ГИБРИДНЫЕ БЕЛКИ И СПОСОБЫ СТИМУЛЯЦИИ РОСТА РАСТЕНИЙ, ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ И ИММОБИЛИЗАЦИИ СПОР BACILLUS НА РАСТЕНИЯХ

1. Способ стимулирования роста растений, включающий введение рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus, экспрессирующего гибридный белок в среде для роста растений, или применение рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus, экспрессирующего гибридный белок, к растению, семени растения или области, окружающей растение или семя растения, причем гибридный белок включает по меньшей мере один белок или пептид, стимулирующий рост растения, и целевую последовательность, которая направляет данный гибридный белок в экзоспорий рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus.
2. Гибридный белок, включающий по меньшей мере один белок или пептид, стимулирующий рост растения, по меньшей мере один белок или пептид, повышающий устойчивость растения к стрессу, или по меньшей мере один белок или пептид, связывающийся с растением, и сигнальную последовательность, способную направлять гибридный белок в экзоспорий рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus, причем белок или пептид, стимулирующий рост растения, включает пептидный гормон, негормональный пептид или фермент, участвующий в образовании или активации соединения, стимулирующего рост растения.
3. Гибридный белок, включающий по меньшей мере один белок или пептид, защищающий растение от патогена, и сигнальную последовательность, способную направлять гибридный белок в экзоспорий рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus, причем белок или пептид, защищающий растение от патогена, включает гарпин, α-эластин, β-эластин, системин, фенилаланин аммиак-лиазу, элиситин, дефензин, криптогеин, белок флагеллин, пептид флагеллина, бактериоцин, лизоцим, пептид лизоцима, сидерофор, нерибосомальный активный пептид, кональбумин, альбумин, лактоферрин, пептид лактоферрина или TasA; причем белок или пептид, защищающий растение от патогена, обладает антигрибковым действием; причем белок или пептид, защищающий растение от патогена, обладает инсектицидной активностью, антигельминтной активностью, подавляет хищничество насекомых или червей, или их комбинацию; или причем белок, защищающий растение от патогена, включает фермент.
4. Способ по п. 1 или гибридный белок по п. 2 или 3, отличающийся тем, что данный гибридный белок включает:
а) сигнальную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере около 43% идентичности с аминокислотами 20-35 из SEQ ID №: 1, причем идентичность с аминокислотами 25-35 составляет по меньшей мере около 54%;
б) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-35 из SEQ ID №: 1;
в) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 20-35 из SEQ ID №: 1;
г) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 1;
д) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 2;
е) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-27 из SEQ ID №: 3;
ж) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 12-27 из SEQ ID №: 3;
з) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 3;
и) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 4;
к) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-38 из SEQ ID №: 5;
л) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 23-38 из SEQ ID №: 5;
м) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 5;
н) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 6;
о) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-28 из SEQ ID №: 7;
п) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 13-28 из SEQ ID №: 7;
р) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 7;
с) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 8;
т) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-24 из SEQ ID №: 9;
у) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 9-24 из SEQ ID №: 9;
ф) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 9;
х) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 10;
ц) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 из SEQ ID №: 11;
ч) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 11;
ш) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 11;
щ) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 12;
э) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 из SEQ ID №: 13;
ю) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 13;
я) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 13;
аа) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 14;
аб) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-43 из SEQ ID №; 15;
ав) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 28-43 из SEQ ID №: 15;
аг) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 15;
ад) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 16;
ае) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-27 из SEQ ID №: 17;
аж) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 12-27 из SEQ ID №: 17;
аз) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 17;
аи) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 18;
ак) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 SEQ ID №: 19;
ал) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 19;
ам) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 19;
ан) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 20;
ао) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 SEQ ID №: 21;
aп) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №:21;
ар) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 21;
ас) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 22;
ат) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-24 из SEQ ID №: 23;
ay) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 9-24 из SEQ ID №: 23;
аф) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 23;
ах) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 24;
ац) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-24 из SEQ ID №: 25;
ач) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 9-24 из SEQ ID №: 25;
аш) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 25;
ащ) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 26;
аэ) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-30 из SEQ ID №: 27;
аю) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 15-30 из SEQ ID №: 27;
ая) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 27;
ба) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 28;
бб) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 SEQ ID №: 29;
бв) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 29;
бг) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 29;
бд) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 30;
бе) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-24 из SEQ ID №:31;
бж) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 9-24 из SEQ ID №:31;
бз) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 31;
би) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 32;
бк) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-15 из SEQ ID №: 33;
бл) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 33;
бм) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 34;
бн) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-16 из SEQ ID №: 35;
бо) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 35;
бп) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 36;
бр) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-29 из SEQ ID №: 43;
бс) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 14-29 из SEQ ID №: 43;
бт) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 43;
бу) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 44;
бф) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-35 из SEQ ID №: 45;
бх) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 20-35 из SEQ ID №: 45;
бц) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 45;
бч) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 46;
бш) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-43 из SEQ ID №: 47;
бщ) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 28-43 из SEQ ID №: 47;
бэ) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 47;
бю) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 48;
бя) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-32 из SEQ ID №: 49;
ва) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 17-32 из SEQ ID №: 49;
вб) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 49;
вв) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 50;
вг) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 SEQ ID №: 51;
вд) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 51;
ве) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 51;
вж) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 52;
вз) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 SEQ ID №: 53;
ви) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 53;
вк) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 53;
вл) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 54;
вм) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-30 из SEQ ID №: 55;
вн) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 15-30 из SEQ ID №: 55;
во) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 55;
вп) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 56;
вр) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-130 из SEQ ID №: 57;
вс) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 115-130 из SEQ ID №: 57;
вт) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 57;
ву) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 58;
вф) фрагмент белка экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 59;
вх) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 60;
вц) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 61;
вч) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 62;
вш) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 63;
вщ) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 64;
вэ) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 65;
вю) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 66;
вя) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 67;
га) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 68;
гб) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 69;
гв) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 70;
гг) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 71;
гд) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 72;
ге) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 73;
гж) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 74;
гз) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 75;
ги) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 76;
гк) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 77;
гл) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 78;
гм) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 79;
гн) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 80;
го) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 81;
гп) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 82;
гр) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 83;
гс) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 84;
гт) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 22-31 из SEQ ID №: 1;
гу) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 22-33 из SEQ ID №: 1;
гф) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 20-31 из SEQ ID №: 1;
гх) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 14-23 из SEQ ID №: 3;
гц) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 14-25 из SEQ ID №: 3; или
гч) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 12-23 из SEQ ID №: 3.
5. Гибридный белок, включающий по меньшей мере один белок или пептид, который защищает растение от патогена и:
а) сигнальную последовательность, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из 16 аминокислот и имеющей по меньшей мере около 43% идентичности с аминокислотами 20-35 из SEQ ID №: 1, причем идентичность с аминокислотами 25-35 составляет по меньшей мере около 54%;
б) сигнальную последовательность, состоящую из аминокислот 1-35 из SEQ ID №: 1;
в) сигнальную последовательность, состоящую из аминокислот 20-35 из SEQ ID №: 1;
г) сигнальную последовательность, состоящую из SEQ ID №: 1;
д) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 60;
е) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-27 из SEQ ID №: 3;
ж) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 12-27 из SEQ ID №: 3;
з) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 3;
и) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 4;
к) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-38 из SEQ ID №: 5;
л) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 23-38 из SEQ ID №: 5;
м) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 5;
н) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 6;
о) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-28 из SEQ ID №: 7;
п) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 13-28 из SEQ ID №: 7;
р) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 7;
с) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 8;
т) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-24 из SEQ ID №: 9;
у) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 9-24 из SEQ ID №: 9;
ф) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 9;
х) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 10;
ц) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 из SEQ ID №: 11;
ч) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 11;
ш) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 11;
щ) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 12;
э) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 из SEQ ID №: 13;
ю) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 13;
я) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 13;
аа) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 14;
аб) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-43 из SEQ ID №: 15;
ав) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 28-43 из SEQ ID №: 15;
аг) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 15;
ад) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 16;
ае) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-27 из SEQ ID №: 17;
аж) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 12-27 из SEQ ID №: 17;
аз) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 17;
аи) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 18;
ак) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 SEQ ID №: 19;
ал) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 19;
ам) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 19;
ан) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 20;
ао) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 SEQ ID №: 21;
aп) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №:21;
ар) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 21;
ас) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 22;
ат) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-24 из SEQ ID №: 23;
ay) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 9-24 из SEQ ID №: 23;
аф) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 23;
ах) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 24;
ац) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-24 из SEQ ID №: 25;
ач) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 9-24 из SEQ ID №: 25;
аш) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 25;
ащ) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 26;
аэ) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-30 из SEQ ID №: 27;
аю) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 15-30 из SEQ ID №: 27;
ая) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 27;
ба) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 28;
бб) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 SEQ ID №: 29;
бв) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 29;
бг) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 29;
бд) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 30;
бе) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-24 из SEQ ID №: 31;
бж) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 9-24 из SEQ ID №: 31;
бз) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 31;
би) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 32;
бк) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-15 из SEQ ID №: 33;
бл) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 33;
бм) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 34;
бн) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-16 из SEQ ID №: 35;
бо) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 35;
бп) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 36;
бр) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-29 из SEQ ID №: 43;
бс) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 14-29 из SEQ ID №: 43;
бт) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 43;
бу) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 44;
бф) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-35 из SEQ ID №: 45;
бх) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 20-35 из SEQ ID №: 45;
бц) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 45;
бч) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 46;
бш) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-43 из SEQ ID №: 47;
бщ) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 28-43 из SEQ ID №: 47;
бэ) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 47;
бю) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 48;
бя) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-32 из SEQ ID №: 49;
ва) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 17-32 из SEQ ID №: 49;
вб) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 49;
вв) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 50;
вг) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 из SEQ ID №: 51;
вд) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №:51;
ве) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 51;
вж) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 52;
вз) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-33 из SEQ ID №: 53;
ви) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 18-33 из SEQ ID №: 53;
вк) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 53;
вл) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 54;
вм) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-30 из SEQ ID №: 55;
вн) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 15-30 из SEQ ID №: 55;
во) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 55;
вп) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 56;
вр) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 1-130 из SEQ ID №: 57;
вс) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 115-130 из SEQ ID №: 57;
вт) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 57;
ву) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 58;
вф) фрагмент белка экзоспория, состоящий из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 59;
вх) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 61;
вц) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 62;
вч) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 63;
вш) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 64;
вщ) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 65;
вэ) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 66;
вю) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 67;
вя) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 68;
га) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 69;
гб) сигнальную последовательность, содержащуюся в SEQ ID №: 70;
гв) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 71;
гг) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 72;
гд) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 73;
ге) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 74;
гж) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 75;
гз) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 76;
ги) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 77;
гк) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 78;
гл) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 79;
гм) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 80;
гн) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 81;
го) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 82;
гп) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 83;
гр) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 84;
гс) сигнальную последовательность, состоящую из аминокислот 22-31 из SEQ ID №: 1;
гт) сигнальную последовательность, состоящую из аминокислот 22-33 из SEQ ID №: 1;
гу) сигнальную последовательность, состоящую из аминокислот 20-31 из SEQ ID №: 1;
гф) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 14-23 из SEQ ID №: 3;
гх) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 14-25 из SEQ ID №:3;
гц) сигнальную последовательность, содержащую аминокислоты 12-23 из SEQ ID №: 3; или
гч) сигнальную последовательность, содержащую метиониновый остаток, ковалентно связанный с аминокислотной последовательностью, состоящей из 16 аминокислот, имеющих по меньшей мере 43% идентичности с аминокислотами 20-35 из SEQ ID №: 7, причем идентичность с аминокислотами 25-35 составляет по меньшей мере 54%;
6. Способ или гибридный белок по п. 4, отличающийся тем, что сигнальная последовательность содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере около 62% идентичности с аминокислотами 20-35 из SEQ ID №: 1, причем идентичность с аминокислотами 25-35 составляет по меньшей мере около 72%.
7. Способ или гибридный белок по п. 4, отличающийся тем, что сигнальная последовательность содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере около 81% идентичности с аминокислотами 20-35 из SEQ ID №: 1, причем идентичность с аминокислотами 25-35 составляет по меньшей мере около 90%.
8. Способ или гибридный белок по п. 4, отличающийся тем, что сигнальная последовательность состоит из:
а) аминокислотной последовательности, состоящей из 16 аминокислот и имеющей по меньшей мере около 43% идентичности с аминокислотами 20-35 из SEQ ID №: 1, причем идентичность с аминокислотами 25-35 составляет по меньшей мере около 54%;
б) аминокислот 1-35 из SEQ ID №: 1;
в) аминокислот 20-35 из SEQ ID №: 1;
г) SEQ ID №: 1; или
д) SEQ ID №: 60.
9. Способ или гибридный белок по п. 4, отличающийся тем, что гибридный белок включает белок экзоспория или фрагмент белка экзоспория, который включает аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичности с SEQ ID №: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 59, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83 или 84.
10. Гибридный белок по п. 5, включающий белок экзоспория, включающий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичности с SEQ ID №: 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 59, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83 или 84; или фрагмент белка экзоспория, состоящий из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичности с SEQ ID №: 59.
11. Гибридный белок, включающий по меньшей мере один целевой белок или пептид и:
а) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 71;
б) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 75;
в) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 80;
г) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 81;
д) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 82;
е) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 83; или
ж) белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую, по меньшей мере 85% идентичности с SEQ ID №: 84.
12. Гибридный белок по п. 11, включающий белок экзоспория, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичности с SEQ ID №: 71, 75, 80, 81, 82, 83 или 84.
13. Гибридный белок по п. 11, отличающийся тем, что целевой белок или пептид включает белок или пептид, стимулирующий рост растения, белок или пептид, защищающий растение от патогена, белок или пептид, повышающий устойчивость растения к стрессу, или белок или пептид, связывающийся с растением; причем белок или пептид, стимулирующий рост растений, необязательно включает пептидный гормон, негормональный пептид или фермент, участвующий в продуцировании или активации соединения, стимулирующего рост растения, или фермент, разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ.
14. Способ по п. 1 или гибридный белок по любому из пп. 2, 3, 5 и 10-13, отличающийся тем, что гибридный белок дополнительно включает аминокислотный линкер между сигнальной последовательностью, белком экзоспория или фрагментом белка экзоспория и целевым белком или пептидом, белком или пептидом, стимулирующим рост растения, белком или пептидом, защищающим растение от патогена, белком или пептидом, повышающим устойчивость растения к стрессу, или белком или пептидом, связывающимся с растением, причем данный линкер необязательно включает:
полиаланиновый линкер, полиглициновый линкер или линкер, содержащий смесь как аланиновых, так и глициновых остатков; и/или
сайт узнавания протеазы.
15. Гибридный белок по п. 2 или 13, отличающийся тем, что:
белок или пептид, стимулирующий рост растения, включает пептидный гормон, и данный пептидный гормон включает фитосульфокин (необязательно фитосульфокин-α), clavata 3 (CLV3), системин, ZmlGF или SCR/SP11;
белок или пептид, стимулирующий рост растения, содержит негормональный пептид, и негормональный пептид включает RKN 16D10, Hg-Syv46, eNOD40 пептид, мелиттин, мастопаран, Mas7, RHPP, POLARIS или ингибитор трипсина Кунитца (ИТК); или
белок или пептид, стимулирующий рост растения, содержит фермент, участвующий в продуцировании или активации соединения, стимулирующего рост растения, соединение, стимулирующее рост растения, включающее соединение, производимое бактериями или грибами в ризосфере, или гормон роста растения.
16. Гибридный белок по п. 15, отличающийся тем, что белок или пептид, стимулирующий рост растения, включает фермент, участвующий в продуцировании или активации соединения, стимулирующего рост растения, и фермент, участвующий в продуцировании или активации соединения, стимулирующего рост растения, включает ацетоинредуктазу, индол-3-ацетамидгидролазу, триптофанмонооксигеназу, ацетолактатсинтетазу, α-ацетолактатдекарбоксилазу, пируватдекарбоксилазу, диацетилредуктазу, бутандиолдегидрогеназу, аминотрансферазу (необязательно включающую триптофанаминотрансферазу), триптофандекарбоксилазу, аминоксидазу, индол-3-пируватдекарбоксилазу, индол-3-ацетальдегид-дегидрогеназу, триптофан боковой цепи-оксидазу, нитрилгидролазу, нитрилазу, пептидазу, протеазу, аденозинфосфат-изопентилтрансферазу, фосфатазу, аденозинкиназу, аденин-фосфорибозилтрансферазу, CYP735A, 5'-рибонуклеотид-фосфогидролазу, аденозин-нуклеозидазу, зеатин-цис-транс-изомеразу, зеатин-О-глюкозилтрансферазу, р-глюкозидазу, цис-гидроксилазу, ЦК-цис-гидроксилазу, ЦК-N-глюкозилтрансферазу, 2,5-рибонуклеотид-фосфогидролазу, аденозин-нуклеозидазу, пурин-нуклеозидфосфорилазу, зеатинредуктазу, гидроксиламинредуктазу, 2-оксоглутаратдиоксигеназу, гибберелловую-2В/3В-гидролазу, гиббереллин-3-оксидазу, гиббереллин-20-оксидазу, хитозиназу, хитиназу, β-1,3-глюканазу, β-1,4-глюканазу, β-1,6-глюканазу, аминоциклопропан-1-карбоновой кислоты-деаминазу или фермент, участвующий в продуцировании nod-фактора (необязательно включающего nodA, nodB или nodI).
17. Гибридный белок по п. 16, отличающийся тем, что фермент, участвующий в продуцировании или активации соединения, стимулирующего рост растения, включает протеазу или пептидазу, расщепляющую белки, пептиды, пробелки или препробелки для получения биологически активного пептида, причем:
протеаза или пептидаза необязательно включает субтилизин, кислую протеазу, щелочную протеазу, протеиназу, эндопептидазу, экзопептидазу, термолизин, папаин, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, сериновую протеазу, глутаминовую протеазу, аспартатную протеазу, цистеиновую протеазу, треониновую протеазу или металлопротеазу;
биоактивный пептид необязательно включает RKN 16D10 или RHPP; и/или
протеаза или пептидаза необязательно расщепляет белки в пище, богатой белком (необязательно соевая мука или дрожжевой экстракт).
18. Способ по п. 1, отличающийся тем, что белок, стимулирующий рост растения, включает фермент.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что фермент включает фермент, который разрушает или модифицирует бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ.
20. Гибридный белок по п. 13 или способ по п. 19, отличающийся тем, что фермент, разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ, включает целлюлазу, липазу, лигниноксидазу, протеазу, гликозидгидролазу, фосфатазу, нитрогеназу, нуклеазу, амидазу, нитратредуктазу, нитритредуктазу, амилазу, аммоний-оксидазу, лигниназу, глюкозидазу, фосфолипазу, фитазу, пектиназу, глюканазу, сульфатазу, уреазу, ксиланазу или сидерофор.
21. Гибридный белок или способ по п. 20, отличающийся тем, что:
фермент, разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ, включает целлюлазу, и целлюлаза включает эндоцеллюлазу, энзоцеллюлазу или β-глюкозидазу;
фермент, разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ, включает липазу, и липаза включает липазу Bacillus subtilis, липазу Bacillus thuringiensis, липазу Bacillus cereus или липазу Bacillus clausii;
фермент, разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ, включает лигниноксидазу, и лигниноксидаза включает лигнинпероксидазу, лакказу, глиоксальоксидазу, лигниназу или марганецпероксидазу;
фермент, разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ, включает протеазу, и протеаза включает субтилизин, кислую протеазу, щелочную протеазу, протеиназу, пептидазу, эндопептидазу, экзопептидазу, термолизин, папаин, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, сериновую протеазу, глутаминовую протеазу, аспартатную протеазу, цистеиновую протеазу, треониновую протеазу или металлопротеазу;
фермент, разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ, включает фосфатазу, и фосфатаза включает фосфорную моноэфир-гидролазу, фосфомоноэстеразу, фосфорную диэфир-гидролазу, фосфодиэстеразу, трифосфорную моноэфир-гидролазу, фосфорил ангидрид-гидролазу, пирофосфатазу, фитазу, триметафосфатазу или трифосфатазу; или
фермент, разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ, включает нитрогеназу, и нитрогеназа включает нитрогеназу из Nif семейства.
22. Гибридный белок или способ по п. 21, отличающийся тем, что:
целлюлаза включает эндоцеллюлазу, и эндоцеллюлаза включает эндоглюканазу (необязательно эндоглюканазу Bacillus thuringiensis, эндоглюканазу Bacillus cereus или эндоглюканазу Bacillus clausii);
целлюлаза включает экзоцеллюлазу, и экзоцеллюлаза включает экзоцеллюлазу Trichoderma reesei;
целлюлаза включает Р-глюкозидазу, и β-глюкозидаза включает β-глюкозидазу Bacillus subtilis, β-глюкозидазу Bacillus thuringiensis, β-глюкозидазу Bacillus cereus или β-глюкозидазу Bacillus clausii;
фосфатаза включает фосфомоноэстеразу, и фосфомоноэстераза включает PhoA4;
фосфатаза включает фитазу, и фитаза включает фитазу Bacillus subtilis ЕЕ148 или фитазу Bacillus thuringiensis ВТ013А; или
нитрогеназа включает нитрогеназу из Nif семейства, и нитрогеназа из Nif семейства включает NifBDEHKNXV Paenibacillus massiliensis.
23. Гибридный белок по любому из пп. 3, 5, 10 и 13, отличающийся тем, что:
белок или пептид, защищающий растение от патогена, включает белок или пептид, усиливающий иммунную систему растения, и белок или пептид, усиливающий иммунную систему растения, включает гарпин, α-эластин, β-эластин, системин, фенилаланин-аммиак-лиазу, элиситин, дефензин, криптогеин, белок флагеллин или пептид флагеллина (необязательно flg22);
белок или пептид, защищающий растение от патогена, обладает антибактериальной активностью, противогрибковой активностью или как антибактериальной, так и противогрибковой активностью, белок или пептид включает бактериоцин, лизоцим, пептид лизоцима (необязательно LysM), сидерофор, нерибосомальный активный пептид, кональбумин, альбумин, лактоферрин, пептид лактоферрина (необязательно LfcinB) или TasA;
белок или пептид, защищающий растение от патогена, обладает инсектицидной активностью, антигельминтой активностью, подавляет хищничество насекомых или червей, или их комбинацию, белок или пептид необязательно включает инсектицидный бактериальный токсин (необязательно инсектицидный токсин VIP), эндотоксин, Cry токсин (необязательно Cry токсин из Bacillus thuringiensis, необязательно белок Cry5B или белок Cry21A), белок или пептид - ингибитор протеазы (необязательно включающий ингибитор трипсина или стреловидный ингибитор протеазы), цистеиновую протеазу или хитиназу; или
белок, защищающий растение от патогена, включает фермент, при этом данный фермент включает протеазу или лактоназу или является специфическим для клеточного компонента бактирии или гриба, причем:
протеаза или лактоназа необязательно является специфической для бактериальной сигнальной молекулы (необязательно бактериальной сигнальной молекулы гомосеринового лактона);
фермент включает лактоназу, и лактоназа необязательно включает 1,4-лактоназу, 2-пирон-4,6-дикарбоксилат-лактоназу, 3-оксоадипат-енол-лактоназу, актиномицин-лактоназу, дезоксилимонат-А-кольцевую-лактоназу, глюконолактоназу, L-рамноно-1,4-лактоназу, лимонин-D-кольцевую-лактоназу, стероид-лактоназу, триацетат-лактоназу или ксилоно-1,4-лактоназу; или
фермент является специфическим для клеточного компонента бактерии или гриба, и фермент необязательно включает β-1,3-глюканазу, β-1,4-глюканазу, β-1,6-глюканазу, хитозиназу, хитиназу, хитозиназоподобный фермент, литиказу, пептидазу, протеиназу, протеазу (необязательно щелочную протеазу, кислую протеазу или нейтральную протеазу), мутанолизин, стафолисин или лизоцим.
24. Гибридный белок по любому из пп. 3, 5, 10 и 13, отличающийся тем, что белок или пептид, защищающий растение из патогена, защищает растение от бактериального патогена, грибкового патогена, патогенного червя или патогенного насекомого; и причем:
бактериальный патоген необязательно включает протеобактерию α-класса, протеобактерию β-класса, протеобактерию γ-класса или их комбинацию;
бактериальный патоген необязательно включает Agrobacterium tumefaciens, Pantoea stewartii, Erwinia carotovora, Ralstonia solanacearum, Pseudomonas syringae, Pseudomonas aeruginosa, Xanthomonas campestris или их комбинацию;
белок или пептид, защищающий растение от патогена, защищает растение от хищничества патогенного червя или насекомого; или
патогенный червь или насекомое необязательно включает совку, совку-ипсилон, кукурузного мотылька, совку травяную, гусеницу озимой совки, хрущика японского, огневку Elasmopalpus lignosellus, долгоносика кукурузного, личинку мухи ростковой, лугового мотылька, огневку кукурузную стеблевую, жука-блошку одиннадцатиточечную, южного картофельного проволочника, совку Papaipema nebris, жука-носорога сахарного тростника, личинку хруща, совку ни, хлопкового долгоносика, совку Spodoptera ornithogalli, пьявицу красногрудую, клопа-черепашку пшеничную североамериканскую, тлю, совку малую, коровку Epilachna varivestis, совку Chrysodeixis includens, Dectes texanus или их комбинацию.
25. Гибридный белок по любому из пп. 2 и 11-13, отличающийся тем, что данный гибридный белок включает по меньшей мере один белок или пептид, повышающий устойчивость растения к стрессу, белок или пептид, повышающий устойчивость растения к стрессу, включает фермент, разрушающий соединение, связанное со стрессом, или белок или пептид, защищающий от воздействия факторов окружающей среды, и причем:
белок или пептид, повышающий устойчивость растения к стрессу, включает фермент, разрушающий соединение, связанное со стрессом и соединение, связанное со стрессом, необязательно включает аминоциклопропан-1-карбоновую кислоту (АЦК), активные формы кислорода, оксид азота, оксилипин, фенольное соединение или их комбинацию;
белок или пептид, повышающий устойчивость растения к стрессу, включает фермент, разрушающий соединение, связанное со стрессом, и фермент, разрушающий соединение, связанное со стрессом, включает супероксиддисмутазу, оксидазу, каталазу, аминоциклопропан-1-карбоновой кислоты-деаминазу, пероксидазу, антиоксидантный фермент или антиоксидантный пептид;
белок или пептид, повышающий устойчивость растения к стрессу, включает белок или пептид, защищающий растение от воздействия факторов окружающей среды и воздействие факторов окружающей среды необязательно включает засуху, наводнение, высокую температуру, заморозки, засаливание, тяжелые металлы, низкое значение рН, высокое значение рН или их комбинацию; или
белок или пептид, повыщающий устойчивость растения к стрессу, включает белок или пептид, защищающий от воздействия факторов окружающей среды, и белок или пептид, защищающий от воздействия факторов окружающей среды, включает белок, индуцирующий формирование микрокристаллов льда, пролиназу, фенилаланин-аммиак-лиазу, изохоризмат-синтазу, изохоризмат-пируват-лиазу или холиндегидрогеназу.
26. Гибридный белок по любому из пп. 2 и 11-13, отличающийся тем, что гибридный белок включает по меньшей мере один белок или пептид, связывающийся с растением, белок или пептид, связывающийся с растением, включающий адгезии (необязательно рикадгезин), флагеллин, омпин, лектин, экспансии, структурный белок биопленки (необязательно TasA и YuaB), белок пилуса, белок curlus, интимин, инвазии, агглютинин или нефимбриальный белок.
27. Рекомбинантный представитель семейства Bacillus cereus, экспрессирующий гибридный белок по любому из пп. 2, 3, 5, 10-13 и 15.
28. Рекомбинантный представитель семейства Bacillus cereus, коэкспрессирующий по меньшей мере один гибридный белок, содержащий белок или пептид, стимулирующий рост растения, белок или пептид, защищающий растение от патогена, или белок или пептид, повышающий устойчивость растения к стрессу, по любому из пп. 2, 3, 5, 10-13 и 15 и по меньшей мере один гибридный белок, содержащий белок или пептид, связывающийся с растением, по п. 26.
29. Способ по п. 1, отличающийся тем, что рекомбинантный представитель семейства Bacillus cereus включает Bacillus anthracis, Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis, Bacillus mycoides, Bacillus pseudomycoides, Bacillus samanii, Bacillus gaemokensis, Bacillus weihenstephensis или их комбинацию.
30. Способ по п. 1 или 29, отличающийся тем, что рекомбинантный представитель семейства Bacillus cereus включает штамм бактерий, стимулирующий рост растения, причем штамм бактерий, стимулирующий рост растения, необязательно: продуцирует инсектицидный токсин (необязательно Cry токсин), продуцирует фунгицидное соединение (необязательно β-1,3-глюканазу, хитозиназу, литиказу или их комбинацию), продуцирует нематоцидное соединение (необязательно Cry токсин), продуцирует бактерицидное соединение, является устойчивым к одному или более антибиотикам, содержит одну или более самостоятельно реплицирующихся плазм ид, прикрепляется к корням растений, колонизирует корни растений, формирует биопленки, растворяет питательные вещества, секретирует органические кислоты или их комбинации.
31. Способ по п. 30, отличающийся тем, что штамм бактерий, стимулирующий рост растения, включает Bacillus mycoides ВТ155, Bacillus mycoides ЕЕ118, Bacillus mycoides EE141, Bacillus mycoides BT46-3, член семейства Bacillus cereus EE128, Bacillus thuringiensis BT013A или член семейства Bacillus cereus EE349.
32. Способ по п. 31, отличающийся тем, что гибридный белок включает сигнальную последовательность из SEQ ID №: 60.
33. Способ по п. 32, отличающийся тем, что негормональный пептид включает ингибитор трипсина Кунитца (НТК); при этом фермент, участвующий в продуцировании или активации соединения, стимулирующего рост растения, включает хитозиназу; при этом белок или пептид, связывающийся с растением, включает ТасА; при этом белок или пептид, защищающий растение от патогена включает ТасА; или при этом фермент разрушающий или модифицирующий бактериальный, грибковый или растительный источник питательных веществ включает фосфатазу (необязательно PhoA или фитазу) или эндоглюканазу.
34. Способ по п. 1 или 29, отличающийся тем, что гибридный белок экспрессируется под контролем споруляционного промотора, нативного по отношению к сигнальной последовательности, белку экзоспория или фрагменту белка экзоспория в гибридном белке и/или отличающийся тем, что гибридный белок экспрессируется под контролем сильного споруляционного промотора; причем:
сильный споруляционный промотор необязательно включает промоторную последовательность сигма-К, специфическую для полимеразы споруляции, промоторную последовательность или последовательности сигма-К, специфические для полимеразы споруляции, необязательно имеющие 100% идентичности с соответствующими нуклеотидами из SEQ ID №: 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102 или 103; и/или
промотор споруляции необязательно включает аминокислотную последоваительность, имеющую по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичности с нуклеотидной последовательностью любой из SEQ ID №№: 85-103.
35. Препарат, содержащий рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus по п. 27 и сельскохозяйственно приемлемый носитель, причем:
сельскохозяйственно приемлемый носитель необязательно включает диспергирующее вещество, сурфактант (необязательно тяжелое нефтяное масло, тяжелый нефтяной дистиллят, сложный эфир полиола жирной кислоты, полиэтоксилированный эфир жирной кислоты, арилалкил полиоксиэтиленгликоля, алкиламин ацетат, алкиларилсульфонат, многоатомный спирт, алкилфосфат или их комбинацию), примесь (необязательно масло, камедь, смолу, глину, полиоксиэтиленгликоль, терпен, вязкую органику, сложный эфир жирной кислоты, сульфатированный спирт, алкилсульфонат, нефтяной сульфонат, сульфат спирта, алкил бутан диамат натрия, полиэфир тиобутандиоата натрия, производное бензол-ацетонитрила, белковый материал или их комбинацию), воду, загуститель (необязательно алкилсульфонат с длинной цепью полиэтиленгликоля, полиоксиэтиленолеат или их комбинацию), противослеживающий агент (необязательно соль натрия, карбонат кальция, диатомит или их комбинацию), противоосадочное вещество, компостирующий препарат, гранулированную подкормку, диатомит, масло, краситель, стабилизатор, консервант, полимер, пленку или их комбинацию;
данный преперат необязательно включает препарат для покрытия семян (необязательно раствор на водной или масляной основе, применяемый для семян, или порошок или гранулированный препарат, применяемый для семян), жидкий препарат, применяемый для растений или для растительных ростовых сред (необязательно концентрированный препарат или препарат готовый для использования) или твердый препарат, применяемый для растений или для растительных ростовых сред (необязательно гранулированный препарат или порошковое вещество);
данный препарат необязательно дополнительно включает удобрение, материал микроэлементов удобрения, инсектицид, гербицид, вещество улучшающее рост растений, фунгицид, инсектицид, моллюскоцид, альгицид, бактериальный инокулянт, грибковый инокулянт или их комбинацию; и/или
сельскохозяйственно приемлемый носитель включает вермикулит, древесный уголь, отходы сатурационного пресса сахарного завода, рисовую шелуху, карбоксиметилцеллюлозу, торф, перлит, мелкий песок, карбонат кальция, муку, квасцы, крахмал, тальк, поливинилпирролидон или их комбинацию.
36. Препарат по п. 35, отличающийся тем, что бактериальный инокулянт включает штамм бактерий, стимулирующий рост растения, причем штамм бактерий, стимулирующий рост растения, необязательно: продуцирует инсектицидный токсин (необязательно Cry токсин), продуцирует фунгицидное соединение (необязательно β-1,3-глюканазу, хитозиназу, литиказу или их комбинацию), продуцирует нематоцидное соединение (необязательно Cry токсин), продуцирует бактерицидное соединение, является устойчивым к одному или более антибиотикам, содержит одну или более самостоятельно реплицирующихся плазмид, прикрепляется к корням растений, колонизирует корни растений, формирует биопленки, растворяет питательные вещества, секретирует органические кислоты или их комбинации.
37. Препарат по п. 36, отличающийся тем, что штамм бактерий, стимулирующий рост растения, включает Bacillus aryabhattai САР53, Bacillus aryabhattai CAP56, Bacillus flexus BT054, Paracoccus kondratievae NC35, Bacillus mycoides BT155, Enterobacter cloacae CAP12, Bacillus nealsonii BOBA57, Bacillus mycoides EE118, Bacillus subtilis EE148, Alcaligenes faecalis EE 107, Bacillus mycoides EE141, Bacillus mycoides BT46-3, член семейства Bacillus cereus EE 128, Bacillus thuringiensis BT013A, Paenibacillus massiliensis BT23, член семейства Bacillus cereus EE349, Bacillus subtilis EE218, Bacillus megaterium EE281 или их комбинацию.
38. Способ стимулирования роста растений, включающий следующие этапы:
введение в среду для роста растений рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus по п. 27; или
применение к растению, семени растения или области, окружающей растение или семя растения, рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus по п 27.
39. Способ для стимулирования роста растений по п. 1 или 29, отличающийся тем, что растения, выращиваемые на среде для роста растений, содержащей рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus, демонстрируют усиленный рост по сравнению с ростом растений на идентичной среде для роста растений, не содержащей рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus.
40. Способ защиты растения от патогена или повышения устойчивости растения к стрессу, включающий следующие этапы:
введение в среду для роста растений рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus по п. 27; или
применение к растению, семени растения или области, окружающей растение или семя растения, рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus по п. 27;
41. Способ по п. 40, отличающийся тем, что способ включает способ защиты растения от патогена, и растения, выращиваемые на среде для роста растений, содержащей рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus, менее восприимчивы к инфекции патогеном по сравнению с растениями, выращиваемыми на идентичной среде для роста растений, не содержащей рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus.
42. Способ по п. 40, отличающийся тем, что способ включает способ повышения устойчивости растения к стрессу, и растения, выращиваемые на среде для роста растений, содержащей рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus, менее восприимчивы к стрессу по сравнению с растениями, выращиваемыми на идентичной среде для роста растений, не содержащей рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus.
43. Способ иммобилизации споры рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus на растении, включающий:
введение в среду для роста растений рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus по п. 27; или
применение к растению, семени растения или области, окружающей растение или семя растения, рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus по п. 27.
44. Способ по п. 43, отличающийся тем, что белок или пептид, связывающийся с растением, избирательно направляет и поддерживает рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus на растении, необязательно на корнях растения, субструктурах корней, надземной части растения или субструктуре надземной части растения.
45. Способ по п. 1 или 29, дополнительно включающий инактивацию рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus до введения в среду для роста растений или применения к растению, семени растения или области, окружающей растение или семя растения; причем рекомбинантный представитель семейства Bacillus cereus необязательно инактивируется термической обработкой; гамма-облучением; рентгеновским облучением; УФ-А облучением; УФ-В облучением; обработкой глютаровым альдегидом, формальдегидом, перекисью водорода, уксусной кислотой, отбеливателем или их комбинацией.
46. Способ по любому пп. 1 или 29, отличающийся тем, что:
среда для роста растений включает почву, воду, водный раствор, песок, гравий, полисахарид, мульчу, компост, торф, солому, необработанный лесоматериал, глину, соевый шрот, дрожжевой экстракт или их комбинацию; и/или
среда для роста растений дополнена субстратом для фермента, при этом субстрат необязательно включает триптофан, аденозинмонофосфат, аденозиндифосфат, аденозинтрифосфат (необязательно аденозин-3-трифосфат), индол, триметафосфат, ферродоксин, ацетоин, диацетил, пируват, ацетолактат, пектин, целлюлозу, метилцеллюлозу, крахмал, хитин, пектин, шрот, производное целлюлозы, фосфат, ацетоин, хитозан, неактивное производное индол-3-уксусной кислоты, неактивное производное гибберелловой кислоты, ксилан, арабиноксилан, жир, воск, масло, фитиновую кислоту, лигнин, гуминовую кислоту, холин, производное холина, пролин, полипролин, белок богатый пролином, муку богатую пролином, фенилаланин, хоризмат или их комбинацию.
47. Способ по п. 1 или 29, включающий покрытие семян рекомбинантным членом семейства Bacillus cereus или препаратом, содержащим рекомбинантный представитель семейства Bacillus cereus, до посадки.
48. Способ по п. 1 или 29, включающий применение рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus или препарата к надземной части растения.
49. Способ по п. 1 или 29, отличающийся тем, что введение рекомбинантного представителя семейства Bacillus cereus в среду для роста растений включает применение жидкого или твердого препарата, содержащего рекомбинантный представитель семейства Bacillus cereus, для среды.
50. Способ по п. 1 или 29, дополнительно включающий введение по меньшей мере одного агрохимиката в среду для роста растений или применение по меньшей мере одного агрохимиката к растениям или семенам, причем агрохимикат включает удобрение, материал микроэлементов удобрения, инсектицид, гербицид, фунгицид, моллюскоцид, альгицид, вещество улучшающее рост растений, бактериальный инокулянт, грибковый инокулянт или их комбинацию, причем:
удобрение включает жидкое удобрение;
материал микроэлементов удобрения включает борную кислоту, борат, борную фритту, сульфат меди, медную фритту, хелат меди, декагидрат тетрабората натрия, сульфат железа, оксид железа, сульфат железа-аммония, железную фритту, хелат железа, сульфат марганца, оксид марганца, хелат марганца, хлорид марганца, марганцевую фритту, молибдат натрия, молибденовую кислоту, сульфат цинка, оксид цинка, карбонат цинка, цинковую фритту, фосфат цинка, хелат цинка или их комбинацию;
инсектицид включает органофосфат, карбамат, пиретроид, акарицид, алкил-фталат, борную кислоту, борат, фторид, серу, мочевину, замещенную ароматическим галоидом, эфир насыщенного спирта, инсектицид на биологической основе или их комбинацию;
гербицид включает хлорфенокси соединение, нитрофенольное соединение, соединение нитрокрезола, соединение дипиридила, ацетамид, алифатическую кислоту, анилид, бензамид, бензойную кислоту, производное бензойной кислоты, анисовую кислоту, производное анисовой кислоты, бензонитрил, бензотиадиазинона диоксид, тиокарбамат, карбамат, карбанилат, хлорпиридинил, производное циклогексенона, производное динитроаминобензола, соединение фтор-динитро-толуидин, изоксазолидинон, никотиновую кислоту, изопропиламин, производные изопропиламина, оксадиазолинон, фосфат, фталат, соединение пиколиновой кислоты, триазин, триазол, урацил, производное мочевины, эндотал, хлорат натрия или их комбинацию;
фунгицид включает замещенный бензол, тиокарбамат, этилен-бис-дитиокарбамат, тиофталид амид, соединение меди, ртутьорганическое соединение, оловоорганическое соединение, соединение кадмия, анилазин, беномил, циклогексамид, додин, этридиазол, ипродион, металаксил, тиамимефон, трифорин или их комбинацию;
грибковый инокулянт включает грибковый инокулянт из семейства Glomeraceae, грибковый инокулянт из семейства Claroidoglomeraceae, грибковый инокулянт из семейства Gigasporaceae, грибковый инокулянт из семейства Acaulosporaceae, грибковый инокулянт из семейства Sacculosporaceae, грибковый инокулянт из семейства Entrophosporaceae, грибковый инокулянт из семейства Pacidsporaceae, грибковый инокулянт из семейства Diversisporaceae, грибковый инокулянт из семейства Paraglomeraceae, грибковый инокулянт из семейства Archaeosporaceae, грибковый инокулянт из семейства Geosiphonaceae, грибковый инокулянт из семейства Ambisporaceae, грибковый инокулянт из семейства Scutellosporaceae, грибковый инокулянт из семейства Dentiscultataceae, грибковый инокулянт из семейства Racocetraceae, грибковый инокулянт из типа Basidiomycota, грибковый инокулянт из типа Ascomycota, грибковый инокулянт из типа Zygomycota или их комбинацию;
бактериальный инокулянт включает бактериальный инокулянт из рода Rhizobium, бактериальный инокулянт из рода Bradyrhizobium, бактериальный инокулянт из рода Mesorhizobium, бактериальный инокулянт из рода Azorhizobium, бактериальный инокулянт из рода Allorhizobium, бактериальный инокулянт из рода Sinorhizobium, бактериальный инокулянт из рода Kluyvera, бактериальный инокулянт из рода Azotobacter, бактериальный инокулянт из рода Pseudomonas, бактериальный инокулянт из рода Azospirillium, бактериальный инокулянт из рода Bacillus, бактериальный инокулянт из рода Streptomyces, бактериальный инокулянт из рода Paenibacillus, бактериальный инокулянт из рода Paracoccus, бактериальный инокулянт из рода Enterobacter, бактериальный инокулянт из рода Alcaligenes, бактериальный инокулянт из рода Mycobacterium, бактериальный инокулянт из рода Trichoderma, бактериальный инокулянт из рода Gliocladium, бактериальный инокулянт из рода Glomus, бактериальный инокулянт из рода Klebsiella или их комбинацию; и/или
2
4
4
удобрение включает сульфат аммония, нитрат аммония, сульфат-нитрат аммония, хлорид аммония, бисульфат аммония, полисульфид аммония, тиосульфат аммония, водный раствор аммиака, безводный аммиак, полифосфат аммония, сульфат алюминия, нитрат кальция, известково-аммиачную селитру, сульфат кальция, обожженный магнезит, кальцитовый известняк, оксид кальция, нитрат кальция, доломитовый известняк, гашеную известь, карбонат кальция, диаммонийфосфат, моноаммонийфосфат, нитрат магния, сульфат магния, нитрат калия, хлорид калия, сульфат калия-магния, сульфат калия, нитраты натрия, магнезиальный известняк, оксид магния, мочевину, карбамидоформальдегидные смолы, мочевино-аммониевый нитрат, покрытую серой мочевину, мочевину с полимерным покрытием, изобутилиден димочевину, KSO-2MgSO, каинит, сильвинит, кизерит, эпсомскую соль, элементарную серу, мергель, измельченные устричные раковины, рыбную муку, жмыхи, рыбный тук, кровяную муку, фосфорит, суперфосфат, шлак, костную муку, древесную золу, навоз, гуано летучих мышей, торф, компост, зеленый песок, муку из семян хлопчатника, муку из перьев, муку из крабов, рыбную эмульсию, гуминовую кислоту или их комбинацию.