Способ оценки угрозы для формирования органов плода при увеличении в плаценте содержания 11-дезоксикортизола на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции
METHOD FOR ASSESSING THE THREAT TO THE FORMATION OF FETAL ORGANS WITH AN INCREASE IN THE PLACENTA CONTENT OF 11-DEOXYCORTISOL IN THE THIRD TRIMESTER OF GESTATION WITH EXACERBATION OF CYTOMEGALOVIRUS INFECTION

1. Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа, позволяющего оценить влияние содержания 11-дезоксикортизола в плаценте беременной на фоне обострения на третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции.
2. Уровень техники
11-дезоксикортизол гормон коры надпочечников, являющийся предшественником гормона кортизола [4]. Если в крови накапливается 11-дезоксикортизол, то содержание кортизола при этом резко снижается. Хотя кортизол и не относится к половым гормонам, но в период беременности он выполняет большую роль [3, 5, 7]. Кортизол считается главным катаболическим гормоном, обеспечивающим необходимый уровень энергетического обмена в организме беременной [6-8, 10]. Кортизол обеспечивает распад гликогена до глюкозы, повышая в крови ее уровень, необходимый для организма как питательный резерв. Нормальный уровень кортизола в начале первого триместра беременности составляет 206,0±2,35 нмоль/л, а в дальнейшем его количестве при нормально протекающей беременности увеличивается, достигая на третьем триместре гестации 730-850 нмоль/л. Снижение уровня кортизола в крови беременной подавляет энергетическую работу организма матери и плода, снижает вес плода в связи с недостатком энергетического материала в организме матери [9]. Развивается фетоплацентарная недостаточность, что отражается на формировании плода в период гестации, выражающаяся в гипотрофии плода и снижении веса новорожденного.
В доступной литературе имеются упоминания об исследовании содержания 11-дезоксикортизола радиоиммунологическим методом и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в сыворотке и плазме крови и моче для диагностики заболеваний гипофизарно-надпочечниковой системы [1, 2]. При беременности содержание 11-дезоксикортизола анализируется в амниотической жидкости плода радиоиммунологическим методом. Для изучения синтеза кортизола в плаценте содержание 11-дезоксикортизола определяется радиоиммунологическим методом в крови пуповины и сосудах матки [3]. Недостатком вышеупомянутых методов является длительное время анализа, необходимость дорогостоящей регистрирующей аппаратуры и реактивов: радиоактивных веществ, имеющих короткий срок хранения; соблюдение усиленных мер по технике безопасности, связанных с радиационным риском для персонала и окружающей среды, трудоемкость выполнения исследований. Биохимические и иммунологические методы не дают представления о месте локализации вещества.
В отличие от вышеприведенных прототипов в данной работе имеются существенные отличия: 1. Анализ содержания 11-дезоксикортизола проводится с помощью иммуноферментной реакции. В качестве субстрата, для которого используется 11-дезоксикортизол. 2. Изменения содержания 11-дезоксикортизола происходят под влиянием обострения цитомегаловирусной инфекции во время беременности. Метод прост в исполнении, не требует дорогостоящих реактивов, обладает хорошей разрешающей способностью и может быть рекомендован в проведении научно-исследовательских работ и лабораторной диагностики.
3. Осуществление изобретения
3.1. Обследованы 37 беременных женщин 18-25 лет с обострением хронической цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации, контрольную группу составили 30 беременных женщин с хронической цитомегаловирусной инфекцией в латентной стадии. У беременных женщин симптоматически цитомегаловирусная инфекция проявлялась в виде острого респираторного заболевания, сопровождающегося ринофарингитом. Клинический диагноз (обострение хронической цитомегаловирусной инфекции) устанавливается по результатам комплексного исследования периферической крови на наличие ДНК цитомегаловируса, IgM или увеличение титра антител IgG в парных сыворотках в 4 раза и более в динамике через 10 суток, а также индекса авидности более 65%. Исследования проводят с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в РФ, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.
3.2. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществляют методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), ДНК ЦМВ выявляют методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).
3.3. Концентрация 11-дезоксикортизола в гомогенате плаценты определяли иммунохимическим методом. Реагент - 11-deoxycortisol (фирма «Sigma», (США). Одновременно в гомогенате плаценты иммунохимическим методом определяли и содержание кортизола. Исследования проводили на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США).
4. Полученные данные
Исследования показали, что при обострении цитомегаловирусной инфекции с титром антител класса G к ЦМВ в гомогенате плаценты увеличивалось содержание 11-дезоксикортизола до 600,0±23,0 нмоль/л при значительном снижении кортизола до 250,0±12,0 мг/л; контроль - 540,0±18,0 мг/л. Таким образом, при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации резко увеличивается содержание предшественника кортизола - 11-дезоксикортизола и снижается содержание кортизола. В складывающихся условиях снижается в организме беременной энергетический обмен и нарушается питание плода, что приводит к формированию у таких плодов гипотрофии и развития фетоплацентарной недостаточности. Вес новорожденных снижался до 2300±35,0 г.
Пример
Беременная О. 24 года. Первородящая. На третьем триместре перенесла обострение цитомегаловирусной инфекции. В периферической крови отмечено повышение 11-дезоксикортизола до 540 мкг/л и снижение кортизола до 220 мкг/л. Роды прошли во время. Однако новорожденный был весом 2350 г, то есть развивалась недостаточность развития плода в силу снижения энергетического обмена и формировании фетоплацентарной недостаточности.
Литература
1. Великанова Л.И. Лабораторная диагностика различных форм гиперандрогении // Справочник заведующего КДЛ. 2014. №5. С. 26-34.
2. Гончаров Н.П., Кация Г.В., Бутнев В.Ю., Воронцов В.И., Хагундокова Л.Б., Веземан Р. Применение радиоиммунного метода определения 11-дезоксикортизола для оценки функции системы гипофиз-кора надпочечников в условиях метопиронового теста // Вопросы медицинской химии. 1988. Т. 34, Вып. 1. С. 130-134.
3. Clapp J.F., Thabault N.C., Hubel С.А., McLaughlin M.K., Auletta F.J. Ovine placental Cortisol production // Endocrinology. 1982. Vol. Ill, №5. P. 1728-1730.
4. 11-deoxycortisol is a corticosteroid hormone in the lamprey. This article has been cited by other articles in PMC.
5. Feng X., Reini S., Richards E., Wood C. Cortisol stimulates proliferation and apoptosis in the late gestation heart: differential effects of mineralocorticoid and glucocorticoid receptors // Amer. J. Physiol. Regul Integr Сотр. Physiol. 2013. 305: R343-R350.
6. Jensen E., Wood C, Keller - Wood M. The normal increase in adrenal secretion during pregnancy contributes to material volume expansion and fetal homeostasis // J. Soc. Gynecol. Investig 9: 2002. 362-371.
7. Jensen E., Wood C, Keller - Wood M. Chronic alteration in ovine material corticosteroid levels influence uterine blood flow and placental and fetal growth // Amer. J. Physiol. Regul. Integr. Сотр. Physiol. 2005. 228: R54-R61.
8. Kawai A., Kuzuja N. On the role of glucocorticoid in glucose-induced insulin secretion // Horm Metab. Res. 9: 361-365, 1977.
9. Mommsen Т., Vijan M., Moon T. Cortisol in teleosts: dynamics, mechanisms of action and metabolic regulation // Rev Fish Biol. 1999. 9. 211-268.
10. Trainer P. Corticosteroids and pregnancy // Semin Reprod Med. 2002. 20: 375-380.