Способ совместного кондиционирования и хемоселекции за один цикл

1. Способ трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (HSC) без облучения, включающий:
(a) введение млекопитающему субъекту одной или двух доз от 2 до 10 мг/кг массы тела аналога пуринового основания, выбранного из 6-тиогуанина (6TG), 6-меркаптопурина (6-МР) или азатиопурина (AZA) в качестве этапа предварительного кондиционирования;
(b) пересадку субъекту HSC доноров с нехваткой гипоксантин-гуанин фосфорибозилтрансферазы (HPRT) в течение 48-72 часов после этапа предварительного кондиционирования; и
(c) немедленное введение субъекту приблизительно от 1 до 5 мг/кг аналога пуринового основания и продолжающееся введение субъекту приблизительно от 1 до 5 мг/кг аналога пуринового основания каждые 2-4 дня в течение 2-8 недель без предусмотренного периода восстановления;
где способ осуществляют в отсутствие предварительного кондиционирования путем облучения и где у субъекта предполагается наличие заболевания или расстройства, поражающего лимфогемопоэтические клетки.
2. Способ по п. 1, где субъект представляет собой человека.
3. Способ по п. 1, где субъект имеет наследственное или генетическое расстройство.
4. Способ по п. 1, где субъект имеет приобретенное заболевание, поражающее лимфогемопоэтические клетки.
5. Способ по п. 4, где заболевание или расстройство представляет собой инфекцию, вызванную вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), или синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД).
6. Способ по п. 4, где расстройство или заболевание представляет собой лимфогемопоэтическое злокачественное новообразование.
7. Способ по п. 1, где расстройство или заболевание представляет собой расстройство или заболевание гемопоэтической, или тромбопоэтической, или лимфопоэтической системы.
8. Способ по п. 7, где расстройство или заболевание гемопоэтической системы представляет собой гемоглобинопатию.
9. Способ по п. 1, дополнительно включающий трансплантацию костного мозга.
10. Способ по п. 1, где аналогом пуринового основания является 6TG.
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что общая дозировка 6TG, которую вводят субъекту, не превышает 105 мг.
12. Способ по п. 1, отличающийся тем, что общая дозировка 6TG, которую вводят субъекту, не превышает 75 мг.
13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что введение на этапе (с) выполняют каждые 3 дня и в течение от двух до четырех недель после этапа пересадки.
14. Способ по п. 1, где между стадиями (а) и (с) проходит не более 5 суток.
15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что у субъекта наблюдают более 75% генетически модифицированных гемопоэтических клеток.
16. Способ по п. 1, отличающийся тем, что у субъекта наблюдают более 95% генетически модифицированных гемопоэтических клеток.
17. Способ по п. 1, отличающийся тем, что HPRT-дефицитные HSC для трансплантации сделали HPRT-дефицитными путем введения последовательностей, кодирующих нуклеазы "цинковые пальцы" (ZFN), эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции (TALEN), матричные цепи небольшого фрагмента гомологичной рекомбинации (SFHR), ингибирующие РНК (siRNA) или микроРНК (miRNA), антисмысловые РНК, транс-сплайсинговые РНК, рибозимы, внутриклеточные антитела или доминантно-негативные или конкурентные белки-ингибиторы.
18. Способ по п. 1, где HPRT-дефицитные HSC для трансплантации сделаны HPRT-дефицитными путем введения последовательностей, кодирующих нуклеазы "цинковые пальцы" (ZFN).
19. Способ по п. 1, где HPRT-дефицитные HSC для трансплантации сделаны HPRT-дефицитными путем введения последовательностей, кодирующих эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции (TALEN).
20. Способ по п. 1, где HPRT-дефицитные HSC для трансплантации сделаны HPRT-дефицитными путем введения последовательностей, кодирующих ингибирующие РНК (siRNA).
21. Способ по п. 1, отличающийся тем, что HPRT-дефицитные HSC для трансплантации были генетически модифицированы.
22. Способ по п. 1, отличающийся тем, что трансплантированные HSC являются аутологичными или сингенными.
23. Способ по п. 1, отличающийся тем, что трансплантированные HSC являются аллогенными.
24. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субъекта не обрабатывают миелоаблативным облучением.
25. Способ лечения симптомов заболевания или расстройства, поражающего лимфогемопоэтические клетки, у субъекта, включающий:
(a) введение млекопитающему субъекту одной или двух доз от 2 до 10 мг/кг массы тела аналога пуринового основания, выбранного из 6-тиогуанина (6TG), 6-меркаптопурина (6-МР) или азатиопурина (AZA) в качестве этапа предварительного кондиционирования;
(b) пересадку субъекту HSC доноров с нехваткой гипоксантин-гуанин фосфорибозилтрансферазы (HPRT) в течение 48-72 часов после этапа предварительного кондиционирования; и
(c) немедленное введение субъекту приблизительно от 1 до 5 мг/кг аналога пуринового основания и продолжающееся введение субъекту приблизительно от 1 до 5 мг/кг аналога пуринового основания каждые 2-4 дня в течение 2-8 недель после этапа пересадки без предусмотренного периода восстановления;
где способ осуществляют в отсутствие предварительного кондиционирования путем облучения.
26. Способ по п. 25, где заболевание или расстройство представляет собой инфекцию, вызванную вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), или синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД).
27. Способ по п. 25, где расстройство или заболевание представляет собой лимфогемопоэтическое злокачественное новообразование.
28. Способ по п. 25, где расстройство или заболевание представляет собой расстройство или заболевание гемопоэтической, или тромбопоэтической, или лимфопоэтической системы.
29. Способ по п. 28, где расстройство или заболевание гемопоэтической системы представляет собой гемоглобинопатию.
30. Способ по п. 25, дополнительно включающий трансплантацию костного мозга или гемопоэтических стволовых клеток.
31. Способ по п. 25, где субъект представляет собой человека.
32. Способ по п. 25, где аналогом пуринового основания является 6TG.
33. Способ по п. 25, отличающийся тем, что введение на этапе (с) выполняют каждые 3 дня и в течение от двух до четырех недель после этапа пересадки.
34. Способ по п. 25, где между введением доз аналога пуринового основания на стадиях (а) и (с) проходит не более 5 суток.
35. Способ по п. 25, где у субъекта наблюдают более 75% генетически модифицированных гемопоэтических клеток.
36. Способ по п. 25, где у субъекта наблюдают более 95% генетически модифицированных гемопоэтических клеток.
37. Способ по п. 25, где HPRT-дефицитные HSC для трансплантации сделали HPRT-дефицитными путем введения последовательностей, кодирующих нуклеазы "цинковые пальцы" (ZFN), эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции (TALEN), матричные цепи небольшого фрагмента гомологичной рекомбинации (SFHR), ингибирующие РНК (siRNA) или микроРНК (miRNA), антисмысловые РНК, транс-сплайсинговые РНК, рибозимы, внутриклеточные антитела или доминантно-негативные или конкурентные белки-ингибиторы.
38. Способ по п. 25, где HPRT-дефицитные HSC для трансплантации сделаны HPRT-дефицитными путем введения последовательностей, кодирующих нуклеазы "цинковые пальцы" (ZFN).
39. Способ по п. 25, где HPRT-дефицитные HSC для трансплантации сделаны HPRT-дефицитными путем введения последовательностей, кодирующих эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции (TALEN).
40. Способ по п. 25, где HPRT-дефицитные HSC для трансплантации сделаны HPRT-дефицитными путем введения последовательностей, кодирующих ингибирующие РНК (siRNA).
41. Способ по п. 25, где HPRT-дефицитные HSC для трансплантации были генетически модифицированы.
42. Способ по п. 1, где трансплантированные HSC являются аутологичными или сингенными.
43. Способ по п. 1, где трансплантированные HSC являются аллогенными.
44. Способ по п. 1, где субъекта не обрабатывают миелоаблативным облучением.