СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНОВ HAEMOPHILUS INFLUENZAE ТИПА В

1. Способ получения в промышленном масштабе капсулярного полисахарида Haemophilus influenzae типа b (PRP), предназначенного для вакцинальных целей, согласно которому культивируют штамм Haemophilus influenzae типа b (Hib) в культуральной среде, собирают супернатант культуры, который обрабатывают для экстрагирования капсулярного полисахарида, причем указанная культуральная среда содержит по меньшей мере:
один источник углерода,
протопорфирин,
соли,
аминокислоты,
NAD или NADH,
витамины,
средства регулирования pH,
отличающийся тем, что указанная культуральная среда является средой с заданным химическим составом и содержит по меньшей мере цинк.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные средства регулирования pH состоят из буферных солей.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанных источников углерода может быть несколько, и они могут быть выбраны из: глюкозы, фруктозы, галактозы, глицерина, ксилозы, рибозы, фукозы, сиаловой кислоты, лактата.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный протопорфирин представляет собой синтетический протопорфирин IX.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные соли выбраны из солей калия, магния, натрия, кальция, железа, цинка, кобальта и марганца.
2
4
2
4
4
2
2
4
2
2
4
2
2
2
4
2
4
2
2
2
4
2
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные соли выбраны из KHPO, KHPO, MgSO·7HO, NaHPO·12HO, NaHPO·2HO, CaCl·2HO, FeSO·7HO, ZnSO·7HO, CoCl·6HO, MnSO·HO.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные аминокислоты выбраны из:
аргинина,
аланина,
по меньшей мере одного из: аспарагина, глутамина, аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты,
лизина,
гистидина,
триптофана,
валина,
изолейцина,
лейцина,
тирозина,
фенилаланина,
цистина или эквивалента.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная культуральная среда содержит по меньшей мере аргинин, аланин, гистидин, триптофан, тирозин, фенилаланин, цистин, аспарагиновую кислоту и глутаминовую кислоту.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная культурная среда включает по меньшей мере:
- аргинин,
- аланин,
- гистидин,
- триптофан,
- тирозин,
- фенилаланин,
- цистеин или глутатион,
- аспарагиновую кислоту и
- глутаминовую кислоту.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные витамины выбраны из: тиамина, пантотената, урацила, пироксантина, биотина, рибофлавина и пиридоксина.
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что культурная среда содержит цитруллин.
12. Способ по п. 1, отличающийся тем, что он дополнительно включает стадию конъюгирования полученного капсулярного полисахарида с белком-носителем.
13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что он дополнительно включает стадию конъюгирования полученного капсулярного полисахарида со столбнячным анатоксином.
14. Применение капсулярного полисахарида, полученного по любому пп. 1-13, для получения вакцинной композиции.
15. Способ получения вакцинной композиции, согласно которому:
a) готовят в промышленном масштабе антиген к Haemophilus influenzae типа b (Hib), состоящий из капсулярного полисахарида (PRP), путем культивирования штамма Hib в среде с заданным химическим составом, природа и количество каждого компонента которой являются вполне определенными, и которая содержит по меньшей мере:
источник углерода,
протопорфирин,
соли,
аминокислоты,
NAD или NADH,
витамины,
цинк,
а также средства регулирования pH,
b) собирают супернатант культуры, который обрабатывают для экстрагирования очищенного капсулярного полисахарида,
c) конъюгируют капсулярный полисахарид, полученный на стадии b), с белком-носителем,
d) комбинируют конъюгат, полученный на стадии c), с по меньшей мере одним или несколькими антигенами, предназначенными для вакцинации против одной или нескольких следующих инфекций: дифтерии, столбняка, полиомиелита, гепатита B, ветряной оспы, свинки, краснухи, инфекций, вызванных Neisseria meningitidis или Streplococcus pneumoniae, инфекций, вызванных ротавирусом, для получения вакцинной комбинации, позволяющей одновременную иммунизацию от нескольких болезней.
16. Способ получения вакцинной композиции по п. 15, отличающийся тем, что конъюгат, полученный на стадии c), комбинируют с антигенами дифтерии, столбняка, гепатита B.
17. Способ получения вакцинной композиции по п. 15, отличающийся тем, что конъюгат, полученный на стадии c), комбинируют с дифтерийным анатоксином, столбнячным анатоксином, бесклеточными антигенами Bordetella pertussis в числе 2 (анатоксин и нитевидный гемагглютинин).
18. Способ получения вакцинной композиции по п. 15, отличающийся тем, что конъюгат, полученный на стадии c), комбинируют с дифтерийным анатоксином, столбнячным анатоксином, бесклеточными антигенами Bordetella pertussis в числе 3 (анатоксин, пертактин и нитевидный гемагглютинин).
19. Способ получения вакцинной композиции по п. 15, отличающийся тем, что конъюгат, полученный на стадии c), комбинируют с дифтерийным анатоксином, столбнячным анатоксином, бесклеточными антигенами Bordetella pertussis в числе 5 (анатоксин, пертактин, агглютиногены и нитевидный гемагглютинин).
20. Способ получения вакцинной композиции по п. 15, отличающийся тем, что конъюгат, полученный на стадии c), комбинируют с дифтерийным анатоксином, столбнячным анатоксином, бесклеточными антигенами Bordetella pertussis в числе 2, 3 или 5, а также с инактивированными вирусами полиомиелита типа 1, 2 и 3.
21. Способ получения вакцинной композиции по п. 15, отличающийся тем, что конъюгат, полученный на стадии c), комбинируют с дифтерийным анатоксином, столбнячным анатоксином, гепатитом B, бесклеточными антигенами Bordetella pertussis в числе 2, 3 или 5, а также с инактивированными вирусами полиомиелита типа 1, 2 и 3.
22. Способ получения вакцинной композиции по п. 15, отличающийся тем, что конъюгат, полученный на стадии c), комбинируют с целой бактерией Bordetella pertussis.