PCSK9 АНТИТЕЛО, ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ДОМЕН И ИХ МЕДИЦИНСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты, содержащие одну или более CDR область, выбранную из следующих: HCDR, как показано в SEQ ID NO 12, SEQ ID NO 13 или SEQ ID NO 14, или HCDR, как показано в последовательности, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью с SEQ ID NO 12, SEQ ID NO 13 или SEQ ID NO 14; и LCDR, как показано в SEQ ID NO 15, SEQ ID NO 16 или SEQ ID NO 17, или LCDR, как показано в последовательности, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью с SEQ ID NO 15, SEQ ID NO 16 или SEQ ID NO 17.
2. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 1, где антитело содержит HCDR1, HCDR2 и HCDR3, как показано в SEQ ID NO 12, SEQ ID NO 13 и SEQ ID NO 14 соответственно, или содержит HCDR1, HCDR2 и HCDR3, как показано в последовательности, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью с SEQ ID NO 12, SEQ ID NO 13 и SEQ ID NO 14 соответственно.
3. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 1, где антитело содержит LCDR1, LCDR2 и LCDR3, как показано в SEQ ID NO 15, SEQ ID NO 16 и SEQ ID NO 17 соответственно, или содержит LCDR1, LCDR2 и LCDR3, как показано в последовательности, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью с этими последовательностями SEQ ID NO 15, SEQ ID NO 16 и SEQ ID NO 17 соответственно.
4. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по любому из пп. 1-3, где антитело содержит HCDR1, HCDR2 и HCDR3, как показано в SEQ ID NO 12, SEQ ID NO 13 и SEQ ID NO 14 соответственно, или содержит HCDR1, HCDR2 и HCDR3, как показано в последовательности, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью с SEQ ID NO 12, SEQ ID NO 13 и SEQ ID NO 14 соответственно; и
LCDR1, LCDR2 и LCDR3, как показано в SEQ ID NO 15, SEQ ID NO 16 и SEQ ID NO 17 соответственно, или содержит LCDR1, LCDR2 и LCDR3, как показано в последовательности, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью с этими последовательностями SEQ ID NO 15, SEQ ID NO 16 и SEQ ID NO 17 соответственно.
5. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по любому из пп. 1-4, где анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты представляют собой мышиное антитело или его фрагменты.
6. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по любому из пп. 1-4, где вариабельная область легкой цепи анти-PCSK9 антитела дополнительно содержит каркасные (FR) области легкой цепи, имеющие происхождение от цепи к мыши или ее варианта, или FR области легкой цепи, имеющие происхождение от цепи λ мыши или ее варианта; где вариабельная область тяжелой цепи анти-PCSK9 антитела дополнительно содержит FR области тяжелой цепи, имеющие происхождение от IgG1 мыши или его варианта, или FR области тяжелой цепи, имеющие происхождение от IgG2 мыши или его варианта, или FR области тяжелой цепи, имеющие происхождение от IgG3 мыши или его варианта.
7. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 6, содержащие вариабельную область тяжелой цепи с последовательностью SEQ ID NO 10 и вариабельную область легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO 11.
8. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по любому из пп. 1-4, где легкая цепь анти-PCSK9 антитела дополнительно содержит константные области легкой цепи, имеющие происхождение от цепи к мыши или ее варианта, или константные области легкой цепи, имеющие происхождение от цепи λ мыши или ее варианта; где тяжелая цепь анти-PCSK9 антитела дополнительно содержит константные области тяжелой цепи, имеющие происхождение от IgG1 мыши или его варианта, или константные области тяжелой цепи, имеющие происхождение от IgG2 мыши или его варианта, или константные области тяжелой цепи, имеющие происхождение от IgG3 мыши или его варианта.
9. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по любому из пп. 1-4, где анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты представляют собой химерное антитело или его фрагменты.
10. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по любому из пп. 1-4, где анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты представляют собой гуманизированное антитело или его фрагменты.
11. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 10, где последовательность FR тяжелой цепи вариабельной области тяжелой цепи гуманизированного антитела имеет происхождение от комбинированной последовательности тяжелых цепей зародышевой линии человека IGHV1-2*02 и hjh2 или ее мутантной последовательности; где гуманизированное антитело содержит FR1, FR2, FR3 тяжелой цепи зародышевой линии человека IGHV1-2*02 и FR4 hjh2 или ее мутантной последовательности.
12. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 11, где гуманизированное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи с последовательностью SEQ ID NO 18; или вариабельную область тяжелой цепи, как показано в варианте SEQ ID NO 18; где вариант SEQ ID NO 18 представляет собой последовательность с 1-10 заменами аминокислот в вариабельной области тяжелой цепи, как показано в SEQ ID NO 18.
13. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 12, где вариант SEQ ID NO 18 имеет 1-10 обратных мутаций аминокислот в FR области вариабельной области тяжелой цепи, как показано в SEQ ID NO 18; предпочтительно обратная мутация выбрана из группы, состоящей из T30N, R87T, R72A, T74K, M48I, V68A, M70L, R38K и R67K.
14. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 11, где гуманизированное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO 19, SEQ ID NO 20, SEQ ID NO 21, SEQ ID NO 22 и SEQ ID NO 23.
15. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 10, где последовательность FR легкой цепи вариабельной области легкой цепи гуманизированного антитела имеет происхождение от комбинированной последовательности легких цепей зародышевой линии человека IGKV1-39*01 и hjk2.1 или ее мутантной последовательности; где гуманизированное антитело содержит FR1, FR2, FR3 зародышевой линии человека IGKV1-39*01 и FR4 hjk2.1 или ее мутантной последовательности.
16. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 15, где гуманизированное антитело дополнительно содержит вариабельную область легкой цепи, как показано в SEQ ID NO 24, или вариабельную область легкой цепи, как показано в варианте SEQ ID NO 24; где вариант SEQ ID NO 24 имеет 1-10 замен аминокислот в вариабельной области легкой цепи, как показано в SEQ ID NO 24.
17. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 16, где вариант SEQ ID NO 24 имеет 1-10 обратных мутаций аминокислот в FR области вариабельной области легкой цепи, как показано в SEQ ID NO 24; предпочтительно обратная мутация выбрана из группы, состоящей из T5S, S66D, Q3V и A49S, предпочтительно A49S.
18. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 15, где гуманизированное антитело содержит вариабельную область легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO 25, SEQ ID NO 26 и SEQ ID NO 27.
19. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 10, где гуманизированное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи и/или вариабельную область легкой цепи, где вариабельная область тяжелой цепи выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO 19, SEQ ID NO 20, SEQ ID NO 21, SEQ ID NO 22 и SEQ ID NO 23, или вариабельная область тяжелой цепи выбрана из группы, состоящей из последовательностей, обладающих по меньшей мере 95% идентичностью с SEQ ID NO 19, SEQ ID NO 20, SEQ ID NO 21, SEQ ID NO 22 и SEQ ID NO 23; где вариабельная область легкой цепи выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO 25, SEQ ID NO 26 и SEQ ID NO 27, или вариабельная область легкой цепи выбрана из группы, состоящей из последовательностей, обладающих по меньшей мере 95% идентичностью с SEQ ID NO 25, SEQ ID NO 26 и SEQ ID NO 27.
20. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 10, где анти-PCSK9 антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, выбранные из группы, состоящей из:
1) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 18 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 25;
2) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 18 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 26;
3) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 18 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 27;
4) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 19 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 24;
5) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 19 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 25;
6) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 19 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 26;
7) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 19 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 27;
8) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 20 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 24;
9) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 20 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 25;
10) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 20 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 26;
11) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 20 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 27;
12) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 21 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 24;
13) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 21 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 25;
14) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 21 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 26;
15) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 21 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 27;
16) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 22 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 24;
17) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 22 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 25;
18) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 22 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 26;
19) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 22 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 27;
20) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 23 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 24;
21) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 23 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 25;
22) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 23 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 26;
23) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 23 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 27; и
24) последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO 18 и последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO 24.
21. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по любому из пп. 9-16, где тяжелая цепь анти-PCSK9 антитела дополнительно содержит константные области тяжелой цепи, имеющие происхождение от IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 человека или его варианта, либо аминокислотные последовательности, обладающие по меньшей мере 95% идентичностью с их последовательностями; предпочтительно содержит константные области тяжелой цепи, имеющие происхождение от IgG1, IgG2 или IgG4 человека или содержит константные области тяжелой цепи вариантов IgG1, IgG2 или IgG4 человека, продлевающих период полувыведения антитела из сыворотки крови за счет мутации аминокислоты, наиболее предпочтительно содержит константные области тяжелой цепи IgG1, IgG2 или IgG4, в которые введена мутация YTE;
где анти-PCSK9 антитело дополнительно содержит константную область легкой цепи, имеющую происхождение от цепи к человека, цепи λ человека или ее варианта, либо аминокислотные последовательности, обладающие по меньшей мере 95% идентичностью с их последовательностям.
22. Анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по п. 21, где гуманизированное антитело содержит тяжелую цепь и легкую цепь, выбранные из группы, состоящей из:
1) тяжелой цепи с последовательностью SEQ ID NO 28 и легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO 30; и
2) тяжелой цепи с последовательностью SEQ ID NO 32 и легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO 30.
23. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество анти-PCSK9 антитела или его антигенсвязывающих фрагментов по любому из пп. 1-22 и одно или более из фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ.
24. Молекула ДНК, кодирующая анти-PCSK9 антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по любому из пп. 1-22.
25. Экспрессионный вектор, содержащий молекулу ДНК по п. 24.
26. Клетка-хозяин, трансформированная экспрессионным вектором по п. 25, которая выбрана из группы, состоящей из прокариотических клеток и эукариотических клеток, предпочтительно эукариотических клеток, более предпочтительно клеток млекопитающих.
27. Применение анти-PCSK9 антитела или его антигенсвязывающих фрагментов по любому из пп. 1-22 или фармацевтической композиции по п. 23 в получении лекарственного средства для лечения PCSK9-опосредованного заболевания или расстройства, где заболевание или расстройство предпочтительно представляет собой заболевание, связанные с повышенным уровнем холестерина; более предпочтительно выбрано из группы, состоящей из гиперхолестеринемии, заболевания сердца, метаболического синдрома, сахарного диабета, ишемической болезни сердца, инсультов, сердечно-сосудистого заболевания (ССЗ), болезни Альцгеймера и общей дислипидемии; наиболее предпочтительно гиперхолестеринемии, дислипидемии, атеросклероза, ССЗ или ишемической болезни сердца.