СОЗДАНИЕ ГАПЛОИДНЫХ РАСТЕНИЙ И УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СЕЛЕКЦИИ РАСТЕНИЙ

1. Трансгенное растение, содержащее экспрессионную кассету для гетерологичного трансгена, причем экспрессионная кассета содержит промотор, функционально связанный с полинуклеотидом, кодирующим рекомбинантно измененный полипептид CENH3, CENPC, MIS 12, NDC80 или NUF2, при этом, если рекомбинантно измененный полипептид экспрессируется в первом растении, содержащем соответствующий инактивированный эндогенный ген CENH3, CENPC, MIS 12, NDC80 или NUF2, и первое растение подвергается скрещиванию с растением дикого типа, то по меньшей мере 0,1% полученного потомства будет гаплоидным.
2. Растение по п.1, в котором один или два аллеля эндогенной геномной кодирующей последовательности CENH3, CENPC, MIS 12, NDC80 или NUF2 растения инактивированы или нокаутированы.
3. Растение по п.2, в котором все аллели эндогенной геномной кодирующей последовательности CENH3, CENPC, MIS 12, NDC80 или NUF2 растения инактивированы или нокаутированы.
4. Растение по п.1, в котором растение при скрещивании с растением дикого типа дает по меньшей мере 0,1% гаплоидного потомства.
5. Растение по п.1, в котором полипептид является рекомбинантно измененным полипептидом CENH3.
6. Растение по п.5, в котором полипептид содержит гетерологичную аминокислотную последовательность из по меньшей мере 5 аминокислот, соединенную с белком, содержащим домен гистоновой складки CENH3, причем эта аминокислотная последовательность гетерологична домену гистоновой складки CENH3.
7. Растение по п.6, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность непосредственно соединяется с доменом гистоновой складки CENH3 и в полипептиде отсутствует хвостовой домен CENH3.
8. Растение по п.6, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность соединяется с доменом гистоновой складки CENH3 через промежуточную белковую последовательность.
9. Растение по п.8, в котором промежуточная белковая последовательность содержит хвостовой домен не CENH3, а другого гистона Н3.
10. Растение по п.8, в котором промежуточная белковая последовательность содержит хвостовой домен CENH3.
11. Растение по п.10, в котором хвостовой домен CENH3 гетерологичен домену гистоновой складки CENH3.
12. Растение по п.8, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность имеет длину по меньшей мере в 10 аминокислот.
13. Растение по п.5, в котором полипептид содержит хвостовой домен не CENH3, соединенный с доменом гистоновой складки CENH3.
14. Растение по п.9, в котором хвостовой домен другого гистона Н3, чем CENH3, содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична SEQ ID NO: 95 или ее фрагменту длиной по меньшей мере в 20 аминокислот.
15. Растение по п.8, в котором промежуточная белковая последовательность содержит хвостовой домен гистона Н3 и гетерологичный хвостовой домен гистона CENH3.
16. Растение по любому из пп.8-15, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность включает зеленый флуоресцентный белок.
17. Растение по любому из пп.7-15, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность разрушает центромеры.
18. Растение по любому из пп.7-15, в котором домен гистоновой складки CENH3 выбирается из группы, состоящей из SEQ ID NO: 49-94.
19. Растение по п.5, в котором полипептид содержит домен гистоновой складки CENH3 и укороченный хвостовой домен CENH3, при этом N-конец хвостового домена укорочен относительно эндогенного хвостового домена растения.
20. Растение по п.19, при этом в укороченном хвостовом домене CENH3 отсутствуют три или больше N-концевых аминокислот эндогенного хвостового домена.
21. Растение по п.19, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность соединяется с N-концом укороченного хвостового домена.
22. Растение по п.21, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность имеет длину по меньшей мере в 10 аминокислот.
23. Растение по п.21, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность содержит зеленый флуоресцентный белок.
24. Растение по п.21, в котором гетерологичная аминокислотная последовательность разрушает центромеры.
25. Растение по любому из пп.19-24, в котором домен гистоновой складки CENH3 выбирается из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 49-94.
26. Растение по п.1, в котором полипептид представляет собой рекомбинантно измененный полипептид CENPC, MIS 12, NDC80 или NUF2.
27. Выделенная нуклеиновая кислота, содержащая полинуклеотид, кодирующий полипептид, причем полипептид содержит:
хвостовой домен не из CENH3, соединенный с доменом гистоновой складки CENH3; или
укороченный хвостовой домен CENH3, соединенный с доменом гистоновой складки CENH3, причем укорочен N-конец хвостового домена.
28. Растение, содержащее молчащий ген CENH3 или одну или две копии аллеля нокаутированного, инактивированного или мутированного эндогенного гена CENH3.
29. Способ получения гаплоидных растений, который включает:
скрещивание растения, экспрессирующего эндогенный белок CENH3, с растением по п.1; и
отбор гаплоидного потомства F1, полученного в результате скрещивания.
30. Способ по п.29, в котором растение, экспрессирующее эндогенный белок CENH3, является опылителем (донором пыльцы) при скрещивании.
31. Способ по п.29, в котором растение, экспрессирующее эндогенный белок CENH3, является опыляемым (донором семяпочки) при скрещивании.
32. Способ по п.29, дополнительно включающий превращение по меньшей мере одного отобранного гаплоидного растения в дигаплоидное растение.
33. Способ получения растений по п.1, включающий:
трансформирование растительных клеток нуклеиновой кислотой, содержащей экспрессионную кассету; и
отбор трансформантов, содержащих нуклеиновую кислоту, при этом получается растение.