Мониторинг цитокинового профиля у больных бронхиальной астмой: влияние глюкокортикоидной терапии

Медицинская иммунология 2001, Т.З, № 1, стр 69-76 © 2001, СПб РО РААКИ

Оригинальные статьи

МОНИТОРИНГ цитокинового ПРОФИЛЯ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ: ВЛИЯНИЕ ГЛЮКОКОРТИКОИДНОЙ ТЕРАПИИ

Шапорова Н.Л., Трофимов В.И.,

Шири Зиад Али, Сесь Т.П.*,

Малышев М.Е.*, Васильева Т.А.,

Дудина О.В.

Кафедра госпитальной терапии СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, Санкт- Петербург

*Лаборатория Иммунологии Института Пульмонологии СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, Санкт-Петербург

Резюме. Изучали влияние гормональной терапии на цитокиновый профиль больных БА. Обследовали 39 больных бронхиальной астмой (БА): 21 - с ведущим аллергическим вариантом заболевания и 18 - с преимущественно гормонозависимой БА. У 9 пациентов последней группы наблюдали кортикочувствительную и у 9 -стероидрезистентную БА. Всем обследованным определяли содержание цитокинов (IL-4, IFNy, TNFa, IL-8) в крови и мокроте в динамике заболевания. У больных БА в фазе обострения заболевания наблюдали местную активацию, как Th2, так и Th 1-лимфоцитов, фаза затихающего обострения характеризуется переключением местных иммунных реакций на преобладание Th 1 - типа иммунного ответа. Показали, что отсутствие понижения уровня IL-8 в мокроте на фоне гормональной терапии может являться маркером резистентности клеток к действию глюкокортикоидных гормонов.

Ключевые слова: бронхиальная астма, глюкокортикоидные гормоны, цитокины.

Shaporova N., Trofimov V., Shiri Ziad Ali, Ses Т., Malyshev М., Vasyljeva Т., Dudina O.

CYTOKINE PROFILE IN PATIENTS WITH BRONCHIAL ASTHMA:

GLUCOCORTICOID TREATMENT INFLUENCE

Abstract. We investigated glucocorticoid treatment influence on cytokine profile in patients with bronchial asthma

имущественной активации Т-хелперов 2 (Th2) по сравнению с Т-хелиерами 1 (Thl) [7]. Преобладание Th2 над Thl лимфоцитами у пациентов с астмой приводит к избыточной активации В-лимфоци-тов и развитию IgE-зависимых реакций. Активность Thl и Th2 лимфоцитов находится под цито-киповым контролем. Цитокины, выполняющие многочисленные регуляторные функции, синтезируются и выделяются различными воспалительными

Введение

В настоящее время считается общепризнанным, что у больных бронхиальной астмой (БА) имеет место изменение функции Т-хелперов в виде пре-

Адрес для переписки:

194156, Санкт-Петербург, Нежинская, д.4, кв. 231, Шатровой Н.Л.

Тел.: (812)234-54-51.

клетками [6]. При этом ТЫ лимфоциты продуцируют преимущественно а ТЬ2 лимфоциты -1Ь-4 и 1Ь-5 [5]. Таким образом, определяя уровень 1Ь-4 и 1РЫу в крови и мокроте пациентов, можно судить о соотношении ТЫ и ТЬ2 лимфоцитов среди Т-хелперов и, следовательно, о характере общего и местного иммунного ответа. ТЫИа является плюри-потентным цитокином, который в основном продуцируется моноцитами и макрофагами. ТЫРа входит в группу провоспалительных цитокинов и выполняет важнейшие функции в период запуска воспаления: активирует эндотелий, повышает экспрессию молекул адгезии на эндотелиальных клетках и способствует адгезии лейкоцитов к эндотелию, активирует лейкоциты, индуцирует продукцию других провоспалительных цитокинов, обладающих синергидным с ТЫРа действием (1Ь-1, 1Ь-6, №N(3, СМ-СБР) [5]. Таким образом, по уровню ТЫРа в биологических жидкостях можно косвенно судить об активности воспалительного процесса в целом. 11,-8, синтезируемый преимущественно моноцитами и макрофагами, является хемоаттрактантом для нейтрофилов, базофилов и Т-лимфоцитов [5]. В последние годы появилась информация о том, что 1Ь-8 также является хемоаттрактантом и для эози-

нофилов [25], а его уровень в крови коррелирует с тяжестью течения БА [24].

Известно, что глюкокортикоидные гормоны способны оказывать влияние как на синтез цитокинов, так и на реализацию их эффектов на уровне клетки [1] (рис. 1). РеЫа С., Магасо _|.А. [21] указывают, что глюкокортикоиды могут ингибировать синтез провоспалительных цитокинов. Известно, что кортикостероидные гормоны снижают продукцию 1Ь-

1, вызывающего экспрессию молекул адгезии на поверхности эндотелиальных клеток [11,12], подавляют освобождение Т-лимфоцитами фактора роста Т-лимфоцитов 1Ь-2 [8, 20], фактора роста тучных клеток 1Ь-3 [13, 17], активатора эозинофилов 1Ь-5 [14,19]. Показана способность глюкокортикоидных гормонов блокировать экспрессию гена 1Ь-8 и продукцию 1Ь-8 в эпителиальных клетках дыхательных путей [16], а также синтез фактора некроза опухоли (ТЫРа), гранулоцитарного и моноцитарного колониестимулирующего фактора (СМ-СБР) и 1Ь-6 [2, 10, 14, 18].

Возможным механизмом влияния кортикостероидных гормонов на иммунное воспаление является обнаруженное в последние годы взаимодействие комплекса глюкокортикоид-рецептор с факторами

Рис. 1. Действие глюкокортикоидных гормонов на воспаление.

транскрипции, такими как активатор-протеин 1 и ядерный фактор каппа - В, осуществляемое по принципу протеин - протеин (рис.1). Известно, что цитокины действуют на клетки путем изменения транскрипции генов. Их взаимодействие с рецепторами на поверхности клетки приводит к активации факторов транскрипции. Эти факторы затем направляются в ядро клетки, где связываются с ДНК и влияют, таким образом, на синтез мРНК и продукцию провоспалительных протеинов в клетке. Оказалось, что комплекс глюкокортикоид-рецептор может взаимодействовать непосредственно как с активатором-протеином 1, так и с ядерным фактором каппа - В в ядре клетки, предупреждая их действие как факторов транскрипции на ДНК и эффективно блокируя влияние цитокинов на клетку. Это взаимодействие объясняет один из наиболее значимых механизмов противовоспалительного действия глюкокортико-идных гормонов [10, 22].

Не только глюкокортикоидные гормоны оказывают влияние на важнейшие механизмы иммунной системы, но и многие цитокины способны воздействовать на гормональный гомеостаз, причем это воздействие является разнонаправленным (рис.1). В последние годы показана роль IL-1 в активации гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси. Sartory M.L. с соавторами [23] показали, что IL-2 способен повышать экспрессию рецепторов к глю-кокортикоидам в мононуклеарах периферической крови. Однако, по мнению Barnes P.J., Adcock I.М. [9], цитокины способны активировать факторы транскрипции, которые могут напрямую связываться с глюкокортикоидными рецепторами (ГР) и блокировать действие глюкокортикоидных гормонов. Таким образом, было высказано предположение о том, что секреция провоспалительных цитокинов может способствовать формированию стероидрези-стентности.

В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы было исследовать уровни цитокинов в биологических жидкостях больных бронхиальной астмой в динамике и под влиянием гормональной терапии.

Материалы и методы

Для решения указанной цели нами было обследовано 39 больных бронхиальной астмой (БА), 14 мужчин и 25 женщин, средний возраст обследованных составил 45,9 ± 2,5 лет. У 21 пациента была диагностирована преимущественно аллергическая (атопическая) бронхиальная астма (БАА) и у 18 преимущественно гормонозависимая астма (БАГЗ). Больные первой группы получали стандартную бронхолитическую и противовоспалительную терапию инталом (или тайледом) или ингаляционными глюкокортикоидами, лечения системными кортико-

стероидными препаратами per os пациентам данной группы не назначали. Больные гормонозависимой БА кроме традиционной бронхолитической и противовоспалительной получали системную глюко-кортикоидную терапию per os. Среди больных последней группы было 9 пациентов, получавших терапию препаратами глюкокортикоидных гормонов через рот в дозе, не превышающей 15 мг преднизо-лона в сутки (кортикочувствительные пациенты (Б АКЧ)) и 9 больных, получавших более 20 мг пред-низолона в сутки через рот (стероидрезистентные пациенты (БАСР)).

У всех пациентов определяли уровни IL-4, IFNy, TNFa, IL-8 в крови и мокроте методом иммунофер-ментного анализа [ 15] с использованием коммерческих наборов ТОО “Цитокин” (Санкт-Петербург, Россия). Часть пациентов была обследована в динамике через 10 - 14 дней (в фазе обострения и в фазе затихающего обострения или ремиссии заболевания). Для расчета нормы использовали собственные данные, полученные в результате обследования крови и лаважной жидкости 30 здоровых добровольцев в возрасте от 25 до 35 лет [4].

Статистическую обработку выполняли с использованием стандартного пакета программ прикладного статистического анализа (“Statistic for Windows”) и системы концептуального моделирования “COMOD”, разработанной в Санкт-Петербургском Государственном Электротехническом университете [3].

Результаты

Уровень IL-4 в крови оказался повышен у 20 из 39 обследованных пациентов: 13 (62%) больных аллергической и 7 (39%) - гормонозависимой БА. При обследовании в динамике уровень IL-4 в крови понизился у 9 из 12 пациентов (75%), у 2-х повысился и у 1 не изменился. Следует отметить, что у 8 из 12 обследованных в динамике пациентов (67%) в фазе затихающего обострения заболевания уровень IL-4 в крови оказался в пределах нормальных величин, в то время как в фазе обострения он был нормальным только у 19 из 39 больных (49%) (рис.2).

Уровень IL-4 в мокроте был повышен только у 5 из 29 обследованных пациентов: 3 больных аллергической и 2 - гормонозависимой БА. При обследовании в динамике у 5 из 9 обследованных пациентов наблюдали снижение уровня IL-4 в мокроте. У 2 больных исходно нормальный уровень IL-4 в мокроте повысился и у 2 не изменился (рис. 2).

Уровень IFNy в крови был повышен у 12 из 39 обследованных больных: 4 - аллергической и 8 -гормонозависимой БА. У 27 из 39 обследованных больных (69%) содержание IFNy в крови оказалось в пределах нормы. В динамике у 8 из 12 обследованных больных наблюдали понижение уровня IFNy

норма

І І І III

<

ш

ет

<

ш

о.

о

<

10

т

*

<

Ц>

111-4 кровь обострение 111-4 кровь затих.обострение

111-4 мокрота обострение 111-4 мокрота затих.обострение

Рис. 2. Содержание 11.-4 в крови и мокроте больных БА в динамике. По оси ординат отложены средние значения 11.-4 в пг/ мл; по

оси абсцисс группы больных: БА - больные бронхиальной астмой (вся группа);

БАА - больные аллергической бронхиальной астмой; БАГЗ - больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАКЧ - кортикочувствительные больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАСР - стероидрезистентные больные гормонозависимой бронхиальной астмой.

600

500

400

300

200

100

14.5

11.5'

норма

ГГІ П

<

ш

со

1_

<

ш

о.

и

<

ш

т

*

<

ш

ІРМ кровь обострение

ІЯМ кровь затих.обострение

ІРМ мокрота обострение

IFN мокрота затих.обострение

Рис. 3. Содержание ШРу в крови и мокроте больных БА в динамике. По оси ординат отложены средние значения МРу в пг/ мл; по оси абсцисс группы больных: БА - больные бронхиальной астмой (вся группа); БАА - больные аллергической бронхиальной астмой;БАГЗ

- больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАКЧ - кортикочувствительные больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАСР

- стероидрезистентные больные гормонозависимой бронхиальной астмой.

в крови, у 2 этот показатель повысился и у 2 - не изменился. При этом у 10 из обследованных в динамике 12 пациентов уровень 1РЫу в крови оказался в пределах нормы (рис.З).

Исследование мокроты показало повышение уровня 1РЫу у 19 из 28 обследованных больных (69%). Нормальный уровень был выявлен только у 9 из 28 пациентов: 5 больных аллергической и 4 - гормонозависимой БА. Средние величины содержания 1РЫу в мокроте больных БА значительно превышали норму (рис. 3). Обследование пациентов в динамике выявило дальнейшее нарастание уровня 1РКу в мокроте у 7 из 8 обследованных в фазе затихающего обострения заболевания больных (88%) и только у 1 пациента этот уровень снизился по сравнению с исходным, но по-прежнему существенно превышал норму. Обращало на себя внимание, что у всех без исключения пациентов БА в фазе затихающего обострения заболевания наблюдался повышенный уровень 1РЫу в мокроте. Анализ средних величин выявил повышение содержания 1РЫу в мокроте у всех групп пациентов: и у больных с аллергической астмой, и у пациентов с гормональной зависимостью. Однако максимальное увеличение уровня 1РЫу в мокроте наблюдали у стероидре-зистентных больных, а у кортикочувствительных пациентов нарастание уровня 1РЫу было незначительным (рис.З).

Сравнительный анализ двух показателей (1Ь-4 и 1РЫу) с использованием критерия х2 показал, что в группе больных БА в целом не было достоверных различий между количеством пациентов с повышенным в крови уровнем 1Ь-4 и количеством больных с повышенным в крови уровнем 1РЫу (1=3,3; р> 0,05). Однако в группе пациентов с аллергической БА количество больных с повышенным в крови уровнем 1Ь-4 по критерию %2 достоверно превышало количество пациентов с повышенным уровнем 1РЫу (1=8,0; р<0,01). При обследовании в динамике наблюдалось понижение как 1Ь-4 , так и 1РКу в крови.

Исследование мокроты показало, что по критерию х2 количество больных БА с исходно повышенным уровнем 1Ь-4 оказалось достоверно ниже, чем количество больных БА с исходно повышенным уровнем ШЫу (1=14,97; р<0,001).

При обследовании в динамике получены достоверные различия но критерию %2 в характере изменений двух указанных показателей в мокроте больных БА: уровень П.-4 преимущественно понижался, а содержание 1РЫу преимущественно повышалось (1=6,9; р<0,01).

Уровень ТЫРа в крови был повышен у 26 из 39 обследованных больных (67%): 12 - аллергической и 14 - гормонозависимой БА. Только у 13 из 39 обследованных больных содержание ТЫРа в крови

120

100

І 80

60

40

35.6 -24.8 -

норма

20

1 250 I

І1ІІІ 200 150 =; 2 "и* с 100 1дЫ

ІП1П 50 41.8 28.2 норма 0 1 в і л і

<

ш

со

<

ш

о.

и

<

ш

X

*

<

ш

<

ш

СО о.

Ь о

< <

Ш Ш

т

*

<

10

ТЫЯ кровь обострение  ТЫР кровь затих.обострение

|ТЫР мокрота обострение ЦТЫР мокрота затих.обострение

Рис. 4. Содержание Т^а в крови и мокроте больных БА в динамике. По оси ординат отложены средние значения 1№а в пг/ мл; по оси абсцисс группы больных: БА - больные бронхиальной астмой (вся группа); БАА - больные аллергической бронхиальной астмой; БАГЗ -больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАКЧ - кортикочувствительные больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАСР -стероидрезистентные больные гормонозависимой бронхиальной астмой.

норма

<

ш

W

[_

<

ш

Q.

О

<

ш

т

<

ш

<

ш

2

ш

«

U

<

ш

0L

о

<

ш

т

*

<

ш

IL8 кровь обострение

IL8 кровь затих.обострение

11.8 мокрота обострение В і 1.8 мокрота затих.обострение

Рис. 5. Содержание 11.-8 в крови и мокроте больных БА в динамике. По оси ординат отложены средние значения 11-8 в пг/мл; по оси абсцисс группы больных: БА - больные бронхиальной астмой (вся группа); БАА - больные аллергической бронхиальной астмой; БАГЗ -больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАКЧ - кортикочувствительные больные гормонозависимой бронхиальной астмой; БАСР -стероидрезистентные больные гормонозависимой бронхиальной астмой.

оказалось в пределах нормы. В динамике у 10 из 12 обследованных больных (83%) наблюдали понижение уровня ТОТа в крови, у 2 этот показатель повысился. Анализ средних величин показал, что в фазе обострения заболевания имело место повышение уровня ТКРа в крови, а в динамике происходила нормализация этого показателя (рис.4).

Уровень ТЫРа в мокроте был повышен только у 11 из 28 обследованных пациентов

- он оказался в пределах нормы: 8 больных аллергической и 9 - гормонозависимой БА. При обследовании в динамике у 5 из 9 обследованных пациентов наблюдали снижение, и у 4 больных - повышение уровня ТКРа в мокроте. Следует отметить, что из 6 обследованных в динамике пациентов гормонозависимой БА, у всех 3 кортикочувствительных больных на фоне проводимой гормональной терапии наблюдали понижение уровня ТОТа в мокроте, а у всех стероидрезистентных (3 человека) - повышение уровня ТЫРа в мокроте (1=6,0; р<0,05).

Исследование уровня 1Ь-8 показало, что у пациентов БА в крови он оказался в пределах нормы как в фазе обострения заболевания, так и при обследовании в динамике (рис.5). Только у 1 больного из 39 обследованных лиц наблюдали повышенный уровень 1Ь-8 в крови в фазе обострения заболевания. Это был пациент с гормонозависимой БА. Содер-

жание 1Ь-8 в крови оказалось нормальным у 8 из 12 обследованных в фазе затихающего обострения заболевания больных. Необходимо отметить, что при обследовании в динамике отмечалось увеличение содержания 1Ь-8 в крови по сравнению с исходным уровнем у 9 из 12 обследованных в динамике больных, у 2 этот показатель не изменился и у 1 гормонозависимого больного с исходно высоким уровнем 1Ь-8 в крови - понизился.

Содержание 1Ь-8 в мокроте было достоверно выше нормы в фазе обострения заболевания у 27 из 28 обследованных больных (рис.5). В динамике 1Ь-8 в мокроте оставался повышенным у всех 9 обследованных пациентов. Необходимо отметить, что кортикочувствительные и стероидрезистентные пациенты достоверно отличались по влиянию гормональной терапии на уровень 1Ь-8 в мокроте. У кортикочувствительных больных наблюдали снижение, а у стероидрезистентных пациентов - повышение содержания 1Ь-8 в мокроте на фоне перо-ральной гормональной терапии (1=5,0; р<0,05) (рис.5).

Обсуждение

Полученные нами результаты позволили уточнить изменение цитокинового спектра у больных Б А

в динамике заболевания и влияние на него гормональной терапии.

Исследование цитокинового профиля показало, что у больных БА в целом в фазе обострения заболевания был повышен уровень как IL-4, так и IFNy в крови, что отражает повышение активности как Th2, так и Thl-лимфоцитов среди Т-хелперов. Однако у больных преимущественно аллергической Б А достоверно чаще наблюдали повышение в крови уровня IL-4 по сравнению с уровнем IFNy, что указывает на поляризацию иммунных реакций в сторону ТЬ2-тииа иммунного ответа и укладывается в общепринятое представление об особенностях иммунного статуса у пациентов с аллергической Б А [7].

Исследование мокроты показало, что у больных БА достоверно чаще имело место повышение уровня IFNy по сравнению с IL-4 даже в фазе обострения заболевания. Таким образом, у больных БА в фазе обострения заболевания наблюдалась местная активация как Th2, так и Thl лимфоцитов среди Т-хелперов. В фазе затихающего обострения или ремиссии заболевания имело место достоверное и значительное понижение уровня IL-4 при одновременном повышении IFNy в мокроте пациентов, что позволяет предполагать переключение местных иммунных реакций на преобладание Thl типа ответа. Так как Thl-лимфоциты являются супрессорами для IgE-зависимых реакций [5], подобное переключение иммунного ответа может являться одним из факторов, способствующих стиханию IgE- опосредованного воспаления у больных БА.

Повышенный уровень TNFa в крови пациентов БА в фазе обострения заболевания, его снижение до нормальных значений в фазе затихающего обострения заболевания укладывается в общепринятое представление о пусковой роли данного цитокина в генезе иммунного воспаления [5].

Мы не наблюдали сколько-нибудь существенных изменений в уровне IL-8 в крови больных БА как в фазе обострения, так и в фазе затихающего обострения заболевания. В то же время содержание IL-8 в мокроте в десятки и даже сотни раз превышало норму в фазе обострения заболевания и оставалось повышенным у больных в фазе затихающего обострения БА. Таким образом, содержание IL-8 изменялось преимущественно в мокроте, а не в крови, что отражает паракринное действие IL-8 в очаге воспаления и свидетельствует о большей значимости этого цитокина для местных воспалительных реакций при БА.

Изучение уровня IL-8 в мокроте пациентов БА в динамике показало, что у кортикочувствительных больных имело место существенное снижение местного уровня IL-8 на фоне проводимой гормональной терапии per os в динамике, а у стероидрезистен-тных пациентов такого эффекта не наблюдалось. Аналогичная тенденция прослеживалась для всех

провоспалительных цитокинов, однако достоверные отличия были получены только для 11.-8. С учетом данных литературы о способности глюкокортико-идных гормонов блокировать экспрессию гена 1Ь-8 и генерацию 1Ь-8 в эпителиальных клетках дыхательных путей [16], наши результаты позволяют предположить, что отсутствие понижения уровня

11.-8 на фоне гормональной терапии может являться маркером резистентности клеток к действию глю-кокортикоидных гормонов.

Список литературы

1. Гущин И.С. Контроль глюкокортикоидами клеточных функций в аллергическом ответе // International Journal on Immunorehabilitation. 1999, № П. - С. 108 -116.

2. Дунаева Л.Л. Комплексная оценка активности воспалительного процесса у больных бронхиальной астмой //дисс.... канд.мед.наук. - Санкт-Петер-бург:- 1998. - С. 154.

3. Немцов В.И. Концептуальные модели различных вариантов бронхиальной астмы на основе нового метода системного моделирования // Дисс.... д-ра мед. наук. - Санкт-Петербург: - 1995. - 385 с.

4. Малышев М.Е. Лабораторные критерии оценки течения воспалительного процесса у больных с профессиональными заболеваниями легких // Ав-тореф. дис.... канд. биол. наук. - Санкт-Петербург. -2000. - 20 с.

5. Фрейдлин И.С. Иммунная система и ее дефекты // Руководство для врачей. - Санкт-Петербург: НТФФ “Полисан”, 1998. - ИЗ с.

6. Фрейдлин И.С., Тотолян А. А. Иммунопатологические механизмы воспаления бронхов и легких // Механизмы воспаления бронхов и легких и противовоспалительная терапия / Под ред. Г.Б.Федосеева. Санкт-Петербург: “Нормед - издат”, 1998. -С.194 - 298.

7. Фрейдлин И.С., Тотолян А. А. Роль изменений иммунной системы в формировании бронхиальной астмы // Бронхиальная астма: Библиотека врача общей практики. Т.2./ Под ред. Г.Б.Федосеева. Санкт-Петербург: Медицинское информационное агентство, 1996. - С. 54 - 69.

8. Bamberger С.М., Else Т., Bamberger A.M., Beil F.U., Schulte H.M. Regulation of the human interleukin-2 gene by the alpha and beta isoforms of the glucocorticoid receptor // Molecula & Cellular Endocrinology. - 1997. - Vol. 136, № 1. - P. 23 - 28.

9. Barnes P.J., Adcock I.M. Steroid resistance in asthma // QJM. - 1995. - Vol. 88, № 7. - P. 455 - 468.

10. Barnes P.J., Pedersen S. Efficacy and safety of inhaled corticosteroids in asthma // American Review of Respiratory Disease. - 1993. - Vol. 148, № 4, Pt 2. -P. 1 - 26.

11. Borish L„ Mascali J.J., Dishuck J. Detection of alveolar macrophage - derived IL-ip in asthma. Inhibition with corticosteroids // J. Immunol. - 1992.

- Vol. 149. - P. 3078 -3082.

12. Crastein B.N. A mechanism for the glucocorticoid receptor regulates leukocyte adhesion to endothelial cells and expression of ELAM-1 and IC AM-1 // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. - 1992. - Vol. 89. - P. 9991 - 9995.

13. Djukanovic R., Wilson J., Britten K. Quantitation of mast cells and eosinofils in the bronchial mucosa of symptomatic atopic asthmatics and healthy control subjects using immunochemistry // Am.Rev.Respir.Dis. - 1990. - Vol. 142, № 4. - P. 863 -869.

14. Hallsworth M.P., Litchfield T.M., Lee T.H. Glucocorticoids inhibit granulocytemacrophage colony-stimulating factor and interleukin-5 enhanced in vitro survival of human eosinophils // Immunology.

- 1992. - Vol. 75. - P. 382 - 385.

15. Koller D.Y., Nething I., Otto J., Urbaner R., Eichler I. Cytokine concentration in sputum from patients with cystic fibrosis and their relation to eosinophil activity // Am. J. Respir. Care Med. - 1997. Vol. 155. - P. 1050 - 1054.

16. Kwon O.J., An B.T., Collins P.D. Inhibition of interleukin-8 expression by dexamethasone in human cultured airway epithelial cells // Immunology. - 1994.

- Vol. 81, N3.-P. 389-394.

17. Laitinen L.A., Laitinen A., Haahtela T. A comparative study of the effects of an inhaled corticosteroid, Budesonide, and of (32-agonist, Terbutaline, on airway inflammation in newly diagnosed asthma //J. Allergy Clin. Immunol. - 1992.

- Vol. 90. - P. 32 - 42.

18. Lamas A.M., Leon O.G., Schleimer R.P. Glucocorticoids inhibit eosinophil responses to granulocyte-macrophage colony-stimulating factor // Immunology. - 1991. - Vol. 147. - P. 254 -259.

19. Mori A., Sulo M.N., Nishizaki Y. Regulation of interleukin-5 production by peripheral blood mononuclear cells from atopic patients with FK 506 cyclosporin A and glucocorticoid // Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. - 1994. - Vol. 104, № 1. - P. 32 - 35.

20. Northrop J.P., Crabtree G.R., Mattila P.S. Negative regulation of interleukin 2 transcription by the glucocorticoid receptor //Journal of Experimental Medicine. - 1992. - Vol. 175, № 5. - P. 1235 - 1245.

21. Pelaia G., Marsico S. A. Molecular bases of antiasthma action of corticosteroids // Recenti Progressi in Medicina. - 1995. - Vol.86, № 6. - P. 248 - 256.

22. Ray A. Siegel MD. Prefontaine KE. Ray P. Anti-inflammation: direct physical association and functional antagonism between transcription factor NF-KB and the glucocorticoid receptor // Chest. -1995. - Vol. 107, № 3, Suppl. - P.139.

23. Sartory M.L., Masera R.G., Staurenghi A., Racca S., Angeli A. Interleukin 2 up-regulates glucocorticoid receptor number in human peripheral blood mononuclear cells and the osteosarcoma cell line Saos-2 in vitro // Steroids. - 1998. - Vol. 63, № 5-6. - P. 349 - 351.

24. Shute J.K., Vrugt B., Lindley I.J., Holgate S.T., Bron A., Aalbers R., Djukanovic R. Free and complexed interleukin-8 in blood and bronchial mucosa in asthma // Am. J. of Respiratory & Critical Care Medicine. -1997. - Vol. 155, № 6. - P. 1877 - 1883.

25. Vrugt B., Djukanovic R., Bron A., Aalbers R. New insights into pathogenesis of severe corticosteroid-dependent asthma // J. of Allergy & Clinical Immunology. - 1996. - Vol. 98, № 5, Pt 2. - P. 22 - 26.

поступила в редакцию 25.01.2001

принята к печати 05.02.2001