КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ MPS1

1. Рекомбинантный вектор, несущий кассету экспрессии, содержащую ген альфа-L-идуронидазы человека (hIDUA), имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 или последовательность, по меньшей мере приблизительно на 80% идентичную SEQ ID NO: 1, которая кодирует функциональную альфа-L-идуронидазу человека, где упомянутая кассета экспрессии дополнительно содержит регуляторные контролирующие последовательности, которые управляют экспрессией альфа-L-идуронидазы человека, при этом упомянутые регуляторные контролирующие последовательности содержат печеночно-специфический промотор.
2. Рекомбинантный вектор по п. 1, где модифицированный ген hIDUA по меньшей мере от приблизительно на 85% до приблизительно на 90% идентичен SEQ ID NO: 1.
3. Рекомбинантный вектор по п. 2, где модифицированный ген hIDUA по меньшей мере от приблизительно на 95% до приблизительно на 99% идентичен SEQ ID NO: 1.
4. Рекомбинантный вектор по п. 1, где функциональная альфа-L-идуронидаза человека выбрана из группы, состоящей из:
(a) от приблизительно 1 до приблизительно 653 аминокислоты SEQ ID NO: 2;
(b) синтетического фермента человека, содержащего гетерологическую лидерную последовательность, слитую с аминокислотами от приблизительно 27 до приблизительно 653 из SEQ ID NO: 2; и
(c) варианта аминокислотной последовательности SEQ ID N0:2, имеющей одну или несколько модификаций, содержащих: восстановление H до Q в аминокислотном положении 82 (SEQ ID NO: 8); замену R на Q в положении 105 (SEQ ID NO: 9); замену G на R в положении 116 (SEQ ID NO: 10); замену V на А в положении 279 (SEQ ID NO: 11); замену L на R в положении 346 (SEQ ID NO: 12); замену А на Τ в положении 361 (SEQ ID NO: 13); замену Η на N в положении 449 (SEQ ID NO: 14); замену V на I в положении 454 (SEQ ID NO: 15); замену А на Τ в положении 591 (SEQ ID NO: 16) и замену А на Τ в положении 622 (SEQ ID NO: 17).
5. Рекомбинантный вектор по п. 1, где промотором является промотор TBG.
6. Рекомбинантный вектор по п. 1, где вектор дополнительно содержит один или несколько энхансеров.
7. Рекомбинантный вектор по п. 6, где энхансеры являются одинаковыми или разными.
8. Рекомбинантный вектор по п. 6, где энхансеры выбраны из группы, состоящей из интрона, энхансера CMV и энхансера Alpha mic/bik.
9. Рекомбинантный вектор по п. 6, где в векторе присутствуют несколько копий выбранного энхансера.
10. Рекомбинантный вектор по п. 9, где несколько копий энхансера расположены в тандеме.
11. Рекомбинантный вектор по п. 1, где кассета экспрессии дополнительно содержит поли-А, выбранную из поли-А глобулина кролика.
12. Рекомбинантный вектор по п. 1, где плазмидой является pENN.TBG.hIDUA.nRBG.
13. Частица рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV), имеющая AAV-капсид и имеющая упакованный в него 5' инвертированный концевой повтор (ITR), ген альфа-L-идуронидазы человека (hIDUA) под контролем регуляторных последовательностей, которые контролируют его экспрессию, и 3' ITR AAV, где упомянутый ген hIDUA имеет последовательность, показанную в SEQ ID NO: 1 (ФИГ. 1), или последовательность, по меньшей мере приблизительно на 95% идентичную ей, которая кодирует функциональную альфа-L-идуронидазу человека.
14. rAAV по п. 13, где модифицированный ген hIDUA экспрессируется под контролем печеночно-специфического промотора.
15. rAAV по п. 14, где промотором является промотор TBG.
16. rAAV по п. 13, где вектор дополнительно содержит один или несколько энхансеров.
17. rAAV по п. 16, где энхансеры являются одинаковыми или разными.
18. rAAV по п. 16, где энхансеры выбраны из группы, состоящей из интрона, энхансера CMV и энхансера Alpha mic/bik.
19. rAAV по п. 18, где в векторе присутствуют несколько копий выбранного энхансера.
20. rAAV по п. 19, где несколько копий энхансера расположены в тандеме.
21. rAAV по п. 13, где частица rAAV содержит AAV-капсид, выбранный из AAV8 и AAV9.
22. rAAV по п. 21, где rAAV является псевдотипированным.
23. rAAV по п. 22, где ITR происходят из AAV2.
24. Частица рекомбинантного аденоассоциированного вируса AAV2/8.TBG.hIDUA.со.
25. Композиция, пригодная для лечения мукополисахаридоза I типа (MPS I), содержащая rAAV по любому из пп. 13-24 и фармацевтически приемлемый носитель.
26. Способ лечения мукополисахаридоза I типа, включающий доставку эффективного количества композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и rAAV по любому из пп. 13-24.
27. Композиция по п. 25, где упомянутый rAAV доставляют внутривенно.
9
12
28. Рекомбинантный вектор по п. 1, где субъекту доставляют от приблизительно 3×10 до приблизительно 3×10 геномных копий rAAV.
29. Применение композиции, содержащей rAAV по любому из пп. 13-24 и фармацевтически приемлемый носитель, для применения при лечении мукополисахаридоза I типа (MPS I).