СПОСОБ БЫСТРОЙ ОПТИМИЗАЦИИ ТРОМБОПЛАСТИНООБРАЗОВАНИЯ У НОВОРОЖДЕННЫХ ПОРОСЯТ С АНЕМИЕЙ
METHOD OF FAST OPTIMISATION OF THROMBOPLASTIN FORMATION IN NEWBORN PIGLETS WITH ANEMIA

Изобретение относится к биологии и ветеринарии.
Аналогов предлагаемого способа нормализации тромбопластинообразования у новорожденных поросят с анемией не существует.
Имеются сведения о применении при анемии у поросят ферроглюкина (Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных. Под ред. В.М.Данилевского. М.: Агропромиздат, 1991. - 576 с.).
В качестве эффективных стимуляторов жизнедеятельности растущего организма в современной ветеринарии применяются полизон - фосфорнокислая соль 2-амино-4-метилтио-(S-оксо-S-амино)-масляной кислоты, представляет собой слаборастворимый в воде порошок от белого до кремового цвета (Овчинников А. и др. Полизон - стимулятор роста // Птицеводство, 2006. - №12. - с.14-15) и крезацин - производный ароксиалкилкарбоновых кислот. Он представляет собой белый кристаллический порошок, хорошо растворимый в воде, со слабым специфическим запахом, сладковато-горьковатого вкуса. Он проявляет эффективное стимулирующее действие на живые организмы, повышая выживаемость человека и животных в неблагоприятных и экстремальных условиях, стимулируя или нормализуя жизненные процессы (Байматов В.Н., Латыпов М.М. Влияние крезацина на состояние птицы. Ветеринария, 2006, №11, с.49-51).
Однако никогда ранее лечебный комплекс, состоящий из ферроглюкина, полизона и крезацина, не применялся у новорожденных поросят с анемией с целью нормализации повышенного у них тромбопластинообразавания.
Целью изобретения является нормализация тромбопластинообразования у новорожденных поросят с анемией.
Сущность заявляемого способа заключается в том, что для нормализации тромбопластинообразования новорожденным поросятам с анемией назначается ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, полизон 5 мг/кг и крезацин 5 мг/кг, включенные в схему выпаивания на 7 суток.
Способ позволяет нормализовать тромбопластинообразование у новорожденных поросят с анемией через 3 дня после окончания лечения. В последующем у данных поросят тромбопластинообразование находится на нормальном уровне, что позволит существенно оздоровить поголовье свиней, нормализовать привесы, уменьшить их патологическую отягощенность, сократить падеж и повысить качество полученной мясной продукции.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
Образование эндогенного тромбопластина определяется по Biggs R., Douglas A.S., Macparlane R.G. The formation of thromboplastin in human blood. // J. Physiol. 1953. - vol.119, №1. - p.89-104.
Принцип метода. Активность и время образования тромбопластина из компонента пластинок, депротромбинизированной плазмы и сыворотки исследуемой крови по тромбиновому времени тест-плазмы в одноминутных интервалах. При инкубации этой смеси с кальцием в течение 3-6 мин образуется высокоактивный тромбопластин.
Для определения эндогенного тромбопластина необходимы следующие инградиенты:
1. суспензия тромбоцитов;
2. депротромбинизированная плазма;
3. сыворотка;
4. хлористый кальций.
Реактивы:
1. 0,1 м раствор оксалата натрия;
2. 1/40 м раствор хлористого кальция;
3. 0,15 м суспензии сульфата бария;
4. физиологический раствор.
В силиконированную пробирку, которая содержит 0,6 мл 0,1 м раствора оксалата натрия, набирают из вены сухой иглой 5,4 мл крови. Осторожно содержимое пробирки смешивают. Одновременно в другую пробирку берут 1-2 мл крови, из которой потом получают сыворотку.
Приготовление суспензии тромбоцитов: оксалатную кровь в силиконовой пробирке центрифугируют в течение 5-7 мин при 1500 об/мин. Плазму отсасывают силиконовой пипеткой в другую силиконированную или пластикатную пробирку. Плазму, обогащенную тромбоцитами, центрифугируют в течение 30 мин при 3000 об/мин. Тромбоциты оседают на дно пробирки. Плазму, которая практически не содержит тромбоцитов, отсасывают в отдельную пробирку, а к тромбоцитам добавляют физиологический раствор, осторожно смешивают и снова центрифугируют в течение 30 мин при 3000 об/мин физиологический раствор отсасывают и процедуру отмывания тромбоцитов повторяют еще раз. После двукратного промывания тромбоцитов к осадку их добавляют физиологический раствор, по объему равный 1/3 количества оксалатной плазмы, взятой для центрифугирования. Содержимое хорошо смешивают, получая рабочую суспензию тромбоцитов.
Приготовление раствора депротромбинизированной плазмы: 0,5-1 мл плазмы, не содержащей тромбоцитов, которая была собрана после центрифугирования в течение 30 минут при 3000 об/мин, депротромбинизируют суспензией барий-сульфата, как было описано выше. Депротромбинизированную плазму разбавляют физиологическим раствором в соотношении 1:4.
Приготовление раствора сыворотки: 1-2 мл венозной крови, взятой в сухую пробирку, ставят на водяную баню при 37°C на 2 часа. Сыворотку отделяют от сгустка крови путем центрифугирования и разбавляют ее физиологическим раствором в соотношении 1:8.
Методика теста: в ряд агглютинационных пробирок (7-8) на водяной бане при 37°C вносят по 0,1 мл плазмы, не содержащей тромбоцитов, которая осталась после центрифугирования в течение 30 минут при 3000 об/мин (часть этой плазмы взята для депротромбинизации). Отдельно в пустую пробирку, также на водяной бане, наливают 0,3 мл суспензии тромбоцитов, 0,3 мл раствора депротромбинизированной плазмы, 0,3 мл раствора сыворотки, 0,3 мл 1/40 м раствора хлористого кальция и включают секундомер. Через каждую минуту 0,1 мл указанной смеси и 0,1 мл 1/40 м раствора хлористого кальция одновременно вносят в одну из ряда пробирок, которая содержит плазму без тромбоцитов и включают другой секундомер. Встряхивая пробирку, отмечают время свертывания плазмы. Ежеминутное исследование продолжают до тех пор, пока тромбиновое время плазмы не станет максимально коротким. Это время характеризует активность тромбопластина, а минута, на которой свернулась смесь, является временем образования тромбопластина. В норме тромбопластин образуется на 2-4 минуте, а его активность равна 12-14 секундам.
При регистрации ускорения образования и/или повышении активности тромбопластина у новорожденных поросят с анемией предлагаемый лечебный комплекс, состоящий из ферроглюкина по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, полизона 5 мг/кг и крезацина 5 мг/кг, включенных в схему выпаивания на 7 суток.
Данный комплекс нормализует тромбопластинообразование через 3 дня после завершения лечения, что является основой оздоровления стада, снижения падежа и залогом повышения качества получаемой мясной продукции.
12
Пример. У новорожденного поросенка №2 с анемией было выявлено нарушение эритропоэза и признаками снижения уровня содержания железа в его организме (сывороточное железо 11,7 мкмоль/л, сидероциты 1,1% при количестве гемоглобина у него 81,2 г/л, эритроцитов - 4,03×10/л.
Утром была взята кровь из вены и определено время образования и активность тромбопластина, составивших 1,3 мин и 10,0 сек, соответственно. Поросенку был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, полизон 5 мг/кг и крезацин 5 мг/кг, включенные в схему выпаивания на 7 суток.
12
Через 3 дня по окончании лечения у поросенка достигнута нормализация красной крови - сывороточное железо 23,6 мкмоль/л, сидероциты 8,9%, при количестве гемоглобина у него 126,0 г/л, эритроцитов - 5,16×10/л). Активность и время образования тромбопластина нормализовались, составляя 12 сек и 2,9 мин, соответственно. В последующем достигнутые показатели у поросенка не испытывали отрицательной динамики.
Использование предлагаемого способа нормализации тромбопластинообразования в биологии и ветеринарии поможет оздоровить стадо свиней, увеличить у них привесы, сократить падеж и получать в последующем от этих животных здоровое потомство.