ПЛАСТИНА С ВИСЯЧИМИ КАПЛЯМИ

1. Пластина с висячими каплями (1; 3; 5; 6; 9), содержащая заданное число ячеек для капли (10; 30; 50; 60; 90), каждая ячейка способна принимать каплю (20; 21; 40; 41; 42; 60; 61; 52; 63; 64) жидкости, соответствующая ячейка для капли (10; 30; 50; 60; 90) содержит круговой микрожидкостный смачивающий барьер (102; 302; 502; 702; 902), выполненный с возможностью окружения соответствующей полости (100; 500) и предотвращающий растекание капли за пределы микрожидкостного смачивающего барьера,
при этом соответствующая ячейка для капли (10; 30; 50; 60; 90) содержит закрытое дно (101; 501) и, по меньшей мере, один дополнительный круговой микрожидкостный смачивающий барьер (104; 304; 306; 504; 506; 508; 510; 604; 606; 904; 906), каждый дополнительный круговой микрожидкостный смачивающий барьер (104; 304; 306; 504; 506; 508; 510; 604; 606; 904; 906) выполнен с возможностью окружения предыдущего кругового микрожидкостного смачивающего барьера (102; 302; 304; 502; 504; 506; 508; 604; 606; 904; 906), а смачиваемый участок (103; 303; 305; 503; 505; 507; 509) расположен между двух рядом расположенных микрожидкостных смачивающих барьеров.
2. Пластина по п.1, в которой соответствующими ячейками для капли являются лунки (10; 30; 60; 90).
3. Пластина по п.1 или 2, в которой круговой микрожидкостный смачивающий барьер содержит круговую кромку (102), при этом, по меньшей мере, один дополнительный круговой микрожидкостный смачивающий барьер содержит, по меньшей мере, одну дополнительную круговую кромку (104), каждая дополнительная круговая кромка (104) выполнена с возможностью окружения предыдущей круговой кромки (102), а смачиваемый участок (103) расположен между двух рядом расположенных круговых кромок (102; 104).
4. Пластина по п.3, в которой две соседние круговые кромки (102; 104) расположены в виде ступеней.
5. Пластина по п.1 или 2, в которой круговой микрожидкостный смачивающий барьер содержит круговой ободок (302; 502; 602; 902) при этом, по меньшей мере, один дополнительный круговой микрожидкостный смачивающий барьер содержит дополнительный круговой ободок, каждый дополнительный круговой ободок (304; 306; 504; 506; 508; 510; 604; 606; 904; 906) окружает предыдущий круговой ободок (302; 304; 502; 504; 506; 508; 602; 604; 902; 904), а смачиваемый участок (303; 305; 503; 505; 507; 509) расположен между двух рядом расположенных круговых ободков.
6. Пластина по п.5, в которой рядом расположенные круговые ободки (302; 304; 306; 602; 604; 606; 902; 904; 906) расположены в виде ступеней.
7. Пластина (6; 9) по п.2, в которой пластина с висячими каплями выполнена из отдельно изготовленной пластины (61; 91), имеющей заданное число отверстий (610; 910), и из соответствующего заданного числа отдельно изготовленных лунок (60; 90), образующих ячейки для капли, каждая отдельно изготовленная лунка запрессована в соответствующее отверстие (610; 910) отдельно изготовленной пластины (61; 91).
8. Пластина (6; 9) по п.3, в которой пластина с висячими каплями выполнена из отдельно изготовленной пластины (61; 91), имеющей заданное число отверстий (610; 910), и из соответствующего заданного числа отдельно изготовленных лунок (60; 90), образующих ячейки для капли, каждая отдельно изготовленная лунка запрессована в соответствующее отверстие (610; 910) отдельно изготовленной пластины (61; 91).
9. Пластина (6; 9) по п.4, в которой пластина с висячими каплями выполнена из отдельно изготовленной пластины (61; 91), имеющей заданное число отверстий (610; 910), и из соответствующего заданного числа отдельно изготовленных лунок (60; 90), образующих ячейки для капли, каждая отдельно изготовленная лунка запрессована в соответствующее отверстие (610; 910) отдельно изготовленной пластины (61; 91).
10. Пластина (6; 9) по п.5, в которой пластина с висячими каплями выполнена из отдельно изготовленной пластины (61; 91), имеющей заданное число отверстий (610; 910), и из соответствующего заданного числа отдельно изготовленных лунок (60; 90), образующих ячейки для капли, каждая отдельно изготовленная лунка запрессована в соответствующее отверстие (610; 910) отдельно изготовленной пластины (61; 91).
11. Пластина (6; 9) по п.6, в которой пластина с висячими каплями выполнена из отдельно изготовленной пластины (61; 91), имеющей заданное число отверстий (610; 910), и из соответствующего заданного числа отдельно изготовленных лунок (60; 90), образующих ячейки для капли, каждая отдельно изготовленная лунка запрессована в соответствующее отверстие (610; 910) отдельно изготовленной пластины (61; 91).
12. Пластина (6; 9) по п.7, в которой отдельно изготовленные лунки (60; 90) запрессованы в отверстия (610; 910) со стороны пластины (6; 9), образующей внешнюю поверхность (611; 911) пластины (6; 9).
13. Пластина (6; 9) по п.8, в которой отдельно изготовленные лунки (60; 90) запрессованы в отверстия (610; 910) со стороны пластины (6; 9), образующей внешнюю поверхность (611; 911) пластины (6; 9).
14. Пластина (6; 9) по п.9, в которой отдельно изготовленные лунки (60; 90) запрессованы в отверстия (610; 910) со стороны пластины (6; 9), образующей внешнюю поверхность (611; 911) пластины (6; 9).
15. Пластина (6; 9) по п.10, в которой отдельно изготовленные лунки (60; 90) запрессованы в отверстия (610; 910) со стороны пластины (6; 9), образующей внешнюю поверхность (611; 911) пластины (6; 9).
16. Пластина (6; 9) по п.11, в которой отдельно изготовленные лунки (60; 90) запрессованы в отверстия (610; 910) со стороны пластины (6; 9), образующей внешнюю поверхность (611; 911) пластины (6; 9).
17. Пластина по п.2, содержащая 24 лунки, 96 лунок или 384 лунки.
18. Пластина по п.5, в которой круговые ободки (503; 504; 506; 508; 510) расположены на плоской поверхности.
19. Комплект пластин с висячими каплями, содержащий пластину (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями по любому из п.1-18, имеющий заданное число ячеек (10; 30; 50; 60; 90) или лунок для капли, и принимающую пластину (7), имеющую число лунок (70), соответствующее заданному числу ячеек (10; 30; 50; 60; 90) или лунок для капли пластины с висячими каплями, пластина (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями и принимающая пластина (7) смонтированы таким образом, чтобы в собранном состоянии лунки (70) принимающей пластины были выровнены с ячейками (10; 30; 50; 60; 90) или лунками для капли пластины с висячими каплями.
20. Способ тестирования вещества на токсичность по отношению к клеткам, содержащий этапы, на которых:
a) вводят заданное число капель (20; 40; 64) жидкости в соответствующее число ячеек (10; 30; 50; 60; 90) для капли пластины (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями, каждая капля содержит заданный объем вещества, подлежащего тестированию, и жидкой питательной среды, а также множество клеток (82);
b) переворачивают и производят инкубацию пластины (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями в течение заданного периода времени, при этом пластина с висячими каплями содержит капли (20; 40; 64) таким образом, чтобы они свисали из соответствующих ячеек (10; 30; 50; 60; 90) для капли, чтобы дать возможность клеткам (82) сформировать трехмерные клеточные совокупности (83) в соответствующих каплях (20; 40; 64);
c) осуществляют подачу дополнительной жидкой питательной среды в капли (20; 40; 64) в соответствующих ячейках (10; 30; 50; 60; 90) для капли с целью содействия росту трехмерных клеточных совокупностей (83); и
d) производят анализ трехмерных клеточных совокупностей (83), чтобы оценить, является ли вещество, подлежащее тестированию, токсичным для трехмерных клеточных совокупностей (83), при этом используется пластина (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями по любому из предыдущих пунктов; и
при этом этап с) выполняют путем повторного переворачивания пластины (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями, добавления капли дополнительной жидкой питательной среды в соответствующие капли, содержащие трехмерные клеточные совокупности, чтобы образовать соответствующие капли (21; 41; 42; 65; 66; 67; 68) большего размера в соответствующих ячейках (10; 30; 50; 60; 90) для капли, и затем, снова переворачивая пластину (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями, чтобы дать возможность трехмерным клеточным совокупностям (83) вырасти в соответствующие капли (21; 41; 42; 65; 66; 67; 68) большего размера, свисающие из ячеек (10; 30; 50; 60; 90) для капли.
21. Способ по п.20, дополнительно содержащий следующие этапы, на которых:
e) переносят выращенные трехмерные клеточные совокупности (83) из ячеек (10; 30; 50; 60; 90) для капли пластины (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями в соответствующее число лунок (70) принимающей пластины (7);
f) производят инкубацию принимающей пластины (7) с лунками (70), содержащими трехмерные клеточные совокупности (83) в течение дополнительного периода времени; и
g) после инкубации осуществляют анализ трехмерных клеточных совокупностей, чтобы оценить, является ли вещество, подлежащее тестированию, токсичным по отношению к трехмерным клеточным совокупностям.
22. Способ по п.21, в котором этап е) выполняют путем сборки пластины (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями и принимающей пластины (7) таким образом, чтобы соответствующие лунки (70) принимающей пластины (7) располагались напротив соответствующих ячеек (10; 30; 50; 60; 90) для капли пластины (1; 3; 5; 6; 9) с висячими каплями, и посредством последующего центрифугирования собранных пластин.
23. Способ по любому из пп. 21 или 22, в котором клетками (82) являются эмбриональные стволовые клетки, а трехмерными клеточными совокупностями (83) являются эмбриоидные тела, при этом этап анализа трехмерных клеточных совокупностей (83) для оценивания, является ли вещество, подлежащее тестированию, токсичным по отношению к трехмерными клеточными совокупностям, выполняется анализом того, содержат ли эмбриоидные тела миокардиальные клетки.