АНТИ-VEGF-АНТИТЕЛО И СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ, ДИАГНОСТИКИ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ РАКА ИЛИ СВЯЗАННОГО С АНГИОГЕНЕЗОМ ЗАБОЛЕВАНИЯ

1. Антитело, которое связывается с фактором роста сосудистого эндотелия (VEGF), причем антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую определяющую комплементарность область (CDR1)1, CDR2 и CDR3, причем CDR2 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; а CDR3 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3, причем CDR3 представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
2. VEGF-связывающее антитело по п.1, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 4-14; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 15-34; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 35-50; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
3. VEGF-связывающее антитело по п.1, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 54-65; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, представленную аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO 78-104.
4. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 4; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 15; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 35; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
5. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 16; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 36; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
6. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 17; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 37; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
7. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 18; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
8. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 19; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 39; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
9. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 20; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 40; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
10. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 21; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
11. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 22; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
12. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 7; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 23; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 41; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
13. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 24; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
14. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 25; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
15. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 8; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 26; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 42; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
16. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 27; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
17. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 9; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 28; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 43; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
18. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 29; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 44; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
19. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 10; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 30; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 45; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
20. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 11; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 31; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 42; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
21. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 11; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 20; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 39; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
22. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 11; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 32; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 46; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
23. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 33; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 45; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
24. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 5; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 34; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 47; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
25. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 6; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 25; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 48; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
26. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 12; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 31; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 38; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
27. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 9; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 31; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 46; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
28. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 10; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 17; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 42; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
29. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 13; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 34; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 49; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
30. VEGF-связывающее антитело по п.2, где антитело включает:
1) вариабельную область легкой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 14; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2; и
2) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:
CDR1, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 17; CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 50; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
31. VEGF-связывающее антитело по п.1, где антитело является антителом человека или гуманизированным антителом.
32. VEGF-связывающее антитело по п.1, где антитело является IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2, IgD, IgE, IgM или их комбинацией или вариантом.
2
33. VEGF-связывающее антитело по п.32, где антитело имеет форму Fab, Fab', F(ab'), Fv, dAb, scFv или конъюгата с матрицей, который содержит CDR указанного антитела в качестве основного участка для связывания с VEGF.
34. ДНК, кодирующая вариабельную область легкой цепи антитела, которое связывается с VEGF, причем вариабельная область легкой цепи содержит CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2.
35. ДНК по п.34, включающая:
нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 51, кодирующую CDR2, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 1; и
нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 52, кодирующую CDR 3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 2.
36. ДНК, кодирующая вариабельную область тяжелой цепи антитела, которое связывается с VEGF, причем вариабельная область тяжелой цепи содержит CDR3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
37. ДНК по п.36, содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 53, кодирующую CDR 3, представленную аминокислотной последовательностью SEQ ID NO 3.
38. Экспрессионный вектор, включающий ДНК по п.34, причем с вектора экспрессируется вариабельная область легкой цепи антитела, которое связывается с VEGF.
39. Экспрессионный вектор, включающий ДНК по п.36, причем с вектора экспрессируется вариабельная область тяжелой цепи антитела, которое связывается с VEGF.
40. Линия клеток животного, трансформированная экспрессионными векторами по пп.38 и 39.
41. Линия клеток животного по п.40, где линией клеток животного является линия клеток CHO, линия клеток HEK или линия клеток NS0.
42. Фармацевтическая композиция для предупреждения, диагностики или лечения рака или связанного с ангиогенезом заболевания, вызванного сверхэкспрессией VEGF, причем композиция включает антитело по п.1.
43. Фармацевтическая композиция по п.42, где рак или связанное с ангиогенезом заболевание, вызванное сверхэкспрессией VEGF, выбрано из группы, состоящей из раковых заболеваний, выбранных из группы, состоящей из колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака почки, рака легких, рака молочной железы, рака яичников и рака мозга; и офтальмологических заболеваний, выбранных из группы, состоящей из макулярной дегенерации, диабетической ретинопатии и ишемической ретинопатии.
44. Фармацевтическая композиция по п.42, где фармацевтическая композиция используется в сочетании с химиотерапевтическим агентом, выбранным из группы, состоящей из алкилирующего агента, антиметаболита, гомолога фолиевой кислоты, пиримидинового гомолога, пуринового гомолога и родственного ингибитора, алкалоида из барвинка, эпиподофиллотоксина, антибиотиков, L-аспарагиназы, ингибитора топоизомеразы, интерферона, координационного комплекса платины, антрацендион-замещенной мочевины, метильного производного гидразина, супрессора надпочечников, адренокортикостероида, прогестина, эстрогена, антиэстрогена, андрогена, антиандрогена и гомолога гонадотропин-рилизинг гормона.
45. Фармацевтическая композиция по п.42, где фармацевтическая композиция используется в сочетании с лекарственным средством, выбранным из группы, состоящей из лекарственного препарата на основе фторпиримидина, паклитаксела, препарата на основе платины, интерферона альфа-2а, карбоплатина, доксорубицина, цисплатина, гемцитабина, 5-фторурацила, лейковорина, иринотекана, оксалаплатина, капецитабина и доцетаксела и их смеси.
46. Набор для диагностики рака или связанного с ангиогенезом заболевания, вызванного сверхэкспрессией VEGF, причем набор содержит антитело, которое связывается с VEGF по п.1.