь или разветвленную цепь. Галоген означает фтор, хлор, бром или иод.
Соединения формулы (I) могут содержать один или более асимметричных центров, и таким образом они могут существовать как энантиомеры или диастереоизомеры. Кроме того, определенные соединения формулы (I), которые содержат алкенильные группы, могут существовать как цис-изомеры или транс-изомеры. В каждом случае изобретение включает как смеси, так и отдельные индивидуальные изомеры.
Соединения формулы (I) могут также существовать в таутомерных формах, и изобретение включает как смеси, так и отдельные индивидуальные таутомеры.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I), которые содержат основной центр, являются, например, нетоксичными кислотными аддитивными солями, образованными с неорганическими кислотами типа соляной, бромистоводородной, серной и фосфорной кислотами, с органокарбоновыми кислотами, с органосульфоновыми кислотами.
Соединения формулы (I) могут также обеспечить фармацевтически приемлемые соли металлов, в частности нетоксичные соли щелочных металлов с основаниями. Примеры включают соли натрия и калия.
1
2
3
4
5
6
5
6
7
5
6
5
6
5
6
1
3
2
3
1
2
2
Предпочтительная группа соединений формулы (I) - это такая, где R представляет собой Н, метил или этил; Rпредставляет собой C-С алкил; R представляет собой С-С алкил или аллил; R представляет собой C-C алкил, необязательно замещенный ОН, NRR, CN, CONRR или COR; ацетил, необязательно замещенный NRR; гидроксиэтил, необязательно замещенный NRR; этоксиметил, необязательно замещенный ОН или NRR;
5
6
7
5
6
5
6
2
2
СН=CHCN; CH=CHCONRR; CH=СНСОR; CONRR; COH; Br; NRR;
2
2
2
5
6
8
9
10
5
6
11
7
8
NHSONRR; NHSOR; SONRR; либо пиридил, либо имидазолил, любой из которых необязательно замещен метилом; R и R представляют собой каждый независимо Н, метил или этил, или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперидиновую, морфолиновую, 4-N(R)-пиперазинильную или имидазолильную группу, где упомянутая группа необязательно замещена метилом или ОН; R представляет собой Н или трет-бутил; R представляет собой метил или
2
2
2
1
3
2
3
5
6
9
10
12
13
14
13
14
11
12
13
14
13
14
13
14
CHCHCHNRR; R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперидиновую или 4-(R)-пиперазинильную группу, где упомянутая труппа необязательно замещена NRR или СОNRR; R представляет собой Н, метил, бензил, 2-гидроксиэтил или ацетил; R представляет собой Н, C-С алкил, (гидрокси) С-С алкил, CSNRR или C(NH)NRR; и R и R представляют собой каждый независимо Н или метил.
1
2
3
4
5
6
5
6
5
6
5
6
7
5
6
5
6
5
6
9
10
5
6
11
7
9
10
12
11
12
1
3
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
1
3
2
Более предпочтительной группой соединений формулы (I) является такая, где R представляет собой метил или этил; R представляет собой C-С алкил; R представляет собой этил, Н-пропил или аллил; R представляет собой CHNRR, COCHNRR, СH(ОH)CHNRR, CHOCHCH, СНOСНСНOН, CHOCHCHNRR, СН=СНСОN(СН), CH=CHCOR, CONRR, COH, Br, NHSONRR, NHSOCHCHCHCHNRR, SONRR, 2-пиридил, 1-имидазолил или 1-метил-2-имидазолил; R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперидиновую, 4-гидроксипиперидиновую, морфолиновую, 4N(R) пиперазинильную или 2-метил-1-имидазолильную группу; Rпредставляет собой Н или трет-бутил, R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4- карбамоилпиперидиновую или 4-N(R)-пипepaзинильнyю группу, R представляет собой метил, бензил, 2-гидроксиэтил или ацетил и R представляет собой Н, C-С алкил, 2-гидроксиэтил или СSNH.
1
2
3
4
5
6
5
6
9
10
5
6
11
9
10
12
11
12
2
2
Особенно предпочтительной группой соединений формулы (I) является такая, где R представляет собой метил или этил; Rпредставляет собой Н-пропил; R представляет собой этил, Н- пропил или аллил; R представляет собой COCHNRR, CONRR, SONRR или 1-метил-2-имидазолил; R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолиновую или 4-N(R)-пипepaзинильнyю группу; R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-N(R)-пиперазинильную группу; R представляет собой метил или ацетил; и R представляет собой Н, метил, 2-пропил или 2-гидроксиэтил.
Самые предпочтительные индивидуальные соединения изобретения включают:
5-(2-этокси-5-морфолинацетилфенил)-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он;
5-(5-морфолинацетил-2-Н-пропоксифенил)-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он;
5-[2-этокси-5-(4-метил-1-пиперазинилсульфонил)-фенил]-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он;
5-[2-aллилoкcи-5-(4-мeтил-1-пипepaзинилcyльфoнил)-фенил]-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он;
5-{2-этокси-5-[4-(2-пропил)-1-пиперазинилсульфонил]фенил}-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он;
5-{2-этокси-5-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинилсульфонил]фенил}-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он;
5-{5-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинилсульфонил]-2-Н-пропоксифенил}-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он;
5-[2-этокси-5-(4-метил-1-пиперазинилкарбонил)-фенил]-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он;
и 5-[2-этокси-5-(1-метил-2-имидазолил)фенил]-1-метил-3-Н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразол[4,3-d]пиримидин-7-он.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли, способы их приготовления, способы испытаний in vitro для определения ингибирующего действия на цГМФ ФДЭ и цАМФ ФДЭ, их фармацевтические композиции и способы введения для использования человеком описаны в ЕР-А-0463756 и ЕР-А-0526004.
Предварительные исследования были выполнены с целью выделения и характеризации циклического нуклеотида ФДЭз пещеристого тела человека, расслабление которого ведет к эрекции пениса. Изучение специфичности субстрата, ответа на активаторы и чувствительности к ингибиторам продемонстрировало, что пещеристое тело человека содержит три различных фермента ФДЭ.
МЕТОДЫ
Свежий замороженный человеческий пенис был получен из ПАМ (Штат Пенсильвания). Ткань размораживают при комнатной температуре, пещеристое тело отделяют от пениса, чтобы получить приблизительно 2-4 г ткани, и осуществляют выделение следующим образом.
Ткани грубо размалывают в холодном изотоническом буфере, смешанном со льдом (35 мл), содержащем 250 мМ сахарозы, 1 мМ EDTA, 0,5 мМ PMSF и 20 мМ HEPES, рН 7,2, и смесь подвергают короткой (1 мин) обработке миксером/эмульгатором Silversen. Гомогенаты приготовляют, используя пробирки гомогенизатора с тефлоновым пестиком, и растворимую фракцию приготовляют центрифугированием при 100000 g в течение 60 мин при 4°С.
10 мл высокоскоростного супернатанта вводят в анионообменную колонку Pharmacia Mono Q (объем набивки 1 мл), уравновешивая буфером, содержащим 1 мМ EDTA, 0,5 мМ PMSF и 20 мМ HEPES, рН 7,2 (хроматографический буфер). Затем колонку промывают 5 объемами набивки хроматографического буфера, после которого ФДЭзы элюируют, используя непрерывный градиент 0-500 мМ NaCl (общий объем 35 мл), и собирают 1 мл фракции.
2
Фракции из колонки тестируют на активность ФДЭ, используя 500 нМ цГМФ или 500 нМ цАМФ как субстрат. Активность цАМФ ФДЭ также определяют в присутствии 1 мкМ немеченного цГМФ, и активность ФДЭ отбираемых фракций определяют в присутствии 10 мМ CaCl и 10 ед/мл бычьего мозгового кальмодулина. Соответствующие фракции объединяют и хранят при 4°С в течение курса изучения.
-10
-4
50
Изучение ингибирования повсюду выполняется, используя субстрат с концентрацией 500 нМ. Все ингибиторы растворяют в ДМСН (диметилсульфоксид),и кривые концентрационной зависимости ответа строят в диапазоне от 3×10 до 1×10 M как полулогарифмические увеличения. Значения IC рассчитывают, используя S-образную кривую, подогнанную по алгоритму биостат.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Растворимые ФДЭзы пещеристого тела человека разделяются на три различные фракции по активности. Первая фракция I (обозначенная по порядку элюирования) представляет собой большую часть представленного ФДЭ и является высоко селективной по отношению к цГМФ как субстрату.
Эта фракция, как обнаружено, является нечувствительной к стимуляции кальцием/кальмодулином и классифицируется как ФДЭу. Фракция II гидролизирует цГМФ и цАМФ с активностью последнего, стимулируемой в присутствии цГМФ, и классифицируется как ФДЭII, в то время как фракция III является селективной по отношению к цАМФ, и эта активность ингибируется в присутствии цГМФ и является совместимой с ФДЭIII активностью.
v
III
II
Чтобы далее характеризовать изоферменты ФДЭ, присутствующие в ткани, выполняют изучение, используя разнообразные ингибиторы. Изучение ингибиторов с фракциями I и II выполняют, используя цГМФ как субстрат, в то время как фракция III изучается, используя цАМФ. Это изучение подтверждает, что фракция I соответствует ФДЭ, в то время как фракция III четко идентифицируется как ФДЭ; фракция II (ФДЭ) относительно нечувствительна ко всем изучаемым ингибиторам.
v
II
III
Как резюме, вышеупомянутые исследования определили три изофермента ФДЭ в ткани пещеристого тела человека. Преобладающая ФДЭ является цГМФ-специфичной ФДЭ, хотя цГМФ, стимулируемая цАМФ ФДЭ, и цГМФ, ингибируемая цАМФ ФДЭ, также присутствуют.
v
50
v
II
III
50
Соединения изобретения были исследованы in vitro и, как обнаружено, являются мощными и селективными ингибиторами цГМФ - специфичной ФДЭ. Например, одно из наиболее предпочтительных соединений изобретения имеет IC=6,8 нМ v. по ферменту ФДЭ, но демонстрирует только слабую ингибирующую активность по отношению к ферментам ФДЭ и ФДЭ с IС, равной или более 100 µM и 34 µМ, соответственно.
Таким образом, расслабление ткани пещеристого тела и последующая эрекция пениса, возможно, вызывается повышением уровней цГМФ в упомянутой ткани на основании ингибирующей зависимости ФДЭ соединений изобретения.
Кроме того, ни одно из соединений изобретения, проверенных на крысе и на собаке, оба интравенозно (ид) и орально (о.) при дозах до 3 мг/кг, не показало никаких явных признаков неблагоприятной острой токсичности. У мышей не произошло смертных случаев после доз до 100 мг/кг и.в. Определенные наиболее предпочтительные соединения не показали никакого токсического влияния при хроническом приеме о. у крысы до 10 мг/кг и у собаки до 20 мг/ кг.
У человека определенные наиболее предпочтительные соединения проверялись орально как в единичной дозе, так и при многократных приемах добровольцами. Кроме того, изучение пациентов, проводимое до настоящего времени, подтверждает, что одно из наиболее предпочтительных соединений стимулирует эрекцию пениса у мужчин-импонентов.
Хотя соединения изобретения предусмотрены, прежде всего, для лечения дисфункции эрекции или мужской сексуальной дисфункции, их можно также применять для лечения женской сексуальной дисфункции, включая дисфункцию оргазма, связанную с клиторальными расстройствами.
Вообще, у человека оральный прием соединений изобретения является предпочтительным способом употребления, являющимся наиболее удобным и исключающим неудобства, связанные с и.к. введением. Предпочтительной схемой приема лекарственного средства для типичного человека является от 5 до 75 мг соединения, три раза ежедневно.
В обстоятельствах, когда пациент страдает от расстройств глотания или от ослабленного всасывания лекарства после орального приема, лекарство может назначаться парентерально, например, под язык или за щеку.
Для ветеринарного использования соединения формулы (I) или его нетоксичная соль вводится как соответствующий приемлемый препарат в соответствии с нормальной ветеринарной практикой, и ветеринарный врач будет определять режим дозировки и способ введения, который будет больше всего соответствовать конкретному животному-самцу.
Таким образом, изобретение включает фармацевтическую композицию для лечения или профилактики дисфункции эрекции у животного-самца, включая человека, содержащую соединение формулы (I), или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Далее обеспечивается способ для получения фармацевтической композиции для лечения или профилактики дисфункции эрекции животного-самца, включая человека, включающей соединение формулы (I), или его фармацевтически приемлемой соли, с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Изобретение также обеспечивает способ лечения или предотвращения у животных-самцов, включая человека, дисфункции эрекции, который включает лечение упомянутого животного-самца эффективным количеством соединения формулы (I), или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей это вещество.
Изобретение также включает применение ингибитора цГМФ ФДЭ, или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей это вещество, для орального лечения дисфункции эрекции у человека.
Изобретение также включает способ орального лечения или предотвращения дисфунции эрекции у человека, который включает лечение орально эффективным количеством ингибитора цГМФ ФДЭ, или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей это вещество.
Кроме того, изобретение включает применение ингибитора цГМФ ФДЭ, или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей это вещество, для получения лекарства орального для лечения или профилактики дисфункции эрекции у человека.